RU2806987C1 - Method for preparing donor material for keratoplasty - Google Patents
Method for preparing donor material for keratoplasty Download PDFInfo
- Publication number
- RU2806987C1 RU2806987C1 RU2022133829A RU2022133829A RU2806987C1 RU 2806987 C1 RU2806987 C1 RU 2806987C1 RU 2022133829 A RU2022133829 A RU 2022133829A RU 2022133829 A RU2022133829 A RU 2022133829A RU 2806987 C1 RU2806987 C1 RU 2806987C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cornea
- minutes
- epithelial
- donor
- graft
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 36
- 239000000463 material Substances 0.000 title abstract description 34
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 claims abstract description 49
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 claims abstract description 46
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims abstract description 29
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 claims abstract description 23
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 claims abstract description 23
- 210000002159 anterior chamber Anatomy 0.000 claims abstract description 15
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 14
- 210000005081 epithelial layer Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 5
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 abstract description 2
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 11
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 5
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 5
- 206010011033 Corneal oedema Diseases 0.000 description 4
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 206010005159 blepharospasm Diseases 0.000 description 4
- 230000000744 blepharospasm Effects 0.000 description 4
- 201000004778 corneal edema Diseases 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 210000001747 pupil Anatomy 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 4
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 description 3
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 3
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 3
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 3
- 201000007717 corneal ulcer Diseases 0.000 description 3
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 3
- 206010001541 Akinesia Diseases 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 206010049244 Ankyloglossia congenital Diseases 0.000 description 2
- 206010023644 Lacrimation increased Diseases 0.000 description 2
- 206010024214 Lenticular opacities Diseases 0.000 description 2
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 2
- 206010034960 Photophobia Diseases 0.000 description 2
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 2
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 2
- 206010037569 Purulent discharge Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 206010064996 Ulcerative keratitis Diseases 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 238000011861 anti-inflammatory therapy Methods 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- JFPVXVDWJQMJEE-IZRZKJBUSA-N cefuroxime Chemical compound N([C@@H]1C(N2C(=C(COC(N)=O)CS[C@@H]21)C(O)=O)=O)C(=O)\C(=N/OC)C1=CC=CO1 JFPVXVDWJQMJEE-IZRZKJBUSA-N 0.000 description 2
- 229960001668 cefuroxime Drugs 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003683 corneal stroma Anatomy 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000004410 intraocular pressure Effects 0.000 description 2
- 230000004317 lacrimation Effects 0.000 description 2
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- FABPRXSRWADJSP-MEDUHNTESA-N moxifloxacin Chemical compound COC1=C(N2C[C@H]3NCCC[C@H]3C2)C(F)=CC(C(C(C(O)=O)=C2)=O)=C1N2C1CC1 FABPRXSRWADJSP-MEDUHNTESA-N 0.000 description 2
- 229960003702 moxifloxacin Drugs 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 2
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 2
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 2
- 230000004304 visual acuity Effects 0.000 description 2
- 102100026802 72 kDa type IV collagenase Human genes 0.000 description 1
- 101710151806 72 kDa type IV collagenase Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102100027995 Collagenase 3 Human genes 0.000 description 1
- 108050005238 Collagenase 3 Proteins 0.000 description 1
- 206010011026 Corneal lesion Diseases 0.000 description 1
- 102000004237 Decorin Human genes 0.000 description 1
- 108090000738 Decorin Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 208000010412 Glaucoma Diseases 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 208000005100 Herpetic Keratitis Diseases 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- 206010022941 Iridocyclitis Diseases 0.000 description 1
- 102100021497 Keratocan Human genes 0.000 description 1
- 101710153980 Keratocan Proteins 0.000 description 1
- 102000011681 Lumican Human genes 0.000 description 1
- 108010076371 Lumican Proteins 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- 102000000380 Matrix Metalloproteinase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010016113 Matrix Metalloproteinase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100030412 Matrix metalloproteinase-9 Human genes 0.000 description 1
- 108010015302 Matrix metalloproteinase-9 Proteins 0.000 description 1
- 206010073938 Ophthalmic herpes simplex Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000035965 Postoperative Complications Diseases 0.000 description 1
- 102000001732 Small Leucine-Rich Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 108010040068 Small Leucine-Rich Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 208000018359 Systemic autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 201000004612 anterior uveitis Diseases 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 210000001742 aqueous humor Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000021921 corneal disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000004452 decreased vision Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002555 descemet membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 102000013373 fibrillar collagen Human genes 0.000 description 1
- 108060002894 fibrillar collagen Proteins 0.000 description 1
- FVTCRASFADXXNN-SCRDCRAPSA-N flavin mononucleotide Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O FVTCRASFADXXNN-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 201000010884 herpes simplex virus keratitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 1
- 230000006058 immune tolerance Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 230000005732 intercellular adhesion Effects 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 210000001365 lymphatic vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000011824 nuclear material Substances 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 238000006552 photochemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003711 photoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 201000000041 pigment dispersion syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно, к офтальмологии, и может быть использовано подготовки донорского материала для кератопластики с целью замещения поврежденных слоев роговицы реципиента аналогичной тканью донора.The invention relates to medicine, namely to ophthalmology, and can be used to prepare donor material for keratoplasty in order to replace damaged layers of the recipient’s cornea with similar donor tissue.
Трансплантация роговицы (кератопластика) относится к основным видам хирургического лечения, направленным на восстановление оптических и структурных свойств патологически измененной роговой оболочки глаза.Corneal transplantation (keratoplasty) is one of the main types of surgical treatment aimed at restoring the optical and structural properties of the pathologically altered cornea of the eye.
Роговицу отличает отсутствие кровеносных и лимфатических сосудов, содержание небольшого количества антиген презентирующих дендритных клеток и макрофагов, а также слабая экспрессия антигенов главного комплекса гистосовместимости. Именно эти факторы определяют высокую частоту прозрачного приживления трансплантата роговицы в неосложненных случаях [Осипян Г.А., Шелудченко В.М., Юсеф Ю.Н., Храйстин X., Джалили Р.А., Краснолуцкая Е.И. Комбинированная межстромальная имплантация полупроницаемой гидрогелевой мембраны при болезни трансплантата роговицы и неоднократной СКП (клиническое наблюдение). Офтальмология. 2021; 18(1): 165-170. https://doi.org/10.18008/1816-5095-2021-1-165-170].The cornea is characterized by the absence of blood and lymphatic vessels, the content of a small number of antigen-presenting dendritic cells and macrophages, and weak expression of major histocompatibility complex antigens. It is these factors that determine the high frequency of transparent engraftment of the corneal graft in uncomplicated cases [Osipyan G.A., Sheludchenko V.M., Yusef Yu.N., Khraistin X., Jalili R.A., Krasnolutskaya E.I. Combined interstromal implantation of a semipermeable hydrogel membrane for corneal graft disease and repeated SKP (clinical observation). Ophthalmology. 2021; 18(1): 165-170. https://doi.org/10.18008/1816-5095-2021-1-165-170].
Однако в ряде случаев исходом операции может быть полупрозрачное/непрозрачное приживление или лизис кератотрансплантата.However, in some cases, the outcome of the operation may be translucent/opaque engraftment or lysis of the keratograft.
По данным литературы среди основных причин этих состояний выделяют реакцию отторжения трансплантата, вторичную глаукому, рецидив заболевания и другие состояния, приводящие к потере эндотелиальных клеток (хронические увеиты, офтальмологические проявления системных аутоиммунных заболеваний, синдром мелкой передней камеры, синдром дисперсии пигмента и др.).According to the literature, among the main causes of these conditions are transplant rejection, secondary glaucoma, relapse of the disease and other conditions leading to the loss of endothelial cells (chronic uveitis, ophthalmological manifestations of systemic autoimmune diseases, small anterior chamber syndrome, pigment dispersion syndrome, etc.).
Так, несмотря на большие успехи в трансплантологии, реакция тканевой несовместимости после кератопластики является одной из главных причин стойкого помутнения трансплантата роговицы и развивается в 5-70% случаев (в зависимости от факторов риска у реципиента, а также от исходной патологии и сроков послеоперационного наблюдения) [Sangwan V.S., Ramamurthy В., Shah U., Garg P., Sridhar M.S., Rao G.N.. Outcome of corneal transplant rejection: a 10-year study. Clin Experiment Ophthalmol. 2005;33:623-627. DOI: 10.1111/j. 1442-9071.2005.01107.x].Thus, despite great advances in transplantology, tissue incompatibility reaction after keratoplasty is one of the main causes of persistent opacification of the corneal graft and develops in 5-70% of cases (depending on the risk factors of the recipient, as well as on the initial pathology and the timing of postoperative observation) [Sangwan V.S., Ramamurthy V., Shah U., Garg P., Sridhar M.S., Rao G.N.. Outcome of corneal transplant rejection: a 10-year study. Clin Experiment Ophthalmol. 2005;33:623-627. DOI: 10.1111/j. 1442-9071.2005.01107.x].
К «кератопластике высокого риска» относят операции у пациентов с такими поражениями роговицы, как язва или перфорация различной этиологии (бактерии, грибы, простейшие; травма), ожоговое помутнение, ранняя или поздняя несостоятельность кератотрансплантата («болезнь трансплантата») [Борзенок С.А., Тонаева Х.Д., Онищенко Н.А., Комах Ю.А. Индукция локальной иммунной толерантности с помощью лимбальной сотрансплантации при кератопластике высокого риска (обзор литературы). Офтальмохирургия. 2011;(2):85-88.]“High-risk keratoplasty” includes operations in patients with corneal lesions such as ulcers or perforations of various etiologies (bacteria, fungi, protozoa; trauma), burn opacities, early or late failure of the keratograft (“graft disease”) [Borzenok S.A. ., Tonaeva Kh.D., Onishchenko N.A., Komakh Yu.A. Induction of local immune tolerance using limbal cotransplantation in high-risk keratoplasty (literature review). Ophthalmosurgery. 2011;(2):85-88.]
Результат кератопластики зависит во многом от качества и способа подготовки донорского материала, техники и объема хирургического вмешательства, течения послеоперационного периода, частоты рецидивов при наличии хронической офтальмопатологии, количества кератопластик в анамнезе (Малюгин, Б. Э. Глубокая передняя послойная кератопластика с использованием фемтосекундного лазера Intralase 60 kHz: первый опыт // Практическая медицина. - 2012. -т.1. - No 4. - С. 100-103.)The result of keratoplasty depends largely on the quality and method of preparation of the donor material, the technique and volume of surgical intervention, the course of the postoperative period, the frequency of relapses in the presence of chronic ophthalmopathology, the number of keratoplasties in history (Malyugin, B. E. Deep anterior lamellar keratoplasty using the Intralase femtosecond laser 60 kHz: first experience // Practical Medicine. - 2012. - Vol. 1. - No. 4. - P. 100-103.)
С целью минимизации послеоперационных осложнений к донорскому материалу предъявляют особые требования: материал для кератопластики должен характеризоваться высокой биосовместимостью, а также такими оптическими параметрами, как прозрачность, сферичность, оптическая сила, зеркальность). Оптимальным материалом для кератопластики является неконсервированная донорская роговица человека, однако не всегда профильное офтальмологическое учреждение может обеспечить хирургу своевременное получение из танатологического отделения качественного донорского материала. Отмена ургентной кератопластики вследствие отсутствия донорского материала в большинстве случаев невозможна.In order to minimize postoperative complications, special requirements are placed on the donor material: the material for keratoplasty must be characterized by high biocompatibility, as well as such optical parameters as transparency, sphericity, optical power, specularity). The optimal material for keratoplasty is an unpreserved donor human cornea, however, a specialized ophthalmological institution cannot always provide the surgeon with timely receipt of high-quality donor material from the thanatology department. Cancellation of urgent keratoplasty due to lack of donor material is impossible in most cases.
Известен способ лечения разных заболеваний роговицы с помощью кросслингинга, при котором при ультрафиолетовом облучении (УФО) роговицы посредством рибофлавин-УФ-индуцируемых фотохимических реакций происходит увеличение меж- и интрафибриллярных ковалентных связей, а также связей между кератоцитами и белками межклеточной адгезии, что стабилизирует биомеханические свойства роговицы, усиливая ее прочность [Бикбов М.М., Халимов А.Р., Усубов Э.Л. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы. Вестник РАМН. 2016;71(3):224-232. doi:10.15690/vramn562].There is a known method for treating various diseases of the cornea using crossling, in which, during ultraviolet irradiation (UVR) of the cornea, through riboflavin-UV-induced photochemical reactions, an increase in inter- and intrafibrillar covalent bonds occurs, as well as connections between keratocytes and intercellular adhesion proteins, which stabilizes biomechanical properties cornea, increasing its strength [Bikbov M.M., Khalimov A.R., Usubov E.L. Ultraviolet crosslinking of the cornea. Bulletin of the Russian Academy of Medical Sciences. 2016;71(3):224-232. doi:10.15690/vramn562].
По данным литературы, при кросслинкинге в зоне активного воздействия рибофлавина и УФО отмечено увеличение диаметра коллагеновых волокон в большей степени в передней части стромы, по сравнению со средним и задним ее отделом. В работе S. Choi и его соавт., при проведении УФ-кросслинкинга на модели роговицы in vitro, было отмечено увеличение диаметра фибриллярного коллагена на 103% и его плотности на 112% [Wollensak G, Wilsch М, Spoerl Е, Seiler Т. Collagen fiber diam- eter in the rabbit cornea after collagen crosslinking by ribo- flavin/UVA. Cornea. 2004;23(5):503-507. doi: 10.1097/01. ico.0000105827.85025.7f. Choi S, Lee SC, Lee HJ, et al. Structural response of human corneal and scleral tissues to collagen cross-linking treatment with riboflavin and ultraviolet A light. Lasers Med Sci. 2013;28(5):1289-1296. doi: 10.1007/s10103-012-1237-6].According to the literature, during cross-linking in the zone of active influence of riboflavin and ultraviolet radiation, an increase in the diameter of collagen fibers was noted to a greater extent in the anterior part of the stroma, compared to its middle and posterior sections. In the work of S. Choi et al., when conducting UV cross-linking on an in vitro cornea model, an increase in the diameter of fibrillar collagen by 103% and its density by 112% was noted [Wollensak G, Wilsch M, Spoerl E, Seiler T. Collagen fiber diam- eter in the rabbit cornea after collagen crosslinking by ribo-flavin/UVA. Cornea. 2004;23(5):503-507. doi: 10.1097/01. ico.0000105827.85025.7f. Choi S, Lee SC, Lee HJ, et al. Structural response of human corneal and scleral tissues to collagen cross-linking treatment with riboflavin and ultraviolet A light. Lasers Med Sci. 2013;28(5):1289-1296. doi:10.1007/s10103-012-1237-6].
Кроме того, многие авторы отмечают выраженную связь между образованием коллагеновых фибрилл и содержанием основных протеогликанов (люмикан, кератокан, декорин), синтез которых после УФ-кросслинкинга соответствует норме. Так, после локального воздействия рибофлавином и УФО протеогликаны стромы становятся более устойчивыми к катаболизму, индуцируемому матриксными металлопротеиназами (ММП), а коллагены I и IV типа - к действию ММП-1, ММП-2, ММП-9 и ММП-13 [Zhang Y, Мао X, Schwend Т, et al. Resistance of corneal RFUVA- cross-linked collagens and small leucine-rich proteoglycans to degradation by matrix metalloproteinases. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2013;54(2):1014-1025. doi: 10.1167/iovs. 12-11277].In addition, many authors note a pronounced connection between the formation of collagen fibrils and the content of the main proteoglycans (lumican, keratocan, decorin), the synthesis of which after UV cross-linking is normal. Thus, after local exposure to riboflavin and UV irradiation, stromal proteoglycans become more resistant to catabolism induced by matrix metalloproteinases (MMPs), and type I and IV collagens become more resistant to the action of MMP-1, MMP-2, MMP-9 and MMP-13 [Zhang Y , Mao X, Schwend T, et al. Resistance of corneal RFUVA-cross-linked collagens and small leucine-rich proteoglycans to degradation by matrix metalloproteinases. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2013;54(2):1014-1025. doi: 10.1167/iovs. 12-11277].
Известен способ кератопластики с использованием кросслинкинг-модифицированного донорского материала у пациентов с язвами роговицы. Так, все донорские роговично-склеральные диски были деэпителизированы без дополнительной скарификации эпителия. Перед проведением эксперимента роговично-склеральные диски насыщали рибофлавином, после этого перекладывали в стерильную емкость эндотелием вниз, обрабатывали ультрафиолетом с длиной волны 370 нм мощностью 3 мВ/см2 в течение времени, рекомендованного фирмой-производителем (30 минут). Для облучения использовали прибор UV-X s/n 1000-401-39 (производство Швейцария). В процессе обработки ультрафиолетом на донорскую роговицу каждые 5 минут капали по 1 капле препарата «Декстралинк». Интраоперационно проводили контроль пахиметрии. Кросслинкинг донорского материала проводили в операционной не позднее суток после консервации (RU 2381649, 20.02.2010).There is a known method of keratoplasty using cross-linking modified donor material in patients with corneal ulcers. Thus, all donor corneal-scleral discs were de-epithelialized without additional scarification of the epithelium. Before the experiment, the corneal-scleral discs were saturated with riboflavin, then transferred to a sterile container with the endothelium down, and treated with ultraviolet light with a wavelength of 370 nm and a power of 3 mV/ cm2 for the time recommended by the manufacturer (30 minutes). For irradiation, a UV-X s/n 1000-401-39 device (made in Switzerland) was used. During ultraviolet treatment, 1 drop of the drug “Dextralink” was dripped onto the donor cornea every 5 minutes. Pachymetry control was performed intraoperatively. Cross-linking of the donor material was carried out in the operating room no later than 24 hours after preservation (RU 2381649, 02/20/2010).
К недостаткам данного способа относится проведение УФО роговицы по классическому типу (плотность мощности 3 мВ/см2 в течение 30 минут с длиной волны 370 нм) только с эпителиальной стороны. При этом процесс сшивания коллагена рибофлавином происходит лишь в поверхностных слоях роговицы (на глубине около 300 мкм). С учетом того, что в случае отека роговицы толщина трансплантата может достигать 640 мкм и более, подобное воздействие не является эффективным для его более глубоких слоев. [Исхаков И.А., Дружинин И.Б., Щербакова Л.В Выбор параметров фемтотрепанации на основе интраоперационного контроля толщины донорской роговицы // Практическая медицина. - 2017. - №9(110). - С. 36-40]. Стоит также отметить, что в способах подготовки донорского материала, в которых УФО проводится только с эпителиальной стороны роговицы, при выборе трансплантата необходимо учитывать состояние эндотелиального слоя, что затруднительно при ургентной кератопластике. Авторы проводили кросслинкинг донорского материала в операционной в срок не позднее 24 часов после консервации. Однако даже небольшой срок консервации до проведения УФО также может привести к дополнительному отеку роговицы. Утолщение роговицы при консервации несомненно вызывает снижение эффективности кросслинкинга, из-за воздействия УФО только на поверхностные слои роговицы.The disadvantages of this method include conducting ultraviolet irradiation of the cornea according to the classical type (power density 3 mV/cm 2 for 30 minutes with a wavelength of 370 nm) only from the epithelial side. In this case, the process of cross-linking collagen with riboflavin occurs only in the superficial layers of the cornea (at a depth of about 300 µm). Considering that in the case of corneal edema, the thickness of the graft can reach 640 microns or more, such an effect is not effective for its deeper layers. [Iskhakov I.A., Druzhinin I.B., Shcherbakova L.V. Selection of femtotrepanation parameters based on intraoperative monitoring of the thickness of the donor cornea // Practical Medicine. - 2017. - No. 9 (110). - P. 36-40]. It is also worth noting that in methods of preparing donor material, in which ultraviolet irradiation is performed only on the epithelial side of the cornea, when choosing a transplant, it is necessary to take into account the state of the endothelial layer, which is difficult with urgent keratoplasty. The authors performed cross-linking of donor material in the operating room no later than 24 hours after preservation. However, even a short period of preservation before ultraviolet irradiation can also lead to additional corneal edema. Thickening of the cornea during conservation undoubtedly causes a decrease in the efficiency of crosslinking, due to the effect of ultraviolet radiation only on the superficial layers of the cornea.
Известен способ комплексного воздействия на роговицу (донорскую и реципиента) во время кератопластики с целью усиления приживления донорского материала для лечения заболеваний роговицы. Для этого из консервированного донорского материала выкраивают роговичный трансплантат (сквозной или послойный). Подготовленный материал укладывают в ложе роговицы реципиента и фиксируют четырьмя провизорными узловыми швами 10/0. По мере наложения остальных узловых или одного непрерывного шва и фиксации материала производят насыщение трансплантата и собственной роговицы инсталляцией препарата «Декстралинк» в течение 15-20 минут.После фиксации трансплантата и насыщения роговицы рибофлавином (оценивают наличием желтого свечения стромы роговицы) выполняют УФО роговицы аппаратом «УФалинк» с плотностью мощности 18 мВт/см2 длиной волны 370 нм и суммарной энергией 5,4 Дж/см2 в течение 5 минут (RU 2676434,12.12.2017).There is a known method of complex effects on the cornea (donor and recipient) during keratoplasty in order to enhance the engraftment of donor material for the treatment of corneal diseases. To do this, a corneal graft (end-to-end or layer-by-layer) is cut out from preserved donor material. The prepared material is placed in the recipient's corneal bed and fixed with four provisional interrupted 10/0 sutures. As the remaining interrupted or one continuous suture is applied and the material is fixed, the graft and its own cornea are saturated with the installation of the drug “Dextralink” for 15-20 minutes. After fixing the graft and saturating the cornea with riboflavin (assessed by the presence of a yellow glow in the corneal stroma), ultraviolet irradiation of the cornea is performed using the “ UValink" with a power density of 18 mW/cm 2 with a wavelength of 370 nm and a total energy of 5.4 J/cm 2 for 5 minutes (RU 2676434, 12/12/2017).
Основным недостатком этого способа является проведение кросслинкинга роговицы только с ее эпителиальной стороны. Поскольку хранение роговицы в консервационной среде в течение нескольких суток часто способствует увеличению ее толщины за счет отека эффективность УФО снижается и нарушается равномерное сшивание коллагена глубоких слоев роговицы.The main disadvantage of this method is cross-linking of the cornea only from its epithelial side. Since storing the cornea in a preservation environment for several days often increases its thickness due to edema, the effectiveness of ultraviolet irradiation is reduced and the uniform cross-linking of collagen in the deep layers of the cornea is disrupted.
Ближайшим аналогом предлагаемого способа является способ обработки донорской роговицы с проведением ультрафиолетового кросслиникинга с двух сторон. С этой целью донорскую роговицу помещают на 1 час в среду для консервации, после чего перемещают в стерильную емкость и выполняют УФО с одной стороны роговицы (длина волны 365 нм, мощность 3 мВ/см2). При этом каждые 5 минут производят инстилляцию на роговицу 1 капли 0,1% раствора рибофлавина. Затем по этому алгоритму выполняют УФО роговицы с противоположной стороны. Среда для консервации содержит рибофлавина мононуклеотид, декстран, глутатион, натрия хлорид и воду дистиллированную очищенную [RU 2613442, 16.03.2017].The closest analogue of the proposed method is a method for treating a donor cornea with ultraviolet crosslinking on both sides. For this purpose, the donor cornea is placed for 1 hour in a preservation medium, after which it is transferred to a sterile container and UV irradiation is performed on one side of the cornea (wavelength 365 nm, power 3 mV/cm 2 ). In this case, every 5 minutes, 1 drop of 0.1% riboflavin solution is instilled onto the cornea. Then, according to this algorithm, UV irradiation of the cornea is performed on the opposite side. The preservation medium contains riboflavin mononucleotide, dextran, glutathione, sodium chloride and distilled purified water [RU 2613442, 03/16/2017].
К недостаткам данного способа относят добавление фотосенсибилизатора в консервационную среду, что приводит к снижению насыщения донорского материала рибофлавином, а значит, к уменьшению эффекта фотополимеризации и образования меж- и интрафибрилярных ковалентных связей под действием УФО. Кроме того, подготовка донорского материала по данному способу проводится в условиях операционной и непосредственно перед хирургическим вмешательством, что увеличивает время операции. Как и в предыдущих способах, УФО выполняли с низкой плотностью мощности.The disadvantages of this method include the addition of a photosensitizer to the preservation medium, which leads to a decrease in the saturation of the donor material with riboflavin, and therefore to a decrease in the effect of photopolymerization and the formation of inter- and intrafibrillar covalent bonds under the influence of ultraviolet radiation. In addition, the preparation of donor material using this method is carried out in the operating room and immediately before surgery, which increases the operation time. As in previous methods, UFO was performed at low power density.
Задачей изобретения является создание оптимального способа подготовки донорской роговицы с проведением УФ-кросслинкинга.The objective of the invention is to create an optimal method for preparing a donor cornea with UV crosslinking.
Техническим результатом предлагаемого способа является повышение жизнеспособности донорского трансплантата с длительным сохранением его прозрачности.The technical result of the proposed method is to increase the viability of the donor graft while maintaining its transparency for a long time.
Технический результат достигается за счет улучшения биохимических, биомеханических, прочностных и ослабления антигенных свойств донорского трансплантата с помощью двустороннего кросслинкинга донорского лоскута в определенных режимах.The technical result is achieved by improving the biochemical, biomechanical, strength and weakening of the antigenic properties of the donor graft using bilateral cross-linking of the donor flap in certain modes.
В результате экспериментальной части работы для достижения таких результатов как повышенная прозрачность пересаженного донорского материала, биосовместимость с тканями реципиента, сниженная антигенность, а также возможность в кратчайшие сроки подготовить трансплантат при неотложных состояниях, нами были разработаны оптимальные параметры для проведения ультрафиолетового облучения: увеличенная плотность мощности, усиленный режим капельного воздействия рибофлавином, а таже последовательность облучения. Увеличение мощности с сохранением времени экспозиции, применяемом при классическом крослинкинге, позволяет добиться более эффективного сшивания коллагена в передних и задних слоях донорской роговицы. Способ обеспечивает приживление донорского материала за счет быстрой резорбции отека вследствие применения в процессе кросслинкинга раствора фотосенсибилизатора с гиперосмотическими свойствами, который также обеспечивает фотохимический и фотопротективный эффект.В результате быстро формируется качественный послеоперационный рубец, что, в итоге ведет к сокращению срока реабилитации.As a result of the experimental part of the work, in order to achieve such results as increased transparency of the transplanted donor material, biocompatibility with recipient tissues, reduced antigenicity, as well as the ability to quickly prepare a transplant in emergency conditions, we have developed optimal parameters for ultraviolet irradiation: increased power density, enhanced regime of drip exposure to riboflavin, as well as the sequence of irradiation. Increasing the power while maintaining the same exposure time used in classical cross-linking allows for more efficient cross-linking of collagen in the anterior and posterior layers of the donor cornea. The method ensures engraftment of the donor material due to the rapid resorption of edema due to the use of a photosensitizer solution with hyperosmotic properties during the crosslinking process, which also provides a photochemical and photoprotective effect. As a result, a high-quality postoperative scar is quickly formed, which ultimately leads to a reduction in the rehabilitation period.
Благодаря разработанным параметрам проведения УФО (мощность 6 мВт/см2, длина волны 370 нм, длительность воздействия - 30 минут, режим капельного воздействия рибофлавином) процесс сшивания коллагена, затрагивает наиболее глубокие слои роговицы (с эпителиальной стороны на глубине около 450 мкм, а с эндотелиальной - около 300 мкм). То есть УФО при этом способе кросслинкинга воздействует практически на всю толщу роговицы. Проведение процедуры кросслинкинга, в том числе с эндотелиальной стороны, приводит к снижению антигенных свойств трансплантата (индукция апоптоза кератоцитов, снижение количества водорастворимых активных белковых и полисахаридных компонентов, материала ядер и цитоплазмы клеток). Таким образом, резко снижается риск отторжения трансплантата. Кроме того, при подготовке донорского материала по предложенному нами способу, не имеет значения состояние эндотелиального слоя, поскольку при двустороннем кросслинкинге донорской роговицы увеличивается эффект фотополимеризации рибофлавином и образования меж- и интрафибрилярных ковалентных связей не только в передней, но и в задней части стромы, что приводит к более компактному расположению коллагеновых волокон в слоях стромы и к дифференцировке структуры десцеметовой мембраны, а также к равномерному поступлению жидкости в строму роговицы, обеспечивая ее прозрачность, даже в условиях отсутствия эндотелиальных клеток.Thanks to the developed parameters of ultraviolet irradiation (power 6 mW/cm 2 , wavelength 370 nm, exposure duration - 30 minutes, drip mode of exposure to riboflavin), the process of collagen cross-linking affects the deepest layers of the cornea (from the epithelial side at a depth of about 450 microns, and from endothelial - about 300 µm). That is, ultraviolet radiation with this method of cross-linking affects almost the entire thickness of the cornea. The cross-linking procedure, including from the endothelial side, leads to a decrease in the antigenic properties of the graft (induction of keratocyte apoptosis, reduction in the amount of water-soluble active protein and polysaccharide components, nuclear material and cytoplasm of cells). Thus, the risk of transplant rejection is sharply reduced. In addition, when preparing donor material according to the method we propose, the state of the endothelial layer does not matter, since with bilateral cross-linking of the donor cornea, the effect of photopolymerization with riboflavin and the formation of inter- and intrafibrillar covalent bonds increases not only in the anterior but also in the posterior part of the stroma, which leads to a more compact arrangement of collagen fibers in the layers of the stroma and to differentiation of the structure of Descemet's membrane, as well as to a uniform flow of fluid into the corneal stroma, ensuring its transparency, even in the absence of endothelial cells.
Следует отметить, что способ позволяет хранить трансплантат в среде Борзенка-Мороз для использования в течение ближайших нескольких дней или в среде Борзенка-Мороз в условиях глубокой заморозки (-70°С) для более длительного хранения. Это обеспечивает доступность донорского материала, особенно, при ургентной кератопластике.It should be noted that the method allows you to store the graft in Borzenka-Moroz medium for use over the next few days or in Borzenka-Moroz medium under deep frozen conditions (-70°C) for longer storage. This ensures the availability of donor material, especially for urgent keratoplasty.
Способ осуществляют следующим образомThe method is carried out as follows
Из донорского глаза выкраивают корнеосклеральный лоскут.Помещают его в искусственную переднюю камеру, удаляют эпителиальный слой роговицы. Капельно воздействуют 0.1% раствором рибофлавина каждые 2 минуты в течение 30 минут поочередно на эндотелиальную и эпителиальную поверхность роговицы. Затем проводят ультрафиолетовое облучение мощностью 6 мВт/см2 с длиной волны 370 нм в течение 30 минут с каждой стороны, начиная с эпителиальной. При этом во время облучения капельно воздействуют раствором 0.1% рибофлавина каждые 5 минут. При необходимости консервации, лоскут, подвергнутый кросслинкингу, помещают в среду Борзенка-Мороз или подвергают глубокому замораживанию в той же среде.A corneoscleral flap is cut out from the donor eye. It is placed in an artificial anterior chamber, and the epithelial layer of the cornea is removed. Apply drops of 0.1% riboflavin solution every 2 minutes for 30 minutes alternately to the endothelial and epithelial surface of the cornea. Then ultraviolet irradiation is carried out with a power of 6 mW/cm 2 with a wavelength of 370 nm for 30 minutes on each side, starting from the epithelial side. In this case, during irradiation, a solution of 0.1% riboflavin is drip-fed every 5 minutes. If preservation is necessary, the crosslinked flap is placed in Borzenka-Moroz medium or deep frozen in the same medium.
Пример 1.Example 1.
Пациентка Б. 1965 года рождения обратилась в ФГБНУ «НИИ ГБ им. М.М. Краснова» с жалобами на постепенное снижение зрения на левом глазу, сопровождающееся выраженным роговичным синдромом, а именно светобоязнь, слезотечение, блефароспазм, ощущение инородного тела, а также покраснение и болевые ощущения глаза. Из анамнеза выявлено, что впервые чувство инородного тела, постепенно усиливающееся и сопровождающееся снижением зрения на левом глазу, появилось 4 месяца назад. Также известно, что пациентка проходила курс консервативного лечения по месту жительства, однако добиться положительной динамики не удалось, вследствие чего была направлена в ФГБНУ «НИИ ГБ им. М.М. Краснова».Patient B., born in 1965, contacted the Federal State Budgetary Institution “Research Institute of GB named after. MM. Krasnov" with complaints of a gradual decrease in vision in the left eye, accompanied by severe corneal syndrome, namely photophobia, lacrimation, blepharospasm, foreign body sensation, as well as redness and pain in the eye. From the anamnesis it was revealed that for the first time the feeling of a foreign body, gradually intensifying and accompanied by decreased vision in the left eye, appeared 4 months ago. It is also known that the patient underwent a course of conservative treatment at her place of residence, but it was not possible to achieve positive dynamics, as a result of which she was sent to the Federal State Budgetary Institution "Research Institute of Gb named after. MM. Krasnov."
Данные при поступлении в стационар: острота зрения левого глаза -неправильная светопроекция, внутриглазное давление не удалось измерить с помощью пневмотонометра и других бесконтактных методов исследования вследствие выраженного блефароспазма, однако пальпаторно давление определялось в пределах нормы. При биомикроскопии левого глаза отмечалась смешанная инъекция, гнойное отделяемое, умеренный отек роговицы, в оптической зоне которой определялся полупрозрачный инфильтрат с глубокой язвой в центре диаметром 3-4 мм, передняя камера глубокая, влага передней камеры опалесцирует, зрачок округлой формы, реакция зрачка на свет слабая, хрусталик - начальные ядерно-кортикальные помутнения. Глазное дно детально не офтальмоскопируется.Data upon admission to the hospital: visual acuity of the left eye - incorrect light projection, intraocular pressure could not be measured using a pneumotonometer and other non-contact research methods due to severe blepharospasm, however, palpation pressure was determined within normal limits. Biomicroscopy of the left eye revealed mixed injection, purulent discharge, moderate corneal edema, in the optical zone of which there was a translucent infiltrate with a deep ulcer in the center with a diameter of 3-4 mm, the anterior chamber is deep, the moisture of the anterior chamber is opalescent, the pupil is round in shape, the pupil reacts to light weak, lens - initial nuclear-cortical opacities. The fundus of the eye is not ophthalmoscoped in detail.
Учитывая вышеизложенные данные, был выставлен диагноз левого глаза: ОС - глубокая язва роговицы с угрозой перфорации с помутнением, иридоциклит. Незрелая осложненная катаракта.Taking into account the above data, a diagnosis was made for the left eye: OS - deep corneal ulcer with threat of perforation with opacification, iridocyclitis. Immature complicated cataract.
Рекомендовано выполнение на левом глазу лечебно-оптической сквозной кератопластики с использованием донорского материала, подготовленного по предложенному нами способу.It is recommended to perform therapeutic-optical penetrating keratoplasty on the left eye using donor material prepared according to the method we proposed.
Пациентке была выполнена операция на левом глазу - лечебно-оптическая сквозная кератопластика в сочетании с кросслинкингом трансплантата.The patient underwent surgery on the left eye - therapeutic-optical penetrating keratoplasty in combination with graft cross-linking.
Ход операции: акинезия, ретробульбарная анестезия была выполнена 2% раствором лидокаина 5,0, после чего верхняя и нижняя прямые мышцы взяты на уздечный шов.Progress of the operation: akinesia, retrobulbar anesthesia was performed with a 2% solution of lidocaine 5.0, after which the upper and lower rectus muscles were taken to the frenulum suture.
Параллельно проводилась подготовка донорского материала, который ранее, за 4 недели до проводимой операции, был изготовлен по нами предложенному способу: из донорского глаза выкраили корнеосклеральный лоскут. Поместили его в искусственную переднюю камеру, удалили эпителиальный слой роговицы. Капельно воздействовали 0.1% раствором рибофлавина каждые 2 минуты в течение 30 минут поочередно на эндотелиальную и эпителиальную поверхность роговицы. Затем провели ультрафиолетовое облучение мощностью 6 мВт/см2 с длиной волны 370 нм в течение 30 минут с каждой стороны, начиная с эпителиальной. При этом во время облучения капельно воздействовали раствором 0.1% рибофлавина каждые 5 минут.In parallel, the preparation of donor material was carried out, which earlier, 4 weeks before the operation, was made according to our proposed method: a corneoscleral flap was cut out from the donor eye. They placed him in an artificial anterior chamber and removed the epithelial layer of the cornea. A 0.1% riboflavin solution was applied dropwise every 2 minutes for 30 minutes alternately to the endothelial and epithelial surfaces of the cornea. Then ultraviolet irradiation was carried out with a power of 6 mW/cm 2 with a wavelength of 370 nm for 30 minutes on each side, starting from the epithelial side. During irradiation, a solution of 0.1% riboflavin was drip-fed every 5 minutes.
Затем корнеосклеральный лоскут был помещен в консервационную среду Борзенка-Мороз и подвергнут глубокому замораживанию (-70°С) в морозильной камере. Перед сквозной кератопластикой донорский материал был доставлен в операционную. Через 20 минут размораживания при комнатной температуре корнеосклеральный лоскут, как это принято, размещен в ложе вакуумного высекателя пластического материала Barron эндотелиальной стороной кверху. Далее с помощью высекателя диаметром 9,0 мм из корнеосклерального лоскута был выкроен «роговичный диск» для трансплантации.The corneoscleral flap was then placed in Borzenk-Moroz preservation medium and deep frozen (-70°C) in a freezer. Before penetrating keratoplasty, donor material was taken to the operating room. After 20 minutes of thawing at room temperature, the corneoscleral flap, as is customary, is placed in the bed of a vacuum cutter of Barron plastic material with the endothelial side up. Next, using a cutter with a diameter of 9.0 mm, a “corneal disc” was cut out of the corneoscleral flap for transplantation.
Трепанация роговицы реципиента выполнена при помощи вакуумного роговичного трепана Barron диаметром 8.75 мм. После введения в переднюю камеру когезивного вискоэластика разрез роговицы продолжили до полной трепанации при помощи микрохирургических ножниц. Подготовленный донорский материал перемещен в ложе роговицы реципиента эндотелиальной стороной книзу и фиксирован четырьмя предварительными узловыми швами (нейлон 10/0) и непрерывным швом (нейлон 10/0). Предварительные узловые швы удалены. Выполнена субъконюнктивальная инъекция 0,1 г Цефуроксима и промывание конъюнктивальной полости раствором антибиотика Моксифлоксацин. В послеоперационном периоде проведеа стандартная антибактериальная и противовоспалительная терапия.Trepanation of the recipient's cornea was performed using a Barron vacuum corneal trephine with a diameter of 8.75 mm. After introducing cohesive viscoelastic into the anterior chamber, the corneal incision was continued until complete trephination using microsurgical scissors. The prepared donor material is moved into the recipient's corneal bed with the endothelial side down and fixed with four preliminary interrupted sutures (10/0 nylon) and a continuous suture (10/0 nylon). Preliminary interrupted sutures have been removed. A subconjunctival injection of 0.1 g of Cefuroxime was performed and the conjunctival cavity was washed with a solution of the antibiotic Moxifloxacin. In the postoperative period, standard antibacterial and anti-inflammatory therapy was administered.
При осмотре в 1-й день после операции отмечен незначительный отек трансплантата, непрерывный роговичный шов чистый, края раны адаптированы, передняя камера средней глубины, влага передней камеры прозрачная, начальные ядерно-кортикальные помутнения хрусталика. Полная резорбция отека была достигнута на 7-й день после операции, а полная эпителизация роговицы - на 5-7-й день. Кроме того, в отдаленном периоде (до 6 месяцев после операции) не отмечено признаков болезни трансплантата.When examined on the 1st day after surgery, slight swelling of the graft was noted, the continuous corneal suture was clean, the edges of the wound were adapted, the anterior chamber was of medium depth, the aqueous humor of the anterior chamber was transparent, and initial nuclear-cortical opacities of the lens. Complete resorption of edema was achieved on the 7th day after surgery, and complete epithelization of the cornea on the 5-7th day. In addition, in the long-term period (up to 6 months after surgery) there were no signs of graft disease.
Пример 2.Example 2.
Пациент К. 1974 года рождения обратился в ФГБНУ «НИИ ГБ им. М.М. Краснова» с жалобами на постепенное снижение зрения на правом глазу, сопровождающееся болевыми ощущениями глаза, блефароспазмом, светобоязнью, слезотечением, а также ощущением инородного тела и покраснением. Из анамнеза установлено, что месяц назад пациент впервые ощутил чувство инородного тела в глазу на фоне неправильного ношения мягких контактных линз. Пациент обращался в частную клинику к офтальмологу и проходил курс консервативного лечения, на фоне которого не была отмечена положительная динамика, в результате чего пациент самостоятельно обратился в ФГБНУ «НИИ ГБ им. М.М. Краснова».Patient K., born in 1974, contacted the Federal State Budgetary Institution “Research Institute of Gb named after. MM. Krasnov" with complaints of a gradual decrease in vision in the right eye, accompanied by pain in the eye, blepharospasm, photophobia, lacrimation, as well as a sensation of a foreign body and redness. From the anamnesis it was established that a month ago the patient first felt the sensation of a foreign body in the eye due to improper wearing of soft contact lenses. The patient went to a private clinic to see an ophthalmologist and underwent a course of conservative treatment, against the background of which no positive dynamics were noted, as a result of which the patient independently contacted the Federal State Budgetary Institution “Research Institute of Gabology named after. MM. Krasnova.
Данные при поступлении в стационар: острота зрения правого глаза -неправильная светопроекция, внутриглазное давление не удалось измерить с помощью пневмотонометра и других бесконтактных методов исследования вследствие выраженного блефароспазма, однако пальпаторно давление определялась гипотония. При биомикроскопии правого глаза отмечалась смешанная инъекция, гнойное отделяемое, выраженный отек роговицы, в оптической зоне определялась зона перфорации диаметром 3-4 мм, где радужка спаяна с задней частью роговицы, передняя камера щелевидная, зрачок деформирован, реакция зрачка на свет отсутствует, хрусталик -факосклероз. Глазное дно детально не офтальмоскопируется.Data upon admission to the hospital: visual acuity of the right eye - incorrect light projection, intraocular pressure could not be measured using a pneumotonometer and other non-contact research methods due to severe blepharospasm, but hypotension was determined by palpation. During biomicroscopy of the right eye, a mixed injection, purulent discharge, pronounced corneal edema were noted, a perforation zone with a diameter of 3-4 mm was determined in the optical zone, where the iris is fused to the back of the cornea, the anterior chamber is slit-like, the pupil is deformed, there is no reaction of the pupil to light, the lens is - phacosclerosis. The fundus of the eye is not ophthalmoscoped in detail.
Учитывая вышеизложенные данные, был выставлен диагноз правого глаза: ОД - глубокая язва роговицы с перфорацией, исход герпетического кератита. Факосклероз.Taking into account the above data, a diagnosis was made for the right eye: OD - deep corneal ulcer with perforation, the outcome of herpetic keratitis. Phacosclerosis.
Рекомендовано выполнение на правом глазу сквозной кератопластики с использованием донорского материала, подготовленный по предложенной нами методике, с лечебной и оптической целью.It is recommended to perform penetrating keratoplasty on the right eye using donor material, prepared according to the method we proposed, for therapeutic and optical purposes.
Пациентке была выполнена операция на правом глазу - сквозная кератопластика в сочетании с кросслинкингом трансплантата.The patient underwent surgery on the right eye - penetrating keratoplasty in combination with graft cross-linking.
Ход операции: акинезия, ретробульбарная анестезия была выполнена 2% раствором лидокаина 5,0, после чего верхняя и нижняя прямые мышцы взяты на уздечный шов.Progress of the operation: akinesia, retrobulbar anesthesia was performed with a 2% solution of lidocaine 5.0, after which the upper and lower rectus muscles were taken to the frenulum suture.
Параллельно проводилась подготовка донорского материала, который до операции за несколько часов, был изготовлен по нами предложенному способу: корнеосклеральный лоскут помещен в искусственную переднюю камеру эпителиальной стороной кверху, после чего с помощью скребца счищен эпителиальный слой роговицы и был закапан 0.1% рибофлавин каждые 2 минуты в течение 30 минут. Далее роговично-склеральный диск поворачивали эндотелиальной стороной кверху и также закапывали 0.1% рибофлавин каждые 2 минуты в течение 30 минут. Затем проводили ультрафиолетовое облучение (УФО) мощностью 6 мВт/см2 с длиной волны 370 нм в течение 30 минут с каждой стороны, начиная с эпителиальной, при этом во время УФО закапывали 0.1% рибофлавином каждые 5 минут в течение 30 минут, после чего корнеосклеральный лоскут был помещен в консервационную среду Борзенка-Мороз. В день операции донорский материал заранее был доставлен в операционную, где корнеосклеральный лоскут укладывали в ложе вакуумного высекателя пластического материала Barron эндотелиальной стороной кверху. Далее с помощью высекателя диаметром 9,0 мм из корнеосклерального лоскута был выкроен «роговичный диск» для трансплантации.In parallel, the preparation of donor material was carried out, which, several hours before the operation, was prepared according to our proposed method: a corneoscleral flap was placed in an artificial anterior chamber with the epithelial side up, after which the epithelial layer of the cornea was cleaned off using a scraper and 0.1% riboflavin was instilled every 2 minutes into the within 30 minutes. Next, the corneal-scleral disc was turned with the endothelial side up and 0.1% riboflavin was also instilled every 2 minutes for 30 minutes. Then ultraviolet irradiation (UVR) was performed with a power of 6 mW/cm 2 with a wavelength of 370 nm for 30 minutes on each side, starting with the epithelial side, while during UV irradiation 0.1% riboflavin was instilled every 5 minutes for 30 minutes, after which the corneoscleral The flap was placed in Borzenka-Moroz preservation medium. On the day of surgery, the donor material was delivered to the operating room in advance, where the corneoscleral flap was placed in the bed of a vacuum cutter of Barron plastic material with the endothelial side up. Next, using a cutter with a diameter of 9.0 mm, a “corneal disc” was cut out of the corneoscleral flap for transplantation.
Трепанация роговицы реципиента выполнена при помощи вакуумного роговичного трепана Barron диаметром 8.75 мм. После введения в переднюю камеру когезивного вискоэластика разрез роговицы продолжили до полной трепанации при помощи микрохирургических ножниц. Подготовленный донорский материал уложили в ложе роговицы реципиента эндотелиальной стороной книзу и зафиксировали четырьмя предварительными узловыми швами 10/0 и непрерывным швом. Затем предварительные узловые швы были сняты.Trepanation of the recipient's cornea was performed using a Barron vacuum corneal trephine with a diameter of 8.75 mm. After introducing cohesive viscoelastic into the anterior chamber, the corneal incision was continued until complete trephination using microsurgical scissors. The prepared donor material was placed in the recipient's corneal bed with the endothelial side down and secured with four preliminary interrupted 10/0 sutures and a continuous suture. The preliminary interrupted sutures were then removed.
Операция завершалась субъконюнктивальной инъекцией 0,1 г Цефуроксима и промыванием конъюнктивальной полости раствором антибиотика Моксифлоксацин. В послеоперационном периоде назначалась стандартная противовоспалительная терапия.The operation was completed with a subconjunctival injection of 0.1 g of Cefuroxime and washing of the conjunctival cavity with a solution of the antibiotic Moxifloxacin. In the postoperative period, standard anti-inflammatory therapy was prescribed.
При осмотре в 1-й день после операции наблюдался отек трансплантата, швы состоятельны, края раны адаптированы, передняя камера мельче средней глубины, влага передней камеры прозрачная, сохранялось частичное помутнение хрусталика. Полная резорбция отека была достигнута на 9-й день после операции, а полная эпителизация роговицы на 7-й день. Кроме того, в отдаленном периоде (до 6 месяцев после операции) не наблюдались признаки болезни трансплантата.When examined on the 1st day after surgery, swelling of the graft was observed, the sutures were intact, the edges of the wound were adapted, the anterior chamber was shallower than the average depth, the moisture of the anterior chamber was transparent, and partial clouding of the lens remained. Complete resorption of edema was achieved on the 9th day after surgery, and complete epithelization of the cornea on the 7th day. In addition, in the long-term period (up to 6 months after surgery), no signs of graft disease were observed.
Таким образом, предложенный способ обеспечивает изготовление донорского материала для замещения роговицы, отличающийся прозрачностью, слабыми антигенными свойствами, обеспечивающими ее высокую биосовместимость и прозрачность. Кроме того, кератотрансплантат может быть подготовлен в кратчайшие сроки, что особенно важно при офтальмопатологии различной этиологии, требующей проведения неотложного хирургического вмешательства.Thus, the proposed method ensures the production of donor material for corneal replacement, characterized by transparency, weak antigenic properties, ensuring its high biocompatibility and transparency. In addition, the keratograft can be prepared in the shortest possible time, which is especially important for ophthalmic pathologies of various etiologies that require emergency surgical intervention.
Claims (3)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2806987C1 true RU2806987C1 (en) | 2023-11-08 |
Family
ID=
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2822406C1 (en) * | 2024-02-21 | 2024-07-04 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) | Method for preparing scleral allograft for scleroplasty in progressive degenerative myopia |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2150920C1 (en) * | 1996-05-22 | 2000-06-20 | Городская клиническая больница скорой медицинской помощи | Surgical method for treating cornea diseases |
| WO2007103053A2 (en) * | 2006-03-06 | 2007-09-13 | Amo Development, Llc | Method of preparing a donor cornea for transplantation |
| CA2644455A1 (en) * | 2006-03-14 | 2007-09-20 | Amo Development, Llc | System and method for ophthalmic laser surgery on a cornea |
| CA2874324A1 (en) * | 2014-12-05 | 2016-06-05 | Rsem, Societe En Commandite | Preparation of corneal graft from corneal tissue |
| RU2631412C1 (en) * | 2016-12-12 | 2017-09-21 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт глазных болезней" | Method for producing donor transplant of descemet's membrane |
| RU2676434C1 (en) * | 2017-12-12 | 2018-12-28 | Государственное бюджетное учреждение "Уфимский научно-исследовательский институт глазных болезней Академии наук Республики Башкортостан" | Combined method for the treatment of corneal diseases with the use of keratoplasty and cross-linking |
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2150920C1 (en) * | 1996-05-22 | 2000-06-20 | Городская клиническая больница скорой медицинской помощи | Surgical method for treating cornea diseases |
| WO2007103053A2 (en) * | 2006-03-06 | 2007-09-13 | Amo Development, Llc | Method of preparing a donor cornea for transplantation |
| CA2644455A1 (en) * | 2006-03-14 | 2007-09-20 | Amo Development, Llc | System and method for ophthalmic laser surgery on a cornea |
| CA2874324A1 (en) * | 2014-12-05 | 2016-06-05 | Rsem, Societe En Commandite | Preparation of corneal graft from corneal tissue |
| RU2631412C1 (en) * | 2016-12-12 | 2017-09-21 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт глазных болезней" | Method for producing donor transplant of descemet's membrane |
| RU2676434C1 (en) * | 2017-12-12 | 2018-12-28 | Государственное бюджетное учреждение "Уфимский научно-исследовательский институт глазных болезней Академии наук Республики Башкортостан" | Combined method for the treatment of corneal diseases with the use of keratoplasty and cross-linking |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ТОНАЕВА Х.Д. Результаты разработки консервационной среды для предоперационной подготовки ультратонкого трансплантата роговицы. Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2018. т. 20 N S1. с. 165. МАЛЮГИН Б.Э. Трансплантация эндотелия и десцеметовой мембраны. Вестник офтальмологии. 2019. т. 135, N 1. c. 98-103. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2822406C1 (en) * | 2024-02-21 | 2024-07-04 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) | Method for preparing scleral allograft for scleroplasty in progressive degenerative myopia |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pruett et al. | Hyaluronic acid vitreous substitute: A six-year clinical evaluation | |
| RU2676434C1 (en) | Combined method for the treatment of corneal diseases with the use of keratoplasty and cross-linking | |
| RU2645931C1 (en) | Keratectasias treatment method | |
| RU2806987C1 (en) | Method for preparing donor material for keratoplasty | |
| RU2348384C1 (en) | Method of cornea surface reconstruction in patients suffering from monocular burn leukomas | |
| RU2723135C1 (en) | Method of corneal graft preparation for layer-by-layer keratoplasty | |
| RU2082364C1 (en) | Method to treat bullous keratopathy | |
| RU2150920C1 (en) | Surgical method for treating cornea diseases | |
| Tay et al. | Crescenteric amniotic membrane grafting in keratoprosthesis-associated corneal melt | |
| RU2348386C2 (en) | Method of nonpenetrating surgical treatment of primary open-angle glaucoma | |
| RU2752547C1 (en) | Method for leveling surface of cornea with microbore in surgical treatment of limbal insufficiency syndrome and/or presence of corneal calcifications (options) | |
| RU2388436C2 (en) | Method of keratoconus treatment | |
| RU2102050C1 (en) | Method for performing layer-by-layer keratoplasty | |
| RU2728708C1 (en) | Method of ultraviolet cross-breeding in patients with progressive keratoconus in initially thin cornea using protective donor corneal protective flap (embodiments) | |
| SU1711878A1 (en) | Method of curative keratoplasty | |
| RU2728707C1 (en) | Method of ultraviolet cross-breeding in patients with progressive keratoconus in initially thin cornea using protective graft of donor cornea | |
| RU2542799C1 (en) | Method of treating corneal keratoconus | |
| RU2396927C1 (en) | Method of surgical treatment of glaucoma | |
| RU2600428C1 (en) | Method for surgical treatment of corneal syndrome in advanced stage of endothelial-epithelial corneal dystrophy | |
| RU2560390C1 (en) | Method of urgent treatment of destructive keratopathy | |
| Ivanovska Adjievska et al. | Corneal edema after cataract surgery-changes in corneal endothelium cell characteristics | |
| RU2804716C1 (en) | Method for accelerated local crosslinking of cornea in keratectasia | |
| RU2811887C1 (en) | Method of early conservative treatment of mild and moderate corneal burns | |
| RU2809524C1 (en) | Method for non-penetrating deep sclerectomy with lenticular tissue drainage for primary open-angle glaucoma | |
| RU2353341C2 (en) | Therapy of recurrent aching bullous keratopathy following phototherapeutic glaucoma eye keratectomy |