RU2713772C1 - Method for producing autologous thrombocyte-rich blood plasma - Google Patents
Method for producing autologous thrombocyte-rich blood plasma Download PDFInfo
- Publication number
- RU2713772C1 RU2713772C1 RU2019116621A RU2019116621A RU2713772C1 RU 2713772 C1 RU2713772 C1 RU 2713772C1 RU 2019116621 A RU2019116621 A RU 2019116621A RU 2019116621 A RU2019116621 A RU 2019116621A RU 2713772 C1 RU2713772 C1 RU 2713772C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- blood
- plasma
- rich
- centrifugation
- platelet
- Prior art date
Links
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 title claims abstract description 23
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 title abstract description 33
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 25
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 25
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 210000004623 platelet-rich plasma Anatomy 0.000 claims description 9
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 claims description 7
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 4
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 206010065319 Macular rupture Diseases 0.000 description 6
- 238000002577 ophthalmoscopy Methods 0.000 description 6
- 230000004304 visual acuity Effects 0.000 description 6
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- IJRKANNOPXMZSG-SSPAHAAFSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O IJRKANNOPXMZSG-SSPAHAAFSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 description 2
- 206010025421 Macule Diseases 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002367 Retinal Perforations Diseases 0.000 description 1
- 206010039897 Sedation Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 230000004452 decreased vision Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 208000029233 macular holes Diseases 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000002406 microsurgery Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000036280 sedation Effects 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F9/00—Methods or devices for treatment of the eyes; Devices for putting in contact-lenses; Devices to correct squinting; Apparatus to guide the blind; Protective devices for the eyes, carried on the body or in the hand
- A61F9/007—Methods or devices for eye surgery
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/19—Platelets; Megacaryocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Hematology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Surgery (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и может быть использовано при хирургическом лечении идиопатических макулярных разрывов сетчатки.The invention relates to medicine, namely to ophthalmology, and can be used in the surgical treatment of idiopathic macular retinal ruptures.
До настоящего времени ведутся дискуссии о протоколах получения аутологичной богатой тромбоцитами плазмы крови. Дизайн и используемое лабораторное оборудование во многом разнятся, что объясняется отсутствием стандартизированной технологии.To date, discussions are ongoing on protocols for obtaining autologous platelet-rich blood plasma. The design and used laboratory equipment are very different, due to the lack of standardized technology.
В получении аутологичной богатой тромбоцитами плазмы крови можно выделить общие ключевые моменты: забор крови, использование антикоагулянта, двухэтапное центрифугирование с использованием различных систем.In obtaining autologous platelet-rich blood plasma, common key points can be identified: blood sampling, the use of an anticoagulant, two-stage centrifugation using various systems.
Известны различные способы получения аутологичной богатой тромбоцитами плазмы крови.Various methods are known for producing autologous platelet-rich blood plasma.
Известен способ получения аутоплазмы с богатым содержанием тромбоцитов, получивший название Плазмолифтинг™. На внутренней стенке пробирки в верхней и средней ее части нанесен мелкодисперсионный гепарин натрия, в нижней части разделительный гель, после забора крови пробирку устанавливают в центрифугу, осуществляют центрифугирование. Относительная сила центрифугирования составляет 1000 об/мин в течение 10 минут (Патент РФ на изобретение №2606338). Следует отметить, что разделительный гель, присутствующий в пробирках, адсорбирует клетки, приводя к получению плазмы с низким содержанием тромбоцитов.A known method of producing autoplasma with a rich platelet content, called Plazmolifting ™. Finely dispersed sodium heparin is applied on the inner wall of the tube in its upper and middle parts, a separation gel is applied in the lower part, after blood sampling, the tube is installed in a centrifuge, centrifugation is carried out. The relative centrifugation force is 1000 rpm for 10 minutes (RF Patent for the invention No. 2606338). It should be noted that the separation gel present in the tubes adsorbs the cells, resulting in a plasma with a low platelet count.
Известен способ получения аутологичного тромбоцитного лизата (pHPL), осуществляемый следующим образом: в 6-8 специализированных пробирок с коммерческим названием Plasmolifting, содержащих гепарин и уникальный гель, производят забор крови объемом 9 мл (всего 54-72 мл), пробирки помещают в центрифугу и центрифугируют в течение 6-7 минут при 3700-3800 об/мин. В ходе вращения в центрифуге, кровь разделяется на две основные фракции - эритроцитарно-лейкоцитарный сгусток и плазму крови, содержащую тромбоциты (тромбоцитарная аутоплазма). Затем шприцем (10,0-20,0 мл) из пробирок забирают супернатант, содержащий аутоплазму, обогащенную тромбоцитами, находящуюся в верхней части пробирки над разделительным гелем помещают в одну пробирку объемом (15,0-50,0 мл) и производят повторное центрифугирование в течение 12-15 минут при 3500-3600 об/мин. Концентрация тромбоцитов в аутоплазме составляет не менее 1000×10 кл/мл. Из обогащенной тромбоцитами аутоплазмы готовят лизат, путем лизиса мембраны тромбоцитов. Тромбоциты аутологичной плазмы лизируют путем двукратного замораживания в жидком азоте (минус 196°С) и быстрого оттаивания на водяной бане (+37°С). Полученный аутологичный тромбоцитный лизат (pHPL) фильтруют через фильтр (0,22 нм) и хранят до использования при температуре минус 20°С. (Патент РФ на изобретение №2652076): Следует отметить необходимость забора большого объема крови, многоэтапность и длительность получения тромбомассы.A known method for producing an autologous platelet lysate (pHPL) is carried out as follows: in 6-8 specialized tubes with the commercial name Plasmolifting, containing heparin and a unique gel, a blood sample of 9 ml (total 54-72 ml) is taken, the tubes are placed in a centrifuge and centrifuged for 6-7 minutes at 3700-3800 rpm During rotation in a centrifuge, blood is divided into two main fractions - an erythrocyte-leukocyte clot and a blood plasma containing platelets (platelet autoplasma). Then, with a syringe (10.0–20.0 ml), the supernatant containing autoplasma enriched with platelets located in the upper part of the tube above the separation gel is taken from one tube into a single tube with a volume (15.0–50.0 ml) and centrifuged again for 12-15 minutes at 3500-3600 rpm. The platelet concentration in autoplasma is at least 1000 × 10 cells / ml. From a platelet-rich autoplasma, a lysate is prepared by lysing the platelet membrane. Autologous plasma platelets are lysed by freezing twice in liquid nitrogen (minus 196 ° C) and quickly thawing in a water bath (+ 37 ° C). The resulting autologous platelet lysate (pHPL) is filtered through a filter (0.22 nm) and stored until use at a temperature of minus 20 ° C. (RF patent for the invention No. 2652076): It should be noted the need for the collection of a large volume of blood, multi-stage and the duration of obtaining thrombomass.
Ближайшим аналогом является способ получения аутологичной богатой тромбоцитами плазмы крови, в которой говорится об эффективном применении аутологичных тромбоцитов в хирургии макулярных разрывов (Konstantinidis, Aristeidis, et al. Efficacy of autologous platelets in macular hole surgery // j. Clinical Ophthalmology / - 2013. - vol. 7, no. 7, p. 745-750). В конце операции на разрыв наносили аутологичный тромбоконцентрат. Получали концентрат следующим путем. Забор 50 мл венозной крови выполняется за 1 час до операции. Данный образец крови смешивают с 6 мл цитрата декстрозы и центрифугируют в режиме 280g (1500 об/мин) в течение 15 минут. Затем выделяется обогащенная тромбоцитами плазма и смешивается с 1/8 объема цитрата декстрозы, после чего снова выполняют центрифугирование в режиме 1000 g в течение 10 минут. Тромбоцитарную массу смешивают с 0,6 мл 0,9% NaCl. Две капли (каждая по 0,1 мл) вводят на поверхность разрыва. По мнению авторов, независимо от скорости вращения центрифуги и времени центрифугирования разделение эритроцитов и тромбоцитов за один этап невозможно.The closest analogue is a method for producing autologous platelet-rich blood plasma, which refers to the effective use of autologous platelets in macular fracture surgery (Konstantinidis, Aristeidis, et al. Efficacy of autologous platelets in macular hole surgery // j. Clinical Ophthalmology / - 2013. - vol. 7, no. 7, p. 745-750). At the end of the operation, an autologous thromboconcentrate was applied to the gap. Received the concentrate in the following way. 50 ml of venous blood is taken 1 hour before surgery. This blood sample was mixed with 6 ml of dextrose citrate and centrifuged at 280g (1500 rpm) for 15 minutes. Then, platelet-rich plasma is released and mixed with 1/8 volume of dextrose citrate, after which centrifugation is again performed in 1000 g mode for 10 minutes. The platelet mass is mixed with 0.6 ml of 0.9% NaCl. Two drops (each 0.1 ml) are injected onto the fracture surface. According to the authors, regardless of the speed of the centrifuge and the time of centrifugation, the separation of red blood cells and platelets in one stage is impossible.
Недостатком данного способа является то, что забор большого объема крови и двухэтапное центрифугирование усложняет методику, а «ручные» процессы получения аутологичной богатой тромбоцитами плазмы четко не регламентированы (перенос слоев из пробирки в пробирку осуществляется «на глаз» с помощью шприца, пипетки), в результате чего не исключено случайное получение плазмы с заниженным количеством тромбоцитов.The disadvantage of this method is that the sampling of a large volume of blood and two-stage centrifugation complicates the procedure, and the “manual” processes for obtaining autologous platelet-rich plasma are not clearly regulated (the layers are transferred from the tube to the tube by eye with a syringe, pipette), As a result, it is possible that plasma with an underestimated platelet count can be obtained.
Задачей изобретения является разработка способа получения аутологичной плазмы с высоким содержанием тромбоцитов путем одноэтапного закрытого центрифугирования из небольшого количества крови.The objective of the invention is to develop a method for producing autologous plasma with a high platelet content by one-stage closed centrifugation from a small amount of blood.
Технический результат, получаемый в результате решения данной задачи, состоит в получении аутологичной богатой тромбоцитами плазмы с высоким содержанием тромбоцитов из небольшого количества крови, путем одноэтапного закрытого центрифугирования, что является доступной и легко воспроизводимой процедурой при наличии стандартного лабораторного оборудования, что расширяет возможности ее применения.The technical result obtained by solving this problem is to obtain an autologous platelet-rich plasma with a high platelet content from a small amount of blood by one-stage closed centrifugation, which is an affordable and easily reproducible procedure with standard laboratory equipment, which expands the possibilities of its application.
Технический результат достигается тем, что, в способе получения аутологичной богатой тромбоцитами плазмы крови, включающем забор венозной крови, смешивание с антикоагулянтом и центрифугирование, согласно изобретению, забор крови проводят в подсоединенный к катетеру шприц с предварительно набранным антикоагулянтом в количестве 1,5 мл, при этом для мужчин объем крови составляет 12,5 мл, а для женщин -13,5 мл; затем шприц закрывают, содержимое перемешивают и вводят в пробирку YCELLBIO-KIT иглой 18 G через парацентральное отверстие в крышке пробирки; центрифугирование проводят при комнатной температуре со скоростью вращения 4000 об/мин в течение 5 минут, извлечение слоя богатой тромбоцитами плазмы проводят тупоконечной тонкостенной канюлей 27 G через центральное отверстие в крышке пробирки.The technical result is achieved by the fact that, in the method of obtaining autologous platelet-rich blood plasma, including venous blood sampling, mixing with an anticoagulant and centrifugation, according to the invention, blood sampling is carried out in a syringe connected to a catheter with a pre-collected anticoagulant in an amount of 1.5 ml, with for men, the blood volume is 12.5 ml, and for women -13.5 ml; then the syringe is closed, the contents are mixed and injected into the YCELLBIO-KIT tube with an 18 G needle through the paracentral hole in the cap of the tube; centrifugation is carried out at room temperature with a rotation speed of 4000 rpm for 5 minutes, the extraction of a layer of platelet-rich plasma is carried out by a blunt, thin-walled 27 G cannula through a central hole in the tube cap.
Способ осуществлялся следующим образом.The method was carried out as follows.
Образец крови берут из кубитальной вены за 30 минут до операции, перед премедикацией. Подготавливают катетер-бабочку, место прокола обрабатывают 70% спиртом и дают высохнуть. После введения иглы в вену жгут тотчас же расслабляют. Забор крови проводят в подсоединенный к катетеру шприц объемом 20 мл с предварительно набранным антикоагулянтом (Цитрат натрия + Декстроза) - 1,5 мл, учитывая пол пациента и физиологическую норму количества тромбоцитов (12,5 мл для мужчин или 13,5 мл для женщин).A blood sample is taken from the cubital vein 30 minutes before surgery, before sedation. A butterfly catheter is prepared, the puncture site is treated with 70% alcohol and allowed to dry. After inserting the needle into the vein, the tourniquet is immediately relaxed. Blood sampling is carried out in a 20 ml syringe connected to a catheter with a pre-collected anticoagulant (Sodium Citrate + Dextrose) - 1.5 ml, taking into account the gender of the patient and the physiological norm of platelet count (12.5 ml for men or 13.5 ml for women) .
Затем шприц закрывают, перемешивают содержимое путем 6-8-кратного переворачивания или вращения (без встряхивания) и переносят кровь в пробирку YCELLBIO-KIT (РУ № РЗН 2014/2149 от 08.12.2014).Then the syringe is closed, the contents are mixed by 6-8-fold inversion or rotation (without shaking) and the blood is transferred into the YCELLBIO-KIT tube (RU No. РЗН 2014/2149 dated 12/08/2014).
Кровь вводят в парацентральное отверстие крышки пробирки под углом 45° иглой 18 G, что облегчает введение.Blood is introduced into the paracentral opening of the tube cap at an angle of 45 ° with a 18 G needle, which facilitates administration.
Универсальный размер пробирки подходит для всех типов центрифуг: с угловым ротором (угол наклона ротора 45°) и ротор-крестовиной с подвесными стаканами.The universal size of the tube is suitable for all types of centrifuges: with an angular rotor (angle of inclination of the rotor 45 °) and a rotor-cross with hanging cups.
Время между взятием образца крови из вены и центрифугированием составляет не более 10 минут. Центрифугирование проводят на лабораторной центрифуге «Armed»:80-2S с угловым ротором при комнатной температуре (от +18 до +24°С). Диапазон скорости вращения прибора - от 1000 до 4000 об/мин с шагом 500 об/мин. Для контроля работы пользуются таймером с установкой времени центрифугирования.The time between taking a blood sample from a vein and centrifugation is no more than 10 minutes. Centrifugation is carried out on an Armed laboratory centrifuge: 80-2S with an angular rotor at room temperature (from +18 to + 24 ° C). The range of rotation speed of the device is from 1000 to 4000 rpm in increments of 500 rpm. To control the operation, they use a timer with a centrifugation time setting.
Пробирку с кровью помещают в центрифугу. В противоположную ячейку ставят такую же пробирку, заполненную водой, в качестве противовеса для уравновешивания образцов.A blood tube is placed in a centrifuge. In the opposite cell, put the same tube filled with water, as a counterweight to balance the samples.
Частоту вращения и времени устанавливают на панели управления прибором: время центрифугирования 5 минут скорость вращения центрифуги 4000 об/мин.The rotation frequency and time are set on the control panel of the device: centrifugation time 5 minutes centrifuge rotation speed 4000 rpm
Сужение в центральной части пробирки обеспечивает точное извлечение слоя богатой тромбоцитами плазмы, которое проводят тупоконечной тонкостенной канюлей 27 G через центральное отверстие в крышке пробирки, что облегчает извлечение.The narrowing in the central part of the tube ensures accurate extraction of the platelet-rich plasma layer, which is carried out by a blunt thin-walled 27 G cannula through the central hole in the tube lid, which facilitates extraction.
Таким образом, разработан способ получения плазмы, который может найти широкое применение в травматологии, спортивной медицине, стоматологии, косметологии. Для получения плазмы сделаны необходимые практические шаги: налажено производство и осуществляется реализация специализированных пробирок (Номер регистрационного удостоверения: YCELLBIO-KIT (Южная Корея) - РУ № РЗН 2014/2149 от 08.12.2014). Особенности конструкции пробирки позволяют проводить закрытое центрифугирование, что исключает непосредственный контакт крови пациента с внешней средой, предотвращая вторичную контаминацию в ходе манипуляций с кровью и плазмой. Герметичная крышка обеспечивает стерильность и неизменность состава плазмы. Разработанный способ получения аутологичной богатой тромбоцитами плазмы крови с использованием специализированных пробирок позволит получить плазму с высоким количеством тромбоцитов. Лабораторные исследования подтвердили увеличение тромбоцитов после центрифугирования в указанном режиме, в среднем, в 7-9 раза. Выбранный опытным путем режим: 4000 об/мин в течение 5 минут - это оптимальный режим для того малого объема крови, с которым необходимо работать, чтобы получить плазму для закрытия макулярного разрыва в центральной зоне сетчатки.Thus, a method for producing plasma has been developed, which can be widely used in traumatology, sports medicine, dentistry, and cosmetology. Necessary practical steps have been taken to obtain plasma: production has been established and specialized tubes are being sold (Registration certificate number: YCELLBIO-KIT (South Korea) - RU No. РЗН 2014/2149 dated 08.12.2014). The design features of the test tube allow for closed centrifugation, which eliminates direct contact of the patient’s blood with the external environment, preventing secondary contamination during manipulations with blood and plasma. Hermetic lid provides sterility and unchanged plasma composition. The developed method for producing autologous platelet-rich blood plasma using specialized test tubes will produce plasma with a high platelet count. Laboratory studies have confirmed an increase in platelets after centrifugation in this mode, on average, 7-9 times. Experimentally selected mode: 4000 rpm for 5 minutes - this is the optimal mode for the small volume of blood that you need to work with to get plasma to close the macular gap in the central area of the retina.
При этом способ является малоинвазивным (требуется незначительное количество крови больного), не затратен (не требуется дорогостоящего оборудования и инструментария).Moreover, the method is minimally invasive (requires a small amount of blood of the patient), is not expensive (does not require expensive equipment and tools).
Пример 1.Example 1
Пациентка Д., 67 лет. Обратилась с жалобами на искривление и снижение зрения на левом глазу в течение 3 месяцев. При обследовании острота зрения на левом глазу 0,06, коррекция улучшения не давала. ВГД=20 мм рт.ст. На правом глазу патологии не выявлено. При офтальмоскопии левого глаза обнаружены помутнения в кортикальных слоях хрусталика и сквозной дефект в макуле. При дополнительном обследовании на оптическом когерентном томографе подтвержден макулярный разрыв D=576 мкм, без задней отслойки стекловидного тела. Диагноз: OS: Осложненная катаракта. Идиопатический макулярный разрыв. Проведена операция микроинвазивная субтотальная витрэктомия с применением богатой тромбоцитами плазмы, полученной из 13,5 мл крови указанным способом. При контрольной явке через 1 месяц коррегированная острота зрения левого глаза 0,4. ВГД 21 мм рт.ст. При офтальмоскопии: передний отрезок без особенностей, интраокулярная линза (ИОЛ) в капсульном мешке, авитрия, макулярный разрыв блокирован, сетчатка прилежит. При осмотре через 3 месяца после операции коррегированная острота зрения левого глаза 0,8. ВГД 19 мм рт.ст. При офтальмоскопии: передний отрезок без особенностей, ИОЛ в капсульном мешке, авитрия, макулярный разрыв блокирован, сетчатка прилежит.Patient D., 67 years old. She complained of distortion and decreased vision in her left eye for 3 months. When examining the visual acuity in the left eye of 0.06, the correction did not give improvement. IOP = 20 mmHg On the right eye pathology is not detected. Ophthalmoscopy of the left eye revealed opacities in the cortical layers of the lens and a through defect in the macula. An additional examination on an optical coherence tomograph confirmed a macular gap of D = 576 μm, without posterior detachment of the vitreous. Diagnosis: OS: Complicated cataract. Idiopathic macular rupture. The operation was performed microinvasive subtotal vitrectomy using platelet-rich plasma obtained from 13.5 ml of blood in the specified way. In the control turnout after 1 month, the corrected visual acuity of the left eye is 0.4. IOP 21 mmHg With ophthalmoscopy: anterior segment without features, an intraocular lens (IOL) in the capsular bag, avitria, macular rupture is blocked, the retina is adjacent. When viewed 3 months after surgery, the corrected visual acuity of the left eye is 0.8. IOP 19 mmHg With ophthalmoscopy: anterior segment without features, IOL in the capsular bag, avitria, macular rupture is blocked, the retina is adjacent.
Пример 2.Example 2
Пациент П., 47 лет. Обратился с жалобами на появление пятна в поле зрения правого глаза в течение 7 месяцев. 3 года назад была проведена факоэмульсификация катаракты обоих глаз. При обследовании острота зрения на правом глазу 0,02, коррекция улучшения не давала. ВГД=20 мм рт.ст. На левом глазу патологии не выявлено. ИОЛ в капсульном мешке. При офтальмоскопии правого глаза - ИОЛ в капсульном мешке, в и сквозной дефект в макуле. При дополнительном обследовании на оптическом когерентном томографе подтвержден макулярный разрыв D=720 мкм, без задней отслойки стекловидного тела. Диагноз: OD: Артифакия. Идиопатический макулярный разрыв. Проведена операция микроинвазивная субтотальная витрэктомия с применением богатой тромбоцитами плазмы, полученной из 12,5 мл крови указанным способом. При контрольной явке через 1 месяц коррегированная острота зрения правого глаза 0,3, ВГД 21 мм рт.ст. При офтальмоскопии: передний отрезок без особенностей, ИОЛ в капсульном мешке, авитрия, макулярный разрыв блокирован, сетчатка прилежит. При осмотре через 3 месяца после операции коррегированная острота зрения правого глаза 0,8. ВГД 19 мм рт.ст. При офтальмоскопии: передний отрезок без особенностей, ИОЛ в капсульном мешке, авитрия, макулярный разрыв блокирован, сетчатка прилежит.Patient P., 47 years old. He complained of the appearance of a spot in the field of vision of the right eye for 7 months. 3 years ago, cataract phacoemulsification of both eyes was performed. When examining the visual acuity in the right eye of 0.02, the correction did not produce improvement. IOP = 20 mmHg On the left eye pathology was not detected. IOL in capsule bag. With ophthalmoscopy of the right eye - IOL in the capsular bag, in and through defect in the macula. An additional examination on an optical coherence tomograph confirmed a macular gap of D = 720 μm, without posterior detachment of the vitreous. Diagnosis: OD: Artifakia. Idiopathic macular rupture. The operation was performed microinvasive subtotal vitrectomy using platelet-rich plasma obtained from 12.5 ml of blood in the specified way. In the control turnout after 1 month, corrected visual acuity of the right eye of 0.3, IOP 21 mm Hg With ophthalmoscopy: anterior segment without features, IOL in the capsular bag, avitria, macular rupture is blocked, the retina is adjacent. When viewed 3 months after surgery, the corrected visual acuity of the right eye is 0.8. IOP 19 mmHg With ophthalmoscopy: anterior segment without features, IOL in the capsular bag, avitria, macular rupture is blocked, the retina is adjacent.
С применением богатой тромбоцитами плазмы, полученной указанным способом в ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» прооперировано 512 пациентов. Во всех случаях были получены хорошие результаты, с высоким количеством тромбоцитов, полученных из небольшого объема крови путем одноэтапного закрытого центрифугирования, что сделало технологию получения плазмы проще.With the use of platelet-rich plasma obtained by the specified method in FSAI "NRC" MTC "Eye Microsurgery" named after Acad. S.N. Fedorov "operated on 512 patients. In all cases, good results were obtained, with a high number of platelets obtained from a small volume of blood by one-stage closed centrifugation, which made the technology for obtaining plasma easier.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019116621A RU2713772C1 (en) | 2019-05-29 | 2019-05-29 | Method for producing autologous thrombocyte-rich blood plasma |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019116621A RU2713772C1 (en) | 2019-05-29 | 2019-05-29 | Method for producing autologous thrombocyte-rich blood plasma |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2713772C1 true RU2713772C1 (en) | 2020-02-07 |
Family
ID=69625503
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019116621A RU2713772C1 (en) | 2019-05-29 | 2019-05-29 | Method for producing autologous thrombocyte-rich blood plasma |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2713772C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2794915C1 (en) * | 2022-11-02 | 2023-04-25 | федеральное государственное автономное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for obtaining autologous platelet-rich plasma in patients with low hematocrit |
| WO2025149908A1 (en) * | 2024-01-08 | 2025-07-17 | Hosa Agrara Rajashekar Sowmya | A composition of platelet rich fibrin and platelet rich plasma and a method thereof |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2391953C1 (en) * | 2009-02-16 | 2010-06-20 | Закрытое акционерное общество "Екатеринбургский центр МНТК "Микрохирургия глаза" | Macular ruptures surgical treatment method |
| RU2606338C1 (en) * | 2015-11-19 | 2017-01-10 | Акционерное общество "Екатеринбургский центр МНТК "Микрохирургия глаза" | Method of surgical management of macular holes using autologous platelet-rich plasma and method of its obtaining |
| RU2652076C1 (en) * | 2017-05-19 | 2018-04-24 | Федеральное государственное автономное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of surgical treatment of end-to-end idiopathic macular ruptures of the retina |
-
2019
- 2019-05-29 RU RU2019116621A patent/RU2713772C1/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2391953C1 (en) * | 2009-02-16 | 2010-06-20 | Закрытое акционерное общество "Екатеринбургский центр МНТК "Микрохирургия глаза" | Macular ruptures surgical treatment method |
| RU2606338C1 (en) * | 2015-11-19 | 2017-01-10 | Акционерное общество "Екатеринбургский центр МНТК "Микрохирургия глаза" | Method of surgical management of macular holes using autologous platelet-rich plasma and method of its obtaining |
| RU2652076C1 (en) * | 2017-05-19 | 2018-04-24 | Федеральное государственное автономное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of surgical treatment of end-to-end idiopathic macular ruptures of the retina |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ARISTEIDIS KONSTANTINIDIS, MARK HERO et.al. Efficacy of autologous platelets in macular hole surgery, Clinical ophthalmology, 2013, v. 7, N 7, p. 745-750. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2794915C1 (en) * | 2022-11-02 | 2023-04-25 | федеральное государственное автономное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for obtaining autologous platelet-rich plasma in patients with low hematocrit |
| RU2805814C1 (en) * | 2022-12-23 | 2023-10-24 | Акционерное общество "Екатеринбургский центр МНТК "Микрохирургия глаза" | Method of producing platelet-rich blood plasma for treatment of macular retinal holes |
| WO2025149908A1 (en) * | 2024-01-08 | 2025-07-17 | Hosa Agrara Rajashekar Sowmya | A composition of platelet rich fibrin and platelet rich plasma and a method thereof |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2606338C1 (en) | Method of surgical management of macular holes using autologous platelet-rich plasma and method of its obtaining | |
| Gehring et al. | Preparation of autologous platelets for the ophthalmologic treatment of macular holes | |
| RU2713772C1 (en) | Method for producing autologous thrombocyte-rich blood plasma | |
| RU2195297C2 (en) | Method for treating dystrophic diseases of eyes | |
| RU2720164C1 (en) | Method for surgical treatment of macular ruptures using autologous thrombocyte enriched plasma | |
| RU2794915C1 (en) | Method for obtaining autologous platelet-rich plasma in patients with low hematocrit | |
| RU2704256C1 (en) | Method of preparation of autologous two-component fibrin adhesive | |
| RU2683740C1 (en) | Method of surgical treatment of retinal detachment with peripheral retinal rupture | |
| RU2735465C1 (en) | Method of treating macular retina fractures without vitreal cavity tamponage | |
| WO2025092080A1 (en) | Use of human-derived mitochondria in preparation of drug for treating achilles tendon injury | |
| RU2455966C1 (en) | Method of microinvasive surgical treatment of retinal detachment recurrence | |
| RU2393824C1 (en) | Method of treating macular oedemas of various geneses | |
| RU2699206C1 (en) | Method of treating corneal defects via an autologous thrombofibrin clot | |
| RU2130186C1 (en) | Method for determining cataract extraction termin in the matched eye in cases of bilateral cataract | |
| RU2805814C1 (en) | Method of producing platelet-rich blood plasma for treatment of macular retinal holes | |
| RU2830805C2 (en) | Method for surgical management of through macular ruptures using autologous platelet-rich plasma | |
| RU2850202C1 (en) | Method for eliminating port mobility when performing vitreoretinal surgeries involving the use of autologous conditioned plasma | |
| RU2822651C1 (en) | Method for determining type of tamponade of vitreal cavity with preoperative use of global tests for assessing the state of haemostasis in surgical treatment of retinal ruptures using platelet-rich blood plasma | |
| RU2822593C1 (en) | Method for determining the exposure time of platelet-rich blood plasma to the area of rupture in the surgical management of macular retinal ruptures with the preoperative application of global test for assessing the state of haemostasis | |
| RU2821827C1 (en) | Method for removing heavy silicone oil from vitreal cavity for eyes with high myopia | |
| RU2827075C1 (en) | Method of producing autologous bone marrow aspirate concentrate | |
| RU2820489C1 (en) | Method of treating macular rupture complicated by drusenoid detachment of retinal pigment epithelium | |
| RU2853301C1 (en) | Method for surgical treatment of retinal macular holes without internal limiting membrane peeling and vitreous cavity tamponade | |
| RU2832387C1 (en) | Method for surgical management of acute keratoconus | |
| RU2770287C1 (en) | Method for the treatment and prevention of corneal transplant rejection |