RU2446821C2 - Лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способ лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями - Google Patents
Лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способ лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями Download PDFInfo
- Publication number
- RU2446821C2 RU2446821C2 RU2010129297/10A RU2010129297A RU2446821C2 RU 2446821 C2 RU2446821 C2 RU 2446821C2 RU 2010129297/10 A RU2010129297/10 A RU 2010129297/10A RU 2010129297 A RU2010129297 A RU 2010129297A RU 2446821 C2 RU2446821 C2 RU 2446821C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibodies
- activated
- brain
- interferon
- potentiated form
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 53
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims abstract description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 title claims abstract description 18
- 208000007125 Neurotoxicity Syndromes Diseases 0.000 title claims abstract description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 18
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 claims abstract description 96
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 claims abstract description 49
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims abstract description 48
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 claims abstract description 47
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims abstract description 47
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims abstract description 47
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 claims abstract description 45
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 33
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 31
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 31
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 14
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims abstract description 8
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 8
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 claims abstract description 5
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims abstract 2
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 claims abstract 2
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 claims abstract 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 52
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 51
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 37
- 230000001632 homeopathic effect Effects 0.000 claims description 24
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 20
- 102000013674 S-100 Human genes 0.000 claims description 9
- 108700021018 S100 Proteins 0.000 claims description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 8
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 7
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 4
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 claims description 3
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 230000028993 immune response Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 40
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 20
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 18
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 13
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 13
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 11
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 10
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 9
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 8
- 238000011161 development Methods 0.000 description 7
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 7
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 6
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 6
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 6
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 6
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 6
- 239000002287 radioligand Substances 0.000 description 6
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 6
- 108010072051 Glatiramer Acetate Proteins 0.000 description 5
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 5
- 229940038717 copaxone Drugs 0.000 description 5
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 5
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 4
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 description 4
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 4
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 4
- VOKSWYLNZZRQPF-BXKNQVALSA-N [3h]pentazocine Chemical compound C[C@H]1[C@]2(C)CCN(CC=C(C)C)[C@H]1CC1=C2C([3H])=C(O)C([3H])=C1 VOKSWYLNZZRQPF-BXKNQVALSA-N 0.000 description 4
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 4
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 206010012305 Demyelination Diseases 0.000 description 3
- 101000836994 Homo sapiens Sigma non-opioid intracellular receptor 1 Proteins 0.000 description 3
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 3
- 101710104750 Sigma non-opioid intracellular receptor 1 Proteins 0.000 description 3
- 102100028656 Sigma non-opioid intracellular receptor 1 Human genes 0.000 description 3
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 208000012997 experimental autoimmune encephalomyelitis Diseases 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000000626 neurodegenerative effect Effects 0.000 description 3
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 3
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000032274 Encephalopathy Diseases 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000004006 Tick-borne encephalitis Diseases 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- LNEPOXFFQSENCJ-UHFFFAOYSA-N haloperidol Chemical compound C1CC(O)(C=2C=CC(Cl)=CC=2)CCN1CCCC(=O)C1=CC=C(F)C=C1 LNEPOXFFQSENCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 2
- 230000031146 intracellular signal transduction Effects 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000004126 nerve fiber Anatomy 0.000 description 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 2
- 230000002887 neurotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800000263 Acidic protein Proteins 0.000 description 1
- 206010001497 Agitation Diseases 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 102000003916 Arrestin Human genes 0.000 description 1
- 108090000328 Arrestin Proteins 0.000 description 1
- 206010003550 Asthenic conditions Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000000584 Calmodulin Human genes 0.000 description 1
- 108010041952 Calmodulin Proteins 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020843 Hyperthermia Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019430 Motor disease Diseases 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 102000017099 Myelin-Associated Glycoprotein Human genes 0.000 description 1
- 108010013731 Myelin-Associated Glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 102100021831 Myelin-associated glycoprotein Human genes 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 208000007542 Paresis Diseases 0.000 description 1
- 102000016202 Proteolipids Human genes 0.000 description 1
- 108010010974 Proteolipids Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 102100028601 Transaldolase Human genes 0.000 description 1
- 108020004530 Transaldolase Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001510 aspartic acids Chemical class 0.000 description 1
- 206010003549 asthenia Diseases 0.000 description 1
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 230000004094 calcium homeostasis Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 238000011037 discontinuous sequential dilution Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000001712 encephalitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- 230000002518 glial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 150000002307 glutamic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960003878 haloperidol Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 230000036031 hyperthermia Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 102000027411 intracellular receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008582 intracellular receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012500 ion exchange media Substances 0.000 description 1
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 1
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 108010077055 methylated bovine serum albumin Proteins 0.000 description 1
- 210000000274 microglia Anatomy 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 239000000712 neurohormone Substances 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 1
- 231100000189 neurotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N pyridoxal 5'-phosphate Chemical compound CC1=NC=C(COP(O)(O)=O)C(C=O)=C1O NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 238000011808 rodent model Methods 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, включающими нейроинфекционные и нейродегенеративные заболевания, выполнено в виде фармацевтической композиции и содержит активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100. Фармацевтическая композиция выполнена в твердой лекарственной форме - в виде гранул. В качестве фармацевтически приемлемых добавок она включает лактозу, микрокристаллическую целлюлозу и стеарат магния, а каждый из компонентов сверхмалых доз аффинно очищенных антител используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, гомеопатических разведений. Способ лечения и профилактики инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, включает введение в организм активированной-потенцированной формы антител к ИФН-γ и усиливающего агента в виде активированной-потенцированной формы сверхмалых доз аффинно очищенных антител к мозгоспецифическому белку S-100. Использование изобретения позволит усилить иммунный ответ на пике развития болезни, обеспечить эффективную реабилитацию и предотвратить рецидивы заболевания. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для эффективного лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями.
Из уровня техники известно лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, в том числе вирусной этиологии, на основе активированной формы сверхмалых доз антител к интерферону (RU 2192888 C1, A61K 39/395, 20.11.2002).
Известен также способ предупреждения клещевого энцефалита у детей путем назначения препарата «Анаферон», который содержит активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека (RU 2281784 C1, A61K 39/395, 20.08.2006; Скрипченко Н.В., Моргацкий Н.В. и др. Перспективы экстренной профилактики клещевого энцефалита у детей. Нейроиммунология, Т.IV, №3-4, 2006, с.52-56).
Однако данные известные лекарственные средства не во всех случаях обеспечивают достаточную терапевтическую эффективность при лечении различных инфекционных заболеваний, в том числе сопровождающихся нейротоксическими нарушениями.
Изобретение направлено на создание эффективного лекарственного средства и способа лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, в том числе у детей.
Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, согласно изобретению, содержит активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100.
При этом активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - вертикального встряхивания.
Кроме того, лекарственное средство может быть выполнено в твердой лекарственной форме, которая содержит эффективное количество гранул нейтрального носителя, насыщенного смесью активированной-потенцированной формы антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, и фармацевтически приемлемые добавки.
При этом водные или водно-спиртовые растворы активированных-потенцированных форм антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и к мозгоспецифическому белку S-100 получены путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия из матричных растворов аффинно очищенных антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и мозгоспецифическому белку S-100 с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.
Предпочтительно каждый из компонентов сверхмалых доз аффинно очищенных антител используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, гомеопатических разведений.
Предпочтительно лекарственное средство содержит активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением матричного раствора в 10012 10030 10050 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30 и С50.
Возможно использование смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30 и С200 или, соответственно, сверхразведений матричного раствора в 10012 10030 100200 раз.
Причем фармацевтически приемлемые добавки включают лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.
Решение поставленной задачи обеспечивается также тем, что в способе лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, путем введения в организм лекарственного средства, согласно изобретению, указанное лекарственное средство содержит активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100.
Предпочтительно указанными инфекционными заболеваниями, сопровождающимися нейротоксическими нарушениями (гипертермия, судороги, возбуждение, расстройство сознания, астения и т.п.), являются нейроинфекции вирусной и смешанной этиологии.
При этом активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - вертикального встряхивания.
Кроме того, лекарственное средство содержит действующие компоненты в соотношении 1:1, при этом каждый компонент используют в виде смеси трех соответствующих матричных растворов, разведенных в 10012, 10030 и 10050 раз, что эквивалентно сотенным гомеопатическим разведениям С12, С30, С50.
Заявленная фармацевтическая композиция может быть использована для профилактики постинфекционных астенических состояний и нейротоксических расстройств, в том числе у склонных к ним детей.
Кроме того, возможно использование фармацевтической композиции в составе комплексной терапии интерфероночувствительных нейродизрегуляторных заболеваний.
Заявленную фармацевтическую композицию рекомендуется принимать, предпочтительно, по 1-2 таблетке 1-4 раза в день.
При лечении инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими явлениями, возможно раздельное применение в виде двух отдельно приготовленных препаратов как в виде растворов, так и в твердых лекарственных формах (таблеток), каждая из которых содержит активированную-потенцированную форму сверхмалых доз аффинно очищенных антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и, соответственно, активированную-потенцированную форму сверхмалых доз аффинно очищенных антител к мозгоспецифическому белку S-100.
Предложенное сочетание активированных-потенцированных форм антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и к мозгоспецифическому белку S-100 в фармацевтической композиции (т.е. формы антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и к мозгоспецифическому белку S-100, приготовленные по гомеопатической технологии потенцирования путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия - вертикального встряхивания, которые обладают активностью в фармакологических моделях и/или клинических методах лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими действиями) обеспечивает получение неожиданного синергетического терапевтического эффекта, экспериментально подтвержденного на адекватной модели, который заключается в существенном улучшении эффективности лечения широкого спектра инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, в том числе нейроинфекции вирусной и смешанной этиологии. Заявленный технический результат обусловлен тем, что в предложенной фармацевтической композиции активированная-потенцированная форма антител к мозгоспецифическому белку S-100 усиливает эффективность действия активированной-потенцированной формы антител к гамма-интерферону, заключающегося в нейропротекторном действии, нормализации нейрогуморальной регуляции при интерферонозависимых заболеваниях нервной системы, усилении сбалансированного влияния на интерфероночувствительные нейродизрегуляторные процессы. Синергетический эффект заявленного решения обусловлен проявлением аффинитета к внутриклеточному рецептору сигма-1, локализованному в центральной нервной системе, большинстве периферических тканях, иммуноцитах, который регулирует через контроль концентрации внутриклеточного кальция внутриклеточной сигнальной каскады, что эффективно нормализует регуляцию процесса миелинизации-демиелинизации нервных волокон.
Кроме того, заявленное лекарственное средство расширяет арсенал препаратов, предназначенных для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, в том числе нейроинфекции вирусной и смешанной этиологии.
Лекарственное средство приготовляют, преимущественно, следующим образом.
Для приготовления гомеопатически активированной-потенцированной формы действующих компонентов используют моноклональные или, преимущественно, поликлональные антитела, которые могут быть получены по известным технологиям-методикам, описанным, например, в книге Иммунологические методы, под ред. Г.Фримеля, М., «Медицина», 1987, с.9-33 или, например, в статье Laffly E., Sodoyer R. Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after. - 2005. - Vol.14. - N 1-2. P.33-55.
Для проведения экспериментальных исследований могут быть использованы антитела, приготовленные по заказу специализированной фармацевтической фирмой.
Моноклональные антитела получают, например, с помощью гибридомной технологии. Причем начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на принципах, уже разработанных при приготовлении поликлональных антисывороток. Дальнейшие этапы работы предусматривают получение гибридных клеток, продуцирующих клоны одинаковых по специфичности антител. Их выделение в индивидуальном виде проводится теми же методами, что и в случае поликлональных антисывороток.
Поликлональные антитела могут быть получены активной иммунизацией животных. Для этого по специально разработанной схеме животным делают серию инъекций требуемым в соответствии с изобретением веществом - антигеном: гамма-интерфероном человека (ИФН-γ) и мозгоспецифическим белком S-100. В результате проведения такой процедуры получают моноспецифическую антисыворотку с высоким содержанием антител, которую и используют для получения активированной-потенцированной формы. При необходимости проводят очистку антител, присутствующих в антисыворотке, например, методом аффинной хроматографии, путем применения фракционирования солевым осаждением или ионообменной хроматографии.
Предпочтительным для приготовления заявленного лекарственного препарата является использование поликлональных антител к гамма-интерферону человека и мозгоспецифическому белку S-100, которые могут быть получены иммунизацией кроликов следующим образом.
Для проведения экспериментальных исследований были использованы антитела, приготовленные по заказу специализированной фармацевтической фирмой.
Для получения поликлональных антител к гамма-интерферону человека в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов используют адъювант и, например, цельную молекулу гамма-интерферона человека следующей последовательности:
Возможно для получения поликлональных антител к гамма-интерферону человека в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов использование адъюванта и, например, одного полипептидного фрагмента гамма-интерферона человека, выбранного из следующих последовательностей:
Перед отбором крови за 7-9 дней проводят 1-3 внутривенных инъекций для повышения уровня антител. В процессе иммунизации у кроликов отбирают небольшие пробы крови для оценки количества антител. Максимальный уровень иммунного ответа на введение большинства растворимых антигенов достигается через 40-60 дней после первой инъекции. После окончания первого цикла иммунизации кроликов в течение 30 дней дают восстановить здоровье и проводят реиммунизацию, включающую 1-3 внутривенные инъекции. Для получения антисыворотки из иммунизированных кроликов собирают кровь в центрифужную пробирку объемом 50 мл. С помощью деревянного шпателя удаляют со стенок пробирки образовавшиеся сгустки и помещают палочку в сгусток, образовавшийся в центре пробирки. Кровь помещают в холодильник (температура 4°С) на ночь. На следующий день удаляют сгусток, прикрепившийся к шпателю, и центрифугируют оставшуюся жидкость при 13000 g в течение 10 мин. Супернатант (надосадочная жидкость) является антисывороткой. Полученная антисыворотка должна быть желтого цвета. Добавляют к антисыворотке 20% (весовая концентрация) NaN3 до конечной концентрации 0,02% и хранят до использования в замороженном состоянии при температуре -20°С. Для выделения из антисыворотки антител к гамма-интерферону человека производят абсорбцию на твердой фазе в следующей последовательности:
1) 10 мл антисыворотки кролика разбавляют в 2 раза 0,15 М NaCl, добавляют 6,26 г Na2SO4, перемешивают и инкубируют 12-16 ч при 4°С;
2) выпавший осадок удаляют центрифугированием, растворяют в 10 мл фосфатного буфера и затем диализуют против того же буфера в течение ночи при комнатной температуре;
3) после удаления осадка центрифугированием раствор наносят на колонку с ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешенную фосфатным буфером;
4) фракцию антител определяют, измеряя оптическую плотность элюата при 280 нм.
Затем производят очистку антител методом аффинной хроматографии путем прикрепления полученных антител к гамма-интерферону человека, который находится на нерастворимом матриксе, с последующим элюированием концентрированными растворами соли.
Полученный таким образом буферный раствор поликлональных кроличьих антител к гамма-интерферону человека, очищенных на антигене, с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, предпочтительно 2,0÷3,0 мг/мл, используют в качестве матричного (первичного) раствора для последующего приготовления активированной-потенцированной формы.
Для получения поликлональных антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют мозгоспецифический белок S-100, физико-химические свойства которого описаны в статье М.В.Старостина, С.М.Свиридов, Нейроспецифический белок S-100, Успехи современной биологии, 1977 г., т.5, с.170-178; книге М.Б.Штарк, Мозгоспецифические белки /антигены/ и функции нейрона, М., "Медицина", 1985 г.; с.12-14, выделенный из ткани головного мозга быка по следующей методике:
- замороженную в жидком азоте ткань растирают в порошок на специальной мельнице;
- экстракцию белков проводят в соотношении 1:3 (вес/объем) в экстрагирующем буфере при гомогенизации;
- гомогенат прогревают в течение 10 мин при 60°С и охлаждают до 4°С на ледяной бане;
- термолабильные белки удаляют центрифугированием;
- проводят ступенчатое фракционирование сульфатом аммония с последующим удалением выпадающих в осадок примесных белков;
- содержащую белок S-100 фракцию осаждают 100% насыщенным сульфатом аммония при снижении рН до 4,0 и собирают центрифугированием;
- осадок растворяют в минимальном объеме буфера, содержащего ЭДТА и меркаптоэтанол, диализируют против деионизованной воды и лиофильно высушивают;
- фракционирование кислых белков продолжают хроматографией на ионообменных носителях - ДЭАЭ целлюлозе ДЕ-52 и затем ДЭАЭ-сефадексе А-50;
- собранные и отдиализованные фракции, содержащие белок S-100, разделяют по молекулярному весу гель-фильтрацией на сефадексе G-100;
- очищенный белок S-100 диализируют и лиофильно высушивают.
Молекулярный вес очищенного мозгоспецифического белка S-100 составляет 21000 д.
Благодаря высокому содержанию аспарагиновой и глутаминовой кислот мозгоспецифический белок S-100 является сильнокислым и занимает крайнее анодное положение при электрофорезе в прерывистой буферной системе в полиакриламидном геле, что облегчает его идентификацию.
Для получения мозгоспецифической антисыворотки к выделенному мозгоспецифическому белку S-100 готовят смесь очищенного белка S-100 (антигена) в комплексе с метилированным бычьим сывороточным альбумином в качестве носителя с полным адъювантом Фрейнда, которую вводят подкожно лабораторному животному - кролику в область спины в количестве 1-2 мл. На 8-й, 15-й день проводят повторную иммунизацию. Забор крови производят (например, из вены уха) на 26-й и 28-й день.
Полученная антисыворотка имеет титр 1:500-1:1000, образует единственную полосу преципитации с экстрактом из нервной ткани, но не реагирует с экстрактами гетерологичных органов и формирует единственный пик преципитации как с чистым белком S-100, так и с экстрактом нервной ткани, что свидетельствует о моноспецифичности полученной антисыворотки.
Полученные таким образом буферные растворы каждого компонента поликлональных антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и мозгоспецифическому белку S-100 с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, предпочтительно 2,5÷3,0 мг/мл, используют в качестве матричных (первичных) растворов для последующего приготовления активированных-потенцированных форм лекарственного средства.
Активированную-потенцированную форму каждого компонента готовят путем равномерного уменьшения концентрации в результате последовательного разведения 1 части упомянутого матричного раствора в 9 частях (для десятичного разведения) или в 99 частях (для сотенного разведения) или в 999 частях (для тысячного разведения) нейтрального растворителя с многократным вертикальным встряхиванием ("динамизацией") каждого полученного разведения и использованием отдельных емкостей для каждого последующего разведения до получения требуемой потенции - кратности разведения по гомеопатическому методу (см., например, В.Швабе. "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29).
Внешнюю обработку в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием.
Например, для приготовления 12-го сотенного разведения С12 одну часть упомянутого матричного раствора антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) (или антител к мозгоспецифическому белку S-100) с концентрацией 3,0 мг/мл разводят в 99 частях нейтрального водного или водно-спиртового растворителя (преимущественно 15% этилового спирта) и многократно (10 и более раз) вертикально встряхивают - потенцируют полученное 1-е сотенное С1 разведение. Из 1-го сотенного С1 разведения приготовляют 2-е сотенное разведение С2. Данную операцию повторяют 11 раз, получая 12-е сотенное разведение С12. Таким образом, 12-е сотенное разведение С12 представляет собой раствор, полученный разбавлением последовательно в разных емкостях 12 раз 1-й части исходного матричного раствора антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) с концентрацией 3,0 мг/мл в 99-ти частях нейтрального растворителя, т.е. раствор, полученный разведением матричного раствора в 10012 раз. Аналогичные операции с соответствующей кратностью разведения проводят для получения разведений С30 и С50.
При использовании в качестве действующих веществ каждого компонента смеси различных гомеопатических, преимущественно сотенных, разведений (например, С12, С30, С50) действующее вещество каждого из компонентов приготовляют раздельно по описанной выше технологии до их предпоследнего разведения (соответственно, до получения С11, С29, С49) и затем вносят в соответствии с составом смеси в одну емкость по одной части каждого компонента и смешивают с требуемым количеством растворителя (соответственно, с 97 частями для сотенного разведения). При этом получают активированную-потенцированную форму антител каждого из компонентов (к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и к мозгоспецифическому белку S-100) в сверхмалой дозе, полученной разведением матричного раствора в 10012, 10030, 10050 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С50.
Возможно использование действующего вещества в виде смеси других различных гомеопатических разведений, например десятичных, и/или сотенных, и/или тысячных (С12, С30, С200; D20, С30, С100 или D20, С30, М100 и т.д.), эффективность которых определяют экспериментально.
При потенцировании вместо встряхивания в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять внешнее воздействие ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием.
Для получения лекарственного средства водные или водно-спиртовые растворы действующих веществ компонентов смешивают, преимущественно, в соотношении 1:1 и используют в жидкой лекарственной форме.
Заявленное лекарственное средство может быть использовано и в твердой лекарственной форме, которая содержит эффективное количество гранул нейтрального носителя - лактозы, насыщенных путем пропитывания до насыщения смесью, приготовленных по вышеуказанной технологии, водных или водно-спиртовых растворов активированных-потенцированных форм антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и к мозгоспецифическому белку S-100, и фармацевтически приемлемые добавки, включающие, преимущественно, лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.
Для получения твердой оральной формы заявленного лекарственного средства производят в установке кипящего слоя (например, типа «Hüttlin Pilotlab» производства компании Hüttlin GmbH) орошение до насыщения вводимых в псевдоожиженный - кипящий слой гранул нейтрального вещества - лактозы (молочного сахара) с размером частиц 150÷300 мкм предварительно полученным водным или водно-спиртовым раствором активированных-потенцированных форм антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и к мозгоспецифическому белку S-100, преимущественно, в соотношении 1 кг раствора антител на 5 или 10 кг лактозы (1:5-1:10) с одновременной сушкой в потоке подаваемого под решетку нагретого воздуха при температуре не выше 40°С. Расчетное количество 0,17÷0,34 от массы твердой оральной формы высушенных гранул, насыщенных активированной-потенцированной формой антител, загружают в смеситель и смешивают с микрокристаллической целлюлозой, вводимой в количестве 3÷8 масс. частей от общей массы загрузки - от массы твердой оральной формы. Затем в эту смесь добавляют 25÷45 масс. частей от общей массы загрузки «ненасыщенной» чистой лактозы (для снижения стоимости и некоторого упрощения и ускорения технологического процесса без снижения эффективности лечебного воздействия), стеарат магния в количестве 0,1÷0,3 масс. частей от общей массы загрузки. Полученную таблеточную массу равномерно перемешивают и таблетируют прямым сухим прессованием (например, в таблет-прессе Korsch - XL 400) с формированием круглых таблеток массой 150÷500 мг. После таблетирования получают таблетки массой 300 мг, пропитанные водно-спиртовым раствором (3,0-6,0 мг/табл.), активированной-потенцированной формой антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и к мозгоспецифическому белку S-100 в сверхмалой дозе, каждого компонента, приготовленной из матричного раствора, разведенного в 10012, в 10030, в 100200, что эквивалентно смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30 и С200.
Предпочтительно использовать таблетки массой 250÷300 мг, которые включают 3,0÷6,0 мг/табл. активированной-потенцированной формы водно-спиртовых разведений субстанции - действующего вещества поликлональных кроличьих антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ) и к мозгоспецифическому белку S-100, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной разведением матричного раствора в 10012, 10030, 10050 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С50.
Предпочтительно заявленное лекарственное средство рекомендуется принимать по 1-2 таблетке 2-4 раза в день.
Пример 1
Исследование влияния заявленного лекарственного средства в виде комплексного препарата СМД AT к ИФН-γ+СМД AT к S100, в состав которого входят сверхмалые дозы антител к белку S100 (смесь гомеопатических разведений С12+С30+С50) и сверхмалые дозы антител к интерферону гамма (смесь гомеопатических разведений С12+С30+С50) в соотношении 1:1, а также компонентов, входящих в его состав (сверхмалые дозы антител к белку S100 (смесь гомеопатических разведений С12+С30+С50) (СМД AT к S100) и сверхмалые дозы антител к интерферону гамма (смесь гомеопатических разведений С12+С30+С50) (СМД AT к ИФН-γ)), in vitro на связывание стандартного лиганда [3Н]пентазоцина с рекомбинантным сигма-1 рецептором человека оценивали радиолигандным методом.
Сигма-1 рецептор - внутриклеточный рецептор, локализованный в клетках центральной нервной системы, клетках большинства периферических тканей и иммунокомпетентных клетках. Этот рецептор посредством контроля гомеостаза внутриклеточного кальция регулирует внутриклеточные сигнальные каскады, приводящие к активации соответствующих транскрипционных факторов и транскрипции целого семейства генов. Сигма-1 рецептор вовлечен в патогенез различных заболеваний, в том числе инфекционных и нейродегенеративных. В связи с этим препараты, оказывающие влияние на данный рецептор и эффективность взаимодействия с ним лигандов, могут рассматриваться как эффективные лекарственные средства для лечения нейроинфекционных, нейродегенеративных и других заболеваний.
В качестве контроля в данной экспериментальной модели была использована потенцированная дистиллированная вода (смесь гомеопатических разведений С12+С30+С50) - (потенцированная вода).
В процессе исследования (для измерения общего связывания) в инкубационную среду вносили 20 мкл комплексного препарата или по 10 мкл СМД AT к S100 или СМД AT к ИФН-γ. Таким образом, количество СМД AT к S100 и СМД AT к ИФН-γ, вносимых в экспериментальную лунку при тестировании комплексного препарата, было идентично количеству СМД AT к S100 и СМД AT к ИФН-γ, тестируемых в качестве монопрепаратов, что позволяет провести сравнение эффективности комплексного препарата с его отдельными компонентами, входящими в его состав. Потенцированную воду вносили в инкубационную среду в объеме 20 мкл и 10 мкл.
Затем вносили 160 мкл (~200µg белка) гомогената мембран клеток линии Jurkat (линия лейкемических Т-лимфоцитов человека) и в последнюю очередь 20 мкл радиолиганда меченого тритием [3Н]пентазоцин (15 нМ).
Для измерения неспецифического связывания вместо препаратов или потенцированной воды в инкубационную среду вносили 20 мкл немеченого лиганда - галоперидол (10 мкМ).
Радиоактивность измеряли на сцинтилляционном счетчике (Topcount, Packard) с использованием сцинтилляционной смеси (Microscint 0, Packard) после инкубации в течение 120 минут при температуре 22°С в 50 мМ Tris-HCl буфере (рН=7,4) и фильтрации на стекловолоконных фильтрах (GF/B, Packard). Специфическое связывание (в опыте или контроле) рассчитывали как разницу между общим (в опыте или контроле) и неспецифическим связыванием.
Результаты исследований представлены в виде процента ингибирования специфического связывания в контроле (в качестве контроля использовали потенцированную воду) (Таблица 1).
| Таблица 1. | |||||
| Влияние препаратов и потенцированной воды на связывание стандартного радиолиганда [3H]пентазоцина с рекомбинантным сигма-1 рецептором человека | |||||
| Эксперименталь ная группа |
Количество, вносимое в экспериментальную лунку | % от специфического связывания радиолиганда в контроле | % ингибированя связывания радиолиганда в контроле | ||
| 1-е измерение | 2-е измерение | Среднее значение | |||
| Комплексный препарат | 20 мкл | 44,2 | 46,2 | 45,2 | 54,8 |
| СМД AT к S100 | 10 мкл | 70,9 | 62,9 | 66,9 | 33,1 |
| СМД AT к ИФН-γ | 10 мкл | 158,9 | 149,8 | 154,3 | -54,3 |
| Потенцированная вода | 20 мкл | 98,1 | 75,8 | 86,9 | 13,1 |
| Потенцированная вода | 10 мкл | 140,1 | 106,2 | 123,2 | -23,2 |
| Примечание: | |||||
| % специфического связывания в контроле=(специфическое связывание в опыте/специфическое связывание в контроле)*100%; | |||||
| % ингибирования специфического связывания в контроле=100% - (специфическое связывание в опыте/специфическое связывание в контроле)*100%. | |||||
В условиях данной экспериментальной модели показано, что комплексный препарат (СМД AT к S100+СМД AT к ИФН-γ) более эффективно, чем отдельные его компоненты (СМД AT к S100) и (СМД AT к ИФН-γ), ингибирует связывание стандартного радиолиганда [3H]пентазоцина с рекомбинантным сигма-1 рецептором человека и может быть использован как эффективное лекарственное средства для лечения нейроинфекционных, нейродегенеративных и других заболеваний, в частности для лечения рассеянного склероза.
Пример 2
Иммунный ответ при рассеянном склерозе характеризуется сложным, многокомпонентным каскадом событий. Широкое использование экспериментальных моделей рассеянного склероза, а именно аутоиммунной энцефалопатии у грызунов и нокаутных мышей, позволило ученым существенно продвинуться в понимании патогенеза данного заболевания.
Экспериментальный аллергический энцефаломиелит (ЭАЭ) является общепризнанной моделью рассеянного склероза - тяжелого аутоиммунного демиелинизирующего заболевания, поражающего людей трудоспособного возраста.
Индуцировать ЭАЭ у чувствительных животных можно гомогенатом гомологичной (Raine, Traugott, 1984) или гетерологичной (McCombe et al., 1994) мозговой ткани, очищенным миелином или белками, входящими в его состав. В настоящее время описано более 20 белков миелина (Baumann, Pham-Dinh, 2001), из которых обладают иммуногенными свойствами и наиболее часто используются для индукции ЭАЭ: основной белок миелина - ОБМ, протеолипидный протеин - ПЛП, гликопротеины: миелин ассоциированный гликопротеин - МАГ и миелин олигодендроцитарный гликопротеин - МОГ, олигодендроцитарный специфический белок - ОСБ. Выявлено, что не только целые белки, но и определенные фрагменты этих белков способны при введении животным вызывать ЭАЭ.
Заболевание типа ЭАЭ (с воспалительным процессом) можно воспроизвести на чувствительных животных белками ЦНС, не входящими в состав миелина: кальмодулином, белком S100, глиальным фибриллярным кислым белком, арестином и трансальдолазой.
Наиболее адекватной моделью PC является ЭАЭ, вызываемый введением гомогената спинного мозга. В этой модели, как и при исходном заболевании, осуществляется иммунный ответ на все компоненты миелина: индуцируется воспаление с последующей демиелинизацией, дегенерацией аксонов, а затем самих нервных клеток. Проявляется патологическая цепь событий с развитием парезов, параличей и других симптомов болезни.
Модель экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (ЭАЭ) у грызунов является основной моделью тестирования новых препаратов для лечения рассеянного склероза.
В НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН была использована модель экспериментальной аутоиммунной энцефалопатии у крыс, вызванной введением гомогената аутологичного спинного мозга в полном адъюванте Фрейнда (ПАФ).
В развитии ЭАЭ можно выделить четыре стадии.
1. Сенсибилизация Т-лимфоцитов на периферии под действием мозгового антигена с ПАФ и увеличение проницаемости ГЭБ.
2. Миграция активированных Т-клеток в ЦНС и активация антигенпредставляющих клеток (астроцитов и микроглии) непосредственно в мозге.
Первые две стадии соответствуют латентному (индуктивному) периоду, при котором не наблюдается клинических проявлений.
3. Развитие аутоиммунных и воспалительных реакций в мозге, приводящих к демиелинизации нервных волокон (клинический период).
4. Супрессия патологических процессов и репарация поврежденных тканей (фаза выздоровления). В этот период у большинства животных неврологические и двигательные нарушения сглаживаются, и наступает частичное или полное выздоровление, после которого животные резистентны к повторной индукции ЭАЭ.
Аналогичные фазы развития патологического процесса в ЦНС наблюдаются и при рассеянном склерозе.
Средняя продолжительность ЭАЭ - 30 дней: латентная стадия, клиническая стадия и стадия выздоровления. Продолжительность каждой стадии обычно 7-10 дней.
В НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН на модели рассеянного склероза (ЭАЭ) были проведены исследования эффективности заявленного лекарственного средства, выполненного в виде фармацевтической композиции - комплексного препарата, который включает водный раствор, содержащий активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора (концентрации 2.5 мг/мл) в 10012, 10030, 10050 раз эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С50, и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора (концентрации 2.5 мг/мл) в 10012, 10030, 10050 раз эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С50 (СМД AT к ИФН-γ+СМД AT к S100). Для экспериментальных исследований были использованы крысы-самки линии Wistar (200-220 г), у которых индуцировали экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит (ЭАЭ) однократной инокуляцией энцефалитогенной смеси (ЭГС) из расчета 100 мг гомогената гомологичного спинного мозга, 0,2 мл полного адъюванта Фрейнда (ПАФ) (содержание убитых микобактерий 5 мг/мл) и 0,2 мл физиологического раствора на одно животное. ЭГС вводили подкожно в основание хвоста вдоль хвостовой вены под легким эфирным наркозом в объеме 0,4 мл (по 0,2 мл справа и слева). Начиная со дня индукции ЭАЭ, вводили внутрижелудочно 2 раза в день с интервалом 7 часов в течение 30 дней (СМД AT к ИФН-γ+СМД AT к S100) (количество мышей n=10, в дозе 5 мл/кг/сут.), препарат сравнения - активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора (концентрации 2.5 мг/мл) в 10012, 10030, 10050 раз эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С50 (СМД AT к ИФН-γ) (n=10; 2,5 мл/кг/сут.), препарат сравнения - активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора (концентрации 2.5 мг/мл) в 10012,10030, 10050 раз эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С50 (СМД AT к S100) (n=10, 2,5 мл/кг/сут.) и дистиллированную воду (контроль; n=10; 5 мл/кг/сут.). В качестве референсного препарата использовали иммуномодулятор копаксон (Тева, Израиль), который вводили внутримышечно крысам-самкам линии Wistar (n=10) в дозе 4 мг/кг, со 2-го по 25-й день после индукции ЭАЭ. Результаты исследований представлены на Фиг.1-4.
Препарат сравнения (СМД AT к S100) отодвигал сроки начала проявления клинических симптомов заболевания как по сравнению с отрицательным контролем (р<0,05), так и по сравнению с референсным препаратом копаксоном (р>0,05). Сроки начала заболевания (Фиг.1) в группах, получавших (СМД AT к ИФН-γ), и в группе, получавшей копаксон, не отличались от контроля. В тоже время, у животных, которым вводили комплексный препарат (СМД AT к ИФН-γ+СМД AT к S100), наблюдали тенденцию к укорочению сроков появления клинических признаков рассеянного склероза по сравнению с контролем. Следует отметить, что были выявлены достоверные различия в сроках начала заболевания между группами (СМД AT к S100) и (СМД AT к ИФН-γ+СМД AT к S100).
Доля животных с тяжелым течением заболевания (>3 баллов) (Фиг.2) также была ниже в группе (СМД AT к S100). У животных, получавших (СМД AT к ИФН-γ+СМД AT к S100), процент животных с тяжелым течением был выше, чем в других исследуемых группах во все сроки заболевания.
В связи с тем, что в разные фазы развития рассеянного склероза задействованы разные механизмы патогенеза ЭАЭ, было проанализировано влияние тестируемых препаратов на тяжесть заболевания в латентный период, в фазе развития клинических признаков и в фазе выздоровления (Фиг.3). (СМД AT к S100) достоверно способствовал снижению среднего балла проявления клинических признаков заболевания в стадии клинических проявлений и в стадии выздоровления, в то время как копаксон и (СМД AT к ИФН-γ) достоверно снижали тяжесть поражения только в последней фазе. Комплексный препарат (СМД AT к ИФН-γ+СМД AT к S100) достоверно по сравнению с контролем и входящими в его состав (СМД AT к ИФН-γ) и (СМД AT к S100) увеличивал средний балл поражения животных на стадии появления клинических признаков заболевания и на стадии выздоровления.
Следует отметить, что у части животных после полного исчезновения клинических признаков заболевания отмечали некое подобие рецидива, то есть возвращение клинических проявлений ЭАЭ (Фиг.4). В группе (СМД AT к S100) несмотря на его благотворное влияние на клиническое течение ЭАЭ (более поздний срок начала заболевания, меньшая тяжесть проявления клинических признаков) отмечено наибольшее число животных (25%) с рецидивом. В то же время в группе (СМД AT к ИФН-γ+СМД AT к S100), для которого было характерно раннее начало заболевания и большая выраженность патологического процесса, ни у одного животного не было выявлено развития рецидива.
На модели экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (ЭАЭ) показано благотворное влияние (СМД AT к S100) на течение заболевания, который оттягивал сроки появления клинических признаков заболевания и снижал тяжесть поражения, при этом (СМД AT к ИФН-γ) и препарат сравнения копаксон не оказывали влияния на течение экспериментального рассеянного склероза, поскольку сроки появления клинических признаков заболевания и тяжесть симптомов не отличались от группы контроля (дистиллированная вода). Эффект комплексного препарата (СМД AT к ИФН-γ+СМД AT к S100) отличался от эффекта входящих в его состав компонентов (СМД AT к S100) и (СМД AT к ИФН-γ), при этом применение (СМД AT к ИФН-γ+СМД AT к S100) приводило к усилению иммунного ответа, что выражалось в более раннем начале заболевания, увеличению доли заболевших животных и тяжести заболевания. Однако в группе (СМД AT к ИФН-γ+СМД AT к S100) рецидива ни у одного животного не было зафиксировано, в то время как у 25% животных группы (СМД AT к S100) и у 15% животных группы (СМД AT к ИФН-γ) в течение периода исследования (30 дней) был выявлен рецидив.
Таким образом, заявленное лекарственное средство (СМД AT к ИФН-γ+СМД AT к S100) является многообещающим препаратом для лечения рассеянного склероза, который дает усиление иммунного ответа на пике развития болезни и может обеспечить более эффективную реабилитацию и предотвращение развития рецидивов заболевания.
Claims (14)
1. Лекарственное средство для лечения заболеваний и состояний нервной системы, содержащее активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека (ИФН-γ), отличающееся тем, что выполнено в виде фармацевтической композиции и включает в качестве дополнительного усиливающего компонента активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100.
2. Лекарственное средство по п.1, характеризующееся тем, что фармацевтическую композицию, включающую активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100, используют для лечения инфекционных заболеваний.
3. Лекарственное средство по п.2, характеризующееся тем, что фармацевтическую композицию, включающую активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100, используют для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями.
4. Лекарственное средство по п.1, характеризующееся тем, что фармацевтическую композицию, включающую активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100, используют для лечения нейроинфекционных заболеваний.
5. Лекарственное средство по п.1, характеризующееся тем, что фармацевтическую композицию, включающую активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100, используют для лечения нейродегенеративных заболеваний.
6. Лекарственное средство по п.1, характеризующееся тем, что активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения матричного раствора соответствующих антител в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - встряхивания.
7. Лекарственное средство по п.1 или 6, характеризующееся тем, что фармацевтическая композиция выполнена в твердой лекарственной форме и содержит эффективное количество гранул нейтрального носителя, насыщенного смесью активированной-потенцированной формы антител к гамма-интерферону человека и активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100, и фармацевтически приемлемые добавки.
8. Лекарственное средство по п.1 или 6, характеризующееся тем, что водные или водно-спиртовые растворы активированных-потенцированных форм антител к гамма-интерферону человека и к мозгоспецифическому белку S-100 получены путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия из матричных растворов аффинно очищенных антител к гамма-интерферону человека и мозгоспецифическому белку S-100 с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.
9. Лекарственное средство по п.1 или 6, характеризующееся тем, что каждый из компонентов сверхмалых доз аффинно очищенных антител используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, гомеопатических разведений.
10. Лекарственное средство по п.7, характеризующееся тем, что фармацевтически приемлемые добавки включают лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.
11. Способ лечения и профилактики инфекционных заболеваний, в том числе сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, путем введения в организм активированной-потенцированной формы антител к гамма-интерферону человека, характеризующийся тем, что дополнительно одновременно и сочетано вводят активированную-потенцированную форму сверхмалых доз аффинно очищенных антител к мозгоспецифическому белку S-100.
12. Способ лечения по п.11, характеризующийся тем, что используют приготовленную в виде единого лекарственного препарата - одной лекарственной формы смесь различных гомеопатических разведений антител к гамма-интерферону человека в сочетании со смесью различных гомеопатических разведений антител к мозгоспецифическому белку S-100.
13. Способ по п.11, характеризующийся тем, что указанным инфекционным заболеванием являются нейроинфекции вирусной и смешанной этиологии.
14. Способ по п.11 или 12, характеризующийся тем, что активированную-потенцированную форму антител к гамма-интерферону человека и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия - встряхивания.
Priority Applications (17)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010129297/10A RU2446821C2 (ru) | 2010-07-15 | 2010-07-15 | Лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способ лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями |
| PCT/IB2011/002375 WO2012017324A2 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with neurodegenerative diseases |
| EP11773542.3A EP2593474A2 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with neurodegenerative diseases |
| CA2804967A CA2804967A1 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with neurodegenerative diseases |
| US13/135,881 US8637034B2 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Pharmaceutical compositions comprising activated-potentiated antibodies to interferon-gamma and S100 protein |
| FR1156472A FR2962652A1 (fr) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Composition pharmaceutique d'association et son utilisation dans des procedes pour traiter les maladies ou affections associees a des maladies neurodegeneratives |
| CN2011800438326A CN103154028A (zh) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | 复合药物组合物以及对神经退行性疾病相关的疾病或病症进行治疗的方法 |
| DE112011102362T DE112011102362T5 (de) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Pharmazeutische Kombinationszusammensetzung und Verfahren zur Behandlung von Erkrankungen oder Zuständen, die mit neurodegenerativen Erkrankungen in Verbindung stehen |
| UAA201300109A UA112751C2 (uk) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Комбінований лікарський препарат та методи лікування захворювань або станів, пов'язаних з нейродегенеративними захворюваннями |
| EA201300137A EA029436B1 (ru) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Комбинированная фармацевтическая композиция для лечения рассеянного склероза и инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способы лечения указанных заболеваний |
| AU2011287288A AU2011287288A1 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with neurodegenerative diseases |
| JP2013519176A JP2013532182A (ja) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | 組み合わせ医薬組成物及び神経変性疾患に関連する疾患又は状態を治療する方法 |
| GB1302652.1A GB2496337A (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with neurodegenerative diseases |
| US14/048,397 US9566332B2 (en) | 2010-07-15 | 2013-10-08 | Methods of treating multiple sclerosis |
| US14/048,299 US9561273B2 (en) | 2010-07-15 | 2013-10-08 | Methods of treating multiple sclerosis |
| US15/397,384 US20170119879A1 (en) | 2010-07-15 | 2017-01-03 | Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with neurodegenerative diseases |
| US15/397,467 US20170121400A1 (en) | 2010-07-15 | 2017-01-03 | Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with neurodegenerative diseases |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010129297/10A RU2446821C2 (ru) | 2010-07-15 | 2010-07-15 | Лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способ лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2010129297A RU2010129297A (ru) | 2012-01-20 |
| RU2446821C2 true RU2446821C2 (ru) | 2012-04-10 |
Family
ID=45785352
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010129297/10A RU2446821C2 (ru) | 2010-07-15 | 2010-07-15 | Лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способ лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2446821C2 (ru) |
| UA (1) | UA112751C2 (ru) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU99111206A (ru) * | 1999-05-28 | 2001-02-20 | Олег Ильич Эпштейн | Нейротропное лекарственное средство |
| RU2192888C1 (ru) * | 2001-02-15 | 2002-11-20 | Эпштейн Олег Ильич | Лекарственное средство и способ лечения патологического синдрома |
| RU2209084C1 (ru) * | 2001-12-26 | 2003-07-27 | Эпштейн Олег Ильич | Лекарственное средство и способ лечения депрессивных расстройств |
| WO2002081507A3 (en) * | 2001-04-06 | 2004-02-12 | Maxygen Holdings Ltd | Interferon gamma polypeptide variants |
| RU2281784C1 (ru) * | 2005-04-20 | 2006-08-20 | Научно-исследовательский институт детских инфекций (НИИДИ) | Способ предупреждения клещевого энцефалита у детей |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2171116C2 (ru) * | 1999-05-28 | 2001-07-27 | Эпштейн Олег Ильич | Нейротропное лекарственное средство |
-
2010
- 2010-07-15 RU RU2010129297/10A patent/RU2446821C2/ru not_active IP Right Cessation
-
2011
- 2011-07-15 UA UAA201300109A patent/UA112751C2/uk unknown
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU99111206A (ru) * | 1999-05-28 | 2001-02-20 | Олег Ильич Эпштейн | Нейротропное лекарственное средство |
| RU2192888C1 (ru) * | 2001-02-15 | 2002-11-20 | Эпштейн Олег Ильич | Лекарственное средство и способ лечения патологического синдрома |
| WO2002081507A3 (en) * | 2001-04-06 | 2004-02-12 | Maxygen Holdings Ltd | Interferon gamma polypeptide variants |
| RU2209084C1 (ru) * | 2001-12-26 | 2003-07-27 | Эпштейн Олег Ильич | Лекарственное средство и способ лечения депрессивных расстройств |
| RU2281784C1 (ru) * | 2005-04-20 | 2006-08-20 | Научно-исследовательский институт детских инфекций (НИИДИ) | Способ предупреждения клещевого энцефалита у детей |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2010129297A (ru) | 2012-01-20 |
| UA112751C2 (uk) | 2016-10-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8637034B2 (en) | Pharmaceutical compositions comprising activated-potentiated antibodies to interferon-gamma and S100 protein | |
| AU2011287292B2 (en) | Combination pharmaceutical composition and methods of treating and preventing the infectious diseases | |
| RU2535034C2 (ru) | Лекарственное средство и способ профилактики инфицирования вич, профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вич или ассоциированных с вич, в том числе спида | |
| RU2535033C2 (ru) | Лекарственное средство и способ профилактики инфицирования вич, профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вич или ассоциированных с вич, в том числе спида | |
| MX2013000808A (es) | Un metodo para el tratamiento de la enfermedad de alzheimer. | |
| MX2013001450A (es) | Composicion farmaceutica y metodo para inhibir la produccion o amplificar la eliminacion de la proteina p24. | |
| RU2446821C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способ лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями | |
| RU2522499C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями, и способ лечения инфекционных заболеваний, сопровождающихся нейротоксическими нарушениями | |
| RU2536234C2 (ru) | Нейротропное лекарственное средство и способ лечения органических заболеваний нервной системы, психоорганического синдрома и энцефалопатий различного генеза | |
| RU2509573C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения рассеянного склероза и способ лечения рассеянного склероза | |
| RU2519196C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения патологического синдрома и способ лечения рассеянного склероза | |
| RU2595809C2 (ru) | Лекарственное средство | |
| RU2526153C2 (ru) | Способ повышения фармакологической активности действующего вещества лекарственного средства и фармацевтическая композиция | |
| RU2441023C1 (ru) | Лекарственное средство для лечения рассеянного склероза и способ лечения рассеянного склероза | |
| RU2533224C2 (ru) | Способ лечения зависимости от психоактивных веществ, алкоголизма и табакокурения и лекарственное средство для лечения зависимости от психоактивных веществ, алкоголизма и табакокурения | |
| RU2517085C2 (ru) | Комплексное лекарственное средство и способ профилактики инфицирования вич, профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вич или ассоциированных с вич, в том числе спида | |
| RU2530638C2 (ru) | Лекарственное средство и способ лечения органических заболеваний нервной системы, психоорганического синдрома и энцефалопатий различного генеза | |
| RU2536232C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения болезни альцгеймера и способ лечения болезни альцгеймера | |
| RU2500427C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения функциональных нарушений желудочно-кишечного тракта и способ лечения функциональных нарушений желудочно-кишечного тракта | |
| RU2542445C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения болезни альцгеймера и способ лечения болезни альцгеймера | |
| RU2542414C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения эректильных дисфункций и способ лечения эректильных дисфункций | |
| RU2532323C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения патологического синдрома и способ лечения функциональных нарушений кишечника | |
| RU2523557C2 (ru) | Способ лечения вегетососудистой дистонии и фармацевтическая композиция для лечения вегетососудистой дистонии | |
| RU2531049C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения заболеваний предстательной железы и способ лечения заболеваний предстательной железы | |
| RU2523451C2 (ru) | Способ лечения хронической сердечной недостаточности и фармацевтическая композиция для лечения хронической сердечной недостаточности |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160716 |