SK283199B6

SK283199B6 - Taxánové deriváty, prostriedok s ich obsahom a ich použitie

Info

Publication number: SK283199B6
Application number: SK334-98A
Authority: SK
Inventors: Eric Mayhew; Shaukat Ali; Andrew S. Janoff
Original assignee: The Liposome Company, Inc.
Priority date: 1995-09-12
Filing date: 1996-09-12
Publication date: 2003-03-04
Also published as: EP0902783B1; AU706290B2; NO981071D0; EP0902783A4; US5703117A; WO1997010234A1; KR19990044409A; HU226325B1; HUP9901433A2; DK1229030T3; PL325477A1; IL123595A0; DE69635428D1; JP2001519755A; ATE216377T1; HUP9901433A3; TR199800443T1; CA2231750A1; PT902783E; EP0902783A1

Abstract

Taxánový derivát, ktorý má uhľovodíkový reťazec pripojený v 2 a/alebo 7 polohe, kde v alfa polohe uhľovodíkového reťazca sa nachádza skupina podporujúca hydrolýzu. Substitúcia tejto skupiny za metylénovú jednotku, obvykle sa nachádzajúcu v alfa polohe, umožňuje zvýšiť terapeutickú aktivitu taxánu. Tiež sú opísané prostriedky obsahujúce taxánové deriváty a ich použitie na liečenie rakoviny.ŕ

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka taxánových derivátov, ku ktorým je pripojený acylový reťazec, ktorý sa derivatizuje tak, že sa k nemu pripojí skupina podporujúca hydrolýzu. Ďalej sa vynález týka prostriedku, ktorý obsahuje taxánové deriváty, vrátane farmaceutických prostriedkov obsahujúcich lipidový nosič, ako aj použitia týchto taxánových derivátov na liečenie rakoviny.

hydrolýzu derivatizovaného acylového reťazca z východiskového taxánu, sotva je taxán disociovaný z nosiča na lipidovej báze, takže sa získa východiskový taxán v terapeuticky užitočnej forme.

Zlúčeniny podľa vynálezu môžu byť podávané živočíchom samy osebe, alebo môžu byť pred podaním formulované spoločne s nosičom založeným na lipidovom nosiči. Takéto formulácie zvyšujú rozširovanie taxánu na príslušné miesta pôsobení a živočíchov.

Doterajší stav techniky

Taxány môžu byť izolované z prírodných zdrojov a môžu byť taktiež pripravené synteticky z prekurzorov vyskytujúcich sa v prírode. Paclitaxel (TAXOL^R, Bristol-Myers Sguibb) sa môže napríklad pripraviť z baccatinu pripojením chrániacich skupín k hydrozylovým skupinám baccatinu, ktoré sa stanú hydroxylovými skupinami paclitaxelu, premenou prekurzora baccatinu na paclitaxel a odstránením chrániacich skupín z hydroxylových skupín za získania paclitaxelu (pozri napríklad WO 93/10076, 27. 5. 93: K. V. Rao, US patent č. 5 200 534, R. A. Holton, US patent č. 5 015 744, PCT/US92/07990, V. J. Stella a A. E. Mathew, US patent č. 4 960 790, K. C. Nicolau, Náture 364 (1993), str. 464 - 466, Nicolau K. C. a kol, Náture 367 (1994), str. 630 - 634, Holton R. A. a kol. J. Am. Chem. Soc. 116 (1994), str. 1597 - 1600, WO 93/16059, 19. 8. 93, EP 528 729, 24. 2. 93: EP 522 958, 13. 1. 93, WO 91/13053, 5. 9. 91, EP 414 610, 27. 2. 91, ktoré sú tu uvádzané ako odkaz).

Taxány sa môžu účinne používať na liečbu rôznych druhov rakoviny. Bolo zistené, že napríklad paclitaxel je účinný proti rakovinám vaječníka a pŕs a tiež proti malígnemu melanómu, rakovine hrubého čreva, leukémii a rakovine pľúc (pozri napríklad Borman, Chemical & Engineering News, 2. 9. 91, str. 11 - 18: The Pharmacological Basis of Therapeutics (vyd. Goodman Gilman a kol.), Pergamon Press, New York (1990), str. 1239, Suffness, Antitumor Alkaloids, v: „The Alkaloids, Vol. XXV“, Academic Press, Inc. (1985), kapitola 1, str. 6 - 18, Rizzo akol., J. Pharm. & Biomed. Anál. 8(12): 159 - 164 (1990), a Biotechnology 9: 933 - 938 (október, 1991). Paclitaxel pôsobí proti rakovinovým bunkám väzbou na tabulín v bunkovom jadre, čím blokuje rozklad mikrotobulov a následne blokuje bunkové delenie (Sciff a kol., Náture 277: 655 (1979).

Ale formulácia taxánov v terapeuticky vhodných nosičoch, tak aby bolo možné taxány podávať živočíchom, spôsobuje problémy, ktoré sú spôsobené povahou taxánových molekúl, ktoré sú málo rozpustné tak vo vodných, ako v lipidových nosičoch. Napríklad paclitaxel je bežne dodávaný ako emulzia v polyoxyetylovanom deriváte ricínového oleja a etanolu (CremophorEL^R), pretože má nízku signifíkačnú rozpustnosť vo vode alebo v lipidoch. Vzhľadom na to, že cremophorový nosič môže byť sám toxický proti živočíchom, podávanie paclitaxelovej formulácie s použitím cremophoru obvykle vyžaduje premedikáciu inými liečivami a tiež pomalá infúzia väčšieho množstva formulácie vyžaduje pobyt v nemocnici cez noc, čo má za následok zvýšenie nákladov.

Prostriedky podľa vynálezu zahrnujú deriváty taxánov, ku ktorým je pripojený acylový reťazec. Acylový reťazec zvyšuje rozpustnosť taxánov v lipidoch tak, že taxán je stabilne spojený s nosičom na lipidovej báze, napríklad s lipozómom predĺžený čas. Acylový reťazec samotný môže byť derivatizovaný tak, že sa k nemu pripojí skupina podporujúca hydrolýzu, ktorá je chemickou časťou, ktorá podporuje

Podstata vynálezu

Vynález sa týka taxánu všeobecného vzorca

kde

A¹ znamená vodík alebo skupinu všeobecného vzorca Z-C(O)NHCH(C₆H₅)CH(OR)C(O)-,

Z znamená C₆H₅-, C₆H₅CH₂-O-, C(CH₃)₃-O- alebo CH(CH₃)=C(CH₃)-,

A² znamená H alebo CH₃C(O)- a

A³ znamená H alebo OH.

Každé R a R¹ znamená H alebo skupinu všeobecného vzorca Y¹ Y² s tým, že aspoň jedno z R a R¹ nie je H, Y¹ znamená skupinu všeobecného vzorca -C(O)CHX'(CH₂)_nl(CH=CH)_n2(CH₂)_n3(CH=CH)„₄(CH₂)_n5(CH=CH)_n6(CH₂)_n7(CH=CH)„₈(CH₂)_n9-.

Súčet nl + 2n2 + n3 + 2n4 + n5 + 2n6 + n7 + 2n8 + n9 jc celé číslo 1 až 21, pričom každé n2, n4, n6 a n8 je nezávisle 0 alebo 1, nl sa rovná 0 alebo celému číslu od 1 do 21, n3 sa rovná 0 alebo celému číslu od 1 do 18, n5 sa rovná 0 alebo celému číslu od 1 do 15, n7 sa rovná 0 alebo celému číslu od 1 do 12, n9 sa rovná 0 alebo celému číslu od 1 do 9 a každé nl až n9 môže byť rovnaké alebo rôzne. Y² znamená -CH₃, -CO₂H alebo -CH₂OH.

X¹ je skupina podporujúca hydrolýzu („HPG“) zahrnujúca, nie však s obmedzením: F, Cl, Br, J, skupinu -OC6II4X² alebo skupinu -C(O)X², kde X² znamená F, Cl, Br, J, NH3⁺, NO2 alebo CN. Najvýhodnejšie X znamená F, Cl, Br alebo J. Výhodne A¹ je skupina Z-C(O)NHCH(C6H₅)CH(OR)C(O)-, Z znamená výhodne C₆H₅ a A¹ znamená výhodnejšie skupinu C6H5C(O)NHCH(C6H5)CH(OR)C(O)-. Najvýhodnejšie A¹ znamená C6H₅C(O)NHCH(C₆H₃)CH(OR)C(O)-, A² znamená CH3C(O)- a A³ znamená H, t. j. taxán je paclitaxel. Ak R¹ znamená vodík, R je potom skupina -Υ'Υ² a keď R znamená vodík, R¹ je skupina -Υ'Υ². Skupina Υ’Υ² má výhodne vzorec -Y*CH3, výhodnejšie vzorec -CCOjCHX’íCH^CHj. Najvýhodnejšie nl potom znamená 3, 5, 9, 11, 13 alebo 15.

Vynález ďalej zahrnuje prostriedky obsahujúce taxán podľa vynálezu; takéto prostriedky môžu tiež obsahovať farmaceutický prijateľné médium. Prostriedky výhodne tiež obsahujú nosič na lipidovej báze, napríklad mastnú kyselinu, fosfolipid, lipoproteín, micelu, lipidový komplex lipozómu, s ktorými taxán je spojený tak, aby bol taxán dodávaný na miesto v tele, kde je to terapeuticky účinné.

Ďalej vynález tiež zahrnuje spôsob podania taxánu živočíchovi, ktorý zahrnuje podanie prostriedku obsahujúce ho taxán živočíchovi. Živočích môže byť postihnutý rakovinou, napríklad rakovinou mozgu, žalúdka, pľúc, hrubého čreva, prostaty, pŕs alebo vaječníkov alebo leukémiou, lymfómom, karcinómom alebo sarkómom. Liečba rakoviny týmto spôsobom zahrnuje podanie protirakovinového účinného množstva taxánu postihnutému živočíchovi. Typicky je toto protirakovinové účinné množstvo taxánu v rozsahu 0,1 až 1000 mg/kg na hmotnosť tela živočícha. Pri takomto protirakovinovom liečení podávaný prostriedok výhodne obsahuje lipidový nosič. Výhodne protirakovinové taxány sú paclitaxely, t. j. taxány, kde A¹ znamená C6H5C(O)NHCH(C6H5)CH(OR)C(O)-, A² znamená CH3C(O)- a A³znamená H. Výhodnejšie R alebo R ¹ znamenajú -C(O)CHX¹(CH₂)niCH₃ a najvýhodnejšie nl je potom 3, 5, 9, 11, 13 alebo 15. Ďalej môže byť živočíchovi podané okrem taxánu i ďalšie bioaktívne činidlo.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Obrázok 1

Účinok lipozómov obsahujúcich paclitaxel- a 2-(2-bróm)-hydrofóbneho derivátu paclitexelu („HTD“) na prežitie SCID myší s nádorom OVCAR3. Vyplnené kosoštvorce : lipozómy obsahujúce paclitaxel, vyplnené štvorce : 2-bróm-C6 HTD (paclitaxel substituovaný so 6-karbonacylovým reťazcom pripojeným k paclitaxclovej hydroxylovej skupine v polohe 2', kde acylový reťazec obsahuje atóm brómu viazaný k jeho α-uhlíku), vyplnené trojuholníky : 2-bróm-C8 HTD, nevyplnené kosoštvorce: 2-bróm-C12 HTD, vyplnené trojuholníky : 2-bróm-C14 HTD, nevyplnené kruhy : 2-bróm-C16 HTD a * : „prázdne lipozómy (lipozómy neobsahujúce paclitaxel alebo substituovaný paclitaxelový derivát).

Vynález sa týka taxánu, ktorý má nasledujúci vzorec:

kde

A¹ znamená vodík alebo skupinu všeobecného vzorca Z-C(O)NHCH(C6H5)CH(OR)C(O)-, A² znamená H alebo CH3C(O)- a A³ znamená H alebo OH. Z znamená C₆H₅-, C₆H₅CH₂-O-, C(CH₃)₃-O- alebo CH(CH₃)=C(CH₃)-. Najvýhodnejšie A¹ znamená C6H5C(O)NHCH(C6H5)CH(OR)C(O)-, A² znamená CH3C(O)- a A³ znamená H. Podľa tohto je najvýhodnejší taxán paclitaxelový ([zlúčenina I] : TAXOL^r (C47H51NO), Bristol Myers Squibb) derivát.

Ale deriváty založené na taxoteru (II), ktoré sa líšia od paclitaxelu tým, že majú terc, butoxy karbonylovú skupinu v polohe C-12 namiesto benzoylovej skupiny, a hydroxylovú skupinu namiesto acetylovej skupiny v polohe C-10, sú tiež zahrnuté do vynálezu. Podľa toho pre taxoter A¹ znamená C(CH₃)₃OC(O)NHCH(C₆H₅)CH(OR)C(O)-, A² znamená H a A³ znamená H.

Taxány podľa vynálezu ďalej zahrnujú, nie však s obmedzením Cephalomannin (III), 19-hydroxybaccatin (IV), Baccatin V (V), 10-deacetylcefalomannin (VI), 10-deacetyl paclitaxel (VII), 7-Epi-10-deacetyl paclitaxel (VIII), 7-Epi-10-deacetyl cefalomannin (IX) a 10-deacetyl baccatin III (X), ako je opísané v nasledujúcej tabuľke.

Zlúčenina	A¹	A²	A³
Paclitaxel (I)	C₆H₅C(O)NHai(C₆H₅) CH(OR)C(O)-	CH₃C(O)-	H
Taxoter (Π)	C(CH₃)OC(a)NHCH (C₆H₅)CH(0R)C(O)-	H	H
Cef alotnannin (Hl)	(CH₃)CH«C(CH₃)C(O)NHCH (C_óH₅)CH(OR)C(O).	CH₃C(O)-	H
19-hydroxy baccatin III (rv)	H	CH₃C(0)-	OH
Baccatin 11I (V)	H	CH₃C(O)-	H
10-Deacetyl - cefalomannin (VI)	(CH₃)CH-C(CH₃)C(O> NHCH(C₆H_s)CH(OR)C(O)	H	H
10-deacetyltaxol (7tt-OH) (VII)	C₆H₃C(O)NHCH(C₆H₅) CH(OR)C(O)-	H	H
7-Epi-10deacetyltaxol (7β-ΟΗ) (VIII)	C₆H₅C(0>KHCH(C₆H₅)	H	H
7-Epi-10deacetylcefaloraannin (7β-ΟΗ) (IX)	(CH₃)CH.C(CH₃)C(0) NHCH(C₆H5)CH(OR)C(O)-	H	H
10-Deacetyl-	H	II	H

baccanin III (X)

Každé R a R¹ znamená vodík alebo skupinu všeobecného vzorca -Y³Y² s tým, že aspoň jedno R a R¹neznamená vodík a Y¹ je skupina všeobecného vzorca -C(O)CHX^,(CH₂)_nl(CH=CH)_n2(CH₂)_n3(CH=CH)_n4(CH₂)„₅(CH=CH)_n6(CH₂)_n7-(CH=CH)„₈(CH₂)_n9-.

Súčet nl + 2n2 + n3 + 2n4 + n5 + 2n6 + n7 + 2n8 + n9 je celé číslo od 1 do 21, pričom každé n2, n4, n6 a n8 je nezávisle 0 alebo 1, nl sa rovná 0 alebo celému číslu od 1 do 21, n3 sa rovná 0 alebo celému číslu od 1 do 18, n5 sa rovná 0 alebo celému číslu od 1 do 15, n7 sa rovná 0 alebo celému číslu od 1 do 12, n9 sa rovná 0 alebo celému číslu od 1 do 9 a každé nl až n9 môže byť rovnaké alebo rôzne. Výhodne je Y¹ nasýtená skupina, t. j. neexistujú žiadne dvojné väzby medzi susednými atómami uhlíka. Podľa toho je výhodne každé n2, n4, n6 a n8 nula, n3, n5, n7 a n9 sú tiež každé nula a Y¹ znamená výhodne -C(O)CHX'(CH2)n|. Alternatívne, Y¹ môže byť nenasýtená skupina, t. j. môže mať jednu alebo viac dvojitých väzieb a jednu alebo viac jednotiek CH=CH, podľa toho je aspoň jedno z n2, n4 a n8 potom 1. Napríklad, ak nenasýťený acylový reťazec obsahuje jednu dvojnú väzbu : n2 znamená 1, n4, n6 a n8 znamená každý nulu, Y¹ je potom skupina -C(O)CHX'‘ (CH2)_nlCH=CH-(CH₂)_n3-, nl je nula alebo celé číslo od 1 do 18, n3 je tiež nula alebo celé číslo od 1 do 18, pričom aspoň jedno z nl alebo n3 nie je nula a súčet nl a n3 sa rovná celému číslu od 1 do 19.

Y² znamená výhodne -CH3-, acylový reťazec je tak odvodený od monokarboxylovej kyseliny, ale môže byť tiež -CO2H, acylový reťazec je potom odvodený od Ω-dikarboxylovej kyseliny alebo -CH2OH, acylový reťazec je potom odvodený od Ω-hydroxykyseliny. Podľa toho má skupina Υ'Υ² výhodne všeobecný vzorec -C(O)CHX'(CH2)_nlCH₃, kde nl znamená najvýhodnejšie 3, 5, 9, 11 alebo 13, ak skupina je umiestnená na R, R¹ alebo tak na R ako aj na R¹.

„Pripojenie“ skupiny -Υ’Υ² k taxánu znamená vytvorenie chemickej väzby medzi skupinou a taxánom spôsobom, bežne používaným pre takúto väzbu. Pripojenie na taxán zahrnuje jednu alebo viac reaktívnych skupín, typicky hydroxyskupín. Pripojenie akéhokoľvek acylového reťazca k taxánu môže stabilizovať spojenie taxánu s lipidovým nosičom, takže taxán a nosič zostávajú spolu, napríklad v plazme živočícha po dlhší čas, ako v prípade zodpovedajúceho spojenia acylový reťazec-voľný taxán. Zvýšená stabilita pripojenia zvyšuje množstvo taxánu v mieste terapeutického pôsobenia in vivo.

Paclitaxel má napríklad dve hydroxylové skupiny, ku ktorým môže byť acylový reťazec pripojený; tieto skupiny sú umiestnené v polohe 2' a 7 s ich relatívnym poradím reaktivity (od najreaktívnejších k menej reaktívnym) 2' > 7. Uhľovodíky môžu byť pripojené k primárnej reaktívnej skupine taxánu, napríklad 2' OH skupine paclitaxelu, s využitím stechiometrického množstva aktívnej formy kyseliny, napríklad chloridov alebo anhydridov. Hydroxylová skupina v polohe 7 paclitaxelu môže byť modifikovaná pripojením acylového reťazca tak 2' ako 7 OH skupín a potom môže byť selektívne odstránený 2' acylový reťazec tak, že acylový reťazec v 7 polohe zostáva pripojený k paclitaxelu. Selektívne odstránenie 2' acylového reťazca môže byť vykonané s použitím stechiometrického množstva miernej bázy, napríklad hydrogenuhličitanu sodného. Ďalej, 7 OH skupina paclitaxelu môže byť modifikovaná chránením 2' OH skupiny pred kovalentným pripojením paclitaxelu s acylovým reťazcom. 2' OH skupina môže byť chránená skupinami, ako je napríklad trifenylmetylová skupina, metoxytrifenylmetylová skupina, trifluoracetylová skupina a TrOC (trichlórmetoxychlórformiátová) skupina, s použitím postupov obvykle známych zo stavu techniky. Chránený paclitaxel potom reaguje s aktívnou formou acylového reťazca, napríklad anhydridmi alebo chloridmi v bezvodnom organickom rozpúšťadle a bázami, ako je DMAP a pyridín. Chrániaca skupina môže byť potom odstránená z 2' polohy známym a ľahko uskutočniteľným spôsobom pri slabo kyslých alebo zásaditých podmienkach. TrOC skupiny môžu byť napríklad odstránené redukčnými reakciami s použitím zinku.

Reakcie sa typicky uskutočňujú v prítomnosti bázy, ako je pyridín, dimetylaminopyridín („DMAP“), trietylamín alebo iné a v bežných polárnych, aprotických organických rozpúšťadlách, ako je dimetylformamid, dimetylsulfoxid a pod. Postup reakcie môže byť sledovaný mnohými veľmi dobre známymi chromatografickými metódami, napríklad chromatografiou v tenkej vrstve s použitím rozpúšťadlového systému 3 % metanolu v chloroforme. Identita zlúčenín môže byť stanovená spektografickými spôsobmi, ako je NMR spektroskopia.

Napríklad na prípravu 2-(+)-2-brómacyl paclitaxelov sa môže použiť nasledujúca schéma pri ďalej uvedených podmienkach:

O *·. ; R-.H

&

Špecifické reakčné podmienky a postupy čistenia sú závislé od množstva faktorov, zahrnujúcich, nie však s ob medzením, použité suroviny a reaktanty, ktoré sú dobre známe odborníkom.

Acylové reťazce substituované skupinou podporujúcou hydrolýzu na α-uhlíku môžu byť získané z komerčne dostupných zdrojov, alebo môžu byť syntetizované akýmkoľvek spôsobom používaným v odbore na substitúciu atómu vodíka naa-uhlíku mastnej kyseliny.

„Skupiny podporujúce hydrolýzu („HPG“) sú substitúciami na acylových reťazcoch α-uhlíka (Ca), ktoré urýchľujú hydrolýzu väzieb medzi východiskovými taxánmi jeho pripojeného acylového reťazca. Skupiny podporujúce hydrolýzu sú elektronegatívne proti vodíku, čo znamená, že priťahujú elektróny viac, ako keby bol v rovnakej polohe molekuly atóm vodíka. Podľa toho substitúcia skupín urýchľujúcich hydrolýzu za atóm vodíka na α-uhlíku vedie k redistribúcii elektrónovej hustoty acylových reťazcov a tým spôsobuje indukčný efekt v acylovom reťazci. Substitúcia aromatickej časti obsahujúca skupiny podporujúce hydrolýzu za atómy vodíka pripojené k α-uhlíku môže taktiež spôsobiť rezonančné efekty, ktoré tiež zahrnujú redistribúciu v substituovanom acylovom reťazci. Indukčné a rezonančné efekty zavedené skupinami podporujúce hydrolýzu stabilizujú zodpovedajúcu bázickú formu kyseliny, ale nie kyselinu samotnú a tým spôsobujú, že kyselina je silnejšia ako keby bola v acylovom reťazci acylová skupina namiesto skupiny podporujúcej hydrolýzu. Acylové reťazce substituované hydrolýzu podporujúcimi skupinami tak všeobecne majú nižší pK_a ako ich zodpovedajúce prírodné formy, t. j. forma, v ktorej je prítomná skupina CH₂ v a-polohe namiesto skupiny substituovanej skupinou podporujúcou hydrolýzu a preto acylové reťazce substituované hydrolýzu podporujúcimi skupinami sú oveľa ľahšie hydrolyzované zo svojich východiskových taxánov ako nesubstituované reťazce. Podľa toho hydrolýzu podporujúcou skupinou X môže byť ktorýkoľvek atóm alebo skupina atómov: (1) majúca elektronegativitu väčšiu ako vodík, a (2) môžu byť pripojené v α-polohe acylového reťazca. X¹ môže byť napríklad F, Cl, Br, J, NH3, skupina -OC6H4X² alebo skupina C(O)X², X² je napríklad F, Cl, Br, J, NH3‘. NO₂ alebo CN. Výhodne je X¹ F, Cl, Br alebo J.

Vynález tiež zahrnuje prostriedok obsahujúci taxán podľa vynálezu. Prostriedok určený na terapeutické použitie taxánu výhodne tiež obsahuje farmaceutický prijateľné médium, ktoré je médiom obvykle určeným na použitie v spojení s podaním aktívnych zložiek živočíchom, ako sú terapeutické a diagnostické činidlá. Toto médium zahrnuje, nie však s obmedzením pevnej formy, ako sú pilulky, kapsuly a tablety, gély, excipienty, a vodné alebo nevodné roztoky. Farmaceutický prijateľné médiá sú obvykle formulované podľa radu faktorov, známych odborníkom a ako príklady, nie však s obmedzením, sa uvádzajú: použitá aktívna zložka, jej koncentrácia, stabilita a predpokladaná biologická dostupnosť, choroba, porucha alebo stav, ktoré majú byť liečené prostriedkom; subjekt, jeho vek, veľkosť a stav; predpokladaná cesta podania prostriedku, napríklad nazálne, orálne, oftalmicky, topicky, transdermálne, vaginálne, subkutánne, intramammáme, intraperitoneálne, intravenózne alebo intramuskuláme (pozri napríklad J. G. Naim v: Remingtn s Pharmaceutical Science (vyd. A. Gennaro), Mack Publishing Co., Easton, PA, (1985), str. 1492 až 1517), uvádzaný tu ako odkaz. Typické farmaceutický prijateľné prostredie používané pri parenterálnom podaní lieku zahrnuje napríklad D5W, vodný roztok obsahujúci 5 % hmotnostných dextrózy a fyziologický roztok.

Prostriedok obsahujúci taxán podľa vynálezu výhodne obsahuje lipidový nosič, s ktorým je taxán spojený. „Lipidové nosiče“ sú hydrofóbne alebo amfifatické molekuly vhodné na podanie živočíchom a zahrnujú bez obmedzenia: mastné kyseliny, fosfolipidy, micely, lipoproteíny, lipidové komplexy, t. j. nelipozomálne, na lipidoch založené štruktúry, ktoré môžu, ale nemusia obsahovať jednu alebo viac nelipidových zložiek, a lipozómy. Výhodne je lipidový nosič lipozóm.

„Lipozómy“ obsahujú jednu alebo viac dvojných vrstiev lipidových molekúl, pričom každá vrstva obklopuje vodný priestor. Monolamenáme lipozómy majú jednu lipidovú dvojnú vrstvu a multilamelárne lipozómy majú viac ako jednu dvojnú vrstvu. Amfifatické lipidové molekuly, ktoré vytvárajú lipidové dvojné vrstvy, obsahujú polámu (hydrofilnú) vrchnú skupinu a jeden alebo dva acylové reťazce. Poláme skupiny môžu byť fosfátové skupiny, sulfátové skupiny alebo skupiny založené na dusíku, výhodne fosfátové skupiny, ako sú fosforylcholínové, fosforyletanolamínové, fosforylserínové, fosforylglycerolové alebo fosforylinozitolové skupiny. Acylové reťazce obvykle obsahujú 12 až 24 atómov uhlíka a môžu byť nasýtené (napríklad laurová, myristová, palmitová alebo stearová kyselina) alebo nenasýtené (napríklad olejová, linolénová alebo arachidónová kyselina). Lipozomálny lipid môže tiež zahrnovať steroly, ako je cholesterol a iné lipidy.

Lipozómy môžu byť pripravené rôznymi spôsobmi, zahrnujúce Banghamové metódy na prípravu multilamelárnych lipozómov (MLV) zahrnujúce sušenie roztoku obsahujúceho sústavu lipid-organické rozpúšťadlo a potom rehydratáciu sušených lipidov vhodným roztokom (pozri Bangham a kol., 1965); Lenkovu metódu na prípravu MLV v podstate s interlamenámou distribúciou rozpustenej látky (SPLV) zahrnujúcu tvorbu dvojfázovej zmesi vodnej fázy a organického rozpúšťadla obsahujúceho lipid a potom emulgáciu lipidu vo vodnej fáze za odparenia organickej látky (pozri US patent}' č. 4 522 803, 5 030 453 a 5 169 637); Fountainovu metódu (US patent č. 4 588 578) prípravu SPLV s použitím jednofázového rozpúšťadlového systému; Cullisovu metódu (US patent č. 5 008 050) prípravy SPLV s použitím opakovaných cyklov vymrazovania a tavenia; prípravu REV cez tvorbu emulzie voda-olej, z ktorej sa odparí organická fáza a získa sa gél, ktorý sa trepe a získajú sa oligolameláme lipozómy (pozri Papahadjopoulos a kol., US patent č. 4 235 871); pretlačovanie MLV na prípravu monolamelámych lipozómov (pozri Cullis a kol., US patent č. 4 975 282); tiež sonikáciu alebo homogenizáciu väčších lipozómov alebo éterové, alebo etanolové injekčné postupy (pozri napríklad R. Deamer a P. Uster, „Liposome Preparation: Methods and Mechanismus“ v Liposomes (vyd. M. Ostro), Marcel Dekker, Inc., New York (1983), str. 27 až 52), uvádzané tu ako odkaz.

„Asociácia“ ako sa tu používa, znamená spojenie medzi acylovým reťazcom pripojeným k taxánu a hydrofóbnej časti lipidového nosiča. Bez obmedzenia na teóriu sa uznáva, že takéto spojenie je cez mnoho vplyvov, ako sú Van der Walsové sily, obyčajne pôsobiace medzi hydrofóbnymi molekulami vo vodnom prostredí. Spôsoby stanovenia stability takýchto spojení, napríklad stanovením regenerovateľného taxánu s fosforom, keď lipidový nosič obsahuje fosfolipid, sú odborníkom známe.

Lipidové nosiče spojené s taxánom podľa vynálezu môžu obsahovať ďalšie bioaktívne činidlo, t. j. bioaktívne činidlo pridané k taxánu. Formulácia založená na systéme lipidový nosič - bioaktívne činidlo môže zvýšiť terapeutický index bioaktívneho činidla, napríklad pufrovaním toxicity činidla z obehu živočícha, čím sa dosiahne, že je potrebné menšie množstvo činidla na žiadaný terapeutický účinok. „Bioaktívne činidlá“ sú zlúčeniny alebo prostriedky, ktoré majú biologickú účinnosť na živočíšne bunky in vitro alebo keď sú podané živočíchovi; bioaktívne činidlá môžu mať terapeutickú a/alebo diagnostickú účinnosť. Tieto činidlá zahrnujú, nie však s obmedzením: antimikrobiálne, protizápalové a protirakovinové činidlá, rovnako rádioaktívne izotopy, enzýmy a farbivá. Ďalšie bioaktívne činidlá taktiež zahrnujú bioaktívne lipidy, ako sú niektoré ceramidy a éterové lipidy, ktoré samotné majú terapeutické uspokojivé vlastnosti. Výhodne pridávaným činidlom je protirakovinové činidlo.

Lipidové nosiče môžu taktiež obsahovať jeden alebo viac lipidov s modifikovanými hlavnými skupinami, ktoré obsahujú poláme skupiny derivatizované pripojením časti, ktorá môže inhibovať väzbu sérových proteínov na lipidové nosiče obsahujúce lipid s modifikovanými hlavnými skupinami. Tým sa mení farmakokinetické chovanie nosičov tak, že zostávajú ďalej v obehu (pozri napríklad Blume a kol., Biochim. Biophys. Acta. 1149:180 (1993), Gabizon a kol., Pharm. Res. 10(5), 703(1993), Park a kol., Biochim. Biophys Acta. 1108: 257 (1992), Woodle a kol., US patent č. 5 013 556, Alien a kol., US patent č. 4 837 028 a 4 920 016, uvádzané tu ako odkaz.

Lipidy s modifikovanými hlavnými skupinami sú typicky fosfatidyletanolamíny (PE), napríklad dipalmitoyl fostatidylatanolamín („DPPE“), palmitoyloleyl fosfatidyltanolamín („POPE“) a dioleyl fosfatidyletanolamín („DOPE“). Takéto lipidy majú hlavné skupiny obvykle derivatizované organickými dikarboxylovými kyselinami, ako je kyselina jantárová alebo kyselina glutamová („GA“) alebo ich zodpovedajúce anhydridy.

Množstvo lipidov s modifikovanými hlavnými skupinami zabudované do lipidového nosiča obvykle závisí od množstva faktorov, ktoré sú odborníkom známe. Ako príklady sa uvádzajú, nie však s obmedzením: typ lipidu a typ modifikácie hlavnou skupinou, typ a veľkosť nosiča a očakávané terapeutické použitie formulácie. Typicky je v systéme lipidov s modifikovanými hlavnými skupinami - lipidový nosič 5 až 20 molámych percent lipidov s modifikovanými hlavnými skupinami.

Ďalším aspektom vynálezu je podanie taxánu živočíchovi, ktoré zahrnuje podanie prostriedku podľa vynálezu živočíchovi, výhodne cicavcovi, akým je človek. Podanie môže byť vykonané akýmkoľvek spôsobom používaným na podanie terapeutických činidiel živočíchom, ale výhodne je intravenózne alebo intraperitoneálne. Živočíchy, ktoré sú postihnuté rakovinou, môžu byť liečené terapeutickým podaním prípravku, ktorý obsahuje taxán, pričom prípravok obsahuje protirakovino účinné množstvo taxánu.

Obvykle sú liečiteľné týmto spôsobom tie rakoviny, ktoré sú alebo môžu byť liečené zodpovedajúcim voľným taxánom, t. j. taxánom, ktorý nemá pripojené acylové reťazce. Tieto rakoviny zahrnujú, nie však s obmedzením, rakovinu mozgu, prsníkov, hrubého čreva, pľúc, vaječníkov, prostaty, slinivky a žalúdka a ďalej leukémiu, lymfóm, sarkómy a karcinómy. Výhodne je liečená rakovina prsníkov a vaječníkov. Liečená môže byť rakovina, ktorá je odolná oproti štandardným terapeutickým režimom, t. j. rakovina odolná liekom.

Protirakovinová účinnosť taxánu môže byť stanovená skúmaním schopnosti taxánov inhibovať rast buniek in vitro, napríklad inkubáciou rakovinovej bunkovej kultúr}' s derivátom a potom vyhodnotením inhibície rastu bunky v kultúre. Alternatívne môže byť taxán skúšaný in vivo na protirakovinovú účinnosť, napríklad najskôr zavedením nádorov do vhodných pokusných živočíchov, napríklad imunodeficientnej myši, ako je SCID myš, podaním taxánu živočíchovi a meraním inhibície rastu nádorov a miery prežitia. Bunky vhodné na takéto in vitro alebo in vivo testy za hmujú, nie však s obmedzením: myšiu leukémiu P388, melanóm B16 a Lewisové pľúcne rakovinové bunky; ľudský karcinóm prsníka MCF7, ľudský MCF-7/ADR (odolný adriamycínu), ľudský vaječníkový OVCAR-3, ľudský karcinóm hrubého čreva HT-29 a ľudské pľúcne rakovinové bunky A549, a ďalšie bunky obvykle používané v stave techniky na takéto testy, vrátane buniek, ktoré sú odolné proti liekom. Odborníci sú dobre schopní vybrať zvláštne taxány na aplikáciu proti rakovinám na základe takýchto faktorov, ako je Gl₅₀, ED₅₀, miera prežitia a ostatné údaje odvodené od cesty in vitro alebo in vivo.

„Protirakovinové účinné množstvo“ taxánu je akékoľvek množstvo taxánu schopné účinne zlepšovať, zmenšovať, inhibovať alebo zabraňovať rozvoju, rastu, metastázam, napadnutiu alebo šíreniu rakoviny a môže byť rovnaké ako terapeutické dávky voľného taxánu.ale pripojenie HPG-derivatizovaného acylového reťazca k taxánu a spojenie tohto taxánu s lipidovým nosičom môže zvýšiť terapeutický index taxánu. Tak protirakovinové množstvo tohto taxánu derivatizovaného acylovým reťazcom môže taktiež byť menšie ako množstvo pri použití zodpovedajúceho voľného taxánu. Protirakovinové účinné množstvá taxánu môžu byť vybrané v súlade od množstva faktorov, ako je napríklad vek, veľkosť a všeobecný stav subjektu, rakovina, ktorá má byť liečená a použitá cesta podania derivátu a stanovená radom spôsobov, napríklad skúšobnými dávkami, veľmi dobre známymi odborníkom. Obvykle je protirakovinové účinné množstvo taxánu aspoň 0,1 mg taxánu/kg hmotnosti tela živočícha, ktorému je prostriedok obsahujúci taxán podávaný. Typicky protirakovinové účinné množstvo taxánu je od 0,1 mg/kg hmotnosti tela živočícha do 1000 mg/kg, výhodne je protirakovinové účinné množstvo 1 mg/kg až 200 mg/kg.

Výhodne prostriedky obsahujúce taxán podľa vynálezu taktiež obsahujú lipidový nosič, výhodnejšie lipozóm a ešte výhodnejšie monolamelárny lipozóm s priemerom menším ako 200 nm. Výhodne v protirakovinových taxánoch je A¹skupina C6H5C(O)NHCH(C6H5)CH(OR)C(O)-, A² je skupina CH3C(O)- a A³ je vodík, t. j. paclitaxely. Aspoň jedno z R alebo R¹ je výhodne -C(O)CHX’(CH₂)₃CH₃, -C(O)CHX’(CH₂)₅CH₃, -C(O)CHX’(CH₂)₉CH₃, -C(O)CHX’jCHjjnCHj alebo -CjOjCHX^CHjjuCHj, kde X¹ výhodne znamená F, Cl, Br alebo J.

Tabuľky 3 a 4 ďalej ukazujú výsledky toxicity paclitaxelu alebo paclitaxelového derivátu pri myšiach, t. j. počet myší v každej skupine, ktoré uhynuli počas prvých 14 dní po aplikácii injekcie.

Výsledky ukazujú, že obidva lipozómy obsahujúce paclítaxelový derivát boli menej toxické ako lipozómy obsahujúce paclitaxel sám osebe, kde všetkých päť myší v skupine, ktorým bolo podané 100 mg/kg paclitaxelu uhynulo v priebehu prvých 14 dni. Lipozómy obsahujúce 2-bróm-C16 paclítaxelový (paclitaxel, ku ktorému v 2 polohe pripojený acylový reťazec so 16 atómami uhlíka, kde acylový reťazec bol derivatizovaný substitúciou atómom brómu na atóme vodíka α-atómu uhlíka) derivát boli menej toxické ako lipozómy obsahujúce 2-bróm-C6 paclítaxelový derivát. Tabuľky 3 a 4 ďalej ukazujú výsledky akútnej toxicity paclitaxelu alebo paclitaxelového derivátu pri myšiach, t. j. počet myší v každej skúšanej skupine, ktoré uhynuli v priebehu prvých 14 dní po aplikácii injekcie. Výsledky ukazujú, že obidva lipozómy obsahujúce paclítaxelový derivát boli menej toxické ako lipozómy obsahujúce paclitaxel sám osebe, kde všetkých päť myší v skupine, ktorým bolo podané 100 mg/kg uhynulo v priebehu prvých 14 dni. Lipozómy obsahujúce 2-bróm-C16 paclítaxelový derivát (paclitaxel derivatizovaný hexanoylovým reťazcom so 16 atómami uhlíka, ku ktorým bol pripojený atóm brómu na α-uhliku) boli menej toxické ako lipozómy obsahujúce 2-bróm-C6 paclítaxelový derivát. Okrem toho, lipozómy obsahujúce ako paclitaxel alebo 2'(2-bróm) hydrofóbny paclítaxelový derivát (obsahujúci acylový reťazec so 6 atómami uhlíka (C-6, C-8, C-12, C-14 alebo C-16 v 2' polohe) boli podané intraperitoneálne v 5 dávkach scid myšiam (vážna kombinovaná imunodeficiencia) majúcich ľudskú rakovinu vaječníkov (OvCar 3) v dávke 12,5 mg paclitaxelu/kg alebo v dávke 50 mg paclitaxelového derivátu/kg. Výsledky tejto liečby sú uvedené na obrázku 1 v termínoch dňov, ktoré prežili myši po podaní buď paclitaxelu, alebo paclitaxelového derivátu. Tieto výsledky jasne ukazujú, že liečba paclitaxelovým derivátom predlžuje dĺžku života myší v porovnaní s liečbou buď paclitaxelom samotným, alebo s „prázdnym“ lipozómom, t. j. lipozómom neobsahujúcim žiadny paclitaxel alebo paclítaxelový derivát. Navyše paclitaxelové deriváty, ktoré majú acylové reťazce s väčšou dĺžkou, sú účinnejšie pri predlžovaní dĺžky života.

Ďalej aspektom vynálezu je ďalšie bioaktivne činidlo, ktoré môže byť podané živočíchovi, ďalšie činidlo je výhodnou, nie však nevyhnutnou zložkou prostriedku obsahujúceho taxán a je výhodne, nie však nevyhnutne spojené s lipidovým nosičom, ak prostriedok obsahuje takýto nosič. Výhodne je nosič lipozóm. Lipozómom môžu byť bioaktívne činidlá dodané solubilizáciou činidla vo vodnej alebo lipidovej fáze použité na prípravu lipozómov. Alternatívne ionizovateľné bioaktivne činidlá môžu byť dodané do lipozómov najprv formovaním lipozómov, zavedením elektrochemického potenciálu, napríklad pH grandientom, cez najvrchnejšiu lipozómovú dvojnú vrstvu a potom pridaní ionizovateľného činidla do vodného média vnútri lipozómu (pozri Bally a kol., US patent č. 5 077 056, uvádzaný tu ako odkaz).

Vynález je ďalej na lepšie pochopenie opísaný nasledujúcimi príkladmi, ktoré však majú informatívny charakter a v žiadnom prípade neobmedzujú rozsah vynálezu, ktorý je definovaný svojimi nárokmi.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Príprava 2-(±)-2-brómhexanoyltaxolu

2-(±)-2-bróm oktanoyl, dodekanoyl, tetradekanoyl a hexadakanoyl paclitaxely sa pripravia (v 80 až 90 % výťažku) opísaným postupom a identifikujú sa *H NMR elementárnou analýzou. K 10 minút miešanému roztoku (±)-2-brómhexánovej kyseliny (229 mg, 1,17 mmol) a 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu (241 mg, 1,17 mmol) v 30 ml suchého metylénchloridu sa pridá taxol (500 mg, 0,586 mmol) a báza 4-dimetylaminopyridínu (71,5 mg, 0,586 mmol). Reakčná zmes sa nechá reagovať pri teplote miestnosti 5 minút. Biela zrazenina dicyklohexylmočoviny sa filtruje cez celitový vankúšik. Vzniknutý filtrát sa odparí vo vákuu a získaný zvyšok sa čistí preparatívnou chromatografiou v tenkej vrstve v zmesi CHC1₃ a MeOH v pomere 95 : 5) a získa sa žiadaný produkt (Rf = 0,58 v CHC1₃: MeOH, 95 : 5). Po filtrácii cez Metricelov filter (0,1 mm) s cieľom odstrániť silikagél z roztoku CHC1₃ sa produkt lyofilizuje z ceklohexánu a získa sa 507 mg (84 % výťažok) ako biely prášok.

'H NMR (CDC1₃, 300 MHz) chemické posuny niektorých charakteristických píkov pri δ: (v ppm) 8,14 (d, J = 7,3 Hz, 2H, aromat.). 7,72 (d, J = 7,3 Hz, 2H, aromatic.), 7,61 (m, 1H, aromatic.), 7,54 - 7,48 (m, 3H, aromatic.), 7,42 - 7,36 (m, 7H, aromatic.), 6,87 (dd, J=2,4 Hz, 3,4 Hz, 1H, NH),

6,29 (m, 2H, H-10 a H-13), 6,0 (m, IH, H-3 ), 5,68 (d, J = = 6,9 Hz, IH, H-2b), 5,50 (dd, J = 1,4 Hz, 1,0 Hz, IH, H-2),4,97 (d, J = 7,8 Hz, IH, H-5), 4,45 (m, IH, H-7), 4,32 (d, J = 7,3 Hz, IH, H-20a), 4,28 (m, IH, CH(Br)), 4,20 (d, J = 8,3 Hz, IH, H-20b), 4,0 (š, OH), 3,81 (d, J = 6,9 Hz, IH, H-3), 0,86 (t, 3H, w-CH₃). FABMS : (MH*) vypočítané pre 0₅₃Η₆οΝΟι₅Βγ 1029,32, získané 1030.

Schéma I: Príprava 2-(±)-2-brómacylpaclitaxelov („DCC“ = = 1,3-dicyklohexylkarbodiimid, „DMAP“ = 4-dimetylaminopyridín)

PhCOO

MulnákysJDCC

DMAP. CH 202 hmin.rx

NTOftn

Príklad 2

Štúdie in vitro

Tabuľka 1 (pozri ďalej) ukazuje hodnoty Gl₅₀ (μΜ) (±-štandardná odchýlka), t. j. koncentráciu požadovanú na 50 % inhibíciu rastu rôznych hydrolyzovateľných derivátov taxánu (HTD) a bunky ľudského karcinómu prsníkov MCF-7 nasledujúce po 72 hodinách inkubácie buniek s HTD.

Tabuľka 1

Cytotoxicita HTD

Derivát paclitaxelu GI^q

2 -Hexanoyl-	0,500	±	0,151
2¹ -2^}-Brómhexanoyl	0.003	±	0,0002
2' -6-Brómhexanoyl-			>10,000
7-Hexanoyl-	0,027	±	0,019
7-2-Bróuihexanoyl-	0,0046	±	0.0001
7-6-Brómhexanoyl-	0,018	±	0,002
2*-Acetyl-7-hexanoyl-	4,46	±	0,06
2¹ »7~di-2-Brómhexanoyl-	1,43	±	0,72
2> ,7-dí-Hexanoyl-			>10,00
2¹-ľroc-7-2-Bťómhexanoyl-	2,67	±	0,08
2^ -Troc-7-6-Brómhexanoyl-	0.47	±	0,03

„2'“ indikuje pripojenie acylového reťazca v 2' polohe, „7'“ pripojenie v 7' polohe, „bróm“: derivatizácia pripojeného acylového reťazca atómom brómu.

Tabuľka 2 ďalej ukazuje hodnoty Gl₅₀ (μΜ) spriemerované z dvoch oddelených pokusov (SRB štandardná cytostatická skúška) pre paclitaxel a rôzne 2-2-bróm paclitaxelové deriváty a A-549 ľudský pľúcny karcinóm, MCF-7 ľudský karcinóm prsníka, MCF-7/ADR (odolný proti adriamycínu) a bunky karcinómu HT-29 ľudského hrubého čreva po 72 hodinách inkubácie buniek a HTD („C-6, 8, 12, 14 a 16“: 6, 8, 12, 14 a 16-uhlíkové acylové reťazce, respektíve pripojenie k paclitaxelu).

Tabuľka 2 Senzitivita in vitro

HTD	A-549	MCF-7	MCF-7/ADR	HT-29
Paclitaxel	0,0023*	<0,0015	4,1675 *	0,0014
	0,0002		0,7177
2*-2-Bróm-C6-paclitaxel	0,0039*	0,0023+	>10,0000	0,0024*
	0,0008	0,0013
2-2-BrómC8’paclitaxel	0.0044X	0,0029i	>10,0000	0,0031*
	0,0001	0,0010		0,0003
2*-2-8rÓK-C12-paalitaxel	0,0044i	0,0028*	>10,0000	0,0032*
	0,0001	0,0007		0.0002
2’-2-Bróm-C14-paclltaxel	0,0317*	0,0160+	>10,0000	0,0206*
	0.0047	0.0091		0.0057
2’-2-Bróm-C16-paclitaxcl	0,1273*	0,0710*	>10.0000	0.0595*
	0,0356	0.0373		0,0187

Príklad 3

Štúdie in vivo

Samiciam 5 až 10 myši CDF1 v skupine sa podajú intraperitoneálne lipozómy obsahujúce buď paclitaxel-, 2’-C6-paclitaxelový derivát, alebo 2'-C16-paclitaxelový derivát v jednej dávke alebo v 5 dávkach v množstve 12,5, 25, 50, 100, 200, 300, 400 alebo 500 mg paclitaxelu alebo paclitaxelového derivátu na kg hmotnosti myši. Tabuľky 3 a 4 ďalej ukazujú výsledky akútnej toxicity paclitaxelu alebo paclitaxelového derivátu pri myšiach, t. j. počet myší v každej liečenej skupine, ktoré uhynuli v priebehu 14 dni po aplikácii injekcie. Výsledky ukazujú, že obidva lipozómy obsahujúce paclitaxelový derivát sú menej toxické ako paclitaxel, v ktorom všetkých päť myši v skupine, ktorým bolo podaných 100 mg/kg paclitaxelu, uhynulo v priebehu prvých 14 dní. Lipozómy obsahujúce 2-bróm-C16 paclitaxelový derivát boli menej toxické ako lipozómy obsahujúce 2-bróm-C6 paclitaxelový derivát.

Tabuľka 3

Podanie jednej dávky

Dávka (mg/kg) Paclitaxel_____________Derivát paclitaxelu

500

400

300 --200 --1005/5

500/10

250/10

12.50/10

2-bróo-C6	2-brôro-C-16
5/5	0/5
5/5	1/5
4/5	1/5
0/2	...
...	...

Tabuľka 4

Podanie piatich dávok

Dávka Paclitaxel 2-br6ii»C6

Derivát paclitaxelu

10/100/5

2510/10

12.50/10

Lipozómy, obsahujúce paclitaxel alebo 2-(2-bróm)hydrofóbny paclitaxelový derivát (obsahujúci acylový reťazec so šiestimi atómami uhlíka (C-6), C-8, C-12, C-14 alebo C-16 v 2 polohe) sa podajú intraperitoneálne v 5 dávkach myšiam scid vážna kombinovaná imunodeficiencia) s ľudskou rakovinou vaječníka (OvCar 3) v dávke 12,5 mg paclitaxelu/kg alebo 50 mg paclitaxelového derivátu/kg. Výsledky tejto liečby sú uvedené na obrázku 1 v počte dní, ktoré prežili myši po podaní buď paclitaxelu alebo paclitaxelového derivátu. Tieto výsledky jasne ukazujú, že liečba paclitaxelovým derivátom predlžuje dĺžku života myší v porovnaní s liečbou buď paclitaxelom samotným s „prázdnym“ lipozómom, t. j. lipozómom neobsahujúcim žiadny paclitaxel, alebo paclitaxelový derivát. Navyše paclitaxelové deriváty, ktoré majú acylové reťazce s väčšou dĺžkou, sú účinnejšie pri predlžovaní dĺžky života.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Taxánové deriváty všeobecného vzorca kde

A¹ je vodík alebo skupina všeobecného vzorca Z-C(O)NHCH(C₆H₅)CH(OR)-C(O)-,

A² je vodík alebo CH₃C(O)- a

A³ je vodík alebo skupina -OH,

Z je C₆H₅-, C₆H₅CH₂O-, C(CH₃)₃-O- alebo CH(CH₃)~C(CH₃)-, každé R a R¹ je vodík alebo skupina vzorca Υ'Υ² s tým, že najmenej jedno R a R¹ nie je vodík,

Y' je -C(O)CHX'-(CH₂)_nl(CH=CH)_n2(CH₂)_n3(CH=CH)_n4(CH₂)„₅(CH=CH)_n6(CH₂)_n7(CH=CH)„₈(CH₂)_n9-, súčet nl + 2n2 + n3 + 2n4 + n5 + 2n6 + n7 + 2n8 + n9 jc celé číslo 1 až 21, každé z n2, n4, n6 a n8 je nezávisle 0 alebo 1, nl je 0 alebo celé číslo 1 až 21, n3 je 0 alebo celé číslo 1 až 18, n5 je 0 a celé číslo 1 až 15, n7 je 0 alebo celé číslo 1 až 12, n9 je 0 alebo celé číslo 1 až 9 a každé z 1 až n9 môže byť rovnaké alebo rozdielne,

X¹ je skupina podporujúca hydrolýzu, ktorá má vyššiu elektronegativitu ako vodík, a

Y² je -CH₃-, CO₂H alebo -CH₂OH.
2. Taxánové deriváty podľa nároku 1, kde A¹ je skupina všeobecného vzorca Z-C(O)NHCH(C₆H₅)CH(OR)-C(O)-.
3. Taxánové deriváty podľa nároku 2, kde R¹ je vodík.
4. Taxánové deriváty podľa nároku 3, kde R je skupina vzorca Y'CH₃.
5. Taxánové deriváty podľa nároku 4, kde R je -C(O)CHX‘(CH₂)₃CH₃, -C(O)CHX'(CH₂)₅CH₃, -C(O)CHX'(CH₂)₉CH₃, -C(O)CHX'(CH₂)hCH₃ alebo -C(O)CHX*(CH₂)₁₃CH₃.
6. Taxánové deriváty podľa nároku 2, kde R je vodík.
7. Taxánové deriváty podľa nároku 6, kde R¹ je skupina vzorca Y’CH₃.
8. Taxánové deriváty podľa nároku 7, kde R¹ je -C(O)CHX'(CH₂)₃CH₃, -C(O)CHX'(CH₂)₅CH₃, -C(O)CHX'(CH₂)₉CH₃, -Č(O)CHX'(CH₂)_nCH₃ alebo -C(O)CHX'(CH₂)₁₃CH₃.
9. Taxánové deriváty podľa nároku 1, kde X¹ je F, Cl, Br, I, skupina -OC6H4X² alebo skupina -C(O)X² a kde X² je F, Cl, Br, I, skupina CN, NO2 alebo NH₃ ⁺.
10. Taxánové deriváty podľa nároku 2, kde Z je C₆H₅.
11. Taxánové deriváty podľa nároku 10, kde A² je CH₃C(O)- a kde A³ je vodík.
12. Taxánové deriváty podľa nároku 11, kde R¹ je vodík a R je -C(O)CHX'(CH₂)₃CH₃, -C(O)CHX'(CH₂)5CH₃, -C(O)CHX‘(CH₂)₉CH₃, -C(O)CHX‘(CH₂)hCH₃ alebo -C(O)CHX'(CH₂)₁₃CH₃.
13. Taxánové deriváty podľa nároku 12, kde X¹ je F, Cl, Br alebo I.
14. Taxánové deriváty podľa nároku 11, kde R¹ je vodík a R je -C(O)CHX'(CH₂)₃CH₃, -C(O)CHX’(CH₂)5CH₃, -C(O)CHX’(CH₂)₉CH₃, -CjOjCHX'CCHÚnCHj alebo -C(O)CHX'(CH₂)₁₃CH₃.
15. Taxánové deriváty podľa nároku 14, kde X¹ je F, Cl, Br alebo I.
16. Prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje taxánové deriváty podľa hociktorého z nárokov 1 až 15 a farmaceutický prijateľné médium.
17. Prostriedok podľa nároku 16, vyznačujúci sa t ý m , že farmaceutický prijateľné médium obsahuje lipidový nosič a kde taxánový derivát je spojený s lipidovým nosičom.
18. Prostriedok podľa nároku 17, vyznačuj úci sa t ý m , že lipidovým nosičom je mastná kyselina, fosfolipid, lipoproteín, micela, lipidový komplex alebo lipozóm.
19. Použitie prostriedku podľa nároku 16 na prípravu liečiva na liečenie rakoviny.
20. Použitie podľa nároku 19, kde množstvo protrakovino účinného taxánového derivátu je 0,1 mg/kg až 1000 mg/kg telesnej hmotnosti živočícha.
21. Použitie podľa nároku 19, kde taxánový derivát je spojený s lipozómom.
22. Použitie podľa nároku 19, kde prostriedok obsahuje taxánové deriváty, v ktorých A¹ je skupina vzorca C6H5C(O)NHCH(C6H5)CH(OR)C(O)-, A² je CH3C(O)-, A³je vodík a jeden z R a R¹ je -C(O)CHX'(CH₂)₃CH₃, -C(O)CHX‘(CH₂)5CH₃, -C(O)CHX'(CH₂)₉CH3, -C(O)CHX'íCHjjuCHj aíebo -C(O)CHX'(CH2)_I3CH₃.
23. Použitie podľa nároku 19, kde rakovinou je rakovina pľúc, mozgu, žalúdka, prsníkov, vaječníkov, prostaty alebo leukémia, lymfóm, sarkóm alebo karcinóm.
24. Použitie podľa nároku 19, ktoré zahŕňa prídavok bioaktívneho činidla.