SK15612003A3

SK15612003A3 - Prípravok s trvalým uvoľňovaním a spôsob jeho výroby

Info

Publication number: SK15612003A3
Application number: SK1561-2003A
Authority: SK
Inventors: Kazumichi Yamamoto; Akiko Yamada; Yoshio Hata
Original assignee: Takeda Chemical Industries, Ltd.
Priority date: 2001-06-29
Filing date: 2002-06-28
Publication date: 2004-07-07
Also published as: TWI225416B; HK1061802A1; HUP0400382A3; JP5931147B2; CA2451718C; NO333531B1; US20040241229A1; EP1399133A2; AU2002311630B2; PT1399133E; MY139606A; DK1399133T3; SK287568B6; US20120295848A1; JP2012136530A; RU2004102503A; PL212531B1; CA2451718A1; CY1109272T1; DK1399133T4

Description

Oblasť techniky

Predkladaný vynález sa týka prípravku s trvalým uvoľňovaním fyziologicky aktívnej látky a spôsobu jeho výroby.

Doterajší stav techniky

V patente č. JP-A 60-100516 sa opisuje mikrokapsula s trvalým uvoľňovaním vodorozpustného liečiva, reprezentovaná časticou so stredným priemerom 2 až 200 pm obsahujúcou vodorozpustné liečivo rozptýlené v matrici tvorenej kopolymérom kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molámej hmotností 5000 až 200 000 g/mol, obsahuje 100 až 50 hmôt. % kyseliny mliečnej a 0 až 50 hmôt. % kyseliny glykolovej a pripravuje sa spôsobom sušenia vo vode.

V patente č. JP-A 62-201816 sa opisuje mikrokapsula s trvalým uvoľňovaním, charakterizovaná tým, že viskozita emulzie typu voda/olej na prípravu emulzie typu voda/olej/voda sa nastaví na hodnotu 150 až 10 000 cP, a spôsob jej prípravy.

V patente č. JP-A 62-54760 sa opisuje polyoxykarboxylový ester, čo je kopolymér alebo polymér, v ktorom obsah vodorozpustnej oxykarboxylovej kyseliny je — v prepočte na jednosýtnu kyselinu — nižší ako 0,01 mol/100 g, a jeho hmotnostný priemer molárnej hmotnosti je 2000 až 50 000 g/mol, a ďalej sa v ňom opisuje injekčná mikrokapsula s trvalým uvoľňovaním, ktorá tento polymér obsahuje.

V patente č. JP-A 61-28521 sa opisuje kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 5000 až 30 000 g/mol, neobsahuje katalyzátor, má polydisperzitu (podľa gélovej permeačnej chromatografie) 1,5 až 2, obsahuje 50 až 95 hmôt. % kyseliny mliečnej a 50 až 5 hmôt. % kyseliny glykolovej, a ďalej sa opisuje liečivo obsahujúce tento polymér ako základ.

V patente č. JP-A 6-192068 sa opisuje spôsob prípravy mikrokapsuly s trvalým uvoľňovaním, ktorý spočíva v zahriatí mikrokapsuly na teplotu vyššiu ako je teplota skelneného prechodu polyméru, pri ktorej jednotlivé častice mikrokapsuly k sebe vzájomne nepriľnú.

V patente č. JP-A 4-218528 sa opisuje spôsob čistenia biodegradabilného alifatického polyesteru, ktorý spočíva v rozpustení biodegradabilného alifatického polyesteru, ktorý obsahuje nízkomolekárny podiel (s molárnou hmotnosťou 1000 g/mol alebo menej), v organickom rozpúšťadle, následnom pridaní vody na vyzrážanie polymérnej látky a odstránení nízkomolekulámeho podielu s molárnou hmotnosťou 1000 g/mol, a ďalej sa uvádza, že voda sa pridáva v objemovom pomere 50 až 150 dielov na

100 dielov organického rozpúšťadla.

Podstata vynálezu

Predkladaný vynález sa týka prostriedka s trvalým uvoľňovaním, ktorý neobsahuje želatínu, ale vo veľkom množstve obsahuje fyziologicky aktívnu látku, a ktorý umožňuje dosiahnuť stabilnú rýchlosť uvoľňovania v rozmedzí jedného mesiaca tým, že potlačí akékoľvek nadmerné počiatočné uvoľňovanie fyziologicky aktívnej látky.

Aby bolo možné tento problém vyriešiť, pôvodcovia tohto vynálezu intenzívne študovali a napokon objavili prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý vo veľkom množstve obsahuje fyziologicky aktívnu látku, bez toho, aby obsahoval želatínu, a ktorý dokáže potlačiť alékoľvek nadmerné počiatočné uvoľňovanie fyziologicky aktívnej látky tak, aby sa dosiahla stabilná rýchlosť uvoľňovania v priebehu jedného mesiaca tým, že ako základ pripravili kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej majúci pomer hmotnostného ku číselnému priemeru molámej hmotnosti 1,9 alebo nižší, alebo použili kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej majúci hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 11 600 až 140 000 g/mol, alebo soľ tohto kopolyméru, čo vyústilo v dokončení predkladaného vynálezu.

Predkladaný vynález teda zahrnuje:

1) prostriedok s trvalým uvoľňovaním obsahujúci kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej majúci pomer hmotnostného ku číselnému priemeru molámej hmotnosti 1,9 alebo nižší, alebo jeho soľ, a fyziologicky aktívnu látku,

2) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 1), pričom fyziologicky aktívnou látkou je fyziologicky aktívny peptid,

3) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 2), pričom fyziologicky aktívnou látkou je derivát luteinizovaný, hormón uvoľňujúci hormón (LH-RH),

4) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 1), pričom hmotnostný priemer molárnej hmotnosti kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej je 3000 až 100 000 g/mol,

5) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 1), pričom hmotnostný priemer molámej hmotnosti kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej je 8000 až 15 000 g/mol,

6) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 1), pričom obsah nízkomolekulámeho podielu kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej s molárnou hmotnosťou 3000 g/mol alebo nižšou je 9 % alebo menej,

7) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 6), pričom obsah nízkomolekulámeho podielu kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej s molárnou hmotnosťou 3000 g/mol alebo nižšou je 3 až 9 %,

8) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 1), pričom uvedený kopolymér má molárny pomer kyseliny mliečnej ku kyseline glykolovej 100:0 až 40:60,

9) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 1), pričom uvedený kopolymér má molárny pomer kyseliny mliečnej ku kyseline glykolovej 70:30 až 80:20,

10) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 3), pričom derivátom LH-RH je peptid tohtovzorca:

5-oxo-Pro-His-T rp-Ser-T yr-Y-Leu-Arg-Pro-Z, kde Y označuje DLeu, DAla, DTrp, DSer (tBu), D2Nal alebo DHis (ImBzl) a Z znamená HN-C₂H₅ alebo Gly-NH₂, alebo jeho soľ,

11) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 3), pričom derivátom LH-RH je peptid vzorca:

5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H5, alebo jeho acetát,

12) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 3), pričom obsah derivátu LH-RH alebo jeho soli v tomto prostriedku s trvalým uvoľňovaním je 5 až 24 hmôt. %,

13) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 1), pričom fyziologicky aktívna látka alebo jej soľ je čiastočne alebo úplne vodorozpustná,

14) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 1), ktorý je určený pre injekcie,

15) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 1), ktorý uvoľňuje fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ aspoň počas dvoch týždňov,

16) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 1), ktorý neobsahuje látku, ktorá zadržuje liečivo,

17) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bode 1), ktorý neobsahuje želatínu,

18) postup prípravy prostriedka s trvalým uvoľňovaním, ako sa definuje v bode 1), spočívajúci v odstránení rozpúšťadla zo zmesného roztoku obsahujúceho fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ a kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej s pomerom hmotnostného ku číselnému priemeru molárnej hmotnosti rovný 1,90 alebo nižším, alebo jeho soľ,

19) postup, ktorý sa opisuje v bode 18, spočívajúci v miešaní a dispergovaní fyziologicky aktívnej látky alebo jej soli v roztoku organického rozpúšťadla, obsahujúceho kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má pomer hmotnostného ku číselnému priemeru molárnej hmotnosti rovný 1,90 alebo nižší, alebo jeho soľ, a v odstránení organického rozpúšťadla,

20) postup, ktorý sa opisuje v bode 19), pričom fyziologicky aktívna látka alebo jej soľ sa použije ako vodný roztok obsahujúci fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ,

21) liečivo obsahujúce prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ako sa definuje v bode

1),

22) činidlo na prevenciu alebo liečbu rakoviny prostaty, prostatomegalie, endometriózy, hysteromyómu. metrofibrómu, predčasnej puberty, dysmenorhey a rakoviny prsníka, alebo kontraceptivum, ktoré obsahuje prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ako sa definuje v bode 3),

23) činidlo na prevenciu relapsu rakoviny prsníka po operácii rakoviny prsníka pred prechodom, ktoré obsahuje prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ako sa definuje v bode 3),

24) spôsob prevencie alebo liečby rakoviny prostaty, prostatomegalie, endometriózy, hysteromyómu, metrofibrómu, predčasnej puberty adysmenorhey, alebo antikoncepcie, ktorý spočíva v tom, že sa cicavcovi podáva účinná dávka prostriedka, ako sa definuje v bode 3),

25) spôsob prevencie relapsu rakoviny prsníka po operácii rakoviny prsníka pred prechodom, kde tento spôsob spočíva v tom, že sa cicavcovi podáva účinná látka prostriedka, ako sa definuje v bode 3),

26) spôsob prípravy kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej majúci hmotnostný priemer molárnej hmotnosti rovný 8000 až 15 000 g/mol a majúceho pomer hmotnostného ku číselnému priemeru molárnej hmotnosti rovný 1,90 alebo nižší, alebo jeho soli, ktorý spočíva v pridaní vody k organickému rozpúšťadlu obsahujúcemu kopolmyér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 8000 až 15 000 g/mol pri objemovom pomere vody k organickému rozpúšťadlu menší ako 5:100 až 50:100,

27) postup prípravy kopolyméru, ktorý sa opisuje v bode 26), pričom organické rozpúšťadlo je hydrofilné,

28) postup prípravy kopolmyéru, ktorý sa opisuje v bode 27), pričom hydrofilným rozpúšťadlom je acetón,

29) postup prípravy kopolyméru, ktorý sa opisuje v bode 26), pričom objemový pomer vody k organickému rozpúšťadlu je 10:100 až 45:100,

30) postup prípravy kopolyméru, ktorý sa opisuje v bode 26), pričom objemový pomer vody k organickému rozpúšťadlu je 40:100,

31) kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej majúci hmotnostný priemer molárnej hmotnosti v rozmedzí 8000 až 15 000 g/mol a pomer hmotnostného ku molárnemu priemeru molárnej hmotnosti rovný 1,90 alebo nižší, alebo jeho soľ,

32) použitie kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo jeho soli, ktorý sa opisuje v bode 31) na prípravu prostriedka s trvalým uvoľňovaním, ktorý neobsahuje želatínu,

33) mikrogulička obsahujúca kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý máypriemer molárnej hmotnosti 11 600 až 14 000 g/mol, a derivát LH-RH alebo jeho soľ, a neobsahuje želatínu,

34) mikrogulička, ktorá sa opisuje v bode 33), pričom derivátom LH-RH alebo jeho soli je peptid . . vzorca

5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z, kde Y označuje DLeu, DAla, DTrp, DSer (tBu), D2Nal alebo DHis (ImBzl) a Z znamená HN-C2H5 alebo Gly-NH₂, alebo príslušnú soľ,

35) mikrogulička, ktorá sa opisuje v bode 33), pričom derivátom LH-RH alebo jeho soli je peptid znázornený vzorcom

5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H₅, alebo jeho acetát,

36) mikrogulička, ktorá sa opisuje v bode 33), pričom derivát LH-RH alebo jeho soľ je prítomný v koncentrácii 5 až 24 hmôt. %,

37) mikrogulička, ktorá sa opisuje v bode 33), ktorá je mikrokapsulou,

38) mikrogulička, ktorá sa opisuje v bode 33), pričom derivát LH-RH alebo jeho soľ sa uvoľňuje aspoň počas dvoch týždňov,

39) činidlo na prevenciu alebo liečbu rakoviny prostaty, prostatomegalie, endometriózy, hysteromyómu, metrofibrómu, predčasnej puberty, dysmenorhey, alebo kontraceptivum, ktoré obsahuje mikroguličky, ktoré sa opisujú v bode 33),

40) činidlo na prevenciu relapsu rakoviny prsníka po operácii rakoviny prsníka pred prechodom, ktoré obsahuje mikroguličky, ktoré sa opisujú v bode 33),

41) spôsob prevencie alebo liečby rakoviny prostaty, prostatomegalie, endometriózy, hysteromyómu, metrofibrómu, predčasnej puberty a dysmenorhey, alebo antikoncepcie, ktorý spočíva v tom, že sa cicavcovi podáva účinná dávka mikroguličiek, ktoré sa opisujú v bode 33),

42) spôsob prevencie relapsu rakoviny prsníka po operácii rakoviny prsníka pred prechodom, kde tento spôsob spočíva v tom, že sa cicavcovi podáva účinná dávka mikroguličiek, ktoré sa opisujú v bode 33).

Fyziologicky aktívna látka, ktorá sa použila v predkladanom vynáleze, sa konkrétne neobmedzuje, pokiaľ je farmaceutický vhodná, či je peptidovou alebo nepeptidovou zlúčeninou. Príklady vhodných nepeptidových zlúčenín zahrňujú agonistu, antagonistu a zlúčeninu majúcu inhibičnú aktivitu pre enzým. Okrem toho sa napríklad ako peptidová zlúčenina preferuje fyziologicky aktívny peptid. Vhodné sú fyziologicky aktívne peptidy, ktoré majú molárnu hmotnosť 3000 až 40 000 g/mol, s výhodou 4000 až 30 000 g/mol, prednostne 5000 až 20 000 g/mol.

Príklady fyziologicky aktívnych peptidov zahrnujú hormón, uvoľňujúci luteinizovaný hormón (LH-RH), inzulín, somatostatín, somatotropín, hormón, uvoľňujúci rastový hormón (GH-RH), prolaktín, erytropoietin, hormón kôry nadľadviniek, hormón uvoľňujúci melanocyt, hormón uvoľňujúci tyroidný hormón, hormón stimulujúci tyroid, luteinizujúci hormón, hormón stimulujúci folikul, vasopresin, oxytocín, kalcitonín, gastrín, sekretín, pankreozymín, cholecystokinín, angiotenzín, ľudský placentálny laktogén, ľudský chorionický gonadotropín, enkefalín, endorfín, kyotrofín, tuftsín, tymopoietín, tymosín, tymotimurín, humorálny brzlíkový faktor, krvný brzlíkový faktor, faktor nádorovej nekrózy, kolonový indukčný faktor, motilín, dynorfín, bombezín, neurotenzín, ceruleín, bradykinín, atriálny faktor zvyšujúci natriuretickú exkréciu, nerovo rastový faktor, stimulátor bunkového rastu, neurotrofný faktor, peptidy majúce aktivitu antagonistickú endotelínu, a ich deriváty, fragmenty a deriváty fragmentov.

Fyziologicky aktívnou látkou, ktorá sa použila v predkladanom vynáleze, môže byť ona sama alebo jej farmakoligická soľ.

Ak má fyziologicky aktívna látka zásaditú skupinu, ako je aminoskupina, potom príklady takýchto solí zahrnujú soli s anorganickými kyselinami (tiež označované ako anorganické voľné kyseliny, ako je napríklad kyselina uhličitá, kyselina hydrogénuhličitá, kyselina chlorovodíková, kyselina sírová, kyselina dusičná, kyselina boritá a pod.) a organickými kyselinami (tiež označované ako organické voľné kyseliny, ako je napríklad kyselina jantárová, kyselina octová, kyselina propiónová, kyselina trifluoroctová a pod.). Ak fyziologicky aktívna látka má kyslú skupinu, ako je karboxylová skupina a pod., potom príklady takýchto solí zahrnujú soli s anorganickými zásadami (tiež označované ako anorganické voľné zásady, ako sú napríklad alkalické kovy typu sodíka, draslíka a pod., kovy alkalických zemín typu vápnika, horčíka a pod.) a organickými zásadami (tiež označované ako organické voľné zásady, ako sú napríklad organické amíny typu trietylamínu a pod., zásadité aminokyseliny typu arginínu a pod.). Okrem toho môže fyziologicky aktívny peptid tvoriť komplexnú zlúčeninu s kovom (napríklad komplex s meďou, so zinkom a pod.).

Výhodné príklady fyziologicky aktívnych peptidov zahrnujú deriváty LH-RH alebo ich soli, ktoré sú účinné pri hormonálne závislých ochoreniach (napríklad rakovine prostaty, rakovine maternice, rakovine prsníka, nádoru hlienových žliaz a pod.), chorobách závislých na pohlavnom hormóne, ako je prostatomegália, endometrióza, hysteromyóm, predčasná puberta, dysmenorhea, amenorhea, premenštruálny syndróm, multilokulárny ovariálny syndróm a pod., pri antikoncepcii (alebo, ak sa využije opačného efektu po vysadení antikoncepcie, pri neplodnosti), prevencii relapsu rakoviny prsníka po operácii tejto rakoviny pred prechodom. Ďalej tieto príklady zahrnujú deriváty LH-RH alebo ich soli, ktoré sú účinné pri nezhubných alebo zhubných nádoroch, nezávislých na pohlavných hormónoch, ale citlivých na LH-RH.

Konkrétne príklady derivátov LH-RH alebo ich solí zahrnujú peptidy, ktoré sa opisujú v knihe Treatment with GnRH analogs: Controversies and perspectives (vydalo nakladateľstvo The Parthenon Publishing Group Ltd., v roku 1966) a ďalej v patentoch JPA 3-503165, JP-A 3-101695, JP-A 7-97334 a JP-A 8-259460.

Príklady derivátov LH-RH zahrnujú agonisti LH-RH a antagonisti LH-RH. Ako antagonista LH-RH sa môže použiť napríklad fyziologicky aktívny peptid znázornený všeobecným vzorcom I:

X-D2Nal-D4CIPhe-D3Pal-Ser-A-B-Leu-C-Pro-DalaNH₂, kde X znamená N(4H₂-furoyl)Gly alebo Nac, A označuje zvyšok, ktorý sa vyberie z

NHeTyr, Tyr, Aph(Atz) a NMeAph(Atz), B označuje zvyšok, ktorý sa vyberie z DLys(Nic),

DCit, DLis(AzaglyNic), DLis(Azaglyfur), DhArg(Et₂), DAph(Atz) a DhCi, a C označuje Lys(Nisp), Arg alebo hArg(Et₂), alebo jeho soľ.

Ako agonista LH-RH sa môže použiť napríklad fyziologicky aktívny peptid znázornený všeobecným vzorcom II:

5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z kde Y označuje zvyšok, ktorý sa vyberie z DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal a DHis(lmBzí) a Z označuje NH-C₂H₅ alebo Gly-NH₂ alebo jeho soľ. Vhodný je najmä peptid, v ktorom Y je DLeu a Z je NH-C₂H₅ (t. j. peptid A, znázornený ako 5-oxo-ProHis~Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H_5l Leuprorelín) alebo jeho soľ (napríklad acetát).

Tieto peptidy sa môžu pripraviť spôsobmi, ktoré sa opisujú vo vyššie zmienených publikáciách alebo patentových publikáciách, alebo spôsobmi podobnými.

Skratky, ktoré sa používajú v predkladanej špecifikácii, majú nasledovné významy:

Skratka	Názov
N(4H2-furoyl)Gly	/V-tetrahydrofuroylglycínový zvyšok
NAc	/V-acetylová skupina
N2Nal	D-3-(2-naftyl)alanínový zvyšok
D4CIPhe	D-3-(4-chloro)fenylalanínový zvyšok
D3Paí	D-3-(3-pyridyl)aíanínový zvyšok
NMeTyr	/V-metyltyrozínový zvyšok
Aph(Atz)	/V-[5'-(3'-amino-1 Ή-1 ',2',4'-triazoyl)fenylalanínový zvyšok
NMeAph(Atz)	/V-metyl-[5'-(3'-amino-1 Ή-1 ',2',4'-triazolyl)fenylalanínový zvyšok
DLys(Nic)	D-(e-/V-nikotinoyl)lyzínový zvyšok
Dcit	D-citrulinový zvyšok
DLys(Azag)yNic)	D-(azaglycylnikotinoyl)lyzínový zvyšok
DLys(AzaglyFur)	D-(azaglycylfuranyl)lyzínový zvyšok
DhArg(Et₂)	D-(/V,/V'-dietyl)homoarginínový zvyšok
DAph(Atz)	D-W-[5'-(3'-amino-1 Ή-1 ',2',4'-triazolyl)]fenylalanínový zvyšok
DhCi	D-homocitrulínový zvyšok
Lys(Nisp)	(e-/V-izopropyl)lyzínový zvyšok
HArg(Et₂)	(/V,/V'-dietyl)homoarginínový zvyšok

Čo sa týka ostatných kyselín, používajú sa tu skratky podľa doporučení Komisie pre biochemickú nomenklatúru pri IUPAC-IUB [pozri Eur. J. Biochem. 138, 9-37 (1984) alebo skratky, ktoré sú bežné v tomto odbore. Okrem toho, ak aminokyselina môže mať optický izomér, ide vždy o L-aminokyselinu, pokiaľ sa neuvádza ináč.

Ako kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý sa používa v predkladanom vynáleze, sa s výhodou používa ten, ktorý má pomer hmotnostného k číselnému priemeru molárnej hmotnosti 1,90 alebo n tis tí

Taktiež je možné použiť soľ kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej. Ako príklady je možné uviesť soli s anorganickými zásadami (napríklad s alkalickými kovmi, ako je sodík, draslík a pod., kovy alkalických zemín, ako je vápnik, horčík a pod.), alebo organickými zásadami (napríklad organickými amínmi, ako je trietylamín a pod. a zásaditými aminokyselinami, ako je arginín a pod.), alebo prechodovými kovmi (napríklad zinkom, železom, meďou a pod.) a komplexné soli.

Molárny pomer zložiek kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej je s výhodou 100/0 až 40/60, prednostne 70/30 až 80/20.

Molárny pomer optických izomérov kyseliny mliečnej, ktorá tvorí jednu z najmenších opakujúcich sa jednotiek kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, teda molárny pomer D-izomér/L-izomér, je s výhodou 75/25 až 25/75. Často sa používa najmä molárny pomer D-izomér/L-izomér 60/40 až 30/70.

Hmotnostný priemer molárnej hmotnosti kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej je zvyčajne 3000 až 100 000 g/mol, s výhodou 3000 až 50 000 g/mol, prednostne 8000 až 15 000 g/mol.

Podiel nízkomolekulárnej frakcie kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktoré majú molárnu hmotnosť 3000 g/mol alebo menšiu, je s výhodou 3 až 9 % alebo menší.

Okrem toho, kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej v predkladanom vynáleze má pomer hmotnostného k číselnému priemeru molárnej hmotnosti 1,90 alebo nižší, s výhodou 1,40 až 1,90, prednostne 1,45 až 1,80.

Výhodné príklady ďalej zahrnujú:

1) kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej majúci hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 3000 až 100 000 g/mol a pomer hmotnostného k molárnemu priemeru molárnej hmotnosti 1,90 alebo nižší,

2) kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej majúci hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 3000 až 50 000 g/mol a pomer hmotnostného k molárnemu priemeru molárnej hmotnosti 1,90 alebo nižší,

3) kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej majúci hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 3000 až 15 000 g/mol a pomer hmotnostného k molárnemu priemeru molárnej hmotnosti 1,90 alebo nižší,

4) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bodoch 1) až 3), v ktorom podiel nízkomolekulárnych frakcií kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, majúci molárnu hmotnosť 3000 g/mol alebo nižšiu, je 9 % alebo nižší, a

5) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bodoch 1) až 3), v ktorom podiel nízkomolekulárnych frakcií kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, majúci molárnu hmotnosť 3000 g/mol alebo nižšiu, je 3 až 9 %.

Výhodnejšie príklady zahrnujú:

6) kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 3000 až 100 000 g/mol a po’^er hmotnostného k molárnemu priemeru molárnej hmotnosti 1,40 až 1,90,

7) kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 3000 až 50 000 g/mol a pomer hmotnostného k molárnemu priemeru molárnej hmotnosti 1,40 až 1,90,

8) kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 3000 až 15 000 g/mol a pomer hmotnostného k molárnemu priemeru molárnej hmotnosti 1,40 až 1,90,

9) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bodoch 6) až 8), v ktorom podiel nízkomolekulárnej frakcie kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má molárnu hmotnosť 3000 g/mol alebo menšiu, je 9 % alebo nižší, a

10) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bodoch 6) až 8), v ktorom podiel nízkomolekulárnej frakcie kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má molárnu hmotnosť 3000 g/mol alebo menšiu, je 3 až 9 %.

Najvýhodnejšie príklady zahrnujú:

11) kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 3000 až 100 000 g/mol a pomer hmotnostného k molárnemu priemeru molárnej hmotnosti 1,45 až 1,80,

12) kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 3000 až 50 000 g/mol a pomer hmotnostného k molárnemu priemeru molárnej hmotnosti 1,45 až 1,80,

13) kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 3000 až 15 000 g/mol a pomer hmotnostného k molárnemu priemeru molárnej hmotnosti 1,45 až 1,80,

14) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bodoch 11) až 13), v ktorom podiel nízkomolekulárnej frakcie kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má molárnu hmotnosť 3000 g/mol alebo menšiu, je 9 % alebo nižší, a

15) prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý sa opisuje v bodoch 11) až 13), v ktorom podiel nízkomolekulárnej frakcie kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má molárnu hmotnosť 3000 g/mol alebo menšiu, je 3 až 9 %.

Ďalej sa môže použiť kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 11 600 až 14 000 g/mol.

Hmotnostné a číselné priemery molárnych hmotností v tejto špecifikácii znamenajú moláme hmotnosti merané gélovou permeačnou chromatografiou (GPC) kalibrovanou desiatimi polystyrénovými monodisperznými štandardmi, ktoré majú hmotnostné priemery molárnej hmotnosti 397 000, 189 000, 98 000, 37 200, 17 100, 9450, 5870, 2500, 1050 a 495 g/mol.

Ďalej, podiel nízkomolekulárnej frakcie kopolyméru, ktorý má molárnu hmotnosť 3000 g/mol alebo nižšiu, zodpovedá množstvu frakcie, ktorá má molárnu hmotnosť 3000 g/mol alebo nižšiu, podľa hmotnostnej distribúcie molárnej hmotnosti, pričom táto distribúcia sa získa vyššie uvedeným meraním GPC. Konkrétnejšie — spočíta sa pomer časti plochy pod distribučnou krivkou, zodpovedajúci molárnej hmotnosti 3000 g/mol a nižšej, k celkovej ploche pod touto krivkou hmotnostnej distribúcie molárnej hmotnosti. Meranie sa uskutočňuje na vysokorýchlostnom prístroji HLC-8120 GPC (vyrába firma Toso) s diferenciálne refraktometrickou detekciou, so sériovo zapojenými kolónami, ktoré vyrába firma Toso, totiž TSKguardcolum Super H-L (vnútorný priemer 4,6 mm x dĺžka 35 mm), TSKgél SuperH4000 (6 mm x 150 mm) a TSKgél SuperH2000 (6mm x 150 mm) a s tetrahydrofuránom ako mobilnou fázou pri prietoku 0,6 ml/min.

Ak je interakcia medzi kopolymérom kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej a fyziologicky aktívnou látkou iónová, potom táto fyziologicky aktívna látka interaguje hlavne s koncovou karboxylovou skupinou kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej.

Ak je nízkomolekulárna frakcia prítomná vo veľkom množstve, potom fyziologicky aktívna látka rýchlo reaguje práve s tými molekulami kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktoré majú nízku molárnu hmotnosť a teda vysokú reaktivitu. V injekčnom prostriedku s trvalým uvoľňovaním je fyziologicky aktívnou látkou, unikajúcou pri príprave a počiatočnom uvoľňovaní, hlavne tá časť fyziologicky aktívnej látky, ktorá interagovala práve s touto nízkomolekulárnou frakciou kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej. Aby sa zvýšil obsah fyziologicky aktívnej látky a potlačilo jej množstvo, ktoré sa uvoľní na začiatku, je nevyhnutné, aby sa podiel tohto kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej s nízkou molárnou hmotnosťou znížil pod určitú hranicu, a pomer hmotnostného k číselnému priemeru molárnej hmotnosti sa takisto znížil pod určitú hranicu. Aby sme napríklad získali kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej pre prostriedok s jednomesačným trvalým uvoľňovaním, je výhodné použiť kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej s vyššie spomínaným hmotnostným priemerom molámej hmotnosti 8000 až 15 000 g/mol, pomerom hmotnostného k číselnému priemeru molárnej hmotnosti 1,90 alebo nižším, s výhodou 1,40 až 1,90, prednostne 1,45 až 1,80, a podielom nízkomolekulárnej frakcie, ktorá má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 3000 g/mol alebo nižší, rovný 9 % alebo menej, s výhodou 3 až 9 %.

„Kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej“ sa môže pripraviť dehydratačnou polykondenzáciou bez katalyzátora z kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej (podľa patentu JP-A 61-28521) alebo polymerizáciou s otvorením kruhu z laktidu a cyklickej diesterovej zlúčeniny, ako je glykolid a iné. (Encyclopedic Handbook of Biomaterials and Bioengineeríng, Part A: Materials, zv. 2, vyd. Marcel Dekker, Inc., 1995).

Kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý sa získa dehydratačnou polykondenzáciou bez katalyzátora z kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, obsahuje všeobecne veľké množstvo nízkomolekulárnej frakcie a má pomer hmotnostného k číselnému priemeru molárnej hmotnosti rovný dvom alebo vyšší. Hmotnostný priemer molárnej hmotnosti kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý sa použil v predkladanom opise, je 5000 až 15 000 g/mol. Množstvo nízkomolekulárnej frakcie, ktorá má molárnu hmotnosť 3000 g/mol alebo nižšiu sa môže meniť v závislosti na hmotnostnom priemere molárnej hmotnosti, a pokiaľ je hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 10 000 g/mol, potom množstvo nízkomolekulárnej frakcie, ktorá má molárnu hmotnosť 3000 g/mol alebo nižšiu je10 % alebo vyšší.

Výsledný kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej sa môže čistiť organickým rozpúšťadlom za vzniku konečného polymérneho produktu.

Príklady organických rozpúšťadiel, ktoré sa použili v predkladanom vynáleze, zahrnujú s výhodou hydrofilné alebo s vodou ľahko miešateľné organické rozpúšťadlá, ako napríklad acetón, tetrahydrofurán, dioxán, dimetylformamid a dimetylsulfoxid, pričom sa s výhodou medzi inými používa acetón.

Množstvo vody a organického rozpúšťadla pridávané v predkladanom vynáleze sa konkrétne neobmedzujú. Ak je však množstvo vody príliš veľké, zníženie obsahu nízkomolekulárnej frakcie je nedostatočné, a tak je obtiažne získať konečný polymér. Na druhej strane, ak je množstvo vody príliš nízke, začne byť obtiažne polymér vyzrážať, izolácia produktu sa tým zhorší, a je možné izolovať iba polymér s vyššou než požadovanou molárnou hmotnosťou. Množstvo vody pripadajúce na 100 objemových dielov organického rozpúšťadla je zvyčajne 5 až 50 objemových dielov, s výhodou 10 až 45 objemových dielov, prednostne 24 až 40 objemových dielov, najlepšie potom 40 objemových dielov. Napríklad 10 g kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej sa rozpustí v 100 ml acetónu ako organického rozpúšťadla, a ku vzniknutému roztoku sa po častiach pridá — za miešania vhodným spôsobom — 40 ml čistenej vody tak, aby sa vyzrážal konečný polymér, ktorý sa potom môže vhodným spôsobom vysušiť. Ak konečný polymér nie je možné získať jedným rozpúšťadlom a jedným zrážacím krokom, môže sa tento postup opakovať.

V prostriedku strvalým uvoľňovaním podľa predkladaného vynálezu sa zásada tvorí s výhodou kopolymérom kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má pomer hmotnostného k číselnému priemeru molárnej hmotnosti 1,90 alebo nižší, alebo jeho solí, alebo kopolymérom kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorého hmotnostný priemer molárnej hmotnosti je 11 600 až 14 000 g/mol, alebo jeho solí. Zloženie dané molárnym pomerom kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej je s výhodou 100/0 až 40/60. Fyziologicky aktívnou látkou je s výhodou derivát LH-RH, prednostne peptid, ktorý má tento vzorec:

5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H₅alebo jeho acetát. Obsah derivátu LH-RH alebo jeho soli je s výhodou 5 až 24 hmôt. %. Ďalej je výhodný taký prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý neobsahuje želatínu a uvoľňuje fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ v priebehu najmenej dvoch týždňov.

Spôsob prípravy mikrokapsuly

Opísaným spôsobom získaný kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej sa môže použiť ako zásada na prípravu prostriedka s trvalým uvoľňovaním. Spôsob prípravy prostriedka s trvalým uvoľňovaním, napríklad mikrokapsuly obsahujúcej fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ a kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo jeho soľ podlá predkladaného vynálezu, sa opisuje v príkladoch.

I) Spôsob sušenia vo vode l-i) Spôsob olej/voda (O/V)

Pri tomto spôsobe sa najskôr pripraví roztok kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo jeho soli v organickom rozpúštädle. Je výhodné, aby organické rozpúštädlo, ktoré sa použije na prípravu prostriedka s trvalým uvoľňovaním podľa predkladaného vynálezu, malo teplotu varu 120 °C alebo nižšiu.

Ako organické rozpúštädlo sa používajú napríklad halogénované uhľovodíky (ako je dichlórmetán, chloroform, dichlóretán, trichlóretán, tetrachlórmetán a pod.), étery (ako je dietyléter, diizopropyléter a pod.), estery mastných kyselín (ako je etylacetát, butylacetát a pod.), aromatické uhľovodíky (ako je benzén, toluén, xylén a pod.) a acetonitril a ich zmesi. Ako organické rozpúštädlo kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo jeho soli je medzi inými výhodný dichlórmetán.

Koncentrácia kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej v roztoku v organickom rozpúštädle sa môže meniť v závislosti na molámej hmotnosti kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej a na type organického rozpúšťadla. Ak sa napríklad ako organické rozpúštädlo použije dichlórmetán, koncentrácia sa všeobecne volí 0,5 až 70 hmot.%, s výhodou 1 až 60 hmôt. %, prednostne 2 až 50 hmot.%.

K takto získanému roztoku kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej v organickom rozpúštädle sa pridá fyziologicky aktívna látka alebo jej soľ a rozpustí či disperguje sa v ňom. Potom sa výsledný roztok v organickom rozpúštädle, ktorý obsahuje prostriedok zložený z fyziologicky aktívnej látky alebo jej soli a kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo jeho soli, pridá k vodnej fáze za vznku emulzie olej (O)/voda (V) a rozpúštädlo v olejovej fáze sa nechá vytekať alebo nadifundovať do vodnej fázy za vzniku mikrokapsúl. Pritom sa objem vodnej fázy všeobecne volí ako jedno-až desaťnásobok, s výhodou päť- až päťtisícnásobok, prednostne desať- až dvetisícnásobok objemu olejovej fázy.

Popri spomínaných zložkách sa k vodnej fáze pridáva emulzifikátor. Môže sa použiť akýkoľvek emulzifikátor, pokiaľ všeobecne tvorí stabilnú emulziu O/V. Konkrétne sa môžu napríklad použiť aniónové surfaktanty (oleát sodný, stearát sodný, laurylsulfát sodný a pod.), i neiónové surfaktanty (polyoxyetylén-sorbitánové estery mastných kyselín, ako sú Tween 80, Tween 60, vyrábané firmou Atlas Powder, derivát polyoxyetylénkastorového oleja, ako sú HCO-60 a HCO-50, vyrábané firmou Nikko Chemical, polyvinylpyrolidon, polyvinylalkohol, karboxymetylcelulóza, lecitín, želatína a kyselina hyalurónová). Môžu sa použiť samostatne alebo v kombinácii. Ich koncentrácia pri použití je s výhodou v rozsahu 0,0001 až 10 hmôt. %, prednostne 0,001 až 5 hmôt. %.

Popri spomínaných zložkách sa k vodnej fáze môže pridať činidlo regulujúce osmotický tlak. Môže sa použiť akékoľvek činidlo regulujúce osmotický tlak, pokiaľ pri pridávaní do vodného roztoku vytvára osmotický tlak.

Príklady činidiel regulujúcich osmotický tlak zahrnujú polyfunkčné alkoholy, monofunkčné alkoholy, monosacharidy, disacharidy, oligosacharidy a aminokyseliny a ich deriváty.

Z polyfunkčných alkholov je možné napríklad použiť trojfunkčné alkoholy, ako je glycerol a iné, pentafunkčné alkoholy, ako je arabitol, xylitol, adonitol a pod. a hexafunkčné alkoholy, ako je manitol, sorbitol, dulcitol a pod. Medzi inými sú vhodné hexafunkčné alkoholy, najmä manitol.

Príklady monofunkčných alkoholov zahrnujú metanol, etanol a izopropylalkohol, pričom výhodný mimo iných je etanol.

Z monosacharidov sa používajú napríklad pentózy, ako je arabinóza, xylóza, ribóza, 2-deoxyribóza a pod., a hexózy, ako je glukóza, fruktóza, galaktóza, manóza, sorbóza, ramnóza, fukóza a pod., pričom výhodné z nich sú hexózy.

Z oligosachariov sa používajú napríklad trisacharidy, ako je maltotrióza, rafinóza a pod., a tetrasacharidy, ako je stachyóza a pod., pričom výhodné z nich sú trisacharidy.

Z derivátov monosacharidov, disacharidov a oligosacharidov sa používajú glukózamín, galaktózamín, kyselina glukurónová a kyselina galakturónová.

Z aminokyselín sa môže použiť akákoľvek L-aminokyselina, napríklad glycín, leucín a arginín. Z nich je výhodný L-arginín.

Tieto činidlá regulujúce osmotický tlak sa môžu použiť samostatne alebo v kombinácii.

Tieto činidlá regulujúce osmotický tlak sa používajú v takej koncentrácii, že osmotický tlak vonkajšej vodnej fázy je päťdesiatinou až päťnásobkom, s výhodou dvadsaťpätinou až trojnásobkom osmotického tlaku fyziologického soľného roztoku. Ak sa ako činidlo regulujúce osmotický tlak použije manitol, jeho koncentrácia je s výhodou 0,5 až 1,5 %.

Na odstránenie organického rozpúšťadla sa používa spôsob známy per se alebo nejaký podobný spôsob. Príklady týchto spôsobov zahrnujú odparenie organického rozpúšťadla za normálneho tlaku alebo za postupne klesajúceho tlaku na zníženú hodnotu za súčasného miešania miešadlom vrtuľového tvaru, magnetickým miešadlom alebo prístrojom generujúcim ultrazvuk, odparenie organického rozpúšťadla pri regulácii stupňa vákua pomocou rotačnej odparky, a postupné odstraňovanie organického rozpúšťadla pomocou dialyzačnej membrány.

Takto získané mikrokapsuly sa centrifugujú alebo filtrujú, aby sa spätne izolovala voľná fyziologicky aktívna látka alebo jej soľ. Liečivo, ktoré zadržuje látka a emulzifikátor, ktoré sa adsorbujú na povrchu mikrokapsuly, sa spláchnu niekoľkokrát destilovanou vodou a mikrokapsuly sa znovu dispergujú v destilovanej vode, ktorá sa potom odstráni lyofilizáciou.

Pretože mikrokapsula podľa predkladaného vynálezu používa ako zásadu kopolymér kyseliny mliečnej akyseliny glykolovej, ktorý má pomer hmotnostného k číselnému priemeru molárnej hmotnosti 1,90 alebo nižší, alebo jeho soľ, alebo kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 11 600 až 14 000 g/mol, alebo jeho soľ, mikrokapsula môže obsahovať liečivo s vysokou koncentráciou, takže nie je nevyhnutné, aby mikrokapsula obsahovala liečivo zadržujúce látku, ako je želatína a zahusťovadlo.

Tieto polyméry sa môžu s výhodou použiť na výrobu prostriedka s trvalým uvoľňovaním, ktorý uvoľňuje liečivo v priebehu najmenej dvoch týždňov.

Počas prípravy sa môže pridať činidlo brániace agregácii, aby sa zamedzilo zhlukovaniu častíc. Ako agregačné brániace činidlo je možné použiť napríklad niektorý vodorozpustný (poly)sacharid, ako je manitol, laktóza, glukóza a škroby (napríklad kukuričný škrob a pod.), aminokyselinu, ako je glycín, aproteín, ako je fibrín a kolagén. Z nich je vhodný manitol.

Ak je to nevyhnutné, po lyofilizácii je možné vodu a organické rozpúšťadlo z mikrokapsúl odstrániť zahrievaním za podmienok, pri ktorých sa mikrokapsuly nespájajú. S výhodou sa zahrieva na teplotu, ktorá je blízka strednej teplote skelneného prechodu mikrokapsuly, získanej diferenciálnym skenovacím kalorimetrom pri rýchlosti ohrevu 10 až 20 °C/min, alebo mierne vyššej. Výhodnejšie sa zahrieva na teplotu, ktorá je blízka strednej teplote skelneného prechodu mikrokapsuly, alebo v teplotnom rozmedzí od strednej teploty skelneného prechodu mikrokapsuly do teploty o 30 °C vyššej ako je stredná teplota skelneného prechodu mikrokapsuly. Prednostne sa zahrieva v teplotnom rozmedzí od strednej teploty skelneného prechodu mikrokapsuly do teploty o 10 °C vyššej ako je stredná teplota skelneného prechodu mikrokapsuly, najlepšie v teplotnom rozmedzí od strednej teploty skelneného prechodu mikrokapsuly do teploty o 5 °C vyššej ako je stredná teplota skelneného prechodu mikrokapsuly.

Cas ohrevu sa môže meniť v závislosti na množstve mikrokapsúl a všeobecne predstavuje 12 až 168 hodín, s výhodou 24 až 120 hodín, prednostne 48 až 96 hodín od času, kedy teplota samotných mikrokapsúl dosiahne požadované hodnoty.

Spôsob zahrievania sa konkrétne neobmedzuje, pokiaľ nedochádza k agregácii mikrokapsúl a mikrokapsuly sa pri danom spôsobe rovnomerne zahrievajú.

Na zahrievanie a sušenie sa používajú napríklad tieto spôsoby: termostatová komora, fluidná komora, pohyblivá komora alebo sušiareň, a zahrievanie a sušenie pomocou mikrovĺn. Z nich je výhodný spôsob zahrievania a sušenia pomocou termostatovej komory.

l-ii) Spôsob V/O/V

Najskôr sa pripraví roztok kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo jeho soli v organickom rozpúšťadle, pričom takto získaný roztok sa označí ako olejová fáza. Spôsob prípravy je identický, ako sa opisuje v časti l-i). Koncentrácia kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej v organickom rozpúšťadle sa môže meniť v závislosti od molárnej hmotnosti kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej a type organického rozpúšťadla. Ak sa napríklad ako organické rozpúšťadlo použije dichlórmetán, volí sa koncentrácia všeobecne 0,5 až 70 hmôt. %, s výhodou 1 až 60 hmôt. %, prednostne 2 až 50 hmôt. %.

V dalšom kroku sa pripraví roztok alebo disperzia fyziologicky aktívnej látky alebo jej soli [rozpúšťadlom je voda alebo zmes vody a niektorého alkoholu (napríklad metanolu, etanolu a pod.)].

Koncentrácia fyziologicky aktívnej látky alebo jej soli, ktorá sa má pridať, je všeobecne 0,001 mg/ml až 10 g/ml, s výhodou 0,1 mg/ml až 5 g/ml, prednostne 10 mg/ml až 3 g/ml.

Ak vyššie uvedená fyziologicky aktívna látka má zásaditú skupinu, ako je aminoskupina, soli fyziologicky aktívnej látky zahrnujú soľ s anorganickou kyselinou (tiež označovaná ako anorganická voľná kyselina, ako je napríklad kyselina uhličitá, kyselina hydrogénuhličitá, kyselina chlorovodíková, kyselina sírová, kyselina dusičná, kyselina boritá a pod.) a organickú kyselinu (tiež označovaná ako organická voľná kyselina, ako je napríklad kyselina jantárová, kyselina octová, kyselina propiónová, kyselina trifluóroctová a pod ).

Ak má fyziologicky aktívna látka kyslú skupinu, ako je karboxylová skupina a pod., potom soli fyziologicky aktívnej látky zahrnujú soľ s anorganickou zásadou (tiež označovaná ako anorganická voľná zásada, ako sú napríklad alkalické kovy typu sodíka, draslíka, kovy alkalických zemín typu vápnika, horčíka a pod.) a organickú zásadu (tiež označovaná ako organická voľná zásada, ako sú napríklad organické amíny typu trietylamínu, zásadité aminokyseliny typu arginínu a pod.). Zároveň môžu fyziologicky aktívne peptidy tvoriť komplexnú zlúčeninu s kovom (napríklad komplex s meďou, so zinkom a pod.). Ak fyziologicky aktívnou látkou je derivát LH-RH, s výhodou sa pridáva kyselina octová.

Ako solubilizačné činidlo a stabilizačné činidlo sa pridávajú známe látky. Na rozpustenie alebo dispergovanie fyziologicky aktívnej látky alebo aditíva je možné použiť zahrievanie, trepanie alebo miešanie v takej miere, aby sa aktivita nestratila, a takto získaný vodný roztok sa označuje ako vnútorná vodná fáza.

Takto vzniknutá vnútorná vodná fáza a olejová fáza sa emulzifikujú známymi spôsobmi, ako je homogenizácie a ultrazvuk za vzniku emisie V/O.

Objem olejovej fázy, určenej na zmiešanie, je jeden- až tisícnásobkom, s výhodou dvoj- až stonásobkom, prednostne tri- až desaťnásobkom objemu vnútornej vodr*> fázy.

Rozsah viskozity výslednej emulzie V/O je všeobecne 10 až 10 000 cP, s výhodou 100 až 5000 cP, prednostne 500 až 2000 cP pri 12 až 25 °C.

Potom sa výsledná emulzia V/O, ktorá obsahuje fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ a kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo jeho soľ pridá k vodnej fáze za vzniku systému V (vnútorná vodná fáza)/O (olejová vodná fáza)/V (vonkajšia vodná fáza). Rozpúšťadlo v olejovej fáze sa splyní (vyteká) alebo difunduje do vonkajšej vodnej fázy a vznikne mikrokapsula. Pritom sa objem vonkajšej vodnej fázy všeobecne volí ako jeden- až desaťtisícnásobok, s výhodou päť- až päťdesiatiisícnásoboj, prednostne desaťaž dvetisícnásobok objemu olejovej fázy.

Emulzifikátor a činidlo regulujúce osmotický tlak, ktoré sa môžu pridať k vodnej fáze popri vyššie uvedených zložkách, ako i spôsoby následného spracovania, sú rovnaké, ako sa uvádzajú v časti l-i).

II) Fázovo separačný spôsob

Ak sa mikrokapsula pripraví týmto spôsobom, potom sa k roztoku v organickom rozpúšťadle, ktorý obsahuje fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ a kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo jeho soľ, ako sa opisuje v spôsobe sušenia vo vode v časti I), pridá za miešania koacervačné činidlo, čím sa mikrokapsuly vyzrážajú a stuhnú. Objem koacervačného činidla môže sa rovnať stotine až tisícnásobku, s výhodou päťstotine až päťstonásobku, prednostne desatine až dvestonásobku objemu olejovej fázy.

Výber koacervačného činidla sa menovite neobmedzuje, pokiaľ je to zlúčenina typu polyméru, minerálneho oleja alebo rastlinného oleja a nerozpúšťa komplex fyziologicky aktívnej látky alebo jej soli a kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej. Konkrétne je možné použiť silikonový olej, sézamový olej, sojový olej, kukuričný olej, olej bavlníkových semien, kokosový olej, ľanový olej, minerálny olej, n-hexán alebo n-heptán.

Takto získané mikrokapsuly sa izolujú, opakovane premyjú heptánom alebo podobným rozpúšťadlom, aby sa z prostriedka, obsahujúceho fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ a kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo jeho soľ, odstránilo koacervačné činidlo a potom sa suší za zníženého tlaku. Alternatívne sa sušenie uskutočňuje rovnakým spôsobom, ktorý sa opisuje ako spôsob sušenia vo vode v časti Ii), totiž lyofilizáciou a následným sušením za tepla.

III) Spôsob sušenia rozprašovaním (sprejovaním)

Ak sa mikrokapsuly pripravujú týmto spôsobom, potom roztok v organickom rozpúšťadle, ktorý obsahuje fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ a kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo jeho soľ, ako sa opisuje pri spôsobe sušenia vo vode v časti I), sa rozprašuje v sušiacej komore rozprašovacieho sušiaka pomocou trysky, a organické rozpúšťadlo sa v jemných kvapôčkach v mimoriadne krátkom čase vyparí za vzniku mikrokapsúl. Príklady trysiek zahrňujú fluidný typ, tlakový typ a rotačno diskový typ. Ak je to nevyhnutné, môžu sa mikrokapsuly následne premyť, lyofilizovať a dalej zahrievať a sušiť tým istým spôsobom, ktorý sa opisuje pri spôsobe sušenia vo vode v časti I).

Okrem uvedenej mikrokapsuly je možné vytvoriť i inú dávkovaciu formu, kedy roztok v organickom rozpúšťadle, ktorý obsahuje fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ a kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo jeho soľ, ako sa opisuje pri spôsobe sušenia vo vode pri príprave mikrokapsuly I), sa suší odparovaním organického rozpúšťadla a vody, pričom stupeň vákua sa reguluje napríklad pomocou rotačnej odparky a odparok sa potom rozomelie pomocou tryskového mlyna za vzniku jemného prášku (tiež označovaný ako mikročastice).

V dalšom kroku sa môže jemne rozomletý prášok premyť tým istým spôsobom, aký sa opisuje pri spôsobe sušenia vo vode pri príprave mikrokapsuly I), lyofilizovať a ďalej sušiť za tepla.

Takto získané mikrokapsuly alebo jemný prášok môžu dosiahnuť uvoľňovanie liečiva zodpovedajúce klesajúcej rýchlosti použitého kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej.

Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa predkladaného vynálezu môže mať akúkoľvek formu, ako je mikrogulička, mikrokapsula alebo jemný prášok (mikročastice), z nich je vhodná mikrokapsula.

Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa predkladaného vynálezu sa môže použiť samostatne, alebo sa tento prostriedok môže použiť ako surovina a pridávať do celej rady dávkovacích foriem, kedy sa môže podávať ako injekčný preparát alebo ako implantabilný preparát pre intravenóznu, subkutánnu a intraorgánovú aplikáciu, ako transmukozálne činidlo, orálny preparát (napríklad ako tvrdá alebo mäkká kapsula a pod.), pevné preparáty, ako sú granule, prášok a pod., alebo kvapalný prípravok, ako je sirup, emulzia, suspenzia a pod. pre nasálne, rektálne alebo maternicové podávanie.

Napríklad pridávanie prostriedka s trvalým uvoľňovaním podľa predkladaného vynálezu do injekčného preparátu sa pridáva do vodnej suspenzie spolu s disperzantom (napríklad surfaktantom, ako je Tween 80, HCO-60 a pod., polysacharidmi, ako je hyaluronát sodný, karboxymetylcelulóza, arginát sodný a pod.), konzervačným činidlom (napríklad metylparabenom a propylparabenom) a izotonikom (chloridom sodným, manitolom, sorbitolom, glukózou a prolínom), alebo sa disperguje do olejovej suspenzie spolu s rastlinným olejom, ako je sézamový olej alebo kukuričný olej, za vzniku injekčného preparátu, ktorý sa môže skutočne použiť.

Pri injekčnej aplikácii môžu byť hodnoty priemeru častíc prostriedka s trvalým uvoľňovaním podľa predkladaného vynálezu v takom rozmedzí, aby sa splnili požiadavky stupňa disperzie a priepustnosti ihly. Stredný priemer častice môže byť napríklad v rozmedzí od 0,1 do 300 pm, s výhodou od 0,5 do 150 pm, prednostne od 1 do 100 pm.

Pri pridávaní prostriedka s trvalým uvoľňovaním podľa predloženého vynálezu do aseptického prípravku sa používajú spôsoby, ktoré zahrnujú tieto neobmedzujúce príklady: aseptické uskutočnenie všetkých krokov prípravy, sterilizácia γ žiarením, pridanie antispetika a pod.

Pretože prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa predloženého vynálezu má nízku toxicitu, môže sa použiť ako bezpečné liečivo pre cicavcov (napríklad človeka, kravu, prasa, psa, mačku, myš, krysu a pod.), pričom dávka prostriedka s trvalým uvoľňovaním podľa predkladaného vynálezu sa môže meniť v závislosti na type a obsahu fyziologicky aktívnej látky, dávkovacej forme, dobe uvoľňovania fyziologicky aktívnej látky, druhu liečeného ochorenia, druhu liečeného živočícha a účinnom množstve fyziologicky aktívnej látky. Jednoduchá dávka fyziologicky aktívnej látky sa môže s výhodou vhodne vybrať v rozsahu 0,01 až 10 mg/kg hmotnosti, prednostne 0,05 až 5 mg/kg hmotnosti dospelého jedinca, ak sa napríklad použije v prostriedku s trvalým uvoľňovaním pre šesťmesačný prostriedok.

Jednoduchá dávka prostriedka s trvalým uvoľňovaním sa môže s výhodou vhodne zvoliť v rozsahu od 0,05 do 50 mg/kg hmotnosti, prednostne od 0,1 do 30 mg/kg hmotnosti dospelého jedinca.

Doba podávania sa môže vhodne zvoliť v závislosti na type a obsahu fyziologicky aktívnej látky ako bázy, dávkovacej forme, dobe uvoľňovania fyziologicky aktívnej látky, liečenej chorobe a druhu živočícha, napríklad raz za niekoľko týždňov, raz za mesiac, raz za niekoľko mesiacov (tri mesiace, štyri mesiace, šesť mesiacov atď.) a pod.

Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podlá predkladaného vynálezu sa môže použiť ako činidlo na prevenciu alebo liečenie celej rady chorôb v závislosti na type fyziologicky aktívnej látky, ktorú obsahuje, a ak je napríklad fyziologicky aktívnou látkou derivát LHRH, môže sa tento prostriedok použiť na prevenciu alebo liečenie hormonálne závislých ochorení, najmä druhov rakovín závislých na pohlavnom hormóne (napríklad rakoviny prostaty, rakoviny maternice, rakoviny prsníka, nádoru hlienových žliaz a pod.), ochorení závislých na pohlavnom hormóne, ako je prostatomegálía, endometrióza, hysteromyóm, predčasná puberta, dysmenorhea, amenorhea, premenštruačný syndróm, mnohopočetný ovariálny syndróm a pod., ako činidlo na prevenciu relapsu rakoviny prsníka po operácii premenopauzálnej rakoviny prsníka, ako činidlo na prevenciu alebo liečenie Alzheimerovej choroby alebo autoimunitných chorôb a ako antikoncepcia (prípadne ako činidlo na prevenciu alebo liečenie neplodnosti, kedy sa využíva opačného účinku, aký nastane po skončenom podávaní). Taktiež sa môže použiť ako činidlo na prevenciu alebo liečenie benigných alebo maligných nádorov, o ktorých je známe, že sú nezávislé na pohlavnom hormóne, ale citlivé na LH-RH.

Z toho vyplýva, že podávaním účinnej látky liečivého alebo preventívneho činidla podľa predkladaného vynálezu cicavcovi je možné predchádzať hormonálne závislým ochoreniam, najmä druhom rakoviny, ktoré sú závislé na pohlavnom hormóne (napríklad rakovine prostaty, rakovine maternice, rakovine prsníka, nádore hlienových žliaz a pod.), ochoreniam závislým na pohlavnom hormóne, ako je prostatomegalia, endometrióza, hysteromyóm, predčasná puberta, dysmenorhea, amenorhea, premenštruačný syndróm, mnohopočetný ovariálny syndróm a pod., alebo ich liečiť, ďalej je možné zamedziť otehotneniu a tiež relapsu rakoviny prsníka po operácii premenopauzálnej rakoviny prsníka.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Predkladaný vynález sa konkrétnejšie vysvetlí pomocou príkladov, porovnávacích príkladov a experimentálnych príkladov, ktorými sa však predkladaný vynález neobmedzuje.

Príklad A1 g kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 9700 g/mol a číselný priemer molárnej hmotnosti 5030 g/mol, ktorý sa syntetizuje polykondenzáciou kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, sa rozpustilo v 100 ml acetónu a k vzniknutému roztoku sa po kvapkách za miešania pridalo 40 ml čistenej vody na vyzrážanie polyméru. Roztok (supernatant) nad vyzrážaným slizovitým polymérom, ktorý je podobný škrobovému sirupu, sa odstránil dekantáciou a získaný polymér sa vákuovo sušil. Výťažok polyméru po sušení bol 8,37 g, jeho hmotnostný priemer molárnej hmotnosti bol 10 500 g/mol a číselný priemer molárnej hmotnosi 6700 g/mol.

Príklad A2

4,87 g polyméru, ktorý sa získal v príklade A1 sa rozpustilo v 8,03 g dichlórmetánu za vzniku olejovej fázy. Táto olejová fáza sa primiešala do vodnej fázy, ktorá vznikla rozpustením 0,597 g acetátu peptidu A v 0,6 ml čistenej vody, a táto zmes sa primáme emulzifikovala pri 25 000 ot/min pomocou prístroja Polytron za vzniku emulzie V/O. Táto V/O emulzia sa pri 15 °C pridala do 1000 ml desaťpercentného vodného roztoku polyvinylalkoholu a pomocou homogenizátora (homomixéra) pri 7000 ot/min sa premenila na emulziu V/O/V. Mikrokapsuly sa stužili odstránením rozpúšťadla pomocou vrtulového miešadla počas troch hodín, potom sa izolovali prejdením cez sito s hustotou ôk 200 mesh, a po pridaní 0,48 g manitolu sa lyofilizovali. Po lyofilizácii výťažok vzniknutých mikrokapsúl bol 3,92 g a obsah peptidu A v nich bol 10,18%.

Porovnávací príklad A1

Mikrokapsuly, ktoré sa získali z kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej z príkladu A1 tým istým spôsobom ako v príklade A2, poskytli výťažok 3,97 g a obsah peptidu A bol 9,50 %.

Experimentálny príklad A1

Mikrokapsuly, ktoré sa získali v príklade A2 a porovnávacom príklade A1 sa dispergovali v 0,3 ml disperzného prostredia (v destilovanej vode, v ktorej sa rozpustilo 0,25 mg karboxymetylcelulózy, 0,5 mg polysorbátu 80 a 25 mg manitolu) v takom množstve, ktoré zodpovedá 2,25 mg peptidu A, a aplikovali sa podkožné do chrbta sedemtýždňovému krysiemu samcovi SD pomocou injekčnej ihly 22G. V čase určenom po podaní sa krysa usmrtila, mikrokapsuly, ktoré zostali v mieste vpichu sa odstránili, stanovil sa v nich obsah zvyšného peptidu A a získaná hodnota sa vydelila príslušným počiatočným obsahom, čo poskytlo pomerné údaje uvedené v tabuľke 1. V nej sú ďalej uvedené hodnoty pomeru hmotnostného k číselnému priemeru molárnej hmotnosti (MJM_n) polymérov, ktoré sa použili v príklade A2 a v porovnávacom príklade A1.

Tabuľka 1

	Porovnávací príklad A1	Príklad A2
MJM_n	1,93	1,57
1 deň	84,64 %	91,17%
2 týždne	32,2 %	54,31 %
4 týždne	2,54 %	10,28%

Z tabuľky 1 je zrejmé, že ak sa na prípravu mikrokapsúl použije polymér z príkladu A2, ktorý má MJM_n rovný 1,90 alebo nižší, a upravený pôsobením acetónu, počiatočné množstvo uvoľneného peptidu A je nižšie, a tak je zabezpečené trvalé uvoľňovanie počas štyroch týždňov.

Príklad A3

V 300,1 g dichlórmetánu sa rozpustilo 185,7 g kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 10 600 g/mol a číselný priemer hmotnosti 6600 g/mol, a teplota rozkladu sa nastavila na 29,5 °C. Z tohto roztoku v organickom rozpúšťadle sa odvážilo 330,2 g a zmiešalo s vodným roztokom, ktorý sa získal rozpustením 15,62 g acetátu peptidu A v 15,31 g destilovanej vody zohriatej na 54,3 °C. Táto zmes sa 1 minútu miešala za vzniku surovej emulzie, ktorá sa v ďalšom kroku dve minúty emulzifikovala pomocou homogenizátora pri 10 000 ot/min za vzniku emulzie V/O. Potom sa táto V/O emulzia ochladila na 17,8 °C, počas 1 minúty a 16 sekúnd sa vliala do 25 litrov vodného roztoku polyvinylalkoholu s koncentráciou 0,1 hmôt. %, ktorého teplota sa vopred nastavila na 17,9 °C, a miešala sa pri 7005 ot/min pomocou prístroja Homomic Line Flow (vyrába firma Tokushukika) za vzniku emulzie V/O/V. Táto V/O/V emulzia sa miešala 3 h do odparenia dichlórmetánu alebo oddifundovania dichlórmetánu do vonkajšej vodnej fázy, olejová fáza sa stužila, prefiltrovala cez sito s priemerom otvorov 75 pm, mikrokapsuly sa nechali sedimentovať pri 2000 ot/min pomocou centrifúgy (H-600S, vyrába firma Kokusanenshinki) a izolovali sa. Izolované mikrokapsuly sa znovu dispergovali v malom množstve destilovanej vody, prefiltrovali cez sito s priemerom otvorov 90 pm, rozpustili prídavkom 17,2 g manitolu a lyofilizovali za vzniku prášku. Výťažok mikrokapsúl bol 76,4 % a obsah peptidu A v mikrokapsulách bol 8,79 %.

Experimentálny príklad A2 mg mikrokapsúl, ktoré sa opisujú v príklade A3, sa dispergovalo v 0,3 ml disperzného prostredia (v destilovanej vode, v ktorej sa rozpustilo 0,15 mg karboxymetylcelulózy, 0,3 mg polysorbátu 80 a 15 mg manitolu). Táto disperzia sa pomocou injekčnej ihly 22G podkožné aplikovala do chrbta sedemtýždňového krysieho samca SD. Po stanovenom čase od aplikácie sa krysa usmrtila, mikrokapsuly zostávajúce v mieste vpichu sa odstránili. Stanovil sa v nich obsah zostávajúceho peptidu A a získaná hodnota sa vydelila príslušným počiatočným obsahom, čo poskytlo pomerné údaje uvedené v tabuľke 2.

Tabuľka 2

Čas od aplikácie	1 deň	1 týždeň	2 týždne	3 týždne	4 týždne	5 týždňov
% zostávajúceho peptidu A	90,29	68,06	36,63	12,75	4,48	1,12

Z tabuľky 2 je zrejmé, že hoci mikrokapsuly, ktoré sa opisujú v príklade A3, majú vysoký obsah fyziologicky aktívnej látky. Podiel fyziologicky aktívnej látky zostávajúci jeden deň po aplikácii, je pozoruhodne vysoký — viac ako 90 %. Z toho vyplýva, že pri nízkej hodnote pomeru MJM_n (1,6) je potlačené nadmerné počiatočné uvoľňovanie fyziologicky aktívnej látky. Navyše tieto mikrokapsuly majú konštantnú rýchlosť uvoľňovania fyziologicky aktívnej látky počas dlhej doby.

Príklad B1

V 320,1 g dichlórmetánu sa rozpustilo 197,7 g kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 12 600 g/mol a číselný priemer molárnej hmotnosti 6400 g/mol. Vzniknutý roztok sa tlakovo sfiltroval cez filter s veľkosťou pórov 0,2 um (EMFLOW, DFA 4201 FRP) a jeho teplota sa nastavila na 30,0 °C. Z tohto roztoku sa odvážilo 330,1 g a zmiešalo s vodným roztokom, ktorý sa pripravil rozpustením 15,68 g acetátu peptidu A v 15,31 ml destilovanej vody a zahrial sa na 56,0 °C. Táto zmes sa 1 minútu miešala za vzniku surovej emulzie, ktorá sa v ďalšom kroku dve minúty emulzifikovala pomocou homogenizátora pri 10 000 ot/min za vzniku emulzie V/O. Potom sa táto V/O emulzia ochladila na 18,2 °C, v priebehu 1 minúty a 16 sekúnd sa vliala do 25 litrov vodného roztoku polyvinylalkoholu (EG-40, vyrába firma Nihongoseikagaku) o koncentrácii 0,1 hmôt. %, ktorého teplota sa vopred nastavila na 18,4 °C, m esa la sa pri 7007 ot/min pomocou prístroka Homomic Line Flow (vyrába firma Tokushukika) za vzniku emulzie V/O/V. Táto V/O/V emulzia sa miešala 3 h do odparenia dichlórmetánu alebo oddifundovania dichlórmetánu do vonkajšej vodnej fázy, olejová fáza sa stužila, prefiltrovala cez sito s priemerom otvorov 75 um, mikrokapsuly sa nechali sedimentovať pri 2000 ot/min pomocou centrifúgy (H-600S, vyrába firma Kokusanenshinki) a izolovali sa. Izolované mikrokapsuly sa znovu dispergovali v malom množstve destilovanej vody, prefiltrovali cez sito s priemerom otvorov 90 um, rozpustili prídavkom 17,2 g manitolu a lyofilizovali za vzniku prášku. Výťažok mikrokapsúl bol 73,47 % a obsah peptidu A v mikrokapsulách bol 8,43 %.

Experimentálny príklad B1

26,7 mg mikrokapsúl, ktoré sa opisujú v príklade B1, sa dispergovalo v 0,3 mg disperzného prostredia (v destilovanej vode, v ktorej sa rozpustilo 0,15 mg karboxymetylcelulózy, 0,3 mg polysorbátu 80 a 15 mg manitolu) a táto disperzia sa pomocou injekčnej ihly 22G podkožné aplikovala do chrbta sedem týždňov starého krysieho samca SD. Po stanovenom čase od aplikácie sa krysa usmrtila, mikrokapsuly zostávajúce v mieste vpichu sa odstránili, stanovil sa v nich obsah zostávajúceho peptidu A a získaná hodnotasa vydelila príslušným počiatočným obsahom, čo poskytlo pomerné údaje uvedené v tabuľke 3.

Tabuľka 3

Čas od aplikácie	1 deň	1 týždeň	2 týždne	3 týždne	4 týždne	5 týždňov
% zostávajúceho peptidu A	82,43	68,33	47,07	23,58	9,05	2,08

Z tabuľky 3 je zrejmé, že mikrokapsuly, ktoré sa opisujú v príklade B1, mohli mať vysoký obsah fyziologicky aktívnej látky i v neprítomnosti želatíny, pozoruhodne potlačené počiatočné uvoľňovanie fyziologicky aktívnej látky, a boli schopné počas dlhej doby uvoľňovať fyziologicky aktívnu látku.

Experimentálny príklad B2

44,6 mg mikrokapsúl, ktoré sa opísali v príklade B1, sa dispergovalo v 1,0 ml disperzného prostredia (v destilovanej vode, v ktorej sa rozpustilo 0,15 mg karboxymetylcelulózy, 0,3 mg polysorbátu 80 a 15 mg manitolu). Táto disperzia sa pomocou injekčnej ihly 23G podkožné aplikovala do chrbta beagla vážiaceho 7 až 12 kg. Po stanovenom čase od aplikácie sa psovi odobrala krv zo žily na prednej nohe, stanovili sa koncentrácie peptidu A a testosterónu. Výsledky sú uvedené v tabuľke 4.

Tabuľka 4

Čas od aplikácie	1 deň	1 týždeň	2 týždne	3 týždne	4 týždne	5 týždňov
Koncentrácia peptidu A	2,21	0,398	0,525	0,433	0,603	0,358
Koncentrácia testosterónu	2,79	0,57	0,35	0,35	0,30	0,39

Z tabuľky 4 je zrejmé, že mikrokapsuly, ktoré sa opisujú v príklade B1, uvoľňujú fyziologicky aktívnu látku počas dlhej doby a udržujú koncentráciu fyziologicky aktívnej látky v krvi. Navyše, aktivita fyziologicky aktívnej látky uvoľnenej do krvi sa nestráca a účinnosť liečiva zostáva zachovaná.

Priemyselná využiteľnosť

Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa predkladaného vynálezu, ktorý má pomer hmotnostného k číselnému priemeru molámej hmotnosti kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej ako zásady rovný 1,90 alebo nižší, alebo používajúci ako zásadu kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej s hmotnostným priemerom molárnej hmotnosti 11 600 až 14 000 g/mol alebo jeho soľ, obsahuje fyziologicky aktívnu látku s vysokou koncentráciou i bez prítomnosti želatíny, potlačuje nadmerné uvoľňovanie uvoľňovanie fyziologicky aktívnej látky a tak môže dosiahnuť stabilnú rýchlosť uvoľňovania v priebehu jedného mesiaca.

Užitočnosť účinkov prostriedka podľa predkladaného vynálezu spočíva v tom, že náklady na výrobný proces sa môžu znížiť, pretože nie je nevyhnutné použiť liečivo zadržujúce látku, ako je želatína, ani zahusťovadlo, že je teda obmedzená potreba aditív, ďalej že prostriedok môže mať vysoký obsah liečiva, beztoho, aby bolo nevyhnutné použiť liečivo zadržujúce látku a zahusťovadlo, že je možné pripraviť prostriedok s trvalým uvoľňovaním, ktorý uvoľňuje liečivo v priebehu aspoň dvoch týždňov, a konečne, že je možné pripraviť prostriedok s vysokou stabilitou vďaka zvýšenej teplote skelneného prechodu.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním vyznačujúci sa tým, že obsahuje kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má pomer hmotnostného k číselnému priemeru molárnej hmotnosti 1,90 alebo nižší, alebo jeho soľ a fyziologicky aktívnu látku.
2. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že fyziologicky aktívnou látkou je fyziologicky aktívny peptid.
3. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 2, vyznačujúci sa tým, že fyziologicky aktívnou látkou je derivát LH-RH.
4. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že hmotnostný priemer molárnej hmotnosti uvedeného kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej je 3000 až 100 000 g/mol.
5. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 4, vyznačujúci sa tým, že hmotnostný priemer molárnej hmotnosti kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej je 8000 až 15 000 g/mol.
6. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že podiel nízkomolekulárnej frakcie kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej s molárnou hmotnosťou 3000 g/mol alebo nižšou je 9 % alebo menej.
7. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 6, vyznačujúci sa tým, že podiel nízkomolekulárnej frakcie kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej s molárnou hmotnosťou 3000 g/mol alebo nižšou je 3 až 9 %.
8. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že uvedený kopolymér má molámy pomer kyseliny mliečnej ku kyseline glykolovej 100:0 až 40:60.
9. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že uvedený kopolymér má molámy pomer kyseliny mliečnej ku kyseline glykolovej 70:30 až 80:20.
10. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 3, vyznačujúci sa tým, že derivátom LH-RH je peptid znázornený všeobecným vzorcom

5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z kde Y označuje DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal, alebo DHis(lmBzl) a Z označuje HN-C₂H₅ alebo Gly-NH₂, alebo jeho soľ.
11. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 3, vyznačujúci sa tým, že derivátom LH-RH je peptid znázornený všeobecným vzorcom

5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Ľeu-Arg-Pro-NH-C₂H₅alebo jeho acetát.
12. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 3, vyznačujúci sa tým, že obsah derivátu LH-RH alebo jeho soli v prostriedku s trvalým uvoľňovaním je 5 až 24 hmôt. %.
13. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že fyziologicky aktívna látka alebo jej soľ je čiastočne rozpustná alebo nerozpustná.
14. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že je určený pre injekcie.
15. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že uvoľňuje fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ v priebehu najmenej dvoch týždňov.
16. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podlá nároku 1,vyznačujúci sa tým, že neobsahuje látku, ktorá zadržuje liečivo.
17. Prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že neobsahuje želatínu
18. Spôsob prípravy prostriedku s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa odstránenie rozpúštádla zo zmesného roztoku obsahujúceho fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ a kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má pomer hmotnostného k číselnému priemeru molárnej hmotnosti 1,90 alebo nižší, alebo jeho soľ.
19. Spôsob podľa nároku 18, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa zmiešanie a dispergovanie fyziologicky aktívnej látky alebo jej soli v roztoku v organickom rozpúštádle, ktorý obsahuje kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má pomer hmotnostného k číselnému priemeru molárnej hmotnosti 1,90 alebo nižší, alebo jeho soľ, a v odstránení organického rozpúštádla.
20. Spôsob podľa nároku 19, vyznačujúci sa tým, že fyziologicky aktívna látka alebo jej soľ sa použije ako vodný roztok obsahujúci fyziologicky aktívnu látku alebo jej soľ.
21. Liečivo, vyznačujúce sa tým, že obsahuje prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 1.
22. Činidlo na prevenciu alebo liečbu rakoviny prostaty, prostatomegalie, endometriózy, hysteromyóm u, metrofibrómu, predčasnej puberty a dysmenorhey, alebo na antikoncepciu, vyznačujúce sa tým, že obsahuje prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 3.
23. Činidlo na prevenciu recidívy rakoviny prsníka po operácii premenopauzálnej rakoviny prsníka, vyznačujúce sa tým, že obsahuje prostriedok s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 3.
24. Spôsob prevencie alebo liečby rakoviny prostaty, prostaromegalie, endometriózy, hysteromyómu, metrofibrómu, predčasnej puberty a dysmenorhey, alebo antikoncepcie, vyznačujúci sa tým, že sa cicavcovi podáva účinná dávka prostriedku s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 3.
25. Spôsob prevencie recidívy rakoviny prsníka po operácii premenopauzálnej rakoviny prsníka, vyznačujúci sa tým, že sa cicavcovi podáva účinná dávka prostriedku s trvalým uvoľňovaním podľa nároku 3.
26. Spôsob prípravy kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molámej hmotnosti 8000 až 15 000 g/mol a pomer hmotnostného k číselnému priemeru molámej hmotnosti 1,90 alebo nižší, alebo jeho soli, vyznačujúci sa tým, že spočíva v pridaní vody k organickému rozpúšťadlu, ktoré obsahuje kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 5000 až 15 000 g/mol pri pomere 5 až 50 objemových dielov vody ku 100 objemových dielov organického rozpúšťadla.
27. Spôsob prípravy kopolyméru podľa nároku 26, v y z n a č u j ú c i sa tým, že organické rozpúšťadlo je hydrofilné.
28. Spôsob prípravy kopolyméru podľa nároku 27, v y z n a č u j ú c i sa tým, že hydrofilným organickým rozpúšťadlom je acetón.
29. Spôsob prípravy kopolyméru podľa nároku 26, v y z n a č u j ú c i sa tým, že pomer objemových dielov vody k objemových dielom organického rozpúšťadla je 10 až 45 ku 100.
30. Spôsob prípravy kopolyméru podľa nároku 26, v y z n a č u j ú c i sa tým, že pomer objemových dielov vody k objemovým dielom organického rozpúšťadla je 40 ku 100.
31. Kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej vyznačujúci sa tým, že má hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 8000 až 15 000 g/mol a pomer hmotnostného ku číselnému priemeru molárnej hmotnosti 1,90 alebo nižší, alebo jeho soľ.
32. Použitie kopolyméru kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej alebo jeho soli podľa nároku 31 na prípravu prostriedku s trvalým uvoľňovaním, ktorý neobsahuje želatínu.
33. M ikrogul ičky vyznačujúce sa tým, že obsahujú kopolymér kyseliny mliečnej a kyseliny glykolovej, ktorý ma hmotnostný priemer molárnej hmotnosti 11 600 až 14 000 g/mol alebo jeho soľ a derivát LH-RH alebo jeho soľ, a neobsahujú želatínu.
34. Mikroguličky podľa nároku 33, v y z n a č u j ú c e sa tým, že derivátom LH-RH alebo jeho solí je peptid všeobecného vzorca:

5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z kde Y označuje DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal alebo DHis(lmBzl) a Z označuje HN-C₂H₅ alebo Gly-NH₂, alebo jeho soľ.
35. Mikroguličky podľa nároku 33, vyznačujúce sa tým, že derivátom LH-RH alebo jeho solí je peptid všeobecného vzorca

5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-HN-C₂H₅, alebo jeho acetát.
36. Mikroguličky podľa nároku 33, vyznačujúce sa tým, že obsah derivátu LHRH alebo jeho soli je 5 až 24 hmôt. %.
37. Mikroguličky podľa nároku 33, v y zn a č u j ú c e sa tým, že sú mikrokapsulami.
38. Mikroguličky podľa nároku 33, vyznačujúce sa tým, že derivát LH-RH alebo jeho soľ sa uvoľňuje v priebehu najmenej dvoch týždňov.
39. Činidlo na prevenciu alebo liečbu rakoviny prostaty, prostatomegalie, endometriózy, hysteromyómu, metrofibrómu, predčasnej puberty a dysmenorhey, alebo na antikoncepciu, vyznačujúce sa tým, že obsahuje mikroguličky podlá nároku 33.
40. Činidlo na prevenciu relapsu rakoviny prsníka po operácii premenopauzálnej rakoviny prsníka, vyznačujúce sa tým, že obsahuje mikroguličky podľa nároku 33.
41. Spôsob prevencie alebo liečby rakoviny prostaty, prostatomegalie, endometriózy, hysteromyómu, metrofibrómu, predčasnej puberty a dysmenorhey, alebo antikoncepcie, v y z n a č u jú c i sa tým, že sa cicavcovi podáva účinná dávka mikroguličiek podľa nároku 33.
42. Spôsob prevencie relapsu rakoviny prsníka po operácii premenopuazálnej rakoviny prsníka, vyznaču júci sa tým, že sa cicavcovi podáva účinná dávka mikroguličiek podľa nároku 33.