[go: up one dir, main page]

RU2798698C1 - Method of preparing endometrium for embryo transfer in art cryoprotocols - Google Patents

Method of preparing endometrium for embryo transfer in art cryoprotocols Download PDF

Info

Publication number
RU2798698C1
RU2798698C1 RU2022132995A RU2022132995A RU2798698C1 RU 2798698 C1 RU2798698 C1 RU 2798698C1 RU 2022132995 A RU2022132995 A RU 2022132995A RU 2022132995 A RU2022132995 A RU 2022132995A RU 2798698 C1 RU2798698 C1 RU 2798698C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
endometrium
cannula
laser
longitudinal axis
expression
Prior art date
Application number
RU2022132995A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Ольга Анатольевна Пустотина
Анфиса Анатольевна Гашенко
Анна Владимировна Лопатина
Original Assignee
Ольга Анатольевна Пустотина
Анфиса Анатольевна Гашенко
Анна Владимировна Лопатина
Filing date
Publication date
Application filed by Ольга Анатольевна Пустотина, Анфиса Анатольевна Гашенко, Анна Владимировна Лопатина filed Critical Ольга Анатольевна Пустотина
Application granted granted Critical
Publication of RU2798698C1 publication Critical patent/RU2798698C1/en

Links

Images

Abstract

FIELD: medicine; gynecology; reproductive medicine.
SUBSTANCE: on the 6th-10th day of the cycle, a single procedure of intrauterine irradiation with an Er:YAG laser is performed in the non-ablative mode at a wavelength of 2,940 nm, with an energy flux density of 1.5 J/cm 2 and a pulse repetition rate of 1.4 Hz. A cannula is inserted into the uterine cavity without expansion of the cervical canal, providing a spot size of 4 mm, and every 2.5 mm, the endometrium is irradiated with a package of four pulses, performing three passes of the cannula, first along the longitudinal axis of the uterine body, and then along the lines located at angles 30° left and right to the specified longitudinal axis of the body of the uterus.
EFFECT: method improves the proliferative activity of the endometrium, reduces the foci of sclerosis and restores the expression of progesterone and estrogen receptors, which makes it possible to increase the susceptibility of the endometrium to embryo transfer.
3 cl, 1 dwg, 2 ex

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к физиотерапии и может быть использовано при подготовке эндометрия к переносу эмбриона в криопротоколах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ).The invention relates to medicine, namely to physiotherapy, and can be used in preparing the endometrium for embryo transfer in cryoprotocols of assisted reproductive technologies (ART).

Известно, что значимой проблемой ВРТ является невысокий процент имплантации эмбрионов, даже морфологически хорошего качества, и недостаточно высокая частота наступления беременности, которая по данным РАРЧ составляет 34,6% (данные РАРЧ 2020). Сегментация цикла стимуляции овуляции с последующей пункцией фолликулов и отсроченным переносом криоконсервированного эмбриона увеличила данный показатель всего на 7,1%. Основной причиной неудач имплантации считается недостаточная функциональная активность или восприимчивость эндометрия. Было показано (Соколова Е.А., Краснопольская К.В., Белокурова М.В., Исакова К.М. Состояние эндометрия у пациенток с синдромом поликистозных яичников. Российский вестник акушера-гинеколога. 2021;21 (2):86-90; Saxtorph М.Н., Hallager Т., Persson G., et al. Assessing endometrial receptivity after recurrent implantation failure: a prospective controlled cohort study. Reprod Biomed Online. 2020;41(6):998-1006; Чистякова Г.Н., Гришкина А.А., Ремизова И.И., и др. Иммуногистохимическая и морфометрическая оценка тонкого эндометрия. Проблемы репродукции. 2021;27(5):38-43), что при неудачах имплантации имеет место повреждение рецепторного аппарата эндометрия, низкий уровень экспрессии рецепторных белков, молекул адгезии, структурная перестройка эндометриальных желез и фибропластические изменения стромального компонента.It is known that a significant problem of ART is a low percentage of embryo implantation, even of morphologically good quality, and an insufficiently high pregnancy rate, which, according to RAHR, is 34.6% (data of RAHR 2020). Segmentation of the ovulation stimulation cycle followed by follicle puncture and delayed cryopreserved embryo transfer increased this indicator by only 7.1%. The main cause of implantation failure is considered to be insufficient functional activity or susceptibility of the endometrium. It was shown (Sokolova E.A., Krasnopolskaya K.V., Belokurova M.V., Isakova K.M. The state of the endometrium in patients with polycystic ovary syndrome. Russian Bulletin of the Obstetrician-Gynecologist. 2021;21 (2):86- 90; Saxtorph M.N., Hallager T., Persson G., et al. Assessing endometrial receptivity after recurrent implantation failure: a prospective controlled cohort study. Reprod Biomed Online. 2020;41(6):998-1006; Chistyakova G. .N., Grishkina A.A., Remizova I.I., et al. Immunohistochemical and morphometric evaluation of the thin endometrium.Problems of Reproduction.2021;27(5):38-43) that failure of implantation results in damage to the receptor apparatus endometrium, low expression of receptor proteins, adhesion molecules, restructuring of the endometrial glands and fibroplastic changes in the stromal component.

Исследования последних лет продемонстрировали эффективность различных физиотерапевтических методов в преодолении бесплодия (Rice AD, Patterson K, Wakefield LB, et al. Ten-year Retrospective Study on the Efficacy of a Manual Physical Therapy to Treat Female Infertiity. Altern Ther Health Med 2015; 21(3): 36-44). Наиболее перспективным считается способ внутриматочного лечения эндометриальной дисфункции с использованием лазерных технологий, фотодинамической терапии, введением аутологичной плазмы крови, обогащенной тромбоцитами, ультразвуковой (УЗ)-кавитацией полости матки низкочастотным УЗ, скретчинг и др. Так, например введение фотосенсибилизатора в полость матки с последующей внутриматочной экспозицией низкоинтенсивного лазерного излучения мощностью 0,05 Вт/см2 и плотностью энергии 40 Дж/см2 у женщин с хроническим эндометритом улучшало гистологическую структуру эндометрия и его толщину по данным УЗ исследования, но при этом рецепторная активность оставалась низкой, а клинические исходы неясные. Более того, описываемая процедура достаточно трудоемкая, длительная, может вызывать отек стромы эндометрия и ряд побочных эффектов у женщин, таких как болевой синдром, субфебрилитет и повышение артериального давления (Серебренникова К.Г., Арутюнян Н.А., Кацалап С.Н., Алехин А.И. Фотодинамическая терапия у пациенток с бесплодием при хроническом эндометрите. Российский вестник акушера-гинеколога. 2020; 20(3):56-61. https://doi.org/10.17116/rosakush20202003156).Recent studies have demonstrated the effectiveness of various physical therapy methods in overcoming infertility (Rice AD, Patterson K, Wakefield LB, et al. Ten-year Retrospective Study on the Efficacy of a Manual Physical Therapy to Treat Female Infertiity. Altern Ther Health Med 2015; 21( 3): 36-44). The most promising method is considered to be the intrauterine treatment of endometrial dysfunction using laser technologies, photodynamic therapy, the introduction of autologous blood plasma enriched with platelets, ultrasonic (US) cavitation of the uterine cavity with low-frequency ultrasound, scratching, etc. For example, the introduction of a photosensitizer into the uterine cavity followed by intrauterine exposure to low-intensity laser radiation with a power of 0.05 W / cm 2 and an energy density of 40 J / cm 2 in women with chronic endometritis improved the histological structure of the endometrium and its thickness according to the ultrasound study, but the receptor activity remained low, and the clinical outcomes were unclear. Moreover, the described procedure is quite laborious, lengthy, can cause edema of the endometrial stroma and a number of side effects in women, such as pain, subfebrile condition and increased blood pressure (Serebrennikova K.G., Arutyunyan N.A., Katsalap S.N. , Alekhin A.I. Photodynamic therapy in infertile patients with chronic endometritis. Russian Bulletin of an Obstetrician-Gynecologist. 2020; 20(3):56-61. https://doi.org/10.17116/rosakush20202003156).

Описан способ лазер-индуцированного лечения атрофии эндометрия (RU 2713797 С1, ООО "ФОТОН-БИО", 07.02.2020), при котором первоначально назначают хлорофилл-содержащий препарат в течение 4-6 недель, контролируют степень его накопления в матке с помощью фото люминесцентной спектроскопии и затем проводят 3-6 сеансов лазерной внутриматочной терапии с использованием одноразовых стерильных колпачков с цилиндрическим рассеивателем, состоящим из кварцевых микросфер, лазерным излучением с длиной волны 0,63 мкм с плотностью энергии 5-500 Дж/см2. Способ обеспечивает восстановление структуры и функции слизистой оболочки матки за счет активации процесса регенерации эпителия и стромы эндометрия в результате долгосрочного синтеза синглетного кислорода при фотохимических реакциях непосредственно в тканях эндометрия. Однако методика требует длительного подготовительного этапа терапии, в ней не описана длительность и периодичность сеансов лазерной терапии и не указана клиническая эффективность проводимого лечения.A method for laser-induced treatment of endometrial atrophy is described (RU 2713797 C1, FOTON-BIO LLC, 02/07/2020), in which a chlorophyll-containing drug is initially prescribed for 4-6 weeks, the degree of its accumulation in the uterus is controlled using photoluminescent spectroscopy and then spend 3-6 sessions of laser intrauterine therapy using disposable sterile caps with a cylindrical diffuser, consisting of quartz microspheres, laser radiation with a wavelength of 0.63 μm with an energy density of 5-500 j/cm 2 . EFFECT: method ensures restoration of the structure and function of the uterine mucosa by activating the process of regeneration of the endometrial epithelium and stroma as a result of long-term synthesis of singlet oxygen during photochemical reactions directly in the endometrial tissues. However, the technique requires a long preparatory stage of therapy, it does not describe the duration and frequency of laser therapy sessions and does not indicate the clinical effectiveness of the treatment.

Для лечения «тонкого» эндометрия в полость матки вводилась смесь газов СО2 и N2 в комбинации с гинекологическим массажем [Шнейдерман М.Г., и др. Проблема тонкого эндометрия: возможности комбинированного негормонального лечения при подготовке к процедуре экстракорпорального оплодотворения. Гинекология. 2014; 03: 67-71]. Данная методика вызывала усиление кровообращения в эндометрии, увеличение толщины базального и функционального слоев эндометрия, расширение мелких артерий, повышение скорости экстракции кислорода тканями, усиление их метаболизма и активацию фибробластов. Однако данный способ не нашел широкого применения вследствие необходимости специального оборудования для приготовления газовой смеси CO2 и N2 в определенном соотношении, а также возможного риска воздушной эмболии из-за проникновения газа в сосудистое русло.For the treatment of "thin" endometrium, a mixture of CO 2 and N 2 gases was introduced into the uterine cavity in combination with gynecological massage [Shneiderman M.G., et al. The problem of thin endometrium: the possibility of combined non-hormonal treatment in preparation for the in vitro fertilization procedure. Gynecology. 2014; 03: 67-71]. This technique caused an increase in blood circulation in the endometrium, an increase in the thickness of the basal and functional layers of the endometrium, an expansion of small arteries, an increase in the rate of oxygen extraction by tissues, an increase in their metabolism and activation of fibroblasts. However, this method has not found wide application due to the need for special equipment for preparing a gas mixture of CO 2 and N 2 in a certain ratio, as well as the possible risk of air embolism due to the penetration of gas into the vascular bed.

Другим способом лечения «тонкого» эндометрия является внутриматочное введение аутоплазмы, содержащей тромбоциты (RU 2646508 С1, ОмГМУ, 05.03.2018). Аутоплазма, содержащая тромбоциты, активирует функцию первичных факторов роста, ускоряет естественные механизмы регенерации, повышает активность фибробластов, ангиогенез и образование соединительной ткани. Однако влияние аутоплазмы на организм человека может иметь негативный эффект вследствие возможного содержания токсических веществ, факторов воспаления и других биологически активных веществ.Another way to treat "thin" endometrium is the intrauterine administration of autoplasma containing platelets (RU 2646508 C1, Omsk State Medical University, 05.03.2018). Autoplasma containing platelets activates the function of primary growth factors, accelerates the natural mechanisms of regeneration, increases the activity of fibroblasts, angiogenesis and the formation of connective tissue. However, the influence of autoplasma on the human body can have a negative effect due to the possible content of toxic substances, inflammation factors and other biologically active substances.

В некоторых клиниках ВРТ для преодоления бесплодия маточного генеза используется скретчинг эндометрия. Легкое повреждение эндометрия вызывает увеличение количества местных цитокинов, участвующих в заживлении ран, что способствует его децидуализации и подготовке к имплантации. Но, несмотря определенные успехи скретчинга в циклах переноса эмбриона, считается недостаточным количество и качество доказательств для внедрения его в клиническую практику (Nastri СО, et al. Endometrial injury in women undergoing assisted reproductive techniques. Cochrane Database Syst Rev 2015; 7: CD 009517).In some ART clinics, endometrial scratching is used to overcome uterine infertility. Mild damage to the endometrium causes an increase in the number of local cytokines involved in wound healing, which contributes to its decidualization and preparation for implantation. But, despite some success of scratching in embryo transfer cycles, the quantity and quality of evidence is considered insufficient to implement it in clinical practice (Nastri CO, et al. Endometrial injury in women undergoing assisted reproductive techniques. Cochrane Database Syst Rev 2015; 7: CD 009517) .

В последние годы в гинекологии применяются лазерные системы, индуцирующие световые волны с хорошим водопоглощением, такие как CO2 и эрбиевые (Er:YAG) лазеры, что актуально для высокогидратированной слизистой оболочки влагалища, а с обеспечением сглаженного режима (SMOOTH) эрбиевого лазера появилась возможность вызывать термодиффузию без абляционного повреждения тканей (см. обзор О.А. Пустотина «Современные лазерные технологии в лечении урогенитальных расстройств у женщин», ж. ФАРМАТЕКА, 2020, №6, с. 105-112). Лазерное излучение с длиной волны 2940 нм в тепловом режиме сверхдлинными пакетными импульсами генерируется Er:YAG лазером на лазерной системе Fotona XS Dynamis (фирма FOTONA, Словения) https://tmexpo.ru/wp-content/uploads/2019/04/FOTONA_ОМ_Dynamis_Spectro_TS_RU.pdf.In recent years, laser systems that induce light waves with good water absorption, such as CO 2 and erbium (Er:YAG) lasers, have been used in gynecology, which is important for highly hydrated vaginal mucosa, and with the provision of a smoothed mode (SMOOTH) of the erbium laser, it became possible to cause thermal diffusion without ablative tissue damage (see review by O.A. Pustotin “Modern laser technologies in the treatment of urogenital disorders in women”, J. PHARMATEKA, 2020, No. 6, pp. 105-112). Laser radiation with a wavelength of 2940 nm in the thermal mode by ultra-long packet pulses is generated by an Er:YAG laser on a Fotona XS Dynamis laser system (FOTONA, Slovenia) https://tmexpo.ru/wp-content/uploads/2019/04/FOTONA_OM_Dynamis_Spectro_TS_RU. pdf.

В безаблационном (сглаженном SMOOTH) режиме происходит этапный прогрев ткани под воздействием быстрой последовательности сверхдлинных пакетных импульсов по 250 мсек, состоящих из нескольких микроимпульсов (300 мксек), с интервалами между пакетными импульсами 400 мсек. За счет контролируемой термодиффузии на всю глубину слизистой оболочки влагалища, состоящей на 90% из воды, лазерная энергия запускает реакции клеточного иммунитета, регенерацию и восстановление эпителиального покрова, активацию фибробластов с образованием новых волокон коллагена и компонентов внеклеточного матрикса, стимулирует восстановления сосудистого кровотока и неоангиогенез, тем самым повышая оксигенацию и поступление питательных веществ в слизистую оболочку (Vizintin Z., Lukac М., Kazic М. et al. Erbium laser in gynecology. Climacteric. 2015; 18 Suppl 1:4-8. doi: 10.3109/13697137.2015.1078668.). Технология дискретной подачи пакетных импульсов позволяет повысить температуру нагрева ткани до 60-63°С, оптимальной для восстановления коллагена и неоангиогенеза, без превышения температурного порога поверхностной аблации или необратимой денатурация коллагена (Lukac М., Zorman A., Lukac N. et al. Characteristics of Non-Ablative Resurfacing of Soft Tissues by Repetitive EnYAG Laser Pulse Irradiation. Lasers Surg Med. 2021 Nov; 53(9): 1266-1278. doi: 10.1002/lsm.23402).In the non-ablative (smoothed SMOOTH) mode, tissue is heated stepwise under the influence of a rapid sequence of ultra-long burst pulses of 250 ms each, consisting of several micropulses (300 μs), with intervals between burst pulses of 400 ms. Due to controlled thermal diffusion to the entire depth of the vaginal mucosa, which consists of 90% water, laser energy triggers cellular immunity reactions, regeneration and restoration of the epithelial cover, activation of fibroblasts with the formation of new collagen fibers and components of the extracellular matrix, stimulates the restoration of vascular blood flow and neoangiogenesis, thereby increasing oxygenation and nutrient supply to the mucosa (Vizintin Z., Lukac M., Kazic M. et al. Erbium laser in gynecology. Climacteric. 2015; 18 Suppl 1:4-8. doi: 10.3109/13697137.2015.1078668 .). The discrete burst pulse technology makes it possible to increase the tissue heating temperature to 60-63°C, which is optimal for collagen restoration and neoangiogenesis, without exceeding the temperature threshold of surface ablation or irreversible collagen denaturation (Lukac M., Zorman A., Lukac N. et al. Characteristics of Non-Ablative Resurfacing of Soft Tissues by Repetitive EnYAG Laser Pulse Irradiation Lasers Surg Med 2021 Nov 53(9): 1266-1278 doi: 10.1002/lsm.23402).

Наиболее близким к патентуемому является способ лечения хронического эндометрита (RU 2692999 С1, ООО "Клиника профессора Пасман", 28.06.2019 - прототип). Осуществляют фотодинамическую терапию путем облучения внутренних стенок полости матки лазерным излучением с длиной волны 662 нм в непрерывном режиме до получения плотности световой энергии 30-40 Дж/см2 при мощности излучения 0,3-0,4 Вт. Общим недостатком методов фотодинамической терапии является необходимость длительной экспозиции фотосенсибилизатора в полости матки, отсутствие четких данных по глубине лазерного воздействия на ткани и болевой синдром во время и после процедуры.The closest to the patentable is a method for the treatment of chronic endometritis (RU 2692999 C1, LLC "Professor Pasman's Clinic", 06/28/2019 - prototype). Photodynamic therapy is carried out by irradiating the inner walls of the uterine cavity with laser radiation with a wavelength of 662 nm in a continuous mode until a light energy density of 30-40 J/cm 2 is obtained at a radiation power of 0.3-0.4 W. A common disadvantage of photodynamic therapy methods is the need for long-term exposure of the photosensitizer in the uterine cavity, the lack of clear data on the depth of laser exposure to tissues, and pain during and after the procedure.

Настоящее изобретение направлено на решение проблемы улучшения пролиферативной активности эндометрия, уменьшению очагов склероза и восстановлению экспрессии рецепторов прогестерона и эстрогенов, что является техническим результатом изобретения. Указанное, как показано в дальнейшем описании изобретения, позволяет повысить восприимчивость эндометрия к переносу эмбриона.The present invention is aimed at solving the problem of improving the proliferative activity of the endometrium, reducing foci of sclerosis and restoring the expression of progesterone and estrogen receptors, which is the technical result of the invention. This, as shown in the following description of the invention, allows you to increase the susceptibility of the endometrium to embryo transfer.

Патентуемый способ подготовки эндометрия к переносу эмбриона в криопротоколах вспомогательных репродуктивных технологий включает облучение полости матки лазерным излучением.The patented method of preparing the endometrium for embryo transfer in cryoprotocols of assisted reproductive technologies includes irradiating the uterine cavity with laser radiation.

Отличие состоит в следующем.The difference is as follows.

На 6-10 день цикла выполняют однократную процедуру внутриматочного облучения Er:YAG лазером в безабляционном режиме на длине волны 2940 нм, с плотностью потока энергии 1,5 Дж/см2 и частотой повторения пакета импульсов 1,4 Гц, при этом в полость матки без расширения цервикального канала вводят канюлю, обеспечивающую размер пятна 4 мм, и через каждые 2,5 мм осуществляют облучение эндометрия пакетом из четырех импульсов, выполняя по три прохода канюли сначала вдоль продольной оси тела матки, а затем - по линиям, расположенным под углами 30° слева и справа к указанной продольной оси тела матки.On the 6-10th day of the cycle, a single procedure of intrauterine irradiation with an Er:YAG laser is performed in the non-ablative mode at a wavelength of 2940 nm, with an energy flux density of 1.5 J/cm 2 and a pulse repetition rate of 1.4 Hz, while in the uterine cavity without dilating the cervical canal, a cannula is inserted providing a spot size of 4 mm, and every 2.5 mm, the endometrium is irradiated with a package of four pulses, performing three passes of the cannula, first along the longitudinal axis of the uterine body, and then along lines located at angles of 30 ° left and right to the specified longitudinal axis of the body of the uterus.

Способ может характеризоваться тем, что используют Er:YAG лазер в безабляционном режиме системы Fotona SP Dynamis, Словения, а также тем, что используют канюлю диаметром 4 мм, которую закрепляют с использованием манипулы R09-2Gu.The method can be characterized by the fact that an Er:YAG laser is used in the non-ablative mode of the Fotona SP Dynamis system, Slovenia, and also that a cannula with a diameter of 4 mm is used, which is fixed using an R09-2Gu handpiece.

На фигуре показана схема перемещений канюли при облучении стенок матки. Позициями обозначены: 1 - тело матки в сечении; 2 - манипула, 3 - канюля; 3.1, 3.2 - положение излучающего конца канюли 3; 4 - продольная ось тела матки 1; 5 - направления перемещения манипулы 2 при облучении тела матки вдоль продольной оси 4, под углами 30° влево (поз. 3.1) и вправо (поз. 3.2) относительно оси 4; 6 - начальное положение излучающего конца канюли 3.The figure shows a diagram of the movements of the cannula during irradiation of the walls of the uterus. The positions indicate: 1 - the body of the uterus in cross section; 2 - handpiece, 3 - cannula; 3.1, 3.2 - the position of the radiating end of the cannula 3; 4 - longitudinal axis of the body of the uterus 1; 5 - directions of movement of the handpiece 2 during irradiation of the body of the uterus along the longitudinal axis 4, at angles of 30° to the left (pos. 3.1) and to the right (pos. 3.2) relative to axis 4; 6 - initial position of the radiating end of the cannula 3.

Способ осуществляют следующим образом. Без расширения цервикального канала в полость матки 1 посредством манипулы 2 марки R09-2Gu вводят канюлю 3 длиной 26 мм и диаметром 4 мм, обеспечивающую размер пятна 4 мм. Затем канюлю 3 проводят вдоль продольной оси 4 до контакта с дном матки 1. Начальное положение излучающего конца канюли обозначено поз. 6. Затем, выдвигая канюлю 3 из полости матки в точках, отстоящих друг от друга на расстоянии 2,5 мм, выполняют облучение Er:YAG лазером в безабляционном режиме на длине волны 2940 нм, пакетами по 4 лазерных импульса с плотностью потока энергии 1,5 Дж/см2 и частотой повторения пакета импульсов 1,4 Гц.The method is carried out as follows. Without expansion of the cervical canal, a cannula 3 26 mm long and 4 mm in diameter is inserted into the uterine cavity 1 by means of a R09-2Gu handpiece 2, providing a spot size of 4 mm. Then the cannula 3 is carried out along the longitudinal axis 4 until it comes into contact with the fundus of the uterus 1. The initial position of the radiating end of the cannula is indicated by pos. 6. Then, pushing the cannula 3 out of the uterine cavity at points spaced 2.5 mm apart, the Er:YAG laser is irradiated in the non-ablative mode at a wavelength of 2940 nm, with packages of 4 laser pulses with an energy flux density of 1, 5 J/cm 2 and a pulse repetition rate of 1.4 Hz.

Указанное расстояние (2,5 мм) выбрано из условия перекрытия пятном лазера диаметром 4 мм всей поверхности полости матки в процессе перемещения канюли 3. Осуществляют три прохода по направлению продольной оси 4 тела матки, затем по три прохода по линиям под углом 30° вправо и влево относительно указанной оси 4. Соответственно всего выполняют 9 проходов в полости матки.The specified distance (2.5 mm) is selected from the condition of overlapping by a laser spot with a diameter of 4 mm of the entire surface of the uterine cavity in the process of moving the cannula 3. Three passes are made in the direction of the longitudinal axis 4 of the uterine body, then three passes along the lines at an angle of 30 ° to the right and to the left relative to the specified axis 4. Accordingly, a total of 9 passages are performed in the uterine cavity.

Пациенты и методы: 25 женщин возраста 26-45 лет, имеющие от 1 до 5 неудачных имплантаций в анамнезе и планирующие беременность в протоколе переноса размороженного эмбриона.PATIENTS AND METHODS: 25 women aged 26-45 years with a history of 1 to 5 unsuccessful implantations and planning a pregnancy in the thawed embryo transfer protocol.

Всем пациенткам на 6-10 день цикла проводилась гистологическая и иммуногистохимическая оценка эндометрия, полученного при офисной гистероскопии. Через 1-2 месяца после гистероскопии на 6-10 день цикла проводилась однократная процедура внутриматочного воздействия безабляционным Er:YAG лазером на лазерной системе Fotona SP Dynamis. У 12 из пролеченных женщин через 1-2 месяца после процедуры на 6-10 день цикла проводилась повторная гистологическая и иммуногистохимическая оценка эндометрия, полученного путем пайпель-биопсии.All patients on the 6th-10th day of the cycle underwent a histological and immunohistochemical evaluation of the endometrium obtained during office hysteroscopy. 1-2 months after hysteroscopy on days 6-10 of the cycle, a single procedure of intrauterine exposure with a non-ablative Er:YAG laser was performed on the Fotona SP Dynamis laser system. In 12 of the treated women, 1-2 months after the procedure, on days 6-10 of the cycle, a repeated histological and immunohistochemical evaluation of the endometrium obtained by pipel biopsy was performed.

Результаты. При гистологическом исследовании эндометрия в середине 1 фазы цикла до лазерной процедуры активная пролиферация отмечалась только у 5/12 (41,7%), тогда как после лазерной процедуры - у 10/12 (83,3%) (р=0,029), склероз спиральных артерий и/или стромы - у 7/12 (58,3%) и 2/12 (16,7%) (р=0,029), соответственно. Признаки хронического эндометрита (CD 138 +, склероз сосудов и стромы) были выявлены у 2 женщин, у одной из которых через месяц после лазерной процедуры они отсутствовали, а у другой очаги склероза значительно уменьшились. Диссеминированная или фокальная лимфоидная инфильтрация встречалась у половины женщин как до, так и после лечения.Results. Histological examination of the endometrium in the middle of the 1st phase of the cycle before the laser procedure showed active proliferation only in 5/12 (41.7%), while after the laser procedure - in 10/12 (83.3%) (p = 0.029), sclerosis spiral arteries and/or stroma - in 7/12 (58.3%) and 2/12 (16.7%) (p=0.029), respectively. Signs of chronic endometritis (CD 138+, vascular and stromal sclerosis) were detected in 2 women, one of whom did not have them a month after the laser procedure, and the other had significantly reduced sclerosis foci. Disseminated or focal lymphoid infiltration occurred in half of the women both before and after treatment.

Позитивная экспрессия антител (AT) к сосудистому эндотелиальному фактору роста (VEGF) до лечения лазером обнаружена в сосудах эндометрия у 9 женщин, у 5 из них - слабая и/или фокальная, и у 3 - в сочетании со слабой экспрессией в строме. У 2 женщин отмечалась слабая экспрессия VEGF только в строме эндометрия, и у одной - экспрессии AT совсем не было. После лазерной процедуры позитивная экспрессия AT к VEGF отмечалась у всех женщин как в сосудах, так и строме эндометрия, и только у трех из них она была фокальной неравномерной.Positive expression of antibodies (AT) to vascular endothelial growth factor (VEGF) before laser treatment was found in endometrial vessels in 9 women, in 5 of them - weak and/or focal, and in 3 - in combination with weak expression in the stroma. In 2 women, there was a weak expression of VEGF only in the stroma of the endometrium, and in one woman, there was no expression of AT at all. After the laser procedure, positive expression of AT to VEGF was noted in all women both in the vessels and in the stroma of the endometrium, and only in three of them it was focally uneven.

Первоначально выраженная экспрессия ядерных рецепторов прогестерона (H-score >200 Н-баллов) в >90% железистых клеток отмечалась у 75% женщин и у 66,7% - в строме. У остальных рецепторы прогестерона обнаруживались в 72-90% клеток и имели сниженную экспрессию (H-score 172-199 Н-баллов), у одной женщины в строме экспрессия отсутствовала.Initially, pronounced expression of nuclear progesterone receptors (H-score >200 H-points) in >90% of glandular cells was noted in 75% of women and in 66.7% in the stroma. In the rest, progesterone receptors were found in 72-90% of cells and had a reduced expression (H-score 172-199 H-points), in one woman there was no expression in the stroma.

Через 1-2 месяца после лазерной процедуры у 11 из 12 (91,7%) женщин >90% железистых клеток эндометрия активно экспрессировали рецепторы прогестерона. Количество стромальных клеток с выраженной экспрессией не изменилось, но общее количество экспрессирующих клеток превысило 90% у 83,3% женщин.1-2 months after the laser procedure, in 11 of 12 (91.7%) women, >90% of endometrial glandular cells actively expressed progesterone receptors. The number of overexpressing stromal cells did not change, but the total number of expressing cells exceeded 90% in 83.3% of women.

Ядерные рецепторы эстрогена с выраженной экспрессией (H-score >200 Н-баллов) в >90% клеток имели 66,7% женщин в железах эндометрия и 33,3% - в строме, при этом у двух женщин экспрессия в стромальных клетках отсутствовала. Через 1-2 месяца после лазерной процедуры все клетки эндометрия экспрессировали рецепторы эстрогена, при этом высокую ядерную активность (H-score >200 Н-баллов) имели 91,7% железистых клеток и 58,3% стромальных.Nuclear estrogen receptors with pronounced expression (H-score >200 H-points) in >90% of cells were found in 66.7% of women in the endometrial glands and 33.3% in the stroma, while two women had no expression in stromal cells. 1-2 months after the laser procedure, all endometrial cells expressed estrogen receptors, while 91.7% of glandular cells and 58.3% of stromal cells had high nuclear activity (H-score > 200 H-points).

Средняя толщина М-эхо на 18-21 день цикла составила 5,6±0,96 мм до лечения и 8,3±2,48 мм после (р<0,001). Проведено 17 переносов размороженных эмбрионов, из них получено 14 (82,4%) успешных имплантаций и 12 (70,6%) клинических беременностей.The average thickness of the M-echo on days 18-21 of the cycle was 5.6±0.96 mm before treatment and 8.3±2.48 mm after (p<0.001). 17 transfers of thawed embryos were performed, of which 14 (82.4%) successful implantations and 12 (70.6%) clinical pregnancies were obtained.

Таким образом показано, что внутриматочная процедура с использованием безаблационного эрбиевого лазера способствовала улучшению пролиферативной активности эндометрия, уменьшению очагов склероза и восстановлению экспрессии рецепторов прогестерона и эстрогенов, что значительно превысило (на 28,9%, р=0,013) существующий показатель эффективности криопротоколов ВРТ (данные РАРЧ 2020). Негативного влияния безаблационного эрбиевого лазера на эндометрий не выявлено.Thus, it was shown that the intrauterine procedure using a non-ablative erbium laser improved the proliferative activity of the endometrium, reduced sclerosis foci, and restored the expression of progesterone and estrogen receptors, which significantly exceeded (by 28.9%, p=0.013) the existing efficiency indicator of ART cryoprotocols (data RAHR 2020). The negative effect of the non-ablative erbium laser on the endometrium was not revealed.

Клинический пример 1. Пациентка, Л. 38 лет. Обратилась к репродуктологу в феврале 2022 г. для подготовки к переносу криоконсервированного эмбриона. В 2021 г. проведены 2 попытки ЭКО и 2 переноса эмбриона (1 перенос - неразвивающаяся беременность 6-7 недель, 2 перенос - беременность не наступила). Соматически здорова. Менструации регулярные, умеренные, резко болезненные. В анамнезе в 25 лет хирургический аборт. В апреле 2022 г. на 10 день менструального цикла проведена офисная гистероскопия, удаление интрацервикальных и внутриматочных синехий. Гистологическое и иммуногистохимическое исследование эндометрия показало слабую пролиферацию желез эндометрия, распространенный склероз межклеточного матрикса и слабую фокальную экспрессию VEGF в строме. Выраженная экспрессия рецепторов прогестерона отмечалась в 93% ядер клеток желез эндометрия и в 88% - в строме. Рецепторы к эстрогену с умеренной экспрессией были обнаружены в 72% клеток желез эндометрия и в 86% - в строме.Clinical example 1. Patient, L., 38 years old. I turned to a reproductive specialist in February 2022 to prepare for the transfer of a cryopreserved embryo. In 2021, 2 IVF attempts and 2 embryo transfers were performed (1 transfer - non-developing pregnancy 6-7 weeks, 2 transfer - pregnancy did not occur). Somatically healthy. Menstruation is regular, moderate, sharply painful. History of surgical abortion at the age of 25. In April 2022, on the 10th day of the menstrual cycle, office hysteroscopy was performed, removal of intracervical and intrauterine adhesions. Histological and immunohistochemical examination of the endometrium showed weak proliferation of endometrial glands, widespread sclerosis of the intercellular matrix, and weak focal expression of VEGF in the stroma. Pronounced expression of progesterone receptors was noted in 93% of the nuclei of endometrial gland cells and in 88% in the stroma. Moderately expressed estrogen receptors were found in 72% of endometrial gland cells and 86% in stroma.

В мае 2022 г. проведена однократная процедура внутриматочного воздействия безабляционным эрбиевым лазером по заявленной методике. Через месяц после процедуры на 9 день цикла проведена пайпель-биопсия эндометрия, исследование которого выявило активную пролиферацию желез эндометрия, отсутствие склероза, диффузную экспрессию VEGF в сосудах и межклеточном матриксе, и более 90% железистых клеток и стромы с выраженной экспрессией рецепторов прогестерона и эстрогена.In May 2022, a single procedure of intrauterine exposure with a non-ablative erbium laser was performed according to the claimed method. A month after the procedure, on the 9th day of the cycle, a biopsy of the endometrium was performed, the study of which revealed active proliferation of the endometrial glands, the absence of sclerosis, diffuse expression of VEGF in the vessels and extracellular matrix, and more than 90% of glandular cells and stroma with a pronounced expression of progesterone and estrogen receptors.

В августе 2022 г. был перенос криоконсервированного эмбриона в полость матки. В настоящее время (12.2022) беременность прогрессирует.In August 2022, a cryopreserved embryo was transferred into the uterine cavity. Currently (12.2022) the pregnancy is progressing.

Клинический пример 2. Пациентка А., 26 лет. Обратилась к репродуктологу в сентябре 2021 года после неудачной попытки переноса криоконсервированного эмбриона. В анамнезе операция кесарева сечения в 2015 г. и 5 выскабливаний полости матки с 2016 по 2021 гг. (3 - неразвивающиеся беременности, 2 - аномальные маточные кровотечения). М-эхо по данным УЗ исследования на 20 день цикла 3 мм. В марте 2022 г. проведена офисная гистеросокпия и синехиолизис (синдром Ашермана 2 ст.). При гистологическом и иммуногистохимическом исследовании выявлен выраженный склероз стенок сосудов и стромы эндометрия, слабая пролиферация желез, единичные клетки в стенках сосудов с позитивной экспрессией VEGF, умеренная экспрессия рецепторов прогестерона и эстрогенов в ядрах клеток желез, умеренная экспрессия рецепторов прогестерона и ее полное отсутствие в строме.Clinical example 2. Patient A., 26 years old. I turned to a reproductive specialist in September 2021 after an unsuccessful attempt to transfer a cryopreserved embryo. History of caesarean section in 2015 and 5 curettage of the uterine cavity from 2016 to 2021. (3 - non-developing pregnancies, 2 - abnormal uterine bleeding). M-echo according to the ultrasound study on the 20th day of the cycle 3 mm. In March 2022, an office hysteroscopy and synechiolysis (Asherman's syndrome stage 2) were performed. Histological and immunohistochemical studies revealed pronounced sclerosis of the walls of blood vessels and endometrial stroma, weak proliferation of glands, single cells in the walls of blood vessels with positive expression of VEGF, moderate expression of progesterone and estrogen receptors in the nuclei of gland cells, moderate expression of progesterone receptors and its complete absence in the stroma.

Через месяц после лазерной процедуры, которая была проведена в апреле 2022 г., исследование эндометрия показало значительное уменьшение очагов склероза, появление диффузной экспрессии VEGF в стенках сосудов и фокально в межклеточном матриксе, выраженной экспрессии рецепторов прогестерона и появлении умеренной экспрессии рецепторов эстрогенов в строме. В сентябре 2022 г. проведен перенос криоконсервированного эмбриона, толщина эндометрия перед переносом составила 6,1 мм. В настоящее время (12.2022) беременность прогрессирует.A month after the laser procedure, which was carried out in April 2022, the study of the endometrium showed a significant decrease in foci of sclerosis, the appearance of diffuse expression of VEGF in the walls of blood vessels and focally in the extracellular matrix, a pronounced expression of progesterone receptors, and the appearance of a moderate expression of estrogen receptors in the stroma. In September 2022, a cryopreserved embryo transfer was performed, the thickness of the endometrium before the transfer was 6.1 mm. Currently (12.2022) the pregnancy is progressing.

Claims (6)

1. Способ подготовки эндометрия к переносу эмбриона в криопротоколах вспомогательных репродуктивных технологий, включающий облучение полости матки лазерным излучением,1. A method for preparing the endometrium for embryo transfer in cryoprotocols of assisted reproductive technologies, including irradiation of the uterine cavity with laser radiation, отличающийся тем, чтоcharacterized in that на 6-10 день цикла выполняют однократную процедуру внутриматочного облучения Er:YAG лазером в безабляционном режиме на длине волны 2940 нм, с плотностью потока энергии 1,5 Дж/см2 и частотой повторения пакета импульсов 1,4 Гц, при этомon the 6th-10th day of the cycle, a single procedure of intrauterine irradiation with an Er:YAG laser is performed in the non-ablative mode at a wavelength of 2940 nm, with an energy flux density of 1.5 J/cm 2 and a pulse repetition rate of 1.4 Hz, while в полость матки без расширения цервикального канала вводят канюлю, обеспечивающую размер пятна 4 мм, и через каждые 2,5 мм осуществляют облучение эндометрия пакетом из четырех импульсов, выполняя по три прохода канюли сначала вдоль продольной оси тела матки, а затем - по линиям, расположенным под углами 30° слева и справа к указанной продольной оси тела матки.a cannula is inserted into the uterine cavity without expansion of the cervical canal, providing a spot size of 4 mm, and every 2.5 mm, the endometrium is irradiated with a package of four pulses, performing three passes of the cannula, first along the longitudinal axis of the uterine body, and then along the lines located at angles of 30° to the left and right to the specified longitudinal axis of the body of the uterus. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют Er:YAG лазер в безаблационном режиме системы Fotona SP Dynamis, Словения.2. The method according to p. 1, characterized in that an Er:YAG laser is used in the non-ablative mode of the Fotona SP Dynamis system, Slovenia. 3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют канюлю диаметром 4 мм, которую закрепляют с использованием манипулы R09-2Gu.3. The method according to p. 1, characterized in that a cannula with a diameter of 4 mm is used, which is fixed using the R09-2Gu handpiece.
RU2022132995A 2022-12-15 Method of preparing endometrium for embryo transfer in art cryoprotocols RU2798698C1 (en)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2798698C1 true RU2798698C1 (en) 2023-06-23

Family

ID=

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2566461C1 (en) * 2014-04-18 2015-10-27 Алексей Юрьевич Грязнов Method for increasing pregnancy rate in programmes of assisted reproductive technologies
RU2692999C2 (en) * 2017-10-13 2019-06-28 Общество с ограниченной ответственностью "Клиника профессора Пасман" (ООО "Клиника профессора Пасман") Method of chronic endometritis treatment
RU2714599C1 (en) * 2018-12-26 2020-02-18 Министерство науки и высшего образования Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное учреждение здравоохранения Центральная клиническая больница Российской академии наук (ЦКБ РАН) Method of infertility treatment in patients with chronic endometritis
RU2762159C1 (en) * 2021-02-10 2021-12-16 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России) Method for intrauterine infusion of autologous plasma of a woman to increase the effectiveness of assisted reproductive technology programs

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2566461C1 (en) * 2014-04-18 2015-10-27 Алексей Юрьевич Грязнов Method for increasing pregnancy rate in programmes of assisted reproductive technologies
RU2692999C2 (en) * 2017-10-13 2019-06-28 Общество с ограниченной ответственностью "Клиника профессора Пасман" (ООО "Клиника профессора Пасман") Method of chronic endometritis treatment
RU2714599C1 (en) * 2018-12-26 2020-02-18 Министерство науки и высшего образования Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное учреждение здравоохранения Центральная клиническая больница Российской академии наук (ЦКБ РАН) Method of infertility treatment in patients with chronic endometritis
RU2762159C1 (en) * 2021-02-10 2021-12-16 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России) Method for intrauterine infusion of autologous plasma of a woman to increase the effectiveness of assisted reproductive technology programs

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
СЕРЕБРЕННИКОВА К.Г. и др. Фотодинамическая терапия у пациенток с бесплодием при хроническом эндометрите. Российский вестник акушера-гинеколога. 2020, N 20(3), с. 56-61. ЗИНОВЬЕВА О.С. и др. Влияние сочетаний плацентарной терапии и инфракрасного спектра лазера на гемодинамические нарушения в гипопластичном эндометрии. Медицинский альманах. 2018, N 6(57), с. 94-97. NIKOLA FISTONIĆ et al. Minimally invasive, non-ablative Er:YAG laser treatment of stress urinary incontinence in women--a pilot study. Lasers Med Sci. 2016, N 31(4), P.635-643. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7753098B2 (en) Systems, devices, and methods for treating tissue and cellulite with non-invasive acoustic subcision
EP2658465B1 (en) Vaginal remodeling/rejuvenation device
ANDERSON Treatment of cervical intraepithelial neoplasia with the carbon dioxide laser: report of 543 patients
JP2004505928A (en) Pharmaceutical composition
Chen et al. A comparison between ultrasound therapy and laser therapy for symptomatic cervical ectopy
RU2798698C1 (en) Method of preparing endometrium for embryo transfer in art cryoprotocols
RU2394616C1 (en) Method of conservative treatment and relapse prevention of virus-associated precancer and early cancer of cervix
Pustotina et al. Intrauterine non-ablative erbium laser for the restoration of a thin endometrium: an open pilot study
CN119896193A (en) A method for constructing a photochemically induced cerebral ischemia model in mice
RU2609995C2 (en) Method for photodynamic therapy of background and pre-cancer cervical diseases
Meissner et al. The erbium: YAG Laser: a new technique for the treatment of scrotal calcinosis.
RU2630599C1 (en) Method for treating vulva kraurosis and leukoplakia in women
RU2077350C1 (en) Method and device for high-frequency therapy
Schatz et al. Low power interstitial Nd-YAG laser photocoagulation in normal rabbit brain
RU2150976C1 (en) Method for treating the cases of chronic salpingo- oophoritis
RU2833124C1 (en) Method of conservative treatment of acute thrombosis of external haemorrhoid
RU2254094C1 (en) Method for making transcervical intratubular sterilization
RU2618203C1 (en) Method of ingrown nail operative therapy by buffer zone formation
US11903909B2 (en) Combined liposuction method
Mozafarpoor et al. Treatment of tongue lymphangioma circumscriptum with non-ablative long-pulsed Nd: YAG laser: a case report and review of literature
RU2330630C1 (en) Method of surgical treatment of background diseases and pre-cancerous conditions of uterus neck
RU2198703C2 (en) Method for repairing interstitial segment of female uterine tubes
RU2755805C1 (en) Method for the treatment of lichen sclerosus of the vulva in women
RU2692999C2 (en) Method of chronic endometritis treatment
RU2735060C1 (en) Method of vaginal rejuvenation