[go: up one dir, main page]

RU2677291C2 - Соединения тетрагидропиразолопиримидина - Google Patents

Соединения тетрагидропиразолопиримидина Download PDF

Info

Publication number
RU2677291C2
RU2677291C2 RU2014154397A RU2014154397A RU2677291C2 RU 2677291 C2 RU2677291 C2 RU 2677291C2 RU 2014154397 A RU2014154397 A RU 2014154397A RU 2014154397 A RU2014154397 A RU 2014154397A RU 2677291 C2 RU2677291 C2 RU 2677291C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
tetrahydropyrazolo
dimethoxyphenyl
pyrimidin
trifluoromethyl
compound
Prior art date
Application number
RU2014154397A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2014154397A (ru
Inventor
Линн Д. ХОКИНС
Рош БУАВЕН
Эрик КАРЛСОН
Ацуси ЭНДО
Ханс ХАНСЕН
Салли ИСИЗАКА
Мэттью МАККИ
Сридхар НАРАЯН
Такаси САТОХ
Шон ШИЛЛЕР
Original Assignee
Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд. filed Critical Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд.
Publication of RU2014154397A publication Critical patent/RU2014154397A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2677291C2 publication Critical patent/RU2677291C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Изобретение относится к соединениям тетрагидропиразолопиримидина общей формулы (I), в которой радикалы и символы имеют определения, указанные в формуле изобретения, а также к их вариантам. Эти соединения действуют в качестве антагонистов или ингибиторов Toll-подобных рецепторов 7 и/или 8. Изобретение также относится к фармацевтическим композициям, эффективным для лечения системной красной волчанки (SLE) и волчаночного нефрита. 17 н. и 30 з.п. ф-лы, 81 ил., 6 табл.

Description

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА СВЯЗАННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] По данной заявке испрашивают приоритет предварительной патентной заявки США № 61/654023, поданной 31 мая 2012 года. Упомянутая выше заявка включена в настоящий документ в качестве ссылки.
ПРЕДПОСЫЛКИ
[0002] Область техники
[0003] Варианты осуществления изобретения относятся к соединениям тетрагидропиразолопиримидина («THPP») и фармацевтическим средствам, содержащим одно или несколько этих соединений в качестве активного ингредиента(ов). Более конкретно, варианты осуществления изобретения относятся к соединению THPP, которое выполняет функцию антагониста или ингибитора Toll-подобных рецепторов (TLR) 7 и 8, и его применению в фармацевтической композиции, эффективной для лечения системной красной волчанки (SLE) и волчаночного нефрита.
[0004] Описание смежных (перекрестных) областей
[0005] Системная красная волчанка (SLE) и волчаночный нефрит представляют собой аутоиммунные заболевания, отличающиеся воспалением и повреждением тканей. Например, SLE может вызывать повреждение кожи, печени, почек, суставов, легких и центральной нервной системы. Страдающие SLE могут испытывать общие симптомы, такие как крайнее утомление, болезненные и набухшие суставы, необъяснимая лихорадка, кожная сыпь и нарушение функции почек. Поскольку вовлечение органов различается среди пациентов, симптомы могут варьировать. SLE преимущественно представляет собой заболевание молодых женщин, с пиковым началом в возрасте между 15-40 годами и приблизительно 10-кратным преобладанием распространенности среди женщин по сравнению с мужчинами.
[0006] Существующее лечение для SLE традиционно включает иммуномодулирующие лекарственные средства, такие как гидроксихлорохин, преднизон и циклофосфамид. Все эти лекарственные средства могут иметь дозолимитирующие побочные эффекты.
КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0007] Варианты осуществления изобретения раскрывают соединения и способы применения для предотвращения или лечения заболеваний или состояний у пациента, отличающихся активацией Toll-подобного рецептора 7 или 8. Один из вариантов осуществления изобретения направлен на соединение формулы (I):
Figure 00000001
,
или его фармацевтически приемлемую соль или его стереоизомеры или их смесью, где
R1 представляет собой необязательно замещенный пиперидинил, необязательно замещенный пиридил, необязательно замещенный пирролил, необязательно замещенный пирролидинил, необязательно замещенный тиазолил, 1,4-климетилтиазолил, 2-этил-4-метилтиазолил, 2-изопропилтиазол-5-ил, тиазолил, 3- этилтиазол-5-ил, 1-метилсульфонилпиперидин-4-ил, или
R1 представляет собой -C(O)Z, где Z представляет собой необязательно замещенный пиперазинил, необязательно замещенный пиридил, необязательно замещенный пирролил, (S)-2-(3-этилпиперазин-1-ил), необязательно замещенный пирролопирролил, пиперидин-3-иламино, или
R1 представляет собой
Figure 00000002
,
где R13 представляет собой H, необязательно замещенный пиразолил, необязательно замещенный имидазолил, бензил, 3-гидроксибутил, 3-(диметиламино)-2,2-диметилпропил, амид, метиламид, этиламид, необязательно замещенный пиридил, метилсульфонил, (1-метилимидазол-2-ил)метил, (1,5-диметилимидазол-4-ил)метил, (1-метилпиррол-2-ил)метил, или где R13 представляет собой C(O)W, где W представляет собой -N(CH3)2, необязательно замещенный пиперидинил, необязательно замещенный пиперазинил, необязательно замещенный пиразолил, необязательно замещенный пирролил или необязательно замещенный морфолинил, или
R1 представляет собой
Figure 00000003
,
где R14 представляет собой -C(O)CH3, H или (1-метилпиррол-2-ил)метил, или
R1 представляет собой
Figure 00000004
Figure 00000005
Figure 00000006
необязательно замещенный пиперидинил, необязательно замещенный пиперазинил, необязательно замещенный пиразолил, необязательно замещенный пирролил, или
R1 представляет собой
Figure 00000007
где A, B и D все могут представлять собой углерод, или где два из A, B и D представляют собой углерод, а другой представляет собой азот, или где один из A, B и D представляет собой углерод, а остальные два представляют собой азот; и когда A представляет собой азот, R4 отсутствует, когда B представляет собой азот, R2 отсутствует, и когда D представляет собой азот, R3 отсутствует; и где
R2 представляет собой H, -CH3 или F или с R3 и атомами в положениях a и b формирует необязательно замещенный пиридин или пиразол; и где
R3 представляет собой H, F, Cl, -CN, -CH3, -OCH3, -OH, -NH2, метилсульфонил,
Figure 00000008
или с R4 и атомами в b и c образует необязательно замещенный бензол, необязательно замещенный имидазол, необязательно замещенный пиразол, необязательно замещенный пиразолидин, необязательно замещенный имидазолидин, необязательно замещенный изотиазол,
Figure 00000009
,
или с R2 и атомами в a и b образует необязательно замещенный пиридин или необязательно замещенный пиразол; и где
R4 представляет собой F, -CN, -OCH3, -OEt, H, Cl, Br, -NH-C(O)-CH-(CH3)2, -N(CH3)2, -CH3, -CH2OH,
Figure 00000010
необязательно замещенный пиперазинил, необязательно замещенный пиперидинил, необязательно замещенный пиразолил, необязательно замещенный пирролил, 4-гидроксипиперизин-1-ил, необязательно замещенный пиперидинил, не прикрепленный к фенильной группе через азот, или с R3 и атомами в b и c образует необязательно замещенное пиразольное кольцо или
Figure 00000011
или с R5 и атомами в c и d образует необязательно замещенный пиразол или необязательно замещенный пиррол, или
R4 представляет собой -(q)-C(O)X, где q представляет собой одинарную связь, представляет собой -NH- или представляет собой -CH2-, и
где X представляет собой -NR11R12,
где R11 и R12 представляют собой два H, два -CH2CH3 или два -CH3, или где один из R11 и R12 представляет собой H, а другой представляет собой 1,1-диметилэтил, циклобутил, циклопропил, низший алкил, метиловый спирт, этиловый спирт, пропиловый спирт, циклобутилметил; 2,3-дигидроксипропил, бензил, азетидинил, необязательно замещенный пиперидинил, необязательно замещенный пиперазинил, необязательно замещенный пиразолил, необязательно замещенный пирролил, необязательно замещенный азетидинил, -CH2-NH-CH3, спирт,
Figure 00000012
где X представляет собой необязательно замещенный пирролидинил, необязательно замещенный пиперидинил, необязательно замещенный пирролидинил, необязательно замещенный пиперазинил или необязательно замещенный морфолинил,
Figure 00000013
и где
R5 представляет собой H, F, Cl, -CH3, -OCH3, пирролил, -CH2OH, -NH2, -OH,
Figure 00000014
или с R4 и атомами в c и d образует необязательно замещенный бензол, необязательно замещенный пиразол, необязательно замещенный пиперидинил, необязательно замещенный пиперазинил или необязательно замещенный пиррол, или с R6 и атомами в d и c образует необязательно замещенный пиридин, или R5 представляет собой C(O)Y, где Y представляет собой -NH2, -N(CH3)2, необязательно замещенный пиперазинил, необязательно замещенный пиперидинил, необязательно замещенный пиперидинил, необязательно замещенный пиперазинил, необязательно замещенный пиразолил, необязательно замещенный пирролил,
Figure 00000015
и где
R6 представляет собой H, F, -CH3, -CF3 или с R5 и атомами в c и d образует необязательно замещенный бензол или необязательно замещенный пиразол; и где
R7 представляет собой H, -CF3, -CHF2, -CF2CH3, -CH3 или -C(CH3)3; и где
R8 представляет собой
Figure 00000016
и где
R9 представляет собой Br, Cl, F, I или H.
[0008] В некоторых вариантах осуществления по изобретению имеет место одно или несколько условий. Упомянутые выше условия традиционно исключают одно или несколько соединений, которые могут быть включены в заявленный класс. При рассмотрении условий, приведенных ниже, понятно, что обратное также применимо. Например, если условие устанавливает, что когда R4 представляет собой F, то R2 не представляет собой CH3 или F, и тогда применимо то, что когда R2 выбирают, который представляет собой -CH3 или F, то R4 не представляет собой F. Также следует отметить, что когда условие представляют как последовательность утверждений, последующие утверждения не связаны до тех пор, пока это не представлено непосредственно в качестве условий в другом месте в документе. Например, если условие устанавливет, что когда R4 представляет собой F, R2 не представляет собой -CH3 или F; и R3 не представляет собой -CH3, тогда не следует подразумевать только из этого утверждения, что когда R3 представляет собой -CH3, тогда R2 не представляет собой -CH3 или F.
[0009] Одно или несколько следующих условий можно применять в различных вариантах осуществления, представленных в настоящем документе:
когда R4 представляет собой F: R2 не представляет собой CH3 или F; R3 не представляет собой -CH3, -CN, F, Cl или -OCH3; R5 не представляет собой -CH3, F, Cl или -OCH3; и R6 не представляет собой -CH3 или F;
когда R4 представляет собой Cl: R2 не представляет собой F; R3 не представляет собой F или -CN; R5 не представляет собой F, -CN или -C(O)N(CH3)2; R6 не представляет собой -CF3 или F; D не представляет собой азот; и также R5 представляет собой -C(O)NH2, или один из R2, R3, R5 и R6 представляет собой -CH3;
когда R4 представляет собой -CH3: R3 не представляет собой F; R5 не представляет собой F; и R5 и R6 не образуют пиримидин вместе с атомами в d и e;
когда R4 представляет собой -OCH3: R2 не представляет собой F; R3 не представляет собой Cl или -OCH3, R5 не представляет собой Cl или -OCH3; и R6 не представляет собой F или -CF3;
когда R4 представляет собой –CN: R2 не представляет собой F; R3 не представляет собой Cl, F или -OCH3; R5 не представляет собой Cl, F или -OCH3; и R6 не представляет собой F;
когда R4 представляет собой -OCH2CH3: R3 не представляет собой Cl или F; R5 не представляет собой Cl или F; и R6 не представляет собой -CF3;
когда R4 представляет собой
Figure 00000017
R3 не представляет собой H или F; и R5 не представляет собой H или F;
когда R4 представляет собой
Figure 00000018
по меньшей мере один из R2, R3, R5 и R6 не представляет собой H;
когда R4 представляет собой
Figure 00000019
R3 не представляет собой F; и R5 не представляет собой F;
когда R2 представляет собой F: R3 не представляет собой -OCH3 или F; R5 не представляет собой -CN; и по меньшей мере один из R3, R4, R5 и R6 не представляет собой H;
когда R2 представляет собой Cl: R3 не представляет собой F;
когда R2 представляет собой -CH3: R3 не представляет собой Cl; по меньшей мере один из R3, R4, R5 и R6 не представляет собой -CH3; и R4 и R5 не образуют пиразолил с атомами в c и d;
когда R3 представляет собой -OCH3: R2 не представляет собой F; и R6 не представляет собой F;
когда R3 представляет собой F: R2 не представляет собой -OCH3; и X не представляет собой
Figure 00000020
когда R3 представляет собой Cl: R5 не представляет собой Cl; R11 не представляет собой бензил; и R12 не представляет собой бензил;
когда R5 представляет собой Cl: R6 не представляет собой -CH3; R11 не представляет собой бензил; и R12 не представляет собой бензил;
когда R5 представляет собой F или -OCH3: R6 не представляет собой F;
когда R6 представляет собой F: по меньшей мере один из R2, R3, R4 и R5 не представляет собой H;
когда R3 и R5 представляют собой H: R11 не представляет собой циклопропил; и R12 не представляет собой циклопропил;
когда R9 представляет собой Cl: R1 не представляет собой амидную группу;
когда B представляет собой азот и A и D представляют собой углерод: R4 может не представлять собой -CN или
Figure 00000021
когда R7 представляет собой -CHF2 и R4 представляет собой
Figure 00000022
тогда R4 не имеет абсолютную стереохимию
Figure 00000023
и где, когда R8 представляет собой
Figure 00000024
тогда действуют следующие условия:
когда R4 представляет собой F: по меньшей мере один из R2, R3, R5 и R6 не представляет собой H; R3 не представляет собой C(O)N(CH3)2; и R5 не представляет собой C(O)N(CH3)2;
когда R4 представляет собой Cl: по меньшей мере один из R2, R3, R5 и R6 не представляет собой H;
когда R3 представляет собой F: R4 не представляет собой C(O)NHCH2CH2CH2CH3, C(O)N(CH3)2, C(O)NHCH2CH2CH3 или C(O)NHC(CH3)3;
R4 не представляет собой C(O)NHCH2CH2CH2OH, C(O)NHCH(CH3)2, -CN или
Figure 00000025
R1 не представляет собой
Figure 00000026
R5 не представляет собой
Figure 00000027
R3 не представляет собой
Figure 00000028
когда R2 представляет собой F: R5 не представляет собой -C(O)NH2;
когда R2 представляет собой -CH3, R4 и R5 не образуют пиразол с атомами в c и d; и когда B представляет собой азот, R3 и R4 не образуют необязательно замещенный имидазол с атомами в b и c; и
где, когда R8 представляет собой
Figure 00000029
тогда действуют следующие условия:
R4 не представляет собой -CH3, -C(O)NHCH2CH2OH, -NHC(O)CH(CH3)2 или
Figure 00000030
когда R4 представляет собой C(O)NHCH3: по меньшей мере один из R2, R3, R5 и R6 не представляет собой H;
когда R4 представляет собой -OCH3: R3 не представляет собой F или -CH3; и R5 не представляет собой F или -CH3;
когда R4 представляет собой
Figure 00000031
R3 не представляет собой Cl и R5 не представляет собой Cl;
когда R4 представляет собой -C(O)NHCH(CH3)2 или -C(O)N(CH2CH3)2: по меньшей мере один из R3 и R5 не представляет собой H;
R5 не представляет собой -C(O)NH2; и
R6 не представляет собой -CF3.
[0010] В дополнительном варианте осуществления соединение формулы (I) имеет абсолютную стереохимию, представленную в формуле (II):
Figure 00000032
,
при условии, что ,когда R8 представляет собой
Figure 00000033
действуют следующие условия:
когда R3 представляет собой F, R4 не представляет собой
Figure 00000034
когда R5 представляет собой F, R4 не представляет собой
Figure 00000035
когда R5 представляет собой -CH3, R3 и R4 с атомами в b и c не образуют
Figure 00000036
и когда R3 представляет собой -CH3, R4 и R5 с атомами в c и d не образуют
Figure 00000037
[0011] В дополнительном варианте осуществления соединение формулы (I) имеет абсолютную стереохимию, представленную в формуле (III):
Figure 00000038
,
при условии, что когда R8 представляет собой
Figure 00000039
R4 не представляет собой
Figure 00000040
и при условии, что когда R8 представляет собой
Figure 00000041
действуют следующие условия:
когда R2 представляет собой -CH3: R3 и R4 не образуют необязательно замещенный пиразолил с атомами в b и c;
когда R2 представляет собой -CH3: R4 и R5 не образуют необязательно замещенный пиразолил с атомами в c и d;
когда R2 представляет собой F: R4 не представляет собой C(O)NH2;
R3 и R4 с атомами в b и c не образуют
Figure 00000042
когда R3 представляет собой Cl: R4 не представляет собой -C(O)NHCH3 или -C(O)NH2;
R3 не представляет собой пиразолил;
когда R3 представляет собой F: R4 не представляет собой
Figure 00000043
или -C(O)NH2;
когда R3 представляет собой -CH3: R4 и R5 не образуют необязательно замещенный пиразолил с атомами в c и d;
R4 не представляет собой -C(O)NHCH2CH2CH2OH;
R4 не представляет собой –CN или
Figure 00000044
когда R5 представляет собой -CH3: R3 и R4 не образуют необязательно замещенный пиразолил с атомами в b и c;
когда R5 представляет собой Cl: R4 не представляет собой -C(O)NH2;
когда R5 представляет собой F: R4 не представляет собой C(O)NH2;
R5 не представляет собой пиразолил;
когда R6 представляет собой -CH3: R4 и R5 не образуют необязательно замещенный пиразолил с атомами в c и d; и
когда B представляет собой азот, R4 не представляет собой -C(O)NHCH3.
[0012] В одном варианте осуществления R1 представляет собой пиперидинил или пиридил; R7 представляет собой -CF3; R8 представляет собой
Figure 00000045
и R9 представляет собой F, Cl, Br или I.
[0013] В другом варианте осуществления R1 представляет собой -C(O)Z, где Z представляет собой пиперазинил, пиперидинил, пирролопирролил или пиперидинил пропил; R7 представляет собой -CH3; R8 представляет собой
Figure 00000046
и R9 представляет собой H.
[0014] В другом варианте осуществления R1 представляет собой
Figure 00000047
R7 представляет собой -CF3, R8 представляет собой
Figure 00000048
и R9 представляет собой H.
[0015] В другом варианте осуществления R1 представляет собой
Figure 00000049
R2 представляет собой H, -CH3 или с R3 образует
Figure 00000050
R3 представляет собой H или с R2 образует
Figure 00000051
или с R4 образует
Figure 00000052
R4 представляет собой H, -CH3, -NHC(O)NH2 или с R3 образует
Figure 00000053
R5 представляет собой H; R6 представляет собой H; R7 представляет собой -CF3; R8 представляет собой
Figure 00000054
и R9 представляет собой H.
[0016] В другом варианте осуществления R1 представляет собой
Figure 00000055
R2 представляет собой H, F или -CH3; R3 представляет собой H или F; R4 представляет собой -(q)-C(O)X, где q представляет собой связь или -CH2-, и X представляет собой пиперазинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, пирролидинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, пирролопирролил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, азетидинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, или
Figure 00000056
или X представляет собой -NR11R12, где один из R11 и R12 представляет собой H, а другой представляет собой необязательно замещенный пирролидинил, необязательно замещенный пиперидинил, необязательно замещенный пиперазинил или необязательно замещенный азетидинил; R5 представляет собой H или C(O)Y, где Y представляет собой -NH(CH3)2, необязательно замещенный пиперазинил, необязательно замещенный пиперидинил,
Figure 00000057
;
R6 представляет собой H, R7 представляет собой -CHF2, R8 представляет собой
Figure 00000058
и R9 представляет собой H.
[0017] В дополнительном варианте осуществления R1 представляет собой
Figure 00000059
где A, B и D все могут представлять собой углерод, или где два из A, B и D представляют собой углерод, а другой представляет собой азот, и когда A представляет собой азот, R4 отсутствует, когда B представляет собой азот, R2 отсутствует, и когда D представляет собой азот, R3 отсутствует; R2 представляет собой H; R3 представляет собой H или -CH3; R4 представляет собой -C(O)X, где X представляет собой необязательно замещенный пиперазинил, или X представляет собой -NR11R12, где R11 и R12 представляют собой H, или где один из R11 или R12 представляет собой H, а другой представляет собой пиперидинил, пирролидинил или -CH3; R5 представляет собой -OCH3, H или Cl; R6 представляет собой H, R7 представляет собой CF3, R8 представляет собой
Figure 00000060
и R9 представляет собой H.
[0018] В дополнительном варианте осуществления R1 представляет собой
Figure 00000061
где A, B и D представляют собой углерод;
R2 представляет собой H, -CH3 или F или с R3 и атомами в положениях a и b образует необязательно замещенный пиразол;
R3 представляет собой H, F, Cl, -CN, -CH3,
Figure 00000062
или с R4 и атомами в b и c образует необязательно замещенный пиразол или
Figure 00000063
,
или с R2 и атомами в a и b образует необязательно замещенный пиразол;
R4 представляет собой -CN, -CH2OH, H,
Figure 00000064
необязательно замещенный пиперазинил или с R3 и атомами в b и c образует необязательно замещенное пиразольное кольцо или
Figure 00000065
или с R5 и атомами в c и d образует необязательно замещенное пиразольное кольцо, или R4 представляет собой -(q)-C(O)X, где q представляет собой связь, и
где X представляет собой -NR11R12,
где R11 и R12 оба представляют собой H, или где один из R11 и R12 представляет собой H, а другой представляет собой 1,1-диметилэтил, циклобутил, циклопропил, низший алкил, C1-3 спирт, циклобутилметил; 2,3-дигидроксипропил, бензил, азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, метилазетидинил, пиразолил, пиперазинил, спирт, -OCH3 или
Figure 00000066
,
или где X представляет собой необязательно замещенный пиперидинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, необязательно замещенный пиперазинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, необязательно замещенный пирролидинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, или необязательно замещенный азетидинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4,
Figure 00000067
R5 представляет собой H или с R4 и атомами в c и d образует необязательно замещенный бензол, необязательно замещенный пиразол, или с R6 и атомами в d и e образует необязательно замещенный пиридин, или R5 представляет собой C(O)Y, где Y представляет собой -NH2, -NH(CH3)2, необязательно замещенный пиперазинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R5, необязательно замещенный пиперидинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R5,
Figure 00000068
и
R6 представляет собой H, F, -CH3 или с R5 и атомами в c и d образует необязательно замещенный пиразол;
R7 представляет собой -CF3;
R8 представляет собой
Figure 00000069
и R9 представляет собой H.
[0019] Другой вариант осуществления включает соединение формулы (IV):
Figure 00000070
,
или его фармацевтически приемлемую соль или его стереоизомеры или их смесь, где: R7a представляет собой H или F; и где кольцо A представляет собой:
Figure 00000071
где Y1 и Y2 независимо выбирают из группы, состоящей из -CH2- и -CH2CH2-, и где каждый из Y1 и Y2 необязательно замещен C1-3 алкилом;
Figure 00000072
где X1, X2 и X3 независимо выбирают из группы, состоящей из -CH- и N;
Figure 00000073
где X1, X2 и X3 независимо выбирают из группы, состоящей из -CH- и N;
Figure 00000074
где X представляет собой N или -CH-, необязательно замещенный -CH3, F или Cl, и
где R9 представляет собой -C(O)Z, где Z представляет собой 2,3-дигидроксипропиламин; циклический диамин, содержащий от пяти до семи звеньев, который необязательно содержит мостик или необязательно замещен по углеродному атому низшим алкилом; бициклодиамин, содержащий от семи до десяти звеньев; спиродиамин, содержащий от семи до одиннадцати звеньев; -NH, замещенный циклическим амином, содержащим от четырех до семи звеньев, необязательно замещенным с использованием -NH2; -OH; -CH2NHR, где R представляет собой H или низший алкил; -NH, замещенный спироалканом, содержащим от семи до одиннадцати звеньев, необязательно замещенным с использованием -NH2; или
R9 представляет собой CH3NHC(O)-, и углеродный атом на арильном кольце, к которому прикрепляют R9, замещен одним из -CH3, F или Cl; R9 представляет собой (CH3)2CHNHC(O)-, и углеродный атом на арильном кольце, к которому прикрепляют R9, замещен одним из -CH3, F или Cl; или R9 представляет собой (CH3)3CNHC(O)-, и углеродный атом на арильном кольце, к которому прикрепляют R9, замещен одним из -CH3, F или Cl; или
R9 представляет собой
Figure 00000075
,
где пиперазин необязательно содержит мостик или замещен низшим алкилом и R10 представляет собой H или -CH3; или
R9 представляет собой
Figure 00000076
где n равен от 1 до 3 и циклический диамин необязательно содержит мостик или замещен низшим алкилом; или
R9 представляет собой
Figure 00000077
где n равен от 1 до 4; или
R9 представляет собой -NHC(O)NH2, -CH2C(O)NH-, где азот замещен циклическим амином, который содержит от четырех до семи звеньев; -CH2-C(O)-, где карбонил замещен бициклодиамином, который содержит от семи до десяти звеньев; и циклический амин, который содержит от четырех до семи звеньев, замещенный с использованием -CH2C(O)NH2; или
Figure 00000078
где X представляет собой N или -CH-, где C необязательно замещен с помощью -CH3, F или Cl, и где
R10 представляет собой -C(O)NH-, где азот замещен циклическим амином, который содержит от четырех до семи звеньев; -C(O)-, замещенный бициклодиамином, который содержит от семи до десяти звеньев; -C(O)-, замещенный спиродиамином, который содержит от семи до одиннадцати звеньев; пиразол; [1,2,4]оксадиазол, необязательно замещенный с помощью -CH3 по углеродному атому оксадиазола; -NHC(O)CH3; -CH2-, замещенный пиперазином; -CH2-, замещенный пиперазином, содержащим метиловый заместитель; -C(O)-, замещенный циклическим диамином, который содержит от пяти до семи звеньев; -C(O)NHCH2-, где -CH2- замещен азетидином; или -C(O)-, замещенный циклическим амином, который содержит от пяти до семи звеньев, где амин содержит заместитель -NH2; или
цианофенил; изохинолин; циклогексен, замещенный с использованием -NH2 в положении 4'; 1,4-диметилиндазол-5-ил; 1,6-диметилиндазол-5-ил; циклогексен, замещенный спиропиперидином в положении 4'; 1-пиперидинопиразол; или о-метоксипиридин.
[0020] В дополнительном варианте осуществления соединение или фармацевтически эффективная соль по предшествующему параграфу этого описания имеет IC50 меньше чем или равную 100 нМ по отношению к рецепторам TLR7 человека, экспрессируемым на клеточной линии HEK-293. В дополнительном варианте осуществления IC50 в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293, измеряют посредством (1) высевания клеток клеточной линии HEK-293, которые стабильно экспрессируют TLR7, в модифицированную по способу Дульбекко среду Игла, содержащую 10% эмбриональную телячью сыворотку, с плотностью 2,22×105 клеток/мл в 384-луночный планшет и инкубирования в течение 2 суток при 37°C, 5% CO2; (2) добавления соединения или его фармацевтически приемлемой соли и инкубации клеток в течение 30 минут; (3) добавления CL097 (InvivoGen) по 3 мкг/мл и инкубирования клеток в течение приблизительно 20 часов; и (4) количественного определения активации NF-каппаB зависимого репортера посредством измерения люминесценции.
[0021] Дополнительный вариант осуществления включает соединение формулы IV или его фармацевтически эффективную соль, где кольцо A представляет собой:
Figure 00000079
где X1, X2 и X3 независимо выбирают из группы, состоящей из -CH- и N;
Figure 00000080
где X4 представляет собой -CH- или N; и где Z представляет собой пиперазин, необязательно содержащий мостик или замещенный по углероду с помощью -CH3; гексагидропирроло[3,4]пиррол; циклический амин, который содержит от четырех до семи звеньев, замещенный с использованием -OH или -NH2; или -NH-, замещенный циклическим амином, который содержит четырех до семи звеньев;
Figure 00000081
где X5 представляет собой -CH- или N; и где R представляет собой пиразол; [1,2,4]оксадиазол, необязательно замещенный с помощью -CH3 по углероду в оксадиазоле; или -C(O)N-, замещенный по его азоту циклическим амином, который содержит от четырех до семи звеньев;
Figure 00000082
1,4-диметилиндазол-5-ил; 1,6-диметилиндазол-5-ил; 1-пиперидинопиразол; циклогексен, замещенный -NH2 в положении 4'; циклогексен, замещенный спиропиперидином в положении 4’; или 2-метоксипиридин-4-ил.
[0022] В дополнительном варианте осуществления соединение или его фармацевтически эффективная соль по предшествующему параграфу настоящего описания имеет IC50 меньше чем или равную 20 нМ в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293. В дополнительном варианте осуществления соединение или его фармацевтически эффективная соль по предшествующему параграфу этого описания имеет IC50 меньше чем или равную 100 нМ в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293. В дополнительном варианте осуществления IC50 в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293, измеряют посредством (1) высевания клеток клеточной линии HK-293, которая стабильно экспрессирует TLR7, в модифицированную по способу Дульбекко среду Игла, содержащую 10% эмбриональную телячью сыворотку, с плотностью 2,22×105 клеток/мл в 384-луночный планшет и инкубирования в течение 2 суток при 37°C, 5% CO2; (2) добавления соединения или его фармацевтически приемлемой соли и инкубирования клеток в течение 30 минут; (3) добавления CL097 (InvivoGen) по 3 мкг/мл и инкубирования клеток в течение приблизительно 20 часов; и (4) количественного определения активации NF-каппаB зависимого репортера посредством измерения люминесценции.
[0023] Дополнительный вариант осуществления включает соединение, которое имеет абсолютную конфигурацию стереохимии, представленную в формуле (V):
Figure 00000083
,
или его фармацевтически приемлемую соль, где: R7n представляет собой H или F; где кольцо A представляет собой:
Figure 00000084
где X1, X2 и X3 независимо выбирают из группы, состоящей из -CH- и N;
Figure 00000085
где X4 представляет собой -CH- или N; и где Z представляет собой пиперазин, необязательно содержащий мостик или замещенный по углероду с помощью -CH3; гексагидропирроло[3,4]пиррол; циклический амин, который содержит от четырех до семи звеньев, замещенный с использованием -OH или -NH2; или -NH-, замещенный циклическим амином, который содержит от четырех до семи звеньев;
Figure 00000086
где X5 представляет собой -CH- или N; и где R представляет собой пиразол; [1,2,4]оксадиазол, необязательно замещенный с помощью -CH3 по углероду в оксадиазоле; или -C(O)NH-, замещенный по его азоту циклическим амином, который содержит от четырех до семи звеньев;
1,4-диметилиндазол-5-ил; 1,6-диметилиндазол-5-ил;
Figure 00000087
1-пиперидинопиразол; циклогексен, замещенный с использованием -NH2 в положении 4’; циклогексен, замещенный спиропиперидином в положении 4’; или 2-метоксипиридин-4-ил.
[0024] В дополнительном варианте осуществления соединение или его фармацевтически эффективная соль по предшествующему параграфу имеет IC50 меньше чем или равную 20 нМ в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HΕΚ-293. В дополнительном варианте осуществления соединение или его фармацевтически эффективная соль по предшествующему параграфу этого описания имеет IC50 меньше чем или равную 100 нМ в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293. В дополнительном варианте осуществления IC50 в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293, измеряют посредством (1) высевания клеток клеточной линии HEK-293, стабильно экспрессирующих TLR7, в модифицированную по способу Дульбекко среду Игла, содержащую 10% эмбриональную телячью сыворотку, с плотностью 2,22×105 клеток/мл в 384-луночный планшет и инкубирования в течение 2 суток при 37°C, 5% CO2; (2) добавления соединения или его фармацевтически приемлемой соли и инкубирования клеток в течение 30 минут; (3) добавления CL097 (InvivoGen) по 3 мкг/мл и инкубирования клеток в течение приблизительно 20 часов; и (4) количественного определения активации NF-каппаB зависимого репортера посредством измерения люминесценции.
[0025] В дополнительных вариантах осуществления изобретения соединения имеют IC50 в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293, меньше чем или равную 200 нМ, меньше чем или равную 180 нМ, меньше чем или равную 160 нМ, меньше чем или равную 140 нМ, меньше чем или равную 120 нМ, меньше чем или равную 100 нМ, меньше чем или равную 80 нМ, меньше чем или равную 60 нМ, меньше чем или равную 40 нМ или меньше чем или равную 20 нМ. В дополнительных вариантах осуществления изобретения соединения имеют IC50 в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293, от 10 нМ до 30 нМ, от 10 нМ до 50 нМ, от 10 нМ до 100 нМ, от 30 нМ до 50 нМ, от 30 нМ до 100 нМ или от 50 нМ до 100 нМ. В дополнительных вариантах осуществления IC50 в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых в HRK-293 клеточной линии, измеряют посредством (1) высевания клеток HRK-293 клеточной линии, стабильно экспрессирующих TLR7, в модифицированную по способу Дульбекко среду Игла, содержащую 10% эмбриональную телячью сыворотку, с плотностью 2,22×105 клеток/мл, в 384-луночный планшет и инкубирования в течение 2 суток при 37°C, 5% CO2; (2) добавления соединения или его фармацевтически приемлемой соли и инкубирования клеток в течение 30 минут; (3) добавления CL097 (InvivoGen) по 3 мкг/мл и инкубирования клеток в течение приблизительно 20 часов; и (4) количественного определения активации NF-каппаB зависимого репортера посредством измерения люминесценции.
[0026] Дополнительные варианты осуществления предусматривают способы лечения системной красной волчанки или волчанки, включающие введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по изобретению.
[0027] Дополнительные варианты осуществления раскрывают способы антагонистического воздействия на TLR7, включающие введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по изобретению.
[0028] Дополнительные варианты осуществления раскрывают способы антагонистического воздействия на TLR8, включающие введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по изобретению.
[0029] Дополнительные варианты осуществления раскрывают фармацевтические композиции, которые содержат по меньшей мере одно соединение или фармацевтически приемлемую соль по раскрытию и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
[0030] Дополнительные варианты осуществления раскрывают способы лечения системной красной волчанки или волчанки, включающие введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по изобретению.
[0031] Дополнительные варианты осуществления раскрывают способы антагонистического воздействия на TLR7, включающие введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по изобретению.
[0032] Дополнительные варианты осуществления раскрывают способы антагонистического воздействия на TLR8, включающие введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по изобретению.
[0033] Дополнительные варианты осуществления раскрывают фармацевтические композиции, которые содержат по меньшей мере одно соединение или фармацевтически приемлемую соль по изобретению и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
[0034] Термин «необязательно замещенный», как используют в настоящем документе, обозначает, что рассматриваемая структура может содержать, но не обязательно содержит, один или несколько заместителей, независимо выбранных из низшего алкила, метокси-, -OH, -NH2, -CH2-NH-CH2, -OCH2CH2CH3 или -OCH(CH3)2. Если необязательно замещенный фрагмент является циклическим, то необязательное замещение может представлять собой метиловый мостик между двумя атомами в кольце.
[0035] Символ «C(O)», как используют в настоящем документе, относится к карбонильной группе, имеющей формулу C=O.
[0036] Если не указано иное, формы единственного числа, как используют в этом раскрытии, включая формулу изобретения, обозначают «один или несколько».
[0037] Как используют в настоящем документе, «низший алкил» относится к неразветвленным или, в случае групп из трех и четырех углеродов, неразветвленным, разветвленным или циклическим насыщенным углеводородам, которые имеют от одного до четырех углеродных атомов.
[0038] Как используют в настоящем документе, термин «прикрепленный через азот», когда относится к гетероциклическому фрагменту, включающему азот, обозначает, что точка прикрепления фрагмента к другой структуре представляет собой азот, который является частью гетероцикла.
[0039] Как используют в настоящем документе, термин «TLR7/8» обозначает «TLR7 и TLR8» или «TLR7 или TLR8» или «TLR7 и/или TLR8», Конкретное значение может понять специалист в данной области, исходя из контекста, в котором встречается «TLR7/8».
[0040] Гетероциклические фрагменты, перечисленные в настоящем документе, включают азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, метилазетидинил, пиразолил, пиперазинил, морфолинил, тиазолил, пирролопирролил, имидазолидинил и изотиазолил. Когда указана гетероциклическая группа, если не указано иное, понятно, что гетероциклический атом(ы) в группе может быть в любом положении в группе. Кроме того, понятно, что имидазолил, пиразолил, тиазолил и пирролил могут быть ненасыщенными или частично ненасыщенными. Вариант осуществления по изобретению может включать фармацевтическую композицию, которая содержит одно или несколько соединений по изобретению с фармацевтически приемлемым эксципиентом. Эти фармацевтические композиции можно использовать для лечения или предотвращения заболевания или состояния, отличающегося активацией TLR7/8 у пациента, типично пациента-человека, который имеет или предрасположен к тому, чтобы иметь такое состояние или заболевание. Примеры заболеваний или состояний, отличающихся активацией TLR7/8, включают системную красную волчанку (SLE) и волчаночный нефрит.
[0041] Как используют в настоящем документе, «эффективное количество» соединения по варианту осуществления изобретения представляет собой эффективное количество идентифицированных выше соединений в количестве, достаточном для лечения или предотвращения SLE и волчаночного нефрита.
[0042] Варианты осуществления, представленные в настоящем документе, могут включать асимметричные или хиральные центры. Варианты осуществления включают различные стереоизомеры и их смеси. Индивидуальные стереоизомеры соединений по вариантам осуществления изобретения можно получать синтетически из коммерчески доступных исходных материалов, которые содержат асимметричные или хиральные центры, или посредством получения смесей энантиомерных соединений, после чего следует разрешение этих соединений. Подходящие способы разрешения включают прикрепление рацемической смеси энантиомеров, обозначаемых (±), к хиральному вспомогательному средству, разделение получаемого диастереомера посредством хроматографии или перекристаллизации и отделение оптически чистого продукта от вспомогательного средства; или прямое разделение смеси оптических энантиомеров на хиральных хроматографических колонках.
[0043] Варианты осуществления изобретения также включают фармацевтическую композицию, которая содержит какое-либо соединение по изобретению, а также фармацевтически приемлемый эксципиент. Фармацевтические композиции можно использовать для того, чтобы лечить или предотвращать SLE и волчаночный нефрит. Следовательно, варианты осуществления изобретения также могут отличаться способом лечения или предотвращения SLE или волчаночного нефрита у пациента-человека, который имеет или предрасположен к тому, чтобы иметь волчаночный нефрит или SLE.
[0044] Варианты осуществления изобретения включают фармацевтически приемлемые соли соединений, представленных в настоящем документе. Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к тем солям, которые входят в объем здравого медицинского суждения, пригодным для использования в контакте с тканями человека и животных без чрезмерной токсичности, раздражения или аллергического ответа. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в данной области. Например, S. M. Berge, et al. подробно описывают фармацевтически приемлемые соли в J. Pharmaceutical Sciences 66: 1-19, 1977. Соли можно получать in situ во время конечного выделения и очистки соединения или отдельно посредством реакции свободной группы основания с подходящей органической кислотой. Иллюстративные примеры кислотно-аддитивных солей включают такие соли, как ацетат, адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, гемисульфат, гептонат, гексаноат, гидробромид, гидрохлорид, гидройодид, 2-гидрокси-этансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, мономалеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, толуенсульфонат, трифторацетат, ундеканоат, валерат и т.п. Иллюстративные соли щелочных или щелочноземельных металлов включают натрий, литий, калий, кальций, магний и т.п., а также нетоксичные катионы аммония, четвертичного аммония и аминов, включая в качестве неограничивающих примеров аммоний, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний, метиламин, диметиламин, триметиламин, триэтиламин, этиламин и т.п. Термин «фармацевтически приемлемый сложный эфир», как используют в настоящем документе, представляет сложные эфиры, которые гидролизуются in vivo, и включает те, которые легко распадаются в организме человека, оставляя исходное соединение или его соль. Подходящие сложноэфирные группы включают, например, те, которые получены из фармацевтически приемлемых алифатических карбоновых кислот, в частности, алкановых, алкеновых, циклоалкановых и алкандиеновых кислот, в которых каждая алкиловая или алкенильная группа типично имеет не больше чем 6 углеродных атомов. Примеры конкретных сложных эфиров включают формиаты, ацетаты, пропионаты, бутилаты, акрилаты и этилсукцинаты.
[0045] В этой заявке энантиомеры обозначают символами «R» или «S» или изображают стандартными средствами с использованием жирных линий, опеределяющих заместители выше плоскости страницы в трехмерном пространстве, и пунктирных или штриховых линий, определяющих заместители ниже плоскости напечатанной страницы в трехмерном пространстве. Если стереохимическое обозначение не выполнено, то определение структуры включает обе стереохимические возможности.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ РИСУНКОВ
[0046] На фиг. 1 представлена кратковременная активность in vivo в отношении пути TLR7 у мыши для соединения ER-892887 (которое имеет химическое название (4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанон). Условные обозначения на фигуре: самкам мышей BALB/c дозировали посредством перорального принудительного кормления только наполнитель (0,5% водная метилцеллюлоза) или соединение ER- 892887, сформулированное в наполнителе по 100 мг/кг или 300 мг/кг. В 13 или 24 часа после перорального дозирования мышам подкожно инъецировали 15 мкг R848 для того, чтобы стимулировать TLR7. Плазму крови собирали посредством сердечного прокола, и затем оценивали уровень IL-6 через 1,5 часа после стимуляции TLR7 посредством стандартной процедуры ELISA. Процент супрессии указан относительно индукции IL-6 после дозирования контроля с наполнителем. Статистическую значимость определяли посредством критерия Манна-Уитни.
[0047] На фиг. 2 представлены результаты тестирования соединения ER-892887 в модели заболевания волчанкой на линии BXSB-Yaa. Условные обозначения на фигуре: мышей BXSB-Yaa в возрасте двенадцати недель рандомизировали в группы с эквивалентными медианными титрами антител к дцДНК и лечили раз в сутки перорально с использованием только наполнителя (Veh; 0,5% метилцеллюлоза) или 300 мг/кг ER-892887 в течение всего 14 недель. (A) Всех мышей умерщвляли в возрасте 26 недель, и конечные титры антител к дцДНК, антител к Sm/nRNP и антител к RiboP оценивали посредством ELISA по сравнению с титрами, наблюдаемыми у мышей перед заболеванием в возрасте 6 недель. (B) Приблизительно за одну неделю до умерщвления (возраст 25 недель, 13 недель лечения), мышей содержали по 1-2 на клетку в метаболических клетках в течение 18 часов для того, чтобы собирать мочу, и определяли соотношение альбумина и креатинина в моче (UACR, протеинурия) для каждого животного в качестве опосредованной меры функции почек. (C) В момент умерщвления почки собирали у отдельных мышей, фиксировали в 10% формалине в течение 24 часов, заливали в парафин, и создавали окрашенные ГЭ срезы для гистопатологической оценки слепым образом. (D) Сводка по смертности, наблюдаемой в исследовании SLE-8. Статистическую значимость определяли посредством критерия Манна-Уитни для (A).
[0048] На фиг. 3 представлены результаты тестирования соединения ER-892887 в модели заболевания волчанкой на линии NZBxNZW. Условные обозначения на фигуре: Самок мышей NZBWF1/J получали в возрасте 6 недель, получали кровь для определения базовых уровней, и у мышей осуществляли мониторинг прогрессирования заболевания, следя за титрами антител к дцДНК. В возрасте 20 недель мышей рандомизировали в группы с эквивалентными медианными титрами антител к дцДНК и лечили в возрасте 23 недели только наполнителем (Veh; 0,5% метилцеллюлоза) или 33, 100 или 300 мг/кг ER-892887 раз в сутки перорально (QD PO). Всех мышей умерщвляли в возрасте 45 недель (всего 22 недели лечения), и определяли титры антител к дцДНК в плазме крови посредством ELISA. (A) Влияние лечения ER-892887 с течением времени на титры антител к дцДНК. (B) Столбчатая диаграмма по данным +22 недель лечения для ER-892887, полученным из данных, представленных на (A). (C) Прямо перед окончанием в возрасте 45 недель (после 22 недель лечения), у отдельных мышей мочу собирали, и определяли соотношение альбумина и креатинина в моче (UACR, протеинурия) для каждого животного в качестве опосредованной меры функции почек. (D) Сводка по смертности, наблюдаемой в этом исследовании. (E) В момент умерщвления у отдельных мышей собирали почки, фиксировали в 10% формалине в течение 24 часов, заливали в парафин, и создавали окрашенные ГЭ срезы для гистопатологической оценки слепым образом. Статистическую значимость определяли посредством критерия Манна-Уитни для (C).
[0049] На фиг. 4 представлены результаты дополнительного тестирования соединения ER-892887 в модели заболевания волчанкой на линии NZBxNZW. Условные обозначения на фигуре: самок мышей NZBWF1/J получали в возрасте 8 недель, получали кровь для определения базовых уровней, и у мышей осуществляли мониторинг прогрессирования заболевания, следя за титрами антител к дцДНК. В возрасте 24 недели мышей рандомизировали в группы с эквивалентными медианными титрами антител к дцДНК и лечили в возрасте 25 недель QD PO с использованием только наполнителя (Veh; 0,5% метилцеллюлоза) или 33, 100 или 300 мг/кг ER-892887. Титры антител к дцДНК определяли посредством ELISA в образцах плазмы крови в указанные моменты времени. (A) Влияние лечения соединением на медианные титры антител к дцДНК с течением времени вплоть до +17 недель лечения. (B) Влияние лечения соединением на медианные титры антител к дцДНК в момент времени +13 недель лечения только по данным, представленным на (A). (C) После 13 недель (верхний график) или 17 недель (нижний график) лечения соединением у отдельных мышей собирали мочу, и определяли соотношение альбумина и креатинина в моче (UACR, протеинурия) для каждого животного в качестве опосредованной меры функции почек. Мыши, приведенные внутри овала, с высоким UACR, представляют собой тех животных, которые погибли между +13 неделями и +17 неделями лечения (статистическую значимость определяли посредством критерия Манна-Уитни). (D) Азот мочевины крови (BUN), измеренный в плазме от выбранных групп после 13 недель лечения. (E) Кривые смертности для мышей, которых лечили наполнителем, в сравнении с соединением, вплоть до 17 недель лечения. Анализ кривой смертности до +17 недель лечения показывал, что лечение ER-892887 33 мг/кг и 100 мг/кг давало статистически значимое преимущество в выживаемости в сравнении с наполнителем, как определяют посредством логарифмического рангового критерия (Кокса-Мантеля). (F) Сводка по смертности, наблюдаемой в этом исследовании.
[0050] На фиг. 5 представлены результаты тестирования соединения ER-892887 в пристане: модель заболевания волчанкой на линии DBA/1. Условные обозначения на фигуре: самкам мышей DBA/1 в возрасте 10-11 недель вводили интраперитонеально инъекцию 0,5 мл пристана или PBS. Раз в сутки пероральное дозирование с наполнителем (Veh; 0,5% метилцеллюлоза) или 300 мг/кг ER-892887 начинали через 3,5 месяца после инъекции пристана в течение всего 3 месяцев лечения. (A) Мышей умерщвляли после 3 месяцев лечения соединением, и измеряли титры антител к дцДНК и антител к RiboP в образцах плазмы крови посредством ELISA (статистическую значимость определяли посредством критерия Манна-Уитни). (B) Развитие артрита оценивали ежемесячно посредством визуальной оценки. (C) Экспрессию IFN-регулируемых генов в цельной крови измеряли с помощью панели qPCR после 3 месяцев лечения, и вычисляли оценку IFN генетической сигнатуры (см. подробности, касающиеся вычисления IFN оценки, в разделе про фармакологические материалы и способы). (D) Полный список из 21 гена, подвергающегося значительной повышающей регуляции посредством лечения пристаном в сравнении с PBS контролями, и отдельные гены, которые значительно снижали с помощью ER-892887 (критерий Стьюдента).
[0051] На фиг. 6 представлены результаты дополнительного тестирования соединения ER-892887 в пристане: модель заболевания волчанкой на линии DBA/1. Условные обозначения на фигуре: самкам мышей DBA/1 в возрасте 11-12 недель вводили интраперитонеально инъекцию 0,5 мл пристана или PBS. Раз в сутки пероральное дозирование с использованием наполнителя (Veh; 0,5% метилцеллюлоза) или 33, 100 или 300 мг/кг ER-892887 начинали через 2 месяца после инъекции пристана в течение всего 3 месяцев лечения. Мышей умерщвляли после 3 месяцев лечения соединением, и измеряли титры антител к дцДНК (A), RiboP (B), Sm/nRNP (C) и гистонам (D) в образцах плазмы крови посредством ELISA (статистическая значимость, определяемая посредством критерия Манна-Уитни). (E) Сводка по смертности, наблюдаемой в этом исследовании во время 3 месяцев лечения соединением. (F) Экспрессию IFN-регулируемых генов в цельной крови измеряли посредством панели qPCR в последний момент времени для мышей, которых лечили наполнителем и 300 мг/кг ER-892887, и вычисляли оценку IFN генетической сигнатуры (см. подробности, касающиеся вычисления IFN оценки, в разделе про фармакологические материалы и способы). (G) Полный список из 22 генов, подвергающихся значительной повышающей регуляции посредством лечения пристаном в сравнении с PBS контролями, и отдельные гены, которые значительно снижали с помощью ER-892887 (критерий Стьюдента).
[0052] На фиг. 7 представлены результаты тестирования соединения ER-885454 в модели заболевания волчанкой на линии BXSB-Yaa. Условные обозначения на фигуре: самцов мышей BXSB-Yaa в возрасте девяти недель лечили раз в сутки перорально с использованием только наполнителя (Veh; 0,5% метилцеллюлоза) или 100 мг/кг или 300 мг/кг ER-885454 в течение всего 15 недель. Всех мышей умерщвляли в возрасте 24 недели, и конечные титры антител к дцДНК (A) и антител к Sm/RNP (B) оценивали посредством ELISA. (C) Приблизительно за одну неделю до умерщвления, мышей содержали по 1-2 на клетку в метаболических клетках в течение 18 часов для того, чтобы собирать мочу, и определяли соотношение альбумина и креатинина в моче (UACR, протеинурия) для каждого животного в качестве опосредованной меры функции почек. (D) В момент умерщвления почки собирали у отдельных мышей, фиксировали в 10% формалине в течение 24 часов, заливали в парафин, и создавали окрашенные ГЭ срезы для гистопатологической оценки слепым образом. Статистическую значимость определяли посредством критерия Манна-Уитни для (A), (B) и (C), выше.
[0053] На фиг. 8 представлены результаты дополнительного тестирования соединения ER-885454 в модели заболевания волчанкой на линии BXSB-Yaa. Условные обозначения на фигуре: мышей BXSB-Yaa в возрасте семнадцать недель рандомизировали в две группы с эквивалентными медианными титрами антител к дцДНК и лечили раз в сутки перорально с использованием только наполнителя (Veh; 0,5% метилцеллюлоза) или 300 мг/кг ER-885454 в течение всего 13 недель. Всех мышей умерщвляли в возрасте 30 недель, и оценивали конечные титры антител к дцДНК (A) и антител к Sm/RNP (B) посредством ELISA по сравнению с титрами, наблюдаемыми у мышей в возрасте 7 недель перед заболеванием. (C) Приблизительно за одну неделю до умерщвления мышей содержали по 1-2 на клетку в метаболических клетках в течение 18 часов для того, чтобы собирать мочу, и соотношение альбумина и креатинина в моче (UACR, протеинурия) определяли для каждого животного в качестве опосредованной меры функции почек. (D) В момент умерщвления почки собирали у отдельных мышей, фиксировали в 10% формалине в течение 24 часов, заливали в парафин, и создавали окрашенные ГЭ срезы для гистопатологической оценки слепым образом. Статистическую значимость определяли посредством критерия Манна-Уитни для (A), (B) и (C), выше.
[0054] На фиг. 9 представлены результаты тестирования соединения ER-885454 в модели заболевания волчанкой на линии NZBxNZW. Условные обозначения на фигуре: получали самок мышей NZBWF1/J в возрасте 6 недель, получали кровь для определения базовых уровней, и у мышей осуществляли мониторинг прогрессирования заболевания, следя за титрами антител к дцДНК. В возрасте 24 недели мышей рандомизировали в группы с эквивалентными медианными титрами антител к дцДНК и лечили с использованием только наполнителя (Veh; 0,5% метилцеллюлоза) или 300 мг/кг ER-885454 раз в сутки перорально (QD PO). Всех мышей умерщвляли в возрасте 47 недель (всего 23 недели лечения), и определяли титры антител к дцДНК в плазме крови посредством ELISA (A). (B) Прямо перед окончанием в возрасте 47 недель мочу собирали у отдельных мышей, и соотношение альбумина и креатинина в моче (UACR, протеинурия) определяли для каждого животного в качестве опосредованной меры функции почек. (C) В момент умерщвления почки собирали у отдельных мышей, фиксировали в 10% формалине в течение 24 часов, заливали в парафин, и создавали окрашенные ГЭ срезы для гистопатологической оценки слепым образом. Статистическую значимость определяли посредством критерия Манна-Уитни для (A), выше.
[0055] На фиг. 10 приведено ORTEP представление рентгеновской структуры соединения ER-887006.
[0056] На фиг. 11A-11NN представлены структуры и соответствующие химические названия в соответствии с различными вариантами осуществления, представленными в настоящем документе. «ER-номер» представляет собой идентификационный номер, присвоенный каждому соединению. Где доступно, активность в отношении клеточной линии HEK, стабильно экспрессирующей TLR7 человека, активность в отношении клеточной линии HEK, стабильно экспрессирующей TLR9 человека, также включены 1H ЯМР данные и данные масс-спектрометрии.
[0057] На фиг. 12 представлен эффект ER-892887 и двух широко используемых способов лечения волчанки человека в модели заболевания волчанкой на линии NZBxNZW. Условные обозначения на фигуре: самок мышей NZBWF1/J получали в возрасте 4 недель, получали кровь для определения базовых уровней на 10 и 26 неделях, и у мышей осуществляли мониторинг прогрессирования заболевания, следя за титрами антител к дцДНК и протеинурией. В возрасте 26 недель мышей рандомизировали в группы с эквивалентными медианными титрами антител к дцДНК и лечили с использованием только наполнителя (Veh; 0,5% метилцеллюлоза) или 100 мг/кг ER-892887, 100 мг/кг гидроксихлорохина, 0,1 мг/кг преднизолона или 0,5 мг/кг преднизолона, отдельно или в указанных комбинациях, раз в сутки перорально (QD PO). Всех мышей умерщвляли в возрасте 45 недель (19 недель лечения лекарственными средствами), и определяли титры антител к дцДНК в плазме крови посредством ELISA. (A) Влияние лечения ER-892887 на титры антител к дцДНК по окончании. (B) В возрасте 41 недели (после 15 недель лечения) мочу собирали у отдельных мышей, и определяли соотношение альбумина и креатинина в моче (UACR, протеинурия) для каждого животного в качестве опосредованной меры функции почек. (C) Позже мочу собирали у отдельных мышей прямо перед окончанием в возрасте 45 недель, после 19 недель лечения, и определяли соотношение альбумина и креатинина в моче (UACR, протеинурия) для каждого животного. (D, E, F) Кривые выживаемости, наблюдаемой в этом исследовании во время лечения с использованием E6887, каждый элемент сопоставления стандартного лечения (D, гидроксихлорохин; E, 0,1 мг/кг преднизолон; F, 0,5 мг/кг преднизолон) или комбинации Е6887 и одного из элементов сравнения. Группы лечения тестировали в сравнении с наполнителем с помощью критерия Кокса-Мантеля.
[0058] На фиг. 13 представлены результаты тестирования соединения ER-892887 и трех широко используемых способов лечения волчанки человека в пристане: модель заболевания волчанкой на линии DBA/1. Условные обозначения на фигуре: самкам мышей DBA/1 в возрасте 11 недель вводили интраперитонеально инъекцию 0,5 мл пристана или PBS. Раз в сутки пероральное дозирование с использованием наполнителя (Veh; 0,5% метилцеллюлоза) или 300 мг/кг ER-892887, 100 мг/кг гидроксихлорохина, 1 мг/кг преднизолона или 100 мг/кг микофенолата начинали через 2 месяца после инъекции пристана и продолжали в течение 3 месяцев лечения. (A) В конце 3 месяца лечения развитие артрита оценивали посредством визуальной оценки отека и воспаления. (B) Мышей умерщвляли после 3 месяцев лечения соединением, и измеряли титры антител к дцДНК, антител к гистонам, антител к Sm/RNP и антител к RiboP в образцах плазмы крови посредством ELISA (статистическую значимость определяли посредством критерия Манна-Уитни). Значениям ELISA, попадающим выше или ниже диапазона калибровочной кривой, присваивали значения, равные наибольшему или наименьшему достоверному измерению, в зависимости от ситуации. (C) Экспрессию IFN-регулируемых генов в цельной крови измеряли посредством qPCR панели после 3 месяцев лечения. Приведен полный список интерферон-регулируемых генов, которые подвергались значительной повышающей регуляции посредством лечения пристаном в сравнении PBS контролями, и отдельные гены, которые значительно снижали посредством ER-892887 (критерий Стьюдента), помечены полужирным начертанием со звездочкой. (D) В этом эксперименте представлены IFN оценки генов, регулируемых пристаном.
[0059] На фиг. 14 представлен эффект соединения ER-892887, оказываемый на артрит и аутоантитела в пристане: модель заболевания волчанкой на линии DBA/1. Условные обозначения на фигуре: самкам мышей DBA/1 в возрасте 10 недель вводили интраперитонеально инъекцию 0,5 мл пристана или PBS. В возрасте 22 недель мышей рандомизировали в группы с эквивалентными медианными титрами антител к дцДНК и лечили с использованием только наполнителя (Veh; 0,5% метилцеллюлоза) или 300 мг/кг ER-892887 раз в сутки перорально (QD PO). Симптомы артрита (отек и воспаление) регистрировали ежемесячно вслепую с помощью наблюдателей. Всех мышей умерщвляли в возрасте 34 недель (12 недель лечения), и определяли титры аутоантител в плазме крови посредством ELISA. Перед окончанием проводили рентгенологическое исследование лап и оценку повреждения и эрозии костей вслепую с помощью двух аналитиков. (A) Вверху - оценки артрита вычисляли ежемесячно в группах дозирования наполнителя и соединения. (A) Внизу - рентгенологические оценки вычисляли после трех месяцев лечения. (B) Титры аутоантител измеряли в конечных образцах плазмы крови посредством ELISA (статистическую значимость определяли посредством критерия Манна-Уитни).
[0060] ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0061] В дополнение к их роли в качестве врожденных иммунных рецепторов, способных обнаруживать экзогенные («не собственные») патоген-ассоциированные молекулярные паттерны (PAMP - т.е. обнаружение бактериальных LPS с помощью TLR4), Toll-подобные рецепторы млекопитающих (TLR) также способны распознавать эндогенные стимулы (DAMP), высвобождаемые после повреждения тканей самого организма или стресса. Kono, H. и K.L. Rock, How dying cells alert the immune system to danger. Nat Rev Immunol, 2008. 8(4): стр. 279-89. В последнее десятилетие появилось понимание связи между активацией TLR посредством эндогенных («собственных») ассоциированных с опасностью молекулярных паттернов (DAMP) и этиологией аутоиммунных нарушений. В частности, TLR7 можно активировать с помощью одноцепочечной РНК (оцРНК), происходящей как от млекопитающих, так и от вирусных источников, тогда как TLR9 можно активировать посредством ДНК, полученной из млекопитающих, вирусных и бактериальных источников.
[0062] Волчанка отличается аутоантителами, обладающими реактивностью к самой двухцепочечной ДНК (дцДНК) и ассоциированным белкам (гистонам), а также к широкому спектру РНК-ассоцииированных белков, таких как Ro, La, Smith (Sm) и U1 snRNP. Kirou, K.A., et al., Activation of the interferon-alpha pathway identifies a subgroup of systemic lupus erythematosus patients with distinct serologic features and active disease. Arthritis Rheum, 2005. 52(5): стр. 1491-503. Вторым общим признаком волчанки, для которого показана корреляция непосредственно с тяжестью заболевания, является нарушение регуляции экспрессии интерферонов 1-го типа (IFN), в частности IFNα, и соответствующее повышение большой панели IFNα-регулируемых генов в PBMC пациентов с волчанкой (так называемая «генетическая сигнатура IFN 1-го типа»). Kirou, K.A., et al., выше. Основным источником в IFN в крови является специализированный иммуноцит, называемый плазмоцитоидной дендритной клеткой (pDC), которая конститутивно экспрессирует и TLR7, и TLR9.
[0063] Причинную связь между этими двумя характеристиками заболевания, аутоантителами и уровнями IFN, постулировали, когда множество исследовательских групп совместно продемонстрировали, что комплексы антител, выделенные у пациентов с волчанкой, но не у здоровых доноров, способны управлять образованием IFN в pDC в зависимости от TLR7/9 и РНК/ДНК. Means, T.K., et al., Human lupus autoantibody-DNA complexes activate DCs through cooperation of CD32 and TLR9. J Clin Invest, 2005. 115(2): стр. 407-17; Vollmer, J., et al., Immune stimulation mediated by autoantigen binding sites within small nuclear RNAs involves Toll-like receptors 7 and 8. J Exp Med, 2005. 202(11): стр. 1575-85; Savarese, E., et al., U1 small nuclear ribonucleoprotein immune complexes induce type 1 interferon in plasmacytoid dendritic cells through TLR7. Blood, 2006. 107(8): стр. 3229-34. Кроме того, IFN стимулирует повышенную экспрессию TLR7/9 на B-клетках, тем самым усиливая активацию TLR/BCR (B-клеточного рецептора) аутореактивных B-клеток для дифференциации в антителопродуцирующие плазматические клетки. Banchereau, J. and V. Pascual, Type I interferon in systemic lupus erythematosus and other autoimmune diseases. Immunity, 2006. 25(3): стр. 383-92. Таким образом, уровни комплексов аутоантител, содержащих лиганды из нуклеиновых кислот для TLR7/9, управляют провоспалительным циклом и прогрессированием заболевания волчанкой. Сообщалось, что отдельно IFN 1-го типа вызывает у человека симптомы, похожие на волчанку. Ho, V., et al., Severe systemic lupus erythematosus induced by antiviral treatment for hepatitis C. J. Clin Rheumatol, 2008. 14(3): 166-8. Ronnblom L.E., et al. Possible induction of systemic lupus erythematosus by interferon-alpha treatment in a patient with a malignant carcinoid tumor. J. Internal Med. 1990. 227: 207-10. Авторы настоящего изобретения полагают, что вероятно, что фармакологический антагонизм TLR7/8 принесет терапевтическую пользу пациентам с волчанкой посредством нарушения этого провоспалительного цикла, снижая уровни IFN и гася аутоиммунный патологический процесс, опосредованный с помощью pDC и B-клеток.
[0064] Некоторые другие данные намекают на роль TLR7 в этиологии волчанки человека и поддерживают мнение о том, что TLR-рецепторы представляют собой правильные мишени для вмешательства в заболевание. Идентифицированы конкретные полиморфизмы в 3' UTR в TLR7, и показана их корреляция как с повышенной экспрессией TLR7, так и с усиленной IFN генетической сигнатурой. Shen, N., et al., Sex-specific association of X-linked Toll-like receptor 7 (TLR7) with male systemic lupus erythematosus. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(36): стр. 15838-43. Кроме того, противомалярийные лекарственные средства, входящие в стандарт лечения (SOC) волчанки, такие как хлорохин, нарушают передачу сигнала эндосомальных TLR7/9 и ингибируют образование IFNα в PBMC и/или pDC, индуцирумое комплексами оцРНК-рибонуклеопротеина или сывороткой пациента с волчанкой. Кроме того, миелоидные DC и моноциты продуцируют IL-12p40, TNFα и IL-6 после передачи сигнала собственной РНК/TLR8, что указывает на дополнительный вклад TLR8-зависимых провоспалительных цитокинов в этиологию волчанки человека в дополнение к TLR7-управляемому IFN посредством pDC. Vollmer, выше; Gorden, K.B., et al., Synthetic TLR agonists reveal functional differences between human TLR7 and TLR8. J Immunol, 2005. 174(3): стр. 1259-68.
[0065] Также существует доказательство роли TLR в волчанке на мышиной модели. Опубликованные исследования совместно демонстрируют, что делеция одного TLR7 или двух TLR7/9 генов или двойное фармакологическое ингибирование TLR7/9 снижает тяжесть заболевания в четырех различных моделях волчанки. Nickerson, K.M., et al., TLR9 regulates TLR7- and MyD88-dependent autoantibody production and disease in a murine model of lupus. J Immunol, 2010. 184(4): стр. 1840-8; Fairhurst, A.M., et al., Yaa autoimmune phenotypes are conferred by overexpression of TLR7. Eur J Immunol, 2008. 38(7): стр. 1971-8; Deane, J.A., et al., Control of toll-like receptor 7 expression is essential to restrict autoimmunity and dendritic cell proliferation. Immunity, 2007. 27(5): стр. 801-10; Savarese, E., et al., Requirement of Toll-like receptor 7 for pristane-induced production of autoantibodies and development of murine lupus nephritis. Arthritis Rheum, 2008. 58(4): стр. 1107-15. Подчеркивая роль TLR7 в качестве ключевого определяющего фактора аутоиммунности, трансгенная сверхэкспрессия только TLR7 ведет к самопроизвольной аутореактивности против РНК и нефриту у обычно устойчивой к заболеванию линии C57BL/6. Deane, выше.
[0066] С точки зрения безопасности, нет сообщений о том, что мыши с дефицитом одного из TLR7, 8 или 9 или двух 7/8 и 7/9 генов имеют иммунитет, нарушенный до такой степени, чтобы наблюдать инфекцию оппортунистическими патогенами. Аналогичным образом, SOC противомалярийные средства считают в целом безопасными и эффективными для длительного использования у человека, для того чтобы управлять неожиданными обострениями заболевания волчанкой, в дозах, для которых прогнозируют по меньшей мере частичное ингибирование передачи сигнала TLR7/9. Lafyatis, R., M. York, and A. Marshak-Rothstein, Antimalarial agents: closing the gate on Toll-like receptors? Arthritis Rheum, 2006. 54(10): стр. 3068-70; Costedoat-Chalumeau, N., et al., Low blood concentration of hydroxychloroquine is a marker for and predictor of disease exacerbations in patients with systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum, 2006. 54(10): стр. 3284-90. Фактически, за исключением повышенной восприимчивости к грамположительным бактериальным инфекциям в детстве и в меньшей степени в зрелости, люди с сильно нарушенными путями передачи сигналов TLR и IL-1R (недостаточность MyD88 или IRA-4), тем не менее, являются здоровыми и в достаточной мере поддерживают механизмы защиты организма-хозяина. Casanova, J.L., L. Abel, and L. Quintana-Murci, Human TLRs and IL-1Rs in Host Defense: Natural Insights from Evolutionary, Epidemiological, and Clinical Genetics. Annu Rev Immunol, 2010.
[0067] На основе этой и другой информации, авторы настоящего изобретения полагают, что в частности TLR7 является хорошо проверенной мишенью в контексте доклинических моделей SLE на мышах. Как генетические, так и функциональные исследования у человека подтверждают гипотезу о том, что антагонизм путей TLR7 и/или TLR8 будет приносить терапевтическую пользу пациентам с волчанкой. Кроме того, как исследования делеции генов TLR у мышей, так и длительное использование противомалярийных средств у человека указывает на то, что можно выполнять фармакологическую супрессию TLR7, 8 и/или 9 без значительного нарушения защиты организма-хозяина.
[0068] Следовательно, можно ожидать, что соединение, которое вызывает супрессию TLR7, TLR8 или и TLR7 и TLR8, действует в качестве терапевтического или профилактического средства для SLE или волчаночного нефрита.
[0069] Авторы настоящего изобретения обнаружили соединения, которые подавляют TLR 7 и/или 8, и, следовательно, ожидают, что они обладают профилактическим или терапевтическим эффектом, оказываемым на SLE или волчаночный нефрит. Соединения и способы по раскрытию описаны в настоящем документе.
[0070] II. Терапевтическое использование
[0071] Уровни доз активных ингредиентов в фармацевтических композициях по изобретению можно варьировать для того, чтобы получать количество активного соединения(й), которое достигает желаемого терапевтического ответа для конкретного пациента, композиции и способа введения. Выбранный уровень дозы зависит от активности конкретного соединения, пути введения, тяжести соединения, подлежащего лечению, и состояния или предшествующей медицинской истории пациента, подлежащего лечению. Дозы определяют для каждого конкретного случая с использованием стандартных способов в соответствии с уникальными факторами пациента, включая возраст, массу, общее состояние здоровья и другие факторы, которые могут влиять на эффективность соединения(й) по изобретению. В целом, в случае перорального введения, THPP соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль вводят в дозе приблизительно от 30 мкг до 100 мкг, в дозе от 30 мкг до 500 мкг, в дозе от 30 мкг до 10 г, в дозе от 100 мкг до 5 г или в дозе от 100 мкг до 1 г на одного взрослого в сутки. В случае введения инъекцией, его вводят в дозе приблизительно от 30 мкг до 1 г, в дозе от 100 мкг до 500 мг или в дозе от 100 мкг до 300 мг на одного взрослого в сутки. В обоих случаях дозу вводят за раз или делят на несколько введений. Дозу можно моделировать, например, с использованием программы Simcyp®.
[0072] Не предполагают, что введение соединения по изобретению млекопитающему, включая человека, ограничено конкретным способом введения, дозой или частотой дозирования. Настоящее изобретение рассматривает все способы введения, включая пероральный, интраперитонеальный, внутримышечный, внутривенный, внутрисуставный, внутрь повреждения, подкожный или какой-либо другой путь, достаточный для того, чтобы предоставить надлежащую дозу для того, чтобы предотвращать или лечить SLE или волчаночный нефрит. Одно или несколько соединений по изобретению можно вводить млекопитающему однократной дозой или множественными дозами. Когда вводят множество доз, дозы могут отделять друг от друга, например, несколько часов, одни сутки, одна неделя, один месяц или один год. Следует понимать, что для какого-либо конкретного субъекта конкретные схемы дозирования следует корректировать с течением времени в соответствии с индивидуальной потребностью и профессиональным суждением человека, вводящего или наблюдающего за введением фармацевтической композиции, которая содержит соединение по изобретению.
[0073] Для клинических применений, соединение по настоящему изобретению обычно можно вводить внутривенно, подкожно, внутримышечно, в ободочную кишку, назально, интраперитонеально, ректально, трансбуккально или перорально. Композиции, содержащие по меньшей мере одно соединение по изобретению, которое пригодно для использования у человека или в ветеринарии, можно представлять в формах, допускающих введение подходящим путем. Эти композиции можно получать в соответствии с обычными способами, используя один или несколько фармацевтически приемлемых адъювантов или эксципиентов. Адъюванты включают, среди прочего, разбавители, стерильные водные среды и различные нетоксичные органические растворители. Приемлемые носители или разбавители для терапевтического использования хорошо известны в фармацевтической области и описаны, например, в Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20th ed.), ed. A. R. Gennaro, Lippincott Williams & Wilkins, 2000, Philadelphia, и Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick and J. C. Boylan, 1988, 1999, Marcel Dekker, New York. Композиции можно представлять в форме таблеток, пилюль, гранул, порошков, водных растворов или суспензий, инъецируемых растворов, эликсиров или сиропов, и композиции необязательно могут содержать одно или несколько средств, выбранных из группы, включающей подсластители, ароматизаторы, красители и стабилизаторы, чтобы получать фармацевтически приемлемые препараты.
[0074] Выбор наполнителя и содержание активного вещества в наполнителе обычно определяют в соответствии с растворимостью и химическими свойствами продукта, конкретным способом введения и положениями, подлежащими наблюдению в фармацевтической практике. Например, эксципиенты, такие как лактоза, цитрат натрия, карбонат кальция и фосфат дикальция, и средства для улучшения распадаемости, такие как крахмал, альгиновые кислоты и определенные комплексные силикаты, в комбинации со смазывающими средствами (например, стеарат магния, лаурилсульфат натрия и тальк) можно использовать для получения таблеток. Для того чтобы получать капсулу, благоприятно использовать лактозу и высокомолекулярные полиэтиленгликоли. Когда используют водные суспензии, они могут содержать эмульгирующие средства, которые содействуют суспензии. Также можно использовать разбавители, такие как сахароза, этанол, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, глицерин, хлороформ или их смеси.
[0075] Для парентерального введения используют эмульсии, суспензии или растворы композиций по изобретению в растительном масле (например, кунжутном масле, масле земляного ореха или оливковом масле), водно-органические растворы (например, вода и пропиленгликоль), инъецируемые органические сложные эфиры (например, этилолеат) или стерильные водные растворы фармацевтически приемлемых солей. Растворы солей композиций по изобретению в частности можно использовать для введения посредством внутримышечной или подкожной инъекции. Водные растворы, которые включают растворы солей в чистой дистиллированной воде, можно использовать для внутривенного введения при условии, что (i) их pH корректируют соответствующим образом, (ii) их надлежащим образом забуферивают и делают изотоническими с использованием достаточного количества глюкозы или хлорида натрия, и (iii) их стерилизуют нагреванием, облучением или микрофильтрованием. Подходящие композиции, содержащие соединение по изобретению, можно растворять или суспендировать в подходящем носителе для использования в небулайзере или аэрозоле суспензии или раствора, или можно абсорбировать или адсорбировать на подходящем твердом носителе для использования в ингаляторе сухого порошка. Твердые композиции для ректального введения включают суппозитории, формулированные в соответствии с известными способами и содержащие по меньшей мере одно соединение по изобретению.
[0076] Дозированные составы соединения по раскрытию, подлежащие использованию для терапевтического введения, должны быть стерильными. Стерильности легко достигают посредством фильтрования через стерильные мембраны (например, мембраны 0,2 мкм) или посредством других стандартных способов. Составы обычно хранят в лиофилизированной форме или в виде водного раствора. pH композиций по этому изобретению в некоторых вариантах осуществления, например, может составлять между 3 и 11, может составлять между 5 и 9 или может составлять между 7 и 8, включительно.
[0077] Несмотря на то, что один путь введения опосредован пероральным введением дозы, можно использовать другие способы введения. Например, композиции можно вводить подкожно, внутривенно, внутримышечно, в ободочную кишку, ректально, назально или интраперитонеально в различных дозированных формах, таких как суппозитории, имплантированные гранулы или маленькие цилиндры, аэрозоли, пероральные дозированные составы и топические составы, такие как мази, капли и кожные пластыри. Соединения по вариантам осуществления изобретения можно встраивать в профилированные изделия, такие как импланты, включая в качестве неограничивающих примеров клапаны, стенты, трубки и протезы, в которых можно использовать инертные материалы, такие как синтетические полимеры или силиконы, (например, композиции Silastic®, силиконовый каучук или другие коммерчески доступные полимеры). Такие полимеры могут включать поливинилпирролидон, пирановые сополимеры, полигидроксипропилметакриламидфенол, полигидроксиэтиласпартамидфенол или полиэтиленоксид-полилизин, замещенный пальмитоиловыми остатками. Кроме того, соединение по изобретению можно сочетать с классом биоразрушаемых полимеров, которые можно использовать для достижения контролируемого высвобождения лекарственного средства, например, полимолочная кислота, полигликолевая кислота, сополимеры полимолочной и полигликолевой кислоты, полиэпсилонкапролактон, полигидроксимасляная кислота, сложные полиортоэфиры, полиацетали, полидигидропираны, полицианоакрилаты и сшитые или амфипатические блок-сополимеры гидрогелей.
[0078] Соединение по изобретению также можно вводить в форме липосомальных систем доставки, таких как маленькие однослойные везикулы, большие однослойные везикулы и многослойные везикулы. Липосомы можно формировать из различных липидов, таких как холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины. Соединение по изобретению также можно доставлять с использованием антител, фрагментов антител, факторов роста, гормонов или других направленных фрагментов, с которыми сопрягают молекулы соединений (например, см. Remington: The Science and Practice of Pharmacy, см. выше), включая конъюгацию соединения по варианту осуществления изобретения с компонентами крови in vivo.
[0079] III. Синтез
[0080] Предоставлены общие и конкретные пути синтеза, которые авторы настоящего изобретения находят эффективными для получения вариантов осуществления по изобретению. Специалисты в данной области могут признать, что определенные вариации или модификации этих процедур также могут вести к синтезу соединений в соответствии с изобретением. В некоторых ситуациях фразу «такой как» используют для того, чтобы перечислять различные альтернативы для более общих соединений или структур. Понятно, что «такой как» не следует толковать в качестве ограничения, и что его значение соответствует «включает, например, но не ограничиваясь этим».
[0081] Определенные условия являются общими для конкретных примеров, представленных ниже. Микроволновое нагревание осуществляли с использованием микроволнового реактора Biotage® Emrys Liberator или Initiator. Колоночную хроматографию осуществляли с использованием системы флэш-хроматографии Biotage® SP4. Удаление растворителя осуществляли с использованием или роторного испарителя Büchii, или центробежного испарителя Genevac®. ЯМР-спектры регистрировали при 400 МГц на спектрометре Varian Unity® с использованием дейтерированных растворителей. Химические сдвиги приводят относительно остаточного протонированного растворителя.
[0082] Тонкослойную хроматографию осуществляли на стеклянных пластинах Whatman®, предварительно покрытых 0,25-мм слоем силикагеля с использованием различных соотношений одного или нескольких из следующих растворителей: этилацетат, гептан, дихлорметан или метанол.
[0083] Аналитическую LC/MS осуществляли на системе Waters Aequity™ с использованием колонки XBridge™ C18 1,7 мкм 2,1×50 мм. Растворители A и B представляют собой воду с 0,1% муравьиной кислотой и ацетонитрил с 0,1% муравьиной кислотой, соответственно. Общее время способа 5 минут с от 5% B до 99% B за 4 минуты при скорости потока 0,3 мл/мин. Данные масс-спектрометрии получали на Waters SQD из 100-2000 а.е.м. в режиме положительного электрораспыления. Эти условия обозначают далее как «условия I».
[0084] Альтернативно, подтверждение чистоты и массы осуществляли на системе Waters Autopurification с использованием колонки XBridge™ C8 3,5 мкм 4,6×50 мм. Растворители A и B представляют собой воду с 0,1% муравьиной кислотой и ацетонитрил с 0,1% муравьиной кислотой, соответственно. Общее время способа 6 минут с от 10% B до 95% B за 5 минут при скорости потока 2,5 мл/мин. Данные масс-спектрометрии получали на Micromass ZQ™ из 130-1000 а.е.м. в режиме положительного электрораспыления. Эти условия обозначают далее как «условия II».
[0085] Препаративную LC/MS с обращенной фазой осуществляли на системе Waters Autopurification с использованием колонки XBridge™ C8 5 мкм, 19×100 мм. Растворители A и B представляют собой воду с 0,1% муравьиной кислотой и ацетонитрил с 0,1% муравьиной кислотой, соответственно. Общее время способа 12 минут с от 30% B до 95% B за 10 минут при скорости потока 20 мл/мин. Данные масс-спектрометрии получали на Micromass ZQ™ из 130-1000 а.е.м. в режиме положительного электрораспыления. Эти условия обозначают далее как «условие III».
[0086] Разрешение рацемических соединений препаративной ВЭЖХ осуществляли с использованием одной из следующих хиральных колонок: Chiralpak® IA (5 см × 50 см или 2 см × 25 см), Chiralpak® AD (2 см × 25 см) или Chiralcel® OD (2 см × 25 см). Соотношения энантиомеров в очищенных соединениях определяли посредством ВЭЖХ анализа на 0,45 см × 25 см колонке, содержащей ту же стационарную фазу (TA, AD или OD).
[0087] Общие способы и эксперименты для получения соединений по настоящему изобретению изложены ниже. В определенных случаях конкретное соединение описано в качестве примера. Однако следует принимать во внимание, что в каждом случае ряд соединений по настоящему изобретению получали в соответствии со схемами и экспериментами, описанными ниже. Для тех соединений, где доступны данные ЯМР и/или масс-спектрометрии, данные представляют сразу после описания синтеза соединения или в таблице 11.
[0088] В настоящем документе используют следующие сокращения:
Определения: следующие сокращения имеют указанные значения:
HATU: N,N,N',N'-тетраметил-O-(7-азабензотриазол-1-ил)урония гексафторфосфат
DIEA: N,N-диизопропилэтиламин
DMAP: 4-диметиламинопиридин
TEA: триэтиламин
DMF: N,N-диметилформамид
NMP: N-метилпирролидин
THF: тетрагидрофуран
DCM: дихлорметан
MTBE: метил-трет-бутиловый эфир
TFA: трифторуксусная кислота
EDC: 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид
NaOH: гидроксид натрия
NaBH4: борогидрид натрия
IPA: изопропиловый спирт или изопропанол
EtOH: этанол
EtOAc: этилацетат
TLR: Toll-подобный рецептор
DAMP: ассоциированный с опасностью молекулярный паттерн
PAMP: патоген-ассоциированный молекулярный паттерн
IFN: интерферон
pDC: плазмоцитоидная дендритная клетка
PBMC: мононуклеарная клетка периферической крови
qPCR: количественная полимеразная цепная реакция
TLDA: Taqman® Low Density Array
PBS: фосфатно-солевой буфер
оцРНК: одноцепочечная РНК
дцДНК: двухцепочечная ДНК
SOC: стандарт лечения
R848: резиквимод
HCQ: гидроксихлорохин
HCl: соляная кислота
водн.: водный
AcOH: уксусная кислота
PhNTf2: N-фенилтрифторметансульфонимид
Tf: трифторметансульфонат
MeOH: метанол
ee: энантиомерный избыток
HEPES: 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновая кислота
NH4Cl: хлорид аммония
[0089] Пример 1
[0090] Общие способы синтеза
[0091] Соединения по изобретению получали в соответствии с общей схемой синтеза, представленной ниже:
[0092]
Figure 00000088
[0093] При получении нескольких примеров используют путь, изображенный на схеме 1. Традиционно, коммерчески доступный нитрил, такой как ароматический, гетероциклический, алифатический или гетероалифатический нитрил (I), подвергают воздействию ацетонитрила в присутствии сильного протонного органического основания, такого как т-амилат калия в нейтральном растворителе, таком как толуол, при 0°C или комнатной температуре, чтобы предоставлять цианоимин (II). После этого проводят реакцию получаемого имина с гидразином в присутствии органической кислоты, такой как уксусная кислота, чтобы предоставить ключевое промежуточное соединение или 3-замещенный-5-аминопиразол (III). Правую половину этих примеров получают посредством конденсации Клайзена с использованием ароматического или гетероароматического ацилкетона (V) с замещенным сложным ацетиловым эфиром, таким как трифтор-, дифтор- или незамещенный сложный ацетиловый эфир (IV), чтобы формировать дикетон (VI).
[0094] Конденсация двух промежуточных соединений III и VI предоставляет 2,3-b-пиразолопиримидин в присутствии слабой органической кислоты, такой как уксусная кислота. В некоторых случаях 5-замещенные-3-аминопиразолы (III) коммерчески доступны, и их используют в этой реакции непосредственно. Восстановление, для того чтобы формировать рацемический 5,7-цис-тетрагидропиразолопиримидин (VIII), осуществляют с использованием источника гидрида или посредством каталитической гидрогенизации. Разрешение посредством хиральной высокоэффективной жидкостной хроматографии или с использованием диастереомерной кристаллизации предоставляет конечные желаемые продукты IX и X. Во многих примерах рацемическую смесь соединения VIII оценивали биологически без дополнительной очистки посредством хирального разрешения.
[0095]
Figure 00000089
[0096] Схема 2 иллюстрирует альтернативный путь для различных соединений по изобретению, начиная с коммерчески доступного 3-гидрокси-5-аминопиразола, конденсированного с дикетоном VI, чтобы предоставлять 2-гидроксипиразолопиримидин X в качестве ключевого промежуточного соединения. Обработка X с использованием подходящего реактива для трифторметилсульфонилирования предоставляет промежуточное соединение трифлата XI. Восстановление трифлата XI, за которым следует перекрестное сочетание Сузуки, с использованием различных боронатов, где R1 является собой ароматическим, гетероароматическим, аллиловым, гетероаллиловым или алифатическим, дает рацемический конечный продукт VIII. Альтернативно, трифлат XI сначала подвергают перекрестному сочетанию Сузуки, и затем промежуточное соединение XIV восстанавливают до рацемического конечного продукта VIII. Как на схеме 1, рацемическое соединение VIII разрешают на составляющие его энантиомеры посредством хиральной хроматографии или посредством диастереомерной кристаллизации.
[0097]
Figure 00000090
[0098] Путь, используемый на схеме 3, представляет собой модификацию схемы 2, в которой бромид замещает трифлат, т.е. группу трифлата в соединении XI заменяют на бромид, как показано в XVI. 3-Бром-5-аминопиразол синтезировали в соответствии со способами из литературы (Moy, et al. J. Med. Chem. 2010, 53, 1238). Условия для перекрестного сочетания Сузуки по существу являются такими же, как на схеме 2.
[0099]
Figure 00000091
[0100] Путь на схеме 4 изменяет направление перекрестного сочетания Сузуки для исходных материалов посредством образования сложного эфира бороната на ключевом пиразолопиримидине, которое следует за конденсацией подходящего электрофила (XIX, X=OTf, Cl, Br, I), для получения VIII после восстановления.
[0101]
Figure 00000092
[0102] На схеме 5 изображены конечные стадии синтеза нескольких примеров общей структуры XV, представленных в настоящем документе. Соответственно, используемое общее промежуточное соединение представляет собой бензонитрил XX, типично замещенный в 3 или 4 положении относительно фрагмента пиразолопиримидина, который превращают в бензойную кислоту XXI через кислый или основный гидролиз. Сочетание XXI с подходящим амином (R4R5NH) предоставляет рацемический амид XXII, который разрешают в его чистый энантиомер XV. Альтернативно, хиральное разрешение можно осуществлять или на этапе бензонитрила (XX->XXIII) или бензойной кислоты (XXI->XXIV), и энантиочистые материалы преобразуют схожим образом в конечный продукт XV.
[0103] Примеры синтеза - раздел A
[0104]
Figure 00000093
Figure 00000094
[0105] В 5-л колбу, загруженную терефталонитрилом (300,0 г, 2,34 моль), добавляли толуол (1,80 л, после чего следовал ацетонитрил (245 мл) при комнатной температуре. Добавляли 24,2% масс. т-амилата калия (1,672 л, 1,338 кг, 2,58 моль), при этом контролируя температуру <30°C в течение периода в 1 час.
[0106] Смесь (густая паста желтого цвета) оставляли остывать до 20°C и перемешивали в течение 16 часов, по истечении этого времени добавляли воду (0,9 л) в энергично перемешиваемую смесь до тех пор, пока твердое вещество желтого цвета не становилось твердым веществом светло-коричневого цвета. Смесь фильтровали через стеклянный фильтр, получаемое твердое вещество промывали водой (1,8 л), после чего следовал IPA (1,8 л), собирали и сушили под вакуумом при 40°C в течение 46 часов. 374,1 г соединения A-2 (2,21 моль, 94% выход) получали в виде порошка светло-коричневого цвета.
[0107] 1H ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ м.д. 4,26 (с, 1H) 7,72-7,77 (м, 2H) 7,77-7,82 (м, 2H).
[0108] MS (Μ+H+) 170,1.
Figure 00000095
[0109] В 5-л колбу загружали 1-(3,4-диметоксифенил)этанон (487 г, 2,70 моль), добавляли THF (487 мл), после чего следовал MTBE (1,46 л). Добавляли этилтрифторацетат (516 мл, 4,33 моль), после чего следовал 25% масс. раствор метоксида натрия (701 г, 3,24 моль) в метаноле при комнатной температуре. Получаемую смесь нагревали вплоть до 40°C и перемешивали при 40-43°C в течение 16 ч, по истечении этого времени реакционную смесь охлаждали до 10°C и выливали в предварительно охлажденную (10°C) смесь MTBE (2,44 л) и 20% масс. лимонной кислоты (1,217 г, 1,279 моль), при этом поддерживая внутреннюю t <20°C. После 30 мин энергичного перемешивания, органический слой отделяли и последовательно промывали два раза с использованием 20% масс. хлорида натрия (1,46 л) и затем концентрировали приблизительно до 1/3 объема.
[0110] Получаемый остаток разводили в MTBE (3,90 л), промывали водой (1,95 л) и концентрировали приблизительно до 1/3 объема, в течение этого времени значительное количество твердого продукта выпадало в осадок из раствора. Получаемую смесь превращали в азеотропную смесь с двукратным высушиванием с использованием н-гептана (1,95 л). Добавляли н-гептан (877 мл) и MTBE (97 мл) и получаемую смесь нагревали до 50°C, оставляли остывать до 15°C в течение периода 2 часов и затем фильтровали осадок. Получаемое твердое вещество коричневого цвета сушили в вакуумной печи (40°C в течение 16 ч, затем 20°C в течение 48 ч), чтобы предоставлять 714,3 г соединения A-6 (2,59 моль, 96% выход).
[0111] 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ м.д. 3,97 (с, 3H) 3,98 (с, 3H) 6,53 (с, 1H) 6,94 (д, 7=8,51 Гц, 1H) 7,48 (д, 7=2,10 Гц, 1H) 7,60 (дд, 7=8,51, 2,10 Гц, 1H).
[0112] MS (M+H+) 277,2.
Figure 00000096
[0113] Соединение A-2 (250 г, 1,478 моль) суспендировали в уксусной кислоте (1,0 л) при перемешивании при комнатной температуре, по истечении этого времени добавляли гидразин (72,5 мл, 1,478 моль) в воде (75 мл) с повышением внутренней температуры до 42°C. Получаемую суспензию нагревали до 70°C и поддерживали при этой температуре в течение 5 мин, в это время суспензия почти превращалась в прозрачную смесь и затем снова становилась мутной, чтобы предоставлять соединение A-3 in situ.
[0114] Толуол (1,50 л) быстро добавляли в приведенную выше смесь (температура падала до 48°C), после чего следовало соединение A-6 (408 г, 1,478 моль). Получаемую смесь нагревали до 80°C, в это время накапливалось значительное количество твердого вещества желтого цвета, образуя очень густую пасту. После поддержания реакции при 80°C в течение 30 мин, смесь охлаждали до 50°C, и ледяную воду (1,50 л) добавляли при энергичном перемешивании. Желтый осадок собирали посредством фильтрования и промывали водой (3,75 л), водой (2,5 л) и IPA (2,50 л). Получаемое твердое вещество желтого цвета сушили под вакуумом (40°C) в течение 3 суток, чтобы предоставлять 464 г соединения A-7 (1,09 моль, 74% выход).
[0115] 1H ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ м.д. 3,90 (с, 4H) 3,95 (с, 4H) 7,10 (д, J=8,54 Гц, 1H) 7,30 (с, 1H) 7,83 (д, J=8,01 Гц, 2H) 7,89 (д, J=2,02 Гц, 1H) 7,92 (с, 1H) 8,23 (д, J=8,66 Гц, 2H).
[0116] MS (M+H+) 425,4.
Figure 00000097
[0117] Соединение A-7 (326 г, 768,2 ммоль) суспендировали в этаноле (3,26 л) и воде (815 мл), после чего следовало нагревание до 68-70°C. Стоковый раствор борогидрида натрия [предварительно полученный отдельно посредством добавления борогидрида натрия (96 г, 2,54 моль) в водный раствор 0,1 М гидроксида натрия (815 мл, 81,50 ммоль) при комнатной температуре, после чего следовало перемешивание в течение 30 мин] добавляли при комнатной температуре в течение 1,5 часа, в течение которых температура реакции росла до 68-71°C. После завершения добавления смесь нагревали при 68-71°C в течение 4 ч, по истечении этого времени смесь охлаждали до 40°C, и ацетон (564 мл) добавляли в течение 30 мин (внутренняя t 40-42°C), после чего следовало перемешивание дополнительные 30 мин при 40-42°C, чтобы предоставлять соединение A-8 in situ.
[0118] 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) м.д. 2,33-2,44 (м, 1H) 2,51 (д, J=6,09 Гц, 1H) 3,91 (с, 3H) 3,93 (с, 3H) 4,33 (с, 1H) 4,45 (дд, J=11,80, 2,08 Гц, 1H) 4,87-4,97 (м, 1H) 5,81 (с, 1H) 6,87-6,91 (м, 1H) 6,96-7,01 (м, 2H) 7,64-7,68 (м, 2H) 7,85-7,90 (м, 2H).
[0119] MS (M+H+) 428,9.
[0120] Гидроксид натрия (461 г, 11,52 моль) добавляли в указанную выше смесь, по истечении этого времени экзотермическую реакцию нагревали до 70-73°C и перемешивали в течение 16 часов. После охлаждения до комнатной температуры воду со льдом (3,260 л) добавляли в смесь для того, чтобы охлаждать ее до 10°C, после чего следовало медленное добавление 10% водной HCl (4,75 л) при поддержании температуры <25°C с энергичным перемешиванием. Энергичное перемешивание продолжали в течение 30 мин. Конечную реакционную смесь декантировали на стеклянный фильтр, чтобы выделять любой неочищенный продукт коричневого цвета из растворителя.
[0121] Твердое вещество, которое оставалось в реакционном сосуде, суспендировали в воде (3,26 л) и перемешивали энергично в течение 30 мин и декантировали, как указано выше. Этот процесс повторяли в течение дополнительного времени. Конечное выделенное твердое вещество промывали водой (3,26 л), после чего следовал IPA (2,61 л), и сушили на воздухе/под вакуумом for 1hand, затем под вакуумом при 45°C в течение 20 ч, чтобы предоставлять 226,7 г соединения A-9 (0,507 моль, 66% выход) в виде твердого вещества светло-коричневого цвета.
[0122] 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 3,76 (с, 3H) 3,79 (с, 3H) 5,86 (с, 1H) 6,84 (с, 1H) 6,92-7,04 (м, 2H) 7,08 (д, J=1,50 Гц, 1H) 7,84 (м, J=8,33 Гц, 2H) 7,95 (м, J=8,23 Гц, 2H).
[0123] MS (M+H+) 448,4.
Figure 00000098
[0124] Соединение A-9 (333,8 г, 746,1 ммоль) растворяли в DMF (1,335 л) и затем разбавляли с использованием DCM (1,00 л), при этом перемешивая при комнатной температуре. Добавляли трет-бутил-пиперазин-1-карбоксилат (139 г, 746,1 ммоль), после чего следовало перемешивание при комнатной температуре в течение дополнительных 20 мин. Добавляли EDC (143 г, 746,1 ммоль), получаемую смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. В энергично перемешиваемую смесь добавляли н-гептан (4,01 л), после чего следовала вода (5,34 л), при сохранении температуры ниже 25°C. Получаемую двухфазную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение дополнительных 30 мин, по истечении этого времени твердое вещество фильтровали, после чего следовало промывание водой (4,0 л) и затем н-гептаном (2,0 л). Твердое вещество сушили под вакуумом при 50°C в течение 18 ч, чтобы предоставлять 478,5 г неочищенного соединения A-12.
[0125] 473 г неочищенного соединения A-12 суспендировали в смеси растворителей из н-гептана (1,0 л) и IPA (1,0 л), после чего следовало нагревание до 50°C и перемешивание при 50°C в течение дополнительных 10 мин. Суспензию охлаждали до 20°C в течение периода 30 минут, после чего следовало перемешивание в течение дополнительных 30 мин. Твердое вещество фильтровали, промывали смесью растворителей из IPA (500 мл) и н-гептана (500 мл) и затем сушили под вакуумом при 50°C в течение 5 ч. Этот приведенный выше процесс суспендирования и фильтрования повторяли один дополнительный раз. 403 г соединения A-12 (0,655 моль, 88% выход?) получали в виде порошка коричневого цвета.
[0126] 1H ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ м.д. 0,94-1,14 (м, 1H) 1,45-1,51 (м, 9Н) 1,57-1,75 (м, 1H) 2,17-2,29 (м, 1H) 2,49-2,58 (м, 1H) 3,84 (с, 3H) 3,87 (с, 3H) 4,45 (д, J=11,44 Гц, 1H) 5,03-5,15 (м, 1H) 6,96-7,01 (м, 1H) 7,03-7,08 (м, 1Н) 7,11 (д, J=1,79 Гц, 1Н) 7,40-7,52 (м, 1H) 7,85 (д, J=8,09 Гц, 2H) 7,99-8,08 (м, 1H).
[0127] MS (M+H+) 616,3.
Figure 00000099
[0128] Соединение A-12 (340 г, 0,552 моль) суспендировали в DCM (510 мл, 7,926 моль и в суспензию добавляли TFA (510 мл, 6,619 моль) в течение 10 мин. Смесь перемешивали при 23-27°C в течение 3 ч, после которых смесь охлаждали до 15°C и разбавляли водой (1700 мл, 9,436 моль), при этом сохраняя внутреннюю температуру ниже 20°C. Смесь разводили н-гептаном (3,4 л, 23,209 моль), затем охлаждали до 15°C. Гидроксид натрия (2,872 кг, 7,179 моль) добавляли в течение 30 мин, при этом контролируя внутреннюю t<25°C. Получаемую смесь перемешивали при 20-25°C в течение 20 мин, затем фильтровали для того, чтобы собирать осадок светло-коричневого цвета. Осадок сначала промывали водой (3,4 л) и затем смесью н-гептана (1,36 л) и DCM (204 мл). Влажный отфильтрованный осадок переносили на лоток и сушили в вакуумной печи при 50°C в течение ночи, чтобы получать 248,8 г (0,483 моль, 87% выход) ER-890044 в виде твердого вещества светло-коричневого цвета.
Figure 00000100
[0129] ER-890044 (30,3 г, 58,8 ммоль) растворяли в растворе дихлорметана и метанола 1:1 (120 мл) и мутный раствор фильтровали через воронку Бюхнера средней пористости. Чистый фильтрат непосредственно использовали для хиральной ВЭЖХ-очистки. 4 мл этого раствора загружали на колонку Chiralpak IA 5 см × 50 см и элюировали с подвижной фазой, содержащей гептан, метанол и этанол (соотношение 4:3:3; модифицированной 0,06% диэтиламином), при скорости потока 75 мл/мин. ER-892887 собирали между 18,5 мин и 23,2 мин, тогда как ER-892924 собирали между 24,2 мин и 32 мин. Осуществляли 30 таких инжекций, и объединенные фракции концентрировали при пониженном давлении, чтобы предоставлять чистые энантиомерные продукты ER-892887 (10,5 г, 20,3 ммоль, >95% ee) и ER-892924 (9,8 г, 19,0 ммоль, >95% ee).
[0130] В раствор ER-892887 (8,50 г, 16,5 ммоль) в сухом этилацетате (500 мл) добавляли 4 M HCl в диоксане (4,53 мл, 18,1 ммоль) по каплям в течение 10 мин. Получали осадок белого цвета. Получаемую суспензию перемешивали при температуре окружающей среды в течение 15 мин, затем фильтровали при пониженном давлении. Собранное твердое вещество промывали в этилацетате (2×100 мл) и простом эфире (2×100 мл) и сушили под вакуумом для того, чтобы получать 8,29 г гидрохлоридной соли ER-892887 (15,0 ммоль, 91% выход)) в виде твердого вещества белого цвета.
[0131] ER-892930
[0132] В 5-мл пробирку с винтовой крышкой добавляли соединение A-9 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойную кислоту (21,7 мг, 0,049 ммоль), 3-амино-1,2-пропандиол (13,2 мг, 0,145 ммоль), HATU (1,10 экв., 24,8 мг, 0,065 ммоль), NMP (0,500 мл) и основание Хунига (6,00 мкл, 0,044 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 30°C в течение ночи. Материал очищали посредством LC/MS с использованием условий III для ВЭЖХ. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали в вакууме, чтобы получать соединение ER-892930 в виде твердого вещества грязно-белого цвета (13,3 мг, 53% выход).
[0133] ER-894463
[0134] В 5-мл пробирку с винтовой крышкой добавляли соединение A-9 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойную кислоту (30,0 мг, 0,067 ммоль), трет-бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилат (74,9 мг, 0,402 ммоль), HATU (50,9 мг, 0,134 ммоль), NMP (0,500 мл) и основание Хунига (6,00 мкл, 0,044 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 30°C в течение ночи. Материал очищали посредством LC/MS с использованием условий III для ВЭЖХ. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали в вакууме. Затем получаемый материал растворяли в этаноле (1,0 мл) и 4,0 M HCl в диоксане (1,0 мл, 4,00 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Затем смесь концентрировали в вакууме, чтобы получать соединение ER-894463 в виде твердого вещества желтого цвета (22,1 мг, 60% выход).
[0135] ER-895080
[0136] В 5-мл пробирку с винтовой крышкой добавляли соединение A-9 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойную кислоту (20,0 мг, 0,045 ммоль), трет-бутил-2,6-диазаспиро[3,4]октан-6-карбоксилат (18,98 мг, 0,089 ммоль), HATU (18,7 мг, 0,049 ммоль), NMP (0,500 мл) и основание Хунига (6,00 мкл, 0,044 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 30°C в течение ночи. Материал очищали посредством LC/MS с использованием условий III для ВЭЖХ. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали в вакууме. Затем получаемый материал поднимали в этаноле (1,0 мл) и 50% трифторуксусной кислоте в DCM (1,0 мл, 4,00 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Затем смесь концентрировали в вакууме, чтобы получать соединение ER-895080 в виде твердого вещества желтого цвета (2,40 мг, 8% выход).
[0137] Пример ER-894462-00 получали из соединения ER-886619 (30,0 мг, 0,067 ммоль) и коммерчески доступного азетидин-3-ола (29,4 мг, 0,402 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-895080. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (8,1 мг, 24%).
[0138] Пример ER-894465-00 получали из соединения ER-886619 (30,0 мг, 0,067 ммоль) и коммерчески доступного пирролидин-3-ола (35,0 мг, 0,402 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-895080. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (18,5 мг, 53%).
[0139] Пример ER-894464-01 получали из соединения ER-886619 (30,0 мг, 0,067 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-пирролидин-3-илкарбамата (74,9 мг, 0,402 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (32,6 мг, 88%).
[0140] Пример ER-895077-01 получали из соединения ER-886619 (30,0 мг, 0,067 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-3-аминоазетидин-1-карбоксилата (69,3 мг, 0,402 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (8,6 мг, 24%).
[0141] Пример ER-895078-01 получали из соединения ER-886619 (30,0 мг, 0,067 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-азетидин-3-илкарбамата (69,3 мг, 0,402 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (29,7 мг, 82%).
[0142] Пример ER-895746-01 получали из соединения ER-886619 (7,8 мг, 0,062 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-карбоксилата (37,0 мг, 0,174 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (27,5 мг, 77%).
[0143] Пример ER-895748-01 получали из соединения ER-886619 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (35,5 мг, 0,177 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (31,3 мг, 99%).
[0144] Пример ER-895749-01 получали из соединения ER-886619 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (36,6 мг, 0,183 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (29,5 мг, 93%).
[0145] Пример ER-895750-01 получали из соединения ER-886619 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-метилпиперазин-1-карбоксилата (31,7 мг, 0,158 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (30,6 мг, 97%).
[0146] Пример ER-895751-01 получали из соединения ER-886619 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-метилпиперазин-1-карбоксилата (43,5 мг, 0,217 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (31,2 мг, 98%).
[0147] Пример ER-895752-01 получали из соединения ER-886619 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (2S,5R)-трет-бутил-2,5-диметилпиперазин-1-карбоксилата (30,3 мг, 0,141 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (30,6 мг, 94%).
[0148] Пример ER-895753-01 получали из соединения ER-886619 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (2R,5R)-трет-бутил-2,5-диметилпиперазин-1-карбоксилата (37,6 мг, 0,175 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (19,5 мг, 60%).
[0149] Пример ER-895754-01 получали из соединения ER-886619 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (1S,4S)-трет-бутил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилата (33,5 мг, 0,169 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (26,7 мг, 85%).
[0150] Пример ER-895083-15 получали из соединения ER-886619 (24,5 мг, 0,055 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-(азетидин-3-илметил)(метил)карбамата (22,4 мг, 0,112 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-895080. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (0,6 мг, 2%).
[0151] Пример ER-895081-15 получали из соединения ER-886619 (20,6 мг, 0,046 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-(6-аминоспиро[3.3]гептан-2-ил)карбамата (23,4 мг, 0,103 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-895080. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (13,3 мг, 43%).
[0152] Пример ER-895082-15 получали из соединения ER-886619 (23,5 мг, 0,053 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-2,7-диазаспиро[4.4]нонан-2-карбоксилата (25,1 мг, 0,111 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-895080. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (5,3 мг, 15%).
[0153] Получали пример ER-898416. 3-(5-(3,4-Диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойную кислоту получали из (3-цианофенил)бороновой кислоты (93 мг, 0,631 ммоль) и 5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-илтрифторметансульфоната (100,0 мг, 0,21 ммоль) и таким образом, который подобен таковому для 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидина (раздел G, получение ER-893393), чтобы получать 3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензонитрил (46 мг, 51% выход). Гидролиз материала (75 мг, 0,175 ммоль), полученного таким образом, который подобен таковому для соединения A-9, давал желаемое соединение (42 мг, 54% выход).
[0154] Пример ER-895811 получали в две стадии из 3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойной кислоты (24 мг, 0,054 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилата (40 мг, 0,215 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение (3S)-трет-бутил-3-(3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамидо)пирролидин-1-карбоксилат (7 мг, 0,011 ммоль, 21% выход). Затем это промежуточное соединение (6 мг, 0,0097 ммоль) обрабатывали HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-895811 (4,4 мг, 82% выход).
[0155] Пример ER-896386 получали в две стадии из 3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойной кислоты (119 мг, 0,266 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-карбоксилата (226 мг, 1,06 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение трет-бутил-5-(3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензоил)гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-карбоксилат (94 мг, 0,146 ммоль, 55% выход). Затем это промежуточное соединение разделяли на составляющие его энантиомеры таким образом, который подобен таковому для ER-890044 (раздел A), чтобы получать трет-бутил-5-(3-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензоил)гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-карбоксилат (33 мг, 0,051 ммоль) и трет-бутил-5-(3-((5R,7S)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензоил)гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-карбоксилат (33 мг, 0,051 ммоль). Затем промежуточное соединение трет-бутил-5-(3-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензоил)гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-карбоксилат (22 мг, 0,034 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-896386 (19 мг, 96% выход).
[0156] Пример ER-896387 получали из промежуточного соединения трет-бутил-5-(3-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензоил)гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-карбоксилата, полученного в примере ER-896386. Затем это промежуточное соединение (16 мг, 0,025 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-896387 (14 мг, 99% выход).
[0157] Пример ER-896388 получали в две стадии из 3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойной кислоты (25 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-пиперазин-1-карбоксилата (42 мг, 0,224 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение трет-бутил-4-(3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензоил)пиперазин-1-карбоксилат (18 мг, 0,029 ммоль, 52% выход). Затем это промежуточное соединение (16 мг, 0,026 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-896388 (14 мг, 98% выход).
[0158] Пример ER-896389 получали в две стадии из соединения 3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойной кислоты (25 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-((3R,5S)-5-метилпиперидин-3-ил)карбамата (48 мг, 0,224 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение трет-бутил-((3R,5S)-1-(3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензоил)-5-метилпиперидин-3-ил)карбамат (22 мг, 0,034 ммоль, 61% выход). Затем это промежуточное соединение (20 мг, 0,031 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-896389 (17,5 мг, 97% выход).
[0159]
[0160| Примеры синтеза - раздел B
[0161] Пример 2 (получение ER-885681)
Figure 00000101
[0162] Соединение B-1 получали из коммерчески доступного трет-бутил-4-цианопиперидин-1-карбоксилата таким образом, который подобен для соединения A-8 (56 г, 70% выход для конечной стадии).
[0163] 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ м.д. 1,44-1,49 (м, 10H) 1,50-1,62 (м, 6Н) 1,89 (д, J=12,05 Гц, 2H) 2,31 (дт, J=13,69, 11,51 Гц, 1H) 2,41-2,49 (м, 1H) 2,69-2,88 (м, 3H) 3,89 (с, 3H) 3,91 (с, 3H) 4,06-4,21 (м, 3H) 4,38 (дд, J=11,71, 1,95 Гц, 1H) 4,81 (дт, J=11,29, 5,80 Гц, 1H) 5,28 (с, 1H) 6,84-6,89 (м, 1H) 6,93-6,98 (м, 2H).
[0164] MS (M+H+) 511,0.
Figure 00000102
[0165] Трифторуксусную кислоту (15 мл) добавляли в раствор соединения B-1 (7,86 г, 15,4 ммоль) в метиленхлориде (15 мл) и смесь перемешивали при КТ. После 15 мин реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток распределяли между MTBE и насыщ. NaHCO3. Слои разделяли, и водный раствор дополнительно экстрагировали дихлорметаном (2×). Объединенные экстракты промывали солевым раствором, сушили (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении, чтобы получать ER-887084 в виде твердого вещества белого цвета (4,28 г, 68%).
[0166] 1H ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ м.д. 1,52-1,64 (м, 3H) 1,84 (уш.с, 1H) 2,06-2,17 (м, 1H) 2,40-2,47 (м, 1H) 2,59-2,70 (м, 5H) 3,01-3,09 (м, 3H) 3,79 (с, 3H) 3,82 (с, 3H) 4,33 (дд, J=11,59, 2,25 Гц, 1H) 4,87-4,95 (м, 1H) 5,30 (с, 1H) 6,93 (д, J=8,31 Гц, 1H) 6,96-7,00 (м, 1H) 7,04 (д, J=1,90 Гц, 1H).
[0167] MS (M+H+) 411,5.
Figure 00000103
Соединения ER-885681 и ER-885682
[0168] Соединение ER-887084 (1,19 г, 2,91 ммоль) растворяли в метаноле (11 мл) и раствор дополнительно разбавляли 19 мл раствора этанол-гептан 1:1, модифицированного 0,05% диэтиламином. 1 мл этого раствора загружали на колонку Chiralcel OD 2 см × 25 см и элюировали с подвижной фазой, содержащей гептан-этанол 1:1 (содержащие 0,05% диэтиламина), при скорости потока 15 мл/мин. Соединение ER-885681 собирали между 7,3 мин и 9,6 мин, тогда как соединение ER-885682 собирали между 9,8 мин и 14,5 мин. Осуществляли 33 такие инжекции, и объединенные фракции концентрировали при пониженном давлении, чтобы предоставлять соединения чистых энантиомерных продуктов ER-885681 (571 мг, 96% выход, >95% ee) и ER-885682 (ER-887275) (574 мг, 96% выход, >95% ee).
Figure 00000104
[0169] Примеры ER-885454 и ER-885455
[0170] Соединение ER-880894 получали из коммерчески доступного 4-цианопиридина (450 г, 4,32 моль) с использованием общей последовательности, изображенной на схеме I и проиллюстрированной получением соединения A-8 (ER-890044), чтобы получать ER-880894 (205 г, ммоль 12% общий выход).
[0171] 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ м.д. 2,29-2,46 (м, 2H) 2,47-2,60 (м, 2H) 3,91 (с, 3H) 3,93 (с, 3H) 4,36 (с, 1H) 4,45 (д, J=9,96 Гц, 1H) 4,93 (дт, J=11,28, 5,79 Гц, 2H) 5,85 (с, 1H) 6,85-6,93 (м, 1H) 6,93-7,04 (м, 2H) 7,59-7,70 (м, 2H) 8,56-8,66 (м, 2H).
[0172] MS (M+H+) 405,2.
[0173] Разрешение ER-880894 (200 мг, 0,495 ммоль) посредством хиральной ВЭЖХ таким образом, который подобен таковому для ER-890044 (за тем исключением, что этанол-гептан 1:1 использовали в качестве подвижной фазы), давало ER-885454 (96 мг, 48% выход) и ER-885455 (91,2 мг, 46% выход).
Figure 00000105
[0174] Примеры ER-886622 и ER-886623
[0175] Пример ER-886434 получали из коммерчески доступного 4-циано-2-метоксипиридина (мг, ммоль) таким образом, который подобен таковому для соединения ER-880894, чтобы получать ER-886434 (127 мг, 62% выход).
[0176]
[0177]
[0178] MS (M+H+) 435,6.
[0179] Разрешение посредством хиральной ВЭЖХ таким образом, который подобен таковому для ER-880894, давало ER-886622 (21,5 мг, 44% выход, >95% ee) и ER-886623 (20,2 мг, 41% выход, >95% ee).
[0180] Примеры синтеза - раздел C
[0181] Получение ER-890035
Figure 00000106
[0182] Соединение C-3
[0183] Раствор соединения C-1 (9,91 г, 100 ммоль) и соединения C-2 (27,6 г, 100 ммоль) в уксусной кислоте (60 мл) нагревали при 80°C. Прозрачная реакционная смесь темно-оранжевого цвета прогрессивно становилась светлее, когда начиналось образование осадка желтого цвета. В пределах 30 мин реакционная смесь превращалась в густую суспензию желтого цвета. Смесь поддерживали при 80°C в течение других 15 мин. Смесь охлаждали до КТ и добавляли IPA. Суспензию нагревали приблизительно до 75°C, затем охлаждали до комнатной температуры. Осадок желтого цвета фильтровали, и твердое вещество промывали дополнительным IPA и сушили при пониженном давлении. Соединение C-3 получали в виде твердого вещества светло-желтого цвета (30,9 г, 91% выход).
[0184] 1H ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ м.д. 3,92-3,92 (м, 3H) 3,96 (с, 3H) 7,10 (д, J=8,51 Гц, 1H) 7,67 (с, 1H) 7,75 (дд, J=8,47, 2,21 Гц, 1H) 7,83-7,86 (м, 1H) (главный таутомер).
[0185] MS (M+H+) 340,5.
[0186] Соединение C-4
[0187] Соединение C-3 (9,9 г, 29,2 ммоль) растворяли в N,N- диизопропилэтиламине (25,4 мл) и 1,2-дихлорэтане (100 мл) и смесь перемешивали при КТ. В этот раствор добавляли N-фенилбис(трифторметансульфонимид) (20,8 г, 58,2 ммоль) и смесь нагревали с обратным холодильником. После 45 мин реакционную смесь охлаждали до КТ и концентрировали при пониженном давлении, чтобы получать остаток оранжево-коричневого цвета. Остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием градиентного элюирования (от 10 до 40% EtOAc в гептане), чтобы получать соединение C-4 в виде твердого вещества желтого цвета (7,10 г, 52% выход). В реакции формировали малое количество N-сульфонилированного региоизомера, но не выделяли.
[0188] 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ м.д. 3,87 (с, 3H) 3,90 (с, 3H) 7,15 (д, J=8,65 Гц, 1H) 7,20 (с, 1H) 7,85 (д, J=2,14 Гц, 1H) 8,00 (дд, J=8,55, 2,14 Гц, 1H) 8,35 (с, 1H).
[0189] MS (M+H+) 472,3.
[0190] Соединение C-5
[0191] В раствор соединения C-4 (2,24 г, 0,00475 моль) в этаноле (29,9 мл) добавляли борогидрид натрия (360 мг, 9,50 моль) и смесь перемешивали при КТ. После 30 мин реакционную смесь осторожно выливали в смесь 1:1 насыщенного раствора NH4Cl и воды. Водный раствор экстрагировали дихлорметаном (3×); объединенные экстракты промывали солевым раствором, сушили и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали посредством хроматографии на силикагеле с использованием градиентного элюирования (от 0 до 50% EtOAc в гептане), чтобы получать соединение C-5 в виде твердого вещества белого цвета (1,94 г, 86% выход).
[0192] 1H ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ м.д. 2,18 (дт, J=13,35, 11,43 Гц, 1Н) 2,47 (ддд, J=13,43, 5,95, 2,59 Гц, 1H) 3,80 (с, 3H) 3,82 (с, 3H) 4,44 (дд, J=11,63, 2,44 Гц, 1H) 4,92- 5,03 (м, 1H) 5,32 (с, 1H) 6,94 (д, J=8,28 Гц, 1H) 6,99 (дд, J=8,41, 1,89 Гц, 1H) 7,04 (д, J=1,95 Гц, 1H). MS (M+H+) 472,3.
[0193] Соединения C-6 и C-7
[0194] Соединение C-5 (900 мг, 1,91 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл) и раствор дополнительно разбавляли этанолом (5 мл) и гептаном (5 мл). 1 мл этого раствора загружали на колонку Chiralcel® OD 2 см × 25 см и элюировали с подвижной фазой, содержащей гептан-этанол 1:1, при скорости потока 15 мл/мин. Соединение C-6 (ER-887274) собирали между 6,0 мин и 7,7 мин, тогда как соединение C-7 (ER-887275) собирали между 8,75 мин и 11,5 мин. Осуществляли 17 таких инжекций, и объединенные фракции концентрировали при пониженном давлении, чтобы предоставлять соединения чистых энантиомерных продуктов C-6 (ER-887274) (683 мг, 1,44 ммоль, >95% ee) и C-7 (ER-887275) (671 мг, 1,41 ммоль, >95% ee).
[0195] Пример ER-890035. В пробирку с винтовой крышкой 15 мм × 75 мм добавляли (3-(5-метил-1,2,4-оксадиазол-3-ил)фенил)бороновую кислоту (36,1 мг, 0,177 ммоль), 0,0750 M тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) в 1,4-диоксане (80,0 мкл, 0,006 ммоль), 0,150 M 5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-илтрифторметансульфонат (C-5) в 1,4-диоксане (420,0 мкл, 0,0631 ммоль) и 2,00 M карбонат натрия в воде (60,0 мкл, 120 ммоль). Реакционный сосуд продували азотом и герметизировали. Сосуд встряхивали и нагревали в алюминиевом блоке при 85°C в течение ночи. В смесь добавляли 1,0 мл насыщенного водного бикарбоната натрия, и затем смесь экстрагировали этилацетатом (2×2,0 мл). Объединенные органические слои концентрировали в вакууме. Остающийся остаток растворяли в 500 мкл DMSO. Материал очищали посредством LC/MS на колонке XTerra C8 19×100 мм с градиентом ацетонитрил:вода (муравьиная кислота). Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали в вакууме, чтобы получать соединение ER-890035 в виде твердого вещества желтого цвета, 2,9 мг (9,5% выход).
[0196] Пример ER-893972 получали из соединения C-6 (250 мг, 0,526 ммоль) и коммерчески доступной (1,4-диметил-1H-индазол-5-ил)бороновой кислоты (200 мг, 1,05 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала желаемый продукт (159 мг, 64% выход).
[0197] Пример ER-892893 получали из соединения C-6 (250 мг, 0,526 ммоль) и коммерчески доступной (4-((3-гидроксипропил)карбамоил)фенил)бороновой кислоты (235 мг, 1,05 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала желаемый продукт (166 мг, 63% выход).
[0198] Пример ER-892892 получали из соединения C-6 (250 мг, 0,526 ммоль) и коммерчески доступной (4-карбамоил-2-фторфенил)бороновой кислоты (192 мг, 1,05 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала желаемый продукт (179 мг, 73% выход).
[0199] Пример ER-892892 получали из соединения C-6 (250 мг, 0,526 ммоль) и коммерчески доступной (4-карбамоил-2-фторфенил)бороновой кислоты (192 мг, 1,05 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала желаемый продукт (179 мг, 73% выход). Пример ER-894680 получали из соединения C-6 (250 мг, 0,526 ммоль) и коммерчески доступной (4-метил-1H-индазол-5-ил)бороновой кислоты (185 мг, 1,05 ммоль таким образом, который подобен таковому для примера ER-890035. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала желаемый продукт (90 мг, 37% выход).
[0200] Пример ER-887734 получали из соединения C-6 (20 мг, 0,042 ммоль) и коммерчески доступной (3-ацетамидофенил)бороновой кислоты (22,6 мг, 0,126 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS (Rt 7,45 мин, условия II) давала желаемый продукт (9,7 мг, 50% выход).
[0201] Пример ER-887738 получали из соединения C-6 (20 мг, 0,042 ммоль) и коммерчески доступной (3-ацетамидофенил)бороновой кислоты (20,3 мг, 0,126 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS (Rt 8,58 мин, условия II) давала желаемый продукт (6,5 мг, 35% выход).
[0202] Пример ER-892889 получали из соединения C-6 (200 мг, 0,421 ммоль) и коммерчески доступной (3-хлор-4-(метилкарбамоил)фенил)бороновой кислоты (180 мг, 0,843 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала желаемый продукт (88 мг, 42% выход).
[0203] Пример ER-892890 получали из соединения C-6 (250 мг, 0,526 ммоль) и коммерчески доступной (4-карбамоил-3-хлорфенил)бороновой кислоты (210 мг, 1,05 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала желаемый продукт (138 мг, 55% выход).
[0204] Пример ER-893961 получали из соединения C-6 (40 мг, 0,084 ммоль) и коммерчески доступной (1,6-диметил-1H-индазол-5-ил)бороновой кислоты (51 мг, 0,268 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS давала желаемый продукт (8,9 мг, 22% выход).
[0205] Пример ER-893961 получали из соединения C-6 (40 мг, 0,084 ммоль) и коммерчески доступного 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она (80,55 мг, 0,309 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS давала желаемый продукт (4,3 мг, 11% выход).
[0206] Пример ER-889871 получали из соединения C-5 (50,0 мг, 0,105 ммоль) и коммерчески доступной (4-карбамоилфенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (12,8 мг, 27%).
[0207] Пример ER-889874 получали из соединения C-5 (50,0 мг, 0,105 ммоль) и коммерчески доступной (4-(гидроксиметил)фенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (7,8 мг, 17%).
[0208] Пример ER-890017 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (4-карбамоил-2-фторфенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (13,4 мг, 46%).
[0209] Пример ER-890019 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (4-карбамоил-3-фторфенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (11,7 мг, 40%).
[0210] Пример ER-890020 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (4-карбамоил-3-хлорфенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (14 мг, 46%).
[0211] Пример ER-890024 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (4-((3-гидроксипропил)карбамоил)фенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (11,5 мг, 36%).
[0212] Пример ER-890027 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (4-(бензилкарбамоил)-3-хлорфенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (12,3 мг, 34%).
[0213] Пример ER-890028 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (3-хлор-4-(изопропилкарбамоил)фенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (18,1 мг, 55%).
[0214] Пример ER-890029 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (3-хлор-4-(метилкарбамоил)фенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (15,4 мг, 49%).
[0215] Пример ER-890035 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (3-(5-метил-1,2,4-оксадиазол-3-ил)фенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (2,9 мг, 9%).
[0216] Пример ER-890043 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (5,6 мг, 19%).
[0217] Пример ER-890044 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (4-(пиперазин-1-карбонил)фенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (13,7 мг, 42%).
[0218] Пример ER-890050-00 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (3-(1H-пиразол-1-ил)фенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (15,4 мг, 52%).
[0219] Пример ER-891029-00 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (6-(метилкарбамоил)пиридин-3-ил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (9 мг, 31%).
[0220] Пример ER-891043 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (1,7-диметил-1H-индазол-5-ил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (18 мг, 61%).
[0221] Пример ER-891044 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (1,4-диметил-1H-индазол-5-ил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому для примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (14,3 мг, 48%).
[0222] Пример ER-891047 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (1,6-диметил-1H-индазол-5-ил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому для примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (18,1 мг, 61%).
[0223] Пример ER-891058 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (4-(циклопропилкарбамоил)-3-фторфенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (13,8 мг, 43%).
[02241 Пример ER-892908 получали из соединения C-5 (30,0 мг, 0,063 ммоль) и коммерчески доступной (4-(трет-бутилкарбамоил)-3-фторфенил)бороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (7 мг, 21%).
[0225] Пример ER-892931 получали из соединения C-5 (32,6 мг, 0,069 ммоль) и коммерчески доступной (1H-индазол-4-ил)бороновой кислоты (2,70 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (5,5 мг, 18%).
[0226] Раздел C.1 (Соединения, полученные перекрестным сочетанием из бромида)
Figure 00000107
[0227] Соединение C-9
[0228] Смесь 3-амино-5-бромпиразола C-8 (3,24 г, 20 ммоль) и дикетона C-2 (5,52 г, 20 ммоль) в уксусной кислоте (20 мл) нагревали до 80°C. После 1 ч реакционную смесь охлаждали до КТ и разбавляли с использованием IPA. В смеси происходило образование осадка желтого цвета, который собирали фильтрованием. При отстаивании происходило образование дополнительного осадка в маточном растворе. Объединенные порции собирали и сушили под вакуумом, чтобы получать 3,89 г соединения C-9 в виде твердого вещества желтого цвета (9,67 ммоль, 48% выход).
[0229] 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ м.д. 3,99 (с, 3H) 4,05 (с, 3H) 6,85 (с, 1H) 7,00 (д, J=8,47 Гц, 1H) 7,57 (с, 1H) 7,62 (дд, J=8,45, 2,16 Гц, 1H) 7,80 (д, J=2,14Гц, 1H).
[0230] MS (M+H+) 402,2
[0231] Соединение C-10
[0232] Соединение C-9 (1,1 г, 2,74 ммоль) суспендировали в этаноле (5 мл) и добавляли борогидрид натрия (155 мг, 4,1 ммоль). Смесь перемешивали при КТ в течение 1,5 ч. В этот момент добавляли дополнительный борогидрид натрия (155 мг) и смесь перемешивали при КТ в течение других 2 ч. Уксусную кислоту (1,56 мл) добавляли для того, чтобы гасить реакцию, и получаемый водный раствор выливали в насыщенный раствор NaHCO3. Осажденное твердое вещество белого цвета собирали с помощью фильтрования, промывали водой и сушили при пониженном давлении, чтобы получать 667 мг соединения C-10 в виде твердого вещества грязно-белого цвета (1,64 г, 60% выход).
[0233] 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ м.д. 2,34-2,37 (м, 1H) 2,49 (м, 1H) 3,86 (с, 1H) 3,91 (с, 3H) 3,92 (с, 3H) 4,40 (дд, J=11,75, 2,44 Гц, 1H) 4,82 (дт, J=11,32, 5,73 Гц, 1H) 5,51 (с, 1H) 6,80-6,91 (м, 2H) 6,93-7,00 (м, 1Н).
[0234] MS (M+H+) 406,4.
[0235] Пример ER-889925 получали из соединения C-10 (37,0 мг, 0,091 ммоль) и коммерчески доступной изохинолин-5-илбороновой кислоты (2,50 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-890035. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (9,9 мг, 24%).
[0236] Примеры синтеза - раздел D
Figure 00000108
[0237] 5-(5-3,4-Диметоксифенил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколинонитрил (D-3)
[0238] В сосуд добавляли 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиколинонитрил (1,95 г, 8,48 ммоль), дициклогексил(2',6'-диметокси-[1,1'-бифенил]-2-ил)фосфин (0,261 г, 0,636 ммоль), 5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил трифторметансульфонат (2,00 г, 4,24 ммоль), ацетат калия (0,833 г, 8,49 ммоль) и ацетат палладия(II) (0,095 г, 0,424 ммоль). После прокачки сосуда и содержимого азотом добавляли дегазированный раствор толуол/этанол 1:1 (20 мл), сосуд герметизировали и нагревали до 80°C в течение 2 суток. Этилацетат добавляли в получаемый осадок светло-желтого цвета, собирали с помощью фильтрования и сушили под глубоким вакуумом (1,13 г, 63%). Этот материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
[0239] 1H ЯМР (400 МГц CDCl3) δ м.д. 4,00 (3H), 4,06 (3H), 7,02 (2H), 7,21 (1H), 7,66 (2H), 7,84 (2H), 8,5 (1H), 9,33 (1Н).
[0240] MS (M+H+) 426,0.
[0241] 5-(5-(3,4-Диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколинонитрил (D-4)
[0242] В смесь 5-(5-3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколинонитрила (1,03 г, 2,43 ммоль) в этаноле (23,0 мл) добавляли борогидрид натрия (0,276 г, 7,29 ммоль); реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч, после которых реакционную смесь оставляли остывать до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Добавляли уксусную кислоту (1,40 мл), за которой следовал 1,0 Н раствор соляной кислоты (48,6 мл) и смесь концентрировали с использованием роторного испарения. В остаток добавляли дихлорметан и фильтровали. Концентрация фильтрата посредством роторного испарения давала неочищенный продукт в виде пены светло-коричневого цвета (0,694 г, 66%). Этот материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
[0243] 1H ЯМР (400 МГц DMSO-d6) м.д. 2,13 (1H), 2,46 (1H), 3,77 (6Н), 4,48 (1H), 5,36 (1H), 5,97 (1H), 6,98 (3H), 7,08 (1H), 8,08 (1H), 8,28 (1H), 9,05 (1H).
[0244] MS (M+H+) 430,0.
[0245] 5-(5-(3,4-Диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиновая кислота (D- 5)
[0246] В суспензию 5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколинонитрила (0,694 г, 1,62 ммоль) добавляли 4,00 M раствор гидроксида натрия в воде (2,02 мл). Получаемую смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч, добавляли 1,0 Н раствор соляной кислоты (11,3 мл), и осадок светло-коричневого цвета фильтровали, промывали обильными количествами воды, сушили на воздухе/под вакуумом в течение 30 мин и затем под глубоким вакуумом 48 ч с получением твердого вещества светло-коричневого цвета (0,535 г, 74%). Этот материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
[0247] 1H ЯМР (400 МГц DMSO-d6) м.д. 2,13 (1H), 2,46 (1H), 3,76 (3H), 3,79 (3H), 4,48 (1H), 5,35 (1H), 6,00 (1H), 6,99 (3H), 7,08 (1H), 8,11 (1H), 8,32 (1H), 9,04 (1H).
[0248] MS (M+H+) 449,01.
[0249] Трет-бутил-4-(5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиноил)пиперазин-1-карбоксилат (D-6)
[0250] В раствор 5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиновой кислоты (458 мг, 1,02 ммоль) в DMF (4,0 мл) добавляли N,N-диизопропилэтиламин (535 мкл, 3,06 ммоль) и HATU (427 мг, 1,12 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч при КТ добавляли трет-бутил-пиперазин-1-карбоксилат (209 мг, 1,12 ммоль) и реакцию перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Воду добавляли, и получаемый осадок светло-коричневого цвета собирали с помощью фильтрования (0,5385 г). Очистка с помощью колоночной хроматографии (от 15% до 100% этилацетат/гептан) давала трет-бутил-4-(5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиноил)пиперазин-1-карбоксилат (332 мг, 54%) в виде твердого вещества светло-желтого цвета.
[0251] 1H ЯМР (400 МГц CD3OD) δ м.д. 1,46 (9H), 2,2 (1H), 2,5 (1H), 3,50 (8H), 3,73 (1H), 3,82 (6Н), 4,45 (1H), 5,08 (1H), 5,91 (1H), 7,02 (3H), 7,62 (1H), 8,23 (1H), 8,92 (1H).
[0252] MS (M+H+) 617,2.
[0253] (5-(5-(3,4-Диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил)метанон (ER-897560)
[0254] Соединение D-6 (66 мг, 0,107 ммоль) разделяли на составляющие его энантиомеры таким образом, который подобен таковому для ER-890044 (раздел A), чтобы получать трет-бутил-4-(5-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиноил)пиперазин-1-карбоксилат (9,2 мг, 14% выход) и трет-бутил-4-(5-((5R,7S)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиноил)пиперазин-1-карбоксилат (9,2 мг, 14% выход).
[0255] В раствор трет-бутил-4-(5-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиноил)пиперазин-1-карбоксилат (90,0 мг, 0,146 ммоль) в этаноле (4 мл) добавляли 4,0 M HCl в 1,4-диоксане (1,84 мл). Реакцию нагревали до 40°C в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали посредством роторного испарения и превращали в азеотроп с использованием толуола, чтобы получать ER-897560 в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (91 мг, 106% выход).
[0256] Пример ER-897097 получали из соединения C-9 (500 мг, 1,243 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (461 мг, 1,492 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-4. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала Boc-защищенное ER-897097 (460 мг, 73% выход). Снятие защитных групп с этого Boc-защищенного продукта (100 мг, 0,197 ммоль) осуществляли таким образом, который подобен таковому для ER-887084 (раздел B), чтобы получать ER-897097 (80 мг, 99% выход). (LC-MS: Rt 1,49 мин, (M+1)+ 409,08 при условиях II).
[0257] Пример ER-897269
[0258] Соединение ER-897097 (94 мг, 0,229 ммоль) разделяли на составляющие его энантиомеры таким образом, который подобен таковому для ER-890044 (раздел A) чтобы получать один из изомеров ER-897269 (15 мг, 16% выход, >95% ee).
[0259] Пример ER-897105 получали из соединения C-9 (500 мг, 1,243 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразол-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата (563 мг, 1,492 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-4. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала Boc-защищенное ER-897105 (312 мг, 44% выход). Снятие защитных групп с этого Boc-защищенного продукта (100 мг, 0,173 ммоль) осуществляли таким образом, который подобен таковому для ER-887084 (раздел B), чтобы получать ER-897105 (71 мг, 86% выход).
[0260] LC-MS: Rt 1,48 мин, (M+1)+ 477,09 при условиях II.
[02611 Примеры ER-897214 и ER-897215
[0262] Соединение ER-897105 (50 мг, 0,105 ммоль) разделяли на составляющие его энантиомеры таким образом, который подобен таковому для ER-890044 (раздел A), чтобы получать ER-897214 (19 мг, 39% выход, >95% ee) и ER-897215 (19 мг, 39% выход, >95% ee).
[0263] Пример ER-897381 получали из соединения C-4 (500 мг, 1,061 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-4-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-ил)пиперазин-1-карбоксилата (621 мг, 1,591 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-4. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала Boc-защищенное ER-897381 (311 мг, 50% выход). Снятие защитных групп с этого Boc-защищенного продукта (100 мг, 0,17 ммоль) осуществляли таким образом, который подобен таковому для ER-887084 (раздел B), чтобы получать ER-897381 (75 мг, 90% выход). LC-MS: Rt 1,52 мин, (M+1)+ 489,21 при условиях II).
[0264] Пример ER-897714 и ER-897715
[0265] Соединение ER-897381 (71 мг, 0,134 ммоль) разделяли на составляющие его энантиомеры таким образом, который подобен таковому из ER-890044 (раздел A), чтобы получать ER-897714 (27 мг, 38% выход, >95% ee) и ER-897716 (30 мг, 42% выход, >95% ee).
[0266] Пример ER-897405 получали из соединения C-4 (500 мг, 1,061 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-4-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоксилата (619 мг, 1,591 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-4. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала Boc-защищенное ER-897405 (311 мг, 65% выход). Снятие защитных групп с этого Boc-защищенного продукта (100 мг, 0,17 ммоль) осуществляли таким образом, который подобен таковому для ER-887084 (раздел B), чтобы получать ER-897405 (72 мг, 87% выход). LC-MS: Rt 1,45 мин, (M+1)+ 489,04 при условиях II.
[0267] Пример ER-897716 и ER-897717
[0268] Соединение ER-897405 (70 мг, 0,143 ммоль) разделяли на составляющие его энантиомеры таким образом, который подобен таковому для ER-890044 (раздел A), чтобы получать ER-897716 (23 мг, 33% выход) и ER-897717 (23 мг, 33% выход).
[0269] Пример ER-897765 получали из соединения C-4 (438 мг, 0,93 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-(1-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)пиперидин-4-ил)карбамата (250 мг, 0,62 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-4. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала Boc-защищенное ER-897765 (161 мг, 43% выход). Снятие защитных групп с этого Boc-защищенного продукта (161 мг, 0,267 ммоль) осуществляли таким образом, который подобен таковому для ER-887084 (раздел B), чтобы получать ER-897765 (131 мг, 98% выход).
[0270] Пример ER-895809 получали в две стадии из соединения D-5 (19 мг, 0,042 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилата (32 мг, 0,169 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение (3S)-трет-бутил-3-(5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколинамидо)пирролидин-1-карбоксилат (19 мг, 0,031 ммоль, 72% выход). Затем это промежуточное соединение (17 мг, 0,028 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-895809 (16 мг, 98% выход).
[0271] Пример ER-895810 получали в две стадии из соединения D-5 (19 мг, 0,042 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилата (32 мг, 0,169 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение (3R)-трет-бутил-3-(5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколинамидо)пирролидин-1-карбоксилат (24 мг, 0,039 ммоль, 92% выход). Затем это промежуточное соединение (22 мг, 0,036 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-895810 (21 мг, 100% выход). Точная вычисленная масса: 516,21. Наблюдаемая: 517,5.
[0272] Пример ER-896133 получали в две стадии из соединения D-5 (15 мг, 0,033 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-пиперазин-1-карбоксилата (25 мг, 0,134 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение трет-бутил-4-(5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиноил)пиперазин-1-карбоксилат (6 мг, 0,009 ммоль, 29% выход). Затем это промежуточное соединение (6 мг, 0,009 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-896133 (5,3 мг, 92% выход).
[0273] Пример ER-896134 получали в две стадии из соединения D-5 (15 мг, 0,033 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-4-аминопиперидин-1-карбоксилата (27 мг, 0,134 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение трет-бутил-4-(5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколинамидо)пиперидин-1-карбоксилат (7 мг, 0,011 ммоль, 33% выход). Затем это промежуточное соединение (7 мг, 0,011 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-896134 (5,8 мг, 87% выход).
[0274] Пример ER-896135 получали в две стадии из соединения D-5 (15 мг, 0,033 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (27 мг, 0,134 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение (3S)-трет-бутил-3-(5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколинамидо)пиперидин-1-карбоксилат (7 мг, 0,011 ммоль, 33% выход). Затем это промежуточное соединение (7 мг, 0,011 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-896135 (6,5 мг, 97% выход).
[0275] Пример ER-896136 получали в две стадии из соединения D-5 (15 мг, 0,033 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (27 мг, 0,134 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение (3R)-трет-бутил-3-(5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколинамидо)пиперидин-1-карбоксилат (7 мг, 0,011 ммоль, 33% выход). Затем это промежуточное соединение (7 мг, 0,011 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-896136 (6,1 мг, 91% выход).
[0276] Пример ER-896137 получали из соединения D-5 (15 мг, 0,033 ммоль) и коммерчески доступного пропан-2-амина (8 мг, 0,134 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать желаемый продукт ER-896137 (5 мг, 31% выход).
[0277] 4-(5-(3,4-Диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиновую кислоту получали таким образом, который подобен таковому из примера D-5 (101 мг, 29% выход).
[0278] Пример ER-897034 получали в две стадии из 4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиновой кислоты (25 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-пиперазин-1-карбоксилата (31 мг, 0,167 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение трет-бутил- 4-(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиноил)пиперазин-1-карбоксилат (15 мг, 0,024 ммоль, 44% выход). Затем это промежуточное соединение (13 мг, 0,021 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-897034 (12,2 мг, 98% выход).
[0279] Пример ER-897036 получали в две стадии из 4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиновой кислоты (25 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (33 мг, 0,167 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение (3S)-трет-бутил-3-(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколинамидо)пиперидин-1-карбоксилат (15 мг, 0,024 ммоль, 43% выход). Затем это промежуточное соединение (13 мг, 0,021 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-897036 (12 мг, 96% выход).
[0280] Пример ER-897037 получали в две стадии из 4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколиновой кислоты (25 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-4-аминопиперидин-1-карбоксилата (33 мг, 0,167 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера D-6, чтобы получать промежуточное соединение трет-бутил-4-(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиколинамидо)пиперидин-1-карбоксилат (14 мг, 0,022 ммоль, 40% выход). Затем это промежуточное соединение (13 мг, 0,021 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-897560, чтобы получать желаемый продукт ER-897037 (11 мг, 90% выход).
[0281] Примеры синтеза - раздел F
Figure 00000109
[0282] Соединение F-1 (9,84 г, 77% выход) получали с использованием 4-(5-амино-1H-пиразол-3-ил)бензонитрила (соединение A-2; 5,31 г, 31,4 ммоль) и коммерчески доступного l-(3,4-диметоксифенил)-4,4-дифторбутан-1,3-диона (8,1 г, 31,4 ммоль) таким образом, который подобен таковому для соединения A-7. MS (M+H+) 407,3.
Figure 00000110
[0283] Соединение F-2 (9,8 г, 99% выход) получали восстановлением F-1 (9,8 г, 24,1 ммоль) с помощью NaBH4 таким образом, который подобен таковому для соединения A-8.
[0284] 1H ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ м.д. 2,17-2,39 (м, 2H) 3,83-3,85 (м, 3H) 3,85-3,88 (м, 3H) 4,47 (дд, J=10,87, 2,29 Гц, 1H) 4,66-4,81 (м, 1H) 5,86 (с, 1H) 6,60 (т, J=55,00 Гц, 1H) 6,97 (д, J=7,97 Гц, 1H) 7,01-7,07 (м, 1H) 7,10 (с, 1H) 7,66-7,76 (м, 2H) 7,91 (д, J=8,13 Гц, 2H). MS (M+H)+ 411,7.
Figure 00000111
[0285] Соединение F-3 (9,4 г, 100% выход) получали с помощью гидролиза F-1 (8,94 г, 21,8 ммоль), используя водный NaOH, таким образом, который подобен таковому для соединения A- 9.
[0286] 1H ЯМР (400 МГц, метанол-d4) м.д. 2,21-2,37 (м, 2H) 3,80-3,82 (м, 4H) 3,84 (с, 3H) 4,46 (дд, J=10,83, 2,56 Гц, 1H) 6,60 (т, J=55,00 Гц, 1H) 6,95 (д, J=8,28 Гц, 1H) 7,00-7,04 (м, 1H) 7,08 (д, J=1,91 Гц, 1H) 7,81 (м, J=8,35 Гц, 2H) 8,00 (м, J=8,39 Гц, 2H). MS (M+H+) 431,4.
Figure 00000112
[0287] В 5-мл пробирку с винтовой крышкой добавляли соединение F-3 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойную кислоту (1,99 г, 4,64 ммоль), трет-бутил-пиперазин-1-карбоксилат (1,05 г, 5,61 ммоль), HATU (2,14 г, 5,62 ммоль), DMF (10,0 мл) и основание Хунига (0,815 мл, 4,67 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 30°C в течение ночи. Смесь разводили этилацетатом, промывали водой, промывали 0,1 Н водной соляной кислотой, промывали водным бикарбонатом натрия, промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением твердого вещества коричневого цвета. Материал очищали посредством флэш-хроматографии с градиентом гептан:этилацетат 0-90%. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали в вакууме с получением твердого вещества грязно-белого цвета. Затем получаемое твердое вещество растворяли в этаноле (10,0 мл) и 4,0 M HCl в диоксане (10,0 мл, 40,00 ммоль), и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Затем смесь концентрировали в вакууме с получением соединения ER-894466 в виде твердого вещества желтого цвета (1,91 г, 77% выход).
Figure 00000113
[0288] Хиральное разделение ER-894466 (1,91 г, 3,59 ммоль) с помощью ВЭЖХ таким образом, который подобен ER-890044, предоставляло ER-895302 (538 мг, 56% выход, >95% ee) и ER-895303 (671 мг, 70% выход, >95% ee).
Figure 00000114
[0289] Соединение F-4 7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ол (30,6 г, 95 ммоль, 95% выход) получали с помощью 5-амино-1H-пиразол-3-ола (9,91 г, 100 ммоль) и 1-(3,4-диметоксифенил)-4,4-дифторбутан-1,3-диона (25,8 г, 100 ммоль) таким образом, который подобен таковому для соединения A-14.
[0290] 1H ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ м.д. 3,87-3,90 (м, 3H) 3,90-3,93 (м, 3H) 5,94 (с, 1H) 7,06 (д, J=8,39 Гц, 1H) 7,29 (т, J=53,00 Гц, 1H) 7,47 (с, 1H) 7,67 (дд, J=8,43, 1,45 Гц, 1H) 7,77 (д, J=1,75 Гц, 1H). MS (M+H+) 323,3.
Figure 00000115
[0291] В суспензию соединения F-4 7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ола (3,21 г, 9,99 ммоль) в DMF (5,00 мл) и THF (25,0 мл) при 0°C добавляли гидрид натрия (0,480 г, 11,99 ммоль) маленькими частями. Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин. 1,1,1-Трифтор-N-фенил-N-(трифторметил)сульфонилметансульфонамид (4,28 г, 11,99 ммоль) добавляли малыми частями и смеси позволяли достигать КТ. Через 1 час реакционную смесь выливали в 0,1 Н раствор HCl, что приводило к образованию осадка белого цвета, который фильтровали и промывали водой. Неочищенный продукт суспендировали в IPA, нагревали до ~70°C и охлаждали до КТ. Получаемый осадок белого цвета промывали дополнительным IPA и сушили при пониженном давлении с получением соединения F-5 7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-илтрифторметансульфоната в виде твердого вещества белого цвета (2,85 г, 6,29 ммоль, 62,9% выход).
[0292] 1H ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ м.д. 3,89 (с, 3H) 3,92 (с, 3H) 6,70 (с, 1H) 7,07 (д, J=8,50 Гц, 1H) 7,17-7,27 (м, 2H) 7,29-7,38 (м, 1Н) 7,78 (дд, J=8,51, 2,14 Гц, 1H) 7,82-7,89 (м, 2H). MS (M+H+) 454,4.
Figure 00000116
[0293] Соединение F-6 (27,2 г, 77% выход) получали восстановлением соединения F-5 (35,0 г, 77,2 ммоль) с помощью NaBH4 таким образом, который подобен таковому для соединения A-16.
[0294] 1H ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ м.д. 2,14-2,32 (м, 2H) 3,79 (с, 3H) 3,81 (с, 3H) 4,44 (дд, J=11,06, 2,67 Гц, 1H) 4,53-4,66 (м, 1H) 5,28 (с, 1H) 6,40 (т, J=2,49 Гц, 1H) 6,91-6,94 (м, 1H) 6,96-7,00 (м, 1H) 7,03 (д, J=1,94 Гц, 1H). MS (M+H+) 458,1.
[0295] Пример ER-895088-01 получали из соединения ER-895305 (25,0 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-метилпиперазин-1-карбоксилата (35,2 мг, 0,177 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (9,3 мг, 29%).
[0296] Пример ER-895116 получали из соединения ER-895305 (25,0 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-пирролидин-3-илкарбамата (36,5 мг, 0,196 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (16 мг, 52%).
[0297] Пример ER-895089 получали из соединения ER-895305 (25,0 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил пирролидин-3-илкарбамата (36,7 мг, 0,197 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (7,1 мг, 23%).
[0298] Пример ER-895090 получали из соединения ER-895305 (25,0 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного (1S,4S)-трет-бутил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилата (38,6 мг, 0,196 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (18,1 мг, 57%).
[0299] Пример ER-895115 получали из соединения ER-895305 (25,6 мг, 0,060 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилата (31,5 мг, 0,169 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (3,5 мг, 11%).
[0300] Пример ER-895745 получали из соединения ER-895305 (26,2 мг, 0,061 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-карбоксилата (32,9 мг, 0,155 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (18,1 мг, 53%).
[0301] Пример ER-895091-01 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-пиперазин-1-карбоксилата (21,0 мг, 0,113 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (2,5 мг, 8%).
[0302] Пример ER-895092 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-4-аминопиперидин-1-карбоксилата (22,0 мг, 0,110 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (5,2 мг, 16%).
[0303] Пример ER-895093 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (22,0 мг, 0,110 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (10,3 мг, 32%).
[0304] Пример ER-895094 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (22,0 мг, 0,110 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (7,4 мг, 23%).
[0305] Пример ER-895096 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (2S,5R)-трет-бутил-2,5-диметилпиперазин-1-карбоксилата (24,0 мг, 0,113 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (13,9 мг, 43%).
[0306] Пример ER-895097 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилата (21,0 мг, 0,113 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (17,3 мг, 56%).
[0307] Пример ER-895098 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилата (21,0 мг, 0,113 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (18,5 мг, 60%).
[0308] Пример ER-895101 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (1S,4S)-трет-бутил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилата (22,0 мг, 0,112 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (9 мг, 28%).
[0309] Пример ER-895099 получали из соединения 4-(7- (дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-3-аминоазетидин-1-карбоксилата (19,0 мг, 0,110 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-895080. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (14,1 мг, 41%).
[0310] Пример ER-895102 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-пиперазин-1-карбоксилата (21,0 мг, 0,113 ммоль) таким образом, который подобен таковому для примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (17,2 мг, 56%).
[0311] Пример ER-895104 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (22,0 мг, 0,110 ммоль) таким образом, который подобен таковому для примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (17,1 мг, 54%).
[0312] Пример ER-895105 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (22,0 мг, 0,110 ммоль) таким образом, который подобен таковому для примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (15,8 мг, 50%).
[0313] Пример ER-895106 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-метилпиперазин-1-карбоксилата (22,0 мг, 0,110 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (14,9 мг, 47%).
[0314] Пример ER-895107 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (2S,5R)-трет-бутил-2,5-диметилпиперазин-1-карбоксилата (24,0 мг, 0,112 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (14,2 мг, 44%).
[0315] Пример ER-895109 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилата (21,0 мг, 0,113 ммоль) таким образом, который подобен таковому для примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (17,7 мг, 57%).
[0316] Пример ER-895112 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (1S,4S)-трет-бутил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилата (22,0 мг, 0,111 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (14,4 мг, 46%).
[0317] Пример ER-895111 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-2,6-диазаспиро[3.3]гептан-2-карбоксилата (22,0 мг, 0,111 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-895080. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (22,7 мг, 63%).
[0318] Пример ER-895731 получали из соединения 3-(7- (дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойной кислоты (25,0 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-пиперазин-1-карбоксилата (32,8 мг, 0,176 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (22,1 мг, 70%).
[0319] Пример ER-895732 получали из соединения 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойной кислоты (25,0 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-4-аминопиперидин-1-карбоксилата (31,0 мг, 0,155 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (22 мг, 70%).
[0320] Пример ER-895733 получали из соединения 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойной кислоты (25,0 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (34,0 мг, 0,170 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (26,5 мг, 85%).
[0321] Пример ER-895734 получали из соединения 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойной кислоты (25,0 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (36,3 мг, 0,181 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (23,4 мг, 75%).
[0322] Пример ER-895739 получали из соединения 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойной кислоты (25,0 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилата (37,7 мг, 0,202 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (22,9 мг, 73 %).
[0323] Пример ER-895740 получали из соединения 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойной кислоты (25,0 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилата (34,8 мг, 0,187 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (23,1 мг, 73%).
[0324] Пример ER-895744 получали из соединения 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойной кислоты (25,0 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-карбоксилата (26,9 мг, 0,127 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (26,5 мг, 82%).
[0325] Пример ER-895741 получали из соединения 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензойной кислоты (25,0 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-3-аминоазетидин-1-карбоксилата (30,1 мг, 0,175 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-895080. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (5,5 мг, 16%).
[0326] Пример ER-895718 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-4-аминопиперидин-1-карбоксилата (45,4 мг, 0,227 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (21,4 мг, 68%).
[0327] Пример ER-895719 получали из соединения 4-(7- (дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил3-аминопиперидин-1-карбоксилата (29,8 мг, 0,149 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (21,6 мг, 69%).
[0328] Пример ER-895720 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (28,6 мг, 0,143 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (21,7 мг, 69%).
[0329] Пример ER-895721 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-метилпиперазин-1-карбоксилата (31,1 мг, 0,155 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (20,2 мг, 64%).
[0330] Пример ER-895722 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-метилпиперазин-1-карбоксилата (41,2 мг, 0,206 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (21 мг, 67%).
[0331] Пример ER-895723 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (2S,5R)-трет-бутил-2,5-диметилпиперазин-1-карбоксилата (34,1 мг, 0,159 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (20,5 мг, 64%).
[0332] Пример ER-895725 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилата (43,7 мг, 0,235 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (19,8 мг, 65%).
[0333] Пример ER-895726 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-аминопирролидин-1-карбоксилата (31,0 мг, 0,167 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (20,6 мг, 67%).
[0334] Пример ER-895729 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (1S,4S)-трет-бутил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилата (29,9 мг, 0,151 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (19,6 мг, 62%).
[0335] Пример ER-895730 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-карбоксилата (28,9 мг, 0,136 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (23,9 мг, 74%).
[0336] Пример ER-895755 получали из соединения 4-(7- (дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензойной кислоты (25,5 мг, 0,058 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-пиперазин-1-карбоксилата (27,9 мг, 0,150 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (28,3 мг, 89%).
[0337] Пример ER-895727 получали из соединения 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензойной кислоты (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-3-аминоазетидин-1-карбоксилата (37,0 мг, 0,215 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-895080. Очистка помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (22,3 мг, 65%).
[0338] Пример ER-896059 получали из соединения ER-895435 (10,0 мг, 0,023 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-4-аминопиперидин-1-карбоксилата (17,8 мг, 0,089 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (11,2 мг, 87%).
[0339] Пример ER-896060 получали из соединения ER-895435 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (19,3 мг, 0,096 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (12,3 мг, 95%).
[0340] Пример ER-896061 получали из соединения ER-895435 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (16,9 мг, 0,084 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (12,2 мг, 94%).
[0341] Пример ER-896062 получали из соединения ER-895435 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-метилпиперазин-1-карбоксилата (23,9 мг, 0,119 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (10,7 мг, 83%).
[0342] Пример ER-896063 получали из соединения ER-895435 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (R)-трет-бутил-3-метилпиперазин-1-карбоксилата (20,5 мг, 0,102 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (10,9 мг, 84%).
[0343] Пример ER-896064 получали из соединения ER-895435 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (2S,5R)-трет-бутил-2,5-диметилпиперазин-1-карбоксилата (17,2 мг, 0,080 ммоль) таким образом, который подобен таковому для примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (10,3 мг, 78%).
[0344] Пример ER-896067 получали из соединения ER-895435 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного (1S,4S)-трет-бутил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилата (15,2 мг, 0,077 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (9,9 мг, 77%).
[0345] Пример ER-896068 получали из соединения ER-895435 (25,0 мг, 0,056 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-карбоксилат (17,3 мг, 0,081 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-894463. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (12,3 мг, 93%).
[0346] Пример ER-896071 получали из соединения ER-895435 (25,9 мг, 0,060 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-3-(аминометил)азетидин-1-карбоксилата (30,4 мг, 0,163 ммоль) таким образом, который подобен таковому для примера ER-895080. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала желаемый продукт (18,6 мг, 51%).
[0347] Примеры синтеза - раздел G
[0348] Получение ER-893993
Figure 00000117
[0349] В 500-мл колбу загружали 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (10,78 г, 42 ммоль), 5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-илтрифторметансульфонат (10,0 г, 21 ммоль), ацетат калия (10,41 г, 106 ммоль) и 1,4-диоксан (100 мл). Реакционную смесь дегазировали азотом в течение 15 минут. Добавляли комплекс дихлорида 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(II) и дихлорметана (4,33 г, 5,3 ммоль) и смесь герметизировали и перемешивали в течение 3 часов при 80°C. Реакционную смесь охлаждали при комнатной температуре и разделяли между EtOAc (1000 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (200 мл). Фазы разделяли, и водную фазу снова экстрагировали 2× с использованием EtOAc (200 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (200 мл). Органический слой сушили безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный материал растворяли в EtOAc (500 мл), добавляли гептан (500 мл), и твердые примеси черного цвета удаляли с помощью фильтрования. Фильтрат, содержащий желаемый продукт, концентрировали при пониженном давлении, суспендировали в 150 мл IPA, нагревали при 70°C в течение 30 минут и затем охлаждали при комнатной температуре. Осадок зеленого цвета отфильтровывали, промывали IPA и сушили под вакуумным насосом. 5-(3,4-Диметоксифенил)-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин (4,50 г, 10,02 ммоль, 47,2% выход).
Figure 00000118
[0350] В 25-мл колбе и под атмосферой азота в раствор трет-бутил-2-метил-4-оксопиперидин-1-карбоксилата (558 мг, 2,6 ммоль) и 1,1,1-трифтор-N-фенил-N-(трифторметил)сульфонилметансульфонамида (1869 мг, 5,2 ммоль) в безводном THF (5 мл) при -78°C добавляли 1,0 М LiHMDS в THF (5,23 мл, 5,2 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом позволяя медленно нагреваться при комнатной температуре. Реакцию гасили насыщенным NaHCO3. Затем смесь экстрагировали 3× с использованием MTBE. Объединенные органические слои сушили сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Смесь региоизомеров (трет-бутил-6-метил-4-(((трифторметил)сульфонил)окси)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат и трет-бутил-2-метил-4-(((трифторметил)сульфонил)окси)-5,6-дигидропиридин-1-(2H)-карбоксилат) получали в виде масла бледно-желтого цвета (397 мг, 44% выход).
Figure 00000119
[0351] В 5-10-мл микроволновый сосуд загружали 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин (650 мг, 1,45 ммоль), трет-бутил-2-метил-4-(((трифторметил)сульфонил)окси)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат (смесь с трет-бутил-6-метил-4-(((трифторметил)сульфонил)окси)-5,6-дигидропиридин-1(2H)- карбоксилатом, всего 396 мг, 1,15 ммоль), карбонат калия (792 мг, 5,7 ммоль), воду (2,0 мл) и THF (4,5 мл). Реакционную смесь дегазировали азотом в течение 15 минут. Добавляли комплекс дихлорида 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(II) и дихлорметана (234 мг, 0,29 ммоль) и смесь шкалировали и перемешивали в течение ночи при 90°C. Реакционную смесь охлаждали при комнатной температуре и концентрировали. Неочищенный продукт очищали на силикагеле (Column Interchim 40 г, 30 мкМ), элюируя с использованием 12-100% EtOAc/гептана. Смесь региоизомеров (трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-метил-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат и трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-6-метил-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат) получали в виде твердого вещества желтого цвета (142 мг, 24% выход).
[0352] Синтез ER-896993
Figure 00000120
[0353] Тетрагидроборат натрия (10,94 мг, 0,29 ммоль) медленно добавляли в суспензию трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-метил-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (смесь с региоизомером трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-6-метил-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилатом, всего 50 мг, 0,096 ммоль) в этаноле (1,0 мл) при комнатной температуре. Смесь нагревали до 80°C в течение 60 минут. Добавляли этилацетат. Смесь последовательно промывали насыщенным водным раствором NH4Cl и затем солевым раствором.
[0354] Органический слой сушили с использованием безводного сульфата натрия, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали на силикагеле (Column Interchim 25 г, 30 мкМ), элюируя с использованием 12-100% EtOAc/гептана. Смесь региоизомеров (трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-метил-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат и трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-6-метил-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат) получали в виде твердого вещества белого цвета (38 мг, 75% выход).
[0355] Трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-метил-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат (смесь с региоизомером трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-6-метил-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилатом, всего 34 мг, 0,065 ммоль) растворяли в этаноле (0,5 мл) и 4,00 М HCl в диоксане (0,5 мл) и смесь перемешивали при 40°C в течение 1 часа. Добавляли 1 мл толуола. Реакционную смесь концентрировали.
[0356] Продукт сушили под вакуумным насосом с получением 29 мг конечного продукта в виде соли HCl (смесь региоизомеров 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(6-метил-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина гидрохлорида и 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2-метил-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина гидрохлорида) (ER-896993).
[0357] Синтез ER-896994
Figure 00000121
[0358] Трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-метил-5,6- дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат (смесь с региоизомером трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-6-метил-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилатом, всего 60 мг, 0,116 ммоль) растворяли в метаноле (2,5 мл). Раствор обрабатывали водородом в течение 2,5 ч при комнатной температуре с использованием H-Cube (полный H2, 1 мл/мин, малый размер (30 мм) 10% палладий на углероде картридж). Добавляли 1 мл толуола. Растворитель концентрировали. Неочищенный продукт очищали на силикагеле (Column Interchim 25 г, 30 мкМ), элюируя с использованием 12-100% EtOAc/гептана, с получением трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-метилпиперидин-1-карбоксилата (36 мг, 0,069 ммоль, 59% выход) в виде твердого вещества белого цвета.
[0359] Трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-метилпиперидин-1-карбоксилат (29 мг, 0,055 ммоль) растворяли в этаноле (0,5 мл) и 4,00 М HCl в диоксане (0,5 мл) и смесь перемешивали при 40°C в течение 1 часа. Добавляли 1 мл толуола. Реакционную смесь концентрировали. Продукт сушили под вакуумным насосом с получением 25 мг конечного продукта в виде соли HCl (5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2-метилпиперидин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина гидрохлорид, ER-896994).
[0360] Пример ER-897090
[0361] Пример ER-897090 получали из 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидина (507 мг, 1,129 ммоль) и трет-бутил-4-(((трифторметил)сульфонил)окси)-2,3,6,7-тетрагидро-1H-азепин-1-карбоксилата (300 мг, 0,869 ммоль), полученного из коммерчески доступного трет-бутил-4-оксоазепан-1-карбоксилата таким образом, который подобен таковому для ER-896993 (раздел G), за тем исключением, что стадию снятия защитных групп осуществляли таким образом, который подобен таковому для ER-887084 (раздел B), чтобы получать ER-897090 (96 мг, 26% выход). LC-MS: Rt 1,49 мин, (M+1)+ 423,06 при условиях II.
[0362] Соединение ER-897090 (94 мг, 0,224 ммоль) разделяли на составляющие его энантиомеры таким образом, который подобен таковому для ER-890044 (раздел A), с получением один из изомеров ER-897212 (17 мг, 18% выход).
[0363] Пример ER-897130 получали из 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидина (493 мг, 1,097 ммоль) и трет-бутил-3-(((трифторметил)сульфонил)окси)-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксилата (174 мг, 0,548 ммоль), полученного из коммерчески доступного трет-бутил-3-оксопирролидин-1-карбоксилата таким образом, который подобен таковому для ER-896993 (раздел G) за тем исключением, что стадию снятия защитных групп осуществляли таким образом, который подобен таковому для ER-887084 (раздел B), с получением ER-897130 (68 мг, 31% выход).
[0364] Пример ER-897142 получали из 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидина (489 мг, 1,089 ммоль) и 4-((трет-бутоксикарбонил)амино)циклогес-1-ен-1-илтрифторметансульфоната (188 мг, 0,544 ммоль), полученного из коммерчески доступного трет-бутил-(4-оксоциклогексил)карбамата таким образом, который подобен таковому для ER-896993 (раздел G) за тем исключением, что стадию снятия защитных групп осуществляли таким образом, который подобен таковому для ER-887084 (раздел B), с получением ER-897142 (111 мг, 48% выход). (LC-MS: Rt 1,57 мин, (M+1)+ 423,06 при условиях II)
[0365] Пример ER-897364 и ER-897365
[0366] Соединение ER-897090 (100 мг, 0,237 ммоль) разделяли на составляющие его энантиомеры таким образом, который подобен таковому для ER-890044 (раздел A), с получением ER-897364 (4 мг, 4% выход, >95% ee) и ER-897365 (6,4 мг, 6% выход, >95% ee).
[0367] Пример ER-897547
[0368] Получение трет-бутил-3-метил-4-оксопиперидин-1-карбоксилата
[0369] Раствор 1-бензил-3-метилпиперидин-4-она (1,63 г, 8,018 ммоль) и ди-трет-бутил-дикарбоната (1,925 г, 8,82 ммоль) в 50 мл метанола гидрогенизировали с использованием H-Cube (контролируемый H2 при 50 бар, скорость потока 1,0 мл/мин) с Pd-C картриджем. Реакционную смесь рециркулировали в течение 12 часов. После промывания H-Cube тщательно метанолом, растворитель выпаривали и получаемое масло очищали с помощью хроматографии на силикагеле с получением указанного в заголовке соединения (1,5 г, 88%).
[0370] Пример ER-897547 получали из 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-7-(трифторметил)пиразолол[1,5-a]пиримидина (488 мг, 1,086 ммоль) и трет-бутил-5-метил-4-(((трифторметил)сульфонил)окси)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (250 мг, 0,724 ммоль), полученного из трет-бутил-3-метил-4-оксопиперидин-1-карбоксилата таким образом, который подобен таковому для ER-896993 (раздел G), за тем исключением, что стадию снятия защитных групп осуществляли таким образом, который подобен таковому для ER-887084 (раздел B), с получением ER-897547 (68 мг, 31% выход).
[0371] Пример ER-897597 получали из 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидина (475 мг, 1,058 ммоль) и коммерчески доступного трет-бутил-4-(4-бромфенил)пиперидин-1-карбоксилата (240 мг, 0,705 ммоль) таким образом, который подобен таковому для ER-896993 (раздел G), за тем исключением, что стадию снятия защитных групп осуществляли таким образом, который подобен таковому для ER-887084 (раздел B), с получением ER-897597 (32 мг, 9% выход). LC-MS: Rt 1,72 мин, (M+1)+ 486,95 при условиях II.
[0372] Пример ER-897814 и ER-897815
[0373] Соединение ER-897597 (20 мг, 0,041 ммоль) разделяли на составляющие его энантиомеры таким образом, который подобен таковому для ER-890044 (раздел A), с получением ER-897814 (7 мг, 35% выход, >95% ee) и ER-897815 (3 мг, 15% выход, >95% ee).
[0374] Пример ER-897728
[0375] Получение бензил-9-оксо-3-азаспиро[5,5]ундец-7-ен-3-карбоксилата
[0376] Бензил-4-формилпиперидин-1-карбоксилат (5,17 г, 20,907 ммоль) и моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (0,398 г, 2,091 ммоль) перемешивали в бензоле (30,0 мл, 334,136 ммоль) при 70°C. Добавляли бут-3-ен-2-он (3,76 мл, 41,813 ммоль) и нагревали реакционную смесь с обратным холодильником в течение ночи, при этом удаляя воду с использованием ловушки Дина-Старка. После охлаждения реакционной смеси до КТ, добавляли насыщенный раствор NaHCO3, и органический слой сушили над Na2SO4 и выпаривали. Получаемое масло очищали посредством Biotage (SiO2, 250 г, EtOAc/гептан от 10% до 50%), с получением указанного в заголовке соединения (3,58 г, 11,96 ммоль, 57,2% выход).
[0377] Получение трет-бутил-9-оксо-3-азаспиро[5,5]ундекан-3-карбоксилата
[0378] Раствор бензил-9-оксо-3-азаспиро[5,5]ундец-7-ен-3-карбоксилата (1,26 г, 4,209 ммоль), ди-трет-бутилдикарбоната (1,01 г, 4,63 ммоль) и TEA (1,47 мл, 10,522 ммоль) в 50 мл метанола гидрогенизировали с использованием H-Cube (полный H2, скорость потока 1,0 мл/мин) с Pd-C картриджем. Реакционную смесь рециркулировали в течение 5 часов. После тщательного прорывания H-Cube метанолом, растворитель выпаривали, и получаемое масло очищали с помощью хроматографии на силикагеле с получением указанного в заголовке соединения (681 мг, 61%).
[0379] Пример ER-897728 получали из 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидина (489 мг, 1,089 ммоль) и трет-бутил-9-(((трифторметил)сульфонил)окси)-3-азаспиро[5,5]ундец-8-ен-3-карбоксилата (290 мг, 0,726 ммоль), полученного из трет-бутил-9-оксо-3-азаспиро[5,5]ундекан-3-карбоксилата таким образом, который подобен таковому для ER-896993 (раздел G), за тем исключением, что стадию снятия защитных групп осуществляли таким образом, который подобен таковому для ER-887084 (раздел B), с получением ER-897728 (91 мг, 26% выход). LC-MS: Rt 1,67 мин, (M+1)+ 477,13 при условиях II.
[0380] Пример ER-897851
[0381] Соединение ER-897728 (85 мг, 0,178 ммоль) разделяли на составляющие его энантиомеры таким образом, который подобен таковому для ER-890044 (раздел A), с получением одного из изомеров ER-897851 (28 мг, 33% выход).
[0382] Пример ER-890978 получали из соединения G2 (600 мг, 1,34 ммоль) и коммерчески доступного 4-бром-2-хлорпиридина таким образом, который подобен таковому из примера ER-896993, с получением 2-(2-хлорпиридин-4-ил)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидина (311 мг, 54% выход), после чего следовало восстановление с использованием NaBH4 (осуществляли на 300 мг этого материала). Очистка с помощью хроматографии на силикагеле давала желаемый продукт (277 мг, 92% выход).
[0383] Примеры синтеза - раздел H
[0384] Получение 1: 1-метил-2-(пропан-2-илиден)гидразин
Figure 00000122
[0385] Ацетон (100 мл) обрабатывали по каплям (шприцевой насос) в течение 45 минут N-метилгидразином (20 мл), и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 45 минут. Реакционный раствор после этого нагревали при 55°C в течение дополнительных 15 минут, охлаждали до комнатной температуры, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с помощью роторного испарителя при 40°C или менее. Затем неочищенный продукт очищали посредством дистилляции при 110-122°C с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (14,2 г, 43,9%).
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 1,58 (с, 3H), 1,72 (с, 3H), 2,63 (с, 3H), 5,21 (уш.с, 1H).
[0386] Получение 2: 3-(этоксиметилен)пентан-2,4-дион
Figure 00000123
[0387] Раствор ацетилацетона (40 мл), этилортоформиата (95,4 мл) и уксусного ангидрида (54,2 мл) нагревали с обратным холодильником (150°C) в течение 1 часа. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и непосредственно подвергали колоночной флэш-хроматографии (E.Merck силикагель (~120 г); элюент: 100% EtOAc, после чего следовал 5% EtOH в EtOAc). Концентрирование фракций, содержащих чистый продукт, с использованием роторного испарителя при 40°C давало указанное в заголовке соединение в виде вязкого масла темно-красного цвета (10,4 г, 17,0%).
[0388] 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 1,36 (т, 3H), 2,28 (с, 3H), 2,35 (с, 3H), 4,22 (кв., 2H), 7,67 (с, 1H).
[0389] Получение 3: 3-((1-метил-2-(пропан-2-илиден)гидразинил)метилен)пентан-2,4-дион
Figure 00000124
[0390] 3-(Этоксиметилен)пентан-2,4-дион (получение 2, 8,6 г) растворяли в простом эфире (30 мл) и охлаждали до 0°C. Реакционный раствор после этого медленно обрабатывали 1-метил-2-(пропан-2-илиден)гидразином (получение 1, 4,8 г) по каплям в течение 5 минут и затем нагревали и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционный раствор очищали непосредственно посредством колоночной флэш-хроматографии (Biotage Quad 25; элюент: 20% EtOH в EtOAc) с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества светло-красного цвета (9,1 г, 84,0%).
[0391] 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 1,82 (с, 3H), 1,89 (с, 3H), 2,05 (с, 6H), 3,07 (с, 3H), 7,40 (с, 1Н).
[0392] Получение 4: 1-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)этанон
Figure 00000125
[0393] 3-((1-Метил-2-(пропан-2-илиден)гидразинил)метилен)пентан-2,4-дион (получение 3, 9,1 г) растворяли в этаноле (20 мл) и обрабатывали 1 М хлороводородом в воде (20 мл). Реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. После этого реакционный раствор концентрировали под вакуумом с использованием роторного испарителя до общего объема приблизительно 20 мл. Реакционный раствор после этого обрабатывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (45 мл) и экстрагировали метиленхлоридом (4×50 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме, что давало указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества светло-оранжевого цвета (6,2 г, 97%).
[0394] 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 2,37 (с, 3H), 2,45 (с, 3H), 3,84 (с, 3H), 7,75 (с, 1Н).
[0395] Получение 5: 1-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-4,4,4-трифтор-3-гидроксибут-2-ен-1-он
Figure 00000126
[0396] 1-(1,3-Диметил-1H-пиразол-4-ил)этанон (получение 4, 4,46 г) растворяли в метаноле (21 мл) и добавляли 25% метоксид натрия в метаноле (11,07 мл). Смесь перемешивали в течение 5 минут и добавляли уксусную кислоту, трифтор-, сложный этиловый эфир (7,701 мл). Смесь нагревали с обратным холодильником при 75°C и перемешивали в течение 19 часов. Реакционный раствор очищали непосредственно посредством колоночной флэш-хроматографии (Biotage Quad 25; элюент: 100% EtOAc, после чего следовал 5% EtOH в EtOAc и затем 20% EtOH в EtOAc), что давало указанное в заголовке соединение (таутомер) в виде пенного твердого вещества светло-красного цвета (7,0 г, 92,3%).
[0397] 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 2,33 (с, 3H), 3,76 (с, 3H), 6,10 (с, 1H), 7,84 (с, 1Н).
[0398] Получение 6: 3-бром-1H-пиразол-5-амин
Figure 00000127
[0399] В раствор 3,4,5-трибромпиразола (60 г) в уксусной кислоте (900 мл) при 10°C добавляли азотную кислоту (21 мл) (90%, дымящуюся). Затем добавляли уксусный ангидрид (300 мл) в течение 20 минут. Реакционный раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 часов. Затем реакционную смесь выливали на лед, что вело к осадку белого цвета. Осадок отфильтровывали и промывали водой (200 мл). Фильтрованный осадок после этого растворяли в толуоле (750 мл), промывали водой (200 мл) и солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия и фильтровали. Затем в раствор толуола добавляли 1H-пиразол, 3,5-диметил (20 г), и раствор нагревали с обратным холодильником в течение 20 минут. Реакционный раствор охлаждали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт растирали с гептаном, и получаемый осадок, который содержал основной продукт, с помощью TLC фильтровали и сушили в вакууме. Неочищенное указанное в заголовке соединение использовали без дополнительной очистки (71,7 мг, 67,6%).
[0400] Это промежуточное соединение, 3,4-дибром-5-нитро-1H-пиразол (69 г), восстанавливали посредством нагревания с обратным холодильником с использованием хлорида олова, дигидрата (135 г) в этилацетате (600 мл) и этаноле (300 мл) при 110°C в течение 45 минут. Гомогенный реакционный раствор желтого цвета охлаждали до комнатной температуры и медленно выливали в энергично перемешиваемый раствор бикарбоната натрия (33 г) в воде (200 мл) и этилацетате (800 мл). В получаемую суспензию добавляли целит (30 г), и эту суспензию фильтровали через слой целита. Отфильтрованный осадок промывали дополнительным этилацетатом (600 мл). После этого органический раствор промывали солевым раствором (200 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта в виде масла оранжевого цвета. Затем неочищенный продукт очищали посредством колоночной флэш-хроматографии (Biotage, Quad 25; элюент: 6% EtOH в метиленхлориде). Это давало указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества светло-бежевого цвета (13,2 г, 32%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 5,20 (м, 3H), 11,60 (уш.с, 1H).
[0401] Получение 7: 2-бром-5-(1-этил-3-метил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин
Figure 00000128
[0402] 1-(1,3-Диметил-1H-пиразол-4-ил)-4,4,4-трифтор-3-гидроксибут-2-ен-1-он (получение 5, 1,7 г) и 3-бром-1H-пиразол-5-амин (получение 6, 1,18 г) в уксусной кислоте (52,61 мл) нагревали при 120°C в герметизированной пробирке в течение ночи. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду со льдом (500 мл), что давало осадок белого цвета. Преципитат фильтровали и промывали обильными количествами воды. Затем осадок собирали и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого порошка (1,9 г, 73,1%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 2,47 (с, 3H), 3,79 (с, 3H), 6,95 (с, 1Н), 7,73 (с, 1H), 8,67 (с, 1H).
[0403] Получение 8: 2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин
Figure 00000129
[0404] Тетрагидроборат натрия (472 мг) медленно добавляли в суспензию 2-бром-5-(1-этил-3-метил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидина (получение 7, 1,8 г) в этаноле (20 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Затем реакционный раствор очень медленно добавляли в охлажденную льдом 1 Н HCl до тех пор, пока не достигали pH=2,0, чтобы гасить любой оставшийся тетрагидроборат натрия. Затем раствор концентрировали под глубоким вакуумом для того, чтобы удалять большую часть этанола. Насыщенный водный раствор бикарбоната натрия после этого медленно добавляли в кислый раствор до тех пор, пока не достигали нейтрального pH (7,0) и не происходило образование осадка белого цвета. Преципитат отфильтровывали и промывали водой (200 мл) и простым эфиром (20 мл). Осадок белого цвета собирали и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде порошка белого цвета (1,36 г, 74,7%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 2,00 (м, 1Н), 2,09 (с, 3H), 2,30 (м, 1H), 3,67 (с, 3H), 4,34 (м, 1H), 5,15 (м, 1Н), 5,31 (с, 1H), 6,69 (с, 1H), 7,63 (с, 1H).
[0405] Получение 9: (5S,7R)-2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин
Figure 00000130
[0406] Рацемический 2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин (1,5 г, 4,1 ммоль, получение 8) растворяли в метаноле (35 мл) и мутный раствор мягко нагревали, предоставляя прозрачный раствор. Затем раствор фильтровали через воронку Бюхнера средней пористости. Прозрачный фильтрат непосредственно использовали для хиральной ВЭЖХ-очистки. 1 мл этого раствора загружали на колонку Chiralcel OD 2,1 см × 25 см и элюировали с использованием подвижной фазы, содержащей изопропиловый спирт и метанол (соотношение 1:1) при скорости потока 15 мл/мин. Два (R и S) энантиомера собирали отдельно. Выполняли 27 таких инъекций, и объединенные фракции чистых (R и S) энантиомеров концентрировали при пониженном давлении. Указанное в заголовке соединение выделяли в виде белого порошка (0,71 г, 1,95 ммоль, >95% ee).
[0407] Получение 10: (5R,7S)-2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин
Figure 00000131
[0408] Рацемический 2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин (1,5 г, 4,1 ммоль, получение 8) растворяли в метаноле (35 мл) и мутный раствор мягко нагревали, предоставляя прозрачный раствор. Затем раствор фильтровали через воронку Бюхнера средней пористости. Прозрачный фильтрат непосредственно использовали для хиральной ВЭЖХ-очистки. 1 мл этого раствора загружали на колонку Chiralcel OD 2,1 см × 25 см и элюировали с использованием подвижной фазы, содержащей изопропиловый спирт и метанол (соотношение 1:1) при скорости потока 15 мл/мин. Два (R и S) энантиомера собирали отдельно. Осуществляли 27 таких инжекций и объединенные фракции чистых (R и S) энантиомеров концентрировали при пониженном давлении. Указанное в заголовке соединение выделяли в виде порошка белого цвета (0,71 г, 1,95 ммоль, >95% ee).
[0409] Пример ER-889996:
[0410] В 5-мл сосуд с винтовой крышкой добавляли 4-(пиперазин-1-карбонил)фенилбороновую кислоту, пинаколовый эфир (51,0 мг, 0,161 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) в 1,4-диоксане (0,075 М, 90 мкл), раствор 2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7- тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина (25,0 мг, 0,069 ммоль, получение 8) в 1,4-диоксане (450 мкл) и 2 М карбонат натрия в воде (70 мкл). Реакционный сосуд продували азотом и герметизировали. Сосуд встряхивали и нагревали в алюминиевом блоке при 85°C в течение 40 ч. В смесь добавляли 1,0 мл насыщенного водного бикарбоната натрия, и затем смесь экстрагировали этилацетатом (2×2,0 мл). Объединенные органические слои концентрировали в вакууме. Остающийся остаток очищали посредством LC/MS в соответствии со способом. Это давало указанное в заголовке соединение в виде белого порошка (7,8 мг, 24,0%).
[0411] Пример ER-889862 получали из 2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина (40,1 мг, 0,11 ммоль, получение 8) и коммерчески доступной изохинолин-5-илбороновой кислоты (2,5 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-889996. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала указанное в заголовке соединение в виде порошка белого цвета (7,5 мг, 17%).
[0412] Пример ER-890007 получали из 2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина (25,0 мг, 0,069 ммоль, получение 8) и коммерчески доступной 8-метилхинолин-5-илбороновой кислоты (2,5 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-889996. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала указанное в заголовке соединение в виде порошка белого цвета (12,2 мг, 42%).
[0413] Пример ER-892900 получали из 2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина (23,0 мг, 0,063 ммоль, получение 8) и коммерчески доступной 1,4-диметил-1H-индазол-5-илбороновой кислоты (2,5 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-889996. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала указанное в заголовке соединение в виде порошка белого цвета (7,7 мг, 28%).
[0414] Пример ER-890066 получали из 2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина (25,0 мг, 0,069 ммоль, получение 8) и коммерчески доступной 2-метил-2H-индазол-5-илбороновой кислоты (2,5 экв.) таким образом, который подобен таковому из примера ER-889996. Очистка с помощью LCMS, с использованием условий III для ВЭЖХ, давала указанное в заголовке соединение в виде порошка белого цвета (0,2 мг, 1%).
[0415] Пример ER-889550
[0416] Герметизированную пробирку загружали 2-бром-5-(1-этил-3-метил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидином (40 мг, 0,11 ммоль, получение 7), 4-(N-этиламинокарбонил)фенилбороновой кислотой (73,2 мг, 0,38 ммоль), карбонатом калия (76,8 мг, 0,56 ммоль), водой (0,559 мл) и тетрагидрофураном (0,838 мл). Реакционную смесь перемешивали, при этом дегазируя азотом, в течение 15 минут. Добавляли комплекс [1,1’-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(II) с дихлорметаном (1:1) (22,7 мг, 0,03 ммоль) и реакционную смесь герметизировали и нагревали при 95°C в течение 16 часов. Неочищенную реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем очищали непосредственно колоночной флэш-хроматографией (Biotage Quad 25; элюент: 100% EtOAc). Это давало 4-(5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a|пиримидин-2-ил)-N-этилбензамид в виде твердого вещества светло-желтого цвета (41,1 мг, 86,4%).
[0417] Тетрагидроборат натрия (6,62 мг) добавляли в суспензию 4-(5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-этилбензамида (30 мг, 0,07 ммоль) в этаноле (1 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционный раствор концентрировали под потоком азота. Затем 1 Н HCl очень медленно добавляли до тех пор, пока борогидрид не расходовался полностью (~2 мл), что вело к осадку коричневого цвета. Водный раствор декантировали и медленно нейтрализовали насыщенным бикарбонатом натрия до тех пор, пока не достигали pH=7,0. Затем нейтрализованный раствор экстрагировали с EtOAc (2×5 мл). Органические экстракты комбинировали и промывали солевым раствором (2 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Это давало указанное в заголовке соединение в виде порошка белого цвета (18,8 мг, 62,1%).
[0418] Пример ER-893888
[0419] В герметизированную пробирку загружали 2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин (30 мг, 0,08 ммоль, получение 8), 4-(уреидо)фенилбороновую кислоту, пинаколовый эфир (73,8 мг, 0,28 ммоль), карбонат калия (56,9 мг, 0,41 ммоль), воду (0,414 мл) и тетрагидрофуран (0,621 мл). Реакционную смесь перемешивали, при этом дегазируя азотом, в течение 15 минут. Добавляли комплекс [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(II) с дихлорметаном (1:1) (16,8 мг, 0,02 ммоль) и реакционную смесь герметизировали и нагревали при 95°C в течение 16 часов. Неочищенную реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем очищали непосредственно колоночной флэш-хроматографией (Biotage Quad 25; элюент: 10% EtOH в EtOAc). Это давало указанное в заголовке соединение в виде порошка светло-желтого цвета (31,1 мг, 90,0%).
[0420] Пример ER-894595 получали из (5S,7R)-2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина (150,0 мг, 0,41 ммоль, получение 9) и коммерчески доступного пинаколового эфира 4-(уреидо)фенилбороновой кислоты (368,8 мг, 1,4 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-893888. Очистка колоночной флэш-хроматографией (Biotage Quad 25; элюент: 10% EtOH в EtOAc) давала указанное в заголовке соединение в виде порошка светло-желтого цвета (141,6 мг, 82,0%).
[0421] Пример ER-894596 получали из (5R,7S)-2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина (150,0 мг, 0,41 ммоль, получение 10) и коммерчески доступного пинаколового эфира 4-(уреидо)фенилбороновой кислоты (368,8 мг, 1,4 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-893888. Очистка колоночной флэш-хроматографией (Biotage Quad 25; элюент: 10% EtOH в EtOAc) давала указанное в заголовке соединение в виде порошка бледно-желтого цвета (144,6 мг, 83,7%).
[0422] Пример ER-893986 получали из (5S,7R)-2-бромо-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина (50,0 мг, 0,14 ммоль, получение 9) и коммерчески доступной 1,4-диметил-1H-индазол-5-бороновой кислоты (89,1 мг, 0,47 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-893888. Очистка колоночной флэш-хроматографией (Biotage Quad 25; элюент: 10% EtOH в EtOAc) давала указанное в заголовке соединение в виде порошка светло-желтого цвета (42,7 мг, 72,4%).
[0423] Пример ER-893987 получали из (5R,7S)-2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина (150,0 мг, 0,41 ммоль, получение 10) и коммерчески доступной 1,4-диметил-1H-индазол-5-бороновой кислоты (267,3 мг, 1,41 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-893888. Очистка колоночной флэш-хроматографией (Biotage Quad 25; элюент: 10% EtOH в EtOAc) давала указанное в заголовке соединение в виде порошка светло-желтого цвета (155,7 мг, 88,0%).
[0424] Пример ER-893990 получали из (5S,7R)-2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина (40,0 мг, 0,11 ммоль, получение 9) и коммерчески доступного пинаколового эфира 2-метилиндазол-5-бороновой кислоты (96,8 мг, 0,38 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-893888. Очистка колоночной флэш-хроматографией (Biotage Quad 25; элюент: 10% EtOH в EtOAc) давала указанное в заголовке соединение в виде порошка светло-желтого цвета (36,9 мг, 80,9%).
[0425] Пример ER-893991 получали из (5R,7S)-2-бром-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина (30,0 мг, 0,082 ммоль, получение 10) и коммерчески доступного пинаколового эфира 2-метилиндазол-5-бороновой кислоты (72,6 мг, 0,28 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-893888. Очистка колоночной флэш-хроматографией (Biotage Quad 25; элюент: 10% EtOH в EtOAc) давала указанное в заголовке соединение в виде порошка светло-желтого цвета (22,0 мг, 64,3%).
[0426] Примеры синтеза - раздел J
Figure 00000132
[0427] Суспензию метил-5-амино-1H-пиразол-3-карбоксилата (1,00 г, 7,086 ммоль) и 1-(3,4-диметоксифенил)-4,4,4-трифторбутан-1,3-диона (2,153 г, 7,794 ммоль) в уксусной кислоте (10 мл, 174,682 ммоль) нагревали с обратным холодильником (при 100°C) в течение 5 часов. Смесь охлаждали при комнатной температуре, добавляли воду, и осадок собирали с помощью фильтрования, промывали водой и сушили под вакуумом с получением J1 в виде твердого вещества зеленого цвета 2,33 г (86% выход).
[0428] Борогидрид натрия (0,446 г, 11,802 ммоль) медленно добавляли в суспензию метил-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-карбоксилата (1,00 г, 2,623 ммоль) в этаноле (25 мл, 428,167 ммоль) при комнатной температуре. Смесь нагревали с обратным холодильником (80°C) в течение 60 минут и осуществляли мониторинг реакции с помощью UPLC/MS. Смесь охлаждали при комнатной температуре. Избыток борогидрида натрия разлагали уксусной кислотой (1,501 мл, 26,226 ммоль). Реакцию выливали в 1,00 M HCl в воде (52,5 мл, 52,451 ммоль) и перемешивали в течение 5 минут. Осадок собирали с помощью фильтрования, промывали водой и сушили на воздухе. Материал очищали посредством флэш-хроматографии с использованием колонки с 25 г диоксида кремния и градиента гептан:этилацетат с получением J2 в виде твердого вещества белого цвета, 507 мг (48% выход).
[0429] В суспензию этил-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-карбоксилата (503 мг, 1,26 ммоль) в этаноле (5,0 мл, 85,633 ммоль) добавляли 4,00 M гидроксид натрия в воде (1,574 мл, 6,298 ммоль). Смесь нагревали при 50°C в течение 1 часа. Смесь охлаждали при комнатной температуре и подкисляли с использованием 1,00 M HCl в воде (12,60 мл, 12,595 ммоль), добавляли воду, и осадок собирали с помощью фильтрования, промывали водой и сушили под вакуумом с получением J3 в виде твердого вещества белого цвета 422 мг (95% выход).
[0430] В 5-мл микроволновый сосуд загружали 5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-карбоновую кислоту (50 мг, 0,135 ммоль), трет-бутил-пиперазин-1-карбоксилат (75 мг, 0,404 ммоль), HATU (205 мг, 0,539 ммоль), N,N-диизопропилэтиламин (0,059 мл, 0,337 ммоль) и DMF (1,0 мл, 12,915 ммоль). Сосуд закрывали крышкой, и смесь перемешивали в течение 6 часов при 40°C. Смесь разводили этилацетатом (5 мл), промывали 2× водой (2 мл), промывали 0,1 Н водной HCl (2 мл), промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (2 мл), промывали солевым раствором (2 мл), сушили сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Соединение очищали посредством хроматографии на Biotage SP4 (Column Interchim 25 г, 30 мкМ) с использованием 12-100% EtOAc/гептана в качестве элюента с получением промежуточного соединения трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-карбонил)пиперазин-1-карбоксилат (38 мг, 0,070 ммоль, 52,3% выход).
[0431] Промежуточное соединение трет-бутил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-карбонил)пиперазин-1-карбоксилат (36 мг, 0,067 ммоль) растворяли в этаноле (0,5 мл, 8,563 ммоль) и 4,00 М HCl в диоксане (0,5 мл, 2,00 ммоль) и смесь перемешивали при 40°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали, и продукт сушили под вакуумным насосом с получением ER-896452 в виде соли HCl (31,0 мг, 0,065 ммоль, 98% выход).
[0432] ER-896453
[0433] Пример ER-896453 получали в две стадии из кислоты J3 (50 мг, 0,135 ммоль) и коммерчески доступного (S)-трет-бутил-3-аминопиперидин-1-карбоксилата (81 мг, 0,404 ммоль) таким образом, который подобен таковому из примера ER-896452, с получением промежуточного соединения (3S)-трет-бутил-3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-карбоксамидо)пиперидин-1-карбоксилат (67 мг, 0,121 ммоль, 90% выход). Это промежуточное соединение (49 мг, 0,089 ммоль) обрабатывали с использованием HCl таким образом, который подобен таковому из примера ER-896452, с получением желаемого продукта ER-896453 (42 мг, 97% выход).
[0434] Определение абсолютной конфигурации ER-885454 и ее корреляция с ER-892887
Figure 00000133
[0435] Абсолютную конфигурацию ER-885454 устанавливали посредством превращения его в 3-йод-производное ER-887006, как показано выше. Структуру ER-887006 определяли посредством рентгеновской дифракции на монокристаллах. Результаты представлены на фиг. 10. Поскольку это преобразование не затрагивает хиральные центры в молекуле, абсолютная конфигурация ER-885454 представляет собой то, что показано. Кроме того, абсолютную конфигурацию ER-892887 устанавливали посредством ее корреляции с соединением C-6, которое в свою очередь коррелировали с ER-885454.
[0436] Общий скрининговый анализ и фармакологическая стратегия.
[0437] Для того чтобы идентифицировать активные и селективные к TLR7/8 соединения, изначально осуществляли скрининг аналогов на клеточной панели репортерных по TLR4, TLR7, и TLR9 линий человека (дополнительные детали см. в материалах и способах). Поднабор соединений, которые эффективны и селективны в отношении TLR7, также тестировали на TLR8 активность (см. ниже таблицу 2) и на TLR7/8 активность в первичном анализе PBMC человека (дополнительные детали см. в материалах и способах). Определенные соединения подвергались кратковременному анализу in vivo (STIV) для определения дозозависимой активности и длительности действия в отношении TLR7 мыши (дополнительные детали см. в материалах и способах). Затем выбранные соединения оценивали по влиянию на одну или несколько из следующих моделей заболевания волчанкой на мышах: BXSB-Yaa, NZBxNZW и пристан:DBA/1.
[0438] Многие соединения, приведенные в качестве вариантов осуществления в настоящем документе, демонстрируют наномолярную активность в отношении как TLR7 человека и мыши, так и TLR8 человека, когда эти рецепторы, экспрессируемые или на клеточных линиях или эмбриональных клетках, стимулируют синтетическим низкомолекулярным соединением (CL097, R848) или лигандами нуклеиновыми кислотами (РНК). Наоборот, большинство соединений, приведенных в качестве вариантов осуществления в настоящем документе, неактивны в отношении пути TLR9.
[0439] Лекарственные средства существующего стандарта лечения волчанки включают противомалярийные средства, такие как хлорохин и гидроксихлорохин (HCQ), для которых показано, что они ингибируют передачу сигнала TLR7/9 in vitro. Это может, по меньшей мере частично, объяснять их эффективность для управления неожиданным обострением волчанки. Однако показано, что варианты осуществления по изобретению предлагают значительно более активное ингибирование. Например, обнаружено, что соединение ER-892887 (показано и рассмотрено выше) приблизительно в 100 раз более активно в отношении РНК-Ig TLR7/8 стимула в сравнении с HCQ (ER-892887 IC50=0,015 мкМ, HCQ IC50~1,5 мкМ). Это подсказывает, что ER-892887 будет обеспечивать значительно более эффективное ингибирование пути TLR7/8 по сравнению с существующим лечением волчанки. Это демонстрируют результаты, представленные ниже в таблице 1.
[0440]
ТАБЛИЦА 1
Активность и избирательность соединения ER-892887 по сравнению с гидроксихлорохином (плаквенил®)
Формат клеток Лиганд Рецептор(ы) Аналит ER-892887 IC50 (мкМ) HCQ2 IC50 (мкМ)
HEK-293 LPS TLR4 человека NFkB-
люцифераза		 >10 N.D.
HEK293 CL097 TLR7 человека NFkB-
люцифераза		 0,010 N.D.
HEK-293 CL097 TLR7 мыши NFkB-
люцифераза		 0,276 N.D.
HEK-293 CL097 TLR8 человека NFkB-
люцифераза		 0,080 N.D.
HEK-293 CpG-ODN TLR9 человека NFkB-
люцифераза		 >10 N.D.
Hu PBMC 1РНК-Ig TLR7/8 человека IL-6 0,015 1-2
Hu PBMC 1РНК-Ig TLR7/8 человека TNFα 0,013 N.D.
Hu PBMC 1РНК-Ig TLR7/8 человека IP-10 0,045 N.D.
Hu PBMC R848 TLR7/8 человека IL-6 0,016 N.D.
Mu селезенка R848 TLR7 мыши IL-6 0,070 N.D.
Hu PBMC Pam3CSK4 TLR1/2 человека IL-6 >10 N.D.
Hu PBMC LPS TLR4 человека IL-6 >10 >10
Hu PBMC CpG-ODN TLR9 человека IL-6 >10 0,15-0,30
Пояснения:
1РНК-Ig = оцРНК, полученная из последовательности стебля/петли мяРНК U1, в комплексе с антителом (дополнительные детали см. в материалах и способах)
2HCQ = гидроксихлорохин
[0441]
ТАБЛИЦА 2
Активность выбранных соединений в отношении TLR8 человека в формате HEK-293 анализа (дополнительные детали см. в материалах и способах)
ER-номер HEK/TLR8 IC50 (мкМ)
ER-885454-00 0,28
ER-885484-00 >10
ER-885690-00 1,49
ER-886434-00 0,30
ER-886622-00 0,07
ER-887534-00 0,41
ER-887734-00 0,14
ER-887738-00 >10
ER-892887-00 0,08
ER-892889-00 0,15
ER-892890-00 1,47
ER-892892-00 0,14
ER-892900-00 0,33
ER-892924-00 0,22
ER-893888-00 0,46
ER-893961-00 0,16
ER-893969-00 0,25
ER-893972-00 0,30
ER-893987-00 0,22
ER-894595-00 0,32
ER-894596-00 0,54
[0442] Кратковременный анализ in vivo (STIV): для того чтобы оценивать активность соединения in vivo в отношении TLR7 мыши, использовали кратковременный анализ in vivo (STIV). В кратком изложении, мышам перорально дозировали соединения и в различные моменты времени после этого подкожно инъецировали агонист R848 для того, чтобы стимулировать TLR7. Затем с помощью ELISA измеряли уровень IL-6 в плазме после R848-стимуляции для того, чтобы оценивать активность соединения и длительность действия. Что важно, с использованием TLR7-дефицитных мышей показано, что образование цитокинов после R848-стимуляции in vitro или in vivo полностью зависит от TLR7. Следовательно, активность соединений в STIV анализе можно уверенно приписывать их модуляции пути TLR7. Одна пероральная доза ER-892887 по 300 мг/кг супрессирует путь R848/TLR7/IL-6 in vivo на 80-90% в течение по меньшей мере 24 часов (см. фиг. 1). Сводка по активности для панели соединений в STIV анализе представлена ниже в таблице 3.
[0443]
Figure 00000134
[0444] Модели заболевания волчанкой на мышах. Три различных модели заболевания волчанкой (BXSB-Yaa, NZBxNZW и пристан) выбирали для POC оценки соединения, поскольку (1) линии BXSB-Yaa и NZB/W самопроизвольно развивают заболевание с полигенной этиологией, демонстрируя многие признаки волчанки человека, такие как ДНК- и РНК-ассоциированная аутореактивность, протеинурия и опосредованные иммунными комплексами нефриты, и (2) положительные результаты валидации мишеней TLR7 и/или TLR9 приведены для всех трех моделей заболевания.
[0445] Сделаны следующие ключевые находки для ER-892887 в моделях заболевания SLE (см. фиг. 1-6 и 12-14):
1) ER-892887 значительно снижал титры антител к дцДНК в TLR7-зависимой BXSB-Yaa модели, что соответствует тенденции в направлении сниженной протеинурии и полного предотвращения начала нефрита 3/4 степени;
2) ER-892887 снижал титры антител к дцДНК в модели NZB/W. Более низкие дозы (33-100 мг/кг) ER-892887 давали преимущество в выживаемости в этой модели, что соответствует сниженной протеинурии и гистологическим признакам гломерулонефрита. ER-892887 задерживал развитие протеинурии в модели NZB/W более эффективно, чем два лекарственных средства, широко используемых при лечении волчанки человека, и был эффективен в комбинации с гидроксихлорохином и преднизолоном;
3) ER-892887 супрессировал различные аутоантитела в модели с пристаном, при особенно сильном воздействии на РНК-связанную реактивность, например, на титры антител к RiboP. Эти изменения соответствовали восстановлению экспрессии генов, управляемой интерфероном цельной крови, и оценке IFN генетической сигнатуры с помощью ER-892887 в этой модели. ER-892887 снижал тяжесть артрита в модели с пристаном и значительно снижал оценку интерфероновой генетической сигнатуры, тогда как три широко используемых способа лечения волчанки не делали этого. ER-892887 также подавлял аутоантитела лучше, чем гидроксихлорохин или преднизолон в тестируемых дозах.
[0446] Сделаны следующие ключевые находки для ER-885454 в моделях заболевания SLE (см. фиг. 7-9):
1) ER-885454 значительно снижал титры антител к дцДНК и антител к Sm/nRNP в TLR7-зависимой BXSB-Yaa модели, что соответствует значительно сниженной протеинурии и полному предотвращению начала нефрита 3/4 степени;
2) ER-885454 снижал антитела к дцДНК, протеинурию и гистологические признаки гломерулонефрита в модели NZB/W.
[0447] Краткое изложение находок: эти данные показывают модерирующий эффект описанных соединений, оказываемый на процессы, вовлеченные в важные аспекты волчанки человека. Иммунные комплексы, содержащие нуклеиновые кислоты, могут управлять продукцией интерферона 1 типа дендритными клетками, и «интерфероновая сигнатура», которая отражает присутствие интерферона и последующую экспрессию регулируемых интерфероном генов, связана с тяжестью заболевания. ER-892887 блокирует цитокиновые ответы на комплексы РНК-Ig in vitro, и подавлял повышающую регуляцию управляемых интерфероном генов в модели с пристаном. Как ER-892887, так и ER-885454 ограничивал образование нескольких специфичностей аутоантител, и подавлял заболевание почек, манифестация которого происходила посредством протеинурии и гистологических изменений. Лечение с использованием ER-892887 значительно увеличивало выживаемость в исследованиях длительного дозирования в самопроизвольной модели NZB/W. Результаты показывают, что эти соединения имеют потенциал для контролирования симптомов и прогрессирования волчанки у пациентов-людей.
[0448] ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ МАТЕРИАЛЫ И СПОСОБЫ
[0449] Фармакологические исследования in vitro: в клетки HEK-293 (ATCC) вводили конструкции, которые стабильно экспрессируют индуцируемый фактором транскрипции NF-κB E-селектиновый (ELAM-1) люциферазный репортер, полученный из плазмиды pGL3 (Promega), содержащей пары оснований от -2241 п.о. до -254 п.о. из промотора гена E-селектина человека (№ доступа NM_000450). Затем в эти клетки впоследствии вводили конструкции для того, чтобы стабильно и индивидуально экспрессировать кДНК полноразмерного ORF TLR4, TLR7 или TLR9 человека. кДНК TLR4 человека (№ доступа NM_138554) клонировали в экспрессирующий вектор pcDNA 3.0 (Invitrogen). В трансфицированные TLR4 клетки также вводили конструкции для того, чтобы экспрессировать корецептор MD-2 человека [кДНК MD-2 (№ доступа NM_015364) клонировали в вектор pEF-BOS], и добавляли 10 нМ растворимого CD14 (R&D Systems) в средах для того, чтобы оптимизировать восприимчивость LPS. кДНК человека TLR9 (№ доступа NM_017442) клонировали в вектор pBluescript II KS (Agilent). кДНК TLR7 человека (№ доступа NM_016562) получали из OriGene. Клетки HEK-293, стабильно экспрессирующие TLR8 человека (№ доступа NM_138636) или TLR7 мыши (№ доступа NM_133211), приобретали в InvivoGen и затем стабильно трансфицировали с использованием плазмиды pNiFty2(NF-κB)-люциферазный репортер (InvivoGen). Каждый тип клеток высевали в модифицированную по способу Дульбекко среду Игла (DMEM), содержащую 10% эмбриональную телячью сыворотку (FBS), при плотности 2,22×105 клеток/мл в 384-луночный планшет и инкубировали в течение 2 суток при 37°C, 5% CO2. Затем добавляли различные концентрации антагонистических соединений. Затем клетки инкубировали в течение других 30 минут перед добавлением подходящего агониста TLR следующим образом (указаны конечные концентрации): липополисахарид (LPS; Sigma) 10 нг/мл для TLR4, CL097 (InvivoGen) по 3 мкг/мл для TLR7 и TLR8 человека и TLR7 мыши, и CpG-2006-2A [последовательность: TCGTCGTTAAGTCGTTAAGTCGTT (SEQ ID NO: 1) с фосфоротиоатным остовом, синтезированная в Sigma-Aldrich] 0,6 мкМ для TLR9. Затем клетки инкубировали в течение ночи, и активацию NF-κB-зависимого люциферазного репортера количественно определяли посредством измерения люминесценции с использованием реактива SteadyGlo® (Promega) или Steadylite™ (Perkin Elmer) согласно предложенному производителем протоколу.
[0450] Анализ на основе клеток PBMC человека. Мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) человека выделяли из свежевзятой гепаринизированной (10 USP Ед./мл, Hospira, Lakeforest, IL) цельной крови здоровых доноров с помощью градиента плотности (Histopaque® 1077, Sigma, inc., St. Louis, MO). В кратком изложении, 25 мл крови разводили в 15 мл PBS (без Ca2+, Mg2+) в 50-мл конической пробирке и подслаивали 12 мл Histopaque с использованием иглы для спинномозговой пункции. Пробирки центрифугировали в течение 45 минут на 1200 об./мин (350xg), и PBMC собирали из лейкотромбоцитарного слоя. Затем клетки два раза промывали в PBS, и красные клетки крови лизировали посредством суспензии в 5 мл раствора хлорида аммония (IX Red Blood Cell Lysis Buffer, eBioscience) в течение 5 минут при комнатной температуре. После конечного промывания в PBS, PBMC ресуспендировали при конечной концентрации 2×106/мл в среде RPMI-1640 с L-глутамином (Invitrogen) и с добавлением 25 мМ HEPES (Mediatech, Inc, Manassas VA), 10% эмбриональной телячьей сыворотки (HyClone, Logan, UT) и пенициллин-стрептомицин-глутамин (Mediatech) и высевали по 100 мкл/лунка (2×105 клеток/лунка) в обработанные 96-луночные планшеты для тканевой культуры (Falcon).
[0451] Антагонистические соединения, солюбилизированные и серийно разведенные в 100% DMSO, добавляли три раза в клетки, чтобы получать конечную концентрацию 0,1% DMSO (об./об.). Гидроксихлорохин (Acros Organics), солюбилизированный и серийно разведенный в PBS, добавляли три раза в клетки. PBMC инкубировали с антагонистическими соединениями или HCQ в течение 30 минут при 37°C, 5% CO2, перед добавлением различных TLR агонистических реактивов в 100 мкл полной среды на лунку следующим образом (указаны конечные концентрации): R848 (резиквимод; GLSynthesis, Worcester, MA) 1 мкМ для TLR7 и TLR8, Pam3CSK4 (InvivoGen) 50 нг/мл для TLR1/2, LPS (Sigma) 10 нг/мл для TLR4, и CpG-2216 (InvivoGen) 5 мкг/мл для TLR9. Для того чтобы получать агонист TLR7/8, который имитирует иммунные комплексы РНК-содержащих аутоантител у пациентов с волчанкой, синтезировали 26-мер РНК с последовательностью, полученной из стебля/петли IV мяРНК U1 человека [(последовательность: GGGGGACUGCGU-UCGCGCUUUCCC (SEQ ID NO: 2) с фосфоротиоатным остовом] (Dharmacon, Inc., Lafayette, CO), для которой предварительно показано, что она представляет собой сильный агонист TLR7 и TLR8. Эту молекулу РНК разводили до 2,5 мкМ в бессывороточной RPMI, и моноклональное антитело мыши против одноцепочечной ДНК человека (MAB3034, Millipore, Inc., Billerica, MA), которое также обладает перекрестной реактивностью с РНК, добавляли в разведении 1:25 или 1 мкг/мл. Получаемый стимул «РНК-Ig» инкубировали при комнатной температуре в течение 15-30 минут перед добавлением в клетки. PBMC инкубировали с различными агонистами TLR в течение 20 часов при 37°C, 5% CO2. Собирали супернатанты клеточных культур, и оценивали уровни различных цитокинов человека, как указано, с помощью стандартной процедуры ELISA в соответствии с рекомендованным производителем протоколом (BD Biosciences, Inc., San Diego, CA). В таблице 4 представлены результаты испытаний ингибирования IL-6 PBMC человека для выбранных соединений.
ТАБЛИЦА 4
Ингибирование IL-6 PBMC человека (лиганд SL4-Ig)
ER-номер IC50 PBMC человека (мкМ) ER-номер IC50 PBMC человека (мкМ)
ER-880269 0,034 ER-887736 0,562
ER-880898 1,761 ER-887968 0,085
ER-885454 0,676 ER-887969 0,108
ER-885681 0,173 ER-889537 0,527
ER-885682 0,357 ER-889538 0,566
ER-885690 9,846 ER-889540 0,248
ER-886161 8,091 ER-889542 0,729
ER-886163 1,059 ER-889544 6,780
ER-886164 0,567 ER-889545 2,403
ER-886166 1,171 ER-889546 0,851
ER-886167 0,402 ER-889549 0,215
ER-886367 5,929 ER-889552 7,329
ER-886434 0,414 ER-889576 1,580
ER-887084 0,101 ER-889826 10,000
ER-887193 0,415 ER-889827 1,020
ER-887238 0,253 ER-889828 0,007
ER-887240 0,559 ER-889829 0,008
ER-887343 0,136 ER-889830 1,767
ER-887532 0,514 ER-889831 0,359
ER-887534 0,274 ER-889833 0,154
ER-887735 0,230 ER-889834 0,858
ER-889904 1,280 ER-892896 1,284
ER-892267 3,235 ER-892900 0,744
ER-892268 3,454 ER-892911 0,875
ER-892269 2,851 ER-892912 1,640
ER-892270 11,002 ER-892913 2,365
ER-892271 7,538 ER-892914 0,757
ER-892272 6,305 ER-892915 0,937
ER-892273 6,248 ER-892916 0,561
ER-892274 8,614 ER-892917 1,082
ER-892275 4,091 ER-892918 0,701
ER-892276 2,215 ER-892919 0,839
ER-892886 0,686 ER-892920 0,711
ER-892887 0,040 ER-892922 2,446
ER-892887 0,051 ER-892923 2,461
ER-892888 0,484 ER-892924 0,160
ER-892889 0,350 ER-892925 0,937
ER-892890 1,712 ER-893774 3,232
ER-892891 0,296 ER-893775 2,059
ER-892892 0,879 ER-893776 2,912
ER-892893 0,164 ER-893777 2,748
ER-892894 0,371 ER-893888 1,949
ER-892895 0,495 ER-893961 0,572
ER-893968 0,436 ER-895091 0,071
ER-893969 0,545 ER-895102 0,029
ER-893970 0,968 ER-895302 0,025
ER-893971 1,144 ER-895303 0,023
ER-893972 0,698 ER-895396 0,027
ER-893973 0,126 ER-895397 0,131
ER-893987 2,112 ER-895436 0,026
ER-893990 4,463 ER-895437 0,334
ER-894462 0,784 ER-895438 0,121
ER-894463 0,048 ER-895440 0,255
ER-894464 0,020 ER-895441 0,277
ER-894466 0,043 ER-895442 0,293
ER-894467 0,406 ER-895484 0,804
ER-894468 0,049 ER-895496 0,017
ER-894595 2,160 ER-895497 0,970
ER-894596 1,750 ER-895676 0,072
ER-895077 0,094 ER-895678 0,071
ER-895078 0,014 ER-895716 0,658
ER-895079 0,229 ER-895718 0,098
ER-895080 0,248 ER-895719 0,031
ER-895081 0,072 ER-895725 0,065
ER-895082 0,058 ER-895727 0,185
ER-895731 0,833 ER-895811 0,111
ER-895732 0,240 ER-896060 0,020
ER-895734 0,021 ER-896064 0,007
ER-895739 0,116 ER-896133 0,064
ER-895746 0,204 ER-896134 0,012
ER-895748 0,027 ER-896135 0,018
ER-895752 0,103 ER-896136 0,019
ER-895755 0,069 ER-896388 0,122
ER-895809 0,021 ER-896452 0,049
ER-895810 0,027 ER-896993 0,038
[0452] Анализ на основе клеток селезенки мыши. Селезенки брали у самок мышей BALB/c (Jackson Labs, Bar Harbor, ME), которых умерщвляли с помощью CO2. Получали одну клеточную суспензию посредством пропускания селезенок через 40-мкм нейлоновое клеточное сито. Клетки промывали два раза с использованием 50 мл PBS (Mediatech, Inc., Manassas, VA), и красные клетки крови лизировали в 5 мл RBC Lysis Buffer (eBioscience, Inc., San Diego, CA) в течение 5 минут при комнатной температуре. Клетки промывали еще два раза в PBS и наконец ресуспендировали до 2,5×106 клеток/мл в PMT-1640 с добавками. Клетки высевали по 100 мкл/лунка (2,5×105 клеток/лунка) в обработанные 96-луночные планшеты для тканевой культуры (Falcon). Серийные разведения соединений, солюбилизированных в 100% DMSO, добавляли три раза в клетки, чтобы получать конечную концентрацию 0,1% DMSO. Клетки инкубировали с соединением в течение 30 минут при 37°C, 5% CO2 перед добавлением 740 нМ R848 по 100 мкл/лунка (резиквимод; GLSynthesis, Worcester, MA) в полных средах до конечной концентрации R848 370 нМ. Клетки инкубировали в течение 20 часов при 37°C, 5% CO2. Культуральные супернатанты собирали, и оценивали уровни IL-6 с помощью стандартной процедуры ELISA в соответствии с рекомендованным производителем протоколом (BD Biosciences, Inc., San Diego, CA). Результаты испытаний для выбранных соединений приведены в таблице 5.
ТАБЛИЦА 5
Ингибирование IL-6 спленоцитов мыши (лиганд R848)
ER-номер IC50 спленоцитов мыши (мкМ) ER-номер IC50 спленоцитов мыши (мкМ)
ER-885454 0,680 ER-894466 0,420
ER-889549 2,700 ER-894468 0,930
ER-889904 1,720 ER-894595 3,110
ER-891029 0,630 ER-894596 3,020
ER-892887 0,070 ER-894646 0,448
ER-892887 0,330 ER-894647 0,718
ER-892889 0,630 ER-894680 0,230
ER-892890 1,750 ER-895302 0,120
ER-892892 0,280 ER-895303 0,270
ER-892893 0,290 ER-895396 0,200
ER-892895 0,300 ER-895496 0,182
ER-893888 3,940 ER-895498 0,306
ER-893990 3,920 ER-895499 0,632
ER-894463 0,116 ER-895676 0,297
ER-894464 0,290 ER-895678 0,175
[0453] Фармакологические исследования in vivo:
[0454] Кратковременный анализ in vivo (STIV). Самкам мышей BALB/c в возрасте от шести до восьми недель (Jackson Labs, Bar Harbor, ME) дозировали посредством перорального принудительного кормления в 200-мкл объеме антагонистические соединения, сформулированные в 0,5% водной метилцеллюлозе (Sigma, St. Louis, MO). В различные моменты времени после этого, мышам подкожно инъецировали (s.c.) в 100-мкл объеме 15 мкг R848 (резиквимод; GLSynthesis, Worcester, MA) для того, чтобы стимулировать TLR7. Плазму крови собирали посредством сердечного прокола и оценивали уровни IL-6 через 1,5 часа после стимуляции TLR7 посредством стандартной процедуры ELISA в соответствии с рекомендованным производителем протоколом (R&D Systems).
[0455] Линии мышей с моделями заболевания волчанкой. Самцов мышей BXSB-Yaa и самок мышей NZBWF1/J приобретали в Jackson Labs (Bar Harbor, ME), и те и другие манифестируют самопроизвольное заболевание волчанкой. Самок мышей DBA/1 приобретали в Harlan Laboratories (Indianapolis, IN) и в указанных возрастах давали интраперитонеальную инъекцию 0,5 мл пристана (2,6,10,14-тетраметилпентадекан; Sigma, St. Louis, MO), чтобы химически индуцировать заболевание волчанкой, или 0,5 мл PBS для того, чтобы создавать не больных контрольных мышей с совпадающим возрастом. Мышам дозировали ежедневно посредством перорального введения соединения или лекарственного средства в 0,5% метилцеллюлозе, в течение указанного периода времени.
[0456] Оценка титров аутоантител с помощью ELISA. Титры антител к дцДНК, Sm/nRNP, RiboP и гистонам оценивали с помощью стандартного подхода ELISA. В кратком изложении, 96-луночные планшеты EIA/RIA ELISA (Corning) покрывали с использованием 100 мкл разведенного антигена в PBS в течение 90 минут при комнатной температуре следующим образом (указаны конечные концентрации): 10 Ед/мл комплекса Sm/nRNP (Immunovision), 10 мкг/мл дцДНК тимуса теленка (Sigma), 5 Ед/мл RiboP (Immunovision) и 5 мкг/мл гистонов (Immunovision). Планшеты промывали с использованием PBS/0,05% Tween20 (промывающий буфер) и блокировали в течение ночи с использованием PBS/1% BSA (блокирующий буфер) при 4°C. Планшеты промывали, в лунки добавляли образцы плазмы мышей, разбавленные в блокирующем буфере (в диапазоне от 1:25 до 1:10000 в зависимости от модели и антигена), в объеме 100 мкл на лунку, и планшеты инкубировали в течение 90 минут при комнатной температуре. Затем планшеты промывали, в каждую лунку добавляли 100 мкл конъюгата антитела к IgG мыши с HRPO (Southern Biotech), разбавленного 1:50000 в PBS/1% BSA/0,05% Tween, и планшеты инкубировали в течение 90 минут при комнатной температуре. Планшеты промывали и в лунки добавляли 100 мкл смеси 1:1 из компонентов субстратов из набора субстратов OptEIA TMB (BD Biosciences). Планшеты инкубировали при комнатной температуре, и после достаточного развития окраски, реакцию останавливали посредством добавления 100 мкл 0,18 M раствора серной кислоты. Планшеты считывали с помощью спектрофотометрии на 450 нм.
[0457] Оценка протеинурии. Мочу собирали вручную у отдельных мышей или посредством содержания 1-2 мышей на одну метаболическую клетку в течение 18 часов, и соотношение альбумина и креатинина в моче (UACR) определяли для каждого животного в качестве опосредованной меры функции почек (UACR вычисляли как соотношение мг альбумина/г креатининина на дл мочи). Уровни альбумина в образцах мочи определяли с использованием обычного протокола сэндвич-ELISA с использованием набора антител против альбумина мыши (Bethyl Labs), который содержал покрывающее антитело и вторичное антитело, меченное конъюгатом HRP для обнаружения. Уровни креатининина определяли с использованием коммерческого набора для анализа креатининина (Cayman).
[0458] Гистологическая оценка нефрита. Почки собирали у отдельных мышей, фиксировали в 10% формалине в течение 24 часов, заливали в парафин, и создавали окрашенные ГЭ срезы для гистопатологической оценки слепым образом. Признаки для оценок заболевания нефритом представляют собой следующее: степень 0 - нормальные пределы; степень 1 - лентоподобное утолщение капиллярной стенки; степень 2 - повышенное содержание паренхиматозных клеток, сегментация, формирование полулуний; степень 3 - см. степень 2, увеличенные тяжесть и масштабы (% пораженных клубочков) повреждения клубочков; степень 4 - склероз; тяжелое заболевание клубочков (нефункциональный орган).
[0459] Статистика: различия в UACR, цитокинах или титрах антител между группами лечения лекарственными средствами и наполнителем вычисляли с использованием значений от всех отдельных животных в группе. Их тестировали посредством однофакторного дисперсионного анализа с использованием апостериорного критерия Данна для того, чтобы сравнивать каждую экспериментальную группу с наполнителем. P-значения представлены на фигурах, или согласно правилу одна звездочка обозначает p<0,05, две звездочки обозначают p<0,01 и три звездочки обозначают p<0,001. Наборы кривых смертности сравнивали с помощью критерия Кокса-Мантеля и, когда обнаруживали значимость, пары кривых тестировали на различие с использованием анализа Вилкоксона.
[0460] Оценка экспрессии генов интерферона в цельной крови. Экспрессию IFN-регулируемых генов в цельной крови измеряли посредством qPCR. В кратком изложении, мышей умерщвляли, кровь собирали через полую вену, и 100 мкл консервировали в пробирках, содержащих RNAlater (Ambion, Austin TX). Общую РНК выделяли с использованием Mouse RiboPure Blood RNA Isolation Kit (Ambion). Концентрации РНК определяли с использованием спектрофотометра NanoDrop ND-1000 (Thermo Scientific, Waltham MA). Первую цепь кДНК синтезировали из 100 нг общей РНК с использованием High Capacity RNA-to-cDNA Master Mix (Applied Biosystems, Foster City CA). После обратной транскрипции кДНК разводили безнуклеазной водой и смешивали с Gene Expression Master Mix (Applied Biosystems). Затем смесь наносили на специальный TaqMan® Low Density Array (TLDA) производства Applied Biosystems, и qPCR осуществляли на ABI 7900HT Fast Real-time PCR System (Applied Biosystems). Исходные данные собирали с использованием RQ Manager 1.2.1 (Applied Biosystems) и анализировали с использованием программного обеспечения GeneData Analyst 2.2 (GeneData).
[0461] Панель TLDA содержала целых 45 генов-мишеней, выбранных из таблицы 6, приведенной ниже, и 3 конститутивных гена для нормализации. Конститутивный ген Hprt1 выбирали для нормализации на основе коэффициента вариации. Относительные количества определяли для генов-мишеней и использовали для того, чтобы вычислять кратность изменения для каждой больной мыши относительно не больной контрольной группы, получающей интраперитонеально только инъекцию PBS. Стандартный критерий Стьюдента использовали для того, чтобы определять, какие гены-мишени значительно возрастали между не больной группой (лечили PBS) и больной группой, которую лечили наполнителем (лечили пристаном), тем самым представляя набор регулируемых заболеванием генов. Впоследствии «IFN оценку» вычисляли для каждой мыши в виде срединного значения кратности изменения всех регулируемых заболеванием генов, идентифицированных с помощью критерия Стьюдента.
ТАБЛИЦА 6
Обозначение гена Taqman ID Название гена
18S Hs99999901_s1 Эукариотическая 18S рРНК
Bst2 Mm01609165_g1 Антиген 2 стромальных клеток костного мозга
C1qa Mm00432142_m1 Компонент комплемента 1, q субкомпонент, альфа-полипептид
C3 Mm00437858_m1 Компонент комплемента 3
C3ar1 Mm02620006_s1 Рецептор 1 компонента комплемента 3
Ccl2 Mm00441243_gl Лиганд 2 хемокинов (мотив C-C)
Ccl5 Mm01302427_m1 Лиганд 5 хемокинов (мотив C-C)
Ccr2 Mm00438270_m1 Рецептор 2 хемокинов (мотив C-C)
Cd274 Mm00452054_m1 Антиген CD274
Cd300e Mm00468131_m1 Антиген CD300e
Cd38 Mm01220906_m1 Антиген CD38
Cd40 Mm00441891_m1 Антиген CD40
Cdkn2c Mm00483243_m1 Ингибитор циклин-зависимой киназы 2C (p18, ингибирует CDK4)
Cmpk2 Mm00469582_m1 Цитидинмонофосфаткиназа 2 (UMP-CMP)
Cxcl10 Mm00445235_m1 Лиганд 10 хемокинов (мотив C-X-C)
Cxcl11 Mm00444662_m1 Лиганд 11 хемокинов (мотив C-X-C)
Ddx60 Mm00460708_m1 Полипептид 60 DEAD-бокса (Asp-Glu-Ala-Asp)
Elane Mm00469310_m1 Эластаза, экспрессируемая нейтрофилами
Epsti1 Mm00712734_m1 Эпителиальное стромальное взаимодействие 1 (молочная железа)
Fcgr1 Mm00438874_m1 Fc рецептор, IgG, высокая аффинность I
Fpr1 Mm00442803_sl Рецептор 1 формил-пептида
Gapdh Mm99999915_gl глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа
Herc6 Mm01341950_m1 Домен hect и RLD 6
Hprt Mm00446968_m1 Гипоксантингуанинфосфорибозилтрансфераза
Ifi202b Mm00839397_m1 Активируемый интерфероном ген 202B
Ifi204 Mm00492602_m1 Активируемый интерфероном ген 204
Ifi2712a Mm01329883_gH интерферон, альфа-индуцибельный белок 27, подобный 2Λ
Ifi35 Mm00510329_m1 Индуцируемый интерфероном белок 35
Ifi44 Mm00505670_m1 Индуцируемый интерфероном белок 44
Ifih1 Mm00459183_m1 Интерферон, индуцированный доменом 1 геликазы С
Ifit1 Mm00515153_m1 Индуцируемый интерфероном белок c тетратрикопептидными повторами 1
Ifit2 Mm00492606_m1 Индуцируемый интерфероном белок с тетратрикопептидными повторами 2
Ifit3 Mm01704846_sl Индуцируемый интерфероном белок с тетратрикопептидными повторами 3
Il3ra Mm00434273_m1 Рецептор интерлейкина 3, альфа-цепь
Il6 Mm00446190_m1 Интерлейкин 6
Il6ra Mm00439653_m1 Рецептор интерлейкина 6, альфа
Irf5 Mm00496477_m1 Интерфероновый регуляторный фактор 5
Trt7 Mm00516788_m1 Интерфероновый регуляторный фактор 7
Isg15 Mm01705338_sl ISG15 убиквитин-подобный модификатор
Isg20 Mm00469585_m1 Интерферон-стимулируемый белок
Lta Mm00440228_gH Лимфотоксин A
Ly6e Mm01200460_gl Комплекс лимфоцитарного антигена 6, локус E
Mmp8 Mm00439509 m1 Матриксная металлопептидаза 8
Mmp9 Mm00442991_m1 Матриксная металлопептидаза 9
Mpo Mm00447886_m1 Миелопероксидаза
Ms4a6c Mm00459296_m1 трансмембранные 4 домена, подсемейство A, член 6C
Mx1 Mm00487796_m1 Устойчивость к миксовирусам 1 (вирус гриппа)
Oas3 Mm00460944_m1 2-5 олигоаденилатсинтетаза 3
Oas12 Mm00496187_m1 2-5 олигоаденилатсинтетаза-подобный 2
Ppia Mm02342430_g1 пептидилпролилизомераза A (циклофилин A)
Prf1 Mm00812512_m1 Перфорин 1 (порообразующий белок)
Rsad2 Mm00491265_m1 Белок 2, содержащий домен радикал S-аденозилметионин
Siglec1 Mm00488332_m1 Связывающий сиаловую кислота Ig-подобный лектин 1, сиалоадгезин
Stat1 Mm00439531_m1 Преобразователь сигнала и активатор транскрипции 1
TLR7 Mm00446590_m1 Toll-подобный рецептор 7
TLR9 Mm00446193_m1 Toll-подобный рецептор 9
Tnf Mm00443258_m1 Фактор некроза опухоли
Tnfsf10 Mm01283606_m1 Суперсемейство фактора некроза опухоли (лиганд), член 10
Tnfsf13b Mm00446347_m1 Суперсемейство фактора некроза опухоли (лиганд), член 13b
Trem14 Mm00553947_m1 Белок 4, подобный триггерному рецептору, экспрессируемому на миелоидных клетках
Trex1 Mm00810120_sl Три-штрих репаративная экзонуклеаза 1
Usp18 Mm00449455_m1 Убиквитин-специфичная пептидаза 18
Xaf1 Mm01248390_m1 XIAP-ассоциированный фактор 1

Claims (472)

1. Соединение формулы (I):
Figure 00000135
,
или его фармацевтически приемлемые соли или стереоизомеры или их смесь, где
R1 представляет собой -С(O)Z, где Z представляет собой пиперазинил, пиперидин-3-иламино, или
R1 представляет собой
Figure 00000136
где R13 представляет собой H, или
R1 представляет собой
Figure 00000137
или R1 представляет собой
Figure 00000138
,
где A, B и D все могут представлять собой углерод, или где два из A, B и D представляют собой углерод и другое представляет собой азот; и когда A представляет собой азот, R4 отсутствует, когда B представляет собой азот, R2 отсутствует, и когда D представляет собой азот, R3 отсутствует; и где
R2 представляет собой H, -CH3 или F или с R3 и атомами в положениях a и b образует пиррол, пиридин или пиразол; и где
R3 представляет собой H, F, Cl, -CN, -CH3
Figure 00000139
или с R4 и атомами в b и c образует пиразол, необязательно замещенный (С1-С6)алкилом, или с R2 и атомами в a и b образует необязательно замещенный пиридин или необязательно замещенный пиразол; и где
R4 представляет собой Н, -CN, -CH3, -CH2OH,
Figure 00000140
пиперазинил, пиперидинил, не прикрепленный к фенильной группе через азот, или с R3 и атомами в b и c образует
Figure 00000141
или
R4 представляет собой -(q)-C(O)X, где q представляет собой связь, представляет собой -NH- или представляет собой -CH2-, и
где X представляет собой -NR11R12,
где R11 и R12 оба представляют собой H, оба представляют собой -CH2CH3 или оба представляют собой -CH3, или где один из R11 и R12 представляет собой H и другой представляет собой (С1-С4)алкил, циклопропил, 3-гидроксипропил, 2,3-дигидроксипропил, бензил, азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, метилазетидинил, или
Figure 00000142
или где X представляет собой необязательно замещенный ОН или NH2 пирролидинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, пиперидинил, не прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, необязательно замещенный OH азетидинил прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, необязательно замещенный (C1-C4алкилом) пиперазинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4,
Figure 00000143
где R5 представляет собой H, -CH3, -OCH3 или
с R4 и атомами в c и d образует необязательно замещенный (С1-С4)алкилом пиразол, или с R6 и атомами в d и e образует необязательно замещенный пиридин, или R5 представляет собой C(O)Y, где Y представляет собой пиперазинил, пиперидинил,
Figure 00000144
и где
R6 представляет собой H, F, -CH3; и где
R7 представляет собой -CF3 или -CHF2; и где
R8 представляет собой
Figure 00000145
и где
R9 представляет собой H;
при следующих условиях:
когда R4 представляет собой -CN: R2 не представляет собой F; R3 не представляет собой Cl или F; R5 не представляет собой -OCH3; и R6 не представляет собой F;
когда R2 представляет собой F: R3 не представляет собой F; и по меньшей мере один из R3, R4, R5 и R6 не представляет собой H;
когда R2 представляет собой -CH3: R3 не представляет собой Cl; по меньшей мере один из R3, R4, R5 и R6 не представляет собой -CH3; и R4 и R5 не образуют пиразолил с атомами в c и d;
когда R3 представляет собой Cl: R11 не представляет собой бензил; или R12 не представляет собой бензил;
когда R6 представляет собой F: по меньшей мере один из R2, R3, R4 и R5 не представляет собой H;
когда R3 и R5 представляют собой H: R11 не представляет собой циклопропил; или R12 не представляет собой циклопропил;
когда B представляет собой азот и A и D представляют собой углерод: R4 может не представлять собой -CN или
Figure 00000146
когда R7 представляет собой -CHF2 и R4 представляет собой
Figure 00000147
тогда R4 не обладает абсолютной стереохимией
Figure 00000148
и где, когда R8 представляет собой
Figure 00000149
,
тогда действуют следующие условия:
когда R3 представляет собой F: R4 не представляет собой C(O)NHCH2CH2CH2CH3, C(O)N(CH3)2, C(O)NHCH2CH2CH3 или C(O)NHC(CH3)3, C(O)NHCH2CH2CH2OH, C(O)NHCH(CH3)2, -CN;
когда R2 представляет собой -CH3, R4 и R5 не образуют пиразол с атомами в c и d; и
когда R8 представляет собой
Figure 00000150
тогда действуют следующие условия:
R4 не представляет собой -CH3, -C(O)NHCH2CH2OH, -NHC(O)CH(CH3)2 или
Figure 00000151
когда R4 представляет собой C(O)NHCH3, по меньшей мере один из R2, R3, R5 и R6 не представляет собой H;
когда R4 представляет собой
Figure 00000152
R3 не представляет собой Cl;
когда R4 представляет собой -C(O)NHCH(CH3)2 или -C(O)N(CH2CH3)2: по меньшей мере один из R3 и R5 не представляет собой H;
когда R2 представляет собой F: R4 не представляет собой C(O)NH2;
когда R3 представляет собой F, R4 не представляет собой
Figure 00000153
когда R5 представляет собой -CH3, R3 и R4 с атомами в b и c не образуют
Figure 00000154
и
когда R3 представляет собой -CH3, R4 и R5 с атомами в c и d не образуют
Figure 00000155
,
и где необязательные заместители выбраны из группы, состоящей из линейных, разветвленных или насыщенных циклических углеводородов, имеющих от 1 до 4 атомов углерода, метокси, -ОН, -NH2, -CH2-NH-CH3, -OCH2CH2CH3 или -OCH(CH3)2.
2. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, которое имеет абсолютную стереохимию, представленную в формуле (II):
Figure 00000156
,
при условии, что, когда R8 представляет собой
Figure 00000157
действуют следующие условия:
когда R2 представляет собой F: R4 не представляет собой C(O)NH2;
когда R3 представляет собой F, R4 не представляет собой
Figure 00000153
когда R5 представляет собой -CH3, R3 и R4 с атомами в b и c не образуют
Figure 00000154
и
когда R3 представляет собой -CH3, R4 и R5 с атомами в c и d не образуют
Figure 00000155
3. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, которое имеет абсолютную стереохимию, приведенную в формуле (III):
Figure 00000158
,
при условии, что, когда R8 представляет собой
Figure 00000159
R4 не представляет собой
Figure 00000160
и при условии, что, когда R8 представляет собой
Figure 00000161
действуют следующие условия:
когда R2 представляет собой -CH3: R3 и R4 не образуют необязательно замещенный пиразолил с атомами в b и c;
когда R2 представляет собой -CH3: R4 и R5 не образуют необязательно замещенный пиразолил с атомами в c и d;
когда R2 представляет собой F: R4 не представляет собой C(O)NH2;
когда R3 представляет собой Cl: R4 не представляет собой -C(O)NHCH3 или -C(O)NH2;
когда R3 представляет собой F: R4 не представляет собой
Figure 00000162
или -C(O)NH2;
когда R3 представляет собой -CH3: R4 и R5 не образуют необязательно замещенный пиразолил с атомами в c и d; R4 не представляет собой -C(O)NHCH2CH2CH2OH; и R4 не представляет собой -CN или
Figure 00000163
когда R5 представляет собой -CH3: R3 и R4 не образуют необязательно замещенный пиразолил с атомами в b и c;
когда R5 представляет собой Cl: R4 не представляет собой -C(O)NH2;
когда R6 представляет собой -CH3: R4 и R5 не образуют необязательно замещенный пиразолил с атомами в c и d; и
когда B представляет собой азот, R4 не представляет собой -C(O)NHCH3.
4. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой -C(O)Z, где Z представляет собой пиперазинил; R7 представляет собой -CF3; R8 представляет собой
Figure 00000164
и R9 представляет собой H.
5. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой
Figure 00000165
R7 представляет собой -CF3, R8 представляет собой
Figure 00000166
и R9 представляет собой H.
6. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой
Figure 00000167
R2 представляет собой H, -CH3 или с R3 образует
Figure 00000168
R3 представляет собой H или с R2 образует
Figure 00000169
или с R4 образует
Figure 00000170
R4 представляет собой H, -CH3 или с R3 образует
Figure 00000171
R5 представляет собой H; R6 представляет собой H; R7 представляет собой -CF3; R8 представляет собой
Figure 00000172
и R9 представляет собой H.
7. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой
Figure 00000173
R2 представляет собой H, F или -CH3: R3 представляет собой H или F; R4 представляет собой -(q)-C(O)X, где q представляет собой связь или -CH2-, и X представляет собой пиперазинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, пирролидинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, азетидинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, или
Figure 00000174
или X представляет собой -NR11R12, где один из R11 и R12 представляет собой H и другой представляет собой пирролидинил, пиперидинил или азетидинил; R5 представляет собой H или C(O)Y, где Y представляет собой пиперазинил, пиперидинил,
Figure 00000175
R6 представляет собой H, R7 представляет собой -CHF2, R8 представляет собой
Figure 00000176
и R9 представляет собой H.
8. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой
Figure 00000177
где A, B и D все могут представлять собой углерод, или где два из A, B и D представляют собой углерод и другой представляет собой азот; и когда A представляет собой азот, R4 отсутствует, когда B представляет собой азот, R2 отсутствует, и когда D представляет собой азот, R3 отсутствует; R2 представляет собой H; R3 представляет собой H или -CH3; R4 представляет собой -C(O)X, где X представляет собой -NR11R12, где R11 и R12 представляют собой H, или где один из R11 или R12 представляет собой H и другой представляет собой пиперидинил, пирролидинил или -CH3; R5 представляет собой -OMe или H; R6 представляет собой H; R7 представляет собой -CF3; R8 представляет собой
Figure 00000178
и R9 представляет собой H.
9. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой
Figure 00000179
где A, B и D представляют собой углерод;
R2 представляет собой H, -CH3 или F или с R3 и атомами в положениях a и b образует пиразол;
R3 представляет собой H, F, Cl, -CN, -CH3,
Figure 00000180
,
или с R4 и атомами в b и c образует необязательно замещенный пиразол или
Figure 00000181
,
или с R2 и атомами в a и b образует необязательно замещенный пиразол;
R4 представляет собой -CN, -CH2OH, H,
Figure 00000182
пиперазинил или
Figure 00000183
или с R5 и атомами в c и d образует пиразол, необязательно замещенный (C1-C4)алкилом или
R4 представляет собой -(q)-C(O)X, где q представляет собой связь, и
где X представляет собой -NR11R12,
где R11 и R12 оба представляют собой H, или где один из R11 и R12 представляет собой H и другой представляет собой (C1-C4)алкил, циклопропил, 3-гидроксипропил, 2,3-дигидроксипропил, бензил, азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, метилазетидинил, или
Figure 00000184
, или
где X представляет собой пиперидинил, не прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, пиперазинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4, пирролидинил, необязательно замещенный ОН или NH2, прикрепленный через азот к группе R4, или необязательно замещенный ОН азетидинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R4,
Figure 00000185
Figure 00000186
Figure 00000187
и R5 представляет собой H или с R4 и атомами в c и d образует необязательно замещенный (C1-C4)алкилом пиразол, или с R6 и атомами в d и e образует необязательно замещенный пиридин, или R5 представляет собой пиперазинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R5, пиперидинил, прикрепленный через азот к карбонильной группе в R5,
Figure 00000188
и R6 представляет собой H, F или -CH3;
R7 представляет собой -CF3;
R8 представляет собой
Figure 00000189
и R9 представляет собой Н.
10. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где указанное соединение выбирают из группы, состоящей из:
(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида (3-аминопирролидин-1-ил)(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)метанона;
(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(3-гидроксипирролидин-1-ил)метанона;
гидрохлорида (4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)((2R,5S)-2,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона;
хлорида 4-(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензоил)пиперазин-1-ия;
гидрохлорида (3-аминоазетидин-1-ил)(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)метанона;
хлорида 1-(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензоил)пирролидин-3-аминия;
хлорида 3-(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамидо)азетидин-1-ия;
хлорида (S)-3-(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамидо)пирролидин-1-ия;
гидрохлорида (4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-ил)метанона;
N-(2,3-дигидроксипропил)-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамида;
хлорида 1-(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензоил)азетидин-3-аминия;
хлорида (R)-3-(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамидо)пирролидин-1-ия;
гидрохлорида 4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пиперидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида 4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((R)-пиперидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида (4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)((R)-2-метилпиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида (3-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-ил)метанона;
гидрохлорида (3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида (4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)((S)-2-метилпиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пирролидин-3-ил)бензамида;
4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-(3-гидроксипропил)бензамида;
гидрохлорида 4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-(пирролидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида N-(азетидин-3-ил)-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамида;
2,2,2-трифторацетата (4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(2,6-диазаспиро[3,4]октан-2-ил)метанона;
2,2,2-трифторацетата N-(6-аминоспиро[3.3]гептан-2-ил)-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамида;
(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидрапиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(3-гидроксиазетидин-1-ил)метанона;
2,2,2-трифторацетата (4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(2,7-диазаспиро[4.4]нонан-2-ил)метанона;
2,2,2-трифторацетата (4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(3-((метиламино)метил)азетидин-1-ил)метанона;
гидрохлорида (4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)((2R,5R)-2,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида (3-((5R,7S)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-ил)метанона;
4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензонитрила;
3-(3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)-5-метил-1,2,4-оксадиазола;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1,7-диметил-1H-индазол-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
2-(3-(1H-пиразол-1-ил)фенил)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1,6-диметил-1H-индазол-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1,4-диметил-1H-индазол-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1,4-диметил-1H-индазол-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамида;
4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензамида;
2-хлор-4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-метилбензамида;
5-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она;
5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)изохинолина;
2-хлор-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамида;
N-бензил-2-хлор-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамида;
2-хлор-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-изопропилбензамида;
2-хлор-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-метилбензамида;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(6-метил-1H-индазол-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
2-хлор-4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамида;
4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторбензамида;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1H-индазол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4-метил-1H-индазол-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
N-циклопропил-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензамида;
N-(трет-бутил)-4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензамида;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(5-метил-1H-индазол-6-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)метанола;
3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензонитрила;
4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторбензамида;
N-(3-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)ацетамида;
дигидрохлорида 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4-((4-метилпиперазин-1-ил)метил)фенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
дигидрохлорида 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(3-(пиперазин-1-илметил)фенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
дигидрохлорида 4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фтор-N-(пиперидин-4-ил)бензамида;
дигидрохлорида (4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторфенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
(3-((5S,7R)-7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-ил)метанона; и
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4-(пиперидин-4-ил)фенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина.
11. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где указанное соединение выбирают из группы, состоящей из:
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2-метоксипиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(пиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2-метоксипиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-метилпиколинамида;
дигидрохлорида (5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиридин-2-ил)(пиперазин-1-ил)метанона;
дигидрохлорида 5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-(пиперидин-4-ил)пиколинамида;
гидрохлорида 5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пирролидин-3-ил)пиколинамида;
гидрохлорида 5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((R)-пирролидин-3-ил)пиколинамида;
дигидрохлорида 5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пиперидин-3-ил)пиколинамида;
дигидрохлорида 5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((R)-пиперидин-3-ил)пиколинамида;
2-(2-хлорпиридин-4-ил)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиридин-2-ил)(пиперазин-1-ил)метанона;
дигидрохлорида 4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пиперидин-3-ил)пиколинамида;
дигидрохлорида 4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-(пиперидин-4-ил)пиколинамида;
дигидрохлорида (5-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиридин-2-ил)(пиперазин-1-ил)метанона;
дигидрохлорида (4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиридин-2-ил)(пиперазин-1-ил)метанона;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина; и
(5R,7S)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина.
12. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где указанное соединение представляет собой (5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(пиперидин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин.
13. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где указанное соединение представляет собой (4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанон.
14. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где указанное соединение выбирают из группы, состоящей из:
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)((2R,5S)-2,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((R)-пиперидин-3-ил)бензамида;
(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фтор-N-(пиперидин-4-ил)бензамида;
гидрохлорида 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пиперидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пирролидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)((S)-2-метилпиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида ((S)-3-аминопирролидин-1-ил)(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)метанона;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фтор-N-((S)-пирролидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторфенил)((2R,5S)-2,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона;
(4-((5S,7R)-7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 2-(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)-1-(пиперазин-1-ил)этанона;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пиперидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилфенил)(гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-ил)метанона;
гидрохлорида 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-(пиперидин-4-ил)бензамида;
гидрохлорида 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((R)-пирролидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фтор-N-((R)-пиперидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторфенил)((2R,5S)-2,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона;
2,2,2-трифторацетата N-(азетидин-3-ил)-4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензамида;
гидрохлорида ((R)-3-аминопирролидин-1-ил)(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)метанона;
(4-((5R,7S)-7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((R)-пиперидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метил-N-((S)-пиперидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метил-N-((R)-пиперидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилфенил)((2R,5S)-2,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метил-N-((S)-пирролидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метил-N-((R)-пирролидин-3-ил)бензамида;
2,2,2-трифторацетата N-(азетидин-3-ил)-4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилбензамида;
гидрохлорида 2-(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)-N-((S)-пиперидин-3-ил)ацетамида;
гидрохлорида 2-(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)-N-((R)-пиперидин-3-ил)ацетамида;
гидрохлорида 2-(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)-1-((S)-2-метилпиперазин-1-ил)этанона;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фтор-N-((S)-пиперидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метил-N-(пиперидин-4-ил)бензамида;
гидрохлорида (3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-ил)метанона;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилфенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 2-(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)-1-(гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-ил)этанона;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фтор-N-((R)-пирролидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пирролидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилфенил)((S)-2-метилпиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 2-(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)-1-((2R,5S)-2,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторфенил)((S)-2-метилпиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида (3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 1-(3-аминоазетидин-1-ил)-2-(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)этанона;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилфенил)((R)-2-метилпиперазин-1-ил)метанона;
2,2,2-трифторацетата N-(азетидин-3-ил)-3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамида;
гидрохлорида 2-(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)-1-((R)-2-метилпиперазин-1-ил)этанона;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторфенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторфенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фтор-N-((R)-пиперидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида N-(азетидин-3-ил)-2-(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)ацетамида;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-ил)метанона;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фтор-N-((S)-пиперидин-3-ил)бензамида;
2,2,2-трифторацетата (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторфенил)(2,6-диазаспиро[3.3]гептан-2-ил)метанона;
гидрохлорида 2-(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)-N-(пиперидин-4-ил)ацетамида;
2,2,2-трифторацетата N-(азетидин-3-илметил)-3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамида; и
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фтор-N-((S)-пирролидин-3-ил)бензамида.
15. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где указанное соединение выбирают из группы, состоящей из:
1-(4-(5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)мочевины;
5-(5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)изохинолина;
5-(5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-8-метилхинолина;
1-(4-((5S,7R)-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)мочевины;
(5S,7R)-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-2-(2-метил-2H-индазол-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(5R,7S)-2-(1,4-диметил-1H-индазол-5-ил)-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина; и
2-(1,4-диметил-1H-индазол-5-ил)-5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина.
16. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где указанное соединение выбирают из группы, состоящей из:
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2,3,6,7-тетрагидро-1H-азепин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1-(пиперидин-4-ил)-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
2-(2,5-дигидро-1H-пиррол-3-ил)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)циклогекс-3-енамина;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1-(пиперидин-4-ил)-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(3-азаспиро[5.5]ундец-8-ен-9-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4-(пиперидин-4-ил)фенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2-(пиперазин-1-ил)пиримидин-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2,3,6,7-тетрагидро-1H-азепин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2-(пиперазин-1-ил)пиримидин-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)циклогекс-3-енамина;
4-((5R,7S)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)циклогекс-3-енамина;
гидрохлорида 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2-изопропил-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(5R,7S)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1-(пиперидин-4-ил)-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(3-метил-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(5R,7S)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2-(пиперазин-1-ил)пиримидин-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(5R,7S)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
гидрохлорида 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(6-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(5R,7S)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2,3,6,7-тетрагидро-1H-азепин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина; и
гидрохлорида 5-(3,4-диметоксифенил)-2-(6-метил-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина.
17. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где указанное соединение выбирают из группы, состоящей из:
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(6-(пиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)циклогекс-3-енамина;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1-(пиперидин-4-ил)-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
дигидрохлорида 4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пиперидин-3-ил)пиколинамида;
дигидрохлорида 4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-(пиперидин-4-ил)пиколинамида;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1-(пиперидин-4-ил)-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6 тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(3-азаспиро[5.5]ундец-8-ен-9-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(4-(пиперидин-4-ил)фенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2-(пиперазин-1-ил)пиримидин-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
3-(3-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)-5-метил-1,2,4-оксадиазола;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1,7-диметил-1H-индазол-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
2-(3-(1H-пиразол-1-ил)фенил)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида (3-аминопирролидин-1-ил)(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)метанона;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1,6-диметил-1H-индазол-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(3-гидроксипирролидин-1-ил)метанона;
гидрохлорида (4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)((2R,5S)-2,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона;
5-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она;
5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1,4-диметил-1H-индазол-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
хлорида 4-(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензоил)пиперазин-1-ия;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(1,4-диметил-1H-индазол-5-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамида;
4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фторбензамида;
2-хлор-4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-метилбензамида;
5-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-1H-бензо[d]имидазол-2(3H)-она;
гидрохлорида (3-аминоазетидин-1-ил)(4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,657-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)метанона;
хлорида 1-(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензоил)пирролидин-3-аминия;
хлорида 3-(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамидо)азетидин-1-ия;
хлорида (S)-3-(4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)бензамидо)пиридин-1-ия;
гидрохлорида (4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-ил)метанона;
(5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(2-метоксипиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидина;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)((2R,5S)-2,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((R)-пиперидин-3-ил)бензамида;
(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фтор-N-(пиперидин-4-ил)бензамида;
гидрохлорида 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пиперидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пирролидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)((S)-2-метилпиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида ((S)-3-аминопирролидин-1-ил)(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)метанона;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-2-фтор-N-((S)-пирролидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-фторфенил)((2R,5S)-2,5-диметилпиперазин-1-ил)метанона;
(4-((5S,7R)-7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанона;
гидрохлорида 2-(4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)-1-(пиперазин-1-ил)этанона;
гидрохлорида 4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((S)-пиперидин-3-ил)бензамида;
гидрохлорида (4-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-3-метилфенил)(гексагидропирроло[3,4-c]пиррол-2(1H)-ил)метанона;
гидрохлорида 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-(пиперидин-4-ил)бензамида;
гидрохлорида 3-(7-(дифторметил)-5-(3,4-диметоксифенил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)-N-((R)-пирролидин-3-ил)бензамида; и
1-(4-(5-(1,3-диметил-1H-пиразол-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)мочевины.
18. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где указанное соединение представляет собой (5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-2-(пиридин-4-ил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин.
19. Способ лечения системной красной волчанки или волчанки, который включает введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по п. 1.
20. Способ по п. 19, где указанное соединение вводят в виде фармацевтически приемлемой соли.
21. Способ антагонистического воздействия на TLR7, который включает введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по п. 1.
22. Способ антагонистического воздействия на TLR8, который включает введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по п. 1.
23. Фармацевтическая композиция для лечения системной красной волчанки или волчанки, которая содержит по меньшей мере одно соединение или фармацевтически приемлемую соль по п. 1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
24. Соединение (4-((5S,7R)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанон или его фармацевтически приемлемая соль.
25. Соединение (4-((5R,7S)-5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанон или его фармацевтически приемлемая соль.
26. Рацемическая смесь соединения (4-(5-(3,4-диметоксифенил)-7-(трифторметил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)фенил)(пиперазин-1-ил)метанона или его фармацевтически приемлемой соли.
27. Способ антагонистического воздействия на TLR7, который включает введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по одному из пп. 24-26.
28. Способ лечения системной красной волчанки или волчанки, который включает введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по одному из пп. 24-26.
29. Способ по п. 28, где указанное соединение вводят в виде фармацевтически приемлемой соли.
30. Способ антагонистического воздействия на TLR8, который включает введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по одному из пп. 24-26.
31. Фармацевтическая композиция для лечения системной красной волчанки или волчанки, содержащая по меньшей мере одно соединение или фармацевтически приемлемую соль по одному из пп. 24-26 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
32. Соединение формулы (IV):
Figure 00000190
,
или его фармацевтически приемлемые соли или стереоизомеры или их смесь, где: R7a представляет собой H или F; и где
кольцо A представляет собой:
Figure 00000191
где Y1 и Y2 независимо выбирают из группы, состоящей из -CH2- и -CH2CH2-, и где каждый из Y1 и Y2 необязательно замещен C1-3 алкилом;
Figure 00000192
где X1, X2 и X3 независимо выбирают из группы, состоящей из -CH- и N;
Figure 00000193
где X1 и X3 представляют собой N, и X2 представляет собой -CH-;
Figure 00000194
где X представляет собой N или -CH-, необязательно замещенный с помощью -CH3, F или Cl, и
где R9 представляет собой -C(O)Z, где Z представляет собой 2,3-дигидроксипропиламин; циклический диамин, содержащий от пяти до семи звеньев, который необязательно содержит мостик или необязательно замещен по углеродному атому линейным, разветвленным или циклическим насыщенным углеводородом, имеющим от 1 до 4 атомов углерода; бициклодиамин, содержащий от семи до десяти звеньев; спиродиамин, содержащий от семи до одиннадцати звеньев; -NH, замещенный циклическим амином, содержащим от четырех до семи звеньев, необязательно замещенным -NH2; -OH; -CH2NHR, где R представляет собой H или линейный, разветвленный или циклический насыщенный углеводород, имеющий от 1 до 4 атомов углерода; -NH, замещенный спироалканом, содержащим от семи до одиннадцати звеньев, необязательно замещенным -NH2; или
R9 представляет собой CH3NHC(O)-, и углеродный атом на кольце Q замещен одним из -CH3, F или Cl; R9 представляет собой (CH3)2CHNHC(O)-, и углеродный атом на кольце Q, замещен одним из -CH3, F или Cl; или R9 представляет собой (CH3)3CNHC(O)-, и углеродный атом на кольце Q замещен одним из -CH3, F или Cl; или
R9 представляет собой
Figure 00000195
,
где пиперазин необязательно содержит мостик или замещен линейным, разветвленным или циклическим насыщенным углеводородом, имеющим от 1 до 4 атомов углерода и R10 представляет собой H или -CH3; или
R9 представляет собой
Figure 00000196
где n составляет от 1 до 3 и циклический диамин необязательно содержит мостик или замещен линейным, разветвленным или циклическим насыщенным углеводородом, имеющим от 1 до 4 атомов углерода; или
R9 представляет собой
Figure 00000197
где n составляет от 1 до 4; или
R9 представляет собой NHC(O)NH2, -CH2C(O)NH-, где азот замещен циклическим амином, содержащим от четырех до семи звеньев; -CH2-C(O)-, где карбонил замещен бициклодиамином, содержащим от семи до десяти звеньев; и циклический амин, содержащий от четырех до семи звеньев, замещенный с использованием -CH2C(O)NH2; или
Figure 00000198
где X представляет собой N или -CH-, где C необязательно замещен с помощью -CH3, F или Cl, и где
R10 представляет собой -C(O)NH-, где азот замещен циклическим амином, содержащим от четырех до семи звеньев; -C(O)-, замещенный бициклодиамином, содержащим от семи до десяти звеньев; -C(O)-, замещенный спиродиамином, содержащим от семи до одиннадцати звеньев; пиразол; [1,2,4]оксадиазол, необязательно замещенный -CH3 по углеродному атому в оксадиазоле; -NHC(O)CH3; -CH2-, замещенный пиперазином; -CH2-, замещенный пиперазином, содержащим метиловый заместитель; -C(O)-, замещенный циклическим диамином, содержащим от пяти до семи звеньев; -C(O)NHCH2-, где -CH2- замещен азетидином; или -C(O)-, замещенный циклическим амином, содержащим от пяти до семи звеньев, где амин содержит заместитель -NH2; или
цианофенил; изохинолин; циклогексен, замещенный с использованием -NH2 в положении 4’; 1,4-диметилиндазол-5-ил; 1,6-диметилиндазол-5-ил; циклогексен, замещенный спиропиперидином в положении 4’; 1-пиперидинопиразол; или o-метоксипиридин, где
где необязательные заместители выбраны из группы состоящей из линейных, разветвленных или насыщенных циклических углеводородов, имеющих от 1 до 4 атомов углерода, метокси, -ОН, -NH2, -CH2-NH-CH3, -OCH2CH2CH3 или -OCH(CH3)2.
33. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 32, где указанное соединение или его фармацевтически эффективная соль имеет IC50, меньше чем или равную 100 нМ в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293.
34. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 33, где IC50 в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293, измеряют посредством (1) высевания клеток клеточной линии HEK-293, стабильно экспрессирующих TLR7, в модифицированную по способу Дульбекко среду Игла, содержащую 10% эмбриональную телячью сыворотку, с плотностью 2,22×105 клеток/мл в 384-луночный планшет и инкубирования в течение 2 суток при 37°C, 5% CO2; (2) добавления соединения или его фармацевтически приемлемой соли и инкубирования клеток в течение 30 минут; (3) добавления CL097 (InvivoGen) по 3 мкг/мл и инкубирования клеток в течение приблизительно 20 часов; и (4) количественного определения активации NF-каппаB зависимого репортера посредством измерения люминесценции.
35. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 32, где кольцо A представляет собой:
Figure 00000199
где X1, X2 и X3 независимо выбирают из группы, состоящей из -CH- и N;
Figure 00000200
где X4 представляет собой -CH- или N; и где Z представляет собой пиперазин, необязательно содержащий мостик или замещенный по углероду с использованием -CH3; гексагидропирроло[3,4]пиррол; циклический амин, содержащий от четырех до семи звеньев, замещенный с использованием -OH или -NH2; или -NH-, замещенный циклическим амином, содержащим от четырех до семи звеньев;
Figure 00000201
где X5 представляет собой -CH- или N; и где R представляет собой пиразол; [1,2,4]оксадиазол, необязательно замещенный с помощью -CH3 по углероду в оксадиазоле; или -C(O)NH-, замещенный по его азоту циклическим амином, содержащим от четырех до семи звеньев;
Figure 00000202
1,4-диметилиндазол-5-ил; 1,6-диметилиндазол-5-ил; 1-пиперидинопиразол; циклогексен, замещенный -NH2 в положении 4’; циклогексен, замещенный спиропиперидином в положении 4’; или 2-метоксипиридин-4-ил.
36. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 35, где указанное соединение или его фармацевтически приемлемая соль имеет IC50, меньше чем или равную 100 нМ в отношении рецепторов TLR7 человека.
37. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 35, где указанное соединение или его фармацевтически приемлемая имеет IC50, меньше чем или равную 20 нМ в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293.
38. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 36 или 37, где IC50 в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293, измеряют посредством (1) высевания клеток клеточной линии HEK-293, стабильно экспрессирующих TLR7, в модифицированную по способу Дульбекко среду Игла, содержащую 10% эмбриональную телячью сыворотку, с плотностью 2,22×105 клеток/мл в 384-луночный планшет и инкубирования в течение 2 суток при 37°C, 5% CO2; (2) добавления соединения или его фармацевтически приемлемой соли и инкубирования клеток в течение 30 минут; (3) добавления CL097 (InvivoGen) по 3 мкг/мл и инкубирования клеток в течение приблизительно 20 часов; и (4) количественного определения активации NF-каппаB зависимого репортера посредством измерения люминесценции.
39. Соединение по п. 32, которое имеет абсолютную стереохимию, приведенную в формуле (V):
Figure 00000203
,
или его фармацевтически приемлемая соль, где: R7a представляет собой H или F; где кольцо A представляет собой:
Figure 00000204
где X1, X2 и X3 независимо выбирают из группы, состоящей из -CH- и N;
Figure 00000205
где X4 представляет собой -CH- или N; и где Z представляет собой пиперазин, необязательно содержащий мостик или замещенный по углероду -CH3; гексагидропирроло[3,4]пиррол; циклический амин, содержащий от четырех до семи звеньев, замещенный -OH или -ΝH2; или -NH-, замещенный циклическим амином, содержащим от четырех до семи звеньев;
Figure 00000206
где X5 представляет собой -CH- или N; и где R представляет собой пиразол; [1,2,4]оксадиазол, необязательно замещенный с помощью -CH3 по углероду в оксадиазоле; или -C(O)NH-, замещенный по его азоту циклическим амином, содержащим от четырех до семи звеньев;
1,4-диметилиндазол-5-ил; 1,6-диметилиндазол-5-ил;
Figure 00000207
1-пиперидинопиразол; циклогексен, замещенный с использованием -NH2 в положении 4’; циклогексен, замещенный спиропиперидином в положении 4’; или 2-метоксипиридин-4-ил.
40. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 39, где указанное соединение или его фармацевтически эффективная соль имеет IC50, меньше чем или равную 100 нМ в отношении рецепторов TLR7 человека в клеточной линии HEK-293.
41. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 39, где указанное соединение или его фармацевтически эффективная соль имеет IC50, меньше чем или равную 20 нМ в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293.
42. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п. 40 или 41, где IC50 в отношении рецепторов TLR7 человека, экспрессируемых на клеточной линии HEK-293, измеряют посредством (1) высевания клеток клеточной линии HEK-293, стабильно экспрессирующих TLR7, в модифицированную по способу Дульбекко среду Игла, содержащую 10% эмбриональную телячью сыворотку, с плотностью 2,22×105 клеток/мл в 384-луночный планшет и инкубирования в течение 2 суток при 37°C, 5% CO2; (2) добавления соединения или его фармацевтически приемлемой соли и инкубирования клеток в течение 30 минут; (3) добавления CL097 (InvivoGen) по 3 мкг/мл и инкубирования клеток в течение приблизительно 20 часов; и (4) количественного определения активации NF-каппаB зависимого репортера посредством измерения люминесценции.
43. Способ лечения системной красной волчанки или волчанки, который включает введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по любому одному из пп. 32-42.
44. Способ по п. 43, где указанное соединение вводят в виде фармацевтически приемлемой соли.
45. Способ антагонистического воздействия на TLR7, который включает введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по любому одному из пп. 32-42.
46. Способ антагонистического воздействия на TLR8, который включает введение фармацевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли по любому одному из пп. 32-42.
47. Фармацевтическая композиция для лечения системной красной волчанки или волчанки, содержащая по меньшей мере одно соединение или фармацевтически приемлемую соль по любому одному из пп. 32-42 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
RU2014154397A 2012-05-31 2013-05-31 Соединения тетрагидропиразолопиримидина RU2677291C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261654023P 2012-05-31 2012-05-31
US61/654,023 2012-05-31
PCT/US2013/043679 WO2013181579A2 (en) 2012-05-31 2013-05-31 Tetrahydropyrazolopyrimidine compounds

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018146532A Division RU2733959C2 (ru) 2012-05-31 2013-05-31 Соединения тетрагидропиразолопиримидина

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2014154397A RU2014154397A (ru) 2016-07-27
RU2677291C2 true RU2677291C2 (ru) 2019-01-16

Family

ID=48626649

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018146532A RU2733959C2 (ru) 2012-05-31 2013-05-31 Соединения тетрагидропиразолопиримидина
RU2014154397A RU2677291C2 (ru) 2012-05-31 2013-05-31 Соединения тетрагидропиразолопиримидина

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018146532A RU2733959C2 (ru) 2012-05-31 2013-05-31 Соединения тетрагидропиразолопиримидина

Country Status (34)

Country Link
US (5) US9126999B2 (ru)
EP (1) EP2855476B1 (ru)
JP (2) JP6285918B2 (ru)
KR (2) KR102403007B1 (ru)
CN (2) CN104507939B (ru)
AR (1) AR091236A1 (ru)
AU (2) AU2013267204B8 (ru)
BR (1) BR112014030060B1 (ru)
CA (1) CA2874445C (ru)
CL (1) CL2014003278A1 (ru)
CY (1) CY1122692T1 (ru)
DK (1) DK2855476T3 (ru)
ES (1) ES2709119T3 (ru)
HR (1) HRP20181889T1 (ru)
HU (1) HUE040562T2 (ru)
IL (2) IL268013B2 (ru)
JO (1) JO3407B1 (ru)
LT (1) LT2855476T (ru)
MX (1) MX368455B (ru)
MY (1) MY172926A (ru)
NZ (1) NZ703459A (ru)
PE (2) PE20190973A1 (ru)
PH (2) PH12014502660B1 (ru)
PL (1) PL2855476T3 (ru)
PT (1) PT2855476T (ru)
RS (1) RS57977B1 (ru)
RU (2) RU2733959C2 (ru)
SG (1) SG11201407890VA (ru)
SI (1) SI2855476T1 (ru)
SM (1) SMT201800626T1 (ru)
TW (1) TWI572606B (ru)
UA (1) UA113440C2 (ru)
WO (1) WO2013181579A2 (ru)
ZA (1) ZA201409273B (ru)

Families Citing this family (48)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JO3407B1 (ar) * 2012-05-31 2019-10-20 Eisai R&D Man Co Ltd مركبات رباعي هيدرو بيرازولو بيريميدين
TWI652014B (zh) * 2013-09-13 2019-03-01 美商艾佛艾姆希公司 雜環取代之雙環唑殺蟲劑
CA2920791C (en) 2013-10-14 2021-11-16 Eisai R&D Management Co., Ltd. Selectively substituted quinoline compounds
RS59911B1 (sr) 2013-10-14 2020-03-31 Eisai R&D Man Co Ltd Selektivno supstituisana jedinjenja hinolina
JP2016540013A (ja) * 2013-12-13 2016-12-22 武田薬品工業株式会社 Ｔｌｒ阻害剤としてのピロロ［３，２−ｃ］ピリジン誘導体
ES2686747T3 (es) * 2014-03-27 2018-10-19 Janssen Pharmaceutica Nv Derivados de 4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[1,5-a]pirimidina y derivados de 2,3-dihidro-1H-imidazo[1,2-b]pirazol sustituidos como inhibidores de ROS1
BR112016030863B1 (pt) 2014-07-31 2021-05-04 Basf Se processo para a preparação de um composto e compostos
US9938100B2 (en) 2014-12-30 2018-04-10 Kodak Alaris Inc. System and method for metallic object detection in a media transport system
ES2882543T3 (es) 2015-05-11 2021-12-02 Basf Se Proceso para la preparación de 4-amino-piridazinas
AU2015401326B2 (en) * 2015-07-03 2018-07-26 China Agricultural University Benzylhydrazone compounds and preparation method and application thereof
US10975036B2 (en) * 2016-02-02 2021-04-13 Basf Se Catalytic hydrogenation process for preparing pyrazoles
CN107174585A (zh) * 2016-03-10 2017-09-19 兰州大学 可用作雄激素受体拮抗剂的吡啶并咪唑类化合物的新用途
US10071079B2 (en) 2016-06-29 2018-09-11 Bristol-Myers Squibb Company [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyridinyl substituted indole compounds
CA3031675A1 (en) 2016-07-30 2018-02-08 Bristol-Myers Squibb Company Dimethoxyphenyl substituted indole compounds as tlr7, tlr8 or tlr9 inhibitors
WO2018024644A1 (en) * 2016-08-02 2018-02-08 Solvay Sa Manufacture of hydrazinyl compounds useful in the manufacture of pyrazole carboxylic acid and derivatives, hydrazinyl compounds and their use
ES2902504T3 (es) * 2016-09-09 2022-03-28 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de indol sustituidos con piridilo
WO2018047081A1 (en) * 2016-09-09 2018-03-15 Novartis Ag Compounds and compositions as inhibitors of endosomal toll-like receptors
EP3636646A4 (en) * 2017-05-18 2020-12-09 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. HETEROARYL PYRAZOL DERIVATIVE AND MANUFACTURING METHOD FOR IT AND MEDICAL USES THEREOF
ES2909401T3 (es) 2017-08-04 2022-05-06 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de indol sustituidos útiles como inhibidores de TLR7/8/9
WO2019028301A1 (en) 2017-08-04 2019-02-07 Bristol-Myers Squibb Company INDOLE COMPOUNDS SUBSTITUTED WITH [1,2,4] TRIAZOLO [4,3-A] PYRIDINYL
EP3710440B1 (en) 2017-11-14 2023-04-05 Bristol-Myers Squibb Company Substituted indole compounds
KR102037494B1 (ko) 2017-12-11 2019-10-28 씨제이헬스케어 주식회사 광학활성을 갖는 피페리딘 유도체의 중간체 및 이의 제조방법
US12030878B2 (en) * 2017-12-15 2024-07-09 Bristol-Myers Squibb Company Substituted indole ether compounds
SI3728252T1 (sl) * 2017-12-18 2023-11-30 Bristol-Myers Squibb Company 4-azaindolne spojine
JP7304352B2 (ja) * 2017-12-19 2023-07-06 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー ６－アザインドール化合物
CN111491930B (zh) 2017-12-19 2023-09-26 百时美施贵宝公司 可用作tlr抑制剂的经取代的吲哚化合物
AU2018392316B2 (en) 2017-12-19 2022-05-12 Bristol-Myers Squibb Company Amide substituted indole compounds useful as TLR inhibitors
US11420958B2 (en) 2017-12-20 2022-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Aryl and heteroaryl substituted indole compounds
AU2018390544A1 (en) 2017-12-20 2020-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Diazaindole compounds
AU2018390610A1 (en) 2017-12-20 2020-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Amino indole compounds useful as TLR inhibitors
EP3728198A1 (en) * 2017-12-22 2020-10-28 Solvay Sa Process for the manufacture of pyrazole carboxylic derivatives and precursors thereof
WO2019123294A2 (en) 2017-12-22 2019-06-27 Novartis Ag Novel uses of pyrazolo piperidine derivatives
JP7312745B2 (ja) * 2018-06-07 2023-07-21 第一三共株式会社 アゼチジン誘導体及びそのプロドラッグ
EP3847173B1 (en) 2018-09-06 2023-04-12 F. Hoffmann-La Roche AG Novel pyrazolopyridine compounds for the treatment of autoimmune disease
US12172995B2 (en) 2018-10-24 2024-12-24 Bristol-Myers Squibb Company Substituted indole and indazole compounds
US11998537B2 (en) 2018-10-24 2024-06-04 Bristol-Myers Squibb Company Substituted indole dimer compounds
EP3877388B1 (en) * 2018-11-09 2023-07-26 F. Hoffmann-La Roche AG 5-[6-[[3-(4,5,6,7-tetrahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-1-yl)azetidin-1-yl]methyl]morpholin-4-yl]quinoline-8-carbonitrile derivatives and similar compounds as tlr7-9 antagonists for treating systemic lupus erythematosus
CN113454086B (zh) * 2019-02-07 2025-03-14 百济神州有限公司 作为tlr7激动剂的咪唑并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺衍生物
ES2987832T3 (es) 2019-05-09 2024-11-18 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de benzimidazolona sustituidos
EP4008720A4 (en) * 2019-08-02 2023-08-02 BeiGene, Ltd. IMIDAZO[2,1-F][1,2,4]TRIAZIN-4-AMINE DERIVATIVE USED AS A TLR8 AGONIST
KR20220075381A (ko) 2019-10-01 2022-06-08 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 치환된 비시클릭 헤테로아릴 화합물
WO2021067657A1 (en) 2019-10-04 2021-04-08 Bristol-Myers Squibb Company Substituted carbazole compounds
KR20190120112A (ko) 2019-10-08 2019-10-23 씨제이헬스케어 주식회사 광학활성을 갖는 피페리딘 유도체의 중간체 및 이의 제조방법
WO2021084022A1 (en) 2019-10-31 2021-05-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Hydropyrazino[1,2-d][1,4]diazepine compounds for the treatment of autoimmune disease
CN114728976B (zh) 2019-11-19 2024-08-16 豪夫迈·罗氏有限公司 用于治疗自身免疫性疾病的氢-1H-吡咯并[1,2-a]吡嗪化合物
JPWO2021112251A1 (ru) * 2019-12-06 2021-06-10
US11661431B2 (en) 2021-04-16 2023-05-30 Gilead Sciences, Inc. Thienopyrrole compounds
CN117957234A (zh) 2021-09-10 2024-04-30 吉利德科学公司 噻吩并吡咯化合物

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009064274A1 (en) * 2007-11-15 2009-05-22 Eisai R & D Management Co., Ltd. Enantiomerically enriched imidazoazepinone compounds
RU2010128543A (ru) * 2007-12-11 2012-01-20 Сайтопатфайндер, Инк. (Jp) Карбоксамидные соединения и их применение в качестве агонистов хемокиновых рецепторов

Family Cites Families (115)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3116230B2 (ja) 1989-02-15 2000-12-11 武田薬品工業株式会社 三環式縮合ピリミジン誘導体
JPH04133055A (ja) 1990-09-25 1992-05-07 Konica Corp 色再現性の改良されたハロゲン化銀カラー写真感光材料
US5356897A (en) 1991-09-09 1994-10-18 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. 3-(heteroaryl)-pyrazololi[1,5-a]pyrimidines
FR2733749B1 (fr) 1995-05-05 1997-06-13 Oreal Compositions pour la teinture des fibres keratiniques contenant des diamino pyrazoles, procede de teinture, nouveaux diamino pyrazoles et leur procede de preparation
DE19709877A1 (de) 1997-03-11 1998-09-17 Bayer Ag 1,5-Dihydro-pyrazolo[3,4-d]-pyrimidinon-derivate
US6472416B1 (en) 1999-08-27 2002-10-29 Abbott Laboratories Sulfonylphenylpyrazole compounds useful as COX-2 inhibitors
UA72611C2 (ru) 2000-05-17 2005-03-15 Орто-Макнейл Фармацевтикал, Інк. Translated By PlajПРОИЗВОДНЫЕ ЗАМЕЩЕННОГО ПИРОЛОПИРИДИНОНА, ПОЛЕЗНЫЕ КАК ИНГИБИТОРЫ ФОСФОДИЭСТЕРАЗЫ
MXPA03004848A (es) 2000-12-06 2003-08-19 Aventis Pharma Gmbh Derivados de guanidina y amidina como inhibidores del factor xa.
KR20030082982A (ko) * 2001-03-14 2003-10-23 그뤼넨탈 게엠베하 치환된 피라졸로피리미딘 및 티아졸로피리미딘
DE60301574T2 (de) 2002-04-26 2006-01-12 Pfizer Products Inc., Groton Triaryl-oxy-aryl-spiro-pyrimidin-2, 4, 6-trion metalloproteinase inhibitoren
DE10221100C1 (de) 2002-05-03 2003-06-05 Neuhaus Elektronik Gmbh Elektrisch leitfähige Dichtung sowie Verfahren und Vorrichtung zu deren Herstellung
JP2003327860A (ja) 2002-05-09 2003-11-19 Konica Minolta Holdings Inc 着色組成物、着色微粒子分散物、インクジェット用インク、インクジェット記録方法
DK1534707T5 (da) 2002-06-19 2010-01-11 Janssen Pharmaceutica Nv Substituerede 2,4-dihydropyrrolo[3,4-b]quinolin-9-on-derivater egnede som phosphodiesteraseinhibitorer
CA2494700C (en) 2002-08-26 2011-06-28 Takeda Pharmaceutical Company Limited Calcium receptor modulating compound and use thereof
CN1771231B (zh) * 2002-08-26 2011-05-25 武田药品工业株式会社 钙受体调节性化合物及其用途
AU2003274652A1 (en) 2002-10-23 2004-05-13 Obetherapy Biotechnology Compounds, compositions and methods for modulating fat metabolism
SE0300120D0 (sv) 2003-01-17 2003-01-17 Astrazeneca Ab Novel compounds
JP2006522744A (ja) * 2003-04-11 2006-10-05 ノボ　ノルディスク　アクティーゼルスカブ グルココルチコイド受容体アゴニスト療法に伴う副作用を最小化するための、１１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ１型阻害剤およびグルココルチコイド受容体アゴニストを使用する併用療法
EP1628970A2 (en) 2003-04-30 2006-03-01 The Institutes of Pharmaceutical Discovery, LLC Heterocycle substituted carboxylic acids as inhibitors of protein tyrosine phosphatase-1b
ES2290743T3 (es) 2003-04-30 2008-02-16 The Institutes For Pharmaceutical Discovery, Llc Heteroarilos sustituidos como inhibidores de las proteina-tirosina fosfatasas.
US7329762B2 (en) 2003-06-12 2008-02-12 Merck & Co., Inc. Prodrugs of mitotic kinesin inhibitors
US20060025337A1 (en) 2003-07-01 2006-02-02 President And Fellows Of Harvard College Sirtuin related therapeutics and diagnostics for neurodegenerative diseases
AU2004253579B2 (en) 2003-07-01 2010-12-23 Biomol International L.P. Sirt1 modulators for manipulating cells/organism lifespan/stress response
US20050085531A1 (en) 2003-10-03 2005-04-21 Hodge Carl N. Thiophene-based compounds exhibiting ATP-utilizing enzyme inhibitory activity, and compositions, and uses thereof
GB0324159D0 (en) 2003-10-15 2003-11-19 Glaxo Group Ltd Novel compounds
US8017634B2 (en) 2003-12-29 2011-09-13 President And Fellows Of Harvard College Compositions for treating obesity and insulin resistance disorders
FR2865208B1 (fr) 2004-01-16 2009-01-16 Sanofi Synthelabo Derives de 1,4-diazabicyclo[3.2.1]octanecarboxmique, leur preparation et leur application en therapeutique
US7279232B2 (en) 2004-01-26 2007-10-09 Universal Display Corporation Electroluminescent stability
US20080004263A1 (en) 2004-03-04 2008-01-03 Santora Vincent J Ligands of Follicle Stimulating Hormone Receptor and Methods of Use Thereof
US20050256210A1 (en) 2004-05-04 2005-11-17 Roger Olsson Compounds with activity at estrogen receptors
US7825265B2 (en) 2004-05-04 2010-11-02 Acadia Pharmaceuticals Inc. Compounds with activity at estrogen receptors
RU2407736C2 (ru) 2004-10-12 2010-12-27 Декод Дженетикс Ехф Пери-замещенные арилсульфонамидные бициклические соединения, предназначенные для лечения окклюзионного заболевания артерий
WO2006055708A2 (en) 2004-11-18 2006-05-26 The Institutes For Pharmaceutical Discovery, Llc Heterocycle substituted carboxylic acids for the treatment of diabetes
US20080051418A1 (en) 2004-11-26 2008-02-28 Tsuyoshi Maekawa Arylalkanoic Acid Derivative
WO2006079021A2 (en) 2005-01-20 2006-07-27 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Use of sirtuin-activating compounds for treating flushing and drug induced weight gain
CA2610854A1 (en) 2005-03-30 2006-10-05 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Nicotinamide riboside and analogues thereof
WO2006129587A1 (ja) 2005-05-30 2006-12-07 Genecare Research Institute Co., Ltd. ピラゾロン誘導体を含有する医薬組成物
JPWO2006129583A1 (ja) 2005-05-30 2009-01-08 株式会社ジーンケア研究所 ピラゾロン誘導体
EP1888512A2 (en) 2005-06-06 2008-02-20 Smithkline Beecham Corporation Chemical compounds
WO2006138418A2 (en) 2005-06-14 2006-12-28 President And Fellows Of Harvard College Improvement of cognitive performance with sirtuin activators
GB0513886D0 (en) 2005-07-06 2005-08-10 Glaxo Group Ltd Novel compounds
US20070149466A1 (en) 2005-07-07 2007-06-28 Michael Milburn Methods and related compositions for treating or preventing obesity, insulin resistance disorders, and mitochondrial-associated disorders
WO2007008541A2 (en) 2005-07-08 2007-01-18 Kalypsys, Inc. Cellular cholesterol absorption modifiers
WO2007026950A1 (en) 2005-09-01 2007-03-08 Astellas Pharma Inc. Pyridazinone derivatives used for the treatment of pain
US20070203236A1 (en) 2006-01-11 2007-08-30 Smith Jeffrey W Novel antagonists of the human fatty acid synthase thioesterase
WO2007087283A2 (en) 2006-01-23 2007-08-02 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiophene-carboxamides useful as inhibitors of protein kinases
JPWO2007102531A1 (ja) 2006-03-08 2009-07-23 武田薬品工業株式会社 併用薬
EP2013206A1 (en) 2006-04-25 2009-01-14 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical compounds
EP2027116A2 (en) 2006-05-23 2009-02-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiophene-carboxamides useful as inhibitors of protein kinases
US7851495B2 (en) 2006-05-23 2010-12-14 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiophene-carboxamides useful as inhibitors of protein kinases
EA201200423A1 (ru) 2006-06-09 2012-08-30 Икос Корпорейшн Замещенные фенилуксусные кислоты как dp-2-антагонисты
AR061974A1 (es) 2006-07-14 2008-08-10 Novartis Ag Derivados de pirimidina como inhibidores de alk, composiciones farmaceuticas y procesos de obtencion
MX2009001036A (es) * 2006-08-04 2009-04-23 Merz Pharma Gmbh & Co Kgaa Pirazolopirimidinas, proceso para su preparacion y su uso como medicina.
WO2008033894A2 (en) 2006-09-14 2008-03-20 Acadia Pharmaceuticals Inc. Compounds with activity at estrogen receptors
CN101534824A (zh) 2006-11-17 2009-09-16 艾博特公司 作为化学活素受体拮抗剂的氨基吡咯烷
PE20121126A1 (es) 2006-12-21 2012-08-24 Plexxikon Inc Compuestos pirrolo [2,3-b] piridinas como moduladores de quinasa
GB0625659D0 (en) 2006-12-21 2007-01-31 Cancer Rec Tech Ltd Therapeutic compounds and their use
EP2121613A2 (en) 2007-01-31 2009-11-25 Vertex Pharmaceuticals, Inc. 2-aminopyridine derivatives useful as kinase inhibitors
WO2008097538A1 (en) 2007-02-08 2008-08-14 Merck & Co., Inc. Therapeutic agents
EP2009002A1 (en) 2007-06-21 2008-12-31 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) New process for the manufacture of 1H-imidazo [4,5-c]-quinoline ring systems
EP2170337A4 (en) 2007-06-28 2013-12-18 Abbvie Inc NEW TRIAZOLOPYRIDAZINE
US8022209B2 (en) 2007-09-12 2011-09-20 Janssen Pharmaceutica Nv Substituted nitrogen-containing heteroaryl derivatives useful as modulators of the histamine H4 receptor
GB0720390D0 (en) 2007-10-18 2007-11-28 Prosidion Ltd G-Protein coupled receptor agonists
CA2709784A1 (en) 2007-12-21 2009-07-09 University Of Rochester Method for altering the lifespan of eukaryotic organisms
AR070127A1 (es) 2008-01-11 2010-03-17 Novartis Ag Pirrolo - pirimidinas y pirrolo -piridinas
JP5584138B2 (ja) 2008-01-11 2014-09-03 ノバルティス アーゲー キナーゼ阻害剤としてのピリミジン類
WO2010051048A1 (en) 2008-02-20 2010-05-06 The Wistar Institute Microrna modulators and method for identifying and using the same
US20120010177A1 (en) 2008-02-20 2012-01-12 The Wistar Institute / North Carolina State University MicroRNA Modulators and Method for Identifying And Using The Same
EP2259680A4 (en) 2008-03-04 2012-01-25 Merck Sharp & Dohme SOLUBLE EPOXYHYDROLASE INHIBITORS, COMPOSITIONS COMPRISING SUCH COMPOUNDS AND TREATMENT METHODS THEREWITH
US9066951B2 (en) 2008-05-29 2015-06-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Drugs to treat HPV infection
CA2727245A1 (en) 2008-06-11 2009-12-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Imidazole derivatives useful as inhibitors of faah
EP2299824B1 (en) 2008-06-11 2013-06-19 Merck Sharp & Dohme Corp. Pyrazole derivatives useful as inhibitors of faah
US20110306597A1 (en) 2008-06-18 2011-12-15 James Michael Crawforth Nicotinamide Derivatives
TW201010997A (en) 2008-06-18 2010-03-16 Pfizer Ltd Nicotinamide derivatives
US8263642B2 (en) 2008-06-25 2012-09-11 Vanderbilt University Antimicrobial compounds and methods of use thereof
CN102131810B (zh) 2008-06-25 2014-02-26 百时美施贵宝公司 作为抗hiv剂的二酮稠合的吡咯并哌啶类和吡咯并哌嗪类
ES2389478T3 (es) 2008-06-25 2012-10-26 Bristol-Myers Squibb Company Derivados de dicetopiperidina como inhibidores de la fijación del VIH
UY31952A (es) 2008-07-02 2010-01-29 Astrazeneca Ab 5-metilideno-1,3-tiazolidina-2,4-dionas sustituidas como inhibidores de quinasa pim
MX2011001090A (es) 2008-07-28 2011-03-15 Gilead Sciences Inc Compuestos de inhibidor de desacetilasa de histona de cicloalquilideno y heterocicloalquilideno.
WO2010017079A1 (en) 2008-08-04 2010-02-11 Merck & Co., Inc. Oxazole derivatives useful as inhibitors of faah
EP2312945A4 (en) 2008-08-13 2012-05-09 Merck Sharp & Dohme PURE DERIVATIVES FOR THE TREATMENT OF MORBUS ALZHEIMER
EP2328871B1 (en) 2008-08-25 2020-04-01 Novartis AG Hedgehog pathway modulators
US8853125B2 (en) 2008-09-24 2014-10-07 Basf Se Pyrazole compounds for controlling invertebrate pests
US8809344B2 (en) 2008-10-29 2014-08-19 Apath, Llc Compounds, compositions, and methods for control of hepatitis C viral infections
EP2352725A1 (en) 2008-11-07 2011-08-10 Wyeth LLC Quinoxaline-based lxr modulators
WO2010083199A1 (en) 2009-01-19 2010-07-22 Abbott Laboratories Benzthiazole inhibitors of poly(adp-ribose)polymerase
EP2380878B1 (en) 2009-01-19 2013-08-14 Daiichi Sankyo Company, Limited Cyclic compound having hetero atom
HUE047643T2 (hu) 2009-03-02 2020-05-28 Stemsynergy Therapeutics Inc Módszerek és készítmények rák kezelésére és a WNT által közvetített hatások csökkentésére egy sejtben
TW201041888A (en) 2009-05-06 2010-12-01 Plexxikon Inc Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
US20120141483A1 (en) 2009-06-04 2012-06-07 Mary Katherine Delmedico Methods of treating or preventing psoriasis, and/or alzheimer's disease using indane acetic acid derivatives
US20110021531A1 (en) 2009-07-27 2011-01-27 Chobanian Harry Oxazole derivatives useful as inhibitors of faah
EP2470183B1 (en) 2009-08-26 2015-09-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Heterocyclic amide compounds as protein kinase inhibitors
ES2620177T3 (es) 2009-10-15 2017-06-27 Guerbet Agentes de formación de imágenes y su uso para el diagnóstico in vivo de enfermedades neurodegenerativas, particularmente la enfermedad de Alzheimer y enfermedades derivadas
UY33001A (es) 2009-11-06 2011-05-31 Boehringer Ingelheim Int Derivados arilo y heteroarilcarbonilo de hexahidroindenopiridina y octahidrobenzoquinolina
JP2013032290A (ja) * 2009-11-20 2013-02-14 Dainippon Sumitomo Pharma Co Ltd 新規縮合ピリミジン誘導体
WO2011072064A1 (en) 2009-12-08 2011-06-16 Array Biopharma Inc. S piro [chroman - 4, 4 ' - imidazol] ones as beta - secretase inhibitors
FR2953837B1 (fr) 2009-12-10 2012-03-09 Sanofi Aventis Derives 9h-pyridino[3,4-b]indole disubstitues, leur preparation et leur utilisation therapeutique
EP2523561A4 (en) 2009-12-22 2013-06-05 Merck Sharp & Dohme 7,8-DIHYDRO-1H-IMIDAZO [2,1-B] PURINE-4 (5H) -ONE DERIVATIVES AND METHOD OF USE
EP2523664A4 (en) 2010-01-13 2013-06-26 Tempero Pharmaceuticals Inc COMPOUNDS AND METHODS
BR112012018913A2 (pt) 2010-01-28 2017-06-20 Merck Sharp & Dohme "composição farmacêutica, e, uso da composição"
US20110190266A1 (en) 2010-02-04 2011-08-04 Daniel Chu 5,6,6a,7,8,9-HEXAHYDRO-2H-PYRIDOPHTHALAZINONE INHIBITORS OF POLY(ADP-RIBOSE)POLYMERASE (PARP)
US8865703B2 (en) 2010-03-26 2014-10-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pyridyltriazoles
JP5871896B2 (ja) 2010-03-26 2016-03-01 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｂ−ｒａｆキナーゼインヒビター
EP2371219A1 (en) 2010-04-01 2011-10-05 Basf Se Herbicidal acylhydrazides
MX2012011504A (es) 2010-04-05 2013-01-18 Mannkind Corp Inhibidores de enzima 1 dependiente de inositol (ire-1 alfa).
JP5856606B2 (ja) 2010-04-22 2016-02-10 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション Ｆａａｈの調節薬として有用なオキサゾール誘導体
AU2011242688B2 (en) 2010-04-23 2015-01-22 Kineta, Inc. Anti-viral compounds
EP2401915A1 (en) 2010-06-29 2012-01-04 Basf Se Pyrazolopyridine compounds
CN102048738A (zh) 2010-12-08 2011-05-11 辽宁利锋科技开发有限公司 含有环嘧耐平药用复合物的药物组合物制剂
TWI574957B (zh) 2011-07-29 2017-03-21 佳佑製藥治療公司 含有醯肼的核運輸調控子及其用途
WO2013019561A1 (en) 2011-07-29 2013-02-07 Karyopharm Therapeutics, Inc. Nuclear transport modulators and uses thereof
JP2013159564A (ja) * 2012-02-02 2013-08-19 Kowa Co ピラゾロピリミジン−７−アミン誘導体を有効成分とするｔｌｒ９阻害剤
TW201336851A (zh) 2012-02-13 2013-09-16 必治妥美雅史谷比公司 烯二炔化合物，其共軛物及彼等之用途與方法
BR112014029868A2 (pt) 2012-05-31 2017-06-27 Phenex Pharmaceuticals Ag compostos, e, composição farmacêutica
JO3407B1 (ar) * 2012-05-31 2019-10-20 Eisai R&D Man Co Ltd مركبات رباعي هيدرو بيرازولو بيريميدين

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009064274A1 (en) * 2007-11-15 2009-05-22 Eisai R & D Management Co., Ltd. Enantiomerically enriched imidazoazepinone compounds
RU2010128543A (ru) * 2007-12-11 2012-01-20 Сайтопатфайндер, Инк. (Jp) Карбоксамидные соединения и их применение в качестве агонистов хемокиновых рецепторов

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DALINGER IGOR L ET AL, Liquid-phase synthesis of combinatorial libraries based on 7-trifluoromethyl-substituted pyrazolo[1,5-a]pyrimidine scaffold" JOURNAL OF COMBINATORIAL CHEMISTRY, AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, vol. 7, no. 2, pages 236 - 245, 2005.02.11. *

Also Published As

Publication number Publication date
AU2013267204A1 (en) 2015-01-29
RU2018146532A (ru) 2019-01-31
CN104507939A (zh) 2015-04-08
CL2014003278A1 (es) 2015-06-12
KR102403007B1 (ko) 2022-05-31
IL268013B2 (en) 2024-05-01
MX368455B (es) 2019-10-03
TW201402575A (zh) 2014-01-16
RU2014154397A (ru) 2016-07-27
HRP20181889T1 (hr) 2019-01-11
ES2709119T3 (es) 2019-04-15
CA2874445C (en) 2022-06-21
SI2855476T1 (sl) 2018-12-31
WO2013181579A3 (en) 2014-03-27
PH12014502660A1 (en) 2015-01-21
HK1203498A1 (en) 2015-10-30
AU2013267204A8 (en) 2017-04-13
SMT201800626T1 (it) 2019-01-11
PT2855476T (pt) 2018-12-03
HUE040562T2 (hu) 2019-03-28
US20160339032A1 (en) 2016-11-24
BR112014030060B1 (pt) 2022-05-31
IL235986B (en) 2019-11-28
LT2855476T (lt) 2019-01-10
AU2017204586B2 (en) 2018-11-08
US20130324547A1 (en) 2013-12-05
AU2013267204B2 (en) 2017-04-06
US20160030430A1 (en) 2016-02-04
AR091236A1 (es) 2015-01-21
US20180273532A1 (en) 2018-09-27
PH12019500522A1 (en) 2020-11-04
ZA201409273B (en) 2016-05-25
US9850242B2 (en) 2017-12-26
JP2015523981A (ja) 2015-08-20
CN104507939B (zh) 2017-07-25
US11130758B2 (en) 2021-09-28
EP2855476B1 (en) 2018-09-05
AU2017204586A1 (en) 2017-07-27
JP2018087221A (ja) 2018-06-07
PE20150220A1 (es) 2015-02-14
CY1122692T1 (el) 2020-07-31
JO3407B1 (ar) 2019-10-20
US20200347050A1 (en) 2020-11-05
US10640500B2 (en) 2020-05-05
US9446046B2 (en) 2016-09-20
KR20210076210A (ko) 2021-06-23
US9126999B2 (en) 2015-09-08
PH12014502660B1 (en) 2020-02-14
IL268013B1 (en) 2024-01-01
DK2855476T3 (en) 2018-12-17
EP2855476A2 (en) 2015-04-08
WO2013181579A2 (en) 2013-12-05
NZ703459A (en) 2016-09-30
IL268013A (en) 2019-09-26
KR20150016366A (ko) 2015-02-11
IL235986A0 (en) 2015-02-01
SG11201407890VA (en) 2014-12-30
RS57977B1 (sr) 2019-01-31
CN107344941B (zh) 2020-04-21
JP6285918B2 (ja) 2018-02-28
MY172926A (en) 2019-12-14
JP6619829B2 (ja) 2019-12-11
KR102268155B1 (ko) 2021-06-24
AU2013267204B8 (en) 2017-04-13
RU2018146532A3 (ru) 2019-06-21
TWI572606B (zh) 2017-03-01
PE20190973A1 (es) 2019-07-09
UA113440C2 (xx) 2017-01-25
PL2855476T3 (pl) 2019-02-28
BR112014030060A2 (pt) 2017-09-12
CN107344941A (zh) 2017-11-14
CA2874445A1 (en) 2013-12-05
RU2733959C2 (ru) 2020-10-08
MX2014014497A (es) 2015-06-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2677291C2 (ru) Соединения тетрагидропиразолопиримидина
US10087174B2 (en) Selectively substituted quinoline compounds
EP3057948B1 (en) Selectively substituted quinoline derivatives
HK1203498B (en) Tetrahydropyrazolopyrimidine compounds