[go: up one dir, main page]

RU2376367C2 - Структурирующие молочнокислые бактерии - Google Patents

Структурирующие молочнокислые бактерии Download PDF

Info

Publication number
RU2376367C2
RU2376367C2 RU2005131964/13A RU2005131964A RU2376367C2 RU 2376367 C2 RU2376367 C2 RU 2376367C2 RU 2005131964/13 A RU2005131964/13 A RU 2005131964/13A RU 2005131964 A RU2005131964 A RU 2005131964A RU 2376367 C2 RU2376367 C2 RU 2376367C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
seq
strain
cncm
polysaccharides
strain according
Prior art date
Application number
RU2005131964/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2005131964A (ru
Inventor
Филипп ОРВАТ (FR)
Филипп ОРВАТ
Элиз МАНУРИ (FR)
Элиз МАНУРИ
Сонья ЮППЕР (FR)
Сонья ЮППЕР
Кристоф ФРЭМО (FR)
Кристоф ФРЭМО
Original Assignee
Даниско А/С
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=32922222&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2376367(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Даниско А/С filed Critical Даниско А/С
Publication of RU2005131964A publication Critical patent/RU2005131964A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2376367C2 publication Critical patent/RU2376367C2/ru

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
    • A23C9/00Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1238Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt using specific L. bulgaricus or S. thermophilus microorganisms; using entrapped or encapsulated yoghurt bacteria; Physical or chemical treatment of L. bulgaricus or S. thermophilus cultures; Fermentation only with L. bulgaricus or only with S. thermophilus
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/52Genes encoding for enzymes or proenzymes
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/21Streptococcus, lactococcus
    • A23V2400/249Thermophilus
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/46Streptococcus ; Enterococcus; Lactococcus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Dairy Products (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области пищевой промышленности и биотехнологии. Описан штамм Streptococcus thermophilus, продуцирующий молочную кислоту. Также раскрыты последовательности нуклеиновых кислот, выделенные из этого штамма, продуцирующие полисахариды, пищевая или фармацевтическая композиция и молочный продукт, содержащие такой штамм. Штамм обладает сильными структурирующими свойствами. Изобретение может быть использовано в пищевой промышленности. 13 н. и 3 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 табл.

Description

Объектом настоящего изобретения являются штаммы молочнокислых бактерий, содержащие, по меньшей мере, одну последовательность, выбранную из группы, состоящей из нуклеотидных последовательностей SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8, а также способ получения этих штаммов. Наконец, настоящее изобретение относится к пищевым продуктам, содержащим и/или произведенным с использованием упомянутых штаммов.
В пищевой промышленности используют многие бактерии, в частности в виде ферментов, в частности, молочнокислые бактерии для улучшения вкуса и консистенции продуктов, а также для увеличения срока хранения этих продуктов. В молочной промышленности молочнокислые бактерии интенсивно используются для обеспечения скисания молока (сквашиванием), а также для структурирования продукта, в который их вводят.
Среди молочнокислых бактерий, используемых в пищевой промышленности, можно указать роды Streprococcus, Lactococcus, Lactobacillus, Leuconostoc, Pediococcus и Bifidobacterium.
Молочнокислые бактерии вида Streptococcus thermophilus используются экстенсивно отдельно или в сочетании с другими бактериями для производства пищевых продуктов, в частности ферментированных продуктов. В частности, они входят в состав ферментов, используемых для производства продуктов из сквашенного молока, например йогуртов. Некоторые из них играют преобладающую роль в получении необходимой консистенции ферментированного продукта. Это свойство тесно связано с производством полисахаридов. Среди штаммов Streptococcus thermophilus различают структурирующие штаммы и неструктурирующие штаммы.
Под структурирующим штаммом Streptococcus thermophilus следует понимать штамм, образующий сквашенное молоко, имеющее в описанных в примерах условиях вязкость, примерно превышающую 35 Па·с, область тиксотропии примерно ниже 2000 Па/с и порог текучести примерно ниже 14 Па. Штамм Streptococcus thermophilus можно определить как сильно структурирующий, если он образует сквашенное молоко, имеющее в условиях, описанных в примерах, вязкость примерно выше 50 Па·с, область тиксотропии примерно ниже 1000 Па/с и порог текучести примерно ниже 10 Па.
Для решения задач, стоящих перед пищевой промышленностью, возникла необходимость в создании новых структурирующих штаммов молочнокислых бактерий, в частности, Streptococcus thermophilus.
В связи с этим задачей настоящего изобретения является создание штамма молочнокислых бактерий, обладающего хорошими свойствами структурирования пищевых продуктов.
С учетом этого объектом настоящего изобретения является штамм молочнокислых бактерий, содержащий, по меньшей мере, одну последовательность, выбранную из группы, состоящей из нуклеотидных последовательностей SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8.
Настоящим изобретением предлагается также новый штамм Streptococcus thermophilus, депонированный 26 февраля 2003 г. в Национальной коллекции культур микроорганизмов под номером 1-2980.
Объектом настоящего изобретения являются также нуклеотидные последовательности SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8, а также нуклеотидные последовательности, содержащие, по меньшей мере, одну из этих нуклеотидных последовательностей.
Еще одним объектом настоящего изобретения являются плазмиды, используемые в качестве векторов для клонирования и/или экспрессии, содержащие, по меньшей мере, одну последовательность, выбранную из группы, состоящей из нуклеотидных последовательностей SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8, а также нуклеотидные последовательности, содержащие, по меньшей мере, одну из этих нуклеотидных последовательностей.
Настоящее изобретение касается также бактерий-хозяев, трансформированных описанными выше плазмидами или векторами.
Объектом настоящего изобретения является также способ получения описанных выше штаммов, заключающийся в том, что эти штаммы получают путем трансформации плазмидами или векторами, содержащими, по меньшей мере, одну из нуклеотидных последовательностей SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8, или с помощью вектора, содержащего нуклеотидную последовательность, содержащую, по меньшей мере, одну из этих нуклеотидных последовательностей.
Настоящим изобретением предлагаются также бактериальные культуры, содержащие, по меньшей мере, один описанный выше штамм или содержащие, по меньшей мере, один штамм, полученный с помощью способа в соответствии с настоящим изобретением.
Наконец, настоящее изобретение касается пищевой или фармацевтической композиции, содержащей, по меньшей мере, один штамм в соответствии с настоящим изобретением или, по меньшей мере, один штамм, полученный с помощью способа в соответствии с настоящим изобретением, или бактериальную культуру в соответствии с настоящим изобретением.
Настоящее изобретение отличается многими преимуществами в плане структурирования сред, в которых оно используется. В частности, оно позволяет получать гели, например, на основе сквашенного молока, которые являются консистентными, клейкими, обволакивающими, обладающими текучестью и устойчивостью по отношению к перемешиванию и не образуют зерен.
Другие преимущества и отличительные признаки настоящего изобретения будут более очевидны из нижеследующего описания и примеров, приведенных в качестве иллюстрации и не носящих ограничительного характера.
Прежде всего, настоящее изобретение относится к штамму молочнокислых бактерий, содержащему, по меньшей мере, одну последовательность, выбранную из группы, состоящей из нуклеотидных последовательностей SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8.
Молочнокислые бактерии являются грамположительными прокариотами, входящими в группу Firmicutes. Они являются гетеротрофными и хемиорганотрофными; как правило, анаэробными или аэротолерантыми, их метаболизм может быть гомо ферментативным или гетероферментативным: молочнокислые бактерии, в основном, производят молочную кислоту путем брожения глюцидного субстрата. Лишенные каталазы молочнокислые бактерии образуют гетерогенную группу кокков, включая роды Aerococcus, Enterococcus, Lactococcus, Leuconostoc, Oenococcus, Pediococcus, Streptococcus, Tetragenococcus, Vagococcus и Weissella или включая палочки родов Lactobacillus и Carnobacterium. Название «молочнокислые бактерии» часто распространяют на другие родственные бактерии, такие как Bifidobacterium.
Среди штаммов молочнокислых бактерий, которые могут использоваться в рамках настоящего изобретения, можно назвать роды Streptococcus, Lactococcus, Lactobacillus, Leuconostoc, Pediococcus и Bifidobacterium.
Предпочтительным штаммом молочнокислых бактерий в соответствии с настоящим изобретением является Streptococcus thermophilus.
Streptococcus thermophilus является видом, присутствующим в естественном виде в молоке и широко используемым в пищевой промышленности, в частности в молочной промышленности, так как позволяет сквашивать и структурировать молоко. В данном случае речь идет о гомоферментативной термофильной бактерии.
Настоящее изобретение касается также штамма Streptococcus thermophilus, депонированного 26 февраля 2003 г. в Национальной коллекции культур микроорганизмов под номером 1-2980.
Объектом настоящего изобретения являются также нуклеотидные последовательности SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8.
Нуклеотидные последовательности SEQ ID №2 - SEQ ID №8 являются частью оперона примерно из 14350 пар оснований, участвующего в синтезе полисахаридов (оперон PS). Этот оперон входит в последовательность SEQ ID №1. Это значит, что в соответствии с настоящим изобретением последовательность SEQ ID №1 включает последовательности SEQ ID №2 - SEQ ID №8.
Первичная структура оперона, определенная в соответствии с настоящим изобретением, приведена на фиг.1. Между генами deoD (перед опероном PS) и orfl4.9 (после оперона PS) было идентифицировано 17 ORF (открытых рамок считывания), называемых eps13A, eps13B, eps13C, eps13D, eps13E, eps13F, eps13G, eps13H, eps13I, eps13J, eps13K, eps13L, eps13M, eps13N, eps13O, eps13P и IS1193. 16 первых ORF, расположенных на кодирующей нити, потенциально кодируют полипептиды, вовлеченные в синтез экзоклеточных или капсульных полисахаридов; 17-я ORF, расположенная на антипараллельной нити, потенциально кодирует функциональный транспозон, принадлежащий к семейству IS1193.
Можно присвоить наименование и определить место каждой ORF. Ниже указано наименование каждой ORF, затем предполагаемая функция выделенного белка и, наконец, позиция области, содержащей эту ORF (по отношению к последовательности SEQ ID №1, указанной в списке последовательностей):
- eps13A: регулятор транскрипции (342…1802)
- eps13B: полимеризация (регуляция длины цепи) и/или транспорт полисахаридов (1803…2534)
- eps13C: полимеризация (регуляция длины цепи) и/или транспорт полисахаридов (2543…3235)
- eps13D: полимеризация (регуляция длины цепи) и/или транспорт полисахаридов (3245…3985)
- eps13E: ундекапренилфосфатгликозилтрансфераза (4042…5409)
- eps13F: ундекапренилфосфатгликозилтрансфераза(5611…6195)
- eps13G: ундекапренилфосфатгликозилтрансфераза (6251…6634)
- eps13H: бета-1,4-галактозилтрансфераза (6643…7092)
- eps13I:. бета-1,4-галактозилтрансфераза (7092…7607)
- eps13J: рамнозилтрансфераза (7597…8493)
- eps13K: гликозилтрансфераза (8763…9797)
- eps13L: полимераза повторяющейся единицы (9827…10969)
- eps13M: полимераза повторяющейся единицы (10984…11793)
- eps13N: гликозилтрансфераза (11844…12578)
- eps13O: гликозилтрансфераза (12633…13016)
- eps13P: трансмембранный переносчик (13049…14482)
- IS1193: транспозон (дополнение (14614…15870).
Настоящее изобретение касается также нуклеотидных последовательностей, содержащих, по меньшей мере, одну последовательность, выбранную из группы, состоящей из нуклеотидных последовательностей SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8. Под нуклеотидной последовательностью, содержащей, по меньшей мере, одну из вышеперечисленных последовательностей, в рамках настоящего изобретения следует понимать нуклеотидные последовательности, содержащие, по меньшей мере, одну ORF, продукт трансляции которой обладает значительной идентичностью (процентное содержание идентичных остатков превышает или равно 80% после сопоставления последовательностей при максимальном соответствии между позициями остатков), по меньшей мере, с одной из полипептидных последовательностей, выведенных из ORF, идентифицированных в последовательностях SEQ ID №1 - SEQ ID №8.
Нуклеотидные последовательности SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8 могут быть встроены в вектор с помощью генной инженерии, в частности с помощью технологий рекомбинантных ДНК, хорошо известных специалистам.
Настоящее изобретение касается также вектора для клонирования и/или экспрессии, содержащего, по меньшей мере, одну последовательность, выбранную из группы, состоящей из нуклеотидных последовательностей SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8, или определенных выше нуклеотидных последовательностей.
Предпочтительным вектором в соответствии с настоящим изобретением являются плазмиды. Речь может идти о репликативных или интегративных плазмидах.
Этими векторами и/или плазмидами можно трансформировать бактерии для включения в них этих векторов и/или плазмид. Трансформацию можно осуществлять с помощью электропорации или конъюгации, как известно специалистам в этой области техники.
Настоящее изобретение касается также бактерий-хозяев, трансформированных указанными выше плазмидами или векторами.
Предпочтительно трансформированными бактериями являются молочнокислые бактерии. В частности, речь идет о молочнокислых бактериях, которые могут быть выбраны из родов Streptococcus, Lactococcus, Lactobacillus, Leuconostoc, Pediococcus и Bifido bacterium.
Предпочтительным штаммом молочнокислых бактерий в соответствии с настоящим изобретением является Streptococcus thermophilus.
Настоящее изобретение касается также способа получения штамма или трансформированных бактерий-хозяев в соответствии с настоящим изобретением, заключающегося в том, что их получают путем трансформации вектором, содержащим, по меньшей мере, одну последовательность, выбранную из группы, состоящей из нуклеотидных последовательностей SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8, или нуклеотидной последовательностью, содержащей, по меньшей мере, одну последовательность, выбранную из группы, состоящей из нуклеотидных последовательностей SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8.
Согласно способу в соответствии с настоящим изобретением предпочтительным вектором является плазмида.
Предпочтительно согласно способу в соответствии с настоящим изобретением трансформация сопровождается встраиванием в геном штамма или бактерии-хозяина, трансформированной, по меньшей мере, одним событием рекомбинации.
Настоящее изобретение касается также бактериальной культуры, содержащей, по меньшей мере, один штамм в соответствии с настоящим изобретением или содержащей, по меньшей мере, один штамм, полученный с помощью способа в соответствии с настоящим изобретением, или содержащей, по меньшей мере, одну бактерию, трансформированную в соответствии с настоящим изобретением.
Под бактериальной культурой понимают смесь различных штаммов, в частности фермент или закваски.
Предпочтительными смесями штаммов в соответствии с настоящим изобретением являются смеси Streptococcus thermophilus с другими Streptococcus thermophilus или смеси Streptococcus thermophilus с Lactobacillus delbrueckii подвид bulgaricus, или смеси Streptococcus thermophilus с другими Lactobacillus и/или с Bifidobacterium, или смеси Streptococcus thermophilus с Lactococcus, или смеси Streptococcus thermophilus с другими штаммами молочнокислых бактерий и/или дрожжевых грибков.
Настоящее изобретение касается также использования штамма в соответствии с настоящим изобретением или штамма, полученного с помощью способа в соответствии с настоящим изобретением, или бактериальной культуры в соответствии с настоящим изобретением для производства пищевого продукта или пищевого ингредиента.
В качестве предпочтительного пищевого продукта или пищевого ингредиента в соответствии с настоящим изобретением можно назвать молочный продукт, мясной продукт, зерновой продукт, напиток, мусс или порошок.
Настоящее изобретение касается также пищевой или фармацевтической композиции, содержащей, по меньшей мере, один штамм в соответствии с настоящим изобретением или, по меньшей мере, один штамм, полученный с помощью способа в соответствии с настоящим изобретением, или бактериальную культуру в соответствии с настоящим изобретением.
Объектом настоящего изобретения является также молочный продукт, содержащий, по меньшей мере, один штамм в соответствии с настоящим изобретением или, по меньшей мере, один штамм, полученный с помощью способа в соответствии с настоящим изобретением, или бактериальную культуру в соответствии с настоящим изобретением.
В случае молочного продукта его производство осуществляют известным в этой области способом, в частности сквашиванием молочного продукта путем включения штамма в соответствии с настоящим изобретением.
В качестве молочного продукта в соответствии с настоящим изобретением можно указать сквашенное молоко, йогурт, созревшие сливки, сыр, творог, молочный напиток, ретентат молочного продукта, плавленый сыр, сливочный десерт, деревенский сыр или детское молоко.
Предпочтительно молочным продуктом в соответствии с настоящим изобретением является молоко животного и/или растительного происхождения.
В качестве молока животного происхождения можно указать коровье молоко, овечье молоко, козье молоко и буйволиное молоко.
В качестве молока растительного происхождения можно указать любое способное к сквашиванию вещество растительного происхождения, которое может быть использовано в рамках настоящего изобретения, в частности полученное из зерен сои, риса или ячменя.
На фиг.1 показана структура оперона PS штамма в соответствии с настоящим изобретением в сравнении с опероном PS других, уже известных штаммов Streptococcus thermophilus.
На фиг.2 показана факториальная схема 1-2 анализа по основным составляющим (АОС), полученная на основании органолептических данных, на сквашенных молочных продуктах, полученных с использованием различных рассматриваемых штаммов.
На фиг.3 показаны средние оценки описательных показателей СТРУКТУРА НА ЛОЖКЕ для каждого из рассматриваемых штаммов. Интерпретация результатов теста Ньюмана-Койлза: разница между штаммами, связанными одной буквой, является несущественной.
На фиг.4 показаны средние оценки описательных показателей СТРУКТУРА ВО РТУ для каждого из рассматриваемых штаммов. Интерпретация результатов теста Ньюмана-Койлза: разница между штаммами, связанными одной буквой, является несущественной.
Далее следует описание конкретных, но не ограничительных примеров.
ПРИМЕРЫ
1) Определение последовательности оперона PS Streptococcus thermophilus CNCM I-2980
Фрагмент ДНК, содержащий оперон PS штамма Streptococcus thermophilus CNCM I-2980, получили с помощью ПЦР-амплификации из геномной ДНК, выделенной из этого штамма. Амплификацию осуществляли с помощью термоциклера Mastercycler (Eppendorf) с использованием ДНК-полимеразы LA-Taq (BioWhittaker/Cambrex) и следующих праймеров: 5'-GGGTGAACGTATCTCAGTAATGGGACTGG-3' и 5'-CCTGAGTTATGCGACGATTACTTGGCTG-3'. Амплификацию проводили в следующих условиях: 14 циклов с чередованием денатурации при 98°C в течение 30 с и гибридизации-синтеза при 68°C в течение 15 мин с 15 с на цикл, затем 1 дополнительный цикл синтеза при 72°C в течение 10 мин. Полную последовательность ПЦР-продукта получали путем клонирования фрагментов.
2) Молекулярная характеристика штамма в соответствии с настоящим изобретением в сравнении с уже известными штаммами Streptococcus thermophilus
- Последовательность оперона PS
Последовательность оперона PS штамма Streptococcus thermophilus CNCM I-2980, состоящую из примерно 17100 пар оснований, синтезировали с помощью ПЦР с использованием в качестве матрицы очищенной геномной ДНК штамма и с использованием двух консервированных специфических праймеров генов (deoD, кодирующего пуриннуклеотидфосфорилазу, и orf14.9 неизвестной функции), обычно обрамляющих оперон PS у Streptococcus thermophilus, описанных в литературе. Последовательность, заключенная между генами deoD и orf14.9, соответствующая последовательности SEQ ID №l, приведена вместе со списком последовательностей.
- Генетическая организация оперона PS
На фиг.1 схематично показана генетическая структура оперона PS штамма CNCM I-2980, установленная с помощью анализа нуклеотидной последовательности, а также структура оперона PS 7 других штаммов Streptococcus thermophilus. Для приведенных структур, идентифицированных наименованием штамма и номером доступа в GENBANK (в скобках), стрелки обозначают место, размер и направление генов от инициаторного кодона инициации до терминирующего кодона. Значения цветов и/или рисунков объяснены на фиг.1.
- Сравнение с литературой
Структурный анализ оперона PS штамма CNCM I-2980 показывает, что его организация аналогична организации уже известных оперонов PS (см. фиг.1): первая ORF, потенциально вовлеченная в регуляцию транскрипции оперона PS, с последующими 3 ORF, вероятно участвующими в регуляции полимеризации повторяющихся единиц PS и/или в их переносе, с последующими 11 ORF, кодирующими гликозилтрансферазы и полимеразу, обеспечивающие сборку повторяющейся единицы, и с последующей 1 ORF, потенциально вовлеченной в перенос повторяющихся единиц через плазмидную мембрану.
Окружающая генетическая среда оперона PS штамма CNCM I-2980 также сходна с окружающей генетической средой других известных оперонов CNCM 1-2980: перед ORF deoD, кодирующая пуриннуклеотидфосфорилазу, и после в противоположном направлении ORF ISI193 и orf14.9, кодирующие соответственно транспозон (принадлежащий к семейству транспозонов IS1193, являющихся подвижными генетическими элементами) и белок неизвестной функции.
Однако сравнение последовательности между белками, потенциально кодируемыми ORF оперона штамма CNCM I-2980, и белками, доступными в опубликованных базах данных (GENBANK), показывает, что генетическое содержание оперона PS штамма CNCM 1-2980 является новым в своей дистальной части.
- Проксимальная часть оперона PS штаммов Streptococcus thermophilus и в целом известных на сегодняшний день стрептококков содержит 4 ORF, называемых epsA (или cpsA, или сарА, или wzg), epsB (или cpsB, или сарВ, или wze), epsC (или cpsC, или сраС, или wzd) и epsD (или cpsD, или capD, или wze), выведенные полипептидные продукты которых для каждой из 4 ORF имеют значительное сходство последовательности между штаммами. На этом уровне полипептидные продукты, выведенные из ORF eps13A, eps13B, eps13C и eps13D оперона PS штамма CNCM I-2980, не отличаются от полипептидных продуктов, выведенных из других оперонов PS (содержание одинаковых аминокислот превышает или равно 94%).
- Сразу же после ORF epsD в большинстве известных оперонов PS у Streptococcus thermophilus присутствует ORF epsE (или cpsE, или сарЕ, или wchA). В этом случае сходство последовательности между гомологическими полипептидными продуктами, полученными из различных известных последовательностей, является значительным; продукт трансляции ORF eps13E штамма CNCM I-2980 имеет значительное сходство с его гомологами, полученными из других штаммов.
- Организация 4 следующих ORF (eps13F, eps13G, eps13H и eps13J) оперона PS штамма CNCM I-2980, хотя и была ранее описана, но встречается реже среди различных известных структур оперонов PS Streptococcus thermophilus. Эта организация была обнаружена, хотя и в неполном виде, в штаммах IP6757 (номер доступа GENBANK AJ289861), «тип VII» (номер доступа GENBANK AF454498) и «тип III» (номер доступа GENBANK AY057915).
- В дистальной части оперона 7 ORF eps13J, eps13L, eps13M, eps13N, eps13C) и eps13P являются новыми и специфическими к оперону PS штамма CNCM I-2980. Хотя и являющееся слабым, их сходство последовательности на белковом уровне или в некоторых случаях наличие специфических белковых рисунков позволяет наделить продукты этих ORF предполагаемой функцией: потенциальная гликозилтрансферазная или полимеразная активность для продукта ORF eps13J-eps13C), трансмембранная транспортная активность PS для продукта ORF eps13P.
3) Сравнительный реологический тест штамма Streptococcus thermophilus CNCM I-2980
Используемые штаммы Streptococcus thermophilus CNCM I-2423, CNCM I-2429, CNCM I-2432, CNCM I-2978 и CNCM I-2979 являются штаммами из коллекции фирмы «Rhodia Food». Их используют в большей степени для промышленного производства сквашенных молочных продуктов или йогуртов в силу их структурирующих свойств. Они являются типичными представителями штаммов, описанных в уровне техники. В дальнейшем они рассматриваются в сравнении со штаммом CNCM 1-2980 и считаются типичньми представителями структурирующих штаммов, используемых в настоящее время в агропромышленном комплексе.
Штаммы Streptococcus thermophilus RD736 и RD676 являются штаммами, выпускаемыми компанией «Rhodia Food», известными своей слабой структурирующей способностью. Полисахариды, которые они могут производить, и их оперон PS неизвестны. В дальнейшем они рассматриваются в сравнении со штаммом CNCM 1-2980 в качестве типичных представителей неструктурирующих штаммов.
Сквашенное молоко получают, добавляя 3% (мас./об.) сухого обезжиренного молока в 100 мл обезжиренного молока UHT 1/2 (Le Petit Vendeén®). Раствор пастеризуют при 90°C в течение 10 мин, при этом температуру измеряют в середине массы молока. Полученный таким образом ферментационный субстрат инокулируют тестируемым штаммом из расчета 106 CFU/мл (колониеобразующие единицы/мл), затем инкубируют при 43°C в водяной бане до получения рН 4,6. Регистрацию рН осуществляют непрерывно. Полученный таким образом сквашенный молочный продукт помещают в вентилируемый шкаф при 6°C до их анализа.
Проводят два типа реологических измерений: определение вязкости и текучести. Измерение вязкости проводят при 8°C на сквашенном молоке после 1, 7, 14 и 28 дней хранения при 6°C с использованием вискозиметра Brookfield® типа RVF (Brookfield Engineering Laboratories, Inc.), установленного на штативе Heilpath (Brookfield Engineering Laboratories, Inc.). Вискозиметр оснащен иглой типа С, и скорость колебания, сообщаемая игле, составляет 10 об/мин. Измерения текучести проводят при 8°C на сквашенном молоке после 14 дней хранения при 6°C после его предварительного перемешивания с использованием реометра AR 1000-N (ТА Instrument), оборудованного коаксиальными цилиндрами (радиус 1=15 мм, радиус 2=13,83 мм, высота 32 мм, промежуточное пространство 2 мм). Для сегмента подъема усилие, прилагаемое при непрерывном сканировании, меняется от 0 до 60 Па в течение 1 минуты в линейном режиме. Для сегмента опускания усилие, прилагаемое при непрерывном сканировании, меняется от 60 до 0 Па в течение 1 минуты в линейном режиме. При этом учитываются значения области тиксотропии и порога текучести; последний вычисляют по модели Кассона.
Вязкость сквашенного молока, полученного с использованием штамма Streptococcus thermophilus CNCM I-2980, была измерена после 1,7, 14 и 28 дней хранения при 6°C (таблица 1). Значение вязкости, измеренной после одного дня хранения, равна 53,3 Па·с. Это значение незначительно меняется во времени, что свидетельствует о стабильности сквашенного молока, полученного с использованием штамма Streptococcus thermophilus CNCM 1-2980. Для сравнения (таблица 1) значения вязкости, измеренной для сквашенного молока, полученного с использованием штаммов RD736 и RD676, известными своей низкой структурирующей способностью, находятся в пределах от 26 до 30 Па·с. Другие тестируемые штаммы придают сквашенному молоку более низкую вязкость, чем штамм CNCM 1-2980. Можно различать первую группу штаммов, придающих вязкость порядка 40 Па·с (CNCM I-2979, CNCM I-2423 и CNCM I-2432), и вторую группу, в которую входит CNCM 1-2980, обеспечивающих вязкость порядка 50 Па·с.
Таблица 1
Вязкость и рН сквашенного молока, полученного с использованием разных штаммов, после разных сроков хранения при 6°C
Штаммы Вязкость, Па·с/рН
1 день хранения 7 дней хранения 14 дней хранения 28 дней хранения
CNCM
I-2980
53,3/4,50 53,0/4,44 53,0/4,42 53,5/4,40
CNCM
I-2429
51,2/4,55 51,9/4,45 51,0/4,44 51,2/4,44
CNCM
I-2978
50,4/4,56 51,8/4,52 49,6/4,49 51,0/4,45
CNCM
I-2432
42,4/4,60 42,2/4,56 43,0/4,55 43,0/4,45
CNCM
I-2423
42,0/4,60 41,9/4.40 42,0/4,37 43,0/4,30
CNCM
I-2979
37,8/4,54 40,7/4,45 42,2/4,42 42,2/4,33
RD676 29,6/4,60 30,0/4,57 30,0/4,57 30,0/4,52
RD736 26,0/4,45 26,0/4,34 28,0/4,34 27,0/4,26
Измерения текучести позволили определить два существенных реологических фактора (порог текучести и области тиксотропии) для реологического описания сквашенного молока (таблица 2). Для сквашенного молока, полученного со штаммом CNCM 1-2980, средние значения составляют от 5,89 Па и 488 Па/с соответственно для порога текучести и для области тиксотропии. Эти значения существенно отличаются от значений, полученных для сквашенного молока, приготовленного с использованием штаммов, считающихся неструктурирующими (RD676 и RD736). Например, для сквашенного молока, полученного со штаммом RD676, эти средние значения составляют соответственно 17,01 Па и 17083 Па/с. В случае штаммов, считающихся структурирующими, значения порога текучести и области тиксотропии являются гораздо более близкими к значениям, полученным при использовании штамма CNCM 1-2980, и вместе с тем значительно их превышают, что доказывает более высокую структурирующую способность штамма CNCM 1-2980.
Таблица 2
Значения порога текучести и области тиксотропии (средние значения при трех повторах), измеренные с помощью прибора AR1000-N сквашенного молока, полученного с использованием разных штаммов, после 14 дней хранения при 6°C
Штаммы Порог текучести (Па) Область тиксотропии (Па/с)
CNCM I-2980 5,89 488
CNCM I-2429 13,32 1215 (2 значения)
CNCM I-2978 10,51 728
CNCM I-2432 12,27 1245
CNCM I-2423 8,86 1344
CNCM I-2979 13,56 1786
RD676 17,01 17083
RD736 15,91 33100
4) Органолептическая характеристика штамма Streptococcus thermophilus CNCM 1-2980 в сравнении с контрольными штаммами
Оценка сквашенного молока была осуществлена органолептическим анализом после 14 дней хранения при 6°C. Количественный описательный анализ сквашенного молока при оптимальной температуре дегустации 12°C был произведен комиссией из 9 экспертов по неструктурированной линейной шкале от 0 до 6 пунктов. Анализ органолептического профиля был продублирован с интервалом в несколько дней. Предварительно отобранные и обученные эксперты проводили оценку по четырем описательным показателям структуры на ложке: ломкость, устойчивость к перемешиванию, стекание, зернистость и по 4 описательным показателям структуры во рту: таяние, клейкость, густота, обволакивание. Органолептические отличия были оценены путем двухфакторного вариационного анализа (называемого ANOVA) с фиксированной моделью с последующим сравнительным тестом по среднему значению Ньюмана-Койлза с порогом альфа 5% на каждом из описательных показателей. Для визуализации пространства продукта был применен анализ по основным составляющим (АОС) с органолептическими описательньми показателями с переменными значениями и штаммами по индивидам. Иерархическая возрастающая классификация (ИВК) позволила выделить группы штаммов на основе АОС. Программными обеспечениями, использованными для этих статистических анализов, являются Fizz® (Biosystems), Statgraphics® и Uniwin plus®.
Данные по сквашенному молоку, полученному с использованием штамма Streptococcus thermophilus CNCM 1-2980, сравнивались с результатами по сквашенному молоку, полученному с использованием других контрольных штаммов. Средние значения, полученные для разных штаммов по определенным показателям структуры, приведены в таблице 3, а существенные отличия, выявленные в результате ANOVA и сравнительного теста по средним значениям, представлены в таблице 4 и на фиг.3 и 4.
Таблица 3
Средние оценки, присвоенные комиссией органолептического анализа для сквашенного молока, полученного с использованием разных рассматриваемых штаммов, по описательным показателям структуры
Штаммы Показатели на ложке Показатели во рту
Ломкость Устойчивость к перемешиванию Зернистость Стекание Таяние Клейкость Густота Обволакивание
CNCM
I-2980
0,89 4,97 0,04 5,09 1,32 4,27 5,06 4,41
CNCM
I-2249
4,12 3,49 1,53 1,24 3,36 1,46 3,54 2.94
CNCM
I-2978
3,39 4,35 0,42 2,83 2,96 1,97 3,86 3,41
CNCM
I-2432
3,28 3,14 1,60 1,32 3,11 1,43 3,01 2,91
CNCM
I-2423
1,64 4,02 0,16 3,44 2,25 2,48 3,61 3,30
CNCM
I-2979
3,98 2,79 2,36 0,74 3,71 0,72 2,39 2,22
RD676 4,98 1,46 5,14 0,17 4,96 0,04 0,91 1,03
RD736 4,35 1,45 3,43 0,04 5,18 0,31 0,77 0,67
Таблица 4
Сравнение средних оценок по каждому из описательных показателей структуры на ложке и структуры во рту с помощью теста Ньюмана-Койлза с 5%. Интерпретация результатов: разница между штаммами, связанными одной и той же буквой, является несущественной
Штаммы Показатели на ложке Показатели во рту
Ломкость Устойчивость к перемешиванию Зернистость Стекание Таяние Клейкость Густота Обволакивание
CNCM
I-2980
Е А Е А D А А А
CNCM
I-2249
В С D D В С В ВС
CNCM
I-2978
С В Е С В ВС В В
CNCM
I-2432
с CD D D В с С ВС
CNCM
I-2423
D В Е В С в в в
CNCM
I-2979
В D С Е В D D с
RD676 А Е А F А D Е D
RD736 В Е В F А D Е D
На фиг.3 и 4 показаны гистограммы результатов, представленных в таблице 4. По всем описательным показателям считающиеся неструктурирующими штаммы RD676 и RD736 существенно отличаются от других штаммов. Среди структурирующих штаммов штамм CNCM I-2980 существенно и резко отличается по всем показателям, кроме зернистости, по которой он не дифференцируется от штаммов CNCM I-2978 и CNCM I-2423.
АОС позволяет определить место штаммов в зависимости от их расстояния по отношению к органолептическим показателям.
На схеме 1-2 АОС на фиг.2 представлено 97,3% пространства продукта. Составляющая 1 противопоставляет две группы органолептических переменных. Первая группа, включающая в себя переменные: устойчивость к перемешиванию, густота во рту, обволакивание во рту, стекание на ложке и клейкость на ложке, характеризует составляющую 1 справа. Вторая группа, включающая в себя переменные: таяние во рту, ломкость на ложке и зернистость на ложке, характеризует составляющую 1 слева. Первая группа антикоррелируется со второй группой. Эти переменные позволяют анализировать место штаммов на этой схеме. Кроме того, анализ по ИВК позволяет классифицировать по разным группам штаммы, обведенные пунктирной линией на факториальной схеме 1-2.
Факториальная схема противопоставляет несколько групп штаммов, определяющих разные свойства структурирования. Из этих анализов следует, что штаммы RD676 и RD736 придают сквашенному молоку ломкую и зернистую структуру на ложке и тающую во рту. При этом они не придают густой, клейкой и обволакивающей структуры во рту и стойкой к перемешиванию или стекающей структуры на ложке по сравнению с другими группами штаммов. Следовательно, в результате их использования получают неструктурированное сквашенное молоко. В отличие от них штаммы CNCM I-2429, CNCM I-2432 и CNCM I-2979 вырабатывают среднеструктурированное сквашенное молоко, штаммы CNCM I-2423 и CNCM I-2978 вырабатывают структурированное сквашенное молоко и штамм CNCM I-2980 вырабатывает высокоструктурированное сквашенное молоко. Этот анализ показывает, что штамм CNCM I-2980 придает сквашенному молоку особые свойства структурирования по сравнению со всеми контрольными штаммами.
5) Сравнительный тест на устойчивость штамма Streptococcus thermophilus CNCM I-2980 по отношению к фагам
Чувствительность штамма к бактериофагу определяют методом зон лизиса. 100 мкл культуры тестируемого штамма и 100 мкл соответствующего разведения сыворотки, содержащей рассматриваемый бактериофаг, использовали для посева на охлажденной агаровой среде (агар 0,6% мас./об.) М17-глюкозы с добавлением 10 мМ CaCl2. Смесь выливали на поверхность отвержденной агаровой среды (агар 1,5% мас./об.) М17-глюкозы с добавлением 10 мМ СаСl2. После инкубации при 42°C в течение 16 часов оценку чувствительности штамма к бактериофагу проводили по наличию зон лизиса. Отсутствие зон лизиса свидетельствует об устойчивости этого штамма по отношению к исследуемым фагам. Спектр чувствительности штамма к бактериофагам (называемый также лизотипом) представляет собой совокупность значений чувствительности и устойчивости по отношению к исследуемым бактериофагам.
В таблице 5 представлены бактериофаги, использованные для этого исследования, и их исходные штаммы/штаммы размножения. Речь идет о штаммах и бактериофагах из коллекции «Rhodia Food». Бактериофаги были выбраны по их способности к заражению контрольных структурирующих штаммов.
Таблица 5
Фаги
Наименование фага Исходный штамм
2972 CNCM I-2423
4082 RD729
4074 CNCM I-2429
4154 CNCM I-2429
1272 CNCM I-2978
4128 RD852
1255 CNCM I-2432
1765 RD728
4121 RD862
Для оценки промышленной применимости штамма CNCM I-2980 в связи с проблемами, связанными с бактериофагами, была произведена оценка лизотипа штамма CNCM I-2980 и его сравнение с контрольными структурирующими штаммами. В таблице 6 показана чувствительность штаммов к различным фагам (лизотип), определенная методом зон лизиса. Оказалось, что шесть исследуемых штаммов имеют разные лизотипы. В частности, штамм CNCM I-2980 имеет лизотип, отличающийся от лизотипов других исследуемых структурирующих штаммов. Действительно, штамм CNCM I-2980 не был заражен тестируемыми фагами.
Таблица 6
Лизотип тестируемых штаммов
Фаги Штаммы
CNCM I-2980 CNCM I-2423 CNCM I-2978 CNCM I-2432 CNCM I-2429 CNCM I-2979
2972 - + - - - -
4082 - + - - - -
1272 - - + - - -
4128 - - + - - -
1255 - - - + - -
1765 - - - + - -
4074 - - - - + -
4154 - - - - + -
4121 - - - - - +
+: чувствительность к тестируемому фагу;
-: устойчивость к тестируемому фагу.
Figure 00000001
Figure 00000002
Figure 00000003
Figure 00000004
Figure 00000005
Figure 00000006
Figure 00000007
Figure 00000008

Claims (16)

1. Штамм Streptococcus thermophilus, продуцирующий молочную кислоту, депонированный 26 февраля 2003 г.в Национальной коллекции культур микроорганизмов под номером 1-2980.
2. Нуклеотидная последовательность SEQ ID №1, выделенная из штамма по п.1, включающая PS оперон, для продуцирования полисахаридов.
3. Нуклеотидная последовательность SEQ ID №2, выделенная из штамма по п.1, которая вызывает продуцирование полисахаридов.
4. Нуклеотидная последовательность SEQ ID №3, выделенная из штамма по п.1, которая вызывает продуцирование полисахаридов.
5. Нуклеотидная последовательность SEQ ID №4, выделенная из штамма по п.1, которая вызывает продуцирование полисахаридов.
6. Нуклеотидная последовательность SEQ ID №5, выделенная из штамма по п.1, которая вызывает продуцирование полисахаридов.
7. Нуклеотидная последовательность SEQ ID №6, выделенная из штамма по п.1, которая вызывает продуцирование полисахаридов.
8. Нуклеотидная последовательность SEQ ID №7, выделенная из штамма по п.1, которая вызывает продуцирование полисахаридов.
9. Нуклеотидная последовательность SEQ ID №8, выделенная из штамма по п.1, которая вызывает продуцирование полисахаридов.
10. Нуклеиновая кислота, выделенная из штамма по п.1, которая вызывает продуцирование полисахаридов, содержащая, по меньшей мере, одну последовательность, выбранную из группы, состоящей из нуклеотидных последовательностей SEQ ID №1, SEQ ID №2, SEQ ID №3, SEQ ID №4, SEQ ID №5, SEQ ID №6, SEQ ID №7, SEQ ID №8, или нуклеиновая кислота, которая содержит, по меньшей мере, одну ORF, продукт трансляции которой обладает процентным содержанием идентичных остатков более или равным 80% с, по меньшей мере, одной из полипептидных последовательностей, выведенных из ORF, идентифицированных в последовательностях SEQ ID №1 - SEQ ID №8.
11. Применение штамма по п.1 для производства пищевого продукта, или пищевого ингредиента, или фармацевтической композиции.
12. Применение по п.11, отличающееся тем, что пищевым продуктом или пищевым ингредиентом является молочный продукт, мясной продукт, зерновой продукт, напиток, мусс или порошок.
13. Пищевая или фармацевтическая композиция, содержащая, по меньшей мере, один штамм по п.1.
14. Молочный продукт, содержащий, по меньшей мере, один штамм по п.1.
15. Молочный продукт по п.14, отличающийся тем, что речь идет о сквашенном молоке, йогурте, созревших сливках, сыре, твороге, молочном напитке, ультраконцентрате молочного продукта, плавленом сыре, сливочном десерте, деревенском сыре или молоке для питания младенцев.
16. Молочный продукт по п.14 или 15, отличающийся тем, что содержит молоко животного и/или растительного происхождения.
RU2005131964/13A 2003-03-17 2004-03-12 Структурирующие молочнокислые бактерии RU2376367C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR03/03242 2003-03-17
FR0303242A FR2852604B1 (fr) 2003-03-17 2003-03-17 Bacteries lactiques texturantes
FR0303242 2003-03-17

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2005131964A RU2005131964A (ru) 2006-03-10
RU2376367C2 true RU2376367C2 (ru) 2009-12-20

Family

ID=32922222

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2005131964/13A RU2376367C2 (ru) 2003-03-17 2004-03-12 Структурирующие молочнокислые бактерии

Country Status (13)

Country Link
US (1) US7582743B2 (ru)
EP (1) EP1604025B2 (ru)
JP (1) JP4669835B2 (ru)
CN (2) CN102409004B (ru)
AR (1) AR043607A1 (ru)
AU (1) AU2004223691B2 (ru)
DE (1) DE602004022028D1 (ru)
DK (1) DK1604025T4 (ru)
ES (1) ES2329470T5 (ru)
FR (1) FR2852604B1 (ru)
NZ (1) NZ542597A (ru)
RU (1) RU2376367C2 (ru)
WO (1) WO2004085607A2 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2455363C1 (ru) * 2011-03-23 2012-07-10 Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии) Синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления streptococcus thermophilus в заквасочных культурах при производстве твердых сыров

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007095958A1 (en) * 2006-02-24 2007-08-30 Chr. Hansen A/S Lactic acid bacteria providing improved texture of fermented dairy products
US20100034924A1 (en) * 2006-06-16 2010-02-11 Christophe Fremaux Bacterium
EP1869983A1 (en) * 2006-06-23 2007-12-26 Chr. Hansen A/S Low post-acidifying lactic acid bacteria
FR2906536B1 (fr) * 2006-10-03 2008-12-26 Danisco Cluster genetique de souches de streptococcus thermophilus presentant des proprietes acidifiantes et texturantes appropriees pour les fermentations laitieres.
PL2367938T3 (pl) 2008-12-12 2014-11-28 Dupont Nutrition Biosci Aps Klaster genetyczny szczepów Streptococcus thermophilus mających unikalne właściwości reologiczne dla fermentacji nabiału
MX2011013188A (es) * 2009-06-30 2012-01-31 Chr Hansen As Metodo para producir un producto lacteo fermentado.
EP2459002B2 (en) * 2009-07-10 2022-06-08 Chr. Hansen A/S Production of cottage cheese by using streptococcus thermophilus
ES2644220T5 (en) * 2009-09-01 2025-04-21 Chr Hansen As Lactic bacterium with modified galactokinase expression for texturizing food products by overexpression of exopolysaccharide
PL2529035T3 (pl) 2010-01-28 2018-08-31 Chr. Hansen A/S Bakteria mlekowa do teksturyzacji produktów żywnościowych wyselekcjonowana na podstawie oporności na faga
KR101579556B1 (ko) * 2010-06-21 2015-12-22 시에이치알. 한센 에이/에스 요거트용 젖산 박테리아
EA029862B1 (ru) 2010-10-22 2018-05-31 Кр. Хансен А/С Текстурирующие штаммы молочно-кислых бактерий
US20140134292A1 (en) 2011-04-20 2014-05-15 Dupont Nutrition Biosciences Aps Production of cheese with s. thermophilus
US10041135B2 (en) 2014-02-20 2018-08-07 Dsm Ip Assets B.V. Phage insensitive Streptococcus thermophilus
WO2015162157A1 (en) * 2014-04-23 2015-10-29 Dsm Ip Assets B.V. Fermented milk product
EP3280267B1 (en) 2015-04-06 2025-11-05 International N&H Denmark ApS Proteases for high protein fermented milk products
KR20190044664A (ko) * 2016-09-01 2019-04-30 시에이치알. 한센 에이/에스 새로운 세균
CN109735556A (zh) * 2019-02-22 2019-05-10 昆明理工大学 引导糖基转移酶基因的用途
US20230048202A1 (en) 2019-12-30 2023-02-16 Dsm Ip Assets B.V. Novel use of formate
TW202229318A (zh) * 2020-10-12 2022-08-01 日商明治股份有限公司 具有發酵乳之牽絲性之提升作用之蛋白質、以及使用其之發酵乳及其製造方法
WO2022080245A1 (ja) * 2020-10-12 2022-04-21 株式会社明治 乳酸菌の菌体外多糖の免疫賦活活性の向上作用を有するタンパク質、並びに、それを用いた発酵乳及びその製造方法
MA69001A1 (fr) * 2022-07-08 2025-10-31 Chr. Hansen A/S Polysaccharides permettant d'obtenir une texture de produits laitiers ameliorée

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6428829B1 (en) * 1994-09-30 2002-08-06 Compagnie Gervais Danone Streptococcus thermophilus strain, fermentation process using such strain and product obtained

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2627779B1 (fr) 1988-02-26 1991-03-15 Sodima Union Coop Agricoles Procede d'epaississement d'un produit du type lait fermente, notamment de yaourt et nouveau polysaccharide utile pour la mise en oeuvre de ce procede
EP0750042A1 (fr) * 1995-06-20 1996-12-27 Societe Des Produits Nestle S.A. Bactéries lactiques produisant des exopolysaccharides
US7256029B2 (en) * 2000-02-02 2007-08-14 United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Biopolymer thickener
FR2807766A1 (fr) * 2000-04-18 2001-10-19 Agronomique Inst Nat Rech Operons de streptococcus thermophilus impliques dans la synthese des eps
HU224134B1 (hu) 2000-07-24 2005-05-30 Magyar Tejgazdasági Kísérleti Intézet Kft. Probiotikus hatású, a vér koleszterinszintjét csökkentő kefir és eljárás előállítására

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6428829B1 (en) * 1994-09-30 2002-08-06 Compagnie Gervais Danone Streptococcus thermophilus strain, fermentation process using such strain and product obtained

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BROADBENT J.R. et al., "Biochemistry, genetics, and applications of exopolysaccharide production in Streptococcus thermophilus: a review", J Dairy Sci. 2003 Feb; 86(2): 407-23. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2455363C1 (ru) * 2011-03-23 2012-07-10 Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии) Синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления streptococcus thermophilus в заквасочных культурах при производстве твердых сыров

Also Published As

Publication number Publication date
CN102409004A (zh) 2012-04-11
DK1604025T3 (da) 2009-11-02
US7582743B2 (en) 2009-09-01
JP4669835B2 (ja) 2011-04-13
DK1604025T4 (en) 2019-01-28
EP1604025B1 (fr) 2009-07-15
AR043607A1 (es) 2005-08-03
EP1604025B2 (fr) 2018-10-03
RU2005131964A (ru) 2006-03-10
JP2006520590A (ja) 2006-09-14
CN102409004B (zh) 2016-09-07
ES2329470T5 (es) 2019-04-16
DE602004022028D1 (de) 2009-08-27
AU2004223691A2 (en) 2004-10-07
NZ542597A (en) 2008-03-28
AU2004223691A1 (en) 2004-10-07
FR2852604B1 (fr) 2005-05-13
WO2004085607A3 (fr) 2005-03-17
WO2004085607A2 (fr) 2004-10-07
EP1604025A2 (fr) 2005-12-14
ES2329470T3 (es) 2009-11-26
AU2004223691B2 (en) 2008-04-03
US20060240539A1 (en) 2006-10-26
CN1761752A (zh) 2006-04-19
FR2852604A1 (fr) 2004-09-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2376367C2 (ru) Структурирующие молочнокислые бактерии
EP2034848B1 (en) Streptococcus thermophilus bacterium
JP5944824B2 (ja) エキソ多糖の過剰発現による、食品をテキスチャリングするための改変されたガラクトキナーゼ発現を伴う乳酸菌
EP2076584B1 (en) Genetic cluster of strains of streptococcus thermophilus having appropriate acidifying and texturizing properties for dairy fermentations
JP5898220B2 (ja) テクスチャを改変する乳酸菌株
Mora et al. Characterization of urease genes cluster of Streptococcus thermophilus
CN102770527A (zh) 基于噬菌体抗性选择的用于对食品进行质构化的乳酸细菌
EP3435773B1 (en) Use of glucose deficient streptococcus thermophilus strains in a process for producing fermented milk products
JPWO2009150897A1 (ja) 発酵乳の製造方法
Urbach et al. The ldh phylogeny for environmental isolates of Lactococcus lactis is consistent with rRNA genotypes but not with phenotypes
EP3688197B1 (en) New lactobacillus plantarum strain imparting high thickness, high ropiness and high mouth thickness to a dairy product produced therewith and uses thereof
JP2013202013A (ja) ジアセチル生産株のスクリーニング方法
CN114616319A (zh) 含有nizo b40样eps基因簇的质地化乳酸乳球菌
US20230404093A1 (en) Protein having fermented milk viscosity improving effect, fermented milk using the same and method for producing the same
Tuncer et al. Properties of exopolysaccharide producer Streptococcus thermophilus ST 8. 01 isolated from homemade yoghurt
WO2023163015A1 (ja) 乳酸菌、乳酸菌組成物、乳酸菌の製造方法、乳酸菌の酸耐性向上方法、乳酸菌のスクリーニング方法、及び発酵乳の製造方法
CN117957307A (zh) 乳酸菌、乳酸菌酵种、发酵乳、发酵乳的制造方法、及乳酸菌的筛选方法
EP1847598A1 (en) Gtf cells, vectors and sequences and applications thereof in the food sector
Knoshaug Exopolysaccharide biosynthesis by a natural lactococcal ropy isolate

Legal Events

Date Code Title Description
PD4A Correction of name of patent owner