[go: up one dir, main page]

RU2055591C1 - Method of preparing complex showing fibrinolytic, thrombolytic and anticoagulative activities - Google Patents

Method of preparing complex showing fibrinolytic, thrombolytic and anticoagulative activities Download PDF

Info

Publication number
RU2055591C1
RU2055591C1 RU93033687A RU93033687A RU2055591C1 RU 2055591 C1 RU2055591 C1 RU 2055591C1 RU 93033687 A RU93033687 A RU 93033687A RU 93033687 A RU93033687 A RU 93033687A RU 2055591 C1 RU2055591 C1 RU 2055591C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
thrombolytic
minutes
fibrinolytic
activity
activities
Prior art date
Application number
RU93033687A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU93033687A (en
Inventor
В.С. Новиков
Л.А. Ляпина
В.Е. Пасторова
М.С. Успенская
Original Assignee
Биологический факультет МГУ им.М.В.Ломоносова
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Биологический факультет МГУ им.М.В.Ломоносова filed Critical Биологический факультет МГУ им.М.В.Ломоносова
Priority to RU93033687A priority Critical patent/RU2055591C1/en
Publication of RU93033687A publication Critical patent/RU93033687A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2055591C1 publication Critical patent/RU2055591C1/en

Links

Images

Landscapes

  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: roots of arborescent peony (Paeonia suffruticosa) were milled and put in distilled water or saline solution at concentration 0.85-0.9%, kept in boiling water bath for 10-20 min at stirring, then kept for 30 min and centrifuged at 1800-2000 rev/min for 20-30 min at usual temperature. Supernatant is frozen and dried by lyophilization. Time for preparing is 2-3 hr (24-36 hr in prototype). Preparation can be used in physiology, pathophysiology, medicinal and chemical-pharmaceutical industry. EFFECT: simplified method of preparing. 1 tbl

Description

Изобретение относится к способам получения биологически активных препаратов и может быть использовано в физиологии, патофизиологии, фармакологии, медицинской и химико-фармацевтической промышленности. The invention relates to methods for biologically active preparations and can be used in physiology, pathophysiology, pharmacology, medical and chemical-pharmaceutical industry.

Известен способ получения антикоагулянта из растения, произрастающего в Южной Африке, Aspilia africana, заключающийся в экстракции биологически активной фракции, дальнейшей ее очистки путем гель-хроматографии на колонке с сефадексом G-50. A known method of obtaining an anticoagulant from a plant growing in South Africa, Aspilia africana, which consists in the extraction of the biologically active fraction, its further purification by gel chromatography on a column with Sephadex G-50.

Способ имеет следующие недостатки: редкий ареал распространения вида растения неэкономичность способа; имеются побочные эффекты от использования фракции; трудоемкость получения препарата; отсутствие в препарате фибринолитических свойств. The method has the following disadvantages: a rare distribution area of a plant species; uneconomical method; there are side effects from using the fraction; the complexity of obtaining the drug; lack of fibrinolytic properties in the preparation.

Известен способ получения вещества, обладающего антикоагулянтной активностью, из растения средней полосы европейской части России (таволги вязолистной Filipendula ulmaria), заключающийся в экстракции биологически активной фракции, инкубации в термостате, центрифугировании с последующим ультрацентрифугированием в градиенте плотности сахарозы. There is a method of producing a substance with anticoagulant activity from a plant in the middle band of the European part of Russia (meadowsweet of the filipendula ulmaria Filipendula ulmaria), which involves extraction of the biologically active fraction, incubation in a thermostat, centrifugation followed by ultracentrifugation in a sucrose density gradient.

Этот способ целесообразно принять за прототип вследствие наличия общих операций. This method is advisable to take as a prototype due to the presence of common operations.

Прототип имеет следующие недостатки: трудоемкость способа получения препарата; неэкономичность необходимость операции ультрацентрифугирования; отсутствие в препарате тромболитических свойств; длительность способа. The prototype has the following disadvantages: the complexity of the method of obtaining the drug; uneconomical need for an ultracentrifugation operation; lack of thrombolytic properties in the drug; the duration of the method.

Целью изобретения является упрощение, ускорение, повышение экономичности способа получения комплекса, обладающего одновременно фибринолитической, тромболитической и антикоагулянтной активностью. The aim of the invention is to simplify, accelerate, increase the efficiency of the method for producing a complex having both fibrinolytic, thrombolytic and anticoagulant activity.

Цель достигается тем, что в качестве источника сырья используют корень древовидного пиона (Paeonia suffruticosa Andrews). Растения выращивают путем стратификации в открытом парнике, корни измельчают до порошкообразного состояния и экстрагируют в дистиллированной воде в концентрации 1-5% (1-5 г порошка в 100-120 мл дистиллированной воды), затем прогревают в течение 10-20 мин на кипящей водяной бане при постоянном помешивании, после чего осадок удаляют центрифугированием при 1800-2000 об/мин в течение 20-30 мин при комнатной температуре. Полученный супернатант подвергают замораживанию при (-10)-(-20)оС и лиофильно высушивают. Полученный препарат обладает одновременно антикоагулянтной, фибринолитической и тромболитической активностями, представленными в таблице.The goal is achieved by the fact that as the source of raw materials use the root of a tree peony (Paeonia suffruticosa Andrews). Plants are grown by stratification in an open greenhouse, the roots are ground to a powder state and extracted in distilled water at a concentration of 1-5% (1-5 g of powder in 100-120 ml of distilled water), then heated for 10-20 minutes in boiling water bath with constant stirring, after which the precipitate is removed by centrifugation at 1800-2000 rpm for 20-30 minutes at room temperature. The resulting supernatant was subjected to freezing at (-10) - (- 20) ° C and freeze-dried. The resulting preparation has both anticoagulant, fibrinolytic and thrombolytic activities, presented in the table.

Из данных таблицы видно, что антикоагулянтная и фибринолитическая активности неферментативной природы препарата по предложенному способу не менее таковых в прототипе. Расширение спектра действия идет за счет одновременно дополнительной антитромботической и высокой тромболитической активности. Антитромботическая активность в предлагаемом препарате составляет не менее 70% Как видно, полный лизис свежих экспериментально образованных тромбов в присутствии предлагаемого препарата осуществлялся в 90% случаев. Предлагаемый способ менее трудоемок, так как отсутствует операция наслоения сахарозы на раствор препарата и более экономичен, так как отсутствуют операции, связанные с ультрацентрифугированием на дорогостоящем оборудовании, ускорен, так как занимает 2-3 ч (в прототипе 24-26 ч). The table shows that the anticoagulant and fibrinolytic activity of the non-enzymatic nature of the drug according to the proposed method is no less than those in the prototype. The expansion of the spectrum of action is due to both additional antithrombotic and high thrombolytic activity. Antithrombotic activity in the proposed drug is at least 70%. As can be seen, the complete lysis of fresh experimentally formed blood clots in the presence of the proposed drug was carried out in 90% of cases. The proposed method is less time-consuming, since there is no operation of layering sucrose on a solution of the drug and more economical, since there are no operations associated with ultracentrifugation on expensive equipment, it is accelerated, since it takes 2-3 hours (in the prototype 24-26 hours).

П р и м е р 1. Берут корень пиона (P. suffruticosa), измельчают до порошкообразного состояния, тщательно растирают 500 мг в фарфоровой ступке в течение 10 мин и по каплям приливают дистиллированную воду до конечного объема 10 мл, затем смесь выдерживают в кипящей водяной бане в течение 10 мин при периодическом помешивании, после чего центрифугируют при 1800 об/мин в течение 20 мин для отделения супернатанта. Полученный супернатант лиофильно высушивают из замороженного состояния и используют в качестве эффективного антитромботического и тромболитического препарата. Выход препарата 5%
Полученный препарат обладает антикоагулянтной активностью, так как не наблюдается образования сгустка плазмы крови крысы и быка в течение более 60 мин в присутствии препарата по сравнению с контролем, где время образования сгустка составляет 85 с. Установлена неферментативная фибринолитическая активность плазмы крови при пероральном введении препарата в дозе 1 мг/кг, превышающая контрольный уровень на 63% антикоагулянтная активность, превышающая контрольный уровень на 24% антитромботическая активность, превышающая контрольный уровень на 75% тромболитическая активность, превышающая контрольный уровень на 100%
П р и м е р 2. Начальные операции проводят согласно примеру 1. Далее материал растирают в фарфоровой ступке 20 мин и приливают по каплям дистиллированную воду до конечного объема 20 мл, затем смесь выдерживают на кипящей водяной бане в течение 20 мин при периодическом помешивании, после чего центрифугируют при 2000 об/мин в течение 30 мин для отделения супернатанта. Полученный супернатант лиофильно высушивают из замороженного состояния. Выход препарата 4%
Полученный препарат обладал антикоагулянтной активностью (не наблюдалось образования сгустка плазмы крови крысы в течение более 60 мин), неферментативной фибринолитической активностью (зоны лизиса 42 кв. мм). При пероральном введении в организм млекопитающих (крысы) установлено, что плазма крови обнаруживает антикоагулянтные и фибринолитические свойства, превышающие контрольный уровень на соответственно 55% и 30% антитромбическую активность, превышающую контрольный уровень на 70% и тромболитические свойства, превышающие контрольный уровень на 95%
П р и м е р 3. Начальные операции проводят согласно примеру 1. Далее материал растирают в фарфоровой ступке 15 мин и приливают по каплям дистиллированную воду до конечного объема 15 мл. Затем смесь выдерживают на кипящей водяной бане в течение 15 мин при периодическом помешивании, после чего центрифугируют при 1900 об/мин в течение 25 мин при комнатной температуре для отделения супернатанта. Полученный супернатант лиофильно высушивают из замороженного состояния. Выход препарата 4%
Полученный препарат обладал антикоагулянтной активностью (не наблюдалось образование сгустка плазмы крови крысы в течение 60 мин), неферментативной фибринолитической активностью (зона лизиса составляла 36 кв. мм). При пероральном введении в организм млекопитающих (крысы) установлено, что плазма крови обнаруживает антикоагулянтные и фибринолитические свойства, превышающие контрольный уровень на соответственно 60% и 32% антитромболитическую активность, превышающую контрольный уровень на 72% и тромболитические свойства, превышающие контрольный уровень на 90%
PRI me R 1. Take the root of the peony (P. suffruticosa), crushed to a powder state, thoroughly triturated with 500 mg in a porcelain mortar for 10 minutes and pour distilled water dropwise to a final volume of 10 ml, then the mixture is kept in boiling a water bath for 10 minutes with periodic stirring, after which it is centrifuged at 1800 rpm for 20 minutes to separate the supernatant. The resulting supernatant is lyophilized dried from a frozen state and used as an effective antithrombotic and thrombolytic drug. The yield of the drug 5%
The resulting preparation has anticoagulant activity, since there is no formation of a blood plasma clot of rat and bull for more than 60 minutes in the presence of the drug compared to the control, where the clot formation time is 85 s. The non-enzymatic fibrinolytic activity of blood plasma was established upon oral administration of the drug at a dose of 1 mg / kg, exceeding the control level by 63%, anticoagulant activity, exceeding the control level by 24%, antithrombotic activity, exceeding the control level by 75%, thrombolytic activity, exceeding the control level by 100%
PRI me R 2. Initial operations are carried out according to example 1. Next, the material is triturated in a porcelain mortar for 20 minutes and distilled water is added dropwise to a final volume of 20 ml, then the mixture is kept in a boiling water bath for 20 minutes with occasional stirring, then centrifuged at 2000 rpm for 30 minutes to separate the supernatant. The resulting supernatant is freeze-dried from the frozen state. The yield of the drug 4%
The resulting preparation had anticoagulant activity (no formation of a rat blood plasma clot was observed for more than 60 minutes), non-enzymatic fibrinolytic activity (lysis zone 42 sq. Mm). When administered orally to mammals (rats), it was found that blood plasma exhibits anticoagulant and fibrinolytic properties that exceed the control level by 55% and 30%, respectively, antithrombotic activity that exceeds the control level by 70% and thrombolytic properties that exceed the control level by 95%
PRI me R 3. Initial operations are carried out according to example 1. Next, the material is triturated in a porcelain mortar for 15 minutes and distilled water is added dropwise to a final volume of 15 ml. The mixture was then kept in a boiling water bath for 15 minutes with occasional stirring, after which it was centrifuged at 1900 rpm for 25 minutes at room temperature to separate the supernatant. The resulting supernatant is freeze-dried from the frozen state. The yield of the drug 4%
The resulting preparation had anticoagulant activity (the formation of a blood plasma clot in rats was not observed for 60 min), non-enzymatic fibrinolytic activity (lysis zone was 36 sq. Mm). When administered orally to mammals (rats), it was found that blood plasma exhibits anticoagulant and fibrinolytic properties that exceed the control level by 60% and 32%, respectively, antithrombolytic activity, which exceeds the control level by 72%, and thrombolytic properties that exceed the control level by 90%

Claims (1)

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСА, ОБЛАДАЮЩЕГО ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ, ТРОМБОЛИТИЧЕСКОЙ И АНТИКОАГУЛЯЦИОННОЙ АКТИВНОСТЬЮ, путем экстрагирования водой растительного сырья, отличающийся тем, что в качестве растительного сырья используют корни древовидного пиона (Paeonis Suffruticosa), которые измельчают и экстрагируют дистиллированной водой при соотношении сырье : экстрагент 1 : 5, прогревают на кипящей водяной бане при помешивании в течение 10 - 20 мин, после чего осадок удаляют центрифугированием при 1800 - 2000 об/мин в течение 20 - 30 мин, супернатант замораживают при (-10) - (-20)oС и лиофильно высушивают.METHOD FOR PRODUCING A COMPLEX POSSESSING FIBRINOLYTIC, THROMBOLYTIC, AND ANTI-COAGULATION ACTIVITY by extracting plant materials with water, characterized in that the tree peony roots (Paeonis Suffruticosa) are used as plant materials, which are extracted by grinding: heated in a boiling water bath with stirring for 10 to 20 minutes, after which the precipitate was removed by centrifugation at 1800 - 2000 rpm for 20 to 30 minutes, the supernatant was frozen and (-10) - (-20) o C and freeze-dried.
RU93033687A 1993-06-30 1993-06-30 Method of preparing complex showing fibrinolytic, thrombolytic and anticoagulative activities RU2055591C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU93033687A RU2055591C1 (en) 1993-06-30 1993-06-30 Method of preparing complex showing fibrinolytic, thrombolytic and anticoagulative activities

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU93033687A RU2055591C1 (en) 1993-06-30 1993-06-30 Method of preparing complex showing fibrinolytic, thrombolytic and anticoagulative activities

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU93033687A RU93033687A (en) 1995-11-20
RU2055591C1 true RU2055591C1 (en) 1996-03-10

Family

ID=20144174

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU93033687A RU2055591C1 (en) 1993-06-30 1993-06-30 Method of preparing complex showing fibrinolytic, thrombolytic and anticoagulative activities

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2055591C1 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2129435C1 (en) * 1997-12-10 1999-04-27 Ульянов Александр Михайлович Antidiabetogenic agent
RU2143270C1 (en) * 1998-12-11 1999-12-27 Успенская Марианна Сергеевна Method of preparing preparation showing fibrinolytic, antithrombocytic, anticoagulant and antidiabetogenic activities
RU2199331C1 (en) * 2001-10-24 2003-02-27 Успенская Марианна Сергеевна Method of preparing agent eliciting anticoagulant, fibrinolytic, antiplateletic, antithrombotic and thrombolytic effect

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Авторское свидетельство СССР N 1601832, кл. A 61K 35/78, 1989. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2129435C1 (en) * 1997-12-10 1999-04-27 Ульянов Александр Михайлович Antidiabetogenic agent
RU2143270C1 (en) * 1998-12-11 1999-12-27 Успенская Марианна Сергеевна Method of preparing preparation showing fibrinolytic, antithrombocytic, anticoagulant and antidiabetogenic activities
RU2199331C1 (en) * 2001-10-24 2003-02-27 Успенская Марианна Сергеевна Method of preparing agent eliciting anticoagulant, fibrinolytic, antiplateletic, antithrombotic and thrombolytic effect

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1927363B1 (en) An extract for preventing or treating thrombotic diseases
KR100347880B1 (en) Extracts of shark cartilage, process of producti0n and uses thereof
US4526717A (en) Polypeptide having an action on the immunological system, processes for its isolation and purification, its use, agents containing this compound, and its cleavage products, their use and agents containing these products
RU2055591C1 (en) Method of preparing complex showing fibrinolytic, thrombolytic and anticoagulative activities
EP0440633B1 (en) Pharmaceutical for treating tumors in humans and method for making it
AU681872B2 (en) Keyhole limpet hemocyanin composition with enhanced anti-tumor activity against bladder cancer
KR930002011B1 (en) Antihypertensive and antihpotensive preparations
KR20130049043A (en) Pharmaceutical composition comprising the extract of betel nut of areca catechu l. for prevention and control of thrombosis
US4728637A (en) Complex of macromolecules extracted from mesenchymal cells for treating chronic degenerative disease
RU2143270C1 (en) Method of preparing preparation showing fibrinolytic, antithrombocytic, anticoagulant and antidiabetogenic activities
WO2007111534A1 (en) Method for producing an interleukin-2 preparation and the thus obtainable preparation
RU2038087C1 (en) Method for obtaining a substance influencing proliferation and differentiation of human keratinocytes from pig skin
RU2199331C1 (en) Method of preparing agent eliciting anticoagulant, fibrinolytic, antiplateletic, antithrombotic and thrombolytic effect
RU93033687A (en) Method of producing a complex possessing fibrinolytic, thrombolytic and anti-coagulant activity
CN119564827B (en) Use of a polypeptide combined with Panax notoginseng for treating cardiovascular and cerebrovascular embolic diseases
El-Mofty et al. Studies on the Mode of Action of Psoralen Derivatives: I. Their Effect on Copper and Glutathione Levels in Blood and Liver
SU975017A1 (en) Method of producing thymozine
RU2147891C1 (en) Method of drug preparing
RU2108800C1 (en) Method of preparing biologically active polysaccharide
Popova et al. Technological aspects of deproteinized calf blood hemoderivative preparation
RU2221591C1 (en) Method for preparing preparation for active immunization against tularemia
CN1145785A (en) Medicine for treatment of malignant tumour and its prepn
RU2175552C1 (en) Method of preparing anticoagulant from sapropel
CA2284863C (en) Active substance and composition inhibiting tumorous proliferation in ectoderm derived tissues
JPS6372629A (en) Production of physiologically active extract from ganoderma lucidum karst.