[go: up one dir, main page]

RS56398B1 - Optimizacija humanih antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene - Google Patents

Optimizacija humanih antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene

Info

Publication number
RS56398B1
RS56398B1 RS20170932A RSP20170932A RS56398B1 RS 56398 B1 RS56398 B1 RS 56398B1 RS 20170932 A RS20170932 A RS 20170932A RS P20170932 A RSP20170932 A RS P20170932A RS 56398 B1 RS56398 B1 RS 56398B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
antibody
antigen
lag
antibodies
human
Prior art date
Application number
RS20170932A
Other languages
English (en)
Inventor
Nils Lonberg
Mohan Srinivasan
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48795938&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS56398(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of RS56398B1 publication Critical patent/RS56398B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2827—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3061—Blood cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/75—Agonist effect on antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

STANJE TEHNIKE PREDMETNOG PRONALASKA
[0001] Terapijska antitela su jedan od najbrže rastućih segmenata farmaceutske industrije. Da bi se održala potentnost i minimizirala imunogenost, antitela i drugi proteinski lekovi moraju biti zaštićeni od fizičke i hemijske degradacije tokom proizvodnje i skladištenja. Zaista, jedna od primarnih poteškoća u razvoju terapeutika na bazi antitela je potencijalni imunogeni odgovor kada se daju subjektu, što može dovesti do brzog klirensa ili čak izazivanja sporednih neželjenih efekata koji su opasni po život, uključujući anafilaktički šok. Razni faktori utiču na imunogenost antitela, kao što su njegove fizičko-hemijske osobine (npr. čistoća, stabilnost ili rastvorljivost), klinički faktori (npr. doza, put administracije, heterogenost bolesti, ili osobine pacijenta), i istovremeno lečenje sa drugim agensima (Swann et al. (2008) Curr Opinion Immuol 20:493-499).
[0002] Imunogenost antitela i/ili gubitak aktivnosti antitela je često usled deamidacije. Deamidacija je hemijski proces razdradnje koji se spontano dešava u proteinima (npr., antitela). Deamidacija uklanja amidnu funkcionalnu grupu sa aminokiselinskog ostatka, kao što su asparagin i glutamin, tako oštećujući njegov bočni lanac koji sadrži amid. Ovo, za uzvrat, uzrokuje strukturne i biološke promene kroz protein, tako stvarajući heterogene oblike antitela. Deamidacija je jedan od najčešćih post-translacionih modifikacija koja se dešava u rekombinantno proizvedenim terapijskim antitelima.
[0003] Na primer, heterogenost u teškom lancu monoklonskog antitela h1B4 (humanizovano anti-CD18 antitelo) usled deamidacije tokom ćelijske kulture je saopštena od strane Tsai et a1. (Pharm Res 10(11):1580 (1993)). Dodatno, smanjenje/gubitak biološke aktivnosti usled deamidacije je problem koji je prepoznat. Kroon et al. su okarakterisali nekoliko mesta deamidacije u terapijskom antitelu OKT3, i saopštili da su uzorci grupe koja proizvodi OKT3 (starosti 14 meseci do 3 godine) pali ispod 75% aktivnost (Pharm Res 9(11):1386 (1992), strana 1389, druga kolona). Dodatno, uzorci OKT3 koji su pokazali velike količine oksidovanih peptida u njihovim mapama su značajno smanjili aktivnost u testu potentnosti vezivanja antigena (strana 1390, prva kolona). Autori su zaključili da specifična mesta hemijske modifikacije koja se dešavaju nakon skladištenja OKT3 su identifikovane mapiranjem peptida i korelisane sa opaženim promenama u hemijskim analizama i biološkim esejima antitela (strana 1392, prvo kolona). Gubitak biološke aktivnosti je takođe saopšten za razne druge deamidovane terapijske proteine, uključujući rekombinantnu humanu DNazu (Cacia et al. (1993) J. Chromatogr.634:229-239) i rekombinantni solubilni CD4 (Teshima et al. (1991) Biochemistry 30:3916-3922).
[0004] Uopšte, deamidacija poseduje značajan i nepredvidljiv problem za farmaceutsku industriju. Napori koji su povezani sa praćenjem varijabilnosti uzrokovane deamidacijom u sklopu terapeutika na bazi antitela, naročito, kao i brige FDA povezane sa ovom varijabilnošću, povećavaju troškove i odlažu kliničke studije. Pred toga, modifikacije koje se odnose na ovo pitanje, uključujući uslove pomeranja (npr., temperaturu, pH, i ćelijski tip) povezane sa rekombinantnom proizvodnjom i/ili promenama amino kiselina koje su podložne deamidaciji (npr., usmerena mutageneza) mogu negativno uticati na stabilnost i aktivnost, naročito kada su promene načinjene unutar regiona koji određuju komplementarnost (CDRs) antitela. Shodno tome, postoji potreba za stabilnijim verzijama terapijskih antitela.
REZIME
[0005] Predmetni pronalazak obezbeđuje izolovana monoklonska antitela (npr., humana monoklonska antitela), i njihove antigen-vezujuće delove, koji vezuju humani LAG-3 kao što je definisano u patentnim zahtevima. Monoklonska antitela predmetnog pronalaska imaju optimizovanu fizičku stabilnost u poređenju sa prethodno opisanim anti-LAG-3 antitelima. Naročito, pronalazak se odnosi na modifikovani oblik antitela 25F7 (US 2011/0150892 A1) koje ispoljava značajno poboljšanu termalnu i hemijsku stabilnost cu poređenju sa nemodifikovanim anitelom. Specifično, menjanjem kritičnog regiona vezivanja CDR2 domena teškog lanca antitela 25F7, pokazano je da je modifikovano antitelo ispoljilo značajno višu fizičku i termalnu stabilnost, smanjenu deamidaciju, višu termalnu reverziibilnost, i nižu agregaciju. U isto vreme, neočekivano je opaženo da je modifikovano antitelo zadržalo isti visok afinitet vezivanja za humani LAG-3 i funkcionalnu aktivnost nemodifikovanog antitela, uključujući sposobnost da inhibira vezivanje LAG-3 za molekule glavnog kompleksa histokompatibilnosti (MHC) klase II i stimuliše odgovore antigenspecifične T ćelije. Kombinovani suštinski porast u stabilnosti i retenciji vezivanja / biološke aktivnosti modifikovanog antitela je iznenađujuć, naročito u pogledu kritičnosti CDR regiona za funkciju antitela.
[0006] Antitela predmetnog pronalaska mogu biti korišćena za razne primene, uključujući detekciju LAG-3 proteina i stimulaciju odgovora antigen-specifične T ćelije kod subjekata koji imaju tumor ili virus.
[0007] Regioni CDR1, CDR2 i CDR 3 teškog lanca antitela, ili njegovog antigen-vezujućeg dela, predmetnog pronalaska sadrže aminokiselinske sekvence sa identifikacionim brojevima sekvenci - SEQ ID NOs: 15, 16, i 17, redom. Regioni CDR1, CDR2, i CDR3 lakog lanca antitela, ili njegovog antigen-vezujućeg dela, predmetnog pronalaska sadrže aminokiselinske sekvence sa SEQ ID NOs: 18, 19, i 20, redom. U jednom tehničkom rešenju, izolovano monoklonsko antitelo (npr., humano antitelo), ili njegov antigen-vezujući deo, predmetnog pronalaska ima varijabilni region teškog lanca koji sadrži aminokiselinsku sekvencu sa SEQ ID NO: 12. U drugom tehničkom rešenju, antitelo dalje obuhvata varijabilni region lakog lanca koji sadrži aminokiselinsku sekvencu sa SEQ ID NO: 14.
[0008] U poželjnom tehničkom rešenju antitelo ispoljava povećane fizičke osobine (tj., termalnu i hemijsku stabilnost) u poređenju sa antitelom 25F7, dok još uvek zadržava barem isti afinitet vezivanja za humani LAG-3 kao 25F7. Na primer, antitelo ispoljava smanjenu varijabilnost sekvenci u CDR2 regionu teškog lanca usled deamidacije, u poređenju sa antitelom 25F7, npr., približno 2.5% ili manje modifikacije aminokiselinske sekvence nakon 12 nedelja na 4C° (tj., u studijama stabilnosti u stvarnom vremenu (“real-time”) kao što je opisano ovde) i/ili približno 12.0% ili manje modifikacije aminokiselinske sekvence nakon 12 nedelja na 40C° (tj., pod ubrzanim stresnim uslovima, kao što je opisano ovde), dok još zadržava afinitet vezivanja za humani LAG-3 od oko najmanje KD of 1 x 10<-7>M ili manje (poželjnije, KDod 1 x 10<-8>M ili manje, a KDof 5 x 10<-9>M ili manje, ili a KDof 1 x 10<-9>M ili manje). U drugom tehničkom rešenju, antitelo ispoljava termalnu reverzibilnost od najmanje oko 40% u PBS na pH 8.0.
[0009] U drugom tehničkom rešenju, antitelo poseduje višu temperaturu topljenja (ukazujući na višu sveukupnu stabilnost in vivo), u poređenju sa nemodifikovanim antitelom (Krishnamurthy R i Manning MC (2002) Curr Pharm Biotechnol 3:361-71). U jednom tehničkom rešenju, antitelo ispoljava TM1 (temperatura inicijalnog razvijanja) veću od 60°C, npr., veću od 65°C, ili veću od 70°C. Tačka topljenja antitela može biti izmerena korišćenjem diferencijalne skenirajuće kalorimetrije (Chen et al (2003) Pharm Res 20: 1952-60; Ghirlando et al (1999) Immunol Lett 68:47-52) ili kružnog dihroizma (Murray et al. (2002) J. Chromatogr Sci 40:343-9).
[0010] U drugom tehničkom rešenju, antitelo je naznačeno njegovom otpornošću na brzu degradaciju. Degradacija antitela može biti izmerena korišćenjem kapilarne elektroforeze (CE) i MALDI-MS (Alexander AJ i Hughes DE (1995) Anal Chem 67:3626-32).
[0011] U drugom tehničkom rešenju, antitelo ispoljava minimalne agregacione efekte, npr., agregacija od 25% ili manje, kao što je 20% ili manje, 15% ili manje, 10% ili manje, 5% ili manje, ili 4% ili manje. Agregacija može voditi ka pokretanju neželjenog imunskog odgovora i/ili izmenjenih nepovoljnih farmakokinetičkih svojstava, agregacija može biti izmerena pomoću nekoliko tehnika, uključujući ekskluzionu hromatografiju po veličini na koloni (SEC), tečnu hromatografiju visokih performansi (HPLC), i rasipanje svetlosti.
[0012] U drugom tehničkom rešenju, antitelo dalje ispoljava najmanje jedno od sledećih svojstava:
(a) vezivanje za majmunski LAG-3;
(b) nedostatak vezivanja za mišji LAG-3;
(c) inhibicija vezivanja LAG-3 za molekule glavnog kompleksa histokompatibilnosti (MHC) klase II; i
(d) stimulacija imunskih odgovora, posebno odgovora antigen-specifičnih T ćelija. Poželjno, antitelo ispoljava najmanje dva od svojstava (a), (b), (c) i (d). Poželjnije, antitelo ispoljava najmanje tri od svojstava (a), (b), (c) i (d). Još poželjnije, antitelo ispoljava sva četiri od svojstava (a), (b), (c) i (d).
[0013] U drugom tehničkom rešenju, antitelo stimuliše odgovor antigen-specifične T ćelije, kao što je proizvodnja interleukina-2 (IL-2) u odgovoru antigen-specifične T ćelije. U drugim tehničkim rešenjima, antitelo stimuliše imunski odgovor, kao što je anti-tumorski odgovor (npr., inhibicija rasta tumora u in vivo modelima tumorskog grafta) ili autoimunski odgovor (npr., razvoj dijabetesa u NOD miševima).
[0014] U drugom tehničkom rešenju, antitelo vezuje epitop humanog LAG-3 koji sadrži aminokiselinsku sekvencu PGHPLAPG (SEQ ID NO: 21). U drugom tehničkom rešenju, antitelo vezuje epitop humanog LAG-3 koji sadrži aminokiselinsku sekvencu HPAAPSSW (SEQ ID NO: 22) ili PAAPSSWG (SEQ ID NO: 23).
[0015] U drugim tehničkim rešenjima, antitelo boji tkivo hipofize imunohistohemijom, ili ne boji hipofizno tkivo imunohistohemijom.
[0016] Antitela predmetnog pronalaska mogu biti antitela u punoj dužini, na primer, IgG1, IgG2 ili IgG4 izotipa, opciono sa mutacijom serina u prolin u zglobnom regionu konstantnog regiona teškog lanca (na položaju koji odgovara položaju 241 kako je opisano u Angal et al. (1993) Mol. Immunol. 30:105-108), tako da je heterogenost disulfidnog mosta između teških lanaca smanjena ili ukinuta. U jednom aspektu, izotip konstantnog regiona je IgG4 sa mutacijom na aminokiselinskim ostacima 228, npr., S228P. Alternativno, antitela mogu biti fragmenti antitela, kao što su Fab, Fab' ili Fab'2 fragmenti, ili antitela sa jednim lancem.
[0017] U drugom aspektu predmetnog pronalaska, antitelo (ili njegov antigen-vezujući deo) je deo imunokonjugata koji uključuje terapijski agens, npr., citotoksin ili radioaktivni izotop, vezan za antitelo. U još jednom aspektu, antitelo je deo bispecifičnog molekula koji uključuje drugi funkcionalni segment (npr., drugo antitelo) koje ima različitu specifičnost vezivanja nego pomenuto antitelo, ili njegov antigen vezujući deo.
[0018] Kompozicije koje sadrže antitela, ili njihove antigen-vezujuće delove, imunokonjugate ili bispecifične molekule predmetnog pronalaska, opciono formulisane u farmaceutski prihvatljivom nosaču, takođe su obezbeđene.
[0019] Molekuli nukleinske kiseline koje kodiraju antitela, ili njegove antigen-vezujuće delove (npr., varijabilni regioni i/ili CDR regioni), predmetnog pronalaska takođe su obezbeđeni, kao i ekspresioni vektori koji sadrže takve nukleinske kiseline i ćelije domaćina koje sadrže takve ekspresione vektore. Metode za pripremanje anti-LAG-3 antitela korišćenjem ćelija domaćina koje sadrži takve ekspresione vektore takođe su obezbeđene, i mogu da obuhvate korake (i) eksprimiranja antitela u ćeliji domaćina i (ii) izolovanje antitela iz ćelije domaćina.
[0020] U još jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje anti-LAG-3 antitela predmetnog pronalaska za primenu u metodama stimulisanja imunskih odgovora. U jednom tehničkom rešenju, metoda obuhvata stimulisanje odgovora antigen-specifične T ćelije kontaktiranjem T ćelija sa antitelom predmetnog pronalaska, tako da je odgovor antigen-specifične T ćelije stimulisan. U poželjnom tehničkom rešenju, proizvodnja interleukina-2 pomoću antigenspecifične T ćelije je stimulisana. U drugom tehničkom rešenju, subjekat je subjekat koji ima tumor i imunski odgovor na tumor je stimulisan. U drugom tehničkom rešenju, subjekat je subjekat koji ima virus i imunski odgovor na virus je stimulisan.
[0021] U još jednom tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje antitelo, ili njegov antigenvezujući deo, predmetnog pronalaska za primenu u metodi za inhibiranje rasta tumorskih ćelija kod subjekta koja sadrži administiranje subjektu antitela, ili njegovog antigenvezujućeg dela, tako da je rast tumora kod subjekta inhibirana. U još jednom tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, predmetnog pronalaska za primenu u metodi za lečenje virusne infekcije kod subjekta koja sadrži administriranje subjektu antitela, ili njegovog antigen-vezujućeg dela, tako da je virusna infekcija lečena kod subjekta. U drugom tehničkom rešenju, ove metode sadrže adminsitriranje kompozicije, bispecifične, ili imunokonjugata predmetnog pronalaska.
[0022] U još jednom tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje antitelo, ili njegov antigenvezujući deo, predmetnog pronalaska za primenu u metodi za stimulaciju imunskog odgovora kod subjekta koji sadrži administraciju antitela subjektu, ili njegovog antigen-vezujućeg dela, i najmanje jednog dodatnog imunostimulatornog antitela, kao što je anti-PD-1 antitelo, anti-PD-L1 antitelo i/ili anti-CTLA-4 antitelo, tako da je imunski odgovor stimulisan kod subjekta, na primer da inhibira rast tumora ili da stimuliše anti-virusni odgovor. U jednom tehničkom rešenju, dodatno imunostimulatorno antitelo je anti-PD-1 antitelo. U drugom tehničkom rešenju, dodatni imunostimulatorni agens je anti-PD-L1 antitelo. U još jednom tehničkom rešenju, dodatni imunostimulatorni je anti-CTLA-4 antitelo. U još jednom tehničkom rešenju, antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, predmetnog pronalaska je administrirano sa citokinom (npr., IL-2 i/ili IL-21), ili kostimulatornim antitelom (npr., anti-CD 137 i/ili anti-GITR antitelo). Antitela mogu biti, na primer, humana, himerna ili humanizovana antitela.
[0023] Predmetni pronalazak obezbeđuje anti-LAG-3 antitela i kompozicije predmetnog pronalaska za primenu u gorenavedenim metodama, ili za proizvodnju leka za primenu u gorenavedenim metodama (npr., za lečenje).
[0024] Druga svojstva i prednosti trenutne objave će biti očigledni iz sledećeg detaljnog opisa i primera, koji se ne bi smeli tumačiti kao ograničavajući.
KRATAK OPIS NACRTA
[0025] Slika 1A prikazuje nukleotidnu sekvencu (sekvenca sa identifikacionim brojem - SEQ ID NO: 1) i aminokiselinsku sekvencu (SEQ ID NO: 2) varijabilnog regiona teškog lanca 25F7 humanog monoklonskog antitela. CDR1 (SEQ ID NO: 5), CDR2 (SEQ ID NO: 6) i CDR3 (SEQ ID NO: 7) regioni su opisani i derivacije V, D i J germinativne linije su naznačene. CDR regioni su opisani korišćenjem Kabat sistema (Kabat et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5. izdanje, U.S. Department of Health i Human Services, NIH broj objave 91-3242).
Slika 1B prikazuje nukleotidnu sekvencu (SEQ ID NO: 3) i aminokiselinsku sekvencu (SEQ ID NO: 4) varijabilnog regiona kapa lakog lanca 25F7 humanog monoklonskog antitela. CDR1 (SEQ ID NO: 8), CDR2 (SEQ ID NO: 9) i CDR3 (SEQ ID NO: 10) regioni su opisani i derivacije V i J germinativne linije su naznačene. Aminokiselinske sekvence teškog i lakog lanca u punoj dužini antitela 25F7 su prikazane u SEQ ID NOs: 32 i 34, redom.
Slika 2A prikazuje aminokiselinsku sekvenca (SEQ ID NO: 12) varijabilnog regiona teškog lanca LAG3.5 monoklonskog antitela. CDR1 (SEQ ID NO: 15), CDR2 (SEQ ID NO: 16) i CDR3 (SEQ ID NO: 17) regioni su opisani. Aminokiselinske sekvence teškog i lakog lanca u punoj dužini antitela LAG3.5 su prikazane u SEQ ID NOs: 35 i 37, redom.
Slika 2B prikazuje nukleotidnu sekvencu (SEQ ID NO: 13) i aminokiselinsku sekvencu (SEQ ID NO: 14) varijabilnog regiona kapa lakog lanca LAG3.5 monoklonskog antitela. CDR1 (SEQ ID NO: 18), CDR2 (SEQ ID NO: 19) i CDR3 (SEQ ID NO: 20) regioni su opisani.
Slika 3 prikazuje aminokiselinske sekvence sekvenci CDR2 varijabilnog regiona teškog lanca LAG-3 varijanti LAG3.5 (SEQ ID NO: 16), LAG3.6 (SEQ ID NO: 24), LAG3.7 (SEQ ID NO: 25), i LAG3.8 (SEQ ID NO: 26), u poređenju sa aminokiselinskom sekvencom sekvence CDR2 varijabilnog regiona teškog lanca antitela 25F7 (LAG3.1) (SEQ ID NO: 6) i odgovarajuće sekvence humane germinativne linije (SEQ ID NO: 27). CDR2 varijabilnog regiona teškog lanca LAG3.5 razlikuje se od CDR2 varijabilnog regiona teškog lanca 25F7 za arginin (R) na položaju 54 (u odnosu na asparagin (N)) i serin (S) na položaju 56 (u odnosu na asparagine(N)). Preostali CDR regioni LAG3.5 i 25F7 su identični.
Slike 4A i 4B su grafici koji prikazuju aktivnost vezivanja (EC50i afinitet, redom) antitela LAG3.1 (25F7), LAG3.2, LAG3.5, LAG3.6, LAG3.7, i LAG3.8 da se aktiviraju CD4+ T ćelije.
Slike 5A, B, C, D, i E su grafici koji prikazuju krive termalnog topljenja (tj., termalna stabilnost) antitela LAG3.1 (25F7), LAG3.5, LAG3.6, LAG3.7, i LAG3.8, redom.
Slike 6A, B, C, D, i E su grafici koji prikazuju krive termalne revezibilnosti (tj., termalna stabilnost) antitela LAG3.1 (25F7), LAG3.5, LAG3.6, LAG3.7, i LAG3.8, redom.
Slika 7 je grafik, koji prikazuje aktivnost vezivanja antitela LAG3.1 (25F7) i LAG3.5 za aktivirane humane CD4+ T ćelije i vezivanje antigena (Biacore).
Slika 8 prikazuje rezultate mapiranja peptida korišćenjem masene spektrometrije (hemijske modifikacije / molekularna stabilnost) za antitela LAG3.1 (25F7) i LAG3.5 koja reflektuju deamidaciju i izomerizaciju nakon inkubacije tokom 5 dana pod ubrzanim stresnim uslovima kao što je opisano ovde.
Slika 9 je grafik koji poredi profile hidrofilnosti antitela LAG3.1 (25F7) i LAG3.5. Slike 10A, B, C, i D su grafici koji porede afinitet i fizičku stabilnost (tj., termalnu i hemijsku stabilnost) antitela LAG3.1 i LAG3.5 na 4C° i 40C°, tj., i studije u ubrzanim stresnim uslovima i "real-time" studije, su opisane ovde.
Slike 11A i B su grafici koji porede procenat modifikacije amino kiselinskih sekvenci antitela LAG3.1 i LAG3.5 na 4C° i 40C°.
DETALJAN OPIS PREDMETNOG PRONALASKA
[0026] Da bi predmetna objava mogla brže da se razume, prvo su definisani određeni termini. Dodatne definicije su postavljene u detaljnom opisu.
[0027] Termini "25F7," "antitelo 25F7," "antitelo LAG3.1," i "LAG3.1" odnose se na antihumano LAG-3 antitelo opisano u US2011/0150892 A1. Nukleotidna sekvenca (SEQ ID NO: 1) koja kodira varijabilni region teškog lanca 25F7 (LAG3.1) i odgovarajuća aminokiselinska sekvenca (SEQ ID NO: 2) je prikazana na Slici 1A (sa CDR sekvencama koje su označene kao SEQ ID NOs: 4, 5, i 7, redom). Nukleotidna sekvenca (SEQ ID NO: 3) koja kodira varijabilni region lakog lanca 25F7 (LAG3.1) i odgovarajuća aminokiselinska sekvenca (SEQ ID NO: 4) je prikazana na Slici 1B (sa CDR sekvencama koje su označene kao SEQ ID NOs: 8, 9, i 10, redom).
[0028] Termin "LAG-3" odnosi se na Limfocitni Aktivacioni Gen-3. Termin "LAG-3" uključuje varijante, izoforme, ortologe i paraloge. Na primer, antitela specifična za humani LAG-3 protein mogu, u određenim slučajevima, unakrsno da reaguju sa LAG-3 proteinom iz vrsta koje nisu humane. U drugim tehničkim rešenjima, antitela specifična za humani LAG-3 protein mogu biti kompletno specifična za humani LAG-3 protein i ne moraju pokazati unakrsnu reaktivnost vrste ili druge tipove unakrsne reaktivnosti, ili mogu unakrsno reagovati sa LAG-3 iz određenih drugih vrsta ali ne svih drugih vrsta (npr., unakrsno reaguju sa majmunskim LAG-3 ali ne mišjim LAG-3). Termin "humani LAG-3" odnosi se na humanu sekvencu LAG-3, kao što je kompletna aminokiselinska sekvenca humanog LAG-3 koja ima Genbank Pristupni br. NP_002277 (SEQ ID NO: 29). Termin "mišji LAG-3" odnosi se na mišju sekvencu LAG-3, kao što je kompletna aminokiselinska sekvenca mišjeg LAG-3 koja ima Genbank Pristupni br. NP_032505. LAG-3 je takođe poznat u oblasti kao, na primer, CD223. Humana LAG-3 sekvenca može da se razlikuje od humanog LAG-3 sa Genbank Pristupnim br. (Pristupnim brojem Banke gena) NP_002277 jer ima, npr., konzervirane mutacije ili mutacije u ne-konzerviranim regionima i LAG-3 ima suštinski istu biološku funkciju kao humani LAG-3 sa Genbank Pristupnim br. NP_002277. Na primer, biološka funkcija LAG-3 je da ima epitop na vanćelijskom domenu LAG-3 koji je specifično vezan pomoću antitela iz trenutne objave ili biološka funkcija LAG-3 je vezivanje za molekule MHC klase II.
[0029] Termin "majmunski LAG-3" bi trebalo da obuhvati LAG-3 proteine eksprimirane od strane majmuna starog sveta i novog sveta, uključujući ali bez ograničenja na LAG-3 cynomolgus majmuna i LAG-3 rhesus majmuna. Reprezentativna aminokiselinska sekvenca za LAG-3 majmuna je aminokiselinska sekvenca LAG-3 rhesus majmuna koja je takođe deponovana kao Genbank Pristupni br. XM_001108923. Druga reprezentativna aminokiselinska sekvenca za majmunski LAG-3 je alternativna sekvenca rhesus majmuna klona pa23-5 kao što je opisano u US 2011/0150892 A1. Ova alternativna rhesus sekvenca ispoljava razliku u pojedinačnoj aminokiselini, na položaju 419, kao u poređenju sa sekvencom deponovanom u Banci gena – Genbank.
[0030] Posebna humana LAG-3 sekvenca će generalno biti najmanje 90% identična u aminokiselinskoj sekvenci humanom LAG-3 sa Genbank Pristupnim br. NP_002277 i sadrži aminokiselinske ostatke koji identifikuju aminokiselinsku sekvencu kao humanu kada se poredi sa LAG-3 aminokiselinskim sekvencama drugih vrsta (npr., murinska). U određenim slučajevima, humani LAG-3 može biti najmanje 95%, ili čak najmanje 96%, 97%, 98%, ili 99% identična u aminokiselinskoj sekvenci sa LAG-3 sa Genbank Pristupnim br. NP_002277. U određenim tehničkim rešenjima, sekvenca humanog LAG-3 će pokazati ne više od 10 razlika u amino kiselinama od LAG-3 sekvence sa Genbank Pristupnim br. NP_002277. U određenim tehničkim rešenjima, humani LAG-3 može da pokaže ne više od 5, ili čak ne više od 4, 3, 2, ili 1 razlike u amino kiselini od sekvence LAG-3 sa Genbank Pristupni br. NP_002277. Procenat identiteta može biti određen kao što je ovde opisano.
[0031] Termin "imunski odgovor" odnosi se delovanje, na primer, limfocita, antigen prezentujućih ćelija, fagocitnih ćelija, granulocita, i solubilnih makromolekula proizvedenih od strane gornjih ćelija ili jetre (uključujući antitela, citokine, i komplement) koji rezultuje u selektivnom oštećenju, uništavanju, ili eliminaciji iz ljudskog tela invazivnih patogena, ćelija ili tkiva koji su inficirani patogenima, kancerskih ćelija, ili, u slučajevima autoimunosti ili patološke inflamacije, normalnih ćelija ili tkiva.
1
[0032] "Odgovor antigen-specifične T ćelije" odnosi se na odgovore od strane T ćelije koji rezultuje iz stimulacije T ćelije sa antigenom za koji je T ćelija specifična. Ne-ograničavajući primeri odgovora od strane T ćelije na antigen-specifičnu stimulaciju obuhvata proliferaciju i proizvodnju citokina (npr., IL-2 proizvodnja).
[0033] Termin "antitelo" kako je ovde pomenuto uključuje cela antitela i bilo koji antigen vezujući fragment (tj., "antigen-vezujući deo") ili pojedinačne lance istih. Cela antitela su glikoproteini koji sadrže najmanje dva teška (H) lanca i dva laka (L) lanca međusobno povezana disulfidnim vezama. Svaki težak lanac sadrži varijabilni region teškog lanca (skraćen ovde kao VH) i konstantni region teškog lanca. Konstantni region teškog lanca sadrži tri domena, CH1, CH2 i CH3. Svaki lak lanac sadrži varijabilni region lakog lanca (skraćeno ovde kao VL) i konstantni region lakog lanca. Konstantni region lakog lanca sadrži jedan domen, CL. VHi VLregioni mogu biti dalje podeljeni u regione hipervarijabilnosti, nazvane regioni koji određuju komplementarnost (CDR), razdvojene regionima koji su više konzervirani, označene kao okvirni regioni (FR). Svaki VH i VL je sastavljen od tri CDR regiona i četiri FR regiona, postavljenih od amino-terminusa do karboksi-terminusa po sledećem redu: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Varijabilni regioni teških i lakih lanaca sadrže vezujući domen koji ineraguje sa antigenom. Konstantni regioni antitela mogu posredovati vezivanju imunoglobulina za tkiva domaćina ili faktore, uključujući razne ćelije imunskog sistema (npr., efektorske ćelije) i prvu komponentu (Clq) klasičnog sistema komplemenata.
[0034] Termin "antigen-vezujući deo" antitela (ili jednostavno "deo antitela"), kao što je ovde korišćeno, odnosi se na jedan ili više fragmenata antitela koji zadržavaju sposobnost da se specifično vežu za antigen (npr., LAG-3 protein). Pokazano je da funkcija antitela da se veže za antigen može biti izvedena pomoću fragmenata antitela u punoj dužini. Primeri vezujućih fragmenata obuhvaćeni unutar termina "antigen-vezujući deo" antitela obuhvataju (i) Fab fragment, monovalentni fragment koji se sastoji od VL, VH, CLi CH1 domena; (ii) F(ab')2fragment, bivalentni fragment koji sadrži dva Fab fragmenta vezana disulfidnim mostom na zglobnom regionu; (iii) Fd fragment koji se sastoji od VHi CH1domena; (iv) Fv fragment koji se sastoji od VHi CH1 domena; (v) Fv fragment koji se sastoji od VLi VHdomena jednog kraja antitela, (vi) dAb fragment (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546), koji se sastoji od VH domena; (vii) izolovani region koji određuje komplementarnost (CDR); i (viii) nanotelo, varijabilni region teškog lanca koji sadrži jedan varijabilni domen i dva konstantna domena. Pored toga, iako su dva domena Fv fragmenta, VL i VH, kodirana odvojenim genima, oni mogu biti spojeni, korišćenjem rekombinantnih metoda, sintetičkim veznikom koji im omogućava da budu napravljeni kao pojedinačan proteinski lanac u kome se VLi VHregioni sparuju da formiraju monovalentne molekule (poznatikao Fv (scFv) sa jednim lancem; videti npr., Bird et al. (1988) Science 242:423-426; i Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883). Takva antitela sa jednim lancem bi takođe trebalo da budu obuhvaćena terminom “antigen-vezujući deo" antitela. Ovi fragmenti antitela su dobijeni korišćenjem konvencionalnih tehnika koje su poznate prosečnim poznavaocima oblasti, i fragmenti su testirani za korisnost na isti način kao što su intaktna antitela.
[0035] "Izolovano antitelo", kao što je ovde korišćeno, treba da se odnosi na antitelo koje je suštinski oslobođeno od drugih antitela koja imaju različite antigenske specifičnosti (npr., izolovano antitelo koje specifično vezuje LAG-3 protein je suštinski oslobođeno od antitela koja specifično vezuju antigene osim LAG-3 proteina). Izolovano antitelo koje specifično vezuje humani LAG-3 protein može, međutim, imati unakrsnu-reaktivnost za druge antigene, kao što su LAG-3 proteini iz drugih vrsta. Štaviše, izolovano antitelo može biti suštinski oslobođeno od drugog ćelijskog materijala i/ili hemikalija.
[0036] Termini "monoklonsko antitelo" ili " kompozicija monoklonskog antitela " kao što je ovde korišćeno odnosi se na preparat molekula antitela od pojedinačne molekularne kompozicije. Kompozicija monoklonskog antitela pokazuje pojedinačnu specifičnost vezivanja i afinitet za poseban epitop.
[0037] Termin "humano antitelo", kao što je ovde korišćeno, bi trebalo da obuhvati antitela koja imaju varijabilne regione u kojima su i okvirni regioni i CDR regioni izvedeni iz sekvenci umunoglobulina humane germinativne linije. Pored toga, ako antitelo obuhvata konstantni region, konstantni region je takođe izveden iz sekvenci imunoglobulina humane germinativne linije. Humana antitela predmetnog pronalaska mogu da obuhvate aminokiselinske ostatke koji nisu kodirani pomoću sekvenci umunoglobulina humane germinativne linije (npr., mutacije uvedene nasumičnom ili usmerenom specifičnom mutagenezom in vitro ili pomoću somatske mutacije in vivo). Međutim, termin "humano antitelo", kao što je ovde korišćeno, ne bi trebalo da obuhvati antitela u kojima CDR sekvence izvedene iz germinativne linije drugih sisarskih vrsta, kao što je miš, su nakalemljene na humane okvirne sekvence.
[0038] Termin "human monoklonsko antitelo" odnosi se na antitela koja pokazuju pojedinačnu specifičnost vezivanja, koja imaju varijabilne regione u kojima su i okvirni i CDR regioni izvedeni iz imunoglobulinskih sekvenci humane germinativne linije. U jednom tehničkom rešenju, humana monoklonska antitela su proizvedena pomoću hibridoma koji uključuje B ćeliju dobijenu iz transgene ne-humane životinje, npr., transgeni miš, koji ima genom koji sadrži transgen humanog teškog lanca i transgen lakog lanca spojen za imortalizovanu ćeliju.
[0039] Termin "rekombinantno humano antitelo", kao što je ovde korišćeno, uključuje sva humana antitela koja su pripremljena, eksprimirana, kreirana ili izolovana rekombinantnim sredstvima, kao što su (a) antitela izolovana iz životinje (npr., miš) koja je transgena ili transhromozomska za humane imunoglubulinske gene ili za hibridome pripremljene odatle (opisano dalje ispod), (b) antitela izolovana iz ćelije domaćina transformisana da eksprimiraju humano antitelo, npr., iz transfektoma, (c) antitela izolovana iz biblioteke rekombinantnih, kombinatornih humanih antitela, i (d) antitela pripremljena, eksprimirana, kreirana ili izolovana drugim sredstvima koja uključuju splajsovanje genskih sekvenci humanog immunoglobulina za druge DNK sekvence. Takva rekombinantna humana antitela imaju varijabilne regione u kojima okvirni i CDR regioni su izvedeni iz sekvenci humanog imunoglobulina germinativne linije. U određenim tehničkim rešenjima, međutim, takva rekombinantna humana antitela mogu biti podvrgnuta in vitro mutagenezi (ili, kada je korišćena životinja transgena za humane Ig sekvence, in vivo somatskoj mutagenezi) i tako aminokiselinske sekvence VH i VL regiona rekombinantnih antitela su sekvence koje, kada su izvedene iz i povezane sa humanim VHi VLsekvencama geminativne linije, ne mogu prirodno da postoje u okviru repertoara humanog antitela germinativne linije in vivo.
[0040] Termin "izotip" odnosi se na klasu antitela (npr., IgM ili IgG1) koja je kodirana pomoću gena konstantnog regiona teškog lanca.
[0041] Fraza "antitelo koje prepoznaje antigen" i "antitelo specifično za antigen" su korišćeni naizmenično ovde sa terminom "antitelo koje se vezuje specifično za antigen."
[0042] Termin "derivati humanog antitela" odnose se na bilo koji modifikovani oblik humanog antitela, npr., konjugat antitela i drugi agens ili antitelo.
[0043] Termin "humanizovano antitelo" bi trebalo da se odnosi na antitela u kojima CDR izvedene iz germinativne linije drugih sisarskih vrsta, kao što je miš, su bile graftovane na humane okvirne sekvence. Dodatne modifikacije okvirnog regiona mogu biti načinjene u sklopu humanih okvirnih sekvenci.
[0044] Termin "himerno antitelo" bi trebalo da se odnosi na antitela u kojima su sekvence varijabilnog regiona izvedene iz jedne vrste i sekvence konstantnog regiona su izvedene iz
1
druge vrste, kao što je antitelo u kome su sekvence varijabilnog regiona izvedene iz mišjeg antitela i sekvence konstantnog regiona su izvedene iz humanog antitela.
[0045] Kao što je ovde korišćeno, antitelo koje "specifično vezuje humani LAG-3" bi trebalo da se odnosi na antitelo koje se vezuje za humani LAG-3 protein (i moguće LAG-3 protein iz jedne ili više ne-humanih vrsta) ali se ne vezuje suštinski za ne-LAG-3 proteine. Poželjno, antitelo se vezuje za humani LAG-3 protein sa "visokim afinitetom", naime sa KDod 1 x 10<-7>M ili manje, poželjnije 1 x 10<-8>M ili manje, poželjnije 5 x 10<-9>M ili manje, poželjnije 1 x 10<-9>M ili manje.
[0046] Termin "ne vezuje se suštinski" za protein ili ćelije, kao što je ovde korišćeno, znači da se ne vezuje ili se ne vezuje sa visokim afinitetom za protein ili ćelije, tj. vezuje se za protein ili ćelije sa KD od 1 x 10<-6>M ili više, poželjnije 1 x 10<-5>M ili više, poželjnije 1 x 10<-4>M ili više, poželjnije 1 x 10<-3>M ili više, čak poželjnije 1 x 10<-2>M ili više.
[0047] Termin "Kasoc" ili "Ka", kao što je ovde korišćeno, bi trebalo da se odnosi na stopu asocijacije posebne antitelo-antigen interakcije, dok termin "Kdis" ili "Kd," kao što je ovde korišćeno, bi trebalo da se odnosi na stopu disasocijacije posebne antitelo-antigen interakcije. Termin "KD," kao što je ovde korišćeno, bi trebalo da se odnosi na konstantnu disocijacije, koja je dobijena iz odnosa Kd prema Ka (tj., Kd/Ka) i izražena je kao molarna koncentracija (M). KDvrednosti za antitela mogu biti određene korišćenjem metoda dobro uspostavljenih u oblasti. Poželjna metoda za određivanje KDantitela je korišćenjem površinske plazmonske rezonance, poželjno korišćenjem sistema biosenzora kao što je Biacore<®>sistem.
[0048] Termin "visok afinitet" za IgG antitelo odnosi se na antitelo koje ima KD od 1 x 10<-7>M ili manje, poželjnije 5 x 10<-8>M ili manje, čak poželjnije 1 x 10<-8>M ili manje, čak poželjnije 5 x 10<-9>M ili manje i čak poželjnije 1 x 10<-9>M ili manje za ciljni antigen. Međutim, vezivanje sa "visokim afinitetom" može da varira za izotipove antitela. Na primer, vezivanje sa “visokim afinitetom” za IgM izotip odnosi se na antitelo koje ima KDof 10<-6>M ili manje, poželjnije 10<-7>M ili manje, čak poželjnije 10<-8>M ili manje.
[0049] Termin "deamidacija" odnosi se na hemijski degradativni proces koji se spontano dešava u proteinima (npr., antitela). Deamidacija uklanja amidnu funkcionalnu grupu sa aminokiselinskog ostataka, kao što su asparagin i glutamin, tako oštećujući, njegove bočne lance koji sadrže amid. Specifično, bočni lanac asparagina napada susednu peptidnu grupu, formirajući simetrični intermedijer sukcinimida. Simetrija intermedijera rezultuje u dva proizvoda hidrolize, ili aspartat ili izoaspartat. Slična reakcija može takođe da se odigra u bočnim lancima aspartata, proizvodeći parcijalnu konverziju u izoaspartat. U slučaju glutamina, brzina deamidacije je generalno deset puta manja nego asparaginska, međutim, mehanizam je sencijalno isto, zahtevajući samo molekule vode da se nastavi.
[0050] Termin "subjekat" uključuje bilo koju humanu ili ne-humanu životinju. Termin "nehumana životinja" uključuje sve kičmenjake, npr., sisare i ne-sisare, kao što su he-humani primati, ovce, psi, mačke, krave, konji, kokoške, vodozemci, i gmizavci, iako su poželjni sisari, kao što su ne-humani primati, ovde, psi, mačke, krave i konji.
[0051] Razni aspekti predmetnog pronalaska su opisani u još detalja u sledećim odeljcima.
ANTI-LAG-3 ANTITELA KOJA IMAJU POVEĆANU STABILNOST I POVOLJNA FUNKCIONALNA SVOJSTVA
[0052] Antitela predmetnog pronalaska specifično se vezuju za humani LAG-3 i imaju optimizovanu stabilnost u poređenju sa prethodno opisanim anti-LAG-3 antitelima, naročito u poređenju sa antitelom 25F7 (LAG3.1). Ova optimizacija uključuje smanjenu deamidaciju (npr., povećanu hemijsku stabilnost) i povećano termalno ponovno sklapanje (npr., povećana fizička stabilnost), dok još zadržava vezivanej sa visokim afinitetom za humani LAG-3.
[0053] Metode za identifikaciju mesta deamidacije su poznate u oblasti (videti, npr., hromatografiju sa razmenom jona, na reverznoj fazi, i sa hidrofobnim interakcijama, i peptidno mapiranje proizvoda proteolitičke digestije (LC-MS)). Pogodni eseji za merenje fizičke stabilnosti obuhvataju, npr., analizu tačaka topljenja i/ili ponovno sklapanje strukture antitela nakon denaturacije (npr., procenat reverzibilnosti kao što je opisano, npr., u Primeru 3, Odeljak 3).
[0054] Vezivanje za humani LAG-3 može biti procenjeno korišćenjem jedne ili više tehnika takođe dobro uspostavljenih u oblasti. Na primer, antitelo može biti testirano pomoću testa protočne citometrije u kome antitelo reaguje sa ćelijskom linijom koja eksprimira humani LAG-3, kao što su CHO ćelije koje su transfektovane da eksprimiraju LAG-3 (npr., humani LAG-3, ili mišji LAG-3 (npr., rhesus ili cynomolgus majmuni) ili mišji LAG-3) na njihovoj ćelijskoj površini. Druge pogodne ćelije za primenu u testovima protočne citometrije obuhvataju anti-CD3-stimulisane CD4<+>aktivirane T ćelije, koje eksprimiraju nativni LAG-3. Dodatno ili alternativno, vezivanje antitela, uključujući kinetiku vezivanja (npr., KD vrednost), može biti testirana u BIAcore esejima. Drugi pogodni eseji vezivanja obuhvataju ELISA eseje, na primer, korišćenjem rekombinantnog LAG-3 proteina.
1
[0055] Antitela predmetnog pronalaska poželjno se vezuju za humani LAG-3 protein sa KD od 1 x 10<-7>M ili manje, i poželjnije 1 x 10<-8>M ili manje, 5 x 10<-9>M ili manje, ili 1 x 10<-9>M ili manje.
[0056] Tipično, antitelo se vezuje za LAG-3 u limfoidnim tkivima, kao što su krajnik, slezina ili timus, koje može biti detektovano imunohistohemijom. U jednom tehničkom rešenju, antitelo boji hipofizno tkivo (npr., su zadržana u hipofizi) kao što je izmereno imunohistohemijom. U drugom tehničkom rešenju, antitelo ne boji hipofizno tkivo (tj., nije zadržano u hipofizi) kao što je izmereno imunohistohemijom.
[0057] Dodatna funkcionalna svojstva obuhvataju unakrsnu-reaktivnost sa LAG-3 iz druge vrste. Na primer, antitelo može da se veže za mišji LAG-3 (npr., cynomolgus majmun, rhesus majmun), ali ne ad se suštinski veže za LAG-3 iz mišjeg LAG-3. Poželjno, antitelo predmetnog pronalaska se vezuje za humani LAG-3 sa visokim afinitetom.
[0058] Druga funkcionalna svojstva obuhvataju sposobnost antitela da stimuliše imunski odgovor, kao što je odgovor antigen-specifične T ćelije. Ovo može biti testirano, na primer, procenjivanjem sposobnosti antitela da stimuliše proizvodnju interleukina-2 (IL-2) u odgovoru antigen-specifične T ćelije. U određenim tehničkim rešenjima, antitelo se vezuje za humani LAG-3 i stimuliše odgovor antigen-specifične T ćelije. U drugim tehničkim rešenjima, antitelo se vezuje za humani LAG-3 ali ne stimuliše odgovor antigen-specifične T ćelije. Drugi načini za evaluaciju kapaciteta antitela da stimuliše imunski odgovor obuhvataju testiranje njegove sposobnosti da inhibira rast tumora, kao što je u in vivo modelu tumorskog grafta (videti, npr., Primer 6) ili sposobnost da stimuliše autoimunski odgovor, kao što je sposobnost da pospešuje razvoj autoimune bolesti u autoimunom modelu, npr., sposobnost da pospešuje razvoj dijabetesa u NOD mišjem modelu.
[0059] Poželjna antitela predmetnog pronalaska su humana monoklonska antitela. Dodatno ili alternativno, antitela mogu biti, na primer, himerna ili humanizovana monoklonska antitela.
MONOKLONSKO ANTITELO LAG3.5
[0060] Poželjno antitelo predmetnog pronalaska je humano monoklonsko antitelo, LAG3.5, strukturno i hemijski okarakterisano kao što je opisano ispod i u sledećim Primerima. VH aminokiselinska sekvenca LAG3.5 je pokazana u SEQ ID NO: 12 (Slika 2A). VLaminokiselinska sekvenca LAG3.5 je pokazana u SEQ ID NO: 14 (Slika 2B).
1
[0061] VH i VL sekvence (ili CDR sekvence) drugih anti-LAG-3 antitela koja vezuju humani LAG-3 mogu biti "izmešana i uparena sa" sa VHi VLsekvencama (ili CDR sekvencama) antitela LAG3.5. Poželjno, kada su VH i VL lanci (ili CDR regioni u sklopu takvih lanaca) izmešani i upareni, VH sekvenca iz posebnog VH/VL uparivanja je zamenjena sa strukturno sličnom VHsekvencom. Isto tako, poželjno VLsekvenca iz posebnog VH/VLuparivanja je zamenjena sa strukturno sličnom VLsekvencom.
[0062] Prema tome, u jednom tehničkom rešenju, antitela predmetnog pronalaska, ili njihovi antigen vezujući delovi, sadrže:
(a) varijabilni region teškog lanca koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 12 (tj., VH LAG3.5); i
(b) varijabilni region lakog lanca koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 14 (tj., VLLAG3.5) VLdrugog anti-LAG3 antitela (tj., koji se razlikuje od LAG3.5);
gde antitelo specifično vezuje humani LAG-3.
[0063] Antitela predmetnog pronalaska, ili njihovi antigen vezujući delovi, sadrže:
(a) regione CDR1, CDR2 i CDR3 teškog lanca koji sadrže aminokiselinske sekvence LAG3.5, SEQ ID NOs:15, 16, i 17, redom; i
(b) regione CDR1, CDR2 i CDR3 lakog lanca koji sadrže aminokiselinske sekvence LAG3.5, SEQ ID NOs:18, 19, i 20, redom;
gde antitelo specifično vezuje humani LAG-3.
[0064] Dalje, antitelo, ili njegov antigen vezujući deo, je opisan ovde da uključuje varijabilni CDR2 region teškog lanca LAG3.5 kombinovan sa CDR regionima drugih antitela koja vezuju humani LAG-3, npr., CDR1 i/ili CDR3 iz varijabilnog regiona teškog lanca, i/ili CDR1, CDR2, i/ili CDR3 iz varijabilnog regiona lakog lanca različitog anti-LAG-3 antitela.
[0065] Dodatno, poznato je u oblasti da CDR3 domen, nezavisno od CDR1 i/ili CDR2 domena, sam može odrediti specifičnost vezivanja za srodni antigen i da višestruka antitela mogu predvidljivo biti generisana imajući istu specifičnost vezivanja na osnovu uobičajene CDR3 sekvence. Videti, npr., Klimka et al., British J. of Cancer B3(2):252-260 (2000); Beiboer et al., J. Mol. BioL 296:833-849 (2000); Rader et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.
95:8910-8915 (1998); Barbas et al., J. Am. Chem. Soc.116:2161-2162 (1994); Barbas et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 92:2529-2533 (1995); Ditzel et al., J. Immunol. 157:739-749 (1996); Berezov et al., BIAjournal 8:Scientific Review 8 (2001); Igarashi et al., J. Biochem (Tokyo) 117:452-7 (1995); Bourgeois et al., J. Virol 72:807-10 (1998); Levi et al., Proc. Natl.
1
Acad. Sci. U.S.A. 90:4374-8 (1993); Polymenis i Stoller, J. Immunol. 152:5218-5329 (1994) i Xu i Davis, Immunity 13:37-45 (2000). Videti takođe, Američki patenti br. 6,951,646; 6,914,128; 6,090,382; 6,818,216; 6,156,313; 6,827,925; 5,833,943; 5,762,905 i 5,760,185.
[0066] Dalje, ovde su opisana antitela koja obuhvataju CDR2 varijabilnog regiona teškog lanca LAG3.5 i najmanje CDR3 varijabilnog regiona teškog i/ili lakog lanca LAG3.5 (SEQ ID NOs: 17 i/ili 20), ili CDR3 varijabilnog regiona teškog i/ili lakog lanca drugog LAG-3 antitela, gde je antitelo sposobno za specifično vezivanje za humani LAG-3. Ova antitela poželjno (a) kompetiraju za vezivanje sa; (b) zadržavaju funkcionalne karakteristike; (c) vezuju se za isti epitop; i/ili (d) imaju slični afinitet vezivanja kao LAG3.5. Antitela dalje mogu da obuhvate CDR2 varijabilnog regiona lakog lanca LAG3.5 (SEQ ID NOs: 17 i/ili 20), ili CDR2 varijabilnog regiona lakog lanca drugog LAG-3 antitela, gde je antitelo sposobno za specifično vezivanje za humani LAG-3. Antitela dalje mogu da obuhvate CDR1 varijabilni region teškog i/ili lakog lanca LAG3.5 (SEQ ID NOs: 17 i/ili 20), ili CDR1 varijabilni region teškog i/ili lakog lanca drugog LAG-3 antitela, gde je antitelo sposobno za specifično vezivanje za humani LAG-3.
KONZERVATIVNE MODIFIKACIJE
[0067] Dalje, ovde su opisana antitela koja sadrže sekvence varijabilnog regiona teškog i/ili lakog lanca ili CDR1, CDR2 i CDR3 sekvence koje se razlikuju od onih od LAG3.5 pomoću jedne ili više konzervativnih modifikacija. Poželjno, međutim, ostaci 54 i 56 od VHCDR2 ostaju kao arginin i serin, redom (tj., nisu mutirane). Razume se u oblasti da određene modifikacije konzervativne sekvence mogu biti načinjene da ne uklanjaju vezivanje antigena. Videti, npr., Brummell et al. (1993) Biochem 32:1180-8; de Wildt et al. (1997) Prot. Eng.
10:835-41; Komissarov et al. (1997) J. Biol. Chem. 272:26864-26870; Hall et al. (1992) J. Immunol. 149:1605-12; Kelley i O'Connell (1993) Biochem.32:6862-35; Adib-Conquy et al. (1998) Int. Immunol. 10:341-6 i Beers et al. (2000) Clin. Can. Res. 6:2835-43. Prema tome, antitelo je opisano ovde da sadrži varijabilni region teškog lanca koji sadrži CDR1, CDR2, i CDR3 sekvence i/ili varijabilni region lakog lanca koji sadrži CDR1, CDR2, i CDR3 sekvence, gde:
(a) sekvenca CDR1 varijabilnog regiona teškog lanca sadrži SEQ ID NO: 15, i/ili njene konzervativne modifikacije, osim na položajima 54 i 56; i/ili
1
(b) sekvenca CDR3 varijabilnog regiona teškog lanca sadrži SEQ ID NO: 17, i njene konzervativne modifikacije; i/ili
(c) sekvence varijabilnog regiona lakog lanca CDR1, i/ili CDR2, i/ili CDR3 sadrže SEQ ID NO: 18, i/ili, SEQ ID NO: 19, i/ili SEQ ID NO: 20, i/ili njihove konzervativne modifikacije; i
(d) antitelo specifično vezuje humani LAG-3.
[0068] Dodatno ili alternativno, antitelo može da poseduje jedan ili više od sledećih funkcionalnih svojstava opisanih iznad, kao što su vezivanje sa visokim afinitetom za humani LAG-3, vezivanje za majmunski LAG-3, nedostatak vezivanja za mišji LAG-3, sposobnost da inhibira vezivanje LAG-3 za molekule MHC klase II i/ili sposobnost da stimuliše odgovore antigen-specifične T ćelije.
[0069] Antitelo opisano ovde može biti, na primer, humano, humanizovano ili himerno antitelo
[0070] Kao što je ovde korišćeno, termin "konzervativne modifikacije sekvence" bi trebalo da se odnosi na amino kiselinske modifikacije koje značajno ne utiču ili ne menjaju karakteristike vezivanja antitela koja sadrže aminokiselinsku sekvencu. Takve konzervativne modifikacije obuhvataju amino kiselinske supstitucije, adicije i delecije. Modifikacije mogu biti uvedene u antitelo predmetnog pronalaska standardnim tehnikama poznatim u oblasti, kao što su usmerena mutageneza i mutageneza posredovana PCR-om. Konzervativne amino kiselinske supstitucije su one u kojima je aminokiselinski ostatak zamenjen sa amino kiselinskim ostatkom koji ima sličan bočni lanac. Familije aminokiselinskih ostataka koji imaju slične bočne lance su definisane u oblasti. Ove familije obuhvataju aminokiseline sa baznim bočnim lancima (npr., lizin, arginin, histidin), kiselim bočnim lancima (npr., asparaginska kiselina, glutaminska kiselina), nenaelektrisanim polarnim bočnim lancima (npr., glicin, asparagin, glutamin, serin, treonin, tirozin, cistein, triptofan), nepolarnim bočnim lancima (npr., alanin, valin, leucin, izoleucin, prolin, fenilalanin, metionin), betarazgranatim bočnim lancima (npr., treonin, valie, izoleucin) i aromatičnim bočnim lancima (npr., tirozin, fenilalanin, triptofan, histidin). Tako, jedan ili više aminokiselinskih ostataka u sklopu CDR regiona antitela predmetnog pronalaska mogu biti zamenjeni sa drugim aminokiselinskim ostacima iz iste familije bočnih lanaca i izmenjeno antitelo može biti testirano za zadržanu funkciju (tj., funkcije prikazane iznad) korišćenjem funkcionalnih eseja opisanih ovde.
1
PROJEKTOVANA I MODIFIKOVANA ANTITELA
[0071] Antitela mogu biti preipremljena korišćenjem antitela koje ima jedan ili više od VH i/ili VL sekvenci od LAG3.5 kao početni materijal da se projektuje modifikovano antitelo. Antitelo može biti projektovano modifikacijom jednog ili više ostataka u sklopu jednog ili oba varijabilna regiona (tj., VH i/ili VL), na primer u sklopu jednog ili više CDR regiona i/ili u sklopu jednog ili više okvirnih regiona. Dodatno ili alternativno, antitelo može biti projektovano modifikovanjem ostataka u sklopu konstantnog(ih) regiona, na primer menjanjem efektorskih funkcija antitela.
[0072] U određenim tehničkim rešenjima, CDR graftovanje može biti korišćeno da se projektuju varijabilni regioni antitela. Antitela interaguju sa ciljni antigenima predominanto preko aminokiselinskih ostataka koji su locirani u šest regiona koji određuju komplementranost teškog i lakog lanca (CDR regioni). Iz ovog razloga, aminokiselinske sekvence u sklopu CDR regiona su raznovrsnije između pojedinačnih antitela negos ekvence izvan CDR regiona. Pošto su CDR sekvence odgovorne za većinu antitelo-antigen interakcija, moguće je da se eksprimiraju rekombinantna antitela koja imitiraju svojstva specifičnih prirodnih antitela konstruisanjem ekspresionih vektora koji obuhvataju CDR sekvence iz specifičnih prirodnih antitela graftovanih na okvirne sekvence iz različitog antitela sa različitih svojstvima (videti, npr., Riechmann et al. (1998) Nature 332:323-327; Jones et al. (1986) Nature 321:522-525; Queen et al. (1989) Proc. Natl. Acad. See. U.S.A.
86:10029-10033; Američki patenti br. 5,225,539; 5,530,101; 5,585,089; 5,693,762 i 6,180,370).
[0073] Predmetni pronalazak se odnosi na izolovano monoklonsko antitelo, ili njegov antigen vezujući deo, koji sadrži varijabilni region teškog lanca koji sadrži CDR1, CDR2, i CDR3 sekvence koje sadrže SEQ ID NOs: 15, 16, 17, redom, i varijabilni region lakog lanca koji sadrži CDR1, CDR2, i CDR3 sekvence koje sadrže SEQ ID NOs: 18, 19, 20, redom (tj., CDR rigioni od LAG3.5). Dok ova antitela sadrže VH i VL CDR sekvence monoklonskog antitela LAG3.5, one mogu sadržati različite okvirne sekvence.
[0074] Takve okvirne sekvence mogu biti dobijene iz javnih DNK baza podataka ili objavljenih referenci koje obuhvataju genske sekvence antitela germinativne linije. Na primer, germinativne DNK sekvence za humane gene varijabilnog regiona teškog i lakog lanca mogu biti nađene u "VBase" bazi podataka humanih germinativnih sekvenci (dostupna na internetu na www.mrc-cpe.cam.ac.uk/vbase), kao i u Kabat et al. (1991), citiran gore,
2
Tomlinson et al. (1992) "The Repertoire of Human Germline VH Sequence Reveals about Fifty Groups of VH Segments with Different Hypervariable Loops" J. Mol. Biol. 227:776-798; i Cox et al. (1994) "A Directory hof human Germ-line VH Segments Reveals a Strong Bias in their Usage" Eur. J. Immunol. 24:827-836. Kao drugi primer, germinativne DNK sekvence za varijabilni region humanog teškog i lakog lanca mogu biti nađene u bazi podataka Banke gena. Na primer, sledeće sekvence teškog lanca germinativne linije nađene u HCo7 HuMAb mišu su dostune u pratećim pristupnim brojevima Banke gena: 1-69 (NG_0010109, NT_024637 & BC070333), 3-33 (NG_0010109 & NT_024637) i 3-7 (NG_0010109 & NT_024637). Kao drugi primer, sledeće sekvence teškog lanca germinativne linije nađene u HCo12 HuMAb mišu su dostupne u pratećim pristupnim brojevima Banke gena: 1-69 (NG_0010109, NT_024637 & BC070333), 5-51 (NG_0010109 & NT_024637), 4-34 (NG_0010109 & NT_024637), 3-30.3 (CAJ556644) & 3-23 (AJ406678).
[0075] Proteinske sekvence antitela su upoređene nasuprot sastavljene baze podataka sekvenci proteina korišćenjem jedne od metoda za pretragu sličnosti sekvenci koja se zove the Gapped BLAST (Altschul et al. (1997), gore), koje je dobro poznata prosečnim poznavaocima oblasti.
[0076] Poželjne okvirne sekvence za primenu u antitelima predmetnog pronalaska su one koje su strukturno slične okvirnim sekvencama korišćenim od strane odabranih antitela predmetnog pronalaska, npr., slične sa VH 4-34 okvirnom sekvencom i/ili VK L6 okvirnom sekvencom korišćenom od strane poželjnih monoklonskih antitela predmetnog pronalaska. VHCDR1, CDR2, i CDR3 sekvence, i VKCDR1, CDR2, i CDR3 sekvence, mogu biti graftovane na okvirne regione koji imaju identičnu sekvencu kao ona nađena u imunoglobulinskom genu germinativne linije od koga se okvirna sekvenca izvodi, ili CDR sekvence mogu biti graftovane na okivirne regione koji sadrže jednu ili više mutacija kao u poređenju sa germinativnom sekvencom. Na primer, nađeno je da je u pojedinim slučajevima efikasno da se mutiraju ostaci u sklopu okvirnih regiona da se održi ili pojača sposobnost antitela da veže antigen (videti npr., Američki patenti br. 5,530,101; 5,585,089; 5,693,762 i 6,180,370).
[0077] Drugi tip modifikacije varijabilnog regiona je mutiranje aminokiselinskih ostataka unutar VH i/ili VL CDR1, CDR2 i/ili CDR3 regiona da se time poboljša jedno ili više svojstava vezivanja (npr., afinitet) antitela od interesa. Usmerena mutageneza ili mutageneza posredovana PCR-om može biti izvedena da se uvede mutacija(e) i efekat na vezivanje antitela, ili drugo funkcionalno svojstvo od interesa, može biti procenjeno u in vitro ili in vivo esejima kako je opisano ovde i obezbeđeno u Primerima. Poželjno konzervativne modifikacije (kao što je razmotreno iznad) su predstavljene. Mutacije mogu biti aminokiselinske supstitucije, adicije ili delecije, ali su poželjne supstitucije. Pored toga, tipično ne više od jednog, dva, tri, četiri ili pet ostataka u sklopu CRD regionu su izmenjeni.
[0078] Prema tome, ovde su opisana izolovana anti-LAG-3 monoklonska antitela, ili njihovi antigen vezujući delovi, koji sadrže varijabilni region teškog lanca koji sadrži: (a) VH CDR1 region koji sadrži SEQ ID NO: 15, ili aminokiselinsku sekvencu koja ima jednu, dve, tri, četiri ili pet aminokiselinskih supstitucija, delecija ili adicija kao u poređenju sa SEQ ID NO: 15; (b) VH CDR2 region koji sadrži SEQ ID NO: 16, ili aminokiselinsku sekvencu koja ima jednu, dve, tri, četiri ili pet aminokiselinskih supstitucija, delecija ili adicija kao u poređenju sa SEQ ID NO: 16 (poželjno gde položaji 54 i 56 su isti kao u SEQ ID NO:16); (c) VHCDR3 region koji sadrži SEQ ID NO: 17, ili aminokiselinsku sekvencu koja ima jednu, dve, tri, četiri ili pet aminokiselinskih supstitucija, delecija ili adicija kao u poređenju sa SEQ ID NO: 17; (d) VLCDR1 region koji sadrži SEQ ID NO: 18, ili aminokiselinsku sekvencu koja ima jednu, dve, tri, četiri ili pet aminokiselinskih supstitucija, delecija ili adicija kao u poređenju sa SEQ ID NO: 18; (e) VL CDR2 region koji sadrži SEQ ID NO: 19, ili aminokiselinsku sekvencu koja ima jednu, dve, tri, četiri ili pet aminokiselinskih supstitucija, delecija ili adicija kao u poređenju sa SEQ ID NO: 19; i (f) VLCDR3 region koji sadrži SEQ ID NO: 20, ili aminokiselinsku sekvencu koja ima jednu, dve, tri, četiri ili pet aminokiselinskih supstitucija, delecija ili adicija kao u poređenju sa SEQ ID NO: 20.
[0079] Projektovana antitela predmetnog pronalaska obuhvataju ona u kojima su modifikacije napravljene na ostacima okvira u sklopu VH i/ili VL, npr. da se poboljšaju svojstva antitela. Tipično takve modifikacije okvira su napravljene da se smanji imunogenost antitela. Na primer, jedan pristup je "povratno mutirati" jedan ili više ostataka okvira do odgovarajuće germinativne sekvence. Specifičnije, antitelo koje je podleglo somatskoj mutaciji može da sadrži ostatake okvira koji se razlikuju od germinativne sekvence od koje je antitelo izvedeno. Takvi ostaci mogu biti identifikovani poređenjem okvirne sekvence antitela sa germinativnom sekvencom od koje je antitelo izvedeno.
[0080] Drugi tip modifikacija okvira uključuje mutiranje jednog ili više ostataka u sklopu okvirnog regiona da se uklone epitope T ćelije da bi se time smanjila potencijalna imunogenost antitela. Ovaj prirtup je takođe nazvan kao "deimunizacija" i opisan je u još detalja u objavi Američkog patenta br.20030153043.
[0081] Dodatno ili alternativno modifikacijama napravljenim u sklopu okvirnih regiona, antitela predmetnog pronalaska mogu biti projektovana da obuhvate modifikacije u sklopu Fc regiona, tipično da se izmene jedno ili više funkcionalnih svojstava antitela, kao što su poluživot u serumu, fiksiranje komplementa, vezivanje FC receptora, i/ili antigen-zavisna ćelijska citotoksičnost. Pored toga, antitelo predmetnog pronalaska može biti hemijski modifikovano (npr., jedan ili više hemijskih segmenata mogu biti prikačeni za antitelo) ili biti modifikovani da izmene njegovu glikozilaciju, ponovo da izmene jedno ili više funkcionalnih svojstava antitela. Svaki od ovih tehničkih rešenja je opisano u još detalja ispod. Numerisanje ostataka u Fc regionu je pomoću EU indeksa Kabat-a.
[0082] U poželjnom tehničkom rešenju, antitelo je antitelo IgG4 izotipa koje sadrži mutaciju serina u prolin na položaju koji odgovara položaju 228 (S228P; EU indeks) u zglobnom regionu konstantnog regiona teškog lanca. Ova mutacija je prijavljena da poništava heterogenost disulfidnih mostova između teških lanaca u zglobnom regionu (Angal et al. gore; položaj 241 je baziran na Kabat-ovom sistemu numeracije).
[0083] U jednom tehničkom rešenju, zglobni region CH1 je modifikovan tako da je broj cisteinskih ostataka u zglobnom regionu izmenjen, npr., povećan ili smanjen. Ovaj pristup je dalje opisan u Američkom patentu br. 5,677,425. Broj cisteinskih ostataka u zglobnom regionu CH1 je izmenjen da, na primer, folakša skapanje lakih i teških lanaca ili da poveća ili smanji stabilnost antitela.
[0084] U drugom tehničkom rešenju, Fc zglobni region antitela je mutiran da smanji biološki poluživot antitela. Specifičnije, jedna ili više mutacija aminokiselina su uvedene u CH2-CH3 granični (interfejs) region domena Fc-zglobnog fragmenta tako da je antitelo smanjilo vezivanje Staphylococcyl proteina A (SpA) u odnosu na vezivanje SpA za nativni Fc-zglobni domen. Ovaj pristup je opisan u još detalja u Američkom patentu br.6,165,745.
[0085] U drugom tehničkom rešenju, antitelo je modifikovano da poveća njegov biološki poluživot. Razni pruistupi su mogući. Na primer, jedna ili više sledećih mutacija može biti uvedena: T252L, T254S, T256F, kao što je opisan u Američkom patentu br. 6,277,375. Alternativno, da bi se povećao biološki poluživot, antitelo može biti izmenjeno u sklopu CH1 ili CL regiona da sadrži epitop koji vezuje “salvage” receptor uzet iz dve petlje CH2 domena Fc regiona IgG, kao što je opisan u Američkim patentima br.5,869,046 i 6,121,022.
[0086] U još nekim tehničkim rešenjima, Fc region je izmenjen zamenjivanjem najmanje jednog aminokielinskog ostatka sa drugačijim aminokiselinskim ostatkom da se izmeni efektorska funkcija(e) antitela. Na primer, jedna ili više aminokiselina odabranih od
2
aminokiselinskih ostataka 234, 235, 236, 237, 297, 318, 320 i 322 može biti zamenjena sa sa drugačijim aminokiselinskim ostatkom tako da antitelo ima izmenjen afinitet za efektorski ligand ali zadržava sposobnost za vezivanje antigena parentalnog antitela. Efektorski ligand kome je afinitet izmenjen može biti, na primer, Fc receptor ili C1 komponenta komplementa. Ovaj pristup je opisan u još detalja u Američkim patentima br.5,624,821 i 5,648,260.
[0087] U još jednom primeru, jedna ili više aminokiselina odabranih od aminokiselinskih ostataka 329, 331 i 322 može biti zamenjena sa drugačijim aminokiselinskim ostatkom tako da antitelo ima izmenjeno Clq vezivanje i/ili smanjenu ili poništenu citotoksičnost zavisnu od komplementa (CDC). Ovaj pristup je opisan u još detalja u Američkom patentu br.6,194,551.
[0088] U još jednom primeru, jedan ili više ainokiselinskih ostataka u sklopu položaja aminokiselina 231 i 239 su izmenjeni da se time izmeni sposobnost antitela da fiksiraju komplement. Ovaj pristup je opisan dalje u objavi PCT prijave WO 94/29351.
[0089] U još jednom primeru, Fc region je modifikovan da poveća sposobnost antitela da posreduje u ćelijskoj citotoskičnosti zavisnoj od antitela (ADCC) i/ili da poveća afinitet za Fcγ receptor modifikovanjem jedne ili više aminokiselina na sledećim položajima: 238, 239, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 265, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 ili 439. Ovaj pristup je opisan dalje u objavi PCT prijave WO 00/42072. Pored toga, mesta vezivanja na humanom IgG1 za FcγR1, FcγRII, FcγRIII i FcRn su mapirana i varijante sa poboljšanim vezivanjem su opisane (videti Shields et al. (2001) J. Biol. Chem. 276:6591-6604). Specifične mutacije na položajima 256, 290, 298, 333, 334 i 339 su pokazane da poboljšavanju vezivanje za FcγRIII. Dodatno, sledeći mutanti kombinacija su pokazani da poboljšavaju FcγRIII vezivanje: T256A/S298A, S298A/E333A, S298A/K224A i S298A/E333A/K334A.
[0090] U još jednom tehničkom rešenju, glikozilacija antitela je modifikovana. Na primer, neglikolizovano antitelo može biti napravljeno (tj., antitelo kome nedostaje glikozilacija). Glikozilacija može biti izmenjena da, na primer, poveća afinitet antitela za antigen. Takve modifikacije ugljenih hidrata mogu biti postignute pomoću, na primer, menjanja jednog ili više mesta glikozilacije u sklopu sekvence antitela. Na primer, jedna ili više aminoksielinskih supstitucija može biti načinjena kao rezultat eliminacije jednog ili više mesta glikozilacije okvira varijabilnog regiona da se time eliminiše glikozilacija na tom mestu. Takva glikozilacija može povećati afinitet antitela za antigen. Videti, npr., Američki patenti br.5,714,350 i 6,350,861.
[0091] Dodatno ili alternativno, antitelo može biti napravljeno da ima izmenjen tip glikozilacije, kao što je hipofukozilovano antitelo koje ima smanjene količine fukozil ostataka ili antitelo koje ima povećane račvaste GlcNac strukture. Takvi izmenjeni šabloni glikozilacije su pokazani da povećavaju ADCC sposobnost antitela. Takve ugljenohidratne modifikacije mogu biti postignute pomoću, na primer, eksprimiranja antitela u ćeliji domaćina sa izmenjenom mašinerijom za glikozilaciju. Ćelije sa izmenjenom mašinerijom za glikozilaciju su opisane u oblasti i mogu biti korišćene kao ćelije domaćina u kojima se eksprimiraju rekombinantna antitela predmetnog pronalaska da se time proizvede antitelo sa izmenjenom glikozilacijom. Na primer, ćelijskim linijima Ms704, Ms705, i Ms709 nedostaje gen za fukoziltransferazu, FUT8 (α (1,6)-fucosyltransferase), tako da antitela eksprimirana u Ms704, Ms705, i Ms709 ćelijskim linijama imaju nedostatak fukoze na njihovim ugljenim hidratima. Ms704, Ms705, i Ms709 FUT8<-/->ćelijske linije su kreirane ciljanim prekidom FUT8 gena u CHO/DG44 ćelijama korišćenjem dva vektora za zamenu (videti objavu Američkog patenta br. 20040110704 i Yamane-Ohnuki et al. (2004) Biotechnol Bioeng 87:614-22). Kao drugi primer, EP 1,176,195 opisuje ćelijsku liniju sa funkcionalno prekinutim FUT8 genom, koji kodira fukozil transferazu, tako da antitela eksprimirana u takvoj ćelijskoj liniji ispoljavaju hipofukozilaciju smanjivanjem ili eliminisanjem enzima povezanog sa α-1,6 vezom. EP 1,176,195 takođe opisuje ćelijske linije koje imaju nisku aktivnost enzima za dodavanje fukoze na N-acetilglukozamin koji se vezuje za Fc region antitela ili nema enzimsku aktivnost, na primer ćelijska linija mišjeg mijeloma YB2/0 (ATCC CRL 1662). Objava PCT prijave WO 03/035835 opisuje varijantnu CHO ćelijsku liniju, Lec13 ćelije, sa smanjenom sposobnošću da prikači fukozu za Asn(297)-povezane ugljene hidrate, takođe rezultujući u hipofukozilaciji antitela ekspirmiranih u toj ćeliji domaćina (videti takođe Shields et al. (2002) J. Biol. Chem. 277:26733-26740). Antitela sa modifikovanim profilom glikozilacije mogu takođe biti proizvedena u kokošjim jajima, kao što je opisano u objavi PCT prijave WO 06/089231. Alternativno, antitela sa modifikovanim profilom glikozilacije mogu biti proizvedena u biljnim ćelijama, kao što je Lemna. Metode za proizvodnju antitela u biljnom sistemu je stavljena na uvid javnosti u američkoj patentnoj prijavi koja odgovara broju slučaja advokata Alston & Bird LLP 040989/314911, podnešenoj 11. Avgusta. 2006. Objava PCT prijave 99/54342 opisuje ćelijske linije projektovana da eksprimiraju glikoprotein-modifikujuće glikozil transferaze (npr., β(1,4)-N-
2
acetilglukozaminiltransferaza III (GnTIII)) tako da antitela eksprimirana u projektovanim ćelijskim linijama ispoljavaju povećane račvaste GlcNac strukture koje rezultuju povećanom ADCC aktivnošću antitela (videti takođe Umana et al. (1999) Nat. Biotech. 17:176-180). Alternativno, fukozni ostaci antitela mogu biti iscepani korišćenjem fukozidaznog enzima; npr., fukozidaza α-L-fukozidaza uklanja fukozil ostatke sa antitela (Tarentino et al. (1975) Biochem. 14:5516-23).
[0092] Još jedna modifikacija antitela ovde koja je predviđena ovom predmetnom objavom je pegilacija. Antitelo može biti pegilovano da, na primer, poveća biološki (npr., serumski) polu život antitela. Da bi se pegilovalo neko antitelo, antitelo, ili fragment istog, tipično reaguje sa polietilen glikolom (PEG), kao što je reaktivni estarski ili aldehidni derivat PEG-a, u uslovima u kojima jedna ili više PEG grupa postaju prikačene za antitelo ili fragment antitela. Poželjno, pegilacija je izvedena pomoću reakcije acilacije ili reakcije alkilacije sa reaktivnim PEG molekulom (ili analognim polimerom rastvornim u vodi). Kao što je ovde korišćeno, termin "polietilen glikol" bi trebalo da obuhvati bilo koji od oblika PEG-a koji je korišćen da derivatizuje druge proteine, kao što su mono (C1-C10) alkoksi- ili ariloksi- polietilen glikol ili polietilen glikol -maleimid. U određenim tehničkim rešenjima, antitelo koje treba pegilovati je aglikozilovano antitelo. Metode za pegilaciju proteina su poznate u oblasti i mogu biti primenjene na antitela predmetnog pronalaska. Videti, npr., EP 0154 316 i EP 0 401 384.
FIZIČKA SVOJSTVA ANTITELA
[0093] Antitela predmetnog pronalaska mogu biti okarakterisana njihovim raznim fizičkim svojstvima, da se detektuju i-ili diferenciraju različite klase istih.
[0094] Na primer, antitela mogu da sadrže jedno ili više mesta glikozilacije u varijabilnom regionu lakog ili teškog lanca. Takva mesta glikozilacije mogu rezultovati u povećanoj imunogenosti antitela ili izmeni pK antitela usled izmenjenog vezivanja antigena (Marshall et al (1972) Annu Rev Biochem 41:673-702; Gala i Morrison (2004) J Immunol 172:5489-94; Wallick et al (1988) JExp Med 168:1099-109; Spiro (2002) Glycobiology 12:43R-56R; Parekh et al (1985) Nature 316:452-7; Mimura et al. (2000) Mol Immunol 37:697-706). Poznato je da se glikozilacija dešava na motivima koji sadrže N-X-S/T sekvencu. U nekim slučajevima, poželjno je imati anti-LAG-3 antitelo koje ne sadrži glikozilaciju varijabilnog regiona. Ovo može biti postignuto ili selektovanjem antitela koja ne sadrže motiv glikozilacije u varijabilnom regionu ili mutiranjem ostataka u sklopu regiona glikozilacije.
2
[0095] U poželjnom tehničkom rešenju, antitela ne sadrže mesta izomerizma. Deamidacija asparagina može da se desi na N-G ili D-G sekvenci i rezultuje u stvaranju ostataka izoasparaginske kiseline koji uvodi nabor u polipeptidni lanac i smanjuje njegovu stabilnost (efekat izoasparaginske kiseline).
[0096] Svako antitelo će imati jedinstvenu izoelektričnu tačku (pI), koja generalno pada u opseg pH između 6 i 9.5. pI za IgG1 antitelo tipično pada u okviru pH opsega od 7-9.5 i pI za IgG4 antitelo tipično pada unutar pH opsega od 6-8. Spekuliše se da antitela sa pI izvan normalnog opsega mgu imati izvesno odmotavanje i nestabilnost u in vivo uslovima. Tako, poželjno je imati anti-LAG-3 antitelo koje obuhvata pI vrednost koja spada u normalni opseg. Ovo može biti postignuto ili selektovanjem antitela sa pI u normalnom opsgeu ili mutiranjem naelektrisanih površinskih ostataka.
MOLEKULI NUKLEINSKE KISELINE KOJI KODIRAJU ANTITELA PREDMETNOG PRONALASKA
[0097] U još jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje molekule nukleinske kiseline koji kodiraju varijabilne regione lakog i teškog lanca, ili CDRs, antitela predmetnog pronalaska. Nukleinske kiseline mogu biti prisutne u celim ćelijama, u ćelijskom lizatu, ili u delimično prečišćenom ili suštinski čistom obliku. Nukleinska kiselina je "izolovana" ili "učinjena suštinski čistom" kada je prečišćena od drugih ćelijskih komponenti ili drugih zagađivača, npr., druge ćelijske nukleinske kiseline ili proteini, standardnim tehnikama, uključujući alkalni/SDS tretman, CsCl “banding”, hromatografiju na koloni, elektroforezu na agaroznom gelu i druge dobro poznate u oblasti. Videti, Ausubel, et al., ed. (1987) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing i Wiley Interscience, Njujork. Nukleinska kiselina predmetnog pronalaska može biti, npr., DNK ili RNK i može ili ne mora da sadrži intronsku sekvencu. U poželjnom tehničkom rešenju, nukleinska kiselina je cDNK molekul.
[0098] Nukleinske kiseline predmetnog pronalaska mogu biti dobijene korišćenjem standardnih molekularno bioloških tehnika. Za antitela eksprimirana pomoću hibridoma (npr., hibridomi pripremljeni od transgenih miševa koji nose humane imunoglobulinske gene kao što je opisano dodatno ispod), cDNK koje kodiraju lake i teške lance antitela napravljene pomoću hibridoma mogu biti dobijene standardnom PCR amplifikacijom ili tehnikama kloniranja cDNK: Za antitela dobijena iz biblioteke imunoglobulinskih gena (npr., korišćenjem tehnika fagnog displeja – “phage display” tehnika”), nukleinska kiselina koja kodira takva antitela može biti nadokađena iz biblioteke gena.
2
[0099] Poželjni molekuli nukleinskih kiselina predmetnog pronalaska obuhvataju one koji kodiraju VHi VLsekvence LAG3.5 monoklonskog antitela (SEQ ID NOs: 12 i 14, redom). Kada su jednom dobijeni DNK fragmenti koji kodiraju VH i VL segmente, ovim DNK fragmentima može dalje da se manipuliše standardnim tehnikama rekombinantne DNK, na primer da se konvertuju varijabilni regioni gena u gene lanca antitela u punoj dužini, u gene Fab fragmenta ili scFv gen. U ovim manipulacijama, VL- ili VH-kodirajući DNK fragment je operativno povezan za drugi DNK fragment koji kodira drugi protein, kao što je konstantni region antitela ili fleksibilni linker. Termin "operativno povezan", kao što je korišćeno u ovom kontekstu, treba da znači da su dva DNK fragmenta spojena tako da su aminokiselinske sekvence kodirane pomoću dva DNK fragmenta koja ostaju u okviru.
[0100] Izolovana DNK koja kodira VH region može biti konvertovana u gen teškog lanca u punoj dužini operativnim vezivanjem VH-kodirajuće DNK za drugi DNK molekul koji kodira konstantne regione teškog lanca (CH1, CH2 i CH3). Sekvence humanog gena konstantnog regiona teškog lanca su poznate u oblasti (videti npr., Kabat et al. (1991), gore) i DNK fragmenti koji obuhvataju ove regione mogu biti dobijeni standardnom PCR amplifikacijom. Konstantni region teškog lanca može biti IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM ili IgD konstantni region, ali najpoželjniji je IgG1 ili IgG4 konstantni region. Za gen teškog lanca Fab fragmenta, VH-kodirajuća DNK može biti operativno povezana za drugi DNK molekul koji kodira samo CH1 konstantni region teškog lanca.
[0101] Izolovana DNK koja kodira VL region može biti konvertovana u gen lakog lanca u punoj dužini (kaoi gen Fab lakog lanca) operativno povezujući VL-kodirajuću DNK za drugi molekul DNK koji kodira konstantni region lakog lanca, CL. Sekvence gena humanog konstantnog regiona lakog lanca su poznate u oblasti (videti npr., Kabat et al., gore) i DNK fragmenti koji obuhvataju ove regione mogu biti dobijeni standardnom PCR amplifikacijom. U poželjnim tehničkim rešenjima, konstantni region lakog lanca mogu biti kapa ili lambda konstantni region.
[0102] Da se kreira scFv gen, VH- i VL-kodirajući DNA fragmenti su operativno povezani za drugi fragment koji kodira fleksibilni veznik, npr., koji kodira aminokiselinsku sekvencu (Gly4-Ser)3, tako da VHi VLsekvence mogu biti ekprimirane kao susedni jednolančani protein, sa VL i VH regionima koji su spojeni fleksibilnim veznikom (videti npr., Bird et al. (1988) Science 242:423-426; Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; McCafferty et al., (1990) Nature 348:552-554).
2
PROIZVODNJA MONOKLONSKIH ANTITELA
[0103] Monoklonska antitela (mAbs) možgu biti proizvedena korišćenjem dobro poznatih tehnika hibridizacije somatskih ćelija (hibridoma) Kohler-a i Milstein-a (1975) Nature 256: 495. Druga tehnička rešenja za proizvodnju monoklonskih antitela obuhvataju virusnu ili onkogensku transformaciju B limfocita i tehniky fagnog displeja. Himerna ili humanizovana antitela su takođe dobro poznata u oblasti. Videti npr., Američke patente br.4,816,567; 5,225,539; 5,530,101; 5,585,089; 5,693,762 i 6,180,370.
[0104] Humana monoklonska antitela usmerena na humani LAG-3 mogu biti generisana korišćenjem transgenih ili transhromozomskih miševa koji nose delove humanog imunskog sistema više nego mišjeg sistema. Ovi transgeni ili transhromozomski miševi obuhvataju miševe koji se nazivaju ovde HuMAb Mouse<®>i KM Mouse<®>, redom, i kolektivno se zovu ovde "humani Ig miševi."
[0105] HuMAb Mouse<®>(Medarex<®>, Inc.) sadrži minilokuse humanog imunoglubulinskog gena koji kodiraju neuređene imunoglobulinske sekvence teškog (µ i γ) i κ lakog lanca, zajedno sa ciljanim mutacijama koje inaktiviraju endogene lokuse µ i κ lanaca (videti npr., Lonberg et al. (1994) Nature 368(6474): 856-859). Prema tome, miševi koji ispoljavaju smanjenu ekspresiju mišjeg IgM ili κ, i u odgovoru na imunizaciju, uvedeni transgeni humanog teškog i lakog lanca podležu izmeni klase i somatskoj mutaciji da se generišu humana IgGκ monoklonska antitela sa visokim afinitetom (Lonberg et al. (1994), gore; prikazano u Lonberg (1994) Handbook of Experimental Pharmacology 113:49-101; Lonberg, N. i Huszar, D. (1995) Intern. Rev. Immunol.13: 65-93, i Harding i Lonberg (1995) Ann. N. Y. Acad. Sci. 764:536-546). Priprema i primena HuMAb Mouse<®>, i genomske modifikacije izvedene pomoću takvih miševa, su dalje opsiani u Taylor et al. (1992) Nucleis Acids Research 20:6287-6295; Chen et al. (1993) International Immunology 5: 647-656; Tuaillon et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:3720-3724; Choi et al. (1993) Nature Genetics 4:117-123; Chen et al. (1993) EMBO J. 12: 821-830; Tuaillon et al. (1994) J. Immunol.
152:2912-2920; Taylor et al. (1994) International Immunology 6: 579-591; i Fishwild et al. (1996) Nature Biotechnology 14: 845-851. Videti dalje, Američke patente br. 5,545,806; 5,569,825; 5,625,126; 5,633,425; 5,789,650; 5,877,397; 5,661,016; 5,814,318; 5,874,299; 5,770,429; i 5,545,807; broj objave PCT. WO 92/03918; WO 93/12227; WO 94/25585; WO 97/13852; WO 98/24884; WO 99/45962 i WO 01/14424.
[0106] Dalje, humana antitela mogu biti povećana korišćenjem miša koji nosi sekvence humanog imunoglobulina na transgenima i transhromozomima, kao što je miš koji nosi
2
humani transgen teškog lanca i humani transhromozom lakog lanca. Ovaj miš se naziva ovde kao "KM mouse<®>," i opisan je detaljno u objavi PCT prijave WO 02/43478. Modifikovan oblik ovog miša, koji dalje sadrži homozigotni poremećaj, gena endogenog FcγRIIB receptora, je takođe opisan u objavi PCT prijave WO 02/43478 i nazvan je ovde kao "KM/FCGR2D mouse<®>." Dodatno, miševi sa transgenima ili HCo7 ili HCo12 teškog lanca ili oba mogu biti korišćeni.
[0107] Dodatno transgene životinje koje mogu biti korišćene za generisanje humanih antitela obuhvataju Xenomouse (Abgenix, Inc., Američki patenti br.5,939,598; 6,075,181; 6,114,598; 6,150,584 i 6,162,963), "TC miševe" (Tomizuka et al. (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97:722-727) i krave koje nose transhromozome humanog teškog i lakog lanca (Kuroiwa et al. (2002) Nature Biotechnology 20:889-894; PCT Publication WO 02/092812).
[0108] Dalje, humana monoklonska antitela mogu biti pripremljena korišćenjem “phage display” tehnika za skrining bliblioteka gena humanog immunoglobulina. Videti, npr. Američki patenti br.5,223,409; 5,403,484; 5,571,698; 5,427,908; 5,580,717; 5,969,108;6,172,197; 5,885,793; 6,521,404; 6,544,731; 6,555,313; 6,582,915; i 6,593,081.
[0109] Humana monoklonska antitela mogu takođe biti pripremljena korišćenjem SCID miševa u humanim imunskim ćelijama koje su rekonstituisane tako da odgovor humanog antitela može biti generisan po imunizaciji. Videti, npr., Američke patente br.5,476,996 i 5,698,767.
[0110] Dalje, humana anti-LAG-3 antitela mogu biti pripremljena korišćenjem “fagnog displeja” gde fagi sadrže nukleinske kiseline koje kodiraju antitela generisana u transgenim životinjama prethodno imunizovanim sa LAG-3. Poželjno, transgena životinja je HuMab, KM, ili Kirin moiš. Videti, npr. Američki patent br.6,794,132.
IMUNIZACIJA HUMANIH IG MIŠEVA
[0111] Humani Ig miševi može biti imunizovani sa prečišćenim ili obogaćenim preparatom LAG-3 antigena, rekombinantnog LAG-3 proteina, ili ćelijama koje eksprimiraju LAG-3 protein. Videti, npr., Lonberg et al. (1994), gore; Fishwild et al. (1996), gore; objave PCT prijava WO 98/24884 ili WO 01/14424. Poželjno, 6-16 nedelja stari miševi su imunizovani sa 5-50 µg LAG-3 proteina. Alternativno, deo LAG-3 fuzionisan za ne-LAG-3 polipetidom je korišćen.
[0112] Transgeni miševi mogu biti imunizovani intraperitonealno (IP) ili intravenski (IV) sa LAG-3 antigenom u kompletnom Freund-om adjuvansu, praćeno sa naknadnim IP ili IV imunizacijama sa antigenom u nekompletnom Freund-om adjuvansu. Adjuvansi koji nisu Freund-ovi ili cele ćelije u odsustvu adjuvansa mogu biti korišćeni. Plazma može biti testirana pomoću ELISA i ćelije miševa sa dovoljno titara anti-LAG3 humanog imunoglobulina mogu biti korišćene za fuzije.
STVARANJE HIBRIDOMA KOJI PROIZVODE HUMANA MONOKLONSKA ANTITELA
[0113] Da bi se napravili hibridomi koji proizvode humana monoklonska antitela, splenociti i/ili ćelije limfnih čvorova iz imunizovanih miševa mogu biti izolovane i fuzionisane za odgovarajuću imortalizovanu ćelijsku liniju, kao što je ćelijska linija mišjeg mijeloma. Dobijeni hibridomi mogu biti testirani za proizvodnju antigen-specifičnih antitela. Stvaranje hibridoma je dobro poznato u oblasti. Videti, npr., Harlow i Lane (1988) Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Publications, Njujork.
STVARANJE TRANSFEKTOMA KOJI PROIZVODE MONOKLONSKA ANTITELA PREDMETNOG PRONALASKA
[0114] Antitela predmetnog pronalaska mogu biti proizveden u transfektomu ćelije domaćina korišćenjem, na primer, kombinacije tehnika rekombinantne DNK i metoda transfekcije gena kao što je dobro poznato u oblasti (npr., Morrison, S. (1985) Science 229:1202). U jednom tehničkom rešenju, DNK koja kodira delimično ili kompletno lake i teške lance dobijena standardnim molekularno biološkim tehnikama je insertovana u jedan ili više ekspresionih vektora tako da su geni operativno povezani za transkripcione i translatorne regulatorne sekvence. U ovom kontekstu, termin "operativno povezan" treba da znači da je gen za antitelo ligiran u vektor tako da transkripcione i translatorne kontrolne sekvence u sklopu vektora vrše njihovu nameravanu funkciju regulisanja transkripcije i translacije gena za antitelo.
[0115] Termin "regulatorna sekvenca" bi trebalo da obuhvati promotere (pokretače), pojačivače i druge elemente za kontrolu ekspresije (npr., signali za poliadenilaciju) koji kontrolišu gene za transkripciju ili translaciju lanaca antitela. Takve regulatorne sekvence su opisane, npr., u Goeddel (Gene Expression Technology. Methods in Enzymology 185,
1
Academic Press, San Diego, CA (1990)). Poželjne regulatorne sekvence za ekspresiju sisarske ćelije domaćina obuhvataju virusne elemente koji usmeravaju visoke nivoe proteinske ekspresije u sisarskim ćelijama, kao što su promoteri i/ili pojačivači izvedeni od citomegalovirusa (CMV), Simian Virusa 40 (SV40), adenovirusa, (npr., adenovirusni glavni kasni promoter (AdMLP) i polioma. Alternativno, nevirusne regulatorne sekvence mogu biti korišćene, kao što je ubikvitinski promoter ili β-globin promoter. Još dodatno, regulatorni elementi sastavljeni od sekvenci iz različitih izvora, kao što je SRα promoterski sistem, koji sadrži sekvence od SV40 ranog promotera i dugačak terminalni ponovak humanog T ćelijskog leukemija virusa tipa 1 (Takebe et al. (1988) Mol. Cell. Biol. 8:466-472). Ekspresioni vektor i sekvence za kontrolu ekspresije su izabrane da budu kompatibilne sa ekspresionom ćelijom domaćina koja je korišćena.
[0116] Gen za laki lanac antitela i gen teškog lanca antitela mogu biti insertovani u iste ili odvojene ekspresione vektore. U poželjnim tehničkim rešenjima, varijabilni regioni su korišćeni da se kreiraju kompletni geni antitela bilo kog izotipa antitela insertujući ih u ekspresione vektore koji već kodiraju konstantne regione teškog lanca i konstantne regione lakog lanca željenog izotipa tako da je VHsegment operativno povezan za CHsegment(e) u sklopu vektora i VL segment je operativno povezan za CL segment u sklopu vektora. Dodatno ili alternativno, rekombinantni ekspresioni vektor može da kodira signalni peptid koji olakšava sekreciju lanca antitela iz ćelije domaćina. Gen za lanac antitela može biti kloniran u vektor tako da je signalni peptid povezan unutar okvira za amino terminus gena za lanac antitela. Signalni peptid može biti imunoglobulinski signalni peptid ili heterologni signalni peptid (tj., signalni peptid iz ne-imunoglobulinskog proteina).
[0117] Kao dodatak genima za lanac antitela i regulatornim sekvencama, rekombinantni ekspresioni vektori predmetnog pronalaska mogu nositi dodatne sekvence, kao što su sekvence koje regulišu replikaciju vektora u ćelijama domaćina (npr., poreklo replikacije) i selektabilni geni markera. Selektabilni marker gen olakšava selekciju ćelija domaćina u koji je vektor uveden (videti, npr., Američki patenti br. 4,399,216; 4,634,665 i 5,179,017). Na primer, tipično selektabilni marker gen daje otpornost na lekove, kao što su G418, higromicin ili metotreksat, ćeliji domaćina u koju je uveden vektor. Poželjni selektabilni marker geni obuhvataju gen za dihidrofolat reduktazu (DHFR) (za primenu u dhfr-ćelijama domaćina sa selekcijom/amplifikacijom metotreksata) i neo gen (za G418 selekciju).
[0118] Za ekspresiju lakih i teških lanca, ekspresioni vektor(i) koji kodiraju teške i lake lance su transfektovani u ćeliju domaćina standardnim tehnikama. Razni oblici termina
2
transfekcija" bi trebalo da obuhvate širog asortiman tehnika obično korišćenih za uvođenje egzogene DNK u prokariotsku ili eukariotsku ćeliju domaćina, npr., elektroporacija, precipitacija kalcijum fosfata, transfekcija DEAE-dekstrana i slično. Iako je teoretski moguće eksprimirati antitela predmetnog pronalaska u ili prokariotkim ili eukariotskim ćelijama domaćina, ekspresija antitela u eukariotskim ćelijama, i najpoželjnije sisarskim ćelijama domaćina, je najpoželjnija jer je najveća verovatnoća da se takve eukariotske ćelije, i naročito sisarske ćelije sakupe i luče ispravno savijena i imunološki aktivna antitela.
[0119] Poželjne sisarske ćelije domaćina za eksprimiranje rekombinantnih antitela predmetnog pronalaska obuhvataju ovarijum kineskog hrčka (CHO ćelije) (uključujući dhfr-CHO ćelije, opisane u Urlaub i Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220, korišćene kao DHFR selektabilni marker, npr., kao što je opisano u R. J. Kaufman i P. A. Sharp (1982) J. Mol. Biol. 159:601-621), NSO mijelomske ćelije, COS ćelije i SP2 ćelije. Naročito, za primenu sa NSO mijelomskim ćelijama, drugi poželjni ekspresioni sistem je GS genski ekspresioni sistem stavljen na uvid javnosti u WO 87/04462, WO 89/01036 i EP 338,841. Kad su rekombinantni ekspresioni vektori koji kodiraju gene antitela uvedeni u sisarske ćelije domaćina, antitela su proizvedena kultivisanjem ćelija domaćina tokom perioda koji je dovoljan da se dozvoli ekspresija antitela u ćelijama domaćina, ili poželjnije, sekrecija antitela u medijum za kulture u kome su ćelije domaćina gajene. Antitela mogu biti opravljena iz medijuma za kulture korišćenjem standardnih metoda prečišćavanja proteina.
IMUNOKONJUGATI
[0120] Antitela predmetnog pronalaska mogu biti spojena sa terapijskim agensom da se formira imunokonjugat kao što je konjugat antitelo-lek (ADC). Pogodni terapijski agensi obuhvataju antimetabolite, alkilujuće agense, agense koji se vezuju za mali žleb DNK, DNK interkalatori, agensi koji unakrsno povezuju DNK, inhibitori histon deacetilaze, inhibitori jedarnog izvoza, proteazomski inhibitori, inhibitori topoizomeraze I ili II, inhibitori proteina toplotnog šoka, inhibitori tirozinkinaze, antibiotici, i anti-mikotici. U ADC, antitelo i terapijski agens poželjno su spojeni preko veznika koji može da se iscepa kao što je peptidil, disulfidni, ili hidrazon veznik. Poželjnije, veznik je peptidil veznik kao što je Val-Cit, Ala-Val, Val-Ala-Val, Lys-Lys, Pro-Val-Gly-Val-Val, Ala-Asn-Val, Val-Leu-Lys, Ala-Ala-Asn, Cit-Cit, Val-Lys, Lys, Cit, Ser, ili Glu. ADCs mogu biti pripremljeni kao što je opisano u Američkim patentima br.7,087,600; 6,989,452; i 7,129,261; Objavama PCT prijava WO 02/096910; WO 07/038658; WO 07/051081; WO 07/059404; WO 08/083312; i WO 08/103693; Objavama amaeričkih patenata 20060024317; 20060004081; i 20060247295.
BISPECIFIČNI MOLEKULI
[0121] U još jednom aspektu, predmetna objava prikazuje bispecifične molekule koji sadrže jedno ili više antitela predmetnog pronalaska vezanih za najmanje jedno drugo antitelo ili njegov antigen-vezujući deo da generišu bispecifični molekul koji se vezuje za najmanje dva različita mesta vezivanja ili ciljne molekule. Prema tome, kao što je ovde korišćeno, "bispecifični molekul" uključuje molekule koji imaju tri ili više specifičnosti. U poželjnom tehničkom rešenju, bispecifični molekul sadrži prvu specifičnost vezivanja za LAG-3 i drugu specifičnost vezivanja za aktivirajući molekul koji upošljava citotoksični efektor ćelije koji može da ubije ciljnu ćeliju koja eksprimira LAG-3. Primeri pogodnih aktivirajućih molekula su CD64, CD89, CD16, i CD3. Videti, npr., Kufer et al., TRENDS in Biotechnology, 22 (5), 238-244 (2004).
[0122] U tehničkom rešenju, bispecifični molekul ima, dodatno na anti-Fc specifičnost vezivanja i anti-LAG-3 specifičnost vezivanja, treću specifičnost. Treća specifičnost može biti za anti-pojačavajući faktor (EF), npr., molekul koji se vezuje za površinski protein uključen u citotoksičnu aktivnost i time povećava imunski odgovor na ciljnu ćeliju. Na primer, anti-pojačavajući faktor može da veže citotoksičnu T-ćeliju (npr. putem CD2, CD3, CD8, CD28, CD4, CD40, ili ICAM-1) ili drugu imunsku ćeliju, rezultujući povećanim imunskim odgovorom na ciljnu ćeliju.
[0123] Bispecifični molekuli mogu doći u mnogo različitih oblika i veličina. Na jednom kraju spektra veličina, bispecifični molekul zadržava format tradiconalnog antitela, osim što, umesto da ima dva vezujuća kraka sa identičnom specifičnošću, ima dva vezujuća kraka koji imaju raziličitu specifičnost. U drugoj krajnosti su bispecifični molekuli koji se sastoje od dva jednolančana fragmenta antitela (scFv's) koji su povezani petidnim lancem, takozvani Bs(scFv)2 konstrukt. Bispecifični molekuli srednje veličine obuhvataju dva različita F(ab) fragmenta koji su povezani sa petidil veznikom. Bispecifični molekuli ovih i drugih formata mogu biti pripremljeni genetičkim inženjeringom, somatskom hibridizacijom, i hemijskim metodama. Videti, npr., Kufer et al, cited gore; Cao i Suresh, Bioconjugate Chemistry, 9 (6), 635-644 (1998); i van Spriel et al., Immunology Today, 21 (8), 391-397 (2000), i reference citirane tamo.
4
FARMACEUTSKE KOMPOZICIJE
[0124] U još jednom aspektu, predmetna objava obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedno ili više antitela predmetnog pronalaska koja je formulisana zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem. Kompozicija može opciono da sadrži jedan ili više farmaceutski aktivnih sastojaka, kao što su drugo antitelo ili lek. Farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska takođe mogu biti administrirane u kombinovanoj terapiji sa, na primer, drugim imunostimulatornim agensom, antikancerskim agensom, antivirusnim agensom, ili vakcinom, tako da anti-LAG-3 antitelo pojačava imunski odgovor na vakcinu.
[0125] Farmaceutska kompozicija može da sadrži bilo koji broj ekscipijenasa. Ekscipijensi koji mogu biti korišćeni obuhvataju nosače, površinske aktivne sastojke, agense za zgušnjavanje ili emulzifikaciju, čvrsta veziva, pomoćne agense za disperziju ili suspenziju, solubilizatore, agense za bojenje, sredstva za ukus, premaze, sredstva za dezintegraciju, lubrikante, zaslađivače, konzervanse, izotonična sredstva, i njihove kombinacije. Selekcija i primena pogodnih ekscipijenasa je učena u Gennaro, ed., Remington: The Science i Practice of Pharmacy, 10. izdanje. (Lippincott Williams & Wilkins 2003).
[0126] Poželjno, farmaceutska kompozicija je pogodna za intravensku, intramuskularnu, subkutanu, parenteralnu, spinalnu ili epidermalnu administraciju (npr., injekcija ili infuzija). U zavisnosti od puta administracije, aktivno jedinjenje može biti presvučeno materijalom da ga zaštiti od delovanja pomoćnih sredstava i drugih prirodnih uslova koja mogu da ga inaktiviraju. Fraza "parenteralna administracija" kao što je ovde korišćeno označava načine administracije osim enteralne i topikalne administracije, obično injekcijom, i uključuje, bez ograničenja, intravensku, intramuskularnu, intraarterijsku, intratekalnu, intrakapsularnu, intraorbitalnu, intrakardijalnu, intradermalnu, intraperitonealnu, transtrahealnu, subkutanu, subkutikularnu, intraartikularnu, subkapsularnu, suarahnoidalnu, intraspinalnu, epiduralnu i intrasternalnu injekciju i infuziju. Alternativno, antitelo predmetnog pronalaska može biti administrirano putem ne-parenteralnog puta, kao što je topikalni, epidermalni ili mukozalni put of administracije, npr., intranazalno, oralno, vaginalno, rektalno, sublingvalno ili topikalno.
[0127] Farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska mogu da obuhvate farmaceutski prihvatljive soli. "Farmaceutski prihvatljiva so" odnosi se na so koja zadržava željenu biološku aktivnost parentalnog jedinjenja i ne daje nikakve neželjene toksikološke efekte. Primeri takvih soli obuhvataju kisele adicione soli i bazne adicione soli. Kisele adicione soli obuhvataju one koje su izvedene iz netoksičnih neorganskih kiselina, kao što su hlorovodonična, azotna, fosforna, sumporna, bromovodonična, jodovodonična, fosforasta i slično, kao i iz netoksičnih neorganskih kiselina kao što su alifatične mono- i dikarboksilne kiseline, fenil-supstituisane alkanske kiseline, hidroksi alkanske kiseline, aromaticne kiseline, alifatične i aromatične sulfonske kiseline i slično. Bazne adicione soli obuhvataju one koje su izvedene iz zemno alkalnih metala, kao što su natrijum, kalijum, magnezijum, kalcijum i slično, kao i iz netoksičnih organskih amina, kao što su N,N'-dibenziletilendiamin, N-metilglukamin, hloroprokain, holin, dietanolamin, etilendiamin, prokain i slično.
[0128] Farmaceutske kompozicije mogu biti u obliku sterilnih vodenih rastvora ili disperzija. One takođe mogu biti formulisane u mikroemulziji, lipozomu, ili drugoj određenoj strukturi pogodnoj za visoke koncentracije leka.
[0129] Količina aktivnog sastojka koji može biti kombinovan sa materijalom nosača da proizvede pojedinačni dozni oblik će varirati u zavisnosti od subjekta koji se leči i konkretnoog načina administracije i generalno će biti ona količina kompozicije koja proizvodi terapijski efekat. Generalno, od sto procenata, ova količina će biti u opsegu od oko 0.01% do oko devedeset četiri procenta aktivnog sastojka, poželjno od oko 0.1% do oko 70%, najpoželjnije od oko 1% do oko 30% aktivnog sastojka u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.
[0130] Dozni režimi su podešeni da obezbede optimalni željeni odgovor (npr., terapijski odgovor). Na primer, pojedinačni bolus može biti administriran, nekoliko podeljenih doza mogu biti administrirane tokom vremena ili doza može biti proporcionalno smanjena ili povećana kao što je ukazano potrebama terapijske situacije. Posebno je povoljno formulisati parenteralne kompozicije u doznom jediničnom obliku za lakoću administracije i uniformnost doze. Dozni jedinični oblik kao što je ovde korišćeno odnosi se na fizički diskretne jedinice koje odgovaraju jediničnim dozama za subjekte koji se tretiraju; svaka jedinica sadrži unapred određenu količinu aktivnog jedinjenja izračunatu da bi proizvela željeni terapijski efekat u vezi sa potrebnim farmaceutskim nosačem. Alternativno, antitelo može biti administrirano kao formulacija sa produženim oslobađanjem, pri čemu je u tom slučaju neophodna manje česta administracija.
[0131] Za administraciju antitela, doze su u opsegu od oko 0.0001 do 100 mg/kg, i i češće 0.01 do 5 mg/kg, telesne mase domaćina. Na primer doze mogu biti 0.3 mg/kg telesne mase, 1 mg/kg telesne mase, 3 mg/kg telesne mase, 5 mg/kg telesne mase ili 10 mg/kg telesne mase ili u sklopu the range of 1-10 mg/kg. Režim lečenja koji služi kao primer podrazumeva adminsitraciju jednom nedeljno, jednom svake dve nedelje, jednom svake tri nedelje, jednom svake četiri nedelje, jednom mesečno, jednom svaka 3 meseca ili jednom svakih tri do 6 meseci. Poželjni dozni režimi za anti-LAG-3 antitelo predmetnog pronalaska obuhvataju 1 mg/kg telesne mase ili 3 mg/kg telesne mase intravenskom administracijom, sa antitelom koje se daje korišćenjem jednim od sledećih doznih rasporeda: (i) svake četiri nedelje za šest doza, zatim svaka tri meseca; (ii) svake tri nedelje; (iii) 3 mg/kg telesne mase jednom praćeno sa 1 mg/kg telesne mase svake tri nedelje. U nekim metodama, doza je prilagođena da se dostigne koncentracija antitela u plazmi od oko 1-1000 µg /ml i u nekim metodama oko 25-300 µg /ml.
[0132] "Terapijski efikasna doza" anti-LAG-3 antitela predmetnog pronalaska poželjno rezultuje u smanjenju težine simptoma bolesti, povećanja u učestalosti i trajanju perioda bez simptoma bolesti, ili prevenciji oštećenja ili onesposobljavanja usled nepovoljnih okolnosti izazvanih bolešću. Na primer, za lečenje subjekata koji nose tumor, "terapijski efikasna doza" poželjno inhibira rast tumora za najmanje oko 20%, poželjnije za najmanje oko 40%, još poželjnije za najmanje oko 60%, i još poželjnije za najmanje oko 80% u odnosu na netretirane subjekte. Terapijski efikasna količina terapijskog jedinjenja može da smanji veličinu tumora, ili na neki drugi način ublaži simptome kod subjekta, koji je tipično čovek ili može biti drugi sisar.
[0133] Farmaceutska kompozicija može biti formulacija sa kontrolisanim oslobađanjem, uključujući implante, transdermalne flastere, i mikroenkapsulirane sisteme isporuke. Biorazgradivi, biokompatibilni polimeri mogu biti korišćeni, kao što su etilen vinil acetat, polianhidridi, poliglikolna kiselia, kolagen, poliortoestri, i polimlečna kiselina. Videti, npr., Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., Njujork, 1978.
[0134] Terapijske kompozicije mogu biti administrirane pomoću medicinskih sredstava kao što su (1) uređaji za ubrizgavanje pod kožu bez igala (npr., US 5,399,163; 5,383,851; 5,312,335; 5,064,413; 4,941,880; 4,790,824; i 4,596,556); (2) mikro-infuzione pumpe (US 4,487,603); (3) transdermalni uređaji (US 4,486,194); (4) infuzioni aparati (US 4,447,233 i 4,447,224); i (5) osmotski uređaji (US 4,439,196 i 4,475,196).
[0135] U određenim tehničkim rešenjima, humana monoklonska antitela predmetnog pronalaska mogu biti formulisana da siguraju ispravnu distribuciju in vivo. Na primer, da bi osigurali da terapijska jedinjenja predmetnog pronalaska prelaze krvno-možanu barijeru, ona mogu biti formulisana u lipozomima, koji mogu dodatno da sadrže ciljajuće delove da se poboljša selektivni transport u specifične ćelije ili organe. Videti, npr. US 4,522,811; 5,374,548; 5,416,016; i 5,399,331; V.V. Ranade (1989) J. Clin. Pharmacol. 29:685; Umezawa et al., (1988) Biochem. Biophys. Res. Commun. 153:1038; Bloeman et al. (1995) FEBS Lett.357:140; M. Owais et al. (1995) Antimicrob. Agents Chemother. 39:180; Briscoe et al. (1995) Am. J. Physiol. 1233:134; Schreier et al. (1994) J Biol. Chem. 269:9090; Keinanen i Laukkanen (1994) FEBS Lett.346:123; i Killion i Fidler (1994) Immunomethods 4:273.
PRIMENE PREDMETNOG PRONALASKA
[0136] Antitela (kompozicije, bispecifična, i imunokonjugati) predmetnog pronalaska imaju brojne in vitro i in vivo korisnosti, uključujući, na primer, detekciju LAG-3 ili poboljšanje imunskih odgovora blokadom LAG-3. U poželjnom tehničkom rešenju, antitela su humana antitela. Takva antitela mogu biti administrirana ćelijama u kulturi, in vitro ili ex vivo, ili humanim subjektima, npr., in vivo, da poboljšaju imunitet u raznim situacijama. Prema tome, antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, predmetnog pronalaska može biti korišćen u metodi modifikovanja imunskog odgovora kod subjekta koji sadrži administraciju antitela subjektu, ili njegovog antigen-vezujućeg dela, tako da je imunski odgovor kod subjekta modifikovan. Poželjno, odgovor je poboljšan, stimulisan ili pozitivno regulisan.
[0137] Poželjni subjekti obuhvataju humane pacijente kod kojih postoji potreba za poboljšanjem imunskog odgovora. Metode su posebno pogodne za lečenje humanih pacijenata koji imaju poremećaj koji može biti lečen povećanjem imunskog odgovora (npr., imunski odgovor posredovan T ćelijama). Dodatno, metode su posebno pogodne za lečenje kancera in vivo. Da se postigne antigen-specifično poboljšanje imuniteta, anti-LAG-3 antitela mogu biti administrirana zajedno sa antigenom od interesa ili antigen već može biti prisutan kod subjekta koji treba da se leči (npr., subjekat koji ima tumor ili virus). Kada su antitela za LAG-3 administrirana zajedno sa drugim agensom, ova dva mogu biti administrirana ili po redu ili istovremeno.
[0138] Dodatno su ovde opisane metode za detektovanje prisustva humanog LAG-3 antigena u uzorku, ili merenje količine humanog LAG-3 antigena, koje sadrži kontaktiranje uzorka, i kontrolnog uzorka, sa humanim monoklonskim antitelom, ili njegovim antigen vezujućim delom, koji se specifično vezuje za humani LAG-3, u uslovima koji dozvoljavaju formiranje između antitela ili njegovog dela i humanog LAG-3. Formiranje kompleksa je zatim detektovano, gde razlika formiranja kompleksa između uzorka u poređenju sa kontrolnim uzorkom je pokazalo prisustvo humanog LAG-3 antigena u uzorku. Pored toga, anti-LAG-3 antitela predmetnog pronalaska mogu biti korišćena da se prečisti humani LAG-3 imunoafinitetnim prečišćavanjem.
[0139] Poznata je sposobnost anti-LAG-3 antitela predmetnog pronalaska da inhibira vezivanje LAG-3 za molekule MHC klase II i stimuliše odgovor antigen-specifičnih T ćelija, antitela predmetnog pronalaska mogu takođe biti korišćena u in vitro i in vivo metodama da stimulišu, poboljšaju ili pospeše odgovor antigen-specifičnih T ćelija. Na primer, antitela predmetnog pronalaska mogu biti korišćena u metodi stimulisanja odgovora antigenspecifične T ćelije koji sadrži vezu pomenute T ćelije sa antitelom, tako da je odgovor antigen-specifične T ćelije stimulisan. Bilo koji pogodni indikator odgovora antigenspecifične T ćelije može biti korišćen da se izmeri odgovor antigen-specifične T ćelije. Neograničavajući primeri takvih pogodnih indikatora obuhvataju povećanu proliferaciju T ćelija u prisustvu antitela i/ili povećanja proizvodnje citokina u prisustvu antitela. U poželjnom tehničkom rešenju, proizvodnja interleukina-2 pomoću antigen-specifične T ćelije je stimulisana.
[0140] Predmeti pronalazak takođe obezbeđuje antitelo predmetnog pronalaska za primenu u metodi za stimulaciju imunskog odgovora (npr., odgovor antigen-specifične T ćelije) kod subjekta koji sadrži administriranje antitela subjektu tako da je imunski odgovor (npr., odgovor antigen-specifične T ćelije) kod subjekta stimulisan. U poželjnom tehničkom rešenju, subjekat je subjekat koji ima tumor i imunski odgovor na tumor je stimulisan. U drugom poželjnom tehničkom rešenju, subjekat je subjekat koji ima virus i imunski odgovor na virus je stimulisan.
[0141] U drugom tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje antitelo predmetnog pronalaska za primenu u metodi za inhibiciju rasta tumorske ćelije kod subjekta koji sadrži administraciju antitela subjektu tako da je rast tumora kod subjekta inhibiran. U još jednom tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje antitelo predmetnog pronalaska za primenu u metodi za lečenje virusne infekcije kod subjekta koji sadrži administraciju antitela subjektu predmetnog pronalaska tako da je virusna infekcija lečena kod subjekta.
[0142] Ove i druge metode predmetnog pronalaska su detaljno razmotrene ispod.
KANCER
[0143] Blokada LAG-3 pomoću antitela može da poboljša imunski odgovor na kancersku ćeliju kod pacijenta. U jednom aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na anti-LAG-3 antitelo predmetnog pronalaska za primenu u lečenju subjekta in vivo tako da rast kancerskih tumora je inhibiran. Anti-LAG-3 antitelo može biti korišćeno samo da inhibira rast kancerskih tumora. Alternativno, anti-LAG-3 antitelo može biti korišćeno u vezi sa drugim imunogenskim agensima, standardnim lečenjima kancera, ili drugim antitelima, kao što je opisano ispod.
[0144] Prema tome, u jednom tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje anti-LAG-3 antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, predmetnog pronalaska za primenu u metodi inhibiranja rasta tumorske ćelije kod subjekta, koja sadrži administiranje subjektu terapijski efikasne količine anti-LAG-3 antitela, ili njegovog antigen-vezujućeg dela. Poželjno, antitelo je humano anti-LAG-3 antitelo (kao svako od humanih anti-humanih LAG-3 antitela opisanih ovde). Dodatno ili alternativno, antitelo može biti himerno ili humanizovano anti-LAG-3 antitelo.
[0145] Poželjni kanceri čiji rast može biti inhibiran korišćenjem antitela predmetnog pronalaska obuhvataju kancere koji tipično odgovaraju na imunoterapiju. Neograničavajući primeri poželjnih kancera za tretman obuhvataju melanom (npr., metastatski maligni melanom), kancer bubrega (npr. karcinom jasnih ćelija), kancer prostate (npr. hormonski refraktorni adenokarcinom prostate), kancer dojke, kancer debelog creva i kancer pluća (npr. nesitnoćelijski kancer pluća). Dodatno, pronalazak uključuje refraktorne ili rekurentne maligne bolesti čiji se rast može inhibirati korišćenjem antitela predmetnog pronalaska.
[0146] Primeri drugih karcinoma koji se mogu lečiti korišćenjem antitela predmetnog pronalaska obuhvataju kancer kostiju, kancer pankreasa, karcinom kože, kancer glave ili vrata, kožni ili intraokularni maligni melanom, karcinom materice, kancer jajnika, kancer rektuma, kancer analnog regiona, kancer želuca, kancer testisa, karcinom jajovoda, karcinom endometrijuma, karcinom grlića materice, karcinom vagine, karcinom vulve, Hočkinovu bolest, ne-Hočkinov limfom, kancer jednjaka, kancer tankog creva, kancer endokrinog sistema, kancer štitne žlezde, kancer paratiroidne žlezde, kancer nadbubrežne žlezde, sarkom mekog tkiva, kancer uretre, kancer penisa, hronične ili akutne leukemije uključujući akutnu mijeloidnu leukemiju, hroničnu mijeloidnu leukemiju, akutnu limfoblastnu leukemija, hroničnu limfocitnu leukemiju, solidne tumore detinjstva, limfocitni limfom, kancer bešike, kancer bubrega ili uretera, karcinom bubrežne karlice, neoplazmu centralnog nervnog sistema
4
(CNS), primarni CNS limfom, tumorsku angiogenezu, tumor kičmene ose, gliom moždanih stem ćelija, hipofizni adenom, Kapošijev sarkom, epidermoidni kancer, kancer skvamoznih ćelija, limfom T-ćelija, kanceri izazvani sredinom, uključujući i one izazvane azbestom, i kombinaciju pomenutih kancera. Predmetni pronalazak je takođe koristan za lečenje metastatskih kancea, posebno metatatskih kancea koji eksprimiraju PD-L1 (Iwai et al. (2005) Int. Immunol. 17:133-144).
[0147] Opciono, antitela za LAG-3 mogu biti kombinovana sa imunogenskim agensima, kao što u kancerske ćelije, prečišćeni tumorski antigeni (uključujući rekombinantne proteine, peptide, i ugljenohidratne molekule), ćelije, i ćelije transfektovane sa genima koji kodiraju imuno stimulatorne citokine (He et al (2004) J. Immunol. 173:4919-28). Neograničavajući primeri tumorskih vakcina koje mogu biti korišćene obuhvataju peptide melanomskih antigena, kao što su peptidi gp100, MAGE antigena, Trp-2, MART1 i/ili tirozinaza, ili tumorske ćelije transfektovane da eksprimiraju citokin GM-CSF (razmotren dodatno ispod).
[0148] Kod ljudi, neki tumori su pokazani kao imunogeni kao što su melanom. Povećavanjem praga aktivacije T ćelija pomoću LAG-3 blokade, tumorski odgovori kod domaćina mogu biti aktivirani.
[0149] LAG-3 blokada je verovatno efikasnija kada je kombinovana sa protokolom vakcinacije. Mnoge eksperimentalne strategije vakcinacije za tumore su smišljene (videti Rosenberg, S., 2000, Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62; Logothetis, C., 2000, ASCO Educational Book Spring: 300-302; Khayat, D.2000, ASCO Educational Book Spring: 414-428; Foon, K. 2000, ASCO Educational Book Spring: 730-738; videti takođe Restifo, N. i Sznol, M., Cancer Vaccines, Ch. 61, str.3023-3043 u DeVita et al. (eds.), 1997, Cancer: Principles and Practice of Oncology, peto izdanje). U jednoj od ovih strategija, vakcina je pripremljena korišćenjem autolognih ili alogenih tumorskih ćelija. Ove ćelijske vakcine su pokazane kao najefikasnije kada su tumorske ćelije transdukovane da eksprimiraju GM-CSF. GM-CSF je pokazan kao potentni aktivator prezentovanja antigena za tumorsku vakcinaciju (Dranoff et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A. 90: 3539-43).
[0150] Studija genske ekspresije i šablona ekspresije velikih gena kod raznih tumora je dovela do definicije takozvanih tumor specifičnih antigena (Rosenberg, SA (1999) Immunity 10: 281-7). U mnogim slučajevima, ovi tumorski specifični antigeni su diferencijalni antigeni eksprimirani u tumorima i u ćeliji iz koje se razvio tumor, na primer melanocitni antigeni gp100, MAGE antigeni, i Trp-2. Još važnije, mnogi od ovih antigena mogu biti pokazani kao mete tumor specifičnih T ćelija koje se nalaze u domaćinu. LAG-3 blokada može biti korišćena u vezi sa kolekcijom rekombinantnih proteina i/ili peptida eksprimiranih u tumoru u cilju da se generiše imunski odgovor na ove proteine. Ovi proteini su normalno viđeni od strane imunskog sistema kao sopstveni antigeni i stoga su tolerantni na njih. Tumorski antigen može da obuhvati protein telomerazu, koja je potrebna za sintezu telomera hromozoma i koja je eksprimirana u više od 85% humanih kancera i samo u ograničenom broju somatskih tkiva (Kim et al. (1994) Science 266: 2011-2013). (Ova somatska tkiva mogu biti zaštićena od imunskog napada raznim načinima). Tumorski antigen može takođe biti "neo-antigeni" eksprimirani u kancerskim ćelijama zbog somatskih mutacija koje menjaju proteinsku sekvecu ili stvaraju fuzione proteine između dve nepovezane sekvence (tj., bcr-abl u Filadelfija hromozomu), ili idiotip iz tumora B ćelija.
[0151] Druge tumorske vakcine mogu da obuhvate proteine iz virusa koji su uključeni u humanim kancerima kao što su Humani Papiloma Virusi (HPV), Hepatitis Virusi (HBV i HCV) i Kapošijev Herpes Sarkoma Virus (KHSV). Drugi oblik tumor specifičnog antigena koji može biti korišćen u vezi sa LAG-3 blokadom su prečišćeni proteini toplotnog šoka (HSP) izolovani iz samog tumorskog tkiva. Ovi proteini tiplotnog šoka sadrže fragmente proteina iz tumorske ćelije i ovi HSP su visoko efikasni pri isporuci antigen prezentujućim ćelijama za izazivanje tumorske imunosti (Suot & Srivastava (1995) Science 269:1585-1588; Tamura et al. (1997) Science 278: 117-120).
[0152] Dendritske ćelije (DC) su potentne antigen prezentujuće ćelije koje mogu biti korišćene da pripreme antigen-specifične odgovore. Dendritske ćelije mogu biti proizvedene ex vivo i napunjene sa raznim proteinskim i peptidnim antigenima kao i tumorskim ćelijskim ekstraktima (Nestle et al. (1998) Nature Medicine 4: 328-332). Dendritske ćelije takođe mogu biti transdukovane genetskim sredstvima kako bi se eksprimirali i ti tumorski antigeni. Dendritske ćelije takođe su spojene direktno sa tumorskim ćelijama u cilju imunizacije (Kugler et al. (2000) Nature Medicine 6:332-336). Metoda vakcinacije, DC imunizacija može biti efikasno kombinovana sa LAG-3 blokadom da se aktiviraju potentniji anti-tumorski odgovori.
[0153] LAG-3 blokada može takođe biti kombinovana sa standardnim lečenjima kancera. LAG-3 blokada može biti efikasno kombinovana sa hemoterapijskim režimima. U ovim slučajevima, može biti moguće smanjiti dozu hemoterapijskog agensa koji je administriran (Mokyr et al. (1998) Cancer Research 58: 5301-5304). Primer takve kombinacije je anti-LAG-3 antitelo u kombinaciji sa dekarbazinom za lečenje melanoma. Drugi primer takve kombinacije je anti-LAG-3 antitelo u kombinaciji sa interleukinom-2 (IL-2) za lečenje melanoma. Naučno obrazloženje iza kombinovane upotrebe blokade LAG-3 i hemoterapije jeste da smrt ćelije, koja je posledica citotoksičnog delovanja većine hemoterapijskih jedinjenja, treba da rezultira povećanim nivoom tumorskog antigena na putu prezentacije antigena. Druge kombinovane terapije koje mogu rezultirati sinergijom sa blokadom LAG-3 kroz ćelijsku smrt su zračenje, operacija, i hormonska deprivacija. Svaki od ovih protokola stvara izvor tumorskog antigena u domaćinu. Inhibitori angiogeneze se takođe mogu kombinovati sa blokadom LAG-3. Inhibicija angiogeneze dovodi do smrti tumorskih ćelija koja može da dovede tumorski antigen u puteve prezentacije antigena domaćina.
[0154] LAG-3 blokirajuća antitela mogu takođe biti korišćena u kombinaciji sa bispecifičnim antitelima koja ciljaju Fcα ili Fcγ receptor-eksprimirajuće efektorske ćelije tumorskim ćelijama (videti, npr., Američke patente br. 5,922,845 i 5,837,243). Bispecifična antitela mogu biti korišćena da ciljaju dva odvojena antigena. Na primer bispecifična antitela za anti-Fc receptor/anti tumorski antigen (npr., Her-2/neu) su korišćena da ciljaju makrofage na mestu tumora. Ovo ciljanje može efikasnije da aktivira tumor specifične odgovore. Količina T ćelija u ovim odgovorima može biti uvećana primenom LAG-3 blokade. Alternativno, antigen može biti isporučen direktno dendritskim ćelijama pomoću primene bispecifičnih antitela koja se vezuju za tumorski antigen i specifični ćelijski površinski marker dendritskih ćelija.
[0155] Tumori izbegavaju imunološki nadzor domaćina velikim brojem mehanizama. Mnogi od ovih mehanizama mogu biti prevaziđeni inaktivacijom proteina koji su eksprimirani od strane tumora i koji su imunosupresivni. Ovi obuhvataju između ostalih TGF-β (Kehrl et al. (1986) J. Exp. Med. 163: 1037-1050), IL-10 (Howard & O'Garra (1992) Immunology Today 13: 198-200), i Fas ligand (Hahne et al. (1996) Science 274: 1363-1365). Antitela za svaki od ovih entiteta mogu biti korišćeni u kombinaciji sa anti-LAG-3 da bi se suprotstavili efektima imunosupresivnog agensa i favorizovali tumorske imunske odgovore od strane domaćina.
[0156] Druga antitela koja aktiviraju imunološko odgovaranje domaćina mogu se koristiti u kombinaciji sa anti-LAG-3. Ovi obuhvataju molekule na površini dendritske ćelije koji aktiviraju DC funkciju i prezentaciju antigena. Anti-CD40 antitela su sposobna efikasno supstituisati za aktivnost T pomoćne ćelije (Ridge et al. (1998) Nature 393: 474-478) i mogu biti korišćena povezana sa LAG-3 antitelom (Ito et al. (2000) Immunobiology 201 (5) 527-40). Aktivirajuća antitela za T ćelijske kostimulatorne molekule kao što je CTLA-4 (npr., Američki patent br.5,811,097), OX-40 (Weinberg et al. (2000) Immunol 164: 2160-2169), 4-
4
1BB (Melero et al. (1997) Nature Medicine 3: 682-685 (1997), i ICOS (Hutloff et al. (1999) Nature 397: 262-266) mogu takođe obezbediti povećane nivoe aktivacije T ćelija.
[0157] Transplantacija koštane srži se trenutno koristi za lečenje različitih tumora hematopoetskog porekla. Dok je bolest kalem aprotiv domaćina konsekvenca ovog lečenja, terapijska korist se može dobiti od odgovora kalema prema domaćinu. LAG-3 blokada se može koristiti da poveća efikasnost donorskih nakalemljenih tumor specifičnih T ćelija.
[0158] Takođe postoji nekoliko eksperimentalnih protokola lečenja koji uključuju ex vivo aktivaciju i proširenje antigen specifičnih T ćelija i adoptivni transfer ovih ćelija u primaoce kako bi se stimulisale antigen-specifične T ćelije protiv tumora (Greenberg & Riddell (1999) Science 285: 546-51). Ove metode mogu takođe biti korišćene da se aktiviraju odgovori T ćelija na infektivne agense kao što je CMV. Ex vivo aktivacija u prisustvu anti-LAG-3 antitela može da poveća učestalost i aktivnost adoptivno transferovanih T ćelija.
INFEKTIVNE BOLESTI
[0159] Dalje, metode su opisane ovde koje se koriste za lečenje pacijenata koji su bili izloženi određenim toksinima ili patogenima. Prema tome, postupak lečenja infektivne bolesti kod subjekta je opisan ovde da sadrži administriranje subjektu anti-LAG-3 antitela, ili njegovog antigen-vezujućeg dela, tako da se subjekat leči od infektivnue bolesti. Poželjno, antitelo je humano antitelo za anti-humani LAG-3 (kao što je bilo koji od humanih anti-LAG-3 antitela opisanih ovde). Dodatno ili alternativno, antitelo može biti himerno ili humanizovano antitelo.
[0160] Slično njenoj primeni na tumorima kao što je prethodno razmotreno, blokada LAG-3 posredovana antitelom se može koristiti sama, ili kao pomoćno sredstvo, u kombinaciji sa vakcinama, kako bi se stimulisao imunski odgovor na patogene, toksine, i sopstvene antigene. Primeri patogena za koje ovaj terapijski pristup može biti naročito koristan, uključuju patogene za koje trenutno nema efikasne vakcine, ili patogene za koje su konvencionalne vakcine manje nego potpuno efikasne. Ove obuhvataju, ali nisu ograničene na HIV, Hepatitis (A, B, & C), Grip, Herpes, Giardia, Malaria, Leishmania, Staphilococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa. LAG-3 blokada je naročito korisna protiv utvrđenih infekcija agensima kao što je HIV koji predstavljaju izmenjene antigene u toku infekcija. Ovi novi epitopi su prepoznati kao strani u vreme administracije anti-humanog LAG-3, čime se izaziva snažan T-ćelijski odgovor koji nije ometan negativnim signalima preko LAG-3.
[0161] Neki primeri patogenih virusa koji uzorkuju infekcije koje se mogu lečiti anti-LAG-3 antitelima, ili njihovim antigen-vezujućim delovima, predmetnog pronalaska obuhvataju HIV, hepatitis (A, B, ili C), herpes virus (npr., VZV, HSV-1, HAV-6, HSV-II, i CMV, Epstein Barr virus), adenovirus, virus gripa, flaviviruse, ehovirus, rinovirus, koksaki virus, koronavirus, respiratorni sincicijski virus, virus mumpsa, rotavirus, virus malih boginja, virus rubeola, parvovirus, vakcinija virus, HTLV virus, virus denge, papiloma virus, molluscum virus, poliovirus, virus besnila, JC virus i virus arbovirusnog encefalitisa.
[0162] Neki primeri patogenih bakterija koje uzrokuju infekcije koje se mogu lečiti metodama opisanim ovde obuhvataju hlamidiju, rikecija bakterije, mikobakterije, stafilokoke, streptokoke, pneumonokoke, meningokoke i gonokoke, klebsijela, proteus, serratia, pseudomonas, legionelu, difteriju, salmonelu, bacile, koleru, tetanus, botulizam, antraks, kugu, leptospirozu, bakterije Limes bolesti.
[0163] Neki primeri patogenih gljiva koje uzrokuju infekcije koje se mogu lečiti metodama opisanim ovde obuhvataju Candida (albicans, krusei, glabrata, tropicalis, itd.), Criptococcus neoformans, Aspergillus (fumigatus, niger, itd.), Genus Mucorales (mucor, absidia, rhizopus) Sporothrix schenkii, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliensis, Coccidioides immitis i Histoplasma capsulatum.
[0164] Neki primeri patogenih parazita koji uzrokuju infeckcije koje se mogu lečiti metodama opisanim ovde obuhvataju Entamoeba histolytica, Balantidium coli, Naegleriafowleri, Acanthamoeba sp., Giardia lambia, Cryptosporidium sp., Pneumocystis carinii, Plasmodium vivax, Babesia microti, Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Toxoplasma gondii, Nippostrongylus brasiliensis.
[0165] U svim gornjim metodama, LAG-3 blokada može biti kombinovana sa drugim oblicima imunoterapije kao što je lečenje citokinima (npr., interferoni, GM-CSF, G-CSF, IL-2), ili terapija bispecifičnim antitelom, koja obezbeđuje poboljšanu prezentaciju tumorskih antigena (videti, npr., Holliger (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448; Poljak (1994) Structure 2:1121-1123).
AUTOIMUNSKE REAKCIJE
[0166] Anti-LAG-3 antitela mogu izazvati i pojačati autoimunske odgovore. Zapravo, indukcija antitumorskih odgovora korišćenjem tumorskih ćelija i peptidnih vakcina otkriva da mnogi anti-tumorski odgovori uključuju anti-samo reaktivnosti (van Elsas et al. (2001) J.
4
Exp. Med.194:481-489; Overwijk, et al. (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.96: 2982-2987; Hurwitz, (2000) gore; Rosenberg & White (1996) J. Immunother Emphasis Tumor Immunol 19 (1): 81-4). Stoga, moguće je uzeti u obzir korišćenje anti-LAG-3 blokade u vezi sa raznim sopstvenim proteinima u cilju da se osmisle protokole vakcinacije za efikasno generisanje imunskih odgovora protiv ovih sopstvenih proteina (samo-proteina) za lečenje bolesti. Na primer, Alchajmerova bolest uključuje neadekvatnu akumulaciju Aβ peptida u amiloidnim depozitima u mozgu; odgovori antitela na amiloid mogu da očiste ove amiloidne depozite (Schenk et al., (1999) Nature 400: 173-177).
[0167] Drugi sopstveni proteini se takođe mogu koristiti kao mete kao što je IgE za lečenje alergije i astme, i TNFa za reumatoidni artritis. Na kraju, odgovori antitela na različite hormone mogu biti indukovani korišćenjem anti-LAG-3 antitela. Neutralizujući odgovori antitela na reproduktivne hormone mogu se koristiti za kontracepciju. Neutralizujući odgovor antitela na hormone i druge solubilne fakotre koji su potrebni za rast određenih tumora takođe se može smatrati mogućim metama vakcinacije.
[0168] Analogne metode kao što je opisano gore za upotrebu anti-LAG-3 antitela mogu se koristiti za indukciju terapijskih autoimunskih odgovora za lečenje pacijenata koji imaju neadekvatnu akumulaciju drugih sopstvenih-antigena, kao što su depoziti amiloida, uključujući Aβ u Alzheimerovoj bolesti, citokina kao što su TNFα, i IgE.
VAKCINE
[0169] Anti-LAG-3 antitela mogu biti korišćena da se stimulišu antigen-specifični imunski odgovori istovremenom administracijom anti-LAG-3 antitela sa antigenom od interesa (npr., vakcina). Prema tome, metoda poboljšavanja imunskog odogovra na antigen kod subjekta je opisana ovde da sadrži administriranje subjektu: (i) antigena; i (ii) anti-LAG-3 antitela, ili njegovog antigen-vezujućeg dela, tako da je imunski odgovor na antigen kod subjekta poboljšan. Poželjno, antitelo je humano antitelo za anti-humani LAG-3 (kao bilo koje od humanih antitela za antihumani LAG-3 koja su opisana ovde dodatno) Dodatno ili alternativno, antitelo može biti himerno ili humanizovano antitelo. Antigen može da bude, na primer, tumorski antigen, virusni antigen, bakterijski antigen ili antigen iz patogena. Neograničavajući primeri takvih antigena obuhvataju one razmotrene u odeljcima iznad, ili antigene iz virusa, bakterija ili drugih patogena opisanih iznad.
4
[0170] Pogodni načini administracije kompozicija antitela (npr., humana monoklonska antitela, multispecifični i bispecifični molekuli i imunokonjugati) predmetnog pronalaska in vivo i in vitro su dobro poznati u oblasti i mogu biti odabrani od strane prosečnih poznavalaca oblasti. Na primer, kompozicije antitela mogu biti administrirane injekcijom (npr., intravenski ili subkutano). Pogodne doze korišćenih molekula će zavisiti od starosti i mase subjekta i koncentracije i/ili formulacije kompozicije antitela.
[0171] Kao što je prethodno opisano, humana anti-LAG-3 antitela predmetnog pronalaska mogu biti ko-administrirana sa jednim ili više drugih terapijskih agenasa npr. citotoksični agens, radiotoksični agens ili imunosupresivni agens. Antitelo može biti vezano za agens (kao imuno-kompleks) ili može biti administrirano odvojeno od agensa. U drugom slučaju (odvojena administracija), antitelo može biti administrirano pre, posle ili istovremeno sa agensom ili može biti koadministrirano sa drugim poznatim terapijama, npr. antikancerska terapija, npr. zračenje. Takvi terapijski agensi obuhvataju, između ostalog, anti-neoplastične agense kao što su doksorubicin (adriamicin), cisplatin bleomicin sulfat, karmustin, hlorambucil, dakarbazin i ciklofosfamid hidroksiurea koji su, sami po sebi, samo efikasni na nivoima koji su toksični ili subtoksični za pacijenta. Cisplatin se intravenski administrira u dozi od 100 mg/ml jednom svake četiri nedelje i adriamicin se intravenski administrira u dozi od 60 do 75 mg/ml jednom svakih 21 dan. Ko-administriranje humanih anti-LAG-3 antibelela ili njihovih fragmenata vezanih za antigen, predmetnog pronalaska sa hemoterapijskim agensima obezbeđuje dva antikancerska agensa koja deluju preko različitih mehanizama koji imaju citotoksični efekat na humane tumorske ćelije. Takva koadministracija može da reši probleme usled razvoja otpornosti na lekove ili promene antigenosti tumorskih ćelija koji bi ih učinili nereaktivnim sa antitelom.
[0172] Takođe u sklopu obima predmetnog pronalaska su kompleti koji sadrže kompozicije antitela predmetnog pronalaska (npr., humana antitela, bispecifični ili multispecifični molekuli, ili imunokonjugati) i uputstva za primenu. Komplet može dalje sadržati najmanje jedan dodatni reagens, ili jedno ili više dodatnih humanih antitela predmetnog pronalaska (npr., huamno antitelo koje ima komplementarnu aktivnost koja se vezuje za epitop u LAG-3 antigenu koji se razlikuje od prvog humanog antitela). Kompleti tipično uključuju oznaku koja označava nameravanu upotrebu sadržaja kompleta. Termin oznaka uključuje bilo koje pisanje, ili snimljeni materijal koji se isporučuje na ili sa kompletom, ili koji inače prati komplet.
4
KOMBINOVANA TERAPIJA
[0173] U još jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje anti-LAG-3 antitelo (ili njegov antigenvezujući deo) predmetnog pronalaska za primenu u metodi kombinovane terapije u kojoj anti-LAG-3 antitelo (ili njegov antigen-vezujući deo) je koadministriran sa jednim ili više dodatnih antitela koja su efikasna u stimulaciji imunskih odgovora da bi se time dalje poboljšali, stimulisali ili pozitivno regulisali imunski odgovori kod subjekta. U jednom tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje anti-LAG-3 antitelo predmetnog pronalaska za primenu u metodi za stimulaciju imunskog odgovora kod subjekta koji sadrži administriranje subjektu anti-LAG-3 antitela i jednog ili više dodatnih imunostimulatornih antitela, kao što su anti-PD-1 antitelo, anti-PD-L1 antitelo i/ili anti-CTLA-4 antitelo, tako da je imunski odgovor stimulisan kod subjekta, na primer da inhibira rast tumora ili da stimuliše anti-virusni odgovor. U drugom tehničkom rešenju, subjektu je administrirano anti-LAG-3 antitelo i anti-PD-1 antitelo. U još jednom tehničkom rešenju, subjektu je administrirano anti-LAG-3 antitelo i anti-PD-L1 antitelo. U još jednom tehničkom rešenju, subjektu je administrirano anti-LAG-3 antitelo i anti-CTLA-4 antitelo. U jednom tehničkom rešenju, anti-LAG-3 antitelo je humano antitelo, kao što je antitelo ove predmetne objave. Alternativno, anti-LAG-3 antitelo može biti, na primer, himerno ili humanizovano antitelo (npr., pripremljeno iz mišjeg anti-LAG-3 mAb). U drugom tehničkom rešenju, najmanje jedno dodatno imunostimulatorno antitelo (npr., anti-PD-1, anti-PD-L1 i/ili anti-CTLA-4 antitelo) je humano antitelo. Alternativno, najmanje jedno dodatno imunostimulatorno antitelo može biti, na primer, himerno ili humanizovano antitelo (npr., pripremljeno od mišjeg anti-PD-1, anti-PD-L1 i/ili anti-CTLA-4 antitela).
[0174] Dalje, metoda za lečenje hiperproliferativne bolesti (npr., kancer) je opisana ovde, koja sadrži administriranje LAG-3 antitela i CTLA-4 antitela subjektu. Anti-LAG-3 antitelo može biti administrirano u subterapijskoj dozi, anti-CTLA-4 antitelo je administrirano u subterapijskoj dozi, ili su oba administrirana u subterapijskoj dozi. Dalje, metoda za izmenu neželjenog događaja povezanog sa lečenjem hiperproliferativnog oboljenja sa imunostimulatornim agensom je opisana ovde, koja sadrži administriranje anti-LAG-3 antitela i subterapijske doze anti-CTLA-4 antitela subjektu. Subjekat može biti čovek, Anti-CTLA-4 antitelo može biti monoklonsko antitelo sa humanom sekvencom 10D1 (opisano u objavi PCT prijave WO 01/14424), anti-LAG-3 antitelo može biti monoklonsko antitelo sa humanom sekvencom, kao što je LAG3.5 opisan ovde. Druga anti-CTLA-4 antitela obuhvaćena metodama predmetnog pronalaska obuhvataju, na primer, one stavljene na uvid
4
javnosti u: WO 98/42752; WO 00/37504; Američki patent br. 6,207,156; Hurwitz et al. (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95(17):10067-10071; Camacho et al. (2004) J. Clin. Oncology 22(14S): Abstrakt br. 2505 (antitelo CP-675206); i Mokyr et al. (1998) Cancer Res. 58:5301-5304. U određenim tehničkim rešenjima, anti-CTLA-4 antitelo se vezuje za humani CTLA-4 sa KDod 5 x 10<-8>M ili manje, vezuje se za humani CTLA-4 sa KDod 1 x 10<-8>M ili manje, vezuje se za humani CTLA-4 sa KD of 5 x 10<-9>M ili manje, ili vezuje se za humani CTLA-4 sa KD od između 1 x 10<-8>M i 1 x 10<-10>M ili manje.
[0175] Dalje, metoda za lečenje hiperproliferativne bolesti (npr., kancer) je opisana ovde, koja sadrži administriranje LAG-3 antitela i PD-1 antitela subjektu. Anti-LAG-3 antitelo može biti administrirano u subterapijskoj dozi, anti-PD-1 antitelo je administrirano u subterapijskoj dozi, ili su oba administrirana u subterapijskoj dozi. Dalje, metoda za izmenu neželjenih događaja povezanih sa lečenjem hiperproliferativne bolesti sa imunostimulatornim agensom ije opisana ovde, koja sadrži administriranje anti-LAG-3 antitela i subterapijske doze anti-PD-1 antitela subjektu. Subjekat može biti čovek. Anti-PD-1 antitelo može biti monoklonsko antitelo sa humanom sekvencom i anti-LAG-3 antitelo je monoklonsko antitelo sa humanom sekvencom, kao što je LAG3.5 opisan ovde. Primeri anti-PD-1 antitela sa humanom sekvencom obuhvataju 17D8, 2D3, 4H1, 5C4 i 4A11, koji su opisani u objavi PCT prijave WO 06/121168. Druga anti-PD-1 antitela obuhvataju, npr., lambrolizumab (WO2008/156712), i AMP514 (WO2010/027423, WO2010/027827, WO2010/027828, WO2010/098788). Anti-PD-1 antitelo može da se veže za humani PD-1 sa KD od 5 x 10<-8>M ili manje, da se veže za humani PD-1 sa KD od 1 x 10<-8>M ili manje, da se veže za humani PD-1 sa KDod 5 x 10<-9>M ili manje, ili da se veže za humani PD-1 sa KDizmeđu 1 x 10<-8>M i 1 x 10<-10>M ili manje.
[0176] Dalje, metoda za lečenje hiperproliferativne bolesti (npr., kancer) je opisana ovde, koja sadrži administriranje LAG-3 antitela i PD-L1 antitela subjektu. Anti-LAG-3 antitelo može biti administrirano u subterapijskoj dozi, anti-PD-L1 antitelo može biti administriran u subterapijskoj dozi, ili oba mogu biti administrirana u subterapijskoj dozi. Dalje, metoda za izmenu neželjenih događaja povezanih sa lečenjem hiperproliferativne bolesti sa imunostimulatornim agensom je opisana ovde, koja sadrži administriranje anti-LAG-3 antitela i subterapijske doze anti-PD-1 antitela subjektu. Subjekat može biti čovek. Anti-PD-L1 antitelo može biti monoklonsko antitelo sa humanom sekvencom i anti-LAG-3 antitelo može biti monoklonsko antitelo sa humanom sekvencom, kao što je LAG3.5 opisan ovde. Primeri humanog sekvenca anti-PD-L1 antitela obuhvataju 3G10, 12A4, 10A5, 5F8, 10H10,
4
1B12, 7H1, 11E6, 12B7 i 13G4, koji su opisani u objavi PCT prijave WO 07/005874. Druga anti-PD-L1 antitela obuhvataju, npr., MPDL3280A (RG7446) (WO2010/077634), MEDI4736 (WO2011/066389), i MDX1105 (WO20071005874). Anti-PD-L1 antitelo može da se veže za humani PD-L1 sa KD od 5 x 10<-8>M ili manje, da se veže za humani PD-L1 sa KDod 1 x 10<-8>M ili manje, da se veže za humani PD-L1 sa KDod 5 x 10<-9>M ili manje, ili da se veže za humani PD-L1 sa KD između 1 x 10<-8>M i 1 x 10<-10>M ili manje.
[0177] Blokada LAG-3 i jednog ili više drugig ciljnih antigena kao što je CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 pomoću antitela koja poboljšavaju imunski odgovor na kancerske ćelije kod pacijenta. Kanceri čiji rast može biti inhibiran korišćenjem antitela trenutne objave obuhvataju kancere koji tipično odgovaraju na imunoterapiju. Reprezentativni primeri kancera za lečenje sa kombinovanom terapijom trenutne objave obuhvataju one kancere koji su specifično navedeni iznad u razmatranju monoterapije sa anti-LAG-3 antitelima.
[0178] U određenim tehničkim rešenjima, kombinacija terapijskih antitela razmotrena ovde može biti administrirana istovremeno sa pojedinačnom kompozicijom u farmaceutski prihvatljivom nosaču, ili istovremeno kao odvojene kompozicije sa svakim antitelom u farmaceutski prihvatljivom nosaču. U drugom tehničkom rešenju, kombinacija terapijskih antitela može biti administrirana sekvencijalno. Na primer, anti-CTLA-4 antitelo i anti-LAG-3 antitelo mogu biti administrirani sekvencijalno, tako što se anti-CTLA-4 antitelo administrira prvo i anti-LAG-3 antitelo drugo, ili anti-LAG-3 antitelo se administrira prvo i anti-CTLA-4 antitelo drugo. Dodatno ili alternativno, anti-PD-1 antitelo i anti-LAG-3 antitelo mogu biti administrirani sekvencijalno, tako što se anti-PD-1 antitelo administrira prvo i anti-LAG-3 antitelo drugo, ili anti-LAG-3 antitelo se administrira prvo i anti-PD-1 antitelo drugo. Dodatno ili alternativno, anti-PD-L1 antitelo i anti-LAG-3 antitelo mogu biti administrirani sekvencijalno, tako što je anti-PD-L1 antitelo administrirano prvo i anti-LAG-3 antitelo drugo, ili anti-LAG-3 antitelo se administrira prvo i anti-PD-L1 antitelo drugo.
[0179] Pored toga, ako je više od jedne doze kombinovane terapije administrirano sekvencijalno, redosled sekvencijalne administracije može biti obrnut ili zadržan po istom redosledu na svakoj tački administracije, sekvencijalne administracije mogu biti kombinovane sa istovremenim administracijama, ili bilo koja kombinacija istih. Na primer, prva administracija kombinacije anti-CTLA-4 antitela i anti-LAG-3 antitela može biti istovremena, druga administracija može biti sekvencijalna sa anti-CTLA-4 prvim i anti-LAG-3 drugim, i treća administracija može biti sekvencijalna sa anti-LAG-3 prvim i anti-CTLA-4 drugim, itd. Dodatno ili alternativno, prva administracija kombinacije anti-PD-1 antitela i anti-LAG-3 antitela može biti istovremena, druga administracija može biti sekvencijalna sa anti-PD-1 prvim i anti-LAG-3 drugim, i treća administracija može biti sekvencijalna sa anti-LAG-3 prvim i anti-PD-1 drugim, itd. Dodatno ili alternativno, prva administracija kombinacije anti-PD-L1 antitela i anti-LAG-3 antitela može biti istovremena, druga administracija može biti sekvencijalna sa anti-PD-L1 prvim i anti-LAG-3 drugim, i treća administracija može biti sekvencijalna sa anti-LAG-3 prvim i anti-PD-L1 drugim, itd. Druga reprezentativna shema doziranja može da uključi prvu administracija koja je sekvencijalna sa anti-LAG-3 prvim i anti-CTLA-4 (i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1) drugim, i sledeće administracije mogu biti istovremene.
[0180] Opciono, kombinacija anti-LAG-3 i jednog ili više dodatnih antitela antitela (npr., anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela) može biti dalje kombinovana sa imunogenskim agensom, kao što su kancerske ćelije, prečišćeni tumorski antigeni (uključujući rekombinantne proteine, peptide, i ugljenohidratne molekule), ćelije, i ćelije transfektovane sa genima koji kodiraju imuno stimulatorne citokine (He et al. (2004) J. Immunol. 173:4919-28). Neograničavajući primeri vakcina protiv tumora koje mogu biti korišćene obuhvataju peptide melanomskih antigena, kao što su peptidi gp100, MAGE antigena, Trp-2, MART1 i/ili tirozinaza, ili tumorske ćelije transfektovane da eksprimiraju citokin GM-CSF (razmotreno dodatno ispod). Kombinovana LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokada može biti dalje kombinovana sa protokolom vakcinacije, kao što je bilo koji od protokola vakcinacije koji je razmotren detaljno iznad u odnosu na monoteraiju sa anti-LAG-3 antitelima.
[0181] Kombinovani LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokada mogu takođe dalje biti kombinovani sa standardnim tretmanima za kancer. Na primer, kombinovan LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokada mogu biti efikasno kombinovani sa hemoterapijskim režimima. U ovim slučajevima, moguće je smanjiti dozu drugog hemoterapijskog reagesna koji je administriran sa kombinacijom trenutne objave (Mokyr et al. (1998) Cancer Research 58: 5301-5304). Kao primer takve kombinacije je kombinacija anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 antitela i/ili anti-PD-1 antitela i/ili anti-PD-L1 antitela dalje u kombinaciji sa dekarbazinom za lečenje melanoma. Drugi primer je kombinacija anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 antitela i/ili anti-PD-1 antitela i/ili anti-PD-L1 antitela dalje u kombinaciji sa interleukinom-2 (IL-2) za lečenje melanoma. Naučno obrazloženje koje stoji iza kombinovane primene LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokade sa hemoterapijom je da ćelijska smrt, koja je posledica citotoksičnog delovanja većine hemoterapijskih jedinjenja, treba da rezultuje povećanim
1
nivoima tumorskog antigena u putu prezentacije antigena. Druge kombinovane terapije koje mogu da rezultuju u sinergiji sa kombinovanim LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokadom kroz ćelijsku smrt obuhvataju zračenje, operaciju, ili hormonsku deprivaciju. Svaki od ovih protokola stvara izvor tumorskog antigena u domaćinu. Inhibitori angiogeneze takođe mogu biti kombinovani sa kombinovanim LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokadom. Inhibicija angiogeneze dovodi do smrti tumorskih ćelija, koja može biti izvor tumorskog antigena koji se unosi u puteve prezentacije antigena domaćina.
[0182] Kombinacija LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokirajućih antitela može takođe biti primenjena u kombinaciji sa bispecifičnim antitelima koja ciljaju Fcα ili Fcγ receptor-eksprimirajuće efektorske ćelije na tumorskim ćelijama (videti, npr., Američke patente br. 5,922,845 i 5,837,243). Bispecifična antitela mogu biti korišćena da ciljaju dva odvojena antigena. Količina T ćelije u ovim odgovorima bi mogla biti uvećana primenom kombinovanog LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokade.
[0183] U još jednom primeru, kombinacija anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 antitela i/ili anti-PD-L1 antitela može biti korišćena u sponi sa antineoplastičnim antitelima, kao što je Rituxan<®>(rituksimab), Herceptin<®>(trastuzumab), Bexxar<®>(tositumomab), Zevalin<®>(ibritumomab), Campath<®>(alemtuzumab), Lymphocide<®>(eprtuzumab), Avastin<®>(bevacizumab), i Tarceva<®>(erlotinib), i slično. Putem primera i bez želje da se bude vezan za teoriju, lečenje sa antikancerskim antitelom ili antikancerskim antitelom koje je konjugovano za toksin može voditi ka smrti kancerskih ćelija (npr., tumorskih ćelija) koje bi potencirale imunski odgovor posredovan od strane CTLA-4, PD-1, PD-L1 ili LAG-3. U tehničkom rešenju koje služi kao primer, lečenje hiperproliferativne bolesti (npr., kancerski tumor) može da obuhvata antikancersko antitelo u kombinaciji sa anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitelom, istovremeno ili sekvencijalno ili bilo koju njihovu kombinaciju, koja bi potencirala anitumorske imunske odgovore od strane domaćina.
[0184] Tumori izbegavaju imunološki nadzor domaćina velikim brojem mehanizama. Mnogi od ovih mehanizama mogu biti prevaziđeni inaktivacijom proteina, koji su eksprimirani od strane tumora i koji su imunosupresivni. Ovi obuhvataju, između ostalih, TGF-β (Kehrl et al. (1986) J. Exp. Med. 163: 1037-1050), IL-10 (Howard & O'Garra (1992) Immunology Today 13: 198-200), i Fas ligand (Hahne et al. (1996) Science 274: 1363-1365). U još jednom primeru, antitela za svaki od ovih entiteta mogu biti dalje kombinovana sa kombinacijom anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela da bi se poništili efekte
2
imunosupresivnih sredstava, i favorizovali antitumorski imunski odgovori od strane domaćina.
[0185] Druga antitela koja se mogu koristiti za aktiviranje imunološkog odgovora domaćina mogu se dalje koristiti u kombinaciji sa kombinacijom anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela. Ovi obuhvataju molekule na površini dendritske ćelije koji aktiviraju DC funkciju i antigen prezentaciju. Anti-CD40 antitela (Ridge et al., gore) mogu biti korišćena u sprezi sa anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 kombinacijom (Ito et al., gore). Druga aktivirajuća antitela za T ćeljske kostimulatorne molekule Weinberg et al., gore, Melero et al. gore, Hutloff et al., gore) mogu takođe obezbediti povećane nivoe aktivacije T ćelija.
[0186] Kao što je razmotreno iznad, transplantacija koštane srži se trenutno koristi za lečenje različitih tumora hematopoetskog porekla. Kombinovani LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokada mogu biti korišćeni da povećaju efikasnost donorskih nakalemljenih tumor specifičnih T ćelija.
[0187] Nekoliko protokola eksperimentalnog lečenja uključuje ex vivo aktivaciju i ekspanziju antigen specifičnih T ćelija i adoptivni transfer ovih ćelija u primaoce radi antigen-specifičnih T ćelija protiv tumora (Greenberg & Riddell, gore). Ove metode se takođe mogu koristiti za aktiviranje odgovora T ćelija na infektivne agense kao što je CMV. Aktivacija ex vivo u prisustvu anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela može se očekivati da poveća učestalost i aktivnost T ćelija koje su prenešene adoptivnim transferom.
[0188] Dalje, metoda za izmenu neželjenih događaja povezanih sa lečenjem hiperproliferativne bolesti (npr., kancer) sa imunostimulatornim agensom je opisana ovde da sadrži administriranje anti-LAG-3 antitela i subterapijske doze anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela subjektu. Na primer, takve metode obuhvataju metodu smanjivanja incidence kolitisa indukovanog imunostimulatornim terapijskim antitelom ili dijareje od strane administriranja ne-apsorbujućeg steroida pacijentu. S obzirom da će svaki pacijent koji će dobiti imunostimulatorno terapijsko antitelo biti pod rizikom za razvoj kolitisa ili dijareje izazvane takvim antitelom, ova cela populacija pacijenata je pogodna za terapiju u skladu sa metodama predmetnog pronalaska. Iako su steroidi administrirani za lečenje inflamatorne bolesti creva (IBD) i sprečavaju pogoršanje IBD-a, oni nisu korišćeni za sprečavanje (smanjenje incidence) IBD-a kod pacijenata kod kojih nije dijagnostikovana IBD. Značajni neželjeni efekti povezani sa steroidima, čak i ne-apsorbujući steroidi, obeshrabruju profilaktičku upotrebu.
[0189] U dodatim tehničkim rešenjima, kombinacija LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokade (tj., imunostimulatorna terapijska antitela anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 antitela i/ili anti-PD-L1 antitela) može biti dalje kombinovana sa primenom bilo kog neapsorbujućeg steroida. Kao što je ovde korišćeno, "ne-apsorbujući steroid" je glukokortikoid koji ispoljava obimni metabolizam prvog prolaza tako da je, nakon metabolizma u jetri, biodostupnost steroida niska, tj., manja od oko 20%. U jednom tehničkom rešenju predmetnog pronalaska, ne-apsorbujući steroid je budezonid. Budezonid je glukokortikosteroid koji deluje lokalno, koji je u velikoj meri metabolisan, primarno od strane jetre, nakon oralne administracije. ENTOCORT EC<®>(Astra-Zeneca) je oralna formulacija budezonida zavisna od pH i vremena razvijena da se optimizuje isporučivanje laka u ileum i kroz debelo crevo. ENTOCORT EC<®>je odobren u SAD za lečenje blage do umerene Kronove bolesti uključujući ileum i uzlazno crevo. Uobičajena oralna doza ENTOCORT EC<®>za lečenje Kronove bolesti je 6 do 9 mg/dan. ENTOCORT EC<®>je oslobođen u crevima pre nego što se apsorbuje i zadrži u sluznici creva. Jednom kada prođe kroz ciljno tkivo sluznice creva, ENTOCORT EC<®>je u velikoj meri metabolisan od strane citohrom P450 sistema u jetri do metabolita sa zanemarljivom glukokortikoidnom aktivnošću. Stoga, bioraspoloživost je niska (oko 10%). Mala biodostupnost budezonida dovodi do poboljšanog terapijskog odnosa u poređenju sa drugim glukokortikoidima sa manje obimnim metabolizmom prvog prolaza. Budezonid ima manje štetnih efekata, uključujući manju supresiju hipotalamus-hipofize, nego sistemski delujući kortikosteroidi. Međutim, hronična administracija ENTOCORT EC® može dovesti do sistemskih glukokortikoidnih efekata kao što je hiperkorticizam i adrenalna supresija. Videti PDR 58. Izdanje 2004; 608-610.
[0190] U još dodatnim tehničkim rešenjima, kombinacija LAG-3 i CTLA-4 i/ili PD-1 i/ili PD-L1 blokade (tj., imunostimulatorna terapijska antitela anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela) u vezi sa ne-apsorbujućim steroidom može dalje biti kombinovana sa salicilatom.S alicilati obuhvataju 5-ASA agense kao što su, na primer: sulfasalazin (AZULFIDINE<®>, Pharmacia & UpJohn); olsalazin (DIPENTUM<®>, Pharmacia & UpJohn); balsalazid (COLAZAL<®>, Salix Farmaceutskes, Inc.); i mesalamin (ASACOL<®>, Procter & Gamble Farmaceutskes; PENTASA<®>, Shire US; CANASA<®>, Axcan Scandipharm, Inc.; ROWASA<®>, Solvay).
[0191] U skladu sa metodama predmetnog pronalaska, salicilat administriran u kombinaciji sa anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitelima i ne-apsorbujućim
4
steroidom mogu da uključe bilo koju istovremenu ili sekvencijalnu administraciju salicilata i ne-apsorbujućeg steroida u svrhu smanjenja incidence kolitisa koji je indukovan uz pomoć imunostimulatornih antitela. Prema tome, na primer, metode za smanjenje incidence kolitisa koji je indukovan imunostimulatornim antitelima u skladu sa predmetnim pronalaskom obuhvataju administriranje salicilata i ne-apsorbujućeg istovremeno ili sekvencijalno (npr., salicilat je administriran 6 sati nakon ne-apsorbujućeg steroida), ili bilo koju njihovu kombinaciju. Dalje, u skladu sa predmetnim pronalaskom, salicilat i ne-apsorbujući steroid mogu biti administrirani istim putem (npr., oba su administrirana oralno) ili različitim putevima (npr., salicilat je administriran oralno i ne-apsorbujući steroid je administriran rektalno), koji mogu da se razliku od puta(puteva) koji su korišćeni za administraciju anti-LAG-3 i anti-CTLA-4 i/ili anti-PD-1 i/ili anti-PD-L1 antitela.
[0192] Predmetna objava je dalje ilustrovana pomoću primera koji slede, koje ne bi trebalo tumačiti kao dodatno ograničavajuće. Posebna referenca je napravljena za objave PCT prijava WO 09/045957, WO 09/073533, WO 09/073546, i WO 09/054863.
PRIMERI PRIMER 1: DIZAJN VARIJANTI LAG3.1 (ANTITELO 25F7)
[0193] Varijante antitela prethodno opisanog anti-LAG-3 antitela, 25F7, koje se ovde nazivaju LAG3.1, su stvorene prvim analiziranjem aminokiselinske sekvence antitela za potencijalna mesta degradacije. Ekspresija usmerene mutageneze LAG3.1 VHregiona izvršeno je korišćenjem kompleta - QuikChange II XL® Site-Directed Mutagenesis Kit (Agilent Technologies). Izmenjeni VH regioni su zatim subklonirani u UCOE® (EMD Millipore) vektore koji sadrže konstantni region humanog IgG4-S228P. Različiti vektori teškog lanca su svaki ko-transfektovan sa vektorom koji eksprimira LAG3.1 kapa lanac u CHO-S ćelije, i stabilni pulovi su odabrani za ekspresiju.
[0194] Pet potencijalnih motiva deamidacije su identifikovani u sklopu varijabilnog regiona teškog lanca CDR2. Ova mesta su locirana na položajima 52, 54, 56, 58, i 60 varijabilnog regiona teškog lanca LAG3.1 (SEQ ID NO: 2) (videti Sliku 1A). Naročito, deamidacija "NG" sekvence u sklopu VH CDR2 (SEQ ID NO: 6) je opažena u svim uslovima, kao i za dalju izomerizaciju sekvence. Deamidacija početnog materijala je oko 10%. Dalje, pronađeno je da ova "NG" sekvenca ne odgovara germitaivnoj sekvenci (videti Sliku 3). Međutim, konsenzus sekvenca germinativne linije je potencijalno mesto glikozilacije i stoga, nije obuhvaćena među varijantama antitela.
[0195] Dizajnirane su četiri varijante (nazvane ovde kao LAG3.5, LAG3.6, LAG3.7, i LAG3.8) koje upućuju na dva potencijalna motiva deamidacije (položaji 54 i 56), kao što je prikazano na Slici 3. Ove varijante su podvrgnute matriksu u uslovima kao što je sumarizovano u Tabeli 1 ispod i sledeće karakteristike su analizirane: (a) hemijske i termalne stabilnosti (fizička stabilnost); (b) ekskluziona hromatografija po veličini (agregacija); (c) Izoelektrični Fokusirajući gel (IEF) (heterogenost naelektrisanja); (d) aktivnost pomoću Biacore analize (vezivanje i funkcionalna aktivnost); i (e) mapiranje peptida masenom spektrometrijom (hemijske modifikacije / molekularna stabilnost).
Table 1
PRIMER 2: KARAKTERIZACIJA LAG-3 VARIJANTI
1. VEZIVANJE AKTIVIRANIH HUMANIH CD4<+>T ĆELIJA
[0196] Da bi se testirala sposobnost varijanti antitela da se vežu za nativni humani LAG-3 na površini aktiviranih humanih T ćelija, mononuklearne ćelije periferne krvi normalnog zdravog donora su stimulisane u pločama za tkivne kulture od 15 cm u gustini od 2x10e6 ćelija/mL, sa kombinacijom anti-CD3 (eBioscience, Cat #16-0037-85) i anti-CD28 (BD Bioscience, Cat # 555725) antitela prisutnih u rastvoru pri 5 µg/mL i 3 µg/mL, redom. Nakon tri dana stimulacije ćelije su sakupljene, isprane 1X sa 1x PFAE puferom (1x PBS 2% FBS, 0.02% natrijum azid, 2mM Na EDTA), i resuspendovane u 1x PFAE puferu za bojenje.
[0197] Za reakciju vezivanja, LAG3.1 varijante su serijski razblažene sa hladnim 1x PFAE puferom, zatim je 50 µl rastvora razblaženog antitela pomešano sa 50 µl Fitc-obeleženog anti-humanog CD4 (BD Bioscience, Cat # 555346) razblaženog 1:16u 1x PFAE puferu. Za reakciju vezivanja, 100 µl ove smeše razblaženog antitela je dodato u 2 x 10<5>ćelija i smeša je inkubirana na 4°C tokom 30 minuta. Ćelije su zatim isprane dva puta sa 1x PFAE puferom.
1:200 razblaženje PE-obeleženog anti-humanog Fcγ-specifičnog antitela (Jackson ImmunoResearch, Cat. # 109-116-170) je dodato i smeša je inkubirana tokom 30 minuta na 4°C, praćeno ispiranjem dva puta sa hladnim x PFAE puferom. Nakon finalnog ispiranja, 150 µl hladnog 1x PFAE je dodat u svaki rastvor i analiza vezivanja antitela je izvedena protočnom citometrijom pomoću FACSCanto protočnog citometra (BD Bioscience).
[0198] Rezultati analize protočnom citometrijom su sumarizovani na Slici 4A koja je grafik koji prikazuje EC50 za vezivanje antitela za aktivirane humane CD4+ T ćelije. Slika 4B je grafik koji prikazuje vezivanje antitela za solubilni humani LAG-3/Fc antigen pomoću BIACORE. Kao što je pokazano, afiniteti vezivanja LAG3.5 i LAG3.8 su malo niži, u poređenju sa LAG3.1, dok su njihove “off-rate” konstante (konstante disocijacije) malo više u poređenju sa LAG3.1.
2. FIZIČKA STABILNOST
[0199] Termalna stabilnost i termalna denaturacija varijanti je testirana korišćenjem Microcal VP-DSC. Specifično, svaka varijnata je razblažena u PBS (Mediatech kat. broj 21-040-CV lot broj 21040139). Finalna koncentracija uzorka je 250 µg/mL nakon razblaživanja u PBS. Uzorak je skeniran do 74°C, ohlađen do 25°C, i ponovo zagejan do 74°C. PBS pufer je korišćen kao “blank” kontrola. Podaci su fitovani u “Non-2-state” modelu i fitovanje krive je izvedeno pomoću Origin softvera.
[0200] Kao što je sumarizovano u Tabeli 2 i pokazano na Slici 5, LAG3.5 je imao višu temperaturu topljenja TM2 nego LAG3.1, ukazujući na veću opštu stabilnost.
Tabela 2
[0201] Ponovno sklapanje natitela nakon denaturacije je obrnuta mera dugoročnog potencijala agregacije. Prema tome, varijante LAG-3 su takođe testirane i upoređene u pogledu termalne reverzibilnosti. Specifično, antitela su zagrejana na 74 ° C i ohlađena na sobnu temperaturu pre zagrevanja do 74° C. Odnos površina pod krivom drugog prema prvom termogramu obezbeđuje procenu termalne reverzibilnosti, koja je direktna mera konformacione reverzibilnosti.
[0202] Kao što je sumarizovano u Tabeli 3 i pokazano na Slici 6, LAG3.5 je imao suštinski višu termalnu reverzibilnost od svih drugih varijanti. Primetno, procentualna reverzibilnost za LAG3.5 (47%) je više nego udvostručena od one za LAG3.1 (20%). Termalna reverzibilnost je snažno korelisana sa dugoročnim potencijalom agregacije. Niža reverzibilnost odgovara većoj potencijalnoj agregaciji. Na osnovu ovog zapažanja, LAG3.1 bi potencijalno pokazao suštinski veću agregaciju tokom vremena, u poređenju sa LAG3.5. Slično tome, sve druge varijante mogu potencijalno pokazati suštinski veću agregaciju tokom vremena u poređenju sa LAG3.5
Tabela 3
3. AGREGACIJA
[0203] Varijante su takođe testirane na stabilnost kao mera proteinske agregacije korišćenjem standardne ekskluzione HPLC po veličini (SEC-HPLC) prema sledećem protokolu: test uzorci antitela su razblaženi do 1.0 mg/ml sa rastvorom fosfatnog slanog pufera (PBS) i 10 uL je primenjeno na HPLC (Waters, model 2795). Separacija je postignuta na filtracionoj koloni sa gelom (TOSOH Bioscience, TSKgel G3000 SWxl, 7,8mm x 300mm, proizvod # 08541) korišćenjem mobilne faze od 0.1M natrijum fosfata, 0.15M natrijum hlorida, 0.1M natrijum sulfata, pH 7.2. Analit je detektovan praćenjem UV apsorbance na 280nm, a procenta površine pika kompozicije antitela je određen korišćenjem Empower softvera. Kao što je pokazano u Tabeli 4, LAG3.5 je pokazao suštinski smanjenu agregaciju u poređenju sa LAG3.1.
Tabela 4
PRIMER 3: SELEKCIJA VARIJANTI
[0204] Na osnovu gore opisanih studija, varijanta antitela LAG3.5 je izabrana za dalju analizu, s obzirom na njegovu značajno poboljšanu fizičku i hemijsku stabilnost u poređenju sa njegovim nemodifikovanim oblikom(LAG3.1), naročito njegovim visokim kapacitetom za konformaciono savijanje (termalna reverzibilnost). Ova analiza uključuje dvostepeni pristup (a) ubrzanog stresa, (b) praćeno procenom stabilnosti u realnom vremenu od 12 nedelja. Specifično, LAG3.5 je inkubiran na 1.0 mg/ml u pH 8.0, 50 mM amonijum bikarbonatu, tokom 5 dana na 40C°. Analiziran je stepen modifikacije nakon 5 dana, kao i efekti na aktivnost i stabilnost. LAG3.5 varijanta je zatim podvrgnuta stvarnoj stabilnosti PBS u trajanju od 12 nedelja i kasnije analizirana. Rezultati ovih studija su opisani ispod.
1. VEZIVANJE ANTIGENA
[0205] Kao što je pokazano na Slici 7 (i Tabeli 5), nije primećena promena u vezivanju antigena nakon 5 dana. Kao što je takođe prikazano na Slikama 10A i B, LAG3.5 je pokazao da nema promene u vezivanju antigena ili fizičkoj stabilnosti nakon 12 nedelja. Naročito, LAG3.5 održava viši afinitet nego LAG3.8 tokom celog perioda od 12 nedelja i na 4°C i na 40°C.
Tabela 5
2. HEMIJSKE MODIFIKACIJE / MOLEKULARNA STABILNOST
[0206] Peptidno mapiranje masenom spektometrijom je korišćeno da se analizira hemijska / molekularna stabilnost LAG3.5 u poređenju sa LAG3.1. Specifično, prečišćeno antitelo je redukovano, alkilovano, dializirano, i digerirano sa tripsinom (Promega Cat. V5111) i GluC (Roche Cat. 11047817001). Digerirani produkti su analizirani nano-LC MSMS masenom spektrometrijom (Thermo Fisher LTQ Orbitrap).
[0207] Kao što je prikazano na Slici 8, LAG3.1 je pokazao povećanu heterogenost u VH u poređenju sa LAG3.5 kada je podvrgnut ubrzanoj stabilnosti na višem pH, koja deamiduje asparaginske ostatke (korak 1). Promena u masi usled izomerizacije ne bi mogla da se detektuje u trenutnim eksperimentalnim uslovima. Procenat promene je izražen kao odnos svih promena kombinovanih sa osnovnim pikom.
[0208] Dodatno, kao što je prikazano na Slici 11, LAG3.1 je pokazao povećanu heterogenost u VHu poređenju sa LAG3.5 kada je podvrgnut produženoj stabilnosti u stvarnom vremenu od 12 nedelja, i na 4°C i na 40°C (korak 2).
3. FIZIČKA STABILNOST
[0209] Termalna reverzibilnost je izmerena u PBS i na pH 8.0. U oba uslova, LAG3.5 je ponovo ispoljio približno dvostruki nivo ponovnog sklapanja u poređenju sa LAG3.1. Specifično, kao što je prikazano u Tabelama 6-8, LAG3.5 je pokazao 43% ponovnog sklapanja u poređenju sa 18% za LAG3.1 u PBS. LAG3.5 takođe eje pokazao 48% ponovnog sklapanja u poređenju sa 29% ponovnog sklapanja za LAG3.1 na pH 8.0.
Tabela 6 - DSC:topljenje
Tabela 7 - Fluorolog-2:razmotavanje
M
Tabela 8: DSC:ponovno sklapanje
4. HETEROGENOST NAELEKTRISANJA
[0210] Da bi se procenila heterogenost naelektrisanja, varijante su analizirane korišćenjem izoelektrofokusiranja (IEF) sa standardnim markerima od pI 5.5 i pI 10.0 u poređenju sa LAG3.1. Ukratko, rastvori antitela ssu primenjeni na 1 mm debeo IEF pI 3-7 unapred napravljen gel (Invitrogen, Kat br. EC6648BOX) uporedo sa pI 3-10 markerima (SERVA, Kat br.39212). Elektroforeza je izvedena korišćenjem IEF 3-7 katodonog pufera (Invitrogen, Kat br. LC5370) i IEF Anodnog pufera (Invitrogen, Kat br. LC5300) i primenjivanjem
1
električne struje po redosledu od 100 V konstantno tokom 1 h, 200 V konstantno tokom 1h, i 500 V konstantno tokom 30 min. IEF gelovi su bojeni sa Komazi plavim da se detektuju proteinske trake i obezbojeni sa rastvorom metanol-sirćetne kiseline. IEF gelovi su zatim analizirani pomoću ImageQuant TL softvera. Na osnovu ovih analiza (podaci nisu prikazani), LAG3.5 je pokazao značajno manju heterogenost u poređenju sa LAG3.1.
5. HIC-HPLC
[0211] Da bi se procenila rastvorljivost, varijnate su analizirane korišćenjem standardne hromatografije hidrofobnih interakcija (HIC-HPLC) u skladu sa sledećim protokolom: 50 uL 2M amonijum sulfata je dodato do 50 uL test uzorka antitela pri 1 mg/ml. 80 uL test uzorka je zatim primenjeno na HPLC (Waters, model 2795) povezanog u redu na HIC koloni (TOSOH Bioscience, Etar-5PW TSK-gel, 7.5mm x 75mm, proizvod br. 07573). Uzorak je eluiran pri brzini protoka od 1.0 ml/min sa gradijentom od 100% pufera A (2M amonijum sulfat, 0.1M natrijum fosfat, pH 7.0) do 100% pufera B (0.1M natrijum fosfat, pH 7.0) tokom 50 minuta. Antitelo je detektovano praćenjem UV apsorbance na 280nm i podaci su analizirani korišćenjem Empower softvera. Kao što je pokazano na Slici 9, hidrofilnost LAG3.5 je pokazala rastvorljivost pri visokim koncentracijama amonijum sulfata.
PRIMER 4: PREOKRET INHIBICIJE IMUNSKOG ODGOVORA KOJI JE POSREDOVAN T ĆELIJAMA
[0212] Aktivnost LAG3.5 je određena pomoću funkcionalnog eseja koji koristi antigenspecifični mišji T ćelisjki hibridom (3A9). Hibridom 3A9 eksprimira T ćelijski receptor specifičan za peptid iz lizozima kokošjeg jajeta (HEL48-62) i sekretuje IL-2 kada je istovremeno kultivisan sa antigen prezentujućim ćelijama koje su peptid-pulsirane, i odgovaraju MHC (LK35.2). Pošto je huLAG-3-Fc sposoban da se veže za mišje B ćelijske linije pozitivne za MHC klau II, ekspresija huLAG-3 u 3A9 liniji bi mogla da vrši inhibitorni efekat kroz angažovanje sa klasom II na mišjoj prezentućoj liniji. Poređenje profila odgovora peptida sa 3A9 roditeljima sa humanim LAG-3-transdukovanim 3A9 ćelijama koje su istovremeno kultivisane sa antigen prezentujućim ćelijama MHC-podudarenim pokazao je da ekspresija humanog LAG-3 inhibira peptidnu reakciju u poređenju sa kontrolnim 3A9 ćelijama. Ova inhibicija je preokrenuta LAG-3 blokadom korišćenjem LAG3.5. Stoga, blokada LAG-3-posredovane inhibicije je pokazana za LAG3.5.
2
PRIMER 5: AKTIVACIJA T ĆELIJA POMOĆU LAG3.5
[0213] Fukcionalna aktivnost LAG3.5 na primarne T ćelije je procenjena korišćenjem humanih PBMC kultura koje su stimulisane superantigenom SEB. Ukupne PBMC su izolovane iz krvi 18 donora i stimulisane tokom 72 h u bilo kom od dva formata testa: (i) fiksna količina antitela (20 µg/mL) i serijska razblaženja SEB, ili (ii) fiksna kolčina SEB (85 ng/mL) i serijska razblaženja antitela. Sekretovan IL-2, kao mera aktivnosti T ćelija, je praćena pomoću ELISA. Antitelo anti-PD-1 antitelo i Ipilimumab su korišćeni kao pozitivne kontrole i aktivnost LAG3.5 u kombinaciji sa anti-PD-1 ili anti-CTLA-4 je takođe procenjena za podskup donora.
[0214] Poboljšana sekrecija IL-2 je opažena u opsegu SEB koncentracija od 15 do 18 donora tretiranih sa samo LAG3.5, u poređenju sa tretmanom izotipskim kontrolnim antitelom. U većini slučajeva stimulacija je manja nego što je opaženo za lečenje sa anti-PD-1 ili Ipilimumabom. Uzimajući u obzir LAG3.5, rezultati dva formata eseja (opisani iznad) se slažu jedan sa drugim. Pored toga, kod 5 od 6 testiranih donora, kombinovanje LAG3.5 sa anti-PD-1 ili Ipilimumabom dovelo je do viših nivoa stimulacije nego što je opaženo za izotipsko kontorlno antitelo kombinovano sa anti-PD-1 ili Ipilimumabom. Ovi podaci otkrili su da LAG3.5 može da fukcioniše u esejima na normalnim humanim T ćelijama i može dalje da aktivira odgovore posredovane inhibicijom PD-1 i CTLA-4 funkcije.
REZIME LISTE SEKVENCI [0215]
4
VHn.a. LAG3.5
humana LAG-3 a.a. sekvenca
LAG3.1HC
PREVOĐENJE\OD\LAG3.1LC
LAG3.5 sekvenca teškog lanca - kompletna
LAG3.5 sekvenca teškog lanca - kompletna
LAG3.5 sekvenca kapa lanca - Kompletna
LAG3.5 - sekvenca kapa lanca - Kompletna
1
2
4
1
2
4
1
2
4

Claims (35)

PATENTNI ZAHTEVI
1. Izolovano monoklonsko antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, koji vezuje humani LAG-3, gde CDR1, CDR2, i CDR3 regioni teškog lanca sadrže aminokiselinske sekvence sa identifikacionim brojevima sekvenci - SEQ ID NOs: 15, 16, i 17, redom, i gde CDR1, CDR2, i CDR3 regioni lakog lanca sadrže aminokiselinske sekvence sa SEQ ID NOs: 18, 19, i 20, redom.
2. Antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, patentnog zahteva 1, gde varijabilni region teškog lanca sadrži aminokiselinsku sekvencu sa SEQ ID NO: 12, i varijabilni region lakog lanca sadrži aminokiselinsku sekvencu sa SEQ ID NO: 14.
3. Antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od prethodnih patentnih zahteva, koji ispoljava jedno ili kombinaciju sledećih svojstava:
(a) vezivanje za majmunski LAG-3;
(b) nedostatak vezivanja za mišji LAG-3;
(c) vezivanje za LAG-3 molekule glavnog kompleksa histokompatibilnosti (MHC) klase II;
(d) inhibira vezivanje LAG-3 za molekule glavnog kompleksa histokompatibilnosti (MHC) klase II; ili
(e) stimuliše imunski odgovor.
4. Antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od prethodnih patentnih zahteva, koji stimuliše proizvodnju interleukina-2 (IL-2) u odgovoru antigen-specifične T ćelije i/ili stimuliše anti-tumorski imunski odgovor.
5. Antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od prethodnih patentnih zahteva, koji se vezuje za humani LAG-3 sa KDod 0.27 x 10<-9>M ili manje kao što je određeno površinskom plazmonskom rezonancom.
6. Antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od prethodnih patentnih zahteva, koje je humano antitelo.
7. Antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od prethodnih patentnih zahteva, koje je IgG1, IgG2 ili IgG4 izotip.
8. Antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od prethodnih patentnih zahteva, koje je IgG4 izotip.
9. Antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od prethodnih patentnih zahteva, koje je fragment antitela ili antitelo sa jednim lancem.
10. Antitelo bilo kog od patentnih zahteva 1-8, koje je antitelo u punoj dužini.
11. Antitelo bilo kog od patentnih zahteva 1-8 ili 10, gde antitelo je izolovano IgG4 humano monoklonsko antitelo u punoj dužini koje se vezuje za humani LAG-3 sa KD od 0.27 x 10<-9>M ili manje kao što je određeno površinskom plazmonskom rezonancom.
12. Bispecifični molekul koji sadrži antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od prethodnih patentnih zahteva, i drugo antitelo ili njegov antigen-vezujući deo.
13. Imunokonjugat koji sadrži antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od patentnih zahteva 1-11, vezan za terapijski agens.
14. Imunokonjugat patentnog zahteva 13, gde terapijski agens je citotoksin ili radioaktivni izotop.
15. Kompozicija koji sadrži antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od patentnih zahteva 1-11, bispecifični molekul patentnog zahteva 12, ili imunokonjugat patentnog zahteva 13 ili 14, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
1 1
16. Kompozicija patentnog zahteva 15, koja dalje sadrži antikancerski agens.
17. Kompozicija patentnog zahteva 16, gde antikancerski agens je antitelo ili hemoterapijski agens.
18. Kompozicija patentnog zahteva 17, gde antitelo je antitelo u punoj dužini.
19. Kompozicija patentnog zahteva 17 ili 18, gde antitelo je IgG4 izotip.
20. Izolovana nukleinska kiselina koja kodira varijabilni region teškog i lakog lanca antitela, ili njegov antigen-vezujući deo, patentnog zahteva 1 ili 2.
21. Ekspresioni vektor koji sadrži nukleinsku kiselinu patentnog zahteva 20.
22. Ćelija domaćina koja sadrži ekspresioni vektor patentnog zahteva 21.
23. Metoda za pripremanje anti-LAG-3 antitela koja sadrži eksprimiranje antitela u ćeliji domaćina patentnog zahteva 22 i izolovanje antitela iz ćelije domaćina.
24. Antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od patentnih zahteva 1-11, ili bispecifični molekul patentnog zahteva 12, ili imunokonjugat patentnog zahteva 13 ili 14 za primenu u metodi stimulacije imunskog odgovora kod subjekta.
25. Antitelo, antigen-vezujući deo, bispecifični molekul, ili imunokonjugat za primenu u skladu sa patentnim zahtevom 24, gde subjekat je subjekat koji ima tumor i imunski odgovor na tumor je stimulisan.
26. Antitelo, antigen-vezujući deo, bispecifični molekul, ili imunokonjugat za primenu u skladu sa patentnim zahtevom 24, gde subjekat je subjekat koji ima virus i imunski odgovor na virus je stimulisan.
1 2
27. Antitelo, antigen-vezujući deo, bispecifični molekul, ili imunokonjugat za primenu u skladu sa patentnim zahtevom 24, gde imunski odgovor je odgovor antigen-specifične T ćelije, tako da je odgovor antigen-specifične T ćelije stimulisan.
28. Antitelo, antigen-vezujući deo, bispecifični molekul, ili imunokonjugat za primenu u skladu sa patentnim zahtevom 27, gde je proizvodnja interleukina-2 pomoću antigenspecifične T ćelije stimulisana.
29. Antitelo, antigen-vezujući deo, bispecifični molekul, ili imunokonjugat za primenu u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 24-26, koji dalje sadrži administraciju najmanje jednog dodatnog imunostimulatornog antitela.
30. Antitelo, antigen-vezujući deo, bispecifični molekul, ili imunokonjugat za primenu u skladu sa patentnim zahtevom 29, gde najmanje jedno imunostimulatorno dodatno antitelo je anti-PD-1 antitelo.
31. Antitelo, antigen-vezujući deo, bispecifični molekul, ili imunokonjugat za primenu u skladu sa patentnim zahtevom 29, gde najmanje jedno dodatno imunostimulatorno antitelo je anti-PD-L1 antitelo.
32. Antitelo, antigen-vezujući deo, bispecifični molekul, ili imunokonjugat za primenu u skladu sa patentnim zahtevom 29, gde najmanje jedno dodatno imunostimulatorno antitelo je anti-CTLA-4 antitelo.
33. Antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od patentnih zahteva 1-11, bispecifični molekul patentnog zahteva 12, ili imunokonjugat patentnog zahteva 13 ili 14 za primenu u metodi za inhibiranje rasta tumorskih ćelija kod subjekta.
34. Antitelo, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od patentnih zahteva 1-11, bispecifični molekul patentnog zahteva 12, ili imunokonjugat patentnog zahteva 13 ili 14 za primenu u metodi za lečenje virusne infekcije kod subjekta.
1
35. Primena antitela, ili njegov antigen-vezujući deo, bilo kog od patentnih zahteva 1-11, bispecifični molekul patentnog zahteva 12, ili imunokonjugat patentnog zahteva 13 ili 14, u proizvodnji leka za stimulisanje imunskog odgovora, opciono odgovor antigen specifične T ćelije, ili inhibiranje rasta tumorskih ćelija, ili lečenje virusne infekcije kod subjekta.
1 4
RS20170932A 2012-07-02 2013-07-02 Optimizacija humanih antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene RS56398B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261667058P 2012-07-02 2012-07-02
PCT/US2013/048999 WO2014008218A1 (en) 2012-07-02 2013-07-02 Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
EP13737946.7A EP2867258B1 (en) 2012-07-02 2013-07-02 Optimization of human antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS56398B1 true RS56398B1 (sr) 2017-12-29

Family

ID=48795938

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20241076A RS65997B1 (sr) 2012-07-02 2013-07-02 Optimizacija antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene
RS20201404A RS61084B1 (sr) 2012-07-02 2013-07-02 Optimizacija antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene
RS20170932A RS56398B1 (sr) 2012-07-02 2013-07-02 Optimizacija humanih antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20241076A RS65997B1 (sr) 2012-07-02 2013-07-02 Optimizacija antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene
RS20201404A RS61084B1 (sr) 2012-07-02 2013-07-02 Optimizacija antitela koja vezuju limfocitni aktivacioni gen-3 (lag-3), i njihove primene

Country Status (39)

Country Link
US (7) US9505839B2 (sr)
EP (4) EP3795592B1 (sr)
JP (5) JP6320376B2 (sr)
KR (6) KR20230159625A (sr)
CN (2) CN108101991B (sr)
AR (3) AR091649A1 (sr)
AU (5) AU2013286914B2 (sr)
BR (1) BR112014032999B1 (sr)
CA (2) CA2877746C (sr)
CL (1) CL2014003637A1 (sr)
CO (1) CO7170127A2 (sr)
CY (3) CY1119563T1 (sr)
DK (3) DK3275899T3 (sr)
EA (2) EA035013B1 (sr)
ES (3) ES2987734T3 (sr)
FI (2) FI3795592T3 (sr)
FR (1) FR22C1057I2 (sr)
HR (3) HRP20171315T1 (sr)
HU (4) HUE069061T2 (sr)
IL (1) IL236517B (sr)
LT (4) LT2867258T (sr)
LU (1) LUC00286I2 (sr)
MX (2) MX365417B (sr)
MY (3) MY197544A (sr)
NL (1) NL301205I2 (sr)
NO (2) NO2023008I1 (sr)
NZ (1) NZ628528A (sr)
PE (4) PE20191324A1 (sr)
PH (2) PH12021552200A1 (sr)
PL (2) PL3795592T3 (sr)
PT (3) PT3795592T (sr)
RS (3) RS65997B1 (sr)
SG (2) SG10201610960YA (sr)
SI (3) SI2867258T1 (sr)
SM (3) SMT202000628T1 (sr)
TN (1) TN2014000536A1 (sr)
TW (7) TWI662046B (sr)
UY (1) UY34887A (sr)
WO (1) WO2014008218A1 (sr)

Families Citing this family (568)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2418278A3 (en) * 2005-05-09 2012-07-04 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Human monoclonal antibodies to programmed death 1(PD-1) and methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
KR101607288B1 (ko) * 2005-07-01 2016-04-05 이. 알. 스퀴부 앤드 선즈, 엘.엘.씨. 예정 사멸 리간드 1 (피디-엘1)에 대한 인간 모노클로날 항체
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
PE20120553A1 (es) 2009-03-25 2012-05-18 Genentech Inc Anticuerpos anti-fgfr3
EP3409278B8 (en) 2011-07-21 2020-11-04 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Heterocyclic protein kinase inhibitors
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
MY210104A (en) * 2013-03-15 2025-08-27 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Anti-lag-3 binding proteins
SG11201508358RA (en) 2013-04-09 2015-11-27 Boston Biomedical Inc 2-acetylnaphtho[2,3-b]furan -4,9-dione for use on treating cancer
CA2917858A1 (en) * 2013-08-02 2015-02-05 Aduro Biotech Holdings, Europe B.V. Combining cd27 agonists and immune checkpoint inhibition for immune stimulation
EP3508502B1 (en) * 2013-09-20 2023-04-26 Bristol-Myers Squibb Company Combination of anti-lag-3 antibodies and anti-pd-1 antibodies to treat tumors
US10570204B2 (en) 2013-09-26 2020-02-25 The Medical College Of Wisconsin, Inc. Methods for treating hematologic cancers
WO2015066413A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Novartis Ag Oxazolidinone hydroxamic acid compounds for the treatment of bacterial infections
PL3081576T3 (pl) 2013-12-12 2020-03-31 Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co., Ltd. Przeciwciało anty pd-1, jego fragment wiążący antygen i ich zastosowanie medyczne
SMT201800643T1 (it) 2013-12-24 2019-01-11 Bristol Myers Squibb Co Composti triciclici come agenti anticancro
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
TWI680138B (zh) * 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
PT3556775T (pt) * 2014-01-28 2021-12-31 Bristol Myers Squibb Co Anticorpos anti-lag-3 para tratar neoplasias malignas hematológicas
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
CA2938193C (en) 2014-01-31 2023-05-02 Aimm Therapeutics B.V. Means and methods for producing stable antibodies
US10618963B2 (en) 2014-03-12 2020-04-14 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
US10519237B2 (en) 2014-03-12 2019-12-31 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
US9394365B1 (en) 2014-03-12 2016-07-19 Yeda Research And Development Co., Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of alzheimer's disease
CN114081946A (zh) 2014-03-12 2022-02-25 耶达研究与开发有限公司 降低系统性调节性t细胞水平或活性来治疗cns疾病和损伤
EP3660050A1 (en) 2014-03-14 2020-06-03 Novartis AG Antibody molecules to lag-3 and uses thereof
ES2719136T3 (es) 2014-03-24 2019-07-08 Novartis Ag Compuestos orgánicos de monobactam para el tratamiento de infecciones bacterianas
CN106535884A (zh) 2014-06-06 2017-03-22 弗雷克萨斯生物科学公司 免疫调节剂
AU2015271709B2 (en) 2014-06-06 2020-11-26 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (GITR) and uses thereof
US10092645B2 (en) * 2014-06-17 2018-10-09 Medimmune Limited Methods of treatment with antagonists against PD-1 and PD-L1 in combination with radiation therapy
TWI693232B (zh) * 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
CN107001316A (zh) 2014-08-06 2017-08-01 诺华股份有限公司 作为抗菌剂的喹诺酮衍生物
JO3663B1 (ar) 2014-08-19 2020-08-27 Merck Sharp & Dohme الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين
KR20170060042A (ko) 2014-09-13 2017-05-31 노파르티스 아게 Alk 억제제의 조합 요법
US20170209574A1 (en) 2014-10-03 2017-07-27 Novartis Ag Combination therapies
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
CN114920840A (zh) 2014-10-14 2022-08-19 诺华股份有限公司 针对pd-l1的抗体分子及其用途
RU2708459C2 (ru) 2014-10-29 2019-12-09 БайсиклРД Лимитед Бициклические пептидные лиганды, специфичные для мт1-ммр
BR112017008809A2 (pt) 2014-11-05 2017-12-19 Flexus Biosciences Inc agentes imunorreguladores
UY36391A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido1), sus métodos de síntesis y composiciones farmacèuticas que las contienen
UY36390A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido), sus métodos de síntesis y composiciones farmacéuticas que los contienen
TWI711630B (zh) 2014-11-21 2020-12-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗ｃｄ７３抗體及其用途
US9827308B2 (en) 2014-12-10 2017-11-28 Wisconsin Alumni Research Foundation Mini-intronic plasmid DNA vaccines in combination with LAG3 blockade
UA121225C2 (uk) 2014-12-16 2020-04-27 Новартіс Аг СПОЛУКИ ІЗОКСАЗОЛГІДРОКСАМОВОЇ КИСЛОТИ ЯК ІНГІБІТОРИ LpxC
US20170340733A1 (en) 2014-12-19 2017-11-30 Novartis Ag Combination therapies
TW201630907A (zh) 2014-12-22 2016-09-01 必治妥美雅史谷比公司 ＴＧＦβＲ拮抗劑
JP6180663B2 (ja) 2014-12-23 2017-08-16 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｔｉｇｉｔに対する抗体
CN107427567A (zh) * 2015-01-29 2017-12-01 宾夕法尼亚大学理事会 检查点抑制剂和疫苗组合物及其用于免疫疗法的用途
US11786457B2 (en) 2015-01-30 2023-10-17 President And Fellows Of Harvard College Peritumoral and intratumoral materials for cancer therapy
MA41463A (fr) * 2015-02-03 2017-12-12 Anaptysbio Inc Anticorps dirigés contre le gène d'activation 3 des lymphocytes (lag-3)
WO2016127052A1 (en) 2015-02-05 2016-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Cxcl11 and smica as predictive biomarkers for efficacy of anti-ctla4 immunotherapy
US20160243228A1 (en) * 2015-02-19 2016-08-25 Bioclin Therapeutics, Inc. Methods, compositions, and kits for treatment of cancer
BR112017017135A2 (pt) 2015-03-02 2018-04-03 Rigel Pharmaceuticals, Inc. inibidores de tgf-beta
JO3746B1 (ar) 2015-03-10 2021-01-31 Aduro Biotech Inc تركيبات وطرق لتنشيط الإشارات المعتمدة على "منبه أو تحفيز جين انترفيرون"
AU2016242978A1 (en) 2015-04-03 2017-11-23 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase for the treatment of cancer
BR112017020952A2 (pt) 2015-04-13 2018-07-10 Five Prime Therapeutics Inc método de tratamento de câncer, composição e uso da composição
KR20250004095A (ko) 2015-04-17 2025-01-07 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-pd-1 항체 및 또 다른 항체의 조합물을 포함하는 조성물
EP3294736B1 (en) 2015-05-11 2020-07-22 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic compounds as anticancer agents
US9725449B2 (en) 2015-05-12 2017-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic compounds as anticancer agents
US10174024B2 (en) 2015-05-12 2019-01-08 Bristol-Myers Squibb Company 5H-pyrido[3,2-B]indole compounds as anticancer agents
EP4086264B1 (en) 2015-05-18 2023-10-25 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Alvocidib prodrugs having increased bioavailability
KR20190080992A (ko) 2015-05-21 2019-07-08 하푼 테라퓨틱스, 인크. 삼중특이성 결합 단백질 및 사용 방법
MX2017015041A (es) 2015-05-29 2018-02-26 Squibb Bristol Myers Co Anticuerpos contra el miembro 4 de la superfamilia del receptor del factor de necrosis tumoral (ox40) y sus usos.
SI3303394T1 (sl) 2015-05-29 2020-10-30 Agenus Inc. Protitelesa proti-CTLA-4 in postopki njihove uporabe
US20180140572A1 (en) 2015-06-03 2018-05-24 Boston Biomedical, Inc. Compositions comprising a cancer stemness inhibitor and an immunotherapeutic agent for use in treating cancer
EA039293B1 (ru) * 2015-06-05 2021-12-30 Мерк Шарп И Доум Корп. Антитела против lag3 и антигенсвязывающие фрагменты
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
MX2017016502A (es) 2015-06-29 2018-03-12 Univ Rockefeller Anticuerpos contra cd40 con actividad agonista mejorada.
WO2017009842A2 (en) 2015-07-16 2017-01-19 Biokine Therapeutics Ltd. Compositions and methods for treating cancer
TWI733687B (zh) * 2015-07-22 2021-07-21 美商索倫多醫療公司 結合ｌａｇ３之抗體治療劑
EP3328861A1 (en) 2015-07-28 2018-06-06 Bristol-Myers Squibb Company Tgf beta receptor antagonists
US20180222982A1 (en) 2015-07-29 2018-08-09 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to pd-1
EP3316902A1 (en) 2015-07-29 2018-05-09 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
PL3317301T3 (pl) 2015-07-29 2021-11-15 Novartis Ag Terapie skojarzone zawierające cząsteczki przeciwciał przeciw lag-3
SG10202010506TA (en) 2015-07-30 2020-11-27 Macrogenics Inc Pd-1-binding molecules and methods of use thereof
US20180250303A1 (en) 2015-08-25 2018-09-06 Bristol-Myers Squibb Company Tgf beta receptor antagonists
IL257798B2 (en) 2015-09-02 2024-10-01 Immutep Sas Antibodies against LAG-3
CN114230571B (zh) 2015-09-14 2025-07-08 无限药品股份有限公司 异喹啉酮的固体形式、其制备方法、包含其的组合物及其使用方法
CA3000638C (en) * 2015-09-29 2024-02-27 Asia Biotech Pte. Ltd. Pd-1 antibodies and uses thereof
CN114773481B (zh) 2015-10-02 2025-04-29 豪夫迈·罗氏有限公司 对pd1和tim3特异性的双特异性抗体
TWI756187B (zh) * 2015-10-09 2022-03-01 美商再生元醫藥公司 抗ｌａｇ３抗體及其用途
US10149887B2 (en) 2015-10-23 2018-12-11 Canbas Co., Ltd. Peptides and peptidomimetics in combination with t cell activating and/or checkpoint inhibiting agents for cancer treatment
US10407510B2 (en) 2015-10-30 2019-09-10 Genentech, Inc. Anti-factor D antibodies and conjugates
EP3371208B8 (en) 2015-11-02 2024-10-23 Five Prime Therapeutics, Inc. Cd80 extracellular domain polypeptides and their use in cancer treatment
WO2017083224A1 (en) 2015-11-09 2017-05-18 Bristol-Myers Squibb Company Methods to manipulate quality attributes of polypeptides produced in cho cells
JP6945456B2 (ja) * 2015-11-13 2021-10-06 マクロジェニクス，インコーポレーテッド Ｌａｇ‐３結合分子及びその使用方法
KR102220275B1 (ko) * 2015-11-18 2021-02-26 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 Pd1 및/또는 lag3 결합제
JP6983776B2 (ja) 2015-11-19 2021-12-17 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーBristol−Myers Squibb Company グルココルチコイド誘発腫瘍壊死因子受容体（ｇｉｔｒ）に対する抗体およびその使用
AU2016358101B2 (en) 2015-11-20 2022-12-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animals having a humanized Lymphocyte-activation gene 3
CN108368174B (zh) 2015-11-23 2023-04-14 戊瑞治疗有限公司 用于癌症治疗的单独fgfr2抑制剂或与免疫刺激剂的组合
US10954301B2 (en) 2015-12-14 2021-03-23 Macrogenics, Inc. Bispecific molecules having immunoreactivity with PD-1 and CTLA-4, and methods of use thereof
WO2017106291A1 (en) 2015-12-15 2017-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Cxcr4 receptor antagonists
EP3399989B1 (en) * 2015-12-16 2023-08-09 Merck Sharp & Dohme LLC Anti-lag3 antibodies and antigen-binding fragments
JP2019503349A (ja) 2015-12-17 2019-02-07 ノバルティス アーゲー Ｐｄ−１に対する抗体分子およびその使用
JP2019506844A (ja) 2015-12-18 2019-03-14 ノバルティス アーゲー ＣＤ３２ｂを標的とする抗体およびその使用方法
WO2017122130A1 (en) 2016-01-11 2017-07-20 Novartis Ag Immune-stimulating humanized monoclonal antibodies against human interleukin-2, and fusion proteins thereof
US20200270265A1 (en) 2016-02-19 2020-08-27 Novartis Ag Tetracyclic pyridone compounds as antivirals
EP4406550A3 (en) * 2016-03-04 2024-10-16 The Rockefeller University Antibodies to cd40 with enhanced agonist activity
CA3016187A1 (en) 2016-03-04 2017-09-08 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy with anti-cd73 antibodies
WO2017163186A1 (en) 2016-03-24 2017-09-28 Novartis Ag Alkynyl nucleoside analogs as inhibitors of human rhinovirus
AU2017249698B2 (en) 2016-04-13 2023-03-09 Vivia Biotech, S.L Ex vivo bite-activated T cells
CN109071665B (zh) 2016-04-18 2022-11-01 塞德斯医疗公司 结合人cd40的激动性抗体及其用途
CN109414421A (zh) 2016-05-04 2019-03-01 百时美施贵宝公司 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法
US10323004B2 (en) 2016-05-04 2019-06-18 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
KR20190003686A (ko) 2016-05-04 2019-01-09 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 인돌아민 2,3-디옥시게나제의 억제제 및 그의 사용 방법
EP3452450A1 (en) 2016-05-04 2019-03-13 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3452451A4 (en) 2016-05-04 2019-11-13 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
MX393609B (es) * 2016-05-18 2025-03-24 Boehringer Ingelheim Int Anticuerpos anti pd-1 y anti-lag3 para el tratamiento de cancer
EA201892587A1 (ru) 2016-05-20 2019-04-30 Биохэйвен Фармасьютикал Холдинг Компани Лтд. Использование глутамат-модулирующих средств вместе с иммунотерапией для лечения рака
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
US11472856B2 (en) 2016-06-13 2022-10-18 Torque Therapeutics, Inc. Methods and compositions for promoting immune cell function
PT3468957T (pt) 2016-06-14 2020-09-24 Novartis Ag Forma cristalina de (r)-4-(5-(ciclopropiletinil)isoxazol-3-il)-n-hidroxi-2-metil-2-(metilsulfonil)butanamida como um agente antibacteriano
WO2017216686A1 (en) 2016-06-16 2017-12-21 Novartis Ag 8,9-fused 2-oxo-6,7-dihydropyrido-isoquinoline compounds as antivirals
WO2017216685A1 (en) 2016-06-16 2017-12-21 Novartis Ag Pentacyclic pyridone compounds as antivirals
BR112018076519A8 (pt) 2016-06-20 2022-07-12 F Star Delta Ltd Moléculas de ligação que se ligam a pd-l1 e lag-3
JP7461741B2 (ja) 2016-06-20 2024-04-04 カイマブ・リミテッド 抗ｐｄ－ｌ１およびｉｌ－２サイトカイン
SG11201811184UA (en) 2016-06-20 2019-01-30 F Star Beta Ltd Lag -3 binding members
ES2915410T3 (es) 2016-06-23 2022-06-22 Jiangsu Hengrui Medicine Co Anticuerpo contra LAG-3, fragmento de unión a antígeno del mismo y aplicación farmacéutica del mismo
UA125216C2 (uk) 2016-06-24 2022-02-02 Інфініті Фармасьютікалз, Інк. Комбінована терапія
EP3507367A4 (en) 2016-07-05 2020-03-25 Aduro BioTech, Inc. CYCLIC DINUCLEOTID COMPOUNDS WITH INCLUDED NUCLEIC ACIDS AND USES THEREOF
EP4512829A3 (en) 2016-07-14 2025-06-11 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against tim3 and uses thereof
WO2018014001A1 (en) 2016-07-14 2018-01-18 Fred Hutchinson Cancer Research Center Multiple bi-specific binding domain constructs with different epitope binding to treat cancer
GB201612520D0 (en) 2016-07-19 2016-08-31 F-Star Beta Ltd Binding molecules
US20190292179A1 (en) 2016-07-21 2019-09-26 Bristol-Myers Squibb Company TGF Beta RECEPTOR ANTAGONISTS
MX2019001897A (es) * 2016-08-15 2019-08-29 Univ Hokkaido Nat Univ Corp Anticuerpo anti-lag-3.
CN109843322A (zh) 2016-08-26 2019-06-04 百时美施贵宝公司 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法
DK3507306T3 (da) * 2016-08-30 2025-10-20 Xencor Inc Bispecifikke immunmodulatoriske antistoffer, der binder co-stimulerende og checkpoint-receptorer
WO2018047109A1 (en) 2016-09-09 2018-03-15 Novartis Ag Polycyclic pyridone compounds as antivirals
EP3515936A1 (en) 2016-09-23 2019-07-31 Elstar Therapeutics, Inc. Multispecific antibody molecules comprising lambda and kappa light chains
JOP20190061A1 (ar) 2016-09-28 2019-03-26 Novartis Ag مثبطات بيتا-لاكتاماز
KR102576042B1 (ko) 2016-10-11 2023-09-07 아게누스 인코포레이티드 항-lag-3 항체 및 이의 사용 방법
BR112019006876A2 (pt) * 2016-10-13 2019-06-25 Symphogen As anticorpos e composições anti-lag-3
WO2018073753A1 (en) 2016-10-18 2018-04-26 Novartis Ag Fused tetracyclic pyridone compounds as antivirals
US10660909B2 (en) 2016-11-17 2020-05-26 Syntrix Biosystems Inc. Method for treating cancer using chemokine antagonists
US11279694B2 (en) 2016-11-18 2022-03-22 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Alvocidib prodrugs and their use as protein kinase inhibitors
WO2018102427A1 (en) 2016-11-29 2018-06-07 Boston Biomedical, Inc. Naphthofuran derivatives, preparation, and methods of use thereof
IL266918B2 (en) 2016-12-07 2024-03-01 Agenus Inc Anti-ctla-4 antibodies and methods of use thereof
WO2018132279A1 (en) 2017-01-05 2018-07-19 Bristol-Myers Squibb Company Tgf beta receptor antagonists
MX389798B (es) 2017-01-20 2025-03-20 Arcus Biosciences Inc Azolopirimidina para el tratamiento de trastornos relacionados con el cáncer.
CN110650974B (zh) 2017-02-10 2024-04-19 瑞泽恩制药公司 用于免疫-pet成像的放射性标记的抗-lag3抗体
WO2018151820A1 (en) 2017-02-16 2018-08-23 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules comprising a trimeric ligand and uses thereof
AU2018226298B2 (en) 2017-02-22 2022-02-17 I-Mab Biopharma (Hangzhou) Co., Ltd. Anti-LAG-3 antibodies and uses thereof
CA3058175A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
CN110709420A (zh) 2017-03-31 2020-01-17 戊瑞治疗有限公司 使用抗gitr抗体的癌症组合疗法
RU2761377C2 (ru) 2017-04-03 2021-12-07 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Иммуноконъюгаты антитела к pd-1 с мутантом il-2 или с il-15
JP2020513009A (ja) 2017-04-05 2020-04-30 シムフォゲン・アクティーゼルスカブＳｙｍｐｈｏｇｅｎ Ａ／Ｓ Ｐｄ−１、ｔｉｍ−３、およびｌａｇ−３を標的とする併用治療
BR112019018779A2 (pt) * 2017-04-05 2020-05-05 Hoffmann La Roche anticorpos isolados, ácido nucleico isolado, célula hospedeira, método para tratar um indivíduo tendo câncer e para produzir um anticorpo, formulação farmacêutica e uso do anticorpo
FI3606955T3 (fi) 2017-04-05 2025-01-08 Hoffmann La Roche Pd1:een ja lag3:een spesifisesti sitoutuvia bispesifisiä vasta-aineita
TWI788340B (zh) 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
CN110709422B (zh) 2017-04-19 2023-12-26 马伦戈治疗公司 多特异性分子及其用途
CA3059939A1 (en) 2017-04-21 2018-10-25 Kyn Therapeutics Indole ahr inhibitors and uses thereof
CN110621341A (zh) 2017-04-26 2019-12-27 百时美施贵宝公司 使二硫键还原最小化的抗体生产方法
AR111419A1 (es) 2017-04-27 2019-07-10 Novartis Ag Compuestos fusionados de indazol piridona como antivirales
KR102769634B1 (ko) * 2017-04-27 2025-02-19 테사로, 인코포레이티드 림프구 활성화 유전자-3 (lag-3)에 대한 항체 작용제 및 그의 용도
EA201992586A1 (ru) 2017-04-28 2020-03-03 Файв Прайм Терапьютикс, Инк. Способы лечения с помощью полипептидов внеклеточного домена cd80
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
EP4328241A3 (en) 2017-04-28 2024-06-05 Marengo Therapeutics, Inc. Multispecific molecules comprising a non-immunoglobulin heterodimerization domain and uses thereof
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
UY37718A (es) 2017-05-05 2018-11-30 Novartis Ag 2-quinolinonas triciclicas como agentes antibacteriales
US11339218B2 (en) 2017-05-10 2022-05-24 Zhejiang Shimai Pharmaceutical Co., Ltd. Human monoclonal antibodies against LAG3 and uses thereof
SG10202107880XA (en) 2017-05-12 2021-09-29 Harpoon Therapeutics Inc Mesothelin binding proteins
WO2018209049A1 (en) 2017-05-12 2018-11-15 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2018213377A1 (en) 2017-05-17 2018-11-22 Arcus Biosciences, Inc. Quinazoline-pyrazole derivatives for the treatment of cancer-related disorders
JP2020520923A (ja) 2017-05-17 2020-07-16 ボストン バイオメディカル， インコーポレイテッド がんを処置するための方法
AU2018277824A1 (en) 2017-05-30 2019-10-17 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of LAG-3 positive tumors
EP3630842A2 (en) 2017-05-30 2020-04-08 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising a combination of an anti-lag-3 antibody, a pd-1 pathway inhibitor, and an immunotherapeutic agent
MX2019012076A (es) * 2017-05-30 2019-12-09 Bristol Myers Squibb Co Composiciones que comprenden un anticuerpo anti gen-3 de activacion del linfocito (lag-3) o un anticuerpo anti-lag-3 y un anticuerpo anti muerte celular programada 1 (pd-1) o anti ligando 1 de muerte celular programada (pd-l1).
US20210246227A1 (en) 2017-05-31 2021-08-12 Elstar Therapeutics, Inc. Multispecific molecules that bind to myeloproliferative leukemia (mpl) protein and uses thereof
WO2018223004A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd20 and cd3
WO2018223002A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd 123 cd3
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
WO2018235056A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag Il-1beta binding antibodies for use in treating cancer
EP3642240A1 (en) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis AG Antibody molecules to cd73 and uses thereof
KR20200021087A (ko) 2017-06-22 2020-02-27 노파르티스 아게 Cd73에 대한 항체 분자 및 이의 용도
WO2018234879A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag Il-1beta binding antibodies for use in treating cancer
JP2020525483A (ja) 2017-06-27 2020-08-27 ノバルティス アーゲー 抗ｔｉｍ−３抗体のための投与レジメンおよびその使用
IL271601B2 (en) 2017-06-30 2024-05-01 Bristol Myers Squibb Co Amorphous and crystalline forms of ido inhibitors
US10844121B2 (en) * 2017-07-13 2020-11-24 Nanjing Leads Biolabs Co., Ltd Antibodies binding LAG-3 and uses thereof
CN111163798A (zh) 2017-07-20 2020-05-15 诺华股份有限公司 用于抗lag-3抗体的给药方案及其用途
JP7186764B2 (ja) 2017-07-28 2022-12-09 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド
JP7670481B2 (ja) 2017-08-04 2025-04-30 バイスクルテクス・リミテッド Ｃｄ１３７に対して特異的な二環式ペプチドリガンド
WO2019035938A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Elstar Therapeutics, Inc. MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF
KR20200051646A (ko) 2017-08-17 2020-05-13 이케나 온콜로지, 인코포레이티드 Ahr 억제제 및 이의 용도
TWI785098B (zh) 2017-08-18 2022-12-01 開曼群島商科賽睿生命科學公司 Tg02之多晶型
KR20200042937A (ko) 2017-08-30 2020-04-24 페인스 테라퓨틱스 인코포레이티드 항-lag-3 항체 및 이의 용도
US10953032B2 (en) 2017-08-31 2021-03-23 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
JP7316263B2 (ja) 2017-08-31 2023-07-27 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド
CN111051327B (zh) 2017-08-31 2023-11-03 百时美施贵宝公司 作为抗癌剂的环二核苷酸
JP7196160B2 (ja) 2017-09-12 2022-12-26 スミトモ ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド Ｍｃｌ－１阻害剤アルボシジブを用いた、ｂｃｌ－２阻害剤に対して非感受性である癌の治療レジメン
WO2019060693A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN LIGANDS AND USES THEREOF
CA3076613A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
TW201927336A (zh) 2017-10-05 2019-07-16 日商第一三共股份有限公司 細胞毒性ｔ細胞耗竭用組成物
WO2019074822A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
US11203592B2 (en) 2017-10-09 2021-12-21 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3694867B1 (en) 2017-10-10 2025-12-24 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
WO2019075090A1 (en) 2017-10-10 2019-04-18 Tilos Therapeutics, Inc. ANTI-LAP ANTIBODIES AND USES THEREOF
PL3694529T3 (pl) 2017-10-13 2024-12-16 Harpoon Therapeutics, Inc. Trójswoiste białka i sposoby zastosowania
IL315737A (en) 2017-10-13 2024-11-01 Harpoon Therapeutics Inc B-cell maturation antigen-binding proteins
JP2020536894A (ja) 2017-10-15 2020-12-17 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 腫瘍処置法
EP3697801B1 (en) 2017-10-16 2024-11-20 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
WO2019077062A1 (en) 2017-10-18 2019-04-25 Vivia Biotech, S.L. C-CELLS ACTIVATED BY BIT
EP3700933A1 (en) 2017-10-25 2020-09-02 Novartis AG Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
KR20200074214A (ko) 2017-11-01 2020-06-24 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 암을 치료하는데 사용하기 위한 면역자극 효능작용 항체
JP7167146B2 (ja) 2017-11-06 2022-11-08 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｈｐｋ１阻害剤として有用なイソフラノン化合物
RU2020119578A (ru) 2017-11-16 2021-12-17 Новартис Аг Комбинированные терапии
CN111315749A (zh) 2017-11-17 2020-06-19 诺华股份有限公司 新颖的二氢异噁唑化合物及其在治疗乙型肝炎中的用途
SG11202005005YA (en) 2017-11-30 2020-06-29 Novartis Ag Bcma-targeting chimeric antigen receptor, and uses thereof
JP7348899B2 (ja) 2017-12-08 2023-09-21 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド 多重特異性分子及びその使用
WO2019121906A1 (en) 2017-12-19 2019-06-27 F-Star Beta Limited Specific pd-l1 binding sequences inserted in a ch3 domain
US11234977B2 (en) 2017-12-20 2022-02-01 Novartis Ag Fused tricyclic pyrazolo-dihydropyrazinyl-pyridone compounds as antivirals
AU2018391217A1 (en) 2017-12-22 2020-07-09 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. LAG-3 antibody pharmaceutical composition and use thereof
IL315310A (en) 2017-12-26 2024-10-01 Kymera Therapeutics Inc Irak degraders and uses thereof
WO2019129136A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
CN109970856B (zh) 2017-12-27 2022-08-23 信达生物制药(苏州)有限公司 抗lag-3抗体及其用途
CN109970857B (zh) 2017-12-27 2022-09-30 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
JP7284759B2 (ja) 2017-12-27 2023-05-31 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗ｃｄ４０抗体およびその使用
WO2019129137A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗lag-3抗体及其用途
WO2019136112A1 (en) 2018-01-05 2019-07-11 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3737408A1 (en) 2018-01-08 2020-11-18 Novartis AG Immune-enhancing rnas for combination with chimeric antigen receptor therapy
WO2019139987A1 (en) 2018-01-09 2019-07-18 Elstar Therapeutics, Inc. Calreticulin binding constructs and engineered t cells for the treatment of diseases
US11485743B2 (en) 2018-01-12 2022-11-01 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
CN120192415A (zh) 2018-01-12 2025-06-24 百时美施贵宝公司 抗tim3抗体及其用途
EP3737675A4 (en) 2018-01-12 2022-01-05 Kymera Therapeutics, Inc. Crbn ligands and uses thereof
US11655295B2 (en) 2018-01-18 2023-05-23 Sichuan Kelun-Biotech Biopharmaceutical Co., Ltd. Anti-LAG-3 antibody and use thereof
IL312674A (en) 2018-01-29 2024-07-01 Merck Patent Gmbh GCN2 inhibitors and uses thereof
EP3746075B1 (en) 2018-01-29 2025-09-03 Merck Patent GmbH Gcn2 inhibitors and uses thereof
US20200354457A1 (en) 2018-01-31 2020-11-12 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific antibodies comprising an antigen-binding site binding to lag3
EP3746470A1 (en) 2018-01-31 2020-12-09 F. Hoffmann-La Roche AG Stabilized immunoglobulin domains
AU2019215031B2 (en) 2018-01-31 2025-10-09 Novartis Ag Combination therapy using a chimeric antigen receptor
US20200399383A1 (en) 2018-02-13 2020-12-24 Novartis Ag Chimeric antigen receptor therapy in combination with il-15r and il15
US10519187B2 (en) 2018-02-13 2019-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
JP7417527B2 (ja) 2018-02-16 2024-01-18 アーカス バイオサイエンシズ インコーポレイティド アゾロピリミジン化合物による投薬
WO2019165315A1 (en) 2018-02-23 2019-08-29 Syntrix Biosystems Inc. Method for treating cancer using chemokine antagonists alone or in combination
JP2021514953A (ja) 2018-02-23 2021-06-17 バイスクルテクス・リミテッド 多量体二環式ペプチドリガンド
EP3759110A1 (en) 2018-02-28 2021-01-06 Novartis AG Indole-2-carbonyl compounds and their use for the treatment of hepatitis b
WO2019165982A1 (en) 2018-02-28 2019-09-06 WuXi Biologics Ireland Limited Monoclonal antibody against human lag-3, method for preparing same, and use thereof
CN115057931B (zh) * 2018-02-28 2025-08-22 广州誉衡生物科技有限公司 抗人lag-3抗体及其用途
CA3091805A1 (en) 2018-03-05 2019-09-12 Arcus Biosciences, Inc. Arginase inhibitors
WO2019173587A1 (en) 2018-03-08 2019-09-12 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
US20210009711A1 (en) 2018-03-14 2021-01-14 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules and uses thereof
WO2019178362A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
EP3768720A4 (en) * 2018-03-20 2022-01-05 Wuxi Biologics Ireland Limited NEW ANTI-BODY ANTI-LAG-3 POLYPEPTIDE
KR20250154550A (ko) 2018-03-21 2025-10-28 파이브 프라임 테라퓨틱스, 인크. 산성 pH에서 VISTA에 결합하는 항체
PE20210665A1 (es) 2018-03-23 2021-03-31 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos contra mica y/o micb y sus usos
EP3774911A1 (en) 2018-03-30 2021-02-17 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
JP7104458B2 (ja) 2018-04-02 2022-07-21 上海博威生物医薬有限公司 リンパ球活性化遺伝子－３（ｌａｇ－３）結合抗体およびその使用
CN110343178B (zh) * 2018-04-03 2022-07-22 上海开拓者生物医药有限公司 抗人lag-3单克隆抗体及其应用
US20210147547A1 (en) 2018-04-13 2021-05-20 Novartis Ag Dosage Regimens For Anti-Pd-L1 Antibodies And Uses Thereof
WO2019204257A1 (en) 2018-04-16 2019-10-24 Arrys Therapeutics, Inc. Ep4 inhibitors and use thereof
IL310398A (en) 2018-04-18 2024-03-01 Xencor Inc Proteins from heterodimeric il-15/il-15rα fc and their uses
JP2021521784A (ja) 2018-04-18 2021-08-30 ゼンコア インコーポレイテッド ＩＬ−１５／ＩＬ−１５ＲａＦｃ融合タンパク質とＰＤ−１抗原結合ドメインを含むＰＤ−１標的化ヘテロダイマー融合タンパク質およびそれらの使用
US12037323B2 (en) 2018-05-03 2024-07-16 Bristol-Myers Squibb Company Uracil derivatives as Mer-AXL inhibitors
TWI869346B (zh) 2018-05-30 2025-01-11 瑞士商諾華公司 Ｅｎｔｐｄ２抗體、組合療法、及使用該等抗體和組合療法之方法
WO2019232244A2 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
US20210205449A1 (en) 2018-06-01 2021-07-08 Novartis Ag Dosing of a bispecific antibody that bind cd123 and cd3
JP7398396B2 (ja) 2018-06-01 2023-12-14 ノバルティス アーゲー Ｂｃｍａに対する結合分子及びその使用
JP2021527082A (ja) 2018-06-11 2021-10-11 イェール ユニバーシティーＹａｌｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ 新規な免疫チェックポイント阻害剤
CN110606892B (zh) * 2018-06-14 2023-09-26 华博生物医药技术（上海）有限公司 一种高亲和力高生物活性的lag-3抗体及其应用
CN110615840A (zh) * 2018-06-19 2019-12-27 信达生物制药(苏州)有限公司 全人源的抗lag-3抗体及其应用
US11180531B2 (en) 2018-06-22 2021-11-23 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands specific for Nectin-4
PL3814347T3 (pl) 2018-06-27 2023-07-24 Bristol-Myers Squibb Company Związki naftyrydynonu użyteczne jako aktywatory komórek t
WO2020006018A1 (en) 2018-06-27 2020-01-02 Bristol-Myers Squibb Company Substituted naphthyridinone compounds useful as t cell activators
JP7003295B2 (ja) 2018-06-29 2022-01-20 ワイ－バイオロジクス・インコーポレイテッド Ｌａｇ－３に特異的に結合する単クローン抗体及びその用途
AU2019297451A1 (en) 2018-07-03 2021-01-28 Marengo Therapeutics, Inc. Anti-TCR antibody molecules and uses thereof
WO2020010227A1 (en) 2018-07-06 2020-01-09 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
US11292792B2 (en) 2018-07-06 2022-04-05 Kymera Therapeutics, Inc. Tricyclic CRBN ligands and uses thereof
MY201995A (en) 2018-07-09 2024-03-28 Five Prime Therapeutics Inc Antibodies binding to ilt4
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
PL3820573T3 (pl) 2018-07-10 2024-02-19 Novartis Ag Pochodne 3-(5-hydroksy-1-oksoizoindolin-2-ylo)piperydyno-2,6-dionu i ich zastosowanie w leczeniu chorób zależnych od palca cynkowego z rodziny ikaros 2 (ikzf2)
JP7700036B2 (ja) 2018-07-11 2025-06-30 ファイヴ プライム セラピューティクス インク 酸性ｐＨでＶＩＳＴＡと結合する抗体
AU2019301204B2 (en) 2018-07-12 2025-10-23 Invox Pharma Limited Antibody molecules that bind PD-L1 and CD137
GB201811410D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd OX40 Binding molecules
MX2021000399A (es) 2018-07-12 2021-05-27 F Star Therapeutics Ltd Moleculas de anticuerpo que se unen a cd137 y ox40.
GB201811415D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd Anti-Mesothelin Anti bodies
GB201811403D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd Antibody molecules
GB201811450D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Delta Ltd Mesothelin and CD137 binding molecules
GB201811408D0 (en) 2018-07-12 2018-08-29 F Star Beta Ltd CD137 Binding Molecules
CN113015523B (zh) 2018-07-18 2024-07-16 艾库斯生物科学有限公司 偶氮嘧啶化合物的固体形式
MX2021000745A (es) 2018-07-20 2021-03-26 Surface Oncology Inc Composiciones anti-cd112r y metodos.
WO2020023355A1 (en) 2018-07-23 2020-01-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US12145927B2 (en) 2018-07-23 2024-11-19 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2020021465A1 (en) 2018-07-25 2020-01-30 Advanced Accelerator Applications (Italy) S.R.L. Method of treatment of neuroendocrine tumors
AU2019309849A1 (en) * 2018-07-26 2021-03-18 Bristol-Myers Squibb Company LAG-3 combination therapy for the treatment of cancer
CN110172099B (zh) * 2018-08-16 2020-03-03 上海健信生物医药科技有限公司 抗lag-3人源化单克隆抗体分子，抗原结合片段及其医药用途
US11253525B2 (en) 2018-08-29 2022-02-22 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US10959986B2 (en) 2018-08-29 2021-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3846793B1 (en) 2018-09-07 2024-01-24 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
EP3849979A1 (en) 2018-09-12 2021-07-21 Novartis AG Antiviral pyridopyrazinedione compounds
AU2019343251B2 (en) 2018-09-21 2022-06-09 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Novel interleukin 2 and use thereof
EP3854805A4 (en) 2018-09-21 2022-08-24 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. NOVEL INTERLEUKIN 2 AND ITS USE
US12195544B2 (en) 2018-09-21 2025-01-14 Harpoon Therapeutics, Inc. EGFR binding proteins and methods of use
CN113286817B (zh) 2018-09-25 2025-01-28 哈普恩治疗公司 Dll3结合蛋白及使用方法
EP3856350A1 (en) 2018-09-27 2021-08-04 Marengo Therapeutics, Inc. Csf1r/ccr2 multispecific antibodies
AU2019350592B2 (en) 2018-09-29 2024-09-26 Novartis Ag Process of manufacture of a compound for inhibiting the activity of SHP2
SG11202103192RA (en) 2018-10-03 2021-04-29 Xencor Inc Il-12 heterodimeric fc-fusion proteins
JP2022504839A (ja) 2018-10-10 2022-01-13 ティロス・セラピューティクス・インコーポレイテッド 抗ｌａｐ抗体変異体及びその使用
CA3116188A1 (en) 2018-10-12 2020-04-16 Xencor, Inc. Pd-1 targeted il-15/il-15ralpha fc fusion proteins and uses in combination therapies thereof
ES2986921T3 (es) * 2018-10-19 2024-11-13 Bristol Myers Squibb Co Terapia combinada para el melanoma
US20230053449A1 (en) 2018-10-31 2023-02-23 Novartis Ag Dc-sign antibody drug conjugates
CA3120196A1 (en) 2018-11-16 2020-05-22 Arcus Biosciences, Inc. Inhibitors of arg1 and/or arg2
US11274150B2 (en) 2018-11-16 2022-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Anti-human natural killer cell inhibitory receptor group 2A protein (NKG2A) antibodies
JP7623943B2 (ja) 2018-11-30 2025-01-29 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｉｒａｋ分解剤およびそれらの使用
CA3119807A1 (en) 2018-12-04 2020-06-11 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Cdk9 inhibitors and polymorphs thereof for use as agents for treatment of cancer
GB201820295D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for MT1-MMP
GB201820288D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicycle Tx Ltd Bicycle peptide ligaands specific for MT1-MMP
GB201820325D0 (en) 2018-12-13 2019-01-30 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for psma
CN113271945A (zh) 2018-12-20 2021-08-17 诺华股份有限公司 包含3-(1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮衍生物的给药方案和药物组合
EP3670659A1 (en) 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Biomarkers, and uses in treatment of viral infections, inflammations, or cancer
US11618776B2 (en) 2018-12-20 2023-04-04 Xencor, Inc. Targeted heterodimeric Fc fusion proteins containing IL-15/IL-15RA and NKG2D antigen binding domains
KR20210108422A (ko) 2018-12-21 2021-09-02 노파르티스 아게 IL-1β 결합 항체의 용도
IL282838B2 (en) 2018-12-21 2025-05-01 Valerio Therapeutics Conjugated nucleic acid molecules and their uses
EP3897849A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 BicycleTx Limited Bicyclic peptide ligands specific for pd-l1
US20220025036A1 (en) 2018-12-21 2022-01-27 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
WO2020128637A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1 binding antibodies in the treatment of a msi-h cancer
CN113227137A (zh) 2018-12-21 2021-08-06 诺华股份有限公司 IL-1β抗体在骨髓增生异常综合征的治疗或预防中的用途
CA3127502A1 (en) 2019-02-12 2020-08-20 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Formulations comprising heterocyclic protein kinase inhibitors
JP7483732B2 (ja) 2019-02-15 2024-05-15 ノバルティス アーゲー ３－（１－オキソ－５－（ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン誘導体及びその使用
EP3924055B1 (en) 2019-02-15 2024-04-03 Novartis AG Substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
AU2020224681A1 (en) 2019-02-21 2021-09-16 Marengo Therapeutics, Inc. Antibody molecules that bind to NKp30 and uses thereof
GB2599228B (en) 2019-02-21 2024-02-07 Marengo Therapeutics Inc Multifunctional molecules that bind to T cell related cancer cells and uses thereof
CN111620949A (zh) 2019-02-28 2020-09-04 三生国健药业（上海）股份有限公司 结合人lag-3的抗体、其制备方法和用途
AU2020239048B2 (en) 2019-03-12 2025-10-16 Arcus Biosciences, Inc. Treatment of oncogene-driven cancers
WO2020187998A1 (en) 2019-03-19 2020-09-24 Fundació Privada Institut D'investigació Oncològica De Vall Hebron Combination therapy with omomyc and an antibody binding pd-1 or ctla-4 for the treatment of cancer
US11793802B2 (en) 2019-03-20 2023-10-24 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Treatment of acute myeloid leukemia (AML) with venetoclax failure
CA3133460A1 (en) 2019-03-22 2020-10-01 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Compositions comprising pkm2 modulators and methods of treatment using the same
AU2020248002A1 (en) 2019-03-26 2021-10-21 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule degraders of STAT3
JP7743309B2 (ja) 2019-03-29 2025-09-24 アーカス バイオサイエンシズ インコーポレイティド 同定されたアデノシンフィンガープリントを利用したがんの処置
EP3947403A1 (en) 2019-03-29 2022-02-09 The Regents Of The University Of Michigan Stat3 protein degraders
EP3946462A1 (en) 2019-04-02 2022-02-09 BicycleTX Limited Bicycle toxin conjugates and uses thereof
MX2021012216A (es) 2019-04-05 2022-01-24 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de transductores de señal y activadores de transcripción (stat) y usos de los mismos.
EP3725370A1 (en) 2019-04-19 2020-10-21 ImmunoBrain Checkpoint, Inc. Modified anti-pd-l1 antibodies and methods and uses for treating a neurodegenerative disease
JP2022532490A (ja) 2019-05-13 2022-07-15 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 癌の治療における有効性の増強のためのｐｄ－１阻害剤とｌａｇ－３阻害剤の組み合わせ
US20230295087A1 (en) 2019-05-13 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
WO2020231713A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
KR20220016155A (ko) 2019-05-30 2022-02-08 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 면역-종양학 (i-o) 요법에 적합한 대상체를 확인하는 방법
EP3977132A1 (en) 2019-05-30 2022-04-06 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and combination therapy
CN114174538A (zh) 2019-05-30 2022-03-11 百时美施贵宝公司 适合于免疫肿瘤学疗法的多肿瘤基因特征
CA3141826A1 (en) 2019-05-31 2020-12-03 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
EP3983084A1 (en) 2019-06-12 2022-04-20 Vanderbilt University Amino acid transport inhibitors and the uses thereof
AU2020291936A1 (en) 2019-06-12 2022-02-03 Vanderbilt University Dibenzylamines as amino acid transport inhibitors
US20220251188A1 (en) * 2019-06-24 2022-08-11 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Formulation comprising anti-lag-3 antibody, method for preparing same and use thereof
BR112021026334A2 (pt) 2019-06-27 2022-05-10 Medstar Health Macrófagos ativados por hdac6, composições, e usos dos mesmos
WO2021003417A1 (en) 2019-07-03 2021-01-07 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Tyrosine kinase non-receptor 1 (tnk1) inhibitors and uses thereof
IT201900011676A1 (it) 2019-07-12 2021-01-12 St Superiore Di Sanita Anticorpo ricombinante umano contro il recettore di membrana LAG3, suoi usi medici e diagnostici.
JP7738909B2 (ja) 2019-07-16 2025-09-16 ザ・リージェンツ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・ミシガン Ｅｅｄ阻害剤としてのイミダゾピリミジンおよびその使用
WO2021026179A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
WO2021024020A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer
CN114641337A (zh) 2019-08-27 2022-06-17 密歇根大学董事会 Cereblon e3连接酶抑制剂
AR119821A1 (es) 2019-08-28 2022-01-12 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de piridopirimidinonilo sustituidos útiles como activadores de células t
US12215105B2 (en) 2019-09-13 2025-02-04 Nimbus Saturn, Inc. HPK1 antagonists and uses thereof
CN114502590A (zh) 2019-09-18 2022-05-13 诺华股份有限公司 Entpd2抗体、组合疗法、以及使用这些抗体和组合疗法的方法
MX2022003204A (es) 2019-09-19 2022-04-18 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos de union al supresor de activacion de linfocitos t que contiene inmunoglobulina con dominio v (vista) a ph acido.
US20220380368A1 (en) 2019-09-19 2022-12-01 The Regents Of The University Of Michigan Spirocyclic androgen receptor protein degraders
BR112022004316A2 (pt) 2019-09-22 2022-06-21 Bristol Myers Squibb Co Caracterização espacial quantitativa para terapia de antagonista lag-3
TW202535873A (zh) 2019-09-26 2025-09-16 瑞士商諾華公司 抗病毒吡唑并吡啶酮化合物
CN115916233A (zh) 2019-10-03 2023-04-04 Xencor股份有限公司 靶向IL-12异源二聚体Fc融合蛋白
JP2022552282A (ja) * 2019-10-09 2022-12-15 エスティーキューブ アンド カンパニー グリコシル化ｌａｇ３に対して特異的な抗体およびその使用方法
TW202128757A (zh) 2019-10-11 2021-08-01 美商建南德克公司 具有改善之特性的 PD-1 標靶 IL-15/IL-15Rα FC 融合蛋白
TW202128191A (zh) 2019-10-21 2021-08-01 瑞士商諾華公司 Tim-3抑制劑及其用途
MX2022004766A (es) 2019-10-21 2022-05-16 Novartis Ag Terapias combinadas con venetoclax e inhibidores de tim-3.
EP4054591A1 (en) 2019-11-04 2022-09-14 Astrazeneca AB Combination therapy for treating cancer
KR20220093349A (ko) 2019-11-08 2022-07-05 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 흑색종에 대한 lag-3 길항제 요법
JP7629459B2 (ja) 2019-11-19 2025-02-13 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｈｅｌｉｏｓタンパク質の阻害剤として有用な化合物
AU2020394424A1 (en) 2019-11-26 2022-06-16 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic carbazole derivatives and uses thereof
CA3159071A1 (en) 2019-11-26 2021-06-03 Tamar I. ROSENBAUM Salts/cocrystals of (r)-n-(4-chlorophenyl)-2-((1s,4s)-4-(6-fluoroquinolin-4-yl)cyclohexyl)propanamide
KR20220145325A (ko) 2019-12-17 2022-10-28 카이메라 쎄라퓨틱스 인코포레이티드 Irak 분해제 및 이의 용도
US11591332B2 (en) 2019-12-17 2023-02-28 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK degraders and uses thereof
TW202135859A (zh) 2019-12-20 2021-10-01 瑞士商諾華公司 組合療法
WO2021133752A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Bristol-Myers Squibb Company Substituted heteroaryl compounds useful as t cell activators
WO2021133920A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca degraders and uses thereof
KR20220120624A (ko) 2019-12-23 2022-08-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 T 세포 활성화제로서 유용한 치환된 피페라진 유도체
AR120823A1 (es) 2019-12-23 2022-03-23 Bristol Myers Squibb Co Compuestos bicíclicos sustituidos útiles como activadores de células t
CN115103841B (zh) 2019-12-23 2024-12-27 百时美施贵宝公司 可用作t细胞激活剂的经取代的喹啉酮基哌嗪化合物
BR112022012179A2 (pt) 2019-12-23 2022-09-06 Bristol Myers Squibb Co Compostos de quinazolina substituída úteis como ativadores de célula t
JP2023509708A (ja) 2020-01-03 2023-03-09 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド 抗ｔｃｒ抗体分子およびその使用
EP4084821A4 (en) 2020-01-03 2024-04-24 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to cd33 and uses thereof
CA3166898A1 (en) 2020-01-06 2021-07-15 Hifibio (Hk) Limited Anti-tnfr2 antibody and uses thereof
CN115210261B (zh) 2020-01-07 2025-07-18 高诚生物医药公司 抗半乳糖凝集素-9抗体及其用途
JP2023510918A (ja) 2020-01-15 2023-03-15 ブループリント メディシンズ コーポレイション Ｍａｐ４ｋ１阻害剤
BR112022012310A2 (pt) 2020-01-17 2022-09-06 Novartis Ag Combinação compreendendo um inibidor de tim-3 e um agente hipometilante para uso no tratamento de síndrome mielodisplásica ou leucemia mielomonocítica crônica
CN111205371B (zh) * 2020-01-22 2022-03-29 北京吉尔麦迪生物医药科技有限公司 一种抗淋巴细胞激活基因3的抗体及应用
WO2021171264A1 (en) 2020-02-28 2021-09-02 Novartis Ag Dosing of a bispecific antibody that binds cd123 and cd3
US11753403B2 (en) 2020-03-03 2023-09-12 PIC Therapeutics, Inc. EIF4E inhibitors and uses thereof
JP2023516459A (ja) 2020-03-09 2023-04-19 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 増強されたアゴニスト活性を有するｃｄ４０に対する抗体
WO2021188769A1 (en) 2020-03-19 2021-09-23 Arcus Biosciences, Inc. Tetralin and tetrahydroquinoline compounds as inhibitors of hif-2alpha
WO2021188948A1 (en) 2020-03-19 2021-09-23 Kymera Therapeutics, Inc. Mdm2 degraders and uses thereof
TW202140441A (zh) 2020-03-23 2021-11-01 美商必治妥美雅史谷比公司 經取代之側氧基異吲哚啉化合物
US20230159573A1 (en) 2020-03-26 2023-05-25 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule stat protein degraders
CN115666648A (zh) * 2020-04-03 2023-01-31 索伦托药业有限公司 结合lag3的工程化抗体
EP4132971A1 (en) 2020-04-09 2023-02-15 Merck Sharp & Dohme LLC Affinity matured anti-lap antibodies and uses thereof
US20230192867A1 (en) 2020-05-15 2023-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to garp
AR122493A1 (es) 2020-06-02 2022-09-14 Arcus Biosciences Inc Anticuerpos anti-tigit
WO2021247897A1 (en) 2020-06-03 2021-12-09 Kymera Therapeutics, Inc. Deuterated irak degraders and uses thereof
TW202210483A (zh) 2020-06-03 2022-03-16 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑之結晶型
TW202214857A (zh) 2020-06-19 2022-04-16 法商昂席歐公司 新型結合核酸分子及其用途
WO2021258010A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime compounds useful as t cell activators
KR20230027056A (ko) 2020-06-23 2023-02-27 노파르티스 아게 3-(1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 유도체를 포함하는 투약 요법
JP2023531230A (ja) * 2020-06-30 2023-07-21 アークス セラピューティクス エーエス 全身性硬化症の治療のための抗ｓ１００ａ４抗体
KR20230035576A (ko) 2020-07-07 2023-03-14 비온테크 에스이 Hpv 양성 암 치료용 rna
WO2022011205A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 The Regents Of The University Of Michigan Androgen receptor protein degraders
US20230257365A1 (en) 2020-07-10 2023-08-17 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule androgen receptor protein degraders
JP2023536462A (ja) 2020-07-30 2023-08-25 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド 変異体リンパ腫を処置する方法
US20230271940A1 (en) 2020-08-03 2023-08-31 Novartis Ag Heteroaryl substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
IL300537A (en) 2020-08-10 2023-04-01 Gv20 Therapeutics Llc Compositions and methods for treating autoimmune diseases and cancer by targeting IGSF8
KR20230050389A (ko) 2020-08-13 2023-04-14 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Il-2를 관심 표적 세포로 재지시하는 방법
KR20230074721A (ko) 2020-08-17 2023-05-31 바이사이클티엑스 리미티드 Nectin-4에 특이적인 이환 콘쥬게이트 및 이의 용도
KR20230074487A (ko) 2020-08-26 2023-05-30 마렝고 테라퓨틱스, 인크. Trbc1 또는 trbc2를 검출하는 방법
MX2023002332A (es) 2020-08-28 2023-03-21 Bristol Myers Squibb Co Terapia con antagonistas del gen 3 de activacion de linfocitos (lag-3) para carcinoma hepatocelular.
CA3190660A1 (en) 2020-08-31 2022-03-03 George C. Lee Cell localization signature and immunotherapy
US20230338587A1 (en) 2020-08-31 2023-10-26 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
WO2022043557A1 (en) 2020-08-31 2022-03-03 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
WO2022072820A1 (en) 2020-10-02 2022-04-07 Dracen Pharmaceuticals, Inc. Lyophilized composition comprising (s)-isopropyl 2-((s)-2- acetamido-3-(1h-indol-3-yl)propanamido)-6-diazo-5- oxohexanoate for subcutaneous administration and the use thereof
CA3198456A1 (en) 2020-10-14 2022-04-21 Five Prime Therapeutics, Inc. Anti-c-c chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies and methods of use thereof
CA3196496A1 (en) 2020-10-23 2022-04-28 Laurence David TOMS Lag-3 antagonist therapy for lung cancer
IL302569A (en) 2020-11-06 2023-07-01 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
EP4255895A1 (en) 2020-12-02 2023-10-11 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
WO2022120353A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
WO2022117572A2 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Oncurious Nv An ltbr agonist in combination therapy against cancer
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
WO2022125497A1 (en) 2020-12-08 2022-06-16 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Eganelisib for use in the treatment of pd-l1 negative cancer
CN114621344B (zh) * 2020-12-10 2022-08-30 北京东方百泰生物科技股份有限公司 一种抗lag-3单克隆抗体的纯化方法
TW202237119A (zh) 2020-12-10 2022-10-01 美商住友製藥腫瘤公司 Ａｌｋ﹘５抑制劑和彼之用途
JP2024501207A (ja) 2020-12-16 2024-01-11 ゴッサマー バイオ サービシズ、インコーポレイテッド Ｔ細胞活性化剤として有用な化合物
WO2022135667A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Therapeutic rna for treating cancer
WO2022135666A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 BioNTech SE Treatment schedule for cytokine proteins
TW202245808A (zh) 2020-12-21 2022-12-01 德商拜恩迪克公司 用於治療癌症之治療性ｒｎａ
CA3196999A1 (en) 2020-12-28 2022-07-07 Masano HUANG Methods of treating tumors
SMT202500208T1 (it) 2020-12-28 2025-07-22 Bristol Myers Squibb Co Composizioni anticorpali e metodi per il loro uso
AR124547A1 (es) 2020-12-30 2023-04-05 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de irak y sus usos
US20250186539A2 (en) 2021-01-11 2025-06-12 Bicycletx Limited Methods for treating cancer
CA3206549A1 (en) 2021-01-29 2022-08-04 Frederick G. Vogt Methods of making modified tumor infiltrating lymphocytes and their use in adoptive cell therapy
CA3210196A1 (en) 2021-01-29 2022-08-04 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods of treating cancer with kinase inhibitors
BR112023015590A2 (pt) 2021-02-02 2023-10-17 Liminal Biosciences Ltd Antagonistas de gpr84 e usos dos mesmos
US12378229B2 (en) 2021-02-02 2025-08-05 Liminal Biosciences Limited GPR84 antagonists and uses thereof
WO2022169921A1 (en) 2021-02-04 2022-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Benzofuran compounds as sting agonists
US20240368150A1 (en) 2021-02-12 2024-11-07 Hoffmann-La Roche Inc. Bicyclic tetrahydroazepine derivatives for the treatment of cancer
WO2022174253A1 (en) 2021-02-12 2022-08-18 Nimbus Saturn, Inc. Hpk1 antagonists and uses thereof
MX2023009527A (es) 2021-02-15 2023-08-24 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de la cinasa 4 asociada al receptor de interleucina 1 (irak4) y usos de los mismos.
US11773103B2 (en) 2021-02-15 2023-10-03 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK4 degraders and uses thereof
US20240166647A1 (en) 2021-03-03 2024-05-23 The Regents Of The University Of Michigan Cereblon Ligands
US20240190874A1 (en) 2021-03-03 2024-06-13 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule degraders of androgen receptor
EP4301756A4 (en) 2021-03-05 2025-02-26 Nimbus Saturn, Inc. HPK1 ANTAGONISTS AND THEIR USES
JP2024510176A (ja) 2021-03-08 2024-03-06 ブループリント メディシンズ コーポレイション Ｍａｐ４ｋ１阻害剤
US11918582B2 (en) 2021-03-15 2024-03-05 Rapt Therapeutics, Inc. Pyrazole pyrimidine compounds and uses thereof
JP2024514245A (ja) 2021-03-29 2024-03-29 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド チェックポイント阻害剤療法とｃａｒ ｔ細胞療法との組合せを用いた投薬および処置のための方法
US12071442B2 (en) 2021-03-29 2024-08-27 Nimbus Saturn, Inc. Substituted pyrrolo[3,4-c]pyridines as HPK1 antagonists
EP4314068A1 (en) 2021-04-02 2024-02-07 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
EP4320125A1 (en) 2021-04-05 2024-02-14 Bristol-Myers Squibb Company Pyridinyl substituted oxoisoindoline compounds for the treatment of cancer
IL307343A (en) 2021-04-06 2023-11-01 Bristol Myers Squibb Co Pyridinyl substituted oxisoisoindoline compounds
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
AU2022253474A1 (en) 2021-04-08 2023-11-16 Board Of Regents, The University Of Texas System Compounds and methods for theranostic targeting of parp activity
WO2022216993A2 (en) 2021-04-08 2022-10-13 Marengo Therapeutics, Inc. Multifuntional molecules binding to tcr and uses thereof
BR112023020781A2 (pt) 2021-04-09 2023-12-19 Nimbus Clio Inc Moduladores de cbl-b e usos dos mesmos
CA3213079A1 (en) 2021-04-13 2022-10-20 Kristin Lynne ANDREWS Amino-substituted heterocycles for treating cancers with egfr mutations
EP4323066A1 (en) 2021-04-16 2024-02-21 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
AR125798A1 (es) 2021-05-07 2023-08-16 Kymera Therapeutics Inc Degradadores cdk2 y usos de los mismos
US20240285740A1 (en) 2021-05-12 2024-08-29 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for treating cancer
AR125874A1 (es) 2021-05-18 2023-08-23 Novartis Ag Terapias de combinación
CN117295741A (zh) 2021-05-21 2023-12-26 艾库斯生物科学有限公司 Axl化合物
WO2022246179A1 (en) 2021-05-21 2022-11-24 Arcus Biosciences, Inc. Axl inhibitor compounds
AU2022312698A1 (en) 2021-07-13 2024-01-25 BioNTech SE Multispecific binding agents against cd40 and cd137 in combination therapy for cancer
JP2024527608A (ja) 2021-07-14 2024-07-25 ブループリント メディシンズ コーポレイション Ｍａｐ４ｋ１阻害剤としての複素環化合物
TW202321238A (zh) 2021-07-15 2023-06-01 美商纜圖藥品公司 Ｍａｐ４ｋ１抑制劑
CA3229560A1 (en) 2021-08-25 2023-03-02 Christopher L. Vandeusen Eif4e inhibitors and uses thereof
JP2024532276A (ja) 2021-08-25 2024-09-05 ピク セラピューティクス， インコーポレイテッド ｅＩＦ４Ｅ阻害剤及びその使用
WO2023039089A1 (en) 2021-09-08 2023-03-16 Twentyeight-Seven, Inc. Papd5 and/or papd7 inhibiting 4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid derivatives
MX2024003936A (es) * 2021-09-29 2024-06-28 Akeso Biopharma Inc Anticuerpo anti-lag3, composicion farmaceutica y uso.
TW202333802A (zh) 2021-10-11 2023-09-01 德商拜恩迪克公司 用於肺癌之治療性rna(二)
AU2022376961A1 (en) 2021-10-29 2024-05-16 Arcus Biosciences, Inc. Inhibitors of hif-2alpha and methods of use thereof
CN118176214A (zh) 2021-10-29 2024-06-11 百时美施贵宝公司 血液癌症的lag-3拮抗剂疗法
EP4422635A4 (en) 2021-10-29 2025-11-26 Kymera Therapeutics Inc IRAQ4 DEGRADATION AGENTS AND THEIR SYNTHESIS
US20240294926A1 (en) 2021-12-16 2024-09-05 Valerio Therapeutics New conjugated nucleic acid molecules and their uses
WO2023114984A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
WO2023122778A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Pyridazinone derivatives useful as t cell activators
WO2023122772A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime derivatives useful as t cell activators
WO2023122777A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime derivatives useful as t cell activators
MX2024008831A (es) 2022-01-26 2024-07-25 Bristol Myers Squibb Co Terapia combinada para carcinoma hepatocelular.
JP2025504908A (ja) 2022-01-28 2025-02-19 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド サイトカイン関連腫瘍浸潤リンパ球組成物及び方法
CA3243560A1 (en) 2022-01-31 2023-08-03 Kymera Therapeutics, Inc. Iraqi Degradation Agents and Their Uses
JP2025503312A (ja) 2022-02-01 2025-01-30 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッド Ｄｇｋ標的化化合物およびその使用
TWI864587B (zh) 2022-02-14 2024-12-01 美商基利科學股份有限公司 抗病毒吡唑并吡啶酮化合物
WO2023164638A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for colorectal carcinoma
WO2023173057A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023173053A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
MX2024011278A (es) 2022-03-15 2024-09-25 Compugen Ltd Anticuerpos antagonistas de il-18bp y su uso en monoterapia y terapia de combinacion en el tratamiento del cancer.
KR20240159621A (ko) 2022-03-18 2024-11-05 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 폴리펩티드를 단리하는 방법
WO2023211889A1 (en) 2022-04-25 2023-11-02 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic compounds and uses thereof
WO2023214325A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Novartis Ag Pyrazolopyrimidine derivatives and uses thereof as tet2 inhibitors
CN114874324B (zh) * 2022-05-13 2023-02-03 苏州旭光科星抗体生物科技有限公司 一种检测可溶性lag-3蛋白含量的酶联免疫检测试剂盒及应用
IL316768A (en) 2022-05-25 2025-01-01 Ikena Oncology Inc MEK inhibitors and their uses
WO2023235847A1 (en) 2022-06-02 2023-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
EP4556493A1 (en) 2022-07-11 2025-05-21 Genuv Inc. Cytokine fusion protein
US20240124490A1 (en) 2022-07-15 2024-04-18 Arcus Biosciences, Inc. Inhibitors of hpk1 and methods of use thereof
EP4558501A1 (en) 2022-07-20 2025-05-28 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
JP2025527248A (ja) 2022-08-02 2025-08-20 リミナル・バイオサイエンシーズ・リミテッド 置換ピリドンｇｐｒ８４アンタゴニスト及びその使用
IL318577A (en) 2022-08-02 2025-03-01 Liminal Biosciences Ltd ARYL-TRIAZOLYL AND RELATED GPR84 ANTAGONISTS AND THEIR USES
IL318575A (en) 2022-08-02 2025-03-01 Liminal Biosciences Ltd HETEROARYL CARBOXAMIDE AND GPR84-RELATED ANTAGONISTS AND USES THEREOF
CN119654312A (zh) 2022-08-08 2025-03-18 百时美施贵宝公司 用作t细胞活化剂的取代的四唑基化合物
WO2024036101A1 (en) 2022-08-09 2024-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Tertiary amine substituted bicyclic compounds useful as t cell activators
CR20250042A (es) 2022-08-11 2025-03-25 Hoffmann La Roche Derivados de tetrahidrotiazepina bicíclicos
CN119677732A (zh) 2022-08-11 2025-03-21 豪夫迈·罗氏有限公司 双环四氢氮杂䓬衍生物
EP4568746A1 (en) 2022-08-11 2025-06-18 F. Hoffmann-La Roche AG Bicyclic tetrahydrothiazepine derivatives
CA3262845A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag BICYCLIC TETRAHYDROTHIAZEPINE DERIVATIVES
CN119768155A (zh) 2022-09-14 2025-04-04 艾库斯生物科学有限公司 依曲地南的分散体
EP4602041A1 (en) 2022-10-14 2025-08-20 Arcus Biosciences, Inc. Hpk1 inhibitors and methods of use thereof
EP4604920A1 (en) 2022-10-20 2025-08-27 Arcus Biosciences, Inc. Lyophilized formulations of cd73 compounds
AU2023369055A1 (en) 2022-10-24 2025-05-15 Cancer Research Technology Limited Tumour sensitisation to checkpoint inhibitors with redox status modifier
WO2024089417A1 (en) 2022-10-24 2024-05-02 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Tumour stratification for responsiveness to an immune checkpoint inhibitor
AR131141A1 (es) 2022-11-22 2025-02-19 Pic Therapeutics Inc Inhibidores de eif4e y usos de los mismos
CN120418289A (zh) 2022-12-14 2025-08-01 安斯泰来制药欧洲有限公司 结合cldn18.2和cd3的双特异性结合剂与免疫检查点抑制剂的联合疗法
WO2024137776A1 (en) 2022-12-21 2024-06-27 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for lung cancer
WO2024137865A1 (en) 2022-12-22 2024-06-27 Gossamer Bio Services, Inc. Compounds useful as t cell activators
CN115819595B (zh) * 2023-01-03 2023-05-16 上海百英生物科技股份有限公司 一种抗lag3纳米抗体及其制备方法与应用
EP4649173A1 (en) 2023-01-13 2025-11-19 Akrivia Biomedics Limited Method of profiling diseases
WO2024163477A1 (en) 2023-01-31 2024-08-08 University Of Rochester Immune checkpoint blockade therapy for treating staphylococcus aureus infections
CN121127264A (zh) 2023-03-13 2025-12-12 瑞泽恩制药公司 用于在治疗黑素瘤中增强疗效的pd-1抑制剂和lag-3抑制剂组合
WO2024196952A1 (en) 2023-03-20 2024-09-26 Bristol-Myers Squibb Company Tumor subtype assessment for cancer therapy
WO2024211551A1 (en) 2023-04-06 2024-10-10 Glaxosmithkline Intellectual Property (No.4) Limited Methods for treating and monitoring cancer
US20240425497A1 (en) 2023-05-05 2024-12-26 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b Inhibitors and Methods of Use Thereof
CN121057732A (zh) 2023-05-08 2025-12-02 百时美施贵宝公司 经取代的苯基噁唑酮化合物
TW202509014A (zh) 2023-05-10 2025-03-01 美商纜圖藥品公司 ＧＳＫ３α抑制劑及其使用方法
WO2024233853A2 (en) * 2023-05-11 2024-11-14 Elixiron Immunotherapeutics (hong Kong) Limited A combination comprising lag-3 targeting moiety and interleukin-10
WO2024243502A1 (en) 2023-05-25 2024-11-28 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
WO2024249540A1 (en) 2023-05-31 2024-12-05 Bristol-Myers Squibb Company Substituted oxazolone compound for decreasing levels of ikzf1-4 proteins
WO2024249894A2 (en) 2023-06-02 2024-12-05 Arcus Biosciences, Inc. Biomarkers for predicting cancer treatment efficacy
WO2024254227A1 (en) 2023-06-07 2024-12-12 Bristol-Myers Squibb Company Spirocyclic substituted oxoisoindolinyl piperidine-2,6-dione compound
WO2024263853A1 (en) 2023-06-23 2024-12-26 Bristol-Myers Squibb Company Substituted oxoisoindolinyl piperidine-2,6-dione compound as anticancer agent
EP4620470A3 (en) 2023-06-23 2025-10-08 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
TW202515608A (zh) 2023-06-26 2025-04-16 以色列商坎布根有限公司 Ｉｌ—１８ｂｐ拮抗抗體及其於癌症治療之單一療法及組合療法的用途
WO2025030002A2 (en) 2023-08-02 2025-02-06 Arvinas Operations, Inc. Dgk targeting compounds and uses thereof
WO2025038763A1 (en) 2023-08-15 2025-02-20 Bristol-Myers Squibb Company Ceramic hydroxyapatite chromatography flow through method
WO2025038857A1 (en) 2023-08-16 2025-02-20 Arcus Biosciences, Inc. TETRALINS TARGETING MUTANT HIF-2α
AR133696A1 (es) 2023-09-02 2025-10-22 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de fenil oxooxazolil piperidinadiona sustituida
WO2025064197A1 (en) 2023-09-02 2025-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Substituted azetidinyl oxoisoindolinyl piperidine-2,6-dione compounds
WO2025054339A1 (en) 2023-09-08 2025-03-13 Arcus Biosciences, Inc. Triazolopyridine compounds as inhibitors of kit
KR20250068738A (ko) 2023-09-13 2025-05-16 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 치환된 옥소이소인돌리닐 피페리딘-2,6-디온 화합물
WO2025072330A1 (en) 2023-09-26 2025-04-03 Arcus Biosciences, Inc. Kit inhibitor compounds and methods of use thereof
WO2025068461A1 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Negio Therapeutics Guanfacine derivatives and their use in treating cancer
WO2025068452A1 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Negio Therapeutics Guanfacine derivatives and their use in treating cancer
WO2025076299A1 (en) 2023-10-06 2025-04-10 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
WO2025096487A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096505A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096494A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096488A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096539A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096490A1 (en) 2023-10-31 2025-05-08 Bristol-Myers Squibb Company Ubiquitin specific processing protease 1 (usp1) compounds
WO2025096979A1 (en) 2023-11-02 2025-05-08 Arcus Biosciences, Inc. Thiazole compounds as kit inhibitors and methods of use thereof
WO2025106736A2 (en) 2023-11-15 2025-05-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Combination of pd-1 inhibitors and lag-3 inhibitors for enhanced efficacy in treating lung cancer
WO2025120866A1 (en) 2023-12-08 2025-06-12 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and agents stabilizing or increasing expression of cldn18.2
WO2025120867A1 (en) 2023-12-08 2025-06-12 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and anti-vegfr2 antibodies
WO2025121445A1 (en) 2023-12-08 2025-06-12 Astellas Pharma Inc. Combination therapy involving bispecific binding agents binding to cldn18.2 and cd3 and agents stabilizing or increasing expression of cldn18.2
WO2025132831A1 (en) 2023-12-19 2025-06-26 Universite D'aix-Marseille N-heteroaryl derivatives and uses thereof for treating cancer
WO2025137370A1 (en) 2023-12-20 2025-06-26 Arcus Biosciences, Inc. Salt forms of an axl inhibitor
US20250215087A1 (en) 2023-12-29 2025-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy of kras inhibitor and treg depleting agent
WO2025151487A2 (en) 2024-01-08 2025-07-17 Regents Of The University Of Michigan Small-molecule inhibitors of adar1
US20250269052A1 (en) 2024-02-27 2025-08-28 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ceacam5 antibody drug conjugates
WO2025184208A1 (en) 2024-02-27 2025-09-04 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ceacam5 antibodies and uses thereof
WO2025193574A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193573A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193569A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193571A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193583A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193572A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides useful as immunomodulators
WO2025193759A1 (en) 2024-03-12 2025-09-18 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of an azolopyrimidine compound
WO2025193770A1 (en) 2024-03-13 2025-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic peptides
WO2025226767A1 (en) 2024-04-24 2025-10-30 Bristol-Myers Squibb Company Substituted 3-(5-(6-aminopyridin-2-yl)-4-fluoro-1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione compounds for use in the treatment of cancer
WO2025245489A1 (en) 2024-05-24 2025-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of tumors in subjects having fgl-1 positive samples
WO2025250011A1 (en) 2024-05-29 2025-12-04 Stichting Het Nederlands Kanker Instituut-Antoni van Leeuwenhoek Ziekenhuis Treatment for cancer
GB202408360D0 (en) 2024-06-11 2024-07-24 Cancer Research Tech Ltd Tumour sensitisation

Family Cites Families (160)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1081681A (en) 1910-08-31 1913-12-16 Otis Elevator Co Alternating-current-motor control.
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4475196A (en) 1981-03-06 1984-10-02 Zor Clair G Instrument for locating faults in aircraft passenger reading light and attendant call control system
US4447233A (en) 1981-04-10 1984-05-08 Parker-Hannifin Corporation Medication infusion pump
US4439196A (en) 1982-03-18 1984-03-27 Merck & Co., Inc. Osmotic drug delivery system
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US4447224A (en) 1982-09-20 1984-05-08 Infusaid Corporation Variable flow implantable infusion apparatus
US4487603A (en) 1982-11-26 1984-12-11 Cordis Corporation Implantable microinfusion pump system
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4486194A (en) 1983-06-08 1984-12-04 James Ferrara Therapeutic device for administering medicaments through the skin
DE3572982D1 (en) 1984-03-06 1989-10-19 Takeda Chemical Industries Ltd Chemically modified lymphokine and production thereof
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
US5374548A (en) 1986-05-02 1994-12-20 Genentech, Inc. Methods and compositions for the attachment of proteins to liposomes using a glycophospholipid anchor
MX9203291A (es) 1985-06-26 1992-08-01 Liposome Co Inc Metodo para acoplamiento de liposomas.
GB8601597D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Wilson R H Nucleotide sequences
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
DE3883899T3 (de) 1987-03-18 1999-04-22 Sb2, Inc., Danville, Calif. Geänderte antikörper.
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
GB8717430D0 (en) 1987-07-23 1987-08-26 Celltech Ltd Recombinant dna product
US5677425A (en) 1987-09-04 1997-10-14 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibody
GB8809129D0 (en) 1988-04-18 1988-05-18 Celltech Ltd Recombinant dna methods vectors and host cells
US5476996A (en) 1988-06-14 1995-12-19 Lidak Pharmaceuticals Human immune system in non-human animal
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
JP2989002B2 (ja) 1988-12-22 1999-12-13 キリン―アムジエン・インコーポレーテツド 化学修飾顆粒球コロニー刺激因子
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5108921A (en) 1989-04-03 1992-04-28 Purdue Research Foundation Method for enhanced transmembrane transport of exogenous molecules
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5976877A (en) 1990-01-08 1999-11-02 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Proteins produced by human lymphocytes DNA sequence encoding these proteins and their pharmaceutical and biological uses
FR2656800B1 (fr) 1990-01-08 1992-05-15 Roussy Inst Gustave Nouvelles proteines produits par les lymphocytes humains, sequence d'adn codant pour ces proteines et applications pharmaceutiques et biologiques.
ATE139258T1 (de) 1990-01-12 1996-06-15 Cell Genesys Inc Erzeugung xenogener antikörper
US6673986B1 (en) 1990-01-12 2004-01-06 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
US6172197B1 (en) 1991-07-10 2001-01-09 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US6255458B1 (en) 1990-08-29 2001-07-03 Genpharm International High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin
US6300129B1 (en) 1990-08-29 2001-10-09 Genpharm International Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5874299A (en) 1990-08-29 1999-02-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5789650A (en) 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5877397A (en) 1990-08-29 1999-03-02 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
AU8507191A (en) 1990-08-29 1992-03-30 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
GB9108652D0 (en) 1991-04-23 1991-06-12 Antisoma Ltd Immunoreactive compounds
ES2341666T3 (es) 1991-12-02 2010-06-24 Medimmune Limited Produccion de autoanticuerpos de repertorios de segmentos de anticue rpos expresados en la superficie de fagos.
EP0746609A4 (en) 1991-12-17 1997-12-17 Genpharm Int NON-HUMAN TRANSGENIC ANIMALS CAPABLE OF PRODUCING HETEROLOGOUS ANTIBODIES
US5714350A (en) 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
EP0640094A1 (en) 1992-04-24 1995-03-01 The Board Of Regents, The University Of Texas System Recombinant production of immunoglobulin-like domains in prokaryotic cells
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
DE69332643T2 (de) 1992-09-16 2003-11-27 The Scripps Research Institute, La Jolla Menschliche, neutralisierende, monoklonale antikörper gegen das respiratorische synzytialvirus
JP3919830B2 (ja) 1992-11-28 2007-05-30 財団法人化学及血清療法研究所 抗ネコヘルペスウイルス−１組換え抗体および該抗体をコードする遺伝子断片
JPH08509612A (ja) 1993-04-26 1996-10-15 ジェンファーム インターナショナル インコーポレイテッド 異種抗体を産生することができるトランスジェニック非ヒト動物
WO1994029351A2 (en) 1993-06-16 1994-12-22 Celltech Limited Antibodies
WO1995018634A1 (en) 1994-01-04 1995-07-13 The Scripps Research Institute Human monoclonal antibodies to herpes simplex virus and methods therefor
RU2178306C2 (ru) 1994-05-06 2002-01-20 Энститю Гюстав Русси Растворимые полипептидные фракции протеина lag-3, способ получения, терапевтическая композиция, антитело
US6121022A (en) 1995-04-14 2000-09-19 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US6410690B1 (en) 1995-06-07 2002-06-25 Medarex, Inc. Therapeutic compounds comprised of anti-Fc receptor antibodies
JP2000508226A (ja) 1995-07-21 2000-07-04 アプライド リサーチ システムズ アース ホールディング エヌ．ヴィ． Ｌａｇ−３タンパク質によるｔｈ１リンパ球を検出、同定、単離並びに選択的に標識およびターゲッティングする方法
US5811097A (en) 1995-07-25 1998-09-22 The Regents Of The University Of California Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling
US6090382A (en) 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
CA2248064A1 (en) 1996-03-07 1997-09-12 Barbara Crawford Jackson Near infrared fluorescent security thermal transfer printing and marking ribbons
US5922845A (en) 1996-07-11 1999-07-13 Medarex, Inc. Therapeutic multispecific compounds comprised of anti-Fcα receptor antibodies
JP2000516101A (ja) 1996-11-28 2000-12-05 アンスティテュ ギュスタブ ルシ Ｌａｇ−３タンパク質の変異体、その発現及び使用
WO1998023748A1 (en) 1996-11-29 1998-06-04 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Methods for preventing graft rejection in transplantation and for producing a universal gene therapy host cell using lymphocyte activation (lag-3)
US6277375B1 (en) 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
AU6703198A (en) 1997-03-21 1998-10-20 Brigham And Women's Hospital Immunotherapeutic ctla-4 binding peptides
ATE319745T1 (de) 1997-05-21 2006-03-15 Biovation Ltd Verfahren zur herstellung von nicht-immunogenen proteinen
EP0900841A1 (en) 1997-06-18 1999-03-10 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) LAG-3 splice variants
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
DK1071700T3 (da) 1998-04-20 2010-06-07 Glycart Biotechnology Ag Glykosylerings-modifikation af antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellulær cytotoksicitet
GB9814383D0 (en) 1998-07-02 1998-09-02 Cambridge Antibody Tech Improvements relating to antibodies
AU5285899A (en) 1998-07-21 2000-02-14 Connex Gesellschaft Zur Optimierung Von Forschung Und Entwicklung Mbh Anti hepatitis c virus antibody and uses thereof
SI2112166T1 (sl) 1998-12-23 2019-05-31 Pfizer Inc. Človeška monoklonska protitelesa proti CTLA-4
KR101077001B1 (ko) 1999-01-15 2011-10-26 제넨테크, 인크. 효과기 기능이 변화된 폴리펩티드 변이체
US6914128B1 (en) 1999-03-25 2005-07-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Human antibodies that bind human IL-12 and methods for producing
AU3672800A (en) 1999-04-09 2000-11-14 Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
GB9911569D0 (en) 1999-05-18 1999-07-21 Oxford Biomedica Ltd Antibodies
DK1210428T3 (en) 1999-08-23 2015-06-15 Dana Farber Cancer Inst Inc PD-1, a receptor for B7-4 AND USE THEREOF
US7605238B2 (en) 1999-08-24 2009-10-20 Medarex, Inc. Human CTLA-4 antibodies and their uses
CN1371416B (zh) 1999-08-24 2012-10-10 梅达里克斯公司 人ctla-4抗体及其应用
US6794132B2 (en) 1999-10-02 2004-09-21 Biosite, Inc. Human antibodies
MXPA02012434A (es) 2000-06-16 2004-09-06 Cambridge Antibody Tech Anticuerpos que se unen inmunoespecificamente a estimulador de linfocitos ii.
US6818216B2 (en) 2000-11-28 2004-11-16 Medimmune, Inc. Anti-RSV antibodies
ES2405944T3 (es) 2000-11-30 2013-06-04 Medarex, Inc. Ácidos nucleicos que codifican las secuencias de inmunoglobulina humana reorganizadas a partir de ratones transcromoscómicos transgénicos zadas
AU2002302919A1 (en) 2001-02-22 2002-10-03 Institut Pasteur Comparative mycobacterial geneomics as a tool for identifying targets for the diagnosis, prophylaxis or treatment of mycobacterioses
US20020146753A1 (en) 2001-04-06 2002-10-10 Henrik Ditzel Autoantibodies to glucose-6-phosphate isomerase and their participation in autoimmune disease
EP1970448A1 (en) 2001-05-11 2008-09-17 Kirin Pharma Kabushiki Kaisha Human artificial chromosome containting human antibody lambda light chain and non-human animal containting the human artificial chromosome capable of genetic transmission
CN1463270A (zh) 2001-05-31 2003-12-24 梅达莱克斯公司 细胞毒素、其有用的前体药物、连接基团和稳定剂
DE60234369D1 (de) 2001-09-19 2009-12-24 Alexion Pharma Inc Manipulierte matrizen und ihre verwendung bei der single-primer-amplifikation
ATE519779T1 (de) 2001-09-19 2011-08-15 Roussy Inst Gustave An das glu-pro motiv-bindende proteine und peptide, diese enthaltende therapeutische zusammensetzungen und deren anwendungen
ATE430580T1 (de) 2001-10-25 2009-05-15 Genentech Inc Glycoprotein-zusammensetzungen
JP2005535290A (ja) 2002-02-22 2005-11-24 ジェネンテック・インコーポレーテッド 免疫関連疾患の治療のための組成物と方法
EP1498485A4 (en) 2002-04-09 2006-09-06 Kyowa Hakko Kogyo Kk MODIFIED GENOME CELLS
CA2481507A1 (en) 2002-04-16 2003-10-30 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
EP1537878B1 (en) 2002-07-03 2010-09-22 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Immunopotentiating compositions
AU2003298607B9 (en) 2002-10-29 2011-08-04 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of immune related diseases
WO2005035732A2 (en) 2003-02-19 2005-04-21 Dyax Corporation Papp-a ligands
EP1596871A4 (en) 2003-02-28 2006-08-23 Drew M Pardoll T-CELL REGULATION
CA2541360A1 (en) 2003-10-08 2005-04-21 Bradley T. Messmer Methods and compositions for diagnosis and treatment of b cell chronic lymphocytic leukemia
SI2418220T1 (sl) * 2003-12-10 2017-10-30 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Interferon alfa protitelesa in njihova uporaba
WO2005100402A1 (en) 2004-04-13 2005-10-27 F.Hoffmann-La Roche Ag Anti-p-selectin antibodies
EP1740946B1 (en) 2004-04-20 2013-11-06 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against cd20
RU2402548C2 (ru) 2004-05-19 2010-10-27 Медарекс, Инк. Химические линкеры и их конъюгаты
MXPA06013413A (es) 2004-05-19 2007-01-23 Medarex Inc Enlazadores quimicos y conjugados de los mismos.
BRPI0513706A (pt) 2004-07-20 2008-05-13 Symphogen As anticorpo policlonal recombinante anti-rhesus d e métodos de produção
WO2006017538A2 (en) 2004-08-03 2006-02-16 Dyax Corp. Hk1-binding proteins
EP1793858A4 (en) 2004-09-08 2008-12-10 Univ Ohio State Res Found HUMAN MONOCLONAL ANTI-CTLA4 ANTIBODIES FOR CANCER TREATMENT
MX2007003533A (es) 2004-10-01 2007-05-23 Medarex Inc Metodos de tratar linfomas cd30 positivas.
PL3428191T3 (pl) 2004-10-06 2025-04-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-H1 i PD-1 w leczeniu raka nerkowokomórkowego
JP5249587B2 (ja) 2005-02-18 2013-07-31 メダレックス， インク． フコシル残基を欠く前立腺特異的膜抗原（ｐｓｍａ）に対するモノクローナル抗体
WO2006101691A1 (en) 2005-03-23 2006-09-28 Pfizer Products Inc. Therapy of prostate cancer with ctla4 antibodies and hormonal therapy
US7714016B2 (en) 2005-04-08 2010-05-11 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
EP2418278A3 (en) 2005-05-09 2012-07-04 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Human monoclonal antibodies to programmed death 1(PD-1) and methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
KR101607288B1 (ko) 2005-07-01 2016-04-05 이. 알. 스퀴부 앤드 선즈, 엘.엘.씨. 예정 사멸 리간드 1 (피디-엘1)에 대한 인간 모노클로날 항체
ES2416136T3 (es) 2005-09-26 2013-07-30 Medarex, Inc. Conjugados de anticuerpo-fármaco y su uso
ES2375843T3 (es) 2005-10-26 2012-03-06 Medarex, Inc. Procedimientos y compuestos para la preparación de an�?logos de cc-1065.
WO2007056441A2 (en) 2005-11-07 2007-05-18 Genentech, Inc. Binding polypeptides with diversified and consensus vh/vl hypervariable sequences
WO2007059404A2 (en) 2005-11-10 2007-05-24 Medarex, Inc. Duocarmycin derivatives as novel cytotoxic compounds and conjugates
JP2009518320A (ja) 2005-12-05 2009-05-07 シュムフォウエン アクティーゼルスカブ 抗オルトポックスウイルス組換えポリクローナル抗体
EP2975057A1 (en) 2006-07-10 2016-01-20 Fujita Health University Novel anti-cd73 antibody
WO2008073160A2 (en) 2006-08-17 2008-06-19 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Methods for converting or inducing protective immunity
EA201201533A1 (ru) 2006-08-18 2014-11-28 Новартис Аг Prlr-специфическое антитело и его применения
CL2007003622A1 (es) 2006-12-13 2009-08-07 Medarex Inc Anticuerpo monoclonal humano anti-cd19; composicion que lo comprende; y metodo de inhibicion del crecimiento de celulas tumorales.
TWI412367B (zh) 2006-12-28 2013-10-21 Medarex Llc 化學鏈接劑與可裂解基質以及其之綴合物
CN101616911A (zh) 2007-02-21 2009-12-30 梅达莱克斯公司 具有单个氨基酸的化学连接物及其偶联物
WO2008121615A2 (en) 2007-03-30 2008-10-09 Medimmune, Inc. Antibody formulation
EP1987839A1 (en) 2007-04-30 2008-11-05 I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
EP2535354B1 (en) 2007-06-18 2017-01-11 Merck Sharp & Dohme B.V. Antibodies to human programmed death receptor pd-1
WO2009014708A2 (en) 2007-07-23 2009-01-29 Cell Genesys, Inc. Pd-1 antibodies in combination with a cytokine-secreting cell and methods of use thereof
ES2573458T3 (es) 2007-09-14 2016-06-08 Vrije Universiteit Brussel Mejoramiento de la capacidad estimulatoria de las células T de las células que presentan antígeno humano y su uso en vacunación
AU2008308956B2 (en) 2007-10-01 2013-03-14 Bristol-Myers Squibb Company Human antibodies that bind mesothelin, and uses thereof
CN101951959A (zh) 2007-11-30 2011-01-19 百时美施贵宝公司 抗b7h4单克隆抗体-药物缀合物和使用方法
EP2229187A2 (en) 2007-11-30 2010-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Monoclonal antibody partner molecule conjugates directed to protein tyrosine kinase 7 (ptk7)
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
US20110159023A1 (en) 2008-08-25 2011-06-30 Solomon Langermann Pd-1 antagonists and methods for treating infectious disease
EA023148B1 (ru) 2008-08-25 2016-04-29 Эмплиммьюн, Инк. Композиции на основе антагонистов pd-1 и их применение
TWI729512B (zh) 2008-12-09 2021-06-01 美商建南德克公司 抗pd-l1抗體及其於增進t細胞功能之用途
CN102666583B (zh) * 2009-07-15 2015-11-25 Aimm医疗股份公司 革兰氏阳性细菌特异性结合化合物
CN104961829B (zh) 2009-11-24 2018-08-21 米迪缪尼有限公司 针对b7-h1的靶向结合剂
JP5934203B2 (ja) * 2010-07-14 2016-06-15 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション 抗ａｄｄｌモノクローナル抗体およびこの使用
WO2012054438A1 (en) * 2010-10-22 2012-04-26 Schering Corporation Anti-pcsk9
KR102702287B1 (ko) 2012-05-15 2024-09-04 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Pd-1/pd-l1 신호전달을 방해하는 것에 의한 암 면역요법
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
MY210104A (en) 2013-03-15 2025-08-27 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Anti-lag-3 binding proteins
CA2917858A1 (en) 2013-08-02 2015-02-05 Aduro Biotech Holdings, Europe B.V. Combining cd27 agonists and immune checkpoint inhibition for immune stimulation
EP3508502B1 (en) 2013-09-20 2023-04-26 Bristol-Myers Squibb Company Combination of anti-lag-3 antibodies and anti-pd-1 antibodies to treat tumors
PT3556775T (pt) 2014-01-28 2021-12-31 Bristol Myers Squibb Co Anticorpos anti-lag-3 para tratar neoplasias malignas hematológicas
KR20250004095A (ko) 2015-04-17 2025-01-07 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-pd-1 항체 및 또 다른 항체의 조합물을 포함하는 조성물
TWI756187B (zh) 2015-10-09 2022-03-01 美商再生元醫藥公司 抗ｌａｇ３抗體及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
CY1119563T1 (el) 2018-03-07
US20170137514A1 (en) 2017-05-18
US20230077348A1 (en) 2023-03-16
US20180371087A1 (en) 2018-12-27
EA035013B1 (ru) 2020-04-17
TWI576355B (zh) 2017-04-01
SMT202000628T1 (it) 2021-01-05
CY2022035I1 (el) 2023-01-05
US20150307609A1 (en) 2015-10-29
EA202090227A1 (ru) 2020-05-31
NL301205I1 (sr) 2023-04-19
HRP20201852T8 (hr) 2021-06-25
AR129651A2 (es) 2024-09-18
AR091649A1 (es) 2015-02-18
NO2023020I1 (no) 2023-05-03
TW202118789A (zh) 2021-05-16
SI3795592T1 (sl) 2024-10-30
TW202313688A (zh) 2023-04-01
KR20150023909A (ko) 2015-03-05
SMT201700449T1 (it) 2017-11-15
FR22C1057I1 (fr) 2023-01-06
SI2867258T1 (sl) 2017-10-30
PE20150221A1 (es) 2015-02-19
US20140093511A1 (en) 2014-04-03
KR102461102B1 (ko) 2022-10-31
ES2831406T3 (es) 2021-06-08
NL301205I2 (nl) 2023-05-24
US11345752B2 (en) 2022-05-31
FR22C1057I2 (fr) 2023-12-15
EP3795592B1 (en) 2024-07-24
US20190256594A1 (en) 2019-08-22
NO2023008I1 (no) 2023-02-07
AU2019204803B2 (en) 2021-06-10
AU2017221874B2 (en) 2019-05-02
LT3275899T (lt) 2020-12-10
CY1123609T1 (el) 2022-03-24
TW201406784A (zh) 2014-02-16
TWI617581B (zh) 2018-03-11
CY2022035I2 (el) 2023-01-27
CA2877746C (en) 2022-07-19
KR20200075891A (ko) 2020-06-26
US10377824B2 (en) 2019-08-13
SG11201408780XA (en) 2015-01-29
AU2017221874A1 (en) 2017-09-21
TWI771721B (zh) 2022-07-21
AU2021225177A1 (en) 2021-09-30
IL236517A0 (en) 2015-02-26
CN104411723A (zh) 2015-03-11
PT2867258T (pt) 2017-08-31
LT2867258T (lt) 2017-09-11
AU2013286914A1 (en) 2015-01-29
LUC00286I2 (sr) 2025-05-12
SMT202400395T1 (it) 2024-11-15
TW202432599A (zh) 2024-08-16
PT3795592T (pt) 2024-09-17
TW201831515A (zh) 2018-09-01
AU2019204803A1 (en) 2019-07-25
LT3795592T (lt) 2024-09-25
MY169383A (en) 2019-03-26
EP2867258A1 (en) 2015-05-06
EP3275899A1 (en) 2018-01-31
ES2638545T3 (es) 2017-10-23
HK1207386A1 (en) 2016-01-29
AU2019204803C1 (en) 2023-06-29
JP6668405B2 (ja) 2020-03-18
TWI662046B (zh) 2019-06-11
CL2014003637A1 (es) 2015-03-27
TWI701045B (zh) 2020-08-11
JP6320376B2 (ja) 2018-05-09
PL2867258T3 (pl) 2017-11-30
TW201726743A (zh) 2017-08-01
US10266591B2 (en) 2019-04-23
HRP20241357T1 (hr) 2024-12-20
PL3795592T3 (pl) 2024-10-07
HUE069061T2 (hu) 2025-02-28
HUE052406T2 (hu) 2021-04-28
UY34887A (es) 2013-12-31
PT3275899T (pt) 2020-11-17
BR112014032999B1 (pt) 2022-10-18
FI3795592T3 (fi) 2024-10-01
PE20191759A1 (es) 2019-12-12
ES2987734T3 (es) 2024-11-18
LTPA2022015I1 (sr) 2022-12-12
KR20230159625A (ko) 2023-11-21
CA3161329A1 (en) 2014-01-09
TN2014000536A1 (en) 2016-03-30
PH12021552200A1 (en) 2022-05-02
BR112014032999A2 (pt) 2017-08-01
CN108101991A (zh) 2018-06-01
HK1249535A1 (en) 2018-11-02
HUS2300002I1 (hu) 2023-01-28
CO7170127A2 (es) 2015-01-28
JP2024041966A (ja) 2024-03-27
MX2015000116A (es) 2015-04-14
RS61084B1 (sr) 2020-12-31
EP3795592A1 (en) 2021-03-24
KR20220150417A (ko) 2022-11-10
EP3275899B1 (en) 2020-08-26
US20250136684A1 (en) 2025-05-01
PE20191324A1 (es) 2019-09-24
RS65997B1 (sr) 2024-10-31
KR20210102485A (ko) 2021-08-19
HRP20201852T1 (hr) 2021-01-08
AU2025200257A1 (en) 2025-02-20
IL236517B (en) 2018-06-28
PH12014502854A1 (en) 2015-02-23
KR102290633B1 (ko) 2021-08-19
CN104411723B (zh) 2018-01-30
DK3795592T3 (da) 2024-10-14
HUE034553T2 (en) 2018-02-28
NZ628528A (en) 2016-07-29
KR20240168469A (ko) 2024-11-29
MY197544A (en) 2023-06-22
LTC2867258I2 (sr) 2025-06-10
AR125268A2 (es) 2023-06-28
JP2015527880A (ja) 2015-09-24
FIC20230009I1 (fi) 2023-02-09
TW201938198A (zh) 2019-10-01
EA201590138A1 (ru) 2015-07-30
EP2867258B1 (en) 2017-06-28
JP2018126149A (ja) 2018-08-16
PE20241623A1 (es) 2024-08-07
JP7009531B2 (ja) 2022-02-10
DK2867258T3 (en) 2017-10-02
DK3275899T3 (da) 2020-11-30
EP4553086A2 (en) 2025-05-14
JP2022064901A (ja) 2022-04-26
SI3275899T1 (sl) 2020-11-30
WO2014008218A1 (en) 2014-01-09
US9505839B2 (en) 2016-11-29
MX365417B (es) 2019-06-03
MY197322A (en) 2023-06-13
SG10201610960YA (en) 2017-02-27
AU2013286914B2 (en) 2017-06-29
HRP20171315T1 (hr) 2017-10-20
MX2019006411A (es) 2019-08-14
KR102126596B1 (ko) 2020-06-24
PH12014502854B1 (en) 2015-02-23
CA2877746A1 (en) 2014-01-09
JP2020103301A (ja) 2020-07-09
CN108101991B (zh) 2022-02-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20250136684A1 (en) Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
JP2023113722A (ja) リンパ球活性化遺伝子－３（ｌａｇ－３）へ結合するヒト抗体およびその使用
HK40051182B (en) Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
HK40051182A (en) Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
HK1249535B (en) Optimization of antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
HK1207386B (en) Optimization of human antibodies that bind lymphocyte activation gene-3 (lag-3), and uses thereof
EA044665B1 (ru) Фармацевтическая композиция, содержащая анти-lag-3 антитело и анти-pd-1 антитело