ES2878188T3

ES2878188T3 - Terapias de combinación que comprenden moléculas de anticuerpos contra LAG-3

Info

Publication number: ES2878188T3
Application number: ES16757391T
Authority: ES
Inventors: Glenn Dranoff; Frédéric Triebel; Chrystlle Brignone; Walter Blattler; Jennifer Mataraza; Catherine Sabatos-Peyton; Hwai Chang; Johann Gerhard
Original assignee: Novartis AG; Immutep SAS
Current assignee: Novartis AG; Immutep SAS
Priority date: 2015-07-29
Filing date: 2016-07-28
Publication date: 2021-11-18
Anticipated expiration: 2036-07-28
Also published as: DK3317301T3; HUE055469T2; SI3317301T1; CY1124299T1; EP3964528A1; EP3317301A1; PT3317301T; US20180340025A1; LT3317301T; WO2017019894A1; EP3317301B1; HRP20211058T8; HRP20211058T1; PL3317301T3; WO2017019894A8; US20220153835A1

Abstract

Una composición que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y una molécula de anticuerpo anti-PD-1, en la que la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende: (a) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 4, una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15; (b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 1; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12; (c) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286, una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15; o (d) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12, y en la que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende: (a) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de GYTFTTY (SEQ ID NO: 4 del documento US 2015/0210769), una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de YPGTGG (SEQ ID NO: 5 del documento US 2015/0210769), y una secuencia aminoácidos de VHCDR3 de WTTGTGAY (SEQ ID NO: 3 del documento US 2015/0210769); y una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de SQSLLDSGNQKNF (SEQ ID NO: 13 de US 2015/0210769), una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de WAS (SEQ ID NO: 14 del documento US 2015/0210769), y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de DYSYPY (SEQ ID NO: 33 del documento US 2015/0210769); o (b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 seleccionada de TYWMH (SEQ ID NO: 1 del documento US 2015/0210769); una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de NIYPGTGGSNFDEKFKN (SEQ ID NO: 2 del documento US 2015/0210769); y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de WTTGTGAY (SEQ ID NO: 3 del documento US 2015/0210769); y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de KSSQSLLDSGNQKNFLT (SEQ ID NO: 10 del documento US 2015/0210769), una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de WASTRES (SEQ ID NO: 11 del documento US 2015/0210769), y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de QNDYSYPYT (SEQ ID NO: 32 del documento US 2015/0210769).

Description

DESCRIPCIÓN

Terapias de combinación que comprenden moléculas de anticuerpos contra LAG-3

Antecedentes

El gen 3 de activación de linfocitos, o LAG-3 (también conocido como CD223), es un miembro de la familia de supergenes de inmunoglobulinas y se expresa en células T activadas (Huard et al. (1994) Immunogenetics 39: 213), Células NK (Triebel et al. (1990) J. Exp. Med. 171: 1393-1405), células T reguladoras (Huang et al., (2004) Immunity 21: 503-513; Camisaschi et al., (2010) J Immunol 184: 6545-6551; Gagliani et al. (2013) Nat Med 19: 739-746), y células dendríticas plasmocitoides (DC) (Workman et al., (2009) J Immunol 182: 1885-1891). LAG-3 es una proteína de membrana codificada por un gen ubicado en el cromosoma 12 y está relacionada estructural y genéticamente con CD4.

De manera similar a CD4, LAG-3 puede interactuar con moléculas del MHC de clase II en la superficie celular (Baixeras et al., (1992) J. Exp. Med. 176: 327-337; Huard et al., (1996) Eur. J. Immunol. 26: 1180-1186). Se ha sugerido que la unión directa de lAG-3 al MHC de clase II juega un papel en la subregulación de la estimulación dependiente de antígeno de linfocitos T CD4+ (Huard et al. (1994) Eur. J. Immunol. 24: 3216-3221) y también se ha demostrado que el bloqueo de LAG-3 revitaliza los linfocitos CD8+ tanto en el tumor como en el antígeno propio (Gross et al., (2007) J Clin Invest. 117: 3383-3392) y modelos virales (Blackburn et al., (2009) Nat. Immunol. 10: 29-37). Además, la región intracitoplasmática de LAG-3 puede interactuar con LAP (proteína asociada a LAG-3), que es una molécula de transducción de señales implicada en la subregulación de la vía de activación de CD3/TCR (Iouzalen et al., (2001) Eur. J. Immunol. 31: 2885-2891). Además, se ha demostrado que las células T reguladoras CD4+CD25+ (Treg) expresan LAG-3 tras la activación, lo que contribuye a la actividad supresora de las células Treg (Huang, C. et al. (2004) Immunity 21: 503-513). LAG-3 también puede subregular la homeostasis de las células T por las células Treg en mecanismos tanto dependientes como independientes de las células T (Workman, C. J. y Vignali, D. A. (2005) J. Immunol. 174: 688-695).

El documento WO-A-2010/019570 describe anticuerpos monoclonales aislados que se unen específicamente a LAG-3 con alta afinidad, particularmente anticuerpos monoclonales humanos. La divulgación también proporciona métodos para detectar LAG-3, así como métodos para estimular respuestas inmunes usando un anticuerpo anti-LAG-3. También se proporciona la terapia de combinación, en la que se coadministra un anticuerpo anti-LAG-3 con al menos un anticuerpo inmunoestimulador adicional.

El documento WO-A-138920 también describe moléculas de anticuerpos que se unen específicamente a LAG-3. Las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 pueden usarse para tratar, prevenir y/o diagnosticar trastornos cancerosos o infecciosos.

El documento US-A-2015/0210769 describe moléculas de anticuerpos que se unen específicamente a PD-1. Las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 pueden usarse para tratar, prevenir y/o diagnosticar afecciones y trastornos cancerosos o infecciosos.

Dada la importancia de LAG-3 en la subregulación de una respuesta inmune, existe la necesidad de desarrollar agentes novedosos que modulen su actividad para activar el sistema inmune. Dichos agentes se pueden usar, por ejemplo, para la inmunoterapia del cáncer y el tratamiento de otras afecciones, tales como infecciones crónicas.

Resumen

La invención está definida por las reivindicaciones.

La invención se refiere a una composición que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y una molécula de anticuerpo anti-PD-1, cada una como se define en la reivindicación 1. La invención también se refiere a una combinación que comprende una molécula anticuerpo anti-LAG-3 y una molécula de anticuerpo anti-PD-1, para su uso en un método de tratamiento de un cáncer en un sujeto, en el que los anticuerpos son como se definen en la reivindicación 1.

Cualquier realización, aspecto, divulgación o ejemplo al que se hace referencia en el presente documento es solo una parte de la invención en la medida en que se refiere a una composición o combinación para su uso en un método de tratamiento del cáncer en un sujeto, que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y una molécula de anticuerpo anti-PD-1 que comprende una VH y una VL que comprenden las correspondientes secuencias de CDR como se define en la reivindicación 1.

Se divulgan en el presente documento, al menos en parte, métodos y composiciones que comprenden una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos entre una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación de antígeno (por ejemplo, presentación de antígeno tumorales); (ii) un agente que mejora la respuesta de una célula efectora (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) un agente que reduce la inmunosupresión tumoral. En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor del gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3) (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento).

Sin desear estar ligado a ninguna teoría, se cree que los enfoques terapéuticos que mejoran la inmunidad antitumoral funcionan más eficazmente cuando la respuesta inmune se optimiza dirigiendo múltiples componentes en una o más etapas de una respuesta inmune, por ejemplo, una respuesta inmune antitumoral. Por ejemplo, enfoques que mejoran la presentación de antígeno, por ejemplo, mediante la activación y/o maduración de células dendríticas, combinados con enfoques que mejoran las respuestas inmunes humorales y celulares (por ejemplo, estimulando, por ejemplo, desinhibiendo, fagocitos y/o linfocitos infiltrantes de tumores (por ejemplo, células NK y células T)), mientras se bloquea la señalización inmunosupresora del tumor (por ejemplo, al aumentar la polarización de los macrófagos, aumentar la eliminación de Treg y/o disminuir las células supresoras derivadas de mieloides (MDSC)) puede resultar en una respuesta terapéutica más efectiva y/o prolongada . Por consiguiente, en el presente documento se divulgan terapias de combinación que optimizan una, dos o todas: (i) la presentación de antígeno, por ejemplo, aumentando la presentación de antígeno (por ejemplo, mejorando una o más de la actividad o maduración de las células dendríticas, la captación de antígenos o el procesamiento de antígenos); (ii) respuesta de células efectoras, por ejemplo, aumento de la respuesta de células efectoras (por ejemplo, mejora de la activación y/o movilización de células B y/o células T, por ejemplo, en el ganglio linfático); o (iii) inmunosupresión tumoral, por ejemplo, disminución de la inmunosupresión tumoral (por ejemplo, aumento de la infiltración de células T y muerte de células tumorales). Las combinaciones divulgadas en el presente documento pueden proporcionar un efecto beneficioso superior, por ejemplo, en el tratamiento de un trastorno, tal como un efecto anticanceroso mejorado, toxicidad reducida y/o efectos secundarios reducidos, en comparación con la administración en monoterapia de los agentes terapéuticos en la combinación. Por ejemplo, uno o más de los agentes terapéuticos en la combinación se pueden administrar a una dosis más baja, o durante un período de administración más corto, de lo que sería necesario para lograr el mismo efecto terapéutico en comparación con la administración en monoterapia. Por lo tanto, se divulgan composiciones y métodos para tratar el cáncer y otros trastornos inmunitarios utilizando las terapias de combinación mencionadas anteriormente.

Por consiguiente, en un aspecto, la divulgación presenta un método para tratar (por ejemplo, inhibir, reducir, mejorar o prevenir) un trastorno, por ejemplo, una afección o trastorno hiperproliferativo (por ejemplo, un cáncer) en un sujeto. El método incluye administrar al sujeto una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos entre una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación de antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral); (ii) un agente que mejora la respuesta de una célula efectora (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral, tratando de ese modo el trastorno, por ejemplo, la condición o trastorno hiperproliferativo (por ejemplo, el cáncer). En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de LAG-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento). El cáncer tratado puede ser, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, tal como un cáncer de pulmón, un melanoma, un cáncer de riñón, un cáncer de hígado, un mieloma, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer colorrectal., un cáncer de páncreas, un cáncer hematológico, un linfoma no Hogdkin o una leucemia, o una lesión metastásica del cáncer.

En otro aspecto, la divulgación presenta un método para reducir una actividad (por ejemplo, crecimiento, supervivencia o viabilidad, o todos), de una célula hiperproliferativa (por ejemplo, un cáncer). El método incluye poner en contacto la célula con una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos entre una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación de antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral); (ii) un agente que mejora la respuesta de una célula efectora (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral, reduciendo así una actividad en la célula hiperproliferativa. En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de LAG-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento). El método se puede realizar en un sujeto, por ejemplo, como parte de un protocolo terapéutico. La célula cancerosa puede ser, por ejemplo, una célula de un cáncer descrito en el presente documento, tal como un cáncer de pulmón, un melanoma, un cáncer de riñón, un cáncer de hígado, un mieloma, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer colorrectal, un cáncer de páncreas, un cáncer hematológico, un linfoma no Hogdkin o una leucemia, o una lesión metastásica del cáncer.

En determinadas realizaciones de los métodos divulgados en el presente documento, el método incluye además determinar el nivel de infiltración de una célula inmune (por ejemplo, una célula T) (por ejemplo, el nivel de linfocitos infiltrantes de tumores (TIL)) en el sujeto. En una realización, el nivel de infiltración de células inmunes se determina in vivo, por ejemplo, de forma no invasiva (por ejemplo, detectando un anticuerpo contra un marcador de células T marcado de forma detectable usando una técnica adecuada de formación imágenes, por ejemplo, barrido por tomografía de emisión de positrones (PET)). En otras realizaciones, el nivel de infiltración de células inmunes se determina en una muestra (por ejemplo, una biopsia de tumor) adquirida del sujeto (por ejemplo, usando técnicas inmunohistoquímicas). En realizaciones, que responden a un nivel bajo o no detectable de infiltrado tumoral en el sujeto, se administran uno o más agentes de las categorías (i) o (ii), o ambos (i) y (ii). En otras realizaciones, en respuesta a un nivel detectable, o un nivel elevado, de infiltrado tumoral en el sujeto, se administran uno o más agentes de la categoría (iii). Las etapas de detección también se pueden usar, por ejemplo, para controlar la eficacia de un agente terapéutico descrito en el presente documento. Por ejemplo, la etapa de detección se puede utilizar para controlar la eficacia de los agentes terapéuticos de las categorías (i), (ii) y/o (iii).

En otro aspecto, la divulgación presenta una composición (por ejemplo, una o más composiciones o formas de dosificación), que incluye una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos entre una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación de antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral); (ii) un agente que mejora la respuesta de una célula efectora (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) un agente que reduce la inmunosupresión tumoral. En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de LAG-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento).

En otro aspecto más, la divulgación presenta una composición (por ejemplo, una o más composiciones o formas de dosificación como se describe en el presente documento), para su uso en el tratamiento de un trastorno, por ejemplo, un cáncer. En las realizaciones, la composición para su uso incluye una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos entre una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación de antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral ); (ii) un agente que mejora la respuesta de una célula efectora (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) un agente que reduce la inmunosupresión tumoral. En algunas realizaciones, la combinación usada incluye un inhibidor de LAG-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento). El cáncer puede ser, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, tal como un cáncer de pulmón, un melanoma, un cáncer de riñón, un cáncer de hígado, un mieloma, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer colorrectal, un cáncer de páncreas, un cáncer hematológico, un linfoma no Hogdkin o una leucemia, o una lesión metastásica del cáncer.

Formulaciones, por ejemplo, formulaciones de dosificación y kits, por ejemplo, kits terapéuticos, que incluyen una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos entre una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación de antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral); (ii) un agente que mejora la respuesta de una célula efectora (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) también se describen un agente que disminuye la inmunosupresión del tumor, reduciendo así una actividad en la célula, y (opcionalmente) las instrucciones de uso. En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de LAG-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento).

Las combinaciones de agentes terapéuticos divulgadas en el presente documento incluyen dos o más agentes terapéuticos descritos en el presente documento. Los agentes terapéuticos en la combinación pueden pertenecer a la misma categoría, por ejemplo, dos o más agentes terapéuticos de la categoría (i), o pueden incluir al menos un agente de dos o más categorías (por ejemplo, un agente terapéutico de la categoría (i) combinado con un agente terapéutico de categoría (ii)), como se describe a continuación. Ciertos agentes terapéuticos pueden pertenecer a dos o más categorías de las categorías (i)-(iii). Por ejemplo, un agente terapéutico (por ejemplo, un agonista de GITR, un antagonista de IDO, un inhibidor de TGF-b, entre otros) puede actuar como agente terapéutico en múltiples categorías.

Las características o realizaciones adicionales de los métodos, composiciones, formulaciones de dosificación y kits descritos en el presente documento incluyen uno o más de los siguientes:

Combinaciones

En determinadas realizaciones, la combinación incluye uno, dos, tres, cuatro o más agentes terapéuticos que mejoran la presentación de antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral) (denominada en el presente documento "combinación de presentación de antígeno"). En determinadas realizaciones, la combinación de presentación de antígeno incluye uno o más de: un agente que mejora la presentación de antígeno (por ejemplo, una vacuna, por ejemplo, una vacuna basada en células o antígenos); un agente que mejora la lisis de las células tumorales (por ejemplo, un virus oncolítico); un agente que estimula (por ejemplo, desinhibe) un fagocito, por ejemplo, un activador de interferón de tipo I (IFN) (por ejemplo, un agonista de TLR, un agonista del receptor similar a RIG-I (RLR)) y/o un agente que activa y/o recluta una célula dendrítica o un macrófago (por ejemplo, un macrófago I), por ejemplo, un acoplador celular bi o triespecífico.

En algunas realizaciones, la combinación de presentación de antígeno incluye uno, dos, tres, cuatro, cinco o más agentes terapéuticos elegidos entre: (i) un agonista del estimulador de genes de interferón (un agonista de STING), (ii) un agonista de un receptor tipo Toll (TLR) (por ejemplo, un agonista de TLR-3, TLR-4, TLR-5, TLR-7, TLR-8 o TLR-9), (iii) un modulador de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo TIM-3), (iv) un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR), (v) un inhibidor de c-Met, (vi) un inhibidor de TGFb (por ejemplo, un anticuerpo anti-TGFb), (vii) un Inhibidor de IDO/TDO, (viii) un antagonista de A2AR, (ix) un virus oncolítico, (x) una vacuna (por ejemplo, una vacuna con estructura), o (xi) un acoplador celular bi o tri-específico. Puede usarse cualquier combinación de los agentes (i)-(xi) mencionados anteriormente en la combinación de presentación de antígeno. En un ejemplo de realización, la combinación de presentación de antígeno incluye un agonista de STING. En otro ejemplo de realización, la combinación de presentación de antígeno incluye un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR7). En otro ejemplo de realización, la combinación de presentación de antígeno incluye un agonista de STING y un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR7). En algunas realizaciones, la combinación de presentación de antígeno se elige entre un agonista de STING, un agonista de TLR, un antagonista de A2AR o un virus oncolítico o una combinación de los mismos y, opcionalmente, uno o más de (iii)-(vii) o (x)-(xi). En algunas realizaciones, la combinación de presentación de antígeno se elige entre un agonista de STING o un agonista de TLR, o una combinación de ambos y, opcionalmente, uno o más de (iii)-(xi). En otra realización, la combinación de presentación de antígeno incluye un agonista de STING, un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR7) y un modulador de TIM-3 (por ejemplo, un inhibidor anti-TIM-3). En otra realización, la combinación de presentación de antígeno incluye un agonista de STING, un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR7) y un inhibidor de VEGFR. En otra realización, la combinación de presentación de antígeno incluye un agonista de STING, un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR7) y un inhibidor de c-MET. En otras realizaciones más, la combinación de presentación de antígeno incluye un virus oncolítico. En otras realizaciones, la combinación de presentación de antígeno incluye un virus oncolítico y una citocina, por ejemplo, un virus oncolítico que expresa uno o más de GM-CSF, o un CSF (por ejemplo, CSF1 o CSF2). En algunas realizaciones, la combinación de presentación de antígeno incluye un acoplador celular bi o tri-específico, por ejemplo, una molécula de anticuerpo bi o tri-específico para CD47 y CD19, con o sin un dominio Fc. En algunas realizaciones, la combinación de presentación de antígeno incluye un inhibidor de TGFb (por ejemplo, un anticuerpo anti-TGFb). En otras realizaciones, la combinación de presentación de antígeno incluye un inhibidor de IDO/TDO. En otras realizaciones más, la combinación de presentación de antígeno incluye un antagonista de A2AR. En otras realizaciones más, la combinación de presentación de antígeno incluye una vacuna (por ejemplo, IL-2 en combinación con MUC1, o una vacuna basada en células dendríticas (por ejemplo, Provenge®)). En otras realizaciones más, la combinación de presentación de antígeno incluye una vacuna y un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR como se describe en el presente documento). En cierta realización, la combinación de presentación de antígeno incluye una vacuna y un agonista de STING. En cierta realización, la combinación de presentación de antígeno incluye una vacuna, un agonista de STING y un agonista de TLR.

En determinadas realizaciones, la combinación incluye uno, dos, tres, cuatro, cinco o más agentes terapéuticos que mejoran la respuesta de una célula efectora (denominada en el presente documento "combinación de células efectoras"). En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un activador de linfocitos, por ejemplo, un activador de células NK y/o un activador de células T. En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras activa (por ejemplo, desinhibe) un linfocito infiltrante de tumor (TIL), por ejemplo, una célula NK o una célula T. En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un modulador de células NK elegido entre un modulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo) de un receptor de NK (por ejemplo, un modulador de uno o más de NKG2A, KIR3DL, NKp46, MICA o CEACAM1); una interleucina o una variante de interleucina (por ejemplo, una citocina IL-2, IL-15, IL-21, IL-13R o IL-12 o una variante de las mismas, o una combinación de las mismas); un acoplador celular bi o tri-específico (por ejemplo, una molécula de anticuerpo biespecífico de NKG2A y CD138, o una molécula de anticuerpo biespecífico de c D3 y TCR); una terapia con células NK; o una vacuna que incluye células NK y un antígeno/estimulante inmunológico. En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un inmunomodulador (por ejemplo, uno o más de: un activador de una molécula coestimuladora o un inhibidor de una molécula de punto de control inmunológico como se describe en el presente documento). En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un modulador de células T elegido entre un inhibidor de un inhibidor de punto de control (por ejemplo, un inhibidor de uno o más de: PD-1, PD-L1, TIM-3, LAG-3, VISTA, DKG-a, B7-H3, B7-H4, TIGIT, CTlA4, BTLA, CD160, TIM1, IDO, LAIR1, IL-12 o una combinación de los mismos, por ejemplo, un inhibidor de LAG-3 y PD-1, o un inhibidor de LAG-3 y TIM-3). En una realización, el inhibidor del inhibidor del punto de control es una molécula de anticuerpo (por ejemplo, un anticuerpo mono o biespecífico o un fragmento del mismo como se describe en el presente documento). Por ejemplo, el inhibidor del inhibidor del punto de control es una molécula de anticuerpo contra PD-1, PD-L1, TIM-3, LAG-3, VISTA, B7-H4, CTLA-4 o TIGIT, o cualquier combinación de los mismos (por ejemplo, una combinación como se describe en el presente documento). En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un modulador de células T elegido entre un agonista o un activador de una molécula coestimuladora. En una realización, el agonista de la molécula coestimuladora se elige entre un agonista (por ejemplo, un anticuerpo agonista o un fragmento de unión a antígeno del mismo, o una fusión soluble) del ligando GITR, OX40, ICOS, SLAM (por ejemplo, SLAMF7), HVEM, LIGHT, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), CD30, CD40, BAFFR, CD7, NKG2C, NKp80, CD160, B7-H3 o CD83. En otras realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un acoplador biespecífico de células T (por ejemplo, una molécula de anticuerpo biespecífica que se une a CD3 y un antígeno tumoral (por ejemplo, EGFR, PSCA, PSMA, EpCAM, HER2 entre otros).

En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras incluye uno, dos, tres, cuatro, cinco o más agentes terapéuticos elegidos entre: (i) un modulador de GITR (por ejemplo, un agonista de GITR), (ii) un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento), (iii) un inhibidor de PD-L1, (iv) un inhibidor de IAP (inhibidor de la proteína de apoptosis), (v) un inhibidor de EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico), (vi) un inhibidor de la diana de rapamicina (mTOR), (vii) IL-15 o una variante de la misma, (viii) un inhibidor de CTLA-4, (ix) un acoplador de células T biespecífico (por ejemplo, una molécula de anticuerpo biespecífico que se une a CD3 y un antígeno tumoral (por ejemplo, EGFR, PSCA, PSMA, EpCAM, HER2 entre otros), (x) un agonista de CD40 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CD40), (xi) un agonista de OX40 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-OX40), o (xii) un agonista de CD27 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CD27). Se puede usar cualquier combinación de los agentes mencionados anteriormente en la combinación de células efectoras. En un ejemplo de realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista de GITR. En otra realización, la combinación de células efectoras incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). En otra de realización, la combinación de células efectoras incluye un inhibidor de PD-L1. En otras realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un agonista de GITR y un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). En otras realizaciones, la combinación de célula efectoras incluye un agonista de GITR y un inhibidor de PD-L1. En otras realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un agonista de GITR, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento) y un inhibidor de PD-L1. En otras realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento) y un inhibidor de PD-L1. En una realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista de GITR y un inhibidor de IAP. En otra realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista de GITR y un inhibidor de un inhibidor de EGFR. En otra realización más, la combinación de células efectoras incluye un agonista de GITR y un inhibidor de un inhibidor de mTOR. En una realización, la combinación de células efectoras incluye IL-15 o una variante de la misma. En una realización, la combinación de células efectoras incluye un inhibidor de CTLA-4. En una realización, la combinación de células efectoras incluye un acoplador de células T biespecíficas (por ejemplo, una molécula de anticuerpo biespecífico que se une a CD3 y un antígeno tumoral (por ejemplo, EGFR, PSCA, PSMA, EpCAM, HER2 entre otros). En una realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista de CD40 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CD40). En una realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista de OX40 (por ejemplo, un molécula de anticuerpo anti-OX40). En una realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista de CD27 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CD27).

En determinadas realizaciones, la combinación incluye uno, dos, tres, cuatro, cinco o más agentes terapéuticos que disminuyen la inmunosupresión tumoral (denominada en el presente documento "combinación de inmunosupresión antitumoral"). En algunas realizaciones, la combinación modula la actividad o el nivel de uno o más de Treg, macrófago 2 o MDSC. En algunas realizaciones, la combinación aumenta uno o más de la polarización de M2, el agotamiento de Treg o el reclutamiento de células T. En algunas realizaciones, la combinación de inmunosupresión antitumoral incluye uno, dos, tres, cuatro, cinco o más agentes terapéuticos elegidos entre: (i) un inmunomodulador (por ejemplo, uno o más de: un activador de una molécula coestimuladora (por ejemplo, un agonista de GITR), o un inhibidor de una molécula de punto de control inmunológico (por ejemplo, uno o más de PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3 o CTLA-4), como se describe en el presente documento), (ii) un inhibidor de LCR -1/1R (por ejemplo, un inhibidor del factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF)), (iii) un inhibidor de IL-17, (iv) un inhibidor de IL-1p, (v) un inhibidor de CXCR2, (vi ) un inhibidor de una fosfoinositido 3-quinasa (PI3K, por ejemplo, PI3Ky o PI3K8), (vii) un inhibidor de BAFF-R, (viii) un inhibidor de MALT-1/BTK, (ix) un inhibidor de JAK, (x) un inhibidor de CRTH2, (xi) un inhibidor de VEGFR, (xiii) una IL-15 o una variante de la misma, (xiv) un inhibidor de CTLA-4, (xv) un inhibidor de IDO/TDO, (xvi) un antagonista de A2AR, (xvii) un inhibidor de TGFb, o (xviii) un inhibidor de PFKFB3. En ciertas realizaciones, el inmunomodulador es un inhibidor de una molécula de punto de control inmunológico (por ejemplo, un inhibidor de PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CeAc AM-1, CEACAM-3 y/o CeAc AM-5), o CTLA-4, o cualquier combinación de los mismos). Se puede usar cualquier combinación de los agentes mencionados anteriormente en la combinación de inmunosupresión tumoral. En un ejemplo de realización, la combinación de inmunosupresión antitumoral incluye uno, dos, tres, cuatro, cinco o más agentes terapéuticos elegidos entre un inhibidor de LAG-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento), un inhibidor PD-1, un inhibidor de PD-L1, un modulador de TIM-3 (por ejemplo, un inhibidor anti-TIM-3), un agonista de GITR, un inhibidor de CSF-1/1R (por ejemplo, Un inhibidor de M-CSF), un inhibidor de IL-17, un inhibidor de IL-1p o un inhibidor de CXCR2. En una realización, la combinación de inmunosupresión antitumoral incluye uno, dos o todos de un inhibidor de CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de M-CSF), un inhibidor de IL-17, un inhibidor de IL-1p. En una realización, la combinación de inmunosupresión antitumoral incluye un inhibidor de IL-17, un inhibidor de CXCR2, un inhibidor de CRTH2, un antagonista de A2AR o un inhibidor de PFKFB3, o una combinación de los mismos.

En algunas realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación de presentación de antígeno. En otras realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación de células efectoras. En otras realizaciones más, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación de inmunosupresión antitumoral. En otras realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación de presentación de antígeno y uno o más agentes terapéuticos de la combinación de células efectoras. En otras realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación de presentación de antígeno y uno o más agentes terapéuticos de la combinación de inmunosupresión antitumoral. En otras realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación de presentación de antígeno, uno o más agentes terapéuticos de la combinación de células efectoras y uno o más agentes terapéuticos de la combinación de inmunosupresión antitumoral. En otras realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación de presentación de antígeno, uno o más agentes terapéuticos de la combinación de células efectoras y uno o más agentes terapéuticos de la combinación de inmunosupresión antitumoral.

En ciertas realizaciones, la combinación incluye:

(i) uno o más agentes terapéuticos de la combinación de presentación de antígeno elegido entre uno, dos o todos de un agonista de STING, un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR7) o un modulador de TIM-3 (por ejemplo, un inhibidor de TIM-3);

(ii) uno o más agentes terapéuticos de la combinación de células efectoras elegidos entre uno, dos o todos de un modulador de GITR (por ejemplo, un agonista de GITR), un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento), o un inhibidor de PD-L1;

(iii) uno o más agentes terapéuticos de la combinación de inmunosupresión antitumoral elegida entre uno, dos o todos de un inhibidor de CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de M-CSF), un inhibidor de IL-17 o un inhibidor de IL-1p; (iv) una combinación de (i) y (ii);

(v) una combinación de (i) y (iii);

(vi) una combinación de (ii) y (iii); o

(vii) una combinación de (i), (ii) y (iii).

La combinación puede usarse para tratar un cáncer como se describe en el presente documento, tal como un cáncer de pulmón, un melanoma, un cáncer de riñón, un cáncer de hígado, un mieloma, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer colorrectal, un cáncer de páncreas, un cáncer hematológico, un linfoma no Hogdkin o una leucemia, o una lesión metastásica del cáncer.

En otras realizaciones, la combinación incluye un agente terapéutico de la combinación de presentación de antígeno (por ejemplo, uno o más de un agonista de STING, un agonista de TLR, una vacuna o un virus oncolítico) en combinación con un agente terapéutico de la célula efectora y/o combinación de inmunosupresión antitumoral (por ejemplo, un inhibidor de un inhibidor del punto de control, por ejemplo, un inhibidor de PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEAc Am -5), o CTLA-4, o cualquier combinación de los mismos. En una realización, uno o más de un agonista de STING, un agonista de TLR, una vacuna o un virus oncolítico se administran en combinación con una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento. En una realización, se administra un agonista de STING y/o una vacuna en combinación con una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento. En una realización, se administra un virus oncolítico en combinación con una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento. La combinación se puede usar para tratar un cáncer como se describe en el presente documento, como un cáncer de pulmón, un melanoma, un cáncer de riñón, un cáncer de hígado, un mieloma, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer colorrectal, un cáncer de páncreas, un cáncer hematológico, un linfoma no Hogdkin, o leucemia, o una lesión metastásica del cáncer.

En determinadas realizaciones, la combinación incluye una combinación de agentes terapéuticos como se proporciona en la sección titulada "Ejemplos de combinaciones de combinaciones de presentación de antígeno, combinaciones de células efectoras y combinaciones de inmunosupresión antitumoral" proporcionada en la Descripción detallada.

Las combinaciones divulgadas en el presente documento se pueden administrar juntas en una sola composición o administrarse por separado en dos o más composiciones diferentes, por ejemplo, composiciones o formas de dosificación como se describe en el presente documento. La administración de los agentes terapéuticos puede realizarse en cualquier orden. El primer agente y los agentes adicionales (por ejemplo, el segundo, tercer agentes) se pueden administrar mediante la misma vía de administración o a través de vías de administración diferentes. Por ejemplo, se puede administrar un primer agente terapéutico al mismo tiempo con, antes o después del agente adicional. En ciertas realizaciones, un primer agente se administra localmente, por ejemplo, un agente terapéutico de cualquiera de las categorías (i)-(iii) se puede acoplar a un agente para direccionamiento al tumor, por ejemplo, un anticuerpo para direccionamiento al tumor (por ejemplo, para formar un conjugado anticuerpo-fármaco), o cualquier otro agente de administración (por ejemplo, una formulación tal como una formulación dirigida) de manera que la administración del primer agente se localice en un sitio deseado, por ejemplo, un sitio de tumor (por ejemplo, un sitio enriquecido con células dendríticas). En una realización, el agente terapéutico es un antígeno (por ejemplo, una vacuna, por ejemplo, una vacuna contra el cáncer in situ), que se dirige al entorno del tumor, lo que da como resultado la activación de células dendríticas. El agente terapéutico también puede administrarse localmente, por ejemplo, inyectarse, en el sitio de un tumor (por ejemplo, administración intratumoral o peritumoral). El suministro o administración localizada del agente terapéutico puede reducir uno o más efectos secundarios o toxicidades que de otro modo estarían asociados con la administración sistémica del agente terapéutico. En un ejemplo de realización, un agente terapéutico (por ejemplo, STING o un TLR) se puede conjugar con un anticuerpo que se une a un tumor (por ejemplo, un anticuerpo que se une a HER2), administrando de este modo el agente terapéutico a la célula que expresa HER-2.

Cuando se administran en combinación, el primer agente, el agente adicional (por ejemplo, segundo o tercer agente), o todos, se pueden administrar en una cantidad o dosis que sea mayor, menor o igual que la cantidad o dosis de cada uno. agente utilizado individualmente, por ejemplo, como monoterapia. En ciertas realizaciones, la cantidad o dosis administrada del primer agente, el agente adicional (por ejemplo, el segundo o tercer agente), o todos, es menor (por ejemplo, al menos 20%, al menos 30%, al menos 40% o al menos 50%) que la cantidad o dosis de cada agente usado individualmente, por ejemplo, como una monoterapia. En otras realizaciones, la cantidad o dosis del primer agente, el agente adicional (por ejemplo, segundo o tercer agente), o todos, que da como resultado un efecto deseado (por ejemplo, tratamiento del cáncer) es menor (por ejemplo, al menos 20%, al menos 30%, al menos 40%, o al menos 50% menos).

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra, sola o en combinación (por ejemplo, en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1), a una dosis de menos de, o aproximadamente, 5 mg./kg; menos de, o aproximadamente, 4 mg/kg; menos de, o aproximadamente, 3 mg/kg; menos de, o aproximadamente, 2 mg/kg; menos de, o aproximadamente, 1 mg/kg, cada dos semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de 1 a 5 mg/kg cada dos semanas; 1 a 4 mg/kg cada dos semanas, 1 a 3 mg/kg cada dos semanas o 1 a 2 mg/kg cada dos semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra, sola o en combinación (por ejemplo, en combinación con una molécula de anticuerpo anti-LAG-3) a una dosis de 1 a 5 mg/kg cada dos semanas; 1 a 4 mg/kg cada dos semanas, 1 a 3 mg/kg cada dos semanas o 1 a 2 mg/kg cada dos semanas.

En ciertas realizaciones, las combinaciones pueden estar en forma de una molécula de anticuerpo, por ejemplo, una molécula biespecífica o triespecífica, contra uno o más agentes terapéuticos elegidos entre la combinación de presentación de antígeno, la combinación de células efectoras o la combinación de inmunosupresión antitumoral, o cualquier combinación de las mismas. Por ejemplo, una molécula biespecífica contra dos o más inhibidores de puntos de control (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y anti-PD-1). En otras realizaciones, las combinaciones pueden estar en forma de una molécula de anticuerpo, por ejemplo, una molécula biespecífica o triespecífica, contra uno o más agentes terapéuticos elegidos entre dos o todas de las combinaciones de presentación de antígeno, la combinación de células efectoras, y/o la combinación de inmunosupresión antitumoral. En una realización, la molécula de anticuerpo es un anticuerpo completo o un fragmento del mismo (por ejemplo, un Fab, F(ab')2, Fv o un fragmento Fv de cadena sencilla (scFv)). En otras realizaciones más, la molécula de anticuerpo tiene una región constante de cadena pesada (Fc) elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD e IgE; particularmente, elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4, más particularmente, la región constante de cadena pesada de IgG1 o IgG4 (por ejemplo, IgG1 o IgG4 humana). En una realización, la región constante de la cadena pesada es IgG1 humana o IgG4 humana. En una realización, la región constante se altera, por ejemplo, se muta, para modificar las propiedades de la molécula de anticuerpo (por ejemplo, para aumentar o disminuir uno o más de: unión al receptor Fc, glicosilación del anticuerpo, el número de residuos de cisteína, la función de la célula efectora, o la función de complemento). En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo está en forma de una molécula de anticuerpo biespecífica o multiespecífica, por ejemplo, una molécula de anticuerpo biespecífica, triespecífica como se describe en el presente documento.

Ciertos ejemplos de agentes terapéuticos y combinaciones de los mismos se proporcionan a continuación en el presente documento. En la Descripción detallada se proporciona una descripción más detallada de los agentes terapéuticos usados en las combinaciones.

Inmunomoduladores

En ciertas realizaciones, el inmunomodulador usado en las combinaciones divulgadas en el presente documento (por ejemplo, en combinación con un agente terapéutico elegido de una combinación de presentación de antígeno) es un inhibidor de una molécula de punto de control inmunológico. En una realización, el inmunomodulador es un inhibidor de PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 y/o TGF beta. En una realización, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunológico inhibe PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEAc A m -3 y/o CEACAM-5), CTLA-4, o cualquier combinación de los mismos.

La inhibición de una molécula inhibidora se puede realizar a nivel del ADN, ARN o la proteína. En las realizaciones, se puede usar un ácido nucleico inhibidor (por ejemplo, un ARNbc, ARNpi o ARNhp), para inhibir la expresión de una molécula inhibidora. En otras realizaciones, el inhibidor de una señal inhibidora es un polipéptido, por ejemplo, un ligando soluble (por ejemplo, PD-1-Ig o CTLA-4 Ig), o un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une a la molécula inhibidora; por ejemplo, un anticuerpo o fragmento del mismo (también denominado en el presente documento como "una molécula de anticuerpo") que se une a PD-1, PD-L1, PD-L2, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), CTLA-4, TIM-3, LAG-3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 y/o TGF beta, o una combinación de los mismos.

En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo está en forma de una molécula de anticuerpo biespecífica o multiespecífica. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífica tiene una primera especificidad de unión para LAG-3 y una segunda especificidad de unión para PD-1, T iM-3, CeACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y PD-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y TIM-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a La G-3 y CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5). En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y CEACAM-1. En otra realización más, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y CEACAM-3. En otra realización más, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y CEACAM-5. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y PD-L1. En aún otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a LAG-3 y PD-L2. Cualquier combinación de las moléculas mencionadas anteriormente se puede preparar en una molécula de anticuerpo multiespecífica, por ejemplo, un anticuerpo triespecífico que incluye una primera especificidad de unión a LAG-3, y una segunda y tercera especificidad de unión a uno o más de: PD-1, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2.

En otras realizaciones, el inmunomodulador es un inhibidor de LAG-3, por ejemplo, LAG-3 humana. En una realización, el inhibidor de LAG-3 es una molécula de anticuerpo contra LAG-3. El inhibidor de LAG-3 se puede administrar solo o en combinación con otros inmunomoduladores, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), TIM-3, PD-1, PD-L1 o CTLA-4. En un ejemplo de realización, el inhibidor de LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un inhibidor de PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1. En un ejemplo de realización, el inhibidor de LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un inhibidor de PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1. En otra realización, el inhibidor de LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un inhibidor de TIM-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3. En otra realización, el inhibidor de LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, inhibidor de CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), por ejemplo, un molécula de anticuerpo anti-CEACAM. En otra realización, el inhibidor de LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-1. En otra realización, el inhibidor de LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-5, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-5. En incluso otras realizaciones, el inhibidor de LAG-3, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un inhibidor de PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 y un inhibidor TIM-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3. Otras combinaciones de inmunomoduladores con un inhibidor de La G-3 (por ejemplo, Uno o más de PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 y/o TGF beta) también se encuentran dentro de la presente divulgación. Cualquiera de las moléculas de anticuerpo conocidas en la técnica o divulgadas en el presente documento puede usarse en las combinaciones de inhibidores de la molécula de punto de control antes mencionadas

En determinadas realizaciones, el inmunomodulador es un inhibidor de PD-1, por ejemplo, PD-1 humana. En otra realización, el inmunomodulador es un inhibidor de PD-L1, por ejemplo, PD-L1 humana. En una realización, el inhibidor de PD-1 o PD-L1 es una molécula de anticuerpo contra PD-1 o PD-L1. El inhibidor de PD-1 o PD-L1 se puede administrar solo o en combinación con otros inmunomoduladores, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de LAG-3, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5) o CTLA-4. En un ejemplo de realización, el inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1, se administra en combinación con un inhibidor de LAG-3, por ejemplo, un molécula de anticuerpo anti-LAG-3. En otra realización, el inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1, se administra en combinación con un inhibidor de TIM-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3.. En otra realización, el inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1, se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, un inhibidor CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM. En otra realización, el inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1, se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-1, por ejemplo, una molécula anticuerpo anti-CEACAM-1.. En otra realización, el inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1, se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-5, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-5. En aún otras realizaciones, el inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1, se administra en combinación con un inhibidor de LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, y un inhibidor de TIM-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3. Otras combinaciones de inmunomoduladores con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, uno o más de PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 y/o TGF beta) también se encuentran dentro de la presente divulgación. Cualquiera de las moléculas de anticuerpo conocidas en la técnica o divulgadas en el presente documento puede usarse en las combinaciones de inhibidores de la molécula de punto de control mencionadas anteriormente.

En otras realizaciones, el inmunomodulador es un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), por ejemplo, CEACAM humana (por ejemplo, CEACAM-1, CEAc A m -3 y/o CEACAM-5). En una realización, el inmunomodulador es un inhibidor de CEACAM-1, por ejemplo, CEACAM-1 humana. En otra realización, el inmunomodulador es un inhibidor de CEACAM-3, por ejemplo, CEACAM-3 humana. En otra realización, el inmunomodulador es un inhibidor de CEACAM-5, por ejemplo, CEACAM-5 humana. En una realización, el inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CeAc AM-5) es una molécula de anticuerpo contra CEACAM (por ejemplo, CeACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5). El inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CeAc AM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5) se puede administrar solo o en combinación con otros inmunomoduladores, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de LAG-3, TIM-3, PD-1, PD-L1 o CTLA-4.

En otras realizaciones, el inmunomodulador es un inhibidor de TIM-3, por ejemplo, TIM-3 humana. En una realización, el inhibidor de TIM-3 es una molécula de anticuerpo contra TIM-3. El inhibidor de TIM-3 se puede administrar solo o en combinación con otros inmunomoduladores, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), LAG-3, PD-1, PD-L1 o CTLA-4.

En ciertas realizaciones, el inmunomodulador usado en las combinaciones divulgadas en el presente documento (por ejemplo, en combinación con un agente terapéutico elegido de una combinación de presentación de antígeno) es un activador o agonista de una molécula coestimuladora. En una realización, el agonista de la molécula coestimuladora se elige entre un agonista (por ejemplo, un anticuerpo agonista o un fragmento de unión a antígeno del mismo, o una fusión soluble) del ligando de OX40, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA -1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 o CD83.

En otras realizaciones, el inmunomodulador es un agonista de GITR. En una realización, el agonista de GITR es una molécula de anticuerpo contra GITR. El agonista de GITR se puede administrar solo o en combinación con otros inmunomoduladores, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de PD-1, PD-L1, CTLA-4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACa M-3 y/o CEACAM-5 ), TIM-3 o LAG-3. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-GITR es un anticuerpo biespecífico que se une a GITR y PD-1, PD-L1, CTLA-4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), TIM-3 o LAG-3. En un ejemplo de realización, la molécula de anticuerpo anti-GITR se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, una molécula anti-PD-1 como se describe en el presente documento). La molécula de anticuerpo de GITR y la molécula de anticuerpo anti-PD-1 pueden estar en forma de una composición de anticuerpo separada o como una molécula de anticuerpo biespecífica. En otras realizaciones, se puede administrar un agonista de GITR en combinación con otra molécula coestimuladora, por ejemplo, un agonista del ligando de OX40, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 o CD83.

En otras realizaciones, el inmunomodulador es un activador de una molécula coestimuladora (por ejemplo, un agonista de OX40). En una realización, el agonista de OX40 es una molécula de anticuerpo contra OX40. El agonista de OX40 se puede administrar solo o en combinación con otros inmunomoduladores, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de PD-1, PD-L1, CTLA-4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), TIM-3 o LAG-3. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-OX40 es un anticuerpo biespecífico que se une a GITR y PD-1, PD-L1, CTLA-4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), TIM-3 o LAG-3. En otro ejemplo de realización, se administra una molécula de anticuerpo OX40 en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, una molécula anti-PD-1 como se describe en el presente documento). La molécula de anticuerpo OX40 y la molécula de anticuerpo anti-PD-1 pueden estar en forma de una composición de anticuerpo separada o como una molécula de anticuerpo biespecífica. En otras realizaciones, el agonista de OX40 se puede administrar en combinación con otra molécula coestimuladora, por ejemplo, un agonista del ligando de GITR, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 o CD83.

Se observa que en el presente documento sólo se proporcionan ejemplos de combinaciones de inhibidores de inhibidores de puntos de control o agonistas de moléculas coestimuladoras. Las combinaciones adicionales de estos agentes están dentro del alcance de la presente divulgación.

Moléculas de anticuerpos contra LAG-3

En una realización, el inhibidor de LAG-3 es una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en la publicación de solicitud de patente de los Estados Unidos No. US 2015/0259420 (USSN 14/657,260), titulada " Antibody Molecules to LAG-3 and Uses Thereof".

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una región de unión a antígeno, por ejemplo, una región variable o su fragmento de unión a antígeno, de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos, tres o cuatro regiones variables de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias anteriormente mencionadas. En una realización, la molécula de anticuerpo incluye una sustitución (por ejemplo, una sustitución de Cys por Ser en la posición 84) en la región 3 del marco de la cadena pesada (VHFW3) (por ejemplo, como se muestra en las Tablas 1 y 2).

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una o dos regiones variables de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una o dos regiones variables de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG4, por ejemplo, una IgG4 humana. En una realización, la IgG4 humana incluye una sustitución en la posición 228 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, una sustitución de Ser por Pro). En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG1, por ejemplo, una IgG1 humana. En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 297 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, una sustitución de Asn por Ala). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 265 de acuerdo con la numeración EU, una sustitución en la posición 329 de acuerdo con la numeración EU, o ambas (por ejemplo, una sustitución de Asp por Ala en la posición 265 de acuerdo con la numeración EU y/o una sustitución de Pro por Ala en la posición 329 de acuerdo con la numeración EU). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 234 de acuerdo con la numeración EU, una sustitución en la posición 235 de acuerdo con la numeración EU, o ambas (por ejemplo, una sustitución de Leu por Ala en la posición 234 de acuerdo con la numeración EU y/o una sustitución de Leu por Ala en la posición 235 de acuerdo con la numeración EU). En una realización, la región constante de cadena pesada comprende una secuencia de aminoácidos expuesta en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a la misma.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, una región constante de cadena ligera kappa humana. En una realización, la región constante de cadena ligera comprende una secuencia de aminoácidos expuesta en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a la misma.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG4, por ejemplo, una IgG4 humana, y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, una región constante de cadena ligera kappa humana, por ejemplo, una región constante de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos expuesta en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99 % idéntica o superior) a la misma. En una realización, la región constante es una IgG4 mutada, por ejemplo, una IgG4 humana mutada (por ejemplo, tiene una mutación en la posición 228 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, una mutación S228P). En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG1, por ejemplo, una IgG1 humana, y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, una región constante de cadena ligera kappa humana, por ejemplo, una región constante de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos expuesta en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a la misma. En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 297 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, una sustitución de Asn por Ala). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 265 de acuerdo con la numeración EU, una sustitución en la posición 329 de acuerdo con la numeración EU, o ambas (por ejemplo, una sustitución de Asp por Ala en la posición 265 de acuerdo con la numeración EU y/o una sustitución de Pro por Ala en la posición 329 de acuerdo con la numeración EU). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 234 de acuerdo con la numeración EU, una sustitución en la posición 235 de acuerdo con la numeración EU, o ambas (por ejemplo, una sustitución de Leu por Ala en la posición 234 de acuerdo con la numeración EU y/o una sustitución de Leu por Ala en la posición 235 de acuerdo con la numeración EU).

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye un dominio variable de cadena pesada y una región constante, un dominio variable de cadena ligera y una región constante, o ambas, que comprende la secuencia de aminoácidos de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3, opcionalmente, comprende una secuencia líder de una cadena pesada, una cadena ligera o ambas, como se muestra en la Tabla 4; o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres regiones determinantes de complementariedad (CDR) de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificada por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos o tres CDR mostradas en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, con respecto a la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres regiones determinantes de complementariedad (CDR) de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificada por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos o tres CDR mostradas en la Tabla 1.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones de aminoácidos o eliminaciones, en relación con el aminoácido que se muestra en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende un secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, con respecto al aminoácido mostrado en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR mostradas en la Tabla 1.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácido mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, con respecto a la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye todas las seis CDR de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1, o estrechamente relacionada con las CDR, por ejemplo, las CDR que son idénticas o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR mostradas en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir cualquier CDR divulgada en el presente documento.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con Kabat (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se expone en la Tabla 1) de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos o tres CDR de acuerdo con Kabat que se muestra en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con Kabat (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se expone en la Tabla 1) de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos o tres CDR de acuerdo con Kabat que se muestra en la Tabla 1.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR de acuerdo con Kabat (por ejemplo, al menos una, dos, tres, cuatro, cinco, o seis CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se expone en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR de acuerdo con Kabat et al., que se muestran en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir cualquier CDR divulgada en el presente documento.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye las seis CDR de acuerdo con Kabat (por ejemplo, las seis CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se expone en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a las seis CDR de acuerdo con Kabat et al., que se muestran en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir cualquier CDR divulgada en el presente documento.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables (por ejemplo, al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se expone en la Tabla 1) de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J, de acuerdo con Chothia (por ejemplo, al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se expone en la Tabla 1); o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con Chothia que se muestran en Tabla 1.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con Chothia (por ejemplo, al menos uno, dos o tres CDR de acuerdo con la definición de Chothia como se expone en la Tabla 1) de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con Chothia que se muestran en Tabla 1.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables (por ejemplo, al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se expone en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o al menos los aminoácidos de aquellos bucles hipervariables que hacen contacto con LAG-3. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables de Chothia de la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye todos los seis bucles hipervariables (por ejemplo, todos los seis bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se expone en la Tabla 1) de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o bucles hipervariables estrechamente relacionadas, por ejemplo, bucles hipervariables que son idénticos o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con todos los seis bucles hipervariables mostrados en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir cualquier bucle hipervariable descrito en el presente documento.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables que tienen las mismas estructuras canónicas que el correspondiente bucle hipervariable de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J, por ejemplo, las mismas estructuras canónicas como al menos el bucle 1 y/o el bucle 2 de los dominios variables de cadena pesada y/o ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento. Véase, por ejemplo, Chothia et al., (1992) J. Mol. Biol. 227: 799-817; Tomlinson et al., (1992) J. Mol. Biol. 227: 776-798 para descripciones de estructuras canónicas de bucle hipervariable. Estas estructuras se pueden determinar mediante la inspección de las tablas descritas en estas referencias.

En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una combinación de CDR o bucles hipervariables definidos de acuerdo con Kabat et al., y Chothia et al.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR o bucles hipervariables de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, bAp 050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J, de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR o bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia como se expone en la Tabla 1); o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos o tres CDR o bucles hipervariables de acuerdo con Kabat y/o Chothia que se muestran en la Tabla 1.

Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir CDR1 de VH de acuerdo con Kabat et al., o el bucle 1 hipervariable de VH de acuerdo con Chothia et al., o una combinación de los mismos, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. En una realización, la combinación de CDR de Kabat y Chothia de CDR1 de VH comprende la secuencia de aminoácidos GFTLTNYGMN (SEQ ID NO: 286), o una secuencia de aminoácidos sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, que tiene al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras)). La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir además, por ejemplo, las Cd R 2-3 de VH de acuerdo con Kabat et al., y las CDR 1-3 de Vl de acuerdo con Kabat et al., por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. Por consiguiente, en algunas realizaciones, las regiones marco se definen basándose en una combinación de CDR definidas de acuerdo con Kabat et al. y bucles hipervariables definidos de acuerdo con Chothia et al. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir FR1 de VH definida con base en el bucle 1 hipervariable de VH de acuerdo con Chothia et al., y FR2 de VH definida con base en CDR 1-2 de VH de acuerdo con Kabat et al., por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir además, por ejemplo, las FR 3-4 de VH definidas con base en las CDR 2-3 de VH de acuerdo con Kabat et al., y las FR 1-4 de VL definidas con base en las CDR 1-3 de VL de acuerdo con Kabat et al.

La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede contener cualquier combinación de CDR o bucles hipervariables de acuerdo con las definiciones de Kabat y Chothia. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum16-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J, de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia como se expone en la Tabla 1).

En una realización, el anticuerpo anti-LAG-3 incluye:

(a) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 4, una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la s Eq ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15;

(b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 1; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12; (c) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286, una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15; o (d) un VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12.

En sus combinaciones, en otra realización, la molécula de anticuerpo comprende (i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y (ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ iD NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12.

En su combinación, en otra realización más, la molécula de anticuerpo incluye: (i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y (ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ iD NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15.

En una realización, por ejemplo, una realización que comprende una región variable, CDR (por ejemplo, CDR o CDR de Kabat), u otra secuencia a la que se hace referencia en el presente documento, por ejemplo, en la Tabla 1, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífica, una molécula anticuerpo biespecífica o es una molécula de anticuerpo que comprende un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo, por ejemplo, medio anticuerpo o un fragmento de unión a antígeno de medio anticuerpo. En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo biespecífica que tiene una primera especificidad de unión para LAG-3 y una segunda especificidad de unión para PD-1, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a LAG-3 y TIM-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y PD-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5). En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y CEACAM-1. En otra realización más, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y CEACAM-5. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a lAG-3 y PD-L1. En otra realización más, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y PD-L2. Cualquier combinación de las moléculas mencionadas anteriormente se puede elaborar en una molécula de anticuerpo multiespecífica, por ejemplo, un anticuerpo triespecífico que incluye una primera especificidad de unión a LAG-3, y una segunda y tercera especificidad de unión a una o más de: TIM-3, PD-1, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2.

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con una molécula biespecífica que comprende una o más de: TIM-3, PD-1, c Ea CAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3, o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífica usada en combinación se une a CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5) y PD-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica usada en combinación se une a CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5) y TIM-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico usada en combinación se une a PD-1 y TIM-3.

Usos de las terapias de combinación

Las combinaciones divulgadas en el presente documento pueden resultar en una o más de: un aumento en la presentación de antígeno, un aumento en la función de la célula efectora (por ejemplo, una o más de la proliferación de células T, secreción de IFN-y o función citolítica), inhibición de la función reguladora de las células T, un efecto sobre la actividad de múltiples tipos de células, tal como las células T reguladoras, las células T efectoras y las células NK), un aumento de los linfocitos infiltrantes del tumor, un aumento de la proliferación mediada por los receptores de las células T y una disminución en la evasión inmune por las células cancerosas. En una realización, el uso de un inhibidor de lAG-3 en las combinaciones inhibe, reduce o neutraliza una o más actividades de LAG-3, dando como resultado el bloqueo o la reducción de un punto de control inmunológico. Por lo tanto, dichas combinaciones pueden usarse para tratar o prevenir trastornos en los que se desea mejorar una respuesta inmune en un sujeto.

Por consiguiente, en otro aspecto de la divulgación, se proporciona un método para modular una respuesta inmune en un sujeto. El método comprende administrar al sujeto una combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, una combinación que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3), sola o en combinación con uno o más agentes o procedimientos, de manera que la respuesta inmune en el sujeto está modulada. En una realización, la molécula de anticuerpo restaura, mejora, estimula o aumenta una respuesta inmune en el sujeto.

El sujeto puede ser un mamífero, por ejemplo, un primate, preferiblemente un primate superior, por ejemplo, un ser humano (por ejemplo, un paciente que tiene, o corre el riesgo de tener, un trastorno descrito en el presente documento). En una realización, el sujeto necesita mejorar una respuesta inmune. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 restaura, mejora o estimula una respuesta de células T específica de antígeno, por ejemplo, producción de interleucina 2 (IL-2) o interferón gamma (IFN-y) en una respuesta de células T, específica de antígeno en el sujeto. En algunas realizaciones, la respuesta inmune es una respuesta antitumoral. En una realización, el sujeto tiene o corre el riesgo de tener un trastorno descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer o un trastorno infeccioso como se describe en el presente documento. En determinadas realizaciones, el sujeto está inmunodeprimido o corre el riesgo de estarlo. Por ejemplo, el sujeto está experimentando o ha sido sometido a un tratamiento quimioterapéutico y/o radioterapia. Alternativamente, o en combinación, el sujeto está, o corre el riesgo de estar inmunodeprimido como resultado de una infección.

En un aspecto de la divulgación, se proporciona un método para tratar (por ejemplo, uno o más de reducir, inhibir o retrasar la progresión) un cáncer o tumor en un sujeto. El método comprende administrar al sujeto una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 divulgada en el presente documento (por ejemplo, una combinación que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3).

En determinadas realizaciones, el cáncer tratado con la combinación incluye, pero no se limita a, un tumor sólido, un cáncer hematológico (por ejemplo, leucemia, linfoma, mieloma) y una lesión metastásica del mismo. En una realización, el cáncer es un tumor sólido. Los ejemplos de tumores sólidos incluyen neoplasias, por ejemplo, sarcomas y carcinomas (por ejemplo, adenocarcinomas), de los diversos sistemas de órganos, como los que afectan a pulmón, mama, linfoide, gastrointestinal o colorrectal, genitales y tracto genitourinario (por ejemplo, células renales, uroteliales, de la vejiga), faringe, SNC (por ejemplo, células cerebrales, neurales o gliales), piel (por ejemplo, melanoma), cabeza y cuello (por ejemplo, carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (HNSCC)) y páncreas. Por ejemplo, el cáncer se puede elegir entre un cáncer de piel (por ejemplo, un melanoma o un carcinoma de células de Merkel), un cáncer de colon, un cáncer gástrico, un cáncer de recto, un cáncer de riñón (por ejemplo, un cáncer de riñón (por ejemplo, carcinoma celular)), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama que no expresa uno, dos o todos los receptores de estrógeno, receptor de progesterona o Her2/neu, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), un cáncer de hígado, un cáncer de pulmón (por ejemplo, u cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC con histología escamosa y/o no escamosa) o cáncer de pulmón de células pequeñas), un cáncer de próstata, un cáncer de cabeza o cuello (por ejemplo, carcinoma de células escamosas HPV+), un cáncer de intestino delgado, un cáncer de cerebro (por ejemplo, un glioblastoma), un cáncer de endometrio o un cáncer de esófago. Los ejemplos de cáncer hematológico incluyen, pero no se limitan a, leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide, leucemia linfoide o leucemia linfocítica crónica (CLL)), linfoma (por ejemplo, linfoma de Hogdkin (HL), linfoma no Hogdkin (NHL), linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), linfoma de células T o linfoma de células del manto (MCL)) y mieloma, por ejemplo, mieloma múltiple. El cáncer puede estar en una etapa temprana, intermedia, tardía o metastásica.

En algunas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer colorrectal (por ejemplo, RCC), melanoma, por ejemplo, melanoma en estadio avanzado (por ejemplo, melanoma en estadio II-IV) o melanoma positivo para HLA-A2; un cáncer de páncreas, por ejemplo, cáncer de páncreas avanzado; un cáncer de mama, por ejemplo, carcinoma de mama metastásico o cáncer de mama triple negativo; un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, HNSCC); un cáncer de esófago; un carcinoma de células renales (RCC), por ejemplo, carcinoma de células renales claras (CCRCC) o carcinoma de células renales metastásico (MRCC); un cáncer de pulmón (por ejemplo, NSCLC); un cáncer de cuello uterino; cáncer de vejiga; o una neoplasia maligna hematológica, por ejemplo, leucemia (por ejemplo, leucemia linfocítica) o linfoma (por ejemplo, linfoma de Hogdkin (HL), linfoma no Hogdkin (NHL), linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), un linfoma de células del manto (MCL), o una CLL, por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica recidivante o refractaria).

En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de alta MSI (alta inestabilidad de microsatélites) (por ejemplo, un cáncer de endometrio de alta MSI). En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer EBV+. En determinadas realizaciones, el cáncer es un cáncer que expresa FoxP3 (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas que expresa FoxP3 o un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello). En otras realizaciones, el cáncer es EGFR mutado o c-MET positivo (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas con mutación de EGFR o positivo para c-MET). En otras realizaciones, el cáncer tiene una mutación de KRAS (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas que tiene una mutación de KRAS).

En una realización, el cáncer es un melanoma avanzado o irresecable que no responde a otras terapias. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma con una mutación de BRAF (por ejemplo, una mutación de BRAF V600). En otras realizaciones más, la combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, la combinación que comprende la molécula de anticuerpo anti-LAG-3) se administra sola o en combinación con uno o más segundos agentes (por ejemplo, un inhibidor de BRAF). En una realización, la combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, la combinación que comprende la molécula de anticuerpo anti-LAG-3) se administra en combinación con (por ejemplo, antes o después del tratamiento o simultáneamente con) un inhibidor de un modulador del punto de control inmunológico (por ejemplo, un inhibidor de PD-1, un inhibidor de PD-L1, un inhibidor de TIM-3, un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEAc A m -1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5) o un inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, Ipilimumab)) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib) para tratar un melanoma. En una realización, la combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, la combinación que comprende la molécula de anticuerpo anti-LAG-3) se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD-L1, para tratar un melanoma como se describe en el presente documento.

En una realización, la combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, la combinación que comprende la molécula de anticuerpo anti-LAG-3) se administra sola o en combinación con un inhibidor de un modulador de punto de control inmunológico (por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), un inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3), un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM1 y/o CEACAM5) (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM) o un inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA4) para tratar un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, HNSCC). En una realización, la combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, la combinación que comprende la molécula de anticuerpo anti-LAG-3) se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD- L1, para tratar un cáncer de cabeza y cuello como se describe en el presente documento.

En una realización, la combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, la combinación que comprende la molécula de anticuerpo anti-LAG-3) se administra sola o en combinación con un inhibidor o activador de un modulador de punto de control inmunológico (por ejemplo, un inhibidor PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), un modulador de TIM-3 (por ejemplo, un activador o inhibidor de TIM-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3), un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM1 y/o CEACAM5) (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM) o un inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA4) para tratar un cáncer de pulmón (por ejemplo, un NSCLC). En una realización, la combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, la combinación que comprende la molécula de anticuerpo anti-LAG-3) se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD-L1, para tratar un cáncer de pulmón (por ejemplo, un NSCLC) como se describe en el presente documento.

En una realización, la combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, la combinación que comprende la molécula de anticuerpo anti-LAG-3) se administra sola o en combinación con un inhibidor de un modulador de punto de control inmunológico (por ejemplo, un inhibidor de PD-1) (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), un inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3), un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM1 y/o CEACAM5) (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM) o un inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA4) para tratar un cáncer gástrico. En una realización, la combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, la combinación que comprende la molécula de anticuerpo anti-LAG-3) se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD-L1, para tratar un cáncer gástrico como se describe en el presente documento.

En una realización, la combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, la combinación que comprende la molécula de anticuerpo anti-LAG-3) se administra sola o en combinación con un inhibidor de un modulador de punto de control inmunológico (por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), un inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3), un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM1 y/o CEACAM5) (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM) o un inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA4) para tratar un linfoma (por ejemplo, linfoma de Hogdkin (HL), linfoma no Hogdkin (NHL), linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), linfoma de células del manto (MCL) o CLL, por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica recidivante o refractaria). En una realización, la combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, la combinación que comprende la molécula de anticuerpo anti-LAG-3) se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD-L1, para tratar un linfoma como se describe en el presente documento.

En un aspecto de la divulgación, se proporciona un método para tratar un cáncer en un sujeto. El método comprende administrar al sujeto una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos entre dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii):

(i) un agente que mejora la presentación del antígeno tumoral elegido entre un agonista de STING, un agonista de TLR, un antagonista de A2AR o un virus oncolítico, o una combinación de los mismos y, opcionalmente, uno o más de: un modulador de TIM-3, un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR), un inhibidor de c-Met, un inhibidor de TGFb, un inhibidor de IDO/TDO, una vacuna o un acoplador de celular biespecíficas o triespecíficas;

(ii) (opcionalmente) un agente que mejora la respuesta de una célula efectora elegida entre uno o más de: un agonista de GITR, un inhibidor de PD-1, un inhibidor de PD-L1, un inhibidor de IAP (inhibidor de la proteína de apoptosis), un inhibidor de EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico), un inhibidor de la diana de rapamicina (mTOR), IL-15 o una variante de la misma, un inhibidor de CTLA-4, una molécula de anticuerpo biespecífico que se une a CD3 y un antígeno tumoral, un agonista de CD40, un agonista de OX40 o un agonista de CD27; o

(iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral elegido entre una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y, opcionalmente, uno o más de: un agonista de GITR, un inhibidor de una molécula de punto de control inmunológico elegido entre uno o más de PD-L1, PD-1, TIM-3 o CTLA-4, un inhibidor de CSF-1/1R, un inhibidor de IL-17, un inhibidor de IL-1p, un inhibidor de CXCR2, un inhibidor de PI3Ky o PI3K8), (vii) un inhibidor BAFF-R, un inhibidor de MALT-1/BTK, un inhibidor de JAK, un inhibidor de CRTH2, un inhibidor de VEGFR, una IL-15 o una variante de la misma, un inhibidor de CTLA-4, un inhibidor de IDO/TDO, un antagonista de A2AR, un inhibidor de TGFb, o un inhibidor de PFKFB3,

en el que la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende:

(b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 1; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12; (c) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286, una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15; o (d) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende:

(a) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 32;

(b) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36;

(c) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40;

(d) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 44;

(e) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 48;

(f) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 52;

(g) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56;

(h) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60;

(i) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o la SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36;

(j) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o la SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40;

(k) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o la SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56;

(l) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o la SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.

(m) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 68 o la SEQ ID NO: 108; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36;

(n) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72 o la SEQ ID NO: 8; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40;

(o) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72 o la SEQ ID NO: 8; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.

(p) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 76; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60;

(q) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 80; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 84;

(r) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 88;

(s) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 92; o

(t) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o la SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 96.

En algunas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer de pulmón, un melanoma, un cáncer de riñón, un cáncer de hígado, un mieloma, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer colorrectal, un cáncer de páncreas, un cáncer hematológico, un linfoma no Hogdkin o una leucemia, o una lesión metastásica del cáncer. En determinadas realizaciones, el cáncer se elige entre melanoma, cáncer de páncreas, cáncer de mama, cáncer de cabeza y cuello o carcinoma de células renales.

En una realización, el microambiente del cáncer tiene un nivel elevado de expresión de PD-L1. Alternativamente, o en combinación, el microambiente del cáncer puede tener una expresión aumentada de IFNy y/o CD8.

En algunas realizaciones, el sujeto tiene, o se identifica que tiene, un tumor que tiene uno o más niveles o expresión de PD-L1 altos, o que es un linfocito infiltrante de tumor (TIL)+ (por ejemplo, que tiene un mayor número de TIL), o ambos. En determinadas realizaciones, el sujeto tiene, o se identifica que tiene, un tumor que tiene un alto nivel o expresión de PD-L1 y que es TIL+. En algunas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento incluyen además la identificación de un sujeto con base en que tiene un tumor que tiene uno o más de alto nivel o expresión de PD-L1 o que es TIL+, o ambos. En determinadas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento incluyen además la identificación de un sujeto con base en que tiene un tumor que tiene un alto nivel o expresión de PD-L1 y que es TIL+. En algunas realizaciones, los tumores que son TIL+ son positivos para CD8 e IFNy. En algunas realizaciones, el sujeto tiene, o se identifica que tiene, un alto porcentaje de células que son positivas para uno, dos o más de PD-L1, CD8 y/o IFNy. En determinadas realizaciones, el sujeto tiene o se identifica que tiene un alto porcentaje de células que son positivas para todas las PD-L1, CD8 e IFNy.

En algunas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento incluyen además la identificación de un sujeto con base en que tiene un alto porcentaje de células que son positivas para uno, dos o más de PD-L1, CD8 y/o IFNy. En determinadas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento incluyen además la identificación de un sujeto con base en que tiene un alto porcentaje de células que son positivas para todas las PD-L1, CD8 e IFNy. En algunas realizaciones, el sujeto tiene, o se identifica que tiene, uno, dos o más de PD-L1, CD8 y/o IFNy, y uno o más de un cáncer de pulmón, por ejemplo, cáncer de pulmón de células escamosas o adenocarcinoma de pulmón; un cáncer de cabeza y cuello; un cáncer de cuello uterino de células escamosas; un cáncer de estómago; un cáncer de esófago; un cáncer de tiroides; un melanoma y/o un cáncer de nasofaringe (NPC). En determinadas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento describen además la identificación de un sujeto con base en que tiene uno, dos o más de PD-L1, CD8 y/o IFNy, y uno o más de un cáncer de pulmón, por ejemplo, cáncer de pulmón de células escamosas o adenocarcinoma de pulmón; un cáncer de cabeza y cuello; un cáncer de cuello uterino de células escamosas; un cáncer de estómago; un cáncer de tiroides; un melanoma y/o un cáncer de nasofaringe.

Los métodos y composiciones divulgados en el presente documento son útiles para tratar lesiones metastásicas asociadas con los cánceres mencionados anteriormente.

En un aspecto adicional, la divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad infecciosa en un sujeto, que comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita en el presente documento, sola o en combinación con uno o más agentes o procedimientos. Se prefieren los anticuerpos de la divulgación para su uso en el método, aunque en su lugar se pueden usar otros anticuerpos anti-LAG-3, o fragmentos de unión a antígeno de los mismos (o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita en el presente documento).

En una realización, la enfermedad infecciosa es hepatitis (por ejemplo, infección por hepatitis B). En cierta realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un antígeno o vacuna de la hepatitis B y, opcionalmente, en combinación con un adyuvante que contiene aluminio.

En otra realización, la enfermedad infecciosa es influenza. En cierta realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un antígeno o vacuna de la influenza.

Además, la divulgación proporciona un método para mejorar una respuesta inmune a un antígeno en un sujeto, que comprende administrar al sujeto: (i) el antígeno; y (ii) una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, de manera que se mejora una respuesta inmune al antígeno en el sujeto. El antígeno puede ser, por ejemplo, un antígeno tumoral, un antígeno viral, un antígeno bacteriano o un antígeno de un patógeno.

La molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación, puede administrarse al sujeto sistémicamente (por ejemplo, por vía oral, parenteral, subcutánea, intravenosa, rectal, intramuscular, intraperitoneal, intranasal, transdérmica o por inhalación o instalación intracavitaria), por vía tópica o por aplicación en las membranas mucosas, tal como la nariz, la garganta y los tubos bronquiales.

Las dosis y los regímenes terapéuticos de los agentes terapéuticos divulgados en el presente documento pueden ser determinados por un experto en la materia. En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra mediante inyección (por ejemplo, por vía subcutánea o intravenosa) a una dosis de aproximadamente 1 a 30 mg/kg, por ejemplo, aproximadamente 5 a 25 mg/kg, aproximadamente 10 a 20 mg/kg, aproximadamente 1 a 10 mg/kg, o aproximadamente 1 mg/kg, 3 mg/kg o 10 mg/kg. La programación de dosificación puede variar, por ejemplo, una vez a la semana a una vez cada 2, 3 o 4 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 10 a 20 mg/kg cada dos semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra (por ejemplo, por vía intravenosa) a una dosis de aproximadamente 3 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 3, 20, 80, 240 u 800 mg. En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra sola a una dosis de aproximadamente 20 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 3, 20, 80, 240 u 800 mg. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 3 a 240 mg, por ejemplo, aproximadamente 3, 20, 80 o 240 mg, cuando se combina con un segundo agente o modalidad terapéutica, por ejemplo, un segundo agente o modalidad terapéutica descrita en el presente documento. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra cada 2 semanas (por ejemplo, durante las semanas 1, 3, 5, 7) durante cada ciclo de 8 semanas, por ejemplo, hasta 96 semanas.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra, sola o en combinación (por ejemplo, en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1), a una dosis de menos de, o aproximadamente, 5 mg/kg; menos de, o aproximadamente, 4 mg/kg; menos de, o aproximadamente, 3 mg/kg; menos de, o aproximadamente, 2 mg/kg; menos de, o aproximadamente, 1 mg/kg, cada dos semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en una dosis de 1 a 5 mg/kg cada dos semanas; 1 a 4 mg/kg cada dos semanas, 1 a 3 mg/kg cada dos semanas o 1 a 2 mg/kg cada dos semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra, sola o en combinación (por ejemplo, en combinación con una molécula de anticuerpo anti-LAG-3) a una dosis de 1 a 5 mg/kg cada dos semanas; 1 a 4 mg/kg cada dos semanas, 1 a 3 mg/kg cada dos semanas o 1 a 2 mg/kg cada dos semanas.

Las moléculas de anticuerpo divulgadas en el presente documento se prefieren para su uso en los métodos descritos en el presente documento, aunque se pueden usar otros anticuerpos anti-LAG-3 en su lugar, o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 de la divulgación.

Otras terapias de combinación

Los métodos y composiciones descritos en el presente documento se pueden usar en combinación con otros agentes o modalidades terapéuticas. En una realización, los métodos descritos en el presente documento incluyen administrar al sujeto una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, en combinación con un agente o procedimiento o modalidad terapéutica, en una cantidad eficaz para tratar o prevenir un trastorno. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y el agente o procedimiento o modalidad terapéutica pueden administrarse simultánea o secuencialmente en cualquier orden. Puede usarse cualquier combinación y secuencia de las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 y otros agentes, procedimientos o modalidades terapéuticas (por ejemplo, como se describe en el presente documento). La molécula de anticuerpo y/u otros agentes, procedimientos o modalidades terapéuticas se pueden administrar durante períodos de trastorno activo, o durante un período de remisión o enfermedad menos activa. La molécula de anticuerpo se puede administrar antes del otro tratamiento, al mismo tiempo que el tratamiento, después del tratamiento o durante la remisión del trastorno.

En ciertas realizaciones, los métodos y composiciones descritos en el presente documento se administran en combinación con una o más de otras moléculas de anticuerpos, quimioterapia, otra terapia contra el cáncer (por ejemplo, terapias contra el cáncer dirigidas, terapia génica, terapia viral, terapia de ARN, trasplante de médula ósea, nanoterapia o fármacos oncolíticos), agentes citotóxicos, terapias inmunitarias (por ejemplo, citocinas o terapias inmunitarias con base en células), procedimientos quirúrgicos (por ejemplo, lumpectomía o mastectomía) y/o procedimientos de radiación, o una combinación de cualquiera de los anteriores. La terapia adicional puede ser en forma de terapia adyuvante o neoadyuvante. En algunas realizaciones, la terapia adicional es un inhibidor enzimático (por ejemplo, un inhibidor enzimático de molécula pequeña) o un inhibidor metastásico.

Los ejemplos de agentes citotóxicos que se pueden administrar en combinación incluyen agentes antimicrotúbulos, inhibidores de topoisomerasa, antimetabolitos, inhibidores mitóticos, agentes alquilantes, antraciclinas, alcaloides de la vinca, agentes intercalantes, agentes capaces de interferir con una ruta de transducción de señales, agentes que promueven la apoptosis, inhibidores del proteosoma y radiación (por ejemplo, irradiación local o de todo el cuerpo (por ejemplo, irradiación gamma)). En otras realizaciones, la terapia adicional es cirugía o radiación, o una combinación de las mismas. En otras realizaciones, la terapia adicional es una terapia dirigida a una o más de las vías de PI3K/AKT/mTOR, un inhibidor de HSP90 o un inhibidor de tubulina. Otros ejemplos de moléculas de anticuerpo que se pueden administrar en combinación incluyen, pero no se limitan a, inhibidores de puntos de control (por ejemplo, anti-PD-1, anti-PD-L1); anticuerpos que estimulan una célula inmunitaria (por ejemplo, anticuerpos agonistas de GITR o CD137); anticuerpos anticancerosos (por ejemplo, rituximab (Rituxan® o MabThera®), trastuzumab (Herceptin®), cetuximab (Erbitux®), entre otros.

Alternativamente, o en combinación con las combinaciones mencionadas anteriormente, los métodos y composiciones descritos en el presente documento se pueden administrar en combinación con uno o más de: un inmunomodulador (por ejemplo, un activador de una molécula coestimuladora o un inhibidor de una molécula inmunoinhibidora, por ejemplo, una molécula de control inmunológico); una vacuna, por ejemplo, una vacuna terapéutica contra el cáncer; u otras formas de inmunoterapia celular.

Ejemplos de combinaciones y usos no limitantes de las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 incluyen lo siguiente.

En determinadas realizaciones, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un modulador de una molécula coestimuladora (por ejemplo, un agonista de una molécula coestimuladora) o un modulador de una molécula inhibidora (por ejemplo, un inhibidor de un inhibidor de punto de control inmunológico).

En una realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un modulador, por ejemplo, un agonista, de una molécula coestimuladora. En una realización, el agonista de la molécula coestimuladora se elige entre un agonista (por ejemplo, un anticuerpo agonista o fusión soluble) del ligando OX40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 o CD83.

En una realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un inhibidor de una molécula inhibidora (o punto de control inmunológico) elegida entre PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 y/o TGF beta. La inhibición de una molécula inhibidora puede realizarse mediante inhibición a nivel de ADN, ARN o proteína. En las realizaciones, se puede usar un ácido nucleico inhibidor (por ejemplo, un ARNbc, ARNpi o ARNhp), para inhibir la expresión de una molécula inhibidora. En otras realizaciones, el inhibidor de una señal inhibidora es un polipéptido, por ejemplo, un ligando soluble, o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, que se une a la molécula inhibidora. En una realización, el inhibidor es un ligando soluble (por ejemplo, un CTLA-4-Ig), o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une a PD-1, PD-L1, PD-L2 o CTLA-4.

Por ejemplo, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se puede administrar en combinación con un inhibidor de, por ejemplo, un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une a, PD-1, PD-L1, PD-L2 o CTLA-4, para tratar un cáncer (por ejemplo, un cáncer elegido entre: un cáncer colorrectal (por ejemplo, RCC); un melanoma, por ejemplo, melanoma en estadio avanzado (por ejemplo, melanoma en estadio II-IV) o melanoma positivo para HLA-A2; un cáncer de páncreas, por ejemplo, cáncer de páncreas avanzado; un cáncer de mama, por ejemplo, carcinoma de mama metastásico o cáncer de mama triple negativo; un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, HNSCC); un cáncer de esófago; un carcinoma de células renales (RCC), por ejemplo, un carcinoma de células renales claras (ccRCC) o carcinoma de células renales metastásicas (MRCC); un cáncer de pulmón (por ejemplo, NSCLC); un cáncer de cuello uterino; un cáncer de vejiga; o una neoplasia maligna hematológica, por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica) o un linfoma (por ejemplo, un linfoma de Hogdkin (HL), un linfoma no Hogdkin (NHL), un linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), un linfoma de células del manto (MCL) o un CLL, por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica recidivante o refractaria).

En una realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con (por ejemplo, antes, con o después) del tratamiento con un anticuerpo anti-CTLA4 (por ejemplo, ipilimumab) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib).

En otra realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, Nivolumab o Pembrokizumab) o un fragmento de unión a antígeno del mismo. En otra realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un anticuerpo anti-TIM-3 o un fragmento de unión a antígeno del mismo. En otra realización más, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-L1 o un fragmento de unión a antígeno del mismo.

En otras realizaciones más, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-1 y un anticuerpo anti-TIM-3 (o fragmentos de unión a antígeno de los mismos). En ciertas realizaciones, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-1 y un anticuerpo anti-PD-L1 (o fragmentos de unión a antígeno de los mismos). En determinadas realizaciones, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un anticuerpo anti-TIM-3 y un anticuerpo anti-PD-L1 (o fragmentos de unión a antígeno de los mismos).

En otra realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, un inhibidor CEACAM-1 y/o de CEACAM-5), por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-5, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-5.

En otras realizaciones más, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-CEACAM (por ejemplo, anti-CEACAM-1 y/o anti-CEACAM-5) y una molécula de anticuerpo anti-PD-1. En otras realizaciones más, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-CEACAM (por ejemplo, anti-CEACAM-1 y/o anti-CEACAM-5) y una molécula de anticuerpo anti-TIM-3. En otras realizaciones más, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-CEACAM (por ejemplo, anti-CEACAM-1 y/o anti-CEACAM-5) y una molécula de anticuerpo anti-PD-L1.

La combinación de anticuerpos enumerados en el presente documento se puede administrar por separado, por ejemplo, como anticuerpos separados o fragmentos de unión a antígeno de los mismos, o enlazados, por ejemplo, como una molécula de anticuerpo biespecífica o triespecífica. En una realización, un anticuerpo biespecífico que incluye una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y uno de: un anticuerpo anti-TIM-3, un anticuerpo anti-CEACAM (por ejemplo, anti-CEACAM-1 y/o anti-CEACAM-5), se administra un anticuerpo anti-PD-L1, o un anticuerpo anti-PD-1, o un fragmento de unión a antígeno de los mismos. En determinadas realizaciones, la combinación de anticuerpos enumerados en el presente documento se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia maligna hematológica). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-1 o anti-PD-L1 para tratar un tumor sólido.

En otras realizaciones, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, se administra en combinación con una citocina. La citocina se puede administrar como una molécula de fusión a la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, o como composiciones separadas. En una realización, el anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una, dos, tres o más citocinas, por ejemplo, como una molécula de fusión o como composiciones separadas. En una realización, la citocina es una interleucina (IL) elegida entre una, dos, tres o más de IL-1, IL-2, IL-12, IL-12, IL-15 o IL-21. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífica tiene una primera especificidad de unión a una primera diana (por ejemplo, a LAG-3), una segunda especificidad de unión a una segunda diana (por ejemplo, PD-1, TIM-3 o PD-L1) y está opcionalmente unida a un dominio de interleucina (por ejemplo, IL-12), por ejemplo, IL-12 de longitud completa o una porción de la misma. En determinadas realizaciones, la combinación de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y la citocina descrita en el presente documento se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido).

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una vacuna, por ejemplo, una vacuna terapéutica contra el cáncer u otras formas de inmunoterapia celular. En una realización, la vacuna se basa en péptidos, en ADN, en ARN o en antígenos, o una combinación de los mismos. En realizaciones, la vacuna comprende uno o más péptidos, ácidos nucleicos (por ejemplo, ADN o ARN), antígenos o una combinación de los mismos. En determinadas realizaciones, la vacuna contra el cáncer comprende un adyuvante (por ejemplo, fosfato de aluminio o hidróxido de aluminio). En algunas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento se administran en combinación con uno o más de la extirpación quirúrgica de un tejido, quimioterapia u otra terapia anticancerosa y la diana principal o única serán las lesiones metastásicas, por ejemplo, metástasis en la médula ósea o ganglios linfáticos.

En una realización, el cáncer es un melanoma, por ejemplo, un melanoma en estadio avanzado (por ejemplo, melanoma en estadio II-IV) o melanoma positivo para HLA-A2. En cierta realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un péptido antigénico tumoral, por ejemplo, uno o más péptidos HLA-A2, y opcionalmente en combinación con un adyuvante, por ejemplo, MontanideMR. Los ejemplos de péptidos tumorales que se pueden administrar en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluyen uno o más de Tirosinasa.A2, MAGE-C2.A2, NY-ESO-1b.A2, MAGE-4.A2, MAGE-3.A2, MAGE-1.A2, NA17.A2 (GnTV) y MAGE-10.A2.

En otra realización, el cáncer es un cáncer de páncreas, por ejemplo, cáncer de páncreas avanzado. En cierta realización, la molécula de anticuerpo se puede administrar en combinación con un agente quimioterapéutico, por ejemplo, gemcitabina.

En otra realización, el cáncer es un cáncer de mama, por ejemplo, carcinoma de mama metastásico o cáncer de mama triple negativo. En cierta realización, la molécula de anticuerpo se puede administrar en combinación con un agente quimioterapéutico, por ejemplo, paclitaxel.

En otra realización, el cáncer es un carcinoma de células renales, por ejemplo, carcinoma de células claras, avanzado (por ejemplo, estadio IV) o carcinoma de células renales metastásico (RCCM).

En otra realización, el cáncer es un cáncer de cabeza o cuello, por ejemplo, carcinoma de células escamosas HPV+.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un antígeno. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede combinar con un antígeno de hepatitis B (por ejemplo, Engerix B). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un antígeno de la gripe.

La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede usar sola en forma no conjugada, o se puede unir a una sustancia, por ejemplo, un agente o una fracción citotóxica (por ejemplo, un fármaco terapéutico; un compuesto que emite radiación; moléculas de origen vegetal, fúngico o bacteriano; o una proteína biológica (por ejemplo, una toxina proteica) o partícula (por ejemplo, una partícula viral recombinante, por ejemplo, a través de una proteína de cubierta viral). Por ejemplo, el anticuerpo puede acoplarse a un isótopo radiactivo tal como un emisor a, p o y, o un emisor p y y.

Terapias de combinación adicionales

Los métodos y composiciones descritos en el presente documento (por ejemplo, anticuerpos LAG-3 y métodos para usarlos) se pueden usar en combinación con otros agentes o modalidades terapéuticas, por ejemplo, un segundo agente terapéutico elegido entre uno o más de los agentes enumerados en la Tabla 7.

En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional se elige entre uno o más de: 1) un inhibidor de la proteína quinasa C (PKC); 2) un inhibidor de la proteína 90 de choque térmico (HSP90); 3) un inhibidor de una fosfoinositida 3-quinasa (PI3K) y/o diana de rapamicina (mTOR); 4) un inhibidor del citocromo P450 (por ejemplo, un inhibidor de CYP17 o un inhibidor de 17 alfa-hidroxilasa/C17-20 liasa); 5) un agente quelante de hierro; 6) un inhibidor de aromatasa; 7) un inhibidor de p53, por ejemplo, un inhibidor de una interacción p53/Mdm2; 8) un inductor de apoptosis; 9) un inhibidor de angiogénesis; 10) un inhibidor de aldosterona sintasa; 11) un inhibidor del receptor suavizado (SMO); 12) un inhibidor del receptor de prolactina (PRLR); 13) un inhibidor de señalización de Wnt; 14) un inhibidor de CDK4/6; 15) un inhibidor del receptor 2 del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR2)/receptor 4 del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR4); 16) un inhibidor del factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF); 17) un inhibidor de uno o más de c-KIT, liberación de histamina, Flt3 (por ejemplo, FLK2/STK1) o PKC; 18) un inhibidor de uno o más de VEGFR-2 (por ejemplo, FLK-1/KDR), PDGFRbeta, c-KIT o Raf quinasa C; 19) un agonista de somatostatina y/o un inhibidor de liberación de la hormona del crecimiento; 20) un inhibidor de la quinasa del linfoma anaplásico (ALK); 21) un inhibidor del receptor del factor 1 de crecimiento similar a la insulina (IGF-1R); 22) un inhibidor de P-glicoproteína 1; 23) un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR); 24) un inhibidor de BCR-ABL quinasa; 25) un inhibidor de FGFR; 26) un inhibidor de CYP11B2; 27) un inhibidor de HDM2, por ejemplo, un inhibidor de la interacción HDM2-p53; 28) un inhibidor de una tirosina quinasa; 29) un inhibidor de c-MET; 30) un inhibidor de JAK; 31) un inhibidor de DAC; 32) un inhibidor de 11p-hidroxilasa; 33) un inhibidor de IAP; 34) un inhibidor de PIM quinasa; 35) un inhibidor de Porcupina; 36) un inhibidor de BRAF, por ejemplo, BRAF V600E o BRAF de tipo silvestre; 37) un inhibidor de HER3; 38) un inhibidor de MEK; o 39) un inhibidor de una lípido quinasa, por ejemplo, como se describe en el presente documento y en la Tabla 7.

En una realización, el agente terapéutico adicional se elige entre uno o más de: Compuesto A8, Compuesto A17, Compuesto A23, Compuesto A24, Compuesto A27, Compuesto A29, Compuesto A33 y Compuesto A13.

En otras realizaciones, el agente terapéutico adicional se elige entre uno o más de: Compuesto A5, Compuesto A8, Compuesto A17, Compuesto A23, Compuesto A24, Compuesto A29 y Compuesto A40.

En otras realizaciones, el agente terapéutico adicional se elige entre uno o más de: Compuesto A9, Compuesto A16, Compuesto A17, Compuesto A21, Compuesto A22, Compuesto A25, Compuesto A28, Compuesto A48 y Compuesto 49.

En una realización, el cáncer se elige entre un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC con histología escamosa y/o no escamosa, o un adenocarcinoma de NSCLC), o divulgado en una publicación enumerada en la Tabla 7.

Realizaciones adicionales de la divulgación

Las realizaciones adicionales proporcionan un método para tratar un cáncer, que comprende: identificar en una muestra (por ejemplo, una muestra de un sujeto que comprende células cancerosas y opcionalmente células inmunes tales como TIL) la presencia de uno, dos o todos los PD-L1, CD8, o IFN-y, proporcionando así un valor para uno, dos o todos los de PD-L1, CD8 e IFN-y. El método puede incluir además comparar los valores de PD-L1, CD8 y/o IFN-y con un valor de referencia, por ejemplo, un valor de control. Si los valores de PD-L1, CD8 y/o IFN-y son mayores que el valor de referencia, por ejemplo, los valores de control, administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de una combinación como se describe en el presente documento (por ejemplo, una combinación que incluye un anticuerpo anti-LAG-3 descrito en el presente documento), solo o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, una molécula de anticuerpo anti-PD-LI, o ambos, al sujeto, opcionalmente en combinación con uno o más de otros agentes, tratando de este modo el cáncer. El cáncer puede ser, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, tal como cáncer de pulmón (escamoso), cáncer de pulmón (adenocarcinoma), cáncer de cabeza y cuello, cáncer de cuello uterino (escamoso), cáncer de estómago, cáncer de tiroides, melanoma, cáncer de nasofaringe o cáncer de mama, por ejemplo, cáncer de mama TN, por ejemplo, cáncer de mama IM-TN. En algunas realizaciones, el cáncer es cáncer de mama ER+ o cáncer de páncreas.

También se proporciona un método para tratar un cáncer, que comprende: analizar una muestra (por ejemplo, una muestra de un sujeto que comprende células cancerosas) para determinar la presencia de PD-L1, identificando de este modo un valor de PD-L1, comparando el valor de PD-L1 con un valor de control, y si el valor de PD-L1 es mayor que el valor de control, administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de una combinación como se describe en el presente documento (por ejemplo, una combinación que incluye un anticuerpo anti-LAG-3 descrito en el presente documento), solo o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, una molécula de anticuerpo anti-PD-LI, o ambas, al sujeto, opcionalmente en combinación con uno o más de otros agentes, tratando de este modo el cáncer. El cáncer puede ser, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento, tal como un cáncer que es adenocarcinoma de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (ACA), un carcinoma de células escamosas de NSCLC (SCC) o un carcinoma hepatocelular (Hc C).

En otro aspecto, la divulgación presenta kits de diagnóstico o terapéuticos que incluyen las moléculas de combinación divulgadas en el presente documento e instrucciones de uso.

Otras características, objetos y ventajas de la divulgación serán evidentes a partir de la descripción y los dibujos, y de las reivindicaciones.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 representa las secuencias de aminoácidos de las regiones variables de cadena ligera (SEQ ID NO: 16) y pesada (SEQ ID NO: 6) del mAb BAP050 anti-LAG-3 murino. Las secuencias de CDR de cadena ligera y pesada con base en la numeración de Kabat están subrayadas. Las secuencias de CDR de cadena ligera y pesada con base en la numeración de Chothia se muestran en negrita y cursiva.

La Figura 2 representa las secuencias de aminoácidos de las regiones variables de cadena ligera (SEQ ID NO: 16) y pesada (SEQ ID NO: 6) de mAb BAP050 anti-LAG-3 murino alineadas con las secuencias de la línea germinal (SEQ ID NOs: 290- 291, respectivamente, en orden de aparición). Las secuencias superior e inferior son las secuencias de la línea germinal (GL) y BAP050 (mAb Mu), respectivamente. Las secuencias de CDR de cadena ligera y pesada con base en la numeración de Kabat están subrayadas. Las secuencias de CDR de cadena ligera y pesada con base en la numeración de Chothia se muestran en negrita y cursiva. "-" significa un residuo de aminoácido idéntico.

La Figura 3 representa gráficos de barras que muestran los resultados del análisis de unión de FACS para los veinte clones de bA p050 humanizados (BAP050-hum01 a BAP050-hum20) y el mAb quimérico (BAp050-qui). Las concentraciones de anticuerpos son 200, 100, 50, 25 y 12,5 ng/ml desde la barra más a la izquierda a la barra más a la derecha para cada mAb analizado.

La Figura 4 representa el análisis estructural de los clones de BAP049 humanizados (a, b, c, d, e, f, g representan varios tipos de secuencias de la región marco). También se muestran las concentraciones de mAb en las muestras. La Figura 5A-5B representa la afinidad de unión y la especificidad de los mAb humanizados medidos en un ensayo de unión competitiva usando una concentración constante de mAb murino marcado con FITC, diluciones en serie de los anticuerpos de prueba y células CHO que expresan LAG-3. El experimento se realizó dos veces y los resultados se muestran en las Figuras 5A y 5B, respectivamente.

La Figura 6 representa la clasificación de los clones de BAP050 humanizados con base en los datos de FACS, la unión competitiva y el análisis estructural. También se muestran las concentraciones de los mAb en las muestras. La Figura 7 representa la afinidad y especificidad de unión de los clones de huBAP050(Ser) medidos en un ensayo de unión competitiva usando una concentración constante de mAb murino marcado con FITC, diluciones en serie de los anticuerpos de prueba y células CHO que expresan LAG-3. Se evaluaron los clones de HuBAP050 (Ser), tales como BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser y BAP050-hum13-Ser. También se incluyeron en los análisis mAb murino BAP050, mAb quimérico BAP050-qui y BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum05, BAP050-hum09, BAP050-hum11, BAP050-hum12 y BAP050-hum13 humanizados.

La Figura 8 representa el bloqueo de la unión de LAG-3-Ig a células Daudi por clones de huBAP050(Ser). Se evaluaron los clones de HuBAP050 (Ser), tales como BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser y BAP050-hum13-Ser,. También se incluyeron en los análisis mAb murino BAP050 y mAb quimérico BAP050-qui.

Las Figuras 9A-9B representan el alineamiento de las secuencias de dominio variable de la cadena pesada para los veinte clones de BAP050 humanizados y la quimera de BAP050 (BAP050-qui). En la Figura 9A, se muestran todas las secuencias (SEQ ID NOs: 20, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 64, 64, 64, 64, 64, 68, 72, 72, 76 y 80, respectivamente, en orden de aparición). En la Figura 9B, solo se muestran las secuencias de aminoácidos que son diferentes de la secuencia de ratón (SEQ ID NOs: 20, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 64, 64, 64, 64, 64, 68, 72, 72, 76 y 80, respectivamente, en orden de aparición).

Las Figuras 10A-10B representan el alineamiento de las secuencias del dominio variable de la cadena ligera para los veinte clones de BAP050 humanizados y la quimera de BAP050 (BAP050-qui). En la Figura 10A, se muestran todas las secuencias (SEQ ID NOs: 24, 32, 36, 36, 36, 292, 292, 292, 44, 48, 52, 56, 56, 60, 60, 60, 60, 84, 88, 92 y 96, respectivamente, en orden de aparición). En la Figura 10B, solo se muestran las secuencias de aminoácidos que son diferentes de la secuencia de ratón (SEQ ID NOs: 24, 32, 36, 36, 36, 292, 292, 292, 44, 48, 52, 56, 56, 60, 60, 60, 60, 84, 88, 92 y 96, respectivamente, en orden de aparición).

La Figura 11 muestra ejemplos de cánceres que tienen proporciones relativamente altas de pacientes que son triple positivos para PD-L1/c D8/IFN-y.

La Figura 12 muestra un ejemplo de cáncer de mama ER+ y cáncer de páncreas que tienen proporciones relativamente bajas de pacientes que son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y

La Figura 13 muestra la proporción de ejemplos de pacientes con cáncer de mama que son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y.

La Figura 14 muestra la proporción de ejemplos de pacientes con cáncer de colon que son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y.

La Figura 15 es un diagrama esquemático que describe el procesamiento y la presentación del antígeno, las respuestas de las células efectoras y las vías de inmunosupresión dirigidas por las terapias de combinación divulgadas en el presente documento.

Breve descripción de las tablas

La Tabla 1 es un resumen de las secuencias de aminoácidos y nucleótidos para las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 murino, quimérico y humanizado. Las moléculas de anticuerpos incluyen mAb murino BAP050 y los mAb quiméricos BAP050-qui, los mAb humanizados BAP050-hum01 a BAP050-hum20, BAP050-hum01-Ser a BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser a BAP050-hum20-Ser y BAP050-Clon-F a BAP050-Clon-J. En esta Tabla se muestran las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las CDR de cadena pesada y ligera, las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las regiones variables de cadena pesada y ligera, y las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las cadenas pesada y ligera.

La Tabla 2 muestra las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las regiones marco de la cadena pesada y ligera para los mAb humanizados BAP050-hum01 a BAP049-hum20, BAP050-hum01-Ser a BAP050-hum15-Ser, bA p 050-hum18-Ser a BAP050-hum20- Ser y BAP049-Clon-F a BAP049-Clon-J.

La Tabla 3 muestra las secuencias de aminoácidos de la región constante de las cadenas pesada de IgG humana y la cadena ligera kappa humana.

La Tabla 4 muestra las secuencias de aminoácidos de las secuencias líder de cadena pesada y ligera para los mAb humanizados BAP050-Clon-F a BAP050-Clon-J.

La Tabla 5 es un resumen del rendimiento, título, contenido de monómeros y niveles de endotoxinas para los ejemplos de mAb BAP050 humanizados expresados en células CHO.

La Tabla 6 muestra las isoformas de carga detectadas por análisis Novex IEF para los ejemplos de mAb BAP050 humanizados expresados en células CHO.

La Tabla 7 es un resumen de agentes terapéuticos seleccionados que se pueden administrar en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 y otros inmunomoduladores (por ejemplo, uno o más de: un activador de una molécula coestimuladora y/o un inhibidor de una molécula de punto de control inmunológico) descritos en el presente documento. La Tabla 7 proporciona de izquierda a derecha lo siguiente: la designación del compuesto del segundo agente terapéutico, la estructura del compuesto y la publicación o publicaciones de patente que divulgan el compuesto. La Tabla 8 proporciona un ejemplo del listado de los agentes terapéuticos de las combinaciones de presentación de antígeno (Categoría A), combinaciones de células efectoras (Categoría B) y combinaciones de inmunosupresión antitumoral (Categoría C).

Descripción detallada

Se divulgan en el presente documento, al menos en parte, métodos y composiciones que comprenden una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos entre una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación de antígeno (por ejemplo, presentación de antígeno tumoral) (por ejemplo, mejorando una o más de la actividad o maduración de las células dendríticas, la captación de antígenos o el procesamiento de antígenos); (ii) un agente que mejora una respuesta de células efectoras (por ejemplo, una respuesta de células efectoras inmunes, por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o T, por ejemplo, en el ganglio linfático); o (iii) un agente que reduce la inmunosupresión tumoral (por ejemplo, aumenta la infiltración de células T y la muerte de células tumorales). En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). Sin desear estar ligado a ninguna teoría, se cree que los enfoques terapéuticos que mejoran la inmunidad antitumoral funcionan de manera más efectiva cuando la respuesta inmune se optimiza mediante múltiples dianas en diferentes etapas de la respuesta inmune. Cada una de estas etapas se muestra en forma esquemática en la Figura 15. Por ejemplo, los enfoques que dan como resultado la activación de células dendríticas combinados con enfoques que mejoran la inmunidad celular y humoral pueden dar como resultado una respuesta terapéutica más eficaz y/o prolongada.

Se definen términos adicionales a continuación y en toda la solicitud.

Como se usa en el presente documento, los artículos "un" y "uno, una" se refieren a uno o más de uno (por ejemplo, al menos uno) del objeto gramatical del artículo.

El término "o" se usa en el presente documento con el significado y se usa indistintamente con el término "y/o", a menos que el contexto indique claramente lo contrario.

"Alrededor de" y "aproximadamente" significarán generalmente un grado aceptable de error para la cantidad medida dada la naturaleza o precisión de las mediciones. Los ejemplos de grados de error están dentro del 20 por ciento (%), típicamente dentro del 10% y más típicamente dentro del 5% de un valor dado o intervalo de valores.

Por "una combinación" o "en combinación con", no se pretende implicar que la terapia o los agentes terapéuticos deban administrarse al mismo tiempo y/o formularse para su administración juntos, aunque estos métodos de administración están dentro del alcance descrito en el presente documento. Los agentes terapéuticos en la combinación se pueden administrar al mismo tiempo, antes o después de una o más terapias o agentes terapéuticos adicionales. Los agentes terapéuticos o el protocolo terapéutico se pueden administrar en cualquier orden. En general, cada agente se administrará en una dosis y/o en un horario determinado para ese agente. Además, se apreciará que el agente terapéutico adicional utilizado en esta combinación puede administrarse junto en una única composición o administrarse por separado en diferentes composiciones. En general, se espera que los agentes terapéuticos adicionales utilizados en combinación se utilicen a niveles que no superen los niveles a los que se utilizan individualmente. En algunas realizaciones, los niveles utilizados en combinación serán más bajos que los utilizados individualmente.

En las realizaciones, el agente terapéutico adicional se administra en una dosis terapéutica o inferior a la terapéutica. En ciertas realizaciones, la concentración del segundo agente terapéutico que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor cuando el segundo agente terapéutico se administra en combinación con el primer agente terapéutico, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1, que cuando el segundo agente terapéutico se administra individualmente. En determinadas realizaciones, la concentración del primer agente terapéutico que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor cuando el primer agente terapéutico se administra en combinación con el segundo agente terapéutico que cuando el primer agente terapéutico se administra individualmente. En ciertas realizaciones, en una terapia de combinación, la concentración del segundo agente terapéutico que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor que la dosis terapéutica del segundo agente terapéutico como monoterapia, por ejemplo, 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% o 80-90% menor. En ciertas realizaciones, en una terapia de combinación, la concentración del primer agente terapéutico que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor que la dosis terapéutica del primer agente terapéutico como monoterapia, por ejemplo, 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% o 80-90% menor.

El término "inhibición", "inhibidor" o "antagonista" incluye una reducción en un cierto parámetro, por ejemplo, una actividad, de una molécula dada, por ejemplo, un inhibidor del punto de control inmunológico. Por ejemplo, la inhibición de una actividad, por ejemplo, una actividad de PD-1 o PD-L1, de al menos 5%, 10%, 20%, 30%, 40% o más está incluida en este término. Por lo tanto, no es necesario que la inhibición sea del 100%.

El término "activación", "activador" o "agonista" incluye un aumento en un cierto parámetro, por ejemplo, una actividad, de una molécula dada, por ejemplo, una molécula coestimuladora. Por ejemplo, el aumento de una actividad, por ejemplo, una actividad coestimuladora, de al menos 5%, 10%, 25%, 50%, 75% o más está incluido en este término.

El término "efecto anticancerígeno" se refiere a un efecto biológico que puede manifestarse por diversos medios, que incluyen, pero no se limita a, una disminución en el volumen del tumor, una disminución en el número de células cancerosas, una disminución en el número de metástasis, aumento de la esperanza de vida, disminución de la proliferación de células cancerosas, disminución de la supervivencia de las células cancerosas o mejora de varios síntomas fisiológicos asociados con la afección cancerosa. Un "efecto anticancerígeno" también puede manifestarse por la capacidad de los péptidos, polinucleótidos, células y anticuerpos en la prevención de la aparición de cáncer en primer lugar.

El término "efecto antitumoral" se refiere a un efecto biológico que puede manifestarse por diversos medios, que incluyen, pero no se limita a, una disminución en el volumen del tumor, una disminución en el número de células tumorales, una disminución en proliferación de células tumorales o disminución de la supervivencia de las células tumorales.

El término "cáncer" se refiere a una enfermedad caracterizada por el crecimiento rápido y descontrolado de células aberrantes. Las células cancerosas pueden diseminarse localmente o a través del torrente sanguíneo y el sistema linfático a otras partes del cuerpo. Los ejemplos de varios cánceres se describen en el presente documento e incluyen, pero no se limitan a, cáncer de mama (por ejemplo, cáncer de mama triple negativo), cáncer de próstata, cáncer de ovario, cáncer de cuello uterino, cáncer de piel (por ejemplo, melanoma), cáncer de páncreas, cáncer colorrectal, cáncer renal cáncer (por ejemplo, carcinoma de células renales), cáncer de hígado (por ejemplo, carcinoma hepatocelular), cáncer de cerebro (por ejemplo, glioblastoma), cáncer de cabeza y cuello, cáncer de endometrio, cáncer de nasofaringe, cáncer de vejiga, linfoma, leucemia, cáncer de pulmón (por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas) y similares. Los términos "tumor" y "cáncer" se usan indistintamente en el presente documento, por ejemplo, ambos términos abarcan tumores sólidos y líquidos, por ejemplo, tumores difusos o circulantes. Como se usa en el presente documento, el término "cáncer" o "tumor" incluye cánceres y tumores premalignos, así como malignos.

El término "célula presentadora de antígeno" o "APC" se refiere a una célula del sistema inmunológico, tal como una célula accesoria (por ejemplo, una célula B, una célula dendrítica y similares) que presenta un antígeno extraño complejado con los complejos mayores de histocompatibilidad (MHC) en su superficie. Las células T pueden reconocer estos complejos utilizando sus receptores de células T (TCR). Las APC procesan antígenos y los presentan a las células T.

El término "molécula coestimuladora" se refiere a la pareja de unión análoga en una célula T que se une específicamente con un ligando coestimulador, mediando así una respuesta coestimuladora por la célula T, tal como, pero sin limitarse a, proliferación. Las moléculas coestimuladoras son moléculas de la superficie celular distintas de los receptores de antígenos o sus ligandos que se requieren para una respuesta inmune eficaz. Las moléculas coestimuladoras incluyen, entre otras, una molécula del MHC de clase I, proteínas receptoras de TNF, proteínas similares a inmunoglobulinas, receptores de citocinas, integrinas, moléculas de activación linfocítica de señalización (proteínas SLAM), receptores de células NK activadoras, BTLA, un receptor del ligando de Toll, OX40, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), 4-1BB (CD137), B7-H3, CDS, ICAM-1, ICOS (CD278), GITR, BAFFR, LIGHT, HVEM (LIGHTR), KIRDS2, SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD19, CD4, CD8alfa, CD8beta, IL2R beta, IL2R gamma, IL7R alfa, ITGA4, VLA, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, NKG2D, NKG2C, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (táctil), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76, PAG/Cbp, CD19a y un ligando que se une específicamente con CD83.

"Célula efectora inmunitaria" o "célula efectora", como se usa ese término en el presente documento, se refiere a una célula que está implicada en una respuesta inmune, por ejemplo, en la promoción de una respuesta efectora inmunitaria. Los ejemplos de células efectoras inmunes incluyen células T, por ejemplo, células T alfa/beta y células T gamma/delta, células B, células asesinas naturales (NK), células T asesinas naturales (NKT), mastocitos y fagocitos derivados de mieloides.

"Efector inmune", "efector", "función" o "respuesta", como se usa ese término en el presente documento, se refiere a la función o respuesta, por ejemplo, de una célula efectora inmunitaria, que mejora o promueve un ataque inmunológico de una célula diana. Por ejemplo, una función o respuesta efectora inmunitaria se refiere a una propiedad de una célula T o NK que promueve la muerte o la inhibición del crecimiento o la proliferación de una célula diana. En el caso de una célula T, la estimulación primaria y la coestimulación son ejemplos de función o respuesta efectora inmunitaria.

El término "función efectora" se refiere a una función especializada de una célula. La función efectora de una célula T, por ejemplo, puede ser actividad citolítica o actividad auxiliar, incluida la secreción de citocinas.

Como se usa en el presente documento, los términos "tratar", "tratamiento" y "que trata" se refieren a la reducción o mejora de la progresión, gravedad y/o duración de un trastorno, por ejemplo, un trastorno proliferativo, o la mejora de uno o más síntomas (preferiblemente, uno o más síntomas discernibles) del trastorno resultante de la administración de una o más terapias. En realizaciones específicas, los términos "tratar', "tratamiento" y "que trata" se refieren a la mejora de al menos un parámetro físico medible de un trastorno proliferativo, tal como el crecimiento de un tumor, no necesariamente discernible por el paciente. En otras realizaciones, los términos "tratar", "tratamiento" y "que trata" se refieren a la inhibición de la progresión de un trastorno proliferativo, ya sea físicamente mediante, por ejemplo, la estabilización de un síntoma discernible, fisiológicamente mediante, por ejemplo, la estabilización de un parámetro físico o ambos. En otras realizaciones, los términos "tratar", "tratamiento" y "que trata" se refieren a la reducción o estabilización del tamaño del tumor o el recuento de células cancerosas.

Las composiciones y métodos de la presente divulgación abarcan polipéptidos y ácidos nucleicos que tienen las secuencias especificadas, o secuencias sustancialmente idénticas o similares a las mismas, por ejemplo, secuencias de al menos 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% idénticas o superiores a la secuencia especificada. En el contexto de una secuencia de aminoácidos, el término "sustancialmente idéntico" se usa en el presente documento para referirse a un primer aminoácido que contiene un número suficiente o mínimo de residuos de aminoácidos que son i) idénticos a, o ii) sustituciones conservadoras de residuos de aminoácidos alineados en una segunda secuencia de aminoácidos de manera que la primera y la segunda secuencias de aminoácidos pueden tener un dominio estructural común y/o una actividad funcional común. Por ejemplo, secuencias de aminoácidos que contienen un dominio estructural común que tiene al menos aproximadamente 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% de identidad con una secuencia de referencia, por ejemplo, una secuencia proporcionada en el presente documento.

En el contexto de la secuencia de nucleótidos, el término "sustancialmente idéntico" se usa en el presente documento para referirse a una primera secuencia de ácido nucleico que contiene un número suficiente o mínimo de nucleótidos que son idénticos a los nucleótidos alineados en una segunda secuencia de ácido nucleico de manera que la primera y segunda secuencias de nucleótidos codifican un polipéptido que tiene una actividad funcional común, o codifican un dominio polipeptídico estructural común o una actividad polipeptídica funcional común. Por ejemplo, las secuencias de nucleótidos que tienen al menos aproximadamente 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% de identidad con una secuencia de referencia, por ejemplo, una secuencia proporcionada en el presente documento.

El término "variante funcional" se refiere a polipéptidos que tienen una secuencia de aminoácidos sustancialmente idéntica a la secuencia de origen natural, o que están codificados por una secuencia de nucleótidos sustancialmente idéntica, y son capaces de tener una o más actividades de la secuencia de origen natural.

Los cálculos de homología o identidad de secuencia entre secuencias (los términos se usan indistintamente en el presente documento) se realizan como sigue.

Para determinar el porcentaje de identidad de dos secuencias de aminoácidos, o de dos secuencias de ácidos nucleicos, las secuencias se alinean con fines de comparación óptimos (por ejemplo, se pueden introducir espacios en una o ambos de una primera y una segunda secuencia de aminoácidos o ácidos nucleicos para una alineación óptima y pueden descartarse secuencias no homólogas para propósitos de comparación). En una realización preferida, la longitud de una secuencia de referencia alineada con fines de comparación es al menos 30%, preferiblemente al menos 40%, más preferiblemente al menos 50%, 60% e incluso más preferiblemente al menos 70%, 80%, 90%, 100% de la longitud de la secuencia de referencia. A continuación, se comparan los residuos de aminoácidos o nucleótidos en las correspondientes posiciones de aminoácidos o posiciones de nucleótidos. Cuando una posición en la primera secuencia está ocupada por el mismo residuo de aminoácido o nucleótido que la posición correspondiente en la segunda secuencia, entonces las moléculas son idénticas en esa posición (como se usa en el presente documento, la "identidad" de aminoácidos o ácidos nucleicos es equivalente a "homología" de aminoácidos o ácido nucleico).

El porcentaje de identidad entre las dos secuencias es una función del número de posiciones idénticas compartidas por las secuencias, teniendo en cuenta el número de espacios y la longitud de cada espacio, que deben introducirse para una alineación óptima de los dos secuencias.

La comparación de secuencias y la determinación del porcentaje de identidad entre dos secuencias se puede lograr usando un algoritmo matemático. En una realización preferida, el porcentaje de identidad entre dos secuencias de aminoácidos se determina utilizando el algoritmo de Needleman y Wunsch ((1970) J. Mol. Biol. 48: 444-453) que se ha incorporado al programa GAP en el paquete de software GCG. (disponible en http://www.gcg.com), utilizando una matriz Blossum 62 o una matriz PAM250, y una ponderación de espacio de 16, 14, 12, 10, 8, 6 o 4 y una ponderación de longitud de 1, 2, 3, 4, 5 o 6. En otra realización preferida, el porcentaje de identidad entre dos secuencias de nucleótidos se determina usando el programa GAP en el paquete de software GCG (disponible en http://www.gcg.com), utilizando una matriz NWSgapdna.CMP y una ponderación de espacio de 40, 50, 60, 70 u 80 y una ponderación de longitud de 1, 2, 3, 4, 5 o 6. Un conjunto de parámetros particularmente preferido (y el que debe usarse a menos que se especifique lo contrario) son una matriz de puntuación Blossum 62 con una penalización de espacio de 12, una penalización de extensión de espacio de 4 y una penalización de espacio por cambio del marco de 5.

El porcentaje de identidad entre dos secuencias de aminoácidos o nucleótidos se puede determinar utilizando el algoritmo de E. Meyers y W. Miller ((1989) CABIOS, 4: 11-17) que se ha incorporado al programa ALIGN (versión 2.0), utilizando una tabla de residuos de peso PAM120, una penalización de longitud de espacio de 12 y una penalización de espacio de 4.

Las secuencias de ácidos nucleicos y proteínas divulgadas en el presente documento se pueden usar como una "secuencia de consulta" para realizar una búsqueda en bases de datos públicas para, por ejemplo, identificar otros miembros de la familia o secuencias relacionadas. Estas búsquedas se pueden realizar utilizando los programas NBLAST y XBLAST (versión 2.0) de Altschul, et al., (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-10. Las búsquedas de nucleótidos por BLAST se pueden realizar con el programa NBLAST, puntuación = 100, longitud de palabra = 12 para obtener secuencias de nucleótidos homólogas a moléculas de ácido nucleico (SEQ ID NO: 1) de la divulgación. Las búsquedas de proteínas por BLAST se pueden realizar con el programa XBLAST, puntuación = 50, longitud de palabra = 3 para obtener secuencias de aminoácidos homólogas a las moléculas de proteína de la divulgación. Para obtener alineaciones con espacios con fines de comparación, se puede utilizar Gapped BLAST como se describe en Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402. Cuando se utilizan los programas BLAST y Gapped BLAST, se pueden utilizar los parámetros predeterminados de los programas respectivos (por ejemplo, Xb lASt y NBLAST). Véase http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

Como se usa en el presente documento, el término "hibrida en condiciones de rigurosidad baja, rigurosidad media, rigurosidad alta o rigurosidad muy alta" describe las condiciones para la hibridación y el lavado. Puede encontrarse orientación para realizar reacciones de hibridación en Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, N.Y. (1989), 6.3.1-6.3.6. Los métodos acuosos y no acuosos se describen en esa referencia y se pueden utilizar. Las condiciones de hibridación específicas a las que se hace referencia en el presente documento son las siguientes: 1) condiciones de hibridación de baja rigurosidad en cloruro de sodio/citrato de sodio 6X (SSC) a aproximadamente 45 °C, seguido de dos lavados en 0,2X SSC, SDS al 0,1% al menos a 50 °C (la temperatura de los lavados se puede aumentar a 55 °C para condiciones de baja rigurosidad); 2) condiciones de hibridación de rigurosidad media en 6X SSC a aproximadamente 45 °C, seguido de uno o más lavados en 0,2X SSC, SDS al 0,1% a 60 °C; 3) condiciones de hibridación de alta rigurosidad en 6X SSC a aproximadamente 45 °C, seguido de uno o más lavados en 0,2X SSC, SDS al 0,1% a 65 °C; y preferiblemente 4) las condiciones de hibridación de rigurosidad muy alta son fosfato de sodio 0,5 M, SDS al 7% a 65 °C, seguido de uno o más lavados a 0,2X SSC, SDS al 1% a 65 °C. Las condiciones de rigurosidad muy alta (4) son las condiciones preferidas y las que deben usarse a menos que se especifique lo contrario.

Se entiende que las moléculas de la presente divulgación pueden tener sustituciones de aminoácidos no esenciales o conservadoras adicionales, que no tienen un efecto sustancial sobre sus funciones.

El término "aminoácido" pretende abarcar todas las moléculas, naturales o sintéticas, que incluyen tanto una función amino como una función ácida y que pueden incluirse en un polímero de aminoácidos de origen natural. Los ejemplos de aminoácidos incluyen aminoácidos de origen natural; análogos, derivados y congéneres de los mismos; análogos de aminoácidos que tienen cadenas laterales variantes; y todos los estereoisómeros de cualquiera de los anteriores. Como se usa en el presente documento, el término "aminoácido" incluye tanto los isómeros ópticos D o L como los peptidomiméticos.

Una "sustitución de aminoácidos conservadora" es aquella en la que el residuo de aminoácido se reemplaza por un residuo de aminoácido que tiene una cadena lateral similar. En la técnica se han definido familias de residuos de aminoácidos que tienen cadenas laterales similares. Estas familias incluyen aminoácidos con cadenas laterales básicas (por ejemplo, lisina, arginina, histidina), cadenas laterales ácidas (por ejemplo, ácido aspártico, ácido glutámico), cadenas laterales polares no cargadas (por ejemplo, glicina, asparagina, glutamina, serina, treonina, tirosina, cisteína), cadenas laterales no polares (por ejemplo, alanina, valina, leucina, isoleucina, prolina, fenilalanina, metionina, triptófano), cadenas laterales beta ramificadas (por ejemplo, treonina, valina, isoleucina) y cadenas laterales aromáticas (por ejemplo, tirosina, fenilalanina, triptófano, histidina).

Los términos "polipéptido", "péptido" y "proteína" (si es de cadena sencilla) se usan indistintamente en el presente documento para referirse a polímeros de aminoácidos de cualquier longitud. El polímero puede ser lineal o ramificado, puede comprender aminoácidos modificados y puede estar interrumpido por no aminoácidos. Los términos también abarcan un polímero de aminoácidos que se ha modificado; por ejemplo, formación de enlaces disulfuro, glicosilación, lipidación, acetilación, fosforilación o cualquier otra manipulación, tal como conjugación con un componente de marcación. El polipéptido puede aislarse de fuentes naturales, puede producirse mediante técnicas recombinantes a partir de un huésped eucariota o procariota, o puede ser un producto de procedimientos sintéticos.

Los términos "ácido nucleico", "secuencia de ácido nucleico", "secuencia de nucleótidos" o "secuencia de polinucleótidos" y "polinucleótido" se usan indistintamente. Se refieren a una forma polimérica de nucleótidos de cualquier longitud, ya sea desoxirribonucleótidos o ribonucleótidos, o análogos de los mismos. El polinucleótido puede ser monocatenario o bicatenario, y si es monocatenario puede ser la cadena codificante o la cadena no codificante (antisentido). Un polinucleótido puede comprender nucleótidos modificados, tales como nucleótidos metilados y análogos de nucleótidos. La secuencia de nucleótidos puede estar interrumpida por componentes no nucleotídicos. Un polinucleótido puede modificarse adicionalmente después de la polimerización, tal como por conjugación con un componente de marcación. El ácido nucleico puede ser un polinucleótido recombinante o un polinucleótido de origen genómico, ADNc, semisintético o sintético que no se encuentra en la naturaleza o está unido a otro polinucleótido en una disposición no natural.

El término "aislado", como se usa en el presente documento, se refiere a material que se ha removido de su entorno original o nativo (por ejemplo, el entorno natural si es de origen natural). Por ejemplo, un polinucleótido o polipéptido de origen natural presente en un animal vivo no se aísla, pero se aísla el mismo polinucleótido o polipéptido, separado por intervención humana de algunos o todos los materiales coexistentes en el sistema natural. Dichos polinucleótidos podrían ser parte de un vector y/o tales polinucleótidos o polipéptidos podrían ser parte de una composición y aún estar aislados en el sentido de que dicho vector o composición no es parte del entorno en el que se encuentra en la naturaleza.

Varios aspectos de la divulgación se describen con más detalle a continuación. Se establecen definiciones adicionales a lo largo de la memoria descriptiva.

Ejemplos de combinaciones de combinaciones de presentación de antígeno, combinaciones de células efectoras y combinaciones de inmunosupresión antitumoral

Se proporcionan en el presente documento ejemplos de combinaciones de agentes terapéuticos de dos o más de la categoría de presentación de antígeno (A), categoría de células efectoras (B) y categoría de inmunosupresión antitumoral (C).

Tabla 8: Listado de a entes tera éuticos en las cate orías A - C

En algunas realizaciones, las combinaciones de la presente divulgación incluyen uno o más de los siguientes:

A1B1, A1B2, A1B3, A1B4, A1B5, A1B6, A1B7, A1B8, A1B9, A1B10, A1B11, A1B12, A2B1, A2B2, A2B3, A2B4, A2B5, A2B6, A2B7, A2B8, A2B9, A2B10, A2B11, A2B12, A3B1, A3B2, A3B3, A3B4, A3B5, A3B6, A3B7, A3B8, A3B9, A3B10, A3B11, A3B12, A4B1, A4B2, A4B3, A4B4, A4B5, A4B6, A4B7, A4B8, A4B9, A4B10, A4B11, A4B12, A5B1, A5B2, A5B3, A5B4, A5B5, A5B6, A5B7, A5B8, A5B9, A5B10, A5B11, A5B12, A6B1, A6B2, A6B3, A6B4, A6B5, A6B6, A6B7, A6B8, A6B9, A6B10, A6B11, A6B12, A7B1, A7B2, A7B3, A7B4, A7B5, A7B6, A7B7, A7B8, A7B9, A7B10, A7B11, A7B12, A8B1, A8B2, A8B3, A8B4, A8B5, A8B6, A8B7, A8B8, A8B9, A8B10, A8B11, A8B12, A9B1, A9B2, A9B3, A9B4, A9B5, A9B6, A9B7, A9B8, A9B9, A9B10, A9B11, A9B12, A10B1, A10B2, A10B3, A10B4, A10B5, A10B6, A10B7, A10B8, A10B9, A10B10, A10B11, A10B12, A11B1, A11B2, A11B3, A11B4, A11B5, A11B6, A11B7, A11B8, A11B9, A11B10, A11B11, A11B12, A1C1, A1C2, A1C3, A1C4, A1C5, A1C6, A1C7, A1C8, A1C9, A1C10, A1C11, A1C12, A1C13, A1C14, A1C15, A1C16, A1C17, A1C18, A1C19, A1C20, A1C21, A2C1, A2C2, A2C3, A2C4, A2C5, A2C6, A2C7, A2C8, A2C9, A2C10, A2C11, A2C12, A2C13, A2C14, A2C15, A2C16, A2C17, A2C18, A2C19, A2C20, A2C21, A3C1, A3C2, A3C3, A3C4, A3C5, A3C6, A3C7, A3C8, A3C9, A3C10, A3C11, A3C12, A3C13, A3C14, A3C15, A3C16, A3C17, A3C18, A3C19, A3C20, A3C21, A4C1, A4C2, A4C3, A4C4, A4C5, A4C6, A4C7, A4C8, A4C9, A4C10, A4C11, A4C12, A4C13, A4C14, A4C15, A4C16, A4C17, A4C18, A4C19, A4C20, A4C21, A5C1, A5C2, A5C3, A5C4, A5C5, A5C6, A5C7, A5C8, A5C9, A5C10, A5C11, A5C12, A5C13, A5C14, A5C15, A5C16, A5C17, A5C18, A5C19, A5C20, A5C21, A6C1, A6C2, A6C3, A6C4, A6C5, A6C6, A6C7, A6C8, A6C9, A6C10, A6C11, A6C12, A6C13, A6C14, A6C15, A6C16, A6C17, A6C18, A6C19, A6C20, A6C21, A7C1, A7C2, A7C3, A7C4, A7C5, A7C6, A7C7, A7C8, A7C9, A7C10, A7C11, A7C12, A7C13, A7C14, A7C15, A7C16, A7C17, A7C18, A7C19, A7C20, A7C21, A8C1, A8C2, A8C3, A8C4, A8C5, A8C6, A8C7, A8C8, A8C9, A8C10, A8C11, A8C12, A8C13, A8C14, A8C15, A8C16, A8C17, A8C18, A8C19, A8C20, A8C21, A9C1, A9C2, A9C3, A9C4, A9C5, A9C6, A9C7, A9C8, A9C9, A9C10, A9C11, A9C12, A9C13, A9C14, A9C15, A9C16, A9C17, A9C18, A9C19, A9C20, A9C21, A10C1, A10C2, A10C3, A10C4, A10C5, A10C6, A10C7, A10C8, A10C9, A10C10, A10C11, A10C12, A10C13, A10C14, A10C15, A10C16, A10C17, A10C18, A10C19, A10C20, A10C21, A11C1, A11C2, A11C3, A11C4, A11C5, A11C6, A11C7, A11C8, A11C9, A11C10, A11C11, A11C12, A11C13, A11C14, A11C15, A11C16, A11C17, A11C18, A11C19, A11C20, A11C21, B1C1, B1C2, B1C3 B1C4, B1C5, B1C6, B1C7, B1C8, B1C9, B1C10, B1C11, B1C12, B1C13, B1C14, B1C15, B1C16, B1C17, B1C18 B1C19, B1C20, B1C21, B2C1, B2C2, B2C3, B2C4, B2C5, B2C6, B2C7, B2C8, B2C9, B2C10, B2C11, B2C12, B2C13 B2C14, B2C15, B2C16, B2C17, B2C18, B2C19, B2C20, B2C21, B3C1, B3C2, B3C3, B3C4, B3C5, B3C6, B3C7 B3C8, B3C9, B3C10, B3C11, B3C12, B3C13, B3C14, B3C15, B3C16, B3C17, B3C18, B3C19, B3C20, B3C21, B4C1 B4C2, B4C3, B4C4, B4C5, B4C6, B4C7, B4C8, B4C9, B4C10, B4C11, B4C12, B4C13, B4C14, B4C15, B4C16 B4C17, B4C18, B4C19, B4C20, B4C21, B5C1, B5C2, B5C3, B5C4, B5C5, B5C6, 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B12C6, B12C7, B12C8, B12C9 B12C10, B12C11, B12C12, B12C13, B12C14, B12C15, B12C16, B12C17, B12C18, B12C19, B12C20, B12C21 A1B1C1, A1B1C2, A1B1C3, A1B1C4, A1B1C5, A1B1C6, A1B1C7, A1B1C8, A1B1C9, A1B1C10, A1B1C11 A1B1C12, A1B1C13, A1B1C14, A1B1C15, A1B1C16, A1B1C17, A1B1C18, A1B1C19, A1B1C20, A1B1C21, A1B2C1 A1B2C2, A1B2C3, A1B2C4, A1B2C5, A1B2C6, A1B2C7, A1B2C8, A1B2C9, A1B2C10, A1B2C11, A1B2C12 A1B2C13, A1B2C14, A1B2C15, A1B2C16, A1B2C17, A1B2C18, A1B2C19, A1B2C20, A1B2C21, A1B3C1, A1B3C2 A1B3C3, A1B3C4, A1B3C5, A1B3C6, A1B3C7, A1B3C8, A1B3C9, A1B3C10, A1B3C11, A1B3C12, A1B3C13 A1B3C14, A1B3C15, A1B3C16, A1B3C17, A1B3C18, A1B3C19, A1B3C20, A1B3C21, A1B4C1, A1B4C2, A1B4C3 A1B4C4, A1B4C5, A1B4C6, A1B4C7, A1B4C8, A1B4C9, A1B4C10, A1B4C11, A1B4C12, A1B4C13, A1B4C14 A1B4C15, A1B4C16, A1B4C17, A1B4C18, A1B4C19, A1B4C20, A1B4C21, A1B5C1, A1B5C2, A1B5C3, A1B5C4 A1B5C5, A1B5C6, A1B5C7, A1B5C8, A1B5C9, A1BSC10, A1B5C11, A1B5C12, A1B5C13, A1B5C14, A1B5C15 A1B5C16, A1B5C17, A1B5C18, A1B5C19, 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A1B11C9, A1B11C10, A1B11C11, A1B11C12, A1B11C13, A1B11C14, A1B11C15, A1B11C16 A1B11C17, A1B11C18, A1B11C19, A1B11C20, A1B11C21, A1B12C1, A1B12C2, A1B12C3, A1B12C4, A1B12C5 A1B12C6, A1B12C7, A1B12C8, A1B12C9, A1B12C10, A1B12C11, A1B12C12, A1B12C13, A1B12C14, A1B12C15 A1B12C16, A1B12C17, A1B12C18, A1B12C19, A1B12C20, A1B12C21, A2B1C1, A2B1C2, A2B1C3, A2B1C4 A2B1C5, A2B1C6, A2B1C7, A2B1C8, A2B1C9, A2B1C10, A2B1C11, A2B1C12, A2B1C13, A2B1C14, A2B1C15 A2B1C16, A2B1C17, A2B1C18, A2B1C19, A2B1C20, A2B1C21, A2B2C1, A2B2C2, A2B2C3, A2B2C4, A2B2C5 A2B2C6, A2B2C7, A2B2C8, A2B2C9, A2B2C10, A2B2C11, A2B2C12, A2B2C13, A2B2C14, A2B2C15, A2B2C16 A2B2C17, A2B2C18, A2B2C19, A2B2C20, A2B2C21, A2B3C1, A2B3C2, A2B3C3, A2B3C4, A2B3C5, A2B3C6 A2B3C7, A2B3C8, A2B3C9, A2B3C10, A2B3C11, A2B3C12, A2B3C13, A2B3C14, A2B3C15, A2B3C16, A2B3C17 A2B3C18, A2B3C19, A2B3C20, A2B3C21, A2B4C1, A2B4C2, A2B4C3, A2B4C4, A2B4C5, A2B4C6, A2B4C7 A2B4C8, A2B4C9, A2B4C10, A2B4C11, A2B4C12, A2B4C13, A2B4C14, A2B4C15, A2B4C16, 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Moléculas de anticuerpos

En una realización, la molécula de anticuerpo se une a LAG-3 de mamífero, por ejemplo, de humano. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo se une específicamente a un epítopo, por ejemplo, un epítopo lineal o conformacional (por ejemplo, un epítopo como se describe en el presente documento) en LAG-3. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo se une a uno o más dominios extracelulares similares a Ig de LAG-3, por ejemplo, el primer, segundo, tercer o cuarto dominio extracelular similar a Ig de LAG-3.

Como se usa en el presente documento, el término "molécula de anticuerpo" se refiere a una proteína, por ejemplo, una cadena de inmunoglobulina o un fragmento de la misma, que comprende al menos una secuencia del dominio variable de inmunoglobulina. El término "molécula de anticuerpo" incluye, por ejemplo, un anticuerpo monoclonal (que incluye un anticuerpo de longitud completa que tiene una región Fc de inmunoglobulina). En una realización, una molécula de anticuerpo comprende un anticuerpo de longitud completa o una cadena de inmunoglobina de longitud completa. En una realización, una molécula de anticuerpo comprende la unión de un antígeno o de un fragmento funcional de un anticuerpo de longitud completa, o una cadena de inmunoglobulina de longitud completa.

En una realización, una molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífico y se une a un solo epítopo. Por ejemplo, una molécula de anticuerpo monoespecífico que tiene una pluralidad de secuencias de dominio variable de inmunoglobulina, cada una de las cuales se une al mismo epítopo.

En una realización, una molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo multiespecífico, por ejemplo, comprende una pluralidad de secuencias de dominios variables de inmunoglobulina, en la que una primera secuencia del dominio variable de inmunoglobulina de la pluralidad tiene especificidad de unión por un primer epítopo y una segunda secuencia del dominio variable de inmunoglobulina de la pluralidad tiene especificidad de unión por un segundo epítopo. En una realización, el primer y segundo epítopos están en el mismo antígeno, por ejemplo, la misma proteína (o subunidad de una proteína multimérica). En una realización, el primer y segundo epítopos se superponen. En una realización, el primer y segundo epítopos no se superponen. En una realización, el primer y segundo epítopos están en diferentes antígenos, por ejemplo, las diferentes proteínas (o diferentes subunidades de una proteína multimérica). En una realización, una molécula de anticuerpo multiespecífico comprende un tercer, cuarto o quinto dominio variable de inmunoglobulina. En una realización, una molécula de anticuerpo multiespecífico es una molécula de anticuerpo biespecífico, una molécula de anticuerpo triespecífico o una molécula de anticuerpo tetraespecífico,

En una realización, una molécula de anticuerpo multiespecífico es una molécula de anticuerpo biespecífico. Un anticuerpo biespecífico tiene especificidad por no más de dos antígenos. Una molécula de anticuerpo biespecífico se caracteriza por una primera secuencia del dominio variable de inmunoglobulina que tiene especificidad de unión por un primer epítopo y una segunda secuencia del dominio variable de inmunoglobulina que tiene especificidad de unión por un segundo epítopo. En una realización, el primer y segundo epítopos están en el mismo antígeno, por ejemplo, la misma proteína (o subunidad de una proteína multimérica). En una realización, el primer y segundo epítopos se superponen. En una realización, el primer y segundo epítopos no se solapan. En una realización, el primer y segundo epítopos están en diferentes antígenos, por ejemplo, las diferentes proteínas (o diferentes subunidades de una proteína multimérica). En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico comprende una secuencia del dominio variable de cadena pesada y una secuencia del dominio variable de cadena ligera que tiene especificidad de unión por un primer epítopo y una secuencia del dominio variable de cadena pesada y una secuencia del dominio variable de cadena ligera que tiene especificidad de unión por un segundo epítopo. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico comprende una mitad de anticuerpo que tiene especificidad de unión por un primer epítopo y un medio anticuerpo que tiene especificidad de unión por un segundo epítopo. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico comprende una mitad de anticuerpo, o fragmento del mismo, que tiene especificidad de unión por un primer epítopo y un medio anticuerpo, o fragmento del mismo, que tiene especificidad de unión por un segundo epítopo. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico comprende un scFv, o un fragmento del mismo, tiene especificidad de unión por un primer epítopo y un scFv, o fragmento del mismo, tiene especificidad de unión por un segundo epítopo. En una realización, el primer epítopo está ubicado en LAG-3 y el segundo epítopo está ubicado en un PD-1, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2.

En una realización, una molécula de anticuerpo comprende un diacuerpo y una molécula monocatenaria, así como un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo (por ejemplo, Fab, F(ab')2 y Fv). Por ejemplo, una molécula de anticuerpo puede incluir una secuencia del dominio variable de cadena pesada (H) (abreviada en el presente documento como VH) y una secuencia del dominio variable de cadena ligera (L) (abreviada en el presente documento como VL). En una realización, una molécula de anticuerpo comprende o consta de una cadena pesada y una cadena ligera (denominada en el presente documento medio anticuerpo). En otro ejemplo, una molécula de anticuerpo incluye dos secuencias de dominio variable de cadena pesada (H) y dos secuencia del dominio variable de cadena ligera (L), formando por lo tanto dos sitios de unión al antígeno, tales como Fab, Fab', F(ab')2, Fc, Fd, Fd', Fv, anticuerpos de dominio variable único de cadena sencilla (por ejemplo scFv), diacuerpos (Dab) (bivalentes y biespecíficos) y anticuerpos quiméricos (por ejemplo, humanizados), que pueden producirse mediante la modificación de anticuerpos completos o aquellos sintetizados de nuevo utilizando tecnologías de ADN recombinante. Estos fragmentos de anticuerpos funcionales conservan la capacidad de unirse selectivamente con sus respectivos antígeno o receptor. Los anticuerpos y fragmentos de anticuerpos pueden ser de cualquier clase de anticuerpos que incluyen, pero no se limitan a, IgG, IgA, IgM, IgD e IgE, y de cualquier subclase (por ejemplo, IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4) de anticuerpos. La preparación de las moléculas de anticuerpo pueden ser monoclonales o policlonales. Una molécula de anticuerpo también puede ser un anticuerpo humano, humanizado, injertado con CDR o generado in vitro. El anticuerpo puede tener una región constante de cadena pesada elegida entre, por ejemplo, IgG1, IgG2, IgG3 o IgG4. El anticuerpo también puede tener una cadena ligera elegida entre, por ejemplo, kappa o lambda. El término "inmunoglobulina" (Ig) se usa indistintamente con el término "anticuerpo" en el presente documento.

Los ejemplos de fragmentos de unión a antígeno de una molécula de anticuerpo incluyen: (i) un fragmento Fab, un fragmento monovalente que consta de los dominios VL, VH, CL y CH1; (ii) un fragmento F(ab')2, un fragmento bivalente que comprende dos fragmentos Fab unidos por un puente disulfuro en la región bisagra; (iii) un fragmento Fd que consta de los dominios VH y CH1; (iv) un fragmento Fv que consta de los dominios VL y VH de un solo brazo de un anticuerpo, (v) un fragmento de diacuerpo (dAb), que consta de un dominio VH; (vi) un dominio variable de camélido o camelizado; (vii) un Fv de cadena sencilla (scFv), véase, por ejemplo, Bird et al., (1988) Science 242: 423-426; y Huston et al., (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 5879-5883); (viii) un anticuerpo de dominio único. Estos fragmentos de anticuerpos se obtienen usando técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica, y los fragmentos se criban para determinar su utilidad de la misma manera que los anticuerpos intactos.

El término "anticuerpo" incluye moléculas intactas así como fragmentos funcionales de las mismas. Las regiones constantes de los anticuerpos se pueden alterar, por ejemplo, mutar, para modificar las propiedades del anticuerpo (por ejemplo, para aumentar o disminuir uno o más de: unión al receptor Fc, glicosilación del anticuerpo, número de residuos de cisteína, función de la célula efectora o función de complemento).

Los anticuerpos de la presente divulgación también pueden ser anticuerpos de dominio único. Los anticuerpos de dominio único pueden incluir anticuerpos cuyas regiones determinantes de complementariedad son parte de un polipéptido de dominio único. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, anticuerpos de cadena pesada, anticuerpos naturalmente desprovistos de cadenas ligeras, anticuerpos de dominio único derivados de anticuerpos de 4 cadenas convencionales, anticuerpos modificados y estructuras de dominio único distintos de los derivados de anticuerpos. Los anticuerpos de dominio único pueden ser cualquiera de la técnica o cualquiera de los anticuerpos futuros de dominio único. Los anticuerpos de dominio único pueden derivarse de cualquier especie, incluidos, pero no se limita a, ratón, ser humano, camello, llama, pez, tiburón, cabra, conejo y bovino. De acuerdo con otro aspecto de la divulgación, un anticuerpo de dominio único es un anticuerpo de dominio único de origen natural conocido como anticuerpo de cadena pesada desprovisto de cadenas ligeras. Dichos anticuerpos de dominio único se divulgan en el documento WO 94/04678, por ejemplo. Por razones de claridad, este dominio variable derivado de un anticuerpo de cadena pesada naturalmente desprovisto de cadena ligera se conoce en el presente documento como VHH o nanocuerpo para distinguirlo del VH convencional de inmunoglobulinas de cuatro cadenas. Tal molécula de VHH puede derivarse de anticuerpos producidos en especies de Camelidae, por ejemplo en camello, llama, dromedario, alpaca y guanaco. Otras especies además de Camelidae pueden producir anticuerpos de cadena pesada naturalmente desprovistos de cadena ligera.

Las regiones VH y VL pueden subdividirse en regiones de hipervariabilidad, denominadas "regiones determinantes de complementariedad" (CDR), intercaladas con regiones que están más conservadas, denominadas "regiones marco" (FR o FW). La extensión de la región marco y las CDR se ha definido con precisión mediante varios métodos (véase, Kabat, EA, et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, quinta edición, Departamento deSalud y Servicios Humanos de los Estados Unidos, Publicación de los NIH No. 91- 3242; Chothia, C. et al., (1987) J. Mol. Biol.

196: 901-917; y la definición de AbM utilizada por el software de modelado de anticuerpos Oxford Molecular's AbM. Véase, en general, por ejemplo, Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains. En: Antibody Engineering Lab Manual (Ed.: Duebel, S. y Kontermann, R., Springer-Verlag, Heidelberg).

Los términos "región determinante de complementariedad" y "CDR", como se usan en el presente documento, se refieren a las secuencias de aminoácidos dentro de las regiones variables del anticuerpo que confieren especificidad antigénica y afinidad de unión. En general, hay tres CDR en cada región variable de cadena pesada (HCDR1, HCDR2, HCDR3) y tres CDR en cada región variable de cadena ligera (LCDR1, LCDR2, LCDR3).

Los límites precisos de la secuencia de aminoácidos de una CDR dada se pueden determinar usando cualquiera de varios esquemas bien conocidos, incluidos los descritos por Kabat et al. (1991), "Sequences of Proteins of Immunological Interest", 5a Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (esquema de numeración de "Kabat"), Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273,927-948 (esquema de numeración de "Chothia"). Como se usa en el presente documento, las CDR definidas de acuerdo con el esquema de numeración de "Chothia" también se denominan a veces "bucles hipervariables".

Por ejemplo, bajo Kabat, los residuos de aminoácidos de CDR en el dominio variable de cadena pesada (VH) se numeran 31-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2) y 95-102 (HCDR3); y los residuos de aminoácidos de CDR en el dominio variable de cadena ligera (VL) se numeran 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) y 89-97 (LCDR3). Bajo Chothia, los aminoácidos de CDR en VH se numeran 26-32 (HCDR1), 52-56 (HCDR2) y 95-102 (HCDR3); y los residuos de aminoácidos en VL se numeran 26-32 (LCDR1), 50-52 (lCd R2) y 91-96 (LCDR3). Al combinar las definiciones de CDR de Kabat y Chothia, las CDR consisten en los residuos de aminoácidos 26-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2) y 95 102 (HCDR3) en VH humano y residuos de aminoácidos 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) y 89-97 (LCDR3) en VL humano.

Generalmente, a menos que se indique específicamente, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 pueden incluir cualquier combinación de una o más CDR de Kabat y/o bucles hipervariables de Chothia, por ejemplo, descritos en la Tabla 1. En una realización, se usan las siguientes definiciones para las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 descritas en la Tabla 1: HCDR1 de acuerdo con las definiciones combinadas de CDR de Kabat y Chothia, y las HCCDR 2-3 y LCCDR 1-3 de acuerdo con la definición de CDR de Kabat. Bajo todas las definiciones, cada VH y VL incluye típicamente tres CDR y cuatro FR, ordenados desde el extremo terminal amino hasta el extremo terminal carboxilo en el siguiente orden: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.

Como se usa en el presente documento, una "secuencia del dominio variable de inmunoglobulina" se refiere a una secuencia de aminoácidos que puede formar la estructura de un dominio variable de inmunoglobulina. Por ejemplo, la secuencia puede incluir toda o parte de la secuencia de aminoácidos de un dominio variable de origen natural. Por ejemplo, la secuencia puede incluir o no uno, dos o más aminoácidos del extremo terminal N o C, o puede incluir otras alteraciones que sean compatibles con la formación de la estructura de la proteína.

El término "sitio de unión al antígeno" se refiere a la parte de una molécula de anticuerpo que comprende determinantes que forman una interfaz que se une al polipéptido de LAG-3, o un epítopo del mismo. Con respecto a las proteínas (o miméticos de proteínas), el sitio de unión al antígeno incluye típicamente uno o más bucles (de al menos cuatro aminoácidos o miméticos de aminoácidos) que forman una interfaz que se une al polipéptido de LAG-3. Normalmente, el sitio de unión al antígeno de una molécula de anticuerpo incluye al menos una o dos CDR y/o bucles hipervariables, o más típicamente al menos tres, cuatro, cinco o seis CDR y/o bucles hipervariables.

Los términos "competir" o "competir de forma cruzada" se usan indistintamente en el presente documento para referirse a la capacidad de una molécula de anticuerpo para interferir con la unión de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 proporcionada en el presente documento, a una diana, por ejemplo, LAG-3 humana. La interferencia con la unión puede ser directa o indirecta (por ejemplo, a través de una modulación alostérica de la molécula de anticuerpo o la diana). El grado en el que una molécula de anticuerpo puede interferir con la unión de otra molécula de anticuerpo a la diana y, por lo tanto, si se puede decir que compite, se puede determinar mediante un ensayo de unión competitiva, por ejemplo, un ensayo FACs , un ensayo ELISA o BIACORE. En algunas realizaciones, un ensayo de unión competitiva es un ensayo competitivo cuantitativo. En algunas realizaciones, se dice que una primera molécula de anticuerpo anti-LAG-3 compite por la unión a la diana con una segunda molécula de anticuerpo anti-LAG-3 cuando la unión de la primera molécula de anticuerpo a la diana se reduce en un 10% o más, por ejemplo, 20% o más, 30% o más, 40% o más, 50% o más, 55% o más, 60% o más, 65% o más, 70% o más, 75% o más, 80% o más, 85% o más, 90% o más, 95% o más, 98% o más, 99% o más en un ensayo de unión competitiva (por ejemplo, un ensayo competitivo descrito en el presente documento).

Como se usa en el presente documento, el término "epítopo" se refiere a las fracciones de un antígeno (por ejemplo, LAG-3 humana) que interactúan específicamente con una molécula de anticuerpo. Dichas fracciones, denominadas en el presente documento determinantes epitópicos, típicamente comprenden, o son parte de, elementos tales como cadenas laterales de aminoácidos o cadenas laterales de azúcar. Un determinante epitópico puede definirse mediante métodos conocidos en la técnica o descritos en el presente documento, por ejemplo, mediante cristalografía o mediante intercambio de hidrógeno-deuterio. Al menos una o algunas de las fracciones en la molécula del anticuerpo, que interactúan específicamente con un determinante epitópico, se localizan típicamente en una o unas c Dr . Normalmente, un epítopo tiene características estructurales tridimensionales específicas. Normalmente, un epítopo tiene características de carga específicas. Algunos epítopos son epítopos lineales mientras que otros son epítopos conformacionales.

Los términos "anticuerpo monoclonal" o "composición de anticuerpo monoclonal", como se usan en el presente documento, se refieren a una preparación de moléculas de anticuerpo de composición molecular única. Una composición de anticuerpo monoclonal muestra una única especificidad de unión y afinidad por un epítopo particular. Se puede preparar un anticuerpo monoclonal mediante tecnología de hibridomas o mediante métodos que no utilizan tecnología de hibridomas (por ejemplo, métodos recombinantes).

Una proteína "efectivamente humana" es una proteína que no evoca una respuesta de anticuerpo neutralizante, por ejemplo, la respuesta de anticuerpo antimurino humano (HAMA). HAMA puede ser problemático en varias circunstancias, por ejemplo, si la molécula de anticuerpo se administra repetidamente, por ejemplo, en el tratamiento de una enfermedad crónica o recurrente. Una respuesta de HAMA puede hacer que la administración repetida de anticuerpos sea potencialmente ineficaz debido a un aumento de la eliminación de anticuerpos del suero (véase, por ejemplo, Saleh et al., Cancer Immunol. Immunother., 32: 180-190 (1990)) y también debido a posibles reacciones alérgica. (véase, por ejemplo, LoBuglio et al., Hybridoma, 5: 5117-5123 (1986)).

La molécula de anticuerpo puede ser un anticuerpo policlonal o monoclonal. En otras realizaciones, el anticuerpo se puede producir de forma recombinante, por ejemplo, mediante la presentación en fagos o mediante métodos combinatorios.

Los métodos combinatorios y de presentación en fagos para generar anticuerpos son conocidos en la técnica (como se describe, por ejemplo, en Ladner et al. Patente de Estados Unidos No. 5.223.409; Kang et al. Publicación Internacional No. WO 92/18619; Dower et al. Publicación internacional No. WO 91/17271; Winter et al. Publicación internacional WO 92/20791; Markland et al. Publicación internacional No. WO 92/15679; Breitling et al. Publicación internacional WO 93/01288; McCafferty et al. Publicación internacional No. WO 92/01047; Garrard et al. Publicación internacional No. WO 92/09690; Ladner et al. Publicación internacional No. WO 90/02809; Fuchs et al. (1991) Bio/Technology 9: 1370-1372; Hay et al. (1992) Hum Antibod Hybridomas 3: 81-85; Huse et al. (1989) Science 246: 1275-1281; Griffths et al. (1993) EMBO J 12: 725-734; Hawkins et al. (1992 ) J Mol Biol 226: 889-896; Clackson et al. (1991) Nature 352: 624-628; Gram et al. (1992) PNAS 89: 3576-3580; Garrad et al. (1991) Bio/Technology 9: 1373 1377; Hoogenboom et al. (1991) Nuc Acid Res 19: 4133-4137; y Barbas et al. (1991) PNAS 88: 7978-7982).

En una realización, el anticuerpo es un anticuerpo completamente humano (por ejemplo, un anticuerpo elaborado en un ratón que ha sido modificado genéticamente para producir un anticuerpo a partir de una secuencia de inmunoglobulina humana), o un anticuerpo no humano, por ejemplo, un anticuerpo de roedor (ratón o rata), cabra, primate (por ejemplo, mono), camello. Preferiblemente, el anticuerpo no humano es un anticuerpo de roedor (anticuerpo de ratón o rata). Los métodos para producir anticuerpos de roedores son conocidos en la técnica.

Se pueden generar anticuerpos monoclonales humanos usando ratones transgénicos que portan los genes de inmunoglobulina humana en lugar del sistema de ratón. Los esplenocitos de estos ratones transgénicos inmunizados con el antígeno de interés se utilizan para producir hibridomas que secretan mAb humanos con afinidades específicas por epítopos de una proteína humana (véase, por ejemplo, Wood et al. Solicitud internacional WO 91/00906, Kucherlapati et al. Publicación PCT WO 91/10741; Lonberg et al. Solicitud internacional WO 92/03918; Kay et al. Solicitud internacional 92/03917; Lonberg, N. et al. 1994, Nature 368: 856-859; Green, LL et al. 1994, Nature Genet.

7: 13-21; Morrison, SL et al. 1994, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-6855; Bruggeman et al. 1993, Year Immunol 7: 33-40; Tuaillon et al. 1993, PNAS 90 : 3720-3724; Bruggeman et al. 1991, Eur J Immunol 21: 1323-1326).

Un anticuerpo puede ser uno en el que la región variable, o una porción de la misma, por ejemplo, las CDR, se generan en un organismo no humano, por ejemplo, una rata o un ratón. Los anticuerpos como parte de la invención tal como se definen en las reivindicaciones pueden ser anticuerpos quiméricos, injertados con CDR o humanizados. Los anticuerpos como parte de la invención como se define en las reivindicaciones pueden generarse en un organismo no humano, por ejemplo, una rata o ratón, y luego modificarse, por ejemplo, en el marco variable o región constante, para disminuir la antigenicidad en un ser humano.

Los anticuerpos quiméricos se pueden producir mediante técnicas de ADN recombinante conocidas en la técnica (véase, Robinson et al. Publicación internacional de patente PCT/US86/02269; Akira, et al. Solicitud de patente europea No. 184.187; Taniguchi, M. Solicitud de Patente europea No. 171.496; Morrison et al. Solicitud de Patente Europea No. 173.494; Neuberger et al. Solicitud Internacional WO 86/01533; Cabilly et al. Patente de los Estados unidos No. 4.816.567; Cabilly et al. Solicitud de Patente europea No. 125.023; Better et al. (1988 Science 240:1041-1043); Liu et al. (1987), PNAS 84:3439-3443; Liu et al., 1987, J. Immunol. 139: 3521-3526; Sun et al. (1987), PNAS 84:214-218; Nishimura et al., 1987, Canc. Res. 47:999-1005; Wood et al. (1985), Nature 314: 446-449; y Shaw et al.

1988, J. Natl Cancer Inst. 80:1553-1559).

Un anticuerpo humanizado o injertado con CDR tendrá al menos una o dos, pero generalmente las tres CDR receptoras (de cadenas de inmunoglobulinas pesadas o ligeras) reemplazadas por una CDR donante. El anticuerpo se puede reemplazar con al menos una parte de una CDR no humana o solo algunas de las CDR se pueden reemplazar con CDR no humanas. Solo es necesario reemplazar el número de CDR requeridas para la unión del anticuerpo humanizado a LAG-3. Preferiblemente, el donante será un anticuerpo de roedor, por ejemplo, un anticuerpo de rata o ratón, y el receptor será un marco humano o un marco de consenso humano. Normalmente, la inmunoglobulina que proporciona las CDR se denomina el "donante" y la inmunoglobulina que proporciona el marco se denomina el "aceptor". En una realización, la inmunoglobulina del donante es una no humana (por ejemplo, de roedor). El marco aceptor es un marco de origen natural (por ejemplo, de humano) o un marco de consenso, o una secuencia de aproximadamente 85% o más, preferiblemente 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma.

Como se usa en el presente documento, el término "secuencia de consenso" se refiere a la secuencia formada a partir de los aminoácidos (o nucleótidos) que ocurren con mayor frecuencia en una familia de secuencias relacionadas (véase, por ejemplo, Winnaker, From Genes to Clones (Verlagsgesellschaft, Weinheim, Alemania 1987). En una familia de proteínas, cada posición en la secuencia de consenso está ocupada por el aminoácido que se encuentra con mayor frecuencia en esa posición en la familia. Si dos aminoácidos ocurren con la misma frecuencia, cualquiera de los dos puede incluirse en la secuencia de consenso. Un "marco de consenso" se refiere a la región del marco en la secuencia de inmunoglobulina de consenso.

Se puede humanizar un anticuerpo mediante métodos conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, Morrison, SL, 1985, Science 229: 1202-1207, por Oi et al., 1986, BioTechniques 4: 214, y por Queen et al. Patentes de los Estados Unidos Nos 5.585.089, 5.693.761 y 5.693.762).

Los anticuerpos humanizados o injertados con CDR se pueden producir mediante injerto de CDR o sustitución de CDR, en el que se pueden reemplazar una, dos o todas las CDR de una cadena de inmunoglobulina. Véase, por ejemplo, la patente de los Estados Unidos No. 5.225.539; Jones et al. 1986, Nature 321: 552-525; Verhoeyan et al.

1988, Science 239: 1534; Beidler et al. 1988 J. Immunol. 141: 4053-4060; Winter, patente de los Estados Unidos No.

5.225.539. Winter describe un método de injerto de CDR que puede usarse para preparar los anticuerpos humanizados de la presente invención como se define en las reivindicaciones (solicitud de Patente del Reino Unido GB 2188638A, presentada el 26 de marzo de 1987; Winter, patente de los Estados Unidos No. 5.225.539).

Los anticuerpos como parte de la invención pueden ser anticuerpos humanizados en los que se han sustituido, eliminado o añadido aminoácidos específicos para llegar a los anticuerpos como se define en las reivindicaciones. Los criterios para seleccionar aminoácidos del donante se describen en la patente de los Estados Unidos No. 5.585.089, por ejemplo, las columnas 12-16 de la patente de los Estados Unidos No. 5.585.089, por ejemplo, las columnas 12-16 de la patente de los Estados Unidos No. 5.585.089. Otras técnicas para humanizar anticuerpos se describen en Padlan et al. EP 519596 A1, publicado el 23 de diciembre de 1992.

La molécula de anticuerpo puede ser un anticuerpo de cadena sencilla. Puede diseñarse un anticuerpo de cadena sencilla (scFV) (véase, por ejemplo, Colcher, D. et al. (1999), Ann NY Acad Sci 880: 263-80; y Reiter, Y. (1996), Clin Cancer Res 2: 245-52). El anticuerpo de cadena sencilla puede dimerizarse o multimerizarse para generar anticuerpos multivalentes que tienen especificidades para diferentes epítopos de la misma proteína diana.

En otras realizaciones más, la molécula de anticuerpo tiene una región constante de cadena pesada elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD e IgE; particularmente, elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada (por ejemplo, humana) de IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4. En otra realización, la molécula de anticuerpo tiene una región constante de cadena ligera elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena ligera (por ejemplo, humana) de kappa o lambda. La región constante se puede alterar, por ejemplo, mutar, para modificar las propiedades del anticuerpo (por ejemplo, para aumentar o disminuir uno o más de: unión al receptor de Fc, glicosilación del anticuerpo, número de residuos de cisteína, función de la célula efectora y/o función de complemento). En una realización, el anticuerpo tiene: función efectora; y puede fijar el complemento. En otras realizaciones, el anticuerpo no lo hace; reclutar células efectoras; o fijar el complemento. En otra realización, el anticuerpo tiene capacidad reducida o nula para unirse a un receptor de Fc. Por ejemplo, es un isotipo o subtipo, fragmento u otro mutante, que no soporta la unión a un receptor de Fc, por ejemplo, tiene una región de unión al receptor de Fc mutagenizada o eliminada.

Se conocen en la técnica métodos para alterar una región constante de anticuerpo. Los anticuerpos con función alterada, por ejemplo, afinidad alterada por un ligando efector, tal como FcR en una célula, o el componente C1 del complemento se pueden producir reemplazando al menos un residuo de aminoácido en la porción constante del anticuerpo con un residuo diferente (véanse, por ejemplo, el documento EP 388.151 A1, la patente de los Estados Unidos No. 5.624.821 y la patente de los Estados Unidos No. 5.648.260). Se podría describir un tipo similar de alteraciones que, si se aplicaran a la inmunoglobulina murina o de otra especie, reducirían o eliminarían estas funciones.

Una molécula de anticuerpo puede derivatizarse o unirse a otra molécula funcional (por ejemplo, otro péptido o proteína). Como se usa en el presente documento, una molécula de anticuerpo "derivatizada" es una que ha sido modificada. Los métodos de derivatización incluyen, pero no se limitan a, la adición de una fracción fluorescente, un radionucleótido, una toxina, una enzima o un ligando de afinidad tal como biotina. Por consiguiente, se pretende que las moléculas de anticuerpo de la invención incluyan formas derivatizadas y modificadas de otro modo siempre que mantengan las características de los anticuerpos definidos en la reivindicación 1, incluidas las moléculas de inmunoadhesión. Por ejemplo, una molécula de anticuerpo se puede unir funcionalmente (mediante acoplamiento químico, fusión genética, asociación no covalente o de otro modo) a una o más de otras entidades moleculares, tal como otro anticuerpo (por ejemplo, un anticuerpo biespecífico o un diacuerpo), un agente detectable, un agente citotóxico, un agente farmacéutico y/o una proteína o péptido que puede mediar en la asociación del anticuerpo o porción de anticuerpo con otra molécula (tal como una región central de estreptavidina o una etiqueta de polihistidina).

Un tipo de molécula de anticuerpo derivatizada se produce entrecruzando dos o más anticuerpos (del mismo tipo o de diferentes tipos, por ejemplo, para crear anticuerpos biespecíficos). Los entrecruzadores adecuados incluyen aquellos que son heterobifuncionales, que tienen dos grupos claramente reactivos separados por un espaciador apropiado (por ejemplo, éster de m-maleimidobenzoil-N-hidroxisuccinimida) u homobifuncionales (por ejemplo, suberato de disuccinimidilo). Tales enlazadores están disponibles a través de Pierce Chemical Company, Rockford, Ill.

Agentes detectables útiles con los que se puede derivatizar (o marcar) una molécula de anticuerpo de la invención para incluir compuestos fluorescentes, diversas enzimas, grupos prostéticos, materiales luminiscentes, materiales bioluminiscentes, átomos metálicos emisores de fluorescencia, por ejemplo, europio (Eu), y otros lantánidos y materiales radiactivos (descritos a continuación). Los ejemplos de agentes detectables fluorescentes incluyen fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína, rodamina, cloruro de 5-dimetilamina-1-naftalenosulfonilo, ficoeritrina y similares. Un anticuerpo también puede derivatizarse con enzimas detectables, tales como fosfatasa alcalina, peroxidasa de rábano picante, p-galactosidasa, acetilcolinesterasa, glucosa oxidasa y similares. Cuando un anticuerpo se derivatiza con una enzima detectable, se detecta agregando reactivos adicionales que la enzima usa para producir un producto de reacción detectable. Por ejemplo, cuando está presente el agente detectable peroxidasa de rábano picante, la adición de peróxido de hidrógeno y diaminobencidina conduce a un producto de reacción coloreado, que es detectable. Una molécula de anticuerpo también puede derivatizarse con un grupo prostético (por ejemplo, estreptavidina/biotina y avidina/biotina). Por ejemplo, un anticuerpo puede derivatizarse con biotina y detectarse mediante medición indirecta de la unión de avidina o estreptavidina. Ejemplos de materiales fluorescentes adecuados incluyen umbeliferona, fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína, rodamina, diclorotriazinilamina, fluoresceína, cloruro de dansilo o ficoeritrina; un ejemplo de material luminiscente incluye luminol; y los ejemplos de materiales bioluminiscentes incluyen luciferasa, luciferina y aequorina.

La molécula de anticuerpo marcada se puede usar, por ejemplo, de forma diagnóstica y/o experimental en varios contextos, que incluyen (i) para aislar un antígeno predeterminado mediante técnicas estándar, tales como cromatografía de afinidad o inmunoprecipitación; (ii) para detectar un antígeno predeterminado (por ejemplo, en un lisado celular o sobrenadante celular) con el fin de evaluar la abundancia y el patrón de expresión de la proteína; (iii) para monitorear los niveles de proteína en el tejido como parte de un procedimiento de prueba clínica, por ejemplo, para determinar la eficacia de un régimen de tratamiento dado.

Una molécula de anticuerpo se puede conjugar con otra entidad molecular, típicamente un marcador o un agente o fracción terapéutica (por ejemplo, un citotóxico o citostático). Los isótopos radiactivos se pueden usar en aplicaciones de diagnóstico o terapéuticas. Los isótopos radiactivos que pueden acoplarse a los anticuerpos anti-PSMA incluyen, pero no se limitan a, emisores a, p o y, o emisores p y y. Dichos isótopos radiactivos incluyen, pero no se limita a, yodo (131I o 125I), itrio (90Y), lutecio (177Lu), actinio (225Ac), praseodimio, astato (211At), renio (186Re), bismuto (212Bi o 213Bi), indio (111In), tecnecio (99mTc), fósforo (32P), rodio (188Rh), azufre (35S), carbono (14C), tritio (3H), cromo (51Cr), cloro (36Cl), cobalto (57Co o 58Co), hierro (59Fe), selenio (75Se) o galio (67Ga). Los radioisótopos útiles como agentes terapéuticos incluyen itrio (90Y), lutecio (177Lu), actinio (225Ac), praseodimio, astato (211At), renio (186Re), bismuto (212Bi o 213Bi) y rodio (188Rh). Los radioisótopos útiles como marcadores, por ejemplo, para uso en diagnóstico, incluyen yodo (131| o 125I), indio (111In), tecnecio (99mTc), fósforo (32P), carbono (14C) y tritio (3H), o uno o más de los isótopos terapéuticos enumerados anteriormente.

La divulgación proporciona moléculas de anticuerpos radiomarcadas y métodos para marcar las mismas. En una realización, se describe un método para marcar una molécula de anticuerpo. El método incluye poner en contacto una molécula de anticuerpo, con un agente quelante, para producir de ese modo un anticuerpo conjugado. El anticuerpo conjugado se marca radiactivamente con un radioisótopo, por ejemplo, 111Indio, 90Yttrio y 177Lutetio, para producir de ese modo una molécula de anticuerpo marcada.

Como se discutió anteriormente, la molécula de anticuerpo se puede conjugar con un agente terapéutico. Ya se han mencionado radioisótopos terapéuticamente activos. Los ejemplos de otros agentes terapéuticos incluyen taxol, citocalasina B, gramicidina D, bromuro de etidio, emetina, mitomicina, etopósido, tenopósido, vincristina, vinblastina, colchicina, doxorrubicina, daunorrubicina, dihidroxi antracindiona, mitoxantrona, mitramicina, actinomicina D, 1-deshidrotestosterona, glucocorticoides, procaína, tetracaína, lidocaína, propranolol, puromicina, maitansinoides, por ejemplo, maitansinol (véase la patente de los Estados Unidos No. 5.208.020), CC-1065 (véanse las patentes de los Estados unidos Nos. 5.475.092, 5.585.499, 5.846.545) y análogos u homólogos de los mismos. Los agentes terapéuticos incluyen, pero no se limita a, antimetabolitos (por ejemplo, metotrexato, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, citarabina, 5-fluorouracil decarbazina), agentes alquilantes (por ejemplo, mecloretamina, tioepa clorambucilo, CC1065, melfalán, carmustina (BSNU) y lomustina (CCNU), ciclotosfamida, busulfán, dibromomanitol, estreptozotocina, mitomicina C y cis-diclorodiamina platino (II) (DDP) cisplatino), antraciclinas (por ejemplo, daunorrubicina (anteriormente daunomicina) y doxorrubicina, antibióticos (por ejemplo, dactinomicina (anteriormente actinomicina), bleomicina, mitramicina y antramicina (AMC)) y agentes antimitóticos (por ejemplo, vincristina, vinblastina, taxol y maitansinoides).

En un aspecto, la divulgación presenta un método para proporcionar una molécula de unión a la diana que se une específicamente a un receptor de LAG-3. Por ejemplo, la molécula de unión a la diana es una molécula de anticuerpo. El método incluye: proporcionar una proteína diana que comprende al menos una porción de proteína no humana, siendo la porción homóloga a (al menos 70, 75, 80, 85, 87, 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98% idéntica a) una porción correspondiente de una proteína diana humana, pero que difiere en al menos un aminoácido (por ejemplo, al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho o nueve aminoácidos); obtener una molécula de anticuerpo que se una específicamente al antígeno; y evaluar la eficacia del agente de unión para modular la actividad de la proteína diana. El método puede incluir además administrar el agente de unión (por ejemplo, molécula de anticuerpo) o un derivado (por ejemplo, una molécula de anticuerpo humanizado) a un sujeto humano.

Esta divulgación proporciona una molécula de ácido nucleico aislada que codifica la molécula de anticuerpo anterior, los vectores y las células huésped de la misma. La molécula de ácido nucleico incluye, pero no se limita a, ARN, ADN genómico y ADNc.

Moléculas de anticuerpos multiespecíficos

En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo multiespecífica (por ejemplo, una biespecífica o una triespecífica). Los protocolos para generar moléculas de anticuerpos biespecíficos o heterodiméricos se conocen en la técnica; incluyendo, pero sin limitarse a, por ejemplo, el enfoque de "botón en ojal" descrito , por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 5.731.168; el emparejamiento Fc de dirección electrostática como se describe, por ejemplo, en los documentos WO 09/089004, WO 06/106905 y WO 2010/129304; formación de heterodímeros de dominios modificados de intercambio de cadena (SEED) como se describe, por ejemplo, en el documento WO 07/110205; intercambio de brazo de Fab como se describe, por ejemplo, en los documentos WO 08/119353, WO 2011/131746 y WO 2013/060867; conjugado de doble anticuerpo, por ejemplo, mediante entrecruzamiento de anticuerpos para generar una estructura biespecífica usando un reactivo heterobifuncional que tiene un grupo reactivo amina y un grupo reactivo sulfhidrilo como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 4.433.059; determinantes de anticuerpos biespecíficos generados recombinando medios anticuerpos (pares de cadena pesada-ligera o Fab) de diferentes anticuerpos a través del ciclo de reducción y oxidación de enlaces disulfuro entre las dos cadenas pesadas, como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 4.444.878; anticuerpos trifuncionales, por ejemplo, tres fragmentos Fab' entrecruzados a través de grupos reactivos con sulfhidrilo, como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 5.273.743; proteínas de unión biosintéticas, por ejemplo, par de scFv entrecruzados a través de colas del extremo terminal C preferiblemente a través de entrecruzamiento químico reactivo con disulfuro o amina, como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 5.534.254; anticuerpos bifuncionales, por ejemplo, fragmentos Fab con diferentes especificidades de unión dimerizados a través de cremalleras de leucina (por ejemplo, c-fos y c-jun) que han reemplazado el dominio constante, como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No.

5.582.996; receptores mono y oligovalentes biespecíficos y oligoespecíficos, por ejemplo, regiones VH-CH1 de dos anticuerpos (dos fragmentos Fab) unidos a través de un espaciador polipeptídico entre la región CH1 de un anticuerpo y la región VH del otro anticuerpo típicamente con cadenas ligeras asociadas, como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 5.591.828; conjugados biespecíficos ADN-anticuerpo, por ejemplo, entrecruzamiento de anticuerpos o fragmentos Fab a través de una pieza de ADN bicatenaria, como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 5.635.602; proteínas de fusión biespecíficas, por ejemplo, un constructo de expresión que contiene dos scFv con un enlazador de péptido helicoidal hidrófilo entre ellos y una región constante completa, como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 5.637.481; proteínas de unión multivalentes y multiespecíficas, por ejemplo, dímero de polipéptidos que tienen el primer dominio con la región de unión de la región variable de la cadena pesada de Ig y el segundo dominio con la región de unión de la región variable de la cadena ligera de Ig, generalmente denominados diacuerpos (las estructuras de orden superior) también se incluyen creando moléculas biespecíficas, tetraespecíficas o tetraespecíficas, como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 5.837.242; constructos de minicuerpos con cadenas VL y VH enlazadas además conectadas con espaciadores de péptidos a una región de bisagra de anticuerpo y una región CH3, que se pueden dimerizar para formar moléculas biespecíficas/multivalentes, como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 5.837.821; dominios VH y VL enlazados con un enlazador peptídico corto (por ejemplo, 5 o 10 aminoácidos) o ningún enlazador en cualquier orientación, que pueden formar dímeros para formar diacuerpos biespecíficos; trímeros y tetrámeros, como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No.

5.844.094; cadena de dominios VH (o dominios VL en miembros de la familia) conectados por enlaces peptídicos con grupos entrecruzables en el extremo terminal C asociado además con dominios VL para formar una serie de FV (o scFv), como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 5.864.019; y polipéptidos de unión de cadena sencilla con un dominio Vh y VL unidos a través de un enlazador peptídico se combinan en estructuras multivalentes mediante entrecruzamiento no covalente o química para formar, por ejemplo, estructuras homobivalentes, heterobivalentes, trivalentes y tetravalentes utilizando tanto un formato de scFV como uno de tipo diacuerpo, como se describe, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 5.869.620. Se encuentran ejemplos adicionales de moléculas multiespecíficas y biespecíficas y métodos para su elaboración, por ejemplo, en los documentos US5910573, US5932448, US5959083, US5989830, US6005079, US6239259, US6294353, US6333396, US6476198, US6511663, US6670453, US6743896, US6809185, US6833441, US7129330, US7183076, US7521056, US7527787, US7534866, US7612181, US2002004587A1, US2002076406A1, US2002103345A1, US2003207346A1, US2003211078A1, US2004219643A1, US2004220388A1, US2004242847A1, US2005003403A1, US2005004352A1, US2005069552A1, US2005079170A1, US2005100543A1, US2005136049A1, US2005136051A1, US2005163782A1, US2005266425A1, US2006083747A1, US2006120960A1, US2006204493A1, US2006263367A1, US2007004909A1, US2007087381A1, US2007128150A1, US2007141049A1, US2007154901A1, US2007274985A1, US2008050370A1, US2008069820A1, US2008152645A1, US2008171855A1, US2008241884A1, US2008254512A1, US2008260738A1, US2009130106A1, US2009148905A1, US2009155275A1, US2009162359A1, US2009162360A1, US2009175851A1, US2009175867A1, US2009232811A1, US2009234105A1, US2009263392A1, US2009274649A1, EP346087A2, WO0006605A2, WO02072635A2, WO04081051A1, WO06020258A2, WO2007044887A2, WO2007095338A2, WO2007137760A2, WO2008119353A1, WO2009021754A2, WO2009068630A1, WO9103493A1, WO9323537A1, WO9409131A1, WO9412625A2, WO9509917A1, WO9637621A2, WO9964460A1. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo monoespecífica, biespecífica o multiespecífica) está unida covalentemente, por ejemplo, fusionada, a otra pareja, por ejemplo, una proteína, por ejemplo, una, dos o más citocinas, por ejemplo, como una molécula de fusión, por ejemplo, una proteína de fusión. En otras realizaciones, la molécula de fusión comprende una o más proteínas, por ejemplo, una, dos o más citocinas. En una realización, la citocina es una interleucina (IL) elegida entre una, dos, tres o más de IL-1, IL-2, IL-12, IL-15 o IL-21. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico tiene una primera especificidad de unión a una primera diana (por ejemplo, a LAG-3), una segunda especificidad de unión a una segunda diana (por ejemplo, PD-1, TIM-3 o PD-L1) y está opcionalmente unida a un dominio de interleucina (por ejemplo, IL-12), por ejemplo, IL-12 de longitud completa o una porción de la misma.

Una "proteína de fusión" y un "polipéptido de fusión" se refieren a un polipéptido que tiene al menos dos porciones unidas covalentemente, en la que cada una de las porciones es un polipéptido que tiene una propiedad diferente. La propiedad puede ser una propiedad biológica, tal como la actividad in vitro o in vivo. La propiedad también puede ser una propiedad química o física simple, tal como la unión a una molécula diana, la catálisis de una reacción, etc. Las dos porciones se pueden unir directamente mediante un enlace peptídico sencillo o mediante un enlazador peptídico, pero están en el marco de lectura entre sí.

Esta descripción proporciona una molécula de ácido nucleico aislada que codifica las moléculas de anticuerpo anteriores, los vectores y las células huésped de los mismos. La molécula de ácido nucleico incluye, pero no se limita a, ARN, ADN genómico y ADNc.

Ejemplos de agentes utilizados en las combinaciones

En el presente documento se describen métodos y composiciones que incluyen una combinación de uno o más de: (i) un agente que mejora la presentación de antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral); (ii) un agente que mejora la respuesta de una célula efectora (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral, tratando de ese modo el trastorno, por ejemplo, la condición o trastorno hiperproliferativo (por ejemplo, el cáncer). En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de LAG-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento). En el presente documento se proporcionan ejemplos de agentes que se pueden usar en estas combinaciones.

Ejemplos de agonistas de STING

En una realización, la combinación incluye un agonista de STING. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de mama, un carcinoma de células escamosas, un melanoma, un cáncer de ovario, un carcinoma de trompas de Falopio, un carcinoma peritoneal, un sarcoma de tejido blando, un melanoma, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de mama, un cáncer de esófago, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer de endometrio, un cáncer de cuello uterino o un carcinoma de células basales), por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica (CLL) o un linfoma (por ejemplo, un linfoma de células B de zona marginal, un linfoma linfocítico pequeño, un linfoma folicular, linfoma de Hodgkin), linfoma de no Hodgkin)).

En algunas realizaciones, el agonista de STING es un dinucleótido cíclico, por ejemplo, un dinucleótido cíclico que comprende nucleobases de purina o pirimidina (por ejemplo, nucleobases de adenosina, guanina, uracilo, timina o citosina). En algunas realizaciones, las nucleobases del dinucleótido cíclico comprenden la misma nucleobase o diferentes nucleobases.

En algunas realizaciones, el agonista de STING comprende una nucleobase de adenosina o guanosina. En algunas realizaciones, el agonista de STING comprende una nucleobase de adenosina y una nucleobase de guanosina. En algunas realizaciones, el agonista de STING comprende dos nucleobases de adenosina o dos nucleobases de guanosina.

En algunas realizaciones, el agonista de STING comprende un dinucleótido cíclico modificado, por ejemplo, que comprende una nucleobase modificada, una ribosa modificada o un enlace fosfato modificado. En algunas realizaciones, el dinucleótido cíclico modificado comprende un enlace fosfato modificado, por ejemplo, un tiofosfato.

En algunas realizaciones, el agonista de STING comprende un dinucleótido cíclico (por ejemplo, un dinucleótido cíclico modificado) con enlaces fosfato 2',5' o 3',5'. En algunas realizaciones, el agonista de STING comprende un dinucleótido cíclico (por ejemplo, un dinucleótido cíclico modificado) con estereoquímica Rp o Sp alrededor de los enlaces fosfato.

En algunas realizaciones, el agonista de STING es Rp,Rp ditio 2',3' c-di-AMP (por ejemplo, Rp,Rp-ditio c-[A (2',5')pA (3',5')p]), o un dinucleótido cíclico análogo del mismo. En algunas realizaciones, el agonista de STING es un compuesto descrito en la publicación de patente de los Estados Unidos No. US2015/0056224 (por ejemplo, un compuesto en la Figura 2c, por ejemplo, compuesto 21 o compuesto 22). En algunas realizaciones, el agonista de STING es c-[G2',5')pG(3',5')p], un derivado del mismo de ditio ribosa sustituido en O, o un compuesto representado en la Figura 4 de las publicaciones PCT Nos. WO 2014/189805 y WO 2014/189806. En algunas realizaciones, el agonista de STING es c-[A(2',5')pA(3',5')p] o un derivado del mismo de ditio ribosa sustituido en O, o es un compuesto representado en la Figura 5 de las publicaciones PCT Nos. WO 2014/189805 y WO 2014/189806. En algunas realizaciones, el agonista de STING es c-[G(2',5')pA(3',5')p], o un derivado del mismo de ditio ribosa sustituido en O, o es un compuesto representado en la Figura 5 de las publicaciones PCT Nos. WO 2014/189805 y WO 2014/189806. En algunas realizaciones, el agonista de STING es 2'-0-propargil-cíclico-[A(2',5')pA(3',5')p](2'-0-propargil-ML-CDA) o un compuesto representado en la Figura 7 de la publicación PCT No. WO 2014/189806.

Se describen otros ejemplos de agonistas de STING, por ejemplo, en las publicaciones PCT Nos. WO 2014/189805 y WO 2014/189806, y la publicación de patente de los Estados Unidos No. 2015/0056225.

Ejemplos de agonistas de TLR

En una realización, una combinación divulgada en el presente documento incluye un agonista del receptor tipo Toll (TLR). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de mama, un carcinoma de células escamosas, un melanoma, un cáncer de ovario, un carcinoma de trompas de Falopio, un carcinoma peritoneal, un sarcoma de tejido blando, un melanoma, un cáncer de mama, un cáncer de esófago, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer de endometrio, un cáncer de cuello uterino, un cáncer de colon (por ejemplo, un cáncer de colon con capacidad de reparación de desajustes metastásicos (MRP)), un cáncer de riñón (por ejemplo, un carcinoma de células renales) o un carcinoma de células basales), por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica (CLL) o un linfoma (por ejemplo, un linfoma de células B de zona marginal, un linfoma linfocítico pequeño, un linfoma folicular, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin)).

Los TLR son una familia de receptores de reconocimiento de patrones que se identificaron inicialmente como sensores del sistema inmune innato que reconocen patógenos microbianos. En los seres humanos, los TLR incluyen TLR-1, TLR-2, TLR-3, TLR-4, TLR-5, TLR-6, TLR-7, TLR-8, TLR-9 y TLR-10. Los TLR-1, TLR-2, TLR-4, TLR-5 y TLR-6 se expresan en la superficie de las células y TLR-3, TLR-7/ TLR-8 y TLR-9 se expresan con el compartimento del ER. Los subconjuntos de células dendríticas humanas pueden identificarse sobre la base de distintos patrones de expresión de TLR. El subconjunto mieloide o "convencional" de células dendríticas humanas expresa TLR 1-8 y el subconjunto plasmocitoide de células dendríticas expresa sólo TLR-7 y TLR-9. La unión del ligando a los TLR invoca una cascada de vías de señalización intracelular que inducen la producción de factores implicados en la inflamación y la inmunidad. Tras la estimulación, el subconjunto mieloide y el subconjunto plasmocitoide de células dendríticas humanas dan como resultado el cebado de células T CD4+ y CD8+ específicas de antígeno y la activación de células NK y células T, respectivamente.

En algunas realizaciones, el agonista de TLR se elige entre uno o más de un agonista de TLR-1, un agonista de TLR-2, un agonista de TLR-3, un agonista de TLR-4, un agonista de TLR-5, un agonista de TLR 6, un agonista de TLR-7, un agonista de TLR-8, un agonista de TLR-9, un agonista de TLR-10, un agonista de TLR-1/2, un agonista de TLR-2/6 o un agonista de TLR-7/8. En una realización, el agonista de TLR es un agonista de TLR-7.

En algunas realizaciones, el agonista de TLR es imiquimod o 3-(2-metilpropil)-3,5,8-triazatriciclo[7.4.0.02,6]trideca-1 (9),2(6),4,7,10,12-hexen-7-amina. Imiquimod o 3-(2-metilpropil)-3,5,8-triazatriciclo[7.4.0.02,6]trideca-1(9),2(6), 4,7,10,12-hexaen-7-amina puede unirse y activar TLR-7 y/o TLR-8.

En algunas realizaciones, el agonista de TLR es 852A. 852A se describe, por ejemplo, en Inglefield et al. J Interferon Cytokine Res. 2008; 28 (4): 253-63. 852A puede unirse a y activar TLR-7 y/o t Lr-8.

En algunas realizaciones, el agonista de TLR es Bacille Calmette-Guérin (BCG). BCG puede unirse y activar TLR-9. En algunas realizaciones, el agonista de TLR es el EMD 120108. El EMD 120108 es un oligonucleótido sintético que contiene oligodesoxinucleótido fosforotioato. El EMD 1201081 puede unirse y activar TLR-9, por ejemplo, en monocitos/macrófagos, células dendríticas plasmocitoides (DC) y células B, iniciando vías de señalización inmunitaria, activando células B e induciendo la producción de citocinas de células T cooperadoras.

En algunas realizaciones, el agonista de TLR es IMO-2055. IMO-2055 es un oligonucleótido sintético que contiene dinucleótidos CpG no metilados. Al imitar secuencias CpG no metiladas en el ADN bacteriano, IMO-2055 puede unirse y activar TLR-9, por ejemplo, en monocitos/macrófagos, células dendríticas (DC) plasmocitoides y células B, iniciando vías de señalización inmunológica y activando células B y DC e induciendo la producción de citocinas en las células T cooperadoras.

Otros ejemplos de agonistas de TLR que se pueden usar en la combinación incluye, por ejemplo, en agonistas de TLR-1/2 (por ejemplo, Pam3Cys), agonistas de TLR-2 (por ejemplo, CFA, MALP2, Pam2Cys, Fs L-1 o Hib-OMPC), agonistas de t LR-3 (por ejemplo, ácido polirribosínico: ácido polirribocitídico (Poli I:C), poliadenosina-ácido poliuridílico (poli AU), ácido poliinosínico-policitidílico estabilizado con poli-L-lisina y carboximetilcelulosa (Hiltonol®)), agonistas de TLR-4 (por ejemplo, lípido A monofosforilado (MPL), LPS, sialil-Tn (STn)), agonistas de TLR-5 (por ejemplo, flagelina bacteriana), agonistas de TLR-7 (por ejemplo, imiquimod), agonistas de TLR-7/8 (por ejemplo, resiquimod o loxoribina) y agonistas de TLR-9 (por ejemplo, dinucleótido CpG no metilado (CpG-ODN)).

En otra realización, el agonista de TLR se usa en combinación con un agonista de GITR, por ejemplo, como se describe en el documento WO2004/060319 y en la publicación internacional No. WO2014/012479.

Ejemplos de inhibidores de VEGFR

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) (por ejemplo, un inhibidor de uno o más de VEGFR (por ejemplo, VEGFR-1, VEGFR-2, VEGFR-3 o VEGF). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un melanoma, un cáncer de mama, un cáncer de colon, un cáncer de esófago, un tumor del estroma gastrointestinal (GIST), un cáncer de riñón (por ejemplo, un cáncer de células renales), un cáncer de hígado, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), un cáncer de ovario, un cáncer de páncreas, un cáncer de próstata o un cáncer de estómago), por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, un linfoma).

En algunas realizaciones, el inhibidor de VEGFR es succinato de vatalanib (Compuesto A47) o un compuesto divulgado en el documento EP 296122.

En alguna realización, el inhibidor de VEGFR es un inhibidor de uno o más de VEGFR-2, PDGFRbeta, KIT o Raf quinasa C, 1-metil-5-((2-(5-(trifluorometil)-1H-imidazol-2-il)piridin-4-il)oxi)-N-(4-(trifluorometil)fenil)-1H-benzo[d] imidazol-2-amina (Compuesto A37) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/030377.

Otros ejemplos de inhibidores de la ruta de VEGFR que pueden usarse en las combinaciones divulgadas en el presente documento incluye, por ejemplo, en bevacizumab (AVASTIN®), axitinib (INLYTA®); alaninato de brivanib (BMS-582664, (S)-(R)-1-(4-(4-fluoro-2-metil-1H-indol-5-iloxi)-5-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-iloxi)propan-2-il)2-aminopropanoato); sorafenib (NEXAVAR®); pazopanib (VOTRIENT®); malato de sunitinib (SUTEn T®); cediranib (AZD2171, CAS 288383-20-1); vargatef (BIBF1120, CAS 928326-83-4); Foretinib (GSK1363089); telatinib (BAY57-9352, CAS 332012-40-5); apatinib (YN968D1, CAS 811803-05-1); imatinib (GLEEVEC®); ponatinib (AP24534, CAS 943319-70-8); tivozanib (AV951, CAS 475108-18-0); regorafenib (BAY73-4506, CAS 755037-03-7); diclorhidrato de vatalanib (PTK787, CAS 212141-51-0); brivanib (BMS-540215, CAS 649735-46-6); vandetanib (CAPRELSA® o AZD6474); difosfato de motesanib (AMG706, CAS 857876-30-3, N-(2,3-dihidro-3,3-dimetil-1H-indol-6-il)-2[(4-piridinilmetil)amino]-3-piridincarboxamida, divulgado en la publicación PCT No. WO 02/066470); ácido dilactico de dovitinib (TKI258, CAS 852433-84-2); linfanib (ABT869, CAS 796967-16-3); cabozantinib (XL184, CAS 849217-68-1); lestaurtinib (CAS 111358-88-4); N-[5-[[[5-(1,1-dimetiletil)-2-oxazolil]metil]tio]-2-tiazolil]-4-piperidincarboxamida (BMS38703, CAS 345627-80-7); (3R,4R)-4-amino-1-((4-((3-metoxifenil)amino)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-5-il)metil) piperidin-3-ol (BMS690514); N-(3,4-dicloro-2-fluorofenil)-6-metoxi-7-[[(3aa,5p,6aa)-octahidro-2-metilciclopenta[c] pirrol-5-il]metoxi]- 4-quinazolinamina (XL647, CAS 781613-23-8); 4-metil-3-[[1-metil-6-(3-piridinil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-il]amino]-N-[3-(trifluorometil)fenil]-benzamida (BHG712, CAS 940310-85-0); aflibercept (EYLEA®) y endostatina (ENDOSTa R®).

Los ejemplos de anticuerpos anti-VEGF que pueden usarse en las combinaciones divulgadas en el presente documento incluye, por ejemplo, en un anticuerpo monoclonal que se une al mismo epítopo que el anticuerpo anti-VEGF monoclonal A4.6.1 producido por el hibridoma ATCC HB 10709; un anticuerpo monoclonal anti-VEGF humanizado recombinante generado de acuerdo con Presta et al. (1997) Cancer Res. 57: 4593-4599. En una realización, el anticuerpo anti-VEGF es Bevacizumab (BV), también conocido como rhuMAb VEGF o AVASTIN®. Comprende regiones marco de IgG1 humana mutada y regiones determinantes de complementariedad de unión a antígeno del anticuerpo monoclonal anti-hVEGF murino A.4.6.1 que bloquea la unión del VEGF humano a sus receptores. El bevacizumab y otros anticuerpos anti-VEGF humanizados se describen adicionalmente en la patente de los Estados Unidos No. 6.884.879 expedida el 26 de febrero de 2005. Los anticuerpos adicionales incluyen los anticuerpos de la serie G6 o B20 (por ejemplo, G6-31, B20-4.1), como se describe en la publicación p Ct No.

WO2005/012359, la publicación PCT No. WO2005/044853. Para anticuerpos adicionales, véanse las patentes de los Estados Unidos Nos. 7.060.269, 6.582.959, 6.703.020, 6.054.297, los documentos WO98/45332, WO 96/30046, WO94/10202, EP 0666868B1, las publicaciones de las solicitudes de patente de los Estados Unidos Nos.

2006/009360, 2005/0186208, 2003/0206899, 2003/0190317, 2003/0203409 y 2005/0112126; y Popkov et al., Journal of Immunological Methods 288: 149-164 (2004). Otros anticuerpos incluyen aquellos que se unen a un epítopo funcional en VEGF humano que comprende los residuos F17, M18, D19, y 21, Y25, Q89, 191, K1 01, El 03 y C104 o, alternativamente, que comprenden los residuos F17, Y21, Q22, Y25, D63, 183 y Q89.

Ejemplos de inhibidores de c-MET

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de c-MET. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer de páncreas, un cáncer de hígado (por ejemplo, un carcinoma hepatocelular, por ejemplo, un carcinoma hepatocelular que sobreexpresa c-MET), un cáncer de tiroides, un tumor cerebral (por ejemplo, un glioblastoma), un cáncer de riñón (por ejemplo, un carcinoma de células renales), un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello).

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-MET es el Compuesto A17 o un compuesto descrito en las patentes de Estados Unidos Nos. 7.767.675 y 8.420.645). c-MET, un receptor de tirosina quinasa sobreexpresado o mutado en muchos tipos de células tumorales, juega un papel clave en la proliferación, supervivencia, invasión, metástasis y angiogénesis tumoral de las células tumorales. La inhibición de c-MET puede inducir la muerte celular en células tumorales que sobreexpresan la proteína c-MET o que expresan la proteína c-MET activada constitutivamente.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-MET es JNJ-38877605. JNJ-38877605 es un inhibidor de molécula pequeña de c-Met disponible por vía oral. JNJ-38877605 se une selectivamente a c-MET, inhibiendo así la fosforilación de c-MET y alterando las vías de transducción de señales de c-Met.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-Met es AMG 208. AMG 208 es un inhibidor selectivo de molécula pequeña de c-MET. AMG 208 inhibe la activación dependiente e independiente del ligando de c-MET, inhibiendo su actividad tirosina quinasa, lo que puede resultar en la inhibición del crecimiento celular en tumores que sobreexpresan c-Met.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-Met es AMG 337. AMG 337 es un inhibidor de c-Met biodisponible por vía oral. AMG 337 se une selectivamente a c-MET, interrumpiendo así las vías de transducción de señales de c-MET.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-Met es LY2801653. LY2801653 es un inhibidor de molécula pequeña de c-Met disponible por vía oral. LY2801653 se une selectivamente a c-MET, inhibiendo así la fosforilación de c-MET y alterando las vías de transducción de señales de c-Met.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-Met es MSC2156119J. MSC2156119J es un inhibidor de c-Met biodisponible por vía oral. MSC2156119J se une selectivamente a c-MET, que inhibe la fosforilación de c-MET y altera las vías de transducción de señales mediadas por c-Met.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-MET es capmatinib. Capmatinib también se conoce como INCB028060. Capmatinib es un inhibidor de c-MET biodisponible por vía oral. Capmatinib se une selectivamente a c-Met, inhibiendo así la fosforilación de c-Met y alterando las vías de transducción de señales de c-Met.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-MET es crizotinib. Crizotinib también se conoce como PF-02341066. Crizotinib es un inhibidor a base de aminopiridina disponible por vía oral del receptor tirosina quinasa del linfoma quinasa anaplásico (ALK) y del receptor del factor de crecimiento de hepatocitos/c-Met (HGFR). Crizotinib, de una manera competitiva con ATP, se une e inhibe la quinasa ALK y las proteínas de fusión ALK. Además, crizotinib inhibe la c-Met quinasa e interrumpe la vía de señalización de c-Met. En conjunto, este agente inhibe el crecimiento de células tumorales.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-MET es golvatinib. Golvatinib es un inhibidor de quinasa dual de c-MET y VEGFR-2, biodisponible por vía oral, con actividad antineoplásica potencial. Golvatinib se une e inhibe las actividades de c-MET y VEGFR-2, lo que puede inhibir el crecimiento de las células tumorales y la supervivencia de las células tumorales que sobreexpresan estas tirosina quinasas receptoras.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-MET es tivantinib. Tivantinib también se conoce como ARQ 197. Tivantinib es un inhibidor de molécula pequeña de c-MET biodisponible por vía oral. Tivantinib se une a la proteína c-MET e interrumpe las vías de transducción de señales de c-Met, que pueden inducir la muerte celular en células tumorales que sobreexpresan la proteína c-MET o que expresan la proteína c-Met activada de forma constitutiva.

Ejemplos de inhibidores de TGFb

En una realización, una combinación divulgada en el presente documento incluye un inhibidor del factor de crecimiento transformante beta (TGF-P). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de cerebro (por ejemplo, un glioma), un melanoma, un cáncer de riñón (por ejemplo, un carcinoma de células renales), un mesotelioma pleural maligno (por ejemplo, un mesotelioma pleural maligno recidivante) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama metastásico)).

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p es fresolimumab (Número de registro CAS: 948564-73-6). Fresolimumab también se conoce como GC1008. Fresolimumab es un anticuerpo monoclonal humano que se une e inhibe las isoformas 1,2 y 3 del TGF-beta.

La cadena pesada de fresolimumab tiene la secuencia de aminoácidos de: QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASG YTFSSNVISWVRQAPGQGLEWMGGVIPIVDIA NYAQRFKGRVTITADESTSTTYMELSSLRSEDTAVYYCASTLGLVL DAMDYWGQGTLV TVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAV LQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLG GPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQ FNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPS QEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVD KSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (SEQ ID NO: 294). La cadena ligera de fresolimumab tiene la secuencia de aminoácidos de:

ETVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQ SLGS S YLAWYQQKPGQ APRLLIYGAS SRAPGIP

DRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYADSPITFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPS

DEQLKS GTAS W CLLNNF YPRE AKV Q WKVDN ALQ S GN S QE S VTEQD SKD S T Y SLS S TL

TLSKADYEKHKYYACEYTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 295).

El fresolimumab se describe, por ejemplo, en el documento WO 2006/086469, las patentes de los Estados Unidos Nos. 8.383.780 y 8.591.901.

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p es XOMA 089. XOMA 089 también se conoce como XPA.42.089. XOMA 089 es un anticuerpo monoclonal completamente humano que se une y neutraliza específicamente los ligandos TGF-beta 1 y 2.

La región variable de la cadena pesada de XOMA 089 tiene la secuencia de aminoácidos de:

QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTAN YAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGLWEVRALPSVYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 296) (divulgada como la SEQ ID NO: 6 en el documento WO 2012/167143). La región variable de cadena ligera de XOm A 089 tiene la secuencia de aminoácidos de:

SYELTQPPSVSVAPGQTARITCGANDIGSKSVHWYQQKAGQAPVLVVSEDIIRPSGIPERI SGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDRDSDQYVFGTGTKVTVLG (SEQ ID NO: 297) (divulgada como la SEQ ID NO 8 en el documento WO2012/167143).

Ejemplos de inhibidores de IDO/TDO

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de indolamina 2,3-dioxigenasa (IDO) y/o triptófano 2,3-dioxigenasa (TDO). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, melanoma, cáncer de pulmón de células no pequeñas, cáncer de colon, cáncer de cabeza y cuello de células escamosas, cáncer de ovario, cáncer peritoneal, cáncer de trompas de Falopio, cáncer de mama (por ejemplo, cáncer de mama metastásico o negativo para HER2)), por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, un linfoma, por ejemplo, un linfoma no Hodgkin o un linfoma de Hodgkin (por ejemplo, un linfoma difuso de células B grandes (DLBCL)).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO/TDO se elige entre (4E)-4-[(3-cloro-4-fluoroanilino)-nitrosometiliden]-1,2,5-oxadiazol-3-amina (también conocida como INCB24360), indoximod (1-metil-D-triptófano) o a-ciclohexil-5H-imidazo[5,1-a]isoindol-5-etanol (también conocido como NLG919).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO/TDO es epacadostat (número de registro CAS: 1204669-58-8). Epacadostat también se conoce como INCB24360 o INCB024360 (Incyte). Epacadostat es un inhibidor potente y selectivo de la indolamina 2,3-dioxigenasa (IDOl) con un CI50 de 10 nM, altamente selectivo sobre otras enzimas relacionadas tales como IDO2 o triptófano 2,3-dioxigenasa (TDO).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO/TDO es indoximod (New Link Genetics). Indoximod, el isómero D del 1-metil-triptófano, es un inhibidor de la vía de la indolamina 2,3-dioxigenasa (IDO) de molécula pequeña que se administra por vía oral y que altera los mecanismos por los cuales los tumores evaden la destrucción inmunomediada.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO/TDO es NLG919 (New Link Genetics). NLG919 es un potente inhibidor de la vía de IDO (indolamina-(2,3)-dioxigenasa) con Ki/CE50 de 7 nM/75 nM en ensayos sin células.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO/TDO es F001287 (Flexus/BMS). F001287 es un inhibidor de molécula pequeña de la indolamina 2,3-dioxigenasa 1 (IDO1).

Ejemplos de antagonistas de A2AR

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un antagonista del receptor de adenosina A2a (A2aR) (por ejemplo, un inhibidor de la ruta de A2aR, por ejemplo, un inhibidor de adenosina, por ejemplo, un inhibidor de A2aR o CD-73). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento. En determinadas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas.

En algunas realizaciones, el antagonista de A2aR es istradefilina (número de registro CAS: 155270-99-8). La istradefilina también se conoce como KW-6002 o 8-[(E)-2-(3,4-dimetoxifenil)vinil]-1,3-dietil-7-metil-3,7-dihidro-1H-purina-2,6-diona. La istradefilina se divulga, por ejemplo, en LeWitt et al., (2008) Annals of Neurology 63 (3): 295-302).

En algunas realizaciones, el antagonista de A2aR es tozadenant (Biotie). El tozadenant también se conoce como SYN115 o 4-hidroxi-N-(4-metoxi-7-morfolin-4-il-1,3-benzotiazol-2-il)-4-metilpiperidina-1-carboxamida. Tozadenant bloquea el efecto de la adenosina endógena en los receptores A2a, lo que produce la potenciación del efecto de la dopamina en el receptor D2 y la inhibición del efecto del glutamato en el receptor mGluR5. En algunas realizaciones, el antagonista de A2aR es preladenant (número de registro CAS: 377727-87-2). El preladenant también se conoce como SCH 420814 o 2-(2-furanil)-7-[2-[4-[4-(2-metoxietoxi)fenil]-1-piperazinil]etil]-7H-pirazolo[4,3-e][1,2,4]triazolo [1,5-c]pirimidin-5-amina. Preladenant se desarrolló como un fármaco que actuaba como un antagonista potente y selectivo del receptor de adenosina A2A.

En algunas realizaciones, el antagonista de A2aR es vipadenan. Vipadenan también se conoce como BIIB014, V2006 o 3-[(4-amino-3-metilfenil)metil]-7-(furan-2-il)triazolo[4,5-d]pirimidin-5-amina, por ejemplo, en algunas realizaciones, el antagonista de A2aR es PBF-509 (Palobiofarma) por ejemplo, en algunas realizaciones, el antagonista de A2aR, por ejemplo, PBF-509 se administra a una dosis diaria de aproximadamente 80 mg, 160 mg o 240 mg.

Otros ejemplos de antagonistas de A2aR incluye, por ejemplo, en ATL-444, MSX-3, SCH-58261, SCH-412.348, SCH-442.416, VER-6623, VER-6947, VER-7835, CGS-15943, o ZM-241.385.

En algunas realizaciones, el antagonista de A2aR es un antagonista de la ruta de A2aR (por ejemplo, un inhibidor de CD-73, por ejemplo, un anticuerpo anti-CD73) es MEDI9447. MEDI9447 es un anticuerpo monoclonal específico para CD73. El direccionamiento de la producción extracelular de adenosina por CD73 puede reducir los efectos inmunosupresores de la adenosina. Se informó que MEDI9447 tiene una variedad de actividades, por ejemplo, inhibición de la actividad de la ectonucleotidasa CD73, alivio de la supresión de linfocitos mediada por AMP e inhibición del crecimiento tumoral singénico. MEDI9447 puede impulsar cambios en las poblaciones de leucocitos infiltrantes tanto mieloides como linfoides dentro del microambiente tumoral. Estos cambios incluye, por ejemplo, en aumentos en las células efectoras CD8 y macrófagos activados, así como una reducción en las proporciones de células supresoras derivadas de mieloides (MDSC) y linfocitos T reguladores.

Ejemplos de virus oncolíticos

En algunas realizaciones, una combinación como se describe en el presente documento incluye un virus oncolítico. En realizaciones, los virus oncolíticos son capaces de replicarse selectivamente y desencadenar la muerte o ralentizar el crecimiento de una célula cancerosa. En algunos casos, los virus oncolíticos no tienen ningún efecto o tienen un efecto mínimo sobre las células no cancerosas. Un virus oncolítico incluye, pero no se limita a, un adenovirus oncolítico, virus del herpes simple oncolítico, retrovirus oncolítico, parvovirus oncolítico, virus vaccinia oncolítico, virus Sindbis oncolítico, virus de la influenza oncolítica o virus del ARN oncolítico (por ejemplo, reovirus oncolítico, virus de la enfermedad de Newcastle oncolítico (NDV), virus oncolítico del sarampión o virus de la estomatitis vesicular oncolítica (VSV)). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de cerebro, por ejemplo, un glioblastoma.

En algunas realizaciones, el virus oncolítico es un virus, por ejemplo, un virus oncolítico recombinante, descrito en el documento US2010/0178684 A1. En algunas realizaciones, un virus oncolítico recombinante comprende, o comprende una secuencia de ácido nucleico (por ejemplo, secuencia de ácido nucleico heteróloga) que codifica, un inhibidor de una respuesta inmune o inflamatoria, por ejemplo, como se describe en el documento US2010/0178684 A1. En realizaciones, el virus oncolítico recombinante, por ejemplo, NDV oncolítico, comprende, o comprende una secuencia de ácido nucleico que codifica, una proteína proapoptótica (por ejemplo, apoptina), una citocina (por ejemplo, GM-CSF, CSF, interferón-gamma, interleucina -2 (IL-2), factor de necrosis tumoral alfa), una inmunoglobulina (por ejemplo, un anticuerpo contra fibronectina ED-B), un antígeno asociado al tumor, una proteína adaptadora biespecífica (por ejemplo, anticuerpo biespecífico o fragmento de anticuerpo dirigido contra la proteína HN del NDV y un receptor coestimulador de células T, tal como CD3 o CD28; o una proteína de fusión entre IL-2 humana y un anticuerpo de cadena sencilla dirigido contra la proteína HN de NDV). Véase, por ejemplo, Zamarin et al. Future Microbiol. 7.3 (2012): 347-67. En algunas realizaciones, el virus oncolítico es un NDV oncolítico quimérico descrito en los documentos US 8591881 B2, US 2012/0122185 A1 o US 2014/0271677 A1.

En algunas realizaciones, el virus oncolítico comprende un adenovirus condicionalmente replicativo (CRAd), que está diseñado para replicarse exclusivamente en células cancerosas. Véase, por ejemplo, Alemany et al. Nature Biotechnol.

18 (2000): 723-27. En algunas realizaciones, un adenovirus oncolítico comprende uno descrito en la Tabla 1 en la página 725 de Alemany et al..

Los ejemplos de virus oncolíticos incluyen, pero no se limita a, los siguientes:

Adenovirus oncolítico del grupo B (ColoAd1) (PsiOxus Therapeutics Ltd.) (véase, por ejemplo, el identificador del ensayo clínico: NCT02053220);

ONCOS-102 (anteriormente llamado CGTG-102), que es un adenovirus que comprende el factor estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos (GM-CSF) (Oncos Therapeutics) (véase, por ejemplo, el identificador del ensayo clínico: NCT01598129);

VCN-01, que es un adenovirus humano oncolítico modificado genéticamente que codifica la hialuronidasa PH20 humana (VCN Biosciences, S.L.) (vease, por ejemplo, los identificadores del ensayo clínico: NCT02045602 y NCT02045589);

Adenovirus condicionalmente replicativo ICOVIR-5, que es un virus derivado del adenovirus humano de tipo silvestre serotipo 5 (Had5) que ha sido modificado para replicarse selectivamente en células cancerosas con una vía desregulada de retinoblastoma/E2F (Institut Catala d'Oncologia) (véase, por ejemplo, el identificador del ensayo clínico: NCT01864759);

Celyvir, que comprende células madre mesenquimales autólogas (CMM) derivadas de la médula ósea infectadas con ICOVIR5, un adenovirus oncolítico (Hospital Infantil Universitario Niño Jesús, Madrid, España/Ramon Alemany) (véase, por ejemplo, el identificador del ensayo clínico: NCT01844661);

CG0070, que es un adenovirus oncolítico del serotipo 5 (Ad5) que se replica condicionalmente en el que el promotor E2F-1 humano dirige la expresión de los genes virales esenciales E1a, lo que restringe la replicación viral y la citotoxicidad a las células tumorales defectuosas en la vía Rb (Cold Genesys, Inc.) (véase, por ejemplo, el identificador del ensayo clínico: NCT02143804); o

DNX-2401 (anteriormente llamado Delta-24-RGD), que es un adenovirus que ha sido diseñado para replicarse selectivamente en células deficientes en la vía del retinoblastoma (Rb) y para infectar células que expresan ciertas integrinas que se unen a RGD de manera más eficiente (Clínica Universidad de Navarra, Universidad de Navarra/ADNtrix, Inc.) (vease, por ejemplo, el identificador del ensayo clínico: NCT01956734).

En algunas realizaciones, un virus oncolítico descrito en el presente documento se administra mediante inyección, por ejemplo, inyección subcutánea, intraarterial, intravenosa, intramuscular, intratecal o intraperitoneal. En las realizaciones, un virus oncolítico descrito en el presente documento se administra por vía intratumoral, transdérmica, transmucosa, oral, intranasal o mediante administración pulmonar.

Ejemplos de vacunas, por ejemplo, vacunas con estructura

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye una vacuna, por ejemplo, una vacuna con estructura. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento.

Las vacunas contra el cáncer se divulgan, por ejemplo, en las publicaciones PCT Nos. WO 2007/070660 y WO 2012/167230, el documento EP 1960009 B1, las patentes de los Estados Unidos Nos. 8.067.237 y 8.932.583 y la publicación de patente de los Estados Unidos No. US2011/0020216. Los componentes que se pueden usar dentro de las vacunas contra el cáncer (por ejemplo, materiales de estructura implantable) se divulgan, por ejemplo, en las publicaciones PCT Nos. WO 2009/102465 y WO 2013/106852. Los métodos que pueden usarse para la administración de vacunas contra el cáncer se divulgan, por ejemplo, en las publicaciones PCT Nos. WO 2013/158673, WO 2012/048165 y WO 2012/149358.

En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer incluye una estructura macroporoso que comprende (i) células o una composición de reclutamiento celular, y (ii) una señal de despliegue capaz de inducir o promover la migración de células, y (iii) una composición bioactiva recubierta o sembrada en/dentro de la estructura, lo que hace que las células reclutadas en la estructura se modifiquen. La migración de las células modificadas puede ser promovida por los macroporos abiertos e interconectados y la señal de despliegue.

En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer induce una respuesta inmune endógena a una diana del cáncer mediante la administración de una estructura porosa que porta una composición de reclutamiento y una composición de antígeno diana, en la que una célula presentadora de antígeno endógena se recluta en la estructura para encontrar el antígeno y en la que dicha célula reside hasta que una señal de despliegue induce la salida a un tejido de nódulo linfático fuera de la estructura, estimulando de ese modo una respuesta inmune endógena a dicha diana del cáncer.

En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer se usa para eliminar una célula diana de un mamífero usando una composición de estructura.

En algunas realizaciones, se genera una vacuna contra el cáncer in situ mediante el reclutamiento de células cancerosas en una estructura implantada y la destrucción de las células usando un agente citotóxico.

En algunas realizaciones, se usa un oligonucleótido de citosina-guanosina (CpG-ODN) como un componente de una estructura, que puede reprogramar y desplegar eficazmente células dendríticas reclutadas en la estructura y generar una respuesta antitumoral eficaz.

En algunas realizaciones, se usan poliinosina-ácido policitidílico (poli I:C) y/o CpG ODN para ejercer un efecto sinérgico sobre la inhibición tumoral.

En algunas realizaciones, los bastones porosos que comprenden un compuesto de reclutamiento de células inmunes (por ejemplo, GM-CSF) y un compuesto de activación de células inmunes (por ejemplo, CpG ODN), y que comprenden opcionalmente un antígeno tal como un lisado tumoral, se utilizan, por ejemplo, para provocar una respuesta inmune a un antígeno de vacuna. En algunas realizaciones, los poros que facilitan el reclutamiento o la liberación de células se forman in situ dentro de los hidrogeles después de la inyección de hidrogel. En algunas realizaciones, para la administración se usa polímero de hidrogel poroso con memoria de forma inyectable.

En otras realizaciones, las combinaciones divulgadas en el presente documento incluyen una vacuna contra el cáncer o el tumor. Los ejemplos no limitantes de vacunas para el tumor que pueden usarse incluyen péptidos de antígenos de melanoma, tales como péptidos de gp100, antígenos MAGE, Trp-2, MART1 y/o tirosinasa, células tumorales transfectadas para expresar la citocina g M-CSF, vacunas con base en ADN, vacunas con base en ARN y vacunas con base en transducción viral. La vacuna contra el cáncer puede ser profiláctica o terapéutica.

Se han ideado muchas estrategias experimentales para la vacunación contra tumores (véase Rosenberg, S., 2000, Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62; Logothetis, C., 2000, ASCO Educational Book Spring: 300- 302; Khayat, D. 2000, ASCO Educational Book Spring: 414-428; Foon, K. 2000, ASCO Educational Book Spring: 730-738; véase también Restifo, N. y Sznol, M., Cancer Vaccines, Cap. 61, páginas 3023-3043 en DeVita, V. et al. (eds.), 1997, Cancer: Principles and Practice of Oncology. Quinta edición). En una de estas estrategias, se prepara una vacuna utilizando células tumorales autólogas o alogénicas. Se ha demostrado que estas vacunas celulares son más eficaces cuando las células tumorales se transducen para expresar GM-CSF. Se ha demostrado que GM-CSF es un potente activador de la presentación de antígeno para la vacunación de tumores (Dranoff et al., (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90: 3539-43).

Las combinaciones divulgadas en el presente documento, por ejemplo, el bloqueo de LAG-3, se pueden usar junto con una colección de proteínas recombinantes y/o péptidos expresados en un tumor para generar una respuesta inmune a estas proteínas. El sistema inmunológico normalmente considera que estas proteínas son autoantígenos y, por lo tanto, son tolerantes a ellas. El antígeno tumoral también puede incluir la proteína telomerasa, que se requiere para la síntesis de los telómeros de los cromosomas y que se expresa en más del 85% de los cánceres humanos y solo en un número limitado de tejidos somáticos (Kim, N et al. (1994)) Science 266: 2011-2013). (Estos tejidos somáticos pueden protegerse del ataque inmunológico por diversos medios). El antígeno tumoral también pueden ser "neoantígenos" expresados en células cancerosas debido a mutaciones somáticas que alteran la secuencia de proteínas o crean proteínas de fusión entre dos secuencias no relacionadas (es decir, bcr-abl en el cromosoma Filadelfia), o idiotipos de tumores de células B.

Otras vacunas contra tumores pueden incluir las proteínas de virus implicados en cánceres humanos tales como virus del papiloma humano (HPV), virus de la hepatitis (HBV y HCV), virus del sarcoma del herpes de Kaposi (KHSV) y virus de Epstein-Barr (EBV). Otra forma de antígeno específico de tumor que puede usarse junto con el bloqueo de PD-1 son las proteínas de choque térmico (HSP) purificadas aisladas del propio tejido tumoral. Estas proteínas de choque térmico contienen fragmentos de proteínas de las células tumorales y estas HSP son altamente eficientes en el suministro a las células presentadoras de antígenos para provocar inmunidad tumoral (Suot, R & Srivastava, P (1995) Science 269: 1585-1588; Tamura, Y. et al. (1997) Science 278: 117-120).

Las células dendríticas (DC) son potentes células presentadoras de antígenos que pueden usarse para cebar respuestas específicas de antígenos. Las DC pueden producirse ex vivo y cargarse con diversos antígenos proteicos y peptídicos, así como extractos de células tumorales (Nestle, F. et al. (1998) Nature Medicine 4: 328-332). Las CD también pueden transducirse por medios genéticos para expresar también estos antígenos tumorales. Las DC también se han fusionado directamente con las células tumorales con fines de inmunización (Kugler, A. et al. (2000) Nature Medicine 6: 332-336). Como método de vacunación, la inmunización con DC puede combinarse eficazmente con otro agente, por ejemplo, bloqueo de PD-1, para activar respuestas antitumorales más potentes.

Ejemplos de acopladores de células T biespecíficos

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un acoplador de células T biespecífico. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer gastrointestinal, un melanoma o un cáncer de pulmón) o una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, linfoma no Hodgkin) o una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfoblástica aguda).

Los acopladores de células T biespecíficos (BiTE®) son una clase de anticuerpos monoclonales biespecíficos artificiales que pueden dirigir el sistema inmunológico de un huésped, por ejemplo, la actividad citotóxica de las células T, contra las células cancerosas. Los acopladores de células T biespecíficos pueden formar un enlace entre las células T y las células tumorales, lo que hace que las células T ejerzan una actividad citotóxica sobre las células tumorales al producir proteínas tales como perforina y granzimas, independientemente de la presencia del MHC I o moléculas coestimuladoras. Estas proteínas entran en las células tumorales e inician la apoptosis celular. Esta acción imita los procesos fisiológicos observados durante los ataques de las células T contra las células tumorales.

En algunas realizaciones, el acoplador de células T biespecífico es una proteína de fusión que comprende dos fragmentos variables de cadena sencilla (scFv) de diferentes anticuerpos. En algunas realizaciones, uno de los scFv se une a las células T, por ejemplo, a través del receptor CD3, y el otro a una célula tumoral, por ejemplo, a través de una molécula específica de tumor.

En algunas realizaciones, el acoplador de células T biespecífico es una molécula de anticuerpo biespecífico de NKG2A y CD138, o una molécula de anticuerpo biespecífico de CD3 y TCR. En algunas realizaciones, el acoplador de células T biespecífico es una molécula de anticuerpo biespecífico que se une a CD3 y un antígeno tumoral (por ejemplo, EGFR, PSCA, PSMA, EpCAM, HER2 entre otros).

En algunas realizaciones, el acoplador de células T biespecífico es blinatumomab (número de registro CAS: 853426 35-4). Blinatumomab también se conoce como MT103. Blinatumomab se dirige específicamente a un sitio CD3 para las células T y un sitio CD 19 para las células B.

En algunas realizaciones, el acoplador de células T biespecífico es MT110. MT110 es un anticuerpo de cadena sencilla que se dirige a EpCAM y CD3. MT110 se divulga, por ejemplo, en Amann et al. J Immunother. 2009; 32 (5): 452-64.

En algunas realizaciones, el acoplador de células T biespecífico se dirige al proteoglicano sulfato de condroitina asociado a melanoma (MCSP). En algunas realizaciones, el acoplador de células T biespecífico se dirige a CD33. En algunas realizaciones, el acoplador de células T biespecífico comprende trastuzumab (dirigido a HER2/neu), cetuximab o panitumumab (ambos dirigidos al receptor de EGF), un fragmento funcional del mismo. En algunas realizaciones, el acoplador de células T biespecífico se dirige a CD66e y EphA2.

Ejemplo de agonista de GITR

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agonista de GITR. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia maligna hematológica. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de cabeza y cuello o un cáncer que expresa FoxP3.

Los ejemplos de agonistas de GITR incluye, por ejemplo, en proteínas de fusión de GITR y anticuerpos anti-GITR (por ejemplo, anticuerpos anti-GITR bivalentes), tales como, una proteína de fusión de GITR descrita en la patente de los Estados Unidos No.: 6.111.090, patente europea No. 0920505B1, patente de los Estados Unidos No.: 8.586.023, publicaciones PCT Nos: WO 2010/003118 y 2011/090754, o un anticuerpo anti-GITR descrito, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No.: 7.025.962, patente europea No: 1947183B1, patente de los Estados Unidos No.: 7.812.135, patente de los Estados Unidos No.: 8.388.967, patente de los Estados Unidos No.: 8.591.886, patente europea No: EP 1866339, publicación PCT No.: WO 2011/028683, patente de los Estados Unidos No.: 8.709.424, Publicación PCT No.: WO 2013/039954, publicación internacional No.: WO2013/039954, publicación de patente de los Estados Unidos No.: US2014/0072566, publicación internacional No.: WO2015/026684, publicación PCT No.: WO2005/007190, publicación PCT No.: WO 2007/133822, publicación PCT No.: WO2005/055808, publicación PCT No.: WO 99/40196, publicación PCT No.: WO 2001/03720, publicación de PCT No.: WO99/20758, patente de los Estados Unidos No.: 6.689.607, publicación PCT No.: WO2006/083289, publicación PCT No.: WO 2005/115451, patente de los Estados Unidos No.: 7.618.632, publicación PCT No.: WO 2011/051726, publicación internacional No.: WO2004060319 y publicación internacional No.: WO2014/012479.

En una realización, el agonista de GITR se usa en combinación con un inhibidor de PD-1, por ejemplo, como se describe en el documento WO2015/026684.

En otra realización, el agonista de GITR se usa en combinación con un agonista de TLR, por ejemplo, como se describe en el documento WO2004/060319, y la publicación internacional No.: WO2014/012479.

Ejemplos de inhibidores de PD-1

PD-1 es un miembro de la familia CD28/CTLA-4 expresado, por ejemplo, en células T CD4+ y CD8+ activadas, células Treg y células B. Regula negativamente la función y la señalización de las células T efectoras. PD-1 se induce en las células T que infiltran el tumor y puede provocar un agotamiento o disfunción funcional (Keir et al. (2008) Annu. Rev. Immunol. 26: 677-704; Pardoll et al. (2012) Nat Rev Cancer 12 (4): 252-64). PD-1 emite una señal coinhibitoria al unirse a cualquiera de sus dos ligandos, ligando 1 de muerte programada (PD-L1) o ligando 2 de muerte programada (PD-L2). PD-L1 se expresa en varios tipos de células, incluidas las células T, las células asesinas naturales (NK), los macrófagos, las células dendríticas (DC), las células B, las células epiteliales, las células endoteliales vasculares así como muchos tipos de tumores. La alta expresión de PD-L1 en tumores murinos y humanos se ha relacionado con malos resultados clínicos en una variedad de cánceres (Keir et al. (2008) Annu. Rev. Immunol. 26: 677-704; Pardoll et al. (2012) Nat Rev Cancer 12 (4): 252 -64). PD-L2 se expresa en células dendríticas, macrófagos y algunos tumores. El bloqueo de la vía de PD-1 se ha validado clínica y preclínicamente para la inmunoterapia contra el cáncer. Tanto los estudios preclínicos como los clínicos han demostrado que el bloqueo anti-PD-1 puede restaurar la actividad de las células T efectoras y da como resultado una sólida respuesta antitumoral. Por ejemplo, el bloqueo de la vía de PD-1 puede restaurar la función de las células T efectoras agotadas/disfuncionales (por ejemplo, proliferación, secreción de IFN-y o función citolítica) y/o inhibir la función de las células Treg (Keir et al. (2008) Annu. Rev. Immunol. 26: 677 704; Pardoll et al. (2012), Nat Rev Cancer 12 (4): 252-64). El bloqueo de la vía de PD-1 puede efectuarse con un anticuerpo, un fragmento de unión a antígeno del mismo, una inmunoadhesina, una proteína de fusión u oligopéptido de PD-1, PD-L1 y/o PD-L2.

Como se usa en el presente documento, el término "muerte programada 1" o "PD-1" incluye isoformas, mamífero, por ejemplo, PD-1 humana, homólogos de especies de PD-1 humana y análogos que comprenden al menos un epítopo común con PD-1. La secuencia de aminoácidos de PD-1, por ejemplo, PD-1 humana, se conoce en la técnica, por ejemplo, Shinohara T et al. (1994) Genomics 23 (3): 704-6; Finger l R et al., Gene (1997) 197 (1-2): 177-87.

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de PD-1. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia maligna hematológica. En algunas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer de tiroides (por ejemplo, un cáncer de tiroides anaplásico), un cáncer de riñón (por ejemplo, un carcinoma de células renales), un cáncer de piel (por ejemplo, un melanoma), un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer de cerebro (por ejemplo, un glioblastoma), un cáncer de páncreas, un cáncer de nasofaringe, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), un cáncer de endometrio, un cáncer de hígado (por ejemplo, un carcinoma hepatocelular), un cáncer de vejiga, un cáncer de ovario, un cáncer con alto MSI, un cáncer que expresa FoxP3 o un linfoma.

Ejemplos de combinaciones no limitantes y usos de las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 se divulgan en la publicación de la solicitud de patente de los Estados Unidos No. 2015/0210769 (USSN 14/604415), titulada "Antibody Molecules to PD-1 and Uses Thereof".

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos uno o dos dominios variables de cadena pesada (que incluyen opcionalmente una región constante), al menos uno o dos dominios variables de cadena ligera (que incluyen opcionalmente una región constante), o ambos, que comprenden la secuencia de aminoácidos de BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1 del documento US 2015/0210769, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente. La molécula de anticuerpo anti-PD-1, opcionalmente, comprende una secuencia líder de una cadena pesada, una cadena ligera o ambas, como se muestra en la Tabla 4 del documento US 2015/0210769; o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres regiones determinantes de complementariedad (CDR) de una región variable de cadena pesada y/o una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre una cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1 del documento US 2015/0210769, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1 del documento US 2015/0210769, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos que se muestra en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una sustitución en una CDR de cadena ligera, por ejemplo, una o más sustituciones en una CDR1, CDR2 y/o CDR3 de la cadena ligera. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una sustitución en la CDR3 de cadena ligera en la posición 102 de la región variable ligera, por ejemplo, una sustitución de un residuo de cisteína por tirosina, o de cisteína por de serina, en la posición 102 de la región variable ligera de acuerdo con la Tabla 1 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 16 o 24 para murina o quimérica, sin modificar; o cualquiera de las SEQ ID NOs: 34, 42, 46, 54, 58, 62, 66, 70, 74, o 78 para una secuencia modificada).

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1 del documento US 2015/0210769, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen una, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, con respecto a la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye:

(a) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 4, una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la s Eq ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 33, cada una divulgada en Tabla 1 del documento US 2015/0210769;

(b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 1; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VlCd R2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 32, cada una divulgada en la Tabla 1 del documento US 2015/0210769;

(c) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 224, una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 33, cada una divulgada en la Tabla 1 del documento US 2015/0210769; o

(d) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 224; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 32, cada una divulgada en la Tabla 1 del documento US 2015/0210769.

En las combinaciones del presente documento a continuación, en otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende (i) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4, o Se Q ID NO: 224; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2 o la SEQ ID NO: 5; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y (ii) una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10 o la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 o la SEQ ID NO: 14, y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 32 o la SEQ ID NO: 33, cada una divulgada en la Tabla 1 del documento US 2015/0210769.

En otras realizaciones, el inhibidor de PD-1 es un anticuerpo anti-PD-1 elegido entre Nivolumab, Pembrolizumab o Pidilizumab.

En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 es Nivolumab. Los nombres alternativos para Nivolumab incluyen MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538 o BMS-936558. En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 es Nivolumab (número de registro CAS: 946414-94-4). Nivolumab es un anticuerpo monoclonal IgG4 completamente humano que bloquea específicamente PD-1. Nivolumab (clon 5C4) y otros anticuerpos monoclonales humanos que se unen específicamente a PD-1 se divulgan en la patente de los Estados Unidos No. 8.008.449 y el documento WO2006/121168. En una realización, el inhibidor de PD-1 es Nivolumab, y tiene una secuencia divulgada en el presente documento (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada).

Las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesada y ligera de Nivolumab son las siguientes:

Cadena pesada

QVQLVESGGGWQPGRSLRLDCKASGITFSNSGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSKRYYADSV

KGRFTISRDNSKNTLFLQMNSLRAEDTAVYYCATNDDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCS

RSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSLGTK

TYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCW

VDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKG

LPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY

KTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (SEQ ID

NO: 298)

Cadena Ligera

EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSG

SGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQSSNWPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSG

TASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVY

ACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 299)

En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 es pembrolizumab. Pembrolizumab (también conocido como Lambrolizumab, MK-3475, MK03475, SCH-900475 o KEYTRUDA®; Merck) es un anticuerpo monoclonal IgG4 humanizado que se une a PD-1. Pembrolizumab y otros anticuerpos anti-PD-1 humanizados se divulgan en Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44, la patente de los Estados Unidos No. 8.354.509 y el documento WO2009/114335. Las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de pembrolizumab son las siguientes:

Cadena pesada (SEQ ID NO: 300)

QVQLVQSGVE VKKPGASVKV SCKASGYTFT NYYMYWVRQA PGQGLEWMGG 50

INPSNGGTNF NEKFKNRVTL TTDSSTTTAYMELKSLQFDD TAVYYCARRD 100

YRFDMGFDYW GQGTTVTVSS ASTKGPSVFP LAPCSRSTSE STAALGCLVK 150

DYFPEPVTVS WNSGALTSGVHTFPAVLQSS GLYSLSSWT VPSSSLGTKT 200

YTCNVDHKPS NTKVDKRVES KYGPPCPPCP APEFLGGPSV FLFPPKPKDT 250

LMISRTPEVT CVWDVSQED PEVQFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQFNSTY 300

RWSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKGLPS SIEKTISKAK GQPREPQVYT 350

LPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS 400

DGSFFLYSRL TVDKSRWQEG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSLGK 447

Cadena ligera (SEQ ID NO: 301)

EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASKGVS TSGYSYLHWY QQKPGQAPRL 50

LIYLASYLES GVPARFSGSG SGTDFTLTIS SLEPEDFAVY YCQHSRDLPL 100

TFGGGTKVEI KRTVAAPSVF IFPPSDEQLK SGTASWCLL NNFYPREAKV 150

QWKVDNALQS GNSQESVTEQ DSKDSTYSLS STLTLSKADY EKHKVYACEV 200

THQGLSSPVT KSFNRGEC 218'

En una realización, el inhibidor de PD-1 es pembrolizumab divulgado, por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 8.354.509 y el documento WO 2009/114335, y que tiene una secuencia divulgada en el presente documento (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada).

En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 es pidilizumab. Pidilizumab (CT-011; Cure Tech) es un anticuerpo monoclonal IgGlk humanizado que se une a PD1. El pidilizumab y otros anticuerpos monoclonales anti-PD-1 humanizados se divulgan en el documento WO2009/101611.

Otros anticuerpos anti-PD1 incluyen AMP 514 (Amplimmune), pero no se limita a, por ejemplo, anticuerpos anti-PD1 divulgados en la patente de los Estados Unidos No. 8.609.089, documentos US 2010028330 y/o US 20120114649.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 es una inmunoadhesina (por ejemplo, una inmunoadhesina que comprende una porción extracelular o de unión a PD-1 de PD-L1 o PD-L2 fusionada a una región constante (por ejemplo, una región Fc de una secuencia de inmunoglobulina). En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 es AMP-224 (B7-DCIg; Amplimmune; por ejemplo, divulgado en los documentos WO2010/027827 y WO2011/066342), es un receptor soluble de fusión PD-L2 Fc que bloquea la interacción entre PD-1 y B7-H1.

Ejemplos de inhibidores de PD-L1 o PD-L2

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de PD-L1 o PD-L2. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia maligna hematológica. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de tiroides (por ejemplo, un cáncer de tiroides anaplásico), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), un cáncer de endometrio, un cáncer de alto MSI o un linfoma.

Los ejemplos de combinaciones y usos no limitantes de las moléculas de anticuerpo anti-PD-L1 se divulgan en la publicación de solicitud de patente de los Estados Unidos No. 2016/0108123 (USs N 14/881.888), titulada "Antibody Molecules to PD-L1 and Uses Thereof".

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye al menos uno o dos dominios variables de cadena pesada (que incluyen opcionalmente una región constante), al menos uno o dos dominios variables de cadena ligera (que incluyen opcionalmente una región constante), o ambos, que comprenden la secuencia de aminoácidos de cualquiera de BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-hum10, BAP058-hum11, BAP058-hum12, BAP058-hum13, BAP058-hum14, BAP058-hum15, BAP058-hum16, BAP058-hum17, BAP058-Clon-K, BAP058-Clon-L, BAP058-Clon-M, BAP058-Clon-N o BAP058-Clon-O; o como se describe en la Tabla 1 del documento US 2016/0108123, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye al menos una, dos o tres regiones determinantes de complementariedad (CDR) de una región variable de cadena pesada y/o una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de cualquiera de BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-hum10 BAP058-hum11, BAP058-hum12, BAP058-hum13, BAP058-hum14, BAP058-hum15, BAP058-hum16, BAP058-hum17, BAP058-Clon-K, BAP058-Clon-L, BAP058-Clon-M, BAP058-Clon-N o BAP058-Clon-O; o como se describe en la Tabla 1 del documento US 2016/0108123, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1 del documento US 2016/0108123, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1 del documento US 2016/0108123, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos que se muestra en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye una sustitución en una CDR de cadena ligera, por ejemplo, una o más sustituciones en una CDR1, CDR2 y/o CDR3 de la cadena ligera.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1 del documento US 2016/0108123. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, con respecto a la secuencia de aminoácidos mostrada en Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 195; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3, cada una divulgada en la Tabla 1 del documento US 2016/0108123; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 9, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 10 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la Se Q ID NO: 11, cada una divulgada en la Tabla 1 del documento Us 2016/0108123.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SeQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 195; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3, cada una divulgada en la Tabla 1 del documento US 2016/0108123; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 12, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 13 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 14, cada una divulgada en la Tabla 1 del documento US 2016/0108123.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 comprende la secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 comprende la secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 4. En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 comprende la secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 195, cada una divulgada en la Tabla 1 del documento US 2016/0108123.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-L1 es una molécula de anticuerpo. En algunas realizaciones, el inhibidor anti-PD-L1 se elige entre YW243.55.S70, MPDL3280A, MEDI-4736, MSB-0010718C o MDX-1105.

En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-L1 es MSB0010718C. MSB0010718C (también denominado como A09-246-2; Merck Serono) es un anticuerpo monoclonal que se une a PD-L1. Pembrolizumab y otros anticuerpos anti-PD-L1 humanizados se divulgan en el documento WO2013/079174 y tienen una secuencia divulgada en el presente documento (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada). Las secuencias de aminoácidos de cadena pesada y ligera de MSB0010718C incluyen al menos las siguientes:

Cadena pesada (SEQ ID NO: 302) (SEQ ID NO: 24 como se describe en WO2013/079174)

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYIMMWVRQAPGKGLEWVSSIYPSGGITFYADKG

RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARIKLGTVTTVDYWGQGTLVTVSS

Cadena ligera (SEQ ID NO: 303) (SEQ ID NO: 25 como se describe en WO2013/079174)

QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSN

RPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTRVFGTGTKVTVL

En una realización, el inhibidor de PD-L1 es YW243.55.S70. El anticuerpo YW243.55.S70 es un anti-PD-L1 descrito en el documento WO 2010/077634 (secuencias de región variable de cadena pesada y ligera mostradas en las SEQ ID Nos. 20 y 21, respectivamente), y que tiene una secuencia divulgada allí (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada).

En una realización, el inhibidor de PD-L1 es MDX-1105. MDX-1105, también conocido como BMS-936559, es un anticuerpo anti-PD-L1 descrito en el documento WO2007/005874 y que tiene una secuencia divulgada allí (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada).

En una realización, el inhibidor de PD-L1 es MDPL3280A (Genentech/Roche). MDPL3280A es un anticuerpo monoclonal IgG1 optimizado para Fc humano que se une a PD-L1. MDPL3280A y otros anticuerpos monoclonales humanos contra PD-L1 se divulgan en la patente de los Estados Unidos No: 7,943,743, la publicación PCT No. WO 2013/019906 y la publicación de patente de los Estados Unidos No.: 20120039906. Por ejemplo, MDPL3280A puede incluir una región variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 24, como se divulga en el documento WO 2013/019906, y una región variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 21, como se divulga en el documento WO 2013/019906 (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada).

En una realización, el inhibidor de PD-L1 es MEDI-4736 (también conocido como durvalumab). MEDI-4736 se describe en los documentos WO 2011/066389 y WO 2015/036499. Por ejemplo, MEDI-4736 puede incluir una región variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 1, como se divulga en el documento WO 2015/036499, y una región variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 2, como se divulga en el documento WO 2015/036499 (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada).

En otras realizaciones, el inhibidor de PD-L2 es AMP-224. AMP-224 es un receptor soluble de fusión PD-L2 Fc que bloquea la interacción entre PD1 y B7-H1 (B7-DCIg; Amplimmune; por ejemplo, divulgado en los documentos WO2010/027827 y WO2011/066342).

Ejemplos de inhibidores de TIM-3

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de TIM-3. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia maligna hematológica. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de piel (por ejemplo, un melanoma) o un cáncer renal (por ejemplo, un carcinoma de células renales).

En una realización, el anticuerpo anti-TIM-3 o fragmento del mismo es una molécula de anticuerpo anti-TIM3 como se describe en la publicación de solicitud de patente de los Estados Unidos No.2015/0218274 (USSN 14/610837), titulada "Antibody Molecules to TIM-3 and Uses Thereof'.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye al menos uno o dos dominios variables de cadena pesada (opcionalmente incluye una región constante), al menos uno o dos dominios variables de cadena ligera (opcionalmente incluye una región constante), o ambos, que comprenden la secuencia de aminoácidos de ABTIM3, ABTIM3-hum01, ABTIM3-hum02, ABTIM3-hum03, ABTIM3-hum04, ABTIM3-hum05, ABTIM3-hum06, ABTIM3-hum07, ABTIM3-hum08, ABTIM3-hum09, ABTIM3-hum10, ABTIM3-hum11, ABTIM3-hum12, ABTIM3-hum13, ABTIM3-hum14, ABTIM3-hum15, ABTIM3-hum16, ABTIM3-hum17, ABTIM3-hum18, ABTIM3-hum19, ABTIM3-hum20, ABTIM3-hum21, ABTIM3-hum22, ABTIM3-hum23; o como se describe en las Tablas 1-4 del documento US 2015/0218274; o codificada por la secuencia de nucleótidos de las Tablas 1-4; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente. La molécula de anticuerpo anti-TIM-3, opcionalmente, comprende una secuencia líder de una cadena pesada, una cadena ligera o ambas, como se muestra en el documento US 2015/0218274; o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye al menos una, dos o tres regiones determinantes de complementariedad (CDR) de una región variable de cadena pesada y/o una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre uno cualquiera de ABTIM3, ABTIM3-hum01, ABTIM3-hum02, ABTIM3-hum03, ABTIM3-hum04, ABTIM3-hum05, ABTIM3-hum06, ABTIM3-hum07, ABTIM3-hum08, ABTIM3-hum09, ABTIM3-hum10, ABTIM3-hum11, ABTIM3-hum12, ABTIM3-hum13, ABTIM3-hum14, ABTIM3-hum15, ABTIM3-hum16, ABTIM3-hum17, ABTIM3-hum18, ABTIM3-hum19, ABTIM3-hum20, ABTIM3-hum21, ABTIM3-hum22, ABTIM3--hum23; o como se describe en las Tablas 1-4 de US 2015/0218274; o codificada por la secuencia de nucleótidos de las Tablas 1-4; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en las Tablas 1-4 del documento US 2015/0218274, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en las Tablas 1-4. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, con respecto a la secuencia de aminoácidos mostrada en Tablas 1-4, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1-4.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en las Tablas 1-4 del documento US 2015/0218274, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en las Tablas 1-4. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, con respecto a la secuencia de aminoácidos mostrada en Tablas 1-4, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en las Tablas 1-4. En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye una sustitución en una CDR de cadena ligera, por ejemplo, una o más sustituciones en una CDR1, CDR2 y/o CDR3 de la cadena ligera.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en las Tablas 1-4 del documento US 2015/0218274, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en las Tablas 1-4. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, con respecto a la secuencia de aminoácidos mostrada en Tablas 1-4, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en las Tablas 1-4.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye:

(a) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 9; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 10; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 5; y una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 12, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 13 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 14, cada una divulgada en Tablas 1-4 de US 2015/0218274;

(b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 3; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 4; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 5; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 6, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 7 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 8, cada una divulgada en las Tablas 1-4 del documento US 2015/0218274;

(c) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 9; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 25; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 5; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 12, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 13 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 14, cada una divulgada en las Tablas 1-4 del documento US 2015/0218274;

(d) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 3; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 24; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 5; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 6, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 7 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 8, cada una divulgada en las Tablas 1-4 del documento US 2015/0218274;

(e) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 9; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 31; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 5; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 12, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 13 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 14, cada una divulgada en las Tablas 1-4 del documento US 2015/0218274; o

(f) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 3; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 30; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 5; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 6, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 7 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 8, cada una divulgada en las Tablas 1-4 del documento US 2015/0218274.

Los ejemplos de anticuerpos anti-TIM-3 se divulgan en la patente de Estados Unidos No.: 8.552.156, documentos WO 2011/155607, EP 2581113 y publicación de la patente de los Estados Unidos No.: 2014/044728.

Ejemplos de inhibidores de CTLA-4

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de CTLA-4. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia maligna hematológica.

Los ejemplos de anticuerpos anti-CTLA4 incluyen Tremelimumab (anticuerpo monoclonal IgG2 disponible a través de Pfizer, anteriormente conocido como ticilimumab, CP-675,206); e ipilimumab (anticuerpo CTLA-4, también conocido como MDX-010, CAS No. 477202-00-9).

En una realización, la combinación incluye una molécula de anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, como se describe en el presente documento, y un anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, ipilimumab. Los ejemplos de dosis que pueden usarse incluyen una dosis de molécula de anticuerpo anti-PD-1 de aproximadamente 1 a 10 mg/kg, por ejemplo, 3 mg/kg, y una dosis de un anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, ipilimumab, de aproximadamente 3 mg/kg.

Otros ejemplos de anticuerpos anti-CTLA-4 se divulgan , por ejemplo, en la patente de los Estados Unidos No. 5.811.097.

Ejemplos de Inhibidores de IAP

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor del inhibidor de la proteína de apoptosis (IAP). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), un cáncer de ovario, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer colorrectal o un cáncer de páncreas), por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, un mieloma múltiple).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP es (S)-N-((S)-1-cidohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il) pirrolidina-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en la patente de Estados Unidos No. 8.552.003.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, por ejemplo, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en la patente de Estados Unidos No. 8.552.003, se administra a una dosis de aproximadamente 1.800 mg, por ejemplo, una vez a la semana.

Ejemplos de Inhibidores de EGFR

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de páncreas, un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo) o un cáncer de colon).

En algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR es (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2013/184757.

En algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR, por ejemplo, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil) azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2013/184757, se administra a una dosis de 150-250 mg, por ejemplo, por día. En algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR, por ejemplo, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2013/184757, se administra a una dosis de aproximadamente 150, 200 o 250 mg, o aproximadamente 150-200 o 200-250 mg.

En algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR se elige entre uno o más de erlotinib, gefitinib, cetuximab, panitumumab, necitumumab, PF-00299804, nimotuzumab o RO5083945.

Ejemplos de inhibidores de mTOR

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de la diana de rapamicina (mTOR). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de próstata, un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), un cáncer de cerebro, un cáncer de vejiga, un cáncer de páncreas, un cáncer de riñón, un cáncer de hígado, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células pequeñas o un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer respiratorio/torácico, un sarcoma, un cáncer de huesos, un cáncer endocrino, un astrocitoma, un cáncer de cuello uterino, un cáncer neurológico, un cáncer colorrectal, un cáncer gástrico o un melanoma), por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, leucemia linfocítica), por ejemplo, un linfoma, o por ejemplo, un mieloma múltiple).

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR es dactolisib (compuesto A4) o 8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (Compuesto A41), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2006/122806.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR es everolimus (también conocido como AFINITOR®; Compuesto A36) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2014/085318.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, por ejemplo, everolimus (Compuesto A36) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra a una dosis de aproximadamente 2,5-20 mg/día. En una realización, el inhibidor de TOR, por ejemplo, everolimus (Compuesto A36) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra a una dosis de aproximadamente 2,5, 5, 10 o 20 mg/día, por ejemplo, aproximadamente 2,5-5, 5-10 o 10-20 mg/día.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR se elige entre uno o más de rapamicina, temsirolimus (TORISEL®), AZD8055, BEZ235, BGT226, XL765, PF-4691502, GDC0980, SF1126, OSI-027, GSK1059615, KU-0063794, WYE-354, Palomid 529 (P529), PF-04691502 o PKI-587, ridaforolimus (formalmente conocido como deferolimus, dimetilfosfinato de (1R,2R,4S)-4-[(2R)-2[(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-dihidroxi-19,30 -dimetoxi- 15,17,21,23,29,35- hexametil-2,3,10,14,20-pentaoxo- 11,36-dioxa-4-azatriciclo [30.3.1.04,9] hexatriaconta-16,24,26,28-tetraen-12-il]propil]-2-metoxiciclohexil, también conocido como AP23573 y MK8669, y descrito en la publicación PCT No. WO 03/064383); everolimus (AFINITOR® o RAD001); rapamicina (AY22989, SIROLIMUS®); simapimod (número de registro CAS: 164301-51-3); (5{2,4-Bi[(3S)-3-metilmorfolin-4-il]pirido[2,3-d] pirimidin-7-il}-2-metoxifenil)metanol (AZD8055); 2-amino-8-[trans-4-(2-hidroxietoxi)ciclohexil]-6-(6-metoxi-3-piridinil)-4-metil-pirido[2,3-d]pirimidin-7(8H)-ona (PF04691502, número de registro CAS: 1013101-36-4); sal interna de N2-[1,4-dioxo-4-[[4-(4-oxo-8-fenil-4H-1-benzopiran-2-il)morfolinio-4-il]metoxi]butil]-L-arginilglicil-L-a-aspartil-L-serina (SEQ ID NO: 304) (SF1126, número de registro CAS: 936487-67-1), o XL765 (SAR245409).

Otros ejemplos de inhibidores de mTOR incluyen, pero no se limitan a, temsirolimus; ridaforolimus, dimetilfosfinato de (1R,2R,4S)-4-[(2R)-2[(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-dihidroxi-19,30-dime -toxi-15,17,21,23,29,35-hexametil-2,3,10,14,20-pentaoxo-11,36-dioxa-4-azatriciclo[30.3.1,049]hexatriaconta-16,24,26 ,28-tetraen-12-il] propil]-2-metoxiciclohexil, también conocido como AP23573 y MK8669; everolimus (RAD001); rapamicina (AY22989); simapimod; (5-{2,4-bis[(3S)-3-metilmorfolin-4-il]pirido[2,3-d]pirimidin-7-il}-2-metoxifenil) metanol (AZD8055); 2-amino-8-[trans-4-(2-hidroxietoxi)ciclohexil]-6-(6-metoxi-3-piridinil)-4-metil-pirido[2,3-d] pirimidin-7(8H)-ona (PF04691502); y N2-[1,4-dioxo-4 -[[4-(4-oxo-8-fenil-4H-1-benzopiran-2-il) morfolinio-4-il] metoxi] butil]-L-arginilglicil-L-a-aspartil-L-serina (SEQ ID NO: 304), sal interna (SF1126); y XL765.

Ejemplos de agonistas de IL-15

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agonista de interleucina 15 (IL-15). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un tumor sólido refractario), (por ejemplo, un melanoma (por ejemplo, un melanoma metastásico o avanzado), un cáncer de riñón (por ejemplo, un cáncer de células renales), un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer de cabeza y cuello de células escamosas o un cáncer de vejiga (por ejemplo, un cáncer de vejiga no invasivo del músculo)), por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, una leucemia, por ejemplo, una leucemia mielógena aguda (por ejemplo, una leucemia mielógena aguda refractaria o recidivante), por ejemplo, un linfoma, por ejemplo, un linfoma no Hodgkin (por ejemplo, un linfoma no Hodgkin de células B indolentes recidivante/refractario) (por ejemplo, un mieloma múltiple recidivante o refractario).

La IL-15, secretada por fagocitos mononucleares (y algunos otros tipos de células) después de una infección viral, regula la activación y proliferación de las células T y de las células asesinas naturales. Esta citocina induce la activación de los activadores de la transcripción STAT3, STAT5 y STAT6 a través de las vías de transducción de señales de la quinasa JAK en mastocitos, células T y células T epidérmicas dendríticas. IL-15 e interleucina 2 (IL-2) son estructuralmente similares y comparten muchas actividades biológicas; ambos pueden unirse a subunidades comunes del receptor de hematopoyetina, regulando negativamente la actividad del otro. El número de células T de memoria CD8+ puede regularse mediante un equilibrio entre IL-15 e IL-2.

En algunas realizaciones, el agonista de IL-15 es una IL-15 humana recombinante (rhIL-15), por ejemplo, CYP0150 (Cytune). CYP0150 es una proteína recombinante que consiste en una IL-15 humana unida al dominio Sushi+ del receptor de la cadena alfa humana (transpresentación).

CYP0150 se divulga, por ejemplo, en la publicación PCT No. WO 2007/046006. CYP0150 tiene la secuencia de aminoácidos de:

MAPRRARGCRTLGLPALLLLLLLRPPATRGDYKDDDDKIEGRITCPPPMSVEHADIWVK SYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVHQRPAPP SGGSGGGGSGGGSGGGGSLQNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTA MKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQ SFVHIVQMFINTS (SEQ ID NO: 305) (divulgada como la SEQ ID NO: 60 en el documento WO 2007/046006) o MDSKGSSQKAGSRLLLLLV VSNLCLLQGVVSTTRDYKDDDDKIEGRNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLE SGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSSGGGSGGGGSGGGGSGG GGSGGGSLQITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVHQ RPAPP (SEQ ID NO: 306) divulgada como la SEQ ID NO: 62 en el documento WO 2007/046006).

En algunas realizaciones, el agonista de IL-15 es ALT-803 (Altor BioScience). ALT-803 es un complejo soluble IL-15N72D: IL-15RaSu/Fc, producido a partir de una línea celular de mamífero recombinante de alto rendimiento que coexpresa la proteína de fusión IL-15N72D e IL-15RaSu/Fc. El mutante de IL-15 (N72D) tiene una actividad biológica de IL-15 mejorada (Zhu et al. 2009, J Immunol. 183: 3598). El mutante IL-15N72D y el dominio soluble de IL-15Ra pueden formar complejos heterodiméricos estables en solución y este complejo exhibe una actividad biológica aumentada (aproximadamente 25 veces más activa) en comparación con la IL-15 no complejada. ALT-803 se divulga, por ejemplo, en la publicación PCT No. WO 2012/040323 y la patente de los Estados Unidos No. 8.507.222.

En algunas realizaciones, el agonista de IL-15 es hetIL-15 (Admune). HetIL-15 es una IL-15 humana heterodimérica (IL-15/sIL-15Ra). HetIL-15 se divulga, por ejemplo, en las publicaciones PCT Nos. WO 2009/002562 y WO 2014/066527.

Ejemplos de agonistas de CD40

En una realización, la combinación incluye un agonista de CD40. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de pulmón, un carcinoma de esófago, un melanoma o un carcinoma de células renales), por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica (CLL)), por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, un linterna no Hodgkin), por ejemplo, o un mieloma múltiple).

En una realización, el agonista de CD40 es ADC-1013 (Alligator/BioInvent). ADC-1013 es un anticuerpo monoclonal agonista de IgG completamente humano contra CD40 humano. CD40, una proteína de membrana integral que se encuentra en la superficie de los linfocitos B, es un miembro de la superfamilia de receptores del factor de necrosis tumoral y se expresa en gran medida en varios cánceres, tales como las neoplasias malignas de células B. Los agonistas de CD40, por ejemplo, anticuerpos anti-CD40, son capaces de sustituir eficazmente la actividad auxiliar de células T (Ridge, J. et al. (1998) Nature 393: 474-478).

El ADC-1013 se divulga, por ejemplo, en la publicación PCT No. WO 2015/091853. Los clones de ADC-1013 incluyen, por ejemplo, en 1136/1137, 1132/1133, 1148/1149, 1140/1135, 1134/1135, 1107/1108, 1142/1135, 1146/1147 y 1150/1151.

La región variable de la cadena pesada de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos de:

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGIGSYGGGT YYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYVNFGMDYWGQGTLVTV SS (SEQ ID NO: 307) (divulgada como la SEQ ID NO: 65 en el documento WO 2015/091853). La región variable de la cadena ligera de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos de:

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSR FSGSGSGTDFTLTISS-LQPEDFATYYCQQYGRNPPTFGQGTKLEIK (SEQ ID NO: 308) (divulgada como la SEQ ID NO: 66 en el documento WO 2015/091853). La CDR1 de cadena pesada de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos de: GFTFSSYA (SEQ ID NO: 309) (divulgada como la SEQ ID NO: 13 en el documento WO 2015/091853). La CDR2 de cadena pesada de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos de IGSYGGGT (SEQ ID NO: 310) (divulgada como la SEQ ID NO: 14 en el documento WO 2015/091853). La CDR3 de cadena pesada de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos: ARYVNFGMDY (SEQ ID NO: 311) (divulgada como la SEQ ID NO: 15 en el documento WO 2015/091853). La CDR1 de cadena ligera de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos: QSISSY (SEQ ID NO: 312) (divulgada como la SEQ ID NO: 16 en el documento WO 2015/091853). La CDR2 de cadena ligera de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos: AAS (SEQ ID NO: 313) (divulgada como la SEQ ID NO: 17 en el documento WO 2015/091853). La CDR3 de cadena ligera 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos: QQYGRNPPT (SEQ ID NO: 314) (divulgada como la SEQ ID NO: 18 en el documento WO 2015/091853).

La región variable de la cadena pesada de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de: EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTY YADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVGYDLVWTLYLQMNSLRAEDTAVGYDLVWRVW (SEQ ID NO: 315) divulgada en la SEQ ID NO.: 79 en el documento WO 2015/091853). La región variable de cadena ligera de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de:

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSR FSGSGSGT DFTLTISS-LQPEDFATYYCQQYGVYPFTFGQGTKLEIK (SEQ ID NO: 316) (divulgada como la SEQ ID NO: 80, en el documento WO 2015/091853). La CDR1 de cadena pesada de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de: GFTFSSYA (SEQ ID NO: 309) (divulgada como la SEQ ID NO: 55 en el documento WO 2015/091853). La CDR2 de cadena pesada de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de: ISGSGGST (SEQ ID NO: 317) (divulgada como la SEQ ID NO: 56, en el documento WO 2015/091853). La CDR3 de cadena pesada de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de: ARRVWGFDY (SEQ ID NO: 318) (divulgada como la SEQ ID NO: 57, en el documento WO 2015/091853). La CDR1 de cadena ligera de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de: QSISSY (SEQ ID NO: 312) (divulgada como la SEQ ID NO: 58, en el documento WO 2015/091853). La CDR2 de cadena ligera de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de: AAS (SEQ ID NO: 313) (divulgada como la SEQ ID NO: 59, en el documento WO 2015/091853). La CDR3 de cadena ligera de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de: QQYGVYPFT (SEQ ID NO: 319) (divulgada como la SEQ ID NO: 60, en el documento WO 2015/091853).

En algunas realizaciones, el agonista de CD40 es ISF35. ISF35 es un CD154 quimérico. La ISF se divulga en las publicaciones PCT Nos. WO 2003/099340 y WO 2008/070743.

En algunas realizaciones, el agonista de CD40 es dacetuzumab. Dacetuzumab también se conoce como SGN-40 o huS2C6. Dacetuzumab es un anticuerpo monoclonal humanizado que se dirige a CD40. El dacetuzumab se divulga, por ejemplo, en Advani et al. J Clin Oncol. 2009; 27 (26): 4371-7; y Khubchandani et al., Curr Opin Investig Drugs.

2009; 10 (6): 579-87.

En algunas realizaciones, el agonista de CD40 es lucatumumab (número de registro CAS: 903512-50-5). Lucatumumab también se conoce como CHIR-12.12 o HCD-122. Lucatumumab se une a CD40 e inhibe, de ese modo la proliferación celular inducida por ligando de CD40 y desencadena la lisis celular mediante citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en células que sobreexpresan CD40. Lucatumumab se divulga, por ejemplo, en Tai et al., Cancer Res. 2005; 65 (13): 5898-906.

Los anticuerpos anti-CD40 pueden sustituir eficazmente la actividad auxiliar de las células T (Ridge, J. et al. (1998) Nature 393: 474-478) y pueden usarse junto con anticuerpos PD-1 (Ito, N et al., (2000) Immunobiology 201 (5) 527 40).

Ejemplos de agonistas de OX40

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agonista de OX40. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de mama, un melanoma, un cáncer de cabeza y cuello o un cáncer de próstata), por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, un linfoma de células B)).

El OX40, también conocido como CD134, es una glicoproteína de la superficie celular y miembro de la superfamilia del receptor del factor de necrosis tumoral (TNF), se expresa en los linfocitos T y proporciona una señal coestimuladora para la proliferación y supervivencia de las células T activadas. La activación de OX40 puede inducir la proliferación de linfocitos T efectores, lo que promueve una respuesta inmune contra las células tumorales que expresan antígenos asociados a tumores (TAA).

En algunas realizaciones, el agonista de OX40 se elige entre mAb 106-222, 106-222 humanizado (Hu106), mAb 119 122 o 119-122 humanizado (Hu119).

Se divulgan los MAb 106-222, 106-222 humanizado (Hu106), mAb 119-122 y 119-122 humanizado (Hu119), por ejemplo, en la publicación PCT No. WO 2012/027328 y en la patente de los Estados Unidos No. 9.006.399. La secuencia de aminoácidos de la región variable de la cadena pesada del mAb 106-222 se divulga como la SEQ ID NO: 4 en el documento WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de la cadena ligera del mAb 106-222 se divulga como la SEQ ID NO: 10 en el documento WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de la cadena pesada de 106-222 humanizado (Hu106) se divulga como SEQ ID NO: 5 en el documento WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de la cadena ligera de 106-222 humanizado (Hu106) se divulga como la SEQ ID NO: 11 en el documento WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de la cadena pesada del mAb 119-122 se divulga como la SEQ ID NO: 16 en el documento WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de la cadena ligera del mAb 119 122 se divulga como la SEQ ID NO: 22 en el documento WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de la cadena pesada de 119-122 humanizado (Hu119) se divulga como la SEQ ID NO: 17 en el documento WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de la cadena ligera de 119-122 humanizado (Hu119) se divulga como la SEQ ID NO: 23 en el documento WO 2012/027328.

En algunas realizaciones, el agonista de OX40 es un anticuerpo monoclonal humanizado divulgado en la patente de los Estados unidos No. 7.959.925 y la publicación PCT No. WO 2006/121810.

En algunas realizaciones, el agonista de OX40 se elige entre MEDI6469, MEDI0562 o MEDI6383. MEDI6469 es un anticuerpo monoclonal murino contra OX40. MEDI0562 es un anticuerpo monoclonal humanizado contra OX40. MEDI6383 es un anticuerpo monoclonal contra OX40.

En algunas realizaciones, el agonista de OX40, por ejemplo, MEDI6469, se administra por vía intravenosa a una dosis de aproximadamente 0,4 mg/kg, por ejemplo, cada dos días.

Se divulgan otros ejemplos de anticuerpos anti-OX-40, por ejemplo, en Weinberg, A. et al., (2000) Immunol 164: 2160 2169).

Ejemplos de agonistas de CD27

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agonista de CD27. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un melanoma, un carcinoma de células renales, un adenocarcinoma de próstata refractario a hormonas, un cáncer de ovario, un cáncer de mama, un adenocarcinoma colorrectal o un cáncer de pulmón de células no pequeñas), por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, un linfoma de Hodgkin, un linfoma de Burkett, un linfoma de células del manto, un linfoma primario del sistema nervioso central, o un linfoma de células B de la zona marginal) o una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica (CLL)).

En una realización, el agonista de CD27 es Varlilumab (número de registro CAS: 1393344-72-3). Varlilumab también se conoce como CDX-1127 (Celldex) o 1F5. Varlilumab es un anticuerpo monoclonal (mAb) completamente humano que se dirige a CD27, molécula en la vía de activación de los linfocitos. CDX-1127 es un mAb anti-CD27 agonista que puede activar las células T humanas en el contexto de la estimulación del receptor de células T y, por lo tanto, mediar los efectos antitumorales. CDX-1127 también puede proporcionar efectos terapéuticos directos contra tumores con expresión de CD27.

El varlilumab se describe, por ejemplo, en Vitale et al., Clin Cancer Res. 2012; 18 (14): 3812-21, WO 2008/051424 y en la patente de los Estados Unidos No. 8.481.029.

En una realización, el agonista de CD27 es BION-1402 (BioNovion). BION-1402 también se conoce como hCD27.15. BION-1402 es un anticuerpo monoclonal anti-CD27 humano. BION-1402 puede estimular la proliferación y/o supervivencia de células CD27+. BION-1402 puede activar CD27 humano de manera más eficaz que su ligando CD70, lo que da como resultado un efecto significativamente mayor sobre la proliferación de células T CD8+ y CD4+.

El BION-1402 se divulga, por ejemplo, como hCD27.15 en el documento WO 2012/004367. Este anticuerpo es producido por el hibridoma hCD27.15, que fue depositado en la ATCC el 2 de junio de 2010 con el número PTA-11008. La región variable de la cadena pesada de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de:

EVRLQQSGADLVKPGASVKLSCASGFIIKATYMHWVRQRPEQGLEWIGRIDPANGEKY DPKFQVKAITADTSSSTAYLQLNSLTSDDTAVYYCARYAWYFDVWGAGTTVTVSSAKT TPPXVYPXXPGS (SEQ ID NO: 320) (divulgada como la SEQ ID NO: 3 en el documento WO 2012/004367). La región variable de cadena ligera de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de:

DIQMTQSPASLSASVGDTVTITCRASENIYSFLAWYHQKQGRSPQLLVYHAKTLAEGVP SRFSGSGSGTQFSLKINSLQAEDFGSYYCQHYYGSPLTFGAGTKLEVKRADAAPTVSIFP PSSEELSL (SEQ ID NO: 321) (divulgada como la SEQ ID NO: 4 en el documento WO 2012/004367). La CDR1 de cadena pesada de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: GFIIKATYMH (SEQ ID NO: 322) (divulgada como la SEQ ID NO: 5 en el documento WO 2012/004367). La CDR2 de cadena pesada de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: RIDPANGETKYDPKFQV (SEQ ID NO: 323) (divulgada como la SEQ ID NO: 6 en el documento WO 2012/004367). La CDR3 de cadena pesada de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: YAWYFDV (SEQ ID NO: 324) (divulgada como la SEQ ID NO: 7 en el documento WO 2012/004367). La CDR1 de cadena ligera de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: RASENIYSFLA (SEQ ID NO: 325) (divulgada como la SEQ ID NO: 8 en el documento WO 2012/004367). La CDR2 de cadena ligera de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: HAKTLAE (SEQ ID NO: 326) (divulgada como la SEQ ID NO: 9 en el documento WO 2012/004367). La CDR3 de cadena ligera de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: QHYYGSPLT (SEQ ID NO: 327) (divulgada como la SEQ ID NO: 10 en el documento WO 2012/004367).

Ejemplos de Inhibidores de LAG-3

El sistema inmunológico tiene la capacidad de reconocer y eliminar células tumorales; sin embargo, los tumores pueden utilizar múltiples estrategias para evadir la inmunidad. El bloqueo de los puntos de control inmunitarios es uno de los enfoques para activar o reactivar la inmunidad terapéutica antitumoral. El gen 3 de activación de linfocitos (LAG-3) se ha descrito como un receptor inhibidor en la sinapsis inmunológica (Chen y Flies (2013) Nat Rev Immunol. 13 (4): 227-42). Por lo tanto, el bloqueo de LAG-3 puede conducir a una mejora de la inmunidad antitumoral.

Varios tipos de células expresan LAG-3. Por ejemplo, LAG-3 se expresa en células T CD4+ y CD8+ activadas, células Treg, células asesinas naturales (NK) y células dendríticas plasmocitoides (DC). LAG-3 se expresa en linfocitos infiltrantes de tumores, por ejemplo, linfocitos infiltrantes en carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (HNSCC). LAG-3 se expresa en Treg naturales e inducidas altamente supresoras. Por ejemplo, nTreg FoxP3+ altamente supresores e - iTreg FoxP3- son positivas para LAG-3 en melanoma y cáncer colorrectal (Camisaschi et al. (2010) J. Immunol. 184 (11): 6545-6551; Scurr et al. (2014) Mucosal Immunol. 7 (2): 428-439).

LAG-3 regula negativamente la señalización y las funciones de las células T. Los ligandos para LAG-3 incluyen, por ejemplo, MHC Clase II y L-SECtin. Se ha demostrado que anti-LSECtin inhibe el crecimiento de células de melanoma B16 (Xu et al., (2014) Cancer Res. 74 (13): 3418-3428). El bloqueo de LAG-3 puede restaurar las actividades de las células efectoras, atenuar la actividad supresora de Treg y/o mejorar la actividad antitumoral anti-PD-1.

Típicamente, aunque no exclusivamente, LAG-3 se coexpresa en células PD-1 y el bloqueo único puede restaurar las actividades in vitro de las células. El grado de agotamiento de las células T CD8+, por ejemplo, como lo muestran los porcentajes de productores duales de IFN-Y/TNE-a, se correlaciona con el número de receptores inhibidores expresados (Blackburn et al., (2009) Nat. Immunol. 10 (1): 29-37). La alta expresión de PD-1/LAG-3 se correlaciona con la infiltración de células T en el melanoma. El bloqueo conjunto de LAG-3 con anti-PD-1 o PD-L1 puede resultar en actividades supresoras de tumores en modelos preclínicos. Por ejemplo, el bloqueo anti-LAG-3 y anti-PD-1 muestra eficacia en modelos de fibrosarcoma de SalN y carcinoma de colon MC38 (Woo et al., (2012) Cancer Res. 72 (4): 917 27).

El bloqueo de LAG-3 también es eficaz en un modelo de virus de coriomeningitis linfocítica (LCMV). Por ejemplo, el bloqueo de PD-L1 más LAG-3 durante la infección crónica por LCMV mejora las respuestas de células T CD8+ antivirales (Blackburn et al., (2009) Nat. Immunol. 10 (1): 29-37).

El término "Gen-3 de activación de linfocitos" o "LAG-3" incluye todas las isoformas, LAG-3 de mamífero, por ejemplo humano, homólogos de especie de LAG-3 humana y análogos que comprenden al menos un epítopo común con LAG-3. Las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de LAG-3, por ejemplo, LAG-3 humana, se conocen en la técnica, por ejemplo, Triebel et al., (1990) J. Exp. Medicina. 171: 1393-1405.

En determinadas realizaciones, las combinaciones descritas en el presente documento incluyen un inhibidor de LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (por ejemplo, moléculas de anticuerpo humanizado) como se describe en el presente documento. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia maligna hematológica. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de piel (por ejemplo, un melanoma) o un cáncer renal (por ejemplo, un carcinoma de células renales).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo LAG-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo aislada o recombinante) tiene una o más de las siguientes propiedades:

(i) se une a LAG-3, por ejemplo, LAG-3 humana, con alta afinidad, por ejemplo, con una constante de afinidad de al menos aproximadamente 107 M-1, típicamente aproximadamente 108 M-1, y más típicamente, aproximadamente 109 M'1 a 1010 M'1 o más fuerte;

(ii) se une a LAG-3, por ejemplo, un transfectante LAG-3-CHO, con una Kd de menos de: 5 nM, 4 nM, 3 nM, 2 nM, 1 nM, por ejemplo, 1 a 3 nM (por ejemplo, aproximadamente 1,92 nM o aproximadamente 2,3 nM);

(iii) no se une sustancialmente a CD4;

(iv) inhibe la unión de LAG-3 a una molécula de histocompatibilidad mayor (MHC) clase II, por ejemplo, muestra una CI 50 de aproximadamente 1 a 20 nM, 5 a 15 nM, por ejemplo, 5,5 nM;

(v) se une al dominio D1 de LAG-3 (por ejemplo, LAG-3 humana), por ejemplo, se une al dominio D1, pero no se une a la región de bucle adicional del dominio D1;

(vi) modula (por ejemplo, estimula, mejora o restaura) una respuesta inmune, por ejemplo, una respuesta de células T específica de antígeno o una respuesta antitumoral;

(vii) se une específicamente a un epítopo en LAG-3, por ejemplo, el mismo o similar epítopo que el epítopo reconocido por el anticuerpo monoclonal murino BAP050 o el anticuerpo quimérico BAP050-qui;

(viii) se une a un epítopo diferente en LAG-3 que el reconocido por el anticuerpo BMS-986016;

(ix) muestra la misma o similar afinidad o especificidad de unión, o ambas, que cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050- hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J.

(x) muestra la misma o similar afinidad o especificidad de unión, o ambas, que una molécula de anticuerpo (por ejemplo, una región variable de cadena pesada y una región variable de cadena ligera) descrita en la Tabla 1;

(xi) muestra la misma o similar afinidad o especificidad de unión, o ambas, que una molécula de anticuerpo (por ejemplo, una región variable de cadena pesada y una región variable de cadena ligera) que tiene una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1;

(xii) muestra la misma o similar afinidad o especificidad de unión, o ambas, que una molécula de anticuerpo (por ejemplo, una región variable de cadena pesada y una región variable de cadena ligera) codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1;

(xiii) inhibe, por ejemplo, inhibe competitivamente, la unión de una segunda molécula de anticuerpo contra LAG-3, en la que la segunda molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo elegida entre, por ejemplo, cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum050-12, BAP050-hum050-13, BAP050-hum08-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum-18, BAP050-hum-19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J;

(xiv) se une al mismo epítopo o uno superpuesto con una segunda molécula de anticuerpo a LAG-3, en el que la segunda molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo elegida entre, por ejemplo, cualquiera de BAP050-hum01, BAP050 hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum013, BAP050-hum14, BAP050-hum-15, BAP050-hum-16, BAP050-hum-17, BAP050-hum-18, BAP050-hum-19, BAP050-hum-20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum-12 -Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum-15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum-19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clone-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J;

(xv) compite por unirse, y/o se une al mismo epítopo, con una segunda molécula de anticuerpo a LAG-3, por ejemplo, medido mediante un método Biacore, un método FACS o ambos, en el que la segunda molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo elegida de, por ejemplo, cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAp050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum5020, huBAPO(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050- Clon-J;

(xvi) tiene una o más propiedades biológicas de una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo elegida entre, por ejemplo, cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050 hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J;

(xvii) tiene una o más propiedades farmacocinéticas de una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo elegida entre, por ejemplo, cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J; o

(xviii) inhibe una o más actividades de LAG-3, por ejemplo, da como resultado una o más de: un aumento en la estimulación dependiente de antígeno de linfocitos T CD4+; un aumento en la proliferación de células T; un aumento en la expresión de un antígeno de activación, por ejemplo, CD25; un aumento en la expresión de una citocina, por ejemplo, interferón-gamma (IFN-y), interleucina 2 (IL-2) o interleucina 4 (IL-4); un aumento en la expresión de una quimiocina, por ejemplo, CCL3, CCL4 o CCL5; una disminución de la actividad supresora de las células Treg; un aumento en la homeostasis de las células T; un aumento de los linfocitos que se infiltran en el tumor; o una disminución de la evasión inmunológica por parte de las células cancerosas.

Como se usa en el presente documento, "huBAP050(Ser)" se refiere a una molécula de anticuerpo BAP050 humanizado, por ejemplo, cualquiera de las moléculas de anticuerpo BAP050 humanizado divulgadas en el presente documento, por ejemplo, como se describe en la Tabla 1, que tiene una sustitución de Cys por Ser en la posición 84 de la región 3 del marco de la cadena pesada (VHFW3). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo huBAP050(Ser) se elige entre BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se une a LAG-3 con alta afinidad, por ejemplo, con una constante de equilibrio de disociación (Kd) que es aproximadamente la misma, o al menos aproximadamente 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% o 90% mayor o menor que la Kd de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murina o quimérica, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murina o quimérica descrita en el presente documento. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se une a LAG-3, por ejemplo, un transfectante LAG-3-CHO, con una Kd de menos de: 5 nM, 4 nM, 3 nM, 2 nM, por ejemplo, 1 a 3 nM (por ejemplo, aproximadamente 1,92 nM o aproximadamente 2,3 nM).

En algunas realizaciones, el nivel de expresión de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es aproximadamente el mismo, mayor o menor, por ejemplo, al menos aproximadamente 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 veces mayor o menor que el nivel de expresión de una molécula de anticuerpo murina o quimérica, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murina o quimérica descrita en el presente documento. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo se expresa en células CHO.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 reduce una o más actividades asociadas a LAG-3 con una CI50 (concentración con 50% de inhibición) que es aproximadamente igual, mayor o menor, por ejemplo, al menos aproximadamente 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% o 90% mayor o menor que la CI50 de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murina o quimérica, por ejemplo, molécula de anticuerpo anti-LAG-3 un murina o quimérica descrita en el presente documento. En algunas realizaciones, la actividad asociada a LAG-3 es la unión de una molécula de MHC de clase II a LAG-3. En algunas realizaciones, la actividad asociada a LAG-3 es la unión de L-SECtin a LAG-3. En una realización, el anticuerpo anti-LAG-3 tiene una CI50 de aproximadamente 1 a 20 nM, 5 a 15 nM, 5,5 nM (por ejemplo, detectada por inhibición de MHC de clase II o la unión L-SECtin).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 tiene aproximadamente la misma estabilidad o una estabilidad mejorada, por ejemplo, al menos aproximadamente 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 veces más estable in vivo o in vitro que una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murina o quimérica, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 murina o quimérica descrita en el presente documento.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es una molécula de anticuerpo humanizada y tiene una puntuación de riesgo con base en el análisis del epítopo de células T de 800 a 1.200, 850 a 1.150, 900 a 1.100, 950 a 1.050 o una puntuación de riesgo como se describe en el presente documento.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una región de unión a antígeno, por ejemplo, Una región variable o un fragmento de unión a antígeno de la misma, de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, Un anticuerpo elegido entre uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP0AP50-hum11, BAP0AP50-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos, tres o cuatro regiones variables de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum013, BAP050-hum014, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-huml9, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente. En una realización, la molécula de anticuerpo incluye una sustitución (por ejemplo, una sustitución de Cys por Ser en la posición 84) en la región 3 del marco de la cadena pesada (VHFW3) (por ejemplo, como se muestra en las Tablas 1 y 2).

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una o dos regiones variables de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, bAp 050- hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una o dos regiones variables de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-huml9, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG4, por ejemplo, una IgG4 humana. En una realización, la IgG4 humana incluye una sustitución en la posición 228 (por ejemplo, una sustitución de Ser por Pro). En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG1, por ejemplo, una IgG1 humana. En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 297 (por ejemplo, una sustitución de Asn por Ala). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 265, una sustitución en la posición 329 o ambas (por ejemplo, una sustitución de Asp por Ala en la posición 265 y/o una sustitución de Pro por Ala en la posición 329). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 234, una sustitución en la posición 235 o ambas (por ejemplo, una sustitución de Leu por Ala en la posición 234 y/o una sustitución de Leu por Ala en la posición 235). En una realización, la región constante de la cadena pesada comprende una secuencia de aminoácidos expuesta en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a la misma.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG4, por ejemplo, una IgG4 humana, y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, una región constante de cadena ligera kappa humana, por ejemplo, una región constante de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos expuesta en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99 % idéntica o superior) a la misma. En una realización, la región constante es una IgG4 mutada, por ejemplo, una IgG4 humana mutada (por ejemplo, tiene una mutación en la posición 228 (por ejemplo, una mutación S228P). En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG1, por ejemplo, una IgG1 humana, y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, una región constante de cadena ligera kappa humana, por ejemplo, una región constante de cadena ligera y pesada que comprende una secuencia de aminoácidos expuesta en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a la misma. En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 297 (por ejemplo, una sustitución de Asn por Ala). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 265, una sustitución en la posición 329, o ambas (por ejemplo, una sustitución de Asp por Ala en la posición 265 y/o una sustitución de Pro por Ala en la posición 329). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 234, un sustitución en la posición 235, o ambas (por ejemplo, una sustitución de Leu por Ala en la posición 234 y/o una sustitución de Leu por Ala en la posición 235).

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye un dominio variable de cadena pesada y una región constante, un dominio variable de cadena ligera y una región constante, o ambos, que comprenden la secuencia de aminoácidos de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3, opcionalmente, comprende una secuencia líder de una cadena pesada, una cadena ligera o ambas, como se muestra en la Tabla 4; o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres regiones determinantes de complementariedad (CDR) de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquier BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP0AP0-hum05011, BAP0AP50-hum012, BAP0AP50--hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-huml6, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos o tres CDR mostradas en la Tabla 1.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres regiones determinantes de complementariedad (CDR) de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquier BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP0AP50-hum11, BAP0AP50-hum12, BAP0AP50-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos o tres CDR mostradas en la Tabla 1.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificado por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones de aminoácidos o eliminaciones, en relación con el aminoácido que se muestra en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende un aminoácido mostrado en la Tabla 1, o codificado por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, con respecto al aminoácido mostrado en la Tabla 1, o codificados por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR mostradas en la Tabla 1.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificado por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, con respecto a la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificado por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye todas las seis CDR de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1, o CDR estrechamente relacionadas, por ejemplo, CDR que son idénticas o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR mostradas en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir cualquier CDR descrita en el presente documento.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con Kabat (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se expone en la Tabla 1) de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, B AP050-Clon-I o BAP050-Clon-J, o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos o tres CDR de acuerdo con Kabat que se muestra en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con Kabat (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se expone en la Tabla 1) de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, B AP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos o tres CDR de acuerdo con Kabat mostradas en la Tabla 1.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR de acuerdo con Kabat (por ejemplo, al menos una, dos, tres, cuatro, cinco, o seis CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se expone en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050- hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20- Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR de acuerdo con Kabat et al., que se muestran en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir cualquier CDR divulgada en el presente documento.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye todas las seis CDR de acuerdo con Kabat (por ejemplo, todas las seis CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se expone en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o B AP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a todas las seis CDR de acuerdo con Kabat et al., mostradas en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir cualquier CDR divulgada en el presente documento.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables (por ejemplo, al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se expone en la Tabla 1) de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, B AP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J, de acuerdo con Chothia (por ejemplo, al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se expone en la Tabla 1); o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con Chothia que se muestran en Tabla 1.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con Chothia (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con la definición de Chothia como se expone en la Tabla 1) de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con Chothia que se muestran en Tabla 1.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables (por ejemplo, al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables de acuerdo con a la definición de Chothia como se expone en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1; o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o al menos los aminoácidos de esos bucles hipervariables que contactan con LAG-3. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables de Chothia mostrados en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye todos los seis bucles hipervariables (por ejemplo, todos los seis bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se expone en la Tabla 1) de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum011, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J, o bucles hipervariables estrechamente relacionados, por ejemplo, bucles hipervariables que son idénticos o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a todos los seis bucles hipervariables mostrados en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir cualquier bucle hipervariable descrito en el presente documento.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables que tienen las mismas estructuras canónicas que el bucle hipervariable correspondiente de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum011, BAP050-hum012, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J, por ejemplo, las mismas estructuras canónicas que al menos el bucle 1 y/o el bucle 2 de los dominios variables de cadena pesada y/o ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento. Véase, por ejemplo, Chothia et al., (1992) J. Mol. Biol. 227: 799-817; Tomlinson et al., (1992) J. Mol. Biol. 227: 776-798 para descripciones de estructuras canónicas de bucles hipervariables. Estas estructuras se pueden determinar mediante la inspección de las tablas descritas en estas referencias.

En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una combinación de CDR o bucles hipervariables definidos de acuerdo con Kabat et al. y Chothia et al.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR o bucles hipervariables de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, bAp 050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum012, BAP050-hum013, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03- Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J, de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR o bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia como se expone en la Tabla 1); o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntica o superior) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente; o que tienen al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) con respecto a una, dos o tres CDR o bucles hipervariables de acuerdo con Kabat y/o Chothia mostrados en la Tabla 1.

Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir CDR1 de VH de acuerdo con Kabat et al., o bucle 1 hipervariable de VH de acuerdo con Chothia et al., o una combinación de los mismos, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. En una realización, la combinación de CDR de Kabat y Chothia de CDR1 de VH comprende la secuencia de aminoácidos GFTLTNYGMN (SEQ ID NO: 286), o una secuencia de aminoácidos sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, que tiene al menos una alteración de aminoácido, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, eliminaciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras)). La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir además, por ejemplo, las CDR 2-3 de VH de acuerdo con Kabat et al. y las CDR 1-3 de Vl de acuerdo con Kabat et al., por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. Por consiguiente, en algunas realizaciones, las regiones marco se definen con base en una combinación de CDR definidas de acuerdo con Kabat et al., y bucles hipervariables definidos de acuerdo con Chothia et al. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir FR1 de VH definida con base en el bucle 1 hipervariable de VH de acuerdo con Chothia et al., y FR2 de VH definida en base a CDR 1-2 de VH de acuerdo con Kabat et al., por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede incluir además, por ejemplo, FR 3-4 de VH definidas con base en las CDR 2-3 de VH de acuerdo con Kabat et al., y FR 1-4 de VL definidas con base en las CDR 1-3 de VL de acuerdo con Kabat et al.

La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede contener cualquier combinación de CDR o bucles hipervariables de acuerdo con las definiciones de Kabat y Chothia. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J, de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia como se expone en la Tabla 1).

En una realización, por ejemplo, una realización que comprende una región variable, CDR (por ejemplo, CDR o CDR de Kabat), u otra secuencia a la que se hace referencia en el presente documento, por ejemplo, en la Tabla 1, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífica, una molécula de anticuerpo biespecífica, o es una molécula de anticuerpo que comprende un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo, por ejemplo, un medio anticuerpo o un fragmento de unión a antígeno de una mitad de anticuerpo. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo biespecífica que tiene una primera especificidad de unión para LAG-3 y una segunda especificidad de unión para PD-1, T iM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACa M-5), PD-L1 o PD-L2.

En una realización, el anticuerpo anti-LAG-3 incluye:

(b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 1; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12; (c) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286, una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15; o (d) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 4, una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la s Eq ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15;

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 1; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12;

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286, una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15; o

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12.

En una realización, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo humanizada. En otra realización, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífica. En otra realización más, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo biespecífica.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO. : 4. En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286.

En una realización, el marco variable de cadena pesada o ligera (por ejemplo, la región que abarca al menos FR1, FR2, FR3 y opcionalmente FR4) de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede elegir entre: (a) un marco variable de cadena pesada o ligera que incluye al menos 80%, 85%, 87% 90%, 92%, 93%, 95%, 97%, 98% o preferiblemente 100% de los residuos de aminoácidos de un marco variable humano de cadena pesada o ligera, por ejemplo, un residuo del marco variable de cadena pesada o ligera de un anticuerpo maduro humano, una secuencia de línea germinal humana o una secuencia de consenso humana; (b) un marco variable de cadena pesada o ligera que incluye de 20% a 80%, 40% a 60%, 60% a 90% o 70% a 95% de los residuos de aminoácidos de un marco humano variable de cadena pesada o ligera, por ejemplo, un residuo del marco variable de cadena pesada o ligera de un anticuerpo maduro humano, una secuencia de línea germinal humana o una secuencia de consenso humana; (c) un marco no humano (por ejemplo, un marco de roedor); o (d) un marco no humano que se ha modificado, por ejemplo, para eliminar determinantes antigénicos o citotóxicos, por ejemplo, desinmunizados o parcialmente humanizados. En una realización, la región del marco variable de cadena pesada o ligera (particularmente FR1, FR2 y/o FR3) incluye una secuencia del marco variable de cadena pesada o ligera de al menos 70, 75, 80, 85, 87, 88, 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98, 99% idéntica o idénticas a los marcos de un segmento de VL o VH de un gen de la línea germinal humana.

En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende un dominio variable de cadena pesada que tiene al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, diez, quince, veinte o más cambios, por ejemplo, sustituciones 0 eliminaciones de aminoácidos, de una secuencia de aminoácidos de BAP050-qui-HC, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos de la región FR en la región variable completa, por ejemplo, mostrada en las Figuras 9A-9B, o la SEQ ID NO: 20 o 22. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende un dominio variable de cadena pesada que tiene uno o más de: E en la posición 1, V en la posición 2, A en la posición 9, V en la posición 11, A en la posición 16, S en la posición 17, L en la posición 18, R en la posición 19, V en la posición 20, V o G en la posición 24, 1 en la posición 37, A o S en la posición 40, R o T en la posición 41, S en la posición 42, Q o R en la posición 43, R en la posición 44, E en la posición 46, I o L en la posición 48, V en la posición 68, V o T en la posición 69, I en la posición 70, A en la posición 72, D en la posición 73, K en la posición 74, V o I en la posición 76, Y en la posición 80, W en la posición 83, C o S en la posición 84, S o T en la posición 85, A en la posición 88, E o S en la posición 89, V o M en la posición 93, o Y en la posición 95 de la secuencia de aminoácidos de BAP050-qui-HC, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos del FR en toda la región variable, por ejemplo, se muestra en las Figuras 9A-9B, o la SEQ ID NO: 20 o 22. En una realización, la molécula de anticuerpo incluye una sustitución (por ejemplo, una sustitución de Cys por Ser en la posición 84) en la región 3 del marco de la cadena pesada (VHFW3) (por ejemplo, como se muestra en la Tabla 2).

Alternativamente, o en combinación con las sustituciones de cadena pesada de BAP050-qui-HC descritas en el presente documento, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende un dominio variable de cadena ligera que tiene al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, diez, quince, veinte o más cambios de aminoácidos, por ejemplo, sustituciones o eliminaciones de aminoácidos, de una secuencia de aminoácidos de BAP050-qui-LC, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos mostrada en las Figuras 10A-10B, o la SEQ ID NO: 24 o 26. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende un dominio variable de cadena pesada que tiene uno o más de: E o A en la posición 1, V en la posición 3, L en la posición 4, S en la posición 7, P en la posición 8, A o L o D en la posición 9, T o F en la posición 10, Q en la posición 11, P en la posición 12, V o L en la posición 13, T en la posición 14, V o P en la posición 15, K en la posición 16, Q o E en la posición 17, T o P o K en la posición 18, A en la posición 19, S en la posición 20, L en la posición 21, T en la posición 22, L en la posición 37, G en la posición 41, K o Q en la posición 42, A o S en la posición 43, P en la posición 44, R o Q en la posición 45, L en la posición 46, I en la posición 58, P o D en posición 60, Y en la posición 67, E en la posición 70, F en la posición 71, T en la posición 72, F en la posición 73, N en la posición 76, S o R en la posición 77, I en la posición 78, Q en la posición 79, A o S o P en la posición 80, D en la posición 81, A o F en la posición 83, Y o V en la posición 85, o F en la posición 87 de la secuencia de aminoácidos de BAP050-qui-LC, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos mostrada en las Figuras 10A-10B, o la SEQ ID NO: 24 o 26.

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una, dos, tres o cuatro regiones marco de la cadena pesada (por ejemplo, una secuencia de aminoácidos o nucleótidos de VHFW mostrada en la Tabla 2, o codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 2), o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En una realización, la molécula de anticuerpo incluye una sustitución (por ejemplo, una sustitución de Cys por Ser en la posición 84) en la región 3 del marco de la cadena pesada (VHFW3) (por ejemplo, como se muestra en la Tabla 2).

En otras realizaciones más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una, dos, tres o cuatro regiones marco de la cadena ligera (por ejemplo, una secuencia de aminoácidos de VLFW mostrada en la Tabla 2, o codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en Tabla 2), o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una, dos, tres o cuatro regiones marco de la cadena pesada (por ejemplo, una secuencia de aminoácidos de VHFW mostrada en la Tabla 2, o codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 2), o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma; y una, dos, tres o cuatro regiones marco de la cadena ligera (por ejemplo, una secuencia de aminoácidos de VLFW mostrada en la Tabla 2, o codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 2), o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región 1 del marco de la cadena pesada (VHFW1) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050-Clon- F o BAP050-Clon-G (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 1 del marco de la cadena pesada (VHFW1) de BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13 o BAP050-hum20, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 1 del marco de la cadena pesada (VHFW1) de BAP050-hum16 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 194). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 1 del marco de la cadena pesada (VHFW1) de BAP050-hum17 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 196). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región 1 del marco de la cadena pesada (VHFW1) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región 2 del marco de la cadena pesada (VHFW2) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum13, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 198). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 2 del marco de la cadena pesada (VHFW2) de BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum20, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum20-Ser o BAP050-Clon-I (por ejemplo, la SEQ ID NO: 202). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 2 del marco de la cadena pesada 2 (VHFW2) de BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum14-Ser o BAP050-hum15-Ser (por ejemplo, la SEQ ID No : 206). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 2 del marco de la cadena pesada (VHFW2) de BAP050-hum16 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 208). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región 2 del marco de la cadena pesada (VHFW2) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región 3 del marco de la cadena pesada (VHFW3) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum18, BAP050-hum19 o BAP050-hum20, (por ejemplo la SEQ ID NO: 210). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 3 del marco de la cadena pesada (VHFW3) de BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14- Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050-hum20-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I, o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 212). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 3 del marco de la cadena pesada (VHFW3) de BAP050-hum16 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 217). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 3 del marco de la cadena pesada (VHFW3) de BAP050-hum17 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 219). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región 3 del marco de la cadena pesada (VHFW3) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región 4 del marco de la cadena pesada (VHFW4) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, o BAP050-hum20, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050-hum20-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 221). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región 4 del marco de la cadena pesada (VHFW4) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región 1 del marco de la cadena ligera (VLFW1) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum04, BAP050-hum07, BAP050-hum09, BAP050-hum11, BAP050-hum13, BAP050-hum17, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 1 del marco de la cadena ligera (VLFW1) de BAP050-hum03, BAP050-hum10, BAP050-hum14, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum10-Ser o BAP050-hum14-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 230). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 1 del marco de la cadena ligera (VLFW1) de BAP050-hum05 o BAP050-hum05-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 232). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 1 marco de la cadena ligera (VLFW1) de BAP050-hum06, BAP050-hum20, BAP050-hum06-Ser o BAP050-hum20-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 234). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 1 del marco de la cadena ligera (VLFW1) de BAP050-hum08, BAP050-hum12, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum19, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum12- Ser, BAP050-hum15-Ser o BAP050-hum19-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 236). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 1 del marco de la cadena ligera (VLFW1) de BAP050-hum18 o BAP050-hum18-Ser (por ejemplo, la s Eq ID NO: 238). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región 1 del marco de la cadena ligera (VLFW1) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región 2 del marco de la cadena ligera 2 (VLFW2) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum05, BAP050-hum09, BAP050-hum13, BAP050-hum17, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum17-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 240). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 2 del marco de la cadena ligera (VLFW2) de BAP050-hum03, BAP050-hum06, BAP050-hum08, BAP050-hum10, BAP050-hum12, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 244). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 2 del marco de la cadena ligera (VLFW2) de BAP050-hum04 o BAP050-hum04-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 246). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 2 del marco de la cadena ligera (VLFW2) de BAP050-hum07, BAP050-hum11, BAP050-hum07-Ser o BAP050-hum11-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 248). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región 2 del marco de la cadena ligera (VLFW2) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región 3 del marco de la cadena ligera (VLFW3) de BAP050-hum01, BAP050-hum03, BAP050-hum05, BAP050-hum10, BAP050-hum14, BAP050-hum19, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-Clon-F (por ejemplo, la SEQ ID NO: 252 ). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 3 del marco de la cadena ligera (VLFW3) de BAP050-hum02, BAP050-hum09, BAP050-hum13, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 255). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 3 del marco de la cadena ligera (VLFw 3) de BAP050-hum04 o BAP050-hum04-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 259). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 3 del marco de la cadena ligera (VLFW3) de BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum11, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum11-Ser o BAP050-Clon-I (por ejemplo, la SEQ ID NO: 261). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 3 del marco de la cadena ligera (VLFW3) de BAP050-hum08, BAP050-hum12, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum18, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum15-Ser o BAP050-hum18-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 265). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 3 marco de la cadena ligera (VLFW3) de BAP050-hum17 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 267). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región 3 del marco de la cadena ligera (VLFW3) de BAP050-hum20 o BAP050-hum20-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 269). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región 3 del marco de la cadena ligera (VHLW3) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la región 4 del marco de la cadena ligera (VLFW4) de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18- Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050-hum20-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 271). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región 4 del marco de la cadena ligera (VLFW4) que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum18, BAP050-hum19 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum20 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum13 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum14 o BAP050-hum15 (por ejemplo, la SEQ iD NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 206 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum16 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 194 (VHFW1), la SEQ ID NO: 208 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 217 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum17 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 196 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 219 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050-Clon-F o BAP050-Clon-G (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum20-Ser, BAP050-Clon-H, o BAP050-Clon I (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum13-Ser o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum14-Ser o BAP050-hum15-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 206 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende además la región 4 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 221). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de la cadena pesada que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquier de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tienen una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum01, BAP050-hum01-Ser o BAP050-Clon-F (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226 ( VLFW1), la SEQ ID NO: 240 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum02, BAP050-hum09, BAP050-hum13, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-Clone-G, BAP050-Clon-H o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226 (VLFW1), la SEQ ID NO: 240 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 255 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum03, BAP050-hum10, BAP050-hum14, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum10-Ser o BAP050-hum14-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 230 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum04 o BAP050-hum04-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226 (VLFW1), la SEQ ID NO: 246 (VLFW2), y la SEQ ID NO: 259 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum05 o BAP050-hum05-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 232 (VLFW1), la SEQ ID NO: 240 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum06 o BAP050-hum06-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 234 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 261 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum07, BAP050-hum11, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum11-Ser o BAP050-Clon-I (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226 (VLFW1), la SEQ ID NO: 248 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 261 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum08, BAP050-hum12, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum12-Ser o BAP050-hum15-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 236 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum17 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226 (VLFW1), la SEQ ID NO: 240 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 267 (VLFW3) ). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum18 o BAP050-hum18-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 238 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum19 o BAP050-hum19-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 236 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum20 o BAP050-hum20-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 234 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 269 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende además la región 4 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050- hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum-20, BAP050hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser, BAP050-hum20-Ser, BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 271). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquier de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tienen una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum01 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum01-Ser o BAP050-Clon-F (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2 ) y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum01, BAP050-hum01-Ser o BAP050-Clon-F (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226 (VLFW1), la SEQ ID NO: 240 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum02 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum02-Ser o BAP050-Clon-G (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2 ) y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum02, BAP050-hum02-Ser o BAP050-Clon-G (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226 (VLFW1), la SEQ ID NO: 240 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 255 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum03 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum03-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y la SEQ ID NO : 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum03 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 230 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum04 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum04-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO : 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum04 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226 (VLFW1), la SEQ ID NO: 246 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 259 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum05 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)) o BAP050-hum05-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum05 o BAP050-hum05-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 232 (VLFW1), la SEQ ID NO: 240 (VLFW2), y la SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum06 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum06-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y la SEQ ID NO : 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum06 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 234 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 261 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum07 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum07-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO : 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum07 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226 (VLFW1), la SEQ ID NO: 248 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 261 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum08 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum08-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum08 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 236 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum09 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 202 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o BAP050-hum09-Ser o BAP050-Clon-H (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 212 ( VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum09, BAP050-hum09-Ser o BAP050-Clon-H (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226 (VLFW1), la SEQ ID NO: 240 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 255 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum10 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 202 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum10-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 202 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum10 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 230 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum11 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 202 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o BAP050-hum11-Ser, o BAP050-Clon-I (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum11, BAP050-hum11-Ser o BAP050-Clon-I (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226 (VLFW1), la SEQ ID NO: 248 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 261 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum12 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 202 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)) o BAP050-hum12-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum12 o BAP050-hum12-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 236 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 265 (VLFW3)) . En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum13 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum13-Ser o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum13, BAP050-hum13-Ser o BAP050-Clon-J (por ejemplo, la SEQ ID NO: 226 (VLFW1), la SEQ ID NO: 240 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 255 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum14 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 206 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum14-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 206 (VHFW2), y la SEQ ID NO : 210 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum14 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 230 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum15 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 206 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum15-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 206 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum15 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 236 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum16 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 194 (VHFW1), la SEQ ID NO: 208 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 217 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum16 (por ejemplo, la Se Q ID NO: 236 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum17 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 196 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 219 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum17 (por ejemplo, la Se Q ID NO: 226 (VLFW1), la SEQ ID NO: 240 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 267 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum18 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum18-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum18 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 238 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 265 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum19 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)), o las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum18-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 187 (VHFW1), la SEQ ID NO: 198 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum19 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 236 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 252 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las regiones 1-3 del marco de la cadena pesada de BAP050-hum20 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 202 (VHFW2), y la SEQ ID NO: 210 (VHFW3)) o BAP050-hum20-Ser (por ejemplo, la SEQ ID NO: 190 (VHFW1), la SEQ ID NO: 202 (VHFW2) y la SEQ ID NO: 212 (VHFW3)); y las regiones 1-3 del marco de la cadena ligera de BAP050-hum20 (por ejemplo, la SEQ ID NO: 234 (VLFW1), la SEQ ID NO: 244 (VLFW2) y la SEQ ID NO: 269 (VLFW3)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada y una de la cadena ligera que tiene una secuencia, o codificada por una secuencia, sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende una región del marco de la cadena pesada que tiene una combinación de regiones del marco FW1, FW2 y FW3 como se muestra en las Figuras 4 o 6. En otra realización, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena ligera que tiene una combinación de regiones del marco FW1, FW2 y FW3 como se muestra en las Figuras 4 o 6. En otras realizaciones más, la molécula de anticuerpo comprende una región del marco de la cadena pesada que tiene una combinación de regiones del marco FW1, FW2 y FW3 como se muestra en las Figuras 4 o 6, y una región marco de la cadena ligera que tiene una combinación de regiones del marco FW1, FW2 y FW3 como se muestra en las Figuras 4 o 6.

En una realización, el dominio variable de cadena pesada o ligera, o ambos, de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una secuencia de aminoácidos, que es sustancialmente idéntica a un aminoácido divulgado en el presente documento, por ejemplo, al menos 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% idéntico o más a una región variable de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum011, BAP050-hum012, BAP050-hum013, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1, o codificado por la secuencia de nucleótidos en la Tabla 1; o que difiere al menos en 1o 5 residuos, pero menos de 40, 30, 20 o 10 residuos, de una región variable de un anticuerpo descrito en el presente documento.

En una realización, la región variable de cadena pesada o ligera, o ambas, de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye una secuencia de aminoácidos codificada por una secuencia de ácido nucleico descrita en el presente documento o un ácido nucleico que se hibrida con un secuencia de ácido nucleico descrita en el presente documento (por ejemplo, una secuencia de ácido nucleico específica o una secuencia de ácido nucleico que codifica una secuencia de aminoácidos descrita en el presente documento, por ejemplo, como se muestra en las Tablas 1 y 2) o su complemento, por ejemplo, bajo rigurosidad baja, rigurosidad media, o rigurosidad alta, u otra condición de hibridación descrita en el presente documento.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos, tres o cuatro regiones de unión a antígeno, por ejemplo, regiones variables, que tienen una secuencia de aminoácidos como se expone en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, o que difiere en no más de 1, 2, 5, 10 o 15 residuos de aminoácidos de la secuencias que se muestran en la Tabla 1). En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye un dominio VH y/o VL codificado por un ácido nucleico que tiene una secuencia de nucleótidos como se expone en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 70%, 75%, 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, o que difieren en no más de 3, 6, 15, 30 o 45 nucleótidos de las secuencias mostradas en la Tabla 1).

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena pesada que tiene una secuencia de aminoácidos como se expone en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena ligera que tiene una secuencia de aminoácidos como se expone en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR de regiones variables de cadena pesada y ligera que tienen una secuencia de aminoácidos como se expone en la Tabla 1), o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En una realización, al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR se definen de acuerdo con Kabat, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. En otra realización, al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR se definen de acuerdo con Chothia, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos o tres CDR y/o bucles hipervariables de una región variable de cadena pesada que tiene una secuencia de aminoácidos de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, una anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum-10, BAP050-hum-11, BAP050-hum06-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, BAP050hum (Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clone-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J, como se resume en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena ligera que tiene una secuencia de aminoácidos de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de uno cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum06-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, BAP050hum (Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum1l-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clone-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J, como se resume en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o eliminaciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende las seis c Dr y/o bucles hipervariables descritos en el presente documento, por ejemplo, los descritos en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 tiene una región variable que es idéntica en secuencia, o que difiere en 1, 2, 3 o 4 aminoácidos de una región variable descrita en el presente documento (por ejemplo, una región FR divulgada en el presente documento).

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es un anticuerpo completo o un fragmento del mismo (por ejemplo, un Fab, F(ab')2, Fv o un fragmento Fv de cadena sencilla (scFv)). En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es un anticuerpo monoclonal o un anticuerpo con especificidad única. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 también puede ser una molécula de anticuerpo humanizada, quimérica, de camélido, de tiburón o generada in vitro. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 del mismo es una molécula de anticuerpo humanizado. Las cadenas pesada y ligera de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 pueden ser de longitud completa (por ejemplo, un anticuerpo puede incluir al menos una, y preferiblemente dos, cadenas pesadas completas y al menos una, y preferiblemente dos, cadenas ligeras completas) o pueden incluir un fragmento de unión a antígeno (por ejemplo, un Fab, F(ab')2, Fv, un fragmento Fv de cadena sencilla, un anticuerpo de dominio único, un diacuerpo (dAb), un anticuerpo bivalente o biespecífico o un fragmento del mismo, una variante de dominio único del mismo, o un anticuerpo de camélido).

En otras realizaciones más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 tiene una región constante de cadena pesada (Fc) elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD e IgE; particularmente, elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4, más particularmente, la región constante de cadena pesada de IgG1, IgG2 o IgG4 (por ejemplo, IgG1, IgG2 o IgG4 humanas). En una realización, la región constante de la cadena pesada es IgG1 humana o IgG4 humana. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 tiene una región constante de cadena ligera elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena ligera de kappa o lambda, preferiblemente kappa (por ejemplo, kappa humana). En una realización, la región constante se altera, por ejemplo, se muta, para modificar las propiedades de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (por ejemplo, para aumentar o disminuir uno o más de: unión al receptor Fc, glicosilación del anticuerpo, número de residuos de cisteína, función de la célula efectora o función del complemento). Por ejemplo, la región constante se muta en las posiciones 296 (M por Y), 298 (S por T), 300 (T por E), 477 (H por K) y 478 (N por F) para alterar la unión del receptor Fc (Por ejemplo, las posiciones mutadas corresponden a las posiciones 132 (M por Y), 134 (S por T), 136 (T por E), 313 (H por K) y 314 (N por F) de las SEQ ID NOs: 212 o 214 ; o posiciones 135 (M por Y), 137 (S por T), 139 (T por E), 316 (H por K) y 317 (N por F) de las SEQ ID NOs: 215, 216, 217 o 218). En otra realización, la región constante de la cadena pesada de una IgG4, por ejemplo, una IgG4 humana, está mutada en la posición 228 (por ejemplo, de S por P), por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende una IgG4 humana mutada en la posición 228 (por ejemplo, de S por P), por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3; y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3. En otra realización más, la región constante de cadena pesada de una IgG1, por ejemplo, una IgG1 humana, está mutada en una o más de la posición 297 (por ejemplo, N por A), posición 265 (por ejemplo, D por A), posición 329 (por ejemplo, P por A), posición 234 (por ejemplo, L por A) o posición 235 (por ejemplo, L por A), por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3. En determinadas realizaciones, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 comprenden una IgG1 humana mutada en una o más de las posiciones mencionadas anteriormente, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3; y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3.

En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 está en forma de una molécula de anticuerpo biespecífica o multiespecífica. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífica tiene una primera especificidad de unión por LAG-3 y una segunda especificidad de unión por PD-1, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a LAG-3 y PD-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y TIM-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5). En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y CEACAM-1. En otra realización más, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a LAG-3 y CEACAM-5. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a lAG-3 y PD-L1. En otra realización más, la molécula de anticuerpo biespecífica se une a lAG-3 y PD-L2. Cualquier combinación de las moléculas mencionadas anteriormente se puede preparar en una molécula de anticuerpo multiespecífica, por ejemplo, un anticuerpo triespecífico que incluye una primera especificidad de unión a LAG-3, y una segunda y tercera especificidad de unión a uno o más de: PD-1, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2.

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con una molécula biespecífica que comprende uno o más de: PD-1, TIM-3, c Ea CAM (por ejemplo, CEACAM-1 o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífica usada en combinación se une a CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5) y PD-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífica usada en combinación se une a CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5) y TIM-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico usada en combinación se une a PD-1 y TIM-3.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 está aislada o es recombinante. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es una molécula de anticuerpo humanizada.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 tiene una puntuación de riesgo con base en el análisis del epítopo de células T de menos de 1.200, 1.150, 1.100, 1.050, 1.000, 950, 900, 850 u 800.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 es una molécula de anticuerpo humanizado y tiene una puntuación de riesgo con base en el análisis del epítopo de células T de 800 a 1.200, 850 a 1.150, 900 a 1.100, 950 a 1.050, o una puntuación de riesgo como se describe en el presente documento.

En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 1, la SEQ ID NO: 4 o la SEQ iD NO: 286; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12.

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida de la SEQ ID NO: 1, la SEQ ID NO: 4 o la SEQ iD NO: 286; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15.

En realizaciones de las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente, la VHCDR1 comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 1. En otras realizaciones, la VHCDR1 comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 4. En otras realizaciones más, la secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286.

En las realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente tienen una región variable de cadena pesada que comprende al menos una región marco (FW) que comprende la secuencia de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NOs: 187, 190, 194, 196, 198, 202, 206, 208, 210, 212, 217, 219 o 221, o una secuencia de aminoácidos al menos en un 90% idéntica a la misma, o que no tenga más de dos sustituciones, inserciones o eliminaciones de aminoácidos en comparación con la secuencia de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NOs: 187, 190, 194, 196, 198, 202, 206, 208, 210, 212, 217, 219 o 221.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente tienen una región variable de cadena pesada que comprende al menos una región marco que comprende la secuencia de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NOs: 187, 190, 194, 196, 198, 202, 206, 208., 210, 212, 217, 219 o 221.

En otras realizaciones más, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente tienen una región variable de cadena pesada que comprende al menos dos, tres o cuatro regiones marco que comprenden las secuencias de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NOs: 187, 190, 194, 196, 198, 202, 206, 208, 210, 212, 217, 219 o 221.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una secuencia de aminoácidos de VHFW1 de las SEQ ID NOs: 187, 190, 194 o 196, una secuencia de aminoácidos de VHFW2 de las SEQ ID NOs: 198, 202, 206 o 208, y una secuencia de aminoácidos de VHFW3 de las SEQ ID NOs: 210, 212, 217 o 219 y, opcionalmente, que comprende además una secuencia de aminoácidos de VHFW4 de la SEQ ID NO: 221.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente tienen una región variable de cadena ligera que comprende al menos una región marco que comprende la secuencia de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NOs: 226, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 244, 246, 248, 252, 255, 259, 261, 265, 267, 269 o 271, o una secuencia de aminoácidos al menos 90% idéntica a la misma, o que no tenga más de dos sustituciones, inserciones o eliminaciones de aminoácidos en comparación con la secuencia de aminoácidos de cualquiera de 226, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 244, 246, 248, 252, 255, 259, 261, 265, 267, 269 o 271.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente tienen una región variable de cadena ligera que comprende al menos una región marco que comprende la secuencia de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NOs: 226, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 244, 246, 248, 252, 255, 259, 261,265, 267, 269 o 271.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente tienen una región variable de cadena ligera que comprende al menos dos, tres o cuatro regiones marco que comprenden las secuencias de aminoácidos de cualquiera de las SEQ ID NOs: 226, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 244, 246, 248, 252, 255, 259, 261, 265, 267, 269 o 271.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una secuencia de aminoácidos de VLFW1 de las SEQ ID NOs: 226, 230, 232, 234, 236 o 2385, una secuencia de aminoácidos de VLFW2 de las SEQ ID NOs: 240, 244, 246, o 248, y una secuencia de aminoácidos de VLFW3 de las SEQ ID NOs: 252, 255, 259, 261, 265, 267 o 269 y, opcionalmente, que comprende además una secuencia de aminoácidos de VLFW4 de la SEQ ID NO: 271.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos al menos 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID NOs: 8, 28, 64, 68, 72, 76, 80, 100, 104 o 108.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de las SEQ ID NOs: 8, 28, 64, 68, 72, 76, 80, 100, 104 o 108.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos al menos 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID NOs: 32, 36, 40, 44, 48, 52, 56, 60, 84, 88, 92 o 96.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de las SEQ ID NOs: 32, 36, 40, 44, 48, 52, 56, 60, 84, 88, 92 o 96.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 8.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 18.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 68.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 70.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74.

E n o tra s re a liz a c io n e s , la s m o lé c u la s d e a n t ic u e rp o m e n c io n a d a s a n te r io rm e n te c o m p re n d e n un d o m in io v a r ia b le d e c a d e n a p e s a d a q u e c o m p re n d e la s e c u e n c ia d e a m in o á c id o s d e la S E Q ID N O : 76.

E n o tra s re a liz a c io n e s , las m o lé c u la s d e a n t ic u e rp o m e n c io n a d a s a n te r io rm e n te c o m p re n d e n u n a c a d e n a p e s a d a q u e c o m p re n d e la s e c u e n c ia d e a m in o á c id o s d e la S E Q ID N O : 78.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 80.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 82.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 100.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 102 o la SEQ ID NO: 113.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 104.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 106.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 122.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 108.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 110.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 134.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 32.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 34.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 44.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 46.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 48.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50.

E n o tra s re a liz a c io n e s , la s m o lé c u la s d e a n t ic u e rp o m e n c io n a d a s a n te r io rm e n te c o m p re n d e n un d o m in io v a r ia b le d e c a d e n a lig e ra q u e c o m p re n d e la s e c u e n c ia d e a m in o á c id o s d e la S E Q ID N O : 52.

E n o tra s re a liz a c io n e s , la s m o lé c u la s d e a n t ic u e rp o m e n c io n a d a s a n te r io rm e n te c o m p re n d e n u n a c a d e n a lig e ra q u e c o m p re n d e la s e c u e n c ia d e a m in o á c id o s d e la S E Q ID N O : 54.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 84.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 86.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 88.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 90.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 92.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 94.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 96.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 98.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 32.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 44.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 48.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 52.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56.

E n o tra s re a liz a c io n e s , la s m o lé c u la s d e a n t ic u e rp o m e n c io n a d a s a n te r io rm e n te c o m p re n d e n un d o m in io v a r ia b le d e c a d e n a p e s a d a q u e c o m p re n d e la s e c u e n c ia d e a m in o á c id o s d e la S E Q ID N O : 28 o la S E Q ID N O : 100 ; y un d o m in io v a r ia b le d e c a d e n a lig e ra q u e c o m p re n d e la s e c u e n c ia d e a m in o á c id o s d e la S E Q ID N O : 60.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o la SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o la SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o la SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o la SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 68 o la SEQ ID NO: 108; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72 o la SEQ ID NO: 8; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72 o la SEQ ID NO: 8; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 76 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 80 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 84.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 88.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o la SEQ ID NO: 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 92.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o la SEQ ID NO: 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 96.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 34.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 46.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 54.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 70 o SEQ ID NO: 110; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74 o SEQ ID NO: 18; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74 o SEQ ID NO: 18; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 78 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 82 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 86.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 30 o SEQ ID NO: 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 94.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la s Eq ID NO: 66 o SEQ ID NO: 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 98.

E n o tra s re a liz a c io n e s , las m o lé c u la s d e a n t ic u e rp o m e n c io n a d a s a n te r io rm e n te c o m p re n d e n u n a c a d e n a p e s a d a q u e c o m p re n d e la s e c u e n c ia d e a m in o á c id o s d e la S E Q ID N O : 113 y u n a c a d e n a lig e ra q u e c o m p re n d e la s e c u e n c ia d e a m in o á c id o s d e la S E Q ID N O : 34.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 113 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 122 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 122 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 134 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se eligen entre un Fab, F(ab')2, Fv o un fragmento Fv de cadena sencilla (scFv).

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de cadena pesada seleccionada entre IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de cadena ligera elegida entre las regiones constantes de cadena ligera de kappa o lambda.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de cadena pesada de IgG4 humana con una mutación en la posición 228 de acuerdo con la numeración EU o la posición 108 de la SEQ ID NO: 275 o 277 y una región constante de cadena ligera kappa.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de cadena pesada de IgG4 humana con una mutación de serina por prolina en la posición 228 de acuerdo con la numeración EU o la posición 108 de la SEQ ID NO: 275 o 277 y una región constante de cadena ligera kappa.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de cadena pesada de IgG1 humana con una mutación de asparagina por alanina en la posición 297 de acuerdo con la numeración EU o posición 180 de la SEQ ID NO: 279 y una región constante de cadena ligera kappa.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de la cadena pesada de IgG1 humana con una mutación de aspartato por alanina en la posición 265 de acuerdo con la numeración EU o la posición 148, y una mutación de prolina a alanina en la posición 329 de acuerdo con la numeración EU o la posición 212 de la SEQ ID NO: 280 y una región constante de cadena ligera kappa.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente comprenden una región constante de cadena pesada de IgG1 humana con una mutación de leucina por alanina en la posición 234 de acuerdo con la numeración EU o la posición 117 y la mutación de leucina por alanina en la posición 235 de acuerdo con la numeración EU o la posición 118 de la SEQ ID NO: 281 y una región constante de cadena ligera kappa.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente son capaces de unirse a LAG-3 humana con una constante de disociación (Kd) de menos de aproximadamente 0,2 nM.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a LAG-3 humana con una Kd de menos de aproximadamente 0,2 nM, 0,15 nM, 0,1 nM, 0,05 nM o 0,02 nM, por ejemplo, aproximadamente 0,05 nM a 0,15 nM, por ejemplo, aproximadamente 0,11 nM, por ejemplo, medido mediante un método Biacore.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a LAG-3 de Cynomolgus con una Kd de menos de aproximadamente 0,2 nM, 0,15 nM, 0,1 nM, 0,05 nM o 0,02 nM, por ejemplo, aproximadamente 0,05 nM a 0,15 nM, por ejemplo, medido mediante un método Biacore.

En determinadas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen tanto a LAG-3 humana como a LAG-3 de Cynomolgus con una Kd similar, por ejemplo, en el intervalo nM, por ejemplo, medido mediante un método Biacore. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a una proteína de fusión de LAG-3-Ig humana con una Kd de menos de aproximadamente 0,5 nM, 0,2 nM, 0,1 nM, 0,05 nM, 0,025 nM o 0,01 nM, por ejemplo, medido mediante ELISA.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a células CHO que expresan LAG-3 humana (por ejemplo, células CHO transfectadas con LAG-3 humana) con una Kd de menos de aproximadamente 4 nM, 2,5 nM, 2 nM, 1,5 nM, 1 nM, 0,75 nM, 0,5 nM, 0,4 nM, 0,3 nM, 0,2 nM, 0,1 nM o 0,05 nM, por ejemplo, aproximadamente 2,3, 1,92 nM o aproximadamente 0,2 nM, por ejemplo, medido mediante análisis FACS.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a células T humanas con una Kd de menos de aproximadamente 0,5 nM, 0,4 nM, 0,3 nM, 0,2 nM, 0,1 nM o 0,05 nM, por ejemplo, aproximadamente 0,26 nM, por ejemplo, medido, mediante análisis FACS.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a células que expresan LAG-3 (por ejemplo, células 300.19 que expresan LAG-3 humana) con una Kd de menos de aproximadamente 20 nM, 15 nM, 10 nM, 5 nM, 2 nM, o 1 nM, por ejemplo, aproximadamente 13,6 nM, por ejemplo, medido mediante análisis FACS.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a células que expresan LAG-3 de rhesus (por ejemplo, células transfectadas con LAG-3 de rhesus) con una Kd de menos de aproximadamente 15 nM, 10 nM, 9 nM, 8 nM, 6 nM, 5 nM, 2 nM o 1 nM, por ejemplo, aproximadamente 8,03 nM, por ejemplo, medido mediante análisis FACS.

En determinadas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente no presentan reactividad cruzada con LAG-3 de ratón. En algunas realizaciones, los anticuerpos mencionados anteriormente no presentan reactividad cruzada con LAG-3 de rata. En otras realizaciones, los anticuerpos antes mencionados presentan reactividad cruzada con LAG-3 de rhesus. En algunas realizaciones, los anticuerpos antes mencionados presentan reactividad cruzada con LAG-3 de rata. Por ejemplo, la reactividad cruzada se puede medir mediante un método Biacore o un ensayo de unión usando células que expresan LAG-3 (por ejemplo, células 300.19 que expresan LAG-3 humana).

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a un dominio extracelular similar a Ig de LAG-3 (por ejemplo, LAG-3 humana), por ejemplo, cualquiera de Dominio 1 (D1), Dominio 2 (D2), Dominio 3 (D3) o Dominio 4 (D4). En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a uno o más residuos de aminoácidos en D1. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente no se unen al bucle adicional de D1 ni a un fragmento del mismo (por ejemplo, medido mediante un método Biacore o un método FACS). En algunas realizaciones, los anticuerpos mencionados anteriormente no se unen a D2. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen tanto a D1 como a D2. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a uno o más residuos de aminoácidos en D1 y/o D2 que se unen a una molécula de MHC de clase II. En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente son capaces de reducir la unión de LAG-3 a una molécula del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC), de clase II o una célula que expresa una molécula de MHC de clase II. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente reducen (por ejemplo, bloquean) la unión de LAG-3-Ig a una molécula de MHC de clase II, por ejemplo, en células Raji o células Daudi, con una CI50 de menos de aproximadamente 10 nM, 8 nM, 5 nM, 4 nM, 3 nM, 2 nM, 1 nM o 0,5 nM, por ejemplo, entre aproximadamente 8 nM y aproximadamente 10 nM o entre aproximadamente 2 nM y aproximadamente 3 nM, por ejemplo, aproximadamente 5,5 nM o aproximadamente 2,3 nM.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente son capaces de mejorar una respuesta de células T específicas de antígeno.

En realizaciones, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífica o una molécula de anticuerpo biespecífica. En realizaciones, la molécula de anticuerpo tiene una primera especificidad de unión para LAG-3 y una segunda especificidad de unión para PD-1, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACa M-5), PD-L1 o PD- L2. En realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo, por ejemplo, un medio anticuerpo o un fragmento de unión a antígeno de una mitad de anticuerpo.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente aumentan la expresión de IL-2 de las células activadas por la enterotoxina B estafilocócica (SEB) (por ejemplo, a 25 pg/ml) en al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo, aproximadamente de 2 a 3 veces, en comparación con la expresión de IL-2 cuando se usa un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, medido en un ensayo de activación de células T SEB o un ensayo ex vivo de sangre completa humana.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente aumentan la expresión de IFN-y de las células T estimuladas por anti-CD3 (por ejemplo, a 0,1 pg/ml) en al menos aproximadamente 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 u 8 veces, por ejemplo, aproximadamente 0,9 a 5,1 veces, por ejemplo, aproximadamente 3 veces, en comparación con la expresión de IFN-y cuando se usa un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, de acuerdo a como se mide en un ensayo de actividad de IFN-y.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente aumentan la expresión de IFN-y de las células T activadas por SEB (por ejemplo, a 3 pg/ml) en al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo aproximadamente 1,2 a 2 veces, por ejemplo, aproximadamente 1,6 veces, en comparación con la expresión de iFNY cuando se usa un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, como se mide en un ensayo de actividad de

IFN-y.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente no aumentan la expresión de IL-2 o IFN-y sin activación del receptor de células T (por ejemplo, en ausencia de SEB).

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente aumentan la expresión de IFN-y de las células T activadas con un péptido de CMV en al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo, aproximadamente 1,1 a 1,7 veces, por ejemplo, aproximadamente 1,4 veces, en comparación con la expresión de

IFN-y cuando se usa un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, como se mide en un ensayo de actividad de IFN-y. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente aumentan la proliferación de células T CD8+ activadas con un péptido de CMV en al menos aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo, aproximadamente 1,5 veces, en comparación con la proliferación de células T CD8+ cuando se usa un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, medido por el porcentaje de células T CD8+ que pasaron a través de al menos n (por ejemplo, n = 2 o 4) divisiones celulares.

En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente tienen una Cmáx. entre aproximadamente 50 pg/ml y aproximadamente 400 pg/ml, entre aproximadamente 100 pg/ml y aproximadamente

350 pg/ml, entre aproximadamente 150 pg/ml y aproximadamente 300 pg/ml, o entre aproximadamente 200 pg/ml y aproximadamente 250 pg/ml, por ejemplo, aproximadamente 166 pg/ml, por ejemplo, medido en un animal.

En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente tienen un T1/2 entre aproximadamente 50 horas y aproximadamente 400 horas, entre aproximadamente 100 horas y aproximadamente

350 horas, entre aproximadamente 150 horas y aproximadamente 300 horas, o entre aproximadamente 200 horas y aproximadamente 250 horas, por ejemplo, aproximadamente 231,9 horas, por ejemplo, medido en un animal.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente se unen a LAG-3 con una Kd más lenta que 5 x 10'4, 1 x 10'4, 5 x 10'5 o 1 x 10'5 s-1, por ejemplo, aproximadamente 7 x 10'5 s-1, por ejemplo, medido mediante un método Biacore. En algunas realizaciones, los anticuerpos mencionados anteriormente se unen a LAG-3 con un Ka más rápida que 1 * 104, 5 * 104, 1 * 105, 5 * 105 o 1 * 106 M'1 s-1, por ejemplo, 105 M’1 s-1, por ejemplo, medido mediante un método Biacore.

En otro aspecto, la divulgación proporciona una molécula de ácido nucleico aislada que codifica cualquiera de las moléculas de anticuerpo, vectores y células huésped de los mismos antes mencionados.

En una realización, el ácido nucleico aislado codifica la región variable de la cadena pesada del anticuerpo o la región variable de la cadena ligera, o ambas, de cualquiera de las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente.

En una realización, el ácido nucleico aislado codifica las CDR 1-3 de cadena pesada, en el que dicho ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos de las SEQ ID NOs: 140-144, 151-155, 162-166, 173-177, 184-186 o 287.

En otra realización, el ácido nucleico aislado codifica las CDR 1-3 de cadena ligera, en el que dicho ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos de las SEQ ID NOs: 145-150, 156-161, 167-172 o 178-183.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena pesada, en la que dicha secuencia de nucleótidos es al menos un 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID NOs: 9, 29, 65, 69, 73, 77, 81, 101, 105, 109, 112, 121, 124, 125, 132 o 133.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena pesada, en la que dicha secuencia de nucleótidos comprende cualquiera de las SEQ ID NOs: 9, 29, 65, 69, 73, 77, 81, 101, 105, 109, 112, 121, 124, 125, 132 o 133.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena pesada, en la que dicha secuencia de nucleótidos es al menos un 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID NOs: 19, 31, 67, 71, 75, 79, 83, 103, 107, 111, 114, 123, 126, 127, 135 o 136.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena pesada, en la que dicha secuencia de nucleótidos comprende cualquiera de las SEQ ID NOs:

19, 31, 67, 71, 75, 79, 83, 103, 107, 111, 114, 123, 126, 127, 135 o 136.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena ligera, en la que dicha secuencia de nucleótidos es al menos un 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID NOs: 33, 37, 41,45, 49, 53, 57, 61, 85, 89, 93, 97, 115, 118, 128, 129 o 137.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena ligera, en la que dicha secuencia de nucleótidos comprende cualquiera de

las SEQ ID NOs: 33, 37, 41,45, 49, 53, 57, 61, 85, 89, 93, 97, 115, 118, 128, 129 o 137.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena ligera, en la que dicha secuencia de nucleótidos es al menos un 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID NOs: 35, 39, 43, 47, 51, 55, 59, 63, 87, 91, 95, 99, 117, 120, 130, 131, 138 o 139.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado anteriormente comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena ligera, en la que dicha secuencia de nucleótidos comprende cualquiera de las SEQ ID NOs: 35, 39, 43, 47, 51, 55, 59, 63, 87, 91, 95, 99, 117, 120, 130, 131, 138 o 139.

En determinadas realizaciones, se proporcionan uno o más vectores de expresión y células huésped que comprenden los ácidos nucleicos mencionados anteriormente.

También se proporciona un método para producir una molécula de anticuerpo o un fragmento de la misma, que comprende cultivar la célula huésped como se describe en el presente documento en condiciones adecuadas para la expresión génica.

En un aspecto, la divulgación presenta un método para proporcionar una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento. El método incluye: proporcionar un antígeno de LAG-3 (por ejemplo, un antígeno que comprende al menos una porción de un epítopo de LAG-3); obtener una molécula de anticuerpo que se una específicamente al polipéptido LAG-3; y evaluar si la molécula de anticuerpo se une específicamente al polipéptido LAG-3, o evaluar la eficacia de la molécula de anticuerpo para modular, por ejemplo, inhibir, la actividad de LAG-3. El método puede incluir además administrar la molécula de anticuerpo a un sujeto, por ejemplo, un animal humano o no humano.

En otro aspecto, la divulgación proporciona composiciones, por ejemplo, composiciones farmacéuticas, que incluyen un vehículo, excipiente o estabilizador farmacéuticamente aceptable, y al menos uno de los agentes terapéuticos, por ejemplo, moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 descritas en el presente documento. En una realización, la composición, por ejemplo, la composición farmacéutica, incluye una combinación de la molécula de anticuerpo y uno o más agentes, por ejemplo, un agente terapéutico u otra molécula de anticuerpo, como se describe en el presente documento. En una realización, la molécula de anticuerpo se conjuga con un marcador o un agente terapéutico.

Inhibidores adicionales de LAG-3

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de LAG-3. En algunas realizaciones, el inhibidor de LAG-3 es una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 distinta de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 de la Tabla 1. En ciertas realizaciones, el inhibidor de LAG-3 comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 de la Tabla 1 y una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 distinta de la molécula de anticuerpo de la Tabla 1. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia maligna hematológica .

En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-LAG-3 es BMS-986016. BMS-986016 (también denominado BMS986016; Bristol-Myers Squibb) es un anticuerpo monoclonal que se une a LAG-3. BMS-986016 y otros anticuerpos anti-LAG-3 humanizados se divulgan en los documentos US 2011/0150892, WO2010/019570 y WO2014/008218.

Ejemplos de agentes de unión a CSF-1/1R

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agente de unión a CSF-1/1R. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de próstata, un cáncer de mama o sinovitis villonodular pigmentada (PVNS)). En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de cerebro (por ejemplo, un glioblastoma multiforme), un cáncer de páncreas, un cáncer de ovario o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo).

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R es un inhibidor del factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF).

En otra realización, el agente de unión a CSF-1/1R es un inhibidor de tirosina quinasa de CSF-1R, 4-((2 -(((1R, 2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2005/073224.

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R es un inhibidor de M-CSF, Compuesto A33, o un agente de unión a CSF-1 divulgado en la publicación PCT No. WO 2004/045532 o la Publicación PCT No. WO 2005/068503 que incluye RX1 o 5H4 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo o un fragmento Fab contra M-CSF).

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R, por ejemplo, un inhibidor de M-CSF, Compuesto A33, o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2004/045532 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo o un fragmento Fab contra M-CSF), se administra a una dosis promedio de aproximadamente 10 mg/kg.

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R es un inhibidor de CSF1R o 4-(2-((1R,2R)-2-hidroxicidohexilamino)benzotiazol-6-iloxi)-N-metilpicolinamida. La 4-(2-((1R,2R)-2-hidroxiciclohexilamino)benzotiazol -6-iloxi)-N-metilpicolinamida se divulga como el Ejemplo 157 en la página 117 de la publicación PCT No. WO 2007/121484.

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R es pexidartinib (número de registro CAS 1029044-16-3). El pexidartinib también se conoce como PLX3397 o 5-((5-cloro-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)metil)-N-((6-(trifluorometil) piridin-3-il)metil)piridin-2-amina. El pexidartinib es un inhibidor de la tirosina quinasa del receptor de molécula pequeña (RTK) de KIT, CSF1R y FLT3. FLT3, CSF1R y FLT3 se sobreexpresan o mutan en muchos tipos de células cancerosas y desempeñan funciones importantes en la proliferación y metástasis de células tumorales. PLX3397 puede unirse e inhibir la fosforilación del receptor del factor de células madre (KIT), el receptor del factor 1 estimulante de colonias (CSF1R) y la tirosina quinasa 3 similar a FMS (FLT3), lo que puede resultar en la inhibición de la proliferación de células tumorales y submodulación de macrófagos, osteoclastos y mastocitos implicados en la enfermedad metastásica osteolítica. En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R, por ejemplo, pexidartinib, se usa en combinación con un inhibidor de PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento.

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R es emactuzumab. Emactuzumab también se conoce como RG7155 o RO5509554. Emactuzumab es un mAb IgG1 humanizado dirigido a CSF1R. En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R, por ejemplo, pexidartinib, se usa en combinación con un inhibidor de PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 descrita en el presente documento. En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R es FPA008. FPA008 es un mAb humanizado que inhibe CSF1R. En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R, por ejemplo, FPA008, se usa en combinación con un inhibidor de PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento.

Ejemplos de inhibidores de IL-17

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de interleucina 17 (IL-17). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido, por ejemplo, cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), cáncer de pulmón (por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas) o cáncer de colon.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-17 es secukinumab (números de registro CAS: 875356-43-7 (cadena pesada) y 875356-44-8 (cadena ligera)). El secukinumab también se conoce como AIN457 y COSENTYX®. Secukinumab es un anticuerpo IgG1/K monoclonal humano recombinante que se une específicamente a IL-17A. Se expresa en una línea celular recombinante de ovario de hámster chino (CHO).

El secukinumab se describe, por ejemplo, en los documentos WO 2006/013107, US 7.807.155, US 8.119.131, US 8.617.552 y EP 1776142. La región variable de cadena pesada de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de:

EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYWMNWVRQAPGKGLEWV AAINQDGSE KYYVGSVKGRFTISRADNKNSLYLQMNSLRVEDTAVYYCVRDYYDILTDYYIHYQWYFD LWGRGT (SEQ ID NO: 328) (divulgada como la SEQ ID NO: 8) en el documento WO 2006/013107). La región variable de cadena ligera de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de:

EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPD RFSGSGSGTDFTLTISR-LEPEDFAVYYCQQYGSSPCTFGQGTRLEIKR (SEQ ID NO: 329) (divulgada como la SEQ ID NO: 10 en el documento WO 2006/013107). La CDR1 de cadena pesada de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de NYWMN (SEQ ID NO: 330) (divulgada como la SEQ ID NO: 1 en el documento WO 2006/013107). La CDR2 de cadena pesada de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de AINQDGSEKYYVGSVKG (Se Q ID NO: 331) (divulgada como la SEQ ID NO: 2 en el documento WO 2006/013107). La CDR3 de cadena pesada de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de DYYDILTDYYIHYWYFDL (SEQ ID NO: 332) (divulgada como la SEQ ID NO: 3 en el documento WO 2006/013107). La CDR1 de cadena ligera de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de RASQSVSSSYLA (SEQ ID NO: 333) (divulgada como la SEQ ID NO: 4 en el documento WO 2006/013107). La CDR2 de cadena ligera de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de GASSRAT (SEQ ID NO: 334) (divulgada como la SEQ ID NO: 5 en el documento WO 2006/013107). La CDR3 de cadena ligera de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de QQYGSSPCT (SEQ ID NO: 335) (divulgada como la SEQ ID NO: 6 en el documento WO 2006/013107).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-17 es CJM112. CJM112 también se conoce como XAB4. CJM112 es un anticuerpo monoclonal completamente humano que se dirige a IL-17A.

CJM112, se divulga, por ejemplo, en el documento WO 2014/122613. La cadena pesada de CJM112 tiene la secuencia de aminoácidos de:

EVQLVESGGDLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLEWVANIKQDGSE KYYVDSVKGRFTISRADNKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDRGSLYYWGQGTLVTV SSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQ SSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELL GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREE QYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPP SREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTV DKSRWQQGNVFSCSVM-HEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 336) (divulgada como la SEQ ID NO: 14 en el documento WO 2014/122613). La cadena ligera de CJM112 tiene la secuencia de aminoácidos de:

AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRPSQGINWELAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLEQGVPS RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSD EQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVADNLQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTL SKADYEKHKVY-ACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 337) (divulgada como la SEQ ID NO: 44 en el documento WO 2014/122613).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-17 es ixekizumab (número de registro CAS: 1143503-69-8). Ixekizumab también se conoce como LY2439821. Ixekizumab es un anticuerpo monoclonal IgG4 humanizado que se dirige a IL-17A.

El ixekizumab se describe, por ejemplo, en los documentos WO 2007/070750, US 7.838.638 y US 8.110.191. La región variable de la cadena pesada de ixekizumab tiene la secuencia de aminoácidos de: QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYSFTDYHIHWVR-QAPGQGLEWMGVINPMYGT TDYNQRFKGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARYDYFTGTGVY-WGQGTLV TVSS (SEQ ID NO: 338) (divulgada como la SEQ ID NO: 118 en el documento WO 2007/070750). La región variable de la cadena ligera de ixekizumab tiene la secuencia de aminoácidos de:

DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSSRSLVHSRGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFI GVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHLPFTFGQGTKLEIK (SEQ ID NO: 339) (divulgada como la SEQ ID NO: 241 en el documento WO 2007/070750).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-17 es brodalumab (número de registro CAS: 1174395-19-7). Brodalumab también se conoce como AMG 827 o AM-14. Brodalumab se une al receptor A de interleucina 17 (IL-17RA) y evita que IL-17 active el receptor.

Brodalumab se divulga, por ejemplo, en los documentos WO 2008/054603, US 7.767.206, US 7.786.284, US 7.833.527, US 7.939.070, US 8.435.518, US 8.545.842, US 8.790.648 y US 9.073.999. La CDR1 de cadena pesada de brodalumab tiene la secuencia de aminoácidos de RYGIS (SEQ ID No : 340) (divulgada como la SEQ ID NO: 146 en el documento WO 2008/054603). La CDR2 de cadena pesada de brodalumab tiene la secuencia de aminoácidos de WISTYSGNTNYAQKLQG (SEQ ID NO: 341) (divulgada como la SEQ ID NO: 147 en el documento WO 2008/054603). La CDR3 de cadena pesada de brodalumab tiene la secuencia de aminoácidos de RQLYFDY (SEQ ID NO: 342) (divulgada como la SEQ ID NO: 148 en el documento WO 2008/054603). La CDR1 de cadena ligera de brodalumab tiene la secuencia de aminoácidos de RASQSVSSNLA (SEQ ID NO: 343) (divulgada como la SEQ ID NO: 224 en el documento WO 2008/054603). La CDR2 de cadena pesada de brodalumab tiene la secuencia de aminoácidos de DASTRAT (SEQ ID NO: 344) (divulgada como la SEQ ID NO: 225 en el documento WO 2008/054603). La CDR3 de cadena pesada de brodalumab tiene la secuencia de aminoácidos de QQYDNWPLT (SEQ ID NO: 345) (divulgada como la SEQ ID NO: 226 en el documento WO 2008/054603).

Ejemplos de inhibidores de IL-1p

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de interleucina 1 beta (IL-1p). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, linfoma de Hodgkin), una leucemia (por ejemplo, una leucemia aguda o crónica, o un mieloma múltiple).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-1p es canakinumab. Canakinumab también se conoce como ACZ885 o ILARIS®. Canakinumab es un anticuerpo IgG1/K monoclonal humano que neutraliza la bioactividad de la IL-1p humana.

Canakinumab se divulga, por ejemplo, en los documentos WO 2002/16436, US 7.446.175 y EP 1.313.769. La región variable de cadena pesada de canakinumab tiene la secuencia de aminoácidos de: MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSVYGMNWVRQAPGKGLEWVAIIWYDGD NQYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNGLRAEDTAVYY CARDLRTGPFDYWG QGTLVTVSS (SEQ ID NO: 346) (divulgada como la SEQ ID NO: 1 en el documento US 7.446.175). La región variable de la cadena ligera de canakinumab tiene la secuencia de aminoácidos de: MLpSQLIGFLLLWVPASRGEIVLTQSPDFQSVTP KEKVTITCRASQSIGSSLHWYQQKPD QSPKLLIKYASQSFSGVPSRFSGSGSGSGTDFTLTINSLEAVEDAAAYY-CHQSSSLPFTFGPGT KVDIK (SEQ ID NO: 347) (divulgada como la SEQ ID NO: 2 en el documento US 7.446.175)

Ejemplos de inhibidores de CXCR2

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor del inhibidor del receptor 2 de quimiocina (motivo C-X-C) (CXCR2). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido, por ejemplo, un cáncer de mama, un sarcoma metastásico, un cáncer de páncreas, un melanoma, un carcinoma de células renales (RCC), un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) o un tumor pediátrico (por ejemplo, un rabdomiosarcoma).

En algunas realizaciones, el inhibidor de CXCR2 es danirixina (número de registro CAS: 954126-98-8). La danirixina también se conoce como GSK1325756 o 1-(4-cloro-2-hidroxi-3-piperidin-3-ilsulfonilfenil)-3-(3-fluoro-2-metilfenil)urea. La danirixina se divulga, por ejemplo, en Miller et al. Eur J Drug Metab Pharmacokinet (2014) 39: 173-181; y Miller et al., BMC Pharmacology and Toxicology (2015), 16:18.

En algunas realizaciones, el inhibidor de CXCR2 es reparixina (número de registro CAS: 266359-83-5). La reparixina también se conoce como repertaxina o (2R)-2-[4-(2-metilpropil)fenil]-N-metilsulfonilpropanamida. La reparixina es un inhibidor alostérico no competitivo de CXCR1/2. La reparixina se divulga, por ejemplo, en Zarbock et al. British Journal of Pharmacology (2008), páginas 1-8.

En algunas realizaciones, el inhibidor de CXCR2 es navarixina. La navarixina también se conoce como MK-7123, SCH 527123, PS291822 o 2-hidroxi-N,N-dimetil-3-[[2-[[(1R)-1-(5-metilfuran-2-il)propil]amino]-3,4-dioxociclobuten-1-il] amino]benzamida. La navarixina se divulga, por ejemplo, en Ning tal. Mol Cancer Ther. 2012; 11 (6): 1353-64.

Ejemplos de inhibidores de PI3K-Y, PI3K-8

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato 3-quinasa (PI3K), por ejemplo, fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato 3-quinasa gamma y/o delta (PI3K-y,8). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer de cerebro, un cáncer de vejiga, un cáncer de páncreas, un cáncer de cáncer, un tumor sólido, un cáncer de hígado, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer endocrino, un cáncer de ovario, un melanoma, un cáncer del sistema reproductivo femenino, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un glioblastoma multiforme, un cáncer de cabeza y cuello, o un cáncer de colon), por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica, por ejemplo, leucemia linfocítica crónica (CLL) (por ejemplo, CLL recidivante)), por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, linfoma no Hodgkin (por ejemplo, linfoma folicular (FL) no Hodgkin de células B recidivante o linfoma linfocítico pequeño (SLL) recidivante), o por ejemplo, mieloma múltiple).

En algunas realizaciones, el inhibidor de PI3K es un inhibidor de las isoformas delta y gamma de PI3K. Los ejemplos de inhibidores de PI3K que se pueden usar en combinación se describen, por ejemplo, en los documento WO 2010/036380, WO 2010/006086, WO 09/114870, WO 05/113556, GSK 2126458, GDC-0980, GDC-0941, Sanofi XL147, XL756, XL147, PF-46915032, BKM 120, CAL-101, CAL 263, SF1126, PX-886 y un inhibidor dual de PI3K (por ejemplo, Novartis BEZ235).

En algunas realizaciones, el inhibidor de PI3K- y,6 es idelalisib (número de registro CAS: 870281-82-6). Idelalisib también se conoce como ZYDELIG®, GS-1101, CAL-101 o 5-Fluoro-3-fenil-2-[(1S)-1-(7H-purin-6-ilamino)propil]-4 (3H)-quinazolinona. Idelalisib bloquea P1105, la isoforma delta de PI3K. Idelalisib se divulga, por ejemplo, en Wu et al. Journal of Hematology & Oncology (2013) 6:36.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PI3K-y,5 es dactolisib (Compuesto A4) o 8-(6-Metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (Compuesto A41), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2006/122806.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PI3K-y,5 es buparlisib (Compuesto A6) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/084786.

En una realización, el inhibidor de PI3K-y,5, por ejemplo, buparlisib (Compuesto A6) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/084786, se administra a una dosis de aproximadamente 100 mg (por ejemplo, por día).

Otros ejemplos de inhibidores de PI3K-y,5 que se pueden usar en la combinación incluyen, por ejemplo, pictilisib (GDC-0941), LY294002, pilaralisib (XL147), PI-3065, PI-103, VS-5584 (SB2343), CZC24832, duvelisib (IPI-145, INK1197), TGI00-115, CAY10505, GSK1059615, PF-04691502, AS-605240, voxtalisib (SAR245409, XL765), IC-87114, omipalisib (GSK2126458, GSK458), TG100713, gedatolisib (PF-05212384, PKI-587), PKI-402, análogo de XL147, PIK-90, PIK-293, PIK-294, 3-Metiladenina (3-MA), AS-252424, AS-604850, o apitolisib (GDC-0980, RG7422).

En algunas realizaciones, el inhibidor de PI3K es el Compuesto A8 o un compuesto descrito en la publicación PCT No. WO2010/029082.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PI3K es un inhibidor de pan-PI3K, (4S,5R)-3-(2'-amino-2-morfolino-4' (trifluorometil)-[4,5'-bipirimidin]-6-il)-4-(hidroximetil)-5-metiloxazolidin-2-ona (Compuesto A13) o un compuesto divulgado en la publicación p Ct No. WO2013/124826.

Los ejemplos de inhibidores de PI3K-Y, PI3K-6 incluyen, pero no se limitan a, duvelisib e idelalisib. Idelalisib (también llamado GS-1101 o CAL-101; Gilead) es una molécula pequeña que bloquea la isoforma delta de PI3K. La estructura de idelalisib (5-fluoro-3-fenil-2-[(1S)-1-(7H-purin-6-ilamino)propil]-4(3H)-quinazolinona) se muestra a continuación.

Duvelisib (también llamado IPI-145; Infinity Pharmaceuticals and Abbvie) es una molécula pequeña que bloquea PI3K-6, y. La estructura de duvelisib (8-cloro-2-fenil-3-[(1S)-1-(9H-purin-6-ilamino)etil]-1(2H)-isoquinolinona) se muestra a continuación.

En una realización, el inhibidor es un inhibidor dual de fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3K) y mTOR seleccionado de 2-amino -8-[trans -4-(2- hidroxietoxi) ciclohexil]-6-(6-metoxi-3-piridinil)-4-metil-pirido [2,3-d] pirimidin -7(8H)- ona (PF-04691502); N-[4-[[4-(Dimetilamino)-1-piperidinil]carbonil]fenil]-N-[4-(4,6-di-4-morfolinil-1,3,5-triazin-2-ilo)fenil]urea (PF -05212384, p K|-587); 2-Metil-2-{4-[3-metil-2-oxo-8-(quinolin-3-il)-2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il]fenil} propanonitrilo (BEZ-235); apitolisib (Gd C-0980, RG7422); 2,4-Difluoro-N-{2-(metiloxi)-5-[4-(4-piridazinil)-6-quinolinil]-3-piridinil}bencenosulfonamida (GSK2126458); Ácido maleico de 8-(6-metoxipiridin-3-il)-3-metil-1-(4-(piperazin-1-il)-3-(trifluorometil) fenil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-2(3H)-ona (NVP-BGT226); 3-[4-(4-Morfolinilpirido[3’,2':4,5]furo[3,2-d] pirimidin-2-il]fenol (Pl-103); 5-(9-isopropil-8-metil-2-morfolino-9H-purin-6-il)pirimidin-2-amina (VS-5584, SB2343); o N-[2-[(3,5-dimetoxifenil)amino]quinoxalin-3-il]-4-[(4-metil-3-metoxifenil)carbonil]aminofenilsulfonamida (XL765).

Ejemplos de inhibidores de BAFF-R

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor del receptor del factor de activación de células B (BAFF-R). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica, por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, leucemia linfocítica crónica (CLL), por ejemplo, leucemia linfocítica crónica recidivante o refractaria).

En una realización, el inhibidor de BAFF-R es VAY736. VAY736 es un anticuerpo monoclonal derivado de la biblioteca de anticuerpos combinatorios completamente humanos (HuCAL) que se dirige a BAFF-R. BAFF-R, también conocido como miembro 13C de la superfamilia del receptor del factor de necrosis tumoral, se sobreexpresa en ciertos tipos de células tumorales y enfermedades autoinmunes. VAY736 tiene actividades antiinflamatorias y antineoplásicas. En las células cancerosas, BAFF-R juega un papel clave en la proliferación y supervivencia de las células B. VAY736 se dirige y se une a BAFF-R, que inhibe tanto la interacción BAFF/BAFF-R como la señalización mediada por BAFF-R. Esto puede disminuir el crecimiento celular en las células tumorales que expresan BAFF-R.

VAY736 se divulga, por ejemplo, en el documento US 8.106.163. La CDR1 de cadena pesada de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de GDSVSSNSAAWG (SEQ ID NO: 348) (divulgada como la SEQ ID NO: 3 en el documento US 8.106.163). La CDR2 de cadena pesada de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de RIYYRSKWYNSYAVSVKS (SEQ ID NO: 349) (divulgada como la SEQ ID NO: 10 en el documento US 8.106.163). La CDR3 de cadena pesada de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de YDWVPKIGVFDS (SEQ ID NO: 350) (divulgada como la SEQ ID NO: 17 en el documento US 8.106.163). La CDR1 de cadena ligera de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de RASQFISSSYLS (SEQ ID NO: 351) (divulgada como la SEQ ID NO: 24 en el documento US 8.106.163). La CDR2 de cadena ligera de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de LLIYGSSSRAT (SEQ ID NO: 352) (divulgada como la SEQ ID NO: 31 en el documento US 8.106.163). La CDR3 de cadena ligera de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de QQLYSSPM (SEQ ID NO: 353) (divulgada como la SEQ ID NO: 38 en el documento US 8.106.163). La región variable de cadena pesada de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de: QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWGWIRQSPGRGLEWLGRIYYRSKW YNSYAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARYDWVPKIGVFDSWGQGT LVTVSS (SEQ ID NO: 354), (divulgada como la SEQ ID NO: 52 en el documento US 8.106.163). La región variable de cadena ligera de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de:

DIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQFISSSYLSWYQQKPGQAPRLLIYGSSSRATGVPA

RFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQLYSSPMTFGQGTKVEIKRT(SEQIDNO:355)

(divulgada como la SEQ ID NO: 45 en el documento US 8.106.163). La cadena pesada de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de:

QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWGWIRQSPGRGLEWLGRIYYRSKW YNSYAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARYDWVPKIGVFDSWGQGT LVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFP AVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPA PELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTK PREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQV YTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYS KLTVDKSRWQQGNVF-SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 356) (divulgada como la SEQ ID NO: 75 en el documento US 8.106.163) . La región variable de cadena ligera de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de:

DIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQFISSSYLSWYQQKPGQAPRLLIYGSSSRATGVPA RFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQLYSSPMTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSD EQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVADNLQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTL SKADYEKHKVY-ACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 357) (divulgada como la SEQ ID NO: 71 en el documento US 8.106.163) .

Ejemplos de inhibidores de MALT-1/BTK

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de MALT-1 y/o BTK. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento.

Los ejemplos de inhibidores de MALT-1/BTK incluyen, pero no se limitan a, (S)-1-(6-(2H-1,2,3-triazol-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-3-(2-cloro-7-(1-metoxietil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)urea, (S)-1-(2-cloro-7-(1-metoxietil) pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3-(2-(trifluorometil)piridin-4-il)urea, (S)-1-(2-cloro-7-(1-metoxietil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3-(1-metil-2-oxo-5-(trifluorometil)-1,2-dihidropiridin-3-il)urea, (R)-1-(6-(2H-1,2,3-triazol-2-il)-5-(trifluorometil)piridin -3-il)-3-(2-cloro-7-(1-metoxi-2-metilpropil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)urea, (R)-1-(5-cloro-6-(2H-1,2,3-triazol-2-il) piridin -3-ilo)-3-(2-cloro-7-(1-metoxi-2-metilpropil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)urea, (S)-1-(7-(1-metoxietil)-2-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3-(2-(trifluorometil)piridin-4-il)urea, (S)-1-(2-fluoro-7-(1-metoxietil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3-(2-(trifluorometil)piridin-4-il)urea, (S)-1-(2-cloro-7-(1-metoxietil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3-(5-cianopiridin-3-il)urea.

Los ejemplos de inhibidores de BTK incluyen, pero no se limitan a, ibrutinib (PCI-32765); GDC-0834; RN-486; CGI-560; CGI-1764; HM-71224; CC-292; ONO-4059; CNX-774; o LFM-A13. En una realización, el inhibidor de BTK no reduce ni inhibe la actividad quinasa de la quinasa inducible por interleucina 2 (ITK), por ejemplo, se selecciona de GDC-0834; RN-486; CGI-560; CGI-1764; HM-71224; CC-292; ONO-4059; CNX-774; o LFM-A13.

En una realización, el inhibidor de quinasa es un inhibidor de BTK, por ejemplo, ibrutinib (PCI-32765). La estructura de ibrutinib (1-[(3R)-3-[4-amino-3-(4-fenoxifenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1 -il]piperidin-1-il]prop-2-en-1 -ona) se muestra a continuación.

En otras realizaciones, el inhibidor de BTK es un inhibidor de BTK descrito en la Solicitud Internacional WO/2015/079417. Por ejemplo, en algunas realizaciones, el inhibidor de BTK es un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

en el que,

R1 es hidrógeno, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido por hidroxi;

R2 es hidrógeno o halógeno;

R3 es hidrógeno o halógeno;

R4 es hidrógeno;

R5 es hidrógeno o halógeno;

o R4 y R5 están unidos entre sí y representan un enlace, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH=CH-, -CH=CH-CH2-; -CH2-CH=CH-; o -CH2-CH2-CH2-;

R6 y R7 representan independientemente entre sí H, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido por hidroxilo, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido por halógeno o hidroxi, o halógeno;

R8, R9, R, R', R10 y R11 independientemente entre sí representan H, o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido por alcoxi C1-C6; o dos cualesquiera de R8, R9, R, R', R10 y R11 junto con el átomo de carbono al que están unidos pueden formar un anillo carbocíclico saturado de 3-6 miembros;

R12 es hidrógeno o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido por halógeno o alcoxi C1-C6;

o R12 y cualquiera de R8, R9, R, R', R10 o R11 junto con los átomos a los que están unidos pueden formar un anillo azacíclico de 4, 5, 6 o 7 miembros, cuyo anillo puede estar opcionalmente sustituido por halógeno, ciano, hidroxilo, alquilo C1-C6 o alcoxi C1-C6;

n es 0 o 1; y

R13 es alquenilo C2-C6 opcionalmente sustituido por alquilo C1-C6, alcoxi C1-C6 o N,N-di-alquilamino C1-C6; alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido con alquilo C1-C6 o alcoxi C1-C6; u óxido de alquilenilo C2-C6 opcionalmente sustituido por alquilo C1-C6.

En algunas realizaciones, el inhibidor de BTK de Fórmula I se elige entre: N-(3-(5-((1-Acriloilazetidin-3-il)oxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; (E)-N-(3-(6-Amino-5-((1-(but-2-enoil)azetidin-3-il) oxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-((1-propioloilazetidin-3-il)oxi) pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-((1-(but-2-inoil)azetidin-3-il)oxi) pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(5-((1-Acriloilpiperidin-4-il)oxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-metilacrilamido)etoxi) pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; (E)-N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-metilbut-2-enamido) etoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-metilpropiolamido) etoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; (E)-N-(3-(6-Amino-5-(2-(4-metoxi-N-metilbut -2-enamido)etoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-metilbut-2-inamido)etoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(2-((4-Amino-6-(3-(4-ciclopropil -2-fluorobenzamido)-5-fluoro-2-metilfenil)pirimidin-5-il)oxi)etil)-N-metiloxirane-2-carboxamida; N-(2-((4-Amino-6-(3-(6-ciclopropil-8-fluoro-1-oxoisoquinolin-2(1H)-il)fenil)pirimidin-5-il)oxi)etil)-N-metilacrilamida; N-(3-(5-(2-Acrilamidoetoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-etilacrilamido) etoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-(2-fluoroetil) acrilamido)etoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(5-((1-Acrilamidociclopropil) metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(5-(2-Acrilamidopropoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(6-Amino-5-(2-(but-2-inamido) propoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-metilacrilamido)propoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-metilbut-2-inamido)propoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(3-(N-metilacrilamido)propoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(5-((1-Acriloilpirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(6-Amino-5-((1-(but-2-inoil)pirrolidin-2-il)metoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; (S)-2 -(3-(5-((1-Acriloilpirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-(hidroximetil)fenil)-6-ciclopropil-3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-ona; N-(2-((4-Amino-6-(3-(6-ciclopropil-1-oxo-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-il)-5-fluoro-2-(hidroximetil) fenil)pirimidin-5-il)oxi)etil)-N-metilacrilamida; N-(3-(5-(((2S,4R)-1-Acriloil-4-metoxipirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(((2S,4R)-1-(but-2-inoil)-4-metoxi-pirrolidin-2-il)metoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; 2-(3-(5-(((2S,4R)-1-Acriloil-4-metoxipirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-(hidroximetil)fenil)-6-ciclopropil-3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-ona; N-(3-(5-(((2S,4S)-1-Acriloil-4-metoxipirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(((2S,4S)-1-(but-2-inoil)-4-metoxipirrolidin-2-il)metoxi) pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(5-(((2S,4R)-1-Acriloil-4-fluoropirrolidin-2-il) metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(((2S,4R)-1-(but-2-inoil)-4-fluoropirrolidin-2-il)metoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(5-((1-Acriloilazetidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(6-Amino-5-((1-propioioilazetidin-2-il)metoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; (S)-2-(3-(5-((1-Acriloilazetidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-(hidroximetil)fenil)-6-ddopropil-3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-ona; (R)-N-(3-(5-((1-Acriloilazetidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; (R)-N-(3-(5-((1-Acriloilpiperidin-3-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(5-(((2R,3S)-1-Acriloil-3-metoxipirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil-2-fluorobenzamida; N-(3-(5-(((2S,4R)-1-Acriloil-4-cianopirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil-2-fluorobenzamida; o N-(3-(5-(((2S,4S)-1-Acriloil-4-cianopirrolidin-2-il) metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil-2-fluorobenzamida.

A menos que se indique lo contrario, los términos químicos usados anteriormente para describir el inhibidor de BTK de Fórmula I se usan de acuerdo con sus significados como se establece en la solicitud internacional WO/2015/079417.

Ejemplos de inhibidores de JAK

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de la quinasa Janus (JAK). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de colon, un cáncer de próstata, un cáncer de pulmón, un cáncer de mama o un cáncer de páncreas), por ejemplo, una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide o una leucemia linfocítica), por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, un linfoma no Hodgkin), o por ejemplo, un mieloma múltiple.

En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK es 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4] triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una sal diclorhídrica del mismo, o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/070514.

En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK, por ejemplo, 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b] [1,2,4]triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una sal diclorhídrica del mismo, o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/070514, se administra a una dosis de aproximadamente 400-600 mg (por ejemplo, por día), por ejemplo, aproximadamente 400, 500 o 600 mg, o aproximadamente 400-500 o 500-600 mg.

En alguna realización, el inhibidor de JAK es fosfato de ruxolitinib (también conocido como JAKAFI; Compuesto A18) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/070514.

En una realización, el inhibidor de JAK, por ejemplo, fosfato de ruxolitinib (también conocido como JAKAFI; Compuesto A18) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/070514, se administra a una dosis de aproximadamente 15-25 mg, por ejemplo, dos veces al día. En algunas realizaciones, la dosis es de aproximadamente 15, 20 o 25 mg, o de aproximadamente 15-20 o 20-25 mg.

Ejemplos de inhibidores de CRTH2

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor del receptor quimioatrayente homólogo a la célula T cooperadora 2 (CRTH2). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento.

En algunas realizaciones, el inhibidor de CRTH2 es QAV680 (número de registro CAS: 872365-16-7). QAV680 también se conoce como ácido 2-[2-metil-1-[(4-metilsulfonilfenil)metil]pirrolo[2,3-b]piridin-3-il]acético. QAV680 se divulga, por ejemplo, en Sandham et al., BioorgMed Chem. 2013; 21 (21): 6582-91.

En algunas realizaciones, el inhibidor de CRTH2 es QAW039 (número CAS: 872365-14-5).

Otros inhibidores de CRTH2 que se pueden usar en la combinación incluyen, por ejemplo, AZD1981, ARRY-502, setipiprant (ACT-453859) y ACT-129968.

Ejemplos de inhibidores de PFKFB3

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de 6-fosfofructo-2-quinasa/fructosa-2,6-bifosfatasa 3 (PFKFB3). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un tumor sólido avanzado).

En algunas realizaciones, el inhibidor de PFKFB3 es PFK-158. PFK-158 también se conoce como ACT-PFK-158 o (E)-1-(piridin-4-il)-3-(7-(trifluorometil)quinolin-2-il)-prop-2-en-1-ona. PFK-158 es un derivado de 3-(3-piridinil)-1-[4-piridinil]-2-propen-1-ona (3PO). PFKFB3, que cataliza la conversión de fructosa-6-fosfato en fructosa-2,6-bisfosfato, se expresa y es muy activo en las células cancerosas humanas y desempeña un papel clave en el aumento del flujo glucolítico y la proliferación de las células cancerosas. Los inhibidores de PFKFB3, por ejemplo, PFK-158, pueden unirse e inhibir la actividad de PFKFB3, lo que conduce a la inhibición tanto de la vía glucolítica como de la captación de glucosa por las células cancerosas. Esto evita la producción de macromoléculas y energía que provoca una mayor proliferación celular en las células cancerosas en comparación con la de las células normales y sanas. Privar a las células cancerosas de nutrientes y energía conduce a la inhibición del crecimiento de las células cancerosas.

PFK158 se divulga, por ejemplo, en la página 5 del documento WO 2013/148228.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PFKFB3 tiene la siguiente estructura:

Composiciones farmacéuticas y kits

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona composiciones, por ejemplo, composiciones farmacéuticamente aceptables, que incluyen moléculas de combinación (por ejemplo, moléculas de anticuerpos) descritas en el presente documento, formuladas junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Como se usa en el presente documento, "vehículo farmacéuticamente aceptable" incluye todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersión, agentes isotónicos y retardadores de la absorción y similares que sean fisiológicamente compatibles. El vehículo puede ser adecuado para administración intravenosa, intramuscular, subcutánea, parenteral, rectal, espinal o epidérmica (por ejemplo, mediante inyección o infusión).

Las composiciones de esta divulgación pueden estar en una variedad de formas. Estas incluyen, por ejemplo, formas de dosificación líquidas, semisólidas y sólidas, tales como soluciones líquidas (por ejemplo, soluciones inyectables e infusibles), dispersiones o suspensiones, liposomas y supositorios. La forma preferida depende del modo de administración y aplicación terapéutica previstas. Las composiciones típicas preferidas están en forma de soluciones inyectables o infusibles. El modo de administración preferido es parenteral (por ejemplo, intravenoso, subcutáneo, intraperitoneal, intramuscular). En una realización preferida, el anticuerpo se administra mediante infusión o inyección intravenosa. En otra realización preferida, el anticuerpo se administra mediante inyección intramuscular o subcutánea.

Las frases "administración parenteral" y "administrado por vía parenteral" como se usan en el presente documento significan modos de administración distintos a la administración enteral y tópica, generalmente por inyección, e incluyen, sin limitación, inyección e infusión intravenosa, intramuscular, intraarterial, intratecal, intracapsular, intraorbital, intracardíaca, intradérmica, intraperitoneal, transtraqueal, subcutánea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnoidea, intraespinal, epidural e intraesternal.

Las composiciones terapéuticas normalmente deben ser estériles y estables en las condiciones de fabricación y almacenamiento. La composición se puede formular como una solución, microemulsión, dispersión, liposoma u otra estructura ordenada adecuada para una alta concentración de anticuerpos. Se pueden preparar soluciones inyectables estériles incorporando el compuesto activo (es decir, anticuerpo o porción de anticuerpo) en la cantidad requerida en un disolvente apropiado con uno o una combinación de los ingredientes enumerados anteriormente, según se requiera, seguido de esterilización por filtración. Generalmente, las dispersiones se preparan incorporando el compuesto activo en un vehículo estéril que contiene un medio de dispersión básico y los otros ingredientes requeridos de los enumerados anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos de preparación preferidos son el secado al vacío y la liofilización que produce un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente deseado adicional de una solución previamente esterilizada filtrada del mismo. La fluidez adecuada de una solución se puede mantener, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento tal como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersión y mediante el uso de tensioactivos. La absorción prolongada de composiciones inyectables puede conseguirse incluyendo en la composición un agente que retrase la absorción, por ejemplo, sales de monoestearato y gelatina.

Las moléculas de combinación (por ejemplo, moléculas de anticuerpos) pueden administrarse mediante una variedad de métodos conocidos en la técnica, aunque para muchas aplicaciones terapéuticas, la vía/modo de administración preferido es la inyección o infusión intravenosa. En una realización, la molécula de anticuerpo se administra mediante infusión intravenosa a una velocidad de más de 20 mg/min, por ejemplo, 20-40 mg/min, y preferiblemente mayor o igual a 40 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 35 a 440 mg/m2, preferiblemente de aproximadamente 70 a 310 mg/m2, y más preferiblemente de aproximadamente 110 a 130 mg/m2. En otra realización, la molécula de anticuerpo se administra mediante infusión intravenosa a una velocidad menor a 10 mg/min; preferiblemente menor o igual a 5 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 1 a 100 mg/m2, preferiblemente aproximadamente 5 a 50 mg/m2, aproximadamente 7 a 25 mg/m2 y más preferiblemente, aproximadamente 10 mg/m2. Como apreciará el experto en la técnica, la vía y/o el modo de administración variarán dependiendo de los resultados deseados. En determinadas realizaciones, el compuesto activo se puede preparar con un vehículo que protegerá al compuesto contra una liberación rápida, tal como una formulación de liberación controlada, que incluye implantes, parches transdérmicos y sistemas de administración microencapsulados. Se pueden usar polímeros biodegradables y biocompatibles, tales como acetato de etileno y vinilo, polianhídridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres y ácido poliláctico. Muchos métodos para la preparación de tales formulaciones están patentados o son generalmente conocidos por los expertos en la técnica. Véase, por ejemplo, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.

En determinadas realizaciones, una molécula de anticuerpo se puede administrar por vía oral, por ejemplo, con un diluyente inerte o un vehículo comestible asimilable. El compuesto (y otros ingredientes, si se desea) también pueden incluirse en una cápsula de gelatina de cubierta dura o blanda, comprimirse en tabletas o incorporarse directamente en la dieta del sujeto. Para la administración terapéutica oral, los compuestos pueden incorporarse con excipientes y usarse en forma de comprimidos ingeribles, comprimidos bucales, grageas, cápsulas, elixires, suspensiones, jarabes, obleas y similares. Para administrar un compuesto de la invención mediante una administración distinta a la parenteral, puede ser necesario recubrir el compuesto con, o coadministrar el compuesto con, un material para prevenir su inactivación. Las composiciones terapéuticas también se pueden administrar con dispositivos médicos conocidos en la técnica.

Los regímenes de dosificación se ajustan para proporcionar la respuesta óptima deseada (por ejemplo, una respuesta terapéutica). Por ejemplo, se puede administrar un solo bolo, se pueden administrar varias dosis divididas a lo largo del tiempo o la dosis se puede reducir o aumentar proporcionalmente de acuerdo con lo indicado por las exigencias de la situación terapéutica. Es especialmente ventajoso formular composiciones parenterales en forma de unidad de dosificación para facilitar la administración y uniformidad de la dosificación. La forma de unidad de dosificación, como se usa en el presente documento, se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitarias para los sujetos a tratar; cada unidad contiene una cantidad predeterminada de compuesto activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. La especificación de las formas unitarias de dosificación de los anticuerpos de acuerdo con la invención está dictada y depende directamente de (a) las características únicas del compuesto activo y el efecto terapéutico particular que se desea lograr, y (b) las limitaciones inherentes a la técnica de elaboración de compuestos tal como un compuesto activo para el tratamiento de la sensibilidad en individuos.

Un ejemplo de intervalo, no limitante para una cantidad terapéutica o profilácticamente eficaz de una molécula de anticuerpo es 0,1-30 mg/kg, más preferiblemente 1-25 mg/kg. Un experto en la materia puede determinar las dosis y los regímenes terapéuticos de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3. En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra mediante inyección (por ejemplo, por vía subcutánea o intravenosa) a una dosis de aproximadamente 1 a 40 mg/kg, por ejemplo, 1 a 30 mg/kg, por ejemplo, aproximadamente 5 a 25 mg/kg. aproximadamente 10 a 20 mg/kg, aproximadamente 1 a 5 mg/kg, 1 a 10 mg/kg, 5 a 15 mg/kg, 10 a 20 mg/kg, 15 a 25 mg/kg, o aproximadamente 3 mg/kg. El programa de dosificación puede variar, por ejemplo, una vez a la semana a una vez cada 2, 3 o 4 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 10 a 20 mg/kg cada dos semanas. La molécula de anticuerpo se puede administrar mediante infusión intravenosa a una velocidad de más de 20 mg/min, por ejemplo, 20-40 mg/min, y preferiblemente mayor o igual a 40 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 35 a 440 mg/m2, preferiblemente aproximadamente 70 a 310 mg/m2, y más preferiblemente, aproximadamente 110 a 130 mg/m2. En realizaciones, la velocidad de infusión de aproximadamente 110 a 130 mg/m2 alcanza un nivel de aproximadamente 3 mg/kg. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra (por ejemplo, por vía intravenosa) a una dosis de aproximadamente 3 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 3, 20, 80, 240 u 800 mg. En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra sola a una dosis de aproximadamente 20 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 3, 20, 80, 240 u 800 mg. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 3 a 240 mg, por ejemplo, aproximadamente 3, 20, 80 o 240 mg, en combinación con un segundo agente o modalidad terapéutica, por ejemplo, un segundo agente o modalidad terapéutica descrita en el presente documento. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra cada 2 semanas (por ejemplo, durante las semanas 1, 3, 5, 7) durante cada ciclo de 8 semanas, por ejemplo, hasta 96 semanas.

La molécula de anticuerpo se puede administrar mediante infusión intravenosa a una velocidad de más de 20 mg/min, por ejemplo, 20-40 mg/min, y preferiblemente mayor o igual a 40 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 35 a 440 mg/m2, preferiblemente aproximadamente 70 a 310 mg/m2, y más preferiblemente aproximadamente 110 a 130 mg/m2. En realizaciones, la velocidad de infusión de aproximadamente 110 a 130 mg/m2 alcanza un nivel de aproximadamente 3 mg/kg. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo se administra mediante infusión intravenosa a una velocidad de menos de 10 mg/min, por ejemplo, menor o igual a 5 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 1 a 100 mg/m2, por ejemplo 5 a 50 mg/m2, aproximadamente 7 a 25 mg/m2 y más preferiblemente, aproximadamente 10 mg/m2. En algunas realizaciones, el anticuerpo se infunde durante un período de aproximadamente 30 minutos.

Cabe señalar que los valores de dosificación pueden variar con el tipo y la gravedad de la afección a aliviar. Debe entenderse además que para cualquier sujeto en particular, los regímenes de dosificación específicos deben ajustarse con el tiempo de acuerdo con la necesidad individual y el juicio profesional de la persona que administra o supervisa la administración de las composiciones, y que los intervalos de dosificación establecidos en el presente documento son ejemplos únicamente y no pretenden limitar el alcance o la práctica de la composición reivindicada.

Las composiciones farmacéuticas de la divulgación pueden incluir una "cantidad terapéuticamente eficaz" o una "cantidad profilácticamente eficaz" de un anticuerpo o porción de anticuerpo de la divulgación. Una "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a una cantidad eficaz, en las dosis y durante los períodos de tiempo necesarios, para lograr el resultado terapéutico deseado. Una cantidad terapéuticamente eficaz del anticuerpo modificado o fragmento de anticuerpo puede variar de acuerdo con factores tales como el estado patológico, la edad, el sexo y el peso del individuo, y la capacidad del anticuerpo o la porción de anticuerpo para provocar una respuesta deseada en el individuo. Una cantidad terapéuticamente eficaz es también aquella en la que los efectos terapéuticamente beneficiosos superan cualquier efecto tóxico o perjudicial del anticuerpo modificado o fragmento de anticuerpo. Una "dosis terapéuticamente eficaz" inhibe preferiblemente un parámetro medible, por ejemplo, la tasa de crecimiento tumoral en al menos aproximadamente un 20%, más preferiblemente en al menos aproximadamente un 40%, incluso más preferiblemente en al menos aproximadamente un 60%, y aún más preferiblemente en al menos aproximadamente un 80% en relación con los sujetos no tratados. La capacidad de un compuesto para inhibir un parámetro medible, por ejemplo, cáncer, puede evaluarse en un sistema de modelo animal predictivo de la eficacia en tumores humanos. Alternativamente, esta propiedad de una composición puede evaluarse examinando la capacidad del compuesto para inhibir dicha inhibición in vitro mediante ensayos conocidos por el médico experto.

Una "cantidad profilácticamente eficaz" se refiere a una cantidad eficaz, en las dosis y durante los períodos de tiempo necesarios, para lograr el resultado profiláctico deseado. Normalmente, dado que se usa una dosis profiláctica en sujetos antes o en una etapa más temprana de la enfermedad, la cantidad profilácticamente eficaz será menor que la cantidad terapéuticamente eficaz.

También dentro del alcance de la divulgación se encuentra un kit que comprende una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento. El kit puede incluir uno o más elementos que incluyen: instrucciones de uso; otros reactivos, por ejemplo, una etiqueta, un agente terapéutico o un agente útil para quelación, o acoplamiento, un anticuerpo para un etiqueta o agente terapéutico, o una composición radioprotectora; dispositivos u otros materiales para preparar el anticuerpo para su administración; vehículos farmacéuticamente aceptables; y dispositivos u otros materiales para la administración a un sujeto.

Usos de moléculas de anticuerpos anti-LAG-3

Las combinaciones, por ejemplo, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 divulgadas en el presente documento, tienen utilidades de diagnóstico in vitro e in vivo, así como terapéuticas y profilácticas. Por ejemplo, estas moléculas se pueden administrar a células en cultivo, in vitro o ex vivo, o a un sujeto, por ejemplo, un sujeto humano, por ejemplo, in vivo, para mejorar la inmunidad. En una realización, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 mejoran una respuesta inmune en un sujeto, por ejemplo, mediante el bloqueo de LAG-3 (por ejemplo, mediante el bloqueo de la unión de LAG-3 a una molécula del MHC u otros ligandos).

Por consiguiente, en un aspecto, la divulgación proporciona un método para modificar una respuesta inmune en un sujeto que comprende administrar al sujeto la molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, de manera que se modifique la respuesta inmune en el sujeto. En una realización, la respuesta inmune se mejora, se estimula o se sobrerregula. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 restaura, mejora o estimula una respuesta de células T específicas de antígeno, por ejemplo, interleucina 2 (IL-2) o interferón-gamma (IFN-y), producción en una respuesta de células T específicas de antígeno, en el sujeto. En algunas realizaciones, la respuesta inmune es una respuesta antitumoral. Los métodos y composiciones descritos en el presente documento son adecuados para tratar pacientes humanos que tienen un trastorno que puede tratarse aumentando la respuesta inmune mediada por células T. Por ejemplo, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación, se pueden administrar a un sujeto para tratar, prevenir y/o diagnosticar una variedad de trastornos, tales como cánceres (melanoma o cánceres hepáticos), o un trastorno infeccioso.

Como se usa en el presente documento, el término "sujeto" pretende incluir animales humanos y no humanos. En una realización, el sujeto es un sujeto humano, por ejemplo, un paciente humano que tiene un trastorno o afección caracterizada por un funcionamiento anormal de LAG-3. El término "animales no humanos" de la divulgación incluye mamíferos y no mamíferos, tales como primates no humanos. En una realización, el sujeto es un ser humano. En una realización, el sujeto es un paciente humano que necesita mejorar una respuesta inmune. En una realización, el sujeto tiene o corre el riesgo de tener un trastorno descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer o un trastorno infeccioso como se describe en el presente documento. En determinadas realizaciones, el sujeto está inmunodeprimido o corre el riesgo de estarlo. Por ejemplo, el sujeto está experimentando o ha sido sometido a un tratamiento quimioterapéutico y/o radioterapia. Alternativamente, o en combinación, el sujeto está, o corre el riesgo de estar inmunodeprimido como resultado de una infección. Por ejemplo, los métodos y composiciones descritos en el presente documento pueden mejorar varias actividades inmunes. En una realización, el sujeto tiene un mayor número o actividad de linfocitos T infiltrantes de tumores (TIL). En otra realización, el sujeto tiene mayor expresión o actividad de interferón-gamma (IFN-y). En otra realización más, el sujeto tiene una expresión o actividad de PD-L1 disminuida.

Por consiguiente, en ciertas realizaciones, cualquiera (por ejemplo, uno, dos, tres o todos) de los TIL, IFN-y, CD8 o PD-L1, pueden usarse como biomarcadores para las inmunoterapias anti-LAG-3 descritas en el presente documento.

Usos terapéuticos

El bloqueo de LAG-3 por anticuerpos puede mejorar una respuesta inmune a las células cancerosas en un sujeto. Similar a CD4, LAG-3 interactúa con moléculas del MHC de clase II pero, a diferencia de CD4, LAG-3 no interactúa con la proteína gp120 del virus de inmunodeficiencia humana (Baixeras et al. (1992), J. Exp. Med. 176: 327-337). Los estudios han demostrado la unión directa y específica de LAG-3 al MHC de clase II en la superficie celular (Huard et al. (1996), Eur. J. Immunol. 26: 1180-1186). La interacción LAG-3/MHC de clase II juega un papel en la subregulación de la estimulación dependiente de antígeno de los linfocitos T CD4+ y CD8+. La adición de anticuerpos anti-LAG-3 puede dar como resultado una mayor proliferación de células T, una mayor expresión de antígenos de activación como CD25 y mayores concentraciones de citocinas tales como interferón-gamma e interleucina 4 (Huard et al. (1994), Eur. J. Immunol. 24: 3216-3221). La región intracitoplasmática de LAG-3 también puede interactuar con LAP, una molécula de transducción de señales implicada en la subregulación de la vía de activación de CD3/TCR (Iouzalen et al. (2001), Eur. J. Immunol. 31: 2885-2891) . Además, LAG-3 contribuye a la actividad supresora de las células T reguladoras CD4+CD25+ (Treg). Las células Treg expresan LAG-3 tras la activación y los anticuerpos contra LAG-3 inhiben la supresión por las células Treg inducidas (Huang, C. et al. (2004), Immunity 21: 503-513). LAG-3 también puede regular negativamente la homeostasis de células T mediante células T reguladoras en mecanismos tanto independientes como dependientes de las células T (Workman, C. J. y Vignali, D. A. (2005) J. Immunol. 174: 688-695). Por lo tanto, la inhibición de LAG-3 puede resultar en un aumento de la respuesta inmune.

Por consiguiente, en un aspecto de la divulgación, se proporciona un método para tratar (por ejemplo, reducir o inhibir) un cáncer o tumor en un sujeto. El método comprende administrar al sujeto una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita en el presente documento, por ejemplo, una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación, por ejemplo, con uno o más agentes o procedimientos. En una realización, se puede usar una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 sola para inhibir el crecimiento de tumores cancerosos. Alternativamente, se puede usar un anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con uno o más de: un tratamiento estándar de atención (por ejemplo, para cánceres o trastornos infecciosos), otro anticuerpo, un inmunomodulador (por ejemplo, un activador de una molécula coestimuladora o un inhibidor de una molécula inhibidora); una vacuna, por ejemplo, una vacuna terapéutica contra el cáncer; u otras formas de inmunoterapia celular, como se describe a continuación. En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un modulador de una molécula coestimuladora (por ejemplo, un agonista de una molécula coestimuladora) o un modulador de una molécula inhibidora (por ejemplo, un inhibidor de un inhibidor de puntos de control inmunológico), por ejemplo, como se describe en el presente documento.

En una realización, los métodos son adecuados para el tratamiento del cáncer in vivo. Para lograr una mejora de la inmunidad específica de antígeno, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede administrarse junto con un antígeno de interés. Cuando se administran anticuerpos contra LAG-3 en combinación con uno o más agentes, la combinación se puede administrar en cualquier orden o simultáneamente.

En ciertas realizaciones, se proporciona un método para tratar a un sujeto, por ejemplo, reducir o mejorar, una condición o trastorno hiperproliferativo (por ejemplo, un cáncer), por ejemplo, un tumor sólido, un cáncer hematológico, un tumor de tejido blando o una lesión metastásica. El método incluye administrar al sujeto una o más de las combinaciones descritas en el presente documento.

Como se usa en el presente documento, el término "cáncer" pretende incluir todos los tipos de crecimientos cancerosos o procesos oncogénicos, tejidos metastásicos o células, tejidos u órganos transformados malignamente, independientemente del tipo histopatológico o etapa de invasividad. Los ejemplos de trastornos cancerosos incluyen, pero no se limitan a, tumores sólidos, cánceres hematológicos, tumores de tejidos blandos y lesiones metastásicas. Los ejemplos de tumores sólidos incluyen neoplasias malignas, por ejemplo, sarcomas y carcinomas (incluidos adenocarcinomas y carcinomas de células escamosas), de los diversos sistemas de órganos, tales como aquellos que afectan al hígado, pulmón, mama, tejido linfoide, gastrointestinal (por ejemplo, colon), tracto genitourinario (por ejemplo, células renales, uroteliales), próstata y faringe. Los adenocarcinomas incluyen neoplasias malignas tales como la mayoría de los cánceres de colon, cáncer de recto, carcinoma de células renales, cáncer de hígado, carcinoma de pulmón de células no pequeñas, cáncer de intestino delgado y cáncer de esófago. Los carcinomas de células escamosas incluyen neoplasias malignas tales como aquellas que afectan al pulmón, esófago, piel, región de la cabeza y el cuello, cavidad bucal, ano y cuello uterino. Las lesiones metastásicas de los cánceres antes mencionados también pueden tratarse o prevenirse usando la composición o combinación para uso como se define en las reivindicaciones.

Los ejemplos de otros cánceres cuyo crecimiento puede inhibirse usando las combinaciones divulgadas en el presente documento incluyen cánceres que responden típicamente a la inmunoterapia. Los ejemplos no limitantes de cánceres preferidos para el tratamiento incluyen melanoma (por ejemplo, un melanoma en estadio avanzado (por ejemplo, estadio II-IV) o un melanoma positivo para HLA-A2), cáncer de páncreas (por ejemplo, cáncer de páncreas avanzado), tumores sólidos, cáncer de mama (por ejemplo, carcinoma de mama metastásico, un cáncer de mama que no expresa uno, dos o todos los receptores de estrógeno, receptor de progesterona o Her2/neu, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo) y carcinoma de células renales (por ejemplo, carcinoma de células renales avanzado (por ejemplo, estadio IV o metastásico (MRCC)). Además, las neoplasias malignas refractarias o recurrentes pueden tratarse usando las moléculas de anticuerpo descritas en el presente documento.

Los ejemplos de otros cánceres que pueden tratarse incluyen, por ejemplo, un tumor sólido, por ejemplo, cáncer de próstata (por ejemplo, adenocarcinoma de próstata resistente a hormonas), cáncer de colon, cáncer de pulmón (por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas), cáncer de hueso, cáncer de piel, cáncer de cabeza o cuello (por ejemplo, carcinoma de células escamosas VPH+), melanoma maligno cutáneo o intraocular, cáncer de útero, cáncer de ovario, cáncer de recto, cáncer de la región anal, cáncer de estómago, cáncer de testículo, cáncer de útero, carcinoma de las trompas de Falopio, carcinoma de endometrio, carcinoma de cuello uterino, carcinoma de vagina, carcinoma de vulva, cáncer de células de Merkel, tumores sólidos de la infancia, cáncer de vejiga, cáncer de riñón o de uréter, carcinoma de la pelvis renal, neoplasia del sistema nervioso central (SNC), angiogénesis tumoral, tumor del eje espinal, glioma de tronco encefálico, adenoma pituitario, sarcoma de Kaposi, cáncer epidermoide o cáncer de células escamosas o una neoplasia maligna hematológica, por ejemplo, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cáncer del esófago, cáncer del intestino delgado, cáncer del sistema endocrino, cáncer de la glándula tiroides, cáncer de la glándula paratiroidea, cáncer de la glándula suprarrenal, sarcoma de tejido blando, cáncer de la uretra, cáncer del pene, leucemias crónicas o agudas que incluyen leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica (por ejemplo, leucemia linfocítica crónica recidivante o refractaria), tumores sólidos de la infancia, linfoma linfocítico, mieloma múltiple, síndromes mielodisplásicos, cáncer de la vejiga, cáncer del riñón o uréter, carcinoma de la pelvis renal, neoplasia del sistema nervioso central (SNC), linfoma primario del SNC, angiogénesis tumoral, tumor del eje espinal, glioma del tronco encefálico, adenoma hipofisario, sarcoma de Kaposi, cáncer epidermoide, cáncer de células escamosas, linfoma de células T, cánceres inducidos por el medio ambiente, incluidos los inducidos por amianto (por ejemplo, mesotelioma) y combinaciones de dichos cánceres. El tratamiento de cánceres metastásicos, por ejemplo, cánceres metastásicos que expresan moléculas del MHC de clase II o LAG-3, puede realizarse usando las moléculas de anticuerpo descritas en el presente documento.

Si bien no desea ceñirse a la teoría, en algunas realizaciones, es más probable que un paciente responda al tratamiento con anti-LAG-3, solo o en combinación con moléculas de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1 (opcionalmente en combinación con uno o más agentes como se describe en el presente documento) si el paciente tiene un cáncer que expresa altamente PD-L1, y/o el cáncer está infiltrado por células inmunes antitumorales, por ejemplo, TIL. Las células inmunitarias antitumorales pueden ser positivas para CD8, PD-L1 y/o IFN-y; por lo tanto, los niveles de CD8, PD-L1 y/o IFN-y pueden servir como lectura de los niveles de TIL en el microambiente. En determinadas realizaciones, el microambiente del cáncer se denomina triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y.

Por consiguiente, en ciertos aspectos de la divulgación, esta solicitud proporciona métodos para determinar si una muestra de tumor es positiva para uno o más de PD-L1, CD8 e IFN-y, y si la muestra de tumor es positiva para uno o más, por ejemplo, dos o los tres marcadores, luego administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula de anticuerpo anti-PD-1, opcionalmente en combinación con uno o más de otros inmunomoduladores o agentes anticancerígenos.

En las siguientes indicaciones, una gran fracción de pacientes son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-y: cáncer de pulmón (escamoso); cáncer de pulmón (adenocarcinoma); cáncer de cabeza y cuello; cáncer de estómago; NSCLC; HNSCC; cánceres gástricos (por ejemplo, MSIhi y/o EBV+); CRC (por ejemplo, MSIhi); cáncer de nasofaringe (NPC); cáncer de cuello uterino (por ejemplo, escamoso); cáncer de tiroides, por ejemplo, tiroides papilar; melanoma; cáncer de mama TN; y DLBCL (linfoma difuso de células B grandes). En el cáncer de mama en general y en el cáncer de colon en general, una fracción moderada de pacientes es triple positiva para PD-L1/CD8/IFN-Y. En las siguientes indicaciones, una pequeña fracción de pacientes son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-y: cáncer de mama ER+ y cáncer de páncreas. Estos hallazgos se discuten con más detalle en el Ejemplo 4. Independientemente de si una fracción grande o pequeña de pacientes es triple positiva para estos marcadores, el cribado de los pacientes para estos marcadores permite identificar una fracción de pacientes que tiene una probabilidad especialmente alta de responder favorablemente a la terapia con un anticuerpo LAG-3, solo o en combinación con un anticuerpo PD-1 (por ejemplo, un anticuerpo PD-1 bloqueante), opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 o una molécula de anticuerpo anti-PD-LI) y/o agentes anticancerígenos, por ejemplo, los enumerados en la Tabla 7 y divulgados en las publicaciones enumeradas en la Tabla 7.

En algunas realizaciones, la muestra de cáncer se clasifica como triple positiva para PDL1/CD8/IFN-Y. Esta medición se puede dividir aproximadamente en dos umbrales: si una célula individual se clasifica como positiva y si la muestra en su conjunto se clasifica como positiva. Primero, se puede medir, dentro de una célula individual, el nivel de PD-L1, CD8 y/o IFN-y. En algunas realizaciones, una célula que es positiva para uno o más de estos marcadores es una célula que tiene un nivel más alto del marcador en comparación con una célula de control o un valor de referencia. Por ejemplo, en algunas realizaciones, un nivel alto de PD-L1 en una célula dada es un nivel más alto que el nivel de PD-L1 en un tejido no canceroso correspondiente en el paciente. Como otro ejemplo, en algunas realizaciones, un nivel alto de CD8 o IFN-y en una célula dada es un nivel de esa proteína que se observa típicamente en un TIL. En segundo lugar, también se puede medir el porcentaje de células en la muestra que son positivas para PD-L1, CD8 y/o IFN-y.

(No es necesario que una sola célula exprese los tres marcadores). En algunas realizaciones, una muestra triple positiva es aquella que tiene un alto porcentaje de células, por ejemplo, más alto que un valor de referencia o más alto que una muestra de control, que son positivas para estos marcadores.

En otras realizaciones, se pueden medir los niveles de PD-L1, CD8 y/o IFN-y en general en la muestra. En este caso, un alto nivel de CD8 o IFN-y en la muestra puede ser el nivel de esa proteína que se observa típicamente en un tumor infiltrado con TIL. De manera similar, un nivel alto de PD-L1 puede ser el nivel de esa proteína que se observa típicamente en una muestra de tumor, por ejemplo, un microambiente tumoral.

La identificación de subconjuntos de pacientes que son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y, como se muestra en el Ejemplo 4 en el presente documento, revela ciertas subpoblaciones de pacientes que probablemente respondan especialmente a terapia con anticuerpos PD-1. Por ejemplo, muchas pacientes con cáncer de mama IM-TN (inmunomodulador, triple negativo) son triple positivas para PDL1/CD8/IFN-Y. El cáncer de mama IM-TN se describe, por ejemplo, en Brian D. Lehmann et al., "Identification of human triplenegative breast cancer subtypes and preclinical models for selection of targeted therapies", J Clin Invest. 1 de julio de 2011; 121 (7): 2750-2767. Los cánceres de mama triple negativos son aquellos que no expresan receptor de estrógeno (ER), receptor de progesterona (PR) y Her2/neu. Estos cánceres son difíciles de tratar porque normalmente no responden a los agentes que se dirigen a ER, PR y Her2/neu. Los cánceres de mama triple negativos se pueden subdividir en diferentes clases, una de las cuales es inmunomoduladora. Como se describe en Lehmann et al., el cáncer de mama IM-TN está enriquecido por factores involucrados en los procesos de las células inmunes, por ejemplo, una o más de las señales de las células inmunes (por ejemplo, la vía de TH1/TH2, la vía de las células NK, la vía de señalización del receptor de las células B, la vía De y señalización del receptor de células T), señalización de citocinas (por ejemplo, vía de citocinas, vía de IL-12 y vía de IL-7), procesamiento y presentación de antígeno, señalización a través de vías de transducción de señales inmunitarias centrales (por ejemplo, señalización de NFKB, TNF, y JAK/STAT), genes implicados en la función de las células T, transcripción inmunitaria, respuesta al interferón (IFN) y el procesamiento de antígenos. Por consiguiente, en algunas realizaciones, el cáncer tratado es un cáncer que es, o se determina que es, positivo para uno o más marcadores de cáncer de mama IM-TN, por ejemplo, un factor que promueve una o más de las señales de células inmunitarias (por ejemplo, Vía TH1/TH2, vía de células NK, vía de señalización del receptor de células B, vía de DC y señalización del receptor de células T), señalización de citocinas (por ejemplo, vía de citocinas, vía de IL-12 y vía de IL-7), procesamiento y presentación de antígeno, señalización a través de vías de transducción de señales inmunitarias centrales (por ejemplo, señalización de NFKB, TNF y JAK/STAT), genes implicados en la función de las células T, transcripción inmunitaria, respuesta al interferón (IFN) y procesamiento de antígenos.

Como otro ejemplo, se muestra en el presente documento que un subconjunto de pacientes con cáncer de colon que tienen una MSI alta (inestabilidad de microsatélites) también es triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y. En consecuencia, en algunas realizaciones, un anticuerpo LAG-3, por ejemplo, un anticuerpo LAG-3 como se describe en el presente documento, solo o en combinación con un anticuerpo PD-1, (opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores tales como un anticuerpo TIM-3 o un anticuerpo PD-L1, y uno o más agentes anticancerígenos, por ejemplo, un agente anticancerígeno descrito en la Tabla 7 o en una publicación en la Tabla 7) se administra a un paciente que tiene, o que se identifica que tiene, cáncer de colon con alta MSI, por lo que trata el cáncer. En algunas realizaciones, una célula con MSI alta es una célula que tiene MSI a un nivel más alto que un valor de referencia o una célula de control, por ejemplo, una célula no cancerosa del mismo tipo de tejido que el cáncer.

Como otro ejemplo, se muestra en el presente documento que un subconjunto de pacientes con cáncer gástrico que tienen una MSI alta, y/o que es EBV+, también es triple positivo para PD-L1/CD8/ iFN-y. Por consiguiente, en algunas realizaciones, un anticuerpo LAG-3, por ejemplo, un anticuerpo LAG-3 como se describe en el presente documento, solo o en combinación con un anticuerpo PD-1, (opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores tales como un anticuerpo TIM-3 o un anticuerpo PD-L1, y uno o más agentes anticancerígenos, por ejemplo, un agente anticancerígeno descrito en la Tabla 7 o en una publicación en la Tabla 7) se administra a un paciente que tiene, o que se identifica que tiene, cáncer gástrico con alta MSI y/o EBV+, tratando así el cáncer. En algunas realizaciones, una célula con MSI alta es una célula que tiene MSI a un nivel más alto que un valor de referencia o una célula de control, por ejemplo, una célula no cancerosa del mismo tipo de tejido que el cáncer.

Además, en el presente documento se divulgan métodos para analizar un cáncer para detectar PD-L1 y luego tratar el cáncer con un anticuerpo LAG-3, solo o en combinación con un anticuerpo PD-1. Como se describe en el Ejemplo 5 en el presente documento, una muestra de cáncer se puede analizar para determinar los niveles de proteína PD-L1 o los niveles de ARNm. Una muestra que tiene niveles de PD-L1 (proteína o ARNm) superiores a un valor de referencia o una célula de control (por ejemplo, una célula no cancerosa) puede clasificarse como positiva para PD-L1. Por consiguiente, en algunas realizaciones, un anticuerpo LAG-3, por ejemplo, un anticuerpo LAG-3 como se describe en el presente documento, solo o en combinación con un anticuerpo PD-1, (opcionalmente en combinación con uno o más agentes anticancerígenos) se administra a un paciente que tiene, o que se identifica que tiene, un cáncer que es positivo para PD-L1. El cáncer puede ser, por ejemplo, adenocarcinoma (ACA) de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), carcinoma de células escamosas (SCC) de NSCLC o carcinoma hepatocelular (HCC).

En algunas realizaciones, los métodos en el presente documento implican el uso de un anticuerpo LAG-3, por ejemplo, un anticuerpo LAG-3 como se describe en el presente documento, por ejemplo, en combinación con un anticuerpo PD-1, para tratar un cáncer que está (o está identificado como) positivo para PD-L1. En algunas realizaciones, el cáncer es cáncer colorrectal (por ejemplo, MSI alta), cáncer gástrico (por ejemplo, MSI alta y/o EBV+), NPC, cáncer de cuello uterino, cáncer de mama (por ejemplo, cáncer de mama TN) y cáncer de ovario. En algunas realizaciones, el cáncer es NSCLC, melanoma o HNSCC. En algunas realizaciones, el anticuerpo LAG-3 se administra a una dosis de, por ejemplo, 1, 3, 10 o 20 mg/kg.

Con base, por ejemplo, en el Ejemplo 4 del presente documento, se encontró que ciertos cánceres gástricos que son triple positivos para PDL1/CD8/IFN-Y también son positivos para PIK3CA. Por consiguiente, en algunas realizaciones, un cáncer se puede tratar con un anticuerpo LAG-3, solo o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD1 (opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 o una molécula de anticuerpo anti-PD-LI) y un agente que inhibe PIK3CA. Ejemplos de agentes en esta categoría se describen en Stein r C (septiembre de 2001). "Prospects for phosphoinositide 3-kinase inhibition as a cancer treatment". Endocrine-related Cancer 8 (3): 237-48 y Marone R, Cmiljanovic V, Giese B, Wymann MP (Enero de 2008). "Targeting phosphoinositide 3-kinase: moving towards therapy". Biochimica et Biophysica Acta 1784 (1): 159-85.

Con base, por ejemplo, en el Ejemplo 4 del presente documento, CRC, por ejemplo, un paciente que tiene (o se identifica que tiene) CRC con MSI alta puede ser tratado con un anticuerpo LAG-3, solo o en combinación con un anticuerpo PD-1, opcionalmente en combinación con un agente terapéutico que se dirige a uno o ambos de RNF43 y BRAF. Por ejemplo, estos cánceres pueden tratarse con un anticuerpo LAG-3 y un anticuerpo PD-1, opcionalmente en combinación con uno o más agentes terapéuticos que se dirigen a uno o más de RNF43 y BRAF. En realizaciones, uno o más agentes terapéuticos incluyen un agente anticancerígeno descrito en la Tabla 7 o una publicación listada en la Tabla 7. Los inhibidores de PD-1, por ejemplo, anticuerpos, se describen en el presente documento. El RNF43 se puede inhibir, por ejemplo, con un anticuerpo, molécula pequeña (por ejemplo, 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28)), ARNip o un ligando Rspo o derivado del mismo. Los inhibidores de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib) se describen en el presente documento.

Con base, por ejemplo, en el Ejemplo 4 del presente documento, un paciente que tiene (o se identifica que tiene) un cáncer de pulmón de células escamosas puede ser tratado con una molécula de anticuerpo LAG-3 en combinación con un agente terapéutico que se dirige a PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo PD-1 y, opcionalmente, con uno o más agentes anticancerígenos, por ejemplo, un agente anticancerígeno descrito en la Tabla 7 o en una publicación en la Tabla 7, o un agente terapéutico que se dirige a TIM-3, por ejemplo, un anticuerpo TIM-3.

Con base, por ejemplo, en el Ejemplo 4 del presente documento, un paciente que tiene (o se identifica que tiene) un cáncer de tiroides puede ser tratado con una molécula de anticuerpo LAG-3, sola o en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1, opcionalmente en combinación con un agente terapéutico que se dirige a BRAF y, opcionalmente, en combinación con uno o más inmunomoduladores, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 y una molécula de anticuerpo anti-PD-L1. Los inhibidores de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib) se describen en el presente documento, por ejemplo, en la Tabla 7 y las publicaciones enumeradas en la Tabla 7.

En algunas realizaciones, las terapias en el presente documento pueden usarse para tratar a un paciente que tiene (o se identifica que tiene) un cáncer asociado con una infección, por ejemplo, una infección viral o bacteriana. Los ejemplos de cánceres incluyen cáncer de cuello uterino, cáncer anal, cáncer de células escamosas de cabeza y cuello asociado al HPV, papilomas esofágicos asociados al HPV, linfomas asociados a1HHV6, linfomas asociados al EBV (incluido el linfoma de Burkitt), linfoma MALT gástrico, otros linfomas MALT asociados a infecciones, HCC, sarcoma de Kaposi. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer hematológico que incluye, pero no se limita a, leucemia o linfoma. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 puede usarse para tratar cánceres y neoplasias que incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, leucemias agudas que incluyen pero no se limitan a, por ejemplo, leucemia linfoide aguda de células B ("BALL"), Leucemia linfoide aguda de células T ("TALL"), leucemia linfoide aguda (ALL); una o más leucemias crónicas que incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, leucemia mielógena crónica (CML), leucemia linfocítica crónica (CLL); cánceres hematológicos o afecciones hematológicas adicionales que incluyen, pero no se limita a, por ejemplo, leucemia prolinfocítica de células B, neoplasia de células dendríticas plasmocitoides blásticas, linfoma de Burkitt, linfoma difuso de células B grandes, linfoma folicular, leucemia de células pilosas, linfoma folicular de células pequeñas o células grandes, afecciones linfoproliferativas malignas, linfoma MALT, linfoma de células del manto, linfoma de zona marginal, mieloma múltiple, mielodisplasia y síndrome mielodisplásico, linfoma no Hodgkin, linfoma plasmablástico, neoplasias de células dendríticas plasmocitoides, macroglobulinemia de "Waldenstrom" y "preleucemia" que son una colección diversa de afecciones hematológicas unidas por la producción ineficaz (o displasia) de células sanguíneas mieloides y similares.

En una realización, el cáncer es un melanoma, por ejemplo, un melanoma avanzado. En una realización, el cáncer es un melanoma avanzado o irresecable que no responde a otras terapias. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma con una mutación BRAF (por ejemplo, una mutación BRAF V600). En otras realizaciones más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra después del tratamiento con un anticuerpo anti-CTLA4 (por ejemplo, ipilimumab) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib).

Los métodos y composiciones descritos en el presente documento son útiles para tratar lesiones metastásicas asociadas con los cánceres mencionados anteriormente.

Se divulgan ejemplos de combinaciones y usos no limitantes de las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 en el documento US 2015/0259420 (USSN 14/657,260), titulado "Antibody Molecules to LAG-3 and Uses Thereof'.

En determinadas realizaciones, la combinación incluye una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con un modulador de una molécula coestimuladora o una molécula inhibidora, por ejemplo, un ligando o receptor co inhibidor.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un modulador, por ejemplo, agonista, de una molécula coestimuladora. En una realización, el agonista de la molécula coestimuladora se elige entre un agonista (por ejemplo, un anticuerpo agonista o fusión soluble) del ligando de OX40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278 ), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 o CD83.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con una molécula coestimuladora, por ejemplo, un agonista asociado con una señal positiva que incluye un dominio coestimulador de CD28, CD27, ICOS y GITR.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de una molécula inhibidora (por ejemplo, un inhibidor de una molécula de punto de control inmunológico). Los expertos en la técnica entenderán que el término "puntos de control inmunológico" significa un grupo de moléculas en la superficie celular de las células T CD4 y CD8. Estas moléculas pueden servir eficazmente como "frenos" para submodular o inhibir una respuesta inmune antitumoral. Las moléculas de puntos de control inmunológico incluyen, entre otras, muerte programada 1 (PD-1), antígeno 4 de linfocito T citotóxico (CTLA-4), B7H1, B7H4, OX-40, CD137, CD40 y TIM-3, que inhiben directamente las células inmunitarias, los agentes inmunoterapéuticos que pueden actuar como inhibidores de puntos de control inmunitarios útiles en los métodos de la presente divulgación, incluyen, pero no se limitan a, inhibidores de PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5) y/o TGF beta. La inhibición de una molécula inhibidora puede realizarse mediante inhibición a nivel de ADN, ARN o proteína. En las realizaciones, se puede usar un ácido nucleico inhibidor (por ejemplo, un ARNbc, ARNpi o ARNhp), para inhibir la expresión de una molécula inhibidora. En otras realizaciones, el inhibidor de una señal inhibidora es un polipéptido, por ejemplo, un ligando soluble, o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, que se une a la molécula inhibidora. Los ejemplos de moléculas de anticuerpo TIM-3 incluyen, pero no se limitan a, MBG220, MBG227 y MBG219. Los ejemplos de inhibidores de TIGIT incluyen, pero no se limitan a, 10A7 y 1F4 (Roche).

Otros ejemplos de moduladores incluyen, pero no se limitan a, B7-H5, ENTPD1, ENTPD2, SIGGIR, B7-1, B7-2, VSIG4, TIM-1, CD200, RANKL y P2X7.

En una realización, el inhibidor es un ligando soluble (por ejemplo, un CTLA-4-Ig o un TIM-3-Ig), o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une a PD-L1, PD-L2 o CTLA4. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede administrar en combinación con un anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, ipilimumab. Los ejemplos de anticuerpos anti-CTLA4 incluyen Tremelimumab (anticuerpo monoclonal IgG2 disponible a través de Pfizer, anteriormente conocido como ticilimumab, CP-675,206); e ipilimumab (anticuerpo CTLA-4, también conocido como MDX-010, CAS No. 477202-00-9). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra después del tratamiento, por ejemplo, después del tratamiento de un melanoma, con un anticuerpo anti-CTLA4 (por ejemplo, ipilimumab) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib). En una realización, el anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, ipilimumab, se administra a una dosis de aproximadamente 3 mg/kg. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede administrar en combinación con una dosis de aproximadamente 20 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 20, 80, 240 u 800 mg. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra cada 2 semanas (por ejemplo, durante las semanas 1, 3, 5, 7) durante cada ciclo de 8 semanas, por ejemplo, hasta 96 semanas.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1. Los ejemplos de dosis que pueden usarse incluyen una dosis de molécula de anticuerpo anti-PD-1 de aproximadamente 1 a 10 mg/kg, por ejemplo, 3 mg/kg. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede administrar en combinación con una dosis de aproximadamente 20 a 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 20, 80, 240 u 800 mg. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra cada 2 semanas (por ejemplo, durante las semanas 1, 3, 5, 7) durante cada ciclo de 8 semanas, por ejemplo, hasta 96 semanas.

Las moléculas inmunoinhibidoras, por ejemplo, PD-1 y LAG-3, pueden regular, por ejemplo, sinérgicamente, la función de las células T para promover el escape inmunitario tumoral. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-TIM-3. En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-L1. En otras realizaciones más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-1 y un anticuerpo anti-TIM-3. En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-PD-1 y un anticuerpo anti-PD-LI. En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un anticuerpo anti-TIM-3 y un anticuerpo anti-PD-L1. La combinación de anticuerpos enumerada en el presente documento puede administrarse por separado, por ejemplo, como anticuerpos separados, o enlazarse, por ejemplo, como una molécula de anticuerpo biespecífica o triespecífica. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, un inhibidor de CEACAM-1 y/o CEACAM-5), por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-5, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-5. En una realización, se administra un anticuerpo biespecífico que incluye una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y un anticuerpo anti-PD-1 o anti-LAG-3. En determinadas realizaciones, la combinación de anticuerpos enumerados en el presente documento se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido). La eficacia de las combinaciones mencionadas anteriormente se puede probar en modelos animales conocidos en la técnica. Por ejemplo, los modelos animales para probar el efecto sinérgico de anti-LAG-3 y anti-PD-1 se describe, por ejemplo, en Woo et al. (2012), Cáncer Res. 72 (4): 917-27).

En una realización, el inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5) es una molécula de anticuerpo anti-CEACAM. Sin desear estar ligado a la teoría, CEACAM-1 se ha descrito como un ligando y compañero de TIM-3 (véase, por ejemplo, el documento WO 2014/022332). Se ha detectado un efecto sinérgico in vivo de la combinación de anticuerpos anti-TIM-3 y anti-CEACAM-1 en modelos de cáncer de xenoinjerto (véase, por ejemplo, el documento WO 2014/022332). Se cree que los tumores usan CEACAM-1 o CEACAM-5 para inhibir el sistema inmunológico, como se describe, por ejemplo, en Markel et al. J Immunol. 15 de marzo de 2002; 168 (6): 2803-10; Markel et al., J Immunol.

1 de noviembre de 2006; 177 (9): 6062-71; Markel et al., Inmunología. Febrero de 2009; 126 (2): 186-200; Markel et al., Cancer Immunol Immunother. Febrero de 2010; 59 (2): 215-30; Ortenberg et al., Mol Cancer Ther. Junio de 2012; 11 (6): 1300-10; Stern et al., J Immunol. 1 de junio de 2005; 174 (11): 6692-701; Zheng et al., PloS One 2 de septiembre de 2010; 5 (9). pii: e12529. Por lo tanto, los inhibidores de CEACAM se pueden usar con los otros inmunomoduladores descritos en el presente documento (por ejemplo, inhibidores anti-LAG-3, anti-PD-1 o anti-TIM-3) para mejorar una respuesta inmune contra un cáncer, por ejemplo, melanoma, pulmón cáncer (por ejemplo, NSCLC), cáncer de vejiga, colon u ovario, u otros cánceres como se describen en el presente documento. En una realización, el inhibidor de CEACAM es un anticuerpo anti-CEACAM-1 como se describe en los documentos WO 2010/125571, WO 2013/82366 y WO 2014/022332, por ejemplo, un anticuerpo monoclonal 34B1, 26H7 y 5F4 o una forma recombinante de los mismos, como se describe, por ejemplo, en los documentos US 2004/0047858, US 7.132.255 y WO 99/52552. En otras realizaciones, el anticuerpo anti-CEACAM es una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-1 y/o anti-CEACAM-5 como se describe, por ejemplo, en los documentos WO 2010/125571, WO 2013/054331 y US 2014/0271618.

En algunas realizaciones, las moléculas inhibidoras inmunitarias de LAG-3 y PD-1 (por ejemplo, moléculas de anticuerpos) se administran en combinación, por ejemplo, para tratar el cáncer. En algunas realizaciones, el paciente es un paciente que progresó (por ejemplo, experimentó crecimiento tumoral) durante la terapia con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo como se describe en el presente documento) y/o un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, molécula de anticuerpo). En algunas realizaciones, se continúa la terapia con la molécula de anticuerpo PD-1 y/o la molécula de anticuerpo PDL1, y se agrega a la terapia una molécula inmunoinhibidora de LAG-3 (por ejemplo, anticuerpo). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo el anti-LAG-3 se administra en combinación con una citocina, por ejemplo, interleucina 21, interleucina 2 o interleucina 15. En determinadas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y citocina descritas en el presente documento se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido o melanoma).

Los ejemplos de inmunomoduladores que se pueden usar en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, afutuzumab (disponible a través de Roche®); pegfilgrastim (Neulasta®); lenalidomida (CC-5013, Revlimid®); talidomida (Thalomid®), actimid (CC4047); y citocinas, por ejemplo, IL-21 o IRX-2 (mezcla de citocinas humanas que incluyen interleucina 1, interleucina 2 e interferón y, CAS 951209-71-5, disponible a través de IRX Therapeutics).

Otro ejemplo de tal combinación es un anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con decarbazina para el tratamiento de melanoma. Otro ejemplo de tal combinación es una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con interleucina 2 (IL-2) para el tratamiento de melanoma. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede combinar con IL-21. Sin pretender imponer ninguna teoría, el uso combinado del bloqueo de LAG-3 y la quimioterapia es que se cree que la muerte celular es facilitada por la muerte celular, que es una consecuencia de la acción citotóxica de la mayoría de los compuestos quimioterapéuticos, que puede resultar en un aumento de los niveles de antígeno tumoral en la vía de presentación del antígeno. Otras terapias combinadas que pueden resultar en una sinergia con el bloqueo de LAG-3 a través de la muerte celular son la radiación, la cirugía y la privación hormonal. Cada uno de estos protocolos crea una fuente de antígeno tumoral en el huésped. Los inhibidores de la angiogénesis también se pueden combinar con el bloqueo de LAG-3. La inhibición de la angiogénesis conduce a la muerte de las células tumorales, lo que puede introducir el antígeno tumoral en las vías de presentación del antígeno del huésped.

Las combinaciones que incluyen anticuerpos bloqueantes de LAG-3 también se pueden usar en combinación con anticuerpos biespecíficos. Se pueden usar anticuerpos biespecíficos para apuntar a dos antígenos separados. Por ejemplo, se han utilizado anticuerpos biespecíficos antirreceptor de Fc/antígeno anti-tumoral (por ejemplo, Her-2/neu) para dirigir macrófagos a sitios del tumor. Este direccionamiento puede activar de forma más eficaz respuestas específicas de tumores. El brazo de las células T de estas respuestas aumentaría mediante el uso del bloqueo de LAG-3. Alternativamente, el antígeno puede administrarse directamente a las DC mediante el uso de anticuerpos biespecíficos que se unen al antígeno tumoral y un marcador de superficie celular específico de células dendríticas.

Los tumores evaden la vigilancia inmunitaria del huésped mediante una gran variedad de mecanismos. Muchos de estos mecanismos pueden superarse mediante la inactivación de proteínas que son expresadas por los tumores y que son inmunosupresoras. Estos incluyen, pero no se limita a, TGF-beta (Kehrl, J. et al. (1986), J. Exp. Med. 163: 1037 1050), IL-10 (Howard, M. & O'Garra, A. (1992) Immunology Today 13: 198-200) y ligando Fas (Hahne, M. et al. (1996), Science 274: 1363-1365). Pueden usarse anticuerpos para cada una de estas entidades en combinación con anti-LAG-3 para contrarrestar los efectos del agente inmunosupresor y favorecer las respuestas inmunes tumorales por parte del huésped.

Otros anticuerpos que pueden usarse para activar la respuesta inmune del huésped pueden usarse en las combinaciones de este documento además en combinación con una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento. Estos incluyen moléculas en la superficie de las células dendríticas que activan la función de DC y la presentación de antígeno. Los anticuerpos antic D40 pueden sustituir eficazmente la actividad auxiliar de las células T (Ridge, J. et al. (1998), Nature 393: 474-478) y pueden usarse junto con anticuerpos LAG-3 (Ito, N. et al. (2000), Immunobiology 201 (5) 527-40). Activar anticuerpos contra moléculas coestimuladoras de células T tales como CTLA-4 (por ejemplo, patente de los Estados Unidos No.

5.811.097), OX-40 (Weinberg, A. et al. (2000), Immunol 164: 2160-2169), 4-1BB (Melero, I. et al. (1997), Nature Medicine 3: 682-685 (1997), e ICOS (Hutloff, A. et al. (1999), Nature 397: 262-266) también pueden proporcionar mayores niveles de activación de células T.

En la sección titulada "Terapias de combinación" en el documento US 2015/0259420 (USSN 14/657.260), titulada "Moléculas de anticuerpo contra LAG-3 y usos de las mismas", se describen ejemplos de tratamientos estándar de atención adicionales, y más adelante.

En todos los métodos descritos en el presente documento, el bloqueo de LAG-3 se puede combinar con otras formas de inmunoterapia tales como el tratamiento con citocinas (por ejemplo, Interferones, GM-CSF, G-CSF, IL-2, IL-21) o terapia con anticuerpos biespecíficos, que proporciona una presentación mejorada de antígenos tumorales (véase, por ejemplo, Holliger (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448; Poljak (1994) Structure 2: 1121-1123).

Los métodos para administrar moléculas de combinación (por ejemplo, las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3) son conocidos en la técnica y se describen a continuación. Las dosis adecuadas de las moléculas utilizadas dependerán de la edad y el peso del sujeto y del fármaco particular utilizado. Un experto en la materia puede determinar las dosis y los regímenes terapéuticos de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3. En determinadas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra mediante inyección (por ejemplo, por vía subcutánea o intravenosa) a una dosis de aproximadamente 1 a 30 mg/kg, por ejemplo, de aproximadamente 5 a 25 mg/kg, aproximadamente de 10 a 20 mg/kg, aproximadamente 1 a 5 mg/kg, o aproximadamente 3 mg/kg, o aproximadamente 10 mg/kg, aproximadamente 20 mg/kg, aproximadamente 30 mg/kg o aproximadamente 40 mg/kg. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 1-3 mg/kg, o aproximadamente 3-10 mg/kg. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 0,5-2, 2 4, 2-5, 5-15 o 5-20 mg/kg. El programa de dosificación puede variar, desde por ejemplo, una vez a la semana hasta una vez cada 2, 3 o 4 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra a una dosis de aproximadamente 10 a 20 mg/kg cada dos semanas.

La molécula de anticuerpo se puede usar en formas no conjugadas o conjugada con un segundo agente, por ejemplo, un fármaco citotóxico, radioisótopo o una proteína, por ejemplo, una toxina proteica o una proteína viral. Este método incluye: administrar la molécula de anticuerpo, sola o conjugada con un fármaco citotóxico, a un sujeto que requiera dicho tratamiento. La molécula de anticuerpo puede usarse para administrar una variedad de agentes terapéuticos, por ejemplo, una fracción citotóxica, por ejemplo, un fármaco terapéutico, un radioisótopo, moléculas de origen vegetal, fúngico o bacteriano, o proteínas biológicas (por ejemplo, toxinas proteicas) o partículas (por ejemplo, partículas virales recombinantes, por ejemplo, a través de una proteína de cubierta viral), o mezclas de las mismas.

Terapia de combinación adicional

Las combinaciones divulgadas en el presente documento, por ejemplo, la combinación que comprende agentes bloqueadores de LAG-3, también se pueden combinar con un tratamiento estándar del cáncer, por ejemplo, regímenes quimioterapéuticos. En estos casos, puede ser posible reducir la dosis de reactivo quimioterapéutico administrado (Mokyr, M. et al. (1998), Cancer Research 58: 5301-5304). En ciertas realizaciones, los métodos y composiciones descritos en el presente documento se administran en combinación con una o más de otras moléculas de anticuerpos, quimioterapia, otra terapia contra el cáncer (por ejemplo, terapias contra el cáncer dirigidas o fármacos oncolíticos), agentes citotóxicos, terapias de base inmunitaria (por ejemplo, citocinas), procedimientos quirúrgicos y/o de radiación.

Ejemplos de agentes citotóxicos que pueden administrarse en combinación incluyen agentes antimicrotúbulos, inhibidores de topoisomerasa, antimetabolitos, inhibidores mitóticos, agentes alquilantes, antraciclinas, alcaloides de la vinca, agentes intercalantes, agentes capaces de interferir con una vía de transducción de señales, agentes que promueven la apoptosis, inhibidores del proteosoma y radiación (por ejemplo, irradiación local o de cuerpo entero).

Alternativamente, o en combinación con las combinaciones mencionadas anteriormente, los métodos y composiciones descritos en el presente documento se pueden administrar en combinación con uno o más de: un inmunomodulador (por ejemplo, un activador de una molécula coestimuladora o un inhibidor de una molécula inhibidora); una vacuna, por ejemplo, una vacuna terapéutica contra el cáncer; u otras formas de inmunoterapia celular.

Los ejemplos de combinaciones, por ejemplo, combinaciones que comprenden moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 y tratamiento estándar para el cáncer, se divulgan en el documento US 2015/0259420 (USSN 14/657,260), titulado "Antibody Molecules to LAG-3 and Uses Thereof", incluidos, pero no se limita a, agentes alquilantes, antraciclinas, alcaloides de la vinca, inhibidores del proteosoma e inhibidores de la tirosina quinasa (por ejemplo, un inhibidor del receptor de tirosina quinasa (RTK)).

Los ejemplos de inhibidores de tirosina quinasa incluyen, pero no se limitan a, un inhibidor de la vía del factor de crecimiento epidérmico (EGF) (por ejemplo, un inhibidor del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR)), un inhibidor de la vía del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) (por ejemplo, un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR) (por ejemplo, un inhibidor de Ve Gf R1, un inhibidor de VEGFR-2, un inhibidor de VEGFR-3)), un inhibidor de la vía del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) (por ejemplo un inhibidor del receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFR) (por ejemplo, un inhibidor de PDGFR-p)), un inhibidor de RAF-1, un inhibidor de KIT y un inhibidor de RET. Los inhibidores de la tirosina quinasa seleccionados se eligen entre sunitinib, erlotinib, gefitinib o sorafenib.

En determinadas realizaciones, las combinaciones incluyen inhibidores del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), por ejemplo, un inhibidor de VEGFR como se describe en el presente documento.

En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PI3K, por ejemplo, un inhibidor de PI3K como se describe en el presente documento.

En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de mTOR, por ejemplo, un inhibidor de mTOR como se describe en el presente documento.

En algunas realizaciones, la combinación incluye, por ejemplo, GSK2118436, RG7204, PLX4032, GDC-0879, PLX4720 y tosilato de sorafenib (Bay 43-9006). En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de RAF, por ejemplo, debrafinib o N-{3-[5-(2-aminopirimidin-4-il)-2-terc-butil-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobenceno sulfonamida.

En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de MEK. En algunas realizaciones, el cáncer tratado con la combinación se elige entre un melanoma, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer de ovario, un cáncer de mama, un cáncer de próstata, un cáncer de páncreas, una neoplasia maligna hematológica o un carcinoma de células renales. En determinadas realizaciones, el cáncer incluye una mutación de BRAF (por ejemplo, una mutación V600E de BRAF), un BRAF de tipo silvestre, un KRAS de tipo silvestre o una mutación activadora de KRAS. El cáncer puede estar en una etapa temprana, intermedia o tardía. Se puede usar cualquier inhibidor de MEK en combinación, incluidos, pero no se limita a, ARRY-142886, G02442104 (también conocido como GSK1120212), RDEA436, RDEA119/BAY 869766, AS703026, G00039805 (también conocido como AZD6244 o selumetinib), BIX 02188, BIX 02189, CI-1040 (PD-184352), PD0325901, PD98059, U0126, GDC-0973 (Metanona, [3,4-difluoro-2-[(2-fluoro-4-yodofenil)amino]fenil][3-hidroxi-3-(25)-2-piperidinil-1-azetidinilo]), G-38963, G02443714 (también conocido como AS703206), o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo. Se divulgan ejemplos adicionales de inhibidores de MEK en los documentos WO 2013/019906, WO 03/077914, WO 2005/121142, WO 2007/04415, WO 2008/024725 y WO 2009/085983. En algunas realizaciones, el inhibidor de MEK es trametinib o N-(3- {3-ciclopropil-5-[(2-fluoro-4-yodofenil)amino]-6,8-dimetil-2,4,7-trioxo-3,4,6,7-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-1 (2H)-il}fenil) acetamida.

En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de JAK2, por ejemplo, CEP-701, INCB18424, CP-690550 (tasocitinib).

En algunas realizaciones, la combinación incluye paclitaxel o un agente de paclitaxel, por ejemplo, TAXOL®, paclitaxel unido a proteínas (por ejemplo, ABRAXANE®).

La radioterapia se puede administrar mediante uno de varios métodos, o una combinación de métodos, que incluyen, sin limitación, terapia de haz externo, radioterapia interna, radiación de implante, radiocirugía estereotáctica, radioterapia sistémica, radioterapia y braquiterapia intersticial permanente o temporal.

Las combinaciones divulgadas en el presente documento se pueden administrar en combinación con una o más de las modalidades existentes para tratar cánceres, que incluyen, pero no se limitan a: cirugía; radioterapia (por ejemplo, radioterapia de haz externo que implica radioterapia conformada tridimensional en la que se diseña el campo de radiación, radiación local (por ejemplo, radiación dirigida a un objetivo u órgano preseleccionado) o radiación enfocada). La radiación enfocada se puede seleccionar del grupo que consiste en radiocirugía estereotáctica, radiocirugía estereotáctica fraccionada y radioterapia de intensidad modulada. La radiación enfocada puede tener una fuente de radiación seleccionada del grupo que consiste en un haz de partículas (protón), cobalto-60 (fotón) y un acelerador lineal (rayos X), por ejemplo, como se describe en el documento WO 2012/177624.

En determinadas realizaciones, la combinación incluye un anticuerpo contra un receptor similar a inmunoglobulina de células asesinas (también denominado en el presente documento "anticuerpo anti-KIR"), un anticuerpo pan-KIR, un anticuerpo anti-NKG2D y un anticuerpo anti-MICA. En determinadas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-LAG-3, molécula de anticuerpo anti-PD-1 y anticuerpo anti-KIR, anticuerpo pan-KIR, anticuerpo anti MICA o anticuerpo anti-NKG2D descrita en el presente documento se usa para tratar una cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido, por ejemplo, un tumor sólido avanzado).

En una realización, la combinación incluye una inmunoterapia celular (por ejemplo, Provenge (por ejemplo, Sipuleucel)), y opcionalmente en combinación con ciclofosfamida. En determinadas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-LAG-3, molécula de anticuerpo anti-PD-1, Provenge y/o ciclofosfamida se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento (por ejemplo, un cáncer de próstata, por ejemplo, un cáncer de próstata avanzado).

En otra realización, la combinación incluye una vacuna, por ejemplo, una vacuna de carcinoma renal de células dendríticas (DC-RCC). En ciertas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-LAG-3, molécula de anticuerpo anti-PD-1 y/o la vacuna DC-RCC se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como se describe en el presente documento (por ejemplo, un carcinoma renal, por ejemplo, carcinoma de células renales metastásico (RCC)).

En una realización, se usa la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), en combinación con quimioterapia para tratar un cáncer de pulmón, por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa con la terapia de doblete de platino para tratar el cáncer de pulmón.

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), es utilizado para tratar un cáncer renal, por ejemplo, carcinoma de células renales (RCC) o RCC metastásico. La molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se puede administrar en combinación con uno o más de: una estrategia inmunitaria (por ejemplo, Interleucina 2 o interferón-a), un agente dirigido (por ejemplo, un inhibidor de VEGF tal como un anticuerpo monoclonal contra VEGF); un inhibidor de la tirosina quinasa de VEGf tal como sunitinib, sorafenib, axitinib y pazopanib; un inhibidor de ARNi), o un inhibidor de un mediador secuencia abajo de la señalización de VEGF, por ejemplo, un inhibidor de la diana de rapamicina en mamíferos (mTOR), por ejemplo, everolimus y temsirolimus.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para su uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 descrita en el presente documento, solo o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), descritos en el presente documento para el tratamiento del cáncer de páncreas incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico, por ejemplo, paclitaxel o un agente de paclitaxel (por ejemplo, una formulación de paclitaxel tal como TAXOL, una formulación de paclitaxel de nanopartículas estabilizadas con albúmina (por ejemplo, ABRAXANE) o una formulación de paclitaxel liposomal); gemcitabina (por ejemplo, gemcitabina sola o en combinación con AXP107-11); otros agentes quimioterapéuticos tales como oxaliplatino, 5-fluorouracilo, capecitabina, rubitecano, clorhidrato de epirrubicina, NC-6004, cisplatino, docetaxel (por ejemplo, TAXOTERE), mitomicina C, ifosfamida; interferón; inhibidor de la tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de EGFR (por ejemplo, erlotinib, panitumumab, cetuximab, nimotuzumab); inhibidor del receptor de HER2/neu (por ejemplo, trastuzumab); inhibidor dual de quinasa (por ejemplo, bosutinib, saracatinib, lapatinib, vandetanib); inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, sorafenib, sunitinib, XL184, pazopanib); inhibidor de VEGF (por ejemplo, bevacizumab, AV-951, brivanib); radioinmunoterapia (por ejemplo, XR303); vacuna contra el cáncer (por ejemplo, GVAX, péptido de survivina); inhibidor de COX-2 (por ejemplo, celecoxib); inhibidor del receptor de IGF-1 (por ejemplo, AMG 479, MK-0646); inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus, temsirolimus); inhibidor de IL-6 (por ejemplo, CNTO 328); inhibidor de quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, P276-00, UCN-01); compuesto dirigido al metabolismo energético alterado (AEMD) (por ejemplo, CPI-613); inhibidor de HDAC (por ejemplo, vorinostat); agonista del receptor 2 de TRAIL (TR-2) (por ejemplo, conatumumab); inhibidor de MEK (por ejemplo, AS703026, selumetinib, GSK1120212); inhibidor dual de Raf/MEK quinasa (por ejemplo, R05126766); inhibidor de la señalización Notch (por ejemplo, MK0752); proteína de fusion anticuerpo monoclonal-anticuerpo (por ejemplo, L19IL2); curcumina inhibidor de HSP90 (por ejemplo, tanespimicina, STA-9090); rIL-2; denileucina diftitox; inhibidor de la topoisomerasa 1 (por ejemplo, irinotecano, PEP02); estatina (por ejemplo, simvastatina); inhibidor del factor VIIa (por ejemplo, PCI-27483); inhibidor de AKT (por ejemplo, RX-0201); profármaco activado por hipoxia (por ejemplo, t H-302); clorhidrato de metformina, inhibidor de gamma-secretasa (por ejemplo, R04929097); inhibidor de la ribonucleótido reductasa (por ejemplo, 3-AP); inmunotoxina (por ejemplo, HuC242-DM4); inhibidor de PARP (por ejemplo, KU-0059436, veliparib); inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, CP-675.206, ipilimumab); Terapia con AdV-tk; inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib (Velcade), NPI-0052); tiazolidindiona (por ejemplo, pioglitazona); NPC-1C; inhibidor de Aurora quinasa (por ejemplo, R763/AS703569), inhibidor de CTGF (por ejemplo, FG-3019); siG12D LODER; y radioterapia (por ejemplo, termoterapia, radiación estereotáctica, terapia de protones), cirugía y una combinación de los mismos. En determinadas realizaciones, se puede utilizar una combinación de paclitaxel o un agente de paclitaxel y gemcitabina con las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 descritas en el presente documento.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer de pulmón de células pequeñas incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico, por ejemplo, etopósido, carboplatino, cisplatino, oxaliplatino, irinotecano, topotecano, gemcitabina, SN-38 liposomal, bendamustina, temozolomida, belotecano, NK012, FR901228, flavopiridol); inhibidor de la tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de EGFR (por ejemplo, erlotinib, gefitinib, cetuximab, panitumumab); inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, sorafenib, sunitinib); inhibidor de VEGF (por ejemplo, bevacizumab, vandetanib); vacuna contra el cáncer (por ejemplo, GVAX); inhibidor de Bcl-2 (por ejemplo, oblimersen sódico, ABT-263); inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib (Velcade), NPI-0052), paclitaxel o un agente paclitaxel; docetaxel; inhibidor del receptor de IGF-1 (por ejemplo, Am G 479); inhibidor de HGF/SF (por ejemplo, A m G 102, MK-0646); cloroquina; inhibidor de Aurora quinasa (por ejemplo, MLN8237); radioinmunoterapia (por ejemplo, TF2); inhibidor de HSP90 (por ejemplo, tanespimicina, STA-9090); inhibidor de mTOR (por ejemplo, Everolimus); anticuerpo biespecífico de Ep-CAM-/C d 3 (por ejemplo, MT110); inhibidor de CK-2 (por ejemplo, CX-4945); inhibidor de HDAC (por ejemplo, Belinostat); antagonista de SMO (por ejemplo, BMS 833923); vacuna de péptido contra el cáncer, y radioterapia (por ejemplo, radioterapia de intensidad modulada (IMRT), radioterapia hipofraccionada, radioterapia guiada por hipoxia), cirugía y combinaciones de los mismos.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer de pulmón de células no pequeñas incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico, por ejemplo, vinorelbina, cisplatino, docetaxel, pemetrexed disódico, etopósido, gemcitabina, carboplatino, SN-38 liposomal, TLK286, temozolomida, topotecano, pemetrexed disódico, azacitidina, irinotecano, tegafur-gimeracilo-oteracilo de potasio, sapacitabina); inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de EGFR (por ejemplo, erlotinib, gefitinib, cetuximab, panitumumab, necitumumab, PF-00299804, nimotuzumab, RO5083945), inhibidor de MET (por ejemplo, PF-02341066, ARQ 197), inhibidor de PI3K quinasa (por ejemplo, XL147, GDC-0941), inhibidor dual de Raf/MEK quinasa (por ejemplo, RO5126766), inhibidor dual de PI3K/mTOR quinasa (por ejemplo, XL765), inhibidor de SRC (por ejemplo, dasatinib), inhibidor dual (por ejemplo, BIBW 2992, g Sk 1363089, ZD6474, AZD0530, AG-013736, lapatinib, MEHD7945A, linifanib), inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, sorafenib, sunitinib, pazopanib, AMG 706, XL184, MGCD265, BMS-690514, R935788), inhibidor de VEGF (por ejemplo, endostar, endostatina, bevacizumab, cediranib, BIBF 1120, axitinib, tivozanib, AZD2171), vacuna contra el cáncer (por ejemplo, vacuna liposómica BLP25, GVAX, ADN recombinante y adenovirus que expresan la proteína L523S), inhibidor de Bcl-2 (por ejemplo, oblimersen sódico), inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib, carfilzomib, NPI-0052, MLN9708), paclitaxel o un agente paclitaxel, docetaxel, inhibidor del receptor de IGF-1 (por ejemplo, cixutumumab, MK-0646, OSI 906, CP-751.871, BIIB022), hidroxicloroquina, inhibidor de HSP90 (por ejemplo, tanespimicina, STA-9090, AUY922, XL888), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus, temsirolimus, ridaforolimus), anticuerpo biespecífico de EpCAM/CD3 (por ejemplo, MT110), inhibidor de CK-2 (por ejemplo, CX-4945), inhibidor de HDAC (por ejemplo, MS 275, LBH589, vorinostat, ácido valproico, FR901228), inhibidor de DHFR (por ejemplo, pralatrexato), retinoide (por ejemplo, bexaroteno, tretinoina), conjugado anticuerpo-fármaco (por ejemplo, SGN-15), bisfosfonato (por ejemplo, ácido zoledrónico), vacuna contra el cáncer (por ejemplo, belagenpumatucel-L), heparina de bajo peso molecular (LMWH) (por ejemplo, tinzaparina, enoxaparina), GSK1572932A, melatonina, talactoferrina, dimesna, inhibidor de topoisomerasa (por ejemplo, amrubicina, etopósido, karenitecina), nelfinavir, cilengitida, inhibidor de ErbB3 (por ejemplo, MM-121, U3-1287), inhibidor de survivina (por ejemplo, YM155, LY2181308), mesilato de eribulina, inhibidor de COX-2 (por ejemplo, celecoxib), pegfilgrastim, inhibidor de quinasa 1 similar a Polo (por ejemplo, BI 6727), agonista del receptor 2 de t Ra IL (TR-2) (por ejemplo, CS-1008), conjugado péptido CNGRC (SEQ ID No : 293)-TNF alfa, dicloroacetato (DCA), inhibidor de HGF (por ejemplo, SCH 900105), SAR240550, agonista de PPAR-gamma (por ejemplo, CS-7017), inhibidor de gamma-secretasa (por ejemplo, RO4929097), terapia epigenética (por ejemplo, 5-azacitidina), nitroglicerina, inhibidor de MEK (por ejemplo, AZD6244), inhibidor de quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, UCN-01), colesterol-Fusl, agente antitubulina (por ejemplo, E7389), inhibidor de farnesil-OH-transferasa (por ejemplo, lonafarnib), inmunotoxina (por ejemplo, BB-10901, SS1 (dsFv) PE38)), fondaparinux, agente disruptor vascular (por ejemplo, AVE8062), inhibidor de Pd-L1 ( por ejemplo, m Dx -1105, MDX-1106), beta-glucano, NGR-hTNF, EMD 521873, inhibidor de MEK (por ejemplo, GSK1120212), análogo de epotilona (por ejemplo, ixabepilona), inhibidor del huso de quinesina (por ejemplo, 4SC-205), agente de direccionamiento de los telómeros (por ejemplo, KML-001), inhibidor de la vía P70 (por ejemplo, LY2584702), inhibidor de AKT (por ejemplo, MK-2206), inhibidor de la angiogénesis (por ejemplo, lenalidomida), inhibidor de la señalización Notch (por ejemplo, OMP-21M18), radioterapia, cirugía y combinaciones de los mismos.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para su uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, antiPD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer de ovario incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, paclitaxel o un agente de paclitaxel; docetaxel; carboplatino; gemcitabina; doxorrubicina; topotecano; cisplatino; irinotecano, TLK286, ifosfamida, olaparib, oxaliplatino, melfalán, pemetrexed disódico, SJG-136, ciclofosfamida, etopósido, decitabina); antagonista de la grelina (por ejemplo, AEZS-130), inmunoterapia (por ejemplo, APC8024, oregovomab, OPT-821), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de EGFR (por ejemplo, erlotinib), inhibidor dual (por ejemplo, E7080), inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, AZD0530, JI-101, sorafenib, sunitinib, pazopanib), ON 01910.Na), inhibidor de VEGF (por ejemplo, bevacizumab, BIBF 1120, cediranib, AZD2171), inhibidor de PDGFR (por ejemplo, IMC-3G3), paclitaxel, inhibidor de topoisomerasa, (por ejemplo, karenitecina, irinotecano), inhibidor de h Da C (por ejemplo, valproato, vorinostat), inhibidor del receptor de folato (por ejemplo, farletuzumab), inhibidor de angiopoyetina (por ejemplo, AMG 386), análogo de epotilona (por ejemplo, ixabepilona), inhibidor de proteasoma (por ejemplo, carfilzomib), Inhibidor del receptor de IGF-1 (por ejemplo, OSI 906, AMG 479), inhibidor de PARP (por ejemplo, veliparib, AG014699, iniparib, MK-4827), inhibidor de Aurora quinasa (por ejemplo, MLN8237, ENMD-2076), inhibidor de angiogénesis (por ejemplo, lenalidomida), Inhibidor de DHFR (por ejemplo, pralatrexato), agente radioinmunoterapéutico (por ejemplo, Hu3S193), estatina (por ejemplo, lovastatina), inhibidor de topoisomerasa 1 (por ejemplo, NKTR-102), vacuna contra el cáncer (por ejemplo, vacuna sintética de péptidos largos p53, vacuna OC-DC autóloga), inhibidor de mTOR (por ejemplo, temsirolimus, everolimus), inhibidor de BCR/ABL (por ejemplo, imatinib), antagonista del receptor de ET-A (por ejemplo, ZD4054), agonista del receptor TRAIL 2 (TR-2) (por ejemplo, CS-1008), inhibidor de HGF/SF (por ejemplo, AMG 102), EGEN-001, inhibidor de la quinasa 1 tipo Polo (por ejemplo, BI 6727), inhibidor de gamma-secretasa (por ejemplo, RO4929097), inhibidor de Wee-1 (por ejemplo, MK-1775), agente antitubulina (por ejemplo, vinorelbina, E7389), inmunotoxina (por ejemplo, denileucina diftitox), SB-485232, agente disruptor vascular (por ejemplo, AVE8062), inhibidor de integrina (por ejemplo, EMD 525797), inhibidor del huso de quinesina (por ejemplo, 4SC-205), revlimid, inhibidor de HER2 (por ejemplo, MGAH22), inhibidor de ErrB3 (por ejemplo, MM-121), radioterapia; y combinaciones de los mismos.

En un ejemplo de realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se utiliza para tratar un mieloma, solo o en combinación con uno o más de: quimioterapia u otros agentes anticancerígenos (por ejemplo, análogos de talidomida, por ejemplo, lenalidomida), TCMH (Cook, R. (2008), J Manag Care Pharm.14 (Supl. 7): 19-25), un anticuerpo anti-TIM3 (Hallett, WHD et al. (2011), J of American Society for Blood and Marrow Transplantation 17 (8): 1133-145), células dendríticas pulsadas por antígenos tumorales, fusiones (por ejemplo, electrofusiones) de células tumorales y células dendríticas, o vacunación con idiotipo de inmunoglobulina producido por células plasmáticas malignas (revisado en Yi, Q. (2009) Cancer J. 15 (6): 502-10).

En otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), es utilizada para tratar un cáncer renal, por ejemplo, carcinoma de células renales (RCC) o RCC metastásica. La molécula de anticuerpo anti-PD-1 se puede administrar en combinación con uno o más de: una estrategia inmunitaria (por ejemplo, interleucina 2 o interferón-a), un agente dirigido (por ejemplo, un inhibidor de VEGF tal como un anticuerpo monoclonal contra VEGF, por ejemplo, bevacizumab (Rini, BI et al. (2010), J. Clin. Oncol. 28 (13): 2137-2143)); un inhibidor de tirosina quinasa de v Eg F tal como sunitinib, sorafenib, axitinib y pazopanib (revisado en Pal. S.K. et al. (2014), Clin. Advances in Hematology & Oncology 12 (2): 90-99)); un inhibidor de ARNi o un inhibidor de un mediador secuencia abajo de la señalización de VEGF, por ejemplo, un inhibidor de la diana de rapamicina en mamíferos (mTOR), por ejemplo, everolimus y temsirolimus (Hudes, G. et al. (2007), N. Engl. J. Med. 356 (22): 2271-2281, Motzer, RJ et al., (2008) Lancet 372: 449 456).

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para su uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de la leucemia mielógena crónica (AML) de acuerdo con la divulgación incluye, pero no se limita a, un compuesto quimioterapéutico (por ejemplo, citarabina, hidroxiurea, clofarabina, melfalán, tiotepa, fludarabina, busulfano, etopósido, cordicepina, pentostatina, capecitabina, azacitidina, ciclofosfamida, cladribina, topotecano), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de BCR/ABL (por ejemplo, imatinib, nilotinib), ON 01910.Na, inhibidor dual (por ejemplo, dasatinib, bosutinib), inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, DCC-2036, ponatinib, sorafenib, sunitinib, RGB-286638)), interferón alfa, esteroides, agente apoptótico (por ejemplo, mepesuccinato de omacetaxina), inmunoterapia (por ejemplo, células T tipo Th1 de memoria CD4+ alogénicas/anti-CD3/anti-CD28 unidas a micropartículas, células asesinas autólogas inducidas por citocinas (CIK), AHN-12), agente de direccionamiento CD52 (por ejemplo, alemtuzumab), inhibidor de HSP90 (por ejemplo, tanespimicina, STA-9090, AUY922, XL888), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), antagonista de SMO (por ejemplo, BMS 833923), inhibidor de ribonucleótido reductasa (por ejemplo, 3-AP), inhibidor de JAK-2 (por ejemplo, INCB018424), hidroxicloroquina, retinoide (por ejemplo, fenretinida), inhibidor de quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, UCN-01), inhibidor de HDAC (por ejemplo, belinostat, vorinostat, JNJ-26481585), inhibidor de PARP (por ejemplo, veliparib), antagonista de MDM2 (por ejemplo, RO5045337), inhibidor de la quinasa Aurora B (por ejemplo, TAK-901), radioinmunoterapia (por ejemplo, anticuerpo anti-CD33 marcado con actinio-225 HuM195), inhibidor de erizo (por ejemplo, PF-04449913), inhibidor de STAT3 (por ejemplo, OPB-31121), KB004, vacuna contra el cáncer (por ejemplo, AG858), trasplante de médula ósea, trasplante de células madre, radioterapia y combinaciones de los mismos.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para su uso en combinación con la molécula de anticuerpo antiLAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de la leucemia linfocítica crónica (CLL) incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, fludarabina, ciclofosfamida, doxorrubicina, vincristina, clorambucilo, bendamustina, clorambucilo, busulfano, gemcitabina, melfalán, pentostatina, mitoxantrona, 5-azacitidina, pemetrexed disódico), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, Inhibidor de EGFR (por ejemplo, Erlotinib), inhibidor de BTK (por ejemplo, PCI-32765), inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, MGCD265, RGB-286638), agente de direccionamiento del CD-20 (por ejemplo, rituximab, ofatumumab, RO5072759, LFB-R603), agente de direccionamiento de CD52 (por ejemplo, alemtuzumab), prednisolona, darbepoetina alfa, lenalidomida, inhibidor de Bcl-2 (por ejemplo, ABT-263), inmunoterapia (por ejemplo, células T tipo Th1 de memoria CD4+ alogénicas/anti-CD3/anti-CD28 unidas a micropartículas, células asesinas autólogas inducidas por citocinas (CIK)), inhibidor de HDAC (por ejemplo, vorinostat, ácido valproico, LBH589, JNJ-26481585, AR-42), inhibidor de X iAp (por ejemplo, a Eg 35156), agente de direccionamiento de CD-74 (por ejemplo, milatuzumab), inhibidor mTOR (por ejemplo, everolimus), AT-101, inmunotoxina (por ejemplo, c AT-8015, anti-Tac (Fv)-PE38 (LMB-2)), agente de direccionamiento de CD37 (por ejemplo, TRU-016), radioinmunoterapia (por ejemplo, 131-tositumomab), hidroxicloroquina, perifosina, inhibidor de SRC (por ejemplo, dasatinib), talidomida, inhibidor de PI3K delta (por ejemplo, CAL-101), retinoide (por ejemplo, fenretinida), antagonista de MDM2 (por ejemplo, RO5045337), plerixafor, inhibidor de Aurora quinasa ( por ejemplo, MLN8237, TAK-901), inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib), agente de direccionamiento de CD-19 (por ejemplo, MEDI-551, MOR208), inhibidor de MEK (por ejemplo, ABT-348), inhibidor de JAK-2 (por ejemplo, INCB018424 ), profármaco activado por hipoxia (por ejemplo, TH-302), paclitaxel o un agente paclitaxel, inhibidor de HSP90, inhibidor de AKT (por ejemplo, MK2206), inhibidor de HMG-CoA (por ejemplo, simvastatina), GNKG186, radioterapia, trasplante de médula ósea, trasplante de células madre, y una combinación de los mismos.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de la leucemia linfocítica aguda (ALL) incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, prednisolona, dexametasona, vincristina, asparaginasa, daunorrubicina, ciclofosfamida, citarabina, etopósido, tioguanina, mercaptopurina, clofarabina anamicina liposomal, busulfano, etopósido, capecitabina, decitabina, azacitidina, topotecano, temozolomida), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de BCR/ABL (por ejemplo, imatinib, nilotinib), ON 01910.Na, inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, sorafenib)) agente de direccionamiento de CD-20 (por ejemplo, rituximab), agente de direccionamiento de CD52 (por ejemplo, alemtuzumab), inhibidor de HSP90 (por ejemplo, STA-9090), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus, rapamicina), inhibidor de JAK-2 (por ejemplo, INCB018424), inhibidor del receptor de HER2/neu (por ejemplo, trastuzumab), inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib), metotrexato, asparaginasa, agente de direccionamiento de CD-22 (por ejemplo, epratuzumab, inotuzumab), inmunoterapia (por ejemplo, células asesinas autólogas inducidas por citocinas (CIK), AHN-12), blinatumomab, inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina ( por ejemplo, UCN-01), agente de direccionamiento de CD45 (por ejemplo, BC8), antagonista de MDM2 (por ejemplo, RO5045337), inmunotoxina (por ejemplo, CAT-8015, DT2219ARL), inhibidor de HDAC (por ejemplo, JNJ-26481585), JVRS-100, paclitaxel o un agente de paclitaxel, inhibidor de STAT3 (por ejemplo, OPB-31121), inhibidor de PARP (por ejemplo, veliparib), EZN-2285, radioterapia, esteroide, trasplante de médula ósea, trasplante de células madre o una combinación de los mismos.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para su uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de leucemia mieloide aguda (AML) incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, citarabina, daunorrubicina, idarrubicina, clofarabina, decitabina, vosaroxina, azacitidina, clofarabina, ribavirina, CPX-351, treosulfano, elacitarabina, azacitidina), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de BCR/ABL (por ejemplo, imatinib, nilotinib), ON 01910.Na, inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, midostaurina, SU 11248, quizartinib, sorafinib)), inmunotoxina (por ejemplo, gemtuzumab ozogamicina), proteína de fusión DT388IL3, inhibidor de HDAC (por ejemplo, vorinostat, LBH589), plerixafor, inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), inhibidor de SRC (por ejemplo, dasatinib), inhibidor de HSP90 (por ejemplo, STA-9090), retinoide (por ejemplo, bexaroteno, inhibidor de Aurora quinasa (por ejemplo, BI 811283), inhibidor de JAK-2 (por ejemplo, INCB018424), inhibidor de quinasa tipo Polo (por ejemplo, BI 6727), cenersen, agente de direccionamiento de c D45 (por ejemplo, BC8), inhibidor de quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, UCN-01), antagonista de MDM2 (por ejemplo, RO5045337), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), LY573636 sódico, ZRx-101, MLN4924, lenalidomida, inmunoterapia (por ejemplo, AHN-12), diclorhidrato de histamina, radioterapia, trasplante de médula ósea, trasplante de células madre y una combinación de los mismos.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del mieloma múltiple (MM) incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, melfalán, amifostina, ciclofosfamida, doxorrubicina, clofarabina, bendamustina, fludarabina, adriamicina, SyB L-0501), talidomida, lenalidomida, dexametasona, prednisona, pomalidomida, inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib, carfilzomib, MLN9708), vacuna contra el cáncer (por ejemplo, GVAX), agente de direccionamiento de CD-40 (por ejemplo, SGN-40, CHIR-12.12), perifosina, ácido zoledrónico, inmunoterapia (por ejemplo, MAGE-A3, NY-ESO-1, HuMax-CD38), inhibidor de HDa C (por ejemplo, vorinostat, LBH589, AR-42), aplidina, inhibidor de quinasa dependiente de ciclinas (por ejemplo, PD-0332991, dinaciclib), trióxido de arsénico, CB3304, inhibidor de HSP90 (por ejemplo, KW-2478), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de EGFR (por ejemplo, cetuximab), inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, AT9283)), inhibidor de v Eg F (por ejemplo, bevacizumab), plerixafor, inhibidor de MEK (por ejemplo, AZD6244), IPH2101, atorvastatina, inmunotoxina (por ejemplo, BB-10901), NPI-0052, compuestos radioinmunoterapéuticos (por ejemplo, itrio Y 90 ibritumomab tiuxetano), inhibidor de STAT3 (por ejemplo, OPB-31121), MLN4924, inhibidor de Aurora quinasa (por ejemplo, ENMD-2076), IMGN901, ACE-041, inhibidor de CK-2 (por ejemplo, CX-4945), radioterapia, trasplante de médula ósea, trasplante de células madre y una combinación de los mismos.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para uso en combinación con la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer de próstata incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, docetaxel, carboplatino, fludarabina), abiraterona, terapia hormonal (por ejemplo, flutamida, bicalutamida, nilutamida, acetato de ciproterona, ketoconazol, aminoglutetimida, abarelix, degarelix, leuprolida, goserelina, triptorelina, buserelina), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de quinasa dual (por ejemplo, lapatinib), inhibidor de multiquinasa (por ejemplo, sorafenib, sunitinib)), inhibidor de VEGF (por ejemplo, bevacizumab), TAK-700, vacuna contra el cáncer (por ejemplo, BPX-101, PEP223), lenalidomida, TOK-001, inhibidor del receptor de IGF-1 (por ejemplo, cixutumumab), TRC105, inhibidor de Aurora A quinasa (por ejemplo, MLN8237), inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib), OGX-011, radioinmunoterapia (por ejemplo, HuJ591-GS), inhibidor de HDAC (por ejemplo, ácido valproico, SB939, LBH589), hidroxicloroquina, inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), lactato de dovitinib, diindolilmetano, efavirenz, OGX-427, genisteína, IMC-3G3, bafetinib, CP-675.206, radioterapia, cirugía o una combinación de los mismos.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de HNSCC incluye, pero no se limita a, uno o ambos del Compuesto A8 como se describe en el presente documento (o un compuesto descrito en la publicación PCT No. WO2010/029082) y cetuximab (por ejemplo, Erbitux, comercializado por BMS). En algunas realizaciones, el compuesto terapéutico (por ejemplo, el Compuesto A8 o un compuesto relacionado con A8) es un modulador de PI3K, por ejemplo, un inhibidor de PI3K. En algunas realizaciones, el compuesto terapéutico (por ejemplo, cetuximab) modula, por ejemplo, inhibe, EGFR. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica por tener, niveles o actividad elevados de PI3K o EGFR en comparación con una célula de control o un valor de referencia.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de cáncer gástrico, por ejemplo, cáncer gástrico MSI-alto y/o EBV+, incluye, pero no se limita a, el Compuesto A8 como se describe en el presente documento (o un compuesto descrito en la publicación PCT No. WO2010/029082). En algunas realizaciones, el compuesto terapéutico (por ejemplo, el Compuesto A8 o un compuesto relacionado con A8) es un modulador de PI3K, por ejemplo, un inhibidor de PI3K. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles o actividad elevados de PI3K en comparación con una célula de control o un valor de referencia.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para su uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer gástrico, por ejemplo, cáncer gástrico con alto MSI y/o inactivado por RNF43, incluye, pero no se limita a, el Compuesto A28 como se describe en el presente documento (o un compuesto descrito en la publicación PCT No. WO2010/101849). En algunas realizaciones, el compuesto terapéutico(por ejemplo, el Compuesto A28 o un compuesto relacionado con A28) es un modulador, por ejemplo, un inhibidor, de la porcupina. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles o actividad elevados de porcupina en comparación con una célula de control o un valor de referencia.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para su uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del tumor estromal G i (GIST), incluye, pero no se limita a, el Compuesto A16 como se describe en el presente documento (o un compuesto descrito en la publicación PCT No. WO1999/003854). En algunas realizaciones, el compuesto terapéutico (por ejemplo, el Compuesto A16 o un compuesto relacionado con A16) es un modulador, por ejemplo, un inhibidor, de una tirosina quinasa. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se determina que tiene, niveles o actividad elevados de una tirosina quinasa en comparación con una célula de control o un valor de referencia.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para su uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de NSCLC, por ejemplo, escamoso o adenocarcinoma, incluye, pero no se limita a, un compuesto o ambos del Compuesto A17 como se describe en el presente documento (o un compuesto descrito en las patentes de los Estados Unidos Nos 7.767.675 y 8.420.645) y el compuesto A23 como se describe en el presente documento (o un compuesto descrito en la publicación PCT No. WO2003/077914). En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A17 o un compuesto relacionado con A17) modula, por ejemplo, inhibe, c-MET. En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A23 o un compuesto relacionado con A23) modula, por ejemplo, inhibe, Alk. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se determina que tiene, niveles o actividad elevados de uno o ambos de c-MET o Alk en comparación con una célula de control o un valor de referencia. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, una mutación en EGFR.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para su uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del melanoma (por ejemplo, melanoma NRAS) incluye, pero no se limita a, uno o ambos del Compuesto A24 como se describe en el presente documento (o un compuesto descrito en las patentes de los Estados Unidos Nos. 8.415.355 y 8.685.980) y el Compuesto A34 como se describe en la presente (o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2003/077914). En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A24 o un compuesto relacionado con A24) modula, por ejemplo, inhibe, uno o más de JAK y CDK4/6. En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto a 34 o un compuesto relacionado con A34) modula, por ejemplo, inhibe, MEK. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles o actividad elevados de uno o más de JAK, CDK4/6 y MEK en comparación con una célula de control o un valor de referencia.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para su uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del melanoma (por ejemplo, melanoma NRAS) incluye, pero no se limita a, uno o ambos del Compuesto A29 como se describe en el presente documento (o un compuesto descrito en la publicación PCT No. WO2011/025927) y el Compuesto A34 como se describe en el presente documento (o un compuesto descrito en la publicación PCT No. WO2003/077914). En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A29 o un compuesto relacionado con A29) modula, por ejemplo, inhibe, BRAF. En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A34 o un compuesto relacionado con A34) modula, por ejemplo, inhibe, MEK. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles o actividad elevados de uno o ambos de BRAF y MEK en comparación con una célula de control o un valor de referencia.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para su uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de NSCLC escamoso incluye, pero no se limita a, el Compuesto A5 como se describe en el presente documento (o un compuesto descrito en la patente de los Estados Unidos No. 8.552.002). En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A5 o compuesto relacionado con A5) modula, por ejemplo, inhibe, FGFR. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles o actividad elevados de FGFR en comparación con una célula de control o un valor de referencia.

Un ejemplo de compuestos terapéuticos adecuados para su uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer colorrectal incluye, pero no se limita a, uno o ambos del Compuesto A29 como se describe en el presente documento (o un compuesto de la publicación PCT No. WO2011/025927) y cetuximab (por ejemplo, Erbitux, comercializado por BMS). En algunas realizaciones, el compuesto terapéutico (por ejemplo, el Compuesto A29 o un compuesto relacionado con A29) modula, por ejemplo, inhibe, BRAF. En algunas realizaciones, el compuesto terapéutico (por ejemplo, cetuximab) modula, por ejemplo, inhibe el EGFR. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles o actividad elevados de BRAF o EGFR en comparación con una célula de control o un valor de referencia.

Esta divulgación también proporciona un método para tratar cáncer con el Compuesto A8, cetuximab y una molécula de anticuerpo LAG-3 (opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 o una molécula de anticuerpo TIM-3). En algunas realizaciones, el paciente se trata primero con el Compuesto A8 y cetuximab. Este tratamiento continúa durante un período de tiempo, por ejemplo, un período de tiempo predeterminado, por ejemplo, de aproximadamente 1, 2, 4, 6, 8, 10 o 12 meses. A continuación, se administra la molécula de anticuerpo LAG-3 (opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 o una molécula de anticuerpo TIM-3). El anticuerpo LAG-3 se puede administrar opcionalmente en combinación con cetuximab.

En algunas realizaciones, el paciente se trata primero con los tres compuestos, A8, cetuximab y una molécula de anticuerpo LAG-3 (opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 o una molécula de anticuerpo TIM-3). Este tratamiento continúa durante un período de tiempo, por ejemplo, un período de tiempo predeterminado, por ejemplo, aproximadamente 6, 8, 10 o 12 meses. A continuación, el Compuesto A8 y/o cetuximab se pueden reducir gradualmente, de modo que la fase de mantenimiento implique el tratamiento con la molécula de anticuerpo LAG-3 (por ejemplo, como una monoterapia o en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 o molécula de anticuerpo TIM-3) pero no el compuesto A8 o cetuximab.

En otras realizaciones, los tres compuestos (Compuesto A8, cetuximab y una molécula de anticuerpo LAG-3, opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 o una molécula de anticuerpo TIM-3) se administran secuencialmente al comienzo del tratamiento. Por ejemplo, el Compuesto A8 y cetuximab se pueden administrar primero, como se describió anteriormente. A continuación, se añade al régimen la molécula de anticuerpo LAG-3 (opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo PD-1 o una molécula de anticuerpo TIM-3). A continuación, el Compuesto A8 y/o cetuximab se pueden reducir gradualmente como se describió anteriormente.

Los ejemplos de dosis para los tres (o más) regímenes de agentes son las siguientes. La molécula de anticuerpo LAG-3 se puede administrar, por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 1 a 40 mg/kg, por ejemplo, 1 a 30 mg/kg, por ejemplo, aproximadamente 5 a 25 mg/kg, aproximadamente 10 a 20 mg/kg, aproximadamente de 1 a 5 mg/kg, o aproximadamente de 3 mg/kg. En algunas realizaciones, el Compuesto A8 se administra a una dosis de aproximadamente 200-300, 300-400 o 200-400 mg. En algunas realizaciones, el cetuximab se administra a una dosis inicial de 400 mg/m2 como una infusión intravenosa de 120 minutos seguida de una infusión semanal de 250 mg/m2 durante 60 minutos. En las realizaciones, uno o más del compuesto A8, cetuximab y molécula de anticuerpo LAG-3 se administra a una dosis que es menor que la dosis a la que ese agente se administra típicamente como monoterapia, por ejemplo, aproximadamente 0-10%, 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% o 80-90% más bajo que la dosis a la que normalmente se administra ese agente como monoterapia. En realizaciones, uno o más del compuesto A8, cetuximab y molécula de anticuerpo LAG-3 se administra a una dosis que es menor que la dosis de ese agente mencionado en este párrafo, por ejemplo, aproximadamente 0-10%, 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% o 80-90% menor que la dosis de ese agente mencionado en este párrafo. En ciertas realizaciones, la concentración del Compuesto A8 que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor cuando el Compuesto A8 se administra en combinación con una o ambas moléculas de anticuerpo cetuximab y LAG-3 que cuando el Compuesto A8 se administra individualmente. En ciertas realizaciones, la concentración de cetuximab que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor cuando el cetuximab se administra en combinación con uno o ambos compuestos A8 y la molécula de anticuerpo LAG-3 que cuando se administra cetuximab individualmente. En ciertas realizaciones, la concentración de la molécula de anticuerpo LAG-3 que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, inhibición del crecimiento, es menor cuando la molécula de anticuerpo lAG-3 se administra en combinación con uno o ambos de cetuximab y el Compuesto A8 que cuando la molécula de anticuerpo LAG-3 se administra individualmente.

Además, se divulga en el presente documento un método para tratar el cáncer con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM-3) y un agente anticancerígeno dirigido, por ejemplo, un agente que se dirige a una o más proteínas. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 (y opcionalmente otro u otros inmunomoduladores) se administran primero, y el agente anticancerígeno dirigido se administra en segundo lugar. El período de tiempo entre la administración de la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y el agente anticancerígeno dirigido puede ser, por ejemplo, 10, 20 o 30 minutos, 1,2, 4, 6 o 12 horas, o 1,2, 3, 4, 5, 6 o 7 días, o cualquier lapso de tiempo dentro de este intervalo. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra repetidamente durante un período de tiempo (por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5 o 6 días, o 1, 2, 4, 8, 12, 16, o 20 semanas, o cualquier lapso de tiempo dentro de este intervalo) antes de que se administre el agente anticancerígeno dirigido. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y el agente anticancerígeno dirigido se administran sustancialmente al mismo tiempo.

Enfermedades infecciosas

Se usan otros métodos de la divulgación para tratar pacientes que han estado expuestos a toxinas o patógenos particulares. Por consiguiente, otro aspecto de la divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad infecciosa en un sujeto que comprende administrar al sujeto una combinación como se divulga en el presente documento, por ejemplo, una combinación que incluye una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, de manera que el sujeto sea tratado por la enfermedad infecciosa.

En el tratamiento de la infección (por ejemplo, aguda y/o crónica), la administración de las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 (solas o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1 o anti-TIM -3) se puede combinar con tratamientos convencionales además o en lugar de estimular las defensas inmunitarias naturales del huésped frente a la infección. Las defensas inmunitarias naturales del huésped a la infección incluyen, entre otras, pero no se limitan a inflamación, fiebre, defensa del huésped mediada por anticuerpos, defensas del huésped mediadas por linfocitos T, incluida la secreción de linfocinas y células T citotóxicas (especialmente durante la infección viral), lisis mediada por el complemento y opsonización (fagocitosis facilitada) y fagocitosis. La capacidad de las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 para reactivar las células T disfuncionales sería útil para tratar infecciones crónicas, en particular aquellas en las que la inmunidad mediada por células es importante para la recuperación completa.

De manera similar a su aplicación a tumores como se discutió anteriormente, el bloqueo de LAG-3 mediado por anticuerpos se puede usar solo o como adyuvante, en combinación con vacunas, para estimular la respuesta inmune a patógenos, toxinas y autoantígenos. Los ejemplos de patógenos para los que este enfoque terapéutico puede ser particularmente útil incluyen patógenos para los que actualmente no existe una vacuna eficaz, o patógenos para los que las vacunas convencionales son menos que completamente eficaces. Estos incluyen, pero no se limitan a, hepatitis (A, B y C), influenza, VIH, herpes, giardia, malaria, leishmania, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa. El bloqueo de LAG-3 es particularmente útil contra infecciones establecidas por agentes tales como el VIH que presentan antígenos alterados durante el curso de las infecciones. Estos nuevos epítopos se reconocen como extraños en el momento de la administración de anti-LAG-3 humana, provocando así una fuerte respuesta de células T que no se ve atenuada por señales negativas a través de LAG-3.

Terapias de combinación adicionales

Las combinaciones divulgadas en el presente documento, por ejemplo, la combinación de moléculas de anticuerpo anti-LAG-3 con uno o más segundos agentes terapéuticos se proporcionan en el presente documento. Muchas de las combinaciones de esta sección son útiles para tratar el cáncer, pero también se describen otras indicaciones. Esta sección se centra en las combinaciones de moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), con uno o más de los agentes descritos en la Tabla 7. En las combinaciones de este documento a continuación, en una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende (i) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende un secuencia de aminoácidos de VHCDR1 elegida entre la SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 286; o una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y (ii) una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12.

En una realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de PKC, Sotrastaurina (Compuesto A1), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2005/039549, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PKC es Sotrastaurina (Compuesto A1) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2005/039549. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Sotrastaurina (Compuesto A1), o un compuesto como se describe en la publicación PCT No. WO 2005/039549, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un melanoma, un linfoma no Hodgkin, una enfermedad inflamatoria intestinal, rechazo de un trasplante, un trastorno oftálmico o psoriasis.

En ciertas realizaciones, la sotrastaurina (Compuesto A1) se administra en una dosis de aproximadamente 20 a 600 mg, por ejemplo, aproximadamente 200 a aproximadamente 600 mg, aproximadamente 50 mg a aproximadamente 450 mg, aproximadamente 100 mg a aproximadamente 400 mg, aproximadamente 150 mg a 350 mg, o aproximadamente 200 mg a 300 mg, por ejemplo, aproximadamente 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg o 600 mg. El programa de dosificación puede variar, por ejemplo, cada dos días a diario, dos o tres veces al día.

En una realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de BCR-ABL, TASIGNA (compuesto A2 o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2004/005281), para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de BCR-ABL es TASIGNa , o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2004/005281. En una realización, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa en combinación con TASIGNA (Compuesto A2), o un compuesto como se describe en la publicación PCT No. WO 2004/005281, para tratar un trastorno como una leucemia linfocítica, enfermedad de Parkinson, un cáncer neurológico, un melanoma, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer colorrectal, una leucemia mieloide, un cáncer de cabeza y cuello o hipertensión pulmonar.

En una realización, el inhibidor de BCR-ABL o TASIGNA se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg (por ejemplo, dos veces al día, por ejemplo, para CML-CP Ph+ recién diagnosticada), o aproximadamente 400 mg, por ejemplo, dos veces al día, por ejemplo, para CML-CP y CML-AP Ph+ resistentes o intolerantes). El inhibidor de b CR-ABL o un Compuesto A2 se administra a una dosis de aproximadamente 300-400 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de HSP90, tal como 5-(2,4-dihidroxi-5-isopropilfenil)-N-etil-4-(4-(morfolinometil)fenil)isoxazol-3-carboxamida (Compuesto A3), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/060937 o WO 2004/072051, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de HSP90 es 5-(2,4-dihidroxi-5-isopropilfenil)-N-etil-4-(4-(morfolinometil)fenil)isoxazol-3-carboxamida (Compuesto A3), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/060937 o WO 2004/072051. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 5-(2,4-dihidroxi-5-isopropilfenil)-N-etil-4-(4-(morfolinometil)fenil)isoxazol-3-carboxamida. (Compuesto A3), o un compuesto como se describe en la Publicación PCT No. WO 2010/060937 o WO 2004/072051, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un mieloma múltiple, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un linfoma, un cáncer gástrico, cáncer de mama, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer de páncreas, un cáncer colorrectal, un tumor sólido o trastorno de la hematopoyesis.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de PI3K y/o mTOR, Dactolisib (Compuesto A4) u 8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidroimidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (Compuesto A41), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2006/122806, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PI3K y/o mTOR es Dactolisib (Compuesto A4), 8-(6-Metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometilfenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (Compuesto A41), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2006/122806. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Dactolisib (Compuesto A4), 8-(6-Metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (Compuesto A41), o un compuesto descrito en la publicación PCT No. WO 2006/122806, para tratar un trastorno como cáncer, un cáncer de próstata, una leucemia (por ejemplo, leucemia linfocítica), un cáncer de mama, un cáncer de cerebro, un cáncer de vejiga, un cáncer de páncreas, un cáncer de riñón, un tumor sólido o un cáncer de hígado.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de FGFR, 3-(2,6-dicloro-3.5- dimetoxifenil)-1-(6-((4-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-1 -metilurea (Compuesto A5) o un compuesto divulgado en la patente de los Estados Unidos No. 8.552.002, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de FGFR es 3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-(6-((4-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-1-metilurea (Compuesto A5) o un compuesto divulgado en la patente de Estados Unidos No. 8.552.002. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con el Compuesto A5, o un compuesto como se describe en la patente de los Estados Unidos No. 8.552.002, para tratar un trastorno tal como un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer hematológico o un tumor sólido.

En una realización, el inhibidor de FGFR o 3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-(6-((4-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)amino) pirimidin-4-il)-1-metilurea (Compuesto A5) se administra a una dosis de aproximadamente 100-125 mg (por ejemplo, por día), por ejemplo, aproximadamente 100 mg o aproximadamente 125 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de PI3K, Buparlisib (Compuesto A6) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/084786, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PI3K es Buparlisib (Compuesto A6) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/084786. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Buparlisib (Compuesto A6), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. W o 2007/084786, para tratar un trastorno tal como, un cáncer de próstata, un cáncer de pulmón de células pequeñas, un cáncer endocrino, una leucemia, un cáncer de ovario, un melanoma, un cáncer de vejiga, un cáncer de mama, un cáncer del sistema reproductor femenino, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer colorrectal, un glioblastoma multiforme, un tumor, un linfoma no Hodgkin, un trastorno de la hematopoyesis o un cáncer de cabeza y cuello.

En una realización, el inhibidor de PI3K o Buparlisib (Compuesto A6) se administra a una dosis de aproximadamente 100 mg (por ejemplo, por día).

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de FGFR, 8-(2,6-difluoro-3.5- dimetoxifenil)-N-(4-((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxalina-5-carboxamida (Compuesto A7) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2009/141386 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de FGFR es 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4 -((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxalina-5-carboxamida (Compuesto A7) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2009/141386. En una realización, el inhibidor de FGFR es 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4-((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxalina-5-carboxamida (Compuesto A7). En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4-((dimetilamino) metil)-1H-imidazol-2 -il)quinoxalina-5-carboxamida (Compuesto A7), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2009/141386, para tratar un trastorno tal como un cáncer caracterizado por angiogénesis.

En una realización, el inhibidor de FGFR o 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4-((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxalina-5 -carboxamida (Compuesto A7) se administra a una dosis de, por ejemplo, de aproximadamente 3 mg a aproximadamente 5 g, más preferiblemente de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 1,5 g por persona por día, opcionalmente dividida en 1 a 3 dosis únicas que pueden ser, por ejemplo, del mismo tamaño.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de PI3K, (S)-N1-(4-metil-5-(2-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4-il)tiazol-2-il)pirrolidin-1,2-dicarboxamida (Compuesto A8) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/029082 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PI3K es (S)-N1-(4-metil-5-(2-(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4-il)tiazol-2-il)pirrolidin-1,2-dicarboxamida (Compuesto A8) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/029082. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con (S)-N1-(4-metil-5-(2-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-ilo)piridin-4-il)tiazol-2-il)pirrolidin-1,2-dicarboxamida (Compuesto A8), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/029082, para tratar un trastorno tal como un cáncer gástrico, un cáncer de mama, un cáncer de páncreas, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un tumor sólido y un cáncer de cabeza y cuello.

En una realización, el inhibidor de PI3K o (S)-N1-(4-metil-5-(2-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4-il) tiazol-2-il)pirrolidin-1,2-dicarboxamida (Compuesto A8) se administra a una dosis de aproximadamente 150-300, 200-300, 200 400 o 300-400 mg (por ejemplo, por día), por ejemplo, aproximadamente 200, 300 o 400 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor del citocromo P450 (por ejemplo, un inhibidor de CYP17) o un compuesto divulgado en la publicación PCT. No. WO 2010/149755, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor del citocromo P450 (por ejemplo, el inhibidor de CYP17) es un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/149755. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/149755, para tratar el cáncer de próstata.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de HDM2, (S)-1-(4-clorofenil)-7- isopropoxi-6-metoxi-2-(4-(metil(((1r, 4S)-4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil)metil)amino)fenil)-1,2-dihidroisoquinolin-3(4H)-ona (Compuesto A10) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/076786 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento). En una realización, el inhibidor de HDM2 es (S)-1-(4-clorofenil)-7-isopropoxi-6-metoxi-2-(4-(metil(((1r, 4S)-4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil) metil)amino)fenil)-1,2-dihidroisoquinolin-3(4H)-ona (Compuesto A10) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/076786. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con (S)-1-(4-clorofenil)-7-isopropoxi-6-metoxi-2-(4-(metil(((1r, 4S )-4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil)metil)amino)fenil)-1,2-dihidroisoquinolin-3(4H)-ona (Compuesto A10), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/076786, para tratar un trastorno tal como un tumor sólido.

En una realización, el inhibidor de HDM2 o (S)-1-(4-clorofenil)-7-isopropoxi-6-metoxi-2-(4-(metil(((1r,4S)-4-(4 -metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil)metil)amino)fenil)-1,2-dihidroisoquinolin-3(4H)-ona (Compuesto A10) se administra a una dosis de aproximadamente 400 a 700 mg, por ejemplo, administrado tres veces por semana, 2 semanas con y una semana sin. En algunas realizaciones, la dosis es de aproximadamente 400, 500, 600 o 700 mg; aproximadamente 400-500, 500-600 o 600-700 mg, por ejemplo, administrados tres veces a la semana.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un agente quelante de hierro, Deferasirox (también conocido como EXJADE; Compuesto A11), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 1997/049395 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el agente quelante de hierro es Deferasirox o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 1997/049395. En una realización, el agente quelante del hierro es Deferasirox (Compuesto A11). En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Deferasirox (Compuesto A11), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 1997/049395, para tratar la sobrecarga de hierro, hemocromatosis o mielodisplasia.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de aromatasa, letrozol (también conocido como FEMARA; Compuesto A12), o un compuesto divulgado en la patente de los Estados Unidos No. 4.978.672 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de la aromatasa es letrozol (compuesto A12) o un compuesto divulgado en la patente de los Estados Unidos No. 4.978.672. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo LAG-3 en combinación con letrozol (Compuesto A12), o un compuesto divulgado en la patente de Estados Unidos NO. 4.978.672, para tratar un trastorno como un cáncer, un leiomiosarcoma, un cáncer de endometrio, un cáncer de mama, un cáncer del sistema reproductor femenino o una deficiencia hormonal.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de PI3K, por ejemplo, un inhibidor de pan-PI3K, (4S,5R)-3-(2'-amino-2-morfolino-4'-(trifluorometil)-[4,5'-bipirimidin]-6-il)-4-(hidroximetil)-5-metiloxazolidin-2-ona (Compuesto A13) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/124826 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PI3K es (4S,5R)-3-(2'-amino-2-morfolino-4'-(trifluorometil)-[4,5'-bipirimidin]-6-il)-4-(hidroximetil)-5-metiloxazolidin-2-ona (Compuesto A13) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/124826. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con (4S,5R)-3-(2'-amino-2-morfolino-4'-(trifluorometil)-[4,5'-bipirimidina]-6-il)-4-(hidroximetil)-5-metiloxazolidin-2-ona (Compuesto A13), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/124826, para tratar un trastorno tal como un cáncer o un tumor sólido avanzado .

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de p53 y/o una interacción p53/Mdm2, (S)-5-(5-cloro-1-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)-6-(4-clorofenil)-2-(2,4-dimetoxipirimidin-5-il)-1 -isopropil -5,6-dihidropirrolo[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (Compuesto A14), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/111105 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de p53 y/o una interacción p53/Mdm2 es (S)-5-(5-cloro-1-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)-6-(4-clorofenil)-2-(2,4-dimetoxipirimidin-5-il)-1-isopropil-5,6-dihidropirrolo[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (Compuesto A14) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/111105. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con (S)-5-(5-cloro-1-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)-6-(4-clorofenil)-2-(2,4-dimetoxipirimidin-5-il)-1-isopropil-5,6-dihidropirrolo[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (Compuesto A14), o un compuesto divulgado en la publicación p Ct No. WO2013/111105, para tratar un trastorno tal como un cáncer o un sarcoma de tejidos blandos.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2005/073224 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R es 4-((2-(((1R, 2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2005/073224. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo LAG-3 en combinación con 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (compuesto A15) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2005/073224, para tratar un trastorno como el cáncer.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inductor de apoptosis y/o un inhibidor de la angiogénesis, tal como mesilato de imatinib (también conocido como GLEEVEC; Compuesto A16) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO1999/003854 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito. En una realización, el inductor de apoptosis y/o un inhibidor de angiogénesis es mesilato de imatinib (Compuesto A16) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO1999/003854. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con mesilato de imatinib (Compuesto A16), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 1999/003854, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un mieloma múltiple, un cáncer de próstata, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un linfoma, un cáncer gástrico, un melanoma, un cáncer de mama, un cáncer de páncreas, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer colorrectal, un glioblastoma multiforme, un cáncer de hígado, un cáncer de cabeza y cuello, asma, esclerosis múltiple, alergia, demencia de Alzheimer, esclerosis lateral amiotrófica o artritis reumatoide.

En ciertas realizaciones, se administra mesilato de imatinib (Compuesto A16) a una dosis de aproximadamente 100 a 1.000 mg, por ejemplo, aproximadamente 200 mg a 800 mg, aproximadamente 300 mg a 700 mg, o aproximadamente 400 mg a 600 mg, por ejemplo, aproximadamente 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg o 700 mg. El programa de dosificación puede variar, por ejemplo, cada dos días a diario, dos o tres veces al día. En una realización, se administra mesilato de imatinib a una dosis oral de aproximadamente 100 mg a 600 mg al día, por ejemplo, aproximadamente 100 mg, 200 mg, 260 mg, 300 mg, 400 mg o 600 mg al día.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de JAK, 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una sal diclorhídrica del mismo, o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/070514, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de JAK es 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una sal diclorhídrica del mismo, o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/070514. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo LAG-3 en combinación con 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il) benzamida (Compuesto A17), o una sal diclorhídrica del mismo, o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/070514, para tratar un trastorno como cáncer colorrectal, leucemia mieloide, cáncer hematológico, enfermedad autoinmune, linfoma no Hodgkin o trombocitemia.

En una realización, el inhibidor de JAK o un 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il) benzamida (Compuesto A17), o una sal diclorhídrica de la misma se administra a una dosis de aproximadamente 400 600 mg (por ejemplo, por día), por ejemplo, aproximadamente 400, 500 o 600 mg, o aproximadamente 400-500 o 500 -600 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de JAK, fosfato de ruxolitinib (también conocido como JAKAFI; compuesto A18) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/070514 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de JAK es fosfato de ruxolitinib (compuesto A18) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/070514. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con fosfato de ruxolitinib (Compuesto A18), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/070514, para tratar un trastorno tal como un cáncer de próstata, una leucemia linfocítica, un mieloma múltiple, un linfoma, un cáncer de pulmón, una leucemia, caquexia, un cáncer de mama, un cáncer de páncreas, artritis reumatoide, psoriasis, un cáncer colorrectal, una leucemia mieloide, un cáncer hematológico, una enfermedad autoinmune, un linfoma no Hodgkin o trombocitemia.

En una realización, el inhibidor de JAK o fosfato de ruxolitinib (compuesto A18) se administra a una dosis de aproximadamente 15-25 mg, por ejemplo, dos veces al día. En algunas realizaciones, la dosis es de aproximadamente 15, 20 o 25 mg, o de aproximadamente 15-20 o 20-25 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de desacetilasa (DAC), Panobinostat (Compuesto A19) o un compuesto divulgado en publicación PCT No. WO 2014/072493 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de DAC es Panobinostat (Compuesto A19) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2014/072493. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Panobinostat (Compuesto A19), un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2014/072493, para tratar un trastorno tal como un cáncer de pulmón de células pequeñas, un cáncer respiratorio/torácico, un cáncer de próstata, un mieloma múltiple, un síndrome mielodisplásico, un cáncer de hueso, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer endocrino, un linfoma, un cáncer neurológico, una leucemia, VIH/SIDA, un trastorno inmunológico, rechazo de trasplante, un cáncer gástrico, un melanoma, un cáncer de mama, un cáncer de páncreas, un cáncer colorrectal, un glioblastoma multiforme, una leucemia mieloide, un cáncer hematológico, un cáncer renal, un linfoma no Hodgkin, un cáncer de cabeza y cuello, un trastorno de la hematopoyesis o un cáncer de hígado.

En una realización, el inhibidor de DAC o Panobinostat (Compuesto A19) se administra a una dosis de aproximadamente 20 mg (por ejemplo, por día).

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de uno o más del citocromo P450 (por ejemplo, 11B2), aldosterona o angiogénesis, Osilodrostat (Compuesto A20), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2007/024945 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de uno o más del citocromo P450 (por ejemplo, 11B2), aldosterona o angiogénesis es Osilodrostat (Compuesto A20) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2007/024945. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Osilodrostat (Compuesto A20), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2007/024945, para tratar un trastorno tal como el síndrome de Cushing, hipertensión o terapia para insuficiencia cardíaca.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) 0 un compuesto divulgado en la patente de los Estados Unidos No. 8.552.003 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de IAP es (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2 -((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en la patente de los Estados Unidos No. 8.552.003. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol -2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la patente de los Estados unidos No. 8.552.003, para tratar un trastorno como el mieloma múltiple, un cáncer de mama, un cáncer de ovario, un cáncer de páncreas o un trastorno de hematopoyesis.

En una realización, el inhibidor de IAP o (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidina-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en la patente de los Estados Unidos No. 8.552.003 se administra a una dosis de aproximadamente 1.800 mg, por ejemplo, una vez a la semana.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor suavizado (SMO), fosfato de Sonidegib (Compuesto A22), (R)-2-(5-(4-(6-bencil-4,5-dimetilpiridazin-3-il)-2-metilpiperazin-1-il)pirazin-2-il)propan-2-ol (Compuesto a 25), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/131201 o WO 2010/007120 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de SMO es fosfato de Sonidegib (Compuesto A22), (R)-2-(5-(4-(6-bencil-4,5-dimetilpiridazin-3-il)-2-metilpiperazin-1-il) pirazin-2-il)propan-2-ol (Compuesto a 25), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/131201 o WO 2010/007120. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con fosfato de Sonidegib (Compuesto A22), (R)-2-(5-(4-(6-bencil-4,5-dimetilpiridazin-3-il))-2-metilpiperazin-1-il)pirazin-2-il)propan-2-01 (Compuesto A25), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/131201 o W o 2010/007120 para tratar un trastorno como un cáncer, un meduloblastoma, un cáncer de pulmón de células pequeñas, un cáncer de próstata, un carcinoma de células basales, un cáncer de páncreas o una inflamación.

En ciertas realizaciones, el fosfato de Sonidegib (Compuesto A22) se administra a una dosis de aproximadamente 20 a 500 mg, por ejemplo, aproximadamente 40 mg a 400 mg, aproximadamente 50 mg a 300 mg o aproximadamente 100 mg a 200 mg, por ejemplo, aproximadamente 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg o 300 mg. El programa de dosificación puede variar, por ejemplo, cada dos días a diario, dos o tres veces al día.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de Alk, ceritinib (también conocido como ZYKADIA; Compuesto A23) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/131201 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de Alk es ceritinib (Compuesto a 23) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/131201. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con ceritinib (Compuesto A23), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/131201, para tratar un trastorno tal como cáncer de pulmón de células no pequeñas o tumores sólidos.

En una realización, el inhibidor de Alk o ceritinib (Compuesto A23) se administra a una dosis de aproximadamente 750 mg, por ejemplo, una vez al día.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de JAK y/o CDK4/6, 7-ciclopentil-N,N- dimetil- -((5-(piperazin-1-il piridin-2-il amino)-7H-pirrol [2,3-d pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A24), o un compuesto divulgado en la patente de los Estados Unidos No. 8.415.355 o la patente de Lo Estados Unidos No. 8.685.980 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de JAK y/o CDK4/6 es 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5-(piperazin-1-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[ 2,3-d]pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A24) o un compuesto divulgado en la patente de los Estados Unidos No.

8.415.355 o en la patente de los Estados Unidos No. 8.685.980. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5-(piperazin-1-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-6-carboxamida (Compuesto A24), o un compuesto divulgado en la patente de los Estados Unidos No.

8.415.355 o en la patente de los Estados Unidos No. 8.685.980, para tratar un trastorno tal como un linfoma, un cáncer neurológico, un melanoma, un cáncer de mama, o un tumor sólido.

En una realización, el inhibidor de JAK y/o CDK4/6 o 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5-(piperazin-1-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A24) se administra a una dosis de aproximadamente 200-600 mg, por ejemplo, por día. En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 200, 300, 400, 500 o 600 mg, o aproximadamente 200-300, 300-400, 400-500 o 500-600 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor del receptor de prolactina (PRLR), una molécula de anticuerpo monoclonal humano (Compuesto A26) como se divulga en la patente de los Estados Unidos No. 7.867.493, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PRLR es un anticuerpo monoclonal humano (Compuesto A26) divulgado en la patente de los Estados Unidos No. 7.867.493. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con una molécula de anticuerpo monoclonal humano (Compuesto A26) descrita en la patente de Estados Unidos No. 7.867.493 para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer de próstata o un cáncer de mama.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de PIM quinasa, N-(4-((1R,3S,5S)-3-amino-5-metilciclohexil piridin-3-il)-6-(2,6-difluorofenil)-5-fluoropicolinamida (Compuesto A27) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/026124 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PIM quinasa es N-(4-((1R,3S,5S)-3-amino-5-metilciclohexil)piridin-3-il)-6-(2,6-difluorofenil)-5-fluoropicolinamida (Compuesto A27) o un compuesto divulgado en la publicación p Ct No. WO 2010/026124. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con N-(4-((1R,3S,5S)-3-amino-5-metilciclohexil)piridin-3-il)-6-(2,6-difluorofenil)-5-fluoropicolinamida (Compuesto A27), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/026124, para tratar un trastorno tal como un mieloma múltiple, síndrome mielodisplásico, una leucemia mieloide o un linfoma no Hodgkin.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de señalización Wnt, 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il piridin-2-il acetamida (Compuesto A28) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. W o 2010/101849 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de señalización de Wnt es 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/101849. En una realización, el inhibidor de señalización de Wnt es 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28). En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/101849, para tratar un trastorno como un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de cabeza y cuello, un carcinoma de células escamosas, un cáncer de mama, un cáncer de páncreas o un cáncer de colon).

En determinadas realizaciones, 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il) piridin-2-il acetamida (Compuesto A28) se administra a una dosis de aproximadamente 1 a 50 mg, por ejemplo, aproximadamente 2 mg a 45 mg, aproximadamente 3 mg a 40 mg, aproximadamente 5 mg a 35 mg, 5 mg a 10 mg o aproximadamente 10 mg a 30 mg, por ejemplo, aproximadamente 2 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg o 40 mg. El programa de dosificación puede variar, por ejemplo, cada dos días a diario, dos o tres veces al día.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de BRAF, encorafenib (Compuesto A29) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/025927 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de BRAF es encorafenib (compuesto A29) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/025927. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con encorafenib (Compuesto A29), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/025927, para tratar un trastorno tal como un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un melanoma o un cáncer colorrectal.

En una realización, el inhibidor de BRAF o encorafenib (Compuesto A29) se administra a una dosis de aproximadamente 200-300, 200-400 o 300-400 mg, por ejemplo, por día. En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 200, aproximadamente 300 o aproximadamente 400 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de CDK4/6, 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5-((1R,6S)-9-metil-4-oxo-3,9-diazabiciclo[4.2.1]nonan-3-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A30), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/101409 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de CDK4/6 es 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5-((1R 6S)-9-metil-4-oxo-3,9-diazabiciclo[4.2.1 ]nonan-3-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo [2,3-d]pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A30) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/101409. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 7-ciclopentil-N, N-dimetil-2-((5-((1R,6S)-9-metil-4-oxo-3,9-diazabiciclo[4.2.1]nonan-3-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida (Compuesto A30), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2011/101409, para tratar un trastorno como un cáncer, un linfoma de células del manto, un liposarcoma, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un melanoma, un cáncer de esófago de células escamosas o un cáncer de mama.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de HER3, Compuesto A31, o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2012/022814, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de HER3 es el Compuesto A31 o un compuesto divulgado en la publicación PCT WO 2012/022814. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con el Compuesto A31, o un compuesto divulgado en la publicación PCT WO 2012/022814, para tratar un trastorno tal como un cáncer gástrico, un cáncer de esófago, un cáncer de cabeza y cuello, un carcinoma de células escamosas, un cáncer de estómago, un cáncer de mama (por ejemplo, cáncer de mama metastásico) o un cáncer digestivo/gastrointestinal.

En algunas realizaciones, el compuesto A31 es una molécula de anticuerpo monoclonal humano.

En una realización, el inhibidor de HER3 o el Compuesto A31 se administra a una dosis de aproximadamente 3, 10, 20 o 40 mg/kg, por ejemplo, una vez a la semana (QW). En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 3-10, 10-20 o 20-40 mg/kg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de FGFR2 y/o FGFR4, Compuesto A32 o un compuesto divulgado en una publicación PCT No. WO 2014/160160 (por ejemplo, un conjugado de fármaco de molécula de anticuerpo contra un FGFR2 y/o FGFR4, por ejemplo, mAb 12425), para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de FGFR2 y/o FGFR4 es el Compuesto A32 o un compuesto divulgado en una publicación PCT No. WO 2014/160160. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con el Compuesto A32, o un compuesto como se describe en la Tabla 7, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer gástrico, un cáncer de mama, un rabdomiosarcoma, un cáncer de hígado, un cáncer suprarrenal, un cáncer de pulmón, un cáncer de esófago, un cáncer de colon o un cáncer de endometrio.

En algunas realizaciones, el compuesto A32 es un conjugado de fármaco de molécula de anticuerpo contra un FGFR2 y/o FGFR4, por ejemplo, mAb 12425.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de M-CSF, Compuesto A33 o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2004/045532 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo o fragmento Fab contra M-CSF), para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de M-CSF es el Compuesto a 33 o un compuesto divulgado en la publicación PCT No.

WO 2004/045532. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con el Compuesto A33, o un compuesto como se describe en la publicación PCT No. WO 2004/045532, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer de próstata, una mama cáncer o sinovitis villonodular pigmentada (PVNS).

En realizaciones, el Compuesto A33 es una molécula de anticuerpo monoclonal contra M-CSF o un fragmento (por ejemplo, un fragmento Fab) del mismo. En realizaciones, el inhibidor de M-CSF o el Compuesto A33 se administra a una dosis promedio de aproximadamente 10 mg/kg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de MEK, binimetinib (Compuesto A34), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2003/077914 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de MEK es binimetinib (Compuesto A34), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2003/077914. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con binimetinib (Compuesto A34), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2003/077914, para tratar un trastorno tal como un cáncer de pulmón de células no pequeñas., un trastorno genético multisistémico, un melanoma, un cáncer de ovario, un cáncer digestivo/gastrointestinal, una artritis reumatoide o un cáncer colorrectal.

En una realización, el inhibidor de MEK o Binimetinib (Compuesto A34) se administra a una dosis de aproximadamente 45 mg, por ejemplo, dos veces al día.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de uno o más de c-KIT, liberación de histamina, Flt3 (por ejemplo, FLK2/STK1) o PKC, midostaurina (compuesto A35) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2003/037347 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor es midostaurina (Compuesto A35) o el compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2003/037347. En una realización, el inhibidor de uno o más de c-KIT, liberación de histamina, Flt3 (por ejemplo, FLK2/STK1) o PKC es midostaurina. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con midostaurina (Compuesto A35), o el compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2003/037347, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer colorrectal, una leucemia mieloide, un síndrome mielodisplásico, una degeneración macular relacionada con la edad, una complicación diabética o un trastorno dermatológico.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de TOR (por ejemplo, inhibidor de mTOR), everolimus (también conocido como AFINITOR; Compuesto A36) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2014/085318 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento). En una realización, el inhibidor de TOR es everolimus (Compuesto A36) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2014/085318. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con everolimus (Compuesto A36) para tratar un trastorno tal como una enfermedad pulmonar intersticial, un cáncer de pulmón de células pequeñas, un cáncer respiratorio/torácico, un cáncer de próstata, un mieloma múltiple, un sarcoma, una degeneración macular relacionada con la edad, un cáncer de huesos, esclerosis tuberosa, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer endocrino (por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico), un linfoma, trastornos neurológicos, un astrocitoma, un cáncer de cuello uterino, un cáncer neurológico, una leucemia, trastornos inmunitarios, rechazo de trasplantes, un cáncer gástrico, un melanoma, epilepsia, un cáncer de mama o un cáncer de vejiga.

En una realización, el inhibidor de TOR o everolimus (Compuesto A36) se administra a una dosis de aproximadamente 2,5-20 mg/día. En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 2,5, 5, 10 o 20 mg/día, por ejemplo, aproximadamente 2,5-5, 5-10 o 10-20 mg/día.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de uno o más de VEGFR-2, PDGFRbeta, KIT o Raf quinasa C, 1-metil-5-((2-(5-(trifluorometil)-1H-imidazol-2-il)piridin-4-il)oxi)-N-(4-(trifluorometil) fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (Compuesto A37) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/030377 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de uno o más de VEGFR-2, PDGFRbeta, KIT o Raf quinasa C es 1-metil-5-((2-(5-(trifluorometil)-1H-imidazol-2-il)piridin-4-il)oxi)-N-(4-(trifluorometil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (Compuesto A37) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/030377. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 1-metil-5-((2-(5-(trifluorometil)-1H-imidazol-2-il)piridin-4-il)oxi)-N-(4-(trifluorometil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (Compuesto A37), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2007/030377, para tratar un trastorno como un cáncer, un melanoma o un tumor sólido.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un agonista de la somatostatina y/o un inhibidor de la liberación de la hormona del crecimiento, diaspartato de pasireotida (también conocido como SIGNIFOR; Compuesto A38) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2002/010192 o la patente de Estados Unidos No. 7.473.761 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el agonista de la somatostatina y/o el inhibidor de la liberación de la hormona del crecimiento es diaspartato de pasireotida (Compuesto A38) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2002/010192 o en la patente de los Estados Unidos No. 7.473.761. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con diaspartato de pasireotida (Compuesto A38), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2002/010192 o en la patente de Estados Unidos No. 7.473.761, para tratar un trastorno tal como un cáncer de próstata, un cáncer endocrino, un cáncer neurológico, un cáncer de piel (por ejemplo, melanoma), un cáncer de páncreas, un cáncer de hígado, síndrome de Cushing, un trastorno gastrointestinal, acromegalia, un trastorno del hígado y del tracto biliar o cirrosis hepática.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un modulador de transducción de señales y/o inhibidor de la angiogénesis, Dovitinib (Compuesto A39) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2009/115562 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el modulador de la transducción de señales y/o el inhibidor de la angiogénesis es Dovitinib (Compuesto A39) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2009/115562. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Dovitinib (Compuesto A39), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. W o 2009/115562, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer respiratorio/torácico, mieloma múltiple, un cáncer de próstata, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer endocrino o un trastorno genético neurológico.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2013/184757 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de EGFR es (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2013/184757. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2013/184757, para tratar un trastorno tal como un cáncer, por ejemplo, un tumor sólido.

En una realización, el inhibidor de EGFR o (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo [d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) se administra a una dosis de 150-250 mg, por ejemplo, por día. En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 150, 200 o 250 mg, o aproximadamente 150-200 o 200-250 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de ALK, N6-(2-isopropoxi-5-metil-4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)-N4-(2-(isopropilsulfonil)fenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4,6-diamina (Compuesto A42) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2008/073687 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de ALK es N6-(2-isopropoxi-5-metil-4-(1-metilpiperidin-4-il) fenil)-N4-(2-(isopropilsulfonil)fenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4,6-diamina (Compuesto A42) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2008/073687. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con N6-(2-isopropoxi-5-metil-4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)-N4-(2-(isopropilsulfonil)fenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4,6-diamina (Compuesto A42), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2008/073687, para tratar un trastorno como el cáncer, un linfoma anaplásico de células grandes (ALCL), un carcinoma de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) o un neuroblastoma.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de IGF-1R, 1,1 -dióxido de 3-(4-(4-((5-cloro-4-((5-metil-1H-pirazol-3-il)amino)pirimidin-2-il)amino)-5-fluoro-2-metilfenil)piperidin-1-il) tietano (Compuesto A43), 5-cloro-N2-(2-fluoro-5-metil-4-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)piperidin-4-il)fenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidin-2,4-diamina (Compuesto A44) o 5-cloro-N2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)-2-fluoro-5-metilfenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidina-2,4-diamina (Compuesto A45) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/002655 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito. En una realización, el inhibidor de IGF-1R es 1,1 -dióxido de 3-(4-(4-((5-cloro-4-((5-metil-1H-pirazol-3-il)amino)pirimidin-2-il)amino)-5-fluoro-2-metilfenil)piperidin-1-il)tietano (Compuesto A43), 5-cloro-N2-(2-fluoro-5-metil-4-(1-(tetrahidro-2H)-piran-4-il)piperidin-4-il)fenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidin-2,4-diamina (Compuesto A44), 5-cloro-N2-(4-( 1 -etilpiperidin-4-il)-2-fluoro-5-metilfenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidin-2,4-diamina (Compuesto A45), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/002655. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 1,1-dioxido de 3-(4-(4-((5-cloro-4-((5-metil-1H-pirazol-3-il)amino)pirimidin-2-il)amino)-5-fluoro-2-metilfenil)piperidin-1-il)tietano (Compuesto A43), 5-cloro-N2-(2-fluoro-5-metil-4-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)piperidin-4-il)fenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidin-2,4-diamina (Compuesto A44), 5-cloro-N2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)-2-fluoro-5-metilfenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidin-2,4-diamina (Compuesto A45), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO 2010/002655, para tratar un trastorno tal como un cáncer o un sarcoma.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de la P-Glicoproteína 1, Valspodar (también conocido como AMDRAY; Compuesto A46) o un compuesto divulgado en el documento EP 296122 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de la P-Glicoproteína 1 es Valspodar (Compuesto A46) o un compuesto divulgado en el documento EP 296122. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con Valspodar (Compuesto A46), o un compuesto divulgado en el documento EP 296122, para tratar un trastorno tal como un cáncer o un tumor resistente a fármacos.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con uno o más de un inhibidor de VEGFR, succinato de vatalanib (Compuesto A47) o un compuesto divulgado en el documento EP 296122 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de VEGFR es succinato de vatalanib (Compuesto A47) o un compuesto divulgado en el documento EP 296122. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con succinato de vatalanib (Compuesto A47), o un compuesto divulgado en el documento EP 296122, para tratar el cáncer.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de IDH o un compuesto divulgado en el documento WO2014/141104 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de IDH es un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2014/141104. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con un compuesto descrito en el documento WO2014/141104 para tratar un trastorno tal como un cáncer.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de BCL-ABL o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 o WO2013/171642 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de BCL-ABL es un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 o WO2013/171642. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 o WO2013/171642 para tratar un trastorno tal como un cáncer.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de c-RAF o un compuesto divulgado en la publicación p Ct No. WO2014/151616 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de c-RAF es el Compuesto A50 o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2014/151616. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2014/151616 para tratar un trastorno tal como un cáncer.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor competitivo de ATP ERK1/2 o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2015/066188 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor competitivo de ATP ERK1/2 es un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2015/066188. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con el Compuesto A51 o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2015/066188 para tratar un trastorno tal como un cáncer.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se usa en combinación con un inhibidor de tirosina quinasa, (Compuesto A52) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2005/073224 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de tirosina quinasa es 4-((2 -(((1R, 2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A52) o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2005/073224. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 en combinación con 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A52), o un compuesto divulgado en la publicación PCT No. WO2005/073224, para tratar un trastorno tal como un cáncer.

En algunas realizaciones, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se administra en combinación con uno o más agentes seleccionados de, Compuesto A8, Compuesto A17, Compuesto A23, Compuesto A24, Compuesto A27, Compuesto A29 y Compuesto A33.

En algunas realizaciones, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en el presente documento, se administra en combinación con un agente anticancerígeno que tiene una actividad conocida en un ensayo de células inmunitarias, por ejemplo, en uno o más de un ensayo de huMLR, un ensayo de proliferación de células T y un ensayo de proliferación de células B. A continuación se describen ejemplos de ensayos. De acuerdo con el ensayo, se puede calcular una CI50 para cada agente de prueba. En realizaciones, el agente anticancerígeno tiene una Cl5ode, por ejemplo, 0-1 j M, 1-4 j M o mayor de 4 j M, por ejemplo, 4-10 j M o 4-20 j M. En realizaciones, el segundo agente terapéutico se elige entre uno o más de: Compuesto A9, Compuesto A16, Compuesto A17, Compuesto A21, Compuesto A22, Compuesto A25, Compuesto A28, Compuesto A48 y Compuesto A49.

En algunas realizaciones, el Compuesto A28 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A28) se administra a una dosis de aproximadamente 5-10 o 10-30 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A22 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A22) se administra a una dosis de aproximadamente 200 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A17 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A17) se administra a una dosis de aproximadamente 400-600 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A16 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A16) se administra a una dosis de aproximadamente 400-600 mg PO cada día. En algunas realizaciones, el Compuesto A29 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A29) se administra a una dosis de aproximadamente 200-400 o 300-400 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A24 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A24) se administra a una dosis de aproximadamente 200-600 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A23 (ceritinib) (o un compuesto relacionado con ceritinib) se administra a una dosis de aproximadamente 750 mg una vez al día. En algunas realizaciones, el Compuesto A8 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A8) se administra a una dosis de aproximadamente 200-400 o 300-400 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A5 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A5) se administra a una dosis de aproximadamente 100-125 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A6 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A6) se administra a una dosis de aproximadamente 100 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A1 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A1) se administra a una dosis de aproximadamente 200-300 o 200-600 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A40 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A40) se administra a una dosis de aproximadamente 150-250 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A10 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A10) se administra a una dosis de aproximadamente 400 a 700 mg, por ejemplo, se administra tres veces a la semana, 2 semanas con y una semana sin. En algunas realizaciones, el inhibidor de BCR-ABL se administra a una dosis de aproximadamente 20 mg dos veces al día - 80 mg dos veces al día.

A continuación se proporcionan ejemplos de ensayos de huMLR y ensayos de proliferación de células B o T.

Reacción de linfocitos mixtos humanos

La reacción de linfocitos mixtos (MLR) es un ensayo funcional que mide la respuesta proliferativa de los linfocitos de un individuo (el respondedor) a los linfocitos de otro individuo (el estimulador). Para realizar una MLR alogénica, se aislaron células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de tres donantes de capas leucocitarias de tipo HLA desconocido (Kantonspital Blutspendezentrum de Berna y Aarau, Suiza). Las células se prepararon a razón de 2 x 105 en 0,2 ml de medio de cultivo que contenía RPMI 1640 GlutaMAXMR con suero de ternero fetal (FCS) al 10%, 100 U de penicilina/100 jg de estreptomicina, 2-mercaptoetanol 50 j M. Las reacciones individuales de 2 vías se establecieron mezclando PBMC de dos donantes diferentes en una proporción de 1:1 y los cocultivos se realizaron por triplicado en placas de cultivo de tejidos de 96 pocillos de fondo plano durante 6 días a 37 °C, CO2 al 5%, en presencia o no de un intervalo de concentración de 8 puntos de compuestos de prueba. Las células se pulsaron con 3H-TdR (1 jC i/0,2 ml) durante las últimas 16 h de cultivo y se utilizó la radiactividad incorporada como medida de la proliferación celular. Se calculó la concentración que inhibía el 50% de la respuesta máxima de huMLR (CI50) para cada compuesto. Se utilizó ciclosporina como control positivo de la inhibición de huMLR.

Ensayo de proliferación de células B humanas

Se aislaron en forma fresca PBMC mediante gradiente de densidad Ficoll-Paque de sangre humana y se sometieron a aislamiento de células B negativas. Las células B se resuspendieron en medio de cultivo (RPMI 1640, HEPES, FCS al 10%, 50 jg/m l de gentamicina, 2-mercaptoetanol 50 j M, 1x ITS (insulina, transferrina y selenito de sodio), 1x aminoácidos no esenciales) a una concentración de 9 x 104 por pocillo en una placa de cultivo de fondo plano de 96 pocillos. La estimulación de las células B se realizó mediante una molécula de anticuerpo anti-IgM humano (30 jg/m l) e IL-4 (75 ng/ml) o mediante el ligando CD40 (3 jg/m l) e IL-4 (75 ng/ml) en presencia o no de un intervalo de concentración de 7 puntos de los compuestos de prueba. Después de 72 h de cultivo a 37 °C, CO2 al 10%, las células se pulsaron con 3H-TdR (1 jCi/pocillo) durante las últimas 6 h de cultivo. A continuación, se recogieron las células B y se midió la incorporación de timidina usando un contador de centelleo. De cada tratamiento por duplicado, se calculó la media y estos datos se representaron en XLfit 4 para determinar los valores de CI50 respectivos.

Ensayo de proliferación de células T humanas

Se aislaron en forma fresca PBMC mediante gradiente de densidad Ficoll-Paque de sangre humana y se sometieron a aislamiento negativo de células T. Las células T se prepararon en medio de cultivo (RPMI 1640, HEPES, FCS al 10%, 50 |jg/ml de gentamicina, 2-mercaptoetanol 50 jM , 1x ITS (insulina, transferrina y selenito de sodio), 1x aminoácidos no esenciales) a una concentración de 8 x104 por pocillo en una placa de cultivo de 96 pocillos de fondo plano. La estimulación de las células T se realizó mediante una molécula de anticuerpo anti-CD3 humano (10 jg/m l) o mediante una molécula de anticuerpo anti-CD3 humano (5 jg/m l) y una molécula de anticuerpo anti-CD28 (1 jg/m l) en presencia o no de un intervalo de concentración de 7 puntos de los compuestos de prueba. Después de 72 h de cultivo a 37 °C, CO2 al 10%, las células se pulsaron con 3H-TdR (1 jCi/pocillo) durante las últimas 6 h de cultivo. La proliferación celular se midió mediante la incorporación de timidina permitiendo la determinación de CI50 para cada compuesto ensayado.

Ácidos nucleicos

La divulgación también presenta ácidos nucleicos que comprenden secuencias de nucleótidos que codifican regiones variables de cadena pesada y ligera y CDR de las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, como se describe en el presente documento. Por ejemplo, la divulgación presenta un primer y un segundo ácido nucleico que codifican regiones variables de cadena pesada y ligera, respectivamente, de una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 elegida entre una o más de las moléculas de anticuerpo divulgadas en el presente documento. El ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos como se establece en las tablas del presente documento, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, o que difiere en no más de 3, 6, 15, 30 o 45 nucleótidos de las secuencias que se muestran en las tablas de este documento.

En ciertas realizaciones, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena pesada que tiene una secuencia de aminoácidos como se establece en las tablas de este documento, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o que tiene una o más sustituciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En otras realizaciones, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena ligera que tiene una secuencia de aminoácidos como se establece en las tablas de este documento, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o que tiene una o más sustituciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En otra realización más, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR de regiones variables de cadena pesada y ligera que tienen una secuencia de aminoácidos como se establece en las tablas de este documento, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o que tiene una o más sustituciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).

En ciertas realizaciones, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena pesada que tiene la secuencia de nucleótidos como se establece en las tablas de este documento, una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o capaz de hibridar bajo las condiciones de rigurosidad descritas en el presente documento). En otra realización, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena ligera que tiene la secuencia de nucleótidos como se establece en las tablas de este documento, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o capaz de hibridar bajo las condiciones de rigurosidad descritas en el presente documento). En otra realización más, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR de regiones variables de cadena pesada y ligera que tienen la secuencia de nucleótidos como se establece en las tablas de este documento, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% idéntica o más a la misma, y/o capaz de hibridar bajo las condiciones de rigurosidad descritas en el presente documento).

En otro aspecto de la divulgación, la solicitud presenta células huésped y vectores que contienen los ácidos nucleicos descritos en el presente documento. Los ácidos nucleicos pueden estar presentes en un solo vector o vectores separados presentes en la misma célula huésped o en una célula huésped separada, como se describe con más detalle a continuación.

Vectores

Se proporcionan adicionalmente en el presente documento vectores que comprenden secuencias de nucleótidos que codifican una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento. En una realización, los vectores comprenden nucleótidos que codifican una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento. En una realización, los vectores comprenden las secuencias de nucleótidos descritas en el presente documento. Los vectores incluyen, pero no se limitan a, un virus, plásmido, cósmido, fago lambda o un cromosoma artificial de levadura (YAC).

Se pueden emplear numerosos sistemas de vectores. Por ejemplo, una clase de vectores utiliza elementos de ADN que se derivan de virus animales tales como, por ejemplo, virus del papiloma bovino, virus polioma, adenovirus, virus vaccinia, baculovirus, retrovirus (virus del sarcoma de Rous, MMTV o MOMLV) o virus SV40. Otra clase de vectores utiliza elementos de ARN derivados de virus de ARN tales como el virus del bosque Semliki, el virus de la encefalitis equina del este y los flavivirus.

Además, las células que han integrado de forma estable el ADN en sus cromosomas pueden seleccionarse introduciendo uno o más marcadores que permitan la selección de células huésped transfectadas. El marcador puede proporcionar, por ejemplo, prototrofia a un huésped auxotrófico, resistencia a biocidas (por ejemplo, antibióticos) o resistencia a metales pesados tales como el cobre o similares. El gen marcador seleccionable puede unirse directamente a las secuencias de ADN que se van a expresar o introducirse en la misma célula mediante cotransformación. También pueden ser necesarios elementos adicionales para la síntesis óptima de ARNm. Estos elementos pueden incluir señales de empalme, así como promotores, mejoradores y señales de terminación de la transcripción.

Una vez que se ha preparado para la expresión el vector de expresión o la secuencia de ADN que contiene los constructos, los vectores de expresión pueden transfectarse o introducirse en una célula huésped apropiada. Se pueden emplear diversas técnicas para lograr esto, tales como, por ejemplo, fusión de protoplastos, precipitación con fosfato de calcio, electroporación, transducción retroviral, transfección viral, pistola génica, transfección basada en lípidos u otras técnicas convencionales. En el caso de la fusión de protoplastos, las células se cultivan en medio y se criban para determinar la actividad apropiada.

Los métodos y condiciones para cultivar las células transfectadas resultantes y para recuperar la molécula de anticuerpo producida son conocidos por los expertos en la técnica, y pueden variarse u optimizarse dependiendo del vector de expresión específico y la célula huésped de mamífero empleados, con base en la presente descripción.

Células

La divulgación también proporciona células huésped que comprenden un ácido nucleico que codifica una molécula de anticuerpo como se describe en el presente documento.

En una realización, las células huésped se modifican por ingeniería genética para comprender ácidos nucleicos que codifican la molécula de anticuerpo.

En una realización, las células huésped se modifican mediante ingeniería genética usando un casete de expresión. La frase "casete de expresión" se refiere a secuencias de nucleótidos que son capaces de afectar la expresión de un gen en huéspedes compatibles con tales secuencias. Dichos casetes pueden incluir un promotor, un marco de lectura abierto con o sin intrones y una señal de terminación. También pueden usarse factores adicionales necesarios o útiles para efectuar la expresión, tales como, por ejemplo, un promotor inducible.

La divulgación también proporciona células huésped que comprenden los vectores descritos en el presente documento.

La célula puede ser, pero no se limita a, una célula eucariota, una célula bacteriana, una célula de insecto o una célula humana. Las células eucariotas adecuadas incluyen, pero no se limitan a, células Vero, células HeLa, células COS, células CHO, células HEK293, células BHK, células MDCKII y línea celular Per C6 (por ejemplo, células PER C6 de Crucell). Las células de insectos adecuadas incluyen, pero no se limitan a, células Sf9.

En algunas realizaciones, la célula huésped es una célula eucariota, por ejemplo, una célula de mamífero, una célula de insecto, una célula de levadura o una célula procariota, por ejemplo, E. coli. Por ejemplo, la célula de mamífero puede ser una célula cultivada o una línea celular. Los ejemplos de células de mamífero incluyen líneas de células linfocíticas (por ejemplo, NSO), células de ovario de hámster chino (CHO), células COS, células de ovocitos y células de un animal transgénico, por ejemplo, células epiteliales mamarias.

Tabla 1. Secuencias de aminoácidos y nucleótidos para moléculas de anticuerpos murinas, quiméricas y humanizadas. Las moléculas de anticuerpos incluyen mAb murino BAP050, mAb quiméricos BAP050-qui, mAb humanizados BAP050-hum01 a BAP050-hum20, mAb humanizados BAP050-hum01-Ser a BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser a BAP050-hum20-Ser, y mAb humanizados BAP050-Clon F a BAP050-Clon-J. Se muestran las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las CDR de cadena pesada y ligera, las regiones variables de cadena pesada y ligera y las cadenas pesada y ligera.

Tabla 4. Secuencias de aminoácidos de las secuencias líder de cadena pesada y ligera para los mAb humanizados BAP050-Clon-F a BAP050-Clon-J

Tabla 5. Véanse los Ejemplos.

Tabla 6. Véanse los Ejemplos.

Tabla 7. Agentes terapéuticos seleccionados que se pueden administrar en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-LAG-3, por ejemplo, como un solo agente o en combinación con otros inmunomoduladores descritos en el presente documento. Cada publicación enumerada en esta Tabla se referencia en el presente documento, incluidas todas las fórmulas estructurales que contiene.

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Ejemplos

Los siguientes ejemplos se exponen para ayudar en la comprensión de la invención, pero no pretenden limitar su alcance de ninguna manera, y no deben interpretarse como tales.

Ejemplo 1: Humanización del anticuerpo anti-LAG-3, BAP050

Se humanizó un anticuerpo monoclonal anti-LAG-3 murino, BAP050. Se obtuvieron las secuencias y muestras de prueba de veinte clones de BAP050 humanizados con secuencias de región variable únicas. Estos clones se analizaron adicionalmente en cuanto a sus funciones biológicas (por ejemplo, unión a antígeno y bloqueo de ligando), características estructurales y expresión transitoria en células CHO.

Ejemplo 1.1: Tecnología y proceso de humanización

La humanización de BAP050 se realizó usando una biblioteca combinatoria de estructuras de región variable (FW) de la línea germinal humana. La tecnología implica transferir las CDR murinas en marco a una biblioteca de regiones variables humanas (VR) que se ha construido combinando aleatoriamente las secuencias FW1, FW2 y FW3 de la línea germinal humana. Solo se utiliza una secuencia FW4, que es WGQGTTVTVSS (SEQ ID NO: 221) para la cadena pesada (HC) (subgrupo I, de human HC de Kabat No. 21) y FGQGTKVEIK (SEQ iD NO: 271) para la cadena ligera (LC) (Subgrupo I k humana de Kabat, No. 5). La biblioteca de secuencias de VR se fusiona con secuencias de región constante humana (CR), IgG4 humana (S228P) de HC y CR de k humana de LC, y la biblioteca resultante de IgG completa se expresa en células CHO para cribado. El cribado se realizó con sobrenadantes de cultivo de tejidos midiendo la avidez de unión en células que expresan antígenos en un formato ELISA de células completas o en fAc S.

El proceso de humanización se realizó de manera escalonada comenzando con la construcción y expresión del mAb quimérico apropiado (VR murina, IgG4 (S228P), k humana), que puede servir como comparador para el cribado de los clones humanizados. Las secuencias de aminoácidos de la región constante para la cadena pesada de IgG4 humana (S228P) y la cadena ligera kappa humana se muestran en la Tabla 6.

La humanización de la VR de LC y HC se realizó en dos etapas independientes. La biblioteca de LC humanizada (huLC) se emparejó con la HC quimérica (VR murina, IgG4 (S228P)) y los mAb "semihumanizados" resultantes se cribaron para determinar la actividad de unión mediante ELISA. Se seleccionaron las huLC de los clones con actividad de unión adecuada (> unión de mAb quimérico). De forma análoga, la biblioteca de HC humanizada (huHC) se emparejó con la LC quimérica (VR murina, k humana) y se cribó para determinar la actividad de unión mediante ELISA. Se seleccionaron los huHC de los clones con actividad de unión apropiada (> unión de mAb quimérico).

Las regiones variables de las huLC y huHC seleccionadas se secuenciaron luego para identificar las huLC y huHC con secuencias únicas (algunos clones del proceso de selección inicial pueden compartir la misma LC o HC). La huLC y el huHC únicas se combinaron luego aleatoriamente para formar una pequeña biblioteca de humAb, que se expresó en células CHO y se cribó en células que expresan antígeno en un formato ELISA y FACS. Los clones con actividades de unión iguales o mejores que la unión del mAb comparador quimérico son el producto final del proceso de humanización.

Ejemplo 1.2: Secuencia de mAb murino BAP050

Se determinaron las secuencias de la región variable LC y HC del mAb anti-LAG-3 murino. Las secuencias obtenidas de dos análisis independientes fueron idénticas y se muestran en la Figura 1.

Se realizó un análisis de la línea germinal y parte del resultado se muestra en la Figura 2 como una alineación de la secuencia de aminoácidos. Para la cadena ligera, el gen V es 96,88% idéntico a mIGkV10-94*01F (279/288 nt) y el gen J es 97,30% idéntico a mIGkJ1*01F (36/37 nt). Para la cadena pesada, el gen V es 96,88% idéntico a mIGHV9-3-1 *01F (279/288 nt), el gen J es 86,79% idéntico a mIGHJ*01F, y el gen D es mIGHD1-1*01F.

Ejemplo 1.3: Clones de anticuerpos humanizados

Como se muestra en la Figura 3, el proceso de humanización produjo veinte clones humanizados con afinidades de unión comparables a las del anticuerpo quimérico. Además de los datos de unión, para cada clon, se proporcionaron las secuencias de VR junto con una muestra del mAb. Las muestras se habían preparado mediante transfecciones transitorias de células CHO y eran sobrenadantes de cultivo de tejidos concentrados. Las concentraciones de mAb en las soluciones se habían determinado mediante un ELISA específico de IgG4.

Como se muestra en la Figura 4, los veinte clones únicos son combinaciones de seis HC únicos y doce LC únicos. Las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de los dominios variables de cadena pesada y ligera para los clones de BAP050 humanizados se muestran en la Tabla 1. Las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las CDR de cadena pesada y ligera de los clones de BAP050 humanizados se muestran en la Tabla 1.

Se obtuvo una diversidad limitada para la región HC FW3 con dieciocho clones que tienen el mismo FWH3, que es de la línea germinal humana IGHV7-4 y tiene un residuo Cys expuesto en la posición 84 de los clones humanizados. Las secuencias de VHFW3 estrechamente relacionadas tienen típicamente un residuo Ser o Ala en esta posición. Por lo tanto, Cys84 fue reemplazado por Ser en clones humanizados seleccionados.

La Figura 4 indica que las muestras variaron en la concentración del mAb, variando de 3,2 pg/ml a 35,8 pg/ml. Estos números fueron representativos de varios experimentos de expresión transitoria.

Ejemplo 1.4: Análisis de los clones humanizados

Ejemplo 1.4.1: Análisis de la actividad de unión y la especificidad de unión de clones humanizados

La actividad de unión y la especificidad se midieron en un ensayo de unión competitiva usando una concentración constante de mAb murino marcado con FITC, diluciones en serie de los mAb de prueba y células CHO que expresan LAG-3. Las incubaciones con las mezclas de mAb que tenían diferentes relaciones de concentración de mAb de prueba a mAb marcado se realizaron a 4 °C durante 30 min. A continuación, se cuantificó el mAb murino marcado unido usando una máquina FACS. El experimento fue realizado dos veces. Los resultados se muestran en las Figuras 5A-5B.

Dentro de la precisión del experimento, todos los clones humanizados muestran una actividad similar para competir con la unión del mAb murino marcado. La actividad también es comparable a la actividad del mAb murino original y del mAb quimérico. Los mAb se clasificaron entre sí. Por ejemplo, puede ser un competidor más débil si en ambos experimentos la curva de un determinado clon está a la derecha de la curva de mAb quimérico o puede ser un mejor competidor si la curva de un cierto clon está al lado izquierdo de la curva de mAb quimérico. Este sistema de clasificación se utilizó en la Figura 6.

Ejemplo 1.4.2: Análisis de secuencia de clones humanizados

Con base en las características estructurales, los veinte mAb humanizados se dividieron en seis grupos y se clasificaron de la A a la F. Los resultados se muestran en la Figura 6.

Ejemplo 1.4.3: Selección de clones humanizados y generación de nuevas versiones con la mutación C84S

La Figura 6 resume los datos que se consideraron para la selección de clones humanizados. Se consideraron los datos de expresión (2a columna), la diversidad en la composición de las regiones variables (3a columna), las clasificaciones relativas en los estudios de unión (4a y 5a columnas) y el análisis estructural (6a columna). Ciertas características que conducen a la selección de clones individuales están marcadas con campos grises.

Se mutaron ciertos clones en la posición 84 de VHFW3 de Cys por Ser (véase el Ejemplo 1.3 anterior). Las nuevas versiones se denominan clones Nos. 1S, 2S, 5S, 9S, 11S, 12S y 13S, y juntos, clones huBAP050(Ser).

Ejemplo 1.4.4: Análisis de la actividad de unión y la especificidad de unión de los clones de huBAP050(Ser) Las nuevas versiones de los clones seleccionados con la mutación C84S en VHFW3 se sometieron a un ensayo de unión competitiva análogo como se describe en el Ejemplo 1.4.1. El experimento incluyó los clones humanizados originales con el residuo Cys84, los nuevos clones humanizados con el residuo Ser84, mAb quimérico y el mAb murino original. Los resultados se muestran en la Figura 7.

Todas las variantes ensayadas fueron comparables al mAb original murino en bloquear la unión del mAb murino marcado a células CHO que expresan LAG-3. De esto se deduce que el comportamiento de los nuevos clones humanizados con el residuo Ser84 no fue diferente del comportamiento de los clones humanizados originales con el residuo Cys84.

Ejemplo 1.4.5: Bloqueo de la unión de LAG-3-Ig a MHC Clase II en células Daudi

El LAG-3 se une al MHC de clase II, por lo tanto, los clones de huBAP050(Ser) seleccionados se probaron para determinar su capacidad para bloquear la unión de LAG-3-Ig soluble a las células Daudi (una línea celular de linfoma de Burkitt) que expresan el MHC de clase II. La capacidad de bloqueo de los mAb se evaluó en un ensayo de unión competitiva utilizando una concentración constante de proteína de fusión Fc LAG-3-hulgG1 (2 |jg/ml), diluciones en serie de los mAb a ensayar y células Daudi. La incubación fue a 4 °C durante 30 min. La proteína de fusión del ligando unido se detectó con un fragmento F(ab')2 conjugado con PE de anti-IgG humana de cabra que no reconoce los mAb IgG4 (Southern Biotech 2043-09) y citometría de flujo. Los resultados se muestran en la Figura 8.

Dentro de la precisión de los experimentos, los siete clones de huBAP050(Ser), el mAb quimérico y el mAb original murino demostraron una actividad de bloqueo comparable para LAG-3-Ig.

Ejemplo 1.4.6: Análisis de epítopos de células T

Se analizaron mAb humanizados para detectar epítopos de células T usando EpibaseMR. El algoritmo analiza cada péptido posible (cada 10 mer a lo largo de la proteína que avanza un aminoácido) para la unión a1HLA de clase II. Estima la energía libre de unión (AGunión) para cada péptido y calcula una KD putativa (AGunión = RT lnKo). Luego, los péptidos se marcan como S, M o N para enlazadores fuerte, medio y no enlazador. Los valores de umbral utilizados para esta clasificación son diferentes para cada alotipo.

Los datos se normalizaron a una puntuación de riesgo. La "puntuación de riesgo" general es la suma de todos los epítopos potenciales con respecto a todos los alelos probados, ponderada por las afinidades de los péptidos respectivos, pero omitiendo todos los epítopos potenciales en las secuencias de línea germinal (el valor más bajo por lo tanto es el "mejor")

Hay aproximadamente tres categorías de mAb, derivados de un gran conjunto de mAb de diferente composición como se describe a continuación.

Puntuación de riesgo de alrededor de 500: Los mAb completamente humanos generados a partir de humanos, ratones "humanizados" y bibliotecas de fagos ("los valores por debajo de 500 son realmente buenos incluso para anticuerpos completamente humanos"). Los mAb humanizados diseñados específicamente (incluso los CDR) para tener una puntuación baja se encuentran típicamente en la categoría de riesgo 500-700.

Puntuación de riesgo de alrededor de 900: anticuerpos injertados con CDR típicos, que tienen CDR completamente murinas con o sin cambios en la región FW ("tecnología de Gary Queen"); los mAb injertados a CDR aprobados están básicamente todos en esta categoría.

Puntuación de riesgo alrededor de 1500: mAb quiméricos.

Los resultados para los mAb BAP050 humanizados seleccionados son:

Las puntuaciones de riesgo de los siete clones humanizados seleccionados están en la categoría típica de mAb injertados a CDR. Por ejemplo, el mAb humano, adalimumab (Humira®), tiene una puntuación de 654, que es relativamente alta para los mAb humanos (en el extremo superior de la curva gaussiana) pero baja en comparación a un mAb injertado a un CDR típico.

Las puntuaciones provienen de las CDR murinas, específicamente los residuos Y. Estos son puntajes aceptables para anticuerpos para el tratamiento del cáncer. Cambiar la puntuación significaría modificar las CDR murinas, eliminando específicamente los residuos de Y.

Resumen y conclusiones

Se humanizó el anticuerpo monoclonal murino anti-LAG-3, BAP050. La tecnología implica la clonación de las CDR murinas en el marco en una biblioteca ordenada de estructuras de región variable de la línea germinal humana, que expresa la biblioteca de regiones variables clonadas como mAb humanizados IgG4 (S228P) intactos en células CHO, y selecciona clones que se unen con afinidad comparable o mayor a la diana que el mAb original. Por lo tanto, se pidió a las CDR murinas que seleccionaran las mejores secuencias marco de la línea germinal humana que preservan sus conformaciones y, por lo tanto, la afinidad y especificidad de unión del mAb murino original. Se obtuvieron las secuencias y muestras de prueba de veinte versiones humanizadas con secuencias de región variable únicas, que también habían pasado una prueba de unión con células CHO transfectadas con LAG-3. Dieciocho clones contenían la misma secuencia de línea germinal de HC FW3, que tiene una Cys rara en la posición 84. En siete clones seleccionados, Cys se reemplazó por Ser creando nuevos mAb marcados con clones huBAP050(Ser). Estos clones se analizaron adicionalmente para determinar sus funciones biológicas (por ejemplo, unión de antígeno y bloqueo de ligando), características estructurales y expresión transitoria en células CHO.

Ejemplo 2: Expresión de anticuerpo anti-LAG-3 humanizado, BAP050

Se seleccionaron cinco clones humanizados descritos en el Ejemplo 1 para la evaluación de la expresión en células de ovario de hámster chino (CHO).

Se construyeron vectores de un solo gen (SGV) usando vectores GS Xceed de Lonza (IgG4proAk para cadena pesada y Kappa para cadena ligera). Los SGV se amplificaron y se cotransfectaron transitoriamente en células CHOK1SV con inactivación de GS para su expresión a un volumen de 2,8 l.

Los cultivos de expresión se recogieron el día 6 después de la transfección y se aclararon mediante centrifugación y filtración estéril. El sobrenadante del cultivo celular clarificado se purificó usando cromatografía de proteína A de una etapa. El análisis de la calidad del producto en forma de SE-HPLC, SDS-PAGE, IEF y LAL se llevó a cabo utilizando material purificado a una concentración de 1 mg/ml que incluye un anticuerpo como muestra de control.

Ejemplo 2.1: Construcción del vector

Las secuencias de las regiones codificantes del dominio variable de la cadena ligera y pesada fueron sintetizadas por GeneArt AG. Las regiones codificantes del dominio variable de la cadena ligera se subclonaron en pXC-Kappa y las regiones codificantes del dominio variable de la cadena pesada en los vectores AK pXC-IgG4pro respectivamente utilizando el sitio de restricción del extremo terminal N Hind III y los sitios de restricción del extremo terminal C BsiWI (cadena ligera) y Apal (cadena pesada). Los clones positivos se cribaron mediante amplificación por PCR (cebadores 1053: GCTGACAGACTAACAGACTGTTCC (SEQ ID NO: 288) y 1072: CAAATGTGGTATGGCTGA (SEQ ID NO: 289)) y se verificaron mediante digestión de restricción (usando una digestión doble de EcoRI-HF y HindIII-HF) y secuenciación de nucleótidos del gen de interés.

Ejemplo 2.2: Amplificación de ADN

Se recogió una única colonia bacteriana en 15 ml de medio Luria Bertani (LB) (Caldo LB, Sigma-Aldrich, L7275) que contenía 50 pg/ml de ampicilina y se incubó a 37 °C durante la noche con agitación a 220 rpm. El cultivo iniciador resultante se utilizó para inocular 1 l de medio Luria Bertani (LB) que contenía 50 pg/ml de ampicilina y se incubó a 37 °C durante la noche con agitación a 220 rpm. El ADN del vector se aisló usando el sistema QIAGEN Plasmid Plus Gigaprep (QIAGEN, 12991). En todos los casos, la concentración de ADN se midió usando un espectrofotómetro Nanodrop 1000 (Thermo-Scientific) y se ajustó a 1 mg/ml con tampón EB (Tris-Cl 10 mM, pH 8,5). La calidad del ADN para los vectores de un solo gen se evaluó midiendo la relación de absorbancia A260/A280. Se encontró que estaba entre 1,88 y 1,90.

Ejemplo 2.3: Cultivo de células CHOK1SV con inactivación de GS

Se cultivaron células CHOK1SV con inactivación de GS en medio CD-CHO (Invitrogen, 10743-029) suplementado con glutamina 6 mM (Invitrogen, 25030-123). Las células se incubaron en una incubadora con agitación a 36,5 °C, CO2 al 5%, humedad de 85%, 140 rpm. Las células se subcultivaron rutinariamente cada 3-4 días, sembrando a 2 x 105 células/ml y se propagaron para tener suficientes células disponibles para la transfección. Las células se descartaron mediante el pase 20.

Ejemplo 2.4: Transfecciones transitorias de células CHOK1SV con inactivación de GS

Se realizaron transfecciones transitorias usando células CHOK1SV con inactivación de GS que habían estado en cultivo un mínimo de dos semanas. Las células se subcultivaron 24 h antes de la transfección y la viabilidad celular era > 99% en el momento de la transfección.

Todas las transfecciones se llevaron a cabo mediante electroporación usando un Gene Pulse MXCell (Bio-Rad), un sistema basado en placas para electroporación. Para cada transfección, las células viables se resuspendieron en medio precalentado a razón de 2,86 x 107 células/ml. Se tomaron alícuotas de 80 pg de ADN (relación 1:1 de SGV de cadena pesada y ligera) y 700 pl de suspensión celular en cada cubeta/pocillo. Las células se sometieron a electroporación a 300 V, 1300 pF. Las células transfectadas se transfirieron a medios precalentados en matraces Erlenmeyer y la cubeta/pocillos se enjuagaron dos veces con medio precalentado que también se transfirió a los matraces. Los cultivos de células transfectadas se incubaron en una incubadora con agitación a 36,5 °C, CO2 al 5%, 85% de humedad, 140 rpm durante 6 días. La viabilidad celular y las concentraciones de células viables se midieron en el momento de la recolección usando un contador celular automatizado Cedex HiRes (Roche).

Ejemplo 2.5: Cromatografía de afinidad de proteína A

El sobrenadante del cultivo celular se recogió y se clarificó mediante centrifugación a 2.000 rpm durante 10 min, luego se filtró a través de un filtro de membrana PES de 0,22 pm. El sobrenadante clarificado se purificó usando una columna HiTrap MabSelect SuRE de 5 ml previamente empacada (GE Healthcare, 11-0034-94) en un purificador AKTA (10 ml/min). La columna se equilibró con fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 125 mM, pH 7,0 (tampón de equilibrado) para 5 volúmenes de columna (CV). Después de cargar la muestra, la columna se lavó con 2 CV de tampón de equilibrio seguido de 3 CV de fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 1 M pH 7,0 y un lavado repetido de 2 CV de tampón de equilibrio. A continuación, el producto se eluyó con formiato de sodio 10 mM, pH 3,5 sobre 5 CV. Las fracciones eluidas que contenían proteínas se ajustaron inmediatamente a pH 7,2 y se filtraron a través de un filtro de 0,2 pm.

Se observó un único pico que contenía proteína durante la fase de elución. Se demostró que este pico contenía el mAb, cuando se analizó mediante SE-HPLC y SDS-PAGE. El rendimiento de proteína recuperado se muestra en la Tabla 5. Los clones se expresaron transitoriamente en un intervalo de 21,9 a 29,4 mg/l.

Tabla 5. Resumen del rendimiento, título, contenido de monómero niveles de endotoxinas

Ejemplo 2.6: Análisis por SE-HPLC

Se analizaron muestras de anticuerpos purificados con proteína A por duplicado mediante SE-HPLC en un sistema de HPLC de la serie 1200 de Agilent, usando una columna Zorbax GF-250 de 4 pm de 9,4 mm de diámetro interno x 250 mm (Agilent). Se filtraron alícuotas de muestra a una concentración de 1 mg/ml a través de un filtro de 0,2 pm antes de la inyección. Se inyectaron alícuotas de 80 pl respectivamente y se procesaron a 1 ml/min durante 15 minutos. Los niveles de agregados solubles se analizaron utilizando el software Chemstation (Agilent).

Se obtuvieron perfiles de cromatografía con un tiempo de retención que muestra el porcentaje de las áreas de los picos totales detectados para los anticuerpos analizados y un anticuerpo IgG4 de control. Los productos muestran un único pico de proteína a aproximadamente 8,59 a 8,61 min, comparable al control de anticuerpo IgG4 humano (aproximadamente 8,64 min) y consistente con un anticuerpo monomérico. Se detectaron pequeñas cantidades (hasta aproximadamente 3-4%) de impurezas de mayor peso molecular, consistentes con agregados solubles, con tiempos de retención de alrededor de 7,90 min.

Ejemplo 2.7: Análisis por SDS-PAGE

Se prepararon muestras reducidas para análisis mezclando con tampón de muestra NuPage 4x LDS (Invitrogen, NP0007) y agente reductor de muestras NuPage 10x (Invitrogen, NP0009), y se incubaron a 70 °C, 10 min. Para las muestras no reducidas, se omitieron el agente reductor y la incubación con calor. Las muestras se sometieron a electroforesis en geles previamente fundidos de Bis-Tris Novex al 4-12% NuPage de 1,5 mm (Invitrogen, NP0335PK2) con tampón de procesamiento NuPage MES SDS en condiciones de desnaturalización. Se incluyeron en el gel alícuotas de 10 pl de estándar de peso molecular teñido previamente con SeeBlue Plus 2 (Invitrogen, LC5925) y un anticuerpo IgG4 de control a razón de 1 mg/ml. Se cargó en el gel 1 pl de cada muestra a 1 mg/ml. Una vez sometidos a electroforesis, los geles se tiñeron con InstantBlue (TripleRed, ISB01L) durante 30 min a temperatura ambiente. Las imágenes de los geles teñidos se analizaron en un sistema de obtención de imágenes BioSpectrum (UVP).

El análisis confirmó la presencia de los productos de anticuerpos y buenos niveles de pureza. En condiciones no reductoras, se observó una banda de proteína predominante cercana a 98 kDa comparable con el anticuerpo IgG4 de control. El anticuerpo IgG4 de control y un clon analizado muestran una banda más débil adicional correspondiente a un semi-anticuerpo de cadena pesada más ligera a aproximadamente 70 kDa en condiciones no reductoras. Esto se espera para el anticuerpo de control. Se observaron dos bandas en condiciones reductoras consistentes con el tamaño de las cadenas pesada (cerca de la posición del marcador de 49 kDa) y ligera (cerca de la posición del marcador de 28 kDa) y comparables con las bandas encontradas para el anticuerpo IgG4 de control.

Ejemplo 2.8: Análisis de enfoque isoeléctrico (IEF)

Se sometieron a electroforesis muestras no reducidas de anticuerpo purificado con proteína A como se describe a continuación.

Se sometieron a electroforesis 5 |jg de muestras purificadas de proteína A en un gel de gradiente de pH 3-10 Novex de 1,0 mm (Invitrogen, EC66552BOX) usando las condiciones de funcionamiento recomendadas por los fabricantes. Se incluyó en el gel una alícuota de 10 j l de marcadores IEF pH 3-10 (Invitrogen, 39212-01). Una vez sometidos a electroforesis, los geles se fijaron con una solución de TCA al 10% durante 30 minutos y luego se tiñeron con InstantBlue (TripleRed, ISB01L) durante la noche a temperatura ambiente. Las imágenes de los geles teñidos se analizaron en un sistema de obtención de imágenes BioSpectrum (UVP).

Como se muestra en la Tabla 6, los clones probados presentan isoformas de carga entre pH 6,0 y 7,45. Las isoformas de carga detectadas son comparables a los pl calculados teóricamente para estos anticuerpos que se predijo que estaban entre 6,35 y 6,82. Los clones F y G tienen ambos un pl predicho de 6,35 y muestran isoformas de carga comparables, lo que también es coherente con que el pl calculado teóricamente sea el mismo para ambos (6,35). El anticuerpo IgG4 de control se comportó como se esperaba.

T l . I f rm r r l n li i IEF N v x

Ejemplo 2.9: Análisis de endotoxinas

Se midieron los niveles de endotoxina de proteínas purificadas a concentraciones finales (hasta 3,44 mg/ml) usando un instrumento Endosafe-PTS, un método de cartucho basado en el ensayo LAL (Charles River).

Como se muestra en la Tabla 8, se encontró que el contenido de endotoxinas variaba de 0,05 a 0,27 EU/mg.

Conclusión

Se construyeron vectores de expresión de gen único GS para mAb anti-LAG-3 humanizados seleccionados y se usaron para transfectar transitoriamente células CHOK1SV con inactivación de GS. Se incubaron de 2,6 a 2,8 litros de cultivo de expresión bajo condiciones estándar durante 6 días y el sobrenadante del cultivo celular resultante se purificó usando cromatografía de proteína A. Los títulos posteriores a la purificación se indican en la Tabla 8 y se encontró que oscilaban entre 21,88 y 29,38 mg/l. Los rendimientos recuperados oscilan entre 61,3 y 82,3 mg.

El análisis por SDS-PAGE y SE-HPLC indicó que la presencia de una pequeña cantidad (hasta 4,69%) de agregados solubles presentes en los productos era predominantemente consistente con el anticuerpo dimérico para el mAb. Los mAb también mostraron impurezas de mayor peso molecular con tiempos de retención consistentes con aquellos de los anticuerpos triméricos.

El enfoque isoeléctrico detectó una serie de isoformas de carga para todos los mAb. Los mAb mostraron isoformas generalmente más básicas cuando se basan en pI calculado teóricamente para estas moléculas, lo que indica algún nivel de modificación posterior a la traducción. Se encontró que los mAb eran comparables a sus valores pI calculados teóricamente.

Los niveles de endotoxina para todas las muestras se midieron antes de la provisión de muestras y se encontraron por debajo de 0,63 EU/mg.

Ejemplo 3: Caracterización de anticuerpos anti-LAG-3 murinos y humanizados

Ejemplo 3.1: Caracterización del anticuerpo anti-LAG-3 murino

Se investigó la afinidad de unión del anticuerpo anti-LAG-3 murino BAP050 con LAG-3. Como muestran los análisis FACS, el anticuerpo anti-LAG-3 murino se une a células CHO transfectadas con LAG-3 humana con una Kd de 0,2 nM, a células T humanas con una Kd de 0,26 nM y a células 300.19 transfectadas con LAG-3 humana con una Kd de 13,6 nM.

Se examinó la actividad de bloqueo del anticuerpo BAP050 anti-LAG-3 murino mediante ensayos de unión competitiva. El anticuerpo anti-LAG-3 murino bloqueó la unión de LAG-3-Ig a moléculas MHC de clase II en células Raji con una CI50 de 2,3 nM.

Se ensayó el efecto del anticuerpo BAP050 anti-LAG-3 murino sobre la expresión del interferón gamma (IFN-y). El anticuerpo anti-LAG-3 murino dio como resultado un aumento de 3,0 ± 2,1 veces en la expresión de IFN-y en células estimuladas con anti-CD3 (0,1 |jg/ml), un aumento de 1,6 ± 0,4 veces en células estimuladas con enterotoxina estafilocócica B (SEB) (3 pg/ml) y un aumento de 1,4 ± 0,3 veces en células estimuladas con péptidos de CMV.

Se examinaron las regiones de LAG-3 que pueden unirse al anticuerpo BAP050 anti-LAG-3 murino. Como se muestra mediante ELISA, el anticuerpo anti-LAG-3 murino se une a una proteína de fusión LAG-3 Ig (sLAG-3 D1-D4Ig) que contiene los cuatro dominios extracelulares similares a Ig (D1-D4), así como una proteína de fusión LAG-3 Ig (sLAG-3 D1-D2Ig) que solo contiene del Dominio 1 (D1) al Dominio 2 (D2). Un análisis más detallado muestra que el anticuerpo anti-LAG-3 se une a las células CHO que expresan LAG-3 de longitud completa, LAG-3 con eliminación de D2 (CHO-LAG-3AD2) y LAG-3 con eliminación parcial del bucle extra de D1 (CHO-lAg -3AP48A60). Por lo tanto, el anticuerpo anti-LAG-3 se une a D1 de LAG-3.

También se encontró que el anticuerpo murino anti-LAG-3 BAP050 aumentaba la secreción de IFN-y en PBMC estimuladas con CD3 en comparación con el control de IgG1 de ratón y sin control de anticuerpo. El doble del aumento varía de 1,4 a 2,9 veces entre cuatro donantes.

Ejemplo 3.2: Caracterización del anticuerpo anti-LAG-3 humanizado

Afinidad y especificidad de unión

Se midió la unión de un ejemplo de anticuerpo anti-LAG-3 humanizado sobre la proteína LAG-3 humana usando un método Biacore. Los resultados son: Ka = 6,41 x 105 M'1 S'1; Kd = 7,00 x 105 M'1 s'1; Kd = 0,109 ± 0,008 nM. El anticuerpo anti-LAG-3 también se une a LAG-3 de Cynomolgus medido por un método Biacore.

La unión del mismo anticuerpo anti-LAG-3 humanizado en células CHO que expresan LAG-3 humana y células HEK 209 que expresan LAG-3 de mono Cynomolgus se midió mediante análisis FACS. El resultado muestra que el anticuerpo anti-LAG-3 (IgG4 humana) se une con alta afinidad a LAG-3 humana en comparación con un control de isotipo IgG4 humano. El anticuerpo anti-LAG-3 se une a células que expresan LAG-3 humana con una Kd de 1,92 nM y se une a células que expresan LAG-3 de mono Cynomolgus con una Kd de 2,3 nM.

También se midió la unión del anticuerpo anti-LAG-3 en células 300.19 que expresan LAG-3 de rhesus. Los resultados muestran que el anticuerpo anti-LAG-3 se une a LAG-3 de rhesus con una Kd de 8,03 nM.

Los análisis de unión adicionales muestran que el ejemplo de anticuerpo anti-LAG-3 humanizado no presenta reactividad cruzada con LAG-3 de ratón ni reactividad cruzada con la línea celular original.

Bloqueo de interacciones entre LAG-3 y sus ligandos

Se examinó la capacidad del ejemplo de anticuerpo anti-LAG-3 humanizado para bloquear las interacciones entre LAG-3 y sus dos ligandos conocidos, moléculas de MHC de clase II. Los resultados muestran que el anticuerpo anti-LAG-3 bloqueó la interacción entre las moléculas de LAG-3 y MHC de clase II en células Daudi con una CI50 de 5,5 nM, en comparación con un control de isotipo IgG4 humana.

Estimulación de LAG-3 de la liberación de citocinas in vitro en ausencia del acoplamiento del receptor de células T

No se espera que el anticuerpo anti-LAG-3 estimule respuestas de citocinas detectables sin una estimulación específica por parte del receptor de células T. El anticuerpo anti-LAG-3 se inmovilizó y entrecruzó altamente mediante secado al aire en una placa de cultivo de tejidos y se probó su capacidad para estimular la producción de citocinas usando un método derivado de Stebbings R., et al., (J Immunol. 2007 179 (5): 3325-3331). No se indujo producción de IL-2 o IFN-y por el anticuerpo anti-LAG-3 o IgG de control en ausencia de estimulación de la enterotoxina B estafilocócica (SEb ) de la sangre completa.

Ejemplo 4: Selección de pacientes con base en el estado de PD-L1/CDS/IFN-Y

Para cada uno de varios tipos de cáncer, se analizaron muestras de múltiples pacientes para determinar el estado de PD-L1/CD8/IFN-Y. Cada muestra se clasificó como: triple negativa para PD-L1/CD8/IFN-Y, simple o doble positiva para estos marcadores o triple positiva para estos marcadores. La Figura 11 muestra que en este experimento, dentro de una población de pacientes, los siguientes tipos de cáncer son frecuentemente triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-y: cáncer de pulmón (escamoso), cáncer de pulmón (adenocarcinoma), cáncer de cabeza y cuello, cáncer de cuello uterino (escamoso), cáncer de estómago, cáncer de tiroides, melanoma y cáncer de nasofaringe. Los pacientes que tienen estos tipos de cáncer son buenos candidatos para la terapia con anticuerpos anti-PD-1 en terapias de combinación como se describe en el presente documento, por ejemplo, anticuerpos anti-LAG-3. La probabilidad de un tratamiento exitoso se puede aumentar aún más determinando qué pacientes son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y, y tratando a los pacientes triple positivos con anticuerpos anti-PD-1 o anti-PD-Ll y una combinación de terapias como se describe en el presente documento, por ejemplo, anticuerpos anti-LAG-3.

La Figura 12 muestra que dentro de una población de pacientes, los siguientes tipos de cáncer rara vez son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-y: cáncer de mama ER+ y cáncer de páncreas. En particular, incluso en cánceres que generalmente no son positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y, se puede aumentar la probabilidad de un tratamiento exitoso al determinar qué pacientes son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y, y tratar los pacientes triple positivos con anticuerpos anti-PD-1 o anti-PD-Ll y terapias de combinación como se describe en el presente documento, por ejemplo, anticuerpos anti-LAG-3.

La Figura 13 muestra la proporción de pacientes con cáncer de mama que son triple positivos para PDL1/CD8/IFN-Y. Teniendo en cuenta el cáncer de mama en general, la proporción de triple positivos es algo baja. Sin embargo, cuando uno se centra solo en el cáncer de mama IM-TN, se puede observar que un porcentaje mucho mayor de pacientes es triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y. El cáncer de mama IM-TN es particularmente difícil de tratar con terapias convencionales. El descubrimiento de que el cáncer de mama IM-TN es a menudo triple positivo para PD-L1/CDS/IFN-Y abre nuevas vías de terapia para este cáncer con anticuerpos anti-PD-1 o anti-PD-L1 y terapias de combinación como se describe en el presente documento, por ejemplo, anticuerpos anti-LAG-3.

La Figura 14 muestra la proporción de pacientes con cáncer de colon que son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y. Teniendo en cuenta el cáncer de colon en general, la proporción de triple positivos es algo baja. Sin embargo, cuando uno se enfoca solo en el cáncer de mama con MSI alto (alta inestabilidad de microsatélites), se puede observar que un porcentaje mucho mayor de pacientes es triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y. Los niveles de MSI se pueden analizar usando, por ejemplo, métodos con base en PCR disponibles comercialmente.

Se analizaron muestras de cáncer gástrico para determinar los niveles de PD-L1/CD8/IFN-Y (datos no mostrados). Se encontró que en los cánceres gástricos con alto MSI o EBV+, alrededor del 49% eran positivos para PD-L1, y una alta proporción de las células positivas para PD-L1 eran triple positivas para PD-L1/CD8/IFN-Y. También se encontró que una proporción de células positivas para PD-L1 y células positivas para PD-L1/CDS/IFN-Y también eran positivas para PIK3CA. Este hallazgo sugiere que estos cánceres pueden tratarse con un anticuerpo PD-1 o anti-PD-L1, por ejemplo, en combinación con un anticuerpo anti-LAG-3, opcionalmente en combinación con un agente terapéutico PIK3.

Se analizaron muestras de CRC con alto MSI para una combinación de marcadores (datos no mostrados). Se encontró que en las muestras de CRC con alto MSI, una alta proporción de las muestras de PD-L1/CD8/IFN-Y también son positivas para LAG-3, PD-1 (también llamado PDCD1), RNF43 y BRAF. Este hallazgo sugiere que estos cánceres pueden tratarse con un anticuerpo LAG-3, opcionalmente en combinación con un compuesto terapéutico que se dirige a uno o más de PD-1, PD-L1, PDCD1, RNF43 y BRAF.

Se analizaron los cánceres de pulmón de células escamosas para una combinación de marcadores (datos no mostrados). Se encontró que en muestras de cáncer de pulmón de células escamosas, una alta proporción de las muestras de PD-L1/CD8/ iFN-y también son positivas para LAG-3. Este hallazgo sugiere que estos cánceres pueden tratarse con un anticuerpo LAG-3, opcionalmente en combinación con un agente terapéutico que se dirija a PD-1 o PD-L1, por ejemplo, un anticuerpo anti-PD-1 o un anticuerpo anti-PD-L1.

Se analizaron los cánceres de tiroides papilares para una combinación de marcadores que incluía la mutación V600E de BRAF (datos no mostrados). Se encontró que una alta proporción de muestras de cáncer de tiroides que son positivas para PD-L1 también son positivas para V600E de BRAF. Este hallazgo sugiere que estos cánceres pueden tratarse con un anticuerpo anti-PD-1 o un anticuerpo anti-PD-L1, por ejemplo, en combinación con un anticuerpo anti-LAG-3, opcionalmente en combinación con un agente terapéutico que se dirige a BRAF.

Ejemplo 5: Selección de pacientes con base en el estado de PD-L1

Para permitir un examen amplio de las indicaciones de cáncer para terapias basadas en inmunomoduladores (por ejemplo, LAG-3 solo o en combinación con PD1/PD-L1), se evaluó la expresión de PD-L1 en los niveles de proteína y ARNm en cánceres humanos, incluidos tumores de pulmón y hepáticos.

La expresión de la proteína PD-L1 se evaluó en un conjunto de adenocarcinoma (ACA) de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) incrustado en parafina y fijado con formalina, carcinoma de células escamosas (SCC) de NSCLC y tumores de carcinoma hepatocelular (HCC) mediante inmunohistoquímica (IHC). La expresión de PD-L1 se puntuó semicuantitativamente mediante una metodología de histo puntuación manual (puntuación H) con base en la intensidad de la tinción y el porcentaje de células tumorales positivas. En este análisis de IHC, la positividad de PD-L1 (PD-L1+) se definió como una puntuación H > 20. En paralelo, se examinaron los datos de expresión de ARNm de PD-L1 a partir de The Cancer Genome Atlas (TCGA) en estas mismas indicaciones (503 NSCLC ACA, 489 NSCLC

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y una molécula de anticuerpo anti-PD-1, en la que la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende:

(b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 1; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12; (c) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286, una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5 y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 15; o (d) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de la SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11 y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de la SEQ ID NO: 12, y

en la que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende:

(a) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de GYTFTTY (SEQ ID NO: 4 del documento u S 2015/0210769), una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de YPGTGG (SEQ ID NO: 5 del documento US 2015/0210769), y una secuencia aminoácidos de VHCDR3 de WTTGTGAY (Se Q ID NO: 3 del documento US 2015/0210769); y una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de SQSLLDSGNQKNF (SEQ ID NO: 13 de US 2015/0210769), una secuencia de aminoácidos de VLCDR2 de WAS (SEQ ID NO: 14 del documento US 2015/0210769), y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de DYSYPY (SEQ ID NO: 33 del documento US 2015/0210769); o

(b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos de VHCDR1 seleccionada de TYWMH (SEQ ID NO: 1 del documento US 2015/0210769); una secuencia de aminoácidos de VHCDR2 de NIYPGTGGSNFDEKFKN (SEQ ID NO: 2 del documento US 2015/0210769); y una secuencia de aminoácidos de VHCDR3 de WTTGTGAY (Se Q ID NO: 3 del documento US 2015/0210769); y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos de VLCDR1 de KSSQSLLDSGNQKNFLT (SEQ ID NO: 10 del documento US 2015/0210769), una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de WASTRES (SEQ ID n O: 11 del documento US 2015/0210769), y una secuencia de aminoácidos de VLCDR3 de QNDYSYPYT (SEQ ID NO: 32 del documento US 2015/0210769).

2. La composición de la reivindicación 1, que comprende una o más composiciones o formas de dosificación.

3. Una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y una molécula de anticuerpo anti-PD-1, para uso en un método de tratamiento de un cáncer en un sujeto,

en la que la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 y la molécula de anticuerpo anti-PD-1 son como se definen en la reivindicación 1.

4. La composición de la reivindicación 1 o 2, o la combinación para uso de la reivindicación 3, en la que la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende:

un dominio variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos de una cualquiera de las SEQ ID NOs: 8, 28, 64, 68, 72, 76, 80, 100, 104 o 108, o una secuencia de aminoácidos al menos 85% idéntica a una cualquiera de las SEQ ID NOs: 8, 28, 64, 68, 72, 76, 80, 100, 104 o 108; y/o

un dominio variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos de una cualquiera de las SEQ ID NOs: 32, 36, 40, 44, 48, 52, 56, 60, 84, 88, 92 o 96, o una secuencia de aminoácidos al menos 85% idéntica a una cualquiera de las SEQ ID NOs: 32, 36, 40, 44, 48, 52, 56, 60, 84, 88, 92 o 96.

5. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1-2 o 4, o la combinación para uso de la reivindicación 3 o 4, en la que la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende:

(a) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 32;

(b) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36;

(c) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40; (d) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 44;

(e) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 48;

(f) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 52;

(g) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56;

(h) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60;

(i) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36;

(j) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40;

(k) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56;

(l) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.

(m) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 68 o 108; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 36;

(n) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72 u 8; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40;

(o) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72 u 8; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 60.

(r) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 88;

(s) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 28 o 100; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 92; o

(t) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 64 o 104; y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 96.

6. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1-2 o 4-5, o la combinación para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 3-5, en la que la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende:

una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de una cualquiera de las SEQ ID NOs: 18, 30, 66, 70, 74, 78, 82, 102, 106, 110, 113, 122 o 134; y/o

una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de una cualquiera de las SEQ ID NOs: 34, 38, 42, 46, 50, 54, 58, 62, 86, 90, 94 o 98.

7. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1-2 o 4-6, o la combinación para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 3-6, en la que la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende:

(a) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 34;

(b) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38;

(c) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42;

(d) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 46;

(e) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50;

(f) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 54;

(g) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58;

(h) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62;

(i) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66 o 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38;

(j) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66 o 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42;

(k) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66 o 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58;

(l) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66 o 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62;

(m) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 70 o 110; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38;

(n) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74 o 18; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42;

(o) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74 o 18; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62;

(p) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 78 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62;

(q) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 82 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 86;

(r) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 30 o 102; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 94;

(s) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66 o 106; y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 98;

(t) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 113 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 34;

(u) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 113 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38;

(v) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 122 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38;

(w) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 122 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 58; o

(x) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 134 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38.

8. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1-2 o 4-7, o la combinación para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 3-7, en la que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos uno o dos dominios variables de cadena pesada que comprenden opcionalmente una región constante, al menos uno o dos dominios variables de cadena ligera que comprenden opcionalmente una región constante, o ambos, en la que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende la secuencia de aminoácidos de:

BAP049-Clon-A que comprende una secuencia de aminoácidos del dominio variable de cadena pesada EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGG SNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTV SS (SEQ ID NO: 38 del documento US 2015/0210769) y una secuencia del aminoácidos de dominio variable de cadena ligera

EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGQAPRLLIYWASTR ESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 42 de US 2015/0210769);

BAP049-Clon-B que comprende una secuencia de aminoácidos del dominio variable de cadena pesada

EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGG SNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTV SS (SEQ ID NO: 38 del documento US 2015/0210769) y una secuencia de aminoácidos del dominio variable de cadena ligera

EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGKAPKLLIYWASTR ESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 54 del documento US 2015/0210769);

BAP049-Clon-C que comprende una secuencia de aminoácidos del dominio variable de cadena pesada

EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGQAPRLLIYWASTR ESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 66 del documento US 2015/0210769);

BAP049-Clon-D que comprende una secuencia de aminoácidos del dominio variable de cadena pesada

EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWIRQSPSRGLEWLGNIYPGTGGSN FDEKFKNRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSS (SEQ ID NO: 50 del documento US 2015/0210769) y una secuencia de aminoácidos del dominio variable de cadena ligera

EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGQAPRLLIYWASTR ESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 70 del documento US 2015/0210769 ); o

BAP049-Clon-E que comprende una secuencia de aminoácidos del dominio variable de cadena pesada

EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGG SNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTV SS (SEQ ID NO: 38 del documento US 2015/0210769) y una secuencia de aminoácidos del dominio variable de cadena ligera EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGQAPRLLIYWASTR ESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 70 del documento US 2015/0210769); o

una secuencia que tiene al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más con cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente.

9. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1-2 o 4-8, o la combinación para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 3-8, en la que la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo humanizada y/o una molécula de anticuerpo monoespecífica o una molécula de anticuerpo biespecífica.

10. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1-2 o 4-9, o la combinación para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 3-9, en la que la molécula de anticuerpo es un anticuerpo monoclonal, un fragmento Fab, F(ab')2, Fv, o un fragmento Fv de cadena sencilla (scFv); o

comprende una región constante de cadena pesada que es IgG1, IgG2, IgG3 o IgG4, y/o una región constante de cadena ligera que es la región constante de cadena ligera de kappa o lambda.

11. La composición de la reivindicación 10, o la combinación para uso de la reivindicación 10, en la que la molécula de anticuerpo anti-LAG-3, la molécula de anticuerpo anti-PD-1, o ambas, comprende:

(a) una región constante de cadena pesada de IgG4 humana con una mutación en la posición 108 de la SEQ ID NO: 275 o 277 y una región constante de cadena ligera kappa;

(b) una región constante de cadena pesada de IgG4 humana de la SEQ ID NO: 275 o 277 y una región constante de cadena ligera kappa;

(c) una región constante de cadena pesada de IgG1 humana de la SEQ ID NO: 279 y una región constante de cadena ligera kappa;

(d) una región constante de cadena pesada de IgG1 humana de la SEQ ID NO: 280 y una región constante de cadena ligera kappa; o

(e) una región constante de cadena pesada de IgG1 humana de la SEQ ID NO: 281 y una región constante de cadena ligera kappa.

12. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1-2 o 4-11, o la combinación para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 3-11, en la que cualquier molécula de anticuerpo tiene una primera especificidad de unión para LAG-3 y una segunda especificidad de unión para PD-1; y/o

en la que la molécula de anticuerpo comprende un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo, opcionalmente un medio anticuerpo o un fragmento de unión a antígeno de un medio anticuerpo.

13. La combinación para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 3-12, en la que el cáncer es un cáncer de pulmón, un melanoma, un cáncer de riñón, un cáncer de hígado, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer colorrectal, un cáncer gástrico, un cáncer de páncreas, un cáncer de tiroides, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer de endometrio, un cáncer de cerebro, un cáncer de nasofaringe, un mesotelioma, un tumor sólido, un cáncer hematológico o una lesión metastásica del cáncer,

opcionalmente en la que el cáncer es un cáncer de alta inestabilidad de microsatélites.

14. La combinación para uso de la reivindicación 13, en la que:

(a) el cáncer de pulmón es un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), un adenocarcinoma de pulmón, un carcinoma de pulmón de células escamosas o un cáncer de pulmón de células pequeñas, opcionalmente, en el que el NSCLC comprende una mutación KRAS;

(b) el melanoma es un melanoma avanzado, un melanoma irresecable, un melanoma metastásico, un melanoma con una mutación BRAF, un melanoma con una mutación NRAS, un melanoma cutáneo o un melanoma intraocular; (c) el cáncer renal es un carcinoma de células renales (RCC), un carcinoma de células renales metastásico o un carcinoma de células renales de células claras (CCRCC);

(d) el cáncer hematológico es un linfoma, un mieloma o una leucemia, opcionalmente, en el que el linfoma es un linfoma no Hodgkin;

(e) el cáncer de cerebro es un glioblastoma;

(f) el cáncer de mama es un cáncer de mama triple negativo o un cáncer de mama ER+; o

(g) el cáncer de hígado es un carcinoma hepatocelular.

15. La combinación para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 3-14, en la que la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se usa simultáneamente con, antes o después de, la molécula de anticuerpo anti-PD-1.