ES2366902T3

ES2366902T3 - Intermedios para la preparación de ciertas triazolopirimidinas como antagonistas de p2t.

Info

Publication number: ES2366902T3
Application number: ES03025535T
Authority: ES
Inventors: David Hardern; Anthony Ingall; Brian Springthorpe; Paul Willis; Simon Guile
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 1998-12-04
Filing date: 1999-12-02
Publication date: 2011-10-26
Anticipated expiration: 2019-12-02
Also published as: BRPI9915883B8; KR100764417B1; DE69915675D1; HK1061684A1; IL169013A; DE69940171D1; USRE46276E1; CZ300373B6; NZ511778A; US20120165348A1; KR20070007971A; RU2007133926A; ATE418547T1; HK1039933B; LTPA2011004I1; US6974868B2; EP1386921A1; US20130072503A1; FR11C0016I2; CZ20011962A3

Abstract

Un compuesto de fórmula (V) **Fórmula** en donde: R1 es propilo; R3 y R4 son ambos hidroxilo o R3 y R4 juntos forman un enlace en el anillo de miembros; R es OCH2CH2OH; y L es halógeno o SR.

Description

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención proporciona intermedios para la preparación de nuevos compuestos de triazol[4,5d]pirimidina.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

La adhesión y agregación de las plaquetas son sucesos iniciadores de la trombosis arterial. Aunque el proceso de la adhesión de las plaquetas a la superficie sub–endotelial puede desempeñar un papel importante en la reparación de las paredes deterioradas de los vasos, la agregación plaquetaria que esto inicia puede precipitar una oclusión trombótica aguda de lechos vasculares vitales, conduciendo a sucesos con alta morbilidad tales como infarto de miocardio y angina inestable. El éxito de las intervenciones utilizadas para prevenir o aliviar estas condiciones, tales como trombólisis y angioplastia se pone también en compromiso por la oclusión o re-oclusión mediada por las plaquetas.

Cierto número de caminos convergentes conducen a la agregación plaquetaria. Cualquiera que sea el estímulo inicial, el suceso final común es una reticulación de las plaquetas por fijación de fibrinógeno a un sitio de fijación de la membrana, la glicoproteína IIb/IIIa (GPIIb/IIIa). La alta eficacia antiplaquetaria de los anticuerpos o antagonistas para GPIIb/IIIa se explica por su interferencia con el suceso final común. Sin embargo, esta eficacia puede explicar también los problemas de hemorragia que se han observado con esta clase de agentes. La trombina puede producir agregación plaquetaria de modo independiente en gran parte de otros caminos, pero es improbable que se presenten cantidades sustanciales de trombina sin activación previa de las plaquetas por otros mecanismos. Los inhibidores de la trombina tales como la hirudina son agentes antitrombóticos altamente eficaces, pero de nuevo pueden producir hemorragias excesivas debido a que funcionan a la vez como agentes antiplaquetarios y anticoagulantes (The TIMI 9a Investigators (1994), Circulation 90, pp. 1624-1630; The Global Use of Strategies to Open Occluded Coronary Artheries (GUSTO), IIa Investigators (1994) Circulation 90, pp. 1631–1637; Neuhaus K.L. et al. (1994) Circulation 90, pp. 1638–1642).

Se ha encontrado que el adenosina 5'–difosfato (ADP) actúa como un mediador clave de la trombosis. Un papel fundamental para ADP está soportado por el hecho de que otros agentes, tales como adrenalina y 5– hidroxitriptamina (5HT, serotonina) producirán únicamente agregación en presencia de ADP. La eficacia antitrombótica limitada de la aspirina puede reflejar el hecho de que la misma bloquea solamente una fuente de ADP que es la liberada de una manera dependiente del tromboxano después de la adhesión plaquetaria (véase, v.g., Antiplatelet Trialists' Collaboration (1994), Br. Med. J. 308, pp. 81–106 y Antiplatelet Trialists' Collaboration (1994), Br. Med. J. 308, pp. 159–168). La aspirina no tiene efecto alguno sobre la agregación producida por otras fuentes de ADP, tales como células deterioradas o ADP liberado en condiciones de flujo turbulento de la sangre.

La agregación plaquetaria inducida por ADP está mediada por el subtipo de receptor P2T localizado en la membrana plaquetaria. El receptor P2T (conocido también como P2YADP o P2TAC) está implicado fundamentalmente en la mediación de la agregación/activación plaquetaria y es un receptor acoplado a proteína G que está todavía sin clonar. Las características farmacológicas de este receptor han sido descritas, por ejemplo, en las referencias publicadas por Humphries et al., Br. J. Pharmacology (1994), 113, 1057–1063, y Fagura et al., Br. J. Pharmacology (1998) 124, 157–164. Recientemente, se ha demostrado que los antagonistas de este receptor ofrecen mejoras significativas sobre otros agentes antitrombóticos (véase J. Med. Chem. (1999) 42, 213). De acuerdo con ello, existe necesidad de encontrar adicionalmente antagonistas P2T (P2YADP o P2TAC)como agentes antitrombóticos.

La Solicitud de Patente Internacional WO 9905143 expone en líneas generales una serie de compuestos de triazol[4,5–d]pirimidina que tienen actividad como antagonistas de P2T (P2Y ADP o P2TAC). Se ha encontrado ahora que ciertos compuestos comprendidos dentro del alcance de la Solicitud de Patente Internacional WO 9905143 pero no descritos específicamente en ella exhiben una potencia elevada combinada con estabilidad y biodisponibilidad metabólicas sorprendentemente altas, por lo que la dosis terapéutica predicha para una inhibición o agregación prolongada en el hombre presenta ventajas.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN

Se proporciona un compuesto de fórmula (I):

imagen1

en donde: R1 es alquilo C3–5 sustituido opcionalmente con uno o más átomos de halógeno; R2 es un grupo fenilo, sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor; R3 y R4 son ambos hidroxi; R es XOH, donde X es CH2, OCH2CH2 o un enlace;

o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, o un solvato de dicha sal, con la condición de que: cuando X es CH2 o un enlace, R1 no es propilo, cuando X es CH2 y R1 es CH2CH2CF3, butilo o pentilo, el grupo fenilo en R2 tiene que estar sustituido con flúor, cuando X es OCH2CH2 y R1 es propilo, el grupo fenilo en R2 tiene que estar sustituido con flúor. Los grupos alquilo, tanto solos como formando parte de otro grupo, son de cadena lineal y totalmente saturados. Convenientemente, R1 es un alquilo C3–5 sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor. Preferiblemente,

R1 es alquilo C3–5 sustituido opcionalmente en el átomo de carbono terminal con tres átomos de flúor. Más

preferiblemente, R1 es 3,3,3–trifluoropropilo, butilo o propilo. Convenientemente, R2 es fenilo o fenilo sustituido con uno o más átomos de flúor. Preferiblemente, R2 es fenilo, 4– fluorofenilo o 3,4–difluorofenilo.

Convenientemente, R es XOH, donde X es CH2, OCH2CH2 o un enlace. Preferiblemente, R es CH2OH u OCH2CH2OH. Compuestos particularmente preferidos incluyen: [1R–[1α,2α,3β(1R*,2S*),5β]]–3–[7–[[2–(4–fluorofe–nil)ciclopropil]amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)–tio]–3H–1,2,3–

triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–5–(hi–droximetil)–ciclopentano–1,2–diol;

[1R–[1α,2α,3β(1R*,2S*),5β]]–3–[7–[[2–(3,4–difluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)–tio]–3H–1,2,3– triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–5–(hi–droximetil)ciclopentano–1,2–diol; [1S–(1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]]–3–[7–[[2–(3,4–difluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–(propiltio)–3H–1,2,3–tri–azol[4,5–

d]pirimidin–3–il]–5–(2–hidroxietoxi)–ciclo–pentano–1,2–diol;

[1R–[1α,2α,3β(1R*,2S*),5β]]–3–[5–(butiltio)–7–[[2–(3,4–difluorofenil)ciclopropil]amino]–3H–1,2,3–tri–azol[4,5– d]pirimidin–3–il]–5–(hidroximetil)–ciclo–pentano–1,2–diol; [1S–[1α,2α,3β,4α (1S*,2R*)]]–4–[5–(butiltio)–7–[[2–(4–fluorofenil)ciclopropil]amino]–3H–1,2,3–triazol–[4,5–

d]pirimidin–3–il]–ciclopentano–1,2,3–triol;

[1S–(1α,2α,3β(1S*,2R*),5β)]–3–[7–[[2–(3,4–difluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)–tio]–3H–1,2,3– triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–5–(2–hi–droxietoxi)–ciclopentano–1,2–diol; [1S–[1α,2α,3β,5β(1S*,2R*)]]–3–(2–hidroxietoxi)–5–[7–(2–fenilciclopropil)amino]–5–[(3,3,3–trifluoropro–pil)tio]–3H–

1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il)–ciclopentano–1,2–diol; [1S–[1α,2β,3β,4α(1S*,2R*)]]–4–[5–(butiltio)–7–[[2–(3,4–difluorofenil)ciclopropil]amino]–3H–1,2,3–tri–azol[4,5– d]pirimidin–3–il]ciclopentano–1,2,3–triol;

[1S–[1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]]–3–[5–(butiltio)–7–[(2–fenilciclopropil)amino]–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]piri–midin–3–il]–5– (2–hidroxietil)–ciclopentano–1,2–diol; y sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, o solvatos de dichas sales. Se proporciona adicionalmente un proceso para la preparación de un compuesto de fórmula (I) que comprende:

(a) hacer reaccionar un compuesto de fórmula (II):

imagen1

donde R, R1, R3 y R4 son como se define en la fórmula (I), o son derivados protegidos de la misma, o R3 y R4 forman juntos un enlace en el anillo de 5 miembros, o R es CH2CH2OR', donde R' es alquilo C1–6 o bencilo; y L es un grupo lábil tal como halógeno o SR, con un compuesto de fórmula (III):

imagen2

o en el caso en que X es un enlace:

(b) hidroxilación de un compuesto de fórmula (IV):

imagen3

imagen4

5

10

15

20

25

30

35

Los compuestos de fórmula (II) se pueden hacer reaccionar con aminas de fórmula (III) en presencia de una base, tal como una amina orgánica terciaria, en un disolvente inerte, tal como diclorometano, a la temperatura ambiente o a temperatura elevada. Otras bases adecuadas incluyen bases inorgánicas tales como carbonato de potasio.

Los grupos hidroxi R3 y R4 pueden estar protegidos como grupos OP1 y OP2 donde P1 y P2 son grupos protectores. Ejemplos de grupos protectores adecuados en los compuestos de fórmula (II) son alquilo C1–6 (preferiblemente metilo), bencilo, (alquilo C1–6)3Si (preferiblemente t–butildimetilsililo), y un grupo C(O)–alquilo C1–6, tal como acetilo. Preferiblemente, los dos grupos P1 y P2, junto con los átomos a los cuales están unidos, forman un anillo alquilideno tal como un anillo metilideno o isopropilideno. Alternativamente, P1 y P2 pueden formar un anillo alcoximetilideno tal como etoximetilideno.

Los grupos protectores pueden añadirse y eliminarse utilizando condiciones de reacción conocidas. El uso de grupos protectores se describe con todo detalle en 'Protective Groups in Organic Chemistry', recopilado por J.W.F. McOmie, Plenum Press (1973), y 'Protective Groups in Organic Synthesis', 2ª edición, TW Greene & PGM Wutz, Wiley– Interscience (1991).

Los grupos protectores éster pueden eliminarse por hidrólisis básica, por ejemplo utilizando un hidróxido metálico, preferiblemente un hidróxido de metal alcalino, tal como hidróxido de sodio o hidróxido de litio, o un hidróxido de amonio cuaternario en un disolvente, tal como etanol acuoso o tetrahidrofurano acuoso, a una temperatura comprendida entre 10º y 100ºC, siendo preferiblemente la temperatura próxima a la temperatura ambiente; o por hidrólisis ácida utilizando un ácido mineral tal como HCl o un ácido orgánico fuerte tal como ácido tricloroacético en un disolvente tal como 1,4–dioxano acuoso. Los grupos protectores trialquilsililo pueden eliminarse por el uso de, por ejemplo, una fuente de ion fluoruro, por ejemplo fluoruro de tetra–n–butilamonio o fluoruro de hidrógeno. Cuando uno o ambos de P1 y P2 son alquilo C1–6, la desprotección puede realizarse utilizando tribromuro de boro. Los grupos bencilo pueden eliminarse por hidrogenólisis utilizando un catalizador de metal de transición, por ejemplo paladio sobre carbón vegetal, bajo una atmósfera de hidrógeno, a una presión de 1 a 5 bares, en un disolvente, tal como ácido acético.

Un compuesto de fórmula (II) se puede preparar por diazotación de un compuesto de fórmula (V):

imagen5

en donde R1 es como se define en la fórmula (I), y R es como se define en la fórmula (I), o es un derivado protegido del mismo, o es OCH2CO2R', donde R' es alquilo C1–6 o bencilo, y L es como se define arriba y R3 y R4 son como se define en la fórmula (I) o son derivados protegidos de la misma, o R3 y R4 forman juntos un enlace en el anillo de 5 miembros,

con un nitrito metálico, por ejemplo un nitrito de metal alcalino, especialmente nitrito de sodio en ácido acuoso diluido, por ejemplo HCl 2M, o con un nitrito de alquilo C1–6, en un disolvente inerte, a una temperatura de aproximadamente –20 a 100ºC. Condiciones preferidas son nitrito de isoamilo en acetonitrilo a aproximadamente 80ºC.

En particular, la invención proporciona un compuesto de fórmula (V):

imagen1

en donde:

R1 es propilo; R3 y R4 son ambos hidroxilo o R3 y R4 juntos forman un enlace en el anillo de 5 miembros; R es OCH2CH2OH; y L es halógeno o SR. Un compuesto de fórmula (V) en donde R es CH2OH, R3 y R4 son hidroxilo o derivados protegidos del mismo y L es

como se define arriba, se puede preparar por reducción de un compuesto de fórmula (VI):

imagen6

en donde R1, L, P1 y P2 son como se define arriba.

La reducción del grupo nitro puede llevarse a cabo por ejemplo utilizando hidrogenación con un catalizador de metal

10 de transición a una temperatura próxima a la temperatura ambiente, por ejemplo paladio sobre carbón vegetal bajo una atmósfera de hidrógeno, preferiblemente a una presión de 1 a 5 atmósferas, en un disolvente, por ejemplo etanol, o por utilización de hierro en un disolvente ácido tal como ácido acético a una temperatura de aproximadamente 100ºC.

La reducción de la lactama puede llevarse a cabo utilizando hidruros metálicos complejos tales como hidruro de litio

15 y aluminio en un disolvente tal como éter o preferiblemente, utilizando borohidruro de sodio en un disolvente adecuado tal como metanol.

Un compuesto de fórmula (VI) se puede preparar por reacción de un compuesto de fórmula (VII):

imagen7

en donde L y R1 son como se define anteriormente arriba y L1 es un grupo lábil, por ejemplo un átomo de halógeno, 20en donde L y L1 son preferiblemente iguales, con un compuesto de fórmula (VIII):

imagen8

en donde P1 y P2 son como se define arriba, en presencia de una base tal como alquilo C1–6–M o MH, en donde M es un ion metálico, por ejemplo n–butil–litio, en un disolvente inerte, tal como tetrahidrofurano, a una temperatura comprendida entre aproximadamente –10ºC y aproximadamente 100ºC. Preferiblemente se utiliza hidruro de sodio

25 en tetrahidrofurano a la temperatura ambiente.

Uno o más grupos funcionales pueden convertirse en otros grupos funcionales utilizando química estándar. Un compuesto en el que X es un enlace se puede convertir en un compuesto en el que X es O(CH2)2 por tratamiento con base seguido por LY donde L es un grupo lábil e Y es (CH2)2OH o una versión protegida del mismo, o Y es CH2COOR' donde R' es alquilo C1–6 o bencilo. Un compuesto en el que R es CH2CH2OR' se puede convertir en un 30 compuesto en el que R es O(CH2)2OH por reducción, por ejemplo utilizando DIBAL–H®. El grupo SR1 puede interconvertirse por oxidación del azufre, por ejemplo utilizando oxoneTM o mCBPA, seguido por tratamiento con un compuesto R1'–SM donde R1' es un grupo R1 diferente y M es un metal tal como sodio. Alternativamente, el producto

de la oxidación de azufre puede tratarse con MSH donde M es un metal tal como sodio, seguido por tratamiento con una base y R1'X, donde R1' es un grupo R1 diferente y X es un grupo lábil. Bases adecuadas incluyen N,N– diisopropiletilamina.

Un compuesto de fórmula (II) donde R, R1, R3 y R4 son como se define en la fórmula (I) o son derivados protegidos

5 de los mismos, o R3 y R4 forman juntos un enlace en el anillo de 5 miembros, o R es OCH2CO2R' donde R' es alquilo C1–6 o bencilo, y L es un grupo lábil tal como halógeno, se puede convertir en un compuesto de fórmula (II) donde R, R1, R3, y R4 son como se define arriba y L es NH2 por tratamiento con un agente de diazotación en presencia de un agente de halogenación, preferiblemente nitrito de isoamilo y tetrabromuro de carbono.

Un compuesto de fórmula (II) donde R, R1, R3 y R4 son como se define arriba y L es NH2 se puede preparar por

10 tratamiento de un compuesto de fórmula (II) donde R, R1, R3, y R4 son como se define arriba y L es un grupo lábil tal como halógeno, con amoniaco en un disolvente tal como metanol.

Los compuestos de fórmula (V) se pueden preparar también por tratamiento de un compuesto de fórmula (XI)

imagen9

donde R, R3 y R4 son como se define en la fórmula (I) o son derivados protegidos de los mismos o R es OCH2CO2R' 15 donde R' es alquilo C1–6 o bencilo o R3 y R4 forman juntos un enlace en el anillo de cinco miembros,

con un compuesto de fórmula (VII) como se define arriba, seguido por reducción del grupo nitro. La reacción se lleva a cabo en un disolvente inerte tal como diclorometano o 1,4–dioxano, en presencia de una base no nucleófila, tal como N,N–diisopropilamina, a una temperatura de aproximadamente –20ºC a aproximadamente 150ºC, preferiblemente a la temperatura ambiente.

20 Los compuestos de fórmula (II) donde R es como se define en la fórmula (I), R3 y R4 forman juntos un enlace en el anillo de 5 miembros, y L es SR1, o un derivado protegido del mismo, se pueden preparar por reacción de un compuesto de fórmula (XII):

imagen10

donde los grupos R1 son como se define en la fórmula (I), 25con un compuesto de fórmula (XIII):

imagen11

en la cual R7 es H o un derivado protegido del mismo. La reacción se puede llevar a cabo en presencia de un complejo de metal de transición adecuado, preferiblemente tetraquistrifenilfosfina–paladio(0).

Los compuestos de fórmula (XII) se pueden preparar a partir de compuestos de fórmula (XIV):

imagen12

por reacción con un compuesto R'X donde R' es como se define en la fórmula (I) y X es un grupo lábil tal como halo, seguido por ciclación.

Los compuestos de fórmula (XI) donde R es OH o una versión protegida del mismo y R3 y R4 son como se define en la fórmula (I) o son derivados protegidos de los mismos se pueden preparar a partir de compuestos de fórmula (XIII) donde R7 es H o un grupo protector por tratamiento con un bis–éster de ácido imidodicarbámico utilizando catálisis con paladio seguida por hidroxilación del enlace doble, y opcionalmente, desprotección del nitrógeno. Preferiblemente se utilizan bis–(1,1–dimetiletil)éster del ácido imidodicarbónico y tetraquistrifenilfosfina–paladio(0), seguidos por te–tróxido de osmio y desprotección utilizando ácido clorhídrico en metanol.

Los compuestos de fórmula (XI), donde R es OCH2CO2R' donde R' es alquilo C1–6 y R3 y R4 forman juntos un enlace en el anillo de cinco miembros, se pueden formar a partir de compuestos de fórmula (XIII), donde R7 es H o un grupo protector, por tratamiento con una azida en presencia de un catalizador de paladio, seguido por reducción de la azida y alquilación del alcohol como se ha descrito previamente.

Los compuestos de fórmula (XI), donde R es OCH2CH2OH y R3 y R4 son como se define en la fórmula (I) o son derivados protegidos de los mismos, se pueden preparar a partir de compuestos de fórmula (XI) donde R es OH y R3 y R4 son como se define en la fórmula (I) o son derivados protegidos de los mismos, por protección del nitrógeno, alquilación del alcohol utilizando un éster de ácido 2–halo–acético, seguido por reducción del éster y desprotección del nitrógeno. Los autores de la invención prefieren la protección del nitrógeno como un derivado carbobenciloxi utilizando cloroformiato de bencilo seguido por alquilación del alcohol utilizando bromoacetato de etilo y t–butóxido de potasio, reducción del éster utilizando borohidruro de litio en tetrahidrofurano y desprotección del nitrógeno por hidrogenación en presencia de paladio sobre carbono. Adicionalmente, los autores de la invención prefieren el caso en que los alcoholes R3 y R4 están protegidos como un anillo de isopropilideno.

Las aminas de fórmula (III) se pueden preparar utilizando procedimientos descritos en H Nishiyama et al., Bull. Chem. Soc., Jpn., 1995, 68, 1247, P. Newman, Optical Resolution Procedures for Chemical Compounds, Vol. 1, Amines and Related Compounds; Optical Resolution and Information Centre: Manhattan College, Riverdale, NY, 1978, p. 120, J. Vallgarda et al., J. Chem. Soc. Perkin 1, 1994, 461, o en la Solicitud de Patente Internacional WO 9905143.

Las sales de los compuestos de fórmula (I) se pueden formar por reacción del ácido libre, o una sal del mismo, o la base libre, o una sal o un derivado de la misma, con uno o más equivalentes de la base apropiada (por ejemplo hidróxido de amonio sustituido opcionalmente con alquilo C1–6 o un hidróxido de metal alcalino o metal alcalino– térreo) o el ácido apropiado (por ejemplo un hidrácido halogenado (especialmente HCl), ácido sulfúrico, oxálico o fosfórico). La reacción puede llevarse a cabo en un disolvente o un medio en el que la sal es insoluble o un disolvente en el cual la sal es soluble, v.g. agua, etanol, tetrahidrofurano o dietil–éter, que puede eliminarse a vacío,

o por liofilización. La reacción puede ser también un proceso de metátesis o se puede llevar a cabo sobre una resina cambiadora de iones. Se prefieren las sales no tóxicas fisiológicamente aceptables, aunque pueden ser útiles otras sales, v.g. en el aislamiento o la purificación del producto.

Los compuestos de fórmula (I) actúan como antagonistas de los receptores P2T (P2YADP o P2TAC). Por esta razón, los compuestos son útiles en terapia, con inclusión de la terapia de combinación, estando particularmente indicados para uso como: inhibidores de la activación, agregación y desgranulación plaquetaria, promotores de la desagregación de las plaquetas, agentes anti–trombóticos o en el tratamiento o la profilaxis de la angina inestable, complicaciones trombóticas arteriales primarias de la ateroesclerosis tales como accidente cerebrovascular trombótico fulminante o embólico ataques isquémicos transitorios, enfermedad vascular periférica, infarto de miocardio con o sin trombólisis, complicaciones arteriales debidas a intervenciones en enfermedad ateroesclerótica tales como angioplastia, con inclusión de angioplastia coronaria (PTCA), endarterectomía, colocación de dilatadores ("stents"), cirugía de injerto coronaria y de otros vasos, complicaciones trombóticas de deterioro quirúrgico o mecánico tales como recuperación de tejidos consecutiva a traumatismo accidental o quirúrgico, cirugía reconstructiva con inclusión de colgajos de piel y de músculo, condiciones con un componente difuso trombótico/de consumo de plaquetas tales como coagulación intravascular diseminada, púrpura trombocitopénica trombótica, síndrome urémico hemolítico, complicaciones trombóticas de la septicemia, síndrome de dificultad respiratoria de los adultos, síndrome anti–fosfolípidos, trombocitopenia inducida por heparina y pre–eclampsia/eclampsia, o trombosis venosa tal como trombosis venosa profunda, enfermedad venooclusiva, condiciones hematológicas tales como enfermedad mieloproliferativa, con inclusión de trombocitemia, enfermedad de células falciformes; o en la prevención de la activación de las plaquetas inducida mecánicamente in vivo, tal como derivación cardio–pulmonar y oxigenación de membranas extracorpóreas (prevención de la microtromboembolia), activación de las plaquetas inducida mecánicamente in vitro, tal como el uso en la preservación de productos de sangre, v.g. concentrados de plaquetas, u oclusión de una derivación tal como en la diálisis y plasmaféresis renal, trombosis secundaria a deterioro/inflamación vascular tal como vasculitis, arteritis, glomerulonefritis, enfermedad intestinal inflamatoria y rechazo de trasplantes de órganos, condiciones tales como migraña, fenómeno de Raynaud, condiciones en las cuales las plaquetas pueden contribuir al proceso de enfermedad inflamatoria subyacente en la pared vascular tales como la formación/progresión de la placa ateromatosa, estenosis/restenosis y en otras condiciones inflamatorias tales como asma, en las cuales las plaquetas y factores derivados de las plaquetas están implicados en el proceso de enfermedad inmunológica. Indicaciones adicionales incluyen tratamiento de trastornos del CNS y prevención del crecimiento y la propagación de los tumores.

Se proporciona adicionalmente el uso de un compuesto de acuerdo con la fórmula (I) como un ingrediente activo en la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento o la prevención de los trastornos arriba indicados. En particular, los compuestos de fórmula (I) son útiles para tratamiento del infarto de miocardio, accidente cerebrovascular trombótico fulminante, ataques isquémicos transitorios, enfermedad vascular periférica, y angina estable e inestable, especialmente angina inestable.

Los compuestos se pueden administrar por vía local externa, v.g. al pulmón y/o las vías aéreas, en la forma de soluciones, suspensiones, aerosoles HFA y formulaciones de polvo seco; o sistémicamente, v.g. por administración oral en la forma de tabletas, píldoras, cápsulas, jarabes, polvos o gránulos, o por administración parenteral en la forma de soluciones o suspensiones parenterales estériles, por administración subcutánea, o por administración rectal en la forma de supositorios o transdérmicamente.

Los compuestos de fórmula (I) se pueden administrar en sí mismos o como composición farmacéutica que comprende el compuesto de fórmula (I) en combinación con un diluyente, adyuvante y/o vehículo farmacéuticamente aceptable. Son particularmente preferidas composiciones que no contienen material capaz de causar una reacción adversa, v.g. una reacción alérgica.

Las formulaciones de polvo seco y los aerosoles HFA presurizados de los compuestos de fórmula (I) pueden administrarse por inhalación oral o nasal. Para la inhalación, el compuesto está, de modo deseable, finamente dividido. Los compuestos de fórmula (I) se pueden administrar también por medio de un inhalador de polvo seco. El inhalador puede ser un inhalador de dosis simple o multidosis, y puede ser un inhalador de polvo seco accionado por la respiración.

Una posibilidad consiste en mezclar el compuesto finamente dividido con una sustancia vehículo, v.g. un mono–, di–

o polisacárido, un alcohol–azúcar u otro poliol. Vehículos adecuados incluyen azúcares y almidón. Alternativamente, el compuesto finamente dividido puede estar recubierto por otra sustancia. La mezcla de polvos puede dispensarse también en cápsulas de gelatina dura, cada una de las cuales contiene la dosis deseada del compuesto activo.

Otra posibilidad es procesar el polvo finamente dividido en esferas que se rompen durante el procedimiento de inhalación. Este polvo esferonizado puede llenarse en el depósito de fármaco de un inhalador multidosis, v.g., el conocido como Turbuhaler® en el cual una unidad de dosificación mide la dosis deseada que es inhalada luego por el paciente. Con este sistema, se suministra al paciente el compuesto activo con o sin una sustancia vehículo.

La composición farmacéutica que comprende el compuesto de fórmula (I) puede ser convenientemente tabletas, píldoras, cápsulas, jarabes, polvos o gránulos para administración oral; soluciones parenterales o subcutáneas estériles, suspensiones para administración parenteral, o supositorios para administración rectal.

Para administración oral, el compuesto activo puede mezclarse con un adyuvante o un vehículo, v.g. lactosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidones tales como almidón de patata, almidón de maíz o amilopectina, derivados de celulosa, un aglomerante tal como gelatina o polivinilpirrolidona, y un lubricante tal como estearato de magnesio, estearato de calcio, polietilenglicol, ceras, parafina, y análogos, y comprimirse luego en tabletas. Si se requieren tabletas recubiertas, los núcleos, preparados como se describe arriba, pueden recubrirse con una solución concentrada de azúcar que puede contener v.g. goma arábiga, gelatina, talco, dióxido de titanio, y análogos. Alternativamente, la tableta puede recubrirse con un polímero adecuado disuelto, sea en un disolvente orgánico fácilmente volátil, o un disolvente acuoso.

Para la preparación de cápsulas de gelatina blanda, el compuesto se puede mezclar, v.g. con un aceite vegetal o polietilenglicol. Las cápsulas de gelatina dura pueden contener gránulos del compuesto utilizado los excipientes mencionados anteriormente para tabletas, v.g. lactosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidones, derivados de celulosa

o gelatina. Asimismo, las formulaciones líquidas o semisólidas del fármaco pueden introducirse en cápsulas de gelatina dura.

Las preparaciones líquidas para aplicación oral pueden encontrarse en la forma de jarabes o suspensiones, por ejemplo soluciones que contienen el compuesto, siendo el resto azúcar y una mezcla de etanol, agua, glicerol y propilenglicol. Opcionalmente, tales preparaciones líquidas pueden contener agentes colorantes, agentes saborizantes, sacarina y carboximetilcelulosa como agente espesante u otros excipientes conocidos por los expertos en la técnica.

EJEMPLOS A EFECTOS ILUSTRATIVOS Y DE REFERENCIA

En los ejemplos, los espectros NMR se midieron en un espectrómetro Varian Unity Inova 300 ó 400 y los espectros MS se midieron como sigue: se obtuvieron los espectros EI en un espectrómetro VG 70–250S o Finnigan Mat Incos– XL; los espectros FAB se obtuvieron en un espectrómetro VG70–250SEQ, y los espectros ESI y APCI se obtuvieron en un espectrómetro Finnigan Mat SSQ7000 o un espectrómetro Micromass Platform. Las separaciones por HPLC preparativa se realizaron generalmente utilizando una columna Novapak®, Bondapak® o Hypersil® compactada con sílice de fase inversa BDSC–18. La cromatografía súbita (indicada en los ejemplos como (SiO2)) se llevó a cabo utilizando sílice Fisher Matrix, 35–70 μm. Para los ejemplos que mostraron la presencia de rotámeros en los espectros NMR del protón, se citan únicamente los desplazamientos químicos del rotámero principal.

Ejemplo 1

[1R–[1α,2α,3β(1R*,2S*),5β]]–3–[7–[[2–(4–Fluorofenil)ciclo–propil]amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)tio]–3H– 1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–5–(hidroximetil)–ciclopen–tano–1,2–diol

a) [3aS–[1(E),3aα,6α,7aβ]]–1–[3–(4–Fluorofenil)–1–oxo–2–propenil]–hexahidro–8,8–dimetil–3H–3a,6–metano– 2,1–benci–sotiazol–2,2–dióxido

Una mezcla de ácido 3–(4–fluorofenil)–2–propenoico (3,0 g) y cloruro de tionilo (5,0 ml) se agitó a 70ºC durante 1 hora, y la mezcla de reacción se concentró luego a presión reducida. El residuo se destiló azeotrópicamente dos veces con diclorometano y se disolvió luego en tolueno (10 ml). A una suspensión de hidruro de sodio (dispersión al 60% en aceite; 0,99 a) en tolueno (40 ml) se añadió una solución de [3aS–(3aα,6α,7aβ)]–hexahidro–8,8–dimetil–3H– 3a,6–metano–2,1– bencisotiazol–2,2–dióxido (3,89 g) en tolueno (40 ml) y la mezcla se agitó durante 30 minutos. Se añadió luego a la mezcla de reacción la solución descrita arriba y la suspensión resultante se agitó durante 16 horas. Se añadió agua (200 ml), se recogieron los componentes orgánicos y la fase acuosa se extrajo en diclorometano (3 x 100 ml). Los componentes orgánicos se reunieron, se secaron y se concentraron. La recristalización (etanol) dio el compuesto del subtítulo como agujas incoloras (5,92 g).

MS (APCI) 364 (M+H+, 100%).

b) 3aS–[1(1S*,2S*),3aα,6α,7aβ]]–1–[[2–(4–Fluorofenil)–ciclopropil]carbonil]–hexahidro–8,8–dimetil–3H–3a,6– meta–no–2,1–bencisotiazol–2,2–dióxido

Una solución de diazometano (2,9 g) en éter (150 ml) (preparada como se describe en Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry, 5ª edición, Longman Scientific and Technical, p. 432) se añadió a una solución del producto del paso a) (5,90 g) y acetato de paladio(II) (18 mg) en diclorometano (350 ml) a 0ºC, y la mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 5 horas. Se añadió ácido acético (5 ml) y la mezcla de reacción se lavó luego con solución saturada de bicarbonato de sodio (200 ml) y los componentes orgánicos se filtraron a través de un pequeño bloque de sílice. Después de concentración a vacío, el residuo se recristalizó (etanol) para dar el compuesto del subtítulo como agujas incoloras (3,81 g).

MS (APCI) 378 (M+H+, 100%).

c) Ácido (1R–trans)–2–(4–fluorofenil)–ciclopropano–carboxílico

Una suspensión del producto del paso b) (3,74 g) e hidróxido de litio monohidratado (4,11 g) en tetrahidrofurano (100 ml)/agua (3 ml) se agitó a 50ºC durante 24 horas. La mezcla de reacción se concentró a vacío, y el residuo se disolvió en agua (100 ml), se acidificó con HCl 2N y se extrajo en diclorometano (3 x 75 ml). Los componentes orgánicos se secaron y se concentraron. La purificación (SiO2, isohexano:dietiléter 2:1 como eluyente) dio el compuesto del subtítulo como un sólido incoloro (1,78 g)

MS (APCI) 179 (M–H+, 100%).

d) (1R–trans)–2–(4–Fluorofenil)ciclopropanamina, [R–(R*,R*)]–2,3–dihidroxibutanodioato (1:1)

A una solución del producto del paso c) (1,78 g) y trietilamina (2,7 ml) en acetona/agua (10:1, 23 ml) a 0ºC, se añadió cloroformiato de etilo (2,0 ml) durante 5 min. La solución se mantuvo a 0ºC durante 30 minutos antes de la adición de azida de sodio (1,52 g) en agua (6 ml). Después de 1 hora más, se añadió agua (350 ml) y la mezcla de reacción se extrajo con tolueno (3 x 100 ml). Los extractos orgánicos se reunieron y se secaron, después de lo cual se calentaron a reflujo durante 2 horas detrás de una pantalla de aire forzado. Después de enfriar la solución, se añadió HCl 6N (50 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante 3 horas. Se añadió agua (150 ml) y la fase acuosa se basificó con NaOH 2N (aq), y se extrajo luego en diclorometano (3 x 100 ml). La fase orgánica se secó y se concentró. La amina se disolvió en etanol (5 ml) y se añadió una solución de ácido L–tartárico (1,48 g) en etanol (20 ml). Después de 20 minutos, se recogió el sólido, proporcionando el compuesto del subtítulo como agujas incoloras (1,12 g).

NMR δH (d6–DMSO) 1,07–1,39 (1H, m), 1,22–1,29 (1H, m), 2,16–2,23 (1H, m), 2,64–2,70 (1H, m), 3,95 (2H, s), 7,06–7,19 (4H, m).

e) [3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]]–6–[7–[[2–(4–Fluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–(propiltio)–3H–1,2,3–triazol– [4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclo–penta–1,3–dioxol–4–metanol

Se añadió N,N–diisopropiletilamina (1,29 g) a una solución de [3aR–(3aα,4α,6α,6aα]–6–[7–cloro–5–(propil–tio)–3H– 1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–metanol (preparado como se describe en la Solicitud de Patente Internacional WO 9703084) (1,0 g) y el producto del paso d) (0,75 g) en diclorometano (25 ml). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 3 horas, se lavó luego con agua, se secó y se evaporó. El residuo se purificó (SiO2, acetato de etilo:isohexano 1:1 como eluyente) para proporcionar el compuesto del subtítulo (1,25 g).

MS (APCI) 515 (M+H+, 100%).

f) [3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]]–6–[7–[[2–(4–Fluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–(propilsulfonil)–3H–1,2,3– tri–azol[4,3–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–metanol

Se añadió ácido 3–cloroperoxibenzoico (70%, 1,8 g) a una suspensión del producto del paso e) (1,25 g) en etanol (25 ml) y la solución resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se recogió en acetato de etilo (500 ml), se lavó con solución acuosa de metabisulfito de sodio al 10% (2 x 100 ml) y solución acuosa al 10% de bicarbonato de sodio (2 x 100 ml), se secó luego y se concentró para proporcionar el compuesto del subtítulo (1,4 g)

MS (APCI) 547 (M+H+, 100%).

g) [[3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]]–6–[7–[[2–(4–Fluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)tio]– 3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il)–tetrahidro–2,2–di–metil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–methanol

Se añadió hidrosulfuro de sodio hidratado (1,4 g) a una solución del producto del paso f) (1,4 g) en dimetil–sulfóxido (20 ml) y la solución se agitó a la temperatura ambiente durante 1,5 horas. Se añadió salmuera (150 ml) y la mezcla se acidificó con ácido acético y se extrajo luego con acetato de etilo (3 x 100 ml). La fase orgánica se secó y se concentró, y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x 100 ml). El residuo se disolvió en N,N– dimetilformamida (20 ml), y se añadieron luego N,N–diisopropiletilamina (0,33 g) y bromuro de 3,3,3–trifluoropropilo (0,48 g). Después de agitar a 50ºC durante 30 minutos, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (100 ml), se lavó luego con salmuera acuosa (3 x 100 ml), se secó y se concentró, después de lo cual se purificó el residuo (SiO2, isohexano:acetato de etilo 1:1 como eluyente) para proporcionar el compuesto del subtítulo (1,4 g).

MS (APCI) 569 (M+H+, 100%).

h) [1R–[1α,2α,3β(1R*,2S*),5β]]–3–[7–[[2–(4–Fluorofenil)–ciclopropil]amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)tio]–3H– 1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–5–(hidroximetil)–ciclopentano–1,2–diol

Una solución del producto del paso g) (1,4 g) en ácido trifluoroacético (10 ml) y agua (2 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (400 ml), se lavó luego con solución de bicarbonato de sodio (400 ml), se secó y se evaporó. El residuo se purificó (SiO2, metanol:cloroformo 3:47 como eluyente) para proporcionar el compuesto del título (0,44 g).

MS (APCI) 529 (M+H+, 100%).

NMR H (d6–DMSO) 9,42 (1H, d), 7,27–7,22 (2H, m), 7,14–7,08 (2H, m), 5,01–4,95 (2H, m), 4,73–4,70 (2H, m), 4,44–4,41 (1H, m), 3,87–3,84 (1H, m), 3,50–3,45 (2H, m), 3,26–3,13 (3H, m), 2,60–2,55 (1H, m), 2,28–2,20 (2H, m), 2,10–2,06 (1H, m), 1,90–1,80 (1H, m), 1,49–1,46 (1H, m), 1,33–1,30 (1H, m).

Ejemplo 2

[1R–[1α,2α,3β(1R*,2S*),5β]]–3–[7–[[2–(3,4–Difluorofenil)–ciclopropil]amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)tio]–3H– 1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–5–(hidroximetil)–ciclopentano–1,2–diol

a) [3aS–[1(E)–3aα,6α,7aβ]]–1–[3–(3,4–Difluorofenil)–1–oxo–2–propenil]–hexahidro–8,8–dimetil–3H–3a,6– metano–2,1–bencisotiazol–2,2–dióxido

El compuesto del subtítulo se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso a) utilizando ácido 3–(3,4– difluorofenil)–2–propenoico.

MS (APCI) 382 (M+H+, 100%).

b) [3aS–[1(1S*,2S*),3aα,6α,7aβ]]–1–[[2–(3,4–Difluoro–fenil)ciclopropil]carbonil]–hexahidro–8,8–dimetil–3H– 3a,6–metano–2,1–bencisotiazol–2,2–dióxido

El compuesto del subtítulo se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso b) utilizando el producto del paso a).

MS (APCI) 396 (M+H+, 100%).

c) Ácido (1R–trans–2–(3,4–difluorofenil)–ciclopropano–carboxílico

El compuesto del subtítulo se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso c) utilizando el producto del paso b).

NMR δH (CDCl3) 7,06 (1H, dt, J = 10,0, J = 8,5 Hz), 6,93–6,80 (2H, m), 2,58–2,52 (1H, m), 1,88–1,82 (1H, m), 1,66 (1H, dt, J = 9,2, J = 5,2 Hz), 1,34 (1H, ddd, J = 8,5, J = 6,5, J = 4,8 Hz).

d) (1R–trans)–2–(3,4–Difluorofenil)ciclopropanamina, [R–(R*,R*)]–2,3–dihidroxibutanodioato (1:1)

El compuesto del subtítulo se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso d) utilizando el producto del paso c).

MS (APCI) 170 (M+H+, 100%).

e) [3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]–6–[7–[[2–(3,4–Difluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–[(3,3,3– trifluoropropil)tio]–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol– 4–methanol

Se añadió nitrito de isoamilo (5,1 ml) a una solución de [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–6–[[5–amino–6–cloro–2–[(3,3,3– trifluoropropil)tio]–4–pirimidinil]–amino]–tetra–hidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–metanol (preparado como se describe en la Solicitud de Patente Internacional WO 9703084) (8,1 g) en acetonitrilo (1000 ml) y la solución se calentó a 70ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción enfriada se concentró y se purificó (SiO2, dicloroetano: acetato de etilo 4:1 como eluyente) para proporcionar un compuesto intermedio que se convirtió en el compuesto del subtítulo por el método del Ejemplo 1, paso e) utilizando el producto del paso d).

MS (APCI) 587 (M+H+, 100%).

f) [1R–[1α,2α,3β(1R*,2S*),5β]]–3–[7–[[2–(3,4–Difluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)tio]– 3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–5–(hidroximetil)–ciclopentano–1,2–diol

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso h) utilizando el producto del paso e).

MS (APCI) 547 (M+H+, 100%).

NMR δH (d6–DMSO) 9,43 (1H, d), 7,35–7,28 (2H, m), 7,14–7,02 (1H, m), 5,01–4,96 (2H, m), 4,72–4,69 (2H, m), 4,42 (1H, q), 3,87–3,84 (1H, m), 3,50–3,44 (2H, m), 3,25–3,12 (3H, m), 2,58–2,50 (2H, m), 2,28–2,21 (3H, m), 1,85–1,80 (1H, m), 1,52–1,50 (1H, m), 1,39–1,37 (1H, m).

Ejemplo 3

[1S–(1α,2α,3β(1S*,2R*),5β)]–3–[7–[2–(3,4–Difluorofenil)–ciclopropil]amino]–5–(propiltio)–3H–1,2,3–triazol[4,5– d]pirimidin–3–il)–5–(2–hidroxietoxi)–ciclopentano–1,2–diol

a) (1R–cis)–Bis(1,1–dimetiletil)–4–hidroxi–2–ciclopenten–ilimidodicarbonato

A una suspensión de hidruro de sodio lavado con éter (dispersión al 60% en aceite; 0,31 g) en tetrahidrofurano (30 ml) se añadió ácido imidodicarbónico–bis–(1,1–dimetiletil)éster (1,84 g). La mezcla se agitó a 40ºC durante 1 hora. A la mezcla, a la temperatura ambiente, se añadieron luego (1S–cis)–4–acetoxi–2–ciclopenten–1–ol (0,5 g) y tetraquis(trifenil–fosfina)paladio(0) (0,18 g). La mezcla de reacción se agitó durante 24 horas, y se purificó luego (SiO2, acetato de etilo:hexano 1:9 como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo como un sólido incoloro (0,90 g).

NMR δH (d6–DMSO) 1,43 (18H, s), 1,61 (1H, ddd, J = 12,3, 7,7, 6,4 Hz), 2,54 (1H, dt, J = 12,6, 7,4 Hz), 4,51–4,57 (1H, m), 4,86 (1H, tq, J = 8,0, 1,8 Hz), 4,91 (1H, d, J = 5,4 Hz), 5,71–5,77 (2H, m).

b) Ácido [1R–(1α,2β,3β,4α)]–2,3,4–trihidroxi–ciclo–pentenilimidodicarbónico, bis(1,1–dimetiletil)éster

A una solución del producto del paso a) (17,1 g) en tetrahidrofurano (500 ml)/agua (50 ml) se añadió N– metilmorfolina–N–óxido (9,4 g) seguido por tetróxido de osmio (10 ml, solución al 2,5% en t–butanol). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 4 días y se trató luego con hidrosulfito de sodio (6,0 g). La suspensión se filtró a través de Celita y el producto se purificó (SiO2, acetato de etilo:hexano 1:1 como eluyente) para proporcionar el compuesto del subtítulo (19,1 g).

NMR δH (d6–DMSO) 1,44 (18H, s), 1,46–1,60 (1H, m), 1,97–2,05 (1H, m), 3,55–3,58 (1H, m), 3,66–3,73 (1H, m), 4,11–4,21 (2H, m), 4,54 (1H, d, J = 4,8 Hz), 4,56 (1H, d, J = 5,9 Hz), 4,82 (1H, d, J = 4,6 Hz)

c) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–6–Amino–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–ol, hidrocloruro

El producto del paso b) (17,4 g) en HCl 6M (100 ml)/metanol (500 ml) se agitó durante 18 horas. La mezcla se evaporó y se destiló luego azeotrópicamente con tolueno (4 x 200 ml) para proporcionar un polvo incoloro (8,7 g). Este sólido se suspendió en acetona (250 ml) que contenía 2,2–dimetoxipropano (25 ml) y cHCl (0,2 ml) y se calentó luego a reflujo durante 2 horas. La mezcla se enfrió, se evaporó y se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x 200 ml). El residuo se disolvió en ácido acético acuoso al 20% y se agitó durante 2 horas. La mezcla se evaporó y se destiló azeotrópicamente con tolueno (4 x 200 ml) para proporcionar el compuesto del subtítulo (10,1 g).

MS (APCI) 174 (M+H+, 100%).

d) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–6–[[6–Cloro–5–nitro–2–(propiltio)–pirimidin–4–il]amino]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H– ciclopenta–1,3–dioxol–4–ol

Una solución del producto del paso c) (10,0 g) y N,N–diisopropiletilamina (35 ml) en tetrahidrofurano (600 ml) se agitó durante 1 hora. La mezcla se filtró y la solución se añadió durante 1 hora a una solución de 4,6–dicloro–5– nitro–2–(propiltio)–pirimidina (preparada como se describe en la Solicitud de Patente Internacional WO 9703084) (25,6 g) en tetrahidrofurano (1000 ml) y se agitó durante 2 horas más. El volumen de disolvente se redujo a vacío y se añadió acetato de etilo (1000 ml). La mezcla se lavó con agua y las capas orgánicas se secaron, se evaporaron y se purificaron (SiO2, isohexano–acetato de etilo como eluyente) para proporcionar el compuesto del subtítulo (14,2 g).

MS (APCI) 405 (M+H+, 100%).

e) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–6–[[5–Amino–6–cloro–2–(propil–tio)–pirimidin–4–il]amino]–tetrahidro–2,2–dimetil– 4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–ol

Se añadió hierro en polvo (3,0 g) a una solución agitada del producto del paso d) (2,7 g) en ácido acético (100 ml). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 2 horas, se concentró a la mitad de su volumen, se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua. La fase orgánica se secó y se concentró para proporcionar el compuesto del subtítulo (2,0 g).

MS (APCI) 375 (M+H+, 100%).

f) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–6–[7–Cloro–5–(propiltio)–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]–pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2– dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–ol

Se añadió nitrito de isoamilo (1,1 ml) a una solución del producto del paso e) (2,0 g) en acetonitrilo (100 ml) y la solución se calentó a 70ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción enfriada se concentró y se purificó (SiO2, acetato de etilo:isohexano 1:3 como eluyente) para proporcionar el compuesto del subtítulo (1,9 g).

MS (APCI) 386 (M+H+, 100%).

g) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–6–[7–Amino–5–(propiltio)–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]–pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2– dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–ol

El producto del paso f) (13,2 g) en tetrahidrofurano (200 ml) que contenía 0,88 amoniaco (5 ml) se agitó durante 2 horas y se concentró luego a sequedad y el residuo se repartió entre agua y acetato de etilo. Los componentes orgánicos se secaron y se concentraron luego para proporcionar el compuesto del subtítulo (12,5 g).

MS (APCI) 367 (M+H+, 100%).

h) Ácido [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–[[6–[7–amino–5–(propil–tio)–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]–pirimidin–3–il]– tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–ol]oxi]acético, éster metílico

A una solución del producto del paso g) (0,50 g) en tetrahidrofurano (25 ml) a 0ºC, se añadió butil–litio (0,62 ml de 2,5N en hexanos). Después de 20 minutos, la suspensión se trató con una solución de éster metílico del ácido trifluorometanosulfoniloxi–acético, (0,34 g) (preparado de acuerdo con el método de Biton, Tetrahedron, 1995, 51, 10513) en tetrahidrofurano (10 ml). La solución resultante se dejó calentar a la temperatura ambiente y se concentró y purificó luego (SiO2, acetato de etilo:hexano 4:6 como eluyente) para proporcionar el compuesto del subtítulo (0,25 g).

MS (APCI) 439 (M+H+, 100%).

i) Ácido [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–[[6–[7–Bromo–5–(propil–tio)–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]–pirimidin–3–il]– tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–ol]oxi]acético, éster metílico

El producto del paso h) (1,1 g) y nitrito de isoamilo (2,4 ml) en bromoformo (30 ml) se calentaron a 80ºC durante 30 minutos. La mezcla de reacción enfriada se purificó (SiO2, acetato de etilo:isohexano 1:4 como eluyente) para proporcionar el compuesto del subtítulo (0,44 g).

MS (APCI) 502/4 (M+H+), 504 (100%).

j) Ácido [3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]]–[[6–[7–[[2–(3,4–difluorofenil)ciclopropil]amino]–5–(propiltio)–3H– 1,2,3–triazol[4,5–d]–pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–il]oxi]acético, éster metílico

A una mezcla de los productos del paso i) (0,80 g) y el Ejemplo 2, paso d) (0,61 g) en diclorometano (25 ml) se añadió N,N–diisopropiletilamina (0,85 ml). La solución resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 16 horas y se concentró luego a vacío. La purificación (SiO2, isohexano:acetato de etilo 3:1 como eluyente) dio el compuesto del subtítulo como una espuma incolora (0,77 g).

MS (APCI) 591 (M+H+, 100%).

k) [3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]]–2–[6–[[7–[2–(3,4–Di–fluorofenil)ciclopropil]amino–5–(propiltio)–3H–1,2,3– triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–il]oxi]–etanol

Se añadió DIBAL–H® (solución 1,0M en hexanos, 5,15 ml) a una solución enfriada en hielo del producto del paso j) (0,76 g) en tetrahidrofurano (1 ml) y la solución se agitó a esta temperatura durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró a vacío y el residuo se disolvió en acetato de etilo (75 ml). Se añadió una solución acuosa saturada de tartrato sódico–potásico (75 ml) y la mezcla se agitó enérgicamente durante 16 horas. Se recogieron los componentes orgánicos y la fase acuosa se re–extrajo con acetato de etilo (2 x 50 ml). Los componentes orgánicos reunidos se secaron y se concentraron, y el residuo se purificó (SiO2, isohexano:acetato de etilo 1:1 como eluyente) para proporcionar el compuesto del subtítulo (0,63 g).

MS (APCI) 563 (M+H+, 100%).

l) [1S–[1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]]–3–[7–(2–(3,4–Difluoro–fenil)ciclopropilamino]–5–(propiltio)–3H–1,2,3–triazol– [4,5–d]pirimidin–3–il)–5–(2–hidroxietoxi)–ciclopentano–1,2–diol

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso h) utilizando el producto del paso k).

MS (APCI) 523 (M+H+, 100%).

NMR δH (d6–DMSO) 8,95 (1H, d, J = 3,3 Hz), 7,39–7,21 (2H, m), 7,10–7,00 (1H, m), 5,12 (1H, d, J = 6,4 Hz), 5,05 (1H, d, J = 3,6 Hz), 4,96 (1H, q, J = 9,0 Hz), 4,62–4,54 (2H, m), 3,95 (1H, br s), 3,79–3,73 (1H, m), 3,55–3,47 (4H, m), 3,20–3,13 (1H, m), 2,98–2,81 (2H, m), 2,63 (1H, dt, J = 13,6, 8,5 Hz), 2,29–2,21 y 2,16–2,09 (1H, m), 2,07–2,00 (1H, m), 1,73–1,33 (4H, m), 0,99 (3H, t, J = 7,4 Hz).

Ejemplo 4

[1R–[1α,2α,3β(1R*,2S*),5β]]–3–[5–(Butiltio)–7–[[2–(3,4–difluorofenil)ciclopropil]amino]–3H–1,2,3–triazol[4,5– d]–pirimidin–3–il]–5–(hidroximetil)–ciclopentano–1,2–diol

a) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–6–[7–Amino–5–(propiltio)–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]tetrahidro–2,2– dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–metanol

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 3, paso g) utilizando [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–6–[7–cloro–5– (propiltio)–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–metanol (preparado como se describe en la Solicitud de Patente Internacional WO 9703084). El producto bruto se purificó (SiO2, metanol:diclorometano 1:19 como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo.

MS (APCI) 381 (M+H+, 100%).

b) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–6–[7–Amino–5–(propilsulfonil)–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro– 2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–metanol

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso f) utilizando el producto del paso a).

MS (APCI) 413 (M+H+, 100%).

c) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–6–[7–Amino–5–(butiltio)–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–di– metil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–metanol

Se añadió 1–butanotiol (2,38 ml) en DMF (25 ml) a una suspensión de hidruro de sodio (60%, 1,09 g) en DMF (50 ml). Después de una hora, se añadió gota a gota una solución del producto del paso b) (3,66 g) en DMF (65 ml) y la mezcla resultante se agitó durante una noche. La mezcla de reacción se añadió lentamente a una solución de bicarbonato de sodio acuoso saturado (1000 ml) y se extrajo luego en acetato de etilo (3 x 200 ml). La fase orgánica se secó (MgSO4) y se concentró a vacío, y el residuo se purificó (SiO2, metanol:diclorometano 1:19 como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo (3,32 g).

MS (APCI) 395 (M+H+, 100%).

d) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–6–[7–Amino–5–(butiltio)–3H–1,2,3–triazol–[4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–di– metil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–metanol, acetato

A una solución del producto del paso c) (3,3 g) en diclorometano (50 ml) se añadieron piridina (2,7 ml), 4– dimetilaminopiridina (0,4 g) y anhídrido acético (2,0 ml). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante una noche, se concentró a vacío y se purificó (SiO2, dietil–éter–isohexano 3:2 como eluyente) para proporcionar el compuesto del subtítulo (2,7 g).

MS (APCI) 437 (M+H+), 100%).

e) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–6–[7–Bromo–5–(butiltio–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–di– metil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–metanol, acetate

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 3, paso i) utilizando el producto del paso d). MS (APCI) 500/502 (M+H+, 500 (100%).

f) [3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]]–6–[5–(Butiltio)–7–[[2–(3,4–difluorofenil)ciclopropil]amino]–3H–1,2,3–triazol– [4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclo–penta–1,3–dioxol–4–metanol, acetate

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 3, paso j) utilizando el producto del Ejemplo 2, paso d) y el producto del paso e).

MS (APCI) 589 (M+H+, 100%).

g) [1R–[1α,2α,3β(1R*,2S*),5β]]–3–[5–(Butiltio)–7–[[2–(3,4–difluorofenil)ciclopropil]amino]–3H–1,2,3–triazol– [4,5–d]pirimidin–3–il]–5–(hidroximetil)–ciclopentano–1,2–diol

El producto del paso f) (0,64 g) en ácido acético acuoso al 80% (30 ml) se calentó a 80ºC durante 1 hora. La mezcla enfriada se vertió en solución saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo en acetato de etilo. La fase orgánica se secó y se concentró a vacío para dar una goma que se disolvió en metanol (50 ml)/solución acuosa al 10% de carbonato de potasio (3 ml). La solución se agitó durante 30 minutos, se neutralizó con ácido acético, y se concentró a vacío. La purificación (SiO2, metanol:diclorometano 1:19 como eluyente) dio un sólido que se recristalizó (acetonitrilo) para dar el compuesto del título (0,25 g).

MS (APCI) 507 (M+H+, 100%).

NMR δ H (d6–DMSO) 9,34 (1H, br), 7,40–7,23 (2H, m), 7,11–7,00 (1H, m), 5,06–4,93 (2H, m), 4,76–4,67 (2H, m), 4,48–4,38 (1H, m), 3,91–3,84 (1H, m), 3,56–3,39 (2H, m), 3,21–3,08 (1H, m), 3,03–2,83 (2H, m), 2,32–2,17 (1H, m), 2,17–2,03 (2H, m), 1,91–1,77 (1H, m), 1,71–1,32 (4H, m), 1,32–1,17 (2H, m), 0,81 (3H, t).

Ejemplo 5

[1S–(1α,2β,3β,4α(1S*,2R*)]]–4–[5–(Butiltio)–7–[[2–(4–fluorofenil)ciclopropil]amino]–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]– pirimidin–3–il]ciclopentano–1,2,3–triol

a) [3aR–[3aα,4α,6α,6aα(1S*,2R*)]]–6–[7–[[(4–Fluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–(propiltio)–3H–1,2,3–triazol– [4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclo–penta–1,3–dioxol–4–ol

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso e) utilizando el producto del Ejemplo 1, paso d) y el producto del Ejemplo 3, paso f).

MS (APCI) 501 (M+H+, 100%).

b) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα(1S*,2R*)]]–6–[[7–[(4–Fluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–(propilsulfonil)–3H–1,2,3–tri– azol[4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–ol

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso f) utilizando el producto del paso a). MS (APCI) 532 (M+H+, 100%).

c) [3aR–[3aα,4α,6α,6aα(1S*,2R*)]]–6–[7–[[(4–Fluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–(butiltio)–3H–1,2,3–triazol– [4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclo–penta–1,3–dioxol–4–ol

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 4, paso c), utilizando el producto del paso b). MS (APCI) 515 (M+H+, 100%).

d) [1S]–[1α,2β,3β,4α(1S*,2R*)]]–4–[5–(Butiltio)–7–[[2–(4–fluorofenil)ciclopropil]amino]–3H–1,2,3–triazol[4,5– d]pi–rimidin–3–il]–ciclopentano–1,2,3–triol

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso h) utilizando el producto del paso c). MS (APCI) 575 (M+H+, 100%).

5

10

15

20

25

30

35

40

45

NMR δ H (d6–DMSO) 7,26–7,22 (2H, m), 7,11 (2H, t), 4,99–4,90 (1H, m), 4,67–4,63 (1H, m), 3,93 (1H, s), 3,77 (1H, bs), 3,35–3,13 (1H, m), 3,00–2,80 (2H, m), 2,59–2,51 (1H, m), 2,15–2,11 (1H, m), 1,91–1,86 (1H, m), 1,53–1,41 (3H, m), 1,35–1,30 (1H, m), 1,22 (2H, sex), 0,80 (3H, t).

Ejemplo 6

[1S–(1α,2α,3β(1S*,2R*),5β)]–3–[7–[[2–(3,4–Difluorofenil)–ciclopropil]amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)tio]–3H– 1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–5–(2–hidroxietoxi)–ciclopentano–1,2–diol

a) [1S–(1α,2α,3β(1S*,2R*),5β)]–3–[7–[[2–(3,4–Difluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–(propilsulfonil)–3H–1,2,3– tri–azol[4,5–d]pirimidin–3–il)–5–(2–hidroxietoxi)–ciclopenta–no–1,2–diol

El compuesto del subtítulo se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso f) utilizando el producto del Ejemplo 3, paso 1).

MS (APCI) 555 (M+H+, 100%).

b) [1S–(1α,2α,3β(1S*,2R*),5β)]–3–[7–[[2–(3,4–Difluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)tio]– 3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il)–5–(2–hidroxi–etoxi)–ciclopentano–1,2–diol

El compuesto del título se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso g) utilizando el producto del paso a).

MS (APCI) 555 (M+H+, 100%).

NMR δH (d6–DMSO) 9,45 (1H, d), 7,36–7,05 (3H, m), 5,05 (1H, d), 5,02 (1H, d), 4,95 (1H, m), 4,60 (2H, m), 3,95 (1H, m), 3,86 (1H, m), 3,47 (4H, m), 3,30–3,11 (3H, m), 2,63–2,49 (3H, m), 2,19 (1H, m), 2,00 (1H, m), 1,53 (1H, m), 1,40 (1H, m).

Ejemplo 7

[1S–[1α,2α,3β,5β(1S*,2R*)]]–3–(2–Hidroxietoxi)–5–[7–(2–fenilciclopropil)amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)tio]– 3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–ciclopentano–1,2–diol

a) Ácido (1S–cis)–2–[[4–[[6–Cloro–5–nitro–2–[(3,3,3–trifluoropropil)tio]–4–pirimidinil]amino]–2–ciclopenten– 1–il]oxi]acético, éster etílico

Una solución de azida de sodio (4,70 g) en agua desgasificada (25 ml) se añadió a una solución de acetato de (1R,4S)–4–hidroxi–2–ciclopenten–1–ilo (9,99 g) en tetrahidrofurano (60 ml) y se agitó durante 10 min. Se añadió tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (365 mg) y se agitó durante 10 min. Se separó la capa acuosa y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las capas orgánicas reunidas se secaron (MgSO4), se concentraron y se purificaron en una columna corta (SiO2, acetato de etilo: isohexano 1:2 como eluyente) para proporcionar un aceite amarillo. Se disolvió éste en tetrahidrofurano (25 ml) y se añadió lentamente a una suspensión de hidruro de sodio (2,94 g, dispersión al 60% en aceite) en tetrahidrofurano (60 ml) a –78ºC. Se añadió una solución de bromoacetato de etilo (8,2 ml) en tetrahidrofurano (5 ml) y la mezcla se dejó calentar a 20ºC y se agitó durante 30 min. Se añadió solución acuosa de cloruro de amonio y la mezcla se extrajo con éter. Las capas orgánicas se secaron (MgSO4), se concentraron y se purificaron (SiO2, éter:isohexano 1:5 como eluyente) para proporcionar un aceite incoloro. Una solución de este aceite y trifenilfosfina (17,89 g) en tetrahidrofurano (90 ml) se agitó durante 10 min. Se añadió agua (15 ml) y la solución se agitó durante 18 horas. El disolvente se eliminó a vacío y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno y se purificó luego (SiO2, acetato de etilo y luego acetato de etilo–metanol–amoniaco

(90:9:1) como eluyente) para proporcionar un aceite amarillo pálido (7,14 g).

Una solución de este compuesto en tetrahidrofurano (50 ml) se añadió durante 25 min a una solución de 4,6– dicloro–5–nitro–2–[(3,3,3–trifluoropropil)tio]–pirimidina (preparada como se describe en la Solicitud de Patente Internacional WO 9703084) (24,8 g) y N,N–diiso–propiletilamina (77,5 ml) en tetrahidrofurano seco (100 ml) y se agitó luego durante 30 minutos. Se añadió agua y la mezcla se extrajo con éter (3 veces). Se secaron las capas orgánicas (MgSO4), se concentraron y se purificaron (SiO2, acetato de etilo:isohexano 1:4 como eluyente) para proporcionar el compuesto del subtítulo (7,39 g).

MS (APCI) 367/9 (M–(EtO2CCH2O)+), 367 (100%).

b) Ácido (1S–cis)–2–[[4–[7–Cloro–5–[(3,3,3–trifluoro–propil)tio]–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]–pirimidin–3–il]–2– ciclopenten–1–il]oxi]acético, éster etílico

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 3, pasos e) y f) utilizando el producto del paso a).

MS (APCI) 348/50 (M–(EtO2CCH2O)+), 348 (100%).

c) Ácido [1S–(cis)]–2–[[4–[7–amino–5–[(3,3,3–trifluoro–propil)tio]–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–2–ci– clopenten–1–il]oxi]acético, éster etílico

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 3, paso g) utilizando el producto del paso b). MS (APCI) 433 (M+H+, 100%).

d) [1S–(cis)]–2–[[4–[7–Amino–5–[(3,3,3–trifluoropropil)–tio]–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–2– ciclopen–ten–1–il]oxi]–1–etanol

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 3, paso k) utilizando el producto del paso c). MS (APCI) 391 (M+H+, 100%).

e) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–2–[6–[7–Amino–5–[(3,3,3–tri–fluoropropil)tio]–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]–pirimidin–3– il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–iloxi]–etanol

Una solución del producto del paso d) (454 mg), tetróxido de osmio (0,17 ml de solución 0,1M en t–butanol), N– metilmorfolina–N–óxido (210 mg) y piridina (0,09 ml) en acetona (5 ml) y agua (1 ml) se calentó a 70ºC durante 5 horas. Se añadió hidrosulfito de sodio (330 mg) en agua (1 ml), se eliminó el disolvente a vacío y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno. Una solución de éste y ácido p–toluenosulfónico (50 mg) en acetona (5 ml) y 2,2–dimetoxipropano (2 ml) se agitó durante 3 h. Se eliminó el disolvente a vacío, se añadió solución acuosa de hidrogenocarbonato de sodio y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Se secaron las capas orgánicas (MgSO4), se concentraron y se purificaron (SiO2, isohexano:acetona 5:2 como eluyente) para proporcionar el compuesto del subtítulo como un sólido blanco (367 mg).

MS (APCI) 465 (M+H+, 100%).

f) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–2–[6–[7–Bromo–5–[(3,3,3–tri–fluoropropil)tio]–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]–pirimidin–3– il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–il–oxi]etanol

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 3, paso i) utilizando el producto del paso e). MS (APCI) 528/30 (M+H+), 528 (100%).

g) [3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]–2–[6–(7–Fenilciclo–propil)amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)tio]–3H–1,2,3– triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–1,3–dioxol–4–iloxi]etanol

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 3, paso j) utilizando el producto del paso f) y (1R–trans)–2– fenilciclopropanamina, [R–(R*,R*)]–2,3–dihidroxibutano–dioato (1:1) (preparado como ha sido descrito por L.A. Mitscher et al., J. Med. Chem. 1986, 29, 2044).

MS (APCI) 581 (M+H+, 100%).

h) [1S–[1α,2α,3β,5β(1S*,2R*)]]–3–(2–Hidroxietoxi)–5–[7–(2–fenilciclopropil)amino]–5–[(3,3,3–trifluoropropil)– tio]–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]–ciclopentano–1,2–diol

Preparado de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso h) utilizando el producto del paso g).

MS (APCI) 540 (M+H+, 100%).

NMR δH (d6–DMSO) 7,35–7,16 (5H, m), 4,97 (1H, q), 4,62–4,54 (1H, m), 3,98–3,92 (1H, m), 3,78–3,72 (1H, m), 3,55–3,44 (4H, m), 3,26–3,19 (2H, m), 3,16–3,07 (1H, m), 2,70–2,61 (1H, m), 2,58–2,52 (1H, m), 2,23–2,18 (1H, m), 2,05–1,97 (1H, m), 1,86 (1H, s), 1,54–1,46 (1H, m), 1,38–1,30 (1H, m).

Ejemplo 8

[1S–[1α,2α,3β,4α(1S*,2R*)]]–4–[5–(Butiltio)–7–[[2–(3,4–difluorofenil)ciclopropil]amino]–3H–1,2,3–triazol[4,5– d]–pirimidin–3–il]ciclopentano–1,2,3–triol

a) [3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]–6–[[7–[(3,4–Difluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–(propiltio)–3H–1,2,3–triazol– [4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclo–penta–1,3–dioxol–4–ol

El compuesto del subtítulo se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso e) utilizando el producto del Ejemplo 3, paso f) y el producto del Ejemplo 2, paso d).

MS (APCI) 519 (M+H+, 100%).

b) [3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]]–6–[[7–[(3,4–Difluoro–fenil)ciclopropil]amino]–5–(propilsulfonil)–3H–1,2,3– tri–azol[4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–ol

El compuesto del subtítulo se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso f) utilizando el producto del paso a).

MS (APCI) 551 (M+H+, 100%).

c) [3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]]–6–[5–(Butiltio)–7–[[2–(3,4–difluorofenil)ciclopropil]amino]–3H–1,2,3– triazol–[4,5–d]pirimidin–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclo–penta–1,3–dioxol–4–ol

El compuesto del título se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 4, paso c) utilizando el producto del paso b).

MS (APCI) 533 (M+H+, 100%).

d) [1S–[1α,2β,3β,4α(1S*,2R*)]]–4–[5–(Butiltio)–7–[[2–(3,4–difluorofenil)ciclopropil]amino]–3H–1,2,3–triazol– [4,5–d]–pirimidin–3–il]ciclopentano–1,2,3–triol

El compuesto del título se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso h) utilizando el producto del paso c).

NMR δH (d6–DMSO) 7,15–6,98 (3H, m), 6,67 (1H, s), 5,11–5,09 (1H, m), 4,82–4,76 (1H, m), 4,34–4,21 (3H, m), 3,7 (1H, s), 3,2–2,92 (4H, m), 2,77 (1H, m), 2,42–2,36 (1H, m), 2,2–2,18 (1H, m), 1,42–1,25 (6H, m), 0,9 (3H, q).

MS (APCI) 493 (M+H+, 100%).

Ejemplo 9

[1S–[1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]]–3–[5–(Butiltio)–7–[(2–fenil–ciclopropil)amino]–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin– 3–il]–5–(2–hidroxietoxi)–ciclopentano–1,2–diol

a) Ácido [3aS–(3aα,4α,6α,6aα)]–[tetrahidro–6–hidroxi–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–il]– carbámico, éster fenilmetílico

Se añadió carbonato de potasio (39,3 g) a una suspensión de hidrocloruro de [3 R–(3a ,4 ,6 ,6a )]–6–amino– tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–ol (preparada como se describe en el documento WO 9905142) (27,1 g) en 4–metil–2–pentanona (500 ml). Se añadió luego agua (150 ml) seguida por adición de cloroformiato de bencilo gota a gota (23,1 g). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 4 horas antes de separar la fase orgánica. La fase acuosa se extrajo con 4–metil–2–pentanona (2 x 50 ml). Las fases orgánicas reunidas se concentraron y el residuo se purificó (SiO2, diclorometano: metanol, 95:5 a 90:10 como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo (39,23 g).

NMR δ H (CDCl3) 7,32 (5H, m), 5,65 (1H, br s), 5,10 (2H, br s), 4,59 (1H, d), 4,48 (1H, d), 4,27 (1H, m), 4,19 (1H, br m), 2,24 (1H, br s), 1,69 (1H, d), 1,41 (3H, s), 1,26 (3H, s).

b) Ácido [3aS–(3aα,4α,6α,6aα)]–[2,2–Dimetil–6–(2–hidroxietoxi)–tetrahidro–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–il]– carbámico, éster fenilmetílico

Se añadió terc–butóxido de potasio (3,6 g) en tetrahidrofurano (20 ml) durante 5 minutos a una solución del producto del paso a) (39,23 g) en tetrahidrofurano (200 ml). Después de 15 minutos, se añadió gota a gota bromoacetato de etilo (3,7 ml) en tetrahidrofurano (10 ml). La mezcla se agitó a 0ºC durante 10 minutos, y se añadió luego una nueva cantidad de bromoacetato de etilo (3,7 ml x 4). La mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 2 horas más. Se añadió luego poco a poco borohidruro de litio (2,79 g) a la suspensión resultante y la mezcla de reacción se agitó a temperatura inferior a 5ºC durante 16 horas. Se añadió gota a gota ácido acético glacial (23 g) a la mezcla fría. Después de agitar durante 30 minutos, se añadió gota a gota agua (100 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 30 minutos. Se separaron luego las fases y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se lavaron con bicarbonato de sodio saturado y salmuera, se secaron y se concentraron. El residuo se purificó (SiO2, acetato de etilo:hexano, 25:75 a 50:50 como eluyente) para dar el compuesto del subtítulo (38,6 g).

MS (APCI) 218 (M+H+, 100%).

c) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–2–[[6–Amino–2,2–dimetil–tetra–hidro–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–il]oxi]–etanol

Una suspensión de paladio al 5% sobre carbón vegetal (4 g) en etanol se añadió a una solución del producto del paso b) (39,96 g) en etanol (250 ml) y la mezcla se hidrogenó a 1,2 bares durante 20 horas. Se separó el catalizador por filtración y el filtrado se concentró para dar el compuesto del subtítulo (23,65 g).

MS (APCI) 160 (M+H+, 100%).

d) 2–(Butiltio)–4,6–dicloropirimidina–5–amina

El compuesto del subtítulo se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 3, paso e) utilizando 2–(butiltio)–4,6– dicloro–5–nitro–pirimidina (preparada como se describe en el documento DE 2223644).

NMR δ H (CDCl3) 4,20 (2H, br s), 3,10 (2H, t), 1,70 (2H, m), 1,47 (2H, m), 0,95 (3H, t)

e) [3aR–(3aα,4α,6α,6aα)]–2–[[6–[[5–Amino–2–(butiltio)–6–cloro–pirimidin–4–il]amino]–tetrahidro–2,2–dimetil– 4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–il]oxi]etanol

El compuesto del subtítulo se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 3, paso d) utilizando los productos de los pasos c) y d).

MS (APCI) 433 (M+H+, 100%).

f) [3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]]–2–[6–[[5–(Butiltio)–7–cloro–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin–3–il]– tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–dioxol–4–il]oxi]–etanol

El compuesto del subtítulo se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 3, paso f) utilizando el producto del paso e).

NMR δH (CDCl3) 5,53 (1H, m), 5,21 (1H, m), 4,88 (1H, d), 4,05 (1H, m), 3,59 (4H, m), 3,24 (2H, t), 2,70 (1H, m), 2,53 (1H, m), 2,13 (1H, t), 1,79 (2H, m), 1,55 (5H, m), 1,37 (3H, s), 0,98 (3H, t).

g) [3aR–[3aα,4α,6α(1R*,2S*),6aα]]–2–[6–[[5–(Butiltio)–7–[2–fenilciclopropil]amino–3H–1,2,3–triazol[4,5– d]pirimi–din–3–il]–tetrahidro–2,2–dimetil–4H–ciclopenta–1,3–di–oxol–4–il]oxi]–etanol

El compuesto del subtítulo se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 3, paso j) utilizando el producto del paso f).

MS (APCI) 541 (M+H+, 100%).

h) [1S–[1α,2α,3β(1S*,2R*),5β]]–3–[5–(Butiltio)–7–[(2–fenilciclopropil)amino]–3H–1,2,3–triazol[4,5–d]pirimidin– 3–il]–5–(2–hidroxietoxi)–ciclopentano–1,2–diol

El compuesto del título se preparó de acuerdo con el método del Ejemplo 1, paso h) utilizando el producto del paso g).

MS (APCI) 501 (M+H+, 100%)

NMR δH (d6–DMSO) 9,33 (1H, d), 7,30 (2H, m), 7,18 (3H, m), 5,12 (1H, d), 5,04 (1H, d), 4,96 (1H, q), 4,59 (2H, m), 3,94 (1H, s), 3,76 (1H, m), 3,51 (4H, m), 3,22 (1H, m), 2,98 (1H, m), 2,86 (1H, m), 2,65 (1H, m), 2,14 (1H, m), 2,05 (1H, m), 1,21–1,53 (6H, m), 0,80 (3H, t).

Datos farmacológicos

La preparación para el ensayo de la actividad agonista/antagonista del receptor P2T (P2YADP o P2TAC) en plaquetas humanas lavadas para los compuestos de fórmula (I) se llevó a cabo como sigue.

Se dividió sangre venosa humana (100 ml) en partes iguales entre tres tubos, cada uno de los cuales contenía citrato trisódico al 3,2% (4 ml) como anti–coagulante. Los tubos se centrifugaron durante 15 minutos a 240G para obtener un plasma rico en plaquetas (PRP) al cual se añadieron 300 ng/ml de prostaciclina para estabilizar las plaquetas durante el procedimiento de lavado. Se obtuvo PRP exento de glóbulos rojos por centrifugación durante 10 minutos a 125G seguido por centrifugación ulterior durante 15 minutos a 640G. Se desechó el sobrenadante y el sedimento de plaquetas se resuspendió en solución Tyrode Exenta de Calcio (CFT) modificada (10 ml), composición: NaCl 137 mM, NaHCO3 11,9 mM, NaH2PO4 0,4 mM, KCl 2,7 mM, MgCl2 1,1 mM, dextrosa 5,6 mM, gasificada con 95% O2/5% CO2 y mantenida a 37ºC. Después de la adición de 300 ng/ml adicionales de PGl2, la suspensión reunida se centrifugó una vez más durante 15 minutos a 640G. Se desechó el sobrenadante y las plaquetas se resuspendieron inicialmente en 10 ml de CFT, añadiéndose más CFT para ajustar el recuento final de plaquetas a 2 x 105/ml. Esta suspensión final se guardó en una jeringuilla de 60 ml a 3ºC con exclusión de aire. Para permitir la recuperación de la inhibición por PGl2 de la función normal, las plaquetas se utilizaron en los estudios de agregación no antes de dos horas desde la resuspensión final.

En todos los estudios, se añadieron partes alícuotas de 3 ml de la suspensión de plaquetas a tubos que contenían solución de CaCl2 (60 μl de solución 50 mM con una concentración final de 1 mM). Se añadieron fibrinógeno humano (Sigma F4883) y 8–sulfofenilteofilina (8–SPT, que se utilizó para bloquear cualquier actividad agonista de P1 de los compuestos) para dar concentra–ciones finales de 0,2 mg/ml (60 μl de solución de 10 mg/ml de proteína coagulable en solución salina) y 300 nM (10 μl de solución 15 mM en glucosa al 6%), respectivamente. Se añadieron plaquetas o tampón, según fuese apropiado, en un volumen de 150 μl a los pocillos individuales de una placa de 96 pocillos. Todas las medidas se realizaron por triplicado en plaquetas de cada donante.

La potencia agonista/antagonista se evaluó como sigue.

Se midieron las respuestas de agregación en placas de 96 pocillos utilizando el cambio de absorbancia dado por el lector de placas a 660 nm. Como lector de placas se utilizó un Bio–Tec Ceres 900C o un Dynatech MRX.

La absorbancia de cada pocillo en la placa se leyó a 660 nm para establecer una cifra de línea base. Se añadieron a

5 cada pocillo solución salina o la solución apropiada de compuesto de ensayo en un volumen de 10 μl para dar una concentración final de 0, 0,01, 0,1, 1, 10 ó 100 mM. Se agitó luego la placa durante 5 min en una máquina de sacudidas orbital puesta en ajuste 10 y se leyó la absorbancia a 660 nm. La agregación en este punto era indicativa de actividad agonista del compuesto de ensayo. Se añadió luego solución salina o ADP (30 mM; 10 μl de 450 mM) a cada pocillo y la placa se agitó mediante sacudidas durante 5 min adicionales antes de leer la absorbancia

10 nuevamente a 660 nm.

La potencia antagonista se estimó como un % de inhibición de la respuesta a ADP del control para obtener un valor CI50. Los compuestos citados como ejemplos tienen valores pCI50 mayores que 5,0.

Claims

REIVINDICACIONES

1.– Un compuesto de fórmula (V)

imagen1

en donde: R1 es propilo; R3 y R4 son ambos hidroxilo o R3 y R4 juntos forman un enlace en el anillo de 5 miembros; R es OCH2CH2OH; y L es halógeno o SR.