ES2208310T3

ES2208310T3 - Derivados de pirimido(6,1-a) isoquinolin-4-ona.

Info

Publication number: ES2208310T3
Application number: ES00920857T
Authority: ES
Inventors: Alexander William Oxford; David Jack
Original assignee: Vernalis PLC
Current assignee: Ligand UK Ltd
Priority date: 1999-03-31
Filing date: 2000-03-29
Publication date: 2004-06-16
Anticipated expiration: 2020-03-29
Also published as: CN100415743C; NZ514158A; US20120302533A1; US8242127B2; MXPA01009846A; BRPI0009446B8; US7105663B2; US20040171828A1; EP1165558A1; JP2002540207A; JP4685243B2; DE60005493D1; BRPI0009446B1; AU773504B2; WO2000058308A1; EP1165558B1; DE60005493T2; BR0009446A; CA2368413C; NO20014728L

Abstract

Un compuesto de **fórmula** en la que cada uno R1 y R2 representa independientemente un grupo alquilo con 1 a 6 átomos de carbono o acilo con 2 a 7 átomos de carbono; R5 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo con uno a tres átomos de carbono, alquenilo, con 2 a 3 átomos de carbono, o alquinilo con 2 a 3 átomos de carbono; R6 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, amino, alquilamino con 1 a 6 átomos de carbono, di-alquilamino (con 1 a 6 átomos de carbono) o acilamino con 2 a 7 átomos de carbono; cada uno de R7 y R8 representa independientemente un átomo de hidrógeno o halógeno o un hidroxi, trifluorometilo, alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, acilo con 2 a 7 átomos de carbono, alquiltio con 1 a 6 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 6 átomos decarbono; y R9 representa un átomo de hidrógeno o halógeno o un grupo hidroxi, trifluorometilo, alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono; alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, acilo con 2 a 7 átomos de carbono, alquiltio con 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi con 1 a 6 átomos de carbono o cicloalquilo con 3 a 6 átomos de carbono; X representa un grupo CR3R4, donde cada uno de R3 y R4 representa independientemente un átomo de nitrógeno o un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono; cada uno de R10 y R11 representa independientemente un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 6 átomos de carbono o fenilo; Y representa un átomo de oxígeno o un grupo CHNO2, NCN, NH o NNO2; n es un número entero de 2 a 4; o una sal del mismo.

Description

Derivados de pirimido[6,1-a] isoquinolin-4-ona.

La presente invención se refiere a derivados de pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona y a su aplicación como inhibidores de isoenzimas de fosfodiesterasa (PDE). Más particularmente, la invención se refiere a derivados de pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona y a su uso en medicina, por ejemplo como broncodilatadores con propiedades anti-inflamatorias.

En todas las células en las que está presente el AMP cíclico (AMPc) como mensajero secundario, las concentraciones intracelulares de AMPc se regulan por los dos procesos implicados en su formación y degradación. La estimulación de receptores unidos a la membrana presentes en la superficie externa de las células (por ejemplo, por agonistas del adrenoceptor \beta) produce la activación de la adenilil ciclasa para generar AMPc a partir de ATP. Las fosfodiesterasas presentes en la célula sirven para reducir la concentración de AMPc hidrolizándolo para dar adenosina monofosfato (AMP).

En una enfermedad tal como el asma, las células principales implicadas en la bronconstricción y en los procesos inflamatorios asociados están sujetas a un control inhibidor por AMPc. Los inhibidores de la fosfodiesterasa de tipo III elevan los niveles intracelulares de AMPc, produciendo una relajación del músculo liso bronquial, mientras que los inhibidores de la fosfodiesterasa de tipo IV inhiben la liberación de mediadores dañinos desde las células pro-inflamatorias. De esta forma, en principio, un inhibidor combinado de PDE III/IV tendría los efectos deseables de un agonista del adrenoceptor \beta más un esteroide anti-inflamatorio inhalado que actualmente es el pilar del tratamiento del asma grave. Además, un inhibidor combinado de PDE III/IV administrado por inhalación conseguiría efectos beneficiosos similares a los de un agonista \beta más un esteroide inhalado y debería ser un tratamiento inusualmente eficaz del asma y de otros trastornos respiratorios sin efectos glucocorticoides indeseables de los esteroides tales como la osteoporosis y la detención del crecimiento.

Los efectos adversos pontenciales de un inhibidor de PDE III/IV (por ejemplo, nauseas y vómitos, secreción de ácido gástrico, efectos cardiovasculares tales como incremento de la contractilidad cardíaca, vasodilatación y actividad arritmogénica potencial) se deberían evitar por medio del uso de un compuesto que se suministre directamente a los pulmones por inhalación. Es deseable que la substancia tenga una acción prolongada, no sea irritante y tenga un sabor que no sea tan desagradable como para tener algún efecto adverso sobre el seguimiento de la terapia por parte del paciente.

Un ejemplo de un derivado de pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona con actividad inhibidora de PDE III/IV y que se sabe que posee actividad vasodilatadora antihipertensiva es trequinsina (9,10-dimetoxi-3-metil-2-mesitilimino-2,3,6,7-tetrahidro-4H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona), que se describe por De Souza, et al., J. Med. Chem., 27 1470-1480 (1984) en el documento GB-A-1597717.

Como se describe por De Souza et al. en el documento GB-A-1597717, la trequinsina tiene propiedades farmacológicas valiosas y puede administrarse a sujetos humanos que padecen, por ejemplo, enfermedades respiratorias. Sin embargo, es inadecuada para la administración por inhalación debido a su sabor amargo y los datos in vitro indican que la persistencia de su acción es menor que la deseable.

Ahora se ha descubierto que es posible diseñar ciertos derivados de pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona que sean inhibidores de PDE, que tengan una duración de la acción más prolongada que la de la trequinsina y que tengan otras propiedades útiles tales como un mejor sabor.

De acuerdo con un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de fórmula general I:

1

\newpage

en la que

cada uno R^{1} y R^{2} representa independientemente un alquilo con 1 a 6 átomos de carbono o acilo con 2 a 7 átomos de carbono;

R^{5} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo con uno a tres átomos de carbono, alquenilo, con 2 a 3 átomos de carbono, o alquinilo con 2 a 3 átomos de carbono;

R^{6} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, amino, alquilamino con 1 a 6 átomos de carbono, di-alquilamino (con 1 a 6 átomos de carbono) o acilamino con 2 a 7 átomos de carbono;

cada uno de R^{7} y R^{8} representa independientemente un átomo de hidrógeno o halógeno o un hidroxi, trifluorometilo, alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, acilo con 2 a 7 átomos de carbono, alquiltio con 1 a 6 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 6 átomos de carbono; y

R^{9} representa un átomo de hidrógeno o halógeno o un grupo hidroxi, trifluorometilo, alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono; alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, acilo con 2 a 7 átomos de carbono, alquiltio con 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi con 1 a 6 átomos de carbono o cicloalquilo con 3 a 6 átomos de carbono;

X representa un grupo CR^{3}R^{4} donde cada uno de R^{3} y R^{4} representa independientemente un átomo de nitrógeno o un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono;

cada uno de R^{10} y R^{11} representa independientemente un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 6 átomos de carbono o fenilo;

Y representa un átomo de oxígeno o un grupo CHNO_{2}, NCN, NH o NNO_{2};

n es un número entero de 2 a 4;

o una sal del mismo.

Como se usa en este documento, el término "halógeno" o su abreviatura "halo" se refiere a flúor, cloro, bromo o yodo.

Como se usa en este documento, el término "alquilo con 1 a 6 átomos de carbono" se refiere a grupos alquilo de cadena lineal o cadena ramificada que tienen de 1 a 6 átomos de carbono. Son ejemplos de tales grupos alquilo, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, neopentilo, y hexilo. Se prefieren los grupos alquilo con 1 a 4 átomos de carbono.

Como se usa en este documento, el término "alquenilo con 2 a 3 átomos de carbono" se refiere a grupos hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que tienen de dos a tres átomos de carbono y que tiene además un doble enlace, de estereoquímica E o Z cuando es aplicable. Este término incluiría por ejemplo, vinilo y 1-propenilo.

Como se usa en este documento, el término "alquinilo con 2 a 3 átomos de carbono" se refiere a grupos hidrocarburo de cadena lineal que tienen de dos a tres átomos de carbono y que tienen además un triple enlace. Este término incluiría por ejemplo, etinilo y 1-propinilo.

Como se usa en este documento, el término "alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono" se refiere a grupos hidrocarburo de cadena lineal o de cadena ramificada que tienen de dos a seis átomos de carbono y que tienen además un doble enlace, de estereoquímica E o Z cuando sea aplicable. Este término incluiría, por ejemplo, vinilo, 1-propenilo, 1- y 2-butenilo y 2-metil-2-propenilo. Se prefieren los grupos alquenilo con 2 a 3 átomos de carbono.

Como se usa en este documento, el término "alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono" se refiere a grupos hidrocarburo de cadena lineal o de cadena ramificada que tienen de 2 a 6 átomos de carbono y que tienen además un triple enlace. Este término incluiría, por ejemplo, etinilo, 1-propinilo, 1- y 2-butinilo, 2-metil-2-propinilo, 2-pentanilo, 3-pentanilo, 4-pentanilo, 2-hexanilo, 3-hexanilo, 4-hexanilo y 5-hexanilo. Se prefieren los grupos alquinilo con 2 a 3 átomos de carbono.

Como se usa en este documento, el término "alcoxi con 1 a 6 átomos de carbono" se refiere a grupos alcoxi de cadena lineal o de cadena ramificada que tienen de uno a seis átomos de carbono. Son ejemplos de tales grupos alcoxi metoxi, etoxi, propoxi, iso-propoxi, butoxi, isobutoxi, sec-butoxi, terc-butoxi, pentoxi, neopentoxi y hexoxi. Se prefieren los grupos alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono.

Como se usa en este documento, el término "acilo con 2 a 7 átomos de carbono" se refiere a grupos acilo de cadena lineal o de cadena ramificada que tienen de dos a siete átomos de carbono. Son ejemplos de tales grupos acilo acetilo, propionilo (o propiono o propanoílo), isopropionilo (o isopropiono o isopropanoílo), butirilo (o butanoílo), isobutirilo (o isobutanoílo), pentanoílo (o varerilo), hexanoílo (o capronilo) y heptanoílo.

Como se usa en este documento, el término "aciloxi con 2 a 7 átomos de carbono" se refiere a grupos aciloxi de cadena lineal o de cadena ramificada que tienen de dos a siete átomos de carbono. Son ejemplos de tales grupos aciloxi acetiloxi, propionil (o propiono o propanoil)oxi, isopropionil (o isopropiono o isopropanoil)oxi, butiril (o butanoil)oxi, isobutiril (o isobutanoil)oxi, pentanoil (o valeril)oxi, hexanoil (o capronil)oxi y heptanoiloxi. Se prefieren los grupos aciloxi con 2 a 4 átomos de carbono.

Como se usa en este documento, el término "cicloalquilo con 3 a 6 átomos de carbono" se refiere a un grupo alicíclico que tiene de tres a seis átomos de carbono. Son ejemplos de tales grupos cicloalquilo ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo. Se prefieren los grupos ciclopentilo y ciclohexilo.

Como se usa en este documento, el término "alquiltio con 1 a 6 átomos de carbono" se refiere a grupos alquiltio de cadena lineal o de cadena ramificada que tienen de uno a seis átomos de carbono. Son ejemplos de tales grupos alquiltio metiltio, etiltio, propiltio, isopropiltio, butiltio, isopropiltio, sec-butiltio, terc-butiltio, pentiltio, neopentiltio y hexiltio. Se prefieren los grupos alquiltio con 1 a 4 átomos de carbono.

Como se usa en este documento, el término "alquilamino con 1 a 6 átomos de carbono" se refiere a grupos alquilamino de cadena lineal o de cadena ramificada que tienen de uno a seis átomos de carbono. Son ejemplos de tales grupos alquilamino metilamino, etilamino, propilamino, isopropilamino, butilanimo, isobutilamino, sec-butilamino, terc-butilamino, pentilamino, neopentilamino y hexilamino. Se prefieren los grupos alquilamino con 1 a 4 átomos de carbono.

Como se usa en este documento, el término "di-alquilamino (con 1 a 6 átomos de carbono)" se refiere a grupos di-alquilamino de cadena lineal o de cadena ramificada que tienen de uno a seis átomos de carbono en cada uno de los grupos alquilo. Son ejemplos de tales grupos dialquilamino di-metilamino, di-etilamino, di-propilamino, di-isopropilamino, di-butilamino, di-isobutilamino, di-sec-butilamino, di-terc-butilamino, di-pentilamino, di-neopentilamino y di-hexilamino. Se prefieren los grupos di-alquilamino (con 1 a 4 átomos de carbono).

Como se usa en este documento, el término "acilamino con 2 a 7 átomos de carbono" se refiere a grupos acilamino de cadena lineal o de cadena ramificada que tienen de dos a siete átomos de carbono. Son ejemplos de tales grupos acilamino, acetilamino, propionil (o propiono o propanoil)amino, isopropionil (o isopropiono o isopropanoil)amino, butiril (o butanoil)amino, isobutiril (isobutanoil)amino, pentanoil (o valeril)amino, hexanoil (o capronil)amino y heptanoilamino. Se prefiere los grupos acilamino con 2 a 4 átomos de carbono.

Donde hay un substituyente que hace un compuesto básico, por ejemplo cuando R^{6} es un grupo amino, alquilamino o dialquilamino, la adición de un ácido produce una sal. El ácido puede ser cualquier ácido adecuado y puede ser orgánico o inorgánico.

Los compuesto preferidos de fórmula general I incluyen aquellos en los que, independientemente o en cualquier combinación compatible:

cada uno de R^{1} y R^{2} representa un grupo alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, preferiblemente un grupo alquilo con 1 a 4 átomos de carbono;

R^{1} y R^{2} son iguales entre sí;

cada uno de R^{3} y R^{4} representa un átomo de hidrógeno;

R^{5} representa un átomo de hidrógeno;

R^{6} representa un átomo de hidrógeno;

cada uno de R^{7} y R^{8} representa un grupo alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, preferiblemente, metilo, etilo, o isopropilo;

R^{7} y R^{8} son iguales entre sí;

R^{9} es un átomo de hidrógeno, un átomo de halógeno o un grupo metilo o acetilo;

Y representa un átomo de oxígeno o un grupo CHNO_{2}; y

n es 2.

Los ejemplos de compuestos incluyen:

\newpage

1. 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona;

2. 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-(N'-isopropilcarbamoil)-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona;

3. 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-[1-(N'-metil-2-nitroetanamina)]-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona;

4. 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-[1-(N'-isopropil-2-nitroetenamina)]-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona;

5. 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-[1-(N',N'-dimetil-2-nitroetenamina)]-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona;

6. 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-(N'-fenilcarbamoil)-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-2-ona;

7. 9,10-Dimetoxi-3-[2-guanidinoetil]-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona;

8. 9,10-Dimetoxi-3-[N-(N'-nitro)-2-guanidinoetil]-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido-[6,1-a]isoquinolin-4-ona;

9. 3-[N-(N'-Ciclohexilcarbamoil)-2-amino-etil]-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetil-fenilimino-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona;

10. 3-(N-Carbamoil-2-aminoetil)-9,10-dimetoxi-2-(2-metilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona;

11. 3-(N-Carbamoil-2-aminoetil)-2-(2,6-diisopropilfenilimino)-9,10-dimetoxi-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona;

12. 3-(N-Carbamoil-4-aminobutil)-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona;

13. 3-[N-(N'-Ciano-N''-metil)-2-guanidinoetil]-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetil-fenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

El compuesto: 9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilpenilimino)-3-(N-carbamoil-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona es particularmente preferido.

Los compuestos de fórmula general I pueden prepararse por cualquier método adecuado conocido en la técnica y/o por los siguientes procesos, que en sí mismos forman parte de la invención.

De acuerdo con un segundo aspecto de la invención, se proporciona un proceso para preparar un compuesto de fórmula general I como ha definido anteriormente, comprendiendo el proceso:

(a) derivatizar un compuesto de fórmula general II:

2

en la que R^{1}, R^{2}, R^{5}, R^{6}, R^{7}, R^{8}, R^{9}, X y n son como se han definido para la fórmula general I, con uno o más compuestos capaces de reaccionar en el grupo de amina primaria del resto aminoalquilo (-(CH_{2})_{n}-NH_{2}), para formar un compuesto de fórmula general I; o

(b) cuando X en la fórmula general I representa un grupo CR^{3}R^{4}, donde R^{3} representa un átomo de hidrógeno, R^{4} representa un átomo de hidrógeno o grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono, y R^{5} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono, hidrogenar un compuesto de fórmula general III:

3

en la que R^{1}, R^{2}, R^{6}, R^{7}, R^{8}, R^{9}, R^{10}, R^{11}, Y y n son como se han definido para la fórmula general I; y

(c) opcionalmente convertir un compuesto de fórmula general I formado de esta forma en otro compuesto de fórmula general I.

Las condiciones de reacción de la etapa (a) generalmente son tales que favorezcan la reacción, que puede ser un desplazamiento nucleófilo o adición y se realizan en un disolvente que es adecuado para la reacción particular.

Los compuestos elegidos para reaccionar con un compuesto de fórmula general II son capaces de reaccionar en el grupo de amina primaria del resto alquilamino del compuesto de fórmula general II, para formar un compuesto de fórmula general I. Por ejemplo:

cuando Y representa un átomo de oxígeno y cada uno de R^{10} y R^{11} representa un átomo de hidrógeno, un compuesto de fórmula general II puede derivatizarse con cianato sódico;

cuando Y representa un átomo de oxígeno, R^{10} representa un átomo de hidrógeno y R^{11} representa un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 6 átomos de carbono o fenilo, puede derivatizarse un compuesto de fórmula general II con un isocianato de fórmula general R^{11}NCO;

cuando Y representa CHNO_{2}, R^{10} representa un átomo de hidrógeno y R^{11} representa un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono o cicloalquilo con 3 a 6 átomos de carbono, un compuesto de fórmula general II puede derivatizarse con un N-alquil con 1 a 3 átomos de carbono- o N-cicloalquil con 3 a 6 átomos de carbono-1-(metiltio)-2-nitroetanamina de fórmula general CH_{3}SC(=CHNO_{2})NR^{10}R^{11};

cuando Y represente CHNO_{2}, un compuesto de fórmula general II puede hacerse reaccionar en primer lugar con 1,1-bis(metiltio)-2-nitroetileno y el compuesto resultante después puede hacerse reaccionar con una amina de la fórmula general R^{10}R^{11}NH, donde R^{10} y R^{11} son como se han definido para la fórmula general I;

cuando Y representa NH, un compuesto de fórmula general II puede derivatizarse con un compuesto de fórmula general CH_{3}SC(=NH)NR^{10}R^{11} o una sal del mismo, donde R^{10} y R^{11} son como se han definido para la fórmula general I.; y

cuando Y representa NCN, un compuesto de fórmula general II puede derivatizarse con un compuesto de fórmula general CH_{3}SC(=NCN)NR^{10}R^{11} o una sal del mismo, donde R^{10} y R^{11} son como se han definido para la fórmula general I.

\newpage

En casos específicos:

para 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, puede elegirse cianato sódico;

para 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-(N'-isopropilcarbamoil)-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, puede elegirse isocianato de isopropilo;

para 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-[1-(N'-metil-2-nitroetanamina)]-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, puede elegirse N-metil-1-(metiltio)-2-nitroetenamina;

para 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-[1-(N'-isopropil-2-nitroetenamina)]-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, puede elegirse 1,1-bis(metiltio)-2-nitroetileno e isopropilamina;

para 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-[1-(N',N'-dimetil-2-nitroetenamina)]-3-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, puede elegirse 1,1-bis(metiltio)-2-nitroetileno y dimetilamina y;

para 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-(N'-fenilcarbamoil)-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-2-ona, puede elegirse isocianato de fenilo.

Los compuestos de fórmula general II pueden prepararse por reacción de un compuesto de fórmula general IV:

4

en la que R^{1}, R^{2}, R^{5}, R^{6}, R^{7}, R^{8}, R^{9}y X son como se han definido para la fórmula general I, con un compuesto de fórmula general V:

VLG-(CH_{2})_{n}-N-PG

en la que n es como se ha definido por la fórmula general I, LG representa un grupo saliente, y PG representa un grupo protector; y después retirando el grupo protector.

La reacción entre un compuesto de fórmula general IV y un compuesto de fórmula general V generalmente se realiza en condiciones adecuadas para la reacción, que es una substitución nucleófila. Puede usarse una base tal como K_{2}CO_{3} en presencia de NaI y la reacción se realiza en un disolvente adecuada tal como 2-butanona.

El grupo saliente LG en la fórmula general V puede ser cualquier grupo saliente adecuado, pero preferiblemente es un átomo de halógeno tal como bromo. El grupo protector PG en la fórmula general V puede ser cualquier grupo protector adecuado tal como un grupo ftaloílo. Si la reacción entre un compuesto de fórmula general IV y V se realiza en una base tal como K_{2}CO_{3}, el grupo protector deber ser estable en medio básico. Un compuesto adecuado de fórmula general V es N-(2-bromoetil)ftalimida:

5

\newpage

El grupo protector después puede retirarse por procedimientos de desproctección convencionales. Por ejemplo, puede usarse hidrazina hidrato. Las condiciones de reacción generalmente son de tal forma que favorezcan la reacción, por ejemplo en un disolvente adecuado tal como etanol y/o cloroformo a temperatura ambiente.

Los compuestos de fórmula general IV pueden prepararse haciendo reaccionar un compuesto de fórmula general VI:

6

en la que R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{6} y X son como se han definido para la fórmula general I y LG representa un grupo saliente; con un compuesto de fórmula general VII:

7

en la que R^{7}, R^{8} y R^{9} son como se han definido para la fórmula general I.

Los compuestos de fórmula general VII son anilinas substituidas que son conocidas en la técnica y están disponibles en el mercado o pueden prepararse fácilmente por métodos conocidos per se.

El grupo saliente LG en los compuestos de fórmula general VI puede ser cloro, un grupo tioalquilo, preferiblemente tiometilo o un grupo alquilsulfonilo, preferiblemente metilsulfonilo. Preferiblemente es cloro.

Las condiciones de reacción generalmente son tales que favorezcan la reacción, que es un desplazamiento nucleófilo que preferiblemente se realiza en un disolvente adecuado tal como dimetilformamida o isopropanol en presencia de una base tal como carbonato potásico. Pueden encontrarse condiciones de reacción adecuadas en los documentos GB-A-1597717 y EP-A-0124893, que describen la preparación de compuestos relacionados.

La reacción generalmente es aplicable para la producción de compuestos de fórmula general I en la que R^{6} es un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono, amino, alquilamino con 1 a 6 átomos de carbono o acilamino con 2 a 7 átomos de carbono y R^{1} a R^{5} y R^{7} a R^{9}, X, Y y n tienen los significados dados anteriormente.

Los compuestos de fórmula general VI en la que LG representa un átomo de cloro pueden prepararse por reacción de un compuesto de fórmula general VIII o un compuesto de fórmula general IX con oxicloruro de fósforo, o por calentamiento de un compuesto de fórmula general VIII con pentacloruro de fósforo

8

9

donde R^{1}, R^{2}, R^{5}, R^{6} y X son como se han definido para la fórmula general I. Los compuestos de fórmula general VI en la que LG representa un grupo tioalquilo pueden prepararse a partir de compuestos de fórmula general VIII por calentamiento con pentasulfuro de fósforo en un disolvente tal como dioxano o piridina para dar inicialmente el tio-derivado intermedio de VIII que, tras el tratamiento con un agente alquilante tal como un yoduro de alquilo, por ejemplo yoduro de metilo, en un disolvente adecuado tal como tetrahidrofurano o acetato de etilo, da el compuesto de tioalquilo. La oxidación del compuesto de tioalquilo con, por ejemplo, ácido 3-cloroperbenzoico en un disolvente tal como cloruro de metileno, da el derivado de alquilsulfona.

Los compuestos de fórmula general VIII pueden prepararse por reacción de un compuesto de fórmula general IX, en la que R^{1}, R^{2}, R^{5} y R^{6} son como se han definido para la fórmula general I, con un agente de ciclodeshidratación tal como oxicloruro de fósforo, en condiciones menos vigorosas, es decir, a temperatura ambiente, que las requeridas para obtener los compuestos de fórmula general VI en la que LG representa un átomo de cloro. Se ha descrito un método alternativo en el documento NL-A-6.401.827 (Horrmann-La Roche) que implica hacer reaccionar la carbamoilmetileno-tetrahidroisoquinolina, fórmula general XI (en la que R^{1}, R^{2}, R^{5} y X tienen los significados dados anteriormente) con carbonato de dietilo en etóxido sódico etanólico:

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Los compuestos de fórmula general IX pueden prepararse por reacción de un compuesto de fórmula general XII

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en la que R^{1}, R^{2}, R^{5} y X son como se han definido para la fórmula general I, con R^{6}CH(CO_{2}Et)_{2}, donde R^{6} es como se ha definido para la fórmula general I, y una base fuerte tal como etóxido sódico en una solución etanólica caliente. Como alternativa, puede emplearse el correspondiente éster dimetílico en presencia de metóxido sódico metanólico caliente.

Los compuestos de fórmula general XII pueden prepararse por reacción de un compuesto de fórmula general XIII:

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en la que R^{1}, R^{2}, R^{5} y X son como se han definido para la fórmula general I, con urea por calentamiento a 160ºC. Como alternativa, los compuestos de fórmula general XIII pueden hacerse reaccionar con cianato potásico en presencia de ácido acético en un disolvente adecuado tal como etanol.

Los compuestos de fórmula general XIII son conocidos en la técnica pueden prepararse fácilmente por procedimientos conocidos per se. Por ejemplo, la preparación de ácido 1-(3,4-dimetoxifenetil)barbitúrico se ha descrito por B. Lal et al., en J. Med. Chem 27 1470-1480 (1984).

Volviendo a la etapa (b), las condiciones de reacción de la etapa (b) generalmente son tales que favorezcan la reacción de hidrogenación y la reacción generalmente se realiza en un disolvente adecuado tal como un alcohol, por ejemplo etanol, con un catalizador de metal noble tal como paladio, platino, rodio o níquel, a temperatura ambiente. El catalizador puede soportarse, por ejemplo, sobre carbono o alúmina.

Los compuestos de fórmula general III pueden prepararse a partir de un compuesto de fórmula general XIV:

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en la que R^{1}, R^{2} y R^{6} son como se han definido para la fórmula general I, y R^{4} y R^{5} representan independientemente un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono. Las reacciones se realizan como se ha descrito anteriormente para la conversión de compuesto de fórmula general VIII en un compuesto de fórmula general II mediante compuestos de fórmula general VI y de fórmula general IV, y las correspondientes condiciones de reacción preferidas.

Los compuestos de fórmula general XIV pueden prepararse a partir de compuestos de fórmula general VIII (en la que X representa un grupo CH_{2} y R^{5} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono) por calentamiento con un catalizador de metal noble tal como paladio, platino, rodio o níquel a una temperatura de 300 a 350ºC. El catalizador puede soportarse sobre carbono o alúmina y la reacción realizarse en un disolvente inerte tal como un hidrocarburo aromático, por ejemplo, p-cimeno.

En la etapa opcional (c), un compuesto de fórmula general I puede convertirse en otro compuesto de fórmula general I. Por ejemplo, los compuestos de fórmula general I en la que R^{6} representa NH_{2} pueden convertirse en compuestos de fórmula general I en la que R^{6} representa un grupo alquilamino con 1 a 6 átomos de carbono por procedimientos químicos convencionales, tales como por alquilación de un derivado protegido tal como un derivado de acilo o p-tolueno sulfonilo seguido por la retirada del grupo protector, tal como por hidrólisis ácida. Los compuestos de fórmula general I en la que R^{6} representa un grupo di-alquilamino (con 1 a 6 átomos de carbono) pueden prepararse por alquilación directa del derivado de alquilamino. Los compuestos de fórmula general I en la que R^{5}, R^{6}, R^{7}, R^{8} y/o R^{9} representa un grupo alquenilo con 2 a 3 átomos de carbono, alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono, alquinilo con 2 a 3 átomos de carbono o alquinilo con 2 a 6 átomos de carbono pueden hidrogenarse para dar el correspondiente compuesto con enlaces saturados. Las condiciones de reacción para la hidrogenación son las indicadas anteriormente para la etapa (b).

De acuerdo con un tercer aspecto, la presente invención proporciona una composición que comprende un compuesto de fórmula general I y un vehículo o diluyente veterinaria o farmacéuticamente aceptable. Preferiblemente, la composición es un composición farmacéutica para medicina humana.

Los compuestos de la presente invención son inhibidores de PDE y, por lo tanto, poseen propiedades farmacológicas valiosas tales como una actividad broncodilatadora como se demuestra por la inhibición de la contracción estimulada por campo en traquea aislada de cobaya, y una actividad anti-inflamatoria como se ilustra en estudios de células mononucleares humanas estimuladas por PHA (fitohemaglutinina). Los datos in vitro e in vivo indican que los compuestos tienen una larga duración de la acción como se demuestra por sus efectos protectores persistentes contra el broncoespasmo inducido por histamina en cobaya cuando se inhala directamente en los pulmones en forma de un polvo seco. Por lo tanto, la invención también se refiere al tratamiento agudo, crónico o profiláctico de pacientes que padecen trastornos respiratorios que incluyen, en particular, asma, asma alérgica, fiebre del heno, rinitis alérgica, bronquitis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), síndrome de insuficiencia respiratoria en adultos (ARDS) y fibrosis quística. También pueden usarse tópicamente en trastornos cutáneos tales como dermatitis atópica y psoriasis, o en inflamación ocular o cualquier otra enfermedad incluyendo la isquemia cerebral o enfermedades autoinmunes en las que se considera beneficioso un incremento de las concentraciones intracelulares de AMPc.

Uno o más de los compuestos indicados en el primer aspecto de la invención pueden estar presentes junto con uno o más vehículos y/o diluyentes y/o adyuvantes y/o propelentes farmacéutica y/o veterinariamente aceptables y no tóxicos y, si se desea, con otros ingredientes activos. Los vehículos o diluyentes adecuados son conocidos en la técnica (por ejemplo, Handbook of Pharmaceutical Excipients (1994) 2ª Edición, Eds. A. Wade/PJ Weller, The Pharmaceutical Press, American Pharmaceutical Association).

Preferiblemente, los compuestos y las composiciones de la presente invención se administran por inhalación, por ejemplo, por aerosoles o pulverizadores que puedan dispersar el ingrediente farmacológico activo en forma de un polvo o en forma de una solución o suspensión. Las composiciones farmacéuticas con propiedades de dispersión de polvo habitualmente contienen, además del ingrediente activo, un propulsor líquido con un punto de ebullición por debajo de la temperatura ambiente y, si se desea, adyuvantes tales como tensioactivos líquidos o sólidos no iónicos o aniónicos y/o agentes humectantes para formar una dispersión adecuada. Las composiciones farmacéuticas en las que el ingrediente farmacológico activo está en solución contienen, además de éste, un propelente adecuado, y además, si es necesario, un disolvente y/o estabilizante adicional. En lugar del propelente también puede usarse aire comprimido, siendo posible producirlo cuando se requiera por medio de un dispositivo de compresión y expansión adecuado. Las composiciones farmacéuticas también pueden suministrarse por dispositivos de inhalación activados por la respiración. Se prefieren composiciones de polvo seco para la administración por inhalación.

De acuerdo con un cuarto aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula general I o una composición que contiene un compuesto de fórmula general I para uso en medicina.

Los compuestos de la presente invención son útiles como inhibidores de isoenzimas de fosfodiesterasa. Los compuestos o composiciones de la presente invención pueden usarse para prevenir o tratar cualquier enfermedad en la que los compuestos o composiciones son útiles, pero particularmente una enfermedad en la que es deseable un aumento de la concentración intracelular de AMPc. Los ejemplos de enfermedades contra las que son útiles los compuestos incluyen trastornos respiratorios incluyendo, en particular, asma, bronquitis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD), síndrome de insuficiencia respiratoria en adultos (ARDS), asma alérgica, fiebre del heno, rinitis alérgica, y fibrosis quística. También pueden usarse tópicamente en trastornos cutáneos tales como dermatitis atópica o psoriasis, inflamación ocular o cualquier otra enfermedad incluyendo la isquemia cerebral o enfermedades autoinmunes en las que se considera beneficioso un incremento de las concentraciones intracelulares de AMPc.

Este aspecto de la invención es particularmente relevante para el tratamiento de seres humanos, pero también es aplicable a la industria veterinaria general, en particular para el tratamiento de animales domésticos tales como perros y gatos y de animales de granja tales como caballos, cerdos, vacas, ovejas, etc.

En el tratamiento de las afecciones mencionadas anteriormente son útiles niveles de dosificación del orden de aproximadamente 0,02 mg a aproximadamente 200 mg, tomados hasta tres veces al día. Más particularmente, es eficaz un intervalo de dosificación de aproximadamente 0,2 mg a aproximadamente 20 mg, tomados hasta tres veces al día. Sin embargo, el régimen de dosificación particular finalmente se determinará por el médico responsable del tratamiento que tendrá en consideración factores tales como la medicación que se esté usando, la edad, el peso, la gravedad de los síntomas y/o la gravedad del tratamiento a aplicar o que se esté aplicando, el método de administración de la medicación, las reacciones adversas y/u otras contraindicaciones.

La medicación de acuerdo con este aspecto de la invención puede administrarse a un paciente junto con otros agentes activos, que pueden ser, por ejemplo, un compuesto diferente de la presente invención u otros compuestos. Los ejemplos incluyen agonistas del adrenoceptor \beta_{2}, esteroides glucocorticoides tópicos, derivados de xantina, compuestos antihistamínicos, antagonistas de leucotrienos, inhibidores de la síntesis de leucotrienos y/o combinaciones de los mismos.

De acuerdo con un quinto aspecto, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula general I en la fabricación de un inhibidor de una isoenzima de fosfodiesterasa de tipo III/IV. La invención incluye el uso de un compuesto de fórmula general I en la fabricación de un broncodilatador y/o una medicación anti-asmática y/o un medicamento para la prevención o tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD).

La invención también se refiere a un método para el tratamiento o prevención de una enfermedad en un mamífero en el que se espera que sea beneficioso un inhibidor de la isoenzima de fosfodiesterasa y/o un broncodilatador, comprendiendo dicho método administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz y no tóxica de un compuesto de fórmula general I. La invención incluye un método para tratar o prevenir el asma y/o la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) en un mamífero.

Las características preferidas de cada aspecto de la invención se aplican a cada uno de los demás aspectos de la invención mutatis mutandis.

La figura 1, mencionada en las preparaciones 1 a 4 presentadas a continuación, muestra la ruta por la que se sintetizaron los compuestos en las preparaciones 1 a 4;

la figura 2, mencionada en el ejemplo A presentado a continuación, es un gráfico que muestra el efecto del DMSO sobre la respuesta contráctil colinérgica en tráquea de cobaya sometida a reperfusión, donde "n" es el número de experimentos;

la figura 3, mencionada en el ejemplo A presentado a continuación, es un gráfico que muestra el efecto de una concentración 10 \muM del compuesto del ejemplo 1 de la presente invención sobre la contracción de tráquea de cobaya ante la estimulación de un campo eléctrico a lo largo del tiempo (n=3), donde la flecha indica el comienzo del período de eliminación;

la figura 4, mencionada en el ejemplo A presentado a continuación, es un gráfico que muestra el efecto de una concentración 10 \muM del compuesto del ejemplo 9 sobre la contracción de tráquea de cobaya ante la estimulación de un campo eléctrico a lo largo del tiempo (n=3);

la figura 5, mencionada en el ejemplo A presentado a continuación, es un gráfico que muestra el efecto de una concentración 10 \muM del compuesto del ejemplo 10 sobre la contracción de tráquea de cobaya ante la estimulación de un campo eléctrico a lo largo del tiempo (n=3);

la figura 6, mencionada en el ejemplo A presentado a continuación, es un gráfico que muestra el efecto de una concentración 10 \muM del compuesto del ejemplo 11 sobre la contracción de tráquea de cobaya ante la estimulación de un campo eléctrico a lo largo del tiempo (n=3);

la figura 7, mencionada en el ejemplo A presentado a continuación, es un gráfico que muestra el efecto de una concentración 10 \muM del compuesto del ejemplo 13 sobre la contracción de tráquea de cobaya ante la estimulación de un campo eléctrico a lo largo del tiempo (n=3);

la figura 8, mencionada en el ejemplo A presentado a continuación, es un gráfico que muestra el efecto de una concentración 10 \muM del compuesto del ejemplo 8 sobre la contracción de tráquea de cobaya ante la estimulación de un campo eléctrico a lo largo del tiempo (n=3);

la figura 9, mencionada en el ejemplo B presentado a continuación, es un gráfico que muestra el efecto del compuesto del ejemplo 1 de la presente invención contra la proliferación de células mononucleares humanas estimuladas por PHA, donde cada punto representa la media de seis experimentos, y las líneas verticales representan el error típico de la media.

Preparación 1

Síntesis de 2-cloro-6,7-dihidro-9,10-dimetoxi-4H-pirimido-[6,1-a]isoquinolin-4-ona (mostrada como (1) en la figura 1)

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Una mezcla del ácido 1-(3,4-dimetoxifenil)barbitúrico (70 g, 0,24 mol) preparada de acuerdo con el método descrito en B. Lal et al., J. Med. Chemical 27-1470-1480 (1984) y oxicloruro de fósforo (330 ml, 3,22 mol) se calentó a reflujo durante 2,5 h. El exceso de oxicloruro de fósforo se retiró por destilación (20 mmHg) después del calentamiento. Después de enfriar, el residuo se suspendió en dioxano (100 ml) y se añadió cautelosamente a una solución agitada vigorosamente de agua enfriada con hielo (11). Se añadió cloroformo (11) y la mezcla resultante se basificó con una solución de hidróxido sódico al 30%. La capa orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo adicionalmente con cloroformo (2 x 750 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (1,51), se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron al vacío para dar un material gomoso (90 g). Esto se agitó en metanol durante unos pocos minutos, se filtró y se lavó con metanol (200 ml), éter dietílico (2 x 200 ml) y se secó al vacío a 40ºC para producir el compuesto del título en forma de un sólido amarillo/naranja. 47 g, 62%.

(300 MHz, CDCl_{3}) 2,96 (2H, t, C_{(7)} H_{2}); 3,96 (6H, s, 2xOCH_{3}); 4,20 (2H, t, C_{(6)} H_{2}); 6,61 (1H, s, C_{(1)} H); 6,76 (1H, s, Ar-H); 7,10 (1H, s, Ar-H).

Preparación 2

9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (mostrada como (2) en la figura 1)

Se agitó 2-cloro-9,10-dimetoxi-6,7-dihidro-4H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, preparada de acuerdo con la preparación 1, (38,5 g, 0,13 mol) y 2,4,6-trimetilanilina (52,7 g, 0,39 mmol) en propan-2-ol (3 l) y se calentó a reflujo en una atmósfera de nitrógeno durante 24 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la solución se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con CH_{2}Cl_{2}/MeOH; inicialmente 98:2, cambiando a 96:4 una vez que el producto había comenzado a eluir en la columna. Se obtuvo el compuesto del título con una ligera impureza, (inmediatamente antes de someter el producto a tlc). Rendimiento 34,6 g, 67%.

Preparación 3

9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(2-N-ftalimidoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (mostrada como (3) en la figura 1)

Una mezcla de 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (que se preparó de acuerdo con la preparación 2) (60,0 g, 0,153 mol), carbonato potásico (191 g, 1,38 mol), yoduro sódico (137 g, 0,92 mol) y N-(2-bromoetil)ftalimida (234 g, 0,92 mol) en 2-butanona (1500 ml) se agitó y se calentó a reflujo en una atmósfera de nitrógeno durante 4 días. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y el filtrado se evaporó al vacío. El residuo se trató con metanol (1000 ml) y el sólido se retiró por filtración, se lavó con metanol y se recristalizó en acetato de etilo para obtener el compuesto del título en forma de un sólido amarillo con un rendimiento de 40,0 g, 46%. La evaporación de las aguas madres y la cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH_{2}Cl_{2} MeOH 95:5) del residuo proporcionó más producto 11,7 g, 13,5%.

Preparación 4

9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (mostrada como (4) en la figura 1)

Una mezcla de 9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(2-N-ftalimidoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (22,0 g, 0,039 mol) preparada de acuerdo con la preparación 3, e hidrazina hidrato (11,3 g, 0,195 mol) en cloroformo (300 ml) y etanol (460 ml) se agitó a temperatura ambiente, en una atmósfera de nitrógeno, durante 18 h. Se añadió más hidrazina hidrato (2,9 g, 0,05 mol) y la mezcla se agitó durante 4 h más. Después de enfriar en agua enfriada con hielo, el sólido se retiró por filtración y el filtrado se evaporó al vacío. El residuo se disolvió en diclorometano y el material insoluble se retiró por filtración. El filtrado se secó (MgSO_{4}) y se evaporó al vacío para producir el compuesto del título en forma de una espuma amarilla con un rendimiento de 16,2 g, 96%.

Ejemplo 1 9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

15

Se añadió gota a gota cianato sódico (6,0 g, 0,092 mol) en agua (100 ml) a una solución agitada de 9,10-dimetoxi-2-(2,4-6-trimetilfenilimino)-3-(2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, preparada de acuerdo con la preparación 4 anterior (20,0 g, 0,046 mol) en agua (600 ml) y HCl 1 N (92 ml) a 80ºC. Después de agitar durante 2 h a 80ºC, la mezcla se enfrió en un baño de hielo y se basificó con NaOH 2 N. La mezcla se extrajo con diclorometano (3 x 200 ml) y el extracto combinado se secó (MgSO_{4}) y se evaporó al vacío. La espuma amarilla resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con CH_{2}Cl_{2}/MeOH (97:3) y se trituró con éter para obtener el compuesto del título en forma de un sólido amarillo, 11,9 g, 54%.

P.f.	234-236ºC
m/z	C_{26}H_{31}N_{5}O_{4} requiere M=477 encontrado (M+1) 478
HPLC	Área (%) 99,50
	Columna ODS (150 x 4,6 mm)
	MP KH_{2}PO_{4} pH 3/CH_{3}CN (60/40)
	FR (ml/min) 1,0
	TR (min) 9,25
	Detección 250 nm

^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 1,92 (1H, s a, NH); 2,06 (6H, s, 2xCH_{3}), 2,29 (3H, s, CH_{3}), 2,92 (2H, t, CH_{2}), 3,53 (2H, m, CH_{2}), 3,77 (3H, s, OCH_{3}), 3,91 (3H, s, OCH_{3}), 4,05 (2H, t, CH_{2}), 4,40 (2H, t, CH_{2}), 5,35 (2H, s a, NH_{2}), 5,45 (1H, s, C=CH), 6,68 (1H, s, ArH), 6,70 (1H, s, ArH), 6,89 (2H, s, 2xArH).

Ejemplo 2 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-(N'-isopropilcarbamoil)-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

16

Se añadió gota a gota isocianato de isopropilo (0,15 g, 1,77 mol) a una solución agitada de 9,10-dimetoxi-2-(2,4-6-trimetilfenilimino)-3-(2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (preparada de acuerdo con la preparación 4 anterior) (0,7 g, 1,61 mol) en tolueno (6 ml) a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno. Después de 2 h, la solución se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH_{2}Cl_{2}/MeOH, 97:3) y se trituró con éter para obtener un sólido blanquecino, 0,42 g, 50%.

P.f.	181-182ºC
m/z	C_{29}H_{37}N_{5}O_{4} requiere M=519 encontrado (M+1) = 520
HPLC	Área (%) 94,99
	Columna ODS (150 x 4,6 mm)
	MP KH_{2}PO_{4} pH 3/CH_{3}CN (40/60)
	FR (ml/min) 1,0
	TR (min) 7,895
	Detección 250 nm

^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 0,89 (6H, d, 2xCH_{3}), 2,05 (6H, s, 2xCH_{3}), 2,29 (3H, s, CH_{3}), 1,94 (1H, s a, NH), 2,90 (2H, t, CH_{2}), 3,49 (2H, m, CH_{2}), 3,77 (3H, s, OCH_{3}), 3,91 (3H, s, OCH_{3}), 4,05 (2H, t, CH_{2}), 4,37 (2H, t, CH_{2}), 5,02 (1H, s a, NH), 5,46 (1H, s, C=CH), 6,67 (1H, s, ArH); 6,69 (1H, s, ArH), 6,87 (2H, s, 2xArH).

Ejemplo 3 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-[1-N'-metil-2-nitroetanamina)]-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]-isoquinolin-4-ona

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Una mezcla de 9,10-dimetoxi-2-(2,4-6-trimetilfenilimino)-3-(2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, preparada de acuerdo con la preparación 4 anterior (0,8 g, 1,84 mural) y N-metil-1-(metiltio)-9-nitroetenamina (0,30 g, 2,03 mmol) en tolueno (20 ml) se agitó y se calentó a reflujo, en una atmósfera de nitrógeno, durante 2 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, el disolvente se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH_{2}Cl_{2}/MeOH, 97:3). Se obtuvo el compuesto del título en forma de una espuma amarilla con un rendimiento de 0,61 g, 62% que, tras la trituración con éter produjo un sólido amarillo 0,40 g, 41%.

P.f.	126-130ºC
m/z	C_{28}H_{34}N_{6}O_{5} requiere M=534 encontrado (M+1) = 535
HPLC	Área (%) 98,98
	Columna ODS (150 x 4,6 mm)
	MP KH_{2}PO_{4} pH 4/CH_{3}CN (45/55)
	FR (ml/min) 1,0
	TR (min) 6,635
	Detección 250 nm

^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 2,07 (6H, S, 2xCH_{3}), 2,29 (3H, s, CH_{3}), 2,45 (3H, d, NHCH_{3}), 2,92 (2H, t, CH_{2}), 3,65 (2H, m, CH_{2}), 3,77 (3H, s, OCH_{3}), 3,90 (3H, s, OCH_{3}), 4,08 (2H, t, CH_{2}), 4,32 (2H, m, CH_{2}), 5,46 (1H, s, =CH), 6,51 (1H, s, CHNO_{2}), 6,70 (2H; S, 2xArH); 6,90 (2H, s, 2xArH), 8,78 (1H, m, NH), 10,35 (1H, m, NH).

Ejemplo 4 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-[1-N'-isopropil-2-nitroetanamina)]-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]-isoquinolin-4-ona

Se agitaron 1,1-bis(metiltio)-2-nitroetileno (5,3 g, 32,2 mmol) y 9,10-dimetoxi-2-(2,4-6-trimetilfenilimino)-3-(2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, preparada de acuerdo con la preparación 4 anterior (1,4 g, 3,22 mmol) en tolueno (20 ml) y se calentaron a reflujo, en una atmósfera de nitrógeno, durante 2 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, el disolvente se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH_{2}Cl_{2}/MeOH, 99:1). Esto produjo el compuesto intermedio (mostrado como compuesto A más adelante) en forma de un aceite que se convirtió en un sólido de color beige claro después de las trituración con éter. Rendimiento de 0,95 g, 53%.

Se añadió isopropilamina (5 ml) a una solución agitada de (A) (0,7 g, 1,27 mmol) en diclorometano (10 ml) y se calentó a reflujo, en una atmósfera de nitrógeno, durante 20 h. Después de enfriar, la solución se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH_{2}Cl_{2}/MeOH, 98:2). Se obtuvo el producto del título (mostrado como B más adelante) en forma de una espuma con un rendimiento 0,64 g, 89%. Esto se convirtió en un sólido amarillo pálido (0,38 g) después de la trituración con éter.

18

P.f.	144-146ºC
m/z	C_{30}H_{38}N_{6}O_{5} requiere M=562 encontrado (M+1) = 563
HPLC	Área (%) 97,57
	Columna ODS (150 x 4,6 mm)
	MP KH_{2}PO_{4} pH4/CH_{3}CN (40/60)
	FR (ml/min) 1,0
	TR (min) 9,028
	Detección 250 nm

^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 0,87 (6H, d, CH(CH_{3})_{2}), 2,05 (6H, s, 2xCH_{3}), 2,29 (3H, s, CH_{3}), 2,93 (2H, m, CH_{2}), 3,48 (1H, m, CH(CH_{3})_{2}), 3,68 (2H, m, CH_{2}), 3,78 (3H, s, OCH_{3}), 3,91 (3H, s, OCH_{3}), 4,09 (2H, t, CH_{2}), 4,34 (2H, m, CH_{2}), 5,48 (1H, s, C=CH), 6,68 (1H, s, CHNO_{2}), 6,69 (2H, s, 2xArH), 6,90 (2H, s, 2xArH), 7,04 (1H, d, NH), 10,75 (1H, m, NH).

Ejemplo 5 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N[1-(N',N'-dimetil-2-nitroetanamina)]-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]-isoquinolin-4-ona

19

Una solución del compuesta A mostrado en el ejemplo 4 anterior (1,0 g, 1,81 mmol) y dimetilamina (33% en EtOH, 5,0 ml, 28 mmol) en diclorometano (10 ml) se agitó a 35ºC, en una atmósfera de nitrógeno, durante 18 horas. Después, la solución se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH_{2}Cl_{2}/MeOH, 97:3) para obtener el compuesto del título en forma de una espuma amarilla con un rendimiento de 0,73 g, 73%. Esto se convirtió en un sólido amarillo pálido (0,60 g) después de la trituración con éter.

P.f.	187-189ºC
m/z	C_{29}H_{36}N_{6}O_{5} requiere M=548 encontrado (M+1) = 549
HPLC	Área (%) 97,89
	Columna ODS (150 x 4,6 mm)
	MP KH_{2}PO_{4} pH4/CH_{3}CN (45/55)
	FR (ml/min) 1,0
	TR (min) 6,768
	Detección 250 nm

\newpage

^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 2,02 (6H, s, 2xCH_{3}), 2,28 (3H, s, CH_{3}), 2,95 (2H, m, CH_{2}), 2,95 (6H, s, N(CH_{3})_{2}), 3,78 (3H, s, OCH_{3}), 3,81 (2H, t, CH_{2}), 3,90 (3H, s, OCH_{3}), 4,05 (2H, t, CH_{2}), 4,55 (2H, t, CH_{2}), 5,43 (1H, s, C=CH), 6,47 (1H, s, ArH), 6,67 (1H, s, CHNO_{2}), 6,70 (1H, s, ArH), 6,89 (2H, s, 2xArH), 9,35 (1H, m, NH).

Ejemplo 6 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-(N'-fenilcarbamoil)-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-2-ona

20

Se añadió gota a gota isocianato de fenilo (0,16 g, 1,38 mmol) a una solución agitada de 9,10-dimetoxi-2-(2,4-6-trimetilfenilimino)-3-(2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, preparada de acuerdo con la preparación 4 anterior (0,6 g, 1,38 mmol) en tolueno (5 ml) a temperatura ambiente, en una atmósfera de nitrógeno. Después de 1 h, el disolvente se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH_{2}Cl_{2}/MeOH, 95:5). Después de la trituración con éter, se obtuvo el compuesto del título en forma de un sólido amarillo pálido 0,61 g, 80%.

P.f.	116-118ºC
m/z	C_{32}H_{33}N_{5}O_{4} requiere M=553 encontrado (M+1) = 554
HPLC	Área (%) 98,80
	Columna ODS (150 x 4,6 mm)
	MP KH_{2}PO_{4} 0,02 M/CH_{3}CN (42/58)
	FR (ml/min) 0,8
	TR (min) 10,622
	Detección 254 nm

^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 2,05 (6H, s, 2xCH_{3}), 2,30 (3H, s, CH_{3}), 2,92 (2H, t, CH_{2}), 3,67 (2H, m, CH_{2}), 3,78 (3H, s, OCH_{3}), 3,91 (3H, s, OCH_{3}), 4,06 (2H, t, CH_{2}), 4,47 (2H, t, CH_{2}), 5,51 (1H, s, C=CH), 5,60 (1H, s a, NH), 6,69 (1H, s, ArH), 6,72 (1H, s, ArH), 6,89 (2H, s, 2xArH), 6,90-7,23 (5H, m, 5xArH), 7,62 (1H, s a, NH).

Ejemplo 7 9,10-Dimetoxi-3-(2-guanidinoetil]-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

21

1-3-Di-(terc-butoxicarbonil)tiourea (1)

Se lavó hidruro sódico (en aceite al 60%, 4,7 g, 0,117 mol) con éter de petróleo para retirar el aceite, después se añadió en porciones a una solución agitada de tiourea (2,0 g, 0,026 mol) en tetrahidrofurano (400 ml) a 0ºC, en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agito durante 5 minutos a 0ºC, después se calentó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Después de enfriar de nuevo a 0ºC, se añadió gota a gota dicarbonato de di-terc-butilo (16,1 g, 0,0585 mol) en tetrahidrofurano (100 ml) y la mezcla se agitó durante 30 minutos a 0ºC. Después de 2 h más a temperatura ambiente, la reacción se inactivó por adición gota a gota de bicarbonato sódico saturado (40 ml) y se vertió en agua (11). La solución se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml) y el extracto combinado se lavó con salmuera, se secó (MgSO_{4}) y se evaporó al vacío. El sólido residual se trituró con éter de petróleo, se retiró por filtración y se secó al vacío. Se obtuvo el compuesto de título (4,3 g, 60%) en forma de un sólido blanquecino, P.f. 124-127ºC.

3-[N-(N'-N''-Di-terc-butoxicarbonil)-2-guanidinoetil]-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (3)

Se añadió gota a gota yoduro de 1-metil-2-cloropiridinio (0,77 g, 3,03 mmol) en N,N-dimetilformamida (4 ml) a una mezcla agitada de N,N'-di-(terc-butoxicarbonil)tiourea (0,84 g, 3,03 mmol), 3-(2-aminoetil)-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (2) (1,1 g, 2,53 mmol) y trietilamina (0,56 g, 5,57 mmol) en N,N-dimetilformamida (8 ml). Después de 18 h, la reacción se inactivó por la adición de agua (40 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3x 25 ml). El extracto combinado se lavó con salmuera, se secó (MgSO_{4}) y se evaporó al vacío. El aceite residual se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (éter de petróleo/acetato de etilo 2:1) para obtener el compuesto del título (1,05 g, 61%) en forma de una espuma amarilla.

M/z [ES]+ 677.

9,10-Dimetoxi-3-[2-guanidinoetil]-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

Se añadió ácido trifluoroacético (0,35 g, 3,1 mmol) a una solución agitada de 3 (0,95 g, 1,4 mmol) en diclorometano (5 ml) a temperatura ambiente. Después de 3 h, se añadió más ácido trifluoroacético (0,35 g) y la mezcla se agitó durante 16 horas más. Después, el disolvente se evaporó al vacío y el residuo se trató con diclorometano (20 ml) y se basificó a pH 10 con bicarbonato sódico saturado. La fase orgánica se separó, se secó (MgSO_{4}) y se evaporó al vacío. El aceite residual se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (CH_{2}Cl_{2}/MeOH, 98:2 \rightarrow 90:10) para obtener el compuesto del título, después de la trituración con éter dietílico, en forma de un sólido blanquecino, 0,27 g, 40%.

P.f.	226-228ºC
m/z	C_{26}H_{32}N_{6}O_{3} requiere M=476, encontrado m/z[ES]^{+} = 554
HPLC:
Área (%)	98,73
Columna	ODS LUNA 3\muc18(2) (100 x 4,6 mm)
MP	CF_{3}CO_{2}H al 0,1%/CH_{3}CN (gradiente 90% ac \rightarrow25%ac durante 25 min)
	11,413
TR (min)	0,8
FR(ml/min)	250nm
Detección

^{1}H RMN (250 MHz, CDCl_{3}, 70ºC): \delta 2,03 (6H, s, 2xCH_{3}), 2,26 (3H, s, CH_{3}), 2,95 (2H, t, CH_{3}), 3,57 (2H, m, CH_{2}), 3,67 (3H, s, OCH_{3}), 3,85 (3H, s, OCH_{3}), 3,98 (2H, t, CH_{2}), 4,33 (2H, t, CH_{2}), 5,40 (1H, s, C=CH), 6,73 (1H, s, ArH), 6,91 (2H, s, 2xArH), 6,98 (1H, s, ArH), 7,25 (2H, s a, NH_{2}), 7,73 (1H, m, NH).

La ^{1}H RMN se realizó a 70ºC para obtener mejor resolución ya que algunas señales se resolvieron deficientemente a temperatura ambiente.

22

220

Ejemplo 8 9,10-Dimetoxi-3-[N-(N'-nitro)-2-guanidinoetil]-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

23

2-Metil-1-nitro-2-isotiourea (1)

Se añadió en porciones sulfato de S-metilisotiouronio (3,0 g, 10,8 mmol) a una mezcla agitada de ácido nítrico fumante (3 ml) y ácido sulfúrico concentrado (9 ml) a -10 - +5ºC. Después de agitar durante 30 min más a 5ºC, la solución se vertió en hielo (120 g) con agitación. El sólido blanco se retiró por filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para obtener 2-metil-1-nitro-2-isotiourea (2,0 g, 69%).

9,10-Dimetoxi-3-[N-(N-nitro)-2-guanidinoetil]-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido-[6,1-a]isoquinolin-4-ona

Se añadió 2-metil-1-nitro-2-isotiourea (0,405 g, 3,0 mmol) a una solución agitada de 3-(2-aminoetil)-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (1,29 g, 3,0 mmol) en etanol (12 ml) y se calentó a 70ºC durante 30 min. Después, el disolvente se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice [CH_{2}Cl_{2}/MeOH, 97:3)] para obtener el compuesto del título en forma de un sólido amarillo pálido (0,76 g, 49%).

\newpage

P.f.:	253-256ºC
m/z:	C_{26}H_{31}N_{7}O_{5} requiere M=521 encontrado m/z [ES]^{+} = 522
HPLC:	Área (%) 99,44
	Columna ODS LUNA 3\muC18(2) (100 x 4,6 mm)
MP	CF_{3}CO_{2}H al 0,1%/CH_{3}CN (gradiente 90% ac \rightarrow25%ac durante 25 min)
	TR (min) 16,842
	FR (ml/min) 1,0
	Detección 250 nm

^{1}H RMN (250 MHz, d_{6}-DMSO, 70ºC): \delta 2,02 (6H, s, 2xCH_{3}), 2,25 (3H, s, CH_{3}), 2,94 (2H, t, CH_{2}), 3,63 (2H, m, CH_{2}), 3,66 (3H, s, OCH_{3}), 3,84 (3H, s, OCH_{3}), 3,96 (2H, t, CH_{2}), 4,37 (2H, t, CH_{2}), 5,38 (1H, s, C=CH), 6,72 (1H, s, ArH), 6,88 (2H, s, 2xArH), 6,96 (1H, s, ArH), 7,89 (1H, s a, NH).

24

\vskip1.000000\baselineskip

25

Ejemplo 9 3-[N-(N'-Ciclohexilcarbamoil)-2-aminoetil]-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

250

Se añadió gota a gota isocianato de ciclohexilo (0,38 g, 3,04 mmol) en tolueno (2 ml) a una solución agitada de 3-(2-aminoetil)-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (1,2 g, 2,76 mmol) en tolueno (8 ml) a temperatura ambiente, en una atmósfera de nitrógeno. Después de agitar durante 16 h, la solución se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice [diclorometano/metanol (97:3)]. El producto se trituró con éter para obtener el compuesto del título (0,61 g, 40%) en forma de un sólido amarillo pálido.

\newpage

P.f.	120-122ºC
m/z	C_{32}H_{41}N_{5}O_{4} requiere M=559 encontrado m/z [ES+] = 560
HPLC	Área (%) 98,59
	Columna ODS LUNA 3\muC18(2)
	MP NH_{4}OAC 0,1 M/CH_{3}CN (40/60)
	TR (min) 9,145
	FR (ml/min) 0,7
	Detección 250 nm

^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 0,7-1,8 (11H, m, ciclohexilo), 2,05 (6H, s, 2xCH_{3}), 2,27 (3H, s, CH_{3}), 2,93 (2H, t, CH_{2}), 3,49 (2H, m, CH_{2}), 3,78 (3H, s, OCH_{3}), 3,91 (3H, s, OCH_{3}), 4,05 (2H, t, CH_{2}), 4,37 (2H, t, CH_{2}), 5,49 (1H, s, C=CH), 5,80 (1H, s a, NH), 6,69 (1H, s, ArH), 6,70 (1H, s, ArH), 6,90 (2H, s, 2xArH).

Ejemplo 10 3-(N-Carbamoil-2-aminoetil)-9,10-dimetoxi-2-(2-metilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

26

9,10-Dimetoxi-2-(2-metilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (1)

Se suspendieron 2-metilanilina (5,44 ml, 51 mmol) y 2-cloro-9,10-dimetoxi-6,7-dihidro-4H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (5 g, 17 mmol) en propan-2-ol (400 ml) y se calentó a reflujo, en una atmósfera de nitrógeno, durante 24 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la solución se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida [diclorometano/metanol (98:2 - 96:4)] para producir el compuesto del título (6,2 g, rendimiento cuantitativo) en forma de un sólido amarillo/naranja.

9,10-Dimetoxi-2-(2-metilfenilimino)-3-(N-ftalimidoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (2)

Una mezcla de isoquinolina 1 (6,2 g, 17 mmol), carbonato potásico (21,1 g, 153 mmol), yoduro sódico (15,3 g, 102 mmol) y N-(2-bromoetil)ftalimida (25,9 g, 102 mmol) en 2-butanona (170 ml) se agitó a reflujo, en una atmósfera de nitrógeno, durante 7 días. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y el residuo se lavó con metanol (150 ml). El filtrado se concentró al vacío y el residuo resultante se trató con metanol (100 ml) y el sólido se retiró por filtración y se lavó con metanol. Este sólido se lavó con éter para dar el compuesto del título (2,67 g, 30%) en forma de un sólido amarillo pálido.

3-(2-Aminoetil)-9,10-dimetoxi-2-(2-metilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona(3)

Una mezcla de ftalimida 2 (2,66 g, 4,96 mmol) y hidrazina monohidrato (1,24 g, 24,8 mmol) en cloroformo (35 ml) y etanol (60 ml) se agitó a temperatura ambiente, en una atmósfera de nitrógeno, durante 18 horas. Se añadió más hidrazina hidrato (0,25 g, 5 mmol) y la mezcla se agitó durante 5 h más. Después de enfriar a 0ºC en un baño de agua enfriada con hielo, el sólido se retiró por filtración, el residuo se lavó con una pequeña cantidad de cloroformo frío y el filtrado se concentró al vacío. Este residuo se recogió en diclorometano y el material insoluble se retiró por filtración. El filtrado se secó (MgSO_{4}), se filtró y se concentró al vacío para producir el compuesto del título (2,05 g, rendimiento cuantitativo) en forma de una espuma amarilla.

3-(N-Carbamoil-2-aminoetil)-9,10-dimetoxi-2-(2-metilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

Se añadió gota a gota cianato sódico (0,64 g, 9,8 mmol) en agua (13 ml) a una solución agitada de amina 3 (2 g, 4,9 mmol) en agua (63 ml) y HCl 1 M (9,8 ml) a 80ºC. Después de agitar durante 3 h a 80ºC, la mezcla se enfrió y se basificó con NaOH 2 M. La mezcla se extrajo con CH_{2}Cl_{2} hasta que no quedaba más producto en la fase orgánica. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron (MgSO_{4}), se filtraron y concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna [diclorometano/metanol (97:3)] y el producto se trituró con éter para producir el compuesto del título (1,0 g, 45%) en forma de un sólido amarillo.

P.f.	236-238ºC
m/z	C_{24}H_{27}N_{5}O_{4} requiere M=449 encontrado (M+1) = 450
HPLC	Área	100%
	Columna	ODS LUNA (150 4,6 mm)
	MP	KH_{2}PO_{4} pH 3/CH_{3}CN gradiente 90% mac a 50% durante 25
	minutos.
	FR	1,0 ml\cdotmin^{-1}
	TR	14,284 min
	Detección	250 nm

^{1}H RMN (300 MHz, d_{6}-DMSO): \delta 2,08 (3H, s, CH_{3}), 2,89 (2H, t, CH_{2}), 3,60 (3H, s, OMe), 3,79 (3H, s, OMe), 3,91 (2H, t, CH_{2}), 4,14 (2H, t, CH_{2}), 5,44 (2H, s a, NH_{2}), 5,64 (1H, s, H vinílico), 6,07 (1H, t, NH), 6,71 (1H, s, ArH), 6,73 (1H, d, ArH), 6,92 (1H, t, ArH), 6,95 (1H, s, ArH), 7,13 (1H, t, ArH), 7,19 (1H, d, ArH).

NB. El espectro de RMN de protón anterior no muestra los desplazamientos químicos para un grupo CH_{2} ya que se cree que esta señal se obscurece por la señal de agua presente en el d_{6}-DMSO a 3,31-3,35.

27

Ejemplo 11 3-(N-Carbamoil-2-aminoetil)-2-(2,6-diisopropilfenilimino)-9,10-dimetoxi-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

28

2-(2,6-Diisopropilfenilimino)-9,10-dimetoxi-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido-[6,1-a]isoquinolin-4-ona (1)

Se suspendieron 2,6-diisopropilamina (9,62 ml, 51 mmol) y 2-cloro-9,10-dimetoxi-6,7-dihidroxi-4H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (5 g, 17 mmol) en propan-2-ol (400 ml) y se calentó a reflujo, en una atmósfera de nitrógeno, durante 4 días. Después de enfriar a temperatura ambiente, la solución se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna [diclorometano/metanol (98:2 - 96:4] para producir el compuesto del título (5,8 g, 79%) en forma de un sólido amarillo/naranja.

2-(2,6-Diisopropilfenilimino)-9,10-dimetoxi-3-(N-ftalimidoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (2)

Una mezcla de isoquinolina 1 (5,8 g 13,4 mmol), carbonato potásico (16,7 g, 121 mmol), yoduro sódico (12,1 g, 80 mmol) y N-(2-bromoetil)ftalimida (25,9 g, 80 mmol) en 2-butanona (150 ml) se agitó a reflujo, en una atmósfera de nitrógeno, durante 5,5 días. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y el residuo se lavó con metanol (150 ml). El filtrado se concentró al vació, el residuo resultante se trató con metanol (100 ml) y el sólido se retiró por filtración y se lavó minuciosamente con metanol. El sólido resultante se secó para dar el compuesto del título (4,9 g, 60%) en forma de sólido amarillo pálido.

3-(2-Aminoetil)-2-(2,6-diisopropilfenilimino)-9,10-dimetoxi-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (3)

Una mezcla de ftalimida 2 (4,9 g, 8,08 mmol) e hidrazina monohidrato (2,01 g, 40,4 mmol) en cloroformo (70 ml) y etanol (105 ml) se agitó a temperatura ambiente, en una atmósfera de nitrógeno, durante 18 horas. Se añadió más hidrazina hidrato (0,5 g, 10 mmol) y la mezcla se agitó durante 3 h más. Después de enfriar a 0ºC en un baño de agua enfriada con hielo, el sólido se retiró por filtración, el residuo se lavó con una pequeña cantidad de cloroformo frío y el filtrado se concentró al vacío. Este residuo se recogió en diclorometano y el material insoluble se retiró por filtración. El filtrado se secó (MgSO_{4}), se filtró y se concentró al vacío para producir el compuesto del título (3,24 g, 84%) en forma de una espuma amarilla.

3-(N-Carbamoil-2-aminoetil)-2-(2,6-diisopropilfenilimino)-9,10-dimetoxi-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

Se añadió gota a gota cianato sódico (0,87 g, 13,4 mmol) en agua (20 ml) a una solución agitada de amina 3 (3,2 g, 6,7 mmol) en agua (100 ml) y HCl 1 M (13,4 ml) a 80ºC. Después de agitar durante 4 h a 80ºC, la mezcla se enfrió y se basificó con NaOH 2 M. La mezcla se extrajo con CH_{2}Cl_{2} hasta que no quedaba más producto en la fase orgánica. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron (MgSO_{4}), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna [diclorometano/metanol (97:3)] y el producto aislado se recogió en una mezcla de diclorometano y éter que, después de la concentración, produjo el compuesto del título (0,6 g, 17%) en forma de una espuma amarilla.

\newpage

P.f.	213-215ºC
m/z	C_{29}H_{37}N_{5}O_{4} requiere M=519 encontrado (M+1) = 520
HPLC	Área	97,59%
	Columna	ODS LUNA (150 4,6 mm)
	MP	KH_{2}PO_{4} pH 3/CH_{3}CN gradiente 90% ac a 50% durante 25
		minutos
	FR	1,0 mlmin^{-1}
	TR	10.723 min
	Detección	250 nm

^{1}H RMN (300 MHz; DMSO): 1,07 (12H, dd, 4 CH_{3}), 2,82-2,94 (4H, m, CH_{2} y 2 CH(CH_{3})_{2}), 3,55 (3H, s, OMe), 3,78 (3H, s, OMe), 3,91 (2H, t, CH_{2}), 4,17 (2H, t, CH_{2}), 5,32 (1H, s, H vinílico), 5,45 (2H, s a, NH_{2}), 6,13 (1H, t, NH), 6,56 (1H, s, ArH), 6,95 (1H, s, ArH); 7,00 (1H, m, ArH); 7,10 (1H, s, ArH), 7,12 (1H, s a, ArH).

NB. El espectro de RMN de protón anterior no muestra los desplazamientos químicos para un grupo CH_{2}, ya que se cree que esta señal se obscurece por la señal de agua presente en el d_{6}-DMSO a 3,30-3,33.

29

Ejemplo 12 3-(N-Carbamoil-4-aminobutil)-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

30

9,10-Dimetoxi-3-(4-N-ftalimidobutil)-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (1)

Una mezcla de 9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (4,0 g, 10,2 mmol), N-(4-bromobutil)ftalimida (8,6 g, 30,6 mmol), carbonato potásico (12,7 g, 91,8 mmol) y yoduro sódico (4,6 g, 30,6 mmol) en 2-butanona (100 ml) se agitó a reflujo, en una atmósfera de nitrógeno, durante 4 días. Después de enfriar a temperatura ambiente, el sólido se retiró por filtración y el filtrado se evaporó al vacío. El sólido residual se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice [éter de petróleo/acetato de etilo (2:1)-(1:1)]. Se obtuvo el compuesto del título (1,45 g, 24%) en forma de un sólido amarillo.

3-(4-Aminobutil)-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (2)

Una solución de 1 (1,4 g, 2,36 mmol) en etanol (30 ml) y cloroformo (20 ml) se trató con hidrazina hidrato (0,42 g, 7,09 mmol) y se agitó a temperatura ambiente, en una atmósfera de nitrógeno. Después de 18 h, se añadió más hidrazina hidrato (0,42 g) y se agitó durante 5 h más. Después, la mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y el sólido se retiró por filtración. El filtrado se secó (MgSO_{4}) y se evaporó al vacío para obtener el compuesto del título (1,0 g, 92%) en forma de un sólido amarillo.

3-(N-Carbamoil-4-aminobutil)-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetifenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

Se añadió gota a gota cianato sódico (0,28 g, 4,32 mmol) en agua (6 ml) a una solución agitada de 2 (1,0 g, 2,16 mmol) en agua (30 ml) y HCl 1 N (4,3 ml) a 80ºC. Después de 2 h a 80ºC, la mezcla se enfrió y se extrajo con diclorometano (3 x 20 ml) y el extracto se secó (MgSO_{4}) y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice [diclorometano/metanol (97:3)] para obtener el compuesto del título (0,70 g, 64%) en forma de un sólido amarillo.

P.f.	234-235ºC
m/z	C_{28}H_{35}N_{5}O_{4} requiere M=505 encontrado m/z [ES+]= 506
HPLC	Área	98,94
	Columna	ODS LUNA 3\muC18(2) (100x4,6 mm)
	MP	KH_{2}PO_{4} 0,02 M/CH_{3}CN (gradiente 90% ac \rightarrow50% ac
		durante 25 min)
	TR	(min) 17,201
	FR	(ml/min) 1,0
	Detección	250 nm

^{1}H RMN (300 MH_{2}; CDCl_{3}): \delta 1,64 (2H, m, CH_{2}), 1,90 (2H, m, CH_{2}), 2,07 (6H, s, 2xCH_{3}), 2,26 (3H, s, CH_{3}), 2,92 (2H, t, CH_{2}), 3,30 (2H, m, CH_{2}), 3,73 (3H, s, OCH_{3}), 3,88 (3H, s, OCH_{3}), 4,06 (2H, t, CH_{2}), 4,27 (4H, m, CH_{2},+NH_{2}), 5,44 (1H, s, C=CH), 6,65 (1H, s, ArH), 6,67 (1H, s, ArH), 6,89 (2H, s, 2xArH).

31

Ejemplo 13 3-[N-(N'-Ciano-N''-metil)-2-guanidinoetil]-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetil-fenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

32

3-[N-(N'-Ciano-S-metil)-2-isotioureidoetil]-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetil-fenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (1)

Se añadió N-cianoditioiminocarbonato de dimetilo (7,45 g, 46,1 mmol) a una solución de 3-(2-aminoetil)-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona(2,0 g, 4,61 mmol) en tolueno (50 ml) y se agitó a 90ºC en una atmósfera de nitrógeno. Después de 2 h, el disolvente se evaporó al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice [diclorometano/metanol (100:0) - (95:5)]. Se obtuvo el compuesto del título (2,30 g, 94%) en forma de un sólido amarillo.

3-[N-(N'-Ciano-NN''-metil)-2-guanidinoetil]-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona

Una solución de 1 (2,0 g, 3,76 mmol) en diclorometano (30 ml) se trató con metilamina 2 M/THF (9,4 ml, 18,8 mmol) y se agitó a reflujo, en una atmósfera de nitrógeno. Después de 16 h más se añadió metilamina 2 M/THF (9,4 ml), seguido de dos porciones más de metilamina 2 M/THF (9,4 ml) durante un intervalo de 2 h. Después de 24 h a reflujo, la reacción se enfrió y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice [diclorometano/metanol (98:2)] para obtener, después de la trituración con éter, el compuesto del título (1,20 g, 62%) en forma de un sólido amarillo.

\newpage

P.f.	223-224ºC
m/z	C_{28}H_{33}N_{7}O_{3} requiere M=515 encontrado m/z [ES+] = 516
HPLC	Área	100
	Columna	ODS LUNA 3\muC1 8(2)(100 x 4,6 mm)
	MP	KH_{2}PO_{4} 0,02 M/CH_{3}CN (gradiente 90% ac \rightarrow 50% ac
	durante 25 min)
	TR	17,838
	FR	1,0
	Detección	250 nm

^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 1,99 (6H, s, 2xCH_{3}), 2,22 (3H, s, CH_{3}), 2,43 (3H, d, NHCH_{3}), 2,86 (2H, t, CH_{2}), 3,52 (2H, m, CH_{2}), 3,69 (3H, s, OCH_{3}), 3,83 (3H, s, OCH_{3}), 4,02 (2H, t, CH_{2}), 4,28 (2H, m, CH_{2}), 5,39 (1H, s, C=CH), 6,61 (1H, s, ArH), 6,63 (1H, s, ArH), 6,82 (2H, s, 2xArH).

33

La utilidad farmacológica de los compuestos de la presente invención se ha demostrado en estudios usando compuestos sintetizados previamente a partir de los ejemplos anteriores. Estos resultados presentados a continuación sirven para ilustrar la aplicación genérica de los compuestos de la presente invención.

Ejemplo A Eficacia de un compuesto de la invención contra la contracción inducida por electricidad de tráquea aislada de cobaya

Se ensayó la eficacia de los compuestos de los ejemplos 1, 8, 9, 10, 11 y 13 contra la contracción inducida por electricidad de tráquea aislada de cobaya. Los resultados demuestran que los compuestos de la presente invención inhiben las respuestas contráctiles con una duración prolongada de la acción.

Método

Se realizó una superfusión de anillos traqueales de cobaya de acuerdo con un método descrito previamente (Coleman et al. 1996; Pulmonary Pharmacology, 9, 107-117). En resumen, se cortaron preparaciones traqueales de cobaya en anillos y después se abrieron seccionando el anillo por el lado opuesto al músculo liso y se suspendieron entre dos electrodos de platino bajo una tensión de 1 g. Los tejidos se sometieron a superfusión a una velocidad de 3,25 ml/min con solución de Krebs-Henseleit a 37ºC que contenía el inhibidor de ciclooxigenasa indometacina (5 \muM) y que se había burbujeado con un 95% de O_{2} y 5% de CO_{2}. Las preparaciones traqueales se dejaron equilibrar durante 40 minutos antes de comenzar la estimulación eléctrica suministrada como una serie de 10 s de pulsos de ondas cuadradas a 3 Hz, de 0,1 ms de duración y 20V (aproximadamente 400 mAmp) generados cada 100 segundos por medio de un estimulador de ondas cuadradas fisiológico.

\newpage

El compuesto del ejemplo 1 se disolvió en DMSO que contenía Tween 80 (al 10%) y agua destilada (0,01 M) y después se añadió al baño de órganos para proporcionar un concentración final de 10 \muM. Los demás compuestos se prepararon en DMSO y se diluyeron en solución de Krebs-Henseleit que produjo una concentración final de superfusión de DMSO al 0,05% y se superfundió a una velocidad de 0,3 ml/min; las respuestas contráctiles a la estimulación del campo eléctrico se registraron en un ordenador Macintosh usando el software MacLab.

Resultados

El vehículo, DMSO, no pudo inhibir significativamente la respuesta contráctil a la estimulación del campo eléctrico (figura 2). Los resultados de los compuestos se muestran en las figuras: 3 para el compuesto del ejemplo 1; 4 para el compuesto del ejemplo 9; 5 para el compuesto del ejemplo 10; 6 para el compuesto del ejemplo 11; 7 para el compuesto del ejemplo 13; y 8 para el compuesto del ejemplo 8.

Los compuestos produjeron una inhibición completa de la respuesta contráctil a la estimulación del campo eléctrico y el efecto se mantuvo durante más de 2-4 horas.

Ejemplo B Eficacia de un compuesto de la invención contra la proliferación de células mononucleares humanas estimuladas por PHA

Se investigó el efecto del compuesto del ejemplo 1, 9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-9-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, contra la proliferación de células mononucleares humanas estimulada por PHA. La proliferación se inhibió significativamente por el compuesto, indicando que posee actividad anti-inflamatoria. El resultado presentado a continuación sirve para ilustrar la aplicación genérica de los nuevos compuestos de la presente invención.

Método

Se sometieron a flebotomía voluntarios sanos normales y se recogieron 25 ml de sangre. Se separaron las células mononucleares y se purificaron de acuerdo con el método de Banner et al., (Banner et al. Br. J. Pharmacol, 116 3169-3174 (1995)). Las células mononucleares periféricas humanas (100.000 por pocillo) se estimularon durante 24 h con fitohemaglutinina (PHA, 2 \mug/ml) en ausencia o en presencia del compuesto del ejemplo 1 (0,001-100 \muM) a 37ºC en un atmósfera con un 95% de aire y un 5% de CO_{2}. Veinticuatro horas después, se añadió [^{3}H]-timidina (0,1 \muCi) a cada pocillo y las células se incubaron durante un período adicional de 24 horas. Las células después se recogieron en filtros de fibra de vidrio usando un recolector de células (ICN Flow, Buckinghamshire) y se contaron en un contador de centelleo.

Resultados

El compuesto de ensayo produjo una inhibición dependiente de la concentración de la proliferación de células mononucleares humanas estimulada con PHA (el número de experimentos es 6: tabla 1). Los valores de IC_{50} y los límites de confianza del 95% para estos compuestos se indican en la tabla 1. El resultado también se muestra en el gráfico de la figura 8.

TABLA 1 Valor de IC_{50} para el compuesto del ejemplo 1 contra la proliferación de células mononucleares humanas estimuladas con PHA

Compuesto de	IC_{50}	n
Ejemplo 1	0,46 \muM (0,239-0,897)	6

Ejemplo C Inhibición de las isozimas de fosfodiesterasa (PDE) de tipo 3 y 4

Se ha demostrado que el compuesto del ejemplo 1, 9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, es un potente inhibidor de las isozimas de fosfodiesterasa (PDE) de tipo 3 y 4. Los valores de IC_{50} se muestran a continuación.

\newpage

	PDE3 (nM) (plaquetas humanas)	PDE4 (nM) (neutrófilos humanos)
Compuesto del ejemplo 1	0,43	1479
Rolipram	ND	6412
Cilostamida	89	ND

El rolipram es un inhibidor de PDE 4 conocido y la cilostamida es un inhibidor de PDE3 conocido. ND - no determinado

Ejemplo D Efecto del compuesto del ejemplo 1, 9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tretahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, sobre la liberación de TNF-\alpha inducida por LPS a partir de monocitos humanos

	CI50 (nM)
Compuesto del ejemplo 1	7,5 n =6
CDP 840 (inhibidor de PDE4)	92 n =6
Siguazodan (inhibidor de PDE3)	>100 \muM

Ejemplo E Ensayos in vivo

1.: El compuesto del ejemplo 1, 9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona, se ensayó en un modelo de broncoespasmo inducido por histamina. Se expusieron cobayas conscientes a un compuesto en polvo seco (micronizado). El fármaco se mezcló con lactosa de forma que la concentración final fue de 0,25, 2,5, y 25%. A diversos tiempos después de la exposición al fármaco, los animales se anestesiaron y se expusieron a dosis variables de histamina. Se registró la resistencia total de las vías respiratorias y la presión sanguínea arterial media.

: La exposición al polvo seco (2,5 y 25%) proporcionó una protección significativa contra el broncoespasmo inducido por histamina durante un período de 5,5 horas y redujo la presión sanguínea media durante este período.

2.: La administración intravenosa del compuesto (de 1 a 100 \mug/kg) a cobayas anestesiados con uretano produjo una reducción dependiente de la dosis en la presión sanguínea arterial media. El compuesto se disolvió en DMSO y después se diluyó con solución salina (hubo indicios de que el compuesto había salido de la solución).

3.: En un modelo de eosinofilia inducida por antígenos en cobaya sensibilizado con ovoalbúmina, el compuesto (10 mg/kg) administrado por vía oral 1 hora antes de la exposición al antígeno, inhibió significativamente el reclutamiento de eosinófilos en los pulmones después de la exposición al antígeno (por medio de un aerosol) en cobayas sensibilizados. La exposición al polvo seco (25%) 1,5 horas antes de la exposición al antígeno, inhibió significativamente el reclutamiento de eosinófilos en los pulmones (las mediciones se realizaron 24 horas después de la exposición).

Se realizaron otros experimentos para caracterizar la duración de la acción en este modelo. La administración del compuesto (25%) 5,5 horas antes de la exposición al antígeno no pudo inhibir significativamente el reclutamiento de eosinófilos en los pulmones.

Ejemplo F Sabor de los compuestos

Para los compuestos farmacéuticos que se administran por vía oral, el sabor es un factor muy importante para asegurar el seguimiento de la terapia por parte del paciente. Inesperadamente, los compuestos de la presente invención son substancialmente insípidos. Por lo tanto, son particularmente adecuados para la administración oral, por ejemplo como un polvo seco para ser inhalado.

\newpage

Método

Se pusieron pequeñas cantidades del compuesto del ejemplo 1, trequinsina (9,10-dimetoxi-3-metil-2-mesitilimino-2,3,6,7-tetrahidro-4H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona) y desmetil trequinsina (9,10-dimetoxi-2-mesitilimino-2,3,6,7-tetrahidro-4H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona) en la punta de la lengua de un voluntario sano del sexo masculino informado, y se evaluó el sabor de cada compuesto.

Resultados

Los resultados presentados en la tabla 3 que se muestra a continuación demuestran que el compuesto del ejemplo 1 tiene un sabor significativamente mejorado en comparación con la trequinsina o la desmetil trequinsina.

Compuesto (de)	Sabor^{1}
Ejemplo 1	***
Trequinsina	*
Desmetil trequinsina	*
^{1} Escala : * Muy amargo
\hskip1.4cm ** Amargo
\hskip1.4cm *** Insípido

Claims

1. Un compuesto de fórmula general I:

34

en la que

cada uno R^{1} y R^{2} representa independientemente un grupo alquilo con 1 a 6 átomos de carbono o acilo con 2 a 7 átomos de carbono;

X representa un grupo CR^{3}R^{4}, donde cada uno de R^{3} y R^{4} representa independientemente un átomo de nitrógeno o un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono;

Y representa un átomo de oxígeno o un grupo CHNO_{2}, NCN, NH o NNO_{2};

n es un número entero de 2 a 4;

o una sal del mismo.

2. Un compuesto de fórmula general I, en la que, independientemente o en cualquier combinación compatible:

cada uno de R^{1} y R^{2} representa un grupo alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, preferiblemente alquilo con 1 a 4 átomos de carbono;

cada uno de R^{3} y R^{4} representa un átomo de hidrógeno;

R^{5} representa un átomo de hidrógeno;

R^{6} representa un átomo de hidrógeno;

R^{7} y R^{8} son iguales entre sí;

R^{9} es un átomo de halógeno o un grupo metilo o acetilo;

Y representa un átomo de oxígeno o un grupo CHNO_{2}; y

n es 2.

3. 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

4. 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-(N'-isopropilcarbamoil)-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

5. 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-[1-(N'-metil-2-nitroetanamina)]-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

6. 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-[1-(N'-isopropil-2-nitroetenamina)]-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

7. 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-[1-(N',N'-dimetil-2-nitroetenamina)]-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

8. 9,10-Dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-[N-(N'-fenilcarbamoil)-2-aminoetil]-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-2-ona.

9. 9,10-Dimetoxi-3-[2-guanidinoetil]-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

10. 9,10-Dimetoxi-3-[N-(N'-nitro)-2-guanidinoetil]-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido-[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

11. 3-[N-(N'-Ciclohexilcarbamoil)-2-amino-etil]-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetil-fenilimino-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

12. 3-(N-Carbamoil-2-aminoetil)-9,10-dimetoxi-2-(2-metilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

13. 3-(N-Carbamoil-2-aminoetil)-2-(2,6-diisopropilfenilimino)-9,10-dimetoxi-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

14. 3-(N-Carbamoil-4-aminobutil)-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

15. 3-[N-(N'-Ciano-N''-metil)-2-guanidinoetil]-9,10-dimetoxi-2-(2,4,6-trimetil-fenilimino)-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona.

16. Un proceso para preparar un compuesto de fórmula general I como se define en la reivindicación 1, comprendiendo dicho proceso:

(a) derivatizar un compuesto de fórmula general II:

35

(b) cuando X en la fórmula general I representa un grupo CR^{3}R^{4}, donde R^{3} representa un átomo de hidrógeno, R^{4} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono, y R^{5} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono, hidrogenar un compuesto de fórmula general III:

36

17. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que en la fórmula general I, cuando Y representa un átomo de oxígeno y cada uno de R^{10} y R^{11} representa un átomo de hidrógeno, un compuesto de fórmula general II se derivatiza con cianato sódico.

18. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que en la fórmula general I, cuando Y representa un átomo de oxígeno, R^{10} representa un átomo de hidrógeno y R^{11} representa un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 6 átomos de carbono o fenilo, se derivatiza un compuesto de fórmula general II con un isocianato de fórmula general R^{11}NCO.

19. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 18, en el que el isocianato es isocianato de isopropilo o isocianato de fenilo.

20. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que en la fórmula general I, cuando Y representa CHNO_{2}, R^{10} representa un átomo de hidrógeno y R^{11} representa un grupo alquilo con 1 a 3 átomos de carbono o cicloalquilo con 3 a 6 átomos de carbono, un compuesto de fórmula general II se derivatiza con un N-alquil con 1 a 3 átomos de carbono- o N-cicloalquil con 3 a 6 átomos de carbono-1-(metiltio)-2-nitroetanamina de fórmula general CH_{3}SC(=CHNO_{2})NR^{10}R^{11}.

21. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 20, en el que el compuesto de fórmula general II se derivatiza con N-metil-1-(metiltio)-2-nitroetanamina.

22. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que en la fórmula general I, cuando Y represente CHNO_{2}, un compuesto de fórmula general II se hacer reaccionar en primer lugar con 1,1-bis(metiltio)-2-nitroetileno y el compuesto resultante después se hace reaccionar con una amina de la fórmula general R^{10}R^{11}NH, donde R^{10} y R^{11} son como se han definido para la fórmula general I.

23. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 22, en el que la amina es isopropilamina o dimetilamina.

24. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que en la fórmula general I, cuando Y representa NH, un compuesto de fórmula general II se derivatiza con un compuesto de fórmula general CH_{3}SC(=NH)NR^{10}R^{11} o una sal del mismo, donde R^{10} y R^{11} son como se han definido para la fórmula general I.

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25. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que en la fórmula general I, cuando Y representa NCN, un compuesto de fórmula general II se derivatiza con un compuesto de fórmula general CH_{3}SC(=NCN)NR^{10}R^{11} o una sal del mismo, donde R^{10} y R^{11} son como se han definido para la fórmula general I.

26. Un proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 16 a 25, en el que el compuesto de fórmula general I es como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15.

27. Una composición que comprende un compuesto de fórmula general I y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

28. Una composición de acuerdo con la reivindicación 27, que comprende además un agente activo tal como un agonista del adrenoceptor \beta_{2} o un esteroide glucocorticoide.

29. Una composición de acuerdo con la reivindicación 27 o con la reivindicación 28, donde la composición es una composición farmacéutica para medicina humana.

30. Una composición de acuerdo con la reivindicación 27, 28 o 29, adaptada para la administración por medio de un aerosol.

31. Una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 27 a 30, en la que el compuesto es como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15.

32. Un compuesto de fórmula general I para uso en medicina.

33. Un compuesto de fórmula general I para uso como un inhibidor de una isoenzima de fosfodiesterasa.

34. Un compuesto de fórmula general I para uso en la prevención o tratamiento de una enfermedad en la que es deseable un aumento de la concentración intracelular de AMPc.

35. Un compuesto de fórmula general I para uso en la prevención o tratamiento del asma.

36. Un compuesto de fórmula I para uso en la prevención o tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD).

37. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 32 a 36, donde el compuesto es como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15.

38. El uso de un compuesto de fórmula general I en la fabricación de un inhibidor de una isoenzima de fosfodiesterasa de tipo III/IV.

39. El uso de un compuesto de fórmula general I en la fabricación de un broncodilatador.

40. El uso de un compuesto de fórmula general I en la fabricación de un anti-asmático.

41. El uso de un compuesto de fórmula general I en la fabricación de un medicamento para la prevención o tratamiento de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD).

42. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 38 a 41, donde el compuesto es como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15.