ES2201677T3

ES2201677T3 - Derivados biciclicos del acido hidroxamico.

Info

Publication number: ES2201677T3
Application number: ES99907795T
Authority: ES
Inventors: Ralph Pelton Robinson
Original assignee: Pfizer Products Inc
Current assignee: Pfizer Products Inc
Priority date: 1998-04-10
Filing date: 1999-03-24
Publication date: 2004-03-16
Anticipated expiration: 2019-03-24
Also published as: US6110964A; AR017730A1; CA2327723A1; ID26089A; AP1047A; HN1999000045A; PT1070069E; TR200002953T2; EA200000920A1; ZA992630B; HRP20000647A2; EP1070069A1; DZ2758A1; PA8469401A1; CO5080804A1; CZ20003738A3; BG104919A; DK1070069T3; NO20005077D0; DE69909613D1

Abstract

Un compuesto de la **fórmula** donde Z es >CH2 o >NR1; R1 es hidrógeno, alquilo(C1-C6), aril(C6- C10)alquilo(C1-C6), heteroaril(C2-C9)-alquilo(C1-C6) o un grupo de la fórmula opcionalmente sustituido en cualquiera de los átomos de carbono del anillo capaces de formar un enlace adicional por uno o más sustituyentes por anillo seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C1-C6), alcoxi(C1-C6), perfluoro-alquilo(C1-C3), perfluoro-alcoxi(C1-C3) y ariloxi(C6-C10); o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

Derivados biciclicos del ácido hidroxamico.

Antecedentes de la Invención

La presente invención se refiere a derivados bicíclicos del ácido hidroxámico y a composiciones farmacéuticas y procedimientos de tratamiento.

Los compuestos de la presente invención son inhibidores de metaloendopeptidasas de cinc, especialmente de las que pertenecen a las subfamilias de las metaloproteinasas de la matriz (también denominadas MMP o matrixinas) y reprolisina (también conocida como adamlisina) de las metcincinas (Rawlings, et al., Methods in Enzymology, 248, 183-228 (1995) y Stocker, et al., Protein Science, 4, 823-840 (1995)). La subfamilia MMP de enzimas, actualmente contiene diecisiete miembros (MMP-1, MMP-2, MMP-3, MMP-7, MMP-8, MMP-9, MMP-10, MMP-11, MMP-12, MMP-13, MMP-14, MMP-15, MMP-16, MMP-17, MMP-18, MMP-19 y MMP-20). La mayoría de las MMP son bien conocidas por su función en la regulación de la renovación de las proteínas de la matriz extracelular y, como tales, desempeñan funciones importantes en procesos fisiológicos normales tales como la reproducción, desarrollo y diferenciación. Además, las MMP se expresan en muchas situaciones patológicas en las que se está produciendo una renovación anormal de tejido conjuntivo. Por ejemplo, se ha demostrado que la MMP-13, una enzima con una potente actividad en la degradación del colágeno de tipo II (el colágeno principal del cartílago), se sobreexpresa en el cartílago con osteoartritis (Mitchell, et al., J. Clin. Invest., 97, 761 (1996)). Otras MMP (MMP-2, MMP-3, MMP-8, MMP-9 y MMP-12) también se sobreexpresan en el cartílago con osteoartritis y es de esperar que la inhibición de algunas o todas estas MMP ralentice o bloquee la pérdida acelerada de cartílago típica de enfermedades de las articulaciones tales como la osteoartritis y la artritis reumatoide.

Las reprolisinas de los mamíferos se conocen como ADAM (A Disintegrin And Metalloproteinase (una desintegrina y metaloproteinasa) (Wolfberg, et al., J. Cell Biol., 131, 175-278 (1995)) y contienen un dominio de desintegrina además de un dominio semejante a una metaloproteinasa. Hasta le fecha se han identificado veintitrés ADAM distintas.

La ADAM-17, también conocida como enzima convertidora del factor alfa de necrosis tumoral (TACE) es la ADAM más conocida. La ADAM-17 (TACE) es responsable de la escisión del factor alfa de necrosis tumoral (

\hbox{TNF- \alpha }

, también conocido como caquectina) unido a las células. Se reconoce que el TNF-\alpha está implicado en muchas enfermedades infecciosas y autoinmunes (W. Friers, FEBS Letters, 285, 199 (1991)). Además, se ha demostrado que el TNF-\alpha es el mediador principal de la respuesta inflamatoria vista en la sepsis y en el choque séptico (Spooner, et al., Clinical Immunology and Immunopathology, 62 S11 (1992)). Hay dos formas de TNF-\alpha, una proteína de membrana de tipo II con una masa molecular relativa de 26.000 (26 kD) y una forma soluble de 17 kD generada a partir de la proteína unida a la célula mediante un escisión proteolítica específica. La forma soluble de 17 kD del TNF-\alpha se libera por la célula y está asociada con los efectos perjudiciales del TNF-\alpha. Esta forma de TNF-\alpha también es capaz de actuar en lugares alejados del sitio de síntesis. Así pues, los inhibidores de TACE previenen la formación del TNF-\alpha soluble y previenen los efectos perjudiciales del factor soluble.

Los compuestos seleccionados de la invención son potentes inhibidores de la agrecanasa, una enzima importante en la degradación del agrecano del cartílago. La agrecanasa también se considera una ADAM. La pérdida de agrecano de la matriz de cartílago es un factor importante en la progresión de enfermedades de las articulaciones tales como la osteoartritis y la artritis reumatoide, y es de esperar que la inhibición de la agrecanasa ralentice o bloquee la pérdida de cartílago en estas enfermedades.

Otras ADAM que han mostrado expresión en situaciones patológicas incluyen la ADAM TS-1 (Kuno, et al., J. Biol. Chem., 272, 556-562 (1997)), y las ADAM 10, 12 y 15 (Wu, et al., Biochem. Biophys. Res. Comm., 235, 437-442, (1997)). A medida que aumente el conocimiento de la expresión, sustratos fisiológicos y asociación de enfermedades de las ADAM, se apreciará el significado completo de la función inhibidora de esta clase de enzimas.

Las enfermedades en las que la inhibición de las MMP y/o las ADAM proporcionará un efecto terapéutico beneficioso incluyen: artritis (incluyendo la osteoartritis y la artritis reumatoide), enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedad de Crohn, enfisema, síndrome de dificultad respiratoria aguda, asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad de Alzheimer, toxicidad de trasplante de órganos, caquexia, reacciones alérgicas, hipersensibilidad alérgica de contacto, cáncer, ulceración de tejidos, restenosis, enfermedad periodontal, epidermolisis ampollosa, osteoporosis, falta de firmeza en implantes de articulaciones artificiales, aterosclerosis (incluyendo la rotura de las placas ateroscleóticas), aneurisma aórtico (incluyendo aneurisma aórtico abdominal y aneurisma aórtico cerebral), insuficiencia cardíaca congestiva, infarto de miocardio, apoplejía, isquemia cerebral, trauma cefálico, lesión de la médula espinal, trastornos neurodegenerativos (agudos y crónicos), enfermedades autoinmunes, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, migraña, depresión, neuropatía periférica, dolor, angiopatía amiloide cerebral, aumento nootrópico o de cognición, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular, lesión de la córnea, degeneración macular, curación anormal de heridas, quemaduras, diabetes, invasión tumoral, crecimiento tumoral, metástasis tumoral, cicatrización de la córnea, escleritis, SIDA, sepsis, choque séptico y otras enfermedades caracterizadas por expresión de metaloproteinasas o de ADAM.

\newpage

Esta invención también se refiere a un procedimiento para usar los compuestos de la invención en el tratamiento de las enfermedades anteriores en mamíferos, especialmente en los seres humanos, y a las composiciones farmacéuticas útiles para el mismo.

Se reconoce que en diferentes situaciones patológicas se expresan diferentes combinaciones de MMP y ADAM. En el caso de enfermedades individuales, pueden preferirse tales inhibidores con selectividades específicas por ADAM y/o MMP individuales. Por ejemplo, la artritis reumatoide es una enfermedad inflamatoria de las articulaciones caracterizada por niveles excesivos de TNF y la pérdida de constituyentes de la matriz de las articulaciones. En este caso, un compuesto que inhibe el TACE y la agrecanasa, así como MMP tales como la MMP-13, puede ser la terapia preferida. Por el contrario, en una enfermedad menos inflamatoria de las articulaciones tal como la osteoartritis, pueden preferirse compuestos que inhiben las MMP que degradan la matriz, tales como la MMP-13, pero no el TACE.

Los presentes inventores también han descubierto que es posible diseñar inhibidores con actividad metaloproteinasa diferencial. Específicamente, por ejemplo, los inventores han podido diseñar moléculas que inhiben selectivamente la metaloproteinasa-13 de la matriz (MMP-13) preferentemente con respecto a la MMP-1.

Los inhibidores de las metaloproteinasas de la matriz son conocidos en la bibliografía. Específicamente, la Publicación PCT WO 96/33172, publicada el 24 de Octubre de 1996, se refiere a ácidos arilsulfonilamino hidroxámicos cíclicos que son útiles como inhibidores de MMP. La Patente de Estados Unidos 5.672.615, la Publicación PCT WO 97/20824, la Publicación PCT WO 98/08825, la Publicación PCT WO 98/27069 y la Publicación PCT WO 98/34918, publicada el 13 de Agosto de 1998 y titulada "Arylsulfonyl Hydroxamic Acid Derivatives" ("Derivados de Ácido Arilsulfonil Hidroxámico") se refieren a ácidos hidroxámicos cíclico que son útiles como inhibidores de MMP. Las Publicaciones PCT WO 96/27583 y WO 98/07697, publicadas el 7 de Marzo de 1996 y el 26 de Febrero de 1998, respectivamente, se refieren a ácidos arilsulfonil hidroxámicos. La Publicación PCT WO 98/03516, publicada el 29 de Enero de 1998, se refiere a fosfinatos con actividad MMP. La Publicación PCT 98/34915, publicada el 13 de Agosto de 1998, titulada "N-Hydroxy-b-Sulfonyl Propionamide Derivatives" ("Derivados de N-Hidroxi-b-Sulfonil Propionamida"), se refiere a propionilhidroxamidas útiles como inhibidores de MMP. La Publicación PCT WO 98/33768, publicada el 6 de Agosto de 1998, titulada "Arylsulfonylamino Hydroxamic Acid Derivatives" ("Derivados del Ácido Arilsulfonilamino Hidroxámico"), se refiere a ácidos arilsulfonilamino hidroxámicos N-no sustituidos. La Publicación PCT WO 98/30566, publicada el 16 de Julio de 1998, titulada "Cyclic Sulfone Derivatives", se refiere a ácidos sulfona hidroxámicos cíclicos como inhibidores de MMP. La Solicitud de Patente Provisional de Estados Unidos 60/55208, presentada el 8 de Agosto de 1997, se refiere a ácidos biaril hidroxámicos como inhibidores de MMP. La Solicitud de Patente Provisional de Estados Unidos No. de Serie 60/55207, presentada el 8 de Agosto de 1997, titulada "Aryloxyarylsulfonylamino Hydroxamic Acid Derivatives", se refiere a ácidos ariloxiarilsulfonil hidroxámicos como inhibidores de MMP. La Solicitud de Patente Provisional de Estados Unidos 60/62766, presentada el 24 de Octubre de 1997, titulada "The Use of MMP-13 Selective Inhibitors For The Treatment of Osteoarthritis and Other MMP Mediated Disorders" (" El Uso de Inhibidores Selectivos de MMP-13 para el Tratamiento de la Osteoartritis y Otros Trastornos Mediados por MMP"), se refiere al uso de inhibidores selectivos de MMP-13 para el tratamiento de la inflamación y de otros trastornos. La Solicitud de Patente Provisional de Estados Unidos No. de Serie 60/68261, presentada el 19 de Diciembre de 1997, se refiere al uso de inhibidores de MMP para tratar la angiogénesis y otros trastornos. Cada una de las publicaciones y solicitudes mencionadas anteriormente se incorpora aquí como referencia en su totalidad.

Resumen de la invención

La presente invención se refiere a un compuesto de la fórmula

1

donde Z es > CH_{2} o > NR^{1};

R^{1} es hidrógeno, alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroaril(C_{2}-C_{9})-alquilo(C_{1}-C_{6}) o un grupo de la fórmula

2

n es un número entero de uno a seis;

R^{2} es hidrógeno o alquilo(C_{1}-C_{6});

Q es alquilo(C_{1}-C_{6}), arilo(C_{6}-C_{10}), heteroarilo(C_{2}-C_{9}), ariloxi(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), ariloxi(C_{6}-C_{10})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), aril(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), aril(C_{6}-C_{10})heteroarilo(C_{2}-
C_{9}), aril(C_{6}-C_{10})aril(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})aril(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), aril(C_{6}-C_{10})aril(C_{6}-C_{10})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroaril(C_{2}- C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}), heteroaril(C_{2}-C_{9})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), aril(C_{6}-C_{10})alcoxi(C_{1}-C_{6})alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})alcoxi(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}), aril(C_{6}-C_{10})alcoxi(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alcoxi(C_{1}-C_{6})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alcoxi(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alcoxi(C_{1}-
C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), ariloxi(C_{6}-C_{10})alquil(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}), ariloxi(C_{6}-C_{10})alquil(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})alquil(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}) o heteroariloxi(C_{2}-C_{9})alquil(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9});

donde cada radical arilo(C_{6}-C_{10}) o heteroarilo(C_{2}-C_{9}) de dicho arilo(C_{6}-C_{10}), heteroarilo(C_{2}-C_{9}), ariloxi(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), ariloxi(C_{6}-C_{10})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), aril(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), aril(C_{6}-C_{10})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), aril(C_{6}-C_{10})aril(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})aril(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), aril(C_{6}-C_{10})aril(C_{6}-C_{10})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroaril(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}), heteroaril(C_{2}-C_{9})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), aril(C_{6}-C_{10})alcoxi(C_{1}-C_{6})alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})alcoxi(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}), aril(C_{6}-C_{10})alcoxi(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alcoxi(C_{1}-C_{6})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alcoxi(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alcoxi(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), ariloxi(C_{6}-C_{10})alquil(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}), ariloxi(C_{6}-C_{10})alquil(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})alquil(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}) o heteroariloxi(C_{2}-C_{9})alquil(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}) está opcionalmente sustituido en cualquiera de los átomos de carbono del anillo capaces de formar un enlace adicional por uno o más sustituyentes por anillo, seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}), perfluoro-alquilo(C_{1}-C_{3}), perfluoro-alcoxi(C_{1}-C_{3}) y ariloxi(C_{6}-C_{10});

o sales farmacéuticamente aceptables del mismo.

La presente invención también se refiere a las sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula I. Los ácidos que se usan para preparar las sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables de los compuestos básicos mencionados anteriormente de esta invención, son los que forman sales de adición de ácidos no tóxicas, es decir, sales que contienen aniones farmacológicamente aceptables, tales como las sales clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, nitrato, sulfato, bisulfato, fosfato, fosfato ácido, acetato, lactato, citrato, citrato ácido, tartrato, bitartrato, succinato, maleato, fumarato, gluconato, sacarato, benzoato, metanosulfonato, etanosulfonato, bencenosulfonato, p-toluenosulfonato y pamoato [es decir, 1,1'-metilen-bis-(2-hidroxi-3-naftoato)].

La invención también se refiere a las sales de adición de bases de fórmula I. Las bases químicas que pueden usarse como reactivos para preparar sales de bases farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula I que son de naturaleza ácida, son las que forman sales de base no tóxicas con tales compuestos. Tales sales de bases no tóxicas incluyen, aunque no se limitan a, las derivadas de cationes farmacológicamente aceptables tales como cationes de metales alcalinos (por ejemplo, potasio y sodio) y cationes de metales alcalinotérreos (por ejemplo, calcio y magnesio), sales de adición de amonio o de amina solubles en agua, tales como N-metilglucamina-(meglumina), trimetil-amonio o dietilamonio, y las sales de alcanolamonio inferior, tales como tris-(hidroximetil)-metilamonio y otras sales de base de aminas orgánicas farmacéuticamente aceptables.

El término "alquilo", como se usa en este documento, a menos que se indique otra cosa, incluye radicales hidrocarburo monovalentes saturados que tienen restos lineales, ramificados o cíclicos o combinaciones de los mismos.

El término "alcoxi", según se usa en este documento, incluye grupos O-alquilo, donde el "alquilo" es como se ha definido anteriormente.

El término "arilo", según se usa en este documento, a menos que se indique otra cosa, incluye un radical orgánico derivado de un hidrocarburo aromático por la eliminación de un hidrógeno, tal como fenilo o naftilo.

El término "heteroarilo", según se usa en este documento, a menos que se indique otra cosa, incluye un radical orgánico derivado de un compuesto heterocíclico aromático por la eliminación de un hidrógeno, tal como piridilo, furilo, piroílo, tienilo, isotiazolilo, imidazolilo, benzoimidazolilo, tetrazolilo, pirazinilo, pirimidilo, quinolilo, isoquinolilo, benzofurilo, isobenzofurilo, benzotienilo, pirazolilo, indolilo, isoindolilo, purinilo, carbazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, oxazolilo, benzotiazolilo o benzoxazolilo.

Los heteroarilos preferidos incluyen piridilo, furilo, tienilo, isotiazolilo, pirazinilo, pirimidilo, pirazolilo, isoxazolilo, tiazolilo u oxazolilo. Los heteroarilos más preferidos incluyen piridilo, furilo o tienilo.

El término "acilo", según se usa en este documento, a menos que se indique otra cosa, incluye un radical de la fórmula general R-(C = O)-, donde R es alquilo, alcoxi, arilo, arilalquilo o arilalcoxi y los términos "alquilo" o "arilo" son como se han definido anteriormente.

El término "aciloxi", según se usa en este documento, incluye grupos O-acilo donde "acilo" es como se ha definido anteriormente.

El compuesto de fórmula I puede tener centros quirales y, por lo tanto, existir en diferentes formas diastereoisómeras o enantiómeras. Esta invención se refiere a todos los isómeros ópticos, tautómeros y estereoisómeros de los compuestos de fórmula I y mezclas de los mismos.

Preferiblemente, los compuestos de fórmula I existen como el isómero exo de la fórmula

3

Son compuestos preferidos aquellos que se reivindican en las reivindicaciones 3-8, 11-14 y 17-20.

Otros compuestos preferidos de fórmula I son aquellos en los que Q es arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), donde cada radical arilo o heteroarilo de dichos grupos arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}) puede estar opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo(C_{1}-C_{3}).

Los compuestos más preferidos de fórmula I incluyen aquellos en los que Q es fenilo, piridiloxifenilo (más preferiblemente 4-piridilo) o fenoxifenilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo(C_{1}-C_{3}), más preferiblemente los sustituyentes se seleccionan entre fluoro, cloro, alcoxi(C_{1}-C_{6}) o alquilo(C_{1}-C_{6}) y más preferiblemente, el sustituyente está en la posición 4.

Los compuestos específicos preferidos de fórmula I incluyen los siguientes:

hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilamino]-8-oxabiciclo[3.2.1]-octano-3-carboxílico;

hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]-octano-3-carboxílico;

hidroxiamida del ácido 3-(4-fenoxibencenosulfonilmetil)-8-oxabiciclo[3.2.1]-octano-3-carboxílico;

hidroxiamida del ácido 3-exo-(4-fluorobifenil-4-bencenosulfonilmetil)-8-oxabiciclo-[3.2.1]-octano-3-carboxílico; e

hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-clorofenoxi)bencenosulfonilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico.

Otros compuestos de la invención de fórmula I incluyen los siguientes:

hidroxiamida del ácido 3-exo-(4-fenoxibencenosulfonilamino)-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(piridin-4-iloxi)bencenosulfonilamino]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-clorofenoxi)bencenosulfonilamino]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

ácido 3-[[4-(4-clorofenoxi)bencenosulfonil]-(3-endo-hidroxicarbamoil-8-oxabiciclo[3.2.1]oct-3-il)amino]propiónico,

\newpage

éster etílico del ácido 3-[[4-(4-clorofenoxi)bencenosulfonil]-(3-endo-hidroxicarbamoil-8-oxabiciclo[3.2.1]oct-3-il)amino]propiónico,

ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil](3-endo-hidroxicarbamoil-8-oxabiciclo[3.2.1]oct-3-il)amino]-propiónico,

éster etílico del ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil](3-endo-hidroxicarbamoil-8-oxabiciclo[3.2.1]oct-3-il)amino]-propiónico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-{[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]metilamino}-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-endo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilamino]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-{[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]piridin-3-ilmetilamino}-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorobenciloxi)bencenosulfonilamino]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-(4-benciloxibencenosulfonilamino)-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-(4-benciloxibencenosulfonilmetil)-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-(metil-[4-(piridin-4-iloxi)bencenosulfonil]amino}-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-(4-metoxibencenosulfonilamino)-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-(4-metoxibencenosulfonilmetil)-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-5-piridin-2-iltiofeno-2-sulfonilamino)-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(piridin-4-iloxi)bencenosulfonilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-clorofenoxi)bencenosulfonilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

ácido 3-[[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]-(3-endo-hidroxicarbamoil-8-oxabiciclo[3.2.1]oct-3-il)amino]propiónico,

ácido 3-[(3-endo-hidroxicarbamoil-8-oxabiciclo[3.2.1]oct-3-il)-(4-fenoxibencenosulfonil)-amino]propiónico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-{[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonil]piridin-3-ilmetilamino}-8-oxabiciclo-[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-[(4-fenoxibencenosulfonil)piridin-3-ilmetilamino]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-{metil[4-(piridin-4-iloxi)bencenosulfonil]amino}-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico,

hidroxiamida del ácido 3-exo-(5-isoxazol-3-il-tiofeno-2-sulfonilamino)-8-oxa-biciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico, e

hidroxiamida del ácido 3-exo-(5-feniltiofeno-2-sulfonilamino)-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico.

La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica para el tratamiento de una afección seleccionada entre el grupo compuesto por artritis (incluyendo la osteoartritis y la artritis reumatoide), enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedad de Crohn, enfisema, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad de Alzheimer, toxicidad de trasplante de órganos, caquexia, reacciones alérgicas, hipersensibilidad alérgica de contacto, cáncer (tal como el cáncer de tumores sólidos incluyendo el cáncer de colon, el cáncer de mama, el cáncer de pulmón y el cáncer de próstata, y procesos malignos hematopoyéticos incluyendo leucemias y linfomas), ulceración de tejidos, restenosis, enfermedad periodontal, epidermolisis ampollosa, osteoporosis, falta de firmeza en implantes de articulaciones artificiales, aterosclerosis (incluyendo la rotura de las placas ateroscleróticas), aneurisma aórtico (incluyendo aneurisma aórtico abdominal y aneurisma aórtico cerebral), insuficiencia cardíaca congestiva, infarto de miocardio, apoplejía, isquemia cerebral, trauma cefálico, lesión de la médula espinal, trastornos neurodegenerativos (agudos y crónicos), enfermedades autoinmunes, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, migraña, depresión, neuropatía periférica, dolor, angiopatía amiloide cerebral, aumento nootrópico o de cognición, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular, lesión de la córnea, degeneración macular, curación anormal de heridas, quemaduras, diabetes, invasión tumoral, crecimiento tumoral, metástasis tumoral, cicatrización de la córnea, escleritis, SIDA, sepsis, choque séptico y otras enfermedades caracterizadas por la actividad de metaloproteinasas y otras enfermedades caracterizadas por la actividad de la reprolisina en un mamífero, incluyendo un ser humano, que comprende una cantidad de un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo eficaz en tales tratamientos, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica para la inhibición de (a) metaloproteinasas de la matriz u otras metaloproteinasas implicadas en la degradación de la matriz, o (b) una reprolisina de mamíferos (tal como la agrecanasa o ADAM TS-1, 10, 12, 15 y 17, más preferiblemente la ADAM-17) en un mamífero, incluyendo un ser humano, que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La presente invención también se refiere a un procedimiento para el tratamiento de una afección seleccionada entre el grupo compuesto por artritis (incluyendo la osteoartritis y la artritis reumatoide), enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedad de Crohn, enfisema, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad de Alzheimer, toxicidad de trasplante de órganos, caquexia, reacciones alérgicas, hipersensibilidad alérgica de contacto, cáncer, ulceración de tejidos, restenosis, enfermedad periodontal, epidermolisis ampollosa, osteoporosis, falta de firmeza en implantes de articulaciones artificiales, aterosclerosis (incluyendo la rotura de las placas ateroscleóticas), aneurisma aórtico (incluyendo aneurisma aórtico abdominal y aneurisma aórtico cerebral), insuficiencia cardíaca congestiva, infarto de miocardio, apoplejía, isquemia cerebral, trauma cefálico, lesión de la médula espinal, trastornos neurodegenerativos (agudos y crónicos), enfermedades autoinmunes, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, migraña, depresión, neuropatía periférica, dolor, angiopatía amiloide cerebral, aumento nootrópico o de cognición, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular, lesión de la córnea, degeneración macular, curación anormal de heridas, quemaduras, diabetes, invasión tumoral, crecimiento tumoral, metástasis tumoral, cicatrización de la córnea, escleritis, SIDA, sepsis, choque séptico y otras enfermedades caracterizadas por la actividad de metaloproteinasas y otras enfermedades caracterizadas por la actividad de la reprolisina en un mamífero, incluyendo un ser humano, que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad de un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo eficaz en el tratamiento de tal afección.

La presente invención también se refiere a un procedimiento para la inhibición de (a) metaloproteinasas de la matriz u otras metaloproteinasas implicadas en la degradación de la matriz, o (b) una reprolisina de mamíferos (tal como la agrecanasa o ADAM TS-1, 10, 12, 15 y 17, preferiblemente la ADAM-17) en un mamífero, incluyendo un ser humano, que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Esta invención también incluye composiciones farmacéuticas que contienen profármacos de compuestos de la fórmula I. Esta invención también incluye procedimientos de tratamiento o prevención de trastornos que pueden tratarse o prevenirse mediante la inhibición de metaloproteinasas de la matriz o la inhibición de la reprolisina de mamíferos, que comprende administrar profármacos de compuestos de la fórmula I. Los compuestos de la fórmula I que tienen grupos amino, amido, hidroxi o carboxílicos libres pueden convertirse en profármacos. Los profármacos incluyen los compuestos en los que un resto aminoácido, o una cadena polipeptídica de dos o más (por ejemplo, dos, tres o cuatro) restos aminoácidos está unida covalentemente a través de enlaces peptídicos a grupos amino, hidroxi o carboxílico libres de los compuestos de fórmula I. Los restos aminoácidos incluyen los 20 aminoácidos naturales, denominados comúnmente por símbolos de tres letras, y también incluyen 4-hidroxiprolina, hidroxilisina, demosina, isodemosina, 3-metilhistidina, norvalina, beta-alanina, ácido gamma-aminobutírico, citrulina, homocisteína, homoserina, ornitina y metionina sulfona. Los profármacos también incluyen compuestos en los que están unidos covalentemente carbonatos, carbamatos, amidas y ésteres alquílicos a los sustituyentes anteriores de fórmula I a través del carbono carbonílico de la cadena lateral del profármaco.

Una experto medio en la técnica apreciará que los compuestos de la invención son útiles en el tratamiento de una amplia serie de enfermedades. Un experto medio en la técnica también apreciará que cuando se usan los compuestos de la invención en el tratamiento de una enfermedad específica, los compuestos de la invención pueden combinarse con diversos agentes terapéuticos existentes usados para tal enfermedad.

Para el tratamiento de la artritis reumatoide, los compuestos de la invención pueden combinarse con agentes tales como inhibidores del TNF-\alpha, tales como anticuerpos monoclonales anti-TNF y moléculas de inmunoglobulina para el receptor de TNF (tales como Enbrel®), una dosis baja de metotrexato, lefunimida, hidroxicloroquina, d-penicilamina, auranofin o sales de oro por vía oral o parenteral.

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Los compuestos de la invención también pueden usarse en combinación con agentes terapéuticos existentes para el tratamiento de la osteoartritis. Los agentes adecuados a usar en combinación incluyen agentes antiinflamatorios no esteroideos convencionales (en lo sucesivo AINE) tales como piroxicam, diclofenaco, ácidos propiónicos tales como naproxeno, flubiprofeno, fenoprofeno, cetoprofeno e ibuprofeno, fenamatos tales como el ácido mefenámico, indometacina, sulindaco, apazona, pirazolonas tales como fenilbutazona, salicilatos tales como aspirina, inhibidores de COX-2 tales como colexicob y rofecoxib, analgésicos y terapias intraarticulares tales como corticosteroides y ácidos hialurónicos tales como hialgan y sinvisc.

Los compuestos de la presente invención también pueden usarse en combinación con agentes contra el cáncer, tales como endostatina y angiostatina, o con fármacos citotóxicos tales como adriamicina, daunomicina, cis-platino, etopósido, taxol, taxótero y alcaloides, tales como vincristina y antimetabolitos tales como metotrexato.

Los compuestos de la presente invención también pueden usarse en combinación con agentes cardiovasculares tales como bloqueantes de los canales de calcio, agentes reductores de lípidos tales como estatinas, fibratos, betabloqueantes, inhibidores de la ACE, antagonistas del receptor de la angiotensina 2 e inhibidores de la agregación de plaquetas.

Los compuestos de la presente invención también pueden usarse en combinación con agentes para el SNC tales como antidepresivos (tales como sertralina), fármacos contra el Parkinson (tales como deprenil, L-dopa, requip, miratex, inhibidores MAOB tales como selegina y rasagilina, inhibidores de comP tales como Tasmar, inhibidores A-2, inhibidores de la recaptación de dopamina, antagonistas NMDA, agonistas nicotínicos, agonistas de Dopamina e inhibidores de la óxido nítrico sintasa neuronal), y fármacos contra el Alzheimer tales como Aricept, tacrine, inhibidores de la COX-2, propentofilina o metrifonato.

Los compuestos de la presente invención también pueden usarse en combinación con agentes para la osteoporosis tales como droloxifeno o fosoma y agentes inmunosupresores tales como FK-506 y rapamicina.

Descripción detallada de la invención

Los siguientes Esquemas de reacción ilustran la preparación de los compuestos de la presente invención. A menos que se indique otra cosa n, R^{1}, R^{2}, Q y Z en los Esquemas de reacción y en la discusión que los sigue se definen como se ha indicado anteriormente.

(Esquema pasa a página siguiente)

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ESQUEMA 1

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ESQUEMA 1 (continuación)

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ESQUEMA 2

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ESQUEMA 2 (continuación)

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ESQUEMA 3

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ESQUEMA 4

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El Esquema 1 se refiere a la preparación de compuestos de fórmula I, donde Z es CH_{2}. Haciendo referencia al Esquema I, un compuesto de fórmula I se prepara a partir de un compuesto de la fórmula II mediante hidrogenólisis bajo una atmósfera de hidrógeno, en presencia de un catalizador en un disolvente inerte a la reacción. Los catalizadores adecuados incluyen paladio al 5% sobre sulfato de bario o paladio al 5% sobre carbón, preferiblemente paladio al 5% sobre sulfato de bario. Los disolventes adecuados incluyen un alcohol tal como etanol, metanol o isopropanol, preferiblemente metanol. La reacción anterior puede realizarse a una presión de aproximadamente 1 a aproximadamente 5,065 x 10^{5} Pa, preferiblemente a aproximadamente 3,033 x 10^{5} Pa. Las temperaturas adecuadas para la reacción anterior varían de aproximadamente 20ºC (temperatura ambiente) a aproximadamente 60ºC, preferiblemente la temperatura puede variar de aproximadamente 20ºC a aproximadamente 25ºC (es decir, la temperatura ambiente). La reacción se completa en un período de aproximadamente 0,5 horas a aproximadamente 5 horas, preferiblemente en aproximadamente 3 horas.

Los compuestos de la fórmula II pueden prepararse a partir de compuestos de fórmula III mediante la reacción con un oxidante en un disolvente inerte a la reacción. Los oxidantes adecuados incluyen el ácido meta-cloroperbenzoico, el peróxido de hidrógeno o el perborato sódico, preferiblemente el ácido meta-cloroperbenzoico. Los disolventes adecuados incluyen disolventes halogenados tales como cloruro de metileno o cloroformo, preferiblemente cloruro de metileno. Las temperaturas adecuadas para la reacción anterior varían de aproximadamente 0ºC a aproximadamente 60ºC, preferiblemente la temperatura puede variar de aproximadamente 20ºC a aproximadamente 25ºC (es decir, la temperatura ambiente). La reacción se completa en un período de aproximadamente 0,5 horas a aproximadamente 24 horas, preferiblemente en aproximadamente 16 horas.

El compuesto de fórmula III se prepara a partir de un compuesto de fórmula IV mediante reacción con clorhidrato de O-bencilhidroxiamina, un agente activante y una base, en un disolvente inerte a la reacción. Los agentes activantes adecuados incluyen hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio o clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida, preferiblemente hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris-(dimetilamino)fosfonio. Las bases adecuadas incluyen aminas terciarias tales como trietilamina, diisopropiletilamina o 4-N,N-dimetilaminopiridina, preferiblemente diisopropiletilamina. La temperatura de la reacción anterior puede variar de aproximadamente 0ºC a aproximadamente 60ºC, preferiblemente a aproximadamente 50ºC. Los disolventes adecuados incluyen N,N-dimetilformamida, disolventes halogenados tales como cloruro de metileno o cloroformo, o éteres tales como THF o éter dietílico, preferiblemente el disolvente es N,N-dimetilformamida. La reacción se completa en aproximadamente 4 horas a aproximadamente 48 horas, preferiblemente en aproximadamente 16 horas.

Los compuestos de la fórmula IV pueden prepararse a partir de compuestos de la fórmula V, mediante reacción con un compuesto de la fórmula QSH, donde Q es como se ha definido anteriormente, en presencia de una base fuerte en un disolvente aprótico polar. Las bases adecuadas incluyen hidruro sódico, diisopropilamida de litio, t-butóxido potásico, amida sódica o hidruro potásico, preferiblemente hidruro sódico. Los disolventes adecuados incluyen éteres (tales como THF, éter dietílico o 1,2-dimetoxietano), o N,N-dimetilformamida, preferiblemente el disolvente es THF. La reacción anterior se realiza a una temperatura de aproximadamente -78ºC a aproximadamente 0ºC, preferiblemente a aproximadamente 22ºC (es decir, a temperatura ambiente), durante un período de 30 minutos a aproximadamente 24 horas, preferiblemente de aproximadamente 2 horas.

Los compuestos de la fórmula V se preparan a partir de compuestos de la fórmula VI mediante deshidratación en presencia de una base de amina terciaria, preferiblemente trietilamina, opcionalmente en presencia de 4-dimetilaminopiridina, y un agente deshidratante en un disolvente inerte. Los agentes deshidratantes adecuados incluyen anhídrido trifluorometanosulfónico, anhídrido metanosulfónico, cloruro de metanosulfonilo, cloruro de p-toluenosulfonilo o cloruro de bencenosulfonilo, preferiblemente cloruro de bencenosulfonilo. Los disolventes adecuados incluyen éter dietílico o diclorometano. La reacción se realiza a una temperatura de aproximadamente -80ºC a aproximadamente 0ºC, preferiblemente a aproximadamente 0ºC. La reacción se realiza durante aproximadamente 10 minutos a aproximadamente 4 horas, preferiblemente durante aproximadamente 1 hora.

Los compuestos de la fórmula VI se preparan a partir de un compuesto de fórmula VII, donde PG^{1} es metilo o etilo, mediante saponificación con una base, tal como hidróxido de litio, en una mezcla de disolventes. Las mezclas de disolventes adecuadas incluyen agua y metanol o agua, metanol y THF. La reacción se realiza a una temperatura de aproximadamente 60ºC a aproximadamente 120ºC, preferiblemente a aproximadamente la temperatura de reflujo de la mezcla de disolventes usada. La reacción se realiza durante aproximadamente 30 minutos a 24 horas, preferiblemente durante aproximadamente 16 horas.

El isómero exo-hidroximetilo del compuesto de la fórmula VII se prepara a partir de un compuesto de fórmula VIII. En general, una solución de un compuesto de fórmula VIII se disuelve en un disolvente aromático inerte, preferiblemente benceno o tolueno, y se enfría a una temperatura desde aproximadamente -40ºC a -20ºC, preferiblemente a aproximadamente -40ºC. A la solución fría se añade un agente reductor impedido adecuado, preferiblemente hidruro de diisobutilaluminio, en un disolvente aromático inerte, manteniendo la temperatura por debajo de -25ºC. Después de completar la adición, la reacción se mantiene por debajo de 0ºC durante aproximadamente 3 horas. Se añade un disolvente prótico, preferiblemente etanol, a aproximadamente -15ºC. Después de agitar a aproximadamente -15ºC durante aproximadamente 1 hora, se añade borohidruro sódico y la reacción se deja calentar a aproximadamente a temperatura ambiente mientras que se agita durante un período de 2 a 24 horas, preferiblemente durante aproximadamente 16 horas.

El isómero endo-hidroximetilo del compuesto de fórmula VII puede prepararse a partir del compuesto exo-hidroximetilo de la fórmula VI mediante una serie de etapas que pueden invertir la estereoquímica alrededor del átomo de carbono que lleva los grupos hidroximetilo y ácido carboxílico. Específicamente, el isómero exo-hidroximetilo de fórmula VI se convierte primero en el correspondiente éster bencílico. La posterior oxidación de Jones del alcohol para dar el ácido carboxílico y la formación del éster alquílico (metílico o etílico) proporciona un éster bencil alquílico mixto intermedio (es decir, el éster exo es metílico o etílico y el éster endo es bencilo). El éster bencílico después se elimina mediante hidrogenólisis y el ácido carboxílico resultante se reduce al alcohol mediante reducción con diborano, proporcionando el isómero endo-hidroximetilo del compuesto de fórmula VII.

Los compuestos de fórmula VIII, donde PG^{1} es etilo o metilo, se preparan a partir de compuestos de la fórmula IX, donde L es metanosulfonilo, bencenosulfonilo o tosilo, mediante reacción con malonato de dimetilo o de dietilo en presencia de una base fuerte, tal como hidruro sódico, en un disolvente polar, tal como N,N-dimetilformamida, durante un período de tiempo que varía de aproximadamente 4 horas a aproximadamente 24 horas, preferiblemente durante aproximadamente 16 horas. La temperatura de la reacción anterior está varía de aproximadamente 70ºC a aproximadamente 150ºC, preferiblemente es de aproximadamente 140ºC.

Los compuestos de la fórmula IX son conocidos o pueden obtenerse por procedimientos bien conocidos por los expertos medios en la técnica.

Los compuestos de la fórmula QSH pueden prepararse mediante la reacción de un haluro de alquilo o arilo con sulfhidruro sódico como se describe en Jerry March, Advanced Organic Chemistry, 360 y 589 (3ª ed. 1985). Como alternativa, los compuestos de la fórmula QSH también pueden prepararse mediante reacción de una sal de aril diazonio con sulfhidruro sódico como se describe en March id. en 601. Como alternativa, los compuestos de fórmula QSH también pueden prepararse mediante reacción de un reactivo de Grignard con azufre como se describe en March id. en 550. Como alternativa, los compuestos de fórmula QSH también pueden preparase mediante reducción de un cloruro de sulfonilo, ácido sulfónico o disulfuro como se describe en March id. en 1107 y 1110.

El Esquema 2 se refiere a la preparación de compuestos de la fórmula I, donde Z es > NR^{1} y R^{1} es hidrógeno. Haciendo referencia al Esquema 2, los compuestos de fórmula I pueden prepararse a partir de compuestos de la fórmula X por hidrogenólisis, bajo una atmósfera de hidrógeno, en presencia de un catalizador en un disolvente inerte a la reacción. Los catalizadores adecuados incluyen paladio al 5% sobre sulfato de bario o paladio al 5% sobre carbón, preferiblemente paladio al 5% sobre sulfato de bario. Los disolventes adecuados incluyen un alcohol, tal como etanol, metanol o isopropanol, preferiblemente metanol. La reacción anterior puede realizarse a una presión de aproximadamente 1,013 x 10^{5} Pa a aproximadamente 5,065 x 10^{5} Pa, preferiblemente a aproximadamente 3,033 x 10^{5} Pa. Las temperaturas adecuadas para la reacción anterior varían de aproximadamente 20ºC (la temperatura ambiente) a aproximadamente 60ºC, preferiblemente la temperatura puede variar de aproximadamente 20ºC a aproximadamente 25ºC (es decir, la temperatura ambiente). La reacción se completa en un período de aproximadamente 0,5 horas a aproximadamente 5 horas, preferiblemente en aproximadamente 3 horas.

El compuesto de fórmula X se prepara a partir de un compuesto de la fórmula XI mediante reacción con clorhidrato de O-bencilhidroxilamina en presencia de un catalizador y una base, en un disolvente inerte a la reacción. Los catalizadores adecuados incluyen hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris-(dimetilamino)fosfonio o clorhidrato de 1-(3-(dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida, preferiblemente hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris-(dimetilamino)fosfonio. Las bases adecuadas incluyen aminas terciarias tales como trietilamina, diisopropiletilamina o 4-N,N-dimetilaminopiridina, preferiblemente diisopropiletilamina. La temperatura de la reacción anterior es de aproximadamente 0ºC a aproximadamente 60ºC, preferiblemente de aproximadamente 50ºC. Los disolventes adecuados incluyen N,N-dimetilformamida o disolventes halogenados tales como cloruro de metileno o cloroformo, preferiblemente, el disolvente es N,N-dimetilformamida. La reacción se realiza durante un período de aproximadamente 4 horas a aproximadamente 48 horas, preferiblemente durante aproximadamente 16 horas.

Los compuestos de la fórmula XI se preparan a partir de compuestos de la fórmula XII, donde PG^{2} es metilo o etilo, mediante saponificación con una base, tal como hidróxido sódico, en una mezcla de disolventes tales como agua y etanol. La reacción se realiza a una temperatura de aproximadamente 60ºC a aproximadamente 100ºC, preferiblemente a aproximadamente la temperatura de reflujo de la mezcla de disolventes usada. La reacción se realiza durante aproximadamente 1 día a aproximadamente 10 días, preferiblemente durante aproximadamente 6 días.

Los compuestos de la fórmula XII, donde PG^{2} es metilo o etilo, se preparan a partir de compuestos de la fórmula XIII, donde PG^{2} es metilo o etilo, mediante reacción con un compuesto de la fórmula QSO_{2}Cl en presencia de una base, tal como trietilamina y un disolvente polar. Los disolventes adecuados incluyen N,N-dimetilformamida, tetrahidrofurano, 1,2-dimetoxietano, dioxano, agua o acetonitrilo, preferiblemente N,N-dimetilformamida. La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante un período de tiempo que varía de aproximadamente 1 hora a aproximadamente 24 horas, preferiblemente durante aproximadamente 16 horas.

Los compuestos de la fórmula XIII, donde PG^{2} es metilo o etilo, se preparan a partir de compuestos de la fórmula XIV, donde PG^{2} es metilo o etilo, mediante hidrólisis en presencia de un ácido mineral acuoso y un disolvente tal como éter dietílico. Los ácidos minerales adecuados incluyen ácido clorhídrico y sulfúrico, preferiblemente ácido clorhídrico. La reacción se realiza a una temperatura que varia de aproximadamente 0ºC a 50ºC; preferiblemente, la temperatura puede variar de aproximadamente 20ºC a aproximadamente 25ºC (es decir, la temperatura ambiente). La reacción se realiza durante un período de aproximadamente 2 horas a aproximadamente 48 horas, preferiblemente durante aproximadamente 16 horas.

Los compuestos de la fórmula XIV, donde PG^{2} es metilo, etilo o bencilo, se preparan a partir de compuestos de la fórmula IX, donde L es metanosulfonilo, bencenosulfonilo o tosilo, mediante reacción con N-difenilmetileno glicina, éster metílico, etílico o bencílico, en presencia de una base fuerte, tal como hidruro sódico, en un disolvente polar, tal como N,N-dimetilformamida, durante un período de tiempo de aproximadamente 4 horas a aproximadamente 24 horas, preferiblemente durante aproximadamente 16 horas. La temperatura de la reacción anterior varía de aproximadamente 70ºC a aproximadamente 140ºC, preferiblemente es de aproximadamente 100ºC. Los compuestos de la fórmula XIV, donde PG^{2} es metilo, etilo o bencilo, se obtienen en forma de mezclas de diastereoisómeros que pueden separarse por técnicas cromatográficas.

Los compuestos de la fórmula QSO_{2}Cl y de la fórmula IX son conocidos, se pueden adquirir en el mercado o pueden fabricarse por procedimientos bien conocidos por los expertos medios en la técnica.

El Esquema 3 se refiere a la preparación de compuestos de la fórmula I, donde Z es NR^{1} y R^{1} es alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alquilo(C_{1}-C_{6}) o un grupo de la fórmula -(CH_{2})_{n}CO_{2}R^{2}, donde n es 1, 3, 4, 5 ó 6 y R^{2} es alquilo(C_{1}-C_{6}).

Haciendo referencia al Esquema 3, los compuestos de fórmula I donde Z es NR^{1} y R^{1} es alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alquilo(C_{1}-C_{6}) o un grupo de la fórmula -(CH_{2})_{n}CO_{2}R^{2} donde n es 1, 3, 4, 5 ó 6 y R^{2} es alquilo(C_{1}-C_{6}), se prepararan a partir de compuestos de la fórmula XV mediante hidrogenólisis bajo una atmósfera de hidrógeno en presencia de un catalizador en un disolvente inerte a la reacción. Los catalizadores adecuados incluyen paladio al 5% sobre sulfato de bario o paladio al 5% sobre carbón, preferiblemente paladio al 5% sobre sulfato de bario. Los disolventes adecuados incluyen un alcohol tal como etanol, metanol o isopropanol, preferiblemente metanol. La reacción anterior puede realizarse a una presión de aproximadamente 1 a aproximadamente 5,065 x 10^{5} Pa, preferiblemente de 3,033 x 10^{5} Pa. Las temperaturas adecuadas para la reacción anterior varían de aproximadamente 20ºC (temperatura ambiente) a aproximadamente 60ºC, preferiblemente la temperatura puede variar de aproximadamente 20ºC a aproximadamente 25ºC (es decir, la temperatura ambiente). La reacción se completa en un período de aproximadamente 0,5 horas a aproximadamente 5 horas, preferiblemente en aproximadamente 3 horas.

El compuesto de fórmula XV se prepara a partir de un compuesto de fórmula XVI mediante la reacción con clorhidrato de O-bencilhidroxilamina en presencia de un catalizador y una base en un disolvente inerte a la reacción. Los catalizadores adecuados incluyen hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio o clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida, preferiblemente hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio. Las bases adecuadas incluyen aminas terciarias tales como trietilamina, diisopropiletilamina o 4-N,N-dimetilaminopiridina, preferiblemente diisopropiletilamina. La temperatura de la reacción anterior varía de aproximadamente 0ºC a aproximadamente 60ºC, preferiblemente es de aproximadamente 50ºC. Los disolventes adecuados incluyen N,N-dimetilformamida o disolventes halogenados tales como cloruro de metileno o cloroformo, preferiblemente el disolvente es N,N-dimetilformamida. La reacción se realiza durante un período de aproximadamente 4 horas a aproximadamente 48 horas, preferiblemente durante aproximadamente 16 horas.

El compuesto de fórmula XVI se prepara a partir de un compuesto de fórmula XVII mediante la retirada del grupo bencilo protector. Específicamente, el grupo bencilo protector se retira mediante hidrogenólisis usando paladio o paladio sobre carbón en un disolvente tal como metanol o etanol, durante un período de aproximadamente 30 minutos a aproximadamente 48 horas, preferiblemente de aproximadamente 16 horas, a una temperatura de aproximadamente 20ºC a aproximadamente 25ºC (es decir, la temperatura ambiente).

El compuesto de fórmula XVII se prepara a partir de un compuesto de la fórmula XII, donde PG^{2} es bencilo, mediante reacción con un derivado reactivo de un alcohol de la fórmula R^{1}OH, tal como un derivado de metanosulfonato, tosilato, cloro, bromo o yodo, preferiblemente el derivado de yodo, en presencia de una base tal como carbonato potásico o hidruro sódico, preferiblemente hidruro sódico, y un disolvente polar, tal como N,N-dimetilformamida. La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante un período de tiempo que varía de aproximadamente 60 minutos a aproximadamente 48 horas, preferiblemente durante aproximadamente 16 horas.

Los compuestos de fórmula XII, donde PG^{2} es bencilo, se preparan de acuerdo con los procedimientos del Esquema 2.

El Esquema 4 se refiere a la preparación de compuestos de fórmula I, donde Z es > NR^{1}, R^{1} es un grupo de la fórmula -(CH_{2})_{2}CO_{2}R^{2} (es decir, n es 2) y R^{2} es alquilo(C_{1}-C_{6}).

Haciendo referencia al Esquema 4, los compuestos de dicha fórmula I se preparan a partir de compuestos de la fórmula XVIII, donde R^{2} es alquilo(C_{1}-C_{6}), mediante reacción con cloruro de oxalilo o cloruro de tionilo, preferiblemente cloruro de oxalilo, y un catalizador, preferiblemente aproximadamente un 2% de N,N-dimetilformamida, en un disolvente inerte, tal como cloruro de metileno, para formar un cloruro de ácido in situ que posteriormente se hace reaccionar con O-trimetilsililhidroxilamina en presencia de una base, tal como piridina, 4-N,N-dimetilaminopiridina o trietilamina, preferiblemente piridina. La reacción se realiza a una temperatura de aproximadamente 22ºC (es decir, a la temperatura ambiente) durante aproximadamente 1 a aproximadamente 12 horas, preferiblemente durante aproximadamente 1 hora.

Los compuestos de la fórmula XVIII, donde R^{2} es alquilo(C_{1}-C_{6}), pueden prepararse a partir de compuestos de la fórmula XIX, donde R^{2} es alquilo(C_{1}-C_{6}), mediante reducción en un disolvente polar. Los agentes reductores adecuados incluyen hidrógeno en paladio e hidrógeno en paladio sobre carbón, preferiblemente hidrógeno en paladio sobre carbón. Los disolventes adecuados incluyen metanol, etanol e isopropanol, preferiblemente etanol. La reacción anterior se realiza a una temperatura de aproximadamente 22ºC (es decir, a la temperatura ambiente) durante un período de 1 a 7 días, preferiblemente de aproximadamente 2 días.

Los compuestos de la fórmula XIX, donde R^{2} es alquilo(C_{1}-C_{6}), pueden prepararse a partir de compuestos de la fórmula XII, donde PG^{2} es bencilo, mediante adición de Michael de un éster de propiolato y una base en un disolvente polar. Los propiolatos adecuados tienen la fórmula H-C\equivC-CO_{2}R^{2}, donde R^{2} es alquilo(C_{1}-C_{6}). Las bases adecuadas incluyen fluoruro de tetrabutilamonio, carbonato potásico y carbonato de cesio, preferiblemente fluoruro de tetrabutilamonio. Los disolventes adecuados incluyen tetrahidrofurano, acetonitrilo, terc-butanol y N,N-dimetilformamida, preferiblemente tetrahidrofurano. La reacción anterior se realiza a una temperatura desde aproximadamente -10ºC a aproximadamente 60ºC, variando preferiblemente de 0ºC a aproximadamente 22ºC (es decir, a la temperatura ambiente). Los compuestos de fórmula XIX se obtienen en forma de mezclas de isómeros geométricos alrededor del doble enlace olefínico; no es necesaria la separación de los isómeros.

Los compuestos de la fórmula XII, donde PG^{2} es bencilo, pueden prepararse de acuerdo con los procedimientos del Esquema 2.

Los compuestos de dicha fórmula I, donde Z es > NR^{1}, R^{1} es un grupo de la fórmula -(CH_{2})_{n}CO_{2}R^{2}, n es de 1 a 6 y R^{2} es hidrógeno, se preparan a partir de compuestos de fórmula I, donde Z es > NR^{1}, R^{1} es un grupo de la fórmula -(CH_{2})_{n}CO_{2}R^{2}, n es de 1 a 6 y R^{2} es alquilo(C_{1}-C_{6}), mediante saponificación, usando una base tal como hidróxido sódico, en un disolvente prótico tal como etanol, metanol o agua, o una mezcla tal como agua y etanol, agua y tolueno, o agua y THF. El sistema disolvente preferido es agua y etanol. La reacción se realiza durante un período de 30 minutos a 24 horas, preferiblemente durante aproximadamente 2 horas.

Los compuestos de la fórmula I que son de naturaleza básica son capaces de formar una amplia diversidad de sales diferentes con diversos ácidos inorgánicos y orgánicos. Aunque tales sales deben ser farmacéuticamente aceptables para la administración a los animales, a menudo es deseable en la práctica aislar inicialmente un compuesto de la fórmula I de la mezcla de reacción en forma de una sal farmacéuticamente inaceptable y después simplemente convertir esta última en el compuesto base libre mediante tratamiento con un reactivo alcalino, y posteriormente convertir la base libre en una sal de adición de ácidos farmacéuticamente aceptable. Las sales de adición de ácidos de los compuestos básicos de esta invención se preparan fácilmente mediante tratamiento del compuesto básico con una cantidad sustancialmente equivalente del ácido mineral u orgánico elegido, en un medio disolvente acuoso o en un disolvente orgánico adecuado tal como metanol o etanol. Tras la evaporación cuidadosa del disolvente se obtiene la sal sólida deseada.

Los ácidos que se usan para preparar las sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables de los compuestos básicos de esta invención son los que forman sales de adición de ácidos no tóxicas, es decir, sales que contienen aniones farmacológicamente aceptables, tales como las sales clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, nitrato, sulfato o bisulfato, fosfato o fosfato ácido, acetato, lactato, citrato o citrato ácido, tartrato o bitartrato, succinato, maleato, fumarato, gluconato, sacarato, benzoato, metanosulfonato y pamoato [es decir, 1,1'-metilen-bis-(2-hidroxi-3-naftoato)].

Los compuestos de la fórmula I que son de naturaleza ácida, son capaces de formar sales de bases con diversos cationes farmacológicamente aceptables. Los ejemplos de tales sales incluyen las sales de metales alcalinos o de metales alcalinotérreos y, particularmente, las sales de sodio y potasio. Todas estas sales se preparan por técnicas convencionales. Las bases químicas que se usan como reactivos para preparar las sales de bases farmacéuticamente aceptables de esta invención son las que forman sales de bases no tóxicas con los compuestos ácidos de fórmula I descritos en este documento. Estas sales de bases no tóxicas incluyen las derivadas de cationes farmacológicamente aceptables tales como sodio, potasio, calcio, magnesio, etc. Estas sales pueden prepararse fácilmente mediante el tratamiento de los correspondientes compuestos ácidos con una solución acuosa que contiene los cationes farmacológicamente aceptables deseados, y después evaporando la solución resultante hasta sequedad, preferiblemente bajo presión reducida. Como alternativa, también pueden prepararse mezclando soluciones de alcanos inferiores de los compuestos ácidos y el alcóxido de metal alcalino deseado entre sí y después evaporando la solución resultante a sequedad de la misma manera que se ha indicado anteriormente. En cualquier caso, preferiblemente se emplean cantidades estequiométricas de los reactivos para asegurar que se completa la reacción y que se obtienen rendimientos máximos de los productos.

La capacidad de los compuestos de fórmula I o sus sales farmacéuticamente aceptables (en lo sucesivo también denominados los compuestos de la presente invención) para inhibir metaloproteinasas o la reprolisina de mamífero y, por consiguiente, demostrar su eficacia para el tratamiento de enfermedades caracterizadas por metaloproteinasas o por la producción del factor de necrosis tumoral, se muestra por los siguientes ensayos in vitro.

Ensayo biológico Inhibición de la colagenasa humana (MMP-1)

Se activa colagenasa humana recombinante con tripsina. La cantidad de tripsina se optimiza para cada lote de colagenasa-1, pero una reacción típica usa la siguiente relación: 5 \mug de tripsina por 100 \mug de colagenasa. La tripsina y la colagenasa se incuban a temperatura ambiente durante 10 minutos y después se añade un exceso de cinco veces (50 mg/10 mg de tripsina) de inhibidor de tripsina de soja.

Se prepararon soluciones madre (10 mM) de inhibidores en dimetilsulfóxido y después se diluyen usando el siguiente esquema:

10 mM \rightarrow 120 \muM \rightarrow 12 \muM \rightarrow 1,2 \muM \rightarrow 0,12 \muM

Después se añaden veinticinco microlitros de cada concentración, por triplicado, a los pocillos apropiados de una placa Microfluor de 96 pocillos. La concentración final de inhibidor será una dilución 1:4 después de la adición de enzima y sustrato. Los controles positivos (con enzima, sin inhibidor) se disponen los pocillos D7-D12 y los controles negativos (sin enzima y sin inhibidor) se disponen en los pocillos D1-D6.

La colagenasa-1 se diluye a 240 ng/ml y después se añaden 25 ml a los pocillos apropiados de la placa Microfluor. La concentración final de la colagenasa en el ensayo es de 60 ng/ml.

El sustrato (DNP-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys-(NMA)-NH_{2}) se obtiene como una solución madre 5 mM en dimetilsulfóxido y después se diluye a 20 \muM en tampón de ensayo. El ensayo se inicia mediante la adición de 50 ml de substrato por pocillo de la placa Microfluor para dar una concentración final de 10 mM.

Las lecturas de fluorescencia (excitación 360 nm, emisión 460 nm) se toman en el tiempo 0 y, después, a intervalos de 20 minutos. El ensayo se realiza a temperatura ambiente con un tiempo de ensayo típico de 3 horas.

Después se representa la fluorescencia frente al tiempo tanto para el blanco como para las muestras que contienen colagenasa (se calcula el promedio de los datos de las determinaciones por triplicado). Se elige un punto de tiempo que proporciona una buena señal (al menos cinco veces mayor que el blanco) y que está en una parte lineal de la curva (normalmente alrededor de 120 minutos) para determinar los valores de CI_{50}. El tiempo cero se usa como blanco para cada compuesto a cada concentración y estos valores se restan de los datos de 120 minutos. Los datos se representan como concentración de inhibidor frente al % de control (fluorescencia del inhibidor dividido por fluorescencia de la colagenasa sola x 100). Los valores de CI_{50} se determinan a partir de la concentración de inhibidor que proporciona una señal que es el 50% del control.

Si las CI_{50} son menores de 0,03M, entonces se ensayan los inhibidores a concentraciones de 0,3mM, 0,03 mM y 0,003 mM.

Inhibición de gelatinasa (MMP-2)

Se activa gelatinasa de 72 kD humana recombinante (MMP-2, gelatinasa A) durante 16-18 horas con acetato p-aminofenil-mercúrico 1 mM (procedente de una solución madre 100 mM recién preparada en NaOH 0,2 N), a 4ºC, con agitación suave.

Se diluyen en serie soluciones madre de inhibidores en dimetilsulfóxido 10 mM, en tampón de ensayo (TRIS 50 mM, pH 7,5, NaCl 200 mM, CaCl_{2} 5 mM, ZnCl_{2} 20 \muM y BRIJ-35 al 0,02% (vol./vol.)) usando el siguiente esquema:

Cuando es necesario, se realizan diluciones adicionales siguiendo este mismo esquema. En cada ensayo se realiza un mínimo de cuatro concentraciones de inhibidor por cada compuesto. Después se añaden 25 \mul de cada concentración, por triplicado, a los pocillos de una placa negra Microfluor de 96 pocillos con fondo en U. Como el volumen final del ensayo es de 100 \mul, las concentraciones finales de inhibidor son el resultado de una dilución 1:4 adicional (es decir, 30 \muM \rightarrow 3 \muM \rightarrow 0,3 \muM \rightarrow 0,03 \muM, y así sucesivamente). También se preparan un blanco (sin enzima y sin inhibidor) y un control de enzima positivo (con enzima y sin inhibidor), por triplicado.

La enzima activada se diluye hasta 100 ng/ml en tampón de ensayo, se añaden 25 \mul por pocillo a los pocillos apropiados de la microplaca. La concentración final de enzima en el ensayo es de 25 ng/ml (0,34 nM).

Se diluye una solución madre en dimetilsulfóxido 5 mM de sustrato (Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH_{2}) en tampón de ensayo a 20 \muM. El ensayo se inicia mediante la adición de 50 \mul de sustrato diluido produciendo una concentración final de ensayo de sustrato 10 \muM. A tiempo cero, se toma inmediatamente la lectura de fluorescencia (excitación 320, emisión 390) y posteriormente se toman lecturas cada quince minutos a temperatura ambiente con un Lector de Placas Multi-Well Plate Reader PerSeptive Biosystems CytoFluor, con la ganancia a 90 unidades.

El valor promedio de fluorescencia de la enzima y el blanco se representan frente al tiempo. Se elige uno de los primeros puntos de tiempo sobre la parte lineal de esta curva para las determinaciones de CI_{50}. El punto de tiempo cero para cada compuesto a cada dilución se resta del último punto de tiempo y después los datos se expresan como porcentaje de control de enzima (fluorescencia del inhibidor dividido por fluorescencia del control positivo de enzima x 100). Los datos se representan como concentración de inhibidor frente al porcentaje de control de enzima. Las CI50 se definen como la concentración de inhibidor que proporciona una señal que es el 50% del control positivo de enzima.

Inhibición de la actividad de estromelisina (MMP-3)

Se activa estromelisina humana recombinante (MMP-3, estromelisina 1) durante 20-22 horas con acetato p-aminofenil-mercúrico 2 mM (procedente de una solución madre 100 mM recién preparada en NaOH 0,2 N), a 37ºC.

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Se diluyen en serie soluciones madre de inhibidores en dimetilsulfóxido 10 mM, en tampón de ensayo (TRIS 50 mM, pH 7,5, NaCl 150 mM, CaCl_{2} 10 mM, y BRIJ-35 al 0,05% (vol./vol.)) usando el siguiente esquema:

La enzima activada se diluye a 200 ng/ml en tampón de ensayo, se añaden 25 \mul por pocillo a los pocillos apropiados de la microplaca. La concentración final de enzima en el ensayo es de 50 ng/ml (0,875 nM).

Una solución madre en dimetilsulfóxido 10 mM de sustrato (Mca-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nva-Trp-Arg-Lys(Dnp)-NH_{2}) se diluye en tampón de ensayo a 6 \muM. El ensayo se inicia mediante la adición de 50 \mul de sustrato diluido produciendo una concentración final de ensayo de sustrato 3 \muM. A tiempo cero, se toma inmediatamente la lectura de fluorescencia (excitación 320, emisión 390) y posteriormente se toman lecturas cada quince minutos a temperatura ambiente con un Lector de Placas Multi-Well Plate Reader PerSeptive Biosystems CytoFluor con la ganancia a 90 unidades.

El valor promedio de fluorescencia de la enzima y el blanco se representan frente al tiempo. Se elige uno de los primeros puntos de tiempo sobre la parte lineal de esta curva para las determinaciones de CI_{50}. El punto de tiempo cero para cada compuesto a cada dilución se resta del último punto de tiempo y después los datos se expresan como porcentaje de control de enzima (fluorescencia del inhibidor dividido por fluorescencia del control positivo de enzima x 100). Los datos se representan como concentración de inhibidor frente al porcentaje de control de enzima. Las CI_{50} se definen como la concentración de inhibidor que proporciona una señal que es el 50% del control positivo de enzima.

Como alternativa, la inhibición de la estromelisina puede ensayarse usando Mca-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nva-Trp-Arg-Lys(Dnp)-NH_{2} (3 \muM) bajo condiciones similares a las de la inhibición de la colagenasa humana (MMP-1).

La estromelisina humana se activa durante 20-24 horas a 37ºC con APMA 2 mM (acetato p-aminofenil mercúrico) y se diluye a una concentración final en el ensayo de 50 ng/ml. Los inhibidores se diluyen como en el caso de la inhibición de la colagenasa humana (MMP-1) para dar concentraciones finales en el ensayo de 30 \mum, 3 \muM, 0,3 \muM y 0,03 \muM. Cada concentración se realiza por triplicado.

Las lecturas de fluorescencia (excitación 320 nm, emisión 390 nm) se toman a tiempo cero y después a intervalos de 15 minutos durante 3 horas.

Las CI_{50} se determinan como en el caso de la inhibición de la colagenasa humana (MMP-1). Si las CI_{50} son menores de 0,03 \muM, entonces los inhibidores se ensayan a las concentraciones finales de 0,03 \muM, 0,003 \muM, 0,0003 \muM y 0,00003 \muM.

Los valores de CI_{50} se determinaron de la misma manera que en el caso de la colagenasa.

Inhibición de MMP-13

Se activa MMP-13 humana recombinante con APMA 2 mM (acetato p-aminofenil mercúrico) durante 2,0 horas, a 37ºC y se diluye a 240 ng/ml en tampón de ensayo (Tris 50 mM, pH 7,5, cloruro sódico 200 mM, cloruro cálcico 5 mM, cloruro de cinc 20 \muM y brij 35 al 0,02%). Se añaden veinticinco micrólitros de enzima diluida por pocillo de una placa Microfluor de 96 pocillos. La enzima después se diluye en una relación 1:4 mediante la adición de inhibidor y sustrato para dar una concentración final en el ensayo de 60 ng/ml.

Se realizan soluciones madre (10 mM) de inhibidores en dimetilsulfóxido y después se diluyen en tampón de ensayo como en el esquema de dilución del inhibidor para la inhibición de la colagenasa-1 humana (MMP-1): se añaden veinticinco micrólitros de cada concentración por triplicado a la placa Microfluor. Las concentraciones finales en el ensayo son 30 mM, 3 mM, 0,3 mM y 0,03 mM.

El sustrato (Dnp-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH_{2}) se prepara como en el caso de la inhibición de la colagenasa humana (MMP-1) y se añaden 50 \mul a cada pocillo para dar una concentración final de ensayo de 10 \muM. Las lecturas de fluorescencia (excitación 360 nm; emisión 450 nm) se toman a tiempo 0 y cada 5 minutos durante 1 hora.

Los controles positivos y los controles negativos se realizan por triplicado como se ha indicado en el ensayo de MMP-1.

Las CI_{50} se determinan como en la inhibición de la colagenasa humana (MMP-1). Si las CI_{50} son menores de 0,03 mM, entonces los inhibidores se ensayan a concentraciones finales de 0,3 mM, 0,03 mM, 0,003 mM y 0,0003 mM.

Inhibición de la producción de TNF

La capacidad de los compuestos o de sus sales farmacéuticamente aceptables para inhibir la producción de TNF y, por consiguiente, demostrar su eficacia para el tratamiento de enfermedades que implican la producción de TNF se muestra por el siguiente ensayo in vitro:

Se aislaron células mononucleares humanas de sangre humana anticoagulada usando una técnica de separación de Ficoll-hypaque de una sola etapa. (2) Las células mononucleares se lavaron tres veces en solución salina equilibrada de Hanks (HBSS) con cationes divalentes y se resuspendieron a una densidad de 2 x 10^{6}/ml en HBSS que contenía un 1% de BSA. Los recuentos diferenciales determinados usando el analizador Cell Dyn 3500 de Abbott indicaron que los monocitos variaban de un 17 a un 24% de las células totales en estas preparaciones.

Se pusieron alícuotas de 180 \mul de la suspensión celular en placas de 96 pocillos de fondo plano (Costar). Las adiciones de compuestos y LPS (concentración final 100 ng/ml) dieron un volumen final de 200 \mul. Todas las condiciones se realizaron por triplicado. Después de una incubación de cuatro horas a 37ºC en un incubador con CO_{2} humidificado, las placas se retiraron y centrifugaron (10 minutos a aproximadamente 250 x g) y los sobrenadantes se retiraron y ensayaron con respecto al TNFa usando el estuche R&D ELISA.

Inhibición de la producción de TNF-\alpha soluble

La capacidad de los compuestos o de sus sales farmacéuticamente aceptables para inhibir la liberación celular de TNF-\alpha y, por consiguiente, demostrar su eficacia para el tratamiento de las enfermedades que implican la regulación anómala del TNF-\alpha soluble, se muestra mediante el siguiente ensayo in vitro:

Procedimiento para la evaluación de la actividad de la enzima convertidora de TNF-\alpha recombinante Expresión de TACE recombinante

Un fragmento de ADN que codifica la secuencia señal, el preprodominio, el predominio y el dominio catalítico de TACE (aminoácidos 1-473) puede amplificarse mediante una reacción en cadena con polimerasa usando una genoteca de ADNc de pulmón humano como molde. El fragmento amplificado después se clona en el vector pFastBac. La secuencia de ADN del inserto se confirma para las dos cadenas. Un bácmido preparado usando pFastBac en E. coli DH10Bac se transfecta en células de insecto SF9. Las partículas víricas después se amplifican hasta las fases P1, P2 y P3. El virus P3 infecta a células de insecto tanto Sf9 como High Five y se desarrolla a 27ºC durante 48 horas. El medio se recoge y se usa para realizar ensayos y para una purificación adicional.

Preparación de sustrato inactivado fluorescente

Se prepara un modelo peptídico de sustrato de TNF-\alpha (LY-LeucinaAlaninaGlutaminaAlaninaValinaArgininaSerina-SerinaLisina(CTMR)-Arginina (LY = Amarillo Lucifer.; CTMR = Carboxitetrametil-Rodamina)) y la concentración se estima por absorbancia a 560 nm (E_{560}, 60.000 M-1CM-1) de acuerdo con el procedimiento de Geoghegan, KF, "Improved method for converting an unmodified peptide to an energy-transfer substrate for a proteinase". Bioconjugate Chem. 7, 385-391 (1995). Este péptido incluye el sitio de escisión en pro-TNF que es escindido in vivo por TACE.

Expresión de TACE recombinante

Se amplifica un fragmento de ADN que codifica para la secuencia señal, el preprodominio, el predominio y el dominio catalítico de TACE (aminoácidos 1-473) mediante reacción en cadena con la polimerasa usando una genoteca de ADNc de pulmón humano como molde. El fragmento amplificado se clona después en el vector pFastBac. La secuencia de ADN del inserto se confirma para las dos cadenas. Un bácmido preparado usando pFastBac en E. coli DH10Bac se transfecta en células de insecto SF9. Las partículas víricas se amplificarán después hasta las fases P1, P2 y P3. El virus P3 infecta a células de insecto tanto Sf9 como High Five y se desarrolla a 27ºC durante 48 horas. El medio se recoge y se usa para realizar ensayos y para una purificación adicional.

Reacción enzimática

La reacción, realizada en una placa de 96 pocillos (Dynatech), está compuesta por 70 \mul de solución tampón (Hepes-HCl 25 mM, pH 7,5, más ZnCl_{2} 20 \muM), 10 \mul de sustrato inactivado fluorescente 100 \muM, 10 \mul de una solución de compuesto de ensayo en DMSO (5%) y una cantidad de enzima r-TACE que provocará un 50% de escisión en 60 minutos - en un volumen total de 100 \mul. La especificidad de la escisión enzimática en el enlace amida entre la alanina y la valina se verifica por HPLC y espectrometría de masas. Las velocidades iniciales de escisión se controlan midiendo la velocidad de aumento de fluorescencia a 530 nm (excitación a 409 nm) durante 30 minutos. El experimento se controla como se indica a continuación: 1) para la fluorescencia de fondo del sustrato; 2) para la fluorescencia del sustrato totalmente escindido; y 3) para la inactivación o aumento de fluorescencia de soluciones que contienen el compuesto de ensayo.

Los datos se analizan como se indica a continuación. Se calculó el promedio de las velocidades de las reacciones de "control" que no contenían compuesto de ensayo para establecer el valor del 100%. Se comparó la velocidad de reacción en presencia del compuesto de ensayo con la velocidad en ausencia de compuesto y se indicó en la tabla como "porcentaje de control que no contiene compuesto de ensayo". Los resultados se representan como "% de control" frente al log. de concentración de compuesto y se determina el punto semi-máximo o valor de CI_{50}.

Todos los compuestos de la invención tienen valores de CI_{50} menores de 1 \muM, preferiblemente menores de 50 nM. Los compuestos más preferidos de la invención son al menos 100 veces menos potentes frente a la r-MMP-1 que en el ensayo de TACE anterior.

Ensayo de monocitos humanos

Se aíslan células mononucleares humanas a partir de sangre humana anticoagulada usando una técnica de separación de Ficoll-hypaque de una sola etapa. (2) Las células mononucleares se lavan tres veces en solución salina equilibrada de Hanks (HBSS) con cationes divalentes y se resuspenden a una densidad de 2 x 10^{6}/ml en HBSS que contiene un 1% de BSA. Los recuentos diferenciales determinados usando el analizador Cell Dyn 3500 de Abbott indicaron que los monocitos variaban de un 17 a un 24% de las células totales en estas preparaciones.

Se pusieron alícuotas de 180 \mum de la suspensión celular en placas de 96 pocillos de fondo plano (Costar). Las adiciones de los compuestos y LPS (100 ng/ml de concentración final) dieron un volumen final de 200 \mul. Todas las condiciones se realizaron por triplicado. Después de una incubación de cuatro horas a 37ºC en un incubador de CO_{2} humidificado, las placas se retiraron y centrifugaron (10 minutos a aproximadamente 250 x g) y los sobrenadantes se retiraron y se ensayó el TNF-\alpha usando el Estuche R&D ELISA.

Ensayo de agrecanasa

Se aíslan condrocitos porcinos primarios de cartílago articular mediante digestión secuencial con tripsina y colagenasa seguido por digestión con colagenasa durante una noche y se cultivan a una densidad de 2 x 10^{5} células por pocillo en placas de 48 pocillos con 5 \muCi/ml de azufre ^{35}S (1000 Ci/mmol) en placas recubiertas con colágeno de tipo I. Se deja que las células incorporen el marcador en su matriz de proteoglucano (aproximadamente 1 semana) a 37ºC, bajo una atmósfera de CO_{2} al 5%.

La noche antes de iniciar el ensayo, se lavan las monocapas de condrocitos dos veces en DMEM/1% de PSF/G y después se dejan incubar en DMEM/1% de FBS limpio durante una noche.

La mañana siguiente, los condrocitos se lavan una vez en DMEM/1% de PSF/G. El líquido de lavado final se deja en las placas del incubador mientras que se realizan las diluciones.

Los medios y las diluciones pueden realizarse como se describe en la Tabla siguiente.

Medio de	DMEM solo (medio de control)
control
Medio de	DMEM + IL-1 (5 ng/ml)
IL-1
Diluciones	Realizar todas las soluciones madre de compuesto a una concentración 10 mM en DMSO.
de Fármaco	Realizar una solución madre 100 \muM de cada compuesto en DMEM en placas de 96 pocillos.
	Almacenar el un congelador durante una noche.
	Al día siguiente, realizar diluciones en serie en DMEM con IL-1 a 5 \muM, 500 nM y 50 nM.
	Aspirar los lavados finales de los pocillos y añadir 50 \mul de compuesto de las diluciones
	anteriores a 450 \mul de medio IL-1 en pocillos apropiados de las placas de 48 pocillos.
	Concentraciones finales de compuesto iguales a 500 nM, 50 nM y 5 nM.
	Todas las muestras se completaron por triplicado con muestras de Control y de IL-1 sola en
	cada placa.

Las placas se marcan y sólo se usan los 24 pocillos interiores de la placa. En una de las placas, varias columnas se designan como IL-1 (sin fármaco) y Control (sin IL-1 y sin fármaco). Estas columnas de control se cuentan periódicamente para controlar la liberación de 35S-proteoglucano. Se añaden medio de control y medio IL-1 a los pocillos (450 \mul) seguido por el compuesto (50 \mul) para iniciar el ensayo. Las placas se incuban a 37ºC con una atmósfera de CO_{2} al 5%.

Cuando se alcanza una liberación del 40-50% (cuando el valor de CPM del medio IL-1 es 4-5 veces mayor que el del medio de control) como se evalúa por recuento de centelleo líquido (LSC) de muestras de medio, se termina el ensayo (9-12 horas). El medio se retira de todos los pocillos y se dispone en tubos de centelleo. Se añade el líquido de centelleo y se adquieren los recuentos radiactivos (LSC). Para solubilizar las capas de células, se añaden 500 \mul de tampón de digestión de papaína (Tris 0,2 M, pH 7,0, EDTA 5 mM, DTT 5 mM y 1 mg/ml de papaína) a cada pocillo. Las placas con solución de digestión se incuban a 60ºC durante una noche. La capa de células se retira de las placas al día siguiente y se dispone en tubos de centelleo. Después se añade el líquido de centelleo y se cuentan las muestras (LSC).

Se determina el porcentaje de recuentos liberados del total presentes en cada pocillo. Se obtienen promedios de los triplicados restando el efecto de fondo del control de cada pocillo. El porcentaje de inhibición del compuesto se basa en las muestras de IL-1 como inhibición del 0% (100% de recuentos totales).

Para la administración a los mamíferos, incluyendo los seres humanos, para la inhibición de las metaloproteinasas de la matriz o la producción del factor de necrosis tumoral (TNF), puede usarse una diversidad de vías convencionales incluyendo la vía oral, parenteral (por ejemplo, intravenosa, intramuscular o subcutánea), sublingual, anal y tópica. En general, los compuestos activos se administrarán en dosis que varían de aproximadamente 0,1 a 25 mg/kg de peso corporal del sujeto a tratar por día, preferiblemente de aproximadamente 0,3 a 5 mg/kg. Preferiblemente, el compuesto activo se administrará por vía oral o parenteral. Sin embargo, necesariamente se producirá alguna variación en la dosificación dependiendo de la afección del sujeto a tratar. La persona responsable de la administración, en cualquier caso, determinará la dosis apropiada para el sujeto individual.

Los compuestos de la presente invención pueden administrarse en una amplia diversidad de formas de dosificación diferentes, en general, los compuestos terapéuticamente eficaces de esta invención están presentes en tales formas de dosificación a niveles de concentración que varían de aproximadamente un 5,0% a aproximadamente un 70% en peso.

Para la administración oral, pueden emplearse comprimidos que contienen diversos excipientes tales como celulosa microcristalina, citrato sódico, carbonato sódico, fosfato dicálcico y glicina, junto con diversos disgregantes tales como almidón (y preferiblemente almidón de maíz, patata o tapioca), ácido algínico y ciertos silicatos complejos, junto con ligantes de granulación tales como polivinilpirrolidona, sacarosa, gelatina y goma arábiga. Además, a menudo son muy útiles para formar comprimidos agentes lubricantes tales como el estearato de magnesio, el lauril sulfato sódico y el talco. También pueden emplearse composiciones sólidas de un tipo similar como cargas en cápsulas de gelatina; los materiales preferidos a este respecto también incluyen lactosa o azúcar de la leche, así como polietilenglicoles de alto peso molecular. Cuando se desean suspensiones acuosas y/o elixires para la administración oral, el ingrediente activo puede combinarse con diversos agentes edulcorantes o aromatizantes, materiales colorantes o tintes y, si se desea, también agentes emulsionantes y/o de suspensión, así como, junto con diluyentes tales como agua, etanol, propilenglicol, glicerina y diversas combinaciones de los mismos. En el caso de los animales, ventajosamente se incluyen en el pienso del animal o en el agua de bebida en una concentración de 5-5000 ppm, preferiblemente de 25 a 500 ppm.

Para la administración parenteral (uso intramuscular, intraperitoneal, subcutáneo e intravenoso), normalmente se prepara una solución estéril inyectable del ingrediente activo. Pueden emplearse soluciones de un compuesto terapéutico de la presente invención en aceite de sésamo o de cacahuete en propilenglicol acuoso. Las soluciones acuosas deben ajustarse y tamponarse convenientemente, preferiblemente a un pH mayor de 8, si es necesario, y el diluyente líquido primero debe hacerse isotónico. Estas soluciones acuosas son apropiadas para fines de inyección intravenosa. Las soluciones aceitosas son adecuadas para fines de inyección intraarticular, intramuscular y subcutánea. La preparación de todas estas soluciones bajo condiciones estériles se realiza fácilmente por técnicas farmacéuticas convencionales bien conocidas por los especialistas en la técnica. En el caso de los animales, los compuestos pueden administrarse por vía intramuscular o subcutánea, a niveles de dosificación de aproximadamente 0,1 a 50 mg/kg/día, ventajosamente de 0,2 a 10 mg/kg/día, administrados en una sola dosis o hasta en 3 dosis divididas.

Para la administración tópica ocular, puede emplearse la aplicación directa al ojo afectado en forma de una formulación tal como gotas oculares, aerosol, geles o pomadas, o puede incorporarse en colágeno (tal como poli-2-hidroxietilmetacrilato y copolímeros del mismo), o un soporte polimérico hidrófilo. Los materiales también pueden aplicarse como una lente de contacto o mediante un depósito local o como una formulación para la subconjuntiva.

Para la administración intraorbital, normalmente se prepara una solución inyectable estéril del ingrediente activo. Pueden emplearse soluciones de un compuesto terapéutico de la presente invención en una solución o suspensión acuosa (tamaño de partículas menor de 10 micrómetros). Las soluciones acuosas pueden ajustarse y tamponarse convenientemente, preferiblemente a un pH de 5 a 8, si es necesario, y el diluyente líquido primero debe hacerse isotónico. Pueden añadirse pequeñas cantidades de polímeros para aumentar la viscosidad o para la liberación sostenida (tal como polímeros de celulosa, Dextrano, polietilenglicol o ácido algínico). Estas soluciones son adecuadas para fines de inyección intraorbital. La preparación de todas estas soluciones bajo condiciones estériles se realiza fácilmente por técnicas farmacéuticas convencionales bien conocidas para los especialistas en la técnica. En el caso de los animales, los compuestos pueden administrarse por vía intraorbital a niveles de dosificación de aproximadamente 0,1 a 50 mg/kg/día, ventajosamente de 0,2 a 10 mg/kg/día administrados en una sola dosis o en hasta en 3 dosis divididas.

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Los compuestos activos de la invención también pueden formularse en composiciones rectales tales como supositorios o enemas de retención, por ejemplo, que contienen bases de supositorios convencionales tales como manteca de cacao u otros glicéridos.

Para la administración intranasal o la administración por inhalación, los compuestos activos de la invención se liberan convenientemente en forma de una solución o suspensión desde un recipiente de pulverización con una bomba que se comprime o bombea por el paciente, o en forma de una presentación de pulverización en aerosol desde un recipiente presurizado o nebulizador, con el uso de un propulsor adecuado, por ejemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otros gases adecuados. En el caso de un aerosol presurizado, la dosis unitaria puede determinarse disponiendo una válvula para liberar una cantidad medida. El recipiente presurizado o nebulizador puede contener una solución o suspensión del compuesto activo. Pueden formularse cápsulas y cartuchos (hechos, por ejemplo, de gelatina) para uso en un inhalador o insuflador, que contienen una mezcla de polvo de un compuesto de la invención y una base de polvo adecuada tal como almidón o lactosa.

Las siguientes Preparaciones y Ejemplos ilustran la preparación de los compuestos de la presente invención. Los puntos de fusión están sin corregir. Los datos de RMN se expresan en partes por millón (\delta) y se refieren a la señal de estabilización de deuterio del disolvente de la muestra (deuterocloroformo a menos que se especifique otra cosa). Los reactivos comerciales se usaron sin purificación adicional. THF se refiere a tetrahidrofurano. DMF se refiere a N,N-dimetilformamida. Cromatografía se refiere a cromatografía en columna realizada usando gel de sílice de 32-63 mm y se realiza bajo condiciones de presión de nitrógeno (cromatografía ultrarrápida). Temperatura ambiente se refiere a 20-25ºC. Todas las reacciones no acuosas se realizaron bajo una atmósfera de nitrógeno por motivos de conveniencia y para maximizar los rendimientos. La concentración a presión reducida significa que se usó un evaporador rotatorio.

Preparación 1

4-(4-Fluorofenoxi)tiofenol

Se añadió en porciones hidruro de litio y aluminio (9,95 gramos, 0,26 moles) a una solución agitada de cloruro de 4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilo (30 gramos, 0,105 moles) en tetrahidrofurano (700 ml). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 1,5 horas, se enfrió en un baño de hielo y se extinguió por la adición de una solución acuosa al 10% de ácido sulfúrico (100 ml). Después de agitar durante 30 minutos, la mezcla se filtró a través de Celite™ y el tetrahidrofurano se eliminó al vacío. El residuo se diluyó con agua y se extrajo con éter dietílico. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró al vacío proporcionando el compuesto del título en forma de un sólido blanco (23 gramos, 100%).

Preparación 2

4'-Fluorobifenil-4-tiol

Se añadió en porciones hidruro de litio y aluminio (0,95 gramos, 25 mmoles) a una solución agitada de cloruro de 4'-fluorobifenil-4-sulfonilo (2,7 gramos, 10 mmoles) en tetrahidrofurano (75 ml). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 4 horas, se enfrió en un baño de hielo y se inactivó mediante la adición de una solución acuosa al 10% de ácido sulfúrico (100 ml). Después de agitar durante 30 minutos, la mezcla se filtró a través de Celite™ y el tetrahidrofurano se eliminó al vacío. El residuo se diluyó con agua y se extrajo con éter dietílico. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró al vacío hasta que se obtuvo un sólido. La trituración del sólido con éter dietílico, la eliminación del material insoluble por filtración y la concentración del filtrado produjeron el compuesto del título en forma de un sólido amarillo (1,4 gramos, 69%).

Preparación 3

4-(4-Clorofenoxi)tiofenol

Se añadió en porciones hidruro de litio y aluminio (6,5 gramos, 0,17 moles), manteniendo un reflujo suave, a una solución agitada de cloruro de 4-(4-clorofenoxi)bencenosulfonilo (20,5 gramos, 68 mmoles) en tetrahidrofurano (400 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, se enfrió en un baño de hielo y se extinguió mediante la adición de una solución acuosa al 10% de ácido sulfúrico (100 ml). Después de agitar durante 30 minutos, la mezcla se diluyó con agua y se extrajo con éter dietílico. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró al vacío proporcionando el compuesto del título en forma de un sólido blanco (15,9 gramos, 99%).

Ejemplo 1 Hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilamino]-8-oxa-biciclo[3.2.1]-octano-3-carboxílico A) Éster etílico del ácido 3-(benzhidrilideno-amino)-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico

A una suspensión de hidruro sódico (0,41 gramos, 17,1 mmoles) en N,N-dimetilformamida (50 ml) a 0ºC, se añadió gota a gota una solución del éster etílico de la N-difenilmetilenglicina (2,07 gramos, 7,8 mmoles) en N,N-dimetilformamida (50 ml). Después de agitar durante 30 minutos a temperatura ambiente, se añadió gota a gota una solución de ditosilato de cis-2,5-bis(hidroximetil)-tetrahidrofurano (4,1 gramos, 9,3 mmoles) en N,N-dimetilformamida (50 ml). La mezcla de reacción se calentó gradualmente a 100ºC en un baño de aceite y se agitó a esta temperatura durante una noche. El disolvente se evaporó al vacío y el residuo se recogió en agua y se extrajo dos veces con éter dietílico. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron hasta que se obtuvo un aceite pardo, a partir del cual se aisló el compuesto del título (1,42 gramos, 51%, una mezcla 3:1 de diastereoisómeros exo/endo) mediante cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo al 20% en hexano como eluyente).

B) Clorhidrato del éster etílico del ácido 3-amino-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico

Una mezcla de dos fases de éster etílico del ácido 3-(benzhidrilidenoamino)-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico (1,4 gramos, 3,9 mmoles) en solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N (100 ml) y éter dietílico (100 ml) se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La capa acuosa se concentró proporcionando el compuesto del título (0,70 gramos, 78%, una mezcla 3:1 de diastereoisómeros exo/endo) en forma de un sólido amarillo claro.

C) Éster etílico del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilamino]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico

Una solución de clorhidrato de éster etílico del ácido 3-amino-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico (690 mg, 2,9 mmoles), cloruro de 4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilo (923 mg, 3,2 mmoles) y trietilamina (0,9 ml, 6,5 mmoles) en N,N-dimetilformamida (45 ml) se agitó a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se eliminó al vacío y el residuo se recogió en solución acuosa saturada de bicarbonato sódico. Después de extraer dos veces con cloruro de metileno, las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron hasta que se obtuvo un aceite pardo. El compuesto del título (492 mg, 38%) se aisló por cromatografía sobre gel de sílice usando metanol al 1% en cloruro de metileno como eluyente.

D) Ácido 3-exo-[4-(4-Fluorofenoxi)-bencenosulfonilamino]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico

Se añadió hidróxido sódico (1,5 gramos, 38 mmoles) a una solución de éster etílico del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilamino]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico (492 mg, 1,09 mmoles) en una mezcla de etanol (10 ml) y agua (10 ml). La mezcla se calentó a reflujo durante 6 días, se enfrió y se acidificó con una solución acuosa 1 N de ácido clorhídrico. La mezcla se extrajo con acetato de etilo y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró proporcionando el compuesto del título (411 mg, 89%) en forma de una espuma de color castaño.

E) Benciloxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilamino]-8-oxabiciclo[3.2.1]-octano-3-carboxílico

A una solución del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)-bencenosulfonilamino]-8-oxabiciclo-[3.2.1]octano-3-carboxílico (411 mg, 0,98 mmoles) y trietilamina (0,19 ml, 1,36 mmoles) en N,N-dimetilformamida (30 ml) se añadió hexafluoroborato de (benzotriazol-1-iloxi)tris-(dimetilamino)fosfonio (474 mg, 1,07 mmoles). Después de agitar a temperatura ambiente durante 1 hora, se añadieron más trietilamina (0,22 ml, 1,58 mmoles) y clorhidrato de O-bencilhidroxilamina (187 mg, 1,17 mmoles). La mezcla de reacción se agitó durante 1 día a temperatura ambiente y después durante 1 día a 50ºC. Después de la concentración al vacío, el residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó secuencialmente con una solución acuosa 1 N de ácido clorhídrico, una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y salmuera. La solución se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró hasta que se obtuvo un aceite del que se aisló, en forma de un sólido blanco, el compuesto del título (237 mg, 46%), mediante cromatografía (acetato de etilo al 50% en hexano como eluyente).

F) Hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilamino]-8-oxa-biciclo[3.2.1]-octano-3-carboxílico

Una solución de benciloxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilamino]-8-oxabiciclo-[3.2.1]-octano-3-carboxílico (237 mg, 0,45 mmoles) en metanol (25 ml) se trató con paladio al 5% sobre sulfato de bario (150 mg) y se hidrogenó a una presión de 3,033 x 10^{5} Pa durante 4 horas en un agitador Parr™. El catalizador se retiró pasándolo a través de un filtro de nylon de 0,45 \mum y el filtrado se concentró hasta que se obtuvo una espuma blanca. La cristalización en cloruro de metileno produjo el compuesto del título en forma de un sólido blanco (62 mg, 32%). Se obtuvo una segunda recolección (62 mg, 32%) mediante cristalización en acetato de etilo/hexano.

P.f. 138-141ºC. ^{1}H RMN (d_{6}-DMSO): \delta 10,50 (s ancho, 1H), 8,56 (s a, 1H), 7,67 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,66 (s a, 1H, solapado), 7,26-7,22 (m, 2H), 7,16-7,12 (m, 2H), 7,01 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 4,09 (s a, 2H), 2,32 (d, J = 14,1 Hz, 2H), 1,68-1,63 (m, 4H), 1,51-1,48 (m, 2H). EM: 435 m/e (M-H). La confirmación adicional de la estructura y estereoquímica se realizó por cristalografía de rayos X de cristales individuales.

Ejemplo 2 Hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilmetil]-8-oxabiciclo-[3.2.1]-octano-3-carboxílico A) Éster dietílico del ácido 8-oxabiciclo[3.2.1]-octano-3,3-dicarboxílico

Se añadió en porciones hidruro sódico (2,28 gramos, 95 mmoles) a una solución agitada de malonato de dietilo (15 ml, 99 mmoles) en N,N-dimetilformamida (400 ml). La mezcla se agitó durante 45 minutos, después de los cuales había finalizado el desprendimiento de hidrógeno. Después, se añadió gota a gota una solución de ditosilato de cis-2,5-bis(hidroximetil)tetrahidrofurano (19,0 gramos, 43 mmoles) en N,N-dimetilformamida (400 ml). La mezcla se calentó en un baño de aceite a 140ºC durante una noche. Después de enfriar a la temperatura ambiente, la mezcla se inactivó mediante la adición de una solución acuosa saturada de cloruro amónico y se concentró al vacío. El aceite residual se recogió en agua y se extrajo con éter dietílico. El extracto orgánico se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró hasta que se obtuvo un aceite. La destilación al vacío produjo el compuesto del título (7,8 gramos, 71%) en forma de un aceite transparente.

B) Éster etílico del ácido 3-exo-hidroximetil-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico

Una solución 1,2 M de hidruro de diisobutilaluminio en tolueno (62,5 ml, 75 mmoles) se añadió gota a gota a una solución de éster dietílico del ácido 8-oxabiciclo[3.2.1]-octano-3,3-dicarboxílico (7,8 gramos, 30 mmoles) en tolueno (80 ml) a -40ºC. La mezcla se dejó calentar a 0ºC mientras que se agitaba durante un período de 3 horas. Después se enfrió a -15ºC y se añadió lentamente etanol (8 ml) mientras que se mantenía esta temperatura. Después de agitar a -15ºC durante 1 hora, se añadió borohidruro sódico (1,1 gramos, 30 mmoles). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche y se inactivó mediante la adición gota a gota de una solución acuosa saturada de sulfato sódico. Se añadió acetato de etilo y, después de agitar durante 20 minutos, el material insoluble se eliminó mediante filtración a través de Celite™. El filtrado se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para producir el compuesto del título (5,1 gramos, 80%) en forma de un aceite transparente.

C) Ácido 3-exo-hidroximetil-8-oxabiciclo[3.2.1]-octano-3-carboxílico

Se añadió hidróxido de litio hidratado (2,5 gramos, 59,5 mmoles) a una solución de éster etílico del ácido 3-exo-hidroximetil-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico (5,1 gramos, 23,8 mmoles) en una mezcla de metanol (25 ml), tetrahidrofurano (25 ml) y agua (2,5 ml). La mezcla se calentó a reflujo durante una noche, se enfrió y se inactivó mediante la adición de resina de intercambio iónico Amberlite IR-120™. Después de agitar durante 20 minutos, la resina se separó mediante filtración, lavándose con tetrahidrofurano. La evaporación de los disolventes y la trituración del residuo con éter dietílico produjo el compuesto de título (2,35 gramos, 53%) en forma de un sólido blanco.

D) 3',8-Dioxaspiro[biciclo[3.2.1]octano-3,1'-ciclobutano]-2'-ona

Se añadió gota a gota cloruro de bencenosulfonilo (1,7 ml, 13,5 mmoles) a una solución de ácido 3-exo-hidroximetil-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico (2,3 gramos, 12,3 mmoles), trietilamina (3,4 ml, 24,7 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (300 mg, 2,5 mmoles) en cloruro de metileno (50 ml) a 0ºC. La mezcla se agitó a 0ºC durante 1 hora, se diluyó con cloruro de metileno y se lavó con solución de ácido clorhídrico 1N, solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y salmuera. Después de secar sobre sulfato de magnesio, el disolvente se evaporó produciendo el compuesto del título en forma de un sólido blanco (1,8 gramos, 90%).

E) Ácido 3-exo-[4-(4-Fluorofenoxi)fenilsulfanil-metil]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico

Una solución de 4-(4-fluorofenoxi)tiofenol (2,2 gramos, 10 mmoles) en tetrahidrofurano (10 ml) se añadió gota a gota a una suspensión de hidruro sódico (270 mg, 11,3 mmoles) en tetrahidrofurano (20 ml) a -10ºC. La mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente mientras que se agitaba durante 30 minutos. Después de enfriar de nuevo a -10ºC, se añadió gota a gota una solución de 3',8-dioxaspiro[biciclo[3.2.1]octano-3,1'-ciclobutano]-2'-ona (1,8 gramos, 10 mmoles) en tetrahidrofurano (20 ml). El baño de refrigeración se eliminó y se continuó la agitación a temperatura ambiente durante 2 horas, tras lo cual la mezcla se extinguió con una solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y se extrajo dos veces con cloruro de metileno. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron hasta que se obtuvo un sólido. La recristalización en éter dietílico/hexano produjo el compuesto del título (1,8 gramos, (47%)) en forma de un sólido blanco. La concentración de las aguas madres, seguida por cromatografía en gel de sílice (metanol al 2% en cloroformo como eluyente) produjo más compuesto del título (500 mg, 13%).

F) Benciloxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)fenilsulfanilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico

A una solución del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfanilmetil]-8-oxabiciclo-[3.2.1]octano-3-carboxílico (1,0 gramos, 2,6 mmoles) y diisopropiletilamina (0,5 ml, 2,9 mmoles) en N,N-dimetilformamida (20 ml), se añadió hexafluoroborato de (benzotriazol-1-iloxi)tris-(dimetilamino)fosfonio (1,2 gramos, 2,7 mmoles). Después de agitar a la temperatura ambiente durante 2,5 horas, se añadió más diisopropiletilamina (0,86 ml, 4,9 mmoles) y clorhidrato de O-bencilhidroxilamina (525 mg, 3,3 mmoles). La mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 50ºC. Después de la concentración al vacío, el residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó secuencialmente con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N, solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y salmuera. La solución se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para dar un aceite del que se aisló el compuesto del título (405 mg, 32%) en forma de una espuma blanca, mediante cromatografía (acetato de etilo al 30% en hexano como eluyente).

G) Benciloxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)fenilsulfonilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico

Se añadió ácido meta-cloroperbenzoico sólido al 57-85% (283 mg) a una solución de benciloxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)fenilsulfanilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico en cloruro de metileno (15 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante una noche y después se extinguió mediante la adición de solución acuosa saturada de bisulfito sódico. Después de la dilución con cloruro de metileno, la capa orgánica se separó y se lavó con solución acuosa saturada de bicarbonato sódico, agua y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró dando el compuesto del título en forma de una espuma blanca (390 mg, 90%).

H) Hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilmetil]-8-oxabiciclo-[3.2.1]-octano-3-carboxílico

Una solución de benciloxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-fluorofenoxi)bencenosulfonilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]-octano-3-carboxílico (390 mg, 0,74 mmoles) en metanol (20 ml) se trató con paladio al 5% sobre sulfato de bario (195 mg) y se hidrogenó a una presión de 3,033 x 10^{5} Pa durante 3,5 horas en un agitador Parr™. El catalizador se eliminó pasándolo a través de un filtro de nylon de 0,45 \mum y el filtrado se concentró hasta que se obtuvo una espuma blanca. La cristalización en una mezcla de acetato de etilo y hexano produjo el compuesto del título en forma de un sólido blanco (230 mg, 71%).

P.f. 134-139ºC. ^{1}H RMN (d_{6}-DMSO): \delta 8,55 (s a, 1H), 7,76 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,30-7,26 (m, 2H), 7,20-7,16 (m, 2H), 7,09 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 4,13 (s a, 2H), 3,40 (s, 2H), 2,24 (d, J = 14,3 Hz, 2H), 1,78-1,73 (m, 4H), 1,57-1,55 (m, 2H). EM m/e 434 (M-H). La confirmación adicional de la estructura y estereoquímica se realizó mediante cristalografía de rayos-X de cristales individuales.

Ejemplo 3 Hidroxiamida del ácido 3-(4-fenoxibencenosulfonilmetil)-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico

Preparado de acuerdo con el mismo procedimiento que en el Ejemplo 2, usando 4-fenoxifeniltiofenol en la etapa E.

^{1}H RMN (d_{6}-DMSO): \delta 8,54 (s a, 1H), 7,75 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,44-7,40 (m, 2H), 7,23-7,21 (m, 1H), 7,11-7,07 (m, 4H), 4,11 (s a, 2H), 3,38 (s, 2H), 2,22 (d, J = 14,3 Hz, 2H), 1,80-1,70 (m, 4H), 1,60-1,50 (m, 2H). EM m/e 416 (M-H).

Ejemplo 4 Hidroxiamida del ácido 3-exo-(4'-fluorobifenil-4-sulfonilmetil)-8-oxabiciclo-[3.2.1]octano-3-carboxílico

Preparado de acuerdo con el mismo procedimiento que en el Ejemplo 2, usando 4'-fluorobifenil-4-tiol en la etapa E.

^{1}H RMN (d_{6}-DMSO): \delta 10,60 (s a, 1H), 8,58 (s a, 1H), 7,88-7,85 (m, 4H), 7,81-7,78 (m, 2H), 7,36-7,31 (m, 2H), 4,13 (s a, 2H), 3,47 (s, 2H), 2,25 (d, J = 14,5 Hz, 2H), 1,80-1,76 (m, 4H), 1,60-1,55 (m, 2H). EM m/e 418 (M-H).

Ejemplo 5 Hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-clorofenoxi)bencenosulfonilmetil]-8-oxa-biciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico A) Ácido 3-exo-[4-(4-clorofenoxi)fenilsulfanilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]-octano-3-carboxílico

Se añadió 4-(4-clorofenoxi)tiofenol (2,07 gramos, 6,8 mmoles) a una suspensión de hidruro sódico (180 mg, 7,5 mmoles) en tetrahidrofurano (50 ml) a temperatura ambiente. La mezcla se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 45 minutos. Se añadió 3',8-dioxaspiro[biciclo[3.2.1]octano-3,1'-ciclobutano]-2'-ona (1,04 gramos, 6,2 mmoles) sólida y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se extinguió con solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N y se extrajo dos veces con cloruro de metileno. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron hasta que se obtuvo un sólido. La trituración con éter dietílico produjo, después de la filtración, el compuesto del título en forma de un sólido blanco (1,47 gramos, 59%).

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B) Hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-clorofenoxi)fenilsulfanilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]-octano-3-carboxílico

A una suspensión de ácido 3-exo-[4-(4-clorofenoxi)fenilsulfanilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico
(1,47 gramos, 3,63 mmoles) en cloruro de metileno (20 ml) a temperatura ambiente, se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (0,8 ml, 9,2 mmoles) y N,N-dimetilformamida (1 gota). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Después de la evaporación de los volátiles al vacío, el residuo se disolvió en cloruro de metileno (20 ml), se enfrió a 0ºC y se trató gota a gota con O-trimetilsililhidroxilamina (1,35 ml, 11,0 mmoles). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3,5 horas, se enfrió en un baño de hielo y se inactivó mediante la adición de una solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N, agitando a 0ºC durante 30 minutos más. Después de la dilución con acetato de etilo, la capa orgánica se separó, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró produciendo el compuesto del título en forma de una espuma blanca (1,52 gramos, 100%).

C) Hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-clorofenoxi)bencenosulfonilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]-octano-3-carboxílico

Se añadió Oxone™ (4,2 gramos, 8,63 mmoles) a una solución de hidroxiamida del ácido 3-exo-[4-(4-clorofenoxi)fenil-sulfanilmetil]-8-oxabiciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico (1,52 gramos, 3,63 mmoles) en una mezcla de agua (30 ml), metanol (40 ml) y tetrahidrofurano (12 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante una noche, se diluyó con agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron hasta que se obtuvo una espuma de la cual se aisló el compuesto del título (846 mg, 52%) mediante cromatografía en gel de sílice (metanol al 4% en cloroformo como eluyente).

^{1}H RMN (d_{6}-DMSO): \delta 10,58 (s a, 1H), 8,53 (s a, 1H), 7,76 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,46 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,15-7,11 (m, 4H), 4,11 (s a, 2H), 3,40 (s, 2H), 2,22 (d, J = 14,3 Hz, 2H), 1,76-1,71 (m, 4H), 1,57-1,55 (m, 2H). EM m/e 450 (M-H).

Claims

1. Un compuesto de la fórmula

10

donde Z

es > CH_{2} o > NR^{1};

11

n es un número entero de uno a seis;

R^{2} es hidrógeno o alquilo(C_{1}-C_{6});

Q es alquilo(C_{1}-C_{6}), arilo(C_{6}-C_{10}), heteroarilo(C_{2}-C_{9}), ariloxi(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), ariloxi(C_{6}-C_{10})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), aril(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), aril(C_{6}-C_{10})heteroarilo(C_{2}-
C_{9}), aril(C_{6}-C_{10})aril(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})aril(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), aril(C_{6}-C_{10})aril(C_{6}-C_{10})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroaril(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}), heteroaril(C_{2}-C_{9})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), aril(C_{6}-C_{10})alcoxi(C_{1}-C_{6})alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})alcoxi(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}), aril(C_{6}-C_{10})alcoxi(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alcoxi(C_{1}-C_{6})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alcoxi(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alcoxi(C_{1}-
C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), ariloxi(C_{6}-C_{10})alquil(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}), ariloxi(C_{6}-C_{10})alquil(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})alquil(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}) o heteroariloxi(C_{2}-C_{9})alquil(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9});

donde cada radical arilo(C_{6}-C_{10}) o heteroarilo(C_{2}-C_{9}) de dicho arilo(C_{6}-C_{10}), heteroarilo(C_{2}-C_{9}), ariloxi(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), ariloxi(C_{6}-C_{10})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), aril(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), aril(C_{6}-C_{10})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), aril(C_{6}-C_{10})aril(C_{6}-C_{10})alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})aril(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), aril(C_{6}-C_{10})aril(C_{6}-C_{10})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroaril(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}), heteroaril(C_{2}-C_{9})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), aril(C_{6}-C_{10})alcoxi(C_{1}-C_{6})alquilo(C_{1}-C_{6}), aril(C_{6}-C_{10})alcoxi(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}), aril(C_{6}-C_{10})alcoxi(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alcoxi(C_{1}-C_{6})alquilo(C_{1}-C_{6}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alcoxi(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}), heteroaril(C_{2}-C_{9})alcoxi(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), ariloxi(C_{6}-C_{10})alquil(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}), ariloxi(C_{6}-C_{10})alquil(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})alquil(C_{1}-C_{6})arilo(C_{6}-C_{10}) o heteroariloxi(C_{2}-C_{9})alquil(C_{1}-C_{6})heteroarilo(C_{2}-C_{9}) opcionalmente sustituido en cualquiera de los átomos de carbono del anillo capaces de formar un enlace adicional por uno o más sustituyentes por anillo seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}), perfluoro-alquilo(C_{1}-C_{3}), perfluoro-alcoxi(C_{1}-C_{3}) y ariloxi(C_{6}-C_{10});

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, con la estereoquímica representada por la fórmula

12

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que Z es CH_{2}.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que Z es CH_{2}.

5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que Z es > NR^{1} y R^{1} es un grupo de la fórmula

13

y donde n es 2.

6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que Z es > NR^{1} y R^{1} es un grupo de la fórmula

14

y donde n es 2.

7. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que Z es >NR^{1} y R^{1} es hidrógeno.

8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que Z es >NR^{1} y R^{1} es hidrógeno.

9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que Q es arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), donde cada radical arilo o heteroarilo de dichos grupos arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}) puede estar opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo

\hbox{(C _{1} -C _{3} )}

.

10. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que Q es arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), donde cada radical arilo o heteroarilo de dichos grupos arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}) puede estar opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo

\hbox{(C _{1} -C _{3} )}

.

11. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en el que Q es arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), donde cada radical arilo o heteroarilo de dichos grupos arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}) puede estar opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo

\hbox{(C _{1} -C _{3} )}

.

12. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5, en el que Q es arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), donde cada radical arilo o heteroarilo de dichos grupos arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}) puede estar opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo

\hbox{(C _{1} -C _{3} )}

.

\newpage

13. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 7, en el que Q es arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), donde cada radical arilo o heteroarilo de dichos grupos arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}) puede estar opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo

\hbox{(C _{1} -C _{3} )}

.

14. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 8, en el que Q es arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}), donde cada radical arilo o heteroarilo de dichos grupos arilo(C_{6}-C_{10}), heteroariloxi(C_{2}-C_{9})arilo(C_{6}-C_{10}) o ariloxi(C_{6}-C_{10})arilo(C_{6}-C_{10}) puede estar opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo

\hbox{(C _{1} -C _{3} )}

.

15. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que Q es fenilo, piridiloxifenilo o fenoxifenilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo(C_{1}-C_{3}).

16. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que Q es fenilo, piridiloxifenilo o fenoxifenilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo(C_{1}-C_{3}).

17. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en el que Q es fenilo, piridiloxifenilo o fenoxifenilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo(C_{1}-C_{3}).

18. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5, en el que Q es fenilo, piridiloxifenilo o fenoxifenilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo(C_{1}-C_{3}).

19. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 7, en el que Q es fenilo, piridiloxifenilo o fenoxifenilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo(C_{1}-C_{3}).

20. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 8, en el que Q es fenilo, piridiloxifenilo o fenoxifenilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre fluoro, cloro, bromo, alquilo(C_{1}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}) o perfluoro-alquilo(C_{1}-C_{3}).

21. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicho compuesto se selecciona entre el grupo compuesto por:

hidroxiamida del ácido 3-exo-(4-fluorobifenil-4-sulfonilmetil)-8-oxabiciclo-[3.2.1]-octano-3-carboxílico; e

22. Una composición farmacéutica para el tratamiento de una afección seleccionada entre el grupo compuesto por artritis (incluyendo la osteoartritis y la artritis reumatoide), enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedad de Crohn, enfisema, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad de Alzheimer, toxicidad de trasplante de órganos, caquexia, reacciones alérgicas, hipersensibilidad alérgica de contacto, cáncer, ulceración de tejidos, restenosis, enfermedad periodontal, epidermolisis ampollosa, osteoporosis, falta de firmeza en implantes de articulaciones artificiales, aterosclerosis (incluyendo la rotura de las placas ateroscleóticas), aneurisma aórtico (incluyendo aneurisma aórtico abdominal y aneurisma aórtico cerebral), insuficiencia cardíaca congestiva, infarto de miocardio, apoplejía, isquemia cerebral, trauma cefálico, lesión de la médula espinal, trastornos neurodegenerativos (agudos y crónicos), trastornos autoinmunes, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, migraña, depresión, neuropatía periférica, dolor, angiopatía amiloide cerebral, aumento nootrópico o de cognición, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular, lesión de la córnea, degeneración macular, curación anormal de heridas, quemaduras, diabetes, invasión tumoral, crecimiento tumoral, metástasis tumoral, cicatrización de la córnea, escleritis, SIDA, sepsis y choque séptico en un mamífero, incluyendo un ser humano, que comprende una cantidad de un compuesto de la reivindicación 1 eficaz en tal tratamiento, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

\newpage

23. Un compuesto o sal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21 para su uso en medicina.

24. El uso de un compuesto o sal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21 en la preparación de un medicamento para el tratamiento de una afección que puede tratarse mediante inhibidores de una metaloproteinasa de matriz y/o una reprolisina en un mamífero.

25. El uso de acuerdo con la reivindicación 24 en el que la afección seleccionada entre el grupo compuesto por artritis (incluyendo la osteoartritis y la artritis reumatoide), enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedad de Crohn, enfisema, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad de Alzheimer, toxicidad de trasplante de órganos, caquexia, reacciones alérgicas, hipersensibilidad alérgica de contacto, cáncer, ulceración de tejidos, restenosis, enfermedad periodontal, epidermolisis ampollosa, osteoporosis, falta de firmeza en implantes de articulaciones artificiales, aterosclerosis (incluyendo la rotura de las placas ateroscleóticas), aneurisma aórtico (incluyendo aneurisma aórtico abdominal y aneurisma aórtico cerebral), insuficiencia cardíaca congestiva, infarto de miocardio, apoplejía, isquemia cerebral, trauma cefálico, lesión de la médula espinal, trastornos neurodegenerativos (agudos y crónicos), trastornos autoinmunes, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, migraña, depresión, neuropatía periférica, dolor, angiopatía amiloide cerebral, aumento nootrópico o de cognición, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, angiogénesis ocular, lesión de la córnea, degeneración macular, curación anormal de heridas, quemaduras, diabetes, invasión tumoral, crecimiento tumoral, metástasis tumoral, cicatrización de la córnea, escleritis, SIDA, sepsis y choque séptico en un mamífero, incluyendo un ser humano.

26. Una composición farmacéutica para el tratamiento de una afección que puede tratarse mediante la inhibición de metaloproteinasas de matriz en un mamífero, incluyendo un ser humano, que comprende una cantidad de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21 eficaz en tal tratamiento y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

27. Una composición farmacéutica para el tratamiento de una afección que puede tratarse mediante la inhibición de una reprolisina de mamífero en un mamífero, incluyendo un ser humano, que comprende una cantidad de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21 eficaz en tal tratamiento y un vehículo farmacéuticamente aceptable.