RU2325184C2 - Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий - Google Patents
Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий Download PDFInfo
- Publication number
- RU2325184C2 RU2325184C2 RU2005108994/15A RU2005108994A RU2325184C2 RU 2325184 C2 RU2325184 C2 RU 2325184C2 RU 2005108994/15 A RU2005108994/15 A RU 2005108994/15A RU 2005108994 A RU2005108994 A RU 2005108994A RU 2325184 C2 RU2325184 C2 RU 2325184C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- outer membrane
- vesicles
- bacteria
- protein
- centrifugation
- Prior art date
Links
- 239000012528 membrane Substances 0.000 title claims abstract description 47
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 38
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 25
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 24
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims abstract description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 13
- 241000588653 Neisseria Species 0.000 claims abstract description 10
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims abstract description 10
- 229940009976 deoxycholate Drugs 0.000 claims abstract description 4
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 52
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 34
- 241000588650 Neisseria meningitidis Species 0.000 claims description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 15
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 14
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 14
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 10
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 claims description 7
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 6
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 5
- 108010031133 Transferrin-Binding Protein A Proteins 0.000 claims description 3
- STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N tributyl phosphate Chemical compound CCCCOP(=O)(OCCCC)OCCCC STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 2
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 claims description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 5
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 1
- 241000588677 Neisseria meningitidis serogroup B Species 0.000 claims 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 abstract description 4
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 abstract description 4
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 54
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 54
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 50
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 30
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 19
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 14
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 9
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 7
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 description 6
- -1 etc.) Proteins 0.000 description 6
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 5
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 5
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 5
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- DRHZYJAUECRAJM-DWSYSWFDSA-N (2s,3s,4s,5r,6r)-6-[[(3s,4s,4ar,6ar,6bs,8r,8ar,12as,14ar,14br)-8a-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3-[(2s,3r,4s,5r,6s)-5-[(2s,3r,4s,5r)-4-[(2s,3r,4r)-3,4-dihydroxy-4-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxyoxan-2-yl]oxy-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-5-[(3s,5s, Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@H](O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@H]5CC(C)(C)CC[C@@]5([C@@H](C[C@@]4(C)[C@]3(C)CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)O)C(=O)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H]([C@@H]([C@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@](O)(CO)CO3)O)[C@H](O)CO2)O)[C@H](C)O1)O)O)OC(=O)C[C@@H](O)C[C@H](OC(=O)C[C@@H](O)C[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](CO)O1)O)[C@@H](C)CC)C(O)=O)[C@@H]1OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DRHZYJAUECRAJM-DWSYSWFDSA-N 0.000 description 4
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000040340 Oat mosaic virus Species 0.000 description 4
- 101710116435 Outer membrane protein Proteins 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 4
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 4
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- CTMZLDSMFCVUNX-VMIOUTBZSA-N cytidylyl-(3'->5')-guanosine Chemical group O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O)[C@@H](CO)O1 CTMZLDSMFCVUNX-VMIOUTBZSA-N 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 3
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 3
- 102100034452 Alternative prion protein Human genes 0.000 description 2
- 241000588832 Bordetella pertussis Species 0.000 description 2
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 101710154643 Filamentous hemagglutinin Proteins 0.000 description 2
- 241000589989 Helicobacter Species 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 2
- 241000588655 Moraxella catarrhalis Species 0.000 description 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 2
- 241000605862 Porphyromonas gingivalis Species 0.000 description 2
- 241000193985 Streptococcus agalactiae Species 0.000 description 2
- 241000193990 Streptococcus sp. 'group B' Species 0.000 description 2
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 2
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 2
- 108010031127 Transferrin-Binding Protein B Proteins 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 229940047650 haemophilus influenzae Drugs 0.000 description 2
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 2
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N n-Triacontane Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 2
- 229940066429 octoxynol Drugs 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000010845 search algorithm Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 16-Epiaffinine Natural products C1C(C2=CC=CC=C2N2)=C2C(=O)CC2C(=CC)CN(C)C1C2CO PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRSASMSXMSNRBT-UHFFFAOYSA-N 5-methylcytosine Chemical compound CC1=CNC(=O)N=C1N LRSASMSXMSNRBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710122462 65 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 241000710780 Bovine viral diarrhea virus 1 Species 0.000 description 1
- 108010071134 CRM197 (non-toxic variant of diphtheria toxin) Proteins 0.000 description 1
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 241001647372 Chlamydia pneumoniae Species 0.000 description 1
- 241000606153 Chlamydia trachomatis Species 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 241000710777 Classical swine fever virus Species 0.000 description 1
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 1
- YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N DDT Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1C(C(Cl)(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100037840 Dehydrogenase/reductase SDR family member 2, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 241000725619 Dengue virus Species 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 101001122279 Escherichia coli (strain K12) Outer membrane porin N Proteins 0.000 description 1
- 241000710781 Flaviviridae Species 0.000 description 1
- 241000710831 Flavivirus Species 0.000 description 1
- 206010018612 Gonorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 101150029115 HOPX gene Proteins 0.000 description 1
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 description 1
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 241000709721 Hepatovirus A Species 0.000 description 1
- 241000702617 Human parvovirus B19 Species 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 241000710842 Japanese encephalitis virus Species 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 241001082241 Lythrum hyssopifolia Species 0.000 description 1
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 description 1
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000588621 Moraxella Species 0.000 description 1
- 208000005647 Mumps Diseases 0.000 description 1
- 241000711386 Mumps virus Species 0.000 description 1
- 101100476480 Mus musculus S100a8 gene Proteins 0.000 description 1
- BACYUWVYYTXETD-UHFFFAOYSA-N N-Lauroylsarcosine Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)N(C)CC(O)=O BACYUWVYYTXETD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700020354 N-acetylmuramyl-threonyl-isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- 241001644525 Nastus productus Species 0.000 description 1
- 241000588652 Neisseria gonorrhoeae Species 0.000 description 1
- 241000588649 Neisseria lactamica Species 0.000 description 1
- 241001174901 Neisseria meningitidis alpha275 Species 0.000 description 1
- 241000921898 Neisseria meningitidis serogroup A Species 0.000 description 1
- 101100446533 Neisseria meningitidis serogroup B (strain MC58) fhbP gene Proteins 0.000 description 1
- 241000947238 Neisseria meningitidis serogroup C Species 0.000 description 1
- 241001573069 Neisseria meningitidis serogroup Y Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 1
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 1
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 1
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 101150093941 PORA gene Proteins 0.000 description 1
- 108010081690 Pertussis Toxin Proteins 0.000 description 1
- 241000710778 Pestivirus Species 0.000 description 1
- 208000000474 Poliomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 241000605894 Porphyromonas Species 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 description 1
- 101710194807 Protective antigen Proteins 0.000 description 1
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 1
- 101710188053 Protein D Proteins 0.000 description 1
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 229940124875 RabAvert Drugs 0.000 description 1
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 description 1
- 101710132893 Resolvase Proteins 0.000 description 1
- 241000710799 Rubella virus Species 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 241000607762 Shigella flexneri Species 0.000 description 1
- 101710084578 Short neurotoxin 1 Proteins 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 1
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 1
- 241001505901 Streptococcus sp. 'group A' Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000710771 Tick-borne encephalitis virus Species 0.000 description 1
- 101710182223 Toxin B Proteins 0.000 description 1
- 101710182532 Toxin a Proteins 0.000 description 1
- 108010062476 Transferrin-Binding Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010912 Transferrin-Binding Proteins Human genes 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 241000589886 Treponema Species 0.000 description 1
- 241000589884 Treponema pallidum Species 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 241000710886 West Nile virus Species 0.000 description 1
- 241000710772 Yellow fever virus Species 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 229940061720 alpha hydroxy acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001280 alpha hydroxy acids Chemical class 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical class O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- DIZPMCHEQGEION-UHFFFAOYSA-H aluminium sulfate (anhydrous) Chemical compound [Al+3].[Al+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O DIZPMCHEQGEION-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 229940065181 bacillus anthracis Drugs 0.000 description 1
- 239000000227 bioadhesive Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229940038705 chlamydia trachomatis Drugs 0.000 description 1
- 230000002281 colonystimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006392 deoxygenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 101150046339 fur gene Proteins 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 208000001786 gonorrhea Diseases 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 description 1
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 1
- 229930186900 holotoxin Natural products 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 238000000464 low-speed centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 208000037941 meningococcal disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000003232 mucoadhesive effect Effects 0.000 description 1
- 208000010805 mumps infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- UNEIHNMKASENIG-UHFFFAOYSA-N para-chlorophenylpiperazine Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1N1CCNCC1 UNEIHNMKASENIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011236 particulate material Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 108010021711 pertactin Proteins 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 238000009521 phase II clinical trial Methods 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 description 1
- 239000002745 poly(ortho ester) Substances 0.000 description 1
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 1
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 1
- 239000004632 polycaprolactone Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000056 polyoxyethylene ether Polymers 0.000 description 1
- 229940051841 polyoxyethylene ether Drugs 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 108700004121 sarkosyl Proteins 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 208000013223 septicemia Diseases 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 229940105067 sodium chloride 9 mg/ml Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 230000007332 vesicle formation Effects 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 229940051021 yellow-fever virus Drugs 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/095—Neisseria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/06—Lysis of microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N13/00—Treatment of microorganisms or enzymes with electrical or wave energy, e.g. magnetism, sonic waves
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/22—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Neisseriaceae (F)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
Данное изобретение относится к медицине и фармакологии и может быть использовано для изготовления лекарственного средства для усиления иммунного ответа у пациентов. Настоящий способ получения препарата везикул наружной мембраны из бактерий рода Neisseria предусматривает разрушение оболочки бактерий и сбор везикул наружной мембраны в присутствии ≤0,05% дезоксихолатного детергента, причем бактерии в избыточном количестве экспрессируют TbpA. Изобретение позволяет сохранить важные бактериальные иммуногенные компоненты, в частности (i) защитный поверхностный белок NspA, (ii) белок '287' и (iii) белок '741'. 4 н. и 13 з.п. ф-лы, 2 табл., 3 ил.
Description
Все приведенные в настоящем описании документы полностью включены в него в качестве ссылки.
Область техники
Данное изобретение относится к области получения везикул в целях иммунизации.
Предшествующий уровень техники
Одним из различных подходов к иммунизации против инфекции N.meningitidis является применение везикул наружной мембраны (OMV). Эффективная вакцина OMV против серологической группы В была изготовлена Норвежским национальным институтом общественного здравоохранения [см. ссылку 1], но, хотя указанная вакцина безопасна и предотвращает заболевание менингитом В, ее эффективность ограничена штаммом, используемым для изготовления вакцины.
Вакцина "RIVM" основана на содержащих везикулы шести различных подтипах PorA, и было показано, что она иммуногенна у детей на II фазе клинических испытаний [2].
В ссылке 3 раскрыта вакцина против различных патогенных серологических типов менингококка серологической группы В на основе OMV, которые сохраняют белковый комплекс 65 кДа. В ссылке 4 раскрыта вакцина, содержащая OMV из штаммов менингококков, полученных методами генной инженерии, причем OMV содержали по меньшей мере один белок наружной мембраны класса 1 (ОМР), но не содержали ОМР класса 2/3. В ссылке 5 раскрыты OMV, содержащие ОМР, которые имеют мутации в их поверхностных петлях, и OMV, включающие в себя производные менингококкового липополисахарида (LPS).
В ссылке 6 раскрыты композиции, включающие в себя OMV с добавками белков, связывающих трансферрин (например, TbpA и TbpB), и/или Cu,Zn-супероксиддисмутазы. В ссылке 7 раскрыты композиции, включающие в себя OMV с добавками различных белков. В ссылке 8 раскрыты препараты везикул мембраны, полученные из N.meningitidis модифицированным геном fur.
Так же как серологическая группа В N.meningitidis, везикулы были получены для других бактерий. В ссылке 9 раскрыт способ получения вакцин на основе OMV для менингококка серологической группы А. В ссылках 10 и 11 раскрыты везикулы из N.gonorrhoeae. В ссылке 12 раскрыты препараты из N.Lactamica. Везикулы также получали из Moraxella catarrhalis [13, 14], Shigella flexneri [15, 16], Pseudomonas aeruginosa [15, 16], Porphyromonas gingivalis [17], Treponema pallidum [18], Haemophilus influenzae [19 и 20] и Helicobacter pylori [21].
Один недостаток препаратов везикул бактерий состоит в том, что отсутствуют важные защитные антигены. Для сохранения антигенов, таких как NspA, в препаратах OMV, в ссылке 20 речь идет о том, что экспрессия nspA должна подвергаться стимулирующей регуляции сопутствующим «выбиванием» porA и cps. Целью изобретения является предоставление дополнительных и улучшенных препаратов везикул вместе со способами их изготовления. В частности, целью изобретения является предоставление везикул, которые сохраняют важные бактериальные иммуногенные компоненты из N.meningitidis.
Описание изобретения
Способы с применением препарата менингококковых OMV включают в себя использование детергента во время разрушения бактериальной мембраны [например, см. ссылку 22, где используется дезоксихолатный детергент]. Изобретение основано на удивительном открытии, что разрушение мембраны по существу в отсутствие детергента приводит к получению OMV, которые сохраняют важные бактериальные иммуногенные компоненты, в частности (i) защитный поверхностный белок NspA, (ii) белок '287' и (iii) белок '741'.
Поэтому изобретение предоставляет способ изготовления препарата везикул наружной мембраны из бактерии, где бактериальную мембрану разрушают по существу в отсутствие детергента. Предоставляются также препараты OMV, которые можно получить способами согласно изобретению.
Для получения везикул NspA+ve способ согласно изобретению гораздо проще, чем выполнение множественных генетических манипуляций, как описано в ссылке 20.
Способ согласно изобретению обычно должен включать в себя следующие основные этапы: (а) обработку бактериальных клеток по существу в отсутствие детергента; (b) центрифугирование композиции, полученной на этапе (а), для отделения везикул наружной мембраны от обработанных клеток и клеточного дебриса и сбор надосадочной жидкости; (с) выполнение высокоскоростного центрифугирования надосадочной жидкости, полученной на этапе (b), и сбор везикул наружной мембраны в осадке в пробирке после центрифугирования; (d) повторное диспергирование в пробирке полученного после центрифугирования осадка с этапа (с) в буфере; (е) выполнение второго высокоскоростного центрифугирования в соответствии с этапом (с), сбор везикул наружной мембраны в осадке, полученном в пробирке после центрифугирования, (f) повторное диспергирование осадка, полученного в пробирке после центрифугирования на этапе (е) в водной среде.
Способ может также включать в себя следующие этапы: (g) выполнение стерильной фильтрации по меньшей мере через 2 фильтра с уменьшающимся размером пор повторно диспергированной композиции, полученной на этапе (f); и (h) необязательно включение композиции, полученной на этапе (g), в фармацевтически приемлемый носитель и/или композицию адъюванта.
Этап (а) дает получение везикул наружной мембраны бактерий, и везикулы в целом включают в себя компоненты наружной мембраны по существу в их нативной форме. Преимущество заключается в сохранении компонентов NspA, '287' и '741'.
Этап (b) должен обычно включать в себя центрифугирование примерно при 5000-10000 g в течение до 1 ч.
Этапы (с) и (е) должны обычно включать центрифугирование примерно при 35000-100000 g в течение периода вплоть до 2 ч.
Этапы центрифугирования предпочтительно выполняются при температуре от 2 до 8°С.
Любой подходящий буфер можно использовать на этапе (d), например Трис-буфер, фосфатный буфер, гистидиновый буфер и т.д.
Этап (f) может также включать в себя использование буфера, который может представлять собой такой же буфер, который используется на этапе (d), или может просто включать в себя использование воды (например, воды для инъекций).
Этап (g) предпочтительно заканчивается фильтрованием через фильтр с размером пор примерно 0,2 мкм.
Изобретение также представляет собой композицию везикул N.meningitidis, отличающуюся тем, что везикулы содержат (i) белок NspA, (ii) белок '287' и (iii) белок '741'.
Бактерия
Бактерия, из которой получают OMV, может быть грамположительной, но она предпочтительно является грамотрицательной. Бактерия может быть из рода Moraxella, Shigella, Pseudomonas, Treponema, Porphyromonas или Helicobacter (предпочтительные виды см. выше), но предпочтительно она из рода Neisseria. Предпочтительными видами Neisseria являются N.meningitidis и N.gonorrhoeae. В пределах N.meningitidis можно использовать любую из серологических групп А, С, W135 и Y, но предпочтительно получать везикулы из серологической группы В. Предпочтительными штаммами в пределах серогруппы В являются МС58, 2996, Н4476 и 394/98.
Для снижения пирогенной активности предпочтительно, чтобы бактерия имела низкие уровни эндотоксина (LPS). Подходящие мутантные бактерии известны, например, мутантная Neisseria [23] и мутантная Helicobacter [24]. Способ получения наружных мембран с истощенными запасами LPS грамотрицательных бактерий раскрыты в ссылке 25.
Бактерия может представлять собой бактерию дикого типа или она может представлять собой рекомбинантную бактерию. Предпочтительные рекомбинантные бактерии избыточно экспрессируют (относительно соответствующего штамма дикого типа) иммуногены, такие как NspA, '287' и '741', TbpA, TbpB, супероксиддисмутаза [6] и т.д. Бактерия может экспрессировать более чем один белок наружной мембраны класса I PorA, например, 2, 3, 4, 5 или 6 подтипов PorA: Р1.7,16; Р1.5,2; Р1.19,15; Р1.5 с,10; Р1.12,13; и Р1.7h,4 [например, ссылки 26, 27].
Способ согласно изобретению обычно должен включать в себя начальный этап культивирования бактерий, необязательно с последующим этапом концентрирования культивированных клеток.
Разрушение мембраны
Разрушение мембраны для образования везикул выполняется по существу в отсутствие детергента.
В частности, разрушение мембраны может выполняться по существу в отсутствие дезоксихолатного детергента, причем присутствие других детергентов необязательно.
Разрушение мембраны может выполняться по существу в отсутствие ионного детергента, причем присутствие неионного детергента необязательно. Альтернативно, оно может выполняться по существу в отсутствие неионного детергента, причем присутствие ионного детергента необязательно. В некоторых вариантах реализации не присутствует ни ионный, ни неионный детергент.
Этапы после разрушения мембраны и образования везикул могут включать в себя использование детергента. Таким образом, способ, при котором разрушение мембраны происходит в отсутствие детергента, но детергент добавляется к полученным везикулам позднее, входит в объем данного изобретения.
Термин «по существу в отсутствие» означает, что рассматриваемый детергент присутствует в концентрации не более чем 0,05% (например, ≤0,025%, ≤0,015%, ≤0,010%, ≤0,005%, ≤0,002%, ≤0,001% или даже 0%) во время разрушения мембраны. Таким образом, способы, где микроколичества детергента присутствуют во время получения везикул, не исключаются.
Разрушение мембраны в отсутствие детергента может выполняться на интактных бактериях с использованием физических методик, например, обработки ультразвуком, гомогенизации, микрофлюидизации, кавитации, осмотического шока, помола, французского пресса, перемешивания и т.д.
Везикулы
Способы согласно изобретению продуцируют везикулы наружной мембраны. OMV получают из наружной мембраны культивированных бактерий. Их можно получить из бактерий, выращенных в бульоне или в твердой культуральной среде, предпочтительно путем отделения бактериальных клеток от культуральной среды (например, путем фильтрации или высокоскоростного центрифугирования для осаждения клеток), лизирования клеток (без детергента) и отделения фракции наружной мембраны от цитоплазматических молекул (например, путем фильтрации, дифференциального осаждения или агрегации наружных мембран и/или OMV, способами аффинного разделения с использованием лигандов, которые специфически распознают молекулы наружной мембраны, или высокоскоростного центрифугирования, которое осаждает наружные мембраны и/или OMV.
OMV можно отличить от микровезикул (MV [28]) и нативных OMV ('NOMV' [66]), которые представляют собой естественно встречающиеся везикулы мембраны, которые спонтанно образуются во время роста бактерий, и которые высвобождаются в культуральную среду. MV можно получить путем культивирования Neisseria в бульонной культуральной среде путем отделения цельных клеток от бульонной культуральной среды (например, путем фильтрации или низкоскоростного центрифугирования для осаждения только клеток, а не более мелких везикул), а затем сбора MV, которые присутствуют в среде, лишенной клеток (например, путем фильтрации, дифференциального осаждения или агрегации MV, высокоскоростного центрифугирования для осаждения MV). Штаммы для использования при продукции MV можно в целом отобрать на основании количества MV, продуцированного в культуре. В ссылках 29 и 30 описаны Neisseria с высокой продукцией MV.
Сохраненные бактериальные иммуногенные компоненты
По существу отсутствующий детергент в способах согласно изобретению приводит к получению препаратов везикул, которые сохраняют иммуногенные компоненты бактериальной поверхности, которые при использовании основанных на детергентах способов предшествующего уровня техники иначе были бы утрачены или содержание которых уменьшилось бы. В N.meningitidis 3 иммуногена, которые преимущественно сохраняются при применении изобретения, включают в себя, не ограничиваясь ими: (1) NspA; (2) белок '741' и (3) белок '287'.
NspA (белок А поверхности Neisseria) раскрыт в ссылках 31-37 и в виде последовательностей SEQ ID 4008-4033 из ссылки 38. Это перспективная вакцина для предотвращения заболевания, вызванного менингококками. Она очень сохранна у различных штаммов. Однако несмотря на существовавшую надежду, в настоящее время считается, что NspA сам по себе не будет адекватным защитным антигеном, и его нужно будет вводить с дополнительными антигенами [например, ссылка 36 и пример 11 из ссылки 38]. Было обнаружено, что NspA удалялся при использовании способов получения предшествующего уровня техники на основе детергента. Однако в соответствии с настоящим изобретением, NspA может сохраняться в везикулах. Такие везикулы NspA+ve имеют преимущество, потому что комбинацию двух известных активных иммуноглобулинов (т.е. везикул + NspA) получают в одном способе при усилении каждым иммуногеном эффективности другого.
Белок '741' раскрыт в виде 'NMB1870' в ссылке 39 (GenBank: AAF2204, GI:7227128). Он также раскрыт в ссылках 40 и 41. Он вызывает продукцию сильных бактерицидных антител. Было обнаружено, что белок '741' частично удаляется в носителях, полученных способами на основе детергентов предшествующего уровня техники. Однако в соответствии с настоящим изобретением, '741' может сохраняться в везикулах. Такие везикулы NspA+ve имеют преимущество, потому что комбинацию двух известных активных иммуноглобулинов (т.е. везикул+741) получают в едином процессе, при усилении каждым иммуногеном эффективности другого.
Белок '287' раскрыт под видом 'NMB2132' в ссылке 39 (GenBank: AAF2240, GI:7227388). Он также раскрыт в ссылках 40 и 42. Он вызывает продукцию сильных бактерицидных антител. Белок '287' обычно не присутствует в везикулах, полученных способами на основе детергентов предшествующего уровня техники, и ранее предлагалось, что для предотвращения его удаления к препаратам OMV можно добавлять 287 [43]. Однако в соответствии с настоящим изобретением, '287' может сохраняться в везикулах. Такие везикулы 287+ve имеют преимущество, потому что комбинацию двух известных активных иммуноглобулинов (т.е. везикул + 287) получают в едином процессе, при усилении каждым иммуногеном эффективности другого.
Предпочтительный NspA (а) имеет по меньшей мере идентичность последовательности α% с аминокислотной последовательностью GI:1518522 и/или (b) включает в себя фрагмент по меньшей мере χ аминокислот из аминокислотной последовательности GI:1518522. Предпочтительный '741' (а) имеет по меньшей мере идентичность последовательности b% с аминокислотной последовательностью GI:7227128 и/или (b) включает в себя фрагмент по меньшей мере из χ аминокислот из аминокислотной последовательности GI:7227128. Предпочтительный '287' (а) имеет по меньшей мере идентичность последовательности с% с аминокислотной последовательностью GI:7227388 и/или (b) включает в себя фрагмент по меньшей мере из χ аминокислот из аминокислотной последовательности GI:7227388. Величины а, b и с независимы друг от друга, но каждая величина составляет по меньшей мере 70 (например, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5 или 100). Величины x, y и z независимы друг от друга, но каждая величина составляет, по меньшей мере, 8 (например, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250 и т.д.). Фрагменты предпочтительно включают в себя эпитопы.
Предпочтительные белки NspA, 287 и 741 по существу сохраняют способность белков дикого типа (как обнаружено в интактных бактериях) вызывать продукцию бактерицидных антител у пациентов.
Иммуногенные фармацевтические композиции
Способ согласно изобретению обеспечивает получение везикул. Для введения пациенту везикулы предпочтительно составлены в виде иммуногенных композиций, а предпочтительнее, в виде композиций, подходящих для использования в качестве вакцины для человека (например, детей или взрослых). Вакцины согласно изобретению могут быть или профилактическими (т.е. для предотвращения инфекции), или терапевтическими (т.е. для лечения заболевания после инфекции), но обычно профилактическими.
Композиция согласно изобретению является предпочтительно стерильной.
Композиция согласно изобретению является предпочтительно лишенной пирогенов.
Композиция согласно изобретению в целом имеет рН от 6,0 до 7,0, предпочтительнее, от 6,3 до 6,9, например, 6,6±0,2. Композиция предпочтительно забуферена при данном рН.
Другие компоненты, подходящие для введения человеку, раскрыты в ссылке 44.
Композиция должна в целом включать в себя адъювант. Предпочтительные адъюванты для усиления эффективности композиции включают в себя, не ограничиваясь ими, (А) MF59 (5% Squalene, 0,5% Tween 80 и 0,5% Span 85, составленные в субмикронные частицы с использованием микрофлюидизаторов) [см. главу 10 ссылки 45; см. также ссылку 46]; (В) микрочастицы (т.е. частицы диаметром от ~100 нм до ~150 мкм, предпочтительнее, диаметром от ~200 нм до ~30 мкм, а наиболее предпочтительно, диаметром от ~500 нм до ~10 мкм), образованные из материалов, которые являются биологически разлагаемыми и нетоксичными (например, поли(α-гидроксикислоту), полигидроксимасляную кислоту, сложный полиортоэфир, полиангидрид, поликапролактон и т.д.), причем предпочтительнее поли(лактид-когликолид), необязательно имеющий заряженную поверхность (например, путем добавления катионного, анионного или неионного детергента, такого как SDS (отрицательного) или СТАВ (положительного) [например, ссылки 47 и 48]); [см. главу 23 ссылки 45], (С) липосомы [см. главы 13 и 14 ссылки 45]; (D) ISCOM [см. главу 23 ссылки 45], которые могут быть лишены дополнительного детергента [49]; (E) SAF, содержащий 10% Squalane, 0,4% Tween 80, 5% плюроник-блок-полимер L121 и thr-MDP, или микрофлюидизированный в субмикронную эмульсию, или перемешанный в вихревой мешалке для создания эмульсии с частицами большего размера [см. главу 12 ссылки 45]; (F) систему адъюванта Ribi™ (RAS), (Ribi Immunochem), содержащую 2% Squalane, 0,2% Tween 80, и один или несколько компонентов стенок бактериальных клеток из группы, состоящей из монофосфориллипида А (MPL), димиколата трегалозы (TDM) и каркаса клеточной стенки (CWS), предпочтительно, MPL+CWS (Detox™); (G) адъюванты сапонина, такие как QuilA или QS21 [см. главу 22 ссылки 45], также известные как Stimulon™; (H) хитозан [например, 50]; (I) полный адъювант Фрейнда (CFA) и неполный адъювант Фрейнда (IFA); (J) цитокины, такие как интерлейкины (например, IL-1, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-12 и т.д.), интерфероны (например, интерферон-γ), колониестимулирующий фактор макрофагов, фактор некроза опухоли и т.д. [см. главы 27 и 28 ссылки 45]; (K) сапонин (например, QS21)+3dMPL+IL-12 (необязательно + стерин) [51]; (L) монофосфориллипид А (MPL) или 3-О-дезацилированный MPL (3dMPL) [например, глава 21 ссылки 45]; (М) комбинации 3dMPL, например, с QS21 и/или эмульсиями масло-в-воде [52]; (N) олигонуклеотиды, содержащие мотивы CpG [53], т.е. содержащие по меньшей мере один динуклеотид CG, с 5-метилцитозином, необязательно используемым вместо цитозина; (О) простой полиоксиэтиленовый эфир или сложный полиоксиэтиленовый эфир [54]; (P) поверхностно-активный сложный полиоксиэтиленовый эфир сорбитана в комбинации с октоксинолом [55] или поверхностно-активный простой или сложный полиоксиэтиленалкиловый эфир в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным неионным поверхностно-активным веществом, таким как октоксинол [56]; (Q) иммуностимулирующий олигонуклеотид (например, олигонуклеотид CpG) и сапонин [57]; (R) иммуностимулятор и частицу соли металла [58]; (S) сапонин и эмульсию масло-в-воде [59]; (T) термолабильный энтеротоксин E.coli ("LT") или его детоксифицированные мутанты, такие как мутанты К63 или R72 [например, глава 5 ссылки 60]; (U) холерный токсин («СТ») или его детоксифицированные мутанты [например, глава 5 ссылки 60]; (V) двунитевую РНК; (W) соли алюминия, такие как гидроокиси алюминия (включая оксигидроокиси), фосфаты алюминия (включая гидроксифосфаты), сульфат алюминия и т.д. [главы 8 и 9 в ссылке 61]; (X) имитаторы монофосфорилового липида А, такие как производные фосфата аминоалкилглюкозаминида, например, RC-529 [62]; (Y) полифосфазен (РСРР); или (Z) биоадгезивное вещество [63], такое как микросферы эстерифицированной гиалуроновой кислоты [64], или мукоадгезивное вещество, выбранное из группы, состоящей из поперечно сшитых производных поли(акриловой кислоты), поливинилового спирта, поливинилпирролидона, полисахаридов и карбоксиметилцеллюлозы. Можно также использовать другие вещества, которые действуют в качестве иммуностимулирующих средств для усиления эффективности композиции [например, см. главу 7 ссылки 45]. Соли алюминия (особенно фосфаты и/или гидроокиси алюминия) представляют собой предпочтительные адъюванты для парентеральной иммунизации. Мутантные токсины представляют собой адъюванты слизистой мембраны.
Везикулы в композициях согласно изобретению должны присутствовать в «иммунологически эффективных количествах», т.е. введение такого количества индивиду либо в однократной дозе, либо в виде части серии введений эффективно для лечения или предотвращения заболевания. Данное количество варьируется, в зависимости от здоровья и физического состояния индивида, которого предстоит лечить, возраста, таксономической группы индивида, которого предстоит лечить (например, нечеловекообразного примата, примата и т.д.), способности иммунной системы индивида синтезировать антитела, степени необходимой защиты, состава вакцины, оценки медицинской ситуации лечащим врачом, а также других релевантных факторов. Ожидается, что это количество подпадет под относительно широкий диапазон, который можно определить посредством стандартных испытаний. Дозировка лечения может представлять собой схему с однократной дозой или схему с множеством доз (например, включая бустерные дозы). Вакцину можно вводить в сочетании с другими иммунорегуляторными средствами.
Обычно композиции согласно изобретению получают в виде препаратов для инъекций. Прямая доставка композиций обычно осуществляется парентеральной (например, путем инъекции, либо подкожно, внутрибрюшинно, внутривенно, либо внутримышечно, либо путем доставки в интерстициальное пространство ткани), либо через слизистую оболочку (например, перорально или интраназально [65, 66]). Композиции можно также вводить в очаг поражения.
После составления композиции согласно изобретению можно вводить непосредственно индивиду. Индивиды, подлежащие лечению, могут представлять собой животных; в частности, можно лечить человека. Вакцины особенно полезны для вакцинации детей и подростков.
Композиция может включать в себя везикулы из нескольких серологических подтипов N.meningitidis [28]. Аналогичным образом, композиция может включать в себя несколько типов везикул, например как MV, так и OMV.
Так же как везикулы, композиция согласно изобретению может включать в себя другие антигены. Например, композиция может включать в себя один или несколько из следующих дополнительных антигенов:
- антигены из Helicobacter pylori, такие как CagA [67-70], VacA [71, 72], NAP [73, 74, 75], HopX [например, 76], HopY [например, 76] и/или уреаза;
- сахаридный антиген из N.meningitidis серогруппы А, С, W135 и/или Y, такой как олигосахарид, раскрытый в ссылке 77, из серогруппы С [см. также ссылку 78], или олигосахариды ссылки 79;
- сахаридный антиген из Streptococcus pneumoniae [например, 80, 81, 82];
- антиген из вируса гепаптита А, такой как инактивированный вирус [например, 83, 84];
- антиген из вируса гепаптита В, такой как поверхностные и/или сердцевинные антигены [например, 84, 85];
- антиген из Bordetella pertussis, такой как коклюшный голотоксин (РТ) и нитевидный гемагглютинин (FHA) из B.pertussis, необязательно также в комбинации с пертактином и/или агглютиногенами 2 и 3 [например, ссылки 86 и 87];
- дифтерийный антиген, такой как дифтерийный токсоид [например, глава 3 ссылки 88], например, мутант CRM197 [например, 89];
- столбнячный антиген, такой как столбнячный токсоид [например, глава 4 ссылки 108];
- сахаридный антиген из Haemophilus influenzae B [например, 78];
- антиген из вируса гепатита С [например, 90];
- антиген из N.gonorrhoeae [например, 91, 92, 93, 94];
- антиген из Chlamydia pneumoniae [например, ссылки 95-101];
- антиген из Chlamydia trachomatis [например, 102];
- антиген из Porphyromonas gingivalis [например, 103];
- антиген(ы) полиомиелита [например, 104, 105], такой как OPV, или, предпочтительно, IPV;
- антиген(ы) бешенства [например, 106], такой как лиофилизированный инактивированный вирус [например, 107, RabAvert™];
- антигены вирусов кори, эпидемического паротита и/или краснухи [например, главы 9, 10 и 11 ссылки 108];
- антиген(ы) вируса гриппа [например, глава 19 ссылки 108], такие как гемагглютинин и/или поверхностные белки нейраминидазы;
- антиген из Moraxella catarrhalis [например, 109];
- белковый антиген из Streptococcus agalactiae (стрептококк группы В) [например, 110, 111];
- сахаридный антиген из Streptococcus agalactiae (стрептококк группы В);
- антиген из Streptococcus pyrogenes (стрептококк группы А) [например, 111, 112, 113];
- антиген из Streptococcus aureus [например, 114];
- антиген из Bacillus anthracis [например, 115, 116, 117];
- антиген из вируса из семейства Flaviviridae (род Flavivirus), такого как вирус желтой лихорадки, вирус японского энцефалита, 4 серотипа вируса денге, вируса клещевого энцефалита, вируса западного Нила;
- антиген пестивируса, такого как классический вирус свиной лихорадки, вирус коровьей вирусной диареи и/или вирус пограничного заболевания;
- антиген парвовируса, например, из парвовируса В19;
- белок приона (например, белок приона CJD);
- амилоидный белок, такой как пептид бета [118];
- раковый антиген, такой как антигены, перечисленные в табл.1 ссылки 119, или в табл.3 и 4, ссылки 120.
Композиция может включать в себя один или несколько из указанных дополнительных антигенов.
Токсические белковые антигены можно при необходимости детоксифицировать (например, дектоксификация коклюшного токсина химическими и/или генетическими средствами [87]).
Когда дифтерийный антиген включается в композицию, предпочтительно также включить столбнячный антиген и коклюшный антиген. Аналогичным образом, когда включен столбнячный антиген, предпочтительно также включить дифтерийный и коклюшный антигены. Аналогичным образом, когда включен коклюшный антиген, предпочтительно также включить дифтерийный и столбнячный антигены. Таким образом, предпочтительны комбинации DTP (дифтерийного, столбнячного и коклюшного антигенов).
Сахаридные антигены представлены предпочтительно в форме конъюгатов. Белки-носители для конъюгатов включают в себя белок наружной мембраны N.meningitidis [121], синтетические пептиды [122, 123], белки теплового шока [124, 125], белки коклюшного возбудителя [126, 127], белок D из H.influenzae [128], цитокины [129], лимфокины [129], гормоны [129], ростовые факторы [129], токсин А и В из C.difficile [130], захватывающие железо белки [131] и т.д. Предпочтительным белком-носителем является дифтерийный токсоид CRM197 [132].
Антигены серогруппы В N.meningitidis можно также добавлять к композициям OMV. В частности, можно добавить белковый антиген, такой как антиген, раскрытый в ссылках 133-139.
Антигены в композиции должны обычно присутствовать в концентрации по меньшей мере 1 мкг/мл каждый. В целом концентрация любого данного антигена должна быть достаточной для того, чтобы вызвать иммунную реакцию против указанного антигена.
В качестве альтернативы использованию белковых антигенов, в композиции согласно изобретению можно использовать нуклеиновую кислоту, кодирующую антиген. Таким образом, белковые компоненты композиций согласно изобретению можно заменить нуклеиновой кислотой (предпочтительно, ДНК, например, в форме плазмиды), которая кодирует белок.
Способы лечения пациентов
Изобретение обеспечивает везикулы согласно изобретению для применения в качестве лекарственных средств.
Изобретение также обеспечивает способ усиления иммунного ответа у пациента, включающий в себя введение пациенту композиции согласно изобретению. Иммунный ответ предпочтительно защищает против менингококкового заболевания и может включать в себя гуморальный иммунный ответ и/или клеточный иммунный ответ. Пациентом предпочтительно является ребенок.
Способ может повысить вторичный иммунный ответ у пациента, который уже был подвергнут первичной иммунизации против N.meningitidis. Схемы подкожной и интраназальной первичной/вторичной иммунизации для OMV раскрыты в ссылке 65.
Изобретение также предполагает применение везикул согласно изобретению при изготовлении лекарственного средства для усиления иммунного ответа у пациента. Лекарственное средство представляет собой предпочтительно иммуногенную композицию (например, вакцину). Лекарственное средство предпочтительно предназначено для предотвращения и/или лечения заболевания, вызванного Neisseria (например, вызывающими менингит, септицемию, гонорею и т.д.).
Способы и виды применения изобретения могут включать в себя введение везикул из нескольких серологических подтипов N.meningitidis [например, ссылка 28].
Композиция OMV
Изобретение обеспечивает композицию, содержащую везикулы наружной мембраны менингококков, адъювант гидроокиси алюминия, гистидиновый буфер и хлорид натрия, где (а) концентрация хлорида натрия больше чем 7,5 мг/мл; и/или (b) концентрация OMV составляет менее чем 100 мкг/мл.
Концентрация хлорида натрия составляет предпочтительно больше чем 8 мг/мл, а предпочтительнее, примерно 9 мг/мл.
Концентрация OMV составляет предпочтительно менее чем 75 мкг/мл, например, примерно 50 мкг/мл.
Гистидиновый буфер обеспечивает предпочтительно диапазон от рН 6,3 до рН 6,7, например, рН 6,5.
Адъювант можно использовать в концентрации примерно 3,3 мг/мл (выраженной в виде концентрации Al3+).
Определения
Ссылки на степень идентичности (в процентах) последовательностей между двумя аминокислотными последовательностями означают, что при выравнивании процентное содержание аминокислот одинаково при сравнении двух последовательностей. Указанное выравнивание и процентную гомологию или идентичность последовательностей можно определить с использованием пакетов программного обеспечения, известных в данной области, например тех, которые описаны в разделе 7.7.18 ссылки 140. Предпочтительный ряд определяется алгоритмом поиска гомологии Смита-Уотермана с использованием поиска аффинного гэпа со штрафом за «открытый гэп», составляющим 12, и штрафом за «протяженность гэпа», составляющим 2, матрицы BLOSUM из 62. Алгоритм поиска гомологии Смита-Уотермана хорошо известен и раскрыт в ссылке 141.
Термин «охватывающий» означает «включающий в себя», а также «состоящий», например композиция, «включающая в себя» Х, может либо состоять исключительно из Х, либо может включать в себя что-то дополнительное, например X+Y.
Термин «примерно» в отношении числовой величины χ означает, например, χ±10%.
Слово «по существу» не исключает «полностью», например, композиция, которая «по существу свободна» от Y, может быть полностью свободна от Y. При необходимости, слово «по существу» может быть опущено из определения изобретения.
Краткое описание чертежей
На Фиг.1 и 2 показано присутствие/отсутствие (1) белка '287' и (2) белка '741' в бактерии («ТОТ») и везикулах наружной мембраны ("OMV"), полученных из штаммов МС58, Н4476 и 394/98 N.meningitidis. Стрелка показывает положение '287' на фиг.1 и '741' на фиг.2.
На фиг.3 показаны аминокислотные последовательности, занесенные в банк генов GenBank GI:7227128, GI:7227388 и GI:1518522 от 29 августа 2002 г.
Способы осуществления изобретения
Получение OVM
OMV получали или «норвежскими» способами предшествующего уровня техники (штаммы Н4476 и 394/98), или следующим способом (штамм МС58):
- Бактерии из 2-5 чашек собирают в 10 мл буфера 10 мМ Трис-HCl (рН 8,0) и убивают нагреванием при 56°С в течение 45 мин. Образцы затем обрабатывают ультразвуком на льду (рабочий цикл 50 в течение 10 мин наконечником на 6/7) для разрушения мембран.
- Клеточный дебрис удаляют центрифугированием при 5000 g в течение 30 мин при 4°С или 10000 g в течение 10 мин.
- Надосадочную жидкость повторно центрифугируют при 50000 g в течение 75 мин при 4°С.
- Осадок в пробирке после центрифугирования повторно суспендируют в 7 мл 2% N-лауроилсаркозината (саркозил) в 10 мл 10 мМ Трис-HCl (рН 8,0) в течение 20 мин при комнатной температуре для солюбилизации цитоплазматических мембран.
- Образец центрифугируют при 10000 g в течение 10 мин для удаления материалов в виде частиц, а надосадочную жидкость центрифугируют при 75000 g в течение 75 мин при 4°С. Образец промывают в 10 мМ Трис-HCl (рН 8,0) и центрифугируют при 75000 g в течение 75 мин.
- Осадок в пробирке после центрифугирования повторно суспендируют в 10 мМ Трис-HCl (рН 8,0) или дистиллированной воде.
Бактерии и препараты OVM тестировали методом вестерн-блоттинга на присутствие NspA, 287 и 741 (фиг.1 и 2); полученные результаты сведены в следующую таблицу:
| Штамм | Детергент | NspA | 287 | 741 | |||
| Бактерии | OMV | Бактерии | OMV | Бактерии | OMV | ||
| MC58 | - | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
| H44/76 | + | +++ | -[20] | +++ | - | +++ | + |
| 394/98 | + | +++ | n.d. | +++ | ++ | +++ | + |
В отличие от способов предшествующего уровня техники на основе детергентов, отсутствие детергента приводит к сохранению NspA и позволяет избежать потери 287 и 741.
Составление композиции OVM, полученных из новозеландского штамма MenB
OVM получают из штамма 394/98 серогруппы В N.meningitidis. Их включали в композиции двумя различными путями, причем компоненты имеют следующие концентрации:
| Композиция «А» | Композиция «В» | |
| OVM | 50 мкг/мл | 50 мкг/мл |
| Адъювант гидроокиси алюминия | 3,3 мкг/мл | 3,3 мкг/мл |
| Сахароза | 3% | - |
| Гистидиновый буфер, рН 6,5 | - | 5 мМ |
| Хлорид натрия | - | 9 мг/мл |
Было обнаружено, что композиция «В» в иммунологическом отношении лучше композиции «А». Композиция «В» отличается от композиции, раскрытой в ссылке 142, тем, что в ней содержится половина концентрации OMV, выше концентрации NaCl, и она несколько отличается значением рН.
Следует понимать, что изобретение было описано только в качестве примера, и модификации могут производиться в пределах объема и сущности изобретения.
Claims (17)
1. Способ получения препарата везикул наружной мембраны (OMV) из бактерий рода Neisseria, предусматривающий разрушение оболочки бактерий и сбор везикул наружной мембраны, отличающийся тем, что бактериальную оболочку разрушают в присутствии ≤0,05% дезоксихолатного детергента, а бактерии в избыточном количестве экспрессируют TbpA.
2. Способ по п.1, согласно которому бактериальную мембрану разрушают, по существу, в отсутствие какого бы то ни было детергента.
3. Способ по п.1 или 2, предусматривающий следующие основные стадии: (а) обработку бактериальных клеток, по существу, в отсутствие детергента; (b) центрифугирование композиции, полученной на стадии (а), для отделения везикул наружной мембраны от обработанных клеток и клеточного дебриса и сбор надосадочной жидкости; (с) выполнение высокоскоростного центрифугирования надосадочной жидкости, полученной на стадии (b), и сбор везикул наружной мембраны в осадке, полученном после центрифугирования; (d) повторное диспергирование осадка, полученного на стадии (с), в буфере; (е) выполнение второго высокоскоростного центрифугирования, в соответствии со стадией (с), сбор везикул наружной мембраны в осадке, полученном после центрифугирования; (f) повторное диспергирование осадка, полученного на стадии (е), в водной среде.
4. Способ по п.3, где стадия (b) включает в себя центрифугирование примерно при 5000-10000 g в течение периода вплоть до 1 ч, а стадии (с) и (е) включают в себя центрифугирование примерно при 50000 g в течение 75 мин.
5. Способ по п.1 или 2, где разрушение мембраны производится путем обработки ультразвуком.
6. Способ по п.3, где буфер, используемый на стадии (d) и/или стадии (f), представляет собой Трис-буфер.
7. Способ по п.1, где бактерия представляет собой N.meningitidis или N.gonorrhoeae.
8. Способ по п.7, где Neisseria meningitidis относится к серогруппе В.
9. Способ по п.3, где бактерия представляет собой Neisseria meningitidis серогруппы В штамма Н4476.
10. Способ получения иммуногенной композиции, содержащий препарат везикул наружной мембраны из бактерий рода Neisseria, полученный способом по любому из пп.1-3, дополнительно включающий в себя стадию составления иммунологически эффективного количества везикул наружной мембраны в качестве иммуногенной композиции.
11. Препарат везикул наружной мембраны из бактерий рода Neisseria meningitidis, который можно получить способом по любому из пп.1-3.
12. Иммуногенная композиция везикул наружной мембраны из бактерий рода Neisseria meningitidis, отличающаяся тем, что включает в себя эффективное количество везикул наружной мембраны, указанных в п.1, содержащих (i) белок NspA, (ii) белок '287' и (iii) белок '741'; приблизительно 3,3 мг/мл гидроокиси алюминия в качестве адъюванта, адъюванта, более 7,5 мг/мл хлорида натрия и гистидиновый буфер в количестве, обеспечивающем диапазон рН приблизительно от 6,3 до 6,7.
13. Препарат по п.11, отличающийся тем, что композиция является стерильной и/или лишенной пирогенов и/или забуференной при рН от 6,0 до 7,0.
14. Препарат по п.11 для использования в качестве лекарственного средства.
15. Препарат по п.11, используемый в изготовлении лекарственного средства для усиления иммунного ответа у пациента.
16. Препарат по п.13 для использования в качестве лекарственного средства.
17. Препарат по п.13, используемый в изготовлении лекарственного средства для усиления иммунного ответа у пациента.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB0220194.5A GB0220194D0 (en) | 2002-08-30 | 2002-08-30 | Improved vesicles |
| GB0220194.5 | 2002-08-30 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2005108994A RU2005108994A (ru) | 2006-02-10 |
| RU2325184C2 true RU2325184C2 (ru) | 2008-05-27 |
Family
ID=9943238
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2005108994/15A RU2325184C2 (ru) | 2002-08-30 | 2003-09-01 | Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20060166344A1 (ru) |
| EP (5) | EP2258390A1 (ru) |
| JP (3) | JP2006503822A (ru) |
| CN (2) | CN102188700A (ru) |
| AT (1) | ATE366117T1 (ru) |
| AU (1) | AU2003263534B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0314094A8 (ru) |
| CA (1) | CA2497165C (ru) |
| CY (3) | CY1107737T1 (ru) |
| DE (1) | DE60314756T2 (ru) |
| DK (3) | DK1864679T3 (ru) |
| ES (4) | ES2520392T3 (ru) |
| FR (1) | FR13C0046I2 (ru) |
| GB (1) | GB0220194D0 (ru) |
| LU (1) | LU92239I2 (ru) |
| MX (1) | MXPA05002316A (ru) |
| NZ (1) | NZ538673A (ru) |
| PT (3) | PT1864679E (ru) |
| RU (1) | RU2325184C2 (ru) |
| SI (2) | SI2258389T1 (ru) |
| WO (1) | WO2004019977A2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2607021C2 (ru) * | 2011-07-07 | 2017-01-10 | Де Стат Дер Недерланден, Верт. Дор Де Министер Ван Ввс | Способ бездетергентного получения везикул наружной мембраны грамотрицательной бактерии |
Families Citing this family (84)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SG152917A1 (en) * | 1998-01-14 | 2009-06-29 | Chiron Srl | Neisseria meningitidis antigens |
| ES2278446T3 (es) | 1998-05-29 | 2007-08-01 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Vacunas combinadas b/c contra la meningitis. |
| EP1860191A3 (en) | 1999-05-19 | 2008-02-13 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Combination neisserial compositions |
| GB9928196D0 (en) | 1999-11-29 | 2000-01-26 | Chiron Spa | Combinations of B, C and other antigens |
| EP2275129A3 (en) | 2000-01-17 | 2013-11-06 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Outer membrane vesicle (OMV) vaccine comprising N. meningitidis serogroup B outer membrane proteins |
| ES2519440T3 (es) | 2000-07-27 | 2014-11-07 | Children's Hospital & Research Center At Oakland | Vacunas para la protección de amplio espectro contra enfermedades causadas por Neisseria meningitidis |
| MX339524B (es) | 2001-10-11 | 2016-05-30 | Wyeth Corp | Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica. |
| GB0227346D0 (en) | 2002-11-22 | 2002-12-31 | Chiron Spa | 741 |
| GB0316560D0 (en) | 2003-07-15 | 2003-08-20 | Chiron Srl | Vesicle filtration |
| GB0323103D0 (en) | 2003-10-02 | 2003-11-05 | Chiron Srl | De-acetylated saccharides |
| CU23377A1 (es) * | 2003-11-04 | 2009-05-28 | Ct De Ingenieria Genetica Y Biotecnologia | Metodo para la incorporacion de antigenos en vesiculas de membrana externa de bacterias y formulaciones resultantes |
| GB0416120D0 (en) | 2004-07-19 | 2004-08-18 | Health Prot Agency | Stable compositions containing OMV's |
| EP1789094B1 (en) | 2004-08-13 | 2014-12-10 | MARSHALL, Barry J. | Bacterial delivery system |
| US8029777B2 (en) * | 2004-08-13 | 2011-10-04 | Marshall Barry J | Helicobacter system and uses thereof |
| GB0419627D0 (en) | 2004-09-03 | 2004-10-06 | Chiron Srl | Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins |
| GB0424092D0 (en) | 2004-10-29 | 2004-12-01 | Chiron Srl | Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins |
| DK2682126T3 (en) | 2005-01-27 | 2017-02-27 | Children's Hospital & Res Center At Oakland | GNA1870-based vesicle vaccines for broad-spectrum protection against diseases caused by Neisseria meningitidis |
| US8062644B2 (en) * | 2005-02-18 | 2011-11-22 | Novartis Vaccines & Diagnostics Srl. | Immunogens from uropathogenic Escherichia coli |
| GB2441094B (en) * | 2005-05-19 | 2010-11-03 | Edward Jenner Inst For Vaccine | Methods for treatment and prevention of infection |
| PL2878307T3 (pl) | 2005-06-27 | 2020-01-31 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Kompozycja immunogenna |
| GB0524066D0 (en) | 2005-11-25 | 2006-01-04 | Chiron Srl | 741 ii |
| AU2016204760A1 (en) * | 2006-04-26 | 2016-07-28 | Wyeth Llc | Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions |
| AU2014268186C1 (en) * | 2006-04-26 | 2017-12-07 | Wyeth Llc | Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions |
| AR064642A1 (es) | 2006-12-22 | 2009-04-15 | Wyeth Corp | Polinucleotido vector que lo comprende celula recombinante que comprende el vector polipeptido , anticuerpo , composicion que comprende el polinucleotido , vector , celula recombinante polipeptido o anticuerpo , uso de la composicion y metodo para preparar la composicion misma y preparar una composi |
| NZ584683A (en) | 2007-10-19 | 2012-05-25 | Novartis Ag | Neisseria meningitidis serogroup B vaccine formulations |
| US9579372B2 (en) | 2008-02-21 | 2017-02-28 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Meningococcal fHBP polypeptides |
| GB0819633D0 (en) * | 2008-10-25 | 2008-12-03 | Isis Innovation | Composition |
| GB0822634D0 (en) | 2008-12-11 | 2009-01-21 | Novartis Ag | Meningitis vaccines |
| BRPI0923006A2 (pt) | 2008-12-17 | 2016-03-08 | Novartis Ag | vacinas meningococicas incluindo receptor de hemoglobina |
| ES2797504T3 (es) | 2009-03-24 | 2020-12-02 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Proteína de enlace del factor H meningocócico utilizada como adyuvante |
| NZ595361A (en) * | 2009-04-30 | 2013-09-27 | Childrens Hosp & Res Ct Oak | Chimeric factor h binding proteins (fhbp) and methods of use |
| CN102762226A (zh) | 2009-06-10 | 2012-10-31 | 诺华有限公司 | 含苯并萘啶的疫苗 |
| WO2011022229A2 (en) * | 2009-08-20 | 2011-02-24 | Srisuda Dhamwichukorn | Method for enhanced sustainable production of algal bio-products, comprising use of symbiotic diazotroph-attenuated stress co-cultivation |
| CN102740882A (zh) | 2009-08-27 | 2012-10-17 | 诺华有限公司 | 含有铝、寡核苷酸和聚阳离子的佐剂 |
| BR112012004275A2 (pt) | 2009-08-27 | 2016-11-16 | Novartis Ag | polipeptídios híbridos incluindo sequências meningocócicas de fhbp |
| WO2011027956A2 (ko) | 2009-09-04 | 2011-03-10 | 주식회사이언메딕스 | 그람 양성 박테리아에서 유래한 세포밖 소포체 및 이를 이용한 질병 모델 |
| WO2011027971A2 (ko) * | 2009-09-01 | 2011-03-10 | 주식회사이언메딕스 | 장내 공생 세균유래 세포밖 소포체, 및 이를 이용한 질병모델, 백신, 후보 약물 탐색 방법, 및 진단 방법 |
| JO3257B1 (ar) | 2009-09-02 | 2018-09-16 | Novartis Ag | مركبات وتركيبات كمعدلات لفاعلية tlr |
| ES2443952T3 (es) | 2009-09-02 | 2014-02-21 | Novartis Ag | Composiciones inmunógenas que incluyen moduladores de la actividad de TLR |
| GB0917003D0 (en) | 2009-09-28 | 2009-11-11 | Novartis Vaccines Inst For Global Health Srl | Purification of bacterial vesicles |
| WO2011039631A2 (en) | 2009-09-30 | 2011-04-07 | Novartis Ag | Expression of meningococcal fhbp polypeptides |
| EP2493499A1 (en) | 2009-10-27 | 2012-09-05 | Novartis AG | Modified meningococcal fhbp polypeptides |
| WO2011057148A1 (en) | 2009-11-05 | 2011-05-12 | Irm Llc | Compounds and compositions as tlr-7 activity modulators |
| US9408907B2 (en) | 2009-12-15 | 2016-08-09 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Homogenous suspension of immunopotentiating compounds and uses thereof |
| WO2012020326A1 (en) | 2010-03-18 | 2012-02-16 | Novartis Ag | Adjuvanted vaccines for serogroup b meningococcus |
| JP5848748B2 (ja) | 2010-03-23 | 2016-01-27 | アイアールエム・リミテッド・ライアビリティ・カンパニーＩｒｍ，Ｌｌｃ | 感染症、炎症、呼吸器疾患などの処置に使用するｔｌｒ２アゴニストとしての化合物（システインベースのリポペプチド）および組成物 |
| CN103079592B (zh) | 2010-07-01 | 2015-10-21 | 浦项工科大学校产学协力团 | 使用来自细胞的微泡治疗和诊断癌症的方法 |
| PT3246044T (pt) | 2010-08-23 | 2021-02-15 | Wyeth Llc | Formulações estáveis de antigénios de rlp2086 de neisseria meningitidis |
| AU2011300418B2 (en) | 2010-09-10 | 2016-05-12 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Meningococcus overexpressing NadA and/or NHBA and outer membrane vesicles derived therefrom |
| AU2011300409B2 (en) | 2010-09-10 | 2015-03-26 | Wyeth Llc | Non-lipidated variants of Neisseria meningitidis ORF2086 antigens |
| WO2012153302A1 (en) | 2011-05-12 | 2012-11-15 | Novartis Ag | Antipyretics to enhance tolerability of vesicle-based vaccines |
| MX2014008988A (es) | 2012-02-02 | 2014-08-27 | Novartis Ag | Promotores para aumento de expresion de proteinas en meningococo. |
| US10598666B2 (en) | 2012-03-08 | 2020-03-24 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | In vitro potency assay for protein-based meningococcal vaccines |
| US8986710B2 (en) | 2012-03-09 | 2015-03-24 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| SA115360586B1 (ar) | 2012-03-09 | 2017-04-12 | فايزر انك | تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها |
| EP2833911A4 (en) | 2012-04-06 | 2016-07-13 | Univ Cornell | SUB-VACCINE VACCINATING PLATFORM FOR ROBUST HUMORAL AND CELLULAR IMMUNE RESPONSES |
| US10376573B2 (en) | 2012-06-14 | 2019-08-13 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Vaccines for serogroup X meningococcus |
| AU2013295242C1 (en) | 2012-07-27 | 2018-08-09 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale | CD147 as receptor for pilus-mediated adhesion of meningococci to vascular endothelia |
| RU2015106930A (ru) | 2012-09-06 | 2016-10-20 | Новартис Аг | Комбинированные вакцины с менингококком серогруппы в и к/д/с |
| RU2662970C2 (ru) | 2012-09-18 | 2018-07-31 | Новартис Аг | Везикулы наружной мембраны |
| US20160120818A1 (en) | 2013-02-07 | 2016-05-05 | Glaxosmithline Biological Sa | Pharmaceutical compositions comprising vesicles |
| WO2014136064A2 (en) | 2013-03-08 | 2014-09-12 | Pfizer Inc. | Immunogenic fusion polypeptides |
| MX369534B (es) | 2013-09-08 | 2019-11-11 | Pfizer | Composiciones de neisseria meningitidis y sus metodos. |
| CA2940447C (en) | 2014-02-28 | 2023-07-11 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Modified meningococcal fhbp polypeptides |
| RU2723045C2 (ru) | 2015-02-19 | 2020-06-08 | Пфайзер Инк. | Композиции neisseria meningitidis и способы их получения |
| US11066453B2 (en) | 2015-05-18 | 2021-07-20 | Biomvis Srl | Immunogenic compositions containing bacterial outer membrane vesicles and therapeutic uses thereof |
| US10835601B2 (en) * | 2015-11-10 | 2020-11-17 | Ohio State Innovation Foundation | Methods and compositions related to accelerated humoral affinity |
| JP7104027B2 (ja) | 2016-09-02 | 2022-07-20 | グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム | 淋菌に対するワクチン |
| AU2017347870B2 (en) * | 2016-10-28 | 2024-05-23 | Vedanta Biosciences, Inc. | Methods and compositions for preserving bacteria |
| SG10202111092UA (en) | 2017-01-31 | 2021-11-29 | Pfizer | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| CN110891599A (zh) * | 2017-03-31 | 2020-03-17 | 印度医学研究理事会 | 基于来自伤寒样沙门菌物种的两种不同菌株的外膜囊泡的肠热疫苗 |
| AR113011A1 (es) | 2017-09-08 | 2020-01-15 | Evelo Biosciences Inc | Vesículas extracelulares bacterianas |
| US10793865B2 (en) | 2018-06-05 | 2020-10-06 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Navy | Transferrable mechanism of generating inducible, BAR domain protein-mediated bacterial outer membrane extensions |
| EP3607967A1 (en) | 2018-08-09 | 2020-02-12 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Modified meningococcal fhbp polypeptides |
| AU2019376832B2 (en) | 2018-11-06 | 2024-01-25 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Immunogenic compositions |
| WO2020172492A2 (en) * | 2019-02-22 | 2020-08-27 | Evelo Biosciences, Inc. | Bacterial membrane preparations |
| US20220378902A1 (en) * | 2019-08-22 | 2022-12-01 | Sichuan University | Bacterial membrane vesicles, and separation and preparation system and method therefor |
| CN110563829B (zh) * | 2019-09-17 | 2021-03-26 | 中国人民解放军国防科技大学 | 用于调控脂质体囊泡行为、功能的反光蛋白体系及其应用 |
| CA3155669A1 (en) | 2019-09-27 | 2021-04-01 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| EP3799884A1 (en) | 2019-10-01 | 2021-04-07 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Immunogenic compositions |
| US20230321213A1 (en) | 2020-09-11 | 2023-10-12 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Outer membrane vesicles |
| GB202115077D0 (en) | 2021-10-21 | 2021-12-08 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Assay |
| WO2023097652A1 (en) * | 2021-12-03 | 2023-06-08 | National Center For Nanoscience And Technology | An engineered cell and application thereof |
| GB202211033D0 (en) | 2022-07-28 | 2022-09-14 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Purification process |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2132383C1 (ru) * | 1990-09-07 | 1999-06-27 | Сентро Де Инженьериа Генетика И Биотекнологиа | ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ БЕЛОК ВНЕШНЕЙ МЕМБРАНЫ NEISSERIA MENINGITIDIS ШТАММА В:4:Р1:15, БЕЛОК ВНЕШНЕЙ МЕМБРАНЫ NEISSERIA MENINGITIDIS, РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pМ-6, ШТАММ БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA COLI НВМ 64, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БЕЛКА ВНЕШНЕЙ МЕМБРАНЫ NEISSERIA MENINGITIDIS, ВАКЦИННАЯ КОМПОЗИЦИЯ |
| WO2001091788A1 (en) * | 2000-06-02 | 2001-12-06 | Statens Institutt For Folkehelse | Outer membrane vesicle vaccine against disease caused by neisseria meningitidis serogroup a and process for the production thereof |
| WO2002062378A2 (en) * | 2001-02-08 | 2002-08-15 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Hyperblebbing bacterial strains and use thereof for production of vaccines |
Family Cites Families (87)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2848965A1 (de) | 1978-11-11 | 1980-05-22 | Behringwerke Ag | Verfahren zur herstellung von membranproteinen aus neisseria meningitidis und diese enthaltende vaccine |
| US4707543A (en) * | 1985-09-17 | 1987-11-17 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Process for the preparation of detoxified polysaccharide-outer membrane protein complexes, and their use as antibacterial vaccines |
| RU2023448C1 (ru) | 1987-07-30 | 1994-11-30 | Сентро Насьональ Де Биопрепарадос | Способ получения вакцины против различных патогенных серотипов менингита нейссера группы в |
| DE3841091A1 (de) | 1988-12-07 | 1990-06-13 | Behringwerke Ag | Synthetische antigene, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
| WO1990006696A2 (en) | 1988-12-19 | 1990-06-28 | Praxis Biologics, Inc. | Meningococcal class 1 outer-membrane protein vaccine |
| EP0378881B1 (en) | 1989-01-17 | 1993-06-09 | ENIRICERCHE S.p.A. | Synthetic peptides and their use as universal carriers for the preparation of immunogenic conjugates suitable for the development of synthetic vaccines |
| HU212924B (en) | 1989-05-25 | 1996-12-30 | Chiron Corp | Adjuvant formulation comprising a submicron oil droplet emulsion |
| EP0482068A1 (en) | 1989-07-14 | 1992-04-29 | American Cyanamid Company | Cytokine and hormone carriers for conjugate vaccines |
| IT1237764B (it) | 1989-11-10 | 1993-06-17 | Eniricerche Spa | Peptidi sintetici utili come carriers universali per la preparazione di coniugati immunogenici e loro impiego per lo sviluppo di vaccini sintetici. |
| EP0471177B1 (en) | 1990-08-13 | 1995-10-04 | American Cyanamid Company | Filamentous hemagglutinin of bordetella pertussis as a carrier molecule for conjugate vaccines |
| US5993826A (en) | 1993-03-02 | 1999-11-30 | Board Of Regents, The University Of Texas | Methods and compositions relating to useful antigens of moraxella catarrhalis |
| US5552146A (en) | 1991-08-15 | 1996-09-03 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions relating to useful antigens of Moraxella catarrhalis |
| WO1993018150A1 (en) | 1992-03-02 | 1993-09-16 | Biocine S.P.A. | Helicobacter pylori proteins useful for vaccines and diagnostics |
| IT1262896B (it) | 1992-03-06 | 1996-07-22 | Composti coniugati formati da proteine heat shock (hsp) e oligo-poli- saccaridi, loro uso per la produzione di vaccini. | |
| FR2692592B1 (fr) * | 1992-06-19 | 1995-03-31 | Pasteur Merieux Serums Vacc | Fragments d'ADN codant pour les sous-unités du récepteur de la transferrine de Neisseria meningitidis et procédés les exprimant. |
| EP0761231B1 (en) | 1992-06-25 | 2000-01-12 | SMITHKLINE BEECHAM BIOLOGICALS s.a. | Vaccine composition containing adjuvants |
| IL102687A (en) | 1992-07-30 | 1997-06-10 | Yeda Res & Dev | Conjugates of poorly immunogenic antigens and synthetic pepide carriers and vaccines comprising them |
| NL9201716A (nl) | 1992-10-02 | 1994-05-02 | Nederlanden Staat | Buitenmembraanvesikel dat voorzien is van een groep polypeptiden welke ten minste de immuunwerking van aan membraan gebonden buitenmembraaneiwitten (OMP's) hebben, werkwijze ter bereiding ervan alsmede een vaccin dat een dergelijk buitenmembraanvesikel omvat. |
| ES2145072T3 (es) | 1993-05-13 | 2000-07-01 | American Cyanamid Co | Preparacion y usos de proteinas de membranas externas carentes de los de cocos gramnegativos. |
| GB9326253D0 (en) | 1993-12-23 | 1994-02-23 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccines |
| ES2128055T3 (es) * | 1994-04-20 | 1999-05-01 | Us Army | Vacuna contra infecciones de bacterias gram-negativas. |
| JPH10502365A (ja) | 1994-07-01 | 1998-03-03 | リカン・リミテッド | ヘリコバクタータンパク質およびワクチン |
| US6207646B1 (en) | 1994-07-15 | 2001-03-27 | University Of Iowa Research Foundation | Immunostimulatory nucleic acid molecules |
| EP0772619B2 (en) | 1994-07-15 | 2010-12-08 | The University of Iowa Research Foundation | Immunomodulatory oligonucleotides |
| IL117483A (en) | 1995-03-17 | 2008-03-20 | Bernard Brodeur | MENINGITIDIS NEISSERIA shell protein is resistant to proteinase K. |
| US6180111B1 (en) | 1995-05-18 | 2001-01-30 | University Of Maryland | Vaccine delivery system |
| GB9513261D0 (en) | 1995-06-29 | 1995-09-06 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccines |
| AU707131B2 (en) | 1995-08-04 | 1999-07-01 | University Of Guelph | Novel vaccines and pharmaceutical compositions using membrane vesicles of microorganisms, and methods for preparing same |
| GB2324093A (en) | 1996-01-04 | 1998-10-14 | Rican Limited | Helicobacter pylori bacterioferritin |
| DE19630390A1 (de) | 1996-07-26 | 1998-01-29 | Chiron Behring Gmbh & Co | Proteine, insbesondere Membranproteine von Helicobacter pylori, ihre Herstellung und Verwendung |
| ATE292980T1 (de) | 1996-10-11 | 2005-04-15 | Univ California | Immunostimulierende oligonucleotidekonjugate |
| ES2195317T3 (es) | 1997-01-30 | 2003-12-01 | Chiron Corp | Uso de microparticulas con antigeno adsorbido para estimular respuestas inmunitarias. |
| AU738513B2 (en) | 1997-02-28 | 2001-09-20 | University Of Iowa Research Foundation, The | Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide in the treatment of LPS-associated disorders |
| EP1005368B1 (en) | 1997-03-10 | 2009-09-02 | Ottawa Hospital Research Institute | Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide in combination with alum as adjuvants |
| DE69838294T2 (de) | 1997-05-20 | 2009-08-13 | Ottawa Health Research Institute, Ottawa | Verfahren zur Herstellung von Nukleinsäurekonstrukten |
| ATE432348T1 (de) | 1997-06-06 | 2009-06-15 | Univ California | Inhibitoren von immunstimulatorischen dna sequenz aktivität |
| GB9711964D0 (en) | 1997-06-09 | 1997-08-06 | Medical Res Council | Live attenuated vaccines |
| GB9712347D0 (en) | 1997-06-14 | 1997-08-13 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
| GB9713156D0 (en) | 1997-06-20 | 1997-08-27 | Microbiological Res Authority | Vaccines |
| AU748973B2 (en) * | 1997-07-17 | 2002-06-13 | Baxter Healthcare Sa | Immunogenic conjugates comprising a group B meningococcal porin and an H. influenzae polysaccharide |
| CA2300854C (en) | 1997-08-21 | 2011-04-05 | Peter Andre Van Der Ley | Novel mutants of gram negative mucosal bacteria and application thereof in vaccines |
| DE69838992T2 (de) | 1997-09-05 | 2008-12-24 | Glaxosmithkline Biologicals S.A., Rixensart | Öl-in-Wasser Emulsionen mit Saponinen |
| ATE476508T1 (de) | 1997-11-06 | 2010-08-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Neisseriale antigene |
| BR9814878A (pt) | 1997-11-21 | 2000-10-03 | Genset Sa | Sequência genÈmica e polipeptìdeos de chlamydia pneumoniae, fragmentos dos mesmos e usos dos mesmos, em particular para o diagnóstico, a prevenção e o tratamento de infecção |
| BR9814912A (pt) | 1997-11-28 | 2000-10-03 | Genset Sa | Sequência genÈmica e polipeptìdeos de chlamydia trachomatis, fragmentos dos mesmos e usos dos mesmos, em particular para o diagnóstico, a prevenção e o tratamento de infecção |
| GB9725084D0 (en) | 1997-11-28 | 1998-01-28 | Medeva Europ Ltd | Vaccine compositions |
| SG152917A1 (en) | 1998-01-14 | 2009-06-29 | Chiron Srl | Neisseria meningitidis antigens |
| GB9806456D0 (en) * | 1998-03-25 | 1998-05-27 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine composition |
| WO1999052549A1 (en) | 1998-04-09 | 1999-10-21 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Adjuvant compositions |
| EP2261341A3 (en) | 1998-05-01 | 2012-01-04 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Neisseria meningitidis antigens and compositions |
| GB9817052D0 (en) | 1998-08-05 | 1998-09-30 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
| CN1338005A (zh) | 1998-10-09 | 2002-02-27 | 希龙公司 | 奈瑟球菌基因组序列及其用途 |
| CZ301212B6 (cs) | 1998-10-16 | 2009-12-09 | Smithkline Beecham Biologicals S. A. | Vakcinacní prostredek |
| GB9823978D0 (en) | 1998-11-02 | 1998-12-30 | Microbiological Res Authority | Multicomponent meningococcal vaccine |
| EP1133572A4 (en) | 1998-11-12 | 2005-06-15 | Univ California | GENOMIC SEQUENCE OF CHLAMYDIA PNEUMONIAE |
| GB9828000D0 (en) | 1998-12-18 | 1999-02-10 | Chiron Spa | Antigens |
| PT1150712E (pt) * | 1999-02-05 | 2008-12-22 | Merck & Co Inc | Formulações para a vacina do vírus do papiloma humano |
| US7081244B2 (en) * | 1999-02-22 | 2006-07-25 | Health Protection Agency | Neisserial vaccine compositions and methods |
| DK1154791T3 (da) | 1999-02-22 | 2008-06-16 | Health Prot Agency | Neisseria-vaccinesammensætninger og fremgangsmåder |
| DE69942774D1 (de) | 1999-02-26 | 2010-10-28 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Verwendung von bioadhaesiven und adjuvantien für die mukosale anwendung von antigenen |
| EP1162999B1 (en) | 1999-03-19 | 2006-11-29 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Vaccine against Streptococcus pneumoniae |
| US6245568B1 (en) * | 1999-03-26 | 2001-06-12 | Merck & Co., Inc. | Human papilloma virus vaccine with disassembled and reassembled virus-like particles |
| JP2002541808A (ja) | 1999-04-09 | 2002-12-10 | テクラブ， インコーポレイテッド | ポリサッカリド結合体ワクチンのための組換えトキシンａタンパク質キャリア |
| TR200103018T2 (tr) | 1999-04-19 | 2002-02-21 | Beecham Biologicals S.A. Smithkline | İmmünostimülatör oligonükleotid ve saponin içeren katkı bileşikleri. |
| EP1228217B1 (en) | 1999-04-30 | 2012-11-21 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Conserved neisserial antigens |
| AUPQ005499A0 (en) * | 1999-04-30 | 1999-05-27 | Townsend, Roy Leslie | Printing process |
| EP1860191A3 (en) | 1999-05-19 | 2008-02-13 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Combination neisserial compositions |
| GB9918319D0 (en) | 1999-08-03 | 1999-10-06 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine composition |
| JP2003509473A (ja) | 1999-09-24 | 2003-03-11 | スミスクライン ビーチャム バイオロジカルズ ソシエテ アノニム | ワクチン |
| KR20020048942A (ko) | 1999-09-24 | 2002-06-24 | 장 스테판느 | 폴리옥시에틸렌 알킬 에테르 또는 에스테르 및 하나이상의 비이온성 계면활성제를 포함하는 애쥬번트 |
| AU1917501A (en) | 1999-11-12 | 2001-06-06 | University Of Iowa Research Foundation, The | Control of neisserial membrane synthesis |
| EP2275129A3 (en) | 2000-01-17 | 2013-11-06 | Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. | Outer membrane vesicle (OMV) vaccine comprising N. meningitidis serogroup B outer membrane proteins |
| GB0007432D0 (en) | 2000-03-27 | 2000-05-17 | Microbiological Res Authority | Proteins for use as carriers in conjugate vaccines |
| GB0007433D0 (en) * | 2000-03-27 | 2000-05-17 | Microbiological Res Authority | Recombinant transferrin binding proteins |
| ATE440861T1 (de) | 2000-07-03 | 2009-09-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Immunisierung gegen chlamydia pneumoniae |
| GB0017149D0 (en) | 2000-07-12 | 2000-08-30 | Chiron Spa | Helicobacter pylori mutants |
| ES2519440T3 (es) * | 2000-07-27 | 2014-11-07 | Children's Hospital & Research Center At Oakland | Vacunas para la protección de amplio espectro contra enfermedades causadas por Neisseria meningitidis |
| GB0103170D0 (en) | 2001-02-08 | 2001-03-28 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine composition |
| CN101428006A (zh) | 2000-09-28 | 2009-05-13 | 诺华疫苗和诊断公司 | 微粒体组合物及其生产方法 |
| WO2002034771A2 (en) | 2000-10-27 | 2002-05-02 | Chiron Srl | Nucleic acids and proteins from streptococcus groups a & b |
| GB0103424D0 (en) | 2001-02-12 | 2001-03-28 | Chiron Spa | Gonococcus proteins |
| GB0115176D0 (en) | 2001-06-20 | 2001-08-15 | Chiron Spa | Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines |
| GB0118249D0 (en) * | 2001-07-26 | 2001-09-19 | Chiron Spa | Histidine vaccines |
| WO2003009869A1 (en) | 2001-07-26 | 2003-02-06 | Chiron Srl. | Vaccines comprising aluminium adjuvants and histidine |
| GB0121591D0 (en) | 2001-09-06 | 2001-10-24 | Chiron Spa | Hybrid and tandem expression of neisserial proteins |
| GB0130123D0 (en) * | 2001-12-17 | 2002-02-06 | Microbiological Res Agency | Outer membrane vesicle vaccine and its preparation |
| DK2255826T3 (en) * | 2002-08-02 | 2016-06-20 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Neisserial vaccine compositions comprising a combination of antigens. |
-
2002
- 2002-08-30 GB GBGB0220194.5A patent/GB0220194D0/en not_active Ceased
-
2003
- 2003-09-01 EP EP10179787A patent/EP2258390A1/en not_active Withdrawn
- 2003-09-01 AT AT03791150T patent/ATE366117T1/de active
- 2003-09-01 DK DK07012893.9T patent/DK1864679T3/da active
- 2003-09-01 JP JP2004532626A patent/JP2006503822A/ja not_active Withdrawn
- 2003-09-01 SI SI200332269T patent/SI2258389T1/sl unknown
- 2003-09-01 NZ NZ538673A patent/NZ538673A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-09-01 ES ES10179782.7T patent/ES2520392T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-09-01 SI SI200332378T patent/SI1864679T1/sl unknown
- 2003-09-01 PT PT70128939T patent/PT1864679E/pt unknown
- 2003-09-01 AU AU2003263534A patent/AU2003263534B2/en not_active Ceased
- 2003-09-01 ES ES10179783T patent/ES2423019T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-09-01 MX MXPA05002316A patent/MXPA05002316A/es active IP Right Grant
- 2003-09-01 EP EP03791150A patent/EP1534326B1/en not_active Revoked
- 2003-09-01 ES ES03791150T patent/ES2289351T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-09-01 PT PT03791150T patent/PT1534326E/pt unknown
- 2003-09-01 CN CN2011101128386A patent/CN102188700A/zh active Pending
- 2003-09-01 EP EP07012893.9A patent/EP1864679B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-09-01 DE DE60314756T patent/DE60314756T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2003-09-01 CA CA2497165A patent/CA2497165C/en not_active Expired - Fee Related
- 2003-09-01 BR BRPI0314094A patent/BRPI0314094A8/pt not_active IP Right Cessation
- 2003-09-01 WO PCT/IB2003/004293 patent/WO2004019977A2/en not_active Ceased
- 2003-09-01 DK DK03791150T patent/DK1534326T3/da active
- 2003-09-01 RU RU2005108994/15A patent/RU2325184C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2003-09-01 DK DK10179783.5T patent/DK2258389T3/da active
- 2003-09-01 CN CNA038237237A patent/CN1688334A/zh active Pending
- 2003-09-01 EP EP10179782.7A patent/EP2258388B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-09-01 EP EP10179783.5A patent/EP2258389B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-09-01 US US10/526,113 patent/US20060166344A1/en not_active Abandoned
- 2003-09-01 ES ES07012893.9T patent/ES2483592T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-09-01 PT PT101797835T patent/PT2258389E/pt unknown
-
2007
- 2007-09-17 CY CY20071101197T patent/CY1107737T1/el unknown
-
2010
- 2010-03-23 JP JP2010067009A patent/JP2010150287A/ja not_active Withdrawn
-
2013
- 2013-03-29 JP JP2013072014A patent/JP5808358B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2013-07-04 LU LU92239C patent/LU92239I2/fr unknown
- 2013-07-31 FR FR13C0046C patent/FR13C0046I2/fr active Active
- 2013-09-02 CY CY20131100752T patent/CY1114570T1/el unknown
-
2014
- 2014-09-11 CY CY20141100736T patent/CY1115777T1/el unknown
-
2015
- 2015-06-01 US US14/727,248 patent/US20150258188A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2132383C1 (ru) * | 1990-09-07 | 1999-06-27 | Сентро Де Инженьериа Генетика И Биотекнологиа | ФРАГМЕНТ ДНК, КОДИРУЮЩИЙ БЕЛОК ВНЕШНЕЙ МЕМБРАНЫ NEISSERIA MENINGITIDIS ШТАММА В:4:Р1:15, БЕЛОК ВНЕШНЕЙ МЕМБРАНЫ NEISSERIA MENINGITIDIS, РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pМ-6, ШТАММ БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA COLI НВМ 64, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БЕЛКА ВНЕШНЕЙ МЕМБРАНЫ NEISSERIA MENINGITIDIS, ВАКЦИННАЯ КОМПОЗИЦИЯ |
| WO2001091788A1 (en) * | 2000-06-02 | 2001-12-06 | Statens Institutt For Folkehelse | Outer membrane vesicle vaccine against disease caused by neisseria meningitidis serogroup a and process for the production thereof |
| WO2002062378A2 (en) * | 2001-02-08 | 2002-08-15 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Hyperblebbing bacterial strains and use thereof for production of vaccines |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2607021C2 (ru) * | 2011-07-07 | 2017-01-10 | Де Стат Дер Недерланден, Верт. Дор Де Министер Ван Ввс | Способ бездетергентного получения везикул наружной мембраны грамотрицательной бактерии |
| US9707286B2 (en) | 2011-07-07 | 2017-07-18 | De Staat Der Nederlanden, Vert. Door De Minister Van Vws Ministerie Van Volksgezondheid, Welzun En Sport | Process for detergent-free production of outer membrane vesicles of a gram-negative bacterium |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2325184C2 (ru) | Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий | |
| ES2369852T3 (es) | Ultrafiltración y ultracentrifugación para preparar vesículas de membrana externa. | |
| JP6077983B2 (ja) | 外膜タンパク質を有する免疫原性細菌小胞 | |
| RU2475496C2 (ru) | МЕНИНГОКОККОВЫЕ ПОЛИПЕПТИДЫ fHBP | |
| JP5220658B2 (ja) | 莢膜性多糖類の可溶化および組合せワクチン | |
| JP2003514868A (ja) | 血清型ＢおよびＣ由来のＮｅｉｓｓｅｒｉａｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ抗原、ならびにさらなる抗原を含む組成物 | |
| JP2011236254A (ja) | 髄膜炎菌外膜ベシクルに関する改良 | |
| US20110262484A1 (en) | Outer membrane vesicle prime-protein boost vaccine | |
| JP4522699B2 (ja) | アジュバント化されたＭｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃｕｓ組成物 | |
| RU2360699C2 (ru) | Композиции менингококковых вакцин с адъювантами |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160902 |