RU2360699C2 - Композиции менингококковых вакцин с адъювантами - Google Patents
Композиции менингококковых вакцин с адъювантами Download PDFInfo
- Publication number
- RU2360699C2 RU2360699C2 RU2004113432/13A RU2004113432A RU2360699C2 RU 2360699 C2 RU2360699 C2 RU 2360699C2 RU 2004113432/13 A RU2004113432/13 A RU 2004113432/13A RU 2004113432 A RU2004113432 A RU 2004113432A RU 2360699 C2 RU2360699 C2 RU 2360699C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- protein
- antigen
- plg
- microparticles
- cpg
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 73
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 title claims description 46
- 229960005037 meningococcal vaccines Drugs 0.000 title 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 148
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 148
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 135
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 claims abstract description 81
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 66
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 66
- 241000588653 Neisseria Species 0.000 claims abstract description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 16
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 11
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims abstract description 7
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N lactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims abstract description 4
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 claims abstract 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims description 40
- RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane-2,5-dione Chemical compound O=C1COC(=O)CO1 RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 claims description 9
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 claims description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 8
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical group [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229940061720 alpha hydroxy acid Drugs 0.000 claims description 3
- 150000001280 alpha hydroxy acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 2
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 claims 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 claims 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 claims 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 abstract description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 abstract description 3
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 abstract 1
- CTMZLDSMFCVUNX-VMIOUTBZSA-N cytidylyl-(3'->5')-guanosine Chemical group O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O)[C@@H](CO)O1 CTMZLDSMFCVUNX-VMIOUTBZSA-N 0.000 description 83
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 51
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 25
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 18
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 14
- 241000588650 Neisseria meningitidis Species 0.000 description 11
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 10
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 9
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 9
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 9
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 9
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 9
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 8
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 8
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 8
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 7
- -1 random copolymer D Chemical compound 0.000 description 7
- JJTUDXZGHPGLLC-IMJSIDKUSA-N 4511-42-6 Chemical compound C[C@@H]1OC(=O)[C@H](C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 6
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 6
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 6
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 6
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 241000588677 Neisseria meningitidis serogroup B Species 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 5
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 5
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 description 4
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical class NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 4
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 4
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- TVZRAEYQIKYCPH-UHFFFAOYSA-N 3-(trimethylsilyl)propane-1-sulfonic acid Chemical compound C[Si](C)(C)CCCS(O)(=O)=O TVZRAEYQIKYCPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 3
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 3
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 3
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 3
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 3
- OJSUWTDDXLCUFR-HGZMBBKESA-N (2r,3s,4r,5r)-n-[3-[[(4r)-4-[(3r,5r,8r,9s,10s,12s,13r,14s,17r)-3,12-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoyl]-[3-[[(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanoyl]amino]propyl]amino Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)N(CCCNC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO)CCCNC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 OJSUWTDDXLCUFR-HGZMBBKESA-N 0.000 description 2
- UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]propane-1-sulfonate Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 0.000 description 2
- GUQQBLRVXOUDTN-XOHPMCGNSA-N 3-[dimethyl-[3-[[(4r)-4-[(3r,5s,7r,8r,9s,10s,12s,13r,14s,17r)-3,7,12-trihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoyl]amino]propyl]azaniumyl]-2-hydroxypropane-1-sulfonate Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC(O)CS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 GUQQBLRVXOUDTN-XOHPMCGNSA-N 0.000 description 2
- 102100034452 Alternative prion protein Human genes 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 241000588832 Bordetella pertussis Species 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical class C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- 108700020354 N-acetylmuramyl-threonyl-isoglutamine Proteins 0.000 description 2
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 2
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 2
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 2
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- NWMHDZMRVUOQGL-CZEIJOLGSA-N almurtide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CO[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@@H](NC(C)=O)C=O NWMHDZMRVUOQGL-CZEIJOLGSA-N 0.000 description 2
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 2
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 2
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 2
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 2
- IZWSFJTYBVKZNK-UHFFFAOYSA-N lauryl sulfobetaine Chemical compound CCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O IZWSFJTYBVKZNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical group 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- GCRLIVCNZWDCDE-SJXGUFTOSA-N n-methyl-n-[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl]nonanamide Chemical compound CCCCCCCCC(=O)N(C)C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO GCRLIVCNZWDCDE-SJXGUFTOSA-N 0.000 description 2
- SBWGZAXBCCNRTM-CTHBEMJXSA-N n-methyl-n-[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl]octanamide Chemical compound CCCCCCCC(=O)N(C)C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO SBWGZAXBCCNRTM-CTHBEMJXSA-N 0.000 description 2
- 229940066429 octoxynol Drugs 0.000 description 2
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229920001432 poly(L-lactide) Polymers 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 2
- 229920005604 random copolymer Polymers 0.000 description 2
- 238000010845 search algorithm Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DRHZYJAUECRAJM-DWSYSWFDSA-N (2s,3s,4s,5r,6r)-6-[[(3s,4s,4ar,6ar,6bs,8r,8ar,12as,14ar,14br)-8a-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3-[(2s,3r,4s,5r,6s)-5-[(2s,3r,4s,5r)-4-[(2s,3r,4r)-3,4-dihydroxy-4-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxyoxan-2-yl]oxy-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-5-[(3s,5s, Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@H](O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@H]5CC(C)(C)CC[C@@]5([C@@H](C[C@@]4(C)[C@]3(C)CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)O)C(=O)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H]([C@@H]([C@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@](O)(CO)CO3)O)[C@H](O)CO2)O)[C@H](C)O1)O)O)OC(=O)C[C@@H](O)C[C@H](OC(=O)C[C@@H](O)C[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](CO)O1)O)[C@@H](C)CC)C(O)=O)[C@@H]1OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DRHZYJAUECRAJM-DWSYSWFDSA-N 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YHQZWWDVLJPRIF-JLHRHDQISA-N (4R)-4-[[(2S,3R)-2-[acetyl-[(3R,4R,5S,6R)-3-amino-4-[(1R)-1-carboxyethoxy]-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-5-amino-5-oxopentanoic acid Chemical compound C(C)(=O)N([C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](CCC(=O)O)C(N)=O)C1[C@H](N)[C@@H](O[C@@H](C(=O)O)C)[C@H](O)[C@H](O1)CO YHQZWWDVLJPRIF-JLHRHDQISA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- NKOTXYPTXKUCDL-UHFFFAOYSA-N 4-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine Chemical compound NC1=NC=CC(C(F)(F)F)=N1 NKOTXYPTXKUCDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710115267 ATP synthase protein MI25 Proteins 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101100214875 Autographa californica nuclear polyhedrosis virus p95 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- CXRFDZFCGOPDTD-UHFFFAOYSA-M Cetrimide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C CXRFDZFCGOPDTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 description 1
- 241000710777 Classical swine fever virus Species 0.000 description 1
- 102100031725 Cortactin-binding protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N DDT Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1C(C(Cl)(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000710829 Dengue virus group Species 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 101100478173 Drosophila melanogaster spen gene Proteins 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000710781 Flaviviridae Species 0.000 description 1
- 241000710831 Flavivirus Species 0.000 description 1
- 108010007979 Glycocholic Acid Proteins 0.000 description 1
- 108010035713 Glycodeoxycholic Acid Proteins 0.000 description 1
- WVULKSPCQVQLCU-UHFFFAOYSA-N Glycodeoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 WVULKSPCQVQLCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150029115 HOPX gene Proteins 0.000 description 1
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 1
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 241000709721 Hepatovirus A Species 0.000 description 1
- 101000833492 Homo sapiens Jouberin Proteins 0.000 description 1
- 101000651236 Homo sapiens NCK-interacting protein with SH3 domain Proteins 0.000 description 1
- 101000651298 Homo sapiens TRAF-interacting protein with FHA domain-containing protein A Proteins 0.000 description 1
- 241000702617 Human parvovirus B19 Species 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 241000710842 Japanese encephalitis virus Species 0.000 description 1
- 102100024407 Jouberin Human genes 0.000 description 1
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010027202 Meningitis bacterial Diseases 0.000 description 1
- 241000588655 Moraxella catarrhalis Species 0.000 description 1
- 208000005647 Mumps Diseases 0.000 description 1
- 101100476480 Mus musculus S100a8 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100513476 Mus musculus Spen gene Proteins 0.000 description 1
- 108700015872 N-acetyl-nor-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- RFDAIACWWDREDC-UHFFFAOYSA-N Na salt-Glycocholic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 RFDAIACWWDREDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001644525 Nastus productus Species 0.000 description 1
- 241000588652 Neisseria gonorrhoeae Species 0.000 description 1
- 206010062212 Neisseria infection Diseases 0.000 description 1
- 241000588649 Neisseria lactamica Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 1
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 1
- 102000019040 Nuclear Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010051791 Nuclear Antigens Proteins 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 101150075249 ORF40 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150004576 ORF83 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100317123 Orgyia pseudotsugata multicapsid polyhedrosis virus GP41 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100156835 Paenarthrobacter nicotinovorans xdh gene Proteins 0.000 description 1
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 108010081690 Pertussis Toxin Proteins 0.000 description 1
- 241000710778 Pestivirus Species 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920000331 Polyhydroxybutyrate Polymers 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 241000605862 Porphyromonas gingivalis Species 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 description 1
- 101710197985 Probable protein Rev Proteins 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 1
- 229940124875 RabAvert Drugs 0.000 description 1
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 description 1
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 241000193985 Streptococcus agalactiae Species 0.000 description 1
- 101000874347 Streptococcus agalactiae IgA FC receptor Proteins 0.000 description 1
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 1
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 1
- 241001505901 Streptococcus sp. 'group A' Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000029662 T-helper 1 type immune response Effects 0.000 description 1
- 102100027651 TRAF-interacting protein with FHA domain-containing protein A Human genes 0.000 description 1
- WBWWGRHZICKQGZ-UHFFFAOYSA-N Taurocholic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)C1(C)C(O)C2 WBWWGRHZICKQGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000710771 Tick-borne encephalitis virus Species 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 208000037386 Typhoid Diseases 0.000 description 1
- 101710134973 Uncharacterized 9.7 kDa protein in cox-rep intergenic region Proteins 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 201000006449 West Nile encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 206010057293 West Nile viral infection Diseases 0.000 description 1
- 241000710772 Yellow fever virus Species 0.000 description 1
- KGUHOFWIXKIURA-VQXBOQCVSA-N [(2r,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl]methyl dodecanoate Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCC)O[C@@H]1O[C@@]1(CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 KGUHOFWIXKIURA-VQXBOQCVSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940047712 aluminum hydroxyphosphate Drugs 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229940065181 bacillus anthracis Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 201000009904 bacterial meningitis Diseases 0.000 description 1
- QVZZPLDJERFENQ-NKTUOASPSA-N bassianolide Chemical compound CC(C)C[C@@H]1N(C)C(=O)[C@@H](C(C)C)OC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C(C)C)OC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C(C)C)OC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C(C)C)OC1=O QVZZPLDJERFENQ-NKTUOASPSA-N 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 1
- SXPWTBGAZSPLHA-UHFFFAOYSA-M cetalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SXPWTBGAZSPLHA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000228 cetalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 1
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 239000011362 coarse particle Substances 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 238000002050 diffraction method Methods 0.000 description 1
- CSNHNGDROQRZKT-DSVPTQILSA-M dimethyl-[(2,3,4,5,6-pentadeuteriophenyl)methyl]-tetradecylazanium bromide Chemical compound [Br-].C(C1=C(C(=C(C(=C1[2H])[2H])[2H])[2H])[2H])[N+](CCCCCCCCCCCCCC)(C)C CSNHNGDROQRZKT-DSVPTQILSA-M 0.000 description 1
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- XJWSAJYUBXQQDR-UHFFFAOYSA-M dodecyltrimethylammonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C XJWSAJYUBXQQDR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N glycocholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N 0.000 description 1
- 229940099347 glycocholic acid Drugs 0.000 description 1
- WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N glycodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N 0.000 description 1
- 229940047650 haemophilus influenzae Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 description 1
- 229930186900 holotoxin Natural products 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- JMUHBNWAORSSBD-WKYWBUFDSA-N mifamurtide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)COP(O)(=O)OCCNC(=O)[C@H](C)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)OC(O)[C@@H]1NC(C)=O JMUHBNWAORSSBD-WKYWBUFDSA-N 0.000 description 1
- 229960005225 mifamurtide Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 208000010805 mumps infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 125000001446 muramyl group Chemical group N[C@@H](C=O)[C@@H](O[C@@H](C(=O)*)C)[C@H](O)[C@H](O)CO 0.000 description 1
- UMWKZHPREXJQGR-UHFFFAOYSA-N n-methyl-n-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl)decanamide Chemical compound CCCCCCCCCC(=O)N(C)CC(O)C(O)C(O)C(O)CO UMWKZHPREXJQGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UMWKZHPREXJQGR-XOSAIJSUSA-N n-methyl-n-[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl]decanamide Chemical compound CCCCCCCCCC(=O)N(C)C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO UMWKZHPREXJQGR-XOSAIJSUSA-N 0.000 description 1
- VHYYJWLKCODCNM-OIMNJJJWSA-N n-methyl-n-[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl]heptanamide Chemical compound CCCCCCC(=O)N(C)C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO VHYYJWLKCODCNM-OIMNJJJWSA-N 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 1
- HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N octyl beta-D-glucopyranoside Chemical compound CCCCCCCCO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 239000006179 pH buffering agent Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 108010021711 pertactin Proteins 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000005015 poly(hydroxybutyrate) Substances 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 239000002745 poly(ortho ester) Substances 0.000 description 1
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 1
- 239000004632 polycaprolactone Substances 0.000 description 1
- 229920000056 polyoxyethylene ether Polymers 0.000 description 1
- 229940051841 polyoxyethylene ether Drugs 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004626 scanning electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M sodium cholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M 0.000 description 1
- OABYVIYXWMZFFJ-ZUHYDKSRSA-M sodium glycocholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 OABYVIYXWMZFFJ-ZUHYDKSRSA-M 0.000 description 1
- VMSNAUAEKXEYGP-YEUHZSMFSA-M sodium glycodeoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 VMSNAUAEKXEYGP-YEUHZSMFSA-M 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- JAJWGJBVLPIOOH-IZYKLYLVSA-M sodium taurocholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 JAJWGJBVLPIOOH-IZYKLYLVSA-M 0.000 description 1
- 229940045946 sodium taurodeoxycholate Drugs 0.000 description 1
- YXHRQQJFKOHLAP-FVCKGWAHSA-M sodium;2-[[(4r)-4-[(3r,5r,8r,9s,10s,12s,13r,14s,17r)-3,12-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoyl]amino]ethanesulfonate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 YXHRQQJFKOHLAP-FVCKGWAHSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 1
- 229940032085 sucrose monolaurate Drugs 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- WBWWGRHZICKQGZ-GIHLXUJPSA-N taurocholic acid Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2O)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@H](O)C1 WBWWGRHZICKQGZ-GIHLXUJPSA-N 0.000 description 1
- AWDRATDZQPNJFN-VAYUFCLWSA-N taurodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 AWDRATDZQPNJFN-VAYUFCLWSA-N 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000003656 tris buffered saline Substances 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 201000008297 typhoid fever Diseases 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 229940051021 yellow-fever virus Drugs 0.000 description 1
- PAPBSGBWRJIAAV-UHFFFAOYSA-N ε-Caprolactone Chemical compound O=C1CCCCCO1 PAPBSGBWRJIAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к вакцинам, а также к области молекулярной биологии и генетической инженерии. Предложена иммуногенная композиция, содержащая антиген Neisseria, содержащий белок серогруппы В Neisseria meningitides, выбранный из группы, состоящей из белка NadA, белка 287, белка 741, белка 953; CpG-олигонуклеотид; а также биологически разлагаемые микрочастицы, представляющие собой сополимер D, L лактида с гликолипидом - PLG. Кроме того, предложены способ повышения гуморального ответа млекопитающего, способ защиты млекопитающего и применение композиции для производства лекарственного средства. Изобретение может быть использовано для получения вакцин. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 11 табл.
Description
Все документы, процитированные здесь, включены со ссылкой на них во всей их полноте.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Данное изобретение относится к вакцинам, более конкретно к вакцинам против Neisseria meningitidis.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Геномные последовательности для Neisseria meningitidis (менингококк) серогрупп А (1) и В (2, 3) были описаны. Последовательность для серогруппы В была изучена в отношении идентификации вакцинных антигенов (например, ссылки с 4 по 9), и антигены-кандидаты были подвергнуты манипуляциям с целью улучшения гетерологичной экспрессии (ссылки с 10 по 12).
Антигены обычно требуют совместного введения адъювантов для усиления их иммуногенности в вакцинах (13). Для менингококков серогруппы В использовали адъювант Фрейнда (9), а в лицензированной вакцине MenjugateТМ против серогруппы С используют гидроксид алюминия (14). Сообщалось также об усилении бактерицидной активности антигенов Neisseria при использовании олигонуклеотидных адъювантов, содержащих мотивы CpG (15).
Объектом данного изобретения является получение дополнительных и улучшенных адъювантов для антигенов Neisseria.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Было обнаружено, что комбинация CpG-олигонуклеотидов и полимерных микрочастиц является чрезвычайно эффективным адъювантом для антигенов Neisseria, причем комбинация дает значительно более хорошие результаты, чем любой из отдельных компонентов. Данное изобретение поэтому представляет композицию, состоящую из: (а) антигена Neisseria; (b) CpG-олигонуклеотида и (с) биологически разлагаемых полимерных микрочастиц.
Антиген Neisseria
Антиген Neisseria может быть белковым антигеном, нуклеиновой кислотой, кодирующей белковый антиген, или сахаридным антигеном. Антиген предпочтительно вызывает бактерицидный или защитный иммунный ответ (например, гуморальный иммунный ответ) у млекопитающего-реципиента.
Антиген может происходить из любого вида Neisseria, включая N.gonorrhoeae, N.lactamica и N.meningitidis. Предпочтителен антиген N.meningitidis, и он может быть из любой серогруппы. Когда антиген происходит из серогруппы В, предпочтительно использовать белковый антиген; когда он происходит из серогрупп А, С, W135 или Y, то предпочтительно использовать сахаридный антиген. Когда используют сахаридные антигены, их обычно получают из капсульных полисахаридов бактерий (например, олигосахаридов, таких как олигосахариды, полученные путем гидролиза), и они будут обычно конъюгированы с белками-носителями (например, с CRM197).
Предпочтительными белковыми антигенами, получаемыми из N.meningitidis серогруппы В, являются:
- белок, описанный в любом из источников 4, 5, 6, 7, 8 или 9 (в частности, 446 четных SEQ ID (т.е. 2, 4, 6, …, 890, 892), описанных в источнике 4, 45 четных SEQ ID (т.е. 2, 4, 6, …, 88, 90), описанных в источнике 5, и 1674 четных SEQ ID 2-3020, четных SEQ ID 3040-3114 и все SEQ ID 3115-3241, описанные в источнике 6);
- белок, содержащий иммуногенный фрагмент из одного или более белков, описанных в любом из источников 4, 5, 6, 7, 8 или 9;
- белок, содержащий последовательность, имеющую идентичность последовательности (предпочтительно более 50%, например 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99% или более) с одним или более белков, описанных в любом из источников 4, 5, 6, 7, 8 или 9;
- белок, описанный в любом из источников 10, 11 или 12;
- белок, содержащий последовательность, имеющую идентичность последовательности (предпочтительно более 50%, например 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99% или более) с одним или более белков, описанных в любом из источников 10, 11 или 12.
Особенно предпочтительным белковым антигеном из N.meningitidis серогруппы В является белок '287'. Этот белок можно использовать в форме дикого типа (например, GenBank поступление gi:7228690; выравнивания полиморфных форм 287 показаны на фиг.5 и 15 из источника 8), но можно использовать и производные белка дикого типа. Например, можно использовать белки, имеющие 50% или более идентичность последовательности (например, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99% или более) с gi:7228690. Можно использовать варианты данного белка - белки с укорочением или делецией, такие как усеченные на N-конце формы, описанные в источниках с 10 по 12 (в частности '∆G287', в котором N-конец белка вплоть до и включая шесть повторяющихся глициновых остатков удален). Можно использовать слитые белки, содержащие такие последовательности 287. Все из данных форм 287, а более конкретно те, которые сохраняют иммуногенность белков 287 дикого типа, входят в значение '287', как оно использовано здесь.
Другим, особенно предпочтительным белковым антигеном из N.meningitidis серогруппы В является белок '961', известный также как 'NadA' (16). Данный белок можно использовать в форме дикого типа (например, GenBank поступление gi:7227256; аллели 961 описаны в источнике 17), но можно использовать и производные белка дикого типа. Например, можно использовать белки, имеющие 50% или более идентичность последовательности (например, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99% или более) с gi:7227256. Можно использовать варианты данного белка - белки с усечением или делецией, такие как белки, описанные в источниках с 10 по 12 ('961 с', в частности, у которого отсутствует С-концевой мембранный якорь). Можно использовать слитые белки, содержащие такие последовательности 961. Все из данных форм 961, и особенно формы, которые сохраняют иммуногенность белков 961 дикого типа, входят в значение '961' или 'NadA', которое использовано здесь.
Другими предпочтительными белковыми антигенами являются белок '741' и белок 'ORF46.1', и белки 'ORF1', 'ORF4', 'ORF25', 'ORF40', 'ORF83', 'NMB1343', '230', '233', '292', '594', '687', '736', '907', '919', '936', '953' и '983'. Другими предпочтительными белковыми антигенами являются гибридные белки, описанные в источниках с 10 по 12, особенно белки, включающие один или более из: белок 287, белок 953, белок 936 и/или белок 741.
Белковые антигены можно получить из любого штамма N.meningitidis. Предпочтительно использовать антигены из штаммов 2996, МС58, 95N477 и 394/98.
Помимо вариантов штамма могут быть произведены единичные или множественные замены консервативных аминокислот с изменением иммуногенности антигенов, используемых в соответствии с данным изобретением.
В дополнение к белковым антигенам или вместо них в композиции данного изобретения могут быть включены нуклеиновые кислоты, кодирующие белковый антиген. Нуклеиновые кислоты будут экспрессироваться in vivo при введении реципиенту-млекопитающему, и будет продуцироваться белковый антиген. Такая иммунизация нуклеиновыми кислотами хорошо известна (например, источники с 18 по 23 и др.) Нуклеиновая кислота будет обычно плазмидной ДНК.
Предпочтительным сахаридным антигеном, получаемым из N.meningitidis серогруппы С, является олигосахаридный конъюгат, используемый в MenjugateTM (24, 25), который содержит от 12 до 22 моносахаридных единиц из капсульного полисахарида серогруппы С.
Предпочтительным сахаридным антигеном, получаемым из серогруппы А, является олигосахарид, в котором одна или более из гидроксильных групп в составных моносахаридных элементах замещены блокирующей группой (26).
Дополнительные олигосахаридные антигены из серогрупп А, W135 и Y описаны в источнике 27.
Композиция данного изобретения может включать более одного антигена Neisseria. Когда включены сахариды из обеих серогрупп А и С N.meningitidis, предпочтительно, чтобы отношение (вес/вес) сахарид MenA:сахарид MenC было более 1 (например,
2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 10:1 или более).
Композиция данного изобретения является предпочтительно иммуногенной композицией или вакциной. Такие композиции включают иммунологически эффективное количество антигена. Под “иммунологически эффективным количеством” подразумевается, что введение индивидууму композиции данного изобретения, содержащей такое количество антигена (или в разовой дозе, или в виде части серии), является эффективным для формирования терапевтического или профилактического иммунного ответа. Это количество меняется в зависимости от состояния здоровья и физического состояния индивидуума, которого нужно лечить, возраста, таксономической группы индивидуума, которого нужно лечить (например, примата, не являющегося человеком, примата и т.д.), способности иммунной системы индивидуума синтезировать антитела, степени желаемой защиты, состава вакцины, суждения лечащего врача о медицинской ситуации и других значимых факторов. Данное количество может соответствовать относительно широкому интервалу, который может быть определен путем обычных испытаний. Антигены обычно присутствуют в концентрации, по меньшей мере, 1 мкг/мл каждого.
Режим дозирования для лечения может состоять из единственной дозы или множественных доз (например, включая ревакцинирующие дозы).
CpG-олигонуклеотид
Известно, что CpG-олигонуклеотиды используют в качестве адъювантов в вакцинах (например, ист.28), и они вызывают сильный иммунный Th1-ответ. Они пригодны в качестве адъювантов для парентерального введения и для нанесения на слизистые оболочки (29).
CpG-олигонуклеотид, используемый в соответствии с данным изобретением, является нуклеиновой кислотой, которая включает, по меньшей мере, один динуклеотид CG, т.е. цитозиновый нуклеотид, за которым следует гуанозиновый нуклеотид. Олигонуклеотид может содержать множественные динуклеотиды CG.
CG-последовательность в олигонуклеотиде может быть флангирована двумя пуринами с 5'-стороны и двумя пиримидинами с 3'-стороны, т.е. RRCGYY.
Цитозиновые нуклеотиды в олигонуклеотиде CpG могут быть метилированы, но предпочтительно они должны быть неметилированными.
Цитозиновые и гуанозиновые нуклеотиды предпочтительно являются дезоксинуклеотидами, и нуклеиновой кислотой предпочтительно является ДНК. Для повышения устойчивости к нуклеазам олигонуклеотид может содержать модифицированную скелетную цепь, такую как фосфоротиоатную скелетную цепь. В качестве альтернативы использованию ДНК можно использовать ПНК (пептидно-нуклеиновая кислота). Кроме того, олигонуклеотиды могут включать замещения групп сахаров и азотистых оснований.
Олигонуклеотид предпочтительно состоит из от 6 до примерно 100 нуклеотидов, более предпочтительно от примерно 8 до примерно 50 нуклеотидов, наиболее предпочтительно от примерно 10 до примерно 40 нуклеотидов.
Олигонуклеотиды, содержащие, по меньшей мере, один динуклеотид CG, могут быть получены удобным образом с применением обычного олигонуклеотидного синтеза.
Примеры CpG-олигонуклеотидных адъювантов находятся в источниках с 30 по 55.
Биологически разлагаемые полимерные микрочастицы
Биологически разлагаемые полимерные микрочастицы, как известно, используются в качестве вакцинных адъювантов (например, ист.56). Они пригодны в качестве адъювантов для парентерального введения и для нанесения на слизистые оболочки.
Кроме того, что он является биоразлагаемым, полимер, используемый для получения микрочастиц, обычно должен быть стерилизуемым и нетоксичным (биосовместимым). Подходящие биоразрушаемые полимеры можно легко приобрести, и они включают полимеры, которые получают из полигидроксимасляной кислоты; поликапролактона; полиортоэфира; полиангидрида; полигидроксибутирата и поли-α-гидроксикислоты. Предпочтительные полимеры получают из одной или более из поли-α-гидроксикислот, например поли-L-лактида, поли-D,L-лактида, сополимеров D,L-лактида и гликолида (такого как статистический сополимер D,L-лактид с гликолидом) или сополимер D,L-лактида или капролактона. Микрочастицы, полученные из статистического сополимера D,L-лактида с гликолидом (PLG), являются предпочтительными.
Существуют полимеры с разными молекулярными массами, и подходящая молекулярная масса для данного антигена может быть легко определена. Для поли-L-лактида подходящая молекулярная масса будет составлять порядка от примерно 2000 до 250000. Для PLG подходящая молекулярная масса будет обычно находиться в интервале от примерно 10000 до примерно 200000, предпочтительно от примерно 15000 до примерно 150000 и наиболее предпочтительно от примерно 50000 до примерно 100000.
Для микрочастиц из PLG можно использовать лактид:гликолид в разном соотношении, и отношение большей частью является делом выбора, зависящего частично от вводимого вместе с ними антигена и от степени желаемого их разрушения. Например, PLG 50:50, содержащий 50% D,L-лактида и 50% гликолида, будет давать быстро рассасывающийся сополимер, тогда как PLG 75:25 разлагается более медленно, а 85:15 и 90:10 еще более медленно из-за повышенного содержания лактидного компонента. Подходящее отношение лактид:гликолид легко определить на основе природы рассматриваемых антигена и заболевания. Кроме того, смеси микрочастиц с разным отношением лактид:гликолид найдут применение в препаратах для того, чтобы достичь желаемой кинетики высвобождения для данного антигена, и чтобы получить как первичный, так и вторичный иммунный ответ. Скорость разложения микрочастиц данного изобретения можно также регулировать с помощью таких факторов, как молекулярная масса полимера и кристалличность полимера.
Термин «микрочастица», как он использован здесь, относится к частице диаметром от примерно 100 нм до примерно 150 мкм, более предпочтительно диаметром от примерно 200 нм до примерно 30 мкм и наиболее предпочтительно диаметром от примерно 500 нм до примерно 10 мкм. Предпочтительно микрочастицы будут диаметром, который дает возможность парентерального введения без закупоривания игл и капилляров. Размер микрочастиц легко определить методами, хорошо известными в данной области техники, такими как фотонная корреляционная спектроскопия, лазерная дифрактометрия и/или сканирующая электронная микроскопия. Термин «микрочастица» включает «наночастицы» (57) в их границах. Предпочтительными микрочастицами являются микросферы, хотя можно также использовать ламеллярные частицы (58).
Микрочастицы можно получить, применяя любой из нескольких методов, хорошо известных в данной области техники (например, источник 59). Например, для получения микрочастиц можно использовать методы двойного выпаривания эмульсии/растворителя (например, источники 60 и 61). Эти методики включают образование первичной эмульсии, состоящей из капелек раствора полимера, содержащего антиген (если антиген должен заключаться в микрочастице), которую затем смешивают с непрерывной водной фазой, содержащей стабилизатор частиц/поверхностно-активное вещество.
Более конкретно, систему с выпариванием растворителя вода-в-масле-в-воде (в/м/в) можно использовать для получения микрочастиц, как описано в источниках 62, 63 и 64. При данной методике конкретный полимер соединяют с органическим растворителем, таким как этилацетат, диметилхлорид (также называемый метиленхлоридом и дихлорметаном), ацетонитрил, ацетон, хлороформ и тому подобное. Данный полимер будет представлен в примерно 2-15% растворе в органическом растворителе. Добавляют примерно равное количество раствора антигена (например, в воде) и эмульгируют раствор полимер/антиген, используя, например, гомогенизатор. Эмульсию затем объединяют с большим объемом водного раствора стабилизатора эмульсии, такого как поливиниловый спирт (PVA) или поливинилпирролидон. Стабилизатор эмульсии обычно представлен в примерно 2-15% растворе, более типично в примерно 4-10% растворе. Смесь затем гомогенизируют с получением стабильной двойной эмульсии (в/м/в). Органические растворители затем выпаривают.
Параметрами препарата можно манипулировать, чтобы обеспечить возможность получения небольших (<5 мкм) и больших (>30 мкм) микрочастиц (например, 63, 65). Например, сниженное перемешивание дает в результате микрочастицы большего размера, что дает увеличение объема внутренней фазы. Мелкие частицы продуцируются с помощью небольших объемов водной фазы при помощи высоких концентраций PVA.
Микрочастицы могут быть также сформированы с применением распылительной сушки и коацервации (например, источники 66, 67 и 68); методики взвешенного слоя, такие как сушка во взвешенном слое и слой Wurster (69, 70), ионное гелеобразование (71).
Перед использованием микрочастиц содержание антигена обычно определяют с тем, чтобы соответствующее количество микрочастиц можно было ввести субъекту для получения адекватного иммунного ответа.
Содержание антигена в микрочастицах можно определить известными специалистам методами, такими как разрушение микрочастиц и экстрагирование заключенного в них антигена. Например, микрочастицы можно растворить в диметилхлориде и экстрагировать белок в дистиллированную воду (например, источники 72, 73, 74). Альтернативно, микрочастицы можно диспергировать в 0,1 М NaOH, содержащем 5% (в/о) ДСН. Образец взбалтывают, центрифугируют и проводят количественный анализ супернатанта на антиген, применяя подходящий метод анализа (75).
Антиген и/или CpG-олигонуклеотиды можно включить в микрочастицы. Захват будет обычно осуществляться путем обеспечения присутствия антигена/олигонуклеотида при образовании микрочастиц, в то время как адсорбция на поверхности достигается путем добавления антигена/олигонуклеотида к предварительно полученным микрочастицам.
Одним из методов адсорбции антигена/олигонуклеотида на предварительно полученных микрочастицах является следующий. К микрочастицам добавляют воду и диспергируют до по существу мономерной суспензии микрочастиц, используя диализируемые анионные и катионные детергенты. Подходящие детергенты включают, но не ограничиваются ими, любой из разнообразных N-метилглюкамидов (известных как MEGA), таких как гептаноил-N-метилглюкамид (MEGA-7), октаноил-N-метилглюкамид (MEGA-8), нонаноил-N-метилглюкамид (MEGA-9) и деканоил-N-метилглюкамид (MEGA-10); холевая кислота; холат натрия; дезоксихолевая кислота; дезоксихолат натрия; таурохолевая кислота; таурохолат натрия; тауродезоксихолевая кислота; тауродезоксихолат натрия; 3-((3-холамидопропил)диметиламмонио)-1-пропансульфонат (CHAPS); N-октилглюкозид; 3-((3-холамидопропил)диметиламмонио)-2-гидрокси-1-пропансульфонат (CHAPSO); N-додецил-N,N-диметил-3-аммонио-1-пропансульфонат (ZWITTERGENT 3-12); N,N-БИС-(3-D-глюконамидопропил)-дезоксихоламид (DEOXYBIGCHAP); монолаурат сахарозы; гликохолевая кислота/гликохолат натрия; лауросаркозин (натриевая соль); гликодезоксихолевая кислота/гликодезоксихолат натрия; додецилсульфат натрия (ДСН; SDS); и гексадецилтриметиламмония бромид (СТАВ); додецилтриметиламмония бромид; гексадецилтриметиламмония бромид; тетрадецилтриметиламмония бромид; бензилдиметилдодециламмония бромид; бензилдиметилгексадециламмония хлорид; бензилдиметилтетрадециламмония бромид. Вышеперечисленные детергенты доступны для приобретения. В качестве детергентов можно также использовать различные катионные липиды, известные в данной области техники (76, 77).
Смесь микрочастиц/детергента затем физически растирают, например, используя керамическую ступку и пестик, до образования однородной густой суспензии. Затем добавляют подходящий водный буфер, такой как забуференный фосфатом солевой раствор (ФСБ; PBS) или забуференный Tris солевой раствор, и полученную смесь обрабатывают ультразвуком или гомогенизируют до тех пор, пока микрочастицы полностью не суспендируются. К суспензии микрочастиц затем добавляют антиген/олигонуклеотид и систему диализируют для удаления детергента. Микрочастицы из полимера и детергентную систему предпочтительно выбирают так, что антиген/олигонуклеотид будет адсорбироваться на поверхности микрочастиц, в то же время сохраняя активность. Полученные микрочастицы, содержащие адсорбированные на поверхности антиген/олигонуклеотид, можно отмыть от несвязанного антигена/олигонуклеотида и хранить в виде суспензии в соответствующем буферном составе или лиофилизировать с подходящими вспомогательными веществами, которые описаны далее ниже.
Комбинация антигена/CpG/микрочастицы
Различные физические взаимоотношения возможны между тремя основными компонентами композиций данного изобретения. Данные взаимоотношения возникают из-за того, что микрочастицы обладают внутренним объемом и поверхностью, оба из которых могут быть использованы для расположения CpG-олигонуклеотида и/или антигена.
Таким образом, данный антиген может быть заключен внутри микрочастиц, он может быть адсорбирован на микрочастицах или он может быть в простой смеси с микрочастицами без включения или адсорбции. Адсорбция является предпочтительной.
Подобным же образом CpG-олигонуклеотид может быть включен в микрочастицы, он может быть адсорбирован на микрочастицах или он может быть в простой смеси с микрочастицами. Адсорбция может быть достигнута при использовании таких детергентов, как CTAB.
CpG-олигонуклеотид и антиген, оба могут одинаково взаимодействовать как с микрочастицами, так и друг с другом, или взаимодействие может быть различным. Также CpG-олигонуклеотид и антиген могут быть адсорбированы на одних и тех же микрочастицах или CpG-олигонуклеотид и антиген могут быть адсорбированы на разных микрочастицах. Все возможные комбинации охватываются данным изобретением:
Композиции данного изобретения могут включать смеси, приведенные выше, например некоторые микрочастицы в композиции имеют заключенный в них антиген, а некоторые имеют адсорбированный антиген.
Фармацевтические композиции
Для фармацевтического применения композиции данного изобретения будут обычно включать фармацевтически приемлемый носитель. Это дает фармацевтическую композицию данного изобретения.
Фармацевтически приемлемый носитель может быть любым веществом, которое само не вызывает продукции антител, опасных для пациента, получающего композицию, и который может вводиться без чрезмерной токсичности. Подходящие носители могут быть представлены большими медленно метаболизируемыми макромолекулами, такими как белки, полисахариды, полимолочные кислоты, полигликолевые кислоты, полимерные аминокислоты, аминокислотные сополимеры и инактивированные вирусные частицы. Такие носители хорошо известны специалистам в данной области. Фармацевтически приемлемые носители могут включать жидкости, такие как вода, физиологический раствор, глицерин и этанол. Вспомогательные вещества, такие как улучшающие смачивание или эмульгирующие средства, буферные вещества для рН и тому подобное, также могут присутствовать в таких носителях. Подходящими носителями являются липосомы. Полное обсуждение фармацевтических носителей можно найти в источнике 78.
Композиции данного изобретения могут быть получены в разных формах. Например, композиции могут быть изготовлены в виде инъекционных форм, или растворов, или суспензий в жидкостях. Могут быть также изготовлены твердые формы, пригодные для получения растворов или суспензий в жидких носителях перед инъекциями. Может быть изготовлена композиция для местного применения, например мазь, крем или порошок. Может быть изготовлена композиция для перорального введения, например, в виде таблетки или капсулы, или сиропа (необязательно с корригентами). Данная композиция может быть изготовлена для легочного введения, например, в виде ингалятора с использованием тонкоизмельченного порошка или аэрозоля. Данная композиция может быть изготовлена в виде суппозитория или пессария. Может быть изготовлена композиция для назального введения, введения в уши или в глаза, например, в виде капель, в виде аэрозоля или в виде порошка (например, 79).
Фармацевтическая композиция является предпочтительно стерильной. Предпочтительно она является апирогенной. Она предпочтительно является буферной, например, с рН 6 и рН 8, обычно около рН 7.
Фармацевтическая композиция может быть лиофилизированной.
Данное изобретение представляет также устройство для доставки, содержащее фармацевтическую композицию данного изобретения. Устройство может представлять собой, например, шприц.
Медицинское лечение и использование
Композиции данного изобретения можно использовать терапевтически (т.е. для лечения существующей вызванной нейссериями инфекции) или профилактически (т.е. для предупреждения вызванной нейссериями инфекции в будущем).
Данное изобретение представляет композицию данного изобретения для использования в качестве лечебного средства.
Данное изобретение представляет также способ повышения антительного ответа у млекопитающего, включающий введение фармацевтической композиции данного изобретения млекопитающему. Антительный ответ является предпочтительно ответом IgA или IgG и предпочтительно он является бактерицидным.
Данное изобретение представляет также способ лечения млекопитающего, страдающего вызванными нейссериями инфекцией и/или заболеванием, включающий введение пациенту фармацевтической композиции данного изобретения.
Данное изобретение представляет также способ защиты млекопитающего от вызванных нейссериями инфекции и/или заболевания, включающий введение млекопитающему фармацевтической композиции данного изобретения.
Данное изобретение представляет также использование (а) антигена нейссерий, (b) CpG-олигонуклеотида и (с) биологически разлагаемых полимерных микрочастиц в производстве лекарственного средства для профилактики или лечения заболевания и/или инфекции у млекопитающего.
Млекопитающее является предпочтительно человеком. Человек может быть взрослым или предпочтительно ребенком. Композиции данного изобретения особенно полезны для иммунизации детей и подростков.
Применение и способы данного изобретения особенно пригодны для лечения/защиты от инфекций, вызванных N.meningitidis. Применение и способы особенно полезны для профилактики/лечения заболеваний, включая бактериальный менингит.
Эффективность терапевтического лечения может быть испытана путем отслеживания вызываемой Neisseria инфекции после введения композиции данного изобретения. Эффективность профилактического лечения может быть испытана путем контроля иммунного ответа на Neisseria после введения данной композиции.
Композиции данного изобретения будут обычно вводить непосредственно пациенту. Прямая доставка может быть осуществлена путем парентеральной инъекции (например, подкожно, внутрибрюшинно, внутривенно, внутримышечно или в интерстициальное пространство ткани) или путем ректального, перорального, вагинального введения, местного применения, трансдермального, в глаза, назального, в уши или пульмонарного введения. Предпочтительны инъекции и интраназальное введение.
Дозировка при лечении может быть представлена режимом с введением единственной дозы или режимом с многократным введением доз.
Дополнительные компоненты
Композиции данного изобретения могут включать адъюванты в дополнение к CpG-олигонуклеотидам и полимерным микрочастицам. Предпочтительные дополнительные адъюванты включают, но не ограничиваются этим: (А) соединения алюминия (например, гидроксид алюминия, фосфат алюминия, гидроксифосфат алюминия, оксигидроксид, ортофосфат, сульфат и т.д. (например, смотрите главы 8 и 9 источника 13)), или смеси разных соединений алюминия, причем соединения принимают любую подходящую форму (например, вид геля, кристаллический, аморфный и т.д.), и предпочтительной является адсорбция; (В) MF59 (5% сквален, 0,5% твин 80 и 0,5% спен 85, изготовленные в виде субмикронных частиц с использованием аппарата для микропсевдоожижения) (смотрите, глава с 10 из 13; см. также ист.80); (С) липосомы (см. главы 13 и 14 из ист.13); (D) ISCOM (см. глава 23 из ист.13), которые могут не содержать дополнительный детергент (81); (Е) SAF, содержащий 10% сквалена, 0,4% твин 80, 5% плурониевого блокполимера L121 и thr-MDP, или микропсевдоожиженный до субмикронной эмульсии или встряхиваемый до получения эмульсии с крупными частицами (см., глава 12 из ист.13); (F) адъювантную систему Ribi™ (RAS), (Ribi Immunochem), содержащую 2% сквалена, 0,2% твин 80 и один или более из компонентов бактериальной клеточной стенки из группы, состоящей из монофосфориллипида А (MPL), димиколата трегалозы (TDM) и каркаса клеточной стенки (CWS), предпочтительно MPL+CWS (Detox™); (G) сапониновые адъюванты, такие как QuilA или QS21 (см. главу 22 из ист.13), известный также как стимулон™ (Stimulon™) (82); (Н) хитозан (например, 83); (I) полный адъювант Фрейнда (ПАФ; CFA) и неполный адъювант Фрейнда (НАФ; IFA); (J) цитокины, такие как интерлейкины (например, IL-1, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-12 и т.д.), интерфероны (например, интерферон-г), стимулирующий колонии макрофагов фактор, фактор некроза опухолей и т.д. (см. главы 27 и 28 из ист.13); (К) монофосфориллипид А (MPL) или 3-О-дезацилированный MPL (3dMPL) (например, глава 21 из ист.13); (L) комбинации 3dMPL с, например, QS21 и/или эмульсиями масло-в-воде (84); (М) простой эфир полиоксиэтилена или сложный эфир полиоксиэтилена (85); (N) поверхностно-активное вещество (ПВА) - сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана в сочетании с октоксинолом (86) или ПВА - простой эфир или сложный эфир полиоксиэтиленалкила в комбинации с, по меньшей мере, одним дополнительным неионным ПВА, таким как октоксинол (87); (N) частицы соли металла (88); (О) сапонин и эмульсия масло-в-воде (89); (Р) сапонин (например, QS21)+3dMPL+IL-12 (необязательно+стерол) (90); (Q) термолабильный энтеротоксин («LT») E.coli или его детоксифицированные мутанты, такие как мутанты К63 или R72 (например, глава 5 из ист.91); (R) холерный токсин («ХТ») или его детоксифицированные мутанты (например, глава 5 из ист.91); (S) двунитевая РНК и (Т) другие вещества, которые действуют как иммуностимулирующие средства для повышения эффективности композиции (например, см. главу 7 из ист.13). Квасцы (особенно алюминия фосфат и/или гидроксид) и MF59 являются предпочтительными дополнительными адъювантами для парентеральной иммунизации. Мутантные токсины являются предпочтительными мукозными адъювантами.
Мурамиловые пептиды включают N-ацетилмурамил-L-треонил-D-изоглютамин (thr-MDP), N-ацетилнормурамил-L-аланил-D-изоглютамин (nor-MDP), N-ацетилмурамил-L-аланил-D-изоглютаминил-L-аланин-2-(1'-2'-дипальмитоил-sn-глицеро-3-гидроксифосфорилокси)этиламин МТР-РЕ) и т.д.
Помимо антигена(ов) Neisseria композиция может также включать дополнительные антигенные компоненты. Антигены, которые могут быть включены в композицию данного изобретения, включают:
- антигены из Helicobacter pylori, такие как CagA (c 92-95), VacA (96, 97), NAP (98, 99, 100), HopX (например, 101), HopY (например, 101) и/или уреаза;
- препарат везикул наружной мембраны (OMV) из N.meningitidis серогруппы В, такой как описанный в ист.102, 103, 104, 105 и т.д.;
- сахаридный антиген из Streptococcus pneumoniae (например, 106, 107, 108);
- антиген из вируса гепатита А, такой как инактивированный вирус (например, 109, 110);
- антиген из вируса гепатита В, такой как поверхностные и/или ядерные антигены (например, 110, 111);
- антиген из вируса гепатита С (например, 112);
- антиген из Bordetella pertussis, такой как коклюшный голотоксин (РТ) и гемагглютинин микроворсинок (FHA) из B. pertussis, необязательно также в сочетании с пертактином и/или агглютиногенами 2 и 3 (например, ист.113 и 114);
- дифтерийный антиген, такой как дифтерийный токсоид (например, глава 3 из ист.115), например мутанта CRM197 (например, 116);
- столбнячный антиген, такой как столбнячный токсоид (например, глава 4 из ист.115);
- сахаридный антиген из Haemophilus influenzae B (например, 23);
- антиген из Chlamidya pneumoniae (например, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123);
- антиген из Chlamidya trachomatis (например, 124);
- антиген из Porphyromonas gingivalis (например, 125);
- полиоантиген(ы) (например, 126, 127), такие как IPV или OPV;
- антиген(ы) бешенства (например, 128), такие как лиофилизированный инактивированный вирус (например, 129, RabAvert™);
- антиген(ы) кори, паротита и/или краснухи (например, главы 9, 10 и 11 из ист.115);
- антиген(ы) из вируса гриппа (например, глава 19 из ист.115), такие как гемагглютинин и/или нейраминидазные поверхностные белки;
- антиген(ы) из парамиксовирусов, таких как респираторно-синцитиальный вирус (RSV (130, 131)) и/или вирус парагриппа (PIV3 (132));
- антиген из Moraxella catarrhalis (например, 133);
- антиген из Streptococcus agalactiae (стрептококки группы В) (например, 134, 135);
- антиген из Streptococcus pyogenes (стрептококки группы A) (например, 135, 136, 137);
- антиген из Staphylococcus aureus (например, 138);
- антиген из Bacillus anthracis (например, 139, 140, 141);
- антиген из вируса семейства Flaviviridae (род Flavivirus), такой как из вируса желтой лихорадки, вируса японского энцефалита, четырех серотипов вирусов Денге, вируса клещевого энцефалита, вируса лихорадки западного Нила;
- пестивирусный антиген, такой как из вируса классической свиной лихорадки, вируса диареи крупного рогатого скота и/или вируса пограничного заболевания;
- парвовирусного антигена, например, из парвовируса В19;
- прионный белок (например, прионный белок CJD);
- амилоидный протеин, такой как бетапептид (142);
- раковый антиген, такой как антигены, перечисленные в таблице 1 из ист.143 или в таблицах 3 и 4 из ист.144.
Композиция может включать один или более из этих дополнительных антигенов.
Антигены, являющиеся белками токсинов, могут быть детоксифицированы, когда необходимо (например, детоксификация коклюшного токсина химическими и/или генетическими средствами (114)).
Когда в композицию включают дифтерийный антиген, предпочтительно также включить столбнячный антиген и коклюшные антигены. Подобным же образом, когда включен столбнячный антиген, предпочтительно также включать дифтерийный антиген и коклюшные антигены. Подобным же образом, когда включен коклюшный антиген, предпочтительно также включать дифтерийный антиген и столбнячный антиген.
Антигены предпочтительно адсорбируют на соли алюминия.
Антигены в композиции будут обычно присутствовать в концентрации, равной, по меньшей мере, 1 мкг/мл, каждый. В основном концентрация любого данного антигена будет достаточной для получения иммунного ответа против этого антигена.
В качестве альтернативы использования белковых антигенов в композиции данного изобретения можно использовать нуклеиновые кислоты, кодирующие данные антигены. Белковые компоненты композиций данного изобретения могут быть, таким образом, заменены нуклеиновыми кислотами (предпочтительно ДНК, например, в виде плазмид), которые кодируют белки.
Определения
Термин «содержащая» означает «включающая», а также «состоящая из», например композиция, «содержащая» Х, может состоять исключительно из Х или может включать что-нибудь дополнительное, например Х+Y.
Упоминания о проценте идентичности последовательности между двумя аминокислотными последовательностями означает при выравнивании процент аминокислот, которые являются одинаковыми при сравнении двух последовательностей. Это выравнивание и процент гомологии или идентичности последовательности можно определить с использованием программного обеспечения, известного в данной области техники, например программ, описанных в разделе 7.7.18 источника 145. Предпочтительное выравнивание определяется по алгоритму поиска гомологии Smith-Waterman с использованием поиска аффинного интервала с удалением открытого интервала, равным 12, и с удлинением интервала удаления, равным 2, матрица BLOSUM из 62. Алгоритм поиска гомологии Smith-Waterman указан в источнике 146.
СПОСОБЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Парентеральное примирование и вторичная иммунизация через слизистую антигеном Neisseria meningitidis серогруппы В
В источнике 6 описан белок из N.meningitidis серогруппы В, названный '287'. В источниках с 10 по 12 описаны пути улучшения его экспрессии. Один из путей включает делецию N-конца у белка до и включая шесть повторяющихся глициновых остатков. Этот белок назван “ДG287”.
Мышей примировали и повторно иммунизировали антигеном MenB ДG287 (20 мкг/дозу) из штамма 2996, приготовленного в форме для внутримышечного (IM) введения путем адсорбции на микрочастицах из PLG, с CpG-олигонуклеотидом или без него (также адсорбированным на микрочастицах). В качестве дополнительного препарата для интраназального (IN) введения использовали адъювант LT-К63. Мыши получали или 3 дозы IM или 2 дозы IM, затем 2 дозы IN (дозы вводили на: день 0; 28 день; 84 день и, необязательно, 98 день).
| Таблица 1 | ||||||
| Группа | Препарат | Путь | Доза | Антитела GMT через 2 недели | ||
| доза 2 | доза 3 | доза 4 | ||||
| 1 | PLG/287 | IM | 1,2,3 | 10,729 | 2,853 | - |
| 2 | PLG/287+PLG/CpG | IM | 1,2,3 | 15,673 | 4,163 | - |
| 3 | PLG/287 | IM | 1,2 | 9,064 | 7,948 | 9,412 |
| 287+LT-К63 | IN | 3,4 | ||||
| 4 | PLG/287+PLG/CpG | IM | 1,2 | 34,891 | 15,167 | 16,556 |
| 287+LT-К63 | IN | 3,4 | ||||
Таким образом, включение CpG-олигонуклеотида повышало титры антител против введенного внутримышечно белка MenB 287 (сравниваемые группы 1 и 2). Титры могли быть повышены заменой третьего внутримышечного введения двумя интраназальными дозами (сравниваемые группы 1 и 3). Усиление c помощью CpG также наблюдали при внутримышечно/интраназальном режиме (сравниваемые группы 3 и 4).
Сравнение адъювантов для белка MenB-287
ДG287 готовили в рецептуре с разными адъювантами и вводили мышам. Сыворотку от мышей оценивали, применяя анализ на бактерицидные антитела (БЦА), и титры были следующими:
| Таблица 2 | ||
| Адъювант | БЦА, после 2 | БЦА, после 3 |
| Адъювант Фрейнда | 2048 | 8192 |
| Квасцы | <4 | 256 |
| Квасцы+CpG-олигонуклеотид | 256 | 4096 |
| MF59 | <4 | <4 |
| CpG-олигонуклеотид | <4 | 128 |
| PLG-микрочастицы (адсорбированные) | 8 | 1024 |
| PLG-микрочастицы (адсорбированные)+CpG | 2048 | 16384 |
CpG-олигонуклеотид был, таким образом, только умеренно эффективным как адъювант, почти сравнимым с квасцами. Микрочастицы из PLG были более эффективными, чем квасцы и CpG, но не так эффективны, как адъювант Фрейнда. По заметному контрасту, однако, смесь CpG и PLG по активизации была равна адъюванту Фрейнда на стадии после второй иммунизации и превосходила адъювант Фрейнда после третьей иммунизации.
Повышение адъювантности PLG с помощью применения CpG наблюдалось также в отдельном исследовании (02-0279):
| Таблица 3 | ||
| Адъювант | GMT, после 2 | GMT, после 3 |
| MF59 | 6967 | 13417 |
| PLG-микрочастицы (адсорбированные) | 7070 | 11367 |
| PLG-микрочастицы (адсорбированные)+CpG | 15099 | 26833 |
Эффект адсорбции на адъювантность
Был исследован эффект адсорбции на адъювантность. Белок ДG287 был или адсорбирован на микрочастицах PLG с использованием сурфактанта DSS или ДСН, или просто смешан с частицами. Иммунизацию выполняли в дни 0, 21 и 35, и титры оценивали на 35 и 49 день. Результаты были следующими:
| Таблица 4 | |||
| Препарат | БЦА | Титр антител через 2 недели | |
| Доза 2 | Доза 3 | ||
| CpG+287 адсорбированные на PLG (DSS) | 4096 | 45817 | 67921 |
| CpG+287 адсорбированные на PLG (ДСН) | 4096 | 39730 | 29911 |
| CpG+287+PLG (нет адсорбции) | <16 | 62 | 1065 |
| DSS+287 адсорбированные на квасцах | <16 | 1209 | 1249 |
| CpG+287 адсорбированные на квасцах | 1024 | 4054 | 12236 |
| 287, адсорбированный на квасцах | 128 | 646 | 2454 |
Адъювантность смесей CpG и микрочастиц для ДG287, таким образом, является оптимальной, когда антиген адсорбируется на микрочастицах.
В источнике 6 описан белок из N.meningitidis серогруппы В, названный «961» (в настоящее время известный как «NadA» (16, 17)). В источниках 10 и 12 описаны пути улучшения экспрессии NadA. Один из путей включает делецию С-конца белка с удалением его мембранного якоря (т.е. удалением аминокислот 351-405 для штамма 2996), а также естественное удаление его лидерного пептида. Этот белок назван «961 с». Эффект адсорбции на адъювантность PLG при одновременном введении с CpG был изучен для 961 с, как описано выше для 287:
| Таблица 5 | ||
| Препарат | БЦА | Титр антител через 2 недели после 3 дозы |
| 961 адсорбированный на PLG (ДСН) | 2048 | 20661 |
| 961+PLG (без адсорбции) | 256 | 1706 |
| 287, адсорбированный на PLG | 4096 | 63057 |
| 287, адсорбированный на PLG+растворимый 961 | 4096 | 287:86052; 961:1924 |
| 287, адсорбированный на PLG+961, адсорбированный на PLG | 8192 | 287:107142; 961:11717 |
| 287 (не адсорбированный)+961 (не адсорбированный)+«чистый» PLG | 1024 | 287:1266; 961:145 |
| 287 (адсорбированный)+961 (адсорбированный)+«чистый» PLG | 8192 | 287:78176; 961:20876 |
Поэтому, что касается ДG287, адъювантность смесей CpG и микрочастиц для 961с является оптимальной, когда антиген адсорбирован на микрочастицах. Это верно в отношении антигена самого по себе и антигена при сочетании с ДG287.
Поэтому в отношении ДG287 и 961с, отдельно и в сочетании, наилучшая адъювантность для смесей CpG и PLG наблюдается, когда антигены адсорбированы на микрочастицах из PLG.
PLG, CpG, квасцы и MF59
Разные комбинации PLG, CpG и квасцов испытывали в отношении протеина ДG287, экспрессированного в виде His-меченного продукта. Сывороточные бактерицидные титры после трех иммунизаций были следующими:
| Таблица 6 | |
| Адъювант | Титр |
| Квасцы | 2048 |
| Квасцы+CpG | 32768 |
| MF59 | 8192 |
| MF59+CpG | 32768 |
| PLG (антиген, адсорбированный на PLG) | 1024 |
| PLG+CpG (антиген и CpG, оба адсорбированы на PLG) | 4096 |
| PLG+MF59 (антиген, адсорбированный на PLG) | 2048 |
| PLG+MF59+CpG (антиген, адсорбированный на PLG) | 8192 |
| Полный адъювант Фрейнда | 32768 |
| PLG+полный адъювант Фрейнда (антиген, адсорбированный на PLG) | 2048 |
Выполняли подобные же эксперименты и результаты были следующими:
| Таблица 7 | |
| Адъювант | Титр |
| PLG (антиген, адсорбированный на PLG) | 1024 |
| PLG+CpG (антиген, адсорбированный на PLG) | 16384 |
| PLG+CpG (антиген и CpG, оба адсорбированы на PLG) | 16384 |
| PLG+квасцы (антиген, адсорбированный на PLG) | 1024 |
| PLG+квасцы+CpG (антиген, адсорбированный на PLG) | 16384 |
| PLG+квасцы+CpG (антиген и CpG, оба адсорбированы на PLG) | 8192 |
| PLG+MF59 (антиген адсорбирован на PLG) | 4096 |
| PLG+MF59+CpG (антиген адсорбирован на PLG) | 16384 |
| Квасцы (антиген адсорбирован на квасцах) | 256 |
| CpG | 128 |
| Квасцы+CpG | 1024 |
| Квасцы+CpG+PLG (антиген адсорбирован на квасцах; CpG адсорбирован на PLG) | 4096 |
| CpG+PLG (CpG адсорбирован на PLG; антиген не адсорбирован) | 64 |
Таким образом, MF59 и квасцы могут дополнительно усиливать эффективность смесей CpG/PLG, адсорбция CpG на микрочастицах из PLG не является необходимой для адъювантности, но адсорбция антигена на микрочастицах, как наблюдалось, опять является оптимальной.
Смеси антигенов
Эффект адсорбции на адъювантность изучены в отношении белков ДG287 и 961 с, отдельно или в комбинации. Титры антител после трех введений были следующими:
| Таблица 8 | ||
| Препарат | Антитела GMT к | |
| 287 | 961 | |
| CpG+961, адсорбированный на PLG | - | 20661 |
| CpG+961+PLG (без адсорбции) | - | 1706 |
| CpG+961+287, адсорбированный на PLG | 86052 | 1924 |
| CpG+961, адсорбированный на PLG, +287, адсорбированный на PLG | 107142 | 11717 |
| CpG+287, адсорбированный на PLG | 63057 | - |
| CpG+287 и 961, совместно адсорбированные на PLG | 57306 | 6251 |
| CpG+961, адсорбированный на PLG, +287, адсорбированный на PLG+PLG | 78176 | 20876 |
| 287+961+PLG (без адсорбции антигенов) | 1266 | 145 |
Поэтому, что касается ДG287, адъювантность смесей CpG и микрочастиц для белка 961с является оптимальной, когда антиген адсорбирован на микрочастицах.
Дополнительные комбинации адъювантов с микрочастицами из PLG были испытаны в отношении белков ДG287 и 961с. CpG был или растворенным, или адсорбированным на микрочастицах из PLG. Результаты были следующими:
| Таблица 9 | |||
| Препарат+PLG микрочастицы | БЦА | GMT к | |
| 287 | 961 | ||
| 287 (адсорбированный на PLG)+961 (адсорбированный на PLG) | 256 | 5719 | 2412 |
| 287 (адсорбированный на PLG)+961 (адсорбированный на PLG)+CpG | 512 | 17553 | 8627 |
| 287 (адсорбированный на PLG)+961(адсорбированный на PLG)+CpG (адсорбированный на PLG) | 1024 | 16906 | 6720 |
| 287 (адсорбированный на PLG)+961 (адсорбированный на PLG)+MF59 | 64 | 4636 | 3969 |
| 287 (адсорбированный на PLG)+961 (адсорбированный на PLG)+MF59+CpG | 2048 | 23642 | 48446 |
Подобную же работу выполняли на группах из 10 мышей CD-1, используя 20 мкг адсорбированного на PLG антигена на IM дозу (дни 0, 21 и 35). Когда присутствовал CpG, его давали по 10 мкг на дозу. Титры по ТИФА (GMT) рассчитывали как обратную величину разведения сыворотки, дающую OD450 нм 0,5, и сыворотки тестировали на оба антигена. Титры бактерицидной активности сыворотки (БАС) рассчитывали как обратную величину разведения сыворотки, убивающего 50% целевых бактерий, и сыворотки испытывали на активность против штамма 2996 и против МС58, гетерологичного штамма. Титры на 49 день (через 2 недели после третьей дозы) были следующими:
| Таблица 10 | ||||||
| 287 | 961 | Дополнительный адъювант | GMT | БАС | ||
| 287 | 961 | 2996 | МС58 | |||
| Х | - | - | 8375 | - | 512 | <4 |
| Х | - | Растворенный CpG | 33736 | - | 1024 | 128 |
| Х | - | Адсорбированный на PLG CpG | 32058 | - | 1024 | 64 |
| - | Х | - | - | 3818 | но | но |
| - | Х | Растворенный CpG | - | 14149 | 2048 | <4 |
| - | Х | Адсорбированный на PLG CpG | - | 18526 | 2048 | <4 |
| Х | Х | - | 13557 | 2476 | но | но |
| Х | Х | Растворенный CpG | 21664 | 6557 | 8192 | 64 |
| Х | Х | Адсорбированный на PLG CpG | 27259 | 7510 | 2048 | 128 |
| Х | Х | Растворенный CpG+MF59 | 27981 | 26826 | 2048 | 256 |
| Контроль: растворенный 287 с CFA | 37889 | - | 1024 | <32 | ||
| Контроль: растворенный 961 с CFA | - | 50453 | 4096 | <4 | ||
| Контроль: растворенный 287 и 961 с CFA | 1678 | 27069 | 512 | <32 | ||
В источнике 12 описана комбинация трех белков, которые включают пять различных антигенов N.meningitidis: (1) 961с2996; (2) ДG287NZ-9532996 и (3) 9362996-ДG741МС58. Смесь антигенов испытывали в источнике 12, используя в качестве адъюванта гидроксид алюминия. В соответствии с данным изобретением стимулирующая активность смеси антигенов усиливается адсорбцией на биологически разлагаемых полимерных частицах плюс CpG-олигонуклеотид. Титры после третьей дозы были следующими:
| Таблица 11 | |||||||||||
| Иммунизация | ТИФА GMT | БАС (против семи штаммов) | |||||||||
| 961 | 287 | 741 | 953 | 2996 | МС58 | BZ133 | 394/98 | NGH38 | F6124 | 44/76 | |
| (1) 961 на квасцах | 12346 | - | - | - | 4096 | <4 | <4 | <4 | <4 | 64 | <4 |
| (2) 287-953 на квасцах | - | 6415 | - | 585 | 1024 | 1024 | 256 | 1024 | 4096 | 256 | 1024 |
| (3) 936-741 на квасцах | - | - | 10625 | - | <4 | 32768 | 16384 | 1024 | 128 | 16384 | 32768 |
| (1), (2) и (3) на квасцах | 42302 | 18206 | 33881 | 4549 | 8192 | 32768 | 32768 | 2048 | 4096 | 32768 | 65536 |
| (1) 961 на PLG | 14185 | - | - | - | 2048 | 4 | <4 | <4 | 16 | 256 | <4 |
| (2) 287-953 на PLG | - | 43515 | - | 478 | 2048 | 128 | 2048 | 2048 | 8192 | 4096 | 128 |
| (3) 936-741 на PLG | - | - | 16150 | - | <4 | 32768 | 16384 | 1024 | 512 | 8192 | 262144 |
| (1), (2) и (3) на PLG | 6735 | 24304 | 13801 | 1214 | 4096 | 65536 | 32768 | 2048 | 4096 | 32768 | 65536 |
| (1), (2) и (3) на PLG+CpG | 10896 | 40697 | 26966 | 2301 | 8192 | 262144 | 65536 | 4096 | 8192 | 32768 | 262144 |
По сравнению с алюминиевым адъювантом, использованным в источнике 12, смесь PLG+CpG приводит к более низким общим титрам антител (за исключением для белка 287), но важно, что она дает более высокие бактерицидные титры против широкого ряда штаммов. Несмотря на то, что абсолютные титры являются более низкими, адъювант данного изобретения, следовательно, преимущественно повышает продукцию бактерицидных антител.
Будет понятно, что данное изобретение было описано только в качестве примера, и можно осуществить модификации, оставаясь в рамках объема и сущности данного изобретения.
Claims (15)
1. Иммуногенная композиция, содержащая:
(а) антиген Neisseria, содержащий белок серогруппы В Neisseria meningitides, выбранный из группы, состоящей из:
a) белка NadA или последовательности, которая более чем на 80% гомологична белку NadA;
b) белка 287 или последовательности, которая более чем на 80% гомологична белку 287;
c) белка 741 с последовательностью:
1 VNRTAFCCLS LTTALILTAC SSGGGGVAAD IGAGLADALT APLDHKDKGL
51 QSLTLDQSVR KNEKLKLAAQ GAEKTYGNGD SLNTGKLKND KVSRFDFIRQ
101 IEVDGQLITL ESGEFQVYKQ SHSALTAFQT EQIQDSEHSG KMVAKRQFRI
151 GDIAGEHTSF DKLPEGGRAT YRGTAFGSDD AGGKLTYTID FAAKQGNGKI
201 EHLKSPELNV DLAAADIKPD GKRHAVISGS VLYNQAEKGS YSLGIFGGKA
251 QEVAGSAEVK TVNGIRHIGL AAKQ
или последовательности, которая более чем на 80% гомологична белку 741;
d) белка с последовательностью:
1 MKKIIFAALA AAAISTASAA TYKVDEYHAN ARFAIDHFNT STNVGGFYGL
51 TGSVEFDQAK RDGKIDITIP IANLQSGSQH FTDHLKSADI FDAAQYPDIR
101 FVSTKFNFNG KKLVSVDGNL TMHGKTAPVK LKAEKFNCYQ SPMEKTEVCG
151 GDFSTTIDRT KWGMDYLVNV GMTKSVRIDI QIEAAKQ
или последовательности, которая более чем на 80% гомологична белку 953;
(b) CpG-олигонуклеотид; и
(c) биологически разлагаемые полимерные микрочастицы, представляющие собой сополимер D, L лактида с гликолидом (PLG).
(а) антиген Neisseria, содержащий белок серогруппы В Neisseria meningitides, выбранный из группы, состоящей из:
a) белка NadA или последовательности, которая более чем на 80% гомологична белку NadA;
b) белка 287 или последовательности, которая более чем на 80% гомологична белку 287;
c) белка 741 с последовательностью:
1 VNRTAFCCLS LTTALILTAC SSGGGGVAAD IGAGLADALT APLDHKDKGL
51 QSLTLDQSVR KNEKLKLAAQ GAEKTYGNGD SLNTGKLKND KVSRFDFIRQ
101 IEVDGQLITL ESGEFQVYKQ SHSALTAFQT EQIQDSEHSG KMVAKRQFRI
151 GDIAGEHTSF DKLPEGGRAT YRGTAFGSDD AGGKLTYTID FAAKQGNGKI
201 EHLKSPELNV DLAAADIKPD GKRHAVISGS VLYNQAEKGS YSLGIFGGKA
251 QEVAGSAEVK TVNGIRHIGL AAKQ
или последовательности, которая более чем на 80% гомологична белку 741;
d) белка с последовательностью:
1 MKKIIFAALA AAAISTASAA TYKVDEYHAN ARFAIDHFNT STNVGGFYGL
51 TGSVEFDQAK RDGKIDITIP IANLQSGSQH FTDHLKSADI FDAAQYPDIR
101 FVSTKFNFNG KKLVSVDGNL TMHGKTAPVK LKAEKFNCYQ SPMEKTEVCG
151 GDFSTTIDRT KWGMDYLVNV GMTKSVRIDI QIEAAKQ
или последовательности, которая более чем на 80% гомологична белку 953;
(b) CpG-олигонуклеотид; и
(c) биологически разлагаемые полимерные микрочастицы, представляющие собой сополимер D, L лактида с гликолидом (PLG).
2. Композиция по п.1, в которой CpG-олигонуклеотид содержит от примерно 6 до примерно 100 дезоксирибонуклеотидов.
3. Композиция по п.1, в которой биологически разлагаемые полимерные микрочастицы содержат поли-α-гидроксикислоты.
4. Композиция по п.1, в которой антиген Neisseria заключен внутри микрочастиц.
5. Композиция по п.1, в которой антиген Neisseria адсорбирован на микрочастицах.
6. Композиция по п.1, в которой CpG-олигонуклеотид заключен внутри микрочастиц.
7. Композиция по п.1, в которой CpG-олигонуклеотид адсорбирован на микрочастицах.
8. Композиция по п.1, дополнительно содержащая адъювант.
9. Композиция по п.8, содержащая адъювант MF59.
10. Композиция по п.8, содержащая адъювант - соль алюминия.
11. Композиция по п.1, содержащая, по меньшей мере, один дополнительный антиген не Neisseria.
12. Композиция по п.1, дополнительно содержащая фармацевтически приемлемый носитель.
13. Способ повышения гуморального ответа у млекопитающего, включающий введение млекопитающему композиции по любому из пп.1-12.
14. Способ защиты млекопитающего от инфекции и/или заболевания, вызванных Neisseria, включающий введение данному пациенту композиции по любому из пп.1-12.
15. Применение композиции по п.1, включающей (а) антиген Neisseria, содержащий белок NadA, 287, 741, 953 серогруппы В Neisseria meningitides; (b) CpG-олигонуклеотид; и (с) биологически разлагаемые полимерные микрочастицы, представляющие собой сополимер D, L лактида с гликолидом (PLG) для производства лекарственного средства для профилактики или лечения заболевания и/или инфекции у млекопитающего.
Applications Claiming Priority (13)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US32692901P | 2001-10-03 | 2001-10-03 | |
| US60/326,929 | 2001-10-03 | ||
| PCT/US2002/010869 WO2002080648A2 (en) | 2001-04-05 | 2002-04-05 | Mucosal boosting following parenteral priming |
| USPCT/US02/10869 | 2002-04-05 | ||
| US60/373,547 | 2002-04-17 | ||
| US38067702P | 2002-05-13 | 2002-05-13 | |
| US60/380,677 | 2002-05-13 | ||
| US0230423 | 2002-09-24 | ||
| US10/254,438 | 2002-09-24 | ||
| USPCT/US02/30423 | 2002-09-24 | ||
| USPCT/US02/31486 | 2002-10-03 | ||
| US10/265,083 | 2002-10-03 | ||
| PCT/US2002/031486 WO2003028656A2 (en) | 2001-10-03 | 2002-10-03 | Adjuvant compositions |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2004113432A RU2004113432A (ru) | 2005-04-20 |
| RU2360699C2 true RU2360699C2 (ru) | 2009-07-10 |
Family
ID=35634732
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2004113432/13A RU2360699C2 (ru) | 2001-10-03 | 2002-10-03 | Композиции менингококковых вакцин с адъювантами |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2360699C2 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2440141C1 (ru) * | 2010-05-31 | 2012-01-20 | Федеральное Государственное Автономное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Дальневосточный Федеральный Университет" (Двфу) | Способ регуляции иммуногенности антигена |
| RU2491090C2 (ru) * | 2007-08-29 | 2013-08-27 | Виттисель | Комбинированный препарат для увеличения иммуногенности вакцины (варианты) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6239116B1 (en) * | 1994-07-15 | 2001-05-29 | University Of Iowa Research Foundation | Immunostimulatory nucleic acid molecules |
-
2002
- 2002-10-03 RU RU2004113432/13A patent/RU2360699C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6239116B1 (en) * | 1994-07-15 | 2001-05-29 | University Of Iowa Research Foundation | Immunostimulatory nucleic acid molecules |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2491090C2 (ru) * | 2007-08-29 | 2013-08-27 | Виттисель | Комбинированный препарат для увеличения иммуногенности вакцины (варианты) |
| RU2440141C1 (ru) * | 2010-05-31 | 2012-01-20 | Федеральное Государственное Автономное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Дальневосточный Федеральный Университет" (Двфу) | Способ регуляции иммуногенности антигена |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2004113432A (ru) | 2005-04-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| USRE45137E1 (en) | Adjuvanted meningococcus compositions | |
| JP4696260B2 (ja) | キトサンアジュンバントおよび髄膜炎菌抗原を用いる粘膜ワクチン | |
| JP5670003B2 (ja) | 血清型ＢおよびＣ由来のＮｅｉｓｓｅｒｉａｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ抗原、ならびにさらなる抗原を含む組成物 | |
| JP5597245B2 (ja) | アジュバント添加した髄膜炎菌ｈ因子結合タンパク質 | |
| RU2325184C2 (ru) | Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий | |
| JP5075317B2 (ja) | 莢膜性多糖類の可溶化および組合せワクチン | |
| JP5038136B2 (ja) | サッカリド抗原のためのグリコセラミドアジュバント | |
| PT1409013E (pt) | Vacinas compreendendo os adjuvantes alumínio e histidina | |
| ES2399386T3 (es) | Aumento de la inmunidad de las mucosas tras sensibilización parenteral | |
| JP4522699B2 (ja) | アジュバント化されたＭｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃｕｓ組成物 | |
| AU2002334844A1 (en) | Adjuvanted meningococcus compositions | |
| US7838015B2 (en) | Adjuvanted meningococcus compositions | |
| RU2360699C2 (ru) | Композиции менингококковых вакцин с адъювантами | |
| MXPA04003186A (es) | Composiciones de meningococo coadyuvantes. | |
| AU2007231677A1 (en) | Adjuvanted meningococcus compositions | |
| JP2006516609A (ja) | 粘膜髄膜炎菌性ワクチン |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20131004 |