RU2380358C2

RU2380358C2 - Пентафторсульфанил-бензоилгуанидины, способ их получения, их применение в качестве лекарственных или диагностических средств, а также содержащие их лекарственные средства

Info

Publication number: RU2380358C2
Application number: RU2006120448/04A
Authority: RU
Inventors: Хайнц-Вернер КЛЕЕМАНН (DE); Хайнц-Вернер КЛЕЕМАНН
Original assignee: Санофи-Авентис Дойчланд Гмбх
Priority date: 2003-11-13
Filing date: 2004-11-03
Publication date: 2010-01-27
Also published as: CA2551057A1; JP2007513076A; DE502004004460D1; HRP20070364T3; AU2004288758B2; CY1106868T1; IL175237A0; RU2006120448A; TNSN06116A1; PT1685096E; MY144211A; ES2287788T3; HK1095584A1; DE10353202A1; IL175237A; CN100445265C; JO2466B1; PE20051034A1; ZA200602579B; OA13285A

Abstract

Изобретение относится к новым пентафторсульфанил-бензоилгуанидинам формулы I, где R1 обозначает алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами, R2 обозначает водород, R3 обозначает -SO₂CH₃, R4 обозначает водород, а также их фармацевтически приемлемым солям, которые являются пригодными для применения в качестве ингибитора NHE1 или для получения обладающего ингибирующей активностью в отношении NHE1 лекарственного средства, а также к способу получения соединений формулы I. 4 н. и 2 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл.

Description

Пентафторсульфанил-бензоилгуанидины формулы I

где R1-R4 имеют значения, приведенные в пунктах формулы изобретения, и их фармацевтически приемлемые соли являются замещенными ацилгуанидинами и ингибируют клеточный натрий-водородный обмен (ионообменник Na⁺/H⁺, NHE). Благодаря NHE-ингибирующим свойствам соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли пригодны для профилактики и лечения заболеваний, вызываемых активацией NHE или активированным NHE, а также вторичных заболеваний, вызываемых нарушениями, обусловленными NHE.

По сравнению с известными соединениями соединения согласно изобретению характеризуются чрезвычайно высокой эффективностью в ингибировании Na⁺/H⁺-обмена, а также улучшенными свойствами ADMET. Посредством ксенобиотической структуры (в особенности посредством введения более «неестественных/чуждых природе» заместителей SF₅) оказывается предпочтительное влияние на распределение в тканях. Кроме прочего, это ведет к повышенной экспозиции in vivo. При этом условия резорбции оказывают несущественное влияние, и поддерживается высокая биодоступность ацилгуанидинов.

В противоположность некоторым описанным в литературе ацилгуанидинам, предлагаемые соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли не характеризуются никакими нежелательными и вредными салуретическими свойствами.

Изобретение касается пентафторсульфанил-бензоилгуанидинов формулы I

где

R1 обозначает водород, алкил с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, F, Cl, Br, I, -CN, NR5R6, -O_p-(CH₂)_n-(CF₂)_o-CF₃ или -(SO_m)_q-(CH₂)_r-(CF₂)_s-CF₃;

R5 и R6

независимо друг от друга обозначают водород, алкил с 1, 2, 3 или 4 C-атомами или -CH₂-CF₃;

m обозначает ноль, 1 или 2;

n, o, p, q, r и s

независимо друг от друга обозначают ноль или 1;

R2 обозначает водород, алкил с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, F, Cl, Br, I, -CN, NR7R8, -O_t-(CH₂)_u-(CF₂)_v-CF₃ или -(SO_w)_x-(CH₂)_y-(CF₂)_z-CF₃;

R7 и R8

w обозначает ноль, 1 или 2;

t, u, v, x, y и z

R3 обозначает Cl, Br, I, -CN, -SO₂CH₃, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, NR9R10, -O_a-(CH₂)_b-(CF₂)_c-CF₃, -(SO_d)_e-(CH₂)_f-(CF₂)_g-CF₃, алкил с 1, 2, 3, 4, 5 или 6 C-атомами или циклоалкил с 3, 4, 5, 6, 7 или 8 C-атомами, в котором 1, 2, 3 или 4 атома водорода могут быть замещены атомами фтора;

R9 и R10

a, b и c

d обозначает ноль, 1 или 2;

e обозначает ноль или 1;

f обозначает ноль, 1, 2, 3 или 4;

g обозначает ноль или 1;

или

R3 обозначает -(CH₂)_h-фенил или -O-фенил,

в которых фенильный остаток не замещен или замещен 1, 2 или 3 остатками, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, -O_j-(CH₂)_k-CF₃, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, алкила с 1, 2, 3 или 4 C-атомами и -SO₂CH₃;

j обозначает ноль или 1;

k обозначает ноль, 1, 2 или 3;

h обозначает ноль, 1, 2, 3 или 4;

или

R3 обозначает -(CH₂)_aa-гетероарил,

незамещенный или замещенный 1, 2 или 3 остатками, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, -O_bb-(CH₂)_cc-CF₃, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, алкила с 1, 2, 3 или 4 C-атомами и -SO₂CH₃;

bb обозначает ноль или 1;

cc обозначает ноль, 1, 2 или 3;

aa обозначает ноль, 1, 2, 3 или 4;

R4 обозначает водород, F, Cl, Br, I, -CN, -SO₂CH₃, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, NR11R12, -O_dd-(CH₂)_ee-(CF₂)_ff-CF₃, -(SO_gg)_hh-(CH₂)_jj-(CF₂)_kk-CF₃, алкил с 1, 2, 3, 4, 5 или 6 C-атомами или циклоалкил с 3, 4, 5, 6, 7 или 8 C-атомами, в котором 1, 2, 3 или 4 атома водорода могут быть замещены атомами фтора;

R11 и R12

dd, ee и ff

gg обозначает ноль, 1 или 2;

hh обозначает ноль или 1;

jj обозначает ноль, 1, 2, 3 или 4;

kk обозначает ноль или 1;

или

R4 обозначает -(CH₂)_ll-фенил или -O-фенил,

в которых фенильный остаток незамещен или замещен 1, 2 или 3 остатками, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, -O_mm-(CH₂)_nn-CF₃, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, алкила с 1, 2, 3 или 4 C-атомами и -SO₂CH₃;

mm обозначает ноль или 1;

nn обозначает ноль, 1, 2 или 3;

ll обозначает ноль, 1, 2, 3 или 4;

или

R4 обозначает -(CH₂)_oo-гетероарил,

незамещенный или замещенный 1, 2 или 3 остатками, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, -O_pp-(CH₂)_rr-CF₃, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, алкила с 1, 2, 3 или 4 C-атомами и -SO₂CH₃;

pp обозначает ноль или 1;

rr обозначает ноль, 1, 2 или 3;

oo обозначает ноль, 1, 2, 3 или 4;

а также их фармацевтически приемлемые соли.

Предпочтительными являются соединения формулы I, в которой:

R5 и R6

m обозначает ноль, 1 или 2

n, o, p, q, r и s

R2 обозначает водород или F;

R3 обозначает Cl, Br, I, -CN, -SO₂CH₃, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, NR9R10, -O_a-(CH₂)_b-(CF₂)_c-CF₃, -(SO_d)_e-(CH₂)_f-(CF₂)_g-CF₃, алкил с 1, 2, 3, 4, 5 или 6 C-атомами или циклоалкил с 3, 4, 5, 6, 7 или 8 C-атомами,

в котором 1, 2, 3 или 4 атома водорода могут быть замещены атомами фтора;

R9 и R10

a, b и c

d обозначает ноль, 1 или 2;

e обозначает ноль или 1;

f обозначает ноль, 1, 2, 3 или 4;

g обозначает ноль или 1;

или

R3 обозначает -(CH₂)_h-фенил или -O-фенил,

в которых фенильные остатки не замещены или замещены 1, 2 или 3 остатками, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, -O_j-(CH₂)_k-CF₃, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, алкила с 1, 2, 3 или 4 C-атомами и -SO₂CH₃;

j обозначает ноль или 1;

k обозначает ноль, 1, 2 или 3;

h обозначает ноль, 1, 2, 3 или 4;

или

R3 обозначает -(CH₂)_aa-гетероарил,

bb обозначает ноль или 1;

cc обозначает ноль, 1, 2 или 3;

aa обозначает ноль, 1, 2, 3 или 4;

R4 обозначает водород или F;

Особенно предпочтительными являются соединения формулы I, в которой:

R1 обозначает водород, алкил с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, F, Cl, Br, I, -CN, NR5R6, -O-CH₂-CF₃ или -(SO_m)_q-(CH₂)_r-CF₃;

R5 и R6

m обозначает ноль, 1 или 2;

q и r

R2 обозначает водород или F;

R3 обозначает Cl, Br, I, -CN, -SO₂CH₃, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, NR9R10, -O-CH₂-CF₃, -(SO_d)_e-CF₃, алкил с 1, 2, 3, 4, 5 или 6 C-атомами или циклоалкил с 3, 4, 5, 6, 7 или 8 C-атомами, в котором 1, 2, 3 или 4 атома водорода могут быть замещены атомами фтора;

R9 и R10

d обозначает ноль, 1 или 2;

e обозначает ноль или 1;

или

R3 обозначает фенил,

незамещенный или замещенный 1, 2 или 3 остатками, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, -O_j-(CH₂)_k-CF₃, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, алкила с 1, 2, 3 или 4 C-атомами и -SO₂CH₃;

j обозначает ноль или 1;

k обозначает ноль, 1, 2 или 3;

или

R3 обозначает гетероарил,

bb обозначает ноль или 1;

cc обозначает ноль, 1, 2 или 3;

R4 обозначает водород или F;

Еще более предпочтительными являются соединения формулы I, в которой:

R1 обозначает водород, алкил с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, метокси, этокси, F, Cl, NR5R6, -O-CH₂-CF₃ или -(SO_m)_q-(CH₂)_r-CF₃;

R5 и R6

m обозначает ноль, 1 или 2;

q и r

R2 обозначает водород или F;

R3 обозначает Cl, -CN, -SO₂CH₃, метокси, этокси, NR9R10, -O-CH₂-CF₃, -(SO_d)_e-CF₃, алкил с 1, 2, 3, 4, 5 или 6 C-атомами или циклоалкил с 3, 4, 5, 6 или 7 C-атомами, в котором 1, 2, 3 или 4 атома водорода могут быть замещены атомами фтора;

R9 и R10

независимо друг от друга обозначают водород, метил, этил или -CH₂-CF₃;

d обозначает ноль, 1 или 2;

e обозначает ноль или 1;

или

R3 обозначает фенил,

незамещенный или замещенный 1 или 2 остатками, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, -O_j-(CH₂)_k-CF₃, метокси, этокси, алкила с 1, 2, 3 или 4 C-атомами и -SO₂CH₃;

j и k

или

R3 обозначает гетероарил,

незамещенный или замещенный 1 или 2 остатками, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, -O_bb-(CH₂)_cc-CF₃, метокси, этокси, алкила с 1, 2, 3 или 4 C-атомами и -SO₂CH₃;

bb и cc

R4 обозначает водород или F;

При этом в одной форме выполнения предпочтительными являются соединения формулы I, в которых R1 обозначает водород, алкил с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, F, Cl, Br, I, -CN, NR5R6, причем R5 и R6 независимо друг от друга обозначают водород, алкил с 1, 2, 3 или 4 C-атомами или -CH₂-CF₃, -O-CH₂-CF₃ или -(SO_m)_q-(CH₂)_r-CF₃, причем m обозначает ноль, 1 или 2, и q и r независимо друг от друга обозначают ноль или 1; особенно предпочтительными являются соединения, в которых R1 обозначает водород, алкил с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, метокси, этокси, F, Cl, NR5R6, причем R5 и R6 независимо друг от друга обозначают водород, алкил с 1, 2, 3 или 4 C-атомами или -CH₂-CF₃, -O-CH₂-CF₃ или -(SO_m)_q-(CH₂)_r-CF₃, причем m обозначает ноль, 1 или 2, и q и r независимо друг от друга обозначают ноль или 1; совсем особенно предпочтительными являются соединения, в которых R1 обозначает водород, метил, этил, CF₃-CH₂-O-, F, Cl или CF₃. В следующей форме выполнения предпочтительными являются соединения, в которых R1 обозначает водород, метил или этил, в особенности метил или этил.

В следующей форме выполнения предпочтительными являются соединения формулы I, в которых R2 обозначает водород или F; особенно предпочтительными являются соединения, в которых R2 обозначает водород.

В следующей форме выполнения предпочтительными являются соединения формулы I, в которых R3 обозначает Cl, -CN, -SO₂CH₃, метокси, этокси, NR9R10, причем R9 и R10 независимо друг от друга обозначают водород, метил, этил или -CH₂-CF₃, -O-CH₂-CF₃, -(SO_d)_e-CF₃, причем d обозначает ноль, 1 или 2, и e обозначает ноль или 1; алкил с 1, 2, 3, 4, 5 или 6 C-атомами или циклоалкил с 3, 4, 5, 6 или 7 C-атомами, в котором 1, 2, 3 или 4 атома водорода могут быть замещены атомами фтора; фенил, незамещенный или замещенный 1, 2 или 3 остатками, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, -O_j-(CH₂)_k-CF₃, причем j обозначает ноль или 1, и k обозначает ноль, 1, 2 или 3, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, алкила с 1, 2, 3 или 4 C-атомами и -SO₂CH₃, или гетероарил, незамещенный или замещенный 1, 2 или 3 остатками, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, -O_bb-(CH₂)_cc-CF₃, причем bb обозначает ноль или 1, и cc обозначает ноль, 1, 2 или 3, алкокси с 1, 2, 3 или 4 C-атомами, алкила с 1, 2, 3 или 4 C-атомами и -SO₂CH₃; особенно предпочтительными являются соединения, в которых R3 обозначает Cl, -CN, -SO₂CH₃, метокси, этокси, NR9R10, причем R9 и R10 независимо друг от друга обозначают водород, метил, этил или -CH₂-CF₃, -O-CH₂-CF₃, -(SO_d)_e-CF₃, причем d обозначает ноль, 1 или 2, и e обозначает ноль или 1; алкил с 1, 2, 3, 4, 5 или 6 C-атомами или циклоалкил с 3, 4, 5, 6 или 7 C-атомами, в котором 1, 2, 3 или 4 атома водорода могут быть замещены атомами фтора, фенил, незамещенный или замещенный 1-2 остатками, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, -O_j-(CH₂)_k-CF₃, причем j и k независимо друг от друга обозначают ноль или 1, метокси, этокси, алкила с 1, 2, 3 или 4 C-атомами и -SO₂CH₃, или гетероарил, незамещенный или замещенный 1-2 остатками, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, -O_bb-(CH₂)_cc-CF₃, причем bb и cc независимо друг от друга обозначают ноль или 1, метокси, этокси, алкила с 1, 2, 3 или 4 C-атомами и -SO₂CH₃; совсем особенно предпочтительными являются соединения, в которых R3 обозначает Cl, -CN или -SO₂CH₃.

В следующей форме выполнения предпочтительными являются соединения формулы I, в которых R4 обозначает водород и F, особенно предпочтительными являются соединения, в которых R4 обозначает водород.

В следующей форме выполнения предпочтительными являются соединения формулы I, в которых p, t, a и dd независимо друг от друга обозначают 1.

Если заместители R1-R4 содержат один или несколько центров асимметрии, то они могут независимо друг от друга иметь как S-, так и R-конфигурацию. Соединения могут существовать в виде оптических изомеров, в виде диастереомеров, в виде рацематов или в виде смеси таковых.

Данное изобретение включает все таутомерные формы соединений формулы I.

Алкильные остатки могут быть неразветвленными или разветвленными. Это также имеет силу, если у них есть заместители или они выступают в качестве заместителей других остатков, например, во фторалкильных остатках или в алкоксильных остатках. Примерами алкильных остатков являются метил, этил, н-пропил, изопропил (=1-метилэтил), н-бутил, изобутил (=2-метилпропил), втор-бутил (=1-метилпропил), трет-бутил (=1,1-диметилэтил), н-пентил, изопентил, трет-пентил, неопентил и гексил. Предпочтительными алкильными остатками являются метил, этил, н-пропил и изопропил. В алкильных остатках один или несколько, например 1, 2, 3, 4 или 5, атомов водорода могут быть замещены атомами фтора. Примерами таких фторалкильных остатков являются трифторметил, 2,2,2-трифторэтил и пентафторэтил. Замещенные алкильные остатки могут быть замещены в любых положениях.

Примерами циклоалкильных остатков являются циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил или циклооктил. В циклоалкильных остатках один или несколько, например 1, 2, 3 или 4, атомов водорода могут быть замещены атомами фтора. Замещенные циклоалкильные остатки могут быть замещены в любых положениях.

Фенильные остатки могут быть незамещенными или одно- или многократно, например однократно, двукратно или трехкратно, замещенными одинаковыми или разными остатками. Если фенильный остаток замещен, он предпочтительно имеет один или два одинаковых или разных заместителя. Это имеет силу также для замещенных фенильных остатков в группах, таких как, например, фенилалкильная группа или фенилоксигруппа. В монозамещенных фенильных остатках заместитель может находиться в 2-положении, 3-положении или 4-положении. Двукратно замещенный фенил может быть замещен в 2,3-положении, 2,4-положении, 2,5-положении, 2,6-положении, 3,4-положении или 3,5-положении. В трехкратнозамещенном фенильном остатке заместители могут находиться в 2,3,4-положении, 2,3,5-положении, 2,4,5-положении, 2,4,6-положении, 2,3,6-положении или 3,4,5-положении.

Гетероарильные остатки являются ароматическими циклическими соединениями, в которых один или несколько атомов в кольце являются атомами кислорода, атомами серы или атомами азота, например 1, 2 или 3 атома азота, 1 или 2 атома кислорода, 1 или 2 атома серы или комбинация из различных гетероатомов. Гетероарильные остатки могут быть замещены во всех положениях, например в 1-положении, 2-положении, 3-положении, 4-положении, 5-положении, 6-положении, 7-положении или 8-положении. Гетероарильные остатки могут быть незамещенными или одно- или многократно, например однократно, двукратно или трехкратно, замещенными одинаковыми или разными остатками. Это имеет силу также для гетероарильных остатков, таких как, например, в гетероарилалкильном остатке. Гетероарил обозначает, например, фуранил, тиенил, пирролил, имидазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, индолил, индазолил, хинолил, изохинолил, фталазинил, хиноксалинил, хиназолинил и циннолинил.

В качестве гетероарильных остатков в особенности имеют в виду 2- или 3-тиенил, 2- или 3-фурил, 1-, 2- или 3-пирролил, 1-, 2-, 4- или 5-имидазолил, 1-, 3-, 4- или 5-пиразолил, 1,2,3-триазол-1-, -4- или -5-ил, 1,2,4-триазол-1-, -3- или -5-ил, 1- или 5-тетразолил, 2-, 4- или 5-оксазолил, 3-, 4- или 5-изоксазолил, 1,2,3-оксадиазол-4- или -5-ил, 1,2,4-оксадиазол-3- или -5-ил, 1,3,4-оксадиазол-2-ил или -5-ил, 2-, 4- или 5-тиазолил, 3-, 4- или 5-изотиазолил, 1,3,4-тиадиазол-2- или -5-ил, 1,2,4-тиадиазол-3- или -5-ил, 1,2,3-тиадиазол-4- или -5-ил, 2-, 3- или 4-пиридил, 2-, 4-, 5- или 6-пиримидинил, 3- или 4-пиридазинил, пиразинил, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- или 7-индолил, 1-, 2-, 4- или 5-бензимидазолил, 1-, 3-, 4-, 5-, 6- или 7-индазолил, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-хинолил, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-изохинолил, 2-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-хиназолинил, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-хиннолинил, 2-, 3-, 5-, 6-, 7- или 8- хиноксалинил, 1-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-фталазинил. Далее включают соответствующие N-оксиды этих соединений, то есть, например, 1-окси-2-, -3- или -4-пиридил.

Особенно предпочтительными являются гетероароматические соединения 2- или 3-тиенил, 2- или 3-фурил, 1-, 2- или 3- пирролил, 1-, 2-, 4- или 5-имидазолил, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-хинолил, 1-, 3-, 4- или 5-пиразолил, 2-, 3- или 4-пиридил, 2- или 3-пиразинил, 2-, 4-, 5- или 6-пиримидинил и 3- или 4-пиридазинил.

Далее изобретение касается способа получения соединений формулы I, отличающегося тем, что соединение формулы II

где R1-R4 имеют указанное значение, и L обозначает нуклеофильно замещаемую удаляемую группу, подвергают взаимодействию с гуанидином.

Активированные производные кислот формулы II, где L обозначает алкокси-, предпочтительно метоксигруппу, феноксигруппу, фенилтио-, метилтио-, 2-пиридилтиогруппу, азотный гетероцикл, предпочтительно 1-имидазолил, получают предпочтительно известными специалисту способами из исходных хлорангидридов карбоновых кислот (формула II; L=Cl), которые, со своей стороны, также могут быть получены известным способом из карбоновых кислот (формула II; L=OH), например, с тионилхлоридом.

Помимо хлорангидридов карбоновых кислот формулы II (L=Cl), далее также активированные производные кислот формулы II можно получать известным способом непосредственно из бензойных кислот (формула II; L=OH), такие как сложный метиловый эфир формулы II с L=OCH₃ путем обработки газообразным HCl в метаноле, имидазолиды формулы II посредством обработки карбонилдиимидазолом, смешанные ангидриды формулы II путем обработки Cl-COOC₂H₅ или толуолсульфохлоридом в присутствии триэтиламина в инертном растворителе, также возможно активирование бензойных кислот дициклогексилкарбодиимидом (DCC) или O-[(циано(этоксикарбонил)метилен)амино]-1,1,3,3-тетраметилурониум-тетрафторборатом (“TOTU”). Ряд пригодных методов для получения активированных производных карбоновых кислот формулы II приведен в литературных источниках, в J. March, Advanced Organic Chemistry, Third Edition (John Wiley & Sons, 1985, S. 350).

Взаимодействие активированного производного карбоновой кислоты формулы II с гуанидином предпочтительно происходит известным способом в протонном или апротонном полярном или инертном органическом растворителе. При этом для превращения метилового эфира бензойной кислоты с гуанидином (формула II; L=OCH₃) оказывается пригодным метанол, изопропанол или ТГФ при температуре от 20°C вплоть до температуры кипения этого растворителя. При большинстве превращений соединений формулы II с бессолевым гуанидином работают в апротонных инертных растворителях, таких как ТГФ, диметоксиэтан, диоксан. А также в качестве растворителя может быть использована вода при использовании основания, такого как, например, NaOH, при превращении соединений формулы II с гуанидином.

Если L обозначает Cl, предпочтительно работают с добавлением улавливателя кислоты, например, в форме избыточного гуанидина, для связывания галогенводородных кислот.

Соединения формулы II могут быть получены по схеме, в которой

a) производное 4-нитрофенил-серупентафторида формулы III восстанавливают до амина формулы IV,

b) соединение формулы IV галогенируют в ортоположение к аминогруппе галогенирующим средством до соединения формулы V,

c) в соединении формулы V с помощью пригодного нуклеофила или элементорганического соединения, например соединения алкилбора, в случае необходимости каталитически, замещают заместитель галоген посредством замещения R1,

d) в соединении формулы VI аминогруппу заменяют путем замещения галогеном,

e) в соединении формулы VII галогенный заместитель замещают нитрильной группой,

f) нитрильную группу соединения формулы VIII гидролизуют до карбоновой кислоты,

g) соединение формулы IX нитруют в ортоположение к пентафторсульфанильной группе до соединения формулы X,

h) нитросоединение формулы X восстанавливают до анилина,

i) в соединении формулы XI замещают аминогруппу с пригодным нуклеофильным соединением посредством R3

и

k) соединение формулы XII подвергают превращению до соединения формулы II, причем в соединениях формул II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI и XII,

R1-R4 определены, как в формуле I,

L определено, как в формуле II, и

X и Y независимо друг от друга обозначают F, Cl, Br или I.

При получении соединений формулы II исходят, например, из того, что сначала на стадии a соединения формулы III известными способами восстановления ароматических нитросоединений до ароматических аминов подвергают превращению до соединений формулы IV. Такие методы описаны, например, в: R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, VCH Publishers, New York, Weinheim, 1999, 821-828 и цитируемой там литературе.

Затем (стадия b) соединения формулы IV растворяют в органическом растворителе A и подвергают превращению с галогенирующим средством, например с бромирующим средством. При этом температура реакции составляет в целом -30°C -+150°C, предпочтительно 0°C - 40°C. Время реакции в общем составляет от 10 минут до 20 часов, в зависимости от состава смеси и выбранной области температур. Для обработки далее полученная реакционная смесь может быть профильтрована через слой кизельгеля, промыта органическим растворителем A, и после отделения растворителя в вакууме продукт очищают общепринятыми методами очистки, такими как перекристаллизация, дистилляция или хроматография.

Например, 0,1-10 моль соединения формулы IV растворяют в 1000 мл органического растворителя A. Например, на 1 моль подвергаемого галогенированию соединения формулы IV используют 0,8-1,2 эквивалентов галогенирующего средства.

Под понятием „галогенирующее средство“ имеют в виду, например, элементарные галогены, галоген-аминные комплексы, циклические и нециклические N-галогенированные амиды и имиды карбоновых кислот, а также мочевину, например, описанные в публикации: R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, VCH Publishers, New York, Weinheim, 1999, 619-628, и цитируемой там литературе или в публикации: M.B. Smith and J. March, Marchґs Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, Wiley, New York, 2001, 704-707, и цитируемой там литературе, такие как, например, N-бромсукцинимид, N-хлорсукцинимид, HBr в H₂SO₄ или 1,3-дибром-5,5-диметил-имидазолидин-2,4-дион. Под понятием „бромирующее средство“ имеют в виду, например, элементарный бром, бром-аминные комплексы, циклические и нециклические N-бромированные амиды и имиды карбоновых кислот, а также мочевину, например, описанные в публикации: R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, VCH Publishers, New York, Weinheim, 1999, 622-624, и цитируемой там литературе или в: M.B. Smith and J. March, Marchґs Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, Wiley, New York, 2001, 704-707 и цитируемой там литературе, например, N-бромсукцинимид, HBr в H₂SO₄ или 1,3-дибром-5,5-диметил-имидазолидин-2,4-дион, причем последний может передавать 2 атома брома на молекулу. Под понятием „органический растворитель A“ предпочтительно имеют в виду апротонный растворитель, такой как, например, дихлорметан, хлороформ, тетрахлорметан, пентан, гексан, гептан, октан, бензол, толуол, ксилол, хлорбензол, 1,2-дихлорэтан, трихлорэтилен или ацетонитрил.

Возможно, образующийся при реакции HX может быть связан органическими или неорганическими основаниями.

Затем, на стадии c, соединения формулы V растворяют в органическом растворителе B и подвергают превращению с нуклеофильным соединением R1^- или элементорганическим соединением, содержащим заместители R1, до соединения формулы VI. При этом можно работать с добавлением основания A и добавлять катализирующую соль металла A.

При этом температура реакции составляет в общем -20°C -+150°C, предпочтительно 30°C - 100°C. Время реакции в общем составляет от 0,5 часа до 20 часов, в зависимости от состава смеси и выбранной области температур. Для обработки затем полученная реакционная смесь может быть профильтрована через слой кизельгеля, промыта органическим растворителем B, и после отделения растворителя в вакууме продукт очищают общепринятыми методами очистки, такими как перекристаллизация, хроматография, например, на кизельгеле, дистилляция или перегонка с водяным паром.

Например, 0,1-10 моль соединения формулы V растворяют в 1000 мл органического растворителя B. Например, на 1 моль исходного соединения формулы V используют 0,8-3 эквивалента нуклеофила R1^- или элементорганического соединения, содержащего заместители R1.

Под понятием „нуклеофильное соединение R1^-“ имеют в виду соединения, которые образуются при депротонировании соединения R1-H сильным основанием, такие как, например, соединения алкил- или -ариллития, магнийорганические соединения, алкоголяты или диизопропиламид лития.

Под термином „элементорганические соединения, содержащие заместители R1“ понимают, например, литийорганические соединения R1-Li, магнийорганические соединения R1-Mg-Hal, с Hal=Cl, Br, I, борорганические соединения, такие как R1-B(OH)₂, R1-эфиры бороновой кислоты, такие как, например,

R2-ангидриды бороновой кислоты, такие как, например,

или цинкорганические соединения R1-Zn-Z, с Z=Cl, Br, I.

Под термином „основание A“ понимают основания, как они используются в качестве вспомогательных оснований при перекрестных реакциях сочетания и приведены, например, в A. Suzuki et al., Chem. Rev. 1995, 95, 2457-2483, M. Lamaire et al., Chem. Rev. 2002, 102, 1359-1469 или в S.P. Stanforth, Tetrahedron 1998, 54, 263-303, и цитируемой там литературе, например, Na₂CO₃, Cs₂CO₃, KOH, NaOH, K₃PO₄, N(этил)₃.

Под термином “органический растворитель B“ понимают протонный или апротонный растворитель, такой как диэтиловый эфир, диметоксиэтан, ТГФ, спирты, вода или их смеси. В одной форме выполнения предпочтительными являются смеси с водой.

Под термином „катализирующая соль металла A“ понимают, среди прочих, катализаторы Pd и Ni, как они используются для реакций Сузуки (Suzuki) и Негиши (Negishi) и описаны, например, в публикациях: A. Suzuki et al., Chem. Rev. 1995, 95, 2457-2483, или M. Lamaire et al., Chem. Rev. 2002, 102, 1359-1469, или S.P. Stanforth, Tetrahedron. 1998, 54, 263 oder G.C. Fu et al., J. Am. Chem. Soc. 2001, 123, 10099, или G.C. Fu et al., J. Am. Chem. Soc. 2002, 124, 13662, и цитируемой там литературе, включая дополнительные лиганды, такие как Pd(OAc)₂, PdCl₂(dppf) или Pd₂(dba)₃.

Затем на стадии d соединения формулы VI переводят посредством способов диазотирования и галогенирования со средствами диазотирования-галогенирования, например со средством диазотирования-бромирования, как оно описано для других ароматических аминов для обмена аминной функции на галогенную, например, в публикациях: M.B. Smith and J. March, Marchґs Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, Wiley, New York, 2001, 935-936, или R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, VCH Publishers, New York, Weinheim, 1999, 678-679, и цитируемой там литературе, например, посредством реакции Сандмеера (Sandmeyer) или Гаттермана (Gattermann), в соединения формулы VII. Предпочтительным является способ M. Doyle et al., J. Org. Chem. 1977, 42, 2426 или von S. Oae et al., Bull. Chem. Soc. Jpn. 1980, 53, 1065.

На стадии e соединения формулы VII подвергают превращению в растворителе C с цианирующим средством, например, при добавлении катализирующей соли металла B. Температура реакции составляет в основном 20°C - 200°C, предпочтительно 80°C - 150°C. Время реакции составляет в общем от 1 часа до 20 часов, в зависимости от состава смеси и выбранной области температур. Полученная реакционная смесь может быть отфильтрована через слой кизельгеля или кизельгура, и фильтрат обработан водной экстракцией. После выпаривания испарителя в вакууме соединение формулы VIII очищают общепринятыми способами, такими как перекристаллизация, хроматография на кизельгеле, дистилляция или перегонка с водяным паром.

Например, 0,1-10 моль соединения формулы VII растворяют в 1000 мл органического растворителя C. Например, на 1 моль подвергающегося превращению соединения формулы VII используют 1-10 эквивалентов цианирующего средства.

Под термином „цианирующее средство“ понимают, например, цианиды щелочных металлов или Zn(CN)₂, или по отдельности, или в смеси с металлическим цинком, предпочтительно в форме цинковой пыли.

Под термином „органический растворитель C“ предпочтительно понимают апротонный полярный растворитель, такой как, например, ДМФА, диметилацетамид, НМП (NMP), ДМСО.

Под термином „катализирующая соль металла B“, кроме прочего, понимают катализаторы Pd и Ni, используемые для реакций Сузуки и, например, описанные в публикациях: A. Suzuki et al., Chem. Rev. 1995, 95, 2457-2483, или M. Lamaire et al., Chem. Rev. 2002, 102, 1359-1469, или S.P. Stanforth, Tetrahedron. 1998, 54, 263, и цитируемой там литературе, например, PdCl₂(dppf), Pd(OAc)₂, Pd₂(dba)₃.

Затем полученные соединения формулы VIII на стадии f, например, в присутствии основания, подвергают гидролизу с получением карбоновых кислот формулы IX. Это может происходить по известным специалисту способам гидролиза ароматических нитрилов, таких как, например, описанные в публикациях: R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, VCH Publishers, New York, Weinheim, 1999, 1986-1987 или M.B. Smith and J. March, Marchґs Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, Wiley, New York, 2001, 1179-1180, и цитируемой там литературе.

На стадии g соединения формулы IX подвергают нитрованию с помощью нитрующего средства, такого как, например, описано в публикации: Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie 4. Auflage, Organo-Stickstoff-Verbindungen IV, Teil 1, Georg Thieme Verlag Stuttgart. 1992, S. 262-341.

На стадии h нитросоединения формулы X подвергают превращению по, в принципе известному, способу восстановления ароматических нитросоединений до ароматических аминов с получением соединений формулы XI. Такие методы, например, описаны в публикации: R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations: a Guide to Functional Group Preparations, VCH Publishers, New York, Weinheim, 1999, 821-828, и цитируемой там литературе.

На стадии i анилины формулы XI путем замещения-диазотирования переводят в соединения формулы XII при замещении аминогруппы на R3. Такие методы известны специалисту и описаны, например, в публикации: Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie 4. Auflage, Organo-Stickstoff-Verbindungen I, Teil 2, Georg Thieme Verlag Stuttgart 1990, S. 1087-1136, а также в цитируемых там литературных ссылках.

Например, анилин формулы XI путем замещения-диазотирования может быть переведен в сульфохлорид формулы XII (R3=SO₂Cl), как описано, например, в Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie 4. Auflage, Organo-Schwefel-Verbindungen, Teil 2, Georg Thieme Verlag Stuttgart 1985, S. 1069-1070.

На стадии k соединения формулы XII по способу, известному специалисту, и как описано выше, переводят в соединения формулы II. На этой стадии, например, сульфохлориды формулы XII (R3=SO₂Cl) сначала могут подвергать превращению до соответствующих сульфиновых кислот (как, например, описано в публикациях: Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie 4. Auflage, Organo-Schwefel-Verbindungen, Teil 1, Georg Thieme Verlag Stuttgart 1985, S. 620-621 и Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Schwefel-, Selen-, Tellur-Verbindungen, Georg Thieme Verlag Stuttgart 1955, S.304-309) и затем алкилировать до метилсульфона, как, например, описано в Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie 4. Auflage, Organo-Schwefel-Verbindungen, Teil 2, Georg Thieme Verlag Stuttgart 1985, S. 1145-1149. При этом одновременно происходит этерификация карбоновой кислоты с образованием сложного метилового эфира.

Для получения соединений формулы I, в которых R1 является водородом, осуществляют синтез без стадий b и c.

Для получения соединений формулы I, в которых R3 обозначает NR9R10, осуществляют синтез без стадии i.

В исходных соединениях также могут иметься функциональные группы в защищенной форме или в форме предварительной стадии, и тогда в соединениях формулы II, полученных вышеописанным способом, их переводят в желаемые группы. Соответствующая методика защиты групп известна специалисту.

Точно также соответствующие функциональные группы могут быть подвергнуты превращению до производных известными специалисту способами. Например, соединения, в которых R3 обозначает NH₂, путем взаимодействия с соответствующими алкилгалогенидами или 2,2,2-трифторэтилгалогенидами, например метилйодидом, этилйодидом или 2,2,2-трифторэтилйодидом, подвергают превращению с образованием соединений, в которых R3 обозначает NR9R10, причем R9 и R10 независимо друг от друга обозначают водород, алкил с 1, 2, 3 или 4 C-атомами или -CH₂-CF₃, и оба одновременно не являются водородом.

Пентафторсульфанил-бензоилгуанидины формулы I в целом являются слабыми основаниями и могут связывать кислоты с образованием солей. В качестве солей присоединения кислот речь идет о солях всех фармацевтически приемлемых кислот, например галогенидах, в особенности гидрохлоридах, лактатах, сульфатах, цитратах, тартратах, ацетатах, фосфатах, метилсульфонатах, п-толуолсульфонатах.

Соединения формулы I являются замещенными ацилгуанидинами и ингибируют клеточный натрий-водородный обмен (Na⁺/H⁺-обмен, NHE), в особенности подтип NHE1.

На основе NHE-ингибирующих свойств соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли пригодны для профилактики и лечения заболеваний, вызываемых активацией NHE или активированным NHE, а также вторичных заболеваний, вызываемых нарушениями, обусловленными NHE.

Соединения формулы I также могут использоваться для лечения и профилактики заболеваний, причем NHE ингибируется лишь частично, например, путем использования сниженной дозировки.

Так как NHE-ингибиторы преобладающим образом оказывают влияние посредством клеточной регуляции pH, они благоприятным образом могут быть комбинированы с другими соединениями, также регулирующими внутриклеточное значение pH, причем имеются в виду ингибиторы ферментных групп карбоангидраз, ингибиторы систем, транспортирующих бикарбонатные ионы, такие как ингибиторы натрий-бикарбонатного сотранспорта (NBC) или зависимого от натрия хлорид-бикарбонатного обмена (NCBE), а также с NHE-ингибиторами с ингибирующим действием в отношении подтипов NHE, в качестве компонентов комбинации, так как с их помощью могут быть усилены или модулированы существенные фармакологические эффекты, регулирующие pH, описанных здесь NHE-ингибиторов.

Применение соединений согласно изобретению касается профилактики и лечения острых и хронических заболеваний в ветеринарной медицине и медицине человека.

Таким образом, NHE-ингибиторы согласно изобретению пригодны для лечения заболеваний, вызванных ишемией и реперфузией.

Описанные здесь соединения вследствие своих фармакологических свойств пригодны в качестве антиаритмических лекарственных средств. Посредством своих кардиопротективных компонентов NHE-ингибиторы исключительно пригодны для профилактики инфаркта и лечения инфаркта, а также для лечения стенокардии, причем они также превентивно ингибируют или сильно сокращают патофизиологические процессы при возникновении индуцированных ишемией нарушений, в особенности при возникновении индуцированных ишемией сердечных аритмий. Благодаря их защитному действию против патологических гипоксических и ишемических ситуаций соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли, используемые согласно изобретению, вследствие ингибирования клеточного механизма Na⁺/H⁺-обмена могут быть использованы в качестве лекарственных средств для лечения всех острых или хронических повреждений, вызванных ишемией, или первичных или вторичных индуцированных ею заболеваний.

Это касается также их применения в качестве лекарственных средств при хирургических вмешательствах. Так, соединения могут быть использованы при трансплантации органов, причем соединения могут быть использованы как для защиты органов донора перед и во время изъятия, для защиты изъятых органов, например, при лечении или их хранении в физиологическом растворе, а также при введении в организм реципиента.

Соединения согласно изобретению также являются ценными лекарственными средствами с защитным действием при проведении ангиопластических операций, например, на сердце, а также на периферических органах и сосудах.

Далее соединения согласно изобретению могут быть использованы при операциях шунтирования, например при шунтировании коронарных сосудов и при аортокоронарном шунтировании (Coronary Artery Bypass Graft) (CABG).

В соответствии со своим действием против ишемически вызванных нарушений соединения согласно изобретению формулы I также могут быть использованы для реанимации после остановки сердца.

Соединения согласно изобретению представляют интерес для лекарственных средств против угрожающих жизни аритмий. Они останавливают мерцание желудочков и восстанавливают физиологический синусоидальный ритм сердца.

Так как NHE1-ингибиторы не только эффективно защищают ткани и органы человека, в особенности сердце, от повреждений, вызываемых ишемией и реперфузией, но и от цитотоксического действия лекарственных средств, в особенности используемых при лечении рака и аутоиммунных заболеваний, пригодно комбинированное применение соединений формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солей, которые могут ингибировать цитотоксическое, в особенности кардиотоксическое побочное действие названных соединений. Путем уменьшения цитотоксического эффекта, в особенности кардиотоксичности, вследствие дополнительного назначения лекарственного средства с NHE1-ингибиторами, кроме того, доза цитотоксического терапевтического средства может быть увеличена, и/или использование таких лекарственных средств продлено. Терапевтическая польза такой цитотоксической терапии может быть существенно увеличена посредством комбинации с NHE-ингибиторами.

Кроме того, NHE1-ингибиторы формулы I согласно изобретению и/или их фармацевтически приемлемые соли используют при повреждающем сердце перепроизводстве гормонов щитовидной железы, тиреотоксикозе или при внешнем введении гормонов щитовидной железы. Поэтому соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли пригодны для улучшения лечения кардиотоксическими лекарственными средствами.

В соответствии со своим защитным действием против ишемически индуцированных повреждений соединения согласно изобретению также пригодны в качестве лекарственных средств для лечения ишемии нервной системы, в особенности центральной нервной системы, причем они, например, пригодны для лечения удара или отека головного мозга.

Соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли пригодны также для лечения и профилактики заболеваний и нарушений, вызванных повышенной возбудимостью центральной нервной системы, в особенности для лечения заболеваний, входящих в сферу эпилептических, вызванных клоническими и тоническими спазмами центральной нервной системы, психических депрессивных состояний, состояний страха и психозов. При этом описанные здесь NHE-ингибиторы могут быть использованы по отдельности или в комбинации с другими антиэпилептическими веществами или антипсихотическими активными веществами, или ингибиторами карбоангидраз, например с ацетазоламидом, а также с другими NHE-ингибиторами или ингибиторами натрий-зависимого хлорид-бикарбонатного обмена (NCBE).

В дополнение к этому соединения формулы I, используемые согласно изобретению, и/или их фармацевтически приемлемые соли также пригодны для лечения форм шока, таких как, например, аллергический, кардиогенный, гиповолемический и бактериальный шок.

Соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли также могут использоваться для профилактики и лечения тромботических заболеваний, так как они в качестве NHE-ингибиторов сами могут ингибировать агрегацию тромбоцитов. Кроме этого они могут ингибировать или предотвращать высвобождение медиаторов воспаления и коагуляции, в избытке присутствующих после ишемии и реперфузии, в особенности фактор Виллебранда и тромбогенные селективные протеины. Тем самым может быть уменьшено или исключено патогенное действие существенных тромбогенных факторов. Поэтому NHE-ингибиторы согласно данному изобретению можно комбинировать с другими антикоагуляционными и/или тромболитическими биологически активными веществами, такими как, например, плазминогенные активаторы рекомбинантных или естественных тканей, стрептокиназы, урокиназы, ацетилсалициловая кислота, антагонисты тромбина, антагонисты фактора Xa, фибринолитически действующие лекарственные средства, антагонисты рецептора тромбоксана, ингибиторы фосфодиэстеразы, антагонисты фактора VIIa, клопидогрел, тиклопидин и т.д. Комбинированное использование данных NHE-ингибиторов с ингибиторами NCBE и/или с ингибиторами карбоангидразы, например, с ацетазоламидом, особенно предпочтительно.

Кроме этого NHE1-ингибиторы характеризуются сильным ингибирующим действием на пролиферацию клеток, например пролиферацию фибробластов и пролиферацию клеток гладких мышц сосудов. Поэтому речь идет о соединениях формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солях в качестве ценных терапевтических средств для заболеваний, первичной или вторичной причиной которых является пролиферация клеток, и поэтому они могут использоваться в качестве средств против атеросклероза, средств против хронической почечной недостаточности, онкологических заболеваний.

Показано, что с помощью NHE-ингибиторов ингибируется миграция клеток. Поэтому речь идет о соединениях формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солях в качестве ценных терапевтических средств для заболеваний, первичной или вторичной причиной которых является миграция клеток, таких как, например, онкологические заболевания с явно выраженной склонностью к метастазированию.

NHE1-ингибиторы далее характеризуются замедлением или предотвращением заболеваний, вызванных фиброзом. Таким образом, соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли пригодны в качестве средств для лечения фиброзов сердца, а также фиброза легких, фиброза печени, фиброза почек и других фиброзных заболеваний. Таким образом, они могут использоваться для лечения гипертрофии и гиперплазии органов, например сердца и простаты. Поэтому они пригодны для профилактики и лечения острой сердечной недостаточности (congestive heart failure=CHF), а также для лечения и профилактики гиперплазии простаты или гипертрофии простаты.

Так как NHE у эссенциальных гипертоников является значительно повышенным, соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли пригодны для профилактики и лечения повышенного кровяного давления и сердечно-сосудистых заболеваний. При этом они могут использоваться отдельно или совместно с пригодными компонентами для комбинаций и препаративных готовых форм для лечения повышенного кровяного давления и сердечно-сосудистых заболеваний. Так, например, один или несколько тиазидоподобных мочегонных средств, петлевых диуретиков, антагонистов альдостерона и псевдоальдостерона, таких как гидрохлоротиазид, индапамид, политиазид, фуросемид, пиретанид, торасемид, буметанид, амилорид, триамтерен, спиронолактон или эплерон, могут быть скомбинированы с соединениями формулы I. Далее, NHE-ингибиторы данного изобретения могут использоваться в комбинации с антагонистами кальция, такими как верапамил, дилтиазем, амлодипин или нифедипин, а также с ACE-ингибиторами, такими как, например, рамиприл, эналаприл, лисиноприл, фосиноприл или каптоприл. Другими благоприятными компонентами для комбинаций также являются Я-блокаторы, такие как метопролол, албутерол и т.д., антагонисты рецептора ангиотензина и подтипов его рецепторов, такие как лосартан, ирбесартан, валсартан, омапатрилат, гемопатрилат, антагонисты эндотелина, ингибиторы ренина, агонисты рецепторов аденозина, ингибиторы и активаторы калиевых каналов, такие как глибенкламид, глимепирид, диазоксид, кромакалим, миноксидил и их производные, активаторы митохондриального чувствительного к ATP калиевого канала (mitoK(ATP) Kanal), ингибиторы Kv1.5 и т.д.

Было показано, что NHE1-ингибиторы характеризуются существенным противовоспалительным действием, и поэтому могут быть использованы в качестве противовоспалительных средств. При этом обращает на себя внимание ингибирование высвобождения медиаторов воспаления. Таким образом, соединения могут использоваться по отдельности или в комбинации с противовоспалительным средством для профилактики или лечения хронических и острых воспалительных заболеваний. В качестве компонентов для комбинаций предпочтительно используют стероидные и нестероидные противовоспалительные средства. Далее соединения согласно изобретению могут использоваться для профилактики или лечения заболеваний, вызванных простейшими, таких как малярия и куриный кокцидиоз.

Кроме того, было обнаружено, что NHE1-ингибиторы оказывают благоприятное влияние на сывороточные липопротеины. Общепризнанно, что для возникновения атеросклеротических изменений сосудов, в особенности коронарных сердечных заболеваний, высокое содержание липидов в крови, так называемая гиперлипидемия, представляет существенный фактор риска. Поэтому для профилактики и регрессии атеросклеротических изменений снижение повышенного содержания сывороточных липопротеинов имеет чрезвычайное значение. Помимо сокращения общего сывороточного холестерина особенное значение имеет снижение доли специфической атерогенной липидной фракции этого общего холестерина, в особенности липопротеинов низкой плотности (LDL) и липопротеинов очень низкой плотности (VLDL), так как эти фракции липидов представляют атерогенный фактор риска. Напротив, липопротеинам высокой плотности приписывают защитную функцию против коронарных заболеваний сердца. Соответственно этому гиполипидемические средства должны быть в состоянии понижать не только общий холестерин, но и в особенности VLDL и LDL-фракции сывороточного холестерина. Теперь показано, что NHE1-ингибиторы характеризуются ценными терапевтически используемыми свойствами в отношении влияния на уровень сывороточных липидов. Так, они существенно снижают повышенные концентрации LDL и VLDL в сыворотке до уровня, который может наблюдаться, например, при усиленном диетическом приеме не содержащей холестерина и жиров пищи, или при патологических изменениях обмена веществ, например, генетически обусловленной гиперлипидемии. Поэтому они могут использоваться для профилактики и регрессии атеросклеротических изменений, в которых они исключают причинный фактор риска. К ним относят не только первичные гиперлипидемии, но и известные вторичные гиперлипидемии, которые имеют место, например, при диабете. Кроме того, NHE1-ингибиторы приводят к явному сокращению инфарктов, вызванных аномалиями обмена веществ, и в особенности к существенному уменьшению величины индуцированного инфаркта и его степени тяжести.

Поэтому соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли предпочтительно находят применение для получения лекарственного средства для лечения гиперхолистеринемии; для получения лекарственного средства для предупреждения атерогенеза; для получения лекарственного средства для профилактики и лечения атеросклероза, для получения лекарственного средства для профилактики и лечения заболеваний, вызванных повышенным уровнем холестерина, для получения лекарственного средства для профилактики и лечения заболеваний, вызванных эндотелиальной дисфункцией; для получения лекарственного средства для профилактики и лечения гипертонии, индуцированной атеросклерозом, для получения лекарственного средства для профилактики и лечения тромбозов, индуцированных атеросклерозом, для получения лекарственного средства для профилактики и лечения ишемических нарушений и постишемических реперфузионных нарушений, индуцированных гиперхолистеринемией и эндотелиальной дисфункцией, для получения лекарственного средства для профилактики и лечения сердечной гипертрофии и кардиомиопатии и конгестивной сердечной недостаточности (CHF), индуцированных гиперхолистеринемией и эндотелиальной дисфункцией, для получения лекарственного средства для профилактики и лечения коронарных спазмов сосудов и миокардиального инфаркта, индуцированных гиперхолистеринемией и эндотелиальной дисфункцией, для получения лекарственного средства для лечения названных болезней в комбинации с веществами, снижающими кровяное давление, предпочтительно с ингибиторами ангиотензин-превращающих ферментов (ACE) и антагонистов рецепторов ангиотензина. Комбинация NHE-ингибитора формулы I и/или его фармацевтически приемлемых солей с биологически активными веществами, снижающими уровень жира в крови, предпочтительно с ингибитором HMG-CoA-редуктазы (например, ловастатином или правастатином), причем последний приводит к гиполипидемическому действию и вследствие этого повышает гиполипидемические свойства NHE-ингибитора формулы I и/или его фармацевтически приемлемых солей, представляет собой благоприятную комбинацию с усиленным действием и сокращенным использованием биологически активных веществ.

Таким образом, соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли способствуют эффективной защите против повреждений эндотелия различного генеза. С этой защитой сосудов против синдрома эндотелиальной дисфункции соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли являются ценными лекарственными средствами для профилактики и лечения спазмов коронарных сосудов, заболеваний периферических сосудов, в особенности интермиттирующей хромоты, атерогенеза и атеросклероза, левожелудочковой гипертрофии и дилатационной кардиомиопатии, и заболеваний на основе тромбоза.

Кроме того, было показано, что NHE1-ингибиторы пригодны для лечения инсулинонезависимого диабета (NIDDM), причем резистентность к инсулину подавляется. При этом усилению антидиабетического эффекта и качеству действия соединений согласно изобретению может способствовать их комбинирование с бигуанидом, например метформин, с антидиабетической сульфонилмочевиной, например глибенкламид, глимепирид, толбутамид и т.д., ингибитором глюкозидазы, агонистом PPAR, например росиглитазон, пиоглитазон и т.д., с инсулиновыми препаратами различных форм применения, с DB4-ингибитором, с сенсибилизатором инсулина или с меглитинидом.

Помимо острых антидиабетических эффектов, соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли противодействуют возникновению поздних диабетических осложнений и поэтому могут использоваться в качестве лекарственных средств для профилактики и лечения поздних диабетических нарушений, таких как диабетическая нефропатия, диабетическая невропатия, диабетическая ретинопатия, диабетическая кардиомиопатия и другие заболевания, возникающие как следствие диабета. При этом они могут предпочтительно комбинироваться с антидиабетическими лекарственными средствами, описанными выше при лечении NIDDM. Комбинация с благоприятными формами приема инсулина при этом может иметь особое значение.

NHE1-ингибиторы, помимо защитного действия против острых ишемических ситуаций и последующих также остро отягощенных реперфузионных ситуаций, обнаруживают также прямое терапевтически пригодное для использования действие против заболеваний и повреждений всего организма млекопитающих, которые тесно связаны с симптомами хронически протекающего процесса старения и которые также являются независимыми от острых состояний недостаточного кровоснабжения и также могут встречаться при нормальных, неишемических условиях. Для этих патологических, возникающих после продолжительного старения возрастных проявлений, таких как недомогания, слабость и смерть, которые в последнее время смогли сделать доступными для лечения с помощью NHE-ингибиторов, речь идет о заболеваниях и нарушениях, в значительной степени обусловленных возрастными изменениями жизненно необходимых органов и их функций, приобретающих в стареющем организме возрастающее значение.

К заболеваниям, связанным с функциональными возрастными нарушениями, с обусловленными возрастом симптомами износа органов, относятся, например, недостаточная контактность и способность кровеносных сосудов к реакции по отношению к реакциям контракции и релаксации. Это обусловленное возрастом ослабление способности к реакции сосудов на сжимающее и релаксирующее возбуждение, которое является существенным процессом сердечно-сосудистой системы и тем самым жизни и здоровья, может быть в значительной степени ликвидировано или сокращено с помощью NHE-ингибиторов. Важной функцией и мерой для поддерживания способности сосудов к реакции является блокада или ретардация обусловленной возрастом прогрессирующей эндотелиальной дисфункции, которая может быть значительно сокращена посредством NHE-ингибиторов. Таким образом, соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли исключительно пригодны для лечения и профилактики обусловленной возрастом прогрессирующей эндотелиальной дисфункции, в особенности интермиттирующей хромоты.

Примером показателя, характеризующего последующий процесс старения, является ослабление сокращаемости сердца и ослабление адаптации сердца к требуемой мощности сердечного насоса. Эта пониженная сердечная деятельность как следствие процесса старения в большинстве случаев связана с дисфункцией сердца, вызванной, кроме прочего, отложением соединительной ткани в ткани сердца. Это отложение соединительной ткани характеризуется увеличением веса сердца, увеличением сердца и ограниченной сердечной функцией. Неожиданно было показано, что подобное старение органа сердца могло быть ингибировано почти полностью. Тем самым соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли исключительно пригодны для лечения и профилактики сердечной недостаточности, повреждения закупорившегося сердца (congestive heart failure) (CHF).

Путем подавления пролиферации могут излечиваться не только уже наступившие онкологические заболевания, но и с помощью NHE-ингибиторов сокращаться или сильно замедляться множественные возрастные формы возникновения рака. Особенно достойно внимания заключения о том, что сокращаются или сильно замедляются возникающие возрастные заболевания всех органов, а не только определенных форм рака. Таким образом, соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли пригодны для лечения и, в особенности, для профилактики обусловленных возрастом форм рака.

С помощью NHE-ингибиторов обеспечивают существенно замедленное по времени наступление возрастных заболеваний всех исследованных органов, включая сердце, сосуды, печень и т.д., а также значительное замедление старческого рака. Более того, это также может неожиданно приводить к продлению жизни в той мере, которая до сих пор не могла быть достигнута никакими другими группами лекарственных средств или какими-либо природными материалами. Это единственное в своем роде действие NHE-ингибиторов также дает возможность, помимо исключительного использования биологически активных веществ для человека и животных, комбинировать эти NHE-ингибиторы с другими геронтологически используемыми принципами действия, мероприятиями, веществами и природными материалами, в основе которых лежит другой механизм действия. Такого рода классами биологически активных веществ, используемых в геронтологической терапии, являются: в особенности витамины и вещества с антиокислительным действием. Так как существует корреляция между энергетической (калорийной) нагрузкой или приемом пищи и процессом старения, может существовать комбинация диетических мероприятий, например, с регулированием аппетита. Таким же образом может быть упомянута комбинация с понижающими кровяное давление лекарственными средствами, такими как, например, ACE-ингибиторы, антагонисты рецепторов ангиотензина, мочегонные средства, антагонисты Ca⁺² и т.д., или с лекарственными средствами, нормализирующими обмен веществ, такими как вещества, понижающие холестерин.

Таким образом, соединения формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли исключительно пригодны для профилактики возрастных изменений тканей и для продления жизни при сохранении высокого качества жизни.

Соединения согласно изобретению являются эффективными ингибиторами клеточного натрий-водородного обмена (ионообмен Na/H), который при многочисленных заболеваниях (эссенциальная гипертония, атеросклероз, диабет и т.д.) также повышен в таких клетках, измерения являются легкодоступными, как, например, в эритроцитах, тромбоцитах или лейкоцитах. Поэтому используемые согласно изобретению соединения пригодны в качестве исключительных и простых средств, например, при их применении в качестве диагностических средств для определения и распознавания определенных форм гипертонии, а также атеросклероза, диабета и поздних диабетических осложнений, пролиферативных заболеваний и т.д.

Далее, в медицине человека, ветеринарии или для защиты растений используют лекарственные средства, содержащие эффективное количество соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемых солей вместе с фармацевтически приемлемыми носителями и добавками, по отдельности или в комбинации с другими фармакологическими биологически активными веществами или лекарственными средствами.

Лекарственные средства, содержащие соединение формулы I и/или его фармацевтически приемлемые соли, можно вводить, например, орально, парентерально, внутривенно, ректально, чрескожно или путем ингаляции, причем предпочтительное применение зависит от соответствующей формы проявления болезни. Соединения формулы I при этом могут использоваться по отдельности или вместе с галеновыми вспомогательными веществами как в ветеринарной медицине, так и в медицине человека. Лекарственные средства содержат биологически активные вещества формулы I и/или их фармацевтически приемлемые соли, в общем, в количестве от 0,01 мг до 1 г на дозиметрическую единицу.

Какие вспомогательные вещества пригодны для желаемых лекарственных готовых форм, известно специалисту благодаря его специальным знаниям. Помимо растворителей, гелеобразователей, основ суппозиториев, вспомогательных веществ для таблеток и других носителей биологически активных веществ, могут быть использованы, например, антиоксиданты, диспергаторы, эмульгаторы, антивспениватели, вещества, улучшающие вкус, консервирующие средства, агенты растворения или красители.

Для оральной формы введения активные соединения смешивают с пригодными для этого добавками, такими как носители, стабилизаторы или инертные разбавители, и с помощью общепринятых методов доводят до пригодных форм применения, таких как таблетки, драже, разъемные капсулы, водные, спиртовые или масляные растворы. В качестве инертных носителей могут быть использованы, например, гуммиарабик, магнезия, карбонат магния, фосфат калия, молочный сахар, глюкоза или крахмал, в особенности кукурузный крахмал. При этом композиция может существовать в виде как сухого, так и влажного гранулята. В качестве масляных носителей или в качестве растворителей используют, например, растительные или животные масла, например подсолнечное масло или рыбий жир.

Для подкожного, внутримышечного или внутривенного введения употребляют активные соединения, по желанию с общепринятыми для этого веществами, такими как агенты растворения, эмульгаторы или другие вспомогательные вещества в растворе, суспензии или эмульсии. В качестве растворителей имеют в виду, например, воду, физиологический раствор поваренной соли или спирты, например этанол, пропанол, глицерин, наряду с этим также растворы сахаров, такие как растворы глюкозы или маннита, или также смесь из различных названных растворителей.

В качестве фармацевтических препаративных готовых форм для введения в форме аэрозолей или спреев пригодны, например, растворы, суспензии или эмульсии биологически активных веществ формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солей в фармацевтически безвредных растворителях, в особенности этаноле или воде, или смеси таких растворителей. Препаративная готовая форма может при необходимости содержать и другие фармацевтические вспомогательные вещества, такие как тензиды, эмульгаторы и стабилизаторы, а также пропеллент. Одна такая препаративная готовая форма обычно содержит биологически активное вещество в концентрации приблизительно от 0,1 до 10, в особенности приблизительно от 0,3 до 3 мас.%.

Дозировка принимаемого биологически активного вещества формулы I и частота приема зависят от эффективности и времени воздействия используемых соединений; кроме того, также влияют вид и интенсивность болезни, подвергаемой лечению, а также пол, возраст, вес и индивидуальная предрасположенность млекопитающего, подвергаемого лечению.

В среднем дневная доза соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемых солей при весе пациента около 75 кг составляет, по меньшей мере, 0,001 мг/кг, например 0,01 мг/кг, вплоть до максимально 10 мг/кг, например 1 мг/кг веса тела. В острых ситуациях болезни, например непосредственно после перенесения инфаркта миокарда, могут быть необходимы еще более высокие и, прежде всего, более частые дозировки, например, вплоть до 4-разовых доз в день. В особенности при внутривенном введении, например, у пациентов с инфарктом в отделении интенсивной терапии может быть необходима доза вплоть до 700 мг в день, и соединения согласно изобретению могут вводиться путем инъекций.

Список сокращений:
АРМВТ (ADMET)	абсорбция - распределение - метаболизм - выделение - токсикология
ДИМ (CDI)	диимидазол-1-илметанон
дба (dba)	дибензилиденацетон
ДИП (DIP)	диизопропиловый эфир
ДИПЭА (DIPEA)	диизопропилэтиламин
ДМЭ (DME)	1,2-диметоксиэтан
ДМФА (DMF)	N,N-диметилформамид
ДМСО (DMSO)	диметилсульфоксид
ЭА (EE)	этилацетат
эк. (eq.)	эквивалент
HOAc	уксусная кислота
KOtBu	калий-2-метилпропан-2-олят
MeOH	метанол
Т.пл.	температура плавления
ТБМЭ (MTB)	простой трет-бутилметиловый эфир
НМП (NMP)	N-метил-2-пирролидон
OAc	ацетат
дффф (dppf)	1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен
КТ	комнатная температура
ТГФ (THF)	тетрагидрофуран
ТМЭДА (TMEDA)	N,N,N',N'-тетраметилэтан-1,2-диамин

Экспериментальная часть

Пример 1: N-(5-метансульфонил-2-метил-4-пентафторсульфанил бензоил)гуанидин

a) 4-аминофенилсерапентафторид

Раствор хлорида олова(II) (1465 г, 7,73 моль) в концентрированном (32-процентном) водном растворе HCl нагревали при перемешивании до 80°C и затем при охлаждении льдом в течение 1 часа вносили 8 порций 4-нитрофенилсерапентафторида (584 г, 2,344 моль). При этом температуру внутри поддерживали ниже 100°C. Затем смесь 1,5 часа перемешивали при температуре внутри 85°C и затем в течение следующего часа охлаждали до 45°C. Подготавливали смесь изо льда (12 кг), NaOH (2 кг) и дихлорметана (1,5 л) и добавляли реакционную смесь при сильном перемешивании. Разделяли фазы, водную фазу 3 раза по 1 л экстагировали дихлорметаном и объединенные органические фазы сушили над Na₂SO₄ и выпаривали в вакууме. Получали 510 г 4-аминофенилсерапентафторида в виде светло-желтого, кристаллического порошка, т.пл. 63-65°C.

b) 4-амино-3-бромфенилсерапентафторид

4-аминофенилсерапентафторид (510 г, 2,327 моль) растворяли в дихлорметане (7 л), раствор охлаждали до 5°C и при перемешивании, при охлаждении льдом несколькими порциями вносили 1,3-дибром-5,5-диметилимидазолидин-2,4-дион (326 г, 1,14 моль) таким образом, что температуру внутри поддерживали при 3-8°C (около 1 часа). Затем смесь без наружного охлаждения перемешивали 1 час и давали нагреться до комнатной температуры. Смесь фильтровали через слой кизельгеля (объем около 1 л), промывали дихлорметаном (5,5 л) и фильтрат выпаривали в вакууме. Получали около 700 г красно-коричневой кристаллической массы, которую при 60°C растворяли в н-гептане (600 мл) и затем подвергали кристаллизации в холодильнике при 4°C. После отсасывания получили 590 г (85%) 4-амино-3-бромфенилсерапентафторид в виде буроватых кристаллов, т.пл. 59-59,5°C.

c) 4-амино-3-метилфенилсерапентафторид

Смесь из Cs₂CO₃ (794 г, 2,7 моль), диметоксиэтана (2 л), воды (300 мл) и триметилбороксина (50-процентный раствор в ТГФ, 225 г, 0,9 моль) нагревали до 70°C, добавляли PdCl₂(dppf)×CH₂Cl₂ (37 г, 45 ммоль) и прикапывали раствор 4-амино-3-бромфенилсерапентафторида (270 г, 0,9 моль) в диметоксиэтане (400 мл) в течение 2 часов при нагревании с обратным оттоком. Затем следующие 3 часа нагревали с обратным оттоком, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ТБМЭ (MTB) (500 мл), фильтровали через колонку с кизельгелем (14×7 см, 70-200 мкм) и промывали ТБМЭ (MTB) (2500 мл). Фильтрат выпаривали в вакууме. Получали 490 г черной полукристаллической массы, которую подвергали перегонке с водяным паром. В совокупности собирали 5,5 л конденсата, из которого продукт уже выделялся кристаллически. Конденсат 3 раза экстрагировали ТБМЭ (MTB), объединенные органические фазы сушили над Na₂SO₄ и выпаривали в вакууме. Получали 4-амино-3-метилфенилсерапентафторид (181 г, 76%) в виде бесцветных кристаллов, т.пл. 65-66°C.

d) 4-бром-3-метилфенилсерапентафторид

Смесь из трет-бутилнитрита (90-процентный, 37 мл, 280 ммоль) и CuBr₂ (35,8 г, 160 ммоль) в ацетонитриле (260 мл) подавали при 5°C и при перемешивании и охлаждении льдом прикапывали раствор 4-амино-3-метилфенилсерапентафторида (30,9 г, 132,5 ммоль) в ТБМЭ (MTB) (140 мл) в течение 1 часа при 5-8°C. При этом примерно через 2 минуты устанавливали выделение азота. Затем смесь в течение 1 часа при перемешивании оставляли нагреваться до комнатной температуры, добавляли смесь изо льда (250 г), 26-процентного водного раствора NH₃ (50 мл) и ТБМЭ (MTB) (250 мл) и смесь 10 минут перемешивали. Фазы разделяли, водные экстрагировали 3 раза ТБМЭ (MTB) (по 150 мл) и объединенные органические фазы однократно встряхивали с 400 мл воды. После сушки с Na₂SO₄ и выпаривания органической фазы получили 39 г 4-бром-3-метилфенилсерапентафторида в виде красно-коричневого масла, которое было загрязнено 8 мол.% 4,5-дибром-3-метилфенилсерапентафторида, но было использовано далее без последующей очистки. Выход 89%, в расчете на чистоту 90%.

e) 4-циан-3-метилфенилсерапентафторид

Смесь из 4-бром-3-метилфенилсерапентафторида (136,4 г, чистота 80%, 0,367 моль), Zn(CN)₂ (72,8 г, 0,62 моль) и Zn-пыли (7,2 г, 0,11 моль) подавали в диметилацетамид (900 мл) и воду (40 мл) при пропускании азота, при перемешивании нагревали до 125°C и добавляли PdCl₂(dppf)×CH₂Cl₂ (32,7 г, 40 ммоль). После часового перемешивания при 125°C еще раз добавляли PdCl₂(dppf)×CH₂Cl₂ (16,3 г, 20 ммоль) и Zn-пыль (3,6 г, 55 ммоль) и перемешивали еще 2 часа при 125°C. Затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли н-гептаном (400 мл) и смесь при добавлении 5 н. водного раствора NH₄Cl (250 мл) и воды (450 мл) в течение 15 минут сильно перемешивали. Смесь отсасывали через слой кизельгеля, разделяли фазы и водную фазу 2 раза экстрагировали н-гептаном (200 мл). Объединенные органические фазы встряхивали с водой (450 мл), сушили над MgSO₄ и выпаривали в вакууме. Полученный черный осадок растворяли в 200 мл н-гептана, фильтровали и вновь выпаривали в вакууме. Получили 78 г темно-коричневой жидкости, которую очищади посредством хроматографии на колонке с кизельгелем (7×55 см, 60-200 мкм, н-гептан/дихлорметан от 4:1 до 3:2). В качестве первой фракции получили 6,5 г 4-бром-3-метилфенилсерапентафторида (эдукт) в виде желтоватой жидкости и затем 71,1 г (80%) 4-циано-3-метилфенилсерапентафторида в виде светло-желтого масла.

f) 2-метил-4-пентафторсульфанилбензойная кислота

Смесь из 4-циано-3-метилфенилсерапентафторида (41,2 г, 169,4 ммоль), NaOH (20,4 г, 510 ммоль) и воды (60 мл) в этиленгликоле (160 мл) нагревали до 130°C и 4 часа перемешивали при этой температуре. Затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ТБМЭ (MTB) (150 мл) и водой (250 мл) и отсасывали смесь. Фазы фильтрата разделяли, водную фазу подкисляли концентрированным водным раствором HCl и отсасывали выпавшее твердое вещество. Получали 41,1 г (93%) 2-метил-4-пентафторсульфанилбензойной кислоты в виде бесцветных кристаллов, т.пл. 138-139°C.

g) 2-метил-5-нитро-4-пентафторсульфанилбензойная кислота

6,0 г 2-метил-4-пентафторсульфанилбензойной кислоты растворяли в 60 мл 90% водного раствора HNO₃ и прикапывали при комнатной температуре (КТ) 6 мл 96% H₂SO₄. Оставляли стоять 28 часов при КТ, затем выливали на 300 г льда, добавляли 300 мл воды, 1 час перемешивали и затем отфильтровывали продукт. Сушили на воздухе и получили 6,5 г бледно-желтого твердого вещества, т.пл. 218-220°C.

R_f (DIP/2% HOAc)=0,27; MS (ES^-): 306

h) 5-амино-2-метил-4-пентафторсульфанилбензойная кислота

6,5 г 2-метил-5-нитро-4-пентафторсульфанилбензойной кислоты растворяли в 100 мл MeOH и 20 мл HOAc и смешивали с 500 мг 10% Pd/C. В течение 20 часов гидрировали водородом при нормальном давлении и КТ. Превращение было неполным, поэтому гидрировали следующие 48 часов при давлении водорода 6 бар и КТ. Затем отфильтровывали катализатор и растворитель отгоняли в вакууме. Получали 5,7 г светло-серого твердого вещества. Т.пл. 187-189°C.

R_f (DIP/2% HOAc)=0,23; MS (ES^-): 276

i) 5-хлорсульфонил-2-метил-4-пентафторсульфанилбензойная кислота

1,0 г 5-амино-2-метил-4-пентафторсульфанилбензойной кислоты растворяли в 30 мл HOAc и смешивали с 30 г льда и 30 мл насыщенного водного раствора HCl. Затем при 0°C прикапывали раствор 274 мг NaNO₂ в 1 мл воды в течение 1 минуты. 15 минут перемешивали при 0°C. Затем полученную таким образом суспензию порциями добавляли к охлажденной до 0°C суспензии из 6,1 мг CuCl и 61,5 мг CuCl₂×2H₂O в 30 мл насыщенного раствора SO₂ в HOAc. Перемешивали 1 час при 0°C, затем 1 час при КТ. Затем экстрагировали реакционную смесь 3 раза диэтиловым эфиром (по 200 мл). Сушили над MgSO₄ и отгоняли в вакууме летучие компоненты. Получали 1,3 г продукта, который далее непосредственно подвергали превращению.

k) 2-метил-5-сульфино-4-пентафторсульфанилбензойная кислота

1,2 г 5-хлорсульфонил-2-метил-4-пентафторсульфанилбензойной кислоты порционно добавляли к нагретому до 70°C раствору из 4,2 г Na₂SO₃ в 50 мл воды и при этом с помощью 2 н. водного раствора NaOH поддерживали pH раствора между pH 9 и pH 11. Перемешивали 20 минут при 70°C, охлаждали до КТ и устанавливали pH 1-2 водным раствором HCl. Оставляли стоять 16 часов при КТ, затем отфильтровывали продукт и сушили в вакууме. Получали 1,0 г белого твердого вещества, т.пл. 288-290°C (с разложением).

R_f (EE/MeOH 1:1)=0,52

l) Метиловый эфир 5-метансульфонил-2-метил-4-пентафторсульфанилбензойной кислоты

1,0 г 2-метил-5-сульфино-4-пентафторсульфанилбензойной кислоты суспендировали в 10 мл воды и добавляли 3,1 мл водного раствора 2 н. NaOH (фенолфталеин:щелочная среда). Воду отгоняли в вакууме и затем 2 раза испаряли с толуолом (по 20 мл). Затем динатриевую соль растворяли в 40 мл безводного ДМФА, добавляли 0,69 мл метилйодида и перемешивали сначала 4 часа при 60°C, затем 15 часов при КТ. Реакционную смесь вливали в 100 мл воды и отсасывали первую часть продукта (500 мг). Водным раствором HCl у фильтрата устанавливали pH 2 и 3 раза по 30 мл экстрагировали ЭА. Сушили над MgSO₄ и отгоняли растворитель в вакууме. Посредством хроматографии на кизельгеле с ДИП (DIP) получали следующие 460 мг белых кристаллов, т.пл. 127°C.

R_f (DIP)=0,36

m) N-(5-метансульфонил-2-метил-4-пентафторсульфанилбензоил) гуанидин

0,70 г хлорида гуанидина и 0,68 г KOtBu в 20 мл безводного ДМФА перемешивали 30 минут при КТ. Затем эту суспензию добавляли к 0,43 г метилового эфира 5-метансульфонил-2-метил-4-пентафторсульфанилбензойной кислоты и 16 часов перемешивали при КТ. Затем реакционную смесь выливали в 200 мл воды, с помощью водного раствора HCl устанавливали pH 8 и 3 раза экстрагировали ЭА (EE) (по 100 мл). Сушили над MgSO₄ и отгоняли растворитель в вакууме. Осадок суспендировали в 5 мл CH₂Cl₂ и отфильтровывали продукт. Получали 190 мг бесцветных кристаллов, т.пл. 254-256°C.

R_f (EE)=0,22; MS (ES⁺): 382

Пример 2: N-(5-метансульфонил-2-метил-4-пентафторсульфанил бензоил)гуанидин, соль метансульфоновой кислоты

9,3 г соединения, полученного в примере 1, суспендировали в 100 мл воды и добавляли раствор 2,3 г метансульфоновой кислоты в 10 мл воды. 30 минут перемешивали при КТ, затем воду отгоняли в вакууме. Получали 11,7 г соли метансульфоновой кислоты, которую затем еще перекристаллизовывали из 110 мл воды. Получали 10,0 г N-(5-метансульфонил-2-метил-4-пентафторсульфанилбензоил) гуанидина, соли метансульфоновой кислоты в виде белых кристаллов, т.пл. 230°C.

Пример 3: N-(5-метансульфонил-2-метил-4-пентафторсульфанил бензоил)гуанидин, гидрохлорид

300 мг соединения, полученного в примере 2, суспендировали в 50 мл насыщенного водного раствора Na₂CO₃ и 2 раза экстрагировали ЭА (по 40 мл). ЭА-фазу затем сушили над MgSO₄ и отгоняли растворитель в вакууме. Осадок растворяли в 10 мл MeOH и смешивали с 2 мл 10% водного раствора HCl. Летучие компоненты отгоняли в вакууме и получали 230 мг белых кристаллов, т.пл. 276-278°C.

Определение NHE-ингибирования

Концентрацию ингибирования IC₅₀ для подавления NHE1 определяли следующим образом:

IC₅₀ для подавления NHE1 определяли анализом FLIPR посредством измерения роста pH_i в трансфицированной линии клеток, которые экспримируют человеческий NHE1.

Анализ проводили в приборе FLIPR (считывающее устройство флуоресцентного отображения фотопластинки) с 96-луночным микротитрационным планшетом (с черными стенками) с прозрачным дном. Трансфицированные линии клеток, которые экспримируют различные субтипы NHE (родительская линия LAP-1 не характеризуется как результат мутагенеза и последующей селекции никакой эндогенной активностью NHE), высевали в предыдущий день с густотой ~25000 клеток на лунку.

Питательная среда трансфицированных клеток (Iscove+10% зародышевой телячьей сыворотки) дополнительно содержит G418 в качестве селекционного антибиотика, чтобы обеспечивать присутствие трансфицированных последовательностей.

Непосредственный анализ начинают с удаления питательной среды и добавления 100 мкл/на лунку нагружаемого буфера (5 мкМ BCECF-AM [2',7'-бис(карбоксиэтил)-5-(и -6)-карбоксифлуоресцеин, сложный ацетоксиметиловый эфир] в 20 мМ NH₄Cl, 115 мМ холинхлорида, 1 мМ MgCl₂, 1 мМ CaCl₂, 5 мМ KCl, 20 мМ HEPES, 5 мМ глюкозы; pH 7,4 [устанавлен KOH]). Затем клетки в течение 20 минут инкубируют при 37°C. Эта инкубация приводит к нагружению клеток флуоресцирующим красителем, интенсивность флуоресценции которого зависит от pH_i, и NH₄Cl, что приводит к слабой щелочности клеток.

Нефлуоресцирующий краситель предварительной стадии BCECF-AM в виде сложного эфира является мембранопроницаемым. Внутриклеточно с помощью эстеразы высвобождается непосредственный краситель BCECF, который не является мембранопроницаемым.

После 20-минутной инкубации удаляют нагрузочный буфер, содержащий NH₄Cl и свободный BCECF-AM, путем трехкратной промывки в промывателе клеток (Tecan Columbus), каждый раз используя по 400 мкл промывочного буфера (133,8 мМ холинхлорида, 4,7 мМ KCl, 1,25 мМ MgCl₂, 1,25 мМ CaCl₂, 0,97 мМ K₂HPO₄, 0,23 мМ KH₂PO₄, 5 мМ HEPES, 5 мМ глюкозы; pH 7,4 [установлен KOH]). Остающийся в лунках остаточный объем составляет 90 мкл (возможно, 50-125 мкл). Эта стадия промывки удаляет свободный BCECF-AM и, как следствие, ведет к удалению внешних ионов NH₄ ⁺до внутриклеточного подкисления (~pH_i 6,3-6,4).

Так как равновесие внутриклеточных ионов NH₄ ⁺с NH₃ и H⁺нарушается вследствие удаления внеклеточных ионов NH₄ ⁺и посредством последующих, мгновенно протекающих переходов NH₃ через клеточную мембрану, процесс промывки ведет к тому, что внутриклеточные H⁺остаются, что является причиной внутриклеточного подкисления. В конечном итоге это может привести к гибели клеток, если они удерживаются достаточно долго. В этом положении было важно, что промывочный буфер не содержал натрия (<1 мМ), так как внеклеточные ионы натрия приводили бы в мгновенному росту pH_i посредством активности клонированных изоформ NHE.

Также было важно, что все используемые буферы (нагрузочный буфер, промывочный буфер, восстанавливающий буфер) не содержали никаких ионов HCO₃ ^-, так как присутствие бикарбоната привело бы к активации нарушающей, зависимой от бикарбоната системы регуляции pH_i, которая содержится в родительской линии клеток LAP-1.

Микротитрационный планшет с подкисленными клетками затем (через 20 минут после подкисления) переносили к FLIPR. В FLIPR внутриклеточный флуоресцентный краситель возбуждали светом с длиной волны 488 нм, который создавали аргонным лазером, и параметры измерения (мощность лазера, выдержка и диафрагма (Blende) CCD-камеры, встроенной в FLIPR) выбирали таким образом, что средний сигнал флуоресценции на лунку имел значение между 30000 и 35000 относительных единиц флуоресценции.

Непосредственное измерение в FLIPR начинают с того, что управляемая программа каждые две секунды делает съемку CCD-камерой. Через десять секунд возбуждали рост внутриклеточного pH путем добавки 90 мкл восстанавливающего буфера (133,8 мМ NaCl, 4,7 мМ KCl, 1,25 мМ MgCl₂, 1,25 мМ CaCl₂, 0,97 мМ K₂HPO₄, 0,23 мМ KH₂PO₄, 10 мМ HEPES, 5 мМ глюкозы; pH 7,4 [установлен NaOH]) с помощью 96-луночного микротитрационного планшета, встроенного в FLIPR.

В качестве положительного контроля (100% активность NHE) служат лунки, в которые был добавлен чистый восстанавливающий буфер, отрицательного контроля (0% активность NHE) - содержащие промывочный буфер. Во все другие лунки был добавлен восстанавливающий буфер с двукратно концентрированными тестируемыми веществами. Измерения в FLIPR заканчивали через 60 точек измерения (две минуты).

Исходные данные экспортируют в программу ActivityBase. С помощью этой программы сначала рассчитывают активность NHE для каждой тестируемой концентрации вещества и из этого рассчитывают значение IC₅₀ для веществ. Так как ход повышения pH_i не был линейным в течение всего эксперимента, а в конце снижался вследствие уменьшающейся активности NHE при повышенных значениях pH_i, для оценки измерения было важно выбирать ту часть кривой, в которой прирост флуоресценции положительного контроля был линейным.

Пример	Ингибирование NHE1 IC₅₀ [нМ]
1	49

Фармакокинетика in vivo - профилирование с помощью „n в одном методе“

В качестве фармакокинетических параметров были определены данные экспозиции и распределение объемов, как указано:

NHE1-ингибитор согласно изобретению из примера 1 и в качестве сравнительного вещества - известный NHE1-ингибитор карипорид формулы

растворяли в водной, слегка кислой среде (вода, pH 4, установлен 1 M соляной кислотой). Концентрация полученной таким образом водной композиции составляла примерно по 1,5 мг вещества на 1 г раствора. 10 мл этой композиции однократно вводили самцу гончей собаки натощак в глоточную вену (Vena jugularis) с помощью катетера в качестве болюса (доза примерно по 1 мг введенного вещества на кг веса тела собаки). С помощью второго катетера через 5 минут, 15 минут, 30 минут, 1 час, 2 часа, 4 часа, 8 часов и 24 часа получали пробы крови и изготавливали гепаринизированную плазму путем центрифугирования при 1000g в соответствующих канюлях для плазмы.

Пробы плазмы обрабатывали и после разделения ВЭЖХ давали им количественную оценку посредством MS/MS. Этот метод позволял вследствие своей высокой специфичности одновременное определение нескольких веществ. Из кривых концентрация - время (смотрите чертеж) могут быть рассчитаны экспозиции с помощью компьютерной программы WinNonlin и сравнены с экспозицией известного сравнительного вещества NHE1. Так как различные вещества были измерены у одного животного за равные моменты времени, выявилось точное сравнение соединений, и смогли установить соотношение объемов распределения.

Соединение	Объемы распределения [л/кг веса тела]
Пример 1	1,67
Сравнительное вещество карипорид	2,94

Из кривых концентрация - время отчетливо видно, что соединения согласно изобретению в крови также сохраняются через более продолжительные промежутки времени, и поэтому экспозиция приблизительно в 2-3 раза выше, чем у сравнительного вещества карипорид. Через 24 часа карипорид больше не определяется в плазме.

На чертеже приведены следующие обозначения:

Фиг.1: Кривые концентрация - время в плазме крови собак после приема приблизительно по 1 мг/кг соединения из примера 1 и карипорида.

Ось Y: концентрация измеряемого соединения в мкг/мл в плазме.

Ось X: время в часах.

Claims

1. Соединения формулы I

где
R1 обозначает алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами,
R2 обозначает водород,
R3 обозначает -SO₂CH₃,
R4 обозначает водород,
а также их фармацевтически приемлемые соли.

2. Соединение формулы I по п.1, представляющее собой N-(5-метансульфонил-2-метил-4-пентафторсульфанилбензоил)гуанидин, а также его фармацевтически приемлемые соли.

3. Способ получения соединения формулы I по п.1 и/или его фармацевтически приемлемых солей, отличающийся тем, что соединение формулы II,

где R1-R4 имеют значения, указанные в п.1, и L обозначает нуклеофильно замещаемую удаляемую группу, подвергают превращению с гуанидином.

4. Соединение формулы I и/или его фармацевтически приемлемые соли по п.1 для применения в качестве лекарственного средства в качестве ингибитора NHE1.

5. Применение соединения по п.2 формулы для получения лекарственного средства, обладающего способностью ингибировать NHE1.

6. Лекарственное средство, обладающее способностью ингибировать NHE1, содержащее эффективное количество соединения по п.2 вместе с фармацевтически приемлемыми носителями и добавками.