RU2370499C2

RU2370499C2 - Новые фторгликозидные производные пиразолов, содержащее их лекарственное средство и их применение

Info

Publication number: RU2370499C2
Application number: RU2007101154/04A
Authority: RU
Inventors: Харм БРУММЕРХОП (DE); Харм Бруммерхоп; Венделин ФРИК (DE); Венделин Фрик; Хайнер ГЛОМБИК (DE); Хайнер Гломбик; Оливер ПЛЕТТЕНБУРГ (DE); Оливер ПЛЕТТЕНБУРГ; Мартин БИККЕЛЬ (DE); Мартин Биккель; Хуберт ХОЙЕР (DE); Хуберт Хойер; Штефан ТАЙС (DE); Штефан Тайс
Original assignee: Санофи-Авентис Дойчланд Гмбх
Priority date: 2004-06-11
Filing date: 2005-06-03
Publication date: 2009-10-20
Also published as: NO20070176L; JP2008501745A; EP1758914A1; PE20060297A1; CA2570042C; BRPI0510770A; US7820804B2; PT1758914E; IL179757A; DE502005002056D1; UY28955A1; WO2005121161A1; RS50541B; MXPA06013513A; ES2296180T3; HK1100411A1; DE102004028241B4; DK1758914T3; HRP20080023T3; AU2005252329A1

Abstract

Изобретение относится к соединениям формулы I, где R1, R4, R5, R6, R7, R8 - Н; R2 - F; А означает О; R3 - (С₁-С₆)-алкил, причем один, несколько или все атомы водорода могут быть замещены фтором; В - (С₀-С₁₅)-алкилен; Х - СО или связь; L - (С₁-С₆)-алкилен, причем в каждом случае одна или две -СН₂-группы могут быть замещены NH, или (С₂-С₅)-алкенилен; Y - СО, NHCO или связь; R9 - водород, (С₁-С₆)-алкил, (С₁-С₆)-алкилен-ОН, (С₁-С₆)-алкилен-NH₂ или (С₀-С₆)-алкилен-СОNН₂, причем одна или более СН₂-групп алкильного остатка может быть замещена -ОН, -OSО₃Н, -NH-SO₃H, адамантилом или сахарным остатком формулы

или R8 и R9 вместе с несущим их атомом N образуют 5-7-членный насыщенный цикл Сус2, причем одна или более СН₂-групп цикла также может быть замещена О, NH, NSO₃H, N-(С₁-С₆)-алкилом и причем алкильная группа может быть замещена группой -ОН, а также к их фармацевтически приемлемым солям. Изобретение относится к лекарственному средству для снижения уровня сахара в крови, содержащему одно или несколько соединений формулы I. Кроме того, изобретение относится к применению соединений формулы I для получения медикамента для снижения уровня сахара в крови и для получения медикамента для лечения диабета первого и второго типов. 4 н. и 6 з.п. ф-лы, 1 табл.

Description

Изобретение относится к замещенным фторгликозидным производным пиразолов, их физиологически приемлемым солям, а также к физиологически функциональным производным.

В литературе уже известно несколько классов веществ с SGLT-действием. Все эти структуры служат образцом природного вещества флорицина. Из них были выведены следующие классы, которые описаны в нижеследующих охранных документах:

- пропиофенонгликозиды, Tanabe (WO 0280936, WO 0280935, JP 2000080041 и EP 850948);

- 2-(глюкопиранозилокси)-бензилбензолы, Kissei (WO 0244192, WO 0228872, WO 03011880 и WO 0168660);

- глюкопиранозилоксипиразолы, Kissei, Bristol-Myers Squibb и Ajinomoto (WO 02068440, WO 02068439, WO 0236602, WO 01016147, WO 02053573, WO 03020737, WO 03090783, WO 04014932, WO 04019958 и WO 04018491);

- O-гликозидбензамиды, Bristol-Myers Squibb (WO 0174835 и WO 0174834);

- глюкопиранозилокситиофены, Aventis (WO 04007517);

- и C-арилгликозиды, Bristol-Myers Squibb (WO 03099836, WO 0127128 и US 2002137903).

Все известные структуры содержат глюкозу как очень важный структурный элемент.

В основе изобретения стоит задача предоставить новые соединения, с которыми возможно предупреждение и лечение диабета первого и второго типов.

Авторы неожиданно обнаружили, что фторгликозидные производные пиразолов усиливают действие на SGLT. Поэтому эти соединения особенно подходят для предупреждения и лечения диабета первого и второго типов.

Поэтому изобретение относится к соединениям формулы I

где

R1 и R2 независимо друг от друга означают F или H, причем один из остатков R1 или R2 должен быть F;

A означает О, NH, CH₂, S или связь;

R3 означает водород, F, Cl, Br, I, OH, CF₃, NO₂, CN, COOH, CO(C₁-C₆)-алкил, COO(C₁-C₆)-алкил, CONH₂, CONH(C₁-C₆)-алкил, CON[(C₁-C₆)-алкил]₂, (C₁-C₆)-алкил, (C₃-C₆)-циклоалкил, (C₂-C₆)-алкенил, (C₂-C₆)-алкинил, O-(C₁-C₆)-алкил, HO-(C₁-C₆)-алкилен, (C₁-C₆)-алкилен-О-(C₁-C₆)-алкил, фенил, бензил, (C₁-C₆)-алкоксикарбонил, причем в алкильном, алкенильном, алкинильном или O-алкильном остатке один, несколько или все атомы водорода могут быть замещены фтором;

SO₂-NH₂, SO₂NH(C₁-C₆)-алкил, SO₂N[(C₁-C₆)-алкил]₂, S-(C₁-C₆)-алкил, S-(CH₂)_o-фенил, SO-(C₁-C₆)-алкил, SO-(CH₂)_o-фенил, SO₂-(C₁-C₆)-алкил, SO₂-(CH₂)_o-фенил, причем o может быть равным от 0 до 6, а фенильный остаток может быть до двух раз замещен F, Cl, Br, OH, CF₃, NO₂, CN, OCF₃, О-(C₁-C₆)-алкилом, (C₁-C₆)-алкилом, NH₂;

NH₂, NH-(C₁-C₆)-алкил, N((C₁-C₆)-алкил)₂, NH-CO-(C₁-C₇)-алкил, фенил, О-(CH₂)_o-фенил, причем o может быть равным от 0 до 6, причем фенильный остаток может быть от одного до трех раз замещен F, Cl, Br, I, OH, CF₃, NO₂, CN, OCF₃, O-(C₁-C₆)-алкилом, (C₁-C₆)-алкилом, NH₂, NH(C₁-C₆)-алкилом, N((C₁-C₆)-алкил)₂, SO₂-CH₃, COOH, COO-(C₁-C₆)-алкилом, CONH₂;

R4 означает водород, (C₁-C₆)-алкил, (C₂-C₆)-алкенил, (C₃-C₆)-циклоалкил, или фенил, который при необходимости может быть замещен галогеном или (C₁-C₄)-алкилом;

B означает (C₀-C₁₅)-алкилен, причем один или несколько атомов C алкиленового остатка независимо друг от друга могут быть замещены -O-, -(C=O)-, -CH=CH-, -C≡C-, -S-, -CH(OH)-, -CHF-, -CF₂-, -(S=O)-, -(SO₂)-, -N((C₁-C₆)-алкил)-, -N((C₁-C₆)-алкилфенил)- или -NH-;

R5, R6, R7 независимо друг от друга означают водород, F, Cl, Br, I, OH, CF₃, NO₂, CN, COOH, COO(C₁-C₆)-алкил, CO(C₁-C₄)-алкил, CONH₂, CONH(C₁-C₆)-алкил, CON[(C₁-C₆)-алкил]₂, (C₁-C₆)-алкил, (C₂-C₆)-алкенил, (C₂-C₆)-алкинил, О-(C₁-C₈)-алкил, HO-(C₁-C₆)-алкилен, (C₁-C₆)-алкилен-O-(C₁-C₆)-алкил, причем в алкильном, алкенильном, алкинильном или O-алкильном остатках один, несколько или все атомы водорода могут быть замещены фтором;

SO₂-NH₂, SO₂NH(C₁-C₆)-алкил, SO₂N[(C₁-C₆)-алкил]₂, S-(C₁-C₆)-алкил, S-(CH₂)_o-фенил, SCF₃, SO-(C₁-C₆)-алкил, SO-(CH₂)_o-фенил, SO₂-(C₁-C₆)-алкил, SO₂-(CH₂)_o-фенил, причем o может быть равным от 0 до 6, а фенильный остаток может быть до двух раз замещен F, Cl, Br, OH, CF₃, NO₂, CN, OCF₃, O-(C₁-C₆)-алкилом, (C₁-C₆)-алкилом, NH₂;

NH₂, NH-(C₁-C₆)-алкил, N((C₁-C₆)-алкил)₂, NH-CO-(C₁-C₆)-алкил, фенил, О-(CH₂)_o-фенил, причем o может быть равным от 0 до 6, причем фенильный остаток может быть от одного до трех раз замещен F, Cl, Br, I, OH, CF₃, NO₂, CN, OCF₃, O-(C₁-C₈)-алкилом, (C₁-C₆)-алкилом, NH₂, NH(C₁-C₆)-алкилом, N((C₁-C₆)-алкил)₂, SO₂-CH₃, COOH, COO-(C₁-C₆)-алкилом, CONH₂;

или

R6 и R7 вместе с несущими их атомами C образуют 5-7-членный насыщенный, частично или полностью ненасыщенный цикл Cyc1, причем 1 или 2 атома C цикла также могут быть замещены N, O или S, и Cyc1 при необходимости может быть замещен (C₁-C₆)-алкилом, (C₂-C₅)-алкенилом, (C₂-C₅)-алкинилом, причем в каждом случае одна CH₂-группа может быть замещена O, или может быть замещен H, F, Cl, OH, CF₃, NO₂, CN, COO(C₁-C₄)-алкилом, CONH₂, CONH(C₁-C₄)-алкилом, OCF₃;

X означает CO, O, NH, S, SO, SO₂ или связь;

L означает (C₁-C₆)-алкилен, (C₂-C₅)-алкенилен, (C₂-C₅)-алкинилен, причем в каждом случае одна или две CH₂-группы могут быть замещены O или NH;

Y означает CO, NHCO, SO, SO₂ или связь;

R8, R9 независимо друг от друга означают водород, SO₃H, остаток сахара, (C₁-C₆)-алкил, причем одна или несколько CH₂-групп алкильного остатка независимо друг от друга могут быть замещены (C₁-C₆)-алкилом, OH, (C₁-C₆)-алкилен-OH, (C₂-C₆)-алкенилен-OH, остатком O-сахара, OSO₃H, NH₂, NH-(C₁-C₆)-алкилом, N[(C₁-C₆)-алкил]₂, NH-CO-(C₁-C₆)-алкилом, остатком NH-сахара, NH-SO₃H, (C₁-C₆)-алкилен-NH₂, (C₂-C₆)-алкенилен-NH₂, (C₀-C₆)-алкилен-COOH, (C₀-C₆)-алкилен-CONH₂, (C₀-C₆)-алкилен-CONH-(C₁-C₆)-алкилом, (C₀-C₆)-алкилен-SONH₂, (C₀-C₆)-алкилен-SONH-(C₁-C₆)-алкилом, (C₀-C₆)-алкилен-SO₂NH₂, (C₀-C₆)-алкилен-SO₂NH-(C₁-C₆)-алкилом, адамантилом;

или

R8 и R9 вместе с несущим их атомом N образуют 5-7-членный насыщенный цикл Cyc2, причем одна или несколько CH₂-групп цикла также могут быть замещены O, S, NH, NSO₃H, остатком N-сахара, N-(C₁-C₆)-алкилом, причем одна или несколько CH₂-групп алкильного остатка независимо друг от друга могут быть замещены (C₁-C₆)-алкилом, OH, (C₁-C₆)-алкилен-OH, (C₂-C₆)-алкенилен-OH, NH₂, NH-(C₁-C₆)-алкилом, N[(C₁-C₆)-алкил]₂, NH-CO-(C₁-C₆)-алкилом, остатком NH-сахара, (C₁-C₆)-алкилен-NH₂, (C₂-C₆)-алкенилен-NH₂, (C₀-C₆)-алкилен-COOH, (C₀-C₆)-алкилен-CONH₂, (C₀-C₆)-алкилен-CONH-(C₁-C₆)-алкилом, (C₀-C₆)-алкилен-SONH₂, (C₀-C₆)-алкилен-SONH-(C₁-C₆)-алкилом, (C₀-C₆)-алкилен-SO₂NH₂, (C₀-C₆)-алкилен-SO₂NH-(C₁-C₆)-алкилом,

а также их фармацевтически приемлемые соли.

Под остатками сахаров понимают соединения, которые являются производными альдоз и кетоз с 3-7 атомами углерода, которые могут относиться к ряду D или L; к ним относятся также аминосахар, сахарные спирты или сахарные кислоты (Jochen Lehmann, Chemie der Kohlenhydrate, Thieme Verlag 1976). В качестве примеров следует назвать глюкозу, маннозу, фруктозу, галактозу, рибозу, эритрозу, глицериновый альдегид, седогептулозу, глюкозамин, галактозамин, глюкуроновую кислоту, галактуроновую кислоту, глюконовую кислоту, галактоновую кислоту, манноновую кислоту, глюкамин, 3-амино-1,2-пропандиол, гликаровую кислоту и галактаровую кислоту. При этом связи могут находиться в альфа- и бета-форме.

Места присоединения A, B, R3 и R5 к циклу могут быть выбраны свободно. Все получаемые соединения формулы I относятся к настоящему изобретению.

Предпочтительны соединения формулы I,

где A означает O, NH, связь;

R3 означает водород, F, Cl, Br, I, OH, CF₃, NO₂, CN, COOH, CO-(C₁-C₆)-алкил, COO-(C₁-C₆)-алкил, CONH₂, CONH-(C₁-C₆)-алкил, CO-N[(C₁-C₆)-алкил]₂, (C₁-C₆)-алкил, (C₂-C₆)-алкенил, (C₂-C₆)-алкинил, O-(C₁-C₆)-алкил, HO-(C₁-C₆)-алкилен, (C₁-C₆)-алкилен-O-(C₁-C₆)-алкил, фенил, бензил, (C₁-C₄)-алкилен-COOH, SO-(C₁-C₆)-алкил, причем в алкильном остатке один, несколько или все атомы водорода могут быть замещены фтором;

или

R4 означает водород, (C₁-C₆)-алкил, (C₁-C₆)-алкенил, (C₃-C₆)-циклоалкил;

B означает (C₀-C₆)-алкилен, причем один или несколько атомов C алкиленового остатка независимо друг от друга могут быть замещены -O-, -(C=O)-, -CH=CH-, -C≡C-, -S-, -CH(OH)-, -CHF-, -CF₂-, -(S=O)-, -(SO₂)-, -N((C₁-C₆)-алкилен)-, -N((C₁-C₆)-алкиленфенилен)- или -NH-.

Далее, предпочтительны соединения формулы I, в которых остатки сахара присоединены в бета(β)-положении, и стереохимия в положениях 2, 3 и 5 остатка сахара соответствует конфигурации D-глюко.

Далее, предпочтительны соединения формулы I,

где R1 означает водород и

R2 означает фтор;

или

R1 означает фтор и

R2 означает водород;

A означает O, NH;

R3 означает водород, F, Cl, Br, I, OH, CF₃, (C₁-C₆)-алкил, (C₃-C₆)-циклоалкил, (C₂-C₆)-алкенил, O-(C₁-C₆)-алкил, причем в алкильном остатке один, несколько или все атомы водорода могут быть замещены фтором;

R4 означает водород, (C₁-C₆)-алкил, (C₃-C₆)-циклоалкил;

B означает (C₀-C₄)-алкилен, причем один или несколько атомов C алкиленового остатка независимо друг от друга могут быть замещены -O-, -(C=O)-, -CH=CH-, -CH(OH)-, -CHF-, -CF₂- или -NH-;

R5, R6, R7 независимо друг от друга означают водород, F, Cl, Br, I, OH, CF₃, NO₂, CN, COOH, COO(C₁-C₆)-алкил, CO(C₁-C₄)-алкил, CONH₂, CONH-(C₁-C₆)-алкил, CO-N[(C₁-C₆)-алкил]₂, (C₁-C₆)-алкил, (C₂-C₆)-алкенил, (C₂-C₆)-алкинил, O-(C₁-C₈)-алкил, HO-(C₁-C₆)-алкилен, (C₁-C₆)-алкилен-O-(C₁-C₆)-алкил, причем в алкильном, алкенильном, алкинильном или O-алкильном остатке один, несколько или все атомы водорода могут быть замещены фтором;

NH₂, NH-(C₁-C₆)-алкил, N((C₁-C₆)-алкил)₂, NH-CO-(C₁-C₆)-алкил,

или

X означает CO, O, NH, связь;

L означает (C₁-C₆)-алкилен, (C₂-C₅)-алкенилен, причем в каждом случае одна или две CH₂-группы могут быть замещены O или NH;

Y означает CO, NHCO, связь.

Особенно предпочтительны соединения формулы I,

где R1 означает водород;

R2 означает фтор;

A означает O;

R3 означает CF₃, метил, изопропил;

R4 означает водород;

B означает (C₀-C₄)-алкилен, причем один или несколько атомов C алкиленового остатка независимо друг от друга могут быть замещены -O-, -(C=O)-, -CHF- или -CF₂-;

X означает CO, O, связь;

L означает (C₁-C₄)-алкилен, (C₂-C₄)-алкенилен, причем в каждом случае одна или две CH₂-группы могут быть замещены O или NH;

Y означает CO, NHCO, связь.

Еще более предпочтительны соединения формулы I,

где R1 означает водород;

R2 означает фтор;

A означает O;

B означает -CH₂-;

R5 означает водород, Cl, метил, этил, OH, CF₃;

R6, R7 означают водород;

X означает CO, О, связь;

L означает (C₁-C₃)-алкилен, (C₂-C₃)-алкенилен, причем в каждом случае одна CH₂-группа может быть замещена O или NH;

Y означает CO, NHCO, связь.

Особенно предпочтительны соединения формулы I, где заместители A и B занимают соседнее положение (орто-положение), а R3 занимает соседнее положение (орто-положение) к B.

Кроме того, еще более предпочтительны соединения формулы I,

где R8, R9 независимо друг от друга означают водород, SO₃H, остаток сахара, (C₁-C₄)-алкил, причем алкильный остаток может быть однократно или независимо друг от друга многократно замещен (C₁-C₂)-алкилом, OH, (C₁-C₂)-алкилен-OH, OSO₃H, NH₂, CONH₂, SO₂NH₂, NH-SO₃H или адамантилом;

или

R8 и R9 вместе с несущим их атомом N образуют 5-7-членный насыщенный цикл Cyc2, выбранный из группы пиперазина, который при N может быть замещен (C₁-C₂)-алкилом, (C₁-C₂)-алкилен-OH или SO₃H, или пиперидина, азепана, пирролидина или морфолина.

В одной частной форме реализации соединений формулы I заместители B и X находятся в пара-положении к фенильному кольцу.

В следующей форме реализации соединений формулы I заместитель A находится в положении 3, B - в положении 4, и R3 - в положении 5 к циклу пиразола.

В следующей форме реализации соединений формулы I заместитель A находится в положении 5, B - в положении 4, и R3 - в положении 3 к циклу пиразола.

Алкильные остатки в заместителях R3, R4, R5, R6, R7, R8 и R9 могут быть как линейными, так и разветвленными. Под галогеном понимают F, Cl, Br, I, предпочтительно F и Cl.

Изобретение относится к соединениям формулы I в форме их рацематов, рацемических смесей и чистых энантиомеров, а также к их диастереомерам и их смесям. Настоящее изобретение охватывает все эти изомерные и при необходимости таутомерные формы соединений формулы I. Эти изомерные формы, даже если это (отчасти) не описано дословно, могут быть получены по известным методам.

Фармацевтически приемлемые соли, благодаря их более высокой растворимости в воде по сравнению с исходными, или базисными, соединениями, особенно подходят для медицинских приложений. Эти соли должны иметь фармацевтически приемлемый анион или катион. Подходящими фармацевтически приемлемыми кислотно-аддитивными солями соединений согласно изобретению являются такие соли неорганических кислот, как соляная, бромистоводородная, фосфорная, метафосфорная, азотная и серная кислоты, а также таких органических кислот, как, например, уксусная, бензосульфоновая, бензойная, лимонная, этансульфоновая, фумаровая, глюконовая, гликолевая, изетионовая, молочная, лактобионовая, малеиновая, яблочная, метансульфоновая, янтарная, п-толуолсульфоновая и винная кислоты. Подходящими фармацевтически приемлемыми основными солями являются аммиачные соли, соли щелочных металлов (например, соли натрия и калия), щелочно-земельные соли (например, соли магния и кальция) и соли трометамола (2-амино-2-гидроксиметил-1,3-пропандиол), диэтаноламина, лизина или этилендиамина.

Соли с фармацевтически неприемлемым анионом, например трифторацетат, также охватываются рамками изобретения как полезные промежуточные продукты для получения или очистки фармацевтически приемлемых солей и/или для нетерапевтических применений, например для применений in vitro.

Используемое в данном описании понятие "физиологически функциональное производное" означает любое физиологически переносимое производное соединения формулы I согласно изобретению, например сложный эфир, который при введении такому млекопитающему, как, например, человек, способен (прямо или косвенно) образовать соединение формулы I или его активный метаболит.

К физиологически функциональным производным относятся также такие пролекарства соединений согласно изобретению, как, например, описанные в работе H. Okada et al., Chem. Pharm. Bull. 1994, 42, 57-61. Такие пролекарства могут быть метаболизированы in vivo в соединение согласно изобретению. Сами эти пролекарства могут быть активными или неактивными.

Соединения согласно изобретению могут находиться в таких различных полиморфных формах, например, как аморфные и кристаллические полиморфные формы. Все полиморфные формы соединений согласно изобретению охватываются рамками изобретения и являются следующим объектом изобретения.

Далее все ссылки на "соединение(я) формулы I" относятся к соединению(ям) формулы I, как они описаны выше, а также к их солям, сольватам и физиологически функциональным производным, как описанные в данном описании.

Применение

Настоящее изобретение относится, кроме того, к применению соединений формулы I и их фармацевтических композиций для ингибирования SGLT1 (натрийзависимый переносчик глюкозы 1). SGLT1 принимает участие в усвоении углеводов в кишечнике, в частности в усвоении глюкозы в кишечнике (E. Turk et al., Nature 1991, 350, 354-356). Ингибирование всасывания глюкозы препятствует повышению концентрации глюкозы в крови. Тем самым ингибиторы SGLT1 подходят для лечения, контроля и профилактики метаболических заболеваний, в частности сахарного диабета.

Соединения формулы I отличаются благоприятным действием на обмен глюкозы, они, в частности, понижают уровень сахара в крови и подходят для лечения диабета первого и второго типов. При этом соединения могут приниматься самостоятельно или в комбинации с другими понижающими уровень сахара в крови активными веществами (антидиабетическими средствами).

Соединения формулы I подходят, кроме того, для предупреждения и лечения таких поздних осложнений диабета, как, например, нефропатии, ретинопатии, невропатии, а также синдрома X, ожирения, инфаркта сердца, инфаркта миокарда, периферических облитерирующих эндартериитов, тромбозов, артериосклероза, воспалений, иммунных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, например СПИД, астмы, остеопороза, рака, псориаза, болезни Альцгеймера, шизофрении и инфекционных заболеваний; предпочтительно лечение диабета первого и второго типов, а также предупреждение и лечение поздних осложнений диабета, синдрома X и ожирения.

Галеновы препараты

Количество соединения формулы I, которое требуется для достижения желаемого биологического эффекта, зависит от ряда факторов, например конкретно выбранного соединения, планируемого применения типа введения и клинического состояния пациента. Обычно суточная доза составляет от 0,3 мг до 100 мг (обычно от 3 мг до 50 мг) в день на килограмм веса тела, например, 3-10 мг/кг/сут. Такие принимаемые орально готовые препараты с разовой дозой, как, например, таблетки или капсулы, могут, например, содержать от 1,0 до 1000 мг, обычно от 10 до 600 мг. Для лечения названных выше состояний соединения формулы I могут применяться самостоятельно как соединение, однако предпочтительно они предлагаются вместе с совместимой основой в виде одной фармацевтической композиции. Основа должна, естественно, быть переносимой, в том смысле, что она должна быть совместимой с другими компонентами композиции и не должна вредить здоровью пациента. Основа может быть твердым веществом или жидкостью, или тем и другим и предпочтительно ее составляют с соединением в качестве такой разовой дозы, как, например, таблетка, которая может содержать от 0,05 до 95 мас.% активного вещества. Также могут иметь место и другие фармацевтически активные вещества, в том числе другие соединения формулы I. Фармацевтические композиции согласно изобретению могут быть получены по одному из известных фармацевтических методов, которые в основном состоят в том, чтобы смешать компоненты с фармакологически приемлемой основой и/или со вспомогательными веществами.

Фармацевтическими композициями согласно изобретению являются такие композиции, которые подходят для орального, ректального, перорального (например, сублингвального) применения, хотя самый подходящий способ введения в каждом отдельном случае зависит от вида и тяжести заболевания, которое нужно лечить, и от типа фактически применяемого соединения формулы I. Рамками изобретения охватываются также дражированные лекарственные формы и дражированные лекарственные формы пролонгированного действия. Предпочтительны рецептуры, устойчивые к действию кислот и желудочного сока. Подходящие устойчивые к действию желудочного сока покрытия включают ацетатфталат целлюлозы, поливинилацетатфталат, фталат гидропропилметилцеллюлозы и анионные полимеры метакриловой кислоты и сложного метилового эфира метакриловой кислоты.

Фармацевтическиe соединения, подходящие для орального применения, могут быть предложены в таких отдельных элементах, как, например, капсулы, облатки, сосательные таблетки или таблетки, которые содержат определенное количество соединения формулы I; как порошок или гранулят; как раствор или суспензия в водной или неводной жидкости, или как эмульсия "масло-в-воде" или "вода-в-масле". Эти композиции могут, как уже упоминалось, быть приготовлены по любому подходящему фармацевтическому методу, включающему этап, на котором активное вещество и основа (которая может состоять из одного или нескольких дополнительных компонентов) приводят в контакт. Обычно композиции получают путем равномерного и однородного смешения активного вещества с жидкой и/или тонкодисперсной твердой основой, после чего продукт, если требуется, формуют. Так, например, таблетку можно сделать тем, что порошок или гранулят соединения прессуют или формуют, при необходимости с одним или несколькими дополнительными компонентами. Прессованные таблетки могут быть получены таблетированием соединения в такой свободнотекучей форме, как, например, порошок или гранулят, возможно, смешанный с вяжущим, смазкой, инертным разбавителем и/или одним (несколькими) поверхностно-активным веществом/диспергирующим агентом, в подходящем аппарате. Формованные таблетки могут быть получены формованием порошкообразного соединения, смоченного инертным жидким разбавителем, в подходящем аппарате.

Фармацевтические композиции, подходящие для перорального (сублингвального) приема, включают сосательные таблетки, которые содержат соединение формулы I вместе со вкусовым веществом, обычно сахарозой и гуммиарабиком или трагантом, и пастилки, которые содержат соединение в такой инертной основе, как желатин и глицерин или сахарозу и гуммиарабик.

Фармацевтическиe композиции, подходящие для ректального введения, предлагаются предпочтительно как свечки с разовой дозой. Они могут быть получены тем, что соединение формулы I смешивают с одной или несколькими обычными твердыми основами, например маслом какао, и образованную смесь формуют.

Комбинации с другими медикаментами

Соединения согласно изобретению принимают самостоятельно или в комбинации с одним или несколькими дополнительными фармакологически активными веществами, которые, например, оказывают благоприятное действие на нарушения обмена веществ или на часто связанные с этим заболевания. Такими медикаментами являются, например:

1) медикаменты, снижающие уровень сахара в крови, антидиабетические средства,

2) активные вещества для лечения дислипидемии,

3) антиатеросклеротические медикаменты,

4) средства от ожирения,

5) противовоспалительные активные вещества,

6) активные вещества для лечения злокачественных опухолей,

7) антитромботические активные вещества,

8) активные вещества для лечения высокого кровяного давления,

9) активные вещества для лечения сердечной недостаточности, а также

10) активные вещества для лечения и/или предупреждения осложнений, обусловленных диабетом или связанных с диабетом.

Они могут быть скомбинированы с соединениями формулы I согласно изобретению, в частности, для улучшения синергетического действия. Введение комбинации активных веществ может осуществляться или через раздельное введение активных веществ пациенту, или в виде комбинированного препарата, в котором несколько активных веществ находятся в одной фармацевтической готовой лекарственной форме.

В качестве примеров следует назвать

Антидиабетические средства

Подходящие антидиабетические средства описаны, например, в Красном списке 2001, глава 12 и в USP словаре USAN and International Drug Names, US Pharmacopeia, Rockville 2003. Антидиабетические средства включают все виды инсулина и производных инсулина, например Lantus® (см. www.lantus.com) или Apidra^®, а также другие быстродействующие инсулины (см. документ US 6221633), такие модуляторы рецепторов ГПП-1, которые описаны в WO 01/04146, а также, например, те, которые описаны в документе WO 98/08871, принадлежащем Novo Nordisk A/S.

Действующие орально гипогликемические активные вещества предпочтительно включают сульфонилмочевину, бигуанидин, меглитинид, оксадиазолидиндион, тиазолидиндион, ингибиторы глюкозидазы, антагонисты глюкагона, оральные агонисты ГПП-1, ингибиторы DPP-IV, активаторы калиевых каналов, например, те, что раскрыты в документах WO 97/26265 и WO 99/03861, сенсибилизаторы инсулина, ингибиторы ферментов печени, которые участвуют в стимулировании глюконеогенеза и/или глюкогенoлиза, модуляторы усвоения глюкозы, соединения, изменяющие обмен веществ, которые приводят к изменению состава липидов в крови, соединения, которые уменьшают потребление и усвоение продуктов питания, модуляторы PPAR и PXR, и активные вещества, которые воздействуют на АТФ-зависимые калиевые каналы бета-клеток.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с инсулином.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с веществами, которые влияют на производство глюкозы в печени, такими, например, как ингибиторы глюкоген фосфорилазы (см. WO 01/94300, WO 02/096864, WO 03/084923, WO 03/084922, WO 03/104188).

В одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с такой сульфонилмочевиной, как, например, толбутамид, глибенкламид, глипизид или глимепирид.

В одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с активным веществом, которое воздействует на АТФ-зависимые калиевые каналы бета-клеток, таким, например, как толбутамид, глибенкламид, глипизид, глимепирид или репаглинид.

В одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с таким бигуанидом, как, например, метформин.

В еще одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с таким меглитинидом, как, например, репаглинид.

В одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с таким тиазолидиндионом, как, например, циглитазон, пиоглитазон, розиглитазон, или с соединениями, раскрытыми в патенте WO 97/41097, принадлежащем Исследовательскому центру им др. Reddy, в частности, 5-[[4-[(3,4-дигидро-3-метил-4-оксо-2-хиназолинилметокси]фенил]метил]-2,4-тиазолидиндион.

В одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с ингибитором DPP-IV, например, описанным в документах WO 98/19998, WO 99/61431, WO 99/67278, WO 99/67279, WO 01/72290, WO 02/38541, W003/040174, в частности P-93/01 (1-циклопентил-3-метил-1-оксо-2-пентанаммонийхлорид), P-31/98, LAF237 (1-[2-[3-гидроксиадамант-1-иламино)ацетил]пирролидин-2-(S)-карбонитрил), TS021 ((2S,4S)-4-фтор-1-[[(2-гидрокси-1,1-диметилэтил)амино]ацетил]пирролидин-2-карбонитрил монобензолсульфонат).

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с таким агонистом PPAR-гамма, как, например, розиглитазон, пиоглитазон.

В одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с такими соединениями с ингибирующим действием на SGLT-1 и/или -2, как, например, явно или неявно описанные в документах WO 2004/007571, WO 2004/052902, WO 2004/052903.

В одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с таким ингибитором α-глюкозидазы, как, например, миглитол или акарбоза.

В одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с более одним из названных выше соединений, например, в комбинации с сульфонилмочевиной и метформином, сульфонилмочевиной и акарбозой, репаглинидом и метморфином, инсулином и сульфонилмочевиной, инсулином и метформином, инсулином и троглитазоном, инсулином и ловастатином и т.д.

Модуляторы липидов

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с таким ингибитором ГМГ-КоА-редуктазы, как ловастатин, флювастатин, правастатин, симвастатин, ивастатин, итавастатин, аторвастатин, розувастатин.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с ингибитором всасывания желчной кислоты (см., например, документы US 6245744, US 6221897, US 6277831, EP 0683773, EP 0683774).

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с таким полимерным поглотителем желчной кислоты, как, например, холестирамин, колезевелам.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с таким ингибитором всасывания холестерина, как, например, описанный в документе WO 0250027, или эзетимибом, тиквезидом, памаквезидом.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с индуктором ЛНП-рецепторов (см. документ US 6342512).

В одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с балластными веществами, предпочтительно нерастворимыми балластными веществами (см., например, цератония/каромакс^® (Zunft H J; et al., Carob pulp preparation for treatment of hypercholesterolemia, ADVANCES IN THERAPY (2001 Sep-Oct), 18(5), 230-6). Каромакс является содержащим цератонию продуктом фирмы Nutrinova, Nutrition Specialties &Food Ingredients GmbH, Industriepark Höchst, 65926 Frankfurt/Main). Комбинация с каромаксом^® может быть осуществлена в одной лекарственной форме или путем раздельного приема соединения формулы I и каромакса^®. При этом каромакс^® принимают также в виде такого продукта питания, как, например, выпечка или хлопья мюсли.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с агонистом PPAR-альфа.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с такими смешанными агонистами PPAR альфа/гамма, как, например, AZ 242 (тезаглитазар, (S)-3-(4-[2-(4-метансульфонилоксифенил)этокси]фенил)-2-этоксипропионовая кислота), BMS 298585 (N-[(4-метоксифенокси)карбонил]-N-[[4-[2-(5-метил-2-фенил-4-оксазолил)этокси]фенил]метил]глицин) или как описанные в документах WO 99/62872, WO 99/62871, WO01/40171, WO01/40169, WO 96/38428, WO 01/81327, WO 01/21602, WO 03/020269, WO 00/64888 или WO 00/64876.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с таким фибратом, как, например, фенофибрат, гемфиброзил, клофибрат, безафибрат.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с никотиновой кислотой или ниацином.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с CETP-ингибитором, например CP-529, 414 (торсетрапиб).

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с ингибитором ACAT.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с таким MTP-ингибитором, как, например, имплитапид.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с антиоксидантом.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с ингибитором липопротеинлипазы.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с ингибитором АТФ-цитратлиазы.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с ингибитором скваленсинтетазы.

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с липопротеином(-aми).

Средства от ожирения

В одном способе осуществления изобретения соединения формулы I принимают в комбинации с таким ингибитором липазы, как, например, орлистат.

В одном способе осуществления дополнительным активным веществом является фенфлурамин или дексфенфлурамин.

Еще в одном способе осуществления дополнительным активным веществом является сибутрамин.

В следующем способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с модуляторами CART (см. "Cocaine-amphetamine-regulated transcript influences energy metabolism, anxiety and gastric emptying in mice" Asakawa, A, et. al., M.: Hormone and Metabolic Research (2001), 33(9), 554-558), антагонистами NPY, например гидрохлоридом {4-[(4-аминохиназолин-2-иламино)метил]циклогексилметил}амиднафталин-1-сульфоновой кислоты (CGP 71683A)), агонистами MC4 (например, [2-(3a-бензил-2-метил-3-оксо-2,3,3a,4,6,7-гексагидропиразоло[4,3-c]пиридин-5-ил)-1-(4-хлорфенил)-2-оксоэтил]амид 1-амино-1,2,3,4-тетрагидронафталин-2-карбоновой кислоты (WO 01/91752)), антагонистами орексина (например, гидрохлорид 1-(2-метилбензоксазол-6-ил)-3-[1,5]нафтиридин-4-ил-мочевины (SB-334867-A)), агонистами H3 (соль щавелевой кислоты и 3-циклогексил-1-(4,4-диметил-1,4,6,7-тетрагидроимидазо[4,5-c]пиридин-5-ил)пропан-1-она (WO 00/63208)); агонистами TNF, антагонистами CRF (например, [2-метил-9-(2,4,6-триметилфенил)-9H-1,3,9-триазафлуорен-4-ил]дипропиламин (WO 00/66585)), антагонистами CRF-BP (например, урокортин), агонистами урокортина, β3-агонистами (например, гидрохлорид 1-(4-хлор-3-метансульфонилметилфенил)-2-[2-(2,3-диметил-1H-индол-6-илокси)этиламино]этанола (WO 01/83451)), агонистами MSH (меланоцитстимулирующих гормонов), агонистами CCK-A (например, соль трифторуксусной кислоты и {2-[4-(4-хлор-2,5-диметоксифенил)-5-(2-циклогексилэтил)тиазол-2-илкарбамоил]-5,7-диметилиндол-1-ил}уксусной кислоты (WO 99/15525)), ингибиторами обратного захвата серотонина (например, дексфенфлюрамин), смешанными серотонинергическими и норадренергическими соединениями (например, WO 00/71549), агонистами 5HT, например соль щавелевой кислоты и 1-(3-этилбензофуран-7-ил)пиперазина (WO 01/09111), агонистами бомбезина, антагонистами галанина, гормоном роста (например, гормоном роста человека), соединениями, высвобождающими гормоны роста (сложный трет-бутиловый эфир 6-бензилокси-1-(2-диизопропиламиноэтилкарбамоил)-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-карбоновой кислоты (WO 01/85695)), агонистами TRH (см., например, документ EP 0462884), 2- и 3-модуляторами, расщепляющими белок, агонистами лептина (см., например, Lee, Daniel W.; Leinung, Matthew C.; Rozhavskaya-Arena, Marina; Grasso, Patricia. Leptin agonists as a potential approach to the treatment of obesity. Drugs of the Future (2001), 26(9), 873-881), агонистами DA (бромокриптин, допрексин), ингибиторами липазы/амилазы (например, WO 00/40569), модуляторами PPAR (например, WO 00/78312), модуляторами RXR или агонистами TR-β.

В одном способе осуществления изобретения другим активным веществом является лептин.

В одном способе осуществления другим активным веществом является дексамфетамин, амфетамин, мазиндол или фентермин.

В одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с такими медикаментами, действующими на сердечно-сосудистую и кровеносную систему, как, например игибитор ACE (например, рамиприл), с медикаментами, которые действуют на систему ангиотензин-ренин, антагонистами кальция, бета-блокаторами и т.д.

В одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с противовоспалительными медикаментами.

В одном способе осуществления соединения формулы I принимают в комбинации с медикаментами, которые применяются для лечения и предупреждения рака.

Разумеется, любая подходящая комбинация соединений согласно изобретению с одним или несколькими вышеуказанными соединениями и по выбору с одним или несколькими дополнительными фармакологически активными веществами рассматривается как подпадающая в область защиты настоящего изобретения.

Эффективность соединений проверялась следующим образом:

Получение мембранных везикул щеточной каймы из тонкой кишки кроликов, крыс и свиней

Получение мембранных везикул щеточной каймы из кишечных клеток тонкой кишки проводилось по так называемому методу осаждения Mg²⁺. Соскабливали слизистую оболочку из тонкой кишки и диспергировали в 60 мл ледяного буфера Трис/HCl (pH 7,1)/300 мМ маннита, 5 мМ ЭГТА. После разбавления до 300 мл ледяной дистиллированной водой гомогенизировали с помощью смесителя Ultraturrax (18-вальный, IKA Werk Staufen, ФРГ) 2 раза по 1 минуте при 75% максимальной мощности при охлаждении на льду. После добавления 3 мл 1 М раствора MgCl₂ (конечная концентрация 10 мМ) оставляли ровно на 15 минут при 0°C. При добавлении Mg²⁺ клеточные мембраны агрегировали и выпадали в осадок, за исключением мембран щеточной каймы. После 15-минутного центрифугирования при 3000×g (5000 об/мин, ротор SS-34) осадок выбрасывали, а всплывший слой, который содержал мембраны щеточной каймы, центрифугировали 30 минут при 26700×g (15000 об/мин, ротор SS-34). Всплывший слой отбрасывали, а осадок повторно гомогенизировали с помощью гомогенизатора Поттера-Эльвенгейма (Braun, Melsungen, 900 об/мин, 10 ходов) в 60 мл смеси 12 мМ буфер Трис/HCl (pH 7,1)/60 мМ маннит, 5 мМ ЭГТА. После добавления 0,1 мл 1 M раствора MgCl₂ и 15-минутного выдерживания при 0°C снова центрифугировали 15 минут при 3000×g. Затем всплывший слой снова центрифугировали 30 минут при 46000×g (20000 об/мин, ротор SS-34). Осадок вводили в 30 мл смеси 20 мМ буфер Трис/Hepes (pH 7,4)/280 мМ маннит и за 20 ходов однородно редиспергировали в гомогенизаторе Поттера-Эльвенгейма при 1000 об/мин. После 30-минутного центрифугирования при 48000×g (20000 об/мин, ротор SS-34) осадок вводили в 0,5-2 мл буфера Трис/Hepes (pH 7,4)/280 мМ маннита (конечная концентрация 20 мг/мл) и редиспергировали с помощью шприца для инъекции туберкулина с иглой 27-го калибра.

Везикулы или использовали сразу после получения для исследований с радиоактивной маркировкой или переноса, или хранили при -196°C в 4-мг порциях в жидком азоте.

Для получения мембранных везикул щеточной каймы из тонкой кишки крыс было умерщвлено от 6 до 10 самцов крыс серии Wistar (выведенных в Kastengrund, Aventis Pharma) путем цервикальной дислокации и тонкие кишки были удалены и промыты холодным изотоническим раствором поваренной соли. Кишки разрезали и соскабливали слизистую оболочку. Обработку для выделения мембран щеточной каймы проводили, как описано выше. Для отделения цитоскелетных фракций мембранные везикулы щеточной каймы из тонкой кишки крыс обрабатывали KSCN как хаотропным ионом.

Для получения мембран щеточной каймы из тонкой кишки кроликов, кроликов умерщвляли внутривенной инъекцией 0,5 мл водного раствора 2,5 мг тетракаин-HCl, 100 мг m-бутрамида и 25 мг йодида мебезония. Тонкие кишки удаляли, промывали ледяным физиологическим раствором поваренной соли, замораживали в пластиковом пакете в атмосфере азота при -80°C и хранили от 4 до 12 недель. Для получения мембранных везикул замороженные кишки оттаивали при 30°C в водяной бане и затем соскабливали слизистую оболочку. Обработку мембранных везикул проводили, как описано выше.

Для получения мембранных везикул щеточной каймы из свиной кишки сегменты тонкой кишки только что заколотой свиньи промывали ледяным изотоническим раствором поваренной соли и замораживали в пластиковых пакетах в атмосфере азота при -80°C. Получение мембранных везикул проводили, как описано выше.

Измерение всасывания глюкозы через мембранные везикулы щеточной каймы

Всасывание меченой [¹⁴C]-глюкозы в мембранных везикулах щеточной каймы измеряли по методу мембранной фильтрации. 10 мкл суспензии мембранных везикул щеточной каймы в смеси 10 мМ буфер Трис/Hepes (pH 7,4)/300 мМ маннитол соединяли при 20°C с 90 мкл раствора 10 пМ [¹⁴C]D-глюкозы и с находящимся в соответствующей концентрации ингибитором (5-200 мкм) в смеси 10 мМ буфер Трис/Hepes (pH 7,4)/100 мМ NaCl/100 мМ.

После 15-секундного выдерживания процесс переноса останавливали добавкой 1 мл ледяного стопперирующего раствора (10 мМ буфер Трис/Hepes (pH 7,4)/150 мМ KCl) и суспензию везикул сразу же отсасывали через мембранный фильтр из нитрата целлюлозы (0,45 мкм, диаметр 25 мм, Schleicher & Schüll) при давлении вакуума от 25 до 35 мбар. Фильтр дополнительно промывали 5 мл ледяного стопперирующего раствора. Каждую точку измерения проводили как двойное или тройное определение.

Для измерения впитывания меченого субстрата мембранный фильтр растворяли в 4 мл соответствующего сцинтиллятора (Quickszint 361, Zinsser Analytik GmbH, Франкфурт на Майне) и радиоактивность измеряли с помощью счетчика жидкостной сцинтилляции. Измеренные значения были получены в виде dpm (число распадов в минуту) после калибрования прибора с помощью стандартных образцов и после коррекции на возможно имеющуюся хемилюминесценцию.

Сравнение активности активных вещества проводили по значениям IC₅₀, полученным для выбранных веществ в опытах на перенос на мембранных везикулах щеточной каймы тонкой кишки кроликов (абсолютные значения могут зависеть от вида и эксперимента).

Следующим методом оценки эффективности соединений является ингибирование in vitro активности переноса натрийзависимого переносчика глюкозы-1 человека (SGLT1, SLC5A1):

1. Клонирование вектора экспрессии для SGLT1 человека

кДНК для SGLT1 человека вводили по таким стандартным молекулярно-биологическим методам, как описанные у Sambrook и др. (Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2nd Edition), в вектор пкДНК4/TO (Invitrogen). Последующее секвенирование вставки давало полную идентичность с основаниями 11-2005 описанной Hediger и др. (Hediger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1989, 86, 5748-5752) и внесенной в базу данных последовательностей "GenBank" последовательности оснований SGLT1 человека (код доступа GenBank: М24847). Основания 11-2005 соответствуют полной кодирующей области SGLT1 человека.

2. Получение рекомбинантной клеточной линии с индуцируемой экспрессией для SGLT1 человека

Вектор экспрессии для SGLT1 человека вводили липофекцией FuGene6 (Roche) в клетки CHO-TRex (Invitrogen). Для отбора отдельных клеточных клонов в среду клеточной культуры (смесь питательных веществ F-12 (Ham), (Invitrogen) дополненную 10% сыворотки эмбриона теленка (BD Biosciences), добавляли 10 мкг/мл бластицидина S (CN Biosciences), 100 единиц/мл пенициллина, 100 единиц/мл стрептомицина, 600 мкг/мл цеозина (Invitrogen). Функциональность полученных селекцией отдельных клеточных клонов проверяли по их активности поглощения меченого метил-α-D-глюкопиранозида. Клеточные клоны с самой высокой активностью поглощения метил-α-D-глюкопиранозида, обозначаемые далее CHO-TRex-hSGLT1, отбирали для следующих экспериментов и, кроме того, культивировали в присутствии 600 мкг/мл цеозина.

3. Измерение ингибирующего действия испытуемых веществ на поглощение метил-α-D-глюкопиранозида (α-MDG)

Клетки CHO-TRex-hSGLT1 высевали в концентрации 50000 клеток на лунку в сцинтилляционный 96-луночный планшет Cytostar-T (Amersham Biosciences) в среду клеточной культуры и культивировали 24 часа. Экспрессию рекомбинантного SGLT1 человека индуцировали добавлением 1 мкг/мл тетрациклина на следующие 24 часа. Для экспериментов по поглощению α-MDG клетки промывали PBS и затем в течение часа выдерживали в среде без питательных веществ (PBS с добавлением 10% сыворотки эмбриона теленка) при 37°C. После дополнительного этапа промывки буфером опыта по переносу (140 мМ хлорида натрия, 2 мМ хлорида калия, 1 мМ хлорида магния, 1 мМ хлорида кальция, 10 мМ HEPES/Трис, pH 7,5) клетки инкубировали 15 минут при комнатной температуре или в отсутствие, или в присутствии тестируемых веществ в различной концентрации. Тестируемые вещества разбавляли соответствующим образом исходя из 10 мМ концентрированного раствора в диметилсульфоксиде в буфере опыта по переносу (40 мкл/лунку). Затем добавлением 10 мкл смеси меченого метил-α-D-[U-¹⁴C]глюкопиранозида (Amersham) и немеченного метил-α-D-глюкопиранозида (Acros) начинали опыт. Конечная концентрация метил-α-D-глюкопиранозида в опыте составляла 50 мкМ. После периода выдерживания 30 минут при комнатной температуре реакцию останавливали добавлением 50 мкл/лунку 10 мМ метил-α-D-глюкопиранозида в буфере анализа на перенос (4°C) и на сцинтилляционном микропланшетном счетчике MicroBeta (Wallac) определяли радиоактивность, поглощенную клетками.

Ингибирующее действие тестированных соединений, составляющее половину от максимального (величина IC₅₀), определяли следующим образом.

1. Установление значений для ингибирования 0%. Это есть величина, измеренная в отсутствие вещества в содержащем натрий буфере опыта по переносу.

2. Установление значения для 100% ингибирования. Эта величина измерена в отсутствие вещества в не содержащем натрия буфере опыта по переносу (140 мМ холинхлорида, 2 мМ хлорида калия, 1 мМ хлорида магния, 1 мМ хлорида кальция, 10 мМ HEPES/Трис, pH 7,5).

3. Проводили расчет процентного значения ингибирования для тех измерений, которые были проведены в присутствии различных концентраций тестируемых веществ. Затем из этого можно было определить концентрацию тестируемого вещества, которая снижает поглощение метил-α-D-глюкопиранозида на 50% (значение IC₅₀).

Значения IC₅₀ для протестированных веществ (мкМ) [испытания in vitro поглощения метил-α-D-глюкопиранозида]
Пример №	IC ₅₀ [мкM]
3	0,043
6	0,133
9	0,081
12	0,139
15	0,170
18	0,080
21	0,047
22	0,144
24	0,208
31	0,252
33	0,070
36	0,043

Приведенные ниже примеры служат для пояснения изобретения, однако не ограничивают его.

Таблица 1
Соединения формулы I

При мер

R1

R2

R3

R4

R5

R6

R7

R8, R9

A

B

X

L

Y

МС*

t _R [мин]

1

H

F

и-Pr

H

CH₂CH₂NHCH₂CH₂

O

CH₂

-

-CH=CHCH₂-

-

505,47

1,19

2

H

F

и-Pr

H

H; CH₂CH₂CH₂CH₃

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

522,57

1,74

3

H

F

и-Pr

H

H; CH₂CH₂CONH₂

O

CH₂

-

-CH=CHCH₂-

CO

535,44

1,15

4

H

F

и-Pr

H

H; CH₂CH₂CONH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

537,44

1,13

5

H

F

и-Pr

H

H; CH₂CONH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

523,38

1,15

6

H

F

CH₃

H

H; CH₂CH₂CONH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

509,33

1,02

7

H

F

и-Pr

H

H; CH₂CH₂CONH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂-

CO

523,42

1,36

8

H

F

и-Pr

H

H; CH₂CONH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂-

CO

509,29

1,08

9

H

F

и-Pr

H

H; CH[CH₂OH]CONH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

552,29

1,13

10

H

F

CH₃

H

H; CH[CH₂OH]CONH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

525,31

1,02

11

H

F

CH₃

H

CH₂CH₂N[CH₂CH₂OH]CH₂CH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

551,30

0,95

12

H

F

и-Pr

H

CH₂CH₂N[CH₃]CH₂CH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

549,30

1,07

13

H

F

и-Pr

H

CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

534,54

1,77

14

H

F

и-Pr

H

CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

548,56

1,83

15

H

F

и-Pr

H

CH₂CH₂CH₂CH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

520,52

1,67

16

H

F

и-Pr

H

CH₂CH₂NHCH₂CH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

535,32

1,06

17

H

F

и-Pr

H

H; CH₂CH₂OH

O

CH₂

-

-CH₂CH₂-

CO

496,43

1,37

18

H

F

и-Pr

H

H; C[CH₃]₂CH₂OH

O

CH₂

-

-CH₂CH₂-

CO

524,26

1,34

19

H

F

и-Pr

H

H; C[CH₃]₂CH₂OH

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

538,28

1,26

20

H

F

и-Pr

H

H; CH₂CH₂OH

O

CH₂

-

-CH=CH-

CO

494,28

1,10

21

H

F

и-Pr

H

H; C[CH₂OH]₃

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

570,33

1,14

22

H

F

и-Pr

H

H; CH₂CH₂CH₂NH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

522,52

1,74

23

H

F

и-Pr

H

H;

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

614,45

2,11

24

H

F

и-Pr

H

H;

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

628,25

1,07

25

H

F

и-Pr

H

CH₂CH₂N[SO₃H]CH₂CH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

615,42

1,64

26

H

F

и-Pr

H

H; CH₂CH₂CH₂NHSO₃H

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

603,41

1,56

27

H

F

и-Pr

H

H; CH₂CH₂OSO₃H

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

588,50

1,60

28

H

F

и-Pr

H

H; C[CH₃]₂CH₂OSO₃H

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

616,52

1,61

29

H

F

и-Pr

H

CH₂CH₂OCH₂CH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

536,48

1,58

30

H

F

и-Pr

H

H; C[CH₃]₂CH₂CH₃

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

CO

536,54

1,84

31

H

F

CH₃

H

H; CH₂CH₂CH₃

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

NHCO

494,12

2,77

32

H

F

и-Pr

H

H; H

O

CH₂

CO

-NHCH₂CH₂-

-

494,97

0,97

33

H

F

и-Pr

H

H; H

O

CH₂

CO

-NHCH₂-

-

481,19

1,02

34

H

F

CF₃

H

H; H

O

CH₂

CO

-NHCH₂CH₂-

-

521,16

1,00

35

H

F

CF₃

H

H; H

O

CH₂

CO

-NHCH₂-

-

507,16

1,20

36

H

F

и-Pr

H

CH₂CH₂N[CH₃]CH₂CH₂

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

NHCO

н.о.

37

H

F

и-Pr

H

H; C[CH₃]₂CH₂OH

O

CH₂

-

-CH₂CH₂CH₂-

NHCO

н.о.

Присоединения указаны в описании примеров в экспериментальной части.

*Градиент для ЖХ-МС: от ацетонитрил + 0,05% ТФА:вода + 0,05% ТФА: 5:95 (0 минут) до 95:5 (2,5 минуты) до 95:5 (3 минуты); колонка: YMC J'shere 33×2, 4 µМ, поток 1,3 мл/мин (градиент 1).

Кроме того, в экспериментальной части указаны другие, отличающиеся от этого, градиенты ЖХ-МС:

Градиент 2: от 96% H₂O (0,05% ТФА) при 0 минут до 95% MeCN (2,0 минуты), затем до 95% MeCN (2,4 минуты); затем до 4% MeCN (2,45 минуты); 1 мл/мин; 110-1000 МВт; 0,4 µл (YMC J'sphere ODS H80 20×2 1,4).

Градиент 3: 0 минут - 95% H₂O (5 ммоль аммонийацетата) до 95% MeCN при 3,5 минуты, затем для 2 минут - 95% ACN; затем через одну минуту до 5% MeCN; 0,5 мл/мин; 115-1000 МВт; 1 µл (Merck Purospher, 2×55 мм).

Предметом изобретения является, кроме того, способ получения соединений общей формулы I.

Ниже подробно описано получение примеров. Соединения по изобретению могут быть получены аналогично или в соответствии со способами, описанными в документах WO 0414932 и WO 0418491.

Экспериментальная часть:

Реакционная схема: Синтез β-бромгликозида 4

Метил-2,3,6-три-O-бензоил-4-фтор-4-дезокси-D-глюкопиранозид (2)

3,0 г метил-2,3,6-три-O-бензоил-α-D-галактопиранозида (Reist et al., J. Org. Chem. 1965, 30, 2312) вводят в дихлорметан и охлаждают до -30°C. Затем по каплям добавляют 3,06 мл [бис(2-метоксиэтил)амино]трифторида серы (BAST). Реакционный раствор нагревают до комнатной температуры и перемешивают 12 часов. Осадок разбавляют дихлорметаном и органическую фазу экстрагируют H₂О, раствором NaHCО₃ и насыщенным раствором NaCl. Органическую фазу сушат над Na₂SО₄ и концентрируют. Сырой продукт кристаллизуют из этилацетата и гептана. Получают 1,95 г продукта 2 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₈H₂₅FO₈ (508,51): МС (ESI⁺) 526,18 (M+NH₄ ⁺).

Альтернативно реакцию можно провести с использованием 2,8 экв диэтиламинотрифторида серы (DAST); тогда реакционный раствор после произведенного добавления кипятят с обратным холодильником 18 часов. Обработка проводится аналогично описанному выше.

1-O-ацетил,2,3,6-три-O-бензоил-4-фтор-4-дезоксиглюкоза (3)

12,0 г соединения метил-2,3,6-три-О-бензоил-4-фтор-4-дезокси-α-D-глюкопиранозида суспендируют в 150 мл ангидрида уксусной кислоты. Смешивают 8,4 мл концентрированной серной кислоты со 150 мл ледяной уксусной кислоты и при охлаждении добавляют к осадку. Осадок перемешивают при комнатной температуре в течение 60 часов. Реакционную смесь выливают в раствор NaHCО₃ и полученный раствор экстрагируют дихлорметаном. Органическую фазу промывают раствором NaCl, сушат над Na₂SО₄ и концентрируют. Остаток перекристаллизовывают из этилацетата и гептана. Получают 5,97 г продукта 3 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₉H₂₅FО₉ (536,52): МС (ESI⁺) 554,15 (M+NH₄ ⁺).

1-бром-4-дезокси-4-фтор-2,3,6-три-O-бензоил-альфа-D-глюкоза (4)

1,44 г 1-O-ацетил,2,3,6-три-O-бензоил-4-фтор-4-дезоксиглюкозы в 20 мл бромистоводородной кислоты растворяют в ледяной уксусной кислоте (33%) и перемешивают при комнатной температуре. Через 5 часов осадок помещают на ледяную воду, водную фазу трижды экстрагируют дихлорметаном. Соединенные органические фазы промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия и концентрируют досуха. Сырой продукт фильтруют через силикагель со смесью этилацетат/гептан (70:30). Получают 1,40 г продукта 4 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₇H₂₂BrFО₇ (557,37): МС (ESI⁺) 574,05/576,05 (M+NH₄ ⁺).

Реакционная схема I: Синтез примера 1:

4-(4-бромбензил)-5-изопропилпираз-3-ол (6)

15,2 г сложного метилового эфира изобутирилуксусной кислоты (5) вводят при охлаждении льдом в суспензию гидрида натрия (60%, 3,85 г) в 250 мл тетрагидрофурана. Затем добавляют раствор 20,0 г 4-бромбензилбромида в 100 мл ТГФ и перемешивают 48 часов при комнатной температуре. После добавления 300 мл H₂О и 300 мл EtOAc органическую фазу сушат над MgSО₄ и растворитель удаляют на ротационном испарителе. Полученный сырой продукт растворяют в 120 мл толуола, смешивают с гидразингидратом (8,01 г) и кипятят с обратным холодильником 12 часов на водоотделителе. Реакционную смесь сгущают до объема 50 мл и охлаждают до 0°C. Выкристаллизовавшийся продукт отсасывают и промывают гептаном. Получают 10,8 г соединения 6 в виде светло-желтой субстанции.

C₁₃H₁₅BrN₂O (295,18): МС (ESI⁺) 294,04 (M+H⁺).

Соединение 7

530 мг 4-(4-бромбензил)-5-изопропилпираз-3-ола (6) и 1,50 г бромида 4 растворяют в 50 мл метиленхлорида. К этому раствору последовательно добавляют 1,86 г карбоната калия, 91 мг бензилтриэтиламмонийбромида и 0,8 мл воды и затем перемешивают 24 часа при комнатной температуре. Реакционный раствор помещают в делительную воронку и последовательно промывают водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушат над сульфатом магния и концентрируют на ротационном испарителе. Сырой продукт отделяют путем хроматографии на силикагеле (EtOAc/гептан). Получают 193 мг 7 в виде бесцветного твердого вещества.

C₄₀H₃₆BrFN₂О₈ (771,6): МС (ESI⁺) 773,1 (M+H⁺).

Соединение 8

193 мг гликозида 7 растворяют в 1,25 мл ДМФА и смешивают с 2,3 мг Pd(OAc)₂, 6,09 мг три-o-толилфосфина, 0,25 мл триэтиламина и 84,6 мл 1-аллилпиперазина. Реакционную смесь нагревают в нагретой до 100°C масляной бане в течение 18 часов. Растворитель удаляют на ротационном испарителе и сырой продукт очищают путем хроматографии на силикагеле (EtOAc/MeOH). Получают 117 мг соединения 8 в виде бесцветного воска.

C₄₇H₄₉FN₄O₈ (816,9): МС (ESI⁺) 817,05 (M+H⁺).

Соединение 9 (пример 1)

98 мг гликозида 8 вводят в 4 мл смеси метанол/вода/триэтиламин (3:3:1) и перемешивают 48 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрируют на ротационном испарителе и остаток очищают путем хроматографии на силикагеле (метиленхлорид/метанол/концентрированный аммиак). Получают 34 мг соединения 9 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₆H₃₇FN₄О₅ (504,61): МС (ESI⁺) 505,47 (M+H⁺).

Реакционная схема II: Синтез примера 2

Соединение 10

7,20 г гликозида 7 растворяют в 109 мл ацетонитрила и смешивают с 41,9 мг Pd(OAc)₂, 113,6 мг три-о-толилфосфина, 39,2 мл триэтиламина и 1,04 г винилуксусной кислоты. Реакционную смесь кипятят 60 часов с обратным холодильником. Растворитель удаляют на ротационном испарителе и сырой продукт очищают путем хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂/MeOH/концентрированный аммиак = 30/5/1). Получают 6,18 г соединения 10 в виде бесцветного воска.

C₄₄H₄₁FN₂О₁₀ (776,8).

Соединение 11

100 мг соединения 10 растворяют в 4,00 мл дихлорметана и 9,41 мг н-бутиламина, добавляют 119,8 мг диизопропилэтиламина, 26,1 мг 1-гидроксибензотриазола и 30 мг N-(3-диметиламинопропил)-N-этилкарбодиимида. Реакционную смесь перемешивают 16 часов при 20°C. Раствор последовательно промывают 5 мл раствора NaHCО₃, 5 мл соляной кислоты (0,2 M) и 5 мл насыщенного раствора NaCl. Растворитель удаляют на ротационном испарителе и сырой продукт без дальнейшей очистки преобразуют в соединение 12.

C₄₈H₅₀FN₂₃O₉ (831,9).

Соединение 12

82 мг соединения 11 растворяют в 5,00 мл метанола и добавляют 10,5 мг палладия на активированном угле (10%). Реакционную смесь перемешивают 16 часов в атмосфере H₂ при 1 бар. Палладий на угле отфильтровывают и растворитель удаляют на ротационном испарителе. Дальнейшая очистка сырого продукта через силикагель не требуется. Получают 72 мг желаемого соединения 12 в виде бесцветного воска.

C₄₈H₅₂FN₂₃O₉ (834,0).

Соединение 13 (пример 2)

72 мг гликозида 12 растворяют в 10 мл метанола и смешивают с 1,72 мл метанольного раствора метилата натрия (0,2 M). Реакционную смесь перемешивают 4 часа при 20°C и смешивают с 46,2 мг хлорида аммония. Растворитель удаляют на ротационном испарителе и сырой продукт очищают через силикагель (сначала смесью этилацетат/гептан = 5/1, затем смесью метиленхлорид/метанол/концентрированный аммиак = 30/5/1). Получают 24 мг соединения 13 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₇H₄₀FN₃O₉ (521,63): МС (ESI⁺) 522,57 (M+H⁺).

Соединение 14 (пример 3)

Синтез соединения 14 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с гидрохлоридом 3-аминопропионамида, и не проводя последующего гидрирования, получают соединение 14 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₆H₃₅FN₄О₇ (534,6): МС (ESI⁺) 535,44 (M+H⁺).

Соединение 15 (пример 4)

Синтез соединения 15 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с гидрохлоридом 3-аминопропионамида, получают соединение 15 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₆H₃₇FN₄О₇ (536,6): МС (ESI⁺) 537,44 (M+H⁺).

Соединение 16 (пример 5)

Синтез соединения 16 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с гидрохлоридом глицинамида, получают соединение 16 в виде бесцветного воска.

C₂₅H₃₅FN₄О₇ (522,6): МС (ESI⁺) 523,38 (M+H⁺).

Соединение 17

Синтез соединения 17 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 7 (схема I). Однако вместо сложного метилового эфира изобутирилуксусной кислоты исходят из этилацетоацетата. Получают соединение 17 в виде бесцветного твердого вещества.

C₃₈H₃₂BrFN₂О₈ (743,6).

Соединение 18 (пример 6)

Синтез соединения 18 проводят аналогично синтезу, описанному для соединения 15 (пример 4). Однако вместо гликозида 10 исходят из гликозида 17. Получают соединение 18 в виде бесцветного воска.

C₂₄H₃₃FN₄О₇ (508,6): МС (ESI⁺) 509,33 (M+H⁺).

Соединение 19 (пример 7)

Синтез соединения 19 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 15 (пример 4). Однако в реакцию с акриловой кислотой вместо винилуксусной кислоты приводят соединение брома 7. Получают соединение 19 в виде бесцветного воска.

C₂₅H₃₅FN₄О₇ (522,6): МС (ESI⁺) 523,42 (M+H⁺).

Соединение 20 (пример 8)

Синтез соединения 20 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 19 (пример 7). Однако при амидном связывании гидрохлорид 3-аминопропионамида заменяют гидрохлоридом глицинамида. Получают соединение 20 в виде бесцветного воска.

C₂₄H₃₃FN₄О₇ (508,6): МС (ESI⁺) 509,29 (M+H⁺).

Соединение 21 (пример 9)

Синтез соединения 21 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с гидрохлоридом L-серинамида, получают соединение 21 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₆H₃₇FN₄O₈ (552,6): МС (ESI⁺) 553,29 (M+H⁺).

Соединение 22 (пример 10)

Синтез соединения 22 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 18 (пример 6). Исходя из гликозида 17, который, однако, приводят во взаимодействие не с гидрохлоридом 3-аминопропионамида, а гидрохлоридом L-серинамида, получают соединение 22 в виде бесцветного воска.

C₂₄H₃₃FN₄О₈ (524,6): МС (ESI⁺) 525,31 (M+H⁺).

Соединение 23 (пример 11)

Синтез соединения 23 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 18 (пример 6). Исходя из гликозида 17, который, однако, приводят во взаимодействие не с гидрохлоридом 3-аминопропионамида, а с N-(2-гидроксиэтил)пиперазином, получают соединение 23 в виде бесцветного воска.

C₂₇H₃₉FN₄О₇ (550,6): МС (ESI⁺) 551,30 (M+H⁺).

Соединение 24 (пример 12)

Синтез соединения 24 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с N-метилпиперазином, получают соединение 24 в виде бесцветного воска.

C₂₈H₄₁FN₄O₆ (548,7): МС (ESI⁺) 549,30 (M+H⁺).

Соединение 25 (пример 13)

Синтез соединения 25 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с пиперидином, получают соединение 25 в виде бесцветного воска.

C₂₈H₄₀FN₃O₆ (533,7): МС (ESI⁺) 534,54 (M+H⁺).

Соединение 26 (пример 14)

Синтез соединения 26 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с гексагидро-1H-азепином, получают соединение 26 в виде бесцветного воска.

C₂₉H₄₂FN₃О₆ (547,7): МС (ESI⁺) 548,56 (M+H⁺).

Соединение 27 (пример 15)

Синтез соединения 27 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с пирролидином, получают соединение 27 в виде бесцветного воска.

C₂₇H₃₈FN₃О₆ (519,6): МС (ESI⁺) 520,52 (M+H⁺).

Соединение 28 (пример 16)

Синтез соединения 28 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с бензил-1-пиперазинкарбоксилатом, получают соединение 28 в виде бесцветного воска.

C₂₇H₃₉FN₄О₆ (534,6): МС (ESI⁺) 535,32 (M+H⁺).

Соединение 29 (пример 17)

Синтез соединения 29 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 19 (пример 7). Однако при амидном связывании гидрохлорид 3-аминопропионамида заменяют 2-аминоэтанолом. Получают соединение 29 в виде бесцветного масла.

C₂₄H₃₄FN₃О₇ (495,6): МС (ESI⁺) 496,43 (M+H⁺).

Соединение 30 (пример 18)

Синтез соединения 30 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 19 (пример 7). Однако при амидном связывании гидрохлорид 3-аминопропионамида заменяют 2-амино-2-метил-1-пропанолом. Получают соединение 30 в виде бесцветного масла.

C₂₆H₃₈FN₃О₇ (523,6): МС (ESI⁺) 524,26 (M+H⁺).

Соединение 31 (пример 19)

Синтез соединения 31 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с 2-амино-2-метил-1-пропанолом, получают соединение 31 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₇H₄₀FN₃O₇ (537,6): МС (ESI⁺) 538,28 (M+H⁺).

Соединение 32 (пример 20)

Синтез соединения 32 проводят аналогично синтезу, описанному для соединения 29 (пример 17). Однако этап гидрирования не проводят. Получают соединение 32 в виде бесцветного воска.

C₂₄H₃₂FN₃О₇ (493,6): МС (ESI⁺) 494,28 (M+H⁺).

Соединение 33 (пример 21)

Синтез соединения 33 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с трис(гидроксиметил)аминометаном, получают соединение 33 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₇H₄₀FN₃O₉ (569,6): МС (ESI⁺) 570,33 (M+H⁺).

Соединение 34 (пример 22)

Синтез соединения 34 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с гидрохлоридом N-карбобензокси-1,3-диаминопропана, получают соединение 34 в виде бесцветного масла.

C₂₆H₃₉FN₄О₆ (522,6): МС (ESI⁺) 522,52 (M+H⁺).

Соединение 35 (пример 23)

Синтез соединения 35 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с 1-адамантанметиламином, получают соединение 35 в виде бесцветного воска.

C₃₄H₄₈FN₃О₆ (613,8): МС (ESI⁺) 614,45 (M+H⁺).

Соединение 36 (пример 24)

Синтез соединения 36 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с 2,3,4,6-тетра-O-ацетил-1-амино-1-дезокси-бета-D-глюкозой, получают соединение 36 в виде бесцветного масла.

C₂₉H₄₂FN₃О₁₁ (627,7): МС (ESI⁺) 628,25 (M+H⁺).

Соединение 37 (пример 25)

Синтез соединения 37 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 28 (пример 16). Однако перед последним этапом - удалением защиты с метанолятом натрия - проводят реакцию с комплексом триоксид серы/триэтиламин. Для этого 63,0 мг соединения пиперазина растворяют в 10,0 мл метанола, смешивают при 0°C с 202 мг комплекса триоксид серы/триэтиламин и перемешивают 2 часа при 0°C. Растворитель удаляют на ротационном испарителе и сырой продукт очищают через силикагель (метиленхлорид/метанол/концентрированный аммиак = 30/5/1). Получают 59 мг сульфатного соединения, которое аналогично синтезу соединения 28, метилатом натрия переводят в соединение 37, получаемое в виде бесцветного воска.

C₂₇H₃₉FN₄O₉S (614,7): МС (ESI⁺) 615,42 (M+H⁺).

Соединение 38 (пример 26)

Синтез соединения 38 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 37 (пример 25). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с бензил-1-пиперазинкарбоксилатом, а с гидрохлоридом N-карбобензокси-1,3-диаминопропана, получают соединение 38 в виде бесцветного воска.

C₂₆H₃₉FN₄O₉S (602,7): МС (ESI⁺) 603,41 (M+H⁺).

Соединение 39 (пример 27)

Синтез соединения 39 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 37 (пример 25). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с бензил-1-пиперазинкарбоксилатом, а с 2-аминоэтанолом, получают соединение 39 в виде бесцветного воска.

C₂₅H₃₆FN₃О₁₀S (589,6): МС (ESI⁺) 588,50 (M⁺-H).

Соединение 40 (пример 28)

Синтез соединения 40 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 37 (пример 25). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не бензил-1-пиперазинкарбоксилатом, а с 2-амино-2-метил-1-пропанолом, получают соединение 40 в виде бесцветного воска.

C₂₇H₄₀FN₃O₁₀S (617,7): МС (ESI⁺) 616,52 (M⁺-H).

Соединение 41 (пример 29)

Синтез соединения 41 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с морфолином, получают соединение 41 в виде светло-желтого воска.

C₂₇H₃₈FN₃О₇ (535,6): МС (ESI⁺) 536,48 (M+H⁺).

Соединение 42 (пример 30)

Синтез соединения 42 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 13 (пример 2). Исходя из гликозида 10, который, однако, приводят во взаимодействие не с н-бутиламином, а с трет-амиламином, получают соединение 42 в виде светло-желтого воска.

C₂₈H₄₂FN₃О₆ (535,7): МС (ESI⁺) 536,54 (M+H⁺).

Соединение 43 (пример 31)

41,3 мг 1-аллил-3-пропилмочевины растворяют в 5,00 мл ТГФ, смешивают с 1,21 мл раствора 9-BBN в толуоле (0,5 M) и перемешивают 4 часа при 20°C. Затем добавляют раствор 180 мг гликозида 17 в 10,0 мл толуола, 7,4 мг три-о-толилфосфина, 102,7 мг фосфата калия и 2,7 мг Pd(OAc)₂. Реакционную смесь нагревают 3 часа при 100°C. Осадок отфильтровывают и органическую фазу промывают 10 мл воды и сушат над сульфатом магния. Растворитель удаляют на ротационном испарителе и сырой продукт очищают путем хроматографии на силикагеле (EtOAc/гептан). Получают 59 мг бесцветного твердого вещества, которое аналогично получению соединения 13 (пример 2), приводят во взаимодействие с метилатом натрия. Получают соединение 43 в виде бесцветного воска.

C₂₄H₃₅FN₄О₆ (494,6) МС (ESI⁺) 494,12 (M⁺).

4-(2-этоксикарбонил-4-метил-3-оксопент-1-енил)бензойная кислота (смесь изомеров E/Z) (44)

29,0 г этилизобутирилацетата и 33,0 г 4-карбоксибензальдегида нагревают 6 часов на водоотделителе. Реакционный раствор концентрируют, вводят в этилацетат и экстрагируют 20%-ным раствором хлорида аммония и насыщенным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют и сразу преобразуют в 45. Получают 50,0 г масла.

C₁₆H₁₈О₅ (290,3): МС (ESI⁺): 291,1 (M+H)⁺, t_R = 1,42 минуты (градиент 2).

4-(2-этоксикарбонил-4-метил-3-оксопентил)бензойная кислота (45)

50 г 4-(2-этоксикарбонил-4-метил-3-оксопент-1-енил)бензойной кислоты растворяют в 300 мл ТГФ, смешивают с 1,00 г палладия на угле (10%) и гидрируют 24 часа в автоклаве при давлении водорода 4 бар. Осадок разбавляют дихлорметаном, фильтруют в вакууме через целит, остаток промывают дихлорметаном и концентрируют в вакууме. Остаток очищают путем хроматографии на силикагеле (этилацетат/н-гептан = 3/1). Получают 45 г соединения 45 в виде масла.

C₁₆H₂₀О₅ (292,3) МС (ESI⁺): 293,1 (M+H)⁺, t_R = 1,37 минуты (градиент 2).

4-[1-(2-цианоэтил)-5-гидрокси-3-изопропил-1H-пиразол-4-илметил]бензойная кислота (46)

15 г соединения 45 растворяют в 100 мл ледяной уксусной кислоты. Добавляют 7,4 мл 2-цианоэтилгидразина и раствор нагревают в течение 2 часов при 100°C. Осадок подают на ледяную воду и несколько раз экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу экстрагируют 20%-ным раствором хлорида аммония и насыщенным раствором хлорида натрия и сушат над сульфатом натрия. Из фазы этилацетата кристаллизуют 2,40 г желаемого соединения 46. Маточный раствор сгущают и хроматографируют на силикагеле (дихлорметан/метанол/ледяная уксусная кислота = 100/10/1). Получают еще 1,10 г соединения 46, а также 7,0 г повторно выделенного исходного соединения 45.

C₁₇H₁₉N₃О₃ (313,4): МС (ESI⁺): 314,2 (M+H)⁺, t_R= 0,97 минуты (градиент 2).

N-(2-карбамоилэтил)-4-[1-(2-цианэтил)-5-гидрокси-3-изопропил-1H-пиразол-4-илметил]бензамид (47)

Вводят 500 мг соединения 46 и 145 мг β-аланинамидгидрохлорида в 10 мл дихлорметана и смешивают с 0,8 мл N,N-диизопропилэтиламина, 215 мг 1-гидроксибензотриазола и 306 мг гидрохлорида 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида. Раствор перемешивают в течение 12 часов. Раствор концентрируют и сырой продукт очищают путем хроматографии на силикагеле (дихлорметан/метанол/ледяная уксусная кислота 100/0/5 → 100/10/5). Получают 440 мг желаемого соединения 47.

C₂₀H₂₅N₅О₃ (383,5): МС (ESI⁺): 384,2 (M+H)⁺, t_R = 3,58 минуты (градиент 3).

Соединение 48

300 мг соединения 47, 436 мг соединения 4 и 324 мг карбоната калия суспендируют в 25 мл ацетонитрила и 2,5 мл воды и перемешивают в течение 72 часов. Реакционную смесь фильтруют, остаток промывают дихлорметаном и соединенные органические фазы экстрагируют водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и остаток фроматографируют на силикагеле (дихлорметан/метанол = 100/5). Получают 207 мг гликозида 48 в виде бесцветного твердого вещества.

C₄₇H₄₆FN₅О₁₀ (859,9): МС (ESI⁺): 860,3 (M+H)⁺, t_R= 1,70 минуты (градиент 2).

Соединение 49 (пример 32)

200 мг соединения 48 растворяют в 15 мл ТГФ и в атмосфере аргона охлаждают до -78°С. Через перегородку медленно добавляют 0,81 мл раствора литий-бис(триметилсилил)амида (1 М в гексане). Через 30 минут на холоде добавляют 2 мл 20%-ного раствора хлорида аммония и раствор нагревают до комнатной температуры. Добавляют 2 мл насыщенного раствора хлорида натрия, органическую фазу отделяют и водную фазу дважды экстрагируют этилацетатом. Соединенные органические фазы концентрируют и остаток вводят в смесь триэтиламин/метанол/вода (14 мл, 1/3/3). Раствор перемешивают 24 часа, затем концентрируют до сухого состояния и затем очищают путем хроматографии на силикагеле. Получают 50 мг соединения 49 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₃H₃₁FN₄O₇ (494,5): МС (ESI^-): 493,2 (M-H)^-, t_R = 3,58 минуты (градиент 3); t_R = 0,97 минуты (градиент 1).

Соединение 50 (пример 33)

Синтез соединения 50 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 49 (пример 32). Однако используют не β-аланинамид, а гидрохлорид глицинамида. Получают соединение 50 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₂H₂₉FN₄О₇ (480,5): МС (ESI⁺) 481,19 (M+H⁺).

Соединение 51 (пример 34)

Синтез соединения 51 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 49 (пример 32). Однако исходят не из этилизобутилацетата, а из 4,4,4-трифторацетоацетата. Получают соединение 51 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₁H₂₄F₄N₄О₇ (520,4): МС (ESI⁺) 521,16 (M+H⁺).

Соединение 52 (пример 35)

Синтез соединения 52 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 50 (пример 33). Однако исходят не из этилизобутилацетата, а из 4,4,4-трифторацетоацетата. Получают соединение 52 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₀H₂₂F₄N₄О₇ (506,4): МС (ESI⁺) 507,16 (M+H⁺).

Соединение 53 (пример 36)

Синтез соединения 53 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 43 (пример 31). Однако исходят не из 1-аллил-3-пропилмочевины, а из 1-(N-метилпиперазин)-3-аллилмочевины, и вместо гликозида 17 используют гликозид 7. Получают соединение 53 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₈H₄₂FN₅О₆ (563,7).

Соединение 54 (пример 37)

Синтез соединения 54 проводят аналогично процедуре синтеза, описанной для соединения 43 (пример 31). Однако исходят не из 1-аллил-3-пропилмочевины, а из 1-(N-метилпиперазин)-3-аллилмочевины, и вместо гликозида 17 используют гликозид 7. Получают соединение 54 в виде бесцветного твердого вещества.

C₂₇H₄₁FN₄O₇ (552,7).

Claims

1. Соединения формулы I

где R1 означает Н;
R2 означает F;
А означает О;
R3 означает (С₁-С₆)-алкил, причем один, несколько или все атомы водорода могут быть замещены фтором;
В означает (С₀-С₁₅)-алкилен;
R4, R5, R6, R7 означают водород;
Х означает СО или связь;
L означает (С₁-С₆)-алкилен, причем в каждом случае одна или две -СН₂-группы могут быть замещены NH, или (С₂-С₅)-алкенилен;
Y означает СО, NHCO или связь;
R8 означает водород;
R9 означает водород, (С₁-С₆)-алкил, (С₁-С₆)-алкилен-ОН, (С₁-С₆)-алкилен-NH₂ или (С₀-С₆)-алкилен-СОNН₂, причем одна или более СН₂-групп алкильного остатка может быть замещена -ОН, -OSO₃Н, -NH-SO₃H, адамантилом или сахарным остатком формулы

или R8 и R9 вместе с несущим их атомом N образуют 5-7-членный насыщенный цикл Сус2, причем одна или более СН₂-групп цикла также может быть замещена О, NH, NSO₃Н, N-(С₁-С₆)-алкилом и причем алкильная группа может быть замещена группой -ОН,
а также их фармацевтически приемлемые соли.

2. Соединения формулы I по п.1, где
В означает (С₀-С₆)-алкилен.

3. Соединения формулы I по п.1, где остатки сахаров присоединены в положении бета (β) и стереохимия в положениях 2, 3 и 5 остатка сахара соответствует конфигурации D-глюко.

4. Соединения формулы I по п.1, где
R3 означает СF₃, (С₁-С₆)-алкил, причем в алкильном остатке один, несколько или все атомы водорода могут быть замещены фтором;
В означает (С₀-С₄)-алкилен.

5. Соединение формулы I по п.1, где
R3 означает СF₃, метил, изопропил;
В означает (С₀-С₄)-алкилен;
L означает (С₁-С₄)-алкилен, причем в каждом случае одна или две СН₂-группы могут быть замещены NH, или (С₂-С₄)-алкенилен.

6. Соединения формулы I по п.1, где
В означает -СН₂-;
L означает (С₁-С₃)-алкилен, причем в каждом случае одна СН₂-группа может быть замещена NH, или (С₂-С₃)-алкенилен.

7. Соединение формулы I по п.1, где
R8 означает водород;
R9 означает водород, (С₁-С₆)-алкил, (С₁-С₆)-алкилен-ОН, (С₁-С₆)-алкилен-NH₂ или (С₀-С₆)-алкилен-СОNH₂, причем одна или более СН₂-групп алкильного остатка может быть замещена -ОН, -OSO₃H, -NН-SO₃Н, адамантилом или сахарным остатком формулы

или R8 и R9 вместе с несущим их атомом N образуют 5-7-членный насыщенный цикл Сус2, выбранный из группы пиперазина, который у N может быть замещен (С₁-С₂)-алкилом, (С₁-С₂)-алкилен-ОН или SO₃Н, пиперидина, азепана, пирролидина или морфолина.

8. Лекарственное средство для снижения уровня сахара в крови, содержащее одно или несколько соединений по пп.1-7.

9. Применение соединения по любому из пп.1-7 для получения медикамента для лечения диабета первого и второго типов.

10. Применение соединений по пп.1-7 для получения медикамента для снижения уровня сахара в крови.