RS50541B - Novi fluoroglukozidni derivati pirazola, lekovi koji sadrže ova jedinjenja i njihova upotreba - Google Patents

Description

NOVI FLUOROGLUKOZIDNI

DERIVATI PIRAZOLA, LEKOVI KOJI

SADRŽE OVA JEDINJENJA I NJIHOVA

UPOTREBA

Pronalazak se odnosi na supstituisane fluoroglukozidne derivate pirazola, njihove fiziološki podnošljive soli i fiziološki funkcionalne derivate.

Više klasa supstanci koje imaju SGLT efekat je opisano u literaturi. Model za sve ove strukture je prirodni proizvod florizin. Iz ovoga su izvedene sledeće klase koje su opisane u niže navedenim patentima: - propion glokozidi Tanabe-a (WO 0280936, WO 0280935, JP 2000080041 i EP 850948) - 2-(glukopiranoziloksi)benzilbenzeni Kissei-a (WO 0244192, WO 0228872, WO 03011880 i WO 0168660) - glukopiranoziloksipirazoli Kissei-a, Bristol-Mevers Squibb-a i Ajinomoto-a (WO 02068440, WO 02068439, WO 0236602, WO 01016147, WO 02053573, WO 03020737, WO 03090783, WO 04014932, WO 04019958 i WO 04018491) - O-glukozid benzamidi Bristol-Meyers Squibb-a (WO 0174835 i WO 0174834)

- glukopiranoziloksitiofeni Aventis-a (VVO 04007517)

- i C-aril glukozidi Bristol-Mevers Squibb-a (WO 03099836, VVO 0127128 i US 2002137903).

Sve poznate strukture sadrže glukozu kao vrlo važan strukturni element.

Pronalazak je baziran na cilj dobijanja novih jedinjenja sa kojima je moguće sprečiti i lečiti dijabetes tipa 1 i tipa 2. Mi smo sada neočekivano našli da fluoroglukozidni derivati pirazola povećavaju efekat na SGLT. Ova jedinjenja su prema tome naročito pogodna za prevenciju i lečenje dijabetesa tipa 1 i tipa 2.

Pronalazak se prema tome odnosi na jedinjenja formule I

u kojoj su sledeća značenja za

Rl i R2 nezavisno jedan od drugog F ili H, gde jedan od radikala Rl ili R2 mora biti

F;

A O, NH, CH2, S ili veza;

R3 vodonik, F, Cl, Br, l, OH, CF3, N02( CN, COOH, CO-(C,-C6)-alkil, COO(C,-C6)-alkil, CONH2, CONH-(C,-C6)-alkil, CON[(C,-C6)-alkil]2) (C,-C6)-aIkil, (C3-C6)-cikloalkil, (C2-C6)-aikenil, (C2-Q)-alkinii, 0-(C:-C5)-alkil, HO-(CrC6)-aIkilen, (C,-C6)-alkilen-0-(CrC6)-alkil, fenil, benzil, (Ci-C6)-alkoksikarbonil, gde jedan, više od jednog ili svi atomi vodonika u alkil. alkenil, alkinil i O-alkil radikalima mogu biti zamenjeni fluorom;

S02-NH2, S02-NH(CrC6)-alkil, S02-N[(C,-C6)-alkil]2, S-(C,-C6)-alkil, S-(CH2)0-fenil, SO-(C,-C6)-alkil, SO-(CH2)0-fenil, S02- (Ci-C6)-alkil, SO2-(CH2)0-fenii, gde o može biti 0 do 6, i fenil radikal može biti supstuituisan do dva puta sa F, Cl, Br, OH, CF3, N02, CN, OCF3, 0- (CrC6)-alkil, (CrCć)-alkil, NH2;

NH2, NH- (C|-C6)-alkil,N((C,-C6)-alkil)2,NH-CO-(C,-C7)-alkil, fenil, 0-(CH2)0-fenil, gde0može biti od 0 - 6, gde fenil prsten može biti supstuituisan jedan do tri puta sa F, CI, Br, I, OH, CF3,N02) CN, OCF3, 0-(C,-C6)-alkil, (C,-C6)-aIkil, NH2, NH(C,-C6)-alkil, N((CrC5)-aIkiI)2jS02-CH3>COOH, COO- (C,-C5)-alkil, CONH2;

R4 vodonik, (Ci-C6)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C3-C6)-cikloaIkil, ili fenil koji po izboru može biti supstituisan sa halogenom ili (C|-C4)-alkilom;

B (Co-Ci5)-alkilen, gde jedan ili više C atoma aJkilenskog radikala mogu nezavisno jedan od drugog biti zamenjeni sa -O-, -(C=0)-, -CH=CH-,- C=C-,-S-, - CH(OH)-, -CHF-, CF2-, -(S=0)-, -(S02)-, -N((Ci-Cć)-alkil)-, -N((C,-C6)-alkilfeniI) ili-NH-j

R5, R6, R7 nazavisno jedan od drugog, vodonik, F, Cl, Br, I, OH, CF3, N02, CN, COOH, COO(C,-C6)-alkil, CO(C,-C4)-alkil, CONH2>CONH (Ci-C6)-alkil, CON[(C,-C6)alkil]2, (C,-C6)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C2-Cć)-alkiniil, 0-(CrC8)-alkil, HO-(C,-C6)-alkilen, (Ci-C6)-aIkilen-0- (C|-Ce)-alkil, gde jedan, više od jednog ili svi atomi vodonika u alkil, alkenil, alkinil i O-aJkil radikalima mogu biti zamenjeni fluorom,

S02-NH2, S02-NH(C,-C6)-alkil, S02N[(C,-C6)-a]ki!]2, S-(C,-C6)-alkil, S-(CH2)0-fenil, SCF3, SO-(C,-Cć)-alkil, SO-(CH2)0-fenil, S02- (C,-C6)-alkil, SO2-(CH2)0-fenil, gde o može biti 0 do 6, i fenil prsten može biti supstuituisan do dva puta sa F, Cl, Br, OH, CF3, N02, CN, OCF3, O- (CrC6)-alkil, (C,-C6)-alkil, NH2;

NH2, NH- (C,-C6)-aikil, N((Ci-C6)-aikil)2, NH-CO- (C,-C6)-alkil, fenil, 0-(CH2)o-fenil, gde0može biti 0 - 6, i gde fenil prsten može biti supstuituisan jedan do tri puta sa F, Cl, Br, 1, OH, CF3, N02, CN, OCF3, O- (C,-Cg)-alkil, (C,-C6)-alkil, NH2, NH(C,-C6)-alkiI, N((Ci-C6)-alkil)2, S02-CH3, COOH, COO- (C,-C6)-alkil, CONH2;

ili

R6 i R7 zajedno sa C atomiima koji ih nose grade 5 do 7 člani, zasićeni, delimtčno ili potpuno nezasićeni prsten Cycl, gde 1 ili 2 C atoma prstena mogu takođe biti zamenjena sa N, O ili S, i Cycl može po izboru biti supstituisan sa (Ct-C6)-alkil, (C2-C5)-alkenil, (C2-C5)-alkinil, i gde u svakom slučaju jedna CH2grupa može biti zamenjena sa O ili supstituisana sa H, F, Cl, OH, CF3, N02:CN, COOCCrO-alkil, CONH2, CONH(C,-C4)-alkil, OCF3;

X CO, O, NH, S, SO, S02ili veza;

L (Ci-Cć)-alkilen, (C2-C5)-alkenilen, gde u svakom slučaju jedna ili dve CH2grupe mogi biti zamenjene sa O ili NH;

Y CO, NHCO, SO, SOzili veza;

R8, R9 nezavisno jedan od drugog, vodonik, SO3H, ostatak šećera, (Cj-C6)-alkil, gde jedna ili više CH2grupa alkilskog radikala može biti supstituisana nezavisno jedna od druge sa (G~C6)-alkil, OH, (CrC6)-alkilen-OH, (C2-C6)-alkenilen-OH, O-ostatak šećera, OSO3H, NH2, NH-(Ci-Q)-alkil, N[(C|-C6)-alkil]2,NH-CO- (C,-C6}-aIkii, NH-ostatak šećera, NH-SO3H, (C,-C6)-aiki!en-NH2, (C2-C6)-alkenilen-NH2) (C0-C6)-a]ki!en-COOH-, (C0-C6)-alkilen-CONH2, (C0-C6)-alkilen-CONH-(Ci-C6)-alkil, (C0-C6)-alkilen-SONH2, (C0-C6)-alkilen-SONH-{C,-C6)-alkil, (C0-C6)-alkilen-SO2NH2, (C0-C6)-alkiIen-SO2NH2-(CrC6)-alkil, adamantil; ili

R8 i R9 zajedno sa N atomom koji ih nose grade 5 do 7-člani zasićeni prsten Cyc2, gde jedna ili više CH2grupa prstena može takođe biti zamenjena sa O, S, NH, NSOsH, N-ostatak Šećera, N-(Ci-C6)-alkil, gde jedna ili više CH2grupa alkilskog radikala može biti supstituisana nezavisno jedna od druge sa (G-C6)-alkil, OH, (Ci-C6)-alkilen-OH, (Cj-Cć)-alkenilen-OH, NH2, NH-(C,-C6)-alkil, N[(C,-C6)-alkil]2,NH-CO- (C,-C6)-alkil, NH-ostatak šećera, (C2-C6)-alkilen-NH2, (C2-C6)-alkenilen-NH2, (C0-C6)-alkilen-COOH, (C0-C6)-alkilen-CONH2, (C0-C6)-alkiIen-CONH-(C,-C6)-alkil, (C0-C6)-alkilen-SONH2, (C0-C6)-alkilen-SONH-(C|-C6)-alkil, (C0-C6)-alkilen-SO2NH2s (Co-CaJ-alkilen-SOiNHrfd-Cć)-alkil;

i njihove farmaceutski prihvatljive soli.

Ostatak šećera označava jedinjenja izvedena od aldoza i ketoza koja imaju 3 do 7 atoma ugljenika, koji mogu da pripadaju D ili L serijama; ovde su takođe uključeni aminosaharidi, šećerni alkoholi ili saharinske kiseline (Jochen Lehman, Chemie der Kohlenhydrate, Thieme Verlag, 1976). Primeri koji se mogu pomenuti su glukoza, manoza, fruktoza, galaktoza, riboza, eritroza, gliceraldehid, sedoheptuloza, glukozamin, galaktozamin, giukuronska kiselina, galakturonska kiselina, glukonska kiselina, galaktonska kiselina, manonska kiselina, glukamin, 3-amino-l,2-propandiol, glukarična kiselina i galaktartčna kiselina. Jedinjenja mogu osim toga da se javljaju u alfa i beta obliku.

Tačke vezivanja A, B, R3 i R5 za prsten se mogu izabrati bez ograničenja. Sva jedinjenja formule I koja se dobijaju uključena su u predmetni pronalazak.

Prioritet je dat jedinjenjima formule I u kojima su značenja

A O, NH, veza;

R3 vodonik, F, Cl, Br, I, OH, CF3, NO*CN, COOH, CO-(CrC6)-a!kil, COO(C,-C6)-alkil, CONH2, CONH-(C,-C6)-alkil, CON[(C,-C6)-alkil]2, (C,-C6)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C2-C6)-atkinil, 0-(C,-C6)-alkil, HO-(C,-C6)-alkilen, (Ci-C6)-alkilen-0-(C,-C6)-aIkil, fenil, benzil, (CrC4)-alkilen-COOH, SO-(C,-C6)-alkil, gde jedan, više od jednog ili svi atomi vodonika u alkil radikalima mogu biti zamenjeni fluorom; ili R4 vodonik, (G-C6)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C3-C6)-cikloaIkil;

B (Co-C6)-alkilen, gde jedan ili više C atoma alkilenskog radikala mogu nezavisno jedan od drugog biti zamenjeni sa -0-, -(C=0)-, -CH=CH-, -OC-, -S-, - CH(OH)-, -CHF-, CF2-, -(S=0)-, -(S02)-, -N((C,-C6)-alkilen)-, -N((C,-C6)-alkiIen-fenilen) ili-NH-.

Druga prioritetna jedinjenja formule I su ona u kojima su ostaci šećera beta(/?)-vezani, i stereohemija na položajima2, 3i 5 ostatka šećera ima D-gluko konfiguraciju.

Prioritet je dalje dat jedinjenjima formule I u kojima:

Rl je vodonik i

R2 je fluor;

ili

Rl je fluor i

R2 je vodonik;

A je O, NH;

R3 je vodonik, F, Cl, Br, i, OH, CF3, (C,-Q)-alkil, (C3-C6)-cikloalkil, (C2-C6)-alkenil, O- (CrC6)-alkil, gde jedan, više od jednog ili svi atomi vodonika alkil radikala mogu biti zamenjeni fluorom;

R4 je vodonik, (CrC6)-aIkil, (CrC6)-cikloalkil;

B je (C0-C4)-alkiien, gde jedan ili više C atoma alkilen radikala može biti zamenjeno nezavisno jedan od drugog sa -0-, -(0=0)-, -CH=CH-, -CH(OH)-, -CHF-, CF2ili -NH-;

R5, R6, R7 nezavisno jedan od drugog, su vodonik, F, Cl, Br, I,OH, CF3, NO2, CN, COOH, COOCCrCeHlkil, CO(Ci-C4)-alkil, CONH2, CONH(C,-C6)-alkil, CON[(C,-C6)-aiktlj2, (CrC6)-alkil, (C2-C6)-aikenil, (C2-C6)-alkinil, O- (C,-C8)-alkil, HO- (C,-C6)-alkilen, (CiLC6)-alkilen-0-(Ci-Cć)-alkil, gde jedan, više od jednog ili svi atomi vodonika u alkil, alkenil, alkinil i O-alkil radikalima mogu biti zamenjeni fluorom;

NH2, NH-(Ci-C6)-alkii, N[(Ci-C6)-aIkil]2,NH-CO-(C,-C6)-aikil,

ili

R6 i R7 zajedno sa C atomiima koji ih nose grade 5 do 7 člani, zasićeni, delilično ili potpuno nezasićeni prsten Cycl, gde 1 ili 2 C atoma prstena mogu takođe biti zamenjena sa N, O ili S, i Cycl može po izboru biti supstituisan sa (0-C6)-alkiI, (C2-C5)-alkenil, (C2-Cs)-alkinil, i gde u svakom slučaju jedna CH2grupa može biti zamenjena sa 0, ili supstituisana sa H, F, Cl, OH, CF3, N02, CN, COO(C,-C4)-alkil, CONH2, CONH(CrC4)-alkil, OCF3;

X je CO, 0, NH, veza;

L je (Ci-C6)-aikilen, (C2-C5)-alkenilen, gde u svakom slučaju jedna ili dve CH2grupe mogu biti zamenjene sa O ili NH;

Y je CO, NHCO, veza.

Poseban prioritet je dat jedinjenjima forlume I u kojima

Rl je vodonik,

R2 je fluor;

A jeO;

R3 je CFj, metil, izopropil;

R4 je vodonik;

B je (Co-C^-alkilen, gde jedan ili više C atoma alkilenskog radikala može biti nezavisno jedan od drugog zamenjeno sa -O-, -(C=0)-, -CHF- ili-CFj-;

X je CO, O, veza;

L je (Ci-C4)-alkilen, (Cj-C^-alkenilen, gde u svakom slučaju jedna ili dve CH2grupe mogu biti zamenjene sa O ili NH;

Y je CO, NHCO, veza.

Vrlo poseban prioritet je dat jedinjenjima formule I u kojima

Rl je vodonik

R2 je fluor;

A jeO;

B je -CH2-;

R5 je vodonik, Cl, metil, etil, OH, CF3;

R6, R7 su vodonik;

X je CO, O, veza;

L je (Ci-C3)-alkilen, (C2-C3>-a]keni]en, gde u svakom slučaju jedna ili dve CH2grupe mogu biti zamenjene sa O ili NH;

Y je CO, NHCO, veza.

Posebno prioritetna jedinjenja forlume I su ona u kojima supstituenti A i B zauzimaju susedne položaje (orto položaj) i R3 zauzima susedni položaj (orto položaj) u odnosu na B.

Vrlo poseban prioritet je osim toga dat jedinjenjima forlumelu kojima

R8, R9 nezavisno jedan od drugog, su vodonik, SO3H, ostatak šećera, (CpCO-alkil, gde u svakom slučaju alkil radikal može nezavisno jedan od drugog ili više puta biti supstituisansa (C)-C2)-alkil, OH, (C,-C2)-alkilen-OH, OSO3H, NH2, S02NH2, NH-SO3H ili adamantil;

ili

R8 i R9 zajedno sa N atomom za koji su vezani grade 5 do 7-51ani, zasićeni prsten Cyc2, izabran iz grupe piperazina, koji mogu biti N-supstituisani sa (CrC2)-alkil, (C|-C2)-alkilen-OH, ili OSO3H, piperidinom, azepanom, pirolidinom ili morfolinom.

U posebnoj realizaciji jedinjenja formule I, supstituenti B i X se nalaze u para položaju prema fenil prstenu.

Usdrugoj realizaciji jedinjenja formule I, supstituenti A se nalaze u položaju 3, B u položaju 4 i R3 u položaju 5 na pirazotovom prstenu.

U sledećoj realizaciji jedinjenja Formule I, supstituenti A se nalaze u položaju 5, B u položaju 4 i R3 u položaju 3 na pirazolovom prstenu.

Alkil radikali u supstituentima R3, R4, R5, R6, R7, R8 i R9 mogu biti pravog lanca ili razgranati. Halogen znači F, Cl, Br, 1, prioritetno F i Cl.

Pronalazak se odnosi na jedinjenja formule I u obliku njihovih tautomera, racemata, racemskih smeša ili čistih enantiomera, i na njihove diastereoizomere i njihove smeše. Predmetni pronalazak obuhvata sve ove izomerne oblike, i gde je pogodno, tautomerne oblike jedinjenja formule I. Ovi izomerni oblici mogu biti dobijeni poznatim metodama čak i ako nisu ( u nekim slučajevima) specijalno opisani.

Farmaceutski prihvatljive soli su, pošto je njihova rastvorljivost u vodi veća nego ona početnog ili baznog jedinjenja, naročito pogodne za medicinsku primenu. Ove soli moraju imati farmaceutski prihvatljiv anjon ili katjon. Pogodne farmaceutski prihvatljive kisele adicione soli jedinjenja pronalaska su soli neorganskih kiselina kao što su hlorovodonična, bromovodonična, fosforna, metafosforna, azotna i sumporna kiselina i organske kiseline kao što su, na primer, sirćetna kiselina, benzensulfonska, benzoeva, limunska, etansulfonska, fumarna, glukonska, glikolna, izetionska, mlečna, laktobionska, melinska, malna, metansulfonska, ćilibarna, p-toluensulfonska i vinska kiselina. Pogodne farmaceutski prihvatljive bazne soli su amonijumove soli, soli alkalnih metala (kao što su soli natrijuma i kalijuma), soli zemnoalkalnih metala (kao što su soli magnezijuma i kalcijuma) i soli trometamol (2-amino-2-hidroksimetil-l,3-propandtol), dietanolamina, lizina ili etilendiamina.

Soli sa farmaceutski neprihvatljivim anjonom kao što je, na primer, trifluoroacetat takođe spadaju u okvir pronalaska kao korisni intermedijari za dobijanje ili prečišćavanje farmaceutski prihvatljivih soli i/ili za upotrebu u neterapeutskim, na primer in vitro, primenama.

Izraz "fiziološki funkcionalni derivati" kako je ovde korišćen, odnosi se na bilo koji fiziološki podnošljiv derivat jedinjenja formule I pronalaska, na primer, estar, koji je pri administraciji sisarima, kao što su , na primer, ljudi, sposoban da gradi (direktno ili indirektno) jeđinjenje formule I ili njegov aktivni metabolit.

Fiziološki funkcionalni derivati takođe obuhvataju prolekove jedinjenja špronalaska, kao Što je opisano, na primer, u H. Okada et al., Chem. Pharm. Buli. 1944, 42, 57-61. Takvi prolekovi se in vivo mogu metabolizovati ujedinjenje pronalaska. Ti prolekovi sami po sebi mogu biti aktivni ili ne.

Jedinjenja pronalaska mogu takođe da postoje u raznim polimorfnim oblicima, na primer kao amorfni ili kristalni polimorfni oblici. Svi polimorfni oblici jedinjenja pronalaska spadaju u okvir pronalask i predstavljaju dalji aspekt pronalaska.

Sva pozivanja na "jedinjenje (jedinjenja) formule I" ovde ubuduće odnose se na jedinjenje (jedinjenja) formule I kao što su ovde ranije opisana, i njihove soli, solvate i fiziološki funkcionalne derivate kako je ovde opisano.

Upotreba

Ovaj pronalazak se dalje odnosi na upotrebu jedinjenja formule I i njihovih farmaceutskih preparata za inhibiciju SGTL 1 (transportera glukoze koji zavisi od natrijuma 1). SGLT 1 je uključen intestinalnu apsorpciju i asimilaciju ugljenih hidrata, posebno intestinalnu apsorpciju i asimilaciju glukoze (E. Turk et al.,Nature, 1991, 350, 354-356).Inhibicija apsorpcije glukoze inhibira porast koncentracije glukoze u krvi. Prema tome, inhibitori SGLT ] su pogodni za lečenje, kontrolu i profilaksu metaboličkih poremećaja, specijalno dijabetes mellitusa.

Jedinjenja formule I se odlikuju blagotvornim efektom na metabolizam glukoze; posebno, ona smanjuju nivo glukoze u krvi i pogodna su za lečenje tipa 1 i tipa 2 dijabetesa. Jedinjenja se stoga mogu upotrebiti sama ili u kombinaciji sa drugim sastojcima koja aktivno smanjuju nivo glukoze u krvi (antidijabetici).

Jedinjenja formule I su dalje pogodna za prevenciju i lečenje kasnijih posledica dijabetesa, kao što je, na primer, nefropatija, retinopatija, neuropatija i sindrom X, gojaznost, obrazovanje infarkta miokarda, infrarkt miokarda, periferna arterijska okluzivna oboljenja, tromboze, arterioskleroza, inflamacije, imuna oboljenja, autoimuna oboljenja kao što je, na primer, AIDS, astma, osteoporoza, kancer, psorijaza, Alchajmer, šizofrenija i infektivne bolesti, pri Čemu je prioritet dat lečenju tipa 1 i tipa 2 dijabetesa i za prevenciju i lečenje kasnijih posledina dijabetesa, Sindroma X i gojaznosti.

Formulacije

Količina jedinjenja formule I koja je potrebna da se postigne željeni biološki efekat zavisi od brojnih faktora, na primer, izabranog specifičnog jedinjenja, namene korišćenja, načina administracije i kliničkog stanja pacijenta. Dnevna doza je u opštem slučaju u oblasti od 0.3 mg do 100 mg (tipično od 3 mg do 50 mg) na dan po kilogramu telesne težine, na primer 3-10 mg/kg/dan. Formulacije jediničnih doza koje se mogu administrirati oralno, kao što su, na primer, tablete ili kapsule, mogu da sadrže, na primer, od 1.0 do 1000 mg, tipično od 10 do 600 mg. Za terapiju gore pomenutih stanja, jedinjenja formule I kogu se koristiti kao sama jedinjenja, ali su ona prioritetno u obliku farmaceutskih kompozicija sa prihvatljivim nosačem. Nosač mora, naravno, biti prihvatljiv u tom smislu daje kompatibilan sa drugim saastojcima kompozicije i da nije škodljiv za zdravlje pacijenta. Nosač može biti čvrst ili tečan ili oba i prioritetno je formulisan sa jedinjenjem kao jedinična doza, na primer kao tableta, koja može da sadrži od 0.05% do 95% težinskih aktivnog sastojka. Druge farmaceutski aktivne supstance mogu takođe biti prisutne, uključujući druga jedinjenja formule I. Farmaceutske kompozicije pronalaska mogu biti proizvedene jednim od poznatih farmaceutskih postupaka, koji se u suštini sastoje od mešanja sastojaka sa farmaceutski prihvatljivim nosačima i/ili puniocima.

Farmaceutske kompozicije pronalaska su one pogodne za oralnu, rektalnu, topikalnu, peroralnu (na primer sublingvalnu) administraciju, mada najpogodniji način administracije zavisi od svakog individualnog slučaja i težine stanja koje će se lečiti i prirode jedinjenja formule I koje se koristi u svakom slučaju. Obložene formulacije i obložene formulacije koje se sporo oslobađaju takođe spadaju u okvir pronalaska. Prioritet je dat formulacijema koje su otporne na kiseli i želudačni sok. Pogodne obloge koje su otprne na želudačni sok sadrže celuloza acetat ftalat, polivinil acetat ftalat, hidroksipropil-metilceluloza ftalat i anjonske polimere metakrilne kiseline i metil metakrilat.

Pogodna farmaceutska jedinjenja za oralnu administraciju mogu biti u obliku odvojenih jedinica kao što su, na primer, kapsule, vrećice, tablete za sisanje ili tablete, od kojih svaka sadrži definisanu količinu jedinjenja formule I; u obliku prahova ili granula; kao rastvor ili suspenzija u vodenoj ili nevodenoj tečnosti; ili u obliku emulzije ulje u vodi ili voda u ulju.. Ove kompozicije mogu, kao Što je ranije navedeno, biti dobijene bilo kojim pogodnim farmaceutskim postupkom koji uključuje korak u kome su aktivni sastojak i nosač (koji se može sastojati od jednog ili više dodatnih sastojaka) dovedeni u kontakt. Kompozicije su u opštem slučaju proizvedene uniformnim i homogenim mešanjem aktivnog sastojka sa tečnim i/ili fino podeljenim čvrstim nosačem, posle čega se proizvod oblikuje, ako je potrebno. Prema tome, tableta može biti proizvedena kompresijom ili oblikovanjem praha ili granula jedinjenja, gde je pogodno sa jednim ili više dodanih sastojaka. Sabijene tablete se nogu proizvesti tabletiranjcm jedinjenja u tečljivom obliku kao Što je na primer, prah ili granule, gde je pogodno mešanim sa vezivom, klizivom, inertnim razblaživačem i/ili jednim (ili više) površinski aktivnim/đisperzujućim sredstvom u pogodnoj mašini. Oblikovane tablete mogu biti dobijene oblikovanjem jedinjenja, koje je u obliku praha i ovlaženo inertnim tečnim razblaživačem, u pogodnoj mašini.

Farmaceutske kompozicije koje su pogodne za peroralnu (sublingvalnu) administraciju obuhvataju tablete za sisanje koje sadrže jedinjenje formule I sa začinima, normalno saharozom i gumi arabikom ili tragakantom, i pastile koje sadrže jedinjenje u inertnoj bazi kao što je želatin i glicerol ili saharoza i gumi arabika.

Farmaceutske kompozicije koje su pogodne za rektalnu administraciju su prioritetno u obliku supozitorija jedinične doze. One mogu biti proizvedene mešanjem jedinjenja formule I sa jednim ili više konvencionalnih čvrstih nosača, na primer kakao buterom, i oblikovanjem dobijene smeše.

Kombinacije sa drugim lekovima

Jedinjenja pronalaska mogu biti administrirana sama ili u kombinaciji sa jednom ili više farmakološki aktivnih supstanci koje imaju, na primer, povoljne efekte na metaboličke poremećaje ili oboljenja sa kojima su često povezani. Primeri takvih lekova su:

1. lekovi koji smanjuju glukozu u krvi, antidijabetici.

2. aktivni sastojci za lečenje dislipidemija,

3. antiaterosklerotični lekovi,

4. sredstva protiv gojaznosti,

5. antiinflamatorni aktivni sastojci,

6. aktivni sastojci za lečenje malignih tumora

7. antitrombotični aktivni sastojci

8. aktivni sastojci za lečenje visokog krvnog pritiska

9. aktivni sastojci za lečenje srčane insuficijencije i

10. aktivni sastojci za lečenje i/ili prevenciju komplikacija izazvanih dijabetesom ili povezanih sa dijabetesom.

Oni mogu biti kombinovani sa jedinjenjima pronalaska formule I posebno za sinergetično poboljšanje efekta. Administracija kombinacije aktivnih sastojaka se može izvesti bilo odvojenom administracijom aktivnih sastojaka pacijentu, ili u obliku kombinovanog proizvoda u kome je više aktivnih sastojaka prisutno u jednom farmaceutskom preparatu.

Primeri koji se mogu pomenuti su:

Antidijabetici

Pogodni antidijabetici su opisani, na primer, u Rote Liste 2001, poglavlje 12 ili u US Dictionarv USAN and lnternatrional Drug Names, US Pharmacopeia, Rockville 2003. Anitidijabetici uključuju sve insuline i derivate insulina, kao što su, na primer, Lantus<®>

(vidi www.lantus.com) ili Apidra<®>, i drugi brzo delujući insulini (vidi US 6,221,633), modulatori GLP-1 receptora kao što su opisani u VVO 01/04146 ili neki drugi, na primer, oni opisani u VVO 98/08871 Novo Nordisk A/S.

Oralno efektivni hipoglikemični aktivni sastojci uključuju, preferentno, sulfoniluree, bigvanide, meglitinide, oksadioazolidindione, tiazolidindione, inhibitore glukozidaze, anatgoniste glukagona, oralne agoniste GLP-1, inhibitore DPP-IV, otvarače kaiijumovih kanala kao što su, na primer, oni opisani u VVO 97/26265 i VVO 99/03861, pojačivači osetljivosti insulina, inhibitori enzima jetre koji su uključeni u stimulaciju glukoneogeneze i/ili glukogenolize, modulatori apsorpcije i asimilacije glukoze, jedinjenja koja menjaju metabolizam lipida i dovode do promene u sastavu lipida krvi, jedinjenja koja redukuju apsorpciju i asimilaciju hrane, mođultori PPAR i PXR i aktivni sastojci koji deluju na kalijumove kanale beta ćelija koji zavise od ATP.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa insulinom

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su u kombinaciji sa supstancama koje utiču na proizvodnju hepatične glukoze, kao što su, na primer, inhibitori glikogcn fosforilaze (vidi: VVO 01/94300, WO 02/096864, VVO 03/084923, WO 03/084922, Wo 03/104188).

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa suifonilureom kao što je, na primer, tolbutamid, glibenklamid, glipizid ili glimepirid.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa aktivnim sastojkom koji deluje na kalijumove kanale beta ćelija koji zavise od ATP, kao što su, na primer, tolbutamid, glibenklamid, glipizid, glimepirid ili repaglinid.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa bigvanidom kao što je, na primer, metformin.

U drugoj relaizaciji pronalaska, jedinjenja formulelsu administrirana u kombinaciji sa meglitinidom, kao što je, na primer, repaglinid.

U jednoj realizaciji, jedinjenja formule 1 su administrirana u kombinaciji sa tiazolidindionom kao što je, na primer, ciglitazon, pioglitazon, roziglitazon ili jedinjenja opisana u VVO 97/41097 Dr. Reddy's Research Foundation, posebno 5-[[4-f(3,4-dihidro-3-metil-4-okso-2-hinazolinilmetoksi]feniI]metil]-2,4-tiazolidindion.

U jednoj realizaciji, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa inhibitorima

DPPIV kako su opisani u, na primer, u VVO 98/19998, VVO 99/61431, VVO 99/68278, VVO 99/67279, WO 01/72290, VVO 02/38541, VVO 03/040174, posebno P 93/01 (1-ciklopentil-3-meti!-l-okso-2-pentanamonijum hlorid), P 31/98, LAF237 (l-(2-[3-hidroksiadamant-l-ilamino)acetil]pirolidin-2-(S)-karbonitril), TS021 ((2S,4S)-4-fluoro-l-[[(2-hidroksi-l, 1-dimetiletil)amino]acetiI]pirolidin-2-karbonitriI monobenzensulfonat).

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa agonistima PPARgama kao što su, na primer, roziglitazon, pioglitazon.

U jednoj realizaciji, jedinjenja formule 1 su administrirana u kombinaciji sa jedinjenjima koja imaju efekat inhibicije SGLT-1 i/ili 2, kao što je otkriveno direktno ili indirektno, na primer, u VVO 2004/007571, VVO 2004/052902, VVO 2004/052903.

U jednoj realizaciji, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa inhibitorom o> glukozidaze kao što je, na primer, miglitol ili akarboza.

U jednoj realizaciji, jedinjenja formule 1 su administrirana u kombinaciji sa više od jednim od gore pomenutih jedinjenja, na pr., u kombinaciji sa sulfonilureom i metforminom, silfonilureom i akarbozom, repaglirtiđom i metforminom, nsulinom i sulfonilureom, insulinom i metforminom, insulinom i troglitazonom, insulinom i lovastatinom, itđ.

Modulatori lipida

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule 1 su administrirana u kombinaciji sa inhibitorom HMGCoA reduktaze kao što je lovastatin, fluvastatin, pravastatin, simvastatin, ivastatin, ttavastatin, atorvastatin, rosuvastatin.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa inhibitorom apsorpcije žučne kiseline, vidi, na primer, US 6,245,744, US 6,221,897, US 6,277,83 i, EP 0683 773, Ep 0683 774).

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa polimernim apsorbentima žučne kisel ine kao što je, na primer, holestiramin, kolcsevelam.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule] su administrirana u kombinaciji sa inhibitorom apsorpcije holesterola kao što je opisano, na primer, u VVO 0250027, ili ezetimib, tikvezid, pamakvezid,

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa induktorima LDL receptora (vidi, na primer, US 6,342,512).

U jednoj realizaciji, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa puniocem, prioritetno nerastvorljivim puniocem (vidi, na primer, rogač/Caromax® (Zunft, H. J; et al., Carob pulp preparation for treatment of hvpercholesterolemia, ADVANCES UN TI1ERAPY (2001 Sep-Oct), 18(5), 230-6). Caromax® je proizvod koji sadrži rogač proizvod Nutrinova, Nutrition Specialities & Food Ingrcdicnts GMBH, lndustriepark Hochst, 65926 Frankfurt/Main). Kombinacija sa Caromax® je moguća u jednom preparatu ili odvojenom administracijom jedinjenja formule I i Caromax<®->a. Sa tim u vezi Caromax<®>može takođe biti dministriran u obliku hrane kao što je, na primer, pekarski proizod ili štangla muslija.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule 1 su administrirana u kombinaciji sa agonistom PPARalfa.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa mešanim PPAR alfa/gama anonistima kao što je, na primer, AZ 242 (Tesaglitazar, (S)-3-(4-{2-(4-metansulfoniioksifenil)ctoksiJfenil)-2-ctoksipropionska kiselina), BMS 298585 (N-4[(4-metoksifenoksi)karbonil]-N-[[4-2-(5-metil-2-fenil-4-oksazolil)-etoksi]-feniljmetitjglicin) ili kao što je opisano u WO 99762872, WO 99/62871, VVO 01/40171, VVO 01/40169, VVO 96/38428, VVO 01/81327, WO 01/21602, VVO 03/020269, WO 00/64888 ili VVO 00/64876.

U jednoj realizaciji projekta, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa fibratom kao što je, na primer, fenofibrat, gemfibrozil, klofibrat, bezafibrat,

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule 1 su administrirana u kombinaciji sa nikotinskom kiselinom ili niacinom.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule 1 su administrirana u kombinaciji sa inhibitorom CETP, na pr. CP-529, 414 (torcetrapib).

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa nihibitorom ACAT.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule 1 su administrirana u kombinaciji sa MTP inhibitorom kao što je, na primer, implitapid.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule 1 su administrirana u kombinaciji sa antikosidantom.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa inhibitorom lipoprotein lipaze.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa inhibitorom lijaze ATP citrata.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa inhibitorom skvalen sintetitaze.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa antagonistom lipoproteina.

Sredstva protiv gojaznosti.

U jednoj realizaciji pronalaska, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sainhibitorom lipaze kao što je, na primer, orlistat.

U jednoj realizaciji, drugi aktivni sastojak je fenfluramin ili deksfenfluramin.

U drugoj realizaciji, drugi aktivni sastojak je subutramin.

U daljoj realizaciji, jedinjenja formule I su administrirana u kombinaciji sa CART modulatorima (vidi "Cocaine-amphetamine-regulated transcript influences energv metabolism, anxiety and gastric emptving in mice" Asakavva, A, et al., M.: Hormone and Metabolic Research (2001), 33(9), 554-558), antagonistima NPY, na pr., hidrohlorid naftalen-1 -sulfonske kiseline {4-[(4-aminohinazolin-2-ilamino)metil]cik!oheksiI-metil}amid (CGP 71683A), agonistima MC4 (na pr. 1-amino-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-2-karboksilna kiselina [2-(3a-benzil-2-metil-3-okso-2,3,3a,4,6,7-heksahidropirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-l-(4-hlorofenil-2-oksoetil]amid; (WO 01/91752)), antagonistima orexina (na pr., l-(2-metilbenzoksazol-6-il-3-[l,5]naftiridin-4-ilurea hidrohlorid (SB-334867-A)), agonistima H3 (3-cikloheksil-l-(4,4-dimetil-l,4,6,7-tetrahidroimidazo[4,5-c]piridin-5-il)propan-l-on so kosalne kiseline (VVO 00/63208); agonistima TNF, antagonistima CRF (na pr., [2-metil-9-(2,4,6-trimetilfenil-9H-l,3,9-triazafluoren-4-ii]dipropilamin (WO 00/66585)), antagonistima CRF BP (na pr., urokortin) agonistima urokortina, agonistima

(33 (na pr., l-(4-hloro-3-metansuifoni]metUfenil)-2-[2-(2,3-clirnetil-!H-indo!-6-i!oksi)etil-amino]etanol hidrohlorid (VVO 01/83451)), agoniste MSH (hormon koji stimuliše melanocit), agoniste CCK-A (na pr., {2-[4-(4-hloro-2,5-dimetoksifenil)-5-(2-cikloheksi!etil)tiazoi-2-karbamoil]-5,7-dimetilindol-l-il}sirćetna kiselina so trifluorosirćetne kiseline (WO 99/15525)), inhibitorima ponovne apsorpcije i asimilacije serotonina (na pr., deksfenfluramin), mešanim sertoninergičkim i noradrenergičkim jedinjenjima (na pr., VVO 00/71549), agonistima 5HT na pr. l-(3-etilbenzofuran-7-iljpiperazin so oksalne kiseline (WO 01/09111) agonistima bombezina, antagonistima galanina, hormonom rasta (na pr., humanim hormonom rasta), jedinjenjima koja oslobađaju hormon rasta (6-benziloksi-!-(2-diizopropilaminoetilkarbamoil)-3,4-dihidro-lH-izohinolin-2-karboksilna kiselina tercijarni butil estar (VVO 01/85695)), agonistima TRH (vidi, na primer, EP 0 462 884), mođulatorima nekuplujućeg proteina 2 ili 3, agonistima leptina (vidi, na primer, Lee, Daniel W.; Leinung, Matthew C; Rozhavskava-Arena, Marina; Grasso, Patricia, Leptin agonists as a potencial approach to the treatment of obesitv. Drugs of the Future (2001), 26(9), 873-881, agonistima DA (bromokriptin, Doprexin), inhibitorima lipaze/amilaze (na pr., VVO 00/40569), mođulatorima PPAR (na pr., 00/78312), mođulatorima RXR ili agonistima TR-p.

U jednoj realizaciji pronalaska, dalji aktivni sastojak je leptin

U jednoj realizaciji, dalji aktivni sastojak je deksamfatamin, amfetamin, mazindol ili fentermin.

U jednoj realizaciji, jedinjenja formule [ su administrirana u kombinaciji sa lekovima koji imaju uticaj na koronarnu cirkulaciju i vaskularni sistem, kao sto su,na primer, Inhibitori ACE (na pt., ramipril), sa lekovima koji deluju na angiotenzim-renin sistem, antagonistima kalcijuma, beta blokatorima itd.

Ujednoj realizaciji, jedinjenja formile I su administrirana u kombinaciji sa lekovima koji imaju efekat na koronarnu cirkulaciju i vaskularni sistem, kao što su, na primer, inhibitori ACE (napr., rampi!), lekovima koji deluju na angiotenson-renin sistem, antagoniste kalcijuma, beta blokatore utd.

Ujednoj realizaciji, jedinjenja formile I su administrirana u kombinaciji sa lekovima koji imaju infiamatorni efekat.

U jednoj realizaciji, jedinjenja formule 1 su administrirana u kombinaciji sa lekovima koji se koriste u terapiji kancera i prevenciji kancera.

Razume se da se smatra daje svaka pogodna kombinacija jedinjenja pronalaska sa jednim ili više od gore pomenutih jedinjenja i po potrebi sa jednom ili više farmakološki aktivnih supstanci obuhvaćena predmetnim pronalaskom.

Aktivnost jedinjenja je testirana kako sledi:

Dobijanje četkastog pokrova membrane vezikule od crevnih ćelija tankih creva zečeva, pacova i svinja

Dobijanje četkastog pokrova membrane vezikule od crevnih ćelija tankih creva je izvedeno takozvanim postupkom taloženja MG<2+.>SItizokoža tankih creva je odstrugana i suspenđovana u 60 ml ledeno hladnog Tris/HCl pufeia (pH 7.1V300 mM manitola, 5 mM EGTA. Razblaživanje do 200 ml sa ledenom-hladnom destilovanom vodom je praćeno homogenizacijom sa Ultraturrax-om (18 otvora, IKA VVerk Staufen, FRG) na 75% maksimalne snage tokom 2 x I minut, uz hlađenje ledom. Posle dodavanja 3 ml IM MgCl?rastvora (krajnja koncentracija 10 mM), smeša je ostavljena da stoji na 0°C tokom tačno 15 minuta. DodatakMg<*+>čini da se ćelijske membrane gomilaju i talože izuzev četkatog pokrova membrana. Posle centrifugiranja na 3 00 x g (5000 rpm, SS-34 rotor) tokom 15 minuta, talog je odbačen i supernatant, koji sadrži četkasti pokrov membrane, je centrifugiran na 26 700 x g (15 000 rpm, SS-34 rotor) tokom 30 minuta. Supernatant je odstranjen, i talog ponovo homonegenizovan u 60 ml 12M Tris/HC! pufera (pH 7. l)/60 mM manitola, 5 mM EGTA korišćenjem Potter Elvejhen homogenizatora (Braun, Melsungen 900 rpm, 10 ponavljanja). Dodatak 0.1 ml IM MgCferastvora i inkubacija na 0°C tokom 15 minuta je praćena centrifugiranjem ponovo na 3 000 x g tokom 15 minuta. Supernatant je zatim ponovo centrifugiran na 46 000 x g (20 000 rpm, SS-34 rotor) tokom 30 minuta. Talog je stavljen u 30 ml 20 mM Tris/Hepes pufera (pH 7.4)/280 mM manitola i homogeno ponovo suspendovan sa 20 ponavljanja u Potter Elvejhen homogenizatoru na 1000 rpm, Posle centrifugiranja na 48 000 x g (200 000 rpm, SS-34 rotor) 30 minuta, talog je stavljen u 0.5 do 2 ml Tris/Hepes pufera (pH 7.4)/280 mM manitola (krajnja koncentracija 20 mg/ml) i ponovo sispendovan upotrebom tuberkulin šprica sa iglom veličine 27.

Vezikule su ili korišćene direktno posle pripreme za labeliranje ili iza spitivanja transporta, ili su čuvane u tečnom azotu na -196 °C u porcijama od 4 mg.

Da bi se pripremio četkasti pokrov membrane vezikule tankih creva pacova, 6 do 10 mužjaka VVistar pacova (gajeni na Kastelgrund, Aventis Pharma) je žrtvovano cervikalnom dislokacijom, i tanka creva izvađena i isprana hladnom izotoničnom solanom. Creva su isečena i sluzokoža odstrugana. Postupak izolovanja četkastog pokrova membrane vezikule je izveden kako je gore opisano. Da bi se odstranili citoskeletalne frakcije, četkasti pokrov membrane vezikule tankih creva pacova je tretiran sa KSCN kao haotropičnim jonom.

Da bi se pripremio četkasti pokrov membrane vezikule tankih creva zečeva, zečevi su žrtvovani intravenoznom injekcijom 0.5 ml vodenog rastvora tetrakain HCI, 100 mg m-butramida i 25 mg mebezonijum jodida. Tanka creva su izvađena i isprana ledeno-hladnom fiziološkom solanom i čuvane zamrznute u plastičnim vrećama u atmosferi azota na -80 °C tokom 4 do 12 nedelja. Za pripremu membrane vezikule, zamrznuta creva su otopljena na 30 °C u vodenom kupatilu i tada je sluzokoža odstrugana. Postupak za dobijanje membrane vezikule je izveden kao što je gore opisano.

Da bi se pripremio četkasti pokrov membrane vezikule tankih creva svinja, segmenti jejunuma sveže zaklanih svinja su isprani ledeno-hladnom izotoničnom solanom i zamrznute u plastičnim vrećama u atmosferi azota na -80 °C. Dobijanje membrane vezikule je izvedeno kao što je gore opisano.

Merenje apsorpcije i asimilacije glukoze pomoću četkastog pokrova membrane vezikule.

Apsorpcija i asimilacija ['"<*>C]-labelirane glukoze u četkastom pokrovu membrane vezikule je merena postupkom filtriranja membrane. 10 ul suspenzije četkastog pokrova membrane vezikule u 10 mM Tris/Heper pufera (pH 7.4 )/300 mM manitola je dodano na 20 °C u 90 ul rastvora 10 pM [<14>C]D glukoze i odgovarajuće koncentracije relevantnih inhibitora (5-200 um) u 10 mM Tris/Heper pufera (pH 7.4V100 mM NaCl/100 mM.

Posle inkubacije tokom 15 sekundi, proces transporta je zaustavljen dodatkom 1 ml ledeno hladnog rastvora za zaustavljanje (10 mM Tris/Heper pufera (pH 7.4)/150 mM KC1) i suspenzija vezikula odmah filtrirana sukcijom kroz membranski filter nitrata celuloze (0.45 pm, 25 mm prečnik, Schleicher & Schttll) u vakumu od 25 do 30 mbara. Filterje ispan sa 5 ml ledeno hladnog rastvora za zaustavljanje. Svako merenje je izvedeno kao dvostruko ili trostruko određivanje.

Da bi se izmerila apsorpcija i asimilacija radiolabelitanog substrata, membranski filter je rastvoren u 4 ml odgovarajućeg scintilatora (Quickszint 361, Zinsser Analvtik GmbH, Frankfurt am Main), i radioaktivnost određena metodom tećne scintilacije. Izmerene vrednosti su dobijene kao dpm (dekompozicija na minut) posle kalibracije instrumenta upotrebom standardnih uzoraka i posle korekcije za bilo kakvu prisutnu hemiluminiscenciju.

Aktivnost aktivnih sastojaka je poređena na osnovu podataka IC50dobijenih u analizi transporta na četkastom pokrovu membrane vezikule tankih creva zečeva za izabrane supstance. (Apsolutne vrednosti mogu da zavise od vrste i eksperimenta)

Dalji postupak za testiranje aktivnosti jedinjenja je inibicija transportne aktivnosti humanog natrijum-zavisnog transportera glukoze 1 (SGLT1, SLC5A1)in vitro:

1. Kloniranje vektora ekspresije za humani SGLT1

cDNA za humani SGLT1 je uveden u pcDNA4/TO vektor (Invitrogen) standardnim metodama molekularne biologije kao što je opisano u Sambrook et al., (Sambrook et al., Molecular Cloning, A Labortorv Manul, 2nd Eđition). Sekvenciranje inserta pokazalo je kompletnu identifikaciju sa bazama 11 do 1005 baze sekvencija za humani SGLT1 koje je opisao Hediger et al. (Hediger et al.,Proc. Natl. Acad. Sci. USA1989, 85, 5748-5752.) i deponovano u GenBank bazu podataka sekvenci (GenBank Accesion Number: M24847) Bazel 1 do 2005 odgovaraju kompletnom regionu kodiranja humanog SGLT1.

2. Priprema linije rekombinantnih ćelija sa induciblinom ekspresijom humanog SGLT1

Vektor ekspresije za humani SGLT1 je uveden u CHO-Trex ćelije (Invitrogen) pomoću FuGene6 lipofekcije (Roche). Da bi se izdvojili klonovi pojedinačnih ćelija, 600 ug/ml Zeocin-a (Invitrogen) je dodano medijumu kulture ćelija (Nutrient Mixture F-12 (Ham), (Invitrogen), snabdevenog sa 10 % seruma fetusa te leta (BD Biosciences), 10 p-g/ml blasticidina S (CN Biosciences), 100 jedinica/ml penicilina, 100 jedinica /ml streptomicina). Funkcionalnost klonova pojedinačnih ćelija kao rezultata selekcije je testirana preko njihove aktivnosti apsorpcije i asimilacije radioiabeliranog metil a-D-glukopiranosida. Klonovi ćelija sa najvećom aktivnosti apsorpcije i asimilacije za a-D-glukopiranozid, koje u daljem tekstu pominjemo kao CHO-Trex-hSGLTl, izabrane su za dalje eksperimente i kultivacija je nastavljena u prisustvu 600 pg/ml zeocina. 3. Merenje inhibitornog efekta test supstanci na apsorpciju i asimilaciju metil a- D-glukopiranozid ( a- MDG).

CHO-Trex-hSGLTl ćelije su zasjane u koncentraciji od 50 00 ćelija po ćeliji u Cytostar-T scintilacione 96-ćelijske ploče (Amersham Biosciences) u medijumu kulture ćelija i kultivisane tokom 24 sata. Ekspresija rekombinantnog humanog SGLT1 je izazvana dodatkom 1 pg/ml tetraciklina tokom daljih 24 sata. Za eksperimante apsorpcije i asimilacije a-MDG, ćelije su isprane sa PBS i zatim ostavljenje (PBS uz dodatak 10% seruma fetusa teleta) na 37 °C tokom jednog sata. Posle sledećeg stupnja ispiranja sa puferom analize transporta (140 mM natrijum hlorida, 2 mM kalijum hlorida, 1 mM magnezijum hlorida, 1 mM kalcijum hlorida, 10 mM HEPES/Tris, pO 7.5), ćelije su inkubirane bilo u odsustvu ili u prisustvu test supstance u varirajućoj koncentraciji na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. Test supstance su na odgovarajući način razblažene u puferu analize transporta (40 ul/ćelija) počev od 10 pl matičnog rastvora u đimetil sulfoksidu. Analiza je tada započeta dodavanjem 10 pl smeše radioiabeliranog metil a.-D-[U-<14>C]glukopiranozida (Amersham) i nelabeliranog metil a-D-glukopiranozida (Acros). Krajnja koncentracija a-D-glukopiranozida u probije 50 um. Posle inkubacionog vremena od 30 minuta na sobnoj temperaturi, reakcija je zaustavljena dodatkom 50 pl/ćelija 10 mM metil a-D-glukopiranozida u puferu analize transporta (4 °C), apsorpcija i asimilacija radioaktivnosti u ćelijama određena je u MicroBeta ScintiHation Mickroplate Reader (VVallac). Polovina maksimuma efekta inhibicije test supstance (IC50)je određena na sledeći način:

1. Određivanje vrednosti za 0% inhibicije. Ovo je merenje u odsustvu supstance, mereno u puferu analize transporta koji sadrži natrij um 2. Određivanje vrednosti zal00% inhibicije. Ovo je merenje u odsustvu supstance, mereno u puferu analize transporta koji ne sadrži natrijum (140 mM holin hlorida, 2 mM kalijum hlorida, 1 mM magnezijum hlorisa, 1 mM kalcijum hlorida, 10 mM HEPES/Tris, pH 7.5). 3. Izračunavanje procenta inhibicije za merenja izvedena u prisustvu različitih koncentracija test supstance. Iz ovog je zatim bilo moguće odrediti koncentraciju test supstance koja redukuje apsorpciiju i asimilaciju metil a-D-glukopiranozida za 50% (IC50).

IC50 vrednosti test supstanci (uM)

[In vitro testranje apsorpcije i asimilacije metil a-D-glukopiranozida]

Primeri detaljno opisani u daljem tekstu služe da ilustruju pronalazak, ne ograničavajući ga-

Pronalazak se dalje odnosi na procese za dobijanje jedinjenja opšte formule I.

Dobijanje primera je u tekstu koji sledi detaljno opisano. Jedinjenja pronalaska mogu biti dobijena anlogno ili u saglasnosti sa procesima opisanim u WO 04 14932 i WO 0418491.

Eksperimentalni deo

Reakciona šema: Sinteza o-bromoglikozida 4

Meta 2,3,6-0-benzoiI-4-fluoro-4-deoksi-o-D-glukopiranozid (2)

3.0 g metil 2,3,6-tri-O-benzoil-a-D-galaktopiranpzida (Reist et al., J. Org Chem. 1965, 30, 2312) je uvedeno u dihlorometan i ohlađeno na -30°C. Zatim je u kapima dodano 3.06 ml [bis(2-metoksietil)amino]sumpor trifluoriđa (BAST). Reakcioni rastvor je zagrejan do sobne temperature i mešan 12 h. Smeša je razblažen sa dihlorometanom, i organska faza ekstrahovana sa H2O, NaHCOsrastvorom i zasićenim NaCl rastvorom. Organska faza je sušena iznad Na2S04i koncentrovana. Sirovi proizvod je kristalisan iz etil acetata i heptana. Dobijeno je 1.95 g proizvoda 2 kao bezbojna čvrsta supstanca. C28H25FO8(508.51) MS (ESI') 526.18 (M+NH4<1>), Alternativno, reakcija može takođe biti izvedena korišćenjem 2.8 ekv. dietilaminosumpor trifluoriđa (DAST); u tom slučaju, reakcioni rastvor je refluksovan tokom 18 sati posle dodavanja. Dorada se izvodi anlogno gornjem opisu.

l-0-Acetil-2,3,6-tri-0-benzoiI-4-fluoro-4-deoksiglukoza (3)

12.0 g jedinjenja metil 2,3,6-0-benzoil-4-fluoro-4-deoksi-a-D-glukopixanozida je suspendovano u 150 ml sirćetnog anhidrida. 8.4 ml konc. sumporne kiseline je pomešano sa 150 ml glacijalne sirćetne kiseline i dodano smeši uz hlađenje u ledu. Smeša se meša na sobnoj temperaturi 60 h. Smeša je sipana u rastvor NaHCOs, i ovaj rastvor je ekstrahovan sa dihlorometanom. Organska faza je ekstrahovana sa rastvorom NaCl,

sušena iznad Na2S04i koncentrovana. Ostatak je prekristalisan iz smeše etil acetat/heptan. Dobijeno je 5.97 proizvoda 3 kao bezbojna čvrsta supstanca. C29H25FO9(536.52) MS (ESI<+>) 554.15 (M+NH4<+>).

1-Bromo 4-deoksi-4-fluoro-2,3,6-tri-0-ben2oil-alfa-D-glukoza (4)

1.44 g l-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzoil-4-fluoro-4-đeoksiglukoze je rastvoreno u 20 ml bromovodonične kiseline u glacijalnoj sirćetnoj kiselini (33%) i mešano na sobnoj temperaturi. Posle 5 sati, smeša je sipana u smešu vode i leda, i vodena faza ekstrahovana tri puta sa dihlorometanom. Sakupljene organske faze su isprane zasićenim rastvorom natrijum hloida, sušene iznad natrijum sulfata i uparene do suvog. Sirovi proizvod je filtriran kroz silika gel kolonu sa smešom etil acetat/heptan 70:30. Dobijeno je 1.40 g proizvoda 4 kao bezbojna čvrsta supstanca. C^HbBrFO? (557.37) MS (ESI<*>) 574.057576.05 (M+NH4<+>). 4-(4-Br omohenzil)-5-izopr opiIpiraz-3-ol(6):

15.2 g metilizobutilacetata (5) dodano je suspenziji natrijum hiđriđa (60%, 3.85 g) u 250 ml tetrahidrofurana uz hlađenje ledom. Rastvor 20.0 g 4-bromobenzil bromida u 100 ml THF je zatim dodano i sneša mešana na sobnoj temšeraturi 48 h. Posle dodatka 300 ml H2O i 300 ml EtOAc, organska faza je sušena iznad MgS04 i rastvarač uklonjen u

rotacionom isparivaču. Dobijeni sirovi proizvod je rastvoren u 120 ml toluena, pomešan sa hiđrazin hidratom (8.01 g) i zagrevan pod refluksom sa vodenim separatotom (sifonom) tokom 12 h. Reakciona smeša je koncentrovana do zapremine od 50 ml i ohlađena na 0°C, kristalisani proizvod je otfiltriran usisavanjem i ispran heptanom. Dobijeno je 10.8 g jedinjenja 6 kao bledo žuta čvrsta supstanca. CuHisBr^O (295.18) MS (ESf) 294.04 (M+H<+>). 530 mg 4-(4-bromobenzil)-5-izopropilpiraz-3-ola (6) i 150 g brotniđa 4 je rastvoreno u 50 ml metilen hlorida. Ovom rastvoru je jedan za drugim dodano 1.86 g kalijum karbonata, 91 mg benziltrietilamonijum bromida i 0.08 ml vode, i ovo je zatim mešano na sobnoj temperaturi 24 h. Reakcioni rastvor je prebačen u levak za razdvajanje i ispran vodom, pa zatim rastvorom natrijum hlorida. Organska faza je sušena iznad MgS04 i koncentrovana u rotacionom isparivaču. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (EtOAc/heptan). Dobijeno je 193 mg jedinjenja 7 kao bezbojna čvrsta supstanca, C4oH36BrFN208(771.6) (MS (ESI<*>) 773.1 (M+H<*>)-

193 mg glukozida 7 je rastvoreno u 1.25 ml DMF, i dodano 2.3 mg Pd(Oac>2,6.09 mg tri-o-tolilfosfina, 0.25 ml truetilamina i 84.6 ml 1-alilpiperazina. Reakciona smeša je zagrevana u uljanom kupatilu na 100°C tokom 18 h. Rastvarao" je uklonjen u rotacionom isparivaču i sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (EtOAc/MeOH). Dobijeno je 117 mg jedinjenja 8 kao bezbojni vosak. C47H49FN4O8(816.9) (MS (ESI<+>) 817.5 (M+H*).

Jedinjenje 9 (Primer 1):

98 g glukozida 8 je stavljeno u 4 ml smeše metanol/voda/trietilamin (3:3:1) i mešano na sobnoj temperaturi tokom 48 h. Reakciona smeša je koncentrovana u rotacionom isparivaču i sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (metilen hlorid/metanol/konc amonijak). Dobijeno je 34 mg jedinjenja 9 kao bezbojna čvrsta supstanca. C26H37FN4O5(504.61) (MS (ESI<*>) 505.47 (M+H<4>).

Jedinjenje 10:

7.20 g glikozida 7 je rastvoreno u 109 ml acetonitrila, i dodano 41.9 mgPđ(OAc)2> 113.6 mg tri-o-tolilfosflna, 39.2 ml trietilamina i 1.04 g vinil serćetne kiseline. Reakciona smeša je zagrevana pod refluksom 60 h. Rastvarač je uklonjen u rotacionom isparivaču i sirovi proizvod prečišćen hromatografijom na silika gelu (CH2Cl2/MeOH/konc amonijak = 30/5/1)). Dobijeno je 6.18 g jedinjenja 10 kao bezbojni vosak, C44H41FN2O10(776.8).

Jedinjenje 11:

100 mg jedinjenja10je rastvoreno u 4.00 ml dihlorometana, pa je dodano 9.41 mg n-butilamina, 119.8 mg diizopropiletilamina, 26.1 mg 1-hidroksibenzotriazola i 30 mg N-(3-đimetilaminopropil)-N-etilkarbodiimida. Reakciona smeša je mešanana 20°C tokom 16 h. Rastvor je ispran sukcesuvno svaki put sa 5 ml rastvora NaHC03, 5 ml 0.2 M hlorovodonične kiseline i 5mlzasićenog rastvora NaCl. Rastvaranje uklonjen u rotacionom isparivaču i sirovi proizvod bez daljeg prečišćavanja pretvoren ujedinjenje 12. C48H5oFN2309 (831.9).

Jedinjenje 12

82 mg jedinjenja 11 je rastvoreno u 5.00 ml metanola, i dodano 10.5 mgpaladijuma na

aktivirnom ugljeniku (10%). Reakciona smeša je mešana u atmosferi 1 bara Hbtokom 16 h. Paladijum na ugljeniku je otfiltriran i rastvarač uklonjen u rotacionom isparivaču. Dalje prečišćavanje sirovog proizvoda na silika gelu je nepotrebno. Dobijeno je 72 mg željenog jedinjenja 12 kao bezbojni vosak. C48H52FN23O9(834.0).

Jedinjenje 13 (Primer2):

72 mg glukozida 12 je rastvoreno u 10 ml mwtanola i dodano 1.72 ml 2M metanolnog rastvora natrijum metoksida. Reakciona smeša je mešan na 20°C 4 h, pa je dodano 46.2 mg amonijum hlorida. Rastvarač je uklonjen u rotacionom isparivaču, i sirovi proizvod prečišćen na silika gelu (u početku sa etil acetat/heptan = 5:1; zatim metilen hlorid/metanol/konc.amonija = 30/5/1). Dobijeno je 24 jedinjenja 13 kao bezbojna čvrsta supstanca C27H40FN4O7(521.63): MS (ESI<*>) 522.57 (M+H4).

Jedinjenje 14 (Primer3):

.OH

Jedinjenje14je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2), Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa 3-aminopropionamid hidrohloridom, i bez izvođenja hidrogenacije, dobijeno je jedinjenje

14kao bezbojna čvrsta supstanca C26H35FN4O7(534.6) :(MS (ESI<4>) 535.44

(M+H<*>).

Jedinjenje 15 (Primer 4):

Jedinjenje 15 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2). Počev od glukozida10,koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa 3-aminopropionamid hidrohloridom, dobijeno je jedinjenje15kao bezbojna čvrsta supstanca C26H37FN4O7(536.6): MS (ESI4) 537.44 (M+H<4>).

Jedinjenje 16 (Primer5):

Jedinjenje16 jesintetizovano analogno nacmu sinteze opisanom zajeamjenjeu(jpraner 2). Počev od glukozida10,koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa glicinamid hidrohloridom, dobijeno je jedinjenje16kao bezbojni vosak C25H35FN4O7(522.6): MS (ESI<*>) 523.38 (M+H<4>).

Jedinjenje 17:

Jedinjenje 17 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 7 (šema 1). Međutim, umesto metil izobutiirlacetata kao početni materijal korišcen je etil acetoacetat. Jedinjenje 17 je dobijeno kao bezbojna čvrsta supstanca. CsglfoBrF^Os (743.6).

Jedinjenje 18 (Primer 6):

Jedinjenje 18 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 15 (primer 4). Međutim, kao početni materijal korišcen je glukozid 17 umesto glukozida 10. Jedinjenje 18 je dobijeno je kao bezbojni vosak. C24II33FN4O7 (508.6): MS (ESI<4>) 509.33 (M+H4).

Jedinjenje 19 (Primer 7):

Jedinjenje 19 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 15 (primer 4). Međutim, bromo jedinjenje 7 je reagovalo sa akrilnom kiselinom umesto sa vinilsirćetnom kiselinom. Jedinjenje 19 je dobijeno je kao bezbojni vosak. C25H3SFN4O7(522.6): MS (ESI<4>) 523.42 (M+H4).

Jedinjenje 20 (Primer8):

Jedinjenje 20 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 19 (primer 7). Međutim, 3-aminopropionamid birdohlorid je zamenjen glicinamid hidrohloridom u kuplovanju amida. Jedinjenje 20 je dobijeno je kao bezbojni vosak. C24H33FN4O7(508.6): MS (ESI<*>) 509.29 (M+r<f>).

Jedinjenje 21 (Primer 9):

Jedinjenje 21 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2). Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa L-serinamid hidrohloridom, dobijeno je jedinjenje 21 kao bezbojni vosak. C26H37FN4O8(552.6):MS (ESI4) 553.29 (M+H4).

Jedinjenje 22 (Primer 10):

Jedinjenje 22 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 18 (primer 6). Počev od glukozida 17, koji je međutim, reagovao ne sa 3-aminopropioamid hidrohloridom već sa L-serinamid hidrohloridom, dobijeno je jedinjenje 22 kao bezbojni vosak. C24H33FN4O8(524.6):MS (ESI<*>) 525.31 (M+H<4>).

Jedinjenje 23 (Primer 11):

Jedinjenje 23 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 18 (primer 6). Počev od glukozida 17, koji je međutim, reagovao ne sa 3-aminopropioamid hidrohloridom već sa N-(2-hidroksietil)piperazinom, dobijeno je jedinjenje 22 kao bezbojni vosak. C27H39FN4O7(550.6): MS (ESI<4>) 551.30 (M+H4).

Jedinjenje 24 (Primer 12):

Jedinjenje 24 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2). Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već saN-metilpiperazinom, dobijeno je jedinjenje 24 kao bezbojni vosak. C28H41FN4O6(548.7): MS (ESI<4>) 549.30 (M+H<*>).

Jedinjenje 25 (Primer 13):

iSII

Jedinjenje 25 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2). Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa piperiđinom, dobijeno je jedinjenje 25 kao bezbojni vosak. C28H40FN3O6(533.7): MS (ESI4) 534.54 (M+H<4>).

Jedinjenje 26 (Primer 14):

Jedinjenje 26 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje13(primer 2). Počev od glukozida10,koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa heksahidro-lH-azepinom, dobijeno je jedinjenje 26 kao bezbojni vosak. C29H42FN3O6(547.7): MS (ESI<4>) 548.56 (M+H<4>).

Jedinjenje 27 (Primer 15):

Jedinjenje 27 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2). Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa pirolidinom, dobijeno je jedinjenje 27 kao bezbojni vosak. C27H38FN3O6(519.6): MS (ESI<4>) 520.52 (M+H4).

Jedinjenje 28 (Primer 16):

Jedinjenje 28 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2). Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa benzill-piperazin karboksilatom, dobijeno je jedinjenje 28 kao bezbojni vosak. C27H39FN4O6(534.6): MS (ESI<4>) 535.32 (M+H<*>).

Jedinjenje 29 (Primer 17):

Jedinjenje 29 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 19 (primer 7). Međutim, 3-aminopropionamid hidrohlorid je zamenjen sa 2-aminoetanoIom u kuplovanju amiđa.. Jedinjenje 29 je dobijeno je kao bezbojni vosak. C2+H34FN3O7(495.6): MS (ESI4) 496.43 (M+H1).

Jedinjenje30(Primer18):

Jedinjenje 30 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 19 (primer 7). Međutim,3-aminopropionamiđ hidrohlorid je zamenjen sa 2-amino-2-metil-l-propanolom u kuplovanju amiđa.. Jedinjenje 30 je dobijeno je kao bezbojni vosak C26H38FN3O7(523.6): MS (ESf) 524.26 (M+H<4>).

Jedinjenje 31 (Primer 19):

Jedinjenje 31 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2). Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa 2-amino-2-metil-l-propanolom, dobijeno je jedinjenje 31 kao bezbojničvrsta supstanca. C27H4oFN307(537.6): MS (ESI<4>) 538.28 (M+H<4>).

Jedinjenje 32 (Primer 20):

Jedinjenje 32 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 29 (primer 17). Međutim, postupak hidrogenacije nije izveden. Jedinjenje 32 je dobijeno kao bezbojni vosak. C24H32FN3O7 (493.6): MS (ESI<4>) 494.28 (M+H4).

Jedinjenje 33 (Primer 21):

Jedinjenje 33 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2). Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već satris(hidroksimetil)aminometanom, dobijeno je jedinjenje 33 kao bezbojna čvrsta supstanca. C27H40FN3O9(569.6): MS (ESI<4>) 570.33 (M+H<4>).

Jedinjenje 34 (Primer 22):

Jedinjenje34je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 ( primer 2). Počev od glukozida10,koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa N-karbobenzoksi-l,3-diaminopropan hidrohloridom, dobijeno je jedinjenje 33 kao bezbojno ulje. C26H39FN4O6(522.6): MS (ESI<4>) 522.52 (M+H<4>).

Jedinjenje 35 (Primer 23):

Jedinjenje 35 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2). Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa 1-adamantan-metilaminom, dobijeno je jedinjenje 35 kao bezbojni vosak. C34H48FN3O6(613.8): MS (ESI4) 614.45 (M+H*).

Jedinjenje 36 (Primer 24):

Jedinjenje 36 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2). Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa 2,3,4,6-tetra-O-acetil-l-anMno-l-deoksi-beta-D-glukozom, dobijeno je jedinjenje 36 kao bezbojno ulje. C29H42FN3O11(627.7): (MS (ESI*) 628.25 (M+H<4>).

Jedinjenje 37 (Primer 25):

Jedinjenje 37 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 28 (primer 16). Međutim poslednjem stupnju, deprotekciji natrijum metanolatom, prethodila je reakcija sa kompleksom sumpur trioksid-trietil amin: ovo je učinjeno rastvaranjem 63.0 mg piperazinskog jedinjenja u 10.0 ml metanola i, na 0°C, dodavanjem 202 mg kompleksa sumpur trioksid-trietil amin i mešanjem na 0°C tokom 2h. Rastvarač je uklonjen u rotacionom isparivaču i sirovi proizvod prečišćen na silika gelu (metilen hlorid/metanol/konc amonijak = 30/5/1). Dobijeno je 50 mg sumpornog jedinjenja i pretvoreno, analogno sintezi jedinjenja 28, sa natrijum metoksidom ujedinjenje 37, koje je dobijeno kao bezbojni vosak. C27H39FN4O9S (614.7): MS (ESf) 615.42 (M+H<*>).

Jedinjenje 38 (Primer 26):

Jedinjenje 38 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 37 (primer 25). Počev od glukozida 10, koji je, međutim, reagovao ne sa benzil 1-piperazin karboksilatom već sa N-karbobenzoksi-l,3-diaminopropan hidrohloridom, dobijeno je jedinjenje 38 kao bezbojni vosak. C26H39FN4O9S (602.7): MS (ESI*) 603.41 (M+H<4>).

Jedinjenje 39 (Primer 27):

Jedinjenje 39 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 37 (primer 25). Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa benzil 1-piperazin karboksilatom već sa 2-aminoetanolom, dobijeno je jedinjenje 39 kao bezbojni vosak. C25H36FN3OioS (589.6): (MS (ESI<*>) 588.50 (M^H).

Jedinjenje 40 (Primer 28):

Jedinjenje40je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 37 (jsrimer 25). Počev od glukozida10,koji je međutim, reagovao ne sa benzil 1-piperazin karboksilatom već sa 2-aminoetil-l-propanolom, dobijeno je jedinjenje 40 kao bezbojni vosak. C27H40FN3O10S (617.7): MS (ESI*) 616.52 (M<+->H).

Jedinjenje 41 (Primer 29):

Jedinjenje41je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2). Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa morfolinom, dobijeno je jedinjenje41kao Medo žuti vosak. C27H38FN3O7 (535.6): MS (ESI<*>) 536.48 (M+H<*>).

Jedinjenje 42 (Primer30):

42 (Primer 30)

Jedinjenje 42 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 13 (primer 2). Počev od glukozida 10, koji je međutim, reagovao ne sa n-butilaminom već sa terc-amilaminom, dobijeno je jedinjenje 42 kao bledo žuti vosak. C28H42FN3O6(535.7): MS (ESI*) 536.54 (M+H*).

Jedinjenje 43 (Primer 31):

43 (Primer 31)

41.3 mg l-alil-3-propiluree je rastvoreno u 5.00 ml THF,idodano 1.21 ml 0.05 M 9-BBN rastvora u toluenu, i smeša je mešana na 20 °C tokom 4 h.Potom, dodani su rastvor 180 mg glukozida 17 u 10.0 ml toluena, 7.4 mg tri-o-tolifosfina, 102.7 mgkalijum fosfata i 2.7 mg Pd(OAc)2. Reakciona smeša je zagrevana na 100°C tokom 3 b. Talog je otfiltriran, i organska faza isprana sa 10 ml vode i sušena iznad magnezijum sulfata. RastvaraČ je uklonjen u rotacionom isparivaču, i sirovi proizvod prečišćen hromatografijom na silika gelu (EtOAc/heptan). Dobijeno je 59 mg bezbojne čvrste supstance i reagovalo sa

natrijum metoksiđom analogno dobijanju jedinjenje 13 (primer 2). Jedinjenje 43 je dobijeno kao bezbojni vosak. C24H35FN4O6(494.6): MS (ESI<*>) 494.12 (M<*>).

4-(2-(Etoksikarbonil-4-metil-3-okso-pent-l-enU)benzoeva kiselina(E/ZizomernasmeSa( (44):

29.0 g etil izobutirilacetata i 33.0 g 4-karboksibenzaldehida je zagrevano sa separatorom vode tokom 6 h. Reakcioni rastvor je koncentrovan, stavljen u etil acetat i ekstrahovan sa 20% rastvorom amonijum hlorida i zasićenim rastvorom natrijum hlorida. Organska faza je sušena iznad magnezijum sulfata, koncentrovana i direktno dalje reagovala do 45. Dobijeno je 50.0 g ulja. CaHuOs (290.3): MS (ESI<*>) 291.1 (M+H)<*>,/R= 1.42 min (Gradijent 2).

4-(2-(TEtoksikarbonil-4-metil-3-okso-pentil)benzoeva kiselina (45):

50 g 4-(2-etoksikaibonil-4-metil-3-okso-pent-l-enil)benzoeve kiseline je rastvoreno u 300 ml THF, dodano je 1.0 g plađijuma na ugljeniku (10%), i smeša hidrogenizovana pod pritiskom vodonika od 4 bara u autoklavu tokom 24 h. Smeša je razblažena dihlorometanom i sukcijom filtrirana kroz Celit, ostatak je ispran dihlorometanom i koncentrovan u vakumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (etil acetat/n-heptan =3/1).Dobijeno je 45 g jedinjenja 45 kao ulje. C16H20O5(292.3) MS (ESf) 293.1 (M+H)<+>, r* = 1.37 min (Gradijent 2). 4^[l-<2-Cijanoe«I)-5-hidroksi-3-izopropil-lH-pirazol-4-ilmetil]benzoeva kiselina (46): 15 g jedinjenja 45 je rastvoreno u 100 ml glacijalne sirćetne kiseline. Dodano je 7.4 ml 2-cijanoetilhidrazina, i rastvor zagrevan na 100°C tokom 2 h. Smeša je dodana u ledenu vodu i ekstrahovana sa 20% rastvorom amonijum hlorida i zasićenim rastvorom natrijum hlorida i sušena iznad magnezijum sulfata. 24.0 g željenog jedinjenja 46 je iskristalisalo sa etil acetatnom fazom. Matična tečnost je koncentrovana i hromatografisaĐa na silika gelu (dihlorometan:metanol:glacijalna sirćetna kiselina = 100:10:1). Dobijeno je još 1.10 g jedinjenja 46 plus 7.0 g ponovo izolovanog prethodnika 45. C17H19N3O3(313.4): MS (ESr<*>) 314.2 (M+H)<+>,fR- 0.97 min (Gradijent 2).

N-(2-KarbamoUettt)-4^[i-(2-cijano-etU>^

UmetU]benzamid (47):

500 mg jedinjenja 46 i 145 mg p-alaninamid hidrohlorida je uvedno u 10 ml dihlorometana, idođano je 0.8 ml NjN-điizopropiletilamina, 215 mg 1-hidroksibenzotriazola i 306 mg l-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorida .Rastvor je mešanl2 h. Rastvor je koncentrovan i sirovi proizvod prečišćena na na silika gelu (dihlorometan/metanol/glacijalna sirćetna kiselina = 100:0:5 do 100:10:5). Dobijeno 440 mg željenog jedinjenja 47. C20H25N5O3(383.5): MS (ESI<*>) 384.2 (M+H)<+>,/R= 3.58 min (Gradijent 2).

Jedinjenje 48

300 mg jedinjenja 47, 436 mg jedinjenja 4, i 324 mg kaiijum karbonata je suspendovano u 25 ml acetonitrila i 2.5 ml ode i mešano 72 h. Reakciona smeša je filtrirana, ostatak ispran dihlorometanom, i kombinovane organske faze ekstrahovane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida. Orgasska faza je sušena iznad natrijum sulfata i ostata hromatogarfisan na silika gelu (dihlorometan/metanol = 100/5). Dobijeno je 207 mg glukozida 48 kao bezbojna čvrsta supstanca. C47H46FN5O10(859.9): MS (ESI<*>) 860.3 (M+H)<+>,tR= 1.70 min (Gradijent 2).Jedinjenje 49 (Primer 32) 200 mg jedinjenja 48 je rastvoreno u 15 ml THF i ohlađeno na -78°C u atmosferi argona. Polako je dodano kroz septum 0.81 mg rastvora litijum bis(trimetilsilil)amida (1 M u heksanu). Posle 30 min, u hladnu smešu je dodano 2 ml 20% rastvora amonijum hlorida, i rastvor zagrejan do sobne temperature. Dodano je 2 ml zasićenog rastvora natrijum hlorida, organska faza izdvojena, i vodena faza ekstrahovana dva puta etil acetatom. Kombinovane organske faze su koncentrovane i ostatak stavljen u smešu trietilamin: metanol.voda (14 ml 1:3:3). Rastvor je mešan tokom 24 h i zatim koncentrovan do suvog i prečišćen hromatografijom na silika gelu. Dobijeno je 50 mg jedinjenja 49 kao bezbojna čvrsta supstanca. C23H31FN4O7(494.5): MS (ESI ) 493.2 (M-H), /R- 3.58 min (Gradijent 3); rR=> 0.97 (Gradijent 1).

Jedinjenje 50 (Primer 33)

Jedinjenje50je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje49(primer 32). Međutim, glicinamid hidrohlorid je upotrebljen umesto p^alaninamida. Jedinjenje50je dobijeno kao bezbojna čvrsta supstanca. C22H29FN4O7(480.5): MS (ESI<4>) 481.19 (M+H<4>).

Jedinjenje51 (Primer34)

Jedinjenje 51 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 49 (primer 32). Međutim, 4,4,4-trifluoroacetoacetat je upotrebljen kao početni materijal umesto etil izobutilacetata. Jedinjenje 51 je dobijeno kao bezbojna čvrsta supstanca. C21H24F4N4O7(520.4): MS (ESI<4>) 521.16 (M+H4).

Jedinjenje 52 (Primer 35)

Jedinjenje 52 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 50 (primer 33). Međutim, 4,4,4-trifluoroacetoacetat je upotrebljen kao početni materijal umesto etil izobutilacetata. Jedinjenje 52 je dobijeno kao bezbojna čvrsta supstanca. C20H22F4N4O7(506.4): MS (ESI<4>) 507.16 (M+H<4>).

Jedinjenje 53 (Primer 36):

Jedinjenje 53 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 43 (primer 331, ali je l-(N-metilpiperazin)-3-alilurea koriščena kao kao početni materijal umesto 1-alil-3-propiluree, i glukozid 7 je upotrebljen umesto glukozida 17 . Jedinjenje 53 je dobijeno kao bezbojna čvrsta supstanca. C28H42FN5O6(563.7).

Jedinjenje 54 (Primer 36):

Jedinjenje 54 je sintetizovano analogno načinu sinteze opisanom za jedinjenje 43 (primer 33), ali je l-(N-metilpiperazin)-3-alilurea koriščena kao kao početni materijal umesto 1-alil-3-propiluree, i glukozid 7 je upotrebljen umesto glukozida 17 . Jedinjenje 54 je dobijeno kao bezbojna čvrsta supstanca. C27H41FN4O7(552.7).

Claims (17)

1. Jedinjenje formule I naznačeno time, što: Rl i R2 su nezavisno jedan od drugog F ili H, gde jedan od radikala Rl ili R2 mora biti F; A je O, NH, CH2, S ili veza; R3 je vodonik, F, Cl, Br, I, OH, CF3, N02, CN, COOH, CO-(Ci-C6)-alkil, COO(Ci-Qs)-alkil, CONH2, CONH-(Ci-C6)-alkiI, CON[(CrC6>alkilj2, (Ci-CeJ-alkil, (C3-C6)-cikloalkil, (C2-C6)-alkenil, (C2-C6)-alkinil, 0-(Ci-C<s)-alkil, HO-(Ci-C6)-alkilen, (Ci-C6)-alkilen-0-(Ci-C6)-alkil, fenil, benzil, (Ct-Caj-alkoksikarbonil, gde jedan, viže od jednog ili svi atomi vodonika u alkil, alkenil, alkinil i O-alkil radikalima mogu biti zamenjeni fluorom; S02-NH2, S02-NH(Ci-C6)-alkil, S02N[(Ci-C6)-alkil]2, S-<CI-C6)-alkil, S-(CH2)0-fenii, SO-(Ci-C6>alld1, SO-(CH2)0-fenil, S02- (Ci<^)-alkil, S02-(CH2)0-fenil, gde o može biti 0 do 6, i fenil radikal može biti supstuituisan do dva puta sa F, Cl, Br, OH, CF3>N02, CN, OCF3, 0-(C,-C6)-alkil, (CpCej-alkil, NH2; NH2, NH-(CrC6)-alkil, N((C,-C6)-alkil)2, NH-CO-{CrC7)-alkil, fenil, 0-(CH2)„-fenil, gde o može biti od 0 - 6, gde fenil prsten može biti supstuituisan jedan do tri puta sa F, Cl, Br, L OH, CF3, N02, CN, OCF3,0-(CrC6)-alkil, (Ci-C6)-alkil, NH2, NH(CrCć)-alkil, N((C,-Cć)-alkil)2, S02-CH3>COOH, COO-(CrC6)-alkil, CONH2; R4 je vodonik, (Ci-Cć)-alkil, (C2-Cs)-alkenil, (C3<^)-cikloalkil, ili fenil koji po izbom može biti supstituisan sa halogenom ili (Ci-C^-alkilom; B je (Co-Ci5)-alkilen, gde jedan ili više C atoma alkilenskog radikala mogu nezavisno jedan od drugog biti zamenjeni sa -O-, -(C=0)-, -CH=CH-, -OC-, -S-, -CH(OH)-, - CHF-, CF2-, -(S=0)-,~(S02)-, -N((C!-Cć)-alkil)-, -N((C,-C6)-alkilfenil) ili-NH-; R5, R6, R7 nazavisno jedan od drugog, vodonik, su F, Cl, Br, I, OH, CF3, NO2, CN, COOH, COO(CrC6)-alkil, CO(CrC4)-alkil, CONH2, CONH(Ci-C6)-alkil, CON[(Cj-C6)alkil]2, (Ci-C6)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C2-C6)-alkiniil, 0-(Ci-«)-alkil, HO-(CrC6)-alkilen, (Ci-Cs)-alkilen-O- (Ci-C6)-alkil, gde jedan, više od jednog ili svi atomi vodonika u alkil, alkenil, alkinil i O-alkil radikalima mogu biti zamenjeni fluorom, S02-NH2, S02-NH(C,-C6)-alkil, S02N[(Ci-C6)-alkil]2, S-(C,-C6)-alkil, S-(CH2)0-fenil, SCF3,SO-(C,-C6)-alkil, SO-(CH2)0-fenil, S02-(C|-C6)-alkil, S02-(CH2)0-fenil, gde o može biti 0 do 6, i fenil prsten može biti supstuituisan do dva puta sa F, Cl, Br, OH, CF3)NO2, CN, OCF3, O- (Ci-Cć)-alkil, (C,-C5)-alkil, NH2; NH2, NH-(Ci-C6)-alkil, N((C,-C6)-alkil)2, NH-CO-(CrC6)-alkil, fenil, 0-(CH2)0-fenil, gde o može biti 0 - 6, i gde fenil prsten može biti supstuituisan jedan do tri puta sa F, Cl, Br, I, OH, CF3lN02, CN, OCF3, O- (Ci-C8)-alkil, (Ci-C6)-alkil, NH2, NH(Ci-C6)-alkil, N((C,-C6)-alkil)2, S02-CH3, COOH, COO- (CrC6)-alkil, CONH2; ili R6 i R7 zajedno sa C atomiima koji ih nose grade 5 do 7 člani, zasićeni, delimično ili potpuno nezasićeni prsten Cycl, gde 1 ili 2 C atoma prstena mogu takođe biti zamenjena sa N, O ili S, i Cycl može po izboru biti supstituisan sa (Ci-C6)-alkil, (C2-Cs)-alkenil, (C2-Cs)-alkinil, i gde u svakom slučaju jedna CH2grupa može biti zamenjena sa O ilisupstituisana sa H, F, Cl, OH, CF3l N02, CN, COO(CrC4)-alkil, CONH2, CONH(C,-C4)-alkil, OCF3; X je CO, O, NH, S, SO, SO2ili veza; L je (Ci-Cćj-alkilen, (C2-Cs)-alkenilen, gde u svakom slučaju jedna ili dve CH2grupe mogi biti zamenjene sa O ili NH; Y je CO, NHCO, SO, S02ili veza; R8, R9 nezavisno jedan od drugog su vodonik, SO3H, ostatak šećera, (Ci-Cćj-alkil, gde jedna ili više CH2grupa alkilskog radikala može biti supstituisana nezavisno jedna od druge sa (Ci-C6)-alkil, OH, (Ci-C6)-alkilen-OH, (C2-C6)-alkenilen-OH, O-ostatak šećera, OSO3H, NH2, NH-(Ci-C6)-alkil, N[(Ci-C6)-alkil]2,NH-CO- (Ci-C6)-alkil, NH-ostatak šećera, NH-SO3H, (Ci-C6)-alkilen-NH2, (C2-C6)-alkenilen-NH2, (Co-C6)-alkilen-COOH-, (C0-C6)-alkilen-CONH2, (Co-C6)-alkilen-CONH-(C,-C6)-alkil, (C0-C6)-alkilen-SONH2, (Q-C6)-alkilen-SONH-(C, -C6)-alkil, (QrC6)-alkilen-S02NH2, (Co-CeJ-alkilen-SOsNH-(Ci-C6)-alkiI, adamantil; ili R8 i R9 zajedno sa N atomom koji ih nose grade 5 do 7-čiani zasićeni prsten Cyc2, gde jedna ili više CH2grupa prstena može takođe biti zamenjena sa O, S, NH, NSO3H, N-ostatak šećera, N-(Ci-C6)-alkil, gde jedna ili više CH2grupa alkil radikala može biti supstituisana nezavisno jedna od druge sa (Cj-C<s)-alkil, OH, (CrCsj-alkilen-OH, (C2-Cć)-alkenilen-OH, NH2, NH-(C,-C6)-alkil, N[(Ci-C6)-alkiI32,NH-CO- (C2-C6)-alkil, NH-ostatak šećera, (Ci-C6)-alkilen-NH2, (C2-C6)-alkenilen-NH2, (Co-C6>alkilen-COOH, (C<>-C6)-alkilen-CONH2, (Co-C6>alkilen-CONH-(Ci-C6)-alkil, (Co-C6)-aIkilen-SONH2, (C0-C6)-alkilen-SONH-(C,-C6)-alkil,(Co-C6)-alkilen-S02NH2,(Co-C6)-aMlen-S02N^^C6)-alkil; i njihove farmaceutski prihvatljive soli.

2. Jedinjenje formule 1 prema zahtevu 1, naznačeno time, što : A je O, NH, veza; R3 je vodonik, F, Cl, Br, I, OH, CF3, N02, CN, COOH, CO-(Ci-C6)-alkil, COO(C,-C6)-alkil, CONH2, CONH-(Ci-C(i)-aIkil, CON[(Ci-C«)-alkil]2, (CrC&)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C2-C6)-alkinil, 0-(CrQ)-alkil, HO-(Ci-Cs)-alkilen, (Ci-C6)-alkilen-0-(Ci-C6)-alkil, fenil, benzil, gde jedan, više od jednog ili svi atomi vodonika u alkil radikalima mogu biti zamenjeni fluorom, SO-(Ci-C5)-alkil; ili R4 je vodonik, (C;-C6)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C3-C6)-cikloalkil; B je (Co-C6)-alkilen, gde jedan ili više C atoma alkilen radikala mogu nezavisno jedan od drugog biti zamenjeni sa -O-, -(C=0)-, -CH=CH-, -OsC-, -S-, -CH(OH)-, -CHF-, CF2-, -(S=0)-, -(S02)-, -N((Ci-C6)-alkilen)-, -N((Ci-C6)-alkilen-fenilen)- ili-NH-.

3. Jedinjenje formule 1 prema zahtevima 1 i 2, naznačeno time, što su ostaci šećera beta(P) - vezani, i stereohemija na položajima 2, 3 i 5 ostatka šećera ima D-gluko konfiguraciju.

4. Jedinjenje formule 1 prema zahtevima 1 do 3, naznačenot time, što : Rl je vodonik i R2je fluor; ili Rl je fluor i R2 je vodonik; A je 0,NH; R3 je vodonik, F, Cl, Br, I, OH, CF3, (Ci-C6)-alkil, (C3-C6)-cikloalkil, (C2-C6)-alkenil, O-(Ci-C6)-alkil, gde jedan, više od jednog ili svi atomi vodonika alkil radikala mogu biti zamenjeni fluorom; R4 je vodonik, (Ci-C^-alkil, (C3-C6)-cikloaIkil; B je (Co-C4)-alkilen, gde jedan ili više C atoma alkilen radikala može biti zamenjeno nezavisno jedan od drugog sa -O-, -(C=0)-, -CH=CH-, -CH(OH)-, -CHF-, -CF2- ili -NH-; R5, R6, R7 nezavisno jedan od drugog, vodonik, F, Cl, Br, I,OH, CF3, N02, CN, COOH, COOCCrCej-alkil, CO(Ci-C4)-alkil, CONH2, CONH(C[-C6)-alkil, CON[(C1-C6)-alkil]2, (CrC6)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C2-C6)-alkinil, O- (Ci-Cg)-alkil, HO- (Ct-C6)-alkilen, (Cr C6)-alkilen-0-(Ci-C6)-alkil, gde jedan, više od jednog ili svi atomi vodonika u alkil, alkenil, alkinil i O-alkil radikalima mogu biti zamenjeni fluorom; NH2, NH-(Ci-C6)-alkil, N[(Ci-C6)-alkil]2,NH-CO-(C|-C6)-alkil, ili R6 i R7 zajedno sa C atomiima koji ih nose grade 5 do 7 člani, zasićeni, delimično ili potpuno nezasićeni prsten Cycl, gde 1 ili 2 C atoma prstena mogu takođe biti zamenjena sa N, O ili S, i Cycl može po izboru biti supstituisan sa (Ci-C6)-alkil, (C2-C5)-alkenil, (C2-C5)-a!kiniI, i gde u svakom slučaju jedna CH2grupa može biti zamenjena sa O, ili supstituisana sa H, F, Cl, OH, CFj, N02, CN, COO(C)-C4)-alkil, CONH2, CONH(Ci-C4)-alkil, OCF3; X je CO, O, NH, veza; L je (Ci-Cćj-alkilen, (C2-C5)-alkenilen, gde u svakom slučaju jedna ili dve CH2grupe mogu biti zamenjene sa O ili NH; Yje CO,NHCO,veza.

5. Jedinjenje formule 1 prema zahtevima 1 do 4, naznačeno time, što: Rije vodonik, R2 je fluor; A je O; R3 je CFj, metil, izopropil; R4 je vodonik; Bje (Co-C-O-alkilen, gde jedan ili više C atoma alkilenskog radikala može biti nezavisno jedan od drugog zamenjeno sa -O-, -(C=0>, -CHF- ili-CF2-; Xje CO, O, veza; L je (C)-C4)-alkilen, (C2-C4)-alkenilen, gde u svakom slučaju jedna ili dve CH2grupe mogu biti zamenjene sa O ili NH; Yje CO, NHCO, veza.

6. Jedinjenje formule 1 prema zahtevima 1 do 5,naznačeno time, što: Rlje vodonik R2je fluor; A O; B je -CH2-; R5 je vodonik, Cl, metil, etil, OH, CF3; R6, R7 je vodonik; X je CO, O, veza; L je (Ci-C3)-alkilen, (C2-C3)-alkenilen, gde u svakom slučaju jedna ili dve CH2grupe mogu biti zamenjene sa O ili NH; Yje CO, NHCO, veza.

7. Jedinjenje formule I kao u zahtevima 1 do 6, u kojima supstituenti A i B zauzimaju susedne položaje (orto položaj) i R3 zauzima susedni položaj (orto položaj) u odnosu na B.

8. Jedinjenje formule 1 prema zahtevima 1 do 7, naznačeno time, što: R8, R9 nezavisno jedan od drugog, su vodonik, S03H, ostatak šećera, (Ci-C4)-alkil, gde alkil radikal može nezavisno jedan od drugog jedan ili više puta biti supstituisan sa (Ci-C2)-alkiI, OH, (Ci-C2)-alkilen-OH, OSOA CONH2, NH2, S02NH2, NH-S03H ili adamantil; ili R8 i R9 zajedno sa N atomom za koji su vezani grade 5 do 7-člani, zasićeni prsten Cyc2, izabran iz grupe piperazina, koji može biti N-supstituisan sa (Ci-C2)-alkil, (Cj-C2)-allđlen-OH, ili OSO3H, piperidinom, azepanom, pirohdinom ili morfolinom.

9. Jedinjenje izabrano iz grupe:

10. Lek, naznačen time, što sadrži jedno ili više jedinjenja prema zahtevima 1 do 9.

11. Lek, naznačen time, što sadrži jedno ili više jedinjenja prema zahtevima 1 do 9 i jedan ili više aktivnih sastojaka koji smanjuju nivo glukoze u krvi.

12. Primena jedinjenja prema zahtevima 1 do 9 za proizvodnju leka.

13. Primena jedinjenja prema zahtevima 1 do 9 za proizvodnju leka za lečenje tipa 1 i tipa 2 dijabetesa.

14. Primena jedinjenja prema zahtevima 1 do 9 za proizvodnju leka za smanjivanje nivoa glukoze u krvi.

15. Primena jedinjenja prema zahtevima 1 do 9 u kombinaciji sa najmanje jednim aktivnim sastojkom za smanjenje nivoa glukoze u krvi, za proizvodnju leka za lečenje tipa 1 i tipa 2 dijabetesa.

16. Primena jedinjenja prema zahtevima 1 do 9 u kombinaciji sa najmanje jednim aktivnim sastojkom za smanjenje nivoa glukoze u krvi, za proizvodnju leka za smanjenje nivoa glukoze u krvi.

17. Postupak za proizvodnju leka koji sadrži jedan ili više jedinjenja prema zahtevima 1 do 9, naznačen time, što obuhvata mešanje aktivnog sastojka sa farmaceutski pogodnim nosačem, i pretvaranje smeše u oblik pogodan za administraciju.