RU2119955C1 - Способ получения (s)-кетопрофена - Google Patents
Способ получения (s)-кетопрофена Download PDFInfo
- Publication number
- RU2119955C1 RU2119955C1 RU94015601A RU94015601A RU2119955C1 RU 2119955 C1 RU2119955 C1 RU 2119955C1 RU 94015601 A RU94015601 A RU 94015601A RU 94015601 A RU94015601 A RU 94015601A RU 2119955 C1 RU2119955 C1 RU 2119955C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- ketoprofen
- ester
- biotransformation
- microorganism
- carried out
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
- C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
- C07D213/55—Acids; Esters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
- C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
- C12P41/005—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of carboxylic acid groups in the enantiomers or the inverse reaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/44—Polycarboxylic acids
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Изобретение относится к разделению арилалкановых кислот. Для получения (S)-кетопрофена рацемическую смесь энантиомеров сложного эфира кетопрофена подвергают взаимодействию с микроорганизмом Trichosporen laibacchii. Процесс ведут при рН 4,5-7,5 и температуре 20-30oC. Способ позволяет достигать селективности до 98%, при этом он прост, экономичен. 6 з.п.ф-лы, 3 табл.
Description
Настоящее изобретение относится к разделению арилалкановых кислот.
Известно, что многие фармацевтически активные соединения, получаемые химическим синтезом, производятся и поступают в продажу в виде смесей стереоизомеров. Однако зачастую лишь один из этих стереомеров является фармацевтически активным. Примесный энантиомер часто обладает очень низкой активностью или вообще не проявляет никакой активности, а в ряде случаев оказывает нежелательное побочное физиологическое воздействие или является токсичным.
Известно, что антивоспалительная активность 2-арилпропионовых кислот напроксена и ибупрофена присуща (S) - энантиомеру. Аналогичная ситуация наблюдается и в случае кетопрофена, который в настоящее время производится и поступает в продажу в виде рацемата.
Арилалкановые кислоты можно разделить путем биотрансформации по следующей схеме:
где R' - алкильная группа, Ar - остаток ароматического углеводорода, а R, например, является остатком алифатического углеводорода, содержащего от 1 до 4 атомов углерода.
где R' - алкильная группа, Ar - остаток ароматического углеводорода, а R, например, является остатком алифатического углеводорода, содержащего от 1 до 4 атомов углерода.
Наибольший интерес из арилалкановых кислот представляет (+) -α- (3-бензоилфенил)-пропионовая кислота ((S)-кетопрофен), которую получают путем проведения энантиоселективного синтеза. Данный способ, заключающийся в осуществлении асимметричной гомогенной гидрогенизации α- (3-бензоилфенил)акриловой кислоты, является наиболее близким по технической сущности к заявляемому, и он описан G. Comisso, M.Mihalic etc..., Enantioselective synthesis and absolute confiquration of (+)- α- (3-benzoylphenyl)propionic acid, Gazzetta chimica Italiana, 110, 1980, p. 123 - 127.
Целью настоящего изобретения является экономичный способ получения оптически чистого (S)-кетопрофена.
Поставленная цель достигается способом получения (S)-кетопрофена из рацемической смеси энантиомеров сложного эфира кетопрофена, в котором рацемическую смесь энантиомеров сложного эфира кетопрофена подвергают взаимодействию с микроорганизмом Trichosporon laibacchii, при этом используют микроорганизм, хараткеризующийся способностью селективно превращать рацемическую смесь энантиомеров сложного эфира кетопрофена в (S)-кетопрофен.
Предпочтительно в настоящем изобретении в качестве сложного эфира кетопрофена используют этиловый эфир и/или метиловый эфир.
Предпочтительно используемый микроорганизм представляет собой микроорганизм штамма Trichosporon Laibacchii IMICC 348917.
Предпочтительно способ согласно настоящему изобретению осуществляют при pH 4,5 - 7,5.
Предпочтительно способ осуществляют при температуре 20 - 30oC.
Способ позволяет достигать селективности до 98%, при этом он прост и экономичен.
Указанный выше способ основывается на биокаталитическом гидролизе сложного эфира рацемического кетопрофена, в ходе которого получают бульон, содержащий кетопрофен в кислотной форме, значительно обогащенной одним энантиомером, и эфир кетопрофена, значительно обогащенный другим энантиомером. При условии, что кислотный продукт биотрасформации в значительной степени обогащен требуемым энантиомером, дальнейшее улучшение оптической чистоты может быть легко и экономично достигнуто при использовании стандартных химических способов путем образования соли с хиральным амином высокой оптической чистоты и последующей кристаллизацией из раствора. Оставшийся после проведения биотрансформации эфир кетопрофена очищают, рацемизируют химическим способом и повторяют цикл для проведения повторной биотрансформации, снижая при этом затраты на исходные материалы.
Достижение поставленной цели настоящего изобретения основывается на открытии биокатализатора, пригодного для проведения указанной выше биотрансформации, а именно микроорганизма (ENZA-13). Микроорганизм был впервые выделен при отборе образцов при работах, связанных с орошением, для выращивания на этаноле в качестве единственного источника углерода. Последующий отбор организмов на пластинах, содержащих этилкетопрофен, показал, что в процессе роста наблюдается интенсивное расщепление нерастворимого в воде этилкетопрофена вокруг колоний ENZA-13 (что указывает на возможный гидролиз эфира). Последующий выбор жидкой среды показал, что ENZA-13 проявляет значительно большую активность при гидролизе этилкетопрофена, чем другие культуры.
Показано, что этот штамм имеет ряд особенностей при получении (S)-кетопрофена из рацемического сложного эфира кетопрофена, а именно топрофена, а именно:
(а) он очень быстро гидролизует сложные эфиры кетопрофена с короткой углеродной цепью;
(б) он образует кислотную форму (S)-кетопрофена из рацемического этилкетопрофена с очень высокой энантиоселективностью так, что при низких уровнях конверсии может быть получен (S)-кетопрофен с чистотой более 95%, при степени превращения, приближающейся к 50% (40 - 50%), оптическая чистота снижается до 90%. Эта селективность достигается без необходимой очистки от посторонних активностей (что может быть весьма дорогим) или воспроизведения нужной активности путем клонирования;
(в) при изменении субстрата от этилкетопрофена к метилкетопрофену можно менять селективность биокатализа так, что вместо (S)-энантиомера будет предпочтительно накапливаться кислотная форма (R)-кетопрофена. Так, при осуществлении биотрансформации более, чем на 50%, (S)-кетопрофен может быть получен в виде метилового эфира;
(г) Организм быстро растет при комнатной температуре со временем удвоения от 1,5 до 2 ч, что позволяет легко и экономично осуществить биокатализ.
(а) он очень быстро гидролизует сложные эфиры кетопрофена с короткой углеродной цепью;
(б) он образует кислотную форму (S)-кетопрофена из рацемического этилкетопрофена с очень высокой энантиоселективностью так, что при низких уровнях конверсии может быть получен (S)-кетопрофен с чистотой более 95%, при степени превращения, приближающейся к 50% (40 - 50%), оптическая чистота снижается до 90%. Эта селективность достигается без необходимой очистки от посторонних активностей (что может быть весьма дорогим) или воспроизведения нужной активности путем клонирования;
(в) при изменении субстрата от этилкетопрофена к метилкетопрофену можно менять селективность биокатализа так, что вместо (S)-энантиомера будет предпочтительно накапливаться кислотная форма (R)-кетопрофена. Так, при осуществлении биотрансформации более, чем на 50%, (S)-кетопрофен может быть получен в виде метилового эфира;
(г) Организм быстро растет при комнатной температуре со временем удвоения от 1,5 до 2 ч, что позволяет легко и экономично осуществить биокатализ.
Выделенный штамм идентифицирован в Centralbureau Voor Schimmelcultures (CBS) в Голландии как Trichosporon Laibacchii (Windisch), который также классифицируют как Endomyces laibacchii. От CBS могут быть получены несколько альтернативных штаммов этого образца. Эти штаммы, например, CBS 5791, 5790, 5381 и 2495 получены и подвергнуты тем же испытаниям, что и культура ENZA-13. В ходе проведения этих испытаний показано, что некоторые из указанных штаммов обладают при проведении биотрансформаций почти такой же активностью, что и культура ENZA-13. В каталоге CBS1990 года (32-е издание) эти штаммы классифицированы как Trichosporon beigelii, однако они затем переименованы CBS в Endomyces laibacchii. Изученные штаммы T. beigelii показывают при испытаниях селективность, аналогичную ENZA-13, однако они не обладают такой же активностью.
ENZA-13 депонирован 20-го августа 1991 г. в Международном институте микологии (1М1 Кью, Великобритания) на условиях Будапештского соглашения и получил регистрационный номер 348917.
Далее представлены следующие характеристики депонированного ENZA-13:
Ферментативное выращивание:
глюкоза - -ve
Аэробное выращивание:
D-глюкоза - +ve
D-галактоза - +ve
L-сорбоза - +ve
D-глюкозамин - +ve
D-рибоза - +ve
D-ксилоза - +ve
L-арабиноза - +ve
D-арабиноза - -ve
L-рамноза - +ve
сахароза - +ve
мальтоза - +ve
альфа-альфа-трегалоза - +ve
метил-альфа-глюкозид - +ve
целлобиоза - +ve
салицин - +ve
арбутин - +ve
мелибиоза - +ve
лактоза - +ve
раффиноза - +ve
мелезитоза - +ve
инулин - -ve
растворимый крахмал - +ve
глицерин - +ve
мезо-эритрит - -ve
рибит - -ve
ксилит - -ve
L-арабинит - +ve
D-глюцит - +ve
D-маннит - -ve
галактит - +ve
миоинозит - +ve
глюконолактон - -ve
D-глюконат - +ve
D-глюкуронат - +ve
D-галактуронат - -ve
дилактат - +ve
сукцинат - +ve
цитрат - +ve
метанол - -ve
этанол - +ve
Использование источников азота:
нитрат - -ve на нитрате
нитрит - -ve
этиламин - +ve
L-лизин - +ve
кадаверин - +ve
креатин - -ve
креатинид - +ve
Выращивание: +ve при 25oC, 30oC; -ve при 35oC, 37oC
Внешний вид: колонии - крем, пленкообразные; филаменты - хорошо развитые pseudohyphae septae hyphae arthrocandida; asci - нет; teliospores/basidia - нет.
Ферментативное выращивание:
глюкоза - -ve
Аэробное выращивание:
D-глюкоза - +ve
D-галактоза - +ve
L-сорбоза - +ve
D-глюкозамин - +ve
D-рибоза - +ve
D-ксилоза - +ve
L-арабиноза - +ve
D-арабиноза - -ve
L-рамноза - +ve
сахароза - +ve
мальтоза - +ve
альфа-альфа-трегалоза - +ve
метил-альфа-глюкозид - +ve
целлобиоза - +ve
салицин - +ve
арбутин - +ve
мелибиоза - +ve
лактоза - +ve
раффиноза - +ve
мелезитоза - +ve
инулин - -ve
растворимый крахмал - +ve
глицерин - +ve
мезо-эритрит - -ve
рибит - -ve
ксилит - -ve
L-арабинит - +ve
D-глюцит - +ve
D-маннит - -ve
галактит - +ve
миоинозит - +ve
глюконолактон - -ve
D-глюконат - +ve
D-глюкуронат - +ve
D-галактуронат - -ve
дилактат - +ve
сукцинат - +ve
цитрат - +ve
метанол - -ve
этанол - +ve
Использование источников азота:
нитрат - -ve на нитрате
нитрит - -ve
этиламин - +ve
L-лизин - +ve
кадаверин - +ve
креатин - -ve
креатинид - +ve
Выращивание: +ve при 25oC, 30oC; -ve при 35oC, 37oC
Внешний вид: колонии - крем, пленкообразные; филаменты - хорошо развитые pseudohyphae septae hyphae arthrocandida; asci - нет; teliospores/basidia - нет.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами. В примерах 1 - 5 используют приведенную в табл. 1 среду (в которой получают (S)-кетопрофен).
Кислотность всех сред перед помещением в автоклав доводят до 6,5 с помощью едкого натра. Все среды перед внесением посевного материала подвергают термической стерилизации при температуре 121oC в течение от 20 до 40 мин. Глюкозу в виде 50%-ного раствора стерилизуют отдельно.
Смесь для биотрансформации включает:
фосфат натрия - 100 мМ, pH 6,5
дрожжевой экстракт - 10 г/л
твин 80 - 5 г/л
пеногаситель (XFO 371) - 1 мл/л
В смесь для биотрансформации добавляют этиловый эфир кетопрофена так, что конечная концентрация после прибавления посевного материала составляет 50 г/л. Среду для проведения биотрансформации подвергают термической стерилизации при 121oC в течение 20 - 40 мин; этиловый эфир кетопрофена подвергают термической стерилизации отдельно.
фосфат натрия - 100 мМ, pH 6,5
дрожжевой экстракт - 10 г/л
твин 80 - 5 г/л
пеногаситель (XFO 371) - 1 мл/л
В смесь для биотрансформации добавляют этиловый эфир кетопрофена так, что конечная концентрация после прибавления посевного материала составляет 50 г/л. Среду для проведения биотрансформации подвергают термической стерилизации при 121oC в течение 20 - 40 мин; этиловый эфир кетопрофена подвергают термической стерилизации отдельно.
Раствор микроэлементов имеет следующий состав:
CaCl2 • 2H2O - 3,57 г/л
ZnO - 2,0 г/л
CuCl2 • 2H2O - 0,85 г/л
Na2MoO4 • 2H2O - 4,8 г/л
MnCl2 • 4H2O - 2,0 г/л
FeCl2 • 6H2O - 5,4 г/л
H3BO3 - 0,3 г/л
CoCl2 • 6H2O - 2,4 г/л
HCl - 250 мл/л
Пример 1. Клетки (ENZA-13) высевают на пластины агара YM (Difco) и выдерживают при температуре 23oC в течение 2 дн. Колонию затем переносят в 75 мл посевной среды, помещенной в колбу емкостью 500 мл, и при встряхивании выращивают аэробно при температуре 23oC в течение 24 ч. Затем культуру переносят в ферментатор емкостью 2,8 л, содержащий 1,5 л среды выращивания с температурой 23oC. Выращивание проводят в течение 10 ч при эффективной аэрации и перемешивании для создания аэробных условий. 150 мл полученной культуры переносят в сосуд емкостью 2,8 л, содержащий 1,35 л среды для проведения биотрансформации. Во время проведения биотрансформации осуществляют перемешивание со скоростью 1200 об/мин и аэрируют со скоростью 0,5 объем/объем в минуту. Температуру поддерживают на уровне 23oC. Проба, взятая через 20 ч после начала процесса, показывает концентрацию кетопрофена 7 г/л с чистотой (S)-кетопрофена на уровне 98%. Проба, взятая через 73 ч после начала биотрансформации, показывает концентрацию кетопрофена 23,3 г/л с чистотой (S)-кетопрофена на уровне 94%.
CaCl2 • 2H2O - 3,57 г/л
ZnO - 2,0 г/л
CuCl2 • 2H2O - 0,85 г/л
Na2MoO4 • 2H2O - 4,8 г/л
MnCl2 • 4H2O - 2,0 г/л
FeCl2 • 6H2O - 5,4 г/л
H3BO3 - 0,3 г/л
CoCl2 • 6H2O - 2,4 г/л
HCl - 250 мл/л
Пример 1. Клетки (ENZA-13) высевают на пластины агара YM (Difco) и выдерживают при температуре 23oC в течение 2 дн. Колонию затем переносят в 75 мл посевной среды, помещенной в колбу емкостью 500 мл, и при встряхивании выращивают аэробно при температуре 23oC в течение 24 ч. Затем культуру переносят в ферментатор емкостью 2,8 л, содержащий 1,5 л среды выращивания с температурой 23oC. Выращивание проводят в течение 10 ч при эффективной аэрации и перемешивании для создания аэробных условий. 150 мл полученной культуры переносят в сосуд емкостью 2,8 л, содержащий 1,35 л среды для проведения биотрансформации. Во время проведения биотрансформации осуществляют перемешивание со скоростью 1200 об/мин и аэрируют со скоростью 0,5 объем/объем в минуту. Температуру поддерживают на уровне 23oC. Проба, взятая через 20 ч после начала процесса, показывает концентрацию кетопрофена 7 г/л с чистотой (S)-кетопрофена на уровне 98%. Проба, взятая через 73 ч после начала биотрансформации, показывает концентрацию кетопрофена 23,3 г/л с чистотой (S)-кетопрофена на уровне 94%.
Пример 2. Осуществляемые операции аналогичны описанным в Примере 1, но проводятся в большем масштабе.
Клетки высевают на пластинах агара YM (Difco) и выдерживают в течение 2 дн. Колонии переносят в каждую из четырех конических колб емкостью 1 л, содержащих по 250 мл посевной среды. После выращивания в течение 1 дн содержимое всех колб переносят в ферментатор емкостью 15 л, содержащий 9 л среды выращивания. После выращивания в течение 10 ч в аэробных условиях 5 л бульона с культурой переносят в сосуд емкостью 75 л, содержащий 45 л среды для проведения биотрансформации. Для обеспечения аэробных условий и хорошего перемешения скорость подачи воздуха составляет 0,2 объем/объем в минуту, а скорость перемешивания 500 об/мин. Проба, взятая через 71 ч после начала биотрансформации, показывает, что накопилось 17 г/л кетопрофена с чистотой (S)-энантиомера на уровне 93%.
Пример 3. Клетки различных штаммов, которые получены от CBS и приведены в следующей далее таблице, переносят со свежих пластин агара YM в колбы емкостью 250 мл, содержащие по 25 мл среды выращивания без глюкозы. После выращивания в течение 24 ч по 5,0 мл каждой культуры переносят в перемешиваемые колбы емкостью 250 мл, содержащие по 20 мл среды для проведения биотрансформации. Пробы берут после перемешивания при 23oC в течение 72 ч. Результаты приведены в табл. 2.
Пример 4. Влияние температуры. Исследования показывают, что при температурах 23 и 26oC поведение биокатализатора в процессе биотрансформации сходное. При 20oC скорость процесса биотрансформации аналогична скорости трансформации при 23oC, однако энантиоселективность биокатализатора падает так, что при проведении стандартного процесса биотрансформации (Пример 1) чистота кислотной формы составляет через 70 ч лишь 88% (S)-кетопрофена, а не 93 - 94%. При 30oC степень конверсии уменьшается на 40 - 50%; энантиоселективность также неудовлетворительная.
Пример 5. Влияние pH. Активность катализатора наблюдается в интервале от 4,5 до 7,5 (и наверняка при больших значениях, однако это не исследовалось). Селективность биокатализатора значительно снижается при pH меньше 4,5. Оптимальное значение pH составляет от 6,5 до 7,5.
Так при использовании стандартной методики (Пример 1) с контролируемым pH 4,5 проба через 66 ч показывает содержание продукта 8 г/л (чистота (S)-кетопрофена составляет 91%); при pH 6,5 через 66 ч - 24 г/л (чистота (S)-кетопрофена составляет 94%); при pH 7,5 через 66 ч - 23 г/л (чистота (S)-кетопрофена составляет 80%);
Пример 6. Влияние длины алкильной цепи. Клетки ENZA-13 выращивают в среде, содержащей 25 г/л дрожжевого экстракта, 10 г/л дигидрофосфата калия, 0,5 г/л гептагидрата сульфата магния, 2 г/л сульфата аммония и 1 мл/л раствора микроэлементов. (CaCl2 • 2H2O - 53 г/л, FeSO4 • 7H2O - 2 г/л, MnSO4 • H2O - 100 мг/л, ZnSO4 • 7H2O - 200 мг/л, CuSO4 - 40 мг/л, CoCl2 • 6H2O - 60 мг/л, NaMoO4 - 40 мг/л, H3BO3 - 30 мг/л), при этом pH доводят до 6,5 с помощью едкого натра. После выращивания в течение 12 ч культуры переносят в количестве 20% в перемешиваемые колбы емкостью 250 мл, содержащие по 25 мл посевной среды, но разные эфиры кетопрофена, которые прибавляют до получения конечной концентрации 10 г/л. Определяют скорость протекания процесса биотрансформации и энантиомерную чистоту выделяемого кетопрофена. Получены результаты, приведенные в табл.3.
Пример 6. Влияние длины алкильной цепи. Клетки ENZA-13 выращивают в среде, содержащей 25 г/л дрожжевого экстракта, 10 г/л дигидрофосфата калия, 0,5 г/л гептагидрата сульфата магния, 2 г/л сульфата аммония и 1 мл/л раствора микроэлементов. (CaCl2 • 2H2O - 53 г/л, FeSO4 • 7H2O - 2 г/л, MnSO4 • H2O - 100 мг/л, ZnSO4 • 7H2O - 200 мг/л, CuSO4 - 40 мг/л, CoCl2 • 6H2O - 60 мг/л, NaMoO4 - 40 мг/л, H3BO3 - 30 мг/л), при этом pH доводят до 6,5 с помощью едкого натра. После выращивания в течение 12 ч культуры переносят в количестве 20% в перемешиваемые колбы емкостью 250 мл, содержащие по 25 мл посевной среды, но разные эфиры кетопрофена, которые прибавляют до получения конечной концентрации 10 г/л. Определяют скорость протекания процесса биотрансформации и энантиомерную чистоту выделяемого кетопрофена. Получены результаты, приведенные в табл.3.
Claims (7)
1. Способ получения (S)-кетопрофена из рацемической смеси энантиомеров сложного эфира кетопрофена, отличающийся тем, что рацемическую смесь энантиомеров сложного эфира кетопрофена подвергают взаимодействию с микроорганизмом Trichosporon laibacchii.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют микроорганизм, характеризующийся способностью селективно превращать рацемическую смесь энантиомеров сложного эфира кетопрофена в (S)-кетопрофен.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что в качестве сложного эфира кетопрофена используют этиловый эфир.
4. Способ по п. 2 или 3, отличающийся тем, что в качестве сложного эфира кетопрофена используют метиловый эфир.
5. Способ по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что используют микроорганизм штамма Trichosporon laibacchii IMICC 348917.
6. Способ по любому из пп. 1-5, отличающийся тем, что процесс ведут при pH 4,5-7,5.
7. Способ по любому из пп. 1-6, отличающийся тем, что процесс ведут при температуре 20-30oC.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB919118149A GB9118149D0 (en) | 1991-08-22 | 1991-08-22 | Araylalkanoic acid resolution |
| GB9118149.5 | 1991-08-22 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU94015601A RU94015601A (ru) | 1996-07-10 |
| RU2119955C1 true RU2119955C1 (ru) | 1998-10-10 |
Family
ID=10700381
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU94015601A RU2119955C1 (ru) | 1991-08-22 | 1992-08-19 | Способ получения (s)-кетопрофена |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5516690A (ru) |
| EP (1) | EP0599967B1 (ru) |
| JP (1) | JP3174328B2 (ru) |
| KR (1) | KR100240696B1 (ru) |
| AT (1) | ATE161053T1 (ru) |
| AU (1) | AU662556B2 (ru) |
| BG (1) | BG62056B1 (ru) |
| CA (1) | CA2116003C (ru) |
| CZ (1) | CZ283141B6 (ru) |
| DE (2) | DE69223516T2 (ru) |
| DK (1) | DK0599967T3 (ru) |
| ES (1) | ES2058047T3 (ru) |
| FI (1) | FI103807B (ru) |
| GB (1) | GB9118149D0 (ru) |
| GR (2) | GR940300068T1 (ru) |
| HU (1) | HU213748B (ru) |
| NO (1) | NO315750B1 (ru) |
| RO (1) | RO115970B1 (ru) |
| RU (1) | RU2119955C1 (ru) |
| SK (1) | SK280179B6 (ru) |
| UA (1) | UA27817C2 (ru) |
| WO (1) | WO1993004189A1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2290758C1 (ru) * | 2005-04-25 | 2006-12-27 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Воронежский научно-исследовательский институт связи" | Способ передачи дискретной информации в радиолинии со скачкообразной перестройкой рабочей частоты |
| RU2364442C1 (ru) * | 2008-06-30 | 2009-08-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тверской государственный технический университет" | Способ приготовления модифицированного платинового катализатора для энантиоселективного гидрирования сложных эфиров альфа-кетокарбоновых кислот |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9304351D0 (en) * | 1993-03-03 | 1993-04-21 | Chiros Ltd | Arylalkanoic acid resolution and microorganisms for use therein |
| US5912164A (en) * | 1993-03-03 | 1999-06-15 | Laboratorios Menarini S.A. | Stereoselective hydrolysis of chiral carboxylic acid esters using esterase from ophiostoma or ceratocystis |
| GB9304256D0 (en) * | 1993-03-03 | 1993-04-21 | Chiros Ltd | Arylalkanoic acid resolution |
| US6242243B1 (en) * | 1998-03-30 | 2001-06-05 | Council Of Scientific & Industrial Research | Trichosporon sp RRLY-15 (DSM 11829) and its use to prepare S(+)-6-methoxy-methyl-2-naphthalene acetic acid |
| US20030059903A1 (en) * | 2001-04-03 | 2003-03-27 | Degussa Ag | Process for the production of L-amino acids using strains of the family enterobacteriaceae that contain an attenuated aceA gene |
| US7223582B2 (en) * | 2002-01-17 | 2007-05-29 | Korea Research Institute Of Bioscience And Biotechnology | Esterase, its DNA, its overexpression and production of optically active aryl propionic acids using the same |
| CN105848638A (zh) * | 2013-12-16 | 2016-08-10 | 硕腾服务有限责任公司 | 长效酮洛芬组合物 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0197474B1 (en) * | 1985-04-01 | 1991-07-10 | Kanegafuchi Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Process for preparing optically active indoline-2-carboxylic acid |
| US5322791A (en) * | 1985-12-20 | 1994-06-21 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Process for preparing (S)-α-methylarylacetic acids |
| KR880007428A (ko) * | 1985-12-20 | 1988-08-27 | 존 알. 파이크 | (S)-α-메틸 아릴 아세트산의 제조방법 |
| US4857469A (en) * | 1987-04-09 | 1989-08-15 | Toyo Jozo Co., Ltd. | Process for preparing optically active mercapto compound |
| US5108916A (en) * | 1989-06-05 | 1992-04-28 | Rhone-Poulenc Rorer, S.A. | Process for stereoselectively hydrolyzing, transesterifying or esterifying with immobilized isozyme of lipase from candida rugosa |
| WO1991013163A1 (en) * | 1990-02-26 | 1991-09-05 | Rhone-Poulenc Inc. | Stereospecific resolution by hydrolysis of esters of 2-arylpropionic acids by liver enzymes |
-
1991
- 1991-08-22 GB GB919118149A patent/GB9118149D0/en active Pending
-
1992
- 1992-08-19 EP EP92918204A patent/EP0599967B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-19 US US08/193,004 patent/US5516690A/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-19 ES ES92918204T patent/ES2058047T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-19 SK SK176-94A patent/SK280179B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1992-08-19 DE DE69223516T patent/DE69223516T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-19 HU HU9400462A patent/HU213748B/hu unknown
- 1992-08-19 DK DK92918204T patent/DK0599967T3/da active
- 1992-08-19 KR KR1019940700492A patent/KR100240696B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-19 AT AT92918204T patent/ATE161053T1/de active
- 1992-08-19 CZ CZ94364A patent/CZ283141B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1992-08-19 CA CA002116003A patent/CA2116003C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-19 DE DE0599967T patent/DE599967T1/de active Pending
- 1992-08-19 JP JP51163292A patent/JP3174328B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-19 RO RO94-00247A patent/RO115970B1/ro unknown
- 1992-08-19 UA UA94005318A patent/UA27817C2/uk unknown
- 1992-08-19 WO PCT/EP1992/001892 patent/WO1993004189A1/en not_active Ceased
- 1992-08-19 AU AU24685/92A patent/AU662556B2/en not_active Expired
- 1992-08-19 RU RU94015601A patent/RU2119955C1/ru active
-
1994
- 1994-02-16 BG BG98484A patent/BG62056B1/bg unknown
- 1994-02-18 NO NO19940570A patent/NO315750B1/no not_active IP Right Cessation
- 1994-02-18 FI FI940792A patent/FI103807B/fi not_active IP Right Cessation
- 1994-10-31 GR GR940300068T patent/GR940300068T1/el unknown
-
1998
- 1998-03-06 GR GR980400474T patent/GR3026303T3/el unknown
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| G. Comisso, M. Mihalic etc... Enantioselective synthesis and absolute configuration of (+)-α (3-benzoylphenyl) propionic acid, Gazzetta chimica Italiana, 110, 1980, p. 123-127. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2290758C1 (ru) * | 2005-04-25 | 2006-12-27 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Воронежский научно-исследовательский институт связи" | Способ передачи дискретной информации в радиолинии со скачкообразной перестройкой рабочей частоты |
| RU2364442C1 (ru) * | 2008-06-30 | 2009-08-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Тверской государственный технический университет" | Способ приготовления модифицированного платинового катализатора для энантиоселективного гидрирования сложных эфиров альфа-кетокарбоновых кислот |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0195717B1 (en) | Process for the biotechnological preparation of optically active alpha-arylalkanoic acids | |
| EP0227078A1 (en) | Process for preparing (S)-alpha-methylarylacetic acids | |
| RU2119955C1 (ru) | Способ получения (s)-кетопрофена | |
| EP0264457A1 (en) | Process for preparing optically active cyclopropanecarboxylic acids | |
| KR0136574B1 (ko) | 발효에 의한 2-(4-히드록시페녹시)프로피온산의 제조 방법 | |
| US5043274A (en) | Process for producing an optically active 2-arylpropionic acid | |
| AU677805B2 (en) | Enantioselective production of chiral carboxylic acids | |
| JPH04234991A (ja) | 新規微生物 | |
| US5846792A (en) | Method of producing (R)-2-amino-1-phenylethanol and opticaly active phenylserine and their halogen substituted products using tyrosine decarboxylase | |
| EP0952227B1 (en) | A bio-resolution process | |
| JPH02303499A (ja) | ハロゲノプロピオン酸エステルの酵素による鏡像異性選択的分離方法 | |
| EP0783039B1 (en) | Process for producing optically active 2-alkoxycyclohexanol derivatives | |
| JPH04252189A (ja) | ベンゼンジカルボン酸モノエステルまたはその誘導体の製造方法 | |
| JPH05192187A (ja) | 光学活性２−ヒドロキシシクロアルカンカルボン酸エステル類の製造法 | |
| KR20010085642A (ko) | 미생물을 이용하여 광학적으로 활성인 3-히드록시피롤리딘유도체를 제조하는 방법 | |
| JPS59210892A (ja) | 光学活性第一菊酸の生化学的製造法 | |
| JPH0738792B2 (ja) | プロトカテキュ酸の製造方法 | |
| CA2303697A1 (en) | An optical resolution of 4-halogeno-3-alkanoyloxybutyronitrile | |
| JPH05103693A (ja) | 光学活性アルコールの製造方法 | |
| JPH07327692A (ja) | 光学活性β−ヒドロキシカルボン酸及びその対掌体エステルの製造方法 | |
| JP2000300289A (ja) | （ｓ）−イブプロフェンの製造方法 | |
| JPH0378102B2 (ru) |