RU2012112067A

RU2012112067A - Терапевтические dll4-связующие белки

Info

Publication number: RU2012112067A
Application number: RU2012112067/10A
Authority: RU
Inventors: Лоренцо БЕНАТУИЛ; Эрвин Р. БОГХАРТ; Цзицзе ГУ; Мария ХАРРИС; Джонатан А. ХИКСОН; Чунг-минг ХСИЕХ; Юлия КУЦКОВА; Инчунь ЛИ; Чжихун ЛЮ; Сьюзан МОРГАН-ЛЭПП
Original assignee: Эбботт Лэборетриз
Priority date: 2009-08-29
Filing date: 2010-08-27
Publication date: 2013-10-10
Also published as: DOP2012000052A; CR20120105A; AR077998A1; CO6612215A2; US9469688B2; CN102741288B; US20110117079A1; TW201113038A; TWI465250B; AU2015202977A1; CL2012000520A1; US20180371071A1; US20160060332A1; US9132190B2; CA2952742A1; IL218401A; CA2771575A1; AU2010286518B2; IL218401A0; UY32869A

Abstract

1. Связующий белок, содержащий антигенсвязующий домен, способный связываться с человеческим DLL4, где указанный антигенсвязующий домен содержит по меньшей мере одну или несколько CDR, выбранных из группы, состоящей из:CDR-H1: X-X-X-X-X-X-X(SEQ ID NO: 99),где Xпредставляет собой S или N;Xпредставляет собой S, G или N;Xпредставляет собой S, N, T, G или R;Xпредставляет собой Y;Xпредставляет собой Y или H;Xпредставляет собой W иXпредставляет собой G;CDR-H2: X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X(SEQ ID NO: 100),где Xпредставляет собой D;Xпредставляет собой I;Xпредставляет собой Y, N или S;Xпредставляет собой Y;Xпредставляет собой T, N, A, I, S или R;Xпредставляет собой G;Xпредставляет собой S, N, T или G;Xпредставляет собой T;Xпредставляет собой Y;Xпредставляет собой Y;Xпредставляет собой N;Xпредставляет собой P;Xпредставляет собой S;Xпредставляет собой L;Xпредставляет собой K иXпредставляет собой S, N, D или G;CDR-H3: X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X(SEQ ID NO: 101),где Xпредставляет собой E, Y, F, Q, W, L или A;Xпредставляет собой D, A, S, G, V, E или N;Xпредставляет собой V, M, L, P или A;Xпредставляет собой I, A, P, R, S, K, Q, V, G, M или E;Xпредставляет собой L, Y, F или M;Xпредставляет собой R, G, S, Q или A;Xпредставляет собой G;Xпредставляет собой G, A или S;Xпредставляет собой S, A, L, V, R или G;Xпредставляет собой D иXпредставляет собой Y, D, S, N, H, E, R, L, P, C, I, M, T, Q или K;CDR-L1: X-X-X-X-X-X-X-X-X-X-X(SEQ ID NO: 102),где Xпредставляет собой S;Xпредставляет собой G;Xпредставляет собой Q, E или D;Xпредставляет собой R, S, G, M, K, L или T;Xпредставляет собой L;Xпредставляет собой G;Xпредставляет собой D или E;Xпредставляет собой K;Xпредставляет собой Y;Xпредставляет собой A или V иXпредставляет собой S;CDR-L2: X-X-X-X-X-X-X(SEQ ID NO: 103),где Xпредставляет собой E или Q;Xпредставляет собой D;Xпредставляет собой S, L, T, A, E или F;Xпредставляет собой K, T, Е, N, Q, S и

Claims

1. Связующий белок, содержащий антигенсвязующий домен, способный связываться с человеческим DLL4, где указанный антигенсвязующий домен содержит по меньшей мере одну или несколько CDR, выбранных из группы, состоящей из:

CDR-H1: X₁-X₂-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇ (SEQ ID NO: 99),

где X₁ представляет собой S или N;

X₂ представляет собой S, G или N;

X₃ представляет собой S, N, T, G или R;

X₄ представляет собой Y;

X₅ представляет собой Y или H;

X₆ представляет собой W и

X₇ представляет собой G;

CDR-H2: X₁-X₂-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇-X₈-X₉-X₁₀-X₁₁-X₁₂-X₁₃-X₁₄-X₁₅-X₁₆ (SEQ ID NO: 100),

где X₁ представляет собой D;

X₂ представляет собой I;

X₃ представляет собой Y, N или S;

X₄ представляет собой Y;

X₅ представляет собой T, N, A, I, S или R;

X₆ представляет собой G;

X₇ представляет собой S, N, T или G;

X₈ представляет собой T;

X₉представляет собой Y;

X₁₀ представляет собой Y;

X₁₁ представляет собой N;

X₁₂ представляет собой P;

X₁₃ представляет собой S;

X₁₄ представляет собой L;

X₁₅ представляет собой K и

X₁₆ представляет собой S, N, D или G;

CDR-H3: X₁-X₂-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇-X₈-X₉-X₁₀-X₁₁ (SEQ ID NO: 101),

где X₁ представляет собой E, Y, F, Q, W, L или A;

X₂ представляет собой D, A, S, G, V, E или N;

X₃ представляет собой V, M, L, P или A;

X₄ представляет собой I, A, P, R, S, K, Q, V, G, M или E;

X₅ представляет собой L, Y, F или M;

X₆ представляет собой R, G, S, Q или A;

X₇ представляет собой G;

X₈ представляет собой G, A или S;

X₉ представляет собой S, A, L, V, R или G;

X₁₀ представляет собой D и

X₁₁ представляет собой Y, D, S, N, H, E, R, L, P, C, I, M, T, Q или K;

CDR-L1: X₁-X₂-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇-X₈-X₉-X₁₀-X₁₁ (SEQ ID NO: 102),

где X₁ представляет собой S;

X₂ представляет собой G;

X₃ представляет собой Q, E или D;

X₄ представляет собой R, S, G, M, K, L или T;

X₅ представляет собой L;

X₆ представляет собой G;

X₇ представляет собой D или E;

X₈ представляет собой K;

X₉ представляет собой Y;

X₁₀ представляет собой A или V и

X₁₁ представляет собой S;

CDR-L2: X₁-X₂-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇ (SEQ ID NO: 103),

где X₁ представляет собой E или Q;

X₂ представляет собой D;

X₃ представляет собой S, L, T, A, E или F;

X₄ представляет собой K, T, Е, N, Q, S или M;

X₅ представляет собой R;

X₆ представляет собой P и

X₇ представляет собой S;

и

CDR-L3: X₁-X₂-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇-X₈-X₉ (SEQ ID NO: 104),

где X₁ представляет собой Q;

X₂ представляет собой A;

X₃ представляет собой W;

X₄ представляет собой D;

X₅ представляет собой R, S, M, E, N, G или K;

X₆ представляет собой D или E;

X₇ представляет собой T, V, A, S или M;

X₈ представляет собой G, A или C и

X₉ представляет собой V.

2. Связующий белок по п.1, где указанная по меньшей мере одна CDR содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

остатков 31-37 SEQ ID NO: 1 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 1 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 1 (CDR-H3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 111 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 111 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 111 (CDR-L3);

SEQ ID NO: 117 (CDR-H1); SEQ ID NO: 118 (CDR-H2); SEQ ID NO: 119 (CDR-H3); SEQ ID NO: 121 (CDR-H1); SEQ ID NO: 122 (CDR-H2); SEQ ID NO: 123 (CDR-H3); SEQ ID NO: 125 (CDR-H1); SEQ ID NO: 126 (CDR-H2); SEQ ID NO: 127 (CDR-H3); SEQ ID NO: 129 (CDR-H1); SEQ ID NO: 130 (CDR-H2); SEQ ID NO: 131 (CDR-H3); SEQ ID NO: 133 (CDR-H1); SEQ ID NO: 134 (CDR-H2); SEQ ID NO: 135 (CDR-H3); SEQ ID NO: 137 (CDR-H1); SEQ ID NO: 138 (CDR-H2); SEQ ID NO: 139 (CDR-H3); SEQ ID NO: 141 (CDR-H1); SEQ ID NO: 142 (CDR-H2); SEQ ID NO: 143 (CDR-H3); SEQ ID NO: 145 (CDR-H1); SEQ ID NO: 146 (CDR-H2); SEQ ID NO: 147 (CDR-H3); SEQ ID NO: 149 (CDR-H1); SEQ ID NO: 150 (CDR-H2); SEQ ID NO: 151 (CDR-H3); SEQ ID NO: 153 (CDR-H1); SEQ ID NO: 154 (CDR-H2); SEQ ID NO: 155 (CDR-H3); SEQ ID NO: 157 (CDR-HI); SEQ ID NO: 158 (CDR-H2); SEQ ID NO: 159 (CDR-H3); SEQ ID NO: 161 (CDR-H1); SEQ ID NO: 162 (CDR-H2); SEQ ID NO: 163 (CDR-H3); SEQ ID NO: 165 (CDR-H1); SEQ ID NO: 166 (CDR-H2); SEQ ID NO: 167 (CDR-H3); SEQ ID NO: 169 (CDR-H1); SEQ ID NO: 170 (CDR-H2); SEQ ID NO: 171 (CDR-H3); SEQ ID NO: 173 (CDR-H1); SEQ ID NO: 174 (CDR-H2); SEQ ID NO: 175 (CDR-H3); SEQ ID NO: 177 (CDR-H1); SEQ ID NO: 178 (CDR-H2); SEQ ID NO: 179 (CDR-H3); SEQ ID NO: 181 (CDR-H1); SEQ ID NO: 182 (CDR-H2); SEQ ID NO: 183 (CDR-H3); SEQ ID NO: 185 (CDR-H1); SEQ ID NO: 186 (CDR-H2); SEQ ID NO: 187 (CDR-H3); SEQ ID NO: 189 (CDR-H1); SEQ ID NO: 190 (CDR-H2); SEQ ID NO: 191 (CDR-H3); SEQ ID NO: 193 (CDR-H1); SEQ ID NO: 194 (CDR-H2); SEQ ID NO: 195 (CDR-H3); SEQ ID NO: 197 (CDR-H1); SEQ ID NO: 198 (CDR-H2); SEQ ID NO: 199 (CDR-H3); SEQ ID NO: 201 (CDR-H1); SEQ ID NO: 202 (CDR-H2); SEQ ID NO: 203 (CDR-H3); SEQ ID NO: 205 (CDR-H1); SEQ ID NO: 206 (CDR-H2); SEQ ID NO: 207 (CDR-H3); SEQ ID NO: 209 (CDR-H1); SEQ ID NO: 210 (CDR-H2); SEQ ID NO: 211 (CDR-H3); SEQ ID NO: 213 (CDR-H1); SEQ ID NO: 214 (CDR-H2); SEQ ID NO: 215 (CDR-H3); SEQ ID NO: 217 (CDR-L1); SEQ ID NO: 218 (CDR-L2); SEQ ID NO: 219 (CDR-L3); SEQ ID NO: 221 (CDR-L1); SEQ ID NO: 222 (CDR-L2); SEQ ID NO: 223 (CDR-L3); SEQ ID NO: 225 (CDR-L1); SEQ ID NO: 226 (CDR-L2); SEQ ID NO: 227 (CDR-L3); SEQ ID NO: 229 (CDR-L1); SEQ ID NO: 230 (CDR-L2); SEQ ID NO: 231 (CDR-L3); SEQ ID NO: 233 (CDR-L1); SEQ ID NO: 234 (CDR-L2); SEQ ID NO: 235 (CDR-L3); SEQ ID NO: 237 (CDR-L1); SEQ ID NO: 238 (CDR-L2); SEQ ID NO: 239 (CDR-L3); SEQ ID NO: 241 (CDR-L1); SEQ ID NO: 242 (CDR-L2); SEQ ID NO: 243 (CDR-L3); SEQ ID NO: 245 (CDR-L1); SEQ ID NO: 246 (CDR-L2); SEQ ID NO: 247 (CDR-L3); SEQ ID NO: 249 (CDR-L1); SEQ ID NO: 250 (CDR-L2); SEQ ID NO: 251 (CDR-L3); SEQ ID NO: 253 (CDR-L1); SEQ ID NO: 254 (CDR-L2); SEQ ID NO: 255 (CDR-L3); SEQ ID NO: 257 (CDR-L1); SEQ ID NO: 258 (CDR-L2); SEQ ID NO: 259 (CDR-L3); SEQ ID NO: 261 (CDR-L1); SEQ ID NO: 262 (CDR-L2); SEQ ID NO: 263 (CDR-L3); SEQ ID NO: 265 (CDR-L1); SEQ ID NO: 266 (CDR-L2); SEQ ID NO: 267 (CDR-L3); SEQ ID NO: 269 (CDR-L1); SEQ ID NO: 270 (CDR-L2); SEQ ID NO: 271 (CDR-L3); SEQ ID NO: 273 (CDR-L1); SEQ ID NO: 274 (CDR-L2); SEQ ID NO: 275 (CDR-L3); SEQ ID NO: 277 (CDR-L1); SEQ ID NO: 278 (CDR-L2); SEQ ID NO: 279 (CDR-L3); SEQ ID NO: 281 (CDR-L1); SEQ ID NO: 282 (CDR-L2); SEQ ID NO: 283 (CDR-L3); SEQ ID NO: 285 (CDR-L1); SEQ ID NO: 286 (CDR-L2); SEQ ID NO: 287 (CDR-L3); SEQ ID NO: 289 (CDR-L1); SEQ ID NO: 290 (CDR-L2); SEQ ID NO: 291 (CDR-L3); SEQ ID NO: 293 (CDR-L1); SEQ ID NO: 294 (CDR-L2); SEQ ID NO: 295 (CDR-L3); SEQ ID NO: 297 (CDR-L1); SEQ ID NO: 298 (CDR-L2); SEQ ID NO: 299 (CDR-L3); SEQ ID NO: 301 (CDR-L1); SEQ ID NO: 302 (CDR-L2); SEQ ID NO: 303 (CDR-L3); SEQ ID NO: 305 (CDR-L1); SEQ ID NO: 306 (CDR-L2); SEQ ID NO: 307 (CDR-L3); SEQ ID NO: 309 (CDR-L1); SEQ ID NO: 310 (CDR-L2); SEQ ID NO: 311 (CDR-L3); SEQ ID NO: 313 (CDR-L1); SEQ ID NO: 314 (CDR-L2); SEQ ID NO: 315 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 334 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 334 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 334 (CDR-H3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 335 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 335 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 335 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 336 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 336 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 336 (CDR-H3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 337 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 337 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 337 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 338 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 338 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 338 (CDR-H3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 339 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 339 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 339 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 340 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 340 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 340 (CDR-H3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 341 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 341 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 341 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 342 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 342 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 342 (CDR-H3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 343 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 343 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 343 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 344 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 344 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 344 (CDR-H3);

остатков 24-34 SEQ ID NO: 345 (CDR-L1); остатков 50-56 SEQ ID NO: 345 (CDR-L2); остатков 89-97 SEQ ID NO: 345 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 346 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 346 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 346 (CDR-H3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 347 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 347 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 347 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 348 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 348 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 348 (CDR-H3);

остатков 24-34 SEQ ID NO: 349 (CDR-L1); остатков 50-56 SEQ ID NO: 349 (CDR-L2); остатков 89-97 SEQ ID NO: 349 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 350 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 350 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 350 (CDR-H3);

остатков 24-34 SEQ ID NO: 351 (CDR-L1); остатков 50-56 SEQ ID NO: 351 (CDR-L2); остатков 89-97 SEQ ID NO: 351 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 352 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 352 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 352 (CDR-H3);

остатков 24-34 SEQ ID NO: 353 (CDR-L1); остатков 50-56 SEQ ID NO: 353 (CDR-L2); остатков 89-97 SEQ ID NO: 353 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 354 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 354 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 354 (CDR-H3);

остатков 24-34 SEQ ID NO: 355 (CDR-L1); остатков 50-56 SEQ ID NO: 355 (CDR-L2); остатков 89-97 SEQ ID NO: 355 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 356 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 356 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 356 (CDR-H3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 357 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 357 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 357 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 358 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 358 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 358 (CDR-H3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 359 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 359 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 359 (CDR-L3);

остатков 31-37 SEQ ID NO: 360 (CDR-H1); остатков 52-67 SEQ ID NO: 360 (CDR-H2); остатков 100-110 SEQ ID NO: 360 (CDR-H3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 361 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 361 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 361 (CDR-L3).

3. Связующий белок по п.2, где указанный связующий белок содержит по меньшей мере 3 CDR.

4. Связующий белок по п.3, где указанные по меньшей мере 3 CDR включают набор CDR вариабельного домена, выбранный из группы, состоящей из:

Набора VH E9 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 1

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 1

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 1

Набора VL E9 CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 111

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 111

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 111

Набора VH E9.4 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 117

CDR-H2: SEQ ID NO: 118

CDR-H3: SEQ ID NO: 119

Набора VL E9.4 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 229

CDR-L2: SEQ ID NO: 230

CDR-L3: SEQ ID NO: 231

Набора VH E9.11 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 121

CDR-H2: SEQ ID NO: 122

CDR-H3: SEQ ID NO: 123

Набора VL E9.11 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 233

CDR-L2: SEQ ID NO: 234

CDR-L3: SEQ ID NO: 235

Набора VH E9.14 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 125

CDR-H2: SEQ ID NO: 126

CDR-H3: SEQ ID NO: 127

Набора VL E9.14 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 237

CDR-L2: SEQ ID NO: 238

CDR-L3: SEQ ID NO: 239

Набора VH E9.17 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 129

CDR-H2: SEQ ID NO: 130

CDR-H3: SEQ ID NO: 131

Набора VL E9.17 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 241

CDR-L2: SEQ ID NO: 242

CDR-L3: SEQ ID NO: 243

Набора VH E9.18 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 133

CDR-H2: SEQ ID NO: 134

CDR-H3: SEQ ID NO: 135

Набора VL E9.18 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 245

CDR-L2: SEQ ID NO: 246

CDR-L3: SEQ ID NO: 247

Набора VH E9.19 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 137

CDR-H2: SEQ ID NO: 138

CDR-H3: SEQ ID NO: 139

Набора VL E9.19 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 249

CDR-L2: SEQ ID NO: 250

CDR-L3: SEQ ID NO: 251

Набора VH E9.22 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 141

CDR-H2: SEQ ID NO: 142

CDR-H3: SEQ ID NO: 143

Набора VL E9.22 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 253

CDR-L2: SEQ ID NO: 254

CDR-L3: SEQ ID NO: 255

Набора VH E9.48 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 145

CDR-H2: SEQ ID NO: 146

CDR-H3: SEQ ID NO: 147

Набора VL E9.48 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 257

CDR-L2: SEQ ID NO: 258

CDR-L3: SEQ ID NO: 259

Набора VH E9.65 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 149

CDR-H2: SEQ ID NO: 150

CDR-H3: SEQ ID NO: 151

Набора VL E9.65 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 261

CDR-L2: SEQ ID NO: 262

CDR-L3: SEQ ID NO: 263

Набора VH E9.66 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 153

CDR-H2: SEQ ID NO: 154

CDR-H3: SEQ ID NO: 155

Набора VL E9.66 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 265

CDR-L2: SEQ ID NO: 266

CDR-L3: SEQ ID NO: 267

Набора VH E9.71 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 157

CDR-H2: SEQ ID NO: 158

CDR-H3: SEQ ID NO: 159

Набора VL E9.71 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 269

CDR-L2: SEQ ID NO: 270

CDR-L3: SEQ ID NO: 271

Набора VH E9.13 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 161

CDR-H2: SEQ ID NO: 162

CDR-H3: SEQ ID NO: 163

Набора VL E9.13 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 217

CDR-L2: SEQ ID NO: 218

CDR-L3: SEQ ID NO: 219

Набора VH E9.16 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 165

CDR-H2: SEQ ID NO: 166

CDR-H3: SEQ ID NO: 167

Набора VL E9.16 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 221

CDR-L2: SEQ ID NO: 222

CDR-L3: SEQ ID NO: 223

Набора VH E9.38 CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 169

CDR-H2: SEQ ID NO: 170

CDR-H3: SEQ ID NO: 171

Набора VL E9.38 CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 225

CDR-L2: SEQ ID NO: 226

CDR-L3: SEQ ID NO: 227

Набора VH E9.2В CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 173

CDR-H2: SEQ ID NO: 174

CDR-H3: SEQ ID NO: 175

Набора VL E9.2В CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 273

CDR-L2: SEQ ID NO: 274

CDR-L3: SEQ ID NO: 275

Набора VH E9.1F CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 177

CDR-H2: SEQ ID NO: 178

CDR-H3: SEQ ID NO: 179

Набора VL E9.1F CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 277

CDR-L2: SEQ ID NO: 278

CDR-L3: SEQ ID NO: 279

Набора VH E9.10H CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 181

CDR-H2: SEQ ID NO: 182

CDR-H3: SEQ ID NO: 183

Набора VL E9.10H CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 301

CDR-L2: SEQ ID NO: 302

CDR-L3: SEQ ID NO: 303

Набора VH E9.5E CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 185

CDR-H2: SEQ ID NO: 186

CDR-H3: SEQ ID NO: 187

Набора VL E9.5E CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 293

CDR-L2: SEQ ID NO: 294

CDR-L3: SEQ ID NO: 295

Набора VH E9.10C CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 189

CDR-H2: SEQ ID NO: 190

CDR-H3: SEQ ID NO: 191

Набора VL E9.10C CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 281

CDR-L2: SEQ ID NO: 282

CDR-L3: SEQ ID NO: 283

Набора VH E9.7E CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 193

CDR-H2: SEQ ID NO: 194

CDR-H3: SEQ ID NO: 195

Набора VL E9.7E CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 289

CDR-L2: SEQ ID NO: 290

CDR-L3: SEQ ID NO: 291

Набора VH E9.12B CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 197

CDR-H2: SEQ ID NO: 198

CDR-H3: SEQ ID NO: 199

Набора VL E9.12B CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 297

CDR-L2: SEQ ID NO: 298

CDR-L3: SEQ ID NO: 299

Набора VH E9.10E CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 201

CDR-H2: SEQ ID NO: 202

CDR-H3: SEQ ID NO: 203

Набора VL E9.10E CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 285

CDR-L2: SEQ ID NO: 286

CDR-L3: SEQ ID NO: 287

Набора VH E9.6A CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 205

CDR-H2: SEQ ID NO: 206

CDR-H3: SEQ ID NO: 207

Набора VL E9.6A CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 305

CDR-L2: SEQ ID NO: 306

CDR-L3: SEQ ID NO: 307

Набора VH E9.7A CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 209

CDR-H2: SEQ ID NO: 210

CDR-H3: SEQ ID NO: 211

Набора VL E9.7A CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 309

CDR-L2: SEQ ID NO: 310

CDR-L3: SEQ ID NO: 311

Набора VH E9.8H CDR

CDR-H1: SEQ ID NO: 213

CDR-H2: SEQ ID NO: 214

CDR-H3: SEQ ID NO: 215

Набора VL E9.8H CDR

CDR-L1: SEQ ID NO: 313

CDR-L2: SEQ ID NO: 314

CDR-L3: SEQ ID NO: 315

Набора VH E9.1 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 334

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 334

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 334

Набора VL E9.1 CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 335

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 335

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 335

Набора VH E9-SE1 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 336

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 336

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 336

Набора VL E9-SE1 CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 337

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 337

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 337

Набора VH E9-SE2 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 338

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 338

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 338

Набора VL E9-SE2 CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 339

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 339

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 339

Набора VH E9-SE3 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 340

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 340

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 340

Набора VL E9-SE3 CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 341

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 341

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 341

Набора VH E9-SE4 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 342

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 342

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 342

Набора VL E9-SE4 CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 343

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 343

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 343

Набора VH E9-SE5 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 344

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 344

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 344

Набора VL E9-SE5 CDR

CDR-L1: остатки 24-34 SEQ ID NO: 345

CDR-L2: остатки 50-56 SEQ ID NO: 345

CDR-L3: остатки 89-97 SEQ ID NO: 345

Набора VH E9-SE6 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 346

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 346

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 346

Набора VL E9-SE6 CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 347

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 347

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 347

Набора VH E9-SE7 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 348

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 348

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 348

Набора VL E9-SE7 CDR

CDR-L1: остатки 24-34 SEQ ID NO: 349

CDR-L2: остатки 50-56 SEQ ID NO: 349

CDR-L3: остатки 89-97 SEQ ID NO: 349

Набора VH E9-SE8 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 350

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 350

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 350

Набора VL E9-SE8 CDR

CDR-L1: остатки 24-34 SEQ ID NO: 351

CDR-L2: остатки 50-56 SEQ ID NO: 351

CDR-L3: остатки 89-97 SEQ ID NO: 351

Набора VH E9-FR1 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 352

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 352

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 352

Набора VL E9-FR1 CDR

CDR-L1: остатки 24-34 SEQ ID NO: 353

CDR-L2: остатки 50-56 SEQ ID NO: 353

CDR-L3: остатки 89-97 SEQ ID NO: 353

Набора VH E9-FR2 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 354

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 354

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 354

Набора VL E9-FR2 CDR

CDR-L1: остатки 24-34 SEQ ID NO: 355

CDR-L2: остатки 50-56 SEQ ID NO: 355

CDR-L3: остатки 89-97 SEQ ID NO: 355

Набора VH E9.71 CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 356

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 356

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 356

Набора VL E9.71 CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 357

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 357

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 357

Набора VH E9.71(M) CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 358

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 358

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 358

Набора VL E9.71(M) CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 359

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 359

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 359

Набора VH E9.71(L) CDR

CDR-H1: остатки 31-37 SEQ ID NO: 360

CDR-H2: остатки 52-67 SEQ ID NO: 360

CDR-H3: остатки 100-110 SEQ ID NO: 360

Набора VL E9.71(L) CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 361

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 361

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 361.

5. Связующий белок по п.4, содержащий по меньшей мере два набора CDR вариабельных доменов.

6. Связующий белок по п.5, где указанные по меньшей мере два набора CDR вариабельных доменов выбраны из группы, состоящей из:

набора VH E9 CDR и набора VL E9 CDR,

набора VH E9.4 CDR и набора VL E9.4 CDR,

набора VH E9.11 CDR и набора VL E9.11 CDR,

набора VH E9.14 CDR и набора VL E9.14 CDR,

набора VH E9.17 CDR и набора VL E9.17 CDR,

набора VH E9.18 CDR и набора VL E9.18 CDR,

набора VH E9.19 CDR и набора VL E9.19 CDR,

набора VH E9.22 CDR и набора VL E9.22 CDR,

набора VH E9.48 CDR и набора VL E9.48 CDR,

набора VH E9.65 CDR и набора VL E9.65 CDR,

набора VH E9.66 CDR и набора VL E9.66 CDR,

набора VH E9.71 CDR и набора VL E9.71 CDR,

набора VH E9.13 CDR и набора VL E9.13 CDR,

набора VH E9.16 CDR и набора VL E9.16 CDR,

набора VH E9.38 CDR и набора VL E9.38 CDR,

набора VH E9.2B CDR и набора VL E9.2B CDR,

набора VH E9.1F CDR и набора VL E9.1F CDR,

набора VH E9.10H CDR и набора VL E9.10H CDR,

набора VH E9.5E CDR и набора VL E9.5E CDR,

набора VH E9.10C CDR и набора VL E9.10C CDR,

набора VH E9.7E CDR и набора VL E9.7E CDR,

набора VH E9.12B CDR и набора VL E9.12B CDR,

набора VH E9.10E CDR и набора VL E9.10E CDR,

набора VH E9.6A CDR и набора VL E9.6A CDR,

набора VH E9.7A CDR и набора VL E9.7A CDR,

набора VH E9.8H CDR и набора VL E9.8H CDR,

набора VH E9-SE1 CDR и набора VL E9-SE1 CDR,

набора VH E9-SE2 CDR и набора VL E9-SE2 CDR,

набора VH E9-SE3 CDR и набора VL E9-SE3 CDR,

набора VH E9-SE4 CDR и набора VL E9-SE4 CDR,

набора VH E9-SE5 CDR и набора VL E9-SE5 CDR,

набора VH E9-SE6 CDR и набора VL E9-SE6 CDR,

набора VH E9-SE7 CDR и набора VL E9-SE7 CDR,

набора VH E9-SE8 CDR и набора VL E9-SE8 CDR,

набора VH E9-FR1 CDR и набора VL E9-FR1 CDR,

набора VH E9-FR2 CDR и набора VL E9-FR2 CDR,

набора VH E9.71 CDR и набора VL E9.71 CDR,

набора VH E9.71(M) CDR и набора VL E9.71(M) CDR, и

набора VH E9.71(L) CDR и набора VL E9.71(L) CDR.

7. Связующий белок по п.1, который также содержит человеческую акцепторную каркасную область.

8. Связующий белок по п.7, где указанная человеческая акцепторная каркасная область содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

последовательностей акцепторной каркасной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 6-22,

акцепторных последовательностей тяжелой цепи SEQ ID NO: 35-62,

акцепторных последовательностей легкой цепи SEQ ID NO: 23-34 и

акцепторных последовательностей легкой цепи SEQ ID NO: 63-98.

9. Связующий белок по п.7, где указанная человеческая акцепторная каркасная область содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену в каркасной области, где указанная аминокислотная последовательность каркасной области по меньшей мере на 65% идентична последовательности указанной человеческой акцепторной каркасной области и содержит по меньшей мере 70 аминокислотных остатков, идентичных остаткам указанной человеческой акцепторной каркасной области.

10. Связующий белок по п.8, где указанная человеческая акцепторная каркасная область содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену в каркасной области в положении ключевого остатка, где указанный ключевой остаток выбран из группы, состоящей из:

остатка, смежного с CDR;

остатка сайта гликозилирования;

редкого остатка;

остатка, способного взаимодействовать с человеческим DLL4;

канонического остатка;

остатка зоны контактирования вариабельной области тяжелой цепи с вариабельной областью легкой цепи;

остатка в зоне Верньера и

остатка в области, которая перекрывается с областью CDR1 вариабельной тяжелой цепи, определенной по Чотиа, и с первой каркасной областью тяжелой цепи, определенной по Кэбату.

11. Связующий белок по п.10, где указанный ключевой остаток выбран из группы, состоящей из: 2H, 4H, 24H, 26H, 27H, 29H, 34H, 35H, 37H, 39H, 44H, 45H, 47H, 48H, 49H, 50H, 51H, 58H, 59H, 60H, 63H, 67H, 69H, 71H, 73H, 76H, 78H, 91H, 93H, 94H, 2L, 4L, 25L, 29L, 27bL, 33L, 34L, 36L, 38L, 43L, 44L, 46L, 47L, 48L, 49L, 55L, 58L, 62L, 64L, 71L, 87L, 89L, 90L, 91L, 94L, 95L.

12. Связующий белок по п.11, где указанным связующим белком является консенсусный человеческий вариабельный домен.

13. Связующий белок по п.1, где указанный связующий белок содержит по меньшей мере один вариабельный домен, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 111, 116, 228, 120, 232, 124, 236, 128, 240, 132, 244, 136, 248, 140, 252, 144, 256, 148, 260, 152, 264, 156, 268, 160, 216, 164, 220, 168, 224, 172, 272, 176, 276, 180, 300, 184, 292, 188, 280, 192, 288, 196, 296, 200, 284, 204, 304, 208, 308, 212, 312, 334, 335, 336, 337, 338, 339, 340, 341, 342, 343, 344, 345, 346, 347, 348, 349, 350, 351, 352, 353, 354, 355, 356, 357, 358, 359, 360 и 361.

14. Связующий белок по п.13, где указанный связующий белок содержит два вариабельных домена, где указанные два вариабельных домена имеют аминокислотные последовательности, выбранные из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1 и 111, SEQ ID NO: 116 и 228, SEQ ID NO: 120 и 232, SEQ ID NO: 124 и 236, SEQ ID NO: 128 и 240, SEQ ID NO: 132 и 244, SEQ ID NO: 136 и 248, SEQ ID NO: 140 и 252, SEQ ID NO: 144 и 256, SEQ ID NO: 148 и 260, SEQ ID NO: 152 и 264, SEQ ID NO: 156 и 268, SEQ ID NO: 160 и 216, SEQ ID NO: 164 и 220, SEQ ID NO: 168 и 224, SEQ ID NO: 172 и 272, SEQ ID NO: 176 и 276, SEQ ID NO: 180 и 300, SEQ ID NO: 184 и 292, SEQ ID NO: 188 и 280, SEQ ID NO: 192 и 288, SEQ ID NO: 196 и 296, SEQ ID NO: 200 и 284, SEQ ID NO: 204 и 304, SEQ ID NO: 208 и 308, SEQ ID NO: 212 и 312, SEQ ID NO: 334 и 335, SEQ ID NO: 336 и 337, SEQ ID NO: 338 и 339, SEQ ID NO: 340 и 341, SEQ ID NO: 342 и 343, SEQ ID NO: 344 и 345, SEQ ID NO: 346 и 347, SEQ ID NO: 348 и 349, SEQ ID NO: 350 и 351, SEQ ID NO: 352 и 353, SEQ ID NO: 354 и 355, SEQ ID NO: 356 и 357, SEQ ID NO: 358 и 359, SEQ ID NO: 360 и 361.

15. Связующий белок по п.11, где указанный связующий белок содержит по меньшей мере один вариабельный домен, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 111, 116, 228, 120, 232, 124, 236, 128, 240, 132, 244, 136, 248, 140, 252, 144, 256, 148, 260, 152, 264, 156, 268, 160, 216, 164, 220, 168, 224, 172, 272, 176, 276, 180, 300, 184, 292, 188, 280, 192, 288, 196, 296, 200, 284, 204, 304, 208, 308, 212, 312, 334, 335, 336, 337, 338, 339, 340, 341, 342, 343, 344, 345, 346, 347, 348, 349, 350, 351, 352, 353, 354, 355, 356, 357, 358, 359, 360 и 361.

16. Связующий белок по п.2, где указанный антигенсвязующий домен содержит V_H.

17. Связующий белок по п.16, где указанный V_H содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 116, 120, 124, 128, 132, 136, 140, 144, 148, 152, 156, 160, 164, 168, 172, 176, 180, 184, 188, 192, 196, 200, 204, 208, 212, 334, 336, 338, 340, 342, 344, 346, 348, 350, 352, 354, 356, 358 и 360.

18. Связующий белок по п.2, где указанный антигенсвязующий домен содержит V_L.

19. Связующий белок по п.18, где указанный V_L содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 111, 228, 232, 236, 240, 244, 248, 252, 256, 260, 264, 268, 216, 220, 224, 272, 276, 300, 292, 280, 288, 296, 284, 304, 308, 312, 335, 337, 339, 341, 343, 345, 347, 349, 351, 353, 355, 357, 359 и 361.

20. Связующий белок по п.2, где указанный антигенсвязующий домен содержит V_H и V_L.

21. Связующий белок по п.19, который также содержит V_H, где указанный V_H включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 116, 120, 124, 128, 132, 136, 140, 144, 148, 152, 156, 160, 164, 168, 172, 176, 180, 184, 188, 192, 196, 200, 204, 208, 212, 334, 336, 338, 340, 342, 344, 346, 348, 350, 352, 354, 356, 358 и 360.

22. Связующий белок по п.20, где указанный V_L содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 111, 228, 232, 236, 240, 244, 248, 252, 256, 260, 264, 268, 216, 220, 224, 272, 276, 300, 292, 280, 288, 296, 284, 304, 308, 312, 335, 337, 339, 341, 343, 345, 347, 349, 351, 353, 355, 357, 359 и 361.

23. Связующий белок по п.2, который также содержит константный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, выбранный из группы, состоящей из константного домена человеческого IgM, константного домена человеческого IgG1, константного домена человеческого IgG2, константного домена человеческого IgG3, константного домена человеческого IgG4, константного домена человеческого IgE и константного домена человеческого IgA.

24. Связующий белок по п.23, где указанный константный домен тяжелой цепи иммуноглобулина представляет собой человеческий константный домен IgG1.

25. Связующий белок по п.24, где указанный константный домен человеческого IgG1 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 3.

26. Связующий белок по п.2, который также содержит константный домен легкой цепи иммуноглобулина, выбранный из группы, состоящей из константного домена Ig каппа человека и константного домена Ig лямбда человека.

27. Связующий белок по п.26, где указанный константный домен легкой цепи иммуноглобулина представляет собой константный домен Ig каппа человека, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4.

28. Связующий белок по п.26, где указанный константный домен легкой цепи иммуноглобулина представляет собой константный домен Ig лямбда человека, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5.

29. Связующий белок по п.1, где указанный связующий белок выбран из группы, состоящей из молекулы иммуноглобулина, scFv, моноклонального антитела, человеческого антитела, химерного антитела, гуманизированного антитела, однодоменного антитела, Fab-фрагмента, Fab'-фрагмента, F(ab')₂-фрагмента, Fv-фрагмента, Fv, связанного дисульфидной связью, однодоменного антитела, диантитела, мультиспецифического антитела, биспецифического антитела и антитела с двойной специфичностью.

30. Связующий белок по п.29, где указанным связующим белком является человеческое антитело.

31. Связующий белок, обладающий способностью связываться с человеческим DLL-4, где указанный связующий белок содержит:

константную область тяжелой цепи Ig, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 3;

константную область легкой цепи Ig, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4 и SEQ ID NO: 5;

вариабельную область тяжелой цепи Ig, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

SEQ ID NO: 1, 116, 120, 124, 128, 132, 136, 140, 144, 148, 152, 156, 160, 164, 168, 172, 176, 180, 184, 188, 192, 196, 200, 204, 208, 212, 334, 336, 338, 340, 342, 344, 346, 348, 350, 352, 354, 356, 358 и 360; и

вариабельную область легкой цепи Ig, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

SEQ ID NO: 111, 228, 232, 236, 240, 244, 248, 252, 256, 260, 264, 268, 216, 220, 224, 272, 276, 300, 292, 280, 288, 296, 284, 304, 308, 312, 335, 337, 339, 341, 343, 345, 347, 349, 351, 353, 355, 357, 359 и 361.

32. Связующий белок по п.31, где указанной константной областью легкой цепи Ig является SEQ ID NO: 5.

33. Связующий белок по любому из пп.1-32, где указанный связующий белок обладает способностью блокировать взаимодействие DLL4 с белком Notch, выбранным из группы, состоящей из Notch-1, Notch-2, Notch-3, Notch-4 и их комбинаций.

34. Связующий белок по п.33, где указанный связующий белок обладает способностью блокировать взаимодействие DLL4 с Notch-1 и Notch-4.

35. Связующий белок по п.33, где указанный связующий белок обладает способностью блокировать взаимодействие DLL4 с Notch-1.

36. Связующий белок по п.33, где указанный связующий белок обладает способностью блокировать взаимодействие DLL4 с Notch-4.

37. Связующий белок по п.1, где указанный связующий белок обладает способностью модулировать биологическую функцию DLL4.

38. Связующий белок по п.1, где указанный связующий белок обладает способностью нейтрализовать DLL4.

39. Нейтрализующий связующий белок по п.38, где указанный DLL4 выбран из группы, состоящей из человеческого DLL4, мышиного DLL4, DLL4 яванского макака и крысиного DLL4.

40. Нейтрализующий связующий белок по п.38, где указанный нейтрализующий связующий белок подавляет способность DLL4 связываться с его рецептором.

41. Нейтрализующий связующий белок по п.38, где указанный нейтрализующий связующий белок обладает способностью снижать нормальный ангиогенез.

42. Нейтрализующий связующий белок по п.38, где указанный нейтрализующий связующий белок имеет константу диссоциации (K_D), выбранную из группы, состоящей из: примерно максимум 10^-7 M; примерно максимум 10^-8 M; примерно максимум 10^-9 M; примерно максимум 10^-10 M; примерно максимум 10^-11 M; примерно максимум 10^-12 M и максимум 10^-13 M.

43. Нейтрализующий связующий белок по п.38, где указанный нейтрализующий связующий белок имеет скорость ассоциации, выбранную из группы, состоящей из: по меньшей мере примерно 10²M^-1c^-1; по меньшей мере примерно 10³M^-1c^-1; по меньшей мере примерно 10⁴M^-1c^-1; по меньшей мере примерно 10⁵M^-1c^-1 и по меньшей мере примерно 10⁶M^-1c^-1.

44. Нейтрализующий связующий белок по п.38, где указанный нейтрализующий связующий белок имеет скорость диссоциации, выбранную из группы, состоящей из: примерно максимум 10^-3c^-1; примерно максимум 10^-4c^-1; примерно максимум 10^-5c^-1 и примерно максимум 10^-6c^-1.

45. Меченый связующий белок, содержащий связующий белок по любому из пп.1-32, где указанный связующий белок конъюгирован с детектируемой меткой.

46. Меченый связующий белок по п.45, где указанная детектируемая метка выбрана из группы, состоящей из радиоактивной метки, фермента, флуоресцентной метки, люминесцентной метки, биолюминесцентной метки, магнитной метки и биотина.

47. Меченый связующий белок по п.46, где указанной меткой является радиоактивная метка, выбранная из группы, состоящей из: ³H, ¹⁴C, ³⁵S, ⁹⁰Y, ⁹⁹Tc, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁷⁷Lu, ¹⁶⁶Ho и ¹⁵³Sm.

48. Конструкция антитела, содержащая связующий белок по любому из пп.1-32, а также полипептидный линкер или константный домен иммуноглобулина.

49. Конструкция антитела по п.48, выбранная из группы, состоящей из:

молекул иммуноглобулина,

моноклонального антитела,

химерного антитела,

CDR-привитого антитела,

гуманизированного антитела,

Fab,

Fab',

F(ab')₂,

Fv,

Fv, связанного дисульфидной связью,

scFv,

однодоменного антитела,

диантитела,

мультиспецифического антитела,

антитела с двойной специфичностью и

биспецифического антитела.

50. Конструкция антитела по п.48, где указанная конструкция антитела включает константный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, выбранный из группы, состоящей из:

константного домена человеческого IgM,

константного домена человеческого IgG1,

константного домена человеческого IgG2,

константного домена человеческого IgG3,

константного домена человеческого IgG4,

константного домена человеческого IgE,

константного домена человеческого IgA, и

варианта константного домена IgG с одной или несколькими мутациями, изменяющими силу связывания с неонатальным Fc-рецептором, рецепторами Fc-гамма или C1q.

51. Конструкция антитела по п.48, включающая константный домен иммуноглобулина, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5 и их комбинаций.

52. Конъюгат антитела, содержащий конструкцию антитела по п.48, где указанная конструкция антитела конъюгирована с терапевтическим или цитотоксическим средством.

53. Конъюгат антитела по п.52, где указанное терапевтическое или цитотоксическое средство выбрано из группы, состоящей из антиметаболита, алкилирующего агента, антибиотика, фактора роста, цитокина, антиангиогенного агента, антимитотического средства, антрациклина, токсина и апоптотического агента.

54. Изолированная нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид, выбранный из группы, состоящей из: полипептида, содержащего вариабельный домен тяжелой цепи, где указанный вариабельный домен тяжелой цепи включает одну или несколько из CDR-H1, CDR-H2 или CDR-H3 по п.1; полипептида, содержащего вариабельный домен легкой цепи, где указанный вариабельный домен легкой цепи включает одну или несколько из CDR-L1, CDR-L2 или CDR-L3 по п.1; или комбинации обоих полипептидов.

55. Вектор, содержащий изолированную нуклеиновую кислоту по п.54.

56. Вектор по п.55, где указанный вектор выбран из группы, состоящей из pcDNA, pTT, pTT3, pEFBOS, pBV, pJV, pHybE и pBJ.

57. Клетка-хозяин, содержащая вектор по любому из пп.55 и 56.

58. Клетка-хозяин по п.57, где указанной клеткой-хозяином является прокариотическая клетка.

59. Клетка-хозяин по п.58, где указанной клеткой-хозяином является Escherichia coli.

60. Клетка-хозяин по п.59, где указанной клеткой-хозяином является эукариотическая клетка.

61. Клетка-хозяин по п.60, где указанная эукариотическая клетка выбрана из группы, состоящей из клетки протиста, клетки животного, клетки растения и клетки грибов.

62. Клетка-хозяин по п.61, где указанной эукариотической клеткой является клетка животного, выбранная из группы, состоящей из клетки млекопитающего, клетки птиц и клетки насекомого.

63. Клетка-хозяин по п.62, где указанной клеткой млекопитающего является клетка CHO.

64. Клетка-хозяин по п.62, где указанной клеткой млекопитающих является клетка COS.

65. Клетка-хозяин по п.61, где указанной клеткой грибов является Saccharomyces cerevisiae.

66. Клетка-хозяин по п.62, где указанной клеткой насекомых является клетка Sf9.

67. Способ получения связующего белка, который связывается с человеческим DLL4, где указанный способ включает культивирование клетки-хозяина по любому из пп.57-66 в культуральной среде в условиях, достаточных для продуцирования связующего белка, который связывается с человеческим DLL4.

68. Связующий белок, полученный способом по п.67.

69. Кристаллизованный связующий белок, включающий связующий белок по любому из пп.1-32, где указанный связующий белок присутствует в виде кристалла.

70. Кристаллизованный связующий белок по п.69, где указанным кристаллом является не содержащий носитель фармацевтический кристалл с контролируемым высвобождением.

71. Кристаллизованный связующий белок по п.69, где указанный связующий белок имеет более длительное время полужизни in vivo, чем растворимый аналог указанного связующего белка.

72. Кристаллизованный связующий белок по п.69, где указанный связующий белок сохраняет свою биологическую активность.

73. Композиция для высвобождения связующего белка, где указанная композиция включает:

(a) состав, где указанный состав содержит кристаллизованный связующий белок по любому из пп.69-72 и ингредиент; и

(b) по меньшей мере один полимерный носитель.

74. Композиция по п.73, где указанным полимерным носителем является полимер, выбранный из одной или нескольких групп, состоящих из полиакриловой кислоты, полицианоакрилатов, полиаминокислот, полиангидридов, полидепсипептида, полиэфиров, полимолочной кислоты, сополимера молочной и гликолевой кислоты или PLGA, поли-β-гидроксибутирата, поликапролактона, полидиоксанона, полиэтиленгликоля, полигидроксипропилметакриламида, полиорганофосфазена, полиортоэфиров, поливинилового спирта, поливинилпирролидона, сополимеров малеинового ангидрида-алкилвинилового эфира, полиолов плюроников, альбумина, альгината, целлюлозы и производных целлюлозы, коллагена, фибрина, желатина, гиалуроновой кислоты, олигосахаридов, гликаминогликанов, сульфатированных полисахаридов и их смесей и сополимеров.

75. Композиция по п.73, где указанный ингредиент выбран из группы, состоящей из альбумина, сахарозы, трегалозы, лактита, желатина, гидроксипропил-β-циклодекстрина, метоксиполиэтиленгликоля и полиэтиленгликоля.

76. Способ лечения млекопитающего, включающий стадию введения указанному млекопитающему эффективного количества композиции по п.73.

77. Фармацевтическая композиция, содержащая связующий белок по любому из пп.1-32 и фармацевтически приемлемый носитель.

78. Фармацевтическая композиция по п.77, которая также включает по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство для лечения расстройства, ассоциированного с негативной активностью DLL4.

79. Фармацевтическая композиция по п.78, где указанное дополнительное средство выбрано из группы, состоящей из ингибитора ангиогенеза; ингибиторов киназы; блокаторов костимулирующей молекулы; блокаторов адгезивной молекулы; антитела против цитокина или его функционального фрагмента; метотрексата; кортикостероидов; циклоспорина; рапамицина; FK506 и нестероидных противовоспалительных средств.

80. Способ снижения активности человеческого DLL4, включающий контактирование человеческого DLL4 со связующим белком по любому из пп.1-32, которое приводит к снижению DLL4-активности.

81. Способ снижения активности человеческого DLL4 у человека, страдающего расстройством, ассоциированным с негативной активностью DLL4, где указанный способ включает введение указанному индивидууму связующего белка по любому из пп.1-32, которое приводит к снижению активности IL-17 у человека.

82. Способ лечения заболевания или расстройства у индивидуума, ассоциированного с негативным воздействием DLL4-активности, путем введения указанному индивидууму связующего белка по любому из пп.1-32 в целях достижения эффективного лечения.

83. Способ по п.82, где указанное расстройство выбрано из группы, состоящей из рака молочной железы, рака толстой кишки, рака прямой кишки, рака легких, рака ротоглотки, рака гортани, рака пищевода, рака желудка, рака поджелудочной железы, рака печени, рака желчного пузыря, рака желчных протоков, рака тонкого кишечника, рака мочевых путей, рака женских половых органов, рака мужских половых органов, рака эндокринных желез, рака кожи, гемангиомы, меланомы, саркомы, опухоли головного мозга, рака нервных тканей, рака глаз, рака мозговой оболочки, солидных опухолей, происходящих от гемопоэтических злокачественных опухолей, метастазов опухолей, глазной неоваскуляризации, отеков, ревматоидного артрита, рассеянного склероза, атеросклеротических бляшек, болезни Крона, воспалительного заболевания кишечника, асцита, трудно поддающегося лечению, псориаза, саркоидоза, артериосклероза, сепсиса, пептических язв, ожогов, панкреатита, поликистоза яичника (ПКЯ), эндометриоза, фибромы матки, злокачественной гипертрофии предстательной железы и других ассоциированных и не ассоциированных с ангиогенезом заболеваний, характеризующихся абберантной активностью DLL4.

84. Способ по п.83, где указанным расстройством является первичный и метастатический рак.

85. Способ по п.83, где рак мочевых путей выбран из группы, состоящей из рака почек, рака мочевого пузыря и рака уротелия.

86. Способ по п.83, где рак женских половых органов выбран из группы, состоящей из рака шейки матки, рака матки, рака яичника, хориокарциномы и трофобластоза у беременных.

87. Способ по п.83, где рак мужских половых органов выбран из группы, состоящей из рака предстательной железы, рака семенных пузырьков, рака яичек и эмбрионально-клеточной опухоли.

88. Способ по п.83, где рак эндокринных желез выбран из группы, состоящей из рака щитовидной железы, рака коры надпочечника и рака гипофиза.

89. Способ по п.83, где саркома выбрана из группы, состоящей из саркомы костей, саркомы мягких тканей и саркомы Капоши.

90. Способ по п.83, где рак коркового слоя выбран из группы, состоящей из астроцитомы, глиомы, глиобластомы, ретинобластомы, невромы, нейробластомы, шванномы и менингиомы.

91. Способ по п.83, где солидной опухолью, происходящей от гемопоэтической злокачественной опухоли, является лейкоз, ходжкинский лейкоз, неходжкинский лейкоз, лимфома, ходжкинская лимфома и неходжкинская лимфома.

92. Способ по п.83, где глазная неоваскуляризация выбрана из группы, состоящей из слепоты при диабете, ретинопатии, возрастной дегенерации желтого пятна и покраснения глаз.

93. Способ лечения пациента, страдающего расстройством, ассоциированным с негативным воздействием DLL4, где указанный способ включает стадию введения связующего белка по любому из пп.1-32 до, во время или после введения второго агента, где указанный второй агент выбран из группы, состоящей из антитела или его фрагмента, обладающего способностью связываться с человеческим VEGFR2; метотрексата, антитела или его фрагмента, обладающего способностью связываться с человеческим TNF; кортикостероидов; циклоспорина; рапамицина; FK506; и нестероидных противовоспалительных средств.

94. Связующий белок, содержащий антигенсвязующий домен, способный связываться с человеческим DLL4, где указанный антигенсвязующий домен содержит по меньшей мере одну или более CDR, выбранных из группы, состоящей из:

CDR-H1: X₁-X₂-X₃-X₄-Х₅(SEQ ID NO: 105),

где X₁ представляет собой S, N или D;

X₂ представляет собой H или Y;

X₃ представляет собой W;

X₄ представляет собой M;

X₅ представляет собой S или H;

CDR-H2: X₁-X₂-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇-X₈-X₉-X₁₀-X₁₁-X₁₂-X₁₃-X₁₄-X₁₅-X₁₆-Х₁₇ (SEQ ID NO: 106),

где X₁ представляет собой I, D, M или Т;

X₂ представляет собой I;

X₃ представляет собой S;

X₄ представляет собой Y, N, S, Q, V, T, H или D;

X₅ представляет собой D;

X₆ представляет собой G;

X₇ представляет собой S, R, I, T, G, K, H или N;

X₈ представляет собой N, Y, S, I или T;

X₉представляет собой K, M, N, Q, E, T, R, S, A или L;

X₁₀ представляет собой Y, D или E;

X₁₁ представляет собой S или Y;

X₁₂ представляет собой А;

X₁₃ представляет собой D;

X₁₄ представляет собой S;

X₁₅ представляет собой V;

X₁₆ представляет собой K и

X₁₇ представляет собой G;

CDR-H3: X₁-X₂-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇-X₈-X₉-X₁₀ (SEQ ID NO: 107),

где X₁ представляет собой A;

X₂ представляет собой G, А или R;

X₃ представляет собой G;

X₄ представляет собой G, S или А;

X₅ представляет собой N;

X₆ представляет собой V или М;

X₇ представляет собой G;

X₈ представляет собой F, L, Y или M;

X₉представляет собой D и

X₁₀представляет собой I, S или L;

CDR-L1: X₁-X₂-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇-X₈-X₉-X₁₀-X₁₁ (SEQ ID NO: 108),

где X₁ представляет собой S;

X₂ представляет собой А или G;

X₃ представляет собой D;

X₄ представляет собой K, N, L, Q, M, E, S, T, G или D;

X₅ представляет собой L;

X₆ представляет собой G;

X₇ представляет собой T, S, N, A, G или E;

X₈ представляет собой K, Q, N или R;

X₉представляет собой Y;

X₁₀представляет собой V или I и

X₁₁ представляет собой S;

CDR-L2: X₁-X₂-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇ (SEQ ID NO: 109),

где X₁ представляет собой Q;

X₂ представляет собой D;

X₃ представляет собой A, G, W, S или D;

X₄ представляет собой K, M, Q, N, L, T, I или E;

X₅ представляет собой R;

X₆ представляет собой P;

X₇ представляет собой S и

CDR-L3: X₁-X₂-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇-X₈-X₉ (SEQ ID NO: 110),

где X₁ представляет собой Q;

X₂ представляет собой S или A;

X₃ представляет собой W;

X₄ представляет собой D;

X₅ представляет собой R, S, Q, P, A, V, W или M;

X₆ представляет собой S, G, I, N, R или T;

X₇ представляет собой D или G;

X₈ представляет собой V, A, P или E и

X₉ представляет собой V.

95. Связующий белок по п.94, где указанный по меньшей мере один CDR включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

остатков 31-35 SEQ ID NO: 112 (CDR-H1); остатков 50-66 SEQ ID NO: 112 (CDR-H2); остатков 99-108 SEQ ID NO: 112 (CDR-H3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 113 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 113 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 113 (CDR-L3);

остатков 31-35 SEQ ID NO: 316 (CDR-H1); остатков 50-66 SEQ ID NO: 316 (CDR-H2); остатков 99-108 SEQ ID NO: 316 (CDR-H3);

остатков 31-35 SEQ ID NO: 317 (CDR-H1); остатков 50-66 SEQ ID NO: 317 (CDR-H2); остатков 99-108 SEQ ID NO: 317 (CDR-H3);

остатков 31-35 SEQ ID NO: 318 (CDR-H1); остатков 50-66 SEQ ID NO: 318 (CDR-H2); остатков 99-108 SEQ ID NO: 318 (CDR-H3);

остатков 31-35 SEQ ID NO: 319 (CDR-H1); остатков 50-66 SEQ ID NO: 319 (CDR-H2); остатков 99-108 SEQ ID NO: 319 (CDR-H3);

остатков 31-35 SEQ ID NO: 320 (CDR-H1); остатков 50-66 SEQ ID NO: 320 (CDR-H2); остатков 99-108 SEQ ID NO: 320 (CDR-H3);

остатков 31-35 SEQ ID NO: 321 (CDR-H1); остатков 50-66 SEQ ID NO: 321 (CDR-H2); остатков 99-108 SEQ ID NO: 321 (CDR-H3);

остатков 31-35 SEQ ID NO: 322 (CDR-H1); остатков 50-66 SEQ ID NO: 322 (CDR-H2); остатков 99-108 SEQ ID NO: 322 (CDR-H3);

остатков 31-35 SEQ ID NO: 323 (CDR-H1); остатков 50-66 SEQ ID NO: 323 (CDR-H2); остатков 99-108 SEQ ID NO: 323 (CDR-H3);

остатков 31-35 SEQ ID NO: 324 (CDR-H1); остатков 50-66 SEQ ID NO: 324 (CDR-H2); остатков 99-108 SEQ ID NO: 324 (CDR-H3);

остатков 31-35 SEQ ID NO: 325 (CDR-H1); остатков 50-66 SEQ ID NO: 325 (CDR-H2); остатков 99-108 SEQ ID NO: 325 (CDR-H3);

остатков 31-35 SEQ ID NO: 326 (CDR-H1); остатков 50-66 SEQ ID NO: 326 (CDR-H2); остатков 99-108 SEQ ID NO: 326 (CDR-H3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 327 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 327 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 327 (CDR-L3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 328 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 328 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 328 (CDR-L3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 329 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 329 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 329 (CDR-L3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 330 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 330 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 330 (CDR-L3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 331 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 331 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 331 (CDR-L3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 332 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 332 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 332 (CDR-L3);

остатков 23-33 SEQ ID NO: 333 (CDR-L1); остатков 49-55 SEQ ID NO: 333 (CDR-L2); остатков 88-96 SEQ ID NO: 333 (CDR-L3).

96. Связующий белок по п.95, где указанный связующий белок содержит по меньшей мере 3 CDR.

97. Связующий белок по п.96, где указанные по меньшей мере 3 CDR содержат набор CDR вариабельного домена, выбранный из группы, состоящей из:

набора VH A10 CDR

CDR-H1: остатки 31-35 SEQ ID NO: 112

CDR-H2: остатки 50-66 SEQ ID NO: 112

CDR-H3: остатки 99-108 SEQ ID NO: 112

набора VL A10 CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 113

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 113

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 113

набора VH A10.3 CDR

CDR-H1: остатки 31-35 SEQ ID NO: 316

CDR-H2: остатки 50-66 SEQ ID NO: 316

CDR-H3: остатки 99-108 SEQ ID NO: 316

набора VL A10.3 CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 327

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 327

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 327

набора VH A10.К30 CDR

CDR-H1: остатки 31-35 SEQ ID NO: 317

CDR-H2: остатки 50-66 SEQ ID NO: 317

CDR-H3: остатки 99-108 SEQ ID NO: 317

набора VH A10.К42 CDR

CDR-H1: остатки 31-35 SEQ ID NO: 318

CDR-H2: остатки 50-66 SEQ ID NO: 318

CDR-H3: остатки 99-108 SEQ ID NO: 318

набора VH A10.9А CDR

CDR-H1: остатки 31-35 SEQ ID NO: 319

CDR-H2: остатки 50-66 SEQ ID NO: 319

CDR-H3: остатки 99-108 SEQ ID NO: 319

набора VH A10.8А CDR

CDR-H1: остатки 31-35 SEQ ID NO: 320

CDR-H2: остатки 50-66 SEQ ID NO: 320

CDR-H3: остатки 99-108 SEQ ID NO: 320

набора VH A10.1А CDR

CDR-H1: остатки 31-35 SEQ ID NO: 321

CDR-H2: остатки 50-66 SEQ ID NO: 321

CDR-H3: остатки 99-108 SEQ ID NO: 321

набора VH A10.5D CDR

CDR-H1: остатки 31-35 SEQ ID NO: 322

CDR-H2: остатки 50-66 SEQ ID NO: 322

CDR-H3: остатки 99-108 SEQ ID NO: 322

набора VH A10.3А CDR

CDR-H1: остатки 31-35 SEQ ID NO: 323

CDR-H2: остатки 50-66 SEQ ID NO: 323

CDR-H3: остатки 99-108 SEQ ID NO: 323

набора VL A10.3А CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 330

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 330

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 330

набора VH A10.6В CDR

CDR-H1: остатки 31-35 SEQ ID NO: 324

CDR-H2: остатки 50-66 SEQ ID NO: 324

CDR-H3: остатки 99-108 SEQ ID NO: 324

набора VL A10.6В CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 331

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 331

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 331

набора VH A10.3D CDR

CDR-H1: остатки 31-35 SEQ ID NO: 325

CDR-H2: остатки 50-66 SEQ ID NO: 325

CDR-H3: остатки 99-108 SEQ ID NO: 325

набора VL A10.3D CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 332

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 332

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 332

набора VH A10.4С CDR

CDR-H1: остатки 31-35 SEQ ID NO: 326

CDR-H2: остатки 50-66 SEQ ID NO: 326

CDR-H3: остатки 99-108 SEQ ID NO: 326

набора VL A10.4С CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 333

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 333

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 333

набора VL A10.L45 CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 328

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 328

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 328

набора VL A10.L75 CDR

CDR-L1: остатки 23-33 SEQ ID NO: 329

CDR-L2: остатки 49-55 SEQ ID NO: 329

CDR-L3: остатки 88-96 SEQ ID NO: 329.

98. Связующий белок по п.97, содержащий по меньшей мере два набора CDR вариабельных доменов.

99. Связующий белок по п.98, где указанные по меньшей мере два набора CDR вариабельных доменов выбраны из группы, состоящей из:

набора VH A10 CDR и набора VL A10 CDR;

набора VH A10.3 CDR и набора VL A10.3 CDR:

набора VH A10.3A CDR и набора VL A10.3A;

набора VH A10.6B CDR и набора VL A10.6B;

набора VH A10.3D CDR и набора VL A10.3D CDR;

набора VH A10.4C CDR и набора VL A10.4C CDR;

набора VH A10.K30 CDR и набора VL A10.3 CDR;

набора VH A10.K42 CDR и набора VL A10.3 CDR;

набора VH A10.3 CDR и набора VL A10.L45 CDR;

набора VH A10.3 CDR и набора VL A10.L73 CDR;

набора VH A10.9A CDR и набора VL A10.3 CDR;

набора VH A10.8A CDR и набора VL A10.3 CDR;

набора VH A10.1A CDR и набора VL A10.3 CDR; и

набора VH A10.5D CDR и набора VL A10.3 CDR.

100. Связующий белок по любому из пп.94-99, который также включает человеческую акцепторную каркасную область.

101. Связующий белок по п.100, где указанная человеческая акцепторная каркасная область содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

акцепторных последовательностей легкой цепи SEQ ID NO: 23-34, и

102. Связующий белок по п.100, где указанная человеческая акцепторная каркасная область содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену в каркасной области, где указанная аминокислотная последовательность каркасной области по меньшей мере на 65% идентична последовательности указанной человеческой акцепторной каркасной области и содержит по меньшей мере 70 аминокислотных остатков, идентичных остаткам указанной человеческой акцепторной каркасной области.

103. Связующий белок по п.101, где указанная человеческая акцепторная каркасная область содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену в каркасной области в положении ключевого остатка, где указанный ключевой остаток выбран из группы, состоящей из:

остатка, смежного с CDR;

остатка сайта гликозилирования;

редкого остатка;

канонического остатка;

остатка в зоне Верньера и

104. Связующий белок по п.103, где указанный ключевой остаток выбран из группы, состоящей из: 2H, 4H, 24H, 26H, 27H, 29H, 34H, 35H, 37H, 39H, 44H, 45H, 47H, 48H, 49H, 50H, 51H, 58H, 59H, 60H, 63H, 67H, 69H, 71H, 73H, 76H, 78H, 91H, 93H, 94H, 2L, 4L, 25L, 29L, 27bL, 33L, 34L, 36L, 38L, 43L, 44L, 46L, 47L, 48L, 49L, 55L, 58L, 62L, 64L, 71L, 87L, 89L, 90L, 91L, 94L, 95L.

105. Связующий белок по п.104, где указанным связующим белком является консенсусный человеческий вариабельный домен.

106. Связующий белок по п.94, где указанный связующий белок содержит по меньшей мере один вариабельный домен, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 112, 113, 316, 327, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 330, 324, 331, 325, 332, 326, 333, 328 и 329.

107. Связующий белок по п.106, где указанный связующий белок содержит два вариабельных домена, где указанные два вариабельных домена имеют аминокислотные последовательности, выбранные из группы, состоящей из SEQ ID NO: 112 и 113, SEQ ID NO: 316 и 327, SEQ ID NO: 323 и 330, SEQ ID NO: 324 и 331, SEQ ID NO: 325 и 332, и SEQ ID NO: 326 и 333.

108. Связующий белок по п.104, где указанный связующий белок содержит по меньшей мере один вариабельный домен, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 112, 113, 316, 327, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 330, 324, 331, 325, 332, 326, 333, 328 и 329.

109. Связующий белок по п.95, где указанный антигенсвязующий домен содержит V_H.

110. Связующий белок по п.109, где указанный V_H содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 112, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325 и 326.

111. Связующий белок по п.95, где указанный антигенсвязующий домен содержит V_L.

112. Связующий белок по п.111, где указанный V_L содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 113, 327, 328, 329, 330, 331, 332 и 333.

113. Связующий белок по п.95, где указанный антигенсвязующий домен содержит V_H и V_L.

114. Связующий белок по п.112, который также включает V_H, где указанный V_H содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 112, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325 и 326.

115. Связующий белок по п.20, где указанный V_L содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 113, 327, 328, 329, 330, 331, 332 и 333.

116. Связующий белок по п.95, который также включает константный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, выбранный из группы, состоящей из константного домена человеческого IgM, константного домена человеческого IgG1, константного домена человеческого IgG2, константного домена человеческого IgG3, константного домена человеческого IgG4, константного домена человеческого IgE и константного домена человеческого IgA.

117. Связующий белок по п.116, где указанный константный домен тяжелой цепи иммуноглобулина представляет собой человеческий константный домен IgG1.

118. Связующий белок по п.117, где указанный константный домен человеческого IgG1 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 3.

119. Связующий белок по п.95, который также содержит константный домен легкой цепи иммуноглобулина, выбранный из группы, состоящей из константного домена Ig каппа человека и константного домена Ig лямбда человека.

120. Связующий белок по п.119, где указанный константный домен легкой цепи иммуноглобулина представляет собой константный домен Ig каппа человека, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4.

121. Связующий белок по п.119, где указанный константный домен легкой цепи иммуноглобулина представляет собой константный домен Ig лямбда человека, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5.

122. Связующий белок по п.94, где указанный связующий белок выбран из группы, состоящей из молекулы иммуноглобулина, scFv, моноклонального антитела, человеческого антитела, химерного антитела, гуманизированного антитела, однодоменного антитела, Fab-фрагмента, Fab'-фрагмента, F(ab')₂-фрагмента, Fv-фрагмента, Fv, связанного дисульфидной связью, однодоменного антитела, диантитела, мультиспецифического антитела, биспецифического антитела и антитела с двойной специфичностью.

123. Связующий белок по п.122, где указанным связующим белком является человеческое антитело.

124. Связующий белок, обладающий способностью связываться с человеческим DLL-4, где указанный связующий белок содержит:

вариабельную область тяжелой цепи Ig, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из

SEQ ID NO: 112, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325 и 326; и

вариабельную область легкой цепи Ig, имеющую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 113, 327, 328, 329, 330, 331, 332 и 333.

125. Связующий белок по п.124, где указанной константной областью легкой цепи Ig является SEQ ID NO: 5.

126. Связующий белок по п.94, где указанный связующий белок обладает способностью блокировать взаимодействие DLL4 с белком Notch, выбранным из группы, состоящей из Notch-1, Notch-2, Notch-3, Notch-4 и их комбинаций.

127. Связующий белок по п.126, где указанный связующий белок обладает способностью блокировать взаимодействие DLL4 с Notch-1 и Notch-4.

128. Связующий белок по п.126, где указанный связующий белок обладает способностью блокировать взаимодействие DLL4 с Notch-1.

129. Связующий белок по п.126, где указанный связующий белок обладает способностью блокировать взаимодействие DLL4 с Notch-4.

130. Связующий белок по п.94, где указанный связующий белок обладает способностью модулировать биологическую функцию DLL4.

131. Связующий белок по п.94, где указанный связующий белок обладает способностью нейтрализовать DLL4.

132. Нейтрализующий связующий белок по п.131, где указанный DLL4 выбран из группы, состоящей из человеческого DLL4, мышиного DLL4, DLL4 яванского макака и крысиного DLL4.

133. Нейтрализующий связующий белок по п.131, где указанный нейтрализующий связующий белок подавляет способность DLL4 связываться с его рецептором.

134. Нейтрализующий связующий белок по п.131, где указанный нейтрализующий связующий белок обладает способностью снижать нормальный ангиогенез.

135. Нейтрализующий связующий белок по п.131, где указанный нейтрализующий связующий белок имеет константу диссоциации (K_D), выбранную из группы, состоящей из: примерно максимум 10^-7 M; примерно максимум 10^-8 M; примерно максимум 10^-9 M; примерно максимум 10^-10 M; примерно максимум 10^-11 M; примерно максимум 10^-12 M и максимум 10^-13 M.

136. Нейтрализующий связующий белок по п.131, где указанный нейтрализующий связующий белок имеет скорость ассоциации, выбранную из группы, состоящей из: по меньшей мере примерно 10² M^-1c^-1; по меньшей мере примерно 10³ M^-1c^-1; по меньшей мере примерно 10⁴ M^-1c^-1; по меньшей мере примерно 10⁵ M^-1c^-1 или по меньшей мере примерно 10⁶ M^-1c^-1.

137. Нейтрализующий связующий белок по п.131, где указанный нейтрализующий связующий белок имеет скорость диссоциации, выбранную из группы, состоящей из: примерно максимум 10^-3 c^-1; примерно максимум 10^-4c^-1; примерно максимум 10^-5c^-1 или примерно максимум 10^-6 c^-1.

138. Меченый связующий белок, содержащий связующий белок по любому из пп.94-137, где указанный связующий белок конъюгирован с детектируемой меткой.

139. Меченый связующий белок по п.138, где указанная детектируемая метка выбрана из группы, состоящей из радиоактивной метки, фермента, флуоресцентной метки, люминесцентной метки, биолюминесцентной метки, магнитной метки и биотина.

140. Меченый связующий белок по п.139, где указанной меткой является радиоактивная метка, выбранная из группы, состоящей из: ³H, ¹⁴C, ³⁵S, ⁹⁰Y, ⁹⁹Tc, ¹¹¹In, ¹²⁵i, ¹³¹I, ¹⁷⁷Lu, ¹⁶⁶Ho и ¹⁵³Sm.

141. Конструкция антитела, содержащая связующий белок по любому из пп.94-137, а также полипептидный линкер или константный домен иммуноглобулина.

142. Конструкция антитела по п.141, выбранная из группы, состоящей из:

молекул иммуноглобулина,

моноклонального антитела,

химерного антитела,

CDR-привитого антитела,

гуманизированного антитела,

Fab,

Fab',

F(ab')₂,

Fv,

Fv, связанного дисульфидной связью,

scFv,

однодоменного антитела,

диантитела,

мультиспецифического антитела,

антитела с двойной специфичностью и

биспецифического антитела.

143. Конструкция антитела по п.141, где указанная конструкция антитела включает константный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, выбранный из группы, состоящей из:

константного домена человеческого IgM,

константного домена человеческого IgG1,

константного домена человеческого IgG2,

константного домена человеческого IgG3,

константного домена человеческого IgG4,

константного домена человеческого IgE,

константного домена человеческого IgA, и

144. Конструкция антитела по п.141, содержащая константный домен иммуноглобулина, имеющий аминокислотную последовательность выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5 и их комбинаций.

145. Конъюгат антитела, содержащий конструкцию антитела по п.141, где указанная конструкция антитела конъюгирована с терапевтическим или цитотоксическим средством.

146. Конъюгат антитела по п.145, где указанное терапевтическое или цитотоксическое средство выбрано из группы, состоящей из антиметаболита, алкилирующего агента, антибиотика, фактора роста, цитокина, антиангиогенного агента, антимитотического средства, антрациклина, токсина и апоптотического агента.

147. Изолированная нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид, выбранный из группы, состоящей из: полипептида, содержащего вариабельный домен тяжелой цепи, где указанный вариабельный домен тяжелой цепи включает одну или несколько из CDR-H1, CDR-H2 или CDR-H3 по п.94; полипептида, содержащего вариабельный домен легкой цепи, где указанный вариабельный домен легкой цепи включает одну или несколько из CDR-L1, CDR-L2 или CDR-L3 по п.94; или комбинации обоих полипептидов.

148. Вектор, содержащий изолированную нуклеиновую кислоту по п.147.

149. Вектор по п.148, где указанный вектор выбран из группы, состоящей из pcDNA, pTT, pTT3, pEFBOS, pBV, pJV, pHybE и pBJ.

150. Клетка-хозяин, содержащая вектор по любому из пп.148 и 149.

151. Клетка-хозяин по п.150, где указанной клеткой-хозяином является прокариотическая клетка.

152. Клетка-хозяин по п.151, где указанной клеткой-хозяином является Escherichia coli.

153. Клетка-хозяин по п.152, где указанной клеткой-хозяином является эукариотическая клетка.

154. Клетка-хозяин по п.153, где указанная эукариотическая клетка выбрана из группы, состоящей из клетки протиста, клетки животного, клетки растения и клетки грибов.

155. Клетка-хозяин по п.154, где указанной эукариотической клеткой является клетка животного, выбранная из группы, состоящей из клетки млекопитающего, клетки птиц и клетки насекомого.

156. Клетка-хозяин по п.155, где указанной клеткой млекопитающего является клетка CHO.

157. Клетка-хозяин по п.155, где указанной клеткой млекопитающих является клетка COS.

158. Клетка-хозяин по п.154, где указанной клеткой грибов является Saccharomyces cerevisiae.

159. Клетка-хозяин по п.155, где указанной клеткой насекомых является клетка Sf9.

160. Способ получения связующего белка, который связывается с человеческим DLL4, где указанный способ включает культивирование клетки-хозяина по любому из пп.150-159 в культуральной среде в условиях, достаточных для продуцирования связывающего белка, который связывается с человеческим DLL4.

161. Связующий белок, полученный способом по п.160.

162. Кристаллизованный связующий белок, включающий связующий белок по любому из пп.94-137, где указанный связующий белок присутствует в виде кристалла.

163. Кристаллизованный связующий белок по п.162, где указанным кристаллом является не содержащий носитель фармацевтический кристалл с контролируемым высвобождением.

164. Кристаллизованный связующий белок по п.162, где указанный связующий белок имеет более длительное время полужизни in vivo, чем растворимый аналог указанного связующего белка.

165. Кристаллизованный связующий белок по п.162, где указанный связующий белок сохраняет свою биологическую активность.

166. Композиция для высвобождения связующего белка, где указанная композиция включает:

(a) состав, где указанный состав содержит кристаллизованный связующий белок по любому из пп.162-165 и ингредиент; и

167. Композиция по п.166, где указанным полимерным носителем является полимер, выбранный из одной или нескольких групп, состоящих из полиакриловой кислоты, полицианоакрилатов, полиаминокислот, полиангидридов, полидепсипептида, полиэфиров, полимолочной кислоты, сополимера молочной и гликолевой кислоты или PLGA, поли-β-гидроксибутирата, поликапролактона, полидиоксанона, полиэтиленгликоля, полигидроксипропилметакриламида, полиорганофосфазена, полиортоэфиров, поливинилового спирта, поливинилпирролидона, сополимеров малеинового ангидрида-алкилвинилового эфира, полиолов плюроников, альбумина, альгината, целлюлозы и производных целлюлозы, коллагена, фибрина, желатина, гиалуроновой кислоты, олигосахаридов, гликаминогликанов, сульфатированных полисахаридов и их смесей и сополимеров.

168. Композиция по п.166, где указанный ингредиент выбран из группы, состоящей из альбумина, сахарозы, трегалозы, лактита, желатина, гидроксипропил-β-циклодекстрина, метоксиполиэтиленгликоля и полиэтиленгликоля.

169. Способ лечения млекопитающего, включающий стадию введения указанному млекопитающему эффективного количества композиции по п.166.

170. Фармацевтическая композиция, содержащая связующий белок по любому из пп.94-137 и фармацевтически приемлемый носитель.

171. Фармацевтическая композиция по п.170, которая также включает по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство для лечения расстройства, ассоциированного с негативной активностью DLL4.

172. Фармацевтическая композиция по п.171, где указанное дополнительное средство выбрано из группы, состоящей из ингибиторов ангиогенеза; ингибиторов киназы; блокаторов костимулирующей молекулы; блокаторов адгезивной молекулы; антитела против цитокина или его функционального фрагмента; метотрексата; кортикостероидов; циклоспорина; рапамицина; FK506 и нестероидных противовоспалительных средств.

173. Способ снижения активности человеческого DLL4, включающий контактирование человеческого DLLU со связующим белком по любому из пп.94-137, которое приводит к снижению DLL4-активности.

174. Способ снижения активности человеческого DLL4 у индивидуума, страдающего расстройством, ассоциированным с негативной активностью DLL4, где указанный способ включает введение указанному индивидууму связующего белка по любому из пп.94-137, которое приводит к снижению активности человеческого IL-17 у индивидуума.

175. Способ лечения заболевания или расстройства у индивидуума, ассоциированного с негативным воздействием DLL4-активности, путем введения указанному индивидууму связующего белка по любому из пп.94-137 в целях достижения эффективного лечения.

176. Способ по п.175, где указанное расстройство выбрано из группы, состоящей из рака молочной железы, рака толстой кишки, рака прямой кишки, рака легких, рака ротоглотки, рака гортани, рака пищевода, рака желудка, рака поджелудочной железы, рака печени, рака желчного пузыря, рака желчных протоков, рака тонкого кишечника, рака мочевых путей, рака женских половых органов, рака мужских половых органов, рака эндокринных желез, рака кожи, гемангиомы, меланомы, саркомы, опухоли головного мозга, рака нервных тканей, рака глаз, рака мозговой оболочки, солидных опухолей, происходящих от гемопоэтических злокачественных опухолей, метастазов опухолей, глазной неоваскуляризации, отеков, ревматоидного артрита, рассеянного склероза, атеросклеротических бляшек, болезни Крона, воспалительного заболевания кишечника, асцита, трудно поддающегося лечению, псориаза, саркоидоза, артериосклероза, сепсиса, пептических язв, ожогов, панкреатита, поликистоза яичника (ПКЯ), эндометриоза, фибромы матки, злокачественной гипертрофии предстательной железы и других ассоциированных и не ассоциированных с ангиогенезом заболеваний, характеризующихся абберантной активностью DLL4.

177. Способ по п.176, где указанным расстройством является первичный и метастатический рак.

178. Способ по п.176, где рак мочевых путей выбран из группы, состоящей из рака почек, рака мочевого пузыря и рака уротелия.

179. Способ по п.176, где рак женских половых органов выбран из группы, состоящей из рака шейки матки, рака матки, рака яичника, хориокарциномы и трофобластоза у беременных.

180. Способ по п.176, где рак мужских половых органов выбран из группы, состоящей из рака предстательной железы, рака семенных пузырьков, рака яичек и эмбрионально-клеточной опухоли.

181. Способ по п.176, где рак эндокринных желез выбран из группы, состоящей из рака щитовидной железы, рака коры надпочечника и рака гипофиза.

182. Способ по п.176, где саркома выбрана из группы, состоящей из саркомы костей, саркомы мягких тканей и саркомы Капоши.

183. Способ по п.176, где рак коркового слоя выбран из группы, состоящей из астроцитомы, глиомы, глиобластомы, ретинобластомы, невромы, нейробластомы, шванномы и менингиомы.

184. Способ по п.176, где солидной опухолью, происходящей от гемопоэтической злокачественной опухоли, является лейкоз, ходжкинский лейкоз, неходжкинский лейкоз, лимфома, ходжкинская лимфома и неходжкинская лимфома.

185. Способ по п.176, где глазная неоваскуляризация глаз выбрана из группы, состоящей из слепоты при диабете, ретинопатии, возрастной дегенерации желтого пятна и покраснения глаз.

186. Способ лечения пациента, страдающего расстройством, ассоциированным с негативным воздействием DLL4, где указанный способ включает стадию введения связующего белка по любому из пп.94-137 до, во время или после введения второго агента, где указанный второй агент выбран из группы, состоящей из антитела или его фрагмента, обладающего способностью связываться с человеческим VEGFR2; метотрексата, антитела или его фрагмента, обладающего способностью связываться с человеческим TNF; кортикостероидов; циклоспорина; рапамицина; FK506; и нестероидных противовоспалительных средств.