[go: up one dir, main page]

RS57494B1 - Anti-cd38 antitela - Google Patents

Anti-cd38 antitela

Info

Publication number
RS57494B1
RS57494B1 RS20180902A RSP20180902A RS57494B1 RS 57494 B1 RS57494 B1 RS 57494B1 RS 20180902 A RS20180902 A RS 20180902A RS P20180902 A RSP20180902 A RS P20180902A RS 57494 B1 RS57494 B1 RS 57494B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
antibody
antibodies
seq
cells
binding
Prior art date
Application number
RS20180902A
Other languages
English (en)
Inventor
Kathleen Ann Elias
Gregory Landes
Shweta Singh
Wouter Korver
Andrew Walling Drake
Mary Haak-Frendscho
Gyorgy Pal Snell
Vinay Bhaskar
Original Assignee
Takeda Pharmaceuticals Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Takeda Pharmaceuticals Co filed Critical Takeda Pharmaceuticals Co
Publication of RS57494B1 publication Critical patent/RS57494B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6871—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting an enzyme
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/99—Enzyme inactivation by chemical treatment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/77—Internalization into the cell
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Opis
STANJE TEHNIKE
[0001] CD38, poznat i kao ciklična ADP riboza hidrolaza, je transmembranski glikoprotein tipa II sa dugim C-terminalnim ekstracelularnim domenom i kratkim N-terminalnim citoplazmatskim domenom. CD38 je član grupe povezanih membranski vezanih ili rastvorljivih enzima, koji sadrže CD157 i Aplisia ADPR ciklazu. Ova porodica enzima ima jedinstveni kapacitet za pretvaranje NAD u cikličnu ADP ribozu ili nikotinska kiselina-adenin dinukleotid fosfat.
[0002] Pored toga, prijavljeno je da je CD38 uključen u Ca<2+>mobilizaciju i transdukciju signala kroz fosforilaciju tirozina brojnih signalnih molekula, uključujući fosfolipazu Cγ, ZAP-70, syk i c-cbl. Na osnovu ovih opservacija, predloženo je da CD38 bude važan signalni molekul u sazrevanju i aktivaciji limfoidnih ćelija tokom njihovog normalnog razvoja.
[0003] Među hematopoetskim ćelijama, asortiman funkcionalnih efekata pripisan je CD38 posredovanoj signalizaciji, uključujući proliferaciju limfocita, oslobađanje citokina, regulaciju B i razvoja mijeloidnih ćelija i preživljavanje i indukciju sazrevanja dendritičkih ćelija.
[0004] Ipak, tačna uloga CD38 u transdukciji signala i hematopoezi ostaje nejasna, s obzirom da je većina studija transdukcije signala koristila ćelijske linije koje ektopično prekomerno eksprimiraju CD38 i anti-CD38 monoklonska antitela, koja su ne-fiziološki ligandi.
[0005] Pretpostavljeni prirodni ligand CD38 je CD31 (PECAM-1, molekul-1 endotelne ćelijske adhezije krvnih ploča). CD31 je član 130kD imunoglobulinske superporodice koji se eksprimira na površini cirkulišućih trombocita, neutrofila, monocita i naivnih B-limfocita. Funkcionalno, CD31 se smatra da deluje kao adhezioni molekul. Predloženo je da interakcija CD38 sa CD31 može delovati u promovisanju preživljavanja ćelija leukemije.
[0006] Životinjski modeli koji imaju nedostatak jednog molekula u mnogim slučajevima su bili osnovni alati za razumevanje biološke uloge molekula u životinjama. Osnovna pretpostavka je da ako protein ima ne-izlišnu funkciju, onda će njegov potpuni nedostatak dovesti do potpunog gubitka te funkcije.
[0007] Generisani su CD38 knockout miševi. Ove životinje pokazuju skoro potpuni gubitak aktivnosti NADaze povezane sa tkivom. Ipak, ove životinje su održive, što dovodi do zaključka da CD38 i njene aktivnosti nisu neophodno za život. Ovi miševi, međutim, pokazuju defekt u urođenom imunitetu i smanjenom T-ćelijskom zavisnom humoralnom odgovoru.
[0008] Za razliku od rezultata kod miševa, kod ljudi postoje snažni indirektni dokazi da odsustvo CD38 nije kompatibilno sa životom. Analiza više od 5000 uzoraka krvi od novorođenčeta nije identifikovala jednog CD38<->pojedinca; ukazujući da je za razliku od miševa, CD38 neophodan za preživljavanje. Stoga, nije jasno da li se posmatranja napravljena kod miševa, koja se odnose na CD38 funkciju, mogu ekstrapolirati na ljude.
[0009] CD38 je regulisan na gore u mnogim hematopoetskim malignitetima i u ćelijskim linijama izvedenim iz različitih hematopoetskih maligniteta, uključujući ne-Hodžkinov limfom (NHL), Burkitov limfoma (BL), multipli mijeloma (MM), B hroničnu limfocitnu leukemiju (B-CLL), B i T akutnu limfocitnu leukemiju (ALL), limfom T ćelija (TCL), akutnu mijeloidnu leukemiju (AML), leukemiju dlakavih ćelija (HCL), Hodžkinov limfom (HL) i hroničnu mijeloidnu leukemiju (CML). Sa druge strane, većina primitivnih pluripotentnih matičnih ćelija hematopoetskog sistema su CD38<->(Slika 1).
[0010] Uprkos nedavnom napretku u otkrivanju i razvoju antikancerogenih agenasa, mnogi oblici raka koji uključuju tumore koji eksprimiraju CD38 i dalje imaju lošu prognozu. Stoga, postoji potreba za poboljšanim postupcima za lečenje takvih oblika raka.
KRATAK SAŽETAK PREDMETNOG PRONALASKA
[0011] Ovaj pronalazak pruža izolovano antitelo koje specifično vezuje ljudski CD38 (SEQ ID NO:1) i cinomolgus CD38 (SEQ ID NO:2) koji obuhvata:
a) varijabilnu regiju teškog lanca koja sadrži SEQ ID NO:9; i
b) varijabilnu regiju lakog lanca koja sadrži SEQ ID NO:10.
[0012] Ovaj pronalazak dalje pruža ćeliju domaćina koja sadrži izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira teški lanac antitela iz ovog pronalaska i izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira laki lanac antitela iz ovog pronalaska.
[0013] Predmetni pronalazak takođe pruža postupak za proizvodnju antitela prema predmetnom pronalasku koji obuhvata kultivaciju ćelije domaćina predmetnog pronalaska pod uslovima u kojima se proizvodi navedeno antitelo.
[0014] Ovaj pronalazak takođe pruža izolovano antitelo prema predmetnom pronalasku za upotrebu u postupku lečenja autoimunih oboljenja.
KRATAK PREGLED OBELODANJENJA
[0015] Ovde su navedeni reagensi i postupci vezivanja za CD38 i postupak, za lečenje bolesti povezanih sa CD38 i objava CD38 pomoću CD38-specifičnih vezujućih agenasa uključujući antitela specifična za CD38.
[0016] nekim otelotvorenjima, opisano je izolovano antitelo specifično za ljudski CD38 (SEQ ID NO:1) i cinomolgus CD38 (SEQ ID NO:2). Ovo antitelo se sastoji od varijabilne regije teškog lanca i varijabilne regije lakog lanca, pri čemu se varijabilna regija teškog lanca sastoji se od tri regije za određivanje komplementarnosti (CDR), HCDR1, HCDR2 i HCDR3, i gde je varijabilna regija lakog lanca je takođe sastavljena od tri CDR, LCDR1, LCDR2 i LCDR3. Sekvence CDR su predstavljene pomoću: HCDR1 (SEQ ID NO:3), HCDR2 (SEQ ID NO:4), HCDR3 (SEQ ID NO:5), LCDR1 (SEQ ID NO:6), LCDR2 (SEQ ID NO:7) i LCDR3 (SEQ ID NO:8).
[0017] U drugim otelotvorenjima, izolovano antitelo se sastoji od varijabilne regije teškog lanca, pri čemu je sekvenca varijabilne regije teškog lanca obuhvaćena od strane SEQ ID NO:9. U drugim otelotvorenjima, izolovano antitelo se sastoji od varijabilne regije lakog lanca, pri čemu je sekvenca varijabilne regije lakog lanca obuhvaćena od strane SEQ ID NO:10.
[0018] U nekim otelotvorenjima izolovano antitelo se sastoji od varijabilne regije teškog lanca, pri čemu je sekvenca varijabilne regije teškog lanca obuhvaćena od strane SEQ ID NO:9. U drugim otelotvorenjima, izolovano antitelo se sastoji od varijabilne regije lakog lanca, pri čemu je sekvenca varijabilne regije lakog lanca obuhvaćena od strane SEQ ID NO:10. Ova kombinacija varijabilne regije teškog lanca i varijabilne regije lakog lanca naziva se Ab79.
[0019] U nekim otelotvorenjima izolovano antitelo se sastoji od teškog lanca i lakog lanca, gde je sekvenca teškog lanca obuhvaćena od strane SEQ ID NO:11, a laki lanac je obuhvaćen od strane SEQ ID NO:12.
[0020] U nekim otelotvorenjima izolovano antitelo uključuje Fc domen. U drugim otelotvorenjima, domen Fc je ljudski Fc domen. U još nekim otelotvorenjima, Fc domen je varijanta Fc domena.
[0021] U nekim otelotvorenjima pružena je izolovana nukleinska kiselina koja kodira teški lanac od SEQ ID NO:11. U drugim otelotvorenjima, pružena je izolovana nukleinska kiselina koja kodira laki lanac od SEQ ID NO:12.
[0022] U nekim otelotvorenjima pružena je ćelija domaćina, gde ćelija domaćina sadrži izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira teški lanac od SEQ ID NO:11 i izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira laki lanac od SEQ ID NO:12.
[0023] U nekim otelotvorenjima obezbeđen je postupak za proizvodnju antitela objave.
Postupak obuhvata kultivaciju ćelije domaćina koja sadrži izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira teški lanac od SEQ ID NO:11 i izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira laki lanac od SEQ ID NO:12 pod uslovima u kojima su izolovane nukleinske kiseline eksprimirane i proizvedeno je antitelo.
[0024] U nekim otelotvorenjima opisano je izolovano antitelo specifično za ljudski CD38 (SEQ ID NO:1) i cinomolgus CD38 (SEQ ID NO:2). Ovo antitelo se sastoji od šest CDR-a, pri čemu se svaka CDR ovog antitela može razlikovati od SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7 i SEQ ID NO:8 za 0, 1 ili 2 aminokiselinske supstitucije.
[0025] U drugim otelotvorenjima opisano je izolovano antitelo specifično za ljudski CD38 (SEQ ID NO:1) i cinomolgus CD38 (SEQ ID NO:2). Ovo antitelo se sastoji od varijabilne regije teškog lanca i varijabilne regije lakog lanca, pri čemu se varijabilna regija teškog lanca sastoji od tri regije za određivanje komplementarnosti (CDR), HCDR1, HCDR2 i HCDR3, i gde je varijabilna regija lakog lanca takođe sastavljena od tri CDR-e, LCDR1, LCDR2 i LCDR3. Sekvence CDR-a su predstavljene pomoću: HCDR1 (SEQ ID NO:13), HCDR2 (SEQ ID NO:14), HCDR3 (SEQ ID NO:15), LCDR1 (SEQ ID NO:16), LCDR2 (SEQ ID NO:17) i LCDR3 (SEQ ID NO:18).
[0026] U drugim otelotvorenjima, izolovano antitelo se sastoji od varijabilne regije teškog lanca, pri čemu je sekvenca varijabilne regije teškog lanca obuhvaćena od strane SEQ ID NO:19. U drugim otelotvorenjima, izolovano antitelo se sastoji od varijabilne regije lakog lanca, pri čemu je sekvenca varijabilne regije lakog lanca obuhvaćena od strane SEQ ID NO:20.
[0027] U nekim otelotvorenjima izolovano antitelo se sastoji od varijabilne regije teškog lanca, pri čemu je sekvenca varijabilne regije teškog lanca obuhvaćena od strane SEQ ID NO:19. U drugim otelotvorenjima, izolovano antitelo se sastoji od varijabilne regije lakog lanca, pri čemu je sekvenca varijabilne regije lakog lanca obuhvaćena od strane SEQ ID NO:20. Ova kombinacija varijabilne regije teškog lanca i varijabilne regije lakog lanca naziva se Ab19.
[0028] U nekim otelotvorenjima izolovano antitelo se sastoji od teškog lanca i lakog lanca, pri čemu je sekvenca teškog lanca obuhvaćena od strane SEQ ID NO:21, i lak lanac je obuhvaćen od strane SEQ ID NO:22.
[0029] U nekim otelotvorenjima pružena je izolovana nukleinska kiselina koja kodira teški lanac od SEQ ID NO:21. U drugim otelotvorenjima, pružena je izolovana nukleinska kiselina koja kodira laki lanac od SEQ ID NO:22.
[0030] U nekim otelotvorenjima pružena je ćelija domaćina, gde ćelija domaćina sadrži izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira teški lanac od SEQ ID NO:21 i izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira laki lanac od SEQ ID NO:22.
[0031] U nekim otelotvorenjima obezbeđen je postupak za proizvodnju antitela kako je ovde opisano. Postupak obuhvata kultivaciju ćelije domaćina koja sadrži izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira teški lanac od SEQ ID NO:21 i izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira laki lanac od SEQ ID NO:22 pod uslovima u kojima su izolovane nukleinske kiseline eksprimirane i proizvedeno je antitelo.
[0032] U drugim otelotvorenjima opisano je izolovano antitelo specifično za ljudski CD38 (SEQ ID NO:1) i cinomolgus CD38 (SEQ ID NO:2). Ovo antitelo se sastoji od šest CDR-a, pri čemu se svaka CDR ovog antitela može razlikovati od SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17 i SEQ ID NO:18 za 0, 1 ili 2 aminokiselinske supstitucije.
[0033] U nekim otelotvorenjima je obezbeđeno izolovano anti-CD38 antitelo koje se specifično vezuje za ljudski CD38 (SEQ ID NO:1) i cinomolgus CD38 (SEQ ID NO:2), pri čemu se antitelo vezuje za ljudski CD38 sa KD od oko 10<-6>, 10<-7>, 10<-8>, 10<-9>ili više i vezuje cinomolgus CD38 sa KD od oko 10<-6>, 10<-7>, 10<-8>, 10<-9>ili više.
[0034] U nekim otelotvorenjima pružena su antitela koja se nadmeću sa Ab79 i/ili Ab19 za vezivanje za ljudski CD38 i/ili cinomolgus CD38.
[0035] Ove i druge varijante, karakteristike i potencijalne prednosti će postati očigledne s obzirom na sledeći opis i crteže.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0036]
SLIKA 1 prikazuje CD38 profil eksprimiranja na limfoidnim linijskim ćelijama sa zvezdom koja pokazuje visoko eksprimiranje CD38. Eksprimiranje CD38 je identifikovano na pro-B ćelijama (CD34<+>CD19<+>CD20-), aktiviranim B ćelijama (CD19<+>CD20<+>), plazma ćelijama (CD138<+>CD19-CD20-), aktiviranim CD4<+>i CD8<+>T ćelijama, NKT ćelijama (CD3<+>CD56<+>) i NK ćelijama (CD56<+>CD16<+>). Pored toga, CD38 eksprimiranje se sreće na limfoidnim progenitorskim ćelijama (CD34<+>CD45RA<+>CD10<+>CD19-), ali ne na limfoidnim matičnim ćelijama. Pored toga, povećano eksprimiranje CD38 se vidi na zrelim DC i aktiviranim monocitima.
SLIKA 2 prikazuje sekvence teškog i lakog lanca Ab79 i Ab19.
SLIKA 3 prikazuje sekvence ljudskog i cinomolgus CD38.
SLIKA 4 prikazuje epitope ljudskog CD38 koji se vezuju za svako od antitela, benčmark 1 i 2, Ab19 i Ab79.
SLIKA 5 prikazuje povećano eksprimiranje CD38 u PMBC-u od pacijenata sa SLE-om koristeći komercijalno dostupno ljudsko CD38 antitelo.
SLIKA 6 prikazuje procentualnu promenu broja ćelija kod cyno majmuna u roku od 24 sata nakon doziranja.
SLIKA 7 pokazuje oporavak trošenja nakon jedne doze Ab79.
SLIKA 8 prikazuje rezultate jednog HuSCID miša u smislu značajnog smanjenja svih Ig izotipova nakon jedne doze Ab79.
SLIKA 9 je slična Slici 8 za deaktiviranje Ab79 u miševima HuSCID-a kako je opisano u Primerima.
SLIKA 10 prikazuje značajno smanjenje anti-tetanusnog odgovora u HuSCID modelu nakon tretmana Ab79.
SLIKA 11 prikazuje, ponovo u HuSCID modelu, značajan porast preživljavanja nakon lečenja Ab79, suštinski tip grafta u odnosu na model domaćina.
SLIKA 12 prikazuje razlike u eksprimiranju CD38 antigena kod PBMC-a ljudi i miševa, koristeći komercijalna antitela prema svakom.
SLIKA 13 pokazuje razlike u eksprimiranju DC38 antitela ljudskog I mišijeg PBMCs koristeći komercijalna antitela prema svakom.
DETALJNI OPIS PRONALASKA
Pregled
[0037] Pokazalo se da ekstracelularni domen CD38 ima bifunkcionalnu enzimsku aktivnost, koja ima i ADP-ribozil ciklazu, kao i aktivnosti ADP-ribozil hidrolaze. Prema tome, CD38 može katalizovati konverziju NAD<+>u cADPR (ciklaza) i može dalje hidrolizovati ADP-ribozu (hidrolaza). cADPR je uključen u mobilizaciju kalcijuma iz intracelularnih zaliha što je druga mesendžer aktivnost važna za proliferaciju ćelija, diferencijaciju i apoptozu.
[0038] Povećano eksprimiranje CD38 je dokumentovano u različitim bolestima hematopoetskog porekla i opisano je kao negativni prognostički marker u hroničnoj limfoblastnoj leukemiji. Takve bolesti uključuju, ali nisu ograničene na, multipli mijelom (Jackson i dr. (1988)), hroničnu limfoblastnu leukemiju (Moribito i dr. (2001), Jelinek i dr. (2001), Chevalier i dr. (2002), Dürig i dr. (2002)), B-ćelijsku hroničnu limfocitnu leukemiju, akutnu limfoblastnu leukemiju (Keyhani i dr. (2000)) uključujući akutnu limfocitnu leukemiju B-ćelija, Valdenstromovu makroglobulinemiju, primarnu sistemsku amiloidozu, limfom plaštastih ćelija, pro-limfocitnu/mijelocitnu leukemiju, akutnu mijeloidnu leukemiju (Keyhani i dr. (1993)), hroničnu mijeloidnu leukemiju (Marinov i dr. (1993)), folikularni limfom, leukemiju NK-ćelija i leukemiju plazma ćelija. Kao takav, CD38 pruža korisnu metu u lečenju bolesti hematopoetskog sistema.
[0039] Nekoliko anti-CD38 antitela su u kliničkim studijama za lečenje karcinoma povezanih sa CD38. Prema tome, korisna su antitela na CD38 sa terapeutskim efektom i/ili dijagnostičkim primenama. Obelodanjivanje pruža dva različita anti-CD38 seta CDR-a koje se vezuju za različite epitope CD38 i koje se vezuju za ljudske i cinomolgus oblike CD38 i antitela koja sadrže ove CDR.
[0040] Pored toga, predmetno obelodanjenje pokazuje da anti-CD38 antitela pronalaze upotrebu u dijagnozi i/ili lečenju inflamacijskih i/ili imunoloških poremećaja povezanih sa aktiviranim limfocitima, uključujući specifično autoimune bolesti. Kao što je ovde prikazano, eksprimiranje CD38 u nezrelim hematopoijskim ćelijama, dole regulisanim u zrelim ćelijama, i ponovo izraženo na visokim nivoima u aktiviranim limfocitima i plazma ćelijama. Na primer, visoko eksprimiranje CD38 se vidi kod aktiviranih B ćelija, plazma ćelija, aktiviranih CD4 T ćelija, aktiviranih CD8 T ćelija, NK ćelija, NKT ćelija, zreli dendritiskih ćelija (DCs) i aktiviranih monocita.
[0041] Rezultati su iznenađujući jer je prisustvo autoantitela na CD38 povezano sa dijabetesom, hroničnim autoimunim tiroiditisom i Gravesovom bolešću (vidi Antonelli i dr, Clin. Ekp. Immunol 2001.126: 426-431; Mallone i dr., Diabetes 50: 752 (2001) i Antonelli i dr., J. Endocrinol, Invest 27: 695-707 (2004).
[0042] Prema tome, antitela pronalaska nalaze upotrebu u dijagnozi i/ili lečenju više bolesti, uključujući, ali ne ograničavajući se na autoimune bolesti kao što je navedeno u nastavku, uključujući, ali ne ograničavajući se na sistemski lupus erthematosus (SLE), reumatoidni artritis (RA ), inflamatorna bolest creva (IBD) i ulcerativni kolitis.
[0043] Tako, na primer, mogu se odabrati pacijenti sa visokim sadržajem plazma ćelija, kao što su SLE pacijenti koji pokazuju visoke plazemske ćelije, kao i pacijenti sa RA koji pokazuju da ne reaguju na terapije zasnovane na CD20.
[0044] Terapeutska anti-CD38 antitela predmetnog pronalaska se vezuju za CD38 pozitivne ćelije, što dovodi do smanjenja ovih ćelija, kao što su aktivirani limfociti, kroz više mehanizama delovanja, uključujući, ali ne ograničavajući se na CDC, ADCC i puteve apoptoze, kao što je prikazano ovde, što dovodi do lečenja i/ili poboljšanja autoimunih bolesti.
[0045] Jedna prednost, koja nije viđena u nekim anti-CD38 antitelima u onkološkom kliničkom ispitivanju, je sposobnost vezivanja za cinomolgus CD38, pošto ovi primati pronalaze primenu u predkliničkom testiranju i na taj način mogu dovesti do ranog vrednovanja doziranja, toksičnosti, efikasnosti itd.
CD38 proteini
[0046] Shodno tome, predmetni pronalazak pruža izolovana anti-CD38 antitela koja specifično vezuju ljudski CD38 protein (i, kako je opisano ispod, dodatno i poželjno specifično vezuju primatski CD38 protein). Kao što je poznato u struci, CD38 proteini se nalaze u brojnim vrstama. Od posebne primene u predmetnom pronalasku su antitela koja se vezuju i za ljudske i primatske CD38 proteine, posebno za primate koji se koriste u kliničkim ispitivanjima, kao što su cinomolgus (Macaca fascicularis, makaki koji jede krabe, ponekad se ovde označava kao „cyno“) majmuna. Pod „ljudskim CD38“ ili „ljudskim CD38 antigenom“ se misli na protein od SEQ ID NO:1 ili funkcionalni fragment, kao što je epitop, kao što je ovde definisano. Generalno, CD38 poseduje kratak intracitoplazmični rep, transmembranski domen i ekstracelularni domen, u specifičnim otelotvorenjima, antitela pronalaska se vezuju za ekstracelularni deo CD38 proteina. Pod „cinomolgus CD38“ ovde se misli na SEQ ID NO:2, koji je 92% identičan sa CD38 čoveka.
[0047] Sinonimi CD38 uključuju ADP ribozil ciklazu 1, cADPr hidrolazu 1, Cd38-rsl, cikličnu ADP-riboza hidrolazu 1, 1-19 i NIM-R5 antigen.
[0048] Anti-CD38 Ab79 antitela iz pronalaska su u interakciji sa CD38 u nizu aminokiselinskih ostataka uključujući K121, F135, Q139, D141, M142, D202, V203, H205,
1
Q236, E239, W241, S274, C275, K276, F284, C287, V288, K289, N290, P291, E292, D293. Kao što je ovde navedeno, druga antitela koja su u interakciji sa ovim ostacima takođe se koriste u terapijskim i dijagnostičkim primenama.
[0049] U nekim otelotvorenjima, anti-CD38 antitela iz ovog pronalaska opciono (i u nekim slučajevima poželjno) se ne vezuju za druge članove CD38 porodice kao što je CD157. Na primer, poželjna otelotvorenja ovde se ne vezuju za ljudski CD157 od SEQ ID NO:23 (Genbank accession NP_004325).
Antitela
[0050] Ovaj pronalazak pruža anti-CD3 8 antitela, uglavnom terapijska i/ili dijagnostička antitela kako je ovde opisano. Antitela koja pronalaze upotrebu u ovom pronalasku mogu da preuzmu niz formata kako je ovde opisano, uključujući tradicionalna antitela, kao i derivate antitela, fragmente i mimetike, opisane u nastavku. U suštini, objava pruža strukture antitela koje sadrže set od 6 CDR-a kako je ovde definisano (uključujući mali broj aminokiselinskih promena kako je opisano u nastavku).
[0051] Tradicionalne strukturne jedinice antitela obično sadrže tetramer. Svaki par tetramera se sastoji od dva identična para polipeptidnih lanaca, pri čemu svaki par ima jedan „laki“ (obično ima molekulsku težinu od oko 25 kDa) i jedan „teški“ lanac (obično ima molekulsku težinu od oko 50-70 kDa). Ljudski laki lanci su klasifikovani kao kapa i lambda laki lanci. Teški lanci su klasifikovani kao mu, delta, gama, alfa ili epsilon i definišu izotip antitela kao IgM, IgD, IgG, IgA i IgE, respektivno. IgG ima nekoliko podklasa, uključujući, ali ne ograničavajući se na IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4. IgM ima podklase, uključujući, ali ne ograničavajući se na, IgM1 i IgM2. Prema tome, „izotip“, kad se ovde koristi, podrazumeva bilo koju od podklasa imunoglobulina definisanih hemijskim i antigenim karakteristikama njihovih konstantnih regija. Poznati ljudski imunoglobulinski izotipi su IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, IgA2, IgM1, IgM2, IgD i IgE. Trebalo bi shvatiti da terapeutska antitela mogu takođe sadržati hibride izotipa i/ili podklasa.
[0052] Amino-terminalni deo svakog lanca uključuje varijabilnu regiju od oko 100 do 110 ili više aminokiselina koje su prvenstveno odgovorne za prepoznavanje antigena. U varijabilnoj regiji, tri petlje se prikupljaju za svaki od V domena teškog lanca i lakog lanca kako bi se formiralo mesto za vezivanje antigena. Svaka od petlji se naziva regijom koja određuje komplementarnost (u daljem tekstu „CDR“), u kojoj je najvažnija varijacija u sekvenci aminokiselina. „Varijabilno“ se odnosi na činjenicu da se određeni segmenti varijabilne regije obično razlikuju u nizu među antitelima. Varijabilnost unutar varijabilne regije nije ravnomerno raspoređena. Umesto toga, V regije se sastoje od relativno invarijantnih poteza koji se zovu okvirne regije (FRs) od 15-30 aminokiselina razdvojenih kraćim regijama ekstremne varijabilnosti pod nazivom „hipervarijabilne regije“, koje su dužine ili dužine 9-15 aminokiselina.
[0053] Svaki VH i VL se sastoje od tri hipervarijabilne regije („komplementarno odredivi regioni“, „CDR“) i četiri FR, raspoređeni od amino-terminusa do karboksi-terminusa u sledećem redosledu: FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4.
[0054] Hipervarijabilna regija uglavnom obuhvata ostatke aminokiselina od približno 24-34 aminokiselinskih ostataka (LCDR1; „L“ označava laki lanac), 50-56 (LCDR2) i 89-97 (LCDR3) u varijabilnoj regiji lakog lanca i oko 31-35B (HCDR1; „H“ označava teški lanac), 50-65 (HCDR2) i 95-102 (HCDR3) u varijabilnoj regiji teškog lanca; Kabat i dr., SEQUENCES OF PROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991) i/ili onih ostataka koji formiraju hipervarijabilnu petlju (npr. ostaci 26-32 (LCDR1), 50-52 (LCDR2) i 91-96 (LCDR3) u varijabilnoj regiji lakog lanca i 26-32 (HCDR1), 53-55 (HCDR2) i 96-101 (HCDR3) u varijabilnoj regiji teškog lanca; Chothia i Lesk (1987) J. Mol. Biol.196: 901-917. Specifične CDR pronalaska su opisane u nastavku.
[0055] U celoj predmetnoj specifikaciji, Kabat sistem numerisanja se generalno koristi kada se govori o ostatku u varijabilnom domenu (približno, ostaci 1-107 varijabilne regije lakog lanca i ostaci 1-113 varijabilne regije teškog lanca) (npr., Kabat i dr., supra (1991)), dok se EU sistem numerisanja koristi za Fc regiju.
[0056] CDR doprinose stvaranju antigen-vezujućeg ili, konkretnije, mesta vezivanja epitopa na antitelu. „Epitop“ se odnosi na determinantu koja se interakuje sa specifičnim mestom vezivanja antigena u varijabilnoj regiji molekula antitela poznatog kao paratop. Epitopi su grupe molekula, kao što su aminokiseline ili lanci bočnih šećera i obično imaju specifične strukturne karakteristike, kao i specifične karakteristike naelektrisanja. Jedan antigen može imati više od jednog epitopa. Na primer, kako je prikazano ovde, ova dva različita antitela navedena ovde kao „Ab19“ i „Ab79“ se vezuju za različite epitope na CD38 molekulu.
[0057] Epitop može sadržati aminokiselinske ostatke direktno uključene u vezivanje (takođe nazvane imunodominantna komponenta epitopa) i ostale aminokiselinske ostatke, koji nisu direktno uključeni u vezivanje, kao što su ostaci aminokiselina koji su efikasno blokirani specifičnim antigen vezujućim peptidom; drugim rečima, ostatak aminokiselina je unutar otiska specifičnog antigen vezujućeg peptida.
[0058] Epitopi mogu biti konformacioni ili linearni. Konformacioni epitop se proizvodi od prostorno jukstapozicioniranih aminokiselina iz različitih segmenata linearnog polipeptidnog lanca. Linearni epitop je jedan koji se proizvodi susednim aminokiselinskim ostacima u polipeptidnom lancu. Konformacioni i nekonformacioni epitopi mogu se razlikovati u tome što vezivanje za prethodne, ali ne i druge, izgubljeno je u prisustvu denaturišućih rastvarača.
[0059] Epitop tipično uključuje najmanje 3, a najčešće najmanje 5 ili 8-10 aminokiselina u jedinstvenu prostornu konformaciju. Antitela koja prepoznaju isti epitop mogu se verifikovati u jednostavnom imunotestu koji pokazuje sposobnost jednog antitela da blokira vezivanje drugog antitela u ciljani antigen, na primer „bining“, kako je navedeno u istraživanjima rendgenske kristalografije, kao što je prikazano u Primerima, identifikovao je aminokiselinske ostatke koji se vezuju za antitela kako objave (uključujući Ab19 i Ab79), tako i stanja tehnike (Benčmark 1 i Benčmark 2), kako je prikazano na Slici 4.
[0060] U ovom pronalasku, Ab79 kao što je opisano u Primerima, interakuje sa većim brojem aminokiselinskih ostataka CD38 uključujući K121, F135, Q139, D141, M142, E239, W241, S274, C275, K276, F284, V288, K289, N290, P291, E292 i D293. Treba napomenuti da su ovi ostaci identični i kod ljudi i kod cynomoglus majmuna, sa izuzetkom da je S274 zapravo F274 kod cyno majmuna. Ovi ostaci mogu predstavljati imunodominantni eptitop i/ili ostatke unutar otiska specifičnog antigen vezujućeg peptida.
[0061] Kao što je ovde opisano, Ab19 se vezuje za različiti epitop, uključujući G91, E103, E1034, D105, Q107, M110, K111, T114, Q115, T148, V192, R194, R195, F196, A199, H228, N229, Q231, E233 i K234. Treba napomenuti da su ovi ostaci identični kod ljudi i
1
cyno majmuna, s izuzetkom da M110 je V110 kod cyno majmuna, a A199 je T199 kod cyno majmuna.
[0062] Stoga, u nekim otelotvorenjima, antitela koja se nadmeću sa AB79 i Ab19 vezivanjem na bilo kom od ovih epitopa mogu se koristiti za lečenje autoimunih bolesti. Treba napomenuti da se Ab79 i BM1 donekle preklapaju; pa antitela koja se nadmeću sa Ab79 a nisu BM1 pronalaze upotrebu u ovom pronalasku.
[0063] Prema tome, predmetna objava pruža antitela koja se vezuju za ljudski i cyno CD38 i interakuju sa najmanje 80%, 90%, 95% ili 98% ovih ostataka. Drugim rečima, površina zone interakcije nije ništa više od površine ovih ostataka.
[0064] Karboksi-terminalni deo svakog lanca definiše konstantna regija koja je primarno odgovorna za efektorsku funkciju. Kabat i dr. su prikupili brojne primarne sekvence varijabilnih regija teških lanaca i lakih lanaca. Na osnovu stepena očuvanja sekvenci, klasifikovali su pojedinačne primarne sekvence u CDR i okviru i napravili spisak (pogledati SEQUENCES OF IMMUNOLOGICAL INTEREST, 5th edition, NIH publication, No. 91-3242, E.A. Kabat i dr.).
[0065] U IgG podklasi imunoglobulina, u teškim lancima postoji nekoliko domena imunoglobulina. Pod „domenom imunoglobulina (Ig)“ ovde se podrazumeva regija imunoglobulina koja ima posebnu tercijarnu strukturu. Od interesa u predmetnom pronalasku su domeni teškog lanca, uključujući konstantne teške (CH) domene i zglobne domene. U kontekstu IgG antitela, izotipovi IgG-a imaju po tri CH regije. Shodno tome, domeni „CH“ u kontekstu IgG su kako sledi: „CH1“ se odnosi na položaje 118-220 prema EU indeksu kao kod Kabata. „CH2“ odnosi se na položaje 237-340 prema EU indeksu kao kod Kabata, a
„CH3“ odnosi se na položaje 341-447 prema EU indeksu kao kod Kabata.
[0066] Druga vrsta Ig domena teškog lanca je zglobna regija. Pod „zglobom“ ili „zglobnom regijom“ ili „zglobnom regijom imunoglobulina“ ovde se misli na fleksibilni polipeptid koji sadrži aminokiseline između prvog i drugog konstantnog domena antitela. Strukturno, IgG CH1 domen se završava na EU položaju 220, a domen IgG CH2 počinje na EU položaju 237. Tako je IgG zglob antitela ovde definisan tako da uključuje položaje 221 (D221 u IgG1) do 236 (G236 u IgG1), gde je brojanje prema EU indeksu kao kod Kabata. U nekim otelotvorenjima, na primer u kontekstu Fc regije, uključen je donji zglob, pri čemu se „donji zglob“ obično odnosi na položaje 226 ili 230.
[0067] Od posebnog interesa u ovom pronalasku su Fc regije. Pod „Fc“ ili „Fc regija“ ili „Fc domen“, kad se ovde koristi, podrazumeva se polipeptid koji sadrži konstantnu regija antitela isključujući prvu konstantnu regiju domena imunoglobulin i, u nekim slučajevima, i deo zgloba. Tako se Fc odnosi na poslednje dve konstantne regije domena imunoglobulina IgA, IgD i IgG, gde su poslednje tri konstantne regije domena imunoglobulina IgE i IgM, i fleksibilan zglob N-terminalni na ove domene. Za IgA i IgM, Fc može uključiti i J lanac. Za IgG, domen Fc sadrži domene imunoglobulina Cγ2 i Cγ3 (Cγ2 i Cγ3) i donju zglobnu regiju između Cγ1 (Cγ1) i Cγ2 (Cγ2). Iako se granice Fc regije mogu razlikovati, Fc regija za teški lanac IgG obično se definiše tako da uključuje ostatke C226 ili P230 do svog karboksilterminusa, pri čemu je brojanje prema EU indeksu kao kod Kabata. U nekim otelotvorenjima, kao što je detaljnije opisano u nastavku, modifikacije aminokiselina se vrše u Fc regiji, na primer kako bi se promenilo vezivanje za jedan ili više FcyR receptor ili FcRn receptor.
[0068] U nekim otelotvorenjima, antitela su pune dužine. Pod „ antitelom su pune dužine“ ovde se podrazumeva struktura koja čini prirodni biološki oblik antitela, uključujući varijabilne i konstantne regije, uključujući jednu ili više modifikacija kako je ovde navedeno.
[0069] Alternativno, antitela mogu biti razne strukture, uključujući, ali ne ograničavajući se na, fragmente antitela, monoklonska antitela, bispecifična antitela, minitela, antitela u domenu, sintetička antitela (ponekad ovde označena kao „antitela mimetici“), himerna antitela, humanizovana antitela, fuzije antitela (ponekad se nazivaju „konjugati antitela“), i fragmenti svakog od njih, respektivno.
[0070] U jednom otelotvorenju, antitelo je fragment antitela. Specifični fragmenti antitela uključuju, ali nisu ograničeni na: (i) Fab fragment koji se sastoji od domena VL, VH, CL i CH1, (ii) Fd fragment koji se sastoji od VH i CH1 domena, (iii) Fv fragment koji se sastoji od VL i VH domena pojedinačnog antitela; (iv) dAb fragment (Ward i dr., 1989, Nature 341:544-546) koji se sastoji od jednog varijabilnog domena, (v) izolovane CDR regije, (vi) F (ab')2 fragmente, dvovalentne fragmente koji sadrže dva povezana Fab fragmenta (vii) jednolančane Fv molekule (scFv), pri čemu su VH domen i VL domen povezani sa peptidnim veznikom koji dozvoljava da se dva domena udružuju kako bi se formiralo mesto vezivanja
1
antigena (Bird i dr., 1988, Science 242:423-426, Huston i dr., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 85:5879-5883), (viii) bispecifičan jednolančani Fv (WO 03/11161) i (ix) „dijatela“ ili
„trijatela“, multivalentni ili multispecifični fragmenti izgrađeni fuzijom gena (Tomlinson i dr., 2000, Methods Enzymol. 326:461-479; WO94/13804; Holliger i dr., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.90:6444-6448).
Himerna i humanizovane antitela
[0071] U nekim otelotvorenjima, antitelo može biti mešavina različitih vrsta, npr. Himerno antitelo i/ili humanizovano antitelo. To jest, u ovom pronalasku, CDR setovi mogu se koristiti sa konstantnim regijama, različitim od onih koje su ovde posebno specifikovane.
[0072] Generalno, i „himerna antitela“ i „humanizovana antitela“ odnose se na antitela koja kombinuju regije od više od jedne vrste. Na primer, „himerna antitela“ tradicionalno obuhvataju varijabilne regije) od miša (ili pacova, u nekim slučajevima) i konstantne regije od čoveka. „Humanizovana antitela“ se uglavnom odnose na ne-ljudska antitela kojima su okvirne regije varijabilnog domena zamenjene za sekvence pronađene u ljudskim antitelima. Generalno, u humanizovanom antitelu, celo antitelo, osim CDR-e, je kodirano polinukleotidom ljudskog porekla ili je identično takvom antitelu, osim u okviru svojih CDR-a. CDR-e, od kojih neke ili sve kodirane nukleinskim kiselinama poreklom iz ne-ljudskog organizma, se primenjuju u beta-listu okvira varijabilne regije ljudskog antitela kako bi se stvorilo antitelo, čija specifičnost je određena od strane uvezanih CDR-a. Stvaranje takvih antitela je opisano u, na primer, WO 92/11018, Jones, 1986, Nature 321:522-525, Verhoeyen i dr., 1988, Science 239:1534-1536. „Mutacija unazad“ odabranih ostataka akceptorskog okvira prema odgovarajućim ostacima donora često je potrebna kako bi se povratio afinitet koji se izgubio u inicijalnom graftovanom konstruktu (US 5530101; US 5585089; US 5693761; US 5693762; US 6180370; US 5859205; US 5821337; US 6054297, US 6407213). Humanizovano antitelo optimalno će takođe sadržati barem deo konstantne regije imunoglobulina, obično ljudskog imunoglobulina, i time će obično sadržati ljudsku Fc regiju. Humanizovana antitela se takođe mogu generisati pomoću mišjih sa genetski modifikovanim imunim sistemom. Roque i dr., 2004, Biotechnol. Prog.20:639-654. Različite tehnike i postupci humanizacije i preoblikovanja ne-ljudskih antitela su dobro poznati u struci (pogledati Tsurushita & Vasquez, 2004, Humanization of Monoclonal Antitelaes, Molecular Biology of B Cells, 533-545, Elsevier Science (USA), i reference citirane tamo). Postupci humanizacije uključuju, ali nisu ograničeni na postupke opisane u Jones i dr., 1986, Nature
1
321:522-525; Riechmann i dr.,1988; Nature 332:323-329; Verhoeyen i dr., 1988, Science, 239:1534-1536; Queen i dr., 1989, Proc Natl Acad Sci, USA 86:10029-33; He i dr., 1998, J. Immunol. 160: 1029-1035; Carter i dr., 1992, Proc Natl Acad Sci USA 89:4285-9, Presta i dr., 1997, Cancer Res.57(20):4593-9; Gorman i dr., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:4181-4185; O'Connor i dr., 1998, Protein Eng 11:321-8. Humanizacija ili drugi postupci smanjivanja imunogenosti neprekidnih regija ne-ljudskih antitela mogu uključivati postupke za ponovno izranjanje, kako je to opisano na primer u Roguska i dr., 1994, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:969-973. U jednom aspektu, roditeljsko antitelo je afinitetno sazrelo, kako je poznato u struci. Postupci bazirani na strukturi mogu biti korišćeni za humanizaciju i sazrevanje afiniteta, na primer kako je opisano u USSN 11/004,590. Postupci zasnovani na selekciji mogu se koristiti za humanizaciju i/ili afinitetno sazrevanje varijabilnih regija antitela, uključujući, ali ne ograničavajući se na postupke opisane u Wu i dr., 1999, J. Mol. Biol. 294:151-162; Baca i dr., 1997, J. Biol. Chem.272(16):10678-10684; Rosok i dr., 1996, J. Biol. Chem.271(37): 22611-22618; Rader i dr., 1998, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:
8910-8915; Krauss i dr., 2003, Protein Engineering 16(10):753-759. Drugi postupci humanizacije mogu uključivati graftovanje samo delova CDR-a, uključujući, ali ne ograničavajući se na postupke opisane u USSN 09/810,510; Tan i dr., 2002, J. Immunol. 169:1119-1125; De Pascalis i dr., 2002, J. Immunol.169:3076-3084.
[0073] U jednom otelotvorenju, antitela iz ovog pronalaska mogu biti multispecifična antitela, a naročito bispecifična antitela, koja se ponekad nazivaju i „dijatelima“. To su antitela koja se vezuju za dva (ili više) različitih antigena, ili različitih epitopa na istom antigenu. Dijatela mogu biti proizvedena na različite načine poznate u struci (Holliger and Winter, 1993, Current Opinion Biotechnol. 4:446-449, npr., pripremljeni hemijski ili od hibridnih hibridoma.
[0074] U jednom otelotvorenju, antitelo je minitelo. Minitela su minimizovani proteini poput antitela koji sadrže scFv spojen sa CH3 domenom. Hu i dr., 1996, Cancer Res.56:3055-3061. U nekim slučajevima, scFv može da se poveže sa Fc regijom, a može uključivati i deo ili čitavu zglobnu regiju.
[0075] Antitela iz ovog pronalaska su generalno izolovana ili rekombinantna. „Izolovano“, kada se koristi da opiše različite polipeptide koji su ovde opisani, označava polipeptid koji je identifikovan i odvojen i/ili je obrađen iz ćelije ili ćelijske kulture iz koje je eksprimiran.
1
Obično, izolovani polipeptid će se pripremiti najmanje jednim korakom prečišćavanja.
„izolovano antitelo“ odnosi se na antitelo koje je u suštini bez drugih antitela koja imaju različite antigenske specifičnosti. Na primer, izolovano antitelo koje se specifično vezuje za CD38 je u suštini bez antitela koja specifično vezuju antigene koji nisu CD38.
[0076] Izolovano antitelo koje se specifično vezuje za epitop, izoform ili varijantu ljudskog CD38 ili cinomolgus CD38 može, međutim, imati unakrsnu reaktivnost prema drugim srodnim antigenima, na primer od drugih vrsta, kao što su homolozi CD38 vrsta. Štaviše, izolovano antitelo može biti u suštini bez drugih ćelijskih materijala i/ili hemikalija.
[0077] Izolovana monoklonska antitela, koja imaju različite specifičnosti, mogu se kombinovati u dobro definisanom sastavu. Na taj način, na primer, Ab79 i Ab19 mogu se kombinovati u jednoj formulaciji, po želji.
[0078] Anti-CD38 antitela iz ovog pronalaska specifično vezuju CD38 ligande (npr. ljudske i cinomolgus CD38 proteine od SEQ ID NO: 1 i 2. „Specifično vezivanje“ ili „specifično vezivanje za“ ili „je specifično za“ određeni antigen ili epitop znači vezivanje koje se merljivo razlikuje od nespecifične interakcije. Specifično vezivanje može se meriti, na primer, određivanjem vezivanja molekula u poređenju sa vezivanjem kontrolnog molekula, koji je u principu molekul slične strukture koji nema aktivnost vezivanja. Na primer, specifično vezivanje može biti određeno nadmetanjem sa kontrolnim molekulom koji je sličan cilju.
[0079] Specifično vezivanje za određeni antigen ili epitop može se pokazati, na primer, od strane antitela koje ima KD za antigen ili epitop od najmanje oko 10<-4>M, barem oko 10<-5>M, barem oko 10<-6>M, barem oko 10<-7>M, barem oko 10<-8>M, barem oko 10<-9>M, alternativno barem oko 10<-10>M, barem oko 10<-11>M, barem oko 10<-12>M ili više, gde se KD odnosi na stopu disocijacije određene interakcije antitela i antigena. Tipično, antitelo koje specifično vezuje antigen će imati KD koji je 20-, 50-, 100-, 500-, 1000-, 5.000-, 10.000- ili više puta veći za kontrolni molekul u odnosu na antigen ili epitop.
[0080] Takođe, specifično vezivanje za određeni antigen ili epitop može se pokazati, na primer, od strane antitela koje ima KA ili Ka za antigen ili epitop od najmanje 20-, 50-, 100-,
1
500-, 1000-, 5.000 -, 10.000- ili više puta veći za epitop u odnosu na kontrolu, gde KA ili Ka označava brzinu asocijacije određene interakcije antitela i antigena.
Modifikacije antitela
[0081] Predmetni pronalazak dalje pruža varijante antitela. To jest, postoje brojne modifikacije koje mogu biti izvedene antitelima pronalaska, uključujući, ali ne ograničavajući se na, modifikacije aminokiselina u Fc regiji, varijante glikozilacije, kovalentne modifikacije drugih vrsta itd.
[0082] Pod „varijantom“ ovde se podrazumeva polipeptidna sekvenca koja se razlikuje od roditeljskog polipeptida zbog barem jedne modifikacije aminokiselina. Modifikacije aminokiselina mogu uključivati supstitucije, umetanja i brisanja, pri čemu su prve u mnogim slučajevima poželjne.
[0083] Generalno, varijante mogu uključivati bilo koji broj modifikacija, sve dok je funkcija proteina i dalje prisutna, kako je ovde opisano. To jest, u slučaju varijanti aminokiselina generisanih sa CDR od Ab79 ili Ab19, na primer, antitelo bi trebalo da se specifično vezuje za ljudski i cinomolgus CD38. Slično tome, ako se varijante aminokiselina generišu sa Fc regijom, na primer, varijanta antitela treba da održavaju potrebne funkcije vezivanja receptora za određenu primenu ili indikaciju antitela.
[0084] Međutim, generalno, od 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 aminokiselinskih supstitucija koje se generalno koriste često, cilj je izmeniti funkciju sa minimalnim brojem modifikacija. U nekim slučajevima postoji od 1 do 5 modifikacija, dok 1-2, 1-3 i 1-4, takođe nalaze primenu u mnogim otelotvorenjima.
[0085] Treba napomenuti da broj modifikacija aminokiselina može biti u funkcionalnim domenima: na primer, možda je poželjno imati od 1-5 modifikacija u Fc regiji divljih ili veštačkih proteina, kao i od 1 do 5 modifikacije u regiji Fv, npr. Varijanta polipeptidne sekvence će poželjno imati najmanje oko 80%, 85%, 90%, 95% ili do 98 ili 99% identičnosti sa roditeljskim sekvencama (npr. varijabilne regije, konstantne regije i/ili sekvence teškog i lakog lanca za Ab79 i/ili Ab19). Treba napomenuti da u zavisnosti od veličine sekvence, procenat identičnosti zavisiće od broja aminokiselina.
1
[0086] Pod pojmom „supstitucija aminokiselina“ ili „supstitucija“ ovde se podrazumeva zamena aminokiseline na određenom položaju u matičnoj polipeptidnoj sekvenci sa drugom aminokiselinom. Na primer, zamena S100A odnosi se na varijantu polipeptida u kojoj se serin na položaju 100 zamenjuje sa alaninom. „Umetanje aminokiselina“ ili „umetanje“, kad se ovde koristi, označava dodavanje aminokiseline na određenom položaju u matičnoj polipeptidnoj sekvenci. Pod „uklanjanjem aminokiselina“ ili „uklanjanjem“, kad se ovde koristi, podrazumeva uklanjanje aminokiseline na određenoj položaju u matičnoj polipeptidnoj sekvenci.
[0087] Pod pojmom „matični polipeptid“, „roditeljski protein“, „polipeptid prekursor“ ili
„protein prekursor“, kao što se ovde koristi, podrazumeva se nemodifikovani polipeptid koji je kasnije modifikovan da generiše varijantu. Generalno, matični polipeptidi su Ab79 i Ab19. Roditeljski polipeptid može se odnositi na sam polipeptid, sastave koje čine matični polipeptid ili aminokiselinsku sekvencu koja ga kodira. Prema tome, pod „roditeljskim Fc polipeptidom“ kad se ovde koristi, podrazumeva se Fc polipeptid koji je modifikovan da generiše varijantu, a „roditeljsko antitelo“ kad se ovde koristi označava antitelo koje je modifikovano da generiše varijantno antitelo.
[0088] Pod „divljim tipom“ ili „WT“ ili „prirodnim“ ovde se podrazumeva aminokiselinska sekvenca ili nukleotidna sekvenca koja se nalazi u prirodi, uključujući alelne varijacije. WT protein, polipeptid, antitelo, imunoglobulin, IgG itd. ima sekvencu aminokiselina ili nukleotidnu sekvencu koja nije bila namerno modifikovana.
[0089] Pod „varijantom Fc regije“ ovde se podrazumeva Fc sekvenca koja se razlikuje od one u Fc sekvenci divljih vrsta zahvaljujući barem jednoj aminokiselinskoj modifikaciji. Fc varijanta može se odnositi na sam Fc polipeptid, sastave koje sadrže Fc varijantu polipeptida ili aminokiselinsku sekvencu.
[0090] U nekim otelotvorenjima opisanim ovde samo za potrebe reference, jedna ili više modifikacija aminokiselina se vrši u jednoj ili više CDR-a antitela (bilo Ab79 ili Ab19).
Generalno, samo 1 ili 2 ili 3 aminokiseline su supstituisane u bilo kojoj pojedinačnoj CDR-i, i generalno ne vrši se više od 4, 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 promena unutar seta CDR-a. Međutim, treba imati u vidu da svaka kombinacija bez supstitucija, 1, 2 ili 3 supstitucija u bilo kojoj CDR-i može biti nezavisno i opciono kombinovana sa bilo kojom drugom supstitucijom.
2
[0091] U nekim slučajevima, modifikacije aminokiselina u CDR-i nazivaju se „sazrevanje afiniteta“. „Afinitetno zrelo“ antitelo je ono koje ima jednu ili više izmena u jednoj ili više CDR-a što rezultuje poboljšanjem afiniteta antitela za antigen, u poređenju sa roditeljskim antitelom koji ne poseduje te izmene. U nekim slučajevima, iako retko, može biti poželjno da se smanji afinitet antitela na njegov antigen, ali to uglavnom nije poželjno.
[0092] Sazrevanja afiniteta se može uraditi kako bi se afinitet vezivanja antitela za antigen povećao za najmanje oko 10% do 50-100-150% ili više ili od 1 do 5 puta u odnosu na
„roditeljsko“ antitelo. Poželjna afiinitetno zrela antitela će imati nanomolarne ili čak i pikomolarne afinitete za ciljani antigen. Afinitetno zrela antitela proizvedena su poznatim procedurama. Pogledati, na primer, Marks i dr., 1992, Biotechnology 10:779-783 koji opisuje sazrevanje afiniteta pomoću zamene domena varijabilnog teškog lanca (VH) i varijabilnog lanca (VL). Slučajna mutageneza CDR i/ili okvirnih ostataka opisana je u: Barbas, i dr.1994, Proc. Nat. Acad. Sci, USA 91:3809-3813; Shier i dr., 1995, Gene 169:147-155; Yelton i dr., 1995, J. Immunol. 155:1994-2004; Jackson i dr., 1995, J. Immunol.154(7):3310-9; and Hawkins i dr., 1992, J. Mol. Biol.226:889-896 npr.
[0093] Alternativno, modifikacije aminokiselina mogu se napraviti u jednoj ili više CDR-a antitela koje su „tihe“, npr. koje ne menjaju značajno afinitet antitela za antigen. One se mogu napraviti iz više razloga, uključujući i optimizaciju eksprimiranja (što se može uraditi za nukleinske kiseline koje kodiraju antitela).
[0094] Tako, uključeni u definiciju CDR-a i antitela objave su varijante CDR i antitela; to jest, antitela iz ovog pronalaska mogu uključivati aminokiselinske modifikacije u jednoj ili više CDR-a Ab79 i Abl9. Pored toga, kako je navedeno ispod, modifikacije aminokiselina mogu takođe samostalno i opciono biti napravljene u bilo kojoj regiji izvan CDR-a, uključujući okvirne i konstantne regije.
[0095] U nekim otelotvorenjima opisane su varijante Ab79 antitela i Ab19 koja su specifična za ljudski CD38 (SEQ ID NO:1) i cinomolgus CD38 (SEQ ID NO:2). Ovo antitelo se sastoji od šest CDR-a, pri čemu se svaka CDR ovog antitela može razlikovati od SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7 i SEQ ID NO:8 sa 0, 1 ili 2 aminokiselinske supstitucije. U drugim otelotvorenjima, varijanta anti-CD38 antitela se sastoji od šest CDR-a, pri čemu se svaka CDR ovog antitela može razlikovati od SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID br .: 17 i SEQ ID NO:18 sa 0, 1 ili 2 aminokiselinske supstitucije.
[0096] U nekim otelotvorenjima, anti-CD38 antitela prema pronalasku su sastavljena od domena varijante Fc. Kao što je poznato u struci, Fc regije antitela interakuje sa određenim brojem Fc receptora i liganda, prenoseći niz značajnih funkcionalnih sposobnosti nazvanih efektorske funkcije. Ovi Fc receptori uključuju, ali nisu ograničeni na, (kod ljudi) FcγRI (CD64) uključujući izoforme FcγRIa, FcγRIb i FcγRIc; FcγRII (CD32), uključujući izoforme FciRIIa (uključujući alotipove H131 i R131), FciRIIb (uključujući FcγRIIb-1 i FcγRIIb-2) i FcγRIIc; i FcγRIII (CD16), uključujući izoforme FcγRIIIa (uključujući alotipove V158 i F158, korelirane sa citotoksičnostima zavisnim od antitela i ADC) i FcγRIIIb (uključujući alotipove FcγRIIIb-NA1 i FcγRIIIb-NA2), FcRn (neonatalni receptor), C1k komplementarni protein uključen u citotoksičnost zavisno od komplementa (CDC)) i FcRn (neonatalni receptor uključen u poluživot u serumu). Odgovarajuće modifikacije mogu se izvršiti na jednom ili više položaja kao što je generalno opisano, na primer u US prijava patenta 11/841,654 i referencama citiranim tamo, US 2004/013210, US 2005/0054832, US 2006/0024298, US 2006/0121032, US 2006/0235208, US 2007/0148170, USSN 12/341,769, US Patent No.6,737,056, US Patent No.7,670,600, US Patent No.6,086,875, a naročito za specifične supstitucije aminokiselina koje povećavaju vezivanje za Fc receptore.
[0097] Pored gore navedenih modifikacija, mogu se izvršiti i druge modifikacije. Na primer, molekuli se mogu stabilizovati uključenjem disulfidnih mostova koji povezuju VH i VL domene (Reiter i dr., 1996, Nature Biotech.14: 1239-1245). Pored toga, postoje različite kovalentne modifikacije antitela koje mogu biti napravljene kako je navedeno ispod.
[0098] Kovalentne modifikacije antitela uključene su u opseg ovog pronalaska i generalno, ali ne uvek, post-translaciono. Na primer, nekoliko vrsta kovalentnih modifikacija antitela se unose u molekul reakcijom specifičnih aminokiselinskih ostataka antitela sa organskim agensom za derivatizaciju koji može reagovati sa odabranim bočnim lancima ili N- ili C-terminalnim ostacima.
[0099] Cisteinilski ostaci najčešće reaguju sa α-haloacetatima (i odgovarajućim aminima), kao što je hlorosirćetna kiselina ili hloroacetamid, kako bi se dobili karboksimetil ili karboksiamidometil derivati. Cisteinilski ostaci takođe mogu biti derivati reakcije sa bromotrifluoroacetonom, α-bromo-β-(5-imidozoil) propionskom kiselinom, hloroacetil fosfatom, N-alkilmaleimidom, 3-nitro-2-piridil disulfidom, metil 2-piridil disulfidom, phloromerkuribenzoatom , 2-hloromercuri-4-nitrofenolom ili hloro-7-nitrobenzo-2-oksa-1,3-diazolom i slično.
[0100] Ostaci histidina se derivatizuju reakcijom sa dietilpirokarbonatom pri pH 5,5-7,0, jer je ovaj agens relativno specifično za histidni bočni lanac. Para-bromofenacil bromid je takođe koristan; reakcija se poželjno izvodi u 0,1M natrijum-kacodilatu na pH 6,0.
[0101] Lizinil i amino terminalni ostaci reaguju sa sukcinskim ili anhidridima druge karboksilne kiseline. Derivatizacija sa tim agensima ima efekat promene punjenja lizinil ostataka. Ostali pogodni reagensi za derivatizaciju ostataka koji sadrže alfa-amino uključuju imidoestere kao što je metil pikolinimidat; piridoksal fosfat; piridoksal; hloroborohidrid; trinitrobenzensulfonska kiselina; O-metilizourea; 2,4-pentandion; i transaminazakatalizovana reakcija sa glioksilatom.
[0102] Arginilski ostaci se modifikuju reakcijom sa jednim ili više konvencionalnih reagensa, među kojima su fenilglioksal, 2,3-butandion, 1,2-cikloheksandion i ninhidrin. Derivatizacija ostataka arginina zahteva da se reakcija izvede u alkalnim uslovima zbog visoke pKa gvanidinske funkcionalne grupe. Dalje, ovi reagensi mogu reagovati sa grupama lizina, kao i arginin-epsilon-amino grupom.
[0103] Moguća je specifična modifikacija tirozilnih ostataka, sa posebnim interesovanjem za uvođenje spektralnih oznaka u tirozilnske ostatke reakcijom sa aromatičnim diazonijum jedinjenjima ili tetranitrometanom. Najčešće se koriste N-acetilimidizol i tetranitrometan kako bi se formirali O-acetil tirozil vrste i 3-nitro derivati, respektivno. Tirozilni ostaci se jodiraju pomoću 1251 ili 1311 za pripremu označenih proteina za upotrebu u radioimunotestu, gde je pogodan postupak hloramina T opisan gore.
[0104] Karboksilne grupe (aspartil ili glutamil) se selektivno modifikuju reakcijom sa karbodiimidima (R'-N=C=N--R'), gde su R i R' opcionalno različite alkil grupe, kao što su 1-cikloheksil-3-( 2-morfolinil-4-etil)karbodiimid ili 1-etil-3- (4-azonia-4,4-dimetilpentil)
2
karbodiimid. Osim toga, ostaci aspartila i glutamila pretvaraju se u asparaginil i glutaminil ostatke reakcijom sa amonijumovim jonima.
[0105] Derivatizacija pomoću bifunkcionalnih agenasa je korisna za unakrsnu vezu antitela sa matricom ili površinom koja nije nerastvorljiva u vodi za upotrebu u različitim postupcima, pored postupaka koji su opisani u nastavku. Najčešće korišćeni agensi za ukrštanje uključuju npr.1,1-bis(diazoacetil)-2-feniletan, glutaraldehid, N-hidroksisukcinimid estre, na primer, estri sa 4-azidosalicilnom kiselinom, homobifunkcionalni imidoestri, uključujući disukcinimidil estre kao što je 3,3'-ditiobis(sukcinimidilpropionat) i bifunkcionalni maleimidi kao što je bis-N-maleimido-1,8-oktan. Derivatizujući agensi kao što je metil-3-[(p-azidofenil)dithio]propioimidat daju fotoagnetabilne međuproizvode koji su sposobni da formiraju unakrsne veze u prisustvu svetlosti. Alternativno, reaktivne matrice bez mirisa u vodi, kao što su ugljovodonici aktivirani sa cinomolgusogen bromidom i reaktivni supstrati opisani u U.S. Pat. Nos.3,969,287; 3,691,016; 4,195,128; 4,247,642; 4,229,537; i 4,330,440, koriste se za imobilizaciju proteina.
[0106] Glutaminilni i asparaginilni ostaci često se deamidiraju odgovarajućim glutamilnim i aspartilnim ostacima, respektivno. Alternativno, ovi ostaci su deamidirani pod blagim kiselim uslovima. Bilo koji oblik ovih ostataka spada u okvir ovog pronalaska.
[0107] Ostale modifikacije uključuju hidroksilaciju prolina i lizina, fosforilaciju hidroksilnih grupa seril ili treonil ostataka, metilovanje α-amino grupa lizinskih, argininskih i histidinskih bočnih lanaca (T. E. Creighton, Proteins: Structure and Molecular Properties, W. H. Freeman & Co., San Francisco, pp.79-86 [1983], acetilacija N-terminalnog amina i amidacija bilo koje C-terminalne karboksilne grupe.
[0108] Pored toga, kao što će se ceniti stručnjaci, oznake (uključujući fluorescentne, enzimske, magnetne, radioaktivne i sl.) mogu se dodati antitelima (kao i drugim sastavima pronalaska).
Glikozilacija
[0109] Druga vrsta kovalentne modifikacije je izmena u glikozilaciji. U još jednom otelotvorenju, antitela koja su ovde prikazana, mogu se modifikovati tako da uključuju jedan ili više konstruisan glikoform. Pod pojmom „konstruisan glikoform“, kad se ovde koristi, podrazumeva se sastav ugljenih hidrata koji je kovalentno vezan za antitelo, pri čemu se sastav ugljenih hidrata hemijski razlikuje od onog od roditeljskog antitela. Konstruisani glikoformi mogu biti korisne za razne namene, uključujući, ali ne ograničavajući se na povećanje ili smanjenje efektorske funkcije. Poželjni oblik konstruisanog glikoforma je afukosilacija, za koju se pokazalo da je u korelaciji sa povećanjem ADCC funkcije, verovatno kroz strože vezivanje za FcγRIIIa receptor. U ovom kontekstu, „afkozilacija“ znači da je većina antitela proizvedenih u ćelijama domaćina u značajnoj meri lišena fukoze, npr.90-95-98% generisanih antitela nema značajnu fukozu kao sastojak ugljenih hidrata u antitelu (obično vezana za N297 u Fc regiji). Definisano funkcionalno, afukosilovana antitela obično pokazuju najmanje 50% ili veći afinitet prema FcγRIIIa receptoru.
[0110] Konstruisani glikoformi mogu biti generisani različitim postupcima poznatim u struci (Umaña i dr., 1999, Nat Biotechnol 17:176-180; Davies i dr., 2001, Biotechnol Bioeng 74:288-294; Shields i dr., 2002, J Biol Chem 277:26733-26740; Shinkawa i dr., 2003, J Biol Chem 278:3466-3473; US 6,602,684; USSN 10/277,370; USSN 10/113,929; PCT WO 00/61739A1; PCT WO 01/29246A1; PCT WO 02/31140A1; PCT WO 02/30954A1;
(Potelligent® technology [Biowa, Inc., Princeton, NJ]; GlycoMAb® tehnologija inžinjeringa glikosilacije [Glycart Biotechnology AG, Zürich, Switzerland]). Mnoge od ovih tehnika su zasnovane na kontrolisanju nivoa fukoziliranih i/ili bisekcionih oligosaharida koji su kovalentno vezani za Fc regije, na primer eksprimiranjem IgG u različitim organizmima ili ćelijskim linijama, konstruisanim ili na drugačijim (na primer Lec-13 CHO ćelije ili pacovske hibridoma YB2/0 ćelije, regulišući enzime uključene u put glikozilacije (na primer, FUT8 [α1,6-fukosiltranseraza] i/ili β1-4-N-acetilglukozaminiltransferaza III [GnTIII]) ili modifikovanjem ugljenih hidrata nakon što je IgG eksprimiran. Na primer, „antitelo konstruisano od šećera“ ili „SEA tehnologija“ od Seattle Genetics funkcioniše dodavanjem modifikovanih saharida koji inhibiraju fokozilaciju tokom proizvodnje, pogledati na primer 20090317869. Konstruisani glikoform se tipično odnosi na različite ugljene hidrate ili oligosaharide tako da antitelo može uključiti konstruisan glikoform.
[0111] Alternativno, konstruisan glikoform može da se odnosi na varijantu IgG koja sadrži različite ugljovodonike ili oligosaharide. Kao što je poznato u struci, obrasci glikozilacije mogu zavisiti i od sekvence proteina (npr. prisustvo ili odsustvo određenih glikozilacionih aminokiselinskih ostataka, o kojima se govori u nastavku), ili ćelije domaćini ili organizmi u kojima se proizvodi protein. Posebni sistemi eksprimiranja su razmotreni u nastavku.
2
[0112] Glikozilacija polipeptida je tipično N-vezana ili O-vezana. N-vezano se odnosi na vezivanje ugljovodoničnog dela na bočni lanac ostatka asparagina. Tripeptidne sekvence asparagin-X-serin i asparagin-X-treonin, gde je X bilo koja aminokiselina osim prolina, su sekvence prepoznavanja za enzimsko vezivanje ugljovodonične grupe na asparaginski bočni lanac. Stoga, prisustvo bilo koje od ovih tri-peptidnih sekvenci u polipeptidu stvara potencijalno mesto glikozilacije. O-povezana glikozilacija se odnosi na vezivanje jednog od šećera N-acetilgalaktozamina, galaktoze ili ksiloze u hidroksiaminokiselini, najčešće serinu ili treoninu, iako se mogu koristiti 5-hidroksiprolin ili 5-hidroksilizin.
[0113] Dodavanje mesta glikozilacije u antitelo se pogodno vrši promenom aminokiselinske sekvence tako da sadrži jednu ili više gore opisanih tri-peptidnih sekvenci (za N-povezana mesta glikozilacije). Promena se takođe može izvršiti dodavanjem ili zamenom pomoću jednog ili više ostataka serina ili treonina do početne sekvence (za O-povezane glikozilatne lokacije). Za lakoću, aminokiselinska sekvenca antitela se poželjno menja kroz promene na nivou DNK, naročito mutiranjem DNK koja kodira ciljani polipeptid na prethodno izabranim bazama tako da se generišu kodoni koji će se prevesti u željene aminokiseline.
[0114] Još jedan način povećanja broja ugljovodoničnih delova na antitelu je hemijsko ili enzimsko spajanje glikozida sa proteinom. Ove procedure su pogodne po tome što ne zahtevaju proizvodnju proteina u ćeliji domaćinu koja ima sposobnosti glikozilacije za N- i O-povezanu glikozilaciju. U zavisnosti od korišćenog načina spajanja, šećer se može pričvrstiti na (a) arginin i histidin, (b) slobodne karboksilne grupe, (c) slobodne sulfhidril grupe kao što su cistein, (d) slobodne hidroksilne grupe kao što su one od serina, treonina ili hidroksiprolina, (e) aromatične ostaci kao što su oni fenilalanina, tirozina ili triptofana, ili (f) amidne grupe glutamina. Ovi postupci su opisani u WO 87/05330 i u Aplin and Wriston, 1981, CRC Crit. Rev. Biochem., pp.259-306.
[0115] Uklanjanje ugljovodoničnih delova, prisutnih na početnom antitelu (npr. posttranslaciono), može se postići hemijski ili enzimski. Hemijska deglikozilacija zahteva izlaganje proteina jedinjenju trifluorometansulfonske kiseline ili ekvivalentnom jedinjenju. Ovaj tretman rezltuje cepanjem većine ili svih šećera osim veznik šećera (N-acetilglukozamin ili N-acetilgalaktozamin), a polipeptid ostavlja netaknut. Hemijska deglikozilacija je opisana od strane Hakimuddin i dr., 1987, Arch. Biochem. Biophys.259:52 and by Edge i dr., 1981,
2
Anal. Biochem. 118:131. Enzimsko cepanje ugljenih hidrata na polipeptidima može se postići upotrebom različitih endo- i ekso-glikozidaza kao što je opisano u Thotakura i dr., 1987, Meth. Enzymol. 138:350, ovde u potpunosti uključen referencom, glikozilacija na potencijalnim mestima glikozilacije može se sprečiti upotrebom jedinjenja tunicamicina kao što je opisano kod Duskin i dr., 1982, J. Biol. Chem.257:3105. Tunicamicin blokira formiranje veza proteina-N-glikozida.
[0116] Druga vrsta kovalentne modifikacije antitela obuhvata povezivanje antitela sa različitim neproteinskim polimerima, uključujući, ali ne ograničavajući se na, različite poliole kao što su polietilen glikol, polipropilen glikol ili polioksialkileni, na način naveden u, na primer, 2005-2006 PEG Catalog od Nektar Therapeutics (dostupno na Nektar veb stranici) US Patent 4,640,835; 4,496,689; 4,301,144; 4,670,417; 4,791,192 ili 4,179,337. Pored toga, kako je poznato u ovoj oblasti, zamene aminokiselina mogu biti izvedene u različitim položajima unutar antitela kako bi se olakšalo dodavanje polimera kao što je PEG. Pogledati, na primer, U.S. Objava No. 2005/0114037A1.
Specifične otelotvorenja CDR i varijabilne regije
[0117] Ovaj pronalazak pruža veliki broj antitela, svako sa specifičnim skupom CDR-a. Kao što je gore opisano, antitela se mogu definisati setovima od 6 CDR-a, po varijabilnim regijama ili težim i lakim lancima u pune dužine, uključujući i konstantne regije. Kao što je gore opisano, mogu se praviti zamene aminokiselina. Samo za potrebe reference, uopšteno, u kontekstu promena unutar CDR-a, usled relativno kratke dužine CDR-a, modifikacije aminokiselina generalno se opisuju u smislu broja modifikovanih aminokiselina koje se mogu napraviti. Iako se ovo takođe primenjuje na raspravu o broju modifikacija aminokiselina koje se mogu unositi u varijabilne, konstantne ili sekvence pune dužine, pored broja promena, takođe je prikladno definisati ove promene u smislu „% identičnosti“. Prema tome, kao što je ovde opisano, antitela uključena u opisivanje su 80, 85, 90, 95, 98 ili 99% identična sa SEQ ID NO koji su ovde navedeni.
[0118] U kontekstu Ab79 antitela, set CDR-a je sledeći: tri CDR-e teškog lanca obuhvataju HCDR1 SEQ ID NO:3 (HCDR1), SEQ ID NO:4 (HCDR2) i SEQ ID NO:5 ( HCDR3), i tri CDR-a lakog lanca obuhvataju SEQ ID NO:6 (LCDR1), SEQ ID NO:7 (LCDR2) i SEQ ID NO:8 (LCDR3).
2
[0119] U kontekstu Ab19, skup CDR-a je sledeći: HCDR1 (SEQ ID NO:13), HCDR2 (SEQ ID NO:14) i HCDR3 (SEQ ID NO:15) i LCDR1 (SEQ ID NO:16 ), LCDR2 (SEQ ID NO:17) i LCDR3 (SEQ ID NO:18).
[0120] Posebno isključena iz ovog pronalaska su antitela SEQ ID NO:24 i 25 (teški i laki lanac Benčmarka 1) i SEQ ID NO:26 i 27 (teški i laki lanac Benčmarka 2). Treba napomenuti da ova antitela nisu unakrsno reaktivna sa cinomolgus CD38, o kom se govori u nastavku.
[0121] Antitela iz ovog pronalaska su unakrsno reaktivna sa ljudskim i cinomolgus CD38 i stoga su antitela unakrsno reaktivna među vrstama. „Antitelo unakrsno reaktivno među vrstama“ je antitelo koje ima afinitet vezivanja za antigen iz prve vrste sisara koji je skoro isti kao afinitet vezivanja za homolog tog antigena od druge vrste sisara. Unakrsna reaktivnost među vrstama može se izraziti, na primer, kao odnos KD antitela za antigen prve vrste sisara preko KD istog antitela za homolog antigena iz druge vrste sisara, pri čemu je odnos 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 2, 5, 10, 15, do 20. Alternativno ili dodatno, antitelo je „unakrsno reaktivno među vrstama“ kada pokazuje terapeutsku ili dijagnostičku efikasnost kada se daje drugim vrstama. Tako, u ovom slučaju, antitela pronalaska su unakrsno reaktivna sa cinomolgus CD38, pokazuju pretkliničku efikasnost kada se primenjuju na cinomolgus primate i prema tome se smatraju reakcionim putem.
[0122] U nekim otelotvorenjima koja su ovde opisani samo za potrebe reference, pružena su antitela koja se nadmeću sa antitelima iz pronalaska (na primer sa Ab79 i/ili Ab19) za vezivanje za CD38 i/ili cinomolgus CD38 čoveka, ali ni BM1 niti BM2 nisu uključeni.
Nadmetanje za vezivanje na CD38 ili deo CD38 sa dva ili više anti-CD38 antitela može se odrediti bilo kojom odgovarajućom tehnikom, kako je poznato u struci.
[0123] Nadmetanje u kontekstu ovog pronalaska odnosi se na svako vidljivo značajno smanjenje sklonosti antitela iz pronalaska (npr. Ab79 ili Ab19) kako bi se vezao za svoj određeni vezivni partner, npr. CD38, u prisustvu test jedinjenja. Tipično, nadmetanje znači najmanje oko 10-100% smanjenja vezivanja antitela iz ovog pronalaska na CD38 u prisustvu takmaca, mereno standardnim tehnikama kao što su ELISA ili Biacore® analize. Na taj način, na primer, moguće je postaviti kriterijume za nadmetanje u kojima se detektuje najmanje oko 10% relativne inhibicije; detektuje se najmanje oko 15% relativne inhibicije; ili se detektuje barem oko 20% relativne inhibicije pre nego što se antitelo smatra dovoljno konkurentnim. U
2
slučajevima kada su epitopi koji pripadaju konkurentnim antitelima blisko locirani u antigenu, nadmetanje se može označiti za više od oko 40% relativne inhibicije vezivanja CD38 (npr., najmanje oko 45% inhibicije, kao što je najmanje oko 50% inhibicije, na primer najmanje oko 55% inhibicije, kao što je najmanje oko 60% inhibicije, na primer najmanje oko 65% inhibicije, kao što je najmanje oko 70% inhibicije, na primer, najmanje oko 75% inhibicije, kao što je najmanje oko 80% inhibicije, na primer, najmanje oko 85% inhibicije, kao što je najmanje oko 90% inhibicije, na primer, najmanje oko 95% inhibicije ili viši nivo relativne inhibicije).
[0124] U nekim slučajevima, označena je jedna ili više komponenti testova vezivanja nadmetanja, kako je navedeno u nastavku u kontekstu dijagnostičkih primena.
[0125] Takođe može biti slučaj da postoji konkurencija između anti-CD38 antitela u odnosu na više od jednog CD38 epitopa, i/ili deo CD38, npr. u kontekstu gde su osobine vezivanja za antitelo određene regije CD38 zadržane u njegovim fragmentima, kao što je u slučaju dobro predstavljenog linearnog epitopa lociranog u različitim test fragmentima ili konformacijskim epitopom koji je prikazan u dovoljno velikim fragmentima CD38 kao i u CD38.
[0126] Procena konkurencije obično uključuje procenu relativnog inhibitornog vezivanja koristeći antitelo pronalaska, CD38 (bilo ljudski ili cinomolgus ili oba) i test molekul. Test molekuli mogu uključivati bilo koji molekul, uključujući i druga antitela, male molekule, peptide itd. Jedinjenja se mešaju u količinama koje su dovoljne za upoređivanje koje daje informacije o selektivnosti i/ili specifičnosti molekula u pitanju u odnosu na drugi predmetni molekuli.
[0127] Količina test jedinjenja, CD38 i antitela iz ovog pronalaska može se promeniti. Na primer, za ELISA procene oko 5-50 μg (npr. oko 10-50 μg, oko 20-50 μg, oko 5-20 μg, oko 10-20 μg, itd.) anti-CD38 antitela i/ili CD38 mete su potrebni kako bi se procenilo da li postoji nadmetanje. Uslovi takođe treba da budu pogodni za vezivanje. Tipično, fiziološki ili skoro fiziološki uslovi (npr., temperatura oko 20-40°C, pH od oko 7-8, itd.) su pogodni za anti-CD38:CD38 vezivanje.
[0128] Često je nadmetanje obeležena znatno većom relativnom inhibicijom od oko 5%, kako je utvrđeno pomoću ELISA i/ili FACS analize. Može biti poželjno postaviti veći prag
2
relativne inhibicije kao kriterijum/determinant za odgovarajući nivo konkurencije u određenom kontekstu (npr. kada se analiza nadmetanja koristi za odabir ili prikazivanje novih antitela konstruisanih sa namerom blokiranja vezivanja drugog peptida ili molekula na CD38 (npr. prirodni vezivni partneri CD38 kao što je CD31, takođe nazivan CD31 antigen, EndoCAM, GPIIA, PECAM-1, molekul adhezije trombocita/endotelnih ćelija ili prirodno anti-CD38 antitelo).
[0129] U nekim otelotvorenjima, anti-CD38 antitelo prema predmetnom pronalasku se specifično vezuje za jedan ili više ostataka ili regija u CD38, ali takođe i ne reaguje sa drugim proteinima sa homologijom za CD38, kao što je BST-1 (stromalni antigen kostne srži-1) i Mo5, takođe poznat kao CD157.
[0130] Tipično, nedostatak unakrsne reaktivnosti znači manje od oko 5% relativne kompetitivne inhibicije između molekula kada se proceni pomoću ELISA i/ili FACS analize koristeći dovoljne količine molekula pod odgovarajućim uslovima testiranja.
Inhibicija CD38 aktivnosti
[0131] Otkrivena antitela mogu da se koriste u blokiranju ligand-receptora interakcije ili inhibiranja interakcije receptorske komponente. Anti-CD38 antitela prema pronalasku mogu biti „blokirajuća“ ili „neutralizujuća“. „Neutralizujuće antitelo“ je namenjeno da se odnosi na antitelo čije vezivanje za CD38 rezltuje inhibicijom biološke aktivnosti CD38, na primer njenog kapaciteta za interakciju sa ligandima, enzimskom aktivnošću signalizacijskim kapacitetom, i naročito njegova sposobnost da izazove aktivirane limfocite. Inhibicija biološke aktivnosti CD38 može se proceniti jednom ili više standardnom in vitro ili in vivo analizom poznatom u struci (pogledati primere u nastavku).
[0132] „Inhibicija vezivanja“ ili „blokiranje vezivanja“ (na primer kada se govori o inhibiciji/blokiranju vezivanja CD38 vezujućeg partnera na CD38) obuhvataju i delimičnu i potpunu inhibiciju/blokadu. Inhibicija/blokiranje vezivanja CD38 vezujućeg partnera na CD38 može smanjiti ili promeniti normalni nivo ili tip ćelijske signalizacije koji se javlja kada se CD38 vezujući partner vezuje za CD38 bez inhibicije ili blokiranja. Inhibicija i blokiranje takođe imaju za cilj da uključe bilo kakvo merljivo smanjenje afiniteta vezivanja CD38 vezujućeg partnera na CD38 kada je u kontaktu sa anti-CD38 antitelom, u poređenju sa ligandom koji nije u kontaktu sa anti-CD38 antitelom, na primer a blokiranje vezivanja CD38 vezujućeg partnera na CD38 za najmanje oko 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 99% ili 100%.
[0133] Objavljena anti-CD38 antitela takođe mogu inhibirati rast ćelija. „Inhibirati rast“ uključuje bilo kakvo merljivo smanjenje rasta ćelija kada se dovede u dodir sa anti-CD38 antitelom, u poređenju sa rastom istih ćelija koje nisu u kontaktu sa anti-CD38 antitelima, na primer inhibicijom rasta ćelije kultura za najmanje oko 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 99% ili 100%.
[0134] U nekim otelotvorenjima, obelodanjena anti-CD38 antitela mogu da oštete aktivirane limfocite i plazma ćelije. U ovom kontekstu "osiromašenje" znači merljivo smanjenje serumskih nivoa (na primer, testirano kod cyno majmuna) aktiviranih limfocita i/ili plazma ćelija u poređenju sa nelečenim životinjama. Uopšteno uočeno je smanjenje od najmanje 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 99% ili 100%. Dodatno, kao što je prikazano niže u primerima, jedna posebna prednost koju pokazuju antitela iz ovog pronalaska je obnovljivost ćelija nakon doziranja; to jest, kao što je poznato po nekim tretmanima (na primer sa anti-CD20 antitelima na primer), smanjenje ćelija može trajati duži vremenski period, uzrokujući neželjene efekte. Kao što je prikazano ovde, efekti na aktivirane limfocite i/ili plazma ćelije mogu da se povrate.
Postupci za proizvodnju antitela pronalaska
[0135] Ovaj pronalazak dalje pruža postupke za proizvodnju objavljenih anti-CD38 antitela. Ovi postupci obuhvataju kultivaciju ćelije domaćina koja sadrži izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira antitela pronalaska. Kao što će se ceniti stručnjaci, to se može uraditi na različite načine, u zavisnosti od prirode antitela. U nekim otelotvorenjima, u slučaju kada su antitela iz ovog pronalaska tradicionalna antitela pune dužine, na primer, varijabilna regija teškog lanca i varijabilna regija lakog lanca pod uslovima tako da se proizvede antitelo i da se može izolovati.
[0136] Generalno, obezbeđene su nukleinske kiseline koje kodiraju antitela pronalaska. Takvi polinukleotidi kodiraju i varijabilne i konstantne regije svakog od teških i lakih lanaca, iako su druge kombinacije takođe obuhvaćene ovim pronalaskom u skladu sa ovde opisanim sastavima. Predmetni pronalazak takođe obuhvata oligonukleotidne fragmente izvedene iz
1
objavljenih polinukleotida i sekvenci nukleinske kiseline koji su komplementarni ovim polinukleotidima.
[0137] Polinukleotidi mogu biti u obliku RNK ili DNK. Polinukleotidi u obliku DNK, cDNK, genomske DNK, analogije nukleinske kiseline i sintetičke DNK su u okviru ovog pronalaska. DNK može biti dvolančani ili jednolančani, a ako je jednolančani, može biti kodirajući (sens) lanac ili nekodirajuća (anti-sens) lanac. Serijska sekvenca koja kodira polipeptid može biti identična kodirajućoj sekvenci koja je ovde navedena ili može biti različita kodirajuća sekvenca, koja, kao rezultat suvišnosti ili degeneracije genetičkog koda, kodira iste polipeptide kao DNK koja je ovde data.
[0138] U nekim otelotvorenjima, nukleinske kiseline koje kodiraju antitela iz ovog pronalaska uključena su u vektore eksprimiranja, koji mogu biti ekstrahromozomski ili konstruisana da se integrišu u genom ćelije domaćina u koju je uveden. Vektori eksprimiranja mogu sadržati bilo koji broj odgovarajućih regulatornih sekvenci (uključujući, ali ne ograničavajući se na, transkripcijske i translacijske kontrolne sekvence, promotere, mesta za vezivanje ribozoma, poboljšivače, poreklo replikacije itd.) ili druge komponente (geni za selekciju itd.), koje su sve funkcionalno povezane, kako je dobro poznato u ovoj oblasti. U nekim slučajevima se koriste dve nukleinske kiseline i svaka se stavlja u drugi vektor eksprimiranja (npr. teški lanac u prvom vektoru eksprimiranja, laki lanac u drugom vektoru eksprimiranja), ili alternativno se mogu staviti u isti vektor eksprimiranja. Stručnjaci će razumeti da dizajn vektora eksprimiranja, uključujući i izbor regulatornih sekvenci, može zavisiti od faktora kao što je izbor ćelije domaćina, nivo eksprimiranja željenog proteina itd.
[0139] Generalno, nukleinske kiseline i/ili eksprimiranje se mogu uneti u pogodnu ćeliju domaćina kako bi se stvorila rekombinantna ćelija domaćin koristeći bilo koji postupak koji odgovara odabranoj ćeliji domaćinu (npr. transformacija, transfekcija, elektroporacija, infekcija), tako da su molekuli nukleinske kiseline operativno povezani sa jednim ili više kontrolnih elemenata eksprimiranja (npr. u vektoru, u konstruktu stvorenom procesima u ćeliji, integrisani u genom ćelije domaćina). Dobijena rekombinantna ćelija domaćin može se održavati pod uslovima pogodnim za eksprimiranje (npr. u prisustvu induktora, u pogodnoj ne-ljudskoj životinji, u odgovarajućem medijumu kulture dopunjenom sa odgovarajućim solima, faktorima rasta, antibioticima, prehrambenim dodatcima itd.), pri čemu su
2
proizvedeni kodirani polipeptidi. U nekim slučajevima, teški lanac se proizvodi u jednoj ćeliji, a laki lanac u drugoj.
[0140] Ćelijske linije sisara koje su dostupne kao domaćini za eksprimiranje su poznate u struci i uključuju mnoge imortalizovane ćelijske linije koje su dostupne od American Type Culture Collection (ATCC), Manassas, VA uključujući, ali ne ograničavajući se na ćelije kineskog hrčka (CHO), HEK 293 ćelije, NSO ćelije, HeLa ćelije, ćelije bubrega bebe hrčka (BHK), ćelije bubrega majmuna (COS), ljudske ćelije hepatocelularnog karcinoma (npr. Hep G2) i niz drugih ćelijskih linija. Ne-sisarske ćelije, uključujući ali ne ograničavajući se na bakterije, kvasac, insekte i biljke, takođe se mogu koristiti za eksprimiranje rekombinantnih antitela. U nekim otelotvorenjima, antitela mogu biti proizvedena u transgenim životinjama kao što su krave ili pilići.
[0141] Opšti postupci za molekularnu biologiju antitela, eksprimiranje, prečišćavanje i skrining su opisani, na primer, u Antibody Engineering, uređen od strane Kontermann & Dubel, Springer, Heidelberg, 2001 i 2010 Hayhurst & Georgiou, 2001, Curr Opin Chem Biol 5:683-689; Maynard & Georgiou, 2000, Annu Rev Biomed Eng 2:339-76; i Morrison, S. (1985) Science 229:1202.
Primene i indikacije
[0142] Jednom napravljena, antitela iz ovog pronalaska se koriste u različitim primenama, uključujući dijagnozu bolesti povezanih sa CD38 i njihov tretman.
CD38 povezana stanja
[0143] U jednom aspektu, otelotvorenje pruža metode dijagnostikovanja i lečenja stanja povezanih s upalom i imunološkim oboljenjima, posebno bolestima povezanim sa aktiviranim limfocitima. Kao što je ovde prikazano, CD38 se eksprimira u nezrelim hematopoietskim ćelijama, niže regulisanim u zrelim ćelijama, i re-eksprimira na visokim nivoima u aktiviranim limfocitima i plazma ćelijama. Na primer, visoko eksprimiranje CD38 se vidi kod aktiviranih B ćelija, plazma ćelija, aktiviranih CD4 T ćelija, aktiviranih CD8 T ćelija, NK ćelija, NKT ćelija, zrelih dendritičkih ćelija (DCs) i aktiviranih monocita.
[0144] Terapeutska anti-CD38 antitela predmetnog pronalaska vezuju se za CD38 pozitivne ćelije, što dovodi do smanjenja ovih ćelija, kao što su aktivirani limfociti, kroz višestruke mehanizme delovanja, uključujući i CDC i ADCC puteve.
[0145] Tako, bilo koja autoimuna bolest koja pokazuje ili povećanu ekspresiju CD38 ili povećan broj eksprimiranih CD38 ćelija kao komponente bolesti može se tretirati korišćenjem antitela iz ovog pronalaska. Oni uključuju, ali se i ne ograničavaju na, alogeno odbacivanje granul rastvarača, alopecia areat, ankilozni spondilitis, antifosfolipidni sindrom, autoimunu Adisonovu bolest, antineutroficnu citoplazmičnu autoantitela (ANCA), autoimune bolesti nadbubrežne žlezde, autoimunu hemolitičke anemije, autoimuni hepatitis, autoimuni miokarditis, autoimunu neutropeniju, autoimuni ooferitis i orhitis, autoimunu trombocitopeniju, autoimuu urtikariju, behetovu bolest, bulozni pemfigoid, kardiomiopatiju, Castlemanov sindrom, celiak kontaktni-dermatitis, sindrom hronične zamorne imune disfunkcije, hroničnu inflamatornu demielinizirajuću polineuropatiju, Churg-Strausov sindrom, cicatricni pemfigoid, CREST sindrom, bolest hladnog aglutinina, Hronovu bolest, dermatomiozitis, diskoidni lupus, esencijalnu mešovitu krioglobulinemija, deficijentni faktor VIII, fibromialgija-fibromiozitis, glomerulonefritis, Graveova bolest, Guillain-Barre, Godpastureov sindrom, bolest graft-versus-host (GVHD), Hashimoto tiroididitis, hemofiliju A, idiopatske plućne fibroze, idiopatske trombocitopenije purpure (ITP), IgA neuropatije, polineuropathije IgM-a, trombocitopenije imunološkog poremećaja, juvenilnog artritisa, Kavasaki-ove bolesti, lichen plantus-a, lupus eritematozusu, Meniereovu bolesti, mešovite bolesti vezivnog tkiva, multiple sklerozu i dijabetes mellitus, miastenia gravis, pemfigus vulgaris, pernicioznu anemiju, poliarteritis nodosa, polihrondritis, poliglundularni sindrom, polimialgija reumatiku, polimiozitis i dermatomiozitis, primarna agammaglobinuliniemija, primarnu bilijarnu cirozu, psorijazu, psoriatični artritis, Reinauldov fenomen, Reiterov sindrom, reumatoidni artritis, sarkoidozu, sklerodermu, Sjorgenov sindrom, odbacivanje srži čvrstih organa, sindrom mišićne krutosti, sistemski lupus eritematozus, takaiasu arteritis, temporalni arteristis / arteritis gigantskih ćelija, trombotična trombocitopenija purpura, ulcerativni kolitis, uveitis, vaskulitidi kao što je dermatitis herpetiformis vaskulitis, i Vegnerovu granulomatozu.
[0146] Posebna upotreba u nekim oblicima je upotreba ovih antitela za upotrebu u dijagnozi i/ili lečenju brojnih bolesti, uključujući, ali ne ograničavajući se na autoimune bolesti,
4
uključujući ali ne ograničavajući se na sistemski lupus erthematosus (SLE) reumatoidni artritis (RA), upalne bolesti creva (IBD), ulcerativnog kolitisa i graft-v-host bolesti.
[0147] Tako, na primer, mogu se odabrati pacijenti sa visokim sadržajem plazma ćelija, kao što su SLE pacijenti koji pokazuju visok nivo ćelija plazme, kao i pacijenti sa RA koji pokazuju da ne reaguju na terapije zasnovane na CD20.
[0148] U jednom aspektu, objava daje postupke tretiranja stanja koja su povezani sa proliferacijom ćelija koje eksprimiraju CD38, koji obuhvataju davanje pacijentu farmaceutski efikasne količine objavljenog antitela. U određenim aspektima, stanje je kancer, i u naročitim otelotvorenjima, kancer je hematološki kancer. U drugim posebnim otelotvorenjima, stanje je multipli mijelom, hronična limfoblastna leukemija, hronična limfocitna leukemija, leukemija plazma ćelija, akutna mijeloidna leukemija, hronična mijeloična leukemija, B-ćelijski limfom ili Burkitov limfom.
[0149] U struci je poznato da su određena stanja povezana sa ćelijama koje eksprimiraju CD38 i da su određena stanja povezana sa prekomernim eksprimiranjem, eksprimiranjem visoke gustine ili na gore regulisanim eksprimiranjem CD38 na površinama ćelija. Bilo da populacija ćelija eksprimira CD38 ili ne, može se odrediti postupcima poznatim u struci, na primer određivanje protočnom citometrijom procenta ćelija u datoj populaciji koja je označena antitelom koje specifično vezuje CD38 ili imunohistokemijske analize, kako se generalno opisuje u nastavku za dijagnostičke primene. Na primer, populacija ćelija u kojima se detektuje eksprimiranje CD38 u oko 10-30% ćelija može se smatrati slabo pozitivnom za CD38; i populacija ćelija u kojima se detektuje eksprimiranje CD38 u više od oko 30% ćelija može se smatrati definitivnom pozitivnom za CD38 (kao kod Jackson i dr. (1988), Clin. Exp. Immunol. 72: 351-356), mada se i drugi kriterijumi mogu koristiti za utvrđivanje da li populacija ćelija eksprimira CD38. Gustina eksprimiranja na površinama ćelija može se odrediti korišćenjem postupaka poznatih u struci, kao što su, na primer, merenje protočnom citometrijom srednjih intenziteta fluorescencije ćelija koje su fluorescentno obeležene korišćenjem antitela koja specifično vezuju CD38.
[0150] U nekim otelotvorenjima, sastavi i postupci objave primenjuju se na kancer kao što je
„hematološki kancer“, koji se odnosi na maligne neoplazme tkiva koja formiraju krv i obuhvata leukemiju, limfom i multipli mijelom. Neograničavajući primeri stanja povezanih sa eksprimiranjem CD38 uključuju, ali nisu ograničeni na, multipli mijelom (Jackson i dr. (1988), Clin. Exp. Immunol. 72: 351-356), B-ćelijsku hroničnu limfocitnu leukemiju (B-CLL) Dürig i dr. (2002), Leukemjia 16: 30-5; Morabito i dr. (2001), Leukemia Research 25: 927-32; Marinov i dr. (1993), Neoplasma 40(6): 355-8; i Jelinek i dr. (2001), Br. J. Haematol.
115: 854-61), akutnu limfoblastnu leukemiju (Keyhani i dr. (1999), Leukemia Research 24: 153-9; i Marinov i dr. (1993), Neoplasma 40(6): 355-8), hroničnu mijeloidnu leukemiju (Marinov i dr. (1993), Neoplasma 40(6): 355-8), akutnu mijeloidnu leukemiju (Keyhani i dr. (1999), Leukemia Research 24: 153-9), hroničnu limfocitnu leukemiju (CLL), hroničnu mijelogenu leukemiju (HML), akutnu mijelogenu leukemiju (AML), akutnu limfocitnu leukemiju (ALL), leukemiju dlakavih ćelija (HCL), mijelodisplastični sindrom (MDS) ili hroničnu mijelogenu leukemiju (CML-BP) u blastičnom, i sve podtipove ovih leukemija koji su definisani morfološkim, histohemijskim i imunološkim tehnikama koje su dobro poznate stručnjacima u oblasti.
[0151] „Neoplazma“ ili „neoplastično stanje“ odnosi se na stanje povezano sa proliferacijom ćelija koje se karakterišu gubitkom normalnih kontrola, što dovodi do jednog ili više simptoma, uključujući neregulisan rast, nedostatak diferencijacije, invaziju lokalnog tkiva i metastazu.
[0152] U nekim obelodanjenim otelotvorenjima, hematološki kancer je izabran iz grupe Hronične limfocitne leukemije (CLL), Hronične mijelogene leukemije (CML), akutne mijelogene leukemije (AML) i akutne limfocitne leukemije (ALL).
[0153] Dalje, u struci je poznato da je eksprimiranje CD38 prognostički indikator za pacijente sa stanjima kao što su, na primer, hronična limfocitna leukemija B-ćelija (Dürig i dr. (2002), Leukemia 16: 30-5; and Morabito i dr. (2001), Leukemia Research 25: 927-32) i akutna mijelogena leukemija (Keyhani i dr. (1999), Leukemia Research 24: 153-9).
[0154] CLL je najčešća leukemija odraslih u zapadnom svetu. CLL uključuje klonsku ekspanziju zrelih limfocita koji uključuju limfne čvorove i druga limfoidna tkiva sa progresivnom infiltracijom koštane srži i prisustvom u perifernoj krvi. B-ćelijski oblik (B-CLL) predstavlja skoro sve slučajeve.
B-CLL
[0155] B-CLL je neizlečiva bolest koja se karakteriše progresivnim povećanjem anergičnih monoklonskih B linijskih ćelija koje se akumuliraju u koštanoj srži i perifernoj krvi u dugotrajnom obliku tokom mnogo godina. Eksprimiranje CD38 se smatra nezavisnim prognostičkim prognostičkim faktorom za B-CLL. Hamblin i dr., Blood 99:1023-9 (2002).
[0156] Današnja standardna terapija B-CLL je palijativna i uglavnom se vrši pomoću citostatičkog agensa hlorambucila ili fludarabina. Kada dođe do recidiva, često se inicira kombinovana terapija koja koristi fludarabin, ciklofosfamid u kombinaciji sa rituksimabom (monoklonsko antitelo protiv CD20) ili kampatom (monoklonsko antitelo protiv CD52). Stoga, postoji kritično neuslišena medicinska potreba za lečenjem B-CLL. U nekim otelotvorenjima su obezbeđeni postupci za lečenje B-CLL koristeći objavljena anti-CD38 antitela (i, kako je prikazano u nastavku, ovo se može uraditi korišćenjem kombinovanih terapija uključujući po želji i nezavisno bilo koji od navedenih lekova).
[0157] B-CLL karakterišu dva podtipa, indolentni i agresivni. Ovi klinički fenotipi su u korelaciji sa prisustvom ili odsustvom somatskih mutacija u genu varijabilne regije teškog lanca imunoglobulina (IgVH). Kad se ovde koristi, indolentni B-CLL se odnosi na poremećaj kod pacijenata koji imaju mutirani IgVH gen i/ili predstavlja sa jednim ili više kliničkih fenotipova povezanih sa indolentnim B-CLL. Kad se ovde koristi, fraza agresivna B-CLL se odnosi na poremećaj kod pacijenta koji ima nemutirani IgVH i/ili predstavlja jedan ili više kliničkih fenotipova koji su povezani sa agresivnim B-CLL.
Multipli mijelom
[0158] Multipli mijelom je maligni poremećaj linije B ćelija koji se karakteriše neoplastičnom proliferacijom plazma ćelija u koštanoj srži. Trenutni režimi lečenja pokazuju umerenu stopu odgovora. Međutim, primećuju se samo marginalne promene u ukupnom preživljavanju, i srednje preživljavanje je oko 3 godine. Prema tome, postoji kritična neuslišena medicinska potreba za lečenjem multiplog mijeloma. U nekim otelotvorenjima objave obezbeđeni su postupci za lečenje multiplog mijeloma korišćenjem antitela objave.
[0159] CD38 je visoko eksprimiran u plazma ćelijama koje su terminalno diferencirane B ćelije.
[0160] Proliferacija ćelija mijeloma uzrokuje različite efekte, uključujući lizične lezije (rupe) u kostima, smanjenje broja crvenih krvnih ćelija, stvaranje abnormalnih proteina (sa pratećim oštećenjem bubrega, nerava i drugih organa), smanjena funkcija imunog sistema, i povećani nivoi kalcijuma u krvi (hiperkalcemija).
[0161] Trenutno opcije lečenja uključuju hemoterapiju, poželjno povezanu kada je moguće sa transplantacijom autologne matične ćelije (ASCT).
Monoklonska gamopatija neodređenog značaja i tinjajući multipli mijelom
[0162] U nekim otelotvorenjima objave obezbeđeni su postupci za lečenje monoklonske gamopatije korišćenjem antitela objave. U drugim otelotvorenjima objave, obezbeđeni su postupci za lečenje multiplog mijeloma korišćenjem antitela objave.
[0163] Monoklonska gamopatija neodređenog značaja (MGUS) i tinjajući multiple mijelom (SMM) su asimptomatski, pred maligni poremećaji koji se karakterišu proliferacijom monoklonskih plazma ćelija u koštanoj srži i odsustvom oštećenja krajnjeg organa.
[0164] Tinjajući multipli mijelom (SMM) je asimptomatski proliferativni poremećaj plazma ćelija sa visokim rizikom progresije na simptomatski ili aktivni multipli mijelom (N. Engl. J. Med. 356(25): 2582-2590 (2007)).
[0165] Međunarodni konsenzus kriterijumi koji definišu SMM su usvojeni 2003. godine i zahtevaju da pacijent ima nivo M-proteina od> 30 g/L i/ili klonske ćelije plazme u koštanoj srži> 10% (Br. J. Haematol.121: 749-57 (2003)). Pacijent ne mora imati organsko ili slično oštećenje tkiva, uključujući lezije kostiju ili simptome (Br. J. Haematol.121: 749-57 (2003)).
[0166] Nedavne studije su identifikovale dva podskupa SMM-a; i) pacijenti sa evoluirajućom bolesti i ii) pacijenti sa ne-evoluirajućom bolesti (Br. J. Haematol.121: 631-636 (2003)). Međunarodni kriterijumi konsenzusa koji definišu MGUS zahtevaju da pacijent ima nivo M-proteina <30 g/L, plazma ćelije koštane srži <10% i odsustvo organa ili slično oštećenje tkiva, uključujući lezije kostiju ili simptome (Br. J. Haematol.121: 749-57 (2003)).
[0167] SMM podseća na monoklonsku gamopatiju neodređenog značaja (MGUS) kako oštećenja krajnjeg organa nisu prisutna (N. Engl. J. Med.356 (25): 2582-2590 (2007)).
Klinički, međutim, SMM ima daleko veću verovatnoću napredovanja na aktivni multipli mijelom ili amiloidozu na 20 godina (78% verovatnoća za SMM u odnosu na 21% za MGUS) (N. Engl. J. Med.356 (25): 2582-2590 (2007)).
Sastavi antitela za in vivo primenu
[0168] Formulacije antitela korišćenih u skladu sa ovim pronalaskom se pripremaju za skladištenje mešanjem antitela koji ima željeni stepen čistoće sa opcionim farmaceutski prihvatljivim nosačima, ekscipijentima ili stabilizatorima (Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. [1980]), u obliku liofilizovanih formulacija ili vodenih rastvora. Prihvatljivi nosači, ekscipijenti ili stabilizatori su netoksični za primaoce u dozama i koncentracijama koje se koriste, i uključuju pufere kao što su fosfat, citrat i druge organske kiseline; antioksidanse uključujući askorbinsku kiselinu i metionin; konzervanse (kao što su oktadecildimetilbenzil amonijum hlorid, heksametonski hlorid, benzalkonijum hlorid, benzetonijum hlorid, fenol, butil ili benzil alkohol, alkil parabeni kao metil ili propil paraben, katehol, resorcinol, cikloheksanol, 3-pentanol i m-krezol); polipeptide niske molekulske mase (manje od 10 ostataka); proteine, kao što su serumski albumini, želatin ili imunoglobulini; hidrofilne polimere kao što je polivinilpirolidon; aminokiseline kao što su glicin, glutamin, asparagin, histidin, arginin ili lizin; monosaharidi, disaharidi i drugi ugljeni hidrati, uključujući glukozu, manozu ili dekstrine; helatirajuće agense kao što su EDTA; šećere kao što su saharoza, manitol, trehaloza ili sorbitol; kontra-jone koji formiraju soli kao što je natrijum; metalne komplekse (npr., komplekse Zn-proteina); i/ili nejonske surfaktante kao što su TWEEN™, PLURONICS™ ili polietilen glikol (PEG).
[0169] Formulacija ovde može takođe sadržati više od jednog aktivnog jedinjenja ako je potrebno za određenu indikaciju koja se tretira, poželjno ona jedinjenja sa komplementarnim aktivnostima koje ne utiču negativno jedna na druge. Na primer, možda bi bilo poželjno pružiti antitela sa drugim specifičnostima. Alternativno, ili pored toga, sastav može obuhvatati citotoksični agens, citokin, agens inhibitor rasta i/ili antagonist malih molekula. Takvi molekuli su odgovarajuće prisutni u kombinaciji u količinama koje su efikasne za namenjene svrhe.
[0170] Aktivni sastojci se takođe mogu uhvatiti u mikrokapsule pripremljene, na primer, tehnikom koacervacije ili međusobnom polimerizacijom, na primer, hidroksimetilcelulozom ili mikrokapsulama želatina i mikrokapsulama iz poli (metilmetakilata), u koloidnim sistemima za davanje lekova (na primer, lipozomi, albumin mikrosfere, mikroemulzije, nanočestice i nanokapsule) ili u makroemulzijama. Takve tehnike su objavljene u Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980).
[0171] Formulacije koje se koriste za in vivo primenu treba da budu sterilne, ili skoro takve. Ovo se lako postiže filtracijom kroz sterilne filtracione membrane.
[0172] Pripreme sa produženim oslobađanjem mogu se pripremiti. Pogodni primeri priprema sa produženim oslobađanjem uključuju semipermeabilne matrice čvrstih hidrofobnih polimera koje sadrže antitelo, koje su matrice u obliku oblikovanih proizvoda, npr. filmovi ili mikrokapsule. Primeri matrica sa produženim oslobađanjem uključuju poliestere, hidrogelove (na primer, poli(2-hidroksietil-metakrilat) ili poli(vinilalkohol)), polilaktide (U.S. Pat. No. 3,773,919), kopolimere L-glutaminske kiseline i .gama. etil-L-glutamat, ne-razgradivi etilenvinilacetat, razgradive kopolimere mlečne i glikolne kiseline kao što je LUPRON DEPOT™ (injektirajuće mikrosfere sastavljene od kopolimera mlečne i glikolne kiseline i leuprolid acetata) i poliD-(-)-3-hidroksibuterna kiselina. Dok polimeri kao što su etilen-vinil acetat i mlečna-glikolna kiselina omogućavaju oslobađanje molekula duže od 100 dana, određeni hidrogeli oslobađanju proteine u kraćim vremenskim periodima.
[0173] Kada inkapsulirana antitela ostaju u telu dugo vremena, mogu denaturisati ili agregirati kao rezultat izloženosti vlazi na 37°C, što rezltuje gubitkom biološke aktivnosti i mogućim promenama imunogenosti. Racionalne strategije mogu biti osmišljene za stabilizaciju u zavisnosti od uključenog mehanizma. Na primer, ako se otkrije da je mehanizam agregacije intermolekularna formacija S-S veze kroz tio-disulfidnu izmenu, stabilizacija može biti postignuta modifikacijom sulfhidrilnih ostataka, liofilizacijom iz kiselih rastvora, kontrolom sadržaja vlage, korišćenjem adekvatnih aditiva i razvojem specifičnog polimernih matričnih sastava.
Modaliteti primene
[0174] Antitela iz ovog pronalaska se daju pacijentu, u skladu sa poznatim postupcima, kao što je intravenozna primena kao bolus ili kontinualna infuzija tokom određenog vremenskog perioda, intramuskularnim, intraperitonealnim, intrakerobrospinalnim, potkožnim, intraartikularnim, intrasinovalnim, intratekalnim, oralnim, lokalnim ili inhalacionim putevima. Poželjno je intravenozno ili potkožno davanje antitela.
4
Modaliteti lečenja
[0175] U postupcima objave, terapija se koristi kako bi se dobio pozitivan terapeutski odgovor u odnosu na bolest ili stanje. Pod „pozitivnim terapijskim odgovorom“ misli se na poboljšanje bolesti ili stanja i/ili poboljšanje simptoma povezanih sa bolestima ili stanjima. Na primer, pozitivan terapijski odgovor bi se odnosio na jedno ili više sledećih poboljšanja u bolesti: (1) smanjenje broja neoplastičnih ćelija; (2) povećanje smrti neoplastičnih ćelija; (3) inhibicija preživljavanja neoplastičnih ćelija; (5) inhibicija (tj., u određenoj meri usporavanje, poželjno zaustavljanje) rasta tumora; (6) povećana stopa preživljavanja pacijenta; i (7) olakšanje od jednog ili više simptoma povezanih sa bolestima ili stanjima.
[0176] Pozitivni terapeutski odgovori u bilo kojoj bolesti ili stanju mogu se odrediti standardizovanim kriterijumima odgovora specifičnim za tu bolest ili stanje. Odgovor tumora se može proceniti za promene u morfologiji tumora (tj. opšte tumorsko opterećenje, veličina tumora i slično) koristeći tehnike snimanja kao što su skeniranje magnetne rezonance (MRI), rendgenografska slika, kompjutersko tomografsko (CT) skeniranje, skeniranje kostiju, endoskopija i uzimanje uzoraka biopsije tumora uključujući aspiraciju koštane srži (BMA) i brojanje tumorskih ćelija u cirkulaciji.
[0177] Osim ovih pozitivnih terapeutskih odgovora, pacijent koji prolazi kroz terapiju može doživeti blagotvoran efekat poboljšanja simptoma povezanih sa bolestima.
[0178] Tako za tumore B ćelija, pacijent može doživeti smanjenje takozvanih B simptoma, tj. noćno znojenje, groznicu, gubitak težine i/ili urtikariju. Za pre-maligna stanja, terapija sa anti-CD38 terapeutskim agensom može blokirati i/ili produžiti vreme pre razvoja povezanog malignog stanja, na primer, razvoj multiplih mijeloma kod pacijenata koji pate od monoklonske gamopatije neodređenog značaja (MGUS).
[0179] Poboljšanje bolesti može se okarakterisati kao potpuni odgovor. Pod „potpunim odgovorom“ predviđeno je odsustvo klinički detektabilne bolesti uz normalizaciju bilo koje prethodno abnormalne radiografske studije, koštane srži i cerebrospinalne tečnosti (CSF) ili abnormalnog monoklonskog proteina u slučaju mijeloma.
[0180] Takav odgovor može trajati najmanje 4 do 8 nedelja, ili ponekad 6 do 8 nedelja, nakon tretmana prema postupcima objave. Alternativno, poboljšanje bolesti može biti kategorizovano kao delimičan odgovor. Pod „delimičnim odgovorom“ misli se na najmanje oko 50% smanjenja u svim merljivim opterećenjima tumora (tj., broj malignih ćelija prisutnih u pacijentu, ili delimičan ukupne tumorske mase ili količina abnormalnog monoklonskog proteina) u odsustvu novih lezija, koji mogu trajati 4 do 8 nedelja, ili 6 do 8 nedelja.
[0181] Tretman prema predmetnom pronalasku uključuje „terapeutski efikasnu količinu“ upotrebljenih lekova. „Terapeutski efikasna količina“ odnosi se na količinu koja je efikasna, u dozama i za vremenske periode potrebne za postizanje željenog terapeutskog rezultata.
[0182] Terapeutski efikasna količina može varirati u zavisnosti od faktora kao što su stanje bolesti, starost, pol i težina pojedinca, i sposobnost lekova da izazovu željeni odgovor kod pojedinca. Terapeutski efikasna količina je takođe ona u kojoj su neki otrovni ili štetni efekti antitela ili dela antitela nadjačani terapeutski korisnim efektima.
[0183] „Terapeutski efikasna količina“ za tumorsku terapiju može se takođe meriti njegovom sposobnošću da stabilizuje progresiju bolesti. Sposobnost jedinjenja da inhibira rak može se proceniti u sistemu životinjskog modela koji predviđa efikasnost kod tumora čoveka.
[0184] Alternativno, ova osobina sastava može biti procenjena ispitivanjem sposobnosti jedinjenja da inhibira rast ćelija ili indukuje apoptozu in vitro testovima poznatim stručnjaku. Terapeutski efikasna količina terapeutskog jedinjenja može smanjiti veličinu tumora ili na neki drugi način poboljšati simptome kod pacijenta. Stručnjak u oblasti bi mogao utvrditi takve količine zasnovane na faktorima kao što su veličina pacijenta, težina simptoma pacijenta i određeni sastav ili način odabira.
[0185] Režimi doziranja se prilagođavaju da obezbede optimalni željeni odgovor (npr., terapijski odgovor). Na primer, jedan bolus može biti primenjen, nekoliko podeljenih doza može da se primeni tokom vremena ili doza može biti srazmerno smanjena ili povećana, kao što je pokazano potrebama terapeutske situacije. Parenteralni sastavi mogu se formulisati u obliku jedinjenja doze za lakšu primenu i jedinstvenost doziranja. Oblik dozne jedinice kao što se ovde koristi odnosi se na fizički diskretne jedinice koje su pogodne za jedinične doze za pacijente koji se tretiraju; gde svaka jedinica sadrži unapred određenu količinu aktivnog jedinjenja izračunatu kako bi proizvela željeni terapeutski efekat u saradnji sa potrebnim farmaceutskim nosačem.
[0186] Specifikacije oblika dozne jedinice prema predmetnom pronalasku diktiraju i direktno zavise od (a) jedinstvenih karakteristika aktivnog jedinjenja i određenog terapeutskog efekta koji treba postići, i (b) ograničenja koja su inherentna u struci sastavljanja takvih aktivnih jedinjenja za tretman osetljivosti kod pojedinaca.
[0187] Efikasne doze i režimi doziranja za anti-CD38 antitela korišćena u predmetnom pronalasku zavise od bolesti ili stanja koji treba tretirati i mogu biti određeni od strane stručnjaka.
[0188] Primeran, neograničavajući opseg terapeutski efikasne količine anti-CD38 antitela koji se koristi u ovom pronalasku je oko 0,1-100 mg/kg, kao što je oko 0,1-50 mg/kg, na primer oko 0,1-20 mg/kg, kao što je oko 0,1-10 mg/kg, na primer oko 0,5, oko 0,3, oko 1 ili oko 3 mg/kg. U još jednom otelotvorenju, antitelo se primenjuje u dozi od 1 mg/kg ili više, kao što je doza od 1 do 20 mg/kg, npr. doza od 5 do 20 mg/kg, npr. doza od 8 mg/kg.
[0189] Medicinski radnik sa iskustvom u struci može lako odrediti i propisati efektivnu količinu potrebnog farmaceutskog sastava. Na primer, lekar ili veterinar može započeti dozu medikamenta koji se koristi u farmaceutskom sastavu na nivoima nižim od onog koji je potreban kako bi se postigao željeni terapeutski efekat, i da postepeno povećava doza dok se ne postigne željeni efekat.
[0190] U jednom otelotvorenju, anti-CD38 antitelo se daje infuzijom u nedeljnoj dozi od 10 do 500 mg/kg, kao što je od 200 do 400 mg/kg. Takva primena se može ponoviti, npr., 1-8 puta, kao što je 3 do 5 puta. primena se može izvoditi kontinuiranom infuzijom tokom perioda od 2 do 24 sata, na primer od 2 do 12 sati.
[0191] U jednom otelotvorenju, anti-CD38 antitelo se daje sporom kontinualnom infuzijom tokom dužeg perioda, kao što je više od 24 sata, ako je potrebno, kako bi se smanjili neželjeni efekti uključujući toksičnost.
[0192] U jednom otelotvorenju anti-CD38 antitelo se primenjuje u nedeljnoj dozi od 250 mg do 2000 mg, kao na primer 300 mg, 500 mg, 700 mg, 1000 mg, 1500 mg ili 2000 mg, do 8 puta, od 4 do 6 puta. Primena se može izvoditi kontinuiranom infuzijom tokom perioda od 2
4
do 24 sata, na primer od 2 do 12 sati. Takav režim se može ponoviti jedan ili više puta po potrebi, na primer, nakon 6 meseci ili 12 meseci. Doziranje se može odrediti ili prilagoditi merenjem količine jedinjenja iz ovog pronalaska u krvi nakon primene, na primer uzimanjem biološkog uzorka i upotrebom anti-idiotipskih antitela koja ciljaju antigen vezujuću regija anti-CD38 antitela.
[0193] U daljem otelotvorenju, anti-CD38 antitelo se primenjuje jednom nedeljno u trajanju od 2 do 12 nedelja, na primer u trajanju od 3 do 10 nedelja, na primer u trajanju od 4 do 8 nedelja.
[0194] U jednom otelotvorenju, anti-CD38 antitelo se primenjuje održavanjem terapije, kao što je, npr., jednom nedeljno tokom perioda od 6 meseci ili više.
[0195] U jednom otelotvorenju, anti-CD38 antitelo se primenjuje putem režima uključujući jednu infuziju anti-CD38 antitela praćenu infuzijom anti-CD38 antitela konjugovanog sa radioizotopom. Režim se može ponoviti, npr., 7 do 9 dana kasnije.
[0196] Kao neograničavajući primeri, tretman prema predmetnom pronalasku može biti obezbeđen kao dnevna doza antitela u količini od oko 0,1-100 mg/kg, kao što je 00,5, 0,9, 1,0, 1,1, 1,5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 ili 100 mg/kg dnevno, najmanje jedan od dana 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, ili 40 ili, alternativno, najmanje jedna od nedelja 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ili 20 nakon iniciranja terapije ili bilo koje njihove kombinacije, koristeći pojedinačne ili podeljene doze svakih 24, 12, 8, 6, 4 ili 2 sata ili bilo koje njihove kombinacije.
[0197] U nekim otelotvorenjima molekul anti-CD38 antitela se koristi u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapeutskih agenasa, npr. hemoterapeutskim agensom.
Neograničavajući primeri DNK oštećujućih hemoterapeutskih agenasa uključuju inhibitore topoizomeraze I (npr., irinotekan, topotekan, kamptotecin i analoge ili njihove metabolite i doksorubicin); inhibitore topoizomeraze II (npr., etopozid, tenipozid i daunorubicin); agense za alkilovanje (npr. melfalan, hlorambucil, busulfan, tiotepa, ifosfamid, karmustin, lomustin, semustin, streptozocin, dekarbazin, metotreksat, mitomicin C i ciklofosfamid); DNK interkalatore (npr., cisplatin, oksaliplatin i karboplatin); DNK interkalatori i generatore slobodnog radikala kao što je bleomicin; i nukleozidne mimetike (npr., 5-fluorouracil, kapecitibin, gemcitabin, fludarabin, citarabin, merkaptopurin, tioguanin, pentostatin i hidroksiurea).
[0198] Hemoterapeutski agensi koji narušavaju ćelijsku replikaciju uključuju: paklitaksel, docetaksel i srodne analoge; vinkristin, vinblastin i srodne analoge; talidomid, lenalidomid i srodne analoge (npr., CC-5013 i CC-4047); inhibitore proteina tirozin kinaze (npr., imatinib mezilat i gefitinib); inhibitore proteazoma (npr., bortezomib); NF-κB inhibitore, uključujući inhibitore IKB kinaze; antitela koja se vezuju za prekomerno eksprimirane proteine u karcinomu i na taj način smanjuju replikaciju ćelija (npr., trastuzumab, rituksimab, cetuksimab i bevacizumab); i drugi inhibitori proteina ili enzima za koje je poznato da su regulisani, prekomerno eksprimirani ili aktivirani kod karcinoma, čija inhibicija smanjuje reprodukciju ćelija.
[0199] U nekim otelotvorenjima, antitela iz ovog pronalaska mogu se koristiti pre, istovremeno sa ili posle tretmana sa Velcade® (bortezomib).
Dijagnostičke upotrebe
[0200] Dostupna Anti-CD38 antitela takođe se u in vitro ili in vivo snimanje tumora ili autoimunih stanja bolesti povezanih sa CD38. U nekim otelotvorenjima antitela opisana ovde služe za dijagnozu i lečenje, ili samo za dijagnozu. Kada se anti-CD38 antitela koriste za dijagnozu i lečenje, neka otelotvorenja se oslanjaju na dva različita anti-CD38 antitela na dva različita epitopa, tako da se dijagnostičko antitelo ne nadmeće za vezivanje sa terapijskim antitelom, iako se u nekim slučajevima isti antitelo može koristiti za oba. Na primer, u nekim slučajevima, Ab19 antitelo se koristi dijagnostički (obično se označava kao što je opisano u nastavku), dok se Ab79 koristi terapeutski, ili obrnuto. Tako obuhvaćeni u pronalasku su sastavi koje sadrže dijagnostičko antitelo i terapeutsko antitelo, a u nekim otelotvorenjima dijagnostičko antitelo je označeno kako je ovde opisano. Pored toga, sastav terapijskih i dijagnostičkih antitela može se takođe primeniti sa drugim lekovima kao što je ovde navedeno.
[0201] U mnogim otelotvorenjima, dijagnostičko antitelo je označeno. „Označeno“ ovde znači da antitela objavljena ovde imaju jedan ili više elemenata, izotopa ili hemijskih
4
jedinjenja koji su pričvršćena kako bi se omogućila detekcija u skriningu ili dijagnostičkoj proceduri. Uopšteno govoreći, oznake spadaju u nekoliko klasa: a) imune oznake, koje mogu biti epitopom ugrađene kao fuzioni partner koji je prepoznao antitelo, b) izotopske oznake, koje mogu biti radioaktivni ili teški izotopi, c) oznake malih molekula, koje mogu uključivati fluorescentne i kolorimetrijske boje ili molekule kao što je biotin koji omogućavaju druge postupke etiketiranja i d) oznake kao što su čestice (uključujući i mehuriće za označavanje ultrazvuka) ili paramagnetske oznake koje omogućavaju snimanje tela. Oznake mogu biti uključene u antitela na bilo kom položaju i mogu biti uključene in vitro ili in vivo tokom eksprimiranja proteina, kako je poznato u struci.
[0202] Dijagnoza se može izvršiti bilo in vivo, primenom dijagnostičkog antitela koje omogućava snimanje celog tela kako je opisano u nastavku, ili in vitro, na uzorcima koji su uklonjeni od pacijenta. Uzorak u ovom kontekstu uključuje bilo koji broj stvari, uključujući, ali ne ograničavajući se na, telesne tečnosti (uključujući, ali ne ograničavajući se na na, krv, urin, serum, limfu, pljuvačku, analnu i vaginalnu sekreciju, znoj i seme), kao i uzorke tkiva, kao što je rezultat biopsija relevantnih tkiva.
[0203] U nekim otelotvorenjima, in vivo snimanje je obavljeno, uključujući, ali ne ograničavajući se na ultrazvuk, CT skenere, rendgenske snimke, MRI i PET skenere, kao i optičke tehnike, kao što su oni koji koriste optičke oznake za tumore blizu površine tela.
[0204] In vivo snimanje oboljenja povezanih sa CD38 može se obaviti bilo kojom odgovarajućom tehnikom. Na primer,<99>Tc-označavanje ili označavanje sa drugim izotopom koji emituje β-zrake može se koristiti za označavanje anti-CD38 antitela. Varijacije ove tehnike mogu uključiti upotrebu magnetne rezonance (MRI) za poboljšanje snimanja putem tehnika gama kamera. Slični imunoscintigrafski postupci i principi opisani su, na primer, kod Srivastava (ed.), Radiolabeled Monoclonal Antibodies For Imaging And Therapy (Plenum Press 1988), Chase, „Medical Applications of Radioisotopes,“ u Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Gennaro i dr., (eds.), pp.624-652 (Mack Publishing Co., 1990), i Brown, „Clinical Use of Monoclonal Antibodies,“ u Biotechnology And Pharmacy 227-49, Pezzuto i dr., (eds.) (Chapman & Hall 1993).
[0205] U jednom aspektu, ovo otkriće pruža in vivo postupak snimanja gde je anti-CD38 antitelo konjugovano na agens za promovisanje detekcije, konjugovano antitelo se primenjuje
4
na domaćina, kao što je injekcijom u krvotok, a prisustvo i lokacija označenog antitela u domaćinu se analizira. Kroz ovu tehniku i bilo koji drugi dijagnostički postupak koji je ovde dat, predmetni pronalazak pruža postupak za skrining prisustva ćelija koje su u vezi sa bolesti kod pacijenta čoveka ili biološkog uzorka uzetog od pacijenta čoveka.
[0206] Za dijagnostičko snimanje, radioizotopi mogu biti vezani za anti-CD38 antitelo bilo direktno ili indirektno pomoću posredničke funkcionalne grupe. Korisne posredničke funkcionalne grupe uključuju kelatore, kao što su etilendiaminetetrasirćetna kiselina i dietilentriamin pentasirćetna kiselina (pogledati npr. U.S. Pat. No.5,057,313). U takvim dijagnostičkim testovima koji uključuju anti-CD38 antitela konjugovana sa radioizotopom, doza konjugovanog anti-CD38 antitela koji se isporučuje pacijentu obično se održava na najnižim nivoima kroz izbor izotopa za najbolju kombinaciju minimalnog poluživota, minimalnog zadržavanje u telu i minimalne količina izotopa, što će omogućiti detekciju i tačno merenje.
[0207] Pored radioaktivnih izotopa i radio-prozirnih agenasa, dijagnostički postupci se mogu izvesti pomoću anti-CD38 antitela koja su konjugovana bojama (kao što je biotin-streptavidin kompleks), kontrastnih agenasa, fluorescentnih jedinjenja ili molekula i agenasa za poboljšanje (npr. paramagnetni joni) za magnetnu rezonancu (MRI) (pogledati, npr., U.S. Pat. No. 6,331,175, koji opisuje tehnike MRI i pripremu antitela konjugovanih sa agensom za poboljšanje MRI). Takvi dijagnostički/detekcioni agensi mogu biti izabrani od agenasa za upotrebu u snimanju magnetne rezonance i fluorescentnih jedinjenja.
[0208] kako bi se anti-CD38 antitelo opteretilo radioaktivnim metalima ili paramagnetnim jonima, može biti neophodno reagovati ih sa reagensom koji ima dugačak rep, na koji je pričvršćeno mnoštvo čeličnih grupa za vezivanje jona. Takav rep može biti polimer kao što je polilizin, polisaharid ili neki drugi derivatizovani lanac, ili lanac koji se može derivatizovati, koji ima grupe privezaka na koje mogu biti vezane helatne grupe kao što su npr. porfirini, poliamini, krunski etri, bisthiosemikarbazoni, polioksimi i slične grupe za koje je poznato da su korisne za ove svrhe.
[0209] Helati mogu biti spojeni sa anti-CD38 antitelima koristeći standardne hemikalije. Kelat je obično povezan sa anti-CD38 antitelom od strane grupe koja omogućava stvaranje
4
veze sa molekulom sa minimalnim gubitkom imunoreaktivnosti i minimalnom agregacijom i/ili unutrašnjim unakrsnim povezivanjem.
[0210] Primeri potencijalno korisnih kombinacija metal-helata uključuju 2-benzil-DTPA i monometil i cikloheksil analoge, koji se koriste sa dijagnostičkim izotopima u opštem energetskom opsegu od 60 do 4000 keV, kao što su 1<125>I,<123>I,<124>I,<62>Cu,<64>Cu,<18>F,<111>In,<67>Ga,<99>Tc,<94>Tc,<11>C,<13>N,<5>O, i<76>Br, za radio-snimanje.
[0211] Oznake uključuju radionuklid, radiološki kontrastni agens, paramagnetni jon, metal, fluorescentnu oznaku, hemiluminiscentnu oznaku, ultrazvučni kontrastni agens i fotoaktivni agens. Takvi dijagnostički agensi su dobro poznati i svaki takav poznati dijagnostički agens može se koristiti. Neograničavajući primeri dijagnostičkih sredstava mogu uključiti radionuklid kao što je<110>In,<111>In,<177>Lu,<18>F,<52>Fe,<62>Cu,<64>Cu,<67>Cu,<67>Ga,<68>Ga,<86>Y,<90>Y,<89>Zr,<94>mTc,<94>Tc,<99>mTc,<120>I,<123>I,<124>I,<125>I,<131>I,<154-158>Gd,<32>P,<11>C,<13>N,<15>O,<186>Re,<188>Re,<51>Mn,<52>mMn,<55>Co,<72>As,<75>Br,<76>Br,<82>mRb,<83>Sr, ili drugi γ-, β- ili emiteri pozitrona.
[0212] Paramagnetni joni od koristi mogu uključivati hrom (III), mangan (II), gvožđe (III), gvožđe (II), kobalt (II), nikal (II), bakar (II), neodimijum (III) , iterbium (III), gadolinijum (III), vanadijum (II), terbijum (III), disprozij (III), holmijum (III) ili erbijum (III). Metalni kontrastni agensi mogu uključivati lantan (III), zlato (III), olovo (II) ili bizmut (III).
[0213] Ultrazvučni kontrastni agensi mogu sadržati lipozome, kao što su lipozomi ispunjeni gasom. Radio-prozirna dijagnostička sredstva mogu biti izabrana od jedinjenja barijuma, jedinjenja galijuma i jedinjenja talijuma.
[0214] Ovi i slični helati, kada su složeni sa ne-radioaktivnim metalima, kao što su mangan, gvožđe i gadolinijum, mogu biti korisni za MRI dijagnostičke postupke u vezi sa anti-CD38 antitelima. Makrociklični helati kao što su NOTA, DOTA i TETA koriste se različitim metalima i radiometalima, posebno sa radionuklidima galijuma, itrijuma i bakra. Takvi kompleksi metal-helata mogu postati vrlo stabilni prilagođavanjem veličine prstena do metala od interesa. Ostali helati tipa prstenova, kao što su makrociklični polietri, koji su od interesa za stabilno vezivanje nukleida, kao što je<223>Ra, mogu biti pogodni i za dijagnostičke postupke.
4
[0215] Prema tome, ovaj pronalazak pruža dijagnostičke konjugate anti-CD38 antitela, pri čemu je konjugat anti-CD38 antitela konjugovan kontrastnim agensom (kao što su magnetna rezonanca, kompjuterska tomografija ili ultrazvučni kontrastni agens) ili radionuklid koji može biti , na primer, γ-, β-, α-, Auger-elektron ili izotop koji emituje pozitrone.
[0216] Anti-CD38 antitela takođe mogu biti korisna u, na primer, detektovanju eksprimiranja antigena koji je od interesa u specifičnim ćelijama, tkivima ili serumu. Za dijagnostičke primene, antitelo se obično označava detektabilnim delom za in vitro testove. Kao što će ceniti stručnjaci, postoji širok izbor odgovarajućih oznaka za upotrebu kod in vitro testiranja. Pogodne boje za upotrebu u ovom aspektu pronalaska uključuju, ali nisu ograničene na, fluorescentne lantanidne komplekse, uključujući one od europijuma i terbijuma, fluorescein, rodamin, tetrametilrodamin, eozin, eritrozin, kumarin, metil-kumarin, kvantne tačke (takođe se nazivaju „nanokristali“, pogledati U.S. Ser. No.09/315,584, ovde su uključeni referencom), piren, malazitna zelena, stilben, Lucifer žuta, Cascade Blue., TM, Teksas crvena, Cy boje (Cy3, Cy5 itd.), alexa boje (uključujući Alexa, fikoeritin, bodipi i druge opisane u 6th Edition of the Molecular Probes Handbook by Richard P. Haugland, koji je ovde izričito uključen referencom.
[0217] Obojena tkiva se onda mogu proceniti za brojanje radioaktivnosti kao indikator količine CD38-pridruženih peptida u tumoru. Slike dobijene korišćenjem takvih tehnika mogu se koristiti za procenu biodistribucije CD38 kod pacijenta, sisara ili tkiva, na primer u kontekstu korišćenja CD38 kao biomarkera za prisustvo invazivnih ćelija karcinoma.
Predmeti proizvodnje
[0218] U drugim otelotvorenjima, obezbeđen je predmet proizvodnje koji sadrži materijale koji su korisni za lečenje poremećaja opisanih iznad. Predmet proizvodnje sadrži kontejner i etiketu. Pogodni kontejneri uključuju, na primer, bočice, boce, špriceve i epruvete. Kontejneri mogu biti formirani od raznih materijala kao što su staklo ili plastika. Kontejner sadrži sastav koji je efikasn za lečenje stanja i može imati sterilni pristupni ulaz (na primer, kontejner može biti vreća za intravenski rastvor ili bočica koja ima zatvarač koji može da se probije sa podizačem iglom za injekciju). Aktivni agens u sastavu je antitelo. Etiketa na ili u vezi sa kontejnerom označava da se sastav koristi za tretiranje izabranog stanja. Predmet proizvodnje može dalje sadržati drugi kontejner koji sadrži farmaceutski prihvatljiv pufer, kao što je fiziološki rastvor sa fosfatom, Ringerov rastvor i rastvor dekstroze. On dalje može uključiti i
4
druge materijale koji su poželjni sa komercijalnog i korisničkog stanovišta, uključujući i druge pufere, razblaživače, filtere, igle, špriceve i pakovanja sa uputstvima za upotrebu.
PRIMERI
[0219] Sledeći primeri su ponuđeni za ilustraciju, ali ne ograničavaju pronalazak.
PRIMER 1: Izrada vektora eksprimiranja koji sadrže polinukleotide koji kodiraju ljudski, cinomolgus i mišji CD38
[0220] Za konstrukciju vektora koji eksprimira ljudski CD38 (huCD38), polinukleotid koji kodira huCD38 je izolovan iz cDNK dobijene od Origene Technologies Trueclone® čoveka. Izolovani huCD38 je kloniran u stabilan vektor eksprimiranja (XOMA, Inc.) koji sadrži gen otpornosti na neomicin (neo<R>), što je omogućilo izbor G418 (Geneticin)-rezistentnih transfektanata. HuCD38 gen prisutan u odabranim transfektantima je sekvenciran kako bi se identifikovale greške sekvence. Greške u sekvenci koje su odstupali od pristupa Genbank accession NM_001775 su ispravljene putem PCR-usmerene mutageneze. Konačna vektorska DNK je potvrđena sa 5' sekvencioniranjem.
[0221] Za konstrukciju vektora koji eksprimira cinomolgus CD38 (cyCD38), polinukleotid koji kodira cyCD38 je izolovano od DNK dobijene iz cDNK-majmuna (cinomolgus) -normalnog tkiva slezine od Biochain Institute. Izolovani cyCD38 je kloniran u stabilan vektor eksprimiranja (XOMA, Inc.) koji sadrži neo<R>gena, što je omogućilo izbor G418 (Geneticin) -rezistentnih transfektanata. cyCD38 gen prisutan u odabranim transfektantima je sekvenciran da identifikuje greške sekvence. Greške u sekvenci koje su odstupali odGenbank accession AY555148 su korigovane pomoću PCR usmerene mutageneze. Konačna vektorska DNK je potvrđena sekvencioniranjem.
[0222] Kako bi se konstruisao vektor koji eksprimira mišji CD38 (moCD38), polinukleotid koji kodira moCD38 je izolovan od DNK dobijene od Origeneove TrueORF kolekcije.
Izolovani moCD38 je kloniran u stabilan vektor eksprimiranja (XOMA, Inc.) koji sadrži neo<R>gena, što je omogućilo izbor G418 (Geneticin) -rezistentnih transfektanata. moCD38 gen koji je prisutan u izabranim transfektantima je sekvenciran kako bi se identifikovale greške sekvence. Greške u sekvenci koje su odstupile od Genbank accession NM_007646 su korigovane putem PCR-usmerene mutageneze. Konačna vektorska DNK je potvrđena sekvencioniranjem.
Primer 2: Razvoj ćelija jajnika kineskog hrčka (CHO) koje eksprimiraju CD38
[0223] Za razvoj CHO ćelija koje eksprimiraju huCD38, muCD38 i cyCD38, CHO ćelije su transfektovane linearizovanom DNK. Posle jedne nedelje pod selekcijom, ćelije su sortirane pomoću protočne citometrije, a ćelije koje najviše eksprimiraju huCD38, muCD38 ili cyCD38 (gornjih 15%) su stavljene u 96-komorične ploče za proizvodnju pojedinačnih kolonija. Preostale ćelije su takođe bile pokrivene pod selekcijom kako bi generisale rezervne kolonije. Otprilike 12-14 dana nakon stavljanja, pojedine kolonije su identifikovane i prenete na duboke 96-komorične ploče. Klonovi su prikazani pomoću FACS analize nakon drugog prolaska. Klonovi sa najvećom proizvodnjom su provučeni i prošireni na mikser bočice. Gornja 2 klona su zamrznuti i/ili kultivisani za mikoplazmalno AVA testiranje i uvećanje.
[0224] Za konstrukciju reportera luciferaze za diseminirane modele ksenografta komercijalni vektor koji sadrži CMV promoter/luciferaza gen/neomicin selektabilni marker (Promega, Madison, WI) je korišćen za generisanje stabilne linije transfekcije u Daudi Burkittovim limfoma ćelijama.
PRIMER 3: Biblioteke prikaza faga i skrining agensa koji vezuju CD38
[0225] Izbor ciljanih specifičnih antitela iz biblioteke prikaza faga vršen je prema postupcima opisanim od strane Marks i dr. (2004, Methods Mol. Biol.248:161-76). Ukratko, biblioteka prikaza faga je inkubirana sa 100 pmola biotinilovanog CD38 na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 sata, a formirani kompleks je zatim zarobljen primenom 100 μL suspenzije streptavidinskog zrna (DYNABEADS® M-280 Streptavidin, Invitrogen). Nespecifični fagi su uklonjeni pranjem perli puferom za pranje (5% mleka u PBS). Vezani fagi su eluirani sa 0,5 ml 100 nM trietilamina (TEA) i odmah neutralisani dodavanjem jednake zapremine 1M TRIS-CI, pH 7,4. Eluirana grupa faga je korišćen da inficira TG1 ćelije E. coli koje rastu u logaritamskoj fazi, a fagemid je spašen kao što je opisano u Marks i dr., Id. Selekcija je ponovljena u ukupno tri runde.
[0226] Alternativno, biblioteke prikaza faga bile su panirane protiv imobilizovanih CD38 (R&D sistemi) kako bi se identifikovao panel fragmenata antitela sa mogućnošću vezivanja CD38. Paniranje je izvršeno koristeći standardne protokole (pogledati, npr., Methods in Molecular Biology, vol.178: Antibody Phage Display: Methods and Protocols Edited by: P.M. O'Brien and R. Aitken, Humana Press; „Panning of Antibody Phage-Display Libraries,“
1
Coomber, D.W.J., pp.133-145, i „Selection of Antibodies Against Biotinylated Antigens,“ Chames i dr., pp.147-157). Ukratko, tri komorice NUNC® MAXISORP ploče su obložene sa 50 μL rekombinantnih CD38 (R&D Systems) u koncentraciji od 10 μg/ml u PBS. Posle inkubacije preko noći na 4°C, slobodna mesta vezivanja su blokirana sa 5% mlekom u PBS tokom jednog sata na sobnoj temperaturi. Zatim je oko 200 μL biblioteke faga u 5% mleka/PBS dodato u blokirane komorice i inkubirano je na sobnoj temperaturi oko jedan do dva sata. Komorice su isprane i vezani fag je eluiran korišćenjem standardnih postupaka (pogledati, npr., Sambrook and Russell, Molecule Cloning: A Laboratory Manual, 3rd Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001). Elutirani fag je pojačan inficiranjem E. coli TG 1 ćelija domaćina u fazi logaritamskog rasta. Inficirane TG1 ćelije su prikupljene centrifugiranjem na 2500 ppm u toku pet minuta, obložene na 15 cm 2YT-ampicilin-2% agar ploče sa glukozom i inkubirane na 30°C preko noći. Proces paniranja je zatim ponovljen korišćenjem pojačanih faga. Ciklus paniranja, elucije i amplifikacije ponovljen je u tri runde.
[0227] Posle završetka paniranja, pojedine kolonije iz obloženih TG1 ćelija korišćene su za inokulaciju medija u pločama sa 96 komorica. Mikrokulture su porasle do OD600 od 0,6, pri čemu je eksprimiranje rastvorljivog scFv indukovano dodavanjem 1 mM IPTG i inkubacije preko noći u mikseru na 30°C. Bakterije su peletirane centrifugiranjem, a periplazmatski ekstrakt korišćen je za testiranje vezivanja scFv na imobilizovan CD38 pomoću standardnog ELISA testa i FACS-vezujućeg testa.
[0228] Za FACS vezujući test, CHO ćelije koje stabilno eksprimiraju CD38 su korišćene za prikazivanje scFvs u periplazmatskom ekstraktu (PPE) zbog svoje sposobnosti da vezuju prirodni, membranski vezani CD38. Roditeljski i CHO transfektanti (ljudske CD38 ili cyno CD38 ili mišje CD38-eksprimirajuće ćelijske linije) su ponovo resuspendovani na 2x10<6>ćelija/ml u PBS (Life Technologies), 0,5% BSA (SigmaAldrich) i 0,1% NaN3 (SigmaAldrich) (FACS pufer). Roditeljske CHO ćelije koje ne eksprimiraju CD38 koriste se kao negativna kontrola. Dvadeset pet mikro alikvota ćelija je pokriveno u pločama sa 96 komorica sa V-dnom (Costar Cat # 3897) i 25 μL periplazmatskog ekstrakta koji sadrži mycoznačen scFv fragment antitela je dodato ćelijama, i zatim se smeša inkubira na 4°C tokom 30 minuta. Ćelije su zatim isprane dva puta posle čega je peleta resuspendovana u 25 μL mišjeg anti c-myc (1/1000 u FACS puferu)(Roche) i ponovo su inkubirane na 4°C tokom 30 minuta. Ćelije su zatim oprane dva puta i ponovo resuspendovane u 25 μL 1/200 razblaženog anti-mišjeg IgG-PE u FACS puferu (Jackson labs) i ponovo inkubirane na 4°C tokom 30
2
minuta. Ćelije su zatim oprane dva puta kako bi se uklonilo višak neograničenog antitela i ponovo resuspendovane u 70 μL FACS pufera i analizirane na BD FACScan®. Dobijeni podaci su procenjivani korišćenjem FlowJo softvera (TreeStar, Inc.). Pozitivni uzorci su identifikovani upoređivanjem srednjeg intenziteta fluorescencije CD38 transfektirane CHO ćelije u odnosu na srednji intenzitet fluorescencije roditeljske CHO ćelijske linije (CD38-).
[0229] Klonovi antitela koji su vezali ljudski CD38 bili su sekvencirani da identifikuju jedinstvene klonove. Jedinstveni klonovi scFV su zatim rangirani na osnovu off-stopa utvrđenih Biacore® analizama.200RU do 500RU ljudskog rekombinantnog CD38 (R&D Systems cat # 2404-AC ili ekvivalent) su imobilisani pomoću standardne hemije aminskog spajanja (Biacore®) na CM5 ili ekvivalentnom čipu. Takođe je pripremljena referentna tačka koja je aktivirana i blokirana bez imobilizacije proteina. Ovo se uradilo razređivanjem antigena na 1-3 μg/ml u acetatnom puferu, pH 5,0, i injektiranjem preko aktivirane površine dok potrebni nivo nije imobilizovan (3-5) minuta. Površina je zatim blokirana etanolaminom. Periplazmični ekstrakti su razblaženi jedan-na-jedan pomoću pufera za testiranje 10 mM HEPES-a, 150 mM NaCl, 3 mM EDTA (etilendiaminetetraacetatne kiseline) i 0,05% polisorbata 20 pri pH 7,4 sa 2 mg/mL BSA (goveđi serum albumin)). Razblaženi periplazmatski ekstrakt je injektiran preko površine površinske plazmonske rezonance (SPR) na 30 minuta tokom 300 sekundi sa dodatnim vremenskim intervalom od 900 sekundi.
Regeneracija je bila sa jednom 8-sekundnim injekcijom 100 mM HCI. Podaci iz referentnih tačaka su oduzeti od podataka sa aktivne površine, a zatim su uklonjene krive disocijacije pomoću modela diskacije 1:1 u softveru Biacore® T100.
[0230] Top-rangirani scFv klonovi su pretvoreni u IgG1 antitela. FACS vezujući skrining je ponovljen na IgG1 reformatovanim klonovima koristeći roditeljske CHO ćelije i CHO ćelije koje eksprimiraju CD38 čoveka, miševa i cinomolgusa kako bi se osigurala svojstva vezivanja i procenila unakrsna reaktivnost. FACS karakterizacija IgG-reformatovanih klonova sprovedena je kao što je gore opisano, ali koraci koji se sastoje od dodavanja anti-cmyc antitela i anti-mišjeg IgG-PE zamenjeni su jednim korakom u kom je vezivanje ljudskog IgG pune dužine bilo detektovano dodatkom fjukoeritrin konjugovanog anti-ljudskog IgG (Jackson Labs).
PRIMER 4: In vitro testovi bazirani na ćelijama IgG-reformatovanih klonova
[0231] Oko 150 klonova su reformatirani kao ljudska IgG1 antitela i pet (Ab19, Ab43, Ab72, Ab79 i Ab110) su u potpunosti ocenjene koristeći panel testova, kako je opisano u nastavku. Performanse IgG-reformatovanih klonova u in vitro i in vivo testovima su upoređeni sa dva antitela, BMTK4-1 (takođe nazvani benčmark-1, BM-1 ili BMTK-1) (SEQ ID NO: 24 i 25, varijabilne regije teškog i lakog lanca) i BMTK4-2 (takođe nazvani benčmark -2, BM-2 ili BMTK-2) (SEQ ID NO: 26 i 27; varijabilne regije teškog i lakog lanca), njihove aminokiselinske sekvence su izvedene iz sekvenci poznatih anti-CD38 antitela daratumumaba (takođe nazvane HuMax-CD38, objavljen u International Publication No. WO 06/099875) i SAR650984 (objavljen u International Publication No. WO 08/047242), respektivno. Palivizumab (SINAGIS®) (Medlmmune), klinički odobreno antitelo koje prepoznaje respiratorni sincicijalni virus, služi kao negativna kontrola za vezivanje CD38.
PRIMER 5: Detekcija vezivanja Ab79 imunofluorescencijom
[0232] Alexa Fluor®-488 bojom označeno Ab79 antitelo primenjeno je na zamrznute delove normalnog ljudskog kolorektalnog tkiva i tkiva prostate i limfe. Alexa Fluor®-488 bojom označen Palivizumab (Sinagis®) služio je kao negativna kontrola bojenja. Rezltujuće imunofluorescentne slike su prikazane na Slici 4. Šablon za bojenje koji je primećen za Ab79 je identičan onom koji se vidi sa komercijalno dostupnim poliklonskim anti-CD38 antitelima na normalnom ljudskom kolorektalnom tkivu i tkivu prostate i limfe (podaci nisu prikazani).
[0233] Alexa Fluor®-488 boja sa oznakom Ab79 takođe se primenjuje na uzorke koštane srži, normalne i sa multiplim mijelomom (podaci nisu prikazani). Dok je Ab79 vezan za ~10% ćelija iz normalne koštane srži, >90% više ćelija kostne srži sa multiplim mijelomom, u 4 od 4 ispitana uzorka, pokazalo je vezivanje Ab79.
[0234] Ispitivana je i sposobnost Ab79 da se veže na više ćelijskih linija (MOLP-8, DAUDI, RPMI i MCF7). MOLP-8 (ljudski multipli mijelom), DAUDI (limfoblast izveden od pacijenta sa Burkitovim limfomom) i RPMI (ćelijska linija uspostavljena od pacijenta sa hroničnom mijelogelnom leukemijom) ćelije su sve pokazale vezivanje Ab79. Linija raka dojke, MCF7, u velikoj meri je bila negativna za vezivanje Ab79 (podaci nisu prikazani).
[0235] Alexa Fluor® 488-konjugovana antitela su obojena na 8 μm kriostatom zamrznutim isečcima od 8 μm, koji su fiksirani u smeši etanola/acetona tokom 5 minuta, nakon čega sledi inkubacija sa antitelima 1 sat na sobnoj temperaturi u komori pod kontrolom vlage. Isečci su
4
zatim oprani, dodan je DAPI materijal (Vector Laboratories, cat # H1500) i primenjen je poklopac.
PRIMER 6: Evaluacija Ab79 eksprimiranja na multiplom mijelomu (MM) i hroničnoj limfocitnoj leukemiji (CLL)
[0236] Ab79 vezivanje za uzorke koštane srži od bolesnika sa multipli, mijelomom analizirano je protočnom citometrijom bilo nakon obogaćivanja za CD138<+>ćelije ili gatingom na CD138<+>CD45<-/lo>ćelije (Slika 7A). Otkriveno je da je Ab79 eksprimiran na >95% ćelija iz četiri od šest uzoraka multiplog mijeloma. Obrazac vezivanja Ab79 pojavio se u velikoj meri sličan onom anti-CD38 antitela koji se koristi u kliničkim laboratorijama. Pored toga, Ab79 vezuje ćelije kod pacijenata sa hroničnom limfocitnom leukemijom (Slika 7B).
[0237] Za merenje Ab79 vezivanja za MM i CLL od FACS uzorci pacijenata su obrađeni u roku od 24 sata. Mononuklearne ćelije periferne krvi su izolovane od strane Ficoll- Paque™ (GE Healthcare) u skladu sa uputstvima proizvođača. Analiza eksprimiranja izvedena je pomoću sledećih panela antitela sa klonovima u zagradama. MM panel: AAb79-Alexa Fluor®-488, CD45-PerCP(2D1), CD138-APC (MI15). CLL panel: Ab79-Alexa Fluor®-488; CD5-PE (UCHT2), CD45-PerCP(2D1), CD19-APC (SJ25C1).5 μL PE, PerCP ili APC označenog antitela ili 10 μL antitela označenog sa Alexa Fluor®-488 sa oznakom ili kontrolnim izotipom je dodato svakoj komorici ili cevi koja sadrži bilo 100 μL 0,2 x 10<6>PBMC ili CD138 obogaćenih ćelija iz aspiracije koštane srži. Uzorci su inkubirani 30 minuta na sobnoj temperaturi nakon čega su crvene krvne ćelije lizovane pomoću BD Pharmlyse, prema uputstvima proizvođača. Svi uzorci su isprani tri puta u FACS puferu. Uzorci su fiksirani u 1% paraformaldehidu i analizirani na BD FACSCanto™ II ili BD FACSCaliber™.
PRIMER 7: Analize anti-CD38 indukovane CDC
[0238] Unakrsno-reaktivni klonovi Cinomolgusa su testirani na sposobnost da indukuju citotoksičnost zavisnu od komplementa (CDC). MOLP-8 ćelije su pokrivene u gustini od 10.000 ćelija po komorici na crnoj 96-komoričnoj ploči za kulturu tkiva sa ravnim dnom u 50 μL kompletnog medijuma (RPMI su dopunjeni sa 10% fetalnog goveđeg seruma).50 μL 2x anti-CD38 antitela, kontrolnog IgG antitela ili samo medijuma dodato je u svaku komoricu i ostavljeno da se inkubira na sobnoj temperaturi 10 minuta. Različite količine (2-15 μL) prečišćenog zečjeg komplementa (cat # CL 3441 Cedarlane Laboratories, Kanada), u zavisnosti od ćelijske linije, dodato je u svaku komoricu, osim kontrolne komorice. Posle jednog sata inkubacije na 37°C, ploče su dovedene na sobnu temperaturu, 100 μL ćelijskog titra CytoTox Glo™ reagensa (Promega G7571/G7573) je dodato po komorici, ploča je trešena 5 do 7 min i luminescencija je pročitana na EnVision® (Perkin Elmer) čitaču ploča za luminiscenciju. Ispitani uslovi: samo ćelije; ćelije komplement; ćelije IgG kontrola komplement; ćelije antitelo komplement. % CDC je izračunat korišćenjem sledeće jednačine:
100 – (RLUT/RLUC) x 100),
[0239] gde je RLUTrelativna jedinice luminescencije u test uzorku i RLUCje relativna jedinice luminescencije uzorka sa samim komplementom. Statistička analiza izvršena je korišćenjem softvera PRISM. EC50vrednosti, kao što su utvrđene na osnovu vrednosti % CDC u odnosu na koncentraciju antitela, prikazane su u Tabeli 1.
PRIMER 8: Anti-CD38 indukovani ADCC testovi
[0240] Citotoksičnost posredovana ćelijama i zavisna od antitela (ADCC) procenjena je korišćenjem ćelijskih linija Daudi, MOLP-8 i RPMI-8226 kao ciljanim ćelijama. PBMC su izolovani kao efektorske ćelije odvajanjem Ficoll-Plaque™ od puferske obloge ili LRS-a koji su dobijeni iz Stanford Blood Center (Palo Alto, CA). Uzorci su razblaženi 1:3 sa 2% FBS u PBS. 15 mL Ficoll-Plaque™ (GE Healthcare) je nežno nanesen ispod 35 ml razblaženog uzorka i centrifugirano je na 1800 obrtaja u minuti (kočnica) u trajanju od 25 minuta.
Maglovita interfaza koja sadrži PBMCs je sakupljena, isprana 3 puta u 2% FBS u PBS i zamrznuti alikvoti od 50x10<6>ćelija/mL po alikvotu u 10% DMSO/FBS. Zamrznuti alikvoti PBMC-a se otapaju i kultivišu preko noći u 10% FBS/RPMI 5 ng/ml rekombinantnog ljudskog IL2 (R&D Systems # 202-IL) na 2x10<6>po ml, po potrebi.
[0241] Za ADCC analizu, svi koraci su izvršeni u kompletnom medijumu. 5000 ciljanih ćelija je naneseno po komorici na ploči sa 96 komorica u 50 μL 3x anti-CD38, kontrolnog IgG ili samog medijuma je dodato praćeno sa 50 μL ljudskih efektora PBMC-a na nivou od 1:25 do 1:50 cilj:efektor (T:E) ćelije. Ploče su na kratko centrifugirane ~ 30 sekundi pri 800 o/min kako bi se sve ćelije dovele u neposrednu blizinu. Posle 4 sata na 37°C, ploče su centrifugirane na 1100rpm tokom 5 min i supernatant od 100 μL je prenesen na belu ploču. U supernatant je dodato 100 μL reagensa CytoTox Glo™ (Promega cat # G9292) i ploče su ostavljene da se mešaju 20-30 min na RT. Luminescencija je pročitana na čitaču luminescencntnih ploče EnVision® (Perkin Elmer) i procenjena specifična liza je izračunata pomoću sledeće jednačine:
(RLUT/RLUE/T) / (RLUL/RLUE/T) x 100
[0242] Gde je RLUTrelativna jedinice luminescencije u test uzorku i RLUE/Tje relativna jedinice luminescencije uzorka koji sadrže samo ciljane ćelije i efektorske ćelije, a RLULje relativna jedinica luminescencije za ćelije lizovane sa Tritonom X-100. Statistička analiza izvršena je korišćenjem softvera PRISM. EC50vrednosti, kao što je utvrđeno iz vrednosti % specifične lize u odnosu na koncentraciju antitela, prikazane su u Tabeli 1.
TABELA 1 CDC, ADCC, i agonist aktivnost za IgG-reformirana antitela
PRIMER 9: Određivanje afiniteta od strane FACS-a
[0243] MOLP-8 ćelije koje eksprimiraju CD38 su suspendovane u 1% FBS puferu u održivoj ćelijskoj koncentraciji od oko 2 miliona ćelija/mL. Monoklonska antitela koji se testiraju bili su serijski razblažena (dvostruko) preko dve 96-komorične ploče u 1x PBS. Poslednji izvori svake titracije sadržali su samo pufer. Dodatni PBS i suspenzije ćelija su dodate u svaki komoricu, tako da je krajnji volumen bio 300 ∼L/komorica i svaka komorica sadrži oko 100.000 ćelija. Monoklonska antitela su navedena dole sa odgovarajućim konačnim opsegom koncentracije vezujućeg mesta monoklonskog antitela (2X molekularna koncentracija) koji se koristi za titracije:
Benčmark 1, [monoklonsko antitelo]vezujuće mesto = 50,8nM -49,7 pM Benčmark 2, [monoklonsko antitelo]vezujuće mesto = 49,5 nM -48,3 pM
Ab 43, [monoklonsko antitelo]vezujuće mesto = 49,3 nM -48,2 pM
Ab 110, [monoklonsko antitelo]vezujuće mesto = 204 nM -49,9 pM
Ab 79, [monoklonsko antitelo]vezujuće mesto =103 nM -25,3 pM
Ab 72, [monoklonsko antitelo]vezujuće mesto =103 nM -25,2 pM
Ab 19, [monoklonsko antitelo]vezujuće mesto =100 nM -12,2 pM
[0244] Ploče su postavljene u mešavinu ploča tokom 5 sati na 4°C, nakon čega su ploče oprane 3 puta na 4°C sa 1 X PBS. Zatim je dodato 200µl 99 nM Cy5 kozjeg anti-ljudskog IgG Fc specifičnog poliklonskog antitela (Jackson ImmunoResearch Laboratories, # 109-175-008) u svaku komorice, a ploče su mešane 30 minuta na 4°C. Ploče su opet isprane 2x na 4°C pomoću IX PBS, a zatim je korišćen FACSCanto™ HTS protočni citometar za snimanje srednjih intenziteta fluorescencije (MFI) od 5000 događaja za svaku bazu koja sadrži jedinstvenu koncentraciju vezujućeg mesta monoklonskog antitela. Grafikon intenziteta srednje fluorescencije kao funkcija koncentracije mesta za vezivanje antibiotika bio je nelinearno povezan pomoću softvera Scientist 3.0 korišćenjem sledeće jednačine za procenu KD:
F = p[(KD LT n(M)) – {(KD LT n(M))2 – 4n(M)(LT)}1/2]/2 B
gde je F (srednji intenzitet fluorescencije), LT (ukupna koncentracija vezujućeg mesta monoklonskog antitela), p (konstanta proporcionalnosti koja povezuje proizvoljne jedinice fluorescencije sa vezanim monoklonskim antitelom), M (ćelijska koncentracija u molarnosti, 0,553 fM na bazi 100.000 ćelija u 300μl), n (broj receptora po ćeliji), B (pozadinski signal) i KD = ravnotežna konstanta disocijacije.
[0245] Za svaku krivu titracije antitela, procena za KD je dobijena kad P, n, B i KD slobodno plutaju u nelinearnoj analizi. Za detaljno otelotvorenje gornje jednačine, pogledati Drake and Klakamp (2007), „A rigorous multiple independent binding site model for determining cellbased equilibrium dissociation constants,“ J. Immunol. Methods 318: 157 -62 , koji je ovde uključen referencom. Tabela 3 navodi rezultujuće KD za sva antitela u poređenju sa smanjenjem afiniteta zajedno sa intervalom pouzdanosti od 95% svake stavke u zagradama. Koncentracija na vezujućem mestu antitela (2X molekularna koncentracija) korišćena je za nelinearno uklapanje krivih.
PRIMER 10: Određivanje afiniteta pomoću Biacore®
[0246] Afinitet IgG antitela na rastvorljiv CD38 ektodomain (ECD) određen je pomoću analize površinske plazmonske rezonance (SPR) na Biacore™ A100 na 22°C. Kozje anti— ljudsko IgG poliklonsko antitelo (Caltag H10500) je imobilisano na CMOS biosensor čipu pomoću standardnog aminskog spajanja na tačke 1, 2, 4 i 5 u okviru sve četiri ćelije protoka čipa. Nivoi imobilizacije na svakom mestu variraju od 5865 RU do 6899 RU. Ljudski CD38 je dobijen od R&D Systems (Cat # 2404-AC, Lot # PEH020812A). Koncentracija zalihe za CD38 je određena korišćenjem postupaka opisanih u Pace i dr. (1995) „How to measure and predict molar absorption coefficient of a protein“ Protein Science 4(11):2411-23 i Pace and Grimsley (2004) „Spectrophotometric determination of protein concentration,“ in Current Protocols in Protein Science, Chapter 3: Unit 3.1, koji su ovde uključeni referencom.
[0247] Tekući pufer je pripremljen degaziranjem HEPES-puferisanog fiziološkog rastvora, 0,005% polisorbata 20, i dodavanjem filtriranog BSA do konačne koncentracije od 100 µg/ml. Svih osam prečišćenih monoklonskih antitela razblaženo je do približno 2 μg/mL sa aktivnim puferom. Preliminarni eksperimenti procenili su količinu svakog uhvaćenog monoklonskog antitela kako bi se održao površinski kapacitet (Rmax) ne veći od ~ 100 RU. Za svaki ciklus hvatanja monoklonskog antitela/injekcije antigena, monoklonsko antitelo je uhvaćeno na tačkama 1 i 5 u okviru svake protočne ćelije sa suprotstavljenim tačkama 2 i 4 koje služe kao odgovarajuće referentne površine. Svako razblaženo monoklonsko antitelo je uhvaćeno 1 minut sa brzinom protoka od 10 μL/min, nakon čega slede tri minuta tečnog pufera za stabilizaciju površine. HuCD38 je injektiran u sve četiri ćelije protoka tokom 120 sekundi na 30 μL/min u opsegu koncentracije od 193,7 nM -3,0 nM (2x serijsko razblaživanje), i zatim 15-minutna faza disocijacije. Uzorci su svi pripremljeni u tamponijumu i nasumično su ubrizgavani u tri kopije sa sedam puferskih injekcija koje su podeljene za dvostruku referencu. Površine su regenerisane sa dva 20-sekundna impulsa od 10 mM glicina, pH 1,7.
[0248] Svi podaci o senzorima su obrađeni softverom Scrubber 2.0c i globalno se uklapaju u model interakcije 1:1 u Scrubber 2.0c. Rezultujuće konstante vezivanja su prikazane u Tabeli 2.
TABELA 2
PRIMER 11: Ispitivanja internalizacije imunofluorescencije
[0249] Tehnike imunofluorescencije korišćene su za procenu internalizacije anti-CD38 antitela u MOLP-8 ćelije. MOLP-8 ćelije su sakupljene i 5x10<6>ćelija je obojene 10 minuta na 4°C u RPMI-1640 sa 1 μg svakog anti-CD38 antitela koje je direktno konjugovano sa Alexa Fluor® 488. Ćelije su isprane u PBS sa 1% BSA i 1x10<6>ćelija je inkubirano 3 ili 6 sati na 4°C ili 37°C. Površinsko bojenje je ugašeno tokom 30 minuta na 4°C koristeći 2 μg zečja anti-Alexa Fluor®-488 antitela (Invitrogen). Ćelije su isprane i fiksirane u PBS sa 1% PFA, prebačene na p96-komoričnu Microtest (BD Biosciences) ploču i procenjene protočnom citometrijom pomoću protočnog citometra FACSCanto™ II (BD Biosciences) ili prikazane pomoću ImageXpress® Micro (Molecular Devices) sa uvećanjem od 20x.
PRIMER 12: Bining epitopa pomoću Biacore®
[0250] Instrumenti Biacore® A100 korišćeni su za ublažavanje dva benčmark antitela, kao i Ab19 i Ab79. Antitela su prvo imobilisana na visokim i niskim gustinama na CM5 čipu pomoću hemije spajanja NHS/EDC. Za svaki ciklus eksperimenta bininga epitopa, CD38 se prvi put injektira preko ovih površina. Analogno sendvič testu u ELISA formatu, jedinstveno antitelo (uzeto iz skupa imobilizovanih antitela) je zatim ubrizgano na površine koje sadrže komplekse CD38/antitela. Površine su regenerisane pomoću impulsa fosforne kiseline na kraju svakog ciklusa. Podaci su sakupljeni na 22°C korišćenjem HBS-P (10 mM 10 HEPES pH 7,4, 150 mM NaCI, 0,005%) P-20) dopunjen sa BSA. Dobijeni senzori su obrađeni pomoću modula „Epitop Mapping“ u programskom paketu Biacore® A100 Evaluation, kao i probnoj verziji Scrubber za A100 skupova podataka. Replikati podataka korišćeni su za generisanje binarne x k 4 matrice za gore navedena 4 monoklonskih antitela iz dva odvojena eksperimenta, kao što je prikazano u Tabeli 3.
TABELA 3
PRIMER 13: In vivo analiza u onkologiji
[0251] In vivo efikasnost Ab19 i Ab79 je testirana u diseminiranom Daudi-luciferaza modelu ljudskog limfoma. 6-8 nedelje stari ženski CB.17 SCID miševi od Taconic Laboratories su intravenozno injektirani sa 1x10<6>ćelije tumora Daudi-Luc. Na studijskom danu 7, miševi su tretirani intraperitonealno sa: palivizumabom, Ab 79, Ab19, Benčmarkom 1 i Benčmarkom 2. Bioluminescentno snimanje je vršeno nedeljno od 21. dana pomoću IVIS Xenogen sistema (Caliper Life Sciences) za praćenje tumorskog opterećenja. Za snimanje, životinjama je injektiran IP luciferazni supstrat (150 mg/kg) 10 minuta pre snimanja, zatim su životinje anestezirane pod izofluranom i snimljene. Rezultati su prikazani na Slikama 8 i 9.
PRIMER 14: Korelacija upalno/imunološke bolesti
[0252] Pokazalo se da je CD38 dramatično povećan u PBMC ćelijama nakon aktivacije. U preostalim PMBC od normalnih donora, manje od 20% preostalih ćelija eksprimiraju CD38, pri čemu se brojevi receptora računaju na približno 10,000-20,000 po ćeliji. Aktivirani PMBC, ponovo iz normalnih donora, pokazuju 60-75% ćelija koje eksprimiraju CD38, pri čemu brojevi receptora pokazuju 110.000 do 160.000 ćelija.
1
[0253] Pored toga, kao što je prikazano na slici 5, CD38 je pokazao povećano eksprimiranje u PMBC-u kod pacijenata sa SLE.
[0254] Uzorci su imunohistološki testirani za preveliko eksprimiranje CD38. Analizirano je 19 uzoraka od pacijenata sa SLE, što je rezultiralo opažanjem povećanog eksprimiranja CD38 na B i T memorijskim ćelijama i pDC. Analizirana su 3 bolesnika sa RA koji su pokazali infiltraciju CD38 plazma ćelija u sinovijskom tkivu kod sva tri pacijenta, kao i povećano bojenje sinovijskih tkiva sa Ab79. Analizirani su pacijenti Crohnove bolesti i pacijenti sa 6 ulcerativnih kolitisa i pokazali su infiltraciju CD38 eksprimirajućih ćelija plazme u glatkim mišićima debelog creva (testiran na dva primarna ćelijska uzorka od pacijenata.) Treba istaći da je isti broja normalnih pacijenata testirano bez pokazivanja ovih rezultata.
PRIMER 15: Iscrpljivanje pomoću anti-CD38 antitela
[0255] Doziranje cinomolgus majmuna sa Ab79 pokazuje značajno smanjenje limfocita, B i T ćelija, i NK ćelije. Antitelo je dozirano preko 30-minutne IV infuzije u dozama prikazanim na slici 6, pri čemu se podaci prikupljaju 24 sata. Slični podaci su posejani 4, 7, 11 i 18. dana.
[0256] Međutim, podaci pK/pD pokazuju oporavak životinja nakon doziranja. Kao što je prikazano na slici 7, broj limfocita se vratio slično kontrolnim brojevima nakon nekoliko dana nakon jedne IV 30-minutne doze infuzije, čak i nakon najveće doze, što ukazuje na to da nema problema sa limfoidnim progenitorskim ćelijama.
PRIMER 16: Modeli autoimune bolesti
Korišćena su tri različita modela
[0257] Model HuScid miša služi kao model pseudo-graft-v-host, kao i model za anti-tetanus odgovor, smanjenje IgG i ukupni opstanak. CB17/HuSCID miševima su ubrizgan ASGM1 da bi oštetili NK ćelije, a zatim im se dan kasnije ubrizgava humani PBMC. Omogućeno je da se nastavi preklapanje nakon 7-10 dana, pri čemu se serum prikuplja nasumično za humanu Ig. Dan kasnije, miševima su injektirani sa Ab79 na 10 mg/kg, a zatim TTd, sa drugom dozom 4 dana kasnije, trećom dozom 3 dana nakon toga, sa sakupljenim serumom za brojanje humanog Ig i otkrivanje anti-tetanusa 3 dana nakon to (ukupno 10 dana od prve doze). Na
2
slici 8 prikazani su rezultati jednog donor miša, koji ukazuju na značajno smanjenje svih izotipa Iga nakon tretmana.
[0258] Slika 9 prikazuje rezultate prosečnih nivoa Ig za svaku grupu primaoca, pri čemu svaka tačka podataka predstavlja prosečnu vrednost po grupi (n= 5 do n= 10). Slika 10 prikazuje značajno smanjenje odgovora anti-tetanusa nakon tretmana AB79. Na kraju, Slika 11 prikazuje opšte značajno preživljavanje korišćenjem tretmana Ab79.
Eksperimenti sa miš surogatom
[0259] Kako Ab79 ne reaguje sa glodarima CD38, razvijeno je surogat antitelo. Kao preliminarno pitanje, upotrebom komercijalnog antitela na humani CD38 i komercijalnog antitela na mišji CD38, značajne razlike su prikazane u nivoima eksprimiranja CD38 između tipova ćelija između čoveka i miša (vidi sliku 12), što pokazuje da je biologija bolesti drugačija. Stoga, upotrebom antitela koja reaguju s majmunom CD38 u modelu majmuna mogu dati značajno bolje rezultate.
[0260] Razvijeno je surogat antitelo koja pokazuje slično smanjenje CD38+ ćelija dobijenih iz slezine, krvi i koštane srži (podaci nisu prikazani), kao i iz periferne krvi (videti sliku 13). Osim toga, kinetika smanjenja je prikazana na Slici 14, sa slezinom, krvlju i koštanoj srži prikupljenoj 1, 2 ili 3 dana nakon pojedinačne doze surogata miševa na 10 mg/kg. Brzo iscrpljivanje B ćelija u krvi pokazano je u roku od 24 sata, sa usporenim trošenjem posejanom u slezini i koštanoj srži.
Model SLE miša
[0261] Surogat miša anti-CD38 testiran je u MRL/lpr modelu, koristeći sledeća privremena očitavanje (na primer, svake dve nedelje), od krvi: anti-dsDNK autoantitela, CBC, FACS za T/B trošenje ćelija, protein albumin u urinu i zapaljenju kože). Privremena očitavanja uključuju, ali nisu ograničena na, krv: anti-dsDNK autoantitela, CBC, FACS za trovanje T/B ćelija, od slezine, limfnih čvorova i koštane srži: težina organa, brojevi imunih ćelija, FACS za T/B ćeliju trošenje, za bubrege: težina organa, histopat (H i E i PAS), disfunkcija IC, inflamatorne ćelije i upala kože (histopath).
Model artritisa indukiovanog kolagenom (CIA)
[0262] CIA model miša korišćen je pomoću surogat antitela miša, sa 7 grupa miševa za procenu kako bi se procenila i pro-profilaktička, i profilaktička i terapeutska efikasnost. Svi miševi su imunizirani sa CII/CFA nultog dana, uz povećanje CII/CFA 21. dana, što generalno dovodi do progresije bolesti od 21. do 42. dana (završetak studije). Grupa 1 (10 miševa) bila je ubrizgana sa 10 mg / kg surogat antitela dva puta nedeljno, počevši od nultog dana (proprophilatic). Grupa 2 (n = 10) je slično ubrizgana, ali počevši od 21. dana. Grupa 3 (n = 10) je slično ubrizgana na početku bolesti (dan 25 -28). Grupa 4 (n = 10) je ubrizgana na istom nivou, ali sa hIgG1 (npr. Izotip) nultog dana. Grupa 5 (n = 10) je ubrizgana na istom nivou sa hIgG1, ali počevši od 21. dana. Grupa 6) ( n = 10) je ubrizgana na dan 21 sa 0,5 mg/l vode deksametazona, a grupa 7 (n = 5) nije tretirana.
[0263] Obavljena je studija cinomolgus majmuna CIA koristeći n = 3 za svaku grupu, grupa 1 je naivna životinja, samo vozilo. Grupa 2 je jednokratna doza Ab79 na 3 mg/kg ili 10 mg/kg, qlw (profilaktički tretman počinje na 7. dan nakon imunizacije kolagena). Grupa 3 je Ab79 kod 3 mg/kg ili 10 mg/kg qlw, za terapijsko lečenje počevši od početka bolesti, 21. ili 28. dana. Grupa 4 se leči sa 0.1 mg / kg qld sa deksametazonom na početku bolesti.
LISTA SEKVENCI
[0264]
SEQ ID NO:3 (HCDR1 Ab79)
GFTFDDYG SEQ ID NO:4 (HCDR2 Ab79)
ISWNGGKT SEQ ID NO:5 (HCDR3 Ab79)
ARGSLFHDSSGFYFGH SEQ ID NO:6 (LCDR1 Ab79)
4
SSNIGDNY
SEQ ID NO:7 (LCDR2 Ab79)
RDS SEQ ID NO:8 (LCDR3 Ab79) QSYDSSLSGS SEQ ID NO:9 (Teški lanac Ab79)
SEQ ID NO:11 (Teški lanac Abl9)
SEQ ID NO:13 (HCDR1 Abl9)
GFTFNNYG SEQ ID NO:14 (HCDR2 Ab19)
ISYDGSDK SEQ ID NO:15 (HCDR3 Ab19) ARVYYYGFSGPSMDV SEQ ID NO:16 (LCDR1 Ab19)
NSNIGSNT SEQ ID NO:17 (LCDR2 Ab19)
SDS SEQ ID NO:18 (LCDR3 Ab19) QSYDSSLSGSR SEQ ID NO:19 (Teški lanac Ab19) s konstantnom
SEQ ID NO:20 (Laki lanac Ab19) s konstantnom
SEQ ID NO:22 (Laki lanac Ab79)
SEQ ID NO:24 (Referentna vrednost 1; Varijabilna regija teškog lanca)
SEQ ID NO:25 (Referentna vrednost 1; Varijabilna regija lakog lanca)
SEQ ID NO:26 (Referentna vrednost 2; Varijabilna regija teškog lanca)
SEQ ID NO:27 (Referentna vrednost 2; Varijabilna regija lakog lanca)
SEQ ID NO:28 (Teški lanac Ab43)
SEQ ID NO:30 (Teški lanac Ab72)
SEQ ID NO:32 (Teški lanac Ab110)
SEQ ID NO:34 (Teški lanac Ab19) s konstantnom
SEQ ID NO:35 (Laki lanac Ab19) s konstantnom
LISTA SEKVENCI
1
2
4
1
2
4
�
2
�

Claims (12)

Patentni zahtevi
1. Izolovano antitelo koje specifično vezuje ljudski CD38 (SEQ ID NO:1) i cinomolgus CD38 (SEQ ID NO:2) koje obuhvata:
a) varijabilnu regiju teškog lanca koji sadrži SEQ ID NO:9; i
b) varijabilnu regiju lakog lanca koji sadrži SEQ ID NO:10.
2. Izolovano antitelo prema patentnom zahtevu 1, gde teški lanac sadrži SEQ ID NO:21, a laki lanac sadrži SEQ ID NO:22.
3. Izolovano antitelo prema patentnom zahtevu 1 dalje sadrži Fc domen.
4. Izolovano antitelo prema patentnom zahtevu 3, gde je navedeni Fc domen ljudski.
5. Izolovano antitelo prema patentnom zahtevu 3, gde je navedeni Fc domen varijanta Fc domena.
6. Ćelija domaćin koja sadrži izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira teški lanac prema patentnom zahtevu 1 i izolovanu nukleinsku kiselinu koja kodira laki lanac prema patentnom zahtevu 1.
7. Postupak za proizvodnju antitela prema patentnom zahtevu 1 koji obuhvata kultivisanje ćelije domaćina prema patentnom zahtevu 6 pod uslovima u kojima se proizvodi navedeno antitelo.
8. Izolovano antitelo prema patentnom zahtevu 1 za upotrebu u lečenju autoimune bolesti.
9. Izolovano antitelo za upotrebu prema patentnom zahtevu 8, gde je navedena autoimuna bolest izabrana iz grupe koju čine reumatoidni artritis, sistemski eritematozni lupus, inflamatorna bolest creva, ulcerativni kolitis i bolest graft-versushost.
10. Izolovano antitelo prema patentnom zahtevu 1 za upotrebu kao lek.
11. Izolovano antitelo prema patentnom zahtevu 1, za upotrebu u lečenju hematološkog kancera, gde je hematološki kancer izabran je iz grupe koja se sastoji od multiplog mijeloma, hronične limfoblastne leukemije, hronične limfocitne leukemije, leukemije plazma ćelija, akutne mijeloične leukemije, hronične mijeloične leukemije, B-ćelijskog limfoma i Burkitovog limfoma.
12. Izolovano antitelo za upotrebu u lečenju hematološkog kancera prema patentnom zahtevu 11 gde je navedeni hematološki kancer multiple mijelom.
RS20180902A 2010-12-30 2011-12-30 Anti-cd38 antitela RS57494B1 (sr)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201061428699P 2010-12-30 2010-12-30
US201161470382P 2011-03-31 2011-03-31
US201161470406P 2011-03-31 2011-03-31
US201161485104P 2011-05-11 2011-05-11
EP11811633.4A EP2658871B1 (en) 2010-12-30 2011-12-30 Anti-cd38 antibodies
PCT/US2011/068235 WO2012092612A1 (en) 2010-12-30 2011-12-30 Anti-cd38 antibodies

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS57494B1 true RS57494B1 (sr) 2018-10-31

Family

ID=45498158

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20201556A RS61280B1 (sr) 2010-12-30 2011-12-30 Anti-cd38 antitela
RS20180902A RS57494B1 (sr) 2010-12-30 2011-12-30 Anti-cd38 antitela
RS20180859A RS57526B1 (sr) 2010-12-30 2011-12-30 Konjugovana anti-cd38 antitela

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20201556A RS61280B1 (sr) 2010-12-30 2011-12-30 Anti-cd38 antitela

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20180859A RS57526B1 (sr) 2010-12-30 2011-12-30 Konjugovana anti-cd38 antitela

Country Status (38)

Country Link
US (11) US9102744B2 (sr)
EP (6) EP3789404A1 (sr)
JP (10) JP6148984B2 (sr)
KR (5) KR102070326B1 (sr)
CN (4) CN107365385A (sr)
AR (1) AR084747A1 (sr)
AU (3) AU2011351921B2 (sr)
BR (1) BR112013017009B1 (sr)
CA (1) CA2822061C (sr)
CO (1) CO6761368A2 (sr)
CR (1) CR20130313A (sr)
CY (3) CY1122161T1 (sr)
DK (3) DK2658871T3 (sr)
EA (2) EA029303B1 (sr)
EC (1) ECSP13012794A (sr)
ES (3) ES2690095T3 (sr)
GE (1) GEP20166493B (sr)
HR (3) HRP20181245T1 (sr)
HU (3) HUE038535T2 (sr)
IL (1) IL226973A (sr)
JO (2) JOP20210044A1 (sr)
LT (3) LT3284754T (sr)
MA (1) MA34763B1 (sr)
MX (2) MX350903B (sr)
MY (1) MY160499A (sr)
NZ (2) NZ612272A (sr)
PE (1) PE20140247A1 (sr)
PL (3) PL3284754T3 (sr)
PT (3) PT2658871T (sr)
RS (3) RS61280B1 (sr)
SG (1) SG191211A1 (sr)
SI (3) SI2658871T1 (sr)
SM (2) SMT201800388T1 (sr)
TR (1) TR201808709T4 (sr)
TW (1) TWI564304B (sr)
UY (1) UY33850A (sr)
WO (2) WO2012092612A1 (sr)
ZA (1) ZA201304696B (sr)

Families Citing this family (194)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MXPA06008700A (es) 2004-02-06 2007-01-19 Morphosys Ag Anticuerpos anti-cd38 humanos y usos para los mismos.
US9200061B2 (en) * 2004-02-06 2015-12-01 Morpho Sys AG Generation and profiling of fully human HuCAL gold®-derived therapeutic antibodies specific for human CD3i
HUE035250T2 (hu) 2005-10-12 2018-05-02 Morphosys Ag Humán CD38-ra specifikus teljesen humán HuCAL GOLD-eredetû terápiás ellenanyagok létrehozása és profilozása
EP1914242A1 (en) * 2006-10-19 2008-04-23 Sanofi-Aventis Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
PL2621531T3 (pl) 2010-09-27 2017-07-31 Morphosys Ag Przeciwciało anty-CD38 i lenalidomid lub bortezomib do leczenia szpiczaka mnogiego i NHL
JOP20210044A1 (ar) * 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
EA034989B1 (ru) 2011-10-28 2020-04-15 Тева Фармасьютикал Австралия Пти Лтд Полипептидная конструкция для применения при лечении рака, включающая аттенуированный альфа-интерферон
WO2014010586A1 (ja) 2012-07-10 2014-01-16 武田薬品工業株式会社 注射用製剤
AU2013322806C1 (en) 2012-09-25 2018-03-08 Morphosys Ag Combinations and uses thereof
UA118255C2 (uk) * 2012-12-07 2018-12-26 Санофі Композиція, яка містить антитіло до cd38 і леналідомід
US10342869B2 (en) 2012-12-07 2019-07-09 The Regents Of The University Of California Compositions comprising anti-CD38 antibodies and lenalidomide
AR095863A1 (es) 2013-04-16 2015-11-18 Genentech Inc Variantes de pertuzumab, su evaluación, método de tratamiento, método de preparación y artículo de fabricación
CA2909952C (en) * 2013-04-29 2021-10-12 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd. Anti-cd38 antibodies and fusions to attenuated interferon alpha-2b
US11117975B2 (en) 2013-04-29 2021-09-14 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd Anti-CD38 antibodies and fusions to attenuated interferon alpha-2B
CA2927099A1 (en) * 2013-10-31 2015-05-07 Sanofi Specific anti-cd38 antibodies for treating human cancers
MY176522A (en) 2013-11-04 2020-08-13 Ichnos Sciences SA Production of t cell retargeting hetero-dimeric immunoglobulins
JP2017506640A (ja) * 2014-02-14 2017-03-09 セントローズ， エルエルシー 細胞外標的化薬物共役体
US9603927B2 (en) 2014-02-28 2017-03-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-CD38 antibodies
US9732154B2 (en) * 2014-02-28 2017-08-15 Janssen Biotech, Inc. Anti-CD38 antibodies for treatment of acute lymphoblastic leukemia
ES2939760T3 (es) 2014-03-15 2023-04-26 Novartis Ag Tratamiento de cáncer utilizando un receptor quimérico para antígenos
UA119352C2 (uk) 2014-05-01 2019-06-10 Тева Фармасьютикалз Острейліа Пті Лтд Комбінація леналідоміду або помалідоміду і конструкції анти-cd38 антитіло-атенуйований інтерферон альфа-2b та спосіб лікування суб'єкта, який має cd38-експресуючу пухлину
WO2016011210A2 (en) 2014-07-15 2016-01-21 Juno Therapeutics, Inc. Engineered cells for adoptive cell therapy
JP2017528433A (ja) 2014-07-21 2017-09-28 ノバルティス アーゲー 低い免疫増強用量のｍＴＯＲ阻害剤とＣＡＲの組み合わせ
SG11201701867SA (en) * 2014-09-09 2017-04-27 Janssen Biotech Inc Combination therapies with anti-cd38 antibodies
SG11201703251TA (en) 2014-10-29 2017-05-30 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd INTERFERON α2B VARIANTS
MA40894A (fr) * 2014-11-04 2017-09-12 Glenmark Pharmaceuticals Sa Immunoglobulines hétéro-dimères reciblant des lymphocytes t cd3/cd38 et leurs procédés de production
US11773166B2 (en) 2014-11-04 2023-10-03 Ichnos Sciences SA CD3/CD38 T cell retargeting hetero-dimeric immunoglobulins and methods of their production
WO2016089960A1 (en) 2014-12-04 2016-06-09 Janssen Biotech, Inc. Anti-cd38 antibodies for treatment of acute myeloid leukemia
US11161907B2 (en) 2015-02-02 2021-11-02 Novartis Ag Car-expressing cells against multiple tumor antigens and uses thereof
MA41555A (fr) * 2015-02-17 2017-12-26 Millennium Pharm Inc Polythérapie pour le traitement du cancer
ES2927119T3 (es) * 2015-04-08 2022-11-02 Sorrento Therapeutics Inc Productos terapéuticos de anticuerpos que se unen a CD38
US12128069B2 (en) 2015-04-23 2024-10-29 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Treatment of cancer using chimeric antigen receptor and protein kinase a blocker
MA42136A (fr) 2015-05-20 2018-03-28 Janssen Biotech Inc Anticorps anti-cd38 pour le traitement de l'amyloïdose à chaînes légères et d'autres tumeurs malignes hématologiques positives à cd38
LT3303373T (lt) 2015-05-30 2020-07-10 Molecular Templates, Inc. Deimunizuoto shiga toksino a subvieneto karkasai ir juos apimančios ląstelės taikinio molekulės
US10668149B2 (en) * 2015-06-22 2020-06-02 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies for heme malignancies with anti-CD38 antibodies and survivin inhibitors
US20170044265A1 (en) 2015-06-24 2017-02-16 Janssen Biotech, Inc. Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38
EP3313441B1 (en) * 2015-06-24 2024-02-21 Janssen Biotech, Inc. Immune modulation and treatment of solid tumors with antibodies that specifically bind cd38
MX2017015817A (es) 2015-07-06 2018-04-10 Ucb Biopharma Sprl Anticuerpos de union a tau.
MA42895A (fr) 2015-07-15 2018-05-23 Juno Therapeutics Inc Cellules modifiées pour thérapie cellulaire adoptive
EP3331913A1 (en) 2015-08-07 2018-06-13 Novartis AG Treatment of cancer using chimeric cd3 receptor proteins
US20180264038A1 (en) 2015-09-28 2018-09-20 Regents Of The University Of Minnesota Chimeric antigen receptor (car) t cells as therapeutic interventions for auto- and allo-immunity
ES2894304T3 (es) 2015-10-25 2022-02-14 Sanofi Sa Proteínas de unión triespecíficas y/o trivalentes para la prevención o tratamiento de infección por VIH
PH12018500950B1 (en) 2015-11-03 2023-09-20 Janssen Biotech Inc Subcutaneous formulations of anti-cd38 antibodies and their uses
US10781261B2 (en) 2015-11-03 2020-09-22 Janssen Biotech, Inc. Subcutaneous formulations of anti-CD38 antibodies and their uses
PL3380620T3 (pl) 2015-11-23 2024-11-12 Novartis Ag Zoptymalizowane lentiwirusowe wektory transferowe i ich zastosowanie
CA3009709A1 (en) 2015-12-30 2017-07-06 Novartis Ag Immune effector cell therapies with enhanced efficacy
EP3423498A1 (en) * 2016-03-04 2019-01-09 MorphoSys AG Clinical assessment of m-protein response in multiple myeloma
EP3432924A1 (en) 2016-03-23 2019-01-30 Novartis AG Cell secreted minibodies and uses thereof
TWI788286B (zh) 2016-04-13 2023-01-01 法商賽諾菲公司 三特異性和/或三價結合蛋白
EP4257193A3 (en) 2016-04-13 2024-01-24 Sanofi Trispecific and/or trivalent binding proteins
EP3452109A1 (en) * 2016-05-03 2019-03-13 Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale (INSERM) Cd31shed as a molecular target for imaging of inflammation
WO2018002181A1 (en) * 2016-06-28 2018-01-04 Umc Utrecht Holding B.V. TREATMENT OF IgE-MEDIATED DISEASES WITH ANTIBODIES THAT SPECIFICALLY BIND CD38
JP7316930B2 (ja) * 2016-07-15 2023-07-28 武田薬品工業株式会社 形質芽細胞及び形質細胞枯渇療法に対する応答を評価するための方法及び材料
JP7241677B2 (ja) 2016-07-19 2023-03-17 テバ・ファーマシューティカルズ・オーストラリア・ピーティワイ・リミテッド 抗ｃｄ４７併用療法
WO2018015498A1 (en) 2016-07-20 2018-01-25 Hybrigenics Sa Combinations of inecalcitol with an anti-cd38 agent and their uses for treating cancer
CN110167964B (zh) 2016-11-02 2023-12-01 百时美施贵宝公司 组合用于治疗多发性骨髓瘤的针对bcma和cd3的双特异性抗体和免疫药物
CN110337590A (zh) * 2016-11-04 2019-10-15 奥胡斯大学 以新生儿Fc受体过表达为特征的肿瘤的识别和治疗
WO2018111340A1 (en) 2016-12-16 2018-06-21 Novartis Ag Methods for determining potency and proliferative function of chimeric antigen receptor (car)-t cells
US11535662B2 (en) 2017-01-26 2022-12-27 Novartis Ag CD28 compositions and methods for chimeric antigen receptor therapy
WO2018144535A1 (en) 2017-01-31 2018-08-09 Novartis Ag Treatment of cancer using chimeric t cell receptor proteins having multiple specificities
EP3589647A1 (en) 2017-02-28 2020-01-08 Novartis AG Shp inhibitor compositions and uses for chimeric antigen receptor therapy
WO2018159549A1 (ja) * 2017-03-01 2018-09-07 株式会社膠原病研究所 自己免疫疾患の予防および／または治療剤、並びに、ワクチン
KR20190133005A (ko) 2017-03-24 2019-11-29 젠야쿠코교가부시키가이샤 항 IgM/B 세포 표면 항원 이중 특이성 항체
WO2018183376A1 (en) * 2017-03-28 2018-10-04 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Acvr2a-specific antibody and method of use thereof
CA3058966A1 (en) 2017-04-14 2018-10-18 Tollnine, Inc. Immunomodulating polynucleotides, antibody conjugates thereof, and methods of their use
KR20250025514A (ko) * 2017-06-08 2025-02-21 블랙 벨트 테라퓨틱스 리미티드 Cd38 조정 항체
KR20250025513A (ko) * 2017-06-08 2025-02-21 블랙 벨트 테라퓨틱스 리미티드 Cd38 조정 항체
CN111051344B (zh) * 2017-06-08 2023-10-27 黑带医疗有限公司 Cd38调节抗体
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
WO2018235024A1 (en) * 2017-06-20 2018-12-27 Sorrento Therapeutics, Inc. Cd38 antibody drug conjugate
EP3538645B1 (en) 2017-06-20 2021-01-20 Institut Curie Immune cells defective for suv39h1
EP3434692A1 (en) * 2017-07-24 2019-01-30 Encefa Compounds which specifically binds to cd38 for use in the treatment of neurodegenerative diseases
WO2019035938A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Elstar Therapeutics, Inc. MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF
AU2018316521B2 (en) * 2017-08-16 2025-01-30 Black Belt Therapeutics Limited CD38 modulating antibody
AU2018316522B2 (en) 2017-08-16 2025-02-20 Black Belt Therapeutics Limited CD38 antibody
US11542338B2 (en) 2017-08-16 2023-01-03 Black Belt Therapeutics Limited CD38 modulating antibody
CA3075399A1 (en) 2017-09-13 2019-03-21 Teneobio, Inc. Heavy chain antibodies binding to ectoenzymes
US11186649B2 (en) * 2017-10-10 2021-11-30 Sanofi Anti-CD38 antibodies and methods of use
US20210040205A1 (en) 2017-10-25 2021-02-11 Novartis Ag Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
CN111566124A (zh) 2017-10-25 2020-08-21 诺华股份有限公司 制备表达嵌合抗原受体的细胞的方法
WO2019089798A1 (en) 2017-10-31 2019-05-09 Novartis Ag Anti-car compositions and methods
US11618787B2 (en) 2017-10-31 2023-04-04 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating high risk multiple myeloma
PL3703750T3 (pl) 2017-11-01 2025-04-07 Juno Therapeutics, Inc. Chimeryczne receptory antygenowe specyficzne dla antygenu dojrzewania komórek b i kodujące polinukleotydy
US12031975B2 (en) 2017-11-01 2024-07-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods of assessing or monitoring a response to a cell therapy
SG11202003688PA (en) 2017-11-01 2020-05-28 Juno Therapeutics Inc Process for generating therapeutic compositions of engineered cells
US11564946B2 (en) 2017-11-01 2023-01-31 Juno Therapeutics, Inc. Methods associated with tumor burden for assessing response to a cell therapy
KR20200074997A (ko) 2017-11-01 2020-06-25 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 B-세포 성숙 항원에 특이적인 항체 및 키메릭 항원 수용체
EP3704229B1 (en) 2017-11-01 2023-12-20 Juno Therapeutics, Inc. Process for producing a t cell composition
CN111542545A (zh) 2017-11-03 2020-08-14 索伦托治疗有限公司 Cd38定向嵌合抗原受体构建体
EP3717517A1 (en) * 2017-11-30 2020-10-07 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-pd-l1 antibodies and methods of using the same for detection of pd-l1
CN111587254B (zh) * 2017-12-05 2025-02-25 特拉维夫医疗中心医学研究基础设施及卫生服务基金 包含抗cd38和抗cd138嵌合抗原受体的t-细胞及其用途
KR102853341B1 (ko) 2017-12-08 2025-09-02 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 조작된 ｔ 세포의 조성물을 제조하는 방법
CA3084446A1 (en) 2017-12-08 2019-06-13 Juno Therapeutics, Inc. Phenotypic markers for cell therapy and related methods
SG11202005228YA (en) 2017-12-08 2020-07-29 Juno Therapeutics Inc Serum-free media formulation for culturing cells and methods of use thereof
CA3088199A1 (en) * 2018-01-12 2019-07-18 Takeda Pharmaceutical Company Limited Subcutaneous dosing of anti-cd38 antibodies
CN110144008B (zh) * 2018-02-12 2021-03-19 杭州尚健生物技术有限公司 Cd38蛋白抗体及其应用
CA3095086A1 (en) * 2018-03-28 2019-10-03 Takeda Pharmaceutical Company Limited Subcutaneous dosing of anti-cd38 antibodies
CN108318689A (zh) * 2018-04-09 2018-07-24 北京大学深圳研究生院 一种多发性骨髓瘤的诊断方法
WO2019210153A1 (en) 2018-04-27 2019-10-31 Novartis Ag Car t cell therapies with enhanced efficacy
US12048745B2 (en) 2018-05-01 2024-07-30 Augusta University Research Institute, Inc. Methods for detecting and reversing immune therapy resistance
US20210396739A1 (en) 2018-05-01 2021-12-23 Novartis Ag Biomarkers for evaluating car-t cells to predict clinical outcome
US20210213063A1 (en) 2018-05-25 2021-07-15 Novartis Ag Combination therapy with chimeric antigen receptor (car) therapies
WO2019237035A1 (en) 2018-06-08 2019-12-12 Intellia Therapeutics, Inc. Compositions and methods for immunooncology
CN108752475B (zh) * 2018-06-14 2021-07-30 北京智仁美博生物科技有限公司 抗人cd38抗体及其用途
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
JP7534281B2 (ja) 2018-07-13 2024-08-14 ジェンマブ エー／エス Ｃｄ３８抗体を使用したトロゴサイトーシスを介した治療
MY205398A (en) 2018-07-13 2024-10-19 Genmab As Variants of cd38 antibody and uses thereof
KR20210059715A (ko) 2018-08-09 2021-05-25 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 통합된 핵산 평가 방법
CA3111651A1 (en) * 2018-09-11 2020-03-19 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Anti-cd38 antibody, antigen-binding fragment thereof, and pharmaceutical use
CN109053892B (zh) * 2018-09-19 2021-03-26 苏州思坦维生物技术股份有限公司 特异结合人及猴cd38抗原的单克隆抗体及其制备方法与应用
JP7462621B2 (ja) 2018-10-09 2024-04-05 サノフイ 三重特異性抗ｃｄ３８、抗ｃｄ２８、および抗ｃｄ３結合タンパク質ならびにウイルス感染を処置するための使用方法
US20210388106A1 (en) 2018-10-26 2021-12-16 Teneobio, Inc. Heavy chain antibodies binding to cd38
CA3117419A1 (en) 2018-11-01 2020-05-07 Juno Therapeutics, Inc. Methods for treatment using chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
PE20211058A1 (es) 2018-11-01 2021-06-07 Juno Therapeutics Inc Receptores de antigenos quimericos especificos para el miembro d del grupo 5 de la clase c del receptor acoplado a proteina g (gprc5d)
AU2019395841B2 (en) 2018-12-14 2025-02-27 Morphosys Ag Antibody formulations
KR20210106437A (ko) 2018-12-20 2021-08-30 노파르티스 아게 3-(1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 유도체를 포함하는 투약 요법 및 약학적 조합물
CA3127660A1 (en) 2019-01-23 2020-07-30 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Cd38-binding proteins comprising de-immunized shiga toxin a subunit effectors
EP3914358A1 (en) 2019-01-23 2021-12-01 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Anti-cd38 antibodies
WO2020152290A1 (en) * 2019-01-23 2020-07-30 Encefa Cd31 competitors and uses thereof
US12479817B2 (en) 2019-02-15 2025-11-25 Novartis Ag Substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
AU2020222345B2 (en) 2019-02-15 2022-11-17 Novartis Ag 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-yl)isoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
SG11202107319PA (en) 2019-03-15 2021-08-30 Morphosys Ag Anti-cd38 antibodies and pharmaceutical compositions thereof for the treatment of autoantibody-mediated autoimmune disease
US20200316197A1 (en) * 2019-03-28 2020-10-08 Janssen Biotech, Inc. Clinically Proven Subcutaneous Pharmaceutical Compositions Comprising Anti-CD38 Antibodies and Their Uses in Combination with Bortezomib and Dexamethasone
US20200308296A1 (en) * 2019-03-28 2020-10-01 Janssen Biotech, Inc. Clinically Proven Subcutaneous Pharmaceutical Compositions Comprising Anti-CD38 Antibodies and Their Uses in Combination with Pomalidomide and Dexamethasone
WO2020194243A1 (en) * 2019-03-28 2020-10-01 Janssen Biotech, Inc. Clinically proven subcutaneous pharmaceutical compositions comprising anti-cd38 antibodies and their uses in combination with lenalidomide and dexamethasone
US20200330593A1 (en) * 2019-03-28 2020-10-22 Janssen Biotech, Inc. Clinically Proven Subcutaneous Pharmaceutical Compositions Comprising Anti-CD38 Antibodies and Their Uses in Combination with Bortezomib, Mephalan and Prednisone
US20220144966A1 (en) * 2019-03-29 2022-05-12 Sorrento Therapeutics, Inc. Engineered Variant Antibodies that Bind CD38
US11613576B2 (en) 2019-04-09 2023-03-28 Sanofi Trispecific binding proteins, methods, and uses thereof
CN113950484B (zh) * 2019-04-09 2025-07-29 赛诺菲 三特异性结合蛋白、其方法和用途
CN114025788A (zh) 2019-05-01 2022-02-08 朱诺治疗学股份有限公司 从经修饰的tgfbr2基因座表达重组受体的细胞、相关多核苷酸和方法
MX2021013223A (es) 2019-05-01 2022-02-17 Juno Therapeutics Inc Celulas que expresan un receptor quimerico de un locus cd247 modificado, polinucleotidos relacionados y metodos.
JP7489407B2 (ja) 2019-05-21 2024-05-23 ノバルティス アーゲー Ｃｄ１９結合分子及びその使用
JP7705353B2 (ja) 2019-06-10 2025-07-09 武田薬品工業株式会社 Ｃｄ３８抗体を使用する併用療法
PH12021553254A1 (en) 2019-06-27 2022-09-19 Crispr Therapeutics Ag Use of chimeric antigen receptor t cells and nk cell inhibitors for treating cancer
CA3142632A1 (en) * 2019-07-03 2021-01-07 Crystal Bioscience Inc. Anti-cd38 antibody and methods of use thereof
AU2020318781A1 (en) 2019-07-23 2022-02-10 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Immune cells defective for SUV39H1
CN112538114B (zh) * 2019-09-20 2025-05-02 上海普铭生物科技有限公司 抗人cd38抗体及其应用
WO2021092332A1 (en) * 2019-11-07 2021-05-14 Ohio State Innovation Foundation Methods and compositions relating to selective intracellular delivery of cd38 inhibitors
CN112876563B (zh) * 2019-11-29 2022-08-16 康诺亚生物医药科技（成都）有限公司 药物组合物及其制备方法和应用
IL293751A (en) 2019-12-18 2022-08-01 Teneofour Inc Heavy chain antibodies binding to cd38
JP2023506958A (ja) 2019-12-20 2023-02-20 ノバルティス アーゲー 骨髄線維症および骨髄異形成症候群を処置するための、デシタビンまたは抗ｐｄ－１抗体スパルタリズマブを伴うかまたは伴わない抗ｔｉｍ－３抗体ｍｂｇ４５３および抗ｔｇｆ－ベータ抗体ｎｉｓ７９３の組合せ
KR20220130724A (ko) 2020-01-16 2022-09-27 젠맵 에이/에스 Cd38 항체의 제제 및 그의 용도
CN115427458A (zh) 2020-02-28 2022-12-02 塔拉克治疗公司 转谷氨酰胺酶介导的缀合
IL296723A (en) 2020-03-26 2022-11-01 Seagen Inc Methods of treating multiple myeloma
WO2021207689A2 (en) 2020-04-10 2021-10-14 Juno Therapeutics, Inc. Methods and uses related to cell therapy engineered with a chimeric antigen receptor targeting b-cell maturation antigen
EP4121112A4 (en) 2020-05-08 2023-11-15 The University Of Southern California Site-specific antibody-drug conjugates by adp-ribosyl cyclases
KR20230024283A (ko) 2020-05-13 2023-02-20 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 임상 반응과 관련된 특징을 식별하는 방법 및 이의 용도
AU2021288224A1 (en) 2020-06-11 2023-01-05 Novartis Ag ZBTB32 inhibitors and uses thereof
WO2021260528A1 (en) 2020-06-23 2021-12-30 Novartis Ag Dosing regimen comprising 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives
US20240216508A1 (en) 2020-06-26 2024-07-04 Juno Therapeutics Gmbh Engineered t cells conditionally expressing a recombinant receptor, related polynucleotides and methods
WO2021260657A1 (en) 2020-06-26 2021-12-30 Crispr Therapeutics Ag Allogeneic cell therapy of b cell malignancies using genetically engineered t cells targeting cd19
CA3190266A1 (en) 2020-07-30 2022-02-03 Institut Curie Immune cells defective for socs1
WO2022029573A1 (en) 2020-08-03 2022-02-10 Novartis Ag Heteroaryl substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
EP4240756A1 (en) 2020-11-04 2023-09-13 Juno Therapeutics, Inc. Cells expressing a chimeric receptor from a modified invariant cd3 immunoglobulin superfamily chain locus and related polynucleotides and methods
US20240018248A1 (en) 2020-12-02 2024-01-18 Vib Vzw An ltbr agonist in combination therapy against cancer
US20220202859A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Crispr Therapeutics Ag Cancer treatment using cd38 inhibitor and/or lenalidomide and t-cells expressing a chimeric antigen receptor
WO2022187406A1 (en) 2021-03-03 2022-09-09 Juno Therapeutics, Inc. Combination of a t cell therapy and a dgk inhibitor
CN116997654A (zh) 2021-03-17 2023-11-03 第一三共株式会社 编码抗乙酰胆碱受体自身抗体的嵌合受体的基因
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
US20240384293A1 (en) 2021-04-27 2024-11-21 Novartis Ag Viral vector production system
CN117916256A (zh) 2021-05-06 2024-04-19 朱诺治疗学有限公司 用于刺激和转导t细胞的方法
US20240269282A1 (en) 2021-05-10 2024-08-15 Institut Curie Methods for the Treatment of Cancer, Inflammatory Diseases and Autoimmune Diseases
US20220387488A1 (en) 2021-05-12 2022-12-08 Crispr Therapeutics Ag Genetically engineered immune cells targeting cd70 for use in treating hematopoietic malignancies
AR125852A1 (es) 2021-05-12 2023-08-16 Crispr Therapeutics Ag Células inmunes modificadas genéticamente que se focalizan en cd70 para su uso en tratamiento de tumores sólidos
US20240261446A1 (en) * 2021-05-17 2024-08-08 Université de Liège Anti-cd38 single domain antibodies in disease monitoring and treatment
EP4346912A1 (en) 2021-05-25 2024-04-10 Institut Curie Myeloid cells overexpressing bcl2
WO2022271987A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 TeneoFour, Inc. Anti-cd38 antibodies and epitopes of same
JP2024527047A (ja) 2021-07-28 2024-07-19 ジェネンテック， インコーポレイテッド 血液がんの処置のためのｉｌ１５／ｉｌ１５ｒアルファヘテロ二量体ｆｃ融合タンパク質
WO2023017392A1 (en) 2021-08-13 2023-02-16 3M Innovative Properties Company Antistatic fabric article
CN113896802A (zh) * 2021-10-09 2022-01-07 宜明昂科生物医药技术（上海）有限公司 靶向cd47和cd38的重组融合蛋白及其制备和用途
EP4456910A1 (en) 2021-12-28 2024-11-06 Mnemo Therapeutics Immune cells with inactivated suv39h1 and modified tcr
JP2025504002A (ja) 2022-01-28 2025-02-06 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 細胞組成物を製造する方法
JP2025508739A (ja) 2022-02-18 2025-04-10 ラクテン・メディカル，インコーポレイテッド 抗プログラム細胞死リガンド１（ｐｄ－ｌ１）抗体分子、それをコードするポリヌクレオチド、および使用方法
WO2023187024A1 (en) 2022-03-31 2023-10-05 Institut Curie Modified rela protein for inducing interferon expression and engineered immune cells with improved interferon expression
WO2023213969A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Juno Therapeutics Gmbh Viral-binding protein and related reagents, articles, and methods of use
WO2023214325A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Novartis Ag Pyrazolopyrimidine derivatives and uses thereof as tet2 inhibitors
US20250302954A1 (en) 2022-05-11 2025-10-02 Celgene Corporation Methods to overcome drug resistance by re-sensitizing cancer cells to treatment with a prior therapy via treatment with a t cell therapy
WO2023230548A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Celgene Corporation Method for predicting response to a t cell therapy
WO2023230581A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Celgene Corporation Methods of manufacturing t cell therapies
JP2025531850A (ja) 2022-09-08 2025-09-25 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｔ細胞療法および継続的または間欠的ｄｇｋ阻害剤投薬の組合せ
AU2023338115A1 (en) * 2022-09-09 2025-02-27 Takeda Pharmaceutical Company Limited Subcutaneous dosing of anti-cd38 antibodies for treating patients with moderate to severe systemic lupus erythematosus
TW202423970A (zh) 2022-10-10 2024-06-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 Ｇｐｒｃ５ｄ ｔｃｂ及ｃｄ３８抗體之組合療法
AU2023369684A1 (en) 2022-10-26 2025-04-17 Novartis Ag Lentiviral formulations
EP4612177A1 (en) 2022-10-31 2025-09-10 Genmab A/S Cd38 antibodies and uses thereof
WO2024100604A1 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Juno Therapeutics Gmbh Methods for manufacturing engineered immune cells
KR20250121074A (ko) 2022-12-09 2025-08-11 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 홀로그래픽 이미징을 사용하여 세포 표현형을 예측하기 위한 기계 학습 방법
KR20250135226A (ko) 2023-01-06 2025-09-12 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 자가면역 질환의 치료를 위한 항-cd38 항체
CN121002052A (zh) 2023-02-03 2025-11-21 C3S2 有限公司 用于非病毒生产工程化免疫细胞的方法
AU2024276994A1 (en) 2023-05-24 2025-10-23 Kumquat Biosciences Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
WO2025042742A1 (en) 2023-08-18 2025-02-27 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising antibodies that bind bcma and cd3 and methods of treatment
WO2025153973A1 (en) 2024-01-16 2025-07-24 MorphoSys GmbH Highly concentrated liquid formulations for antibodies
WO2025193746A1 (en) 2024-03-12 2025-09-18 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dosing regimens of anti-cd38 antibodies for treatment of subjects with immune thrombocytopenia
WO2025235919A1 (en) 2024-05-09 2025-11-13 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dosing regimens of anti-cd38 antibodies for treatment of subjects with immunoglobulin a nephropathy
CN119119277B (zh) * 2024-10-24 2025-09-09 深圳技术大学 一种靶向cd38的纳米抗体、药物组合物及其应用

Family Cites Families (163)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US3691016A (en) 1970-04-17 1972-09-12 Monsanto Co Process for the preparation of insoluble enzymes
CA1023287A (en) 1972-12-08 1977-12-27 Boehringer Mannheim G.M.B.H. Process for the preparation of carrier-bound proteins
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4195128A (en) 1976-05-03 1980-03-25 Bayer Aktiengesellschaft Polymeric carrier bound ligands
US4330440A (en) 1977-02-08 1982-05-18 Development Finance Corporation Of New Zealand Activated matrix and method of activation
CA1093991A (en) 1977-02-17 1981-01-20 Hideo Hirohara Enzyme immobilization with pullulan gel
US4169888A (en) 1977-10-17 1979-10-02 The Upjohn Company Composition of matter and process
US4229537A (en) 1978-02-09 1980-10-21 New York University Preparation of trichloro-s-triazine activated supports for coupling ligands
US4307016A (en) 1978-03-24 1981-12-22 Takeda Chemical Industries, Ltd. Demethyl maytansinoids
US4256746A (en) 1978-11-14 1981-03-17 Takeda Chemical Industries Dechloromaytansinoids, their pharmaceutical compositions and method of use
JPS55102583A (en) 1979-01-31 1980-08-05 Takeda Chem Ind Ltd 20-acyloxy-20-demethylmaytansinoid compound
JPS55162791A (en) 1979-06-05 1980-12-18 Takeda Chem Ind Ltd Antibiotic c-15003pnd and its preparation
JPS6023084B2 (ja) 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
JPS5645483A (en) 1979-09-19 1981-04-25 Takeda Chem Ind Ltd C-15003phm and its preparation
EP0028683A1 (en) 1979-09-21 1981-05-20 Takeda Chemical Industries, Ltd. Antibiotic C-15003 PHO and production thereof
JPS5645485A (en) 1979-09-21 1981-04-25 Takeda Chem Ind Ltd Production of c-15003pnd
WO1982001188A1 (en) 1980-10-08 1982-04-15 Takeda Chemical Industries Ltd 4,5-deoxymaytansinoide compounds and process for preparing same
US4450254A (en) 1980-11-03 1984-05-22 Standard Oil Company Impact improvement of high nitrile resins
US4313946A (en) 1981-01-27 1982-02-02 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Chemotherapeutically active maytansinoids from Trewia nudiflora
US4315929A (en) 1981-01-27 1982-02-16 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Method of controlling the European corn borer with trewiasine
JPS57192389A (en) 1981-05-20 1982-11-26 Takeda Chem Ind Ltd Novel maytansinoid
US4640835A (en) 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
US4496689A (en) 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
US4970198A (en) 1985-10-17 1990-11-13 American Cyanamid Company Antitumor antibiotics (LL-E33288 complex)
EP0206448B1 (en) 1985-06-19 1990-11-14 Ajinomoto Co., Inc. Hemoglobin combined with a poly(alkylene oxide)
US5776093A (en) 1985-07-05 1998-07-07 Immunomedics, Inc. Method for imaging and treating organs and tissues
US5057313A (en) 1986-02-25 1991-10-15 The Center For Molecular Medicine And Immunology Diagnostic and therapeutic antibody conjugates
JPS63502716A (ja) 1986-03-07 1988-10-13 マサチューセッツ・インステチュート・オブ・テクノロジー 糖タンパク安定性の強化方法
EP0271581B1 (en) 1986-04-17 1993-01-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Novel compounds dc-88a and dc-89a1 and process for their preparation
US4791192A (en) 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
US4880935A (en) 1986-07-11 1989-11-14 Icrf (Patents) Limited Heterobifunctional linking agents derived from N-succinimido-dithio-alpha methyl-methylene-benzoates
US5053394A (en) 1988-09-21 1991-10-01 American Cyanamid Company Targeted forms of methyltrithio antitumor agents
US5606040A (en) 1987-10-30 1997-02-25 American Cyanamid Company Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group
US5770701A (en) 1987-10-30 1998-06-23 American Cyanamid Company Process for preparing targeted forms of methyltrithio antitumor agents
FI102355B1 (fi) 1988-02-11 1998-11-30 Bristol Myers Squibb Co Menetelmä yhdistävän välikappaleen omaavien antrasykliini-immunokonjugaattien valmistamiseksi
US5084468A (en) 1988-08-11 1992-01-28 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Dc-88a derivatives
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
JP2598116B2 (ja) 1988-12-28 1997-04-09 協和醗酵工業株式会社 新規物質ｄｃ１１３
JP2510335B2 (ja) 1989-07-03 1996-06-26 協和醗酵工業株式会社 Ｄｃ―８８ａ誘導体
US5187186A (en) 1989-07-03 1993-02-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Pyrroloindole derivatives
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
CA2026147C (en) 1989-10-25 2006-02-07 Ravi J. Chari Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
IE911537A1 (en) 1990-05-07 1991-11-20 Scripps Clinic Res Intermediates in the formation of the calicheamicin and¹esperamicin oligosaccharides
CA2103059C (en) 1991-06-14 2005-03-22 Paul J. Carter Method for making humanized antibodies
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
US5264586A (en) 1991-07-17 1993-11-23 The Scripps Research Institute Analogs of calicheamicin gamma1I, method of making and using the same
US5622929A (en) 1992-01-23 1997-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Thioether conjugates
DE69231123T2 (de) 1992-03-25 2001-02-15 Immunogen Inc Konjugaten von Zell-bindender Mittel und Derivaten von CC-1065
ZA932522B (en) 1992-04-10 1993-12-20 Res Dev Foundation Immunotoxins directed against c-erbB-2(HER/neu) related surface antigens
US5635483A (en) 1992-12-03 1997-06-03 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Tumor inhibiting tetrapeptide bearing modified phenethyl amides
EP0672142B1 (en) 1992-12-04 2001-02-28 Medical Research Council Multivalent and multispecific binding proteins, their manufacture and use
US5780588A (en) 1993-01-26 1998-07-14 Arizona Board Of Regents Elucidation and synthesis of selected pentapeptides
AU6123894A (en) * 1993-01-29 1994-08-15 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Modulation of physiological responses of lymphocytes by cd38 or antibodies thereto
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
ES2233928T3 (es) 1993-10-01 2005-06-16 Teikoku Hormone Mfg. Co., Ltd. Derivados de dolastatina.
CA2165819C (en) 1994-04-22 2005-12-27 Nobuyoshi Amishiro Dc-89 derivatives
JPH07309761A (ja) 1994-05-20 1995-11-28 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd デュオカルマイシン誘導体の安定化法
US5773001A (en) 1994-06-03 1998-06-30 American Cyanamid Company Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis
US5550246A (en) 1994-09-07 1996-08-27 The Scripps Research Institute Calicheamicin mimics
US5663149A (en) 1994-12-13 1997-09-02 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory pentapeptide heterocyclic and halophenyl amides
US6086875A (en) 1995-01-17 2000-07-11 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Receptor specific transepithelial transport of immunogens
US5714586A (en) 1995-06-07 1998-02-03 American Cyanamid Company Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US5712374A (en) 1995-06-07 1998-01-27 American Cyanamid Company Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
DE69626849T2 (de) 1995-12-22 2003-12-24 Bristol-Myers Squibb Co., Princeton Verzweigte hydrazongruppen enthaltende kuppler
ES2273415T3 (es) * 1997-04-07 2007-05-01 Genentech, Inc. Anticuerpos anti-vegf.
PT1071700E (pt) 1998-04-20 2010-04-23 Glycart Biotechnology Ag Modificação por glicosilação de anticorpos para melhorar a citotoxicidade celular dependente de anticorpos
US7112661B1 (en) 1998-10-30 2006-09-26 The Research Foundation Of State University Of New York Variable heavy chain and variable light chain regions of antibodies to human platelet glycoprotein Ib alpha
US7425541B2 (en) 1998-12-11 2008-09-16 Medarex, Inc. Enzyme-cleavable prodrug compounds
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
WO2000061739A1 (fr) 1999-04-09 2000-10-19 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Methode de regulation de l'activite d'une molecule immunologiquement fonctionnelle
US6939545B2 (en) 1999-04-28 2005-09-06 Genetics Institute, Llc Composition and method for treating inflammatory disorders
WO2001024763A2 (en) 1999-10-01 2001-04-12 Immunogen, Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
US7303749B1 (en) 1999-10-01 2007-12-04 Immunogen Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
US7504256B1 (en) 1999-10-19 2009-03-17 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for producing polypeptide
US6333410B1 (en) 2000-08-18 2001-12-25 Immunogen, Inc. Process for the preparation and purification of thiol-containing maytansinoids
MXPA03002974A (es) 2000-10-06 2004-05-05 Kyowa Hakko Kogyo Kk Celulas que producen composiciones de anticuerpo.
EP1333032A4 (en) 2000-10-06 2005-03-16 Kyowa Hakko Kogyo Kk PROCESS FOR PURIFYING ANTIBODY
IT1320715B1 (it) 2000-10-19 2003-12-10 Cselt Centro Studi Lab Telecom Modulo generatore di circuiti per la decodifica di codiciconvoluzionali, metodo per la generazione di tale tipo di circuito e
ES2649037T3 (es) 2000-12-12 2018-01-09 Medimmune, Llc Moléculas con semividas prolongadas, composiciones y usos de las mismas
EP1243276A1 (en) 2001-03-23 2002-09-25 Franciscus Marinus Hendrikus De Groot Elongated and multiple spacers containing activatible prodrugs
EP2009027B1 (en) * 2001-04-27 2014-05-21 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Anti-CD40 monoclonal antibody
US6884869B2 (en) 2001-04-30 2005-04-26 Seattle Genetics, Inc. Pentapeptide compounds and uses related thereto
US6441163B1 (en) 2001-05-31 2002-08-27 Immunogen, Inc. Methods for preparation of cytotoxic conjugates of maytansinoids and cell binding agents
KR20030033007A (ko) 2001-05-31 2003-04-26 코울터 파머수티컬, 인코포레이티드 세포독소, 약물전구체, 링커 및 이에 유용한 안정화제
JP2005538706A (ja) 2001-07-12 2005-12-22 ジェファーソン フーテ， スーパーヒト化抗体
US7497862B2 (en) 2001-08-03 2009-03-03 Tyco Healthcare Group Lp Tissue marking apparatus and method
US7317091B2 (en) 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US8188231B2 (en) 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
JP4741838B2 (ja) 2002-07-31 2011-08-10 シアトル ジェネティクス，インコーポレーテッド 癌、自己免疫疾患または感染症を治療するための薬物結合体およびその使用
EP1391213A1 (en) 2002-08-21 2004-02-25 Boehringer Ingelheim International GmbH Compositions and methods for treating cancer using maytansinoid CD44 antibody immunoconjugates and chemotherapeutic agents
US20060235208A1 (en) 2002-09-27 2006-10-19 Xencor, Inc. Fc variants with optimized properties
DE10246870B3 (de) 2002-10-08 2004-04-29 Renk Aktiengesellschaft Elektro-Hydrodynamische Überlagerungslenkung
CN100526460C (zh) * 2002-11-08 2009-08-12 麒麟医药株式会社 朊病毒蛋白活性降低的转基因有蹄类动物及其用途
JP2006507322A (ja) 2002-11-14 2006-03-02 シンタルガ・ビーブイ 多重自己脱離放出スペーサーとして構築されたプロドラッグ
US20090010920A1 (en) 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
US8084582B2 (en) 2003-03-03 2011-12-27 Xencor, Inc. Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants
US7610156B2 (en) 2003-03-31 2009-10-27 Xencor, Inc. Methods for rational pegylation of proteins
EP3524611B1 (en) 2003-05-20 2020-12-30 ImmunoGen, Inc. Improved cytotoxic agents comprising new maytansinoids
US7276497B2 (en) 2003-05-20 2007-10-02 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising new maytansinoids
CN104998273A (zh) 2003-11-06 2015-10-28 西雅图基因公司 能够与配体偶联的单甲基缬氨酸化合物
WO2006125640A2 (en) * 2005-05-24 2006-11-30 Morphosys Ag Generation and profiling of fully human hucal gold®-derived therapeutic antibodies specific for human cd38
AU2005216251B2 (en) 2004-02-23 2011-03-10 Genentech, Inc. Heterocyclic self-immolative linkers and conjugates
ES2533695T3 (es) 2004-03-02 2015-04-14 Seattle Genetics, Inc. Anticuerpos cargados parcialmente y métodos para su conjugación
WO2005112919A2 (en) 2004-05-19 2005-12-01 Medarex, Inc. Self-immolative linkers and drug conjugates
US7691962B2 (en) 2004-05-19 2010-04-06 Medarex, Inc. Chemical linkers and conjugates thereof
EP3088004B1 (en) 2004-09-23 2018-03-28 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
EA037929B1 (ru) 2005-03-23 2021-06-08 Генмаб А/С Антитела к cd38 человека и их применение
US7714016B2 (en) 2005-04-08 2010-05-11 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
CA2605507C (en) 2005-04-19 2016-06-28 Seattle Genetics, Inc. Humanized anti-cd70 binding agents and uses thereof
PL1912671T3 (pl) 2005-07-18 2018-02-28 Seattle Genetics, Inc. Koniugaty beta-glukuronid-linker-lek
CA2617907A1 (en) 2005-08-05 2007-02-15 Syntarga B.V. Triazole-containing releasable linkers and conjugates comprising the same
EP1931709B1 (en) 2005-10-03 2016-12-07 Xencor, Inc. Fc variants with optimized fc receptor binding properties
HUE035250T2 (hu) 2005-10-12 2018-05-02 Morphosys Ag Humán CD38-ra specifikus teljesen humán HuCAL GOLD-eredetû terápiás ellenanyagok létrehozása és profilozása
US7847105B2 (en) 2005-10-26 2010-12-07 Medarex, Inc. Methods and compounds for preparing CC-1065 analogs
CA2627190A1 (en) 2005-11-10 2007-05-24 Medarex, Inc. Duocarmycin derivatives as novel cytotoxic compounds and conjugates
KR20080114709A (ko) 2006-02-02 2008-12-31 신타가 비.브이. 수용성 ｃｃ-1065 유사체 및 그들의 결합체
WO2008007648A1 (fr) 2006-07-10 2008-01-17 Institute For Antibodies Co., Ltd. Procédé de classification d'antigène, procédé d'identification d'antigène, procédé d'obtention d' un ensemble d'antigènes ou d'anticorps, procédés de construction d'un panel d'anticorps, anticorps et ens
ME03503B (me) 2006-09-26 2020-04-20 Genmab As Anti-cd38 plus kortkosteroidni plus ne-kortikosteroidni hemoterapeutik za tretiranje tumora
EP1914242A1 (en) 2006-10-19 2008-04-23 Sanofi-Aventis Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
US8680293B2 (en) 2007-08-01 2014-03-25 Syntarga B.V. Substituted CC-1065 analogs and their conjugates
US20090076249A1 (en) * 2007-09-19 2009-03-19 Michel De Weers Antibodies against CD38 for treatment of multiple myeloma
JP5737944B2 (ja) * 2007-12-17 2015-06-17 ファイザー・リミテッドＰｆｉｚｅｒ Ｌｉｍｉｔｅｄ 間質性膀胱炎の治療
EP2300052A4 (en) 2008-06-16 2012-11-14 Immunogen Inc NEW SYNERGISTIC EFFECTS
JP2012506695A (ja) * 2008-08-20 2012-03-22 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 改変された抗ｉｌ−１３抗体、組成物、方法、及び使用
JP5677970B2 (ja) 2008-11-03 2015-02-25 シンタルガ・ビーブイ 新規ｃｃ−１０６５類似体およびその複合体
EP2191841A1 (en) 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and vincristine
EP2191840A1 (en) 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and melphalan
EP2191842A1 (en) 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and cytarabine
EP2191843A1 (en) 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and cyclophosphamide
JP5725508B2 (ja) 2009-03-25 2015-05-27 国立大学法人東北大学 Ｌｈ型二重特異性抗体
US10817851B2 (en) 2009-12-23 2020-10-27 Aristocrat Technologies Australia Pty Limited System and method for cashless gaming
SI2580243T1 (sl) 2010-06-09 2020-02-28 Genmab A/S Protitelesa proti humanemu CD38
PL2621531T3 (pl) 2010-09-27 2017-07-31 Morphosys Ag Przeciwciało anty-CD38 i lenalidomid lub bortezomib do leczenia szpiczaka mnogiego i NHL
UA112170C2 (uk) 2010-12-10 2016-08-10 Санофі Протипухлинна комбінація, що містить антитіло, яке специфічно розпізнає cd38, і бортезоміб
GB2486424A (en) 2010-12-13 2012-06-20 Univ Sussex Markers for plasma cell disorders
JOP20210044A1 (ar) 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
WO2012118750A2 (en) 2011-02-28 2012-09-07 Genentech, Inc. Biological markers and methods for predicting response to b-cell antagonists
CA2831572C (en) 2011-05-02 2019-11-26 Immunomedics, Inc. Ultrafiltration concentration of allotype selected antibodies for small-volume administration
GB201203938D0 (en) 2012-03-06 2012-04-18 Binding Site Group The Ltd Assay system
GB201212900D0 (en) 2012-07-20 2012-09-05 Binding Site Group The Ltd Triage scoring system
US10342869B2 (en) 2012-12-07 2019-07-09 The Regents Of The University Of California Compositions comprising anti-CD38 antibodies and lenalidomide
UA118255C2 (uk) 2012-12-07 2018-12-26 Санофі Композиція, яка містить антитіло до cd38 і леналідомід
US20160075766A1 (en) 2013-05-21 2016-03-17 Roche Diagnostics Operations, Inc. Method for producing antibodies using ovine b-cells and uses thereof
US10782290B2 (en) 2013-06-11 2020-09-22 National Center Of Neurology And Psychiatry Method for predicting post-therapy prognosis of relapsing-remitting multiple sclerosis (RRMS) patient, and method for determining applicability of novel therapy
BR112016002001B1 (pt) 2013-07-30 2023-04-25 SBI Biotech Co., Ltd Uso de anticorpo monoclonal, método in vitro para detectar células b ativadas, reagente para detectar células b ativadas, método in vitro para suprimir a atividade b das células ativadas, e anticorpo monoclonal
CA2927099A1 (en) 2013-10-31 2015-05-07 Sanofi Specific anti-cd38 antibodies for treating human cancers
UA119352C2 (uk) 2014-05-01 2019-06-10 Тева Фармасьютикалз Острейліа Пті Лтд Комбінація леналідоміду або помалідоміду і конструкції анти-cd38 антитіло-атенуйований інтерферон альфа-2b та спосіб лікування суб'єкта, який має cd38-експресуючу пухлину
US10617757B2 (en) 2014-08-08 2020-04-14 The Regents Of The University Of California Methods for treating multiple myeloma
SG11201701867SA (en) 2014-09-09 2017-04-27 Janssen Biotech Inc Combination therapies with anti-cd38 antibodies
MA41555A (fr) 2015-02-17 2017-12-26 Millennium Pharm Inc Polythérapie pour le traitement du cancer
MX380557B (es) 2015-05-13 2025-03-12 Morphosys Ag Anticuerpos específicos para cd38 para usarse en el tratamiento de mieloma múltiple (mm).
MA42136A (fr) 2015-05-20 2018-03-28 Janssen Biotech Inc Anticorps anti-cd38 pour le traitement de l'amyloïdose à chaînes légères et d'autres tumeurs malignes hématologiques positives à cd38
PH12018500950B1 (en) 2015-11-03 2023-09-20 Janssen Biotech Inc Subcutaneous formulations of anti-cd38 antibodies and their uses
US20170121417A1 (en) 2015-11-03 2017-05-04 Janssen Biotech, Inc. Subcutaneous Formulations of Anti-CD38 Antibodies and Their Uses
JP7316930B2 (ja) * 2016-07-15 2023-07-28 武田薬品工業株式会社 形質芽細胞及び形質細胞枯渇療法に対する応答を評価するための方法及び材料
US20180117150A1 (en) 2016-11-01 2018-05-03 Janssen Biotech, Inc. Combination Therapies for CD38-Positive Hematological Malignances with ANTI-CD38 Antibodies and Cyclophosphamide
US11392902B2 (en) 2017-06-06 2022-07-19 United Parcel Service Of America, Inc. Systems, methods, apparatuses and computer program products for providing notification of items for pickup and delivery
US11618787B2 (en) 2017-10-31 2023-04-04 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating high risk multiple myeloma
CA3088199A1 (en) * 2018-01-12 2019-07-18 Takeda Pharmaceutical Company Limited Subcutaneous dosing of anti-cd38 antibodies
US20210269546A1 (en) * 2018-07-11 2021-09-02 Momenta Pharmaceuticals, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS RELATED TO ENGINEERED Fc-ANTIGEN BINDING DOMAIN CONSTRUCTS TARGETED TO CD38

Also Published As

Publication number Publication date
JP6563446B2 (ja) 2019-08-21
JP2019205454A (ja) 2019-12-05
LT3284754T (lt) 2021-01-25
US10494444B2 (en) 2019-12-03
ES2841299T3 (es) 2021-07-08
JP7096301B2 (ja) 2022-07-05
IL226973A (en) 2016-08-31
PT2658870T (pt) 2018-07-03
EP3284755B1 (en) 2020-10-07
US20140155584A1 (en) 2014-06-05
LT2658871T (lt) 2018-09-10
KR102070326B1 (ko) 2020-01-29
SI3284754T1 (sl) 2021-03-31
WO2012092616A1 (en) 2012-07-05
SMT201800405T1 (it) 2018-09-13
HK1245284A1 (en) 2018-08-24
JP2018019689A (ja) 2018-02-08
US20180066069A1 (en) 2018-03-08
AU2011351921A1 (en) 2013-07-11
US9102744B2 (en) 2015-08-11
US20230037373A1 (en) 2023-02-09
JP6621447B2 (ja) 2019-12-18
KR101945002B1 (ko) 2019-02-07
AU2019264573A1 (en) 2019-12-05
DK2658870T3 (en) 2018-08-06
ECSP13012794A (es) 2013-10-31
AU2017204571B2 (en) 2019-09-19
JP6425644B2 (ja) 2018-11-21
JP5843884B2 (ja) 2016-01-13
US9790285B2 (en) 2017-10-17
EP3284754B1 (en) 2020-11-04
CN107365385A (zh) 2017-11-21
CY1123739T1 (el) 2022-03-24
EA201791186A1 (ru) 2017-10-31
CA2822061A1 (en) 2012-07-05
MY160499A (en) 2017-03-15
JP2020022464A (ja) 2020-02-13
US8362211B2 (en) 2013-01-29
EP3789404A1 (en) 2021-03-10
LT2658870T (lt) 2018-09-10
PT2658871T (pt) 2018-08-07
HK1250735A1 (en) 2019-01-11
CA2822061C (en) 2022-10-18
DK2658871T3 (en) 2018-08-13
US20120201827A1 (en) 2012-08-09
KR20140032963A (ko) 2014-03-17
ES2674175T3 (es) 2018-06-27
EP2658870B1 (en) 2018-04-25
US20200031951A1 (en) 2020-01-30
EP3284754A1 (en) 2018-02-21
US20150291702A1 (en) 2015-10-15
HUE038535T2 (hu) 2018-10-29
UY33850A (es) 2012-07-31
PL2658870T3 (pl) 2018-11-30
KR20220139441A (ko) 2022-10-14
EA201390993A1 (ru) 2013-12-30
EP3798231A1 (en) 2021-03-31
KR20190015764A (ko) 2019-02-14
CO6761368A2 (es) 2013-09-30
HRP20181176T1 (hr) 2018-09-21
JP2021019588A (ja) 2021-02-18
US12209138B2 (en) 2025-01-28
ZA201304696B (en) 2014-09-25
JP2021087437A (ja) 2021-06-10
PL2658871T3 (pl) 2018-11-30
CN103282383B (zh) 2017-08-29
BR112013017009A2 (pt) 2017-07-25
SI2658870T1 (sl) 2018-10-30
EP2658870A1 (en) 2013-11-06
US11434304B2 (en) 2022-09-06
MX2013007455A (es) 2013-07-22
EP3284755A1 (en) 2018-02-21
RS57526B1 (sr) 2018-10-31
JP6766233B2 (ja) 2020-10-07
CR20130313A (es) 2013-08-09
CY1122161T1 (el) 2020-07-31
HUE052906T2 (hu) 2021-05-28
DK3284754T3 (da) 2020-12-21
US10336833B2 (en) 2019-07-02
AU2019264573B2 (en) 2021-08-12
JP6840813B2 (ja) 2021-03-10
AU2011351921B2 (en) 2017-04-13
KR102602640B1 (ko) 2023-11-16
PE20140247A1 (es) 2014-03-12
US20250171561A1 (en) 2025-05-29
HUE038727T2 (hu) 2018-11-28
KR102294213B1 (ko) 2021-08-27
CN103282383A (zh) 2013-09-04
CN119775422A (zh) 2025-04-08
SG191211A1 (en) 2013-07-31
EP2658871A1 (en) 2013-11-06
CN113480649B (zh) 2025-01-28
US20130171154A1 (en) 2013-07-04
EP2658871B1 (en) 2018-05-02
PT3284754T (pt) 2020-12-21
JP6148984B2 (ja) 2017-06-14
EA029303B1 (ru) 2018-03-30
MA34763B1 (fr) 2013-12-03
KR102451597B1 (ko) 2022-10-06
US9676869B2 (en) 2017-06-13
BR112013017009B1 (pt) 2022-07-26
NZ705848A (en) 2016-07-29
JP2014509837A (ja) 2014-04-24
JP2016121139A (ja) 2016-07-07
CY1122165T1 (el) 2020-07-31
MX350903B (es) 2017-09-25
JP2016034954A (ja) 2016-03-17
GEP20166493B (en) 2016-06-27
PL3284754T3 (pl) 2021-04-06
HRP20181245T1 (hr) 2018-10-05
HRP20201996T1 (hr) 2021-02-05
JOP20210044A1 (ar) 2017-06-16
US20180016349A1 (en) 2018-01-18
WO2012092612A1 (en) 2012-07-05
JP2014509187A (ja) 2014-04-17
ES2690095T3 (es) 2018-11-19
TWI564304B (zh) 2017-01-01
NZ612272A (en) 2015-04-24
AR084747A1 (es) 2013-06-05
SMT201800388T1 (it) 2018-09-13
US20150203587A1 (en) 2015-07-23
JP7315598B2 (ja) 2023-07-26
MX2020012426A (es) 2021-02-18
AU2017204571A1 (en) 2017-07-27
CN113480649A (zh) 2021-10-08
RS61280B1 (sr) 2021-02-26
TW201247705A (en) 2012-12-01
KR20200009142A (ko) 2020-01-29
JP6425635B2 (ja) 2018-11-21
SI2658871T1 (sl) 2018-11-30
US8926969B2 (en) 2015-01-06
TR201808709T4 (tr) 2018-07-23
KR20210107892A (ko) 2021-09-01
JP2018029581A (ja) 2018-03-01
US20200040105A1 (en) 2020-02-06
JOP20110402B1 (ar) 2021-08-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12209138B2 (en) Anti-CD38 antibodies
KR20230027270A (ko) 항-cd38 항체 및 그의 용도
HK40044692A (en) Anti-cd38 antibodies
HK1245284B (en) Anti-cd38 antibodies
EA042773B1 (ru) Антитела к cd38 человека и способы их применения, нуклеиновые кислоты, векторы и композиции на их основе
EA049898B1 (ru) Антитела к cd38 человека и способы их применения, нуклеиновые кислоты, вектора и композиции на их основе
HK1191340B (en) Anti-cd38 antibodies
HK1191340A (en) Anti-cd38 antibodies