[go: up one dir, main page]

RS55701B1 - Trpv1 antagonisti koji uključuju dihidroksi supstituent i njihove upotrebe - Google Patents

Trpv1 antagonisti koji uključuju dihidroksi supstituent i njihove upotrebe

Info

Publication number
RS55701B1
RS55701B1 RS20170182A RSP20170182A RS55701B1 RS 55701 B1 RS55701 B1 RS 55701B1 RS 20170182 A RS20170182 A RS 20170182A RS P20170182 A RSP20170182 A RS P20170182A RS 55701 B1 RS55701 B1 RS 55701B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
formula
pharmaceutically acceptable
following form
fumaric acid
Prior art date
Application number
RS20170182A
Other languages
English (en)
Inventor
Laykea Tafesse
Shigeru Ando
Noriyuki Kurose
Original Assignee
Purdue Pharma Lp
Shionogi & Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=46513798&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS55701(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Purdue Pharma Lp, Shionogi & Co filed Critical Purdue Pharma Lp
Publication of RS55701B1 publication Critical patent/RS55701B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/428—Thiazoles condensed with carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/28—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C309/29—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton of non-condensed six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/28—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C309/29—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton of non-condensed six-membered aromatic rings
    • C07C309/30—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton of non-condensed six-membered aromatic rings of six-membered aromatic rings substituted by alkyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C57/00—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C57/02—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms with only carbon-to-carbon double bonds as unsaturation
    • C07C57/13—Dicarboxylic acids
    • C07C57/15—Fumaric acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/235—Saturated compounds containing more than one carboxyl group
    • C07C59/245—Saturated compounds containing more than one carboxyl group containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C59/255—Tartaric acid

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Description

1. OBLAST PRONALASKA
Objava se odnosi na Jedinjenja Formule (I) i njihove farmaceutski prihvatljive derivate, smeše koje sadrže efikasnu količinu Jedinjenja Formule (I) i njihovu upotrebu za lečenje ili prevenciju stanja kao što su bol, npr., bol udružen sa osteoartritisom, osteoartritis, UI, čir, IBD i IBS, koja uključuje davanje životinji kojoj je to potrebno, efikasne količine Jedinjenja Formule (I).
2. OSNOV PRONALASKA
Bolje najčešći simptom zbog kojeg pacijenti traže medicinski savet i lečenje. Bol može biti akutan ili hroničan. Dok je akutan bol obično samoograničavajući, hroničan bol traje tri meseca ili duže i može da dovede do značajnih promena pacijentove ličnosti, načina života, funkcionlne sposobnosti i ukupnog kvaliteta života (Foley, "Pain", uCecil Textbook of Medicine,pp. 100-107 (Bennett and Plum eds. 20<th>ed. 1996)).
Pored toga, hroničan bol može da se klasifikuje kao nociceptivan ili neuropatski. Nociceptivan bol uključuje bol izazvan povredom tkiva i zapaljenski bol kao stoje onaj udružen sa artritisom. Neuropatski bol prouzrokovan je oštećenjem perifernog ili centralnog nervnog sistema i održava se somatosenzornim procesovanjem koje odstupa od uobičajenog. Postoji veliki broj dokaza koji povezuju aktivnost vaniloidnih receptora (Di Maržoet ah,"Endovanilloid signaling in pain",Current Opinion in Neurobiologyl_2:372-379 (2002)) sa procesovanjem bola.
Nociccptivni bol sc tradicionalno leči davanjem ncopioidnih antagonista, kao što su acetilsalicilna kiselina, holin magnezijum trisalicilat, acetaminofen, ibuprofen, fenoprofen, difluzinal i naproksen; ili opioidnih analgetika, uključujući morfin, hidromorfon, metadon, levorfanol, fentanil, oksikodon i oksimorfon. Gore navedena referenca. Pored gore navedenih načina lečenja, teško lečiv neuropatski bol leči se i antiepilepticima (npr., gabapentin, karbamazepin, valproinska kiselina, topiramat, fenitoin), NMDA antagonistima (npr., ketamin, dekstrometorfan), površinskim nanošenjem lidokaina (za postherpesnu neuralgiju) i tricikličnim antidepresivima (npr., fluoksetin, sertralin i amitriptilin).
UI je nekontrolisano mokrenje (uncontrollable urination, UI), obično prouzrokovano nestabilnošću mišića detrusora mokraćne bešike. UI se javlja kod ljudi svih godina i nivoa fizičkog zdravstvenog stanja, kako u okviru zdravstvenih ustanova tako i u društvu uopšte. Fiziološko kontrahovanje mokraćne bešike velikim je delom rezultat acetilholinom izazvane stimulacije postganglijskih muskarinskih receptora na glatkoj muskulaturi mokraćne bešike. Lečenje UI uključuje primenu lekova koji deluju kao relaksanti mokraćne bešike, što pomaže u kontroli preterane aktivnosti mišića detrusora mokraćne bešike.
Nijedanim od načina lečenja postojećim komercijalnim lekovima za UI ne postiže se potpuni uspeh kod svih klasa pacijenata sa UI, niti postoji lečenje bez značajnih sporednih efekata.
Lečenje ulcera obično podrazumeva redukovanje ili inhibiranje agresivnih činilaca. Na primer, za neutralisanje želudačne kiseline mogu da se koriste antacidi kao aluminijum-hidroksid, magnezij um-hidrohlorid, natrij um-bikarbonat i kalcij um-bikarbonat. Antacidi, međutim, mogu da prouzrokuju alkalozu, što dovodi do muke, glavobolje i slabosti. Antacidi takođe interferiraju sa apsorbovanjem drugih lekova u krv i dovode do dijareje.
Za lečenje ulcera koriste se i H2-antagonisti kao cimetidin, ranitidin, famotidin i nizatidin. H2-antagonisti podstiču zarastanje ulcera tako što smanjuju sekreciju želudačne kiseline i digestivnih enzima, izazvanu histaminom i drugim Fb-agonistima u želucu i duodenumu. Međutim, Lb-antagonisti mogu da prouzrokuju povećanje grudi i impotenciju kod muškaraca, mentalne promene (naročito kod starijih osoba), glavobolju, vrtoglavicu, muku, mijalgiju, dijareju, osip i groznicu.
Inhibitori H<+>,K<+->ATP-aze, kao omeprazol i lansoprazol, takođe se koriste za lečenje ulcera. Inhibitori H<+>,K<+->ATP-aze inhibiraju proizvodnju enzima koje želudac koristi za sekreciju kiseline. Sporedni efekti udruženi sa inhibitorima H<+>,K<+->ATP-aze obuhvataju muku, dijareju, stomačne grčeve, glavobolju, vrtoglavicu, pospanost, osip na koži i prolazno povišenje aktivnosti aminotransferaza u plazmi.
Zapaljenska bolest creva (inflammatorv bowel disease, IBD) je hronični poremećaj u kojem crevo postaje zapaljeno, često dovodeći do ponavljanih stomačnih grčeva i dijareje. Dva tipa IBD su Crohn-ova bolest i ulcerativni kolitis.
Crohn-ova bolest koja uključuje regionalni enteritis, granulomatozni ileitis i ileokolitis, predstavlja hronično zapaljenje zida creva. Crohn-ova bolest se sreće podjednako kod oba pola, a češća je kod Jevreja istočnoevropskog porekla. U većini slučajeva Crohn-ova bolest počinje pre 30. godine starosti, najčešće između 14. i 24. godine starosti. Bolest često zahvata crevni zid čitavom debljinom. Obično bolest zahvata niži deo tankog creva (ileum) i debelo crevo, ali može se sresti u bilo kom delu digestivnog trakta.
Grčevi i dijareja, sporedni efekti udruženi sa Crohn-ovom bolešću, mogu se olakšati antiholinergičkim lekovima, difenoksilatom, loperamidom, deodorisanom tinkturom opijuma ili kodeinom. Kada Crohn-ova bolest izazove opstrukciju creva ili kada apsces ili fistula ne mogu da zarastu, može biti neophodan hirurški zahvat da bi se uklonio deo creva zahvaćen bolešću. Hirurški zahvat međutim ne leči bolest i zapaljenje teži da se ponovo pojavi na mestu spoja na crevu. U gotovo polovini slučajeva neophodna je i druga operacija. Berkowet al.,eds., "Crohn's Disease",Merck Manual of Medical Information,pp. 528-530 (1997).
Ulcerativni kolitis je hronična bolest u kojoj debelo crevo posaje zapaljeno i ulcerisano, što dovodi do epizoda krvavih dijareja, stomačnih grčeva i groznice. Ulcerativni kolitis obično počinje između 15. i 30. godine starosti; međutim, mali broj ljudi prvi napad dobija između 50. i 70. godine. Za razliku od Crohn-ove bolesti, ulcerativni kolitis nikada ne napada tanko crevo i ne zahvata zid creva čitavom debljinom. Bolest obično počinje u rektumu i sigmoidnom kolonu da bi na kraju zahvatila, delimično ili potpuno, celo debelo crevo. Uzrok ulcerativnog kolitisa nije poznat.
Lečenje ulcerativnog kolitisa usmereno je na kontrolu zapaljenja, smanjenje simptoma i nadoknadu izgubljene tečnosti i hranljivih materija. Antiholinergički lekovi i niske doze difenolata ili loperamida daju se za lečenje blage dijareje. Za jaču dijareju daju se više doze difenolata ili loperamida, ili deodorisana tinktura opijuma ili kodein.
Sindrom iritabilnog kolona (irritable bowel svndrome, IBS) je poremećaj motiliteta čitavog digestivnog trakta, koji dovodi do bola u trbuhu, konstipacije i/ili dijareje. IBS se javlja tri puta češće kod žena nego kod muškaraca. Kod IBS stimulusi kao što su stres, dijeta, lekovi, hormoni, ili iritanti mogu da prouzrokuju abnormalne kontrakcije gastrointestinalnog trakta. Tokom epizode IBS, kontrakcije gastrointestinalnog trakta postaju jače i češće, što dovodi do brzog prolaska hrane i fecesa kroz tanko crevo, često dovodeći do dijareje Grčevi nastaju kao rezultat jakih kontrakcija debelog creva i pojačane osetljivosti receptora za bol u debelom crevu.
Lečenje IBS obično uključuje modifikovanje dijete obolelog od IBS. Obično se preporučuje da oboleli od IBS izbegava mahunarke, kupus, sorbitol i fruktozu. Dijeta sa niskim sadržajem masti i visokim sadržajem vlakana takođe može da pomogne jednom broju obolelih od IBS. Redovna fizička aktivnost takođe može da doprinese ispravnom funkcionisanju gastrointestinalnog trakta. Lekovi, kao propantelin, koji usporavaju funkcionisanje gastrointestinalnog trakta obično nisu efikasni u lečenju IBS. Antidijaretici kao što su difenoskilat i loperamid pomažu kod dijareje. Berkovvet al.,eds., "Irritable Bowel Svndrome",Merck Manual of Medical Information,pp. 525-526
(1997).
Međunarodna publikacija br. WO 98/31677 opisuje klasu aromatičnih amina izvedenih iz cikličnih amina, koji su korisni kao lekovi protiv depresije. Međunarodna publikacija br. WO 01/027107 opisuje klasu heterocikličnih jedinjenja koja su inhibitori razmene natrij uma/protona. Međunarodna publikacija br. WO 99/37304 opisuje supstituisana oksoazaheterociklična jedinjenja korisna za inhibiranje faktora Xa. U.S. Patent No. 6,248,756, Anthonvet al.i međunarodna publikacija br. WO 97/38665, opisuju klasu piperidin-sadržavajućih jedinjenja koja inhibiraju farnezil-protein transferazu (Ftazu). Međunarodna publikacija br. WO 98/31669 opisuje klasu aromatičnih amina izvedenih iz cikličnih amina, koji su korisni kao lekovi protiv depresije. Međunarodna publikacija br. WO 97/28140 opisuje klasu piperidina izvedenih iz l-(piperazin-l-il)aril(oksi/amino)karbonil-4-aril-piperidina, koji su korisni kao antagonisti 5-HTiobreceptora. Međunarodna publikacija br. WO 97/38665 opisuju klasu piperidin-sadržavajućih jedinjenja koja su korisna kao inhibitori farnezil-protein transferaze.
U.S. Patent No. 4,797,419, Mooset al,opisuje klasu jedinjenja uree za stimulisanje oslobađanja acetilholina, koja su korisna za lečenje simptoma pada kognitivnih sposobnosti u starosti. U.S. Patent No. 5,891,889, Anthonvet al.opisuje klasu supstituisanih piperidinskih jedinjenja koja su korisna kao inhibitori farnezil-protein transferaze i farnezilaciju onkogenog proteina Ras. U.S. Patent No. 6.150,129, Cooket al.opisuje klasu dinitrogenih heterocikla koji su korisni kao antibiotici. U.S. Patent No. 5,529,998, Habichet al.opisuje klasu benzooksazolil- i benzotiazoliloksazolidona koji su korisni kao antibakterijska sredstva. Međunarodna publikacija br. WO 01/57008 opisuje klasu derivata 2-benzotiazolil uree, koji su korisni kao inhibitori serin/treonin- i tirozin-kinaze. Međunarodna publikacija br. WO 02/08221 opisuje aril-piperazinska jedinjenja koja su korisna za lečenje hroničnih i akutnih bolnih stanja i urinarne inkontinencije. Međunarodna publikacija br. WO 00/59510 opisuje aminopirimidine koji su korisni kao inhibitori sorbitol-dehidrogenaze. Japanska patentna prijava br. 11-199573, Kivoshiet ahopisuje derivate benzotiazola koji su antagonisti 5HT3 receptora u nervnom sistemu crevnog kanala i korisni su za lečenje digestivnih poremećaja i insuficijencije pankreasa. Nemačka patenta prijava br. 199 34 799, Ranneret al.opisuje mcšavinu hiralno-smektičkih tečnih kristala, koja sadrži jedinjenja sa 2 povezana (hetero)aromatična prstena ili jedinjenja sa 3 povezana (hetero)aromatična prstena. Chu Moyeret al., J. Med. Chem.45:511-528 (2002) opisuju heterocikl-supstituisane piperazino-pirimidine koji su korisni kao inhibitori sorbitol-dehidrogenaze. Khadseet al., Buli. Haff. Instt.l( 3)-27-32 (1975) opisuju 2-(A^-supstituisane-jV<y->piperazinil) pirido(3,2-</)tiazole i 5-nitro-2-(A^-supstituisane-V-piperazinil)benzotiazole koji su korisni kao antihelmintska sredstva.
U.S. Patent Application Publication No. US 2004/0186111 Al i Međunarodna publikacija br. WO 2004/058754 Al opisuje klasu jedinjenja koja su korisna za lečenje bola. U.S. Patent Application Publication No. US 2006/0199824 Al i Međunarodna publikacija br. WO 2005/009987 Al opisuju klasu jedinjenja koja su korisna za lečenje bola. U.S. Patent Application Publication No. US 2006/0128717 Al i Međunarodna publikacija br. WO 2005/009988 Al opisuju klasu jedinjenja koja su korisna za lečenje bola. U.S. Patent Application Publication No. US 2009/0170867 Al, US 2009/0170868 Al i 2009/0176796 Al i Međunarodna publikacija br. WO 2008/132600 A2 opisuju klasu jedinjenja koja su korisna za lečenje bola.
Međutim, u stanju tehnike i dalje postoji jasna potreba za novim lekovima koji su korisni za lečenje ili prevenciju bola, npr., bola udruženog sa osteoartritisom, osteoartritisa, UI, ulcera, IBD i IBS.
3. KRATAK OPIS PRONALASKA
U prvom aspektu objave, opisana su nova jedinjenja koja pokazuju afinitet za TRPV1 receptor.
U nekim formama, takva nova jedinjenja pokazuju antagonističku aktivnost na nivou TRPV1 receptora. U drugim formama, takva nova jedinjenja pokazuju delimičnu antagonističku aktivnost na nivou TRPVI receptora.
Određena nova jedinjenja objave nogu da se koriste za lečenje životinje koja pati od bola, npr., hroničnog ili akutnog bola.
U sledećem aspektu objave, opisana su jedinjenja za upotrebu u metodima lečenja hroničnog ili akutnog bola kod životinje, davanjem jednog ili više Jedinjenja Formule (I) životinji kojoj je potrebno takvo lečenje. U određenim formama, takva nova Jedinjenja Formule (1) efikasno leče hronični ili akutni bol kod životinje, proizvodeći manji broj ili umanjene sporedne efekte u poređenju sa ranije raspoloživim jedinjenjima.
U ovom tekstu objavljena su Jedinjenja Formule (I):
ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivat, gde:
R]je -halo ili;
R4je-H;
svaki Rg i R9 je nezavisno -H, -halo, -CH3ili -CF3;
svaki halo je nezavisno -F, -Cl, -Br, ili -I; i
m je ceo broj 1;
gde je metil grupa vezana za piperazinski prsten (S)-2-metil grupa; i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji; pri čemu se farmaceutski prihvatljivi derivat bira iz grupe koja sadrži farmaceutski prihvatljivu so, polimorf, pseudopolimorf, solvat, kokristal, radioobeleženi oblik, i/ili tautomer.
Jedinjenja Formule (I) su potentna na nivou TRPVI receptora i rastvorljiva su u vodenim rastvorima na pH 6.8 ili pH 1.2.
Jedinjenje Formule (I) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, korisni su za lečenje ili prevenciju bola, npr., bola udruženog sa osteoartritisom, osteoartritisa, UI, ulcera, IBD ili IBS (svaki je "Stanje") kod životinje.
Objava se takođe odnosi na smeše koje sadrže efikasnu količinu Jedinjenja Formule (I), ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata, i farmaceutski prihvatljivi nosač ili ekscipijent. Smeše su korisne za lečenje ili prevenciju Stanja kod životinje.
Objava se odnosi i na Jedinjenje Formule (I), njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, smešu koja sadrži Jedinjenje Formule (I), i/ili smešu koja sadrži farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (I), za upotrebu u lečenju bola, npr., bola udruženog sa osteoartritisom, osteoartritisa, UI, ulcera, IBD ili IBS kod životinje. Objava se odnosi i na upotrebu Jedinjenja Formule (I), ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata u izradi leka za lečenje i/ili prevenciju Stanja, kao što su bol i/ili osteoartriotis. Objava se odnosi i na Jedinjenje Formule (I) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji Stanja kao što su bol i/ili osteoartriotis.
Objava se odnosi i na metod inhibiranja funkcije kanala za prolazne receptorske potencijale, vaniloidni tip 1 (transient receptor potential vaniloid 1, TRPV1, ranije poznat kao vaniloidni receptor 1 ili VRI) u ćeliji, koji uključuje dovođenje u kontakt ćelije koja je sposobna da eksprimira TRPV1, sa efikasnom količinom Jedinjenja Formule (I) ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata.
Objava se odnosi i na metod pripremanja smeše, koji uključuje korak mešanja Jedinjenja Formule (I) ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata, i farmaceutski prihvatljivog nosača ili ekscipijenta.
Objava se odnosi i na kit koji sadrži kontejner sa efikasnom količinom Jedinjenja Formule (I) ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata.
U jednoj formi, poželjna Jedinjenja Formule (I) su Jedinjenja Formule (II):
ili njihov farmaceutski prihvatljivi derivat, gde:
R4je-H;
Rsje-H, -F ili CH3;
R9je-H, -halo, -CH3 ili -CF3; i
svaki halo je nezavisno -F, -Cl, -Br, ili -I;
gde je metil grupa vezana za piperazinski prsten (5)-2-metil grupa; i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u (5) konfiguraciji; pri čemu se farmaceutski prihvatljivi derivat bira iz grupe koja sadrži farmaceutski prihvatljivu so, polimorf, pseudopolimorf, solvat, kokristal, radioobeleženi oblik, i/ili tautomer.
Mnoga Jedinjenja Formule (II) su rastvorljiva, u nekim slučajevima visokorastvorljiva, u vodenim rastvorima na pH 6.8 ili pH 1.2, potentna su na nivou TRPV1 receptora, bioraspoloživa su oralnim putem, imaju dobar terapijski indeks, i veruje se da su visoko efikasna kod životinja za lečenje bola i/ili osteoartritisa. Pored toga, Jedinjenja Formule (II) sposobna su da ublaže neželjene sporedne efekte, kao što je porast telesne temperature, do kojih može doći poslein vivoprimene nekih jedinjenja koja modulišu TRPV1 receptor.
3.1 Kratak opis crteža
Slika 1 prikazuje obrazac PXRD (CuKa zračenje) proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom.
Slika 2 prikazuje<!5>N NMR CP/MAS spektre proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, dihidrohloridne soli Jedinjenja A 155(a) i slobodne baze Jedinjenja A 155(a).
Slika 3 prikazuje<13>C NMR CP/MAS spektar proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom.
4. DETALJAN OPIS
Pronalazak uključuje sledeće:
(1.) Jedinjenje Formule (I):
ili njegovfarmaceutski prihvatljivi derivat, gde:
Rije -halo;
Pm je -H;
svaki Rg i R9 je nezavisno -H, -halo, -CH3ili -CF3;
svaki halo je nezavisno -F, -Cl, -Br, ili -I; i
m je ceo broj 0;
gde je metil grupa vezana za piperazinski prsten ( S)- 2- met\\ grupa; i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji; i pri Čemu se farmaceutski prihvatljivi derivat bira iz grupe koja sadrži farmaceutski prihvatljivu so,
polimorf, pseudopolimorf, solvat, kokristal, radioobeleženi oblik, i/ili tautomer.
(2.) Jedinjenje gornjeg (1.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, gdejeR, -F ili -Cl.
(3.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (1.) ili (2.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, gde je Ri -F.
(4.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (3.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, gde je R9-H, -F, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3.
(5.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (4.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, gde je K%-H, -F ili -CH3.
(6.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (5.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, gde je Rg -F ili -CH3.
(7.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (6.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, gde je R9-H.
(8.) Jedinjenje iz gornjih (1.) do (7.) gde je farmaceutski prihvatljivi derivat farmaceutski prihvatljiva so, radioobeleženi oblik, kokristal ili njihova kombinacija.
(9.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih, gde je farmaceutski prihvatljivi derivat hidrohloridna so, natrij umova so, kalij umova so, so p-toluensulfonske kiseline, so fumarne kiseline ili fumarno-kiselinski kokristal.
(10.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (8.) gde je farmaceutski prihvatljivi derivat so fumarne kiseline, fumarno-kiselinski kokristal ili njihova kombinacija.
(11.) Smeša koja sadrži jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (10.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat i farmaceutski prihvatljivi nosač ili ekscipijent.
(12.) In vivometod inhibiranja funkcije TRPV1 u ćeliji, koji uključuje dovođenje u kontakt ćelije koja je sposobna da eksprimira TRPV1, sa efikasnom količinom jedinjenja iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (11.) ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata.
(13.) Proizvod kombinovanja jedinjenja iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (11.) sa fumarnom kiselinom, pri čemu u proizvodu molarni odnos (Jedinjenje Formule (I)):(fumarna kiselina) iznosi oko 1:0.5.
(14.) Smeša koja sadrži proizvod iz gornjeg (13.) i farmaceutski prihvatljivi nosač ili ekscipijent.
(15.)In vitrometod inhibiranja funkcije TRPV1 u ćeliji, koji uključuje dovođenje u kontakt ćelije koja je sposobna da eksprimira TRPV1, sa efikasnom količinom proizvoda iz gornjeg (13.).
(16.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (1.), (3.) ili (5.), koje je Jedinjenje Formule (II):
ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, gde: R4je -H;
Rgje-H, -F ili -CH3;
R9je -H, -halo, -CH3ili -CF3; i
svaki halo je nezavisno -F, -Cl, -Br, ili -I,
gde je metil grupa vezana za piperazinski prsten (S)-2-metil grupa; i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji; pri čemu se farmaceutski prihvatljivi derivat bira iz grupe koja sadrži farmaceutski prihvatljivu so,
polimorf, pseudopolimorf, solvat, kokristal, radioobeleženi oblik, i/ili tautomer.
(17.) Jedinjenje iz gornjeg (16.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, gde je R9-
H.
(18.) Jedinjenje iz gornjeg (16.) ili (17.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, gde je R8-F.
(19.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (16.) do (18.), gde je farmaceutski prihvatljivi derivat farmaceutski prihvatljiva so, ili fumarno-kiselinski kokristal.
(20.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (16.) do (19.), gde je farmaceutski prihvatljivi derivat kokristal hlorovodonične kiseline, tartarne kiseline, benzensulfonske kiseline,p-toluensulfonske kiselne ili fumarne kiseline.
(21.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (16.) do (19.), gde je farmaceutski prihvatljivi derivat so fumarne kiseline, fumarno-kiselinski kokristal ili njihova kombinacija.
(22.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (16.), (17.) ili (19.) do (21.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, koji su
(23.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (16.) ili (17.) do (24.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, koji su (25.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (16.) ili (17.) do (26.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, koji su
(27.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (22.) do (26.) koje je slobodna baza.
(28.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (22.) do (26.) koje je so fumarne kiseline, kokristal fumarne kiseline ili njihova kombinacija.
(29.) Smeša koja sadrži jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (16.) do (28.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, i farmaceutski prihvatljivi nosač ili ekscipijent.
(30.)In vitrometod inhibiranja funkcije TRPV1 u ćeliji, koji uključuje dovođenje u kontakt ćelije koja je sposobna da eksprimira TRPV1, sa efikasnom količinom jedinjenja iz bilo kojeg od gornjih (16.) do (28.) ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata.
(31.) Proizvod kombinovanja jedinjenja iz bilo kojeg od gornjih (16.) do (27.) sa fumarnom kiselinom, pri čemu u proizvodu molarni odnos (Jedinjenje Formule (I)):(fumarna kiselina) iznosi oko 1:0.5.
(32.) Smeša koja sadrži proizvod iz gornjeg (31.) i farmaceutski prihvatljivi nosač ili ekscipijent.
(33.)In vitrometod inhibiranja funkcije TRPV1 u ćeliji, koji uključuje dovođenje u kontakt ćelije koja je sposobna da eksprimira TRPV1, sa efikasnom količinom proizvoda iz gornjeg (31.).
(34.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (33.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, gde %ee jedinjenjaiznosi najmanje oko 90%.
(35.) Jedinjenje iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (34.) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, gde % jedinjenja iznosi najmanje oko 93%.
(36.) Jedinjenje, proizvod ili farmaceutski prihvatljivi derivat istog ili smeša iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (11.), (13.), (14.), (16.) do (27.), (30.), (34.) ili (35.) za upotrebu u lečenju bola, bola udruženog sa osteoartritisom, osteoartritisa, UI, ulcera, IBD ili IBS, kod životinje.
(37.) Jedinjenje, proizvod ili farmaceutski prihvatljivi derivat istog ili smeša iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (11.), (13.), (14.), (16.) do (29.), (31.), (32.) ili (34.) do (36.) za upotrebu u lečenju bola kod životinje.
(38.) Jedinjenje, proizvod ili smeša iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (11.), (13.), (14.), (16.) do (27.), (29.), (30.) ili (32.) do (34.) za upotrebu u lečenju bola udruženog sa osteoartritisom kod životinje.
(39.) Jedinjenje, proizvod ili farmaceutski prihvatljivi derivat istog ili smeša iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (11.), (13.), (14.), (16.) do (27.), (31.), (32.) ili (34.) do (36.) za upotrebu u lečenju osteoartritisa kod životinje.
(40.) Upotreba jedinjenja, proizvoda ili smeše iz bilo kojeg od gornjih (1.) do (11.), (13.), (14.), (16.) do (29.), (31.), (32.) ili (34.) do (36.) ili farmaceutski prihvatljivog derivata istog u izradi leka za lečenje bola, bola udruženog sa osteoartritisom, osteoartritisa, UI, ulcera, IBD ili IBS.
4.1 Jedinjenja Formule (I)
Objava obuhvata Jedinjenja Formule (I)
ili njihove farmaceutski prihvatljive derivate,
(1) uz uslov da ako je Pm-H, onda je m 1, i
(2) uz uslov da ako je R4-H i a-b veza je u (5) konfiguraciji, onda je metil grupa vezana za piperazinski prsten( S)- 2-metilgrupa, (5)-3-metil grupa ili (J?)-3-metil grupa,
pri čemu su Ri, R4, R8, R9i m kako je definisano gore za Jedinjenja Formule (I), pri čemu se farmaceutski prihvatljivi derivat bira iz grupe koja sadrži farmaceutski
prihvatljivu so, polimorf, pseudopolimorf, solvat, kokristal, radioobeleženi oblik, i/ili tautomer.
Određene forme formule (I) predstavljene su dole.
U jednoj formi, Jedinjenje Formule (I) je slobodna baza.
U drugoj formi, Jedinjenje Formule (I) je farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (I).
U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (I) je farmaceutski prihvatljiva so. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (I) je so fumarne kiseline. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (I) je so fumarne kiseline, gde molarni odnos Jedinjenje Formule (I):fumarna kiselina iznosi oko 1:0.5.
U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (I) je kokristal. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (I) je fumarno-kiselinski kokristal. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (I) je fumarno-kiselinski kokristal, gde molarni odnos Jedinjenje Formule (I):fumarat iznosi oko 1:0.5.
U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (I) je so fumarne kiseline, fumarno-kiselinski kokristal, ili njihova kombinacija. U sledećoj formi, molarni odnos Jedinjenje Formule (I):(fumarna kiselina i/ili fumarat) iznosi oko 1:0.5. Druge forme odnose se na proizvod kombinovanja Jedinjenja Formule (I) sa fumarnom kiselinom, gde molarni odnos (Jedinjenje Formule (I)):(fumarna kiselina) u proizvodu iznosi oko 1:0.5; smešu koja sadrži taj proizvod i farmaceutski prihvatljivi nosač ili ekscipijent; iin vitrometod inhibiranja funkcije TRPV1 u ćeliji, koji uključuje dovođenje u kontakt ćelije koja je sposobna da eksprimira TRPV1 sa efikasnom količinom tog proizvoda.
U sledećoj formi, obezbeđuje se i to da:
(4) ako je R4-H, ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u (5) konfiguraciji, Rg je -F i R9 je -F, onda je metil grupa vezana za piperazinski prsten (S)-2-metil grupa.
U sledećoj formi, obezbeđuje se i to da:
(4) ako je R4-H, ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji, Rsje -F i R9 je -F, onda je metil grupa vezana za piperazinski prsten (S)-2-metil grupa.
U sledećoj formi, Rije -F, -Cl ili -Br.
U sledećoj formi, Rije -F ili -Cl.
U sledećoj formi, Rije -F.
U sledećoj formi, R\je -Cl.
U sledećoj formi, Rije -F ili -Cl.
U sledećoj formi, Rije -F.
U sledećoj formi, Rije -Cl.
U sledećoj formi, Ri je -Br.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3. U sledećoj formi, R9je -H, -F, -Cl, -CH3ili -CF3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -CH3ili -CF3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -Cl.
U sledećoj formi, R9je -H ili -F.
U sledećoj formi, R9je -H ili -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -Cl ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H.
U sledećoj formi, R9 je -F.
U sledećoj formi, R9 je -Cl.
U sledećoj formi, R9je -CH3.
U sledećoj formi, Rg je -H, -F, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3. U sledećoj formi, R8 je -H, -F, -Cl ili -CH3.
U sledećoj formi, Rg je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, Rg je -H, -F ili -Cl.
U sledećoj formi, Rg je -H ili -F.
U sledećoj formi, Rg je -H ili -CL
U sledećoj formi, Rg je -H ili -CH3.
U sledećoj formi, Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R8 je -F ili -Cl.
U sledećoj formi, Rg je -Cl ili -CH3.
U sledećoj formi, Rg je -H.
U sledećoj formi, Rg je -F.
U sledećoj formi, Rg je -Cl.
U sledećoj formi, Rg je -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -Br, -CH3, -CF3i Rg je -H, -F ili -CH3. U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -CH3ili -CF3i R8 je -H, -F ili -CH3. U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3i Rg je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9je -H, -F, -Cl ili -CH3i Rg je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -CH3i Rg je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9je -H, -F ili -Cl i Rg je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -F i Rg je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -Cl i R8je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -CH3i R8 je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -CH3i R8 je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -Cl i Rg je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -Cl ili -CH3i Rg je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H i Rg je -H, -F ili CH3.
U sledećoj formi, R9 je -F i Rg je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -Cl i R8 je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -CH3i R8 je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3i Rg je -F ili -CH3. U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3i R8 je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3i R8 je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -CH3i R8 je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -Cl i R8 je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -F i R8 je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -Cl i Rs je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -CH3i R8 je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -CH3i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9je -F ili -Cl i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 jc -Cl ili -CH3i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H i R8 je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -F i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -Cl i R8 je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -CH3i R8 je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3i R8 je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH33i Rg je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3i R8 je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -CH3i Rg je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -Cl i R8 je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -F i R8 je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -Cl i R8 je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -CH3i R8 je -F.
U sledećoj formi, R9je -F ili -CH3i Rg je -F.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -Cl i Rg je -F.
U sledećoj formi, R9 je -Cl ili -CH3i Rg je -F.
U sledećoj formi, R9je -H i R8 je -F.
U sledećoj formi, R9je -F i R8je -F.
U sledećoj formi, R9 je -Cl i Rs je -F.
U sledećoj formi, R9 je -CH3i Rs je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3, R8 je -F ili CH3i Rj je -Cl. U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili CH3, Rg je -F ili CH3i R]je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -CH3, R8 je -F ili -CH3i Ri je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili Cl, Rg je -F ili -CH3i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -F, R8 je -F ili -CH3i R) je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -Cl, R8 je -F ili -CH3i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9je -H ili -CH3, R8je -F ili -CH3i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -CH3, R8 je -F ili -CH3i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -Cl, R8 jc -F ili -CH3i R\jc -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -Cl ili -CH3, Rs je -F ili -CH3i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9je -H, R8je -F ili -CH3i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -F, je -F ili -CH3i Ri je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -Cl, Rs je -F ili -CH3i R\je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -CH3, Rg je -F ili -CH3i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3, R8 je -F i R, je -Cl. U sledećoj formi, R9je -H, -F, -Cl, -CH3ili -CF3, Rg je -F i R, je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili CH3, Rg je -F i R, je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3, R8 je -F i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -II, -F ili -CII3, Rg je -F i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -Cl, Rg je -F i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -F, Rg je -F iR\je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -Cl, Rs je -F iR\je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -CH3, Rg je -F i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -CH3, Rg je -F i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -Cl, Rg je -F i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9je -Cl ili -CH3, Rg je -F i R]je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, Rg je -F i Ri je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -F, Rg je -F i Ri je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -Cl, Rg je -F iR\je -Cl.
U sledećoj formi, R9je -CH3, Rg je -F i Rije -Cl.
U sledećoj formi. R9 je -H, -F, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3, R8 je -CH3i R, je -Cl. U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -CH3ili -CF3, R8 je -CH3i R, jc -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3, R8 je -CH3i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3, R8 je -CH3i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -CH3, R8 je -CH3i R, je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -Cl, Rg je -CH3i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9je -H ili -F, R8je -CH3i R\je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -Cl, R8 je -CH3i Ri je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -CH3, R8 je -CH3i Ri je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -CH3, R8 je -CH3i Ri je- Cl.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -Cl, R8 je- CH3i R\je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -Cl ili -CH3, R8 je -CH3i R, je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, Rg je -CH3i R| je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -F, Rg je -CH3i Rije- Cl.
U sledećoj formi, R9 je -Cl, R8 je -CH3i R\je- Cl.
U sledećoj formi, R9 je -CH3, Rg je -CH3i Ri je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3, R8 je -F i R, je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3, Rg je -F i R, je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -CH3, Rg je -F i R\je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -Cl, Rg je -F i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9je -H ili -F, Rg je -F i Ri je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -Cl, Rg je -F i Rjje -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -CH3, R8 je -F i R\je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -CH3, R8 je -F i Rj je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -Cl, R8 je -F i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -Cl ili -CH3, R8 je -F i R\je -Cl.
U sledećoj formi, R9je -H, R8je -F i R]je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -F, Rg je -F i Ri je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -Cl, R8 je -F i R]je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -CH3, R8 je -F i Rj je -Cl.
U sledećoj formi, R4 je -H.
U sledećoj formi, R4je -H i Rije -F ili -Cl.
U sledećoj formi, R4 je -H i Ri je -F.
U sledećoj formi, R4 je -H i Rije -F ili -Cl.
U sledećoj formi, R4 je -H i Rije -Cl.
U sledećoj formi, R4 je -H i m je 1.
U sledećoj formi, R4 je -H, R\je -F, ili -Cl i m je 1.
U sledećoj formi, R4 je -H, Rije -Cl i m je 1.
U sledećoj formi, R4 je -H,R\je -F i m je 1.
U sledećoj formi, R4 je -H, Rije -F ili -Cl i m je 1.
U sledećoj formi, R4 je -H, Rije -Cl i mje 1.
U sledećoj formi, R4 je -H i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji. U sledećoj formi, R4 je -H, Rije -F, -Cl, ili -CF3i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji.
U sledećoj formi, R4 je -H, Rije -F ili -CF3i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji.
U sledećoj formi, R4je -H,R\je -F ili -Cl i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u ( S) konfiguraciji.
U sledećoj formi, R4je -H, R]je -Cl i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u (5) konfiguraciji.
U sledećoj formi, R4je -H, m je 1 i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u ( S) konfiguraciji.
U sledećoj formi, R4je -II,R\je -F ili -Cl, m je 1 i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji.
U sledećoj formi, R4 je -H, Ri je -Cl, m je 1 i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji.
U sledećoj formi, R4 je -H, Rije -F, m je 1 i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji.
U sledećoj formi, R4je -H, R]je -F ili -Cl, m je 1 i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u ( S) konfiguraciji.
U sledećoj formi, R4je -H, R\je -Cl, m je 1 i ugljenikov atom na apoziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji.
U sledećoj formi, m je 1 i metil grupa vezana za piperidinski prstenje (5)-2-metil grupa. Rastvorljivost jedinjenja u vodi obično je poželjna osobina. Na primer, rastvorljivost jedinjenja u vodi omogućava da se to jedinjenje lakše formuliše u vidu različitih doznih formi koje mogu da se daju životinji. Kada jedinjenje nije u potpunosti rastvorljivo u biološkim tečnostima, npr., krvi, ono može da precipitira i, prema tome, odgovor životinje kojoj je lek dat neće biti u skladu sa dozom. Rastvorljivost u vodi povećava verovatnoću da će jedinjenje biti bolje rastvoreno i, kod jedinjenja sa dobrom permeabilnošću, to rezultuje visokom izloženošću u krvi životinje i povećanjem mogućnosti da se predvidi izloženost na mestu koje je ciljno za jedinjenje.
Mnoga Jedinjenja Formule (I) su rastvorljiva, a u nekim slučajevima su visoko rastvorljiva u vodenom rastvoru. Na primer, na pH 6.8 ili pH 1.2, jedinjenje 200 je nerastvorljivo u vodenom rastvoru, tj. njegova rastvorljivost u vodi iznosi <0.1 uM. Nasuprot tome, rastvorljivost u vodi na pH 1.2 sledećih Jedinjenja Formule (I) je >50 uM: A126(a), A155(a), A155(d), A155(e), A158(a), C125(r) i C126(r). Rastvorljivost u vodi na pH 6.8 u uM, Jedinjenja Formule (I) A126(a), A155(a), A155(d), A155(e), A158(a), C125(r) i C126(r) je 14, 17, 4.0, 5.0, 3.0, odnosno 4.0. Pored toga, rastvorljivost u vodi na pH 6.8 ili pH 1.2 Jedinjenja Formule (I) A122(a), je >50 uM. Rastvorljivost u vodi u uM, na pH 1.2 jedinjenja 209, 210, 211, 212, 213, 214 i 215 je 9.3, 2.0, 1.3, 10.3, 39.6, >50 , odnosno 9.6. Sledeća jedinjenja nisu rastvorljiva u vodi na pH 6.8: 203, 207, 200 i 208. Sledeća jedinjenja imaju nisku rastvorljivost u vodi na pH 6.8: 209, 210, 211, 212, 213, 214 i 215, njihova rastvorljivost u vodi u uM iznosi 1.0, 0.4, 0.4, 1.9, 0.8, 1.8 odnosno 0.6.
Sledeće hcmijske strukture odnose se na neka od gore pomenutih jedinjenja:
4.2 Jedinjenja Formule (II)
Objava takođe obuhvata poželjna Jedinjenja Formule (I) kao Jedinjenja Formule (II):
ili njihov farmaceutski prihvatljivi derivat,
(I) uz uslov da ako je Pm-H i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u (5) konfiguraciji, onda je metil grupa vezana za piperazinski prsten (5)-2-metil grupa, pri čemu su Pm, Rg i R9kao što je definisano gore za Jedinjenja Formule (II), pri čemu se farmaceutski prihvatljivi derivat bira iz grupe koja sadrži farmaceutski prihvatljivu so, polimorf, pseudopolimorf, solvat, kokrisatl, radioobeleženi oblik i/ili tautomer.
Određene forme formule (II) predstavljene su dole.
U jednoj formi, Jedinjenje Formule (II) je slobodna baza.
U sledećoj formi, Jedinjenje Formule (II) je farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (II).
U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (II) je farmaceutski prihvatljiva so. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (II) je so fumarne kiseline. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (II) je so fumarne kiseline gde molarni odnos Jedinjenje Formule (II):fumarna kiselina iznosi oko 1:0.5.
U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (II) je kokristal. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (II) je fumarno-kiselinski kokristal. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (II) je fumarno-kiselinski kokristal, gde molarni odnos Jedinjenje Formule (II) :fumarat iznosi oko 1:0.5.
U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat Jedinjenja Formule (II) je so fumarne kiseline, fumarno-kiselinski kokristal ili njihova kombinacija. U sledećoj formi, molarni odnos Jedinjenje Formule (II):(fumarna kiselina i/ili fumarat) je oko 1:0.5.
Druge forme se odnose na proizvod kombinovanja Jedinjenja Formule (II) sa fumarnom kiselinom, pri čemu molarni odnos (Jedinjenje Formule (II)):(fumarna kiselina) u proizvodu iznosi oko 1:0.5; smešu koja sadrži taj proizvod i farmaceutski prihvatljivi nosač ili ekscipijent; upotrebu jedinjenja za lečenje bola, npr., bola udruženog sa osteoartritisom, osteoartritisa, UI, ulcera, IBD ili IBS, kod životinje, koji uključuje davanje životinji kojoj je to potrebno, efikasne količine tog proizvoda; iin vitrometod inhibiranja TRPV1 funkcije u ćeliji, koji uključuje dovođenje u kontakt ćelije koja je sposobna da eksprimira TRPV1 sa efikasnom količinom tog proizvoda.
U sledećoj formi, obezbeđuje se i to da:
(3) ako je Pm-H, ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji, R8je -F i R9 je -F, onda je metil grupa vezana za piperazinski prsten (S)-2-metil grupa.
U sledećoj formi, obezbeđuje se i to da:
(3) ako je R4-H, ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji, R8je -F i R9 je -F, onda je metil grupa vezana za piperazinski prsten ( S)- 2-metil grupa.
U sledećoj formi, obezbeđuje se i to da:
(3) ako je R4-H, ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u (5) konfiguraciji, R8je -F i R9 je -F, onda je metil grupa vezana za piperazinski prsten (5)-2-metil grupa.
U sledećoj formi, obezbeđuje se i to da:
(3) ako je R4-H, ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji, R8je -F i R9 je -F, onda je metil grupa vezana za piperazinski prsten (S)-2-metil grupa; i
U sledećoj formi, obezbeđuje se i to da:
(3) ako je R4-H, ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u (5) konfiguraciji, R8je -F i R9 je -F, onda je metil grupa vezana za piperazinski prsten (5)-2-metil grupa; i
U sledećoj formi, obezbeđuje se i to da:
(3) ako je R4-H, ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u (S) konfiguraciji, R8je -F i R9 je -F, onda je metil grupa vezana za piperazinski prsten (5)-2-metil grupa; i
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -CH3ili -CF3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -F.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -Cl ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H.
U sledećoj formi, R9 je -F.
U sledećoj formi, R9 je -Cl.
U sledećoj formi, R9 je -CH3.
U sledećoj formi. Rg je -H ili -F.
U sledećoj formi, Rg je -H ili -CH3.
U sledećoj formi, Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, Rg je -H.
U sledećoj formi, Rg je -F.
U sledećoj formi, Rg je -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3i Rg je -F ili -CH3. U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -CH3ili -CF3i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl ili -CH3i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, ili -CH3i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -F i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F ili -Cl i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9je -H ili -F i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -Cl i R8 je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -CH3i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -CH3i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -F ili -Cl i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9je -Cl ili -CH3i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -F i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -Cl i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -CH3i Rg je -F ili -CH3.
U sledećoj formi, R9 je -H, -F, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3i Rg je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H -F, -Cl, -CH3ili -CF3i R8 je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H -F, -Cl, ili -CH3i R8 je -F.
U sledećoj formi, R9je -H -F ili -CH3i R8je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -F i R8 je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H -F ili -Cl i Rg je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -F i Rg je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -Cl i R8 je -F.
U sledećoj formi, R9 je -H ili -CH3i Rg je -F.
U sledećoj formi, Pm je -H, ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji, metil grupa vezana za piperazinski prstenje (5)-2-metil grupa i R9 je -H, -CH3ili -CF3. U sledećoj formi, R4 je -H, ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u (5) konfiguraciji, metil grupa vezana za piperazinski prstenje (5)-2-metil grupa, R8 je -F ili -CH3i R9 je - H, -Cl, -Br, -CH3ili -CF3.
U sledećoj formi, R4 je -H, ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji, metil grupa vezana za piperazinski prsten je (S)-2-metil grupa, Rg je -F i R9je -H, -Cl, - Br, -CH3ili -CF3.
U sledećoj formi, R4 je -H, ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji, metil grupa vezana za piperazinski prstenje (S)-2-metil grupa, R8 je -CH3i R9 je -H, -F,
-Cl, -Br, -CH3ili -CF3.
Ilustrativna Jedinjenja Formule (I) i/ili (II) navedene su dole u Tabelama 1-3, pri čemu Jedinjenja u Tabeli 1 (b) do (g) kao i jedinjenja označena sa u Tabeli 1 i jedinjenja u Tabeli 2 i Tabeli 3 nisu zahtevana.
4. 3 Definicije
Kada se koriste u ovom tekstu, gore upotrebljeni pojmovi imaju sledeća značenja: "-(C|-C4)alkil" označava linearno-lančani ili granati neciklični ugljovodonik koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma. Reprezentativni linearno-lančani -(Ci-C4)alkili uključuju - metil, -etil, -n-propil i -n-butil. Reprezentativni granati -(C]-C4)alkili uključuju- iso-propil, -sec-butil, -z'so-butil i- tert- butil.
"-Halogen" ili "-halo" označava -F, -Cl, -Br ili -I.
U vezi sa metil supstituentom piperazinskog prstena npr., jedinjenja formule (I), "2-metil grupa", "2-pozicija metil grupe" i slično označava gde su Ri, R4, Rg i R9kako je dcfinisano gore za Jedinjenja Formule (I) i gde brojevi označavaju poziciju svakog atoma u piperazinskom prstenu.
U vezi sa metil supstituentom piperazinskog prstena npr., jedinjenja formule (I),( R)- 3-metil grupa", "(i?)-3-pozicija metil grupe" i slično označava
gde su Rj, R4, R8i R9kako je definisano gore za Jedinjenja Formule (I) i gde brojevi označavaju poziciju svakog atoma u piperazinskom prstenu. U vezi sa metil supstituentom piperazinskog prstena npr., jedinjenja formule (I), (5)-3-metil grupa", "(5)-3-pozicija metil grupe" i slično označava gde su Rj, R4, Rg i R9kako je definisano gore za Jedinjenja Formule (I) i gde brojevi označavaju poziciju svakog atoma u piperazinskom prstenu. U vezi sa supstituentom piridinskog prstena koji sadrži R4, izraz "gde je R4-CH3i ugljenikovi atomi na a i c pozicijama a-b veze i c-d veze su, svaki, u (5) konfiguraciji" i slično znači
gde se mala slova koriste da označe određenu C-O vezu u tom supstituentu.
U vezi sa supstituentom piridinskog prstena koji sadrži R4, izraz "gde je R4-CH3i ugljenikovi atomi na a i c pozicijama a-b veze i c-d veze su, svaki, u( R)konfiguraciji" i slično znači
gde se mala slova koriste da označe određenu C-O vezu u tom supstituentu.
U vezi sa supstituentom piridinskog prstena koji sadrži R4, izraz "gde je R4-CH3i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( R)konfiguraciji i ugljenikov atom na c poziciji c-d veze je u( S)konfiguraciji" i slično znači
gde se mala slova koriste da označe određenu C-O vezu u tom supstituentu.
U vezi sa supstituentom piridinskog prstena koji sadrži R4, izraz "gde je Pm -CH3i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji i ugljenikov atom na c poziciji c-d veze je u (i?) konfiguraciji" i slično znači
gde se mala slova koriste da označe određenu C-O vezu u tom supstituentu.
U vezi sa supstituentom piridinskog prstena koji sadrži Pm, izraz "gde je R4-H i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u (5) konfiguraciji" i slično znači
gde se mala slova koriste da označe određenu C-O vezu u tom supstituentu.
U vezi sa supstituentom piridinskog prstena koji sadrži Pm, izraz "gde je Pm-H i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( R)konfiguraciji" i slično znači
gde se mala slova koriste da označe određenu C-O vezu u tom supstituentu.
Izraz "životinja" uključuje, ali se ne ograničava na kravu, majmuna, babuna, šimpanzu, konja, ovcu, svinju, pile, ćurku, patku, mačku, psa, miša, pacova, zeca, morsko prase i čoveka.
Izraz "farmaceutski prihvatljivi derivat", kako se koristi u ovom tekstu, uključuje svaku farmaceutski prihvatljivu so, polimorf, pseudopolimorf, solvat, kokristal, radioobeleženi oblik, stereoizomer, enantiomer, dijastereomer, drugi stereoizomerni oblik, racemsku mešavinu, geometrijski izomer, i/ili tautomer, npr., Jedinjenja Formule (I) objave.
U jednoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat je farmaceutski prihvatljiva so, polimorf, pseudopolimorf, solvat, kokristal, radioobeleženi oblik, i/ili tautomer, npr., Jedinjenja Formule (I) objave. U drugoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat je farmaceutski prihvatljiva so, kokristal, i/ili tautomer, npr., Jedinjenja Formule (I) objave. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat je farmaceutski prihvatljiva so, polimorf i/ili tautomer, npr., Jedinjenja Formule (I) objave. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat je farmaceutski prihvatljiva so, i/ili tautomer, npr., Jedinjenja Formule (I) objave. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat je farmaceutski prihvatljiva so npr., Jedinjenja Formule (I) objave. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat je polimorf npr., Jedinjenja Formule (I) objave. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat je pseudopolimorf npr., Jedinjenja Formule (I) objave. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat je solvat npr., Jedinjenja Formule (I) objave. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat je kokristal npr., Jedinjenja Formule (I) objave. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat je radioobeleženi oblik npr., Jedinjenja Formule (I) objave. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljivi derivat je tautomer npr., Jedinjenja Formule (I) objave.
Izraz "farmaceutski prihvatljiva so", kako se koristi u ovom tekstu, je svaka farmaceutski prihvatljiva so koja može da se pripremi od Jedinjenja Formule (I) uključujući so formiranu od kisele i bazne funkcionalne grupe, kao što je grupa azota, Jedinjenja Formule (I). Ilustrativne soli uključuju, ali se ne ograničavaju na soli: sulfat, citrat, acetat, trifluoroacetat, oksalat, hlorid, bromid, jodid, nitrat, bisulfat, fosfat, kiseli fosfat, izonikotinat, laktat, salicilat, kiseli citrat, tartarat, oleat, tanat, pantotenat, bitartarat, askorbat, sukcinat, maleat, gentisinat, fumarat, glukonat, glukuronat, saharat, format, benzoat, glutamat, metansulfonat, etansulfonat, benzensulfonat,p-toluensulfonat, i pamoat (tj., l,l'-metilen-bis-(2-hidroksi-3-naftoat). Izraz "farmaceutski prihvatljiva so" uključuje i so pripremljenu od Jedinjenja Formule (I) sa kiselom funkcionalnom grupom, kao što je karboksilno-kiselinska funkcionalna grupa, i farmaceutski prihvatljive neorganskc ili organske baze. Pogodne baze uključuju, ali se ne ograničavaju na hidrokside alkalnih metala kao što su natrijum, kalijum, cezijum i litijum; hidrokside zemno-alkalnih metala kao što su kalcijum i magnezijum; hidrokside drugih metala kao što su aluminij um i cink; amonijak i organske amine kao nesupstituisani ili hidroksi-supstituisani mono-, di- ili trialkilamini; dicikloheksilamin; tributil amin; piridin; pikolin; A'-metil-jV-etilamin; dietilamin; trietilamin; mono-, bis-, ili tris-(2-hidroksi-(Ci-C3)alkil amine), kao mono-, bis-, ili tris-(2-hidroksietil)amin, 2-hidroksi-fer/-butilamin ili tris(hidroksimctil)mctilamin, A<r>,A<r->di-[(Ci-C3)alkil]-//-
(hidroksi-(Ci-C3)alkil)-amine kao Ar,Ar-dimetil-JV-(2-hidroksietil)amin ili tri-(2-hidroksietil)amin; iV-metil-D-glukamin; i amino-kiseline kao arginin, lizin i slično. U jednoj formi, farmaceutski prihvatljiva so je hidrohloridna so, sulfatna so, natrij umova so, kalijumova so, so benzensulfonske kiseline, so/?ara-toluensulfonske kiseline, ili so fumarne kiseline. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljiva so je hidrohloridna so ili sulfatna so. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljiva so je hidrohloridna so. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljiva so je sulfatna so. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljiva so je natrijumova so. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljiva so je kalijumova so. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljiva so je so/?ć*ra-toluensulfonske kiseline. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljiva so je so fumarne kiseline. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljiva so je so fumarne kiseline koja sadrži oko jedan ekvivalent Jedinjenja Formule (I) i oko 0.5 ekvivalenata fumarne kiseline, npr., od oko 0.3 do oko 0.7 ekvivalenata fumarne kiseline u jedoj formi, od oko 0.4 do oko 0.6 ekvivalenata fumarne kiseline u drugoj formi, od oko 0.44 do oko 0.56 ekvivalenata fumarne kiseline u sledećoj formi, ili od oko 0.47 do oko 0.53 ekvivalenata fumarne kiseline u sledećoj formi. U sledećoj formi, farmaceutski prihvatljiva so fumarne kiseline sadrži jedan ekvivalent Jedinjenja Formule (I) i 0.5 ekvivalenata
fumarne kiseline. Stručnjak u oblasti će prepoznati da npr., kisele adicione soli Jedinjenja Formule (I) mogu da se pripreme reakcijom jedinjenja sa pogodnom kiselinom, različitim poznatim metodima.
Jedinjenja objave data u ovom tekstu obuhvataju i sve polimorfe i pseudopolimorfe Jedinjenja Formule (I). "Polimorfi" su poznati u struci (vidi npr., Giron, "Investigations of Polvmorphism and Pseudo-polvmorphism in Pharmaceuticals by Combined Thermoanalvtical Techniques",J. Thermal Anal. Cal.64:37-60 (2001)) i smatra se da su to različite kristalne faze u kojima može postojati Jedinjenje Formule (I). Kristalne faze mogu imati različite aranžmane ("pakujući polimorfizam") i/ili konformacije ("konformacioni polimorfizam") molekula u kristalnoj rešetki. Na primer, u dva različita polimorfa Jedinjenja Formule (I), svaki polimorf može imati molekule aranžirane u različitom fundamentalnom kristalnom sistemu - triklinični, monoklinični, ortorombični, tetragonalni, trigonalni, heksagonalni ili kockasti. Izraz "anhidrat", kako se koristi u ovom tekstu, označava svaku kristalnu formu Jedinjenja Formule (I) u kojoj vodeni molekuli nisu integralni delovi kristala. Anhidrat Jedinjenja Formule (I) može da se pripremi na primer, kristalizacijom u rastvaraču koji suštinski ne sadrži vodu. U jednoj formi, Jedinjenje Formule (I) prisutno je kao anhidrat, tj., kao slobodna baza, gde kristalna rešetka suštinski ne sadrži molekule vode i svi prisutni molekuli vode prisutni su kao "površinska voda" (npr., labavo vezan za površinu kristala), što će stručnjaci u oblasti primetiti i razlikovati, pomoću npr., termogravimetrijske analize (TGA) i/ili diferencijalno-skenirajuće kalorimetrije (DSC), od vodenih molekula koji su integralni delovi kristala (npr., hidrat). Anhidrat Jedinjenja Formule (I) ima manje od oko 0.2 mola vode u jednoj formi, manje od oko 0.15 molova vode u drugoj formi, manje od oko 0.12 molova vode u sledećoj formi, manje od oko 0.1 mola vode u sledećoj formi, manje od oko 0.085 molova vode u sledećoj formi, manje od oko 0.075 molova vode u sledećoj formi, manje od oko 0.06 molova vode u sledećoj formi, manje od oko 0.057 molova vode u sledećoj formi, manje od oko 0.05 molova vode u sledećoj formi, manje od oko 0.03 mola vode u sledećoj formi, manje od oko 0.025 molova vode u sledećoj formi, manje od oko 0.02 mola vode u sledećoj formi, manje od oko 0.01 mola vode u sledećoj formi, manje od oko 0.005 molova vode u sledećoj formi i manje od oko 0.001 mola vode u sledećoj formi, svaka pomenuta forma uzima u obzir prisustvo površinske vode i svaka pomenuta forma je po 1 molu Jedinjenja Formule (I).
Jedinjenja objave data u ovom tekstu obuhvataju i sve solvate Jedinjenja Formule (I). "Solvati" su poznati u struci i smatra se da predstavljaju kombinaciju, fizičku asocijaciju i/ili solvataciju Jedinjenja Formule (I) sa molekulom rastvarača. Ova fizička asocijacija može podrazumevati različite stepene jonskog i kovalentnog povezivanja, uključujući povezivanje vodoničnim vezama. Kada je solvat stehiometrijskog tipa, postoji fiksirani odnos molekula rastvarača prema Jedinjenju Formule (I), npr., disolvat, monosolvat ili hemisolvat, kada molarni odnos molekuli rastvarača:molekuli Jedinjenja Formule (I) iznosi 2:1, 1:1 ili 1:2, respektivno. U drugim formama, solvat je nestehiometrijskog tipa. Na primer, kristal Jedinjenja Formule (I) može sadržati molekule rastvarača u strukturnim prazninama, npr., kanalima kristalne rešetke. U određenim slučajevima, solvat može da bude izolovan, na primer kada se jedan ili više molekula rastvarača inkorporiše u kristalnu rešetku kristalne čvrste supstance. Prema tome, "solvat", kako se koristi u ovom tekstu, obuhvata rastvorno-fazne i izolabilne solvate. Kako kristalni oblik solvata može biti označen i kao "pseudopolimorf, jedinjenja objave data u ovom tekstu obuhvataju i sve pseudopolimorfe Jedinjenja Formule (I). Jedinjenje Formule (I) objave može biti prisutno kao solvatisani oblik sa farmaceutski prihvatljivim rastvaračem, kao što su voda, metanol, etanol i slično, i objava treba da uključuje i solvatisane i nesolvatisane oblike Jedinjenja Formule (I). Pošto se "hidrat" odnosi na posebnu podgrupu solvata, tj., kada je molekul rastvarača voda, hidrati su uključeni u solvate objave. U jednoj formi, Jedinjenje Formule (I) prisutno je kao monohidrat, tj., kao slobodna baza, gde molarni odnos voda Jedinjenje Formule (I) iznosi oko 1:1, npr., od 0.91:1 do 1.09:1 u jednoj formi, od 0.94:1 do 1.06:1 u drugoj formi, od 0.97:1 do 1.03:1 u sledećoj formi, i od 0.985:1 do 1.015:1 u sledećoj formi, svaka pomenuta forma ne uzima u obzir površinsku vodu koja može biti prisutna, ako je uopšte ima. Pripremanje solvata poznato je u struci. Na primer, Cairaet ah,"Preparation and Crvstal Characterization of a Polvmorph, a Monohvdrate and an Ethyl Acetate Solvate of the Antifungal Fluconazole",J. Pharmaceut. Sci.,93(3):601-611 (2004), opisuju pripremanje solvata flukonazola sa etil-acetatom i sa vodom. Slično pripremanje solvata, hemisolvata, hidrata i slično, opisano je u Van Tonderet al.,"Prepaartion and Physicochemical Characterization of 5 Niclosamide Solvates and 1 Hemisolvate",AAPS Pharm, Sci. Tech.,5(1) Article 12 (2004) i Binghamet al.,"Over one hundred solvates of sulfathiazole",Chem. Comm.,pp. 603-604 (2001). U jednoj formi, bez ograničavanja, postupak uključuje rastvaranje Jedinjenja Formule (I) u željenoj količini željenog rastvarača (organski rastvarač, voda, ili njihova mešavina) na temperaturama iznad oko 20 °C do oko 25 °C, hlađenje rastvora brzinom dovoljnom da se formiraju kristali i izolovanje kristala poznatim mctodima, npr., filtracijom. Analitičke tehnike, na primer, spektroskopija infracrvenim zracima, mogu da se koriste da bi se pokazalo prisustvo rastvarača u kristalu solvata.
Jedinjenja objave data u ovom tekstu obuhvataju i sve kokristale Jedinjenja Formule (I). "Kokristali" su poznati u struci; smatra se daje kokristal strukturno homogen kristalni materijal koji sadrži dva ili više neutralna gradivna bloka, npr., Jedinjenje Formule (I) sa koformirajućim materijalom, koji su prisutni u definisanim stehiometrijskim količinama. Aakerovet al,"Co-crystal or Salt: Does it Really Matter",Mol. Pharmaceutics4(3):317-322 (2007) Kako se koristi u ovom tekstu, "kokristal" uključuje sve polimorfe tog kokristala, tj., sve različite kristalne faze tog kokristala. Glavna razlika između solvata i kokristala je fizičko stanje izolovanih čistih komponenti. Za npr., dvokomponentni sistem, ako je jedna komponenta tečna na temperaturi od oko 25 °C, onda je kristal koji sadrži obe komponente označen kao solvat; ako su obe komponente čvrste na toj temperaturi, onda je kristal koji sadrži obe komponente označen kao kokristal. Sekhon, "Pharmaceutical Co-crystals - A Review",Ars. Pharm.,50(3).99-l 17 (2009). Pored toga, kokristali i soli mogu da se razmatraju kao suprotni "ekstremi" na lestvici mogućih multikomponentnih struktura. Soli se formiraju jonizacijom, npr., reakcijom kiselina-baza ili donacijom protona koja se dešava između aktivnih farmaceutskih sastojaka i kisele ili bazne supstance. Nasuprot tome, kada aktivni farmaceutski sastojak/sastojci nemaju jonizabilno mesto podložno formiranju soli, kokrstal može da se formira sjedinjavanjem, npr., vodoničnim povezivanjem,n- nili van der Waals-ovim interakcijama uspostavljenim između komponenti. Razlike u strukturi između kokristala, soli i hidrata ilustrovane su npr., na Slikama 1 i 2 Schultheisset al.,"Pharmaceutical Co-crystals and their Physicochemical Properties",Crystal Growth & Design9(6):2950-2967 (2009), koji je ovim uključen kao referenca. Pripremanje kokristala poznato je u struci, na primer, kako je opisano u gore navedenim referencama i u U.S. Patent No. 7,452,555 B2 i 7,935,817 B2.
U sledećoj formi, kokristal sa Jedinjenjem Formule (I) sadrži hlorovodoničnu kiselinu, tartarnu kiselinu, benzensulfonsku kiselinu, toluensulfonsku kiselinu, sukcinsku kiselinu, fumarnu kiselinu, limunsku kiselinu, oksalnu kiselinu, benzoevu kiselinu ili bilo koju njihovu mešavinu. U sledećoj formi, kokristal sa Jedinjenjem Formule (I) sadrži hlorovodoničnu kiselinu, benzensulfonsku kiselinu, toluensulfonsku kiselinu, L-tartarnu kiselinu, fumarnu kiselinu ili bilo koju njihovu mešavinu. U sledećoj formi, kokristal se
sastoji od Jedinjenja Formule (I) i hlorovodonične kiseline. U sledećoj formi, kokristal se sastoji od Jedinjenja Formule (I) i benzensulfonske kiselina. U sledećoj formi, kokristal se sastoji od Jedinjenja Formule (I) i toluensulfonske kiseline. U sledećoj formi, kokristal se sastoji od Jedinjenja Formule (I) i L-tartarne kiseline. U sledećoj formi, kokristal se sastoji od Jedinjenja Formule (I) i fumarne kiseline. U sledećoj formi, kokristal sadrži oko jedan ekvivalent Jedinjenja Formule (I) i oko 0.5 ekvivalenata fumarne kiseline, npr., od oko 0.3 do oko 0.7 ekvivalenata fumarne kiseline u jednoj formi, od oko 0.4 do oko 0.6 ekvivalenata fumarne kiseline u drugoj formi, od oko 0.44 do oko 0.56 ekvivalenata fumarne kiseline u sledećoj formi, ili od oko 0.47 do oko 0.53 ekvivalenta fumarne kiseline u sledećoj formi. U sledećoj formi, kokristal sadrži jedan ekvivalent Jedinjenja Formule (T) i 0.5 ekvivalenata fumarne kiseline.
Analitičke tehnike, na primer, spektroskopija infracrvenim zracima, difrakcija x-zraka na pojedinačnim kristalima (single crvstal x-ray diffraction, XRD), difrakcija x-zraka na prašku (povvder x-ray diffraction, PXRD), određivanje tačke topljenja, DSC, diferencijalna termalna analiza (DTA), TGA, NMR čvrstog stanja (solid-state NMR, SSNMR), fotoelektronska spektroskopija x-zraka (x-ray photoelectron spectroscopy, XPS), mogu da se koriste za rasvetljavanje strukture kokristala. U određenim formama, XRD, SSNMR i/ili XPS koriste sc za određivanje da li jc prisutan kokristal ili so. U određenim formama, kada ne može da se napravi dovoljno veliki pojedinačni kristal, za određivanje da li je prisutan kokristal ili so koriste se SSNMR ili XPS.
Međutim, u struci se prepoznaje da "tačno klasifikovanje jedinjenja kao soli ili kokristala može ponekad da bude donekle problematično". Aakeroyet al,na strani 321. Na primer, Aakeroyet al.opisuju studiju u kojoj se x-zraci i neutronska difrakcija koriste za izučavanje vodoničnih veza između urotropinskog A^-oksida i mravlje kiseline u funkciji temperature, u kojem je nađeno da se tačna lokalizacija protona menja sa temperaturom i pod određenim uslovima, sistem pokazuje parcijalni transfer protona sa kiseline na A-oksidnu komponentu, tj., sistem poseduje karakteristike na prelazu između soli i kokristala. Gore navedeni izvor. Pored toga, Popet al.opisuju tiotropijum fumarat kao, istovremeno, so i kokristal, sa stehiometrijom katjon:anjon:koformer 2:1:1. Popet al.,"Tiotropium Fumarate: An Interesting Pharmaceutical Co-crystal".J. Pharmacol. Sci.98(5): 1820-1834 (2009). Struktura, određena korišćenjem XRD, opisana je kao "napravljena od dva monovalentna tiotropijumska katjona u kombinaciji sa dvovalentnim anjonom fumarata da se dobije so, plus nejonizovana slobodna fumarnokiselinska komponenta da se dobije kokristal". Gore navedeni izvor. Prema tome, u vezi sa odsustvom neosporno jasne razlike između soli i kokristala, treba razumeti da izraz "i njihova kombinacija", kada se koristi u kontekstu soli i/ili kokristala, znači da su karakteristika koja je svojstvena soli i druga karakteristika koja je svojstvena kokristalu istovremeno prisutne u jednoj formi; u drugoj formi, prisutna je karakteristika na prelazu između karakteristike koja je svojstvena soli i karakteristike koja je svojstvena kokristalu.
U ovom tekstu se objavljuju i prolekovi Jedinjenja Formule (I). "Prolekovi" su poznati u struci i, iako ne moraju kao takvi imati nikakvu farmaceutsku aktivnost, smatra se da mogu biti predstavljeni svakim ko valentno vezanim nosačem/nosačima koji oslobađa/osobađaju aktivni roditeljski lekin vivo.Uopšteno, takvi prolekovi će biti funkcionalni derivati Jedinjenja Formule (I) koji se lako mogu konvertovatiin vivo,npr., pošto se metabolišu u potrebno Jedinjenje Formule (I). Konvencionalni postupci biranja i pripremanja pogodnog prolek-derivata opisani su, na primer, u H. Bundgaard ed.,Design of Prodrugs,Elsevier (1985); "Drugs and Enzvme Targeting, Part A", Widderet al,eds., Vol. 112 uMethods in Enzymology,Academic Press (1985); Bundgaard, "Design and Application of Prodrugs", Chapter 5, pp. 113-191 iA Textbook of Drug Design and Development,Krogsgaard-Larsen and Bundgaard Eds., Harvvood Academic Publishers (1991); Bundgaardet al.,"(C) Means to Enhance Penetration (1) Prodrugs as a means to improve the delivery of peptide drugs",Adv. Drug Delivery Revs.8:1-38 (1992); Bundgaardet al.,"Glycolamide Esters as Biolabile Prodrugs of Carboxylic Acid Agents: Synthesis, Stability, Bioconversion, and Physicochemical Properties",J. Pharmaceut. Sci.77(4);285-298 (1988); i Kakeyaet al.,"Studies on Prodrugs of Cephalosporins. I. Synthesis and Biological Properties of Glycyloxygenzoyloxymethyl and Glycylaminobenzoyloxymethyl Esters of 7P-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-(Z)-2-methoxyiminoacetamido]3-methyl-3-cephem Acid",Chem. Pharm. Buli.32:692-698 (1984).
Pored toga, jedan ili više atoma vodonika, ugljenika ili drugih atoma u Jedinjenju Formule (I) može biti zamenjeno radioaktivnim izotopom vodonika, ugljenika ili drugih atoma. Takva "radioobeležena" Jedinjenja Formule (I), "radioobeležene forme" Jedinjenja Formule (I) i slično, od kojih je svako obuhvaćeno objavom, korisna su kao istraživačka i/ili dijagnostička sredstva u farmakokinetičkim studijama metabolizma i u testovima vezivanja. "Radioaktivan", kako se koristi u ovom tekstu u odnosu na atom, označava atom koji je radioaktivan atom i prema tome, njegova specifična radioaktivnost je iznad pozadinskog nivoa radioaktivnosti. Primeri radioaktivnih izotopa koji mogu biti ugrađeni u Jedinjenje Formule (I) objave uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, sumpora, fluora, hlora, broma i joda kao što su<2>H,3H, nC, ,3C,14C, ,5N,170,180,31P,32P,35S, ,8F,19F,36C1,<3>7C1,76Br, 77Br,8,Br,<1>23I,
124I,12<5>I odnosno<131>I. U jednoj formi, radioobeleženo Jedinjenje Formule (I) sadrži 1, 2, 3, 4 ili više radioaktivnih izotopa, od kojih se svaki nezavisno bira između vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, sumpora, fluora, hlora, broma i joda. U drugoj formi, radioobeleženo Jedinjenje Formule (I) sadrži 1 ili 2 radioaktivna izotopa, od kojih se svaki nezavisno bira između vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, sumpora, fluora, hlora, broma i joda. U sledećoj formi, radioobeleženo Jedinjenje Formule (I) sadrži 1 radioaktivni izotop koji se bira između vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, sumpora, fluora, hlora, broma i joda. U sledećoj formi, radioobeleženo Jedinjenje Formule (I) sadrži 1, 2, 3, 4 ili više radioaktivnih izotopa, od kojih se svaki nezavisno bira između<2>H,3H,nC,13C,14C,<l5>N,<l7>0,<I8>0,<3>1P,32P,35S,18F, 1<9>F,<36>C1,<37>C1,<76>Br,<77>Br,<81>Br,<123>I,<12>4I,12<5>I i<l3>,I. U sledećoj formi, radioobeleženo Jedinjenje Formule (I) sadrži 1 ili 2 radioaktivna izotopa, od kojih se svaki nezavisnou-A2TI 3tj 11^ 13-~n 14^ 15-kt 17--, 18,-, 31D 32D 35e 18x7 19t7 36^, 37^, 76^ bira između H, H, C, C, C, N, O, O,P,P, S, F, F, Cl, Cl, Br,<77>Br, 8<1>Br,12<3>I,<124>I,125I i<13I>I. U sledećoj formi, radioobeleženo Jedinjenje Formule (I) sadrži 1 radioaktivni izotop koji se bira između<2>H,<3>H,<n>C,<13>C,<14>C,<15>N,<17>0,<18>0,31P, 3<2>P,<35>S, ,8F,19F,<36>C1,<37>C1,<76>Br,<77>Br,<81>Br, l23I,1241,,<25>I i<131>I. U sledećoj formi, radioobeleženo Jedinjenje Formule (I) sadrži 1, 2, 3, 4 ili više radioaktivnih izotopa, od kojih se svaki nezavisno bira između2H,3H, ,3C,14C,1<5>N,<18>0,<32>Pi<I25>I. U sledećoj formi, radioobeleženo Jedinjenje Formule (I) sadrži 1 ili 2 radioaktivna izotopa, od
kojih se svaki nezavisno bira između<3>H,<14>C,<15>N,,<8>0,<32>P i<125>I. U sledećoj formi, radioobeleženo Jedinjenje Formule (I) sadrži 1 radioaktivni izotop koji se bira između<3>H,<14>C,'<5>N,,80,32Pi<125>I.
Radioobeležena jedinjenja objave mogu da se pripreme metodima koji su poznati u struci. Na primer, Jedinjenje Formule (I) koje sadrži tricijum može da se pripremi uvođenjem tricijuma u određeno Jedinjenje Formule (I), na primer, katalitičkom dehalogenacijom tricijumom. Ovaj metod može uključivati reakciju pogodnog halogen-supstituisanog prekursora Jedinjenja Formule (I) gasovitim tricijumom u prisustvu pogodnog katalizatora, na primer, Pd/C, u prisustvu ili odsustvu baze. Drugi pogodni metodi pripremanja jedinjenja koja sadrže tricijum mogu da se nađu u Filer, "The Preparation and Characterization of Tritiated Neurochemicals", Chapter 6, pp. 155-192 uIsotopes in the Physical and Biomedical Sciences, Vol. 1, Labeled Compounds ( Part A)(1987).<14>C-obeležena jedinjenja mogu da se pripreme korišćenjem polaznih materijala koji imaju<14>C ugljenik. Jedinjenja koja sadrže piperazin izotopski obogaćen sa<13>C i/ili<15>N mogu da se pripreme kako je opisano na primer na Slici 5A i pridruženom opisu, US Patent No. 7,355,045 B2.
Jedinjenje Formule (I) može sadržati jedan ili više asimetričnih centara i prema tome može davati enantiomere, dijastereomere i druge stereoizomerne oblike. Ukoliko specifično nije naznačeno drugačije, objava obuhvata jedinjenja sa svim takvim mogućim oblicima kao i njihove racemske i razdvojene oblike ili bilo koju njihovu mešavinu. Kada Jedinjenje Formule (I) sadrži olefinsku dvostruku vezu ili drugi centar geometrijske asimetrije, i ukoliko specifično nije naznačeno drugačije, treba da uključi sve "geometrijske izomere", npr., i E i Z geometrijski izomer. Ukoliko specifično nije naznačeno drugačije, svi "tautomeri", npr., keton-enol, amid-imidinska kiselina, laktam-laktim, enamin-imin, amin-imin-i enamin-enimin tautomeri, treba takođe da budu obuhvaćeni objavom. Kako se koriste u ovom tekstu, izrazi "stereoizomer", "stereoizomerni oblici" i slično opšti su izrazi za sve izomere pojedinačnih molekula koji se razlikuju samo u orijentaciji svojih atoma u prostoru. To uključuje enantiomere i izomere jedinjenja koji imaju više od jednog hiralnog centra i nisu jedan drugome lik u ogledalu ("dijastereomeri").
Izraz "hiralni centar" odnosi se na ugljenikov atom za koji su vezane četiri različite grupe. Izraz "enantiomer" ili "enantiomerni" odnosi se na molekul koji se ne preklapa sa svojim likom u ogledalu i tako je optički aktivan kada enantiomer rotira ravan polarizovane svetlosti u jednom smeru a njegov lik u ogledalu rotira ravan polarizovane svetlosti u suprotnom smeru.
Izraz "racemski" odnosi se na mešavinu jednakih delova enetiomera koja je optički neaktivna.
Izraz "rezolucija" odnosi se na razdvajanje ili koncentrisanje ili odstranjivanje jednog od dva enantiomerna oblika molekula. Optički izomeri Jedinjenja Formule (I) mogu da se dobiju poznatim tehnikama kao što je hiralna hromatografija ili formiranje dijastereomerne soli, od optički aktivne kiseline ili baze.
Optička čistoća može da se izrazi u odnosu na enantiomerni višak (%ee,enantiomeric excess), koji se određuje prema formuli:
Izraz "MeOH" označava metanol, tj., metil alkohol.
Izraz "EtOH" označava etanol, tj., etil alkohol.
Izraz '7-BuOH" označava ter/-butil alkohol, tj., 2-metilpropan-2-ol. Izraz "THF" označava tetrahidrofuran.
Izraz "DMF" označava N, A-dimetilformamid.
Izraz "DCM" označava metilen hlorid, tj., dihlorometan.
Izraz "DCE" označava dihloroetan.
Izraz "DME" označava 1,2-dimetoksietan, tj., etilen glikol dimetil etar. Izraz "EtOAc" označava etil acetat.
Izraz "NH4OH" označava amonijum hidroksid.
Izraz "TEA" označava trietilamin.
Izraz "MeCN" označava acetonitril.
Izraz "NaH" označava natrijum hidrid.
Izraz "AcOH" označava sirćetnu kiselinu.
Izraz "DMSO" označava dimetilsulfoksid, tj., metilsulfinilmetan. Izraz "DIEA" označava diizopropiletilamin, tj., ALetil-A/-izopropilpropan-2-amin. Izraz "BuLi" označava butil litijum.
Izraz "Boe" označava ter/-butiloksikarbonil:
Izraz "HOBI" označava 1-hidroksibenzotriazol hidrat.
Izraz "EDO" označava l-etil-3-[3-(dimetilamino)propil]karbodiimid.
Izraz "IBD" označava zapaljensku bolest creva.
Izraz "IBS" označava sindrom iritabilnog kolona.
Izraz "ALS" označava amiotrofičnu lateralnu sklerozu.
Izraz "efikasna količina", kada se koristi u vezi sa Jedinjenjem Formule (I), označava količinu koja je efikasna u: (a) lečenju ili prevenciji Stanja ili njihovih simptoma; (b) detektabilno inhibira funkciju TRPV1 receptora u ćeliji, ili (c) detektabilno aktivira funkciju TPvPVl receptora u ćeliji.
Izraz "efikasna količina", kada se koristi u vezi sa drugim terapijskim sredstvom ili sekundarnim terapijskim sredstvom, označava količinu koja obezbeđuje terapijski efekat drugog terapijskog sredstva.
Izraz "terapijski indeks" opisuje razliku između doze koja je efikasna i doze koja izaziva neželjena dejstva.
Izraz "moduliše", "modulišući" i slično, kada se koristi u ovom tekstu u vezi s TRPV1 receptorom, označava medijaciju farmakodinamičkog odgovora (npr., analgeziju) kod životinje kao rezultat (i) inhibiranja ili aktiviranja receptora, ili (ii) direktnog ili indirektnog uticaja na normalnu regulaciju receptorske aktivnosti. Jedinjenja koja modulišu receptorsku aktivnost uključuju agoniste, parcijalne agoniste, antagoniste, mešovite agoniste/antagoniste, mešovitc parcijalne agoniste/antagoniste i jedinjenja koja direktno ili indirektno utiču na regulaciju receptorske aktivnosti.
Kako se koristi u ovom tekstu, jedinjenje koje se vezuje za receptor i imitira regulatorni efekat/efekte endogenog liganda definiše se kao "agonist". Kako se koristi u ovom tekstu, jedinjenje koje se vezuje za receptor i samo je delimično efikasno kao agonist, definiše se kao "parcijalni agonist". Kako se koristi u ovom tekstu, jedinjenje koje se vezuje za receptor, ali ne proizvodi regulatorni efekat nego blokira vezivanje drugog sredstva za receptor definiše se kao "antagonist. (Vidi: Ross and Kenakin,
Pharmacodynamics: Mechanisms of Drug Action and the Relationship Between Drug
U jednoj formi, odlazeće grupe (L) na poziciji 2 i poziciji 5 piridinskog prstena jedinjenja formule 1 mogu da se odaberu tako da budu predstavljene istim atomom halogena npr., svaka je brom, ili, u drugoj formi, može da se bira da atomi halogena budu različiti. Na primer, odlazeća grupa na poziciji 2 piridinskog prstena jedinjenja formule 1 može biti -Cl dok odlazeća grupa na poziciji 5 piridinskog prstena može da bude -Br. Primeri boronatnih estara 2 uključuju, ali se ne ograničavaju na 4,4,6-trimetil-2-vinil-l,3,2-dioksaborinan, 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-l,3,2-dioksaborolan i di-n-butil-vinil organo-borni estar. Reakcija se odvija u pogodnom organskom rastvaraču (npr., THF ili DMF) u prisustvu viška tetra(«-butil)amonijum fiuorida (TBAF). U alternativnoj formi, CsF može da se koristi umesto TBAF. Primeri paladijumskih katalizatora uključuju, ali se ne ograničavaju na [1,1<*->bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II) (Pd(DPPF)Cl2) i bis(trifenilfosfin)dihloropaladijum(II) (Pd(PPli3)2Cl2). Reakcija može da se odvija u prisustvu baze kao što je kalij um karbonat. Jedinjenja formule 1 su komercijalno dostupna ili mogu da se pripreme postupcima poznatim u struci.
4. 4. 1.2 Oksidacija praćena Wittig-ovom olefinacijom
Alternativna tehnika postavljanja vinil grupe prikazana je na Semi 2, dole, gde su Rii L kako je definisano gore.
Prvi korak uključuje oksidaciju alkoholne grupe jedinjenja formule 4 u aldehid, čime nastaje jedinjenje formule 5. Aldehidna grupa jedinjenja formule 5 se zatim konvertuje u vinil grupu reakcijom Wittig-ove olefinacije, da se dobije jedinjenje formule 6. Jedinjenja formule 4 su komercijalno dostupna ili mogu da se pripreme postupcima poznatim u struci.
4. 4. 1.3 Redukcija praćena dehidratacijom
Alternativna tehnika postavljanja vinil grupe prikazana je na Šemi 3, dole, gde suK\,R4i L kako je definisano gore.
Prvi korak uključuje redukciju ketonske grupe jedinjenja formule 7 u hidroksilnu grupu jedinjenja formule 8. Posle adicije/»-toluensulfonske kiseline, jedinjenje formule 8 se dehidratiše da se dobije jedinjenje formule 3. Jedinjenja formule 7 su komercijalno dostupna ili mogu da se pripreme postupcima poznatim u struci.
4.4.2 Metod pripremanja diola
4.4.2.1 Asimetrična dihidroksilacija vinil-supstituisanih piridina
Asimetrična dihidroksilacija može da se obavi kako je ilustrovano na Šemi 4, dole, gde je jedinjenje formule 3 prikazano kao polazni materijal i gde su Rj, R4i L kako je definisano gore. Jedinjenje formule 6 takođe može da posluži kao polazni materijal na Šemi 4.
Kako je pokazano na Šemi 4, stereohemija dobijenog diola zavisi od hiralnosti liganda upotrebljenog u AD-mix-u, kako je opisano na primer u Sharplesset al., J. Org. Chem.57:2768-2771 (1992) i Šemama 1.14 i 1.15 U.S. Patent Application Publication No. 2009/0170868 Al. AD-mix sastavljen je od sledećih komponenti: kalijum osmat (K20s02(OH)4), kalijum fericijanid (K3Fe(CN)6), kalijum karbonat (K2C03), i hiralni ligandi pokazani na Šemi 5. U jednoj formi, reakcija proizvodi hiralni diol koji ima enantiomerni višak{ ee)od najmanje oko 80%. U drugoj formi, reakcija proizvodi hiralni diol koji ima %eeod najmanje oko 90%. U sledećoj formi, reakcija proizvodi hiralni diol koji ima %eeod najmanje oko 93%. U sledećoj formi, reakcija proizvodi hiralni diol koji ima %eeod najmanje oko 94%. U sledećoj formi, reakcija proizvodi hiralni diol koji ima %eeod najmanje oko 95%. U sledećoj formi, reakcija proizvodi hiralni diol koji ima %eeveći od 95% (npr., 95.1%-99.9%). U sledećoj formi, reakcija proizvodi hiralni diol koji ima %eeod najmanje oko 96%. U sledećoj formi, reakcija proizvodi hiralni diol koji ima %eeveći od 96% (npr., 96.1%-99.9%). U sledećoj formi, reakcija proizvodi hiralni diol koji ima %eeod najmanje oko 97%. U sledećoj formi, reakcija proizvodi hiralni diol koji ima %eeveći od 97% (npr., 97.l%-99.9%). 4.4.2.2 Pripremanje hiralnih diola preko Weinreb-ovih amida Dijastereomeri jedinjenja formule 10a i 10b mogu da se pripreme alternativnim sintetskim putem. Primer takvog alternativnog puta prikazan je na Semama 6-10, dole. Weinreb-ov amid formule 14 se prvo priprema na konvencionalan način, kako je pokazano na Šemi 6. Na Šemi 6, protektovanje hidroksilnc grupe jedinjenja formule 11tert-butildimetilsililnom (TBS) grupom praćeno hidrolizom, daje jedinjenje formule 12. Reakcija jedinjenja formule 12 sa jedinjenjem formule 13 (gde je WSC l-(3-dimetilamino)propil-3-etil-karbodiimid) daje jedinjenje formule 14. Jedinjenja formule 11 i 13 komercijalno su dostupna ili mogu da se pripreme postupcima poznatim u struci. Jedinjenje formule 14 zatim reaguje sa jedinjenjem formule 1 u prisustvu izo-propilmagnezijum hlorida i litijum hlorida da se proizvede jedinjenje formule 15, kako je pokazano na Šemi 7, gde su Rii L kako je definisano gore.
Dijastereoselektivna redukcija jedinjenja formule 15 organobornim redukujućim sredstvom L-selektridom proizvodi jedinjenje formule 16, kako je pokazano na Šemi 8.
Reakcija se preferencijalno odvija u mešovitom sistemu rastvarača kao što je heksan/THF na niskoj temperaturi (npr., -78 °C).
Jedinjenje formule 16 zatim reaguje sa 4-nitrobenzoevom kiselinom u prisustvu trifenilfosfina i dietil azodikarboksilata (DEAD) da se dobije jedinjenje formule 17, kako je pokazano na Šemi 9.
Bazna hidroliza jedinjenja formule 17, praćena uklanjanjem TBS grupe daje jedinjenje formule 10c', kako je pokazano na Šemi 10, gde sufiks "prim" (" ' ") označava da je Pm - CH3. Enantiomerni višak(ee) jedinjenjaformule 10c'je najmanje oko 80% i/ili vrednost% eekako je navedeno gore u vezi sa Šemom 4.
Jasno je da kada se enantiomer jedinjenja formule 11 (vidi Šemu 6), tj., jedinjenje 11a koristi kao polazni materijal, onda se proizvodi enantiomer jedinjenja formule 10c', tj., jedinjenje 10d', kako je pokazano na Šemi 11, prateći korake prikazane na Šemama 6-10.
Enantiomerni višak( ee)jedinjenja formule 10d' je oko 80% i/ili vrednost %eekako je navedeno gore u vezi sa Semom 4. Jedinjenja formule 1 la su komercijalno dostupna ili mogu da se pripreme postupcima poznatim u struci.
4.4.2.3 Pripremanje racemskih diola.
Racemski dioli mogu da se pripreme metodima poznatim u struci uz korišćenje osmijum tetroksida (OsCm) i A-metil morfolin yV-oksida (NMO) u vodenom rastvoru acetona.
4.4.3 Metod kuplovanja supstituisanih piridina sa piperazinima
Jedinjenje formule 18 može da se pripremi adicijom jedinjenja formule 10 na jedinjenje formule 19 u prisustvu paladijumskog katalizatora, kako je prikazano na Šemi 12, gde su Ri, R4, m i L kako je gore definisano.
Biće jasno da u skladu sa objavom, jedinjenje formule 19 ima jednu od sledećih struktura:
Jedinjenja formule 19 su komercijalno dostupna ili mogu da se pripreme postupcima poznatim u struci. Biće jasno i to da jedinjenje formule 19 može da reaguje sa jedinjenjem formule 10a, 10b, 10c' ili 1 Od' da se dobije jedinjenje formule 18a, 18b, 18c' ili 18d', respektivno.
U alternativnoj formi, jedinjenje formule 18 može da se dobije kako je pokazano na šemi 13, gde su Ri, R4, m i L kako je gore definisano i Pnje azotna protektujuća grupa (npr., BOC).
U ovoj formi, hidroksilne grupe jedinjenja formule 10 protektuju se da se dobije jedinjenje formule 20, pre kuplovanja jedinjenja formule 20 sa jedinjenjem formule 21. Takvo protektovanje obavlja se tako što se na jedinjenje formule 10 adira 2,2-dimetoksipropan u prisustvu monohidratapara- to\ uensulfonske kiseline (PTSA) da se dobije jedinjenje formule 20. Jedinjenje formule 20 zatim reaguje sa jedinjenjem formule 21 u prisustvu paladijumskog katalizatora i baze da se dobije jedinjenje formule 22. Jedinjenje formule 22 zatim reaguje sa viškom kiseline, npr., HC1 da se dobije deprotektovano jedinjenje formule 18. Biće jasno da u skladu sa objavom, jedinjenje formule 2 lima jednu od sledećih struktura:
Jedinjenja formule 21 su komercijalno dostupna ili mogu da se pripreme postupcima poznatim u struci. Biće jasno da jedinjenje formule 10 može da se zameni jedinjenjem formule 10a, 10b, 10c' ili 10d' na Šemi 13 da se dobije jedinjenje formule 18a, 18b, 18c' ili 18d', respektivno. U ovim formama, enantiomerni višak(ee) jedinjenjaformule 18a (ili 18b ili 18c' ili 18d') je najmanje oko 80% i/ili vrednost %eeje kako je navedeno gore u vezi sa Šemom 4.
4.4.4 Metodi pripremanja benzotiazol-2-amina formule 23
Jedinjenje formule 23 može da se pripremi adicijom kalijum tiocijanata, broma i sirćetne kiseline na jedinjenje formule 24 kako je prikazano na Šemi 14, gde su Rg i R9kako je definisano gore. Jedinjenje formule 23 precipitira u rastvoru posle dodavanja amonijum hidroksida. Jedinjenja formule 24 su komercijalno dostupna ili mogu da se pripreme postupcima poznatim u struci.
4.4.5 Metodi pripremanja karboksamida formule 26
Jedinjenje formule 26 može da se pripremi dodavanjem jedinjenja formule 23 jedinjenju formule 25 u prisustvu baze kao TEA ili DIEA, kako je prikazano na Šemi 15, gde su Ri, R4, R8, R9i m kako je definisano gore i svaki L2je odlazeća grupa nezavisno odabrana između fcnil, 4-nitrofenil, i imidazol-l-il. Jedinjenja formule 25 su komercijalno dostupna ili mogu da se pripreme postupcima poznatim u struci.
4.4.6 Metodi pripremanja piperazinskih derivata Formule (I)
Jedinjenje Formule (I) može da se pripremi dodavanjem jedinjenja formule 26 jedinjenju formule 18 kako je prikazano na Šemi 16, gde su Ri, R4, Rg, R9, m i L2kako je definisano gore.
U određenim formama, reakcija se obavlja u DCM ili aprotičnom organskom rastvaraču. U određenim formama, jedinjenje formule 18a, 18b, 18c' ili 18d' tretira se jedinjenjem formule 26 da se proizvede enantiomerski obogaćeni diol, kako je za primer dato na neograničavajućoj Šemi 17 za jedinjenje formule 18a, gde su R\, R4, Rg, R9, m i L2kako je definisano gore. U ovim formama, enantiomerski višak( ee)Jedinjenja Formule (I) je najmanje oko 80%. U drugoj formi, reakcija proizvodi Jedinjenje Formule (I) koje ima %eeod najmanje oko 90%. U sledećoj formi, reakcija proizvodi Jedinjenje Formule (I) koje ima %eeod najmanje oko 93%. U sledećoj formi, reakcija proizvodi Jedinjenje Formule (I) koje ima %eeod najmanje oko 94%. U sledećoj formi, reakcija proizvodi Jedinjenje Formule (I) koje ima %eeod najmanje oko 95%. U sledećoj formi, reakcija proizvodi Jedinjenje Formule (I) koje ima %eeveći od 95%
(npr., 95.1% do 99.9%). U sledećoj formi, reakcija proizvodi Jedinjenje Formule (I) koje ima %eeod najmanje oko 96%. U sledećoj formi, reakcija proizvodi Jedinjenje Formule (I) koje ima %eeveći od 96% (npr., 96.1% do 99.9%). U sledećoj formi, reakcija proizvodi Jedinjenje Formule (I) koje ima %eeod najmanje oko 97%. U sledećoj formi, reakcija proizvodi Jedinjenje Formule (I) koje ima %eeveći od 97%
(npr., 97.1% do 99.9%).
Biće jasno da za pripremanje Jedinjenja Formule (I) mogu da se koriste alternativni metodi. Na primer, kako je pokazano na Šemi 18, jedinjenje formule 3 može da se doda jedinjenju formule 21 da se proizvede jedinjenje formule 27, npr., metodom iz koraka 2 Šeme 13, gde su Ri, R4, m i Pnkako je definisano gore.
Jedinjenje formule 27 se zatim dihidroksiliše, npr., metodom Šeme 4, Šema 6-10 ili Šeme 11, da se proizvede jedinjenje formule 28 kako je prikazano na šemi 19, gde su Ri, R4, m i Pnkako je definisano gore.
Na primer, reakcija prikazana na Šemi 19 može da se obavi na enantioselektivan način korišćenjem uslova reakcije opisanih na Šemi 4. Alternativno, racemski diol može da se pripremi metodima poznatim u struci korišćenjem osmijum tetroksida (OSO4) i /V-metil morfolin ./V-oksida (NMO) u vodenom rastvoru acetona.
Kako je prikazano na Šemi 20, Ri, R4, R«, R9, m, Pni L2su kako je definisano gore, jedinjenje formule 28 se deprotektuje viškom kiseline, npr., HC1, da se dobije jedinjenje formule 18, npr., metodom koraka 3 Šeme 13. Reakcija jedinjenja formule 18 sa jedinjenjem formule 26 u prisustvu baze (vidi, npr., Šeme 16 i 17) daje Jedinjenje Formule (I).
Napredovanje gornje reakcije/reakcija može se pratiti korišćenjem konvencionalnih analitičkih tehnika koje uključuju, ali se ne ograničavaju na tečnu hromatografiju pod visokim pritiskom (high pressure liquid chromatographa, HPLC), hromatografiju na koloni, tankoslojnu hromatografiju (thin-layer chromatography, TLC), gasnu hromatografiju (gas chromatography, GC), masenu spektrometriju (MS), ili spektroskopiju nuklearne magnetne rezonancije (NMR) kao 1 H NMR i 13C NMR. Jedinjenja Formule (I) mogu da se izoluju i dalje tretiraju, po želji. U jednoj formi, Jedinjenje Formule (I) se izoluje uklanjanjem rastvarača pod sniženim pritiskom. U drugoj formi, Jedinjenje Formule (I) se izoluje ekstrakcijom. Jedinjenja Formule (I) mogu da se dalje tretiraju na primer, hromatografijom na koloni ili rekristalizacijom. Pogodni aprotički organski rastvarači za upotrebu u metodima datim za ilustraciju uključuju, ali se ne ograničavaju na DCM, DMSO, hloroform, toluen, benzen, acetonitril, ugljenik tetrahlorid, pentan, heksan, ligroin, i dietil etar. U jednoj formi, aprotički organski rastvarač je DCM.
Jedan ili više atoma vodonika, ugljenika ili drugih atoma, Jedinjenja Formule (I) može biti zamenjeno izotopom vodonika, ugljenika ili drugog/drugih atoma. Takva jedinjenja koja su obuhvaćena objavom, korisna su, npr., kao istraživačka i dijagnostička sredstva u farmakokinetičkim studijama metabolizma i u testovima vezivanja.
4.5 Terapijska upotreba Jedinjenja Formule (I)
U skladu sa objavom, Jedinjenja Formule (I) primenjuju se kod životinje kojoj je to potrebno za lečenje ili prevenciju Stanja.
U jednoj formi, efikasna količina Jedinjenja Formule (I) može da se koristi za lečenje ili prevenciju svakog stanja koje može da se leči ili prevenira inhibiranjem TRPV1. Primeri Stanja koja mogu da se leče ili preveniraju inhibiranjem TRPV1 uključuju, ali se ne ograničavaju na bol, npr., bol udružen sa osteoartritisom, osteoartritis, UI, ulcer, IBD, i/ili IBS. Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se koriste za lečenje ili prevenciju akutnog ili hroničnog bola. Primeri bola koji može da se leči ili prevenira korišćenjem Jedinjenja Formule (I) uključuju, ali se ne ograničavaju na kancerski bol, neuropatski bol, porođajni bol, bol pri infarktu miokarda, pankreasni bol, bol pri kolikama, postoperativni bol, glavobolju, artritisni bol, i bol udružen sa periodontnom bolešću, uključujući gingivitis i perodontitis.
Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se koriste i za lečenje ili prevenciju bola udruženog sa zapaljenjem ili sa zapaljenskim bolestima kod životinje. Takav bol može nastati tamo gde postoji zapaljenje tkiva u telu, koje može predstavljati lokalni zapaljenski odgovor i/ili sistemsko zapaljenje. Na primer, Jedinjenja Formule (I) mogu da se koriste za lečenje ili prevenciju bola udruženog sa zapaljenskim oboljenjima koja uključuju, ali se ne ograničavaju na: odbacivanje transplantiranog organa; reoksigenacionu povredu koja nastaje kao rezultat transplantacije organa (vidi Gruppet al.,"Protection against Hypoxia-reoxygenation in the Absence of Poly (ADP-ribose) Synthetase in Isolated Working Hearts",J. Mol. Cell Cardiol.3J_:297-303 (1999)) uključujući, ali ne ograničavajući se na transplantaciju srca, pluća, jetre ili bubrega; hronična zapaljenska oboljenja zglobova uključujući artritis, reumatoidni artritis, osteoartritis i bolesti kostiju udruženih sa povećanom resorpcijom kosti; zapaljenske bolesti creva kao ileitis, ulcerativni kolitis, Barrett-ov sindrom i Crohn-ovu bolest; zapaljenske bolesti pluća kao astma, sindrom respiratornog distresa kod odraslih, i hronična opstruktivna bolest disajnih puteva; zapaljenske bolesti oka uključujući distrofiju komee, trahom, onhocercijazu, uveitis, simpatički oftalmitis, i endoftalmitis; hronične zapaljenske bolesti desni, uključujući gingivitis i periodontitis; tuberkulozu; lepru; zapaljenske bolesti bubrega uključujući uremijske komplikacije, glomerulonefritis i nefritis; zapaljenske bolesti kože uključujući sklerodermatitis, psorijazu i ekcem; zapaljenske bolesti centralnog nervnog sistema uključujući hronične demijelinizujuće bolesti nervnog sistema, multiplu sklerozu, neurodegeneraciju vezanu za AIDS i Alzheimer-ovu bolest, infektivni meningitis, encefalomijelitis, Parkinson-ovu bolest, Huntington-ovu bolest, amiotrofičnu lateralnu sklerozu i virusni ili autoimunski encefalitis; autoimunske bolesti uključujući dijabetes melitus tipa I i tipa II; dijabetične komplikacije, uključujući, ali ne ograničavajući se na dijabetičnu kataraktu, glaukom, retinopatiju, nefropatiju (kao mikroalbuminurija i progresivna dijabetična nefropatija), polineuropatiju, mononeuropatije, autonomnu neuropatiju, gangrenu stopala, aterosklerotsku koronarnu arterijsku bolest, perifernu arterijsku bolest, neketonsku hiperglikemijsku-hiperosmolarnu komu, ulceracije stopala, probleme sa stopalima i komplikacije kože i mukusnih membrana (kao što su infekcije, makulozne ospe na potkolenicama, infekcije kandidom ilinecrobiosis lipoidica diabeticorum) ;vaskulitis posredovan imunskim kompleksom i sistemski eritemski lupus (SLE); zapaljenske bolesti srca kao kardiomiopatija, ishemična bolest srca, hiperholesterolemija, i ateroskleroza; kao i različite druge bolesti koje mogu imati značajnu zapaljensku komponentu, uključujući preeklampsiju, hronično slabljenje jetre, traume mozga i kičmene moždine i kancer. Jedinjenja Formule (I) mogu da se koriste i za inhibiranje, lečenje ili prevenciju bola udruženog sa zapaljenskim bolestima koje mogu, na primer, biti sistemsko zapaljenje u telu, primer je šok usled infekcije gram-pozitivnim ili gram-negativnim bakterijama, hemoragijom ili anafilaktičkim šokom ili šokom izazvanim hemoterapijom kancera u odgovoru na proinflamatorne citokine, npr., šok udružen sa proinflamatornim citokinima. Takav šok može da se indukuje npr. hemoterapijskim sredstvom koje se daje za lečenje kancera.
Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se koriste i za lečenje ili prevenciju bola udruženog sa oštećenjem nerava (tj., neuropatskog bola). Hronični neuropatski bol je heterogeno bolesno stanje nejasne etiologije. U hroničnom neuropatskom bolu, bol može da bude posredovan većim brojem mehanizama. Ovaj tip bola obično nastaje usled povrede perifernog ili centralnog nervnog tkiva. Sindromi uključuju bol udružen sa povredom kičmene moždine, multiplom sklerozom, postherpesnu neuralgiju, trigeminusnu neuralgiju, fantomski bol, kauzalgiju i refleksnu simpatičku distrofiju i bol u donjem delu leđa. Hronični bol se razlikuje od akutnog bola po tome što pacijenti sa hroničnim neuropatskim bolom trpe nenormalne bolne senzacije koje mogu da se opišu kao spontani bol, kontinuirani površinski bol u vidu gorenja i/ili duboki tupi bol. Bol može da se pobudi termalnom (toplota, hladnoća) i mehano-hiperalgezijom ili termalnom (toplota, hladnoća) ili mehano-alodinijom. Hronični neuropatski bol može biti prouzrokovan povredom ili infekcijom perifernih senzornih nerava. On uključuje, ali se ne ograničava na bol usled traume perifernuh nerava, infekcije herpes virusom, dijabetesa melitusa, kauzalgije, avulzije pleksusa, neuroma, amputacije ekstremiteta i vaskulitisa. Neuropatski bol može biti prouzrokovan i oštećenjem nerava usled hroničnog alkoholizma, infekcije virusom humane imunodeficijencije, hipotiroidizma, uremije ili deficijencije vitamina. Udar (spinalni i moždani) i povreda kičmene moždine takođe mogu indukovati neuropatski bol. Neuropatski bol u vezi sa kancerom rezultat je rasta tumora, kompresije susednih nerava, mozga ili kičmene moždine. Pored toga, lečenje kancera, uključujući hemioterapiju i terapiju zračenjem, može izazvati oštećenje nerava. Neuropatski bol uključuje, ali se ne ograničava na bol izazvan povredom nerava kao, na primer, bol od kojeg pate dijabetičari.
Jedinjenja Formule (1) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se koriste i za lečenje ili prevenciju migrene, uključujući, ali ne ograničavajući se na migrenu bez aure ("obična migrena"), migrenu sa aurom ("klasična migrena"), migrenu bez glavobolje, bazilarnu migrenu, porodičnu hemiplegičnu migrenu, migrenozni infarkt i migrenu sa produženom aurom.
Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se koriste i za lečenje ili prevenciju bola udruženog sa osteoartritisom. Osteoartritis (OA), poznat i kao osteoartroza, degenerativni artritis ili degenerativno oboljenje zglobova, predstavlja grupu mehaničkih abnormalnosti koje podrazumevaju degradaciju zglobova, uključujući zglobnu hrskavicu i subhondralnu kost. Primeri OA koji se mogu lečiti ili prevenirati Jedinjenjima Formule (I) uključuju, ali se ne ograničavaju na bol u zglobovima, ukočenost zglobova, osetljivost zglobova, "zaključanost" zglobova i zglobnu efuziju.
Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se koriste i za lečenje ili prevenciju UI. Primeri UI koji mogu da se leče ili preveniraju Jedinjenjima Formule (I) uključuju, ali se ne ograničavaju na urgentnu inkontinenciju, stresnu inkontinenciju, prelivnu inkontinenciju, neurogenu inkontinenciju i potpunu inkontinenciju.
Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se koriste i za lečenje ili prevenciju ulcera. Primeri ulcera koji se mogu lečiti ili prevenirati korišćenjem Jedinjenja Formule (I) uključuju, ali se ne ograničavaju na ulcer duodenuma, želudačni ulcer, marginalni ulcer, ezofagealni ulcer ili stresni ulcer. Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se koriste i za lečenje ili prevenciju IBD, uključujući Crohn-ovu bolest i ulcerativni kolitis. Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se koriste i za lečenje ili prevenciju IBS. Primeri IBS koji se mogu lečiti ili prevenirati korišćenjem Jedinjenja Formule (I) uključuju, ali se ne ograničavaju na IBS tipa spastičkog kolona i konstipaciono-predominantni IBS.
Podnosioci veruju da su Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati antagonisti TRPVT. Objava se odnosi i na metode inhibiranja funkcije TRPV1 u ćeliji, koji uključuju dovođenje u kontakt ćelije koja eksprimira TRPV1 sa efikasnom količinom Jedinjenja Formule (I) ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata. Ovaj metod može da se koristiin vitro,na primer kao test za selektovanje ćelija koje eksprimiraju TRPVT i, prema tome, korisne su kao deo testa za selektovanje jedinjenja korisnih za lečenje ili preveniranje bola, npr., bola udruženog sa osteoartritisom, osteoartritisa, UI, ulcera, IBD ili IBS. Metod je takođe koristan za inhibiranje funkcije TRPV1 u ćelijamain vivo,u životinji, čoveku u jednoj formi, dovođenjem u kontakt ćelije, na primer u životinji, sa efikasnom količinom Jedinjenja Formule (I) ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata. U jednoj formi, metod je koristan za lečenje ili prevenciju bola kod životinje. U drugoj formi, metod je koristan za lečenje ili prevenciju UI kod životinje. U sledećoj formi, metod je koristan za lečenje ili prevenciju ulcera kod životinje. U sledećoj formi, metod je koristan za lečenje ili prevenciju IBD kod životinje. U sledećoj formi, metod je koristan za lečenje ili prevenciju IBS kod životinje.
Primeri tkiva koja sadrže ćelije sposobne da eksprimiraju TRPVT uključuju, ali se ne ograničavaju na nervno tkivo, mozak, bubreg, urotel i tkivo mokraćne bešike. Metodi testiranja ćelija koje eksprimiraju TRPV1 poznati su u struci.
4. 6 Terapijska/profilaktička primena i smeše objave
Zbog svoje aktivnosti, Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati su pogodni za korišćenje u veterinarskoj i humanoj medicini. Kako je gore opisano, Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati korisni su za lečenje ili prevenciju Stanja.
Kada se daju životinji, Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati se, u jednoj formi, daju kao komponente smeše koja uključuje farmaceutski prihvatljivi nosač ili ekscipijent. Smeše koje sadrže Jedinjenja Formule (1) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se primene oralnim putem. Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se primene i bilo kojim drugim pogodnim putem, na primer, infuzijom ili bolusnom injekcijom, apsorpcijom preko epitelnog ili mukokutanog omotača (npr., oralna, rektalna ili crevna mukoza, itd.) i mogu da se daju zajedno sa drugim terapijski aktivnim sredstvom. Primena može biti sistemska ili lokalna. Poznati su različiti dostavni sistemi, npr., inkapsuliranje u lipozome, mikročestice, mikrokapsule, kapsule, itd., i oni mogu da se koriste za primenu Jedinjenja Formule (I) ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata.
Metodi primene uključuju, ali se ne ograničavaju na intradermalnu, intramuskularnu, intraperitonealnu, intravensku, subkutanu, intranazalnu, epiduralnu, sublingvalnu, intracerebralnu, intravaginalnu, transdermalnu, rektalnu, inhalacionu ili površinsku, posebno u uvo, nos, oko ili na kožu. Odluka o načinu primene prepušta se stručnjaku. U većini slučajeva, rezultat primene će biti oslobađanje Jedinjenja Formule (I) ili njihovih farmaceutski prihvatljivih derivata u krvotok. U specifičnim formama, može biti poželjna lokalna primena Jedinjenja Formule (I) ili njihovih farmaceutski prihvatljivih derivata. Ona može da se ostvari, na primer i bez ograničavanja, lokalnom infuzijom tokom hirurške intervencije, površinskim nanošenjem, npr., zajedno sa oblogom na rani posle hirurške intervencije, injekcijom, kateterom, supozitorijom ili enemom, ili implantom, pomenuti implant je porozan, neporozan ili želatinozni materijal, uključujući membrane, kao što su elastične membrane ili vlakna.
U određenim formama može biti poželjno da se Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati uvedu u centralni nervni sistem ili gastrointestinalni trakt, bilo kojim pogodnim putem uključujući intraventrikularno, intratekalno i epiduralno injektiranje ili enemu. Intraventrikularno injektiranje može da se olakša intraventrikularnim kateterom, na primer, prikačenim za rezervoar, na primer, Ommava rezervoar. Može da se koristi i primena preko pluća, npr., upotrebom inhalatora ili nebulizera, i formulacija sa aerosolubilizujućim sredstvom, ili perfuzijom u fluorokarbonskom ili sintetskom plućnom surfaktantu. U odeđenim formama, Jedinjenja Formule (I) mogu da se formulišu kao supozitorije, sa tradicionalnim povezivačima i ekscipijentima kao što su trigliceridi. U sledećoj formi, Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se dostave u vezikuli, tačnije, u lipozomu (vidi Langer, "Nevv Methods of Drug Deliverv",Science249:1527-1533 (1999); Lopez-Berestein, "Treatment of Svstemic Fungal Infection with Liposomal Amphotericin B",Liposomes in the Therapy of Infectious Diseases and Cancer,pp. 317-327 (1989); i Treatet al.,"Liposome encapsulated doxorubucin - preliminarv results of phase I and phase II trials",Liposomes in the Therapy of Infectious Diseases and Cancer.pp. 353-365 (1989).
U još jednoj formi, Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se dostave u sistemu za kontrolisano oslobađanje ili sistemu za produženo oslobađanje (vidi npr., Goodson, "Dental Application", pp. 115-138 uMedical Applications of Controlled Release, Vol. 2, Applications and Evaluation,Langer and Wise, eds., CRC Press (1984), kasnije u ovom tekstu "Goodson"). Mogu da se koriste drugi sistemi za kontrolisano ili produženo oslobađanje razmatrani u preglednom radu Langer,Science249:1527-1533 (1990). U jednoj formi, može da se koristi pumpa (Langer,Science249:1527-1533 (1990); Sefton, "Implantable Pumps", uCRC Crit. Rev. Biomed. Eng.14(3):201-240 (1987); Buchvvaldet al.,"Long-term, Continuous Intravenous Heparin Administration by an Implantable Infusion Pump in Ambulatory Patients with Recurrent Venous Thrombosis",Surgery88:507-516 (1980); i Saudeket al.,"A Preliminary Trial of the Programmable Implantable Medication System for Insulin Delivery",New Engl. J. Med.321:574-579 (1989)). U sledećoj formi, mogu da se koriste polimerni materijali (vidi, Goodson; Smolenet al.,"Drug Products Design and Performance",Controlled Drug Bioavailability Vol. 1,John Wiley & Sons, New York (1984); Langeret al.,"Chemical and Physical Structure of Polymers as Carriers for Controlled Release of Bioactive agents: A Revievv",J. Macromol. Sci. Rev. Macromol. Chem.C23(l):61-126 (1983); Lcvyet al.,"Inhibition of Calcification of Bioprosthetic Heart Valves by Local Controlled-Release Diphoshponate",Science228:190-192 (1985); Duringet al.,"Controlled Release of Dopamine from a Polymeric Brain Implant:In VivoCharacterization",Ann. Neurol.25:351-356 (1989); i Howardet al,"Intracerebral drug delivery in rats with lesion-induced memory deficit",/. Neurosurg.71:105 (1989)). U još jednoj formi, sistem za kontrolisano ili produženo oslobađanje može da se postavi blizu cilja Jedinjenja Formule (I), npr., kičmenog stuba, mozga, ili gastrointestinalnog trakta, posle čega postoji potreba za samo delom sistemske doze.
Smeše mogu opciono sadržati pogodnu količinu farmaceutski prihvatljivog ekscipijenta kako bi se obezbedio oblik za pravilnu primenu kod životinje. Takav farmaceutski ekscipijent može da bude razblaživač, suspendujuće sredstvo, solubilizer, povezivač, dezintegrišuće sredstvo, prezervans, sredstvo za bojenje, lubrikant i slično. Farmaceutski ekscipijent može da bude tečan, na primer vodeni ili uljani, uključujući one koji su petrolejskog, životinjskog, biljnog ili sintetskog porekla, kao ulje kikirikija, ulje soje, mineralno ulje, susamovo ulje i slično. Farmaceutski ekscipijent može da bude slani rastvor, akacijina guma, želatin, škrobna pasta, talk, keratin, koloidni silicijum, urea i slično. Pored toga, mogu da se koriste i pomoćne supstance, stabilišuća sredstva, sredstva za zgušnjavanje, lubrikantska sredstva i sredstva za bojenje. U jednoj formi, farmaceutski prihvatljivi ekscipijent je sterilan kada se daje životinji. Voda je posebno korisna kao ekscipijent kada se Jedinjenja Formule (I) primenjuje intravenski. Slani rastvori i vodeni rastvori dekstroze i glicerola takođe mogu da se koriste kao tečni ekscipijenti, posebno za injektabilne rastvore. Pogodni farmaceutski ekscipijenti uključuju i škrob, glukozu, laktozu, saharozu, želatin, slad, pirinač, brašno, kredu, silika-gel, natrijum stearat, glicerol monostearat, talk, natrijum hlorid, sušeno obrano mleko, glicerol, propilen glikol, vodu, etanol i slično. Smeše, po želji, mogu sadržati i male količine vlažećih ili emulgujućih sredstava, ili pH-puferišućih sredstava. Specifični primeri farmaceutski prihvatljivih nosača i ekscipijenata koji mogu da se koriste za formulisanje oralnih doznih formi opisani su uHandbook of Pharmaceutical Excipients,(Amer. Pharmaceutical Ass'n, Washington, DC, 1986).
Smeše mogu imati oblik rastvora, suspenzije, emulzije, tableta, pilula, peleta, multičestica, kapsula, kapsula koje sadrže tečnosti, praškova, multičestica, formulacija sa produženim oslobađanjem, supozitorija, emulzija, aerosola, sprejeva, suspenzija, ili bilo koji drugi oblik pogodan za upotrebu. U jednoj formi, smeša je u obliku kapsule (vidi, npr., U.S. Patent No. 5,698,155). Drugi primeri pogodnih farmaceutskih ekscipijenata opisani su u Radeboughet al.,"Preformulation", pp. 1447-1676 uRemington' s Pharmaceutical Sciences Vol 2(Gennaro, ed. 19<th>ed., Mack Publishing, Easton, PA, 1995).
U jednoj formi, Jedinjenja Formule (I) formulišu se, u skladu sa rutinskim postupcima, kao smeše prilagođene za primenu oralnim putem kod ljudi. Jedinjenje Formule (I) koje se dostavlja oralnim putem može da bude u obliku tableta, kapsula, želatinskih kapsula, kapleta, lozengi, vodenih ili uljanih rastvora, suspenzija, granula, praškova, emulzija, sirupa ili eliksira na primer. Kada je Jedinjenja Formule (I) ugrađeno u oralne tablete, takve tablete mogu da budu komprimovane, tabletni triturati, enteroobložene, šećerom obložene, filmom obložene, višestruko komprimovane ili višeslojne. Tehnike i smeše za spravljanje čvrstih oralnih doznih formi opisane su uPharmaceutical Dosage Forms: Tablets(Liebermanet al,eđs., 2<nd>ed., Macel Dekker, Inc., 1989 &1990). Tehnike i smeše za spravljanje tableta (komprimovanih i ukalupljenih), kapsula (tvrdih i mekih želatinskih) i pilula opisane su i u Kong, "Tablets, Capsules and Pills"., pp. 1553-1593 uRemington' s Pharmaceutical Sciences(Osol, ed. 16<lh>ed., Mack Publishing, Easton, PA, 1980).
Tečne oralne dozne forme uključuju vodene i nevodene rastvore, emulzije, suspenzije i rastvore i/ili suspenzije rekonstituisane iz neefervescentnih granula, koje opciono sadrže jedan ili više pogodnih rastvarača, prezervansa, emulgujućih sredstava, suspendujućih sredstava, razblaživača, zaslađivača, sredstava za bojenje, sredstava za poboljšanje ukusa i slično. Tehnike i smeše za spravljanje tečnih oralnih doznih formi opisane su uPharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems(Liebermanet al,eds., 2<nd>ed., Macel Dekker, Inc., 1996 &1998).
Kada Jedinjenje Formule (I) treba da se injektira parenteralno, ono može da bude, npr., u vidu izotoničnog sterilnog rastvora. Alternativno, kada Jedinjenje Formule (I) treba da se inhalira, ono može da bude formulisano u suvi aerosol ili može da bude formulisano u vodeni ili delimično vodeni rastvor.
Oralno primenjeno Jedinjenje Formule (I) može da sadrži jedno ili više sredstava, na primer, sredstva za zaslađivanje kao što su fruktoza, aspartam ili saharin; sredstva za poboljšanje ukusa kao što su pepcrmint, ulje zimzelena ili višnja; sredstva za bojenje; i prezervirajuća sredstva, da bi se obezbedio farmaceutski ukusan preparat. Pored toga, kada je tableta u vidu pilule, smeše mogu da budu obložene da bi se dezintegracija i apsorpcija u gastrointestinalnom traktu odložile i tako obezbedilo delovanje koje se održava tokom dužeg vremenskog perioda. Selektivno permeabilne membrane koje okružuju osmotski aktivno pokretačko jedinjenje takođe su pogodne za smeše koje se daju orlanim putem. U ovim drugim platformama, pokretačko jedinjenje imbibira tečnost iz sredine koja okružuje kapsulu, bubri i izmešta sredstvo ili smešu sredstva kroz aperturu. Ove dostavne platforme mogu da obezbede sušstinski nulti red dostavnog profila što je suprotno impulsnim profilima formulacija sa trenutnim oslobađanjem. Može da se koristi i materijal za vremensko odlaganje, kao glicerol monostearat ili glicerol stearat. Oralne smeše mogu uključivati standardne ekscipijente kao što su manitol, laktoza, škrob, magnezijum stearat, natrijum saharin, celuloza i magnezijum karbonat. U jednoj formi, ekscipijenti su farmaceutskog stepena čistoće.
U sledećoj formi, Jedinjenja Formule (I) mogu da se formulišu za intravensku primenu. U jednoj formi, smeše za intravensku primenu sadrže sterilni izotonični vodeni pufer. Po potrebi, smeše mogu uključivati i solubilizujuće sredstvo. Jedinjenje Formule (I) za intravensku primenu može opciono uključivati lokalni anestetik kao benzokain ili prilokain, da bi se smanjio bol na mestu injekcije. Obično, sastojci su dati ili zasebno ili pomešani u jediničnoj doznoj formi, na primer, u vidu suvog liofilisanog praha ili bezvodnog koncentrata u hermetički zatvorenom kontejneru kao što je ampula ili saket, sa naznačenom količinom aktivnog sredstva. Kada Jedinjenje Formule (I) treba da se primeni infuzijom, ono može da se dispenzuje, na primer, u infuzionoj boci koja sadrži sterilnu vodu ili slani rastvor farmaceutskog stepena čistoće. Kada se Jedinjenje Formule (I) primenjuje u vidu injekcije, može se obezbediti ampula sterilne vode za injekcije ili slanog rastvora, da bi sastojci mogli da se pomešaju pre primene. Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se primenjuju putem kontrolisanog oslobađanja ili produženog oslobađanja ili uređajima za dostavu koji su poznati uobičajeno obučenim stručnjacima u oblasti. Primeri uključuju, ali se ne ograničavaju na one koji su opisani u U.S. Patent No. 3,845,770; 3,916,899; 3,536,809; 3,598,123; 4,008,719; 5,674,533; 5,059,595; 5,591,767; 5,120,548; 5,073,543; 5,639,476; 5,354,556 i 5,733,566. Takve dozne forme mogu da se koriste za obezbeđivanje kontrolisanog ili produženog oslobađanja jednog ili više aktivnih sastojaka korišćenjem, na primer, hidropropilmetil celuloze, etilceluloze, drugih polimernih matriksa, gelova, permeabilnih membrana, osmotskih sistema, višeslojnih omotača, mikročestica, lipozoma, mikrosfera, ili njihove kombinacije, da bi se obezbedio željeni profil oslobađanja u različitim proporcijama. Pogodne formulacije sa kontrolisanim ili produženim oslobađanjem poznate su uobičajeno obučenim stručnjacima u oblasti i uključuju one koje su ovde opisane i mogu se lako odabrati za upotrebu sa aktivnim sastojcima objave. Objava prema tome obuhvata jedinične dozne forme pogodne za oralnu primenu kao što su, bez ograničavanje, tablete, kapsule, želatinozne kapsule i kapleti koji su prilagođeni za kontrolisano ili produženo oslobađanje.
Farmaceutskle smeše sa kontrolisanim ili produženim oslobađanjem mogu kao zajednički cilj imati poboljšanje lečenja lekom u odnosu na ono što se postiže njihovim parnjacima koji nisu sa kontrolisanim ili produženim oslobađanjem. U jednoj formi, smeša sa kontrolisanim ili produženim oslobađanjem sadrži minimalnu količinu Jedinjenja Formule (I) za lečenje ili kontrolu stanja u minimalnoj količini vremena. Prednost smeša sa kontrolisanim ili produženim oslobađanjem uključuju produženu aktivnost leka, smanjenu učestalost doziranja i povećanu saradljivost pacijenta. Pored toga, smeše sa kontrolisanim ili produženim oslobađanjem mogu pogodno uticati na vreme otpočinjanja dejstva ili druge karakteristike, kao što su nivo u krvi Jedinjenja Formule (I), i tako mogu smanjiti pojavu neželjenih sporednih efekata.
Smeše sa kontrolisanim ili produženim oslobađanjem mogu da se dizajniraju tako da odmah oslobode količinu Jedinjenja Formule (I), ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata, koja će odmah proizvesti željeni terapijski ili profilaktički efekat, i da postepeno i kontinuirano oslobađaju preostalu količinu Jedinjenja Formule (I) za održavanje nivoa terapijskog ili profilaktičkog efekta tokom produženog vremenskog perioda. Da bi se održao konstantni nivo Jedinjenja Formule (I) u telu, Jedinjenje Formule (I) može da sc oslobađa iz dozne forme brzinom kojom će zameniti količinu Jedinjenja Formule (I) koja se metabolisala i izlučila iz tela. Kontrolisano ili produženo oslobađanje aktivnog sastojka može da se stimuliše različitim uslovima, uključujući, ali ne ograničavajući se na promene pH, promene temperature, koncentracije ili raspoloživosti enzima, koncentracije ili raspoloživosti vode, ili drugih fizioloških uslova ili jedinjenja. Količina Jedinjenja Formule (I), ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata, koja je efikasna u lečenju ili prevenciji Stanja može da se odredi standardnim kliničkim tehnikama. Pored toga,in vitroiliin vivotestovi mogu opciono da se koriste da bi se pomoglo u određivanju optimalnih doznih opsega. Precizna doza koja će se upotrebiti zavisiće i od puta primene, i od ozbiljnosti Stanja, i o njoj može da se odluči na osnovu procene praktičara i/ili za svaku životinju pojedinačno. Pogodne efikasne dozne količine međutim, u jednoj formi biće u opsegu od oko 0.01 mg/kg telesne težine do oko 2500 mg/kg telesne težine, iako su one u drugoj formi oko 100 mg/kg telesne težine ili manje. U jednoj formi, efikasna dozna količina u opsegu je od oko 0.01 mg/kg telesne težine do okolOO mg/kg telesne težine Jedinjenja Formule (I); u drugoj formi, oko 0.02 mg/kg telesne težine do oko 50 mg/kg telesne težine; i u sledećoj formi, oko 0.025 mg/kg telesne težine do oko 20 mg/kg telesne težine.
U jednoj formi, efikasna dozna količina primenjuje se na svakih oko 24 h, do ublažavanja Stanja. U drugoj formi, efikasna dozna količina primenjuje se na svakih oko 12 h, do ublažavanja Stanja. U sledećoj formi, efikasna dozna količina primenjuje se na svakih oko 8 h, do ublažavanja Stanja. U sledećoj formi, efikasna dozna količina primenjuje se na svakih oko 6 h, do ublažavanja Stanja. U sledećoj formi, efikasna dozna količina primenjuje se na svaka oko 4 h, do ublažavanja Stanja.
Efikasne dozne količine opisane u ovom tekstu odnose se na ukupne primenjene količine; to znači, ako se primenjuje više od jednog Jedinjenja Formule (I), ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata, efikasne dozne količine odgovaraju ukupnoj primenjenoj količini.
Kada je ćelija koja može da eksprimira TRPV1 u kontaktu sa Jedinjenjem Formule (I)in vitro,količina efikasna za inhibiranje funkcije TRPV1 receptora u ćeliji biće u opsegu od oko 0.01 u.g/1 do oko 5 mg/l; u jednoj formi, od oko 0.01 ug/1 do oko 2.5 mg/l; u drugoj formi, od oko 0.01 ug/1 do oko 0.5 mg/l; i u sledećoj formi, od oko 0.01 ug/1 do oko 0.25 mg/l rastvora ili suspenzije farmaceutski prihvatljivog nosača ili ekscipijenta. U jednoj formi, zapremina rastvora ili suspenzije koji sadrže Jedinjenje Formule (I), ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat je od oko 0.01 ul do oko 1 ml. U sledećoj formi zapremina rastvora ili suspenzije je oko 200 ul.
Jedinjenja Formule (I) ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati mogu da se, pre upotrebe kod ljudi, testirajuin vitrou pogledu željene terapijske ili profilaktičke aktivnosti. Za pokazivanje bezbednosti ili efikasnosti mogu da se koriste životinjski model-sistemi.
In vitrometodi inhibiranja funkcije TRPV1 u ćeliji sposobnoj da eksprimira TRPV1 mogu uključivati još i dovođenje u kontakt ćelije sa efikasnom količinom drugog terapijskog sredstva.
Efikasna količina drugog terapijskog sredstva/sredstava biće poznata stručnjacima u oblasti, zavisno od sredstva. Međutim u nadležnosti je obučenog stručnjaka da odredi optimalan opseg količine drugog terapijskog sredstva. Jedinjenje Formule (I) i drugo terapijsko srdstvo u kombinaciji mogu da deluju aditivno ili sinergistički u lečenju istog Stanja, ili mogu da deluju nezavisno jedan od drugoga, tako da Jedinjenje Formule (I) leči ili prevenira prvo Stanje, a drugo terapijsko sredstvo leči ili prevenira drugi poremećaj koji može biti isti kao prvo Stanje, ili drugi poremećaj. U jednoj formi objave, kada se drugo terapijsko sredstvo primenjuje kod životinje za lečenje Stanja (npr., bola), minimalna efikasna količina Jedinjenja Formule (I) biće manja nego što bi bila minimalna efikasna količina da se ne primenjuje drugo terapijsko sredstvo. U ovoj formi, Jedinjenje Formule (I) i drugo terapijsko sredstvo mogu da deluju sinergistički u lečenju ili prevenciji Stanja. U jednoj formi, Jedinjenje Formule (I) daje se istovremeno sa drugim terapijskim sredstvom u vidu jedne smeše koja sadrži efikasnu količinu Jedinjenja Formule (I) i efikasnu količinu drugog terapijskog sredstva. Alternativno, smeša koja sadrži efikasnu količinu Jedinjenja Formule (I) i druga smeša koja sadrži efikasnu količinu drugog terapijskog sredstva primenjuju se istovremeno. U sledećoj formi, efikasna količina Jedinjenja Formule (1) primenjuje se pre ili posle primene efikasne količine drugog terapisjkog sredstva. U ovoj formi, Jedinjenje Formule (I) se primenjuje dok drugo terapijsko sredstvo ispoljava svoj terapijski efekat, ili se drugo terapijsko sredstvo primenjuje dok Jedinjenje Formule (I) ispoljava svoj terapijski efekat u lečenju ili prevenciji Stanja.
Drugo terapijsko sredstvo može biti, bez ograničavanja, opioidni agonist, neopioidni analgetik, nesteroidno antiinflamatorno sredstvo, sredstvo protiv migrene, inhibitor
Cox-II, antiemetik, |3-adrenergički blokator, antikonvulziv, antidepresiv, blokator Ca<2+>" kanala, antikancersko sredstvo, sredstvo za lečenje ili prevenciju UI, sredstvo za lečenje ili prevenciju ulcera, sredstvo za lečenje ili prevenciju IBD, sredstvo za lečenje ili prevenciju IBS, sredstvo za lečenje poremećaja zavisnosti, sredstvo za lečenje Parkinson-ove bolesti i parkinsonizma, sredstvo za lečenje anksioznosti, sredstvo za lečenje epilepsije, sredstvo za lečenje sloga, sredstvo za lečenje napada, sredstvo za lečenje pruritusnih stanja, sredstvo za lečenje psihoze, sredstvo za lečenje Huntington-ove horeje, sredstvo za lečenje ALS, sredstvo za lečenje kognitivnog poremećaja, sredstvo za lečenje migrene, sredstvo za lečenje povraćanja, sredstvo za lečenje diskinezije, sredstvo za lečenje depresije, farmaceutski prihvatljivi derivat istog ili bilo koja njihova kombinacija. Primeri korisnih opioidnih agonista uključuju, ali se ne ograničavaju na alfentanil, alilprodin, alfaprodin, anileridin, benzilmorfin, bezitramid, buprenorfin, butorfanol, klonitazen, kodein, dezomorfin, dekstromoramid, dezocin, diampromid, diamorfon, dihidrokodein, dihidromorfin, dimenoksadol, dimefeptanol, dimetiltiambuten, dioksafetil butirat, dipipanon, eptazocin, etoheptazin, etilmetiltiambuten, etilmorfin, etonitazen, fentanil, heroin, hidrokodon, hidromorfon, hidroksipetidin, izometadon, ketobemidon, levorfanol, levofenacilmorfan, lofentanil, meperidin, meptazinol, metazocin, metadon, metopon, morfin, mirofin, nalbufin, narcein, nikomorfin, norlevorfanol, normetadon, nalorfin, normorfin, norpipanon, opijum, oksikodon, oksimorfon, papaveretum, pentazocin, fenadokson, fenomorfan, fenazocin, fenoperidin, piminodin, piritramid, proheptazin, promedol, properidin, propiram, propoksifen, sufentanil, tilidin, tramadol, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu kombinaciju.
U određenim formama, opioidni agonist je kodein, hidromorfon, hidrokodon, oksikodon, dihidrokodein, dihidromorfin, morfin, tramadol, oksimorfon, njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati ili bilo koja njihova kombinacija.
Primeri korisnih neopioidnih analgetika uključuju, ali se ne ograničavaju na nesteroidna antizapaljenska sredstva, na primer, aspirin, ibuprofen, diklofenak, naproksen, benoksaprofen, flurbiprofen, fenoprofen, flubufen, ketoprofen, indoprofen, piroprofen, karprofen, oksaprozin, pramoprofen, muroprofen, trioksaprofen, suprofen, aminoprofen, tiaprofenska kiselina, fluprofen, bukloksična kiselina, indometacin, sulindak, tolmetin, zomepirak, tiopinak, zidometacin, acemetacin, fentiazak, klidanak, okspinak, mefenaminska kiselina, meklofenaminska kiselina, flufenaminska kiselina, nifluminska kiselina, tolfenaminska kiselina, diflurizal, flufenizal, piroksikam, sudoksikam, izoksikam, njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati ili bilo koja njihova kombinacija. Drugi pogodni neopioidni analgetici uključuju sledeće neograničavajuće hemijske klase analgetika, antipiretika, ncstcroidnih antizapaljenskih lekova: derivate salicilne kiseline, uključujući aspirin, natrijum salicilat, holin magnezijum trisalicilat, salsalat, diflunizal, salicilsalicilnu kiselinu, sulfasalazin, i olsalazin; derivate para-aminofenola uključujući acetaminofen i fenacetin; indol i inden sirćetne kiseline uključujući indometacin, sulindak, i etodolak; heteroaril sirćetne kiseline, uključujući tolmetin, diklofenak, i ketorolak; antranilne kiseline (fenamate), uključujući mefenaminsku kiselinu i meklofenaminsku kiselinu; enolne kiseline, uključujući oksikame (piroksikam, tenoksikam), i pirazolidindione (fenilbutazon, oksifentartazon); alkanone, uključujući nabumeton; njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu kombinaciju.
Za detaljniji opis NS AID, vidi Insel, "Analgesic, Antipvretic and Anti-Inflammatory Agents and Drugs Employed in the Treatment of Gout", pp. 617-657 uGoodman & Gilman' s The Pharmacological Basis of Therapeutics(Goodmanet al.,Eds., 9<th>Ed., McGeaw-Hill, New York, 1996), i Hanson, "Analgesic, Antipyretic and Anti-Inflammatory Drugs", pp. 1196-1221 uRemington: The Science and Practice of Pharmacy Vol 2(Gennaro, ed., 19<th>ed., Mack Publishing, Easton, PA, 1995).
Primeri korisnih sredstava protiv migrene uključuju, ali se ne ograničavaju na alpiroprid, bromokriptin, dihidroergotamin, dolasetron, ergokornin, ergokorninin, ergokriptin, ergonovin, ergot, ergotamin, flumedrokson acetat, fonazin, ketanserin, lisurid, lomerizin, metilergonovin, metisergid, metoprolol, naratriptan, oksetoron, pizotilin, propranolol, risperidon, rizatriptan, sumatriptan, timolol, trazodon, zolmitriptan, njihovei farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu kombinaciju.
Primeri korisnih inhibitora Cox-II i inhibitora 5-lipooksigenaze kao i njihove kombinacije opisani su u U.S. Patent No.6,136,839. Primeri korisnih inhibitora Cox-II uključuju, ali se ne ograničavaju na celekoksib, DUP-697, flosulid, meloksikam, 6-MNA, L-745337, rofekoksib, nabumeton, nimesulid, NS-398, SC-5766, T-614, L-768277, GR-253035, JTE-522, RS-57067-000, SC-58125, SC078, PD-138387, NS-398, flosulid, D-1367, SC-5766, PD-164387, etorikoksib, valdekoksib, parekoksib, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu kombinaciju.
Drugo terapijsko sredstvo može da bude i sredstvo korisno za smanjenje sporednih efekata Jedinjenje Formule (I). Na primer, drugo terapijsko sredstvo može da bude antiemetičko sredstvo. Primeri korisnih antiemetičkih sredstava uključuju, ali se ne ograničavaju na metoklopromid, domperidon, prohlorperazin, prometazin, hlorpromazin, trimetobenzamid, ondansetron, granisetron, hidroksizin, acetilleucin, monoetanolamin, alizaprid, azasetron, benzhinamid, bietanautin, bromoprid, buklizin, kleboprid, ciklizin, dimenhidrinat, difenidol, dolasetron, meklizin, metalatal, metopimazin, nabilon, oksiperndil, pipamazin, skopolamin, sulpirid, tetrahidrokanabinol, tietilperazin, tioproperazin, tropisetron, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu kombinaciju.
Primeri korisnih p-adrenergičkih blokatora uključuju, ali se ne ograničavaju na acebutolol, alprenolol, amosulabol, arotinolol, atenolol, befunolol, betaksolol, bevantolol, bisoprolol, bopindolol, bukumolol, bufetolol, bufuralol, bunitrolol, bupranolol, butidrin hidrohlorid, butofilolol, karazolol, karteolol, karvedilol, celiprolol, cetamolol, kloranolol, dilevalol, epanolol, esmolol, indenolol, labetalol, levobunolol, mepindolol, metipranolol, metoprolol, moprolol, nadolol, nadoksolol, nebivalol, nifenalol, nipradilol, oksprenolol, penbutolol, pindolol, praktolol, pronetalol, propranolol, sotalol, sulfinalol, talinolol, tertatolol, tilisolol, timolol, toliprolol, ksibenolol, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu. Primeri korisnih antikonvulzanata uključuju, ali se ne ograničavaju na acetilfeneturid, albutoin, aloksidon, aminoglutetimid, 4-amino-3-hidroksibuternu kiselinu, atrolaktamid, beklamid, buramat, kalcij um bromid, karbamazepin, cinromid, klometiazol, klonazepam, decimemid, dietadion, dimetadion, doksenitroin, eterobarb, etadion, etosuksimid, etotoin, felbamat, fluorezon, gabapentin, 5-hidroksitriptofan, lamotrigin, magnezijum bromid, magnezijum sulfat, mefenitoin, mefobarbital, metarbital, metetoin, metsuksimid, 5-metil-5-(3-fenantril)-hidantoin, 3-metil-5-fenilhidantoin, narkobarbital, nimetazepam, nitrazepam, okskarbazepin, parametadion, fenacemid, fenetarbital, feneturid, fenobarbital, fensuksimid, fenilmetilbarbiturnu kiselinu, fenitoin, fetenilat natrijum, kalijum bromid, pregabalin, primidon, progabid, natrijum bromid, solanum, stroncij um bromid, suklofenid, sultiam, tetrantoin, tiagabin, topiramat, trimetadion, valproinsku kiselinu, valpromid, vigabatrin, zonisamid, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih antidepresiva uključuju, ali se ne ograničavaju na binedalin, karoksazon, citalopram, (S)-citalopram, dimetazan, fenkamin, indalpin, indeloksazin hidrohlorid, nefopam, nomifensin, oksitriptan, oksipertin, paroksetin, sertralin, tiazesim, trazodon, benmoksin, iproklozid, iproniazid, izokarboksazid, nialamid, oktamoksin, fenelzin, kotinin, roliciprin, rolipram, maprotilin, metralindol, mianserin, mirtazepin, adinazolam, amitriptilin, amitriptilinoksid, amoksapin, butriptilin, klomipramin, demeksiptilin, desipramin, dibenzepin, dimetakrin, dotiepin, doksepin, fluacizin, imipramin, imipramin N-oksid, iprindol, lofepramin, melitracen, metapramin, nortriptilin, noksiptilin, opipramol, pizotilin, propizepin, protriptilin, hinupramin, tianeptin, trimipramin, adrafinil, benaktizin, bupropion, butacetin, dioksadrol, duloksetin, etoperidon, febarbamat, femoksetin, fenpentadiol, fluoksetin, fluvoksamin, hematoporfirin, hipericin, levofacetoperan, medifoksamin, milnacipran, minaprin, moklobemid, nefazodon, oksaflozan, piberalin, prolintan, pirisukcideanol, ritanserin, roksindol, rubidijum hlorid, sulpirid, tandospiron, tozalinon, tofenacin, toloksaton, tranilcipromin, L-triptofan, venlafaksin, viloksazin, zimeldin, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih blokatora Ca -kanala uključuju, ali se ne ograničavaju na bepridil, klentiazem, diltiazem, fendilin, galopamil, mibefradil, prenilamin, semotiadil, terodilin, verapamil, amlodipin, aranidipin, barnidipin, benidipin, cilnidipin, efonidipin, elgodipin, felodipin, isradipin, lacidipin, lerkanidipin, manidipin, nikardipin, nifedipin, nilvadipin, nimodipin, nisoldipin, nitrendipin, cinarizin, flunarizin, lidoflazin, lomerizin, benciklan, etafenon, fantofaron, perheksilin, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih antikancerskih sredstava uključuju, ali se ne ograničavaju na acivicin, aklarubicin, akodazol hidrohlorid, akronin, adozelesin, aldesleukin, altretamin, ambomicin, ametantron acetat, aminoglutetimid, amsakrin, anastrozol, antramicin, asparaginazu, asperlin, azacitidin, azetepa, azotomicin, batimastat, benzodepa, bikalutamid, bisantren hidrohlorid, bisnafid dimezilat, bizelesin, bleomicin sulfat, brekvinar natrijum, bropirimin, busulfan, kaktinomicin, kalusteron, karacemid, karbetimer, karboplatin, karmustin, karubicin hidrohlorid, karzelesin, cedefingol, hlorambucil, cirolemicin, cisplatin, kladribin, krisnatol mezilat, ciklofosfamid, citarabin, dakarbazin, daktinomicin, daunorubicin hidrohlorid, decitabin, deksormaplatin, dezaguanin, dezaguanin mezilat, diazikvon, docetaksel, doksorubicin, doksorubicin hidrohlorid, droloksifen, droloksifen citrat, dromostanolon propionat, duazomicin, edatreksat, eflornitin hidrohlorid, elsamitrucin, enloplatin, enpromat, epipropidin, epirubicin hidrohlorid, erbulozol, esorubicin hidrohlorid, estramustin, astramustin fosfat natrijum, etanidazol, etopozid, etopozid fosfat, etoprin, fadrozol hidrohlorid, fazarabin, fenretinid, floksuridin, fludarabin fosfat, fluorouracil, flurocitabin, foskvidon, fostriecin natrijum, gemcitabin, gemcitabin hidrohlorid, hidroksiureu, idarubicin hidrohlorid, ifosfamid, ilmofosin, interleukin II (uključujući rekombinantni interleukin II ili rIL2), interferon alfa-2a, interferon alfa-2b, interferon alfa-nl, interferon alfa-n3, interferon beta-Ia, interferon gama-Ib, iproplatin, irinotekan hidrohlorid, lanreotid acetat, letrozol, leuprolid acetat, liarozol hidrohlorid, lometreksol natrijum, lomustin, losoksantron hidrohlorid, masoprokol, majtanzin, mehloretamin hidrohlorid, megestrol acetat, melengestrol acetat, melfalan, menogaril, merkaptopurin, metotreksat, metotreksat natrijum, metoprin, meturedepa, mitindomid, mitokarcin, mitokromin, mitogilin, mitomalcin, mitomicin, mitosper, mitotan, mitoksantron hidrohlorid, mikofenolnu kiselinu, nokodazol, nogalamicin, ormaplatin, oksisuran, paklitaksel, pegaspargazu, peliomicin, pentamustin, peplomicin sulfat, perfosfamid, pipobroman, piposulfan, piroksantron hidrohlorid, plikamicin, plomestan, porfimer natrijum, porfiromicin, prednimustin, prokarbazin hidrohlorid, puromicin, puromicin hidrohlorid, pirazofurin, riboprin, rogletimid, safingol, safingol hidrohlorid, semustin, simtrazen, sparfozat natrijum, sparzomicin, spirogermanijum hidrohlorid, spiromustin, spiroplatin, streptonigrin, streptozocin, sulofenur, talizomicin, tekogalan natrijum, tegafur, teloksantron hidrohlorid, temoporfin, tenipozid, teroksiron, testolakton, tiamiprin, tioguanin, tiotepa, tiazofurin, tirapazamin, toremifen citrat, trestolon acetat, triciribin fosfat, trimetreksat, trimetreksat glukuronat, triptorelin, tubulozol hidrohlorid, uracil iperit, uredepa, vapreotid, verteporfin, vinblastin sulfat, vinkristin sulfat, vindezin, vindezin sulfat, vinepidin sulfat, vinglicinat sulfat, vinleurozin sulfat, vinorelbin tartarat, vinrozidin sulfat, vinzolidin sulfat, vorozol, zeniplatin, zinostatin, zorubicin hidrohlorid, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri drugih antikancerskih lekova uključuju, ali se ne ograničavaju na 20-epi-l,25-dihidroksivitamin D3; 5-etiniluracil; abirateron; aklarubicin; acilfulven; adecipenol; adozelesin; aldesleukin; ALL-TK antagoniste; altretamin; ambamustin; amidoks; amifostin; aminolevulinsku kiselinu; amrubicin; amsakrin; anagrelid: anastrozol; andrografolid; inhibitore angiogeneze; antagonist D; antagonist G; antareliks; antidorzalizujući morfogenetski protein-1; antiandrogen, karcinom prostate; antiestrogen; antineoplaston; "antisense" oligonukleotide; afidikolin glicinat; modulatore apoptotskih gena; regulatore apoptoze; apurinsku kiselinu; ara-CDP-DL-PTBA; arginin deaminazu; asulakrin; atamestan; atrimustin; aksinastatin 1; aksinastatin 2; aksinastatin 3; azasteron; azatoksin; azatirozin; derivate bakatina III; balanol; batimastat; BCR/ABL antagoniste; benzohlorine; benzoilstaurosporin; beta laktamske derivate; beta-aletin; betaklamicin B; betulinsku kiselinu; inhibitor bFGF; bikalutamid; bisantren; bisaziridinilspermin; bisnafid; bistraten A; bizelesin; breflat; bropirimin; budotitan; butionin sulfoksimin; kalcipotriol; kalfostin C; kamptotecinske derivate; kanariproks IL-2; kapecitabin; karboksamid-amino-triazol; karboksiamidotriazol; CaRest M3; CARN 700; inhibitore poreklom iz hrskavice; karzelesin; kazein kinazne inhibitore (ICOS), kastanospermin; cekropin B; cetroreliks; hlorine; hlorohinoksalin sulfonamid; cikaprost; cis-porfirin; kladribin; analoge klomifena; klotrimazol; kolismicin A; kolismicin B; kombretastatin A4; kombretastatinske analoge; konagenin; krambescidin 816; krisnatol; kriptoficin 8; derivate kriptoficina A; kuracin A; ciklopentantrahinone; cikloplatam; cipemicin; citarabin okfosfat; citolitički faktor; citostatin; dakliksimab; decitabin; dehidrodidemnin B; deslorelin; deksametazon; deksifosfamid; deksrazoksan; deksverapamil; diazikvon; didemnin B; didoks; dietilnorspermin; dihidro-5-azacitidin; 9-dihidrotaksol, dioksamicin; difenilspiromustin; docetaksel; dokozanol; dolasetron; doksifluridin; droloksifen; dronabinol; duokarmicin SA; ebselen; ekomustin; edelfozin; edrekolomab; eflornitin; elemen; emitefur; epirubicin; epristerid; estramustinski analog; estrogenske agoniste; estrogenske antagoniste; etanidazol; etopozid fosfat; eksemestan; fadrozol; fazarabin; fenretinid; filgrastim; finasterid; flavopiridol; flezelastin; fluasteron; fludarabin; fluorodaunorubicin hidrohlorid; forfenimeks; formestan; fostriecin; fotemustin; gadolinijum teksafirin; galijum nitrat; galocitabin; ganireliks; inhibitore želatinaze; gemcitabin; inhibitore glutationa; hepsulfam; heregulin; heksametilen bisacetamid; hipericin; ibandronsku kiselinu; idarubicin; idoksifen; idramanton; ilmofozin; ilomastat; imidazoakridoni; imihimod; imunostimulantne peptide; inhibitore receptora za insulinu sličan faktor rasta-1; agoniste interferona; interferone; interleukine; jobenguan; jododoksorubicin; 4-ipomeanol; iroplakt; irsogladin; izobengazol; izohomohalikondrin B; itasetron; jasplakinolid; kahalalid F; lamelarin-N triacetat; lanreotid; leinamicin; lenograstim; lentinan sulfat; leptolstatin; letrozol; leukemijski inhibirajući faktor; leukocitni alfa interferon; leuprolid+estrogen+progesteron; leuprorelin; levamizol; liarozol; linearni poliaminski analog; lipofilni disaharid peptid; lipofilna jedinjenja platine; lisoklinamid 7; lobaplatin; lombricin; lometreksol; lonidamin; losoksantron; lovastatin; loksoribin; lurtotekan; lutecijum teksafirin; lizofilin; litičke peptide; maitanzin; manostatin A; marimastat; mazoprokol; maspin; matrilizinske inhibitore; inhibitore matriksnih metaloproteinaza; menogaril; merbaron; meterelin; metioninaza; metoklopramid; M1F inhibitor; mifepriston; miltefozin; mirimostim; pogrešno sparenu dvolančanu RNK; mitoguazon; mitolaktol; mitomicinske analoge; mitonafid; mitotoksin fibroblastni faktor rasta-saporin; mitoksantron; mofaroten; molgramostim; monoklonsko antitelo, humani horionski gonadotrofin; monofosforil lipid A+sk ćelijskog zida mikobakterije; mopidamol; inhibitor gena za višetruku rezistenciju prema lekovima; terapiju na bazi multiplog tumorskog supresora 1; iperitna antikancerska sredstva; mikaperoksid B; ekstrakte ćelijskog zida mikobakterija; miriaporon; N-acetildinalin; N-supstituisane benzamide; nafarelin; nagrestip; nalokson+pentazocin; napavin; nafterpin; nartograstim; nedaplatin; nemorubicin; neridronsku kiselinu; neutralnu endopeptidazu; nilutamid; nisamicin; modulatore azot oksida; nitroksidne antioksidante; nitrulin; 06-benzilguanin; oktreotid; okicenon; oligonukleotide; onapriston; ondansetron; oracin; oralni induktor citokona; ormaplatin; osateron; oksaliplatin; oksaunomicin; paklitaksel; paklitakselske analoge; derivate paklitaksela; palauamin; palmitoilrizoksin; pamidronsku kiselinu; panaksitriol; panomifen; parabaktin; pazeliptin; pegaspargazu; peldezin; pentozan polisulfat natrijum; pentostatin; pentrozol; perflubron; perfosfamid; perilil alkohol; fenazinomicin; fenilacetat; inhibitore fosfataze; picibanil; pilokarpin hidrohlorid; pirarubicin; piritreksim; placetin A; placetin B; inhibitor plazminogen aktivatora; kompleks platine; jedinjenja platine; kompleks platina-triamin; porfimer natrijum; porfiromicin; prednizon; propil bis-akridon; prostaglandin J2; inhibitore proteazoma; imunske modulatore na bazi proteina A; inhibitor protein kinaze C; inhibitore protein kinaze C; mikroalgal; inhibitore proteinske tirozin fosfataze; inhibitore fosforilaze purinskih nukleozida; purpurine; pirazolakridin; piridoksilisani hemoglobin-polioksietilen konjugat; antagoniste raf; raltitreksed; ramosetron; inhibitore ras farnezil protein transferaze; ras inhibitore; ras-GAP inhibitor; demetilisani reteliptin; renijum Re 186 etidronat; rizoksin; ribozime; RII retinamid; rogletimid; rohitukin; romurtid; rohinimeks; rubiginon BI; ruboksil; safingol; saintopin; SarCNU; sarkofitol A; sargramostim; Sdi 1 mimetike; semustin; inhibitor 1 poreklom iz senescentnih ćelija; "sense" oligonukleotide; inhibitore prenosa signala; modulatore prenosa signala; jednolančani antigen-vezujući protein; sizofiran; sobuzoksan; natrijum borokaptat; natrijum fenilacetat; solverol; somatomedin-vezujući protein; sonermin; sparfosičnu kiselinu; spikamicin D; spiromustin; splenopentin; spongistatin 1; skvalamin; inhibitor matičnih ćelija; inhibitore deobe matičnih ćelija; stipiamid; inhibitore stromelizina; sulfinozin; superaktivni antagonist vazoaktivnog intestinalnog peptida; suradista; suramin; svainsonin; sintetske glikozaminoglikane; talimustin; tamoksifen metjodid; tauromustin; tazaroten; tekogalan natrijum; tegafur; telurapirilijum; inhibitore telomeraze; temoporfin; temozolomid; tenipozid; tetrahlorodekaoksid; tetrazomin; taliblastin; tiokoralin; trombopoetin; trombopoetinski mimetik; timalfazin; agonist timopoetinskog receptora; timotrinan; tiroid-stimulišući hormon; kalaj etil etiopurpurin; tirapazamin; titanocen bihlorid; topsentin; toremifen; faktor totipotentnih matičnih ćelija; inhibitore translacije; tretinoin; triacetiluridin; triciribin; trimetreksat; triptorelin; tropisetron; turosterid; inhibitore tirozin kinaze; tirfostini; UBC inhibitore; ubenimeks; inhibitorni faktor rasta poreklom iz urogenitalnog sinusa; antagoniste urokinaznog receptora; vapreotid; variolin B; vektorski sistem, eritrocitnu gensku terapiju; velarosol; veramin; verdine; verteporfin; vinorelbin; vinksaltin; vitaksin; vorozol; zanoteron; zeniplatin; zilaskorb; zinostatin stimalamer; njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju UI uključuju, ali se ne ograničavaju na propantelin, imipramin, hiosciamin, oksibutinin, diciklomin, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju ulcera uključuju, ali se ne ograničavaju na antacide kao što su aluminijum hidroksid, magnezijum hidroksid, natrijum bikarbonat i kalcijum bikarbonat; jedinjenja bizmuta kao bizmut subsalicilat i bizmut subcitrat; H2antagoniste kao cimetidin, ranitidin, famotidin, i nizatidin; inhibitore H<+>,K<+->ATPaze kao omeprazol, iansoprazol i lansoprazol; karbenoksolon; misprostol; antibiotike kao što su tetraciklini, metronidazol, timidazol, klaritromicin i amoksicilin; njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu. Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju IBD uključuju, ali se ne ograničavaju na antiholinergičke lekove; difenoksilat; loperamid; deodorisanu tinkturu opijuma; kodein; antibiotike širokog spektra kao što je metronidazol; sulfasalazin; olsalazi; mezalamin; prednizon; azatioprin; merkaptopurin; metotreksat; njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju IBS uključuju, ali se ne ograničavaju na propantelin; antagoniste muskarinskih receptora kao pirenzapin, metoktramin, ipratropijum, tiotropijum, skopolamin, metskopolamin, homatropin, homatropin metilbromid, i metantelin; antidijareične lekove kao što su difenoksilat i loperamid; njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu. Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju poremećaja zavisnosti uključuju, ali se ne ograničavaju na metadon, desipramin, amantadin, fluoksetin, buprenorfin, opijatni agonist, 3-fenoksipiridin, levometadil acetat hidrohlorid, antagoniste serotonina, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju Parkinson-ove boleti i parkinsonizma uključuju, ali se ne ograničavaju na karbodopa/levodopa, pergolid, bromokriptin, ropinirol, pramipeksol, entakapon, tolkapon, selegilin, amantadin, triheksifenidil hidrohlorid, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju anksioznosti uključuju, ali se ne ograničavaju na benzodiazcpinc, kao alprazolam, brotizolam, hlordiazepoksid, klobazam, klonazepam, klorazepat, demoksepam, diazepam, estazolam, flumazenil, flurazepam, halazepam, lorazepam, midazolam, nitrazepam, nordazepam, oksazepam, prazepam, kvazepam, temazepam, i triazolam; nebenzodiazepinska sredstva kao buspiron, gepiron, ipsapiron, tiospiron, zolpikon, zolpidem, i zaleplon; trankvilajzere kao što su barbiturati, npr., amobarbital, aprobarbital, butabarbital, butalbital, mefobarbital, metoheksital, pentobarbital, fenobarbital, sekobarbital, i tiopental; propandiolske karbamate kao meprobromat i tibamat; njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju epilepsije uključuju, ali se ne ograničavaju na karbamazepin, etosuksimid, gabapentin, lamotrigin, fenobarbital, fenitoin, primidon, valproinsku kiselinu, trimetadion, benzodiazepine, y vinil GABA, acetazolamid, felbamat, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju šloga uključuju, ali se ne ograničavaju na antikoagulante kao heparin, sredstva koja razlažu ugrušak kao streptokinaza ili tkivni plazminogen aktivator, sredstva koja smanjuju otok kao manitol ili kortikosteroidi, acetilsalicilnu kiselinu, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju napada uključuju, ali se ne ograničavaju na karbamazepin, etosuksimid, gabapentin, lamotrigin, fenobarbital, fenitoin, primidon, valproinsku kiselinu, trimetadion, benzodiazepine, gabapentin, lamotrigin, y-vinil GABA, acetazolamid, felbamat, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju pruritusnih stanja uključuju, ali se ne ograničavaju na naltrekson: nalmefen; danazol; tricikline kao amitriptilin, imipramin i doksepin; antidepresive kao što su oni dole dati, mentol; kamfor; fenol; pramoksin; kapsaicin; katran; steroide; antihistaminike; njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju psihoza uključuju, ali se ne ograničavaju na fenotiazine kao hlorpromazin hidrohlorid, mezoridazin besilat, i toridazin hidrohlorid; tioksantene kao hloroprotiksen i tiotiksen hidrohlorid; klozapin; risperidon; olanzapin; kvetiapin, kvetiapin fumarat; haloperidol; haloperidol dekanoat; loksapin sukcinat; molindon hidrohlorid; pimozid; ziprasidon; njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju Huntington-ove horeje uključuju, ali se ne ograničavaju na haloperidol, pimozid, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju ALS uključuju, ali se ne ograničavaju na baklofen, neurotrofne faktore, riluzol, tizanidin, benzodiazepine kao klonazepan, dantrolen, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju kognitivnih poremećaja uključuju, ali se ne ograničavaju na sredstva za lečenje ili prevenciju demencije kao takrin; donepezil; ibuprofen; antipsihotičke lekove kao tioridazin i haloperidol; lekove protiv depresije kao što su oni gore navedeni; njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju migrene uključuju, ali se ne ograničavaju na alpiroprid, bromokriptin, dihidroergotamin, dolasetron, ergokornin, ergokorninin, ergokriptin, ergonovin, ergot, ergotamin, fiumedrokson acetat, fonazin, ketanserin, lisurid, lomerozin, metilergonovin, metisergid, metoprolol, naratriptan, oksetoron, pizotilin, propranolol, risperidon, rizatriptan, sumatriptan, timolol, trazodon, zolmitriptan, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu. Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju povraćanja uključuju, ali se ne ograničavaju na antagoniste 5-HT3receptora kao ondansetron, dolasetron, granisetron i tropisetron; antagoniste dopaminskog receptora kao prohlorperazin, tietilperazin, hlorpromazin, metoklopramid, i domperidon; glukokortikoide kao deksametazon; benzodiazepine kao lorazepam i alprazolam; njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju diskinezije uključuju, ali se ne ograničavaju na reserpin, tetrabenazin, njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ili prevenciju depresije uključuju, ali se ne ograničavaju na triciklične antidepresive kao amitriptilin, amoksapin, bupropion, klomipramin, desipramin, doksepin, imipramin, maprotilin, nefazadon, nortriptilin, protriptilin, trazodon, trimipramin, i venlaflaksin; selektivne inhibitore preuzimanja serotonina kao citalopram, (S)-citalopram, fluoksetin, fluvoksamin, paroksetin i setralin; inhibitore monoaminooksidaze kao izokarboksazid, pargilin, fenelzin i tranilcipromin; psihostimulanse kao dekstroamfetamin i metilfenidat; njihove farmaceutski prihvatljive derivate ili bilo koju njihovu mešavinu.
Jedinjenje Formule (I) ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat i drugo terapijsko sredstvo mogu delovati aditivno ili, u jednoj formi, sinergistički. U jednoj formi, Jedinjenje Formule (I) se primenjuje istovremeno sa drugim terapijskim sredstvom, na primer, može da se primeni smeša koja sadrži efikasnu količinu Jedinjenja Formule (I) i efikasnu količinu drugog terapijskog sredstva. Alternativno, smeša koje sadrži efikasnu količinu Jedinjenja Formule (I) i smeša različita od te, koja sadrži efikasnu količinu drugog terapijskog sredstva mogu da se primenjuju istovremeno. U sledećoj formi, efikasna količina Jedinjenja Formule (I) primenjuje se pre ili posle primene efikasne količine drugog terapijskog sredstva. U ovoj formi, Jedinjenje Formule (I) se primenjuje dok drugo terapijsko sredstvo ispoljava svoj terapijski efekat, ili, drugo terapijsko sredstvo se primenjuje dok Jedinjenje Formule (I) ispoljava svoj terapijski efekat u lečenju ili prevenciji Stanja.
Smeša objave priprema se prema metodu koji uključuje mešanje Jedinjenja Formule (I) ili njegovog farmaceutski prihvatljivog derivata sa farmaceutski prihvatljivim nosačem ili ekscipijentom. Mešanje može da se obavi korišćenjem metoda poznatih za mešanje jedinjenje (ili derivata) i farmaceutski prihvatljivog nosača ili ekscipijenta. U jednoj formi, Jedinjenje Formule (I) prisutno je u smeši u efikasnoj količini.
4.7 Kitovi
Objava obezbeđuje još i kitove koji mogu da pojednostave rukovanje i primenu Jedinjenja Formule (I) kod životinje.
U jednoj formi, kit objave sadrži jediničnu doznu formu Jedinjenja Formule (I). U drugoj formi, jedinična dozna forma uključuje prvi kontejner koji može biti sterilan, koji sadrži efikasnu količinu Jedinjenja Formule (I) i farmaceutski prihvatljivi nosač ili ekscipijent. Kit može sadržati još i oznaku ili štampano uputstvo za upotrebu Jedinjenja Formule (I) za lečenje ili prevenciju Stanja. Kit može sadržati još i jediničnu doznu formu drugog terapijskog sredstva, na primer, drugi kontejner koji sadrži efikasnu količinu drugog terapijskog sredstva i farmaceutski prihvatljivi nosač ili ekscipijent. U sledećoj formi, kit sadrži kontejner koji sadrži efikasnu količinu Jedinjenja Formule (I), efikasnu količinu drugog terapijskog sredstva i farmaceutski prihvatljivi prenosnik, nosač ili ekscipijent. Primeri drugog terapijskog sredstva uključuju, ali se ne ograničavaju na gore navedena.
Kit objave može sadržati još i uređaj koji se koristi za primenu jediničnih doznih formi. Primeri takvih uređaja uključuju, ali se ne ograničavaju na špric, kesu za infuziju, flaster, inhalator i kesu za enemu.
5. PRIMERI
Neki donji Primeri odnose se na sintezu ilustrativnih Jedinjenja Formule (I) i/ili (II).
5.1 Primer EPripremanje Jedinjenja C126(r) (nije zahtevano)
Tert- buti]4-(5-bromo-3-fluoropiridin-2-il)-piperazin-1 -karboksilat (103)
Reakciona mešavina 5-bromo-2-hloro-3-fluoropiridina (101, 8.0 g, 38.02 mmol, Oakvvood Products, Inc., West Columbia, SC) i/er/-butil piperazin-l-karboksilata (102, 7.08 g, 38.02 mmol, Sigma-Aldrich) u DMSO (32 ml) zagreva se na 100 °C, 16 h. Mešavina se ohladi na temperaturu od oko 25 °C, izlije na hladni 10% vodeni rastvor natrijum karbonata i esktrahuje korišćenjem EtOAc. Organski sloj se ispere vodom, ispere zasićenim slanim rastvorom, suši preko natrijum sulfata i koncentruje da se dobije 15.5 g polučvrste supstance. Polučvrsta supstanca se ispere heksanima i filtrira. Filtrat se koncentruje da se dobije 7.5 g rezidue. Rezidua se hromatografiše na koloni od silika gela uz eluiranje gradijentom od 100% heksana do 10:90 EtOAc:heksani, da se dobije 103 u vidu čvrste supstance (prinos 24%).
(£)-/er/-butil 4-(3-fluoro-5-(prop-l-enil)piridin-2-il)piperazin-l-karboksilat (105)
U atmosferi argona, u rastvor 103 (3.30 g, 9.16 mmol) i (£)-prop-l-enilorganoborne kiseline (104, 0.95 g, 11.0 mmol, Sigma-Aldrich) doda se 1 M rastvor tetra(«-butil)amonijum fluorida (TBAF) u THF (22 ml, 22.0 mmol, Sigma-Aldrich) i [1,1-bis(difenilfosfmo)ferocen]dihloropaladijuma(II) (Pd(DPPF)Cl2, 0.075 g, 0.092mmol, Sigma-Aldrich). Dobijena reakciona mešavina se meša na refluksu 2 sata, ohladi na temperaturu od oko 25 °C, razblaži vodom i ekstrahuej korišćenjem EtOAc. Organski sloj se ispere zasićenim slanim rastvorom i koncentruje da se dobije 3.6 g rezidue. Rezidua se hromatografiše na koloni od silika gela uz eluiranje sa EtOAc.heksani da se dobije 105 (prinos 91%).
Tert- butil4-(5-((1 S, 2S)-1,2-dihidroksipropil)-3-fluoropiridin-2-il)piperazin-1 -karboksilat(106)
U rastvor 105 (2.67 g, 8.29 mmol) u tert-butanolu (80 ml) i vodi (80 ml) doda se metansulfonamid (0.79 g, 8.29 mmol, Sigma-Aldrich). Mešavina se ohladi na 5 °C i doda se AD-mix-a (11.50 g, 8.29 mmol) da se formira reakciona mešavina. Posle zagrevanja reakcione mešavine na temperaturu od oko 25 °C i mešanja 16 sati, doda se čvrsti natrijum sulfit u višku i dobijena emulzija se ostavi da se meša na 15 °C, 30 min. Mešavina se dva puta ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Organske porcije se kombinuju, isperu zasićenim slanim rastvorom, suše (Na2S04) i koncentruju pod sniženim pritiskom. Rezidua se hromatografiše na koloni od silika gela uz eluiranje sa 50:50 EtOAc:heksani i 70:30 EtOAc:heksani da se dobije 106 u vidu čvrste supstane (prinos
>99%).
(15,25)-1 -(5 -fluoro-6-(piperazin-1 -il)piridin-3 -il)propan-1,2-diol (107)
U rastvor 106 (3.0 g, 8.65 mmol) u DCM (25 ml) doda se 4 N HC1 u dioksanu (2.51 ml, 43.2 mmol). Rezultujuća reakciona mešavina se meša na temperaturi od oko 25 °C, u zatvorenom sudu, 16 sati; formira se suspenzija. Suspenzija se meša sa dietil etrom; precipitira čvrsta supstanca. Precipitat se sakupi filtracijom i ispere nekoliko puta etrom da se dobije 107 (prinos 91%), u vidu čvrste supstance boje kože, koja ima čistoću
>99%, analizirano pomoću LC/MS, koja se koristi direktno u sledećem koraku.
4- [5-(( 15,25)-1,2-dihidroksi-propil)-3 -fluoro-piridin-2-il)piperazin-1 -karboksilna kiselina (6-metil-benzotiazol-2-il)-amid (Jedinjenje C126(r))
Suspenzija 107 (200 mg, 0.61 mmol) i A^-(6-metilbenzo[<i]tiazol-2-il)-l//-imidazol-l-karboksamida (108, 160 mg, 0.61 mmol) u DCM (6.0 ml) ohladi se u ledenom kupatilu. Doda se diizopropiletilamin (DIEA, 2.0 ml, Sigma-Aldrich) da se formira reakciona mešavina. Reakciona mešavina se meša na temperaturi od oko 25 °C, 16 sati; formira se precipitat. Precipitat se filtrira i ispere u DCM. Posle toga precipitat se rastvori u 20:80 MeOH:DCM, koncentruje na silicijum dioksidu i hromatografiše na koloni od silika gela uz eluiranje gradijentom od 30:70 EtOAc:DCM do 80:20 EtOAc:DCM da se dobije C126(r) u vidu bele čvrste supstance (prinos 24%). 'H NMR (DMSO-</6) 8: 0.88 (3H, d, 7=6.4 Hz), 2.37 (3H, s), 3.38 (4H, m), 3.69 (5H, m), 4.37 (IH, t, .7=4.8 Hz), 4.65 (IH, d, 7=4.6 Hz), 5.28 (IH, d, 7=4.4 Hz), 7.18 (IH, m), 7.44 (IH, d, 7=14.3 Hz), 7.52 (IH, br s), 7.66 (IH, br s), 7.97 (IH, s) 11.20 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z= 446.
Jedinjenje 108 pripremljeno je na sledeći način:
U rastvor 6-metilbenzo[ć/]fiazol-2-arnina (109, 328 mg, 2 mmol, Sigma-Aldrich) u DMF (5 ml) doda se di(li/-imidazol-l-il)metanon (110, 357 mg, 2.2 mmol, Sigma-Aldrich) na 0 °C. Uz snažno mešanje, dobijena reakciona mešavina se ostavi da se polako zagreje na temperaturu od oko 25 °C, tokom 14 h. Formira se beli precipitat. Precipitat se sakupi filtracijom pod sniženim pritiskom, ispere dva puta sa EtOAc (10 ml za svako ispiranje) i suši pod sniženim pritiskom da se dobije 108 (prinos >99%).
5.2 Primer 2: Pripremanje Jedinjenja (nisu zahtevana) B122(j), B122(k), B122(o), B122(p), B125(j), B125(k), B125(o), B125(p), B155(h), B155(j), B155(o), B158(j), B158(o), C4(r), C123(r), C125(r) i C170(r)
Korišćenjem postupaka sličnih onima koji su opisani u Primeru 1, gore, pripremaju se sledeća Jedinjenja Formule (I).
B122G):( R)- N- benzoL7]tiazol-2-il)-4-{5-[(1 S, 2S)-1,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il}-3-metilpiperazin-l-karboksamid. 'H NMR (DMSO-ć/6) 8: 0.87 (3H, d, J=6.1 Hz), 1.07 (3H, d, 7=6.4 Hz), 3.08-3.45 (3H, m), 3.75-3.54 (2H, m), 3.94-4.30 (3H, m), 4.35 (IH, t, .7=5.0 Hz), 4.66 (IH, d, 7=4.6 Hz), 5.28 (IH, d, 7=4.4 Hz), 7.20 (IH, t, 7= 7.4 Hz), 7.70-7.28 (3H, m), 7.72-7.91 (IH, m), 7.96 (IH, s), 11.33 (IH, br s). LC/MS (M+l):/w/z = 447.
B122(k): (5)-A-benzo[^tiazol-2-il)-4-{5-[(15,2S)-l,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il}-3-metilpiperazin-l-karboksamid. !H NMR (DMSO-4) 8: 0.87 (3H, d, 7=6.4 Hz), 1.07 (3H, d, 7=6.6 Hz), 3.28-3.39 (3H, m), 3.60-3.70 (2H, m), 4.20-4.22 (3H, m), 4.34 (IH, d, 7=5.5 Hz), 4.67 (IH, br s), 5.25 (IH, br s), 7.20 (IH, t, 7=7.5 Hz), 7.32-7.51 (3H, m), 7.80 (IH, br s), 7.96 (IH, s), 11.32 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z =447. B122(o) (^)-A-benzo[^Jtiazol-2-il)-4-{5-l(l^,2/?)-l,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il}-3-metilpiperazin-l-karboksamid.<]>H NMR (DMSO-<4) 8: 0.88 (3H, d, 7=6.3 Hz), 1.05 (3H, d, 7=6.4 Hz), 2.99-3.46 (3H, m), 3.50-3.60 (IH, m), 3.61-3.75 (IH, m), 4.00-4.31 (3H, m), 4.33 (IH, d, 7=5.3 Hz), 4.66 (IH, br s),5.27 (IH, br s), 6.89 (IH, t, 7=7.4Hz), 7.11 (IH, t, 7=7.1 Hz), 7.25 (IH, d, 7=7.9 Hz), 7.39 (IH, dd, 7=1.8, 14.5 Hz), 7.54 (IH, d, 7=7.2 Hz), 7.95 (IH, s). LC/MS (M+l):m/ z= 447.
B122(p): (5)-jV-benzo[<|tiazol-2-il)-4-{5-[(17?,2i?)-l,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il}-3-metilpiperazin-l-karboksamid.<*>H NMR (DMSO-J6) 8: 0.87 (3H, d, 7=6.3 Hz), 1.07 (3H, d, 7=6.6 Hz), 3.21-3.35 (3H, m), 3.62-3.66 (2H, m), 4.03-4.36 (4H, m), 4.66 (IH, d, 7=4.0 Hz), 5.28 (IH, d, 7=4.0 Hz), 7.20 (IH, t, 7=7.5 Hz), 7.33-7.50 (3H, m), 7.80 (IH, br s), 7.95 (IH, s), 11.27 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z= 447. B125(j):( R)- 4-{ 5-[(1 5,25)-1,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il} -^-(ć-fluorobenzo[J]tiazol-2-il)-3-metilpiperazin-l-karboksamid. 'H NMR (DMSO-d6) 8: 0.87 (3H, d, 7=6.3 Hz), 1.07 (3H, d, J=6.6 Hz), 3.10-3.46 (3H, m), 3.55-3.75 (2H, m), 4.03 (IH, d, 7=13.9 Hz), 4.11-4.28 (2H, m), 4.35 (IH, t, .7=4.7 Hz), 4.66 (IH, d, 7=4.6 Hz), 5.28 (IH, d, 7=4.4 Hz), 7.20 (IH, td,7=2.7,9.1 Hz), 7.41(IH, dd,7=1.6,14.4 Hz), 7.50-7.59 (IH, m), 7.77 (IH, dd,7=2.6,8.5 Hz), 7.95 (IH, s), 11.43 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z= 465.
B125(k): (5)-4-{5-[(15,25)-l,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il}-jV-(5-fluorobenzo [J]tiazol-2-il)-3-metilpiperazin-l-karboksamid. 'H NMR (DMSO-<4) 8: 0.87 (3H, d, 7=6.3 Hz), 1.07 (3H, d, 7=6.4 Hz), 3.24-3.40 (3H, m), 3.71-3.60 (2H, m), 4.04-4.20 (3H, m), 4.35 (IH, t, 7=4.6 Hz), 4.65 (IH, d, 7=4.6 Hz), 5.27 (IH, d, 7=4.6 Hz), 7.24-7.38 (3H, m), 7.82 (IH, br s), 7.96 (IH, s), 11.27 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z= 465. B125(o):( R)- 4-{5-[(1 R, 2R)-1,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il}-A-(6-fluoroben-zo[^tiazol-2-il)-3-metilpiperazin-l-karboksamid. fH NMR (DMSO-c/6) 8: 0.87 (3H, d,7=6.4Hz), 1.07 (3H, d,7=6.6Hz), 3.43-3.08 (3H, m), 3.55-3.74 (2H, m), 3.97-4.08 (IH, m), 4.13-4.26 (2H, m), 4.34 (IH, d, 7=5.0 Hz), 4.66 (IH, br s), 5.28 (IH, br s), 7.15 (IH, td, 7=2.7, 9.1 Hz), 7.41 (IH, dd,7=1.6,14.4 Hz), 7.48 (IH, dd, 7=4.7, 8.7 Hz), 7.70 (IH, dd,7=2.6,8.7 Hz), 7.95 (IH, s). LC/MS (M+l):m/ z= 465.
B125(p):(5)-4-Z- {5-[( 1 R, 2R)- l ,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il} -/V-(5-fluoro-benzo[t/]tiazol-2-il)-3-metilpiperazin-l-karboksamid. *H NMR (DMSO-t/6) 8: 0.87 (3H, d, 7=6.3 Hz), 1.07 (3H, d, 7=6.6 Hz), 3.21-3.35 (3H, m), 3.62-3.69 (2H, m), 4.02-4.20 (3H, m), 4.34 (IH, t, 7=4.6 Hz). 4.66 (IH, d, 7=4.6 Hz), 5.28 (IH, d, 7=4.6 Hz), 7.21 (IH, dt, 7=1.7, 9.0 Hz), 7.41 (IH, dd, 7=1.7, 14.3 Hz), 7.55 (IH, br s), 7.77 (IH, d, 7=9.0 Hz), 7.95 (IH, s), 11.30(IH, br s). LC/MS (M+l): m/ z =465.
B155(h): (5)-4-{5-[(15,2>S)-l,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il}-A<f->(5-fluoro-benzo[c/]tiazol-2-il)-2-metilpiperazin-l-karboksamid.<*>H NMR (CDC13) 8: 1.16 (3H, d, 7=6.3 Hz), 1.31 (3H, d, 7-6.7 Hz), 2.97-2.92 (IH, m), 3.11-3.16 (2H, m), 3.39 (IH, dt, 7=3.5, 12,6 Hz), 3.89-4.01 (4H, m), 4.40-4.42 (3H, m), 6.99 (IH, d, 7=2.4, 8.8 Hz), 7.30-7.34 (2H, m), 7.65 (IH, dd, 7=5.2, 8.5 Hz), 7.98 (IH, s), 9.31 (IH, br s). LC/MS
(M+l): m/ z = 465.
B155(j):( R)- 4-{5-[( 15,25)-1,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il}-jV-(5-fluorobenzo[(/]tiazol-2-il)-3-metilpiperazin-l-karboksamid.<*>H NMR (DMSO-<4) 8: 0.87 (3H, d,.7=6.3Hz), 1.07 (3H. d,7=6.4Hz), 3.10-3.44 (3H, m), 3.76-3.52 (2H, m), 4.04 (IH, d, 7=13.9 Hz), 4.13-4.26 (2H, m), 4.29-4.38 (IH, m), 4.61-4.69 (IH, m), 5.28 (IH, d, 7=4.3 Hz), 7.02 (IH, td, 7=9.1, 2.4 Hz), 7.25-7.35 (IH, m), 7.41 (IH, dd, 7=14.3, 1.5 Hz), 7.81 (IH, dd, 7=5.5, 8.7 Hz), 7.95 (IH, s), 11.60 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z= 465.
B155(o): (i?)-4-{5-[(li?,2i?)-l,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il}-iV-(5-iluoroben-zo[c/]tiazol-2-il)-3-metilpiperazin-l-karboksamid. *H NMR (DMSO-J6) 5: 0.87 (3H, d, 7=6.3 Hz), 1.07 (3H. d,7=6.6Hz), 3.08-3.47 (3H, m), 3.56-3.74 (2H, m), 4.04 (IH, d, 7=12.7 Hz), 4.27-4.13 (2H, m), 4.34 (IH, d, 7=5.0 Hz), 4.66 (IH, br s), 5.27 (IH, br s), 6.98 (IH, td,7=2.2, 9.0Hz), 7.26 (IH, dd, 7=2.1, 10.1 Hz), 7.41 (IH, dd, 7=1.3, 14.4 Hz), 7.77 (IH, dd, 7=5.6, 8.5 Hz), 7.95 (IH, s). LC/MS (M+l):m/ z= 465.
B158G): (^^-(S^-dinuorobenzofc/Jtiazol^-ilH-IS-Kl^^^-l^-dihidroksipropilJ-S-lluoropiridin-2-il}-3-metilpiperazin-l-karboksamid.<*>H NMR (DMSO-J6) 8: 0.87 (3H, d, 7=6.3 Hz), 1.06 (3H, d, 7=6.4 Hz), 3.04-3.42 (4H, m), 3.51-3.76 (2H, m), 3.97-4.10 (IH, m), 4.11-4.25 (IH, m), 4.30-4.38 (IH, m), 4.65 (IH, d, 7=4.3 Hz), 5.27 (IH, d, 7=4.6 Hz), 7.35-7.51 (2H, m), 7.80-7.98 (2H, m), 11.52 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z= 483.
B158(o): (i?)-A-(5,6-difluorobenzo[Jltiazol-2-il)-4-{5-[(li?,2i?)-l,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il}-3-metilpiperazin-l-karboksamid. 'H NMR (DMSO-<4) 8: 0.87 (3H, d, 7=6.3 Hz), 1.06 (3H, d, 7=6.6 Hz), 3.06-3.44 (3H, m), 3.52-3.74 (2H, m), 3.94-4.08 (IH, m), 4.10-4.26 (2H, m), 4.29-4.40 (IH, m), 4.58-4.72 (IH, m), 5.19-5.34 (IH, m), 7.34-7.52 (2H, m), 7.81-7.99 (2H, m), 11.49 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z= 483. C4(r):4- {3 -hloro-5 - [(1 S, 2S)-1,2-dihidroksipropil]piridin-2-il} -A^6-fluorobenzo|>/]tiazol-2-il)-piperazin-l-karboksamid. 'h NMR (DMSO-J6) 8: 0.89 (3H, d,7=6.2Hz), 3.24-3.31 (4H, m), 3.69-3.73 (5H, m), 4.40 (IH, d,7=4.4Hz), 4.67 (IH, br s), 5.34 (IH, br s), 7.14 (IH, dt, 7=8.6, 1.7 Hz), 7.47 (IH, dd, 7=8.6, 4.6 Hz), 7.67-7.71 (2H, m), 8.15 (IH, d, 7=1.7 Hz), 11.52 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z = 466.
C123 (r):^-(ć-hlorobenzo [c/]tiazol-2-il)-4-(5 -((1 S, 2Sy 1,2-dihidroksipropil)-3 -fluoro-piridin-2-il)piperazin-l-karboksamid. ]H NMR(DMSO-c/6)8: 0.88 (3H, d,7=6.4Hz), 3.40 (4H, m), 3.70 (5H, m), 4.37 (IH, t, 7=4.8 Hz), 4.65 (IH, d, 7=6.8 Hz), 5.28 (IH, d, 7=4.7 Hz), 7.39 (IH, d, 7=7.5 Hz), 7.44 (IH, d, 7=14,3 Hz), 7.63 (IH, br s), 7.97 (IH, s), 8.03 (IH, br s), 11.40 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z= 466.
C125(r): 4-(5-((15,25)-l,2-dihidroksipropil)-3-fluoropiridin-2-il)-A-(6-fluorobenz tiazol-2-il)piperazin-l-karboksamid.<!>H NMR (DMSO-^O 8: 0.88 (3H, d, 7=6.4 Hz), 3.39 (4H, m), 3.69 (5H, m), 4.37 (IH, t, 7=4.82 Hz), 4.66 (IH, d, 7=4.6 Hz), 5.28 (IH, d, 7=4.6 Hz), 7.22 (IH, t, 7=9.4 Hz), 7.44 (IH, d, 7=14,2 Hz), 7.64 (IH, br s), 7.81 (IH, br s), 7.97 (IH, s), 11.33 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z = 450.
C170(r): 4-(5 -((15,25)-1,2-dihidroksipropil)-3 - lfuoropiridin-2-il)-iV-(5,6-dimetilbenzo-[J]tiazol-2-il)piperazin-l-karboksamid.<]>H NMR (DMSO-J6) 8: 0.88 (3H, d, 7=6.4 Hz), 2.28 (6H, d, 7=5.7 Hz), 3.38 (4H, m), 3.70 (5H, m), 4.36 (IH, d, 7=5.5 Hz), 4.66 (IH, br s), 5.28 (IH, br s), 7.44 (IH, d, 7=12.7 Hz), 7.46 (IH, br s), 7.56 (IH, br s). 7.97 (IH, s), 11.17 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z= 460.
5.3 Primer 3: Pripremanje Jedinjenja BB
Jedinjenje BB priprema se korišćenjem postupaka sličnih onima koji su opisani u Primeru 1, gore.
BB:(5)-4-{5-[(15,25)-l,2-dihidroksipropil]-3-fluoropiridin-2-il}-/V-(6-fluorobenzo[i/]
tiazol-2-il)-2-metilpiperazin-l-karboksamid.<*>H NMR (DMSO-<4) 8: 0.86 (3H, d, 7=6.1 Hz), 1.24 (3H, d,7=6.6Hz), 2.85 (IH, t, 7=11.6 Hz), 3.05 (IH, d, 7=11.6 Hz), 3.24-3.33 (IH, m), 3.65-3.73 (IH, m), 3.77 (III, d, 7=12.9 Hz), 3.93 (III, d, 7=12.3 Hz), 4.16 (IH, br s), 4.36 (IH, t, 7=4.6 Hz), 4.57 (IH, br s), 4.66 (IH, d, 7=4.8 Hz), 5.29 (IH, d, 7=4.6 Hz), 7.21 (IH, t, 7=8.8 Hz), 7.43 (IH, d, 7=14.3 Hz), 7.64 (IH, br s), 7.79 (IH, br s), 7.95 (IH, s), 11.30 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z= 464.
5.4 Primer 4: Pripremanje Jedinjenja A155(a)
2-hloro-3-fluoro-5-vinilpiridin (112)
U rastvor 101 (5.00 g, 23.8 mmol) i 4,4,6-trimetil-2-vinil-l,3,2-dioksaborinana (111, 3.29 g, 21.39 mmol, Sigma-Aldrich) u mešavini TBAF (30 ml) i THF (64.0 ml), u atmosferi argona, dodaju se katalizator bis(trifenilfosfin)dihloropaladijum(lI)
(Pd(PPh3)2Cl2, 1.33 g, 1.90 mmol, Sigma-Aldrich) i K2C03(8.20 g, 59.4 mmol). Dobijena reakciona mešavina se zagreje na 60 °C i održava 16 h u hermetički zatvorenoj boci. Mešavina se ohladi na temperaturu od oko 25 °C, razblaži vodom i ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Organski sloj se izdvoji, ispere zasićenim slanim rastvorom i koncentruje. Rezidua se hromatografiše na koloni od silika gela, uz eluiranje EtOAc:heksanima da se dobije 3.2 g 112 u vidu bezbojnog ulja (prinos 85%).<*>H NMR (CDC13) 5: 5.48 (IH, d, J=10.97 Hz), 5.83 (IH, d, J=17.62 Hz), 6.68 (IH, dd, J=10.97, 17.62 Hz), 7.52 (IH, d, J=1.60 Hz), 8.20 (IH, d, J=1.60 Hz). LC/MS (M+l):m/ z=158.
(1S)-l-(6-hloro-5-fluoropiridin-3-il)etan-l,2-diol (113)
U rastvor 112 (5.00 g, 31.75 mmol) u vodi (162 ml) i fert-butanolu (162 ml), ohlađenom na 0 °C pomoću ledenog kupatila, doda se AD-mix a (54.6 g, Sigma-Aldrich) da se formira reakciona mešavina. Uz ostavljanje ledenog kupatila na mestu, dopusti se da se reakciona mešavina zagreje na temperaturu od oko 25 °C. Posle 16 h, doda se čvrsti natrijum sulfit u višku (60 g) i nastala emulzija se meša na temperaturi od oko 25 °C, 30 min. Mešavina se ekstrahuje dva puta korišćenjem EtOAc. Organske porcije se kombinuju, isperu zasićenim slanim rastvorom, suše (Na2S04) i koncentruju pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se hromatografiše na koloni od silika gela, uz eluiranje gradijentom od 50:50 EtOAc:heksani do 100% EtOAc da se dobije 5.39 g 113 u vidu bele čvrste supstance (prinos 89%).<*>H NMR (CDC13) 5: 2.16 (IH, t, 7=5.60 Hz), 2.88 (IH, d, .7=3.54 Hz), 3.66 (IH, m), 3.84 (IH, m), 4.91 (IH, m), 7.59 (IH, dd,7=1.61,8.73 Hz), 8.29 (IH, d, 7=1.88 Hz). LC/MS (M+l):m/ z=192.
(S)-2-hloro-5-(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)-3-lfuoropiridin (114)
Suspenzija 113 (5.39 g, 28.2 mmol) u 2,2-dimetoksipropanu (58 ml, Sigma-Aldrich) ohladi se u ledenom kupatilu. Monohidrat /?ara-toluensulfonske kiseline (PTSA, 0.54 g, 2.82 mmol, Sigma-Aldrich) doda se da se formira reakciona mešavina. Ledeno kupatilo se ukloni i reakciona mešavina se meša na temperaturi od oko 25 °C, 16 h. Polse toga, mešavina se ohladi pomoću ledenog kupatila, tretira zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Organski sloj se izdvoji, ispere zasićenim slanim rastvorom, suši (Na2S04) i koncentruje da se dobije 5.65 g 114 u vidu ulja (prinos 87%).<!>H NMR (CDC13) 8: 1.48 (3H, s), 1.54 (3H, s), 3.71 (IH, m), 4.37 (IH, m), 5.11 (IH, t, 7=6.76 Hz), 7.53 (IH, dd, 7-1.93, 8.63 Hz), 8.18 (IH, d, 7=1.88 Hz). LC/MS (M+l):m/ z =232.
( S)- tert- bx\\\\ A- {5 - [(5)-2,2-dimetil-1,3 -dioksolan-4-il] -3 -fluoropiridin-2-il} -2-
metilpiperazin-l-karboksilat (116)
U rastvor 114 (1.60 g, 6.91 mmol) u toluenu (21.1 ml) u atmosferi argona dodaju se( S)-ter/-butil2-metilpiperazin-1-karboksilat (115, 1.38 g, 6.91 mmol, AK Scientific, Inc., Union City, CA), natrijum /er/-butoksid (0.73 g, 7.60 mmol, Sigma-Aldrich) i 2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil (tj., "X-Phos", 0.49 g, 1.04 mmol, Sigma-Aldrich). Mešavina se oslobodi gasa pod argonom i zatim se doda tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (Pd2(DBA)3, 0.63 g, 0.69 mmol, Sigma-Aldrich) da se formira reakciona mešavina. Reakciona mešavina se zagreva u uljanom kupatilu koje se održava na temperaturi u opsegu od 80 °C do 85 °C, uz mešanje 1.5 sati. Posle toga, mešavina se ohladi na temperaturu od oko 25 °C, ulije u hladnu vodu, i ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Organski sloj se izdvoji, ispere zasićenim slanim rastvorom i koncentruje do ulja koje se hromatografiše na koloni od silika gela, uz eluiranje 10:90 EtOAc:heksanima i 20:80 EtOAc:heksanima da se dobije 1.71 g 116 u vidu čvrste supstance (prinos, 63%). 'H NMR (CDC13) 5: 1.25 (3H, d, 7=6.80 Hz), 1.46 (3H, s), 1.48 (9H, s), 1.53 (3H, s), 2.89 (IH, dt, J=3.29, 13.59 Hz), 3.09 (IH, dd, 7=3.73, 12.06 Hz), 3.23 (IH, dt, .7=2.85, 13.59 Hz), 3.69 (IH, t, 7=7.89 Hz), 3.83 (IH, d, 7=12.72 Hz), 3.92 (IH, d, 7=13.81 Hz), 4.01 (IH, d, 7=12.90 Hz), 4.27 (IH, t, 7=6.14 Hz), 4.31 (IH, br s), 5.01 (IH, t, 7=7.24 Hz), 7.30 (IH, d, 7=1.97 Hz), 7.95 (IH, s). LC/MS (M+l):m/ z=396.
( S)-1 -{5-fluoro-6-[(S)-3-metilpiperazin-1 -il]piridin-3-il}etan-1,2-diol(117)
U rastvor 116 (1.71 g, 4.33 mmol) u DCM (9.60 ml) i MeOH (1.50 ml) doda se 4 N HC1 u dioksanu (6.49 ml) da se formira reakciona mešavina. Reakciona mešavina se meša na temperaturi od oko 25 °C, u zatvorenom sudu, 16 h. Posle toga, dobijena suspenzija se meša sa dietil etrom. Čvrsti precipitat se sakupi na filter papiru i ispere nekoliko puta dietil etrom da se dobije 1.25 g 117 u vidu čvrste supstance boje kože (prinos 88%), koja se, pošto ima čistoću od >99%, pokazano LC/MS analizom, koristi direktno u sledećem koraku.
(S>4-{5 4(S> 1,2-dihidroksietil]-3-fluoropm metilpiperazin- 1-karboksamid (Jedinjenje A155(a))
Suspenzija 117 (0.18 g, 0.40 mmol) i A<r->(5-fluorobenzo[t/]tiazol-2-il)-l//-imidazol-l-karboksamida (118, 0.105 g, 0.40 mmol) u DCM (5 ml) ohladi se u ledenom kupatilu. Doda se DIEA (1.0 ml) da se formira reakciona mešavina. Reakciona mešavina se meša na temperaturi od oko 25 °C, oko 16 h. Mešavina se razblaži korišćenjem DCM (100 ml), ispere zasićenim vodenim rastvorom NaHC03, ispere dva puta zasićenim slanim rastvorom, suši i koncentruje. Dobijena rezidua se hromatografiše na koloni od silika gela, uz eluiranje gradijentom od 100% DCM do 10:90 MeOH:DCM da se dobije 0.095 g Jedinjenja A155(a) u vidu bele pene (prinos 53%).<*>H NMR (DMSO-d<6>) S: 1.24 (3H, d, 7=6.80 Hz), 2.86 (IH, dt, 7=3.51, 12.50 Hz), 3.05 (IH, dd, 7=3.29, 12.24 Hz), 3.30 (IH, t, 7=12.28 Hz), 3.41 (IH, m, 7=6.14 Hz), 3.48 (IH, m, 7=5.26 Hz), 3.77 (IH, d, 7=12.94 Hz), 3.93 (IH, d, 7=11.62 Hz), 4.19 (IH, d, 7=12.28 Hz), 4.52 (IH, qt, 7=5.48 Hz), 4,61 (IH, br s), 4.77 (IH, t, 7=6.14 Hz), 5.36 (IH, d, 7=4.60 Hz), 7.09 (IH, t, 7=9.21 Hz), 7.36 (IH, br s), 7.47 (IH, d, 7=14.25 Hz), 7.88 (IH, m), 7.97 (IH, s), 11.67 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z=450.
Jedinjenje 118, Ar-(5-fluorobenzo[<3r]tiazol-2-il)-l//-imidazol-l-karboksaniid, priprema se slično kao jedinjenje 108, osim što se 5-fluorobenzo[c/]tiazol-2-amin (Sigma-Aldrich) koristi umesto 6-metilbenzo[t/]tiazol-2-amina.
5.5 Primer 5: Pripremanje Jedinjenja A122(a)
2-hloro-3-fluoro-5-vinilpiridin (112)
U rastvor 101 (5.00 g, 23.8 mmol) i 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-l,3,2-dioksaborolana (119, 21.39 mmol, Sigma-Aldrich) u mešavini EtOH (30 ml) i THF (64.0 ml), u atmosferi argona, dodaju se Pd(PPh3)2Cl2(1.33 g, 1.90 mmol, Sigma-Aldrich) i K2CO3(8.20 g, 59.4 mmol). Dobijena reakciona mešavina se zagreje na 60 °C i održava 16 h u hermetički zatvorenoj boci. Mešavina se ohladi na temperaturu od oko 25 °C, razblaži vodom i ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Organski sloj se izdvoji, ispere zasićenim slanim rastvorom i koncentruje. Rezidua se hromatografiše na koloni od silika gela, uz eluiranje EtOAc:heksanima da se dobije 112 u vidu bezbojnog ulja (prinos 85%). 'H NMR (CDCI3) 5: 5.48 (IH, d, J=10.97 Hz), 5.83 (IH, d, J=17.62 Hz), 6.68 (IH, dd, 7=10.97, 17.62 Hz), 7.52 (IH, d, 7=1.60 Hz), 8.20 (IH, d, 7=1.60 Hz). LC/MS (M+l): m/z =158.
Posle toga, Jedinjenja A122(a) priprema se slično kao Jedinjenje A155(a) u Primeru 4, osim što se jedinjenje 120 koristi umesto jedinjenja 118.
A122(a): (^-A-benzof^tiazol^-iO^KS-C^-l^-dihidroksietilj-S-fluoropiridin^-il)- 2-metilpiperazin-l-karboksamid. 'H NMR(DMSO-</6)5: 1.24 (3H, d, 7=6.6 Hz), 2.85 (lh, t,7=11.0Hz), 3.04 (III, d, 7=12.9 Hz), 3.29 (III, m), 3.41 (III, m, .7=5.5 Hz), 3.48 (IH, m, 7=5.5 Hz), 3.77 (IH, d, 7=12.7 Hz), 3.93 (IH, d, 7=12.5 Hz), 4.21 (IH, br s), 4.52 (IH, q, 7=5.0 Hz), 4.61 (IH, br s), 4.76 (IH, t, 7=6.1 Hz), 5.34 (IH, d, 7=4.6 Hz), 7.20 (IH, t,.7=6.8Hz), 7.36 (IH, t, .7=7.5 Hz), 7.46 (IH, dd,J=1.8,14.3 Hz), 7.55 (IH, br s), 7.82 (IH, br s), 7.97 (IH, s), 11.37 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z =432.Jedinjenje 120, A^-(benzo[</]tiazol-2-il)-l//-imidazol-l-karboksamid priprema se slično kao jedinjenje 108, osim što se benzo[</]tiazol-2-amin (Sigma-Aldrich) koristi umesto 6-metilbenzo[ć/]tiazol-2-amina.
5.6 Primer 6: Pripremanje Jedinjenja A122(b) (nije zahtevano), A122(c) (nije zahtevano), A122(e) (nije zahtevano), A123(e) (nije zahtevano), A125(b) (nije zahtevano), A125(e) (nije zahtevano), A126(a), A126(e) (nije zahtevano), A155(b) (nije zahtevano), A155(d) (nije zahtevano), A155(e) (nije zahtevano), i A158(a)
Korišćenjem postupaka sličnih onima koji su gore opisani u Primerima 4 i 5, pripremaju se sledeća Jedinjenja Formule (I).
A122(b): (7?)-A-(benzo[t/]tiazol-2-il)-4-(5-((5)-l,2-dihidroksietil)-3-fluoropiridin-2-il)-3-metilpiperazin-l-karboksamid. 'H NMR (DMSO-^O 8: 1.08 (3H, d, 7=6.4 Hz), 3.11-3.70 (6H, m), 4.35-3.93 (3H, m), 4.51 (IH, q, 7=5.3 Hz), 4.75 (IH, t, 7=5.6 Hz), 5.33 (IH, d, 7=4.4 Hz), 7.20 (IH, t,7=7.5Hz), 7.35 (IH, t, 7=7.8 Hz), 7.44 (IH, d, 7=14.3 Hz), 7.54 (IH, br s), 7.81 (IH, br s), 7.98 (IH, s), 11.32 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z=433.
A122(c): (Sj-AHbenzo[^tiazol-2-il)-4-{5-[(S> 1,2-dihidroksietil]-3-lfuoropiridin-2-il}-3-metilpiperazin-l-karboksamid. 'H NMR (DMSO-c/6) 8: 1-08 (3H, d, 7=6.6 Hz), 3.23-3.63 (6H, m), 3.90-4.21 (3H, m), 4.50 (IH, t, 7=5.9 Hz), 7.19 (IH, t, 7=7.5 Hz), 7.35 (IH, t, 7=7.5 Hz), 7.44 (IH, dd, 7=1.8, 14.3 Hz), 7.52 (IH, br s), 7.80 (IH, br s), 7.98 (IH, s), 11.26 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z=433.
A122(e): (tf)-W-(benzo[^tiazol-2-il)-4-(5^ 2-metilpiperazin-l-karboksamid. 'H NMR (CD3OD-d4) 8: 1.36 (3H, d, 7=6.4 Hz), 2.95 (IH, m), 3.12 (IH, d, .7=13.6 Hz), 3.41 (IH. m), 3.63 (2H, m), 3.89 (IH, d, 7=12.0 Hz), 4.03 (IH, d, 7=11.0 Hz), 4.67 (IH, m), 7.23 (IH, m), 7.37 (IH, m), 7.48 (2H, d, 7=14.0 Hz), 7.69 (IH, br s), 8.00 (III, s). LC/MS (M+l):m/ z=432.
A123(e): (^)-A<r->(6-hlorobenzo[^tiazol-2-il)-4-(5-((7?)-l,2-dihidroksietil)-3-fluoropiri-din-2-il)-2-metilpiperazin-l-karboksamid. !H NMR (CD3OD-J4) 8: 1.15 (3H, d, 7=6.8 Hz), 2.73 (IH, t, 7=10.0 Hz), 2.91 (IH, d, 7=14.0 Hz), 3.22 (IH, m), 3.42 (2H, m), 3.67 (IH, d, 7=14.0 Hz), 3.81 (IH, d, 7=12.0 Hz), 4.00 (IH, m), 4.45 (IH, t, 7=5.2 Hz), 7.13 (IH, dt, 7=2.0, 8.4 Hz), 7.25 (2H, dd, .7=1.6, 14.0 Hz), 7.55 (IH, m), 7.79 (IH, s).
LC/MS (M+l): m/ z =466.
A125(b): (7^)-4-{54(5)-l,2-dihidroksietil]-3-fluoropiridin-2-il}-A-(6-iluorobenzo[^ tiazol-2-il)-3-metilpiperazin-l-karboksamid. 'H NMR (DMSO-</6) 8: 1.08 (3H, d, 7=6.5 Hz), 3.14-3.68 (6H, m), 4.02 (IH, d, 7=11.9 Hz), 4.26-4.10 (2H, m), 4.51 (IH, dd, 7=5.6, 10.7 Hz), 4.74 (IH, t, 7=5.7 Hz), 5.32 (IH, d, 7=4.5 Hz), 7.21 (IH, td, 7=2.6, 9.1 Hz), 7.39-7.49 (IH, m), 7.51-7.60 (IH, m), 7.78 (IH, dd, 7=2.4, 8.8 Hz), 7.98 (IH, s), 11.37 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z=451.
A125(e): (7?)-4-(5-((i?)-l,2-dihidroksietil)-3-fluoropiridin-2-il)-A-(6-fluorobenzo[(7] tiazol-2-il)-2-metilpiperazin-l-karboksamid.<*>H NMR (CD3OD-J4) 8: 1.26 (3H, d,7=6.8Hz), 2.85 (IH, dt, 7=3.2, 13.0 Hz), 3.02 (IH, dd,7=3.6,13.0 Hz), 3.32 (IH, m), 3.53 (2H, m), 3.78 (IH, d, J=l2.0Hz), 3.92 (IH, d, 7=12.0 Hz), 4.12 (IH, m), 4.56 (IH, t, 7=6.0 Hz), 7.02 (IH, dt, 7=2.8, 12.0 Hz), 7.35 (IH, dd, 7=1.6, 14.0 Hz), 7.41 (2H, m), 7.89 (IH, s). LC/MS (M+l):m/ z =450.
Al 26(a): (5)-4-(5-((5)-l ,2-dihidroksietil)-3-fluoropiridin-2-il)-2-metil-Ar-(6-metilbenzo [c/]tiazol-2-il)piperazin-l-karboksamid. 'li NMR (DMSO-tfc) 8: 1.23 (3H, d, 7=6.8 Hz), 2.37 (3H, s), 2.84 (IH, t, 7=11.0 Hz), 3.03 (IH, dd, 7=3.5, 12.1 Hz), 3.28 (IH, m), 3.41 (IH, m, 7=5.5 Hz), 3.48 (IH, m, 7=5.5 Hz), 3.77 (IH, d, 7=12.7 Hz), 3.93 (IH, d, 7=11.6 Hz), 4.19 (IH, br s), 4.52 (IH, q, 7=5.3 Hz), 4.59 (IH, br s), 4.75 (IH, t, 7=5.3 Hz), 5.34 (IH, d, 7=4.6 Hz), 7.17 (IH, d, 7=7.0 Hz), 7.46 (IH, d, 7=13.6 Hz), 7.61 (2H, br s), 7.97 (IH, s), 11.23 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z=446.
A126(e): (7?)-4-(5-((^)-l,2-dihidroksietil)-3-fluoropiridin-2-il)-2-rnetil-A<r->(6-metilbenzo [c/]tiazol-2-il)piperazin-l-karboksamid. 'H NMR (CD3OD-J4) 8: 1.36 (3H, d, 7=6.8 Hz), 2.43 (3H, s), 2.95 (IH, t, 7=13 Hz), 3.12 (IH, dd,7=3.6, 13.0 Hz), 3.42 (IH, m), 3.64 (2H, m), 3.88 (IH, d, .7=13.0 Hz), 4.02 (IH, d, .7=13.0 Hz), 4.2 (IH, m), 4.67 (IH, t,.7=6.0Hz), 7.19 (IH, d,.7=9.2Hz), 7.34 (IH, m), 7.46 (IH, dd, .7=2.4, 14.0 Hz), 7.50 (IH, m), 8.00 (IH, s). LC/MS (M+l):m/ z=446.
A155(b): (7ć)-4-{54(S)-l,2-dihidroks^ tiazol-2-il)-3-metilpiperazin-l-karboksamid. 'HNMR (DMSO-J6) 8: 1.08 (4H, d, 7=6.7 Hz), 3.13-3.67 (6H, m), 3.94-4.07 (IH, m), 4.07-4.28 (2H, m), 4.50 (IH, q, 7=5.2 Hz), 4.75 (IH, t, .7=5.7 Hz), 5.33 (IH, d, .7=4.4 Hz), 7.00-7.15 (IH, m), 7.38-7.50 (2H, m), 7.85-8.02 (2H, m), 11.39 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z =451.
A155(d): (5)-4-{5-[(i?)-l,2-dihidroksietil]-3-fluoropiridin-2-il}-A-(5-fluorobenzo[i/] tiazol-2-il)-2-metilpiperazin-l-karboksamid. lH NMR (DMSO-J6) 8: 1.25 (3H, d, ,7=6.6 Hz), 2.83-2.93 (IH, m), 3.04 (IH, dd, .7=13.0, 3.4 Hz), 3.25-3.48 (3H, m), 3.77 (IH, d, .7=13.0 Hz), 3.92 (IH, d, .7=13.0 Hz), 4.19 (IH, d, .7=13.0 Hz), 4.57-4.69 (3H, m), 5.33 (IH, s), 7.08 (IH, td, .7=1.5, 8.5 Hz), 7.34 (IH, d, 7=8.5 Hz), 7.45 (IH, dd, 7=1.5, 14.2 Hz), 7.86 (IH, dd, .7=5.5, 8.5 Hz), 7.97 (IH, s), 11.63 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z=451.
A155(e): (7?)-4-{5-[(/?)-l,2-dihidroksietil]-3-lfuoropiridin-2-il}-A-(5-fluorobenzo[J] tiazol-2-il)-2-metilpiperazin-l-karboksamid. 'HNMR (DMSO-^6) 8: 1.24 (3H, d, 7=6.7 Hz), 2.86 (IH, td, .7=12.7, 3.3 Hz), 3.05 (IH, dd, .7=12.7, 3.3 Hz), 3.25-3.48 (3H, m), 3.74-3.79 (IH, m), 3.93 (IH, d, 7=12.7 Hz), 4.19 (IH, d, 7=12.7 Hz), 4.58-4.70 (3H, m), 5.34 (IH, s), 7.08 (IH, dt, 7=2.3, 9.1 Hz), 7.35-7.48 (2H, m), 7.84-7.96 (2H, m), 11.66 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z =451.
A158(a): (5)-A-(5,6-difluorobenzo[i/]tiazol-2-il)-4-5-((5r)-l,2-dihidroksietil)-3-fluoropi-ridin-2-il)-2-metilpiperazin-l-karboksamid. 'H NMR (DMSO-J6) 8: 1.24 (3H, d, 7=6.6 Hz), 2.87 (IH, t, 7=12.9 Hz), 3.06 (IH, d, 7=10.1 Hz), 3.31 (IH, m), 3.46 (2H, m), 3.76 (IH, d, 7=12.9 Hz), 3.92 (IH, d, 7=12.9 Hz), 4.14 (IH, d, 7=12.1 Hz), 4.54 (2H, m), 4.76 (IH, m), 5.35 (IH, d,7=4.2Hz), 7.46 (IH, dd,7=1.5,14.0 Hz), 7.71 (IH, t, 7=10.5 Hz), 7.97 (IH, s), 8.07 (IH, t, 7=8.6 Hz), 11.40 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z =468.
5.7 Primer 7: Pripremanje Jedinjenja AE (nije zahtevano)
Jedinjenja AE priprema se korišćenjem postupaka sličnih onima koji su opisani u Primerima 4 i 5, gore.
AE: (^)-A-(5,6-difluoroberao[^tiazol-2-il)-4-{54(5)-l,2-dihidroksietil]-3-lfuoropiri-din-2-il}-3-metilpiperazin-l-karboksamid. 'H NMR (DMSO-40 8: 1.08 (3H, d, J=6.6 Hz), 3.12-3.68 (6H, m), 4.00 (IH, d, .7=12.4 Hz), 4.08-4.30 (2H, m), 4.51 (IH, q, .7=5.3 Hz), 4.75 (IH, t, .7=5.7 Hz), 5.33 (IH, d,.7=4.6Hz), 7.44 (IH, dd, .7=1.8, 14.3 Hz), 7.64 (IH, dd, .7=7.6, 10.8 Hz), 7.94-7.99 (IH, m), 8.04 (IH, dd, .7=8.0, 10.3 Hz), 11.49 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z=469.
5.8 Primer 8: Pripremanje Jedinjenja A155(ad) (nije zahtevano)
Sledeće jedinjenje, Jedinjenje A155(ad) koje je racemska mešavina(7?)-l,2-dihidroksietil- i (5)-l,2-dihidroksietil-enantiomera, priprema se na isti način kao što je opisano u Primeru 4, gore, osim koraka 2 u kojem se OsCui NMO koriste kao oksidativni reagensi umesto AD-mix alfa.
Al 55(ad): (25)-4-(5-(l ,2-dihidroksietil)-3-fluoropiridin-2-il)-Af-(5-difluorobenzo[t/] tiazol-2-il)-2-metilpiperazin-l-karboksamid. *H NMR (DMSO-<4) 8: 1.24 (3H, d, .7=6.6 Hz), 2.84-2.87 (IH, m), 3.03-3.06 (IH, m), 3.25-3.52 (3H, m), 3.76 (IH, d, .7=12.8 Hz), 3.92 (IH, d, .7=12.8 Hz), 4.19 (IH, d, .7=12.8 Hz), 4.53-4.75 (3H, m), 5.34 (IH, d, .7=4.1 Hz), 7.08 (IH, t, .7=8.8 Hz), 7.24-7.50 (2H, m), 7.86 (IH, br), 7.96 (IH, s), 11.57 (IH, br s). LC/MS (M+l):m/ z=450.
5.9 Primer 9: Određivanje optičke čistoće Jedinjenja A155(e) (nije zahtevano)
%eeodređuje se za Jedinjenje A155(e), kako je prikazano dole:
Hiralna HPLC koristi se za određivanje %eeza Jedinjenje A155(e). Koristi se CHIRALPAK 1A kolona (Daicel Chemical, Tokyo, Japan). Određuje se područje pika za glavni i sporedni enantiomer i 94%eese izračunava korišćenjem jednačine iz Odeljka4.3.
Po želji, može da se koristi i 'H NMR. Za određivanje 'H NMR, pripremaju se bis-Mosher-ovi estarski derivati za jedinjenje/jedinjenja od interesa, npr., A155(e), tehnikom poznatom u struci. Određivanje %eeobavlja se dodavanjem hlorida Mosher-ove kiseline u višku jedinjenju od interesa (oko 0.6 mg) u piridin-d<5>(oko 0.530 ml), na temperaturi od oko 25 °C, u NMR tubi. 'H NMR se dobija 20 h posle dodavanja hlorida Mosher-ove kiseline. Odgovarajući pik se bira, za bis-Mosher-ov estar, sa 8 u opsegu od oko 7.00 ppm do oko 6.60 ppm. Važno je zapaziti da li se<13>C sateliti zapažaju ushodno i/ili nishodno od odabranog pika. 'H NMR pikovi za sporedni i glavni enantiomer se integrišu,<13>C sateliti se oduzmu i %eese izračunava korišćenjem gore navedene jednačine.
5.10 Primer 10: Kombinovanje Jedinjenja Formule (I) i fumarne kiseline
U 20 mg slobodne baze Jedinjenja A155(a) u 0.3 ± 0.1 ml MeOH u 4 ml-skoj fioli na temperaturi od oko 25 °C, doda se 1.1 ekv. fumarne kiseline (AK Scientific). Dobijena emulzija se meša magnetnom mešalicom oko 32 h. Posle toga emulzija evaporiše do suvog uz korišćenje centrifugirajućeg evaporatora (HT-8 Series II, Genevac Inc., Gardiner, NY). Proizvod se analizira pomoću 'H NMR, DTA, PXRD,<13>C NMR i<15>N
NMR.
Rastvaranje proizvoda praćeno 'H NMR analizom dobijenog rastvora za svaku komponentu pokazuje da prosečni molarni odnos Jedinjenja A155(a) prema fumarnoj kiselini iznosi oko 1:0.5 ± 0.2, sa vrednostima iz više određivanja u opsegu od 1:0.4 do 1:0.7. DTA proizvoda, pri stopi od 10 °C/minutu, dovodi do početka topljenja na 176.8 °C, kako je određeno temperaturom na kojoj ekstrapolirana endoterma topljenja pravi devijaciju od ekstrapolirane bazalne linije, i tačke topljenja od 182.9 °C, kako je određeno temperaturom pika endoterme topljenja. Nasuprot tome, za Jedinjenje A155(a) slično kristalisano u anhidratne kristale iz MeOH, ali u odsustvu fumarne kiseline, DTA početak topljenja je na 185.7 °C, a DTA tačka topljenja je na 189.4 °C. Podaci o intenzitetu difrakcije x-zraka na prahu dobijeni su na Bruker D8 Discover aparatu uz korišćenje CuKa radijacije (A,=1.5418 A). Skenirajući opseg bio je od 3.0° do 40° 20. Saopštene 20 vrednosti su ± 0.2° 20. Slika 1 daje PXRD obrazac i Tabela 4 zbirno prikazuje pikove dobijene za proizvod pripremljen sa fumarnom kiselinom, kako je gore opisano, dok Tabela 5 zbirno prikazuje pikove dobijene za kristalni anhidrat (tj., slobodnu bazu) Jedinjenja A155(a). Za obe tabele, maksimum pika u odnosu na intenzitet naznačen je na sledeći način: VS = veoma snažan, S = snažan, M = srednji i W = slab.
Sva određivanja NMR čvrstog stanja sa unakrsnom polarizacijom uz obrtanje pri magičnom uglu (solid state cross polarization magic angle spinning NMR, CP/MAS
NMR) obavljena su na NMR spektrometru Varian NMR System 600 MHz (Varian NMR Inc., Palo Alto, CA) sa rotorom za probu spoljašnjeg dijametra 3.2 mm, pri frekvenciji od 150.8 MHz, za 13C, i 60.79 MHz za 15N.Temperatura uzorka kontroliše se na 10°C±0.2°C.<15>N spektri mere se pod sledećim uslovima: širina spektra 24.510 Hz, vreme sticanja 40 ms, vreme odlaganja ponovljenog ciklusa od 5 s do 15 s, vreme kontakta 2 ms,<I5>N ti/2 pulsne dužine 4.2 ps, IHn/ 2pulsne dužine 2.2 ps. Kao referenca koristi se 15N glicin na 5 od -347.54.<13>C spektri mere se pod sledećim uslovima: širina spektra 43.103 Hz, vreme sticanja 40 ms, vreme odlaganja ponovljenog ciklusa od 10 s, vreme kontakta 3 ms,<l3>C% I2pulsne dužine 2.0 ps, IHk/ 2pulsne dužine 2.2 us. Kao referenca koristi se<13>C metilenski pik adamantana na 8 od 38.52. Za<13>C NMR i<15>N NMR analize, nevodonični atomi Jedinjenja Al 55(a) identifikovani su na sledeći način:
<15>N NMR CP/MAS spektri proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, dihidrohloridne soli Jedinjenja A155(a) i slobodne baze Jedinjenja A155(a) prikazani su na Slici 2. Značajne razlike u oblicima i/ili hemijskim pomacima N-3 i N-25 pikova mogu da se primete između spektra slobodne baze Jedinjenja A155(a) i dihidrohloridne soli Jedinjenja A155(a), i veruje se da ove razlike mogu da se pripišu jonskoj prirodi soli formirane sa svakim od ovih atoma azota u dihidrohloridnoj soli. Nasuprot tome, oblici i/ili hemijski pomaci N-3 i N-25 pikova u spektrima slobodne baze Jedinjenja A155(a) i proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom su daleko sličniji, hemijski pomaci se razlikuju samo za manje od 12 ppm. Veruje se da se njegova kokristalna priroda pokazuje izostajanjem značajne jonizacije N-3 i N-25 atoma azota u proizvodu pripremljenom sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom.
<13>C NMR CP/MAS spektar proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, prikazanje na Slici 3. Hemijski pomaci u ovom spektru su jasno različiti od hemijskih pomaka slobodne baze Jedinjenja A155(a) (nije prikazano). Pored toga, evidentni su novi pikovi (na oko 171,5, 170.3 i/ili 135.6 ppm) koji se pripisuju
prisustvu fumaratnog kokristala i različiti su od pikova fumarne kiseline u njenoj slobodnoj formi; ovi novi pikovi označeni su petokrakim zvezdama na Slici 3 i veruje se da ukazuju na kokristalnu prirodu proizvoda.
U jednoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima tačku početka topljenja od oko 175 °C do oko 179 °C, kada se meri korišćenjem DTA, pri stopi od 10 °C/min. U drugoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima tačku početka topljenja od oko 175.5 °C do oko 178.5 °C kada se meri korišćenjem DTA, pri stopi od 10 °C/min. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima tačku početka topljenja od oko 176 °C do oko 178 °C kada se meri korišćenjem DTA, pri stopi od 10 °C/min. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima tačku početka topljenja od oko 176.4 °C do oko 177.2 °C kada se meri korišćenjem DTA, pri stopi od 10 °C/min. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima tačku početka topljenja od oko 176.8 °C kada se meri korišćenjem DTA, pri stopi od 10 °C/min.
U jednoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima tačku topljenja od oko 181 °C do oko 185 °C kada se meri korišćenjem DTA, pri stopi od 10 °C/min. U drugoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima tačku topljenja od oko 181.5 °C do oko 184.5 °C kada se meri korišćenjem DTA, pri stopi od 10 °C/min. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima tačku topljenja od oko 182 °C do oko 184 °C kada se meri korišćenjem DTA, pri stopi od 10 °C/min. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima tačku topljenja od oko 182.5 °C do oko 183.3 °C kada se meri korišćenjem DTA, pri stopi od 10 °C/min. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima tačku topljenja od oko 182.9 °C kada se meri korišćenjem DTA, pri stopi od 10°C/min.
U jednoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima obrazac difrakcije x-zraka na prahu koji sadrži pik na svakom od 6.5°, 12.5°, 16.8° i 25.3° 20 ± 0.2° 26 kada se meri korišćenjem CuKa radijacije. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima obrazac difrakcije x-zraka na prahu koji sadrži pik na svakom od 6.5°, 12.5°, 16.8°, 23.2°, 25.3° i 38.5° 20 ± 0.2° 29 kada se meri korišćenjem CuKa radijacije. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima obrazac difrakcije x-zraka na prahu koji sadrži pik na svakom od 6.5°, 8.6°, 12.5°, 14.0°, 16.8°, 18.7°, i 25.3° 20 ± 0.2° 20 kada se meri korišćenjem CuKa radijacije. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima obrazac difrakcije x-zraka na prahu koji sadrži pik na svakom od 6.5°, 8.6°, 12.5°, 14.0°, 16.8°, 18.7°, 20.4°, 21.3°, 22.0°, 23.2°. 25.3° i 38.5° 20 ± 0.2° 20 kada se meri korišćenjem CuKa radijacije.
U jednoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima CP/MAS 13 C NMR spektar koj*i sadrži pikove sa hemijskim pomakom od 170.3 ± 0.2 ppm, 130 ± 0.2 ppm i 72,2 ± 0.2 ppm. U drugoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima CP/MAS<13>C NMR spektar koji sadrži pikove sa hemijskim pomakom od 171.5 ± 0.2 ppm, 170.3 ± 0.2 ppm, 130.0 ± 0.2 ppm i 72,2 ± 0.2 ppm. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima CP/MAS,<3>C NMR spektar koji sadrži pikove sa hemijskim pomakom od 171.5 ± 0.2 ppm, 170.3 ± 0.2 ppm, 130.0 ± 0.2 ppm, 72,2 ± 0.2 ppm i 15.1 ± 0.2 ppm. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima CP/MAS 13C NMR spektar koji sadrži pikove sa hemijskim pomakom od 170.3 ± 0.2 ppm, 135.6 ± 0.2 ppm i 72.2 ± 0.2 ppm. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima CP/MAS<13>C NMR spektar koji sadrži pikove sa hemijskim pomakom od 171.5 ± 0.2 ppm, 170.3 ± 0.2 ppm i 135.6 ± 0.2 ppm. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima CP/MAS<13>C NMR spektar koji sadrži pikove sa hemijskim pomakom od 171.5 ± 0.2 ppm, 170.3 ± 0.2 ppm, 135.6 ± 0.2 ppm, i72,2 ±0.2 ppm. U sledećoj formi, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom ima CP/MAS<13>C NMR spektar koji sadrži pikove sa hemijskim pomakom od 171.5 ± 0.2 ppm, 170.3 ± 0.2 ppm, 135.6 ± 0.2 ppm, 72,2 ± 0.2 ppm i 15.1 ± 0.2 ppm. Alternativno, 1.0 g slobodne baze Jedinjenja A155(a) u 20 ml MeOH na temperaturi od oko 25 °C meša se magnetnom mešalicom. Tada se doda 1.1 ekv. fumarne kiseline, dobijena suspenzija se meša magnetnom mešalicom dok rastvaranje naizgled ne bude kompletno, doda se "zasejavajući" kristal proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom i mešanje se nastavi dok se ne formira precipitat. Posle toga, precipitat se isfiltrira i suši pod sniženim pritiskom da se dobije proizvod koji, posle PXRD analize daje suštinski iste PXRD rezultate kao što su pokazani na Slici 1 i Tabeli 4.
5.11 Primer 11: Kombinovanje Jedinjenja Formule (I) i hlorovodonične kiseline
U 0.3 ±0.1 ml MeOH u 4 ml-skoj fioli koja sadrži i molekularno sito kao sredstvo za sušenje, doda se 1.1 ekv. koncentrovane hlorovodonične kiseline. Dobijena mešavina se meša magnetnom mešalicom oko 1 h. Molekularna sita se isfiltriraju. Posle toga doda se 20 mg Jedinjenja Formule (I). Dobijena suspenzija se meša magnetnom mešalicom oko 32 h. Posle toga, suspenzija evaporiše do suvog uz korišćenje centrifugalnog evaporatora (HT-8 Series II, Genevac, Inc., Gardiner, NY). Rezidualni proizvod se analizira pomoću<*>H NMR, DTA, i PXRD, kako je opisano u Primeru 10.
5.12 Primer 12: Kombinovanje Jedinjenja Formule (I) i tartarne kiseline
U 20 mg Jedinjenja Formule (I) u 0.3 ±0.1 ml MeOH u 4 ml-skoj fioli, doda se 1.1 ekv. tartarne kiseline, tj., 2,3-dihidroksisukcinske kiseline (Sigma-Aldrich). Dobijena suspenzija se meša magnetnom mešalicom oko 32 h. Posle toga, suspenzija evaporiše do suvog uz korišćenje centrifugalnog evaporatora (HT-8 Series II, Genevac, Inc., Gardiner, NY). Rezidualni proizvod se analizira pomoću 'H NMR, DTA, i PXRD, kako je opisano u Primeru 10.
5.13 Primer 13: Kombinovanje Jedinjenja Formule (I) i benzensulfonske kiseline
U 20 mg Jedinjenja Formule (I) u 0.3 ±0.1 ml MeOH u 4 ml-skoj fioli, doda se 1.1 ekv. benzensulfonske kiseline (Sigma-Aldrich). Dobijena suspenzija se meša magnetnom mešalicom oko 32 h. Posle toga, suspenzija evaporiše do suvog uz korišćenje centrifugalnog evaporatora (HT-8 Series II, Genevac, Inc., Gardiner, NY). Rezidualni proizvod se analizira pomoću 'H NMR, DTA, i PXRD, kako je opisano u Primeru 10.
5.14 Primer 14: Kombinovanje Jedinjenja Formule (I) i toluensulfonske kiseline
U 20 mg Jedinjenja Formule (I) u 0.3 ±0.1 ml MeOH u 4 ml-skoj fioli, doda se 1.1 ekv. toluensulfonske kiseline, tj., 4-metilbenzensulfonske kiseline (Sigma-Aldrich). Dobijena suspenzija se meša magnetnom mešalicom oko 32 h. Posle toga, suspenzija evaporiše do suvog uz korišćenje centrifugalnog evaporatora (HT-8 Series II, Genevac, Inc., Gardiner, NY). Rezidualni proizvod se analizira pomoću 'H NMR, DTA, i PXRD, kako je opisano u Primeru 10.
5.15 Primer 15: Vezivanje Jedinjenja Formule (I) za TRPV1
Metodi testiranja jedinjenja koja mogu da inhibiraju TRPV1 poznati su u struci, na primer metodi objavljeni u U.S. Patent No. 6,239,267, Duckvvorthet al.,U.S. Patent No.6,406,908, Mclntvreet al.,ili U.S. Patent No. 6,335,180, Juliuset al.Rezultati ovih testova pokazaće da se Jedinjenja Formule (I) vezuju i modulišu aktivnost TRPV1.
PROTOKOL 1
Kloniranje humanog TRPV1
Koristi se RNK humane kičmene moždine (komercijalno se nabavlja od Clontech, Palo Alto, CA). Reverzna transkripcija se obavlja na 1.0 pg ukupne RNK korišćenjem Thermoscript Reverse Transcriptase (komercijalno se nabavlja od Invitrogen, Carlsbad, CA) i oligo dT prajmera, kako je detaljno opisano u opisu proizvoda. Reakcije reverzne transkripcije inkubiraju se na 55 °C, 1 h, inaktiviraju toplotom na 85 °C, 5 min i tretiraju RNK-azom H na 37 °C, 20 min. Sekvenca humane TRPV1 cDNK dobij a se upoređivanjem humane genomske sekvence, pre anotiranja, sa objavljenom sekvencom pacova. Intronske sekvence se uklone i bočne egzonske sekvence se spoje da se stvori hipotetička humana cDNK. Prajmeri bočno od kodirajućeg regiona za humani TRPV1 dizajnirani su na sledeći naćin: "forvvard" prajmer GAAGATCTTCGCTGGTTGCACACTGGGCCACA (SEQ ID NO. 1) i "reverse" prajmer GAAGATCTTCGGGGACAGTGACGTTGGATGT (SEQ ID NO. 2). Korišćenjem ovih prajmera, obavlja se PCR TRPVI na jednoj desetini reakcione mešavine za reverznu transkripciju, uz korišćenje Expand Long Template Polvmerase i Expand Buffer 2, u finalnoj zapremini od 50 ul, prema uputstvima proizvođača (Roche Applied Sciences, Indianapolis, IN). Posle denaturacije na 94 °C, 2 min, obavlja se PCR amplifikacija u 25 ciklusa, na 94 °C, 15 s, 58 °C, 30 s, i 68 °C, 3 min, praćeno finalnom inkubacijom na 72 °C, 7 min, da se okonča amplifikacija. PCR proizvod od oko 2.8 kb se izoluje na gelu uz korišćenje 1.0% agaroze, Tris-acetatnog gela koji sadrži 1.6 ug/ml kristal-violeta i prečisti sa S.N.A.P. UV-Free Gel Purification Kit (komercijalno se nabavlja od Invitrogen). TRPV1 PCR proizvod se klonira u pFND/V5-His-TOPO vektor (komercijalno se nabavlja od Invitrogen), prema uputstvima proizvođača, da se dobije TRPVl-pIND konstrukt. DNK pripremanje, digestije restrikcionim enzimima i preliminarno DNK sekvenciranje obavljaju se prema standardnim protokolima. Sekvenciranje pune dužine potvrđuje identite humanog TRPV1.
Generisanje inducibilnih ćelijskih linija:
Ukoliko nije drugačije napomenuto, reagensi za ćelijske kulture nabavljaju se od Life Technologies of Rockville, MD. HEK293-EcR ćelije koje eksprimiraju ekdizonski receptor (komercijalno se nabavljaju od Intvitrogen) kultivišu se u medijumu za rast (Growth Medium) (Eagles-ov medijum modifikovan po Dulbecco-u koji sadrži 10% fetalni goveđi serum (komercijalno se nabavlja od Hvclone, Logan, UT), lx penicilin/streptomicin, lx glutamin, 1 mM natrijum piruvat i 400 pg/ml zeocina (komercijalno se nabavlja od Invitrogen)). TRPVl-pIND konstrukti se transfektuju u HEK293-EcR ćelijsku liniju korišćenjem Fugene-transfekcionog reagensa (komercijalno se nabavlja od Roche Applied Sciencies, Basel, Svvitzerland). Posle 48 h, ćelije se transformišu u selekcionom medijumu (Selection Mdium) (medijum za rast koji sadrži 300 pg/ml G418 (komercijalno se nabavlja od Invitrogen)). Približno tri nedelje kasnije, pojedinačne zeocin/G418-rezistentne kolonije se izoluju i ekspandiraju. Da bi se identifikovali funkcionalni klonovi, veći broj kolonija se zaseje na ploče sa 96 bunarčića i ekspresija se indukuje tokom 48 h, korišćenjem selekcionog medijuma dopunjenog 5 pM ponesteronom A ("PonA") (komercijalno se nabavlja od Invitrogen). Na dan testa, ćelijama se doda Fluo-4 (kalcijum-senzitivna boja koja se komercijalno nabavlja od Molecular Probes, Eugene, OR) i CAP-posredovani influks kalcij uma se meri korišćenjem fluorescentnog čitača ploča (Fluorescence Imaging Plate Reader, "FLIPR"), kako je dole opisano. Funkcionalni klonovi se ponovo testiraju, ekspandiraju i krioprezerviraju.
Test baziran na pH:
Dva dana pre obavljanja ovog testa, ćelije se zaseju na crne ploče sa 96 bunarčića sa providnim dnom obložene poli-D-lizinom (komercijalno se nabavljaju od Becton-Dickinson), pri 75 000 ćelija/bunarčiću, u medijumu za rast koji sadrži 5 pM "PonA"
(komercijalno se nabavlja od Invitrogen), da se indukuje ekspresija TRPV1. Na dan testa, ploče se isperu sa 0.2 ml lx Hank-ovog balansiranog slanog rastvora (komercijalno se nabavlja od Life Technologies), koji sadrži 1.6 mM CaCL;, i 20 mM HEPES, pH 7.4 ("pufer za ispiranje"), i ćelije se napune dodavanjem 0.1 ml pufera za ispiranje koji sadrži Fluo-4 (3 pM finalna koncentracija, komercijalno se nabavlja od Molecular Probes). Posle 1 h, ćelije se dva puta isperu sa 0.2 ml pufera za ispiranje i resuspenduju u 0.05 ml lx Hank-ovog balansiranog slanog rastvora (komercijalno se nabavlja od Life Technologies) koji sadrži 3.5 mM CaCE;, i 10 mM citrat, pH 7.4 ("pufer za test"). Ploče se zatim prenesu na FLIPR, za testiranje. Testno jedinjenje se razblaži u puferu za test i 50 pl dobijenog rastvora doda se na ćelijske ploče i rastvor se prati dva minuta. Podesi se da finalna koncentracija testnog jedinjenja bude u opsegu od oko 50 pikoM do oko 3 pM. Agonistički pufer (pufer za ispiranje titrovan sa 1 N HC1 da bi se obezbedio rastvor koji ima pH od 5.5 kada se pomeša sa testnim puferom u razmeri 1:1) (0.1 ml) se zatim doda u bunarčiće sa ćelijama i ploče se inkubiraju još 1 minut. Podaci se sakupljaju tokom čitavog vremena i analiziraju korišćenjem Excel i Graph Pad Prism da bi se odredila IC50.
Test baziran na kapsaicinu:
Dva dana pre obavljanja ovog testa, ćelije se zaseju na crne ploče sa 96 bunarčića sa providnim dnom, obložene poli-D-lizinom (50 000 ćelija po bunarčiću) u medijumu za rast koji sadrži 5 pM "PonA" (komercijalno se nabavlja od Invitrogen), da se indukuje ekspresija TRPV1. Na dan testa, ploče se isperu sa 0.2 ml lx Hank-ovog balansiranog slanog rastvora (komercijalno se nabavlja od Life Technologies), koji sadrži 1 mM CaCl2, i 20 mM HEPES, pH 7.4 i ćelije se napune dodavanjem 0.1 ml pufera za ispiranje koji sadrži Fluo-4 (3 pM finalna koncentracija). Posle jednog sata, ćelije se dva puta isperu sa 0.2 ml pufera za ispiranje i resuspenduju u 0.1 ml pufera za ispiranje. Ploče se prenesu na FLIPR, za test. 50 pl testnog jedinjenja razblaženog testnim puferom (lx Hank-ov balansirani slani rastvor koji sadrži 1 mM CaCl2i 20 mM HEPES, pH 7.4) doda se na ploče sa ćelijama i vrši se inkubiranje 2 min. Podesi se da finalna koncentracija jedinjenja bude u opsegu od oko 50 pikoM do oko 3 pM. Humani TRPV1 se aktivira dodavanjem 50 pl kapsaicina (400 nM) i ploče se inkubiraju još 3 min. Podaci se sakupljaju tokom čitavog vremena i analiziraju korišćenjem Excel i Graph Pad Prism da bi se odredila IC50.
PROTOKOL 2
Za Protokol 2, koristi se ćelijska linija ovarijuma kineskog hrčka (Chinese Hamster Ovary, CHO) inženjerisana tako da konstitutivno eksprimira humani rekombinantni TRPV1 (TRPV1/CHO ćelije). TRPV1/CHO ćelijska linija stvara se kako je dole opisano.
Kloniranje humanog TRPV1:
cDNK za humani TRPV1 receptor (hTRPVl) amplifikuje se korišćenjem PCR (KOD-Plus DNA polvmerase, ToYoBo, Japan) iz biblioteke humane moždane cDNK (BioChain) korišćenjem prajmera dizajniranih da okružuju kompletan otvoreni ram čitanja hTRPVl ("forvvard" 5'-GGATCCAGCAAGGATGAAGAAATGG (SEQ ID NO: 3) i "reverse"5'-TGTCTGCGTGACGTCCTCACTTCT (SEQ ID NO: 4)). Dobijeni PCR proizvodi prečiste se sa agaroznih gelova korišćenjem Gel Band Purification Kit (GE Healthcare Bioscience) i subkloniraju u pCR-Blunt vektor (Invitrogen). Klonirana cDNK se potpuno sekvencionira korišćenjem reagensa koji sadrži fluorescentnu boju sa terminatorom lanca (BigDye Terminator ver3.1 Cycle Sequencing Kit, Applied Biosystems) i ABI Prism 3100 genetičkog anaizatora (Applied Biosystems). pCR-Blunt vektor koji sadrži hTRPVl cDNK izloži se restrikcionoj digestiji korišćenjem EcoRl. Restrikcioni fragment se subklonira u ekspresioni vektor pcDNA3.1(-) (Invitrogen) i naziva se pcDNA3.1(-)-hVRl plazmid. Sekvenca cDNK kodirajuće za TRPV1 dostupna je pod GeneBank pristupnim brojem AJ277028.
Stvaranje TRPV1/CH0 ćelijske linije:
CHO-K1 ćelijska linija održava se u medijumu za rast koji se sastoji od ct-MEM, 10% FBS (Hvclone) i mešovitog rastvora 100 IU/ml penicilina - 100 pg/ml streptomicina (Nacalai Tesque, Japan), na 37 °C u uslovima 95%humidifikovanog vazduha i 5% CO2. Ćelije se transfektuju pcDNA3.1(-)-hVRl plazmidom uz korišćenje FuGENE6 (Roche) prema protokolu proizvođača. 24 h posle transfekcije, neomicin-rezistentne ćelije selektuju se korišćenjem 1 mg/ml G418 (Nacalai Tesque). Posle 2 nedelje, pojedinačne kolonije se sakupe, ekspandiraju i pretraže u pogledu ekspresije hTRPVl u testu kapsaicinom indukovanog influksa Ca (vidi dole), uz korišćenje FLIPR (Molecular Devices). Klon sa najvećim Ca<2+->odgovorom na kapsaicin odabere se za ponovno kloniranje istim postupkom. Ćelije koje eksprimiraju hTRPVl kultivišu se u medijumu za rast obogaćenom sa 1 mg/ml G418. Približno 1 mesec kasnije, stabilna ekspresija funkcionalnih TRPV1 receptora u odabranoj ćelijskoj liniji potvrđuje se validacijom Ca<2+->odgovora sa ili bez kapsazepina (Sigma, pri 1 nM-10 pM) u kapsaicinskom testu.
Test kapsaicinom indukovanog influksa Ca za selektovanje ćelija:
Sledeći test obavlja se da bi se identifikovale ćelije koje eksprimiraju hTRPVl. CHO-Kl ćelije transfektovane pcDNA3.1(-)-hVRl plazmidom zaseju se na crne ploče sa 384 bunarčića, sa providnim dnom (Corning) i kultivišu u medijumu za rast (vidi gore) 1 dan. Na dan eksperimenta, kultivacioni medijum se zameni puferom za test (20 mM HEPES, 137 mM NaCl, 2.7 mM KC1, 0.9 mM MgCl2, 5.0 mM CaCl2, 5.6 mMD-glukoza, 2.5 mM probenecid, pH 7.4) koji sadrži 4 pM Fluo-3-AM (Dojin, Japan). Posle inkubacije na 37 °C, 1 h, svi bunarčići se isperu 3 puta puferom za test uz korišćenje uređaja za ispiranje ploča EMBLA 384 (Molecular Devices) i ponovo napune puferom za test. Ploče se inkubiraju na temperaturi od oko 25 °C, 10 min. Zatim se ploče unesu u FLIPR i u svaki bunarčić se doda 1.5 pM rastvor kapsaicina (Sigma) pripremljen u puferu za test (finalna koncentracija 500 nM). Odgovori ćelija prate se 5 min.
Kultura ćelija:
1. Medijum za kulturu ćelija
1. Alfa-MEM (Gibco, CAT: 12561-056, LOT: 1285752): 450 ml.
2. Fetalni goveđi serum (FBS), inaktiviran toplotom (Gibco, CAT: 16140-071, LOT: 1276457): 50 ml. 3. Rastvor HEPES pufera, 1 M stok (Gibco, CAT: 15630-080): 10 ml (finalno 20 mM).
4. Geneticin 50 mg/ml stok (Gibco, CAT: 10135-035): 10 ml (finalno 1 mg/ml).
5. Rastvor mešavine antimikotičkih antibiotika, 100x stok (Nacalai Tesque, CAT: 02892-54): 5 ml).
Komponente 1-5, gore, kombinuju se u navedenim količinama i uskladište na 4 °C. Medijum za kulturu ćelija zagreje se na oko 37 °C pre upotrebe. Opciono, komponenta 5 može da se zameni rastvorom penicilina-streptomicina (na primer, Gibco 15140-122 ili Sigma P-0781).
2. Otapanje ćelija
TRPV1/CHO ćelije su bile zamrznute u CELLBANKER™ (Juji Field, Inc., Japan, CAT: BLC-1) i uskladištene na -80 °C. Korišćen je optimizovani rastvor za krioprezervaciju koji sadrži dimetil sulfoksid.
Fiole sa TRPV1/CHO ćelijama bile su uskladištene na -80 °C. Posle sklanjanja sa -80 °C fiole se odmah prenesu u vodeno kupatilo na 37 °C da se otapaju 1-2 minuta. Kada se potpuno otope, sadržaj fiole (1 ml/fioli) prenese se u sterilnu 15 ml-sku testnu epruvetu i polako se doda 9 ml toplog kultivacionog medij uma. Testna epruveta se zatim centrifugira na 1000 rpm, 4 min na temperaturi od oko 25 °C. Supernatant se ukloni i pelet resuspenduje u 10 ml kultivacinog medijuma. Ćelijska suspenzija se prenese u sterilni 75 cm<2->ski plastični flakon i inkubira u humidifikovanom vazduhu (95%) sa 5% CO2, na 37 °C. Viajbilnost ćelija se prati vizuelno i/ili prebrojavanjem, počevši približno 1 sat od početka inkubacije.
3. Pasažiranje ćelija
U vreme pasažiranja, ćelije u flakonu su blizu konfluencije. Medijum za kulturu ćelija se ukloni iz flakona za kultivisanje i doda se 10 ml sterilnog PBS(-), i flakon se nežno protrese. PBS se ukloni iz flakona i doda se 2 ml rastvora tripsin/EDTA (0.05% tripsina sa EDTA-4Na; Gibco, CAT: 25300-054) i flakon se nežno protrese. Flakon se inkubira na 37 °C, oko 2 min. Zatim se u flakon doda 8 ml ćelijskog kultivacionog medijuma i flakon se protresa da bi se osiguralo da sve ćelije budu u rastvoru. Ćelijska suspenzija se zatim prenese u sterilnu 15 ml-sku ili 50 ml-sku plastičnu epruvetu, centrifugira na 1000 rpm, 4 min, na temperaturi od oko 25 °C. Supernatant se ukloni i pelet resuspenduje u oko 5 ml kultivacionog medijuma. Broj ćelija određuje se pomoću Bruker-Turk hemocitometra.
Ćelije se zaseju u sterilnom 75 cm -skom plastičnom flakonu, pri oko 0.8 x 10 ćel./ml, 72 h i inkubiraju u humidifikovanom 95% vazduhu sa 5% CO2, na 37 °C.
4. Zamrzavanje ćelija
Postupak do određivanja broja ćelija isti je kao u odeljku pod naslovom "Pasažiranje ćelija", gore. Posle toga, ćelijska suspenzija se centrifugira na 1000 rpm, 4 min, na temperaturi od oko 25 °C. Supernatant se ukloni i pelet resuspenduje u CELLBANKER™ rastvoru da se dobije finalna koncentracija od 5 x 10<5>ćel/ml do 5 x IO<6>ćel/ml. Ćelijska suspenzija se prenese u odgovarajuće obeležene 1 ml-ske kriofiole koje se zatim stave u zamrzivač na -80 °C.
Test na bazi pH:
Sledeći test izvodi se da bi se odredila koncentracija sumporne kiseline koja bi dala pH koji indukuje Ca<2+->ski odgovor optimalan za efekat testnih jedinjenja na TRPV1.
1. Ćelije
TRPV1/CHO ćelije se zaseju na crne ploče sa 96 bunarčića, sa providnim dnom (Nunc) pri gustini od 1-2 x IO4 ćel/bunarčiću i rastu u 100 pl kultivacionog medijuma (alfa-MEM dopunjen sa 10% FBS, 20 mM HEPES, 1 mg/ml geneticina i 1% stok rastvora koji sadrži mešavinu antibiotika-antimikotika), 1-2 dana pre eksperimenta.
2. Određivanje pH senzitivnosti i doze agonista
2.1 Rastvor agonista
Sedam različitih rastvora agonista sa sumpornom kiselinom u koncentracijama od 15.0, 15.5, 16.0, 16.5, 17.0, 17,5 i 18.0 mM pripremi se razblaživanjem 1 M sumporne kiseline merećim puferom (vidi, npr., Sliku 1, U.S. Patent Application Publication No US 2009/0170868 Al). Različite koncentracije sumporne kiseline u rastvoru agonista biraju se tako da se razblaženjem 1:4 dobije finalna koncentracija sumporne kiseline od 3.0, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5 i 3.6 mM, označeno kao "B" do "H", respektivno. Korišćenje i pufer bez sumporne kiseline, označen kao "A".
2.2 Test
Određuje se pH zavisan Ca<2+->odgovor u kulturi TRPV1/CHO ćelija kultivisanih na ploči sa 96 bunarčića (vidi npr., Sliku 2, U.S. Patent Aplication Publication No US 2009/0170868 Al). Preciznije, određuje se influks Ca<2+>u TRPV1/CHO ćelije u odgovoru na niski pH, merenjem Fura-2 AM fluorescencije. Ćelije se stimulišu korišćenjem 3.0 mM (bunarčići br. B1-B6), 3.1 mM (C1-C6), 3.2 mM (D1-D6), 3.3 mM (E1-E6), 3.4 mM (F1-F6), 3.5 mM (G1-G6) ili 3.6 mM (H1-H6) H2S04ili merećeg pufera, pH7.2, bez H2S04(A1-A6). (1) Kultivacioni medijum se ukloni korišćenjem 8-kanalske pipete (Rainin, USA) sa ploče sa 96 bunarčića i bunarčići se napune sa po 100 pl pufera za punjenje (20 mM HEPES, 115 mM NaCl, 5.4 mM KC1, 0.8 mM MgCl2, 1.8 mM CaCl2, 13.8 mM D-glukoza, 2.5 mM probenecid, pH 7.4) koji sadrži 5 pM Fura-2-AM (Dojin, Japan).
(2) Ploča sa 96 bunarčića se inkubira na 37 °C, 45 min.
(3) Pufer za punjenje se ukloni iz svih bunarčića. Ćelije se zatim dva puta isperu sa 150 pl merećeg pufera (20 mM HEPES, 115 mM NaCl, 5.4 mM KC1, 0.8 mM MgCl2, 5.0 CaCl2, 13.8 mM D-glukoza, 0.1% BSA, pH 7.4) (bez probenecida). Bunarčići se zatim ponovo napune sa po 80 pl merećeg pufera. (4) Posle inkubacije na 4 °C, 15 min, ploča sa 96 bunarčića se prenese na aparat za čitanje ploča, model FDSS-3000 (Hamamatsu Photonica K. K., Japan). (5) Intenzitet fluorescencije Fura-2 prati se na talasnoj dužini od 340 nm i na 380 nm, respektivno, pri stopi od 0.5 Hz, ukupno 240 sekundi. Posle 16 vremenskih tačaka (32 s) detektovanja bazalne linija, u svaki bunarčić se doda po 20 pl rastvora agonista. Finalna zapreminaje 100 pl/bunarčiću. (6) Odnos intenziteta fluorescencije označava intenzitet fluorescencije na 340 nm prema intenzitetu fluorescencije na 380 nm u određenoj vremenskoj tački. Bazalna linija se podesi na prošek odnosa intenziteta fluorescencije za prvih 16 vremenskih tačaka pre dodavanja rastvora agonista. Maksimalan odgovor je najviši odnos intenziteta fluorescencije tokom 60 vremenskih tačaka posle dodavanja rastvora agnista. (7) Maksimalan odnos signala iz svakog bunarčića izračunava se kao izlazni podatak korišćenjem FDSS-3000 programa za analizu. Podaci se analiziraju korišćenjem Excel (Microsoft) i XLfit (idbs) softvera.
2.3 Određivanje pll
Posle posmatranja Ca<2+->odgovora, pufer iz svakog niza ploče sa 96 bunarčića (50 pl/bunarčiću, 8-20 bunarčića/ploči) se sakupi, bunarčić po bunarčić, i pH vrednost se meri korišćenjem portabl pH-metra (Shindengen, Japan).
Ca<2+->odgovori u nizovima D i E su intermedijarni i prema tome optimalni za testiranje efekata jedinjenja na TRPV1 kalcijumski kanal (vidi, npr., Sliku 2, U.S. Patent Aplication Publication No US 2009/0170868 Al). Finalne koncentracije sumporne kiseline u bunarčićima ovih nizova bile su 3.2 mM odnosno 3.3 mM. Ove finalne koncentracije sumporne kiseline dobijene su korišćenjem rastvora agonista i koncentracija sumporne kiseline od 16.0 mM odnosno 16.5 mM (nizovi D i E). pH dobijen korišćenjem ovih koncentracija sumporne kiseline bio je od oko 5.0 do oko 5.1. Prema tome, rastvori agonista sa sumpornom kiselinom u koncentracijama od 16.0 mM i 16.5 mM (nizovi D i E) odabrani su za eksperimente opisane dole u Odeljku 3.
3.pHtest
3.1 Agonist
U "ploči agonista", dva različita rastvora agonista sa različitim koncentracijama H2SO4, koriste se za svaki pH test (vidi, npr., Sliku 3 A, U.S. Patent Aplication Publication No. US 2009/0170868 Al). Za prvu polovinu ploče sa 96 bunarčića koristi se jedan rastvor agonista; za drugu polovinu koristi se drugi rastvor agonista. Rastvori agonista se dobij aj u razblaživanjem sumporne kiseline (1 M H2SO4) merećim puferom. Koncentracije za dva rastvora agonista određene su kako je opisano gore u Odeljku 2 Protokola 2.
Koncentracije sumporne kiseline dva rastvora agonista razlikuju se za 0.5 mM. U eksperimentu opisanom u Odeljku 2 Protokola 2, određeno je da koncentracije sumporne kiseline u rastvoru agonista iznose 16 mM i 16.5 mM, respektivno. Posle razblaživanja rastvora agonista 1:4, koncentracije sumporne kiseline bile su 3.2 mM i 3.3 mM. Dobijena pH vrednost za test pH bila je 5.0 do 5.1.
3.2 Testna j edinj enj a
Testna jedinjenja rastvore se u DMSO da se dobije 1 mM stok rastvor. Stok rastvor se dalje razblažuje korišćenjem DMSO, u 1:3 serijskim razblaženjima, u 6 stepena (1000, 250, 62.5, 15.625, 3.9062 i 0.977 uM). Tako dobijeni rastvori se dalje razblažuju u merećem puferu (1:100) kao 10x-stok serijska razblaženja sa koncentracijom DMSO od 1%. 10 pl 10x stoka doda se u svaki bunarčić na "ploči antagonista" (vidi korak 3.3.(4) dole). Prema tome, finalne koncentracije antagonista bile su sledeće: 0.977, 3.906, 15.63, 62.5, 250 i 1000 nM, sa 0.1% DMSO (vidi npr., Sliku 3B, U.S. Patent Aplication Publication No US 2009/0170868 Al).
3.3 Test
Koraci (1) i (2) ovog testa isti su kao koraci 2.2.(1) i 2.2.(2), respektivno, Protokola 2. (3) Ćelije se dva puta isperu sa 150 pl merećeg pufera (pomenut u koraku 2.2.(3) Protokola 2, bez probenecida). Bunarčići se zatim ponovo napune sa po 70 pl merećeg pufera. (4) 10 pl merećeg pufera ili 10 pl 10x stok-serijskog razblaženja testnog jedinjenja (opisano u koraku 3.2. gore) stavi se u svaki bunarčić. Obično se samo jedno testno jedinjenje testira na jednoj ploči sa 96 bunarčića. Broj replika po ploči sa 96 bunarčića za određeni antagonist pri određenoj koncentraciji je 2 x 7 jer, kako je opisano za "ploču agonista", koriste dve različite koncentracije sumporne kiseline po ploči sa 96 bunarčića i koristi se sedam nizova (A-C, E-H) po ploči sa 96 bunarčića (N = 2 x 7).
Korak (5) je isti kao korak 2.2.(4), gore.
(6) Intenzitet fluorescencije Fura-2 prati se kako je opisano u koraku 2.2.(5), gore. Posle 16 vremenskih tačaka za detekciju bazalne linije, u svaki bunarčić se doda po 20 pl rastvora agonista (mereći pufer titrovan sa H2SO4, da se dobije pH u opsegu od oko 5.0 do oko 5.1, kada se pomeša u odnosu 1:4 sa merećim puferom koji sadrži testno jedinjenje) (finalna zapremina je 100 pl/bunarčiću).
Koraci (7) i (8) su kao stoje opisano u koracima 2.2.(6) i 2.2.(7), gore, respektivno.
3.4 ProverapH
(1) pH vrednosti pufera u bunarčićima od Al do Hl i A7 do H7 mere se jedna po jedna korišćenjem portabl pH-metra. (2) Kada se potvrdi da pH bunarčića iznosi od oko 5.0 do oko 5.1, sledećih pet bunarčića sa njegove desne strane (npr., za bunarčić BI, to su bunarčići B2 do B6) se proveravaju jedan za drugim. (3) Za izračunavanje IC50, koriste se samo podaci dobijeni za bunarčiće sa pH vrednostima od 5.0-5.1.
Broj bunarčića koji su testirani u pogledu svog pH varira od ploče do ploče (od oko 16 do 60 bunarčića/ploči). Broj zavisi od rezultata koraka 3.4(1) gore i Ca odgovora.
Test baziran na kapsaicinu
Jedan dan pre testa, TRPV1/CHO ćelije se zaseju na crne ploče sa 96 bunarčića sa providnim dnom (20 000 ćelija/bunarčiću) u medijumu za rast. Na dan eksperimenta, ćelije se isperu sa 0.2 ml lx Hank-ovog balansiranog slanog rastvora (Life Technologies), koji sadrži 1.6 mM CaCL. i 20 mM HEPES, pH 7.4 ("pufer za ispiranje"). Posle toga, ćelije se pune inkubiranjem u 0.1 ml pufera za ispiranje koji sadrži Fluo-4 u finalnoj koncentraciji 3 pM. Posle 1 sata, ćelije se dva puta isperu sa 0.2 ml pufera za ispiranje i resuspenduju u 0.1 ml pufera za ispiranje. Ploče se zatim prenesu na fluorescentni čitač ploča Fluorescence Image Plate Reader (Molecular Devices). Intenzitet fluorescencije se prati 15 sekundi da se uspostavi bazalna linija. Posle toga, testna jedinjenja razblažena u puferu za test (lx Hank-ov balansirani slani rastvor koji sadrži 1 mM CaCl2i 20 mM HEPES, pH 7.4) sa 1% DMSO dodaju se na ćelijske ploče i fluorescencija se prati 2 minuta. Finalna koncentracija jedinjenja podešava se da bude u opsegu od 100 pM do 1.5625 pM. Ako je testno jedinjenje posebno snažan antagonist, finalna koncentracija jedinjenja podešava se da bude u opsegu od 10 pM do 1.5625 pM. Humani TRPVI se zatim aktiviraju dodavanjem 50 pl kapsaicina (finalna koncentracija 100 nM) i ploče se inkubiraju još 3 min. Podaci se sakupljaju tokom čitavog vremena i analiziraju korišćenjem Excel i formule za podešavanje krive GraphPad Prism.
Rezultati testova Protokola 2 prikazani su u Tabeli 6.
Test humanog TRPVI baziran na toploti
Koriste se CHO ćelije koje stabilno eksprimiraju humani TRPV1 (hTRPVl). Funkcionalna procena toplotom indukovne aktivatcije hTRPVl obavlja se testom influksa Ca 9+ baziranom na ćelijama, uz kori* šćenj*e ABI7500 Fast Real Time PCR sistema, kao što je opisano u Reubishet ah,"Functional assessment of temperature-gated ion-channel activitv using a real-time PCR machine",www. BioTechniques. com47(3):iii-ix (2009), što je ovim uključeno kao referenca.
Ukratko, hTRPVl/CHO ćelije se kultivišu u medijumu za rast u posudi za kulturu tkiva, na 37 °C, u CO2inkubatoru.Na dan testa, kultivacioni medijum se ukloni i ćelije se odvoje od podloge korišćenjem 0.05% tripsina na 37 °C, uz 5% CO2, 90 s. Odvojene ćelije se centrifugiraju (1000 rpm, 4 min) da se ukloni supernatant koji sadrži tripsin i resuspenduju u puferu za test (115 mM NaCl, 5.4 mM KCL 0.8 mM MgCl2• 6H20, 1.8 mM CaCl2 • 2H20, 13.8 mM D-glukoza i 20 mM HEPES). Zatim se ćelije napune 5 pM Fluo-4 Ca<2+->reporterskom bojom, u prisustvu 2.5 mM probenecida, na 37 °C, uz 5% CO2, 45 min. Posle toga ćelije se isperu dva puta merećim puferom (pufer za test dopunjen 0.1% BSA i 3.2 mM CaCb), zatim se prenesu u Fast 96-well Reaction Plate (0.1 ml) (Part no. 4346907, MICROAMP, Applied Biosystems, Foster City, CA). Gustina ćelija bila je 100 000 ćelija/24 pl/bunarčiću. Rastvor jedinjenja koje se testira (6 pl/bunarčiću) doda se u svaki bunarčić ploče sa 96 bunarčića. Prema tome, reakciona zapremina po bunarčiću iznosi 30 pl.
Ploče se zatim stave u ABI7500 Fast Real Time PCR instrument (Applied Biosystems) da se očitava fluorescencija na na različitim temperaturama uz korišćenje 7500 softvera, verzija 2.02 (Applied Biosystems). Inicijalna temperatura podesi se na 25 °C, 1 min, što je praćeno temperaturnom rampom na 45 °C u 100 s, da bi se ćelijama dostavila toplota.
[Ca<2+>]jod govor hTRPVl/CHO ćelija na toplotu određuje se kao:
[fluorescencija očitana na 45 °C - fluorescencija očitana na 25 °C ].
Krive koncentracionog odgovora jedinjenja i IC50vrednosti analiziraju se korišćenjem GraphPad Prism 4 softvera (GraphPad Software, La Jolla, CA).
Podaci o IC50vrednostima dati u Tabeli 6 prikazani su kao srednja vrednost ± standardna greška; broj merenja izveden za svaki test prikazan je u zagradama, osim kada je vršeno samo jedno merenje i nema broja prikazanog u zagradi. Rezultati u Tabeli 6 pokazuju da su mnoga Jedinjenja Formule (I) i/ili (II) snažni TRPV1 antagonisti.
B155(h)(nije 107 ±20 (4) ~ qh zahtevano)<H>0/'r^CH
JL?N
O^NH N?S
0
F
BI550) (nije 344 ± 116(3) 439 ±71 (2) OH zahtevano) hcv, JL,U
I ?1
F"t? \CH3
N O^NH N^S
<0>
F
B155(o)(nije 249 ± 34 (3) 1233 ±595 (2) oh zahtevano) ^ y^ cH3
pA?.N
?N ?CH?
N
O^NH N?S
F
BI580) (nije 49 ± 10(3) 136 ±20 (3) ^ zahtevano)ho'-(^ch
ACH3
N
O^NH N?S
tt
F F
5.16 Primer 16:In vitrotestovi prevencije ili lečenja bola
Testirane životinje: U svim eksperimentima koriste se pacovi koji su na početku eksperimenta bili teški između 200 i 260 g. Pacovi se drže u grupi i sve vreme imaju slobodan pristup hrani i vodi, osim pre oralne primene Jedinjenja Formule (I), kada se hrana sklanja 16 sati pre doziranja. Kontrolna grupa služi za upoređivanje sa pacovima tretiranim Jedinjenjem Formule (I). Kontrolnoj grupi se daje prenosnik za Jedinjenje Formule (I). Zapremina prenosnika datog kontrolnoj grupi ista je kao zapremina nosača i Jedinjenja Formule (I) datih testnoj grupi.
Akutni bol: Da bi se procenilo delovanje Jedinjenja Formule (I) u lečenju ili prevenciji akutnog bola, može da se koristi test izmicanja repa pacova. Pacovi se blago pridržavaju rukom i rep se izloži usmerenom snopu toplotnog zračenja, na tački 5 cm udaljenoj od vrha, korišćenjem jedinice za test povlačenja repa (Model 7360, komercijalno nabavljeno od Ugo Basile of Italy). Latencije povlačenja repa definišu se kao interval između početka delovanja termičkog stimulusa i povlačenja repa. Životinje koje ne odgovore u roku od 20 sekundi sklanjaju se iz jedinice i pripisuje im se latencija povlačenja od 20 sekundi. Latencije povlačenja repa mere se neposredno pre (pre tretmana) i 1, 3 i 5 sati posle primene Jedinjenja Formule (I). Podaci se izražavaju kao latencija/latencije povlačenja repa, i procenat maksimalnog mogućeg efekta (maximal possible effect, MPF), tj., 20 s. izračunava se na sledeći način:
Test izmicanja repa pacova opisan je u D'Amouret al.,"A Method for Determining Loss of Pain Sensation",J. Pharmacol. Exp. Ther.72:74- 79 (1941).
Zapaljenski bol: Da bi se procenilo delovanje Jedinjenja Formule (I) u lečenju ili prevenciji zapaljenskog bola koristi se model Freund-ovog kompletnog adjuvansa ("FCA") za zapaljenski bol. Zapaljenje zadnje šape pacova indukovano FCA udruženo je sa razvojem perzistentne zapaljenske mehaničke hiperalgezije i omogućava pouzdano predviđanje antihiperalgezijskog dejstva klinički korisnih analgetičkih lekova (Barthoet al.,"Involvement of capsaicin-sensitive neurons in hvperalgesia and enhanced opioid antinociception in inflammation",Naunyn- Schmiedeberg' s Archives of Pharmacol.342:666-670 (1990). U desnu zadnju šapu svakog mužjaka Jcl:SD pacova, starog 6 nedelja daje se intraplantarna injekcija od 50 pl 50% FCA (Sigma-Aldrich). 24 sata posle injekcije procenjuje se odgovor životinje na škodljive mehaničke stimuluse određivanjem PWT, kako je dole opisano. Pacovima se zatim daje jedna injekcija od 0.1, 0.3, 1.3 ili 10 mg/kg prozvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, 20 mg/kg ibuprofena kao kontrola (EMD Millipore Chemicals, Inc.) ili prenosnik kao kontrola (0.5% tež/zapr. metilceluloza (400cP, Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Osaka, Japan)/vodeni rastvor). Količina fumarne kiseline (AK Scientific) uporediva sa onom koja je prisutna u proizvodu pripremljenom sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, takođe je prisutna u svakoj kontroli. Odgovori na škodljivu mehaničku stimulaciju određivani su 1, 3, 5 i 7 sati posle primene. Procenat reverzije hiperalgezije za svaku životinju definisan je kao:
Izuzev kontrola (tj., ibuprofen, prenosnik) gde je korišćen Student-ov Mest, za procenat reverzije rađen je Dunnett-ov test. U oba slučaja, vrednosti sa p<0.05 smatrane su za statistički značajne. Rezultati % reverzije za primenu proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, i odgovarajućih kontrola prikazani su na Tabeli 7.
Kako pokazuju rezultati u Tabeli 7, procenjivanjem delovanja Jedinjenja Formule (I) pokazano je da su ova jedinjenja efikasna, npr., proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, značajno smanjuje FCA-indukovano zapaljenje, sa ED50vrednostima od oko 0.2 mg/kg do oko 0.4 mg/kg i maksimalnim vrednostima % reverzije od oko 24% do oko 100%. Na primer, % reverzije FCA-indukovanog zapaljenja posle primene doze od 3 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, bio je oko 80% ili više, tj., 80.3% 1 sat posle primene, 87.9% 3 sata posle primene, 86.6% 5 sati posle primene i 97.3% 7 sati posle primene proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10.
Čak i pri najmanjoj efikasnoj dozi od 0.1 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, % reverzije FCA-indukovanog zapaljenja bio je oko 24% ili više, tj., 31.9% 1 sat posle primene,
37.8% 3 sata posle primene, 31.3% 5 sati posle primene i 23.6% 7 sati posle primene proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10. Nasuprot tome, doza ibuprofena od 20 mg/kg bila je manje efikasna od doze od 0.3 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, u svakoj testiranoj tački vremena, tj., 28.6% prema 65.0%, respektivno, 1 sat posle primene, 41. 5% prema 60. 2%, respektivno, 3 sata posle primene, 39. 2% prema 54. 1%, respektivno, 5 sati posle primene i 32.5% prema 39.4%, respektivno, 7 sati posle primene. Kada se prave ovakva poređenja treba napomenuti daje primenjena doza ibuprofena, 20 mg/kg, 66 puta veća od doze proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, 0.3 mg/kg.
Bol u osteoartritisu: Da bi se procenilo delovanje Jedinjenja Formule (I) u lečenju ili prevenciji bola u osteoartritisu, koristi se model osteoartritisa indukovanog mononatrijum jodoacetatom (MIA, tj., natrij um-2-jodoacetat) kod pacova. Intraartikularna injekcija MIA dovodi do degeneracije zgloba, koja se karakteriše osteolizom i otokom, sa izmeštanjem patele, uz smanjenje sadržaja minerala kosti i gustine minerala kosti (Pomoniset al.,"Development and Pharmacological characterization of a rat model of osteoarthritis pain",Pain114:339-346 (2005)). Pod izofuranskom anestezijom, daje se intraartikularna injekcija 2 mg MIA (Sigma-Aldrich) u 50 pl slanog rastvora, kroz infrapatelarni ligament zgloba kolena desne zadnje noge mužjaka pacova Crl:CD(SD). starih 6 nedelja. Kontrolni pacovi primaju intraartikularnu injekciju 50 pl slanog rastvora preko zgloba kolena desne zadnje noge. Levi zglob kolena svih pacova ostaje netretiran. Dve nedelje posle injekcije MIA, procenjuje se ponašanje pacova u vezi sa osteoartritisnim bolom neposredno pre i 1, 3, 5, 7 i 24 sata posle oralne primene leka u prenosniku (za dan 1) određivanjem sposobnosti podnošenja tereta, preko testa razlika u podnošenju tereta (weight bearing difference, WBD) i sposobnosti stiska preko testa jačine stiska, testovi se izvode kako je dole opisano. Prema tome, u proceni olakšanja osteoartritisnog bola preko određivanja sposobnosti stiska, 24-časovna vremenska tačka bila je početak novog dana kada je lek u prenosniku ponovo dat oralnim putem (24 sata posle prve primene), za određenu dozu. Na dane 2, 3 i 4, odgovor sposobnosti stiska određivanje 3 i 24 sata kasnije. Pored toga, 3 mg/kg celekoksiba (BioVision, Inc., Milpitas, CA), visokoselktivnog COX-2 inhibitora, koji je prihvaćen kao sredstvo za olakšanje zapaljenja i bola, u prenosniku i sam prenosnik (0.5% težina/zapremini metilceluloze (400cP, Wako Pure Chemical Industries, Ltd.,)/vodeni rastvor) oralno se daju kao kontrole. Količina fuumarne kiseline
uporediva sa onom koja je prisutna u proizvodu pripremljenom sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, takođe je prisutna u svakoj kontroli.
Test razlike u podnošenju tereta kao procena bola vezanog za osteoartritis: Test razlike u podnošenju tereta predstavlja prihvaćeni metod procene efikasnosti klinički korisnih analgetičkih lekova u vezi sa osteoartritisnim bolom (vidi Pomoniset al.(2005)). WBD se procenjuje korišćenjem Linton Icapacitance Tester (Linton Instrumentation, Norfolk, UK). Pacovi se stave na aparat tako da stoje na svojim zadnjim nogama i puste se da se prilagode na aparat. Kada se smire, težina koju podnosi svaka noga meri se tokom perioda od 3 s. Rezultati se uzimaju za svakog pacova i svaku tačku vremena, a srednje vrednosti tri očitavanja koriste se za anlizu podataka. WBD se iskazuje kao "% WR", tj. procenat težine na desnoj zadnjoj nozi u koju je injektiran MIA, korišćenjem sledeće formule:
gde je WR težina na desnoj zadnjoj nozi i WL je težina na levoj zadnjoj nozi (netretiranoj). 50% vrednosti % WR odgovara jednakoj distribuciji težine na obe zadnje noge. "% WRR", tj., reverzije % WR ometenosti koja se zapaža posle injekcije MIA određuje se za svaku dozu, u svakoj vremenskoj tački, uz korišćenje sledeće formule: gde je (% WR)posieieka% WR određen u svakoj tački vremena posle oralne primene za svaku dozu, svake primenjene supstance, (% WR)preiekaje % WR određen pre oralne primene svake primenjene supstance, i (% WR)kontrolni pacovje % WR određen za kontrolne pacove (koji su primali injekciju slanog rastvora u zglob kolena desne zadnje noge). Izuzev kontrola (tj., celekoksib, prenosnik) gde je korišćen Student-ov/-test, izvođen je Dunnett-ov test za % WRR. U oba slučaja, vrednosti sa p<0.05 smatrane su za statistički značajne. Rezultati % WRR za primenu proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, i odgovarajućih kontrola prikazani su na Tabeli 8.
Kako pokazuju rezultati u Tabeli 8, procenjivanjem delovanja Jedinjenja Formule (I) pokazano je da su ova jedinjenja efikasna, npr., proizvod pripremljen sa Jedinjenjem
A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, značajno smanjuje osteoartritisni bol, što je određeno preko WBD, sa maksimalnim vrednostima % reverzije od oko 8.8% do oko 56.9%. Na primer, % reverzije osteoartritisnog bola posle primene doze od 20 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, bio je oko 20% ili više, tj., 41% 1 sat posle primene, 56.9% 3 sata posle primene, 46. 9% 5 sati posle primene, 35.6% 7 sati posle primene i čak 19.8% 24 sata posle primene proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10.
Čak i pri najmanjoj efikasnoj dozi od 1 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, % WR bio je oko 9% ili više, tj., 15.2% 1 sat posle primene, 28.8% 3 sata posle primene, 16.1% 5 sati posle primene i 8.8% 7 sati posle primene proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10. Nasuprot tome, doza celekoksiba od 3 mg/kg bila je manje efikasna od doze od 1 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom kako je opisano u Primeru 10 u svakoj testiranoj tački vremena kraćoj od 24 h, tj., 10.2% prema 15.2%, respektivno, 1 sat posle primene, 27.8%) prema 28.8%, respektivno, 3 sata posle primene, 14.1% prema 16.1%, respektivno, 5 sati posle primene i 6.0% prema 8.8%, respektivno, 7 sati posle primene. Kada se prave ovakva poređenja treba napomenuti da je primenjena doza celekoksiba, 3 mg/kg, 3 puta veća od doze proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, 1 mg/kg.
Test jačine stiska kao metod procene bola vezanog za osteoartritis: Test jačine stiska predstavlja prihvaćeni metod procene efikasnosti klinički korisnih analgetičkih lekova u vezi sa osteoartritisnim bolom (Chandranet al.,"Pharmacological modulation of movement-evoked pain in a rat model of osteoarthritis",Eur. J. Pharmacol.613:39-45
(2009); Chuet al,"TRPVT-related modulation of spinal neuronal activitv and behavior in a rat model of osteoarthritic pain",Brain Res.1369:158-166 (2011)). Jačina stiska (grip force, GF) zadnje noge se procenjuje korišćenjem Animal Grip Strength Svstem (San Diego Instruments, San Diego, CA). Pacovi se blago pridržavaju i puste se da se uhvate zadnjim nogama za prečku metalne mrežice za merenje tenzije. Životinja se zatim povlači u rostro-kaudalnom smeru dok se noge ne otkače od mrežice. Beleži se sila (u g) pri kojoj se pacov odvojio od mrežice. Svaka životinja se testira dva puta u intervalima od oko 3-10 minuta, u svakoj tački vremena, a srednje vrednosti dva očitavanja koriste se kao GF za anlizu podataka. Jačina stiska, normalizovana u odnosu na težinu svake životinje, izražava se kao "GF/B", tj., odnos GF prema telesnoj težini, gde je GF jačina stiska u gramima i B je telesna težina životinje u kg. "% GFR", tj., procenat reverzije ometenosti (normalizovane) jačine stiska, koja se zapaža posle injekcije MIA, određuje se za svaku dozu, u svakoj vremenskoj tački, korišćenjem sledeće formule: gde je (GF/B)iekGF/B određen u svakoj tački vremena posle oralne primene, za svaku dozu, svake primenjene supstance, kod MIA-injektiranih životinja, (GF/B)prenosnikje GF/B određen u svakoj tački vremena posle oralne primene za kontrolu sa prenosnikom primenjenim kod MIA-injektiranih životinja, i (GF/B)kontroini pacov je GF/B određen za kontrolne pacove (životinje injektirane slanim rastvorom koje su oralnim putem primale samo prenosnik). Izuzev kontrola (tj., celekoksib, prenosnik) gde je korišćen Student-ov Mest, izvođen je Dunnett-ov test za % GFR. U oba slučaja, vrednosti sa p<0.05 smatrane su za statistički značajne. Rezultati % GFR za primenu proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, i odgovarajućih kontrola prikazani su na Tabeli 9.
Kako pokazuju rezultati u Tabeli 9, jedna primena proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10 (0.3, 1, 3, 10 ili 20 mg/kg) i primena jednom dnevno proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10 (1, 3 ili 10 mg/kg) tokom četiri dana pokazuje statistički značajne efekte protiv MIA-indukovanog osteoartritisnog bola kod pacova. Posle jedne primene, maksimalni analgetski efekat proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pri 1 i 3 mg/kg (i 10 i 20 mg/kg) bio je veći nego efekat celekoksiba pri 3 mg/kg. Prema tome Jedinjenja Formule (I) su efikasna u olakšanju osteoartritisnog bola
in vivo.
Tačnije, jedna primena proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuje analgezijski efekat u modelu MIA-indukovanog osteoartritisnog bola. Posle doze od 20 mg/kg proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuje značajan analgetski efekat 1, 3, 5 i 7 sati posle primene. Maksimalna analgetska efikasnost zapažena za proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, bila je 65.1% reverzije postignute 3 sata posle primene. Slično, posle doziranja sa 1, 3 i 10 mg/kg, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuje značajan analgetski efekat 1, 3, 5 i 7 sati posle primene. Pored toga, čak i posle doziranja sa 0.3 mg/kg, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuje značajan analgetski efekat 3 i 5 sati posle primene. Maksimalna analgetska efikasnost pri 0.3, 1, 3 i 10 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, bila je 21.1%, 45. 2%, 53.6% odnosno 55.6% reverzije, sve 3 sata posle primene. Ovi rezultati pokazuju da se postiže značajan dozno zavisni analgetski efekat. Rezultati ponavljane primene tokom 4 dana, proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuju značajan dozno zavisni analgetski efekat. Na dan 2 doziranja, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuje značajan dozno zavisni analgetski efekat 3 sata posle primene. Analgetski efekat posle doziranja sa 1, 3 i 10 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, bio je 43.1%, 50.5% i 57.5% reverzije, respektivno. Na dan 3 doziranja, 1, 3 i 10 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuju značajan dozno zavisni analgetski efekat, uz 38.0%, 45.0% i 51.6%> reverzije, respektivno. Na dan 4 doziranja, 1, 3 i 10 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuju značajan dozno zavisni analgetski efekat, uz 40.1%, 45.6% i 52.2% reverzije, respektivno.
Pored toga, rezultati pokazuju da postoji, poželjno, izostanak razvoja tolerancije posle ponavljane primene. Na primer, doziranje sa 10 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuje grubo uporedivi maksimalni analgetski efekat 3 sata posle svake primene, 55.6%, 57.5%, 51.6% i 52.2% reverzije, respektivno, posle dana 1, 2, 3 i 4 primene.
Jedno oralno doziranje celekoksibom, pozitivnom kontrolom, takođe proizvodi analgteske efekte u modelu MIA-indukovanog osteoartritisnog bola. Posle doziranja sa 3 mg/kg, celekoksib pokazuje značajne analgetske efekte 1, 3 i 5 sati posle primene. Međutim, maksimalna analgetska efikasnost zapažena za celekoksib, 30.0% reverzije 3 sata posle dana 1 primene 3 mg/kg iznosila je samo oko 66. 4% i 56.0% respektivno, od 45.2% reverzije pri 1 mg/kg (tj., jedne trećine doze celekoksiba) i 53. 6% reverzije pri 3 mg/kg, svaka je postignuta 3 sata posle dana 1 primene proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10. Neuropatski bol: Da bi se procenilo delovanje Jedinjenja Formule (I) u lečenju ili prevenciji neuropatskog bola, mogu se koristiti Seltzer-ov model ili Chung-ov model. U Seltzer-ovom modelu, koristi se model neuropatskog bola sa parcijalnim podvezivanjem išijadičnog nerva, da se proizvede neuropatska hiperalgezija kod pacova (Seltzeret al.,"A Novel Behavioral Model of Neuropathic Pain Disorders Produced in Rats by Partial Sciatic Nerve Injury",Pain43:205-218 (1990). Parcijalno podvezivanje levog išijadičnog nerva obavlja se pod inhalacionom anestezijom izofuranom/02- Posle indukovanja anestezije, leva butina 6-7 nedelja starog mužjaka Jcl:SD pacova se obrije. Išijadični nerv se preparira visoko na butini, preko malog reza i pažljivo se očisti od okolnog vezivnog tkiva na mestu u blizini trohantera, neposredno distalno od tačke na kojoj se zadnji bicepsni semitendinozni nerv odvaja od zajedničkog išijadičnog nerva. Na nerv se postavi sutura sa 7-0 svilenim koncem, uz korišćenje 3/8 povijenom reverzno-sečenom mini-iglom i čvrsto podveže tako da dorzalna 1/3 do 1/2 debljine nerva bude unutar ligature. Rana se zatvori jednom mišićnom suturom (4-0 najlon (Vicryl) i vetbond-tkivnim lepkom. Područje rane se zapraši antibiotskim praškom. Lažni tretman uključuje identičnu hiruršku proceduru izuzev što išijadični nerv ne podleže manipulisanju ni podvezivanju.
Posle operacije, životinje se mere i stavljaju na toplo jastuče dok se ne oporave od anestezije. Životinje se zatim vraćaju u kaveze do početka testova ponašanja. Životinje se procenjuju u pogledu odgovora na škodljive mehaničke stimuluse određivanjem PWT za zadnje šape životinje, kako je opisano dole, pre operacije (bazalna linija), zatim neposredno pre i 1, 3, 5, 7 i 24 sata posle oralne primene Ieka u prenosniku (za dan 1). Tako, vremenska tačka od 24 sata bila je početak sledećeg dana kada se lek u prenosniku ponovo daje (24 sata posle prethodne primene). Na dane 2 i 3, određuje se PWT odgovor, 1, 3 i 24 sata posle toga. Procenat reverzije neuropatske hiperalgezije u svakom određenom vremenu posle primene definiše se kao:
Pored toga, 10 mg/kg pregabalina (Kemprotec, Ltd., Middlesbrough, UK), antikonvulziva koji je prihvaćen kao sredstvo za olakšanje posebno neuropatskog bola, u prenosniku i sam prenosnik (0.5% težine/zapremini metilceluloze (400cP, Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)/vodeni rastvor), oralno se primenjuju kao kontrole. Količina fumarne kiseline uporediva sa onom koja je prisutna sa Jedinjenjem A155(a) takođe je prisutna u svakoj kontroli. Deset pacova podvrgnutih parcijalnom podvezivanju levog išijadičnog nerva koristi se za svaki grupu tretmana. Dunnett-ov test se vrši za % reverzije, vrednosti p<0.05 smatraju se za statistički značajne. Rezultati primene proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, prikazani su u Tabeli 10.
Pored toga, kao kontrola, pacovi su podvrgnuti lažnoj operaciji u kojoj je identičan operativni postupak sproveden na desnoj butini, ali išijadični nerv nije prepariran ni podvezivan.
Kako je pokazano rezultatima u Tabeli 10, primena jednom dnevno proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10 (1, 3 ili 10 mg/kg), tokom tri dana pokazuje statistički značajne efekte protiv mehaničke hiperalgezije kod pacova izloženih delimičnom podvezivanju išijadičnog nerva u Seltzer-ovom modelu neuropatskog bola. Posle jedne primene ili ponavljane primene tokom 3 dana, maksimalan analgetski efekat proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pri 10 mg/kg bio je veći nego efekat pregabalina pri 10 mg/kg. Prema tome, Jedinjenja Formule (I) su efikasna u olakšanju neuropatskog bolain vivo.
Preciznije, jedna primena proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuje analgetske efekte u Seltzer-ovom modelu. Posle doziranja sa 10 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazani su značajni analgetski efekti na 1, 3, 5 i 7 sati posle primene. Maksimalna analgetska efikasnost zapažena za proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, bila je 34.17% reverzije postignute 3 sata posle primene. Slično, posle doziranja sa 1 i 3 mg/kg, proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom kako je opisano u Primeru 10 pokazani su značajni analgetski efekti na 3 i 5 sati posle primene. Maksimalna analgetska efikasnost sa 1 i 3 mg/kg, proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, bila je 17.04% i 18.39% reverzije, respektivno. Ovi rezultati pokazuju da se postiže značajan dozno-zavisan analgetski efekat. Rezultati ponavljane primene, tokom 3 dana, proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, takođe pokazuju značajan dozno-zavisan analgetski efekat. Na dan 2 doziranja, proizvod pripremljen sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuje značajan dozno-zavisan analgetski efekat na 1 i 3 sata posle primene. Maksimalna analgetska efikasnost posle doziranja sa 1, 3 i 10 mg/kg, proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, bila je 12.84%, 17.14%> i 29.12% reverzije, respektivno, sve u vremenskoj tački 3 sata. Na dan 3 doziranja, 3 i 10 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuju značajan dozno-zavisan analgetski efekat, sa maksimumom od 17.34% reverzije pri 3 mg/ i 28.91%o reverzije pri 10 mg/kg, oba sve u vremenskoj tački 3 sata.
Pored toga, rezultati pokazuju da postoji, poželjno, izostanak razvoja tolerancije posle ponavljane primene. Na primer, doziranje sa 3 mg/kg proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10, pokazuje grubo uporedivi maksimalni analgetski efekat 3 sata posle svake primene, 18.39%, 17.14%), i 17.34% reverzije, respektivno, posle dana 1, 2 i 3 primene.
Jedno oralno doziranje pregabalinom, pozitivnom kontrolom, takođe proizvodi analgteske efekte Seltzer-ovom modelu. Posle doziranja sa 10 mg/kg, pregabalin pokazuje značajne analgetske efekte 1, 3, 5 i 7 sati posle primene. Međutim, maksimalna analgetska efikasnost zapažena za pregabalin, 24.73%> reverzije 3 sata posle dana 1 primene 10 mg/kg iznosila je samo oko 72% od 34.17% reverzije postignute 3 sata posle dana 1 primene 10 mg/kg doze proizvoda pripremljenog sa Jedinjenjem A155(a) i fumarnom kiselinom, kako je opisano u Primeru 10.
U Chung-ovom modelu, za proizvodnju mehaničke hiperalgezije, termalne hiperalgezije i taktilne alodinije kod pacova koristi se model neuropatskog bola sa podvezivanjem spinalnog nerva. Operacija se obavlja pod inhalacionom anestezijom izofluran/02. Posle indukovanja anestezije, napravi se rez od 3 cm i levi paraspinalni mišići se odvoje od spinoznog nastavka na nivou L4-S2. Transverzalni nastavak L(, se pažljivo ukloni korišećnjem hirurškom instrumenta za hvatanje i drobljenje (rongeurs) da bi se vizuelno identifikovali spinalni nervi L4-L6. Levi L5(ili levi L5i L(,) se izoluje/izoluju i čvrsto podveže/podvežu svilenim koncem. Potvrdi se potpuna hemostaza i rana se zašije korišćenjem konaca koji se ne apsorbuju, kao što su najlonski konci ili kopče od nerđajućeg čelika. Lažno operisani pacovi podvrgavaju se istom operativnom postupku osim što se spinalni nervi ne obrađuju. Posle operacije, životinje se mere, daje im se subkutana( s. c.)injekcija slanog rastvora ili ringerovog laktata, područje rane se zapraši antibiotskim praškom i životinje se drže na toplom jastučetu dok se ne oporave od aanestezije. Životinje se vrate u svoje kaveze do početka testova ponašanja. Životinje se procenjuju u pogledu odgovora na škodljivu mehaničku stimulaciju određivanjem PWT kako je dole opisano, pre operacije (bazalni nivo), neposredno pre i 1, 3 i 5 sati pošto su primile Jedinjenje Formule (I) na zadnjim šapama životinje. Može da se procenjuje i odgovor životinje na škodljivi toplotni stimulus ili na taktilnu alodiniju, kako je opisano dole. Chung-ov model neuropatskog bola opisan je u Kim, "An Experimental Model for Peripheral Neuropathv Produced by Segmental Spinal Nerve Ligation in the Rat",Pain50(3):355-363 (1992).
Odgovor na mehaničke stimuluse kao procena mehaničke hiperalgezije: Test pritiska šape koristi se za procenu mehaničke hiperalgezije. Za ovaj test, prag povlačenja zadnje šape (paw withdrawal threshold, PWT) na škodljivi mehanički stimulus određuje se korišćenjem analgometra (Model 37215, komercijalno se nabavlja od Ugo Basile of Italy) kako je opisano u Stein, "Unilateral Inflammation of the Hindpavv in Rats as a Model of Prolonged Noxious Stimulation: Alterations in Behavior and Nociceptive Thresholds",Pharmacol. Biochem. and Behavior3J_:451-455 (1988). Maksimalna težina koja može da se primeni na zadnju šapu postavi se na 250 g i za krajnju tačku se uzima potpuno povlačenje šape. PWT se određuje jednom za svakog pacova, u svakoj vremenskoj tački i testira se ili samo tretirana šapa (ipsilateralna) ili se testiraju obe, ipsilateralna i kontralateralna (nepovređena) šapa.
Odgovor na termalne stimuluse kao procena termalne hiperalgezije: Za procenu termalne hiperalgezije može da se koristi plantarni test. Za ovaj test, latencije povlačenja zadnje šape u odgovoru na škodljivu toplotnu stimulaciju određuje se korišćenjem aparata za plantarni test (komercijalno dostupan, Ugo Basile of Italy), prema tehnici opisanoj u Hargreaveset ah,"A New and Sensitive Method for Measuring Thermal Nociception in Cutaneous Hyperalgesia",Pain32(1)77-88 (1988). Maksimalno vreme izlaganja podesi se na 32 sekunde da bi se izbeglo oštećenje tkiva i svako direktno povlačenje šape od izvora toplote uzima se kao završna tačka. Određuju se tri latencije u svakoj tački vremena i određuje se srednja vrednost. Testira se ili samo obrađivana (ipsilateralna) šapa ili se testiraju i ipsilateralna i kontralateralna (nepovređena) šapa.
Procena taktilne alodinije: Da bi se procenila taktilna alodinija, pacovi se stave u providne plastične odeljke sa podom od žičane mreže i ostave se da se prilagode, najmanje 15 minuta. Posle prilagođavanja, nizom von Frey-evih monofilamenata se "bode" plantarna provršina levog stopala (operisana strana) svakog pacova. Niz von Frey-evih monofdamenata sastoji se od šest monofilamenata rastućeg dijametra sa vlaknom najmanjeg dijametra koje se koristi prvo. Izvodi se pet proba za svaki filament uz razmak između proba od oko 2 minuta. Svako "bodenje" traje 4-8 sekundi ili dok se ne zapazi ponašanje nociceptivnog povlačenja. Trzanje, povlačenje šape ili lizanje šape smatraju se za odgovor nociceptivnog ponašanja.
Test kapsaicinom indukovanog trljanja očiju: Da bi se procenio efekat jedinjenja Formule (I) na bol, posredovan TRPV1 receptorima, koristi se test kapsaicinom indukovanog trljanja očiju (Gavvaet al,"AMG 9810 [(£)-3-(4-/-butilfenil)-N-(2.3-dihidrobenzo[6][l,4]-dioksin-6-il)akrilamid], a Novel Vanilloid Receptor 1 (TRPV1) Antagonist with Antihyperalgesic Properties",J. Pharmacol. Exp. Ther.313:474-484
(2005)). Test trljanja očiju je pouzdan visokopropusni test efekta TRPV1 antagonista. Pacovima se daje jedna injekcija od 1,3, 10 ili 30 mg/kg Jedinjenja Formule (I), 30 mg/kg kontrole izabrane između celebreksa, indometacina, ibuprofena ili naproksena, ili prenosnika. 1, 3 ili 5 sati posle davanja Ieka, 3 pl 100 pM rastvora kapsaicina (u 10% EtOH/PBS) se kapne pipetom ujedno oko svake životinje. Broj pokreta prednjih udova (dodirivanje ili trljanje oka tretiranog kapsaicinom) broji se tokom perioda od 2 minuta posle ukapavanja kapsaicina u oko.
5.17 Primer 17:In vivotest porasta telesne temperature
Poznato je daje hipertermalni ili neželjeni porast telesne temperature životinja neželjeni sporedni efekat udružen sa primenom određenih TRPV1 antagonista (Gavva, "Body temperature maintenance as the predominant function of the vanilloid receptor TRPV1".Trends Pharmacol. Sci.29(11):550-557 (2008)). Jedinjenja Formule (I) i/ili (II) sposobna su da ublaže neželjeni sporedan efekat porasta telesne temperature do kog može da dođe poslein vivoprimene, kako je pokazano u ovom primeru.
Testne životinje: Selekcija pacova (Crl/SD pacovi, 7 nedelja stari, mužjaci) bazira se na merenju rektalne telesne temperature tokom jutra na dan doziranja, kako je opisano dole. Pored toga, da bi se na najmanju meru sveo spontani stresom indukovani porast telesne temperature, pacovi se unapred navikavaju na postupak merenja rektalne telesne temperature i na to da se njima rukuje i da se doziraju. Držanje pacova i svi testovi odvijali su se u laboratoriji sa konstantnom sobnom temperaturom i vlažnošću. Svi pacovi su mogli slobodno da se kreću i uzimaju hranu i vodu po želji tokom eksperimenta. Rep svakog pacova obeležen je linijom u boji, držani su u zasebnim kavezima i dozvoljen im je normalan obim pokreta. Neposredno pre svakog merenja telesne temperature, pacov se prenosi u kavez za merenje. Da bi se smanjio stres koji bi mogao da utiče na njegovu telesnu temperaturu, svaki pacov se prekriva peškirom tokom merenja. Termistorska proba se zatim pažljivo insertuje u rektum svakog pacova i sačeka se da se temperatura koja se očitava na digitalnom ekranu stabilizuje; ova vrednost se beleži.
Test: Na dan pre doziranja, rektalna telesna temperatura se meri u 9:00, 10:00, 11:00, 12:30, 13:30. 14:30 i 15:30 časova, da se pacovi naviknu na postupak merenja pre primene testnog ili kontrolnog tretmana. Pacovi se takođe doziraju oralnim putem, bez prenosnika u 12:30 časova, da se naviknu na postupak rukovanja i doziranja.
Na dan doziranja, za studiju su odabrani samo pacovi čija je rektalna temperatura bila u opsegu od 37.0 °C do 37.7 °C. Rektalna telesna temperatura meri se u 9:00, 10:00 i 11:00 časova. Pacovi su isključeni iz studije ako im je rektalna temperatura bila preko 37.9 °C u 10:00 časova ili ako je bila izvan opsega od 37.0 °C do 37.7 °C u 11:00 časova. Odabrani pacovi su podeljeni u nekoliko grupa na osnovu rektalne telesne temperature u 11:00 časova. Rektalna telesna temperatura odabranih pacova merena je ponovo u 12:30 časova i svaki pacov sa rektalnom temperaturom od 38 °C ili višom, takođe je isključen iz studije.
Posle svrstavanja u testnu ili kontrolnu grupu, pacovima se daju testno jedinjenje ili kontrola. Svako testno jedinjenje se razblaži u prenosniku od 0.5% vodenog rastvora metilceluloze i finalna koncentracija testnog jedinjenja se podesi na 1 mg/kg. Svako testno jedinjenje se daje oralnim putem jednom, u dozi od 10 ml/kg. Ista zapremina kontrole (samo prenosnik) jednom se daje kontrolnoj grupi. Rektalna telesna temperatura meri se u sledećim tačkama: 0.5, 1 i 2 sata posle primene. Porast telesne temperature (ATb) za svako testno jedinjenje izračunava sc oduzimanjem, u svakoj vremenskoj tački, prosečne temperature kontrolne grupe od prosečne temperature grupe koja je primila testno jedinjenje. Najveća ATb dobijena za svako testno jedinjenje u nekoj tački vremena prikazana je na Tabeli 11, dole, zajedno sa ATb kontrole.
Kao što gornji podaci pokazuju, Jedinjenja Formule (I) i/ili (II) sposobna su da ublaže neželjene sporedne efekte na porast telesne temperature do kojih može doći poslein vivoprimene jedinjenja koja modulišu TRPVI receptor. Na primer, porast telesne temperature posle primene Jedinjenja Formule (I) i/ili (II) manji je od 0.7 °C u jednoj formi, 0.6 °C ili manje u drugoj formi, manje od 0.6 °C u sledećoj formi, 0.5 °C ili manje u sledećoj formi, manje od 0.5 °C u sledećoj formi, 0.4 °C ili manje u sledećoj formi, manje od 0.4 °C u sledećoj formi, 0.3 °C ili manje u sledećoj formi, manje od 0.3 °C u sledećoj formi, ili 0.2 °C ili manje u sledećoj formi.
Preciznije, određeno je da je porast telesne temperature posle primene Jedinjenja Formule (I) i/ili (II) bio manji od 0.5 °C, u nekim slučajevima mnogo manji od 0.5 °C, npr., 0.1 °C za Jedinjenja A125(b), A155(d), A155(e) i B158(j), 0.2 °C za Jedinjenja A126(a), A155(a) i C170 (r) i 0.3 °C za Jedinjenja C4(r) i C125(r). Pored toga, Jedinjenja Formule (I) i/ili (II), npr Jedinjenje A155(a), pokazuju razdvojenost između doza efikasnih u modelima bola i doza pri kojima se zapaža porast telesne temperature, što je zapaženo i kod pacova i kod majmuna. Doze koje povećavaju telesnu temperaturu bile su više od 100 puta veće nego EDgou FCA modelu zapaljenskog bola, u nekim slučajevima.
Nasuprot tome, određeno je da je porast telesne temperature posle primene drugih jedinjenja bio veći od 0.5 °C, u nekim slučajevima mnogo veći od 0.5 °C, npr., 0.8 °C za Jedinjenja Dl, DN i AA, 0.9 °C za Jedinjenja DA, DH, DJ, DL, DM, i BA, 1.0 °C za Jedinjenja DC, DD i DG, 1.1 °C za Jedinjenja DB i DO; 1.2 °C za Jedinjenje DP; i 1.3 °C za Jedinjenje DE; u nekim slučajevima, ova jedinjenja indukuju hipertermiju pri dozama koje su manje nego one koje su neophodne za efikasnost u modelima bola, čime pokazuju izostanak razdvojenosti efikasnosti i neželjneog hipertermijskog efekta.

Claims (17)

1. Jedinjenje formule (I): ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat,naznačeni time,što: Ri je -halo ili; R4je-H; svaki Rg i R9 je nezavisno -H, -halo, -CH3ili -CF3; svaki halo je nezavisno -F, -Cl, -Br, ili -I; i m je ceo broj 1; gde je metil grupa vezana za piperazinski prsten( S)- 2- meti\grupa; i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji; pri čemu se farmaceutski prihvatljivi derivat bira iz grupe koja sadrži farmaceutski prihvatljivu so, polimorf, pseudopolimorf, solvat, kokristal, radioobeleženi oblik, i/ili tautomer.
2. Jedinjenje iz zahteva 1,naznačeno time,stoje farmaceutski prihvatljivi derivat farmaceutski prihvatljiva so, radioobeleženi oblik, ili kokristal hlorovodonične kiseline, tartarne kiseline, benzensulfonske kiseline, /^-toluensulfonske kiseline ili fumarne kiseline.
3. Jedinjenje iz zahteva 2,naznačeno time,što je farmaceutski prihvatljivi derivat so fumarne kiseline, fumarno-kiselinski kokristal ili njihova kombinacija.
4. Jedinjenje iz zahteva 1, sa formulom (II): ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat,naznačeni time,što: R4je-H; R8je -H, -F ili -CH3; R9 je -H, -halo, -CH3ili -CF3; i svaki halo je nezavisno -F, -Cl, -Br, ili -I, gde je metil grupa vezana za piperazinski prsten (S)-2-metil grupa; i ugljenikov atom na a poziciji a-b veze je u( S)konfiguraciji; i pri čemu se farmaceutski prihvatljivi derivat bira iz grupe koja sadrži farmaceutski prihvatljivu so, polimorf, pseudopolimorf, solvat, kokristal, radioobeleženi oblik, i/ili tautomer.
5. Jedinjenje iz zahteva 4, naznačeno time, što je farmaceutski prihvatljivi derivat (i) farmaceutski prihvatljiva so, ili fumarno-kiselinski kokristal; ili (ii) so fumarne kiseline, fumarno-kiselinski kokristal, ili njihova kombinacija.
6. Jedinjenje iz zahteva 5, opcija (i), naznačeno time, što je farmaceutski prihvatljivi derivat so hlorovodonične kiseline, natrijumova so, kalijumova so, sop-toluensulfonske kiseline, so fumarne kiseline ili fumarno-kiselinski kokristal.
7. Jedinjenje iz zahteva 4 ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat, naznačeni time, što su: pri čemu se farmaceutski prihvatljivi derivat bira iz grupe koja sadrži farmaceutski prihvatljivu so, polimorf. pseudopolimorf, solvat, kokristal, radioobeleženi oblik i/ili tautomer.
8. Jedinjenje iz bilo kojeg od zahteva 1 ili 7,naznačeno time,što je (i) so fumarne kiseline, fumarno-kiselinski kokristal, ili njihova kombinacija, ili (ii) slobodna baza.
9. Jedinjenje iz bilo kojeg od zahteva 1-8 ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat,naznačeni time,što se koriste za lečenje bola, bola udruženog sa osteoartritisom, osteoartritisa, UI, ulcera, IBD ili IBS, pri čemu se farmaceutski prihvatljivi derivat bira iz grupe koja se sastoji od farmaceutski prihvatljive soli, polimorfa. pseudopolimorfa, solvata, kokristala, radioobeleženog oblika i/ili tautomera.
10. Proizvod kombinovanja jedinjenja iz bilo kojeg od zahteva 1-8 sa fumarnom kiselinom,naznačen time,što u proizvodu, molarni odnos (Jedinjenje Formule (I) ili (II)):(fumarna kiselina) iznosi oko 1.0:0.5.
11. Smeša,naznačena time,što sadrži (i) jedinjenje iz bilo kojeg od zahteva 1-8 ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat: ili (ii) proizvod iz zahteva 10; i farmaceutski prihvatljivi nosač ili ekscipijnt, pri čemu se farmaceutski prihvatljivi derivat bira iz grupe koja se sastoji od farmaceutski prihvatljive soli, polimorfa. pseudopolimorfa, solvata, kokristala, radioobeleženog oblika i/ili tautomera.
12. Proizvod iz zahteva 10 ili njegov farmaceutski prihvatljivi derivat,naznačeni time,što se koriste za lečenje bola, bola udruženog sa osteoartritisom, osteoartritisa, UI, ulcera, IBD ili IBS, pri čemu se farmaceutski prihvatljivi derivat bira iz grupe koja se sastoji od farmaceutski prihvatljive soli, polimorfa. pseudopolimorfa, solvata, kokristala, radioobeleženog oblika i/ili tautomera.
13. Jedinjenje iz zahteva 4,naznačeno time,što ima strukturu ili je fumarno-kiselinski kristal istog.
14. Jedinjenje iz zahteva 13,naznačeno time,stoje u obliku kokristala nastalog kombinovanjem sa fumarnom kiselinom, pri čemu u kokristalu, molarni odnos (Jedinjenje):(fumarna kiselina) iznosi oko 1.0:0.5.
15. Fumarno-kiselinski kokristal iz zahteva 13 ili zahteva 14,naznačen time,što ima obrazac difrakcije x-zraka na prašku, koji sadrži pik na svakom od 6.5° ± 0.2°, 12.5° ±0.2°, 16.8° ±0.2°, i 25.3° ±0.2°.
16. Fumarno-kiselinski kokristal iz zahteva 13 ili zahteva 14,naznačen time,što ima obrazac difrakcije x-zraka na prašku, koji sadrži pik na svakom od 6.5° ± 0.2°, 8.6° ±0.2°, 12.5°±0.2°, 14.0°±0.2°, 16.8°±0.2°, 18.7°± 0.2°, i 25.3°± 0.2°
17. Fumarno-kiselinski kokristal iz zahteva 13 ili zahteva 14,naznačen time,što ima obrazac difrakcije x-zraka na prašku, koji sadrži pik na svakom od 6.5° ± 0.2°, 8.6° ± 0.2°, 12.5° ± 0.2°, 14.0° ± 0.2°, 16.8° ± 0.2°, 18.7°± 0.2°, 20.4° ± 0.2°, 21.3° ± 0.2°, 22.0° ± 0.2°, 23.2° ± 0.2°, 25.3° ± 0.2° i 38.5° ± 0.2°.
RS20170182A 2011-06-22 2012-06-21 Trpv1 antagonisti koji uključuju dihidroksi supstituent i njihove upotrebe RS55701B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161499989P 2011-06-22 2011-06-22
EP12735333.2A EP2723732B1 (en) 2011-06-22 2012-06-21 Trpv1 antagonists including dihydroxy substituent and uses thereof
PCT/IB2012/001252 WO2012176061A1 (en) 2011-06-22 2012-06-21 Trpv1 antagonists including dihydroxy substituent and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55701B1 true RS55701B1 (sr) 2017-07-31

Family

ID=46513798

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170182A RS55701B1 (sr) 2011-06-22 2012-06-21 Trpv1 antagonisti koji uključuju dihidroksi supstituent i njihove upotrebe

Country Status (34)

Country Link
US (4) US9273043B2 (sr)
EP (2) EP3173411B1 (sr)
JP (1) JP5699251B2 (sr)
KR (2) KR20150055094A (sr)
CN (2) CN105693712A (sr)
AR (1) AR086709A1 (sr)
AU (1) AU2012273652B2 (sr)
BR (1) BR112013032658A2 (sr)
CA (1) CA2837178C (sr)
CL (1) CL2013003550A1 (sr)
CO (1) CO6852081A2 (sr)
CY (1) CY1119111T1 (sr)
DK (1) DK2723732T3 (sr)
ES (1) ES2620528T3 (sr)
HR (1) HRP20170507T1 (sr)
HU (1) HUE031372T2 (sr)
IL (1) IL229817A (sr)
LT (1) LT2723732T (sr)
ME (1) ME02609B (sr)
MX (1) MX354015B (sr)
MY (1) MY185061A (sr)
PE (1) PE20141531A1 (sr)
PH (1) PH12013502412B1 (sr)
PL (1) PL2723732T3 (sr)
PT (1) PT2723732T (sr)
RS (1) RS55701B1 (sr)
RU (1) RU2621708C2 (sr)
SG (2) SG10201605163PA (sr)
SI (1) SI2723732T1 (sr)
SM (1) SMT201700197T1 (sr)
TW (1) TWI453205B (sr)
UA (1) UA113288C2 (sr)
WO (1) WO2012176061A1 (sr)
ZA (1) ZA201400419B (sr)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2620528T3 (es) * 2011-06-22 2017-06-28 Purdue Pharma Lp Antagonistas de TRPV1 que incluyen un sustituyente dihidroxi y usos de los mismos
KR101933622B1 (ko) * 2012-10-09 2018-12-28 삼성전자주식회사 소포를 모니터링하기 위한 조성물, 키트 및 이를 이용하여 소포를 모니터링하는 방법
JP6528845B2 (ja) * 2015-07-31 2019-06-12 株式会社村田製作所 アンテナ整合回路、アンテナ回路、フロントエンド回路および通信装置
RU2755206C1 (ru) 2020-05-20 2021-09-14 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова Дальневосточного отделения Российской академии наук (ТИБОХ ДВО РАН) Средство пролонгированного анальгетического действия и лекарственный препарат на его основе
CN113077942B (zh) * 2021-04-12 2021-12-17 西北工业大学 一种基于功率超声制备智能柔性导电薄膜及其应用
CN120513091A (zh) 2022-10-31 2025-08-19 盐野义制药株式会社 作为trpv1拮抗剂的吡啶衍生物的用途

Family Cites Families (177)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3536809A (en) 1969-02-17 1970-10-27 Alza Corp Medication method
US3598123A (en) 1969-04-01 1971-08-10 Alza Corp Bandage for administering drugs
US3845770A (en) 1972-06-05 1974-11-05 Alza Corp Osmatic dispensing device for releasing beneficial agent
US3916899A (en) 1973-04-25 1975-11-04 Alza Corp Osmotic dispensing device with maximum and minimum sizes for the passageway
US4008719A (en) 1976-02-02 1977-02-22 Alza Corporation Osmotic system having laminar arrangement for programming delivery of active agent
US4409229A (en) 1977-12-02 1983-10-11 Hoechst-Roussel Pharmaceuticals, Inc. Antidepressive and tranquilizing substituted 1,3-dihydrospiro[benzo(c)thiophene]s
IE58110B1 (en) 1984-10-30 1993-07-14 Elan Corp Plc Controlled release powder and process for its preparation
JPH0680054B2 (ja) 1985-06-19 1994-10-12 吉富製薬株式会社 ピペリジン誘導体
JPS6289679U (sr) 1985-11-22 1987-06-08
US4797419A (en) 1986-11-03 1989-01-10 Warner-Lambert Company Method of treating the symptoms of senile cognitive decline employing di- or trisubstituted urea cholinergic agents
US5073543A (en) 1988-07-21 1991-12-17 G. D. Searle & Co. Controlled release formulations of trophic factors in ganglioside-lipsome vehicle
DE3905364A1 (de) 1989-02-22 1990-08-23 Hoechst Ag Substituierte pyrimidin-derivate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als tool
IT1229203B (it) 1989-03-22 1991-07-25 Bioresearch Spa Impiego di acido 5 metiltetraidrofolico, di acido 5 formiltetraidrofolico e dei loro sali farmaceuticamente accettabili per la preparazione di composizioni farmaceutiche in forma a rilascio controllato attive nella terapia dei disturbi mentali organici e composizioni farmaceutiche relative.
US5120548A (en) 1989-11-07 1992-06-09 Merck & Co., Inc. Swelling modulated polymeric drug delivery device
US5733566A (en) 1990-05-15 1998-03-31 Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Ii Controlled release of antiparasitic agents in animals
ATE156823T1 (de) 1990-06-07 1997-08-15 Zeneca Ltd Therapeutische heterocyclische verbindungen
US5698155A (en) 1991-05-31 1997-12-16 Gs Technologies, Inc. Method for the manufacture of pharmaceutical cellulose capsules
US5580578A (en) 1992-01-27 1996-12-03 Euro-Celtique, S.A. Controlled release formulations coated with aqueous dispersions of acrylic polymers
JP3191429B2 (ja) 1992-09-02 2001-07-23 富士通テン株式会社 電子機器の挿排装置
CA2145640C (en) 1992-09-28 2001-01-30 Banavara L. Mylari Substituted pyrimidines for control of diabetic complications
DE4234295A1 (de) 1992-10-12 1994-04-14 Thomae Gmbh Dr K Carbonsäurederivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zu ihrer Herstellung
US5591767A (en) 1993-01-25 1997-01-07 Pharmetrix Corporation Liquid reservoir transdermal patch for the administration of ketorolac
DE4302051A1 (de) 1993-01-26 1994-07-28 Thomae Gmbh Dr K 5-gliedrige Heterocyclen, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
JP2606138Y2 (ja) 1993-04-20 2000-09-25 株式会社小松製作所 クラッチ作動圧力検出手段を備えたクラッチ油圧制御弁装置
IT1270594B (it) 1994-07-07 1997-05-07 Recordati Chem Pharm Composizione farmaceutica a rilascio controllato di moguisteina in sospensione liquida
DE19514313A1 (de) 1994-08-03 1996-02-08 Bayer Ag Benzoxazolyl- und Benzothiazolyloxazolidinone
US6136839A (en) 1995-06-12 2000-10-24 G. D. Searle & Co. Treatment of inflammation and inflammation-related disorders with a combination of a cyclooxygenase-2 inhibitor and a 5-lipoxygenase inhibitor
KR100384979B1 (ko) 1995-09-07 2003-10-17 에프. 호프만-라 로슈 아게 심부전증및신부전증치료용의신규한4-(옥시알콕시페닐)-3-옥시-피페리딘
US5837716A (en) 1995-11-13 1998-11-17 Albany Medical College Analgesic heterocyclic compounds
FR2744448B1 (fr) 1996-02-02 1998-04-24 Pf Medicament Nouvelles piperidines derivees d'aryl piperazine, ainsi que leur procede de preparation, les compositions pharmaceutiques et leur utilisation comme medicaments
US5891889A (en) 1996-04-03 1999-04-06 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl-protein transferase
WO1997038665A2 (en) 1996-04-03 1997-10-23 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl-protein transferase
US5948786A (en) 1996-04-12 1999-09-07 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Piperidinylpyrimidine derivatives
US5990107A (en) 1996-06-28 1999-11-23 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonist prodrugs
US5854245A (en) 1996-06-28 1998-12-29 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonists
US5798360A (en) 1996-08-01 1998-08-25 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-(aminoalkyl)- and/or N-(amidoalkyl)- dinitrogen heterocyclic compositions
FR2758328B1 (fr) 1997-01-15 1999-04-02 Pf Medicament Nouvelles amines aromatiques derivees d'amines cycliques utiles comme medicaments
FR2758327B1 (fr) 1997-01-15 1999-04-02 Pf Medicament Nouvelles arylpiperazines derivees de piperidine
ATE253111T1 (de) 1997-08-20 2003-11-15 Univ California Für den capsaicin rezeptor kodierende nukleinsäuresequenzen und dem capsaicin rezeptor ähnliche polypeptide und ihre verwendung
JPH11199573A (ja) 1998-01-07 1999-07-27 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd ５ｈｔ３受容体作動薬及び新規ベンゾチアゾール誘導体
WO1999037304A1 (en) 1998-01-27 1999-07-29 Aventis Pharmaceuticals Products Inc. SUBSTITUTED OXOAZAHETEROCYCLYL FACTOR Xa INHIBITORS
EP0943683A1 (en) 1998-03-10 1999-09-22 Smithkline Beecham Plc Human vanilloid receptor homologue Vanilrep1
WO1999065896A1 (en) 1998-06-19 1999-12-23 Eli Lilly And Company Preparation of heteroaryl compounds
WO2000001688A1 (en) 1998-07-02 2000-01-13 Sankyo Company, Limited Five-membered heteroaryl compounds
US6673799B1 (en) 1998-09-22 2004-01-06 Yamanouchi Pharmaceutical Co. Ltd. Cyanophenyl derivative
EP1146790A4 (en) 1999-01-25 2004-03-17 Smithkline Beecham Corp COMPOUNDS AND METHODS
GB9907097D0 (en) 1999-03-26 1999-05-19 Novartis Ag Organic compounds
NZ514144A (en) 1999-04-01 2001-09-28 Pfizer Prod Inc Aminopyrimidines as sorbitol dehydrogenase inhibitors
AU4797400A (en) 1999-05-17 2000-12-05 Eli Lilly And Company Metabotropic glutamate receptor antagonists
GB9912411D0 (en) 1999-05-28 1999-07-28 Pfizer Ltd Compounds useful in therapy
DE19934799B4 (de) 1999-07-28 2008-01-24 Az Electronic Materials (Germany) Gmbh Chiral-smektische Flüssigkristallmischung und ihre Verwendung in Aktivmatrix-Displays mit hohen Kontrastwerten
AU7514700A (en) 1999-09-07 2001-04-10 Syngenta Participations Ag Cyanopiperidines
US6887870B1 (en) 1999-10-12 2005-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic sodium/proton exchange inhibitors and method
SK12712002A3 (sk) 2000-02-07 2003-02-04 Abbott Gmbh & Co. Kg Deriváty 2-benzotiazolylmočoviny a ich použitie ako inhibítorov proteínkináz
KR100526487B1 (ko) 2000-06-21 2005-11-08 에프. 호프만-라 로슈 아게 벤조티아졸 유도체
AR028782A1 (es) 2000-07-05 2003-05-21 Taisho Pharmaceutical Co Ltd Derivados heterociclicos tetrahidropiridino o piperidino
KR100849981B1 (ko) 2000-07-13 2008-08-01 메르크 파텐트 게엠베하 키랄 화합물 ｉ
KR20030024799A (ko) 2000-07-20 2003-03-26 뉴로젠 코포레이션 캡사이신 수용체 리간드
KR20040025874A (ko) 2000-10-18 2004-03-26 화이자 프로덕츠 인크. 스타틴 및 소르비톨 탈수소효소 억제제의 조합
CA2430298A1 (en) 2000-11-30 2002-06-06 Banavara Lakshman Mylari Combination of gaba agonists and sorbitol dehydrogenase inhibitors
US7193113B2 (en) 2000-12-15 2007-03-20 Japan Science And Technology Corporation Arylbis(perfluoroalkylsulfonyl) methane and metallic salt thereof, and methods for producing the same
US20030232996A1 (en) 2001-04-20 2003-12-18 Brown David L Regioselective synthesis of 3,4-di{(carboclyl or heterocyclyl)thiophenes
CA2446380A1 (en) 2001-05-08 2002-11-14 Yale University Proteomimetic compounds and methods
US20040038982A1 (en) 2001-07-13 2004-02-26 Bondinell William E. Compounds and methods
JP2003095951A (ja) 2001-09-25 2003-04-03 Sumitomo Pharmaceut Co Ltd 慢性関節リウマチ治療剤
EP1437344A4 (en) 2001-09-28 2006-09-20 Takeda Pharmaceutical BENZENE DERIVATIVES AND PROCESS FOR THE PREPARATION AND USE THEREOF
JP2005516950A (ja) 2001-12-19 2005-06-09 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド 代謝型グルタミン酸受容体−５のヘテロアリール置換イミダゾールモジュレータ
US7390813B1 (en) 2001-12-21 2008-06-24 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyridylpiperazines and aminonicotinamides and their use as therapeutic agents
US20050119251A1 (en) 2001-12-21 2005-06-02 Jian-Min Fu Nicotinamide derivatives and their use as therapeutic agents
JP2003192673A (ja) 2001-12-27 2003-07-09 Bayer Ag ピペラジンカルボキシアミド誘導体
EP2033951A3 (en) 2002-02-01 2009-12-23 Euro-Celtique S.A. 2-Piperazine-pyridines useful for treating pain
ES2316777T3 (es) 2002-02-15 2009-04-16 Glaxo Group Limited Moduladores de receptores vainilloides.
US6974818B2 (en) 2002-03-01 2005-12-13 Euro-Celtique S.A. 1,2,5-thiadiazol-3-YL-piperazine therapeutic agents useful for treating pain
IL164004A0 (en) 2002-03-13 2005-12-18 Janssen Pharmaceutica Nv Piperazinyl-,pipertifinyl-and morpholinyl-derivatives as novel inhibitors of histone deacetylase
GB0209715D0 (en) 2002-04-27 2002-06-05 Astrazeneca Ab Chemical compounds
CN1150176C (zh) 2002-05-22 2004-05-19 上海医药工业研究院 芳烷酮哌嗪衍生物及其应用
WO2003099266A2 (en) 2002-05-23 2003-12-04 Abbott Laboratories Acetamides and benzamides that are useful in treating sexual dysfunction
EP1522314B1 (en) 2002-06-26 2014-03-05 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Remedies for diseases caused by vascular contraction or dilation
CN100457735C (zh) 2002-06-28 2009-02-04 欧洲凯尔特公司 用于治疗疼痛的治疗剂
EP1388538B1 (en) 2002-07-09 2010-09-01 Merck Patent GmbH Polymerisation Initiator
US7262194B2 (en) 2002-07-26 2007-08-28 Euro-Celtique S.A. Therapeutic agents useful for treating pain
AU2003256922A1 (en) 2002-07-31 2004-02-16 Smithkline Beecham Corporation Substituted heterocyclic compounds as modulators of the ccr5 receptor
US7157462B2 (en) 2002-09-24 2007-01-02 Euro-Celtique S.A. Therapeutic agents useful for treating pain
ES2387388T3 (es) 2002-09-27 2012-09-21 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. Compuesto de adenina y uso del mismo
WO2004035549A1 (en) 2002-10-17 2004-04-29 Amgen Inc. Benzimidazole derivatives and their use as vanilloid receptor ligands
US7582635B2 (en) * 2002-12-24 2009-09-01 Purdue Pharma, L.P. Therapeutic agents useful for treating pain
WO2004064762A2 (en) 2003-01-21 2004-08-05 S.S.C.I. Inc. Novel cocrystallization
US7223788B2 (en) 2003-02-14 2007-05-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted N-aryl heterocycles, process for their preparation and their use as medicaments
DE10311065A1 (de) 2003-03-13 2004-09-23 Abbott Gmbh & Co. Kg Pyrimidin-2-on-Verbindungen und ihre therapeutische Verwendung
JP5279987B2 (ja) 2003-05-20 2013-09-04 味の素株式会社 アミド誘導体
MY142655A (en) 2003-06-12 2010-12-15 Euro Celtique Sa Therapeutic agents useful for treating pain
US20050009841A1 (en) 2003-07-11 2005-01-13 Zheng Guo Zhu Novel amides useful for treating pain
US7129235B2 (en) 2003-07-11 2006-10-31 Abbott Laboratories Amides useful for treating pain
CN101914088A (zh) 2003-07-24 2010-12-15 尤罗塞尔蒂克股份有限公司 哌啶化合物和含有它们的药物组合物
PL1867644T3 (pl) 2003-07-24 2009-10-30 Euro Celtique Sa Związki heteroarylo-tetrahydropiperydylowe przydatne w leczeniu lub zapobieganiu bólu
GEP20094675B (en) 2003-07-24 2009-05-10 Euro Celtique Sa Heteroaryl- tetra-hydropiperidyl compounds useful for treating or preventing pain
ES2386354T3 (es) 2003-07-29 2012-08-17 Xenon Pharmaceuticals Inc. Derivados de piridilo y su uso como agentes terapéuticos
EP1651616B1 (en) 2003-07-30 2012-05-02 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyridazine derivatives and their use as therapeutic agents
PT1651620E (pt) 2003-07-30 2012-02-10 Xenon Pharmaceuticals Inc Derivados de piperizina e sua utilização como agentes terapêuticos
US7335658B2 (en) 2003-07-30 2008-02-26 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyridazine derivatives and their use as therapeutic agents
JP4782008B2 (ja) 2003-07-30 2011-09-28 ゼノン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド ピリジル誘導体および治療剤としてのその用途
US7759348B2 (en) 2003-07-30 2010-07-20 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyridazine derivatives and their use as therapeutic agents
US7754711B2 (en) 2003-07-30 2010-07-13 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyridazine derivatives and their use as therapeutic agents
CN1832935A (zh) 2003-08-01 2006-09-13 欧洲凯尔特公司 用于治疗疼痛的治疗药
US7632950B2 (en) 2003-08-18 2009-12-15 Fujifilm Finechemicals Co., Ltd Pyridyltetrahydropyridines and pyridylpiperidines and method of manufacturing them
EP2017276B1 (en) 2003-09-22 2011-01-19 Euro-Celtique S.A. Phenyl-carboxamide compounds useful for treating pain
ATE412646T1 (de) 2003-09-22 2008-11-15 Euro Celtique Sa Zur behandlung von schmerzen geeignete therapeutische mittel
WO2005037284A1 (en) 2003-10-15 2005-04-28 Pfizer Products Inc. Sorbitol dehydrogenase inhibitor and hypertensive agent combinations
US20050130974A1 (en) 2003-10-17 2005-06-16 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Benzothiazole compositions and their use as ubiquitin ligase inhibitors
PL1727801T3 (pl) 2003-12-30 2009-08-31 Euro Celtique Sa Piperazyny użyteczne do leczenia bólu
US7355045B2 (en) 2004-01-05 2008-04-08 Applera Corporation Isotopically enriched N-substituted piperazine acetic acids and methods for the preparation thereof
DE102004039789A1 (de) 2004-08-16 2006-03-02 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Arylsubstituierte polycyclische Amine, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
MX2007003321A (es) 2004-09-20 2007-06-05 Xenon Pharmaceuticals Inc Derivados heterociclicos y su uso como agentes terapeuticos.
AU2005286653A1 (en) 2004-09-20 2006-03-30 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyridine derivatives for inhibiting human stearoyl-CoA-desaturase
CA2580857A1 (en) 2004-09-20 2006-09-28 Xenon Pharmaceuticals Inc. Heterocyclic derivatives and their use as stearoyl-coa desaturase inhibitors
BRPI0515505A (pt) 2004-09-20 2008-07-29 Xenon Pharmaceuticals Inc derivados heterocìclicos e sua utilização como inibidores da estearoil-coa desaturase
WO2006051047A1 (en) * 2004-11-09 2006-05-18 Ciba Specialty Chemicals Holding Inc. N-substituted imides as polymerization initiators
US20060116368A1 (en) 2004-11-29 2006-06-01 Calvo Raul R 4-Piperidinecarboxamide modulators of vanilloid VR1 receptor
GT200600046A (es) 2005-02-09 2006-09-25 Terapia de combinacion
MX2007011234A (es) 2005-03-14 2007-11-12 Transtech Pharma Inc Derivados de benzazol, composiciones y metodos de uso en la forma de inhibidores de b-secretasa.
DE102005014904A1 (de) 2005-03-26 2007-02-01 Abbott Gmbh & Co. Kg Substituierte Oxindol-Derivate, diese enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung
FR2884516B1 (fr) 2005-04-15 2007-06-22 Cerep Sa Antagonistes npy, preparation et utilisations
US8193206B2 (en) 2005-06-14 2012-06-05 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Pyrimidine compounds
WO2007023882A1 (ja) 2005-08-26 2007-03-01 Shionogi & Co., Ltd. Ｐｐａｒアゴニスト活性を有する誘導体
US8993763B2 (en) 2005-09-27 2015-03-31 Shionogi & Co., Ltd. Sulfonamide derivative having PGD2 receptor antagonistic activity
US20070155707A1 (en) 2005-12-29 2007-07-05 Kadmus Pharmaceuticals, Inc. Ionizable inhibitors of fatty acid amide hydrolase
AU2007207149A1 (en) 2006-01-18 2007-07-26 Siena Biotech S.P.A. Modulators of alpha7 nicotinic acetylcholine receptors and therapeutic uses thereof
EP1989188B1 (en) 2006-02-28 2015-07-22 Dart Neuroscience (Cayman) Ltd Therapeutic piperazines as pde4 inhibitors
US20070208001A1 (en) 2006-03-03 2007-09-06 Jincong Zhuo Modulators of 11- beta hydroxyl steroid dehydrogenase type 1, pharmaceutical compositions thereof, and methods of using the same
TW200815426A (en) 2006-06-28 2008-04-01 Astrazeneca Ab New pyridine analogues II 333
WO2008005368A2 (en) 2006-06-30 2008-01-10 Abbott Laboratories Piperazines as p2x7 antagonists
WO2008013622A2 (en) 2006-07-27 2008-01-31 E. I. Du Pont De Nemours And Company Fungicidal azocyclic amides
JP2010510201A (ja) 2006-11-20 2010-04-02 グレンマーク・ファーマシューティカルズ・エスエー ステアリン酸ＣｏＡ脱飽和酵素阻害剤としてのアセチレン誘導体
DE102006060598A1 (de) 2006-12-21 2008-06-26 Merck Patent Gmbh Tetrahydrobenzoisoxazole
US7998966B2 (en) 2007-04-13 2011-08-16 Supergen, Inc. Axl kinase inhibitors
PT2142529E (pt) * 2007-04-27 2014-03-20 Purdue Pharma Lp Antagonistas de trpv1 e as respectivas utilizações
EP2479173A1 (en) 2007-04-27 2012-07-25 Purdue Pharma LP Therapeutic agents useful for treating pain
WO2008147864A2 (en) 2007-05-22 2008-12-04 Xenon Pharmaceuticals Inc. Methods of using piperazine compounds in treating sodium channel-mediated diseases or conditions
US8058299B2 (en) 2007-05-22 2011-11-15 Via Pharmaceuticals, Inc. Diacylglycerol acyltransferase inhibitors
EP2581081A3 (en) 2007-06-01 2013-07-31 The Trustees Of Princeton University Treatment of viral infections by modulation of host cell metabolic pathways
MX2009013686A (es) 2007-06-13 2010-01-27 Univ Northeastern Compuestos antibioticos.
US20100249144A1 (en) 2007-06-28 2010-09-30 Demong Duane Eugene Substituted piperazines as cb1 antagonists
EA201070077A1 (ru) 2007-06-29 2010-08-30 Эмори Юниверсити Антагонисты nmda-рецепторов с нейропротективным действием
US20100261723A1 (en) 2007-07-09 2010-10-14 Astrazeneca Ab Trisubstituted pyrimidine derivatives for the treatment of proliferative diseases
JP2010535812A (ja) 2007-08-09 2010-11-25 アボット・ラボラトリーズ Ｔｒｐｖ１拮抗薬としてのテトラヒドロピリジンカルボキサミド誘導体
US7994174B2 (en) 2007-09-19 2011-08-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyridyl sulfonamides as modulators of ion channels
CA2700974A1 (en) 2007-10-04 2009-04-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Substituted aryl sulfone derivatives as calcium channel blockers
CA2708364A1 (en) 2007-12-11 2009-06-18 Efrat Ben-Zeev Carboxamide compounds and their use as chemokine receptor agonists
US7935817B2 (en) 2008-03-31 2011-05-03 Apotex Pharmachem Inc. Salt form and cocrystals of adefovir dipivoxil and processes for preparation thereof
JP2009249346A (ja) 2008-04-08 2009-10-29 Fujifilm Corp ピリジン骨格を有する血液脳関門透過性化合物
WO2009155116A2 (en) 2008-05-30 2009-12-23 Georgetown University Methods of reducing pain and inflammation
CA2730288C (en) 2008-07-21 2016-09-13 Purdue Pharma L.P. Substituted-quinoxaline-type bridged-piperidine compounds and the uses thereof
US8703962B2 (en) 2008-10-24 2014-04-22 Purdue Pharma L.P. Monocyclic compounds and their use as TRPV1 ligands
US8546388B2 (en) 2008-10-24 2013-10-01 Purdue Pharma L.P. Heterocyclic TRPV1 receptor ligands
US8759362B2 (en) 2008-10-24 2014-06-24 Purdue Pharma L.P. Bicycloheteroaryl compounds and their use as TRPV1 ligands
WO2010114957A1 (en) 2009-04-03 2010-10-07 Schering Corporation Bicyclic piperidine and piperazine derivatives as gpcr modulators for the treatment of obesity, diabetes and other metabolic disorders
WO2011147765A1 (de) 2010-05-27 2011-12-01 Bayer Cropscience Ag Pyridinylcarbonsäure derivate als fungizide
WO2011162409A1 (en) 2010-06-22 2011-12-29 Shionogi & Co., Ltd. Compounds having trpv1 antagonistic activity and uses thereof
WO2012047764A1 (en) 2010-10-04 2012-04-12 Intermune, Inc. Therapeutic antiviral peptides
EP2630134B9 (en) 2010-10-20 2018-04-18 Pfizer Inc Pyridine-2- derivatives as smoothened receptor modulators
CN103189371B (zh) 2010-11-04 2015-04-01 施万生物制药研发Ip有限责任公司 丙型肝炎病毒抑制剂
UY33817A (es) 2010-12-21 2012-07-31 Boehringer Ingelheim Int ?nuevas oxindolpirimidinas bencílicas?.
US20120202794A1 (en) 2011-01-24 2012-08-09 Pharmasset, Inc. Compounds
WO2012117421A1 (en) 2011-03-02 2012-09-07 Orchid Research Laboratories Ltd Histone deacetylase inhibitors
CN102336720B (zh) 2011-03-02 2016-01-13 华中科技大学 2-氨基噻唑衍生物及制备方法和应用
WO2012158784A2 (en) 2011-05-16 2012-11-22 Theodore Mark Kamenecka Modulators of the nuclear hormone receptor ror
WO2012158844A1 (en) 2011-05-17 2012-11-22 Shionogi & Co., Ltd. Heterocyclic compounds
ES2620528T3 (es) 2011-06-22 2017-06-28 Purdue Pharma Lp Antagonistas de TRPV1 que incluyen un sustituyente dihidroxi y usos de los mismos
EP2736329A4 (en) 2011-07-29 2015-03-25 Tempero Pharmaceuticals Inc COMPOUNDS AND METHODS
US9394293B2 (en) 2011-08-10 2016-07-19 Purdue Pharma L.P. TRPV1 antagonists including dihydroxy substituent and uses thereof
WO2013066831A1 (en) 2011-10-31 2013-05-10 Glaxosmithkline Llc Compounds and methods
US8426450B1 (en) 2011-11-29 2013-04-23 Helsinn Healthcare Sa Substituted 4-phenyl pyridines having anti-emetic effect
ES2798289T3 (es) 2012-01-25 2020-12-10 Novartis Ag Compuestos heterocíclicos y métodos para su uso
WO2013142628A2 (en) 2012-03-20 2013-09-26 Fred Hutchinson Cancer Research Center Antibiotic compounds and compositions, and methods for identification thereof
WO2013153539A1 (en) 2012-04-13 2013-10-17 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Tricyclic compounds as tec kinase inhibitors
CN104684906B (zh) 2012-05-11 2017-06-09 艾伯维公司 Nampt抑制剂
GB201212513D0 (en) 2012-07-13 2012-08-29 Ucb Pharma Sa Therapeutic agents

Also Published As

Publication number Publication date
US20140329829A1 (en) 2014-11-06
CN103717594B (zh) 2016-12-14
PH12013502412B1 (en) 2022-03-23
PL2723732T3 (pl) 2017-07-31
SI2723732T1 (sl) 2017-05-31
CN103717594A (zh) 2014-04-09
US20200239460A1 (en) 2020-07-30
LT2723732T (lt) 2017-02-27
EP2723732B1 (en) 2017-01-18
SG195136A1 (en) 2013-12-30
EP2723732A1 (en) 2014-04-30
HRP20170507T1 (hr) 2017-06-02
IL229817A (en) 2016-04-21
TW201313707A (zh) 2013-04-01
AU2012273652B2 (en) 2015-09-03
EP3173411B1 (en) 2018-05-09
AR086709A1 (es) 2014-01-15
SMT201700197T1 (it) 2017-05-08
PT2723732T (pt) 2017-02-17
NZ618912A (en) 2015-07-31
TWI453205B (zh) 2014-09-21
PH12013502412A1 (en) 2014-01-06
US9273043B2 (en) 2016-03-01
KR20150055094A (ko) 2015-05-20
WO2012176061A8 (en) 2013-08-08
US10450308B2 (en) 2019-10-22
CN105693712A (zh) 2016-06-22
WO2012176061A1 (en) 2012-12-27
RU2621708C2 (ru) 2017-06-07
MX2014000344A (es) 2015-09-23
KR101589837B1 (ko) 2016-01-29
UA113288C2 (xx) 2017-01-10
ZA201400419B (en) 2015-04-29
ES2620528T3 (es) 2017-06-28
PE20141531A1 (es) 2014-10-23
JP2014520139A (ja) 2014-08-21
WO2012176061A9 (en) 2013-03-14
EP3173411A1 (en) 2017-05-31
CY1119111T1 (el) 2018-02-14
MY185061A (en) 2021-04-30
KR20140022469A (ko) 2014-02-24
SG10201605163PA (en) 2016-08-30
CO6852081A2 (es) 2014-01-30
AU2012273652A1 (en) 2013-05-02
MX354015B (es) 2018-02-08
CA2837178A1 (en) 2012-12-27
CA2837178C (en) 2016-09-20
US20170183337A1 (en) 2017-06-29
HUE031372T2 (en) 2017-07-28
US20160222002A1 (en) 2016-08-04
BR112013032658A2 (pt) 2017-11-07
DK2723732T3 (en) 2017-04-03
CL2013003550A1 (es) 2014-11-14
US9630959B2 (en) 2017-04-25
JP5699251B2 (ja) 2015-04-08
RU2014101255A (ru) 2015-07-27
ME02609B (me) 2017-06-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9156830B2 (en) Heterocyclic compounds
ES2303609T3 (es) Derivados de benzoazolilpiperacina que tienen actividad antagonista de vr1.
EP2091936B1 (en) Therapeutic agents useful for treating pain
JP4686456B2 (ja) 疼痛を治療するのに有用な治療薬
JP5462784B2 (ja) Ｔｒｐｖ１アンタゴニストとその使用
KR20050052514A (ko) 치료용 피페라진 화합물
PT1942106E (pt) Agentes terapêuticos úteis para o tratamento da dor
JP5876423B2 (ja) Ｔｒｐｖ１阻害活性を有する化合物とその使用
RS55701B1 (sr) Trpv1 antagonisti koji uključuju dihidroksi supstituent i njihove upotrebe
ES2322907T3 (es) Piperazinas utiles para el tratamiento de dolor.
ES2322707T3 (es) Derivados de 2-piridina alquino utiles para tratar el dolor.