ES2986067T3

ES2986067T3 - Moléculas de anticuerpos frente a PD-1 y usos de las mismas

Info

Publication number: ES2986067T3
Application number: ES16831788T
Authority: ES
Inventors: Sanela Bilic; Danny Howard; John Cameron; Glenn Dranoff
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2015-12-17
Filing date: 2016-12-16
Publication date: 2024-11-08
Anticipated expiration: 2036-12-16
Also published as: BR112018012138A2; KR102833068B1; EP4424322A3; JP2019503349A; US20180371093A1; CA3007671A1; EP4424322A2; WO2017106656A8; WO2017106656A1; AU2016369537A1; KR20180088907A; MX2018007423A; JP2020143149A; JP7569166B2; AU2016369537B2; IL259987A; RU2018125773A3; JP2024174916A; JP2022180567A; PH12018501206A1

Abstract

Se describen moléculas de anticuerpos que se unen específicamente a PD-1. Las moléculas de anticuerpos se pueden utilizar para tratar o prevenir afecciones y trastornos cancerosos o infecciosos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Moléculas de anticuerpos frente a PD-1 y usos de las mismas

Referencia cruzada a solicitudes relacionadas

Esta solicitud reivindica el beneficio de Solicitud Provisional U.S. No. 62/269,044, presentada el 17 de diciembre de 2015, Solicitud Provisional U.S. No. 62/331,371, presentada el 3 de mayo de 2016, Solicitud Provisional U.S. No. 62/344,784, presentada el 2 de junio de 2016, Solicitud Provisional U.S. No. 62/347,331, presentada el 8 de junio de 2016, Solicitud Provisional U.S. No. 62/359,781, presentada el 8 de julio de 2016, Solicitud provisional No. 62/381,384, presentada el 30 de agosto de 2016, Solicitud provisional No. 62/400,787, presentada el 28 de septiembre de 2016, Solicitud provisional U.S. No. 62/414,128, presentada el 28 de octubre de 2016, y Solicitud provisional U.S. No. 62/431,846, presentada el 9 de diciembre de 2016.

Listado de secuencias

La presente solicitud contiene un Listado de secuencias que se ha presentado electrónicamente en formato ASCII. Dicha copia ASCII, creada el 14 de diciembre de 2016, se denomina C2160-7015WO_SL.txt y tiene un tamaño de 280,741 bytes.

Antecedentes

La capacidad de las células T para mediar una respuesta inmunitaria contra un antígeno requiere dos interacciones de señalización distintas (Viglietta, V. et al. (2007) Neurotherapeutics 4:666-675; Korman, A. J. et al. (2007) Adv. Immunol. 90:297-339). En primer lugar, un antígeno que se ha dispuesto en la superficie de células presentadoras de antígenos (APC) se presenta a una célula T CD4+ ingenua específica de antígeno. Esta presentación emite una señal a través del receptor de células T (TCR) que dirige a la célula T para que inicie una respuesta inmunitaria específica contra el antígeno presentado. En segundo lugar, varias señales coestimuladoras e inhibidoras mediadas por interacciones entre la APC y distintas moléculas de superficie de las células T desencadenan la activación y proliferación de las células T y, en última instancia, su inhibición.

El sistema inmunitario está estrechamente controlado por una red de ligandos y receptores coestimuladores y coinhibidores. Estas moléculas proporcionan la segunda señal para la activación de las células T y proporcionan una red equilibrada de señales positivas y negativas para maximizar las respuestas inmunitarias contra la infección, limitando al mismo tiempo la inmunidad a uno mismo (Wang, L. et al. (Epub Mar. 7, 2011) J. Exp. Med. 208(3):577-92; Lepenies, B. et al. (2008) Endocrine, Metabolic & Immune Disorders--Drug Targets 8:279-288). Ejemplos de señales coestimuladoras incluyen la unión entre los ligandos B7.1 (CD80) y B7.2 (CD86) de la AC y los receptores CD28 y CTLA-4 del linfocito T CD4+ (Sharpe, A. H. et al. (2002) Nature Rev. Immunol. 2:116-126; Lindley, P. S. et al. (2009) Immunol. Rev. 229:307-321). La unión de B7.1 o B7.2 a CD28 estimula la activación de células T, mientras que la unión de B7.1 o B7.2 a CTLA-4 inhibe tal activación (Dong, C. et al. (2003) Immunolog. Res. 28(1):39-48; Greenwald, R. J. et al. (2005) Ann. Rev. Immunol. 23:515-548). CD28 se expresa de forma constitutiva en la superficie de las células T (Gross, J., et al. (1992) J. Immunol.

149:380-388), mientras que la expresión de CTLA-4 es rápidamente sobrerregulada tras la activación de células T (Linsley, P. et al. (1996) Immunity 4:535-543).

Otros ligandos del receptor CD28 incluyen un grupo de moléculas B7 relacionadas, también conocidas como la "Superfamilia B7" (Coyle, A. J. et al. (2001) Nature Immunol. 2(3):203-209; Sharpe, A. H. et al. (2002) Nature Rev. Immunol. 2: 116-126; Collins, M. et al. (2005) Genome Biol. 6:223.1-223.7; Korman, A. J. et al. (2007) Adv. Immunol. 90:297-339). Se conocen varios miembros de la superfamilia B7, incluyendo B7.1 (CD80), B7.2 (CD86), el ligando coestimulador inducible (ICOS-L), el ligando de muerte programada-1 (PD-L1; B7-H1), el ligando de muerte programada-2 (PD-L2; B7-DC), B7-H3, B7-H4 y B7-H6 (Collins, M. et al. (2005) Genome Biol. 6:223.1-223.7).

La proteína de Muerte Programada 1 (PD-1) es un miembro inhibidor de la familia ampliada CD28/CTLA-4 de reguladores de células T (Okazaki et al. (2002) Curr Opin Immunol 14: 391779-82; Bennett et al. (2003) J. Immunol. 170:711-8). Otros miembros de la familia CD28 son CD28, CTLA-4, ICOS y BTLA. Se sugiere que PD-1 existe como monómero, careciendo del residuo de cisteína no apareado característico de otros miembros de la familia CD28. PD-1 se expresa en células B activadas, células T y monocitos.

El gen PD-1 codifica una proteína transmembrana de tipo I de 55 kDa (Agata et al. (1996) Int Immunol. 8:765-72). Aunque estructuralmente similar a CTLA-4, PD-1 carece del motivo MYPPY (SEQ ID NO: 236) que es importante para la unión a B7-1 y B7-2. Se han identificado dos ligandos para PD-1, PD-L1 (B7-H1) y PD-L2 (B7-DC), que han demostrado subregular la activación de células T al unirse a PD-1 (Freeman et al. (2000) J. Exp. Med. 192: 1027-34; Carter et al. (2002) Eur. J. Immunol. 32:634-43). Tanto PD-L1 comoD-L2 son homólogos de B7 que se unen a PD-1, pero no se unen a otros miembros de la familia CD28. PD-L1 es abundante en una variedad de cánceres humanos (Dong et al. (2002) Nat. Med. 8:787-9).

PD-1 es conocida como una proteína inmunoinhibidora que regula negativamente las señales TCR (Ishida, Y. et al. (1992) EMBO J. 11:3887-3895; Blank, C. et al. (Epub 2006 Dec. 29) Immunol. Immunother. 56(5):739-745). La interacción entre PD-1 y PD-L1 puede actuar como punto de control inmunitario, lo que puede provocar, por ejemplo, una disminución de los linfocitos infiltrantes en el tumor, una disminución de la proliferación mediada por receptores de células T y/o la evasión inmunitaria por parte de las células cancerosas (Dong et al. (2003) J. Mol. Med. 81:281-7; Blank et al. (2005) Cancer Immunol. Immunother. 54:307-314; Konishi et al. (2004) Clin. Cancer Res. 10:5094-100). La inmunosupresión puede revertirse inhibiendo la interacción local de PD-1 con PD-L1 o PD-L2; el efecto es aditivo cuando se bloquea la interacción de PD-1 con PD-L2 también (Iwai et al. (2002) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 99: 12293-7; Brown et al. (2003) J. Immunol. 170: 1257 66). Zhang J., 2015 IAS<l>C Conference Poster P2.01-097 "Phase 3 Study of Pembrolizumab vs Platinum-Based Chemotherapy for PD-L1+ NSCLC (ID 2182)" describe que Pembrolizumab (MK-3475), un anticuerpo monoclonal anti-PD-1, ha demostrado una toxicidad manejable y una prometedora actividad antitumoral en pacientes con NSCLC sin tratamiento inscritos en el estudio de fase 1b KeYNOTE-001. El estudio KEYNOTE-042 (identificador de ClinicalTrials.gov NCT02220894) se describe como un estudio aleatorizado, abierto, internacional, de fase 3, diseñado para comparar la eficacia y seguridad de pembrolizumab (dosis fija de 200 mg cada 3 semanas) con las de la quimioterapia con doblete de platino como tratamiento de primera línea del NSCLC avanzado PD-L1-positivo.

El documento US-A-20150290316 describe métodos para el tratamiento clínico del cáncer (por ejemplo, tumores sólidos avanzados refractarios o neoplasias hematológicas) utilizando un anticuerpo anti-KIR en combinación con un anticuerpo anti-PD-1.

El documento WO-A-2015/112900 describe moléculas de anticuerpos que se unen específicamente a PD-1 y pueden utilizarse para tratar, prevenir y/o diagnosticar afecciones y trastornos cancerosos o infecciosos.

Dada la importancia de las vías de puntos de control inmunitarios en la regulación de una respuesta inmunitaria, existe la necesidad de desarrollar terapias combinadas novedosas que modulen la actividad de proteínas inmunoinhibidoras, como PD-1, conduciendo así a la activación del sistema inmunitario. Tales agentes pueden utilizarse, por ejemplo, para la inmunoterapia del cáncer y el tratamiento de otras afecciones, como las infecciones crónicas.

RESUMEN

La invención se define mediante las reivindicaciones.

En el presente documento se divulgan, al menos en parte, moléculas de anticuerpos (por ejemplo, moléculas de anticuerpos humanizados) que se unen a la Muerte Programada 1 (PD-1) con alta afinidad y especificidad. También se proporcionan moléculas de ácido nucleico que codifican las moléculas de anticuerpo, vectores de expresión, células huésped y métodos para fabricar las moléculas de anticuerpo. También se proporcionan composiciones farmacéuticas y formulaciones de dosis que comprenden las moléculas de anticuerpo. Las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 aquí divulgadas pueden utilizarse (solas o en combinación con otros agentes o modalidades terapéuticas) para tratar, prevenir y/o diagnosticar trastornos, como trastornos cancerosos (por ejemplo, tumores sólidos y de tejidos blandos), así como enfermedades infecciosas (por ejemplo, trastornos infecciosos crónicos o sepsis). Por lo tanto, en el presente documento se describen composiciones y métodos para detectar PD-1, así como métodos para tratar diversos trastornos, incluyendo cáncer y/o enfermedades infecciosas, utilizando las moléculas de anticuerpos anti-PD-1. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra o utiliza a una dosis plana o fija.

Por consiguiente, en un aspecto, la divulgación presenta un método para tratar (por ejemplo, inhibir, reducir, mejorar o prevenir) un trastorno, por ejemplo, una afección o trastorno hiperproliferativo (por ejemplo, un cáncer) en un sujeto. El método incluye administrar al sujeto una molécula de anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento, a una dosis de aproximadamente 300 mg a 400 mg una vez cada tres semanas o una vez cada cuatro semanas. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg una vez cada tres semanas. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas. En algunas realizaciones, el trastorno es un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de piel, por ejemplo, un carcinoma de células de Merkel o un melanoma. En una realización, el cáncer es un carcinoma de células de Merkel. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de mama, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC) o un cáncer de mama HER2 negativo. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de riñón, por ejemplo, un carcinoma de células renales (por ejemplo, un carcinoma de células renales claras [CCRCC] o un carcinoma de células renales no claras (nccRCC)). En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de tiroides, por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides (ATC). En otras realizaciones, el cáncer es un tumor neuroendocrino (NET), por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico o un NET en páncreas, tracto gastrointestinal (GI) o pulmón. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC escamoso o un NSCLC no escamoso). En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de ovario. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de trompas de falopio. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer colorrectal (CRC) (por ejemplo, un cáncer colorrectal con alta inestabilidad de microsatélites (CRC con MSI alto) o un cáncer colorrectal con microsatélites estables (MSS CRC)). En ciertas realizaciones, el cáncer es una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML), por ejemplo, una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo).En ciertas realizaciones, el cáncer es un síndrome mielodisplásico (MDS) (por ejemplo, un MDS de alto riesgo).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas o aproximadamente 300 mg una vez cada tres semanas para tratar un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC escamoso o un NSCLC no escamoso). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg una vez cada tres semanas para tratar un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC escamoso o un NSCLC no escamoso). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas para tratar un cáncer de piel, por ejemplo, un carcinoma de células de Merkel o un melanoma. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas para tratar un carcinoma de células de Merkel. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas para tratar un melanoma. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas para tratar un cáncer de mama, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC) o un cáncer de mama HER2 negativo. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas para tratar un cáncer de tiroides, por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides (ATC). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas para tratar un tumor neuroendocrino (NET), por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico o un NET en páncreas, tracto gastrointestinal (GI) o pulmón. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas para tratar un cáncer de riñón, por ejemplo, un carcinoma de células renales [por ejemplo, un carcinoma de células renales claras (CCRCC) o un carcinoma de células renales no claras (nccRCC)]. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas para tratar un cáncer de ovario. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas para tratar un cáncer de trompas de falopio. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas para tratar un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal de alta inestabilidad de microsatélites (CRC con MSI alto) o un cáncer colorrectal estable de microsatélites (MSS CRC)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas para tratar una leucemia (por ejemplo, una AML, por ejemplo, una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo).En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas para tratar un síndrome mielodisplásico (MDS) (por ejemplo, un MDS de alto riesgo).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra por inyección (por ejemplo, subcutánea o intravenosa) a una dosis (por ejemplo, una dosis plana) de aproximadamente 100 mg a 600 mg, por ejemplo, de aproximadamente 200 mg a 500 mg, por ejemplo, de aproximadamente 100 mg a 300 mg, de aproximadamente 250 mg a 450 mg, de aproximadamente 300 mg a 400 mg, de aproximadamente 250 mg a 350 mg, de aproximadamente 350 mg a 450 mg, o de aproximadamente 100 mg, aproximadamente 200 mg, aproximadamente 300 mg o aproximadamente 400 mg. El programa de dosificación (por ejemplo, programa de dosificación plana) puede variar de, por ejemplo, una vez a la semana a una vez cada 2, 3, 4, 5 o 6 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg a 400 mg una vez cada tres semanas o una vez cada cuatro semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg una vez cada tres semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg una vez cada cuatro semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada tres semanas.

En otro aspecto, la divulgación presenta un método para reducir una actividad (por ejemplo, crecimiento, supervivencia o viabilidad, o todo), de una célula hiperproliferativa (por ejemplo, una célula cancerosa). El método incluye poner en contacto la célula con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento. El método puede realizarse en un sujeto, por ejemplo, como parte de un protocolo terapéutico, por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 300 mg a 400 mg de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 una vez cada tres semanas o una vez cada cuatro semanas, En ciertas realizaciones, la dosis es de aproximadamente 300 mg de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 una vez cada tres semanas. En otras realizaciones, la dosis es de aproximadamente 400 mg de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 una vez cada cuatro semanas. La célula cancerosa puede ser, por ejemplo, una célula de un cáncer descrito en el presente documento, como cáncer de pulmón (escamoso), cáncer de pulmón (adenocarcinoma), cáncer de cabeza y cuello, cáncer cervical (escamoso), cáncer de estómago, cáncer de tiroides, cáncer de piel, melanoma, cáncer nasofaríngeo (por ejemplo, carcinoma nasofaríngeo diferenciado o indiferenciado metastásico o localmente recurrente), cáncer de riñón, tumor neuroendocrino (NET), cáncer de ovario, cáncer de trompas de falopio, cáncer colorrectal o cáncer de mama. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de piel, por ejemplo, un carcinoma de células de Merkel o un melanoma. En una realización, el cáncer es un carcinoma de células de Merkel. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de mama, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC) o un cáncer de mama HER2 negativo. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de riñón, por ejemplo, un carcinoma de células renales (por ejemplo, un carcinoma de células renales claras [CCRCC] o un carcinoma de células renales no claras (nccRCC)). En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de tiroides, por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides (ATC). En otras realizaciones, el cáncer es un tumor neuroendocrino (NET), por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico o un NET en páncreas, tracto gastrointestinal (GI) o pulmón. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC escamoso o un NSCLc no escamoso). En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de ovario. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de trompas de falopio. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer colorrectal (CRC) (por ejemplo, un cáncer colorrectal con alta inestabilidad de microsatélites (CRC con MSI alto) o un cáncer colorrectal con microsatélites estables (MSS CRC)). En ciertas realizaciones, el cáncer es una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML), por ejemplo, una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo).En ciertas realizaciones, el cáncer es un síndrome mielodisplásico (MDS) (por ejemplo, un MDS de alto riesgo).

En otro aspecto, la divulgación presenta una composición (por ejemplo, una o más composiciones o formas de dosificación), que incluye una molécula de anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). También se describen en el presente documento formulaciones, por ejemplo, formulaciones de dosificación, y kits, por ejemplo, kits terapéuticos, que incluyen una molécula de anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). En ciertas realizaciones, la composición o formulación comprende 300 mg o 400 mg de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). En algunas realizaciones, la composición o formulación se administra o utiliza una vez cada tres semanas o una vez cada cuatro semanas.

También se divulgan en el presente documento métodos y composiciones que comprenden una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos de una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación de antígenos (por ejemplo, presentación de antígenos tumorales); (ii) un agente que mejora una respuesta de células efectoras (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral. En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra o utiliza a una dosis plana o fija.

Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que los enfoques terapéuticos que mejoran la inmunidad antitumoral funcionan más eficazmente cuando la respuesta inmunitaria se optimiza dirigiéndose a múltiples componentes en una o más etapas de una respuesta inmunitaria, por ejemplo, una respuesta inmunitaria antitumoral. Por ejemplo, los enfoques que mejoran la presentación de antígenos, por ejemplo, mediante la activación y/o maduración de células dendríticas, combinados con enfoques que mejoran las respuestas inmunitarias celular y humoral (por ejemplo, mediante la estimulación, por ejemplo, la desinhibición, de fagocitos y/o linfocitos infiltrantes de tumores (por ejemplo, células NK y células T)), mientras que el bloqueo de la señalización inmunosupresora tumoral (por ejemplo, mediante el aumento de la polarización de los macrófagos, el aumento de la depleción de Treg y/o la disminución de las células supresoras derivadas de mieloides (MDSC)) puede dar lugar a una respuesta terapéutica más eficaz y/o prolongada. Por consiguiente, en el presente documento se describen terapias combinadas que optimizan uno, dos o todos los siguientes aspectos: (i) presentación de antígenos, por ejemplo, aumentando la presentación de antígenos (por ejemplo, mejorando una o más de las actividades o maduración de las células dendríticas, la captación de antígenos o el procesamiento de antígenos); (ii) respuesta de las células efectoras, por ejemplo, aumentando la respuesta de las células efectoras (por ejemplo, aumentando la activación y/o movilización de células B y/o células T, por ejemplo, en el ganglio linfático); o (iii) inmunosupresión tumoral, por ejemplo, disminuyendo la inmunosupresión tumoral (por ejemplo, aumentando la infiltración de células T y la destrucción de células tumorales). Las combinaciones descritas en el presente documento pueden proporcionar un efecto beneficioso superior, por ejemplo, en el tratamiento de un trastorno, como un efecto anticanceroso mejorado, una toxicidad reducida y/o efectos secundarios reducidos, en comparación con la administración en monoterapia de los agentes terapéuticos de la combinación. Por ejemplo, uno o más de los agentes terapéuticos de la combinación pueden administrarse a una dosis menor, o durante un periodo de administración más corto, de lo que sería necesario para lograr el mismo efecto terapéutico en comparación con la administración en monoterapia. Así pues, se divulgan composiciones y métodos para tratar el cáncer y otros trastornos inmunitarios utilizando las terapias combinadas mencionadas.

En consecuencia, en un aspecto, la divulgación presenta un método para tratar (por ejemplo, inhibir, reducir, mejorar o prevenir) un trastorno, por ejemplo, una afección o trastorno hiperproliferativo (por ejemplo, un cáncer) en un sujeto. El método incluye administrar al sujeto una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos de una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación del antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral); (ii) un agente que mejora una respuesta de células efectoras (por ejemplo, (iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral, tratando así el trastorno, por ejemplo, la afección o trastorno hiperproliferativo (por ejemplo, el cáncer). En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). El cáncer tratado puede ser, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, como cáncer de pulmón (escamoso), cáncer de pulmón (adenocarcinoma), cáncer de cabeza y cuello, cáncer cervical (escamoso), cáncer de estómago, cáncer de tiroides, cáncer de piel, melanoma, cáncer nasofaríngeo (por ejemplo, carcinoma nasofaríngeo diferenciado o indiferenciado metastásico o localmente recurrente), cáncer de riñón, tumor neuroendocrino (NET) o cáncer de mama. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de piel, por ejemplo, un carcinoma de células de Merkel o un melanoma. En una realización, el cáncer es un carcinoma de células de Merkel. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de mama, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC) o un cáncer de mama HER2 negativo. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de riñón, por ejemplo, un carcinoma de células renales (por ejemplo, un carcinoma de células renales claras [CCRCC] o un carcinoma de células renales no claras (nccRCC)). En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de tiroides, por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides (ATC). En otras realizaciones, el cáncer es un tumor neuroendocrino (NET), por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico o un NET en páncreas, tracto gastrointestinal (GI) o pulmón. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC escamoso o un NSCLC no escamoso). En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de ovario. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de trompas de falopio. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer colorrectal (CRC) (por ejemplo, un cáncer colorrectal con alta inestabilidad de microsatélites (CRC con MSI alto) o un cáncer colorrectal con microsatélites estables (MSS CRC)). En ciertas realizaciones, el cáncer es una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML), por ejemplo, una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo).En ciertas realizaciones, el cáncer es un síndrome mielodisplásico (MDS) (por ejemplo, un MDS de alto riesgo).

En otro aspecto, la divulgación presenta un método para reducir una actividad (por ejemplo, crecimiento, supervivencia o viabilidad, o todas), de una célula hiperproliferativa (por ejemplo, un cáncer). El método incluye poner en contacto la célula con una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos de una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación del antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral); (ii) un agente que mejora una respuesta de células efectoras (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral, reduciendo así una actividad en la célula hiperproliferativa. En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). El método puede realizarse en un sujeto, por ejemplo, como parte de un protocolo terapéutico. La célula cancerosa puede ser, por ejemplo, una célula de un cáncer descrito en el presente documento, como cáncer de pulmón (escamoso), cáncer de pulmón (adenocarcinoma), cáncer de cabeza y cuello, cáncer cervical (escamoso), cáncer de estómago, cáncer de tiroides, cáncer de piel, melanoma, cáncer nasofaríngeo (por ejemplo, carcinoma nasofaríngeo diferenciado o indiferenciado metastásico o localmente recurrente), cáncer de riñón, tumor neuroendocrino (NET), cáncer de ovario, cáncer de trompas de falopio, cáncer colorrectal o cáncer de mama. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de piel, por ejemplo, un carcinoma de células de Merkel o un melanoma. En una realización, el cáncer es un carcinoma de células de Merkel. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de mama, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC) o un cáncer de mama HER2 negativo. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de riñón, por ejemplo, un carcinoma de células renales[porejemplo, un carcinoma de células renales claras (CCRCC) o un carcinoma de células renales no claras (nccRCC)]. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de tiroides, por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides (ATC). En otras realizaciones, el cáncer es un tumor neuroendocrino (NET), por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico, o un NET en páncreas, tracto gastrointestinal (GI) o pulmón. En ciertas realizaciones, el cánceres un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC escamoso o un NSCLC no escamoso). En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de ovario. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de trompas de falopio. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer colorrectal (CRC) (por ejemplo, un cáncer colorrectal con alta inestabilidad de microsatélites (CRC con MSI alto) o un cáncer colorrectal con microsatélites estables (MSS CRC)). En ciertas realizaciones, el cáncer es una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML), por ejemplo, una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo).En ciertas realizaciones, el cáncer es un síndrome mielodisplásico (MDS) (por ejemplo, un MDS de alto riesgo).

En ciertas realizaciones de los métodos aquí divulgados, el método incluye además determinar el nivel de un infiltrado de células inmunitarias (por ejemplo, una célula T) (por ejemplo, el nivel de linfocitos infiltrantes de tumor (TIL)) en el sujeto. En una realización, el nivel de infiltrado de células inmunitarias se determinain vivo,por ejemplo, de forma no invasiva (por ejemplo, detectando un anticuerpo contra un marcador de células T etiquetado de forma detectable mediante una técnica de generación de imagen adecuada, por ejemplo, exploración por tomografía por emisión de positrones (PET)). En otras realizaciones, el nivel de infiltrado de células inmunitarias se determina en una muestra (por ejemplo, una biopsia tumoral) obtenida del sujeto (por ejemplo, mediante técnicas inmunohistoquímicas). En algunas realizaciones, en respuesta a un nivel bajo o no detectable de infiltrado tumoral en el sujeto, se administran uno o más agentes de las categorías (i) o (ii), o ambos (i) y (ii). En otras realizaciones, en respuesta a un nivel detectable, o un nivel elevado, de infiltrado tumoral en el sujeto, se administran uno o más agentes de la categoría (iii). Los pasos de detección también pueden utilizarse, por ejemplo, para monitorizar la eficacia de un agente terapéutico descrito en el presente documento. Por ejemplo, la etapa de detección puede utilizarse para controlar la eficacia de los agentes terapéuticos de las categorías (i), (ii) y/o (iii).

En otro aspecto, la divulgación presenta una composición (por ejemplo, una o más composiciones o formas de dosificación), que incluye una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos de una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación del antígeno (por ejemplo, presentación del antígeno tumoral; (ii) un agente que potencia una respuesta de células efectoras (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral. En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento).

En otro aspecto más, la divulgación presenta una composición (por ejemplo, una o más composiciones o formas de dosificación como se describe en el presente documento), para su uso en el tratamiento de un trastorno, por ejemplo, un cáncer. En realizaciones, la composición para su uso incluye una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos de una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación del antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral); (ii) un agente que mejora una respuesta de células efectoras (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral. En algunas realizaciones, la combinación utilizada incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). El cáncer puede ser, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, como cáncer de pulmón (escamoso), cáncer de pulmón (adenocarcinoma), cáncer de cabeza y cuello, cáncer cervical (escamoso), cáncer de estómago, cáncer de tiroides, cáncer de piel, melanoma, cáncer nasofaríngeo (por ejemplo, carcinoma nasofaríngeo diferenciado o indiferenciado metastásico o localmente recurrente), cáncer de riñón, tumor neuroendocrino (NET), cáncer de ovario, cáncer de trompas de falopio, cáncer colorrectal o cáncer de mama. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de piel, por ejemplo, un carcinoma de células de Merkel o un melanoma. En una realización, el cáncer es un carcinoma de células de Merkel. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de mama, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC) o un cáncer de mama HER2 negativo. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de riñón, por ejemplo, un carcinoma de células renales (por ejemplo, un carcinoma de células renales claras (CCRCC) o un carcinoma de células renales no claras (nccRCC)]. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de tiroides, por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides (ATC). En otras realizaciones, el cáncer es un tumor neuroendocrino (NET), por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico, o un NET en páncreas, tracto gastrointestinal (GI) o pulmón. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC escamoso o un NSCLC no escamoso). En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de ovario. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de trompas de falopio. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer colorrectal (CRC) (por ejemplo, un cáncer colorrectal con alta inestabilidad de microsatélites (CRC con MSI alto) o un cáncer colorrectal con microsatélites estables (MSS CRC)). En ciertas realizaciones, el cáncer es una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML), por ejemplo, una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo).En ciertas realizaciones, el cáncer es un síndrome mielodisplásico (MDS) (por ejemplo, un MDS de alto riesgo).

Formulaciones, por ejemplo, formulaciones de dosificación, y kits, por ejemplo, kits terapéuticos, que incluyen una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos de una, dos o todas las siguientes categorías (i) -(iii): (i) un agente que mejora la presentación del antígeno (por ejemplo, (i) un agente que mejora la presentación del antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral); (ii) un agente que mejora una respuesta de células efectoras (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral, reduciendo así una actividad en la célula, y (opcionalmente) instrucciones de uso. En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento).

Las combinaciones de agentes terapéuticos aquí divulgadas incluyen dos o más agentes terapéuticos aquí descritos. Los agentes terapéuticos de la combinación pueden pertenecer a la misma categoría, por ejemplo, dos o más agentes terapéuticos de la categoría (i), o pueden incluir al menos un agente de dos o más categorías (por ejemplo, un agente terapéutico de la categoría (i) combinado con un agente terapéutico de la categoría (ii) ), como se describe a continuación. Ciertos agentes terapéuticos pueden pertenecer a dos o más categorías de las categorías (i)-(iii). Por ejemplo, un agente terapéutico (por ejemplo, un agonista de GITR, un antagonista de IDO, un inhibidor de TGF-b, entre otros) puede actuar como agente terapéutico en múltiples categorías.

Características o realizaciones adicionales de los métodos, composiciones, formulaciones de dosificación y kits aquí descritos incluyen una o más de las siguientes:

Combinaciones

En ciertas realizaciones, la combinación incluye uno, dos, tres, cuatro o más agentes terapéuticos que mejoran la presentación del antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral) (denominados en el presente documento "combinación de presentación de antígeno"). En ciertas realizaciones, la combinación de presentación de antígeno incluye uno o más de los siguientes: un agente que mejora la presentación de antígeno (por ejemplo, una vacuna, por ejemplo, una vacuna basada en células o antígenos); un agente que mejora la lisis de células tumorales (por ejemplo, un virus oncolítico); un agente que estimula (por ejemplo, desinhibe) un fagocito, por ejemplo, un activador del interferón (IFN) de tipo I (por ejemplo, un agonista de TLR, un agonista del receptor similar a RIG-I (RLRs)), y/o un agente que activa y/o recluta una célula dendrítica o un macrófago (por ejemplo, un macrófago I), por ejemplo, un captador celular bi- o tri-específico.

En algunas realizaciones, la combinación antígeno-presentación incluye uno, dos, tres, cuatro, cinco o más agentes terapéuticos elegidos entre: (i) un agonista del estimulador de genes interferón (un agonista STING), (ii) un agonista de un receptor tipo Toll (TLR) (por ejemplo, un agonista de TLR-3, -4, -5, -7, -8, o -9), (iii) un modulador TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3), (iv) un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR), (v) un inhibidor de c-Met, (vi) un inhibidor de TGFb (por ejemplo, un anticuerpo anti-TGFb), (vii) un inhibidor de IDO/TDO, (viii) un antagonista de A2AR, (ix) un virus oncolítico, (x) una vacuna (por ejemplo, una vacuna en andamiaje), o (xi) un captador celular bi o tri-específico. En la combinación antígeno-presentación puede utilizarse cualquier combinación de los agentes (i)-(xi) mencionados. En una realización de ejemplo, la combinación antígeno-presentación incluye un agonista de STING. En otra realización de ejemplo, la combinación antígeno-presentación incluye un agonista TLR (por ejemplo, un agonista TLR7). En otra realización de ejemplo, la combinación antígeno-presentación incluye un agonista de STING y un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR7). En algunas realizaciones, la combinación de presentación de antígeno se elige entre un agonista de STING, un agonista de TLR, un antagonista de A2AR, o un virus oncolítico o una combinación de los mismos, y opcionalmente, uno o más de (iii) -(vii) o (x)-(xi). En algunas realizaciones, la combinación de presentación de antígeno se elige entre un agonista de STING o un agonista de TLR, o una combinación de ambos, y opcionalmente, uno o más de (iii)-(xi) . En otra realización, la combinación de presentación de antígeno incluye un agonista de STING, un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR7) y un modulador de TIM-3 (por ejemplo, un inhibidor anti-TIM-3). En otra realización, la combinación antígeno-presentación incluye un agonista de STING, un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR7) y un inhibidor de VEGFR. En otra realización, la combinación antígenopresentación incluye un agonista de STING, un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR7) y un inhibidor de c-MET. En otras realizaciones, la combinación antígeno-presentador incluye un virus oncolítico. En otras realizaciones, la combinación antígeno-presentador incluye un virus oncolítico y una citoquina, por ejemplo, un virus oncolítico que expresa uno o más de GM-CSF, o un CSF (por ejemplo, CSF1, o CSF2). En algunas realizaciones, la combinación antígeno-presentador incluye un captador celular bi- o tri-específico, por ejemplo, una molécula de anticuerpo bi- o tri-específica para CD47 y CD 19, con o sin un dominio Fc. En algunas realizaciones, la combinación antígeno-presentador incluye un inhibidor de TGFb (por ejemplo, un anticuerpo anti-TGFb). En otras realizaciones, la combinación antígeno-presentador incluye un inhibidor de IDO/TDO. En otras realizaciones, la combinación antígeno-presentador incluye un antagonista de A2AR. En otras realizaciones, la combinación antígeno-presentador incluye una vacuna (por ejemplo, IL-2 en combinación con MUC1, o una vacuna basada en células dendríticas (por ejemplo, Provenge®)). En otras realizaciones, la combinación presentadora de antígeno incluye una vacuna y un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR como se describe en el presente documento). En ciertas realizaciones, la combinación antígenopresentador incluye una vacuna y un agonista de STING. En cierta realización, la combinación antígenopresentación incluye una vacuna, un agonista de STING y un agonista de TLR.

En ciertas realizaciones, la combinación incluye uno, dos, tres, cuatro, cinco o más agentes terapéuticos que potencian una respuesta de células efectoras (denominada en el presente documento "combinación de células efectoras"). En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un activador de linfocitos, por ejemplo, un activador de células NK y/o un activador de células T. En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras activa (por ejemplo, desinhibe) un linfocito infiltrante tumoral (TIL), por ejemplo, una célula NK o una célula T. En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un modulador de células NK elegido entre un modulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo) de un receptor NK (por ejemplo, un modulador de uno o más de N<k>G2A, KIR3DL, NKp46, MICA o CEACAM1); una interleucina o una variante de interleucina (por ejemplo, IL-2, IL-15, IL-21, IL-13R o IL-12 citoquina o variante de la misma, o una combinación de las mismas); un captador celular bi- o tri-específico (por ejemplo, una molécula de anticuerpo biespecífico de NKG2A y CD138, o una molécula de anticuerpo biespecífico de CD3 y TCR); una terapia de células NK; o una vacuna que incluye células NK y un antígeno/estimulante inmunitario. En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un inmunomodulador (por ejemplo, uno o más de: un activador de una molécula coestimuladora o un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario como se describe en el presente documento). En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un modulador de células T elegido entre un inhibidor de un inhibidor de punto de control (por ejemplo, un inhibidor de uno o más de: PD-1, PD-L1, TIM-3, LAG-3, VISTA, DKG-a, B7-H3, B7-H4, TIGIT, CTLA-4, BTLA, CD160, TIM1, IDO, LAIR1, IL-12, o una combinación de los mismos, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 y TIM-3, o un inhibidor de PD-1 y LAG-3). En una realización, el inhibidor del inhibidor del punto de control es una molécula de anticuerpo (por ejemplo, un anticuerpo mono o biespecífico o un fragmento del mismo como se describe en el presente documento). Por ejemplo, el inhibidor del inhibidor del punto de control es una molécula de anticuerpo contra PD-1, PD-L1, TIM-3, LAG-3, VISTA, B7-H4, CTLA-4 o TIGIT, o cualquier combinación de las mismas (por ejemplo, una combinación como la descrita en el presente documento). En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un modulador de células T elegido entre un agonista o un activador de una molécula costimuladora. En una realización, el agonista de la molécula coestimuladora se elige entre un agonista (por ejemplo, un anticuerpo agonista o fragmento de unión a antígeno del mismo, o una fusión soluble) de GITR, Ox 40, ICOS, SLAM (por ejemplo, SLAMF7), HVEM, LIGHT, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), CD30, CD40, BAFFR, CD7, NKG2C, NKp80, CD160, B7-H3, o ligando Cd 83. En otras realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un captador de células T biespecífico (por ejemplo, una molécula de anticuerpo biespecífico que se une a CD3 y a un antígeno tumoral (por ejemplo, EGFR, PSCA, PSMA, EpCAM, HER2 entre otros).

En algunas realizaciones, la combinación de células efectoras incluye uno, dos, tres, cuatro, cinco o más agentes terapéuticos elegidos entre: (i) un modulador de GITR (por ejemplo, un agonista de GITR), (ii) un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en este documento), (iii) un inhibidor de PD-L1, (iv) un inhibidor de IAP (Proteína inhibidora de la Apoptosis), (v) un inhibidor de EGFR (receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico), (vi) un inhibidor de la diana de rapamicina (mTOR), (vii) IL-15 o una variante de la misma, (viii) un inhibidor de CTLA-4, (ix) un activador de células T biespecífico (por ejemplo, una molécula de anticuerpo biespecífico que se une a CD3 y a un antígeno tumoral (por ejemplo, EGFR, PSCA, PSMA, EpCAM, HER2 entre otros), (x) un agonista de Cd 40 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CD40), (xi) un agonista OX40 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-OX40), o (xii) un agonista CD27 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CD27). En la combinación de células efectoras puede utilizarse cualquier combinación de los agentes mencionados. En una realización de ejemplo, la combinación de células efectoras incluye un agonista de GITR. En otra realización, la combinación de células efectoras incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). En otra realización, la combinación de células efectoras incluye un inhibidor de PD-L1. En otras realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un agonista de GITR y un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). En otras realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un agonista de GITR y un inhibidor de PD-L1. En otra realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista de GITR, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento) y un inhibidor de PD-L1. En otras realizaciones, la combinación de células efectoras incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento) y un inhibidor de PD-L1. En una realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista de GITR y un inhibidor de IAP. En otra realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista del GITR y un inhibidor de un inhibidor del EGFR. En otra realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista del GITR y un inhibidor de un inhibidor de mTOR. En una realización, la combinación de células efectoras incluye IL-15 o una variante de la misma. En una realización, la combinación de células efectoras incluye un inhibidor de CTLA-4. En una realización, la combinación de células efectoras incluye un captador de células T biespecífico (por ejemplo, una molécula de anticuerpo biespecífico que se une a CD3 y a un antígeno tumoral (por ejemplo, EGFR, PSCA, PSMA, EpCAM, HER2, entre otros). En una realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista CD40 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CD40). En una realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista de OX40 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-OX40). En una realización, la combinación de células efectoras incluye un agonista de CD27 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CD27).

En ciertas realizaciones, la combinación incluye uno, dos, tres, cuatro, cinco o más agentes terapéuticos que disminuyen la inmunosupresión tumoral (denominados en el presente documento "combinación de inmunosupresión antitumoral"). En algunas realizaciones, la combinación modula la actividad o el nivel de uno o más de los Treg, macrófagos 2 o MDSC. En algunas realizaciones, la combinación aumenta una o más de la polarización M2, el agotamiento de Treg o el reclutamiento de células T. En algunas realizaciones, la combinación de inmunosupresión antitumoral incluye uno, dos, tres, cuatro, cinco o más agentes terapéuticos elegidos entre: (i) un inmunomodulador (por ejemplo, uno o más de: un activador de una molécula coestimuladora (por ejemplo, un agonista de GITR), o un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario (por ejemplo, una o más de PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3 o CTLA-4), según se describe en el presente documento), (ii) un inhibidor de CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor del factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF)), (iii) un inhibidor de IL-17, (iv) un inhibidor de IL-1p, (v) un inhibidor de CXCR2, (vi) un inhibidor de una fosfoinositida 3-quinasa (PI3K, por ejemplo, PI3K<y>o PI3K8), (vii) un inhibidor de BAFF-R, (viii) un inhibidor de MALT-1/BTK, (ix) un inhibidor de Ja K, (x) un inhibidor de Cr Th 2, (xi) un inhibidor de VEGFR, (xiii) un IL-15 o una variante del mismo, (xiv) un inhibidor de CTLA-4, (xv) un inhibidor de IDO/TDO, (xvi) un antagonista de A2AR, (xvii) un inhibidor de TGFb, o (xviii) un inhibidor de PFKFB3. En ciertas realizaciones, el inmunomodulador es un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario (por ejemplo, un inhibidor de PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5), o CTLA-4, o cualquier combinación de los mismos). En la combinación de inmunosupresión tumoral puede utilizarse cualquier combinación de los agentes mencionados. En una realización de ejemplo, la combinación de inmunosupresión antitumoral incluye uno, dos, tres, cuatro, cinco o más agentes terapéuticos elegidos entre un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento), un inhibidor de PD-L1, un inhibidor de LAG-3, un modulador de TIM-3 (por ejemplo, un inhibidor anti-TIM-3), un agonista de GITR, un inhibidor de CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de M-CSF), un inhibidor de IL-17, un inhibidor de IL-1p o un inhibidor de CXCR2. En una realización, la combinación de inmunosupresión antitumoral incluye uno, dos o todos los inhibidores de CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de M-CSF), un inhibidor de IL-17, un inhibidor de IL-1p. En una realización, la combinación de inmunosupresión antitumoral incluye un inhibidor de IL-17, un inhibidor de CXCR2, un inhibidor de CRTH2, un antagonista de A2AR o un inhibidor de PFKFB3, o una combinación de los mismos.

En algunas realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación antígenopresentación. En otras realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación de células efectoras. En aún otras realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación de inmunosupresión antitumoral. En otras realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación antígeno-presentación y uno o más agentes terapéuticos de la combinación de células efectoras. En otras realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación antígeno-presentación y uno o más agentes terapéuticos de la combinación inmunosupresora antitumoral. En otras realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación antígeno-presentación, uno o más agentes terapéuticos de la combinación de células efectoras y uno o más agentes terapéuticos de la combinación de inmunosupresión antitumoral. En otras realizaciones, la combinación incluye uno o más agentes terapéuticos de la combinación antígenopresentación, uno o más agentes terapéuticos de la combinación de células efectoras y uno o más agentes terapéuticos de la combinación de inmunosupresión antitumoral.

En ciertas realizaciones, la combinación incluye:

(i) uno o más agentes terapéuticos de la combinación antígeno-presentación elegidos entre uno, dos o todos de un agonista de STING, un agonista de TLR (por ejemplo, un agonista de TLR7), o un modulador de TIM-3 (por ejemplo, un inhibidor de TIM-3);

(ii) uno o más agentes terapéuticos de la combinación de células efectoras elegidos entre uno, dos o todos de un modulador de GITR (por ejemplo, un agonista de GITR), un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento), o un inhibidor de PD-L1;

(iii) uno o más agentes terapéuticos de la combinación de inmunosupresión antitumoral elegidos entre uno, dos o todos de un inhibidor de CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de M-CSF), un inhibidor de IL-17, o un inhibidor de IL-1p:

(iv) una combinación de (i) y (ii);

(v) una combinación de (i) y (iii);

(vi) una combinación de (ii) y (iii); o

(vii) una combinación de (i), (ii) y (iii).

La combinación puede usarse para tratar un cáncer como el descrito en el presente documento, como cáncer de pulmón (escamoso), cáncer de pulmón (adenocarcinoma), cáncer de cabeza y cuello, cáncer cervical (escamoso), cáncer de estómago, cáncer de tiroides, cáncer de piel, melanoma (por ejemplo, melanoma avanzado), cáncer nasofaríngeo, cáncer de riñón, tumor neuroendocrino (NET), cáncer de ovario, cáncer de trompas de falopio, cáncer colorrectal o cáncer de mama. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de piel, por ejemplo, un carcinoma de células de Merkel o un melanoma. En una realización, el cáncer es un carcinoma de células de Merkel. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de mama, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC) o un cáncer de mama HER2 negativo. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de riñón, por ejemplo, un carcinoma de células renales (por ejemplo, un carcinoma de células renales claras [CCRCC] o un carcinoma de células renales no claras (nccRCC)). En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de tiroides, por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides (ATC). En otras realizaciones, el cáncer es un tumor neuroendocrino (NET), por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico o un NET en páncreas, tracto gastrointestinal (GI) o pulmón. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC escamoso o un NSCLC no escamoso). En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de ovario. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de trompas de falopio. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer colorrectal (CRC) (por ejemplo, un cáncer colorrectal con alta inestabilidad de microsatélites (CRC con MSI alto) o un cáncer colorrectal con microsatélites estables (MSS CRC)). En ciertas realizaciones, el cáncer es una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML), por ejemplo, una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo).En ciertas realizaciones, el cáncer es un síndrome mielodisplásico (MDS) (por ejemplo, un MDS de alto riesgo).

En otras realizaciones, la combinación incluye un agente terapéutico de la combinación antígeno-presentación (por ejemplo, uno o más de un agonista de STING, un agonista de TLR, una vacuna o un virus oncolítico) en combinación con un agente terapéutico de la combinación de células efectoras y/o inmunosupresión antitumoral (por ejemplo, un inhibidor de un inhibidor de punto de control, por ejemplo, un inhibidor de PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5), o CTLA-4, o cualquier combinación de los mismos. En una realización, uno o más de un agonista de STING, un agonista de TLR, una vacuna o un virus oncolítico se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento. En una realización, se administra un agonista de STING y/o una vacuna en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento. En una realización, se administra un virus oncolítico en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento. La combinación puede utilizarse para tratar un cáncer como el descrito en el presente documento, como cáncer de pulmón (escamoso), cáncer de pulmón (adenocarcinoma), cáncer de cabeza y cuello, cáncer cervical (escamoso), cáncer de estómago, cáncer de tiroides, cáncer de piel, melanoma (por ejemplo, melanoma avanzado), cáncer nasofaríngeo, cáncer de riñón, tumor neuroendocrino (NET), cáncer de ovario, cáncer de trompas de falopio, cáncer colorrectal o cáncer de mama. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de piel, por ejemplo, un carcinoma de células de Merkel o un melanoma. En una realización, el cáncer es un carcinoma de células de Merkel. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de mama, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC) o un cáncer de mama HER2 negativo. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de riñón, por ejemplo, un carcinoma de células renales (por ejemplo, un carcinoma de células renales claras [CCRCC] o un carcinoma de células renales no claras (nccRCC)). En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de tiroides, por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides (ATC). En otras realizaciones, el cáncer es un tumor neuroendocrino (NET), por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico o un NET en páncreas, tracto gastrointestinal (GI) o pulmón. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC escamoso o un NSCLc no escamoso). En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de ovario. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de trompas de falopio. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer colorrectal (CRC) (por ejemplo, un cáncer colorrectal con alta inestabilidad de microsatélites (CRC con MSI alto) o un cáncer colorrectal con microsatélites estables (MSS CRC)). En ciertas realizaciones, el cáncer es una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML), por ejemplo, una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo).En ciertas realizaciones, el cáncer es un síndrome mielodisplásico (MDS) (por ejemplo, un MDS de alto riesgo).

En ciertas realizaciones, la combinación incluye una combinación de agentes terapéuticos como se proporciona en la sección titulada "Combinaciones ejemplares de combinaciones de presentación de antígenos, combinaciones de células efectoras y combinaciones de inmunosupresión antitumoral " proporcionada en la Descripción Detallada.

En ciertas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No.

8,552,003. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto descrito en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez por semana, por ejemplo, por vía oral. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, NTBC)).

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un inhibidor de mTOR, Everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis de entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, Everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra a una dosis entre 2 mg y 8 mg (por ejemplo, a una dosis de 5 mg), por ejemplo, una vez cada semana, por ejemplo, por vía oral. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, n Tb C)).

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un inhibidor de DAC, Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de DAC, Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, se administra a una dosis entre 5 mg y 15 mg (por ejemplo, a una dosis de 10 mg), por ejemplo, tres veces por semana (por ejemplo, en el esquema de una semana sí/una semana no), por ejemplo, por vía oral. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, NTBC)).

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un inhibidor de IL-1p, canakinumab o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2002/16436. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-1p, canakinumab, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2002/16436, se administra a una dosis entre 50 mg y 150 mg (por ejemplo, a una dosis de 100 mg), por ejemplo, una vez cada ocho semanas, por ejemplo, por vía subcutánea. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable en microsatélites (MSS CRC)), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, NTBC)).

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/122613. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis de entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/122613, se administra a una dosis entre 10 mg y 50 mg (por ejemplo, a una dosis de 25 mg), por ejemplo, una vez cada cuatro semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable a microsatélites (MSS CRC), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, NTBC)).

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un inhibidor de MEK o trametinib. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis de entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de MEK o trametinib, se administra a una dosis entre 0.2 mg y 1 mg (por ejemplo, a una dosis de 0.5 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, NTBC)).

En ciertas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), un inhibidor de BRAF o dabrafenib, y un inhibidor de MEK o trametinib. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis de entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 8 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de BRAF o dabrafenib, se administra a una dosis entre 50 mg y 250 mg (por ejemplo, a una dosis de 150 mg) dos veces al día, por ejemplo, por vía oral. En algunas realizaciones, el inhibidor de MEK o trametinib, se administra a una dosis entre 1 mg y 3 mg (por ejemplo, a una dosis de 2 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral. En ciertas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra, por ejemplo, a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, después de administrar el inhibidor de BRAF o dabrafenib, el inhibidor de MEK o trametinib, o ambos, por ejemplo, durante un período de 2 a 8 semanas, por ejemplo, 4 semanas. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer de piel (por ejemplo, un melanoma, por ejemplo, un melanoma irresecable o metastásico). En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer que tiene una mutación BRAF, por ejemplo, una mutación BRAF V600. En otras realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer en un sujeto que tiene un nivel elevado de lactato deshidrogenasa sérica (LDH), en comparación con un nivel de LDH de referencia. En ciertas realizaciones, la combinación se usa para tratar a un sujeto que tiene un melanoma irresecable o metastásico con una mutación BRAF (por ejemplo, una mutación BRAF V600) y tiene un nivel elevado de LDH en suero, en comparación con un nivel de LDH en suero de referencia.

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor del EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. W<o>2013/184757, se administra a una dosis entre 10 mg y 50 mg (por ejemplo, a una dosis de 25 mg), por ejemplo, una vez al día (por ejemplo, del día 1 al día 10 de un primer ciclo de dosificación), por ejemplo, por vía oral. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, NTBC)).

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 50 mg y 1000 mg (por ejemplo, a una dosis de 100 mg, 150 mg, 300 mg, 600 mg, 900 mg), por ejemplo, diariamente según un programa de 7 días sí/7 días no o una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer cerebral (por ejemplo, un glioblastoma multiforme (GBM)), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, NTBC)) o un cáncer de páncreas.

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un inhibidor de 6-fosfofructo-2-quinasa/fructosa-2,6-bifosfatasa 3 (PFKFB3), PFK-158, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/148228. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer de ovario, un cáncer de trompas de falopio o un cáncer colorrectal (CRC).

En una realización, una combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un agente quimioterapéutico, por ejemplo, un paclitaxel (por ejemplo, un nab-paclitaxel). En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis de entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico, por ejemplo, un paclitaxel (por ejemplo, un nabpaclitaxel), se administra a una dosis entre 50 mg/m2 y 200 mg/m2 (por ejemplo, a una dosis de 100 mg/m2), por ejemplo, semanalmente en el Día 1, Día 8 y Día 15 cada cuatro semanas (qw3/4), por ejemplo, por vía intravenosa. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama HER2 negativo).

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 100 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 100 mg o 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143 se administra a una dosis entre 0.1 mg/kg y 15 mg/kg, por ejemplo, entre 0.1 mg/kg y 6 mg/kg o entre 0.3 mg/kg y 3 mg/kg (por ejemplo, a una dosis de 0.1 mg/kg, 0. 3 mg/kg, 1 mg/kg, 3 mg/kg, 6 mg/kg, 10 mg/kg o 15 mg/kg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer de páncreas, un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable por microsatélites (MSS CRC)), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), un cáncer de hígado (por ejemplo, un carcinoma hepatocelular), un cáncer de próstata o un cáncer renal (por ejemplo, un carcinoma de células renales claras).

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2016/0108123. En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis de entre 100 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 100 mg o 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No.

2016/0108123 se administra a una dosis de entre 10 mg y 2000 mg (por ejemplo, entre 20 mg y 1600 mg o entre 80 mg y 1200 mg (por ejemplo, a una dosis de 20 mg, 80 mg, 240 mg, 800 mg o 1200 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas o una vez cada seis semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido, por ejemplo, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), un cáncer de útero (por ejemplo, un carcinoma endometrial) o un cáncer de tiroides (por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides).

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina). En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, entre 300 mg y 500 mg, por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra a una dosis entre 5 mg/m2 y 50 mg/m2 (por ejemplo, entre 10 mg/m2 y 30 mg/m2, por ejemplo, a una dosis de 20 mg/m2), por ejemplo, diariamente, por ejemplo, durante 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, o más días, por ejemplo, por vía intravenosa. En ciertas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra el día 8 de un ciclo de 28 días, y el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra los días 1, 2, 3, 4 y 5 del ciclo de 28 días. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer hematológico, por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML), por ejemplo, una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo),o un síndrome mielodisplásico (MDS) (por ejemplo, un MDS de alto riesgo).

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de TIM-3 o una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en Solicitud de patente U.S. No. de publicación 2015/0218274, y un agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina). En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de TIM-3 o una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No. 2015/0218274, se administra a una dosis entre 50 mg y 500 mg (por ejemplo, entre 100 mg y 400 mg, por ejemplo, a una dosis de 240 mg), por ejemplo, una vez cada 2 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra a una dosis entre 5 mg/m2 y 50 mg/m2 (por ejemplo, entre 10 mg/m2 y 30 mg/m2, por ejemplo, a una dosis de 20 mg/m2), por ejemplo, diariamente, por ejemplo, durante 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 o más días, por ejemplo, por vía intravenosa. En ciertas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de TIM-3 o una molécula de anticuerpo antiTIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274, se administra en los días 8 y 22 de un ciclo de 28 días, y el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra en los días 1, 2, 3, 4 y 5 del ciclo de 28 días. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer hematológico, por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML), por ejemplo, una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo),o un síndrome mielodisplásico (MDS) (por ejemplo, un MDS de alto riesgo).

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), un inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No. 2015/0218274), y un agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina). En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, entre 300 mg y 500 mg, por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No.

2015/0218274) se administra a una dosis entre 20 mg y 400 mg (por ejemplo, entre 40 mg y 200 mg o entre 50 mg y 100 mg, por ejemplo, a una dosis de 80 mg), por ejemplo, una vez cada 2 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra a una dosis entre 5 mg/m2 y 50 mg/m2 (por ejemplo, entre 10 mg/m2 y 30 mg/m2, por ejemplo, a una dosis de 20 mg/m2), por ejemplo, diariamente, por ejemplo, durante 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, o más días, por ejemplo, por vía intravenosa. En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra el día 8 de un ciclo de 28 días, el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No.

2015/0218274) se administra en los días 8 y 22 de un ciclo de 28 días, y el agente quimioterapéutico (por ejemplo, decitabina) se administra en los días 1, 2, 3, 4 y 5 del ciclo de 28 días. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer hematológico, por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML), por ejemplo, una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo),o un síndrome mielodisplásico (MDS) (por ejemplo, un MDS de alto riesgo).

Las combinaciones aquí divulgadas pueden administrarse juntas en una única composición o administrarse por separado en dos o más composiciones diferentes, por ejemplo, composiciones o formas de dosificación como las aquí descritas. La administración de los agentes terapéuticos puede realizarse en cualquier orden. El primer agente y los agentes adicionales (por ejemplo, segundo, tercer agentes) pueden administrarse por la misma vía de administración o por vías de administración diferentes. Por ejemplo, un primer agente terapéutico puede administrarse simultáneamente, antes o después del agente adicional. En ciertas realizaciones, un primer agente se administra localmente, por ejemplo, un agente terapéutico de cualquiera de las categorías (i)-(iii) puede acoplarse a un agente dirigido al tumor, por ejemplo, un anticuerpo dirigido al tumor (por ejemplo, para formar un conjugado anticuerpo-fármaco), o cualquier otro agente de administración (por ejemplo, una formulación tal como una formulación dirigida) de manera que la administración del primer agente se localice en un sitio deseado, por ejemplo, un sitio tumoral (por ejemplo, un sitio enriquecido con células dendríticas). En una realización, el agente terapéutico es un antígeno (por ejemplo, una vacuna, por ejemplo, una vacuna contra el cáncerin situ),que se dirige al entorno tumoral, lo que produce la activación de las células dendríticas. El agente terapéutico también puede administrarse localmente, por ejemplo, inyectarse, en un sitio tumoral (por ejemplo, administración intratumoral o peritumoral). El suministro o administración localizada del agente terapéutico puede reducir uno o más efectos secundarios o toxicidades que de otro modo se asociarían con la administración sistémica del agente terapéutico. En una realización de ejemplo, un agente terapéutico (por ejemplo, STING o un TLR) puede conjugarse con un anticuerpo de unión tumoral (por ejemplo, un anticuerpo que se une a HER2), suministrando así el agente terapéutico a una célula que expresa HER-2.

Cuando se administran en combinación, el primer agente, el agente adicional (por ejemplo, segundo o tercer agente), o todos, pueden administrarse en una cantidad o dosis mayor, menor o igual que la cantidad o dosis de cada agente utilizado individualmente, por ejemplo, como monoterapia. En ciertas realizaciones, la cantidad o dosis administrada del primer agente, del agente adicional (por ejemplo, el segundo o tercer agente), o de todos ellos, es inferior (por ejemplo, al menos un 20%, al menos un 30%, al menos un 40% o al menos un 50%) a la cantidad o dosis de cada agente utilizado individualmente, por ejemplo, como monoterapia. En otras realizaciones, la cantidad o dosificación del primer agente, del agente adicional (por ejemplo, segundo o tercer agente), o de todos ellos, que produce un efecto deseado (por ejemplo, tratamiento del cáncer) es inferior (por ejemplo, al menos un 20%, al menos un 30%, al menos un 40% o al menos un 50% inferior).

En ciertas realizaciones, las combinaciones pueden estar en forma de una molécula de anticuerpo, por ejemplo, una molécula biespecífica o triespecífica, contra uno o más agentes terapéuticos elegidos entre la combinación antígeno-presentación, la combinación de células efectoras o la combinación de inmunosupresión antitumoral, o cualquier combinación de las mismas. Por ejemplo, una molécula biespecífica contra dos o más inhibidores del punto de control (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 y una molécula de anticuerpo anti-LAG-3). En otras realizaciones, las combinaciones pueden ser en forma de una molécula de anticuerpo, por ejemplo, una molécula bi- o tri-específica, contra uno o más agentes terapéuticos elegidos entre dos o todos de la combinación antígeno-presentación, la combinación de células efectoras, y/o la combinación de inmunosupresión antitumoral. En una realización, la molécula de anticuerpo es un anticuerpo completo o un fragmento del mismo (por ejemplo, un Fab, F(ab')2, Fv, o un fragmento Fv de cadena simple (scFv)). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo tiene una región constante de cadena pesada (Fc) elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD e IgE; en particular, elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3, e IgG4, más particularmente, la región constante de cadena pesada de IgG1 o IgG4 (por ejemplo, IgG1 o IgG4 humana). En una realización, la región constante de cadena pesada es IgG1 humana o IgG4 humana. En una realización, la región constante se altera, por ejemplo, se muta, para modificar las propiedades de la molécula de anticuerpo (por ejemplo, para aumentar o disminuir una o más de: La unión al receptor Fc, la glicosilación del anticuerpo, el número de residuos de cisteína, la función de las células efectoras o la función del complemento). En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo tiene la forma de una molécula de anticuerpo biespecífica o multiespecífica, por ejemplo, una molécula de anticuerpo biespecífica, triespecífica como se describe en el presente documento.

A continuación se proporcionan ciertos agentes terapéuticos de ejemplo y combinaciones de los mismos. En la Descripción Detallada se ofrece una descripción más detallada de los agentes terapéuticos utilizados en las combinaciones.

Inmunomoduladores

En ciertas realizaciones, el inmunomodulador utilizado en las combinaciones aquí divulgadas (por ejemplo, en combinación con un agente terapéutico elegido de una combinación antígeno-presentación) es un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario. En una realización, el inmunomodulador es un inhibidor de PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o - 5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 y/o TGF beta. En una realización, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario inhibe PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5), CTLA-4, o cualquier combinación de los mismos.

La inhibición de una molécula inhibidora puede realizarse a nivel de ADN, ARN o proteína. En realizaciones, se puede utilizar un ácido nucleico inhibidor (por ejemplo, un ARNbc, ARNsi o ARNsh) para inhibir la expresión de una molécula inhibidora. En otras realizaciones, el inhibidor de una señal inhibidora es, un polipéptido, por ejemplo, un ligando soluble (por ejemplo, PD-1-Ig o CTLA-4 Ig), o un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une a la molécula inhibidora; por ejemplo, un anticuerpo o fragmento del mismo (también denominado en el presente documento "molécula de anticuerpo") que se une a PD-1, PD-L1, PD-L2, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5), CTLA-4, TIM-3, LAG-3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 y/o TGF beta, o una combinación de los mismos.

En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo tiene la forma de una molécula de anticuerpo biespecífica 0 multiespecífica. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífico tiene una primera especificidad de unión a PD-1 o PD-L1 y una segunda especificidad de unión, por ejemplo, una segunda especificidad de unión a TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEA<c>A<m>-1, -3 y/o -5), LAG-3, o PD-L2. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 o PD-L1 y TIM-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 o PD-L1 y LAG-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 o PD-L1 y CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o - 5). En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 o PD-L1 y CEACAM-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 o PD-L1 y CEACAM-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 o PD-L1 y CEACAM-5. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 o PD-L1. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 y PD-L2. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a TIM-3 y LAG-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5) y LAG-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5) y TIM-3. Cualquier combinación de las moléculas mencionadas puede realizarse en una molécula de anticuerpo multiespecífica, por ejemplo, un anticuerpo triespecífico que incluye una primera especificidad de unión a PD-1 o PD-1, y una segunda y tercera especificidades de unión a dos o más de: TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, - 3 y/o -5), LAG-3, o PD-L2.

En ciertas realizaciones, el inmunomodulador es un inhibidor de PD-1, por ejemplo, PD-1 humano (por ejemplo, una molécula de anticuerpo como se describe en el presente documento). En otra realización, el inmunomodulador es un inhibidor de PD-L1, por ejemplo, PD-L1 humano. En una realización, el inhibidor de PD-1 o PD-L1 es una molécula de anticuerpo contra PD-1 o PD-L1. El inhibidor de PD-1 o PD-L1 puede administrarse solo, o en combinación con otros inmunomoduladores, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de LAG-3, TIM-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5) o CTLA-4. En una realización de ejemplo, el inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1, se administra en combinación con un inhibidor de LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3. En otra realización, el inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1, se administra en combinación con un inhibidor de TIM-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3. En otra realización, el inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1, se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, un inhibidor de CEACAM-1, -3 y/o -5), por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM. En otra realización, el inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1, se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-1. En otra realización, el inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1, se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-5, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-5. En otras realizaciones, el inhibidor de PD-1 o PD-L1, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1, se administra en combinación con un inhibidor de LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, y un inhibidor de TIM-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3. Otras combinaciones de inmunomoduladores con un inhibidor de p D-1 (por ejemplo, uno o más de PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 y/o TGF beta) también están dentro de la presente divulgación. Cualquiera de las moléculas de anticuerpos conocidas en la técnica o divulgadas en el presente documento puede utilizarse en las combinaciones mencionadas de inhibidores de la molécula de punto de control.

En otras realizaciones, el inmunomodulador es un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5), por ejemplo, CEACAM humana (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5). En una realización, el inmunomodulador es un inhibidor de CEACAM-1, por ejemplo, CEACAM-1 humana. En otra realización, el inmunomodulador es un inhibidor de CEACAM-3, por ejemplo, CEACAM-3 humana. En otra realización, el inmunomodulador es un inhibidor de CEACAM-5, por ejemplo, CEACAM-5 humana. En una realización, el inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5) es una molécula de anticuerpo contra CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5). El inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5) puede administrarse solo, o en combinación con otros inmunomoduladores, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de LAG-3, TIM-3, PD-1, PD-L1 o CTLA-4.

En otras realizaciones, el inmunomodulador es un inhibidor de LAG-3, por ejemplo, LAG-3 humano. En una realización, el inhibidor de LAG-3 es una molécula de anticuerpo contra LAG-3. El inhibidor de LAG-3 puede administrarse solo, o en combinación con otros inmunomoduladores, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5), TIM-3, PD-1, PD-L1 o CTLA-4.

En otras realizaciones, el inmunomodulador es un inhibidor de TIM-3, por ejemplo, TIM-3 humano. En una realización, el inhibidor de TIM-3 es una molécula de anticuerpo contra TIM-3. El inhibidor de TIM-3 puede administrarse solo, o en combinación con otros inmunomoduladores, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5), LAG-3, PD-1, PD-L1 o CTLA-4.

En ciertas realizaciones, el inmunomodulador utilizado en las combinaciones aquí divulgadas (por ejemplo, en combinación con un agente terapéutico elegido de una combinación antígeno-presentación) es un activador o agonista de una molécula costimuladora. En una realización, el agonista de la molécula costimuladora se elige entre un agonista (por ejemplo, un anticuerpo agonista o fragmento de unión a antígeno del mismo, o una fusión soluble) de OX40, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3, o ligando de CD83.

En otras realizaciones, el inmunomodulador es un agonista del GITR. En una realización, el agonista de GITR es una molécula de anticuerpo de GITR. El agonista de GITR puede administrarse solo o en combinación con otros inmunomoduladores, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de PD-1, PD-L1, CTLA-4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5), TIM-3 o LAG-3. En algunas realizaciones, el agonista de GITR es una molécula de anticuerpo contra GITR. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-GITR es un anticuerpo biespecífico que se une a GITR y PD-1, PD-L1, CTLA-4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5), TIM-3 o<l>AG-3. En una realización de ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-GITR se administra en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, una molécula anti-PD-1 como se describe en el presente documento). La molécula de anticuerpo GITR y la molécula de anticuerpo anti-PD-1 pueden estar en forma de composición de anticuerpo separada, o como molécula de anticuerpo biespecífica. En otras realizaciones, puede administrarse un agonista de GITR en combinación con otra molécula costimuladora, por ejemplo un agonista de OX40, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3, o ligando de CD83.

En otras realizaciones, el inmunomodulador es un activador de una molécula costimuladora (por ejemplo, un agonista de OX40). En una realización, el agonista de OX40 es una molécula de anticuerpo de OX40. El agonista de OX40 puede administrarse solo o en combinación con otros inmunomoduladores, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de PD-1, PD-L1, CTLA-4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o - 5), TIM-3 o LAG-3. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-OX40 es un anticuerpo biespecífico que se une a GITR y PD-1, PD-L1, CTLA-4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, -3 y/o -5), TIM-3 o LAG-3. En una realización de ejemplo, se administra una molécula de anticuerpo OX40 en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, una molécula anti-PD-1 como se describe en el presente documento). La molécula de anticuerpo OX40 y la molécula de anticuerpo anti-PD-1 pueden estar en forma de composición de anticuerpo separada, o como molécula de anticuerpo biespecífica. En otras realizaciones, el agonista de OX40 puede administrarse en combinación con otra molécula costimuladora, por ejemplo un agonista de GITR, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3, o ligando de CD83.

Cabe señalar que en el presente documento sólo se proporcionan combinaciones de ejemplo de inhibidores de inhibidores de puntos de control o agonistas de moléculas costimuladoras. Las combinaciones adicionales de estos agentes están dentro del alcance de la presente divulgación.

Moléculas de anticuerpos contra PD-1

En una realización, el inhibidor de PD-1 es una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No. 2015/0210769 (USSN 14/604,415), titulada "Moléculas de anticuerpos contra PD-1 y usos de las mismas". En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una región de unión a antígeno, por ejemplo, una región variable o un fragmento de unión a antígeno de la misma, de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aúnotra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una, dos, tres o cuatro regiones variables de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una o dos regiones variables de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una o dos regiones variables de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG4, por ejemplo, una IgG4 humana. En una realización, la IgG4 humana incluye una sustitución en la posición 228 de acuerdo con la numeración EU (por ejemplo, una sustitución de Ser a Pro). En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG1, por ejemplo, una IgG1 humana. En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 297 según la numeración EU (por ejemplo, una sustitución Asn a Ala). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 265 según la numeración EU, una sustitución en la posición 329 según la numeración EU, o ambas (por ejemplo, una sustitución Asp a Ala en la posición 265 y/o una sustitución Pro a Ala en la posición 329). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 234 según la numeración EU, una sustitución en la posición 235 según la numeración EU, o ambas (por ejemplo, una sustitución Leu a Ala en la posición 234 y/o una sustitución Leu a Ala en la posición 235). En una realización, la región constante de cadena pesada comprende una secuencia amino establecida en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a la misma.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, una región constante de cadena ligera kappa humana. En una realización, la región constante de cadena ligera comprende una secuencia amino establecida en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a la misma.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG4, por ejemplo, una IgG4 humana, y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, una región constante de cadena ligera kappa humana, por ejemplo, una región constante de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia amino establecida en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a la misma. En una realización, la IgG4 humana incluye una sustitución en la posición 228 según la numeración EU (por ejemplo, una sustitución de Ser a Pro). En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una región constante de cadena pesada para una IgG1, por ejemplo, una IgG1 humana, y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, una región constante de cadena ligera kappa humana, por ejemplo, una región constante de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia amino establecida en la Tabla 3, o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a la misma. En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 297 según la numeración EU (por ejemplo, una sustitución de Asn por Ala). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 265 según la numeración EU, una sustitución en la posición 329 según la numeración EU, o ambas (por ejemplo, una sustitución Asp a Ala en la posición 265 y/o una sustitución Pro a Ala en la posición 329). En una realización, la IgG1 humana incluye una sustitución en la posición 234 según la numeración EU, una sustitución en la posición 235 según la numeración EU, o ambas (por ejemplo, una sustitución Leu a Ala en la posición 234 y/o una sustitución Leu a Ala en la posición 235).

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye un dominio variable de cadena pesada y una región constante, un dominio variable de cadena ligera y una región constante, o ambos, que comprenden la secuencia de aminoácidos de BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D, o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas. La molécula de anticuerpo anti-PD-1, opcionalmente, comprende una secuencia líder de una cadena pesada, una cadena ligera, o ambas, como se muestra en la Tabla 4; o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres regiones determinantes de complementariedad (CDR) de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una sustitución en una CDR de cadena ligera, por ejemplo, una o más sustituciones en una CDR1, CDR2 y/o CDR3 de la cadena ligera. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una sustitución en la CDR3 de la cadena ligera en la posición 102 de la región variable ligera, por ejemplo, una sustitución de un residuo de cisteína por tirosina, o de un residuo de cisteína por serina, en la posición 102 de la región variable ligera según la Tabla 1 (por ejemplo, SEQ ID NO: 16 o 24 para murino o quimérico, sin modificar; o cualquiera de SEQ ID NOs: 34, 42, 46, 54, 58, 62, 66, 70, 74, o 78 para una secuencia modificada).

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos que se muestra en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye las seis CDR de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1, 0 CDR estrechamente relacionadas, por ejemplo, CDR idénticas o que tengan al menos una alteración aminoacídica, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir cualquier CDR descrita en el presente documento. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una sustitución en una CDR de cadena ligera, por ejemplo, una o más sustituciones en una CDR1, CDR2 y/o CDR3 de la cadena ligera. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una sustitución en la CDR3 de la cadena ligera en la posición 102 de la región variable ligera, por ejemplo, una sustitución de un residuo de cisteína por tirosina, o de un residuo de cisteína por serina, en la posición 102 de la región variable ligera según la Tabla 1 (por ejemplo, SEQ ID NO: 16 o 24 para murino o quimérico, sin modificar; o cualquiera de SEQ ID NOs: 34, 42, 46, 54, 58, 62, 66, 70, 74, o 78 para una secuencia modificada).

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con Kabatet al.(por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se establece en la Tabla 1) de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) en relación con una, dos o tres CDR según Kabatet al.mostradas en la Tabla 1.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con Kabatet al.(por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se establece en la Tabla 1) de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) en relación con una, dos o tres CDR según Kabatet al.mostradas en la Tabla 1.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR de acuerdo con Kabatet al.(por ejemplo, al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se establece en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias antes mencionadas; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR según Kabatet al.mostrados en la Tabla 1.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye las seis CDR de acuerdo con Kabatet al.(por ejemplo, las seis CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se establece en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con las seis CDR según Kabatet al.mostradas en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir cualquier CDR descrita en el presente documento.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de Chothia (por ejemplo, al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se establece en la Tabla 1) de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describen en la Tabla 1, o codificados por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o que tienen al menos los aminoácidos de los bucles hipervariables que contactan con PD-1; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) relativas a uno, dos o tres bucles hipervariables según Chothiaet al.mostrados en la Tabla 1.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de Chothia (por ejemplo, al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se establece en la Tabla 1) de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describen en la Tabla 1, o codificados por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o que tienen al menos los aminoácidos de los bucles hipervariables que contactan con PD-1; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) relativas a uno, dos o tres bucles hipervariables según Chothiaet al.mostrados en la Tabla 1.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables (por ejemplo, al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se establece en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describen en la Tabla 1, o codificados por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o que tienen al menos los aminoácidos de los bucles hipervariables que contactan con PD-1; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) relativas a uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables según Chothiaet al.mostrados en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye los seis bucles hipervariables (por ejemplo, los seis bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se establece en la Tabla 1) de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E, o bucles hipervariables estrechamente relacionados, por ejemplo,bucleshipervariables que son idénticos o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas); o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) en relación con los seis bucles hipervariables según Chothiaet al.mostrados en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir cualquier bucle hipervariable descrito en el presente documento.

En todavía otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables que tienen las mismas estructuras canónicas que el bucle hipervariable correspondiente de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E, por ejemplo, las mismas estructuras canónicas que al menos el bucle 1 y/o el bucle 2 de los dominios variables de cadena pesada y/o ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento. Véase, por ejemplo, Chothia et al., (1992) J. Mol. Biol. 227:799-817; Tomlinson et al., (1992) J. Mol. Biol. 227:776-798 para descripciones de estructuras canónicas de bucles hipervariables. Estas estructuras pueden determinarse mediante la inspección de las tablas descritas en estas referencias.

En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una combinación de CDR o bucles hipervariables definidos de acuerdo con los estudios de Kabatet al.y Chothiaet al.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR o bucles hipervariables de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E, de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR o bucles hipervariables según la definición de Kabat y Chothia, tal como se establece en la Tabla 1); o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias antes mencionadas; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) en relación con una, dos o tres CDR o bucles hipervariables según Kabat y/o Chothia mostrados en la Tabla 1.

Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir VH CDR1 según Kabatet al.o VH bucle hipervariable 1 según Chothiaet al.,o una combinación de los mismos, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. En una realización, la combinación de CDR de Kabat y Chothia de VH CDR1 comprende la secuencia de aminoácidos GYTFTTYWMH (SEQ ID NO: 224), o una secuencia de aminoácidos sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, que tenga al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras)). La molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir además, por ejemplo, VH CDRs 2-3 según Kabatet al.y VL CDRs 1-3 según Kabatet al.,por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. Por consiguiente, en algunas realizaciones, las regiones marco se definen basándose en una combinación de CDR definidas según Kabatet al.y bucles hipervariables definidos según Chothiaet al.Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir VH FR1 definida basándose en VH bucle hipervariable 1 según Chothiaet al.y VH FR2 definida basándose en VH CDRs 1-2 según Kabatet al.,por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. La molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir además, por ejemplo, Vh FRs 3-4 definidos en base a VH CDRs 2-3 según Kabatet al.y VL FRs 1-4 definidos en base a VL CDRs 1-3 según Kabatet al.

La molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede contener cualquier combinación de CDR o bucles hipervariables según las definiciones de Kabat y Chothia. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E, de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR según la definición de Kabat y Chothia, tal como se establece en la Tabla 1).

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye:

(a) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 4, una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 14, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 33;

(b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 1; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 32;

(c) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de SEQ ID NO: 224, una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 14, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 33; o

(d) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de SEQ ID NO: 224; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 32.

En las combinaciones del presente documento, en otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende (i) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida de SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4, o SeQ ID NO: 224; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 2 o SEQ ID NO: 5; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y (ii) una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 10 o SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 11 o SEQ ID NO: 14, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 32 o SEQ ID NO: 33.

En una realización, por ejemplo, una realización que comprende una región variable, una CDR (por ejemplo, CDR de Chothia o CDR de Kabat), u otra secuencia mencionada en el presente documento, por ejemplo, en la Tabla 1, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífica, una molécula de anticuerpo biespecífica, o es una molécula de anticuerpo que comprende un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo, por ejemplo, medio anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de medio anticuerpo. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo biespecífica que tiene una primera especificidad de unión para PD-1 y una segunda especificidad de unión para TIM-3, LAG-3, CEACA<m>(por ejemplo, CEACAM-1, C<e>ACAM-3, y/o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 y TIM-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 y LAG-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 y CEACAM (por ejemplo,<c>E<a>CAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5). En aún otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 y CEACAM-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 y CEACAM-5. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 y PD-L1. En aún otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico se une a PD-1 y PD-L2. Cualquier combinación de las moléculas anteriormente mencionadas puede realizarse en una molécula de anticuerpo multiespecífica, por ejemplo, un anticuerpo triespecífico que incluye una primera especificidad de unión a PD-1, y una segunda y tercera especificidad de unión a una o más de: TIM-3, LAG-3, CEACAM (por ejemplo, CEA<c>A<m>-1, CEACAM-3 o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2.

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se utiliza en combinación con una molécula biespecífica que comprende una o más de: TIM-3, LAG-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3 o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2. En una realización, la molécula de anticuerpo biespecífico utilizada en combinación se une a CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3, y/o CEACAM-5) y LAG-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico utilizada en combinación se une a CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3, y/o CEACAM-5) y TIM-3. En otra realización, la molécula de anticuerpo biespecífico utilizada en combinación se une a LAG-3 y TIM-3.

Usos de las terapias combinadas

Las combinaciones divulgadas en el presente documento pueden dar lugar a uno o más de: un aumento de la presentación de antígenos, un aumento de la función de las células efectoras (por ejemplo, una o más de proliferación de células T, secreción de IFN-y o función citolítica), inhibición de la función de células T reguladoras, un efecto sobre la actividad de múltiples tipos celulares, tales como células T reguladoras, células T efectoras y células NK), un aumento de los linfocitos infiltrantes en el tumor, un aumento de la proliferación mediada por receptores de células T y una disminución de la evasión inmunitaria por parte de las células cancerosas. En una realización, el uso de un inhibidor de PD-1 en las combinaciones inhibe, reduce o neutraliza una o más actividades de PD-1, lo que resulta en el bloqueo o la reducción de un punto de control inmunitario. Por lo tanto, dichas combinaciones pueden utilizarse para tratar o prevenir trastornos en los que se desea mejorar la respuesta inmunitaria de un sujeto.

Por consiguiente, en otro aspecto, se proporciona un método para modular una respuesta inmunitaria en un sujeto. El método comprende administrar al sujeto una combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, una combinación que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula de anticuerpo anti-PD-1), sola o en combinación con uno o más agentes o procedimientos, de tal manera que se modula la respuesta inmunitaria en el sujeto. En una realización, la molécula de anticuerpo potencia, estimula o aumenta la respuesta inmunitaria en el sujeto. El sujeto puede ser un mamífero, por ejemplo, un primate, preferiblemente un primate superior, por ejemplo, un ser humano (por ejemplo, un paciente que tenga, o corra el riesgo de tener, un trastorno descrito en el presente documento). En una realización, el sujeto necesita potenciar una respuesta inmunitaria. En una realización, el sujeto tiene, o está en riesgo de tener, un trastorno descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer o un trastorno infeccioso como se describe en el presente documento. En ciertas realizaciones, el sujeto está, o corre el riesgo de estar, inmunocomprometido. Por ejemplo, el sujeto está recibiendo o ha recibido un tratamiento quimioterapéutico y/o radioterapia. Alternativamente, o en combinación, el sujeto está, o corre el riesgo de estar, inmunocomprometido como resultado de una infección.

En un aspecto, se proporciona un método para tratar (por ejemplo, uno o más de reducir, inhibir o retrasar la progresión) un cáncer o un tumor en un sujeto. El método comprende administrar al sujeto una combinación divulgada en el presente documento (por ejemplo, una combinación que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

En ciertas realizaciones, el cáncer tratado con la combinación, incluye pero no se limita a, un tumor sólido, un cáncer hematológico (por ejemplo, leucemia, linfoma, mieloma, por ejemplo, mieloma múltiple), y una lesión metastásica. En una realización, el cáncer es un tumor sólido. Ejemplos de tumores sólidos incluyen neoplasias malignas, por ejemplo, sarcomas y carcinomas, por ejemplo, adenocarcinomas de varios sistemas orgánicos, como los que afectan al pulmón, mama, ovario, linfoides, gastrointestinales (por ejemplo, colon), anal, genital y del tracto genitourinario (por ejemplo, renal, urotelial, células de la vejiga, próstata), faringe, CNS (por ejemplo, cerebral, neuronal o células gliales), cabeza y cuello, piel (por ejemplo, melanoma) y páncreas, así como adenocarcinomas que incluyen neoplasias malignas como cáncer de colon, cáncer de recto, cáncer renal (por ejemplo, carcinoma de células renales (carcinoma de células renales claras o no claras), cáncer de hígado, cáncer de pulmón (por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas (cáncer de pulmón de células no pequeñas escamosas o no escamosas)), cáncer de intestino delgado y cáncer de esófago. El cáncer puede encontrarse en una fase temprana, intermedia, tardía o metastásica.

En una realización, el cáncer se elige entre un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC con histología escamosa y/o no escamosa, o un adenocarcinoma de NSCLC)), un cáncer de piel (por ejemplo, un carcinoma de células de Merkel o un melanoma (por ejemplo, un melanoma avanzado)), un cáncer de riñón (por ejemplo, un cáncer renal (por ejemplo, un carcinoma de células renales)), un cáncer de hígado, un mieloma (por ejemplo, un mieloma múltiple), un cáncer de próstata, un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama que no exprese uno, dos o todos los receptores de estrógenos, receptores de progesterona o Her2/neu, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), un cáncer colorrectal, un cáncer de páncreas, un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (HNSCC), un cáncer anal, un cáncer gastroesofágico, un cáncer de tiroides (por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides), un cáncer cervical, un tumor neuroendocrino (NET) (por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico), una enfermedad linfoproliferativa (por ejemplo, una enfermedad linfoproliferativa postrasplante) o un cáncer hematológico, un linfoma de células T, un linfoma de células B, un linfoma no Hogdkin o una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide o una leucemia linfoide).

En otra realización, el cáncer se elige entre un carcinoma (por ejemplo, un carcinoma avanzado o metastásico), un melanoma o un carcinoma pulmonar, por ejemplo, un carcinoma pulmonar de células no pequeñas.

En una realización, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas o un cáncer de pulmón de células pequeñas. En algunas realizaciones, el cáncer de pulmón de células no pequeñas es un cáncer de pulmón de células no pequeñas en estadio I (por ejemplo, estadio Ia o Ib), estadio II (por ejemplo, estadio IIa o IIb), estadio III (por ejemplo, estadio IIIa o IIIb) o estadio IV, cáncer de pulmón de células no pequeñas.

En una realización, el cáncer es un melanoma, por ejemplo, un melanoma avanzado. En una realización, el cáncer es un melanoma avanzado o irresecable que no responde a otras terapias. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma con una mutación BRAF (por ejemplo, una mutación BRAF V600). En aún otras realizaciones, la combinación aquí descrita (por ejemplo, la combinación que comprende la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra después del tratamiento con un anticuerpo anti-CTLA-4 (por ejemplo, ipilimumab) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib).

En otra realización, el cáncer es un hepatocarcinoma, por ejemplo, un hepatocarcinoma avanzado, con o sin una infección viral, por ejemplo, una hepatitis viral crónica.

En otra realización, el cáncer es un cáncer de próstata, por ejemplo, un cáncer de próstata avanzado.

En aún otra realización, el cáncer es un mieloma, por ejemplo, mieloma múltiple.

En aún otra realización, el cáncer es un cáncer renal, por ejemplo, un carcinoma de células renales (RCC) (por ejemplo, un RCC metastásico, un carcinoma de células renales de células no claras (nccRCC) o un carcinoma de células renales de células claras (CCRCC)).

En una realización, el microambiente del cáncer tiene un nivel elevado de expresión de PD-L1. Alternativamente, o en combinación, el microambiente del cáncer puede tener una expresión aumentada de IFN<y>y/o CD8.

En algunas realizaciones, el sujeto tiene, o se identifica que tiene, un tumor que tiene uno o más de alto nivel o expresión de PD-L1, o que es Linfocito Infiltrante de Tumor (TIL)+ (por ejemplo, que tiene un número aumentado de TlLs), o ambos. En ciertas realizaciones, el sujeto tiene, o se identifica que tiene, un tumor con un nivel o expresión de PD-L1 elevado y que es TIL+. En algunas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento incluyen además la identificación de un sujeto basándose en que tiene un tumor que tiene uno o más de los niveles o expresión elevados de PD-L1, o que es TIL+, o ambos. En ciertas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento incluyen además identificar a un sujeto basándose en que tiene un tumor que tiene un nivel o expresión de PD-L1 alto y que es TIL+. En algunas realizaciones, los tumores que son TIL+ son positivos para CD8 e IFN<y>. En algunas realizaciones, el sujeto tiene, o se identifica que tiene, un alto porcentaje de células que son positivas para uno, dos o más de PD-L1, CD8 y/o IFN<y>. En ciertas realizaciones, el sujeto tiene o se identifica que tiene un alto porcentaje de células que son positivas para todos los PD-L1, CD8 e IFNy.

En algunas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento incluyen además identificar a un sujeto basándose en que tiene un alto porcentaje de células que son positivas para uno, dos o más de PD-L1, c D8 y/o IFNy. En ciertas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento incluyen además identificar a un sujeto basándose en que tiene un alto porcentaje de células que son positivas para todos los PD-L1, CD8 e IFN<y>. En algunas realizaciones, el sujeto tiene, o se identifica que tiene, uno, dos o más de PD-L1, CD8, y/o IFNy, y uno o más de un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células escamosas o un adenocarcinoma de pulmón (por ejemplo, un NSCLC); un cáncer de cabeza y cuello; un cáncer cervical de células escamosas; un cáncer de estómago; un cáncer de esófago; un cáncer de tiroides (por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides); un cáncer de piel (por ejemplo, un carcinoma de células de Merkel o un melanoma), un cáncer de mama (por ejemplo, un NTBC), y/o un cáncer nasofaríngeo (CNF). En ciertas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento describen además la identificación de un sujeto basada en tener uno, dos o más de PD-L1, CD8, y/o IFN<y>, y uno o más de un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células escamosas o un adenocarcinoma de pulmón (por ejemplo, un NSCLC); un cáncer de cabeza y cuello; un cáncer cervical de células escamosas; un cáncer de estómago; un cáncer de tiroides (por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides); un cáncer de piel (por ejemplo, un carcinoma de células de Merkel o un melanoma), un tumor neuroendocrino, un cáncer de mama (por ejemplo, un NTBC), y/o un cáncer nasofaríngeo.

Los métodos y composiciones aquí divulgados son útiles para tratar lesiones metastásicas asociadas con los cánceres antes mencionados.

En otro aspecto, la divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad infecciosa en un sujeto, que comprende administrar a un sujeto una combinación como se describe en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento. En una realización, la enfermedad infecciosa se elige entre hepatitis (por ejemplo, infección por hepatitis C) o sepsis.

Aún más, la divulgación proporciona un método para mejorar una respuesta inmunitaria a un antígeno en un sujeto, que comprende administrar al sujeto: (i) el antígeno; y (ii) una combinación como se describe en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento, de tal manera que se mejora una respuesta inmunitaria al antígeno en el sujeto. El antígeno puede ser, por ejemplo, un antígeno tumoral, un antígeno vírico, un antígeno bacteriano o un antígeno de un patógeno.

Las combinaciones aquí descritas pueden administrarse al sujeto por vía sistémica (por ejemplo, por vía oral, parenteral, subcutánea, intravenosa, rectal, intramuscular, intraperitoneal, intranasal, transdérmica o por inhalación o instalación intracavitaria), por vía tópica o por aplicación en las membranas mucosas, como la nariz, la garganta y los bronquios.

Las dosis y regímenes terapéuticos de los agentes terapéuticos descritos en el presente documento pueden ser determinados por un artesano experto. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra mediante inyección (por ejemplo, subcutánea o intravenosa) a una dosis de aproximadamente 1 a 30 mg/kg, por ejemplo, aproximadamente 5 a 25 mg/kg, aproximadamente 10 a 20 mg/kg, aproximadamente 1 a 5 mg/kg, o aproximadamente 3 mg/kg. El programa de dosificación puede variar de, por ejemplo, una vez a la semana a una vez cada 2, 3 o 4 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 10 a 20 mg/kg cada dos semanas.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra por inyección (por ejemplo, subcutánea o intravenosa) a una dosis (por ejemplo, una dosis plana) de aproximadamente 100 mg a 600 mg, por ejemplo, aproximadamente 200 mg a 500 mg, por ejemplo, aproximadamente 250 mg a 450 mg, aproximadamente 300 mg a 400 mg, aproximadamente 250 mg a 350 mg, aproximadamente 350 mg a 450 mg, o aproximadamente 100 mg, aproximadamente 200 mg, aproximadamente 300 mg, o aproximadamente 400 mg. El programa de dosificación (por ejemplo, programa de dosificación plana) puede variar de, por ejemplo, una vez a la semana a una vez cada 2, 3, 4, 5 o 6 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg a 400 mg una vez cada tres semanas o una vez cada cuatro semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg una vez cada tres semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg una vez cada cuatro semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada tres semanas.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra, sola o en combinación (por ejemplo, en combinación con una molécula de anticuerpo anti-LAG-3), a una dosis de menos de, o aproximadamente, 5 mg/kg; menos de, o aproximadamente, 4 mg/kg; menos de, o aproximadamente, 3 mg/kg; menos de, o aproximadamente, 2 mg/kg; menos de, o aproximadamente, 1 mg/kg, cada dos semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de 1 a 5 mg/kg cada dos semanas; 1 a 4 mg/kg cada dos semanas, 1 a 3 mg/kg cada dos semanas, o 1 a 2 mg/kg cada dos semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 se administra, sola o en combinación (por ejemplo, en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1) a una dosis de 1 a 5 mg/kg cada dos semanas; 1 a 4 mg/kg cada dos semanas, 1 a 3 mg/kg cada dos semanas, o 1 a 2 mg/kg cada dos semanas.

Se prefieren las moléculas de anticuerpo descritas en el presente documento para su uso en los métodos descritos en el presente documento, aunque pueden usarse otros anticuerpos anti-PD-1 en su lugar, o en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1 de la divulgación.

Terapias de combinación adicionales

Los métodos y combinaciones descritos en el presente documento pueden incluir, o usarse en combinación con, otros agentes o modalidades terapéuticas. En una realización, los métodos descritos en el presente documento incluyen administrar al sujeto una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, en combinación con un agente o procedimiento o modalidad terapéutica, en una cantidad eficaz para tratar o prevenir un trastorno. La molécula de anticuerpo anti-PD-1 y el agente o procedimiento o modalidad terapéutica pueden administrarse simultánea o secuencialmente en cualquier orden. Puede utilizarse cualquier combinación y secuencia de las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 y otros agentes, procedimientos o modalidades terapéuticos (por ejemplo, como se describe en el presente documento). La molécula de anticuerpo y/u otros agentes, procedimientos o modalidades terapéuticos pueden administrarse durante periodos de trastorno activo, o durante un periodo de remisión o enfermedad menos activa. La molécula de anticuerpo puede administrarse antes del otro tratamiento, simultáneamente con el tratamiento, después del tratamiento o durante la remisión del trastorno.

En ciertas realizaciones, los métodos y composiciones aquí descritos se administran en combinación con una o más de otras moléculas de anticuerpos, quimioterapia, otra terapia anticancerosa (por ejemplo, terapias anticancerosas dirigidas, terapia génica, terapia viral, terapia de ARN, trasplante de médula ósea, nanoterapia o fármacos oncolíticos), agentes citotóxicos, terapias inmunológicas (por ejemplo, citoquinas o terapias inmunológicas basadas en células), procedimientos quirúrgicos (por ejemplo, tumorectomía o mastectomía) o procedimientos de radiación, o una combinación de cualquiera de los anteriores. La terapia adicional puede ser adyuvante o neoadyuvante. En algunas realizaciones, la terapia adicional es un inhibidor enzimático (por ejemplo, un inhibidor enzimático de molécula pequeña) o un inhibidor metastásico. Los agentes citotóxicos de ejemplo que pueden administrarse en combinación incluyen agentes antimicrotúbulos, inhibidores de la topoisomerasa, antimetabolitos, inhibidores mitóticos, agentes alquilantes, antraciclinas, alcaloides de la vinca, agentes intercalantes, agentes capaces de interferir con una vía de transducción de señales, agentes que promueven la apoptosis, inhibidores del proteosoma y radiación (por ejemplo, irradiación local o de todo el cuerpo, por ejemplo, irradiación gamma). En otras realizaciones, la terapia adicional es cirugía o radiación, o una combinación de ambas. En otras realizaciones, la terapia adicional es una terapia dirigida a una o más de las vías PI3K/AKT/mTOR, un inhibidor de HSP90 o un inhibidor de tubulina.

Alternativamente, o en combinación con las combinaciones antes mencionadas, los métodos y composiciones aquí descritos pueden incluir, administrarse en combinación con, uno o más de: un inmunomodulador (por ejemplo, un activador de una molécula coestimuladora o un inhibidor de una molécula inhibidora, por ejemplo, una molécula de punto de control inmunitario); una vacuna, por ejemplo, una vacuna terapéutica contra el cáncer; u otras formas de inmunoterapia celular.

Las combinaciones y usos de ejemplo no limitantes de las combinaciones aquí divulgadas, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluyen lo siguiente.

En ciertas realizaciones, la combinación aquí divulgada, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con un modulador de una molécula coestimuladora o una molécula inhibidora, por ejemplo, un ligando o receptor coinhibidor.

En una realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con un modulador, por ejemplo, agonista, de una molécula costimuladora. En una realización, el agonista de la molécula costimuladora se elige entre un agonista (por ejemplo, un anticuerpo agonista o fragmento de unión a antígeno del mismo, o una fusión soluble) de OX40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 o ligando de c D83.

En una realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con un inhibidor de una molécula inhibidora (o de punto de control inmunitario) elegida entre PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3, y/o CEACAM-5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 y/o TGF beta. En una realización, el inhibidor es un ligando soluble (por ejemplo, un CTLA-4-Ig), o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une a PD-L1, PD-L2 o CTLA-4. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede administrarse en combinación con un anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, ipilimumab, para tratar un cáncer (por ejemplo, un cáncer elegido entre: un melanoma, por ejemplo, un melanoma metastásico; un cáncer de pulmón, por ejemplo, un carcinoma pulmonar de células no pequeñas; o un cáncer de próstata). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra después del tratamiento con un anticuerpo anti-CTLA-4 (por ejemplo, ipilimumab) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib).

En otra realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con un anticuerpo anti-LAG-3 o un fragmento de unión a antígeno del mismo.

En otra realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con un anticuerpo anti-TIM-3 o un fragmento de unión a antígeno del mismo.

En aún otras realizaciones, la combinación aquí divulgada, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con un anticuerpo anti-LAG-3 y un anticuerpo anti-TIM-3 (o fragmentos de unión a antígeno de los mismos).

En otra realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, un inhibidor de CEACAM-1 y/o CEACAM-5), por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti- CEACAM. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti- CEACAM-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-5, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti- CEACAM-5.

La combinación de anticuerpos aquí mencionada puede administrarse por separado, por ejemplo, como anticuerpos separados o fragmentos de unión a antígeno de los mismos, o unidos, por ejemplo, como una molécula de anticuerpo biespecífica o triespecífica. En una realización, se administra un anticuerpo biespecífico que incluye una molécula de anticuerpo anti-PD-1 y un anticuerpo anti-TIM-3, anti-CEACAM (por ejemplo, anti-CEACAM-1, CEACAM-3, y/o anti-CEACAM-5), o anti-LAG-3, o un fragmento de unión a antígeno del mismo. En ciertas realizaciones, la combinación de anticuerpos descrita en el presente documento se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como el descrito en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia hematológica).

En otras realizaciones, la combinación aquí divulgada, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con una citoquina. La citoquina puede administrarse como una molécula de fusión a la molécula de anticuerpo anti-PD-1, o como composiciones separadas. En una realización, el anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con una, dos, tres o más citoquinas, por ejemplo, como molécula de fusión o como composiciones separadas. En una realización, la citoquina es una interleucina (IL) elegida entre una, dos, tres o más de IL-1, IL-2, IL-12, IL-15 o IL-21. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico tiene una primera especificidad de unión a una primera diana (por ejemplo, a PD-1), una segunda especificidad de unión a una segunda diana (por ejemplo, LAG-3 o TIM-3), y está opcionalmente unida a un dominio de interleucina (por ejemplo, IL-12) por ejemplo, IL-12 de longitud completa o una porción de la misma. En ciertas realizaciones, la combinación de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 y la citoquina descrita en el presente documento se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como el descrito en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido).

En ciertas realizaciones, la combinación aquí descrita, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con un anticuerpo específico contra un HLA C, por ejemplo, un anticuerpo específico contra los receptores similares a la inmunoglobulina de células asesinas (también denominado en el presente documento "anticuerpo anti-KIR"). En ciertas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-PD-1 y anticuerpo anti-KIR se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como el descrito en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido, por ejemplo, un tumor sólido avanzado).

En una realización, la combinación aquí descrita, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con una inmunoterapia celular (por ejemplo, Provenge® (por ejemplo, Sipuleucel-T)), y opcionalmente en combinación con ciclofosfamida. En ciertas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-PD-1, Provenge® y/o ciclofosfamida se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como el descrito en el presente documento (por ejemplo, un cáncer de próstata, por ejemplo, un cáncer de próstata avanzado).

En otra realización, la combinación aquí divulgada, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con una vacuna, por ejemplo, una vacuna contra el cáncer, (por ejemplo, una vacuna contra el carcinoma renal de células dendríticas (DC-RCC)). En una realización, la vacuna está basada en péptidos, ADN, ARN o antígenos, o una combinación de los mismos. En algunas realizaciones, la vacuna comprende uno o más péptidos, ácidos nucleicos (por ejemplo, ADN o ARN), antígenos o una combinación de los mismos. En ciertas realizaciones, la combinación de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 y la vacuna DC-RCC se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como el descrito en el presente documento (por ejemplo, un carcinoma renal, por ejemplo, un carcinoma metastásico de células renales (RCC) o un carcinoma de células renales de células claras (CCRCC)).

En otra realización, la combinación aquí divulgada, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con un adyuvante.

En aún otra realización, la combinación descrita en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra en combinación con quimioterapia y/o inmunoterapia. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede usarse para tratar un mieloma, sola o en combinación con uno o más de: quimioterapia u otros agentes anticancerosos (por ejemplo, análogos de talidomida, por ejemplo, lenalidomida), un anticuerpo anti-TIM-3, células dendríticas impulsadas por antígenos tumorales, fusiones (por ejemplo, electrofusiones) de células tumorales y células dendríticas, o vacunación con el idiotipo de inmunoglobulina producido por células plasmáticas malignas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se utiliza en combinación con un anticuerpo anti-TIM-3 para tratar un mieloma, por ejemplo, un mieloma múltiple.

En una realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se usa en combinación con quimioterapia para tratar un cáncer de pulmón, por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se utiliza con quimioterapia pulmonar estándar, por ejemplo, NSCLC, por ejemplo, terapia de doblete de platino, para tratar el cáncer de pulmón. En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se utiliza en combinación con un inhibidor de la indoleamina-pirrol 2,3-dioxigenasa (IDO) (por ejemplo, (4E)-4-[(3-cloro-4-fluoroanilino)-nitrosometilideno]-1,2,5-oxadiazol-3-amina (también conocido como INCB24360), indoximod (1-metil-D-triptófano), a-ciclohexil-5H-imidazo[5,1-a]isoindol-5-etanol (también conocido como NLG919), etc.) en un sujeto con cáncer avanzado o metastásico (por ejemplo, un paciente con cáncer metastásico y recurrente de NSCL).

En aún otras realizaciones, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se usa en combinación con uno o más de los siguientes: una estrategia basada en el sistema inmunitario (por ejemplo, interleucina-2 o interferón-a), un agente diana (por ejemplo, un inhibidor del VEGF, como un anticuerpo monoclonal del VEGF); un inhibidor de la tirosina quinasa del VEGF, como sunitinib, sorafenib, axitinib y pazopanib; un inhibidor del ARNi; o un inhibidor de un mediador de la señalización del VEGF,comoun inhibidor de la diana de rapamicina en mamíferos (mTOR), como everolimus y temsirolimus. Cualquiera de estas combinaciones puede usarse para tratar un cáncer renal, por ejemplo, un carcinoma de células renales (RCC) (por ejemplo, un carcinoma de células renales claras (CCRCC) o un carcinoma de células renales no claras (nccRCC) o un RCC metastásico, o un cáncer de hígado (por ejemplo, un carcinoma hepatocelular).

En algunas realizaciones, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de MEK (por ejemplo, un inhibidor de MEK como se describe en el presente documento). En algunas realizaciones, la combinación del anticuerpo anti-PD-1 y el inhibidor de MEK se utiliza para tratar un cáncer (por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento). En algunas realizaciones, el cáncer tratado con la combinación se elige entre un melanoma, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer de ovario, un cáncer de mama, un cáncer de próstata, un cáncer de páncreas, una neoplasia hematológica o un carcinoma de células renales. En ciertas realizaciones, el cáncer incluye una mutación BRAF (por ejemplo, una mutación BRAF V600E), un tipo salvaje BRAF, un tipo salvaje KRA<s>o una mutación KRAS activadora. El cáncer puede encontrarse en un estadio temprano, intermedio o tardío.

En otra realización, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se usa en combinación con uno, dos o todos de oxaliplatino, leucovorina o 5-FU (por ejemplo, un co-tratamiento FOLFOX). Alternativamente o en combinación, la combinación incluye además un inhibidor de VEGF (por ejemplo, un inhibidor de VEGF como se divulga en el presente documento). En algunas realizaciones, la combinación del anticuerpo anti-PD-1, el co-tratamiento con FOLFOX y el inhibidor de VEGF se usa para tratar un cáncer (por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento). En algunas realizaciones, el cáncer tratado con la combinación se elige entre un melanoma, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer de ovario, un cáncer de mama, un cáncer de próstata, un cáncer de páncreas, una neoplasia hematológica o un carcinoma de células renales. El cáncer puede encontrarse en una fase temprana, intermedia o tardía.

En otras realizaciones, la combinación aquí divulgada, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra con un inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, axitinib) para tratar el carcinoma de células renales y otros tumores sólidos.

En otras realizaciones, la combinación divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, incluye o se administra con un agente dirigido al receptor 4-1BB (por ejemplo, un anticuerpo que estimula la señalización a través de 4-1BB (CD-137), por ejemplo, PF-2566). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un inhibidor de la tirosina quinasa (por ejemplo, axitinib) y un agente dirigido al receptor 4-1BB.

La molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede unirse a una sustancia, por ejemplo, un agente citotóxico o una fracción (por ejemplo, un fármaco terapéutico; un compuesto emisor de radiación; moléculas de origen vegetal, fúngico o bacteriano; o una proteína biológica (por ejemplo, una toxina proteica) o partícula (por ejemplo, una partícula viral recombinante, por ejemplo, a través de una proteína de cubierta viral). Por ejemplo, el anticuerpo puede acoplarse a un isótopo radiactivo, como un emisor a-, p- o y, o un emisor p- y y.

Puede utilizarse cualquier combinación y secuencia de las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 y otros agentes, procedimientos o modalidades terapéuticos (por ejemplo, como se describe en el presente documento). La molécula de anticuerpo y/u otros agentes, procedimientos o modalidades terapéuticos pueden administrarse durante periodos de trastorno activo, o durante un periodo de remisión o enfermedad menos activa. La molécula de anticuerpo puede administrarse antes del otro tratamiento, simultáneamente con el tratamiento, después del tratamiento o durante la remisión del trastorno.

Terapias de combinación adicionales

En ciertas realizaciones, cualquiera de las combinaciones aquí divulgadas, alternativamente o en combinación, incluye además uno o más de los agentes descritos en la Tabla 7.

En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional se elige entre uno o más de: 1) un inhibidor de la proteína quinasa C (PKC); 2) un inhibidor de la proteína de choque térmico 90 (HSP90); 3) un inhibidor de una fosfoinositida 3 quinasa (PI3K) y/o diana de rapamicina (mTOR); 4) un inhibidor del citocromo P450 (por ejemplo, un inhibidor de CYP17 o un inhibidor de 17-alfa-hidroxilasa/C17-20-liasa); 5) un agente quelante del hierro; 6) un inhibidor de la aromatasa; 7) un inhibidor de p53, por ejemplo, un inhibidor de la interacción p53/Mdm2; 8) un inductor de la apoptosis; 9) un inhibidor de la angiogénesis; 10) un inhibidor de la aldosterona sintasa; 11) un inhibidor del receptor de la lisina (SMO); 12) un inhibidor del receptor de la prolactina (PRLR); 13) un inhibidor de la señalización Wnt; 14) un inhibidor de CDK4/6; 15) un inhibidor del receptor 2 del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR2)/receptor 4 del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR4); 16) un inhibidor del factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF); 17) un inhibidor de uno o más de c-KIT, de la liberación de histamina, de Flt3 (por ejemplo, FLK2/STK1) o PKC; 18) un inhibidor de uno o más de VEGFR-2 (por ejemplo, FLK-1/KDR), PDGFRbeta, c-KIT o Raf quinasa C; 19) un agonista de la somatostatina y/o un inhibidor de la liberación de la hormona del crecimiento; 20) un inhibidor de la quinasa del linfoma anaplásico (ALK); 21) un inhibidor del receptor del factor de crecimiento 1 similar a la insulina (IGF-1R); 22) un inhibidor de la P-Glicoproteína 1; 23) un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR); 24) un inhibidor de la quinasa BCR-ABL; 25) un inhibidor del FGFR; 26) un inhibidor del CYP11B2; 27) un inhibidor de la HDM2, por ejemplo, un inhibidor de la interacción HDM2-p53; 28) un inhibidor de una tirosina quinasa; 29) un inhibidor de c-MET; 30) un inhibidor de JAK; 31) un inhibidor de DAC; 32) un inhibidor de 11p-hidroxilasa; 33) un inhibidor de IAP; 34) un inhibidor de PIM quinasa; 35) un inhibidor de Porcupine; 36) un inhibidor de BRAF, por ejemplo, BRAF V600E o BRAF de tipo salvaje; 37) un inhibidor de HEr 3; 38) un inhibidor de MEK; o 39) un inhibidor de una quinasa lipídica, por ejemplo, como se describe en el presente documento y en la Tabla 7.

En una realización, el agente terapéutico adicional se elige entre uno o más de: Compuesto A8, Compuesto A17, Compuesto A23, Compuesto A24, Compuesto A27, Compuesto A29, Compuesto A33 y Compuesto A13. En otras realizaciones, el agente terapéutico adicional se elige entre uno o más de: Compuesto A5, Compuesto A8, Compuesto A17, Compuesto A23, Compuesto A24, Compuesto A29 y Compuesto A40.

En otras realizaciones, el agente terapéutico adicional se elige entre uno o más de: Compuesto A9, Compuesto A16, Compuesto A17, Compuesto a 21, Compuesto A22, Compuesto A25, Compuesto A28, Compuesto A48 y Compuesto 49.

En una realización, el cáncer se elige entre un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC con histología escamosa y/o no escamosa, o un adenocarcinoma de NSCLC), o se divulga en una publicación enumerada en la Tabla 7.

Biomarcadores

En otro aspecto, proporcionado adjunto es un método de evaluar o de supervisar la eficacia de una terapia (por ejemplo, una terapia de la combinación) descrita adjunto, en un tema (por ejemplo, un tema que tiene un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito adjunto). El método incluye adquirir un valor de eficacia a la terapia, en donde dicho valor es indicativo de la eficacia de la terapia.

En realizaciones, el valor de eficacia a la terapia comprende una medida de uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve o más (por ejemplo, todos) de los siguientes:

(i) un parámetro de un fenotipo de linfocitos infiltrantes de tumores (TIL);

(ii) un parámetro de una población de células mieloides;

(iii) un parámetro de un marcador de expresión de superficie;

(iv) un parámetro de un biomarcador de una respuesta inmunológica;

(v) un parámetro de modulación de una citoquina sistémica;

(vi) un parámetro de ADN libre circulante (cfADN);

(vii) un parámetro de la inmunomodulación sistémica;

(viii) un parámetro del microbioma;

(ix) un parámetro de un marcador de activación en una célula inmunitaria circulante; o

(x) un parámetro de una citoquina circulante.

En algunas realizaciones, el parámetro de un fenotipo TIL comprende el nivel o la actividad de uno, dos, tres, cuatro o más (por ejemplo, todos) de la tinción de hematoxilina y eosina (H&E) para recuentos de TIL, CD8, FOXP3, CD4 o CD3, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de tumor). En algunas realizaciones, el parámetro de una población de células mieloides comprende el nivel o la actividad de uno o ambos de CD68 o CD163, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de tumor).

En algunas realizaciones, el parámetro de un marcador de expresión de superficie comprende el nivel o la actividad de uno, dos o más (por ejemplo, todos) de PD-L1, LAG-3, o TIM-3, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de tumor).

En algunas realizaciones, el parámetro de un biomarcador de una respuesta inmunológica comprende el nivel o la secuencia de uno o más marcadores basados en ácido nucleico, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de tumor).

En algunas realizaciones, el parámetro de modulación de citoquinas sistémicas comprende el nivel o la actividad de una, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho o más (por ejemplo, todas) de IL-18, IFN-y, ITAC (CXCL11), IL-6, IL-10, IL-4, IL-17, IL-15 o TGF-beta, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de sangre, por ejemplo, una muestra de plasma).

En algunas realizaciones, el parámetro de cfADN comprende la secuencia o el nivel de una o más moléculas de ADN tumoral circulante (cfADN), en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de sangre, por ejemplo, una muestra de plasma).

En algunas realizaciones, el parámetro de inmunomodulación sistémica comprende la caracterización fenotípica de una célula inmunitaria activada, por ejemplo, una célula que expresa CD3, una célula que expresa CD8, o ambas, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de sangre, por ejemplo, una muestra de PBMC).

En algunas realizaciones, el parámetro del microbioma comprende la secuencia o el nivel de expresión de uno o más genes del microbioma, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de heces).

En algunas realizaciones, el parámetro de un marcador de activación en una célula inmunitaria circulante comprende el nivel o la actividad de una, dos, tres, cuatro, cinco o más (por ejemplo, todas) de células T CD8+, HLA-DR+Ki67+, IFN-<y>, IL-18 o CXCL11 (CCK inducida por IFN-<y>) circulantes que expresan células, en una muestra (por ejemplo, una muestra de sangre, por ejemplo, una muestra de plasma).

En algunas realizaciones, el parámetro de una citoquina circulante comprende el nivel o la actividad de IL-6, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de sangre, por ejemplo, una muestra de plasma).

En algunas realizaciones de cualquiera de los métodos aquí divulgados, la terapia comprende una combinación de

(a) un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1); y

(b) uno o más (por ejemplo, dos, tres, cuatro o más) de:

(i) un inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003;

(ii) un inhibidor de mTOR, Everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318;

(iii) un inhibidor de DAC, Panobinostat (compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493;

(iv) un inhibidor de IL-1p, canakinumab, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2002/16436;

(v) un inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/122613;

(vi) un inhibidor de MEK o trametinib, o

(vii) un inhibidor del EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757.

En algunas realizaciones de cualquiera de los métodos aquí divulgados, la medida de uno o más de (i)-(x) se obtiene de una muestra adquirida del sujeto. En algunas realizaciones, la muestra se elige entre una muestra de tumor, una muestra de sangre (por ejemplo, una muestra de plasma o una muestra de PBMC), o una muestra de heces.

En algunas realizaciones de cualquiera de los métodos aquí divulgados, el sujeto es evaluado antes de recibir, durante o después de recibir la terapia, por ejemplo, la terapia de combinación.

En algunas realizaciones de cualquiera de los métodos aquí divulgados, la medida de uno o más de (i)-(x) evalúa un perfil para uno o más de expresión génica, citometría de flujo o expresión proteica.

En algunas realizaciones de cualquiera de los métodos divulgados en el presente documento, la presencia de un mayor nivel o actividad de una, dos, tres, cuatro, cinco o más (por ejemplo, todas) de células T CD8+, HLA-DR+Ki67+ circulantes, IFN-y, IL-18 o CXCL11 (CCK inducida por IFN-y) que expresan células, y/o la presencia de un menor nivel o actividad de IL-6, en el sujeto o la muestra, es un predictor positivo de la eficacia de la terapia.

Alternativamente, o en combinación con los métodos aquí divulgados, en respuesta a dicho valor, realizar uno, dos, tres, cuatro o más (por ejemplo, todos) de:

(i) administrar al sujeto la terapia (por ejemplo, terapia de combinación);

(ii) administrar una dosis alterada de la terapia (por ejemplo, una terapia de combinación);

(iii) alterar el calendario o el curso temporal de la terapia (por ejemplo, una terapia de combinación);

(iv) administrar al sujeto un agente adicional (por ejemplo, un agente terapéutico descrito en el presente documento) en combinación con la terapia (por ejemplo, una terapia de combinación); o

(v) administrar al sujeto una terapia alternativa (por ejemplo, una terapia descrita en el presente documento).

Otras realizaciones

Otras realizaciones proporcionan un método para tratar un cáncer, que comprende: identificar en un sujeto o una muestra (por ejemplo, una muestra de un sujeto que comprende células cancerosas y opcionalmente células inmunitarias tales como TIL) la presencia de uno, dos o todos los PD-L1, CD8, o IFN-<y>, proporcionando así un valor para uno, dos o todos los PD-L1, CD8, e IFN-<y>. El método puede incluir además comparar los valores de PD-L1, CD8 y/o IFN-y con un valor de referencia, por ejemplo, un valor de control. Si los valores de PD-L1, CD8, y/o IFN-y son mayores que el valor de referencia, por ejemplo, los valores de control, administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de una combinación como la descrita en el presente documento (por ejemplo, una combinación que incluye un anticuerpo anti-PD-1 descrito en el presente documento) al sujeto, opcionalmente en combinación con uno o más agentes, tratando así el cáncer. El cáncer puede ser, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, como cáncer de pulmón (escamoso), cáncer de pulmón (adenocarcinoma), cáncer de cabeza y cuello, cáncer cervical (escamoso), cáncer de estómago, cáncer de tiroides (por ejemplo, carcinoma anaplásico de tiroides), cáncer de piel (por ejemplo, carcinoma de células de Merkel o melanoma), cáncer nasofaríngeo, tumor neuroendocrino (por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico) o cáncer de mama, por ejemplo, cáncer de mama TN, por ejemplo, cáncer de mama IM-TN. En algunas realizaciones, el cáncer es cáncer de mama ER+ o cáncer de páncreas.

También se proporciona un método para tratar un cáncer, que comprende: analizar un sujeto o una muestra (por ejemplo, una muestra de un sujeto que comprende células cancerosas) para detectar la presencia de PD-L1, identificando así un valor de PD-L1, comparar el valor de PD-L1 con un valor de control, y si el valor de PD-L1 es mayor que el valor de control, administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de una combinación como se describe en el presente documento (por ejemplo, una combinación que incluye un anticuerpo anti-PD-1 descrito en el presente documento) al sujeto, opcionalmente en combinación con uno o más agentes, tratando así el cáncer. El cáncer puede ser, por ejemplo, un cáncer como el descrito en el presente documento, como el cáncer es adenocarcinoma (ACA) de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), carcinoma de células escamosas (SCC) de NSCLC o carcinoma hepatocelular (HCC).

En otro aspecto, la divulgación presenta kits diagnósticos o terapéuticos que incluyen las moléculas de anticuerpos descritas en el presente documento e instrucciones de uso.

Otras características, objetos y ventajas de la divulgación se desprenderán de la descripción y de los dibujos, así como de las reivindicaciones.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 representa las secuencias de aminoácidos de las regiones variables de las cadenas ligera y pesada del mAb anti-PD-1 murino BAP049. Las secuencias superior e inferior proceden de dos análisis independientes. Las secuencias CDR de las cadenas ligera y pesada basadas en la numeración de Kabat están subrayadas. Las secuencias CDR de la cadena ligera y pesada basadas en la numeración de Chothia se muestran en negrita y cursiva. El residuo de Cys no apareado en la posición 102 de la secuencia de la cadena ligera aparece en recuadro. Las secuencias se muestran como SEQ ID NOs: 8, 228, 16 y 229, respectivamente, en orden de aparición.

La Figura 2A representa las secuencias de aminoácidos de las regiones variables de las cadenas ligera y pesada del mAb anti-PD-1 murino BAP049 alineadas con las secuencias de la línea germinal. Las secuencias superior e inferior son las secuencias de la línea germinal (GL) y de BAP049 (Mu mAb), respectivamente. Las secuencias CDR de cadena ligera y pesada basadas en la numeración de Kabat están subrayadas. Las secuencias CDR de cadena ligera y pesada basadas en la numeración de Chothia se muestran en negrita y cursiva. "-" significa residuo de aminoácido idéntico. Secuencias divulgadas como SEQ ID NOs: 230, 8, 231 y 16, respectivamente, en orden de aparición.

La Figura 2B representa la secuencia del gen<k>J2 murino y la mutación correspondiente en el mAb anti-PD-1 murino BAP049. "-" significa residuo de nucleótido idéntico. Secuencias divulgadas como SEQ ID NOs: 233, 232, 234 y 235, respectivamente, en orden de aparición.

Las Figuras 3A-3B representan la competición de unión entre el mAb anti-PD-1 murino marcado con fluorescencia BAP049 (mAb Mu) y tres versiones quiméricas de BAP049 (mAb Chi). El experimento se realizó dos veces, y los resultados se muestran en las Figuras 3A y 3B, respectivamente. Los tres anticuerpos quiméricos BAP049 (Chi mAb (Cys), Chi mAb (Tyr) y Chi mAb (Ser)) tienen residuos Cys, Tyr y Ser en la posición 102 de la región variable de la cadena ligera, respectivamente. Los Chi mAb (Cys), Chi mAb (Tyr) y Chi mAb (Ser) también se conocen como BAP049-chi, BAP049-chi-Y y BAP049-chi-S, respectivamente.

La Figura 4 es un gráfico de barras que muestra los resultados del análisis de unión FACS para los dieciséis clones humanizados BAP049 (BAP049-hum01 a BAP049-hum16). Las concentraciones de anticuerpo son 200, 100, 50, 25 y 12.5 ng/ml desde la barra más a la izquierda hasta la barra más a la derecha para cada mAb analizado.

La Figura 5 representa el análisis estructural de los clones humanizados BAP049 (a, b, c, d y e representan varios tipos de secuencias de la región marco). También se muestran las concentraciones de mAbs en las muestras.

Las Figuras 6A-6 B muestran la afinidad y especificidad de unión de los mAbs BAP049 humanizados medida en un ensayo de unión de competición utilizando una concentración constante de mAb murino BAP049 marcado con Alexa 488, diluciones seriadas de los anticuerpos de prueba y células 300.19 que expresan PD-1. El experimento se realizó dos veces y los resultados se muestran en las Figuras 6A y 6 B, respectivamente.

La Figura 7 representa la clasificación de los clones humanizados de BAP049 basada en los datos FACS, la unión por competencia y el análisis estructural. También se muestran las concentraciones de mAbs en las muestras.

Las Figuras 8A-8B representan el bloqueo de la unión del ligando a PD-1 por clones BAP049 humanizados seleccionados. El bloqueo de la unión de PD-L1-Ig y PD-L2-Ig a PD-1 se muestra en la Figura 8A. El bloqueo de la unión de PD-L2-Ig a PD-1 se muestra en la Figura 8B. Se evaluaron BAP049-hum01, BAP049-hum05, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10 y BAP049-hum11. También se incluyeron en los análisis el mAb murino BAP049 y el mAb quimérico con Tyr en la posición 102 de la región variable de la cadena ligera.

Las Figuras 9A-9B muestran la alineación de las secuencias de dominio variable de cadena pesada para los dieciséis clones humanizados BAP049 y la quimera BAP049 (BAP049-chi). En la Figura 9A, se muestran todas las secuencias (SEQ ID NOs: 22, 38, 38, 38, 38, 38, 38, 38, 38 , 38, 50, 50, 50, 50, 82, 82 y 86, respectivamente, en orden de aparición). En la Figura 9B, sólo se muestran las secuencias de aminoácidos que son diferentes de la secuencia de ratón (SEQ ID NOs: 22, 38, 38, 38, 38, 38, 38, 38, 38, 38, 50, 50, 50, 50, 82, 82 y 86, respectivamente, en orden de aparición).

Las Figuras 10A-10B muestran la alineación de las secuencias del dominio variable de la cadena ligera para los dieciséis clones humanizados BAP049 y la quimera BAP049 (BAP049-chi). En la Figura 10A, se muestran todas las secuencias (SEQ ID NOs: 24, 66 , 66 , 66 , 66 , 70, 70, 70, 58, 62, 78, 74, 46, 46, 42, 54 y 54, respectivamente, en orden de aparición). En la Figura 10B, sólo se muestran las secuencias de aminoácidos que son diferentes de la secuencia de ratón (SEQ ID NOs: 24, 66 , 66 , 66 , 66 , 70, 70, 70, 58, 62, 78, 74, 46, 46, 42, 54 y 54, respectivamente, en orden de aparición).

La Figura 11 es un diagrama esquemático que describe el procesamiento y la presentación de antígenos, las respuestas de las células efectoras y las vías de inmunosupresión a las que se dirigen las terapias combinadas aquí descritas.

La Figura 12 representa las concentraciones Cpasante (Cmín) predichas a través de los diferentes pesos para pacientes mientras reciben la misma dosis de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 de ejemplo. Se muestra una comparación de la Cpasantemedia en estado estacionario previsto tras la dosificación de peso corporal frente a la dosificación plana/fija de dos regímenes de la molécula de anticuerpo anti-PD-1.

La Figura 13 representa las concentraciones Cmín observadas frente a las predichas por el modelo (basado en la población o en el individuo).

Las Figuras 14A-14B representan la acumulación, el curso temporal y la variabilidad intraobjeto del modelo utilizado para analizar la farmacocinética. Las áreas sombreadas representan el intervalo de predicción del 90%; las líneas continuas son la mediana de la predicción en cada punto temporal; los puntos negros representan los datos farmacocinéticos observados.

La Figura 15 representa el porcentaje de supervivencia de ratones implantados con células MC38 tras el tratamiento con anticuerpo anti-PD-1, el Compuesto A21, o una combinación de anticuerpo anti-PD-1 y el Compuesto A21.

La Figura 16A representa los pesos corporales de diez animales por grupo tratados con vehículo, anticuerpo anti-ratón PD-1 (10 mg/kg IV QW durante cuatro dosis), panobinostat (Compuesto A19, 10 mg/kg QOD durante cinco dosis), o la combinación de panobinostat y anticuerpo anti-ratón PD-1.

La Figura 16B representa las respuestas de tumores individuales al tratamiento con vehículo de control, anticuerpo anti PD-1 de ratón, panobinostat (Compuesto A19), o la combinación de panobinostat y anticuerpo anti PD-1 de ratón.

La Figura 17 representa el porcentaje de supervivencia de ratones portadores de aloinjertos de linfoma A20 tras el tratamiento con el compuesto A40, ibrutinib, anticuerpo anti-PD-L1, una combinación de compuesto A40 y anticuerpo anti-PD-L1, o una combinación de ibrutinib y anticuerpo anti-PD-L1 (anti-PD-L1 indicado como aPD-L1).

La Figura 18 representa el volumen tumoral medio en ratones portadores de aloinjertos de linfoma A20 tras el tratamiento con el compuesto A40, ibrutinib, anticuerpo anti-PD-L1, una combinación de compuesto A40 y anticuerpo anti-PD-L1, o una combinación de ibrutinib y anticuerpo anti-PD-L1 (anti-PD-L1 indicado como aPD-L1 ).

La Figura 19 representa el diseño de un estudio de fase I/II, primero en humanos, de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 de ejemplo en pacientes con tumores sólidos avanzados. *Se necesitaron al menos 21 pacientes para definir la MTD. Se realizaron evaluaciones tumorales en el momento del cribado, luego cada 2 ciclos (1 ciclo=28 días) ± 1 semana desde el día 1 del ciclo 3 hasta el día 1 del ciclo 11, y posteriormente cada 3 ciclos hasta la progresión de la enfermedad según irRC o la retirada del paciente. irRC: Criterios de Evaluación de la Respuesta en Tumores Sólidos relacionados con el sistema inmunitario; MTD, dosis máxima tolerada; NSCLC: cáncer de pulmón de céluls no pequeñas; RP2D: dosis recomendada de fase II; TNBC: cáncer de mama triple negativo.

La Figura 20 representa el cambio porcentual de las lesiones diana a lo largo del tiempo en cada uno de los pacientes radiográficamente evaluables tratados con la molécula de anticuerpo anti-PD-1 en el estudio de fase I/II. Los pacientes fueron tratados con los siguientes esquemas de dosificación: 1mg/kg q2w, 3 mg/kg q2w, 10 mg/kg q2w, 3 mg/kg q4w, o 5 mg/kg q4w (las líneas de ejemplo en la Figura se indican con los programas de dosificación).

Las Figuras 21A-21C representan las evaluaciones tumorales y la detección inmunohistoquímica de linfocitos T CD8+ en un paciente con tumor carcinoide pulmonar atípico metastásico con respuesta clínica a la molécula de anticuerpo anti-PD-1 en el estudio de fase I/II.

La Figura 21A representa imágenes de escaneo CT que muestran la respuesta en el paciente. El panel izquierdo muestra la metástasis hepática antes del tratamiento con anticuerpos. El panel central muestra una pseudoprogresión en el hígado (acompañada de una reducción significativa de las lesiones pulmonares que no se muestran) en la primera reescenificación. El panel derecho muestra la respuesta en todas las lesiones en la segunda reescenificación.

La Figura 21B muestra la reducción de la carga de tumor carcinoide pulmonar atípico metastásico (% de cambio respecto al valor de línea base) y de las lesiones individuales (tamaño de la lesión (nm)) en el paciente.

La Figura 21C muestra las imágenes de tinción inmunohistoquímica que muestran altos niveles de linfocitos T CD8+ en una muestra tumoral obtenida del paciente durante el Ciclo 2, Día 1. BL, línea de base; C2D1, Ciclo 2, Día 1.

La Figura 22A representa el porcentaje de supervivencia de ratones implantados con células MC38 tras el tratamiento con anticuerpo anti-PD-1, el Compuesto A15 (una vez a la semana o diariamente), o una combinación de anticuerpo anti-PD-1 y el Compuesto A15 (una vez a la semana o diariamente).

La Figura 22B representa el volumen tumoral medio en ratones implantados con células MC38 tras el tratamiento con anticuerpo anti-PD-1, el Compuesto A15 (diario), o una combinación de anticuerpo anti-PD-1 y el Compuesto A15 (diario).

La Figura 22C muestra el volumen tumoral medio en ratones implantados con células MC38 tras el tratamiento con anticuerpo anti-PD-1, el compuesto A15 (una vez a la semana) o una combinación de anticuerpo anti-PD-1 y el compuesto A15 (una vez a la semana).

La Figura 23 representa la mejora en el tiempo hasta el punto final observada en animales tratados con una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 en combinación con un anticuerpo anti-PD-1.

Breve descripción de las Tablas

La Tabla 1 es un resumen de las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 murinos, quiméricos y humanizados. Las moléculas de anticuerpo incluyen el mAb murino BAP049, los mAbs quiméricos BAP049-chi y BAP049-chi-Y, y los mAbs humanizados BAP049-hum01 a BAP049-hum16 y BAP049-Clon-A a BAP049-Clon-E. En esta Tabla se muestran las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las CDR de las cadenas pesada y ligera, las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las regiones variables de las cadenas pesada y ligera, y las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las cadenas pesada y ligera.

La Tabla 2 muestra las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las regiones marco de las cadenas pesada y ligera para los mAbs humanizados BAP049-hum01 a BAP049-hum16 y BAP049-Clon-A a BAP049-Clon-E.

La Tabla 3 muestra las secuencias de aminoácidos de la región constante de las cadenas pesadas IgG humanas y de la cadena ligera kappa humana.

La Tabla 4 muestra las secuencias de aminoácidos de las secuencias líderes de las cadenas pesada y ligera para los mAbs humanizados BAP049-Clon-A a BAP049-Clon-E.

La Tabla 5 muestra parámetros PK de ejemplo basados en programas de dosificación plana.

La Tabla 6 proporciona un listado de ejemplo de los agentes terapéuticos de las Combinaciones Antígeno-Presentación (Categoría A), Combinaciones de Células Efectoras (Categoría B) y Combinaciones de Inmunosupresión Antitumoral (Categoría C).

La Tabla 7 es un resumen de agentes terapéuticos seleccionados que pueden administrarse en combinación con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 y otros inmunomoduladores (por ejemplo, uno o más de: un activador de una molécula coestimuladora y/o un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario) descritos en el presente documento. La Tabla 7 proporciona de izquierda a derecha lo siguiente: la Designación del Compuesto del segundo agente terapéutico, la estructura del Compuesto, y las publicaciones de Patente que divulgan el Compuesto.

La Tabla 8 es un resumen de biomarcadores y recolección de muestras de ejemplo, por ejemplo, para la evaluación de la eficacia de las terapias (por ejemplo, terapias combinadas) descritas en el presente documento.

La Tabla 9 es un resumen de los objetivos y puntos finales del estudio de fase I/II.

En la Tabla 10 se resumen los datos demográficos y las características de los pacientes del estudio de fase I/II.

La Tabla 11 muestra la disposición de los pacientes en el estudio de fase I/II.

La Tabla 12 muestra los acontecimientos adversos independientemente de la relación con el fármaco de estudio en el estudio de fase I/II (cualquier grad que ocurra en >20% de los pacientes - conjunto de seguridad).

La Tabla 13 muestra la mejor respuesta global (basada en la evaluación del investigador del estado de la enfermedad utilizando los criterios RECIST v1.1).

Descripción detallada

En el presente documento se describen, al menos en parte, moléculas de anticuerpos (por ejemplo, moléculas de anticuerpos humanizados) que se unen a la muerte programada 1 (PD-1) con alta afinidad y especificidad. También se proporcionan moléculas de ácido nucleico que codifican las moléculas de anticuerpo, vectores de expresión, células huésped y métodos para fabricar las moléculas de anticuerpo. También se proporcionan composiciones farmacéuticas y formulaciones de dosis que comprenden las moléculas de anticuerpo. Las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 aquí divulgadas pueden utilizarse (solas o en combinación con otros agentes o modalidades terapéuticas) para tratar, prevenir y/o diagnosticar trastornos, como trastornos cancerosos (por ejemplo, tumores sólidos y de tejidos blandos), así como enfermedades infecciosas (por ejemplo, trastornos infecciosos crónicos o sepsis). Por lo tanto, en el presente documento se describen composiciones y métodos para detectar PD-1, así como métodos para tratar diversos trastornos, incluyendo cáncer y/o enfermedades infecciosas, utilizando las moléculas de anticuerpos anti-PD-1. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra o utiliza a una dosis plana o fija.

También se divulgan en el presente documento métodos y composiciones que comprenden una combinación de dos, tres o más agentes terapéuticos elegidos de una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii): (i) un agente que mejora la presentación de antígeno (por ejemplo, presentación de antígeno tumoral) (por ejemplo, (ii) un agente que mejora una respuesta de células efectoras (por ejemplo, una respuesta de células efectoras inmunitarias, por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o T, por ejemplo, en el ganglio linfático); o (iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral (por ejemplo, aumentando la infiltración de células T y la destrucción de células tumorales). En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que los enfoques terapéuticos que mejoran la inmunidad antitumoral funcionan más eficazmente cuando la respuesta inmunitaria se optimiza a través de múltiples dianas en diferentes etapas de la respuesta inmunitaria. Cada una de estas etapas se representa de forma esquemática en la Figura 21. Por ejemplo, los enfoques que activan las células dendríticas combinados con enfoques que mejoran la inmunidad celular y humoral pueden dar lugar a una respuesta terapéutica más eficaz y/o prolongada.

Los términos adicionales se definen a continuación y a lo largo de la solicitud.

Tal como se utilizan en el presente documento, los artículos "un" y "uno, una" se refieren a uno o a más de uno (por ejemplo, a al menos uno) del objeto gramatical del artículo.

El término "o" se utiliza aquí para significar, y se utiliza indistintamente con, el término "y/o", a menos que el contexto indique claramente lo contrario.

"Alrededor" y "aproximadamente" significarán generalmente un grado aceptable de error para la cantidad medida dada la naturaleza o precisión de las mediciones. Grados de error de ejemplo están dentro del 20% (%), típicamente, dentro del 10%, y más típicamente, dentro del 5% de un valor dado o rango de valores.

Por "una combinación" o "en combinación con", no se pretende implicar que la terapia o los agentes terapéuticos deban administrarse al mismo tiempo y/o formularse para su administración conjunta, aunque estos métodos de administración están dentro del ámbito aquí descrito. Los agentes terapéuticos de la combinación pueden administrarse simultáneamente, antes o después de una o más terapias o agentes terapéuticos adicionales. Los agentes terapéuticos o el protocolo terapéutico pueden administrarse en cualquier orden. En general, cada agente se administrará a una dosis y/o en un horario determinado para ese agente. Se apreciará además que el agente terapéutico adicional utilizado en esta combinación puede administrarse conjuntamente en una única composición o administrarse por separado en diferentes composiciones. En general, se espera que los agentes terapéuticos adicionales utilizados en combinación se utilicen a niveles que no superen los niveles a los que se utilizan individualmente. En algunas realizaciones, los niveles utilizados en combinación serán inferiores a los utilizados individualmente.

En algunas realizaciones, el agente terapéutico adicional se administra a una dosis terapéutica o inferior a la terapéutica. En ciertas realizaciones, la concentración del segundo agente terapéutico que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, la inhibición del crecimiento, es menor cuando el segundo agente terapéutico se administra en combinación con el primer agente terapéutico, por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1, que cuando el segundo agente terapéutico se administra individualmente. En ciertas realizaciones, la concentración del primer agente terapéutico que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, la inhibición del crecimiento, es menor cuando el primer agente terapéutico se administra en combinación con el segundo agente terapéutico que cuando el primer agente terapéutico se administra individualmente. En ciertas realizaciones, en una terapia de combinación, la concentración del segundo agente terapéutico que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, la inhibición del crecimiento, es menor que la dosis terapéutica del segundo agente terapéutico como monoterapia, por ejemplo, 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% u 80-90% menor. En ciertas realizaciones, en una terapia de combinación, la concentración del primer agente terapéutico que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, la inhibición del crecimiento, es inferior a la dosis terapéutica del primer agente terapéutico como monoterapia, por ejemplo, 10 -20 %, 20 -30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% u 80-90% inferior.

El término "inhibición", "inhibidor" o "antagonista" incluye una reducción de un parámetro determinado, por ejemplo, una actividad, de una molécula dada, por ejemplo, un inhibidor de puntos de control inmunitarios. Por ejemplo, este término incluye la inhibición de una actividad, por ejemplo, una actividad PD-1 o PD-L1, de al menos el 5%, 10%, 20%, 30%, 40% o más. Por lo tanto, no es necesario que la inhibición sea del 100%.

El término "activación", "activador" o "agonista" incluye un aumento de un parámetro determinado, por ejemplo, una actividad, de una molécula dada, por ejemplo, una molécula costimuladora. Por ejemplo, el aumento de una actividad, por ejemplo, una actividad costimuladora, de al menos un 5%, 10%, 25%, 50%, 75% o más se incluye en este término.

El término "efecto anticanceroso" se refiere a un efecto biológico que puede manifestarse por varios medios, incluyendo pero no limitándose a, por ejemplo, una disminución del volumen tumoral, una disminución del número de células cancerosas, una disminución del número de metástasis, un aumento de la esperanza de vida, una disminución de la proliferación de células cancerosas, una disminución de la supervivencia de células cancerosas, o una mejora de varios síntomas fisiológicos asociados con la afección cancerosa. Un "efecto anticancerígeno" también puede manifestarse por la capacidad de los péptidos, polinucleótidos, células y anticuerpos para prevenir la aparición de cáncer en primer lugar.

El término "efecto antitumoral" se refiere a un efecto biológico que puede manifestarse por varios medios, incluyendo pero no limitándose a, por ejemplo, una disminución del volumen tumoral, una disminución del número de células tumorales, una disminución de la proliferación de células tumorales o una disminución de la supervivencia de células tumorales.

El término "cáncer" se refiere a una enfermedad caracterizada por el crecimiento rápido e incontrolado de células aberrantes. Las células cancerosas pueden propagarse localmente o a través del torrente sanguíneo y el sistema linfático a otras partes del cuerpo. En el presente documento se describen ejemplos de diversos tipos de cáncer, entre los que se incluyen el cáncer de mama, el cáncer de próstata, el cáncer de ovario, el cáncer cervical, el cáncer de piel, el cáncer de páncreas, el cáncer colorrectal, el cáncer renal, el cáncer de hígado, el cáncer cerebral, el linfoma, la leucemia y el cáncer de pulmón. Los términos "tumor" y "cáncer" se utilizan indistintamente en el presente documento, por ejemplo, ambos términos abarcan tumores sólidos y líquidos, por ejemplo, difusos o circulantes. En el presente documento, los términos "cáncer" o "tumor" incluyen cánceres y tumores premalignos y malignos.

El término "célula presentadora de antígeno" o "APC" se refiere a una célula del sistema inmunitario como una célula accesoria (por ejemplo, una célula B, una célula dendrítica) que muestra un antígeno extraño complejado con complejos mayores de histocompatibilidad (MHC) en su superficie. Las células T pueden reconocer estos complejos utilizando sus receptores de células T (TCR). Las APC procesan los antígenos y los presentan a las células T.

El término "molécula coestimuladora" se refiere a la pareja de unión afín en una célula T que se une específicamente con un ligando coestimulador, mediando así una respuesta coestimuladora por parte de la célula T, como la proliferación, entre otras. Las moléculas coestimuladoras son moléculas de la superficie celular distintas de los receptores de antígenos o sus ligandos que son necesarias para una respuesta inmunitaria eficaz. Las moléculas coestimuladoras incluyen, pero no se limitan a, una molécula MHC de clase I, proteínas receptoras de TNF, proteínas similares a las inmunoglobulinas, receptores de citoquinas, integrinas, moléculas de activación linfocítica de señalización (proteínas SLAM), receptores activadores de células NK, BTLA, un receptor de ligando Toll, OX40, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), 4-1BB (CD137), B7-H3, CDS, ICAM-1, ICOS (CD278), GITR, BAFFR, LIGHT, HVEM (LIGHTR), KIRDS2, SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD19, CD4, CD8alfa, CD8beta, IL2R beta, IL2R gamma, IL7R alfa, ITGA4, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6 , VLA-6 , CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, NKG2D, NKG2C, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8 ), SELPLG (CD162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76, PAG/Cbp, CD19a, y un ligando que se une específicamente con CD83.

"Célula efectora inmunitaria" o "célula efectora", tal como se utiliza este término en el presente documento, se refiere a una célula que participa en una respuesta inmunitaria, por ejemplo, en la promoción de una respuesta efectora inmunitaria. Ejemplos de células efectoras inmunitarias incluyen células T, por ejemplo, células T alfa/beta y células T gammaldelta, células B, células asesinas naturales (NK), células T asesinas naturales (NKT), mastocitos y fagocitos derivados de mieloides.

"Efector inmunitario" o “efector”, "función" o "respuesta", tal como se utiliza ese término en el presente documento, se refiere a la función o respuesta, por ejemplo, de una célula efectora inmunitaria, que mejora o promueve un ataque inmunitario de una célula diana. Por ejemplo, una función o respuesta de un efector inmunitario se refiere a una propiedad de una célula T o NK que promueve la muerte o la inhibición del crecimiento o la proliferación de una célula diana. En el caso de una célula T, la estimulación primaria y la coestimulación son ejemplos de función o respuesta de efector inmunitario.

El término "función efectora" se refiere a una función especializada de una célula. La función efectora de una célula T, por ejemplo, puede ser la actividad citolítica o la actividad de ayuda, incluida la secreción de citoquinas.

Como se usan aquí, los términos "trato", "tratamiento" y "tratar" se refieren a la reducción o mejora de la progresión, severidad y/o duración de un trastorno, por ejemplo, un trastorno proliferativo, o la mejora de uno o más síntomas (preferiblemente, uno o más síntomas discernibles) del trastorno resultante de la administración de una o más terapias. En determinadas realizaciones, los términos "trato", "tratamiento" y "tratar" se refieren a la mejora de al menos un parámetro físico medible de un trastorno proliferativo, como el crecimiento de un tumor, no necesariamente perceptible por el paciente. En otras realizaciones, los términos "trato", "tratamiento" y "tratar" se refieren a la inhibición de la progresión de un trastorno proliferativo, ya sea físicamente mediante, por ejemplo, la estabilización de un síntoma perceptible, fisiológicamente mediante, por ejemplo, la estabilización de un parámetro físico, o ambos. En otras realizaciones, los términos "trato", "tratamiento" y "tratar" se refieren a la reducción o estabilización del tamaño del tumor o del recuento de células cancerosas.

Las composiciones y métodos de la presente divulgación abarcan polipéptidos y ácidos nucleicos que tienen las secuencias especificadas, o secuencias sustancialmente idénticas o similares a las mismas, por ejemplo, secuencias al menos 85%, 90%, 95% idénticas o superiores a la secuencia especificada. En el contexto de una secuencia de aminoácidos, el término "sustancialmente idéntica" se utiliza en el presente documento para referirse a un primer aminoácido que contiene un número suficiente o mínimo de residuos de aminoácidos que son i) idénticos a, o ii) sustituciones conservadoras de residuos de aminoácidos alineados en una segunda secuencia de aminoácidos de tal manera que las secuencias de aminoácidos primera y segunda pueden tener un dominio estructural común y/o una actividad funcional común. Por ejemplo, las secuencias de aminoácidos que contienen un dominio estructural común que tiene al menos alrededor del 85%, 90%. 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% de identidad con una secuencia de referencia, por ejemplo, una secuencia proporcionada en el presente documento.

En el contexto de la secuencia de nucleótidos, el término "sustancialmente idéntica" se utiliza aquí para referirse a una primera secuencia de ácido nucleico que contiene un número suficiente o mínimo de nucleótidos que son idénticos a nucleótidos alineados en una segunda secuencia de ácido nucleico de tal manera que las secuencias de nucleótidos primera y segunda codifican un polipéptido que tiene una actividad funcional común, o codifican un dominio de polipéptido estructural común o una actividad de polipéptido funcional común. Por ejemplo, secuencias de nucleótidos que tienen al menos aproximadamente 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% de identidad con una secuencia de referencia, por ejemplo, una secuencia proporcionada en el presente documento.

El término "variante funcional" se refiere a polipéptidos que tienen una secuencia de aminoácidos sustancialmente idéntica a la secuencia de origen natural, o están codificados por una secuencia de nucleótidos sustancialmente idéntica, y son capaces de tener una o más actividades de la secuencia de origen natural.

Los cálculos de homología o identidad de secuencia entre secuencias (los términos se utilizan indistintamente en el presente documento) se realizan como sigue.

Para determinar el porcentaje de identidad de dos secuencias de aminoácidos, o de dos secuencias de ácidos nucleicos, las secuencias se alinean para una comparación óptima (por ejemplo, se pueden introducir brechas en una o ambas secuencias de aminoácidos o ácidos nucleicos para una alineación óptima y las secuencias no homólogas se pueden descartar para la comparación). En una realización preferida, la longitud de una secuencia de referencia alineada con fines de comparación es de al menos el 30%, preferiblemente de al menos el 40%, más preferiblemente de al menos el 50%, el 60%, y aún más preferiblemente de al menos el 70%, el 80%, el 90%, el 100% de la longitud de la secuencia de referencia. A continuación, se comparan los residuos de aminoácidos o nucleótidos en las posiciones de aminoácidos o nucleótidos correspondientes. Cuando una posición de la primera secuencia está ocupada por el mismo residuo de aminoácido o nucleótido que la posición correspondiente de la segunda secuencia, las moléculas son idénticas en esa posición (en el presente documento, "identidad" de aminoácidos o ácidos nucleicos equivale a "homología" de aminoácidos o ácidos nucleicos).

El porcentaje de identidad entre las dos secuencias es una función del número de posiciones idénticas compartidas por las secuencias, teniendo en cuenta el número de brechas, y la longitud de cada brecha, que es necesario introducir para una alineación óptima de las dos secuencias.

La comparación de secuencias y la determinación del porcentaje de identidad entre dos secuencias puede realizarse utilizando un algoritmo matemático. En una realización preferida, el porcentaje de identidad entre dos secuencias de aminoácidos se determina utilizando el algoritmo Needleman and Wunsch ((1970) J. Mol. Biol. 48:444-453) que se ha incorporado al programa GAP en el paquete de software GCG (disponible en www.gcg.com), utilizando una matriz Blossum 62 o una matriz PAM250, y un peso de brecha de 16, 14, 12, 10, 8 , 6 o 4 y un peso de longitud de 1, 2, 3, 4, 5 o 6. En aún otra realización preferida, el porcentaje de identidad entre dos secuencias de nucleótidos se determina utilizando el programa GAP en el paquete de software GCG (disponible en www.gcg.com), utilizando una matriz NWSgapdna.CMP y un peso de brecha de 40, 50, 60, 70 u 80 y un peso de longitud de 1, 2, 3, 4, 5 o 6. Un conjunto de parámetros particularmente preferido (y el que debería usarse a menos que se especifique lo contrario) es una matriz de puntuación Blossum 62 con una penalización de brecha de 12, una penalización de extensión de brecha de 4 y una penalización de brecha de desplazamiento de marco de 5.

El porcentaje de identidad entre dos secuencias de aminoácidos o nucleótidos puede determinarse utilizando el algoritmo de E. Meyers y W. Miller ((1989) CABIOS, 4:11-17) que se ha incorporado al programa ALIGN (versión 2.0), utilizando una tabla de residuos de peso PAM120, una penalización de longitud de brecha de 12 y una penalización de brecha de 4.

Las secuencias de ácido nucleico y proteínas descritas en el presente documento pueden utilizarse como "secuencia de consulta" para realizar una búsqueda en bases de datos públicas con el fin de, por ejemplo, identificar otros miembros de la familia o secuencias relacionadas. Tales búsquedas pueden realizarse utilizando los programas NBLAST y XBLAST (versión 2.0) de Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-10. Las búsquedas de nucleótidos BLAST pueden realizarse con el programa NBLAST, puntuación = 100, longitud de palabra = 12 para obtener secuencias de nucleótidos homólogas a una molécula de ácido nucleico (SEQ ID NO: 1) de la divulgación. Las búsquedas de proteínas BLAST pueden realizarse con el programa XBLAST, puntuación = 50, longitud de palabra = 3 para obtener secuencias de aminoácidos homólogas a las moléculas de proteínas de la divulgación. Para obtener alineaciones con brechas con fines de comparación, puede utilizarse Gapped BLAST como se describe en Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25:3389-3402. Al utilizar los programas BLAST y Gapped BLAST, se pueden utilizar los parámetros por defecto de los respectivos programas (por ejemplo, XBLAST y NBLAST). Véase www.ncbi.nlm.nih.gov.

Tal como se utiliza aquí, el término "hibrida en condiciones de baja rigurosidad, media rigurosidad, alta rigurosidad o muy alta rigurosidad" describe las condiciones de hibridación y lavado. Puede encontrarse orientación para realizar reacciones de hibridación en Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, N.Y. (1989), 6.3.1-6.3.6. En dicha referencia se describen métodos acuosos y no acuosos, pudiendo utilizarse cualquiera de ellos. Las condiciones específicas de hibridación a las que se hace referencia en el presente documento son las siguientes 1 ) condiciones de hibridación de baja rigurosidad en cloruro sódico 6X/citrato sódico (SSC) a aprocimadamente 45°C, seguidas de dos lavados en SSC 0.2X, 0.1% SDS al menos a 50°C (la temperatura de los lavados puede aumentarse a 55°C para condiciones de baja rigurosidad); 2) condiciones de hibridación de rigurosidad media en 6X SSC a aproximadamente 45 °C, seguido de uno o más lavados en 0,2X SSC, 0.1 % SDS a 60 °C; 3) condiciones de hibridación de alta rigurosidad en 6X SSC a aproximadamente 45°C, seguidas de uno o más lavados en 0.2X SSC, 0.1% SDS a 65°C; y preferiblemente 4) condiciones de hibridación de muy alta rigurosidad son 0.5M de fosfato sódico, 7% SDS a 65°C, seguidas de uno o más lavados en 0.2X SSC, 1% SDS a 65°C. Las condiciones de muy alta rigurosidad (4) son las preferidas y las que deben utilizarse a menos que se especifique lo contrario.

Se entiende que las moléculas de la presente divulgación pueden tener sustituciones de aminoácidos conservadoras o no esenciales adicionales, que no tienen un efecto sustancial sobre sus funciones.

El término "aminoácido" abarca todas las moléculas, naturales o sintéticas, que incluyen tanto una funcionalidad amino como una funcionalidad ácida y que pueden incluirse en un polímero de aminoácidos de origen natural. Los aminoácidos de ejemplo incluyen aminoácidos origen natural; análogos, derivados y congéneres de los mismos; análogos de aminoácidos con cadenas laterales variantes; y todos los estereoisómeros de cualquiera de los anteriores. En el presente documento, el término "aminoácido" incluye tanto los isómeros ópticos D o L como los peptidomiméticos.

Una "sustitución conservadora de aminoácidos" es aquella en la que el residuo de aminoácido se sustituye por un residuo de aminoácido con una cadena lateral similar. En la técnica se han definido familias de residuos de aminoácidos con cadenas laterales similares. Estas familias incluyen aminoácidos con cadenas laterales básicas (por ejemplo, lisina, arginina, histidina), cadenas laterales ácidas (por ejemplo, ácido aspártico, ácido glutámico), cadenas laterales polares no cargadas (por ejemplo, glicina, asparagina, glutamina, serina, treonina, tirosina, cisteína), cadenas laterales no polares (por ejemplo, alanina, valina, leucina, isoleucina, prolina, fenilalanina, metionina, triptófano), cadenas laterales beta-ramificadas (por ejemplo, treonina, valina, isoleucina) y cadenas laterales aromáticas (por ejemplo, tirosina, fenilalanina, triptófano, histidina).

Los términos "polipéptido", "péptido" y "proteína" (si es de cadena simple) se utilizan indistintamente en el presente documento para referirse a polímeros de aminoácidos de cualquier longitud. El polímero puede ser lineal o ramificado, puede comprender aminoácidos modificados y puede estar interrumpido por no aminoácidos. Los términos también abarcan un polímero de aminoácidos que ha sido modificado; por ejemplo, formación de enlaces disulfuro, glucosilación, lipidación, acetilación, fosforilación o cualquier otra manipulación, como la conjugación con un componente de etiquetado. El polipéptido puede aislarse de fuentes naturales, puede producirse mediante técnicas recombinantes a partir de un huésped eucariota o procariota, o puede ser producto de procedimientos sintéticos.

Los términos "ácido nucleico", "secuencia de ácido nucleico", "secuencia de nucleótidos" o "secuencia de polinucleótidos" y "polinucleótido" se utilizan indistintamente. Se refieren a una forma polimérica de nucleótidos de cualquier longitud, ya sean desoxirribonucleótidos o ribonucleótidos, o análogos de los mismos. El polinucleótido puede ser monocatenario o bicatenario, y si es monocatenario puede ser la cadena codificante o la cadena no codificante (antisentido). Un polinucleótido puede comprender nucleótidos modificados, como nucleótidos metilados y análogos de nucleótidos. La secuencia de nucleótidos puede estar interrumpida por componentes no nucleotídicos. Un polinucleótido puede modificarse aún más después de la polimerización, por ejemplo mediante conjugación con un componente de etiquetado. El ácido nucleico puede ser un polinucleótido recombinante o un polinucleótido de origen genómico, ADNc, semisintético o sintético que no se encuentra en la naturaleza o está unido a otro polinucleótido en una disposición no natural.

El término "aislado", tal y como se utiliza en el presente documento, se refiere al material que se retira de su entorno original o nativo (por ejemplo, el entorno natural si es de origen natural). Por ejemplo, un polinucleótido o polipéptido presente de origen natural en un animal vivo no está aislado, pero el mismo polinucleótido o polipéptido, separado por intervención humana de algunos o todos los materiales coexistentes en el sistema natural, está aislado. Dichos polinucleótidos podrían formar parte de un vector y/o dichos polinucleótidos o polipéptidos podrían formar parte de una composición, y aún así estar aislados en el sentido de que dicho vector o composición no forma parte del entorno en el que se encuentra en la naturaleza.

A continuación se describen con más detalle diversos aspectos de la divulgación. A lo largo de la especificación se incluyen definiciones adicionales.

Combinaciones de ejemplo de combinaciones de presentación de antígenos, combinaciones de células efectoras y combinaciones de inmunosupresión antitumoral

En el presente documento se proporcionan combinaciones de ejemplo de agentes terapéuticos de dos o más de las categorías de presentación de antígenos (A), células efectoras (B) e inmunosupresión antitumoral (C).

Tabla 6 : Lista de agentes terapéuticos de las categorías (A)-(C)

En algunas realizaciones, las combinaciones de la presente divulgación incluyen una o más de las siguientes:

A1B1, A1B2, A1B3, A1B4, A1B5, A1B6, A1B7, A1B8, A1B9, A1B10, A1B11, A1B12, A2B1, A2B2, A2B3, A2B4, A2B5, A2B6, A2B7, A2B8, A2B9, A2B10, A2B11, A2B12, A3B1, A3B2, A3B3, A3B4, A3B5, A3B6, A3B7, A3B8, A3B9, A3B10, A3B11, A3B12, A4B1, A4B2, A4B3, A4B4, A4B5, A4B6, A4B7, A4B8, A4B9, A4B10, A4B11, A4B12, A5B1, A5B2, A5B3, A5B4, A5B5, A5B6, A5B7, A5B8, A5B9, A5B10, A5B11, A5B12, A6B1, A6B2, A6B3, A6B4, A6B5, A6 B6 , A6B7, A6B8 , A6B9, A6B10, A6B11, A6B12, A7B1, A7B2, A7B3, A7B4, A7B5, A7B6, A7B7, A7B8, A7B9, A7B10, A7B11, A7B12, A8B1, A8B2, A8B3, A8B4, A8B5, A8B6 , A8B7, A8B8 , A8B9, A8B10, A8B11, A8B12, A9B1, A9B2, A9B3, A9B4, A9B5, A9B6, A9B7, A9B8, A9B9, A9B10, A9B11, A9B12, A10B1, A10B2, A10B3, A10B4, A10B5, A10B6, A10B7, A10B8, A10B9, A10B10, A10B11, A10B12, A11B1, A11B2, A11B3, A11B4, A11B5, A11B6, A11B7, A11B8, A11B9, A11B10, A11B11, A11B12, A1C1, A1C2, A1C3, A1C4, A1C5, A1C6, A1C7, A1C8, A1C9, A1C10, A1C11, A1C12, A1C13, A1C14, A1C15, A1C16, A1C17, A1C18, A1C19, A1C20, A1C21, A2C1, A2C2, A2C3, A2C4, A2C5, A2C6, A2C7, A2C8, A2C9, A2C10, A2C11, A2C12, A2C13, A2C14, A2C15, A2C16, A2C17, A2C18, A2C19, A2C20, A2C21, A3C1, A3C2, A3C3, A3C4, A3C5, A3C6, A3C7, A3C8, A3C9, A3C10, A3C11, A3C12, A3C13, A3C14, A3C15, A3C16, A3C17, A3C18, A3C19, A3C20, A3C21, A4C1, A4C2, A4C3, A4C4, A4C5, A4C6, A4C7, A4C8, A4C9, A4C10, A4C11, A4C12, A4C13, A4C14, A4C15, A4C16, A4C17, A4C18, A4C19, A4C20, A4C21, A5C1, A5C2, A5C3, A5C4, A5C5 A5C6, A5C7, A5C8, A5C9, A5C10, A5C11, A5C12, A5C13, A5C14, A5C15, A5C16, A5C17, A5C18, A5C19 A5C20, A5C21, A6C1, A6C2, A6C3, A6C4, A6C5, A6C6 , A6C7, A6C8 , A6C9, A6C10, A6C11, A6C12, A6C13 A6C14, A6C15, A6C16, A6C17, A6C18, A6C19, A6C20, A6C21, A7C1, A7C2, A7C3, A7C4, A7C5, A7C6 A7C7, A7C8, A7C9, A7C10, A7C11, A7C12, A7C13, A7C14, A7C15, A7C16, A7C17, A7C18, A7C19, A7C20 A7C21, A8C1, A8C2, A8C3, A8C4, A8C5, A8C6 , A8C7, A8C8 , A8C9, A8C10, A8C11, A8C12, A8C13, A8C14 A8C15, A8C16, A8C17, A8C18, A8C19, A8C20, A8C21, A9C1, A9C2, A9C3, A9C4, A9C5, A9C6, A9C7, A9C8 A9C9, A9C10, A9C11, A9C12, A9C13, A9C14, A9C15, A9C16, A9C17, A9C18, A9C19, A9C20, A9C21 A10C1, A10C2, A10C3, A10C4, A10C5, A10C6, A10C7, A10C8, A10C9, A10C10, A10C11, A10C12, A10C13 A10C14, A10C15, A10C16, A10C17, A10C18, A10C19, A10C20, A10C21, A11C1, A11C2, A11C3, A11C4 A11C5, A11C6, A11C7, A11C8, A11C9, A11C10, A11C11, A11C12, A11C13, A11C14, A11C15, A11C16 A11C17, A11C18, A11C19, A11C20, A11C21, B1C1, B1C2, B1C3, B1C4, B1C5, B1C6, B1C7, B1C8, B1C9 B1C10, B1C11, B1C12, B1C13, B1C14, B1C15, B1C16, B1C17, B1C18, B1C19, B1C20, B1C21, B2C1, B2C2 B2C3, B2C4, B2C5, B2C6, B2C7, B2C8, B2C9, B2C10, B2C11, B2C12, B2C13, B2C14, B2C15, B2C16 B2C17, B2C18, B2C19, B2C20, B2C21, B3C1, B3C2, B3C3, B3C4, B3C5, B3C6, B3C7, B3C8, B3C9, B3C10 B3C11, B3C12, B3C13, B3C14, B3C15, B3C16, B3C17, B3C18, B3C19, B3C20, B3C21, B4C1, B4C2, B4C3 B4C4, B4C5, B4C6, B4C7, B4C8, B4C9, B4C10, B4C11, B4C12, B4C13, B4C14, B4C15, B4C16, B4C17 B4C18, B4C19, B4C20, B4C21, B5C1, B5C2, B5C3, B5C4, B5C5, B5C6, B5C7, B5C8, B5C9, BSC10, B5C11 B5C12, B5C13, B5C14, B5C15, B5C16, B5C17, B5C18, B5C19, B5C20, B5C21, B6C1, B6C2, B6C3, B6C4 B6C5, B6C6 , B6C7, B6C8 , B6C9, B6C10, B6C11, B6C12, B6C13, B6C14, B6C15, B6C16, B6C17, B6C18 B6C19, B6C20, B6C21, B7C1, B7C2, B7C3, B7C4, B7C5, B7C6, B7C7, B7C8, B7C9, B7C10, B7C11, B7C12 B7C13, B7C14, B7C15, B7C16, B7C17, B7C18, B7C19, B7C20, B7C21, B8C1, B8C2, B8C3, B8C4, B8C5 B8C6 , B8C7, B8C8 , B8C9, B8C10, B8C11, B8C12, B8C13, B8C14, B8C15, B8C16, B8C17, B8C18, B8C19 B8C20, B8C21, B9C1, B9C2, B9C3, B9C4, B9C5, B9C6, B9C7, B9C8, B9C9, B9C10, B9C11, B9C12, B9C13 B9C14, B9C15, B9C16, B9C17, B9C18, B9C19, B9C20, B9C21, B10C1, B10C2, B10C3, B10C4, B10C5 B10C6, B10C7, B10C8, B10C9, B10C10, B10C11, B10C12, B10C13, B10C14, B10C15, B10C16, B10C17 B10C18, B10C19, B10C20, B10C21, B11C1, B11C2, B11C3, B11C4, B11C5, B11C6, B11C7, B11C8, B11C9 B11C10, B11C11, B11C12, B11C13, B11C14, B11C15, B11C16, B11C17, B11C18, B11C19, B11C20 B11C21, B12C1, B12C2, B12C3, B12C4, B12C5, B12C6, B12C7, B12C8, B12C9, B12C10, B12C11, B12C12 B12C13, B12C14, B12C15, B12C16, B12C17, B12C18, B12C19, B12C20, B12C21, A1B1C1, A1B1C2 A1B1C3, A1B1C4, A1B1C5, A1B1C6, A1B1C7, A1B1C8, A1B1C9, A1B1C10, A1B1C11, A1B1C12, A1B1C13 A1B1C14, A1B1C15, A1B1C16, A1B1C17, A1B1C18, A1B1C19, A1B1C20, A1B1C21, A1B2C1, A1B2C2 A1B2C3, A1B2C4, A1B2C5, A1B2C6, A1B2C7, A1B2C8, A1B2C9, A1B2C10, A1B2C11, A1B2C12, A1B2C13 A1B2C14, A1B2C15, A1B2C16, A1B2C17, A1B2C18, A1B2C19, A1B2C20, A1B2C21, A1B3C1, A1B3C2 A1B3C3, A1B3C4, A1B3C5, A1B3C6, A1B3C7, A1B3C8, A1B3C9, A1B3C10, A1B3C11, A1B3C12, A1B3C13 A1B3C14, A1B3C15, A1B3C16, A1B3C17, A1B3C18, A1B3C19, A1B3C20, A1B3C21, A1B4C1, A1B4C2 A1B4C3, A1B4C4, A1B4C5, A1B4C6, A1B4C7, A1B4C8, A1B4C9, A1B4C10, A1B4C11, A1B4C12, A1B4C13 A1B4C14, A1B4C15, A1B4C16, A1B4C17, A1B4C18, A1B4C19, A1B4C20, A1B4C21, A1B5C1, A1B5C2 A1B5C3, A1B5C4, A1B5C5, A1B5C6, A1B5C7, A1B5C8, A1B5C9, A1B5C10, A1B5C11, A1B5C12, A1B5C13 A1B5C14, A1B5C15, A1B5C16, A1B5C17, A1B5C18, A1B5C19, A1B5C20, 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A10B11C1, A10B11C2, A10B11C3, A10B11C4, A10B11C5, A10B11C6, A10B11C7, A10B11C8, A10B11C9, A10B11C10, A10B11C11, A10B11C12, A10B11C13, A10B11C14, A10B11C15, A10B11C16, A10B11C17, A10B11C18, A10B11C19, A10B11C20, A10B11C21, A10B12C1, A10B12C2, A10B12C3, A10B12C4, A10B12C5, A10B12C6, A10B12C7, A10B12C8, A10B12C9, A10B12C10, A10B12C11, A10B12C12, A10B12C13, A10B12C14, A10B12C15, A10B12C16, A10B12C17, A10B12C18, A10B12C19, A10B12C20, A10B12C21, A11B1C1, A11B1C2, A11B1C3, A11B1C4, A11B1C5, A11B1C6, A11B1C7, A11B1C8, A11B1C9, A11B1C10, A11B1C11, A11B1C12, A11B1C13, A11B1C14, A11B1C15, A11B1C16, A11B1C17, A11B1C18, A11B1C19, A11B1C20, A11B1C21, A11B2C1, A11B2C2, A11B2C3, A11B2C4, A11B2C5, A11B2C6, A11B2C7, A11B2C8, A11B2C9, A11B2C10, A11B2C11, A11B2C12, A11B2C13, A11B2C14, A11B2C15, A11B2C16, A11B2C17, A11B2C18, A11B2C19, A11B2C20, A11B2C21, A11B3C1, A11B3C2, A11B3C3, A11B3C4, A11B3C5, A11B3C6, A11B3C7, A11B3C8, A11B3C9, A11B3C10, A11B3C11, A11B3C12, A11B3C13, A11B3C14, A11B3C15, A11B3C16, A11B3C17, A11B3C18, A11B3C19, A11B3C20, A11B3C21, A11B4C1, A11B4C2, A11B4C3, A11B4C4, A11B4C5, A11B4C6, A11B4C7, A11B4C8, A11B4C9, A11B4C10, A11B4C11, A11B4C12, A11B4C13, A11B4C14, A11B4C15, A11B4C16, A11B4C17, A11B4C18, A11B4C19, A11B4C20, A11B4C21, A11B5C1, A11B5C2, A11B5C3, A11B5C4, A11B5C5, A11B5C6, A11B5C7, A11B5C8, A11B5C9, A11B5C10, A11B5C11, A11B5C12, A11B5C13, A11B5C14, A11B5C15, A11B5C16, A11B5C17, A11B5C18, A11B5C19, A11B5C20, A11B5C21, A11B6C1, A11B6C2, A11B6C3, A11B6C4, A11B6C5, A11B6C6, A11B6C7, A11B6C8, A11B6C9, A11B6C10, A11B6C11, A11B6C12, A11B6C13, A11B6C14, A11B6C15, A11B6C16, A11B6C17, A11B6C18, A11B6C19, A11B6C20, A11B6C21, A11B7C1, A11B7C2, A11B7C3, A11B7C4, A11B7C5, A11B7C6, A11B7C7, A11B7C8, A11B7C9, A11B7C10, A11B7C11, A11B7C12, A11B7C13, A11B7C14, A11B7C15, A11B7C16, A11B7C17, A11B7C18, A11B7C19, A11B7C20, A11B7C21, A11B8C1, A11B8C2, A11B8C3, A11B8C4, A11B8C5, A11B8C6, A11B8C7, A11B8C8, A11B8C9, A11B8C10, A11B8C11, A11B8C12, A11B8C13, A11B8C14, A11B8C15, A11B8C16, A11B8C17, A11B8C18, A11B8C19, A11B8C20, A11B8C21, A11B9C1, A11B9C2, A11B9C3, A11B9C4, A11B9C5, A11B9C6, A11B9C7, A11B9C8, A11B9C9, A11B9C10, A11B9C11, A11B9C12, A11B9C13, A11B9C14, A11B9C15, A11B9C16, A11B9C17, A11B9C18, A11B9C19, A11B9C20, A11B9C21, A11B10C1, A11B10C2, A11B10C3, A11B10C4, A11B10C5, A11B10C6, A11B10C7, A11B10C8, A11B10C9, A11B10C10, A11B10C11, A11B10C12, A11B10C13, A11B10C14, A11B10C15, A11B10C16, A11B10C17, A11B10C18, A11B10C19, A11B10C20, A11B10C21, A11B11C1, A11B11C2, A11B11C3, A11B11C4, A11B11C5, A11B11C6, A11B11C7, A11B11C8, A11B11C9, A11B11C10, A11B11C11, A11B11C12, A11B11C13, A11B11C14, A11B11C15, A11B11C16, A11B11C17, A11B11C18, A11B11C19, A11B11C20, A11B11C21, A11B12C1, A11B12C2, A11B12C3, A11B12C4, A11B12C5, A11B12C6, A11B12C7, A11B12C8, A11B12C9, A11B12C10, A11B12C11, A11B12C12, A11B12C13, A11B12C14, A11B12C15, A11B12C16, A11B12C17, A11B12C18, A11B12C19, A11B12C20, o A11B12C21.

Moléculas de anticuerpos

En una realización, la molécula de anticuerpo se une a un PD-1 de mamífero, por ejemplo, humano. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo se une específicamente a un epítopo, por ejemplo, lineal o conformacional, (por ejemplo, un epítopo como se describe en el presente documento) en PD-1.

Tal como se utiliza en el presente documento, el término "molécula de anticuerpo" se refiere a una proteína, por ejemplo, una cadena de inmunoglobulina o fragmento de la misma, que comprende al menos una secuencia de dominio variable de inmunoglobulina. El término "molécula de anticuerpo" incluye, por ejemplo, un anticuerpo monoclonal (incluido un anticuerpo de longitud completa que tiene una región Fc de inmunoglobulina). En una realización, una molécula de anticuerpo comprende un anticuerpo de longitud completa, o una cadena de inmunoglobulina de longitud completa. En una realización, una molécula de anticuerpo comprende una unión a antígeno o fragmento funcional de un anticuerpo de longitud completa, o una cadena de inmunoglobulina de longitud completa. En una realización, una molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo multiespecífica, por ejemplo, comprende una pluralidad de secuencias de dominio variable de inmunoglobulina, en la que una primera secuencia de dominio variable de inmunoglobulina de la pluralidad tiene especificidad de unión para un primer epítopo y una segunda secuencia de dominio variable de inmunoglobulina de la pluralidad tiene especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, una molécula de anticuerpo multiespecífico es una molécula de anticuerpo biespecífico. Un anticuerpo biespecífico tiene especificidad para no más de dos antígenos. Una molécula de anticuerpo biespecífico se caracteriza por una primera secuencia de dominio variable de inmunoglobulina que tiene especificidad de unión para un primer epítopo y una segunda secuencia de dominio variable de inmunoglobulina que tiene especificidad de unión para un segundo epítopo.

En una realización, una molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífica y se une a un único epítopo. Por ejemplo, una molécula de anticuerpo monoespecífica que tiene una pluralidad de secuencias de dominio variable de inmunoglobulina, cada una de las cuales se une al mismo epítopo.

En una realización, una molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo multiespecífica, por ejemplo, comprende una pluralidad de secuencias de dominios variables de inmunoglobulina, en la que una primera secuencia de dominio variable de inmunoglobulina de la pluralidad tiene especificidad de unión para un primer epítopo y una segunda secuencia de dominio variable de inmunoglobulina de la pluralidad tiene especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, los epítopos primero y segundo se encuentran en el mismo antígeno, por ejemplo, la misma proteína (o subunidad de una proteína multimérica). En una realización, los epítopos primero y segundo se solapan. En una realización, los epítopos primero y segundo no se solapan. En una realización, los epítopos primero y segundo se encuentran en antígenos diferentes, por ejemplo, proteínas diferentes (o subunidades diferentes de una proteína multimérica). En una realización, una molécula de anticuerpo multiespecífico comprende un tercer, cuarto o quinto dominio variable de inmunoglobulina. En una realización, una molécula de anticuerpo multiespecífico es una molécula de anticuerpo biespecífico, una molécula de anticuerpo triespecífico o una molécula de anticuerpo tetraespecífico,

En una realización, una molécula de anticuerpo multiespecífico es una molécula de anticuerpo biespecífico. Un anticuerpo biespecífico tiene especificidad para no más de dos antígenos. Una molécula de anticuerpo biespecífico se caracteriza por una primera secuencia de dominio variable de inmunoglobulina que tiene especificidad de unión para un primer epítopo y una segunda secuencia de dominio variable de inmunoglobulina que tiene especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, los epítopos primero y segundo se encuentran en el mismo antígeno, por ejemplo, la misma proteína (o subunidad de una proteína multimérica). En una realización, los epítopos primero y segundo se solapan. En una realización, los epítopos primero y segundo no se solapan. En una realización, los epítopos primero y segundo se encuentran en antígenos diferentes, por ejemplo, proteínas diferentes (o subunidades diferentes de una proteína multimérica). En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico comprende una secuencia de dominio variable de cadena pesada y una secuencia de dominio variable de cadena ligera que tienen especificidad de unión para un primer epítopo y una secuencia de dominio variable de cadena pesada y una secuencia de dominio variable de cadena ligera que tienen especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico comprende medio anticuerpo con especificidad de unión para un primer epítopo y medio anticuerpo con especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico comprende medio anticuerpo, o fragmento del mismo, con especificidad de unión para un primer epítopo y medio anticuerpo, o fragmento del mismo, con especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico comprende un scFv, o fragmento del mismo, con especificidad de unión para un primer epítopo y un scFv, o fragmento del mismo, con especificidad de unión para un segundo epítopo. En una realización, el primer epítopo se localiza en PD-1 y el segundo epítopo se localiza en TIM-3, LAG-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2.

En una realización, una molécula de anticuerpo comprende un diacuerpo y una molécula de cadena simple, así como un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo (por ejemplo, Fab, F(ab')2, y Fv). Por ejemplo, una molécula de anticuerpo puede incluir una secuencia de dominio variable de cadena pesada (H) (abreviada en el presente documento como VH), y una secuencia de dominio variable de cadena ligera (L) (abreviada en el presente documento como VL). En una realización, una molécula de anticuerpo comprende o consiste en una cadena pesada y una cadena ligera (denominada en el presente documento medio anticuerpo). En otro ejemplo, una molécula de anticuerpo incluye dos secuencias de dominio variable de cadena pesada (H) y dos secuencias de dominio variable de cadena ligera (L), formando así dos sitios de unión a antígeno, como Fab, Fab', F(ab')2, Fc, Fd, Fd', Fv, anticuerpos de cadena simple (scFv por ejemplo), anticuerpos de dominio variable simple, diacuerpos (Dab) (bivalentes y biespecíficos), y anticuerpos quiméricos (por ejemplo, humanizados), que pueden producirse modificando anticuerpos enteros o sintetizándolos de novo mediante tecnologías de ADN recombinante. Estos fragmentos de anticuerpos funcionales conservan la capacidad de unirse selectivamente a su antígeno o receptor respectivo. Los anticuerpos y fragmentos de anticuerpos pueden ser de cualquier clase de anticuerpos, incluyendo, pero sin limitarse a, IgG, IgA, IgM, IgD e IgE, y de cualquier subclase (por ejemplo, IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4) de anticuerpos. La preparación de moléculas de anticuerpos puede ser monoclonal o policlonal. Una molécula de anticuerpo también puede ser un anticuerpo humano, humanizado, injertado con CDR o generadoin vitro.El anticuerpo puede tener una región constante de cadena pesada elegida entre, por ejemplo, IgG1, IgG2, IgG3 o IgG4. El anticuerpo también puede tener una cadena ligera elegida entre, por ejemplo, kappa o lambda. El término "inmunoglobulina" (Ig) se utiliza indistintamente con el término "anticuerpo" en el presente documento.

Ejemplos de fragmentos de unión a antígeno de una molécula de anticuerpo incluyen: (i) un fragmento Fab, un fragmento monovalente que consiste en los dominios VL, VH, CL y CH1; (ii) un fragmento F(ab')2, un fragmento bivalente que comprende dos fragmentos Fab unidos por un puente disulfuro en la región bisagra; (iii) un fragmento Fd que consiste en los dominios VH y CH1; (iv) un fragmento Fv que consiste en los dominios VL y VH de un solo brazo de un anticuerpo, (v) un fragmento diacuerpo (dAb), que consiste en un dominio VH; (vi) un dominio variable camélido o camelizado; (vii) un Fv de cadena única (scFv), véase por ejemplo, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; y Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883); viii) un anticuerpo de dominio único. Estos fragmentos de anticuerpo se obtienen mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia, y los fragmentos se analizan para determinar su utilidad del mismo modo que los anticuerpos intactos.

El término "anticuerpo" incluye moléculas intactas, así como fragmentos funcionales de las mismas. Las regiones constantes de los anticuerpos pueden alterarse, por ejemplo, mutarse, para modificar las propiedades del anticuerpo (por ejemplo, para aumentar o disminuir una o más de: La unión al receptor Fc, la glicosilación del anticuerpo, el número de residuos de cisteína, la función de las células efectoras o la función del complemento).

Las moléculas de anticuerpo también pueden ser anticuerpos de dominio único. Los anticuerpos de dominio único pueden incluir anticuerpos cuyas regiones determinantes complementarias forman parte de un polipéptido de dominio único. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, anticuerpos de cadena pesada, anticuerpos naturalmente desprovistos de cadenas ligeras, anticuerpos de dominio único derivados de anticuerpos convencionales de 4 cadenas, anticuerpos de ingeniería y andamiajes de dominio único distintos de los derivados de anticuerpos. Los anticuerpos de dominio único pueden ser cualquiera de los anticuerpos de dominio único actuales o futuros. Los anticuerpos de dominio único pueden derivarse de cualquier especie, incluyendo, pero sin limitarse a, ratón, humano, camello, llama, pez, tiburón, cabra, conejo y bovino. Según otro aspecto de la divulgación, un anticuerpo de dominio único es un anticuerpo de dominio único natural conocido como anticuerpo de cadena pesada desprovisto de cadenas ligeras. Tales anticuerpos de dominio único se divulgan en WO 9404678, por ejemplo. Por razones de claridad, este dominio variable derivado de un anticuerpo de cadena pesada naturalmente desprovisto de cadena ligera se conoce aquí como VHH o nanobody para distinguirlo del VH convencional de las inmunoglobulinas de cuatro cadenas. Dicha molécula VHH puede derivarse de anticuerpos criados en especiesCamelidae,por ejemplo en camello, llama, dromedario, alpaca y guanaco. Otras especies además deCamelidaepueden producir anticuerpos de cadena pesada naturalmente desprovistos de cadena ligera; tales VHH están dentro del alcance de la divulgación.

Las regiones VH y VL pueden subdividirse en regiones de hipervariabilidad, denominadas "regiones determinantes de la complementariedad" (CDR), intercaladas con regiones más conservadas, denominadas "regiones marco" (FR o FW).

La extensión de la región marco y de las CDR se ha definido con precisión mediante varios métodos (véase, Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242; Chothia, C. et al. (1987) J. Mol. Biol. 196:901-917; y la definición AbM utilizada por el software de modelado de anticuerpos AbM de Oxford Molecular. Véase, en general, por ejemplo, Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains. En: Antibody Engineering Lab Manual (Ed.: Duebel, S. y Kontermann, R., Springer-Verlag, Heidelberg).

Los términos "región determinante de la complementariedad" y "CDR", tal como se utilizan aquí, se refieren a las secuencias de aminoácidos dentro de las regiones variables de los anticuerpos que confieren especificidad al antígeno y afinidad de unión. En general, hay tres CDR en cada región variable de cadena pesada (HCDR1, HCDR2, HCDR3) y tres CDR en cada región variable de cadena ligera (LCDR1, LCDR2, Lc Dr 3).

Los límites precisos de la secuencia de aminoácidos de una CDR dada pueden determinarse utilizando cualquiera de una serie de esquemas bien conocidos, incluidos los descritos por Kabat et al. (1991), "Sequences of Proteins of Immunological Interest," 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (esquema de numeración "Kabat"), Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273,927-948 (esquema de numeración "Chothia"). En el presente documento, las CDR definidas según el esquema de numeración "Chothia" también se denominan a veces "bucles hipervariables".

Por ejemplo, bajo Kabat, los residuos de aminoácidos CDR en el dominio variable de cadena pesada (VH) están numerados 31-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2), y 95-102 (HCDR3); y los residuos de aminoácidos C<d>R en el dominio variable de cadena ligera (VL) están numerados 24-34 (LCd R1), 50-56 (LCDR2), y 89-97 (LCDR3). Según Chothia, los aminoácidos CDR en el VH se numeran 26-32 (HCDR1), 52-56 (h Cd R2), y 95-102 (HCDR3); y los residuos de aminoácidos en el VL se numeran 26-32 (LCDR1), 50-52 (LCDR2), y 91-96 (LCDR3). Combinando las definiciones de CDR de Kabat y Chothia, las CDR consisten en los residuos de aminoácidos 26-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2) y 95-102 (HCDR3) en la VH humana y los residuos de aminoácidos 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) y 89-97 (LCDR3) en la VL humana.

Generalmente, a menos que se indique específicamente, las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 pueden incluir cualquier combinación de una o más CDR de Kabat y/o bucles hipervariables de Chothia, por ejemplo, descritos en la Tabla 1. En una realización, se usan las siguientes definiciones para las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 descritas en la Tabla 1: HCDR1 según las definiciones CDR combinadas de Kabat y Chothia, y HCCDRs 2-3 y LCCDRs 1-3 según la definición CDR de Kabat. Bajo todas las definiciones, cada VH y VL incluye típicamente tres CDRs y cuatro FRs, dispuestas desde el amino-terminal al carboxi-terminal en el siguiente orden: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.

Tal como se utiliza en el presente documento, una "secuencia de dominio variable de inmunoglobulina" se refiere a una secuencia de aminoácidos que puede formar la estructura de un dominio variable de inmunoglobulina. Por ejemplo, la secuencia puede incluir toda o parte de la secuencia de aminoácidos de un dominio variable de origen natural. Por ejemplo, la secuencia puede o no incluir uno, dos o más aminoácidos N- o C-terminales, o puede incluir otras alteraciones que sean compatibles con la formación de la estructura de la proteína.

El término "sitio de unión a antígeno" se refiere a la parte de una molécula de anticuerpo que comprende determinantes que forman una interfaz que se une al polipéptido PD-1, o a un epítopo del mismo. Con respecto a las proteínas (o miméticos de proteínas), el sitio de unión a antígeno incluye típicamente uno o más bucles (de al menos cuatro aminoácidos o miméticos de aminoácidos) que forman una interfaz que se une al polipéptido PD-1. Típicamente, el sitio de unión a antígeno de una molécula de anticuerpo incluye al menos una o dos CDR y/o bucles hipervariables, o más típicamente al menos tres, cuatro, cinco o seis CDR y/o bucles hipervariables.

Los términos "competir" o "competencia cruzada" se utilizan indistintamente en el presente documento para referirse a la capacidad de una molécula de anticuerpo de interferir con la unión de una molécula de anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 proporcionada en el presente documento, a una diana, por ejemplo, PD-1 humana. La interferencia con la unión puede ser directa o indirecta (por ejemplo, a través de una modulación alostérica de la molécula de anticuerpo o de la diana). El grado en que una molécula de anticuerpo es capaz de interferir con la unión de otra molécula de anticuerpo a la diana, y por tanto si puede decirse que compite, puede determinarse usando un ensayo de unión competitiva, por ejemplo, un ensayo FACS, un ensayo ELISA o BIACORE. En algunas realizaciones, un ensayo de unión en competición es un ensayo de competición cuantitativo. En algunas realizaciones, se dice que una primera molécula de anticuerpo anti-PD-1 compite por la unión a la diana con una segunda molécula de anticuerpo anti-PD-1 cuando la unión de la primera molécula de anticuerpo a la diana se reduce en un 10% o más, por ejemplo, 20% o más, 30% o más, 40% o más, 50% o más, 55% o más, 60% o más, 65% o más, 70% o más, 75% o más, 80% o más, 85% o más, 90% o más, 95% o más, 98% o más, 99% o más en un ensayo de competición de unión (por ejemplo, un ensayo de competición descrito en el presente documento).

Los términos "anticuerpo monoclonal" o "composición de anticuerpo monoclonal" utilizados en el presente documento se refieren a una preparación de moléculas de anticuerpo de composición molecular única. Una composición de anticuerpo monoclonal muestra una única especificidad de unión y afinidad por un epítopo particular. Un anticuerpo monoclonal puede fabricarse mediante tecnología de hibridoma o mediante métodos que no utilizan tecnología de hibridoma (por ejemplo, métodos recombinantes).

Una proteína "efectivamente humana" es una proteína que no evoca una respuesta de anticuerpos neutralizantes, por ejemplo, la respuesta de anticuerpos antimurinos humanos (HAMA). La respuesta HAMA puede ser problemática en varias circunstancias, por ejemplo, si la molécula de anticuerpo se administra repetidamente, por ejemplo, en el tratamiento de una enfermedad crónica o recurrente. Una respuesta HAMA puede hacer que la administración repetida de anticuerpos sea potencialmente ineficaz debido a una mayor eliminación de anticuerpos del suero (véase, por ejemplo, Saleh et al. Cancer Immunol. Immunother., 32: 180 190 (1990)) y también debido a posibles reacciones alérgicas (véase, por ejemplo, LoBuglio et al., Hybridoma, 5:5117-5123 (1986)).

La molécula de anticuerpo puede ser un anticuerpo policlonal o monoclonal. En otras realizaciones, el anticuerpo puede ser producido recombinantemente, por ejemplo, producido por visualización de fagos o por métodos combinatorios.

Los métodos combinatorios y de visualización de fagos para generar anticuerpos son conocidos en la técnica (como se describe en, por ejemplo, Ladner et al. Patente U.S. No. 5,223,409; Kang et al. Publicación Internacional No. WO 92/18619; Dower et al. Publicación Internacional No. WO 91/17271; Winter et al. Publicación Internacional WO 92/20791; Markland et al. Publicación Internacional No. WO 92/15679; Breitling et al. Publicación Internacional WO 93/01288; McCafferty et al. Publicación Internacional No. WO 92/01047; Garrard et al. Publicación Internacional No. WO 92/09690; Ladner et al. Publicación Internacional No. WO 90/02809; Fuchs et al. (1991) Bio/Technology 9:1370-1372; Hay et al. (1992) Hum Antibody Hybridomas 3:81-85; Huse et al. (1989) Science 246:1275-1281; Griffths et al. (1993) EMBO J 12:725-734; Hawkins et al. (1992) J Mol Biol 226:889-896; Clackson et al. (1991) Nature 352:624-628; Gram et al. (1992) PNAS 89:3576-3580; Garrad et al. (1991) Bio/Technology 9:1373-1377; Hoogenboom et al. (1991) Nuc Acid Res 19:4133-4137; y Barbas et al. (1991) PNAS 88:7978-7982).

En una realización, el anticuerpo es un anticuerpo totalmente humano (por ejemplo, un anticuerpo fabricado en un ratón que ha sido modificado genéticamente para producir un anticuerpo a partir de una secuencia de inmunoglobulina humana), o un anticuerpo no humano, por ejemplo, un anticuerpo de roedor (ratón o rata), cabra, primate (por ejemplo, mono), camello. Preferiblemente, el anticuerpo no humano es un roedor (anticuerpo de ratón o rata). Los métodos de producción de anticuerpos de roedores son conocidos en la técnica.

Los anticuerpos monoclonales humanos pueden generarse utilizando ratones transgénicos portadores de los genes de inmunoglobulina humana en lugar del sistema de ratón. Los esplenocitos de estos ratones transgénicos inmunizados con el antígeno de interés se utilizan para producir hibridomas que secretan mAbs humanos con afinidades específicas para epítopos de una proteína humana (véase, por ejemplo, Wood et al. Solicitud Internacional WO 91/00906, Kucherlapati et al. Publicación PCT WO 91/10741; Lonberg et al. Solicitud Internacional WO 92/03918; Kay et al. Solicitud Internacional 92/03917; Lonberg, N. et al. 1994 Nature 368:856-859; Green, L.L. et al. 1994 Nature Genet. 7:13-21; Morrison, S.L. et al. 1994 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-6855; Bruggeman et al. 1993 Year Immunol 7:33-40; Tuaillon et al. 1993 PNAS 90:3720-3724; Bruggeman et al. 1991 Eur J Immunol 21:1323-1326).

Un anticuerpo puede ser uno en el que la región variable, o una parte de la misma, por ejemplo, las CDR, se generan en un organismo no humano, por ejemplo, una rata o un ratón. Los anticuerpos quiméricos, injertados con CDR y humanizados están dentro de la divulgación. Los anticuerpos generados en un organismo no humano, por ejemplo, una rata o un ratón, y luego modificados, por ejemplo, en el marco variable o la región constante, para disminuir la antigenicidad en un humano están dentro de la divulgación.

Los anticuerpos quiméricos pueden producirse mediante técnicas de ADN recombinante conocidas en la técnica (véase Robinson et al., Publicación internacional de patente PCT/US86/02269; Akira, et al., Solicitud de patente europea 184,187; Taniguchi, M., Solicitud de patente europea 171,496; Morrison et al., Solicitud de patente europea 173,494; Neuberger et al., Solicitud Internacional W o 86/01533; Cabilly et al. Patente U.S. No. 4,816,567; Cabilly et al., Solicitud de patente europea 125,023; Better et al. (1988 Science 240:1041-1043); Liu et al. (1987) PNAS 84:3439-3443; Liu et al., 1987, J. Immunol. 139:3521-3526; Sun et al. (1987) PNAS 84:214-218; Nishimura et al., 1987, Canc. Res. 47:999-1005; Wood et al. (1985) Nature 314:446-449; y Shaw et al., 1988, J. Natl Cancer Inst. 80:1553-1559).

Un anticuerpo humanizado o injertado con CDR tendrá al menos una o dos, pero generalmente las tres CDR receptoras (de cadenas de inmunoglobulina pesada y/o ligera) sustituidas por una CDR donante. El anticuerpo puede sustituirse con al menos una parte de una CDR no humana o sólo algunas de las CDR pueden sustituirse con CDR no humanas. Sólo es necesario sustituir el número de CDR necesarias para la unión del anticuerpo humanizado a PD-1. Preferiblemente, el donante será un anticuerpo de roedor, por ejemplo, un anticuerpo de rata o ratón, y el receptor será un marco humano o un marco consenso humano. Típicamente, la inmunoglobulina que proporciona las CDR se denomina "donante" y la inmunoglobulina que proporciona el marco se denomina "aceptor". En una realización, la inmunoglobulina donante es no humana (por ejemplo, un roedor). El marco aceptor es un marco de origen natural (por ejemplo, humano) o un marco de consenso, o una secuencia idéntica en un 85% o más, preferiblemente en un 90%, 95%, 99% o más.

Como se usa aquí, el término "secuencia consenso" se refiere a la secuencia formada a partir de los aminoácidos (o nucleótidos) que ocurren con más frecuencia en una familia de secuencias relacionadas (Véase por ejemplo, Winnaker, From Genes to Clones (Verlagsgesellschaft, Weinheim, Alemania 1987). En una familia de proteínas, cada posición en la secuencia de consenso está ocupada por el aminoácido que aparece con más frecuencia en esa posición en la familia. Si hay dos aminoácidos con la misma frecuencia, cualquiera de ellos puede incluirse en la secuencia de consenso. Un "marco de consenso" se refiere a la región marco en la secuencia de inmunoglobulina de consenso.

Un anticuerpo puede humanizarse por métodos conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, Morrison, S. L., 1985, Science 229:1202-1207, por Oi et al., 1986, BioTechniques 4:214, y por Queen et al. US 5,585,089, US 5,693,761 y US 5,693,762).

Los anticuerpos humanizados o injertados con CDR pueden producirse por injerto de CDR o sustitución de CDR, en los que pueden sustituirse una, dos o todas las CDR de una cadena de inmunoglobulina. Véase, por ejemplo, Patente U.S. 5,225,539; Jones et al. 1986 Nature 321:552-525; Verhoeyan et al. 1988 Science 239: 1534; Beidler et al. 1988 J. Immunol. 141:4053-4060; Winter US 5,225,539,. Winter describe un método de injerto de CDR que puede utilizarse para preparar los anticuerpos humanizados de la presente divulgación (solicitud de patente del Reino Unido G2188638A, presentada el 26 de marzo de 1987; Winter US 5,225,539).

También están dentro del alcance de la divulgación los anticuerpos humanizados en los que se han sustituido, eliminado o añadido aminoácidos específicos. Los criterios para seleccionar aminoácidos del donante se describen en US 5,585,089, por ejemplo, columnas 12-16 de US 5,585,089, por ejemplo, columnas 12-16 de US 5,585,089. Otras técnicas para humanizar anticuerpos se describen en Padlan et al. EP 519596 A1, publicado el 23 de diciembre de 1992.

La molécula de anticuerpo puede ser un anticuerpo de cadena simple. Puede diseñarse un anticuerpo de cadena simple (scFV) (véase, por ejemplo, Colcher, D. et al. (1999) Ann N Y Acad Sci 880:263-80; y Reiter, Y. (1996) Clin Cancer Res 2:245-52). El anticuerpo de cadena simple puede dimerizarse o multimerizarse para generar anticuerpos multivalentes con especificidades para diferentes epítopos de la misma proteína diana.

En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo tiene una región constante de cadena pesada elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD e IgE; en particular, elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada (por ejemplo, humanas) de IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4. En otra realización, la molécula de anticuerpo tiene una región constante de cadena ligera elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena ligera (por ejemplo, humana) de kappa o lambda. La región constante puede alterarse, por ejemplo, mutarse, para modificar las propiedades del anticuerpo (por ejemplo, para aumentar o disminuir una o más de: la unión al receptor Fc, la glicosilación del anticuerpo, el número de residuos de cisteína, la función de las células efectoras y/o la función del complemento). En una realización, el anticuerpo tiene: función efectora; y puede fijar el complemento. En otras realizaciones, el anticuerpo no recluta células efectoras ni fija el complemento. En otra realización, el anticuerpo tiene una capacidad reducida o nula de unirse a un receptor Fc. Por ejemplo, es un isotipo o subtipo, fragmento u otro mutante, que no admite la unión a un receptor Fc, por ejemplo, tiene una región de unión al receptor Fc mutagenizada o suprimida.

Los métodos para alterar la región constante de un anticuerpo son conocidos en la técnica. Los anticuerpos con función alterada, por ejemplo, afinidad alterada por un ligando efector, tal como FcR en una célula, o el componente C1 del complemento pueden producirse sustituyendo al menos un residuo de aminoácido en la porción constante del anticuerpo por un residuo diferente (véase, por ejemplo, EP 388,151 A1, Patente U.S. No. 5,624,821 y Patente U.S. No. 5,648,260,). Podrían describirse alteraciones de tipo similar que si se aplicaran a la inmunoglobulina murina, o de otras especies, reducirían o eliminarían estas funciones.

Una molécula de anticuerpo puede derivarse o unirse a otra molécula funcional (por ejemplo, otro péptido o proteína). Tal como se utiliza en el presente documento, una molécula de anticuerpo "derivada" es aquella que ha sido modificada. Los métodos de derivación incluyen, pero no se limitan a, la adición de una fracción fluorescente, un radionucleótido, una toxina, una enzima o un ligando de afinidad como la biotina. Por consiguiente, las moléculas de anticuerpo de la divulgación pretenden incluir formas derivadas y modificadas de otro modo de los anticuerpos descritos en el presente documento, incluidas las moléculas de inmunoadhesión. Por ejemplo, una molécula de anticuerpo puede estar funcionalmente unida (por acoplamiento químico, fusión genética, asociación no covalente o de otro modo) a una o más entidades moleculares, como otro anticuerpo (por ejemplo, un anticuerpo biespecífico o un diacuerpo), un agente detectable, un agente citotóxico, un agente farmacéutico, y/o una proteína o péptido que puede mediar la asociación del anticuerpo o porción de anticuerpo con otra molécula (como una región central de estreptavidina o una etiqueta de polihistidina).

Un tipo de molécula de anticuerpo derivado se produce mediante la entrecruzamiento de dos o más anticuerpos (del mismo tipo o de tipos diferentes, por ejemplo, para crear anticuerpos biespecíficos). Los reticulantes adecuados incluyen los heterobifuncionales, que tienen dos grupos reactivos distintos separados por un espaciador apropiado (por ejemplo, éster de m-maleimidobenzoil-N-hidroxisuccinimida) u homobifuncionales (por ejemplo, suberato de disuccinimidilo). Tales enlazadores están disponibles en Pierce Chemical Company, Rockford, Ill.

Los agentes detectables útiles con los que se puede derivar (o etiquetar) una molécula de anticuerpo de la divulgación incluyen compuestos fluorescentes, diversas enzimas, grupos prostéticos, materiales luminiscentes, materiales bioluminiscentes, átomos metálicos emisores fluorescentes, por ejemplo, europio (Eu) y otros antanuros, y materiales radiactivos (descritos a continuación). Los agentes detectables fluorescentes de ejemplo incluyen fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína, rodamina, cloruro de 5dimetilamina-1-naftalenosulfonilo, ficoeritrina. Un anticuerpo también puede derivarse con enzimas detectables, como fosfatasa alcalina, peroxidasa de rábano picante, p-galactosidasa, acetilcolinesterasa, glucosa oxidasa. Cuando un anticuerpo se derivatiza con una enzima detectable, se detecta añadiendo reactivos adicionales que la enzima utiliza para producir un producto de reacción detectable. Por ejemplo, cuando está presente el agente detectable peroxidasa de rábano picante, la adición de peróxido de hidrógeno y diaminobencidina da lugar a un producto de reacción coloreado, que es detectable. Una molécula de anticuerpo también puede derivarse con un grupo prostético (por ejemplo, estreptavidina/biotina y avidina/biotina). Por ejemplo, un anticuerpo puede derivarse con biotina y detectarse mediante la medición indirecta de la unión de avidina o estreptavidina. Ejemplos de materiales fluorescentes adecuados incluyen umbeliferona, fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína, rodamina, fluoresceína diclorotriazinilamina, cloruro de dansilo o ficoeritrina; un ejemplo de material luminiscente incluye luminol; y ejemplos de materiales bioluminiscentes incluyen luciferasa, luciferina y aequorina.

La molécula de anticuerpo etiquetada puede usarse, por ejemplo, diagnóstica y/o experimentalmente en varios contextos, incluyendo (i) para aislar un antígeno predeterminado mediante técnicas estándar, tales como cromatografía de afinidad o inmunoprecipitación; (ii) para detectar un antígeno predeterminado (por ejemplo, en un lisado celular o sobrenadante celular) para evaluar la abundancia y el patrón de expresión de la proteína; (iii) para monitorizar los niveles de proteína en el tejido como parte de un procedimiento de pruebas clínicas, por ejemplo, para determinar la eficacia de un régimen de tratamiento dado.

Una molécula de anticuerpo puede conjugarse con otra entidad molecular, típicamente una etiqueta o un agente o fracción terapéutica (por ejemplo, citotóxica o citostática). Los isótopos radiactivos pueden utilizarse en aplicaciones diagnósticas o terapéuticas.

La divulgación proporciona moléculas de anticuerpo radiomarcadas y métodos de marcaje de las mismas. En una realización, se divulga un método de etiquetado de una molécula de anticuerpo. El método incluye poner en contacto una molécula de anticuerpo, con un agente quelante, para producir de tal modo un anticuerpo conjugado.

Como ya se ha mencionado, la molécula de anticuerpo puede conjugarse con un agente terapéutico. Ya se han mencionado los radioisótopos terapéuticamente activos. Ejemplos de otros agentes terapéuticos incluyen taxol, citocalasina B, gramicidina D, bromuro de etidio, emetina, mitomicina, etopósido, tenopósido, vincristina, vinblastina, colchicina, doxorrubicina, daunorrubicina, dihidroxiantracina diona, mitoxantrona, mitramicina, actinomicina D, 1-dehidrotestosterona, glucocorticoides, procaína, tetracaína, lidocaína, propranolol, puromicina, maytansinoides, por ejemplo, maytansinol (véase, por ejemplo, Pat. U.S. No. 5,208,020), CC-1065 (véase, por ejemplo, Pat. U.S. No. 5,475,092, 5,585,499, 5,846, 545) y análogos u homólogos de los mismos. Los agentes terapéuticos incluyen, pero no se limitan a, antimetabolitos (por ejemplo, metotrexato, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, citarabina, 5-fluorouracilo decarbazina), agentes alquilantes (por ejemplo, mecloretamina, tioepa clorambucil, CC-1065, melfalán, carmustina (BSNU) y lomustina (CCNU), ciclofosfamida, busulfán, dibromomanitol, estreptozotocina, mitomicina C y cis-diclorodiamina platino (II) (DDP) cisplatino), antraciclinas (por ejemplo, daunorrubicina (antes daunomicina) y doxorrubicina), antibióticos (por ejemplo, dactinomicina (antes actinomicina), bleomicina, mitramicina y antramicina (AMC)) y agentes antimitóticos (por ejemplo, vincristina, vinblastina, taxol y maytansinoides).

En un aspecto, la divulgación presenta un método para proporcionar una molécula de unión a diana que se une específicamente a una diana divulgada en el presente documento, por ejemplo,elreceptor PD-1. Por ejemplo, la molécula de unión a diana es una molécula de anticuerpo. Por ejemplo, la molécula de unión a diana es una molécula de anticuerpo. El método incluye: proporcionar una proteína diana que comprende al menos una porción de proteína no humana, siendo la porción homóloga a (al menos 70, 75, 80, 85, 87, 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98% idéntica a) una porción correspondiente de una proteína diana humana, pero difiriendo en al menos un aminoácido (por ejemplo, al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho o nueve aminoácidos); obtención de una molécula de anticuerpo que se une específicamente al antígeno; y evaluación de la eficacia del agente de unión para modular la actividad de la proteína diana. El método puede incluir además la administración del agente de unión (por ejemplo,lamolécula de anticuerpo) o un derivado (por ejemplo, una molécula de anticuerpo humanizada) a un sujeto humano.

Moléculas de anticuerpos multiespecíficos

En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo multiespecífica (por ejemplo, biespecífica o triespecífica). Los protocolos para generar moléculas de anticuerpo biespecíficas o heterodiméricas son conocidos en la técnica; incluyendo pero sin limitarse a, por ejemplo, el enfoque de "botón en un ojal" descrito en, por ejemplo, US5731168; el emparejamiento Fc de dirección electrostática como se describe en, por ejemplo, WO 09/089004, WO 06/106905 y W<o>2010/129304; la formación del heterodímero Strand Exchange Engineered Domains (SEED) descrita, por ejemplo, en WO 07/110205; el intercambio del brazo Fab descrito, por ejemplo, en WO 08/119353, WO 2011/131746, y WO 2013/060867; conjugado doble de anticuerpos, por ejemplo, por entrecruzamiento de anticuerpos para generar una estructura biespecífica utilizando un reactivo heterobifuncional que tiene un grupo reactivo amino y un grupo reactivo sulfhidrilo como se describe en, por ejemplo, US4433059; determinantes de anticuerpos biespecíficos generados por recombinación de medios anticuerpos (pares de cadenas pesadas-luminosas o Fabs) de diferentes anticuerpos mediante ciclos de reducción y oxidación de enlaces disulfuro entre las dos cadenas pesadas, como se describe en, por ejemplo, US 4444878; anticuerpos trifuncionales, por ejemplo, tres fragmentos Fab' reticulados a través de grupos reactivos sulfhidrilo, como se describe en, por ejemplo, US5273743; proteínas de unión biosintética, por ejemplo, par de scFvs reticulados a través de las colas C-terminales preferiblemente a través de disulfuro o entrecruzamiento química reactiva a amina, como se describe en, por ejemplo, US5534254; anticuerpos bifuncionales, por ejemplo, fragmentos Fab con diferentes especificidades de unión dimerizados a través de cremalleras de leucina (por ejemplo, c-fos y c-jun) que han sustituido al dominio constante, como se describe en, por ejemplo, US5582996; receptores mono y oligo específicos y biespecíficos, por ejemplo, regiones VH-CH1 de dos anticuerpos (dos fragmentos Fab) unidos a través de un espaciador polipeptídico entre la región CH1 de un anticuerpo y la región VH del otro anticuerpo típicamente con cadenas ligeras asociadas, como se describe en, por ejemplo, US5591828; conjugados ADN-anticuerpo biespecíficos, por ejemplo, entrecruzamiento de anticuerpos o fragmentos Fab a través de un fragmento de ADN de doble cadena, como se describe en, por ejemplo, US5635602; proteínas de fusión biespecíficas, por ejemplo, un constructo de expresión que contiene dos scFv con un enlazador peptídico helicoidal hidrofílico entre ellos y una región constante completa, como se describe en, por ejemplo, US5637481; proteínas de unión multivalente y multiespecífica, por ejemplo, dímeros de polipéptidos que tienen un primer dominio con una región de unión de la región variable de la cadena pesada de Ig, y un segundo dominio con una región de unión de la región variable de la cadena ligera de Ig, generalmente denominados diacuerpos (también se divulgan estructuras de orden superior que crean moléculas biespecíficas, triespecíficas o tetraespecíficas, como se describe en, por ejemplo, US5837242; constructos de minicuerpos con cadenas VL y VH enlazadas, conectadas además con espaciadores peptídicos a una región bisagra de anticuerpo y a la región CH3, que pueden dimerizarse para formar moléculas biespecíficas/multivalentes, como se describe en, por ejemplo, US5837821; dominios V<h>y VL unidos con un enlazador peptídico corto (por ejemplo, 5 o 10 aminoácidos) o sin enlazador en ninguna orientación, que pueden formar dímeros para formar diacuerpos biespecíficos; trímeros y tetrámeros, como se describe en, por ejemplo, US5844094; cadenas de dominios VH (o dominios VL en los miembros de la familia) conectados por enlaces peptídicos con grupos reticulables en el extremo C asociados además con dominios VL para formar una serie de FV (o scFvs), como se describe en, por ejemplo, US5864019; y polipéptidos de unión de cadena única con un dominio VH y un dominio VL unidos mediante un enlazador peptídico se combinan en estructuras multivalentes mediante entrecruzamiento no covalente o químico para formar, por ejemplo, estructuras homobivalentes, heterobivalentes, trivalentes y tetravalentes utilizando tanto scFV como formato de tipo diacuerpo, como se describe en, por ejemplo, US5869620. Otros ejemplos de moléculas multiespecíficas y biespecíficas y métodos para fabricarlas se encuentran, por ejemplo, en US5910573, US5932448, US5959083, US5989830, US6005079, US6239259, US6294353, US6333396, US6476198, US6511663, US6670453, US6743896, US6809185, US6833441, US7129330, US7183076, US7521056, US7527787, US7534866, US7612181, US2002/004587A1, US2002/076406A1, US2002/103345A1, US2003/207346A1, US2003/211078A1, US2004/219643A1, US2004/220388A1, US2004/242847A1, US2005/003403A1, US2005/004352A1, US2005/069552A1, US2005/079170A1, US2005/100543A1, US2005/136049A1, US2005/136051A1, US2005/163782A1, US2005/266425A1, US2006/083747A1, US2006/120960A1, US2006/204493A1, US2006/263367A1, US2007/004909A1, US2007/087381A1, US2007/128150A1, US2007/141049A1, US2007/154901A1, US2007/274985A1, US2008/050370A1, US2008/069820A1, US2008/152645A1, US2008/171855A1, US2008/241884A1, US2008/254512A1, US2008/260738A1, US2009/130106A1, US2009/148905A1, US2009/155275A1, US2009/162359A1, US2009/162360A1, US2009/175851A1, US2009/175867A1, US2009/232811A1, US2009/234105A1, US2009/263392A1, US2009/274649A1, EP346087A2, WO00/06605A2, WO02/072635A2, WO04/081051A1, WO06/020258A2, WO2007/044887A2, WO2007/095338A2, WO2007/137760A2, WO2008/119353A1, WO2009/021754A2, WO2009/068630A1, WO91/03493A1, WO93/23537A1, WO94/09131A1, WO94/12625A2, WO95/09917A1, WO96/37621A2, WO99/64460A1.

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo monoespecífica, biespecífica o multiespecífica) está unida covalentemente, por ejemplo, fusionada, a otro socio, por ejemplo, una proteína, por ejemplo, una, dos o más citoquinas, por ejemplo, como una molécula de fusión, por ejemplo, una proteína de fusión. En otras realizaciones, la molécula de fusión comprende una o más proteínas, por ejemplo, una, dos o más citoquinas. En una realización, la citoquina es una interleucina (IL) elegida entre una, dos, tres o más de IL-1, IL-2, IL-12, IL-15 o IL-21. En una realización, una molécula de anticuerpo biespecífico tiene una primera especificidad de unión a una primera diana (por ejemplo, a PD-1), una segunda especificidad de unión a una segunda diana (por ejemplo, LAG-3 o TIM-3), y está opcionalmente unida a un dominio de interleucina (por ejemplo, IL-12), por ejemplo, IL-12 de longitud completa o una porción de la misma.

Una "proteína de fusión" y un "polipéptido de fusión" se refieren a un polipéptido que tiene al menos dos porciones unidas covalentemente, donde cada una de las porciones es un polipéptido que tiene una propiedad diferente. La propiedad puede ser una propiedad biológica, como la actividadin vitrooin vivo.La propiedad también puede ser una simple propiedad química o física, como la unión a una molécula diana, la catálisis de una reacción, etc. Las dos porciones pueden estar unidas directamente por un enlace peptídico simple o a través de un enlazador peptídico, pero están en marco de lectura entre sí.

La presente divulgación proporciona una molécula de ácido nucleico aislada que codifica la molécula de anticuerpo anterior, vectores y células huésped de la misma. La molécula de ácido nucleico incluye, pero no se limita a, ARN, ADN genómico y ADNc.

Agentes de ejemplo utilizados en las combinaciones

En el presente documento se describen métodos y composiciones que incluyen una combinación de uno o más de: (i) un agente que mejora la presentación del antígeno (por ejemplo, antígeno tumoral); (ii) un agente que mejora una respuesta de células efectoras (por ejemplo, activación y/o movilización de células B y/o células T); o (iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral, tratando así el trastorno, por ejemplo, la afección o trastorno hiperproliferativo (por ejemplo, el cáncer). En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento). En el presente documento se proporcionan agentes de ejemplo que pueden utilizarse en estas combinaciones.

Agonistas STING de ejemplo

En una realización, la combinación incluye un agonista de STING. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de mama, un carcinoma de células escamosas, un melanoma, un cáncer de ovario, un carcinoma de trompas de falopio, un carcinoma peritoneal, un sarcoma de tejidos blandos, un cáncer de esófago, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer de endometrio, un cáncer cervical o un carcinoma de células basales), por ejemplo, una neoplasia hematológica (por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica (CLL), o un linfoma (por ejemplo, un linfoma de células B de zona marginal, un linfoma linfocítico pequeño, un linfoma folicular, un linfoma de Hodgkin, un linfoma no Hodgkin)). En algunas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (HNSCC)), un cáncer de piel (por ejemplo, un melanoma), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo por ejemplo (TNBC)).

En algunas realizaciones, el agonista de STING es un dinucleótido cíclico, por ejemplo, un dinucleótido cíclico que comprende nucleobases de purina o pirimidina (por ejemplo, nucleobases de adenosina, guanina, uracilo, timina o citosina). En algunas realizaciones, las nucleobases del dinucleótido cíclico comprenden la misma nucleobase o nucleobases diferentes.

En algunas realizaciones, el agonista STING comprende una adenosina o una guanosina nucleobase. En algunas realizaciones, el agonista de STING comprende una nucleobase de adenosina y una nucleobase de guanosina. En algunas realizaciones, el agonista de STING comprende dos nucleobases de adenosina o dos nucleobases de guanosina.

En algunas realizaciones, el agonista STING comprende un dinucleótido cíclico modificado, por ejemplo, que comprende una nucleobase modificada, una ribosa modificada o un enlace fosfato modificado. En algunas realizaciones, el dinucleótido cíclico modificado comprende un enlace fosfato modificado, por ejemplo, un tiofosfato.

En algunas realizaciones, el agonista STING comprende un dinucleótido cíclico (por ejemplo, un dinucleótido cíclico modificado) con enlaces fosfato 2',5' o 3',5'. En algunas realizaciones, el agonista de STING comprende un dinucleótido cíclico (por ejemplo, un dinucleótido cíclico modificado) con estereoquímica Rp o Sp alrededor de los enlaces fosfato.

En algunas realizaciones, el agonista de STING es Rp,Rp-ditio 2',3' c-di-AMP (por ejemplo, Rp,Rp-ditio c-[A(2',5')pA(3',5')p]), o un análogo dinucleótido cíclico del mismo. En algunas realizaciones, el agonista de STING es un compuesto descrito en la Publicación de Patente U.S. No. US2015/0056224 (por ejemplo, un compuesto de la Figura 2c, por ejemplo, el compuesto 21 o el compuesto 22). En algunas realizaciones, el agonista de STING es c-[G(2',5')pG(3',5')p], un derivado ditio ribosa O-sustituido del mismo, o un compuesto representado en la Fig. 4 de la Publicación PCT No. WO 2014/189805 y WO 2014/189806. En algunas realizaciones, el agonista de STING es c-[A(2',5')pA(3',5')p] o un derivado ditio ribosa O-sustituido del mismo, o es un compuesto representado en la Fig. 5 de las Publicaciones PCT Nos. WO 2014/189805 y WO 2014/189806. En algunas realizaciones, el agonista de STING es c-[G(2',5')pA(3',5')p], o un derivado ditio ribosa O-sustituido del mismo, o es un compuesto representado en la Fig. 5 de las Publicaciones PCT Nos. WO 2014/189805 y WO 2014/189806. En algunas realizaciones, el agonista de STING es 2'-0-propargil-ciclo-[A(2',5')pA(3',5')p] (2'-0-propargil- ML-CDA) o un compuesto representado en la Fig. 7 de la Publicación PCT No. WO 2014/189806.

Otros agonistas STING de ejemplo se divulgan, por ejemplo, en las Publicaciones PCT Nos. WO 2014/189805 y WO 2014/189806, y Publicación U.S. No. 2015/0056225.

Agonistas TLR de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agonista del receptor tipo Toll (TLR). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de mama, un carcinoma de células escamosas, un melanoma, un cáncer de ovario, un carcinoma de trompas de falopio, un carcinoma peritoneal, un sarcoma de tejidos blandos, un cáncer de esófago, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer de endometrio, un cáncer cervical o un carcinoma basocelular), por ejemplo, una neoplasia hematológica (por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica (CLL), o un linfoma (por ejemplo, un linfoma de células B de la zona marginal, un linfoma linfocítico pequeño, un linfoma folicular, un linfoma de Hodgkin, un linfoma no Hodgkin)).

Los TLR son una familia de receptores de reconocimiento de patrones que se identificaron inicialmente como sensores del sistema inmunitario innato que reconocen patógenos microbianos. En humanos, los TLRs incluyen TLR-1, TLR-2, TLR-3, TLR-4, TLR-5, TLR-6 , TLR-7, TLR-8 , TLR-9, y TLR-10. TLR-1, -2, -4, -5, y - 6 , se expresan en la superficie de las células y TLR-3, -7/8, y -9 se expresan con el compartimento ER. Los subconjuntos de células dendríticas humanas pueden identificarse en función de los distintos patrones de expresión de TLR. El subconjunto mieloide o "convencional" de células dendríticas humanas expresa los TLR 1-8 y el subconjunto plasmocitoide de células dendríticas expresa únicamente los TLR-7 y TLR-9. La unión del ligando a los TLR invoca una cascada de vías de señalización intracelular que inducen la producción de factores implicados en la inflamación y la inmunidad. Tras la estimulación, el subconjunto mieloide y el subconjunto plasmocitoide de las células dendríticas humanas provocan el cebado de células T CD4+ y CD8+ específicas de antígeno y la activación de células NK y células T, respectivamente.

En algunas realizaciones, el agonista TLR se elige entre uno o más de un agonista TLR-1, un agonista TLR-2, un agonista TLR-3, un agonista TLR-4, un agonista TLR-5 un agonista TLR-6 , un agonista TLR-7, un agonista TLR-8 , un agonista TLR-9, un agonista TLR-10, un agonista TLR-1/2, un agonista TLR-2/6, o un agonista TLR-7/8. En una realización, el agonista de TLR es un agonista de TLR7.

En algunas realizaciones, el agonista TLR es imiquimod o 3-(2-metilpropil)-3,5,8-triazatriciclo[7.4.0.02,6]trideca-1(9),2(6),4,7,10,12-hexaen-7-amina. Imiquimod o 3-(2-metilpropil)-3,5,8-triazatricciclo[7.4.0.02,6]trideca-1(9),2(6),4,7,10,12-hexaen-7-amina pueden unirse a TLR-7 y/o<t>L<r>-8 y activarlos.

En algunas realizaciones, el agonista TLR es 852A. 852A se divulga, por ejemplo, en Inglefield et al. J Interferon Cytokine Res. 2008;28(4):253-63. 852A puede unirse a TLR-7 y/o t Lr -8 y activarlos.

En algunas realizaciones, el agonista TLR es Bacille Calmette-Guérin (BCG). El BCG puede unirse al TLR-9 y activarlo.

En algunas realizaciones, el agonista TLR es EMD 120108. EMD 120108 es un oligonucleótido sintético que contiene oligodesoxinucleótido fosforotioato. EMD 1201081 puede unirse a TLR-9 y activarlo, por ejemplo, en monocitos/macrófagos, células dendríticas plasmocitoides (DC) y células B, iniciando vías de señalización inmunitaria, activando células B e induciendo la producción de citoquinas de células T auxiliares.

En algunas realizaciones, el agonista TLR es IMO-2055. IMO-2055 es un oligonucleótido sintético que contiene dinucleótidos CpG no metilados. IMO-2055, que imita las secuencias CpG no metiladas del ADN bacteriano, puede unirse a TLR-9 y activarlo, por ejemplo, en monocitos/macrófagos, células dendríticas plasmocitoides (DC) y células B, iniciando vías de señalización inmunitaria y activando células B y DC e induciendo la producción de citoquinas de células T auxiliares.

Otros agonistas TLR de ejemplo que pueden usarse en la combinación incluyen, por ejemplo, agonistas TLR-1/2 (por ejemplo, Pam3Cys), agonistas TLR-2 (por ejemplo, CFA, MALP2, Pam2Cys, FSL-1, o Hib-OMPC), agonistas TLR-3 (por ejemplo, ácido polirribosínico:polirribocítido (Poly I:C), ácido poliadenosínico-poliuridílico (poly AU), ácido polinosínico-policitidílico estabilizado con poli-L-lisina y carboximetilcelulosa (Hiltonol®)), agonistas TLR-4 (por ejemplo, lípido monofosforil A (MPL), LPS, sialil-Tn (STn)), agonistas TLR-5 (por ejemplo, flagelina bacteriana), agonistas TLR-7 (por ejemplo, imiquimod), agonistas TLR-7/8 (por ejemplo, resiquimod o loxoribina) y agonistas TLR-9 (por ejemplo, dinucleótido CpG no metilado (CpG-ODN)).

En otra realización, el agonista TLR se utiliza en combinación con un agonista GITR, por ejemplo, como se describe en WO2004060319, y en la Publicación Internacional No.: WO2014012479.

Inhibidores del VEGFR de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) (por ejemplo, un inhibidor de uno o más de VEGFr (por ejemplo, VEGFR-1, VEGFR-2, VEGFR-3) o VEGF). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un melanoma, un cáncer de mama, un cáncer de colon, un cáncer de esófago, un tumor del estroma gastrointestinal (GIST), un cáncer de riñón (por ejemplo, un cáncer de células renales), un cáncer de hígado, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), un cáncer de ovario, un cáncer de páncreas, un cáncer de próstata o un cáncer de estómago), por ejemplo, un tumor hematológico maligno (por ejemplo, un linfoma).

En algunas realizaciones, el inhibidor de VEGFR es succinato de vatalanib (Compuesto A47) o un compuesto divulgado en EP 296122.

En alguna realización, el inhibidor VEGFR es un inhibidor de uno o más de VEGFR-2, PDGFRbeta, KIT o Raf quinasa C, 1-metil-5-((2-(5-(trifluorometil)-1H-imidazol-2-il)piridin-4-il)oxi)-N-(4-(trifluorometil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (Compuesto A37) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/030377.

Otros inhibidores de ejemplo de la vía del VEGFR que pueden utilizarse en las combinaciones aquí divulgadas incluyen, por ejemplo, bevacizumab (AVASTIN®), axitinib (INLYTA®); alaninato de brivanib (BMS-582664, (S)-((R)-1-(4-(4-Fluoro-2-metil-1H-indol-5-iloxi)-5-metilpirrolo[2,1-f][1.2,4]triazin-6-iloxi)propan-2-il)2-aminopropanoato); sorafenib (NEXAV<a>R®); pazopanib (<v>O<t>RIENT®); malato de sunitinib (SUTENT®); cediranib (AZD2171, CAS 288383-20-1); vargatef (BIBF1120, CAS 928326-83-4); foretinib (GSK1363089); telatinib (BAY57-9352, CAS 332012-40-5); apatinib (YN968D1, CAS 811803-05-1); imatinib (GLEEVEC®); ponatinib (AP24534, CAS 943319-70-8); tivozanib (AV951, CAS 475108-18-0); regorafenib (BAY73-4506, CAS 755037-03-7); dihidrocloruro de vatalanib (PTK787, CAS 212141-51-0); brivanib (BMS-540215, CAS 649735 46-6); vandetanib (CAPRELSA® o AZD6474); motesanib difosfato (AMG706, CAS 857876-30-3, N-(2,3-dihidro-3,3-dimetil-1H-indol-6-il)-2-[(4-piridinilmetil)amino]-3-piridinocarboxamida, descrito en la Publicación PCT No. WO 02/066470); ácido diláctico dovitinib (TKI258, CAS 852433-84-2); linfanib (ABT869, CAS 796967-16-3); cabozantinib (XL184, CAS 849217-68-1); lestaurtinib (CAS 111358-88-4); N-[5-[[5-(1,1-dimetiletil)-2-oxazolil]metil]tio]-2-tiazolil]-4-piperidinocarboxamida (BMS38703, CAS 345627-80-7); (3R,4R)-4-amino-1-((4-((3-metoxifenil)amino)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-5-il)metil)piperidin-3-ol (BMS690514); N-(3,4-dicloro-2-fluorofenil)-6-metoxi-7-[[(3aa,5p,6aa)-octahidro-2-metilciclopenta[c]pirrol-5-il]metoxi]- 4-quinazolinamina (XL647, CAS 781613-23-8); 4-metil-3-[[1-metil-6-(3-piridinil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-il]amino]-N-[3-(trifluorometil)fenil]-benzamida (BHG712, CAS 940310-85-0); aflibercept (<e>Y<l>EA®), y endostatina (ENDOSTAR®).

Los anticuerpos anti-VEGF de ejemplo que pueden usarse en las combinaciones aquí divulgadas incluyen, por ejemplo, un anticuerpo monoclonal que se une al mismo epítopo que el anticuerpo monoclonal anti-VEGF A4.6.1 producido por hibridoma<a>T<c>C HB 10709; un anticuerpo monoclonal anti-VEGF humanizado recombinante generado según Presta et al. (1997) Cancer Res. 57:4593-4599. En una realización, el anticuerpo anti-VEGF es Bevacizumab (BV), también conocido como rhuMAb VEGF o AVASTIN®. Comprende regiones marco IgG1 humanas mutadas y regiones determinantes de la complementariedad de unión a antígeno del anticuerpo monoclonal murino anti-hVEGF A.4.6.1 que bloquea la unión del VEGF humano a sus receptores. El bevacizumab y otros anticuerpos anti-VEGF humanizados se describen con más detalle en la Patente U.S. No. 6,884,879 emitiada el 26 de Feb., 2005. Otros anticuerpos son los anticuerpos de las series G6 o B20 (por ejemplo, G6-31, B20-4.1), descritos en la Publicación PCT No. WO2005/012359, Publicación PCT No. WO2005/044853,. Para anticuerpos adicionales, véase Patente U.S. Nos. 7,060,269, 6,582,959, 6,703,020, 6,054,297, WO98/45332, WO 96/30046, WO94/10202, EP 0666868B1, Publicaciones de solicitud de patentes U.S. Nos. 2006/009360, 2005/0186208, 2003/0206899, 2003/0190317, 2003/0203409, y 2005/0112126; y Popkov et al, Journal of Immunological Metods 288: 149-164 (2004). Otros anticuerpos incluyen los que se unen a un epítopo funcional en VEGF humano que comprende los residuos F17, Ml 8 , D19, Y21, Y25, Q89, 191, Kl 01, El 03, y C104 o, alternativamente, que comprende los residuos F17, Y21, Q22, Y25, D63, 183 y Q89.

Inhibidores de c-MET de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de c-MET. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer de páncreas, un cáncer de hígado, un cáncer de tiroides (por ejemplo, carcinoma anaplásico de tiroides), un tumor cerebral (por ejemplo, un glioblastoma), un cáncer de riñón (por ejemplo, un carcinoma de células renales) o un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello). En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de hígado, por ejemplo, un carcinoma hepatocelular (HCC) (por ejemplo, un HCC con expresión de c-MET).

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-MET es el compuesto A17 o un compuesto descrito en la Patentes U.S. Nos. 7,767,675 y 8,420,645). c-MET, un receptor tirosina quinasa sobreexpresado o mutado en muchos tipos de células tumorales, desempeña funciones clave en la proliferación de células tumorales, supervivencia, invasión, metástasis y angiogénesis tumoral. La inhibición de c-MET puede inducir la muerte celular en células tumorales que sobreexpresan la proteína c-MET o que expresan la proteína c-MET activada constitutivamente.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-MET es JNJ-38877605. JNJ-38877605 es una pequeña molécula inhibidora de c-MET disponible por vía oral. JNJ-38877605 se une selectivamente a c-MET, inhibiendo así la fosforilación de c-MET e interrumpiendo las vías de transducción de señales de c-Met.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-Met es AMG 208. AMG 208 es un inhibidor selectivo de molécula pequeña de c-MET. AMG 208 inhibe la activación dependiente de ligando e independiente de ligando de c-MET, inhibiendo su actividad tirosina quinasa, lo que puede resultar en la inhibición del crecimiento celular en tumores que sobreexpresan c-Met.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-Met es AMG 337. AMG 337 es un inhibidor de c-Met biodisponible por vía oral. AMG 337 se une selectivamente a c-MET, interrumpiendo así las vías de transducción de señales de c-MET.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-Met es LY2801653. LY2801653 es una molécula pequeña inhibidora de c-Met disponible por vía oral. LY2801653 se une selectivamente a c-MET, inhibiendo así la fosforilación de c-MET e interrumpiendo las vías de transducción de señales de c-Met.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-Met es MSC2156119J. MSC2156119J es un inhibidor de c-Met biodisponible por vía oral. MSC2156119J se une selectivamente a c-MET, lo que inhibe la fosforilación de c-MET e interrumpe las vías de transducción de señales mediadas por c-Met.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-MET es capmatinib. El capmatinib también se conoce como INCB028060. Capmatinib es un inhibidor de c-MET biodisponible por vía oral. Capmatinib se une selectivamente a c-Met, inhibiendo así la fosforilación de c-Met e interrumpiendo las vías de transducción de señales de c-Met.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-MET es crizotinib. El crizotinib también se conoce como PF-02341066. El crizotinib es un inhibidor basado en aminopiridina disponible por vía oral del receptor tirosina quinasa del linfoma quinasa anaplásico (ALK) y el receptor del factor de crecimiento c-Met/hepatocito (HGFR). El crizotinib, de forma competitiva con el ATP, se une a la quinasa ALK y a las proteínas de fusión ALK y las inhibe. Además, el crizotinib inhibe la quinasa c-Met e interrumpe la vía de señalización c-Met. En conjunto, este agente inhibe el crecimiento de las células tumorales.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-MET es golvatinib. El golvatinib es un inhibidor de quinasa dual biodisponible por vía oral de c-MET y VEGFR-2 con actividad antineoplásica potencial. El golvatinib se une e inhibe las actividades tanto de c-MET como de VEGFR-2, lo que puede inhibir el crecimiento de las células tumorales y la supervivencia de las células tumorales que sobreexpresan estos receptores tirosina quinasas.

En algunas realizaciones, el inhibidor de c-MET es tivantinib. El tivantinib también se conoce como ARQ 197. El tivantinib es una pequeña molécula inhibidora de c-MET biodisponible por vía oral. El tivantinib se une a la proteína c-MET e interrumpe las vías de transducción de señales de c-Met, lo que puede inducir la muerte celular en células tumorales que sobreexpresan la proteína c-MET o que expresan la proteína c-Met activada consitutivamente.

Inhibidores de TGFb de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor del factor de crecimiento transformante beta (TGF-p). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer cerebral (por ejemplo, un glioma), un melanoma, un cáncer de riñón (por ejemplo, un carcinoma de células renales), un mesotelioma pleural maligno (por ejemplo, un mesotelioma pleural maligno recidivante), o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama metastásico)). En ciertas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable a microsatélites (MSS CRC), un cáncer de hígado (por ejemplo, un carcinoma hepatocelular), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (HSCLC)), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC)), un cáncer que expresa TGFb, un cáncer de páncreas, un cáncer de próstata o un cáncer renal (por ejemplo, un carcinoma de células renales).

El TGF-p pertenece a una gran familia de citoquinas estructuralmente relacionadas que incluyen, por ejemplo, proteínas morfogenéticas óseas (BMP), factores de crecimiento y diferenciación, activinas e inhibinas. En algunas realizaciones, los inhibidores de TGF-p descritos en el presente documento pueden unirse y/o inhibir una o más isoformas de TGF-p (por ejemplo, una, dos o todas de TGF-p1, TGF-p2 o TGF-p3).

En condiciones normales, el TGF-p mantiene la homeostasis y limita el crecimiento de linajes celulares epiteliales, endoteliales, neuronales y hematopoyéticos, por ejemplo, mediante la inducción de respuestas antiproliferativas y apoptóticas. En las respuestas celulares al TGF-p intervienen vías de señalización canónicas y no canónicas. La activación de la vía canónica TGF-p/Smad puede mediar los efectos antiproliferativos del TGF-p. La vía no canónica del TGF-p puede activar otras vías intracelulares, por ejemplo, las proteínas quinasas activadas por mitógenos (MAPK), la fosfatidilinositol 3 quinasa/proteína quinasa B, las GTPasas similares a Rho (Tian et al. Cell Signal. 2011; 23(6):951-62; Blobe et al. N Engl J Med. 2000; 342(18):1350-8), modulando así la transición epitelial a mesenquimal (EMT) y/o la motilidad celular.

Las alteraciones de la vía de señalización del TGF-p están asociadas con enfermedades humanas, por ejemplo, cánceres, enfermedades cardiovasculares, fibrosis, trastornos reproductivos y cicatrización de heridas. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, el papel de TGF-p en el cáncer depende del escenario de la enfermedad (por ejemplo, estadio del tumor y alteración genética) y/o contexto celular. Por ejemplo, en fases avanzadas del cáncer, el TGF-p puede modular un proceso relacionado con el cáncer, por ejemplo, promoviendo el crecimiento tumoral (por ejemplo, induciendo la EMT), bloqueando las respuestas inmunitarias antitumorales, aumentando la fibrosis asociada al tumor o potenciando la angiogénesis (Wakefield and Hill Nat Rev Cancer. 2013; 13(5):328-41). En ciertas realizaciones, una combinación que comprende un inhibidor de TGF-p descrito en el presente documento se utiliza para tratar un cáncer en una etapa tardía, un cáncer metastásico o un cáncer avanzado.

Las pruebas preclínicas indican que el TGF-p desempeña un papel importante en la regulación inmunitaria (Wojtowicz-Praga Invest New Drugs. 2003; 21(1):21-32; Yang et al. Trends Immunol. 2010; 31(6):220-7). El TGF-p puede regular a la baja la respuesta inmunitaria del huésped a travésdevarios mecanismos, por ejemplo desplazamiento del equilibrio T-auxiliar hacia el fenotipo inmunitario Th2; inhibición de la respuesta antitumoral de tipo Th1 y de los macrófagos de tipo M1; supresión de las funciones de los linfocitos T CD8+ citotóxicos (CTL), los linfocitos NK y las células dendríticas, generación de células reguladoras T CD4+CD25+; o promoción de macrófagos de tipo M2 con actividad protumoral mediada por la secreción de citoquinas inmunosupresoras (por ejemplo, IL10 o VEGF), citoquinas proinflamatorias (por ejemplo, IL6 , TNFa o IL1) y generación de especies reactivas de oxígeno (ROS) con actividad genotóxica (Yang et al. Trends Immunol.

2010; 31(6):220-7; Truty and Urrutia Pancreatology. 2007; 7(5-6):423-35; Achyut et al Gastroenterology. 2011; 141(4):1167-78).

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p es fresolimumab (Número de Registro CAS: 948564-73-6). Fresolimumab también se conoce como GC1008. Fresolimumab es un anticuerpo monoclonal humano que se une e inhibe las isoformas 1, 2 y 3 de TGF-beta.

La cadena pesada de fresolimumab tiene la secuencia de aminoácidos de: QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFSSNVISWVRQAPGQGLEWMGGVIPIVDIANYA QRFKGRVTITADESTSTTYMELSSLRSEDTAVYYCASTLGLVLDAMDYWGQGTLVTVSSAST KGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLS SVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKD TLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLH QDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGF YPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHN HYTQKSLSLSLGK (SEQ ID NO: 238). La cadena ligera de fresolimumab tiene la secuencia de aminoácidos de:

E T V L T Q S P G T L S L S P G E R A T L S C R A S Q S L G S S Y L A W Y Q Q K P G Q A P R L L 1 Y G A S S R A P G 1 P D R F S

G S G S G T D F T L T IS R L E P E D F A V Y Y C Q Q Y A D S P IT F G Q G T R L E IK R T V A A P S V F IF P P S D E Q L K S G

T A S V V C L L N N F Y P R E A K V Q W K V D N A L Q S G N S Q E S V T E Q D S K D S T Y S L S S T L T L S K A D Y E K H

K V Y A C E V T H Q G L S SP V T K S F N R G E C (S E Q ID N O ; 239 ) .

El fresolimumab se divulga, por ejemplo, en WO 2006/086469, US 8,383,780, y US 8,591,901.

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p es XOMA 089. XOMA 089 también se conoce como XPA.42.089. XOMA 089 es un anticuerpo monoclonal totalmente humano que se une específicamente y neutraliza los ligandos TGF-beta 1 y 2.

La región variable de la cadena pesada de XOMA 089 tiene la secuencia de aminoácidos de: QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQ KFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGLWEVRALPSVYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 240) (divulgada como SEQ ID NO: 6 en WO 2012/167143). La región variable de la cadena ligera de XOMA 089 tiene la secuencia de aminoácidos de:

S Y E L T Q P P S V S V A P G Q T A R IT C G A N D IG S K S V H W Y Q Q K A G Q A P V L V V S E D IIR P S G IP E R IS G S

N S G N T A T L T IS R V E A G D E A D Y Y C Q V W D R D S D Q Y V F G T G T K V T V L G (S E Q ID N O : 241 )

(divulgada como SEQ ID NO: 8 en WO 2012/167143).

XOMA 089 se une con alta afinidad a las isoformas humanas de TGF-p. En general, XOMA 089 se une con alta afinidad a TGF-p1 y TGF-p2, y en menor medida a TGF-p3. En ensayos Biacore, la Kd de XOMA 089 sobre TGF-p humano es de 14.6 pM para TGF-p1, 67.3 pM para TGF-p2 y 948 pM para TGF-p3. Dada la unión de alta afinidad a las tres isoformas de TGF-p, en ciertas realizaciones, se espera que XOMA 089 se una a TGF-p1, 2 y 3 a una dosis de XOMA 089 como se describe en el presente documento. XOMA 089 presenta reacciones cruzadas con TGF-p de roedores y monos cynomolgus y muestra actividad funcionalin vitroein vivo, lo que hace que los roedores y los monos cynomolgus sean especies relevantes para los estudios toxicológicos.

En ciertas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento) y un inhibidor de TGF-p (por ejemplo, un inhibidor de TGF-p descrito en el presente documento).

Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, la resistencia a la inmunoterapia PD-1 está asociada con la presencia de una firma transcripcional que incluye, por ejemplo, genes conectados a la señalización TGF-p y procesos dependientes de TGF-p, por ejemplo, cicatrización de heridas o angiogénesis (Hugo et al. Cell. 2016; 165(1):35-44). En algunas realizaciones, el bloqueo de TGF-p amplía la ventana terapéutica de una terapia que inhibe el eje PD-1/PD-L1. Los inhibidores de TGF-p pueden afectar a los beneficios clínicos de la inmunoterapia PD-1, por ejemplo, modulando el microambiente tumoral, por ejemplo, vasculogénesis, fibrosis o factores que afectan al reclutamiento de células T efectoras (Yang et al. Trends Immunol. 2010; 31(6):220-7; Wakefield y Hill Nat Rev Cancer. 2013; 13(5):328-41; Truty y Urrutia Pancreatology. 2007; 7(5-6):423-35).

Sin querer estar limitado por la teoría, también se cree que en algunas realizaciones, varios elementos del ciclo de inmunidad antitumoral expresan tanto receptores PD-1 como TGF-p, y es probable que los receptores PD-1 y TGF-p propaguen señales celulares no redundantes. Por ejemplo, en modelos de ratón de cáncer de próstata autóctono, el uso de una forma dominante-negativa de TGFBRII o la anulación de la producción de TGF-p en células T retrasa el crecimiento tumoral (Donkor et al. Immunity. 2011; 35(1): 123-34; Diener et al. Lab Invest. 2009; 89(2): 142-51). Los estudios en el adenocarcinoma transgénico de próstata de ratón (TRAMP) los ratones mostraron que el bloqueo de la señalización de TGF-p en las células T transferidas adoptivamente aumenta su persistencia y la actividad antitumoral (Chou et al. J Immunol. 2012; 189(8):3936-46). La actividad antitumoral de las células T transferidas puede disminuir con el tiempo, en parte debido a la regulación al alza de PD-1 en los linfocitos que infiltran el tumor, lo que apoya una combinación de inhibición de PD-1 y TGF-p como se describe en el presente documento. El uso de anticuerpos neutralizantes contra PD-1 o TGF-p también puede afectar a las Tregs, dados sus altos niveles de expresión de PD-1 y su capacidad de respuesta a la estimulación con TGF-p (Riella et al. Am J Transplant. 2012; 12(10):2575-87), lo que respalda una combinación de inhibición de PD-1 y TGF-p para tratar el cáncer, por ejemplo, potenciando la modulación de la diferenciación y función de las Tregs.

Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que los cánceres pueden utilizar TGF-p para escapar de la vigilancia inmune para facilitar el crecimiento tumoral y la progresión metastásica. Por ejemplo, en ciertos cánceres avanzados, los altos niveles de TGF-p se asocian con agresividad tumoral y mal pronóstico, y la vía de TGF-p puede promover uno o más de la motilidad celular del cáncer, invasión, EMT, o un fenotipo de célula madre. La regulación inmunitaria mediada por las células cancerosas y las poblaciones de leucocitos (por ejemplo, a través de una variedad de moléculas expresadas o secretadas por las células, por ejemplo, IL-10 o TGF-p) puede limitar la respuesta a los inhibidores de puntos de control como monoterapia en ciertos pacientes. En ciertas realizaciones, una inhibición combinada de TGF-p con un inhibidor de puntos de control (por ejemplo, un inhibidor de PD-1 descrito en el presente documento) se utiliza para tratar un cáncer que no responde, o responde mal, a una monoterapia con un inhibidor de puntos de control (por ejemplo, anti-PD-1), por ejemplo, un cáncer de páncreas o un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable en microsatélites (MSS CRC)). En otras realizaciones, una inhibición combinada de TGF-p con un inhibidor de punto de control (por ejemplo, un inhibidor de PD-1 descrito en el presente documento) se utiliza para tratar un cáncer que muestra un alto nivel de infiltración de células T efectoras, por ejemplo, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), un cáncer de hígado (por ejemplo, un carcinoma hepatocelular), un cáncer de próstata o un cáncer renal (por ejemplo, un carcinoma de células renales claras). En algunas realizaciones, la combinación de un inhibidor de TGF-p y un inhibidor de PD-1 produce un efecto sinérgico.

En una realización, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis entre 0.1 mg/kg y 20 mg/kg, por ejemplo, entre 0.1 mg/kg y 15 mg/kg, entre 0.1 mg/kg y 12 mg/kg, entre 0.3 mg/kg y 6 mg/kg, entre 1 mg/kg y 3 mg/kg, entre 0.1 mg/kg y 1 mg/kg, entre 0.1 mg/kg y 0.5 mg/kg, entre 0.1 mg/kg y 0.3 mg/kg, entre 0.3 mg/kg y 3 mg/kg, entre 0.3 mg/kg y 1 mg/kg, entre 3 mg/kg y 6 mg/kg, o entre 6 mg/kg y 12 mg/kg, por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 0.1 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.5 mg/kg, 1 mg/kg, 3 mg/kg, 6 mg/kg, 12 mg/kg o 15 mg/kg, por ejemplo, una vez por semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas, una vez cada cuatro semanas o una vez cada seis semanas.

En una realización, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis entre 0.1 mg/kg y 15 mg/kg (por ejemplo, entre 0.3 mg/kg y 12 mg/kg o entre 1 mg/kg y 6 mg, por ejemplo, aproximadamente 0.1 mg/kg, 0.3 mg/kg, 1 mg/kg, 3 mg/kg, 6 mg/kg, 12 mg/kg o 15 mg/kg), por ejemplo, una vez cada tres semanas. Por ejemplo, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, puede administrarse a una dosis entre 0.1 mg/kg y 1 mg/kg (por ejemplo, entre 0.1 mg/kg y 1 mg/kg, por ejemplo, 0.3 mg/kg), por ejemplo, una vez cada tres semanas. En una realización, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra por vía intravenosa.

En una realización, la combinación incluye un inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, y un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, un anticuerpo anti-PD-1 descrito en el presente documento).

En una realización, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis entre 0.1 mg/kg y 15 mg/kg (por ejemplo, entre 0.3 mg/kg y 12 mg/kg o entre 1 mg/kg y 6 mg, por ejemplo, aproximadamente 0.1 mg/kg, 0.3 mg/kg, 1 mg/kg, 3 mg/kg, 6 mg/kg, 12 mg/kg o 15 mg/kg), por ejemplo una vez cada tres semanas, por ejemplo, por vía intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 50 mg y 500 mg (por ejemplo, entre 100 mg y 400 mg, por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 100 mg, 200 mg, 300 mg o 400 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas o una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 100 mg y 300 mg (por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 100 mg, 200 mg o 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis de aproximadamente 0.1 mg/kg o 0.3 mg/kg, por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis de aproximadamente 100 mg, por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis de aproximadamente 0.3 mg/kg, por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis de aproximadamente 100 mg o 300 mg, por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis de aproximadamente 1 mg/kg, 3 mg/kg, 6 mg/kg, 12 mg/kg o 15 mg/kg, por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg, por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis entre 0.1 mg y 0.2 mg (por ejemplo, alrededor de 0.1 mg/kg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 50 mg y 200 mg (por ejemplo, aproximadamente 100 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis entre 0.2 mg y 0.5 mg (por ejemplo, aproximadamente 0.3 mg/kg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 50 mg y 200 mg (por ejemplo, aproximadamente 100 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis de entre 0.2 mg y 0.5 mg (por ejemplo, aproximadamente 0.3 mg/kg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis de entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis de entre 0.5 mg y 2 mg (por ejemplo, aproximadamente 1 mg/kg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis de entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis de entre 2 mg y 5 mg (por ejemplo, aproximadamente 3 mg/kg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis de entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis de entre 5 mg y 10 mg (por ejemplo, aproximadamente 6 mg/kg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis de entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis de entre 10 mg y 15 mg (por ejemplo, alrededor de 12 mg/kg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis de entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra a una dosis de entre 10 mg y 20 mg (por ejemplo, alrededor de 15 mg/kg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis de entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra antes de que se administre el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1). En otras realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra después de administrar el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1). En ciertas realizaciones, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administran por separado con al menos un descanso de 30 minutos (por ejemplo, al menos 1, 1.5 o 2 horas) entre las dos administraciones.

En una realización, el inhibidor de TGF-p, XOMA 089, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/167143, se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un cáncer de páncreas, un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal microsatélite estable MSS CRC)), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), un cáncer de hígado (por ejemplo, un carcinoma hepatocelular), un cáncer de próstata o un cáncer renal (por ejemplo, un carcinoma de células renales claras).

Inhibidores de IDO/TDO de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de la indoleamina 2,3-dioxigenasa (IDO) y/o triptófano 2,3-dioxigenasa (TDO). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, melanoma, cáncer de pulmón de células no pequeñas, cáncer de colon, cáncer de cabeza y cuello de células escamosas, cáncer de ovario, cáncer peritoneal, cáncer de trompas de falopio, cáncer de mama (por ejemplo, cáncer de mama metastásico o HER2 negativo)), por ejemplo, una neoplasia hematológica (por ejemplo, un linfoma, por ejemplo, un linfoma no Hodgkin o un linfoma de Hodgkin (por ejemplo, un linfoma difuso de células B grandes (DLBCL))).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO/TDO se elige entre (4E)-4-[(3-cloro-4-fluoroanilino)-nitrosometilideno]-1,2,5-oxadiazol-3-amina (también conocido como INCB24360), indoximod (1-metil-D-triptófano), o a-ciclohexil-5H-imidazo[5,1-a]isoindol-5-etanol (también conocido como NLG919).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO/TDO es epacadostat (Número de Registro CAS: 1204669-58-8). Epacadostat también se conoce como INCB24360 o INCB024360 (Incyte). El epacadostat es un inhibidor potente y selectivo de la indoleamina 2,3-dioxigenasa (IDO1) con un IC50 de 10 nM, altamente selectivo frente a otras enzimas relacionadas como la IDO2 o la triptófano 2,3-dioxigenasa (TDO).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO/TDO es indoximod (New Link Genetics). El indoximod, el isómero D del 1-metil-triptófano, es un inhibidor de la vía de la indoleamina 2,3-dioxigenasa (IDO) de molécula pequeña administrado por vía oral que altera los mecanismos por los que los tumores evaden la destrucción mediada por el sistema inmunitario.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO/TDO es NLG919 (New Link Genetics). NLG919 es un potente inhibidor de la vía IDO (indoleamina-(2,3)-dioxigenasa) con Ki/EC50 de 7 nM/75 nM en ensayos libres de células.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO/TDO es F001287 (Flexus/BMS). F001287 es una pequeña molécula inhibidora de la indoleamina 2,3-dioxigenasa 1 (IDO1).

Antagonistas de A2AR de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un antagonista del receptor de adenosina A2a (A2aR) (por ejemplo, un inhibidor de la vía A2aR, por ejemplo, un inhibidor de adenosina, por ejemplo, un inhibidor de A2aR o CD-73). En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC).

En algunas realizaciones, el antagonista A2aR es istradefilina (Número de Registro CAS: 155270-99-8). La istradefilina también se conoce como KW-6002 u 8-[(E)-2-(3,4-dimetoxifenil)vinil]-1,3-dietil-7-metil-3,7-dihidro-1H-purina-2,6-diona. La istradefilina se divulga, por ejemplo, en LeWitt et al. (2008) Annals of Neurology 63 (3): 295-302).

En algunas realizaciones, el antagonista A2aR es tozadenant (Biotie). El tozadenant también se conoce como SYN115 o 4-hidroxi-N-(4-metoxi-7-morfolin-4-il-1,3-benzotiazol-2-il)-4-metilpiperidina-1-carboxamida. El tozadenant bloquea el efecto de la adenosina endógena en los receptores A2a, lo que provoca la potenciación del efecto de la dopamina en el receptor D2 y la inhibición del efecto del glutamato en el receptor mGluR5. En algunas realizaciones, el antagonista de A2aR es preladenante (Número de Registro CAS: 377727-87-2). El preladenante también se conoce como SCH 420814 o 2-(2-furanil)-7-[2-[4-[4-(2-metoxietoxi)fenil]-1-piperazinil]etil]7H-pirazolo[4,3-e][1,2,4]triazolo[1,5-c]pirimidina-5-amina. El preladenant se desarrolló como un fármaco que actuaba como antagonista potente y selectivo del receptor A2A de la adenosina.

En algunas realizaciones, el antagonista A2aR es vipadenan. El vipadenan también se conoce como BIIB014, V2006, o 3-[(4-amino-3-metilfenil)metil]-7-(furano-2-il)triazolo[4,5-d]pirimidin-5-amina. En algunas realizaciones, el antagonista de A2 aR es PBF-509 (Palobiofarma). En algunas realizaciones, el antagonista de A2aR, por ejemplo, PBF-509 se administra a una dosis diaria de aproximadamente 80 mg, 160 mg o 240 mg.

Otros antagonistas de A2aR de ejemplo incluyen, por ejemplo, ATL-444, MSX-3, SCH-58261, SCH-412,348, SCH-442,416, VER-6623, VER-6947, VER-7835, CGS-15943, o ZM-241,385.

En algunas realizaciones, el antagonista A2aR es un antagonista de la vía A2aR (por ejemplo, un inhibidor CD-73, por ejemplo, un anticuerpo anti-CD73) es MEDI9447. MEDI9447 es un anticuerpo monoclonal específico para CD73. Dirigirse a la producción extracelular de adenosina por CD73 puede reducir los efectos inmunosupresores de la adenosina. Se ha informado de que MEDI9447 tiene una serie de actividades, por ejemplo, inhibición de la actividad ectonucleotidasa de CD73, alivio de la supresión linfocitaria mediada por AMP e inhibición del crecimiento tumoral singénico. MEDI9447 puede provocar cambios en las poblaciones de leucocitos infiltrantes tanto mieloides como linfoides dentro del microambiente tumoral. Estos cambios incluyen, por ejemplo, aumentos de células efectoras CD8 y macrófagos activados, así como una reducción de las proporciones de células supresoras derivadas de mieloides (MDSC) y linfocitos T reguladores.

Ejemplos de virus oncolíticos

En algunas realizaciones, una combinación como la descrita aquí incluye un virus oncolítico. En algunas realizaciones, los virus oncolíticos son capaces de replicarse selectivamente y provocar la muerte o ralentizar el crecimiento de una célula cancerosa. En algunos casos, los virus oncolíticos no tienen efecto o tienen un efecto mínimo en las células no cancerosas. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer cerebral, por ejemplo, un glioblastoma (GBM). Un virus oncolítico incluye, pero no se limita a, un adenovirus oncolítico, virus del herpes simple oncolítico, retrovirus oncolítico, parvovirus oncolítico, virus vaccinia oncolítico, virus Sindbis oncolítico, virus de la gripe oncolítico o virus<a>R<n>oncolítico (por ejemplo, reovirus oncolítico, virus de la enfermedad de Newcastle (n Dv ) oncolítico, virus del sarampión oncolítico o virus de la estomatitis vesicular (VSV) oncolítico).

En algunas realizaciones, el virus oncolítico es un virus del herpes recombinante, por ejemplo, un virus del herpes simple (HSV) que comprende un gen que codifica GM-CS<f>. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, la inserción del gen GM-CSF puede potenciar una respuesta inmunitaria antitumoral, por ejemplo, reclutando y estimulando células dendríticas en el lugar del tumor. Pueden realizarse otras modificaciones en el virus, por ejemplo, para atenuar el virus y/o aumentar la selectividad para las células cancerosas. En algunas realizaciones, el virus herpes recombinante carece de un gen ICP34.5 funcional, un gen ICP47 funcional, o ambos. En algunas realizaciones, la deleción del gen ICP34.5 previene la infección por VHS de células no tumorales o proporciona replicación selectiva para tumores. En algunas realizaciones, la deleción del gen ICP47 permite o aumenta la presentación de antígenos. La deleción de ICP47 puede causar un aumento de la expresión del gen US11 del VHS y permite que US11 se exprese como un gen temprano inmediato y no como un gen tardío. Esto puede aumentar aún más el grado de replicación viral y oncolisis de células tumorales. En determinadas realizaciones, se utiliza la cepa JS1 del HSV-1, por ejemplo, para mejorar la capacidad de destrucción de células tumorales en comparación con otras cepas del HSV-1. En ciertas realizaciones, el virus herpes recombinante es talimogene laherparepvec (T-VEC). El T-VEC se basa en el virus del herpes simple tipo 1 (HSV-1) modificado para incluir un gen que codifica el GM-CSF humano. Talimogene laherparepvec se describe, por ejemplo, en la Publicación de solicitud internacional No. WO 2014/036412. En ciertas realizaciones, la combinación se usa para tratar un melanoma, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer de páncreas, un cáncer de mama, un cáncer colorrectal o un cáncer renal (por ejemplo, un carcinoma de células renales).En algunas realizaciones, el virus oncolítico es un virus del herpes recombinante, por ejemplo, un virus del herpes simple tipo 1 (HSV-1) neuroatenuado, de replicación restringida. En algunas realizaciones, el virus del herpes recombinante está suprimido del gen ICP34.5. En algunas realizaciones, el virus del herpes recombinante no es capaz de replicarse en células que no se dividen. En algunas realizaciones, el virus del herpes recombinante se obtiene a partir de la cepa 17 de tipo salvaje. En ciertas realizaciones, el virus del herpes recombinante es HSV1716 (SEPREHVIR®). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, tras la inyección intratumoral, el HSV1716 oncolítico se replica y lisa en células en división, tales como las células tumorales. El HSV1716 se describe, por ejemplo, en la Publicación de solicitud internacional No. WO 2003/068809. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un glioma (por ejemplo, un glioma de alto grado), un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello), un melanoma, un cáncer de hígado (por ejemplo, un carcinoma hepatocelular), un mesotelioma pleural o un cáncer pediátrico no relacionado con el CNS.

En algunas realizaciones, el virus oncolítico es un virus vaccinia. En algunas realizaciones, el virus vaccinia incluye un gen que activa la producción de células T citotóxicas (por ejemplo, un gen adaptador inductor de interferón-p (TRIF) que contiene dominio TIR), un gen que disminuye el bloqueo inmunitario (por ejemplo, un gen hidroxiprostaglandina deshidrogenasa 15-(NAD) (HPGD)), o ambos. En algunas realizaciones, la superficie del virus vaccinia está desglicosilada. En algunas realizaciones, el virus vaccinia tiene una o más (por ejemplo, dos, tres o todas) de las propiedades elegidas entre lisis del cáncer, adaptación inmunitaria, estimulación de células T o eliminación de la inhibición inmunitaria. En algunas realizaciones, el virus vaccinia está diseñado a partir de la cepa Western Reserve. En algunas realizaciones, el virus oncolítico es WO-12 (Western Oncolytics Ltd., EE.UU.). En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un tumor sólido.

En algunas realizaciones, el virus oncolítico es un poliovirus recombinante, por ejemplo, un virus oncolítico vivo atenuado y no patógeno en el que el sitio de entrada ribosomal interno (IREs ) se sustituye por un IRES heterólogo, por ejemplo, para reducir o evitar la neurovirulencia. En algunas realizaciones, el IRES heterólogo es un IRES del rinovirus humano tipo 2 (HRV2). En algunas realizaciones, el poliovirus recombinante es el poliovirus oncolítico PVS-RIPO (también conocido como PVSRIPO). PVS-RIPO es una versión no patógena genéticamente modificada del poliovirus Sabin oral de tipo 1 en la que el sitio de entrada ribosómico interno (IRES) del poliovirus se sustituye por el IRES del rinovirus humano de tipo 2 (HRV2). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, PVS-RIPO se propaga preferiblemente en células no neuronales susceptibles (por ejemplo, glioblastoma multiforme (GBM)) debido al HRV2 heterólogo en este virus recombinante. Tras la administración intratumoral de PVS-RIPO, el poliovirus puede ser absorbido selectivamente y replicarse en las células tumorales que expresan CD155 (receptor de poliovirus, PVR o NECL5), causando eventualmente la lisis de las células tumorales. CD155, una molécula de adhesión celular oncofetal y antígeno tumoral, se expresa ectópicamente en ciertos cánceres, como el GMB, y desempeña un papel en la migración, invasión y metástasis de las células tumorales. PVS-RIPO se describe, por ejemplo, en la Publicación de solicitud internacional No. WO 2014/081937. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un tumor sólido, por ejemplo, un tumor sólido que expresa CD155. En otras realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer cerebral, por ejemplo, un glioblastoma.

En algunas realizaciones, el virus oncolítico es un virus, por ejemplo, un virus oncolítico recombinante, descrito en US2010/0178684 A1. En algunas realizaciones, un virus oncolítico recombinante comprende, o comprende una secuencia de ácido nucleico (por ejemplo, secuencia de ácido nucleico heteróloga) que codifica, un inhibidor de una respuesta inmunitaria o inflamatoria, por ejemplo, como se describe en US2010/0178684 A1. En realizaciones, el virus oncolítico recombinante, por ejemplo, el NDV oncolítico, comprende, o comprenden una secuencia de ácido nucleico que codifica, una proteína proapoptótica (por ejemplo, apoptina), una citoquina (por ejemplo, GM-CSF, CSF, interferón-gamma, interleucina-2 (IL-2), factor de necrosis tumoral-alfa), una inmunoglobulina (por ejemplo, un anticuerpo contra la firbonectina ED-B), un antígeno asociado al tumor, una proteína adaptadora biespecífica (por ejemplo, un anticuerpo biespecífico o un fragmento de anticuerpo dirigido contra la proteína HN del NDV y un receptor coestimulador de células T, como CD3 o CD28; o una proteína de fusión entre IL-2 humana y un anticuerpo de cadena simple dirigido contra la proteína HN del NDV). Véase, por ejemplo, Zamarin et al. Future Microbiol. 7.3(2012):347-67. En algunas realizaciones, el virus oncolítico es un NDV oncolítico quimérico descrito en US 8591881 B2, US 2012/0122185 A1, o US 2014/0271677 A1.

En algunas realizaciones, el virus oncolítico comprende un adenovirus condicionalmente replicativo (CRAd), que está diseñado para replicarse exclusivamente en células cancerosas. Véase, por ejemplo, Alemany et al. Nature Biotechnol. 18(2000):723-27. En algunas realizaciones, un adenovirus oncolítico comprende uno descrito en la Tabla 1 en la página 725 de Alemanyet al.

Los virus oncolíticos de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, los siguientes:

Adenovirus oncolítico del grupo B (ColoAd1) (PsiOxus Therapeutics Ltd.) (véase, por ejemplo, Identificador de Ensayo Clínico: NCT02053220);

ONCOS-102 (anteriormente denominado CGTG-102), que es un adenovirus que comprende el factor estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos (GM-CSF) (Oncos Therapeutics) (véase, por ejemplo, Identificador de Ensayo Clínico: NCT01598129);

VCN-01, que es un adenovirus humano oncolítico modificado genéticamente que codifica la hialuronidasa humana PH20 (VCN Biosciences, S.L.)(véanse,por ejemplo, los Identificadores de Ensayos Clínicos: NCT02045602 y NCT02045589);

Adenovirus de replicación condicional ICOVIR-5, que es un virus derivado del adenovirus humano de tipo salvaje de serotipo 5 (Had5) que ha sido modificado para replicarse selectivamente en células cancerosas con una vía retinoblastomalE2F desregulada (Institut Catala d'Oncologia) (véase, por ejemplo, Identificador de Ensayo Clínico: NCT01864759);

Celyvir, que comprende células madre mesenquimales (MSC) autólogas derivadas de médula ósea infectadas con ICOVIRS, un adenovirus oncolítico (Hospital Infantil Universitario Niño Jesús, Madrid, España/ Ramón Alemany) (véase, por ejemplo, el Identificador de Ensayo Clínico: NCT01844661);

CG0070, que es un adenovirus oncolítico de serotipo 5 (Ad5) de replicación condicional en el que el promotor humano E2F-1 impulsa la expresión de los genes virales esenciales E1a, restringiendo así la replicación viral y la citotoxicidad a las células tumorales defectuosas de la vía Rb (Cold Genesys, Inc.) (véase, por ejemplo, el Identificador de Ensayo Clínico: NCT02143804); o

DNX-2401 (anteriormente denominado Delta-24-RGD), que es un adenovirus que ha sido diseñado para replicarse selectivamente en células deficientes en la vía del retinoblastoma (Rb) y para infectar más eficazmente células que expresan determinadas integrinas de unión a RGD (Clínica Universidad de Navarra, Universidad de Navarral DNAtrix, Inc.) (véase, por ejemplo, el Identificador de Ensayo Clínico: NCT01956734).

En algunas realizaciones, un virus oncolítico descrito en el presente documento se administra mediante inyección, por ejemplo, subcutánea, intraarterial, intravenosa, intramuscular, intratecal o intraperitoneal. En algunas realizaciones, un virus oncolítico descrito en el presente documento se administra por vía intratumoral, transdérmica, transmucosa, oral, intranasal o pulmonar.

Vacunas de ejemplo, por ejemplo, vacunas de andamio

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye una vacuna, por ejemplo, una vacuna de andamio. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento.

Las vacunas contra el cáncer se divulgan, por ejemplo, en las Publicaciones PCT Nos. WO 2007/070660 y WO 2012/167230, EP 1960009 B1, Patentes U.S. Nos. US 8,067,237 y US 8,932,583, y Publicación U.S. No. US 2011/0020216. Los componentes que pueden utilizarse dentro de las vacunas contra el cáncer (por ejemplo, materiales de andamiaje implantables) se divulgan, por ejemplo, en las Publicaciones PCT Nos. WO 2009/102465 y WO 2013/106852. Se divulgan métodos que pueden utilizarse para la administración de vacunas contra el cáncer, por ejemplo, en las Publicaciones PCT Nos. WO 2013/158673, WO 2012/048165, y WO 2012/149358.

En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer incluye un andamio macroporoso que comprende (i) células o una composición de reclutamiento celular, y (ii) una señal de despliegue capaz de inducir o promover la migración de células, y (iii) una composición bioactiva recubierta o sembrada sobre/en el andamio, que hace que las células reclutadas en el andamio sean modificadas. La migración de las células modificadas puede ser promovida por los macroporos abiertos e interconectados y la señal de despliegue.

En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer induce una respuesta inmunitaria endógena a una diana cancerosa mediante la administración de un andamio poroso que lleva una composición de reclutamiento y una composición de antígeno diana, en el que una célula presentadora de antígeno endógeno es reclutada en el andamio para encontrar el antígeno y donde dicha célula reside hasta que una señal de despliegue induce la salida a un tejido de ganglio linfático fuera del andamio, estimulando así una respuesta inmunitaria endógena a dicha diana cancerosa.

En algunas realizaciones, la vacuna contra el cáncer se utiliza para eliminar una célula diana de un mamífero utilizando una composición de andamiaje.

En algunas realizaciones, una vacuna contra el cáncerin situse genera a través del reclutamiento de células cancerosas a un andamio implantado y la destrucción de las células utilizando un agente citotóxico.

En algunas realizaciones, se utiliza un oligonucleótido de citosina-guanosina (CpG-ODN) como componente de un andamio, que puede reprogramar y desplegar eficazmente células dendríticas reclutadas al andamio, y generar una respuesta antitumoral eficaz.

En algunas realizaciones, la polinosina-ácido policitidílico (poli I:C) y/o CpG ODN se utilizan para ejercer un efecto sinérgico en la inhibición tumoral.

En algunas realizaciones, se utilizan barras porosas que comprenden un compuesto de reclutamiento de células inmunitarias (por ejemplo, GM-CSF) y un compuesto de activación de células inmunitarias (por ejemplo, CpG ODN), y opcionalmente comprenden un antígeno tal como un lisado tumoral, por ejemplo, para provocar una respuesta inmunitaria a un antígeno de vacuna. En algunas realizaciones, los poros que facilitan el reclutamiento o la liberación de células se formanin situdentro de hidrogeles tras la inyección del hidrogel. En algunas realizaciones, el polímero de hidrogel poroso con memoria de forma inyectable se utiliza para la administración.

En otras realizaciones, las combinaciones aquí divulgadas incluyen una vacuna contra el cáncer o el tumor. Ejemplos no limitantes de vacunas tumorales que pueden usarse incluyen péptidos de antígenos de melanoma, tales como péptidos de gp100, antígenos MAGe , Trp-2, MART1 y/o tirosinasa, células tumorales transfectadas para expresar la citoquina GM-CSF, vacunas basadas en ADN, vacunas basadas en ARN y vacunas basadas en transducción viral. La vacuna contra el cáncer puede ser profiláctica o terapéutica.

Se han ideado muchas estrategias experimentales para la vacunación contra tumores (véase Rosenberg, S., 2000, Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62; Logothetis, C., 2000, ASCO Educational Book Spring: 300-302; Khayat, D. 2000, ASCO Educational Book Spring: 414-428; Foon, K. 2000, ASCO Educational Book Spring: 730-738; véase también Restifo, N. and Sznol, M., Cancer Vaccines, Ch. 61, pp. 3023-3043 in DeVita, V. et al. (eds.), 1997, Cancer: Principles and Practice of Oncology. Fifth Edition). En una de estas estrategias, se prepara una vacuna utilizando células tumorales autólogas o alogénicas. Estas vacunas celulares han demostrado ser más eficaces cuando las células tumorales se transducen para expresar GM-CSF. Se ha demostrado que el GM-CSF es un potente activador de la presentación de antígenos para la vacunación tumoral (Dranoff et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90: 3539-43).

Las combinaciones aquí divulgadas, por ejemplo, el bloqueo de PD-1, pueden usarse junto con un conjunto de proteínas y/o péptidos recombinantes expresados en un tumor a fin de generar una respuesta inmunitaria a estas proteínas. Normalmente, el sistema inmunitario considera estas proteínas como antígenos propios y, por lo tanto, es tolerante a ellas. El antígeno tumoral también puede incluir la proteína telomerasa, necesaria para la síntesis de los telómeros de los cromosomas y que se expresa en más del 85% de los cánceres humanos y sólo en un número limitado de tejidos somáticos (Kim, N et al. (1994) Science 266: 2011-2013). (Estos tejidos somáticos pueden estar protegidos del ataque inmunitario por diversos medios). Los antígenos tumorales también pueden ser "neoantígenos" expresados en células cancerosas debido a mutaciones somáticas que alteran la secuencia proteica o crean proteínas de fusión entre dos secuencias no relacionadas (por ejemplo, bcr-abl en el cromosoma Filadelfia), o idiotipo de tumores de células B.

Otras vacunas tumorales pueden incluir las proteínas de los virus implicados en los cánceres humanos, como los virus del papiloma humano (HPV), los virus de la hepatitis (HBV y HBC), el virus del sarcoma de herpes de Kaposi (KHSV) y el virus de Epstein-Barr (EBV). Otra forma de antígeno específico tumoral que puede utilizarse junto con el bloqueo de PD-1 son las proteínas de choque térmico (HSP) purificadas aisladas del propio tejido tumoral. Estas proteínas de choque térmico contienen fragmentos de proteínas de las células tumorales y estas HSP son muy eficaces en la entrega a las células presentadoras de antígenos para provocar la inmunidad tumoral (Suot, R & Srivastava, P (1995) Science 269:1585-1588; Tamura, Y. et al. (1997) Science 278:117-120 ).

Las células dendríticas (DC) son potentes células presentadoras de antígenos que pueden utilizarse para cebar respuestas antígeno-específicas. Las DC pueden producirseex vivoy cargarse con varios antígenos proteicos y peptídicos, así como con extractos de células tumorales (Nestle, F. et al. (1998) Nature Medicine 4: 328-332). Las DC también pueden transducirse por medios genéticos para que expresen estos antígenos tumorales. Las DC también se han fusionado directamente con células tumorales con fines de inmunización (Kugler, A. et al. (2000) Nature Medicine 6:332-336). Como método de vacunación, la inmunización con DC puede combinarse eficazmente con otro agente, por ejemplo,elbloqueo PD-1, para activar respuestas antitumorales más potentes.

Captadores biespecíficos de células T de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un captador de células T biespecífico. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer gastrointestinal, un melanoma o un cáncer de pulmón) o una neoplasia hematológica (por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, un linfoma no Hodgkin) o una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfoblástica aguda).

Los captadores biespecíficos de células T (BiTE®) son una clase de anticuerpos monoclonales biespecíficos artificiales que pueden dirigir el sistema inmunitario del huésped, por ejemplo, la actividad citotóxica de las células T, contra las células cancerosas. Los captadores de células T biespecíficos pueden formar un vínculo entre las células T y las células tumorales, lo que hace que las células T ejerzan una actividad citotóxica sobre las células tumorales mediante la producción de proteínas como la perforina y las granzimas, independientemente de la presencia del MHC I o de moléculas coestimuladoras. Estas proteínas penetran en las células tumorales e inician la apoptosis de la célula. Esta acción imita los procesos fisiológicos observados durante los ataques de células T contra células tumorales.

En algunas realizaciones, el captador de células T bi-específico es una proteína de fusión que comprende dos fragmentos variables de cadena simple (scFvs) de diferentes anticuerpos. En algunas realizaciones, uno de los scFvs se une a células T, por ejemplo,através del receptor CD3, y el otro a una célula tumoral, por ejemplo,através de una molécula específica de tumor.

En algunas realizaciones, el captador biespecífico de células T es una molécula de anticuerpo biespecífica de NKG2A y CD138, o una molécula de anticuerpo biespecífica de CD3 y TCR. En algunas realizaciones, el captador biespecífico de células T es una molécula de anticuerpo biespecífico que se une a CD3 y a un antígeno tumoral (por ejemplo, EGFR, PSCA, PSMA, EpCAM, HER2 entre otros).

En algunas realizaciones, el captador de células T biespecífico es blinatumomab (Número de Registro CAS: 853426-35-4). Blinatumomab también se conoce como MT103. Blinatumomab se dirige específicamente a un sitio CD3 para las células T y a un sitio CD19 para las células B.

En algunas realizaciones, el captador bi-específico de células T es MT110. MT110 es un anticuerpo de cadena simple dirigido a EpCAM y CD3. MT110 se describe, por ejemplo, en Amann et al. J Immunother.

2009;32(5):452-64.

En algunas realizaciones, el captador de células T biespecífico se dirige al proteoglicano de condroitín sulfato asociado a melanoma (MCSP). En algunas realizaciones, el captador de células T bi-específico se dirige a CD33. En algunas realizaciones, el captador de células T biespecífico comprende trastuzumab (dirigido contra HER2/neu), cetuximab o panitumumab (ambos dirigidos contra el receptor EGF), o un fragmento funcional de los mismos. En algunas realizaciones, el captador de células T biespecífico se dirige a CD66e y EphA2.

Agonista GITR de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agonista GITR. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia hematológica. En algunas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer que expresa la caja de horquilla P3 (FoxP3), un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (HNSCC)) o un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)).

En ciertas realizaciones, el agonista GITR es una molécula de anticuerpo anti-GITR. Se describen moléculas de anticuerpo anti-GITR de ejemplo, por ejemplo, en la Publicación de solicitud internacional No. WO 2016/057846 (por ejemplo, Mab7). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-GITR comprende una secuencia HCDR1 de GFSLSSY (SEQ ID NO: 301) divulgada como SEQ ID NO: 84 de WO 2016/057846), una secuencia HCDR2 de WGGGG (SEQ ID NO: 302) divulgada como SEQ ID NO: 80 de WO 2016/057846), una secuencia HCDR3 de HAYGHDGGFAMDY (SEQ ID NO: 303) divulgada como SEQ ID NO: 29 de WO 2016/057846), una LCDR1 de SESVSSN (SEQ ID NO: 304) divulgada como SEQ ID NO: 85 de WO 2016/057846), una LCDR2 de GAS (SEQ ID NO: 305) divulgada como SEQ ID NO: 82 de WO 2016/057846), y una LCDR3 de SYSYPF (SEQ ID NO: 306) divulgada como SEQ ID NO: 83 de WO 2016/057846), todo de acuerdo con la definición de CDR de Chothia. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-GITR comprende una secuencia HCDR1 de SYGVD (SEQ ID NO: 307) divulgada como SEQ ID n O: 22 de WO 2016/057846), una secuencia HCDR2 de VIWGGGGTYYASSLMG (SEQ ID NO: 308) divulgada como SEQ ID NO: 25 de WO 2016/057846), una secuencia HCDR3 de HAYGHDGGFAMDY (SEQ ID NO: 303) divulgada como SEQ ID NO: 29 de WO 2016/057846), una LCDR1 de RASESVSSNVA (SEQ ID NO: 309) divulgada como SEQ ID NO: 30 de WO 2016/057846), una LCDR2 de GASNRAT (SEQ ID NO: 310) divulgada como SEQ ID NO: 33 de WO 2016/057846), y una LCDR3 de GQSYSYPFT (SEQ ID NO: 311) divulgada como SEQ ID NO: 34 de WO 2016/057846), todas según la definición de CDR de Kabat.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-GITR comprende una secuencia de aminoácidos de región variable (VH) de cadena pesada de EVQLVESGGGLVQSGGSLRLSCAASGFSLSSYGVDWVRQAPGKGLEWVGVIWGGGGTYYA SSLMGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARHAYGHDGGFAMDYWGQGTLVTVS S (SEQ ID NO: 312) (divulgada como SEQ ID NO: 99 de WO 2016/057846). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-GITR comprende una secuencia de aminoácidos de región variable (VL) de cadena ligera de EIVMTQSP A TLSVSPGERA TLSCRASESVSSNV A WYQQRPGQAPRLLIYGASNRA TGIP ARFS GSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCGQSYSYPFTFGQGTKLEIK (SEQ ID NO: 313) (divulgada como SEQ ID NO: 7 de WO 2016/057846).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-GITR comprende una secuencia de aminoácidos de cadena pesada (HC) de: EVQLVESGGGLVQSGGSLRLSCAASGFSLSSYGVDWVRQAPGKGLEWVGVIWGGGGTYYA SSLMGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARHAYGHDGGFAMDYWGQGTLVTVS SASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGL YSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLF PPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWS VLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLT CLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSV MHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 314) (divulgada como SEQ ID NO: 100 de WO 2016/057846). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo antiGITR comprende una secuencia de aminoácidos de cadena ligera (LC) de EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASESVSSNVAWYQQRPGQAPRLLIYGASNRATGIPARFS GSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCGQSYSYPFTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSG TASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKH KVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 315) (divulgada como SEQ ID NO: 66 de WO 2016/057846).

Agonistas GITR de ejemplo incluyen, por ejemplo, proteínas de fusión GITR y anticuerpos anti-GITR (por ejemplo, anticuerpos bivalentes anti-GITR), tales como, una proteína de fusión GITR descrita en la Patente U.S. No.: 6,111.090, Patente Europea No.: 0920505B1, Patente U.S. No.: 8,586,023, Publicación PCT No.: WO 2010/003118 y 2011/090754, o un anticuerpo anti-GITR descrito, por ejemplo, en la Patente U.S. No.: 7,025,962, Patente europea No.: 1947183B1, Patente U.S. No.: 7,812,135, Patente U.S. No..No. de patente U.S.: 8,388,967, No. de patente U.S.: 8,591,886, No. de patente europea: EP 1866339, No. de la Publicación PCT: WO 2011/028683, No. de patente U.S. No.: 8,709,424, Publicación PCT No.:WO 2013/039954, Publicación internacional No.: WO2013/039954, Publicación U.S. No.: US2014/0072566, Publicación internacional No.: WO2015/026684, Publicación PCT No.WO2005/007190, Publicación PCT No.: WO 2007/133822, Publicación PCT No.: WO2005/055808, Publicación PCT No.WO 99/40196, Publicación PCT No.: WO 2001/03720, Publicación PCT No.: WO99/20758, Patente U.S. No.: 6,689,607, Publicación PCT No.WO2006/083289, Publicación PCT No.: WO 2005/115451, Patente U.S. No.: 7,618,632, Publicación PCT No.: WO 2011/051726, Publicación internacional No.: WO2004/060319, y Publicación internacional No.: WO2014/012479.

En una realización, el agonista GITR se utiliza en combinación con un inhibidor PD-1, por ejemplo, como se describe en WO2015/026684.

En otra realización, el agonista GITR se utiliza en combinación con un agonista TLR, por ejemplo, como se describe en WO2004/060319, y la Publicación Internacional No.: WO2014/012479.

Inhibidores de PD-1 de ejemplo

PD-1 es un miembro de la familia CD28/CTLA-4 que se expresa, por ejemplo, en células T CD4+ y CD8+ activadas, Tregs, y células B. Regula negativamente la señalización y la función de las células T efectoras. PD-1 se induce en las células T infiltrantes de tumores y puede provocar un agotamiento funcional o disfunción (Keir et al. (2008) Annu. Rev. Immunol. 26:677-704; Pardoll et al. (2012) Nat Rev Cancer 12(4):252-64). PD-1 emite una señal coinhibitoria al unirse a cualquiera de sus dos ligandos, el ligando de muerte programada 1 (PD-L1) o el ligando de muerte programada 2 (PD-L2). PD-L1 se expresa en varios tipos de células, como las células T, las células asesinas naturales (NK), los macrófagos, las células dendríticas (DC), las células B, las células epiteliales, las células endoteliales vasculares y muchos tipos de tumores. La alta expresión de PD-L1 en tumores murinos y humanos se ha relacionado con malos resultados clínicos en diversos tipos de cáncer (Keir et al. (2008) Annu. Rev. Immunol. 26:677-704; Pardoll et al. (2012) Nat Rev Cancer 12(4):252-64). PD-L2 se expresa en células dendríticas, macrófagos y algunos tumores. El bloqueo de la vía PD-1 ha sido validado preclínica y clínicamente para la inmunoterapia del cáncer. Tanto los estudios preclínicos como los clínicos han demostrado que el bloqueo anti-PD-1 puede restaurar la actividad de las células T efectoras y dar lugar a una respuesta antitumoral robusta. Por ejemplo, el bloqueo de la vía PD-1 puede restaurar la función de las células T efectoras agotadas/disfuncionales (por ejemplo, proliferación, secreción de IFN-y o función citolítica) y/o inhibir la función de las células Treg (Keir et al. (2008) Annu. Rev. Immunol. 26:677-704; Pardoll et al. (2012) Nat Rev Cancer 12(4):252-64). El bloqueo de la vía de PD-1 puede efectuarse con un anticuerpo, un fragmento de unión a antígeno del mismo, una inmunoadhesina, una proteína de fusión u oligopéptido de PD-1, PD-L1 y/o PD-L2.

Tal como se utiliza en el presente documento, el término "muerte programada 1" o "PD-1" incluye isoformas, de mamífero, por ejemplo, PD-1 humana, especies homólogas de PD-1 humana, y análogos que comprenden al menos un epítopo común con PD-1. La secuencia de aminoácidos de PD-1, por ejemplo, PD-1 humana, es conocida en la técnica, por ejemplo, Shinohara T et al. (1994) Genomics 23(3):704-6; Finger LR, et al. Gene (1997) 197(1-2): 177-87.

Las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 descritas en el presente documento pueden usarse solas o en combinación con uno o más agentes adicionales descritos en el presente documento de acuerdo con un método descrito en el presente documento. En ciertas realizaciones, las combinaciones descritas en el presente documento incluyen un inhibidor de PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, moléculas de anticuerpos humanizados) como se describe en el presente documento.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo aislada o recombinante) tiene una o más de las siguientes propiedades:

(i) se une a PD-1, por ejemplo, PD-1 humana, con alta afinidad, por ejemplo, con una constante de afinidad de al menos aproximadamente 107 M-1, típicamente aproximadamente 108 M-1, y más típicamente, aproximadamente 109 M'1 a 1010 M'1 o mayor;

(ii) no se une sustancialmente a CD28, CTLA-4, ICOS o BTLA;

(iii) inhibe o reduce la unión de PD-1 a un ligando de PD-1, por ejemplo, PD-L1 o PD-L2, o ambos;

(iv) se une específicamente a un epítopo en PD-1, por ejemplo, el mismo epítopo o epítopo similar al reconocido por el anticuerpo monoclonal murino BAP049 o un anticuerpo quimérico BAP049, por ejemplo, BAP049-chi o BAP049-chi-Y;

(v) muestra la misma o similar afinidad o especificidad de unión, o ambas, que cualquiera de los BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E;

(vi) muestra la misma o similar afinidad o especificidad de unión, o ambas, que una molécula de anticuerpo (por ejemplo, una región variable de cadena pesada y una región variable de cadena ligera) descrita en la Tabla 1;

(vii) muestra la misma o similar afinidad o especificidad de unión, o ambas, que una molécula de anticuerpo (por ejemplo, una región variable de cadena pesada y una región variable de cadena ligera) que tiene una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1;

(viii) muestra la misma o similar afinidad o especificidad de unión, o ambas, que una molécula de anticuerpo (por ejemplo, una región variable de cadena pesada y una región variable de cadena ligera) codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1;

(ix) inhibe, por ejemplo, inhibe competitivamente, la unión de una segunda molécula de anticuerpo a PD-1, en la que la segunda molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo elegida entre, por ejemplo, cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E;

(x) se une al mismo epítopo o a un epítopo solapado con una segunda molécula de anticuerpo contra PD-1, en la que la segunda molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo elegida entre, por ejemplo, cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E;

(xi) compite por la unión, y/o se une al mismo epítopo, con una segunda molécula de anticuerpo contra PD-1, en la que la segunda molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo elegida entre, por ejemplo, cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E;

(xii) tiene una o más propiedades biológicas de una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo elegida entre, por ejemplo, cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E;

(xiii) tiene una o más propiedades farmacocinéticas de una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, por ejemplo, una molécula de anticuerpo elegida entre, por ejemplo, cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E;

(xiv) inhibe una o más actividades de PD-1, por ejemplo, da lugar a una o más de las siguientes: un aumento de los linfocitos infiltrantes del tumor, un aumento de la proliferación mediada por receptores de células T, o una disminución de la evasión inmunitaria por parte de las células cancerosas;

(xv) se une a la PD-1 humana y tiene reactividad cruzada con la PD-1 de cynomolgus;

(xvi) se une a uno o más residuos dentro de la cadena C, el bucle CC', la cadena C' o el bucle FG de PD-1, o una combinación dos, tres o todos de la cadena C, el bucle CC', la cadena C' o el bucle FG de PD-1, por ejemplo, donde la unión se ensaya mediante ELISA o Biacore; o

(xvii) tiene una región VL que contribuye más a la unión a PD-1 que una región VH.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo se une a PD-1 con alta afinidad, por ejemplo, con una K<d>que es aproximadamente igual, o al menos aproximadamente 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% o 90% mayor o menor que la K<d>de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 murino o quimérico, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 murino o quimérico descrita en el presente documento. En algunas realizaciones, la Kd de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 murino o quimérico es inferior a aproximadamente 0.4, 0.3, 0.2, 0.1 o 0.05 nM, por ejemplo, medido por un método Biacore. En algunas realizaciones, la K<d>de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 murino o quimérico es inferior a aproximadamente 0.2 nM, por ejemplo, aproximadamente 0,135 nM. En otras realizaciones, la Kd de la molécula de anticuerpo anti PD-1 murino o quimérico es inferior a aproximadamente 10, 5, 3, 2 o 1 nM, por ejemplo, medido por unión en células que expresan PD-1 (por ejemplo, células 300.19). En algunas realizaciones, la Kd de la molécula de anticuerpo anti PD-1 murino o quimérico es inferior a aproximadamente 5 nM, por ejemplo, aproximadamente 4,60 nM (o aproximadamente 0,69 pg/mL).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se une a PD-1 con un Kinactivo más lento que 1 * 10'4, 5 * 10'5, or 1 * 10'5 s-1, por ejemplo, aproximadamente 1.65 * 10'5 s-1. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se une a PD-1 con un Kactivo más rápido que 1 * 104, 5 * 104, 1 * 105, or 5 * 105 M 'V , por ejemplo, aproximadamente 1.23 * 105 M 'V .

En algunas realizaciones, el nivel de expresión de la molécula de anticuerpo es mayor, por ejemplo, al menos aproximadamente 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 veces mayor, que el nivel de expresión de una molécula de anticuerpo murino o quimérico, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 murino o quimérico descrita en el presente documento. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo se expresa en células CHO.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 reduce una o más actividades asociadas a PD-1 con una IC50 (concentración al 50% de inhibición) que es aproximadamente igual o menor, por ejemplo, al menos aproximadamente 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% o 90% menor, que la IC50 de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 murino o quimérico, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 murino o quimérico descrita en el presente documento. En algunas realizaciones, la IC50 de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 murino o quimérico es inferior a aproximadamente 6, 5, 4, 3, 2 o 1 nM, por ejemplo, medido por unión en células que expresan PD-1 (por ejemplo, células 300.19). En algunas realizaciones, la IC50 de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 murino o quimérico es inferior a aproximadamente 4 nM, por ejemplo, aproximadamente 3,40 nM (o aproximadamente 0,51 pg/mL). En algunas realizaciones, la actividad asociada a PD-1 reducida es la unión de PD-L1 y/o PD-L2 a PD-1. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se une a células mononucleadas de sangre periférica (PBMC) activadas por enterotoxina estafilocócica B (SEB). En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 aumenta la expresión de IL-2 en sangre total activada por SEB. Por ejemplo, el anticuerpo anti-PD-1 aumenta la expresión de IL-2 en al menos aproximadamente 2, 3, 4 o 5 veces, en comparación con la expresión de IL-2 cuando se utiliza un control de isotipo (por ejemplo, IgG4).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 tiene una estabilidad mejorada, por ejemplo, al menos aproximadamente 0.5, 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 veces más establein vivooin vitro,que una molécula de anticuerpo anti-PD-1 murino o quimérico, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 murino o quimérico descrita en el presente documento.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti PD-1 es una molécula de anticuerpo humanizada y tiene una puntuación de riesgo basada en el análisis de epítopos de células T de 300 a 700, 400 a 650, 450 a 600, o una puntuación de riesgo como se describe en el presente documento.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una región de unión a antígeno, por ejemplo, una región variable o un fragmento de unión a antígeno de la misma, de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una, dos, tres o cuatro regiones variables de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una o dos regiones variables de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una o dos regiones variables de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres regiones determinantes de complementariedad (CDRs) de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización más, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos que se muestra en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos que se muestra en la Tabla 1. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una sustitución en una CDR de cadena ligera, por ejemplo, una o más sustituciones en una CDR1, CDR2 y/o CDR3 de la cadena ligera. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una sustitución en la CDR3 de la cadena ligera en la posición 102 de la región variable ligera, por ejemplo, una sustitución de un residuo de cisteína por tirosina, o de un residuo de cisteína por serina, en la posición 102 de la región variable ligera según la Tabla 1 (por ejemplo, SEQ ID NO: 16 o 24 para murino o quimérico, sin modificar; o cualquiera de SEQ ID NOs: 34, 42, 46, 54, 58, 62, 66, 70, 74, o 78 para una secuencia modificada).

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs (o colectivamente todas las CDRs) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. La secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1 es una secuencia de aminoácidos.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye todas las seis CDR de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido de cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1, 0 CDR estrechamente relacionadas, por ejemplo, CDR idénticas o que tengan al menos una alteración aminoacídica, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir cualquier CDR descrita en el presente documento. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una sustitución en una CDR de cadena ligera, por ejemplo, una o más sustituciones en una CDR1, CDR2 y/o CDR3 de la cadena ligera. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una sustitución en la CDR3 de la cadena ligera en la posición 102 de la región variable ligera, por ejemplo, una sustitución de un residuo de cisteína por tirosina, o de un residuo de cisteína por serina, en la posición 102 de la región variable ligera según la Tabla 1 (por ejemplo, SEQ ID NO: 16 o 24 para murino o quimérico, sin modificar; o cualquiera de SEQ ID NOs: 34, 42, 46, 54, 58, 62, 66, 70, 74, o 78 para una secuencia modificada).

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR de acuerdo con Kabatet al.(por ejemplo, al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR de acuerdo con la definición de Kabat como se establece en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias antes mencionadas; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) en relación con uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR según Kabatet al.mostrados en la Tabla 1.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye las seis CDR según Kabatet al.(por ejemplo, las seis CDR según la definición de Kabat como se establece en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras) en relación con las seis CDR según Kabatet al.mostradas en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir cualquier CDR descrita en el presente documento.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de Chothia (por ejemplo, al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se establece en la Tabla 1) de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificados por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o que tengan al menos los aminoácidos de los bucles hipervariables que contactan con PD-1; o que tengan al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) relativas a uno, dos o tres bucles hipervariables según Chothiaet al.mostrados en la Tabla 1.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de Chothia (por ejemplo, al menos uno, dos o tres bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia tal como se establece en la Tabla 1) de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificados por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o que tengan al menos los aminoácidos de los bucles hipervariables que contactan con PD-1; o que tengan al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) relativas a uno, dos o tres bucles hipervariables según Chothiaet al.mostrados en la Tabla 1.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables (por ejemplo, al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables de acuerdo con la definición de Chothia como se establece en la Tabla 1) de las regiones variables de cadena pesada y ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificados por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o que tengan al menos los aminoácidos de los bucles hipervariables que contactan con PD-1; o que tengan al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) relativas a uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis bucles hipervariables según Chothiaet al.mostrados en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye los seis bucles hipervariables (por ejemplo, los seis bucles hipervariables según la definición de Chothia como se establece en la Tabla 1) de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E, o bucles hipervariables estrechamente relacionados, por ejemplo,bucleshipervariables que son idénticos o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas); o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) en relación con los seis bucles hipervariables según Chothiaet al.mostrados en la Tabla 1. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir cualquier bucle hipervariable descrito en el presente documento.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDRs o bucles hipervariables de una región variable de cadena pesada de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E, de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR o bucles hipervariables según la definición de Kabat y Chothia, tal como se establece en la Tabla 1); o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas; o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas) en relación con una, dos o tres CDR o bucles hipervariables según Kabat y/o Chothia que se muestran en la Tabla 1.

Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir VH CDR1 según Kabatet al.o VH bucle hipervariable 1 según Chothiaet al.,o una combinación de los mismos, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. En una realización, la combinación de CDR de Kabat y Chothia de VH CDR1 comprende la secuencia de aminoácidos GYTFTTYWMH (SEQ ID NO: 224), o una secuencia de aminoácidos sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, que tenga al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras)). La molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir además, por ejemplo, VH CDRs 2-3 según Kabatet al.y VL CDRs 1-3 según Kabatet al.,por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. Por consiguiente, en algunas realizaciones, las regiones marco se definen basándose en una combinación de CDR definidas según Kabatet al.y bucles hipervariables definidos según Chothiaet al.Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir VH FR1 definida basándose en VH bucle hipervariable 1 según Chothiaet al.y VH FR2 definida basándose en VH CDRs 1-2 según Kabatet al.,por ejemplo, como se muestra en la Tabla 1. La molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede incluir además, por ejemplo, VH FRs 3-4 definidos con base en VH CDRs 2-3 según Kabatet al.y VL FRs 1-4 definidos en base a VL CDRs 1-3 según Kabatet al.

La molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede contener cualquier combinación de CDRs o bucles hipervariables de acuerdo con las definiciones de Kabat y Chothia. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E, de acuerdo con la definición de Kabat y Chothia (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR según la definición de Kabat y Chothia, tal como se establece en la Tabla 1).

En una realización, por ejemplo, una realización que comprende una región variable, una CDR (por ejemplo, CDR de Chothia o CDR de Kabat), u otra secuencia mencionada en el presente documento, por ejemplo, en la Tabla 1, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífica, una molécula de anticuerpo biespecífica, o es una molécula de anticuerpo que comprende un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo, por ejemplo, medio anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de medio anticuerpo. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo biespecífica que tiene una primera especificidad de unión para PD-1 y una segunda especificidad de unión para TIM-3, LAG-3, CEACAm (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye:

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de SEQ ID NO: 4, una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos V<l>C<d>R2 de SEQ ID NO: 14, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 33.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 1; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de la SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de la SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de la SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de la SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de la SEQ ID NO: 32.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de SEQ ID NO: 224, una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos VlCd R2 de SEQ ID NO: 14, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 33.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de SEQ ID NO: 224; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VlCd R2 de SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 32.

En una realización, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo humanizada. En otra realización, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífica. En aún otra realización, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo biespecífica.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 224; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 32.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 224; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 14, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 33.

In one embodiment, the anti-PD-1 antibody molecule comprises the VHCDR1 amino acid sequence of SEQ ID NO: 1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende la secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 4. En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende la secuencia de aminoácidos VHCDR1 de la SEQ ID NO: 224.

En una realización, el marco variable de cadena ligera o pesada (por ejemplo, la región que abarca al menos FR1, FR2, FR3, y opcionalmente FR4) de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede elegirse entre: (a) un marco variable de cadena ligera o pesada que incluya al menos 80%, 85%, 87% 90%, 92%, 93%, 95%, 97%, 98%, o preferiblemente 100% de los residuos de aminoácidos de un marco variable de cadena ligera o pesada humano, por ejemplo, un residuo de marco variable de cadena ligera o pesada de un anticuerpo maduro humano, una secuencia de línea germinal humana o una secuencia consenso humana; (b) un marco variable de cadena ligera o pesada que incluya del 20% al 80%, del 40% al 60%, del 60% al 90% o del 70% al 95% de los residuos de aminoácidos de un marco variable de cadena ligera o pesada humana, por ejemplo, un residuo de marco variable de cadena ligera o pesada de un anticuerpo maduro humano, una secuencia de línea germinal humana, o una secuencia consenso humana; (c) un marco no humano (por ejemplo, un marco de roedor); o (d) un marco no humano que ha sido modificado, por ejemplo, para eliminar determinantes antigénicos o citotóxicos, por ejemplo, desinmunizado, o parcialmente humanizado. En una realización, la región de marco variable de cadena ligera o pesada (particularmente FR1, FR2 y/o FR3) incluye una secuencia de marco variable de cadena ligera o pesada al menos 70, 75, 80, 85, 87, 88, 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98, 99% idéntica o idéntica a los marcos de un segmento VL o VH de un gen de línea germinal humana.

En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende un dominio variable de cadena pesada que tiene al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, diez, quince, veinte o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, a partir de una secuencia de aminoácidos de BAP049-chi-HC, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos de la región FR en toda la región variable, por ejemplo, mostrada en las FIGs. 9A-9B, o SEQ ID NO: 18, 20, 22 o 30. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende un dominio variable de cadena pesada que tiene uno o más de: E en la posición 1, V en la posición 5, A en la posición 9, V en la posición 11, K en la posición 12, K en la posición 13, E en la posición 16, L en la posición 18, R en la posición 19, I o V en la posición 20, G en la posición 24, I en la posición 37, A o S en la posición 40, T en la posición 41, S en la posición 42, R en la posición 43, M o L en la posición 48, V o F en la posición 68, T en la posición 69, I en la posición 70, S en la posición 71, A o R en la posición 72, K o N en la posición 74, T o K en la posición 76, S o N en la posición 77, L en la posición 79, L en la posición 81, E o Q en la posición 82, M en la posición 83, S o N en la posición 84, R en la posición 87, A en la posición 88, o T en la posición 91 de la secuencia de aminoácidos de BAP049-chi-HC, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos del FRen toda la región variable, por ejemplo, mostrada en las FIGs. 9A-9B, o SEQ ID NO: 18, 20, 22 o 30.

Alternativamente, o en combinación con las sustituciones de cadena pesada de BAP049-chi-HC descritas aquí, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende un dominio variable de cadena ligera que tiene al menos uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, diez, quince, veinte o más cambios de aminoácidos, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, de una secuencia de aminoácidos de BAP049-chi-LC, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos mostrada en las FIGs. 10A-10B, o SEQ ID NO: 24 o 26. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende un dominio variable de cadena pesada que tiene uno o más de: E en la posición 1, V en la posición 2, Q en la posición 3, L en la posición 4, T en la posición 7, D o L o A en la posición 9, F o T en la posición 10, Q en la posición 11, S o P en la posición 12, L o A en la posición 13, S en la posición 14, P o L o V en la posición 15, K en la posición 16, Q o D en la posición 17, R en la posición 18, A en la posición 19, S en la posición 20, I o L en la posición 21, T en la posición 22, L en la posición 43, K en la posición 48, A o S en la posición 49, R o Q en la posición 51, Y en la posición 55, I en la posición 64, S o P en la posición 66, S en la posición 69, Y en la posición 73, G en la posición 74, E en la posición 76, F en la posición 79, N en la posición 82, N en la posición 83, L o I en la posición 84, E en la posición 85, S o P en la posición 86, D en la posición 87, A o F o I en la posición 89, T o Y en la posición 91, F en la posición 93, o Y en la posición 102 de la secuencia de aminoácidos de BAP049-chi-LC, por ejemplo, la secuencia de aminoácidos que se muestra en las FIGS. 10A-10B, o SEQ ID NO: 24 o 26.

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una, dos, tres o cuatro regiones marco de cadena pesada (por ejemplo, una secuencia de aminoácidos VHFW mostrada en la Tabla 2, o codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 2), o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.

En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una, dos, tres o cuatro regiones marco de cadena ligera (por ejemplo, una secuencia de aminoácidos VLFW mostrada en la Tabla 2, o codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 2), o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una, dos, tres o cuatro regiones marco de cadena pesada (por ejemplo, una secuencia de aminoácidos VHFW mostrada en la Tabla 2, o codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 2), o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma; y una, dos, tres o cuatro regiones marco de cadena ligera (por ejemplo, una secuencia de aminoácidos VLFW mostrada en la Tabla 2, o codificada por la secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 2), o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende la región marco de cadena pesada 1 (VHFW1) de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D, o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 147). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 1 (VHFW1) de BAP049-hum14 o BAP049-hum15 (por ejemplo, s Eq ID NO: 151).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende la región marco de cadena pesada 2 (VHFW2) de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum09, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 153). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 2 (VHFW2) de BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum08, BAP049-hum10, BAP049-hum14, BAP049-hum15, o BAP049-Clon-D (por ejemplo, SEQ ID NO: 157). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 2 (VHFW2) de BAP049-hum16 (por ejemplo, SEQ ID NO: 160).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende la región marco de cadena pesada 3 (VHFW3) de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum09, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 162). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena pesada 3 (VHFW3) de BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum08, BAP049-hum10, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, o BAP049-Clon-D (por ejemplo, SEQ ID NO: 166).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende la región marco de cadena pesada 4 (VHFW4) de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 169).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende la región marco de cadena ligera 1 (VLFW1) de BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum15, BAP049-hum16, o BAP049-Clon-C (por ejemplo, SEQ ID NO: 174). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 1 (VLFW1) de BAP049-hum01, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum07, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum14, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-D, o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 177). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 1 (Vl Fw 1) de BAP049-hum06 (por ejemplo, SEQ ID NO: 181). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 1 (VLFW1) de BAP049-hum13 (por ejemplo, SEQ ID NO: 183). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 1 (VLFW1) de BAP049-hum02, BAP049-hum03 o BAP049-hum12 (por ejemplo, SEQ ID NO: 185).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende la región marco de cadena ligera 2 (VLFW2) de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum06, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-D, o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 187). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 2 (VLFW2) de BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum07, BAP049-hum13, o BAP049-Clon-C (por ejemplo, SEQ ID NO: 191). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 2 (VLFW2) de BAP049-hum12 (por ejemplo, SEQ ID NO: 194).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende la región marco de cadena ligera 3 (VLFW3) de BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D, o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 196). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 3 (VLFW3) de BAP049-hum02 o BAP049-hum03 (por ejemplo, SEQ ID NO: 200). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 3 (VLFW3) de BAP049-hum01 o BAP049-Clon-A (por ejemplo, SEQ ID NO: 202). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende la región marco de cadena ligera 3 (VLFW3) de BAP049-hum04, BAP049-hum05 o BAP049-Clon-B (por ejemplo, SEQ ID NO: 205).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende la región marco de cadena ligera 4 (VLFW4) de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 208).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP-hum07, BAP049-hum09, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 153 (VHFW2) y SEQ ID NO: 162 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum08, BAP049-hum10, o BAP049-Clon-D (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 157 (VHFW2), y SEQ ID NO: 166 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum14 o BAP049-hum15 (por ejemplo, SEQ ID NO: 151 (VHFW1), SEQ ID NO: 157 (VHFW2), y SEQ ID NO: 166 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum16 (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 160 (VHFW2), y SEQ ID NO: 166 (VHFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende además la región marco de cadena pesada 4 (VHFW4) de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum 10, BAP049-hum11, BAP049-hum 12, BAP049-hum 13, BAP049-hum 14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D, o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 169).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum01 o BAP049-Clon-A (por ejemplo, SEQ ID NO: 177 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 202 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum02 o BAP049-hum03 (por ejemplo, SEQ ID NO: 185 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 200 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum04, BAP049-hum05 o BAP049-Clon-B (por ejemplo, SEQ ID NO: 177 (VLFW1), SEQ ID NO: 191 (VLFW2) y SEQ ID NO: 205 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum06 (por ejemplo, SEQ ID NO: 181 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum07 (por ejemplo, SEQ ID NO: 177 (VLFW1), SEQ ID NO: 191 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum15, BAP049-hum16, o BAP049-Clon-C (por ejemplo, SEQ ID NO: 174 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum14, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 177 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2) y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum12 (por ejemplo, SEQ ID NO: 185 (VLFW1), SEQ ID NO: 194 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum13 (por ejemplo, SEQ ID NO: 183 (VLFW1), SEQ ID NO: 191 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)). En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende además la región marco de cadena ligera 4 (VLFW4) de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 208).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum01 o BAP049-Clon-A (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 153 (VHFW2), y SEQ ID NO: 162 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum01 o BAP049-Clon-A (por ejemplo, SEQ ID NO: 177 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 202 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum02 (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 153 (VHFW2), y SEQ ID NO: 162 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum02 (por ejemplo, SEQ ID NO: 185 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 200 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum03 (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 157 (VHFW2), y SEQ ID NO: 166 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum03 (por ejemplo, SEQ ID NO: 185 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 200 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum04 (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 157 (VHFW2), y SEQ ID NO: 166 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum04 (por ejemplo, SEQ ID NO: 177 (VLFW1), SEQ ID NO: 191 (VLFW2), y SEQ ID NO: 205 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum05 o BAP049-Clon-B (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 153 (VHFW2), y SEQ ID NO: 162 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum05 o BAP049-Clon-B (por ejemplo, SEQ ID NO: 177 (VLFW1), SEQ ID NO: 191 (VLFW2), y SEQ ID NO: 205 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum06 (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 153 (VHFW2), y SEQ ID NO: 162 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum06 (por ejemplo, SEQ ID NO: 181 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum07 (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 153 (VHFW2), y SEQ ID NO: 162 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum07 (por ejemplo, SEQ ID NO: 177 (VLFW1), SEQ ID NO: 191 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum08 (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 157 (VHFW2), y SEQ ID NO: 166 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum08 (por ejemplo, SEQ ID NO: 174 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum09 o BAP049-Clon-C (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 153 (VHFW2), y SEQ ID NO: 162 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum09 o BAP049-Clon-C (por ejemplo, SEQ ID NO: 174 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum10 o BAP049-Clon-D (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 157 (VHFW2), y SEQ ID NO: 166 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum10 o BAP049-Clon-D (por ejemplo, SEQ ID NO: 177 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum11 o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 153 (VHFW2), y SEQ ID NO: 162 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum11 o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 177 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum12 (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 153 (VHFW2), y SEQ ID NO: 162 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum12 (por ejemplo, SEQ ID NO: 185 (VLFW1), SEQ ID NO: 194 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum13 (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 153 (VHFW2), y SEQ ID NO: 162 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum13 (por ejemplo, SEQ ID NO: 183 (VLFW1), SEQ ID NO: 191 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum14 (por ejemplo, SEQ ID NO: 151 (VHFW1), SEQ ID NO: 157 (VHFW2), y SEQ ID NO: 166 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum14 (por ejemplo, SEQ ID NO: 177 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum15 (por ejemplo, SEQ ID NO: 151 (VHFW1), SEQ ID NO: 157 (VHFW2), y SEQ ID NO: 166 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum15 (por ejemplo, SEQ ID NO: 174 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las regiones marco de cadena pesada 1-3 de BAP049-hum16 (por ejemplo, SEQ ID NO: 147 (VHFW1), SEQ ID NO: 160 (VHFW2), y SEQ ID NO: 166 (VHFW3)) y las regiones marco de cadena ligera 1-3 de BAP049-hum16 (por ejemplo, SEQ ID NO: 174 (VLFW1), SEQ ID NO: 187 (VLFW2), y SEQ ID NO: 196 (VLFW3)).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende además la región marco de cadena pesada 4 (VHFW4) de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 169) y la región marco de cadena ligera 4 (VLFW4) de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E (por ejemplo, SEQ ID NO: 208).

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende una región marco de cadena pesada que tiene una combinación de regiones marco FW1, FW2 y FW3 como se muestra en las FIGs. 5 o 7. En otra realización, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena ligera que tiene una combinación de regiones marco FW1, FW2 y FW3 como se muestra en las FIGs. 5 o 7. En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende una región marco de cadena pesada que tiene una combinación de regiones marco FW1, FW2 y FW3 como se muestra en las FIGs. 5 o 7, y una región marco de cadena ligera que tiene una combinación de regiones marco FW1, FW2 y FW3 como se muestra en las FIGs.

5 o 7.

En una realización, el dominio variable de cadena pesada o ligera, o ambos, de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una secuencia de aminoácidos, que es sustancialmente idéntica a un aminoácido descrito en el presente documento, por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica a una región variable de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D, o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o que difiere al menos en 1 o 5 residuos, pero menos de 40, 30, 20 o 10 residuos, de una región variable de un anticuerpo descrito en el presente documento.

En una realización, la región variable de cadena pesada o ligera, o ambas, de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye una secuencia de aminoácidos codificada por una secuencia de ácido nucleico descrita en el presente documento o un ácido nucleico que hibrida con una secuencia de ácido nucleico descrita en el presente documento (por ejemplo, una secuencia de ácido nucleico como se muestra en las Tablas 1 y 2) o su complemento, por ejemplo, bajo baja rigurosidad, rigurosidad media o alta rigurosidad, u otra condición de hibridación descrita en el presente documento.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una, dos, tres o cuatro regiones de unión a antígeno, por ejemplo, regiones variables, que tienen una secuencia de aminoácidos como se establece en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, o que difiere en no más de 1,2, 5, 10 o 15 residuos de aminoácidos de las secuencias mostradas en la Tabla 1). En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye un dominio VH y/o VL codificado por un ácido nucleico que tiene una secuencia de nucleótidos tal como se establece en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, o que difiere en no más de 3, 6 , 15, 30 o 45 nucleótidos de las secuencias mostradas en la Tabla 1).

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena pesada que tiene una secuencia de aminoácidos como se establece en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena ligera que tiene una secuencia de aminoácidos como se establece en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR de regiones variables de cadenas pesadas y ligeras que tienen una secuencia de aminoácidos como se establece en la Tabla 1), o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una, dos o tres CDR y/o bucles hipervariables de una región variable de cadena pesada que tiene una secuencia de aminoácidos de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E, tal como se resumen en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a las mismas (por ejemplo, una secuencia al menos un 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o con una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende al menos una, dos o tres CDR y/o bucles hipervariables de una región variable de cadena ligera que tiene una secuencia de aminoácidos de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E, tal como se resumen en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a las mismas (por ejemplo, una secuencia al menos un 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o con una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende las seis CDR y/o bucles hipervariables descritos en el presente documento, por ejemplo, descritos en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 tiene una región variable que es idéntica en secuencia, o que difiere en 1, 2, 3, o 4 aminoácidos de una región variable descrita en el presente documento (por ejemplo, una región FR descrita en el presente documento).

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 es un anticuerpo completo o un fragmento del mismo (por ejemplo, un Fab, F(ab')2, Fv, o un fragmento Fv de cadena simple (scFv)). En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 es un anticuerpo monoclonal o un anticuerpo con especificidad única. La molécula de anticuerpo anti-PD-1 también puede ser una molécula de anticuerpo humanizado, quimérico, camélido, tiburón o generadoin vitro.En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 es una molécula de anticuerpo humanizada. Las cadenas pesadas y ligeras de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 pueden ser de longitud completa (por ejemplo, un anticuerpo puede incluir al menos una, y preferiblemente dos, cadenas pesadas completas, y al menos una, y preferiblemente dos, cadenas ligeras completas) o pueden incluir un fragmento de unión a antígeno (por ejemplo, un Fab, F(ab')2, Fv, un fragmento Fv de cadena única, un anticuerpo de dominio único, un diacuerpo (dAb), un anticuerpo bivalente, o un anticuerpo biespecífico o fragmento del mismo, una variante de dominio único del mismo, o un anticuerpo camélido).

En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 tiene una región constante de cadena pesada (Fc) elegida de, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD, e IgE; particularmente, elegida de, por ejemplo, las regiones constantes de cadena pesada de IgG1, IgG2, IgG3, e IgG4, más particularmente, la región constante de cadena pesada deIgG 1 o IgG2 (por ejemplo, IgG1, IgG2 o IgG4 humanas). En una realización, la región constante de cadena pesada es IgG1 humana. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 tiene una región constante de cadena ligera elegida entre, por ejemplo, las regiones constantes de cadena ligera de kappa o lambda, preferiblemente kappa (por ejemplo, kappa humana). En una realización, la región constante se altera, por ejemplo, se muta, para modificar las propiedades de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, para aumentar o disminuir una o más de: La unión al receptor Fc, la glicosilación del anticuerpo, el número de residuos de cisteína, la función de las células efectoras o la función del complemento). Por ejemplo, la región constante se muta en las posiciones 296 (M a Y), 298 (S a T), 300 (T a E), 477 (H a K) y 478 (N a F) para alterar la unión al receptor Fc (por ejemplo, las posiciones mutadas corresponden a las posiciones 132 (M a Y), 134 (S a T), 136 (T a E), 313 (H a K) y 314 (N a F) de las SEQ ID NOs: 212 o 214; o las posiciones 135 (M a Y), 137 (S a T), 139 (T a E), 316 (H a K) y 317 (N a F) de las SEQ ID NOs: 215, 216, 217 o 218). En otra realización, la región constante de cadena pesada de una IgG4, por ejemplo, una IgG4 humana, se muta en la posición 228 según la numeración EU (por ejemplo, S a P), por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3. En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 comprenden una IgG4 humana mutada en la posición 228 según la numeración EU (por ejemplo, S a P), por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3; y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3. En otra realización, la región constante de cadena pesada de una IgG1, por ejemplo, una IgG1 humana, está mutada en una o más de las posiciones 297 según la numeración EU (por ejemplo, N a A), 265 según la numeración EU (por ejemplo, D a A), la posición 329 según la numeración EU (por ejemplo, P a A), la posición 234 según la numeración EU (por ejemplo, L a A), o la posición 235 según la numeración EU (por ejemplo, L a A), por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3. En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 comprenden una IgG1 humana mutada en una o más de las posiciones antes mencionadas, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3; y una región constante de cadena ligera kappa, por ejemplo, como se muestra en la Tabla 3.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 es aislada o recombinante.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 es una molécula de anticuerpo humanizada.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 tiene una puntuación de riesgo basada en el análisis de epítopos de células T de menos de 700, 600, 500, 400 o menos.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 es una molécula de anticuerpo humanizada y tiene una puntuación de riesgo basada en el análisis de epítopos de células T de 300 a 700, 400 a 650, 450 a 600, o una puntuación de riesgo como se describe en el presente documento.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye:

En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o s Eq ID NO: 224; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 32.

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o<s>E<q>ID NO: 224; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 14, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 33.

In embodiments of the aforesaid antibody molecules, the VHCDR1 comprises the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1. En otras realizaciones, el VHCDR1 comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 4. En otras realizaciones, la secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de SEQ ID NO: 224.

En realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas tienen una región variable de cadena pesada que comprende al menos una región marco (FW) que comprende la secuencia de aminoácidos de cualquiera de los<s>E<q>ID NOs: 147, 151, 153, 157, 160, 162, 166, o 169 , o una secuencia de aminoácidos al menos 90% idéntica a la misma, o que no tiene más de dos sustituciones de aminoácidos, inserciones o deleciones en comparación con la secuencia de aminoácidos de cualquiera de los SEQ ID NOs: 147, 151, 153, 157, 160, 162, 166, o 169.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas tienen una región variable de cadena pesada que comprende al menos una región marco que comprende la secuencia de aminoácidos de cualquiera de los SEQ ID NOs: 147, 151, 153, 157, 160, 162, 166, o 169.

En aún otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas anteriormente tienen una región variable de cadena pesada que comprende al menos dos, tres o cuatro regiones marco que comprenden las secuencias de aminoácidos de cualquiera de los SEQ ID NOs: 147, 151, 153, 157, 160, 162, 166, o 169.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una secuencia de aminoácidos VHFW1 de SEQ ID NO: 147 o 151, una secuencia de aminoácidos VHFW2 de SEQ ID NO: 153, 157 o 160, y una secuencia de aminoácidos VHFW3 de SEQ ID NO: 162 o 166, y, opcionalmente, comprenden además una secuencia de aminoácidos VHFW4 de SEQ ID NO: 169.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas tienen una región variable de cadena ligera que comprende al menos una región marco que comprende la secuencia de aminoácidos de cualquiera de los SEQ ID NOs: 174, 177, 181, 183, 185, 187, 191, 194, 196, 200, 202, 205, o 208, o una secuencia de aminoácidos al menos un 90% idéntica a la misma, o que no tiene más de dos sustituciones, inserciones o deleciones de aminoácidos en comparación con la secuencia de aminoácidos de cualquiera de 174, 177, 181, 183, 185, 187, 191, 194, 196, 200, 202, 205, o 208.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas tienen una región variable de cadena ligera que comprende al menos una región marco que comprende la secuencia de aminoácidos de cualquiera de los SEQ ID NOs: 174, 177, 181, 183, 185, 187, 191, 194, 196, 200, 202, 205, o 208.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas tienen una región variable de cadena ligera que comprende al menos dos, tres o cuatro regiones marco que comprenden las secuencias de aminoácidos de cualquiera de los SEQ ID NOs: 174, 177, 181, 183, 185, 187, 191, 194, 196, 200, 202, 205, o 208.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden una secuencia de aminoácidos VLFW1 de SEQ ID NO: 174, 177, 181, 183, o 185, una secuencia de aminoácidos VLFW2 de SEQ ID NO: 187, 191, o 194, y una secuencia de aminoácidos VLFW3 de SEQ ID NO: 196, 200, 202, o 205, y, opcionalmente, comprenden además una secuencia de aminoácidos VLFW4 de SEQ ID NO: 208.

En otras realizaciones, los anticuerpos mencionados comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos al menos 85% idéntica a cualquiera de los SEQ ID NOs: 38, 50, 82, u 86.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38, 50, 82, u 86.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos idéntica en al menos un 85% a cualquiera de los SEQ ID NOs: 42, 46, 54, 58, 62, 66 , 70, 74, o 78.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 42, 46, 54, 58, 62, 66 , 70, 74, o 78.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 40.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 91.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 50.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 52 o SEQ ID NO: 102.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 82.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 84.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 86.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 88.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 42.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 44.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 46.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 48.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 54.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 56.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 58.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 60.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 62.

En otras realizaciones, dichos anticuerpos comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 64.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 66.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 68.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 70.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 72.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 74.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 76.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 78.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 80.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 66.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 70.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 50 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 70.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 46.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 50 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 46.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 54.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 54.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 58.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 62.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 50 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 66.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 74.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 78.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 82 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 70.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 82 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 66.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 86 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 66.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 91 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 44.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 91 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 56.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 91 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 68.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 91 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 72.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 102 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 72.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 40 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 44.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 48.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 52 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 48.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 52 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 56.

En otras realizaciones, los anticuerpos mencionados comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 40 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 60.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 40 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 64.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 52 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 68.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 40 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 68.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 52 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 72.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 40 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 72.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 40 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 76.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 40 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 80.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 84 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 72.

En otras realizaciones, los anticuerpos mencionados comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 84 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 68.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 88 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 68.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas se eligen entre Fab, F(ab')2, Fv, o un fragmento Fv de cadena simple (scFv).

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una región constante de cadena pesada seleccionada entre IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una región constante de cadena ligera elegida entre las regiones constantes de cadena ligera de kappa o lambda.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una región constante de cadena pesada IgG4 humana con una mutación en la posición 228 según la numeración EU o la posición 108 de SEQ ID NO: 212 o 214 y una región constante de cadena ligera kappa.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una región constante de cadena pesada IgG4 humana con una mutación de Serina a Prolina en la posición 228 según la numeración EU o la posición 108 de SEQ ID NO: 212 o 214 y una región constante de cadena ligera kappa.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una región constante de cadena pesada IgG1 humana con una mutación de Asparagina a Alanina en la posición 297 según la numeración EU 0 la posición 180 de SEQ ID NO: 216 y una región constante de cadena ligera kappa.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una región constante de cadena pesada IgG1 humana con una mutación de aspartato a alanina en la posición 265 según la numeración EU o posición 148 de SEQ ID NO: 217, y una mutación de prolina a alanina en la posición 329 según la numeración EU o posición 212 de SEQ ID NO: 217 y una región constante de cadena ligera kappa.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas comprenden una región constante de cadena pesada IgG1 humana con una mutación de leucina a alanina en la posición 234 según la numeración EU o posición 117 de SEQ ID NO: 218, y una mutación de leucina a alanina en la posición 235 según la numeración EU o posición 118 de SEQ ID NO: 218 y una región constante de cadena ligera kappa.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas son capaces de unirse a PD-1 humana con una constante de disociación (Kd) de menos de aproximadamente 0.2 nM.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas se unen a PD-1 humana con una K<d>de menos de aproximadamente 0.2 nM, 0.15 nM, 0.1 nM, 0.05 nM, o 0.02 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.13 nM a 0.03 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.077 nM a 0.088 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.083 nM, por ejemplo, medido por un método Biacore.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas se unen a PD-1 de cynomolgus con una K<d>de menos de aproximadamente 0.2 nM, 0.15 nM, 0.1 nM, 0.05 nM, o 0.02 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.11 nM a 0.08 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.093 nM, por ejemplo, según lo medido por un método Biacore.

En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas se unen tanto a PD-1 humana como a PD-1 de cynomolgus con K<d>similares, por ejemplo, en el intervalo de nM, por ejemplo, como se mide mediante un método Biacore. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas se unen a una proteína de fusión PD-1-Ig humana con una Kd de menos de aproximadamente 0.1 nM, 0.075 nM, 0.05 nM, 0.025 nM, o 0.01 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.04 nM, por ejemplo, medido por ELISA.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas se unen a células Jurkat que expresan PD-1 humana (por ejemplo, células Jurkat transfectadas con PD-1 humana) con una Kd de menos de aproximadamente 0.1 nM, 0.075 nM, 0.05 nM, 0.025 nM, o 0.01 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.06 nM, por ejemplo, según lo medido por análisis FACS.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas se unen a células T de cynomolgus con un K<d>de menos de aproximadamente 1 nM, 0.75 nM, 0.5 nM, 0.25 nM, o 0.1 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.4 nM, por ejemplo, medido por análisis FACS.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas se unen a células que expresan PD-1 de cynomolgus (por ejemplo, células transfectadas con PD-1 de cynomolgus) con una K<d>de menos de aproximadamente 1 nM, 0.75 nM, 0.5 nM, 0.25 nM, o 0.01 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.6 nM, por ejemplo, según lo medido por análisis FACS.

En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas no son reactivas cruzadas con PD-1 de ratón o rata. En otras realizaciones, los anticuerpos mencionados son de reactividad cruzada con PD-1 de rhesus. Por ejemplo, la reactividad cruzada puede medirse mediante un método Biacore o un ensayo de unión utilizando células que expresan PD-1 (por ejemplo, células 300.19 humanas que expresan PD-1). En otras realizaciones, las citadas moléculas de anticuerpo se unen a un dominio extracelular de tipo Ig de PD-1.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas son capaces de reducir la unión de PD-1 a PD-L1, PD-L2, o ambas, o a una célula que expresa PD-L1, PD-L2, o ambas. En algunas realizaciones, las citadas moléculas de anticuerpo reducen (por ejemplo, bloquean) la unión de PD-L1 a una célula que expresa PD-1 (por ejemplo, células 300.19 humanas que expresan PD-1) con una IC50 inferior a aproximadamente 1.5 nM, 1 nM, 0.8 nM, 0.6 nM, 0.4 nM, 0.2 nM o 0.1 nM, por ejemplo, entre aproximadamente 0.79 nM y aproximadamente 1.09 nM, por ejemplo, aproximadamente 0.94 nM o aproximadamente 0.78 nM o menos, por ejemplo, aproximadamente 0.3 nM. En algunas realizaciones, los anticuerpos mencionados reducen (por ejemplo, bloquean) la unión de PD-L2 a una célula que expresa PD-1 (por ejemplo, células humanas 300.19 que expresan PD-1) con una IC50 de menos de aproximadamente 2 nM, 1.5 nM, 1 nM, 0.5 nM o 0.2 nM, por ejemplo, entre aproximadamente 1.05 nM y aproximadamente 1.55 nM, o aproximadamente 1.3 nM o menos, por ejemplo, aproximadamente 0.9 nM.

En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpos mencionadas son capaces de potenciar una respuesta de células T antígeno-específica.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo es una molécula de anticuerpo monoespecífica o una molécula de anticuerpo biespecífica. En realizaciones, la molécula de anticuerpo tiene una primera especificidad de unión para PD-1 y una segunda especificidad de unión para TIM-3, LAG-3, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1, CEACAM-3, y/o CEACAM-5), PD-L1 o PD-L2. En realizaciones, la molécula de anticuerpo comprende un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo, por ejemplo, medio anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de medio anticuerpo.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas aumentan la expresión de IL-2 de células activadas por enterotoxina estafilocócica B (SEB) (por ejemplo, a 25 pg/mL) en al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo, aproximadamente 2 a 3 veces, por ejemplo, aproximadamente 2 a 2.6 veces, por ejemplo, aproximadamente 2.3 veces, en comparación con la expresión de IL-2 cuando se utiliza un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, según se mide en un ensayo de activación de células T por SEB o en un ensayoex vivode sangre entera humana.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas aumentan la expresión de IFN-y de células T estimuladas por anti-CD3 (por ejemplo, a 0.1 pg/mL) en al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo, aproximadamente 1.2 a 3.4 veces, por ejemplo, aproximadamente 2.3 veces, en comparación con la expresión de IFN-<y>cuando se utiliza un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, según se mide en un ensayo de actividad de IFN-<y>.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas aumentan la expresión de IFN-y de células T activadas por SEB (por ejemplo, a 3 pg/mL) en al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo, aproximadamente de 0.5 a 4.5 veces, por ejemplo, aproximadamente 2.5 veces, en comparación con la expresión de IFN-y cuando se utiliza un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, según se mide en un ensayo de actividad de IFN-<y>.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo antes mencionadas aumentan la expresión de IFN-y de células T activadas con un péptido CMV en al menos aproximadamente 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo, aproximadamente 2 a 3.6 veces, por ejemplo, aproximadamente 2.8 veces, en comparación con la expresión de IFN-y cuando se utiliza un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, según se mide en un ensayo de actividad de IFN-<y>.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpos antes mencionadas aumentan la proliferación de células T CD8+ activadas con un péptido CMV en al menos aproximadamente 1, 2, 3, 4, 5 veces, por ejemplo, aproximadamente 1.5 veces, en comparación con la proliferación de células T CD8+ cuando se utiliza un control de isotipo (por ejemplo, IgG4), por ejemplo, medido por el porcentaje de células T CD8+ que pasaron a través de al menos n (por ejemplo, n = 2 o 4) divisiones celulares.

En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas tienen una Cmáx entre aproximadamente 100 pg/mL y aproximadamente 500 pg/mL, entre aproximadamente 150 pg/mL y aproximadamente 450 pg/mL, entre aproximadamente 250 pg/mL y aproximadamente 350 pg/mL, o entre aproximadamente 200 pg/mL y aproximadamente 400 pg/mL, por ejemplo, aproximadamente 292.5 pg/mL, por ejemplo, según se mide en mono.

En ciertas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas tienen una T1/2 entre aproximadamente 250 horas y aproximadamente 650 horas, entre aproximadamente 300 horas y aproximadamente 600 horas, entre aproximadamente 350 horas y aproximadamente 550 horas, o entre aproximadamente 400 horas y aproximadamente 500 horas, por ejemplo, aproximadamente 465.5 horas, por ejemplo, según se mide en mono.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas se unen a PD-1 con una Kd más lenta que 5*10'4, 1*10'4, 5*10'5, o 1*10-5 s-1, por ejemplo, aproximadamente 2,13*10'4 s-1, por ejemplo, según lo medido por un método Biacore. En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpo mencionadas se unen a PD-1 con una Ka más rápida que 1*104, 5*104, 1*105, o 5*105 M s-1-1, por ejemplo, aproximadamente 2,78*105 M s-1-1, por ejemplo, según se mide con un método Biacore.

En algunas realizaciones, las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 antes mencionadas se unen a uno o más residuos dentro de la cadena C, el bucle CC', la cadena C' y el bucle FG de PD-1. La estructura de dominio de PD-1 se describe, por ejemplo, en Cheng et al., "Structure and Interactions of the Human Programmed Cell Death 1 Receptor" J. Biol. Chem. 2013, 288:11771-11785. Como se describe en Chenget. al.la cadena C comprende residuos F43-M50, el bucle CC' comprende S51-N54, la cadena C' comprende residuos Q55-F62, y el bucle FG comprende residuos L108-I114 (numeración de aminoácidos según Changet al. supra). Porconsiguiente, en algunas realizaciones, un anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento se une a al menos un residuo en uno o más de los rangos F43-M50, S51-N54, Q55-F62, y L108-I114 de PD-1. En algunas realizaciones, un anticuerpo anti-PD-1 según se describe en el presente documento se une a al menos un residuo en dos, tres o los cuatro rangos F43-M50, S51-N54, Q55-F62 y L108-I114 de PD-1. En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 se une a un residuo en PD-1 que también forma parte de un sitio de unión para uno o ambos de PD-L1 y PD-L2.

En otro aspecto, la divulgación proporciona una molécula de ácido nucleico aislada que codifica cualquiera de las moléculas de anticuerpos antes mencionadas, vectores y células huésped de los mismos.

También se proporciona un ácido nucleico aislado que codifica la región variable de la cadena pesada del anticuerpo o la región variable de la cadena ligera, o ambas, de cualquiera de las moléculas de anticuerpo antes mencionadas.

En una realización, el ácido nucleico aislado codifica las CDRs 1-3 de la cadena pesada, donde dicho ácido nucleico comprende una secuencia nucleotídica de SEQ ID NO: 108-112, 223, 122-126, 133-137, o 144-146.

En otra realización, el ácido nucleico aislado codifica las CDRs 1-3 de la cadena ligera, donde dicho ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos de SEQ ID NO: 113-120, 127-132, o 138-143.

En otras realizaciones, dicho ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena pesada, en la que dicha secuencia de nucleótidos es al menos un 85% idéntica a cualquiera de las SEQ ID<n>O: 39, 51, 83, 87, 90, 95, o 101.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena pesada, en el que dicha secuencia de nucleótidos comprende cualquiera de los SEQ ID NO: 39, 51, 83, 87, 90, 95, o 101.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena pesada, en la que dicha secuencia de nucleótidos es idéntica en al menos un 85% a cualquiera de las Se Q ID NO: 41, 53, 85, 89, 92, 96, o 103.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena pesada, en la que dicha secuencia de nucleótidos comprende cualquiera de SEQ ID NO: 41, 53, 85, 89, 92, 96, o 103.

En otras realizaciones, el mencionado ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena ligera, en la que dicha secuencia de nucleótidos es al menos un 85% idéntica a cualquiera de los SEQ ID NO: 43, 47, 55, 59, 63, 67, 71, 75, 79, 93, 97, 99, 104, o 106.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena ligera, en el que dicha secuencia de nucleótidos comprende cualquiera de SEQ ID NO: 43, 47, 55, 59, 63, 67, 71, 75, 79, 93, 97, 99, 104, o 106.

En otras realizaciones, el ácido nucleico mencionado comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena ligera, en la que dicha secuencia de nucleótidos es idéntica en al menos un 85% a cualquiera de las SEQ ID NO: 45, 49, 57, 61, 65, 69, 73, 77, 81, 94, 98, 100, 105 o 107.

En otras realizaciones, dicho ácido nucleico comprende además una secuencia de nucleótidos que codifica una cadena ligera, en la que dicha secuencia de nucleótidos comprende cualquiera de las SEQ ID NO: 45, 49, 57, 61, 65, 69, 73, 77, 81, 94, 98, 100, 105 o 107.

En ciertas realizaciones, se proporcionan uno o más vectores de expresión y células huésped que comprenden los ácidos nucleicos mencionados.

También se proporciona un método de producción de una molécula de anticuerpo o fragmento de la misma, que comprende el cultivo de la célula huésped como se describe en el presente documento en condiciones adecuadas para la expresión génica.

En un aspecto, la divulgación presenta un método para proporcionar una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento. El método incluye: proporcionar un antígeno PD-1 (por ejemplo, un antígeno que comprende al menos una parte de un epítopo PD-1); obtener una molécula de anticuerpo que se une específicamente al polipéptido PD-1; y evaluar si la molécula de anticuerpo se une específicamente al polipéptido PD-1, o evaluar la eficacia de la molécula de anticuerpo para modular, por ejemplo, inhibir, la actividad del PD-1. El método puede incluir además la administración de la molécula de anticuerpo a un sujeto, por ejemplo, un animal humano o no humano.

En otro aspecto, la divulgación proporciona composiciones, por ejemplo, composiciones farmacéuticas, que incluyen un portador, excipiente o estabilizador farmacéuticamente aceptable, y al menos uno de los agentes terapéuticos, por ejemplo, moléculas de anticuerpo anti-PD-1 descritas en el presente documento. En una realización, la composición, por ejemplo, la composición farmacéutica, incluye una combinación de la molécula de anticuerpo y uno o más agentes, por ejemplo, un agente terapéutico u otra molécula de anticuerpo, como se describe en el presente documento. En una realización, la molécula de anticuerpo se conjuga con una etiqueta o un agente terapéutico.

Inhibidores adicionales de PD-1 y otras moléculas de punto de control inmunitario

En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 es un inhibidor, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, distinta de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 de la Tabla 1. En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 de la Tabla 1 y una molécula de anticuerpo anti-PD-1 distinta de la molécula de anticuerpo de la Tabla 1. En otras realizaciones, el inhibidor de PD-1 es un anticuerpo anti-PD-1 elegido entre Nivolumab, Pembrolizumab o Pidilizumab.

En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 es Nivolumab. Nombres alternativos para Nivolumab incluyen MDX- 1106, MDX-1106-04, ONO-4538, o BMS-936558. En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 es Nivolumab (Número de Registro CAS: 946414-94-4). Nivolumab es un anticuerpo monoclonal IgG4 totalmente humano que bloquea específicamente PD-1. El nivolumab (clon 5C4) y otros anticuerpos monoclonales humanos que se unen específicamente a PD-1 se describen en US 8,008,449 y WO2006/121168. En una realización, el inhibidor de PD-1 es Nivolumab, y tiene una secuencia divulgada en el presente documento (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada).

Las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesada y ligera del Nivolumab son las siguientes:

Cadena pesadaQVQLVESGGGVVQPGRSLRLDCKASGITFSNSGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSKRYYADSVKGRF TISRDNSKNTLFLQMNSLRAEDTAVYYCATNDDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSN TKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQ VYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKS RWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (SEQ ID NO: 242 )

Cadena ligeraEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSG TDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQSSNWPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLL NNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSP VTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 243 )

En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 es Pembrolizumab. Pembrolizumab (también denominado Lambrolizumab, MK-3475, MK03475, SCH-900475 o KEYTRUDA®; Merck) es un anticuerpo monoclonal IgG4 humanizado que se une a PD-1. El pembrolizumab y otros anticuerpos humanizados anti-PD-1 se divulgan en Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44, US 8,354,509 y WO2009/114335. Las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesada y ligera de pembrolizumab son las siguientes:

Cadena pesada (SEQ ID NO: 244)

QVQLVQSGVE VKKPGASVKV SCKASGYTFT NYYMYWVRQA PGQGLEWMGG 50

INPSNGGTNF NEKFKNRVTL TTDSSTTTAY MELKSLQFDD TAVYYCARRD 100

YRFDMGFDYW GQGTTVTVSS ASTKGPSVFP LAPCSRSTSE STAALGCLVK 150

DYFPEPVTVS WNSGALTSGV HTFPAVLQSS GLY SLSSVVT VPSSSLGTKT 200

YTCNVDHKPS NTKVDKRVES KYGPPCPPCP APEFLGGPSV FLFPPKPKDT 250

LMISRTPEVT CVVVDVSQED PEVQFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQFNSTY 300

RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKGLPS SIEKTISKAK GQPREPQVYT 350

LPPSQEEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS 400

DGSFFLYSRL TVDKSRWQEG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSLGK 447

Cadena ligera (SEQ ID NO: 245)

EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASKGVS TSGYSYLHWY QQKPGQAPRL 50 LIYLASYLES GVPARFSGSG SGTDFTLTIS SLEPEDFAVY YCQHSRDLPL 100

TFGGGTKVEI KRTVAAPSVF IFPPSDEQLK SGTASVVCLL NNFYPREAKV 150

QWKVDNALQS GNSQESVTEQ DSKDSTYSLS STLTLSKADY EKHKVYACEV 200

THQGLSSPVT KSFNRGEC 218<'>

En una realización, el inhibidor de PD-1 es Pembrolizumab divulgado en, por ejemplo, US 8,354,509 y WO 2009/114335, y que tiene una secuencia divulgada en el presente documento (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada).

En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 es Pidilizumab. Pidilizumab (CT-011; Cure Tech) es un anticuerpo monoclonal IgG1k humanizado que se une a PD-1. Pidilizumab y otros anticuerpos monoclonales humanizados anti-PD-1 se describen en WO2009/101611.

Otros anticuerpos anti-PD-1 incluyen AMP 514 (Amplimmune), entre otros, por ejemplo, anticuerpos anti-PD-1 divulgados en US 8,609,089, US 2010028330, y/o US 20120114649. Otros anticuerpos anti-PD-1 de ejemplo incluyen, por ejemplo, REGN2810, BGB-108 y BGB-A317.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 es una inmunoadhesina (por ejemplo, una inmunoadhesina que comprende una porción extracelular o de unión a PD-1 de PD-L1 o PD-L2 fusionada a una región constante (por ejemplo, una región Fc de una secuencia de inmunoglobulina). En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 es A m P-224 (B7-DCIg; Amplimmune; por ejemplo, divulgado en WO2010/027827 y WO2011/066342), es un receptor soluble de fusión Fc de PD-L2 que bloquea la interacción entre PD-1 y B7-H1.

Inhibidores de PD-L1 o PD-L2 de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de PD-L1 o PD-L2. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia hematológica. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de tiroides (por ejemplo, un cáncer anaplásico de tiroides), un cáncer de endometrio, un linfoma, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo) o un cáncer con MSI alto. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-L1 es un anticuerpo anti-PD-L1 o un fragmento del mismo.

En una realización, el anticuerpo anti-PD-L1 o fragmento del mismo es una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No. 2016/0108123 (USSN 14/881,888), titulada "Moléculas de anticuerpos contra PD-1 y usos de las mismas".

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye al menos uno o dos dominios variables de cadena pesada (incluyendo opcionalmente una región constante), al menos uno o dos dominios variables de cadena ligera (incluyendo opcionalmente una región constante), o ambos, que comprenden la secuencia de aminoácidos de cualquiera de BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-hum10, BAP058-hum11, BAP058-hum12, BAP058-hum13, BAP058-hum14, BAP058-hum15, BAP058-hum16, BAP058-hum17, BAP058-Clon-K, BAP058-Clon-L, BAP058-Clon-M, BAP058-Clon-N, o BAP058-Clon-O; o como se describe en la Tabla 1 de US 2016/0108123, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye al menos una, dos o tres regiones determinantes de complementariedad (CDR) de una región variable de cadena pesada y/o una región variable de cadena ligera de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-hum10, BAP058-hum11, BAP058-hum12, BAP058-hum13, BAP058-hum14, BAP058-hum15, BAP058-hum16, BAP058-hum17, BAP058-Clon-K, BAP058-Clon-L, BAP058-Clon-M, BAP058-Clon-N, o BAP058-Clon-O; o como se describe en la Tabla 1 de US 2016/0108123, o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1 de US 2016/0108123, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1 de US 2016/0108123, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye una sustitución en una CDR de cadena ligera, por ejemplo, una o más sustituciones en una CDR1, CDR2 y/o CDR3 de la cadena ligera.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1 de US 2016/0108123. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 195; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2016/0108123; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 9, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 10, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 11, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2016/0108123.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 195; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2016/0108123; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 12, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 13, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 14, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2016/0108123.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 comprende la secuencia de aminoácidos VHCDR1 de SEQ ID NO: 1 divulgada en la Tabla 1 de US 2016/0108123. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 comprende la secuencia de aminoácidos VHCDR1 de SEQ ID NO: 4 divulgada en la Tabla 1 de Us 2016/0108123. En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 comprende la secuencia de aminoácidos VHCDR1 de SEQ ID NO: 195, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2016/0108123.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 comprende la secuencia de aminoácidos VH de EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQARGQRLEWIGRIDPNSGSTKYN EKFKNRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSS (SEQ ID NO: 316) o SEQ ID NO: 78 de US 2016/0108123, y la secuencia de aminoácidos VL de AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFS GSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 317) o SEQ ID NO: 82 de US 2016/0108123, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2016/0108123. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 comprende la secuencia de aminoácidos VH de EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKY NEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSS (SEQ ID NO: 318) o SEQ ID NO: 30 de US 2016/0108123, y la secuencia de aminoácidos VL de DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRF SGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 319) o SEQ ID NO: 66 de US 2016/0108123, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2016/0108123.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 comprende la secuencia de aminoácidos de cadena pesada de SEQ ID NO: 80 de US 2016/0108123, y la secuencia de aminoácidos de cadena ligera de SEQ ID NO: 84 de US 2016/0108123, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2016/0108123. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 comprende la secuencia de aminoácidos de cadena pesada de SEQ ID NO: 96 de US 2016/0108123, y la secuencia de aminoácidos de cadena ligera de SEQ ID NO: 68 de US 2016/0108123, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2016/0108123.

Un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 descrita en el presente documento) o una composición descrita en el presente documento puede formularse en una formulación (por ejemplo, una formulación de dosis o forma de dosificación) adecuada para la administración (por ejemplo, administración intravenosa) a un sujeto como se describe en el presente documento.

En ciertas realizaciones, la formulación es una formulación líquida. En otras realizaciones, la formulación es una formulación liofilizada, por ejemplo, liofilizada o secada a partir de una formulación líquida. En otras realizaciones, la formulación es una formulación reconstituida, por ejemplo, reconstituida a partir de una formulación liofilizada.

En algunas realizaciones, la formulación comprende el inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1) y un agente tampón.

En algunas realizaciones, la formulación comprende un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1) presente a una concentración de 10 a 500 mg/mL, por ejemplo, 25 a 250 mg/mL, 50 a 150 mg/mL, 50 a 100 mg/mL, o 100 a 200 mg/mL, por ejemplo, 50 mg/mL, 100 mg/mL, 150 mg/mL, o 200 mg/mL. En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) está presente a una concentración de 50 a 150 mg/mL, por ejemplo, 100 mg/mL. En algunas realizaciones, la formulación tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5). En algunas realizaciones, la formulación es para infusión intravenosa, por ejemplo, tras dilución. En algunas realizaciones, la formulación comprende uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

En algunas realizaciones, la formulación comprende un agente tampón que comprende histidina (por ejemplo, un tampón de histidina). En algunas realizaciones, la formulación comprende L-histidina, clorhidrato de L-histidina monohidrato, o ambos. En ciertas realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, tampón de histidina) está presente en una concentración de 1 mM a 20 mM, por ejemplo, 2 mM a 15 mM, 3 mM a 10 mM, 4 mM a 9 mM, 5 mM a 8 mM, o 6 mM a 7 mM, por ejemplo, 1 mM, 2 mM, 3 mM, 4 mM, 5 mM, 6 mM, 6.7 mM, 7 mM, 8 mM, 9 mM, 10 mM, 11 mM, 12 mM, 13 mM, 14 mM, 15 mM, 16 mM, 17 mM, 18 mM, 19 mM, o 20 mM.

En algunas realizaciones, la formulación comprende además un hidrato de carbono. En ciertas realizaciones, el carbohidrato es sacarosa. En algunas realizaciones, el carbohidrato (por ejemplo, sacarosa) está presente en una concentración de 50 mM a 150 mM, por ejemplo, 25 mM a 150 mM, 50 mM a 100 mM, 60 mM a 90 mM, 70 mM a 80 mM, o 70 mM a 75 mM, por ejemplo, 25 mM, 50 mM, 60 mM, 70 mM, 73.3 mM, 80 mM, 90 mM, 100 mM, o 150 mM.

En algunas realizaciones, la formulación comprende además un tensioactivo. En ciertas realizaciones, el tensioactivo es polisorbato 20. En algunas realizaciones, el tensioactivo o polisorbato 20) está presente en una concentración de 0.005% a 0.025% (p/p), por ejemplo, 0.0075% a 0.02% o 0.01% a 0.015% (p/p), por ejemplo, 0.005%, 0.0075%, 0.01%, 0.013%, 0.015% o 0.02% (p/p).

En algunas realizaciones, la formulación comprende un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), un tampón de histidina, un carbohidrato y un tensioactivo. En ciertas realizaciones, la formulación comprende un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), y uno o más (por ejemplo, dos, tres, o todos) de L-histidina, clorhidrato de L-histidina monohidrato, sacarosa, o polisorbato 20, por ejemplo, a un pH de 5 a 6. En ciertas realizaciones, la formulación comprende un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), L-histidina, clorhidrato de L-histidina monohidrato, sacarosa y polisorbato 20, por ejemplo, a un pH de 5 a 6.

Una formulación descrita en el presente documento puede almacenarse en un recipiente. En ciertas realizaciones, 50 mg a 150 mg, por ejemplo, 80 mg a 120 mg, 90 mg a 110 mg, 100 mg a 120 mg, 100 mg a 110 mg, 110 mg a 120 mg, o 110 mg a 130 mg, del inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1), está presente en el recipiente (por ejemplo, vial).

Otros agentes tamponadores de ejemplo que pueden usarse en la formulación descrita aquí incluyen, pero no se limitan a, un tampón de arginina, un tampón de citrato o un tampón de fosfato. Otros carbohidratos de ejemplo que pueden utilizarse en la formulación descrita en el presente documento incluyen, entre otros, trehalosa, manitol, sorbitol o una combinación de los mismos. La formulación aquí descrita también puede contener un agente tonificante, por ejemplo, cloruro sódico, y/o un agente estabilizante, por ejemplo, un aminoácido (por ejemplo, glicina, arginina, metionina, o una combinación de los mismos).

En una realización, la combinación incluye un inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo divulgada en US 2016/0108123, y un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, un anticuerpo anti-PD-1 descrito en el presente documento).

La combinación de un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento) y un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 descrita en el presente documento) se ha probado en un modelo murino MC38 de adenocarcinoma de colon. En el estudio se utilizó un anticuerpo PD-1 anti-ratón sustituto, RMP1-14. La administración conjunta de RMP1-14 y la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 dio lugar a una mayor actividad antitumoral en comparación con ambos agentes individuales en este modelo. Por ejemplo, la combinación de la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 y RMP1-14 produjo respuestas completas en 4/10 animales y respuestas parciales en 3/10 animales. La terapia de combinación dio lugar a una mejora no significativa de la mediana de tiempo hasta el punto final a 46 días, que fue 21 días más largo que los animales tratados con isotipo y más de 20 días más largo que cualquiera de los anticuerpos solos.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se une a PD-1 e inhibe su interacción con PD-L1, PD-L2, o ambos. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1) se une a PD-L1 e inhibe su interacción con PD-1, B7.1, o ambos. PD-1 y PD-L1 desempeñan funciones que se solapan pero que también son distintas en la célula T. Ambos receptores pueden emitir señales negativas a la célula T. Ambos receptores pueden enviar señales negativas a la célula T cuando se activan. PD-L1 puede desempeñar una función inmunosupresora a través de su interacción con B7.1, por ejemplo, bloqueando la capacidad de B7.1 para activar las células T mediante su unión a CD28 y amortiguando aún más la generación de una respuesta inmunitaria (Butte et al. Immunity. 2007; 27(1): 111-22). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, una inhibición combinada de PD-L1 y PD-1 puede dar lugar a una inmunidad no redundante y/o complementaria contra el cáncer (Dong et al. Nat Med. 2002; 8(8):793-800; Yamazaki et al J Immunol. 2002; 169(10):5538-45; Taube et al. Sci Transl Med. 2012; 4(127): 127ra37). En algunas realizaciones, una combinación de un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento) y un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 descrita en el presente documento) aumenta la activación de células T, en comparación con el inhibidor de PD-1 o el inhibidor de PD-L1 solos. En algunas realizaciones, una combinación de un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento) y un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 descrita en el presente documento) tiene una actividad anticancerosa sinérgica.

En una realización, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123, se administra a una dosis (por ejemplo, una dosis plana) entre 10 mg y 2000 mg, por ejemplo, entre 20 mg y 1600 mg, entre 40 mg y 1200 mg, entre 80 mg y 800 mg, entre 100 mg y 600 mg, entre 200 mg y 300 mg, entre 20 mg y 100 mg, entre 40 mg y 200 mg, entre 100 mg y 400 mg, entre 200 mg y 600 mg, entre 800 mg y 1200 mg, o entre 1200 mg y 1600 mg, por ejemplo, a una dosis (por ejemplo, una dosis fija) de aproximadamente 10 mg, 20 mg, 40 mg, 80 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 240 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 800 mg, 1000 mg, 1200 mg, 1600 mg o 2000 mg, por ejemplo, una vez cada tres semanas, una vez cada cuatro semanas o una vez cada seis semanas.

En una realización, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123, se administra a una dosis entre 20 mg y 1200 mg (por ejemplo, entre 80 mg y 800 mg, por ejemplo, aproximadamente 20 mg, 80 mg, 240 mg, 800 mg o 1200 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas o una vez cada seis semanas. Por ejemplo, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123 puede administrarse a una dosis entre 10 mg y 100 mg (por ejemplo, entre 20 mg y 80 mg, por ejemplo, 20 mg, 40 mg u 80 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas o una vez cada seis semanas. En una realización, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123, se administra mediante infusión intravenosa.

En una realización, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123, se administra en una dosis entre 10 mg y 100 mg (por ejemplo, entre 20 mg y 80 mg, por ejemplo, 20 mg, 40 mg u 80 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas o una vez cada seis semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra en una dosis entre 50 mg y 500 mg (por ejemplo, entre 100 mg y 400 mg, por ejemplo, en una dosis de aproximadamente 100 mg, 200 mg, 300 mg o 400 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas o una vez cada 4 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (p. ej., la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra en una dosis de entre 100 mg y 300 mg (p. ej., en una dosis de aproximadamente 100 mg, 200 mg o 300 mg), p. ej., una vez cada 3 semanas, p. ej., mediante infusión intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en el documento US 2016/0108123 se administra en una dosis de aproximadamente 20 mg, p. ej., una vez cada tres semanas, y el inhibidor de PD-1 (p. ej., la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra en una dosis de aproximadamente 100 mg o 300 mg, p. ej., una vez cada tres semanas. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123, se administra en una dosis de aproximadamente 20 mg, 80 mg, 240 mg, 800 mg o 1200 mg, por ejemplo, una vez cada tres semanas, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra en una dosis de aproximadamente 300 mg, por ejemplo, una vez cada tres semanas.

En una realización, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-LI divulgada en US 2016/0108123, se administra a una dosis entre 10 mg y 50 mg (por ejemplo, aproximadamente 20 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas o una vez cada seis semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 50 mg y 200 mg (por ejemplo, aproximadamente 100 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En una realización, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123, se administra a una dosis entre 10 mg y 50 mg (por ejemplo, aproximadamente 20 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas o una vez cada seis semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En una realización, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123, se administra a una dosis entre 50 mg y 100 mg (por ejemplo, aproximadamente 80 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas o una vez cada seis semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En una realización, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123, se administra a una dosis entre 200 mg y 300 mg (por ejemplo, aproximadamente 240 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas o una vez cada seis semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En una realización, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123, se administra a una dosis entre 500 mg y 1000 mg (por ejemplo, aproximadamente 800 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas o una vez cada seis semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En una realización, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123, se administra a una dosis entre 1000 mg y 1500 mg (por ejemplo, aproximadamente 1200 mg), por ejemplo, una vez cada tres semanas o una vez cada seis semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123 se administra antes de que se administre el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1). Por ejemplo, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123 puede administrarse primero y luego enjuagarse con solución de dextrosa durante aproximadamente 1 hora antes de iniciar la administración del inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1). En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123 se administra después de administrar el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1).

En una realización, el inhibidor de PD-L1 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 divulgada en US 2016/0108123, se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un tumor sólido, por ejemplo, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), un cáncer de útero (por ejemplo, un carcinoma de endometrio) o un cáncer de tiroides (por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides).

En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-L1 es una molécula de anticuerpo. En algunas realizaciones, el inhibidor anti-PD-L1 se elige de entre YW243.55.S70, MPDL3280A, MEDI-4736, MSB-0010718C, o MDX-1105.

En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-L1 es MSB0010718C. MSB0010718C (también denominado A09-246-2; Merck Serono) es un anticuerpo monoclonal que se une a PD-L1. El pembrolizumab y otros anticuerpos humanizados anti-PD-L1 se divulgan en WO2013/079174, y tienen una secuencia divulgada en el presente documento (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada). Las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesada y ligera de MSB0010718C incluyen al menos las siguientes: Cadena pesada (SEQ ID NO: 24 como se describe en WO2013/079174)

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYIMMWVRQAPGKGLEWVSSIYPSGGITFYADKGRFTI SRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARIKLGTVTTVDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 246 )

Cadena ligera (SEQ ID NO: 25 como se describe en WO2013/079174)

QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSN RPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTRVFGTGTKVTVL (SEQ ID NO:

247 )

En una realización, el inhibidor de PD-L1 es YW243.55.S70. El anticuerpo YW243.55.S70 es un anticuerpo anti-PD-L1 descrito en WO 2010/077634 (secuencias de región variable de cadena pesada y ligera mostradas en SEQ ID NOs. 20 y 21, respectivamente), y que tiene una secuencia divulgada en el mismo (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada).

En una realización, el inhibidor de PD-L1 es MDX-1105. MDX-1105, también conocido como BMS-936559, es un anticuerpo anti-PD-L1 descrito en WO2007/005874, y que tiene una secuencia divulgada en el mismo (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada).

En una realización, el inhibidor de PD-L1 es MDPL3280A (Genentech / Roche). MDPL3280A es un anticuerpo monoclonal IgG1 humano optimizado para Fc que se une a PD-L1. MDPL3280A y otros anticuerpos monoclonales humanos frente a PD-L1 se divulgan en la Patente U.S. No.: 7,943,743, Publicación PCT No.: WO 2013/019906, y Publicación U.S. No.: 2012/0039906. Por ejemplo, MDPL3280A (también conocido como atezolizumab o RO5541267) puede incluir una región variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 24, como se divulga en WO 2013/019906, y una región variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 21, como se divulga en WO 2013/019906 (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada).

En una realización, el inhibidor de PD-L1 es MEDI-4736 (también conocido como durvalumab). MEDI-4736 se describe en WO 2011/066389 y WO 2015/036499. Por ejemplo, MEDI-4736 puede incluir una región variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1, como se divulga en WO 2015/036499, y una región variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:2, como se divulga en WO 2015/036499 (o una secuencia sustancialmente idéntica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia al menos 85%, 90%, 95% idéntica o superior a la secuencia especificada).

En otras realizaciones, el inhibidor de PD-L2 es AMP-224. AMP-224 es un receptor soluble de fusión Fc de PD-L2 que bloquea la interacción entre PD-1 y B7-H1 (B7-DCIg; Amplimmune; por ejemplo, divulgado en WO2010/027827 y WO2011/066342).

Inhibidores de LAG-3 de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de LAG-3. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia hematológica. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de piel (por ejemplo, un melanoma) o un cáncer renal (por ejemplo, un carcinoma de células renales). En ciertas realizaciones, el inhibidor de LAG-3 es un anticuerpo anti-LAG-3 o un fragmento del mismo.

En una realización, el anticuerpo anti-LAG-3 o fragmento del mismo es una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 como se describe en US 2015/0259420, titulada "Moléculas de anticuerpos contra LAG-3 y usos de las mismas,".

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDRs (o colectivamente todas las CDRs) de una región variable de cadena pesada y ligera (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena pesada, al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena ligera, o ambas) de un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1 de US 2015/0259420; o codificada por la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por.g., al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias antes mencionadas, o CDR estrechamente relacionadas, por ejemplo, CDR que son idénticas o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservativas).

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende al menos una, dos, tres o cuatro regiones variables (por ejemplo, al menos una o dos regiones variables de cadena pesada (opcionalmente incluyendo una región constante), al menos una o dos regiones variables de cadena ligera (opcionalmente incluyendo una región constante), o ambas) de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-hum10, BAP050-hum11, BAP050-hum12, BAP050-hum13, BAP050-hum14, BAP050-hum15, BAP050-hum16, BAP050-hum17, BAP050-hum18, BAP050-hum19, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (por ejemplo, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-hum10-Ser, BAP050-hum11-Ser, BAP050-hum12-Ser, BAP050-hum13-Ser, BAP050-hum14-Ser, BAP050-hum15-Ser, BAP050-hum18-Ser, BAP050-hum19-Ser o BAP050-hum20-Ser), BAP050-Clon-F, BAP050-Clon-G, BAP050-Clon-H, BAP050-Clon-I o BAP050-Clon-J; o como se describe en la Tabla 1 de US 2015/0259420; o codificada por la secuencia de nucleótidos de las Tablas 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1 de US 2015/0259420, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1 de US 2015/0259420, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 incluye una sustitución en una CDR de cadena ligera, por ejemplo, una o más sustituciones en una CDR1, CDR2 y/o CDR3 de la cadena ligera.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1 de US 2015/0259420. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en la Tabla 1, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2015/0259420; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 12, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2015/0259420.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 incluye:

(i) una región variable de cadena pesada (VH) que incluye una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4 o SEQ ID NO: 286; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 5, y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2015/0259420; y

(ii) una región variable de cadena ligera (VL) que incluye una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 14, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 15, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2015/0259420.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la secuencia de aminoácidos VHCDR1 de SEQ ID NO: 1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la secuencia de aminoácidos VHCDR1 de SEQ ID NO: 4. En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende la secuencia de aminoácidos de VHCDR1 de SEQ ID NO: 286, cada una de las cuales se describe en la Tabla 1 de US 2015/0259420.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende una VH que comprende la secuencia de aminoácidos de QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQARGQRLEWIGWINTDTGEPTY ADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTV TVSS (SEQ ID NO: 320) o SEQ ID NO: 104 de US 2015/0259420, y una VL que comprende la secuencia de aminoácidos de DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYLQKPGQSPQLLIYYTSTLHLGVPSRFSG SGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYYNLPWTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 321) o SEQ ID NO: 56 de US 2015/0259420, cada uno divulgado en la Tabla 1 de US 2015/0259420. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende una VH que comprende la secuencia de aminoácidos de QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTDTGEPT YADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTT VTVSS (SEQ ID NO: 322) o SEQ ID NO: 108 de US 2015/0259420, y una VL que comprende la secuencia de aminoácidos de DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSTLHLGIPPRFSGS GYGTDFTLTINNIESEDAAYYFCQQYYNLPWTFGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 323) o SEQ ID NO: 36 de US 2015/0259420, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2015/0259420.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 122 de US 2015/0259420, y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 58 de US 2015/0259420, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2015/0259420. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-LAG-3 comprende una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 134 de US 2015/0259420 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38 de US 2015/0259420, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2015/0259420.

En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-LAG-3 es BMS-986016. BMS-986016 (también denominado BMS986016; Bristol-Myers Squibb) es un anticuerpo monoclonal que se une a LAG-3. El BMS-986016 y otros anticuerpos humanizados anti-LAG-3 se describen en US 2011/0150892, WO2010/019570, y WO2014/008218.

Inhibidores de TIM-3 de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de TIM-3. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia hematológica. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de piel (por ejemplo, un melanoma) o un cáncer renal (por ejemplo, un carcinoma de células renales). En otras realizaciones, el cáncer es distinto de un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un melanoma y un carcinoma de células renales. En algunas realizaciones, el inhibidor de TIM-3 es un anticuerpo anti-TIM-3 o un fragmento del mismo.

En una realización, el anticuerpo anti-TIM-3 o fragmento del mismo es una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 como se describe en US 2015/0218274, titulada "Moléculas de anticuerpos contra TIM-3 y usos de las mismas,".

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera (por ejemplo, al menos una, dos o tres CDR de una región variable de cadena pesada, al menos una, dos o tres c Dr de una región variable de cadena ligera, o ambas) de un anticuerpo elegido entre cualquiera de los siguientes ABTIM3, ABTIM3-hum01, ABTIM3-hum02, ABTIM3-hum03, ABTIM3-hum04, ABTIM3-hum05, ABTIM3-hum06, ABTIM3-hum07, ABTIM3-hum08, ABTIM3-hum09, ABTIM3-hum10, ABTIM3-hum11, ABTIM3-hum12, ABTIM3-hum13, ABTIM3-hum14, ABTIM3-hum15, ABTIM3-hum16, ABTIM3-hum17, ABTIM3-hum18, ABTIM3-hum19, ABTIM3-hum20, ABTIM3-hum21, ABTIM3-hum22, ABTIM3-hum23; o como se describe en las Tablas 1-4 de US 2015/0218274; o codificada por la secuencia de nucleótidos de las Tablas 1-4; o una secuencia sustancialmente idéntica (por.g., al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente, o CDR estrechamente relacionadas, por ejemplo, CDR que son idénticas o que tienen al menos una alteración de aminoácidos, pero no más de dos, tres o cuatro alteraciones (por ejemplo, sustituciones, deleciones o inserciones, por ejemplo, sustituciones conservadoras).

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 comprende al menos una, dos, tres o cuatro regiones variables (por ejemplo, al menos una o dos regiones variables de cadena pesada (incluyendo opcionalmente una región constante), al menos una o dos regiones variables de cadena ligera (incluyendo opcionalmente una región constante), o ambas) de un anticuerpo descrito en el presente documento, por ejemplo, un anticuerpo elegido entre cualquiera de ABTIM3, ABTIM3-hum01, ABTIM3-hum02, ABTIM3-hum03, ABTIM3-hum04, ABTIM3-hum05, ABTIM3-hum06, ABTIM3-hum07, ABTIM3-hum08, ABTIM3-hum09, ABTIM3-hum10, ABTIM3-hum11, ABTIM3-hum 12, ABTIM3-hum13, ABTIM3-huml4, ABTIM3-hum15, ABTIM3-hum16, ABTIM3-hum17, ABTIM3-hum18, ABTIM3-hum19, ABTIM3-hum20, ABTIM3-hum21, ABTIM3-hum22, ABTIM3-hum23; o como se describe en las Tablas 1-4 de US 2015/0218274; o codificada por la secuencia de nucleótidos de las Tablas 1-4; o una secuencia sustancialmente idéntica (por.g., al menos 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye al menos una, dos o tres CDRs (o colectivamente todas las CDRs) de una región variable de cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en las Tablas 1-4 de US 2015/0218274, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en las Tablas 1-4. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en las Tablas 1-4, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en la Tabla 1-4.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye al menos una, dos o tres CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en las Tablas 1-4 de US 2015/0218274, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en las Tablas 1-4. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en las Tablas 1-4, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en las Tablas 1-4. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye una sustitución en una CDR de cadena ligera, por ejemplo, una o más sustituciones en una CDR1, CDR2 y/o CDR3 de la cadena ligera.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR (o colectivamente todas las CDR) de una región variable de cadena pesada y ligera que comprende una secuencia de aminoácidos mostrada en las Tablas 1-4 de US 2015/0218274, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en las Tablas 1-4. En una realización, una o más de las CDR (o colectivamente todas las CDR) tienen uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis o más cambios, por ejemplo, sustituciones o deleciones de aminoácidos, en relación con la secuencia de aminoácidos mostrada en las Tablas 1-4, o codificada por una secuencia de nucleótidos mostrada en las Tablas 1-4.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 incluye:

(a) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 9; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 10; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 5; y una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 12, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 13, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 14, cada una divulgada en las Tablas 1-4 de US 2015/0218274;

(b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 3; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 4; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 5; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 6, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 7, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 8, cada una divulgada en las Tablas 1-4 de US 2015/0218274;

(c) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 9; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 25; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 5; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 12, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 13, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 14, cada una divulgada en las Tablas 1-4 de US 2015/0218274;

(d) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 3; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 24; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 5; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 6, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 7, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 8, cada una divulgada en las Tablas 1-4 de US 2015/0218274;

(e) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 9; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 31; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 5; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 12, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 13, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 14, cada una divulgada en las Tablas 1-4 de US 2015/0218274; o

(f) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida entre SEQ ID NO: 3; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 30; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 5; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 6, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 7, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 8, cada una divulgada en las Tablas 1-4 de US 2015/0218274.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 comprende una VH que comprende la secuencia de aminoácidos de QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWIGDIYPGQGDTSY NQKFKGRATMTADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 324) o SEQ ID NO: 32 de US 2015/0218274, y una VL que comprenda la secuencia de aminoácidos de

DIVLTQSPDSLAVSLGERATINCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGQPPKLLIYAASNVESGVP DRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSRKDPSTFGGGTKVEIK (SEQ ID NO: 325) o SEQ ID NO: 20 de US 2015/0218274, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2015/0218274. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 comprende una VH que comprende la secuencia de aminoácidos de QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGDIYPGNGDTSY NQKFKGRVTITADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTTVTVSS (SEQ ID NO: 326) o SEQ ID NO: 52 de US 2015/0218274, y una VL que comprenda la secuencia de aminoácidos de

AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGKAPKLLIYAASNVESGVP SRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYFCQQSRKDPSTFGGGTKVEIK (SEQ ID NO: 327) o SEQ ID NO: 64 de US 2015/0218274, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2015/0218274.

En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 comprende una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 34 de US 2015/0218274, y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 22 de US 2015/0218274, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2015/0218274. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-TIM-3 comprende una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 54 de US 2015/0218274, y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 66 de US 2015/0218274, cada una divulgada en la Tabla 1 de US 2015/0218274.

También se divulgan anticuerpos anti-TIM-3 de ejemplo en la Patente U.S. No. 8,552,156, WO 2011/155607, EP 2581113 y Publicación U.S. No. 2014/044728.

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 descrita en el presente documento) y un agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina). En algunas realizaciones, el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo antiTIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274) se administra a una dosis entre 10 mg y 1000 mg (por ejemplo, entre 20 mg y 800 mg, entre 80 mg y 400 mg, por ejemplo, a una dosis de 240 mg), por ejemplo, una vez cada 2 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274) se almacena en forma de líquido (por ejemplo, en un vial) para infusión intravenosa. En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra a una dosis entre 5 mg/m2 y 50 mg/m2 (por ejemplo, entre 10 mg/m2 y 30 mg/m2 (por ejemplo, a una dosis de 20 mg/m2), por ejemplo, diariamente, por ejemplo, durante 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 o más días, por ejemplo, por vía intravenosa. Por ejemplo, el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274) puede administrarse los días 8 y 22 de un ciclo de 28 días, y el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) puede administrarse los días 1, 2, 3, 4 y 5 del ciclo de 28 días. En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra mediante infusión intravenosa durante un periodo de 30 minutos a 2 horas, por ejemplo, 1 hora.

En una realización, la combinación incluye además un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento). En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, entre 300 mg y 500 mg, por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. Por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento) puede administrarse el Día 8 del ciclo de 28 días. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se almacena en forma de liofilizado (por ejemplo, en un vial) para infusión intravenosa. En algunas realizaciones, cuando se utiliza en combinación con el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 descrita en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274) se administra a una dosis entre 20 mg y 400 mg (por ejemplo, entre 40 mg y 200 mg o entre 50 mg y 100 mg, por ejemplo, a una dosis de 80 mg), por ejemplo, una vez cada 2 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa.

En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento) y el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No. 2015/0218274) se administran el mismo día. En algunas realizaciones, el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274) se administra antes de que se administre el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento). En algunas realizaciones, el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 descrita en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274) se administra primero y a continuación se realiza un lavado con solución salina o dextrosa, por ejemplo, durante aproximadamente 1 hora, antes de iniciar la administración del inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento). En otras realizaciones, el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 descrita en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274) se administra después de administrar el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento). En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento) y el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274) se administran en días diferentes.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No. 2015/0218274), o ambos, se administra mediante infusión intravenosa durante un periodo de 30 minutos a 2 horas, por ejemplo, aproximadamente 1 hora.

En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer hematológico, por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML)), o un síndrome mielodisplásico (<m>D<s>). En ciertas realizaciones, el cáncer es una leucemia, por ejemplo, una AML en recaída o refractaria, o una AMLde novo(por ejemplo, una AML no apta para el tratamiento estándar). En otras realizaciones, el cáncer es un MDS, por ejemplo, un MDS de alto riesgo.

Inhibidores de CTLA-4 de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de CTLA-4. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento. por ejemplo, un tumor sólido o una neoplasia hematológica.

Los anticuerpos anti-CTLA-4 de ejemplo incluyen Tremelimumab (anticuerpo monoclonal IgG2 disponible en Pfizer, anteriormente conocido como ticilimumab, CP-675.206); e Ipilimumab (anticuerpo CTLA-4, también conocido como MDX-010, CAS No. 477202-00-9).

En una realización, la combinación incluye una molécula de anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, como se describe en el presente documento, y un anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, ipilimumab. Las dosis de ejemplo que pueden usarse incluyen una dosis de molécula de anticuerpo anti-PD-1 de aproximadamente 1 a 10 mg/kg, por ejemplo, 3 mg/kg, y una dosis de un anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, ipilimumab, de aproximadamente 3 mg/kg.

Otros anticuerpos anti-CTLA-4 de ejemplo se describen, por ejemplo, en la Patente U.S. No. 5,811,097.

Inhibidores IAP de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de la proteína inhibidora de la apoptosis (IAP). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer colorrectal (CRC), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC)), un cáncer de ovario o un cáncer de páncreas), por ejemplo, un tumor hematológico maligno (por ejemplo, un mieloma múltiple).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP es (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1 -il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, es una pequeña molécula oral SMAC-mimética que se une al dominio BIR3 de CIAP1, XIAP, y opcionalmente CIAP2. Las proteínas CIAP1 y CIAP2 son componentes de complejos proteicos de la familia de receptores de muerte del TNF. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, la unión del inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, puede activar una función E3 ligasa de CIAP1, induce la ubiquitinación y degradación proteosomal de CIAP1, y/o activa la señalización NF-<k>B corriente abajo de los receptores (Gyrd-Hansen M, Meier P (2010) Nat. Rev. Cancer p. 561-74). En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se usa para aumentar la inmunidad antitumoral en un sujeto. Por ejemplo, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, puede potenciar la proliferación y función de células T humanas y de ratónin vitrotras la coestimulación, y/o la respuesta a vacunas antitumorales profilácticas y terapéuticasin vivo,por ejemplo, mediante la activación de NF-kB (Dougan et al. (2010) J. Exp. Med. p. 2195-206). La actividad de NF-<k>B está implicada en el cebado cruzado de células T durante la muerte celular inmunogénica en respuesta a la liberación de moléculas inflamatorias asociadas al peligro (Yatim et al. (2015) Science p. 328 34), lo que indica un mecanismo para mejorar la función de las células T y la inmunidad antitumoral. Como otro ejemplo, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No.

8,552,003, puede proteger de la apoptosis a las células dendríticas derivadas de monocitos, por ejemplo,deforma similar a la ligadura de CD40 (Knights et al. (2013) Cancer Immunol. Immunother. p. 321-35).

En algunas realizaciones, la combinación aquí descrita incluye un inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, y un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, es una pequeña molécula disponible por vía oral que activa la señalización NF-kB corriente abajo de los miembros de la familia de receptores TNF. El NF-<k>B es un regulador maestro de la transcripción en las células inmunitarias, y también actúa en las células tumorales directamente (Perkins (2012) Nat. Rev. Cancer p. 121-32). Datos preclínicos sugieren que la actividad de NF-kB es necesaria para la cebado cruzado de linfocitos T CD8+ sometidos a muerte celular inmunogénica (Yatim et al. (2015) Science p. 328-34). El compuesto A21 estimuló la proliferación de linfocitos T, indujo IFNgamma y suprimió la producción de IL-10in vitro.Los estudios clínicos con el compuesto A21 demostraron la inducción de citoquinas circulantes como TNFalfa, IL-8, IL-10 y CCL2 (Infante et al. (2014) J. Clin. Oncol. p. 3103-10). Los datos clínicos sugieren que el compuesto A21 aumentó la tasa de respuesta patológica completa del TNBC al tratamiento con paclitaxel. En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, potencia, o se usa para potenciar, una actividad antitumoral del inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, y el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administran cada uno a una dosis y/o en un horario que, en combinación, consigue una actividad antitumoral deseada.

Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que las dosis para el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, igual o inferior a 1800 mg son activos, por ejemplo, basándose en datos farmacodinámicos. Por ejemplo, en biopsias cutáneas emparejadas de dos pacientes tratados con 320 mg, ambas mostraron degradación de CIAP1, la proteína diana del compuesto A21; las biopsias cutáneas recogidas de pacientes tratados con dosis inferiores (160 mg e inferiores) mostraron una actividad farmacodinámica menos consistente (Infante et al. (2014) J. Clin. Oncol. p. 3103-10). En algunas realizaciones, no se requieren dosis superiores a 900 mg para la eficacia clínica. En ciertas situaciones, una dosis del Compuesto A21 de 1800 mg fue mal tolerada cuando se administró en combinación con paclitaxel. Por consiguiente, en una realización, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra a una dosis comprendida entre 300 mg y 900 mg, por ejemplo, una vez a la semana. En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra con menos frecuencia que una vez a la semana, por ejemplo, se administra una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas o una vez cada cuatro semanas.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, por ejemplo, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra a una dosis de aproximadamente 1800 mg o menos, por ejemplo, una vez por semana.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra a una dosis entre 160 mg y 1800 mg, entre 200 mg y 1200 mg, entre 300 mg y 900 mg, entre 400 mg y 800 mg, o entre 500 mg y 700 mg, por ejemplo, a una dosis de 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg, 800 mg o 900 mg, por ejemplo, una vez a la semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas o una vez cada cuatro semanas.

En ciertas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra a una dosis de entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 400 mg, por ejemplo, aproximadamente 300 mg, una vez por semana. En otras realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra a una dosis de entre aproximadamente 800 mg y aproximadamente 1000 mg, por ejemplo, aproximadamente 900 mg, una vez a la semana. En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra a una dosis de entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 400 mg, por ejemplo, aproximadamente 300 mg, una vez cada cuatro semanas.

En ciertas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra por vía oral.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1). En una realización, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En ciertas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra en combinación con el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, Nt Bc )).

Inhibidores del EGFR de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer de páncreas, un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC)) o un cáncer de colon). En ciertas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable por microsatélite (MSS CRC)), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de pulmón triple negativo (NTBC)).

En algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR es (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757.

En algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR, por ejemplo, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) o un compuesto divulgado en la Publicación PC<t>No. WO 2013/184757, se administra a una dosis de 150-250 mg, por ejemplo, por día. En algunas realizaciones, el inhibidor del EGFR, por ejemplo, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, se administra a una dosis de aproximadamente 150, 200 o 250 mg, o de 150-200 o 200-250 mg.

En algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCt No. WO 2013/184757, es un inhibidor covalente e irreversible de la tirosina quinasa. En ciertas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757 inhibe mutaciones activadoras de EGFR (L858R, ex19del). En otras realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757 no inhibe, o no inhibe sustancialmente, el EGFR de tipo salvaje (wt). El compuesto A40 ha demostrado eficacia en pacientes con NSCLC mutante del EGFR. En algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757 también inhibe una o más quinasas de la familia TEC de quinasas. Las quinasas de la familia TEC incluyen, por ejemplo, ITK, BMX, TEC, RLK y BTK, y son centrales en la propogación de la señalización del receptor de células T y del receptor de quimiocinas (Schwartzberg et al. (2005) Nat. Rev. Immunol. p. 284-95). Por ejemplo, el compuesto A40 puede inhibir la ITK con una IC50 bioquímica de 1.3 nM. La ITK es una enzima crítica para la supervivencia de las células Th2 y su inhibición provoca un cambio en el equilibrio entre las células Th2 y Th1. El tratamiento combinado,in vivo,con el inhibidor de ITK ibrutinib o el compuesto A40, y el anticuerpo anti-PD-L1 da lugar a una eficacia superior en comparación con cualquiera de los agentes por separado en varios modelos.

En algunas realizaciones, la combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, y un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

La combinación de la inhibición de ITK (con ibrutinib) y la inhibición del punto de control es más eficaz que cualquiera de los agentes individuales en numerosos modelos de ratones singénicos, por ejemplo, los que expresan ITK pero no BTK. En ciertas realizaciones, el inhibidor del EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, inhibe la ITK. El efecto sinérgico de la inhibición de ITK y el bloqueo de puntos de control se ha probado en aloinjertos de ratón utilizando líneas celulares de cáncer de ratón (A20, CT26 y 4T1) (Sagiv-Barfi et al. (2015) Blood. p. 2079-86). La combinación de anticuerpo anti-PD-L1 e ibrutinib (un inhibidor de ITK) demostró ser significativamente más eficaz que cualquiera de los agentes por separado en los tres modelos. En estos experimentos, el efecto del tratamiento se prolongó a pesar de la dosificación de ibrutinib durante sólo 8 días, y un total de 5 dosis de anticuerpo anti-PD-L1. Aproximadamente la mitad de los ratones portadores de tumores CT26 tratados con esta combinación se curaron (ningún ratón tratado con uno de los dos agentes por separado se curó). La reexposición de estos ratones con inóculo tumoral CT26 demostró una memoria antitumoral a largo plazo específica para esta línea celular (Sagiv-Barfi et al. (2015) Blood. p. 2079-86). Además, se encontraron células T específicas de tumor en la sangre y el bazo de ratones tratados con ibrutinib y anticuerpo anti-PD-L1. Se realizó un experimento similar utilizando el Compuesto A40 en el modelo de linfoma A20 (véase, por ejemplo, el Ejemplo 4). La combinación del Compuesto A40 y anticuerpo anti-PD-L1 o de ibrutinib y anticuerpo anti-PD-Llantibody fue más eficaz que un agente único. El compuesto A40 y el ibrutinib se dosificaron durante sólo diez días, y se administró un total de 5 dosis de anticuerpo anti-PD-L1. El compuesto A40 y el ibrutinib sólo se dosificaron de forma transitoria y los efectos del compuesto A40 más el anticuerpo anti-PD-L1 y del ibrutinib más el anticuerpo anti-PD-L1 sobre la supervivencia se prolongaron más allá de los 60 días. La combinación del anticuerpo anti-PD-L1 y el Compuesto A40 produjo regresión tumoral en ratones portadores de aloinjertos de linfoma A20. Por consiguiente, en algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757 potencia, o se utiliza para potenciar un efecto antitumoral de un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

En algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación p Ct No. WO 2013/184757, y el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), cada uno se administra a una dosis y/o en un horario, que en combinación, logra una actividad antitumoral deseada.

En una realización, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, se administra a una dosis entre 5 mg y 100 mg, por ejemplo, entre 10 mg y 75 mg, entre 15 mg y 50 mg, entre 20 mg y 30 mg, entre 10 mg y 40 mg, entre 10 mg y 25 mg, o entre 25 mg y 40 mg, por ejemplo, a una dosis de 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, o 100 mg, por ejemplo, dos veces al día, una vez al día, una vez cada dos días, una vez cada tres días, o una vez a la semana.

En una realización, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, se administra a una dosis entre 10 mg y 50 mg (por ejemplo, 25 mg), por ejemplo, una vez al día. En algunas realizaciones, el inhibidor del EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, se administra por vía oral. En una realización, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, se administra a una dosis entre 10 mg y 50 mg (por ejemplo, 25 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa. En algunas realizaciones, la combinación se administra en uno o más ciclos de dosificación, por ejemplo, uno o más ciclos de dosificación de 28 días. En ciertas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, se administra en el día 1 al día 10 de un primer ciclo de dosificación. En ciertas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, no se administra en el día 11 al día 28 de un primer ciclo de dosificación, ni en ningún ciclo o ciclos de dosificación posteriores.

En algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación p Ct No. WO 2013/184757, se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un cáncer colorrectal (CRC) (por ejemplo, un MSS CRC), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (N<s c>L<c>)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo por ejemplo (TNBC)).

En algunas realizaciones, el inhibidor del EGFR se elige entre uno o más de erlotinib, gefitinib, cetuximab, panitumumab, necitumumab, PF-00299804, nimotuzumab o RO5083945.

Inhibidores de mTOR de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de la diana de rapamicina (mTOR). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer cerebral, un cáncer de vejiga, un cáncer de páncreas, un cáncer renal o un cáncer de hígado, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células pequeñas o un cáncer de pulmón de células no pequeñas), un cáncer respiratorio/torácico, un sarcoma, un cáncer óseo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer endocrino, un astrocitoma, un cáncer cervical, un cáncer neurológico, un cáncer gástrico o un melanoma), por ejemplo, una neoplasia hematológica (por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, leucemia linfocítica), por ejemplo, un linfoma, o por ejemplo, un mieloma múltiple). En ciertas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable en microsatélites (MSS CRC)), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de pulmón triple negativo (TNBC)).

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR es dactolisib (Compuesto A4) u 8-(6-Metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (Compuesto A41), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2006/122806.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR es everolimus (también conocido como AFINITOR®; Compuesto A36) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, inhibe la diana mamífera de rapamicina (mTOR), una serina-treonina quinasa, corriente abajo de la vía PI3K/AKT. La vía mTOR está desregulada en varios cánceres humanos. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se une a una proteína intracelular, FKBP-12, dando lugar a la formación de un complejo inhibitorio con el complejo 1 de mTOR (mTORC1) y, por lo tanto, a la inhibición de la actividad de la quinasa mTOR. Everolimus (compuesto A36) puede reducir la actividad de la proteína quinasa ribosomal S6 (S6K1) y/o la proteína de unión al factor de iniciación eucariota 4E (4E-BP1), efectores descendentes de mTOR, implicados en la síntesis proteica. S6K1 es un sustrato de mTORC1 y fosforila el dominio de activación 1 del receptor de estrógenos, lo que da lugar a una activación del receptor independiente del ligando. Además, everolimus (compuesto A36) puede inhibir la expresión del factor inducible por hipoxia (por ejemplo, HIF-1) y/o reducir la expresión del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF). Se ha demostrado que la inhibición de mTOR mediante everolimus (compuesto A36) reduce la proliferación celular, la angiogénesis y la captación de glucosa en estudiosin vitroy/oin vivo.La activación constitutiva de la vía PI3K/Akt/mTOR puede contribuir a la resistencia endocrina en el cáncer de mama. Los estudiosin vitromuestran que las células de cáncer de mama dependientes de estrógenos y HER2+ son sensibles a los efectos inhibidores de everolimus (Compuesto A36), y que el tratamiento combinado con everolimus e inhibidores de Akt, HER2 o aromatasa potencia la actividad antitumoral de everolimus (Compuesto A36) de forma sinérgica. Dos reguladores de la señalización mTORC1 son los complejos supresores de oncogenes tuberina-esclerosis 1 y 2 (TSC1, TSC2). La pérdida o inactivación de TSC1 o TSC2 conduce a la activación de la señalización descendente. En el CET, un trastorno genético, las mutaciones inactivadoras de los genes TSC1 o TSC2 conducen a la formación de hamartomas en todo el cuerpo.

En algunas realizaciones, la combinación aquí descrita incluye el inhibidor de mTOR, everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, y un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

Everolimus (Compuesto A36) ha sido usado en clínicas como un agente antitumoral directo a la dosis de 10 mg diarios para reprimir la actividad mTOR en células tumorales, y como un imunosupresor en pacientes que requieren transplantes de órganos sólidos a 1.5-2.0 mg diarios para suprimir la función de linfocitos T. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, a estas dosis y horarios everolimus (Compuesto A36) se espera que perjudique una respuesta antitumoral eficaz. La inmunosenescencia es una disminución de la función inmunitaria que se produce en los ancianos y que incluye una disminución de la respuesta a la vacunación, incluida la vacunación antigripal. El declive de la función inmunitaria con la edad incluye un aumento de linfocitos T PD-1-positivos "agotados" que tienen una respuesta disminuida a la estimulación con antígeno (Lages et al. (2010) Aging Cell 9, 785-798). Los datos clínicos sugieren que una dosis de 5 mg por semana puede ser inmunoestimulante, reduciendo el porcentaje de linfocitos CD4+ y CD8+ PD-1-positivos en comparación con el tratamiento con placebo y mejorando la respuesta a una vacuna contra la gripe en sujetos de edad avanzada (Mannick et al. (2014) Sci. Transl. Med. Vol. 6, Issue 268, pp. 268ra179). En ciertas realizaciones, una dosis inmunoestimulante del inhibidor de mTOR, everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, mejora, o se usa para mejorar, la actividad antitumoral de un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, y el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administran cada uno a una dosis y/o en un programa de tiempo, que en combinación, logra una actividad antitumoral deseada.

En algunas realizaciones, la dosis de everolimus (Compuesto A36) aprobada para indicaciones de cáncer en adultos (por ejemplo, cáncer de mama (por ejemplo, TNBC), carcinoma de células renales y tumores neuroendocrinos (por ejemplo, tumor carcinoide pulmonar atípico) es de 10 mg diarios. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, el modelado y la simulación basados en la fosforilación mediada por mTOR de su diana corriente abajo S6 quinasa (S6K) predijeron que un régimen de dosificación semanal de 20 mg inhibía la fosforilación de S6K mediada por mTOR casi por completo, un régimen de dosificación semanal de 5 mg inhibía la fosforilación de S6K en más del 50%, y un régimen de dosificación diario de 0.5 mg inhibía la fosforilación de S6K en aproximadamente un 38% durante el intervalo de dosificación (Mannick et al. (2014) Sci. Transl. Med. Vol. 6, Issue 268, pp. 268ra179; Tanaka (2008) J. Clin. Oncol. p. 1596 602). Por consiguiente, en ciertas realizaciones, el inhibidor de mTOR, everolimus (compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra a una dosis de 5 mg una vez por semana (QW), por ejemplo, en combinación con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1). En otras realizaciones, también puede usarse una dosis de 0.5 mg una vez al día (QD), por ejemplo, cuando la dosis de 5 mg una vez a la semana (QW) no se tolera bien. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318 se administra a una dosis de 5 mg o menos una vez a la semana.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, por ejemplo, everolimus (Compuesto A36) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra a una dosis de aproximadamente 2,5-20 mg/día. En una realización, el inhibidor de TOR, por ejemplo, everolimus (Compuesto A36) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra a una dosis de aproximadamente 2.5, 5, 10 o 20 mg/día, por ejemplo, aproximadamente 2,5-5, 5-10 o 10-20 mg/día.

En una realización, el inhibidor de mTOR, Everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra a una dosis entre 1 mg y 10 mg, entre 2 mg y 8 mg, entre 3 mg y 7 mg, o entre 4 mg y 6 mg, por ejemplo, a una dosis de 1 mg, 2 mg, 3 mg, 4 mg, 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9 mg o 10 mg, por ejemplo, una vez por semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas o una vez cada cuatro semanas. En una realización, el inhibidor de mTOR, Everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra a una dosis de entre 4 mg y 6 mg, por ejemplo, 5 mg, por ejemplo, una vez por semana.

En otra realización, el inhibidor de mTOR, Everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra a una dosis entre 0.1 mg y 1 mg, entre 0.2 mg y 0.8 mg, entre 0.3 mg y 0.7 mg, o entre 0.4 mg y 0.6 mg, por ejemplo, 0.1 mg, 0.2 mg, 0.3 mg, 0.4 mg, 0.5 mg, 0.6 mg, 0.7 mg, 0.8 mg, 0.9 mg o 1 mg, por ejemplo, una vez al día o una vez a la semana.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, Everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra por vía oral.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, Everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra a una dosis entre 2 mg y 8 mg (por ejemplo, a una dosis de 5 mg), por ejemplo, una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, Everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra en combinación con el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, NTBC)).

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR se elige entre uno o más de rapamicina, temsirolimus (TORISEL®), AZD8055, BEZ235, BGT226, XL765, PF-4691502, GDC0980, SF1126, OSI-027, GSK1059615, KU-0063794, WYE-354, Palomid 529 (P529), PF-04691502, o PKI-587. ridaforolimus (formalmente conocido como deferolimus, (1R,2R,4S)-4-[(2R)-2 [(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R, 23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-dihidroxi-19,30-dimetoxi-15,17,21,23, 29,35-hexametil-2,3,10,14,20-pentaoxo-11,36-dioxa-4-azatriciciclo[30.3.1.04,9] hexatriaconta-16,24,26,28-tetraen-12-il]propil]-2-metoxiciclohexil dimetilfosfinato, también conocido como AP23573 y MK8669, y se describe en la Publicación PCT No. WO 03/064383); everolimus (AFINITOR® o RAD001); rapamicina (AY22989, SIROLIMUS®); simapimod (CAS Número de registro: 164301-51-3); (5-{2,4-Bis[(3S)-3-metilmorfolin-4-il]pirido[2,3-d]pirimidin-7-il}-2-metoxifenil)metanol (AZD8055); 2-Amino-8-[trans-4-(2-hidroxietoxi)ciclohexil]-6-(6-metoxi-3-piridinil)-4-metil-pirido[2,3-d]pirimidin-7(8H)-ona (PF04691502, Número de registro<c>A<s>: 1013101-36-4); N2-[1,4-dioxo-4-[[4-(4-oxo-8-fenil-4H-1-benzopiran-2-il) morfolinio -4-il]metoxi]butil]-L-arginilglicil-L-a-aspartil-L-serina (SEQ ID NO: 237) sal interna (SF1126, Número de registro CAS: 936487-67-1), o XL765 (SAR245409).

Otros Inhibidores mTOR de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, temsirolimus; ridaforolimus (1R,2R,4S)-4-[(2R)-2 [(1R,9S,72S,15R,16E,18R,19R,21R, 23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35Rj-1,18-dihidroxi-19,30-dimetoxi-15,17,21,23,29,35-hexametil-2,3,10,14,20-pentaoxo-11,36-dioxa-4-azatriciclo[30.3.1.049] hexatriaconta-16,24,26,28-tetraen-12-il]propil]-2-metoxiciclohexil dimetilfosfinato, también conocido como AP23573 y MK8669; everolimus (Ra D001); rapamicina (AY22989); simapimod; (5-{2,4-bis[(3S)-3-metilmorfolin-4-il]pirido[2,3-d]pirimidin-7-il}-2-metoxifenil)metanol (AZD8055); 2-mmino-8-[trans-4(2-hidroxietoxi)ciclohexil]-6-(6-metoxi-3-piridinil)-4-metil-pirido[2,3-d]pirimidin-7(8H)-ona (PF04691502); yN2-[1,4-dioxo-4-[[4-(4-oxo-8-fen//-4H-1-benzop/ran-2-//)morfolinio-4-il]metoxi]butil]-L-arginilgicil-L-a-aspartilL-serina- (SEQ ID NO: 237), sal interna (SF1126); y XL765.

Agonistas de la IL-15 de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agonista de la interleucina-15 (IL-15). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un tumor sólido refractario), (por ejemplo, un melanoma (por ejemplo, un melanoma metastásico o avanzado), un cáncer de riñón (por ejemplo, un cáncer de células renales), un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer de cabeza y cuello de células escamosas, o un cáncer de vejiga (por ejemplo, un cáncer de vejiga no músculo-invasivo)), por ejemplo, una neoplasia hematológica (por ejemplo, una leucemia, por ejemplo, una leucemia mielógena aguda (por ejemplo, una leucemia mielógena aguda refractaria o recidivante), por ejemplo, un linfoma, por ejemplo, un linfoma no Hodgkin (por ejemplo, un linfoma no Hodgkin indolente de células B en recaída o refractario), por ejemplo, o un mieloma múltiple (por ejemplo, un mieloma múltiple en recaída o refractario)). En ciertas realizaciones, el cáncer es un tumor sólido.

La IL-15, secretada por los fagocitos mononucleares (y algunos otros tipos de células) tras una infección vírica, regula la activación y proliferación de las células T y las células asesinas naturales. Esta citoquina induce la activación de los activadores de la transcripción STAT3, STATS y STAT6 a través de las vías de transducción de señales JAK quinasa en mastocitos, células T y células T epidérmicas dendríticas. La IL-15 y la interleucina-2 (IL-2) son estructuralmente similares y comparten muchas actividades biológicas; ambas pueden unirse a subunidades comunes del receptor de hematopoyetina, regulando negativamente la actividad de la otra. El número de células T CD8+ de memoria puede regularse mediante un equilibrio entre la IL-15 y la IL-2.

En algunas realizaciones, el agonista de IL-15 es una IL-15 humana recombinante (rhIL-15), por ejemplo, CYP0150 (Cytune). CYP0150 es una proteína recombinante que consiste en una IL-15 humana unida al dominio Sushi+ del receptor de cadena alfa humano (transpresentación).

CYP0150 se divulga, por ejemplo, en la Publicación PCT No. WO 2007/046006. CYP0150 tiene la secuencia de aminoácidos de : MAPRRARGCRTLGLPALLLLLLLRPPATRGDYKDDDDKIEGRITCPPPMSVEHADIWVKSYS LYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVHQRPAPPSGGSGG GGSGGGSGGGGSLQNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQ VISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS (SEQ ID NO: 248) (divulgada como SEQ ID NO: 60 en WO 2007/046006) o MDSKGSSQKAGSRLLLLLVVSNLLLCQGVVSTTRDYKDDDDKIEGRNWVNVISDLKKIEDLI QSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNV TESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSSGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGSLQITC PPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIR DPALVHQRPAPP (SEQ ID NO: 249) (divulgada como SEQ ID NO: 62 en WO 2007/046006).

En algunas realizaciones, el agonista de IL-15 es ALT-803 (Altor BioScience). ALT-803 es un complejo soluble IL-15N72D:IL-15RaSu/Fc, producido a partir de una línea celular de mamífero recombinante de alto rendimiento que coexpresa la proteína de fusión IL-15N72D e IL-15RaSu/Fc. El mutante de IL-15 (N72D) ha mejorado la actividad biológica de IL-15 (Zhu et al. 2009, J Immunol. 183:3598). El mutante IL-15N72d y el dominio soluble de IL-15Ra pueden formar complejos heterodiméricos estables en solución y este complejo muestra una mayor actividad biológica (aproximadamente 25 veces más activo) en comparación con la IL-15 no complejada. a LT-803 se divulga, por ejemplo, en la Publicación PCT No. WO 2012/040323 y Patente U.S. No. 8,507,222.

En algunas realizaciones, el agonista de IL-15 es hetIL-15 (Admune). HetIL-15 es una IL-15 humana heterodimérica (IL-15/sIL-15Ra). HetIL-15 se divulga, por ejemplo, en las Publicaciones PCT Nos. WO 2009/002562 y WO 2014/066527.

Agonistas CD40 de ejemplo

En una realización, la combinación incluye un agonista de CD40. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de pulmón, un carcinoma esofágico, un melanoma o un carcinoma de células renales), por ejemplo, una neoplasia hematológica (por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica (CLL)), por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, un linfoma no Hodgkin], o un mieloma múltiple).

En una realización, el agonista CD40 es ADC-1013 (Alligator/BioInvent). ADC-1013 es un anticuerpo monoclonal agonista IgG totalmente humano contra CD40 humano. CD40, una proteína integral de membrana que se encuentra en la superficie de los linfocitos B, es un miembro de la superfamilia de receptores del factor de necrosis tumoral y se expresa en gran medida en varios tipos de cáncer, como las neoplasias malignas de células B. Los agonistas de CD40, por ejemplo, los anticuerpos anti-CD40, son capaces de sustituir eficazmente la actividad de las células T auxiliares (Ridge, J. et al. (1998) Nature 393: 474-478).

El ADC-1013 se divulga, por ejemplo, en la Publicación PCT No. WO 2015/091853. Los clones de ADC-1013 incluyen, por ejemplo, 1136/1137, 1132/1133, 1148/1149, 1140/1135, 1134/1135, 1107/1108, 1142/1135, 1146/1147 y 1150/1151.

La región variable de la cadena pesada de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos de: EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGIGSYGGGTYYA DSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYVNFGMDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 250) (divulgada como SEQ ID NO: 65 en WO 2015/091853). La región variable de cadena ligera de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos de: DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSG SGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYGRNPPTFGQGTKLEIK (SEQ ID NO: 251) (divulgada como SEQ ID NO: 66 en WO 2015/091853). La cadena pesada CDR1 de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos de: GFTFSSYA (SEQ ID NO: 252) (divulgada como SEQ ID NO: 13 en WO 2015/091853). La CDR2 de cadena pesada de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos de: IGSYGGGT (SEQ ID NO: 253) (divulgada como SEQ ID NO: 14 en WO 2015/091853). La CDR3 de cadena pesada de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos de: ARYVNFGMDY (SEQ ID NO: 254) (divulgada como SEQ ID NO: 15 en WO 2015/091853). La cadena ligera CDR1 de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos de: QSISSY (SEQ ID NO: 255) (divulgada como SEQ ID NO: 16 en WO 2015/091853). La cadena ligera CDR2 de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos de: AAS (SEQ ID NO: 256) (divulgada como SEQ ID NO: 17 en WO 2015/091853). La cadena ligera CDR3 de 1132/1133 tiene la secuencia de aminoácidos de: QQYGRNPPT (SEQ ID NO: 257) (divulgada

como SEQ ID NO: 18 en WO 2015/091853).

La región variable de la cadena pesada de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de:

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYA DSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARRVWGFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 258)

(divulgada como SEQ ID NO: 79 en WO 2015/091853). La región variable de la cadena ligera de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de:

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSG SGSGT DFTLTISSLQPEDFATYYCQQYGVYPFTFGQGTKLEIK (SEQ ID NO: 259) (divulgada como SEQ ID NO: 80 en

WO 2015/091853).

La cadena pesada CDR1 de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de: GFTFSSYA (SEQ ID NO: 252)

(divulgada como SEQ ID NO: 55 en WO 2015/091853). La cadena pesada CDR2 de 1107/1108 tiene la

secuencia de aminoácidos de: ISGSGGST (SEQ ID NO: 260) (divulgada como SEQ ID NO: 56 en WO 2015/091853). La cadena pesada CDR3 de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de: ARRVWGFDY

(SEQ ID NO: 261) (divulgada como SEQ ID NO: 57 en WO 2015/091853). La cadena ligera CDR1 de 1107/1108

tiene la secuencia de aminoácidos de: QSISSY (SEQ ID NO: 255) (divulgada como SEQ ID NO: 58 en WO 2015/091853). La cadena ligera CDR2 de 1107/1108 tiene la secuencia de aminoácidos de: AAS (SEQ ID NO:

256) (divulgada como SEQ ID NO: 59 en WO 2015/091853). La cadena ligera CDR3 de 1107/1108 tiene la

secuencia de aminoácidos de: QQYGVYPFT (SEQ ID NO: 262) (divulgada como SEQ ID NO: 60 en WO 2015/091853).

En algunas realizaciones, el agonista CD40 es ISF35. ISF35 es un CD154 quimérico. ISF se divulga en las Publicaciones PCT Nos. WO 2003/099340 y WO 2008/070743.

En algunas realizaciones, el agonista CD40 es dacetuzumab. El dacetuzumab también se conoce como SGN-40 o huS2C6. El dacetuzumab es un anticuerpo monoclonal humanizado dirigido contra CD40. El dacetuzumab

se describe, por ejemplo, en Advani et al. J Clin Oncol. 2009; 27(26):4371-7; y Khubchandani et al. Curr Opin

Investig Drugs. 2009; 10(6):579-87.

En algunas realizaciones, el agonista CD40 es lucatumumab (Número de Registro CAS: 903512-50-5). El lucatumumab también se conoce como CHIR-12.12 o HCD-122. El lucatumumab se une al CD40 y lo inhibe,

inhibiendo así la proliferación celular inducida por el ligando CD40 y desencadenando la lisis celular a través

de la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en células que sobreexpresan CD40.

Lucatumumab se describe, por ejemplo, en Tai et al. Cancer Res. 2005;65(13):5898-906.

Los anticuerpos anti-CD40 son capaces de sustituir eficazmente la actividad de las células T ayudantes (Ridge,

J. et al. (1998) Nature 393: 474-478) y pueden utilizarse junto con anticuerpos PD-1 (Ito, N. et al. (2000) Immunobiology 201 (5) 527-40).

Agonistas OX40 de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agonista de OX40. En

algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el

presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de mama, un melanoma, un cáncer

de cabeza y cuello o un cáncer de próstata), por ejemplo, una neoplasia hematológica (por ejemplo, un linfoma

(por ejemplo, un linfoma de células B)).

La OX40, también conocida como CD 134, es una glicoproteína de la superficie celular y miembro de la superfamilia de receptores del factor de necrosis tumoral (TNF), se expresa en los linfocitos T y proporciona

una señal coestimuladora para la proliferación y supervivencia de las células T activadas. La activación de

OX40 puede inducir la proliferación de linfocitos T efectores, lo que promueve una respuesta inmunitaria contra

las células tumorales que expresan antígenos asociados a tumores (TAA).

En algunas realizaciones, el agonista OX40 se elige entre mAb 106-222, 106-222 humanizado (Hu106), mAb

119-122, o 119-122 humanizado (Hu119).

El MAb 106-222, el 106-222 humanizado (Hu106), el mAb 119-122 y el 119-122 humanizado (Hu119) se

divulgan, por ejemplo, en la Publicación PCT No. w O 2012/027328 y Patente U.S. No. 9,006,399. La secuencia

de aminoácidos de la región variable de cadena pesada del mAb 106-222 se divulga como SEQ ID NO: 4 en

WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de cadena ligera del mAb 106-222 se

divulga como SEQ ID NO: 10 en WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de

cadena pesada del mAb 106-222 humanizado (Hu106) se divulga como SEQ ID NO: 5 en WO 2012/027328.

La secuencia de aminoácidos de la región variable de cadena ligera del humanizado 106-222 (Hu106) se

divulga como SEQ ID NO: 11 en WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de

cadena pesada del mAb 119-122 se divulga como SEQ ID NO: 16 en WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de cadena ligera de mAb 119-122 se divulga como SEQ ID NO: 22 en WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de cadena pesada del mAb 119-122 humanizado (Hu119) se divulga como SEQ ID NO: 17 en WO 2012/027328. La secuencia de aminoácidos de la región variable de la cadena ligera del humanizado 119-122 (Hu119) se divulga como SEQ ID NO: 23 en WO 2012/027328.

En algunas realizaciones, el agonista OX40 es un anticuerpo monoclonal humanizado divulgado en la Patente U.S. No. 7,959,925 y Publicación PCT No. WO 2006/121810.

En algunas realizaciones, el agonista de OX40 se elige entre MEDI6469, MEDI0562 o MEDI6383. MEDI6469 es un anticuerpo monoclonal murino contra OX40. MEDI0562 es un anticuerpo monoclonal humanizado contra OX40. MEDI6383 es un anticuerpo monoclonal contra OX40.

En algunas realizaciones, el agonista OX40, por ejemplo, MEDI6469, se administra por vía intravenosa a una dosis de aproximadamente 0.4 mg/kg, por ejemplo, cada dos días.

Otros anticuerpos anti-OX-40 de ejemplo se describen, por ejemplo, en Weinberg, A. et al. (2000) Immunol 164: 2160-2169).

Agonistas de CD27 de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agonista de CD27. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un melanoma, un carcinoma de células renales, un adenocarcinoma de próstata refractario a hormonas, un cáncer de ovario, un cáncer de mama, un adenocarcinoma colorrectal o un cáncer de pulmón de células no pequeñas), por ejemplo, una neoplasia hematológica (por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, un linfoma de Hodgkin, un linfoma de Burkett, un linfoma de células del manto, un linfoma primario del sistema nervioso central o un linfoma de células B de la zona marginal), o una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica crónica (CLL)).

En una realización, el agonista CD27 es Varlilumab (Número de Registro CAS: 1393344-72-3). Varlilumab también se conoce como CDX-1127 (Celldex) o 1F5. Varlilumab es un anticuerpo monoclonal (mAb) totalmente humano dirigido contra CD27, molécula de la vía de activación de los linfocitos. CDX-1127 es un mAb agonista anti-CD27 que puede activar las células T humanas en el contexto de la estimulación del receptor de células T y, por tanto, mediar en los efectos antitumorales. CDX-1127 también puede proporcionar efectos terapéuticos directos contra tumores con expresión de CD27.

Varlilumab se divulga, por ejemplo, en Vitale et al., Clin Cancer Res. 2012;18(14):3812-21, WO 2008/051424, y US 8,481,029.

En una realización, el agonista CD27 es BION-1402 (BioNovion). BION-1402 también se conoce como hCD27.15. BION-1402 es un anticuerpo monoclonal anti-CD27 humano. BION-1402 puede estimular la proliferación y/o supervivencia de las células CD27+. BION-1402 puede activar CD27 humano con mayor eficacia que su ligando CD70, lo que se traduce en un efecto significativamente mayor sobre la proliferación de células T CD8+ y CD4+.

BION-1402 se divulga, por ejemplo, como hCD27.15 en WO 2012/004367. Este anticuerpo es producido por el hibridoma hCD27.15, que fue depositado en el ATCC el 2 de junio de 2010 con el número PTA-11008. La región variable de la cadena pesada de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: EVRLQQSGADLVKPGASVKLSCASGFIIKATYMHWVRQRPEQGLEWIGRIDPANGE KY DPKFQVKAITADTSSSTAYLQLNSLTSDDTAVYYCARYAWYFDVWGAGTTVTVSSAKTTPP XVYPXXPGS

(SEQ ID NO: 263) (divulgada como SEQ ID NO: 3 en WO 2012/004367). La región variable de la cadena ligera de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: DIQMTQSPASLSASVGDTVTITCRASENIYSFLAWYHQKQGRSPQLLVYHAKTLAEGVPSRFS GSGSGTQFSLKINSLQAEDFGSYYCQHYYGSPLTFGAGTKLEVKRADAAPTVSIFPPSSEELSL (SEQ ID NO: 264) (divulgada como SEQ ID NO: 4 en WO 2012/004367). La cadena pesada CDR1 de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: GFIIKATYMH (SEQ ID<n>O: 265) (divulgada como SEQ ID NO: 5 en WO 2012/004367). La cadena pesada CDR2 de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: RIDPANGETKYDPKFQV (SEQ ID NO: 266) (divulgada como SEQ ID NO: 6 en WO 2012/004367). La cadena pesada CDR3 de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: YAWYFDV (SEQ ID NO: 267) (divulgada como SEQ ID NO: 7 en WO 2012/004367). La cadena ligera CDR1 de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: RASENIYSFLA (SEQ ID NO: 268) (divulgada como SEQ ID NO: 8 en WO 2012/004367). La cadena ligera CDR2 de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: HAKTLAE (SEQ ID NO: 269) (divulgada como SEQ ID NO: 9 en WO 2012/004367). La cadena ligera CDR3 de hCD27.15 tiene la secuencia de aminoácidos de: QHYYGSPLT (SEQ ID NO: 270) (divulgada como SEQ ID NO: 10 en WO 2012/004367).

Agentes de unión a CSF-1/1R de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agente de unión a CSF-1/1R. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de próstata, un cáncer de mama o sinovitis villonodular pigmentada (PVNS)).

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R es un inhibidor del factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF). El M-CSF también se conoce a veces como CSF-1.

En otra realización, el agente de unión a CSF-1/1R es un inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224. En algunas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer cerebral (por ejemplo, glioblastoma multiforme (GBM)), un cáncer de páncreas o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC)).

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 50 mg y 1500 mg, por ejemplo, entre 75 mg y 1000 mg, entre 100 mg y 900 mg, entre 200 mg y 800 mg, entre 300 mg y 700 mg, entre 400 mg y 600 mg, entre 100 mg y 700 mg, entre 100 mg y 500 mg, entre 100 mg y 300 mg, entre 700 mg y 900 mg, entre 500 mg y 900 mg, entre 300 mg y 900 mg, entre 75 mg y 150 mg, entre 100 mg y 200 mg, entre 200 mg y 400 mg, entre 500 mg y 700 mg, o entre 800 mg y 1000 mg, por ejemplo, a una dosis de 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg, 350 mg, 400 mg, 450 mg, 500 mg, 550 mg, 600 mg, 650 mg, 700 mg, 750 mg, 800 mg, 850 mg, 900 mg, 950 mg, o 1000 mg. En ciertas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibido de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra diariamente, por ejemplo, según un programa de 7 días de administración/7 días de descanso. En otras realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra dos veces por semana, una vez por semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas o una vez cada cuatro semanas.

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 50 mg y 150 mg, por ejemplo, aproximadamente 100 mg, por ejemplo, diariamente, por ejemplo, según un programa de 7 días sí/7días no. En otras realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 100 mg y 200 mg, por ejemplo, aproximadamente 150 mg, por ejemplo, diariamente, por ejemplo, según un programa de 7 días sí/7días no. En otras realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 200 mg y 400 mg, por ejemplo, aproximadamente 300 mg, por ejemplo, diariamente, por ejemplo, según un programa de 7 días sí/7días no. En otras realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 500 mg y 700 mg, por ejemplo, aproximadamente 600 mg, por ejemplo, diariamente, por ejemplo, según un programa de 7 días sí/7días no. En otras realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 800 mg y 1000 mg, por ejemplo, alrededor de 900 mg, por ejemplo, diariamente, por ejemplo, según un programa de 7 días sí/7días no.

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 50 mg y 150 mg, por ejemplo, aproximadamente 100 mg, una vez a la semana. En otras realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 100 mg y 200 mg, por ejemplo, aproximadamente 150 mg, una vez a la semana. En otras realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 200 mg y 400 mg, por ejemplo, aproximadamente 300 mg, una vez a la semana. En otras realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxicidohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 500 mg y 700 mg, por ejemplo, aproximadamente 600 mg, una vez a la semana. En otras realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 800 mg y 1000 mg, por ejemplo, aproximadamente 900 mg, una vez a la semana.

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra por vía oral.

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1). En una realización, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 50 mg y 150 mg (por ejemplo, aproximadamente 100 mg), por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días de administración/7 días de descanso) o una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, o a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo,medianteinfusión intravenosa. En otra realización, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 100 mg y 200 mg (por ejemplo, aproximadamente 150 mg), por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días de administración/7 días de descanso) o una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, o a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa. En otra realización, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días de administración/7 días de descanso) o una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, o a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo,medianteinfusión intravenosa. En otra realización, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 500 mg y 700 mg (por ejemplo, aproximadamente 600 mg), por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días de administración/7 días de descanso) o una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, o a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa. En otra realización, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 800 mg y 1000 mg (por ejemplo, aproximadamente 900 mg), por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días de administración/7 días de descanso) o una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, o a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo,medianteinfusión intravenosa.

En ciertas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R (por ejemplo, un inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra en combinación con el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un cáncer, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un tumor sólido avanzado), por ejemplo, un cáncer cerebral (por ejemplo, glioblastoma multiforme (GBM), por ejemplo, glioblastoma recurrente), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, NTBC]), o un cáncer de páncreas (por ejemplo, cáncer de páncreas avanzado).

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R es un inhibidor de M-CSF, el Compuesto A33, o un agente de unión a CSF-1 divulgado en la Publicación PCT No. WO 2004/045532 o Publicación PCT No. WO 2005/068503 incluyendo RX1 o 5H4 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo o fragmento Fab contra M-CSF). En algunas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer de endometrio, un cáncer de piel (por ejemplo, melanoma), un cáncer de páncreas o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC)).

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R, por ejemplo, un inhibidor de M-CSF, el Compuesto A33, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2004/045532 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo o fragmento Fab contra M-CSF), se administra a una dosis promedio de aproximadamente 10mg/kg. En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R es un inhibidor de CSF1R o 4-(2-((1R, 2R)-2-hidroxiciclohexilamino)benzotiazol-6-iloxi)-N-metilpicolinamida. La 4-(2-((1R, 2R)-2-hidroxiciclohexilamino)benzotiazol-6-iloxi)-N-metilpicolinamida se divulga como ejemplo 157 en la página 117 de la Publicación PCT No. WO 2007/121484.

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R es pexidartinib (Número de Registro CAS 1029044 16-3). El pexidrtinib también se conoce como PLX3397 o 5-((5-cloro-1H-pirrol[2,3-b]piridin-3-il)metil)-N-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metil)piridin-2-amina. El pexidartinib es una molécula pequeña inhibidora del receptor tirosina quinasa (RTK) de KIT, CSF1R y FLT3. FLT3, CSF1R y FLT3 están sobreexpresados o mutados en muchos tipos de células cancerosas y desempeñan papeles importantes en la proliferación y metástasis de las células tumorales. PLX3397 puede unirse a e inhibir la fosforilación del receptor del factor de células madre (KIT), el receptor del factor estimulante de colonias-1 (CSF1R) y la tirosina quinasa 3 similar a FMS (FLT3), lo que puede dar lugar a la inhibición de la proliferación de células tumorales y la modulación a la baja de macrófagos, osteoclastos y mastocitos implicados en la enfermedad metastásica osteolítica. En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R, por ejemplo, pexidartinib, se utiliza en combinación con un inhibidor de PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento.

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R es emactuzumab. El emactuzumab también se conoce como RG7155 o RO5509554. El emactuzumab es un mAb IgG1 humanizado dirigido al CSF1R. En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R, por ejemplo, pexidartinib, se utiliza en combinación con un inhibidor de PD-L1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 descrita en el presente documento.

En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R es FPA008. FPA008 es un mAb humanizado que inhibe CSF1R. En algunas realizaciones, el agente de unión a CSF-1/1R, por ejemplo, FPA008, se usa en combinación con un inhibidor de PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento.

Inhibidores de la IL-17 de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de interleucina-17 (IL-17). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido, por ejemplo, cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo por ejemplo (TNBC)), cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o cáncer de colon. En ciertas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable por microsatélite (MSS CRC)), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de pulmón triple negativo (TNBC)).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-17 es secukinumab (Números de Registro CAS: 875356-43-7 (cadena pesada) y 875356-44-8 (cadena ligera)). Secukinumab también se conoce como AIN457 y COSENTY<x>®. Secukinumab es un anticuerpo monoclonal IgG1/K humano recombinante que se une específicamente a la IL-17A. Se expresa en una línea celular recombinante de ovario de hámster chino (CHO).

El secukinumab se describe, por ejemplo, en WO 2006/013107, US 7,807,155, US 8,119,131, US 8,617,552, y EP 1776142. La región variable de la cadena pesada de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de: EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYWMNWVRQAPGKGLEWVAAINQDGSEKYY VGSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRVEDTAVYYCVRDYYDILTDYYIHYWYFDLWGRG TLVTVSS (SEQ ID NO: 271) (divulgada como SEQ ID NO: 8 en WO 2006/013107). La región variable de la cadena ligera de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de: EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFS GSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPCTFGQGTRLEIKR (SEQ ID NO: 298) (divulgada como SEQ ID NO: 10 en WO 2006/013107). La cadena pesada CDR1 de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de NYWMN (SEQ ID NO: 272) (divulgada como SEQ ID NO: 1 en WO 2006/013107). La cadena pesada CDR2 de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de AINQDGSEKYYVGSVKG (SEQ ID NO: 273) (divulgada como SEQ ID NO: 2 en WO 2006/013107). La cadena pesada CDR3 de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de DYYDILTDYYIHYWYFDL (SEQ ID NO: 274) (divulgada como SEQ ID NO: 3 en WO 2006/013107). La cadena ligera CDR1 de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de RASQSVSSSYLA (SEQ ID NO: 275) (divulgada como SEQ ID NO: 4 en WO 2006/013107). La cadena ligera CDR2 de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de GASSRAT (SEQ ID NO: 276) (divulgada como SEQ ID NO: 5 en WO 2006/013107). La cadena ligera CDR3 de secukinumab tiene la secuencia de aminoácidos de GASSRAT (SEQ ID NO: 299) (divulgada como SEQ ID NO: 6 en WO 2006/013107).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-17 es CJM112. CJM112 también se conoce como XAB4. CJM112 es un anticuerpo monoclonal totalmente humano (por ejemplo, del isotipo IgG1/K) que se dirige a IL-17A.

CJM112 se divulga, por ejemplo, en WO 2014/122613. La cadena pesada de CJM112 tiene la secuencia de aminoácidos de: EVQLVESGGDLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLEWVANIKQDGSEKYY VDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDRGSLYYWGQGTLVTVSSASTKG PSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSV VTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPK DTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVL HQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKG FYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALH NHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 277) (divulgado como SEQ ID NO: 14 en WO 2014/122613). La cadena ligera de CJM112 tiene la secuencia de aminoácidos de: AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRPSQGINWELAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLEQGVPSRFSG SGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGT ASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHK VYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 278) (divulgado como SEQ ID NO: 44 en WO 2014/122613).

CJM112 puede unirse a IL-17A humana, de cynomolgus, ratón y rata y neutralizar la bioactividad de estas citoquinasin vitroein vivo.La IL-17A, miembro de la familia IL-17, es una citoquina proinflamatoria importante que se ha indicado que desempeña funciones importantes en muchas afecciones mediadas por el sistema inmunitario, como la psoriasis y los cánceres (Witowski et al. (2004) Cell Mol. Life Sci. p. 567-79; Miossec and Kolls (2012) Nat. Rev. Drug Discov. p. 763-76). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, un inhibidor de IL-17, por ejemplo, un anticuerpo anti-IL17, puede mejorar la respuesta mediada por PD-1, por ejemplo, bloqueando la expansión mediada por IL-17 de neutrófilos supresores de células T y/o reduciendo la metástasis (Coffelt et al. (2015) Nature p. 345-8).

En algunas realizaciones, la combinación aquí descrita incluye un inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en WO 2006/013107, y un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-pD-1).

La IL-17 es un importante mediador de la inmunidad innata y de la respuesta inflamatoria crónica. Por ejemplo, al aumentar la producción de quimiocinas en varios tejidos, la IL-17 es fundamental en la fisiopatología de las enfermedades autoinmunes (Isailovic et al. (2015) J. Autoimmun. p. 1-11). La IL-17 es secretada principalmente por CD4+ Th17, así como por células T y§, células T CD8+, neutrófilos y eosinófilos, y recluta monocitos y neutrófilos al lugar de la inflamación (Alshaker and Matalka (2011) Cancer Cell Int. p. 11-33). El papel del infiltrado de células Th17 en los tumores se ha estudiado en varios tipos de cáncer y en muchos contextos se correlaciona con un mal pronóstico (Zeng et al. (2015) Int. J. Clin. Exp. Med. p. 10515-36). Las células Th17, y específicamente la IL-17, tienen funciones tanto antitumorales como protumorales. En algunos contextos, la IL-17 promueve la vascularización tumoral, la proliferación celular, la tumorigénesis, la metástasis y/o el reclutamiento de células supresoras derivadas de macrófagos en el microambiente tumoral (Yang et al. (2014) Mediators Inflamm. p. 014:623759). La IL-17 tiene un papel importante en el tratamiento de las neoplasias malignas (Zou and Restifo (2010) Nat. Rev. Immunol. p. 246-56). En ciertas realizaciones, el inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en WO 2006/013107, mejora, o se usa para mejorar, la respuesta mediada por PD-1, por ejemplo, bloqueando la expansión mediada por IL-17 de neutrófilos supresores de células T y/o reduciendo la metástasis.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en WO 2006/013107, y el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administran cada uno a una dosis y/o en un programa de tiempo, que en combinación, logra una actividad antitumoral deseada.

En una realización, el inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en WO 2006/013107, se administra en dosis entre 5 mg y 100 mg, por ejemplo, entre 10 mg y 75 mg, entre 15 mg y 50 mg, entre 20 mg y 30 mg, entre 10 mg y 25 mg, o entre 25 mg y 40 mg, por ejemplo, a una dosis de 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg o 100 mg, por ejemplo, una vez cada dos semanas, cada cuatro semanas, una vez cada seis semanas o una vez cada ocho semanas, por ejemplo, por vía intravenosa.

En una realización, el inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en WO 2006/013107, se administra a una dosis entre 20 mg y 30 mg (por ejemplo, 25 mg), por ejemplo, una vez cada cuatro semanas. En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto descrito en WO 2006/013107, se administra por vía intravenosa. En una realización, el inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en WO 2006/013107, se administra a una dosis entre 20 mg y 30 mg (por ejemplo, 25 mg), por ejemplo, una vez cada cuatro semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En una realización, el inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en WO 2006/013107, se administra en dosis entre 5 mg y 750 mg, por ejemplo, entre 10 mg y 500 mg, entre 15 mg y 450 mg, entre 20 mg y 400 mg, entre 25 y 350 mg, entre 50 mg y 300 mg, entre 75 mg y 250 mg, entre 100 mg y 200 mg, entre 25 mg y 75 mg, o entre 40 mg y 60 mg, por ejemplo, a una dosis de 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg, 350 mg, 400 mg, 450 mg o 500 mg, por ejemplo, una vez cada dos semanas, cada cuatro semanas, una vez cada seis semanas o una vez cada ocho semanas, por ejemplo, por vía subcutánea.

En una realización, el inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en WO 2006/013107, se administra a una dosis entre 40 mg y 60 mg (por ejemplo, 50 mg), por ejemplo, una vez cada cuatro semanas. En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto descrito en WO 2006/013107, se administra por vía subcutánea. En una realización, el inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en WO 2006/013107, se administra a una dosis entre 40 mg y 60 mg (por ejemplo, 50 mg), por ejemplo, una vez cada cuatro semanas, por ejemplo, por inyección subcutánea, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En una realización, el inhibidor de IL-17, CJM112, o un compuesto divulgado en WO 2006/013107, se administra en combinación con el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un cáncer colorrectal (CRC), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo por ejemplo (TNBC)).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-17 es ixekizumab (Número de Registro CAS: 1143503-69-8). El ixekizumab también se conoce como LY2439821. El ixekizumab es un anticuerpo monoclonal IgG4 humanizado que se dirige a la IL-17A.

El ixekizumab se describe, por ejemplo, en WO 2007/070750, US 7,838,638, y US 8,110,191. La región variable de la cadena pesada de ixekizumab tiene la secuencia de aminoácidos de: QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYSFTDYHIHWVRQAPGQGLEWMGVINPMYGTTDY NQRFKGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARYDYFTGTGVYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 279) (divulgada como SEQ ID NO: 118 en WO 2007/070750). La región variable de la cadena ligera de ixekizumab tiene la secuencia de aminoácidos de:

D IV M T Q T P L S L S V T P G Q P A S IS C R S S R S L V H S R G N T Y L H W Y L Q K P G Q S P Q L L IY K V S N R F IG V P

D R F S G S G S G T D F T L K IS R V E A E D V G V Y Y C S Q S T H L P F T F G Q G T K L E IK (S E Q ID N O : 280 )

(divulgada como SEQ ID NO: 241 en WO 2007/070750).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-17 es brodalumab (Número de Registro CAS: 1174395-19-7). El brodalumab también se conoce como AMG 827 o AM-14. El brodalumab se une al receptor A de la interleucina-17 (IL-17RA) e impide que la IL-17 active el receptor.

El brodalumab se divulga, por ejemplo, en WO 2008/054603, US 7,767,206, US 7,786,284, US 7,833,527, US 7,939,070, US 8,435,518, US 8,545,842, US 8,790,648, y US 9,073,999. La cadena pesada CDR1 de brodalumab tiene la secuencia de aminoácidos de RYGIS (SEQ ID NO: 281) (como se describe como SEQ ID NO: 146 en WO 2008/054603). La cadena pesada CDR2 de brodalumab tiene la secuencia de aminoácidos de WISTYSGNTNYAQKLQG (SEQ ID NO: 282) (según se describe como SEQ ID NO: 147 en WO 2008/054603). La CDR3 de cadena pesada de brodalumab tiene la secuencia de aminoácidos de RQLYFDY (SEQ ID NO: 283) (según se describe como SEQ ID NO: 148 en WO 2008/054603). La CDR1 de cadena ligera de brodalumab tiene la secuencia de aminoácidos de RASQSVSSNLA (SEQD NO: 284) (como SEQ ID NO: 224 en WO 2008/054603). La cadena pesada CDR2 de brodalumab tiene la secuencia de aminoácidos de DASTRAT (SEQ ID NO: 285) (según se describe como SEQ ID NO: 225 en WO 2008/054603). La cadena pesada CDR3 de brodalumab tiene la secuencia de aminoácidos de QQYDNWPLT (SEQ ID NO: 286) (como SEQ ID NO: 226 en WO 2008/054603).

Inhibidores de IL-1p de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de la interleucina-1 beta (IL-1p). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, una neoplasia hematológica (por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, linfoma de Hodgkin), una leucemia (por ejemplo, una leucemia aguda o crónica), o un mieloma múltiple) o un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer colorrectal (CLC), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)), o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC)). En ciertas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable por microsatélite (MSS CRC)), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de pulmón triple negativo (TNBC)).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-1p es canakinumab. El canakinumab también se conoce como ACZ885 o ILARIS®. El canakinumab es un anticuerpo monoclonal IgG1/K humano que neutraliza la bioactividad de la IL-1p humana.

El canakinumab se describe, por ejemplo, en WO 2002/16436, US 7,446,175, y EP 1313769. La región variable de cadena pesada de canakinumab tiene la secuencia de aminoácidos de: MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSVYGMNWVRQAP GKGLEWVAIIWYDGDNQYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNGLRAEDTAVYYCARDLR TGPFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 287) (divulgado como SEQ ID NO: 1 en US 7,446,175). La región variable de cadena ligera de canakinumab tiene la secuencia de aminoácidos de: MLPSQLIGFLLLWVPASRGEIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCRASQSIGSSLHWYQQKPDQSPK LLIKYASQSFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTINSLEAEDAAAYYCHQSSSLPFTFGPGTKVDIK (SEQ ID NO: 288) (divulgada como SEQ ID NO: 2 en US 7,446,175).

Canakinumab se ha utilizado, por ejemplo, para el tratamiento de los Síndromes Periódicos Asociados a la Criopirina (CAPS), en adultos y niños, para el tratamiento de la artritis idiopática juvenil sistémica (SJIA), para el tratamiento sintomático de los ataques agudos de artritis gotosa en adultos, y para otras enfermedades inflamatorias impulsadas por IL-1p. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, los inhibidores de la IL-1p, por ejemplo, canakinumab, pueden aumentar la respuesta inmunitaria antitumoral, por ejemplo, bloqueando una o más funciones de la IL-1p incluyendo, por ejemplo, el reclutamiento de neutrófilos inmunosupresores al microambiente tumoral, la estimulación de la angiogénesis tumoral y/o la promoción de la metástasis (Dinarello (2010) Eur. J. Immunol. p. 599-606).En algunas realizaciones, la combinación aquí descrita incluye un inhibidor de IL-1p, canakinumab, o un compuesto divulgado en WO 2002/16436, y un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

La IL-1 es una citoquina pleotrópica secretada con un papel central en la inflamación y la respuesta inmunitaria. Se observan aumentos de IL-1 en múltiples contextos clínicos, incluido el cáncer (Apte et al. (2006) Cancer Metastasis Rev. p. 387-408; Dinarello (2010) Eur. J. Immunol. p. 599-606). La IL-1p está elevada en el cáncer de pulmón, de mama y colorrectal (Voronov et al. (2014) Front Physiol. p. 114) y se asocia a un mal pronóstico (Apte et al. (2000) Adv. Exp. Med. Biol. p. 277-88). Sin querer ceñirse a la teoría, se cree que en algunas realizaciones, la IL-1p secretada, derivada del microambiente tumoral y por células malignas, promueve la proliferación de células tumorales, aumenta la invasividad y amortigua la respuesta inmunitaria antitumoral, en parte reclutando neutrófilos inhibidores (Apte et al. (2006) Cancer Metastasis Rev. p. 387-408; Miller et al. (2007) J. Immunol. p. 6933-42). Los datos experimentales indican que la inhibición de la IL-1p produce una disminución de la carga tumoral y la metástasis (Voronov et al. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. p. 2645 50). Canakinumab puede unirse a IL-1p e inhibir la señalización mediada por IL-1. Por consiguiente, en ciertas realizaciones, un inhibidor de IL-1p, por ejemplo, canakinumab, potencia, o se utiliza para potenciar, un efecto antitumoral mediado inmunológicamente de un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-1p, canakinumab, o un compuesto divulgado en WO 2002/16436, y el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administran cada uno a una dosis y/o en un programa de tiempo, que en combinación, logra una actividad antitumoral deseada.

En una realización, el inhibidor de IL-1p, canakinumab, o un compuesto divulgado en WO 2002/16436, se administra a una dosis entre 25 mg y 200 mg, por ejemplo, entre 50 mg y 150 mg, entre 80 mg y 120 mg, entre 140 mg y 160 mg, entre 40 mg y 60 mg, entre 80 mg y 100 mg, entre 50 mg y 100 mg, o entre 100 mg y 150 mg, por ejemplo, a una dosis de 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 100 mg, 110 mg, 120 mg, 130 mg, 140 mg, 150 mg, 160 mg, 170 mg, 180 mg, 190 mg o 200 mg, por ejemplo, una vez cada cuatro semanas, una vez cada seis semanas, una vez cada ocho semanas, una vez cada diez semanas o una vez cada doce semanas.

En una realización, el inhibidor de IL-1p, canakinumab, o un compuesto divulgado en WO 2002/16436, se administra a una dosis entre 80 mg y 120 mg (por ejemplo, a una dosis de 100 mg), por ejemplo, una vez cada ocho semanas. En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-1p, canakinumab, o un compuesto descrito en WO 2002/16436, se administra por vía subcutánea, por ejemplo, en el abdomen o el muslo. En una realización, el inhibidor de IL-1p, por ejemplo, canakinumab, se administra a una dosis entre 80 mg y 120 mg (por ejemplo, a una dosis de 100 mg), por ejemplo, una vez cada ocho semanas, por ejemplo, por inyección subcutánea, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IL-1p, canakinumab, o un compuesto divulgado en WO 2002/16436, se administra en combinación con el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un cáncer colorrectal (por ejemplo, MSS CRC), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo por ejemplo (TNBC)).

Inhibidores de ejemplo de CXCR2

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor del receptor 2 de quimioquinas (motivo C-X-C) (CXCR2). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido, por ejemplo, un cáncer de mama, un sarcoma metastásico, un cáncer de páncreas, un melanoma, un carcinoma de células renales (RCC), un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) o un tumor pediátrico (por ejemplo, un rabdomiosarcoma).

En algunas realizaciones, el inhibidor de CXCR2 es danirixina (Número de Registro CAS: 954126-98-8). La danirixina también se conoce como GSK1325756 o 1-(4-cloro-2-hidroxi-3-piperidin-3-ilsulfonilfenil)-3-(3-fluoro-2-metilfenil)urea. La danirixina se divulga, por ejemplo, en Miller et al. Eur J Drug Metab Pharmacokinet (2014) 39:173-181; y Miller et al. BMC Pharmacology and Toxicology (2015), 16:18.

En algunas realizaciones, el inhibidor de CXCR2 es reparixina (Número de Registro CAS: 266359-83-5). La reparixina también se conoce como repertaxina o (2R)-2-[4-(2-metilpropil)fenil]-N-metilsulfonilpropanamida. La reparixina es un inhibidor alostérico no competitivo de CXCR1/2. La reparixina se divulga, por ejemplo, en Zarbock et al. British Journal of Pharmacology (2008), 1-8.

En algunas realizaciones, el inhibidor de CXCR2 es navarixin. La navarixina también se conoce como MK-7123, SCH 527123, PS291822, o 2-hidroxi-N,N-dimetil-3-[[2-[(1R)-1-(5-metilfuran-2-il)propil]amino]-3,4-dioxociclobuten-1-il]amino]benzamida. La navarixina se divulga, por ejemplo, en Ning et al. Mol Cancer Ther.

2012;11(6):1353-64.

Inhibidores de PI3K-y, -8 de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de la fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato 3-quinasa (PI3K), por ejemplo, fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato 3-quinasa gamma y/o delta (PI3K-<y>,8). En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer cerebral, un cáncer de vejiga, un cáncer de páncreas, un cáncer renal, un tumor sólido, un cáncer de hígado, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer endocrino, un cáncer de ovario, un melanoma, un cáncer del aparato reproductor femenino, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un glioblastoma multiforme, un cáncer de cabeza y cuello, o un cáncer de colon), por ejemplo, una neoplasia hematológica (por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia linfocítica, por ejemplo, leucemia linfocítica crónica (CLL) (por ejemplo, CLL recidivante)),por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, linfoma no Hodgkin, por ejemplo, linfoma no Hodgkin folicular de células B (FL) recidivante o linfoma linfocítico pequeño (SLL) recidivante), o por ejemplo, un mieloma múltiple).

En algunas realizaciones, el inhibidor de PI3K es un inhibidor de las isoformas delta y gamma de PI3K. Los inhibidores de PI3K de ejemplo que pueden usarse en combinación se describen en, por ejemplo, WO 2010/036380, WO 2010/006086, WO 09/114870, WO 05/113556, GSK 2126458, GDC-0980, GDC-0941, Sanofi XL147, XL756, XL147, PF-46915032, BKM 120, CAL-101, CAL 263, SF1126, PX-886, y un inhibidor dual de PI3K (por ejemplo, Novartis BEZ235).

En algunas realizaciones, el inhibidor de PI3K-<y>,8 es idelalisib (Número de Registro CAS: 870281-82-6). El idelalisib también se conoce como ZYDELIG®, GS-1101, CAL-101, o 5-Fluoro-3-fenil-2-[(1S)-1-(7H-purin-6-ilamino)propil]-4(3H)-quinazolinona. Idelalisib bloquea P1108, la isoforma delta de PI3K. Idelalisib se divulga, por ejemplo, en Wu et al. Journal of Hematology & Oncology (2013) 6: 36.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PI3K-<y>,8 es dactolisib (Compuesto A4) u 8-(6-Metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (Compuesto A41), o un compuesto divulgado en la Publicación P<c>T No. WO 2006/122806.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PI3K-y,8 es buparlisib (Compuesto A6) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/084786.

En una realización, el inhibidor de PI3K-<y>,8, por ejemplo, buparlisib (Compuesto A6) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/084786, se administra a una dosis de aproximadamente 100 mg (por ejemplo, por día).

Otros inhibidores de ejemplo de PI3K-y,8 que pueden usarse en la combinación incluyen, por ejemplo pictilisib (GDC-0941), LY294002, pilaralisib (XL147), PI-3065, PI-103, VS-5584 (SB2343), CZC24832, duvelisib (IPI-145, INK1197), TG100-115, CAY10505, GSK1059615, PF-04691502, AS-605240, voxtalisib (SAR245409, XL765), IC-87114, omipalisib (GSK2126458, GSK458), TG100713, gedatolisib (PF-05212384, PKI-587), PKI-402, análogo de XL147, PIK-90, PIK-293, PIK-294, 3-metiladenina (3-MA), AS-252424, AS-604850, o apitolisib (GDC-0980, RG7422).

En algunas realizaciones, el inhibidor de PI3K es el compuesto A8 o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO2010/029082.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PI3K es un inhibidor pan-PI3K, (4S,5R)-3-(2'-amino-2-morfolino-4'-(trifluorometil)-[4,5'-bipirimidin]-6-il)-4-(hidroximetil)-5-metiloxazolidin-2-ona (Compuesto A13) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2013/124826.

Los inhibidores de ejemplo de PI3K-Y, -8 incluyen, per no se limitan a, duvelisib e idelalisib. El idelalisib (también denominado GS-1101 o CAL-101; Gilead) es una molécula pequeña que bloquea la isoforma delta de PI3K. A continuación se muestra la estructura del idelalisib (5-fluoro-3-fcnil-2-[(lS)-1-(7H-pur/n-6-//am/no)propil]-4(3H)-quinazolinona).

El duvelisib (también llamado IPI-145; Infinity Pharmaceuticals and Abbvie) es una pequeña molécula que bloquea la PI3K-8,y. A continuación se muestra la estructura del duvelisib (8-cloro-2-fenil-3-[(1S)-1-(9H-purin-6-ilamino)etil]-1(2H)-isoquinolinona).

En una realización, el inhibidor es un inhibidor dual de fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3K) y mTOR seleccionado de 2-Amino-8-[frans-4-(2-hidroxietoxi)ciclohexil]-6-(6-metoxi-3-piridinil)-4-metil-pirido[2,3-d]pirimidin-7(8H)-ona(PF-04691502);W-/4-[[4-(Dimetilamino)-1-piperidinil]carbonil]fenil]-N'-[4-(4,6-di-4-morfolinil-1,3,5-triazin-2-il)fenil]urea(PF-05212384, PKI-587); 2-Metil-2-{4-[3-metil-2-oxo-8-(quinolin-3-il)-2,3-dihidro-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il]fenil}propanonitrilo (BEZ-235); apitolisib (GDC-0980, RG7422); 2,4-Difluoro-N-{2-(metiloxi)-5-[4-(4-piridazinil)-6-quinolinil]-3-piridinil}bencenosulfonamida (GSK2126458); ácido maleico de 8-(6-metoxipiridin-3-il)-3-metil-1-(4-(piperazin-1 -il)-3-(trifluorometil)fenil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-2(3H)-ona (<n>V-BGT226); 3-[4-(4-Morfolinilpirido[3',2':4,5]furo[3,2-d]pirimidin-2-il]fenol (PI-103); 5-(9-isopropil-8-metil-2-morfolino-9H-purin-6-il)pirimidin-2-amina (VS-5584, Sb2343); o N-[2-[(3,5-dimetoxifenil)amino]quinoxalin-3-il]-4-[(4-metil-3-metoxifenil)carbonil]aminofenilsulfonamida (XL765).

Inhibidores de BAFF-R de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor del receptor del factor activador de células B (BAFF-R). En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, una neoplasia hematológica, por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, leucemia linfocítica crónica (<c>L<l>), por ejemplo, leucemia linfocítica crónica recidivante o refractaria).

En una realización, el inhibidor de BAFF-R es VAY736. VAY736 es un anticuerpo monoclonal completamente humano derivado de una biblioteca combinatoria de anticuerpos (HuCAL) dirigido a BAFF-R. BAFF-R, también conocido como miembro 13C de la superfamilia de receptores del factor de necrosis tumoral, se sobreexpresa en ciertos tipos de células tumorales y enfermedades autoinmunes. VAY736 tiene actividades antiinflamatorias y antineoplásicas. En las células cancerosas, BAFF-R desempeña un papel clave en la proliferación y supervivencia de las células B. VAY736 se dirige y se une a BAFF-R, lo que inhibe tanto la interacción BAFF/BAFF-R como la señalización mediada por BAFF-R. Esto puede disminuir el crecimiento celular de las células tumorales. Esto puede disminuir el crecimiento celular en las células tumorales que expresan BAFF-R.

VAY736 se divulga, por ejemplo, en US 8,106,163. La cadena pesada CDR1 de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de GDSVSSNSAAWG (SEQ ID NO: 289) (divulgada como SEQ ID NO: 3 en US 8,106,163). La cadena pesada CDR2 de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de RIYYRSKWYNSYAVSVKS (SEQ ID NO: 290) (divulgada como SEQ ID NO: 10 en US 8,106,163). La cadena pesada CDR3 de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de YDWVPKIGVFDS (SEQ ID<n>O: 300) (divulgada como SEQ ID NO: 17 en US 8.106.163) . La cadena ligera CDR1 de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de RASQFISSSYLS (SEQ ID NO: 291) (divulgada como SEQ ID NO: 24 en US 8,106,163). La cadena ligera CDR2 de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de LLIYGSSSRAT (SEQ ID NO: 292) (divulgada como SEQ ID NO: 31 en US 8.106.163) . La cadena ligera CDR3 de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de QQLYSSPM (SEQ ID NO: 293) (divulgada como SEQ ID NO: 38 en US 8,106,163). La región variable de cadena pesada de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de: QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWGWIRQSPGRGLEWLGRIYYRSKWYNS YAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARYDWVPKIGVFDSWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 294) (divulgada como SEQ ID NO: 52 en US 8,106,163). La región variable de cadena ligera de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de: DIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQFISSSYLSWYQQKPGQAPRLLIYGSSSRATGVPARFSG SGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQLYSSPMTFGQGTKVEIKRT (SEQ ID NO: 295) (divulgada como SEQ ID NO: 45 en US 8,106,163). La cadena pesada de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de: QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWGWIRQSPGRGLEWLGRIYYRSKWYNS YAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARYDWVPKIGVFDSWGQGTLVTVSS ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLY SLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFP PKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSV LTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTC LVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVM HEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO: 296) (divulgada como SEQ ID NO: 75 en US 8,106,163). La región variable de cadena ligera de VAY736 tiene la secuencia de aminoácidos de: DIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQFISSSYLSWYQQKPGQAPRLLIYGSSSRATGVPARFSG SGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQLYSSPMTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGT ASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHK VYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 297) (divulgada como SEQ ID NO: 71 en US 8,106,163).

Inhibidores de MALT- 1/BTK de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de MALT-1 y/o BTK. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento.

Los inhibidores de MALT-1/BTK de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, (S)-1-(6-(2H-1,2,3-triazol-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-3-(2-cloro-7-(1-metoxietil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)urea, (S)-1-(2-cloro-7-(1-metoxietil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3-(2-(trifluorometil)piridin-4-il)urea, (S)-1-(2-cloro-7-(1-metoxietil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3-(1-metil-2-oxo-5-(trifluorometil)-1,2-dihidropiridin-3-il)urea, (R)-1-(6-(2H-1,2,3-triazol-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-3-(2-cloro-7-(1-metoxi-2-metilpropil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)urea, (R)-1-(5-cloro-6-(2H-1,2,3-triazol-2-il)piridin-3-il)-3-(2-cloro-7-(1-metoxi-2-metilpropil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)urea, (S)-1-(7-(1-metoxietil)-2-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3-(2-(trifluorometil)piridin-4-il)urea, (S)-1-(2-fluoro-7-(1-metoxietil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3-(2-(trifluorometil)piridin-4-il)urea, y (S)-1-(2-cloro-7-(1-metoxietil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-6-il)-3-(5-cianopiridin-3-il)urea.

Los inhibidores de BTK de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, ibrutinib (PCI-32765); GDC-0834; RN-486; CGI-560; CGI-1764; HM-71224; CC-292; ONO-4059; CNX-774; o LFM-A13. En una realización, el inhibidor de BTK no reduce ni inhibe la actividad quinasa de la quinasa inducible por interleucina-2 (ITK), por ejemplo, se selecciona de GDC-0834; RN-486; CGI-560; CGI-1764; HM-71224; CC-292; ONO-4059; CNX-774; o LFM-A13.

En una realización, el inhibidor de quinasa es un inhibidor de BTK, por ejemplo, ibrutinib (PCI-32765). La estructura de ibrutinib (1-[(3R)-3-[4-amino-3-(4-fenoxifenil)-7H-p/razo/o[3,4-d]pirimidin-1-il]piperidin-1-il]prop-2-en-1-ona) se muestra a continuación.

En otras realizaciones, el inhibidor de BTK es un inhibidor de BTK descrito en la Solicitud Internacional WO/2015/079417,. Por ejemplo, en algunas realizaciones, el inhibidor de BTK es un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

donde,

R1 es hidrógeno, C1-C6 alquilo opcionalmente sustituido por hidroxi;

R2 es hidrógeno o halógeno;

R3 es hidrógeno o halógeno;

R4 es hidrógeno;

R5 es hidrógeno o halógeno;

o R4 y R5 están unidos entre sí y representan un enlace, -CH2-, -CH2-CH2-, -CH=CH-, -CH=CH-CH2-; -CH2-CH=CH-; o -CH2-CH2-CH2-;

R6 y R7 son, independientemente entre sí, H, C1-C6 alquilo opcionalmente sustituido por hidroxilo, C3-C6 cicloalquilo opcionalmente sustituido por halógeno o hidroxi, o halógeno;

R8, R9, R, R', R10 y R11, independientemente entre sí, representan H, o C1-C6 alquilo opcionalmente sustituido por C1-C6 alcoxi; o dos cualesquiera de R8, R9, R, R', R10 y R11 junto con el átomo de carbono al que están unidos pueden formar un anillo carbocíclico saturado de 3 - 6 miembros;

R12 es hidrógeno o C1-C6 alquilo opcionalmente sustituido por halógeno o C1-C6 alcoxi;

o R12 y uno cualquiera de R8, R9, R, R', R10 o R11 junto con los átomos a los que están unidos pueden formar un anillo azaciclo de 4, 5, 6 o 7 miembros, cuyo anillo puede estar opcionalmente sustituido por halógeno, ciano, hidroxilo, C1-C6 alquilo o C1-C6 alcoxi;

n es 0 o 1; y

R13 es C2-C6 alquenilo opcionalmente sustituido por C1-C6 alquilo, C1-C6 alcoxi o N,N-di-C1-C6 alquil amino; C2-C6 alquinilo opcionalmente sustituido por C1-C6 alquilo o C1-C6 alcoxi; u óxido de C2-C6 alquilenilo opcionalmente sustituido por C1-C6 alquilo.

En algunas realizaciones, el inhibidor de BTK de Fórmula I se elige entre: N-(3-(5-((1-Acriloilazetidin-3-il)oxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil)-2-fluorobenzamida; (E)-N-(3-(6-Amino-5-((1-(but-2-enoil)azetidin-3-il)oxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-((1-propioloilazetidin-3-il)oxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5((1-(but-2-inoil)azetidin-3-il)oxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(5-((1-Acriloilpiperidin-4-il)oxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-metilacrilamido)etoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; (E)-N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-metilbut-2-enamido)etoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-metilpropiolamido)etoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; (E)-N-(3-(6-Amino-5-(2-(4-metoxi-N-metilbut-2-enamido)etoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-metilbut-2-inamido)etoxi)pirimidin-4- il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil)-2-fluorobenzamida; N-(2-((4-Amino-6-(3-(4-ciclopropil)-2-fluorobenzamido)-5-fluoro-2-metilfenil)pirimidin-5-il)oxi)etil)-N-metiloxiran-2-carboxamida; N-(2-((4-Amino-6-(3-(6-ciclopropil)-8-fluoro-1-oxoisoquinolin-2(1H)-il)fenil)pirimidin-5-il)oxi)etil)-N-metilacrilamida; N-(3-(5-(2-Acrilamidoetoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fiuoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-etilacrilamido)etoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5- (2-(N-(2-fluoroetil)acrilamido)etoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(5-((1-Acrilamidocidopropil)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(5-(2-Acrilamidopropoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil)-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(6-Amino-5-(2-(but-2-inamido)propoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil)-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-metilacrilamido)propoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(6-Amino-5-(2-(N-metilbut-2-inamido)propoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(3-(N-metilacrilamido)propoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(5-((1-Acriloilpirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(6-Amino-5-((1-(but-2-inoil)pirrolidin-2-il)metoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenii)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; (S)-2-(3-(5-((1-Acriloilpirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-(hidroximetil)fenil)-6-cidopropil)-3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-one; N-(2-((4-Amino-6-(3-(6-ciclopropil)-1-oxo-3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-il)-5-fluoro-2-(hidroximetil)fenil)pirimidin-5-il)oxi)etil)-N-metilacrilamida; N-(3-(5-(((2S,4R)-1-Acriloil-4-metoxipirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(((2S,4R)-1-(but-2-inoil)-4-metoxipirrolidin-2-il)metoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; 2-(3-(5-(((2S,4R)-1-Acriloil-4-metoxipirrolidin-2-il)metoxi)-6- aminopirimidin-4-il)-5 -fluoro-2-(hidroximetil)fenil)-6-cidopropil)-3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-one; N-(3-(5-(((2S,4S)-1-Acriloil-4-metoxipirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(((2S,4S)-1-(but-2-inoil)-4-metoxipirrolidin-2-il)metoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(5-(((2S,4R)-1-Acriloil-4-fluoropirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(6-Amino-5-(((2S,4R)-1-(but-2-inoil)-4-fluoropirrolidin-2-il)metoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(5-((1-Acriloilazetidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; (S)-N-(3-(6-Amino-5-((1-propioloilazetidin-2-il)metoxi)pirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-ciclopropil)-2-fluorobenzamida; (S)-2-(3-(5-((1-Acriloilazetidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-(hidroximetil)fenil)-6-cidopropil)-3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-ona; (R)-N-(3-(5-((1-Acriloilazetidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; (R)-N-(3-(5-((1-Acriloilpiperidin-3-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(5-(((2r ,3S)-1-Acriloil-3-metoxipirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; N-(3-(5-(((2S,4R)-1-Acriloil-4-cianopirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fluoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida; o N-(3-(5-(((2S,4S)-1-Acriloil-4-cianopirrolidin-2-il)metoxi)-6-aminopirimidin-4-il)-5-fiuoro-2-metilfenil)-4-cidopropil)-2-fluorobenzamida.

A menos que se indique lo contrario, los términos químicos utilizados anteriormente para describir el inhibidor de BTK de Fórmula I se utilizan según sus significados establecidos en la Solicitud Internacional WO/2015/079417.

Inhibidores de JAK de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de Janus quinasa (JAK). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de colon, un cáncer de próstata, un cáncer de pulmón, un cáncer de mama o un cáncer de páncreas), por ejemplo, una neoplasia hematológica (por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide o una leucemia linfocítica), por ejemplo, un linfoma (por ejemplo, un linfoma no Hodgkin), o un mieloma múltiple.

En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK es 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b] [1,2,4]triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una sal dihidroclórica del mismo, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514.

En algunas realizaciones, el inhibidor de JAK, por ejemplo, 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b] [1,2,4]triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una sal dihidroclórica del mismo, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514, se administra a una dosis de aproximadamente 400-600 mg (por ejemplo, al día), por ejemplo, aproximadamente 400, 500 o 600 mg, o aproximadamente 400-500 o 500-600 mg.

En alguna realización, el inhibidor de JAK es fosfato de ruxolitinib (también conocido como JAKAFI; Compuesto A18) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514.

En una realización, el inhibidor de JAK, por ejemplo, fosfato de ruxolitinib (también conocido como JAKAFI; Compuesto A18) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514, se administra a una dosis de aproximadamente 15-25 mg, por ejemplo, dos veces al día. En algunas realizaciones, la dosis es de aproximadamente 15, 20 o 25 mg, o de aproximadamente 15-20 o 20-25 mg.

Inhibidores de CRTH2 de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor del receptor quimioatrayente homólogo a la célula T auxiliar 2 (CRTH2). En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento.

En algunas realizaciones, el inhibidor de CRTH2 es QAV680 (Número de Registro CAS: 872365-16-7). QAV680 también se conoce como fevipiprant y ácido 2-[2-metil-1-[(4-metilsulfonilfenil)metil]pirrolo[2,3-b]piridin-3-il]acético. QAV680 se divulga, por ejemplo, en Sandham et al. BioorgMed Chem. 2013;21(21):6582-91. QAW039 también se conoce como ácido [1-(4-metanosulfbnil--2-trifluorometil-bencil)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il]-acético. QAW039 se divulga, por ejemplo, en Sykes et al. European Respiratory Journal 1 de septiembre de 2014 vol. 44 No. Suppl 58 P4074.

En algunas realizaciones, el inhibidor de CRTH2 es QAW039 (Número CAS: 872365-14-5).

Otros inhibidores de CRTH2 que pueden usarse en la combinación incluyen, por ejemplo, AZD1981, ARRY-502, setipiprant (ACT-453859) y ACT-129968.

Inhibidores de PFKFB3 de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de la 6-fosfofructo-2-quinasa/fructosa-2,6-bifosfatasa 3 (PFKFB3). En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un tumor sólido avanzado), por ejemplo, un cáncer de ovario, un cáncer de trompas de falopio, un cáncer colorrectal (CRC), una leucemia, un cáncer de pulmón, un cáncer de próstata, un cáncer de mama o un cáncer de páncreas. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de ovario (por ejemplo, un cáncer de ovario recurrente), un cáncer de trompas de falopio o un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal metastásico). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, la glucólisis impulsada por PFKFB3 puede regular la ramificación de los vasos en el cáncer, y las células endoteliales pueden depender de la glucólisis para la producción de ATP y el potencial metastásico. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer con alta actividad angiogénica. En otras realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer enriquecido en células Th17. En otras realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer que no responde o responde moderadamente a una monoterapia anti-PD-1 o anti-PD-L1.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PFKFB3 es PFK-158. PFK-158 también se conoce como ACT-PFK-158 o (E)-1-(piridin-4-il)-3-(7-(trifluorometil)quinolin-2-il)-prop-2-en-1 -ona (Número CAS 1462249-75-7). PFK-158 es un derivado de 3-(3-piridinil)-1-[4-piridinil]-2-propen-1-ona (3PO). La PFKFB3, que cataliza la conversión de fructosa-6-fosfato en fructosa-2,6-bifosfato, se expresa y activa en gran medida en las células cancerosas humanas y desempeña un papel clave en el aumento del flujo glucolítico y la proliferación de las células cancerosas. En algunas realizaciones, PFKFB3 se expresa (por ejemplo, se sobreexpresa en comparación con un tejido normal) en un cáncer elegido entre una leucemia, un cáncer de colon, un cáncer de pulmón, un cáncer de próstata, un cáncer de ovario, un cáncer de trompas de falopio, un cáncer de mama o un cáncer de páncreas. Los inhibidores de PFKFB3, por ejemplo, PFK-158, pueden unirse e inhibir la actividad de PFKFB3, lo que conduce a la inhibición tanto de la vía glucolítica como de la captación de glucosa por las células cancerosas. Esto impide la producción de macromoléculas y energía que causa la mayor proliferación celular en las células cancerosas en comparación con la de las células normales y sanas. Privar a las células cancerosas de nutrientes y energía conduce a la inhibición del crecimiento de las células cancerosas. En algunas realizaciones, un inhibidor de PFKFB3, por ejemplo, PFK-158, inhibe la captación de glucosa por una célula cancerosa. En otras realizaciones, un inhibidor de PFKFB3, por ejemplo, PFK-158, reduce la angiogénesis patológica. Por ejemplo, PFK-158 puede reducir la captación de 18FDG en tumores xenoinjertados y mostrar actividad antitumoral en ratones con bajo recuento de leucocitos (LLC). PFK-158 se divulga, por ejemplo, en la página 5 de WO 2013/148228.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PFKFB3 tiene la siguiente estructura:

En algunas realizaciones, la combinación aquí descrita se utiliza para tratar un cáncer de ovario. El cáncer de ovario se conoce generalmente como una enfermedad inmunorreactiva (Zhang et al. N Engl J Med. 2003; 348(3):203-13). Por ejemplo, se observó una mejor supervivencia global en pacientes con frecuencias más altas de células T CD8+ intraepiteliales en comparación con pacientes con frecuencias más bajas de células T CD8+ (mediana de supervivencia 55 meses frente a 26 meses; hazard ratio=0.33; P<0.001) (Sato et al. Proc Natl Acad Sci USA. 2005; 102(51): 18538-43). En algunas realizaciones, el aumento de la frecuencia de Treg puede utilizarse como predictor de una supervivencia deficiente (Curiel et al. Nat Med. 2004; 10(9):942-9). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, la alta carga de antígeno tumoral puede resultar en la pérdida progresiva de una o más funciones efectoras de las células T antígeno-específicas, por ejemplo, conduciendo al agotamiento de las células T. Las pacientes con cáncer de ovario, por ejemplo, cáncer de ovario avanzado, pueden seleccionarse para inmunoterapia, por ejemplo, una terapia de combinación descrita en el presente documento, al menos en parte, debido a la pequeña carga de enfermedad tras la terapia inicial y el alto riesgo de recurrencia.

En algunas realizaciones, la combinación incluye además un inhibidor de IDO (por ejemplo, un inhibidor de IDO descrito en el presente documento). En otras realizaciones, la combinación incluye además un agonista de CD-27 (por ejemplo, un agonista de CD-27 descrito en el presente documento). En otras realizaciones, la combinación incluye además un anticuerpo anti-CTLA-4 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA-4 descrito en el presente documento, por ejemplo, ipilimumab). En otras realizaciones, la combinación incluye además un inhibidor de PARP (por ejemplo, un PARP descrito en el presente documento, por ejemplo, ipilimumab). En otras realizaciones, la combinación incluye además una quimioterapia (por ejemplo, una quimioterapia descrita en el presente documento, por ejemplo, paclitaxel). En otras realizaciones, la combinación incluye además un inhibidor del CSF-1R (por ejemplo, un inhibidor del CSF-1R descrito en el presente documento).

En algunas realizaciones, la combinación aquí descrita se utiliza para tratar un cáncer colorrectal. El cáncer colorrectal (CRC) se considera generalmente como un cáncer impulsado por la inflamación. Los cánceres de colon metastásicos, o en estadio IV, tienen una tasa de supervivencia relativa a 5 años de aproximadamente el 11%. Sin querer ceñirnos a la teoría, se cree que, en algunas realizaciones, el desarrollo del CRC humano está enlazado a la vía interleucina-23 (IL-23)-IL-17 (Grivennikov et al., Nature. 2012; 491(7423):254-8). La IL-17 se asocia con un mal pronóstico y promueve la angiogénesis a través de la estimulación de la producción de VEGF de las células cancerosas en el CRC. Las células gdT17 activadas también secretan otras citoquinas, como IL-8, TNF-a y GM-CSF, que quimioatraen a las MDSC del tumor y mantienen su actividad inmunosupresora. Se ha demostrado que las firmas de expresión de células Th17 en el CRC están asociadas a una supervivencia deficiente (Grivennikov et al., Nature. 2012; 491(7423):254-8; Zou and Restifo, Nat Rev Immunol. 2010; 10(4):248-56). El CRC suele ser sensible a la inhibición del VEGF, pero se ha demostrado que una red paracrina mediada por la IL-17 promueve la resistencia tumoral a la terapia antiangiogénica (Chung et al. Nat Med. 2013; 19(9):1114-23). El reclutamiento inducido por IL-17 de células mieloides CD11b+Gr1+ en el microambiente tumoral puede promover el crecimiento tumoral independiente de VEGF.

En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar a un sujeto que tiene un cáncer colorrectal microsatélite estable (MSS). En ciertas realizaciones, el sujeto no responde o responde mal a una monoterapia con un inhibidor de puntos de control. En otras realizaciones, la combinación se utiliza para tratar a un sujeto que padece un cáncer colorrectal microsatélite inestable (MSI). En ciertas realizaciones, el sujeto tiene un cáncer colorrectal MSI o un cáncer colorrectal en estadio IV. En ciertas realizaciones, el sujeto responde al tratamiento con inhibidores de puntos de control.

En algunas realizaciones, la combinación incluye además una quimioterapia, por ejemplo, una quimioterapia descrita en el presente documento. En algunas realizaciones, la combinación incluye además 5-FU, ácido folínico, o ambos. Alternativamente, o en combinación, la combinación incluye además oxaliplatino. Alternativamente, o en combinación, en otras realizaciones, la combinación incluye además irinotecán. En ciertas realizaciones, la combinación incluye además FOLFOX o FOLFIRI. En algunas realizaciones, la combinación incluye además un inhibidor de la angiogénesis (por ejemplo, bevacizumab).

En algunas realizaciones, el inhibidor de PFKFB3, PFK-158, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/148228, se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1). En algunas realizaciones, el inhibidor de PFKFB3, PFK-158, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/148228, se administra por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa. En otras realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer de ovario, un cáncer de trompas de falopio (por ejemplo, un adenocarcinoma seroso papilar) o un cáncer colorrectal. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar a un sujeto que responde mal o al que le ha fallado la quimioterapia (por ejemplo, una quimioterapia basada en platino o una quimioterapia con 5FU).

Quimioterapias de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agente quimioterapéutico. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer de mama, un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)), un cáncer nasofaríngeo o un cáncer de páncreas. En algunas realizaciones, el cáncer es un cáncer de mama, por ejemplo, un cáncer de mama metastásico, por ejemplo, un cáncer de mama HER2 negativo (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC) o un cáncer de mama HR+ resistente a una terapia endocrina). En algunas realizaciones, el cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas) es un NSCLC escamoso o un NSCLC no escamoso. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer nasofaríngeo.

En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico es paclitaxel, por ejemplo, paclitaxel unido a proteínas, también conocido como paclitaxel unido a nanopartículas de albúmina o nab-paclitaxel (ABRAXANE®). En algunas realizaciones, el paclitaxel tiene la siguiente estructura:

El paclitaxel también se conoce como (2a,4a,5p,7p,10p,13a)-4,10-Bis(acetiloxi)-13-{[(2R,3S)-3-(benzoilamino)-2-hidroxi-3-fenilpropanoil]oxi}-1,7-dihidroxi-9-oxo-5,20-epoxi-tax-11-en-2-il benzoato.

El Nab-paclitaxel es una nanopartícula de paclitaxel unida a albúmina que difiere del paclitaxel tradicional que se formula con Kolliphor EL (anteriormente Cremophor EL). Esta formulación sin disolvente se diseñó para mejorar el índice terapéutico del paclitaxel, en particular para reducir toxicidades como las reacciones de hipersensibilidad (lo que permite obviar la premedicación con antihistamínicos y esteroides), al tiempo que aumenta potencialmente la ingesta de paclitaxel en las células cancerosas (Ibrahim et al. Clin Cancer Res.

2002; 8(5):1038-44). El vehículo disolvente utilizado para el paclitaxel tradicional también puede afectar a la administración del fármaco al tumor, limitando su eficacia clínica (ten Tije et al. Clin Pharmacokinet. 2003; 42(7):665-85) y dando lugar a un aumento más que proporcional a la dosis de la exposición sistémica al fármaco en un estrecho intervalo de dosis que se explica muy probablemente por el atrapamiento del paclitaxel en micelas de disolvente (Gianni et al. J Clin Oncol. 1995;l3(1):180-90; van Tellingen et al. Br J Cancer. 1999; 81(2):330-5; Sparreboom et al. Cancer Res. 1999; 59(7): 1454-7). En comparación con el paclitaxel tradicional, el nab-paclitaxel produce una concentración máxima media de paclitaxel libre 10 veces superior y, además, el nab-paclitaxel se transporta más rápidamente a través de las capas de células endoteliales y presenta una mayor penetración tisular y una eliminación más lenta del paclitaxel. Según modelos preclínicos, el aumento de la liberación y retención intratumoral da lugar a concentraciones intratumorales del fármaco un 33 % superiores (Desai et al. Clin Cancer Res. 2006; 12(4): 1317-24. Fe de erratas en: Clin Cancer Res. 2006; 12(12):3869).

Sin querer ser limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, nab-paclitaxel es un inhibidor de microtúbulos que promueve el ensamblaje de microtúbulos a partir de dímeros de tubulina y estabiliza los microtúbulos previniendo la despolimerización. Esta estabilidad resulta en la inhibición de la reorganización dinámica normal de la red de microtúbulos que es importante para las funciones celulares vitales de interfase y mitótica.

En algunas realizaciones, el nab-paclitaxel puede usarse como monoterapia, con una dosis recomendada de 260 mg/m2 cada 3 semanas, para el tratamiento de pacientes con cáncer de mama metastásico, por ejemplo, tras el fracaso de la quimioterapia de primera línea para la enfermedad metastásica o la recaída en los 6 meses siguientes a la quimioterapia adyuvante (la terapia previa debe haber incluido una antraciclina a menos que esté clínicamente contraindicada). Los resultados de un ensayo de fase III que demostraron una mejora significativa de la ORR (33 frente a 19 %; P = 0.001) y del TTP (23.0 frente a 16.9 semanas; HR= 0.75; P = 0.006) en pacientes tratadas en primera y segunda línea o más adelante con nab-paclitaxel en comparación con las pacientes que recibieron paclitaxel tradicional 175 mg/ m2 cada 3 semanas (Gradishar et al. J Clin Oncol. 2005; 23(31):7794-803).

En ciertas realizaciones, se puede utilizar un régimen semanal (Día 1, 8, 15 cada 4 semanas) de nab-paclitaxel. En un ensayo aleatorizado de fase II se compararon dos dosis semanales diferentes (100 mg/m2 y 150 mg/m2 qw3/4) con nab-paclitaxel 300 mg/m2 cada 3 semanas (q3w) y docetaxel 100 mg/m2 q3w en el entorno de primera línea (Gradishar et al. J Clin Oncol. 2009; 27(22):3611-9. Fe de erratas en: J Clin Oncol. 2011; 29(19):2739; Gradishar et al. Clin Breast Cáncer. 2012; 12(5):313-21). En algunas realizaciones, se utiliza la dosificación de 150 mg/m2 qw3/4, por ejemplo, para pacientes que necesitan una respuesta tumoral rápida. En otras realizaciones, se utiliza la dosis de 100 mg/m2 qw3/4, por ejemplo, debido al perfil de seguridad más manejable.

En estudios clínicos se determinó la farmacocinética del paclitaxel total tras infusiones de 30 y 180 minutos de nab-paclitaxel a niveles de dosis de 80 a 375 mg/m2. Los niveles de dosis de mg/m2 se refieren a mg de paclitaxel en nab-paclitaxel. Tras la administración intravenosa de nab-paclitaxel, las concentraciones plasmáticas de paclitaxel disminuyeron de forma bifásica, con un descenso inicial rápido que representaba la distribución al compartimento periférico y una segunda fase más lenta que representaba la eliminación del fármaco. La exposición al fármaco (AUC) fue proporcional a la dosis dentro del intervalo de 80 a 300 mg/m2, y la farmacocinética de paclitaxel para nab-paclitaxel fue independiente de la duración de la administración intravenosa. El aclaramiento total medio oscila entre 13 y 30 L/h/m2, y la semivida terminal media oscila entre 13 y 27 horas.

En algunas realizaciones, la combinación aquí descrita se utiliza para tratar un cáncer de mama, por ejemplo, un cáncer de mama metastásico o un cáncer de mama HER2 negativo (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo). Aunque no se desea estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, el uso de esteroides en combinación con compuestos anti-PD-1 puede ser antagonista y el nab-paclitaxel presenta una ventaja sobre otros taxanos, al menos en parte, porque no es necesaria la premedicación con corticosteroides.

En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar a un sujeto con cáncer de mama triple negativo o cáncer de mama HR+ después de fracasar una terapia endocrina. En otras realizaciones, la combinación se usa para tratar a una paciente sin taxanos o a una paciente que tiene al menos 1 año de supervivencia libre de enfermedad después de su uso en el entorno adyuvante. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar a un sujeto elegible para una quimioterapia de primera línea.

En el cáncer de mama, la interacción del sistema inmunitario con las células tumorales y el microambiente tumoral puede desempeñar un papel importante, por ejemplo, en los subtipos TNBC y HER2+. Los cánceres de mama en general, y en particular los subtipos TNBC, contienen con frecuencia linfocitos infiltrantes de tumores (TIL) en el estroma y se asocian a una expresión elevada de PD-L1 (hasta en el 50% de los tumores). Aunque no se desea estar limitado por la teoría, se cree que, en algunas realizaciones, las quimioterapias citotóxicas pueden mejorar las fases de cebado inmunitario, tráfico de células T y/o efectoras inmunitarias del ciclo cáncer-inmunidad, al tiempo que aumentan la antigenicidad, inmunogenicidad y susceptibilidad a la destrucción inmunitaria de las células cancerosas, incrementando el potencial de respuesta a los inhibidores de puntos de control.

En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar a un sujeto que ha desarrollado, o está en riesgo de desarrollar, resistencia a una terapia anti-PD-1 o anti-PD-L1. Por ejemplo, las pruebas preclínicas y clínicas muestran que varias terapias citotóxicas y dirigidas contra el cáncer pueden ayudar a eludir ciertos mecanismos potenciales de resistencia a la inhibición de PD-L1/PD-1 (por ejemplo, defecto en la activación de células T específicas de antígeno del cáncer o falta de infiltración de células inmunitarias en los tumores) mejorando el tráfico y la infiltración de células T en el lecho tumoral (Zitvogel et al 2013). Varios fármacos citotóxicos (incluido el paclitaxel) también pueden influir directamente en el fenotipo y la función de las células dendríticas (CD), favoreciendo su maduración y la secreción de citoquinas proinflamatorias y sobrerregulando sus funciones de presentación de antígenos (por ejemplo, la expresión de moléculas MHC de clase II en su superficie), lo que da lugar a un aumento del cebado de células T CD8+ y una mayor actividad citotóxica (Pfannenstiel et al. Cell Immunol. 2010; 263(1):79-87). También se ha sugerido que la quimioterapia puede estimular en las células tumorales su antigenicidad (mediante la inducción de mutaciones somáticas y la regulación al alza de múltiples moléculas de superficie en las células tumorales que actúan como nuevos antígenos), inmunogenicidad (mediante la secreción de moléculas asociadas a la muerte celular (CDAM)) y susceptibilidad al ataque inmunitario (mediante la expresión de moléculas coestimuladoras como B7-1 en la superficie de las células malignas o la regulación a la baja de moléculas inmunosupresoras como PD-L1 y PD-L2) (Hodge et al. Int J Cancer. 2013; 133(3):624-36). En modelos preclínicosin vivo,el tratamiento quimioterápico con platino o taxanos sinergiza con anti-PD-L1 e induce respuestas antitumorales duraderas asociadas a un aumento del número de células T CD8+ infiltrantes del tumor (Giacconeet al.2015, Adamset al.2015, Liuet al.2015). En el ámbito clínico se ha observado un aumento de la expresión de PD-L1 en el tumor y de la infiltración de células T CD8+ en pacientes sometidos a biopsias seriadas en un estudio de fase 1b que probaba la combinación de un inhibidor de PD-L1 (atezolizumab) y quimioterapia en NSCLC (Camidgeet al.2015). También se observó el desarrollo de nuevas infiltraciones de células inmunitarias intratumorales tras la terapia neoadyuvante con paclitaxel para el cáncer de mama precoz, y la respuesta clínica y patológica se correlacionó directamente con la infiltración de células inmunitarias tumorales (Demaria et al. Clin Cancer Res. 2001; 7(10):3025-30).

En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar a un sujeto que ha mostrado infiltración inmunitaria, por ejemplo, que contiene linfocitos infiltrantes de tumor (TIL) en el cáncer. En otras realizaciones, el sujeto se selecciona para el tratamiento basándose, al menos en parte, en la presencia de TIL en el cáncer.

Por ejemplo, más del 70% de los cánceres de mama contienen linfocitos infiltrantes de tumores en el estroma, y los datos preclínicos sugieren que en la mayoría de los cánceres de mama el microambiente inmunitario local desempeña un papel en el control de la progresión del cáncer. Varios estudios han demostrado que la infiltración inmunitaria en el cáncer de mama se correlaciona con un mejor pronóstico y con una mayor respuesta a la quimioterapia (Denkert et al. J Clin Oncol. 2010; 28(1): 105-13; Loi et al. Oncoimmunology. 2013; 2(7):e24720.). En el caso del TNBC, aproximadamente el 15% de los tumores muestran un alto grado de infiltración linfocítica en el momento del diagnóstico y la mayoría (65%-80%) albergan un nivel de células inmunitarias de bajo a moderado (Ruffell et al. Proc Natl Acad Sci USA. 2012; 109(8):2796-801; García-Teijido et al. ClinMed Insights Oncol. 2016; 10(Suppl 1):31-9). Los perfiles de expresión génica también demostraron una asociación entre la expresión de genes inmunomoduladores y mejores resultados clínicos en el TNBC (Desmedt et al. J Clin Oncol. 2016; 34(16): 1872-81). En 2 estudios diferentes, uno en muestras de TNBC y otro en todos los tipos de cáncer de mama, la expresión de PD-L1 fue elevada (19% en las muestras de TNBC y 44% en las muestras de todos los tipos de BC) y se asoció con un mayor infiltrado de células T CD8+ que los tumores PD-L1- en las muestras de TNBC (Mittendorf et al. Cancer Immunol Res. 2014; 2(4):361-70., Ghebeh et al. Neoplasia. 2006; 8(3): 190-8). Además, los TBNC parecen presentar una inestabilidad genética con una elevada tasa de mutación que también podría dar lugar a un aumento de los neoantígenos inmunogénicos y de la infiltración de células T antitumorales (Wang et al. Ann Oncol. 2015; 26(3):523-8). En el cáncer de mama HER2-positivo, las firmas TIL e inmunitarias también se asocian a un mejor pronóstico (Salgado et al. JAMA Oncol. 2015; 1(4):448-54). El cáncer de mama HER2-positivo es también un subtipo de cáncer de mama altamente proliferativo con un mayor nivel de inestabilidad genómica. La propia sobreexpresión de HER2 puede actuar como antígeno asociado al tumor, activando el sistema inmunitario. En los cánceres HR+ altamente proliferativos (luminal B), las células inmunitarias pueden predecir un mejor pronóstico (Bianchini et al. J Clin Oncol. 2010; 28(28):4316-23. Fe de erratas en: J Clin Oncol. 2010; 28(32):4868. J Clin Oncol. 2012; 30(6):679). En el cáncer de mama HR+, la interacción entre las células tumorales y el medio inmunitario puede basarse en mecanismos diferentes a los de otros subtipos de cáncer de mama, que implican la modulación del microambiente tumoral mediante la interacción mutua de factores endocrinos, el estado proinflamatorio y las células inmunitarias (Dieci et al. Cancer Treat Rev. 2016; 46:9-19).

En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico, por ejemplo, nab-paclitaxel, y el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administran cada uno a una dosis y/o en un horario, que en combinación, logra una actividad antitumoral deseada.

En una realización, el agente quimioterapéutico, por ejemplo, nab-paclitaxel, se administra en dosis entre 25 mg/m2 y 300 mg/m2, por ejemplo, entre 25 mg/m2 y 250 mg/m2, entre 50 mg/m2 y 200 mg/m2, entre 100 mg/m2 y 150 mg/m2, entre 75 mg/m2 y 125 mg/m2, entre 125 mg/m2 y 175 mg/m2, entre 50 mg/m2 y 100 mg/m2, entre 100 mg/m2 y 200 mg/m2, o entre 200 mg/m2 y 250 mg/m2, por ejemplo, a una dosis de 50 mg/m2, 75 mg/m2, 100 mg/m2, 125 mg/m2, 150 mg/m2, 175 mg/m2, 200 mg/m2, 220 mg/m2, o 260 mg/m2, por ejemplo, tres veces (por ejemplo, semanalmente) durante un periodo de cuatro semanas, por ejemplo, semanalmente en el Día 1, Día 8 y Día 15 cada cuatro semanas (qw3/4), por ejemplo, por vía intravenosa.

En una realización, el agente quimioterapéutico, por ejemplo, nab-paclitaxel, se administra a una dosis entre 50 mg/m2 y 150 mg/m2 (por ejemplo, 100 mg/m2), por ejemplo, semanalmente en el Día 1, Día 8 y Día 15 cada cuatro semanas (qw3/4). En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico, por ejemplo, nab-paclitaxel, se administra por vía intravenosa. En una realización, el agente quimioterapéutico, por ejemplo, nab-paclitaxel, se administra a una dosis entre 50 mg/m2 y 150 mg/m2 (por ejemplo, 100 mg/m2), por ejemplo, semanalmente en el Día 1, Día 8 y Día 15 cada cuatro semanas (qw3/4), por ejemplo, por infusión intravenosa, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas o una vez cada 8 semanas, por ejemplo, por infusión intravenosa. En algunas realizaciones, la infusión del agente quimioterapéutico, por ejemplo, nab-paclitaxel, comienza después (por ejemplo, al menos 30 minutos, 45 minutos, 60 minutos, 75 minutos, 90 minutos o 120 minutos después) del final de la infusión del inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1). Por ejemplo, el agente quimioterapéutico, por ejemplo, nab-paclitaxel, y/o el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, molécula de anticuerpo anti-PD-1), pueden administrarse como una infusión intravenosa de 30 a 120 minutos (por ejemplo, 30 minutos). En una realización, un ciclo de tratamiento es de 28 días o 56 días (por ejemplo, 28 días).

En ciertas realizaciones, el agente quimioterapéutico comprende cisplatino, permetrexed, o ambos. El cisplatino también se conoce como cisplatino, platamina, neoplatino, cismaplat o cis-diamminedicloridoplatino(II) (CDDP). El permetrxed también se conoce como ácido (S)-2-(4-(2-(2-amino-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrol[2,3-d]pirimidin-5-il)etil)benzamido)pentanodioico. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC). En algunas realizaciones, el NSCLC es un NSCLC no escamoso. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer nasofaríngeo.

En ciertas realizaciones, el agente quimioterapéutico comprende paclitaxel, carboplatino, o ambos. El carboplatino también se conoce como cis-diamina(ciclobutano-1,1-dicarboxilato-O,0')platino(N). En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC). En algunas realizaciones, el NSCLC es un NSCLC escamoso. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer nasofaríngeo.

Otros agentes quimioterapéuticos de ejemplo que pueden usarse en la combinación incluyen, pero no se limitan a, un agente alquilante (por ejemplo, un alquilante bifuncional (por ejemplo, ciclofosfamida, una mecloretamina, clorambucilo o melfalán), un alquilante monofuncional (una dacarbazina(DTIC), nitrosoureas, temozolomida (dacarbazina oral)), una antraciclina (por ejemplo, daunorrubicina, doxorrubicina, epirrubicina, idarrubicina, mitoxantrona o valrubicina), un disruptor del citoesqueleto (taxano) (por ejemplo, paclitaxel, docetaxel, abraxano o taxotere), una epotelona, un inhibidor de la histona desacetilasa (por ejemplo, vorinostat o romidepsina), un inhibidor de la topoisomerasa I (por ejemplo, irinotecán o topotecán), un inhibidor de la topoisomerasa II (por ejemplo, etopósido, tenipósido o taflupósido), o un inhibidor de la quinasa (por ejemplo, bortezomib, erlotinib, gefitinib, imatinib, vemurafenib, vismodegib), un análogo de nucleótido o un análogo de precursor (por ejemplo, azacitidina, azatioprina, capecitabina, citarabina, doxifluridina, fluorouracilo, gemcitabina, hidroxiurea, mercaptopurina, metotrexato, tioguanina), un antibiótico peptídico (por ejemplo, bleomicina o actinomicina), un agente a base de platino (por ejemplo, carboplatino, cisplatino u oxaliplatino), un retinoide (por ejemplo, tretinoína, alitretinoína, bexaroteno) o un alcaloide de vinca o derivado (por ejemplo, vinblastina, vincristina, vindesina o vinorelbina).

En algunas realizaciones, la combinación comprende además un inhibidor de la angiogénesis, un inhibidor de EGFR, un inhibidor de PARP (por ejemplo, b SI-201), un conjugado anticuerpo-fármaco (por ejemplo, dirigido a GPNMB (por ejemplo, glembatumumab vedotin (CDX-011)), sacituzumab govitecan ( iMm U-132)), un inhibidor del receptor Frizzled (por ejemplo, vantictumab), un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, atezolizumab), una cirugía, una radioterapia o una combinación de los mismos.

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina). En una realización, la combinación descrita en el presente documento incluye además un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), un inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 descrita en el presente documento), o ambos. En algunas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer hematológico, por ejemplo, una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML)), o un síndrome mielodisplásico (MDS). En ciertas realizaciones, el cáncer es una leucemia, por ejemplo, una AML en recaída o refractaria, o una AMLde novo(por ejemplo, una AML no apta para el tratamiento estándar). En otras realizaciones, el cáncer es un MDS, por ejemplo, un MDS de alto riesgo.

En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico es un agente hipometilante. Un agente hipometilante (o agente desmetilante) es un agente que inhibe la metilación del ADN. En ciertas realizaciones, un agente hipometilante bloquea la actividad de la ADN metiltransferasa (esdecir,inhibidor de la ADN metiltransferasa/Inhibidor de la DNMT). Los agentes hipometilantes de ejemplo que pueden utilizarse en una combinación descrita en el presente documento incluyen decitabina y azacitidina.

En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico es decitabina. La decitabina (también conocida como 5-aza-2'-desoxicitidina o DACOGEN®) es un análogo desoxinucleósido de la citidina. Puede inhibir selectivamente las metiltransferasas del ADN a dosis bajas. La inhibición de las metiltransferasas del ADN por la decitabina puede dar lugar a la hipometilación del promotor del gen, lo que puede conducir a la reactivación de genes supresores de tumores, o a la inducción de la diferenciación celular o la senescencia celular seguida de la muerte celular programada. La decitabina está indicada para el tratamiento de pacientes adultos mayores de 65 años con AMLde novoo secundaria recién diagnosticada, según la clasificación de la OMS, que no son candidatos a la quimioterapia de inducción estándar. Se estudió el uso de decitabina en pacientes con AMLde novoo secundaria recién diagnosticada según la clasificación de la OMS (Malik and Cashen. Cancer Manag Res. 2014; 6: 53-61). La mediana de supervivencia global (OS) en la población por intención de tratar fue de 7.7 meses en los pacientes tratados con decitabina. La tasa de remisión completa (CR remisión completa con recuperación incompleta de plaquetas (CRp)) fue del 17.8% (Lübbert et al. J Clin Oncol. 2011; 29(15): 1987-96). La decitabina está indicada para el tratamiento de pacientes con MDS, por ejemplo, MDS previamente tratados y no tratados,de novoy secundarios de todos los subtipos franco-americano-británicos y de los grupos de riesgo intermedio-1, intermedio-2 y alto del Sistema Internacional de Puntuación de Pronóstico en EE. UU.

En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar una leucemia mieloide aguda (AML). La AML es una neoplasia clonal del sistema hematopoyético que se caracteriza, por ejemplo, por la proliferación de células blásticas mieloides anormales en la médula ósea. La proliferación de células blásticas mieloides anormales puede interferir con la hematopoyesis normal, lo que conduce a una acumulación de células mieloides disfuncionales e inmaduras en la médula y la sangre periférica. En algunas realizaciones, se diagnostica AML cuando los blastos mieloides constituyen >20% de las células nucleadas en un aspirado de médula ósea. Estos blastos leucémicos pueden inhibir las células madre y progenitoras hematopoyéticas normales y afectar a la aparición de células hematopoyéticas maduras y diferenciadas en la sangre periférica. Los síntomas clínicos pueden incluir, por ejemplo, anemia, neutropenia o trombocitopenia, que pueden dar lugar a infecciones y hemorragias potencialmente mortales. La AML puede aparecer en el contexto de un síndrome mielodisplásico previo ("AML secundaria") o de una quimioterapia citotóxica previa ("AML relacionada con el tratamiento").

El control de la enfermedad a largo plazo puede lograrse en pacientes con características de buen pronóstico, por ejemplo, edad joven y citogenética favorable. Los pacientes menores de 60 años sin comorbilidades médicas significativas pueden tratarse inicialmente con quimioterapia de inducción mieloablativa intensiva que suele incluir una antraciclina y citarabina. El objetivo de este tratamiento es conseguir, por ejemplo, una remisión completa (CR) con menos del 5% de blastos en un contexto de hematopoyesis normal, lo que puede lograrse en más del 65% de los casos en esta población de pacientes. Después de la remisión, puede administrarse un tratamiento de consolidación con quimioterapia o un trasplante autólogo o alogénico de células madre hematopoyéticas para aumentar la duración de la remisión. Las tasas de recaída de la AML son bastante elevadas y las opciones terapéuticas eficaces son limitadas. Los pacientes de edad avanzada suelen tener peores resultados, con tasas de respuesta mucho más bajas y menos duraderas y más complicaciones con el tratamiento. Para esta población de edad avanzada que no tolera terapias intensivas, las opciones son limitadas y no existe ningún enfoque estándar eficaz. Las opciones de tratamiento incluyen, por ejemplo, dosis bajas de citarabina o agentes hipometilantes como la 5-azacitadina o la decitabina. Se necesitan modalidades terapéuticas más eficaces para mejorar la supervivencia de los pacientes con AML, por ejemplo,lospacientes de edad avanzada con AML y aquellos con enfermedad recidivante o refractaria.

El síndrome mielodisplásico (MDS) es un grupo heterogéneo de trastornos mieloides crónicos que implican citopenias persistentes en sangre periférica y una mayor prevalencia de transformación leucémica. Las características clínicas son variables y el diagnóstico se realiza normalmente sobre la base de anomalías morfológicas y citogenéticas en las células hematopoyéticas de la médula ósea y la sangre periférica. El pronóstico de los MDS puede determinarse mediante el Sistema Internacional Revisado de Puntuación de Pronóstico (rIPSS), que se basa en la citogenética, el porcentaje de blastos en la médula ósea y los datos clínicos de las citopenias. Los pacientes se agrupan en cinco categorías de riesgo basadas en las puntuaciones totales de estos factores pronósticos (Greenberg et al. J Natl Compr Canc Netw. 2013; 11(7):838-74). Los pacientes diagnosticados de MDS de alto y muy alto riesgo según el rIPSS, tienen altas tasas de transformación a AML y mal pronóstico. Los agentes hipometilantes se consideran un estándar de atención para el tratamiento de los MDS (NCCN Guidelines for Patients®, Myelodysplastic Syndromes, Version 1.2016, National Comprehensive Cancer Network).

Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, la inmunidad antitumoral se puede utilizar para tratar la AML y mejorar los resultados de los pacientes con la enfermedad, por ejemplo, basándose en la actividad antileucémica observada con el trasplante alogénico de células madre hematopoyéticas y las infusiones de linfocitos de donantes. Existen pruebas de la existencia de un microentorno inmunitario supresor en la AML, con una elevada expresión de PD-L1 en los blastos leucémicos. Las pruebas preclínicas en un modelo de ratón de AML indican que la progresión de la enfermedad está asociada a una mayor expresión de PD-1 en las células T CD8 positivas, y que el tratamiento con anticuerpos anti-PD-1 o anti-PD-L1 disminuye la carga de AML y mejora la supervivencia en estos modelos de la enfermedad. En los pacientes hay pruebas de un aumento de la expresión de PD-L1 en un subconjunto de pacientes con AML/m Ds que aumenta aún más en el momento de la progresión.

Además de la activación de la vía PD-1/PD-L1, hay pruebas de que las células madre de la AML coexpresan el punto de control inmunitario TIM-3. TIM-3 puede cooperar con la vía PD-1/PD-L1 para suprimir el reconocimiento del tumor por las células T citotóxicas. TIM-3 es un antígeno único de las células madre de la AML que está presente en los blastos leucémicos pero no en las células madre hematopoyéticas normales, y el tratamiento con anticuerpos anti-TIM3 ha demostrado su eficacia en la reducción de la carga leucémica en un modelo de ratón de a Ml (Kikushige et al. Cell Stem Cell. 2010; 7(6):708-17). En los MDS también hay pruebas de que el tratamiento con decitabina, el agente hipometilante de referencia, aumenta la expresión de PD-1 en las células T, lo que subraya su papel en la inmunomodulación.

Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, los agentes quimioterapéuticos (por ejemplo, agentes hipometilantes, por ejemplo, decitabina) pueden inducir un aumento de la expresión de puntos de control inmunitarios (por ejemplo, PD-1, TIM-3, o ambos) que pueden permitir la evasión inmunitaria y conducir a la resistencia terapéutica. Sin querer estar limitado por la teoría, también se cree que en algunas realizaciones, la AML y los MDS coexpresan los receptores de punto de control inmunitario PD-1 y TIM-3, que cooperan para inhibir el reconocimiento inmunitario por parte de las células T citotóxicas. La evidencia preclínica sugiere que el bloqueo concurrente de PD-1 y TIM-3 promueve una mayor activación de las células T que cualquiera de las terapias por separado (Sakuishi et al. J Exp Med. 2010; 207(10):2187-94, Ngiow et al. Cancer Res. 2011; 71(10):3540-51) e inhibe sinérgicamente el crecimiento tumoral en modelos experimentales de cáncer (Anderson et al. Cancer Immunol Res. 2014; 2(5):393-8, Ngiow et al. Cancer Res. 2011; 71(10):3540-51). En algunas realizaciones, la combinación descrita en el presente documento optimiza el enfoque de la inhibición de puntos de control para AML y MDS, por ejemplo, considerando la inmunomodulación inducida por el tratamiento y las vías coinhibitorias.

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y un agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina). En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, entre 300 mg y 500 mg, por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra a una dosis entre 5 mg/m2 y 50 mg/m2 (por ejemplo, entre 10 mg/m2 y 30 mg/m2, por ejemplo, a una dosis de 20 mg/m2), por ejemplo, diariamente, por ejemplo, durante 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 o más días, por ejemplo, por vía intravenosa. En una realización, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra el día 8 de un ciclo de 28 días, y el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra los días 1, 2, 3, 4 y 5 del ciclo de 28 días.

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de TIM-3 o una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en Solicitud de Patente U.S. No. de Publicación 2015/0218274, y un agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina). En algunas realizaciones, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de TIM-3 o una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No. 2015/0218274, se administra a una dosis entre 10 mg y 1000 mg (por ejemplo, entre 20 mg y 800 mg, entre 80 mg y 400 mg, por ejemplo, a una dosis de 240 mg), por ejemplo, una vez cada 2 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra a una dosis entre 5 mg/m2 y 50 mg/m2 (por ejemplo, entre 10 mg/m2 y 30 mg/m2 (por ejemplo, a una dosis de 20 mg/m2), por ejemplo, diariamente, por ejemplo, durante 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, o más días, por ejemplo, por vía intravenosa. En una realización, el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, el inhibidor de TIM-3 o una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274, se administra en los días 8 y 22 de un ciclo de 28 días, y el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra en los días 1, 2, 3, 4 y 5 del ciclo de 28 días.

En otras realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), un inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No. 2015/0218274), y un agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina). En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274) se administra a una dosis entre 10 mg y 800 mg (por ejemplo, entre 20 mg y 400 mg, entre 40 mg y 200 mg o entre 50 mg y 100 mg, por ejemplo, a una dosis de 80 mg), por ejemplo, una vez cada 2 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa. En algunas realizaciones, el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra a una dosis entre 5 mg/m2 y 50 mg/m2 (por ejemplo, entre 10 mg/m2 y 30 mg/m2 (por ejemplo, a una dosis de 20 mg/m2), por ejemplo, diariamente, por ejemplo, durante 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, o más días, por ejemplo, por vía intravenosa. En una realización, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra el día 8 de un ciclo de 28 días, el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274) se administra en los días 8 y 22 del ciclo de 28 días, y el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante, por ejemplo, decitabina) se administra en los días 1, 2, 3, 4 y 5 del ciclo de 28 días.

En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento) y el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No. 2015/0218274) se administran el mismo día. En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento) y el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274) se administran en días diferentes. En algunas realizaciones, el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274) se administra, por ejemplo, el mismo día, antes de que se administre el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento). En otras realizaciones, se administra el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 descrita en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274), por ejemplo, el mismo día, después de administrar el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento). En ciertas realizaciones, puede realizarse un lavado con solución salina o dextrosa, por ejemplo, durante aproximadamente 1 hora, entre la administración del inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento) y la administración del inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274). En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274), o ambos, se administra mediante infusión intravenosa durante un periodo de 30 minutos a 2 horas, por ejemplo, aproximadamente 1 hora. El inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento), y el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0218274), pueden almacenarse en forma de líquido o liofilizado. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento) se almacena en forma de liofilizado, y el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No.

2015/0218274) se almacena en forma de líquido.

La combinación que incluye el agente quimioterapéutico (por ejemplo, un agente hipometilante (también conocido a veces como agente desmetilante), por ejemplo, decitabina), y uno o ambos del inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento) o el inhibidor de TIM-3 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 divulgada en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No. 2015/0218274), pueden usarse en combinación con una terapia adicional, por ejemplo, para tratar un cáncer, por ejemplo, una terapia contra el cáncer descrita en el presente documento. Las terapias adicionales de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, trióxido de arsénico (trisenox), ácido retinoico todo trans (ATRA), un trasplante de células madre o de médula ósea, un segundo agente quimioterapéutico (por ejemplo, azacitidina, citarabina, daunorrubicina, idarrubicina o lenalidomida) o una radioterapia.

Inhibidores de BRAF y MEK de ejemplo

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de BRAF. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer de piel (por ejemplo, un melanoma). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, la vía de la proteína quinasa activada por mitógenos (MAPK) se activa de forma aberrante en varios cánceres humanos, por ejemplo, por una mutación en la quinasa BRAF, que se ha encontrado en casi el 50% de los melanomas metastásicos. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer que tiene una mutación BRAF, por ejemplo, una mutación BRAF descrita en el presente documento. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un melanoma, por ejemplo, un melanoma irresecable o metastásico. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un melanoma en un sujeto, en el que el melanoma tiene una mutación BRAF (por ejemplo, una mutación BRAF V600) y el sujeto tiene un nivel elevado de lactato deshidrogenasa (LDH) en comparación con un nivel de LDH de referencia.

En algunas realizaciones, el inhibidor de BRAF es dabrafenib. El dabrafenib también se conoce como GSK2118436, N-{3-[5-(2-aminopirimidin-4-il)-2-terc-butil-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida, o TAFINLAR® (Número CAS 1195765-45-7). El dabrafenib es un inhibidor de la quinasa RAF, potente y selectivo, biodisponible por vía oral, de las enzimas humanas BRAF y CRAF de tipo salvaje, así como de las formas mutantes de la enzima BRAF, por ejemplo, BRAF V600E, BRAF V600K y BRAf V600D. El modo de acción del dabrafenib es coherente con la inhibición competitiva de la unión al ATP. En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar a un sujeto que se ha determinado que tiene un cáncer (por ejemplo, un melanoma) con una mutación BRAF, por ejemplo, una mutación BRAF descrita en el presente documento (por ejemplo, una mutación BRAF V600). En otras realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer (por ejemplo, un melanoma) distinto de un cáncer BRAF de tipo salvaje (por ejemplo, un melanoma BRAF de tipo salvaje).

En algunas realizaciones, el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra a una dosis entre 50 mg y 300 mg (por ejemplo, entre 100 mg y 200 mg), por ejemplo, dos veces al día. En ciertas realizaciones, el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra a una dosis entre 100 mg y 200 mg (por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 150 mg), por ejemplo, dos veces al día. Por ejemplo, la segunda dosis del inhibidor de BRAF o dabrafenib puede administrarse unas 12 horas después de la administración de la primera dosis. En algunas realizaciones, el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra a una dosis diaria total entre 100 mg y 600 mg (por ejemplo, entre 200 mg y 400 mg). En ciertas realizaciones, el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra a una dosis diaria total entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis diaria total de aproximadamente 300 mg). En algunas realizaciones, el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra por vía oral.

En una realización, una combinación descrita en el presente documento incluye un inhibidor de MEK. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer de piel (por ejemplo, un melanoma). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que cuando se inhibe MEK, un miembro de la cascada de señalización MAPK, se puede bloquear la proliferación celular e inducir la apoptosis. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un melanoma, por ejemplo, un melanoma irresecable o metastásico. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un melanoma en un sujeto, en el que el melanoma tiene una mutación BRAF (por ejemplo, una mutación BRAF V600) y el sujeto tiene un nivel elevado de lactato deshidrogenasa (LDH) en comparación con un nivel de LDH de referencia.

En algunas realizaciones, el inhibidor de MEK es trametinib. El trametinib también se conoce como GSK1120212, JTP-74057, TMT212, N-(3-{3-ciclopropil-5-[(2-fluoro-4-yodofenil)amino]-6,8-dimetil-2,4,7-trioxo-3,4,6,7-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-1(2H)-il}fenil)acetamida, o Mekinist (Número CAS 871700-17-3). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, trametinib es un inhibidor alostérico reversible y altamente selectivo de MEK1 y MEK2. Las proteínas MEK son componentes críticos de la vía MAPK, que suele estar hiperactivada en células tumorales como las células de melanoma. Las mutaciones oncogénicas tanto en BRAF como en RAS pueden señalar a través de MEK1 o MEK2.

En algunas realizaciones, el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 0.5 mg y 4 mg (por ejemplo, entre 1 mg y 3 mg), por ejemplo, una vez al día. En ciertas realizaciones, el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 1 mg y 3 mg (por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 2 mg), por ejemplo, una vez al día. En algunas realizaciones, el inhibidor de MEK o trametinib se administra por vía oral.

En una realización, una combinación descrita aquí incluye un inhibidor de BRAF y un inhibidor de MEK.

Los datos preclínicosin vitroein vivoindicaron una mayor actividad antitumoral por la combinación de un inhibidor de BRAF (por ejemplo, dabrafenib) y un inhibidor de MEK (por ejemplo, trametinib). Por ejemplo, la combinación de dabrafenib y trametinib ha demostrado una mayor actividad antiproliferativa frente a un panel de líneas celulares mutantes de BRAFin vitro, lo quesugiere un efecto sinérgico de dabrafenib y trametinib a la hora de abordar la resistencia primaria a cada agente por separado. La combinación fue eficaz para inhibir el crecimiento de clones celulares de melanoma con mutación BRAF resistentes a dabrafenib, lo que indica la capacidad potencial de la terapia de combinación para superar la resistencia adquirida. Estos datos de la línea celular son comparables a los resultadosin vitrode otras combinaciones experimentales de inhibidores de BRAF y MEK (Corcoran et al. Sci Signal. 2010; 3(149):ra84; Emery et al. Proc Natl Acad Sci USA. 2009; 106(48):20411-6).

Como otro ejemplo, la combinación de dabrafenib y trametinib demostró una actividad mejorada en modelos de xenoinjerto de ratón de melanoma mutante de BRAF en comparación con cualquiera de los agentes solos. En estudios de toxicidad cutánea realizados en ratas, la adición de trametinib a dabrafenib impidió el desarrollo de las lesiones proliferativas de la piel observadas tras el tratamiento con dabrafenib solo. Estos resultados sugieren que la adición de un inhibidor de MEK a un inhibidor de BRAF puede suprimir las señales proliferativas en las células cutáneas normales, lo que puede conducir al desarrollo de lesiones cutáneas hiperproliferativas que incluyen, por ejemplo, queratoacantomas y carcinomas cutáneos de células escamosas observados con frecuencia en ensayos clínicos con inhibidores de BRAF (Flaherty et al. Curr Opin Oncol. 2010; 22(3): 178-83; Chapman et al. Expert Opin Investig Drugs. 2011; 20(2):209-20; Robert et al. Curr Opin Oncol. 2011; 23(2): 177-82). Se han observado resultados similares con otra combinación de inhibidores de BRAF y MEK (Carnahan et al. Mol Cancer Ther. 2010; 9(8):2399-410).

En algunas realizaciones, el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra a una dosis entre 50 mg y 300 mg (por ejemplo, entre 100 mg y 200 mg), por ejemplo, dos veces al día, por ejemplo,porvía oral, y el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 0.5 mg y 4 mg (por ejemplo, entre 1 mg y 3 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral. En ciertas realizaciones, el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra a una dosis entre 100 mg y 200 mg (por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 150 mg), dos veces al día, por vía oral, y el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 1 mg y 3 mg (por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 2 mg), una vez al día, por vía oral. Por ejemplo, la primera dosis del inhibidor de BRAF o dabrafenib puede administrarse al mismo tiempo que el inhibidor de MEK o dabrafenib, y la segunda dosis del inhibidor de BRAF o dabrafenib puede administrarse unas 12 horas después de la administración de la primera dosis. En algunas realizaciones, el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra a una dosis diaria total entre 100 mg y 600 mg (por ejemplo, entre 200 mg y 400 mg), por ejemplo,porvía oral, y el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 0.5 mg y 4 mg (por ejemplo, entre 1 mg y 3 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral. En ciertas realizaciones, el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra a una dosis diaria total entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis diaria total de aproximadamente 300 mg), por ejemplo,porvía oral, y el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 1 mg y 3 mg (por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 2 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral.

En ciertas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, y (i) un inhibidor de BRAF o dabrafenib, (ii) un inhibidor de MEK o trametinib, o (iii) ambos (i) y (ii). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que el uso de un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 o PD-L1, en combinación con un inhibidor de BRAf (por ejemplo, dabrafenib), un inhibidor de MEK (por ejemplo, trametinib), o ambos, puede mejorar una respuesta (por ejemplo, una respuesta más rápida, una respuesta más duradera, una mayor tasa de respuesta o una respuesta más completa) causada por la inhibición de BRAF y/o MEK.

Las siguientes observaciones, al menos en parte, apoyan un efecto combinatorio o sinérgico de una terapia dirigida (por ejemplo, una terapia dirigida contra BRAF, una terapia dirigida contra MEK, o ambas) con un inhibidor de puntos de control inmunitarios (por ejemplo, un inhibidor de PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1). Por ejemplo, el BRAF oncogénico puede conducir al escape inmunitario en el melanoma (Sumimoto et al. J Exp Med. 2006; 203(7): 1651-6). El bloqueo de la actividad de BRAF conduce a un aumento de la expresión de antígenos de diferenciación del melanomain vitro(Kono et al. Mol Cancer Res. 2006; 4(10):779-92), por ejemplo, mediante la liberación de la represión transcripcional y la posterior expresión de dianas de MITF, por ejemplo, MART-1, gp 100, TRP-1 y TRP-2 (Boni et al. Cancer Res. 2010; 70(13):5213-9). También se estudióin vitroel efecto de la inhibición de la vía MAPK sobre la activación y señalización de las células T. Mientras que los inhibidores de BRAF no mostraron efectos adversos sobre la función de las células T e incluso pueden aumentar su función a través de la señalización paradójica a través de RAS-GTP (Callahan et al. Cancer Immunol Res. 2014; 2(1):70-9), los inhibidores de MEK mostraron una inhibición dependiente de la dosis de la función de las células Tin vitro(Boni et al. Cancer Res. 2010; 70(13):5213-9; Vella et al. Cancer Immunol Res. 2014; 2(4):351-60). El efecto antitumoralin vivode trametinib se exploró más a fondo en un modelo tumoral CT26 singénico BALB/C inmunocompetente murino. En este estudio, la monoterapia con trametinib aumentó los linfocitos infiltrantes de tumores (TIL) CD4+ y no afectó negativamente a la prevalencia de TIL CD8+. La combinación de trametinib con anti-PD-1 murino dio lugar a una respuesta antitumoral eficaz en el modelo de ratón singénico de tumor colorrectal CT26 con mutación KRAS (Liu et al. Clin Cancer Res.

2015; 21(7):1639-51).

Como otro ejemplo, se realizó un análisis de biomarcadores inmunitarios en muestras tumorales de 16 pacientes con melanoma metastásico tratados con vemurafenib o dabrafenib más trametinib. En este análisis, la inhibición de BRAF se asoció con un aumento de la expresión de antígenos de melanoma (por ejemplo, MART, TYRP-1, TYRP-2, gp 100), un aumento significativo de las TIL CD8+, una disminución de la expresión de citoquinas inmunosupresoras en el microambiente tumoral y un aumento de los marcadores de toxicidad de células T, pero también un aumento del marcador de agotamiento de células T (por ejemplo, TIM-3, PD-1). También se observó que la expresión del antígeno y las TIL CD8+ disminuían en el momento de la progresión de la enfermedad del melanoma, pero podían restablecerse mediante la inhibición combinada de BRAF y MEK (Frederick et al. Clin Cancer Res. 2013; 19(5): 1225-31; Wilmott et al. Clin Cancer Res. 2012; 18(5): 1386-94).

Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, el uso de un inhibidor de BRAF (por ejemplo, dabrafenib) o un inhibidor de<m>E<k>(por ejemplo, trametinib), solo o en combinación, puede beneficiar la respuesta a un agente inmunoterapéutico, por ejemplo, alterando el microambiente inmunitario (Schilling et al. Ann Oncol. 2014; 25(3):747-53; Liu et al. Clin Cancer Res. 2015; 1;21(7): 1639-51; Kakavand et al. Clin Cancer Res. 2015; 21(14):3140-8).

En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 200 mg y 600 mg, por ejemplo, entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg) una vez cada cuatro semanas o una vez cada ocho semanas. El análisis farmacocinético (PK) poblacional de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento indicó que los cambios en la exposición debidos a las diferencias de peso de los pacientes son mínimos en el intervalo de peso antibipático de 30 a 150 kg para la población de pacientes, lo que apoya la selección de un esquema de dosificación plana. Se espera que una dosis plana de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas o de aproximadamente 300 mg una vez cada tres semanas alcance un valor Cpasante medio en estado estacionario superior a la EC50ex vivopara la producción de IL-2 estimulada por antígeno, un biomarcador traslacional para el bloqueo de PD-1 (Patnaik et al. Clin Cancer Res. 2015; 21(19):4286-93). Basándose, al menos en parte, en el perfil de seguridad observado y en los valores Cpasante previstos, se espera que una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas sea una dosis segura y eficaz. Aunque no se desea estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, un aumento del intervalo entre administraciones de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 (por ejemplo, a ocho semanas o más) puede hacer que la combinación sea más tolerable. Dada la larga semivida de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento, se espera que los valores Cpasante en la semana 8 estén por encima de la EC50ex vivopara la producción de IL-2 estimulada por antígeno.

En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg) una vez cada cuatro semanas, por ejemplo, por vía intravenosa, por ejemplo, durante un período de 15 a 120 minutos (por ejemplo, aproximadamente 30 minutos). En otras realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg) una vez cada ocho semanas, por ejemplo, por vía intravenosa, por ejemplo, durante un periodo de 15 a 120 minutos (por ejemplo, aproximadamente 30 minutos). En algunas realizaciones, la dosis puede interrumpirse hasta 12 semanas, por ejemplo, hasta 8 semanas o hasta 4 semanas.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra al sujeto como una formulación descrita en el presente documento. En ciertas realizaciones, la formulación es una formulación liofilizada. En otras realizaciones, la formulación es una formulación reconstituida, por ejemplo, reconstituida a partir de una formulación liofilizada. En otras realizaciones, la formulación es líquida. En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) se reconstituye usando agua estéril para inyección.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada cuatro semanas, por ejemplo, por vía intravenosa, y (i) el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra a una dosis entre 50 mg y 300 mg (por ejemplo, entre 100 mg y 200 mg, por ejemplo, a una dosis de 150 mg), por ejemplo, dos veces al día, por ejemplo, por vía oral, o a una dosis diaria total entre 100 mg y 600 mg (por ejemplo, entre 200 mg y 400 mg, por ejemplo, a una dosis diaria total de 300 mg), por ejemplo, por vía oral, (ii) el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 0.5 mg y 4 mg (por ejemplo, entre 1 mg y 3 mg, por ejemplo, a una dosis de 2 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral; o (iii) ambos (i) y (ii).

En ciertas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, un inhibidor de BRAF o dabrafenib, y un inhibidor de MEK o trametinib. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada cuatro semanas, por ejemplo, por vía intravenosa; el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra a una dosis entre 50 mg y 300 mg (por ejemplo, entre 100 mg y 200 mg, por ejemplo, a una dosis de 150 mg), por ejemplo, dos veces al día, por ejemplo,porvía oral, o a una dosis diaria total entre 100 mg y 600 mg (por ejemplo, entre 200 mg y 400 mg, por ejemplo, a una dosis diaria total de 300 mg), por ejemplo, por vía oral; y el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 0.5 mg y 4 mg (por ejemplo, entre 1 mg y 3 mg, por ejemplo, a una dosis de 2 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral.

En algunas realizaciones, la administración del inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) comienza el mismo día que la administración del inhibidor de BRAF o dabrafenib, el inhibidor de MEK o trametinib, o ambos. En otras realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra después de que el inhibidor de BRAF o dabrafenib, el inhibidor de MEK o trametinib, o ambos, se hayan administrado durante unas cuatro semanas o más. Por ejemplo, la administración del inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) puede comenzar el Día 29, cuando la administración del inhibidor de BRAF o dabrafenib, el inhibidor de MEK o trametinib, o ambos, comienza el Día 1. A modo de ejemplo, el inhibidor de BRAF o dabrafenib puede administrarse dos veces al día según el régimen de dosificación para los Días 1-28 de un ciclo de 28 días, y el inhibidor de MEK o trametinib puede administrarse según el régimen de dosificación para los Días 1-28 de un ciclo de 28 días.

En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada ocho semanas, por ejemplo, por vía intravenosa, y (i) el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra a una dosis entre 50 mg y 300 mg (por ejemplo, entre 100 mg y 200 mg, por ejemplo, a una dosis de 150 mg), por ejemplo, dos veces al día, por ejemplo, por vía oral, o a una dosis diaria total entre 100 mg y 600 mg (por ejemplo, entre 200 mg y 400 mg, por ejemplo, a una dosis diaria total de 300 mg), por ejemplo, por vía oral, (ii) el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 0.5 mg y 4 mg (por ejemplo, entre 1 mg y 3 mg, por ejemplo, a una dosis de 2 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral; o (iii) ambos (i) y (ii).

En ciertas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1, un inhibidor de BRAF o dabrafenib, y un inhibidor de MEK o trametinib. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada ocho semanas, por ejemplo, por vía intravenosa; el inhibidor de BRAF o dabrafenib se administra a una dosis entre 50 mg y 300 mg (por ejemplo, entre 100 mg y 200 mg, por ejemplo, a una dosis de 150 mg), por ejemplo, dos veces al día, por ejemplo, por vía oral, o a una dosis diaria total entre 100 mg y 600 mg (por ejemplo, entre 200 mg y 400 mg, por ejemplo, a una dosis diaria total de 300 mg), por ejemplo, por vía oral; y el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 0.5 mg y 4 mg (por ejemplo, entre 1 mg y 3 mg, por ejemplo, a una dosis de 2 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral.

En ciertas realizaciones, la combinación se usa para tratar un cáncer, por ejemplo, un melanoma, con un nivel elevado (por ejemplo, nivel sérico) de LDH, por ejemplo, comparado con un nivel de LDH de referencia, por ejemplo, el nivel de LDH en un sujeto normal. Aunque sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, la LDH sérica es un factor pronóstico independiente en el melanoma, y se correlaciona con un mal pronóstico como se evidencia por la disminución de la supervivencia en pacientes con melanoma avanzado en comparación con pacientes con niveles de LDH dentro del rango normal. Los estudios también demostraron que una LDH elevada era un factor predictivo negativo de la respuesta al tratamiento y otros resultados de eficacia (Sirott et al. Cancer. 1993; 72(10):3091-8; Eton et al. J Clin Oncol. 1998; 16(3): 1103-11; Balch et al. JClin Oncol. 2001; 19(16):3622-34). La población de pacientes con un nivel elevado de LDH representa un área de necesidad médica no cubierta que justifica el uso de una opción de tratamiento (por ejemplo, una terapia de combinación) descrita en el presente documento. En ciertas realizaciones, el cáncer, por ejemplo, un melanoma, tiene además una mutación BRAF V600.

En algunas realizaciones, el nivel de LDH en el sujeto es al menos 2, 3, 4 o 5 veces mayor que un nivel de referencia, por ejemplo, un nivel de referencia descrito en el presente documento. En algunas realizaciones, el nivel de LDH al inicio está entre 1 x límite superior de la normalidad (ULN) y 2 x ULN. En otras realizaciones, el nivel de LDH al inicio es superior a 2 x ULN, por ejemplo, superior a 3 x ULN, 4 x ULN o 5 x ULN. En algunas realizaciones, el nivel de LDH es superior a entre 100 y 350 (por ejemplo, entre 105 y 333) IU/L (unidades internacionales por litro). En algunas realizaciones, el nivel de LDH se determina en suero. Las pruebas para determinar el nivel de LDH se describen, por ejemplo, en Ferri FF, ed. Ferri's Clinical Advisor 2014. Philadelphia: Pa: Elsevier Mosby; 2014 : Sección IV- Pruebas de laboratorio e interpretación de los resultados. En ciertas realizaciones, el sujeto tiene una puntuación de rendimiento ECOG elegida entre 0, 1 o 2. Los métodos para determinar una puntuación de rendimiento ECOG se describen, por ejemplo, en Oken et al. Am J Clin Oncol.

1982; 5: 649-655.

En ciertas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer (por ejemplo, un melanoma) que tiene una mutación BRAF, por ejemplo, una mutación BRAF descrita en el presente documento. En determinadas realizaciones, la mutación BRAF es una mutación V600. En ciertas realizaciones, la mutación BRAF se localiza en el segmento de activación del dominio quinasa. En otras realizaciones, la mutación BRAF da lugar a un aumento de la actividad quinasa y, opcionalmente, se transformain vitro.En algunas realizaciones, la mutación BRAF se elige entre una mutación V600E, una mutación V600K o una mutación V600D. En ciertas realizaciones, la mutación BRAF es una mutación V600E. En otras realizaciones, la combinación se utiliza para tratar un cáncer (por ejemplo, un melanoma) distinto de un cáncer BRAF de tipo salvaje (por ejemplo, un melanoma BRAF de tipo salvaje). En ciertas realizaciones, la mutación BRAF es una mutación sensible o que responde a un inhibidor de BRAF, a un inhibidor de MEK o a ambos.

Las mutaciones BRAF de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, BRAF c.1779_1780delTGinsGA (D594N), BRAF c.1780G>C (D594H), BRAF c.1780G>A (D594N), BRAF c.1781A>G (D594G), BRAF c.1781A>T (D594V), BRAF c.1782T>A (D594E), BRAF c.1782T>G (D594E), BRAF c.1789C>G (L597V), BRAF c.1789 _1790delCTinsTC (L597S), BRAF c.1790T>A (L597Q), BRAF c.1790T>G (L597R), BRAF c.1798G>A (V600M), BRAF c.1798_1 799delGTinsAA (V600K), BRAF c.1798_1799delGTinsAG (V600R), BRAF c.1799T>A (V600E), BRAF c.1799T>G (V600G), BRAF c.1799_1800delTGinsAT (V600D), BRAF c.1799 _1800delTGinsAA (V600E), oR<a>F c.1801A>G (K601E). Otras mutaciones BRAF de ejemplo también incluyen una fusión BRAF, por ejemplo, como se describe en Botton et al. Pigment Cell Melanoma Res. 2013; 26(6):845-51; Hutchinson et al. Clin Cancer Res. 2013; 19(24):6696-702).

En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 es una molécula de anticuerpo anti-PD-L1.

Otros inhibidores de ejemplo de BRAF que pueden usarse en la combinación aquí descrita incluyen, pero no se limitan a, vemurafenib (también conocido como RG7204 o PLX4032), GDC-0879, PLX-4720, sorafenib, o LGX818.

Otros inhibidores de ejemplo de MEK que pueden usarse en la combinación descrita aquí incluyen, pero no se limitan a, cobimetinib (también conocido como XL518), binimetinib (también conocido como MEK162), selumetinib, PD-325901, CI-1040, PD035901, o TAK-733.

En algunas realizaciones, la combinación aquí descrita se utiliza además en combinación con cirugía, un agente quimioterapéutico, una radioterapia, una inmunoterapia (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CTLA-4, una molécula de anticuerpo anti-PD-L1, un interferón, una interleucina (por ejemplo, IL-2), o una terapia TNF), o una terapia dirigida (por ejemplo, un virus oncolítico, o un inhibidor de la angiogénesis).

Composiciones farmacéuticas y kits

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona composiciones, por ejemplo, composiciones farmacéuticamente aceptables, que incluyen una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento, formulada junto con un portador farmacéuticamente aceptable. Tal como se utiliza en el presente documento, "portador farmacéuticamente aceptable" incluye todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersión, agentes isotónicos y retardadores de la absorción que son fisiológicamente compatibles. El portador puede ser adecuado para la administración intravenosa, intramuscular, subcutánea, parenteral, rectal, espinal o epidérmica (por ejemplo, mediante inyección o infusión).

Las composiciones de la presente divulgación pueden presentarse en diversas formas. Estas incluyen, por ejemplo, formas de dosificación líquidas, semisólidas y sólidas, como soluciones líquidas (por ejemplo, soluciones inyectables e infusibles), dispersiones o suspensiones, liposomas y supositorios. La forma preferida depende del modo de administración previsto y de la aplicación terapéutica. Las composiciones típicas preferidas se presentan en forma de soluciones inyectables o infusibles. El modo de administración preferido es parenteral (por ejemplo, intravenoso, subcutáneo, intraperitoneal, intramuscular). En una realización preferida, el anticuerpo se administra por infusión o inyección intravenosa. En otra realización preferida, el anticuerpo se administra mediante inyección intramuscular o subcutánea.

Las expresiones "administración parenteral" y "administrado parenteralmente", tal como se utilizan en el presente documento, significan modos de administración distintos de la administración enteral y tópica, normalmente por inyección, e incluyen, sin limitación, inyección e infusión intravenosa, intramuscular intraarterial, intratecal, intracapsular, intraorbital, intracardíaca, intradérmica, intraperitoneal, transtraqueal, subcutánea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnoidea, intraespinal, epidural e intraesternal.

Las composiciones terapéuticas deben ser típicamente estériles y estables en las condiciones de fabricación y almacenamiento. La composición puede formularse como una solución, microemulsión, dispersión, liposoma u otra estructura ordenada adecuada a la alta concentración de anticuerpos. Las soluciones inyectables estériles pueden prepararse incorporando el compuesto activo(es decir,anticuerpo o porción de anticuerpo) en la cantidad requerida en un disolvente apropiado con uno o una combinación de los ingredientes enumerados anteriormente, según sea necesario, seguido de esterilización filtrada. Generalmente, las dispersiones se preparan incorporando el compuesto activo a un vehículo estéril que contiene un medio de dispersión básico y los demás ingredientes necesarios de los enumerados anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos preferidos de preparación son el secado al vacío y la liofilización que produce un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente adicional deseado a partir de una solución previamente filtrada estérilmente del mismo. La fluidez adecuada de una solución puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento como la lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de la dispersión y mediante el uso de tensioactivos. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede conseguirse incluyendo en la composición un agente que retrase la absorción, por ejemplo, sales de monoestearato y gelatina.

Un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, molécula de anticuerpo anti-PD-1) o una composición descrita en el presente documento puede formularse en una formulación (por ejemplo, una formulación de dosis o forma de dosificación) adecuada para la administración (por ejemplo, administración intravenosa) a un sujeto como se describe en el presente documento.

En ciertas realizaciones, la formulación es una formulación de sustancia farmacológica. En otras realizaciones, la formulación es una formulación liofilizada, por ejemplo, liofilizada o secada a partir de una formulación de sustancia farmacológica. En otras realizaciones, la formulación es una formulación reconstituida, por ejemplo, reconstituida a partir de una formulación liofilizada. En otras realizaciones, la formulación es líquida.

En algunas realizaciones, la formulación es una formulación de sustancia farmacológica. En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación de sustancia farmacológica) comprende el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) y un agente tampón.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación de sustancia farmacológica) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 10 a 50 mg/mL, por ejemplo, 15 a 50 mg/mL, 20 a 45 mg/mL, 25 a 40 mg/mL, 30 a 35 mg/mL, 25 a 35 mg/mL, o 30 a 40 mg/mL, por ejemplo, 15 mg/mL, 20 mg/mL, 25 mg/mL, 30 mg/mL, 33.3 mg/mL, 35 mg/mL, 40 mg/mL, 45 mg/mL, o 50 mg/mL. En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) está presente a una concentración de 30 a 35 mg/mL, por ejemplo, 33.3 mg/mL.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación de la sustancia farmacológica) comprende un agente tampón que comprende histidina (por ejemplo, un tampón de histidina). En ciertas realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, tampón de histidina) está presente en una concentración de 1 mM a 20 mM, por ejemplo, 2 mM a 15 mM, 3 mM a 10 mM, 4 mM a 9 mM, 5 mM a 8 mM, o 6 mM a 7 mM, por ejemplo, 1 mM, 2 mM, 3 mM, 4 mM, 5 mM, 6 mM, 6.7 mM, 7 mM, 8 mM, 9 mM, 10 mM, 11 mM, 12 mM, 13 mM, 14 mM, 15 mM, 16 mM, 17 mM, 18 mM, 19 mM, o 20 mM. En algunas realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, tampón de histidina) está presente en una concentración de 6 mM a 7 mM, por ejemplo, 6.7 mM. En otras realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, un tampón de histidina) tiene un pH de 4 a 7, por ejemplo,de5 a 6, por ejemplo, 5, 5.5 o 6. En algunas realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, un tampón de histidina) tiene un pH de 5 a 6, por ejemplo, 5.5. En ciertas realizaciones, el agente tampón comprende histidina en una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación de sustancia farmacológica) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 30 a 35 mg/mL, por ejemplo, 33.3 mg/mL; y un agente tampón que comprende histidina a una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación de la sustancia farmacológica) comprende además un carbohidrato. En ciertas realizaciones, el carbohidrato es sacarosa. En algunas realizaciones, el carbohidrato (por ejemplo, sacarosa) está presente en una concentración de 50 mM a 150 mM, por ejemplo, 25 mM a 150 mM, 50 mM a 100 mM, 60 mM a 90 mM, 70 mM a 80 mM, o 70 mM a 75 mM, por ejemplo, 25 mM, 50 mM, 60 mM, 70 mM, 73.3 mM, 80 mM, 90 mM, 100 mM, o 150 mM. En algunas realizaciones, la formulación comprende un hidrato de carbono o sacarosa presente a una concentración de 70 mM a 75 mM, por ejemplo, 73.3 mM.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación de sustancia farmacológica) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 30 a 35 mg/mL, por ejemplo, 33.3 mg/mL; un agente tampón que comprende histidina en una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5); y un hidrato de carbono o sacarosa presente en una concentración de 70 mM a 75 mM, por ejemplo, 73.3 mM.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación de la sustancia farmacológica) comprende además un tensioactivo. En ciertas realizaciones, el tensioactivo es polisorbato 20. En algunas realizaciones, el tensioactivo o polisorbato 20) está presente en una concentración de 0.005% a 0.025% (p/p), por ejemplo, 0.0075% a 0.02% o 0.01% a 0.015% (p/p), por ejemplo, 0.005%, 0.0075%, 0.01%, 0.013%, 0.015% o 0.02% (p/p). En algunas realizaciones, la formulación comprende un tensioactivo o polisorbato 20 presente en una concentración del 0.01% al 0.015%, por ejemplo, 0.013% (p/p).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación de sustancia farmacológica) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 30 a 35 mg/mL, por ejemplo, 33.3 mg/mL; un agente tampón que comprende histidina en una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5); y un tensioactivo o polisorbato 20 presente en una concentración de 0.01% a 0.015%, por ejemplo, 0.013% (p/p).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación de sustancia farmacológica) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 30 a 35 mg/mL, por ejemplo, 33.3 mg/mL; un agente tampón que comprende histidina a una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5); un hidrato de carbono o sacarosa presente en una concentración de 70 mM a 75 mM, por ejemplo, 73.3 mM; y un tensioactivo o polisorbato 20 presente en una concentración de 0.01% a 0.015%, por ejemplo, 0.013% (p/p).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación de sustancia farmacológica) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 33.3 mg/mL; un agente tampón que comprende histidina a una concentración de 6.7 mM y tiene un pH de 5.5; sacarosa presente a una concentración de 73.3 mM; y polisorbato 20 presente a una concentración de 0.013% (p/p).

En algunas realizaciones, la formulación es una formulación liofilizada. En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada se liofiliza a partir de una formulación de sustancia farmacológica descrita en el presente documento. Por ejemplo, de 2 a 5 mL, por ejemplo,de3 a 4 mL, por ejemplo, 3.6 mL, de la formulación de sustancia farmacológica descrita en el presente documento pueden llenarse por recipiente (por ejemplo, vial) y liofilizarse.

En ciertas realizaciones, la formulación es una formulación reconstituida. Por ejemplo, una formulación reconstituida puede prepararse disolviendo una formulación liofilizada en un diluyente de manera que la proteína se disperse en la formulación reconstituida. En algunas realizaciones, la formulación liofilizada se reconstituye con 0.5 mL a 2 mL, por ejemplo, 1 mL, de agua o tampón inyectable. En ciertas realizaciones, la formulación liofilizada se reconstituye con 1 mL de agua para inyección, por ejemplo, en un centro clínico.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación reconstituida) comprende el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) y un agente tampón.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación reconstituida) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 20 mg/mL a 200 mg/mL, por ejemplo, 50 mg/mL a 150 mg/mL, 80 mg/mL a 120 mg/mL, o 90 mg/mL a 110 mg/mL, por ejemplo, 50 mg/mL, 60 mg/mL, 70 mg/mL, 80 mg/mL, 90 mg/mL, 100 mg/mL, 110 mg/mL, 120 mg/mL, 130 mg/mL, 140 mg/mL, 150 mg/mL, 160 mg/mL, 170 mg/mL, 180 mg/mL, 190 mg/mL, o 200 mg/mL. En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) está presente a una concentración de 80 a 120 mg/mL, por ejemplo, 100 mg/mL.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación reconstituida) comprende un agente tampón que comprende histidina (por ejemplo, un tampón de histidina). En ciertas realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, tampón de histidina) está presente en una concentración de 5 mM a 100 mM, por ejemplo, 10 mM a 50 mM, 15 mM a 25 mM, por ejemplo, 5 mM, 10 mM, 20 mM, 30 mM, 40 mM, 50 mM, 60 mM, 70 mM, 80 mM, 90 mM, o 100 mM. En algunas realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, tampón de histidina) está presente en una concentración de 15 mM a 25 mM, por ejemplo, 20 mM. En otras realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, un tampón de histidina) tiene un pH de 4 a 7, por ejemplo,de5 a 6, por ejemplo, 5, 5.5 o 6. En algunas realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, un tampón de histidina) tiene un pH de 5 a 6, por ejemplo, 5.5. En ciertas realizaciones, el agente tampón comprende histidina en una concentración de 15 mM a 25 mM (por ejemplo, 20 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación reconstituida) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 80 a 120 mg/mL, por ejemplo, 100 mg/mL; y un agente tampón que comprende histidina a una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación reconstituida) comprende además un hidrato de carbono. En ciertas realizaciones, el carbohidrato es sacarosa. En algunas realizaciones, el carbohidrato (por ejemplo, sacarosa) está presente en una concentración de 100 mM a 500 mM, por ejemplo, 150 mM a 400 mM, 175 mM a 300 mM, o 200 mM a 250 mM, por ejemplo, 150 mM, 160 mM, 170 mM, 180 mM, 190 mM, 200 mM, 210 mM, 220 mM, 230 mM, 240 mM, 250 mM, 260 mM, 270 mM, 280 mM, 290 mM, o 300 mM. En algunas realizaciones, la formulación comprende un hidrato de carbono o sacarosa presente en una concentración de 200 mM a 250 mM, por ejemplo, 220 mM.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación reconstituida) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 80 a 120 mg/mL, por ejemplo, 100 mg/mL; y un agente tampón que comprende histidina en una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5); y un hidrato de carbono o sacarosa presente en una concentración de 200 mM a 250 mM, por ejemplo, 220 mM.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación reconstituida) comprende además un tensioactivo. En ciertas realizaciones, el tensioactivo es polisorbato 20. En algunas realizaciones, el tensioactivo o polisorbato 20 está presente en una concentración de 0.01% a 0.1% (p/p), por ejemplo, 0.02% a 0,08%, 0.025% a 0.06% o 0.03% a 0.05% (p/p), por ejemplo, 0.01%, 0.025%, 0.03%, 0.04%, 0.05%, 0.06%, 0,07%, 0,08%, 0.09% o 0.1% (p/p). En algunas realizaciones, la formulación comprende un tensioactivo o polisorbato 20 presente en una concentración del 0.03% al 0.05%, por ejemplo, 0.04% (p/p).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación reconstituida) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 80 a 120 mg/mL, por ejemplo, 100 mg/mL; y un agente tampón que comprende histidina en una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5); y un tensioactivo o polisorbato 20 presente en una concentración de 0.03% a 0.05%, por ejemplo, 0.04% (p/p).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación reconstituida) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente en una concentración de 80 a 120 mg/mL, por ejemplo, 100 mg/mL; y un agente tampón que comprende histidina en una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5); un hidrato de carbono o sacarosa presente en una concentración de 200 mM a 250 mM, por ejemplo, 220 mM; y un tensioactivo o polisorbato 20 presente en una concentración de 0.03% a 0.05%, por ejemplo, 0.04% (p/p).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación reconstituida) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 100 mg/mL; y un agente tampón que comprende histidina a una concentración de 6.7 mM y tiene un pH de 5.5; sacarosa presente a una concentración de 220 mM; y polisorbato 20 presente a una concentración de 0.04% (p/p).

En algunas realizaciones, la formulación se reconstituye de tal manera que un volumen extraíble de al menos 1 mL (por ejemplo, al menos 1.5 mL, 2 mL, 2.5 mL o 3 mL) de la formulación reconstituida puede extraerse del recipiente (por ejemplo, vial) que contiene la formulación reconstituida. En ciertas realizaciones, la formulación se reconstituye y/o se extrae del recipiente (por ejemplo, vial) en un centro clínico. En ciertas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación reconstituida) se inyecta en una bolsa de infusión, por ejemplo, en el plazo de 1 hora (por ejemplo, en el plazo de 45 minutos, 30 minutos o 15 minutos) antes de que comience la infusión al paciente.

En ciertas realizaciones, la formulación es una formulación líquida. En algunas realizaciones, la formulación líquida se prepara diluyendo una formulación de sustancia farmacológica descrita en el presente documento. Por ejemplo, una formulación de sustancia farmacológica puede diluirse, por ejemplo, con 10 a 30 mg/mL (por ejemplo, 25 mg/mL) de una solución que comprende uno o más excipientes (por ejemplo, excipientes concentrados). En algunas realizaciones, la solución comprende uno, dos o todos los excipientes histidina, sacarosa o polisorbato 20. En algunas realizaciones, la solución comprende los mismos excipientes que la formulación del fármaco. Los excipientes de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, un aminoácido (por ejemplo, histidina), un hidrato de carbono (por ejemplo, sacarosa) o un tensioactivo (por ejemplo, polisorbato 20). En ciertas realizaciones, la formulación líquida no es una formulación liofilizada reconstituida. En otras realizaciones, la formulación líquida es una formulación liofilizada reconstituida. En algunas realizaciones, la formulación se almacena como líquido. En otras realizaciones, la formulación se prepara como líquido y luego se seca, por ejemplo, mediante liofilización o secado por pulverización, antes del almacenamiento.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación líquida) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 5 mg/mL a 50 mg/mL, por ejemplo, 10 mg/mL a 40 mg/mL, 15 mg/mL a 35 mg/mL, o 20 mg/mL a 30 mg/mL, por ejemplo, 5 mg/mL, 10 mg/mL, 15 mg/mL, 20 mg/mL, 25 mg/mL, 30 mg/mL, 35 mg/mL, 40 mg/mL, 45 mg/mL, o 50 mg/mL. En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) está presente a una concentración de 20 a 30 mg/mL, por ejemplo, 25 mg/mL.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación líquida) comprende un agente tampón que comprende histidina (por ejemplo, un tampón de histidina). En ciertas realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, tampón de histidina) está presente en una concentración de 5 mM a 100 mM, por ejemplo, 10 mM a 50 mM, 15 mM a 25 mM, por ejemplo, 5 mM, 10 mM, 20 mM, 30 mM, 40 mM, 50 mM, 60 mM, 70 mM, 80 mM, 90 mM, o 100 mM. En algunas realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, tampón de histidina) está presente en una concentración de 15 mM a 25 mM, por ejemplo, 20 mM. En otras realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, un tampón de histidina) tiene un pH de 4 a 7, por ejemplo,de5 a 6, por ejemplo, 5, 5.5 o 6. En algunas realizaciones, el agente tampón (por ejemplo, un tampón de histidina) tiene un pH de 5 a 6, por ejemplo, 5.5. En ciertas realizaciones, el agente tampón comprende histidina en una concentración de 15 mM a 25 mM (por ejemplo, 20 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación líquida) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 20 a 30 mg/mL, por ejemplo, 25 mg/mL; y un agente tampón que comprende histidina a una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación líquida) comprende además un hidrato de carbono. En ciertas realizaciones, el carbohidrato es sacarosa. En algunas realizaciones, el carbohidrato (por ejemplo, sacarosa) está presente en una concentración de 100 mM a 500 mM, por ejemplo, 150 mM a 400 mM, 175 mM a 300 mM, o 200 mM a 250 mM, por ejemplo, 150 mM, 160 mM, 170 mM, 180 mM, 190 mM, 200 mM, 210 mM, 220 mM, 230 mM, 240 mM, 250 mM, 260 mM, 270 mM, 280 mM, 290 mM, o 300 mM. En algunas realizaciones, la formulación comprende un hidrato de carbono o sacarosa presente en una concentración de 200 mM a 250 mM, por ejemplo, 220 mM.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación líquida) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 20 a 30 mg/mL, por ejemplo, 25 mg/mL; y un agente tampón que comprende histidina en una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5); y un hidrato de carbono o sacarosa presente en una concentración de 200 mM a 250 mM, por ejemplo, 220 mM.

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, la formulación líquida) comprende además un tensioactivo. En ciertas realizaciones, el tensioactivo es polisorbato 20. En algunas realizaciones, el tensioactivo o polisorbato 20 está presente en una concentración de 0.01% a 0.1% (p/p), por ejemplo, 0.02% a 0,08%, 0.025% a 0.06% o 0.03% a 0.05% (p/p), por ejemplo, 0.01%, 0.025%, 0.03%, 0.04%, 0.05%, 0.06%, 0,07%, 0,08%, 0.09% o 0.1% (p/p). En algunas realizaciones, la formulación comprende un tensioactivo o polisorbato 20 presente en una concentración del 0.03% al 0.05%, por ejemplo, 0.04% (p/p).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación líquida) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 20 a 30 mg/mL, por ejemplo, 25 mg/mL; y un agente tampón que comprende histidina en una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5); y un tensioactivo o polisorbato 20 presente en una concentración de 0.03% a 0.05%, por ejemplo, 0.04% (p/p).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación d líquida) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 20 a 30 mg/mL, por ejemplo, 25 mg/mL; y un agente tampón que comprende histidina a una concentración de 6 mM a 7 mM (por ejemplo, 6.7 mM) y tiene un pH de 5 a 6 (por ejemplo, 5.5); un hidrato de carbono o sacarosa presente en una concentración de 200 mM a 250 mM, por ejemplo, 220 mM; y un tensioactivo o polisorbato 20 presente en una concentración de 0.03% a 0.05%, por ejemplo, 0.04% (p/p).

En algunas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación líquida) comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) presente a una concentración de 25 mg/mL; y un agente tampón que comprende histidina a una concentración de 6.7 mM y tiene un pH de 5.5; sacarosa presente a una concentración de 220 mM; y polisorbato 20 presente a una concentración de 0.04% (p/p).

En ciertas realizaciones, de 1 mL a 10 mL (por ejemplo,de2 mL a 8 mL, de 3 mL a 7 mL, o de 4 mL a 5 mL, por ejemplo, 3 mL, 4 mL, 4.3 mL, 4.5 mL, 5 mL, o 6 mL) de la formulación líquida se llena por recipiente (por ejemplo, vial). En otras realizaciones, la formulación líquida se llena en un recipiente (por ejemplo, vial) de manera que pueda extraerse un volumen extraíble de al menos 2 mL (por ejemplo, al menos 3 mL, al menos 4 mL o al menos 5 mL) de la formulación líquida por recipiente (por ejemplo, vial). En ciertas realizaciones, la formulación líquida se diluye a partir de la formulación de la sustancia farmacológica y/o se extrae del recipiente (por ejemplo, vial) en un centro clínico. En ciertas realizaciones, la formulación (por ejemplo, formulación líquida) se inyecta en una bolsa de infusión, por ejemplo, en el plazo de 1 hora (por ejemplo, en el plazo de 45 minutos, 30 minutos o 15 minutos) antes de que comience la infusión al paciente.

Una formulación descrita en el presente documento puede almacenarse en un recipiente. El recipiente utilizado para cualquiera de las formulaciones descritas en el presente documento puede incluir, por ejemplo, un vial y, opcionalmente, un tapón, una tapa o ambos. En ciertas realizaciones, el vial es un vial de vidrio, por ejemplo, un vial de vidrio blanco 6R. En otras realizaciones, el tapón es un tapón de goma, por ejemplo, un tapón de goma gris. En otras realizaciones, el tapón es un tapón abatible, por ejemplo, un tapón abatible de aluminio. En algunas realizaciones, el contenedor comprende un vial de vidrio blanco 6R, un tapón de goma gris y una tapa abatible de aluminio. En algunas realizaciones, el contenedor (por ejemplo, vial) es para un contenedor de un solo uso. En ciertas realizaciones, 50 mg a 150 mg, por ejemplo, 80 mg a 120 mg, 90 mg a 110 mg, 100 mg a 120 mg, 100 mg a 110 mg, 110 mg a 120 mg, o 110 mg a 130 mg, del inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1), está presente en el recipiente (por ejemplo, vial).

Otros agentes tampón de ejemplo que pueden usarse en la formulación descrita aquí incluyen, pero no se limitan a, un tampón de arginina, un tampón de citrato o un tampón de fosfato. Otros carbohidratos de ejemplo que pueden utilizarse en la formulación descrita en el presente documento incluyen, pero no se limitan a, trehalosa, manitol, sorbitol o una combinación de los mismos. La formulación aquí descrita también puede contener un agente tonificante, por ejemplo, cloruro sódico, y/o un agente estabilizante, por ejemplo, un aminoácido (por ejemplo, glicina, arginina, metionina, o una combinación de los mismos).

Las moléculas de anticuerpo pueden administrarse por una variedad de métodos conocidos en la técnica, aunque para muchas aplicaciones terapéuticas, la ruta/modo de administración preferido es la inyección o infusión intravenosa. Por ejemplo, las moléculas de anticuerpo pueden administrarse por infusión intravenosa a una tasa de más de 20 mg/min, por ejemplo, 20-40 mg/min, y típicamente mayor o igual a 40 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 35 a 440 mg/m2, típicamente de aproximadamente 70 a 310 mg/m2, y más típicamente, de aproximadamente 110 a 130 mg/m2. En otras realizaciones, las moléculas de anticuerpo pueden administrarse por infusión intravenosa a una tasa inferior a 10 mg/min; preferiblemente inferior o igual a 5 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 1 a 100 mg/m2, preferiblemente de aproximadamente 5 a 50 mg/m2, de aproximadamente 7 a 25 mg/m2 y más preferiblemente, de aproximadamente 10 mg/m2. Como apreciará el experto en la materia, la vía y/o modo de administración variará en función de los resultados deseados. En ciertas realizaciones, el compuesto activo puede prepararse con un portador que proteja el compuesto contra la liberación rápida, como una formulación de liberación controlada, incluidos implantes, parches transdérmicos y sistemas de administración microencapsulados. Pueden utilizarse polímeros biodegradables y biocompatibles, como el acetato de etileno vinilo, los polianhídridos, el ácido poliglicólico, el colágeno, los poliortoésteres y el ácido poliláctico. Muchos métodos para la preparación de tales formulaciones están patentados o son generalmente conocidos por los expertos en la materia. Véase, por ejemplo, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., Nueva York, 1978.

En ciertas realizaciones, una molécula de anticuerpo puede administrarse por vía oral, por ejemplo, con un diluyente inerte o un portador comestible asimilable. El compuesto (y otros ingredientes, si se desea) también puede incluirse en una cápsula de gelatina dura o blanda, comprimirse en comprimidos o incorporarse directamente a la dieta del sujeto. Para la administración terapéutica oral, los compuestos pueden incorporarse con excipientes y utilizarse en forma de comprimidos ingeribles, comprimidos bucales, troques, cápsulas, elixires, suspensiones, jarabes, obleas. Para administrar un compuesto de la divulgación por vías distintas a la parenteral, puede ser necesario recubrir el compuesto con, o coadministrar el compuesto con, un material para evitar su inactivación. Las composiciones terapéuticas también pueden administrarse con dispositivos médicos conocidos en la técnica.

Los regímenes de dosificación se ajustan para proporcionar la respuesta óptima deseada (por ejemplo, una respuesta terapéutica). Por ejemplo, puede administrarse un único bolo, pueden administrarse varias dosis divididas a lo largo del tiempo o la dosis puede reducirse o aumentarse proporcionalmente según indiquen las exigencias de la situación terapéutica. Resulta especialmente ventajoso formular composiciones parenterales en forma de unidades de dosificación para facilitar la administración y uniformizar la dosificación. La forma de unidad de dosificación como se usa aquí se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosis unitarias para los sujetos a tratar; cada unidad contiene una cantidad predeterminada de compuesto activo calculado para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el portador farmacéutico requerido. La especificación para las formas de unidad de dosificación de la revelación está dictada por y directamente dependiente en (a) las características únicas del compuesto activo y el efecto terapéutico particular para ser conseguido, y (b) las limitaciones inherentes en la técnica de la composición tal un compuesto activo para el tratamiento de sensibilidad en individuos.

Un rango de ejemplo, no limitante, para una cantidad terapéutica o profilácticamente eficaz de una molécula de anticuerpo es 0.1-30 mg/kg, más preferiblemente 1-25 mg/kg. Las dosis y regímenes terapéuticos de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 pueden determinarse por un artesano experto. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra por inyección (por ejemplo, subcutánea o intravenosa) a una dosis de aproximadamente 1 a 40 mg/kg, por ejemplo, 1 a 30 mg/kg, por ejemplo, aproximadamente 5 a 25 mg/kg, aproximadamente 10 a 20 mg/kg, aproximadamente 1 a 5 mg/kg, 1 a 10 mg/kg, 5 a 15 mg/kg, 10 a 20 mg/kg, 15 a 25 mg/kg, o aproximadamente 3 mg/kg. El programa de dosificación puede variar, por ejemplo, de una vez a la semana a una vez cada 2, 3 o 4 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 10 a 20 mg/kg cada dos semanas.

Como otro ejemplo, el rango no limitante para una cantidad terapéutica o profilácticamente eficaz de una molécula de anticuerpo es 200-500 mg, más preferiblemente 300-400 mg/kg. Las dosificaciones y regímenes terapéuticos de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 pueden determinarse por un artesano experto. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra por inyección (por ejemplo, subcutánea o intravenosa) a una dosis (por ejemplo, una dosis plana) de aproximadamente 200 mg a 500 mg, por ejemplo, aproximadamente 250 mg a 450 mg, aproximadamente 300 mg a 400 mg, aproximadamente 250 mg a 350 mg, aproximadamente 350 mg a 450 mg, o aproximadamente 300 mg o aproximadamente 400 mg. El programa de dosificación (por ejemplo, programa de dosificación plana) puede variar de, por ejemplo, una vez a la semana a una vez cada 2, 3, 4, 5 o 6 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg a 400 mg una vez cada tres o una vez cada cuatro semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg una vez cada tres semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg una vez cada cuatro semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada tres semanas. Aunque no se desea estar limitado por la teoría, en algunas realizaciones, la dosificación plana o fija puede ser beneficiosa para los pacientes, por ejemplo, para ahorrar suministro de fármacos y reducir los errores de farmacia.

En algunas realizaciones, el aclaramiento (CL) de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 es de aproximadamente 6 a 16 mL/h, por ejemplo, de aproximadamente 7 a 15 mL/h, de aproximadamente 8 a 14 mL/h, de aproximadamente 9 a 12 mL/h, o de aproximadamente 10 a 11 mL/h, por ejemplo, de aproximadamente 8.9 mL/h, 10.9 mL/h, o 13.2 mL/h.

En algunas realizaciones, el exponente de peso sobre CL de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 es de aproximadamente 0.4 a 0.7, aproximadamente 0.5 a 0.6, o 0.7 o menos, por ejemplo, 0.6 o menos, o aproximadamente 0,54.

En algunas realizaciones, el volumen de distribución en estado estacionario (Vss) de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 es de aproximadamente 5 a 10 V, por ejemplo, aproximadamente 6 a 9 V, aproximadamente 7 a 8 V, o aproximadamente 6.5 a 7.5 V, por ejemplo, aproximadamente 7.2 V.

En algunas realizaciones, la vida media de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 es de aproximadamente 10 a 30 días, por ejemplo, aproximadamente 15 a 25 días, aproximadamente 17 a 22 días, aproximadamente 19 a 24 días, o aproximadamente 18 a 22 días, por ejemplo, aproximadamente 20 días.

En algunas realizaciones, la Cmín (por ejemplo, para un paciente de 80 kg) de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 es de al menos aproximadamente 0.4 pg/mL, por ejemplo, al menos aproximadamente 3.6 pg/mL, por ejemplo, de aproximadamente 20 a 50 pg/mL, por ejemplo, de aproximadamente 22 a 42 pg/mL, de aproximadamente 26 a 47 pg/mL, de aproximadamente 22 a 26 pg/mL, de aproximadamente 42 a 47 pg/mL, de aproximadamente 25 a 35 pg/mL, de aproximadamente 32 a 38 pg/mL, por ejemplo, de aproximadamente 31 pg/mL o de aproximadamente 35 pg/mL. En una realización, la Cmín se determina en un paciente que recibe la molécula de anticuerpo anti-PD-1 a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas. En otra realización, la Cmín se determina en un paciente que recibe la molécula de anticuerpo anti-PD-1 a una dosis de aproximadamente 300 mg una vez cada tres semanas. En algunas realizaciones, en ciertas realizaciones, la Cmín es al menos unas 50 veces superior, por ejemplo, al menos unas 60 veces, 65 veces, 70 veces, 75 veces, 80 veces, 85 veces, 90 veces, 95 veces o 100 veces, por ejemplo, al menos unas 77 veces, superior a la EC50 de la molécula de anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, según se determina basándose en el cambio de IL-2 en un ensayoex-vivoSEB. En otras realizaciones, la Cmín es al menos 5 veces mayor, por ejemplo, al menos 6 veces, 7 veces, 8 veces, 9 veces o 10 veces, por ejemplo, al menos aproximadamente 8.6 veces, mayor que la EC90 de la molécula de anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, según se determina basándose en el cambio de IL-2 en un ensayo SEBex-vivo.

La molécula de anticuerpo puede administrarse por infusión intravenosa a una tasa de más de 20 mg/min, por ejemplo, 20-40 mg/min, y típicamente mayor o igual a 40 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 35 a 440 mg/m2, típicamente de aproximadamente 70 a 310 mg/m2, y más típicamente, de aproximadamente 110 a 130 mg/m2. En algunas realizaciones, la tasa de infusión de aproximadamente 110 a 130 mg/m2 alcanza un nivel de aproximadamente 3 mg/kg. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo puede administrarse por infusión intravenosa a una tasa inferior a 10 mg/min, por ejemplo, inferior o igual a 5 mg/min para alcanzar una dosis de aproximadamente 1 a 100 mg/m2, por ejemplo, aproximadamente 5 a 50 mg/m2, aproximadamente 7 a 25 mg/m2, o, aproximadamente 10 mg/m2. En algunas realizaciones, el anticuerpo se infunde durante un periodo de aproximadamente 30 minutos. Debe tenerse en cuenta que los valores de dosificación pueden variar con el tipo y la gravedad de la afección que se desea aliviar. Debe entenderse además que para cualquier sujeto particular, los regímenes de dosificación específicos deben ajustarse con el tiempo según la necesidad individual y el juicio profesional de la persona que administra o supervisa la administración de las composiciones, y que los rangos de dosificación establecidos aquí son sólo de ejemplo y no pretenden limitar el alcance o la práctica de la composición reivindicada.

Las composiciones farmacéuticas de la divulgación pueden incluir una "cantidad terapéuticamente eficaz" o una "cantidad profilácticamente eficaz" de un anticuerpo o porción de anticuerpo de la divulgación. Una "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a una cantidad eficaz, a las dosis y durante los periodos de tiempo necesarios, para lograr el resultado terapéutico deseado. Una cantidad terapéuticamente eficaz del anticuerpo o fragmento de anticuerpo modificado puede variar en función de factores como el estado de la enfermedad, la edad, el sexo y el peso del individuo, y la capacidad del anticuerpo o fragmento de anticuerpo para provocar una respuesta deseada en el individuo. Una cantidad terapéuticamente eficaz es también aquella en la que cualquier efecto tóxico o perjudicial del anticuerpo o fragmento de anticuerpo modificado se ve compensado por los efectos terapéuticamente beneficiosos. Una "dosis terapéuticamente eficaz" inhibe preferiblemente un parámetro medible, por ejemplo, la tasa de crecimiento tumoral en al menos un 20%, más preferiblemente en al menos un 40%, aún más preferiblemente en al menos un 60%, y aún más preferiblemente en al menos un 80% en relación con los sujetos no tratados. La capacidad de un compuesto para inhibir un parámetro medible, por ejemplo, el cáncer, puede evaluarse en un sistema modelo animal predictivo de la eficacia en tumores humanos. Alternativamente, esta propiedad de una composición puede evaluarse examinando la capacidad del compuesto para inhibir, dicha inhibición in vitro mediante ensayos conocidos por el profesional experto.

Una "cantidad profilácticamente eficaz" se refiere a una cantidad eficaz, en las dosificaciones y durante los periodos de tiempo necesarios, para lograr el resultado profiláctico deseado. Típicamente, dado que una dosis profiláctica se utiliza en sujetos antes o en una etapa más temprana de la enfermedad, la cantidad profilácticamente eficaz será menor que la cantidad terapéuticamente eficaz.

También está dentro del alcance de la divulgación un kit que comprende una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento. El kit puede incluir uno o más elementos que incluyen: instrucciones de uso; otros reactivos, por ejemplo, una etiqueta, un agente terapéutico, o un agente útil para quelar, o acoplar de otro modo, un anticuerpo a una etiqueta o agente terapéutico, o una composición radioprotectora; dispositivos u otros materiales para preparar el anticuerpo para su administración; portadores farmacéuticamente aceptables; y dispositivos u otros materiales para su administración a un sujeto.

Usos de las terapias combinadas

Las combinaciones, por ejemplo, las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 aquí divulgadas, tienen utilidades diagnósticasin vitro e in vivo,así como terapéuticas y profilácticas. Por ejemplo, estas moléculas pueden administrarse a células en cultivo,in vitrooex vivo,o a un sujeto, por ejemplo, un sujeto humano, para tratar, prevenir y/o diagnosticar una variedad de trastornos, tales como cánceres y trastornos infecciosos.

Por consiguiente, en un aspecto, la divulgación proporciona un método para modificar una respuesta inmunitaria en un sujeto que comprende la administración al sujeto de la combinación descrita en el presente documento, de forma que se modifica la respuesta inmunitaria en el sujeto. En una realización, la respuesta inmunitaria se mejora, estimula o sobrerregula.

Como se usa aquí, el término "sujeto" pretende incluir animales humanos y no humanos. En una realización, el sujeto es un sujeto humano, por ejemplo, un paciente humano que tiene un trastorno o afección caracterizada por el funcionamiento anormal de PD-1.El término "animales no humanos" incluye mamíferos y no mamíferos, como primates no humanos. En una realización, el sujeto es un ser humano. En una realización, el sujeto es un paciente humano que necesita mejorar su respuesta inmunitaria. En una realización, el sujeto está inmunocomprometido, por ejemplo, el sujeto está recibiendo o ha recibido quimioterapia o radioterapia. Alternativamente, o en combinación, el sujeto está, o corre el riesgo de estar, inmunocomprometido como resultado de una infección. Los métodos y composiciones descritos en el presente documento son adecuados para el tratamiento de pacientes humanos que padecen un trastorno que puede tratarse aumentando la respuesta inmunitaria mediada por células T. Por ejemplo, los métodos y composiciones aquí descritos pueden aumentar una serie de actividades inmunitarias. En una realización, el sujeto ha aumentado el número o la actividad de los linfocitos T infiltrantes de tumores (TIL). En otra realización, el sujeto tiene una mayor expresión o actividad de interferón gamma (IFN-y). En aún otra realización, el sujeto presenta una disminución de la expresión o actividad de PD-L1.

Usos terapéuticos

El bloqueo de PD-1 puede potenciar una respuesta inmunitaria frente a células cancerosas en un sujeto. El ligando de PD-1, PD-L1, no se expresa en células humanas normales, pero es abundante en una variedad de cánceres humanos (Dong et al. (2002) NatMed 8:787-9). La interacción entre PD-1 y PD-L1 puede provocar una disminución de los linfocitos infiltrantes en el tumor, una disminución de la proliferación mediada por receptores de células T y/o una evasión inmunitaria por parte de las células cancerosas (Dong et al. (2003) J Mol Med 81:281-7; Blank et al. (2005) Cancer Immunol. Immunother. 54:307-314; Konishi et al. (2004) Clin. Cancer Res. 10:5094-100). La inmunosupresión puede revertirse inhibiendo la interacción local de PD-1 con PD-L1; el efecto es aditivo cuando también se bloquea la interacción de PD-1 con PD-L2 (Iwai et al. (2002) PNAS 99: 12293-7; Brown et al. (2003) J. Immunol. 170: 1257-66). Así pues, la inhibición de PD-1 puede aumentar la respuesta inmunitaria.

En un aspecto, la divulgación se refiere al tratamiento de un sujetoin vivoutilizando una molécula de anticuerpo anti-PD-1 de tal manera que se inhibe o reduce el crecimiento de tumores cancerosos. Un anticuerpo anti-PD-1 puede usarse solo para inhibir el crecimiento de tumores cancerosos. Alternativamente, un anticuerpo anti-PD-1 puede usarse en combinación con uno o más de los siguientes: un tratamiento estándar (por ejemplo, para cánceres o trastornos infecciosos), otro anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo, un inmunomodulador (por ejemplo, un activador de una molécula coestimuladora o un inhibidor de una molécula inhibidora); una vacuna, por ejemplo, una vacuna terapéutica contra el cáncer; u otras formas de inmunoterapia celular, como se describe a continuación.

Por consiguiente, en una realización, la divulgación proporciona un método para inhibir el crecimiento de células tumorales en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento.

En una realización, los métodos son adecuados para el tratamiento del cáncerin vivo.Para lograr una mejora de la inmunidad específica de antígeno, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede administrarse junto con un antígeno de interés. Cuando los anticuerpos contra PD-1 se administran en combinación con uno o más agentes, la combinación puede administrarse en cualquier orden o simultáneamente.

En otro aspecto, se proporciona un método para tratar a un sujeto, por ejemplo, reduciendo o mejorando una afección o trastorno hiperproliferativo (por ejemplo, un cáncer), por ejemplo, un tumor sólido, un cáncer hematológico, un tumor de tejido blando o una lesión metastásica. El método incluye administrar al sujeto una o más de las combinaciones aquí divulgadas.

Tal como se utiliza aquí, el término "cáncer" incluye todos los tipos de crecimientos cancerosos o procesos oncogénicos, tejidos metastásicos o células, tejidos u órganos malignamente transformados, independientemente del tipo histopatológico o estadio de invasividad. Los ejemplos de trastornos cancerosos incluyen, pero no se limitan a, tumores sólidos, cánceres hematológicos, tumores de tejidos blandos y lesiones metastásicas. Los ejemplos de tumores sólidos incluyen neoplasias malignas, por ejemplo, sarcomas, y carcinomas (incluidos adenocarcinomas y carcinomas de células escamosas), de los diversos sistemas orgánicos, como los que afectan al hígado, pulmón, mama, linfoides, gastrointestinales (por ejemplo, colon), tracto genitourinario (por ejemplo, renal, células uroteliales), próstata y faringe. Los adenocarcinomas incluyen neoplasias malignas como la mayoría de los cánceres de colon, cáncer rectal, carcinoma de células renales, cáncer de hígado, carcinoma de células no pequeñas de pulmón, cáncer de intestino delgado y cáncer de esófago. Los carcinomas de células escamosas incluyen tumores malignos, por ejemplo, en el pulmón, el esófago, la piel, la región de la cabeza y el cuello, la cavidad oral, el ano y el cuello uterino. En una realización, el cáncer es un melanoma, por ejemplo, un melanoma en estadio avanzado. Las lesiones metastásicas de los cánceres mencionados también pueden tratarse o prevenirse utilizando los métodos y composiciones de la divulgación.

Cánceres de ejemplo cuyo crecimiento puede inhibirse usando las moléculas de anticuerpos aquí divulgadas incluyen cánceres típicamente sensibles a la inmunoterapia. Ejemplos no limitantes de cánceres preferidos para el tratamiento incluyen melanoma (por ejemplo, melanoma maligno metastásico), cáncer renal (por ejemplo, carcinoma de células claras), cáncer de próstata (por ejemplo, adenocarcinoma de próstata refractario a hormonas), cáncer de mama, cáncer de colon y cáncer de pulmón (por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas). Además, las neoplasias refractarias o recurrentes pueden tratarse con las moléculas de anticuerpos descritas en el presente documento.

Ejemplos de otros cánceres que pueden tratarse incluyen cáncer de hueso, cáncer de páncreas, cáncer de piel, cáncer de cabeza o cuello, melanoma maligno cutáneo o intraocular, cáncer uterino, cáncer de ovario, cáncer rectal, cáncer anal, gastroesofágico, cáncer de estómago, liposarcoma, cáncer testicular, cáncer uterino, carcinoma de las trompas de falopio, carcinoma de endometrio, carcinoma de cuello uterino, carcinoma de vagina, carcinoma de vulva, cáncer de células de Merkel, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cáncer de esófago, cáncer de intestino delgado, cáncer del sistema endocrino, cáncer de glándula tiroides, cáncer de glándula paratiroides, cáncer de glándula suprarrenal, sarcoma de partes blandas, cáncer de uretra, cáncer de pene, leucemias crónicas o agudas, incluida la leucemia mieloide aguda, la leucemia mieloide crónica, la leucemia linfoblástica aguda, la leucemia linfocítica crónica, los tumores sólidos de la infancia, el linfoma linfocítico, el cáncer de vejiga, el mieloma múltiple, los síndromes mielodisplásicos, cáncer de riñón o uréter, carcinoma de la pelvis renal, neoplasia del sistema nervioso central (CNS), linfoma primario del CNS, tumor angiogénico, tumor del eje espinal, glioma del tronco encefálico, adenoma hipofisario, sarcoma de Kaposi, cáncer epidermoide, cáncer de células escamosas, linfoma de células T, cánceres inducidos por el medio ambiente, incluidos los inducidos por el amianto (por ejemplo, mesotelioma), y combinaciones de dichos cánceres. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de piel, por ejemplo, un carcinoma de células de Merkel o un melanoma. En una realización, el cáncer es un carcinoma de células de Merkel. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de mama, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC) o un cáncer de mama HER2 negativo. En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de riñón, por ejemplo, un carcinoma de células renales (por ejemplo, un carcinoma de células renales claras (CCRCC) o un carcinoma de células renales no claras (nccRCC)). En otras realizaciones, el cáncer es un cáncer de tiroides, por ejemplo, un carcinoma anaplásico de tiroides (ATC). En otras realizaciones, el cáncer es un tumor neuroendocrino (NET), por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico o un NET en páncreas, tracto gastrointestinal (GI) o pulmón. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC escamoso o un NSCLc no escamoso). En ciertas realizaciones, el cáncer es una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide aguda (AML), por ejemplo, una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo).En ciertas realizaciones, el cáncer es un síndrome mielodisplásico (MDS) (por ejemplo, un MDS de alto riesgo).

En algunas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer de pulmón, un cáncer de pulmón de células escamosas, un melanoma, un cáncer renal, un cáncer de hígado, un mieloma, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer de mama ER+, un cáncer de mama IM-TN, un cáncer colorrectal, un cáncer colorrectal con alta inestabilidad de microsatélites, un cáncer gástrico EBV+, un cáncer de páncreas, un cáncer de tiroides, un cáncer hematológico, un linfoma no Hogdkin o una leucemia, o una lesión metastásica del cáncer. En algunas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), un adenocarcinoma de NSCLC, un carcinoma de células escamosas de NSCLC, un carcinoma hepatocelular.

El tratamiento de cánceres metastásicos, por ejemplo, cánceres metastásicos que expresan PD-L1 (Iwai et al. (2005) Int. Immunol. 17: 133-144) puede efectuarse utilizando las moléculas de anticuerpo descritas en el presente documento. En una realización, el cáncer expresa un nivel elevado de PD-L1, IFNy y/o CD8.

Sin querer estar limitado por la teoría, en algunas realizaciones, es más probable que un paciente responda al tratamiento con un inmunomodulador (opcionalmente en combinación con uno o más agentes como se describe en el presente documento) si el paciente tiene un cáncer que expresa PD-L1 en alto grado, y/o el cáncer está infiltrado por células inmunitarias antitumorales, por ejemplo, TIL. Las células inmunitarias antitumorales pueden ser positivas para CD8, PD-L1 y/o IFN-y; por lo tanto, los niveles de CD8, PD-L1 y/o IFN-y pueden servir como indicador de los niveles de TIL en el microambiente. En ciertas realizaciones, el microambiente del cáncer se denomina triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y.

Por consiguiente, en ciertos aspectos, la presente solicitud proporciona métodos para determinar si una muestra tumoral es positiva para uno o más de PD-L1, CD8 e IFN-<y>, y si la muestra tumoral es positiva para uno o más, por ejemplo, dos, o los tres, de los marcadores, entonces administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una molécula de anticuerpo anti-PD-1, opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores o agentes anticancerígenos.

En las siguientes indicaciones, una gran fracción de pacientes son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-y: Cáncer de pulmón (escamoso); cáncer de pulmón (adenocarcinoma); cáncer de cabeza y cuello; cáncer de estómago; NSCLC; HNSCC; cánceres gástricos (por ejemplo, MSIhi y/o EBV+); CRC (por ejemplo, MSIhi); cáncer nasofaríngeo (NPC); cáncer cervical (por ejemplo, escamoso); cáncer de tiroides (por ejemplo, tiroides papilar, por ejemplo, carcinoma anaplásico de tiroides); cáncer de piel (por ejemplo, carcinoma de células de Merkel o melanoma); cáncer de mama (por ejemplo, cáncer de mama<t>N); y DLBCL (linfoma difuso de células B grandes). En el cáncer de mama en general y en el cáncer de colon en general, una fracción moderada de pacientes es triple positiva para PD-L1/CD8/IFN-Y. En las siguientes indicaciones, una pequeña fracción de pacientes es triple positiva para PD-L1/CD8/IFN-<y>: Cáncer de mama ER+ y cáncer de páncreas. Estos resultados se analizan con más detalle en el Ejemplo 4. Independientemente de si una fracción grande o pequeña de pacientes es triple positiva para estos marcadores, el cribado de los pacientes para estos marcadores permite identificar una fracción de pacientes que tiene una probabilidad especialmente alta de responder favorablemente a la terapia con un anticuerpo PD-1 (por ejemplo, un anticuerpo PD-1 bloqueante), opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 o una molécula de anticuerpo anti-PD-LI) y/o agentes anticancerosos, por ejemplo, los enumerados en la Tabla 7 y divulgados en las publicaciones enumeradas en la Tabla 7.

En algunas realizaciones, la muestra de cáncer se clasifica como triple positiva para PD-L1/CD8/IFN-Y. Esta medición puede dividirse aproximadamente en dos umbrales: si una célula individual se clasifica como positiva, y si la muestra en su conjunto se clasifica como positiva. En primer lugar, se puede medir, dentro de una célula individual, el nivel de PD-L1, CD8 y/o IFN-<y>. En algunas realizaciones, una célula que es positiva para uno o más de estos marcadores es una célula que tiene un nivel más alto del marcador en comparación con una célula de control o un valor de referencia. Por ejemplo, en algunas realizaciones, un nivel alto de PD-L1 en una célula dada es un nivel superior al nivel de PD-L1 en un tejido no canceroso correspondiente del paciente. Como otro ejemplo, en algunas realizaciones, un nivel alto de CD8 o IFN-y en una célula dada es un nivel de esa proteína observado típicamente en un TIL. En segundo lugar, también se puede medir el porcentaje de células en la muestra que son positivas para PD-L1, CD8, y/o IFN-y. (No es necesario que una sola célula exprese los tres marcadores.) En algunas realizaciones, una muestra triple positiva es aquella que tiene un alto porcentaje de células, por ejemplo, superior a un valor de referencia o superior a una muestra de control, que son positivas para estos marcadores.

En otras realizaciones, se pueden medir los niveles de PD-L1, CD8 y/o IFN-y en general en la muestra. En este caso, un nivel alto de CD8 o IFN-<y>en la muestra puede ser el nivel de esa proteína observado típicamente en un tumor infiltrado con TIL. Del mismo modo, un nivel alto de PD-L1 puede ser el nivel de esa proteína observado típicamente en una muestra tumoral, por ejemplo, un microambiente tumoral.

La identificación de subconjuntos de pacientes que son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y, como se muestra en el Ejemplo 4 del presente documento, revela ciertas subpoblaciones de pacientes que es probable que respondan a la terapia con anticuerpos contra PD-1. Por ejemplo, muchas pacientes con cáncer de mama IM-TN (inmunomodulador, triple negativo) son triple positivas para PD-L1/CD8/IFN-Y. El cáncer de mama IM-TN se describe, por ejemplo, en Brian D. Lehmann et al., "Identification of human triple-negative breast cancer subtypes and preclinical models for selection of targeted therapies", J Clin Invest. Jul 1, 2011; 121(7): 2750 2767. Los cánceres de mama triple negativos son aquellos que no expresan receptor de estrógeno (ER), receptor de progesterona (PR) y Her2/neu. Estos cánceres son difíciles de tratar porque normalmente no responden a los agentes dirigidos al ER, PR y Her2/neu. Los cánceres de mama triple negativos pueden subdividirse a su vez en diferentes clases, una de las cuales es la inmunomoduladora. Como se describe en Lehmannet al., elcáncer de mama IM-TN está enriquecido para factores implicados en procesos de células inmunitarias, por ejemplo, uno o más de los siguientes: señalización de células inmunitarias (por ejemplo, vía TH1/TH2, vía de células NK, vía de señalización de receptores de células B, vía de DC y señalización de receptores de células T), señalización de citoquinas (por ejemplo, la vía de las citoquinas, la vía de la IL-12 y la vía de la IL-7), el procesamiento y la presentación de antígenos, la señalización a través de las principales vías de transducción de señales inmunitarias (por ejemplo, la señalización NFKB, TNF y JAK/STAT), los genes implicados en la función de las células T, la transcripción inmunitaria, la respuesta al interferón (IFN) y el procesamiento de antígenos. Por consiguiente, en algunas realizaciones, el cáncer tratado es un cáncer que es, o se determina que es, positivo para uno o más marcadores de cáncer de mama IM-TN, por ejemplo, un factor que promueve uno o más de la señalización de células inmunitarias (por ejemplo, la vía TH1/TH2, la vía de células NK, la vía de señalización de receptores de células B, la vía DC y la señalización de receptores de células T), la señalización de citoquinas (por ejemplo, vía de las citoquinas, vía de la IL-12 y vía de la IL-7), procesamiento y presentación de antígenos, señalización a través de vías de transducción de señales inmunitarias básicas (por ejemplo, señalización NFKB, TNF y JAK/STAT), genes implicados en la función de las células T, transcripción inmunitaria, respuesta al interferón (IFN) y procesamiento de antígenos.

Como otro ejemplo, se muestra en el presente documento que un subconjunto de pacientes con cáncer de colon que tienen una alta MSI (inestabilidad de microsatélites) también es triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y. En consecuencia, en algunas realizaciones, un anticuerpo PD-1, por ejemplo, un anticuerpo PD-1 como se describe en el presente documento, (opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores tales como un anticuerpo LAG-3, un anticuerpo TIM-3, o un anticuerpo PD-L1, y uno o más agentes anticancerígenos, por ejemplo, un agente anticancerígeno descrito en la Tabla 7 o en una publicación de la Tabla 7) se administra a un paciente que tiene, o que se identifica que tiene, cáncer de colon con alta MSI, tratando así el cáncer. En algunas realizaciones, una célula con MSI alto es una célula que tiene MSI a un nivel más alto que un valor de referencia o una célula de control, por ejemplo, una célula no cancerosa del mismo tipo de tejido que el cáncer.

Como otro ejemplo, se muestra en el presente documento que un subconjunto de pacientes con cáncer gástrico que tienen alto MSI, y/o que es EBV+, también es triple positivo para PD-L1/CD8/IFN-Y. Por consiguiente, en algunas realizaciones, un anticuerpo PD-1, por ejemplo, un anticuerpo PD-1 como se describe en el presente documento, (opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores tales como un anticuerpo LAG-3, un anticuerpo TIM-3, o un anticuerpo PD-L1, y uno o más agentes anticancerosos, por ejemplo, un agente anticanceroso descrito en la Tabla 7 o en una publicación de la Tabla 7) se administra a un paciente que tiene, o que se identifica que tiene, cáncer gástrico con MSI alto y/o EBV+, tratando así el cáncer. En algunas realizaciones, una célula con MSI alto es una célula que tiene MSI a un nivel superior a un valor de referencia o una célula de control, por ejemplo, una célula no cancerosa del mismo tipo de tejido que el cáncer.

Además, en el presente documento se describen métodos para analizar un cáncer en busca de PD-L1, y luego tratar el cáncer con un anticuerpo PD-1. Como se describe en el Ejemplo 5 del presente documento, una muestra de cáncer puede analizarse para determinar los niveles de proteína PD-L1 o los niveles de ARNm. Una muestra que tiene niveles de PD-L1 (proteína o ARNm) superiores a un valor de referencia o una célula de control (por ejemplo, una célula no cancerosa) puede clasificarse como PD-L1 positiva. Por consiguiente, en algunas realizaciones, un anticuerpo PD-1, por ejemplo, un anticuerpo PD-1 como el descrito en el presente documento, (opcionalmente en combinación con uno o más agentes anticancerosos) se administra a un paciente que tiene, o que se identifica que tiene, un cáncer que es PD-L1 positivo. El cáncer puede ser, por ejemplo, un adenocarcinoma (ACA) de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), un carcinoma de células escamosas (SCC) de NSCLC o un carcinoma hepatocelular (HCC).

En algunas realizaciones, los métodos aquí descritos comprenden el uso de un anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, un anticuerpo anti-PD-1 como se describe aquí, por ejemplo, como monoterapia, para tratar un cáncer que es (o se identifica como) positivo para PD-L1. En algunas realizaciones, el cáncer es cáncer colorrectal (por ejemplo, MSI-alto), cáncer gástrico (por ejemplo, MSI-alto y/o EBV+), CNF, cáncer cervical, cáncer de mama (por ejemplo, cáncer de mama TN) y cáncer de ovario. En algunas realizaciones, el cáncer es NSCLC, melanoma o HNSCC. En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de, por ejemplo, 1, 3, 10 o 20 mg/kg. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de, por ejemplo, 200, 250, 300, 350, 400, 450 o 500 mg. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de 250 mg a 450 mg, por ejemplo, 250 mg, 300 mg, 350 mg, 400 mg o 450 mg.

Basándose, por ejemplo, en el Ejemplo 4 del presente documento, se descubrió que ciertos cánceres gástricos que son triple positivos para PD-L1/CD8/IFN-Y también son positivos para PIK3CA. Por consiguiente, en algunas realizaciones, un cáncer puede tratarse con una molécula de anticuerpo anti-PD-1 (opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1) y un agente que inhibe PIK3CA. Agentes de ejemplo de esta categoría se describen en Stein RC (septiembre de 2001). "Prospects for phosphoinositide 3-kinase inhibition as a cancer treatment". Endocrine-related Cancer 8 (3): 237-48 y Marone R, Cmiljanovic V, Giese B, Wymann MP (enero de 2008). "Targeting phosphoinositide 3-kinase: moving towards therapy". Biochimica et Biophysica Acta 1784 (1): 159-85.

Basándose en, por ejemplo,elEjemplo 4 del presente documento, el CRC, por ejemplo, un paciente que tiene (o se identifica que tiene) CRC con MSI alto puede tratarse con un anticuerpo PD-1, opcionalmente en combinación con una terapéutica que se dirige a uno o más de LAG-3, RNF43 y BRAF. Por ejemplo, estos cánceres pueden tratarse con un anticuerpo PD-1, opcionalmente en combinación con una o más terapias dirigidas a uno o más de LAG-3, PD-1, RNF43 y BRAF. En las realizaciones, la una o más terapéuticas incluyen un inmunomodulador tal como una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, y un agente anticanceroso descrito en la Tabla 7 o una publicación listada en la Tabla 7. Los inhibidores de LAG-3, por ejemplo, anticuerpos, se describen en el presente documento. RNF43 puede inhibirse, por ejemplo, con un anticuerpo, una molécula pequeña (por ejemplo, 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28)), ARNsi, o un ligando Rspo o derivado del mismo. En el presente documento se describen inhibidores de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib).

Basándose en, por ejemplo, el Ejemplo 4 del presente documento, un paciente que tiene (o se identifica que tiene) un cáncer de pulmón de células escamosas puede tratarse con una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con una terapéutica que se dirige a LAG-3, por ejemplo, una molécula de anticuerpo LAG-3, y opcionalmente con uno o más agentes anticancerosos, por ejemplo, un agente anticanceroso descrito en la Tabla 7 o en una publicación de la Tabla 7.

En algunas realizaciones, un sujeto que tiene (o se identifica que tiene) un cáncer de pulmón de células escamosas puede tratarse con un anticuerpo PD-1, opcionalmente en combinación con una terapia dirigida a TIM-3, por ejemplo, un anticuerpo TIM-3. Los inhibidores de TIM-3, por ejemplo anticuerpos, se describen en el presente documento.

Basándose en, por ejemplo, el Ejemplo 4 del presente documento, un paciente que tiene (o se identifica que tiene) un cáncer de tiroides (por ejemplo, carcinoma anaplásico de tiroides) puede tratarse con una molécula de anticuerpo PD-1, opcionalmente en combinación con una terapia dirigida contra BRAF, y opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3, y una molécula de anticuerpo anti-PD-L1. Los inhibidores de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib) se describen en el presente documento, por ejemplo, en la Tabla 7 y en las publicaciones enumeradas en la Tabla 7.

En algunas realizaciones, las terapias aquí descritas pueden usarse para tratar a un paciente que tiene (o se identifica que tiene) un cáncer asociado con una infección, por ejemplo, una infección viral o bacteriana. Los cánceres de ejemplo incluyen el cáncer cervical, el cáncer anal, el cáncer de células escamosas de cabeza y cuello asociado al HPV, los papilomas esofágicos asociados al HPV, los linfomas asociados al VHH6, los linfomas asociados al VEB (incluido el linfoma de Burkitt), el linfoma MALT gástrico, otros linfomas MALT asociados a infección, el HCC y el sarcoma de Kaposi.

En otras realizaciones, el cáncer es una neoplasia maligna hematológica o cáncer que incluye pero no se limita a una leucemia o un linfoma. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede usarse para tratar cánceres y neoplasias malignas que incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, leucemias agudas que incluyen pero no se limitan a, por ejemplo, Leucemia linfoide aguda de células B ("BALL"), leucemia linfoide aguda de células T ("TALL"), leucemia linfoide aguda (ALL); una o más leucemias crónicas, incluidas, entre otras,laleucemia mielógena crónica (CML), la leucemia linfocítica crónica (CLL); otros cánceres o enfermedades hematológicas, incluidas, entre otras, la leucemia prolinfocítica de células B, neoplasia de células dendríticas plasmocitoides blásticas, linfoma de Burkitt, linfoma difuso de células B grandes, linfoma folicular, leucemia de células pilosas, linfoma folicular de células pequeñas o grandes, afecciones linfoproliferativas malignas, linfoma MALT, linfoma de células del manto, linfoma de la zona marginal mieloma múltiple, mielodisplasia y síndrome mielodisplásico, linfoma no Hodgkin, linfoma plasmablástico, neoplasia de células dendríticas plasmocitoides, macroglobulinemia de Waldenstrom y "preleucemia", que son un conjunto diverso de afecciones hematológicas unidas por la producción ineficaz (o displasia) de células sanguíneas mieloides.

En una realización, el cáncer se elige entre un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (por ejemplo, un NSCLC con histología escamosa y/o no escamosa, o un adenocarcinoma de NSCLC)), un melanoma (por ejemplo, un melanoma avanzado), un cáncer renal (por ejemplo, un carcinoma de células renales, por ejemplo, un carcinoma de células renales claras), un cáncer de hígado, un mieloma (por ejemplo, un mieloma múltiple), un cáncer de próstata, un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama que no exprese uno, dos o todos los receptores de estrógenos, receptores de progesterona o Her2/neu, por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo), un cáncer colorrectal, un cáncer de páncreas, un cáncer de cabeza y cuello (por ejemplo, un carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (HNSCC), un cáncer anal, un cáncer gastroesofágico, un cáncer de tiroides (por ejemplo, carcinoma anaplásico de tiroides), cáncer cervical, una enfermedad linfoproliferativa (por ejemplo, una enfermedad linfoproliferativa postrasplante) o un cáncer hematológico, un linfoma de células T, un linfoma no Hogdkin o una leucemia (por ejemplo, una leucemia mieloide).

En otra realización, el cáncer se elige de entre un carcinoma (por ejemplo, carcinoma avanzado o metastásico), melanoma o un carcinoma pulmonar, por ejemplo, un carcinoma pulmonar de células no pequeñas.

En una realización, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas.

En aún otra realización, el cáncer es un cáncer renal, por ejemplo, un carcinoma de células renales (CRC) (por ejemplo, un RCC metastásico, un carcinoma de células renales no claras (nccRCC) o un carcinoma de células renales claras).

En una realización, el cáncer es un melanoma, por ejemplo, un melanoma avanzado. En una realización, el cáncer es un melanoma avanzado o irresecable que no responde a otras terapias. En otras realizaciones, el cáncer es un melanoma con una mutación BRAF (por ejemplo, una mutación BRAF V600). En algunas realizaciones, el cáncer (por ejemplo, melanoma) está presente en un sujeto que tiene un nivel elevado de LDH en suero, en comparación con un nivel de LDH en suero de referencia. En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra después del tratamiento con un anticuerpo anti-CTLA-4 (por ejemplo, ipilimumab) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra con un inhibidor de BRAF. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede administrarse a una dosis de entre 200 mg y 600 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas o una vez cada 8 semanas, por ejemplo, por vía intravenosa, y el inhibidor de BRAF o dabrafenib, puede administrarse a una dosis de entre 50 mg y 250 mg (por ejemplo, a una dosis de 150 mg) dos veces al día, por ejemplo, por vía oral. En una realización, la combinación incluye además un inhibidor de MEK o trametinib.

En una realización, el cáncer es un cáncer colorrectal (CRC). El cáncer colorrectal es el tercer cáncer más común en el mundo, con aproximadamente 1.4 millones de personas diagnosticadas en 2012, y la cuarta causa más común de muerte por cáncer, con 694,000 muertes (World Cancer Report 2014). Los resultados de los pacientes con CRC están relacionados con el infiltrado inmunitario en los tumores, lo que sugiere que el CRC puede beneficiarse de terapias que estimulen una respuesta inmunitaria (Fridman et al. 2011 Cancer Res. p.

5601-5). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, las terapias combinadas pueden ser más eficaces en el tratamiento del cáncer colorrectal, por ejemplo, fuera de la subpoblación deficiente en reparación de emparejamientos erróneos, cuando las monoterapias son menos eficaces (Kroemer et al. (2015) Oncolmmunology 4:7, e1058597-1-3). Por ejemplo, una combinación de un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) y un segundo agente terapéutico descrito en el presente documento, puede aumentar la tasa de respuesta y/o la durabilidad de la respuesta, en comparación con una monoterapia (por ejemplo, el inhibidor de PD-1 solo, o el segundo agente terapéutico solo).

En otra realización, el cáncer es un cáncer de pulmón, por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC). El cáncer de pulmón es el cáncer más común en el mundo, con aproximadamente 1.8 millones de nuevos casos en 2012, y la causa más común de muerte por cáncer, con 1.6 millones de muertes (World Cancer Report 2014). De estos casos, aproximadamente el 85% son cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC). Para tratar el NSCLC se utilizan inhibidores de la interacción PD-1/PD-L1. La tasa de respuesta a estos agentes en una población de pacientes no seleccionada es de aproximadamente el 20% tras el fracaso de la terapia de primera línea (Gettinger and Herbst (2014) Cancer J. p. 281-9; Brahmer et al. (2012) N. Engl. J. Med. p. 123-35; Topalian et al. (2012) N. Engl. J. Med. p. 2443-54; Herbst et al. (2014) Nature p.

563-7; Borghaei et al. (2015) N. Engl. J. Med. p. 1627-39). En algunas realizaciones, la selección para la expresión de PD-L1 en tumores puede enriquecer la respuesta a inhibidores de PD-1/PD-L1. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, las terapias de combinación pueden ser más eficaces en el tratamiento del cáncer de pulmón (por ejemplo, NSCLC), en comparación con las monoterapias. Por ejemplo, una combinación de un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) y un segundo agente terapéutico descrito en el presente documento, puede aumentar la tasa de respuesta y/o la durabilidad de la respuesta (por ejemplo, para ampliar la actividad, profundizar las respuestas, y/o conducir a respuestas más duraderas), en comparación con una monoterapia (por ejemplo, el inhibidor de PD-1 solo, o el segundo agente terapéutico solo).

El cáncer de mama es el segundo cáncer más frecuente en el mundo, con aproximadamente 1.7 millones de nuevos casos en 2012, y la quinta causa de muerte por cáncer, con aproximadamente 521,000 fallecimientos (Informe Mundial sobre el Cáncer). De estos casos, aproximadamente el 15% son triple negativos, que no expresan el receptor de estrógeno (ER), el receptor de progesterona (PR) o HER2. Como tales, estas pacientes no suelen beneficiarse de las terapias dirigidas disponibles para pacientes con otros subtipos de cáncer de mama. El cáncer de mama triple negativo (TNBC) es una enfermedad agresiva y los resultados tras la terapia son malos (Foulkes et al. (2010) N. Engl. J. Med. p. 1938-48). Datos recientes sugieren que los inhibidores de PD-1 son activos en algunas pacientes, con respuestas notificadas en cinco de 27 pacientes tratadas con pembrolizumab con TNBC metastásico en el estudio Keynote-012 (Buisseret et al. (2015) Annals of Oncology 26(suppl_3): p. 6-9). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, las terapias de combinación pueden ser más eficaces en el tratamiento del cáncer de mama (por ejemplo, TNBC), en comparación con las monoterapias. Por ejemplo, una combinación de un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) y un segundo agente terapéutico descrito en el presente documento, puede aumentar la tasa de respuesta y/o la durabilidad de la respuesta (por ejemplo, aumentar la proporción de pacientes que responden al tratamiento), en comparación con una monoterapia (por ejemplo, el inhibidor de PD-1 solo, o el segundo agente terapéutico solo).

Terapias de combinación

En la publicación de solicitud de patente U.S. No. 2015/0210769 (USSN 14/604,415), titulada "Moléculas de anticuerpos contra PD-1 y usos de las mismas", se describen combinaciones y usos de ejemplo no limitativos de las moléculas de anticuerpos contra PD-1.

En ciertas realizaciones, la combinación incluye una molécula de anticuerpo anti-PD-1 en combinación con un modulador de una molécula coestimuladora o una molécula inhibidora, por ejemplo, un ligando o receptor co inhibidor.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un modulador, por ejemplo, agonista, de una molécula costimuladora. En una realización, el agonista de la molécula costimuladora se elige entre un agonista (por ejemplo, un anticuerpo agonista o fragmento de unión a antígeno del mismo, o fusión soluble) de OX40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 o ligando de CD83.

En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se utiliza en combinación con una molécula costimuladora, por ejemplo, un agonista asociado con una señal positiva que incluye un dominio costimulador de CD28, CD27, ICOS y GITR.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un inhibidor de una molécula inhibidora de una molécula de punto de control inmunitario. Los expertos en la materia entenderán que el término "puntos de control inmunitarios" se refiere a un grupo de moléculas en la superficie celular de las células T CD4 y CD8. Estas moléculas pueden servir eficazmente como "frenos" para submodular o inhibir una respuesta inmunitaria antitumoral. Las moléculas de punto de control inmunitario incluyen, pero no se limitan a, la muerte programada 1 (PD-1), el antígeno linfocitario T citotóxico 4 (CTLA-4), B7H1, B7H4, OX-40, CD137, CD40, lAG-3 y TIM-3, que inhiben directamente las células inmunitarias. Los agentes inmunoterapéuticos que pueden actuar como inhibidores del punto de control inmunitario útiles en los métodos de la presente divulgación incluyen, pero no se limitan a, inhibidores de PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4, CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5), y/o TGF beta.

En una realización, el inhibidor es un ligando soluble (por ejemplo, un CTLA-4-Ig o un TIM-3-Ig), o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une a PD-L1, PD-L2 o Ct l A-4. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede administrarse en combinación con un anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, ipilimumab, por ejemplo, para tratar un cáncer (por ejemplo, un cáncer elegido entre: un melanoma, por ejemplo, un melanoma metastásico; un cáncer de pulmón, por ejemplo, un carcinoma pulmonar de células no pequeñas; o un cáncer de próstata). Los anticuerpos anti-CTLA-4 de ejemplo incluyen Tremelimumab (anticuerpo monoclonal IgG2 disponible en Pfizer, anteriormente conocido como ticilimumab, CP-675,206); e Ipilimumab (anticuerpo CTLA-4, también conocido como MDX-010, CAS No. 477202-00-9). En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra después del tratamiento, por ejemplo, después del tratamiento de un melanoma, con un anticuerpo anti-CTLA-4 (por ejemplo, ipilimumab) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib 0 dabrafenib). Las dosis de ejemplo que pueden usarse incluyen una dosis de molécula de anticuerpo anti-PD-1 de aproximadamente 1 a 10 mg/kg, por ejemplo, 3 mg/kg, o 200 a 500 mg, por ejemplo, 300 mg o 400 mg), y una dosis de un anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, ipilimumab, de aproximadamente 3 mg/kg.

Las moléculas inhibidoras inmunitarias, por ejemplo, PD-1 y LAG-3, pueden regular, por ejemplo, sinérgicamente, la función de las células T para promover el escape inmunitario tumoral. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un anticuerpo anti-LAG-3 o un fragmento de unión a antígeno del mismo. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un anticuerpo anti-TIM-3 o un fragmento de unión a antígeno del mismo. En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un anticuerpo anti-LAG-3 y un anticuerpo anti-TIM-3, o fragmentos de unión a antígeno de los mismos. La combinación de anticuerpos aquí mencionada puede administrarse por separado, por ejemplo, como anticuerpos separados, o unidos, por ejemplo, como una molécula de anticuerpo biespecífica o triespecífica. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM (por ejemplo, inhibidor de CEACAM-1, CEACAM-3 y/o CEACAM-5), por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-1. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un inhibidor de CEACAM-5, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti- CEACAM-5. En una realización, se administra un anticuerpo biespecífico que incluye una molécula de anticuerpo anti-PD-1 y un anticuerpo anti-TIM-3 o anti-LAG-3, o un fragmento de unión a antígeno del mismo. En ciertas realizaciones, la combinación de anticuerpos aquí mencionada se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como el descrito en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido). La eficacia de las combinaciones mencionadas puede probarse en modelos animales conocidos en la técnica. Por ejemplo, los modelos animales para probar el efecto sinérgico de anti-PD-1 y anti-LAG-3 se describen, por ejemplo, en Woo et al. (2012) Cancer Res. 72(4):917-27).

En una realización, el inhibidor de CEACAM (por ejemplo, CEACAM-1 y/o CEACAM-5) es una molécula de anticuerpo anti-CEACAM. Sin querer estar limitado por la teoría, CEACAM-1 se ha descrito como un ligando y socio de TIM-3 (véase, por ejemplo, WO 2014/022332). Se ha detectado un efecto sinérgico in vivo de la combinación de anticuerpos anti-TIM-3 y anti-CEACAM-1 en modelos de xenoinjerto de cáncer (véase, por ejemplo, WO 2014/022332). Se cree que los tumores utilizan CEACAM-1 o CEACAM-5 para inhibir el sistema inmunitario, como se describe, por ejemplo,enMarkel et al. J Immunol. 2002 Mar 15;168(6):2803-10; Markel et al. J Immunol. 2006 Nov 1;177(9):6062-71; Markel et al. Immunology. 2009 Feb;126(2):186-200; Markel et al. Cancer Immunol Immunother. 2010 Feb;59(2):215-30; Ortenberg et al. Mol Cancer Ther. 2012 Jun;11(6):1300-10; Stem et al. J Immunol. 2005 Jun 1;174(11):6692-701; Zheng et al. PLoSOne. 2010 Sep 2;5(9). pii: e12529. Así, los inhibidores de CEACAM pueden usarse con los otros inmunomoduladores descritos en el presente documento (por ejemplo, inhibidores anti-PD-1 o anti-TIM-3) para potenciar una respuesta inmunitaria contra un cáncer, por ejemplo, melanoma, cáncer de pulmón (por ejemplo, NSCLC), cáncer de vejiga, colon u ovario, u otros cánceres según se describe en el presente documento. En una realización, el inhibidor de CEACAM es un anticuerpo anti-CEACAM-1 como se describe en WO 2010/125571, WO 2013/82366 y WO 2014/022332, por ejemplo, un anticuerpo monoclonal 34B1, 26H7 y 5F4 o una forma recombinante del mismo, como se describe, por ejemplo, en US 2004/0047858, US 7,132,255 y WO 99/52552. En otras realizaciones, el anticuerpo anti-CEACAM es una molécula de anticuerpo anti-CEACAM-1 y/o anti-CEACAM-5 como se describe, por ejemplo,enWO 2010/125571, WO 2013/054331 y US 2014/0271618.

En algunas realizaciones, las moléculas inhibidoras inmunitarias PD-1 y LAG-3 (por ejemplo, moléculas de anticuerpo) se administran en combinación entre sí, por ejemplo, para tratar el cáncer. En algunas realizaciones, el paciente es un paciente que progresó (por ejemplo, experimentó crecimiento tumoral) durante la terapia con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo como se describe en el presente documento) y/o un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, molécula de anticuerpo). En algunas realizaciones, se continúa la terapia con la molécula de anticuerpo de PD-1 y/o la molécula de anticuerpo de PD-L1, y se añade a la terapia una molécula inmunoinhibidora de LAG-3 (por ejemplo, un anticuerpo).

En algunas realizaciones, las moléculas inhibidoras inmunitarias PD-1 y TIM-3 (por ejemplo, moléculas de anticuerpo) se administran en combinación entre sí, por ejemplo, para tratar el cáncer. En algunas realizaciones, el paciente es un paciente que progresó (por ejemplo, experimentó crecimiento tumoral) durante la terapia con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo como se describe en el presente documento) y/o un inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, molécula de anticuerpo). En algunas realizaciones, se continúa la terapia con la molécula de anticuerpo PD-1 y/o la molécula de anticuerpo PD-L1, y se añade a la terapia una molécula inmunoinhibidora TIM-3 (por ejemplo, un anticuerpo).

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con una citoquina, por ejemplo, interleucina-21, interleucina-2, interleucina-12 o interleucina-15. En ciertas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-PD-1 y citoquina descrita en el presente documento se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como el descrito en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido o melanoma).

Los inmunomoduladores de ejemplo que pueden usarse en combinación con moléculas de anticuerpos anti-PD-1 incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, afutuzumab (disponible en Roche®); pegfilgrastim (Neulasta®); lenalidomida (CC-5013, Revlimid®); talidomida (Thalomid®), actimid (CC4047); y citoquinas, por ejemplo, IL-21 o IRX-2 (mezcla de citoquinas humanas que incluye interleucina 1, interleucina 2 e interferón<y>, CAS 951209 71-5, disponible en IRX Therapeutics).

En aún otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se usa en combinación con un inhibidor de indoleamina-pirrol 2,3-dioxigenasa (IDO) (por ejemplo, INCB24360) en un sujeto con cáncer avanzado o metastásico (por ejemplo, un paciente con cáncer NSCL metastásico y recurrente).

En otras realizaciones, las combinaciones aquí divulgadas, por ejemplo, la combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1, se administran a un sujeto junto con (por ejemplo, antes, simultáneamente o después de) uno o más de: trasplante de médula ósea, terapia ablativa de células T con agentes quimioterapéuticos como fludarabina, radioterapia de haz externo (<x>R<t>), ciclofosfamida y/o anticuerpos como OKT3 o<c>A<m>PATH. En una realización, las combinaciones, por ejemplo, las combinaciones que comprenden una molécula de anticuerpo anti-PD-1, se administran después de una terapia ablativa de células B, como agentes que reaccionan con CD20, por ejemplo, Rituxan. Por ejemplo, en una realización, los sujetos pueden someterse a un tratamiento estándar con altas dosis de quimioterapia seguido de un trasplante de células madre de sangre periférica. En ciertas realizaciones, tras el trasplante, los sujetos reciben las combinaciones. En otra realización, las combinaciones se administran antes o después de la cirugía.

Otro ejemplo de combinación es un anticuerpo anti-PD-1 en combinación con decarbazina para el tratamiento del melanoma. Otras terapias combinadas que pueden producir sinergia con el bloqueo de PD-1 a través de la muerte celular son la radiación, la cirugía y la privación hormonal. Cada uno de estos protocolos crea una fuente de antígeno tumoral en el huésped. Los inhibidores de la angiogénesis también pueden combinarse con el bloqueo de PD-1. La inhibición de la angiogénesis provoca la muerte de las células tumorales, lo que puede introducir el antígeno tumoral en las vías de presentación de antígenos del huésped.

Las combinaciones que incluyen anticuerpos bloqueadores de PD-1 también pueden usarse en combinación con anticuerpos biespecíficos. Los anticuerpos biespecíficos pueden usarse para dirigirse a dos antígenos separados. Por ejemplo, se han utilizado anticuerpos biespecíficos anti-receptor Fc/antígeno antitumoral (por ejemplo, Her-2/neu) para dirigir macrófagos a zonas tumorales. Esta orientación puede activar más eficazmente las respuestas específicas del tumor. La rama de células T de estas respuestas aumentaría con el uso del bloqueo PD-1. Alternativamente, el antígeno puede administrarse directamente a las DC mediante el uso de anticuerpos biespecíficos que se unen al antígeno tumoral y a un marcador de superficie celular específico de las células dendríticas.

Los tumores evaden la vigilancia inmunitaria del huésped mediante una gran variedad de mecanismos. Muchos de estos mecanismos pueden superarse mediante la inactivación de proteínas expresadas por los tumores y que son inmunosupresoras. Entre ellas se incluye el TGF-beta (Kehrl, J. et al. (1986) J. Exp. Med. 163: 1037 1050), IL-10 (Howard, M. & O'Garra, A. (1992) Immunology Today 13: 198-200), y ligando Fas (Hahne, M. et al. (1996) Science 274: 1363-1365). Las composiciones aquí divulgadas que incluyen anticuerpos anti-PD-1 pueden contrarrestar los efectos del agente inmunosupresor y favorecer las respuestas inmunitarias tumorales por parte del huésped.

Otros anticuerpos que pueden usarse para activar la capacidad de respuesta inmunitaria del huésped pueden usarse en las combinaciones aquí descritas además en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe aquí. Estos incluyen moléculas en la superficie de células dendríticas que activan la función de DC y la presentación de antígenos. Los anticuerpos anti-CD40 son capaces de sustituir eficazmente la actividad de las células T ayudantes (Ridge, J. et al. (1998) Nature 393: 474-478) y pueden usarse junto con anticuerpos PD-1 (Ito, N. et al. (2000) Immunobiology 201 (5) 527-40). Anticuerpos contra moléculas costimuladoras de células T como CTLA-4 (por ejemplo, Patente U.S. No. 5,811,097), OX-40 (Weinberg, A. et al. (2000) Immunol 164: 2160-2169), 4-1BB (Melero, I. et al. (1997) Nature Medicine 3: 682-685 (1997), e ICOS (Hutloff, A. et al. (1999) Nature 397: 262-266) también pueden contribuir a aumentar los niveles de activación de las células T.

En la sección titulada "Terapias de combinación" de la publicación de solicitud de patente U.S. No.

2015/0210769 (USSN 14/604,415), titulada "Moléculas de anticuerpos contra PD-1 y usos de las mismas", se describen otros tratamientos estándar de ejemplo.

En todos los métodos aquí descritos, el bloqueo de PD-1 puede combinarse con otras formas de inmunoterapia, como el tratamiento con citoquinas (por ejemplo, interferones, GM-CSF, G-CSF, IL-2, IL-21), o la terapia con anticuerpos biespecíficos, que proporciona una presentación mejorada de los antígenos tumorales (véase, por ejemplo, Holliger (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448; Poljak (1994) Structure 2: 1121-1123).

Los métodos de administración de las moléculas de anticuerpos son conocidos en la técnica y se describen a continuación. Las dosis adecuadas de las moléculas utilizadas dependerán de la edad y el peso del sujeto y del fármaco concreto utilizado. Las dosis y regímenes terapéuticos de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 pueden ser determinados por un artesano experto. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra por inyección (por ejemplo, subcutánea o intravenosa) a una dosis de aproximadamente 1 a 30 mg/kg, por ejemplo, aproximadamente 5 a 25 mg/kg, aproximadamente 10 a 20 mg/kg, aproximadamente 1 a 5 mg/kg, o aproximadamente 3 mg/kg. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 1 mg/kg, aproximadamente 3 mg/kg, aproximadamente 5 mg/kg, aproximadamente 10 mg/kg, aproximadamente 20 mg/kg, aproximadamente 30 mg/kg o aproximadamente 40 mg/kg. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 1-3 mg/kg, o de aproximadamente 3-10 mg/kg. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 0.5-2, 2-4, 2-5, 5-15 o 5-20 mg/kg. El programa de dosificación puede variar, por ejemplo, de una vez a la semana a una vez cada 2, 3 o 4 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 10 a 20 mg/kg cada dos semanas. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 1 mg/kg una vez cada dos semanas, aproximadamente 3 mg/kg una vez cada dos semanas, 10 mg/kg una vez cada dos semanas, 3 mg/kg una vez cada cuatro semanas o 5 mg/kg una vez cada cuatro semanas.

En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra por inyección (por ejemplo, subcutánea o intravenosa) a una dosis (por ejemplo, una dosis plana) de aproximadamente 200 mg a 500 mg, por ejemplo, aproximadamente 250 mg a 450 mg, aproximadamente 300 mg a 400 mg, aproximadamente 250 mg a 350 mg, aproximadamente 350 mg a 450 mg, o aproximadamente 300 mg o aproximadamente 400 mg. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 200 mg, 250 mg, 300 mg, 350 mg, 400 mg, 450 mg o 500 mg. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 250-450 mg, o aproximadamente 300 400 mg. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 200-300 mg, 250-350 mg, 300-400 mg, 350-450 mg o 400-500 mg. El programa de dosificación puede variar, por ejemplo, de una vez a la semana a una vez cada 2, 3, 4, 5 o 6 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg a 400 mg una vez cada tres o una vez cada cuatro semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg una vez cada tres semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg una vez cada cuatro semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada tres semanas.

Las moléculas de anticuerpo pueden utilizarse en formas no conjugadas o conjugadas con un segundo agente, por ejemplo, un fármaco citotóxico, un radioisótopo o una proteína, por ejemplo, una toxina proteica o una proteína viral. Este método incluye: administrar la molécula de anticuerpo, sola o conjugada con un fármaco citotóxico, a un sujeto que requiera dicho tratamiento. Las moléculas de anticuerpo pueden utilizarse para administrar una variedad de agentes terapéuticos, por ejemplo, una fracción citotóxica, por ejemplo, un fármaco terapéutico, un radioisótopo, moléculas de origen vegetal, fúngico o bacteriano, o proteínas biológicas (por ejemplo, toxinas proteicas) o partículas (por ejemplo, partículas víricas recombinantes, por ejemplo, a través de una proteína de cubierta vírica), o mezclas de las mismas.

Terapias de combinación adicionales

Las combinaciones aquí divulgadas, por ejemplo, la combinación que comprende agentes bloqueadores de PD-1, también pueden combinarse con un tratamiento estándar contra el cáncer, por ejemplo, regímenes quimioterapéuticos. En estos casos, puede ser posible reducir la dosis de reactivo quimioterapéutico administrado (Mokyr, M. et al. (1998) Cancer Research 58: 5301-5304). En ciertas realizaciones, los métodos y composiciones aquí descritos se administran en combinación con una o más de otras moléculas de anticuerpos, quimioterapia, otra terapia anticancerosa (por ejemplo, terapias anticancerosas dirigidas, o fármacos oncolíticos), agentes citotóxicos, terapias basadas en el sistema inmunitario (por ejemplo, citoquinas), procedimientos quirúrgicos y/o de radiación. Entre los agentes citotóxicos de ejemplo que pueden administrarse en combinación se incluyen agentes antimicrotúbulos, inhibidores de la topoisomerasa, antimetabolitos, inhibidores mitóticos, agentes alquilantes, antraciclinas, alcaloides de la vinca, agentes intercalantes, agentes capaces de interferir en una vía de transducción de señales, agentes que promueven la apoptosis, inhibidores del proteosoma y radiación (por ejemplo, irradiación local o de todo el cuerpo).

Alternativamente, o en combinación con las combinaciones antes mencionadas, los métodos y composiciones aquí descritos pueden administrarse en combinación con uno o más de los siguientes: un inmunomodulador (por ejemplo, un activador de una molécula coestimuladora o un inhibidor de una molécula inhibidora); una vacuna, por ejemplo, una vacuna terapéutica contra el cáncer; u otras formas de inmunoterapia celular.

Combinaciones de ejemplo, por ejemplo, combinaciones que comprenden moléculas de anticuerpos anti-PD-1 y tratamientos estándar para el cáncer, se divulgan en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No.

2015/0210769 (USSN 14/604,415), titulada "Moléculas de Anticuerpos contra PD-1 y usos de las mismas,", que incluye, pero no se limita a, agentes alquilantes, antraciclinas, alcaloides de vinca, inhibidores del proteosoma e inhibidores de tirosina quinasa (por ejemplo, un inhibidor del receptor tirosina quinasa (RTK)).

Los inhibidores de tirosina quinasa de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, un inhibidor de la vía del factor de crecimiento epidérmico (EGF) (por ejemplo, un inhibidor del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR)), un inhibidor de la vía del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) (por ejemplo, un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR) (por ejemplo, un inhibidor de VEGFR-1, un inhibidor de VEGFR-2, un inhibidor de VEGFR-3)), un inhibidor de la vía del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) (por ejemplo, un inhibidor del receptor del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFR) (por ejemplo, un inhibidor de PDGFR-p)), un inhibidor de RAF-1, un inhibidor de KIT y un inhibidor de RET. Los inhibidores de tirosina quinasa seleccionados se eligen entre sunitinib, erlotinib, gefitinib o sorafenib. El sorafinib también se conoce como 4-[4-[[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]carbamoilamino]fenoxi]-N-metil-piridina-2-carboxamida. En ciertas realizaciones, la combinación incluye sorafenib, por ejemplo, para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer de hígado (por ejemplo, un carcinoma hepatocelular).

En ciertas realizaciones, las combinaciones incluyen inhibidores del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), por ejemplo, un inhibidor del VEGFR como se describe en el presente documento.

En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de PI3K, por ejemplo, un inhibidor de PI3K como se describe en el presente documento.

En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de mTOR, por ejemplo, un inhibidor de mTOR como se describe en el presente documento.

En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de BRAF, por ejemplo, GSK2118436, RG7204, PLX4032, GDC-0879, PLX4720 y tosilato de sorafenib (Bay 43-9006). En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de RAF, por ejemplo, debrafinib o N-{3-[5-(2-aminopirimidin-4-il)-2-terc-butiM,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida.

En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de MEK. En algunas realizaciones, el cáncer tratado con la combinación se elige entre un melanoma, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer de ovario, un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo por ejemplo (TNBC)), un cáncer de próstata, un cáncer de páncreas, una neoplasia hematológica o un carcinoma de células renales. En ciertas realizaciones, el cáncer incluye una mutación BRAF (por ejemplo, una mutación BRAF V600E), una BRAF tipo salvaje, una KRAS tipo salvaje o una mutación<k>R<a>S activadora. El cáncer puede encontrarse en un estadio temprano, intermedio o tardío. En una realización, el cáncer tratado con la combinación es un melanoma irresecable o metastásico, por ejemplo, con una mutación BRAFV600. En ciertas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable en microsatélites (MSS CRC)), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de pulmón triple negativo (TNBC)).

Puede utilizarse en combinación cualquier inhibidor de MEK, incluidos, pero no limitados a, ARRY-142886, G02442104 (también conocido como GSK1120212), RDEA436, RDEA119/BAY 869766, AS703026, G00039805 (también conocido como AZD-6244 o selumetinib), BIX 02188, BIX 02189, CI-1040 (PD-184352), PD0325901, PD98059, U0126, GDC-0973 (Metanona, [3,4-difluoro-2-[(2-fluoro-4-iodofenil)amino]fenil][3-hidroxi-3-(25)-2-piperidinil-l -azetidinil]-), G-38963, G02443714 (también conocido como AS703206), o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo. Otros ejemplos de inhibidores de MEK se describen en WO 2013/019906, WO 03/077914, WO 2005/121142, WO 2007/04415, WO 2008/024725 y WO 2009/085983,.

En algunas realizaciones, el inhibidor de MEK es trametinib o N-(3-{3-ciclopropil-5-[(2-fluoro-4-yodofenil)amino]-6,8-dimetil-2,4,7-trioxo-3,4,6,7-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-1(2H)-il}fenil)acetamida.

En algunas realizaciones, el inhibidor de MEK o trametinib es un inhibidor alostérico reversible y altamente selectivo de MEK1 y MEK2. Las proteínas MEK son componentes importantes de la vía MAPK que suele estar hiperactivada en las células tumorales. Las mutaciones oncogénicas tanto en BRAF (un miembro de las quinasas RAF) como en RAS señalizan a través de MEK1 o MEK2. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, un inhibidor de MEK, por ejemplo, trametinib, puede aumentar los linfocitos infiltrantes tumorales CD4+ y CD8+ (TIL) y/o aumentar la eficacia de un inhibidor de PD-1 (Liu et al. (2014) Clin. Cancer Res. p. 462-8).

En algunas realizaciones, la combinación aquí descrita incluye un inhibidor de MEK o trametinib, y un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

La señalización de la vía MAPK es importante para el crecimiento tumoral (Downward (2003) Nat. Rev. Cancer. p. 11-22) y trametinib es eficaz como monoterapia y en combinación con dabrafenib para el tratamiento del melanoma mutante BRAFV600. Trametinib logra la inhibición de MEK en células tumorales a las exposiciones alcanzadas a la dosis aprobada de 2 mg p.o. una vez al día (QD) (Infante et al. (2012) Lancet Oncol. p. 773 81). Los datos preclínicos en el modelo singénico de ratón CT26 demuestran que la combinación de trametinib y anticuerpo anti-PD-L1 produce un aumento de los TIL, una disminución del crecimiento tumoral y una prolongación de la supervivencia (Liu et al. (2015) Clin. Cancer Res. p. 1639-51). Los efectos inmunomoduladores de trametinib en combinación con anticuerpos inhibidores de puntos de control se han investigado en el modelo singénico murino CT26in vivo.Por ejemplo, trametinib aumenta el número de linfocitos infiltrantes tumorales (TIL), y trametinib potencia los efectos antitumorales del tratamiento con anticuerpos anti-PD-1, anticuerpos anti-PD-L1 y anticuerpos anti-CTLA-4. En este modelo, se trataron ratones con trametinib en combinación con anticuerpos inhibidores de puntos de control. Utilizando este modelo, los ratones fueron tratados con control, trametinib, anticuerpo anti-PD-1 o la combinación de trametinib y anticuerpo anti-PD-1 durante siete días y luego se recolectaron los tumores. El tratamiento con trametinib o trametinib y anticuerpo anti-PD-1 durante siete días produjo aumentos significativos de células T CD4+ en el tejido tumoral. Sólo el tratamiento con la combinación de trametinib y anticuerpo anti-PD-1 produjo aumentos significativos de células T CD8+. Además, en el modelo murino CT26, la combinación de trametinib y anticuerpo anti-PD-1 fue más eficaz para inhibir el crecimiento tumoral que cualquiera de los agentes por separado. El tratamiento con la combinación también prolongó la supervivencia. El programa de administración del fármaco puede ser importante. El crecimiento tumoral se inhibió cuando trametinib y el anticuerpo anti-PD-1 se administraron simultáneamente, o cuando trametinib se administró primero como agente único durante 7 días antes del tratamiento combinado. El crecimiento tumoral no se inhibió cuando se administró primero el anticuerpo seguido del tratamiento combinado, lo que indica que el calendario de administración del fármaco puede ser importante. En algunas realizaciones, el inhibidor de MEK o trametinib potencia, o se utiliza para potenciar, un efecto antitumoral del inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1).

En algunas realizaciones, el inhibidor de MEK o trametinib, y el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administran cada uno a una dosis y/o en un cronograma, que en combinación, logra una actividad antitumoral deseada.

En una realización, el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 0.2 mg y 5 mg, por ejemplo, entre 0.3 mg y 4 mg, entre 0.4 mg y 3 mg, entre 0.5 mg y 2 mg, entre 1 mg y 1.5 mg, entre 1.5 mg y 2 mg, o entre 0.4 mg y 0.6 mg, por ejemplo, a una dosis de 0.2 mg, 0.5 mg, 1 mg, 1.5 mg, 2 mg, 2.5 mg, 3 mg, 4 mg o 5 mg, por ejemplo, dos veces al día, una vez al día, una vez cada dos días, una vez cada tres días o una vez a la semana.

En una realización, el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis de entre 0.4 mg y 0.6 mg (por ejemplo, a una dosis de 0.5 mg) una vez al día. En otra realización, el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis de entre 1 mg y 3 mg (por ejemplo, a una dosis de 2 mg) una vez al día. En algunas realizaciones, el inhibidor de MEK o trametinib se administra por vía oral. En una realización, el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 0.4 mg y 0.6 mg (por ejemplo, a una dosis de 0.5 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis de entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo,medianteinfusión intravenosa. En una realización, el inhibidor de MEK o trametinib se administra a una dosis entre 1 mg y 3 mg (por ejemplo, a una dosis de 2 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas o una vez cada 8 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa.

En una realización, el inhibidor de MEK o trametinib, se administra en combinación con el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un melanoma (por ejemplo, un melanoma metastásico o irresecable), un cáncer colorrectal (CRC), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo por ejemplo (TNBC)). En ciertas realizaciones, el melanoma tiene una mutación BRAF, por ejemplo, una mutación BRA<f>V600. En algunas realizaciones, la combinación incluye además un inhibidor de BRAF, por ejemplo, dabrafenib. En algunas realizaciones, la combinación se utiliza para tratar a un sujeto que tiene un nivel elevado de LDH en suero, en comparación con un nivel de LDH en suero de referencia.

En algunas realizaciones, la combinación incluye un inhibidor de JAK2, por ejemplo, CEP-701, INCB18424, CP-690550 (tasocitinib).

En algunas realizaciones, la combinación incluye paclitaxel o un agente de paclitaxel, por ejemplo, TAXOL®, paclitaxel unido a proteínas (por ejemplo, ABRAXANE)®

La radioterapia puede administrarse a través de uno de varios métodos, o una combinación de métodos, incluyendo sin limitación la radioterapia de haz externo, la radioterapia interna, la radiación de implante, la radiocirugía estereotáctica, la radioterapia sistémica, la radioterapia y la braquiterapia intersticial permanente o temporal.

Las combinaciones divulgadas pueden administrarse en combinación con una o más de las modalidades existentes para tratar cánceres, incluyendo, pero sin limitarse a: cirugía; radioterapia (por ejemplo, terapia de haz externo que implica radioterapia tridimensional y conformada en la que se diseña el campo de radiación, radiación local (por ejemplo, radiación dirigida a un objetivo u órgano preseleccionado), o radiación focalizada). La radiación focalizada puede seleccionarse del grupo formado por la radiocirugía estereotáctica, la radiocirugía estereotáctica fraccionada y la radioterapia de intensidad modulada. La radiación focalizada puede tener una fuente de radiación seleccionada del grupo que consiste en un haz de partículas (protón), cobalto-60 (fotón), y un acelerador lineal (rayos X), por ejemplo, como se describe en WO 2012/177624.

En ciertas realizaciones, las combinaciones incluyen un anticuerpo contra un receptor similar a inmunoglobulina de células asesinas (también denominado en el presente documento "anticuerpo anti-KIR"), un anticuerpo pan-KIR, un anticuerpo anti-NKG2D y un anticuerpo anti-MICA. En ciertas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-PD-1 y anticuerpo anti-KIR, anticuerpo pan-KIR, o un anticuerpo anti-NKG2D descrito en el presente documento se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como el descrito en el presente documento (por ejemplo, un tumor sólido, por ejemplo, un tumor sólido avanzado).

En una realización, la combinación incluye una inmunoterapia celular (por ejemplo, Provenge (por ejemplo, Sipuleucel)), y opcionalmente en combinación con ciclofosfamida. En ciertas realizaciones, la combinación de molécula de anticuerpo anti-PD-1, Provenge y/o ciclofosfamida se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como el descrito en el presente documento (por ejemplo, un cáncer de próstata, por ejemplo, un cáncer de próstata avanzado).

En otra realización, la combinación incluye una vacuna, por ejemplo, una vacuna contra el carcinoma renal de células dendríticas (DC-RCC). En ciertas realizaciones, la combinación de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 y la vacuna DC-RCC se utiliza para tratar un cáncer, por ejemplo, un cáncer como el descrito en el presente documento (por ejemplo, un carcinoma renal, por ejemplo, un carcinoma metastásico de células renales (RCC) o un carcinoma de células renales de células claras (CCRCC)).

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se administra en combinación con quimioterapia y/o inmunoterapia. Por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede utilizarse para tratar un mieloma, sola o en combinación con uno o más de los siguientes: quimioterapia u otros agentes anticancerosos (por ejemplo, análogos de la talidomida, por ejemplo, lenalidomida), un anticuerpo anti-TIM-3, células dendríticas impulsadas por antígenos tumorales, fusiones (por ejemplo, electrofusiones) de células tumorales y células dendríticas, o vacunación con el idiotipo de inmunoglobulina producido por células plasmáticas malignas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se utiliza en combinación con un anticuerpo anti-TIM-3 para tratar un mieloma, por ejemplo, un mieloma múltiple.

En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se usa en combinación con quimioterapia para tratar un cáncer de pulmón, por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se utiliza con terapia de doblete de platino para tratar el cáncer de pulmón.

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se usa para tratar un cáncer renal, por ejemplo, carcinoma de células renales (RCC), por ejemplo, carcinoma de células renales claras (CCRCC), un carcinoma de células renales no claras (nccRCC), o un RCC metastásico. La molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede administrarse en combinación con uno o más de los siguientes: una estrategia basada en la inmunidad (por ejemplo, interleucina-2 o interferón-a), un agente dirigido (por ejemplo, un inhibidor del VEGF, como un anticuerpo monoclonal contra el VEGF); un inhibidor de la tirosina quinasa del VEGF, como sunitinib, sorafenib, axitinib y pazopanib; un inhibidor del ARNi), o un inhibidor de un mediador corrient abajo de la señalización del VEGF, por ejemplo, un inhibidor de la diana de rapamicina en mamíferos (mTOR), por ejemplo, everolimus y temsirolimus. En ciertas realizaciones, la combinación incluye sorafenib, por ejemplo, para tratar un cáncer descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer de hígado (por ejemplo, un carcinoma hepatocelular).

Un ejemplo de terapéutica adecuada para su uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L 1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer pancreático incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico, por ejemplo, paclitaxel o un agente de paclitaxel (por ejemplo, una formulación de paclitaxel como TAXOL, una formulación de paclitaxel en nanopartículas estabilizadas con albúmina (por ejemplo, ABRAXANE) o una formulación liposomal de paclitaxel); gemcitabina (por ejemplo, gemcitabina sola o en combinación con AXP107-11); otros agentes quimioterapéuticos como oxaliplatino, 5-fluorouracilo, capecitabina, rubitecán, clorhidrato de epirubicina, NC-6004, cisplatino, docetaxel (por ejemplo, TAXOTERE), mitomicina C, ifosfamida; interferón; inhibidor de la tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor del EGFR (por ejemplo, erlotinib, panitumumab, cetuximab, nimotuzumab); inhibidor del receptor HER2/neu (por ejemplo, trastuzumab); inhibidor dual de la quinasa (por ejemplo, bosutinib, saracatinib, lapatinib, vandetanib); inhibidor multiquinasa (por ejemplo, sorafenib, sunitinib, XL184, pazopanib); inhibidor del VEGF (por ejemplo, bevacizumab, a V-951, brivanib); radioinmunoterapia (por ejemplo, XR303); vacuna contra el cáncer (por ejemplo, GVAX, péptido de survivina); inhibidor de la COX-2 (por ejemplo, celecoxib); inhibidor del receptor de IGF-1 (por ejemplo, AMG 479, MK-0646); inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus, temsirolimus); inhibidor de la iL-6 (por ejemplo, CNTO 328); inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, P276-00, UCN-01); compuesto dirigido al metabolismo energético alterado (AEMD) (por ejemplo, CPI-613); inhibidor de HDAC (por ejemplo, vorinostat); agonista del receptor 2 de TRAIL (TR-2) (por ejemplo, conatumumab); inhibidor de MEK (por ejemplo, AS703026, selumetinib, GSK1120212); inhibidor de quinasa dual Raf/MEK (por ejemplo, RO5126766); inhibidor de la señalización Notch (por ejemplo, MK0752); proteína de fusión anticuerpo-anticuerpo monoclonal (por ejemplo, L19IL2); curcumina; inhibidor de HSP90 (por ejemplo, tanespimicina, STA-9090); rIL-2;, denileucina diftitox; inhibidor de la topoisomerasa 1 (por ejemplo, irinotecán, PEP02); estatina (por ejemplo, simvastatina); inhibidor del factor VIIa (por ejemplo, PCI-27483); inhibidor de AKT (por ejemplo, RX-0201); profármaco activado por hipoxia (por ejemplo, TH-302); clorhidrato de metformina, inhibidor de gamma-secretasa (por ejemplo, RO4929097); inhibidor de la ribonucleótido reductasa (por ejemplo, 3-AP); inmunotoxina (por ejemplo, HuC242-DM4); inhibidor de PARP (por ejemplo, KU-0059436, veliparib); inhibidor de CTLA-4 (por ejemplo, CP-675.206, ipilimumab); terapia AdV-tk; inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib (Velcade), NPI-0052); tiazolidinediona (por ejemplo, pioglitazona); NPC-1C; inhibidor de la quinasa Aurora (por ejemplo, R763/AS703569), inhibidor de Ct Gf (por ejemplo, FG-3019); siG12D LODER; y radioterapia (por ejemplo, tomoterapia, radiación estereotáctica, terapia de protones), cirugía y una combinación de las mismas. En ciertas realizaciones, puede utilizarse una combinación de paclitaxel o un agente de paclitaxel, y gemcitabina con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 descritas en el presente documento.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-PD-1, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer de pulmón de células pequeñas incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico, por ejemplo, etopósido, carboplatino, cisplatino, oxaliplatino, irinotecán, topotecán, gemcitabina, SN-38 liposomal, bendamustina, temozolomida, belotecán, NK012, FR901228, flavopiridol); inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor del EGFR (por ejemplo, erlotinib, gefitinib, cetuximab, panitumumab); inhibidor multiquinasa (por ejemplo, sorafenib, sunitinib); inhibidor del VEGF (por ejemplo, bevacizumab, vandetanib); vacuna contra el cáncer (por ejemplo, GVAX); inhibidor de Bcl-2 (por ejemplo, oblimersen sódico, ABT-263); inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib (Velcade), NPI-0052), paclitaxel o un agente de paclitaxel; docetaxel; inhibidor del receptor de IGF-1 (por ejemplo, AMG 479); inhibidor de HGF/SF (por ejemplo, AMG 102, MK-0646); cloroquina; inhibidor de la quinasa Aurora (por ejemplo, MLN8237); radioinmunoterapia (por ejemplo, TF2); inhibidor de HSP90 (por ejemplo, tanespimicina, STA-9090); inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus); anticuerpo biespecífico Ep-CAM-/CD3 (por ejemplo, MT110); inhibidor de CK-2 (por ejemplo, CX-4945); inhibidor de HDAC (por ejemplo, belinostat); antagonista de SMO (por ejemplo, BMS 833923); vacuna peptídica contra el cáncer, y radioterapia (por ejemplo, radioterapia de intensidad modulada (IMRT), radioterapia hipofraccionada, radioterapia guiada por hipoxia), cirugía y combinaciones de las mismas.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-PD-1, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer de pulmón de células no pequeñas incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico, por ejemplo, vinorelbina, cisplatino, docetaxel, pemetrexed disódico, etopósido, gemcitabina, carboplatino, SN-38 liposomal, TLK286, temozolomida, topotecán, pemetrexed disódico, azacitidina, irinotecán, tegafur-gimeracil-oteracil potásico, sapacitabina); inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor del EGFR (por ejemplo, erlotinib, gefitinib, cetuximab, panitumumab, necitumumab, PF-00299804, nimotuzumab, RO5083945), inhibidor de MET (por ejemplo, PF-02341066, ARQ 197), inhibidor de la quinasa PI3K (por ejemplo, XL147, GDC-0941), inhibidor de la quinasa dual Raf/MEK (por ejemplo, RO5126766), inhibidor de la quinasa dual PI3K/mTOR (por ejemplo, XL765), inhibidor del SRC (por ejemplo, dasatinib), inhibidor dual (por ejemplo, BIBW 2992, GSK1363089, ZD6474, AZD0530, AG-013736, lapatinib, MEHD7945A, linifanib), inhibidor multiquinasa (por ejemplo, sorafenib, sunitinib, pazopanib, AMG 706, XL184, MGCD265, BMS-690514, R935788), inhibidor del V<e>GF (por ejemplo, endostar, endostatina, bevacizumab, cediranib, BIBF 1120, axitinib, tivozanib, AZD2171), vacuna contra el cáncer (por ejemplo, vacuna liposomal BLP25, GVAX, ADN recombinante y adenovirus que expresan la proteína L523S), inhibidor de Bcl-2 (por ejemplo, oblimersen sódico), inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib, carfilzomib, NPI-0052, MLN9708), paclitaxel o un agente de paclitaxel, docetaxel, inhibidor del receptor de IGF-1 (por ejemplo, cixutumumab, MK-0646, OSI 906, CP-751,871, BIIB022), hidroxicloroquina, inhibidor de HSP90 (por ejemplo, tanespimicina, STA-9090, AUY922, XL888), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus, temsirolimus, ridaforolimus), anticuerpo Ep-CAM-/CD3-biespecífico (por ejemplo, MT110), inhibidor de la CK-2 (por ejemplo, CX-4945), inhibidor de la HDAC (por ejemplo, MS 275, LBH589, vorinostat, ácido valproico, FR901228), inhibidor de la DHFR (por ejemplo, pralatrexato), retinoide (por ejemplo, bexaroteno, tretinoína), conjugado anticuerpo-fármaco (por ejemplo, SGN-15), bifosfonato (por ejemplo, ácido zoledrónico), vacuna contra el cáncer (por ejemplo, belagenpumatucel-L), heparina de bajo peso molecular (HBPM) (por ejemplo, tinzaparina, enoxaparina), GSK1572932A, melatonina, talactoferrina, dimesna, inhibidor de la topoisomerasa (por ejemplo, amrubicina, etopósido, karenitecina), nelfinavir, cilengitida, inhibidor de ErbB3 (por ejemplo, MM-121, U3-1287), inhibidor de survivina (por ejemplo, YM155, LY2181308), mesilato de eribulina, inhibidor de COX-2 (por ejemplo, celecoxib), pegfilgrastim, inhibidor de la quinasa 1 similar al polo (por ejemplo, BI 6727), agonista del receptor 2 de TRAIL (TR-2) (por ejemplo, CS-1008), conjugado de péptido CNGRC (SEQ ID No : 225)-TNF alfa, dicloroacetato (D<c>A), inhibidor de HGF (por ejemplo, SCH 900105), SAR240550, agonista de PPAR-gamma (por ejemplo, CS-7017), inhibidor de gamma-secretasa (por ejemplo, RO4929097), terapia epigenética (por ejemplo, 5-azacitidina), nitroglicerina, inhibidor de MEK (por ejemplo, AZD6244), inhibidor de quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, UCN-01), colesterol-Fus1, agente antitubulina (por ejemplo, E7389), inhibidor de la farnesil-OH transferasa (por ejemplo, lonafarnib), inmunotoxina (por ejemplo, BB-10901, SS1 (dsFv) PE38), fondaparinux, agente disruptor vascular (por ejemplo, AVE8062), inhibidor de PD-L1 (por ejemplo, MDX-1105, MDX-1106), betaglucano, NGR-hTNF,<e>M<d>521873, inhibidor de MEK (por ejemplo, GSK1120212), análogo de la epothilona (por ejemplo, ixabepilona), inhibidor del huso de kinesina (por ejemplo, 4SC-205), agente dirigido a los telómeros (por ejemplo, KML-001), inhibidor de la vía P70 (por ejemplo, LY2584702), inhibidor de AKT (por ejemplo, MK-2206), inhibidor de la angiogénesis (por ejemplo, lenalidomida), inhibidor de la señalización Notch (por ejemplo, OMP-21M18), radioterapia, cirugía y combinaciones de los mismos.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para su uso en combinación con las moléculas de anticuerpo anti-PD-1, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer de ovario incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, paclitaxel o un agente de paclitaxel; docetaxel; carboplatino; gemcitabina; doxorrubicina; topotecán; cisplatino; irinotecán, TLK286, ifosfamida, olaparib, oxaliplatino, melfalán, pemetrexed disódico, SJG-136, ciclofosfamida, etopósido, decitabina); antagonista de ghrelina (por ejemplo, AEZS-130), inmunoterapia (por ejemplo, APC8024, oregovomab, OPT-821), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de EGFR (por ejemplo, erlotinib), inhibidor dual (por ejemplo, E7080), inhibidor multiquinasa (por ejemplo, AZD0530, JI-101, sorafenib, sunitinib, pazopanib), ON 01910.Na), inhibidor del VEGF (por ejemplo, bevacizumab, BIBF 1120, cediranib, AZD2171), inhibidor del PDG<f>R (por ejemplo, IMC-3G3), paclitaxel, inhibidor de la topoisomerasa (por ejemplo, karenitecina, Irinotecan), inhibidor de la HDAC (por ejemplo, valproato, vorinostat), inhibidor del receptor de folato (por ejemplo, farletuzumab), inhibidor de la angiopoyetina (por ejemplo, AMG 386), análogo de la epothilona (por ejemplo, ixabepilona), inhibidor del proteasoma (por ejemplo, carfilzomib), inhibidor del receptor de IGF-1 (por ejemplo, OSI 906, AMG 479), inhibidor de PARP (por ejemplo, veliparib, AG014699, iniparib, MK-4827), inhibidor de la quinasa Aurora (por ejemplo, MLN8237, ENMD-2076), inhibidor de la angiogénesis (por ejemplo, lenalidomida), inhibidor de la DHFR (por ejemplo, pralatrexato), agente radioinmunoterapéutico (por ejemplo, Hu3S193), estatina (por ejemplo, lovastatina), inhibidor de la topoisomerasa 1 (por ejemplo,<n>K<t>R-102), vacuna contra el cáncer (por ejemplo, vacuna de péptidos largos sintéticos p53, vacuna autóloga OC-DC), inhibidor de mTOR (por ejemplo, temsirolimus, everolimus), inhibidor de BCR/ABL (por ejemplo, imatinib), antagonista del receptor ET-A (por ejemplo, ZD4054), agonista del receptor TRAIL 2 (TR-2) (por ejemplo, CS-1008), inhibidor de HGF/SF (por ejemplo, AMG 102), EGEN-001, inhibidor de la quinasa 1 tipo polo (por ejemplo, BI 6727), inhibidor de la gamma-secretasa (por ejemplo, RO4929097), inhibidor de Wee-1 (por ejemplo, MK-1775), agente antitubulina (por ejemplo, vinorelbina, E7389), inmunotoxina (por ejemplo, denileukina diftitox), SB-485232, agente de alteración vascular (por ejemplo, AVE8062), inhibidor de la integrina (por ejemplo, EMD 525797), inhibidor de la quinesina-huso (por ejemplo, 4SC-205), revlimid, inhibidor de HER2 (por ejemplo, MGAH22), inhibidor de ErrB3 (por ejemplo, MM-121), radioterapia; y combinaciones de los mismos.

En una realización de ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se utiliza para tratar un mieloma, sola o en combinación con uno o más de: quimioterapia u otros agentes anticancerosos (por ejemplo, análogos de talidomida, por ejemplo, lenalidomida), HSCT (Cook, R. (2008) J Manag Care Pharm.

14(7 Suppl): 19-25), un anticuerpo anti-TIM-3 (Hallett, WHD et al. (2011) J of American Society for Blood and Marrow Transplantation 17(8): 1133-145), células dendríticas impulsadas por antígenos tumorales, fusiones (por ejemplo, electrofusiones) de células tumorales y células dendríticas, o vacunación con el idiotipo de inmunoglobulina producido por células plasmáticas malignas (revisado en Yi, Q. (2009) Cancer J. 15(6):502-10).

En aún otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1, sola o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), se utiliza para tratar un cáncer renal, por ejemplo, un carcinoma de células renales (RCC), un carcinoma de células renales de células no claras o un RCC metastásico. La molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede administrarse en combinación con uno o más de los siguientes: una estrategia basada en la inmunidad (por ejemplo, interleucina-2 o interferóna), un agente dirigido (por ejemplo, un inhibidor de VEGF como un anticuerpo monoclonal contra VEGF, por ejemplo, bevacizumab (Rini, B.I. et al. (2010) J. Clin. Oncol. 28(13):2137-2143)); un inhibidor de la tirosina quinasa del VEGF, como sunitinib, sorafenib, axitinib y pazopanib (revisados en Pal. S.K. et al. (2014) Clin. Advances in Hematology & Oncology 12(2):90-99)); un inhibidor de ARNi), o un inhibidor de un mediador descendente de la señalización del VEGF, por ejemplo, un inhibidor de la diana de rapamicina en mamíferos (mTOR), por ejemplo, everolimus y temsirolimus (Hudes, G. et al. (2007) N. Engl. J. Med. 356(22):2271-2281, Motzer, R.J. et al. (2008) Lancet 372: 449-456).

Un ejemplo de terapéutico adecuado para su uso en las combinaciones descritas en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de la leucemia mielógena crónica (AML) según la divulgación incluye, pero no se limita a, un quimioterapéutico (por ejemplo, citarabina, hidroxiurea, clofarabina, melfalán, tiotepa, fludarabina, busulfán, etopósido, cordicepina, pentostatina, capecitabina, azacitidina, ciclofosfamida, cladribina, topotecán), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de BCR/ABL (por ejemplo, imatinib, nilotinib), ON 01910.Na, inhibidor dual (por ejemplo, dasatinib, bosutinib), inhibidor multiquinasa (por ejemplo, DCC-2036, ponatinib, sorafenib, sunitinib, r GB-286638)), interferón alfa, esteroides, agente apoptótico (por ejemplo, omacetaxina mepesuccinat), inmunoterapia (por ejemplo, células T de memoria CD4+ alogénicas similares a Th1/anti-CD3/anti-CD28 unidas a micropartículas, células asesinas autólogas inducidas por citoquinas (CIK), AHN-12), agente dirigido a CD52 (por ejemplo, alemtuzumab), inhibidor de HSP90 (por ejemplo, tanespimicina, STA-9090, AUY922, XL888), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), antagonista de la SMO (por ejemplo, BMS 833923), inhibidor de la ribonucleótido reductasa (por ejemplo, 3-AP), inhibidor de la JAK-2 (por ejemplo, INCB018424), hidroxicloroquina, retinoide (por ejemplo, fenretinida), inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, UCN-01), inhibidor de HDAC (por ejemplo, belinostat, vorinostat, JNJ-26481585), inhibidor de PARP (por ejemplo, veliparib), antagonista de Md M2 (por ejemplo, RO5045337), inhibidor de quinasa Aurora B (por ejemplo, TAK-901), radioinmunoterapia (por ejemplo, anticuerpo anti-CD33 HuM195 marcado con actinio-225), inhibidor de Hedgehog (por ejemplo, P<f>-04449913), inhibidor de STAT3 (por ejemplo, OPB-31121), KB004, vacuna contra el cáncer (por ejemplo, AG858), trasplante de médula ósea, trasplante de células madre, radioterapia y combinaciones de los mismos.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para uso en las combinaciones aquí descritas, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 aquí descritas, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de la leucemia linfocítica crónica (CLL) incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, fludarabina, ciclofosfamida, doxorrubicina, vincristina, clorambucil, bendamustina, clorambucil, busulfán, gemcitabina, melfalán, pentostatina, mitoxantrona, 5-azacitidina, pemetrexed disódico), inhibidor de la tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de EGFR (por ejemplo, erlotinib), inhibidor de BTK (por ejemplo, PCI-32765), inhibidor multiquinasa (por ejemplo, MGCD265, Rg B-286638), agente dirigido a c D-20 (por ejemplo, rituximab, ofatumumab, RO5072759, LFB-R603), agente dirigido a CD52 (por ejemplo, alemtuzumab), prednisolona, darbepoetina alfa, lenalidomida, inhibidor de Bcl-2 (por ejemplo, ABT-263), inmunoterapia (por ejemplo, células T alogénicas CD4+ con memoria Th1/micropartículas anti-CD3/anti-CD28, células asesinas autólogas inducidas por citoquinas (CIK)), inhibidor de HDAC (por ejemplo, vorinostat, ácido valproico, LBH589, JNJ-26481585, AR-42), inhibidor de XlAp (por ejemplo, AEG35156), agente dirigido a CD-74 (por ejemplo, milatuzumab), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), AT-101, inmunotoxina (por ejemplo, CAT-8015, anti-Tac(Fv)-PE38 (LMB-2)), agente dirigido a CD37 (por ejemplo, TRU-016), radioinmunoterapia (por ejemplo, 131-tositumomab), hidroxicloroquina, perifosina, inhibidor de SRC (por ejemplo, dasatinib), talidomida, inhibidor de PI3K delta (por ejemplo, CAL-101), retinoide (por ejemplo, fenretinida), antagonista de MDM2 (por ejemplo, RO5045337), plerixafor, inhibidor de la quinasa Aurora (por ejemplo, MLN8237, TAK-901), inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib), agente dirigido a c D-19 (por ejemplo, MEDI-551, MOR208), inhibidor de MEK (por ejemplo, ABT-348), inhibidor de JAK-2 (por ejemplo, IN Cb 0 18424), profármaco activado por hipoxia (por ejemplo, TH-302), paclitaxel o un agente de paclitaxel, inhibidor de HSP90, inhibidor de AKT (por ejemplo, MK2206), inhibidor de HMG-CoA (por ejemplo, simvastatina), GNKG186, radioterapia, trasplante de médula ósea, trasplante de células madre y una combinación de los mismos.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para su uso en las combinaciones descritas en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpos anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de la leucemia linfocítica aguda (LLA) incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, prednisolona, dexametasona, vincristina, asparaginasa, daunorrubicina, ciclofosfamida, citarabina, etopósido, tioguanina, mercaptopurina, clofarabina, anamicina liposomal, busulfán, etopósido, capecitabina, decitabina, azacitidina, topotecán, temozolomida), inhibidor de la tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de BCR/ABL (por ejemplo, imatinib, nilotinib), ON 01910.Na, inhibidor multiquinasa (por ejemplo, sorafenib)), agente dirigido a CD-20 (por ejemplo, rituximab), agente dirigido a CD52 (por ejemplo, alemtuzumab), inhibidor de HSP90 (por ejemplo, STA-9090), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus, rapamicina), inhibidor de JAK-2 (por ejemplo, INCB018424), inhibidor del receptor HER2/neu (por ejemplo, trastuzumab), inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib), metotrexato, asparaginasa, agente dirigido contra CD-22 (por ejemplo, epratuzumab, inotuzumab), inmunoterapia (por ejemplo, células asesinas autólogas inducidas por citoquinas (CIK), AHN-12), blinatumomab, inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, UCN-01), agente dirigido a CD45 (por ejemplo, BC8), antagonista de MDM2 (por ejemplo, RO5045337), inmunotoxina (por ejemplo, CAT-8015, DT2219ARL), inhibidor de HDAC (por ejemplo, JNJ-26481585), JVRS-100, paclitaxel o un agente de paclitaxel, inhibidor de STAT3 (por ejemplo, OB-31121), inhibidor de PARP (por ejemplo, veliparib), EZN-2285, radioterapia, esteroides, trasplante de médula ósea, trasplante de células madre o una combinación de los mismos.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para su uso en las combinaciones descritas en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de la leucemia mieloide aguda (AML) incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, citarabina, daunorrubicina, idarrubicina, clofarabina, decitabina, vosaroxina, azacitidina, clofarabina, ribavirina, CPX-351, treosulfán, elacitarabina, azacitidina), inhibidor de tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor de BCR/ABL (por ejemplo, imatinib, nilotinib), ON 01910.Na, inhibidor multiquinasa (por ejemplo, midostaurina, SU 11248, quizartinib, sorafinib)), inmunotoxina (por ejemplo, gemtuzumab ozogamicina), proteína de fusión DT388IL3, inhibidor de HDAC (por ejemplo, vorinostat, LBH589), plerixafor, inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), inhibidor de SRC (por ejemplo, dasatinib), inhibidor de HSP90 (por ejemplo, STA-9090), retinoide (por ejemplo, bexaroteno, inhibidor de quinasa Aurora (por ejemplo, BI 811283), inhibidor de JAK-2 (por ejemplo, INCB018424), inhibidor de la quinasa tipo polo (por ejemplo, BI 6727), cenersen, agente dirigido a CD45 (por ejemplo, BC8), inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo, UCN-01), antagonista de m Dm 2 (por ejemplo, RO5045337), inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), LY573636-sodio, ZRx-101, MLN4924, lenalidomida, inmunoterapia (por ejemplo,<a>H<n>-12), dihidrocloruro de histamina, radioterapia, trasplante de médula ósea, trasplante de células madre y una combinación de los mismos.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para su uso en las combinaciones aquí descritas, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 aquí descritas, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpos anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del mieloma múltiple (MM) incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, melfalán, amifostina, ciclofosfamida, doxorrubicina, clofarabina, bendamustina, fludarabina, adriamicina, SyB L-0501), talidomida, lenalidomida, dexametasona, prednisona, pomalidomida, inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib, carfilzomib, MLN9708), vacuna contra el cáncer (por ejemplo, GVAX), agente dirigido contra CD-40 (por ejemplo, SGN-40, CHIR-12.12), perifosina, ácido zoledrónico, Inmunoterapia (por ejemplo, MAGE-A3, NY-ESO-1, HuMax-CD38), inhibidor de la HDAC (por ejemplo, vorinostat, LBH589, AR-42), aplidina, inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (por ejemplo,D-0332991, dinaciclib), trióxido de arsénico, CB3304, inhibidor de la HSP90 (por ejemplo, KW-2478), inhibidor de la tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor del EGFR (por ejemplo, cetuximab), inhibidor multiquinasa (por ejemplo, AT9283)), inhibidor del VEGF (por ejemplo, bevacizumab), plerixafor, inhibidor de MEK (por ejemplo, AZD6244), IPH2101, atorvastatina, inmunotoxina (por ejemplo, BB-10901), NPI-0052, radioinmunoterapéutico (por ejemplo, itrio Y 90 ibritumomab tiuxetan), inhibidor de STAT3 (por ejemplo, OPB-31121), MLN4924, inhibidor de quinasa Aurora (por ejemplo, ENMD-2076), IMGN901, ACE-041, inhibidor de la CK-2 (por ejemplo, CX-4945), radioterapia, trasplante de médula ósea, trasplante de células madre y una combinación de los mismos.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para su uso en las combinaciones descritas en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpos anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer de próstata incluye, pero no se limita a, un agente quimioterapéutico (por ejemplo, docetaxel, carboplatino, fludarabina), abiraterona, terapia hormonal (por ejemplo, flutamida, bicalutamida, nilutamida, acetato de ciproterona, ketoconazol, aminoglutetimida, abarelix, degarelix, leuprolida, goserelina, triptorelina, buserelina), inhibidor de la tirosina quinasa (por ejemplo, inhibidor dual de la quinasa (por ejemplo, lapatanib), inhibidor multiquinasa (por ejemplo, sorafenib, sunitinib)), inhibidor del VEGF (por ejemplo, bevacizumab), TAK-700, vacuna contra el cáncer (por ejemplo, BPX-101, PEP223), lenalidomida,<t>OK-001, inhibidor del receptor IGF-1 (por ejemplo, cixutumumab), TRC105, inhibidor de la quinasa Aurora A (por ejemplo, MLN8237), inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib), OGX-011, radioinmunoterapia (por ejemplo, HuJ591-GS), inhibidor de HDAC (por ejemplo, ácido valproico, SB939, LBH589), hidroxicloroquina, inhibidor de mTOR (por ejemplo, everolimus), lactato de dovitinib, diindolilmetano, efavirenz, OGX-427, genisteína, IMC-3G3, bafetinib, CP-675,206, radioterapia, cirugía o una combinación de los mismos.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para uso en las combinaciones descritas en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de HNSCC incluye, pero no se limita a, uno o ambos del Compuesto A8 descrito en el presente documento (o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO2010/029082) y cetuximab (por ejemplo, Erbitux, comercializado por BMS). En algunas realizaciones, el terapéutico (por ejemplo, el compuesto A8 o compuesto relacionado con A8) es un modulador de PI3K, por ejemplo, un inhibidor de PI3K. En algunas realizaciones, el terapéutico (por ejemplo, cetuximab) modula, por ejemplo, inhibe, el EGFR. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles o actividad elevados de PI3K o EGFR en comparación con una célula de control o un valor de referencia.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para uso en las combinaciones descritas en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de cáncer gástrico, por ejemplo, cáncer gástrico MSI-alto y/o EBV+, incluye, pero no se limita a, el compuesto A8 descrito en el presente documento (o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO2010/029082). En algunas realizaciones, el terapéutico (por ejemplo, el Compuesto A8 o compuesto relacionado con A8) es un modulador de PI3K, por ejemplo, un inhibidor de PI3K. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles elevados o actividad de PI3K en comparación con una célula de control o valor de referencia.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para su uso en las combinaciones descritas en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de cáncer gástrico, por ejemplo, cáncer gástrico con MSI alto y/o RNF43-inactivado, incluye, pero no se limita a, el Compuesto A28 descrito en el presente documento (o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO2010/101849). En algunas realizaciones, el terapéutico (por ejemplo, el Compuesto A28 o compuesto relacionado con A28) es un modulador, por ejemplo, inhibidor, del puercoespín. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles elevados o actividad de porcupina en comparación con una célula de control o valor de referencia.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para uso en las combinaciones descritas en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de tumor estromal gastrointestinal (GIST), incluye, pero no se limita a, el compuesto A16 descrito en el presente documento (o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO1999/003854). En algunas realizaciones, el terapéutico (por ejemplo, el Compuesto A16 o compuesto relacionado con A16) es un modulador, por ejemplo, inhibidor, de una tirosina quinasa. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se determina que tiene, niveles elevados o actividad de una tirosina quinasa en comparación con una célula de control o valor de referencia.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para uso en las combinaciones aquí descritas, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 aquí descritas, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para tratamiento de NSCLC, por ejemplo, escamoso o adenocarcinoma, incluye, pero no se limita a, uno o ambos del compuesto A17 descrito en el presente documento (o un compuesto descrito en laa Patentes US Nos.

7,767,675 y 8,420,645) y el compuesto A23 descrito en el presente documento (o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO2003/077914). En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el compuesto A17 o compuesto relacionado con A17) modula, por ejemplo, inhibe, c-MET. En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el compuesto A23 o compuesto relacionado con A23) modula, por ejemplo, inhibe, Alk. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se determina que tiene, niveles elevados o actividad de uno o ambos de c-MET o Alk en comparación con una célula de control o valor de referencia. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, una mutación en EGFR.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para uso en las combinaciones descritas en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpo anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para tratamiento de melanoma (por ejemplo, melanoma NRAS) incluye, pero no se limita a, uno o ambos del compuesto A24 como se describe en el presente documento (o un compuesto descrito en las Patentes US Nos. 8,415,355 y 8,685,980) y el compuesto A34 como se describe en el presente documento (o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO2003/077914). En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el compuesto A24 o compuesto relacionado con A24) modula, por ejemplo, inhibe, uno o más de JAK y CDK4/6. En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el compuesto A34 o compuesto relacionado con A34) modula, por ejemplo, inhibe, MEK. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles elevados o actividad de uno o más de JAK, CDK4/6 y MEK en comparación con una célula de control o valor de referencia.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para su uso en las combinaciones descritas en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpos anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del melanoma (por ejemplo, melanoma NRAS) incluye, pero no se limita a, uno o ambos del compuesto A29 descrito en el presente documento (o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO2011/025927) y el compuesto A34 descrito en el presente documento (o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO2003/077914). En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el compuesto A29 o compuesto relacionado con A29) modula, por ejemplo, inhibe, BRA<f>. En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el compuesto A34 o compuesto relacionado con A34) modula, por ejemplo, inhibe, MEK. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles elevados o actividad de uno o ambos de BRAF y MEK en comparación con una célula de control o valor de referencia.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para su uso en las combinaciones descritas en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpos anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento de NSCL<c>escamoso incluye, pero no se limita a, el Compuesto A5 descrito en el presente documento (o un compuesto descrito en la Patente U.S. No. 8,552,002). En algunas realizaciones, el compuesto (por ejemplo, el Compuesto A5 o compuesto relacionado con A5) modula, por ejemplo, inhibe, FGFR. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles elevados o actividad de FGFR en comparación con una célula de control o valor de referencia.

Un ejemplo de terapéutica adecuada para su uso en las combinaciones descritas en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 descritas en el presente documento, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), para el tratamiento del cáncer colorrectal incluye, entre otros, uno o ambos del compuesto A29 descrito en el presente documento (o un compuesto Publicación PCT No. WO2011/025927) y cetuximab (por ejemplo, Erbitux, comercializado por BMS). En algunas realizaciones, el terapéutico (por ejemplo, el compuesto A29 o compuesto relacionado con A29) modula, por ejemplo, inhibe, BRAF. En algunas realizaciones, el compuesto terapéutico (por ejemplo, cetuximab) modula, por ejemplo, inhibe EGFR. En algunas realizaciones, el cáncer tiene, o se identifica que tiene, niveles elevados o actividad de BRAF o EGFR en comparación con una célula de control o valor de referencia.

Esta divulgación también proporciona un método de tratamiento del cáncer con el compuesto A8, cetuximab y una combinación descrita en el presente documento, por ejemplo, las combinaciones con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 descritas en el presente documento, (opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo TIM-3 o una molécula de anticuerpo LAG-3). En algunas realizaciones, el paciente se trata primero con el compuesto A8 y cetuximab. Este tratamiento continúa durante un periodo de tiempo, por ejemplo, un periodo de tiempo predeterminado, por ejemplo, aproximadamente 1, 2, 4, 6, 8, 10 o 12 meses. A continuación, se administra la molécula de anticuerpo PD-1 (opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo TIM-3 o una molécula de anticuerpo LAG-3). El anticuerpo PD-1 puede administrarse opcionalmente en combinación con cetuximab.

En algunas realizaciones, el paciente se trata primero con el compuesto A8, cetuximab y una molécula de anticuerpo PD-1 (opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo TIM-3 o una molécula de anticuerpo LAG-3). Este tratamiento continúa durante un tiempo, por ejemplo, un tiempo predeterminado, por ejemplo, aproximadamente 6, 8, 10 o 12 meses. A continuación, el compuesto A8 y/o el cetuximab pueden reducirse gradualmente, de modo que la fase de mantenimiento implique el tratamiento con la molécula de anticuerpo PD-1 (por ejemplo, como monoterapia, o en combinación con una molécula de anticuerpo TIM-3 o una molécula de anticuerpo LAG-3) pero no con el compuesto A8 o el cetuximab.

En otras realizaciones, los tres compuestos (compuesto A8, cetuximab y una molécula de anticuerpo contra PD-1, opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo contra TIM-3 o una molécula de anticuerpo contra LAG-3) se administran secuencialmente al inicio del tratamiento. Por ejemplo, el compuesto A8 y el cetuximab pueden administrarse en primer lugar, como se ha descrito anteriormente. A continuación, se añade al régimen la molécula de anticuerpo PD-1 (opcionalmente en combinación con una molécula de anticuerpo TIM-3 o una molécula de anticuerpo LAG-3). A continuación, el compuesto A8 y/o el cetuximab pueden reducirse gradualmente, como se ha descrito anteriormente.

Las dosis de ejemplo para los regímenes de tres (o más) agentes son las siguientes. La molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede administrarse, por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 1 a 40 mg/kg, por ejemplo, 1 a 30 mg/kg, por ejemplo, aproximadamente 5 a 25 mg/kg, aproximadamente 10 a 20 mg/kg, aproximadamente 1 a 5 mg/kg, o aproximadamente 3 mg/kg. Alternativamente, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede administrarse, por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 200 a 500 mg, por ejemplo, aproximadamente 300 a 500 mg, aproximadamente 200 a 400 mg, aproximadamente 250 a 350 mg, o aproximadamente 300 a 400 mg, o aproximadamente 300 mg o aproximadamente 400 mg. En una realización, la molécula de anticuerpo PD-1 se administra una vez cada tres semanas, por ejemplo, a una dosis de 300 mg una vez cada tres semanas. En otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra una vez cada cuatro semanas, por ejemplo, a una dosis de 400 mg una vez cada cuatro semanas. En algunas realizaciones, el compuesto A8 se administra a una dosis de aproximadamente 200-300, 300-400 o 200-400 mg. En algunas realizaciones, el cetuximab se administra a una dosis inicial de 400 mg/m2 como infusión intravenosa de 120 minutos, seguida de una infusión semanal de 250 mg/m2 durante 60 minutos. En algunas realizaciones, una o más moléculas del Compuesto A8, cetuximab y anticuerpo PD-1 se administran a una dosis inferior a la dosis a la que ese agente se administra normalmente como monoterapia, por ejemplo, aproximadamente 0-10%, 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% u 80-90% inferior a la dosis a la que ese agente se administra normalmente como monoterapia. En ciertas realizaciones, el compuesto A8, el cetuximab y la molécula de anticuerpo PD-1 se administran a una dosis inferior a la dosis de dicho agente mencionada en este párrafo, por ejemplo, aproximadamente 0-10%, 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% u 80-90% inferior a la dosis de dicho agente mencionada en este párrafo. En ciertas realizaciones, la concentración del Compuesto A8 que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, la inhibición del crecimiento, es menor cuando el Compuesto A8 se administra en combinación con una o ambas moléculas de cetuximab y anticuerpo PD-1 que cuando el Compuesto A8 se administra individualmente. En ciertas realizaciones, la concentración de cetuximab que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo, la inhibición del crecimiento, es menor cuando el cetuximab se administra en combinación con uno o ambos del Compuesto A8 y la molécula de anticuerpo PD-1 que cuando el cetuximab se administra individualmente. En ciertas realizaciones, la concentración de la molécula de anticuerpo de PD-1 que se requiere para lograr la inhibición, por ejemplo,lainhibición del crecimiento, es menor cuando la molécula de anticuerpo de PD-1 se administra en combinación con uno o ambos del cetuximab y el Compuesto A8 que cuando la molécula de anticuerpo de PD-1 se administra individualmente.

Además, en el presente documento se describe un método de tratamiento del cáncer con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1, solas o en combinación con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molécula de anticuerpos anti-LAG-3, anti-PD-L1 o anti-TIM-3), y un agente anticanceroso dirigido, por ejemplo, un agente dirigido a una o más proteínas. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 (y opcionalmente otro(s) inmunomodulador(es)) se administran en primer lugar, y el agente anticanceroso diana se administra en segundo lugar. El intervalo de tiempo entre la administración de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 y el agente anticanceroso diana puede ser, por ejemplo,de10, 20 o 30 minutos, 1, 2, 4, 6 o 12 horas, o 1, 2, 3, 4, 5, 6 o 7 días, o cualquier intervalo de tiempo dentro de este rango. En ciertas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra repetidamente durante un periodo de tiempo (por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5 o 6 días, o 1, 2, 4, 8, 12, 16 o 20 semanas, o cualquier periodo de tiempo dentro de este rango) antes de que se administre el agente anticanceroso dirigido. En otras realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 y el agente anticanceroso diana se administran prácticamente al mismo tiempo.

Enfermedades infecciosas

Otros métodos de la divulgación se utilizan para tratar a pacientes que han estado expuestos a toxinas o patógenos particulares. En consecuencia, otro aspecto de la divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad infecciosa en un sujeto que comprende administrar al sujeto una combinación como la divulgada en el presente documento, por ejemplo, una combinación que incluye una molécula de anticuerpo anti-PD-1, de tal manera que el sujeto es tratado para la enfermedad infecciosa.

En el tratamiento de infecciones (por ejemplo, agudas y/o crónicas), la administración de las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 puede combinarse con tratamientos convencionales además o en lugar de estimular las defensas inmunitarias naturales del huésped contra la infección. Las defensas inmunitarias naturales del huésped frente a la infección incluyen, pero no se limitan a, inflamación, fiebre, defensas del huésped mediadas por anticuerpos, defensas del huésped mediadas por linfocitos T, incluida la secreción de linfoquinas y células T citotóxicas (especialmente durante la infección vírica), lisis mediada por complemento y opsonización (fagocitosis facilitada) y fagocitosis. La capacidad de las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 para reactivar las células T disfuncionales sería útil para tratar infecciones crónicas, en particular aquellas en las que la inmunidad mediada por células es importante para una recuperación completa.

De manera similar a su aplicación a tumores, como se discutió anteriormente, el bloqueo de PD-1 mediado por anticuerpos puede usarse solo, o como adyuvante, en combinación con vacunas, para estimular la respuesta inmune a patógenos, toxinas y autoantígenos. Ejemplos de patógenos para los que este enfoque terapéutico puede ser particularmente útil incluyen patógenos para los que actualmente no existe una vacuna eficaz, o patógenos para los que las vacunas convencionales son menos que completamente eficaces. Estos incluyen, pero no se limitan a, VIH, Hepatitis (A, B y C), Gripe, Herpes, Giardia, Malaria, Leishmania,Staphylococcus aureus y Pseudomonas Aeruginosa.El bloqueo de PD-1 es particularmente útil contra infecciones establecidas por agentes como el VIH que presentan antígenos alterados en el curso de las infecciones. Estos nuevos epítopos se reconocen como extraños en el momento de la administración de PD-1 antihumano, provocando así una fuerte respuesta de células T que no se ve amortiguada por señales negativas a través de PD-1.

Terapias de combinación adicionales y posteriores

Las moléculas de anticuerpos anti-PD-1 pueden utilizarse en cualquiera de las combinaciones aquí descritas. En algunas realizaciones, aquí se proporcionan combinaciones con uno o más tratamientos adicionales.

Muchas de las combinaciones de esta sección son útiles en el tratamiento del cáncer, pero también se describen otras indicaciones. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra mediante inyección (por ejemplo, subcutánea o intravenosa) a una dosis (por ejemplo, una dosis plana) de aproximadamente 200 mg a 500 mg, por ejemplo, aproximadamente 300 mg a 400 mg, o aproximadamente 300 mg o aproximadamente 400 mg. El programa de dosificación (por ejemplo, programas de dosificación plana) puede variar de, por ejemplo, una vez a la semana a una vez cada 2, 3, 4, 5 o 6 semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg una vez cada tres semanas. En una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra a una dosis de aproximadamente 400 mg una vez cada cuatro semanas. Esta sección se centra en las combinaciones de moléculas de anticuerpo anti-PD-1, opcionalmente en combinación con uno o más inmunomoduladores (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-TIM-3, una molécula de anticuerpo anti-LAG-3 o una molécula de anticuerpo anti-PD-L1), con uno o más de los agentes descritos en la Tabla 7. En las combinaciones descritas a continuación, en una realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 incluye:

En las combinaciones siguientes, en otra realización, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende (i) una región variable de cadena pesada (VH) que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 elegida de SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 4, o SEQ ID NO: 224; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 2 o SEQ ID NO: 5; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y ii) una región variable de cadena ligera (VL) que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 10 o SEQ ID NO: 13, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 11 o SEQ ID NO: 14, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 32 o SEQ ID NO: 33.

En una realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de PKC, Sotrastaurin (Compuesto A1), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/039549, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PKC es Sotrastaurin (Compuesto A1) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/039549. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con Sotrastaurin (Compuesto A1), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/039549, para tratar un trastorno como un cáncer, un melanoma, un linfoma no Hodgkin, una enfermedad inflamatoria intestinal, rechazo de trasplante, un trastorno oftálmico o psoriasis.

En ciertas realizaciones, la Sotrastaurina (Compuesto A1) se administra a una dosis de aproximadamente 20 a 600 mg, por ejemplo, aproximadamente 200 a aproximadamente 600 mg, aproximadamente 50 mg a aproximadamente 450 mg, aproximadamente 100 mg a 400 mg, aproximadamente 150 mg a 350 mg, o aproximadamente 200 mg a 300 mg, por ejemplo, aproximadamente 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, o 600 mg. El programa de dosificación puede variar, por ejemplo, de un día sí y otro no a diario, dos o tres veces al día.

En una realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de BCR-ABL, TASIGNA (Compuesto A2), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2004/005281, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de BCR-ABL es TASIGNA, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2004/005281. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con TASIGNA (Compuesto A2), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2004/005281, para tratar un trastorno como una leucemia linfocítica, la enfermedad de Parkinson, un cáncer neurológico, un melanoma, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer colorrectal, una leucemia mieloide, un cáncer de cabeza y cuello, o hipertensión pulmonar.

En una realización, el inhibidor de BCR-ABL o TASIGNA se administra a una dosis de aproximadamente 300 mg (por ejemplo, dos veces al día, por ejemplo, para LMC-CP Ph+ recién diagnosticada), o de aproximadamente 400 mg, por ejemplo, dos veces al día, por ejemplo, para LMC-CP Ph+ resistente o intolerante y LMC-AP). El inhibidor de BCR-ABL o un Compuesto A2 se administra a una dosis de aproximadamente 300-400 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de HSP90, tal como 5-(2,4-dihidroxi-5-isopropilfenil)-N-etil-4-(4-(morfolinometil)fenil)isoxazol-3-carboxamida (Compuesto A3), o un compuesto divulgado en la Publicación P<c>T No. WO 2010/060937 o WO 2004/072051, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de HSP90 es 5-(2,4-dihidroxi-5-isopropilfenil)-N-etil-4-(4-(morfolinometil)fenil)isoxazol-3-carboxamida (Compuesto A3), o un compuesto divulgado en la Publicación Pc T No. WO 2010/060937 o WO 2004/072051. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo contra PD-1 en combinación con 5-(2,4-dihidroxi-5-isopropilfenil)-N-etil-4-(4-(morfolinometil)fenil)isoxazol-3-carboxamida (Compuesto A3), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. w O 2010/060937 o WO 2004/072051, para tratar un trastorno como un cáncer, un mieloma múltiple, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un linfoma, un cáncer gástrico, un cáncer de mama, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer de páncreas, un cáncer colorrectal, un tumor sólido o un trastorno de la hematopoyesis.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe aquí, se usa en combinación con un inhibidor de PI3K y/o mTOR, Dactolisib (Compuesto A4) u 8-(6-Metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidroimidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (Compuesto A41), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2006/122806, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PI3K y/o mTOR es Dactolisib (Compuesto A4), 8-(6-Metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (Compuesto A41), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2006/122806. En una realización, se utiliza una molécula de anticuerpo contra PD-1 en combinación con dactolisib (compuesto A4), 8-(6-metoxi-piridin-3-il)-3-metil-1-(4-piperazin-1-il-3-trifluorometil-fenil)-1,3-dihidro-imidazo[4,5-c]quinolin-2-ona (compuesto A41), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2006/122806, para tratar un trastorno como un cáncer, un cáncer de próstata, una leucemia (por ejemplo, leucemia linfocítica), un cáncer de mama, un cáncer cerebral, un cáncer de vejiga, un cáncer pancreático, un cáncer renal, un tumor sólido o un cáncer de hígado.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se utiliza en combinación con un inhibidor de FGFR, 3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-(6-((4-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-1-metilurea (Compuesto A5) o un compuesto divulgado en la Patente U.S. 8,552,002, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de FGFR es 3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1 -(6-((4-(4-etilpiperazin-1 -il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-1 -metilurea (Compuesto A5) o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,002. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con el Compuesto A5, o un compuesto como el descrito en US 8,552,002, para tratar un trastorno tal como un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer hematológico, o un tumor sólido.

En una realización, el inhibidor del FGFR o 3-(2,6-dicloro-3,5-dimetoxifenil)-1-(6-((4-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-1 -metilurea (Compuesto A5) se administra a una dosis de aproximadamente 100 125 mg (por ejemplo, por día), por ejemplo, aproximadamente 100 mg o aproximadamente 125 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de PI3K, Buparlisib (Compuesto A6), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/084786, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PI3K es Buparlisib (Compuesto A6) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/084786. En una realización, se utiliza una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con Buparlisib (Compuesto A6), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/084786, para tratar un trastorno como, por ejemplo, un cáncer de próstata, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer endocrino, una leucemia, un cáncer de ovario, un melanoma, un cáncer de vejiga, un cáncer de mama, un cáncer del aparato reproductor femenino, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer colorrectal, un glioblastoma multiforme, un tumor sólido, un linfoma no Hodgkin, un trastorno de la hematopoyesis, o un cáncer de cabeza y cuello.

En una realización, el inhibidor de PI3K o Buparlisib (Compuesto A6) se administra a una dosis de aproximadamente 100 mg (por ejemplo, por día).

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se utiliza en combinación con un inhibidor de FGFR, 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4-((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxalina-5-carboxamida (Compuesto A7) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2009/141386 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de FGFR es 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4-((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxalina-5-carboxamida (Compuesto A7) o un compuesto divulgado en una Publicación PCT No. WO 2009/141386. En una realización, el inhibidor de FGFR es 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4-((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxalina-5-carboxamida (Compuesto A7). En una realización, una molécula de anticuerpo contra PD-1 se usa en combinación con 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4-((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxafina-5-carboxamida (Compuesto A7), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2009/141386, para tratar un trastorno como un cáncer caracterizado por angiogénesis.

En una realización, el inhibidor del FGFR o 8-(2,6-difluoro-3,5-dimetoxifenil)-N-(4-((dimetilamino)metil)-1H-imidazol-2-il)quinoxalina-5-carboxamida (Compuesto A7) se administra a una dosis de, por ejemplo, de aproximadamente 3 mg a aproximadamente 5 g, más preferiblemente de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 1.5 g por persona y día, opcionalmente dividida en 1 a 3 dosis únicas que pueden, por ejemplo, ser del mismo tamaño.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de PI3K, (S)-N1-(4-metil-5-(2-( 1,1,1trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4-il)tiazol-2-il)pirrolidin-1,2-dicarboxamida (Compuesto A8) o un compuesto divulgado Publicación PCT No. WO 2010/029082 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PI3K es (S)-N1-(4-metil-5-(2-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4-il)tiazol-2-il)pirrolidin-1,2-dicarboxamida (Compuesto A8) o un compuesto divulgado Publicación PCT No. WO 2010/029082. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo contra PD-1 en combinación con (S)-N1-(4-metil-5-(2-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4-il)tiazol-2-il)pirrolidin-1,2-dicarboxamida (Compuesto A8), o un compuesto divulgado Publicación PCT No. WO 2010/029082, para tratar un trastorno como un cáncer gástrico, un cáncer de mama, un cáncer de páncreas, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un tumor sólido y un cáncer de cabeza y cuello.

En una realización, el inhibidor de PI3K o (S)-N1-(4-metil-5-(2-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4-il)tiazol-2-il)pirrolidin-1,2-dicarboxamida (Compuesto A8) se administra a una dosis de aproximadamente 150 300, 200-300, 200-400, o 300-400 mg (por ejemplo, al día), por ejemplo, aproximadamente 200, 300 o 400 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor del citocromo P450 (por ejemplo, un inhibidor de CYP17) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/149755, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor del citocromo P450 (por ejemplo, el inhibidor de CYP17) es un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/149755. En una realización, se utiliza una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2010/149755, para tratar el cáncer de próstata.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se utiliza en combinación con un inhibidor de HDM2, (S)-1-(4-clorofenil)-7-isopropoxi-6-metoxi-2-(4-(metil((1r,4S)-4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil)metil)amino)fenil)-1,2-dihidroisoquinolin-3(4H)-ona (Compuesto A10) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2011/076786 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento). En una realización, el inhibidor de HDM2 es (S)-1-(4-clorofenil)-7-isopropoxi-6-metoxi-2-(4-(metil((1r,4S)-4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil)metil)amino)fenil)-1,2-dihidroisoquinolin-3(4H)-ona (Compuesto A10) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2011/076786. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con (S)-1-(4-clorofenil)-7-isopropoxi-6-metoxi-2-(4-(metil((1r,4S)-4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil)metil)amino)fenil)-1,2-dihidroisoquinolin-3(4H)-ona (Compuesto A10), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2011/076786, para tratar un trastorno como un tumor sólido.

En una realización, el inhibidor de HDM2 o (S)-1-(4-clorofenil)-7-isopropoxi-6-metoxi-2-(4-(metil((1r,4S)-4-(4-metil-3-oxopiperazin-1-il)ciclohexil)metil)amino)fenil)-1,2-dihidroisoquinolin-3(4H)-ona (Compuesto A10) se administra a una dosis de aproximadamente 400 a 700 mg,p. Ej.g., administrada tres veces por semana, 2 semanas sí y una semana no. En algunas realizaciones, la dosis es de aproximadamente 400, 500, 600 o 700 mg; aproximadamente 400-500, 500-600 o 600-700 mg, por ejemplo, administrados tres veces por semana.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe aquí, incluye o se usa en combinación con un agente quelante de hierro, Deferasirox (también conocido como EXJADE; Compuesto A11), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 1997/049395 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el agente quelante del hierro es Deferasirox o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 1997/049395. En una realización, el agente quelante del hierro es Deferasirox (Compuesto A11). En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con Deferasirox (Compuesto A11), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 1997/049395, para tratar la sobrecarga de hierro, hemocromatosis, o mielodisplasia.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de aromatasa, Letrozol (también conocido como FEMARA; Compuesto A12), o un compuesto divulgado en US 4,978,672 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de aromatasa es Letrozol (Compuesto A12) o un compuesto divulgado en la Patente US 4,978,672. En una realización, se utiliza una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con Letrozol (Compuesto A12), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. 4,978,672, para tratar un trastorno como un cáncer, un leiomiosarcoma, un cáncer de endometrio, un cáncer de mama, un cáncer del aparato reproductor femenino o una deficiencia hormonal.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se utiliza en combinación con un inhibidor de PI3K, por ejemplo, un inhibidor pan-PI3K, (4S,5R)-3-(2'-amino-2-morfolino-4'-(trifluorometilH4,5'-bipirimidin]-6-il)-4-(hidroximetil)-5-metiloxazolidin-2-ona (Compuesto A13) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2013/124826 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PI3K es (4S,5R)-3-(2'-amino-2-morfolino-4'-(trifluorometilH4,5'-bipirimidin]-6-il)-4-(hidroximetil)-5-metiloxazolidin-2-ona (Compuesto A13) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2013/124826. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con (4S,5R)-3-(2'-amino-2-morfolino-4'-(trifluorometil)-[4,5'-bipirimidin]-6-il)-4-(hidroximetil)-5-metiloxazolidin-2-ona (Compuesto A13), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2013/124826, para tratar un trastorno como un cáncer o un tumor sólido avanzado.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se utiliza en combinación con un inhibidor de p53 y/o una interacción p53/Mdm2, (S)-5-(5-cloro-1-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)-6-(4-clorofenil)-2-(2,4-dimetoxipirimidin-5 -il)-1 -isopropil-5,6-dihidropirrolo [3,4-d] imidazol-4(1H)-ona (Compuesto A14), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2013/111105 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el p53 y/o un inhibidor de la interacción p53/Mdm2 es (S)-5-(5-cloro-1-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)-6-(4-clorofenil)-2-(2,4-dimetoxipirimidin-5-il)-1-isopropil-5,6-dihidropirrolo[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (Compuesto A14) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2013/111105. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo contra PD-1 en combinación con (S)-5-(5-cloro-1-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)-6-(4-clorofenil)-2-(2,4-dimetoxipirimidin-5-il)-1-isopropil-5,6-dihidropirrolo[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (Compuesto A14), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2013/111105, para tratar un trastorno como un cáncer o un sarcoma de tejidos blandos.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R es 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. W<o>2005/073224. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, para tratar un trastorno como el cáncer.

Los macrófagos diferenciados por CSF-1, a veces denominados macrófagos M2 o macrófagos asociados a tumores (TAM) cuando están presentes en tejidos malignos, son generalmente pro-tumorigénicos y pueden caracterizarse, por ejemplo, por la expresión de CSF-1R y CD163. En el cáncer, los macrófagos diferenciados por CSF-1 a menudo reflejan una integridad tisular disminuida y/o un proceso adaptativo al que recurren los tumores para favorecer el crecimiento (Noy y Pollard (2014) Immunity, 41(1):49-61). Para ejercer su actividad pro-tumorigénica, los macrófagos M2 producen una serie de moléculas, por ejemplo, citoquinas, quimiocinas, factores de crecimiento, hormonas, proteasas remodeladoras de la matriz y metabolitos como CSF-1 y CCL2, prostaglandina E2 y patrones moleculares asociados a daños como la proteína de caja 1 del grupo de alta movilidad, trifosfato de adenosina extracelular y componentes degradados de la matriz extracelular (Ruffell et al. (2012) Trends Immunol; 33(3):119-26; Zelenay et al. (2013) Trends Immunol; 34(7):329-35). Estudiosin vivohan revelado que los macrófagos M2 también median en la resistencia a la quimioterapia proporcionando factores de supervivencia y/o activando programas antiapoptóticos en células malignas. Por ejemplo, la neutralización del CSF-1 mejora la respuesta a la quimioterapia en carcinomas mamarios (DeNardo et al. (2011) Cancer Discov. 1, 54-67). Los TAM están asociados a la señalización del factor de crecimiento endotelial vascular y son reguladores de la angiogénesis tumoral (Murdoch et al. (2008) Nat Rev Cáncer; 8(8):618-31; Ruffell et al. (2012) Trends Immunol; 33(3): 119-26). Los macrófagos M2 también pueden suprimir directamente la proliferación de células T CD8+ en modelos tumorales murinos (DeNardo et al. (2011) Cancer Discov. 1, 54 67; Doedens et al. (2010) Cancer Res; 70(19):7465-75; Movahedi et al. (2010) Cancer Res; 70(14):5728-39; Ruffell et al. (2014) Cancer Cell; 26, 623-637). Por ejemplo, los macrófagos suprimen directamente las respuestas de las células T a través de la expresión de PD-L1 en carcinomas hepatocelulares y ováricos (Kuang et al. (2009) J ExpMed; 206(6):1327-37; Kryczek et al. (2006) J ExpMed; 203(4):871-81).

Los datos preclínicos indican que las TAM pueden servir como diana terapéutica, al menos en parte, porque representan orquestadores clave de varios procesos promotores de tumores, por ejemplo, el escape de la vigilancia inmunitaria. Por ejemplo, la diferenciación, migración y supervivencia de las TAM pueden estar reguladas por el CSF-1R al entrar en contacto con el CSF soluble. El CSF-1R es miembro de la familia de receptores tirosina quinasa de los receptores de factores de crecimiento, que incluye varios protooncogenes conocidos (Ries et al. (2014) Cancer Cell 25(6):846-59). Al interferir con la vía<c>S<f>-1R, el compuesto A15 indujo la reducción y reprogramación de los macrófagos de tipo M2 en modelos animales de glioma, proporcionando eficacia antitumoral mediante la eliminación/reprogramación de los TAM inmunosupresores. Como monoterapia, la inhibición del CSF-1R por sí sola impide el crecimiento de líneas celulares de PDAC implantadas ortotópicamente (Mitchem et al. (2013) Cancer Res; 73(3): 1128-41) e induce la regresión del glioblastoma multiforme (GBM) (Pyontech et al. (2013) Nat Med; 19(10): 1264-72).

La inmunidad antitumoral dentro del microambiente tumoral puede ser suprimida por una variedad de leucocitos infiltrantes del tumor, incluyendo Tregs, MDSCs y TAMs. Los TAM y los MDSC pueden encontrarse en gran número en los tumores y su actividad inmunomoduladora se ejerce a menudo localmente dentro del microambiente tumoral. Sin querer ceñirnos a la teoría, se cree que los mecanismos empleados por estos tipos celulares para suprimir la inmunidad efectiva incluyen, por ejemplo, la secreción de citoquinas como IL-10 y TGF-p, y la expresión de receptores inhibidores, por ejemplo, c TlA-4 y PD-L1. La eliminación de las TAM y MDSC que son importantes en la inmunosupresión generativa proporciona, al menos en parte, la base para estrategias de combinación con inhibidores de puntos de control como la terapia anti-PD-1 en aquellas neoplasias malignas en las que las TAM contribuyen a la patogénesis tumoral. En consecuencia, un inhibidor del CSF-1R puede mejorar la eficacia clínica de un inhibidor de puntos de control, como una molécula de anticuerpo anti-PD-1, y/o inducir un beneficio clínico, por ejemplo, en pacientes con tumores que muestran una alta expresión de TAM (por ejemplo, cáncer cerebral (por ejemplo, glioblastoma), cáncer de mama (por ejemplo, TNBC) o cáncer de páncreas) y en aquellos que no responden eficazmente a una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como agente único.

Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, inhibe selectivamente la actividad quinasa del CSF-1R. El compuesto A15 inhibe potentemente el CSF-1R (IC50 12 nM) según se determinó en un ensayo de quinasain vitrocon dominio de quinasa CSF-1R recombinante. La actividad celular del compuesto A15 se demostró mediante la reducción de los niveles tirosina-fosforilados del CSF-1R en células (EC50 pCSF-1R 58 nM) y un efecto antiproliferativo significativo en la línea celular dependiente del factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF) MNFS-60 (EC5071 nM). Se ha demostrado la selectividad bioquímica y celular del compuesto A15 con un panel de más de 200 quinasas y a nivel celular mediante ensayos inmunoenzimáticos de autofosforilación (ELISA) y ensayos de proliferación de BaF3 transfectados con quinasas. Las ICso para un subconjunto relevante de quinasas, incluidas las RTK de clase III relacionadas cKit y PDGFRp, fueron como al menos >3 pM. La selectividad quinasa del compuesto A15 se ha confirmado a nivel celular mediante ensayos de autofosforilación (ensayos ECL ELISA) y ensayos de proliferación BaF3. Las ECso celulares para pPDGFRp, BAF3-PDGFRp y pcKit fueron > 2 pM todas las demás líneas celulares de BaF3 fueron >10 pM mientras que las EC50 celulares de proliferación dependiente de pCSF-1R y MCSF fueron < 71 nM.

Los efectos biológicos de la señalización CSF-1R incluyen, por ejemplo, la diferenciación, proliferación, migración y/o supervivencia de los macrófagos precursores y osteoclastos del linaje monocítico. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, un mecanismo por el que el Compuesto A15 media la actividad antitumoral a través de la señalización CSF-1R es cuando los macrófagos asociados a tumores (TAM) se reducen o reprograman a un macrófago fagocítico clásicamente activado (Pyonteck et al. (2013) Nat Med; 19(10): 1264-72; Mao et al. (2016) Clin Cancer Res. Mar 8, DOI: 10.1158/1078-0432.CRC-15-1912, Epub ahead of print). Se ha demostrado que el compuesto A15 (200 mg/kg diarios) induce la regresión de tumores establecidos y aumenta la supervivencia en un modelo genético de ratón de glioblastoma, y ralentiza el crecimiento de xenoinjertos proneurales derivados de glioblastoma (Pyonteck et al. (2013) Nat Med; 19(10): 1264-72). En el modelo genético (impulsado por el factor de crecimiento derivado de plaquetas B, o ratones PDG), la eficacia del compuesto A15 se acompañó de una aparente reprogramación del fenotipo M2 a M1. También se ha demostrado el potencial clínico del compuesto A15 (200 mg/kg diarios durante 10 días) en un modelo animal de neuroblastoma (Mao et al. (2016) Clin Cancer Res. Mar 8, DOI: 10.1158/1078-0432.CRC-15-1912). Este estudio demostró que las células mieloides CSF-1R+ infiltrantes son supresoras y predicen un mal resultado clínico en pacientes con neuroblastoma. La adición del compuesto A15 recuperó el potencial de las células mieloides para estimular la proliferación de células T humanas (Mao et al. (2016) Clin Cáncer Res. Mar 8, DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-15-1912). Del mismo modo, se co-cultivaron monocitos primarios humanos con líneas celulares de neuroblastoma y luego se demostró que adquirían una fuerte capacidad supresora contra las células T autólogas. La adición del compuesto A15 fue capaz de inhibir la función supresora de los monocitos educados por el tumor sobre las células T CD8+ y CD4+ (Mao et al. (2016) Clin Cancer Res. Mar 8, DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-15-1912).

Como se describe en el Ejemplo 6, el Compuesto A15 también se probó en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1 de ejemplo en el modelo de cáncer colorrectal sinénico MC38, elegido en función de la presencia de TAM y la respuesta al anti-PD-1, y se demostró que inhibía el crecimiento tumoral y aumentaba la supervivencia en comparación con la molécula de anticuerpo anti-PD-1 sola.

En algunas realizaciones, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra según un esquema no continuo. Los datos preclínicos sugieren que se puede conseguir una actividad antitumoral comparable con determinados esquemas no continuos. Los experimentos en ratas y monos han mostrado una elevación de las transaminasas con una dosificación diaria continua. Estas elevaciones de las transaminasas son generalmente transitorias y puede seleccionarse un régimen de 7 días de inicio y 7 días de finalización para lograr un perfil tolerable y el agotamiento de TAM. En otras realizaciones, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra una vez a la semana. Los datos preclínicos sugieren que la administración una vez a la semana (Q1W) del Compuesto A15 funciona al menos tan bien como la dosis diaria en términos de depleción de TAMs y actividad antitumoral. En ciertas realizaciones, la dosis del inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, como se usa en la combinación, es de al menos dos (por ejemplo, al menos 3, 4, o 5) por debajo de la dosis más alta investigada de agente único para el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224. En algunas realizaciones, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 50 mg y 1500 mg, por ejemplo, entre 75 mg y 1000 mg, entre 100 mg y 900 mg, entre 200 mg y 800 mg, entre 300 mg y 700 mg, entre 400 mg y 600 mg, entre 100 mg y 700 mg, entre 100 mg y 500 mg, entre 100 mg y 300 mg, entre 700 mg y 900 mg, entre 500 mg y 900 mg, entre 300 mg y 900 mg, entre 75 mg y 150 mg, entre 100 mg y 200 mg, entre 200 mg y 400 mg, entre 500 mg y 700 mg, o entre 800 mg y 1000 mg, por ejemplo, a una dosis de 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg, 350 mg, 400 mg, 450 mg, 500 mg, 550 mg, 600 mg, 650 mg, 700 mg, 750 mg, 800 mg, 850 mg, 900 mg, 950 mg, o 1000 mg, por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días sí/7 días no), o dos veces por semana, una vez por semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas, o una vez cada cuatro semanas. En algunas realizaciones, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No.<w>O 2005/073224, se administra a una dosis de 100 mg, 150 mg, 300 mg, 600 mg o 900 mg. En otras realizaciones, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra diariamente, por ejemplo, según un programa de 7 días sí/7 días no, o una vez por semana. En algunas realizaciones, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 50 mg y 150 mg, por ejemplo, aproximadamente 100 mg, por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días sí/7días no). En otras realizaciones, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 100 mg y 200 mg, por ejemplo, aproximadamente 150 mg, por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días sí/7días no). En otras realizaciones, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1r ,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 200 mg y 400 mg, por ejemplo, aproximadamente 300 mg, por ejemplo, diariamente (según un programa de 7 días de administración/7 días de descanso). En otras realizaciones, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 500 mg y 700 mg, por ejemplo, aproximadamente 600 mg, por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días sí/7días no). En otras realizaciones, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 800 mg y 1000 mg, por ejemplo, alrededor de 900 mg, por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días sí/7días no).

En algunas realizaciones, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxicidohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 50 mg y 150 mg, por ejemplo, aproximadamente 100 mg, una vez a la semana. En otras realizaciones, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 100 mg y 200 mg, por ejemplo, aproximadamente 150 mg, una vez a la semana. En otras realizaciones, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 200 mg y 400 mg, por ejemplo, aproximadamente 300 mg, una vez a la semana. En otras realizaciones, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 500 mg y 700 mg, por ejemplo, aproximadamente 600 mg, una vez a la semana. En otras realizaciones, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación p CT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis de entre 800 mg y 1000 mg, por ejemplo, aproximadamente 900 mg, una vez a la semana.

En algunas realizaciones, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la PublicaciónCT No. WO 2005/073224, se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1). En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis de entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas. En otras realizaciones, el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas. En una realización, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 50 mg y 150 mg (por ejemplo, aproximadamente 100 mg), por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días de administración/7 días de descanso) o una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, o a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa. En otra realización, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 100 mg y 200 mg (por ejemplo, aproximadamente 150 mg), por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días de administración/7 días de descanso) o una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, o a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo,medianteinfusión intravenosa. En otra realización, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, aproximadamente 300 mg), por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días de administración/7 días de descanso) o una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, o a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo,medianteinfusión intravenosa. En otra realización, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 500 mg y 700 mg (por ejemplo, aproximadamente 600 mg), por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días de administración/7 días de descanso) o una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, o a una dosis entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa. En otra realización, el inhibidor de la tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra a una dosis entre 800 mg y 1000 mg (por ejemplo, alrededor de 900 mg), por ejemplo, diariamente (por ejemplo, según un programa de 7 días de administración/7 días de descanso) o una vez a la semana, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis de entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, o a una dosis de entre 200 mg y 400 mg (por ejemplo, a una dosis de 300 mg), por ejemplo, una vez cada 3 semanas, por ejemplo,medianteinfusión intravenosa.

En algunas realizaciones, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra por vía oral. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra por vía intravenosa. En algunas realizaciones, la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra mediante infusión intravenosa, por ejemplo, durante un periodo de 15 minutos a 3 horas, por ejemplo, durante un periodo de 30 minutos a 2 horas, por ejemplo, durante un periodo de 30 minutos, 1 hora, 1.5 horas o 2 horas. En ciertas realizaciones, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra antes de la administración de la molécula de anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, en ayunas. Por ejemplo, la administración de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 puede comenzar en cualquier momento después de la administración del inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224.

En ciertas realizaciones, el inhibidor de tirosina quinasa CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-hidroxiciclohexil)amino)benzo[d]tiazol-6-il)oxi)-N-metilpicolinamida (Compuesto A15), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2005/073224, se administra en combinación con el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un cáncer, por ejemplo, un tumor sólido (por ejemplo, un tumor sólido avanzado). Cánceres de ejemplo que pueden tratarse mediante la combinación incluyen, pero no se limitan a, un cáncer cerebral (por ejemplo, glioblastoma multiforme (GBM), por ejemplo, glioblastoma recurrente), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, NTBC)), o un cáncer de páncreas (por ejemplo, cáncer de páncreas avanzado). Las características comunes de estos cánceres incluyen, por ejemplo, una biología tumoral caracterizada por altos niveles de TAM en el microambiente tumoral que pueden contribuir a la evasión inmunitaria y la inmunosupresión. En algunas realizaciones, el bloqueo del CSF-1R junto con una terapia anti-PD-1 puede, por ejemplo, promover la reprogramación de los TAM y/o eliminar la supresión inmunitaria de los linfocitos infiltrantes tumorales (TIL).

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe aquí, incluye o se usa en combinación con un inductor de apoptosis y/o un inhibidor de angiogénesis, tal como mesilato de Imatinib (también conocido como GLEEVEC®; Compuesto A16) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO1999/003854 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito. En una realización, el inductor de apoptosis y/o un inhibidor de angiogénesis es mesilato de Imatinib (Compuesto A16) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO1999/003854. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con mesilato de Imatinib (Compuesto A16), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO1999/003854, para tratar un trastorno como un cáncer, un mieloma múltiple, un cáncer de próstata, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un linfoma, un cáncer gástrico, un melanoma, un cáncer de mama, un cáncer de páncreas, un cáncer digestivo/gastrointestinal, un cáncer colorrectal, un glioblastoma multiforme, un cáncer de hígado, un cáncer de cabeza y cuello, asma, esclerosis múltiple, alergia, demencia de Alzheimer, esclerosis lateral amiotrófica o artritis reumatoide.

En ciertas realizaciones, el mesilato de Imatinib (Compuesto A16) se administra a una dosis de aproximadamente 100 a 1000 mg, por ejemplo, aproximadamente 200 mg a 800 mg, aproximadamente 300 mg a 700 mg, o aproximadamente 400 mg a 600 mg, por ejemplo, aproximadamente 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, o 700 mg. El esquema de dosificación puede variar, por ejemplo, de un día sí y un día no a diario, dos o tres veces al día. En una realización, el mesilato de imatinib se administra a una dosis oral de aproximadamente 100 mg a 600 mg al día, por ejemplo, aproximadamente 100 mg, 200 mg, 260 mg, 300 mg, 400 mg o 600 mg al día.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de JAK, 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una sal dihidroclórica del mismo, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de JAK es 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una sal dihidroclórica del mismo, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo contra PD-1 en combinación con 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una sal dihidroclórica del mismo, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514, para tratar un trastorno como cáncer colorrectal, leucemia mieloide, cáncer hematológico, enfermedad autoinmune, linfoma no Hodgkin o trombocitemia.

En una realización, el inhibidor de JAK o una 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzamida (Compuesto A17), o una sal dihidrodórica del mismo se administra a una dosis de aproximadamente 400-600 mg (por ejemplo, al día), por ejemplo, aproximadamente 400, 500 o 600 mg, o aproximadamente 400-500 o 500-600 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe aquí, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de JAK, Fosfato de Ruxolitinib (también conocido como JAKAFI; Compuesto A18) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de JAK es fosfato de ruxolitinib (compuesto A18) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con fosfato de ruxolitinib (compuesto A18), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/070514, para tratar un trastorno como un cáncer de próstata, una leucemia linfocítica, un mieloma múltiple, un linfoma, un cáncer de pulmón, una leucemia, caquexia, un cáncer de mama, un cáncer de páncreas, artritis reumatoide, psoriasis, un cáncer colorrectal, una leucemia mieloide, un cáncer hematológico, una enfermedad autoinmune, un linfoma no Hodgkin o una trombocitemia.

En una realización, el inhibidor de JAK o Fosfato de Ruxolitinib (Compuesto A18) se administra a una dosis de aproximadamente 15-25 mg, por ejemplo, dos veces al día. En algunas realizaciones, la dosis es de aproximadamente 15, 20 o 25 mg, o de aproximadamente 15-20 o 20-25 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe aquí, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de desacetilasa (DAC), Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de DAC es Panobinostat (Compuesto A19) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con Panobinostat (Compuesto A19), un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, para tratar un trastorno tal como un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón de células pequeñas, un cáncer respiratorio/torácico, un cáncer de próstata, un mieloma múltiple, un síndrome mielodisplásico, un cáncer óseo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer endocrino, un linfoma, un cáncer neurológico, una leucemia, VIH/SIDA, un trastorno inmunitario, rechazo de trasplante, un cáncer gástrico, un melanoma, un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC)), un cáncer de páncreas, un cáncer colorrectal, un glioblastoma multiforme, una leucemia mieloide, un cáncer hematológico, un cáncer renal, un linfoma no Hodgkin, un cáncer de cabeza y cuello, un trastorno hematopoyético o un cáncer de hígado. En algunas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable por microsatélite (MSS CRC)), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de pulmón triple negativo (TNB<c>)).

En algunas realizaciones, el inhibidor de desacetilasa (DAC), Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, es un inhibidor de histona desacetilasas (HDACs). Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, el inhibidor de desacetilasa (DAC), Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493 pertenece a una clase de compuestos de ácido hidroxámico cinámico y es un pan-inhibidor de DACs (HDACs) de histonas de Clase I, II, y IV (y no histonas). Estas HDAC son moduladores epigenéticos e importantes dianas contra el cáncer debido a la desregulación de estas enzimas en muchos tipos de tumores. Las enzimas DAC también se dirigen a grupos de lisina en varias proteínas no histónicas como p53, a-tubulina, Hsp90 y HIF1-a. Así, en ciertas realizaciones, el inhibidor de la desacetilasa (DAC), Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, es un inhibidor pan-DAC. El inhibidor de desacetilasa (DAC), Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, puede ofrecer un enfoque multifacético para la inhibición de la proliferación y/o supervivencia de células cancerosas, por ejemplo, a través de sus efectos sobre la acetilación de histonas, la expresión génica, y/o la función oncogénica de proteínas no histonas como Hsp90. El panobinostat (compuesto A19), por ejemplo, como inhibidor pan-HDAC, es muy eficaz para inhibir la actividad HDAC de la mayoría de las isoformas de clase I, IIa, IIb y IV a bajas concentraciones nanomolares.

En algunas realizaciones, la combinación aquí descrita incluye un inhibidor de la desacetilasa (DAC), Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, y un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, los modificadores epigenéticos, como los inhibidores de HDAC, pueden utilizarse para mejorar la inmunoterapia. El panobinostat (compuesto A19) aumentó la expresión del gen PD-L1 en líneas celulares de melanoma, material de biopsia de melanoma cultivado y en ratones portadores de tumores. Panobinostat (Compuesto A19) también mejoró modestamente las respuestas al tratamiento con un inhibidor de PD-1 en ratones (Woods et al. (2015) Cancer Immunol. Res. p. 1375-85). Los datos clínicos indican que los modificadores epigenéticos, incluida la combinación de un inhibidor de HDAC con un inhibidor de DNMT, son activos en algunos pacientes con NSCLC (Juergens et al. (2011) Cancer Discov. p. 598-607). Los datos preclínicos indican que inmunoterapias como los inhibidores de PD-1 o CTLA-4 pueden aumentar esta actividad (Kim et al. (2014) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. p. 11774-9). En algunas realizaciones, el inhibidor de desacetilasa (DAC), Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, mejora, o se usa para mejorar, una inmunoterapia, por ejemplo, una inmunoterapia que comprende un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1). En algunas realizaciones, el inhibidor de la desacetilasa (DAC), Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, y el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), cada uno se administra a una dosis y/o en un programa de tiempo, que en combinación, logra una actividad antitumoral deseada.

En algunas realizaciones, la dosis aprobada de panobinostat (compuesto A19) en el mieloma múltiple es de 20 mg en días alternos, tres veces a la semana (TIW), dos semanas de inicio/una semana de descanso de panobinostat (compuesto A19) durante un ciclo de 21 días. En otras realizaciones, también se ha ensayado en pacientes con mieloma un programa de administración menos frecuente de una semana sí/una semana no durante un ciclo de 28 días utilizando dosis de 30 mg - 60 mg TIW. En ciertas realizaciones, el inhibidor de la desacetilasa (DAC), Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, se administra a una dosis de 10 mg TIW en el esquema de una semana sí/una semana no, por ejemplo, en combinación con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1). La dosis y el programa pueden aumentarse al régimen de 20 mg de TIW, dos semanas sí/una semana no, si es factible basándose en la seguridad y tolerabilidad de la dosis más baja y el programa menos frecuente. Si la dosis de 10 mg de TIW en el régimen de una semana sí/una semana no es inaceptablemente tóxica, se puede utilizar una dosis más baja o un régimen menos frecuente.

En una realización, el inhibidor de DAC, Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493 se administra a una dosis de aproximadamente 20 mg (por ejemplo, por día).

En una realización, el inhibidor de DAC, Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, se administra a una dosis entre 2 mg y 30 mg, entre 5 mg y 20 mg, o entre 10 mg y 15 mg, por ejemplo, 2 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 25 mg, o 30 mg, por ejemplo, una vez al día, tres veces en una semana, o una vez a la semana, por ejemplo, en el esquema de una semana sí/una semana no, una semana sí/tres semanas no, o dos semanas sí/una semana no. En una realización, el inhibidor de DAC o Panobinostat (Compuesto A19) se administra a una dosis de entre 5 mg y 15 mg, por ejemplo, aproximadamente 10 mg, por ejemplo, tres veces por semana, por ejemplo, en el esquema de una semana sí/tres semanas no o una semana sí/una semana no. En otra realización, el inhibidor de DAC o Panobinostat (Compuesto A19) se administra a una dosis de entre 15 mg y 25 mg, por ejemplo, 20 mg, por ejemplo, tres veces por semana, por ejemplo, en el programa de dos semanas de inicio/tres semanas de descanso.

En algunas realizaciones, el inhibidor de DAC, Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, se administra por vía oral.

En una realización, el inhibidor de DAC, Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, se administra a una dosis entre 5 mg y 15 mg (por ejemplo, a una dosis de 10 mg), por ejemplo, tres veces en una semana (por ejemplo, en el programa de una semana sí/tres semanas no o una semana sí/una semana no), por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa.

En una realización, el inhibidor de DAC, Panobinostat (Compuesto A19), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/072493, se administra en combinación con el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un cáncer colorrectal (por ejemplo, un MSS CRC), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo por ejemplo (TNBC)).

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se utiliza en combinación con un inhibidor de uno o más de los citocromos P450 (por ejemplo, 11B2), aldosterona o angiogénesis, Osilodrostat (Compuesto A20), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2007/024945 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de uno o más de los citocromos P450 (por ejemplo, 11B2), aldosterona o angiogénesis es Osilodrostat (Compuesto A20) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2007/024945. En una realización, se utiliza una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con Osilodrostat (Compuesto A20), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2007/024945, para tratar un trastorno como el síndrome de Cushing, la hipertensión o la terapia de la insuficiencia cardíaca.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en US 8,552,003 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno del sistema inmunitario.g ,un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de IAP es (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en la Patente US 8.552.003. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. 8,552,003, para tratar un trastorno como un mieloma múltiple, un cáncer colorrectal (CLC), un cáncer de pulmón (por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC)), un cáncer de ovario, un cáncer de páncreas o un trastorno de la hematopoyesis. En algunas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable por microsatélite (MSS CRC)), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de pulmón triple negativo [TNBC]).

En algunas realizaciones, el inhibidor IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, es una pequeña molécula oral SMAC-mimética que se une al dominio BIR3 de CIAP1, XIAP, y opcionalmente CIAP2. Las proteínas CIAP1 y CIAP2 son componentes de complejos proteicos de la familia de receptores de muerte del TNF. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, la unión del inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, puede activar una función E3 ligasa de CIAP1, inducir la ubiquitinación y degradación proteosomal de CIAP1, y/o activar la señalización NF-kB corriente abajo de los receptores (Gyrd-Hansen M, Meier P (2010) Nat. Rev. Cancer p. 561-74). En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se usa para aumentar la inmunidad antitumoral en un sujeto. Por ejemplo, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, puede potenciar la proliferación y función de células T humanas y de ratónin vitrotras coestimulación, y/o la respuesta a vacunas antitumorales profilácticas y terapéuticasin vivo,por ejemplo, mediante la activación de NF-kB (Dougan et al. (2010) J. Exp. Med. p. 2195-206). La actividad de NF-kB está implicada en el cebado cruzado de células T durante la muerte celular inmunogénica en respuesta a la liberación de moléculas inflamatorias asociadas al peligro (Yatim et al. (2015) Science p. 328 34), lo que indica un mecanismo para mejorar la función de las células T y la inmunidad antitumoral. Como otro ejemplo, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No.

8.552.003, puede proteger de la apoptosis a las células dendríticas derivadas de monocitos, de forma similar a la ligadura de CD40 (Knights et al. (2013) Cancer Immunol. Immunother. p. 321-35).

Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, es una pequeña molécula disponible por vía oral que activa la señalización NF-kB corriente abajo de los miembros de la familia de receptores TNF. El NF-<k>B es un regulador maestro de la transcripción en las células inmunitarias, y también actúa en las células tumorales directamente (Perkins (2012) Nat. Rev. Cancer p. 121-32). Datos preclínicos sugieren que la actividad de NF-kB es necesaria para la cebado cruzado de linfocitos T CD8+ sometidos a muerte celular inmunogénica (Yatim et al. (2015) Science p. 328-34). El compuesto A21 estimuló la proliferación de linfocitos T, indujo IFNgamma y suprimió la producción de IL-10in vitro. Losestudios clínicos con el compuesto A21 demostraron la inducción de citoquinas circulantes como TNFalfa, IL-8, IL-10 y CCL2 (Infante et al. (2014) J. Clin. Oncol. p. 3103-10). Los datos clínicos sugieren que el Compuesto A21 aumentó la tasa de respuesta patológica completa del TNBC al tratamiento con paclitaxel. En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, potencia, o se usa para potenciar, una actividad antitumoral del inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, y el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), se administran cada uno a una dosis y/o en un horario que, en combinación, consigue una actividad antitumoral deseada.

En una realización, el inhibidor de IAP o (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en US 8,552,003 se administra a una dosis de aproximadamente 1800 mg o menos, por ejemplo, una vez por semana.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IAP, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra a una dosis entre aproximadamente 160 mg y aproximadamente 1800 mg, entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 1200 mg, entre aproximadamente 300 mg y aproximadamente 900 mg, entre 400 mg y aproximadamente 800 mg, o entre aproximadamente 500 mg y aproximadamente 700 mg, por ejemplo, a una dosis de aproximadamente 300 mg, aproximadamente 400 mg, aproximadamente 500 mg, aproximadamente 600 mg, aproximadamente 700 mg, aproximadamente 800 mg o aproximadamente 900 mg, por ejemplo, una vez a la semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas o una vez cada cuatro semanas.

En ciertas realizaciones, el inhibidor de IAP, por ejemplo, (S)-N-((S)-1-ciclohexil-2-((S)-2-(4-(4-fluorobenzoil)tiazol-2-il)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2-(metilamino)propanamida (Compuesto A21) o un compuesto divulgado en la Patente U.S. No. 8,552,003, se administra en combinación con el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar cáncer colorrectal (por ejemplo, MSS CRC), cáncer de pulmón (por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o cáncer de mama (por ejemplo, cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, NTBC)).

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación un inhibidor de Smoothened (SMO), fosfato de Sonidegib (Compuesto A22), (R)-2-(5-(4-(6-bencil-4,5-dimetilpiridazin-3-il)-2-metilpiperazin-1 -il)pirazin-2-il)propan-2-ol (Compuesto A25), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/131201 o WO 2010/007120 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de SMO es fosfato de Sonidegib (Compuesto A22), (R)-2-(5-(4-(6-bencil-4,5-dimetilpiridazin-3-il)-2-metilpiperazin-1-il)pirazin-2-il)propan-2-ol (Compuesto A25), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. W o 2007/131201 o w O 2010/007120. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con fosfato de sonidegib (compuesto A22), (R)-2-(5-(4-(6-bencil-4,5-dimetilpiridazin-3-il)-2-metilpiperazin-1-il)pirazin-2-il)propan-2-ol (compuesto A25), o un compuesto divulgado en la Publicación Pc T No. WO 2007/131201 o WO 2010/007120 para tratar un trastorno como un cáncer, un meduloblastoma, un cáncer de pulmón de células pequeñas, un cáncer de próstata, un carcinoma basocelular, un cáncer de páncreas o una inflamación.

En ciertas realizaciones, el fosfato de sonidegib (Compuesto A22) se administra a una dosis de aproximadamente 20 a 500 mg, por ejemplo, aproximadamente 40 mg a 400 mg, aproximadamente 50 mg a 300 mg, o aproximadamente 100 mg a 200 mg, por ejemplo, aproximadamente 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg o 300 mg. El programa de dosificación puede variar, por ejemplo, de un día sí y otro no a diario, dos o tres veces al día.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de Alk, ceritinib (también conocido como ZYKADIA; Compuesto A23) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/131201 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de Alk es ceritinib (Compuesto A23) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/131201. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con ceritinib (Compuesto A23), o un compuesto divulgado en la PublicaciónC<t>No. WO 2007/131201, para tratar un trastorno tal como cáncer de pulmón de células no pequeñas o tumores sólidos.

En una realización, el inhibidor de Alk o ceritinib (Compuesto A23) se administra a una dosis de aproximadamente 750 mg, por ejemplo, una vez al día.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se utiliza en combinación con un inhibidor de JAK y/o CDK4/6, 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5-(piperazin-1-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A24), o un compuesto divulgado en la Patente U.S. 8,415,355 o Patente U.S.

8,685,980 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de JAK y/o CDK4/6 es 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5-(piperazin-1-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A24) o un compuesto divulgado en la Patente U.S.

8.415.355 o Patente U.S. 8,685,980. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5-(piperazin-1-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A24), o un compuesto divulgado en U<s>8,415,355 o US 8,685,980, para tratar un trastorno como un linfoma, un cáncer neurológico, un melanoma, un cáncer de mama o un tumor sólido.

En una realización, el inhibidor de JAK y/o CDK4/6 o 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5-(piperazin-1-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A24) se administra a una dosis de aproximadamente 200-600 mg, por ejemplo, por día. En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 200, 300, 400, 500 o 600 mg, o de aproximadamente 200-300, 300-400, 400-500 o 500-600 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación un inhibidor del receptor de prolactina (PRLR), una molécula de anticuerpo monoclonal humano (Compuesto A26) como se divulga en la Patente US 7,867,493), para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de PRLR es un anticuerpo monoclonal humano (Compuesto A26) descrito en US 7,867,493. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con una molécula de anticuerpo monoclonal humano (Compuesto A26) descrito en la Patente US 7,867,493 para tratar un trastorno, por ejemplo, un cáncer, un cáncer de próstata o un cáncer de mama.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de la PIM-quinasa, N-(4-((1R,3S,5S)-3-amino-5-metilciclohexil)piridin-3-il)-6-(2,6-difluorofenil)-5-fluoropicolinamida (Compuesto A27) o un compuesto divulgado en la Publicación p Ct No. WO 2010/026124 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de quinasa PIM es N-(4-((1R,3S,SS)-3-amino-5-metilciclohexil)piridin-3-il)-6-(2,6-difluorofenil)-5-fluoropicolinamida (Compuesto A27) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/026124. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con N-(4-((1R,3S,5S)-3-amino-5-metilciclohexil)piridin-3-il)-6-(2,6-difluorofenil)-5 - fluoropicolinamida (Compuesto A27), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/026124, para tratar un trastorno como un mieloma múltiple, un síndrome mielodisplásico, una leucemia mieloide o un linfoma no Hodgkin.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación un inhibidor de la señalización Wnt, 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28) o un compuesto divulgado en publicación PCT No. WO 2010/101849 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de la señalización Wnt es 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28) o un compuesto divulgado en publicación PCT No. WO 2010/101849. En una realización, el inhibidor de la señalización Wnt es 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28). En una realización, se usa una molécula de anticuerpo contra PD-1 en combinación con 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28), o un compuesto divulgado en publicación PCT No. W<o>2010/101849, para tratar un trastorno tal como un tumor sólido (por ejemplo, un cáncer de cabeza y cuello, un carcinoma de células escamosas, un cáncer de mama, un cáncer de páncreas o un cáncer de colon). En ciertas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer de piel (por ejemplo, un melanoma), un tumor sólido con inestabilidad de microsatélites alta (MSI-alta), un cáncer de páncreas o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (T<n>B<c>)).

En ciertas realizaciones, 2-(2',3-dimetil-[2,4'-bipiridin]-5-il)-N-(5-(pirazin-2-il)piridin-2-il)acetamida (Compuesto A28) se administra a una dosis de aproximadamente 1 a 50 mg, por ejemplo, aproximadamente 2 mg a 45 mg, aproximadamente 3 mg a 40 mg, aproximadamente 5 mg a 35 mg, 5 mg a 10 mg o aproximadamente 10 mg a 30 mg, por ejemplo, aproximadamente 2 mg, 5 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg o 40 mg. El programa de dosificación puede variar, por ejemplo, de un día sí y otro no a diario, dos o tres veces al día.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe aquí, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de BRAF, Encorafenib (Compuesto A29), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2011/025927 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de BRAF es Encorafenib (Compuesto A29) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2011/025927. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con Encorafenib (Compuesto A29), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2011/025927, para tratar un trastorno como un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un melanoma o un cáncer colorrectal.

En una realización, el inhibidor de BRAF o Encorafenib (Compuesto A29) se administra a una dosis de aproximadamente 200-300, 200-400 o 300-400 mg, por ejemplo, por día. En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 200, aproximadamente 300 o aproximadamente 400 mg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación un inhibidor de CDK4/6, 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5-((1R,6S)-9-metil-4-oxo-3,9-diazabiciclo[4.2.1]nonan-3-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A30), o un compuesto divulgado en publicación PCT No. WO 2011/101409 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de CDK4/6 es 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5-((1R,6S)-9-metil-4-oxo-3,9-diazabiciclo[4.2.1]nonan-3 -il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3 -d]pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A30) o un compuesto divulgado en publicación PCT No. Wo 2011/101409. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo contra PD-1 en combinación con 7-ciclopentil-N,N-dimetil-2-((5-((1R,6S)-9-metil-4-oxo-3,9-diazabiciclo[4.2.1]nonan-3-il)piridin-2-il)amino)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-carboxamida (Compuesto A30), o un compuesto divulgado en publicación PCT No. WO 2011/101409, para tratar un trastorno como un cáncer, un linfoma de células del manto, un liposarcoma, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un melanoma, un cáncer de esófago de células escamosas o un cáncer de mama.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de HER3, el Compuesto A31, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/022814, para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de HER3 es el Compuesto A31 o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2012/022814. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con el Compuesto A31, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT WO 2012/022814, para tratar un trastorno tal como un cáncer gástrico, un cáncer esofágico, un cáncer de cabeza y cuello, un carcinoma de células escamosas, un cáncer de estómago, un cáncer de mama (por ejemplo, cáncer de mama metastásico), o un cáncer digestivo/gastrointestinal.

En algunas realizaciones, el compuesto A31 es una molécula de anticuerpo monoclonal humano.

En una realización, el inhibidor de HER3 o el Compuesto A31 se administra a una dosis de aproximadamente 3, 10, 20 o 40 mg/kg, por ejemplo, una vez por semana (QW). En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 3-10, 10-20, o 20-40 mg/kg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe aquí, incluye o se usa en combinación un inhibidor de FGFR2 y/o FGFR4, el Compuesto A32, o un compuesto divulgado en una publicación Publicación PCT No. WO 2014/160160 (por ejemplo, un conjugado anticuerpo-molécula-fármaco contra un FGFR2 y/o FGFR4, por ejemplo, mAb 12425), para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de FGFR2 y/o FGFR4 es el Compuesto A32 o un compuesto divulgado en una publicación Publicación PCT No. WO 2014/160160. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con el Compuesto A32, o un compuesto como se describe en la Tabla 7, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer gástrico, un cáncer de mama, un rabdomiosarcoma, un cáncer de hígado, un cáncer suprarrenal, un cáncer de pulmón, un cáncer de esófago, un cáncer de colon o un cáncer de endometrio.

En algunas realizaciones, el Compuesto A32 es un conjugado anticuerpo-molécula-fármaco contra un FGFR2 y/o FGFR4, por ejemplo, mAb 12425.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe aquí, incluye o se usa en combinación un inhibidor de M-CSF, el Compuesto A33, o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2004/045532 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo o fragmento Fab contra M-CSF), para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí. En una realización, el inhibidor de M-CSF es el compuesto A33 o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2004/045532. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con el Compuesto A33, o un compuesto como el descrito en la Publicación p Ct No. WO 2004/045532, para tratar un trastorno como un cáncer, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, o sinovitis villonodular pigmentada (PVNS).

En las realizaciones, el Compuesto A33 es una molécula de anticuerpo monoclonal contra el M-CSF o un fragmento (por ejemplo, fragmento Fab) del mismo. En realizaciones, el inhibidor de M-CSF o el Compuesto A33 se administra a una dosis media de aproximadamente 10mg/kg.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de MEK, Binimetinib (Compuesto A34), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2003/077914 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de MEK es Binimetinib (Compuesto A34), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2003/077914. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con binimetinib (compuesto A34), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2003/077914, para tratar un trastorno como un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un trastorno genético multisistémico, un melanoma, un cáncer de ovario, un cáncer digestivo/gastrointestinal, una artritis reumatoide o un cáncer colorrectal.

En una realización, el inhibidor de MEK o Binimetinib (Compuesto A34) se administra a una dosis de aproximadamente 45 mg, por ejemplo, dos veces al día.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación un inhibidor de uno o más de c-KIT, liberación de histamina, Flt3 (por ejemplo, FLK2/STK1) o PKC, Midostaurin (Compuesto A35) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. Wo 2003/037347 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor es Midostaurin (Compuesto A35) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2003/037347. En una realización, el inhibidor de uno o más de c-KIT, liberación de histamina, Flt3 (por ejemplo, FLK2/STK1) o PKC es Midostaurin. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con Midostaurina (Compuesto A35), o el compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2003/037347, para tratar un trastorno como un cáncer, un cáncer colorrectal, una leucemia mieloide, un síndrome mielodisplásico, un deterioro mascular relacionado con la edad, una complicación diabética o un trastorno dermatológico.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe aquí, incluye o se usa en combinación con un inhibidor TOR (por ejemplo, inhibidor mTOR), Everolimus (también conocido como AFINITOR; Compuesto A36) o un Compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito aquí). En una realización, el inhibidor de TOR es Everolimus (Compuesto a 36) o un Compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con Everolimus (Compuesto A36) para tratar un trastorno como un cáncer colorrectal, una enfermedad pulmonar intersticial, un cáncer de pulmón de células pequeñas, un cáncer respiratorio/torácico, un cáncer de próstata, un mieloma múltiple, un sarcoma, una degeneración macular relacionada con la edad,un cáncer óseo, una esclerosis tuberosa, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer endocrino, un linfoma, un trastorno neurológico, un astrocitoma, un cáncer cervical, un cáncer neurológico, una leucemia, un trastorno inmunitario, un rechazo de trasplante, un cáncer gástrico, un melanoma, epilepsia, un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (TNBC), o un cáncer de vejiga. En algunas realizaciones, el cáncer se elige entre un cáncer colorrectal (por ejemplo, un cáncer colorrectal estable por microsatélite (MSS CRC)), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de pulmón triple negativo [TNBC]).

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, y el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), cada uno se administra a una dosis y/o en un cronograma, que en combinación, logra una actividad antitumoral deseada.

En algunas realizaciones, la dosis de everolimus (Compuesto A36) aprobada para indicaciones de cáncer en adultos (por ejemplo, cáncer de mama (por ejemplo, TNBC), carcinoma de células renales y tumores neuroendocrinos (por ejemplo, un tumor de carcinoma pulmonar atípico) es de 10 mg diarios. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, el modelado y la simulación basados en la fosforilación mediada por mTOR de su diana descendente S6 quinasa (S6K) predijeron que un régimen de dosificación semanal de 20 mg inhibía la fosforilación de S6K mediada por mTOR casi por completo, un régimen de dosificación semanal de 5 mg inhibía la fosforilación de S6K en más del 50%, y un régimen de dosificación diario de 0.5 mg inhibía la fosforilación de S6K en más del 50%.5 mg inhibió la fosforilación de S6K en aproximadamente un 38% durante el intervalo de dosificación (Mannick et al. (2014) Sci. Transl. Med. Vol. 6, Issue 268, pp. 268ra179; Tanaka (2008) J. Clin. Oncol. p. 1596-602). Por consiguiente, en ciertas realizaciones, el inhibidor de mTOR, everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra a una dosis de 5 mg una vez por semana (QW), por ejemplo, en combinación con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1). En otras realizaciones, también puede usarse una dosis de 0.5 mg una vez al día (QD), por ejemplo, cuando la dosis de 5 mg una vez a la semana (QW) no se tolera bien. En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318 se administra a una dosis de 5 mg o menos una vez a la semana.

En una realización, el inhibidor TOR o Everolimus (Compuesto A36) se administra a una dosis de aproximadamente 2,5-20 mg/día. En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 2.5, 5, 10 o 20 mg/día, por ejemplo, aproximadamente 2,5-5, 5-10 o 10-20 mg/día.

En algunas realizaciones, el inhibidor de mTOR, Everolimus (Compuesto A36), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2014/085318, se administra en combinación con el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un cáncer colorrectal (por ejemplo, un MSS CRC), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo (por ejemplo, NTBC)).

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se utiliza en combinación un inhibidor de uno o más de VEGFR-2, PDGFRbeta, KIT o Raf quinasa C, 1-metil-5-((2-(5-(trifluorometil)-1H-imidazol-2-il)piridin-4- il)oxi)-N-(4-(trifluorometil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (Compuesto A37) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/030377 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de uno o más de VEGFR-2, PDGFRbeta, KIT o Raf quinasa C es 1-metil-5-((2-(5-(trifluorometil)-1H-imidazol-2-il)piridin-4-il)oxi)-N-(4-(trifluorometil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (Compuesto A37) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/030377. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo contra PD-1 en combinación con 1-metil-5- ((2-(5-(trifluorometil)-1H-imidazol-2-il)piridin-4-il)oxi)-N-(4-(trifluorometil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (Compuesto A37), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2007/030377, para tratar un trastorno como un cáncer, un melanoma o un tumor sólido.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se utiliza en combinación un agonista de la somatostatina y/o un inhibidor de la liberación de la hormona del crecimiento, diaspartato de pasireotida (también conocido como SIGNIFOR; Compuesto A38) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2002/010192 o Patente U.S. No. 7,473,761 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el agonista de somatostatina y/o el inhibidor de la liberación de la hormona del crecimiento es diaspartato de pasireotida (compuesto A38) o un compuesto descrito en la Publicación PCT No. WO2002/010192 o Patente U.S. No. 7,473,761. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con diaspartato de pasireotida (Compuesto A38), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2002/010192 o Patente U.S. No. 7,473,761, para tratar un trastorno como un cáncer de próstata, un cáncer endocrino, un cáncer nurologico, un tumor neuroendocrino (NET) (por ejemplo, un tumor carcinoide pulmonar atípico), un cáncer de piel (por ejemplo, un melanoma o un carcinoma de células de Merkel), un cáncer de páncreas, un cáncer de hígado, un síndrome de Cushing, un trastorno gastrointestinal, una acromegalia, un trastorno del hígado y las vías biliares o una cirrosis hepática.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un modulador de la transducción de señales y/o un inhibidor de la angiogénesis, Dovitinib (Compuesto A39) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2009/115562 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el modulador de la transducción de señales y/o el inhibidor de la angiogénesis es Dovitinib (Compuesto A39) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2009/115562. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con Dovitinib (Compuesto A39), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2009/115562, para tratar un trastorno tal como un cáncer, un cáncer respiratorio/torácico, un mieloma múltiple, un cáncer de próstata, un cáncer de pulmón de células no pequeñas, un cáncer endocrino, o un trastorno genético neurológico.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de EGFR es (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino) but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, para tratar un trastorno tal como un cáncer, por ejemplo, un tumor sólido.

En algunas realizaciones, el inhibidor del EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PC<t>No. WO 2013/184757, es un inhibidor covalente e irreversible de la tirosina quinasa. En ciertas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757 inhibe mutaciones activadoras de EGFR (L858R, ex19del). En otras realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757 no inhibe, o no inhibe sustancialmente, EGFR de tipo salvaje (wt). El compuesto A40) ha demostrado eficacia en pacientes con NSCLC mutante del EGFR. En algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757 también inhibe una o más quinasas de la familia TEC de quinasas. Las quinasas de la familia TEC incluyen, por ejemplo, ITK, BMX, TEC, RLK y BTK, y son centrales en la propogación de la señalización del receptor de células T y del receptor de quimiocinas (Schwartzberg et al. (2005) Nat. Rev. Immunol. p. 284-95). Por ejemplo, el compuesto A40 puede inhibir la ITK con una IC50 bioquímica de 1.3 nM. La ITK es una enzima crítica para la supervivencia de las células Th2 y su inhibición provoca un cambio en el equilibrio entre las células Th2 y Th1. El tratamiento combinado,in vivo,con el inhibidor de ITK ibrutinib o el compuesto A40 y el anticuerpo anti-PD-L1- resulta en una eficacia superior en comparación con cualquiera de los agentes por separado en varios modelos.

En algunas realizaciones, la combinación aquí descrita incluye un inhibidor del EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. W<o>2013/184757, y un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

La combinación de la inhibición de ITK (con ibrutinib) y la inhibición del punto de control es más eficaz que cualquiera de los agentes por separado en numerosos modelos de ratones singénicos, por ejemplo, los que expresan ITK pero no BTK. En ciertas realizaciones, el inhibidor del EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, inhibe la ITK. El efecto sinérgico de la inhibición de ITK y el bloqueo de puntos de control se ha probado en aloinjertos de ratón utilizando líneas celulares de cáncer de ratón (A20, CT26 y 4T1) (Sagiv-Barfi et al. (2015) Blood. p. 2079-86). La combinación de anticuerpo anti-PD-L1 e ibrutinib (un inhibidor de ITK) demostró ser significativamente más eficaz que cualquiera de los agentes por separado en los tres modelos. En estos experimentos, el efecto del tratamiento se prolongó a pesar de la dosificación de ibrutinib durante sólo 8 días, y un total de 5 dosis de anticuerpo anti-PD-L1. Aproximadamente la mitad de los ratones portadores de tumores CT26 tratados con esta combinación se curaron (ningún ratón tratado con uno de los dos agentes por separado se curó). La reexposición de estos ratones con inóculo tumoral CT26 demostró una memoria antitumoral a largo plazo específica para esta línea celular (Sagiv-Barfi et al. (2015) Blood. p. 2079-86). Además, se encontraron células T específicas de tumor en la sangre y el bazo de ratones tratados con ibrutinib y anticuerpo anti-PD-L1. Para ampliar esta observación al compuesto A40, se realizó un experimento similar utilizando el modelo de linterna A20. En este estudio, la combinación del compuesto A40 y el anticuerpo anti-PD-LI o del ibrutinib y el anticuerpo anti-PD-LI fue más eficaz que cualquier agente por separado. El compuesto A40 y el ibrutinib se dosificaron durante sólo diez días, y se administró un total de 5 dosis de anticuerpo anti-PD-L1. Los efectos del compuesto A40 más el anticuerpo anti-PD-L1 y del ibrutinib más el anticuerpo anti-PD-L1 sobre la supervivencia se prolongaron más allá de los 60 días, incluso cuando el compuesto A40 y el ibrutinib sólo se dosificaron de forma transitoria. La combinación del anticuerpo anti-PD-L1 y el compuesto A40 produjo la regresión tumoral en ratones portadores de aloinjertos de linfoma A20. Por consiguiente, en algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757 potencia, o se utiliza para potenciar un efecto antitumoral de un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1).

En algunas realizaciones, el inhibidor del EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la PublicaciónC<t>No. WO 2013/184757, y el inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario, por ejemplo, un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1), cada uno se administra a una dosis y/o en un horario, que en combinación, logra una actividad antitumoral deseada.

En una realización, el inhibidor del EGFR o (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40) se administra a una dosis de 150-250 mg, por ejemplo, al día. En una realización, el compuesto se administra a una dosis de aproximadamente 150, 200 o 250 mg, o de aproximadamente 150-200 o 200-250 mg.

En una realización, el inhibidor del EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, se administra a una dosis entre 10 mg y 50 mg(por ejemplo,25 mg) una vez al día. En algunas realizaciones, el inhibidor del EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, se administra por vía oral. En una realización, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, se administra a una dosis entre 10 mg y 50 mg (por ejemplo, 25 mg), por ejemplo, una vez al día, por ejemplo, por vía oral, y el inhibidor de PD-1 (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1) se administra a una dosis entre 300 mg y 500 mg (por ejemplo, a una dosis de 400 mg), por ejemplo, una vez cada 4 semanas, por ejemplo, mediante infusión intravenosa. En algunas realizaciones, la combinación se administra en uno o más ciclos de dosificación, por ejemplo, uno o más ciclos de dosificación de 28 días. En ciertas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, se administra en el día 1 al día 10 de un primer ciclo de dosificación. En ciertas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2013/184757, no se administra en el día 11 al día 28 de un primer ciclo de dosificación, ni en ningún ciclo o ciclos de dosificación posteriores.

En algunas realizaciones, el inhibidor de EGFR, (R,E)-N-(7-cloro-1-(1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)azepan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-metilisonicotinamida (Compuesto A40), o un compuesto divulgado en la Publicación p Ct No. WO 2013/184757, se administra en combinación con un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, una molécula de anticuerpo anti-PD-1) para tratar un cáncer colorrectal (CRC), un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC)) o un cáncer de mama (por ejemplo, un cáncer de mama triple negativo por ejemplo (TNBC)).

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación un inhibidor de ALK, N6-(2-isopropoxi-5-metil-4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)-N4-(2-(isopropilsulfonil)fenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4,6-diamina (Compuesto A42) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2008/073687 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de ALK es N6-(2-isopropoxi-5-metil-4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)-N4-(2-(isopropilsulfonil)fenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4,6-diamina (Compuesto A42) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2008/073687. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo contra PD-1 en combinación con N6-(2isopropoxi-5-metil-4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)-N4-(2-(isopropilsulfonil)fenil)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4,6-diamina (Compuesto A42), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2008/073687, para tratar un trastorno como un cáncer, un linfoma anaplásico de células grandes (ALCL), un carcinoma pulmonar de células no pequeñas (NSCLC) o un neuroblastoma.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se utiliza en combinación un inhibidor de IGF-1R, 3-(4-(4-((5-cloro-4-((5-metil-1H-pirazol-3-il)amino)pirimidin-2-il)amino)-5-fluoro-2-metilfenil)piperidin-1-il)tietano 1,1-dióxido (Compuesto A43), 5-cloro-N2 -(2-fluoro-5-metil-4-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)piperidin-4-il)fenil)-N4 -(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidina-2,4-diamina (Compuesto A44), o 5-cloro-N2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)-2-fluoro-5-metilfenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidina-2,4-diamina (Compuesto A45) o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/002655 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito. En una realización, el inhibidor de IGF-1R es 3-(4-(4-((5-cloro-4-((5-metil-1H-pirazol-3-il)amino)pirimidin-2-il)amino)-5-fluoro-2-metilfenil)piperidin-1-il)tietano 1,1-dióxido (Compuesto A43), 5-cloro-N2 -(2-fluoro-5-metil-4-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)piperidin-4-il)fenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidina-2,4-diamina (Compuesto A44), 5-cloro-N2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)-2-fluoro-5-metilfenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidina-2,4-diamina (Compuesto A45), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/002655. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con 3-(4-(4-((5-cloro-4-((5-metil-1H-pirazol-3-il)amino)pirimidin-2-il)amino)-5-fluoro-2-metilfenil)piperidin-1-il)tietano 1,1-dióxido (Compuesto A43), 5-cloro-N2 -(2-fluoro-5-metil-4-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)piperidin-4-il)fenil)-N4 -(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidina-2,4-diamina (Compuesto A44), 5-cloro-N2-(4-(1-etilpiperidin-4-il)-2-fluoro-5-metilfenil)-N4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)pirimidina-2,4-diamina (Compuesto A45), o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO 2010/002655, para tratar un trastorno como un cáncer o un sarcoma.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación un inhibidor de la P-Glicoproteína 1, Valspodar (también conocido como AMDRAY; Compuesto A46) o un compuesto divulgado en EP 296122 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de la P-Glicoproteína 1 es Valspodar (Compuesto A46) o un compuesto divulgado en EP 296122. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con Valspodar (Compuesto A46), o un compuesto divulgado en EP 296122, para tratar un trastorno tal como un cáncer o un tumor resistente a fármacos.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación uno o más de un inhibidor de VEGFR, succinato de Vatalanib (Compuesto A47) o un compuesto divulgado en EP 296122 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de VEGFR es succinato de Vatalanib (Compuesto A47) o un compuesto divulgado en EP 296122. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con succinato de Vatalanib (Compuesto A47), o un compuesto divulgado en EP 296122, para tratar el cáncer.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se utiliza en combinación con un inhibidor de IDH o un compuesto divulgado en WO2014/141104 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de IDH es un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2014/141104. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con un compuesto divulgado en WO2014/141104 para tratar un trastorno tal como un cáncer.

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se utiliza en combinación con un inhibidor de BCL-ABL o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2013/171639, WO2013/171640,, WO2013/171641o WO2013/171642 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de BCL-ABL es un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2013/171639, WO2013/171640,, WO2013/171641o WO2013/171642. En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se utiliza en combinación con un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641o WO2013/171642 para tratar un trastorno como un cáncer.

En otra realizac/ón,lacombinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor de c-RAF o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2014/151616 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor de c-RAF es el compuesto A50 o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2014/151616. En algunas realizaciones, el inhibidor de c-RAF o el Compuesto A50 es un compuesto de fórmula (I):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que:

Z1 es O, S, S(=O) o SO2;

Z2 es N, S o CRa, donde Ra es H, halo, C1-4 alquilo o C1-4 haloalquilo;

R1 es CN, halo, OH, C1-4 alcoxi, o C1-4 alquilo que está opcionalmente sustituido con uno a tres grupos seleccionados entre halo, C1-4 alcoxi, CN e hidroxilo;

El anillo B se selecciona entre fenilo, piridina, pirimidina, pirazina, piridazina, piridona, pirimidona, pirazinona, piridazinona y tiazol, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con hasta dos grupos seleccionados entre halo, OH, CN, C1-4 alquilo, C2-4 alquenilo, -O-(C1-4 alquilo), NH2, NH-(C1-4 alquilo), -N(C1-4 alquilo)2, -SO2R2, NHSO2R2, NHC(O)R2, NHCO2R2, C3.6 cicloalquilo, heteroarilo de 5-6 miembros, -O-C3-6 cicloalquilo, -O-(heteroarilo de 5-6 miembros), C4-8 heterocicloalquilo, y -O-(heterocicloalquilo de 4-8 miembros), donde cada heterocicloalquilo y heteroarilo contiene hasta tres heteroátomos seleccionados entre N, O y S como miembros del anillo,

donde cada C1-4 alquilo, C2-4 alquenilo, C3-6 cicloalquilo, heteroarilo de 5-6 miembros, y heterocicloalquilo de 4 8 miembros está opcionalmente sustituido con hasta tres grupos seleccionados entre oxo, hidroxilo, halo, C1-4 alquilo, C1-4 haloalquilo, C1-4 alcoxi, y -(CH2)1-2Q donde Q es OH, C1.4 alcoxi, -CN, NH2, -NHR3, -N(R3)2, - SO2R3, NHSO2R3, NHC(o )o R3, o NHC(O)R3; cada R2 y R3 es independientemente C1-4 alquilo; y

El anillo B está opcionalmente fusionado a un anillo aromático o no aromático de 5-6 miembros que contiene hasta dos heteroátomos seleccionados entre N, O y S, donde el anillo de 5-6 miembros puede estar sustituido con halo, C1-4 alquilo, C1-4 haloalquilo, o C1-4 alcoxi, y si el anillo fusionado es no aromático las opciones de sustitución pueden incluir además oxo;

cada Y se selecciona independientemente entre C1-4 alquilo, C1-4 alcoxi, CN, halo, oxo, -(CH2)pOR4, - (CH2)p N(R4)2, -(CH2)pNHC(O)R4, -(CH2)pNHCOO(Ci-4 alquilo),e imidazol,

o dos grupos Y del anillo A se unen opcionalmente para formar un anillo fusionado o puenteado con el anillo A, en el que dicho anillo fusionado o puenteado contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N O y S como miembro del anillo, y está opcionalmente sustituido con hasta dos grupos seleccionados entre C1-4 alquilo, C1.4 alcoxi, CN, halo, oxo, -(CH)2p OR4, -(CH)2p N(R)42, -(CH)2p NHC(O)R4, y -(CH)2p NHCOO(C^ alquilo);

cada R4 es independientemente H o C1-4 alquilo;

cada p es independientemente 0, 1 o 2;

q es 0, 1 o 2;

Z3, Z4, y Z5 se seleccionan independientemente entre CH y N y opcionalmente NO;

L es -C(=O)-NR4 -[CY] o -NR4 -C(=O)-[CY], donde [CY] indica qué átomo de L está unido a CY; y

CY es un anillo aromático seleccionado entre fenilo, piridina, pirimidina, pirazina, piridazina, piridona, tiazol, isotiazol, oxazol, pirazol e isoxazol, en el que el anillo está opcionalmente fusionado a un anillo de tiofeno, imidazol, oxazolona o pirrol;

y CY está sustituido con hasta dos grupos seleccionados entre halo, CN, R5, OR5, SO2R5, - S(=NH)(=O)R5, OH, NH2, NHR5, y -N(R5)2,

donde cada R5 es independientemente C1-4 alquilo, C2-4 alquenilo, C2-6 heterociclilo, heteroarilo de 5 miembros que contenga hasta tres heteroátomos seleccionados entre N, O y S como miembros del anillo, o C3-8 cicloalquilo, y R5 está opcionalmente sustituido con hasta cuatro grupos seleccionados entre oxo, halo, CN, R6, OH, OR6, SO2R6, NH2, NHR6, N(R6)2, NHSO2R6, NHCOOR6, NHC(=O)R6, -CH2OR7, -CH2N(R7)2, en donde cada

R6 es independientemente C1-4 alquilo, y cada R7 es independientemente H o C1-4 alquilo;

y dos R4, R5, R6, o R7 sobre el mismo átomo de nitrógeno pueden tomarse juntos para formar un anillo heterocíclico de 5-6 miembros que contiene opcionalmente un N, O o S adicional como miembro del anillo y opcionalmente sustituido con hasta dos grupos seleccionados entre C1-4 alquilo, oxo, halo, OH, y C1-4 alcoxi.

En una realización, una molécula de anticuerpo PD-1 se usa en combinación con un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2014/151616 para tratar un trastorno como un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento. En ciertas realizaciones, el cáncer es un cáncer de pulmón (por ejemplo, un cáncer de pulmón de células no pequeñas).

En otra realización, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, incluye o se usa en combinación con un inhibidor competitivo de ERK1/2 ATP o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2015/066188 para tratar un trastorno, por ejemplo, un trastorno descrito en el presente documento. En una realización, el inhibidor competitivo de ERK1 /2 ATP es un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2015/066188. En una realización, se usa una molécula de anticuerpo PD-1 en combinación con el compuesto A51 o un compuesto divulgado en la Publicación PCT No. WO2015/066188 para tratar un trastorno tal como un cáncer.

En algunas realizaciones, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, se administra en combinación con uno o más agentes seleccionados entre, el Compuesto A8, el Compuesto A17, el Compuesto A23, el Compuesto A24, el Compuesto A27, el Compuesto A29 y el Compuesto<a>33.

En algunas realizaciones, la combinación, por ejemplo, una combinación que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 como se describe en el presente documento, se administra en combinación con un agente anticanceroso que tiene una actividad conocida en un ensayo de células inmunitarias, por ejemplo, en uno o más de un ensayo huMLR, un ensayo de proliferación de células T y un ensayo de proliferación de células B. Los ensayos de ejemplo se describen a continuación. A continuación se describen ensayos de ejemplo. Basándose en el ensayo, puede calcularse un IC50 para cada agente de ensayo. En algunas realizaciones, el agente anticanceroso tiene una IC50 de, por ejemplo, 0-1 pM, 1-4 pM, o superior a 4 pM, por ejemplo, 4-10 pM o 4-20 pM. En realizaciones, el segundo agente terapéutico se elige entre uno o más de: Compuesto A9, Compuesto A16, Compuesto A17, Compuesto A21, Compuesto A22, Compuesto A25, Compuesto A28, Compuesto A48 y Compuesto 49.

En algunas realizaciones, el Compuesto A28 (o un compuesto relacionado con el Compuesto A28) se administra a una dosis de aproximadamente 5-10 o 10-30 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A22 (o compuesto relacionado con el Compuesto A22) se administra a una dosis de aproximadamente 200 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A17 (o compuesto relacionado con el Compuesto A17) se administra a una dosis de aproximadamente 400-600 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A16 (o compuesto relacionado con el Compuesto A16) se administra a una dosis de aproximadamente 400-600 mg PO qDía. En algunas realizaciones, el compuesto A29 (o compuesto relacionado con el compuesto A29) se administra a una dosis de aproximadamente 200-400 o 300-400 mg. En algunas realizaciones, el compuesto A24 (o compuesto relacionado con el compuesto A24) se administra a una dosis de aproximadamente 200-600 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A23 (ceritinib) (o compuesto relacionado con ceritinib) se administra a una dosis de aproximadamente 750 mg una vez al día. En algunas realizaciones, el Compuesto A8 (o compuesto relacionado con el Compuesto A8) se administra a una dosis de aproximadamente 200-400 o 300-400 mg. En algunas realizaciones, el compuesto A5 (o compuesto relacionado con el compuesto A5) se administra a una dosis de aproximadamente 100-125 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A6 (o compuesto relacionado con el Compuesto A6) se administra a una dosis de aproximadamente 100 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A1 (o compuesto relacionado con el Compuesto A1) se administra a una dosis de aproximadamente 200-300 o 200-600 mg. En algunas realizaciones, el Compuesto A40 (o compuesto relacionado con el Compuesto A40) se administra a una dosis de aproximadamente 150-250 mg. En algunas realizaciones, el compuesto A10 (o compuesto relacionado con el compuesto A10) se administra a una dosis de aproximadamente 400 a 700 mg, por ejemplo, administrado tres veces por semana, 2 semanas de inicio y una semana de descanso. En algunas realizaciones, el inhibidor de BCR-ABL se administra a una dosis de aproximadamente 20 mg bid-80 mg bid.

A continuación se proporcionan ensayos de ejemplo de huMLR y de proliferación de células B o T.

Reacción linfocitaria mixta humana

La reacción linfocitaria mixta (MLR) es un ensayo funcional que mide la respuesta proliferativa de los linfocitos de un individuo (el respondedor) a los linfocitos de otro individuo (el estimulador). Para realizar una MLR alogénica, se aislaron células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de tres donantes a partir de buffycoats de tipo HLA desconocido (Kantonspital Blutspendezentrum de Berna y Aarau, Suiza). Las células se prepararon a 2.105 en 0.2mL de medio de cultivo que contenía RPMI 1640 GlutaMAX™ con un 10% de suero de ternera fetal (FCS), 100U de penicilina/ 100pg de estreptomicina, 50pM de 2-Mercaptoetanol. Las reacciones individuales de 2 vías se establecieron mezclando PBMC de dos donantes diferentes en una proporción 1:1 y los co-cultivos se realizaron por triplicado en placas de cultivo de tejidos de 96 pocilios de fondo plano durante 6 días a 37°C, 5% CO2, en presencia o no de un rango de concentración de 8 puntos de los compuestos de prueba. Las células recibieron un impulso de 3H-TdR (1 |jCi/0.2mL) durante las últimas 16h de cultivo y la radiactividad incorporada se utilizó como medida de la proliferación celular. Para cada compuesto se calculó la concentración que inhibía el 50% de la respuesta huMLR máxima (IC50). La ciclosporina se utilizó como control positivo de la inhibición del huMLR.

Ensayo de proliferación de células B humanas

Las PBMC se aislaron en fresco mediante gradiente de densidad Ficoll-Paque a partir de sangre humana y se sometieron a aislamiento negativo de células B. Las células B se resuspendieron en medio de cultivo (RPMI 1640, HEPES, 10% FCS, 50jg/mL gentamicina, 50jM 2-Mercaptoetanol, 1x ITS (insulina, transferrina y selenito sódico), 1x aminoácidos no esenciales) a una concentración de 9.104 por pocillo en una placa de cultivo de 96 pocillos de fondo plano. La estimulación de células B se llevó a cabo mediante molécula de anticuerpo anti-IgM humano (30ug/mL) e IL-4 (75ng/mL) o mediante ligando CD40 (3ug/mL) e IL-4 (75ng/mL) en presencia o no de un rango de 7 concentraciones de compuestos de ensayo. Tras 72h de cultivo a 37°C, 10% CO2, las células fueron pulsadas con 3H-TdR (1 jCi/pocillo) durante las últimas 6h de cultivo. A continuación, se recolectaron las células B y se midió la incorporación de timidina utilizando un contador de centelleo. De cada tratamiento duplicado, se calculó la media y estos datos se trazaron en XLfit 4 para determinar los respectivos valores IC50.

Ensayo de proliferación de células T humanas

Las PBMC se aislaron en fresco mediante gradiente de densidad Ficoll-Paque a partir de sangre humana y se sometieron a aislamiento negativo de células T. Las células T se prepararon en medio de cultivo (RPMI 1640, HEPES, 10% FCS, 50jg/mL gentamicina, 50jM 2-Mercaptoetanol, 1x ITS (insulina, transferrina y selenito sódico), 1x aminoácidos no esenciales) a una concentración de 8.104 por pocillo en una placa de cultivo de 96 pocillos de fondo plano. La estimulación de las células T se realizó con molécula de anticuerpo anti-CD3 humano (10ug/mL) o con molécula de anticuerpo anti-CD3 humano (5jg/mL) y molécula de anticuerpo anti-CD28 (1jg/mL) en presencia o no de un rango de 7 concentraciones de compuestos de ensayo. Tras 72h de cultivo a 37°C, 10% CO2, las células fueron pulsadas con 3H-TdR (1 jCi/pocillo) durante las últimas 6h de cultivo. La proliferación celular se midió mediante la incorporación de timidina, lo que permitió determinar la IC50 de cada compuesto ensayado.

Anticoncepción

En algunas realizaciones de cualquiera de los métodos aquí divulgados, el sujeto usa anticonceptivos (por ejemplo, un anticonceptivo) antes de recibir, durante o después de recibir una terapia (por ejemplo, una terapia de combinación) que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita aquí. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en ciertas realizaciones, el uso de anticonceptivos durante un periodo antes de recibir, durante o después de recibir, la terapia (por ejemplo, la terapia de combinación) puede reducir o prevenir el riesgo de toxicidad embriofetal, por ejemplo, aumento de abortos o muerte infantil prematura.

En ciertas realizaciones, el método descrito en el presente documento comprende administrar un anticonceptivo a un sujeto (por ejemplo, un sujeto femenino) que está recibiendo, o ha recibido, una terapia (por ejemplo, una terapia de combinación) que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento. En otras realizaciones, un anticonceptivo se utiliza en combinación con una terapia (por ejemplo, una terapia de combinación) que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento para tratar un trastorno descrito en el presente documento, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento. En otras realizaciones, un anticonceptivo se usa en combinación con una terapia (por ejemplo, una terapia de combinación) que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 descrita en el presente documento para reducir o prevenir el riesgo de toxicidad embriofetal, por ejemplo, aumento de abortos o muerte infantil prematura.

En algunas realizaciones, se aconseja al sujeto, por ejemplo, por un profesional sanitario, que interrumpa la terapia (por ejemplo, la terapia de combinación) que comprende la molécula de anticuerpo anti-PD-1, cuando el sujeto está embarazada o se sabe que está embarazada, o corre el riesgo de estarlo. En otras realizaciones, el sujeto interrumpe el tratamiento (por ejemplo, el tratamiento combinado) que comprende la molécula de anticuerpo anti-PD-1 cuando está embarazada o se sabe que lo está, o corre el riesgo de estarlo.

En algunas realizaciones, la duración del período en que el sujeto (por ejemplo, un sujeto femenino) usa anticonceptivos eficaces (a veces denominado en el presente documento período de anticoncepción) puede determinarse, al menos en parte, por la semivida sérica (T ^ ) de la molécula de anticuerpo anti-PD-1. Durante el período de anticoncepción, el sujeto puede haber completado la terapia o estar aún recibiendo la terapia. Durante un periodo de anticoncepción, el sujeto puede haber completado la terapia o seguir recibiéndola. En ciertas realizaciones, el periodo de anticoncepción comprende un periodo posterior a la última dosis de la terapia (por ejemplo, la última dosis de la molécula de anticuerpo anti-PD-1). En otras realizaciones, el periodo de anticoncepción comprende además un periodo durante el cual el sujeto está recibiendo la terapia (por ejemplo, la molécula de anticuerpo anti-PD-1).

En algunas realizaciones, el período de anticoncepción comprende un período de 50 días o más, por ejemplo, 60 días o más, 80 días o más, 90 días o más, 100 días o más, 110 días o más, 120 días o más, 130 días o más, 140 días o más, 150 días o más, 160 días o más, 170 días o más, 180 días o más, 190 días o más, 200 días o más, 220 días o más, 240 días o más, 260 días o más, 280 días o más, o 300 días o más, por ejemplo, después de la última dosis de la molécula de anticuerpo anti-PD-1. En ciertas realizaciones, el período de anticoncepción comprende un período de 150 días o más, por ejemplo, después de la última dosis de la molécula de anticuerpo anti-PD-1. En ciertas realizaciones, el período de anticoncepción comprende un período en el que el sujeto recibe la molécula de anticuerpo anti-PD-1, y un período de 150 días o más después de la última dosis de la molécula de anticuerpo anti-PD-1.

En algunas realizaciones, el periodo de anticoncepción es al menos 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, o 10 veces de la vida media sérica de la molécula de anticuerpo anti-PD-1. En ciertas realizaciones, el periodo de anticoncepción es al menos 5 veces la semivida sérica de la molécula de anticuerpo anti-PD-1. En ciertas realizaciones, la semivida sérica de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 está comprendida entre 10 y 30 días, por ejemplo, entre 15 y 25 días, entre 17 y 23 días, o entre 19 y 21 días, por ejemplo, 15 días o más, 16 días o más, 17 días o más, 18 días o más, 19 días o más, 20 días o más, 21 días o más, 22 días o más, o 23 días o más. En ciertas realizaciones, la semivida sérica de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 está entre 17 días y 23 días, por ejemplo, aproximadamente 19 días, 20 días, 21 días, 22 días o 23 días.

En algunas realizaciones, el sujeto usa anticonceptivos antes de recibir la terapia (por ejemplo, la terapia de combinación) que comprende la molécula de anticuerpo anti-PD-1. En otras realizaciones, el sujeto usa anticonceptivos durante la terapia (por ejemplo, la terapia de combinación) que comprende la molécula de anticuerpo anti-PD-1. En otras realizaciones, el sujeto usa anticonceptivos durante la terapia (por ejemplo, la terapia de combinación) que comprende la molécula de anticuerpo anti-PD-1. En otras realizaciones, el sujeto usa anticonceptivos después de recibir la terapia (por ejemplo, la terapia de combinación) que comprende la molécula de anticuerpo anti-PD-1.

En ciertas realizaciones, el sujeto usa anticonceptivos durante y después de recibir la terapia (por ejemplo, la terapia de combinación) que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1. En otras realizaciones, el sujeto usa anticonceptivos antes de recibir y durante la terapia (por ejemplo, la terapia de combinación) que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1. En otras realizaciones, el sujeto usa anticonceptivos antes de recibir, y durante, la terapia (por ejemplo, la terapia de combinación) que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1. En otras realizaciones, el sujeto usa anticonceptivos antes y después de recibir la terapia (por ejemplo, la terapia de combinación) que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1. En otras realizaciones, el sujeto usa anticonceptivos antes de recibir, durante y después de recibir la terapia (por ejemplo, la terapia de combinación) que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1.

En algunas realizaciones, el sujeto usa anticonceptivos al menos 1, 3, 7, 14, o 28 días, o al menos 1, 2, o 3 meses, antes de que al sujeto se le administre la molécula de anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, antes de la primera dosis de la molécula de anticuerpo anti-PD-1.

En otras realizaciones, el sujeto usa anticonceptivos durante la terapia (por ejemplo, la terapia de combinación) al menos una vez, dos veces, 3 veces, 4 veces, 5 veces, 6 veces, 7 veces, 8 veces, 9 veces, o 10 veces, durante el período en que se administra al sujeto la molécula de anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, entre la primera y la última dosis de la molécula de anticuerpo anti-PD-1.

En aún otras realizaciones, el sujeto usa anticonceptivos durante un período de al menos 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, o 300 días, o al menos 3, 4, 5, 6, 7, 9, o 10 meses, después de que al sujeto se le administra la molécula de anticuerpo anti-PD-1, por ejemplo, después de la última dosis de la molécula de anticuerpo anti-PD-1.

El sujeto puede utilizar varios tipos de anticonceptivos (por ejemplo, anticonceptivos). Por ejemplo, la anticoncepción puede ser un dispositivo, un fármaco, un método o cualquier combinación de los mismos. Algunos tipos de anticonceptivos (por ejemplo, anticonceptivos) que puede utilizar el sujeto incluyen, pero no se limitan a, un implante anticonceptivo (por ejemplo, etonogestrel), un parche anticonceptivo, una píldora anticonceptiva (por ejemplo, progestina y/o estrógeno), una esponja anticonceptiva (por ejemplo, medroxiprogesterona), una esponja anticonceptiva, un anillo vaginal anticonceptivo, la lactancia materna como método anticonceptivo, un capuchón cervical, un preservativo, un diafragma, un preservativo femenino, un método basado en el conocimiento de la fertilidad, un dispositivo intrauterino (IUD o espiral), una píldora del día después (anticoncepción de emergencia), una relación sexual sin penetración, un espermicida, la esterilización femenina (esterilización tubárica), la vasectomía, la abstinencia (método del retiro) o una combinación de los mismos.

En algunas realizaciones, el sujeto es una mujer, por ejemplo, una mujer con potencial reproductivo. El potencial reproductivo femenino puede estar influenciado por varios factores, por ejemplo, edad, salud, genética, condiciones patológicas o exposiciones ambientales. En ciertas realizaciones, el sujeto tiene entre 15 y 50 años de edad, por ejemplo, entre 18 y 45 años de edad, entre 20 y 40 años de edad, o entre 25 y 35 años de edad. En algunas realizaciones, el sujeto tiene al menos 20, 25, 30, 35, 40 o 45 años de edad.

Biomarcadores

La divulgación también presenta métodos para evaluar o monitorizar la eficacia de una terapia (por ejemplo, una terapia de combinación) descrita en el presente documento, en un sujeto (por ejemplo, un sujeto que tiene un cáncer, por ejemplo, un cáncer descrito en el presente documento). El método incluye adquirir un valor de eficacia a la terapia, en donde dicho valor es indicativo de la eficacia de la terapia.

En las realizaciones, el valor de la eficacia de la terapia comprende una medida de uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve o más (por ejemplo, todos) de los siguientes:

(i) un parámetro de un fenotipo de linfocitos infiltrantes de tumores (TIL);

(ii) un parámetro de una población de células mieloides;

(iii) un parámetro de un marcador de expresión de superficie;

(iv) un parámetro de un biomarcador de una respuesta inmunológica;

(v) un parámetro de modulación de una citoquina sistémica;

(vi) un parámetro de ADN libre circulante (cfADN);

(vii) un parámetro de la inmunomodulación sistémica;

(viii) un parámetro del microbioma;

(x) un parámetro de una citoquina circulante.

En algunas realizaciones, el parámetro de un fenotipo TIL comprende el nivel o la actividad de uno, dos, tres, cuatro o más (por ejemplo, todos) de la tinción de hematoxilina y eosina (H&E) para recuentos TIL, CD8, FOXP3, CD4 o CD3, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra tumoral). En algunas realizaciones, el parámetro de una población de células mieloides comprende el nivel o la actividad de uno o ambos CD68 o CD163, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra tumoral). En algunas realizaciones, el parámetro de un marcador de expresión de superficie comprende el nivel o la actividad de uno, dos o más (por ejemplo, todos) de PD-L1, LAG-3 o TIM-3, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra tumoral). En algunas realizaciones, el parámetro de un biomarcador de una respuesta inmunológica comprende el nivel o la secuencia de uno o más marcadores basados en ácidos nucleicos, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra tumoral). En algunas realizaciones, el parámetro de modulación de citoquinas sistémicas comprende el nivel o la actividad de una, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho o más (por ejemplo, todas) de IL-18, IFN-y, ITAC (CXCL11), IL-6, IL-10, IL-4, IL-17, IL-15 o TGF-beta, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de sangre, por ejemplo, una muestra de plasma). En algunas realizaciones, el parámetro de cfADN comprende la secuencia o el nivel de una o más moléculas de ADN tumoral circulante (cfADN), en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de sangre, por ejemplo, una muestra de plasma). En algunas realizaciones, el parámetro de la inmunomodulación sistémica comprende la caracterización fenotípica de una célula inmunitaria activada, por ejemplo, una célula que expresa CD3, una célula que expresa CD8, o ambas, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de sangre, por ejemplo, una muestra de PBMC). En algunas realizaciones, el parámetro del microbioma comprende la secuencia o el nivel de expresión de uno o más genes del microbioma, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de heces). En algunas realizaciones, el parámetro de un marcador de activación en una célula inmunitaria circulante comprende el nivel o la actividad de una, dos, tres, cuatro, cinco o más (por ejemplo, todas) células T CD8+, HLA-DR+Ki67+, IFN-y, IL-18 o CXCL11 (CCK inducida por IFN-y) circulantes, en una muestra (por ejemplo, una muestra de sangre, por ejemplo, una muestra de plasma). En algunas realizaciones, el parámetro de una citoquina circulante comprende el nivel o la actividad de IL-6, en el sujeto, por ejemplo, en una muestra del sujeto (por ejemplo, una muestra de sangre, por ejemplo, una muestra de plasma).

En algunas realizaciones, la evaluación o monitorización incluye un análisis de biomarcadores. Por ejemplo, la eficacia de la terapia puede evaluarse o monitorizarse a nivel molecular y/o celular para uno o más biomarcadores descritos en el presente documento. En algunas realizaciones, un cambio en el marcador puede estar relacionado con un resultado clínico. En la Tabla 8 se describen biomarcadores y recolección de muestras de ejemplo.

Tabla 8. Biomarcadores de ejemplo y recolección de muestras

En algunas realizaciones, se obtiene una muestra tumoral emparejada evaluable para evaluar el efecto farmacodinámico en el microambiente tumoral. En ciertas realizaciones, las muestras tumorales se obtienen en el cribado y después de aproximadamente dos ciclos de terapia. En otras realizaciones, se obtiene una muestra tumoral en la progresión de la enfermedad que ocurre durante el tratamiento.

En algunas realizaciones, una evaluación inicial de un portaobjetos teñido con hematoxilina y eosina (H&E) para el recuento de linfocitos infiltrantes tumorales (TIL) se utiliza para guiar el análisis adicional por IHC del microambiente tumoral, por ejemplo, una o más de las caracterizaciones por IHC de los TIL (por ejemplo, CD8, CD3, CD4 o FOXP3), una población de células mieloides (por ejemplo, CD163 o CD68), como marcador de superficie, por ejemplo, LAG-3, TIM-3 o PD-L1. En este ámbito científico en rápida evolución pueden emplearse otras metodologías para evaluar biomarcadores de respuesta inmunológica, como las basadas en ácidos nucleicos (secuenciación o cuantificación de ADN o ARN) u otros métodos.

El grado de infiltración tumoral por células inmunitarias, incluidos linfocitos y macrófagos, los cambios en las células T reguladoras y/o los cambios en la expresión génica en las biopsias tumorales pueden contribuir a tomar una decisión sobre los posibles beneficios de una combinación determinada.

En algunas realizaciones, se recoge una muestra de sangre como se especifica en la Tabla 8 para caracterizar los niveles circulantes de citoquina en plasma y un marcador de activación en células inmunitarias circulantes. Sin querer estar limitado por la teoría, se cree que en algunas realizaciones, un aumento en el número de una o más de las células T CD8+ circulantes, HLA-DR+Ki67+, IFN-<y>, IL-18 o CXCL11 (CCK inducida por IFN-<y>) que expresan células indica expansión de una respuesta inmunitaria cebada preexistente, mientras que la disminución de IL-6 es indicativa de células supresoras derivadas de mieloides (MDSC) reducidas (Herbst et al. (2016) Lancet 387(10027): 1540-50; Tumeh et al. (2014) Nature p. 568-71; Powles et al. (2014) Nature p.

558-62). En algunas realizaciones, se obtiene una muestra de sangre en el cribado y/o al final del tratamiento para analizar el ADN libre circulante (cfADN), por ejemplo, para evaluar cualquier correlación con un resultado clínico. También pueden utilizarse otros marcadores o métodos conocidos en la técnica. En algunas realizaciones, la combinación de marcadores específicos del compuesto se ejecuta para determinar la actividad farmacodinámica a las dosis más bajas utilizadas en la terapia, que son o pueden ser más bajas que las dosis previamente establecidas.

Ácidos nucleicos

La divulgación también presenta ácidos nucleicos que comprenden secuencias de nucleótidos que codifican regiones variables de cadena pesada y ligera y CDR o bucles hipervariables de las moléculas de anticuerpo anti-PD-1, como se describe en el presente documento. Por ejemplo, la divulgación presenta un primer y segundo ácido nucleico que codifican regiones variables de cadena pesada y ligera, respectivamente, de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 elegida de una o más de las moléculas de anticuerpo divulgadas en el presente documento. El ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos como se establece en las tablas del presente documento, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, o que difiere en no más de 3, 6, 15, 30, o 45 nucleótidos de las secuencias mostradas en las tablas del presente documento.

En ciertas realizaciones, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDR o bucles hipervariables de una región variable de cadena pesada que tiene una secuencia de aminoácidos como se establece en las tablas del presente documento, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una o más sustituciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En otras realizaciones, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDR o bucles hipervariables de una región variable de cadena ligera que tiene una secuencia de aminoácidos como se establece en las tablas del presente documento, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una o más sustituciones, por ejemplo, sustituciones conservadas). En aún otra realización, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR o bucles hipervariables de las regiones variables de las cadenas pesada y ligera que tienen una secuencia de aminoácidos como se establece en las tablas del presente documento, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o que tiene una o más sustituciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).

En ciertas realizaciones, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDR o bucles hipervariables de una región variable de cadena pesada que tiene la secuencia de nucleótidos como se establece en las tablas del presente documento, una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o capaz de hibridar en las condiciones de rigurosidad descritas en el presente documento). En otra realización, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDR o bucles hipervariables de una región variable de cadena ligera que tiene la secuencia de nucleótidos como se establece en las tablas del presente documento, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o capaz de hibridar en las condiciones de rigurosidad descritas en el presente documento). En otra realización, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR o bucles hipervariables de regiones variables de cadenas pesadas y ligeras que tienen la secuencia de nucleótidos como se establece en las tablas del presente documento, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o capaz de hibridar en las condiciones de rigurosidad descritas en el presente documento).

En otro aspecto, la solicitud presenta células huésped y vectores que contienen los ácidos nucleicos descritos en el presente documento. Los ácidos nucleicos pueden estar presentes en un único vector o en vectores separados presentes en la misma célula huésped o en células huésped separadas, como se describe con más detalle a continuación.

En ciertas realizaciones, se proporciona una o más moléculas de ácido nucleico que comprenden una o ambas secuencias de nucleótidos que codifican regiones variables de cadena pesada y ligera, CDRs, bucles hipervariables, regiones marco de las moléculas de anticuerpo anti-PD-1. En ciertas realizaciones, la secuencia de nucleótidos que codifica la molécula de anticuerpo anti-PD-1 está optimizada en codones. Por ejemplo, la divulgación presenta un primer y segundo ácido nucleico que codifican regiones variables de cadena pesada y ligera, respectivamente, de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 elegida de una o más de, por ejemplo, cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E, como se resume en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma. Por ejemplo, el ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos como se establece en las Tablas 1 y 2, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, o que difiere en no más de 3, 6, 15, 30, o 45 nucleótidos de las secuencias mostradas en las Tablas 1 y 2).

En otras realizaciones, la molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena pesada y/o una región constante de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D, o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1; o la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

En otras realizaciones, la molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio variable de cadena ligera y/o una región constante de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D, o BAP049-Clon-E; o como se describe en la Tabla 1; o la secuencia de nucleótidos de la Tabla 1; o una secuencia sustancialmente idéntica (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica) a cualquiera de las secuencias mencionadas.

Las secuencias de nucleótidos antes mencionadas que codifican el dominio variable de las cadenas pesada y ligera anti-PD-1 y las regiones constantes pueden estar presentes en una molécula de ácido nucleico separada, o en la misma molécula de ácido nucleico. En ciertas realizaciones, las moléculas de ácido nucleico comprenden una secuencia de nucleótidos que codifica una secuencia líder, por ejemplo, una secuencia líder como se muestra en la Tabla 4, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma.

En ciertas realizaciones, la molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDR, o bucles hipervariables, de una región variable de cadena pesada que tiene una secuencia de aminoácidos como se establece en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos en un 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o con una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).

En otra realización, la molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos o tres CDR, o bucles hipervariables, de una región variable de cadena ligera que tiene una secuencia de aminoácidos como se establece en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, y/o con una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).

En aún otra realización, la molécula de ácido nucleico comprende una secuencia de nucleótidos que codifica al menos una, dos, tres, cuatro, cinco o seis CDR, o bucles hipervariables, de las regiones variables de las cadenas pesada y ligera que tienen una secuencia de aminoácidos como se establece en la Tabla 1, o una secuencia sustancialmente homóloga a la misma (por ejemplo, una secuencia idéntica en al menos un 85%, 90%, 95%, 99% o más, y/o con una, dos, tres o más sustituciones, inserciones o deleciones, por ejemplo, sustituciones conservadas).

En una realización, la molécula de ácido nucleico incluye una secuencia de nucleótidos que codifica una molécula de anticuerpo anti-PD-1 que incluye una sustitución en la CDR3 de la cadena ligera en la posición 102 de la región variable ligera, por ejemplo, una sustitución de un residuo de cisteína por tirosina, o de un residuo de cisteína por serina, en la posición 102 de la región variable ligera según la Tabla 1 (por ejemplo, SEQ ID NO: 16 o 24 para murino o quimérico, sin modificar; o cualquiera de SEQ ID NOs: 34, 42, 46, 54, 58, 62, 66, 70, 74, o 78 para una secuencia modificada).

En otra realización, la molécula de ácido nucleico incluye una o más regiones marco de cadena pesada (por ejemplo, cualquiera de VHFW1 (tipo a), VHFW1 (tipo b), VHFW2 (tipo a), VHFW2 (tipo b), VHFW2 (tipo c), VHFW3 (tipo a), VHFW3 (tipo b), o VHFW4, o cualquier combinación de las mismas, por ejemplo, una combinación marco como la descrita en el presente documento) para cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E, como se resume en las Tablas 1 y 2, o una secuencia sustancialmente idéntica a las mismas. Por ejemplo, la molécula de ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos como se establece en las Tablas 1 y 2, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, o que difiere en no más de 3, 6, 15, 30, o 45 nucleótidos de las secuencias mostradas en las Tablas 1 y 2).

En otra realización, la molécula de ácido nucleico incluye una o más regiones marco de cadena ligera (por ejemplo, cualquiera de VLFW1 (tipo a), VLFW1 (tipo b), VLFW1 (tipo c), VLFW1 (tipo d), VLFW1 (tipo e), VLFW2 (tipo a), VLFW2 (tipo b), VLFW2 (tipo c), VLFW3 (tipo a), VLFW3 (tipo b), VLFW3 (tipo c), VLFW3 (tipo d), o VLFW4, o cualquier combinación de las mismas, por ejemplo, una combinación marco como la descrita en el presente documento) para cualquiera de BAP049-hum01, BAP049-hum02, BAP049-hum03, BAP049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-hum08, BAP049-hum09, BAP049-hum10, BAP049-hum11, BAP049-hum12, BAP049-hum13, BAP049-hum14, BAP049-hum15, BAP049-hum16, BAP049-Clon-A, BAP049-Clon-B, BAP049-Clon-C, BAP049-Clon-D o BAP049-Clon-E, como se resume en las Tablas 1 y 2, o una secuencia sustancialmente idéntica a las mismas. Por ejemplo, la molécula de ácido nucleico puede comprender una secuencia de nucleótidos como se establece en las Tablas 1 y 2, o una secuencia sustancialmente idéntica a la misma (por ejemplo, una secuencia al menos aproximadamente 85%, 90%, 95%, 99% o más idéntica a la misma, o que difiere en no más de 3, 6, 15, 30, o 45 nucleótidos de las secuencias mostradas en las Tablas 1 y 2).

En otra realización, la molécula de ácido nucleico incluye una o más regiones marco de cadena pesada y una o más regiones marco de cadena ligera como se describe en el presente documento. Las regiones marco de cadena pesada y ligera pueden estar presentes en el mismo vector o en vectores separados.

Vectores y células huésped

En otro aspecto, la solicitud presenta células huésped y vectores que contienen los ácidos nucleicos descritos en el presente documento. Los ácidos nucleicos pueden estar presentes en un único vector o en vectores separados presentes en la misma célula huésped o en una célula huésped separada.

En una realización, los vectores comprenden nucleótidos que codifican una molécula de anticuerpo descrita en el presente documento. En una realización, los vectores comprenden las secuencias de nucleótidos descritas en el presente documento. Los vectores incluyen, pero no se limitan a, un virus, plásmido, cósmido, fago lambda o un cromosoma artificial de levadura (YAC).

Pueden emplearse numerosos sistemas de vectores. Por ejemplo, una clase de vectores utiliza elementos de ADN derivados de virus animales como, por ejemplo, el virus del papiloma bovino, el virus del polioma, el adenovirus, el virus vaccinia, el baculovirus, los retrovirus (virus del sarcoma de Rous, MMTV o MOMLV) o el virus SV40. Otra clase de vectores utiliza elementos de ARN derivados de virus de ARN como el virus del bosque de Semliki, el virus de la encefalitis equina oriental y los flavivirus.

Además, las células que han integrado de forma estable el ADN en sus cromosomas pueden seleccionarse introduciendo uno o más marcadores que permitan la selección de células huésped transfectadas. El marcador puede proporcionar, por ejemplo, prototropía a un hospedador auxotrófico, resistencia a biocidas (por ejemplo, antibióticos), o resistencia a metales pesados como el cobre, o similares. El gen marcador seleccionable puede unirse directamente a las secuencias de ADN que se van a expresar, o introducirse en la misma célula por cotransformación. También pueden necesitarse elementos adicionales para una síntesis óptima del ARNm. Estos elementos pueden incluir señales de empalme, así como promotores transcripcionales, potenciadores y señales de terminación.

Una vez que se ha preparado el vector de expresión o la secuencia de ADN que contiene los constructos para la expresión, los vectores de expresión pueden transfectarse o introducirse en una célula huésped apropiada. Para ello, pueden emplearse diversas técnicas, como, por ejemplo, la fusión de protoplastos, la precipitación de fosfato de calcio, la electroporación, la transducción retroviral, la transfección viral, la pistola de genes, la transfección basada en lípidos u otras técnicas convencionales. En el caso de la fusión de protoplastos, las células se cultivan en medios y se examinan para determinar la actividad apropiada. Los métodos y condiciones para cultivar las células transfectadas resultantes y para recuperar la molécula de anticuerpo producida son conocidos por los expertos en la materia, y pueden variarse u optimizarse dependiendo del vector de expresión específico y de la célula huésped de mamífero empleada, basándose en la presente descripción.

La divulgación también proporciona células huésped que comprenden un ácido nucleico que codifica una molécula de anticuerpo como se describe en el presente documento.

En una realización, las células huésped son modificadas genéticamente para comprender ácidos nucleicos que codifican la molécula de anticuerpo.

En una realización, las células huésped se modifican genéticamente utilizando un casete de expresión. La expresión "casete de expresión" se refiere a secuencias de nucleótidos capaces de afectar a la expresión de un gen en huéspedes compatibles con dichas secuencias. Dichos casetes pueden incluir un promotor, un marco de lectura abierto con o sin intrones, y una señal de terminación. También pueden utilizarse factores adicionales necesarios o útiles para efectuar la expresión, como, por ejemplo, un promotor inducible.

La divulgación también proporciona células huésped que comprenden los vectores aquí descritos.

La célula puede ser, pero no se limita a, una célula eucariota, una célula bacteriana, una célula de insecto o una célula humana. Las células eucariotas adecuadas incluyen, pero no se limitan a, células Vero, células HeLa, células COS, células CHO, células HEK293, células BHK y células MDCKII. Las células de insecto adecuadas incluyen, pero no se limitan a, las células Sf9.

En algunas realizaciones, la célula huésped es una célula eucariota, por ejemplo, una célula de mamífero, una célula de insecto, una célula de levadura, o una célula procariota, por ejemplo,E. coli.Por ejemplo, la célula de mamífero puede ser una célula cultivada o una línea celular. Las células de mamífero de ejemplo incluyen líneas celulares linfocíticas (por ejemplo, NSO), células de ovario de hámster chino (CHO), células COS, células de ovocitos y células de un animal transgénico, por ejemplo, célula epitelial mamaria.

Tabla 1. Secuencias de aminoácidos y nucleótidos de moléculas de anticuerpos murinos, quiméricos y humanizados. Las moléculas de anticuerpo incluyen el mAb murino BAP049, los mAbs quiméricos BAP049-chi y BAP049-chi-Y, y los mAbs humanizados BAP049-hum01 a BAP049-hum16 y BAP049-Clon-A a BAP049-Clon-E. Se muestran las secuencias de aminoácidos y nucleótidos de las CDR de las cadenas pesada y ligera, las regiones variables de las cadenas pesada y ligera y las cadenas pesada y ligera.

Ĳ73

5

Ĳ75

Ĳ76 Tabla 3. Secuencias de aminoácidos de la región constante de las cadenas pesadas IgG humanas y de la cadena ligera kappa humana

Tabla 4. Secuencias de aminoácidos de las secuencias líder de las cadenas pesada y ligera para los mAbs humanizados BAP049-Clon-A a BAP049-Clon-E

Tabla 7. Agentes terapéuticos seleccionados que pueden administrarse en combinación con las moléculas de anticuerpos anti-PD-1, por ejemplo, como agente único o en combinación con otros inmunomoduladores descritos en el presente documento. Se hace referencia a cada publicación enumerada en esta Tabla en su totalidad, incluidas todas las fórmulas estructurales en la misma.

Ejemplos

Los Ejemplos que figuran a continuación se exponen para facilitar la comprensión de las divulgaciones, pero no pretenden ni deben interpretarse como una limitación de su ámbito de aplicación.

Ejemplo 1: Análisis farmacocinético de programas de dosificación planos

Basándose en modelos farmacocinéticos (PK), se espera que la utilización de dosis planas proporcione la exposición a los pacientes en las concentraciones Cmín apropiadas. Más del 99.5% de los pacientes estarán por encima de la EC50 y más del 93% de los pacientes estarán por encima de la EC90. Se espera que la Cmín media en estado estacionario prevista para la molécula de ejemplo de anticuerpo anti-PD-1 utilizando 300 mg una vez cada tres semanas (Q3W) o 400 mg una vez cada cuatro semanas (Q4W) esté por encima de 20ug/mL (con el peso más elevado, 150 kg) en promedio.

Tabla 5. Parámetros PK de ejemplo basados en esquemas de dosificación plana

Las concentraciones Cmín medias en estado estacionario previstas para la molécula de anticuerpo anti-PD-1 de ejemplo observada con cualquiera de las dosis/regímenes (300 mg q3w o 400 mg q4w) serán al menos 77 veces superiores a la EC50 (0,42ug/mL) y aproximadamente 8.6 veces superiores a la EC90. La potenciaex vivose basa en el cambio de IL-2 en el ensayoex vivoSEB.

Se espera que menos del 10% de los pacientes alcancen concentraciones de Cmín inferiores a 3.6ug/mL con 300 mg Q3W o 400 mg Q4W. Se espera que menos del 0.5% de los pacientes alcancen concentraciones de Cmín inferiores a 0.4 pg/mL con 300 mg Q3W o 400 mg Q4W.

En la Figura 12 se muestran las concentraciones Cpasante (Cmín) pronosticadas a través de los diferentes pesos para los pacientes mientras reciben la misma dosis de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 de ejemplo. La dosificación basada en el peso corporal se compara con la dosis fija (3,75 mg/kg q 3w frente a 300 mg Q3W y 5 mg/kg Q4W frente a 400 mg Q4W). La Figura 12 apoya la dosificación plana de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 de ejemplo.

El modelo PK se valida adicionalmente. Como se muestra en la Figura 13, las concentraciones observadas frente a las predichas por el modelo se sitúan en la línea de unidad. Las Figuras 14A-14B muestran que el modelo capta la acumulación, el curso temporal y la variabilidad dentro del sujeto.

Ejemplo 2: Farmacologíain vivopara la combinación del anticuerpo anti-PD-1 y el compuesto A21

El compuesto A21 se combinóin vivocon una molécula de ejemplo de anticuerpo anti-PD-1 en un modelo tumoral singénico murino, MC38. Se implantaron ratones C57Bl/6 con 1*10® células MC38/ratón. Se administró vehículo y el compuesto A21 (50 mg/kg por vía oral dos veces al día QW) durante cuatro dosis, comenzando el día 4 post implante tumoral. Se administraron isotipo y anti-ratón PD-1 10 mg/kg IV QW.

Como se muestra en la Figura 15, se observó actividad sinérgica con la combinación del compuesto A21 (100 mg/kg por vía oral una vez a la semana, administrados en fracciones de 50 mg/kg, b.i.d.) y el anticuerpo anti-PD-1 (10 mg/kg IV una vez a la semana), independientemente de la eficacia del agente único LCL161. La cohorte de la combinación logró 4 respuestas completas (CR), mientras que ninguno de los tratamientos con un solo agente produjo ninguna CR.

Ejemplo 3: Farmacologíain vivopara la combinación de anticuerpo anti-PD-1 y panobinostat (compuesto A19)

El panobinostat (compuesto A19) se combinóin vivocon una molécula de anticuerpo anti-PD-1 de ejemplo en un modelo tumoral singénico murino, MC38. Panobinostat (Compuesto A19) se dosificó cada dos días a 12 mg/kg, una dosis que da lugar a una exposición al fármaco comparable a la observada en pacientes tratados con la dosis y el programa aprobados. Se observó cierta reducción del peso corporal con el agente único panobinostat y con la combinación, con recuperación tras finalizar la dosificación de panobinostat. Como se muestra en las Figuras 16A-16B, se observó una actividad sinérgica sustancial con la combinación de panobinostat (Compuesto A19) y la molécula de anticuerpo anti-PD1 (10 mg/kg IV una vez por semana): todos los diez animales tratados con la combinación lograron CR, en comparación con tres de diez animales tratados con el inhibidor de PD-1 como agente único o dos de diez tratados con panobinostat como agente único.

Ejemplo 4: Farmacologíain vivopara la combinación del anticuerpo anti-PD-L1 y el compuesto A40

El compuesto A40 se combinóin vivocon una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 de ejemplo en un modelo de linfoma A20. Como se muestra en la Figura 17, la combinación del anticuerpo anti-PD-L1 y el compuesto A40, o del anticuerpo anti-PD-L1 y el ibrutinib, fue más eficaz que cualquier agente por separado. El compuesto A40 y el ibrutinib se dosificaron durante sólo diez días, y se administró un total de 5 dosis de anticuerpo anti-PD-L1. Aunque el compuesto A40 y el ibrutinib sólo se dosificaron de forma transitoria, los efectos del compuesto A40 más el anticuerpo anti-PD-L1 y del ibrutinib más el anticuerpo anti-PD-L1 sobre la supervivencia se prolongaron más allá de los 60 días. Como se muestra en la Figura 18, la combinación de anticuerpo anti-PD-L1 y el compuesto A40 también provocó la regresión tumoral en ratones portadores de aloinjertos de linfoma A20.

Ejemplo 5: Un primer estudio en humanos de fase I/II de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 de ejemplo en pacientes con tumores sólidos avanzados.

Moléculas de anticuerpos

La molécula de anticuerpo de ejemplo (BAP049-Clon-E) probada en este estudio es un anticuerpo monoclonal (mAb) IgG4 humanizado anti-muerte programada-1 (PD-1) que bloquea la unión del ligando de muerte celular programada-1 (PD-L1) y del ligando de muerte celular programada-2 (PD-L2) a PD-1. Se une a PD-1 con alta afinidad e inhibe su actividad biológica. Se une a PD-1 con alta afinidad e inhibe su actividad biológica. Las secuencias de aminoácidos de esta molécula de anticuerpo se describen en la Tabla 1 (VH: SEQ ID NO: 38; VL: SEQ ID NO: 70). Los resultados de los estudios toxicológicos preclínicos han demostrado que tiene un perfil de seguridad favorable. También se ha demostrado su actividad farmacodinámicain vivo. Eneste ejemplo se presentan datos del primer estudio de fase I/II en humanos de esta molécula de anticuerpo en adultos con tumores sólidos avanzados.

Métodos

Diseño y tratamiento del estudio

La Figura 19 muestra el diseño de un estudio de Fase I/II, multicéntrico, abierto, de escalada de dosis y de expansión de la seguridad y eficacia de la molécula de anticuerpo de ejemplo administrada a pacientes con tumores sólidos avanzados.

Los pacientes fueron tratados con la molécula de anticuerpo hasta que experimentaron una toxicidad inaceptable, enfermedad progresiva según los Criterios de Evaluación de la Respuesta en Tumores Sólidos relacionados con el sistema inmunitario modificados ([irRC], definidos como un aumento >20% en la suma de los diámetros de todas las lesiones diana medidas. La progresión debe confirmarse en una segunda evaluación >4 semanas después, tomando como referencia la menor suma de diámetros de todas las lesiones diana registradas en la línea base o después. La suma también debe demostrar un aumento absoluto de >5 mm), y/o la interrupción del tratamiento a discreción del investigador o del paciente.

En la fase de escalada de dosis del estudio, la molécula de anticuerpo se administró por vía intravenosa (i.v.) cada 2 semanas (Q2W) o cada 4 semanas (Q4W). Se evaluaron cinco regímenes de dosificación de la molécula de anticuerpo: 1 mg/kg Q2W, 3 mg/kg Q2W, l0 mg/kg Q2W, 3 mg/kg Q4W y 5 mg/kg Q4W. Los pacientes debían ser tratados con la molécula de anticuerpo hasta que se alcanzara la dosis máxima tolerada (MTD) o hasta que se estableciera una dosis inferior recomendada de fase II (RP2D). Para guiar el escalado de dosis se utilizó un modelo lineal Bayesiano de relación dosis-exposición para la molécula de anticuerpo y un modelo de regresión logística Bayesiana adaptativa siguiendo el principio de escalado con control de sobredosis.

Objetivos y puntos finales del estudio

Los objetivos y puntos finales del estudio se muestran en la Tabla 9.

Tabla 9. Objetivos del estudio y puntos finales

Criterios clave de inclusión

Se incluyeron pacientes con tumores sólidos avanzados/metastásicos, con enfermedad medible o no medible según los Criterios de Evaluación de la Respuesta en Tumores Sólidos (RECIST) versión 1.1, que han progresado a pesar de la terapia estándar o son intolerantes a la misma, o para los que no existe terapia estándar. El estado de rendimiento del Eastern Cooperative Oncology Group era < 2. El tumor era susceptible de biopsia y el paciente dio su consentimiento para la biopsia tumoral al inicio y durante el tratamiento con el fármaco del estudio.

Criterios clave de exclusión

Se excluyó a los pacientes con metástasis sintomáticas en el sistema nervioso central (CNS), o metástasis en el CNS que requirieran tratamiento local dirigido al CNS (como radioterapia o cirugía), o dosis crecientes de corticosteroides en las 2 semanas previas. Se excluyeron los pacientes que recibieron tratamiento sistémico contra el cáncer en las 2 semanas anteriores a la primera dosis del tratamiento del estudio, o tratamiento previo dirigido a PD-1 o PD-L1. También se excluyeron los pacientes que requerían tratamiento crónico con esteroides sistémicos, salvo esteroides a dosis de sustitución en caso de insuficiencia suprarrenal, o que tenían antecedentes de reacciones de hipersensibilidad grave a otros mAbs.

Evaluaciones

Los acontecimientos adversos (AEs) se clasificaron utilizando la versión 4.03 de los Criterios Terminológicos Comunes para los Acontecimientos Adversos (NCI CTCAE) del Instituto Nacional del Cáncer. Se obtuvo un muestreo farmacocinético (PK) exhaustivo en múltiples puntos temporales (hasta 336 horas después de la dosis para Q2W y 672 horas después de la dosis para<q>4<w>) de todos los pacientes de la fase I. Se realizó un análisis PK poblacional preliminar para estimar los parámetros de PK y evaluar el impacto del peso como covariable en el aclaramiento y el volumen de distribución. La respuesta radiológica se evaluó mediante tomografía computarizada (CT) según la versión 1.1 de RECIST. Se realizaron exploraciones cada 2 ciclos desde el día 1 del ciclo 3 hasta el día 1 del ciclo 11, y después cada 3 ciclos hasta la progresión de la enfermedad por irRC o la retirada del paciente. Para los análisis de biomarcadores, se recogieron en el cribado una muestra tumoral de archivo y una biopsia tumoral recién obtenida antes del tratamiento. Durante el tratamiento se obtuvo una biopsia tumoral adicional.

Resultados

Datos demográficos y características de los pacientes

Como se muestra en la Tabla 10, se incluyeron 58 pacientes en la fase I del estudio. Los pacientes presentaban un rango diverso de tumores sólidos avanzados. 4/58 (7%) pacientes recibieron 0 regímenes antineoplásicos previos, 7/58 (12%) recibieron 1 régimen antineoplásico previo, 13/58 (22%) recibieron 2 regímenes antineoplásicos previos y 34/58 (59%) recibieron >3 regímenes antineoplásicos previos.

Tabla 10. Datos demográficos y características de los pacientes

Característica Todos los pacientes de fase I N=58 Edad mediana, años (rango) 55 (23-82)

Sexo, n (%)

Mujer 26 (45)

Hombre 32 (55)

Raza, n (%)

Caucásico 44 (76)

Negro 2 (3)

Asiático 9 (16)

Desconocido 1 (2)

Otros 2 (3)

Estado funcional OMS/ECOG, n (%)

0 24 (41)

1 33 (57)

2 1 (2)

Diagnóstico de la enfermedad, n (%)

Cáncer anal 2 (3)

Cáncer de mama 2 (3)

Colangiocarcinoma 2 (3)

Melanoma cutáneo 1 (2)

Cáncer de esófago 1 (2)

Cáncer gástrico 1 (2)

Cáncer de cabeza y 3 (5)

cuello

Carcinoma 2 (3)

hepatocelular

Liposarcoma 3 (5)

RCC metastásico 6 (10)

NSCLC 1 (2)

Cáncer de próstata 1 (2)

SCLC 2 (3)

TNBC 1 (2)

Otros 30 (52)

Número de regímenes antineoplásicos previos, n (%)

0 4 (7)

1 7 (12)

2 13 (22)

>3 34 (59)

ECOG, Eastern Cooperative Oncology Group; NSCLC, cáncer de pulmón de células no pequeñas; RCC, carcinoma de células renales; SCLC, cáncer de pulmón de células pequeñas; TNBC, cáncer de mama triple negativo; OMS, Organización Mundial de la Salud.

Disposición del paciente y exposición

Como se muestra en la Tabla 11, 11/58 (19%) pacientes estaban recibiendo el fármaco del estudio. De los 58 pacientes en la fecha de corte de los datos, 46 llevaban en el estudio más de 8 semanas; 34, más de 12 semanas; 20, más de 20 semanas; y 6, más de 36 semanas. La Tabla 11 también indica que la razón principal para finalizar el tratamiento fue la enfermedad progresiva, que se produjo en 39/58 (67%) pacientes. En los pacientes de fase I, la mediana de la duración de la exposición fue de 14 semanas (rango 2-46); en los pacientes de fase II, la mediana de la duración de la exposición fue de 2.86 semanas (rango 0.6-9,9).

Tabla 11. Disposición de los pacientes

Motivo de la 1 mg/kg 3 mg/kg 10 Todos los 3 mg/kg 5 mg/kg Todos los Todos los disposición Q2W Q2W mg/kg pacientes Q4W Q4W pacientes pacientes de N=16 n N=15 n Q2W Q2W N=42 N=6 n N=10 n Q4W N=16 fase I N=58 (%) (%) N=11 n n (%) (%) (%) n (%) n (%)

(%)

Pacientes tratados

Tratamiento 13 (81) 11 (73) 9 (82) 33 (79) 6 (100) 8 (80) 14 (88) 47(81) interrumpido

Tratamiento en 3 (19) 4 (27) 2 (18) 9 (21) 0 2 (20) 2 (13) 11 (19) curso*

(%)

Motivo principal del fin del tratamiento

Acontecimiento 1 (6) 0 0 1 (2) 0 0 0 1 (2) adverso

Enfermedad 11 (69) 8 (53) 7 (64) 26 (62) 6 (100) 7 (70) 13 (81) 39 (67) progresiva

Decisión del 0 2 (13) 1 (9) 3 (7) 0 0 0 3 (5) paciente/tutor

Muerte 1 (6) 1 (7) 1 (9) 3 (7) 0 1 (10) 1 (6) 4 (7)

* Pacientes en curso en el momento del corte.

Toxicidades limitantes de la dosis (DLTs), PK clínica y RP2D

No se notificaron toxicidades limitantes de la dosis. En la Figura 14 se muestran los perfiles de concentracióntiempo predichos por el modelo (Ciclo 1/Ciclo 3, cuando se disponía de ellos; vista semilogarítmica) para la molécula de anticuerpo por dosis y régimen de dosificación. Las concentraciones séricas máximas (Cmáx) se produjeron generalmente 1 hora después del final de la infusión. Se observaron aumentos de la exposición aproximadamente proporcionales a la dosis a partir de 1-10 mg/kg. La molécula de anticuerpo alcanza un AUCo-336h de aproximadamente 1000 |jg*día/mL en el ciclo 3 con 3 mg/kg Q2W o 5 mg/kg Q4W.

Se observó una acumulación de aproximadamente 2.1 ~ 3.4 veces con la dosis Q2W y de 1.6 ~ 2.2 veces con la dosis Q4W. La variabilidad PK fue de baja a moderada; la variabilidad entre sujetos (CV% medio geométrico) osciló entre 0.5 y 39.2% para la Cmáx y entre 3.6 y 47.7% para el AUC0-336hrs (Ciclo 1). La semivida estimada a partir del análisis PK poblacional preliminar en pacientes es de 20 (CI 95%:17-23) días.

Sobre la base de un análisis farmacocinético (PK) poblacional, se prevé que una dosis plana de 400 mg Q4W alcanzará concentraciones Cpasante medias en estado estacionario de aproximadamente 31 jg/m L (CI del 90%: 22-42), que supera la EC50ex vivopara el bloqueo de PD-1 de 0.42 jg/m L (Figura 12). Por lo tanto, la dosis recomendada de fase II (RP2D) para la molécula de anticuerpo se seleccionó como 400 mg Q4W. Se espera que un régimen de dosificación alternativo de 300 mg Q3W logre una exposición similar a 400 mg Q4W, y puede ser utilizado en regímenes de combinación donde un programa Q3W es más conveniente.

Seguridad y tolerabilidad

En los pacientes de la Ffase I, los efectos adversos (AEs) de todos los grados más comunes (que ocurrieron en >20% de los pacientes), independientemente de la relación con el fármaco del estudio, fueron náuseas, fatiga, anemia, diarrea, disnea, vómitos, dolor abdominal, disminución del apetito y estreñimiento (Tabla 12). El AE de grado 3/4 más frecuente (>10% de los pacientes), independientemente de la relación con el fármaco del estudio, fue la anemia. El AE de todos los grados más frecuente (se produjo en >20% de los pacientes) con sospecha de relación con el fármaco del estudio fue la fatiga. Los A<e>de grado 3/4 sospechosos de estar relacionados con el fármaco del estudio fueron poco frecuentes, y sólo se produjeron en el 3.4% de los pacientes. No se observó ninguna tendencia en el perfil de acontecimientos adversos entre las cohortes de dosificación.

Tabla 12. Acontecimientos adversos independientemente de la relación con el fármaco del estudio (cualquier grado que ocurra en >20% de los pacientes - conjunto de seguridad).

Término preferido Todos los grados n (%)

Náuseas 23 (40)

Fatiga 21 (36)

Término preferido Todos los grados n (%) Anemia 19 (33)

Diarrea 17 (29)

Disnea 17 (29)

Vómitos 14 (24)

Dolor abdominal 13 (22)

Disminución del apetito 13 (22)

Estreñimiento 12 (21)

Sólo se notifican los acontecimientos adversos ocurridos durante el tratamiento o en los 90 días siguientes a la última medicación del estudio.

En los pacientes de Fase II, los AE de todos los grados más comunes (que ocurrieron en >10% de los pacientes), independientemente de la relación con el fármaco del estudio, fueron dolor abdominal, estreñimiento, tos, disminución del apetito, disnea, fatiga y aumento de la gamma-glutamil transferasa. Los AE de grado 3/4 más frecuentes (ocurrieron en >5% de los pacientes), independientemente de la relación con el fármaco del estudio, fueron dolor abdominal y aumento de la gamma-glutamil transferasa. Los AE de todos los grados más frecuentes (ocurrieron en >5% de los pacientes) sospechosos de estar relacionados con el fármaco del estudio fueron fatiga, náuseas y prurito. No se notificaron AE de grado 3/4 sospechosos de estar relacionados con el fármaco del estudio.

No se notificaron reacciones a la infusión ni reducciones de dosis. Un paciente interrumpió el tratamiento debido a un acontecimiento adverso (disnea de grado 3), no sospechoso de estar relacionado con el fármaco del estudio.

Eficacia

La tasa de respuesta global y la tasa de control de la enfermedad en el amplio rango de tipos tumorales fueron del 2% y el 41%, respectivamente (Tabla 13). Los cambios en la carga tumoral a lo largo del tiempo para cada uno de los pacientes evaluables radiográficamente pueden verse en la Figura 20. Los diagnósticos de los pacientes que permanecían en el estudio en el momento del corte de la fase I incluyen: liposarcoma (dos pacientes), cáncer testicular, carcinoide pulmonar atípico, carcinoma anaplásico de tiroides, carcinoma de células de Merkel, carcinoma de células renales claras, melanoma y cáncer de mama triple negativo (TNBC). Como se muestra en las Figuras 21A-21B, se observó una respuesta parcial tras pseudoprogresión en un paciente con un tumor carcinoide pulmonar atípico metastásico. Como se muestra en la Figura 21C, se detectaron niveles elevados de linfocitos T CD8+ mediante tinción inmunohistoquímica en una muestra tumoral obtenida de este paciente durante el Día 1 del Ciclo 2.

Tabla 13. Mejor respuesta global (basada en la evaluación del investigador del estado de la enfermedad utilizando los criterios RECIST v 1.1)

1 mg/kg 3 mg/kg 10 mg/kg Todos los 3 mg/kg 5 mg/kg Todos los Todos los Q2W Q2W Q2W pacientes Q4W Q4W pacientes pacientes (N=16)n (N=15) n (N=11) n Q2W (N=6) n (N=10) n Q4W de fase I (%) (%) (%) (N=42)n (%) (%) (N=16)n (N=58) n (%) (%) (%) Pacientes 16 15 11 42 6 10 16 58 evaluables*

Mejor

respuesta

global

Respuesta 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) completa

(CR)

Respuesta 0 (0) 1 (7) 0 (0) 1 (2) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 1 (2) parcial (PR)

Enfermedad 9 (56) 6 (40) 3 (27) 18 (43) 3 (50) 2 (20) 5 (31) 23 (40) estable (SD)

Enfermedad 5 (31) 6 (40) 4 (36) 15 (36) 3 (50) 7 (70) 10 (63) 25 (43) progresiva

(PD)

Desconocido 2 (13) 2 (13) 4 (36) 8 (19) 0 (0) 1 (10) 1 (6) 9 (16) Tasa de 0 (0) 1 (7) 0 (0) 1 (2) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 1 (2) respuesta

global (CR o

PR)

90 % [0; 17] [0; 28] [0; 24] [0; 11] [0; 39] [0; 26] [0; 17] [0; 8] Intervalo de

confianza*

Tasa de 9 (56) 7 (47) 3 (27) 19 (45) 3 (50) 2 (20) 5 (31) 24 (41) control de la

enfermedad

(CR o PR o

SD)

90 % [33; 77] [24; 70] [8; 56] [32; 59.0] [15; 85] [4; 51] [13; 55] [30; 53] Intervalo de

confianza

SD incluye pacientes con mejor respuesta global No-CR/No-PD; el intervalo de confianza del 90% se calculó utilizando el intervalo exacto (Clopper-Pearson).

*Los pacientes evaluables se definen como los pacientes con al menos una evaluación post-tratamiento o interrumpidos antes de la primera evaluación post-línea base.

Resumen

La molécula de anticuerpo de ejemplo fue bien tolerada y tuvo un perfil de seguridad manejable. La RP2D se seleccionó como 400 mg Q4W. Se espera que un programa de dosificación alternativo de 300 mg Q3W logre una exposición similar, y puede ser una alternativa más conveniente para evaluar ciertos regímenes de tratamiento de combinación que implican la molécula de anticuerpo. Los datos preliminares de eficacia en un paciente sugieren una respuesta antitumoral impulsada por una mayor actividad de los linfocitos T CD8+, como cabría esperar de un inhibidor de PD-1 clínicamente activo.

Ejemplo 6: Farmacologíain vivopara la combinación del anticuerpo anti-PD-1 y el compuesto A15

El compuesto A15 se ensayó en combinación con una molécula de anticuerpo anti-PD-1 de ejemplo en el modelo de cáncer colorrectal singénico MC38, elegido en función de la presencia de TAM y la respuesta al anti-PD-1. Como se muestra en las Figuras 22A-22C, la combinación del anticuerpo anti-PD-1 y el Compuesto A15 inhibió el crecimiento tumoral y mejoró la supervivencia en comparación con el anti-PD-1 solo. En este estudio, la administración semanal del Compuesto A15 (200 mg/kg) en combinación con la molécula de anticuerpo anti-PD-1 fue más eficaz (8 de 11 respondedores completos) que la administración diaria del Compuesto A15 (200 mg/kg) en combinación con una dosis semanal de la molécula de anticuerpo anti-PD-1 (4 de 11 respondedores completos) y la molécula de anticuerpo anti-PD-1 sola (5 de 11 respondedores completos, dosis semanal). Se observó una modesta disminución de TAM 2 días después de la segunda dosis del esquema semanal del Compuesto A15. La cinética de TAM observada con el programa semanal del compuesto A15 y la combinación anti-PD-1 fue transitoria, ya que el número de TAM volvió a la normalidad 7 días después de la segunda dosis. Se observó una disminución de las Treg tumorales en todos los puntos temporales probados (2 y 7 días tras la dosis) con el compuesto A15 más la molécula de anticuerpo anti-PD-1 en un programa semanal.

Ejemplo 7: Actividad del anticuerpo anti-PD-L1 en el modelo de carcinoma de colon MC38 en combinación con el anticuerpo anti-PD-1

La combinación de una molécula de anticuerpo anti-PD-1 de ejemplo y una molécula de anticuerpo anti-PD-L1 de ejemplo se probó en el modelo murino MC38 de adenocarcinoma de colon. Se utilizó un anticuerpo anti ratón p D-1 sustituto, RMP1-14. Como se muestra en la Figura 23, la administración conjunta de RMP1-14 y la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 dio lugar a una mayor actividad antitumoral en comparación con ambos agentes por separado en este modelo. Específicamente, la molécula de anticuerpo anti-PD-L1 y RMP1-14 en combinación dieron como resultado 4/10 animales con respuestas completas, así como 3/10 animales que demostraron respuestas parciales. Además, la terapia de combinación dio lugar a una mejora no significativa de la mediana del tiempo transcurrido hasta el punto final a 46 días, lo que supuso 21 días más que en los animales tratados con isotipo y más de 20 días más que con cualquiera de los anticuerpos por separado.

Otras realizaciones y ejemplos que incluyen Figuras y Tablas se divulgan en la Publicación de Solicitud de Patente Internacional No. WO 2015/112900 y en la Publicación de Solicitud de Patente U.S. No. US 2015/0210769, tituladas "Moléculas de anticuerpos contra PD-1 y usos de las mismas".

Equivalentes

Aunque se han discutido realizaciones específicas de la invención en cuestión, la especificación anterior es ilustrativa y no restrictiva. Muchas variaciones de la invención se harán evidentes para los expertos en la técnica tras la revisión de esta especificación y las reivindicaciones a continuación. El alcance completo de la invención debe determinarse por referencia a las reivindicaciones, junto con su alcance completo de equivalentes, y la especificación, junto con tales variaciones.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una molécula de anticuerpo anti-PD-1 para su uso a una dosis de 300 mg una vez cada tres semanas o 400 mg una vez cada cuatro semanas en el tratamiento de un cáncer en un sujeto,

en el que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende:

(b) una VH que comprende una secuencia de aminoácidos VHCDR1 de SEQ ID NO: 1; una secuencia de aminoácidos VHCDR2 de SEQ ID NO: 2; y una secuencia de aminoácidos VHCDR3 de SEQ ID NO: 3; y una VL que comprende una secuencia de aminoácidos VLCDR1 de SEQ ID NO: 10, una secuencia de aminoácidos VLCDR2 de SEQ ID NO: 11, y una secuencia de aminoácidos VLCDR3 de SEQ ID NO: 32;

2. La molécula de anticuerpo para uso de la reivindicación 1, en la que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se usa en combinación con uno o más agentes terapéuticos elegidos de una, dos o todas las siguientes categorías (i)-(iii):

(i) un agente que potencia la presentación del antígeno tumoral elegido entre uno o más de: un agonista de STING, un agonista de TLR, un antagonista de A2AR, un virus oncolítico, un modulador de TIM-3, un inhibidor del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR), un inhibidor de c-Met, un inhibidor de TGFb, un inhibidor de IDO/TDO, una vacuna o un captador celular bi o tri-específico;

(ii) un agente que potencia una respuesta celular efectora elegido entre uno o más de: un agonista de GITR, un inhibidor de PD-L1, un inhibidor de IAP (Proteína Inhibidora de la Apoptosis), un inhibidor de EGFR (receptor del factor de crecimiento epidérmico), un inhibidor de la diana de rapamicina (mTOR), IL-15 o una variante de la misma, un inhibidor de CTLA-4, una molécula de anticuerpo biespecífica que se une a CD3 y a un antígeno tumoral, un agonista de CD40, un agonista de OX40 o un agonista de CD27; o

(iii) un agente que disminuye la inmunosupresión tumoral elegido entre uno o más de: un agonista de GITR, un inhibidor de una molécula de punto de control inmunitario elegida entre una o más de PD-L1, LAG-3, TIM-3 o CTLA-4, un inhibidor de CSF-1/1R, un inhibidor de IL-17, un inhibidor de IL-1p, un inhibidor de CXCR2, un inhibidor de PI3Ky o PI3K8, un inhibidor de BAFF-R, un inhibidor de MALT-1/BTK, un inhibidor de JAK, un inhibidor de CRTH2, un inhibidor de VEGFR, un inhibidor de IL-15 o una variante del mismo, un inhibidor de CTLA-4, un inhibidor de IDO/TDO, un antagonista de A2AR, un inhibidor de TGFb o un inhibidor de PFKFB3.

3. La molécula de anticuerpo para uso de la reivindicación 1 o 2, en la que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende:

(a) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 42;

(b) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66;

(d) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 70;

(d) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 70;

(e) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 46; (f) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 46; (g) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 54; (h) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 54; (i) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 58;

(j) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62; (k) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66; (l) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74; (m) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 78;

(n) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 82 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 70; (o) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 82 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 66; o (p) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 86 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 66.

4. La molécula de anticuerpo para uso de cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en la que el cáncer es un tumor sólido o un cáncer hematológico.

5. La molécula de anticuerpo para uso de cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en la que el cáncer se elige entre un cáncer de pulmón, un cáncer de riñón, un cáncer de hígado, un mieloma, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer colorrectal (CRC), un cáncer gástrico, un cáncer de páncreas, un cáncer de tiroides, un tumor neuroendocrino (NET), un cáncer de ovario, un cáncer de trompas de falopio, un linfoma, una leucemia, un síndrome mielodisplásico (MDS) o una lesión metastásica del cáncer,

opcionalmente, en la que

el cáncer de piel es un carcinoma de células de Merkel o un melanoma,

el cáncer de mama es un cáncer de mama triple negativo (TNBC), un cáncer de mama HER2 negativo o un cáncer de mama ER+,

el cáncer de riñón es un carcinoma de células renales, opcionalmente un carcinoma de células renales claras (CCRCC) o un carcinoma de células renales no claras (nccRCC),

el cáncer de tiroides es un carcinoma anaplásico de tiroides (ATC),

el tumor neuroendocrino (NET) es un tumor carcinoide pulmonar atípico o un NET en páncreas, tracto gastrointestinal (GI) o pulmón,

el cáncer de pulmón es un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), opcionalmente un NSCLC escamoso, un NSCLC no escamoso o un adenocarcinoma de NSCLC,

el cáncer colorrectal (CRC) es un cáncer colorrectal de alta inestabilidad de microsatélites (CRC de alta MSI) o un cáncer colorrectal de microsatélites estables (MSS CRC),

la leucemia es una leucemia mieloide aguda (AML) en la que opcionalmente la leucemia mieloide aguda (AML) es una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo,

el síndrome mielodisplásico (MDS) es un MDS de alto riesgo,

el cáncer de hígado es un carcinoma hepatocelular,

el cáncer gástrico es un cáncer gástrico EBV+, o

el linterna es un linterna no Hogdkin.

6. La molécula de anticuerpo para uso de cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en la que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se usa en combinación con:

un inhibidor de IAP;

un inhibidor de mTOR;

un inhibidor de DAC;

un inhibidor de la IL-1p;

un inhibidor de la IL-17;

un inhibidor de MEK; o

un inhibidor del EGFR.

7. La molécula de anticuerpo para uso de la reivindicación 6, en la que la combinación se usa para tratar un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón o un cáncer de mama, opcionalmente en el que el cáncer de pulmón es un NSCLC o el cáncer de mama es un NTBC.

8. La molécula de anticuerpo para uso de cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en la que:

la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se utiliza en combinación con un agente de unión a CSF-1/1R, opcionalmente en el que la combinación se utiliza para tratar un cáncer cerebral, un cáncer de mama o un cáncer de páncreas, opcionalmente en el que el cáncer cerebral es un glioblastoma multiforme (GBM) o el cáncer de mama es un NTBC;

la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se usa en combinación con un inhibidor de la 6-fosfofructo-2-quinasa/fructosa-2,6-bifosfatasa 3 (PFKFB3), opcionalmente en la que la combinación se utiliza para tratar un cáncer de ovario, un cáncer de trompas de falopio o un cáncer colorrectal (CRC);

la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se usa en combinación con un agente quimioterapéutico opcionalmente un paclitaxel, y opcionalmente en la que la combinación se usa para tratar un cáncer de mama, opcionalmente en la que el cáncer de mama es un cáncer de mama HER2-negativo;

la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un inhibidor de BRAF y un inhibidor de MEK, opcionalmente en la que la combinación se utiliza para tratar un cáncer de piel opcionalmente un melanoma;

la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un inhibidor de TGF-p; opcionalmente, la combinación se utiliza para tratar un cáncer de páncreas, un cáncer colorrectal, un cáncer de pulmón, un cáncer de mama, un cáncer de hígado, un cáncer de próstata o un cáncer de riñón; opcionalmente, el cáncer colorrectal es un cáncer colorrectal estable por microsatélite (MSS-CRC), el cáncer de pulmón es un NSCLC, el cáncer de mama es un TNBC, el cáncer de hígado es un carcinoma hepatocelular, o el cáncer de riñón es un carcinoma de células renales claras;

la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un inhibidor de PD-L1, opcionalmente cuando la combinación se usa para tratar un cáncer de pulmón, un cáncer de mama, un cáncer de útero o un cáncer de tiroides, opcionalmente cuando el cáncer de pulmón es un NSCLC, el cáncer de mama es un TNBC, el cáncer de útero es un carcinoma de endometrio, o el cáncer de tiroides es un carcinoma anaplásico de tiroides; o

la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se administra en combinación con un agente hipometilante, opcionalmente en la que la combinación comprende además un inhibidor de TIM-3, y opcionalmente en la que la combinación se utiliza para tratar una leucemia o un síndrome mielodisplásico (MDS), opcionalmente en la que la leucemia es una leucemia mieloide aguda (AML) o el MDS es un MDS de alto riesgo.

9. La molécula de anticuerpo para uso de cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en la que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se usa en combinación con un segundo inhibidor de PD-1.

10. Una composición farmacéutica o formulación de dosis que comprende una molécula de anticuerpo anti-PD-1 para uso en un método de tratamiento de un cáncer, en una dosis de 300 mg una vez cada tres semanas o 400 mg una vez cada cuatro semanas,

en el que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende:

11. La composición farmacéutica para uso o formulación de dosis para uso de la reivindicación 10, en la que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende:

(e) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 46;

(f) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 46;

(g) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 54;

(h) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 54;

(i) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 58;

(j) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 62;

(k) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 50 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 66;

(l) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74;

(m) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 38 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 78;

(n) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 82 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 70;

(o) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 82 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 66; o (p) un dominio variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 86 y un dominio variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 66.

12. La composición farmacéutica para uso o formulación de dosis para uso de la reivindicación 10 u 11, en la que el cáncer se elige entre un cáncer de pulmón, un cáncer de riñón, un cáncer de hígado, un mieloma, un cáncer de próstata, un cáncer de mama, un cáncer colorrectal un cáncer gástrico, un cáncer de páncreas, un cáncer de tiroides, un tumor neuroendocrino (NET), un cáncer de ovario, un cáncer de trompas de falopio, un linfoma, una leucemia, un síndrome mielodisplásico (MDS) o una lesión metastásica del cáncer; opcionalmente, en la que

el cáncer de piel es un carcinoma de células de Merkel o un melanoma;

el cáncer de mama es un cáncer de mama triple negativo (TNBC), un cáncer de mama HER2 negativo o un cáncer de mama ER+;

el cáncer de riñón es un carcinoma de células renales, opcionalmente en el que el carcinoma de células renales es un carcinoma de células renales claras (CCRCC) o un carcinoma de células renales no claras (nccRCC); el cáncer de tiroides es un carcinoma anaplásico de tiroides (ATC);

el tumor neuroendocrino (NET) es un tumor carcinoide pulmonar atípico o un NET en páncreas, tracto gastrointestinal (GI) o pulmón;

el cáncer de pulmón es un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), en el que opcionalmente el NSCLC es un NSCLC escamoso, un NSCLC no escamoso o un adenocarcinoma de NSCLC;

el cáncer colorrectal (CRC) es un cáncer colorrectal de alta inestabilidad de microsatélites (CRC de alta MSI) o un cáncer colorrectal de microsatélites estables (MSS CRC);

la leucemia es una leucemia mieloide aguda (AML), opcionalmente una AML en recaída o refractaria o una AMLde novo;o

el síndrome mielodisplásico (MDS) es un MDS de alto riesgo.

13. Una molécula de anticuerpo anti-PD-1 para uso en una dosis de 300 mg una vez cada tres semanas o 400 mg una vez cada cuatro semanas en el tratamiento de un cáncer en un sujeto, en el que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 comprende una cadena pesada (HC) que comprende una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 91 y una cadena ligera (LC) que comprende una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 72.

14. Una molécula de anticuerpo anti-PD-1 para uso de acuerdo con la reivindicación 13, en la que la molécula de anticuerpo anti-PD-1 se usa en combinación con dabrafenib y trametinib.

15. Una molécula de anticuerpo anti-PD-1 para uso de acuerdo con la reivindicación 14, en la que dabrafenib se usa a una dosis de 150 mg dos veces al día, y en la que trametinib se usa a una dosis de 2 mg una vez al día.

16. La molécula de anticuerpo para uso de cualquiera de las reivindicaciones 13-15, en la que el cáncer comprende una mutación BRAF.

17. La molécula de anticuerpo para uso de la reivindicación 16, en la que el cáncer es un melanoma mutante BRAF V600E.

18. La molécula de anticuerpo para uso de la reivindicación 16, en la que el cáncer es un cáncer de pulmón de células no pequeñas mutante BRAF V600E.

19. La molécula de anticuerpo para uso de la reivindicación 16, en la que el cáncer es un cáncer colorrectal BRAF V600E.

20. La molécula de anticuerpo para uso de la reivindicación 16, en la que el cáncer es un cáncer pancreático BRAF V600E.