TWI387592B - 經取代之苯并咪唑及其作為與腫瘤形成相關激酶之抑制劑之方法 - Google Patents

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經取代之苯并咪唑及其作為與腫瘤形成相關激酶之抑制劑之方法

本發明係關於新穎的經取代之苯并咪唑化合物、其互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯類、代謝產物和前藥，該化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯類、代謝產物和前藥的在藥學上可接受之鹽類，任何前述具體實施例與在藥學上可接受之載劑的組合物，以及任何前述的具體實施例，單獨或與至少一種預防或治療癌症之額外治療劑併用的用途。

已知與腫瘤形成有關的激酶，包括Raf絲胺酸/蘇胺酸激酶和受體酪胺酸激酶(RTKs)。

Raf絲胺酸/蘇胺酸激酶是Raf/有絲分裂原－活化蛋白質激酶(MAPK)信號模組的必要組件，其反映細胞外之刺激控制複雜的轉錄程式。Raf基因編碼高度保留之絲胺酸－蘇胺酸－專一的蛋白質激酶，已知其與ras致癌基因結合。它們是信號轉導路徑的一部份，咸相信該信號轉導路徑由受體酪胺酸激酶、p21 ras、Raf蛋白質激酶、Mek1(ERK活化劑或MAPKK)激酶和ERK(MAPK)激酶所組成，其最後磷酸化轉錄因子。在該路徑中，Raf激酶被Ras激活，並磷酸化和激活兩個有絲分裂原－活化蛋白質激酶的同功型(稱為Mek1和Mek2)，它們是雙重專一性蘇胺酸/酪胺酸激酶。兩種Mek同功型激活有絲分裂原活化激酶1和2(MAPK，亦叫做細胞外配體調節激酶1和2，或Erk1和Erk2)。MAPKs磷酸化許多受質，包括轉錄因子，並如此組成其轉錄程序。Raf激酶參與Ras/MAPK路徑，影響並調節許多細胞功能，如增殖、分化、存活、致癌轉變和細胞凋亡。

已經從在哺乳動物細胞中使用取消管制和顯性抑制之Raf突變種的研究中，以及從使用模式生物之生化和遺傳技術的研究中，證實在許多信號路徑中之Raf的必要角色和位置兩者。在許多情況下，由受體激活Raf，其刺激細胞之酪胺酸磷酸化的作用，依賴Ras的活性，暗示Raf上游的Ras功能。在激活時，Raf－1磷酸化然後激活Mek1，結果傳送信號至下游的效應物，如MAPK(有絲分裂原－活化蛋白質激酶；Crews等人，1993,Cell 74：215)。認為Raf絲胺酸/蘇胺酸激酶是主要的Ras效應物，涉及動物細胞的增殖(Avruch等人，1994,Trends Biochem.Sci.19：279)。

Raf激酶有三個不同的同功型，Raf－1(c－Raf)、A－Raf和B－Raf，差異在於它們與Ras產生交互作用、激活MAPK激酶路徑的能力、組織分布和次－細胞定位(Marias等人，Biochem.J.351：289－305,2000；Weber等人Oncogene 19：169－176,2000；Pritchard等人，Mol.Cell.Biol.15：6430－6442,1995)。可以在所有腫瘤的大約20%中看到Ras基因之一的激活突變，並在所有腫瘤的大約30%中看到Ras/Raf/MEK/ERK路徑被激活(Bos等人，Cancer Res.49：4682－4689,1989；Hoshino等人，Oncogene 18：813－822,1999)。最近的研究已經顯示在皮膚痣中的B－Raf突變作用，是黑色素細胞瘤開始的關鍵步驟(Pollock等人，Nature Genetics 25：1－2,2002)。此外，最近的研究大多數已經發現在B－Raf之激酶功能部位的激活突變，出現在大約66%的黑色素瘤、12%結腸癌和14%肝癌中(Davies等人，Nature 417：949－954,2002；Yuen等人，Cancer Research 62：6451－6455,2002；Brose等人，Cancer Research 62：6997－7000,2002)。

黑色素瘤，其持續代表顯著不適當的醫療需求，是複雜的多基因疾病，有不良的預後，特別是晚期轉移階段。最近已經在各種惡性中發現在B－Raf原－致癌基因中的激活體突變，而最多的是在黑色素瘤中。大約70%黑色素瘤表現B－Raf的突變和激活形式(V600E)，使其成為藥物發展的優秀標靶。此外，其他10－15%黑色素瘤表現突變的N－Ras，更證實MAPK路徑在黑色素瘤細胞之生長和存活上的重要性。

Ras/Raf/MEK/ERK路徑在Raf激酶層面的抑制劑，有可能在作為對抗具有過度表現或突變之受體酪胺酸激酶、激活之細胞內酪胺酸激酶的腫瘤、具有異常表現之Grb2(一種接合體蛋白質，其容許藉著Sos交換因子刺激Ras)的腫瘤，以及藏有Raf本身之激活突變的腫瘤之治療劑上是有效的。在早期臨床試驗中，Raf－1激酶的抑制劑亦抑制B－Raf，顯示作為癌症療法中之治療劑的前途(Crump,Current Pharmaceutical Design 8：2243－2248,2002；Sebastien等人，Current Pharnaceutical Design 8：2249－2253,2002)。

經由應用RNA反義技術，破壞Raf在細胞株中的表現，已經顯示壓抑了Ras和Raf－調節之腫瘤形成性兩者(Kolch等人，Nature 349：416－428,1991：Monia等人，Nature Medicine 2(6)；668－675,1996)。亦已經顯示投與對抗Raf激酶的失活抗體，或共同表現顯性抑制Raf激酶或顯性抑制MEK，Raf激酶的受質，導致將轉化細胞逆轉成正常生長的表現型(參見Daum等人，Trends Biochem.Sci 1994,19：474－80；Fridman等人J.Biol.Chem.1994,269：30105－8)。

已經描述了數個Raf激酶抑制劑，在活體外及/或在活體內的測定中，顯示在抑制腫瘤細胞增殖上的效力(參見例如美國專利第6,391,636號、6,358,932號、6,037,136號、5,717,100號、6,458,813號、6,204,467號和6,268,391號)。其他專利和專利申請案建議使用Raf激酶抑制劑來治療白血病(參見例如美國專利第6,268,391號6,204,467號，以及已公開的美國專利申請案第20020137774號；20020082192號；20010016194號和20010006975號)，或治療乳癌(參見例如美國專利第6,358,932號、5,717,100號、6,458,813號、6,268,391號和6,204,467號，以及已公開的美國專利申請案第20010014679號)。

血管生成亦在癌細胞的生長中扮演重要的角色。已知一旦一窩癌細胞達到某種尺寸，直徑大約1至2毫米，癌細胞就必須發展血液供應，以便使腫瘤生長更大，因為擴散將不足以供應癌細胞足夠的氧和營養。因此，預期抑制血管生成，便抑制了癌細胞的生長。

受體酪胺酸激酶(RTKs)是穿透膜多肽，其調節發育細胞的生長和分化，成年組織的改建和再生(Mustonen,T.等人，J.Cell Biology 129：895－898,1995；van der Geer,P.等人，Ann Rev.Cell Biol.10：251－337,1994)。已知作為生長因子或細胞激動素的多肽配體，已知激活RTKs。發出信號的RTKs涉及配體結合和在受體之外部功能部位中的構形改變，結果導致其二聚作用(Lymboussaki,A."在胚胎、成人和腫瘤中的血管內皮生長因子及其受體(Vascular Endothelial Growth Factors and their Receptors in Embryos,Adults and in Tumors)"Academic Dissertation,University of Helsinki,Molecular/Cancer Biology Laboratory and Department of Pathology,Haartman Institute,1999；Ullrich,A.等人，Cell 61：203－212,1990)。配體與RTK的結合，導致受體在特定酪胺酸殘基處的轉磷酸作用，以及後續激活了細胞質受體之轉磷酸作用的催化功能部位(在同一書中)。

兩個RTKs亞家族對血管內皮是專一的。這些包括血管內皮生長因子(VEGF)亞家族和Tie受體亞家族。V類的RTKs包括VEGFR1(FLT－1)、VEGFR2(KDR(人類)、Flk－1(老鼠))和VEGFR3(FLT－4)(Shibuya,M.等人，Oncogene 5：519－525,1990；Terman,B.等人，Oncogene 6：1677－1683,1991；Aprelikova,O.等人，Cancer Res.52：746－748,1992)。已經敘述VEGF亞家族的成員能夠誘導血管通透性和內皮細胞增殖，更確認其為血管生成和血管新生的主要誘導劑(Ferrara,N.等人，Endocrinol.Rev.18：4－25,1997)。

已知VEGF專一地與RTKs結合，包括FLT－1和Flk－1(DeVries,C.等人，Science 255：989－991,1992；Quinn,T.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.90：7533－7537,1993)。VEGF刺激內皮細胞的移動和增殖，並在活體外和活體內誘導血管生成(Connolly,D.等人，J.Biol.Chem.264：20017－20024,1989；Connolly,D.等人，J.Clin.Invest.84：1470－1478,1989；Ferrara,N.等人，Endocrinol.Rev.18：4－25,1997；Leung,D.等人，Science 246：1306－1309,1989；Plouet,J.等人，EMBO J 8：3801－3806,1989)。

在各種經過培養之內皮細胞系統上的研究，已經確立VEGFR2在血管生成中調解大部分的VEGF下游作用(Wey S.等人，Clinical Advances in Hematology and Oncology,2：37－45,2004)。咸相信調解內皮細胞增殖的VEGFR2，涉及Ras/Raf/Mek/Erk路徑的激活(Veikkola T.等人，Cancer Res 60：203－212,2000)。已經在黑色素瘤、乳癌、膀胱癌、肺癌、甲狀腺癌、前列腺癌和卵巢癌中觀察到VEGFR2的表現(參見Wey等人，在前)。對VEGFR2的中和單株抗體(KDR)已經顯示在阻斷腫瘤血管生成上是有效的(參見Kim等人，Nature 362：841,1993；Rockwell等人，Mol.Cell Differ.3：315,1995)。因為已知血管生成是癌症生長的關鍵因素，並經由VEGF和VEGF－RTK控制，故已經著手發展抑制或阻止血管生成並抑制VEGF－RTK之化合物的後續努力。

血小板衍生之生長因子受體激酶(PDGFR)是另一型的RTK。已經顯示PDGF在許多不同的固體腫瘤中表現，從神經膠質母細胞瘤和骨肉瘤到前列腺癌。在這些各種的腫瘤類型中，PDGF發送信號的生物學角色可從刺激癌細胞生長的自分泌，到涉及相鄰基質之更敏銳的旁分泌交互作用和血管生成。PDGF與酪胺酸激酶受體PDGFRα和PDGFRβ產生交互作用。因此，期望以小的分子抑制PDGFR激酶活性，干擾腫瘤生長和血管生成。

纖維母細胞生長因子受體激酶(FGFRs)代表另一型的RTKs。纖維母細胞生長因子是涉及各種活性之多肽生長因子的家族，包括有絲分裂發生、血管生成和傷口癒合。它們包括一家族相關但各自不同的酪胺酸激酶受體，含有細胞外功能部位，帶有2或3個類－免疫球蛋白(Ig)的功能部位、穿透膜功能部位和細胞質酪胺酸受體功能部位。已經確認纖維母細胞生長因子受體包括FGFR1(Ruta,M等人，Oncogene 3：9－15,1988)；FGFR2(Dionne,C等人，Cytogenet.Cell Genet.60：34－36,1992)；FGFR3(Keegan,K等人，Proc.Natl.Acad.Sci.88：1095－1099,1991)；和FGFR4(Partanen,J等人，EMBO J.10：1347－1354,1991)。

已經闡明纖維母細胞生長因子受體，特別是FGFR3，在癌症中的角色。藉著移位至14q32上的免疫球蛋白重鏈(IgH)位點，致癌基因的調節異常是在B－細胞腫瘤之發病機制中有發展性的事件。在多發性骨髓瘤中，在20至60%病例中出現位移至IgH位點。對於大多數的位移，夥伴染色體是未知的；至於其他的，已經利用經常涉及的唯一染色體11q13，確認多樣的染色體夥伴陣列。Bergsagel等人確認違法轉變的重組片段(定義為含有來自只有1個轉變區的序列)，成為在21個骨髓瘤細胞株之15個中，包括8個未檢測到14q32位移之核型株中的7個，IgH轉變區中位移事件的可能標記。這些位移斷點涉及6個染色體位點：4p16.3；6；8q24.13；11q13.3；16q23.1和21q22.1(Bergsagel等人，Proc.Natl.Acad.Sci.93：13931－13936,1996)。Chesi等人(Nature Genet.16：260－264,1997)在5個骨髓瘤細胞株中，並在10個與多發性骨髓瘤有關之原發性腫瘤的至少3個中發現核型無聲位移t(4；14)(p16.3；q32.3)，顯示FGFR3突變增加的表現和激活。染色體－4斷點聚集在FGFR3之著絲粒的70－kb區，認為它是調節異常的致癌基因。具有該位移的兩個細胞株和一個原發性腫瘤，選擇性地表現含有先前在致死性侏儒症中確認之激活突變：tyr373至cys、lys650至glu和lys650至met的FGFR3對偶基因。至於K650E，已經藉著轉移感染實驗證實在缺少配體之下，FGFR3的組成激活作用。Chesi等人(1997)提出在t(4；14)位移之後，在腫瘤進行期間的體突變經常產生FGFR3蛋白質，其在缺乏配體下是有活性的。

Rasmussen,T等人引用在多發性骨髓瘤中t(4；14)位移有3至24%的頻率(Rasmussen,T等人，Br.J.Haematol.117：626－628,2002)。在患有非確定意義的單株γ球蛋白病(MGUS)之患者中，觀察到明顯較低頻率的位移，暗示在從MGUS轉變至多發性骨髓瘤上的角色。t(4；14)位移影響兩個可能的致癌基因：FGFR3和多發性骨髓瘤組功能部位(MMSET)。Rasmussen等人(2002)調查FGFR3調節異常的頻率及其在多發性骨髓瘤中的預後價值。在110之16個骨髓瘤骨髓試樣中(14.5%)，發現調節異常之FGFR3的表現。

此外，已經出現更多的證據，指出FGFR3在癌瘤中的致癌角色(Cappellen,D.等人，(Lettet)Nature Genet.23：18－20,1999)。Cappellen等人發現在組成上激活之FGFR3，在2種常見的表皮癌症，膀胱癌和子宮頸癌的大部分中表現。FGFR3似乎是在膀胱癌中最常突變的致癌基因，在超過30%的案例中發生良性突變。FGFR3似乎調節相反的信號，在骨骼中擔任生長的負調節子，並在數個腫瘤類型中擔任致癌基因。在這些癌症中確認的所有FGFR3錯義體突變，與引起致死性發育異常的生殖激活突變相同(作者注意到在2個突變中出現該等同，因為在表皮細胞中表現的FGFR3b同功型含有比在骨骼中表現之FGFR3c同功型更多2個胺基酸)。在表皮腫瘤中的FGFR3改變，以S249C突變為最常見，影響9中之5個膀胱癌和3中之3個子宮頸癌。

亦已經出現證據，指出激活的FGFR3被c－Cb1－調節之泛素化作用瞄準成為溶菌酶降解的目標，且在軟骨發育不全和相關軟骨發育異常的患者中發現激活突變，擾亂了該過程，導致激活受體的再循環並擴大FGFR3信號(Cho等人，Proc.Natl.Acad.Sci.101：609－614,2004)。Cho等人提出該機制助成了軟骨發育不全的分子發病機制，並代表治療干涉的可能標靶。溶菌酶瞄準缺陷對於其他提出用以解釋軟骨發育不全之發病機制的機制而言是額外的。

其他結果指出FGFR2和FGFR3是腫瘤形成的重要因素(Jang JH等人，"在纖維母細胞生長因子受體2和纖維母細胞生長因子受體3基因中的突變與人類胃和結直腸癌有關(Mutations in fibroblast growth factor receptor 2 and fibroblast growth factor receptor 3 genes associated with human gastric and colorectal cancers)"Cancer Res.61(9)：354 1－3,2001)。歸因於其在多發性骨髓瘤、膀胱癌和腫瘤形成中的角色，纖維母細胞生長因子受體激酶之抑制劑的發展，特別是FGFR2和FGFR3的抑制劑，將在癌症治療中扮演重要的角色。

c－Kit是另一個屬於PDGF受體家族的受體酪胺酸激酶，且正常在造血子代、肥大和生殖細胞中表現。C－kit表現已經涉及許多癌症，包括肥大細胞白血病、生殖細胞腫瘤、小細胞肺癌、胃腸道基質腫瘤、急性骨髓性白血病(AML)、紅血球性白血病、神經胚細胞瘤、黑色素瘤、卵巢癌、乳癌(Heinrich,M.C.等人；J.Clin.Onc.20,6 1692－1703,2002(回顧論文)；Smolich,B.D.等人，Blood,97,5；1413－1421)。

CSF－1R，一種菌落刺激因子－1(CSF－1)受體的過度表現，已經涉及許多人類癌症，包括乳房、卵巢、子宮內膜、肺臟、腎臟、胰臟和前列腺的癌症(Sapi,E.,Exp.Biol.Med 229：1－11,2004)。CSF－1R是酪胺酸激酶受體，當它被其配體CSF－1激活時，誘發控制細胞增殖和分化的信號轉導路徑。在懷孕和泌乳期間，在乳腺中表現CSF－1R。異常的CSF－1R表現已經與所有乳癌的58%，以及85%侵入性乳癌有關連(參見Sapi，在前)。

持續需要抑制毛細血管增殖、抑制腫瘤生長、治療癌症、調節細胞週期停止及/或抑制諸如一或多個Ras、Raf、突變的B－Raf、VEGFR2(KDR,Flk－1)、FGFR2/3、c－Kit、PDGFRβ、CSF－1R之類分子的化合物，以及含有這類化合物的藥學調配物和醫藥品。亦需要對需要其之患者或個體投與這類化合物、藥學調配物和醫藥品的方法。

以式(I)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物：

其中，R¹ 分別選自羥基、鹵素、C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、(C_{1 － 6} 烷基)硫基、(C_{1 － 6} 烷基)磺醯基、環烷基、雜環烷基、苯基和雜芳基；R² 為C_{1 － 6} 烷基或鹵(C_{1 － 6} 烷基)；R³ 分別選自鹵素、C_{1 － 6} 烷基和C_{1 － 6} 烷氧基；R⁴ 分別選自羥基、C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、鹵素、雜環烷羰基、羧基、(C_{1 － 6} 烷氧基)羰基、胺羰基、C_{1 － 6} 烷胺基羰基、腈、環烷基、雜環烷基、苯基和雜芳基；其中R¹ 、R² 、R³ 和R⁴ 可視需要分別以一或多個選自羥基、鹵素、C_{1 － 6} 烷基、鹵(C_{1 － 6} 烷基)、C_{1 － 6} 烷氧基和鹵(C_{1 － 6} 烷氧基)的取代基取代；a為1、2、3、4或5；b為0、1、2或3；且c為1或2；或其互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥，或該化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥之在藥學上可接受的鹽。

在另外的具體實施例中，以式(II)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物：

其中，R¹ 分別選自C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、羥基、鹵素、(C_{1 － 6} 烷基)硫基、(C_{1 － 6} 烷基)磺醯基、環烷基、雜環烷基、苯基和雜芳基；R³ 分別選自鹵素、C_{1 － 6} 烷基和C_{1 － 6} 烷氧基；R⁴ 分別選自羥基、C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、鹵素、羧基、(C_{1 － 6} 烷氧基)羰基、胺羰基、腈、環烷基、雜環烷基、雜環烷羰基、苯基和雜芳基；其中R¹ 、R² 、R³ 和R⁴ 可視需要分別以一或多個選自羥基、鹵素、C_{1 － 6} 烷基和C_{1 － 6} 烷氧基的取代基取代；a為1、2、3、4或5；b為0、1、2或3；且c為1或2；或其互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥，或該化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥之在藥學上可接受的鹽。

在其他的具體實施例中，以式(III)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物：

其中，R¹ 分別選自C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、羥基、鹵素、(C_{1 － 6} 烷基)硫基、(C_{1 － 6} 烷基)磺醯基、環烷基、雜環烷基、苯基和雜芳基；R⁴ 分別選自羥基、C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、鹵素、羧基、(C_{1 － 6} 烷氧基)羰基、胺羰基、腈、環烷基、雜環烷基、雜環烷羰基、苯基和雜芳基；其中R¹ 和R⁴ 可視需要分別以一或多個選自羥基、鹵素、C_{1 － 6} 烷基和C_{1 － 6} 烷氧基的取代基取代；a為1、2、3、4或5；且c為1或2；或其互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥，或該化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥之在藥學上可接受的鹽。

亦揭示下式(IV)之化合物：

其中，R¹ 分別選自C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、羥基、鹵素、(C₁ －₆ 烷基)硫基、(C_{1 － 6} 烷基)磺醯基、環烷基、雜環烷基、苯基和雜芳基；R² 為C_{1 － 6} 烷基或鹵(C_{1 － 6} 烷基)；R³ 分別選自鹵素、C_{1 － 6} 烷基和C_{1 － 6} 烷氧基；R⁴ 分別選自羥基、C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、鹵素、羧基、(C_{1 － 6} 烷氧基)羰基、胺羰基、C_{1 － 6} 烷胺基羰基、腈、腈(C_{1 － 6} 烷基)、環烷基、雜環烷基、雜環烷基(C_{1 － 6} 烷基)、雜環烷羰基、苯基和雜芳基；其中R¹ 、R² 、R³ 和R⁴ 可視需要分別以一或多個選自羥基、鹵素、C_{1 － 6} 烷基和C_{1 － 6} 烷氧基的取代基取代；a為1、2、3、4或5；且b為0、1、2或3；或其互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥，或該化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥之在藥學上可接受的鹽。

在其他的具體實施例中，以式(I)－(IV)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物，其中R¹ 分別選自羥基、氯、氟、溴、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、三氟甲硫基、六氫吡啶基、C_{1 － 6} 烷基六氫吡啶基、六氫吡基、C_{1 － 6} 烷基六氫吡基、四氫呋喃基、吡啶基和嘧啶基所組成之群。在另外的具體實施例中，以式(I)－(IV)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物，其中a為1或2，且至少一個R¹ 是鹵(C_{1 － 6} 烷基)，如三氟甲基。在另外的具體實施例中，以式(I)－(IV)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物，其中R² 為C_{1 － 6} 烷基，像是例如甲基或乙基。在更多的具體實施例中，以式(I)、(II)和(IV)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物，其中b為0，並因此沒有R³ 。在另類的具體實施例中，以式(I)－(IV)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物，其中b為1，且R³ 為C_{1 － 6} 烷氧基，像是例如甲氧基。在更多的具體實施例中，以式(I)－(III)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物，其中c為1或2，且至少一個R⁴ 為鹵(C_{1 － 6} 烷基)，像是例如三氟甲基。

在其他方面，本發明提供在需要這類治療之人類或動物個體中治療Raf相關病症之方法，包括對該個體投與在個體中有效降低或預防腫瘤生長之含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物，或其在藥學上可接受之鹽的任何具體實施例。

在另一方面，本發明提供在需要這類治療之人類或動物個體中治療Raf相關病症的方法，包括對該個體投與在個體中有效降低或預防腫瘤生長之含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物，或其在藥學上可接受之鹽的任何具體實施例，連同至少一種治療癌症的額外製劑。

在其他方面，本發明提供治療組合物，包括至少一種式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或其在藥學上可接受的鹽，與一或多種用以治療癌症之額外製劑混合，像是在癌症治療中常用的。

本發明之化合物可用來治療癌症，包括癌瘤(例如肺臟、胰臟、卵巢、甲狀腺、膀胱和結腸的)、黑色素瘤、骨髓樣病症(例如骨髓性白血病、多發性骨髓瘤和紅白血病)、腺瘤(例如絨毛狀結腸腺瘤)和肉瘤(例如骨肉瘤)。

在其他方面，本發明係關於在個體中抑制在MAPK信號路徑中之至少一種絲胺酸/蘇胺酸激酶，或在個體中治療由在MAPK信號路徑中之絲胺酸/蘇胺酸激酶調解之生物學狀況的方法，包括投與治療組合物，其包括至少一種式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或其在藥學上可接受的鹽，在個體中有效抑制MAPK信號路徑。該治療組合物可用來治療需要這類抑制劑的患者(例如受到由異常MAPK信號調解之癌症所苦的那些)。在一具體實施例中，本發明係關於在個體中抑制Raf激酶的方法，包括投與治療組合物，其包括{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺，及其互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥，或該化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥之在藥學上可接受的鹽。

在另一方面，本發明係關於在個體中抑制至少一種酪胺酸激酶受體，選自VEGFR－2、PDGFR－β、pERK、bFGF、FGFR1、FGFR2、FGFR3、c－Kit和CSF－1R所組成之群，或治療由至少一種VEGFR－2、PDGFR－β、pERK、bFGF、FGFR1、FGFR2、FGFR3、c－Kit和CSF－1R調解之生物學狀況的方法，包括投與治療組合物，其包括至少一種式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或其在藥學上可接受的鹽，在個體中有效抑制酪胺酸激酶受體。治療組合物可用來治療需要這類抑制劑的患者(例如受由異常酪胺酸激酶受體信號調解之癌症所苦的那些)。在一具體實施例中，本發明係關於在個體中抑制酪胺酸激酶，選自VEGFR－2、PDGFR－β、pERK、bFGF、FGFR1、FGFR2、FGFR3、c－Kit和CSF－1R所組成之群的方法，包括投與治療組合物，其包括{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺，或其互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥，或該化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥之在藥學上可接受的鹽。

按照在本發明之詳細說明中所述，本發明更提供組合物、使用方法和製造方法。

根據本發明之觀點，以式(I)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物：

其中，R¹ 分別選自羥基、鹵素、C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、(C_{1 － 6} 烷基)硫基、(C_{1 － 6} 烷基)磺醯基、環烷基、雜環烷基、苯基和雜芳基；R² 為C_{1 － 6} 烷基或鹵(C_{1 － 6} 烷基)；R³ 分別選自鹵素、C_{1 － 6} 烷基和C_{1 － 6} 烷氧基；R⁴ 分別選自羥基、C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、鹵素、羧基、(C_{1 － 6} 烷氧基)羰基、胺羰基、C_{1 － 6} 烷胺基羰基、腈、環烷基、雜環烷基、雜環烷羰基、苯基和雜芳基；其中R¹ 、R² 、R³ 和R⁴ 可視需要分別以一或多個選自羥基、鹵素、C_{1 － 6} 烷基、鹵(C_{1 － 6} 烷基)、C_{1 － 6} 烷氧基和鹵(C_{1 － 6} 烷氧基)的取代基取代；a為1、2、3、4或5；b為0、1、2或3；且c為1或2；或其互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥，或該化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥之在藥學上可接受的鹽。

在另外的具體實施例中，以式(II)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物：

其中，R¹ 分別選自C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、羥基、鹵素、(C_{1 － 6} 烷基)硫基、(C_{1 － 6} 烷基)磺醯基、環烷基、雜環烷基、苯基和雜芳基；R³ 分別選自鹵素、C_{1 － 6} 烷基和C_{1 － 6} 烷氧基；R⁴ 分別選自羥基、C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、鹵素、羧基、(C_{1 － 6} 烷氧基)羰基、胺羰基、腈、環烷基、雜環烷基、雜環烷羰基、苯基和雜芳基；其中R¹ 、R² 、R³ 和R⁴ 可視需要分別以一或多個選自羥基、鹵素、C_{1 － 6} 烷基和C_{1 － 6} 烷氧基的取代基取代；a為1、2、3、4或5；b為0、1、2或3；且c為1或2；或其互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥，或該化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥之在藥學上可接受的鹽。

在其他的具體實施例中，以式(III)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物：

其中，R¹ 分別選自C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、羥基、鹵素、(C_{1 － 6} 烷基)硫基、(C_{1 － 6} 烷基)磺醯基、環烷基、雜環烷基、苯基和雜芳基；R⁴ 分別選自羥基、C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、鹵素、羧基、(C_{1 － 6} 烷氧基)羰基、胺羰基、腈、環烷基、雜環烷基、雜環烷羰基、苯基和雜芳基；其中R¹ 和R⁴ 可視需要分別以一或多個選自羥基、鹵素、C_{1 － 6} 烷基和C_{1 － 6} 烷氧基的取代基取代；a為1、2、3或5；且c為1或2；或其互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥，或該化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥之在藥學上可接受的鹽。

亦揭示下式(IV)之化合物：

其中，R¹ 分別選自C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、羥基、鹵素、(C_{1 － 6} 烷基)硫基、(C_{1 － 6} 烷基)磺醯基、環烷基、雜環烷基、苯基和雜芳基；R² 為C_{1 － 6} 烷基或鹵(C_{1 － 6} 烷基)；R³ 分別選自鹵素、C_{1 － 6} 烷基和C_{1 － 6} 烷氧基；R⁴ 分別選自羥基、C_{1 － 6} 烷基、C_{1 － 6} 烷氧基、鹵素、羧基、(C_{1 － 6} 烷氧基)羰基、胺羰基、C_{1 － 6} 烷胺基羰基、腈、腈(C_{1 － 6} 烷基)、環烷基、雜環烷基、雜環烷基(C_{1 － 6} 烷基)、雜環烷羰基、苯基和雜芳基；其中R¹ 、R² 、R³ 和R⁴ 可視需要分別以一或多個選自羥基、鹵素、C_{1 － 6} 烷基和C_{1 － 6} 烷氧基的取代基取代；a為1、2、3、4或5；且b為0、1、2或3；或其互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥，或該化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥之在藥學上可接受的鹽。

在其他的具體實施例中，以式(I)－(IV)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物，其中R¹ 分別選自羥基、氯、氟、溴、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、三氟甲硫基、六氫吡啶基、C_{1 － 6} 烷基六氫吡啶基、六氫吡基、C_{1 － 6} 烷基六氫吡基、四氫呋喃基、吡啶基和嘧啶基所組成之群。在另外的具體實施例中，以式(I)－(IV)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物，其中a為1或2，且至少一個R¹ 是鹵(C_{1 － 6} 烷基)，如三氟甲基。在另外的具體實施例中，以式(I)－(IV)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物，其中R² 為C_{1 － 6} 烷基，像是例如甲基或乙基。在更多的具體實施例中，以式(I)、(II)和(IV)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物，其中b為0，並因此沒有R³ 。在另類的具體實施例中，以式(I)－(IV)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物，其中b為1，且R³ 為C_{1 － 6} 烷氧基，像是例如甲氧基。在更多的具體實施例中，以式(I)－(III)提供新穎的經取代之苯并咪唑化合物，其中c為1或2，且至少一個R⁴ 為鹵(C_{1 － 6} 烷基)，像是例如三氟甲基。

在某些具體實施例中，R¹ 、R² 、R³ 和R⁴ 可視需要分別以一至五個選自羥基、鹵素、C_{1 － 6} 烷基、鹵(C_{1 － 6} 烷基)、C_{1 － 6} 烷氧基和鹵(C_{1 － 6} 烷氧基)的取代基取代。

在某些具體實施例中，R¹ 、R² 、R³ 和R⁴ 可視需要分別以一至三個選自羥基、鹵素、C_{1 － 6} 烷基、鹵(C_{1 － 6} 烷基)、C_{1 － 6} 烷氧基和鹵(C_{1 － 6} 烷氧基)的取代基取代。

在某些具體實施例中，R¹ 分別選自鹵素、C_{1 － 6} 烷氧基、鹵(C_{1 － 6} 烷基)、羥基、鹵(C_{1 － 6} 烷氧基)、鹵(C_{1 － 6} 烷基)磺醯基、雜芳基、鹵(C_{1 － 6} 烷基)硫基、雜環烷基和(C_{1 － 6} 烷基)雜環烷基所組成之群。在某些這類的具體實施例中，a為1且R¹ 分別選自2－氯、2－乙基、2－三氟甲基、3－三氟甲基、4－三氟甲基、3－第三－丁基、4－第三－丁基、3－乙基、4－乙基、4－氯、4－溴、4－三氟甲氧基、4－三氟甲硫基、4－三氟甲基磺醯基和4－(4－甲基六氫吡基)所組成之群。在另外的具體實施例中，a為2且R¹ 分別選自2－氟、2－氯、2－羥基、2－甲氧基、3－甲氧基、5－甲氧基、4－氯、4－氟、3－三氟甲基、4－三氟甲基、5－三氟甲基、5－吡啶基、5－吡啶基－3－基、5－吡啶基－4－基、3－四氫呋喃－3－基、3－異丙基、5－異丙基和5－第三－丁基所組成之群。

在某些具體實施例中，R⁴ 選自C_{1 － 6} 烷基、羥基(C_{1 － 6} 烷基)、鹵(C_{1 － 6} 烷基)、鹵(C_{1 － 6} 烷基)硫基、(C_{1 － 6} 烷氧基)羰基、(C_{1 － 6} 烷基)雜環烷基、腈、苯基、鹵(C_{1 － 6} 烷基)苯基、(C_{1 － 6} 烷基)雜環烷基羰基和羥基(C_{1 － 6} 烷胺基羰基)所組成之群。在某些這類的具體實施例中，c為1且R⁴ 選自三氟甲基、腈、苯基、三氟甲硫基、甲氧羰基、4－乙基六氫吡基、4－乙基六氫吡基－1－羰基或2－羥基乙胺基羰基所組成之群。在另外的具體實施例中，c為2且R⁴ 分別選自甲基、3－三氟甲苯基、4－三氟甲苯基、三氟甲基、乙氧羰基、羥甲基和苯基所組成之群。

在其他的具體實施例中，提供化合物或其在藥學上可接受的鹽，其中該化合物具有下式：

或該化合物之互變異構物，或具有下式之互變異構物在藥學上可接受的鹽：

在其他方面，本發明提供在需要這類治療之人類或動物個體中治療Raf相關病症的方法，包括對該個體投與在個體中有效降低或預防腫瘤生長之含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物。

另一方面，本發明提供在需要這類治療之人類或動物個體中治療Raf相關病症的方法，包括對該個體投與在個體中有效降低或預防腫瘤生長之含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物，連同至少一種用於治療癌症的額外製劑。

另一方面，本發明提供在需要這類治療之人類或動物個體中治療Raf相關病症的方法，包括對該個體投與在個體中有效降低或預防腫瘤生長之含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物，連同至少一種用於治療癌症的額外製劑。企圖在本發明之方法中使用許多用來作為混合療法的適當抗癌製劑。確實，本發明期待，但不限於投與許多抗癌製劑，如：多核苷酸(例如核酶)；多肽(例如酵素)；藥物；生物模仿物；生物鹼；烷基化製劑；抗腫瘤抗生素；抗代謝產物；激素；鉑化合物；與抗癌藥物、毒素及/或放射性核素共軛的單株抗體；生物反應修飾子(例如干擾素[例如IFN－a等等]和介白素[例如IL－2等等]等等)；過繼式免疫治療劑；造血生長因子；誘導腫瘤細胞分化的製劑(例如全反式視黃酸等等)；基因治療試劑；反義治療試劑和核苷酸；腫瘤疫苗；血管生成的抑制劑及其類似物。適合與所揭示之式(I)、(II)、(III)或(IV)化合物共同投藥的許多化療化合物和抗癌療法的其他實例，為熟諳此藝者已知的。

在較佳的具體實施例中，與本發明之化合物併用的抗癌製劑，包括誘導或刺激細胞凋亡的製劑。誘導細胞凋亡之製劑包括，但不限於輻射；激酶抑制劑(例如表皮細胞生長因子受體[EGFR]激酶抑制劑、血管生長因子受體[VGFR]激酶抑制劑、纖維母細胞生長因子受體[FGFR]激酶抑制劑、血小板衍生之生長因子受體[PGFR]I激酶抑制劑和Bcr－Abl激酶抑制劑，如STI－571、格列衛(Gleevec)和基利克(Glivec)))；反義分子；抗體[例如賀癌平(Herceptin)和美羅華(Rituxan)]；抗－雌激素[例如雷洛昔芬(raloxifene)和他莫昔芬(tamoxifen)]；抗－雄激素[例如氟他胺(flutamide)、比卡魯米(bicalutamide)、非那雄胺(finasteride)、氨魯米特(aminoglutethamide)、酮康唑(ketoconazole)和皮質類固醇]；環氧化酶2(COX－2)抑制劑[例如希樂葆(Celecoxib)、美洛昔康(meloxicam)、NS－398和非類固醇消炎藥(NSAIDs)]；以及癌症化療藥物[例如伊立替康(irinotecan)(伊立替康(Camptosar))、CPT－11、氟達拉濱(fludarabine)(福達華(Fludara))、甲嗪咪唑胺(dacarbazine)(DTIC)、地塞米松、米托蒽醌(mitoxantrone)、麥羅塔(Mylotarg)、VP－16、順氯氨鉑(cisplatinum)、5－FU、阿黴素(Doxrubicin)、剋癌易(Taxotere)或紫杉醇(taxol)]；細胞信號分子；神經醯胺類和細胞激動素；以及星形孢菌素(staurosprine)及其類似物。

在另一方面，本發明提供醫藥組合物，包括至少一種式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物，或其在藥學上可接受的鹽，連同在藥學上可接受之適合投與人類或動物個體的載劑，單獨或與其他抗癌製劑併用。

在另一方面，本發明提供製造如同在本文中所述之式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物的方法。

在另一方面，本發明提供化合物，其為酵素Raf激酶的抑制劑。因為酵素是p21^{r a s} 的下游效應物，瞬間抑制劑可用在適合人類或脊椎動物使用，指示抑制raf激酶路徑的醫藥組合物中，例如治療由Raf激酶調解的腫瘤及/或癌性細胞生長。特定而言，化合物可用來治療人類或動物，例如老鼠的癌症，因為這些癌症的進行依賴Ras蛋白質信號轉導階梯，並因此易受到藉著經由抑制Raf激酶活性來干擾階梯之治療的影響。因此，本發明之化合物可用來治療固體癌症，像是例如癌瘤(例如肺臟、胰臟、甲狀腺、膀胱或結腸)、骨髓樣病症(例如骨髓性白血病、多發性骨髓瘤和紅血球性白血病)、腺瘤(例如絨毛狀結腸腺瘤)或肉瘤(例如骨肉瘤)。

當在本文中使用"Raf抑制劑"一詞時，意指對Raf激酶活性顯示出不超過大約100 μM之IC_{5 0} 的化合物，更具代表性的是不超過大約50 μM，係在下文普遍描述的Raf/Mek過濾測定中測量。將顯示本發明之化合物抑制了較佳的Raf激酶同功型，包括A－Raf、B－Raf和C－Raf(Raf－1)。"IC_{5 0} "是降低酵素(例如Raf激酶)活性至半－峰程度的抑制劑濃度。已經發現本發明之代表性化合物顯示出對Raf的抑制活性。本發明之化合物最好對Raf顯示出不超過大約10 μM的IC_{5 0} ，更佳的是不超過大約5 μM，再更佳的是不超過大約1 μM，而最佳的是不超過大約200 nM，係在本文描述之Raf激酶測定中測量。

當在本文中使用時，片語"MAPK信號轉導路徑"為在由Ras－Raf－MEK1－ERK信號分子組成的模組中，有絲分裂原－活化蛋白質激酶信號轉導路徑的縮寫。

"烷基"意指飽和的烴基，其不含雜原子並包括直鏈烷基基團，如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基及其類似物。烷基亦包括直鏈烷基基團的支鏈異構體，包括但不限於下列，以例如：－CH(CH₃ )₂ 、－CH(CH₃ )(CH₂ CH₃ )、－CH(CH₂ CH₃ )₂ 、－C(CH₃ )₃ 、－C(CH₂ CH₃ )₃ 、－CH₂ CH(CH₃ )₂ 、－CH₂ CH(CH₃ )－(CH₂ CH₃ )、－CH₂ CH(CH₂ CH₃ )₂ 、－CH₂ C(CH₃ )₃ 、－CH₂ C(CH₂ CH₃ )₃ 、－CH(CH₃ )－CH(CH₃ )(CH₂ CH₃ )、－CH₂ CH₂ CH(CH₃ )₂ 、－CH₂ CH₂ －CH(CH₃ )(CH₂ CH₃ )、－CH₂ CH₂ CH(CH₂ CH₃ )₂ 、－CH₂ CH₂ C(CH₃ )₃ 、－CH₂ CH₂ C(CH₂ CH₃ )₃ 、－CH(CH₃ )CH₂ CH(CH₃ )₂ 、－CH(CH₃ )－CH(CH₃ )CH(CH₃ )₂ 、－CH(CH₂ CH₃ )CH(CH₃ )CH(CH₃ )(CH₂ CH₃ )及其他提供。因此，烷基基團包括一級烷基基團、二級烷基基團和三級烷基基團。片語"C_{1 － 1 2} 烷基"意指具有從1到12個碳原子的烷基基團。片語"C_{1 － 6} 烷基"意指具有從1到6個碳原子的烷基基團。

"烯基"意指具有從2到6個碳原子的直鏈或分支之烴基，且最好是2至4個碳原子，並具有至少1個，最好是從1到2個位置的乙烯基(>C＝C<)不飽和。這類基團的實例為乙烯基、烯丙基和丁－3－烯－1－基。在該名詞中包括順和反式異構體，或這些異構體的混合物。

"烷氧基"意指RO－，其中R為烷基基團。當在本文中使用片語"C_{1 － 6} 烷氧基"時，意指RO－，其中R為C_{1 － 6} 烷基基團。C_{1 － 6} 烷氧基的代表性實例包括甲氧基、乙氧基、第三－丁氧基及其類似物。

"(C_{1 － 6} 烷氧基)羰基"意指酯－C(＝O)－OR，其中R為C_{1 － 6} 烷基。

"醯胺基"意指基團－C(＝NH)NH₂ 。"脒"意指含有這類基團的化合物。

"胺羰基"在本文中意指基團－C(O)－NH₂ 。

"C_{1 － 6} 烷胺基羰基"意指基團－C(O)－NRR'，其中R為C_{1 － 6} 烷基且R'選自氫和C_{1 － 6} 烷基。

"羰基"意指二價基團－C(O)－。

"羧基"意指－C(＝O)－OH。

"氰基"、"腈"或"腈"意指－CN。

"腈(C_{1 － 6} 烷基)"意指以－CN取代的C_{1 － 6} 烷基。

"環烷基"意指單－或多環的烷基取代基。代表性的環烷基基團具有從3至8個碳環原子。代表性的環烷基基團包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基和環辛基。

"鹵素"或"鹵"意指氯、溴、氟和碘基團。

"鹵(C_{1 － 6} 烷基)"意指以一或多個鹵素原子取代的C_{1 － 6} 烷基基團，最好是1至5個鹵素原子。較佳的鹵(C_{1 － 6} 烷基)基團是三氟甲基。

"鹵(C_{1 － 6} 烷基)苯基"意指以鹵(C_{1 － 6} 烷基)基團取代的苯基基團。

"鹵(C_{1 － 6} 烷氧基)"意指以一或多個鹵素原子取代的烷氧基基團，較佳的是1至5個鹵素原子。較佳的鹵(C_{1 － 6} 烷氧基)基團是三氟甲氧基。

"鹵(C_{1 － 6} 烷基)磺醯基"和"鹵(C_{1 － 6} 烷基)硫基"意指以鹵(C_{1 － 6} 烷基)基團取代磺醯基和硫基基團，其中磺醯基和硫基如同在本文中之定義。

"雜芳基"意指芳香族基團，在芳香族環中具有從1至4個雜原子作為環原子，而剩下的環原子則是碳原子。適合用在本發明之化合物中的雜原子為氮、氧和硫，其中可視需要將氮和硫原子氧化。代表性的雜芳基基團具有5至14個環原子，並包括例如苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并唑基、二氮呯基、呋喃基、吡基、吡唑基、吡啶基、嗒基、嘧啶基、吡咯基、唑基、異唑基、咪唑基、吲哚基、吲唑基、喹啉基、異喹啉基、喹唑啉基、喹喏啉基、噻唑基、噻吩基和三唑基。

"雜環烷基"在本文中意指在環結構中具有從1至5個，更典型的是從1至2個雜原子的環烷基取代基。適合在本發明之化合物中使用的雜原子是氮、氧和硫，其中可視需要將氮和硫原子氧化。代表性的雜環烷基部分包括，例如嗎啉基、六氫吡基、六氫吡啶基及其類似物。

"(C_{1 － 6} 烷基)雜環烷基"意指以C_{1 － 6} 烷基基團取代的雜環烷基基團。

"雜環烷基(C_{1 － 6} 烷基)"意指以雜環烷基取代的C_{1 － 6} 烷基。

"雜環烷羰基"在本文中意指基團－C(O)－R^{1 0} ，其中R^{1 0} 為雜環烷基。

"(C_{1 － 6} 烷基)雜環烷羰基"意指基團－C(O)－R^{1 1} ，其中R^{1 1} 為(C_{1 － 6} 烷基)雜環烷基。

"羥基"意指－OH。

"羥基(C_{1 － 6} 烷基)"意指以羥基取代的C_{1 － 6} 烷基基團。

"羥基(C_{1 － 6} 烷胺基羰基)"意指以羥基取代的C_{1 － 6} 烷胺基羰基基團。

"亞胺酸"或"亞胺酸酯"意指基團－C(＝NH)O－或含有這類基團的化合物。亞胺酸酯包括，例如亞胺酸甲基酯－C(＝NH)OCH₃ 。

"硝基"意指－NO₂ 。

"磺醯基"在本文中意指基團－SO₂ －。

"硫基"在本文中意指基團－S－。"烷基磺醯基"意指結構－SO₂ R^{1 2} 的經取代之磺醯基，其中R^{1 2} 為烷基。"烷硫基"意指結構－SR^{1 2} 的經取代硫基，其中R^{1 2} 為烷基。在本發明之化合物中使用的烷基磺醯基和烷硫基基團，包括(C_{1 － 6} 烷基)磺醯基和(C_{1 － 6} 烷基)硫基。因此，代表性的基團包括，例如甲磺醯基和甲硫基(即其中R^{1 2} 為甲基)、乙磺醯基和乙硫基(即其中R^{1 2} 為乙基)、丙磺醯基和丙硫基(即其中R^{1 2} 為丙基)，及其類似物。

"羥基經保護之基團"意指OH基團的保護基。當在本文中使用該名詞時，亦意指保護酸COOH的OH基團。適當的羥基保護基，以及特殊官能基之適當的保護和脫保護條件，為此項技藝中已熟知的。例如，在T.W.Greene和P.G.M.Wuts,有機合成中的保護基(Protecting Groups in Organic Synthesis)，第3版，Wiley,New York,1999中描述了許多這類的保護基。這類羥基保護基包括C_{1 － 6} 烷基醚、苯甲醚、對－甲氧苯甲醚、矽烷基醚及其類似物。

"多晶型物"一詞意指化合物的不同結晶形式。多晶型物彼此的差異在於各種物理特性，像是例如在其X－光繞射圖、紅外線吸收光譜、熔點、穩定性或溶解度上的差異。

"代謝產物"意指在投與親代化合物之後，任何在個體中產生的衍生物。可在個體中藉著各種生化轉化作用，像是例如氧化、還原、水解或共軛作用，從親代化合物產生衍生物，並包括例如氧化物和脫甲基化的衍生物。亦可藉著在活體外的方法，或經由合成方法，產生與這類衍生物一致的代謝產物。在某些具體實施例中，式(I)－(IV)之化合物的代謝產物為氧化物。在某些方面，氧化物為藉著以氧化劑處理式(I)－(IV)之化合物，以合成方式形成的N－氧化物。在某些方面，氧化劑是N－甲基嗎啉N－氧化物或氫過氧化物，如過氧化氫。在某些具體實施例中，將式(I)－(IV)之化合物與葡萄糖醛酸共軛，形成代謝產物。在其他方面，提供具有下列結構之代謝產物、其互變異構物或立體異構物：

"可視需要取代"或"經取代"意指以單價或二價基團置換一或多個氫原子。

當經取代之取代基包括直鏈基團時，取代作用可發生在鏈內(例如2－羥丙基、2－胺丁基及其類似物)，或在鏈末端(例如2－羥乙基、3－氰丙基及其類似物)。經取代之取代基可以是直鏈、分支或環狀排列的共價結合之碳或雜原子。

上文的定義並非企圖包括不許可的取代方式(例如以5個氟基團取代甲基，或以其他鹵素原子取代鹵素原子)。這類不許可的取代方式為熟諳此藝者所熟知的。

熟諳此藝者亦了解本發明之化合物，包括式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或其立體異構物和多晶型物，以及它們任一在藥學上可接受的鹽類、酯類、代謝產物和前藥，可經歷互變異構作用，並因此可能以各種互變異構形式存在，其中分子之一原子的質子轉移到另一原子上，該分子之原子間的化學鍵結因而重新排列。參見，例如March,高等有機化學：反應、機制和結構(Advanced Organic Chemistry：Reactions,Mechanisms and Structures)，第4版，John Wiley & Sons,第69－74頁(1992)。當在本文中使用時，"互變異構物"一詞意指由質子轉移所產生的化合物，並應了解在本發明中包含所有的互變異構形式，只要它們有可能出現。例如，式(Ia)化合物的互變異構物(在它下一個的是c為1之式(I)化合物)為式(Ib)化合物。同樣的，式(IVc)化合物的互變異構物為式(IVd)或(IVe)化合物。

本發明之化合物，包括式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或其互變異構物和多晶型物，以及它們任一在藥學上可接受的鹽類、酯類、代謝產物和前藥，可包括不對稱經取代的碳原子。這類不對稱經取代的碳原子，結果使本發明之化合物以對映體、非對映異構物和其他的立體異構形式存在，可能以絕對立體化學的角度來定義，如以(R)－或(S)－形式。結果，本發明化合物之所有這類可能的異構物、以其在光學上純的形式之個別立體異構物、其混合物、消旋混合物(或"消旋物")、非對映異構物的混合物，以及單一的非對映異構物，均包含在本發明中。當在本文中使用"S"和"R"組態時，係按照IUPAC 1974推薦第E章，基本立體化學(RECOMMENDATIONS FOR SECTION E,FUNDAMENTAL STEREOCHEMISTRY),Pure Appl.Chem.45：13－30(1976)之定義。環狀化合物的環位置則使用α和β。參考平面的α－面是在其上有較多取代基位於較低編號位置的那一面。將位在參考平面之相反側的那些取代基指派為β解說圖。請注意該用途與環狀立體親代的不同，其中"α"意指"在平面之下"，並表示絕對組態。α和β組態，當在本文中使用時，係按照化學摘要索引指南－附錄IV(CHEMICAL ABSTRACTS INDEX GUIDE－APPENDIX IV)(1987)第203段的定義。

熟諳此藝者亦將知曉本發明之化合物，包括式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或其立體異構物和互變異構物，以及它們任一在藥學上可接受的鹽類、酯類、代謝產物和前藥，可以各種結晶形式存在(或"多晶型物")存在，具有不同的物理特性。應了解本發明化合物所有的多晶型物，包括其代謝產物、前藥、立體異構物和互變異構物，以及它們任一在藥學上可接受的鹽類，只要有可能存在，以經過分離之形式或其混合物，均包含在本發明內。

當在本文中使用時，"在藥學上可接受之鹽類"一詞意指式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥的無毒性酸，或鹼土金屬鹽類。可在式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物最後的分離和純化期間就地製備，或藉著使鹼或酸官能分別與適當的有機或無機酸或鹼反應，來製備這些鹽類。代表性的鹽類包括，但不限於下列的：乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、檸檬酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、二葡萄糖酸鹽、環戊烷丙酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、葡糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、反丁烯二酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2－羥基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲烷磺酸鹽、菸鹼酸鹽、2－萘磺酸鹽、草酸鹽、帕馬酸鹽、果膠脂酸鹽、過硫二酸鹽、3－苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對－甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。再者，可利用諸如低碳數烷基鹵化物，如甲基、乙基、丙基和丁基氯、溴和碘；硫酸二烷基酯，像是硫酸二甲酯、二乙酯、二丁酯和二戊酯；長鏈鹵化物，如癸基、月桂基、肉荳蔻基和硬脂醯基氯、溴和碘；苯烷基鹵化物，如苄基和苯乙基溴及其他製劑，將鹼性含氮基團季銨化。藉此獲得水或油溶性，或可分散的產物。

可用以形成在藥學上可接受之酸加成鹽的酸之實例，包括無機酸，如鹽酸、硫酸和磷酸，以及有機酸，如草酸、順丁烯二酸、甲烷磺酸、琥珀酸和檸檬酸。可在式(I)化合物最後的分離和純化期間就地製備鹼加成鹽，或藉著使羧酸部分分別與適當的鹼反應，如在藥學上可接受之金屬陽離子的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽，或與氨或有機的一級、二級或三級胺反應。在藥學上可接受的鹽類包括，但不限於以鹼金屬或鹼土金屬為基礎之陽離子，如鈉、鋰、鉀、鈣、鎂、鋁鹽及其類似物，以及無毒性的銨、季銨和胺陽離子，包括但不限於銨、四甲銨、四乙銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺及其類似物。其他可用來形成鹼加成鹽類的代表性有機胺類，包括二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、六氫吡及其類似物。

亦在2006年8月30日申請之標題為"苯并咪唑基吡啶基醚之鹽類及其調配物(Salts of Benzimidazolyl Pyridyl Ethers and Formulations Thereof)"的臨時申請案(代理案第PP028258.0001號)中，揭示了本發明化合物之鹽類和調配物，全部以引用的方式併入本文中。

當在本文中使用時，"在藥學上可接受的酯"一詞意指在活體內水解的酯類，並包括在人體內迅速瓦解留下親代化合物或其鹽的那些。適當的酯基團包括，例如衍生自在藥學上可接受之脂肪族羧酸，特別是烷酸、烯酸、環烷酸和烷二酸的那些，其中每個烷基或烯基部分最好具有不超過6個的碳原子。特殊酯類的實例包括甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯和乙基琥珀酸酯。

當在本文中使用時，"在藥學上可接受的前藥"一詞意指本發明化合物的那些前藥，在合理的醫學判斷範圍內，其適合用來與人類或低等動物的組織接觸，而沒有不當的毒性、刺激性、過敏反應及其類似物，與合理的利益/風險比例相稱，並對它期望的用途有效，在可能之處還有本發明化合物的兩性形式。"前藥"一詞意指化合物可在活體內迅速地轉化，產生上式之親代化合物，例如在血液中藉著水解作用。在T.Higuchi和V.Stella,作為新穎遞送系統的前藥(Pro－drugs as Novel Delivery Systems),A.C.S.論文集系列的第14冊，以及在Edward B.Roche編輯，藥物設計中的生物可逆性載劑(Bioreversible Carriers in Drug Design),American Pharmaceutical Association and Pergamon Press,1987中提供了徹底的討論，兩者全部以引用的方式併入本文中。

熟諳此藝者將知曉本發明之化合物，包括式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或其互變異構物、前藥、立體異構物和多晶型物，以及它們任一在藥學上可接受的鹽類、酯類和前藥，可在活體內加工處理，經過人類或動物體或細胞中的代謝，產生在具有藥理學活性的代謝產物，其保留作為抑制劑的活性。可使用在此項技藝中已知的例行技術，確認本發明化合物之具有活性的代謝產物。參見，例如Bertolini,G.等人，J.Med.Chem.40：2011－2016(1997)；Shan,D.等人，J.Pharm.Sci.86(7)：765－767；Bagshawe K.,Drug Dev.Res.34：220－230(1995)；Bodor,N.,Advances in Drug Res.13：224－331(1984)；Bundgaard,H.,前藥的設計(Design of Prodrugs)(Elsevier Press 1985)；以及Larsen,I.K.,前藥的設計和應用，藥物設計與發展(Design and Application of Prodrugs,Drug Design and Development)(Krogsgaard－Larsen等人編輯，Harwood Academic Publishers,1991)。應了解個別的化學化合物，為本發明化合物之有活性的代謝產物，均包含在本發明內。

"癌症"意指可藉著抑制激酶，特別是Raf激酶而有利地治療的癌症疾病，包括例如固體癌症，如癌瘤(例如肺臟、胰臟、甲狀腺、卵巢、膀胱、乳房、前列腺或結腸的)、黑色素瘤、骨髓樣病症(例如骨髓性白血病、多發性骨髓瘤和紅血球性白血病)、腺瘤(例如絨毛狀結腸腺瘤)和肉瘤(例如骨肉瘤)。

在本發明代表性的具體實施例中，本發明之化合物包括例如{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲苯基)－胺，(2－氟－5－吡啶－3－基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(2－氟－5－吡啶－4－基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(4－第三－丁基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基)－1H－咪唑－2－基]－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(3－三氟甲基－苯基)－胺，(3－乙基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(4－氯－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(4－乙基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(4－氯－3－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(4－氟－3－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲氧基－苯基)－胺，(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－(1－甲基－5－{2－[5－甲基－4－(3－三氟甲基－苯基)－1H－咪唑－2－基]－吡啶－4－基氧基}－1H－苯并咪唑－2－基)－胺，(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－(1－甲基－5－{2－[5－甲基－4－(4－三氟甲基－苯基)－1H－咪唑－2－基]－吡啶－4－基氧基}－1H－苯并咪唑－2－基)－胺，2－{4－[2－(2－氟－5－三氟甲基－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－5－三氟甲基－1H－咪唑－4－羧酸乙酯，(2－{4－[2－(2－氟－5－三氟甲基－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－5－三氟甲基－1H－咪唑－4－基}－甲醇，2－{4－[1－甲基－2－(4－三氟甲基－苯胺基)－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－3H－咪唑－4－腈，(3－第三－丁基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－苯基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(1－甲基－5－[2－(5－苯基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲硫基－苯基)－胺，(3－第三－丁基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，[4－氟－3－(四氫－呋喃－3－基)－苯基]－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(4－溴－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(4－氟－3－異丙基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲硫基－苯基)－胺，(2－氟－5－異丙基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(5－第三－丁基－2－氟－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(2－氯－4－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，2－{4－[2－(2－氟－5－三氟甲基－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－3H－咪唑－4－腈，(5－第三－丁基－2－氯－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(4－苯基－5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(2－氯－5－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(4－苯基－5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，{1－甲基－5－[2－(4－苯基－5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(3－三氟甲基－苯基)－胺，(3－乙基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(4－苯基－5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(4－第三－丁基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(4－苯基－5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(2－氯－5－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－甲基－4－苯基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(2－氯－5－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－甲基－4－苯基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(4－第三－丁基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－甲基－4－苯基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，{1－甲基－5－[2－(5－甲基－4－苯基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(3－三氟甲基－苯基)－胺，(5－第三－丁基－2－氟－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－甲基－4－苯基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，[4－(4－甲基－六氫吡－1－基)－苯基]－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，2－{4－[2－(2－氟－5－三氟甲基－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－3H－咪唑－4－羧酸甲酯，2－{4－[2－(2－氯－5－三氟甲基－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－5－三氟甲基－1H－咪唑－4－羧酸甲酯，(2－氟－4－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(2－氯－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(2,5－二甲氧基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(3,5－二甲氧基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(2－三氟甲基－苯基)－胺，(2－乙基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，(4－乙基－六氫吡－1－基)－(2－{4－[2－(2－氟－5－三氟甲基－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－3H－咪唑－4－基)－甲烷酮，2－{4－[2－(2－氟－5－三氟甲基－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－3H－咪唑－4－羧酸(2－羥基－乙基)－醯胺，{1－乙基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－胺，(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－{6－甲氧基－1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺，{6－甲氧基－1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺，(4－乙基－六氫吡－1－基)－(2－{4－[1－甲基－2－(4－三氟甲基－苯胺基)－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－3H－咪唑－4－基}－甲烷酮，{1－乙基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺，2－{4－[1－甲基－2－(4－三氟甲基－苯胺基)－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－3H－咪唑－4－羧酸(2－羥基－乙基)－醯胺，2－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基胺基}－5－三氟甲基－酚，以及3－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基胺基}－6－三氟甲基－酚；或其互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥，或該化合物、互變異構物、立體異構物、多晶型物、酯、代謝產物或前藥之在藥學上可接受的鹽。

在另一方面，本發明係關於製備式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物的製程，以及可用在這類製程中之合成中間物。

本發明亦關於製備本發明之化合物的製程，以及可用在這類製程中之合成中間物，如同在下文中詳細描述的。

合成方法

計畫1解釋了本發明化合物之中央二芳基醚部分的建構。使化合物1.1與化合物1.2反應，其中L¹ 或L² 之一是鹵素，而另一個L¹ 或L² 是OH，形成醚1.3。可在有機溶劑，如乙腈或二甲亞碸中，在鹼的存在下進行偶聯，亦可在升高或迴流溫度下進行。適當的鹼包括K₂ CO₃ 、CaCO₃ 、KOH、NaOH或KF.Al₂ O₃ (Journal of Organic Chemistry第63冊，第18期，1998第6338－6343頁)。在化合物1.1中的激團Q可以是NH₂ 或胺基前驅物，如NO₂ 或經保護之胺基基團，稍後可分別藉著將胺基前驅物還原或脫保護，將其轉變為胺。在化合物1.2中的Z基團可以是以一或兩個R⁴ 基團取代的咪唑基基團，或可用來形成咪唑基基團的官能基。適當的官能基包括醛，或任何醛前驅物，如酯或腈，稍後可將其轉變為醛。可利用還原劑將酯和腈基團還原成醛，如氫化二異丁基鋁。Z也可以是－CH₂ OR⁵ ，其中R⁵ 為羥基保護基。可在較晚的階段，藉著R⁵ 基團的脫保護，以及所得之醇氧化為醛的作用，而露出醛。在計畫3中出示將醛轉變為經取代之咪唑基團的過程。在計畫6中出示形成經取代之咪唑基團的其他方法。

計畫2顯示合成某些二芳基醚的合成實例。當然為了解釋，計畫2使用下列的取代方式：Q為NO₂ ，L¹ 為Cl，且Z為第三－丁酯。在實例1中出示合成醛2.7的實例，其中R² 為甲基且b為0。可經由許多已知的方法，將胺2.1轉變為烷基胺2.2。在一項觀點中，以乙酸酐和甲酸處理胺2.1，形成相對應的甲醯胺，可將其還原成烷基胺2.2。適當的還原劑包括NaBH₄ ，在BF₃ (OCH₂ CH₃ )₂ 的存在下。另外，亦可藉著使胺2.1與三氟乙酸酐反應，以烷基化製劑，如烷基鹵化物將相對應的醯胺烷基化，並藉著以鹼，如NaOH處理移除三氟乙醯胺保護基，合成烷基胺2.2。

可藉著以過量的亞硫醯氯處理吡啶甲酸2.3，形成醯基氯2.4，然後與二碳酸二－第三－丁酯和吡啶接觸，產生氯化物2.5，來製備氯化物2.5。烷基胺2.2之醇與氯化物2.5在鹼性條件下偶聯，得到酯2.6，然後可藉著以氫化二異丁基鋁還原，將其直接轉變成醛2.7，或在兩個步驟中，藉著將酯2.6還原為醇，接著氧化成醛。

計畫3解釋了咪唑環的形成。可使醛2.7與化合物3.1反應，其中X^b 為＝O或＝NHOH，且R^{4 p} 和R^{4 q} 分別為H或R⁴ ，其中R⁴ 按照先前之定義，其限制條件為R^{4 p} 和R^{4 q} 中至少有一個是R⁴ 。該反應可在極性溶劑，如乙酸乙酯/乙醇混合物中，並在NH₄ OH的存在下進行，提供化合物3.2。可藉著以還原劑，如連二亞硫酸鈉(Na₂ S₂ O₄ )處理，將化合物3.2的硝基基團還原成胺3.3。

計畫4解釋了苯并咪唑環的形成。使二胺3.3與硫代異氰酸鹽4.1反應，提供硫脲4.2。以脫硫劑處理4.2，得到式(I)化合物。"脫硫劑"一詞意指適用於影響環閉合的製劑，如FeCl₃ 、2－氯－1－甲基碘化吡啶鎓(Mukaiyama試劑)、2－氯－1,3－二甲基氯化咪唑鎓、POCl₃ ，或烷基鹵化物，如甲基碘。亦可使用經修飾之Mukaiyama試劑(Journal of Organic Chemistry，第70冊，第7期，2005第2835－2838頁)。

可另行藉著修改偶聯反應的順序，合成本發明之化合物。計畫5解釋了偶聯5.1與5.2，形成醚鍵結，並偶聯5.3與3.1，形成咪唑環，作為形成完全偶聯之五環核心的倒數第二個步驟。關於中間物5.1和5.2，L³ 和L⁴ 之一為鹵素，而另一個L³ 或L⁴ 則是OH。可按照在先前計畫中所示，使用適合的起始物質及/或保護基，以適當的反應順序，製備這些中間物。這類因素為此項技藝所熟知的。例如醛5.3，可藉著以氫化二異丁基鋁還原相對應的腈來製備，在實例60中出示它的合成。根據上文計畫3，使醛5.3與酮3.1反應，得到式(I)化合物。

可按照在計畫6中所示，藉著使其中Z為腈的化合物6.1與醯肼6.2反應，製備具有三唑終端基團的本發明化合物。在實例60中描述了合成化合物6.3的實例。

應知曉在偶聯反應中使用的咪唑中間物，可使用其他的合成路徑來製備。在計畫7中出示一種這類的方法。將其中Z為CN的化合物1.3轉變為其中Z為脒基基團的化合物。該轉化可藉著使1.3與醇鹽，如甲醇鹽反應，將腈轉變為醯亞胺酯，接著使其與銨試劑，如乙酸銨或苯甲酸銨反應，形成脒而完成。脒與其中X^a 為釋離基之化合物(Va)的反應，得到烷基化和環化的化合物7.2或其互變異構物。加熱化合物7.2，導致水分排出(脫水)，並形成中間物7.3。其他的脫水條件包括以有機酸，如乙酸、甲烷磺酸、樟腦磺酸、三氟甲烷磺酸和三氟乙酸，以及無機酸，如鹽酸和硫酸處理7.2。通常以一瓶的順序進行四個反應－醯亞胺酯的形成、脒的形成、烷基化作用/環化作用和脫水。

本發明之化合物可在活體外或在活體內，用來抑制癌細胞的生長。該化合物可單獨使用，或與在藥學上可接受之載劑或賦形劑一起，以組合物之形式使用。適當的在藥學上可接受之載劑或賦形劑包括，例如加工劑和藥物遞送修飾子及促進劑，像是例如磷酸鈣、硬脂酸鎂、滑石、單醣類、二醣類、澱粉、明膠、纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、右旋糖、羥丙基－β－環糊精、聚乙烯吡咯烷酮、低熔點的蠟、離子交換樹脂及其類似物，及其任兩種或多種的組合。在"雷明頓氏藥理學(Remington's Pharmaceutical Sciences)",Mack Pub.Co.,New Jersey(1991)中描述了其他適當的在藥學上可接受之賦形劑，以引用的方式併入本文中。

本發明之化合物的有效含量，通常包括任何足以藉著在本文中描述之任何測定，藉著其他已知的Raf激酶活性測定檢測到抑制Raf活性，或由熟諳此藝者迅速探知，或藉著檢測到抑制或減輕癌症症狀的含量。

可與載劑材料混合而產生單一劑型的活性成分含量，將視待治療之宿主和特殊的投藥模式而定。然而，任何特定患者之特殊劑量當然將視各種因素而定，包括所使用之特定化合物的活性、年齡、體重、健康狀況、性別、飲食、投藥時間、投藥路徑、排泄速率、藥物組合和接受治療之特殊疾病的嚴重性。可藉著例行的實驗迅速決定特定狀況之在治療上有效的含量，並在臨床醫師的技能和判斷內。

為了本發明，在治療上有效的含量通常將是以單一或分開給藥，投與宿主的總每日劑量，可能是例如從0.001到1000毫克/公斤體重每天的量，較佳的是從1.0到30毫克/公斤體重每天。劑量單位組合物可含有這類含量的約數，構成每日劑量。

本發明之化合物可以口服、非經腸、舌下、藉著氣溶膠化或吸入噴霧、經直腸或局部，以劑量單位調配物投藥，其可按希望含有傳統的無毒性、在藥學上可接受的載劑、佐劑和媒劑。局部投藥亦可涉及使用經皮投藥，如經皮貼片或電泳裝置。當在本文中使用非經腸一詞時，包括皮下注射、靜脈內、肌肉內、胸骨內注射或輸液技術。

可根據已知的技藝，使用適當的分散或濕潤劑和懸浮劑，調配注射用製備物，例如無菌注射用水性或油性懸浮液。無菌注射用製備物亦可以是在無毒性非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中的無菌注射用之溶液或懸浮液，例如在1,3－丙二醇中的溶液。在可接受之媒劑和溶劑中，可使用的有水、林格氏液和等張的氯化鈉溶液。此外，在傳統上亦使用無菌的固定油作為溶劑或懸浮介質。為了該目的，可使用任何無刺激性的固定油，包括合成的單－或二－甘油酯。此外，亦發現脂肪酸，如油酸在注射用之製備物上的用途。

可藉著將藥物與適當之無刺激性的賦形劑，如可可脂和聚乙二醇混合，製備用於藥物之直腸投藥的栓劑，該賦形劑在常溫下為固體，但在直腸溫度下為液體，並因此將在直腸中溶化，而釋放出藥物。

口服投藥的固體劑型可包括膠囊、錠劑、藥丸、粉末和顆粒。在這類固體劑型中，可將活性成分與至少一種惰性稀釋劑，如蔗糖、乳糖或澱粉混合。如一般的慣例，這類劑型亦可包括惰性稀釋劑以外的物質，例如潤滑劑，如硬脂酸鎂。在膠囊、錠劑和藥丸的案例中，劑型亦可包括緩衝劑。錠劑和藥丸可額外地利用腸衣來製備。

口服投藥的液體劑型可包括在藥學上可接受的乳劑、溶液、懸浮液、糖漿和酏劑，含有在此項技藝中常用的惰性稀釋劑，如水。這類組合物亦可包括佐劑，如濕潤劑、乳化和懸浮劑、環糊精和增甜劑、香料和調味劑。

本發明之化合物亦可以脂質體的形式投與。如同在此項技藝中已知的，脂質體通常衍生自磷脂類或其他脂質物質。由單－或多－層水合的液晶形成脂質體，其可分散於水性介質中。可使用能夠形成脂質體之任何無毒性、在生理學上可接受並可代謝的脂質。本發明之脂質體形式的組合物，除了本發明化合物之外，尚可含有穩定劑、防腐劑、賦形劑及其類似物。較佳的脂質是天然或合成的磷脂類和磷脂醯膽鹼(卵磷脂)。形成脂質體的方法是此項技藝中已知的。參見，例如Prescott編輯，細胞生物學的方法(Methods in Cell Biology),第XIV冊，Academic Press,New York,N.W.,第33頁及以下(1976)。

雖然本發明之化合物可以單一活性藥學製劑之形式投與，但它們亦可與一或多種其他用來治療癌症的製劑併用。本發明之化合物亦可與已知的治療劑和抗癌製劑併用，且在本文中揭示之化合物與其他抗癌或化療製劑的組合亦在本發明之範圍內。可在腫瘤學的癌症原理和實行(Cancer Principles and Practice of Oncology),V.T.Devita和S.Hellman(編輯)，第6版(2001年2月15日)，Lippincott Williams & Wilkins Publishers中找到這類製劑的實例。熟諳此藝者將能以藥物之特性和所涉及之癌症為基礎，辨別那種製劑組合將是有用的。這類抗癌製劑包括，但不限於下列：雌激素受體調節子、雄激素受體調節子、類視黃酸受體調節子、細胞毒性/細胞靜止製劑、抗增殖製劑、異戊烯基－蛋白質轉移酶抑制劑、HMG－CoA還原酶抑制劑，及其他血管生成抑制劑、細胞增殖和存活信號的抑制劑、細胞凋亡誘導劑，以及干擾細胞週期檢查點的製劑。當與輻射療法共同－投與時，亦可使用本發明之化合物。

因此，在本發明之一具體實施例中，本發明之化合物亦可與已知的抗癌製劑併用，包括例如雌激素受體調節子、雄激素受體調節子、類視黃酸受體調節子、細胞毒性製劑、抗增殖製劑、異戊烯－蛋白質轉移酶抑制劑、HMG－CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉錄酶抑制劑及其他血管生成抑制劑。

雌激素受體調節子是干擾或抑制雌激素與受體結合的化合物，與機制無關。雌激素受體調節子的實例包括，但不限於他莫昔芬、雷洛昔芬、艾多昔芬(idoxifene)、LY353381、LY117081、托瑞米芬(toremifene)、氟維司群(fulvestrant)、4－[7－(2,2－二甲基－1－氧丙氧基－4－甲基－2－[4－[2－(1－六氫吡啶基)乙氧基]苯基]－2H－1－苯并哌喃－3－基)－苯基－2,2－二甲基－丙酸酯、4,4'－二羥基二苯酮－2,4－二硝苯基－腙和SH646。

雄激素受體調節子是干擾或抑制雄激素與雄激素受體結合的化合物。雄激素受體調節子的實例包括非那雄胺及其他5α －還原酶抑制劑、尼魯米特(nilutamide)、氟他胺、比卡魯米、利阿唑(liarozole)和醋酸阿比特龍(abiraterone)。類視黃酸受體調節子是干擾或抑制類視黃酸與類視黃酸受體結合的化合物。類視黃酸受體調節子的實例包括蓓薩羅丁(bexarotene)、崔提諾(tretinoin)、13－順－視黃酸、9－順－視黃酸、α－二氟甲基鳥胺酸、LX23－7553、反－N－(4'－羥苯基)視黃醯胺(retinamide)和N4－羧苯基視黃醯胺。

細胞毒性及/或細胞靜止製劑是引起細胞死亡或抑制細胞增殖的化合物，主要是藉著直接干擾細胞產生功能或抑制或干擾細胞有絲分裂，包括烷基化製劑、腫瘤壞死因子、嵌入劑、缺氧可活化的化合物、微管抑制劑/微管－穩定劑、有絲分裂驅動蛋白(kinesins)的抑制劑、涉及有絲分裂過程之激酶的抑制劑、抗代謝產物；生物反應調節子；激素/抗－激素之治療劑、造血生長因子、單株抗體瞄準之治療劑、拓樸異構酶抑制劑、蛋白質體抑制劑和泛素連接酶抑制劑。細胞毒性製劑的實例包括，但不限於舍特內夫(sertenef)、惡液質素(cachectin)、異環磷醯胺(ifosfamide)、塔索內米(tasonermin)、氯尼達明(lonidamine)、卡鉑(carboplatin)、六甲蜜胺(altretamine)、潑尼氮芥(prednimustine)、二溴衛茅醇(dibromodulcitol)、雷莫司汀(ranimustine)、福莫司汀(fotemustine)、奈達鉑(nedaplatin)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、替莫唑胺(temozolmide)、庚鉑(heptaplatin)、雌莫司丁(estramustine)、英丙舒凡甲苯磺酸鹽(improsulfan tosilate)、曲磷胺(trofosfamide)、尼莫司汀(nimustine)、二溴螺氯銨(dibrospidium chloride)、嘌嘧替派(pumitepa)、洛鉑(lobaplatin)、賽特鉑(satraplatin)、普菲羅黴素(profiromycin)、順氯氨鉑、伊洛福芬(irofulven)、右異環磷醯胺(dexifosfamide)、順－胺二氯(2－甲基－吡啶)鉑、苄基鳥嘌呤、糖異環磷醯胺(glufosfamide)、GPX100、(反,反,反)－雙－μ－(己烷－1,6－二胺)－μ－[二胺－鉑(II)]雙[二胺(氯)鉑(II)]四氯化物、二氮雜環丙烷基精胺(diarizidinylspermine)、三氧化二砷、1－(11－十二烷胺基－10－羥基十一烷基)－3,7－二甲基黃嘌呤、佐柔比星(zorubicin)、伊達比星(idarubicin)、道諾紅菌素、比生群(bisantrene)、米托蒽醌、吡柔比星(pirarubicin)、吡萘非特(pinafide)、戊柔比星(valrubicin)、氨柔比星(amrubicin)、安提紐普頓(antineoplaston)、3'－脫胺－3'－嗎啉－13－脫氧－10－羥基洋紅黴素、脂質體蒽環黴素(annamycin)、格柔比星(galarubicin)、依利奈法德(elinafide)、MEN10755和4－脫甲氧基－3－脫胺基－3－氮雜環丙烷基－4－甲磺醯基－道諾紅菌素(參見WO 00/50032)。缺氧可活化之化合物的代表性實例是替拉扎明(tirapazamine)。蛋白質體抑制劑包括，但不限於乳胞素(lactacystin)和保特佐米(bortezomib)。微管抑制劑/微管－穩定劑的實例，包括紫杉醇(paclitaxel)、硫酸長春地辛(vindesine sulfate)、3',4'－二脫氫－4'－脫氧－8'－去甲長春花鹼(norvincaleukoblastine)、多舍他昔(docetaxol)、根瘤菌素(rhizoxin)、海兔毒素(dolastatin)、米佛布林(mivobulin)羥乙基磺酸鹽、奧雷斯塔汀(auristatin)、西馬多丁(cemadotin)、RPP109881、BMS184476、長春氟寧(vinflunine)、隱非辛(cryptophycin)、2,3,4,5,6－五氟－N－(3－氟－4－甲氧苯基)苯磺醯胺、脫水長春花鹼(anhydrovinblastine)、N,N－二甲基－L－纈胺醯基－L－纈胺醯基－N－甲基－L－纈胺醯基－L－脯胺醯基－L－脯胺酸－第三－丁醯胺、TDX258、艾普西隆(epothilones)(參見例如美國專利第6,284,781號和6,288,237號)和BMS188797。拓樸異構酶抑制劑的代表性實例包括拓撲太肯(topotecan)、海肯他邁(hycaptamine)、伊立替康、魯比特康(rubitecan)、6－乙氧基丙醯基－3',4'－O－表－亞苄基－醇酒菌素(chartreusin)、9－甲氧基－N,N－二甲基－5－硝基吡唑并[3,4,5－kl]吖啶－2－(6H)丙胺、1－胺基－9－乙基－5－氟－2,3－二氫－9－羥基－4－甲基－1H,12H－苯并[de]哌喃并[3',4'：b,7]－吲并[1,2b]喹啉－10,13(9H,15H)二酮、勒托替康(lurtotecan)、7－[2－(N－異丙胺基)乙基]－(20S)喜樹鹼、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、索布佐生(sobuzoxane)、2'－二甲胺基－2'－脫氧－依托泊苷、GL331、N－[2－(二甲胺基)乙基]－9－羥基－5,6－二甲基－6H－吡啶并[4,3－b]咔唑－1－羧醯胺、阿蘇拉凱(asulacrine)、(5a,5aB,8aa,9b)－9－[2－[N－2－(二甲胺基)乙基]－N－甲胺基]乙基]－5－[4－氫氧基－3,5－二甲氧苯基]－5,5a,6,8,8a,9－六－氫呋(3',4'：6,7)萘并(2,3－d)－1,3－二氧雜環戊二烯－6－酮、2,3－(亞甲二氧基)－5－甲基－7－羥基－8－甲氧苯并[c]菲啶鎓、6,9－雙[(2－胺乙基)胺基]苯并[g]異喹啉－5,10－二酮、5－(3－胺基丙胺基)－7,10－二羥基－2－(2－羥乙基－胺甲基)－6H－吡唑并[4,5,1'－de]吖啶－6－酮、N－[1－[2(二乙胺基)乙胺基]－7－甲氧基－9－氧基－9H－噻吨－4－基甲基]甲醯胺、N－(2－(二甲胺基)乙基)－吖啶－4－羧醯胺、6－[[2－(二甲胺基)乙基]胺基]－3－羥基－7H－茚并[2,1－c]喹啉－7－酮和地美司鈉(dimesna)。有絲分裂驅動蛋白之抑制劑的實例，如在PCT公開案WO 01/30768和WO 01/98278、WO 03/050,064(2003年6月19日)、WO 03/050,122(2003年6月19日)、WO 03/049,527(2003年6月19日)、WO 03/049,679(2003年6月19日)、WO 03/049,678(2003年6月19日)和WO 03/39460(2003年5月15日)，以及尚在申請中之PCT申請案第US03/06403號(2003年3月4日申請)、US03/15861號(2003年5月19日申請)、US03/15810號(2003年5月19日申請)、US03/18482號(2003年6月12日申請)和US03/18694號(2003年6月12日申請)中描述的人類有絲分裂驅動蛋白KSP。在有絲分裂驅動蛋白之抑制劑的具體實施例中，包括但不限於KSP之抑制劑、MKLP1之抑制劑、CENP－E之抑制劑、MCAK之抑制劑、Kifl4之抑制劑、Mphosph1之抑制劑和Pab6－KIFL之抑制劑。

涉及有絲分裂過程之激酶的抑制劑包括，但不限於曙光(aurora)激酶的抑制劑、類Polo激酶(PLK)的抑制劑(例如PLK－1的抑制劑)、bub－1的抑制劑和bub－R1的抑制劑。抗增殖製劑包括反義RNA和DNA寡核苷酸，如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001，以及抗代謝產物，如依諾他濱(enocitabine)、卡莫氟(carmofur)、替加氟(tegafur)、噴司他丁(pentostatin)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、三甲曲沙(trimetrexate)、氟達拉濱、截瘤達(capecitabine)、加洛他濱(galocitabine)、阿糖胞苷(cytarabine)、歐佛沙費(ocfosfate)、福司替拜(fosteabine)鈉水合物、雷替曲塞(raltitrexed)、帕替曲塞(paltitrexid)、依米呋(emitefur)、噻唑呋林(tiazofurin)、地西他濱(decitabine)、諾拉曲特(nolatrexed)、培美曲塞(pemetrexed)、2'－脫氧－2'－亞甲基胞嘧啶核苷、2'－氟亞甲基－2'－脫氧胞嘧啶核苷、N－[5－(2,3－二氫－苯并呋喃基)磺醯基]－N'－(3,4－二氯苯基)脲、N6－[4－脫氧－4－[N2－[2(E),4(E)－十四碳二烯醯基甘胺醯胺基]－L－甘油基－B－L－吡喃甘露庚糖基]腺嘌呤、艾普里待(aplidine)、海鞘素(ecteinascidin)、曲沙他濱(troxacitabine)、4－[2－胺基－4－氧基－4,6,7,8－四氫－3H－嘧啶并[5,4－b][1,4]噻－6－基－(S)－乙基]－2,5－噻吩基－L－穀胺酸、胺基喋呤、5－氟尿嘧啶、(alanosine)、11－乙醯基－8－(胺甲醯氧基甲基)－4－甲醯基－6－甲氧基－14－－1,1－二氮雜四環(7.4.1.0.0)－十四－2,4,6－三烯－9－基乙酸酯、斯烷寧(swainsonine)、洛美曲索(lometrexol)、右雷佐生(dexrazoxane)、甲硫胺酸酶(methioninase)、2'－氰基－2'－脫氧－N4－棕櫚醯基－1－B－D－阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶和3－胺基吡啶－2－羧醛縮胺基硫脲。單株抗體瞄準之治療劑的實例，包括有細胞毒性製劑或放射性同位素的那些治療劑，附接在對癌細胞專一或對標靶細胞專一之單株抗體上。實例包括，例如貝薩(Bexxar)。HMG－CoA還原酶抑制劑是3－羥基－3－甲基戊二醯－CoA還原酶的抑制劑。藉著使用此項技藝中已熟知的測定，像是在美國專利第4,231,938號和WO 84/02131中描述或引用的那些，迅速地確認對HMG－CoA還原酶有抑制活性的化合物。可使用之HMG－CoA還原酶抑制劑的實例包括，但不限於洛伐他汀(lovastatin)(美降脂(MEVACOR)；參見美國專利第4,231,938號、4,294,926號和4,319,039號)、辛伐他丁(simvastatin)(柔克(ZOCOR)；參見美國專利第4,444,784號、4,820,850號和4,916,239號)、普伐他汀(pravastatin)(普拉固(PRAVACHOL)；參見美國專利第4,346,227號、4,537,859號、4,410,629號、5,030,447號和5,180,589號)、氟伐他汀(fluvastatin)(益脂可(LESCOL)；參見美國專利第5,354,772號、4,911,165號、4,929,437號、5,189,164號、5,118,853號、5,290,946號和5,356,896號)，以及阿托伐他汀(atorvastatin)(立普妥(LIPITOR)；參見美國專利第5,273,995號、4,681,893號、5,489,691號和5,342,952號)。在M.Yalpani,"降低膽固醇的藥物(Cholesterol Lowering Drugs)",Chemistry & Industry,第85－89頁(1996年2月5日)的第87頁，以及美國專利第4,782,084號和4,885,314號中描述了可用在本方法中之這些和額外HMG－CoA還原酶抑制劑的結構式。在一具體實施例中，HMG－CoA還原酶抑制劑選自洛伐他汀和辛伐他丁。

異戊烯－蛋白質轉移酶抑制劑是抑制任一或任何組合之異戊烯－蛋白質轉移酶酵素的化合物，包括法呢基－蛋白質轉移酶(FPT酶)、牻牛兒基牻牛兒基－蛋白質轉移酶第I型(GGPT酶－I)和牻牛兒基牻牛兒基－蛋白質轉移酶第II型(GGPT酶－II，亦稱為Rab GGPT酶)。異戊烯－蛋白質轉移酶抑制化合物的實例包括(±)－6－[胺基(4－氯苯基)(1－甲基－1H－咪唑－5－基)甲基]－4－(3－氯苯基)－1－甲基－2(1H)－喹啉酮、(－)－6－[胺基(4－氯苯基)(1－甲基－1H－咪唑－5－基)甲基]－4－(3－氯苯基)－1－甲基－2(1H)－喹啉酮、(＋)－6－[胺基(4－氯苯基)(1－甲基－1H－咪唑－5－基)甲基]－4－(3－氯苯基)－1－甲基－2(1H)－喹啉酮、5(S)－正－丁基－1－(2,3－二甲苯基)－4－[1－(4－氰苄基)－5－咪唑甲基－2－六氫吡酮、(S)－1－(3－氯苯基)－4－[1－(4－氰苄基)－5－咪唑甲基]－5－[2－(乙烷磺醯基)甲基)－2－六氫吡酮、5(S)－正－丁基－1－(2－甲苯基)－4－[1－(4－氰苄基)－5－咪唑甲基]－2－六氫吡酮、1－(3－氯苯基)－4－[1－(4－氰苄基)－2－甲基－5－咪唑甲基]－2－六氫吡酮、1－(2,2－二苯乙基)－3－[N－(1－(4－氰苄基)－1H－咪唑－5－基乙基)胺甲醯基]六氫吡啶、4－{－[4－羥甲基－4－(4－氯吡啶－2－基甲基)－六氫吡啶－1－基甲基]－2－甲基咪唑－1－基甲基}苯甲腈、4－{－5－[4－羥甲基－4－(3－氯苄基)－六氫吡啶－1－基甲基]－2－甲基咪唑－1－基甲基}－苯甲腈、4－{3－[4－(2－氧代－2H－吡啶－1－基)苄基]－3H－咪唑－4－基甲基}苯甲腈、4－{3－[4－(5－氯－2－氧代－2H－[1,2']二吡啶－5'－基甲基]－3H－咪唑－4－基甲基}苯甲腈、4－{3－[4－(2－氧代－2H－[1,2']二吡啶－5'－基甲基]－3H－咪唑－4－基甲基}苯甲腈、4－[3－(2－氧代－1－苯基－1,2－二氫吡啶－4－基甲基)－3H－咪唑－4－基甲基}苯甲腈、18,19－二氫－19－氧代－5H,17H－6,10：12,16－二次甲基－1H－咪唑并[4,3－c][1,11,4]二氮雜環－十九炔－9－腈、(±)－19,20－二氫－19－氧代－5H－18,21－橋亞乙基－12,14－亞乙烯基－6,10－次甲基－22H－苯并[d]咪唑并[4,3－k][1,6,9,12]三氮雜－環十八炔－9－腈、19,20－二氫－19－氧代－5H,17H－18,21－橋亞乙基－6,10：12,16－二次甲基－22H－咪唑并[3,4－h][1,8,11,14]三氮雜環二十炔－9－腈，以及(±)－19,20－二氫－3－甲基－19－氧代－5H－18,21－橋亞乙基－12,14－亞乙烯基－6,10－次甲基－22H－苯并[d]咪唑并[4,3－k][1,6,9,12]－三氮雜環十八炔－9－腈。可在下列公開案和專利中找到異戊烯－蛋白質轉移酶抑制劑的其他實例：WO 96/30343、WO 97/18813、WO 97/21701、WO 97/23478、WO 97/38665、WO 98/28980、WO 98/29119、WO 95/32987、美國專利第5,420,245號、美國專利第5,523,430號、美國專利第5,532,359號、美國專利第5,510,510號、美國專利第5,589,485號、美國專利第5,602,098號、歐洲專利公開案0 618 221、歐洲專利公開案0 675 112、歐洲專利公開案0 604 181、歐洲專利公開案0 696 593、WO 94/19357、WO 95/08542、WO 95/11917、WO 95/12612、WO 95/12572、WO 95/10514、美國專利第5,661,152號、WO 95/10515、WO 95/10516、WO 95/24612、WO 95/34535、WO 95/25086、WO 96/05529、WO 96/06138、WO 96/06193、WO 96/16443、WO 96/21701、WO 96/21456、WO 96/22278、WO 96/24611、WO 96/24612、WO 96/05168、WO 96/05169、WO 96/00736、美國專利第5,571,792號、WO 96/17861、WO 96/33159、WO 96/34850、WO 96/34851、WO 96/30017、WO 96/30018、WO 96/30362、WO 96/30363、WO 96/31111、WO 96/31477、WO 96/31478、WO 96/31501、WO 97/00252、WO 97/03047、WO 97/03050、WO 97/04785、WO 97/02920、WO 97/17070、WO 97/23478、WO 97/26246、WO 97/30053、WO 97/44350、WO 98/02436和美國專利第5,532,359號。異戊烯－蛋白質轉移酶抑制劑在血管生成中之角色的實例，參見European J.of Cancer 35(9)：1394－1401(1999)。

血管生成抑制劑意指抑制新血管形成的化合物，無論其機制。血管生成抑制劑的實例包括，但不限於酪胺酸激酶抑制劑，如酪胺酸激酶受體Flt－1(VEGFR1)和Flk－1/KDR(VEGFR2)的抑制劑、表皮－衍生、纖維母細胞－衍生或血小板衍生之生長因子的抑制劑、MMP(基質金屬蛋白酶)抑制劑、整合素阻斷劑、干擾素－α、介白素－12、多硫酸戊聚糖、環氧化酶抑制劑，包括非類固醇消炎藥(NSAIDs)，像阿斯匹靈和布洛芬(ibuprofen)，以及選擇性環氧化酶－2抑制劑，像希樂葆和羅非昔布(rofecoxib)(PNAS 89：7384(1992)；JNCI 69：475(1982)；Arch.Ophthalmol.108：573(1990)；Anat.Rec.,(238)：68(1994)；FEBS Letters 372：83(1995)；Clin.Orthop.313：76(1995)；J.Mol.Endocrinol.16：107(1996)；Jpn.J.Pharmacol.75：105(1997)；Cancer Res.57：1625(1997)；Cell 93：705(1998)；Intl.J.Mol.Med.2：715(1998)；J.Biol.Chem.274：9116(1999))、類固醇的消炎藥(如皮質類固醇、礦物皮質激素、地塞米松、脫氫可的松、脫氫皮甾醇、甲基脫氫皮甾醇、倍他米松(betamethasone))、羧醯胺三唑(carboxyamidotriazole)、康布瑞塔卡汀(combretastin)A4、角鯊胺(squalamine)、6－O－氯乙醯基－羰基)－菸黴醇(fumagillol)、沙利度胺(thalidomide)、血管生長抑素(angiostatin)、肌鈣蛋白(troponin)－1、血管收縮素II拮抗劑(參見Fernandez等人，J.Lab.Clin.Med.105：141－145(1985))，以及對VEGF的抗體(參見Nature Biotechnology,17：963－968(1999年10月)；Kim等人，Nature,362：841－844(1993)；WO 00/44777；和WO 00/61186)。亦可與本發明化合物併用之調節或抑制血管生成的其他治療劑，包括調節或抑制凝固和血纖維蛋白溶酶作用系統的製劑(參見在Clin.Chem.La.Med.38：679－692(2000)中的回顧)。這類調節或抑制凝固和血纖維蛋白溶酶作用路徑之製劑的實例，包括但不限於肝素(參見Thromb.Haemost.80：10－23(1998))、低分子量的肝素類和羧基肽酶U抑制劑(亦稱為活性凝血酶活化血纖維蛋白溶酶作用抑制劑[TAFIa]的抑制劑)(參見Thrombosis Res.101：329－354(2001))。已經在PCT公開案WO 03/013,526和美國專利第60/349,925號(2002年1月18日申請)中描述了TAFIa抑制劑。本發明亦包括本發明化合物與屬於選擇性COX－2抑制劑之NSAIDs(通常將其定義為藉著細胞或微粒體測定，評估COX－2之IC_{5 0} 對COX－1之IC_{5 0} 的比例來測量，具有抑制COX－2之專一性勝過COX－1至少100倍的那些)的組合。這類化合物包括，但不限於在1995年12月12日發證的美國專利第5,474,995號、1999年1月19日發證的美國專利第5,861,419號、1999年12月14日發證的美國專利第6,001,843號、2000年2月1日發證的美國專利第6,020,343號、1995年4月25日發證的美國專利第5,409,944號、1995年7月25日發證的美國專利第5,436,265號、1996年7月16日發證的美國專利第5,536,752號、1996年8月27日發證的美國專利第5,550,142號、1997年2月18日發證的美國專利第5,604,260號、1997年12月16日發證的美國專利第5,698,584號、1998年1月20日發證的美國專利第5,710,140號、1994年7月21日發表的WO 94/15932、1994年6月6日發證的美國專利第5,344,991號、1992年7月28日發證的美國專利第5,134,142號、1995年1月10日發證的美國專利第5,380,738號、1995年2月20日發證的美國專利第5,393,790號、1995年11月14日發證的美國專利第5,466,823號、1997年5月27日發證的美國專利第5,633,272號和1999年8月3日發證的美國專利第5,932,598號中揭示的那些，全部以引用的方式併入本文中。可用在本發明方法中的代表性COX－2抑制劑包括3－苯基－4－(4－(甲磺醯基)苯基)－2－(5H)－呋喃酮和5－氯－3－(4－甲磺醯基)苯基－2－(2－甲基－5－吡啶基)吡啶。可在下列的專利、正在申請中之申請案和公開案中，找到為COX－2之專一抑制劑並因此可用在本發明中的化合物，及其合成方法，以引用的方式併入本文中：1994年7月21日發表的WO94/15932、1994年6月6日發證的美國專利第5,344,991號、1992年7月28日發證的美國專利第5,134,142號、1995年1月10日發證的美國專利第5,380,738號、1995年2月20日發證的美國專利第5,393,790號、1995年11月14日發證的美國專利第5,466,823號、1997年5月27日發證的美國專利第5,633,272號、1999年8月3日發證的美國專利第5,932,598號、1995年12月12日發證的美國專利第5,474,995號、1999年1月19日發證的美國專利第5,861,419號、1999年12月14日發證的美國專利第6,001,843號、2000年2月1日發證的美國專利第6,020,343號、1995年4月25日發證的美國專利第5,409,944號、1995年7月25日發證的美國專利第5,436,265號、1996年7月16日發證的美國專利第5,536,752號、1996年8月27日發證的美國專利第5,550,142號、1997年2月18日發證的美國專利第5,604,260號、1997年12月16日發證的美國專利第5,698,584號和1998年1月20日發證的美國專利第5,710,140號。血管生成抑制劑的其他實例包括，但不限於內皮生長抑素(endostatin)、優克雷(ukrain)、豹蛙酶(ranpirnase)、IM862、5－甲氧基－4－[2－甲基－3－(3－甲基－2－丁烯基)環氧乙烷基]－1－螺[2,5]辛－6－基(氯乙醯基)胺基甲酸酯、乙醯待納林(acetyldinanaline)、5－胺基－1－[[3,5－二氯－4－(4－氯苯甲醯基)苯基]甲基]－1H－1,2,3－三唑－4－羧醯胺、CM101、角鯊胺、康布瑞塔卡汀、RPI4610、NX31838、硫酸化的甘露戊糖磷酸鹽、7,7－(羰基－雙[亞胺基－N－甲基－4,2－吡咯并羰亞胺基[N－甲基－4,2－吡咯]－羰亞胺基]－雙(1,3－萘二磺酸鹽)和3－[(2,4－二甲基吡咯－5－基)亞甲基]－2－吲哚酮(SU5416)。

干擾細胞週期檢查點的製劑是抑制轉導細胞週期檢查點信號之蛋白質激酶的化合物，藉此使癌細胞對DNA傷害劑敏化。這類製劑包括ATR、ATM、Chk1和Chk2激酶的抑制劑，以及cdk和cdc激酶抑制劑，並特別以7－羥基星形孢菌素、黃普里多(flavopiridol)、CYC202(Cyclacel)和BMS－387032舉例說明。

細胞增殖和存活信號路徑的抑制劑是抑制細胞表面受體和這些表面受體之信號轉導下游階梯的藥學製劑。這類製劑包括EGFR的抑制劑(例如吉非替尼(gefitinib)和埃羅替尼(erlotinib))、ERB－2的抑制劑(如曲妥珠單抗(trastuzumab))、IGFR的抑制劑、細胞激動素受體的抑制劑、MET的抑制劑、PI3K的抑制劑(例如LY294002)、絲胺酸/蘇胺酸激酶的抑制劑(包括但不限於Akt的抑制劑，如在WO 02/083064、WO 02/083139、WO 02/083140和WO 02/083138中描述的)、Raf激酶的抑制劑(例如BAY－43－9006)、MEK的抑制劑(例如CI－1040和PD－098059)，以及mTOR的抑制劑(例如Wyeth CCI－779)。這類製劑包括小分子抑制劑化合物和抗體拮抗劑。

細胞凋亡誘導劑包括TNF受體家族成員(包括TRAIL受體)的活化劑。

在本發明之某些較佳的具體實施例中，可與本發明化合物併用來治療癌症的代表性製劑，包括例如伊立替康、拓撲太肯、吉西他濱(gemcitabine)、5－氟尿嘧啶、甲醯四氫葉酸(leucovorin)、卡鉑、順氯氨鉑、紫杉烷、特查他濱(tezacitabine)、環磷醯胺、長春花生物鹼、伊馬替尼(imatinib)(格列衛)、氨茴環黴素、利妥昔單抗(rituximab)、曲妥珠單抗，以及其他癌症化療劑。

將以在醫師桌上參考手冊(Physicians' Desk Reference)(PDR)第47版(1993)中指示的治療用量，或像熟諳此藝者已知的治療有效量，使用與本發明之化合物併用的上述化合物，以引用的方式併入本文中。

可以建議的最大臨床劑量或以較低之劑量，投與本發明之化合物和其他抗癌製劑。可依據投藥路徑、疾病之嚴重性和患者的反應，改變在本發明之組合物中活性化合物的劑量含量，以便獲得想要的治療反應。可以分開的組合物或以含有兩種製劑之單一劑型，投與該組合。當以組合投藥時，可將治療劑調配成分開的組合物，在相同或不同的時間給予，或可以單一組合物之形式給予。

抗雌激素，如他莫昔芬，經由誘導細胞週期停止而抑制乳癌生長，其需要細胞週期抑制劑p27Kip的作用。最近，已經顯示Ras－Raf－MAP激酶路徑的激活，改變了p27Kip的磷酸化狀態，以致於減弱其在妨礙細胞週期上的抑制活性，藉此促成了雌激素抗藥性(Dpnovan等人，J.Biol.Chem.276：40888,2001)。根據Donovan等人的報告，經由以MEK抑制劑處理，抑制MAPK發送信號，在激素難以治療的乳癌細胞株中，改變了p27的磷酸化狀態，並如此恢復了激素敏感性。因此，在一項觀點中，可使用式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或其互變異構物、在藥學上可接受之鹽或其互變異構物在藥學上可接受之鹽的任何具體實施例，治療激素依賴性的癌症，如乳癌和前列腺癌，逆轉在利用傳統的抗癌製劑時，經常在這些癌症中看到的激素抗藥性。

在血液學癌症中，如慢性骨髓性白血病(CML)，染色體移位負責在組成上激活BCR－AB1酪胺酸激酶。受苦的患者對格列衛，小分子酪胺酸激酶抑制劑產生反應，結果抑制Ab1激酶活性。然而，許多患有晚期疾病的患者，立刻對格列衛起反應，但稍後恢復，因為在Ab1激酶功能部位中抗藥性－賦予了突變作用。在活體外的研究已經證實BCR－Av1使用Raf激酶路徑來誘發其作用。此外，抑制在相同路徑中一種以上的激酶，替抗藥性－賦予之突變提供了額外的保護。因此，在本發明的其他觀點中，式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或其互變異構物、在藥學上可接受之鹽或其互變異構物在藥學上可接受之鹽的任何具體實施例，均可與至少一種額外製劑，如格列衛併用，來治療血液學癌症，如慢性骨髓性白血病(CML)，逆轉或防止對至少一種額外製劑的抗藥性。

在其他方面，本發明係關於在個體中抑制在MAPK發信發送路徑中之至少一種絲胺酸/蘇胺酸激酶，或在個體中治療由在MAPK發信發送路徑中之絲胺酸/蘇胺酸激酶調節之生物學狀況的方法，包括投與治療組合物，其包括至少一種式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或互變異構物、在藥學上可接受之鹽或其互變異構物在藥學上可接受之鹽，有效地在個體中抑制在MAPK信號發送路徑中之至少一種絲胺酸/蘇胺酸激酶的活性。

根據本發明該觀點之治療組合物，可用來治療需要這類抑制劑的患者(例如受由異常MAPK信號發送調節之癌症所苦的那些)。由異常MAPK信號發送調節的癌症，包括例如黑色素瘤、乳頭狀癌、甲狀腺癌、卵巢癌、結腸癌、胰臟癌、非－小細胞肺癌(NSCLC)、急性淋巴母細胞細胞性白血病(ALL)和急性骨髓性白血病。可藉著投與抑制野外型或突變形式之Ras、Raf、MEK或ERK的化合物，來抑制異常的MAPK信號發送。

在一具體實施例中，本發明提供抑制Ras(野外型或突變的Ras)的方法。該方法包括對需要其之個體，投與有效含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或互變異構物、在藥學上可接受之鹽或其互變異構物在藥學上可接受之鹽的任何具體實施例。

在一具體實施例中，本發明提供抑制Raf(野外型或突變的B－Raf)的方法。該方法包括對需要其之個體，投與有效含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或互變異構物、在藥學上可接受之鹽或其互變異構物在藥學上可接受之鹽的任何具體實施例。

在一具體實施例中，本發明提供抑制MEK的方法。該方法包括對需要其之個體，投與有效含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或互變異構物、在藥學上可接受之鹽或其互變異構物在藥學上可接受之鹽的任何具體實施例。

在一具體實施例中，本發明提供抑制ERK的方法。該方法包括對需要其之個體，投與有效含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物或互變異構物、在藥學上可接受之鹽或其互變異構物在藥學上可接受之鹽的任何具體實施例。

可用在本發明該項觀點之方法中的代表性化合物，{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺，顯示出MAPK發送信號路徑的有效抑制，如同下文在實例82－86和89－90中所述，以及在圖6－12B；14A－C和15中所示。該化合物在生化測定中，是有效的B－Raf、c－Raf、突變B－Raf和突變Ras抑制劑，如同在實例82中所示，證實突變B－Raf活性的抑制(0.0053 μM之IC_{5 0} )、B－Raf活性的抑制(0.068 μM 之IC_{5 0} )和c－Raf活性的抑制(0.004 μM之IC_{5 0} )。在全部三種突變B－Raf異種移植的模式(A375M、MEXF276和HT29)中，測試利用引起腫瘤退行之化合物的處理，在K－Ras和N－Ras駕馭之異種移植模式中的腫瘤生長抑制，如同下文在表7中概述的，並在實例84、85和86中描述之。

在以{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺處理之後，在腫瘤細胞A375M、MEXF276和HCT－116中標靶調節的分析，指出以劑量和時間－依賴性的模式，抑制了MEK的磷酸化作用，如同在圖7B、8B和10C中所示。此外，亦在圖7D、8C和9C中出示了以調節Raf下游標記，包括BIM、週期素D1、p27Kip和pAKT的化合物來處理腫瘤細胞A375M、MEXF276和HCT－116。在臨床前模式中的這些測定，指出{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺對MEK標靶磷酸化作用和在MAPK路徑中之Raf下游的信號分子，顯示出劑量和時間依賴性的抑制作用。

在其他方面，本發明係關於在個體中抑制至少一種酪胺酸激酶受體，選自VEGFR－2、PDGFR－β、pERK、bFGF、FGFR1、FGFR2、FGFR3、c－Kit和CSF－1R所組成之群，或在個體中治療由至少一種VEGFR－2、PDGFR－β、pERK、bFGF、FGFR1、FGFR2、FGFR3、c－Kit和CSF－1R調節之生物學狀況的方法，包括投與治療組合物，其包括至少一種式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物，或其在藥學上可接受的鹽，在個體中有效地抑制酪胺酸激酶受體。

根據本發明該項觀點的治療化合物，可用來治療需要這類抑制劑的患者(例如受由異常酪胺酸激酶受體發送信號調節之癌症所苦的那些)。由異常之酪胺酸激酶受體發送信號調節之癌症包括，例如黑色素瘤、乳癌、膀胱癌、肺癌、甲狀腺癌、前列腺癌、卵巢癌、肥大細胞性白血病、生殖細胞腫瘤、小細胞肺癌、胃腸道基質腫瘤、急性骨髓性白血病(AML)、神經胚細胞瘤和胰臟癌。

在一具體實施例中，本發明提供抑制VEGFR－2的方法。該方法包括對需要其之個體，投與有效含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物的任何具體實施例，或其在藥學上可接受的鹽。該方法可藉著抑制血管生成，而用來治療固體腫瘤。

在一具體實施例中，本發明提供抑制PDGFR－β的方法。該方法包括對需要其之個體，投與有效含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物的任何具體實施例，或其在藥學上可接受的鹽。

在一具體實施例中，本發明提供抑制c－Kit的方法。該方法包括對需要其之個體，投與有效含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物的任何具體實施例，或其在藥學上可接受的鹽。

在一具體實施例中，本發明提供抑制CSF－1R的方法。該方法包括對需要其之個體，投與有效含量的式(I)、(II)、(III)或(IV)之化合物的任何具體實施例，或其在藥學上可接受的鹽。

可用在本發明該項觀點之方法中的代表性化合物，{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺，在生化測定中，是酪胺酸激酶受體VEGFR－2、PDGFR－β、pERK、bFGF、FGFR1、FGFR2、FGFR3、c－Kit和CSF－1R的有效抑制劑。該化合物證實VEGFR－2活性的抑制(0.07 μM之IC_{5 0} )、PDGFR－β的抑制(0.0032 μM之IC_{5 0} )、c－Kit的抑制(0.02 μM之IC_{5 0} )和CSF－1R的抑制(0.20 μM之IC_{5 0} )，如同在實例87中所述。此外，化合物亦在活體內的基底膠(matrigel)模式中，誘導血管生成的抑制，如同13中所示，以及在實例88中所述。

藉著參考下列的實例，將更迅速了解本發明，藉著解釋提供這些實例，並非企圖限制本發明。

在下文的實例以及整個申請書中，下列的縮寫具有下列的意義。若未定義，則該名詞具有其普遍接受的意義。

APCI 氣壓化學電離質譜分析aq. 水性的atm 大氣壓cm 公分℃ 攝氏溫度DIPEA 二異丙基乙胺DMC 2－氯－1,3－二甲基氯化咪唑鎓DMSO 二甲亞碸eq. 當量EtOAc 乙酸乙酯EtOH 乙醇g或gm 克h/hr/hrs 小時HPLC 高效液相層析法IPA 異丙醇L 公升LCAP 液相層析法面積百分比LC/MS 液相層析質譜分析M 莫耳濃度MeCN 乙腈mL 毫升NaOMe 甲醇鈉1－PrOH 1－丙醇TEA 三乙胺TFAA 三氟乙酸酐THF 四氫呋喃

通常可根據下列的程序，製備用在下列實例之化合物中的代表性側鏈：

實例1

製備{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺

步驟1

在500毫升三頸燒瓶上架設機械攪拌器，並裝入K₂ CO₃ (4.15克，30毫莫耳)。密封試管，抽真空並燒乾。容許裝置冷卻至室溫，並以氬氣吹掃。在反應試管中加入4－胺基－3－硝基酚1a(3.08克，20毫莫耳)、4－氯吡啶－2－羧酸第三－丁酯1b(5.2克，24毫莫耳)和無水DMSO(30毫升)。劇烈地攪拌所得的混合物，並加熱至100℃大約14小時。將該反應倒在冰過的磷酸緩衝溶液(pH＝7)上，並以MTBE(甲基第三丁基醚)和水徹底沖洗反應燒瓶。使混合的兩相混合物通過矽藻土(>2公分墊子)過濾。分開並分離層次，並以MTBE(3X100毫升)萃取液相。以水(5X100毫升)沖洗混合的有機層，脫水(MgSO₄ )並蒸發。使粗製的殘餘物吸附在SiO₂ 上，並藉著閃爍層析法純化(4：1,2：1,1：1己烷－EtOAc(乙酸乙酯))，提供4.92克(14.9毫莫耳，74%產量)的1c，為黃棕色的固體。¹ H NMR(300 MHz，CDCl₃ )δ 8.58(d,J＝5.8 Hz，1H),7.90(d,J＝2.8 Hz，1H),7.56(d,J＝2.5 Hz，1H),7.17(dd,J＝2.8,8.8 Hz，1H),6.94(dd,J＝2.8,5.8 Hz，1H),6.91(d,J＝9.1 Hz，1H),6.15(br s,2H),1.62(s,9H)；^{1 3} C NMR(75 MHz，CDCl₃ )δ 165.8.164.0,151.8,151.5,143.4,143.2,131.5,129.8,121.0,118.0,114.2,113.1,83.0,28.4；熔點163－166℃。

步驟2

將TFAA(2.4毫升，3.6克，17毫莫耳)加至在0℃下，在CH₂ Cl₂ (85毫升)中之硝基苯胺1c(5.62克，17毫莫耳)的溶液中。移開冰浴，並將該反應維持在室溫下2小時。將該反應冷卻至0℃，並加入TBAC1(氯化四丁銨，2.5克，8.5毫莫耳)、Me₂ SO₄ (硫酸二甲酯，3.2毫升，4.3克，34毫莫耳)和10% NaOH(34毫升)。在室溫下劇烈地攪拌所得的混合物4小時。以水稀釋該反應，分開並分離所得的層次。以CH₂ Cl₂ (3X100毫升)萃取液相，並以鹽水(2X100毫升)沖洗混合的有機層，脫水(MgSO₄ )並蒸發。使粗製的殘餘物吸附在矽膠上，並藉著閃爍層析法純化(4：1,2：1,1：1,1：2己烷/EtOAc)，得到4.5克(13.0毫莫耳，76%)的1d，為黃橘色的固體。¹ H NMR(300 MHz，CDCl₃ )δ 8.54(d,J＝5.5 Hz，1H),8.04(br d,J＝4.7 Hz，1H),7.93(d,J＝2.8 Hz，1H),7.53(d,J＝2.5 Hz，1H),7.25(app dd,J＝2.8,9.1 Hz，1H),6.91(m,2H),3.04(d,J＝4.9 Hz，3H),1.59(s,9H)；^{1 3} C NMR(75 MHz，CDCl₃ )δ 165.9,164.1,151.1,144.7,142.1,130.4,118.8,115.5,114.1,112.9,82.9,30.4,28.5；熔點187－189℃。

步驟3

以N₂ 吹掃燒亁了的500毫升三頸圓底燒瓶，裝入LAH(氫化鋁鋰，3.0克，75毫莫耳)和無水THF(240毫升)。將所得的懸浮液冷卻至0℃，並慢慢地加入第三－丁酯1d(20.7克，60毫莫耳)，同時將內部反應溫度維持在5℃之下。在0℃下攪拌該反應混合物2小時，隨後在室溫下攪拌過夜。加入NaBH₄ (2.27克，60毫莫耳)，並在室溫下再攪拌該反應混合物1小時。在判斷反應完成之後，以連續逐滴加入水(3毫升)、15% NaOH(3毫升)和水(9毫升)，處理該反應混合物。通過矽藻土過濾所得的混合物，並以EtOAc和甲醇沖洗剩下的固體。蒸發混合的有機部份，並使所得的粗製殘餘物吸附在SiO₂ 上，並藉著閃爍層析法純化(97：3 CH₂ Cl₂ －MeOH)，得到7.63克(27.7毫莫耳，46%)的1e，為紅橘色的固體。¹ H NMR(300 MHz，CDCl₃ )δ 8.40(d,J＝5.5 Hz，1H),8.05(br s,1H),7.96(d,J＝2.75 Hz，1H),7.29(d,J＝2.75 Hz，1H),6.92(d,J＝9.35 Hz，1H),6.75(m,2H),4.68(s,2H),3.07(d,J＝5.23 Hz，3H)。

步驟4

在100毫升圓底燒瓶中裝入苯甲醇1e(1.38克，5.0毫莫耳)、MnO₂ (6.52克，75毫莫耳)和CHCl₃ (20毫升)。在室溫下攪拌所得的懸浮液2天。通過矽藻土過濾該反應混合物，並以CHCl₃ 和EtOH連續沖洗剩下的固體。蒸發混合的有機部份，吸附在矽膠上，並藉著閃爍層析法純化(98：2 CH₂ Cl₂ /MeOH)，得到790毫克(2.89毫莫耳，58%)的1f，為橘色的固體。¹ H NMR(300 MHz，CDCl₃ )δ 10.0(s,1H),8.64(d,J＝5.5 Hz，1H),8.09(br s,1H),7.96(d,J＝2.75 Hz，1H),7.37(d,J＝2.48 Hz，1H),7.29(d,J＝2.75 Hz，1H),7.08(dd,J＝2.47,5.5 Hz，1H),6.94(d,J＝9.35 Hz，1H),3.08(d,J＝5.23 Hz，3H)。

步驟5

咪唑環的形成(Baldwin,J.J.；Engelhardt,E.L.；Hirschmann,R.；Lundell,G.F.；Ponticello,G.S.J.Med.Chem 1979,22,687)：將化合物1g(Lancaster(Windham,NH),25.75毫升，136.5毫莫耳)加至在H₂ O(60毫升)中之NaOAc(22.4克，273毫莫耳)的溶液中，並將所得的溶液加熱至100℃ 40分鐘。在冷卻至室溫之後(室溫)，將1 h的溶液加至在NH₄ OH(150毫升)和甲醇(450毫升)中之1f(25克，91毫莫耳)的懸浮液中。在室溫下攪拌所得的混合物過夜。TLC(薄層層析法，95：5 CH₂ Cl₂ /MeOH)顯示1f的完全耗盡。將粗產物濃縮成水性淤漿，並在飽和的Na₂ CO₃ 和CH₂ Cl₂ 之間分溶。以CH₂ Cl₂ 萃取液相三次，並以鹽水沖洗混合的有機物，然後脫水(MgSO₄ )並濃縮，得到31.6克的1i(83毫莫耳)，為橘色的固體(91%產量)。不需進一步純化。

可以類似的方式製備其他用來製備經取代之咪唑的中間物。例如，依據步驟5，如下文所示使用3,3,3－三氟－1－苯基丙烷－1,2－二酮水合物代替1h，合成中間物1i² (MeOH＝甲醇，RT＝室溫，o/n＝過夜，min＝分鐘)：

依據步驟5，如下文所示使用1－苯基－1,2－丙烷二酮代替1h，合成中間物1i³ ：

依據步驟5，如下文所示使用1－(3－三氟甲苯基)－1,2－丙烷二酮或1－(4－三氟甲苯基)－1,2－丙烷二酮代替1h，合成中間物1i⁴ ：

依據步驟5，與在美國專利第5,374,615號中的程序連結，如下文所示使用由4,4,4－三氟－3－氧代丁酸乙酯製造的(2Z)－4,4,4－三氟－2－(羥基亞胺基)－3－氧代丁酸乙酯代替1h，合成中間物1i⁵ (NMA＝N－甲基乙醯胺)：

步驟6

以N₂ 對在MeOH(220毫升)和EtOAc(220毫升)中之硝基苯胺1i(45.76克，120毫莫耳)的淤漿充氣20分鐘，然後裝入在MeOH(60毫升)中之10% Pd/C(12.77克，120毫莫耳)的懸浮液。以H₂ 吹掃該反應，並維持在H₂ 氣壓下2天。通過矽藻土的墊子過濾該反應，並以MeOH和EtOAc連續沖洗收集到的固體。蒸發混合的有機濾液，使所得的固體與CH₂ Cl₂ 共沸，然後在真空下脫水過夜，得到40.17克(115毫莫耳)的1j，為黃褐色的粉末(96%產量)。LC/MS m/z 336.1(MH^＋ )，t_R ＝1.81分鐘。

步驟7

在室溫下，將異硫氰酸4－三氟甲苯基酯(23.27克，115毫莫耳)加至在MeOH(460毫升)中之二胺1j(40.17克，115毫莫耳)之經過攪拌的溶液中。將該反應維持在室溫下16小時。在判斷反應完成之後，將在MeOH(50毫升)中之FeCl₃ (20.52克，126.5毫莫耳)的溶液加至該反應中，並在室溫下攪拌所得的混合物過夜。將粗製的反應混合物加至含有EtOAc(750毫升)和水(750毫升)的3公升分液漏斗中。分離層次，並以EtOAc萃取液相(保留液相)。混合有機層，以飽和的Na₂ CO₃ 水溶液、水和鹽水沖洗，然後脫水(MgSO₄ )並濃縮。藉著加入飽和的Na₂ CO₃ 水溶液使保留的液相變成鹼性(pH＝10)，並將所得的淤漿加至含有EtOAc(500毫升)的3公升分液漏斗中。攪動該混合物，並通過濾紙過濾所得的乳劑，然後分離層次，並以EtOAc(2x500毫升)萃取液相。混合有機層，以鹽水沖洗，然後脫水(MgSO₄ )，加至先前萃取的物質中並濃縮。以CH₂ Cl₂ (500毫升)濕磨混合的產物，吸附在SiO₂ 上，並藉著閃爍層析法純化。最後將該物質與CH₂ Cl₂ 濕磨，產生{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺，為純的白色固體。LC/MS m/z 519.1(MH^＋ )；¹ H NMR(300 MHz，CDCl₃ )δ 8.44(d,J＝5.5 Hz，1H),7.75(d,J＝8.8 Hz，2H),7.61(dd,J＝2.2,8.5 Hz，1H),7.59(d,J＝8.8 Hz，2H),7.56(d,J＝2.5 Hz，1H),7.38(app d,J＝8.5 Hz，1H),7.23(d,J＝1.9 Hz，1H),6.96(dd,J＝2.2,8.5 Hz，1H),6.93(dd,J＝2.5,5.5 Hz，1H),3.76(s,3H)；LC/MS m/z＝519.0,t_R ＝2.57分鐘(MH^＋ )；C_{2 4} H_{1 6} F₆ N₆ O之分析計算值：C 55.6,H 3.11,N 16.21；實驗值；C 55.81,H 3.43,N 16.42；熔點：217－220℃。

實例2

製備(2－氟－5－吡啶－3－基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺

按照上文在實例1之步驟7中所述，使用3－(4－氟－3－異硫氰酸－苯基)－吡啶，合成(2－氟－5－吡啶－3－基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺。LC/MS m/z 546.1(MH^＋ ),R_t 1.82分鐘。

實例3

製備(2－氟－5－吡啶－4－基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺

按照上文在實例1之步驟7中所述，使用4－(4－氟－3－異硫氰酸－苯基)－吡啶，合成(2－氟－5－吡啶－4－基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺。LC/MS m/z 546.5(MH^＋ ),R_t 1.83分鐘。

實例4

製備(4－第三－丁基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺

按照上文在實例1之步驟7中所述，使用異硫氰酸4－第三－丁基苯基酯，合成(4－第三－丁基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺。LC/MS m/z 425.4(MH^＋ ),R_t 2.56分鐘。

實例5

製備{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(3－三氟甲基－苯基)－胺

按照上文在實例1之步驟7中所述，使用異硫氰酸3－(三氟甲基)苯基酯，合成{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(3－三氟甲基－苯基)－胺。LC/MS m/z 519.4(MH^＋ ),R_t 2.36分鐘。

實例6

製備(3－乙基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺

按照上文在實例1之步驟7中所述，使用異硫氰酸3－乙酯，合成(3－乙基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺。LC/MS m/z 479.4(MH^＋ ),R_t 2.32分鐘。

實例7

製備(4－氯－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺

按照上文在實例1之步驟7中所述，使用異硫氰酸4－氯苯基酯，合成(4－氯－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺。LC/MS m/z 485.4(MH^＋ ),R_t 2.23分鐘。

實例8

製備(4－乙基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺

按照上文在實例1之步驟7中所述，使用異硫氰酸4－乙基苯基酯，合成(4－乙基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺。LC/MS m/z 479.5.1(MH^＋ ),R_t 2.31分鐘。

實例9

製備(4－氯－3－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺

按照上文在實例1之步驟7中所述，使用異硫氰酸4－氯－3－(三氟甲基)苯基酯，合成(4－氯－3－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺。LC/MS m/z 553.4(MH^＋ ),R_t 2.51分鐘。

實例10

製備(4－氟－3－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺

按照上文在實例1之步驟7中所述，使用異硫氰酸4－氟－3－(三氟甲基)苯基酯，合成(4－氟－3－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺。LC/MS m/z 537.4(MH^＋ ),R_t 2.40分鐘。

實例11

製備{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲氧基－苯基)－胺

按照上文在實例1之步驟7中所述，使用異硫氰酸4－(三氟甲氧基)苯基酯，合成{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲氧基－苯基)－胺。LC/MS m/z 535.4(MH^＋ ),R_t 2.24分鐘。

實例12

製備(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－(1－甲基－5－{2－[5－甲基－4－(3－三氟甲基－苯基)－1H－咪唑－2－基]－吡啶－4－基氧基}－1H－苯并咪唑－2－基)－胺

使用與上文在實例1中所述類似的程序，使用異硫氰酸2－氟－5－(三氟甲基)苯基酯，合成(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－(1－甲基－5－{2－[5－甲基－4－(3－三氟甲基－苯基)－1H－咪唑－2－基]－吡啶－4－基氧基}－1H－苯并咪唑－2－基)－胺。LC/MS m/z 627.5(MH^＋ ),R_t 2.79分鐘。

實例13

製備(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－(1－甲基－5－{2－[5－甲基－4－(4－三氟甲基－苯基)－1H－咪唑－2－基]－吡啶－4－基氧基}－1H－苯并咪唑－2－基)－胺

使用與上文在實例1中所述類似的程序，使用異硫氰酸2－氟－5－(三氟甲基)苯基酯，合成(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－(1－甲基－5－{2－[5－甲基－4－(4－三氟甲基－苯基)－1H－咪唑－2－基]－吡啶－4－基氧基}－1H－苯并咪唑－2－基)－胺。LC/MS m/z 627.5(MH^＋ ),R_t 2.79分鐘。

實例14

製備2－{4－[2－(2－氟－5－三氟甲基－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－5－三氟甲基－1H－咪唑－4－羧酸乙酯

使用與上文在實例1中所述類似的程序，使用異硫氰酸2－氟－5－(三氟甲基)苯基酯，合成2－{4－[2－(2－氟－5－三氟甲基－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－5－三氟甲基－1H－咪唑－4－羧酸乙酯。LC/MS m/z 609.5(MH^＋ )。

實例15

製備(2－{4－[2－(2－氟－5－三氟甲基－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－5－三氟甲基－1H－咪唑－4－基)－甲醇

將紅－Al(氫化雙(2－甲氧乙氧基)鋁鈉，在甲苯中65重量%，0.1毫升)逐滴加至在甲苯中之2－{4－[2－(2－氟－5－三氟甲基－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－5－三氟甲基－1H－咪唑－4－羧酸乙酯(0.0104克，0.017毫莫耳)的溶液中。觀察到冒泡，並在20分鐘後以H₂ O、NaOH使該反應驟冷，並以EtOAc萃取。以H₂ O沖洗有機層，覆以Na₂ SO₄ 脫水，過濾並濃縮，得到5.9毫克粗製的(2－{4－[2－(2－氟－5－三氟甲基－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－5－三氟甲基－1H－咪唑－4－基)－甲醇，藉著RPHPLC(逆相HPLC)進一步純化，得到1.1毫克純的化合物(98%產量)，LC/MS m/z 567.1(MH^＋ )，R_t 2.40分鐘。

實例16

2－{4－[1－甲基－2－(4－三氟甲基－苯胺基)－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－3H－咪唑－4－腈

將在MeOH(10毫升)中之根據實例1製備的{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺(1.83克，3.4毫莫耳)和28%NH₄ OH(23毫升)的淤漿密封在試管中，並加熱至140℃3小時。在藉著LC/MS判斷反應完成之後，將粗製的反應混合物加至分液漏斗中，並在EtOAc(50毫升)和水(50毫升)之間分溶。分離層次，並以EtOAc(2x50毫升)萃取液相。混合有機層，以鹽水沖洗，然後脫水(MgSO₄ )並濃縮。使粗產物吸附在SiO₂ 上，並藉著閃爍層析法純化，得到白色固體狀之2－{4－[1－甲基－2－(4－三氟甲基－苯胺基)－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－基}－3H－咪唑－4－腈。LC/MS m/z 476.1(MH^＋ )。

實例17－59a

依據對實例1－16描述的程序，製備下表中出示的化合物(實例17－59a)。在化合物之合成中使用的各種起始物質，均為熟諳此藝者所知曉的(例如Tordeux,M.；Langlois,B.；Wakselman,C.J.Chem Soc.Perkin Trans 1 1990,2293)。

實例60

製備(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－吡啶－2－基－2H－[1,2,4]三唑－3－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺

製備4－[2－(2－氟－5－三氟－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－腈

步驟1. 合成4－(4－胺基－3－硝基－苯氧基)吡啶－2－腈：

在真空中利用加熱將碳酸鉀(9克)脫水，在氮氣下冷卻至室溫。加入4－胺基－3－硝基酚(3.4克)、4－氯－2－氰基吡啶(3.0克)和二甲亞碸(30毫升，無水的)。在氮氣下攪拌該系統，將其加熱至103℃，並維持該溫度1小時。將該反應冷卻至室溫，倒入冰/H₂ O(500毫升)中，收集沉澱物，沖洗(H₂ O)，溶解(EtOAc)，脫水(Na₂ SO₄ )，過濾並汽提成固體。使其懸浮(Et₂ O)，收集，風乾得4.1克(73.5%)，並收集第二批(0.55克，10%)。m/z＝257(M＋1)。

步驟2. 合成N－[4－(2－氰基－吡啶－4－基氧基)－2－硝基－苯基]－2,2,2－三氟－N－甲基－乙醯胺：

在真空中利用加熱將碳酸鉀(1.6克)脫水，冷卻至室溫，並在氮氣下，與4－(4－胺基－3－硝基－苯氧基)吡啶－2－腈(2.0克)一起懸浮於二氯甲烷(30毫升)中。將其冷卻至0℃，並適切地加入三氟乙酸酐(2.2毫升)。起始物質進入溶液中迅速地進行加成作用。在0℃下10分鐘之後，以二氯甲烷稀釋該混合物，沖洗(H₂ O，含水的NaCl)，脫水(K₂ CO₃ )，過濾並汽提成黃色的泡沫。m/z＝353(M＋1)。使用該產物不需純化。在氮氣下將碘化甲烷(0.53毫升)加至在二甲基甲醯胺DMF(30毫升，含有化合物2，約7.8毫莫耳)之碳酸鉀(1.858克)的懸浮液中。在室溫下攪拌該懸浮液過夜，然後倒入H₂ O(300毫升)中，萃取(Et₂ O，3x150毫升)，沖洗混合的萃取物(H₂ O，含水的NaCl)，脫水(碳酸鉀)，過濾並汽提，產生橘色的油(7.4922克)。m/z＝367(M＋1)。

步驟3. 合成4－(4－甲胺基－3－硝基－苯氧基)－吡啶－2－腈：

在室溫下，將NaOH(1毫升，1N當量)逐滴加至在乙醇(6毫升)中之N－[4－(2－氰基－吡啶－4－基氧基)－2－硝基－苯基]－2,2,2－三氟－N－甲基－乙醯胺(3，440毫克)的溶液中。在40分鐘之後，以H₂ O(20毫升)稀釋該混合物，並冷卻至0℃。收集亮橘色的結晶，沖洗(H₂ O)並風乾，得311.1毫克(94%)。m/z＝271(M＋1)。

步驟4. 合成4－[2－(2－氟－5－三氟－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－腈：

在氮氣下，將批鈀木炭(46毫克，10%重量/重量)懸浮於MeOH(2毫升)中。在氮氣下，將所得的懸浮液加至在室溫下，在MeOH(3毫升)中之4－(4－甲胺基－3－硝基－苯氧基)－吡啶－2－腈(311毫克)的懸浮液中。以氫氣交換氣壓，並在1大氣壓的氫氣下劇烈地攪拌該系統1小時。然後以氮氣交換氣壓，過濾混合物(矽藻土)，並在下一個反應中使用濾液，不需進一步純化。m/z＝242(M＋1)。將異硫氰酸2－氟－5－三氟甲苯基酯(250毫克)加至在MeOH(10毫升)中之化合物5的溶液中。迴流攪拌該溶液2小時。在判斷反應完成之後，在該反應中加入無水FeCl₃ (1.3當量，244毫克)，並在室溫下攪拌所得的混合物過夜。將粗製的反應混合物加至含有EtOAc和水的分液漏斗中。分離層次，並以EtOAc萃取液相。混合有機層，以飽和含水的Na₂ CO₃ 溶液、水和鹽水沖洗，然後脫水(MgSO₄ )並濃縮。將該物質層析(在矽膠上，在二氯甲烷中之梯度0－5% MeOH)，分離想要的化合物，從化合物4中產量為28%。m/z＝428(M＋1)。

步驟5.(2－氟－5－三氟甲基－苯基)－{1－甲基－5－[2－(5－吡啶－2－基－2H－[1,2,4]三唑－3－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－胺：

步驟6將4－[2－(4－氟－苯胺基)－1－甲基－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－腈溶解於EtOH(0.1 M)中，並加入NaOEt(1當量，在EtOH中的0.5 M)，接著加入甲基吡啶醯肼(1當量)，並在微波爐中加熱該溶液2000秒，到140℃。然後濃縮該反應混合物，並藉著逆相HPLC純化，產生想要的產物。m/z＝547(M＋1)。

實例61－64

藉著依據實例60描述的程序，製備在下表2中出示的化合物(實例61－64)。

實例65

製備N－(4－羥基－2－硝苯基)－甲醯胺

根據下列的程序製備N－(4－羥基－2－硝苯基)－甲醯胺：1.組合3－公升，5－頸反應燒瓶，其裝設有內部溫度探測計、溫度控制器、加熱罩子、冷凝器、機械攪拌器、1－公升添加漏斗和氮氣入口。以氮氣沖刷反應器5分鐘。

2.在燒瓶中裝入乙酸酐(245毫升)。在氮氣下攪拌。

3.加入一部分甲酸(125毫升)(觀察到放熱，其係因混合乙酸酐和甲酸及其彼等間之反應)。

4.設定內部溫度(IT)終點在60℃，並開始加熱。在IT達到60℃之後，攪拌並維持另外的2小時。

5.以冰浴冷卻內容物。

6.當IT達到周圍溫度(約20℃)時，經由1－公升添加漏斗，開始分批加入在700毫升無水THF(四氫呋喃)中之4－胺基－3－硝基酚(160克)的溶液，使得IT不超過40℃。開始沉澱出黃色固體狀之產物。

7.當加成作用完成時，以加熱罩子取代冰浴。設定IT終點在60℃，並開始加熱。

8.藉著HPLC監視反應的進行。反應正常花費1小時以下。

9.當起始物質<1面積%時，加入500毫升水。以冰浴冷卻至室溫。

10.藉著真空過濾收集產物。以3x200毫升的水沖洗濾餅。風乾，並在50℃/27吋汞柱真空的烘箱中，以微風或抽出氮氣進一步脫水，直到達到恆重為止。

實例66

製備4－甲胺基－3－硝基酚

根據下列的程序製備4－甲胺基－3－硝基酚：1.組合500毫升，3－頸反應燒瓶，其裝設有內部溫度探測器和氮氣入口。以氮氣沖刷反應器5分鐘。

2.在反應器中裝入N－(4－羥基－2－硝苯基)－甲醯胺(5克)和無水的THF(100毫升)。在N₂ 下攪拌，得到黃色淤漿。

3.經由注射筒慢慢地加入三氟化硼二乙醚合物(3.83毫升)。

4.在室溫下攪拌該反應混合物30分鐘。

5.經由添加漏斗分批加入硼氫化鈉(1.04克)。

6.攪拌該反應1小時，隨後每小時藉著HPLC監視該反應(通常反應花費3小時)。

7.當HPLC試樣顯示起始物質低於1.0%時，經由注射筒在10分鐘內慢慢地加入1 M HCl(40毫升)。

8.攪拌60分鐘。

9.按需要經由注射筒加入1 M NaOH，使pH值達到7±0.5。

10.將該反應混合物倒入500毫升圓底燒瓶中，並在減低的壓力(20毫米汞柱，25℃)下濃縮，直到移除大約100毫升澄清液體為止。

11.在反應試管中加入水(100毫升)。冷卻至0±2℃，加以攪拌。沉澱出紅色固體狀的產物。

12.藉著真空過濾，通過粗多孔漏斗收集產物。以水(2x20毫升)沖洗濾餅。風乾，並在50℃/27吋汞柱的烘箱中脫水，直到達到恆重為止。將試樣交付分析。

實例67

製備4－氯吡啶－2－羰基氯

根據下列的程序製備4－氯吡啶－2－羰基氯：1.組合5－公升，5－頸反應燒瓶，其裝設有內部溫度(IT)探測器、溫度控制器、加熱罩子、冷凝器、機械攪拌器、氮氣入口、在冷凝器頂部的氣體出口，其連接至2－公升，2－頸液體陷阱，其轉而連接裝滿大約6公升8 M NaOH溶液的12－公升洗滌器，並以磁性攪拌器攪拌。以氮氣沖刷反應器5分鐘，然後切斷氮氣流。

2.在反應器中裝入亞硫醯氯(1.18公升)，接著裝入溴化鉀(38.4克)，同時維持適度的攪拌(約200 rpm)。

3.在反應器中裝入吡啶甲酸(397克)。

4.設定IT終點在80℃，並開始加熱。

5.取試樣並藉著HPLC監視反應的進行。該反應到完成通常花費大約14小時。延長加熱將導致較多的二氯化作用。

6.當認為該反應完成時(在該反應混合物中出現低於1%的吡啶甲酸)，停止加熱。移除加熱罩子。

7.當IT低於30℃時，將液體移至3－公升燒瓶中。以700毫升甲苯沖洗5－公升反應器。將沖洗液移至3－公升燒瓶。在減低的壓力下移除過量的SOCl₂ 和甲苯。以2x700毫升甲苯重複該過程。移除所有的溶劑，產生黃－橘色的固體。在該反應混合物中加入甲苯(400毫升)。將所得的混合物用在下一個步驟中。

實例68

製備4－氯吡啶－2－羧酸第三－丁酯

根據下列的程序製備4－氯吡啶－2－羧酸第三－丁酯：1.裝設有機械攪拌器和溫度計的12公升圓底燒瓶。

2.在反應器中裝入甲苯(1公升)、吡啶(977.7克)和二碳酸二－第三－丁酯(BOC)₂ O(855.5克)。

3.冷卻該反應器，使得內部溫度為0℃。

4.以保持反應之內部溫度低於5℃的速率，在反應器中加入4－氯吡啶－2－羰基氯(686克)。

5.容許該反應慢慢地回到室溫(約20℃)，並攪拌16小時。

6.當使用HPLC(起始物質<0.5面積%)認為該反應完成時，以水(2x4公升)沖洗該反應，然後以1 M HCl溶液(2x2公升)沖洗。

7.在減低的壓力下濃縮該反應混合物，移除甲苯和剩下的吡啶。

8.加入甲苯(500毫升)，然後在減低的壓力下濃縮該反應混合物，獲得想要的產物。

實例69

製備4－(4－甲胺基－3－硝苯氧基)－吡啶－2－羧酸第三－丁酯

根據下列的程序製備4－(4－甲胺基－3－硝苯氧基)－吡啶－2－羧酸第三－丁酯：1.裝設有機械攪拌器、溫度計和氮氣入口的3公升圓底燒瓶。

2.將K₂ CO₃ (123克)裝入反應器中。

3.將反應試管放在惰性氣壓下。

4.將4－甲胺基－3－硝基酚(100克)、4－氯吡啶－2－羧酸第三－丁酯(127克)和無水DMSO(1公升)裝入反應器中。

5.劇烈地攪拌該反應，並加熱至100℃。

6.在使用HPLC認為反應完成(<0.5面積%4－氯吡啶－2－羧酸第三－丁酯)時，將熱的反應混合物倒入3公升正在攪拌的冰水中(按體積計)。

7.藉著過濾分離想要的化合物，為橘色至橘－棕色的固體。

8.以水(2x200毫升)沖洗經過分離的固體，接著以庚烷(2x200毫升)沖洗。

9.在大約45－50℃的真空烘箱中將該物質脫水，直到達到恆重為止。

實例70

製備4－(4－(甲胺基)－3－硝基苯氧基)吡啶－2－醛

根據下列的程序製備4－(4－(甲胺基)－3－硝基苯氧基)吡啶－2－醛：1.裝設有氮氣入口、機械攪拌器和溫度計的1000毫升圓底燒瓶。

2.經由粉末漏斗，在反應器中裝入4－(4－甲胺基－3－硝基苯氧基)－吡啶－2－羧酸第三－丁酯(10克)。

3.經由粉末漏斗，加入2－甲基THF(100毫升)。

4.冷卻該反應器，直到內部溫度為－25℃。

5.經由添加漏斗，以保持內部溫度低於－15℃的速率，加入DIBAL(氫化二異丁基鋁，1.5 M在甲苯中；72毫升)。

6.經由HPLC或GC(氣體層析)分析該反應，檢查酯的消失。

7.在－20℃下攪拌該反應，每小時監視。

8.若在2小時之後反應無法進行，加入另0.5當量的DIBAL(氫化二異丁基鋁)，並監視該反應。繼續重複該步驟，直到已經耗盡所有的酯為止。

9.一旦反應完成，利用MeOH(10毫升)慢慢地使其驟冷。

10.在200毫升水中加入酒石酸鉀鈉(40克)，並攪拌至溶解。

11.將水溶液加至該反應混合物中，並容許加溫至室溫。

12.在反應試管中加入2－甲基THF(100毫升)。

13.將該反應加熱至50℃ 1小時，並加以攪拌。

14.容許相位分離。

15.移除下方的液層。

16.通過矽藻土的塞子過濾有機層。

17.以2－甲基THF(2x50毫升)沖洗矽藻土。

18.將該反應混合物加至500毫升圓底燒瓶中。

19.藉著蒸餾濃縮該反應混合物至大約50毫升。

20.將該反應混合物冷卻至0℃，並加以攪拌。

21.在0℃下攪拌該反應混合物1小時。

22.通過粗多孔濾器過濾該反應混合物。

23.容許固體在濾器上乾燥30分鐘至1小時。

24.藉著GC或NMR分析該固體，決定醇的百分比，在30℃的甲醇中形成淤漿1小時(每克化合物5毫升甲醇)，若需要移除醇的雜質。

實例71

製備4－(2－(5－(三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基)－N－甲基－2－硝基苯胺

根據下列的程序製備4－(2－(5－(三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基)－N－甲基－2－硝基苯胺：1.裝設有機械攪拌器、內部溫度探測器、溫度控制器和冷凝器的2公升圓底燒瓶(3頸)。

2.經由粉末漏斗在反應器中裝入水(590毫升)。

3.開始攪拌該混合物，並在反應器中裝入乙酸鈉(240克)。

4.以水(30毫升)沖洗用來裝乙酸鈉的燒瓶。

5.加熱該反應至50℃。

6.在50℃下分批加入3,3－二溴－1,1,1－三氟丙烷－2－酮(395克)，保持反應的內部溫度低於100℃。

7.加熱該反應至100℃之內部溫度。

8.在100℃下攪拌該反應1小時之後，移出試樣進行分析。

9.繼續在100℃下攪拌該反應，直到起始物質<1.5%為止。

10.一旦反應完成，便冷卻該反應混合物至<65℃。

11.在冷卻反應的同時，裝設有內部溫度探測器、溫度控制器、迴流冷凝器和機械攪拌器的5公升圓底燒瓶(附有4頸)。

12.經由粉末漏斗，在5公升反應器中裝入乙酸乙酯(500毫升)，並開始攪拌。

13.經由粉末漏斗，在5公升反應器中裝入4－(4－(甲胺基)－3－硝基苯氧基)吡啶－2－醛(200克)。

14.以乙酸乙酯(200毫升)沖洗粉末漏斗，到5公升反應器內。

15.在5公升反應器中裝入95%乙醇(1.3公升)。

16.將丙酮醛反應混合物從2公升反應器中移至5公升反應器。在此時該混合物的溫度約為35℃。

17.分批慢慢地加入濃NH₄ OH(1.3公升)，監視溫度。該反應為放熱的，故前500毫升應該分批加入，保持內部溫度低於50℃。總加入時間約為25分鐘。升高的溫度導致終產物變得較紅。

18.加熱5公升反應器至50℃。

19.在50℃下攪拌該反應混合物。在此時溶液通常是紅－橘色。

20.每小時監視該反應，直到反應完成為止。

21.一旦認為反應完成，便將該反應混合物冷卻至0℃ 2小時。

22.藉著通過粗多孔玻璃濾器過濾分離產物。

23.以冰冷的乙醇(150毫升)沖洗反應器。將沖洗液移至濾器。

24.在5公升反應器中裝入水(2公升)。

25.攪拌並冷卻該反應器至10℃。

26.將濕餅從濾器移至5公升反應器。

27.在10℃下攪拌60分鐘。

28.通過粗多孔玻璃濾器過濾產物。

29.以水(250毫升)沖洗該反應器。將沖洗液移至濾器。

30.在濾器上將濕餅脫水1小時。

31.將產物移至2公升圓底燒瓶(單頸)，並使用45℃浴溫的旋轉式汽化器鼓轉脫水，直到紀錄到恆重為止。

實例72

製備4－(2－(5－(三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)吡啶－4－基氧基)－N1－甲基苯－1,2－二胺

根據下列的程序製備4－(2－(5－(三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)吡啶－4－基氧基)－N1－甲基苯－1,2－二胺：1.裝設有機械攪拌器、內部溫度探測器、溫度控制器、氮氣吹掃和迴流冷凝器的2公升圓底燒瓶(4頸)。

2.經由粉末漏斗在反應器中裝入EtOH(125毫升)。開始迅速攪拌。

3.經由粉末漏斗在反應器中裝入4－(2－(5－(三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)吡啶－4－基氧基)－N－甲基－2－硝基苯胺(50克)。

4.將該反應加熱至50℃。

5.在加熱反應的同時，經由粉末漏斗在250毫升錐形瓶中裝入水(75毫升)，開始迅速攪拌。

6.經由粉末漏斗在250毫升錐形瓶中裝入3.0當量的碳酸鈉(41.92克)。

7.攪拌該混合物，直到固體溶解為止。

8.一旦懸浮液達到50℃，便經由粉末漏斗將碳酸鈉混合物從250毫升錐形瓶中移到反應混合物中。

9.經由粉末漏斗在250毫升錐形瓶中裝入水(75毫升)。開始迅速攪拌。

10.經由粉末漏斗在250毫升錐形瓶中裝入1.0當量的連二亞硫酸鈉(22.95克)，然後馬上加至反應燒瓶中。

11.迅速攪拌固體，直到它們大半溶解。

12.經由粉末漏斗，將連二亞硫酸鈉迅速從250毫升錐形瓶中移至反應混合物中。

13.在50℃下攪拌該反應30分鐘。

14.經由粉末漏斗在250毫升錐形瓶中裝入水(75毫升)。開始迅速攪拌。

15.經由粉末漏斗在250毫升錐形瓶中裝入1.0當量的連二亞硫酸鈉(22.95克)，然後馬上加至反應燒瓶中。

16.迅速攪拌固體，直到它們大半溶解。

17.經由粉末漏斗，將連二亞硫酸鈉迅速從250毫升錐形瓶中移至反應混合物中。

18.在50℃下攪拌該反應30分鐘。

19.經由粉末漏斗在250毫升錐形瓶中裝入水(150毫升)。

20.經由粉末漏斗在250毫升錐形瓶中裝入2.0當量的連二亞硫酸鈉(45.90克)，然後馬上加至反應燒瓶中。

21.迅速攪拌固體，直到它們大半溶解。

22.經由粉末漏斗，將連二亞硫酸鈉迅速從250毫升錐形瓶中移至反應混合物中。

23.在50℃下攪拌該反應60分鐘。

24.取出試樣，證實反應完成。

25.若反應≧98%完成，進至步驟36。若否則繼續步驟26。

26.經由粉末漏斗在2公升反應燒瓶中裝入1.0當量連二亞硫酸鈉(22.95克)。

27.在50℃下迅速攪拌該反應混合物60分鐘。

28.取出試樣，證實反應完成。

29.若反應≧98%完成，進至步驟36。若否則繼續步驟26。

30.經由粉末漏斗在2公升反應燒瓶中裝入1.0當量碳酸鈉(13.97克)。

31.在50℃下迅速攪拌該反應混合物15分鐘。

32.經由粉末漏斗在2公升反應燒瓶中裝入1.0當量連二亞硫酸鈉(22.95克)。

33.在50℃下迅速攪拌該反應混合物60分鐘。

34.取出試樣，證實反應完成。

35.當反應≧98%完成，進至步驟36。

36.一旦認為反應完成，經由粉末漏斗在2公升反應燒瓶中裝入水(125毫升)。

37.將該反應混合物冷卻至10℃，並攪拌1小時。

38.藉著通過粗多孔玻璃濾器過濾，分離產物。

39.以水(50毫升)沖洗反應器。將沖洗液移至濾器。

40.在濾器上將濕餅脫水，直到它不再滴水為止。

41.經由粉末漏斗在2公升反應燒瓶中裝入水(500毫升)。

42.經由粉末漏斗將濾餅移回反應燒瓶內。

43.在室溫下攪拌該物質60分鐘。

44.藉著通過粗多孔玻璃濾器過濾，分離產物。

45.以水(25毫升)沖洗反應器。將沖洗液移至濾器。

46.在濾器上將濕餅脫水大約1小時。

47.將產物移至2公升圓底燒瓶(單頸)，使用50℃浴溫的旋轉式汽化器慢慢地鼓轉脫水，直到紀錄到恆重為止。

實例73

製備{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺

根據下列的程序製備{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺：1.裝設有機械攪拌器、內部溫度探測器、溫度控制器、氮氣吹掃和冷凝器的2－公升、4－頸圓底燒瓶。

2.經由粉末漏斗在反應器中裝入4－(2－(5－(三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)吡啶－4－基氧基)－N1－甲基苯－1,2－二胺(200克)。

3.經由粉末漏斗在反應器中裝入乙腈(1公升)。

4.在周圍溫度和氮氣壓下，開始攪拌該混合物。

5.在20±5分鐘之後，經由粉末漏斗在反應器中裝入異硫氰酸4－三氟甲基苯基酯(104克)。

6.在加入異硫氰酸酯之後30分鐘取得試樣，證實反應完成。

7.一旦反應完成，便通過粗多孔玻璃濾器過濾該混合物。

8.以MeCN(200毫升)沖洗該反應器。將沖洗液移至濾器。

9.以MeCN(200毫升)沖洗移出的固體。

10.將濾液移至裝設有機械攪拌器、內部溫度探測器、溫度控制器、氮氣吹掃和冷凝器的3－公升、4－頸圓底燒瓶。

11.經由粉末漏斗在反應器中裝入N,N－二異丙基乙胺。

12.經由粉末漏斗在反應器中裝入2－氯－1,3－二甲基氯化咪唑鎓，分成四份，每10分鐘一份(總加入時間為30分鐘)。在最後的加入之後，容許攪拌該反應混合物另10分鐘。

13.將該反應加熱至50℃±5℃。

14.在加熱該混合物之後30分鐘取得試樣，證實反應完成。

15.一旦反應完成，便將反應混合物通過線上的0.2微米膠囊濾器移至如步驟10裝設的3－公升圓底燒瓶中。

16.經由粉末漏斗加入水。

17.將該反應加熱至50℃±5℃。

18.在加熱2小時之後，容許將該反應混合物冷卻至20－25℃，並攪拌另1小時。

19.藉著通過中等多孔玻璃濾器過濾，分離產物。

20.以2：1 MeCN/水(300毫升)沖洗反應器。將沖洗液移至濾器。

21.以2：1 MeCN/水(300毫升)沖洗濾餅。

22.在濾器上將濕餅脫水大約1小時。

23.將產物移至乾燥盤內，並在70±5℃的真空烘箱中，利用抽出少量氮氣將該物質脫水，直到剩餘MeCN(乙腈)的量低於410 ppm為止。

24.欲再結晶，在裝設有機械攪拌器、內部溫度探測器、溫度控制器、氮氣吹掃和冷凝器的反應器中，在15份體積(重量對體積)的EtOH中將產物加熱至迴流。

25.將該混合物迴流30分鐘，此時將蒸餾頭換成冷凝器。

26.蒸餾掉EtOH，直到剩下4份體積。停止加熱，並加入一份體積的水。

27.容許將該混合物冷卻至0－5℃。

28.藉著通過中等多孔玻璃濾器過濾，分離產物。

29.以4：1 EtOH/水(1份體積)沖洗反應器。將沖洗液移至濾器。

30.以水(一份體積)沖洗濾餅。

31.在濾器上將濕餅脫水大約1小時。

32.將產物移至乾燥盤內，並在50±5℃的真空烘箱中，利用抽出少量氮氣將該物質脫水，直到獲得恆重為止。

實例74

製備{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺將異硫氰酸4－三氟甲基苯基酯(200毫克，1毫莫耳)加至在3毫升乙腈中之4－(2－(5－三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)吡啶－4－基氧基)－N1－甲基苯－1,2－二胺(350毫克，1毫莫耳)的混合物中。在周圍溫度下攪拌20分鐘後，HPLC分析顯示完全轉變。加入三乙胺(0.3毫升，2.2毫莫耳)，接著加入2－氯－1－甲基碘化吡啶鎓(270毫克，1.05毫莫耳)。將該反應混合物加熱至50℃5小時。停止加熱，並加入1.5毫升的水。在攪拌該混合物2小時之後，藉著過濾收集固體，並以2：1乙腈/水(3x1毫升)沖洗，得到317毫克(61%)的標題化合物。

實例74a

製備4－(2－(5－(三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)吡啶－4－基氧基)－N－甲基－2－硝基苯胺

將NaOMe(1.5毫升，6.3毫莫耳，25重量%在MeOH中)加至在1－PrOH(10毫升)中之4－(4－(甲胺基)－3－硝基苯氧基)吡啶－2－腈(1.72克，6.3毫莫耳)的混合物中。在加熱1小時之後，HPLC分析指出起始物質的完全轉變。加入NH₄ OAc(1.46克，18.9毫莫耳)，並將該混合物加熱至70℃。在70℃下1小時之後，將該混合物加熱至85℃。同時每30分鐘分批加入4x0.2－毫升的3－溴－1,1,1－三氟丙酮(0.8毫升，7.56毫莫耳)。將該混合物加熱至85℃ 20小時。然後容許該混合物冷卻至周圍溫度，並加入水(10毫升)。在攪拌數小時之後，在冰/水浴中冷卻該混合物。在冰/水浴中1小時後，藉著過濾收集固體，並以1：1 1－PrOH/水(2x7毫升)沖洗。在50℃的真空烘箱中將該固體脫水大約16小時，得到0.982克(41%)的標題化合物。

實例74b

製備4－(2－(5－(三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基)－N－甲基－2－硝基苯胺

將NaOMe(0.46毫升，2毫莫耳，25重量%在MeOH中)加至在1－PrOH(3毫升)中之4－氯－2－氰基－吡啶(277毫克，2毫莫耳)的混合物中。在加熱1小時之後，HPLC分析指出起始物質的完全轉變。將該混合物加熱至70℃，並加入NH₄ OAc(462毫克，6毫莫耳)。同時每30分鐘以4x0.063毫升分批加入3－溴－1,1,1－三氟丙酮(0.25毫升，2.4毫莫耳)。將該混合物加熱至85℃大約20小時。藉著HPLC分析粗產物為72.4%(LCAP)，並藉著LC－MS分析證實。

實例74c

製備4－氯－2－氰基－吡啶

經由外部冷卻單位，將在EtOAc(500毫升)中之4－氯－2－吡啶羧醯胺(93.9克，0.6莫耳)和TFA(125毫升，0.9莫耳)至0.2℃。經由添加漏斗，在40分鐘內加入TFAA(92毫升，0.66莫耳)。在加入期間，內部溫度升至10℃。在加成作用完成時的溫度為0.0℃。在加入之後，關掉冷卻器。在另30分鐘之後，HPLC分析顯示4.3%(LCAP)的起始物質。加入額外的8.3毫升(0.06莫耳)TFAA。在攪拌該反應混合物另20分鐘之後，HPLC指出完全轉變。加入10%含水的K₂ CO₃ (重量/體積，500毫升)。內部溫度從13.7升高到22.0℃。在攪拌20分鐘之後，將混合物移至分液漏斗。分離層次，並以EtOAc(150毫升)萃取液層。以10%含水的檸檬酸(重量/體積，300毫升)沖洗混合的有機層，脫水(Na₂ SO₄ )，過濾並濃縮。在50℃的真空烘箱中將粗產物脫水大約16小時，得到72.85克(87%)的標題化合物：¹ H NMR(400 MHz，CDCl₃ )δ 8.6(m,1H),7.7(m,1H),7.5(m,1H)；^{1 3} C NMR(100 MHz，CDCl₃ )δ 151.8,145.3,134.9,128.7,127.4,116.1；HPLC>99%(LCAP)。

實例74d

4－(4－甲胺基－3－硝基－苯氧基)－吡啶－2－腈

將在DMSO(80毫升)中之4－氯－2－氰基－吡啶(6.9克，0.05莫耳)、4－甲胺基－3－硝基酚(8.4克，0.05莫耳)和K₂ CO₃ (10.4克，0.075莫耳)的混合物加熱至60℃。在11.5小時之後，HPLC分析指出兩種起始物質均完全轉變。在冷卻至20℃後，在該反應混合物中加入水(240毫升)。溫度升高至40℃，之後降低至周圍溫度。藉著過濾收集固體，並以水(2x40毫升)沖洗。然後使該固體在庚烷(40毫升)中形成淤漿。收集固體並以庚烷(40毫升)沖洗。在50℃的真空烘箱中將粗產物脫水16小時，得到10.33克(76%)的標題化合物：¹ H NMR(400 MHz，DMSO－d₆ )δ 8.5(m,1H),8.2(m,1H),7.9(m,1H),7.7(m,1H),7.5(m,1H),7.2(m,1H),7.1(m,1H),3.0(s,3H)；^{1 3} C NMR(100 MHz，DMSO－d₆ )δ 165.1,152.9,144.4,140.6,134.1,130.4,130.1,117.9,117.1,117.0,116.5,114.9,29.8；APCI MS[M＋H]^＋ ＝271；HPLC>99%(LCAP)。

實例74e

4－(4－甲胺基－3－胺基－苯氧基)－吡啶－2－腈

將在EtOH(15毫升)中之4－(4－甲胺基－3－硝基－苯氧基)－吡啶－2－腈(5.0克，0.019莫耳)加熱至40℃。加入Na₂ CO₃ (4.7克，0.044莫耳)，接著加入H₂ O(8.4毫升)。加入Na₂ S₂ O₄ (3.3克，0.019莫耳)，接著加入H₂ O(10毫升)。溫度從41.7升高到49.5℃。在冷卻至41.7℃後，加入Na₂ S₂ O₄ (3.3克，0.019莫耳)，接著加入H₂ O(10毫升)。溫度升高至44.5℃。在冷卻至36.7℃後，加入Na₂ S₂ O₄ (6.6克，0.038莫耳)，接著加入H₂ O(20毫升)。溫度升高至44.0℃。HPLC分析顯示4.1%(LCAP)的起始物質。加入額外的Na₂ S₂ O₄ (3.3克，0.019莫耳)。在攪拌另外15分鐘之後，移開熱源並加入H₂ O(12.5毫升)。在25℃下，加入額外的Na₂ CO₃ (1.3克，0.012莫耳)，並在冰/水浴中冷卻該混合物。在低於5℃下，容許該混合物老化30分鐘(終溫為1.5℃)。藉著過濾收集固體，並以H₂ O(10毫升，接著5毫升)沖洗。在濾器上將該固體脫水30分鐘，然後移至反應燒瓶，並加入H₂ O(50毫升)。攪拌該混合物45分鐘。然後藉著過濾收集固體，並以H₂ O(2x10毫升)沖洗。在50℃的真空烘箱中將粗產物脫水16小時，得到3.50克(76%)的標題化合物：¹ H NMR(400 MHz，DMSO－d₆ )δ 8.5(m,1H),7.5(m,1H),7.1(m,1H),6.4(m,1H),4.8(s,2H),4.7(s,1H),2.7(s,3H)；APCI MS[M＋H]^＋ ＝241；HPLC>99%(LCAP)。

實例74f

4－[1－甲基－2－(4－(三氟甲基)苯胺基)－1H－苯并咪唑－5－基氧基]－吡啶－2－腈

將異硫氰酸4－(三氟甲基)苯基酯(9.65克，0.0475莫耳)加至在MeCN(60毫升)中之4－(4－甲胺基－3－胺基－苯氧基)－吡啶－2－腈(12.0克，0.05莫耳)的溶液中。HPLC分析指出在40分鐘後胺完全轉變。過濾該混合物，並以MeCN(2x12毫升)沖洗移出的固體。在濾液中加入DIPEA(17.5毫升，0.1莫耳)。每10分鐘以4x2.11－克分批加入2－氯－1,3－二甲基氯化咪唑鎓(DMC)(8.44克，0.05莫耳)。在最後的添加之後，容許攪拌該混合物另外10分鐘，此時HPLC分析指出完全轉變。然後將該混合物加熱至50℃(內部溫度)。在50℃下45分鐘之後，HPLC分析指出完全轉變為產物。容許冷卻該混合物至周圍溫度，然後加入H₂ O(45毫升)。反應混合物一開始是均質的，隨後化合物開始從混合物中沉澱。在攪拌2小時之後，藉著過濾收集固體，並以2：1 MeCN/H₂ O(2x20毫升)沖洗。在50℃的真空烘箱中將粗產物脫水16小時，得到16.10克(78%)的標題化合物。¹ H NMR(400 MHz，DMSO－d₆ )δ 9.5(m,1H),8.5(m,1H),8.0(m,2H),7.7(m,2H),7.6(m,1H),7.4(m,1H),7.3(m,1H),7.1(m,1H),6.9(m,1H),3.7(m,3H)；APCI MS[M＋H]^＋ ＝410；HPLC>99%(LCAP)。

實例74g

{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺

將NaOMe(0.23毫升，1毫莫耳，25重量%在MeOH中)加至在MeOH(4毫升)中之實例74f(409毫克，1毫莫耳)的混合物中。在周圍溫度下1小時之後，HPLC分析指出46.2%(LCAP)的起始物質。將該混合物加熱至50℃(反應中斷溫度)。在加熱1小時之後，HPLC分析指出剩下4.1%(LCAP)的起始物質。加入NH₄ OAc(231毫克，3毫莫耳)，接著加入3－溴－1,1,1－三氟丙酮(0.13毫升，1.2毫莫耳)。將該混合物加熱至50℃大約20小時。加入額外的3－溴－1,1,1－三氟丙酮(0.06毫升，0.58毫莫耳)，並將該混合物加熱至60℃。在60℃下24小時之後，容許該混合物冷卻至周圍溫度。加入水(4毫升)，接著加入EtOAc(4毫升)。分離層次，並以EtOAc萃取液相。將混合的有機層脫水(Na₂ SO₄ )，過濾並濃縮。將粗產物溶解於IPA(4毫升)中。將甲烷磺酸(0.020毫升)加至1毫升IPA溶液中。將該混合物加熱至80℃過夜。然後將該混合物冷卻至周圍溫度，並濃縮，得到標題化合物：APCI MS[M＋H]^＋ ＝519。

實例74h

{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺

將NaOMe(0.23毫升，1毫莫耳，25重量%在MeOH中)加至在1－PrOH(2毫升)中之實例74f(409毫克，1毫莫耳)的混合物中。將該混合物加熱至50℃(反應中斷溫度)。在加熱1小時之後，HPLC分析指出起始物質的完全轉變。將混合物加熱至70℃，並加入NH₄ OAc(231毫克，3毫莫耳)。在70℃下1小時之後，將該混合物加熱至85℃。同時每30分鐘以4x0.033毫升分批加入3－溴－1,1,1－三氟丙酮(0.13毫升，1.2毫莫耳)。將該混合物加熱至85℃大約20小時。容許該混合物冷卻至周圍溫度，並加入水(2毫升)。在攪拌數小時之後，藉著過濾收集固體，並以1：1 1－PrOH/水(2x3毫升)沖洗。在50℃的真空烘箱中將該固體脫水大約16小時，得到0.11克(21%)的標題化合物。

實例75

製備{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺將異硫氰酸4－三氟甲基苯基酯(200毫克，1毫莫耳)加至在3毫升乙腈中之4－(2－(5－(三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)吡啶－4－基氧基)－N1－甲基苯－1,2－二胺(350毫克，1毫莫耳)的混合物中。在周圍溫度下攪拌20分鐘之後，HPLC分析顯示完全轉變。在周圍溫度下攪拌在POCl₃ (3毫升)中之硫脲(553毫克，1毫莫耳)的混合物。在4小時之後，將該混合物加熱至大約50℃。在加熱2小時之後，HPLC分析指出反應完成。

實例76

Raf/Mek過濾測定緩衝溶液測定緩衝溶液：50 mM Tris,pH 7.5,15 mM MgCl₂ ,0.1 mM EDTA,1 mM DTT沖洗緩衝溶液：25 mM Hepes,pH 7.4,50 mM焦磷酸鈉,500 mM NaCl中止試劑：30 mM EDTA

材料Raf，有活性的：Upstate Biotech #14－352 Mek，失活的：Upstate Biotech #14－205^{3 3} P－ATP：NEW Perkin Elmer #NEG 602h 96孔測定培養盤：Falcon U型底聚丙烯培養盤#35－1190過濾裝置：Millipore #MAVM 096 OR 96孔過濾培養盤：Millipore Immobilon 1#MAIP NOB閃爍液：Wallac OptiPhase"SuperMix"#1200－439

測定條件Raf約120 pM Mek約60 nM^{3 3} P－ATP 100 nM在室溫下反應時間45－60分鐘

測定草案以2X終濃度，在測定緩衝溶液(50 mM Tris,pH 7.5,15 mM MgCl₂ ,0.1 mM EDTA和1 mM DTT)中混合Raf和Mek，並以每孔15微升分配到聚丙烯測定培養盤中(Falcon U型底聚丙烯96孔測定培養盤#35－1190)。在含有Mek和DMSO但沒有Raf的孔中，定出背景值。

在含有Raf/Mek的孔中加入3微升以100% DMSO稀釋的10X raf激酶抑制劑受試化合物。藉著每孔加入12微升以測定緩衝溶液稀釋的2.5X^{3 3} P－ATP，開始raf激酶活性反應。在45－60分鐘之後，加入70微升中止試劑(30 mM EDTA)使該反應中止。以70%乙醇預先弄濕過濾培養盤5分鐘，然後藉著以沖洗緩衝溶液過濾沖洗之。然後將試樣(90微升)從反應孔移至過濾培養盤。使用Millipore過濾裝置，以沖洗緩衝溶液沖洗過濾培養盤6次。將該盤脫水，並以每孔100微升加入閃爍液(Wallac OptiPhase"Supre Mix"#1200－439)。然後使用Wallac Microbeta 1450讀取器，決定CPM。

實例77

測定2：生物素基化的Raf篩選在活體外的Raf篩選可藉著提供ATP、MEK受體，並測定磷酸部分轉移至MEK殘基，來測量Raf絲胺酸/蘇胺酸激酶之各種同功型的活性。藉著從以人類Raf重組桿狀病毒表現載體感染的sf9昆蟲細胞中純化，獲得Raf的重組同功型。在大腸桿菌中表現重組激酶失活之MEK，並在純化後以生物素標示。關於每個測定，以DMSO連續稀釋受試化合物，然後在加ATP(1 μM)的反應緩衝溶液中，與Raf(0.50 nM)和激酶失活之生物素－MEK(50 nM)混合。隨後在室溫下培養該反應2小時，並藉著加入0.5 M EDTA使其中止。將中止的反應混合物移至塗覆中性抗生物素蛋白(neutradavin)的培養盤(Pierce)，並培養1小時。以DELFIA時差式螢光系統(Wallac)測量磷酸化的產物，使用兔子抗－p－MEK(Cell Signaling)作為初級抗體，並以銪標示之抗－兔作為二級抗體。在Wallac 1232 DELFIA螢光計上讀取時差式螢光。使用XL吻合數據分析軟體，藉著非線性回歸計算每個化合物50%抑制的濃度(IC_{5 0} )。

使用實例76或77之程序，顯示實例1－64之化合物具有低於5 μM之IC_{5 0} 的raf激酶抑制活性。

實例78

抑制黑色素瘤腫瘤生長將3x106個A375M人類黑色素瘤細胞，皮下植入重約24克之10－12週齡雌性Nu/Nu老鼠的右側。當平均腫瘤體積達到大約150立方毫米時(植入後17天)，按腫瘤體積將老鼠隨機分成四組，每組九隻老鼠，並開始以本發明之化合物處理。藉著每天經口灌食14天，給予老鼠單獨的媒劑或10毫克/公斤、30毫克/公斤或100毫克/公斤之實例25的化合物，全部是以0.2毫升之體積。每週使用數位測徑器測量腫瘤體積兩次。在圖1中出示平均腫瘤體積。

實例79

在黑色素瘤細胞中抑制Raf激酶發送信號如同在實例78中，將3x10⁶ 個A375M人類黑色素瘤細胞，皮下植入重約24克之10－12週齡雌性Nu/Nu老鼠的右側。當平均腫瘤體積達到大約150立方毫米時(植入後17天)，按腫瘤體積將老鼠隨機分成四組，藉著每天經口灌食5天，給予老鼠單獨的媒劑或10毫克/公斤、30毫克/公斤或100毫克/公斤之實例25的化合物，全部是以0.2毫升之體積。在給藥後4和24小時，將老鼠安樂死，收穫腫瘤並瞬間冷凍。

使冷凍的腫瘤在冰上融化，秤重並使用Roche Magna－lyser(在4℃下以6500 rpm的2x1分鐘循環)，在帶有Roche完全、最低不含EDTA之蛋白酶抑制劑雞尾酒錠(每25毫升緩衝溶液2錠)、1 mM苯甲基磺醯氟(PMSF)和1X Sigma磷酸酶抑制劑雞尾酒II的RIPA緩衝溶液中將其均質化。對於每100毫克的腫瘤組織，加入1毫升RIPA溶解緩衝溶液。在4℃下，在微量離心機中以14000 RPM離心勻漿20分鐘，接著使用Qiagen Qiashredders(在4℃下以9000 RPM離心2分鐘)，進一步均質化。使用Pierce BCA蛋白質測定決定蛋白質濃度，然後將每種試樣各20微克，裝入在4－20% Tris－甘胺酸SDS－聚丙烯醯胺凝膠上的每個孔中。隨著PAGE，蛋白質被轉移至硝基纖維素膜上，在室溫下阻斷1小時(在TBST中5%脫脂奶粉)，然後在4℃下探測過夜，使用1：1000稀釋(以阻斷緩衝溶液)的兔多株抗－磷酸－ERK1/2抗體(Cell Signalling #9101)、兔多株抗－磷酸－MEK抗體(Cell Signalling #9121)、兔子多株抗－ERK1/2抗體(Cell Signalling #9102)或兔子多株抗－MEK抗體(Cell Signalling #9122)。然後在室溫下以TBST沖洗該膜5－次(各5分鐘)，並在所有的墨點中，以1：5000稀釋(在阻斷緩衝溶液中)，加入HRP－標示之山羊－抗－兔子抗體，並在室溫下培養1小時。然後以TBST沖洗該膜5次(各5分鐘)，並將該膜與Pierce Super－Signal一起培養4分鐘，接著使軟片曝光，曝光時間從1秒延伸至20分鐘。在圖2A和2B中分別出示給藥後4和24小時之試樣的結果。

實例80

抑制結腸癌腫瘤生長將2x10⁶ 個HT29P人類結腸癌細胞，皮下植入重約24克之10－12週齡雌性Nu/Nu老鼠的右側。當平均腫瘤體積達到大約250立方毫米時(植入後14天)，按腫瘤體積將老鼠隨機分成四組，每組十隻，並開始以本發明之化合物處理。藉著每天經口灌食14天，給予老鼠單獨的媒劑或10毫克/公斤、30毫克/公斤或100毫克/公斤之實例25的化合物，全部是以0.2毫升之體積。每週使用數位測徑器測量腫瘤體積兩次。在圖3中出示平均腫瘤體積。

實例81

抑制在結腸癌細胞中的Raf激酶發送信號將3x10⁶ 個HT29P人類結腸癌細胞，皮下植入重約24克之10－12週齡雌性Nu/Nu老鼠的右側。當平均腫瘤體積達到大約150立方毫米時(植入後17天)，按腫瘤體積將老鼠隨機分成四組，並開始以本發明之化合物處理。藉著每天經口灌食5天，給予老鼠單獨的媒劑或10毫克/公斤、30毫克/公斤或100毫克/公斤之實例25的化合物，全部是以0.2毫升之體積。在給藥後1、4和24小時，將老鼠安樂死，收穫腫瘤並瞬間冷凍。然後根據實例79之程序處理冷凍的腫瘤。在圖4A、4B和2C中分別出示給藥後1、4和24小時之試樣的結果。

實例82

在活體外的生化測定中，以實例1之化合物抑制Raf激酶發送信號在活體外的Raf測定使用下列生物素基化的測定，決定實例1之化合物：{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺對野外型B－Raf、野外型c－Raf和突變的B－Raf(V600E)的抑制效果。可藉著提供ATP、重組的激酶失活之MEK受體，並測定磷酸部分轉移至MEK殘基，來測量Raf絲胺酸/蘇胺酸激酶之各種同功型的激酶活性。在大腸桿菌中表現帶有失活K97R ATP結合位置突變(使它成為失活之激酶)的重組全長MEK，並在純化後以生物素標示。利用N－終端(his)₆ 標籤繼代選殖MEK cDNA，並在大腸桿菌中表現，然後藉著鎳親和力層析，接著是陰離子交換，從大腸桿菌溶胞產物中純化重組的MEK受質。將最終的MEK受質製備物生物素化(Pierce EZ－Link Sulfo－NHS－LC－生物素)，並濃縮成11.25 μM。藉著從以相對應之人類Raf重組表現載體感染的sf9昆蟲細胞中純化，獲得重組的B－Raf、c－Raf和突變的B－Raf。經由Glu抗體交互作用或藉著金屬離子層析法，純化重組的Raf同功型。

關於每個測定，以DMSO連續稀釋實例1之化合物，然後與B－Raf、c－Raf或突變的B－Raf(各0.50 nM)混合。在加ATP(1 μM)的反應緩衝溶液中，加入激酶失活之生物素－MEK受質(50 nM)。反應緩衝溶液含有30 mM Tris－HCL₂ pH 7.5,10 mM MgCl₂ ,2 mM DTT,4 mM EDTA,25 mM β－甘油磷酸鹽，5 mM MnCl₂ 和0.01% BSA/PBS。隨後在室溫下培養該反應2小時，並藉著加入0.5 M EDTA使其中止。將中止的反應混合物移至塗覆中性抗生物素蛋白的培養盤(Pierce)，並培養1小時。以DELFIA時差式螢光系統(Wallac)測量磷酸化的產物，使用兔子抗－p－MEK(Cell Signaling)作為初級抗體，並以銪標示之抗－兔作為二級抗體。在Wallac 1232 DELFIA螢光計上讀取時差式螢光。使用XL吻合數據分析軟體，藉著非線性回歸計算實例1之化合物50%抑制的濃度(IC_{5 0} )。

結果：實例1之化合物顯示B－Raf、c－Raf和突變之B－Raf(V600E)活性的有效抑制(IC_{5 0} <0.1 μM)，如同在下文表3中所示。

如同在上文表3中所示，實例1之化合物展現對抗野外型同功型B－Raf、野外型同功型c－Raf和突變的B－Raf(V600E)Raf激酶的有效抑制活性。如同在圖5中所示，認為Raf激酶是在MAPK(Ras/Raf/MER/ERK)發送信號路徑中主要的Ras效應物。Raf激酶被Ras激活，並磷酸化和激活Mek1和Mek2，其轉而激活MAPK路徑中的有絲分裂原活化激酶1和2(MAPK)。已知Raf激酶影響並調節細胞增殖、分化、存活、致癌轉變和細胞凋亡。已經顯示B－Raf同功型是涉及信號發送之Raf的主要活化形式，並為擴大Ras發送信號的關鍵。

如同下文在表4中所示，MAPK發送信號路徑牽連到許多人類癌症。在所有人類癌症的15%中發現Ras突變(被激活)。在所有人類癌症的30%中發現ERK突變(高度激活)。與癌症有關的致癌基因突變，通常是在該路徑中的數個成員中，例如突變的B－Raf(V600E)出現在大約70%的黑色素瘤，和大約12%的結腸癌中(Davies等人，在前；Yuen等人，在前，和Brose等人，在前)。

參見Sebolt－Leopole和Herrera,Nature Reviews Cancer(4)：937(2004)。

如同上文在表4中所示，B－Raf的突變形式(V600E)，它是激活的，是癌症治療的重要標靶，因為其表現為不良預後的指標，它在組成上是有活性的，且其駕馭數個腫瘤，包括黑色素瘤、乳頭狀甲狀腺癌、卵巢癌和結腸癌。先前已經證實野外型Raf激酶的抑制劑，亦抑制突變的B－Raf，顯示有希望成為癌症治療的治療劑。例如，已經顯示在黑色素瘤細胞株中，突變的B－Raf被傷害ERK發送信號和增殖的siRNA耗盡(Dibb,N.J.等人，Nature Reviews Cancer(4)：718,2004)。因此，明顯地注意到利用實例1之化合物抑制突變的B－Raf，甚至比野外型B－Raf更有效，藉此證實了抑制Raf之化合物在治療Raf－調節之疾病，包括黑色素瘤、卵巢癌、乳頭狀甲狀腺癌和結腸癌之治療上的用途。

實例83

在以細胞為基礎的測定中，以實例1之化合物抑制突變的B－Raf發送信號1.抑制ERK磷酸化作用方法：使用兩種黑色素瘤細胞株，A375M(突變的B－Raf V600E)和SKMEL－28(突變的B－Raf V600E)，測量實例1之化合物在以細胞為基礎之測定中的抑制效力。在SKMEL－28細胞和A375M細胞中，在以連續稀釋的實例1之化合物：{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺處理之後，分析ERK磷酸化作用。藉著使數據與四參數曲線吻合，定出EC_{5 0} 值。

結果：如同在下文表5中所示，實例1之化合物在SKMEL－28細胞和A375M細胞中抑制了突變的B－Raf(V600E)激酶活性，係藉著降低磷酸－ERK來測量。

2.抑制MEK磷酸化作用方法：使用三種黑色素瘤細胞株，A375M(突變的B－Raf V600E)、SKMEL－28(野外型Raf，突變的N－Ras)和CHL－1(野外型Raf，野外型Ras)，測量實例1之化合物在以細胞為基礎之測定中的抑制效力。在37℃下，在0.1%胎牛血清和0.1 μM、0.5 μM、1 μM、5 μM和10 μM濃度之實例1化合物中培養三種細胞株。在培養4小時之後，藉者西方墨點分析分析MEK磷酸化作用。

結果：在圖6A、6B和6C中出示結果。如同在圖6A中所示，實例1之化合物在從0.1 μM到10 μM之濃度範圍內，在A375M細胞(圖6A)、SKMEL－2細胞(圖6B)和CHL－1細胞(圖6C)中，是Raf下游信號發送的有效抑制劑。

3.抑制不依賴細胞附著的細胞生長為了證實Raf轉譯成抗－增殖活性的抑制作用，測試實例1之化合物對抗各種生長在軟－瓊脂上的細胞株和人類腫瘤分離株，如同在下文表6中列舉的。

軟瓊脂增殖測定：關於在下文表6中列舉的每個細胞株，以每100微升500個細胞播種在Corning 96孔平底Ultra Low Attachment Micro培養盤(Corning #3474)中^。 在完全培養基中加入1% seakem GTG瓊脂糖(50微升/孔)，容許固化，然後在每孔中加入100微升完全培養基。以在不含血清之培養基中終濃度5%的DMSO，進行實例1之化合物：{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺的連續稀釋，並在每孔中加入25微升經過稀釋的化合物(終DMSO濃度為0.5%)。在測定中亦包括含有0.5% DMSO但沒有化合物的對照孔。在以化合物培養細胞7天之後，在每孔中加入25微升Alamar藍(Trek Diagnostic Systems #00－100)，並在37℃下培養4小時。以螢光培養盤讀取器讀取培養盤，激發530毫微米，發射590毫微米。藉著使數據吻合四－參數曲線定出EC_{5 0} 值。

亦測試實例1之化合物對抗人類腫瘤分離株名單在軟瓊脂(Oncotest,GmbH,Freiburg,Germany)上的生長。從患者中分離腫瘤，然後以腫瘤碎片之形式移至免疫－妥協的老鼠中，並使用上述的方法測定。

結果：實例1之化合物對表現突變的B－Raf、突變的K－Ras和突變的N－Ras之細胞株和人類腫瘤分離株，具有有效的抗增殖效力，如同在下文表6中所示。

在上文表6中出示的實例1之化合物對廣泛細胞株和人類腫瘤分離株名單的抑制活性，證實化合物在表現突變之B－Raf的腫瘤細胞中有效的抗增殖活性。化合物以<0.0098到0.07 μM之範圍，對突變的B－Raf黑色素瘤細胞展現出有效的抑制。化合物以0.026 μM到0.13 μM之範圍，對突變的B－Raf結直腸細胞株展現出類似程度的抑制。化合物亦在兩種受試的表現K－Ras之結直腸癌腫瘤細胞中，證實有效的抗－增殖活性(0.07 μM到0.016 μM)，證實在K－Ras突變上游前後之B－Raf/c－Raf的抑制作用，導致抗－增殖活性。

與得自上述之細胞株的結果相符，實例1之化合物對人類腫瘤分離株，證實對突變之B－Raf黑色素瘤有最有效的抑制(EC_{5 0} ＝0.055 μM至0.20 μM)，接著是N－Ras突變的黑色素瘤(EC_{5 0} ＝0.57 μM)。一胰臟腫瘤和一結直腸腫瘤具有1 μM範圍的EC_{5 0} 。剩下的腫瘤具有超過1 μM的EC_{5 0} 值。咸相信得自患者之人類腫瘤分離株代表比細胞株更準確的疾病模式，因為腫瘤分離自患者，並以腫瘤碎片之形式移至免疫－妥協的老鼠中。因此，不選擇讓它們生長在塑膠製品上，且其維持一些原始的腫瘤構造。

有趣的是注意到實例1之化合物在腎細胞癌腫瘤分離株中，具有範圍超過1 μM的抑制活性。雖然未定出在這些特殊腫瘤上的基因型，但已知腎細胞癌腫瘤通常不表現突變的Ras或B－Raf。因此，實例1之化合物似乎專一地抑制MAPK路徑的信號發送分子，特別是Raf和Ras激酶分子。

實例84

以實例1之化合物處理，在A375M(B－Raf V600E)人類黑色素瘤異種移植模式中引起腫瘤退行方法：將3x10⁶ 個A375M人類黑色素瘤細胞，皮下植入重約24克之10－12週齡雌性Nu/Nu老鼠的右側。當平均腫瘤體積達到大約150立方毫米時(植入後17天)，按腫瘤體積將老鼠隨機分成四組，每組九隻老鼠，並開始以實例1之化合物處理。藉著每天經口灌食14天，給予老鼠單獨的媒劑或10毫克/公斤、30毫克/公斤或100毫克/公斤之實例1的化合物，全部是以0.1毫升之體積。在100% PEG中調配實例1之化合物：{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺。每週使用數位測徑器測量腫瘤體積兩次。

西方墨點分析在第14次給藥之後8和24小時，將老鼠安樂死，收穫腫瘤並瞬間冷凍。使冷凍的腫瘤在冰上融化，秤重並使用Roche Magna－lyser(在4℃下以6500 rpm的2x1分鐘循環)，在帶有Roche完全、最低不含EDTA之蛋白酶抑制劑雞尾酒錠(每25毫升緩衝溶液2錠)、1mM苯甲基磺醯氟(PMSF)和1X Sigma磷酸酶抑制劑雞尾酒II的RIPA緩衝溶液中將其均質化。對於每100毫克的腫瘤組織，加入1毫升RIPA溶解緩衝溶液。在4℃下，在微量離心機中以14000 RPM離心勻漿20分鐘，接著使用Qiagen Qiashredders(在4℃下以9000 RPM離心2分鐘)，進一步均質化。使用Pierce BCA蛋白質測定決定蛋白質濃度，然後將每種試樣各20微克，裝入在4－20% Tris－甘胺酸SDS－聚丙烯醯胺凝膠上的每個孔中。隨著PAGE，蛋白質被轉移至硝基纖維素膜上，在室溫下阻斷1小時(在TBST中5%脫脂奶粉)，然後在4℃下探測過夜，使用1：1000稀釋(以阻斷緩衝溶液)的兔多株抗－磷酸－ERK1/2抗體(Cell Signalling #9101)、兔多株抗－磷酸－MEK抗體(Cell Signalling #9121)、兔子多株抗－ERK1/2抗體(Cell Signalling #9102)或兔子多株抗－MEK抗體(Cell Signalling #9122)。使用1：1000稀釋的抗－Bim抗體(Chemicon,#AB17003)、抗－週期素D1抗體純種系5D4(Upstate,#05－263)、抗－p27Kip－1(182－198)抗體(Calbiochem,#506127)、抗－磷酸－AKT(S473)抗體(Cell Signaling,#9271)、抗－磷酸－Akt(T308)抗體(Cell Signaling,#9275)和抗－磷酸－總Akt抗體(Cell Signaling,#9272)，進行下游標記調節的分析。

然後在室溫下以TBST沖洗該膜5－次(各5分鐘)，並在所有的墨點中，以1：5000稀釋(在阻斷緩衝溶液中)，加入HRP－標示之山羊－抗－兔子抗體，並在室溫下培養1小時。然後以TBST沖洗該膜5次(各5分鐘)，並將該膜與Pierce Super－Signal一起培養4分鐘，接著使軟片曝光，曝光時間從1秒延伸至20分鐘。

結果：圖7A是顯示在老鼠中以10毫克/公斤、30毫克/公斤或100毫克/公斤之口服劑量的實例1化合物處理時，在A375M(B－Raf V600E)人類黑色素瘤腫瘤的腫瘤體積上之平均降低的劑量反應的圖。如同在圖7A中所示，實例1之化合物以口服劑量－依賴性的模式，具有有效的抗－腫瘤活性。在口服劑量100毫克/公斤的化合物下，在9/9的受試老鼠中觀察到腫瘤退行。

分別在圖7B和圖7C中，出示在實例1化合物10毫克/公斤、30毫克/公斤和100毫克/公斤劑量的第14次給藥之後8小時和24小時的西方墨點分析之結果。西方墨點數據顯示該化合物在100毫克/公斤之劑量下抑制MEK磷酸化作用(其誘導腫瘤退行)，且MEK抑制作用在最後一次給藥之後持續超過24小時，如在圖7C中所示。

如同在圖7D中所示，在第14次給藥後24小時，在腫瘤溶胞產物中之下游生物標記調節的分析，顯示BIM(細胞凋亡的標記)和p27Kip(細胞週期停止的標記)的增加，和週期素D的減少(細胞週期抑制)。這些結果證實實例1之化合物抑制了MAPK路徑中的Raf信號發送。

實例85

以實例1之化合物處理，抑制了黑色素瘤腫瘤生長測試實例1之化合物在黑色素瘤腫瘤模式MEXF276(突變的B－Raf V600E)和黑色素瘤腫瘤模式MEXF1341野外型B－Raf、突變的N－Ras(Q61K)中的抑制活性。

方法：將連續繼代的人類黑色素瘤MEXF276(突變的B－Raf V600E)腫瘤細胞，皮下植入10－12週齡雌性Nu/Nu老鼠的後腿側面。當平均腫瘤體積達到大約65立方毫米時，按腫瘤體積將老鼠隨機分組，並開始以實例1之化合物{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺處理。因為已知MEXF276模式多少是惡病質的，預期在未－處理對照組老鼠中有一些毒性，故如下使用間斷的給藥攝生法，以便預防在藥物處理組中嚴重的體重喪失。藉著經口灌食給予老鼠單獨的媒劑，或下列給藥攝生法之實例1化合物：10毫克/公斤，在第0、2、4、6、14、16和20天；30毫克/公斤，在第0、2、14、16和20天；以及100毫克/公斤，在第0、2、14、16和20天。

至於MEXF1341模式，將連續繼代的人類黑色素瘤MEXF1341腫瘤細胞，皮下植入雌性Nu/Nu老鼠的後腿側面。當平均腫瘤體積達到大約78立方毫米時，按腫瘤體積將老鼠隨機分組，並開始以實例1之化合物處理。藉著經口灌食給予老鼠單獨的媒劑，或下列給藥攝生法之實例1化合物：10毫克/公斤，在第0、2、4、6、10、12、18和20天；30毫克/公斤，在第0、2、4、6、10、12、18和20天；以及100毫克/公斤，在第0、2、4、6、10、12和20天。

在最後一次給藥後4小時，將得自MEXF276和MEXF1341模式的老鼠安樂死，收穫腫瘤並瞬間冷凍。隨後藉著西方墨點，針對標靶調節(pMEK)和下游標記(BIM、p27Kip和pAKT)的調節，按照在實例84中所述，分析得自這些腫瘤的溶胞產物。

結果：圖8A是顯示在老鼠中，當以實例1之化合物處理時，在MEXF276(B－Raf V600E)黑色素瘤腫瘤的腫瘤體積上之平均降低的圖。在圖8A中出示的結果，指出實例1之化合物，在10毫克/公斤下，對MEXF276分離株顯示出明顯的腫瘤生長抑制，且在30毫克/公斤和100毫克/公斤下，在8/8的老鼠中有超過或等於50%的腫瘤退行。在腫瘤溶胞產物中pMEK磷酸化作用(圖8B)和下游生物標記調節的分析，證實在MEXF276腫瘤中抑制了突變的B－Raf活性，如在圖8B中，藉著磷酸－MEK的減少所示。如同在圖8C中所示，觀察到BIM(細胞凋亡之標記)和p27Kip(細胞週期停止)的增加，和磷酸－AKT(存活路徑發送信號)的減少，證實抑制了在MAPK路徑中的Raf激酶活性。

圖9A是顯示在老鼠中，當以實例1之化合物處理時，MEXF1341(N－Ras Q61K)黑色素瘤腫瘤的腫瘤生長之平均抑制的圖。在圖9A中出示的結果，指出實例1之化合物在30毫克/公斤和100毫克/公斤之下，在MEXF1341突變之N－Ras(N－Ras Q61K)黑色素瘤腫瘤模式中，引起明顯的腫瘤生長抑制(高達70%抑制)，但未引起腫瘤退行。如同在圖9B中所示，磷酸－MEK的分析在以100毫克/公斤之化合物處理後的20天之後，並未顯示出在磷酸－MEK上有可觀察到的減少，與在MEXF276(突變的B－Raf)模式中獲得的結果相反。此外，在MEXF1341模式中有一些影響在Raf之MAPK路徑下游之信號發送分子的證據，該作用比在MEXF276模式中觀察到的更不令人驚訝。例如，如同在圖9C中所示，在30毫克/公斤和100毫克/公斤組中p27Kip含量(細胞週期停止)的增加，表示生長停止，並觀察到細胞凋亡標記BIM的些微增加。因此，實例1之化合物似乎在MEXF276(突變的B－Raf)異種移植之模式中具有有效的活性，引起腫瘤退行，但在MEXF1341(野外型B－Raf，突變的N－Ras)異種移植之模式中有明顯但較不有效的活性，引起腫瘤生長抑制。

實例86

以實例1之化合物處理，抑制了人類結直腸癌腫瘤生長測試實例1之化合物在結直腸癌異種移植模式HCT－116(突變的K－Ras G13D)、HT－29(B－Raf V600E)和急性白血病異種移植模式MV4－11(FLT3 ITD)中的抑制活性。

方法：將5x10⁶ 個HCT－116(突變的K－Ras G13D)人類結直腸癌細胞，皮下植入重約24克之10－12週齡雌性Nu/Nu老鼠的後腿側面。當平均腫瘤體積達到大約212立方毫米時，藉著經口灌食給予老鼠單獨的媒劑，或下列給藥攝生法之實例1化合物：在第1天然後每2天一次(q2d)，共28天，藉著經口灌食10毫克/公斤、30毫克/公斤或100毫克/公斤。在第三次給藥之後4小時、8小時和24小時將衛星老鼠安樂死，並收穫腫瘤。隨後藉著西方墨點，按照在上文實例84中所述，針對標靶調節(pMEK)分析得自這些腫瘤的溶胞產物。

如下測試第二個人類結直腸癌模式HT－29(B－Raf V600E)。將2x10⁶ 個HT－29細胞，皮下植入重約24克之10－12週齡雌性Nu/Nu老鼠的後腿側面。當平均腫瘤體積達到大約167立方毫米時，藉著經口灌食給予老鼠單獨的媒劑或下列給藥攝生法之實例1化合物：在第1天然後每2天一次(q2d)，共28天，藉著經口灌食10毫克/公斤、30毫克/公斤或100毫克/公斤。

如下測試人類急性單核細胞性白血病異種移植模式：將5x10⁶ 個MV4－11細胞，皮下植入重約24克之10－12週齡雌性Nu/Nu老鼠的後腿側面。當平均腫瘤體積達到大約190立方毫米時，藉著經口灌食給予老鼠單獨的媒劑，或下列給藥攝生法之實例1化合物：在第1天然後每2天一次(q2d)，共16天，藉著經口灌食10毫克/公斤、30毫克/公斤或100毫克/公斤。在第三次給藥之後4小時將衛星老鼠安樂死，並收穫腫瘤。隨後藉著西方墨點，按照在上文實例84中所述，針對標靶調節(pMEK)分析得自這些腫瘤的溶胞產物。

結果：在圖10A－D中出示HCT－116研究的結果。圖10A是顯示在老鼠中，當以100毫克/公斤之實例1化合物處理時，HCT－116(K－Ras G13D)結直腸癌腫瘤的腫瘤體積之平均降低的圖。如同在圖10B－10D中所示，磷酸－MEK的分析，在第三次給藥之後4小時(圖10B)、8小時(圖10C)和24小時(圖10D)，顯示在磷酸－MEK上可觀察到減少。

圖11是顯示在老鼠中，當以實例1之化合物處理時，在HT－29(B－Raf V600E)結直腸癌腫瘤的腫瘤體積之平均降低的圖。如同在圖11中所示，在30毫克/公斤和100毫克/公斤處觀察到腫瘤退行。

在圖12A－B中出示MV4－11研究的結果。圖12A是顯示在老鼠中，當以實例1之化合物處理時，MV4－11急性單核細胞性白血病癌腫瘤的腫瘤生長之平均抑制的圖。MV4－11腫瘤細胞係由突變的受體酪胺酸激酶(MV4；11,FLT3 ITD)駕馭。如所示，實例1之化合物在MV－11模式中引起明顯的腫瘤生長抑制，然而，沒有腫瘤退行的證據(圖12A)，也沒有可觀察到的MEK信號發送的抑制(圖12B)。雖然不希望與理論結合，但在MV4－11模式中，腫瘤生長抑制的效力，可能是化合物抗－血管生成活性的結果，主要是經由VEGFR－2的抑制，如同下文在實例87－88中所述。

在下文表7中，提供了獲自實例1化合物在上述黑色素瘤、結直腸癌和白血病異種移植模式中之效力評估的數據概要。

從在表7中概述的數據，如同在圖6－12中所示，以及在實例82－86中所述，實例1之化合物在其中B－Raf突變的每個受試之異種移植模式中均是有效的，在總共三個受試模式(A375M、MEXF276和HT29)中，引起腫瘤退行和標靶調節。

實例87

酪胺酸激酶抑制測定1.生化測定：藉著提供ATP和適當的含有可供磷酸化之酪胺酸胺基酸殘基的肽或蛋白質，並測定磷酸化部分轉移至酪胺酸殘基，來測量許多蛋白質酪胺酸激酶的激酶活性。藉著從以相對應之人類VEGFR2、PDGFRβ、CSF－1R和c－Kit重組桿狀病毒表現載體感染的Sf9昆蟲細胞中純化，獲得與VEGFR2、PDGFRβ、CSF－1R和c－Kit之細胞質功能部位相符的重組蛋白質。關於每個測定，以DMSO連續稀釋實例1之化合物：{1－甲基－5－[2－(5－三氟甲基)－1H－咪唑－2－基)－吡啶－4－基氧基]－1H－苯并咪唑－2－基}－(4－三氟甲基－苯基)－胺，然後與加了ATP的適當激酶反應緩衝溶液混合(ATP濃度是個別的Km值或正好低於個別的Km值)。加入激酶蛋白質和適當的生物素基化之肽受質，得到50－100微升之終體積。在室溫下培養該反應1－3小時，然後藉著加入25－50微升45 mM EDTA,50 mM Hepes pH 7.5使其中止。將中止的反應混合物(75微升)移至以鏈黴菌抗生物素蛋白－塗覆的微量滴定盤(Boehringer Mannheim)上，並培養1小時。以DELFIA時差式螢光系統(Wallac或PE Bioscience)測量磷酸化的肽產物，使用銪標示之抗－磷酸酪胺酸抗體PT66，藉著補充1 mM MgCl₂ ，修改DELFIA測定緩衝溶液，以供抗體稀釋用。在Wallac 1232 DELFIA螢光計或PE Victor II多信號讀取器上讀取時差式螢光。使用XL吻合數據分析軟體，利用非線性回歸計算每個化合物50%抑制的濃度(IC_{5 0} )。

在50 mM Hepes pH 7.0、2 mM MgCl₂ 、10 mM MnCl₂ 、1 mM NaF、1 mM二硫蘇糖醇(DTT)、1毫克/毫升牛血清白蛋白(BSA)、1至30 μM ATP和0.25 μM生物素基化的肽受質"GGGGQDGKDYIVLPI"(SEQ ID NO：1)中，測定VEGFR2激酶(0.05微克/毫升)。

至於PDGFR激酶測定，使用120微克/毫升酵素和與上述相同的緩衝溶液條件，除了ATP和肽受質濃度改成1.4 μM ATP和0.25 μM生物素基化的肽受質"GGGGQDGKDYIVLPI"(SEQ ID NO：1)。

在測定緩衝溶液(50 mM HEPES pH 7.0、5 mM MgCl₂ 、10 mM MnCl₂ 、0.1% BSA、1 mM DTT、0.01%吐溫，終pH 7.5)、1 μM ATP和50 nM生物素基化的肽受質"EEEEAYGWLNF"(SEQ ID NO：2)中測定CSF－1R的激酶活性。

藉著提供ATP和與c－Kit受體(獲自Proquinase)之細胞質功能部位相符的重組蛋白質，測量c－Kit的激酶活性。在加了ATP(8 μM)的反應緩衝溶液中，加入c－Kit激酶蛋白質(2 nM)和生物素基化的肽受質(1 μM)"GGLFDDPSWNVQNL"(SEQ ID NO：3)，得到100微升之終體積。c－Kit之反應緩衝溶液為50 mM HEPES pH 7.5、1 mM NaF、2 mM MgCl₂ 、10 mM MnCl₂ 和1毫克/毫升BSA。在室溫下培養該反應2小時，並藉著加入50微升45 mM EDTA、50 mM HEPES,pH7.5使其中止。將中止的反應混合物(75微升)移至以鏈黴菌抗生物素蛋白－塗覆的微量滴定盤(Boehringer Mannheim)上，並培養1小時。以DELFIA時差式螢光系統(Wallac或PE Bioscience)測量磷酸化的肽產物，使用銪標示之抗－磷酸酪胺酸抗體PT66，藉著補充1 mM MgCl₂ ，修改DELFIA測定緩衝溶液，以供抗體檢測用。在Wallac 1232 DELFIA螢光計或PE Victor II多信號讀取器上讀取時差式螢光。使用XL吻合數據分析軟體，利用非線性回歸計算實例1化合物50%抑制的濃度(IC_{5 0} )。

結果：如同在下文表8中所示，實例1之化合物是VEGFR2、c－Kit、PDGFRβ和CSF－1R的有效抑制劑。

亦使用以細胞為基礎的測定，如下測量實例1之化合物對抗在表8中出示之標靶分子的活性。

在以實例1化合物處理之後，在HMVEC細胞中的標靶調節，顯示VEGF調節之VEGFR－2磷酸化作用的抑制，有0.03 μM之EC_{5 0} ，因為藉著西方墨點測量到在磷酸－VEGFR的降低(未顯示)。

在以實例1化合物處理之後，在Mo7e細胞中c－Kit的抑制分析，顯示c－Kit磷酸化作用的抑制，有1.1 μM之EC_{5 0} ，因為藉著ELISA測量到磷酸－c－Kit的降低。

在以實例1化合物處理之後，在MG63細胞中PDGFR－β的抑制分析，顯示磷酸－PDGFR－β的抑制作用，有0.7 μM之EC_{5 0} ，因為藉著ELISA測量到磷酸－PDGFR－β的降低。

實例88

血管生成的抑制欲進一步調查實例1之化合物對VEGFR－2的影響，在CHO－VEGF基底膠血管生成模式中評估該化合物。

方法：在研究開始之前，先使110隻Nu/Nu老鼠適應環境1週。在第1天，將在0.5毫升基底膠中的5x10⁶ 個VEGF－CHO細胞皮下注射到老鼠的上腹部內。在第1天，給老鼠口服劑量的媒劑、10毫克/公斤、30毫克/公斤或100毫克/公斤的實例1化合物，按照每天一次x5的給藥計畫。在5天之後，從老鼠中移出基底膠塞子，並定量其中的血紅素濃度。

結果：圖13為顯示在以10毫克/公斤、30毫克/公斤和100毫克/公斤的實例1化合物處理之後，在CHO－VEGF基底膠模式中，抑制VEGF－調節之血管生成的圖。如同在圖13中所示，在5天內投與化合物，明顯地抑制了VEGF－調節的血管生成。

實例89

給藥計畫影響在A375M人類黑色素瘤異種移植模式中進行實例1之化合物的給藥計畫研究，評估在突變的B－Raf抑制、腫瘤反應和化合物在血漿中之濃度之間的關係。

已經在A375M模式中利用實例1之化合物建立了清楚的劑量－反應關係，如在圖7A中所示。在圖7A中的數據指出實例1之化合物，當每天給予100毫克/公斤時，誘導腫瘤退行，而腫瘤退行與突變之B－Raf的持續抑制有關(在圖7B中藉著在磷酸－MEK的降低來顯示)。然而，對該給藥計畫，老鼠不能完全容忍30毫克/公斤和100毫克/公斤劑量含量的實例1之化合物，因為在第14天，老鼠平均喪失其起始體重的10%。因此，如下述進一步評估最有效的劑量100毫克/公斤。

方法：如同在實例84中，將3x10⁶ 個A375M人類黑色素瘤細胞，皮下植入重約24克之10－12週齡雌性Nu/Nu老鼠的右側。當平均腫瘤體積達到大約200立方毫米時，按腫瘤體積將老鼠隨機分成四組，每組九隻老鼠，並開始以實例1之化合物處理。藉著經口灌食32天，給予老鼠單獨的媒劑或以下列給藥攝生法的實例1化合物：100毫克/公斤，按每2天、每3天或每4天一次之計畫，總共28天。

在本研究中，給予帶有腫瘤的老鼠衛星組藥物，以便監視在腫瘤中的標靶調節。在每2天組的5次給藥，和每4天組的3次給藥之後，在不同的時間點從老鼠收穫腫瘤和血漿。為了西方墨點分析磷酸－MEK之含量，按照在實例84中所述，處理腫瘤，並分離血漿以便測量藥物含量。

結果：圖14A是顯示在老鼠中，當以100毫克/公斤的實例1化合物按照每2天、每3天或每4天一次之給藥攝生法處理時，A375M黑色素瘤腫瘤的腫瘤體積之平均降低的圖。如同在圖14A中所示，以每2天、每3天或每4天一次之計畫口服給予100毫克/公斤的實例1化合物，結果產生明顯的效力。在圖14B中出示的西方墨點分析指出，在化合物處理之老鼠中的腫瘤，相對於媒劑處理對照組，在每2天一次的試樣中，在給藥後高達48小時有降低的磷酸－MEK含量。在每4天一次的試樣中，三個腫瘤中只有一個在72小時有降低的磷酸－MEK含量，而所有化合物處理的腫瘤均在96小時仍有可與媒劑處理腫瘤相比擬的磷酸－MEK含量。這些結果與在圖7B中所示之每2天一次的計畫所獲得的結果一致。

如同在下文表9中所示，受試老鼠較能容忍每3天和每4天一次的計畫，係藉著體重喪失來測量。

總括而言，當一起考量標靶調節數據和效力數據時，似乎每2天或每3天一次的計畫產生最有效之腫瘤退行的結果，且有最大的宿主容忍性。

實例90

標靶血漿濃度研究如同在上文實例89中所述，取得以實例1化合物處理之老鼠的血清試樣。從血清試樣中決定藥物濃度，並在圖15中以化合物濃度對時間作圖來顯示結果。藉著考量在圖14A和圖14B中出示之標靶調節數據，可從圖15估計標靶調節的閾藥物濃度。如同在圖14B中所示，在給藥後所有高達48小時的時間點，相對於媒劑處理的腫瘤，在化合物處理之腫瘤中的磷酸－MEK含量均降低，因此相對應的藥物濃度必然在該閾值以上。如同在圖14C中所示，在給藥後的72和96小時，沒有標靶調節，並因此相對應的藥物濃度必然低於該閾值。結果，估計化合物之閾值是在大約50,000到80,000毫微克/毫升之間，如大約70，000毫微克/毫升(135μM)。

有趣的是注意到在上述老鼠異種移植研究中的標靶血漿濃度，比在活體外之A375M細胞中標靶調節的EC_{5 0} (.16 μM)更高大約1000－倍(參見表5)。主要可藉著血漿蛋白質結合來解釋該差異，因為實例1之化合物在血漿中被超過99.9%的蛋白質結合。考慮到這件事，自由藥物濃度的粗略估計為大約0.135 μM，接近在A375M細胞中替標靶調節定出的在活體外之EC_{5 0} ，0.16 μM。

為了進一步探討血漿蛋白質結合對實例1之化合物的影響，進行一系列在活體外的實驗，其中在50%來自老鼠、大鼠、狗、猴子或人類的血清中預先培養化合物，然後再應用於A375M細胞或Mo7e細胞上。在過夜培養之後，測量在A375M細胞中的磷酸－MEK和磷酸－ERK含量(以便測定突變的B－Raf抑制)。在培養4小時之後，在Mo7e細胞中測量磷酸－c－Kit含量(以便測定c－Kit抑制)。在下文表10中概述這些測定的結果。

可使用在表10中的數據，評估實例1之化合物對得自不同物種之血漿蛋白質的相對結合，並作為以在老鼠中決定之標靶血漿濃度來推測其他物種的校正因子之基礎。例如，以這些數據為基礎，將估計在大鼠中之標靶血漿濃度比在老鼠中的更低大約5－倍，且在人類中的標靶血漿濃度比在老鼠中的更低大約10－倍。

雖然已經解釋並描述了本發明較佳的具體實施例，但應了解可進行不違背本發明之精神和範圍的各種改變。

當藉著參考下列的詳細說明，連同附錄的突變時，將更徹底了解本發明的前述觀點和許多附帶利益，其中：圖1為顯示當按照在實例78中所述，以本發明之化合物處理時，在老鼠中之A375M人類黑色素瘤腫瘤之腫瘤體積上之平均降低的圖；圖2A和2B是PAGE玻片，顯示在按照在實例79中所述，以本發明之化合物處理之後4－(圖2A)和24－小時(圖2B)，在老鼠中之A375M人類黑色素瘤腫瘤細胞中，來自Raf激酶之下游信號的抑制；圖3為顯示當按照在實例80中所述，以本發明之化合物處理時，在老鼠中之HT29P人類結腸癌腫瘤之腫瘤體積上之平均降低的圖；圖4A、4B和4C是PAGE玻片，顯示在按照在實例81中所述，以本發明之化合物處理之後1小時(圖4A)、4小時(圖4B)和24小時(圖4C)，在老鼠中之HT29P人類結腸癌腫瘤細胞中，來自Raf激酶之下游信號的抑制；圖5解釋了包括Ras、Raf、MEK和ERK的MAPK信號路徑，以及按照在實例82－86中所述，以實例1之化合物抑制來自Raf激酶之下游信號的計畫點；圖6A、6B和6C是PAGE玻片，顯示在按照在實例83中所述，以一濃度範圍的實例1之化合物培養處理4小時之後，在A375M細胞(圖6A)、SK－MEL2細胞(圖6B)和CHL－1細胞(圖6C)中來自Raf激酶之下游信號的抑制；圖7為顯示當按照在實例84中所述，以10毫克/公斤、30毫克/公斤或100毫克/公斤之口服劑量的實例1化合物處理時，在老鼠中之A375M(B－Raf V600E)人類黑色素瘤腫瘤之腫瘤體積上之平均降低的劑量反應的圖；圖7B是PAGE玻片，顯示在按照在實例84中所述，在利用實例1化合物的第14次處理之後8小時，在老鼠之A375M腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游信號的抑制；圖7C是PAGE玻片，顯示在按照在實例84中所述，在利用實例1化合物的第14次處理之後24小時，在老鼠之A375M腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游信號的抑制；圖7D是PAGE玻片，顯示在按照在實例84中所述，在利用實例1化合物的第14次處理之後24小時，在A375M腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游標記的調節；圖8A是顯示當按照在實例85中所述，以實例1之化合物處理時，在老鼠中之MAXF276(B－Raf V600E)黑色素瘤腫瘤之腫瘤體積上之平均降低的圖；圖8B是PAGE玻片，顯示在按照在實例85中所述，在利用實例1化合物的第20次處理之後4小時，在老鼠之MEXF276腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游信號的抑制；圖8C是PAGE玻片，顯示在按照在實例85中所述，在利用實例1化合物的第20次處理之後4小時，在老鼠之MEXF276腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游標記的調節；圖9A是顯示當按照在實例85中所述，以實例1之化合物處理時，在老鼠中之MAXF1341(N－Ras Q61K)黑色素瘤腫瘤的腫瘤生長之平均抑制的圖；圖9B是PAGE玻片，顯示在按照在實例85中所述，在利用實例1化合物的第20次處理之後4小時，在老鼠之MEXF1341腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游信號的抑制；圖9C是PAGE玻片，顯示在按照在實例85中所述，在利用實例1化合物的第20次處理之後4小時，在老鼠之AMEXF1341腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游標記的調節；圖10A是顯示當按照在實例86中所述，以實例1之化合物處理時，在老鼠中之HCT－116(K－Ras G13D)結直腸癌腫瘤之腫瘤體積上之平均降低的圖；圖10B是PAGE玻片，顯示在按照在實例86中所述，在利用實例1化合物的第3次處理之後4小時，在老鼠之HCT－116腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游信號的抑制；圖10C是PAGE玻片，顯示在按照在實例86中所述，在利用實例1化合物的第3次處理之後8小時，在老鼠之HCT－116腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游信號的抑制；圖10D是PAGE玻片，顯示在按照在實例86中所述，在利用實例1化合物的第3次處理之後24小時，在老鼠之HCT－116腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游信號的抑制；圖11為顯示當按照在實例86中所述，以實例1之化合物處理時，在老鼠中之HT－29(B－Raf V600E)結直腸癌腫瘤之腫瘤體積上之平均降低的圖；圖12A為顯示當按照在實例86中所述，以實例1之化合物處理時，在老鼠中之MV4－11(FLT3 ITD)急性單核細胞性白血病腫瘤的腫瘤生長之平均抑制的圖；圖12B是PAGE玻片，顯示在按照在實例86中所述，在利用實例1化合物的第3次處理之後4小時，在老鼠之MV4－11腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游信號；圖13是顯示當按照在實例88中所述，在以10毫克/公斤、30毫克/公斤和100毫克/公斤的實例1之化合物處理之後’在CHO－VEGF基底膠模式中，抑制VEGF－調節之血管生成的圖；圖14A是顯示當按照在實例89中所述，以100毫克/公斤的實例1之化合物，按每2天一次、每3天一次或每4天一次之劑量攝生法處理時，在老鼠中之A375M黑色素瘤腫瘤之腫瘤體積上之平均降低的圖；圖14B是PAGE玻片，顯示在按照在實例89中所述，在利用實例1化合物，按每2天一次之劑量攝生法的第5次處理之後8小時、24小時和48小時，在老鼠之A375M腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游信號的抑制；圖14C是PAGE玻片，顯示在按照在實例89中所述，在利用實例1化合物，按每4天一次之劑量攝生法的第3次處理之後48小時、72小時和96小時，在老鼠之A375M腫瘤細胞中來自Raf激酶之下游信號的抑制；及圖15為顯示當按照在實例90中所述，在以各種濃度的實例1之化合物處理A375M腫瘤細胞時，隨著時間經過的化合物之血清濃度和標靶調節之閾濃度之間關係的圖。

Claims (39)

1. 一種式(I)化合物： 其中，R¹ 分別選自羥基、鹵素、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、(C_1-6 烷基)硫基、(C_1-6 烷基)磺醯基、環烷基、雜環烷基、苯基和雜芳基；R² 為C_1-6 烷基或鹵(C_1-6 烷基)；R³ 分別選自鹵素、C_1-6 烷基和C_1-6 烷氧基；R⁴ 分別選自羥基、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、鹵素、羧基、(C_1-6 烷氧基)羰基、胺羰基、C_1-6 烷胺基羰基、腈、環烷基、雜環烷基、雜環烷羰基、苯基和雜芳基；其中R¹ 、R² 、R³ 和R⁴ 可視需要分別以一或多個選自羥基、鹵素、C_1-6 烷基、鹵(C_1-6 烷基)、C_1-6 烷氧基和鹵(C_1-6 烷氧基)的取代基取代；a為1、2、3、4或5；b為0、1、2或3；c為1或2；環烷基為具有3至8個碳環原子的單-或多環的烷基取代基；雜芳基為具有5至14個環原子的芳香族基團，其中1至 4個環原子為雜原子；雜環烷基為在環結構中具有1至5個雜原子的環烷基；且雜原子為選自氮、氧及硫；或其互變異構物或立體異構物，或該化合物、互變異構物或立體異構物之在藥學上可接受的鹽。
2. 如請求項1之化合物，其中R¹ 分別選自羥基、氯、氟、溴、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、六氫吡啶基、C_1-6 烷基六氫吡啶基、六氫吡基、C_1-6 烷基六氫吡基、四氫呋喃基、吡啶基和嘧啶基所組成之群。
3. 如請求項1之化合物，其中a為1或2，且至少一個R¹ 為鹵(C_1-6 烷基)。
4. 如請求項3之化合物，其中至少一個R¹ 為三氟甲基。
5. 如請求項1之化合物，其中R² 為C_1-6 烷基。
6. 如請求項1之化合物，其中R² 為甲基或乙基。
7. 如請求項4之化合物，其中R² 為甲基。
8. 如請求項1之化合物，其中b為0，且R³ 不存在。
9. 如請求項1之化合物，其中b為1，且R³ 為C_1-6 烷氧基。
10. 如請求項9之化合物，其中R³ 為甲氧基。
11. 如請求項1之化合物，其中c為1或2，且至少一個R⁴ 為鹵(C_1-6 烷基)。
12. 如請求項11之化合物，其中至少一個R⁴ 為三氟甲基。
13. 如請求項1之化合物，其具有式(II)： 其中R¹ 分別選自C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、羥基、鹵素、(C_1-6 烷基)硫基、(C_1-6 烷基)磺醯基、環烷基、雜環烷基、苯基和雜芳基；R³ 分別選自鹵素、C_1-6 烷基和C_1-6 烷氧基；R⁴ 分別選自羥基、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、鹵素、羧基、(C_1-6 烷氧基)羰基、胺羰基、腈、環烷基、雜環烷基、雜環烷羰基、苯基和雜芳基；其中R¹ 、R³ 和R⁴ 可視需要分別以一或多個選自羥基、鹵素、C_1-6 烷基和C_1-6 烷氧基的取代基取代；a為1、2、3、4或5；b為0、1、2或3；且c為1或2；或其互變異構物或立體異構物，或該化合物、互變異構物或立體異構物之在藥學上可接受的鹽。
14. 一種式(III)之化合物： 其中，R¹ 分別選自C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、羥基、鹵素、(C_1-6 烷基)硫基、(C_1-6 烷基)磺醯基、環烷基、雜環烷基、苯基和雜芳基；R⁴ 分別選自羥基、C_1-6 烷基、C_1-6 烷氧基、鹵素、羧基、(C_1-6 烷氧基)羰基、胺羰基、腈、環烷基、雜環烷基、雜環烷羰基、苯基和雜芳基；其中R¹ 和R⁴ 可視需要分別以一或多個選自羥基、鹵素、C_1-6 烷基和C_1-6 烷氧基的取代基取代；a為1、2、3、4或5；且c為1或2；環烷基為具有3至8個碳環原子的單-或多環的烷基取代基；雜芳基為具有5至14個環原子的芳香族基團，其中1至4個環原子為雜原子；雜環烷基為在環結構中具有1至5個雜原子的環烷基；且雜原子為選自氮、氧及硫；或其互變異構物或立體異構物，或該化合物、互變異構物或立體異構物之在藥學上可接受的鹽。
15. 如請求項14之化合物，其中R¹ 分別選自羥基、氯、氟、溴、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、六氫吡啶基、C_1-6 烷基六氫吡啶基、六氫吡基、C_1-6 烷基六氫吡基、四氫呋喃基、吡啶基和嘧啶 基所組成之群。
16. 如請求項15之化合物，其中a為1或2，且至少一個R¹ 為鹵(C_1-6 烷基)。
17. 如請求項16之化合物，其中至少一個R¹ 為三氟甲基。
18. 如請求項14之化合物，其中a為1。
19. 如請求項18之化合物，其中R¹ 為三氟甲基。
20. 如請求項14之化合物，其中c為1或2，且至少一個R⁴ 為鹵(C_1-6 烷基)。
21. 如請求項20之化合物，其中至少一個R⁴ 為三氟甲基。
22. 如請求項21之化合物，其中c為1。
23. 一種化合物，選自下列所組成之群：(1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(4-三氟甲苯基)-胺，(2-氟-5-吡啶-3-基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(2-氟-5-吡啶-4-基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(4-第三-丁基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基)-1H-咪唑-2-基]-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(3-三氟甲基-苯基)-胺，(3-乙基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(4-氯-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)- 吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(4-乙基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(4-三氟甲氧基-苯基)-胺，(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-(1-甲基-5-{2-[5-甲基-4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡啶-4-基氧基}-1H-苯并咪唑-2-基)-胺，(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-(1-甲基-5-{2-[5-甲基-4-(4-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-吡啶-4-基氧基}-1H-苯并咪唑-2-基)-胺，2-{4-[2-(2-氟-5-三氟甲基-苯胺基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基氧基]-吡啶-2-基}-5-三氟甲基-1H-咪唑-4-羧酸乙酯，(2-{4-[2-(2-氟-5-三氟甲基-苯胺基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基氧基]-吡啶-2-基}-5-三氟甲基-1H-咪唑-4-基)-甲醇，2-{4-[1-甲基-2-(4-三氟甲基-苯胺基)-1H-苯并咪唑-5-基氧基]-吡啶-2-基}-3H-咪唑-4-腈，(3-第三-丁基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-苯基-1H-咪唑-2- 基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，{1-甲基-5-[2-(5-苯基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(4-三氟甲硫基-苯基)-胺，(3-第三-丁基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，[4-氟-3-(四氫-呋喃-3-基)-苯基]-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(4-溴-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(4-氟-3-異丙基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(4-三氟甲硫基-苯基)-胺，(2-氟-5-異丙基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(5-第三-丁基-2-氟-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(2-氟-5-吡啶-3-基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺， 2-{4-[2-(2-氟-5-三氟甲基-苯胺基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基氧基]-吡啶-2-基}-3H-咪唑-4-腈，(2-氯-4-三氟甲基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(5-第三-丁基-2-氯-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(2-氟-5-吡啶-4-基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(4-苯基-5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(4-苯基-5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，{1-甲基-5-[2-(4-苯基-5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(3-三氟甲基-苯基)-胺，(3-乙基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(4-苯基-5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(4-第三-丁基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(4-苯基-5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺， (2-氯-5-三氟甲基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(4-第三-丁基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，{1-甲基-5-[2-(5-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(3-三氟甲基-苯基)-胺，(5-第三-丁基-2-氟-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，[4-(4-甲基-六氫吡-1-基)-苯基]-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，2-{4-[2-(2-氟-5-三氟甲基-苯胺基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基氧基]-吡啶-2-基}-3H-咪唑-4-羧酸甲酯，2-{4-[2-(2-氯-5-三氟甲基-苯胺基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基氧基]-吡啶-2-基}-5-三氟甲基-1H-咪唑-4-羧酸甲酯，(2-氟-4-三氟甲基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(2-氯-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(2,5-二甲氧基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(3,5-二甲氧基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪 唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(2-三氟甲基-苯基)-胺，(2-乙基-苯基)-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，(4-乙基-六氫吡-1-基)-(2-{4-[2-(2-氟-5-三氟甲基-苯胺基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基氧基]-吡啶-2-基}-3H-咪唑-4-基)-甲酮，2-{4-[2-(2-氟-5-三氟甲基-苯胺基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-基氧基]-吡啶-2-基}-3H-咪唑-4-羧酸(2-羥基-乙基)-醯胺，{1-乙基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-胺，(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-{6-甲氧基-1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-胺，{6-甲氧基-1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-胺，(4-乙基-六氫吡-1-基)-(2-{4-[1-甲基-2-(4-三氟甲基-苯胺基)-1H-苯并咪唑-5-基氧基]-吡啶-2-基}-3H-咪唑-4-基}-甲酮，{1-乙基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-胺， 2-{4-[1-甲基-2-(4-三氟甲基-苯胺基)-1H-苯并咪唑-5-基氧基]-吡啶-2-基}-3H-咪唑-4-羧酸(2-羥基-乙基)-醯胺，2-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基胺基}-5-三氟甲基-酚，以及3-{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基胺基}-6-三氟甲基-酚；或其互變異構物或立體異構物，或該化合物、互變異構物或立體異構物之在藥學上可接受的鹽。
24. 如請求項23之化合物，或其在藥學上可接受的鹽，其中該化合物具有下式： 或該化合物之互變異構物，或具有下式之互變異構物在藥學上可接受的鹽：
25. 一種組合物，包括如請求項1或24中任一項之化合物、互變異構物、在藥學上可接受的鹽，或其互變異構物在藥學上可接受的鹽，連同在藥學上可接受的載劑。
26. 一種如請求項1或24中任一項之化合物、互變異構物、 在藥學上可接受的鹽，或其互變異構物在藥學上可接受的鹽之用途，其係用於製備在人類或動物個體中治療癌症病症的藥物。
27. 如請求項26之用途，其中該化合物、互變異構物、在藥學上可接受的鹽，或其互變異構物在藥學上可接受的鹽抑制Raf激酶或突變的B-Raf激酶。
28. 如請求項26之用途，其中該藥物與至少一種額外的治療癌症之製劑併用。
29. 如請求項28之用途，其中該至少一種額外的治療癌症之製劑係選自伊立替康(irinotecan)、拓撲太肯(topotecan)、吉西他濱(gemcitabine)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)、甲醯四氫葉酸(leucovorin)、卡鉑(carboplatin)、順氯氨鉑(cisplatin)、紫杉烷(taxanes)、特查他濱(tezacitabine)、環磷醯胺(cyclophosphamide)、長春花生物鹼(vinca alkaloids)、伊馬替尼(imatinib)、氨茴環黴素(anthracyclines)、利妥昔單抗(rituximab)和曲妥珠單抗(trastuzumab)所組成之群。
30. 如請求項26之用途，其中該癌症是黑色素瘤。
31. 如請求項26之用途，其中該癌症是乳癌或前列腺癌。
32. 一種如請求項1或24中任一項之化合物、互變異構物、在藥學上可接受的鹽，或其互變異構物在藥學上可接受的鹽之用途，其係用於製備在個體中抑制在MAPK發送信號路徑中之至少一種絲胺酸/蘇胺酸激酶，或在個體中治療由在MAPK發送信號路徑中之絲胺酸/蘇胺酸激酶調 節之生物狀況的藥物。
33. 如請求項32之用途，其中該化合物、互變異構物、在藥學上可接受的鹽，或其互變異構物在藥學上可接受的鹽抑制Raf激酶。
34. 如請求項32之用途，其中該化合物、互變異構物、在藥學上可接受的鹽，或其互變異構物在藥學上可接受的鹽抑制突變的B-Raf激酶。
35. 如請求項32之用途，其中該生物狀況係選自黑色素瘤、乳頭狀甲狀腺癌、卵巢癌、結腸癌、胰臟癌、肺癌和白血病所組成之群。
36. 如請求項32之用途，其中該化合物為{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(4-三氟甲苯基)-胺或在藥學上可接受的鹽、互變異構物，或其互變異構物在藥學上可接受的鹽。
37. 一種如請求項1或24中任一項之化合物、互變異構物、在藥學上可接受的鹽，或其互變異構物在藥學上可接受的鹽之用途，其係用於製備在個體中抑制受體酪胺酸激酶或在個體中治療由受體酪胺酸激酶調節之生物狀況的藥物，其中該受體酪胺酸激酶係選自VEGFR-2、FGFR-3、c-Kit、PDGFR-β和CSF-1R所組成之群。
38. 如請求項37之用途，其中該生物狀況係選自肥大細胞白血病、紅血球性白血病、生殖細胞腫瘤、小細胞肺癌、胃腸道基質腫瘤、急性骨髓性白血病、神經胚細胞瘤、黑色素瘤、多發性骨髓瘤、卵巢癌和乳癌所組成之群。
39. 如請求項37之用途，其中該化合物為{1-甲基-5-[2-(5-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-4-基氧基]-1H-苯并咪唑-2-基}-(4-三氟甲苯基)-胺或在藥學上可接受的鹽、互變異構物，或其互變異構物在藥學上可接受的鹽。