ES2891983T3 - Composiciones de insulina de acción rápida - Google Patents

Abstract

Una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizantes y, opcionalmente, un agente tamponador.

Description

DESCRIPCIÓN

Composiciones de insulina de acción rápida

La presente invención es una composición farmacéutica de insulina para su uso en el tratamiento de la diabetes para contrarrestar las oscilaciones de glucosa en sangre postprandiales y para el tratamiento agudo de la hiperglucemia. La composición incluye insulina humana o un análogo de insulina y treprostinil. La composición tiene una absorción más rápida de insulina de los sitios de inyección que las composiciones de insulina comerciales existentes, y es lo suficientemente estable para el almacenamiento a largo plazo. La composición es útil para proporcionar actividad de insulina en las comidas o un tratamiento agudo para la hiperglucemia cuando se necesita insulina.

El perfil de acción temporal de la insulina es importante para controlar los niveles de glucosa en sangre posprandiales. En individuos sanos, el páncreas segrega un pico de insulina en respuesta a los alimentos absorbidos, lo que resulta en un aumento de los niveles de insulina en la sangre por varios minutos. En individuos con diabetes tipo 1 y en ciertos individuos con diabetes tipo 2, se debe administrar insulina. Sin embargo, la insulina administrada entra en la sangre lentamente. La aparición demasiado lenta y la liberación inadecuada de insulina al comienzo de una comida conducen a la hiperglucemia después de la comida. La duración demasiado prolongada de la acción y el exceso de insulina entre las comidas provoca hipoglucemia posprandial y puede contribuir al aumento de peso.

Se han realizado esfuerzos previos para reducir el tiempo de acción de los productos de insulina. Los primeros esfuerzos para desarrollar tales productos incluyeron el desarrollo de nuevos análogos de insulina de "acción rápida", como la insulina lispro (HUMALOG® y la insulina aspart (NOVOLOG®), que logran una acción rápida a través de cambios en las secuencias de aminoácidos de las secuencias de las cadenas de aminoácidos en la insulina humana. Otro análogo, la insulina glulisina (APIDRA®), carece de zinc y no forma hexámeros estabilizadores. Por lo tanto, APIDRA® requiere un agente estabilizador adicional, el polisorbato 20. Los análogos de insulina de acción rápida estuvieron disponibles en la década de 1990 y principios de la década de 2000. Incluso con los llamados análogos de insulina de acción rápida, el nivel máximo de insulina no se alcanza hasta 50-90 minutos después de la inyección. Esto es más lento de lo que la insulina es liberada por un páncreas que funciona normalmente y no siempre coincide con los perfiles de absorción de carbohidratos.

Otra vía para lograr una acción rápida que se ha explorado es buscar ingredientes que mejoren el perfil de acción temporal de la insulina cuando se administra en combinación con la insulina. Por ejemplo, en la década de 1980 se afirmó que la prostaglandina E1 acelera la absorción de insulina cuando se administra en combinación con insulina. Williams, et al., 1 Diabetic Med. 109-13 (1984). La prostaglandina E1, sin embargo, es químicamente inestable, mínimamente soluble en agua y catabolizada rápidamente, que no son rasgos deseables para su uso en composiciones de insulina. Otro agente que se dice que acelera la absorción de insulina es el inhibidor de la proteasa aprotinina, pero la aprotinina no es adecuada para una administración repetida debido a su potencial para inducir reacciones inmunológicas. D.R. Owens, et al., 25 BR. J. CLIN. FARMAC. 453-456 (1988). Más recientemente, se ha declarado que un inicio de acción más rápido en comparación con las terapias de insulina existentes se puede lograr agregando un compuesto nicotínico, como la nicotinamida, el aminoácido arginina y, opcionalmente, el ácido glutámico. Véase la Patente de los Estados Unidos No. 8,324,157.

Sin embargo, sigue existiendo la necesidad de composiciones de insulina, destinadas al uso en el momento de la comida, que: tengan una absorción más rápida de la insulina desde el lugar de la inyección y más inicios rápidos de acción que los productos de insulina existentes; son estables química y físicamente durante el almacenamiento prolongado para minimizar los riesgos de seguridad y para asegurar la precisión y eficacia de la dosis; no dé lugar a niveles inaceptables de dolor en el lugar de la inyección; y/o requiere un número mínimo de ingredientes y/o excipientes para lograr mejoras en la acción del tiempo y mantener la estabilidad suficiente.

La presente invención pretende proporcionar formulaciones que satisfagan estas necesidades. En particular, la presente invención proporciona formulaciones de insulina y treprostinil que tienen una captación más rápida de insulina en la sangre. La presente invención también proporciona un inicio de acción y/o absorción más rápido que los productos de insulina comerciales existentes. Además, las formulaciones de la presente invención son suficientemente estables. Además, la administración de las formulaciones de la presente invención no da como resultado un dolor inaceptable en el lugar de la inyección. Las formulaciones de la presente invención logran estos efectos al usar un número mínimo de componentes adicionales.

De acuerdo con un primer aspecto de la presente invención, se proporciona una composición que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizantes y, opcionalmente, un agente tamponador.

En una realización, la insulina se selecciona del grupo que consiste en insulina humana o una variante, mutante o análogo estructural de acción rápida de la insulina humana, como la insulina lispro, la insulina aspart y la insulina glulisina. En una realización preferida, la insulina es insulina lispro. En una realización, la concentración de insulina lispro es de aproximadamente 40 a aproximadamente 500 UI/ml. Preferiblemente, la concentración de insulina lispro es 100 UI/ml o 200 UI/ml.

La cantidad de treprostinil en la composición debe ser suficiente para dar como resultado un inicio de acción y/o absorción que sea más rápido que el de la formulación de insulina sin treprostinil. La concentración de treprostinil utilizada en las composiciones de la presente invención varía de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 30 j M, en particular de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 26 j M, de aproximadamente 0,05 a 0,3 j M, de aproximadamente 0,1 a 0,5 j M, de aproximadamente 0,3 a 1,5 j M, de aproximadamente 0,5 a 5,1 j M, aproximadamente 1,5 a 5,9 j M, aproximadamente 5,1 a 12,8 j M, aproximadamente 5,9 a 20 j M, aproximadamente 12,8 a 24 j M, aproximadamente 20 a 26 j M, o aproximadamente 26 a 30 j M, particularmente a aproximadamente 0,05, 0,1, 0,3, 0,5, 1,5, 5,1, 5,9, 12,8, 20, 24 o 26 j M. La insulina y el treprostinil están presentes en una combinación de dosis fija.

En una realización de la presente invención, la composición comprende uno o más conservantes. En una realización preferida, el uno o más conservantes se seleccionan del grupo que consiste en fenol, metacresol y alcohol bencílico. Preferiblemente, el conservante es metacresol. En una realización, la concentración de metacresol es de aproximadamente 2,5 mg/ml a aproximadamente 3,8 mg/ml. Preferiblemente, la concentración de metacresol es de aproximadamente 3,15 mg/ml.

En una realización de la presente invención, la composición comprende un agente de tonicidad. En una realización, el agente de tonicidad se selecciona del grupo que consiste en glicerol y cloruro de sodio. En una realización preferida, el agente de tonicidad es glicerol. En otra realización preferida, la concentración de glicerol es de aproximadamente 5 a aproximadamente 20 mg/ml. Preferiblemente, la concentración de glicerol es de aproximadamente 16 mg/ml.

La composición comprende uno o más agentes estabilizadores. En una realización preferida, el uno o más agentes estabilizadores se seleccionan del grupo que consiste en zinc, cloruro de sodio, cloruro de calcio y arginina. Preferiblemente, el agente estabilizador es zinc. El óxido de zinc se puede proporcionar en las composiciones en una cantidad suficiente para proporcionar el número deseado de átomos de zinc. Las composiciones de ciertas realizaciones de la presente invención incluyen zinc en una proporción de aproximadamente 2-4 átomos de zinc por seis moléculas de insulina. Ciertas composiciones preferidas tendrán aproximadamente 2,5-3,5 átomos de zinc por seis moléculas de insulina. En ciertas realizaciones, la concentración de zinc es de aproximadamente 0,00525 mg/ml a aproximadamente 0,131 mg/ml. Preferiblemente, cuando la concentración de insulina es de aproximadamente 100 Ul/ml, la concentración de zinc es de aproximadamente 0,0197 mg/ml.

En una realización, la composición puede comprender además un agente tamponador. En ciertas realizaciones, el agente tamponador se selecciona del grupo que consiste en tamponadores de fosfato, tales como fosfato de sodio dibásico, TRIS (2-amino-2-hidroximetil-propano-1,3-diol; Trometamina) o acetato de sodio. En ciertas realizaciones preferidas, el agente tamponador es fosfato o TRIS.

En ciertas realizaciones de la invención, el pH de la composición es de aproximadamente 7,0 a aproximadamente 7,8. Preferiblemente, el pH es de aproximadamente 7,4.

En una realización, la composición comprende insulina lispro en una concentración de aproximadamente 40 a aproximadamente 500 Ul/ml, treprostinil en una concentración de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 30 j M, metacresol en una concentración de aproximadamente 2,5 a aproximadamente 3,8 mg/Ml, glicerol en una concentración de aproximadamente 5 a aproximadamente 20 mg/ml, zinc en una concentración de aproximadamente 0,00525 a aproximadamente 0,131 mg/ml, y el pH de la composición es de aproximadamente 7,0 a aproximadamente 7,8. En una realización preferida, la concentración de insulina es de aproximadamente 100 Ul/ml, la concentración de treprostinil es de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 26 j M, la concentración de zinc es de aproximadamente 0,0197 mg/ml, la concentración de metacresol es de aproximadamente 3,15 mg/ml, la concentración de glicerol es aproximadamente 16 mg/ml, y el pH de la composición es de aproximadamente 7,4.

En el presente documento se describe un procedimiento para tratar la diabetes que comprende administrar a un ser humano que lo necesite una dosis efectiva de cualquiera de las composiciones mencionadas anteriormente.

De acuerdo con un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona cualquiera de las composiciones mencionadas anteriormente para su uso como un medicamento. En una realización, el uso de la composición es para su uso en el tratamiento de la diabetes. También se describe el uso de cualquiera de las composiciones mencionadas anteriormente para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la diabetes.

De acuerdo con un tercer aspecto de la presente invención, se proporciona un artículo de fabricación que comprende cualquiera de las composiciones mencionadas anteriormente. En una realización, el artículo de fabricación es un vial de usos múltiples. En otra realización, el artículo de fabricación es un inyector de pluma reutilizable. En otra realización, el artículo de fabricación es un dispositivo de bombeo para terapia de infusión subcutánea continua de insulina.

En el presente documento se describe la insulina para su uso en combinación con treprostinil. En el presente documento se describe adicionalmente treprostinil para su uso en combinación con insulina.

El inicio de la acción y/o el perfil de absorción de un producto de insulina se puede medir de varias maneras. Por ejemplo, las concentraciones séricas de insulina pueden medirse para calcular los parámetros farmacocinéticos relevantes para la acción del tiempo, como el tiempo hasta la concentración máxima de insulina (Tmáx), la concentración máxima de insulina (Cmáx) y el tiempo para alcanzar la exposición total a la insulina, que se mide como el área total bajo la curva de concentración de insulina desde 0 hasta el infinito (AUCinf). De manera similar, la tasa de infusión de glucosa (GIR) requerida para mantener las concentraciones séricas de glucosa después de la administración de insulina proporciona una medida directa de la acción farmacodinámica de la insulina. La presente invención proporciona una captación más rápida de insulina en la sangre y/o un inicio de acción más rápido que los productos de insulina comerciales existentes, tal como se refleja, por ejemplo, en Tmáx más corto, tiempo más corto para alcanzar el 50 % de la Cmáx (principios del 50 % Tmáx), tiempo más corto para que se limpie el 50% de la Cmáx (Tmáx tardío del 50 %), tiempo más corto para alcanzar el 10 %, 20 % o 50 % del AUCinf, tiempo más corto para el GIR máximo o 50 % del GIR máximo, y/u otros parámetros farmacocinéticos y/o farmacodinámicos que reflejen una absorción o acción más rápida de la insulina.

Cuando se usa en el presente documento, el término "composición" se refiere a una combinación de dosis fija de insulina y treprostinil, en la que la insulina, treprostinil y cualquier otro ingrediente o excipiente, se combinan en una única formulación combinada.

Cuando se usa en el presente documento, "insulina" significa insulina humana o una variante, mutante o análogo estructural de acción rápida de la insulina humana que tiene la actividad funcional de un inicio de acción más rápido que la insulina humana. Los análogos particulares de acción rápida de la insulina humana son la insulina lispro, la insulina aspart y la insulina glulisina. La insulina para productos comerciales puede producirse utilizando procedimientos de ADN recombinante o por síntesis química. Los procedimientos recombinantes son bien conocidos y son muy preferidos. Una molécula de insulina humana (número CAS 11061-68-0) consta de dos cadenas de aminoácidos, A y B, cuyas secuencias son bien conocidas.

La cadena A de insulina humana tiene la siguiente secuencia de aminoácidos:

Gly Ilc Val Glu Gln Cys Cys Thr Ser lie Cys Ser Leu Tyr Gln Leu Glu Asn Tyr Cys Asn

(SEQ ID NO: 1).

La cadena B de insulina humana tiene la siguiente secuencia de aminoácidos:

Phc Val Asn Gln His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly

Glu Arg Gly Phc Phe Tyr Thr Pro Lys Thr (SEQ ID NO: 2).

Las cadenas están unidas por dos enlaces disulfuro: CysA7-CysB7 y CysA20-CysB19. La cadena A tiene un enlace disulfuro intracatenario en CysA6-CysA11. La insulina humana tiene la fórmula empírica C257H383N65O77S6 y un peso molecular de 5808.

La insulina lispro (a veces denominada KPB), la sustancia farmacéutica en HUMALOG®, es idéntica a la insulina humana en términos de su secuencia de aminoácidos primaria, excepto por una inversión de la secuencia natural de prolina-lisina en la cadena B en posiciones 28 y 29 (28B-L-Lisina-29B-L-prolina insulina humana). La insulina lispro (número CAS 133107-64-9) ha demostrado ser equipotente a la insulina humana en base molar, pero su efecto después de la inyección subcutánea es más rápido y de menor duración que el de la insulina humana soluble inyectada. HUMALOG® contiene m-cresol como conservante y agente estabilizador, modificador de la tonicidad (glicerina), agente tamponador (fosfato de sodio dibásico), estabilizador (óxido de zinc) y ajuste de pH para el vehículo.

Una molécula de insulina lispro consiste en la cadena humana de insulina A (SEQ ID NO: 1) entrecruzada con la cadena B de insulina lispro, cuya secuencia de aminoácidos está dada por la SEQ ID NO: 3, a continuacón:

Phe Val Asn Gln His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly

Glu Arg Gly Phc Phc Tyr Thr Lys Pro Thr (SEQ ID NO: 3).

La fórmula química de la insulina lispro es C257H383N65O77S6 y su peso molecular es de aproximadamente 5808. Una unidad de insulina lispro es equivalente a 0,0347 mg de insulina lispro.

La insulina aspart (número de CAS 116094-23-6), la sustancia farmacológica de NOVOLOG®, es otro análogo de la insulina de inicio rápido. Su estructura consiste en la cadena A de insulina humana (SEQ ID NO: 1) y una cadena B en la que el Pro en B28 se reemplaza por Asp (Pro-B28-Asp insulina humana), como se refleja en el siguiente aminoácido secuencia:

Phc Val Asn Gln His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly

Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Asp Lys Thr (SEQ ID NO: 4).

La insulina aspart (28B ácido aspártico-insulina humana) tiene la fórmula empírica C256H381N65O79S6 y un peso molecular de aproximadamente 5826. Una unidad de insulina aspart corresponde a 6 nmol, correspondiente a 0035 mg de aspart insulina anhidra sin sal.

La insulina glulisina (número de CAS 207748-29-6), la sustancia farmacológica en APIDRA®, es otro análogo de la insulina de inicio rápido. Una molécula de insulina glulisina consiste en una cadena A de insulina humana (SEQ ID NO:1) y una cadena B modificada (Asn-B3-Lys, Lys-B29-Glu) en comparación con la insulina humana, como se refleja en la siguiente secuencia de aminoácido:

La insulina glulisina (3B-lisina-29B-ácido glutámico-insulina humana) tiene la fórmula empírica C258H384N64O78S6 y un peso molecular de 5823. Una unidad de insulina glulisina corresponde aproximadamente a 0,0349 mg de insulina glulisina.

El siguiente esquema representa las secuencias de aminoácidos y los enlaces disulfuro de la insulina humana y de las sustancias farmacológicas en los productos de insulina de acción rápida que están actualmente aprobados para su uso en el tratamiento de oscilaciones de glucosa en la sangre durante las comidas:

Cadena A de insulina humana

^{Gly lie Val Glu Gln Cys} c|s ^{Thr Ser lie Cys Ser Leu Tyr Gln Leu Glu Asn}

^{Phe Val Asn Gln His Leu} cjs ^{Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr}

Lys (glulisina)

Leu Val Cvs Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Lys Thr

Glu (glulisina)

-------------- 1 Asp (aspart)

Lys Pro (lispro)

Las composiciones de la presente invención tienen concentraciones de insulina entre 0,24 y 3 mM (40 - 500 UI/ml; 1,4 mg/ml -17,5 mg/ml). Es probable que las composiciones de la presente invención tengan concentraciones específicas de 40, 100, 200, 300, 400 y 500 UI/ml (1,4, 3,5, 7, 10,5, 14 y 17,5 mg/ml). Las composiciones preferidas tienen concentraciones de 100 UI/ml o 200 UI/ml.

Las mejoras en el perfil de acción en el tiempo de los análogos de insulina citados anteriormente demostrados en la presente invención se logran mediante el uso de pequeñas cantidades de treprostinil, el análogo de la prostaciclina (número CAS 81846-19-7). El nombre químico de treprostinil es ácido (1R, 2R, 3aS, 9aS)-[[2,3,3a,4,9,9a-hexahidro-2-hidroxi-1-[(3S)-3-hidroxioctil]-1H-benz[f]inden-5-il]oxi]acético. Tiene un peso molecular de 390,52 y una fórmula molecular de C23H34O5. Treprostinil es el ingrediente activo en los medicamentos comerciales vendidos con los nombres comerciales Remodulin®, Tyvaso® y Orenitran™, que están indicados para el tratamiento de la hipertensión arterial pulmonar para disminuir los síntomas asociados con el ejercicio (Remodulin®) y para mejorar la capacidad del ejercicio (Tyvaso® y Orenitran™). Tyvaso® y Orenitran™ son, respectivamente, formas de dosificación por inhalación y por vía oral, y Remodulin® está indicado para su uso subcutáneo o intravenoso como infusión continua. Remodulin® está actualmente disponible en dosis de 1, 2,5, 5 y 10 mg/ml, y cada ml también contiene 3 mg de metacresol, 6,3 mg de citrato de sodio, ya sea 5,3 mg (concentraciones de 1, 2,5 y 5 mg/ml) o 4,0 mg (10 mg/ml de concentración de fuerza) cloruro de sodio y agua para inyección.

La vía de administración para las composiciones de la presente invención será típicamente mediante inyección subcutánea autoadministrada, por ejemplo, mediante el uso de una jeringa o un dispositivo de pluma, o mediante terapia de infusión continua de insulina subcutánea con un dispositivo de bomba de insulina, aunque también se pueden utilizar rutas intravenosa, intradérmica o intraperitoneal. Preferiblemente, la vía de administración es mediante inyección subcutánea autoadministrada. La dosis de agente activo inyectado será determinada por el paciente en consulta con el médico del paciente.

Las composiciones son estériles cuando se producen por primera vez. Cuando la composición se proporciona en un vial o cartucho de uso múltiple, un compuesto conservante antimicrobiano o una mezcla de compuestos que es compatible con los otros componentes de la formulación se agrega típicamente con la fuerza suficiente para cumplir con los requisitos regulatorios y farmacopéicos del conservante antimicrobiano. Véase U.S. Pharmacopeia Monographs. Insulin lispro injection. USP29-NF24; British Pharmacopeia Monographs 2008 Volume III: Insulin aspart injection; U.S. Pharmacopeia Monographs. Insulin assays; y U.S. Pharmacopeia general chapters. USP29-NF24. Rockville, MD: U.S. Pharmacopeial Convention; 2005. Antimicrobial effectiveness testing; pp. 2499-2500. Los conservantes preferidos son ácidos arílicos y compuestos fenólicos, o mezclas de tales compuestos. Las concentraciones efectivas se pueden determinar fácilmente usando los procedimientos mencionados anteriormente. Los conservantes más utilizados en productos de insulina son fenol, m-cresol y alcohol bencílico. Las presentes composiciones comerciales, por ejemplo, contienen 3,15 mg/ml de m-cresol (HUMALOG® y APIDRA®), 1,72 mg/ml de m-cresol y 1,50 mg/ml de fenol (NOv OlOG®) y 2,5 mg/ml de m-cresol (HUMULIN® R U-500).

Es deseable igualar aproximadamente la tonicidad (es decir, la osmolalidad) de los fluidos corporales en el lugar de la inyección lo más cerca posible cuando se administran las composiciones porque las soluciones que no son aproximadamente isotónicas con los fluidos corporales pueden producir una sensación de escozor dolorosa cuando se administran. Por lo tanto, es deseable que las composiciones sean aproximadamente isotónicas con fluidos corporales en los sitios de inyección. Si la osmolalidad de una composición en ausencia de un agente de tonicidad es suficientemente menor que la osmolalidad del tejido (para la sangre, aproximadamente 300 mOsmol/kg; el requisito de la osmolalidad de la Farmacopea Europea es >240 mOsmol/kg), por lo cual en general, se debe agregar un agente de tonicidad para aumentar la tonicidad de la composición a aproximadamente 300 mOsmol/kg. Los agentes de tonicidad típicos son glicerol (glicerina) y cloruro de sodio. La cantidad de agente de tonicidad que hay que agregar se determina fácilmente usando técnicas estándar. Remington: The Science and Practice of Pharmacy, David B. Troy and Paul Beringer, eds., Lippincott Williams & Wilkins, 2006, pp. 257-259; Remington: Essentials of Pharmaceutics, Linda Ed Felton, Pharmaceutical Press, 2013, pp. 277-300.

Si es necesario, la composición puede comprender además uno o más agentes estabilizadores, tales como zinc, cloruro de sodio, cloruro de calcio y arginina. El zinc es un agente estabilizador comúnmente usado, y se puede agregar óxido de zinc para proporcionar el número deseado de átomos de zinc. Algunas composiciones comerciales de insulina tienen aproximadamente 2,4 átomos de zinc por seis moléculas de insulina (HUMULIN® R U-500), y algunas tienen aproximadamente 3,0 átomos de zinc por seis moléculas de insulina (HUMALOG®, NOVOLOG®).

Si es necesario, se puede incluir un compuesto tamponador. Ejemplos de tales compuestos tamponadores son los tamponadores de fosfato, tales como fosfato de sodio dibásico, TRIS o acetato de sodio. Se prefieren los tamponadores de fosfato o TRIS.

El pH para las formulaciones de insulina comerciales está generalmente en el intervalo de 7,2 a 7,6, con 7,4 ± 0,1 como un pH objetivo común. El pH de la presente invención es típicamente de 7,0 a 7,8 y se ajusta usando ácidos y bases fisiológicamente apropiados, típicamente ácido clorhídrico al 10 % e hidróxido de sodio al 10 %. Preferiblemente, el pH es de aproximadamente 7,4.

En una realización, los inicios de los perfiles de acción y/o absorción de las composiciones de la presente invención son al menos aproximadamente un 20 % más rápidos que las composiciones que contienen la misma insulina pero que no contienen treprostinil, como se mide, por ejemplo, por: parámetros farmacocinéticos, incluidos, entre otros, Tmáx, Tmáx temprano al 50 %, Tmáx al final del 50 %, Cmáx y/o tiempo para alcanzar el 10 %, 20 % o 50 % del AUCinf total; y/o parámetros farmacodinámicos, como el tiempo para alcanzar el GIR máximo o el tiempo para alcanzar el 50 % del GIR máximo. En otra realización, los perfiles de acción y/o absorción de las composiciones de la presente invención son al menos aproximadamente un 25 % más rápidos que las composiciones que contienen la misma insulina pero que no contienen treprostinil, según se mide, por ejemplo, por farmacocinética y/o parámetros farmacodinámicos, incluidos los mencionados anteriormente. En otra realización, los perfiles de acción y/o absorción de las composiciones de la presente invención son al menos aproximadamente un 30 % más rápidos que las composiciones que contienen la misma insulina pero que no contienen treprostinil, según se mide, por ejemplo, por farmacocinética y/o parámetros farmacodinámicos, incluidos los mencionados anteriormente.

La presente invención también contempla la siguiente lista no limitativa de realizaciones, que se describen adicionalmente en otra parte del presente documento:

Una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizadores y, opcionalmente, un agente tamponador.

Una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizadores, y opcionalmente, un agente tamponador, en el que la insulina se selecciona del grupo que consiste en insulina humana, insulina lispro, la insulina aspart y la insulina glulisina, el uno o más conservantes se seleccionan del grupo que consiste en fenol, metacresol y alcohol bencílico, el agente de tonicidad se selecciona del grupo que consiste en glicerol y cloruro de sodio, el uno o más agentes estabilizadores se selecciona del grupo que consiste en zinc, cloruro de sodio, cloruro de calcio y arginina y el agente tamponador se selecciona del grupo que consiste en fosfato, TRIS o acetato de sodio.

Una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizadores y, opcionalmente, un agente tamponador, en el que la insulina es insulina lispro, el conservante es metacresol, el agente de tonicidad es glicerol, el agente estabilizador es el zinc, y el agente tamponador es TRIS.

Una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizadores y, opcionalmente, un agente tamponador, en el que la insulina es insulina lispro, el conservante es metacresol, el agente de tonicidad es glicerol, el agente estabilizador es el zinc y el agente tamponador es fosfato.

Una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizadores y, opcionalmente, un agente tamponador, en el que la insulina es insulina lispro, el conservante es metacresol, el agente de tonicidad es el cloruro de sodio, el agente estabilizador es el zinc y el agente tamponador es TRIS.

Una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizadores y, opcionalmente, un agente tamponador, en el que la insulina es insulina lispro, el conservante es metacresol, el agente de tonicidad es gligerol, el agente estabilizador es zinc y el agente tamponador es fosfato.

Una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizadores y, opcionalmente, un agente tamponador, en el que la insulina es insulina lispro, el conservante es metacresol, el agente de tonicidad es el cloruro de sodio, el agente estabilizador es zinc y el agente tamponador es fosfato, y en la que la concentración de insulina lispro es de aproximadamente 40 a aproximadamente 500 UI/ml, la concentración de treprostinilo es de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 30 |jM, la concentración de zinc es de aproximadamente 0,00525 mg/ml a aproximadamente 0,131 mg/ml, la concentración de metacresol es de aproximadamente 2,5 mg/ml a aproximadamente 3,8 mg/ml, y la concentración de glicerol es de aproximadamente 5 a aproximadamente 20 mg/ml.

Una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizadores y, opcionalmente, un agente tamponador, en el que la insulina es insulina lispro, el conservante es metacresol, el agente de tonicidad es cloruro de sodio cloruro, el agente estabilizador es zinc y el agente tamponador es fosfato, y en la que la concentración de insulina lispro es de aproximadamente 100 UI/ml, la concentración de treprostinil es de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 26 jM , la concentración de zinc es de aproximadamente 0,0197 mg/ml, la concentración de metacresol es de aproximadamente 3,15 mg/ml y la concentración de glicerol es de aproximadamente 16 mg/ml.

Una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizantes y, opcionalmente, un agente tamponador, en la que la insulina es insulina lispro, el conservante es meta-cresol, el agente de tonicidad es sodio. cloruro, el agente estabilizador es zinc y el agente tamponador es TRIS, y en la que la concentración de insulina lispro es de aproximadamente 100 UI/ml, la concentración de treprostinil es de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 26 jM , la concentración de zinc es de aproximadamente 0,0197 mg/ml, la concentración de metacresol es de aproximadamente 3,15 mg/ml, y la concentración de glicerol es de aproximadamente 16 mg/ml, y en la que el pH de la composición es de aproximadamente 7,4.

Una composición farmacéutica que comprende cualquiera de las composiciones mencionadas anteriormente en la que el inicio de acción y/o el perfil de absorción de la composición es al menos aproximadamente un 20 % más rápido que las composiciones que contienen la misma insulina pero que no contienen treprostinil, según lo medido, para por ejemplo, Tmáx, 50 % Tmáx temprano, 50 % Tmáx tardío, Cmáx, tiempo para alcanzar el 10 %, 20 % o 50 % del AUCinf total, tiempo para alcanzar el GIR máximo y/o tiempo para alcanzar el 50 % del GIR máximo. Una composición farmacéutica que comprende cualquiera de las composiciones mencionadas anteriormente en la que el inicio de la acción y/o el perfil de absorción de la composición es al menos aproximadamente un 25 % más rápido que las composiciones que contienen la misma insulina pero que no contienen treprostinil, medido, por ejemplo, por Tmáx, 50 % Tmáx temprano, 50 % Tmáx tardío, Cmáx, tiempo para alcanzar el 10 %, 20 % o 50 % del AUCinf total, tiempo para alcanzar el GIR máximo y/o tiempo para alcanzar el 50 % del GIR máximo. Una composición farmacéutica que comprende cualquiera de las composiciones mencionadas anteriormente en la que el inicio de la acción y/o el perfil de absorción de la composición es al menos aproximadamente un 30 % más rápido que las composiciones que contienen la misma insulina pero que no contienen treprostinil, medido, por ejemplo, por Tmáx, 50 % Tmáx temprano, 50 % Tmáx tardío, Cmáx, tiempo para alcanzar el 10 %, 20 % o 50 % del AUCinf total, tiempo para alcanzar el GIR máximo y/o tiempo para alcanzar el 50 % del GIR máximo.

Una composición farmacéutica que comprende cualquiera de las composiciones mencionadas anteriormente en la que la composición se administra por inyección subcutánea.

También se divulgan: Un procedimiento para tratar la diabetes que comprende administrar a un ser humano que lo necesite una dosis efectiva de una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizadores y, opcionalmente, un agente tamponador, en el que la insulina es insulina lispro, el conservante es metacresol, el agente de tonicidad es el cloruro de glicerol sódico, el agente estabilizador es zinc y el agente tamponador es fosfato o TRIS, y en el que el inicio de acción y/o el perfil de absorción de la composición es al menos aproximadamente un 20 % más rápido que las composiciones que contienen la misma insulina pero que no contienen treprostinil, según lo medido, por ejemplo, por Tmáx, 50 % Tmáx temprano, 50 % Tmáx tardío, Cmáx, tiempo para alcanzar 10 %, 20 % o el 50 % del total de AUCinf, el tiempo para alcanzar el GIR máximo y/o el tiempo para alcanzar el 50 % del GIR máximo. Un procedimiento para tratar la diabetes que comprende administrar a un ser humano que lo necesite una dosis efectiva de una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizadores y, opcionalmente, un agente tamponador, en el que la insulina es insulina lispro, el conservante es metacresol, el agente de tonicidad es glicerol o cloruro de sodio, el agente estabilizador es zinc y el agente tamponador es fosfato o TRIS, y en el que el inicio de acción y/o el perfil de absorción de la composición es al menos aproximadamente un 25 % más rápida que las composiciones que contienen la misma insulina pero que no contienen treprostinil, según lo medido, por ejemplo, por Tmáx, 50 % Tmáx temprano, 50 % Tmáx tardío, Cmáx, tiempo para alcanzar 10 %, 20 % o 50 % del total de AUCinf, tiempo para alcanzar el GIR máximo y/o tiempo para alcanzar el 50 % del GIR máximo. Un procedimiento para tratar la diabetes que comprende administrar a un ser humano que lo necesite una dosis efectiva de una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizadores y, opcionalmente, un agente tamponador, en el que la insulina es insulina lispro, el conservante es metacresol, el agente de tonicidad es glicerol o cloruro de sodio, el agente estabilizador es zinc y el agente tamponador es fosfato o TRIS, y en el que el inicio de acción y/o el perfil de absorción de la composición es al menos aproximadamente un 30 % más rápida que las composiciones que contienen la misma insulina pero que no contienen treprostinil, según lo medido, por ejemplo, por Tmáx, 50 % Tmáx temprano, 50 % Tmáx tardío, Cmáx, tiempo para alcanzar 10 %, 20 % o 50 % del total de AUCinf, tiempo para alcanzar el GIR máximo y/o tiempo para alcanzar el 50 % del GIR máximo.

La invención se ilustra adicionalmente mediante los siguientes ejemplos, que no deben interpretarse como limitantes.

Estudio de estabilidad

Se realiza un estudio de estabilidad para evaluar la estabilidad de la insulina lispro cuando se formula conjuntamente con treprostinil. Las muestras de estabilidad se preparan combinando una formulación de insulina lispro (Lilly Material # QA415Q) y Remodulin® (United Therapeutics, lote 922017), un producto disponible comercialmente que contiene 1 mg/ml de treprostinil, 3 mg/ml de m-cresol, 6,3 mg citrato de sodio, 5,3 mg/ml de cloruro de sodio y agua para inyección. Cada mililitro de la formulación colocada en la estabilidad contiene insulina lispro 100 unidades, 16 mg de glicerina, 2,13 mg de fosfato de sodio dibásico, 3,18 mg de m-cresol, 0,0197 mg de ion de zinc, 0,01 mg de treprostinil, 0,063 mg de citrato de sodio, 0,053 mg de cloruro de sodio, 0,0024 mg de hidróxido de sodio, y agua Milli-Q. El pH se ajusta a un pH final de 7,4 mediante la adición de soluciones acuosas de ácido clorhídrico 1 N y/o hidróxido de sodio 1 N.

La solución se filtra utilizando un filtro de vacío Steriflip de 50 ml con una membrana PES de 0,22 pm (Cat#: SCGP00525, EMD Millipore, Billerica, MD) y se distribuye en viales de centelleo de 7 ml con cierre de urea blanca con tapa de rosca y revestimientos de papel de aluminio con respaldo de corcho (viales y tapones: cat#: 03-340-4A, Kimble Chase, Rockwood, TN), incubados a 5 °C, 25 °C, 30 °C y 37 °C respectivamente, y retirados para su análisis al inicio, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas y 36 días puntos de tiempo. Las muestras también se extraen para su análisis a los 44, 54 y 66 días de las soluciones incubadas a 5 °C, 25 °C y 30 °C.

La cromatografía de exclusión por tamaño a alta presión (HP-SEC) se utiliza para evaluar la estabilidad de la proteína y cuantificar las especies de alto peso molecular en cada formulación utilizando un sistema Agilent 1200 con detección de UV a 214 nm (Agilent Technologies, Santa Clara, CA). Cada muestra (5 j l) se inyecta en una columna Tosoh TSKgel G2000SWxl (Tosoh Bioscience LLC, King of Prussia, PA; 3000 mm x 7,8 mm) y se separa a un caudal de 0,5 ml/min utilizando una fase móvil que contiene fosfato de sodio 10 mM, acetonitrilo al 10 % (ACN) y NaCl 300 mM a pH 7,4. El porcentaje de peso molecular alto ( % HMW) se calcula dividiendo las áreas de pico de HMW cromatográficas a 214 nm por el área de pico total.

Los resultados de la SEC (% HMW) se dan en la tabla dada a continuación.

La formación de HMW es inferior al 1 % para todas las muestras hasta 36 días a 37 °C y 66 días a 30 °C, lo que indica un bajo riesgo de inestabilidad.

El análisis de cromatografía líquida de alto rendimiento en fase inversa (RP-HPLC) se realiza para evaluar la pureza de la proteína en los puntos de tiempo de estabilidad utilizando un sistema Agilent 1200 con detección de UV a 214 nm (Agilent Technologies, Santa Clara, CA). Cada muestra (5 j l ) se separa a 60 °C utilizando un Symmetry Shield RP18 de 4,6 x 100 mm (3,5 jm ) (Waters, Huntingdon Valley, pA) a un caudal de 0,9 ml/min con fase móvil A (0,1 % de ácido trifluoroacético (TFA) en agua) y fase móvil B (TFA al 0,1 % en acetonitrilo). El gradiente de la fase móvil B a 0, 3, 5, 20, 25, 27 y 30 min es de 10, 10, 20, 45, 90, 10 y 10 %, respectivamente.

Las concentraciones de insulina se calculan mediante la integración del área del pico de insulina y la comparación con un estándar de insulina lispro. Los resultados, reportados en Ul/ml, se dan a continuación.

(continuación)

Se observa una pérdida de insulina mínima, si la hubiera, para todas las muestras hasta 36 días a 37 °C y 66 días a 30 °C.

El porcentaje de muestra fuera del pico principal se calcula dividiendo el área del pico principal cromatográfico por el área del pico total. Los resultados ( % fuera del pico principal) se dan a continuación.

El porcentaje fuera del área del pico principal es inferior al 3 % para todas las muestras a 37 °C durante 36 días e inferior al 3,5 % para todas las muestras a 30 °C durante 66 días, lo que es aceptable para las formulaciones de insulina.

Estudios farmacocinéticos y farmacodinámicos.

Se utilizan quince cerdos macho Yucatán, castrados, en miniatura (edad promedio 20 meses de edad y peso corporal promedio de 42 kg) con puertos de acceso vascular previamente ajustados. Los animales diabéticos se alojan de forma individual y tienen acceso ad libitum a agua dulce en todo momento. Se alimentan con dos comidas al día de la dieta de la casa S-9 y reciben el mantenimiento adecuado de insulina basal y prandial dos veces al día para controlar su afección diabética.

Los artículos de prueba (Formulaciones A, B y C en la tabla a continuación) se formulan y envían durante la noche en paquetes fríos al sitio de prueba. El control de insulina Humalog es un material comercial de 100 UI/ml almacenado en el sitio de prueba.

Los artículos de prueba se almacenan refrigerados hasta el momento de la dosificación y luego se devuelven al refrigerador una vez finalizada la dosificación de todos los animales. Durante el período de dosificación, los artículos de prueba permanecen en una caja aislada cuando no se retiran.

El estudio es un diseño cruzado de cuatro vías. Este diseño permite que cada animal individual reciba cada uno de los tres artículos de prueba y controle la insulina mediante la dosificación de un artículo de prueba cada fecha de estudio (4 fechas cada 7 días).

El día anterior al estudio, los animales se alimentan con la mitad de su ración diaria y reciben 0,2 U/kg de Humalog Mix 75/25 Insulina como su administración de mantenimiento por la mañana. Todos los animales del estudio están en ayunas durante la noche y no reciben su insulina o comida por la noche antes de la administración del medicamento el día del estudio.

En la mañana del estudio, todos los animales se colocan en cabestrillos para restringirlos y se tiene acceso a sus puertos de acceso vascular (equipados para la toma de muestras de sangre) y se verifica su permeabilidad. Los animales se colocan al azar en grupos de tratamiento (4 grupos n=3-4 por grupo produce n=15 por tratamiento antes de cualquier exclusión). Después de recolectar dos muestras de sangre de referencia (-30 y -20 min), los animales se devuelven a sus corrales y se alimentan con ~300 g de dieta S-9. Dos animales se excluyeron del grupo de tratamiento con insulina lispro treprostinil 10 ng por no cumplir con los criterios de inclusión de la glucemia basal por encima de 200 mg/dL, y se excluyó un animal del análisis de datos de ese grupo debido a valores de insulina anteriores a la dosis de 10,000 pM, dando n=12 para ese grupo de tratamiento. Se excluyó a un animal del grupo de tratamiento con 1 ng de insulina lispro treprostinil por no cumplir con los criterios de inclusión de la glucemia basal por encima de 200 mg/dL, lo que arroja n=14 para ese grupo de tratamiento.

Veinte minutos después de la presentación de la comida completamente consumida, se inyecta a los animales con el artículo de prueba 0,2 U/kg (basado en la concentración de insulina, promedio de 9 Unidades/cerdo) por vía subcutánea en el flanco (0 min) con una jeringa de insulina Terumo (aguja de 0,5 ml 1/2"). Todos los animales del estudio tienen acceso libre a agua limpia y fresca durante todo el período restante de recolección de sangre.

La presión sanguínea se evalúa mediante Cardell Monitor (utilizando un manguito veterinario en la cola) a los -30 y 0 minutos (antes de la dosis) para la línea de base y luego 30 y 60 minutos después de la dosis. Se toman tres mediciones secuenciales en cada punto de tiempo /- 5 minutos. Los datos presentados son el promedio de las tres lecturas por cerdo individual.

Se recogen muestras de sangre en serie (2,0 ml cada una) de cada animal en los siguientes puntos de tiempo: -30, -20 (y luego se alimentan inmediatamente), 0 (justo antes de la dosis), 5, 10, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 150, 180, 240 y 360 minutos después de la dosificación subcutánea (sc).

No se observan eventos adversos durante la duración del experimento. La glucemia se monitoriza en tiempo real con glucómetros de mano y todos los animales se observan de forma rutinaria para detectar signos clínicos de hipoglucemia. La presión arterial se registra a los -30 y 0 minutos para los valores de referencia y luego se controla 30 y 60 minutos después de la dosis para evaluar la incidencia de hipotensión inducida. No se producen cambios significativos. No se observan reacciones locales en el lugar de la inyección.

Las muestras de sangre (anticoagulante: ninguna [suero]) se mantienen a temperatura ambiente durante al menos 30 minutos, pero no más de 2 horas para permitir la coagulación. Luego, el suero se separa por centrifugación y se divide en dos alícuotas y se almacena congelado a aproximadamente -70 °C.

Las concentraciones de glucosa en suero se determinan utilizando un analizador de química clínica automático Cobas c311 (Roche Diagnostics, Indianapolis, Indiana). El análisis de varianza de una sola vez seguido por la prueba de Dunnett de la comparación de la media del grupo se realiza a través de JMP 9 Statistical Discovery por SAS en glucosa en comparación con el control de Humalog con una significación de p<0,05. Las concentraciones de glucosa en suero (mg/dL) después del tratamiento con el control y las formulaciones de prueba (0,2 U/kg en el momento 0) se proporcionan en la tabla a continuación.

(continuación)

La insulina más treprostinil produjo un cambio dependiente de la dosis de la respuesta de disminución de la glucosa en comparación con Humalog solo. La insulina más treprostinil también resultó en una mayor magnitud de la disminución de la glucosa desde el inicio que Humalog solo. El cambio medio de glucosa desde el inicio (línea base = promedio de muestras de -30 y -20 min) a la Tmáx media de Humalog (90 minutos) fue de -129 mg/dL para Humalog, -197 mg/dL de insulina lispro 1 ng de treprostinil , -234 mg/dL de insulina lispro 10 ng de treprostinil, y -237 mg/dL de insulina lispro 400 ng de treprostinil. Las comparaciones medias de glucosa con el procedimiento de Dunnett demuestran diferencias estadísticamente significativas entre la muestra de insulina lispro 400 ng de treprostinil en comparación con el control de Humalog tan pronto como a los 45 minutos (p=0,0148). A los 60 minutos y a los 150 minutos, las reducciones de glucosa para la insulina lispro 400 ng de treprostinil e insulina lispro 10 ng de treprostinil son estadísticamente diferentes de los controles de Humalog. No hay una diferencia perceptible o estadística (de Dunnett) en la presión arterial sistólica o diastólica media al inicio (-30 y 0 min) o después del tratamiento con cualquiera de las tres dosis de insulina lispro treprostinil en comparación con el control de Humalog.

Con respecto a la farmacocinética, los niveles de insulina para todas las muestras de PK en suero se miden utilizando un radioinmunoensayo de insulina total (RIA). Los límites inferior y superior de cuantificación para el ensayo son 20 pM y 5000 pM, respectivamente. Se asume que los valores por debajo del límite inferior de cuantificación son 20 pM. Los análisis farmacocinéticos no compartimentales se realizan utilizando Phoenix WinNonlin v6,3.

La combinación de insulina lispro con treprostinil produjo un cambio dependiente de la dosis en los perfiles de insulina PK, en comparación con Humalog solo. La mediana de los valores de Tmáx fue de 90 min, 60 min, 45 min y 30 min respectivamente para Humalog solo, insulina lispro treprostinil 1 ng, insulina lispro treprostinil 10 ng e insulina lispro treprostinil 400 ng. La adición de treprostinil también condujo a aumentos en la Cmáx de la insulina en comparación con Humalog solo. Lo anterior, una Cmáx más alta es consistente con lo que se esperaría para una mayor tasa de absorción. La exposición total a la insulina (AUC^{in f}) fue aproximadamente un 30 % mayor en los tres grupos que contenían treprostinil, en relación con Humalog solo.

Tomados en conjunto, los cambios en los perfiles de insulina PK y los perfiles de glucosa resultantes cuando se administra treprostinil con insulina lispro indican que el treprostinil facilita una absorción más rápida de la insulina, en comparación con Humalog solo. Las mejoras en la acción del tiempo se logran sin ningún efecto discernible sobre la presión arterial en estos animales.

Los estudios descritos anteriormente demuestran que la adición de pequeñas cantidades de treprostinil a las formulaciones que contienen insulina lispro puede causar Tmáx más temprano y Cmáx más alto en el perfil farmacocinético de la insulina, así como efectos anteriores y mayores de reducción de la glucosa, y que tales formulaciones son lo suficientemente estables.

Secuencias

Cadena A de insulina humana

Claims (21)

REIVINDICACIONES

1. Una composición farmacéutica que comprende una insulina, treprostinil, uno o más conservantes, un agente de tonicidad, uno o más agentes estabilizantes y, opcionalmente, un agente tamponador.

2. La composición farmacéutica de la reivindicación 1, en la que la insulina es un análogo de la insulina humana seleccionada de: insulina lispro, insulina aspart e insulina glulisina.

3. La composición farmacéutica de la reivindicación 2, en la que la insulina es insulina lispro.

4. La composición farmacéutica de la reivindicación 3, en la que la concentración de insulina lispro es aproximadamente 100 UI/ml o aproximadamente 200 UI/ml.

5. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que la concentración de treprostinil es de 0,01 a 30 pM.

6. La composición farmacéutica de la reivindicación 5, en la que la concentración de treprostinil es de 1,5 a 5,9 pM.

7. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en la que uno o más conservantes comprenden metacresol.

8. La composición farmacéutica de la reivindicación 7, en la que la concentración de metacresol es de 2,5 mg/ml a 3,8 mg/ml.

9. La composición farmacéutica de la reivindicación 8, en la que la concentración de metacresol es de aproximadamente 3,15 mg/ml.

10. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en la que el agente de tonicidad es glicerol.

11. La composición farmacéutica de la reivindicación 10, en la que la concentración de glicerol es de 5 a 20 mg/ml.

12. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en la que uno o más agentes estabilizantes se seleccionan del grupo que consiste en zinc, cloruro de sodio, cloruro de calcio y arginina.

13. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en la que uno o más agentes estabilizantes es zinc.

14. La composición farmacéutica de la reivindicación 13, en la que la concentración de zinc es de 0,00525 mg/ml a 0,131 mg/ml.

15. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, que comprende un agente tamponador.

16. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 para su uso en terapia.

17. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 para su uso en el tratamiento de la diabetes.

18. Un artículo de fabricación que comprende una cualquiera de las composiciones farmacéuticas de las reivindicaciones 1 a 15.

19. El artículo de fabricación de la reivindicación 18, que es un vial de usos múltiples.

20. El artículo de fabricación de la reivindicación 18, que es un inyector de pluma reutilizable.

21. El artículo de fabricación de la reivindicación 18, que es un dispositivo de bomba para terapia de infusión de insulina subcutánea continua.