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ES2418479T3 - Antagonistas de la ruta erizo de ftalazinas disustituidas - Google Patents

Antagonistas de la ruta erizo de ftalazinas disustituidas Download PDF

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ES2418479T3
ES2418479T3 ES09740613T ES09740613T ES2418479T3 ES 2418479 T3 ES2418479 T3 ES 2418479T3 ES 09740613 T ES09740613 T ES 09740613T ES 09740613 T ES09740613 T ES 09740613T ES 2418479 T3 ES2418479 T3 ES 2418479T3
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ES
Spain
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cancer
fluorine
phthalazin
hydrogen
pharmaceutically acceptable
Prior art date
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Active
Application number
ES09740613T
Other languages
English (en)
Inventor
Jolie Anne Bastian
Philip Arthur Hipskind
Daniel Jon Sall
Takako Wilson
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Eli Lilly and Co
Original Assignee
Eli Lilly and Co
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Publication date
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Application filed by Eli Lilly and Co filed Critical Eli Lilly and Co
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Abstract

Un compuesto de la fórmula siguiente: en la que, R1 es hidrógeno, flúor, ciano, trifluorometilo o metoxi; R2 es hidrógeno, flúor o trifluorometilo; R3 es hidrógeno o cloro, siempre y cuando al menos uno de R2 y R3 sea hidrógeno; R4 es cloro, flúor, ciano, trifluorometilo, difluorometoxi, metoxi o trifluorometoxi; representa un piperazin-1, 4-diilo sustituido seleccionado del grupo constituido por o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

Antagonistas de la ruta erizo de ftalazinas disustituidas
La presente invención se refiere a antagonistas de la ruta Erizo y más específicamente, a ftalazinas 1,4-disustituidas novedosas y al uso terapéutico de las mismas. La ruta de señalización Erizo (Hh) juega un papel importante en la 5 formación de patrones embrionarios y en el mantenimiento tisular del adulto dirigiendo la diferenciación y proliferación de las células. La familia de proteínas Erizo (Hh), que incluye Erizo Sonic (Shh), Erizo Indio (Ihh) y Erizo del Desierto (Dhh) son glucoproteínas segregadas que sufren modificaciones postraduccionales, incluyendo escisión autocatalítica y acoplamiento de colesterol al péptido aminoterminal para formar el fragmento que posee actividad de señalización. Hh une a las 12 proteínas transmembrana Ptch (Ptch1 y Ptch2), aliviando así la supresión mediada por
10 Ptch de Alisado (Smo). La activación de Smo desencadena una serie de eventos intracelulares que culminan en la estabilización de los factores de transcripción de Gli (Gli1, Gli2 y Gli3) y la expresión de genes dependientes de Gli que son responsables de proliferación celular, supervivencia celular, angiogénesis e invasión.
La señalización de Hh ha atraído recientemente interés considerable en base al descubrimiento de que la activación aberrante de señalización Shh conduce a la formación de diversos tumores, por ejemplo, cáncer pancreático, 15 meduloblastoma, carcinoma celular basal, cáncer de pulmón de células pequeñas y cáncer de próstata. Se han comunicado varios antagonistas Hh en la técnica, tales como el compuesto alcaloide esteroideo IP-609; el compuesto de aminoprolina CUR61414; y el compuesto JK18 tiazol 2,4-disustiuido. El documento WO2005033288 revela ciertos compuestos de ftalazina 1,4-disustituidos que se afirma que son antagonistas de erizo. De forma similar, el documento WO2008110611 revela ciertos compuestos de ftalazina 1,4-disustituidos que se refieren al
20 diagnóstico y al tratamiento de patologías relacionadas con la ruta erizo.
Existe aún una necesidad de inhibidores de ruta erizo potentes, particularmente aquellos que tienen perfiles farmacodinámicos, farmacocinéticos y toxicológicos deseables. La presente invención proporciona ftalazinas 1,4disustituidas novedosas que son antagonistas potentes de esta ruta.
La presente invención proporciona un compuesto de Fórmula I:
Fórmula 1
en la que,
30 R1 es hidrógeno, flúor, ciano, trifluorometilo o metoxi; R2 es hidrógeno, flúor o trifluorometilo; R3 es hidrógeno o cloro, con la condición de que al menos uno de R2 y R3 sea hidrógeno; R4 es cloro, flúor, ciano, trifluorometilo, metoxi, difluorometoxi o trifluorometoxi;
representa un piperazin-1,4-diilo sustituido seleccionado del grupo constituido por
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En las estructuras de anillo de piperazina anteriores se entenderá el lado izquierdo del anillo de piperazina, como
5 está dibujado, está enlazado a la ftalizina bicíclica y el lado derecho del anillo de piperazina está enlazado al carbonilo.
Se entenderá por el trabajador experto que los compuestos de la presente invención comprenden un resto de amina terciaria y son capaces de reacción con una serie de ácidos inorgánicos y orgánicos para formar sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables. Tales sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables y la
10 metodología común para prepararlas se conocen bien en la técnica. Véanse, por ejemplo, P. Stahl y cols., HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS: PROPERTIES, SELECTION AND USE, (VCHA/Wiley-VCH, 2002);
S.M. Berge y cols., "Pharmaceutical Salts, "Journal of Pharmaceutical Sciences, vol. 66, N.º: 1, enero 1977. Las realizaciones específicas de la invención incluyen compuestos de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente
aceptable de los mismos, en la que: 15 (a) R1 es hidrógeno, flúor o ciano;
(b)
R1 es flúor;
(c)
R2 es hidrógeno o flúor;
(d)
R2 es hidrógeno;
(e) R3 es hidrógeno; 20 (f) R4 es flúor, cloro, ciano, trifluorometoxi, difluorometoxi o trifluorometilo;
(g)
R4 es flúor o ciano;
(h)
R4 es flúor;
(i)
25 (j)
(k)
(m)
R1 es hidrógeno, flúor o ciano; y R2 es hidrógeno; 5 (n) R1 es flúor; y R2 es hidrógeno o flúor;
(o)
R1 es flúor; y R2 es hidrógeno;
(p)
R1 es hidrógeno, flúor o ciano; R2 es hidrógeno o flúor; y R4 es flúor, cloro, ciano, trifluorometoxi, difluorometoxi o trifluorometilo;
(q)
R1 es hidrógeno, flúor o ciano; R2 es hidrógeno; y R4 es flúor, cloro, ciano, trifluorometoxi, difluorometoxi o 10 trifluorometilo;
(r)
R1 es flúor; R2 es hidrógeno o flúor; y R4 es flúor, cloro, ciano, trifluorometoxi, difluorometoxi o trifluorometilo;
(s)
R1 es flúor; R2 es hidrógeno; y R4 es flúor, cloro, ciano, trifluorometoxi, difluorometoxi o trifluorometilo;
(t)
R1 es hidrógeno, flúor o ciano; R2 es hidrógeno o flúor; R3 es hidrógeno; y R4 es flúor, cloro, ciano, trifluorometoxi, difluorometoxi o trifluorometilo;
15 (u) R1 es hidrógeno, flúor o ciano; R2 es hidrógeno; R3 es hidrógeno; y R4 es flúor, cloro, ciano, trifluorometoxi, difluorometoxi o trifluorometilo;
(v)
R1 es flúor; R2 es hidrógeno o flúor; R3 es hidrógeno; y R4 es flúor, cloro, ciano, trifluorometoxi, difluorometoxi
o trifluorometilo; y
(w) R1 es flúor; R2 es hidrógeno; R3 es hidrógeno; y R4 es flúor, cloro, ciano, trifluorometoxi, difluorometoxi o 20 trifluorometilo;
(x)
R1 es flúor; R2 es hidrógeno; R3 es hidrógeno; y R4 es flúor;
(y)
R1 es hidrógeno, flúor o ciano; R2 es hidrógeno o flúor; y
(z)
R1 es hidrógeno, flúor o ciano; R2 es hidrógeno; y
(z)
R1 es flúor; R2 es hidrógeno o flúor; y
es
10 es
(aa) R1 es hidrógeno, flúor o ciano; R2 es hidrógeno o flúor; R3 es hidrógeno; y R4 es flúor, cloro, ciano, 15 trifluorometoxi, difluorometoxi o trifluorometilo; y
o
(bb) R1 es hidrógeno, flúor o ciano; R2 es hidrógeno; R3 es hidrógeno; R4 es flúor o ciano; y
La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con un excipiente, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.
Los compuestos de la presente invención se formulan preferentemente como composiciones farmacéuticas que se administran por una diversidad de vías. Preferentemente, tales composiciones son para administración oral o intravenosa. Tales composiciones y procedimientos farmacéuticos para prepararlas se conocen bien en la técnica. Véase, por ejemplo, REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY (A. Gennaro y cols., eds., 19ª ed., Mack Publishing Co., 1995).
La presente invención proporciona también un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de cáncer. En particular, el cáncer se selecciona del grupo constituido por cáncer cerebral, carcinoma de células basales, cáncer de esófago, cáncer gástrico, cáncer pancreático, cáncer del tracto biliar, cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer de pulmón de células pequeñas, cáncer de pulmón de células no pequeñas, linfoma de linfocitos B, mieloma múltiple, cáncer de ovario, cáncer colorrectal, cáncer de hígado, cáncer de riñón o melanoma.
Se entenderá que la cantidad del compuesto administrada realmente se determinará por un médico, según las circunstancias procedentes, incluyendo la afección a tratar, la vía de administración elegida, el compuesto real administrado o los compuestos reales administrados, la edad, el peso y la respuesta del paciente individual y la gravedad de los síntomas del paciente. Las dosificaciones por día caen normalmente en el intervalo de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 5 mg/kg de peso corporal. En algunos casos los niveles de dosificación por debajo del límite inferior del intervalo citado realmente pueden ser más adecuados, mientras que en otros casos se pueden emplear dosis aún más grandes. Por lo tanto, el intervalo de dosificación anterior no se pretende que limite el alcance de la invención de ninguna manera. Esta invención también proporciona un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para usar como un medicamento.
Adicionalmente, esta invención proporciona el uso de un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la elaboración de un medicamento para tratar el cáncer. En particular, el cáncer se selecciona del grupo constituido por cáncer cerebral, carcinoma de células basales, cáncer de esófago, cáncer gástrico, cáncer pancreático, cáncer del tracto biliar, cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer de pulmón de células pequeñas, cáncer de pulmón de células no pequeñas, linfoma de linfocitos B, mieloma múltiple, cáncer de ovario, cáncer colorrectal, cáncer de hígado, cáncer de riñón y melanoma.
Además, esta invención proporciona una composición farmacéutica de una compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como un ingrediente activo para tratar cáncer cerebral, carcinoma de células basales, cáncer de esófago, cáncer gástrico, cáncer pancreático, cáncer del tracto biliar, cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer de pulmón de células pequeñas, cáncer de pulmón de células no pequeñas, linfoma de linfocitos B, mieloma múltiple, cáncer de ovario, cáncer colorrectal, cáncer de hígado, cáncer de riñón o melanoma..
Los compuestos de Fórmula I, o sales de los mismos, se pueden preparar por una diversidad de procedimientos conocidos en la técnica, así como por aquellos descritos en los Esquemas, Preparaciones y Ejemplos más adelante. Las etapas sintéticas específicas para cada una de las vías descritas se pueden combinar de diferentes maneras, o junto con etapas de diferentes esquemas, para preparar compuestos de Fórmula I o sales de los mismos.
Los sustituyentes, a menos que se indique lo contrario, son según se definen anteriormente. Los reactivos y materiales de partida están generalmente fácilmente disponibles para alguien de habilidad ordinaria en la técnica. Otros pueden prepararse por técnicas estándar de química orgánica y heterocíclica, técnicas que son análogas a la síntesis de compuestos estructuralmente similares conocidos y a los procedimientos descritos en las Preparaciones y Ejemplos que siguen incluyendo cualesquiera procedimientos novedosos.
Tal como se usa en el presente documento, los siguientes términos tienen los significados indicados: "Et2O" se refiere a éter dietílico; "DMF" se refiere a dimetilformamida; "DMSO" se refiere a dimetilsulfóxido; "EtOAc" se refiere a acetato de etilo; "THF" se refiere a tetrahidrofurano; "MeOH" se refiere a metanol; "MTBE" se refiere a éter metilterc-butílico; "boc" o "t-boc" se refiere a terc-butoxicarbonilo; "SCX" se refiere a intercambio de cationes fuertes; y
"CI50" se refiere a la concentración de un agente que produce el 50 % de la respuesta inhibidora máxima posible para ese agente.
Esquema 1
Un compuesto de Fórmula (6b) se puede preparar de acuerdo con reacciones como se describen en el Esquema 1.
En el Esquema 1, Etapa 1, se puede hacer reaccionar 1,4-dicloroftalazina (2) con una piperazina sustituida (3a) o (3b) en una sustitución aromática nucleofílica (SNAr) para proporcionar una piperazinil-ftalazina de Fórmula (4a) o (4b). La reacción tiene lugar en un disolvente dipolar aprótico tal como DMSO o DMF con una base apropiada tal como trietilamina, diisopropiletilamina, o carbonato de potasio. La mezcla se calienta a aproximadamente 70-150 ºC. El trabajador experto reconocerá que en algunos casos será ventajoso usar un grupo protector tal como un grupo fboc en una piperazina de Fórmula (3a) permitiendo protección del átomo de nitrógeno menos impedido, como en (S)-3-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo. Por el contrario, cuando la reacción tiene lugar en el nitrógeno menos impedido puede ser posible usar piperazinas no protegidas tales como cis-2,6-dimetilpiperazina o piperazin2-il-metanol. No se requiere ninguna protección cuando se usa 2,5-dimetilpiperazina.
En la Etapa 2, el cloruro de ftalazinilo de fórmula (4) se hace reaccionar con un ácido fenilborónico en condiciones de acoplamiento cruzado de Suzuki. El experto en la técnica reconocerá que existe una diversidad de condiciones útiles para facilitar tales reacciones de acoplamiento cruzado. Las condiciones de reacción hacen uso de un disolvente adecuado tal como dioxano o dioxano/agua. La reacción se logra en presencia de una base tal como carbonato de cesio o cloruro de cesio. La reacción tiene lugar en presencia de un catalizador de paladio tal como bis(di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfina)-dicloropaladio (II), cloruro de (1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno)paladio (II),
o (SP-4-1)-bis[bis(1,1-dimetiletil)(4-metoxifenil)fosfina-κP]dicloropaladio (preparado de acuerdo con la síntesis de catalizador D en J. Org. Chem. 2007, 72, 5104-5112) en una atmósfera inerte a una temperatura de aproximadamente 80-110 ºC dando una fenilpiperazinilftalazina de fórmula (6a) o (6b).
Alternativamente, en la Etapa 3, un cloruro de fenilftalazinilo de fórmula (5) se hace reaccionar con una piperazina de fórmula (3a) o (3b) en una sustitución aromática nucleofílica (SNAr) similar a aquella descrita en la Etapa 1, anteriormente.
En el Esquema 1, Etapa 4, la funcionalidad amina, tal como aquella presente en la fenilpiperazinilftalazina de fórmula (6a), puede desprotegerse (6b) y hacerse reaccionar adicionalmente dando compuestos de la invención. Los procedimientos para eliminar grupos protectores de nitrógeno se conocen bien en la técnica (véase, por ejemplo, Greene y Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3ª ed., John Wiley and Sons, Nueva York, (1999)). Por ejemplo, la desprotección de boc de la fenilpiperazinilftalazina de fórmula (6) puede lograrse en condiciones ácidas, tal como con cloruro de hidrógeno. La sal de HCl resultante se puede transformar a la amina libre usando una columna SCX o una base inorgánica tal como bicarbonato de sodio.
Se apreciará por el trabajador experto que compuestos de fórmula (5) en el Esquema 1 están comercialmente disponibles o se pueden preparar fácilmente por procedimientos similares a aquellos descritos en el presente documento o usando procedimientos que están establecidos en la técnica. Por ejemplo, un ácido 2fenilcarbonilbenzoico, generado a partir de una reacción de Grignard de un bromuro de fenilmagnesio con anhídrido ftálico, puede ciclarse con hidrazina dando una 4-fenil-2H-ftalazin-1-ona. El tratamiento subsiguiente con oxicloruro de fósforo proporciona la 1-cloro-4-fenil-ftalazina de fórmula (5). Alternativamente, 1,4-dicloroftalazina se puede hacer reaccionar con un ácido fenilborónico en una reacción de acoplamiento de Suzuki dando la 1-cloro-4-fenilftalazina correspondiente de fórmula (5).
Esquema 2
En el Esquema 2, la piperazinilftalazina desprotegida de fórmula (6b) puede acilarse usando un isocianato de fenilo sustituido en un disolvente inerte tal como diclorometano dando una urea de Fórmula (I).
Las siguientes Preparaciones y Ejemplos se proporcionan para ilustrar la invención en detalle adicional y representan la síntesis típica de los compuestos de Fórmula (I). Los nombres de los compuestos de la presente invención se proporcionan generalmente por ChemDraw Ultra® 10.0.
Preparación 1
(S)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo
Calentar una mezcla de 1-cloro-4-(4-fluorofenil)ftalazina (5,0 g, 19,3 mmol), (S)-2-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo (5,03 g, 25,1 mmol) y trietilamina (8,1 ml, 59,0 mmol) en DMSO (97 ml) a 115 ºC durante 3 días. Verter la mezcla de reacción en agua, aclarando con CH2Cl2. Extraer con Et2O. Lavar la fase orgánica con agua (2 x), después secar sobre Na2SO4 y concentrar a presión reducida. Purificar el residuo resultante por cromatografía en gel de sílice ultrarrápida (gradiente de EtOAc del 0 al 20 % en CH2Cl2) para proporcionar el compuesto del título como una espuma amarilla pálida (7,05 g, al 84 %). EM/ES m/z 423,2 (M+1).
Procedimiento alternativo:
Añadir (S)-2-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butílico (276 g, 1,38 mol) a una suspensión de 1-cloro-4-(4fluorofenil)ftalazina (275 g, 1,06 mol) y diisopropiletilamina (346 ml, 1,99 mol) en DMSO (2,56 l) a 25 ºC. Calentar la mezcla a 102 ºC durante 9 horas. Enfriar la reacción a 25 ºC y agitar durante 48 horas. Añadir la mezcla a EtOAc (2,5 l) y agua (3,5 l). Extraer la fase acuosa con acetato de etilo (2 x 2,0 l). Combinar las fases orgánicas, lavar con agua (2,5 l) y concentrar a una espuma marrón. Disolver la espuma en acetonitrilo (1,0 l) y enfriar a 1 ºC durante 30 minutos. Filtrar el precipitado para obtener un sólido de color canela. Concentrar las aguas madres y suspender el residuo en acetonitrilo (500 ml) durante 30 minutos. Filtrar la molécula para obtener un sólido canela. Combinar los precipitados sólidos y secar en un horno de vacío (1.866,51 pascales (14 torr), 25 ºC) durante 25 horas para obtener el compuesto del título como un sólido canela (435 g, al 96 %). EM/ES m/z 423,0 (M+1).
Preparar las piperazinilftalazinas de la tabla siguiente siguiendo esencialmente el procedimiento descrito en la Preparación 1, usando 1,5 equivalentes de la piperazina apropiadamente sustituida y 3-5 equivalentes de trietilamina a una temperatura de 115 a 150 ºC durante 3 a 6 días.
Prep. N.º
Nombre químico Estructura CL-EM/EM m/z
2
(S)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-i)-3metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo 423,2 (M+1)
3
(R)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo 423,2 (M+1)
4*
(R)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-3metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo 423,2 (M+1)
5
4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metilpiperazin1-carboxilato de terc-butilo 423,0 (M+1)
6
4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-3-metilpiperazin1-carboxilato de terc-butilo 423,0 (M+1)
*Usar DMF como disolvente.
5 Procedimiento alternativo para la Preparación 2:
Añadir 1-cloro-4-(4-fluorofenil)ftalazina (200 g, 773 mmol) a una solución de (S)-3-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo (232 g, 1,16 mol), diisopropiletilamina (674 ml, 28,1 mol) y DMSO (2,0 l). Calentar la mezcla a 120 ºC durante 60 horas. Enfriar la mezcla a 25 ºC, verter en agua helada y filtrar (3,0 l). Recoger los sólidos, disolver en CH2Cl2 (2,0 l) y extraer con agua (2,0 l). Concentrar la fase orgánica y añadir a un lecho corto de sílice (3,0 kg de
10 sílice) eluyendo con THF al 3 % en CH2Cl2 para proporcionar el compuesto del título como una espuma amarilla (126 g, al 38 %). EM/ES m/z 423,0 (M+1).
Preparación 7
(S)-2-etil-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo
Calentar una mezcla de 1-cloro-4-(4-fluorofenil)ftalazina (5,02 g, 19,4 mmol), (S)-2-etilpiperazin-1-carboxilato de tercbutilo (5,00 g, 23,3 mmol) y K2CO3 (5,38 g, 38,9 mmol) en DMSO (75 ml) a 120 ºC durante 1 día. Verter la mezcla de reacción en agua, aclarando con EtOAc. Extraer con EtOAc. Lavar la fase orgánica con agua (2 x), después salmuera, secar sobre Na2SO4 y concentrar a presión reducida. Purificar el residuo resultante por cromatografía en gel de sílice de lavado (gradiente de EtOAc del 0 al 80 % en hexanos) para proporcionar el compuesto del título (5,11 g, al 60 %). EM/ES m/z 437,2 (M+1).
Preparar la piperazinilftalazina de la tabla siguiente siguiendo esencialmente el procedimiento descrito en la Preparación 7 usando cis-2,6-dimetilpiperazina.
Prep. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
8
1-(cis-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-4-(4fluorofenil)ftalazina 337,2 (M+1)
Preparación 9
(R)-(4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)piperazin-2-il)metanol
Disolver 1-cloro-4-(4-fluorofenil)ftalazina (0,1 g, 0,39 mmol), (R)-piperazin-2-ilmetanol (0,07 g, 0,58 mmol) y diisopropiletilamina (0,34 ml, 1,93 mmol) en DMSO (1 ml). Agitar la reacción a 120 ºC durante 64 horas. Purificar la mezcla de reacción por cromatografía en gel de sílice ultrarrápida (amoniaco 2 M al 0-10 %/MeOH en CH2Cl2) para
15 proporcionar el compuesto del título como un sólido marrón (0,11 g, al 84 %). EM/ES m/z 339,0 (M+1).
Preparar las piperazinilftalazinas de la tabla siguiente siguiendo esencialmente el procedimiento en la preparación 9 usando la piperazina sustituida apropiada.
Prep. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
10
(S)-(4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)piperazin-2il)metanol 339,0 (M+1)
11
1-((2S,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-4-(4fluorofenil)ftalazina 337,0 (M+1)
12
1-(cis-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-4-(4fluorofenil)ftalazina (mezcla racémica) 337,0 (M+1)
13
1-(trans-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-4-(4fluorofenil)ftalazina (mezcla racémica) 337,0 (M+1)
Preparación 14
(S)-4-(4-cloroftalazin-1-il)-3-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo
Calentar una mezcla de 1,4-dicloroftalazina (10,0 g, 50,2 mmol), (S)-3-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo (15,1 g, 75,4 mmol) y trietilamina (21,0 ml, 150,7 mmol) en DMSO (200 ml) a 120 ºC durante 2 días. Verter la mezcla 10 en agua, aclarar con CH2Cl2. Extraer con Et2O. Lavar la fase orgánica con agua (2 x), secar sobre Na2SO4 y
concentrar a presión reducida. Purificar el residuo resultante por cromatografía en gel de sílice ultrarrápida (gradiente de EtOAc del 0 al 20 % de EtOAc en CH2Cl2) para proporcionar el compuesto del título como un sólido amarillo pálido (6,0 g, al 33 %). EM/ES m/z (35Cl) 363,0 (M+1).
Preparación 15
(S)-4-(4-cloroftalazin-1-il)-2-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo
Calentar una mezcla de 1,4-dicloroftalazina (7,80 g, 39,2 mmol), (S)-2-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo,
10 (4,98 g, 24,9 mmol) y trietilamina (10,3 ml, 73,9 mmol) en DMSO (110 ml) a 80 ºC durante 18 horas. Verter la mezcla de reacción en agua, aclarar con EtOAc. Extraer con EtOAc. Lavar la fase orgánica con agua (2 x) y salmuera y secar sobre Na2SO4 y concentrar a presión reducida. Purificar el residuo resultante por cromatografía en gel de sílice ultrarrápida (gradiente de EtOAc del 0 al 80 % en hexanos) para proporcionar el compuesto del título (4,13 g, al 46 %). EM/ES m/z (35Cl) 363,0 (M+1).
15 Preparación 16
(S)-4-(4-(4-cianofenil)ftalazin-1-il)-3-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo
20 Calentar una mezcla de (S)-4-(4-cloroftalazin-1-il)-3-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo (4,0 g, 11,0 mmol), ácido 4-cianofenilborónico (2,43 g, 16,5 mmol), carbonato de cesio (14,4 g, 44,1 mmol) y (SP-4-1)-bis[bis(1,1dimetiletil)(4-metoxifenil)fosfina-κP]dicloro-paladio (J. Org. Chem. 2007, 72, 5104-5112) (75,4 mg, 0,11 mmol) en 1,4dioxano (80 ml) y agua (20 ml) a 90 ºC durante toda una noche. Partición de la mezcla de reacción entre agua y CH2Cl2. Extraer la fase acuosa con CH2Cl2. Secar la fase orgánica combinada sobre Na2SO4 y concentrar a presión
25 reducida. Purificar el residuo resultante por cromatografía en gel de sílice ultrarrápida (gradiente de EtOAc del 0 al 20 % en CH2Cl2) para proporcionar el compuesto del título como una espuma naranja claro (4,46 g, al 94 %). EM/ES m/z 430,2 (M+1).
Preparar las piperazinilftalazinas de la tabla siguiente siguiendo esencialmente el procedimiento en la Preparación 16 usando la 4-cloroftalazina apropiada y el ácido borónico apropiado. Desgasificar las preparaciones 19-20 antes
30 de añadir bis(di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfina)dicloropaladio (II) como el catalizador y calentar las mezclas resultantes a 90 ºC durante 72 horas.
Prep. N.º
Nombre químico Estructura CL-EM/EM m/z
17
(S)-3-metil-4-(4fenilftalazin-1-il)piperazin-1carboxilato de terc-butilo 405,2 (M+1)
18
(S)-4-(4-(4-cianofenil) ftalazin-1-il)-2-metilpiperazin-1carboxilato de terc-butilo 430,2 (M+1)
19
(S)-2-metil-4-(4fenilftalazin-1-il)piperazin-1carboxilato de terc-butilo 405,2 (M+1)
20
(S)-2-metil4-(4-(4-(trifluorometil)fenil)ftalazina1-il)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo 473,2 (M+1)
Preparación 21
(S)-4-(4-(4-metoxifenil)ftalazin-1-il)-2-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo
Tratar una mezcla desgasificada de (S)-4-(4-cloroftalazin-1-il)-2-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo (0,81 g, 2,23 mmol), ácido 4-metoxibencenborónico (1,07 g, 7,05 mmol) y fluoruro de cesio (1,05 g, 6,94 mmol) en 1,4
10 dioxano (30 ml) con cloruro de (1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno)paladio (II) (0,27 g, 0,33 mmol). Calentar la mezcla resultante a 95 ºC durante toda una noche. Partición de la mezcla de reacción entre agua y EtOAc. Extraer la fase acuosa con EtOAc. Lavar la parte orgánica con agua y salmuera, secar sobre Na2SO4 y concentrar a presión reducida. Purificar el residuo resultante por cromatografía en gel de sílice ultrarrápida (gradiente de EtOAc del 15 al 70 % en hexanos) para proporcionar el compuesto del título (0,94 g, al 96 %). EM/ES m/z 435,2 (M+1).
15 Preparación 22
(S)-1-(4-fluorofenil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)ftalazina Tratar una solución de (S)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metilpiperazin-1-carboxilato de terc-butilo (7,05 g, 16,2 mmol) en 1,4-dioxano (50 ml) con HCl 4 M en 1,4-dioxano (25 ml). Añadir MeOH para disolver el precipitado
5 resultante y agitar durante 2 horas a temperatura ambiente. Concentrar la mezcla de reacción a presión reducida. Disolver el residuo en MeOH y verter sobre una columna Varian® SCX de 50 g. Aclarar con MeOH y CH2Cl2, eluir después el producto con CH2Cl2:amoniaco 2 M en MeOH 1:1. Concentrar el eluyente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como una espuma amarilla pálida (4,83 g, al 93 %). EM/ES m/z 323,2 (M+1).
Procedimiento alternativo para la Preparación 22:
10 Enfriar metanol (2,82 l) a 0 ºC por medio de un baño de acetona/agua 1:1 con hielo seco y añadir cloruro de acetilo (142 ml, 2,0 mol) gota a gota durante un periodo de 30 minutos, manteniendo la temperatura por debajo de 15 ºC durante la adición. Agitar la mezcla durante 15 minutos. Añadir (S)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metilpiperazin-1carboxilato de terc-butilo (282 g, 667 mmol) de una vez. Agitar la mezcla durante 12 horas a 25 ºC. Concentrar y disolver el residuo en agua (3,0 l). Añadir NaHCO3 sólido hasta que el pH sea 7. Extraer el producto con CH2Cl2 (2 x
15 2,0 l), combinar las fases orgánicas y concentrar para dar el compuesto del título como una espuma triturable marrón en rendimiento cuantitativo (236 g, > 100 %). EM/ES m/z 323,0 (M+1).
Preparar las piperazinilftalazinas de la tabla siguiente siguiendo esencialmente el procedimiento descrito en la Preparación 22 usando la piperazinilftalazina protegida por boc con tiempos de reacción desde 2 horas hasta durante toda una noche. Para las preparaciones 30-34 usar MeOH como disolvente.
Prep. N.º
Nombre químico Estructura CL-EM/EM m/z
23
(S)-1-(4-fluorofenil)-4-(2-metilpiperazin-1-il)ftalazina 323,2 (M+1)
24
(R)-1-(4-fluorofenil)-4-(3-metilpiperazin-1il)ftalazina 323,2 (M+1)
25
(R)-1-(4-fluorofenil)-4-(2-metilpiperazin-1il)ftalazina 323,2 (M+1)
26
(±)-1-(4-fluorofenil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)ftalazina 323,0 (M+1)
27
(±)-1-(4-fluorofenil)-4-(2-metilpiperazin-1-il)ftalazina 323,0 (M+1)
28
(S)-1-(2-metilpiperazin-1-il)-4-fenilftalazina 305,2 (M+1)
29
(S)-4-(4-(2-metilpiperazin-1-il)ftalazin-1il)benzonitrilo 330,2 (M+1)
30
(S)-1-(3-etilpiperazin-1-il)-4-(4-fluorofenil)ftalazina 337,2 (M+1)
31
(S)-1-(3-metilpiperazin-1-il)-4-fenilftalazina 305,2 (M+1)
32
(S)-1-(3-metilpiperazin-1-il)-4-(4(trifluorometil)fenil)ftalazina 373,2 (M+1)
33
(S)-4-(4-(3-metilpiperazin-1-il)ftalazin-1il)benzonitrilo 330,2 (M+1)
(continuación)
Prep. N.º
Nombre químico Estructura CL-EM/EM m/z
34
(S)-1-(4-metoxifenil)-4-(3-metilpiperazin-1il)ftalazina 335,2 (M+1)
Preparación 35
3-fluoro-4-isocianatobenzonitrilo
Enfriar una solución de trifosgeno (1,09 g, 3,67 mmol) en tolueno (20 ml) en un baño de agua helada. Tratar con una solución de un 4-amino-3-fluorobenzonitrilo (1,36 g, 10,0 mmol) y trietilamina (2,8 ml, 20,0 mmol) en tolueno (30 ml) gota a gota. Calentar la mezcla resultante a 70 ºC durante 5 horas. Enfriar la mezcla de reacción a temperatura
10 ambiente y separar el sólido por filtración. Concentrar el filtrado a presión reducida dando un sólido blanco (1,44 g, al 84 %) que se usa sin purificación adicional. CG/EM m/z 162 (M+).
Preparar el isocianato conocido de la tabla siguiente a partir de la anilina apropiada, siguiendo esencialmente el procedimiento descrito en la Preparación 35.
Prep. N.º
Nombre químico Estructura CG/EM m/z
36
2-fluoro-1-isocianato-4-(trifluorometil)benceno 205 (M+)
15 Ejemplo 1 Clorhidrato de (S)-N-(4-fluorofenil)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metilpiperazin-1-carboxamida
20 Tratar una solución de (S)-1-(4-fluorofenil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)ftalazina (1,0 g, 3,1 mmol) en CH2Cl2 (31 ml) con 1-fluoro-4-isocianatobenceno (0,42 ml, 3,72 mmol). Agitar durante 3 días a temperatura ambiente. Concentrar la mezcla de reacción a presión reducida. Triturar el residuo con Et2O y filtrar. Aclarar el sólido con pentano y después secar en un horno de vacío a 45 ºC. Disolver el sólido en una mezcla de CH2Cl2 y MeOH y tratar con 3 equivalentes de HCl 1 M en Et2O. Agitar la mezcla resultante, concentrar a presión reducida y secar en un horno de vacío a 45 ºC proporcionando la sal clorhidrato del título como una espuma amarilla (1,5 g, al 98 %). EM/ES m/z 460,0 (M+1).
Procedimiento alternativo para el Ejemplo 1:
Añadir 1-fluoro-4-isocianatobenceno (105 ml, 930 mmol) gota a gota durante 1 hora a una solución de (S)-1-(4
5 fluorofenil)-4-3-metilpiperazin-1-il)ftalazina (300 g, 930 mmol) en CH2Cl2 (4,5 l) a 25 ºC. Agitar la mezcla durante 25 minutos y concentrar a una espuma. Suspender la espuma en MTBE (3,0 l) y lavar la torta húmeda con MTBE (500 ml). Concentrar las aguas madres a un aceite. Suspender el aceite en acetato de etilo (2,0 l) dando un sólido y filtrar. Combinar los sólidos filtrados y secar obteniendo el compuesto del título como un sólido canela (344 g, al 80 %). Suspender el sólido (327 g, 711 mmol) en isopropanol (3,27 l) a 42 ºC y tratar con HCl 4 M en 1,4-dioxano (177 ml,
10 711 mmol). Calentar la mezcla resultante a 60 ºC durante 30 minutos. Enfriar a 25 ºC lentamente durante 2 horas. Filtrar y lavar la torta húmeda con isopropanol (200 ml) y heptano (200 ml). Secar la torta en una estufa de vacío (1.599,86 pascales (12 torr), 35 ºC, 2 horas) obteniendo el compuesto del título como un sólido amarillo pálido (308 g, al 87 %). EM/ES m/z 460,0 (M+1).
Ejemplo 2
15 Clorhidrato de (S)-N-(4-fluorofenil)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-3-metilpiperazin-1-carboxamida
Tratar una solución de (S)-1-(4-fluorofenil)-4-(2-metilpiperazin-1-il)ftalazina (0,5 g, 1,55 mmol) en CH2Cl2 (15,5 ml)
20 con 1-fluoro-4-isocianatobenceno (0,194 ml, 1,71 mmol). Agitar durante toda una noche a temperatura ambiente. Purificar la mezcla de reacción por cromatografía en gel de sílice ultrarrápida (gradiente de amoniaco 2 M del 0 al 3 %/MeOH en CH2Cl2). Disolver la base libre purificada en una mezcla de CH2Cl2 y MeOH y tratar con 3 equivalentes de HCl 1 M en Et2O. Agitar la mezcla resultante, concentrar a presión reducida y secar en un horno de vacío a 45 ºC proporcionando la sal clorhidrato del título como una espuma amarilla (0,72 g, al 94 %). EM/ES m/z 460,0 (M+1).
25 Procedimiento alternativo para el Ejemplo 2:
Añadir 1-fluoro-4-isocianatobenceno (27,9 ml, 245 mmol) gota a gota durante 1 hora a una solución de (S)-1-(4fluorofenil)-4-(2-metilpiperazin-1-il)ftalazina (72 g, 223 mmol) en CH2Cl2 (500 l) a 25 ºC. Agitar la mezcla durante 25 minutos y concentrar a una espuma. Añadir cloruro de acetilo (16,5 ml, 231 mmol) a metanol a 0 ºC y agitar durante 5 minutos. Añadir la espuma a la solución de metanol y agitar durante 1 hora. Concentrar la solución a una espuma.
30 Suspender la espuma en acetonitrilo (200 ml) y CH2Cl2 (30 ml), filtrar y recoger el compuesto del título como un sólido amarillo (91g, al 86 %). EM/ES m/z 460,0 (M+1).
Preparar las ureas de la tabla siguiente siguiendo esencialmente los procedimientos descritos en el Ejemplo 1 o el Ejemplo 2 usando la piperazinilftalazina apropiada y un ligero exceso de isocianato apropiado. Los tiempos de reacción varían desde 0,5 horas hasta 3 días. Purificar los compuestos por trituración (con Et2O o CH2Cl2:hexanos
35 1:1) o por cromatografía en gel de sílice ultrarrápida. Para los Ejemplos 57-60 y 66-69, purificar por cromatografía en fase inversa guiada por masas (columna Waters XBridge C18 ODB EM HPLC, 30 x 75 mm, tamaño de partícula 5 mm, gradiente del 20 al 70 % de acetonitrilo en agua que contenga bicarbonato de amonio 0,01 M, a caudal de 85 ml/minutos durante 8 minutos). Para los Ejemplos 75-82, usar los isocianatos en bruto (Preparaciones 35-36) en exceso de 1,5-2 veces. Para los Ejemplos 18, 29 y 38 omitir MeOH del procedimiento de formación de sales de HCl.
Ej. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
3
Clorhidrato de (±)-N-(4-fluorofenil)-4-(4(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2metilpiperazin-1-carboxamida 460,0 (M+1)
4
Clorhidrato de (±)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metil-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 526,0 (M+1)
5
Clorhidrato de (±)-N-(4-fluorofenil)-4-(4(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-3metilpiperazin-1-carboxamida 460,0 (M+1)
6
Clorhidrato de (±)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-3-metil-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 526,0 (M+1)
7
Clorhidrato de (R)-N-(4-fluorofenil)-4-(4(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2metilpiperazin-1-carboxamida 460,2 (M+1)
8
Clorhidrato de (R)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metil-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 526,2 (M+1)
9
Clorhidrato de (R)-N-(4-cianofenil)-4-(4(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2metilpiperazin-1-carboxamida 467,2 (M+1)
10
Clorhidrato de (R)-N-(2,4-difluorofenil)-4(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2metilpiperazin-1-carboxamida 478,2 (M+1)
11
Clorhidrato de (R)-N-(4-fluorofenil)-4-(4(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-3metilpiperazin-1-carboxamida 460,2 (M+1)
(continuación) (continuación)
Ej. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
12
Clorhidrato de (R)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-3-metil-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 526,2 (M+1)
13
Clorhidrato de (R)-N-(4-cianofenil)-4-(4(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-3metilpiperazin-1-carboxamida 467,2 (M+1)
14
Clorhidrato de (R)-N-(2,4-difluorofenil)-4(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-3metilpiperazin-1-carboxamida 478,2 (M+1)
15
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metil-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 526,2 (M+1)
16
Clorhidrato de (S)-N-(4-cianofenil)-4-(4(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2metilpiperazin-1-carboxamida 467,2 (M+1)
17
Clorhidrato de (S)-N-(2,4-difluorofenil)-4(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2metilpiperazin-1-carboxamida 478,2 (M+1)
18
Clorhidrato de (S)-N-(4-flúor-2(trifluorometil)fenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metilpiperazin-1carboxamida 528,0 (M+1)
19
Clorhidrato de (S)-N-(3-cloro-4fluorofenil)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)2-metilpiperazin-1-carboxamida 35Cl 494,0 (M+1)
Ej. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
20
Clorhidrato de (±)-N-(4-clorofenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metilpiperazin1-carboxamida 35Cl 476,0 (M+1)
21
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metil-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 510,0 (M+1)
22
Clorhidrato de (S)-N-(4(difluorometoxi)fenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il-2-metilpiperazin-1carboxamida 508,0 (M+1)
23
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-N-(4-metoxifenil)2-metilpiperazin-1-carboxamida 472,0 (M+1)
24
Clorhidrato de (S)-N-(4-cianofenil)-4-(4(4-cianofenil)ftalazin-1-il)-2metilpiperazin-1-carboxamida 474,2 (M+1)
25
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-N-(4-fluorofenil)-2metilpiperazin-1-carboxamida 467,2 (M+1)
26
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-N-(2,4-fluorofenil)2-metilpiperazin-1-carboxamida 485,0 (M+1)
27
Clorhidrato de (S)-N-(3-cloro-4fluorofenil)-4-(4-(4-cianofenil)ftalazin-1-il)2-metilpiperazin-1-carboxamida 35Cl 500,8 (M+1)
(continuación)
20 (continuación) (continuación) (continuación) (continuación) (continuación) (continuación) (continuación)
Ej. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
28
Clorhidrato de (S)-N-(4-clorofenil)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-2-metilpiperazin1-carboxamida 35Cl 483,0 (M+1)
29
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-N-(4-flúor-2(trifluorometil)fenil)-2-metilpiperazin-1carboxamida 535,0 (M+1)
30
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-2-metil-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 517,0 (M+1)
31
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-2-metil-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 533,0 (M+1)
32
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-N-(4(difluorometoxi)fenil)-2-metilpiperazin-1carboxamida 515,0 (M+1)
33
Clorhidrato de (S)-N-(4-fluorofenil)-2metil-4-(4-fenilftalazin-1-il)piperazin-1carboxamida 442,2 (M+1)
34
Clorhidrato de (S)-N-(2,4-difluorofenil)-2metil-4-(4-fenilftalazin-1-il)piperazin-1carboxamida 460,2 (M+1)
Ej. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
35
Clorhidrato de (S)-N-(4-cianofenil)-2metil-4-(4-fenilftalazin-1-il)piperazin-1carboxamida 449,2 (M+1)
36
Clorhidrato de (S)-N-(3-cloro-4fluorofenil)-2-metil-4-(4-fenilftalazin-1il)piperazin-1-carboxamida 35Cl 476,0 (M+1)
37
Clorhidrato de (S)-N-(4-clorofenil)-2-metil4-(4-fenilftalazin-1-il)piperazin-1carboxamida 35Cl 458,0 (M+1)
38
Clorhidrato de (S)-N-(4-flúor-2(trifluorometil)fenil)-2-metil-4-(4fenilftalazin-1-il)piperazin-1-carboxamida 510,0 (M+1)
39
Clorhidrato de (S)-2-metil-4-(4fenilftalazin-1-il)-N-(4(trifluorometil)fenil)piperazin-1carboxamida 492,0 (M+1)
40
Clorhidrato de (S)-2-metil-4-(4fenilftalazin-1-il)-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 508,0 (M+1)
41
Clorhidrato de (S)-N-(4(difluorometoxi)fenil)-2-metil-4-(4fenilftalazin-1-il) piperazin-1-carboxamida 490,0 (M+1)
Ej. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
42
Clorhidrato de (S)-N-(4-cianofenil)-4-(4(4-metoxifenil)ftalazin-1-il)-2metilpiperazin-1-carboxamida 478,8 (M+1)
43
Clorhidrato de (S)-N-(4-fluorofenil)-4-(4(4-metoxifenil)ftalazin-1-il)-2metilpiperazin-1-carboxamida 472,2 (M+1)
44
Clorhidrato de (S)-N-(2,4-difluorofenil)-4(4-(4-metoxifenil)ftalazin-carboxamida 490,2 (M+1)
45
Clorhidrato de (S)-N-(4-fluorofenil)-2metil-4-(4-(4-(trifluorometil)fenil)ftalazin-1il)piperazin-1-carboxamida 510,2 (M+1)
46
Clorhidrato de (S)-N-(4-cianofenil)-2metil-4-(4-(4-(trifluorometil)fenil)ftalazin-1il)piperazin-1-carboxamida 517,2 (M+1)
47
Clorhidrato de (S)-N-(2,4-fluorofenil)-2metil-4-(4-(4-(trifluorometil)fenil)ftalazin-1il)piperazin-1-carboxamida 528,0 (M+1)
48
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-3-metil-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 526,2 (M+1)
49
Clorhidrato de (S)-N-(4-cianofenil)-4-(4(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-3metilpiperazin-1-carboxamida 467,2 (M+1)
Ej. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
50
Clorhidrato de (S)-N-(2,4-difluorofenil)-4(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-3metilpiperazin-1-carboxamida 478,2 (M+1)
51
Clorhidrato de (S)-N-(4-flúor-2(trifluorometil)fenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-3-metilpiperazin-1carboxamida 528,0 (M+1)
52
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-N-(4-metoxifenil)3-metilpiperazin-1-carboxamida 472,0 (M+1)
53
Clorhidrato de (S)-N-(3-cloro-4fluorofenil)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)3-metilpiperazin-1-carboxamida 35Cl 494,0 (M+1)
54
Clorhidrato de (S)-N-(4-clorofenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-3-metilpiperazin1-carboxamida 35Cl 476,0 (M+1)
55
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-3-metil-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 510,0 (M+1)
56
Clorhidrato de (S)-N-(4(difluorometoxi)fenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-3-metilpiperazin-1carboxamida 508,0 (M+1)
57
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-N-(4-fluorofenil)-3metilpiperazin-1-carboxamida 467,0 (M+1)
Ej. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
58
Clorhidrato de (S)-N-(4-cianofenil)-4-(4(4-cianofenil)ftalazin-1-il)-3metilpiperazin-1-carboxamida 474,0 (M+1)
59
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-N-(2,4-fluorofenil)3-metilpiperazin-1-carboxamida 485,2 (M+1)
60
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-N-(4-flúor-2(trifluorometil)fenil)-3-metilpiperazin-1carboxamida 535,0 (M+1)
61
Clorhidrato de (S)-N-(3-cloro-4fluorofenil)-4-(4-(4-cianofenil)ftalazin-1-il)3-metilpiperazin-1-carboxamida 35Cl 501,0 (M+1)
62
Clorhidrato de (S)-N-(4-clorofenil)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-3-metilpiperazin1-carboxamida 35Cl 483,0 (M+1)
63
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-3-metil-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 517,0 (M+1)
64
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-3-metil-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 533,0 (M+1)
65
Clorhidrato de (S)-4-(4-(4cianofenil)ftalazin-1-il)-N-(4(difluorometoxi)fenil)-3-metilpiperazin-1carboxamida 515,0 (M+1)
66
Clorhidrato de (S)-N-(4-fluorofenil)-3metil-4-(4-fenilftalazin-1-il)piperazin-1carboxamida 442,2 (M+1)
Ej. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
67
Clorhidrato de (S)-N-(4-cianofenil)-3metil-4-(4-fenilftalazin-1-il)piperazin-1carboxamida 449,2 (M+1)
68
Clorhidrato de (S)-N-(2,4-difluorofenil)-3metil-4-(4-fenilftalazin-1-il)piperazin-1carboxamida 460,0 (M+1)
69
Clorhidrato de (S)-N-(4-fluoro-2(trifluorometil)fenil)-3-metil-4-(4fenilftalazin-1-il)piperazin-1-carboxamida 510,0 (M+1)
70
Clorhidrato de (S)-N-(3-cloro-4fluorofenil)-3-metil-4-(4-fenilftalazin-1il)piperazin-1-carboxamida 35Cl 476,0 (M+1)
71
Clorhidrato de (S)-N-(4-clorofenil)-3-metil4-(4-fenilftalazin-1-il)piperazin-1carboxamida 35Cl 458,0 (M+1)
72
Clorhidrato de (S)-3-metil-4-(4fenilftalazin-1-il)-N-(4(trifluorometil)fenil)piperazin-1carboxamida 492,0 (M+1)
73
Clorhidrato de (S)-3-metil-4-(4fenilftalazin-1-il)-N-(4(trifluorometoxi)fenil)piperazin-1carboxamida 508,0 (M+1)
74
Clorhidrato de (S)-N-(4(difluorometoxi)fenil)-3-metil-4-(4fenilftalazin-1-il) piperazin-1-carboxamida 490,0 (M+1)
Ej. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
75
Clorhidrato de (S)-N-(4-ciano-2fluorofenil)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)2-metilpiperazin-1-carboxamida 484,8 (M+1)
76
Clorhidrato de (S)-N-(2-fluoro-4(trifluorometil)fenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-1-carboxamida 528,0 (M+1)
77
Clorhidrato de (S)-N-(4-ciano-4fluorofenil)-4-(4-(4-cianofenil)ftalazin-1-il)2-metilpiperazin-1-carboxamida 492,0 (M+1)
78
Clorhidrato de (S)-N-(4-ciano-2fluorofenil)-2-metil-4-(4-fenilftalazin-1il)piperazin-1-carboxamida 467,0 (M+1)
79
Clorhidrato de (S)-N-(4-cloro-2fluorofenil)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)3-metilpiperazin-1-carboxamida 484,8 (M+1)
80
Clorhidrato de (S)-N-(2-fluoro-4(trifluorometil)fenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-3-1-carboxamida 528,0 (M+1)
81
Clorhidrato de (S)-N-(4-ciano-2fluorofenil)-4-(4-(4-cianofenil)ftalazin-1-il)2-metilpiperazin-1-carboxamida 492,0 (M+1)
82
Clorhidrato de (S)-N-(4-ciano-2fluorofenil)-3-metil-4-(4-fenilftalazin-1il)piperazin-1-carboxamida 467,0 (M+1)
Ej. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
83
Clorhidrato de N-(4-cianofenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-cis-2,6dimetilpiperazin-1-carboxamida 481,2 (M+1)
84
Clorhidrato de N-(4-fluorofenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-cis-2,6dimetilpiperazin-1-carboxamida 474,2 (M+1)
85
Clorhidrato de (S)-N-(4-cianofenil)-2-etil4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)piperazin1-carboxamida 481,2 (M+1)
86
Clorhidrato de (S)-N-(2,4-difluorofenil)-2etil-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1il)piperazin-1-carboxamida 492,2 (M+1)
87
Clorhidrato de (S)-2-etil-N-(4-fluoro2-(trifluorometil)fenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il) piperazin-1 -carboxamida 542,2 (M+1)
88
Clorhidrato de (S)-2-etil-N-(4-fluorofenil)4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)piperazin-1carboxamida 474,2 (M+1)
89
Clorhidrato de (2S,5S)-N-(4-cianofenil)-4(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2,5dimetilpiperazin-1-carboxamida 481,0 (M+1)
Ejemplo 90
Clorhidrato de (R)-N-(4-fluorofenil)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-(hidroximetil)piperazin-1-carboxamida
Tratar una solución de (R)-(4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)piperazin-2-il)-metanol (0,15 g, 0,44 mmol) en CH2Cl2 (3 ml) con 1-fluoro-4-isocianatobenceno (0,04 g, 0,31 mmol). Agitar la reacción a temperatura ambiente durante 30
5 minutos y después concentrar la mezcla de reacción. Purificar el residuo resultante por cromatografía en gel de sílice ultrarrápida (EtOAc al 0-50 % en hexanos, después cambiar a MeOH al 3 % en CH2Cl2) proporcionando un sólido. Disolver el sólido en MeOH (1 ml) y tratar con HCl acuoso 1 N (0,13 ml, 0,13 mmol). Concentrar la solución obteniendo el compuesto del título como un sólido (0,065 g, al 29 %). EM/ES m/z 476,0 (M+1).
Preparar las piperazinilftalazina ureas de la tabla siguiente siguiendo esencialmente el procedimiento en el Ejemplo 10 90 usando la piperazinilftalazina apropiada y el isocianato apropiado.
Ej. N.º
Nombre químico Estructura EM/ES m/z
91
Clorhidrato de (R)-N-(4-fluorofenil)-4-(4(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2(hidroximetil)piperazin-1-carboxamida 476,0 (M+1)
92
Clorhidrato de (S)-N-(4-fluorofenil)-4-(4(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2(hidroximetil)piperazin-1-carboxamida 476,0 (M+1)
93
Clorhidrato de (R)-N-(4-cianofenil)-4-(4(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-2(hidroximetil)piperazin-1-carboxamida 483,0 (M+1)

Ejemplos 94 y 95
Clorhidrato de N-(4-fluorofenil)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-trans-2,5-dimetilpiperazin-1-carboxamida, Isómero 1 e Isómero 2
Tratar una solución de 1-(trans-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-4-(4-fluorofenil)ftalazina (0,3 g, 0,89 mmol) en CH2Cl2 (5 ml) con 1-flúor-4-isocianatobenceno (0,17 g, 1,25 mmol). Agitar la reacción a temperatura ambiente durante 1 hora. Purificar la mezcla de reacción por cromatografía en gel de sílice (EtOAc al 0-50 % en hexanos). Almacenar y concentrar las fracciones apropiadas. Disolver la mezcla de isómeros de N-(4-fluorofenil)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin1-il)-trans-2,5-dimetilpiperazin-1-carboxamida (0,3 g, 0,59 mmol) en MeOH (2 ml). Separar la mezcla de isómeros trans por cromatografía quiral (Chiralcel OJ-H, caudal 30 ml/minuto, detección 225 nm, MeOH:acetonitrilo 6:4). Recoger el primer pico que eluye como Isómero 1 y el segundo pico que eluye como Isómero 2. Almacenar y concentrar las fracciones apropiadas. Disolver los isómeros separados en MeOH (1 ml) y tratar cada solución con 1 equivalente de HCl acuoso 1 N. Concentrar dando las sales de clorhidrato de Isómero 1 (0,131 g, al 44 %) e Isómero 2 (0,129 g, al 43 %). Isómero 1: EM/ES m/z 474,2 (M+1), ee del 99 %. Isómero 2: EM/ES m/z 474,2 (M+1), ee del 99 %.
Ejemplos 96 y 97
Clorhidrato de N-(4-fluorofenil)-4-(4-(4-fluorofenil)ftalazin-1-il)-cis-2,5-dimetilpiperazin-1-carboxamida, Isómero 1 e Isómero 2
Preparar los Ejemplos 96 y 97, siguiendo esencialmente el procedimiento como se describe para los Ejemplos 94 y 95 usando la mezcla de cis-dimetilpiperazinas de la Preparación 12. Separar la mezcla de isómeros cis por HPLC quiral y hacer las sales de HCl dando Isómero 1 (0,21 g, al 34 %) e Isómero 2 (0,20 g, al 33 %). Isómero 1: EM/ES m/z 474,2 (M+1), ee del 95 %. Isómero 2: EM/ES m/z 474,2 (M+1), ee del 92 %.
Biología
Erizo se ha implicado como un factor de supervivencia para los siguientes cánceres: carcinoma de célula basales; cánceres del tracto gastrointestinal superior (de esófago, de estómago, de páncreas y de tracto biliar); cáncer de próstata; cáncer de mama; cáncer de pulmón de células pequeñas; cáncer de pulmón no de células pequeñas; linfoma de linfocitos B; mieloma múltiple; cáncer gástrico, cáncer ovárico; cáncer colorrectal, cáncer de hígado; melanoma; cáncer de riñón; y cáncer de cerebro.
Se ha afirmado que elementos de la ruta de erizo son objetivos de fármacos potenciales para el tratamiento de cánceres. Una línea celular Daoy establecida a partir de tumor de meduloblastoma (ATCC, HTB-186), responde a ligandos Hh. Cuando estas células se tratan con medios Shh-condicionados añadidos de forma exógena, se activa la ruta de señalización de Hh y da como resultado una expresión incrementada de Gli1. La ciclopamina, un alcaloide aislado del falso eléboro Veratrum californicum, es un antagonista débil de erizo y se ha mostrado que suprime la expresión de Gli1 en respuesta a estimulación con Shh. Observaciones recientes sugieren que la ciclopamina inhibe el crecimiento de las células de meduloblastoma cultivadas y los alotransplantes. Usando este sistema de modelo celular Daoy, se pueden identificar inhibidores potentes de las rutas de señalización de erizo. Dado que los compuestos de la presente invención son inhibidores de erizo, son adecuados tratando los tipos de tumores anteriormente mencionados.
Determinación de CI50 de actividad biológica
El siguiente protocolo de ensayo y los resultados del mismo demuestran adicionalmente la utilidad y eficacia de los compuestos y procedimientos de la presente invención. Ensayos funcionales proporcionan respaldo a que los compuestos de la presente invención presentan la capacidad de inhibir señalización Shh. Todos los ligandos, disolventes y reactivos empleados en el siguiente ensayo están fácilmente disponibles a partir de fuentes comerciales o pueden prepararse fácilmente por alguien experto en la técnica.
La actividad biológica se determina usando un ensayo funcional en células de cáncer neuronal Daoy y mide niveles de ácido ribonucleico de Gli1 por medio de un sistema de ensayo de ADNb (ácido desoxirribonucleico ramificado) (Panomics, Inc., Fremont, CA). Gli se descubrió originalmente en una línea celular de glioblastoma y codifica una proteína de dedos de cinc que se activa por señalización Shh. La respuesta máxima se obtiene induciendo transcripción de Gli1 en las células Daoy con medio condicionado (riñón embrionario humano, células HEK-293 que expresan de forma estable Shh recombinante) durante 24 horas y midiendo después la cantidad de transcrito de Gli1 estimulado. La respuesta mínima es la cantidad de transcrito Gli1 inhibido con un compuesto control en células Daoy que se han estimulado con medios condicionados (riñón embrionario humano, células HEK-293 que expresan de forma estable Shh recombinante) durante 24 horas.
Ensayo funcional para medir la inhibición de Gli1 en células Daoy
El sistema de ensayo de ADNb utiliza la tecnología de ADN de cadena ramificada para permitir la amplificación de un ácido ribonucleico objetivo (transcrito). La tecnología emplea tres tipos de sondas de ADNc específicas de Gli1 cortas híbridas sintéticas que determinan la especificidad del transcrito objetivo [expansores de capturas (CE), expansores de marcas (LE) y bloqueantes (BL)] que hibridan como un complejo con los transcritos objetivo amplificando la señal de hibridación. La adición de un sustrato quimiolumigénico durante la etapa de amplificación permite la detección usando luminiscencia.
La línea celular Daoy obtenida de la American Type Culture Collection (ATCC) es una línea celular tumoral neuronal humana con capacidad de respuesta a Shh y se estableció en 1985 a partir de un tumor de meduloblastoma cerebelar desmoplástico, una línea celular tumoral fisiológicamente relevante. Los niveles endógenos de niveles de transcritos Gli1 son bajos en células Daoy pero pueden estimularse usando medios condicionados tomados de células que sobreexpresan de forma estable Shh humano (una línea celular HEK-293 transfectada establemente con hShh).
Las células Daoy se cultivan hasta confluencia en matraces T225 de cultivo de tejidos en medios de crecimiento Daoy que contienen Medio Mínimo Esencial (MEM) más Suero Fetal Bovino al 10 % (FBS) con aminoácidos no esenciales 0,1 nM y piruvato de sodio 1 mM. Las células se retiran de los matraces T225 usando tripsina de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), se centrifugan, se resuspenden en medios y después se cuentan.
Las células Daoy se siembran después a 50.000 células por pocillo en medios de cultivo en placas de cultivo de tejidos transparentes de 96 pocillos Costar y se dejan incubar durante toda una noche a 37 ºC en dióxido de carbono al 5 % (CO2). Las células se lavan una vez en solución salina tamponada con fosfato (PBS) seguido por adición de 100 ml de Medios Condicionados de Shh (Shh-CM) estimulando niveles de expresión de Gli1. Shh-CM se diluye logrando estimulación máxima usando medios de control de crecimiento-FBS al 0,1 %/DMEM (Medio Eagle Modificado de Dulbecco). Las células Daoy tratadas con Shh-CM se tratan después con diversas concentraciones de inhibidores de erizo variando desde aproximadamente 1 mM a 0,1 nM. Los compuestos de prueba se dejan incubar durante 24 horas a 37 ºC a CO2 al 5 %.
La medida del transcrito de Gli1 se lleva a cabo usando el ensayo de Gli1 Quantigene 2.0 como se describe por el fabricante (Panomics, Inc.). Preparar un tampón de mezcla de lisis diluida (DLM), que incluye Proteinasa K. Después de una incubación de 24 horas con compuesto, las células se lavan una vez con PBS y se añaden a las células 180 ml de DLM. La placa de células que contiene el tampón de lisis se sella y se coloca a 55 ºC durante 30 a 45 minutos. Los lisados celulares resultantes se trituran después 5 veces. Se elabora un grupo de sondas de trabajo que contienen sondas de Gli1 diluyendo las sondas en el DLM de acuerdo con las directrices del fabricante y después se añaden 20 ml del grupo de sondas de trabajo a las placas de ensayo de ADNb junto con 80 ml de los lisados de Daoy. Las placas se siembran e incuban durante toda una noche a 55 ºC. Las placas de ADNb se procesan después de acuerdo con las directrices del fabricante. La señal se cuantifica leyendo las placas en un lector de Perkin Elmer Envision que detecta luminiscencia. La señal luminiscente es directamente proporcionar a la cantidad de transcrito objetivo presente en la muestra.
Los datos de señal luminiscente a partir del ensayo funcional se usan calculando la CI50 para el ensayo in vitro. Los datos se calculan en base a los valores de control máximos (células Daoy tratadas con Shh-CM) y los valores de control mínimos (células Daoy tratadas con Shh-CM y una concentración inhibidora de un compuesto control, 1 mM de N-(3-(1H-benzo[d]imidazol-2-il)-4-clorofenil)-3,5-dimetoxibenzamida). Un ajuste de la curva de la función logística de cuatro parámetros se usa generando los valores de CI50 usando programas de software ActivityBase versión 5.3, ecuación 205 (Assay Guidance Manual Version 5.0, 2008, Eli Lilly and Company y NIH Chemical Genomics Center).
Tras el protocolo descrito, los compuestos de la invención ejemplificados en el presente documento presentan una CI50 de < 40 nM. Por ejemplo, el compuesto del Ejemplo 2 tiene una CI50 de aproximadamente 0,42 nM con un error estándar de 0,21 (n = 2) en el ensayo descrito anteriormente. Estos resultados proporcionan evidencia de que los compuestos de la presente invención son antagonistas de erizo y como tales, son útiles como agentes anticancerígenos.
Ensayo de inhibición de CYP3A4
Las muestras de incubación se preparan añadiendo una preparación microsómica al inhibidor de prueba (concentraciones finales 0,05 mg/ml de proteína, inhibidor 10 mM en NaPO4 100 mM, tampón de pH 7,4) y se mezclan. Las muestras se preincuban durante aproximadamente cinco minutos a 37 ºC. Tras el periodo de preincubación, se inicia la reacción con la adición de una solución que contiene NADPH e imidazolam como el sustrato de la enzima, (concentración final NADPH 1 mM, imidazolam 5 mM). Después de adición de la solución de NADPH, las muestras se incuban durante 3 minutos a aproximadamente 37 ºC. Tras el periodo de incubación, la reacción se desactiva por la adición de 50 ml de metanol (y un patrón interno para cromatografía) y las muestras se mezclan bien. Después de desactivar la reacción, la mezcla se centrifuga a aproximadamente 4000 rpm durante 15 minutos a aproximadamente 5 ºC y se analiza por análisis de CL/EM.
5 Las muestras se analizaron usando HPLC/EM con elución de gradiente en columnas C18 convencionales cortas, (Fase móvil de carga -H2O Milli-Q/metanol 95/5 (v/v) con ácido acético al 1 %. Fase móvil B -H2O Milli-Q/metanol 80/20 (v/v) con ácido acético al 1 %. Fase móvil C -H2O Milli-Q/metanol 5/95 (v/v) con ácido acético al 1 %. Fase móvil de aclarado -H2O Milli-Q/acetonitrilo 75/25 (v/v)).
Las muestras se inyectan en un Analizador Espectral de Masas para Seguimiento de Iones Seleccionados (SIM) a
10 una masa de 342,1 (1-OH-midazolam) y 346,1 (patrón interno de α-hidroximidazolam-d4) usando Turbolon Spray en condiciones positivas. Los datos se dan como % de inhibición de la formación de 1-OH-midazolam en presencia de una concentración de inhibidor de 10 mM.
Tras el protocolo descrito, los siguientes compuestos de la invención ejemplificados en el presente documento (Ejemplos 1-18, 26, 33-35, 44-51, 57-60, 66-69 y 85-94) presentan inhibición < 45 %. Además, los compuestos de
15 Ejemplos 1-5, 7-17, 33-35, 44, 46, 49-51, 57-59, 66-68, 85 y 89-94 presentan inhibición < 10 %.

Claims (11)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto de la fórmula siguiente:
    5 en la que, R1 es hidrógeno, flúor, ciano, trifluorometilo o metoxi; R2 es hidrógeno, flúor o trifluorometilo; R3 es hidrógeno o cloro, siempre y cuando al menos uno de R2 y R3 sea hidrógeno; R4 es cloro, flúor, ciano,
    10 trifluorometilo, difluorometoxi, metoxi o trifluorometoxi;
    representa un piperazin-1,4-diilo sustituido seleccionado del grupo 15 constituido por
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
    20 2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en el que R1 es hidrógeno, flúor o ciano, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  2. 3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o 2 en el que R1 es flúor, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  3. 4. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en el que R2 es hidrógeno o flúor, o 25 una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  4. 5.
    El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 en el que R2 es hidrógeno, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  5. 6.
    El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en el que R3 es hidrógeno, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
    5 7. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 en el que R4 is flúor, cloro, ciano, trifluorometoxi, trifluorometilo o difluorometoxi, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  6. 8. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 en el que R4 is flúor o ciano, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  7. 9. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 en el que: 10
    es
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  8. 10. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 que es (S)-N-(4-fluorofenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metilpiperazin-1-carboxamida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
    20 11. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 10 que es clorhidrato de (S)-N-(4-fluorofenil)-4-(4-(4fluorofenil)ftalazin-1-il)-2-metilpiperazin-1-carboxamida.
  9. 12.Una composición farmacéutica que comprende el compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-11,
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.
    25 13. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para usar como un medicamento.
  10. 14.
    Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para usar en el tratamiento de cáncer.
  11. 15.
    El compuesto o sal para usar de acuerdo con la reivindicación 14 en el que el cáncer está seleccionado del grupo
    30 constituido por cáncer cerebral, carcinoma de células basales, cáncer de esófago, cáncer gástrico, cáncer pancreático, cáncer del tracto biliar, cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer de pulmón de células pequeñas, cáncer de pulmón de células no pequeñas, linfoma de infocitos B, mieloma múltiple, cáncer de ovario, cáncer colorrectal, cáncer de hígado, cáncer de riñón y melanoma.
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