ES2216050T3

ES2216050T3 - Uso de l-carnitina y derivados para reducir niveles de ceramida y potenciar el efecto antiretroviral.

Info

Publication number: ES2216050T3
Application number: ES96924124T
Authority: ES
Inventors: Sonia Moretti
Original assignee: Mendes SRL; Sigma Tau Industrie Farmaceutiche Riunite SpA
Current assignee: Mendes SRL; Sigma Tau Industrie Farmaceutiche Riunite SpA
Priority date: 1995-08-03
Filing date: 1996-07-19
Publication date: 2004-10-16
Anticipated expiration: 2016-07-19
Also published as: DE69631768T2; MX9800915A; DE69631768D1; BR9609947A; EP0839033B1; CN1193912A; WO1997005864A3; CN1161116C; HK1015273A1; IT1277897B1; ITRM950544A1; AU719906B2; WO1997005864A2; ITRM950544A0; RU2269340C2; TW464493B; DK0839033T3; KR100412532B1; EP0839033A2; AU6469096A

Abstract

LA PRESENTE INVENCION PRESENTA UN USO NUEVO DE L - CARNITINA, SUS DERIVADOS Y SUS SALES FARMACOLOGICAMENTE ACEPTABLES EN COMBINACION CON FARMACOS ANTIRRETROVIRICOS PARA REDUCIR LOS NIVELES DE CERAMIDA Y POTENCIAR LA ACTIVIDAD DE LOS FARMACOS ANTIRRETROVIRICOS ANTES MENCIONADOS PARA EL TRATAMIENTO TERAPEUTICO DE LA INFECCION POR EL VIH Y EL SIDA.

Description

Uso de L-carnitina y derivados para reducir niveles de ceramida y potenciar el efecto antiretroviral.

La presente invención se refiere a un uso terapéutico novedoso de la L-carnitina, de los derivados de la misma y de sus sales farmacéuticamente aceptables en combinación con fármacos antirretrovíricos para el tratamiento terapéutico de la infección por VIH y el sida. Más particularmente, la presente invención se refiere al uso de L-carnitina, L-carnitinas de acilo, en las que el grupo acilo, lineal o ramificado, tiene 2-6 átomos de carbono, y las sales farmacéuticamente aceptables de las mismas en combinación con inhibidores semejantes a nucleósidos de la transcriptasa inversa, inhibidores no nucleósidos de la transcriptasa inversa e inhibidores de la proteasa del VIH, para reducir los niveles de ceramida y aumentar la actividad de los fármacos antirretrovíricos mencionados anteriormente en los pacientes infectados por VIH.

La mayoría de los mecanismos patógenos que contribuyen a la progresión de la infección debida al virus de la inmunodeficiencia humana 1 ó 2 (VIH-1, VIH-2) están relacionados, directa o indirectamente, con el estado de activación general del sistema inmunitario.

La activación crónica del sistema inmunitario potencia la replicación vírica a través de la secreción de diversas citoquinas que favorecen la expresión del VIH y mediante el mantenimiento de una reserva de células inmunitarias activadas que actúan como dianas del VIH y facilitan su replicación.

Además, el estado de activación persistente del sistema inmunitario induce anormalidades de tal naturaleza (por ejemplo, apoptosis aumentada) que conducen a un debilitamiento progresivo de las respuestas inmunitarias.

De este modo, se establece un círculo vicioso: pérdida progresiva de la competencia del sistema inmunitario\rightarrow diseminación vírica\rightarrow eliminación reducida de los virus\rightarrow activación crónica del sistema inmunitario. El proceso anterior puede durar años hasta que sucede un deterioro marcado del sistema inmunitario tal que conduce a una replicación vírica incontrolada y al inicio de las infecciones oportunistas o al desarrollo del síndrome de inmunodeficiencia adquirida (sida).

Sobre la base de los mecanismos patógenos esbozados anteriormente, parece claro que cualquier tratamiento anti-VIH debe dirigirse a la reducción de la replicación vírica y al bloqueo del deterioro del sistema inmunitario.

Desafortunadamente, en lo que se refiere a la terapia antirretrovírica, el VIH se caracteriza por un alto grado de variabilidad genética que se origina sobre todo por la falta sustancial de precisión de la transcriptasa inversa. La enzima retrovírica carece de sistemas enzimáticos para el control de los posibles errores de la transcripción. El resultado es la aparición de variantes del virus-hasta un intervalo que es función de la replicación vírica-que son responsables de la evitación progresiva del sistema inmunitario y de la resistencia a los fármacos antirretrovíricos. En el caso de la zidovudina (AZT, ZDV) la pérdida de eficacia clínica en situaciones de monoterapia es un hecho ampliamente conocido. Incluso los agentes antirretrovíricos descubiertos más recientemente, por ejemplo, zalcitabina [ddc], didanosina [ddI] y lamivudina [3TC] sufren la misma desventaja.

Recientemente, se ha demostrado que la ceramida estimula la expresión del VIH. Además, la ceramida es uno de los factores capaces de inducir la apoptosis celular, un fenómeno que aumenta en los sujetos con infección por VIH y que contribuye a la reducción de los linfocitos TCD4 y TCD8. De este modo, parece evidente que los cambios en la concentración o el metabolismo de la ceramida pueden afectar a la carga vírica y a la apoptosis celular en los sujetos infectados por VIH (Papp B. y col., AIDS, Res. Hum. Retrovirus, 10 (7), 775-80).

De un modo sorprendente, ahora se ha encontrado que la L-carnitina y los derivados de la misma, es decir, las L-carnitinas de acilo en las que el grupo acilo, lineal o ramificado, tiene 2-6 átomos de carbono y las sales farmacéuticamente aceptables de las mismas inhiben la síntesis de ceramida en, al menos, el 25% y cuando se usan en combinación con fármacos antirretrovíricos tales como, por ejemplo, AZT, estavudina [d4T], fluorotimidina [FLT], azidouridina [Azdu], nucleósidos acíclicos fosforilados [PMEA], nucleósidos específicos de VIH-1 [TSAO], zalcitabina [ddC], didanosina [ddI] y lamivudina [3TC], dipiridodiacepinonas, tetrahidroimidazolbenzodiacepinonas, piridonas o fármacos L, bis-heteroarilpiperazinas, derivados de \alpha-anilinofenil-acetamida, derivados de quinaxolina, Ro-31-8959, U-81.749, KNI-227, SC-52.151, HOE/BAY 793 y similares, aumentan la actividad antirretrovírica y la defensa del sistema inmunitario ejercida por estos fármacos.

Un objeto de la presente invención es el uso de L-carnitina o L-carnitinas de acilo, en las que el grupo acilo es como se define anteriormente, y las sales farmacéuticamente aceptables de las mismas en combinación con los fármacos antirretrovíricos anteriores para producir un medicamento para el tratamiento terapéutico de la infección por VIH y el sida en pacientes con niveles normales séricos e intracelulares de carnitina.

Las sales farmacéuticamente aceptables de L-carnitina o L-carnitina de acilo incluyen, además de las sales internas, cualquier sal de éstas con ácidos que no den lugar a efectos tóxicos o secundarios indeseables. Estos ácidos son bien conocidos para los farmacólogos medianamente expertos y para los expertos en la tecnología farmacéutica.

Los ejemplos no limitantes de sales adecuadas incluyen el cloruro; bromuro; yoduro; aspartato, particularmente aspartato ácido; citrato, particularmente citrato ácido; tartrato; fosfato, particularmente fosfato ácido; fumarato, particularmente fumarato ácido; glicerofosfato; fosfato de glucosa; lactato; maleato, particularmente maleato ácido; orotato; oxalato, particularmente oxalato ácido; sulfato, particularmente sulfato ácido; tricloroacetato; trifluoroacetato y metansulfonato.

Son particularmente preferidos L-carnitina, y L-carnitina de acetilo, propionilo, butirilo, valerilo e isovalerilo.

La administración combinada de L-carnitina y sus derivados como se definen anteriormente más un agente antirretrovírico es, generalmente, realizada a través de las vías oral o parenteral en dosis diarias que varían de 1 a 500 mg/kg, con una preferencia particular por las dosis de 20 a 100 mg/kg, con una relación de L-carnitina y sus derivados como se definen anteriormente respecto al agente antirretrovírico que varía de 1:40 a 40:1, con una preferencia particular por las relaciones de 1:10 a 10:1.

De un modo conveniente, la administración tomará la forma de una dosis única que incluye ambos ingredientes activos y que también puede incluir excipientes e ingredientes activos adicionales bien conocidos por los expertos en la técnica, tales como, por ejemplo, dextrano, inhibidores del TNF-\alpha (por ejemplo, pentoxifilina), glutatión y otros fármacos antioxidantes (por ejemplo, acetilcisteína), fármacos inmuno-moduladores, agentes inmunosupresores o quimioterapéuticos, vitaminas y oligoelementos.

Por último, debe indicarse que todo sugiere que otros aminoácidos básicos, particularmente lisina, derivados acílicos de aminoácidos básicos y sus sales farmacéuticamente aceptables son capaces de reducir los niveles de ceramida y de potenciar la actividad de los fármacos antirretrovíricos en la gestión terapéutica de la infección por VIH y el sida.

El fin de los ejemplos que siguen en el presente documento más adelante es ilustrar la invención y no deben interpretarse como limitantes, de ningún modo, del intervalo de posibilidades.

Ejemplo 1

Se evaluó el efecto de la administración de una combinación de L-carnitina (8 g diarios vía oral durante cuatro semanas) más AZT (600 mg diarios vía oral) en 13 pacientes que padecían sida con niveles normales séricos e intracelulares de carnitina y acetilcarnitina, a los que se les había prescrito previamente el tratamiento con AZT (600 mg diarios vía oral) durante, al menos, 6 meses.

Las determinaciones se llevaron a cabo antes del tratamiento combinado, mientras los pacientes estaban tomando solamente AZT (T0), después de 4 semanas de terapia con la combinación de L-carnitina-AZT (T1) y un mes después de la interrupción del tratamiento con L-carnitina (T2), dejando a los pacientes sólo con AZT. Se midieron los linfocitos TCD4 mediante citometría de flujo por medio de un anticuerpo monoclonal específico (número de linfocitos por mm^{3}) y los linfocitos apoptóticos mediante citometría de flujo después de teñirlos con yoduro de propidio, cuantificándose las células con núcleos hipodiploides (número de linfocitos por 50.000 células). La carga vírica (número de partículas víricas por ml de suero) se determinó cuantificándose el ARN del VIH -1 por medio de una reacción en cadena de la polimerasa (sistema de detección de VIH Amplicor de Roche). Se usó el test de Wilcoxon para el procesamiento estadístico.

Los resultados se muestran en la tabla 1 más adelante en el presente documento.

TABLA 1

1

2

En los mismos sujetos, los niveles de ceramida en linfocitos, medidos mediante el ensayo de la DAG (diacilglicerol) quinasa (Cifone M.G. y col., J.Exp. Med., 180 (4), 1547-52), cayeron de 48\pm8 pmoles/10^{6} linfocitos medidos antes del tratamiento de combinación (T0) hasta 27\pm5 pmoles/10^{6} linfocitos (T1) (P < 0,01), elevándose de nuevo hasta 38\pm9 pmoles/10^{6} linfocitos un mes después de la interrupción del tratamiento con L-carnitina (T2).

Estos resultados muestran claramente que el tratamiento con AZT solo, incluso aunque previamente se había prolongado durante más de seis meses (T0), no proporciona las mejoras inmunológicas y virológicas que se consiguen con la combinación de L-carnitina-AZT en sólo cuatro semanas (T1). Estas mejoras tienden a declinar cuando se interrumpe el tratamiento (T2).

Ejemplo 2

Se trataron cuatro sujetos con sida con 600 mg de AZT diariamente vía oral. De éstos, dos también se trataron con 3 g de L-carnitina diariamente. La duración total del tratamiento fue de 6 meses. Se realizaron biopsias de músculo antes y después del tratamiento. Se determinó la ceramida presente al nivel de las células musculares antes y después del tratamiento, después de sonicar y homogeneizar el material de la biopsia. Se determinó la carga vírica en los mismos homogeneizados de músculo, como se describe en el ejemplo 1.

Los resultados se muestran en la tabla 2 más adelante en el presente documento.

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA 2

3

Es evidente que el tratamiento con la combinación de L-carnitina-AZT es distintivamente más eficaz a la hora de reducir la carga vírica y los niveles de ceramida, también al nivel del músculo, en comparación con el tratamiento con AZT solo.

Claims

1. Uso de L-carnitina, L-carnitina de acilo, en la que el grupo acilo, lineal o ramificado, tiene 2-6 átomos de carbono y las sales farmacéuticamente aceptables de las mismas en combinación con inhibidores semejantes a nucleósidos de la transcriptasa inversa, inhibidores no nucleósidos de la transcriptasa inversa e inhibidores de la proteasa del VIH, para producir un medicamento adecuado para reducir los niveles de ceramida y aumentar la actividad de los fármacos antirretrovíricos mencionados anteriormente en el tratamiento terapéutico de la infección por VIH y el sida en pacientes con niveles normales séricos e intracelulares de carnitina, siendo capaz, dicho medicamento, de elevar el número de linfocitos TCD4; siendo capaz, dicho medicamento, de disminuir la carga vírica y siendo, dicho medicamento administrado durante, al menos, 4 semanas.

2. El uso de la reivindicación 1, en el que se usa L-carnitina.

3. El uso de la reivindicación 1, en el que la L-carnitina de acilo es L-carnitina de isovalerilo.

4. El uso de la reivindicación 1, en el que se usa un aminoácido básico, un aminoácido básico acilado, o sales farmacéuticamente aceptable de los mismos.