ES2273910T3

ES2273910T3 - Nuevos derivados de pirazolopiridinma substituidos con sulfonamida.

Info

Publication number: ES2273910T3
Application number: ES01989460T
Authority: ES
Inventors: Johannes-Peter Stasch; Achim Feurer; Stefan Weigand; Elke Stahl; Dietmar Flubacher; Cristina Alonso-Alija; Frank Wunder; Dieter Lang; Klaus Dembowsky; Alexander Straub; Elisabeth Perzborn
Original assignee: Bayer Healthcare AG
Current assignee: Bayer AG
Priority date: 2000-11-22
Filing date: 2001-11-12
Publication date: 2007-05-16
Anticipated expiration: 2021-11-12
Also published as: DE50111292D1; EP1339714A1; AU2002227919A1; JP2004517828A; EP1339714B1; JP4309653B2; DE10057754A1; US7115599B2; US20040067937A1; CA2429313A1; WO2002042302A1

Abstract

Compuestos de fórmula general (I) en la que R1 representa H, Cl o NH2, R2 y R3 forman, junto con los heteroátomos a los que están unidos, un heterociclo de cinco a siete eslabones que puede ser saturado o parcialmente insaturado, dado el caso puede contener uno o varios otros heteroátomos del grupo de N, O, S y dado el caso puede estar substituido; así como sales, isómeros e hidratos de los mismos.

Description

Nuevos derivados de pirazolopiridina substituidos con sulfonamida.

La presente invención se refiere a nuevos compuestos químicos que estimulan la guanilatociclasa soluble, a su preparación y a su uso como medicamentos, en especial como medicamentos para el tratamiento de enfermedades cardiocirculatorias.

Uno de los sistemas de transmisión celular más importantes en células de mamíferos es el monofosfato cíclico de guanosina (GMPc). Junto con monóxido de nitrógeno (NO), que se libera del endotelio y transmite señales hormonales y mecánicas, constituye el sistema NO/GMPc. Las guanilatociclasas catalizan la biosíntesis de GMPc a partir de trifosfato de guanosina (GTP). Los representantes hasta ahora conocidos de esta familia pueden clasificarse tanto por características estructurales como también por el tipo de los ligandos en dos grupos: las guanilatociclasas particulares estimulables por péptidos natriuréticos y las guanilatociclasas solubles estimulables por NO. Las guanilatociclasas solubles están compuestas por dos subunidades y contienen con la máxima probabilidad un hemo por heterodímero que es una parte del centro regulador. Esto tiene una importancia capital para el mecanismo de activación. El NO puede unirse al átomo de hierro del hemo y aumentar de este modo claramente la actividad de la enzima. Las preparaciones exentas de hemo no pueden por el contrario estimularse por NO. También el CO es capaz de fijarse al átomo central de hierro del hemo, siendo la estimulación por CO claramente menor que la de por NO.

Mediante la formación de GMPc y la regulación de fosfodiesterasas, canales de iones y proteinquinasas resultante de ello, la guanilatociclasa juega un papel decisivo en distintos procesos fisiológicos, en especial en la relajación y proliferación de células de músculo liso, la agregación y adhesión plaquetaria y la transmisión de señales neuronales así como en enfermedades que son consecuencia de una alteración de los procesos anteriormente indicados. En condiciones patofisiológicas el sistema NO/GMPc puede estar suprimido, lo que por ejemplo puede conducir a hipertensión arterial, a una activación plaquetaria, a una proliferación celular incrementada, disfunción endotelial, aterosclerosis, angina de pecho, insuficiencia cardiaca, trombosis, apoplejía cerebral e infarto de miocardio.

Una posibilidad de tratamiento para tales enfermedades independiente del NO, dirigido a influir en la ruta de la señal del GMPc, es un enfoque prometedor debido a la elevada eficiencia y pocos efectos secundarios que son de esperar.

Para la estimulación terapéutica de la guanilatociclasa soluble se han utilizado hasta ahora exclusivamente compuestos como nitratos orgánicos, cuya actividad se basa en NO. Este se forma por bioconversión y activa la guanilatociclasa soluble por fijación al átomo central de hierro del hemo. Además de los efectos secundarios, el desarrollo de tolerancias pertenece a los inconvenientes decisivos de este modo de tratamiento.

En los últimos años se han descrito algunas substancias que estimulan directamente la guanilatociclasa soluble, es decir sin liberación previa de NO, como por ejemplo el 3-(5'-hidroximetil-2'-furil)-1-bencilindazol (YC-1, Wu y col., Blood 84 (1994), 4226; Mülsch y col., Brit. J. Pharmacol. 120 (1997), 681), Fettsäuren (Goldberg y col., J. Biol. Chem. 252 (1977), 1279), el hexafluorofosfato de difenilyodonio (Pettibone y col., Eur. J. Pharmacol. 116 (1985), 307), la isoliquiritigenina (Yu y col., Brit. J. Pharmacol. 114 (1995), 1587) así como distintos derivados de pirazol substituidos (documento WO 98/16223).

Además en los documentos WO 98/16507, WO 98/23619, WO 00/06567, WO 00/06568, WO 00/06569 y WO 00/21954 están descritos derivados de pirazolopiridina como estimuladores de la guanilatociclasa soluble. En estas solicitudes de patente están también descritas pirazolopirimidinas que presentan un resto pirimidina en posición 3. Tales compuestos presentan una actividad in vitro muy elevada en lo que respecta a la estimulación de la guanilatociclasa soluble. No obstante se ha mostrado que estos compuestos presentan algunos inconvenientes en lo que respecta a sus propiedades in vivo, como por ejemplo su comportamiento en el hígado, su comportamiento farmacocinético, su relación dosis-actividad o su ruta de metabolización.

Ha sido por consiguiente el cometido de la presente invención proporcionar otros derivados de pirazolopiridina que actúen como estimuladores de la guanilatociclasa soluble, pero no presenten los inconvenientes anteriormente mencionados de los compuestos del estado de la técnica.

Este cometido se resuelve conforme a la presente invención mediante los compuestos según la reivindicación 1. Estos nuevos derivados de pirazolopiridina se caracterizan por un resto de pirimidina en la posición 3 que presenta un patrón de substitución determinado, concretamente un resto sulfonamida en la posición 5 del anillo de pirimidina así como uno o dos grupos amino en la posición 4 y dado el caso 6 del anillo de pirimidina.

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En concreto la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I)

1

en la que

R^{1}: representa H, Cl o NH_{2},

R^{2} y R^{3} forman, junto con los heteroátomos a los que están unidos, un heterociclo de cinco a siete eslabones que puede ser saturado o parcialmente insaturado, dado el caso puede contener uno o varios otros heteroátomos del grupo de N, O, S y dado el caso puede estar substituido;

así como sales, isómeros e hidratos de los mismos.

Son preferidos conforme a la presente invención compuestos de fórmula (I) en la que

R^{1}: representa H, Cl o NH_{2},

R^{2} y R^{3} forman, junto con los heteroátomos a los que están unidos, un heterociclo de cinco a siete eslabones que puede ser saturado o parcialmente insaturado, dado el caso puede contener uno o varios otros heteroátomos del grupo de N, O, S;

así como sales, isómeros e hidratos de los mismos.

Son especialmente preferidos a este respecto compuestos de fórmula (I) en la que

R^{1}: representa H, Cl o NH_{2},

R^{2} y R^{3} forman, junto con los heteroátomos a los que están unidos, un heterociclo de cinco a siete eslabones saturado;

así como sales, isómeros e hidratos de los mismos.

Los compuestos de fórmula general (I) conforme a la invención pueden también presentarse en forma de sus sales. En general son aquí de mencionar sales con bases o ácidos orgánicos o inorgánicos.

En el marco de la presente invención se prefieren sales fisiológicamente inocuas. Sales fisiológicamente inocuas de los compuestos conforme a la invención pueden ser sales de las substancias conforme a la invención con ácidos minerales, ácidos carboxílicos o ácidos sulfónicos. Son especialmente preferidas p.ej. sales con ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido p-toluenosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido naftalenodisulfónico, ácido acético, ácido propiónico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido maleico o ácido benzoico.

Igualmente pueden ser sales fisiológicamente inocuas sales de metales o de amonio de los compuestos conforme a la invención que posean un grupo carboxilo libre. Son especialmente preferidas, p.ej., las sales de sodio, potasio, magnesio o calcio así como las sales de amonio, derivadas del amoniaco, o de aminas orgánicas como por ejemplo la etilamina, di- o trietilamina, di- o trietanolamina, diciclohexilamina, dimetilaminoetanol, arginina, lisina o etilendiamina.

Los compuestos conforme a la invención pueden existir en formas estereoisómeras que se comportan como objeto y su imagen especular (enantiómeros), o que no se comportan como objeto y su imagen especular (diastereómeros). La invención se refiere tanto a los enantiómeros o diastereómeros como también a sus mezclas respectivas. Las formas racémicas pueden separarse de modo conocido, por ejemplo por separación cromatográfica, al igual que los diastereómeros, en los componentes estereoisómeros unitarios. En los compuestos conforme a la invención los dobles enlaces existentes pueden estar presentes en la configuración cis o trans (forma Z o E).

Además determinados compuestos pueden presentarse en formas tautómeras. Esto es sabido por el técnico en la materia y tales compuestos están igualmente comprendidos en el alcance de la invención.

Además, los compuestos conforme a la invención pueden presentarse en forma de sus hidratos, dependiendo el número de moléculas de agua unidas a la molécula del respectivo compuesto conforme a la invención.

En el marco de la presente invención los substituyentes tienen en general en tanto no se indique otra cosa el siguiente significado:

Alquilo representa en general un resto de hidrocarburo de cadena lineal o ramificado de 1 a 20 átomos de carbono. A modo de ejemplo son de mencionar metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, pentilo, isopentilo, hexilo, isohexilo, heptilo, isoheptilo, octilo e isooctilo, nonilo, decilo, dodecilo, eicosilo.

Alquileno representa en general un puente de hidrocarburo de cadena lineal o ramificado de 1 a 20 átomos de carbono. A modo de ejemplo son de mencionar metileno, etileno, propileno, \alpha-metiletileno, \beta-metiletileno, \alpha-etiletileno, \beta-etiletileno, butileno, \alpha-metilpropileno, \beta-metilpropileno, \gamma-metilpropileno, \alpha-etilpropileno, \beta-etilpropileno, \gamma-etilpropileno, pentileno, hexileno, heptileno, octileno, nonileno, decileno, dodecileno y eicosileno.

Alquenilo representa en general un resto de hidrocarburo de cadena lineal o ramificado de 2 a 20 átomos de carbono y con uno o varios, preferiblemente con uno o dos enlaces dobles. A modo de ejemplo son de mencionar alilo, propenilo, isopropenilo, butenilo, isobutenilo, pentenilo, isopentenilo, hexenilo, isohexenilo, heptenilo, isoheptenilo, octenilo, isooctenilo.

Alquinilo representa en general un resto de hidrocarburo de cadena lineal o ramificado de 2 a 20 átomos de carbono y con uno o varios, preferiblemente con uno o dos enlaces triples. A modo de ejemplo son de mencionar etinilo, 2-butinilo, 2-pentinilo y 2-hexinilo.

Acilo representa en general un alquilo inferior de cadena lineal o ramificado de 1 a 9 átomos de carbono que está unido a través de un grupo carbonilo. A modo de ejemplo son de mencionar: acetilo, etilcarbonilo, propilcarbonilo, butilcarbonilo e isobutilcarbonilo.

Alcoxi representa en general un resto de hidrocarburo de cadena lineal o ramificado de 1 a 14 átomos de carbono unido a través de un átomo de oxígeno. A modo de ejemplo son de mencionar metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutoxi, pentoxi, isopentoxi, hexoxi, isohexoxi, heptoxi, isoheptoxi, octoxi o isooctoxi. Los términos "alcoxi" y "alquiloxi" se utilizan como sinónimos.

Alcoxialquilo representa en general un resto alquilo de hasta 8 átomos de carbono que está substituido con un resto alcoxi de hasta 8 átomos de carbono.

Alcoxicarbonilo puede representarse por ejemplo mediante la fórmula

---

\delm{C}{\delm{\dpara}{\delm{O}{}}}

--- OAlquilo

Alquilo representa aquí en general un resto de hidrocarburo de cadena lineal o ramificado de 1 a 13 átomos de carbono. A modo de ejemplo son de mencionar los siguientes restos alcoxicarbonilo: metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, propoxicarbonilo, isopropoxicarbonilo, butoxicarbonilo o isobutoxicarbonilo.

Cicloalquilo representa en general un resto de hidrocarburo cíclico de 3 a 8 átomos de carbono. Son preferidos ciclopropilo, ciclopentilo y ciclohexilo. Son de mencionar a modo de ejemplo ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y ciclooctilo.

Cicloalcoxi representa en el marco de la invención un resto alcoxi cuyo resto de hidrocarburo es un resto cicloalquilo. El resto cicloalquilo tiene en general hasta 8 átomos de carbono. Son de mencionar a modo de ejemplo ciclopropiloxi y ciclohexiloxi. Los términos "cicloalcoxi" y "cicloalquiloxi" se utilizan como sinónimos.

Arilo representa en general un resto aromático de 6 a 10 átomos de carbono. Son restos arilo preferidos fenilo y naftilo.

Halógeno representa en el marco de la invención flúor, cloro, bromo y yodo.

Heterociclo representa en general en el marco de la invención un heterociclo saturado, insaturado o aromático de 3 a 10 eslabones, por ejemplo de 5 ó 6 eslabones, que puede contener hasta 3 heteroátomos de la serie de S, N y/u O y que en el caso de un átomo de nitrógeno puede estar unido también a través de este. A modo de ejemplo son de mencionar: oxadiazolilo, tiadiazolilo, pirazolilo, piridilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirazinilo, tienilo, furilo, pirrolilo, pirrolidinilo, piperazinilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrofuranilo, 1,2,3-triazolilo, tiazolilo, oxazolilo, imidazolilo, morfolinilo o piperidilo. Son preferidos tiazolilo, furilo, oxazolilo, pirazolilo, triazolilo, piridilo, pirimidinilo, piridazinilo y tetrahidropiranilo. El término "heteroarilo" (o "hetarilo") representa un resto heterocíclico aromático.

Los compuestos de fórmula (I) conforme a la invención pueden prepararse por reacción del compuesto de fórmula (II)

2

en la que R^{1} está definido como anteriormente;

con un compuesto de fórmula X-L-SO_{2}X

en la que

X: representa un grupo saliente que puede substituirse por un grupo amino, como por ejemplo halógeno;

L: representa un grupo alcanodiilo o un grupo alquenodiilo con respectivamente 3 a 5 átomos de carbono, pudiendo estar reemplazado uno o varios átomos de carbono por uno o varios heteroátomos del grupo de N, O, S y pudiendo estar el grupo, dado el caso, substituido;

en presencia de una base orgánica a temperatura ambiente y subsiguiente reacción con una base en un disolvente orgánico con calefacción.

El compuesto de partida de fórmula (IIa)

3

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puede prepararse por reacción del compuesto de fórmula (III)

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con el compuesto de fórmula (IV)

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5

en un disolvente orgánico con calentamiento para obtener un compuesto de fórmula (V)

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6

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reacción con un agente reductor como níquel Raney en presencia de hidrógeno en un disolvente orgánico con calentamiento para obtener un compuesto de fórmula (VI)

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y eliminación del grupo hidroxi por reacción con un agente de cloración como POCl_{3} en presencia de una base orgánica con calentamiento y subsiguiente reacción con formiato amónico en presencia de un catalizador en un disolvente orgánico.

El compuesto de partida de fórmula (IIb)

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puede prepararse por reacción del compuesto de fórmula (III)

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con el compuesto de fórmula (VII)

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en un disolvente orgánico en presencia de una base con calentamiento para obtener un compuesto de fórmula (VIII)

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y reacción con un agente reductor como níquel Raney en un disolvente orgánico con calentamiento.

El compuesto de fórmula (III) puede prepararse conforme al siguiente esquema de reacciones:

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El compuesto de fórmula (III) puede obtenerse en una síntesis de varias etapas a partir de la sal sódica del éster etílico del ácido cianopirúvico conocida por la literatura (Borsche y Manteuffel, Liebigs Ann. Chem. 1934, 512, 97). Mediante su reacción con 2-fluorobencilhidrazina con calentamiento en una atmósfera de gas protector en un disolvente inerte como dioxano se obtiene 5-amino-1-(2-fluorobecil)-pirazol-3-carboxilato de etilo, que por reacción con dimetilaminoacroleína en medio ácido bajo atmósfera de gas protector y calentamiento se cicla al correspondiente derivado de piridina. Este derivado de piridina, el 1-(2-fluorobecil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-carboxilato de etilo, se transforma mediante una secuencia de varios pasos constituida por la transformación del éster con amoniaco en la correspondiente amida, deshidratación con un agente sustractor de agua como anhídrido trifluoroacético al correspondiente derivado nitrilo, reacción del derivado nitrilo con metilato sódico y finalmente reacción con cloruro amónico, en el compuesto de fórmula (III).

El compuesto de fórmula (IV) puede obtenerse a partir de cianoacetato de etilo y anilina conforme al protocolo de Menon R., Purushothaman E., J. Indian Chem. Soc. 74 (1977), 123.

La reacción del compuesto de fórmula (III) con el compuesto de fórmula (IV) para dar el compuesto de fórmula (V) puede realizarse por reacción de estos reactantes preferiblemente en cantidades equimolares, dado el caso en un disolvente orgánico, por ejemplo un hidrocarburo aromático, en especial tolueno, preferiblemente a presión normal y con agitación de la solución de reacción durante varias horas, por ejemplo 12 horas, a temperatura elevada, por ejemplo a 60-130ºC, preferiblemente a reflujo del disolvente.

La reacción del compuesto de fórmula (V) para dar el compuesto de fórmula (VI) puede realizarse por reacción con hidrógeno en presencia de un catalizador utilizado habitualmente para tales reacciones, como por ejemplo Ni Raney, en un disolvente orgánico utilizado habitualmente para tales reacciones, como por ejemplo dimetilformamida (DMF) (cf. también los datos para la síntesis del compuesto VIII) preferiblemente por aplicación de hidrógeno a 3 a 8 MPa, en especial de hidrógeno a 5 a 7 MPa y agitación de la solución de reacción durante varias horas, por ejemplo 24 horas, a temperatura elevada, por ejemplo a 50-100ºC, preferiblemente a 50 a 80ºC.

La eliminación del grupo hidroxi del compuesto de fórmula (VI) obteniendo el compuesto de fórmula (IIa) puede realizarse conforme a la invención preferiblemente a través de una reacción en dos etapas. En el primer paso se substituye conforme a la invención el grupo hidroxi por un grupo halógeno, preferiblemente un resto cloro. Esto puede llevarse a cabo por reacción del compuesto de fórmula (VI) con una cantidad preferiblemente equimolar de un agente de halogenación, en especial un agente de cloración como por ejemplo POCl_{3} en presencia de cantidades catalíticas de una base orgánica, por ejemplo una amina, preferiblemente N,N-dimetilanilina, dado el caso en un disolvente orgánico utilizado habitualmente para tales reacciones, preferiblemente a presión normal y agitando la solución de reacción durante varias horas, por ejemplo 3 a 6 horas, a temperatura elevada, por ejemplo 60-130ºC, preferiblemente a reflujo de la solución de reacción. En el segundo paso se elimina entonces el resto halógeno, como el resto cloro, del modo conocido por el técnico en la materia, por ejemplo por reacción con un exceso, por ejemplo un exceso de siete a quince veces, de formiato amónico en presencia de un catalizador utilizado habitualmente para tales reacciones, como por ejemplo Pd/C, en un disolvente orgánico utilizado habitualmente para tales reacciones, como por ejemplo un alcohol, preferiblemente metanol, y agitación de la solución de reacción durante varias horas a varios días, por ejemplo 1 a 3 días, a temperatura elevada, por ejemplo 50-130ºC, preferiblemente a reflujo de la solución de reacción.

La síntesis del compuesto de fórmula (VII), fenilazomalonodinitrilo, a partir de anilina y malonodinitrilo por diazotación es conocida por la literatura (L.F. Cavalieri, J.F. Tanker, A. Bendlich, J. Am. Chem. Soc. 1949, 71, 533).

La reacción del compuesto de fórmula (IIb) con fenilazomalonodinitrilo (compuesto de fórmula (VII)) se lleva a cabo en presencia de una base. A este respecto pueden utilizarse en general bases inorgánicas u orgánicas. A estas pertenecen preferiblemente hidróxidos alcalinos como por ejemplo hidróxido sódico o hidróxido potásico, hidróxidos alcalinotérreos como por ejemplo hidróxido de bario, carbonatos alcalinos como carbonato sódico o carbonato potásico, carbonatos alcalinotérreos como carbonato cálcico, o alcoholatos alcalinos o alcalinotérreos como metanolato sódico o potásico, etanolato sódico o potásico o terc-butilato potásico, o aminas orgánicas (trialquil(C_{1}-C_{6})aminas) como trietilamina, o heterociclos como 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO), 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU), piridina, diaminopiridina, metilpiperidina o morfolina. También es posible utilizar como bases metales alcalinos, como sodio, y sus hidruros, como hidruro sódico. Es preferido el metanolato sódico.

Como disolvente son adecuados a este respecto disolventes orgánicos inertes. A estos pertenecen éteres, como dietiléter o tetrahidrofurano, DME, dioxano, alcoholes como metanol y etanol, hidrocarburos halogenados como diclorometano, triclorometano, tetraclorometano, 1,2-dicloroetano, tricloroetano, tetracloroetano, 1,2-dicloroetano o tricloroetileno, hidrocarburos como benceno, xileno, tolueno, hexano, ciclohexano o fracciones de petróleo, nitrometano, dimetilformamida, acetona, acetonitrilo o hexametilfosforotriamida. Es igualmente posible utilizar mezclas de los disolventes. Es especialmente preferido el tetrahidrofurano, la dimetilformamida, el tolueno, dioxano o
dimetoxietano.

La reacción se lleva a cabo calentando a temperaturas entre 60ºC y 110ºC y a presión normal. Se deja reaccionar la mezcla de reacción aproximadamente 5-24 horas, preferiblemente 12 a 24 horas.

A continuación, por disociación del grupo azo, se obtiene el compuesto de fórmula (IIb). Como agente reductor pueden utilizarse para ello metales, en especial cinc, en presencia de ácidos minerales, como ácido clorhídrico, Na_{2}SO_{4}, boranos o hidrógeno en presencia de un catalizador. Conforme a la invención es preferido el uso de hidrógeno en presencia de níquel Raney.

Como disolvente pueden utilizarse los disolventes anteriormente indicados. Es especialmente preferida a este respecto la dimetilformamida (DMF). La reacción se lleva a cabo preferiblemente con calentamiento, por ejemplo a 50-80ºC, y a una presión de hidrógeno de 3 a 8 MPa, preferiblemente de 5 a 7 MPa. Se deja reaccionar a los reactantes durante aproximadamente 24 horas.

Los compuestos de fórmula (II) así obtenidos pueden transformarse en los compuestos de fórmula (I) conforme a la invención por reacción con una cantidad equimolar o preferiblemente un exceso, por ejemplo un exceso de una a cinco veces, de un compuesto de sulfonilo de fórmula X-L-SO_{2}X en la que X representa un grupo saliente substituible por un grupo amino, como por ejemplo halógeno y L representa un grupo alcanodiilo o un grupo alquenodiilo con respectivamente 3 a 5 átomos de carbono, pudiendo estar uno o varios átomos de carbono reemplazados por uno o varios heteroátomos del grupo de N, O, S, y pudiendo estar el grupo, dado el caso, substituido. La reacción se realiza en dos pasos. En primer lugar, los compuestos de fórmula (II) se hacen reaccionar con una cantidad equimolar o preferiblemente un exceso, por ejemplo un exceso de una a cinco veces, en especial un exceso de una a tres veces, de los compuestos de sulfonilo de fórmula X-L-SO_{2}X descritos anteriormente, en presencia de una base como un amina orgánica, preferiblemente piridina, preferiblemente a presión normal y con agitación de la solución de reacción durante varias horas, por ejemplo 12 horas, a temperatura ambiente. Los compuestos de sulfonilo descritos anteriormente y utilizados en este contexto pueden obtenerse comercialmente o son accesibles de modo conocido para el técnico en la materia. A continuación, los productos intermedios así obtenidos se disuelven en un disolvente orgánico, se mezclan con un exceso, por ejemplo un exceso de una a diez veces, en especial un exceso de tres a ocho veces, de una base y se hacen reaccionar preferiblemente a presión normal y con agitación de la solución de reacción durante varias horas, por ejemplo 12 horas, a temperatura elevada, por ejemplo a 60-130ºC, preferiblemente a 70-90ºC, para obtener los compuestos de fórmula (I) conforme a la invención. Como disolventes son adecuados a este respecto disolventes orgánicos inertes. A estos pertenecen éteres, como dietiléter o tetrahidrofurano, DME, dioxano, alcoholes como metanol y etanol, hidrocarburos halogenados como diclorometano, triclorometano, tetraclorometano, 1,2-dicloroetano, tricloroetano, tetracloroetano, 1,2-dicloroetano o tricloroetileno, hidrocarburos como benceno, xileno, tolueno, hexano, ciclohexano o fracciones de petróleo, nitrometano, dimetilformamida, acetona, acetonitrilo o hexametilfosforotriamida. Es igualmente posible utilizar mezclas de los disolventes. Es especialmente preferida la dimetilformamida. Como bases pueden utilizarse a este respecto en general bases inorgánicas u orgánicas. A estas pertenecen preferiblemente hidróxidos alcalinos como por ejemplo hidróxido sódico o hidróxido potásico, hidróxidos alcalinotérreos como por ejemplo hidróxido de bario, carbonatos alcalinos como carbonato sódico o carbonato potásico, carbonatos alcalinotérreos como carbonato cálcico, o alcoholatos alcalinos o alcalinotérreos como metanolato sódico o potásico, etanolato sódico o potásico o terc-butilato potásico, o aminas orgánicas (trialquil(C_{1}-C_{6})aminas) como trietilamina, o heterociclos como 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO), 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU), piridina, diaminopiridina, metilpiperidina o morfolina. También es posible utilizar como bases metales alcalinos, como sodio, y sus hidruros, como hidruro sódico. Es preferido el carbonato potásico.

Los compuestos de fórmula general (I) conforme a la invención muestran un valioso espectro farmacológico de actividad no previsible.

Los compuestos de fórmula general (I) conforme a la invención conducen a una relajación vascular, una inhibición de la agregación de trombocitos y un descenso de la presión sanguínea así como a un aumento del flujo sanguíneo coronario. Estas actividades están mediadas a través de una estimulación directa de la guanilatociclasa soluble y un incremento del GMPc intracelular. Además, los compuestos de fórmula general (I) conforme a la invención refuerzan la actividad de substancias que incrementan el nivel del GMPc, como por ejemplo el EDRF (endothelium derived relaxing factor, factor relajante derivado del endotelio), donadores de NO, protoporfirina IX, ácido araquidónico o derivados de fenilhidrazina.

Por consiguiente pueden utilizarse en medicamentos para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, como por ejemplo para el tratamiento de la hipertensión sanguínea y de la insuficiencia cardiaca, de angina de pecho estable e inestable, enfermedades vasculares periféricas y cardiacas, de arritmias, para el tratamiento de enfermedades tromboembólicas e isquemias, como el infarto de miocardio, apoplejía cerebral, ataques transitorios e isquémicos, trastornos de la circulación periférica, prevención de la restenosis, como después de terapias trombolíticas, angioplastias transluminales percutáneas (PTA), angioplastias coronarias transluminales percutáneas (PTCA), bypass, así como para el tratamiento de arteriosclerosis, enfermedades asmáticas y enfermedades del sistema urogenital, como por ejemplo hipertrofia prostática, disfunción eréctil, disfunción sexual femenina, osteoporosis, gastroparesia e incontinencia.

Los compuestos de fórmula general (I) descritos en la presente invención representan también principios activos para combatir enfermedades del sistema nervioso central caracterizadas por trastornos del sistema NO/GMPc. En especial son adecuados para la supresión de déficits cognitivos, para la mejora de las capacidades de aprendizaje y memoria y para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer. Son adecuados también para el tratamiento de enfermedades del sistema nervioso central, como estados de ansiedad, tensión y depresión, disfunciones sexuales y trastornos del sueño de etiología nerviosocentral, así como para la regulación de trastornos patológicos de la ingestión de alimentos, estimulantes y drogas.

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Además, los principios activos son adecuados también para la regulación de la circulación cerebral y representan por consiguiente agentes valiosos para combatir la migraña.

También son adecuados para la profilaxis y para combatir las consecuencias de eventos de infarto cerebral (apoplexia cerebri) como ataque apoplético, isquemias cerebrales y traumatismo craneoencefálico. Igualmente los compuestos de fórmula general (I) conforme a la invención pueden utilizarse para combatir estados dolorosos.

Además, los compuestos conforme a la invención poseen actividad antiinflamatoria.

Además de esto, la invención comprende la combinación de los compuestos de fórmula general (I) conforme a la invención con nitratos orgánicos y donadores de NO.

Los nitratos orgánicos y donadores de NO en el marco de la invención son en general substancias que despliegan su actividad terapéutica por medio de la liberación de NO o especies de NO. Son preferidos el nitroprusiato sódico, la nitroglicerina, el dinitrato de isosorbida, el mononitrato de isosorbida, la molsidomina y el SIN-1.

Además, la invención comprende la combinación con compuestos que inhiben la degradación del monofosfato cíclico de guanosina (GMPc). Estos son en especial inhibidores de las fosfodiesterasas 1, 2 y 5; nomenclatura de Beavo y Reifsnyder (1990) TiPS 11 págs. 150 a 155. Mediante estos inhibidores se potencia el efecto del compuesto conforme a la invención y se incrementa el efecto farmacológico deseado.

Estudios biológicos Actividad relajante vascular in vitro

Se aturdieron conejos golpeándolos en la nuca y se desangraron. Se retiró la aorta, se desprendió del tejido adherido, se dividió en anillos de 1,5 mm de ancho y se llevaron individualmente bajo tensión previa a baños de órganos de 5 ml con solución de Krebs-Henselheit gaseada con carbógeno y calentada a 37ºC de la siguiente composición (mM): NaCl: 119; KCl: 4,8; CaCl_{2} x 2 H_{2}O: 1; MgSO_{4} x 7 H_{2}O: 1,4; KH_{2}PO_{4}: 1,2; NaHCO_{3}: 25; glucosa: 10. La fuerza de contracción se determinó con células Statham UC2, se intensificó, se digitalizó mediante un transductor A/D (DAS-1802 HC, Keithley Instruments München) y se registró paralelamente con un registrador de trazo continuo. Para generar una contracción se añadió fenilefrina al baño acumulativamente en concentración creciente. Después de varios ciclos de control la substancia de ensayo se examinó en cada paso sucesivo de dosificación respectivamente creciente y se compararon la altura de la contracción con la altura de la contracción alcanzada en el paso anterior. De aquí se calculó la concentración que era precisa para reducir la altura del valor de control al 50% (CI_{50}). El volumen de aplicación estándar fue de 5 \mul, la proporción de DMSO en la solución del baño correspondió al 0,1%. Los resultados están expuestos a continuación en la tabla 1:

TABLA 1 Actividad relajante vascular in vitro

Ejemplo nº	CI_{50} [nm]
1	290
3	350

Determinación del aclaramiento hepático in vitro

Se anestesiaron ratas, se heparinizaron y el hígado se prefundió in situ a través de la vena porta. Se obtuvieron entonces ex vivo del hígado mediante solución de colagenasa los hepatocitos primarios de rata. Se incubaron a 37ºC 2 \cdot 10^{6} hepatocitos por ml con respectivamente la misma concentración del compuesto a investigar. La disminución del substrato que se investigaba a través del tiempo se determinó bioanalíticamente (HPLC/UV, HPLC/Fluorescencia o EM EM/CL) en respectivamente 5 momentos en el intervalo de tiempo de 0-15 min tras el inicio de la incubación. A partir de ello se calculó a través del número de células y el peso del hígado el aclaramiento.

Determinación del aclaramiento plasmático in vivo

La substancia a investigar se administró a ratas intravenosamente en forma de solución a través de la vena de la cola. En momentos establecidos se extrajo sangre a las ratas, esta se heparinizó y por métodos habituales se obtuvo a partir de ella plasma. La substancia se cuantificó bioanalíticamente en el plasma. A partir de las curvas concentración en plasma-tiempo así determinadas se calcularon los parámetros farmacocinéticos mediante métodos no compartimentales utilizados habitualmente para ello.

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A la presente invención pertenecen preparados farmacéuticos que además de vehículos no tóxicos, farmacéuticamente inertes adecuados contienen los compuestos de fórmula general (I) conforme a la invención así como procedimientos para la elaboración de estos preparados.

El principio activo puede presentarse dado el caso también en forma microencapsulada en uno o más de los vehículos anteriormente indicados.

Los compuestos de fórmula general (I) terapéuticamente activos deben estar presentes en los preparados farmacéuticos anteriormente mencionados en una concentración de aproximadamente 0,1 a 99,5, preferiblemente de aproximadamente 0,5 a 95% en peso, de la mezcla total.

Los preparados farmacéuticos anteriormente mencionados pueden contener además de los compuestos de fórmula general (I) conforme a la invención también otros principios activos farmacéuticos.

En general ha mostrado ser ventajoso tanto en medicina como también en veterinaria administrar los principios activos conforme a la invención en cantidades totales de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 700, preferiblemente de 0,01 a 100 mg/kg de peso corporal cada 24 horas, dado el caso en forma de varias monodosis, para la consecución de los resultados deseados. Una monodosis contiene el o los principios activos conforme a la invención preferiblemente en cantidades de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 80, en especial de 0,1 a 30 mg/kg de peso corporal.

La presente invención se describe seguidamente con más detalle mediante ejemplos preferidos no limitantes. En tanto no se indique otra cosa todos los datos cuantitativos están referidos en porcentajes en peso.

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Ejemplos Abreviaturas

TA:: Temperatura ambiente

AE:: Acetato de etilo

MCPBA:: Ácido m-cloroperoxibenzoico

BABA:: Acetato de n-butilo/n-butanol/ácido acético glacial/tampón fosfato pH 6 (50:9:25:15; fase org.)

DMF:: N,N-Dimetilformamida

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Eluyentes de la cromatografía en capa fina

T1 E1:: Tolueno-acetato de etilo (1:1)

T1 EtOH1:: Tolueno-metanol (1:1)

C1 E1:: Ciclohexano-acetato de etilo (1:1)

C1 E2:: Ciclohexano-acetato de etilo (1:2)

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Métodos para la determinación de los tiempos de retención en HPLC Método A (HPLC-EM)

Eluyente:: A = CH_{3}CN B = 0,6 g HCl al 30%/l H_{2}O

Flujo:: 0,6 ml/min

Estufa columna:: 50ºC

Columna:: Symmetry C18 2,1*150 mm

Gradiente:

Tiempo (min)	% A	% B	Flujo (ml/min)
0	10	90	0,6
4	90	10	0,6
9	90	10	0,8

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Método B (HPLC)

Eluyente:: A = 5 ml HClO_{4}CN/l H_{2}O, B = CH_{3}CN

Flujo:: 0,75 ml/min

Temperatura L-R:: 30,00ºC 29,99ºC

Columna:: Kromasil C18 60*2 mm

Gradiente:

Tiempo (min)	% A	% B
0,50	98	2
4,50	10	90
6,50	10	90
6,70	98	2
7,50	98	2

Método C (HPLC)

Eluyente:: A = H_{3}PO_{4} 0,01 ml/l, B = CH_{3}CN

Flujo:: 0,75 ml/min

Temperatura L-R:: 30,01ºC 29,98ºC

Columna:: Kromasil C18 60*2 mm

Gradiente:

Tiempo (min)	% A	% B
0,00	90	10
0,50	90	10
4,50	10	90
8,00	10	90
8,50	90	10
10,00	90	10

Método D (HPLC quiral)

Eluyente:: A = 50% iso-hexano, 50% etanol

Flujo:: 1,00 ml/min

Temperatura:: 40ºC

Columna:: 250*4,6 mm rellena con Chiralcel OD, 10 mm

Método E (HPLC-EM)

Eluyente:: A = CH_{3}CN, B = 0,3 g de HCl al 30%/l H_{2}O

Flujo:: 0,9 ml/min

Estufa columna:: 50ºC

Columna:: Symmetry C18 2,1*150 mm

Gradiente:

Tiempo (min)	% A	% B	Flujo (ml/min)
0	10	90	0,9
3	90	10	1,2
6	90	10	1,2

Compuestos de partida I. Síntesis de 1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-carboxamidina 1A) Éster etílico del ácido 5-amino-1-(2-fluorobencil)-pirazol-3-carboxílico

13

Se mezclaron 100 g (0,613 mol) de la sal sódica del éster etílico del ácido cianopirúvico (síntesis análoga a la de Borsche y Manteuffel, Liebigs Ann. 1934, 512, 97) con buena agitación bajo argón en 2,5 l de dioxano a temperatura ambiente con 111,75 g (75 ml, 0,98 ml) de ácido trifluoroacético y se agitó durante 10 min, disolviéndose una gran parte del reactante. Entonces se añadieron 85,93 g (0,613 mol) de 2-fluorobencilhidrazina y se sometió a ebullición durante la noche. Tras enfriamiento se separaron por filtración con succión los cristales del trifluoroacetato sódico precipitado, se lavaron con dioxano y la solución bruta se hizo reaccionar más adelante.

1B) Éster etílico del ácido1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-carboxílico

14

La solución obtenida en 1A) se mezcló con 61,25 ml (60,77 g, 0,613 mol) de dimetilaminoacroleína y 56,28 ml (83,88 g, 0,736 mol) de ácido trifluoroacético y se sometió a ebullición bajo argón durante 3 días. A continuación se evaporó el disolvente a vacío, el residuo se echó en 2 l de agua y se extrajo tres veces con sendos 1 l de acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se secaron con sulfato magnésico y se evaporaron en rotavapor. Se cromatografió sobre 2,5 kg de gel de sílice y se eluyó con un gradiente de tolueno/tolueno-acetato de etilo = 4:1. Rendimiento 91,6 g (49,9% d.t. a través de dos etapas).

P.f. 85ºC

R_{f} (SiO_{2}, T1E1): 0,83

1C) 1-(2-Fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-carboxamida

15

Se dispusieron 10,18 g (34 mmol) del éster obtenido en el ejemplo 1B) en 150 ml de metanol saturado con amoniaco a 0-10ºC. Se agitó durante dos días a temperatura ambiente y a continuación se concentró a vacío.

R_{f} (SiO_{2}, T1E1): 0,33

1D) 3-Ciano-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina

16

Se disolvieron 36,1 g (133 mmol) de 1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-carboxamida del ejemplo 1C) en 330 ml de THF y se mezclaron con 27 g (341 mmol) de piridina. A continuación se añadieron en el transcurso de 10 min 47,76 ml (71,66 g, 341 mmol) de anhídrido trifluoroacético subiendo la temperatura hasta 40ºC. Se agitó durante la noche a temperatura ambiente. A continuación se vertió la mezcla de reacción en 1 l de agua y se extrajo tres veces con sendos 0,5 l de acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con solución saturada de hidrogenocarbonato sódico y con HCl 1 N, se secó con MgSO_{4} y se evaporó en rotavapor.

Rendimiento: 33,7 g (100% d.t.)

P.f.: 81ºC

R_{f} (SiO_{2}, T1E1): 0,74

1E) Éster metílico del ácido (2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-carboximídico

17

Se disolvieron 30,37 g (562 mmol) de metilato sódico en 1,5 l de metanol y se añadieron 36,45 g (144,5 mmol) de 3-ciano-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridina (del ejmplo 1D). Se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente y la solución obtenida se utilizó directamente para la siguiente etapa.

1F) 1-(2-Fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-carboxamidina

18

La solución de éster metílico del ácido (2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-carboximídico obtenida en el ejemplo 1E) se mezcló con 33,76 g (32,19 ml, 562 mmol) de ácido acético glacial y 9,28 g (173 mmol) de cloruro amónico y se agitó durante la noche a reflujo. Se evaporó el disolvente a vacío, se trituró bien el residuo con acetona y se separó el sólido precipitado por filtración con succión.

RMN-^{1}H (d_{6}-DMSO, 200 MHz): d = 5,93 (s, 2H); 7,1-7,5 (m, 4H); 7,55 (dd, 1H); 8,12 (dd, 1H); 8,30 (dd, 1H); 9,5 (sa, 4H intercambiables) ppm.

EM (EI): m/z = 270,2 (M-HCl).

II. Síntesis de 6-amino-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-5-[(E)-fenildiazenil]-4-pirimidinol

19

Se calentaron durante 12 h a reflujo 2,43 g (9,02 mmol) de 1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-carboximidamida del ej. I y acetato de etilciano[(E)-fenildiazenilo] (1,96 g, 9,02 mmol). Tras enfriamiento a temperatura ambiente se separó por filtración el sedimento precipitado y este se lavó varias veces con tolueno. La cromatografía de resolución rápida (CH_{2}Cl_{2}/acetato de etilo 50:1 \rightarrow AE) proporcionó el producto deseado.

Rendimiento: 2,52 g (63%)

Valor R_{f}: 0,72 (CH_{2}Cl_{2}/MeOH 20/1)

RMN-^{1}H (300 MHz, D_{6}-DMSO): \delta = 5,87 (s, 2H, 2 x CH_{2}O), 7,17 (t, 1H, Ar-H), 7,25 (d, 1H, Ar-H), 7,3-7,6 (m, 6H, Ar-H, NH_{2}), 7,80 (d, 2H, Ar-H), 8,75 (s a, 2H, Ar-H), 9,05 (d, 1H), 10,23 (s a, 1H), 12,1 (s a, 1H).

CLEM: Tiempo de ret.: 3,94 min (columna: Symmetry, C18, 3,5 \mum, 50 x 2,1 \mum, flujo 0,5 ml/min, 40ºC, gradiente: agua (+0,1% de ácido fórmico):acetonitrilo (+0,1% de ácido fórmico) a 0 min: 90:10, a 6,0 min 10:90)); EM: (ESI pos.), m/z = 441 ([M+H]^{+}), (ESI neg.), m/z = 439 ([M-H]^{-}).

III. Síntesis de 5,6-diamino-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4-pirimidinol

20

Se disolvió 6-amino-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-5-[(E)-fenildiazenil]-4-pirimidinol (2,52 g, 5,72 mmol) del ej. II y Ni Raney (al 50% en H_{2}O, 0,217 g) en DMF y se hidrogenó a 6,5 MPa de H_{2} durante 22 h a 62ºC. Tras enfriamiento se recogió en DMF, se calentó a 100ºC y se eliminó el catalizador por filtración. Las aguas madres se mezclaron con 10 ml de HCl (5 N) y H_{2}O (20 ml). Tras 30 min de agitación a temperatura ambiente se filtró para separar el sedimento precipitado y después se lavó con H_{2}O.

Rendimiento: 1,94 g (97%)

Valor R_{f}: 0,10 (CH_{2}Cl_{2}/MeOH 10/1)

RMN-^{1}H (300 MHz, D_{6}-DMSO): \delta = 5,78 (s, 2H, CH_{2}O), 5,90 (s, 2H, NH_{2}), 7,1-7,4 (m, 7H, Ar-H, NH_{2}), 8,64 (d, 1H, Ar-H), 8,85 (s, 1H, Ar-H), 11,7 (s a, 1H, OH).

CL-EM: Tiempo de retención: 2,74 min (columna: Symmetry, C18, 3,5 \mum, 50 x 2,1 mm, flujo 0,5 ml/min, 40ºC, gradiente: agua (+0,1% de ácido fórmico):acetonitrilo (+0,1% de ácido fórmico) a 0 min: 90:10, a 6,0 min 10:90)); EM: (ESI pos.), m/z = 352 ([M+H]^{+}), (ESI neg.), m/z = 350 ([M-H]^{-}).

IV. Síntesis de 6-cloro-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4,5-pirimidindiamina

21

Se disolvió 5,6-diamino-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4-pirimidinol (0,15 mg, 0,42 mmol) del ej. III en POCl_{3} (5 ml) y se mezcló con N,N-dimetilanilina (5,0 mg, 0,04 mmol, 0,1 equivalentes). Se calentó durante 4 h a reflujo y se eliminó entonces el reactivo en exceso a vacío. Se recogió en acetato de etilo y se lavó con solución acuosa sat. de NaHCO_{3}, H_{2}O y solución acuosa saturada de NaCl. Las fases orgánicas reunidas se concentraron y se purificaron por cromatografía de resolución rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH 40:1).

Rendimiento: 0,12 g (77%)

Valor R_{f}: 0,60 (CH_{2}Cl_{2}/MeOH 10/1)

CLEM: Tiempo de retención: 3,70 min (columna: Symmetry, C18, 3,5 \mum, 50 x 2,1 mm, flujo 0,5 ml/min, 40ºC, gradiente: agua (+0,1% de ácido fórmico):acetonitrilo (+0,1% de ácido fórmico) a 0 min: 90:10, a 6,0 min 10:90)); EM: (ESI pos.), m/z = 370 ([M+H]^{+}), (ESI neg.), m/z = 368 ([M-H]^{-}).

V. Síntesis de 2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4,5-pirimidindiamina

22

Se disolvió 6-cloro-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4,5-pirimidindiamina (74 mg, 0,20 mmol) del ej. IV en MeOH (4 ml) y se mezcló con Pd/C (10%, 20 mg) y formiato amónico (126 mg, 2,00 mmol, 10 equivalentes). Se calentó durante 2 días a reflujo y se dejó entonces enfriar a temperatura ambiente antes de eliminar el catalizador por filtración. La purificación realizada por HPLC preparativa (columna: Cromsil 120 ODS, C-18, 10 \mum, 250 x 30 mm, flujo 50 ml/min, temperatura ambiente, gradiente: agua acetonitrilo a 0 min: 90:10, a 28 min 5:95) proporcionó el producto deseado.

Rendimiento: 0,054 g (80%)

Valor R_{f}: 0,10 (CH_{2}Cl_{2}/MeOH 20/1)

RMN-^{1}H (300 MHz, D_{6}-DMSO): \delta = 5,90 (s, 2H, OCH_{2}), 7,1-7,6 (m, 6H, Ar-H, NH_{2}), 8,75 (d, 1H, Ar-H), 8,98 (d, 1H, Ar-H)

CLEM: Tiempo de ret.: 2,66 min (columna: Symmetry, C18, 3,5 \mum, 50 x 2,1 mm, flujo 0,5 ml/min, 40ºC, gradiente: agua (+0,1% de ácido fórmico):acetonitrilo (+0,1% de ácido fórmico) a 0 min: 90:10, a 6,0 min 10:90)); EM: (ESI pos.), m/z = 336 ([M+H]^{+}), (ESI neg.), m/z = 334 ([M-H]^{-}).

VI. Síntesis de 2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-5-[(E)-fenildiazenil]-4,6-pirimidindiamina

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23

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A una solución agitada de 21,92 g (71,7 mmol) de 1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-carboxamidina en tolueno del ejemplo I se le añadieron 3,87 g de metanolato sódico y a continuación 12,2 g (71,7 mmol) de fenilazomalonodinitrilo (L.F. Cavalieri, J.F. Tanker, A. Bendlich, J. Am. Chem. Soc. 1949, 71, 533). Se agitó durante la noche a 110ºC y se dejó enfriar. El sólido aquí precipitado se separó por filtración con succión y se lavó con etanol. Tras secado se obtuvieron 23 g (73% d.t.) del compuesto deseado.

Valor R_{f}: 0,50 (tolueno/AE 1:1)

RMN-^{1}H (300 MHz, D_{6}-DMSO): \delta = 5,88 (s, 2H, OCH_{2}), 7,1-7,5 (m, 7H, Ar-H), 7,87 (s a, 2H, NH_{2}), 7,96 (s, 2H, Ar-H), 8,00 (s, 1H, Ar-H), 8,03 (s, 1H, Ar-H), 8,03 (s, 1H, Ar-H), 8,48 (s a, 2H, NH_{2}), 8,65 (d, 1H, Ar-H), 9,20 (d, 1H, Ar-H).

EM: (ESI pos.), m/z = 440 ([M+H]^{+}).

VII. Síntesis de triclorhidrato de 2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]- 4,5,6-pirimidintriamina

24

Se hidrogenaron 5 g (11,38 mmol) de 2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-5-[(E)-fenildiazenil]-4,6-pirimidindiamina del ejemplo VI con 800 mg de níquel Raney al 50% en agua en 60 ml de DMF durante 22 horas a 6,5 MPa de presión de hidrógeno y a 62ºC. Se separó el catalizador filtrando con succión a través de tierra de diatomeas, se evaporó la solución a vacío y se agitó con HCl 5 N. El sedimento pardo amarillento precipitado se separó por filtración con succión y se secó. Se obtuvieron 3,1 g (59,3% d.t.) del compuesto deseado. La base libre se obtuvo por agitación con solución diluida de NaHCO_{3} y extracción con acetato de etilo. El sólido insoluble e ambas fases se separó por filtración con succión. También la fase de acetato de etilo contenía pequeñas cantidades de la base libre.

Valor R_{f}: 0,18 (AE)

RMN-^{1}H (300 MHz, D_{6}-DMSO): \delta = 4,45 (s a, 6H, NH_{2}), 5,92 (s, 2H, OCH_{2}), 7,1-7,6 (m, 5H, Ar-H), 8,76 (d, 2H, Ar-H), 8,98 (d, 1H, Ar-H).

VIII. 6-Amino-5-(1,1-dióxido-2-isotiazolidinil)-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4-pirimidinol

25

Se dispuso 5,6-diamino-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4-pirimidinol (0,25 g, 0,71 mmol) del ej. III en piridina (2,5 ml) y se mezcló con cloruro de 3-cloropropanosulfonilo (0,19 g, 1,1 mmol, 1,5 equiv.). Tras 12 h a temperatura ambiente se concentró a vacío y se disolvió en DMF (2,5 ml). Se mezcló con K_{2}CO_{3} (0,69 g, 5,0 mmol, 7 equiv.) y se agitó durante 20 h a 40ºC. Se recogió en acetato de etilo y H_{2}O y se extrajo varias veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron a vacío. Los cristales así obtenidos se agitaron con CH_{3}CN, se separaron por filtración con succión y se secaron a vacío.

Rendimiento: 0,128 g (39%)

RMN-^{1}H (300 MHz, D_{6}-DMSO): \delta = 2,43 (s a, 2H, CH_{2}), 3,29 (s a, 2H, CH_{2}), 3,60 (d a, 2H, CH_{2}), 5,82 (s, CH_{2}O), 6,8 (s a, 2H, NH_{2}), 7,1-7,5 (m, 5H, Ar-H), 8,45 (s, 1H, Ar-H), 8,69 (d, 1H, Ar-H), 8,90 (d, 1H, Ar-H), 11,93 (s, 1H, OH).

CLEM: Tiempo de retención: 3,36 min (columna: Symmetry, C18, 3,5 \mum, 50 x 2,1 mm, flujo 0,5 ml/min, 40ºC, gradiente: agua (+0,1% de ácido fórmico):acetonitrilo (+0,1% de ácido fórmico) a 0 min: 90:10, a 6,0 min 10:90)); EM: (ESI pos.), m/z = 456 ([M+H]^{+}), (ESI neg.), m/z = 454 ([M-H]^{-}).

Ejemplos 1. 6-Cloro-5-(1,1-dióxido-2-isotiazolidinil)-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4-pirimidinamina

26

Se agitaron 6-amino-5-(1,1-dióxido-2-isotiazolidinil)-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4-pirimidinol (0,080 g, 0,18 mmol) del ej. VIII y óxido de diclorofenilfosfina (2,0 ml) a 160ºC durante 2 h. Tras enfriamiento se hidrolizó con agua con hielo y se purificó el producto por HPLC preparativa (columna: Cromsil 120 ODS, C-18, 10 \mum, 250 x 30 mm, flujo 50 ml/min, temp. ambiente, gradiente: agua acetonitrilo a 0 min: 90:10, a 28 min 5:95).

Rendimiento: 0,050 g (60%)

RMN-^{1}H (300 MHz, D_{6}-DMSO): \delta = 2,55 (t, 2H, CH_{2}), solapado parcialmente por DMSO, 3,36 (t, 2H, CH_{2}), solapado parcialmente por H_{2}O, 3,64 (tt, 2H, CH_{2}), 5,84 (s, CH_{2}O), 7,1-7,5 (m, 5H, Ar-H), 7,9 (s a, 2H, NH_{2}), 8,66 (dd, 1H, Ar-H), 8,91 (d, 1H, Ar-H).

CLEM: Tiempo de ret.: 3,90 min (columna: Symmetry, C18, 3,5 \mum, 50 x 2,1 mm, flujo 0,5 ml/min, 40ºC, gradiente: agua (+0,1% de ácido fórmico):acetonitrilo (+0,1% de ácido fórmico) a 0 min: 90:10, a 6,0 min 10:90)); EM: (ESI pos.), m/z = 474 ([M+H]^{+}), (ESI neg.), m/z = 472 ([M-H]^{-}).

2. 5-(1,1-Dióxido-2-isotiazolidinil)-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4-pirimidinilamina

27

Se mezcló 2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4,5-pirimidindiamina (50 mg, 0,15 mmol) del ej. V en piridina (1,3 ml) a temperatura ambiente con cloruro de 3-cloropropanosulfonilo (79 mg, 0,45 mmol, 3 equivalentes). Se agitó durante 12 h a temperatura ambiente y se mezcló con más cloruro de 3-cloropropanosulfonilo (39 mg, 0,23 mmol, 1,5 equivalentes). Tras 6 h se eliminó el reactivo en exceso a vacío y se purificó por cromatografía de resolución rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH 20:1). El producto intermedio así obtenido se suspendió en DMF (1 ml), se mezcló con K_{2}CO_{3} (144 mg, 1,04 mmol, 7 equivalentes) y se calentó durante 12 h a 80ºC. A continuación se eliminó la DMF a vacío y se purificó por cromatografía de resolución rápida (CH_{2}Cl_{2}:MeOH 20:1).

Rendimiento: 0,021 g (32%)

Valor R_{f}: 0,45 (CH_{2}Cl_{2}/MeOH 20:1)

RMN-^{1}H (300 MHz, D_{6}-DMSO): \delta = 2,60 (tt, 2H, CH_{2}), 3,41 (t, 2H, CH_{2}), 3,75 (t, 2H, CH_{2}), 5,70 (s a, 2H, NH_{2}), 5,94 (s, CH_{2}O), 6,9-7,4 (m, 5H, Ar-H, NH_{2}), 8,45 (s, 1H, Ar-H), 8,60 (d, 1H, Ar-H), 8,91 (d, 1H, Ar-H).

CLEM: Tiempo de ret.: 3,10 min (columna: Symmetry, C18, 3,5 \mum, 50 x 2,1 mm, flujo 0,5 ml/min, 40ºC, gradiente: agua (+0,1% de ácido fórmico):acetonitrilo (+0,1% de ácido fórmico) a 0 min: 90:10, a 6,0 min 10:90)); EM: (ESI pos.), m/z = 440 ([M+H]^{+}), (ESI neg.), m/z = 438 ([M-H]^{-}).

Como alternativa se preparó 5-(1,1-dióxido-2-isotiazolidinil)-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4-pirimidinilamina (ej. 2) a partir de 6-cloro-5-(1,1-dióxido-2-isotiazolidinil)-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4-pirimidinamina (0,040 mg, 0,084 mmol) del ej. 1, que se disolvió en MeOH (4 ml) y se mezcló con Pd/C (10%, 0,009 g) y formiato amónico (0,053 mg, 0,84 mmol, 10 equiv.). Se calentó durante 2 días a reflujo y se dejó enfriar entonces a temperatura ambiente antes de separar por filtración el catalizador. El producto bruto se concentró a vacío.

Rendimiento: 0,007 g (19%)

Los datos espectroscópicos fueron idénticos a los del producto preparado por la ruta anteriormente descrita.

3. 5-(1,1-Dióxido-2-isotiazolidinil)-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4,6-pirimidinildiamina

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Se disolvió 2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4,5,6-pirimidintriamina (0,30 g, 0,86 mmol) del ej. VII a temperatura ambiente en piridina (2 ml) y se mezcló con cloruro de 3-cloropropanosulfonilo (0,23 g, 1,3 mmol, 1,5 equivalentes). Se agitó durante 12 h a temperatura ambiente y a continuación se eliminó el disolvente en evaporador rotatorio. El producto bruto así obtenido se disolvió en DMF (1 ml) y se mezcló con K_{2}CO_{3} (0,83 g, 6,0 mmol, 7 equivalentes). Se agitó durante 12 h a 80ºC. La mezcla bruta se purificó por HPLC preparativa (columna: Cromsil 120 ODS, C-18, 10 mm, 250 x 30 mm, flujo 50 ml/min, temp. ambiente, gradiente: agua acetonitrilo a 0 min: 90:10, a 28 min 5:95).

Rendimiento: 0,22 g (55%)

RMN-^{1}H (400 MHz, D_{6}-DMSO): \delta = 2,45 (tt, 2H, CH_{2}, solapado parcialmente por DMSO), 3,46 (t, 2H, CH_{2}), solapado parcialmente por 3,50 (t, 2H, CH_{2}), 5,81 (s, CH_{2}O), 6,6 (s a, 4H, 2 x NH_{2}), 7,1-7,4 (m, 5H, Ar-H), 8,62 (m_{c}, 1H, Ar-H), 9,03 (d, 1H, Ar-H).

CLEM: Tiempo de ret.: 2,80 min (columna: Symmetry, C18, 3,5 \mum, 50 x 2,1 mm, flujo 0,5 ml/min, 40ºC, gradiente: agua (+0,1% de ácido fórmico):acetonitrilo (+0,1% de ácido fórmico) a 0 min: 90:10, a 6,0 min 10:90)); EM: (ESI pos.), m/z = 455 ([M+H]^{+}), (ESI neg.), m/z = 499 ([M-H, +HCOOH]^{-}).

4. 5-(1,1-Dióxido-1,2-tiazinan-2-il)-2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4,6-pirimidinildiamina

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Se disolvió 2-[1-(2-fluorobencil)-1H-pirazolo[3,4-b]piridin-3-il]-4,5,6-pirimidintriamina (0,080 g, 0,23 mmol) del ej. VII a temperatura ambiente en piridina (5 ml) y se mezcló con cloruro de 4-clorobutanosulfonilo (0,065 g, 0,34 mmol, 1,5 equivalentes; síntesis a partir de tetrahidrotiofeno conforme a Runge y col., J. Prakt. Chem. 1955, 279, 288). Se agitó durante 12 h a temperatura ambiente y a continuación se eliminó el disolvente en evaporador rotatorio. El producto bruto así obtenido se disolvió en DMF (1 ml) y se mezcló con K_{2}CO_{3} (0,22 g, 1,6 mmol, 7 equivalentes) Se agitó durante 12 h a 80ºC. La mezcla bruta se purificó por HPLC preparativa (columna: Cromsil 120 ODS, C-18, 10 mm, 250 x 30 mm, flujo 50 ml/min, temperatura ambiente, gradiente: agua acetonitrilo a 0 min: 90:10, a 28 min 5:95).

Rendimiento: 0,022 g (19%)

Valor R_{f}: 0,25 (CH_{2}Cl_{2}/MeOH 20:1)

RMN-^{1}H (300 MHz, D_{6}-DMSO): \delta = 1,90 (m_{c}, 2H, CH_{2}), 2,15 (m_{c}, 2H, CH_{2}), 3,48 (m_{c}, 4H, 2 x CH_{2}), 5,80 (s, CH_{2}O), 6,48 (s a, 4H, 2 x NH_{2}), 7,1-7,4 (m, 5H, Ar-H), 8,61 (m_{c}, 1H, Ar-H), 9,05 (d, 1H, Ar-H).

CLEM: Tiempo de retención: 2,90 min (columna: Symmetry, C18, 3,5 \mum, 50 x 2,1 mm, flujo 0,5 ml/min, 40ºC, gradiente: agua (+0,1% de ácido fórmico):acetonitrilo (+0,1% de ácido fórmico) a 0 min: 90:10, a 6,0 min 10:90)); EM: (ESI pos.), m/z = 469 ([M+H]^{+}).

Claims

1. Compuestos de fórmula general (I)

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en la que

R^{1}: representa H, Cl o NH_{2},

así como sales, isómeros e hidratos de los mismos.

2. Compuestos conforme a la reivindicación 1,

en los que

R^{1}: representa H, Cl o NH_{2},

así como sales, isómeros e hidratos de los mismos.

3. Compuestos conforme a la reivindicación 1,

en los que

R^{1}: representa H, Cl o NH_{2},

así como sales, isómeros e hidratos de los mismos.

4. Procedimiento para la preparación de compuestos de fórmula I que comprende la reacción del compuesto de fórmula (II)

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en la que R^{1} está definido como anteriormente;

con un compuesto de fórmula X-L-SO_{2}X

en la que

5. Compuestos de fórmula general (I) para el tratamiento de enfermedades.

6. Medicamentos que contengan al menos un compuesto de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1.

7. Procedimiento para la fabricación de medicamentos caracterizado porque se transforma al menos un compuesto de fórmula (I) conforme a la reivindicación 1, dado el caso con coadyuvantes y aditivos, en una forma de administración adecuada.

8. Medicamentos que contengan al menos un compuesto de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en combinación con nitratos orgánicos o donadores de NO.

9. Medicamentos que contengan al menos un compuesto de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en combinación con compuestos que inhiban la degradación del monofosfato cíclico de guanosina (GMPc).

10. Uso de compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la fabricación de medicamentos para el tratamiento de enfermedades cardiocirculatorias.

11. Uso de compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la fabricación de medicamentos para el tratamiento de la hipertonía.

12. Uso de compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la fabricación de medicamentos para el tratamiento de enfermedades tromboembólicas e isquemias.

13. Uso de compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la fabricación de medicamentos para el tratamiento de la disfunción sexual.

14. Uso de compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la fabricación de medicamentos con propiedades antiinflamatorias.

15. Uso de compuestos de fórmula general (I) conforme a la reivindicación 1 en la fabricación de medicamentos para el tratamiento de enfermedades del sistema nervioso central.

16. Uso conforme a una de las reivindicaciones 10 a 15 utilizando los compuestos de fórmula general conforme a la reivindicación 1 en combinación con nitratos orgánicos o donadores de NO o en combinación con compuestos que inhiben la degradación del monofosfato cíclico de guanosina (GMPc).