UA46666C2 - Method for preparing dosage form of short-term acting insulin - Google Patents
Method for preparing dosage form of short-term acting insulin Download PDFInfo
- Publication number
- UA46666C2 UA46666C2 UA2001129229A UA2001129229A UA46666C2 UA 46666 C2 UA46666 C2 UA 46666C2 UA 2001129229 A UA2001129229 A UA 2001129229A UA 2001129229 A UA2001129229 A UA 2001129229A UA 46666 C2 UA46666 C2 UA 46666C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- insulin
- ether
- dosage form
- short
- human insulin
- Prior art date
Links
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 78
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 title claims abstract description 33
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 title claims abstract description 33
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 title claims abstract description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 101000976075 Homo sapiens Insulin Proteins 0.000 claims abstract description 29
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims abstract description 21
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 17
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 16
- 108010005991 Pork Regular Insulin Proteins 0.000 claims abstract description 13
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims abstract description 12
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims abstract description 9
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims abstract description 9
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims abstract description 5
- 108010026951 Short-Acting Insulin Proteins 0.000 claims description 17
- 229940123958 Short-acting insulin Drugs 0.000 claims description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 8
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 7
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 7
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 4
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 3
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 claims description 2
- AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N di-tert-butyl ether Chemical compound CC(C)(C)OC(C)(C)C AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 abstract description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 abstract 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WERYXYBDKMZEQL-UHFFFAOYSA-N butane-1,4-diol Chemical compound OCCCCO WERYXYBDKMZEQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 4
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- -1 samostatin Proteins 0.000 description 4
- 108010076181 Proinsulin Proteins 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L calcium acetate Chemical compound [Ca+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000001639 calcium acetate Substances 0.000 description 3
- 235000011092 calcium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 229960005147 calcium acetate Drugs 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical class OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101000993800 Sus scrofa Insulin Proteins 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- ALQSHHUCVQOPAS-UHFFFAOYSA-N 1,5-Pentadiol Natural products OCCCCCO ALQSHHUCVQOPAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HFDKKNHCYWNNNQ-YOGANYHLSA-N 75976-10-2 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)N)C(C)C)[C@@H](C)O)C1=CC=C(O)C=C1 HFDKKNHCYWNNNQ-YOGANYHLSA-N 0.000 description 1
- 238000012371 Aseptic Filling Methods 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 102400000321 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 206010049287 Lipodystrophy acquired Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 102000018886 Pancreatic Polypeptide Human genes 0.000 description 1
- 101000983124 Sus scrofa Pancreatic prohormone precursor Proteins 0.000 description 1
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- RCFKEIREOSXLET-UHFFFAOYSA-N disulfamide Chemical compound CC1=CC(Cl)=C(S(N)(=O)=O)C=C1S(N)(=O)=O RCFKEIREOSXLET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N hydridophosphorus(.) (triplet) Chemical class [PH] BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 239000004026 insulin derivative Substances 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 208000006132 lipodystrophy Diseases 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- CRKADHVTAQCXRA-UHFFFAOYSA-K trisodium;phosphate;dihydrate Chemical class O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O CRKADHVTAQCXRA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Опис винаходу
Винахід відноситься до хіміко-фармацевтичної промисловості Її може бути використаний у виробництві 2 високоякісних готових лікарських форм інсулінів короткої дії.
Відомий спосіб одержання готової лікарської форми свинячого інсуліну водно-спиртовою екстракцією підшлункової залози тварин, очищенням одержаного екстракту від баластних білків, розчиненням очищеної субстанції інсуліну порціями в розбавленій кислоті, наступним змішуванням з розчинами метілпарабену та натрію хлориду (ЗсПііспіКгиї! .. еї аї, Іпзцп Каріїага апа Іпзиціїп Асігаріа. Асіа Мей Зсапа 177:103 - 113). 70 Такий спосіб дозволяє отримати фармацевтичний препарат інсуліну, в якім містяться домішки проінсуліну, глюкагону, самостатіну, пакреатичного поліпептиду та інших білків (до 4595 - 5595). Але вже через З місяці після початку інсулінотерапії у сироватці крові хворих за допомогою радіоїмунних методів досліджень виявляються антитіла до перерахованих вище домішок, що викликає ряд небажаних алергічних реакцій, ліподистрофію, інсулінорезистентність, розвиток ранніх ускладнень. Окрім того, для такого способу характерні 12 значні втрати інсуліну при приготування його лікарської форми.
Найбільш близьким до способу, який заявляється, є спосіб одержання готової лікарської форми інсуліну короткої дії, згідно з яким спочатку одержують ефір інсуліну людини транспептидацією свинячого інсуліну з супутніми спорідненими домішками у водно-органічному середовищі в присутності трипсину та органічної кислоти, яку проводять за молярного надлишку ди-трет-бутилового ефіру треоніну по відношенню до свинячого інсуліну більш ніж 5 та за вагового співвідношення трипсину і свинячого інсуліну від 1 до 1 - 200, потім інгібують реакцію створенням кислого середовища з рН 3, очищують одержаний ефір інсуліну людини аніонною та/або катіонною хроматографією, знімають захисні групи відомим способом трифтороцтовою кислотою, після чого проводять кристалізацію сирого інсуліну людини, одержані кристали розчиняють в розбавленій кислоті та змішують з розчинами консерванту, ізотонічного агента та з речовинами з буферною ємністю, в якості яких с використовують фенол або т-крезол, гліцерин і солі фосфорної кислоти (Саїепісв ої Іпзціїп Ргерагайопв. У. (3
Вгапде ейаї!., стр. 27, 66). Цей спосіб дозволяє збільшити вихід ефіру інсуліну людини, який визначає вихід інсуліну людини в процесі виробництва, до 6095 (а за певних умов навіть до 9095) і суттєво знизити кількість шкідливих домішок до (до 790).
Але недоліками цього способу все ще залишаються досить високі імунологічні властивості препарату та ее, значні втрати інсуліну у процесі виробництва. Ге)
Завданням винаходу є створення ефективного, економічного способу приготування готової лікарської форми інсуліну короткої дії з низькими імунологічними властивостями, який гарантує зменшення втрат інсуліну в ее, процесі виробництва. Ге)
Поставлене завдання вирішується тим, що у способі приготування готової лікарської форми інсуліну короткої дії, який включає одержання ефіру інсуліну людини транспептидацією свинячого інсуліну надлишком З ди-трет-бутилового ефіру треоніну у водно-органічному середовищі в присутності трипсину, хроматографічне очищення отриманого ефіру, зняття захисних груп, кристалізацію інсуліну людини, його наступне розчинення в розбавленій кислоті та змішування з розчинами консерванту, ізотонічного агента та речовинами з буферною «4 ємністю, реакцію транспептидації проводять за молярного надлишку ди-трет-бутилового ефіру треоніну від З більш ніж 100 до 500 та за вагового співвідношення трипсину і свинячого інсуліну від 1 до З00 - 1000, потім с розбавляють реакційну суміш водою у 2 - З рази і проводять очищення рідинною хроматографією високого тиску
Із» ефіру інсуліну людини та інсуліну людини, одержаного після прямої кристалізації, наступне розчинення кристалів інсуліну в розбавленій кислоті проводять поетапно, причім спочатку одержують дрібнодисперсну суспензію кристалів інсуліну у воді, а потім до неї додають розбавлену кислоту.
Супутніми спорідненими домішками до свинячого інсуліну являються свинячий проінсулін та продукти шк модифікації і деградації свинячого інсуліну.
Ге») Водно-органічне середовище являє собою воду з сумішшю апротонних (наприклад, діметілацетамід) та протонних (наприклад, 1,2 етандіол, 1,4 бутандіол, 1,5 пентадіол) розчинників. б Трипсин у представленому технічному рішенні може бути свинячим або бичачим.
Ге»! 20 В реакції транспептидації може використовуватися ди-трет-бутиловий ефір треоніну або його сіль.
Розбавлення реакційної суміші водою в 2 - З рази дозволяє безпосередньо наносити розбавлену суміш на щи колонку системи рідинної хроматографії високого тиску або, як вона ще називається, системи високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ), що спрощує спосіб та усуває необхідність виконання ряду технологічних операцій, які описані в прототипі, тобто: осадження реакційної суміші, відокремлення осаду центрифугуванням, 25 розчинення осаду. Необхідність виконання таких операцій також усувається і після зняття захисних груп завдяки
ГФ) прямій кристалізації.
Окрім того, використання системи ВЕРХ дозволяє ефективно відокремити ефір інсуліну людини від свинячого о інсуліну, який не прореагував, та домішок-супутників реакції транспептидації.
Заключне очищення на першій стадії процесу приготування готової лікарської форми кристалів інсуліну 60 людини, які одержуються після зняття захисних груп відомим способом трифтороцтовою кислотою та прямої кристалізації, також проводиться на колонці системи високоефективної рідинної хроматографії і дозволяє досягти ще кращих результатів.
Умови реакції транспептидації (фермент-субстратне співвідношення та молярний надлишок ди-трет-бутилового ефіру треоніну), які відрізняють рішення, що заявляється, дозволяють збільшити ступінь бо конверсії свинячого інсуліну або вихід ефіру інсуліну людини, який характеризує вихід кінцевого продукту семісинтезу, до 9895 та зменшити кількість домішок, котрі важко усуваються, до 1,595. На ще більший ступінь усунення домішок спрямоване і додаткове очищення одержаних кристалів інсуліну людини - до 0,995.
На другій стадії приготування готової лікарської форми інсуліну короткої дії кристали інсуліну людини спочатку суспендують у воді і для одержання дрібнодисперсної суспензії добре перемішують, а потім додають до неї ТМ НОЇ. Приготування дрібнодисперсної суспензії на першому етапі, тобто коли кожна окрема дрібна частка інсуліну виявляється вже з усіх боків оточеною водою, створює умови для їх швидкого розчинення у розбавленій кислоті на другому етапі. Таким чином, час контакту кристалів інсуліну з кислотою зменшується, що призводить, згідно з дослідженнями авторів, до зменшення кількості А21-дезаміду інсуліну, що утворюється, а 7/0 отже до збільшення чистоти препарату.
Як консервант використовують т-крезол або фенол, як ізотонічний та буферні агенти використовують гліцерин та одно- та двозаміщені солі фосфорної кислоти.
Вирішення поставленого завдання ілюструється прикладами конкретного виконання.
Приклад 1 бг сирого свинячого інсуліну суспендували в 24мл води, додали З,Омл оцтової кислоти, 180мл 0,7М ди-трет-бутилового ефіру треоніну в суміші діметілацетаміду та 1,4 бутандіолу, 19мг трипсину в 12мл 0,05М кальцію ацетату, реакційну суміш перемішували протягом 16 годин за температури 232С. Реакцію інгібували розбавленням водою у два рази по відношенню до об'єму реакційної суміші і рН суміші довели до 2,5 1095 НОЇ.
Розбавлену реакційну суміш профільтрували через фільтр з розміром пор 0,2мкм для нанесення на колонку системи ВЕРХ. В якості нерухомої фази використали сорбент ОІАБОСЕЇ 005 (С 18) з розміром часток від 15мкм і розміром пор від 100 до 150А. Для рухомої фази використали 0,06М гліцин-НСІ буфер, який містив 0,015М амонію сульфату і пропанолу-2 з концентрацією від 20 до 3595 за рН 2,5. Фракцію ефірної похідної осаджували в присутності іонів цинку за рН від 6,8 до 7,0, віддентрифугували, одержаний осад промили водою та висушили у вакуумній сушильній шафі. 5,Ог одержаного ефіру інсуліну людини розчинили в бОмл с трифтороцтової кислоти, витримали суміш протягом 40 хвилин за температури 25922, трифтороцтову кислоту відігнали на роторному випарнику за температури не вище ніж 302С, одержаний залишок сирого інсуліну людини і) розчинили у воді і провели пряму цитратну кристалізацію за рН 5,8.
Кристалічну суспензію відфільтрували, кристали промили водою, розчинили в 0,25М оцтовій кислоті та нанесли на колонку системи ВЕРХ. В якості рухомої фази використали 0,05М ацетатний буфер, який містив (Се) пропанолу-2 від 15 до 2595 за рН 2,5. Фракцію інсуліну людини кристалізували за рН 5,8, суспензію кристалів відфільтрували, промили водою та ліофільно висушили. Методом імуноферментного аналізу було встановлено, ї-о що залишок свинячого проінсуліну у отриманому інсуліні людини становив менше мкг/г. Щодо інших (Се) споріднених домішок, то за допомогою аналітичної системи ВЕРХ був встановлений їх вміст - 0,85905.
Отриманий інсулін людини помістили в 5бОмл води, а потім добре перемішали до одержання ї-оі дрібнодисперсної суспензії, додали таку кількість ТМ НС, щоб рН розчину був не нижче 3,1. Далі приготували «Ж буферний розчин з 5,88г натрію фосфорнокислого однозаміщеного двоводного в 2,32л води, додали ще 44,8г гліцерину, 7,3бг т-крезолу, перемішали протягом ЗО хвилин і рН суміші довели до 7,8. Далі розчин кристалів інсуліну людини змішали з буферним розчином і довели рН до 7,3. Об'єм розчину довели водою для ін'єкцій до « 2,вл, провели його стерилізуючу фільтрацію з наступним розливом в асептичних умовах у флакони та картриджі, 470 закупоркою та маркуванням. Дослідження готової лікарської форми інсуліну короткої дії за допомогою - с аналітичної системи ВЕРХ показали, що фармацевтичний препарат має активність 39,8МоО/мл, вміст а високомолекулярних сполук 0,25905, споріднених супутніх домішок 0,7595, А21-дезаміду інсуліну 0,3 Об. "» Приклад 2
Умови одержання кристалів інсуліну людини та проведення інших операцій по приготуванню готової лікарської форми інсуліну короткої дії, як в прикладі 1, за винятком того, що на першій стадії процесу додали
Її ЗОмг трипсину в 12мл 0,05М кальцію ацетату, а реакцію проводили протягом 10 годин за температури 23260. бу Аналіз за даними ВЕРХ виявив, що кількість супутніх споріднених домішок у кінцевому продукті першої стадії процесу дорівнювала 4,295. Дослідження готової лікарської форми інсуліну короткої дії згідно з прикладом 2 за (е)) допомогою аналітичної системи ВЕРХ показали, що її активність складала 38,2МоО/мл, вміст
Фу 50 Ввісокомолекулярньх сполук 0,790, споріднених супутніх домішок 3,995, А21-дезаміду інсуліну 1,590.
Приклад З 4) Умови одержання кристалів інсуліну людини та проведення інших операцій по приготуванню готової лікарської форми інсуліну короткої дії, як в прикладі 1, за винятком того, що на першій стадії процесу додали 4,8Ммг трипсину в 12мл 0,05М кальцію ацетату, а реакційну суміш перемішували протягом 20 годин за температури 2020. Аналіз проміжного продукту за допомогою аналітичної системи ВЕРХ виявив, що кількість о супутніх споріднених домішок у ньому дорівнювала 1095. Дослідження готової лікарської форми інсуліну короткої дії згідно з прикладом З показали, що її активність складала 38,5МО/мл, вміст високомолекулярних сполук 0,890, ко споріднених супутніх домішок 1,595, А21-дезаміду інсуліну 1,095.
Приклад 4 60 Умови одержання кристалів інсуліну людини та проведення інших операцій по приготуванню готової лікарської форми інсуліну короткої дії, як в прикладі 1, за винятком того, що на першій стадії процесу додали 180О0мл 0,51М ді-трет-бутилового ефіру треоніну в суміші діметілацетаміду та 1,5 пентадіолу. Аналіз за даними
ВЕРХ виявив, що кількість супутніх споріднених домішок у проміжному продукті дорівнювала 1895. Дослідження готової лікарської форми інсуліну короткої дії згідно з прикладом 4 показали, що її активність складала б5 39,0МоО/мл, вміст високомолекулярних сполук 1,095, споріднених супутніх домішок 1,995, А21-дезаміду інсуліну 0,89.
Приклад 5
Умови одержання кристалів інсуліну людини та проведення інших операцій по приготуванню готової лікарської форми інсуліну короткої дії, як в прикладі 1, за винятком того, що на першій стадії процесу додали 18О0мл 1,29М ді-трет-бутилового ефіру треоніну в суміші діметілацетаміду та 1,4 бутандіолу. Аналіз за даними
ВЕРХ показав, що кількість споріднених домішок у проміжному продукті складає 1595. Дослідження готової лікарської форми інсуліну короткої дії згідно з прикладом 5 показали, що фармацевтичний препарат має активність 38,8МО/мл, вміст високомолекулярних сполук 0,7595, споріднених супутніх домішок 1,3590,
А21-дезаміду інсуліну 1,190. 70 Приклад 6
Умови виконання операцій першої і другої стадій процесу приготування готової лікарської форми інсуліну короткої дії, як в прикладі 1, за винятком того, що кристали інсуліну безпосередньо розчиняли в розбавленій кислоті. Дослідження готової лікарської форми інсуліну короткої дії згідно з прикладом б показали, що фармацевтичний препарат має активність 39,3МО/мл, вміст високомолекулярних сполук 0,595, споріднених супутніх домішок 0,990, А21-дезаміду інсуліну 2,190.
Таким чином, аналіз виконаних прикладів показує (приклади 2 - 5), що недодержання діапазонів величин, які заявляються, призводить до погіршення характеристик готових лікарських форм та до збільшення втрат інсуліну в процесі виробництва. Приклад б чітко виявляє залежність вмісту А21-дезаміду інсуліну, тобто чистоти препарату, від способу одержання розчину кристалів інсуліну у розбавленій кислоті. У той же час додержання діапазонів величин і способу одержання розчину кристалів інсуліну у розбавленій кислоті, які заявляються (приклад 1), дозволяє приготувати економічнім та вискокоефективним способом готову лікарську форму інсуліну короткої дії зі зниженими імунологічними властивостями.
Claims (1)
- Формула винаходу с щі 6) Спосіб приготування готової лікарської форми інсуліну короткої дії, який включає одержання ефіру інсуліну людини транспептидацією свинячого інсуліну надлишком ді-трет-бутилового ефіру треоніну у водно-органічному середовищі в присутності трипсину, хроматографічне очищення отриманого ефіру, зняття захисних груп, «со зо кристалізацію інсуліну людини, його наступне розчинення в розбавленій кислоті та змішування з розчинами консерванту, ізотонічного агента та речовинами з буферною ємкістю, який відрізняється тим, що реакцію. транспептидації проводять за молярного надлишку ді-трет-бутилового ефіру треоніну від більш ніж 100 до 500 со та за вагового співвідношення трипсину і свинячого інсуліну від 1 до 300-1000, потім розбавляють реакційну суміш водою у 2-3 рази і проводять очищення рідинною хроматографією високого тиску ефіру інсулінулюдини та інсуліну людини, одержаного після прямої кристалізації, а розчинення кристалів інсуліну в розбавленій кислоті «т проводять поетапно, причому спочатку одержують дрібнодисперсну суспензію кристалів інсуліну у воді, а потім до неї додають розбавлену кислоту.- . и? щ» (о) (о) (о) 4) іме) 60 б5
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2001129229A UA46666C2 (en) | 2001-12-29 | 2001-12-29 | Method for preparing dosage form of short-term acting insulin |
| RU2002135038/15A RU2261107C2 (ru) | 2001-12-29 | 2002-12-26 | Способ приготовления готовой лекарственной формы инсулина короткого действия |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2001129229A UA46666C2 (en) | 2001-12-29 | 2001-12-29 | Method for preparing dosage form of short-term acting insulin |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA46666C2 true UA46666C2 (en) | 2006-01-16 |
Family
ID=35850191
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2001129229A UA46666C2 (en) | 2001-12-29 | 2001-12-29 | Method for preparing dosage form of short-term acting insulin |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2261107C2 (uk) |
| UA (1) | UA46666C2 (uk) |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS55138393A (en) * | 1979-04-13 | 1980-10-29 | Shionogi & Co Ltd | Semisynthesis of insulin |
| DE3101382A1 (de) * | 1981-01-17 | 1982-09-02 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | "verfahren zur herstellung von humanisulin oder dessen derivaten aus schweineinsulin oder dessen derivaten" |
| ES8403723A1 (es) * | 1982-03-03 | 1984-04-16 | Nordisk Insulinlab | Procedimiento de producir preparaciones de insulina. |
| DE3511269A1 (de) * | 1985-04-12 | 1986-10-09 | Veb Berlin-Chemie, Ddr 1199 Berlin | Verfahren zur reinigung von insulin |
| DE4028120C2 (de) * | 1990-09-05 | 1996-09-19 | Hoechst Ag | Verfahren zur Reinigung von Insulin und/oder Insulinderivaten |
| RU2087151C1 (ru) * | 1992-06-30 | 1997-08-20 | Веселкина Ольга Сергеевна | Способ получения высокочистого инсулина |
| RU2120299C1 (ru) * | 1995-06-08 | 1998-10-20 | Акционерное курганское общество "Синтез" | Способ получения высокоочищенного монокомпонентного инсулина |
-
2001
- 2001-12-29 UA UA2001129229A patent/UA46666C2/uk unknown
-
2002
- 2002-12-26 RU RU2002135038/15A patent/RU2261107C2/ru not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2261107C2 (ru) | 2005-09-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Brange | Galenics of insulin: the physico-chemical and pharmaceutical aspects of insulin and insulin preparations | |
| FI66751C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av ett stabilt insulinpreparatmed laongtidsverkan | |
| RU2156257C2 (ru) | Способ получения стабильного кристаллического аналога цинк-инсулина | |
| US4183849A (en) | Therapeutic insulin preparation and a process for the production of a stable insulin preparation with protracted effect | |
| JP3844504B2 (ja) | アシル化タンパク質粉末の製造 | |
| CN112661815B (zh) | 一种Tirzepatide的纯化方法 | |
| US3907676A (en) | Process for purifying insulin | |
| EP0194864A2 (en) | Novel peptides | |
| PL86966B1 (uk) | ||
| EP4070817A1 (en) | Liquid preparation containing anti-il-17 antibody | |
| Markussen et al. | Turkey glucagon: crystallization, amino acid composition and immunology | |
| US4033941A (en) | Process for purifying glucagon | |
| Craig et al. | Dialysis studies. IX. On the conformational stability of glucagon, adrenocorticotropic hormone, and similar peptides | |
| CN107760661B (zh) | 药用激肽原酶的peg修饰物及其制备方法和应用 | |
| SU1591814A3 (ru) | Способ получения рекомбинантного ^-интерферона | |
| UA46666C2 (en) | Method for preparing dosage form of short-term acting insulin | |
| CN117003825B (zh) | 阿胶特征肽、制备方法、组合物及其在孕前调理膏方上的应用 | |
| CN108721598B (zh) | 一种缩宫素原料的制备方法及其药物组合物和制剂 | |
| CS225117B2 (en) | The purification of insulin | |
| JP2021512124A (ja) | ヒトインスリンアナログのアシル化誘導体を含有する医薬組成物及びその調製方法 | |
| RU2252782C2 (ru) | Способ приготовления готовой лекарственной формы инсулина пролонгированного действия | |
| US3687833A (en) | Purification of lactogen | |
| EP4353248A1 (en) | Calcium-sensing receptor agonist composition and application thereof | |
| US2974088A (en) | Method of preparing growth hormone | |
| US3728326A (en) | Hypocalcemic peptide and process of preparing it using a two-phase n-butanol-pyridine-acetic acid-ammonium acetate-water system |