TW201416360A

TW201416360A - 用於治療及預防ｂ型肝炎病毒感染之新穎６－胺基酸雜芳基二氫嘧啶

Info

Publication number: TW201416360A
Application number: TW102132494A
Authority: TW
Inventors: Lei Guo; Tai-Shan Hu; yi-min Hu; Buelent Kocer; xian-feng Lin; hai-xia Liu; Alexander V Mayweg; Zong-Xing Qiu; Hong Shen; guo-zhi Tang; li-sha Wang; Guo-Long Wu; shi-xiang Yan; wei-xing Zhang; ming-wei Zhou; Wei Zhu
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 2012-09-10
Filing date: 2013-09-09
Publication date: 2014-05-01
Also published as: EP2892893A1; IL236691A0; ES2617906T3; US20150031687A1; US9447086B2; US20160237078A9; CN104603125A; ZA201500580B; MX2015002954A; MA37942B1; WO2014037480A1; JP6113285B2; PH12015500347A1; KR20150054795A; MA37942A2; AU2013311705A1; CL2015000482A1; BR112015004113A2; EP2892893B1; EA201590384A1

Abstract

本發明提供具有以下通式之新穎化合物：□其中R1、R2、R3、R4及A係如本文中所述，包括該等化合物之組合物，及使用該等化合物之方法。

Description

用於治療及預防B型肝炎病毒感染之新穎6-胺基酸雜芳基二氫嘧啶

本發明係關於用於人類中之療法及/或預防之有機化合物、且特定而言係關於藉由靶向HBV殼體用於治療HBV感染之B型肝炎病毒(HBV)抑制劑。

HBV係病毒之肝DNA病毒科之物種。HBV係嚴重的世界性公共衛生問題，其中尤其亞太地區中超過400,000,000個人長期受此較小有包膜DNA病毒感染。儘管大部分個人似乎在急性症狀後解決了感染，但15%至40%之HBV患者最後將在其壽命期間患上臨床疾病、最顯著地肝炎、肝硬化及肝細胞癌瘤。每年500,000個至1,000,000個人死於由HBV感染引起之肝疾病之末期。

HBV生命週期以「丹恩(Dane)」顆粒與肝細胞表面上之未經鑑別受體之結合開始。進入後，將病毒基因組遞送至核中，在該核中藉助病毒鬆弛環狀DNA之DNA修復形成共價閉合環狀DNA(cccDNA)。不同於大部分其他DNA病毒之機制，HBV cccDNA藉助1.1-基因組單位長度RNA拷貝(前基因組RNA)之反轉錄進行複製。病毒前基因組RNA與其他兩種病毒組份(即殼體蛋白及聚合酶)以及一些宿主因子相互作用，以形成發生病毒DNA複製之殼體顆粒。然後使殼體化基因組之大部分拷貝與用於病毒粒子組裝及分泌之包膜蛋白有效聯結；將少數之該等基因組分流至核中，在該核中將其轉化成cccDNA。

目前，市面上有兩種類型之抗HBV劑，即靶向病毒聚合酶之核苷(酸)類似物(拉米夫定(lamivudine)、阿德福韋(adefovir)、泰諾福韋(tenofovir)、喜必福(telbivudine)及阿巴卡韋(entecavir))及調節宿主免疫功能之干擾素。該聚合酶之一級序列中之賦予對拉米夫定及阿德福韋之抗性之突變已在臨床上經鑑別，並導致70%之所治療患者在開始拉米夫定療法3年內所經歷的血清病毒力價反彈。儘管對喜必福、阿德福韋及阿巴卡韋之抗性更罕見，但其已有記錄。干擾素α係可用於B型肝炎之另一主要療法，但其受較差長期反應及衰弱之副效應限制。一些病毒基因型對干擾素療法不顯示良好反應。現在，HBV感染之臨床治癒之標準係HBsAg之損失及/或血清轉化。大多數(大約或超過90%)所治療患者不能達成此目標。此缺點主要係歸因於核中病毒cccDNA之穩定庫之存在，該穩定庫不能自我複製，從而不顯示核苷(酸)類似物可及性。

因此，業內確實存在對具有經改良特性之治療及研發用於HBV感染之療法之各種方法之醫學需求。

HBV殼體蛋白在HBV複製中起重要作用。HBV具有包含殼體(或核心)蛋白之240個拷貝之二十面體核心。殼體蛋白之主要生物學功能係充當結構蛋白以使前基因組RNA殼體化，並在細胞質中形成未成熟殼體顆粒。此步驟係病毒DNA複製之先決條件。HBV殼體自發地自細胞質中所存在之核心二聚體之許多拷貝自組裝。已顯示，藉由一次添加一個二聚體亞單位來進行三聚體核之形成及後續延長反應，直至完成為止。除此功能以外，殼體蛋白藉助其C-端磷酸化位點之不同磷酸化狀態調控病毒DNA合成。當藉助病毒前基因組RNA之逆轉錄形成近全長鬆弛環狀DNA時，未成熟殼體變成成熟殼體。一方面，殼體蛋白可藉助位於殼體蛋白之C-端區之富精胺酸結構域中之核定位信號促進病毒鬆弛環狀基因組之核易位。在核中，作為病毒cccDNA袖珍染色體之組份，殼體蛋白可在cccDNA袖珍染色體之功能中起結構及調控作用。殼體蛋白亦與內質網中之病毒性較大包膜蛋白相互作用，並誘發完整病毒顆粒自肝細胞釋放。

已報導數種殼體相關之抗HBV抑制劑。例如，包括命名為AT-61及AT-130之化合物之苯基丙烯醯胺衍生物(Feld J.等人Antiviral Research 2007,168-177)及一類來自Valeant R&D之噻唑啶-4-酮(WO2006/033995)已顯示抑制pgRNA包裝。最近研究表明，事實上，苯基丙烯醯胺係HBV殼體組裝之促進劑，且其作用導致空殼體之形成。該等極感興趣結果闡釋成功病毒組裝中之動力學路徑之重要性。

包括命名為Bay 41-4109、Bay 38-7690及Bay 39-5493之化合物之雜芳基二氫嘧啶或HAP係於基於組織培養之篩選中發現(Deres K.等人Science 2003,893)。該等HAP類似物充當合成異位活化劑，且能夠誘導導致核心蛋白降解之異常殼體形成。HAP類似物亦將核心蛋白自經預組裝之殼體重組至非殼體聚合物中，此大概藉由HAP與在殼體「呼吸」(即個別亞單位間鍵之短暫斷裂)期間釋放之二聚體之相互作用達成。將Bay 41-4109投與至HBV感染之轉基因小鼠或人類化小鼠模型中，且其證明隨HBV DNA減少而變之活體內效力(Deres K.等人Science 2003,893；Brezillon N.等人PLoS ONE 2011,e25096)。亦顯示bis-ANS，即一種小分子，其充當分子「楔」並干預正常殼體-蛋白質幾何學及殼體形成(Zlotnick A.等人J.Virol. 2002,4848-4854)。

本發明之標的係式I之新穎化合物、其製造、基於本發明化合物之醫藥及其產生以及式I化合物作為HBV抑制劑及用於治療或預防HBV感染之用途。式I化合物顯示優越抗HBV活性。另外，式I化合物亦顯示高選擇性指數、較好溶解度及小鼠SDPK特徵。

圖1 化合物E之X射線晶體結構。

定義

本文所用術語「C_1-6烷基」單獨或組合地表示含有1個至6個、特定而言1個至4個碳原子之飽和、直鏈或具支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、1-丁基、2-丁基、第三丁基及諸如此類。特定「C_1-6烷基」係甲基、乙基、異丙基及第三丁基。

術語「-C_xH_2x-」單獨或組合地表示含有1個至6個碳原子、特定而言1個至4個碳原子之飽和、直鏈或具支鏈烷基。

術語「環烷基」單獨或組合地係指含有3個至7個碳原子、特定而言3個至6個碳原子之飽和碳環，例如，環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基及諸如此類。特定「環烷基」係環丙基、環戊基及環己基。

術語「羧基」單獨或組合地係指基團-COOH。

術語「氰基」單獨或組合地係指基團-CN。

術語「鹵素」意指氟、氯、溴或碘。特定而言，鹵素係氟、氯或溴。

術語「硫基(sulfanyl)」單獨或組合地係指基團-S-。

術語「鏡像異構體」係指化合物之兩個彼此係不可重疊鏡像之立體異構體。

術語「非鏡像異構體」表示具有兩個或更多個對掌性中心且其分子彼此並非鏡像之立體異構體。

本發明之化合物可以其醫藥上可接受之鹽之形式存在。術語「醫藥上可接受之鹽」係指保留式I化合物之生物學有效性及性質之習用酸加成鹽或鹼加成鹽，且其係自適宜無毒有機或無機酸或有機或無機鹼形成。例如，酸加成鹽包括自諸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、胺基磺酸、磷酸及硝酸等無機酸衍生之彼等，以及自諸如對甲苯磺酸、水楊酸、甲烷磺酸、草酸、琥珀酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、富馬酸及諸如此類等有機酸衍生之彼等。鹼加成鹽包括自氫氧化銨、氫氧化鉀、氫氧化鈉及氫氧化四級銨(例如，氫氧化四甲基銨)衍生之彼等。將醫藥化合物化學修飾成鹽係醫藥化學家熟知之技術，以獲得化合物之經改良物理及化學穩定性、吸濕性、流動性及溶解度。其係闡述於(例如)Bastin R.J.等人，Organic Process Research & Development 2000,4,427-435；或Ansel,H.等人，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems，第6版(1995)，第196頁及第1456頁至第1457頁中。特定者係式I化合物之鈉鹽。

含有一個或若干個對掌性中心之通式I化合物可以外消旋體、非鏡像異構體混合物或視情況活性單一異構體之形式存在。根據已知方法可將外消旋體分離成鏡像異構體。特定而言，可藉由結晶分離之非鏡像異構體鹽係自外消旋體混合物藉由與諸如(例如)D-或L-酒石酸、杏仁酸、蘋果酸、乳酸或樟腦磺酸等視情況活性酸反應來形成。

HBV之抑制劑

本發明提供(i)具有通式I之新穎化合物：

其中 R¹係C_1-6烷基或三氟甲基-C_xH_2x-，其中x係1至6；R²及R³中之一者係經C_1-6烷基、氰基或鹵素取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係苯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基、鹵素或環烷基取代，其中該C_1-6烷基可進一步視情況經鹵素取代； A係、、、、或，其係未經取代或經選自C_1-6烷基、氘及鹵素之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。

本發明之其他實施例係(ii)式I之化合物，其中R¹係甲基、乙基、丙基、異丙基、第三丁基或三氟甲基甲基；R²及R³中之一者係經氟、氯、溴、碘、甲基或氰基取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係苯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經甲基、異丙基、第三丁基、二氟甲基、三氟甲基、環丙基、甲基硫基、氟或氯取代； A係、、、、或，其係未經取代或經選自甲基、異丙基、氘及氟之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。

本發明之另一實施例係(iii)式I之化合物，其中R¹係C_1-6烷基或三氟甲基-C_xH_2x-，其中x係1至6；R²及R³中之一者係經C_1-6烷基、氰基或鹵素取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係苯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基、鹵素或環烷基取代，其中該C_1-6烷基可進一步視情況經鹵素取代； A係、、、或，其係未經取代或經選自C_1-6烷基、氘及鹵素之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。

本發明之其他實施例係(iv)式I之化合物，其中R¹係甲基、乙基、丙基、異丙基或三氟甲基甲基；R²及R³中之一者係經氟、氯、溴、碘、甲基或氰基取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係苯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經甲基、異丙基、三氟甲基、環丙基、甲基硫基、氟或氯取代； A係、、、或，其係未經取代或經選自甲基、異丙基、氘及氟之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。

本發明之另一實施例係(v)式I之化合物，其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經C_1-6烷基或鹵素取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經C_1-6烷基、鹵素或環烷基取代，其中該C_1-6烷基可進一步視情況經鹵素取代；A係、或；其係未經取代或經選自C_1-6烷基、氘及鹵素之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。

本發明之其他實施例係(vi)式I之化合物，其中R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係經氟、氯、溴、碘或甲基取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經甲基、異丙基、三氟甲基、環丙基或氟取代； A係、或，其係未經取代或經選自甲基、異丙基、氘及氟之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。

本發明之另一實施例係(vii)式I之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經鹵素取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫；R⁴係；A係，其係未經取代或經C_1-6烷基取代。

本發明之又一實施例係(viii)式I之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係經氟、氯或溴取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫；R⁴係；A係，其係未經取代或經甲基取代。

本發明之又一實施例係(ix)式I之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係，且另一者係氫，其中A¹係氫或氟；A²係氫或氟；A³係氟、氯或溴；限制條件係A¹及A²中之至少一者係氫；R⁴係； A係，其中A⁴係氫或甲基。

本發明之另一實施例係(x)式I之化合物，其中R¹係C_1-6烷基或三氟甲基-C_xH_2x-，其中x係1至6；R²及R³中之一者係經C_1-6烷基、氰基或鹵素取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基、鹵素或環烷基取代，其中該C_1-6烷基可進一步視情況經鹵素取代； A係、、、或，其係未經取代或經選自C_1-6烷基、氘及鹵素之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。

本發明之其他實施例係(xi)式I之化合物，其中 R¹係甲基、乙基、丙基、異丙基或三氟甲基甲基；R²及R³中一者係經氟、氯、溴、甲基或氰基取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經甲基、異丙基、三氟甲基、環丙基、甲基硫基、氟或氯取代；A係、、、或，其係未經取代或經選自甲基、氘及氟之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。

本發明之另一實施例係(xii)式I之化合物，其中R¹係C_1-6烷基或三氟甲基-C_xH_2x-，其中x係1至6；R²及R³中之一者係經C_1-6烷基或鹵素取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基、鹵素或環烷基取代，其中該C_1-6烷基可進一步視情況經鹵素取代； A係、或，其係未經取代或經選自C_1-6烷基、氘及鹵素之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。

本發明之其他實施例係(xiii)式I之化合物，其中R¹係甲基、乙基、異丙基或三氟甲基甲基；R²及R³中之一者係經氟、氯、溴、碘或甲基取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經甲基、異丙基、三氟甲基、環丙基、甲基硫基或氟取代；A係、或，其係未經取代或經選自甲基、異丙基、氘及氟之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。

本發明之另一實施例係(xiv)式I之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係C_1-6烷基或三氟甲基-C_xH_2x-，其中x係1至6；R²及R³中之一者係經鹵素取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係，其係未經取代或經C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基或環烷基取代，其中該C_1-6烷基可進一步視情況經鹵素取代；A係、或，其係未經取代或經選自C_1-6烷基、氘及鹵素之基團取代。

本發明之其他實施例係(xv)式I之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係甲基、乙基、丙基、異丙基或三氟甲基甲基；R²及R³中之一者係經氟、氯、溴或碘取代一次或兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘； R⁴係，其係未經取代或經甲基、異丙基、三氟甲基、環丙基或甲基硫基取代； A係、或，其係未經取代或經選自甲基、異丙基、氘及氟之基團取代。

本發明之另一實施例係(xvi)式I之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係C_1-6烷基； R²及R³中之一者係，且另一者係氫；R⁴係，其係未經取代或經C_1-6烷基取代； A係，其係經鹵素取代。

本發明之另一實施例係(xvii)式I之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經鹵素取代之苯基；且另一者係氫； R⁴係，其係經C_1-6烷基取代； A係或，其係未經取代或經鹵素取代。

本發明之其他實施例係(xviii)式I之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係經氟或氯取代之苯基；且另一者係氫；R⁴係或； A係或，其係未經取代或經氟取代。

本發明之另一實施例係(xix)式I之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經鹵素取代之苯基；且另一者係氫；R⁴係； A係或，其係未經取代或經鹵素取代。

本發明之其他實施例係(xx)式I之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中 R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係經氟、氯或溴取代之苯基；且另一者係氫；R⁴係； A係或，其係未經取代或經氟取代。

本發明之另一實施例係(xxi)式Ib之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，

其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經氰基或鹵素取代兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係苯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基；其係未經取代或經C_1-6烷基、鹵素、環烷基或三氟甲基取代一次或兩次；R⁵係氫；R⁶係氫；A係、、或；其係未經取代或經氘或鹵素取代兩次或四次。

本發明之其他實施例係(xxii)式Ib之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係經氰基、氟、氯或溴取代兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係苯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基；其係未經取代或經甲基、異丙基、第三丁基、氟、氯、環丙基或三氟甲基取代一次或兩次；R⁵係氫；R⁶係氫；A係、、或；其係未經取代或經氘或氟取代兩次或四次。

本發明之另一實施例係(xxiii)式Ib之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經氰基或鹵素取代兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係噻唑基或咪唑基；其係未經取代或經C_1-6烷基、鹵素、環烷基或三氟甲基取代一次或兩次；R⁵係氫；R⁶係氫； A係、、或；其係未經取代或經氘或鹵素取代兩次或四次。

本發明之其他實施例係(xxiv)式Ib之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係經氰基、氟、氯或溴取代兩次或三次之苯基；且另一者係氫或氘；R⁴係噻唑基或咪唑基；其係未經取代或經甲基、異丙基、第三丁基、環丙基或三氟甲基取代一次或兩次；R⁵係氫；R⁶係氫；A係、、或；其係未經取代或經氘或氟取代兩次或四次。

本發明之另一實施例係(xxv)式Ib之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經鹵素取代兩次之苯基；且另一者係氫；R⁴係苯基、噁唑基、噻吩基或吡啶基；其係未經取代或經C_1-6烷基、鹵素、環烷基或三氟甲基取代一次或兩次；R⁵係氫；R⁶係氫； A係或；其係未經取代或經鹵素取代兩次。

本發明之其他實施例係(xxvi)式Ib之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係甲基；R²及R³中之一者係經氟或氯取代兩次之苯基；且另一者係氫；R⁴係苯基、噁唑基、噻吩基或吡啶基；其係經甲基、氟或氯取代一次或兩次；R⁵係氫；R⁶係氫； A係或；其係未經取代或經氟取代兩次。

式I之特定化合物(包括NMR數據及MS數據)係概述於下表1及2中。

式I之更特定化合物包括以下：(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-[4-2H]-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(3,5-二氟-吡啶-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(3,5-二氟-吡啶-2-基)-5-甲氧基羰基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-環丙基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-氟-噻吩-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-甲基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-甲基-噻唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-[3,3-2H2]-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-三氟甲基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-異丙基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2,4-二氯-苯基)- 2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(R)-6-(2,4-二氯-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(3,4-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-6-(3,4,5-三氟-苯基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-6-(2,3,4-三氟-苯基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氯-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(4-氯-2-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2,3-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-5-(2,2,2-三氟-乙氧基羰基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-6-(4-溴-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-5-乙氧基羰基-6-(3-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-5-乙氧基羰基-6-(4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(3,4-二氟-苯基)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2,4-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-甲基硫基-1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸；(2S)-1-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-甲基硫基-1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-溴-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(5-甲基-噁唑-4- 基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2,3-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-溴-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(4-氯-2-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-6-(4-氯-3-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-4-[(R)-6-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-3-甲基-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-6-(4-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-4-(2-溴-4-氟-苯基)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2,4-二氯-苯基)- 2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(S)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1,4-二甲基-1H-咪唑-2-基)-5-甲氧基羰基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(4-溴-2-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-三氟甲基-噻唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-2-甲基-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-異丙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-異丙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(R)-4-(2-溴-4-氟-苯基)-6-((S)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(R)-4-(2-溴-4-氟-苯基)-6-((R)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(R)-6-((S)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(2R,3S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-6-(2,3,4-三氟-苯基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-溴-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-異丙基-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-(((R)-6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氫嘧啶-4-基)甲基)-3-甲基嗎啉-3-甲酸；(S)-4-(((R)-6-(2-溴-4-氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6- 二氫嘧啶-4-基)甲基)嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4S)-4-(4-溴苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸；(S)-4-(((R)-6-(2-溴苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氫嘧啶-4-基)甲基)嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4R)-4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4R)-5-乙氧基羰基-4-(2-碘苯基)-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸；及(2S)-1-[[(4S)-4-(4-溴苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸。

與先前報導之殼體組裝效應子(例如Bay 41-4109)相比，本發明之化合物具有良好抗HBV活性、高選擇性指數、優越溶解度及小鼠SDPK特徵。作為參照，為Bay 41-4109之Bayer化合物之內部數據亦顯示於表3、4、5及6中。

具有有利藥物動力學之化合物更可能有效且安全。對於藥物而言，具有中等或較低清除率及合理半衰期係極為重要的，此乃因此經常導致良好的經口生物可用度及較高全身性暴露。降低化合物或藥物之清除率可降低效力所需要之日劑量，且從而得到較好的效力及安全特徵。對於HBV感染治療化合物而言，顯示良好肝暴露亦極為重要，此乃因此係靶向器官。如表4中所顯示，本發明之化合物呈現良好小鼠SDPK特徵：較低至中等清除率、於血漿及肝二者中在較低劑量下之良好暴露及良好生物可用度。如表5中所顯示，本發明之化合物亦在活體外人類肝微粒體穩定性分析中呈現較低清除率。

Bay 41-4109、實例2、實例5及實例16於小鼠血漿及肝中之單一劑量PK參數係顯示於表4中。

表4：特定化合物於雄性ICR小鼠中之藥物動力學

¹ 文獻數據，氫參見Deres K.等人，Science 2003,893-896

² 於肝中不可檢測。

Cl：清除率；

AUC_(0-∞)：自給藥時間至無窮大之曲線下面積

經正規化之AUC_(0-∞)=AUC_(0-∞)/劑量

F：生物可用度。

水溶解度係在各種物理及生物過程中起重大作用之重要物理化學性質。期望對於PD/PK研究具有使良好的滲透性及胃腸吸收成為可能之良好溶解度、線性劑量比例、較小PK可變性及調配便宜性。在藥物發現/研發過程之不同階段，必須測定溶解度，且尤其在早期(先導性生成(lead generation)至先導性最佳化(lead optimization))需要高通量方法。冷凍乾燥溶解度分析(Lysa)係在工業中量測化合物溶解度之充分採用之高通量分析。

Lysa之結果係於表6中給出。

基於FDA指導，為支持於人類中之臨床測試，可接受之風險-益處之評估必須藉由提供活體外抗病毒活性(EC₅₀)及細胞毒性(CC₅₀)之明顯證據來達成。重要的係確定，研究用產物在各濃度下具有可活體內達成之抗病毒活性，而不誘導對細胞之毒性效應。此外，在細胞培養模型中，研究用產物之表觀抗病毒活性可係宿主細胞在暴露於該產物中後死亡之結果。該化合物之抑制病毒複製與誘導細胞死亡相比之相對有效性係定義為選擇性指數(CC₅₀值/EC₅₀值)。期望具有給出最大抗病毒活性及最小細胞毒性之較高選擇性指數。

CC₅₀及相應選擇性指數之結果係於表7中給出。

合成

本發明之化合物可藉由任何習用方式來製備。合成該等化合物以及其起始材料之適宜製程係提供於下文方案及實例中。除非另有指示，否則所有取代基、特定而言R¹至R⁴及A係如上文所定義。此外，且除非另外明確說明，否則所有反應、反應條件、縮寫及符號具有熟悉有機化學者所熟知之含義。

A. 化合物Ia、Iaa及Iab之一般合成途徑(方案1)

所關注化合物Ia、Iaa及Iab可根據方案1製備。以乙酸乙醯基酯IIa、醛III及脒IV起始，二氫嘧啶Va可藉助一鍋式縮合反應合成。化合物Va之溴化提供溴化物VIa。使溴化物VIa與環狀胺基酸VII偶合生成所關注化合物Ia。Ia之進一步對掌性分離提供兩種鏡像異構體純的所關注化合物Iaa及Iab。

二氫嘧啶Va可自乙酸乙醯基酯II、醛III及脒IV之縮合及環化順序製備。該反應可於諸如三氟乙醇等適宜醇溶劑中在諸如乙酸鉀等鹼之存在下在加熱條件下實施若干小時。

溴化物VIa可藉由Va與諸如N-溴琥珀醯亞胺等溴化試劑於諸如四氯化碳等適宜惰性溶劑中在80℃至100℃下反應約1小時來製備。

所關注化合物Ia可藉由使溴化物VIa與環狀胺基酸VII偶合來獲得。該反應通常係於諸如1,2-二氯乙烷等適宜溶劑中在諸如N,N-二異丙基乙胺等有機鹼之存在下在室溫下實施若干小時。

其他所關注之化合物Iaa及Iab係藉由非鏡像異構體混合物Ia之製備型HPLC分離獲得。Iaa之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及SFC滯留時間與藉由合成途徑B製得之相同化合物比較來測定。

B. 化合物Iaa之替代一般合成途徑(方案2)

R³係氫或氘。

另一選擇係，所關注化合物Iaa可根據方案2製備。乙酸乙醯基酯II、醛III及脒IV之間之一鍋式反應得到二氫嘧啶Va。然後藉由Va之SFC對掌性分離獲得(-)-鏡像異構體Vaa，且藉由將其SFC滯留時間與立體化學係藉由X射線繞射研究測定之其一特定化合物E比較來測定Vaa立體化學(圖1)。

然後Vaa之溴化提供VIaa。使VIaa與適宜環狀胺基酸VII偶合得到所關注化合物Iaa。

自Vaa至Iaa之合成程序與方案1中所闡述相同，惟使用對掌性中間物Vaa替代外消旋體Va。

C. 化合物IV之一般合成途徑(方案3)

任一市面不可得之脒建構組元IV可自相應腈VIII藉由先與甲氧化鈉反應、接著利用氯化銨處理來製備，如方案3中所闡述。

本發明亦係關於製備式I化合物之製程，其包含：(a)式(XZ)之化合物

與在鹼之存在下之反應；(b)式(YZ)之化合物

在對掌性分離條件下之反應；其中除非另有指示，否則R¹至R⁴及A係定義於上文中。

在步驟(a)中，該鹼可係(例如)N,N-二異丙基乙胺。

式I化合物在根據上述製程製造時亦為本發明之標的。

醫藥組合物及投與

本發明亦係關於用作治療活性物質之式I化合物。

另一實施例提供含有本發明化合物及治療上惰性之載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物或醫藥，以及使用本發明化合物製備該等組合物及醫藥之方法。在一實例中，式I化合物可藉由在室溫下在適當pH下且以期望純度與生理上可接受之載劑(即，在所用劑量及濃度下對接受者無毒之載劑)混合成蓋倫製劑(galenical)投與形式來調配。調配物之pH主要取決於化合物之特定用途及濃度，但較佳係在約3至約8之範圍內。在一實例中，在pH 5之乙酸鹽緩衝液中調配式I化合物。在另一實施例中，式I化合物係滅菌的。該化合物可以(例如)固體或非晶形組合物、凍乾調配物或水性溶液形式儲存。

組合物係以與良好醫療實踐一致之方式調配、給藥及投與。在此上下文中，考慮因素包括所治療之特定病症、所治療之特定人類、個別患者之臨床病狀、病症起因、藥劑遞送位點、投與方法、投與時間安排及醫療從業者已知之其他因素。欲投與之化合物之「有效量」可由該等因素決定，且係血清HBV DNA含量之阻抑、或HBeAg至 HBeAb之血清轉化、或HBsAg損失、或丙胺酸胺基轉移酶含量之正常化及肝組織學之改良所需要之最小量。例如，該量可低於對正常細胞或人類整體具有毒性之量。

在一實例中，每劑量中非經腸投與之本發明化合物之醫藥上有效量將係在約0.01至100mg/kg患者體重/天或者約0.1mg/kg患者體重/天至20mg/kg患者體重/天之範圍內，其中所用化合物之典型初始範圍係0.3mg/kg/天至15mg/kg/天。在另一實施例中，經口單位劑型(例如錠劑及膠囊)含有約0.1mg至約1000mg之本發明化合物。

本發明化合物可藉由任何適宜方式來投與，包括經口、局部(包括經頰及舌下)、經直腸、經陰道、經皮、非經腸、皮下、腹膜內、肺內、真皮內、鞘內及硬膜外及鼻內以及(若期望用於局部治療)病灶內投與。非經腸輸注包括肌內、靜脈內、動脈內、腹膜內或皮下投與。

本發明化合物可以任何方便投與形式投與，例如錠劑、粉劑、膠囊、溶液、分散液、懸浮液、糖漿、噴霧、栓劑、凝膠、乳液、貼劑等。該等組合物可含有醫藥製劑中習用之組份，例如稀釋劑、載劑、pH調整劑、甜味劑、增積劑及其他活性劑。

典型調配物係藉由將本發明化合物與載劑或賦形劑混合來製備。適宜載劑及賦形劑已為彼等熟習此項技術者所熟知且詳細闡述於以下中：例如Ansel,Howard C.等人，Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems.Philadelphia：Lippincott,Williams & Wilkins,2004；Gennaro,Alfonso R.等人，Remington：The Science and Practice of Pharmacy.Philadelphia：Lippincott,Williams & Wilkins,2000；及Rowe,Raymond C.Handbook of Pharmaceutical Excipients.Chicago,Pharmaceutical Press,2005。調配物亦可包括一或多種緩衝液、穩定劑、表面活性劑、潤濕劑、潤滑劑、乳化劑、懸浮劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑、助流劑、加工助劑、著色劑、甜味劑、香化劑、矯味劑、稀釋劑及其他已知添加劑以提供藥物(即本發明化合物或其醫藥組合物)之美觀外觀或有助於製造醫藥產品(即醫藥)。

適宜經口劑型之實例係含有約0.1mg至1000mg之本發明化合物與約90mg至30mg無水乳糖、約5mg至40mg交聯羧甲基纖維素鈉、約5mg至30mg聚乙烯吡咯啶酮(PVP)K30及約1mg至10mg硬脂酸鎂之複合之錠劑。首先將粉末狀成份混合在一起，且然後與PVP溶液混合。可將所得組合物乾燥，製粒，與硬脂酸鎂混合並使用習用設備壓製成錠劑形式。氣溶膠調配物之實例可藉由將本發明化合物(例如5mg至400mg)溶解於適宜緩衝溶液(例如磷酸鹽緩衝液)中並視需要添加滲透壓調節劑(tonicifier)(例如諸如氯化鈉等鹽)來製備。可(例如)使用0.2微米過濾器過濾該溶液以去除雜質及污染物。

因此，實施例包括包含式I之化合物或其立體異構體或醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物。在又一實施例中包括包含式I之化合物或其立體異構體或醫藥上可接受之鹽連同醫藥上可接受之載劑或賦形劑之醫藥組合物。

適應症及治療方法

本發明之化合物可抑制HBV之重新DNA合成，並減少HBV DNA含量。因此，本發明之化合物可用於治療或預防HBV感染。

發明之化合物可用作HBV之抑制劑。

本發明係關於式I之化合物用於治療或預防HBV感染之用途。

式I之化合物用於製備用於治療或預防與HBV感染相關之疾病之醫藥的用途係本發明之標的。

特定而言，本發明係關於式I之化合物用於製備用以治療或預防HBV感染之醫藥之用途。

另一實施例包括治療或預防需要該治療之人類之HBV感染之方法，其中該方法包含向該人類投與治療有效量之式I之化合物、其立體異構體、互變異構體、前藥或醫藥上可接受之鹽。

組合療法

本發明之化合物可與干擾素、聚乙二醇化之干擾素、拉米夫定、阿德福韋酯(Adefovir dipivoxil)、阿巴卡韋、喜必福及泰諾福韋酯(Tenofovir disoproxil)一起用於治療或預防HBV。

實例

將藉由參照以下實例來更全面地理解本發明。然而，不應將其理解為限制本發明之範圍。

本文所用之縮寫係如下：

[α]_D ²⁰：20℃下之旋光度

calc'd：計算值

CC₅₀：導致50%之細胞死亡之濃度

CCK-8：細胞計數套組-8

CCl₄：四氯化碳

CDCl₃-d：氘代氯仿

CLh：肝清除率

CMV：細胞巨大病毒

CuOAc 乙酸銅

d：天

DIG：地穀新配質(digoxigenin)

DIPEA：N,N-二異丙基乙胺

DCM：二氯亞甲基

DMAc：二甲基乙醯胺

D₂O：氘水

FDA：食品與藥物管理局(Food and Drug Administration)

PE：石油醚

DMSO：二甲亞碸

DMSO-d₆：氘化二甲亞碸

DNA：去氧核糖核酸

EDTA：乙二胺四乙酸

EtOH：乙醇

EtOAc或EA：乙酸乙酯

g：克

EC₅₀：乙酸化微管蛋白減少50%所需要之濃度

h或hr：小時

hrs：小時

HAP：雜芳基二氫嘧啶

HBeAb：B型肝炎e抗體

HBeAg：B型肝炎e抗原

HBsAg：B型肝炎表面抗原

HCl：氯化氫

HPLC：高效液相層析

HPLC-UV：帶有紫外線檢測器之高效液相層析

Hz：赫茲

IPA：異丙醇

KCN：氰化鉀

MeOD-d₄：氘化甲醇

MeOH：甲醇

mg：毫克

MHz：百萬赫

min：分鐘

mins：分鐘

mL：毫升

mm：毫米

mM：毫升

mmol：毫莫耳

MS：質譜法

MW：分子量

NaCl：氯化鈉

Na₂SO₄：硫酸鈉

NaOH：氫氧化鈉

NBS：N-溴琥珀醯亞胺

NMR：核磁共振

PBS：磷酸鹽緩衝鹽水

PD：藥效動力學

PK：藥物動力學

prep-HPLC：製備型高效液相層析

Prep-TLC：製備型薄層層析

rpm：轉/分鐘

rt：室溫

sat. 飽和

SDPK：單一劑量藥物動力學

SFC：超臨界流體層析

SSC：鹽水-檸檬酸鈉緩衝液

TEA：三乙胺

Tet：四環素

TFA：三氟乙酸

THF：四氫呋喃

Tris：叁(羥甲基)胺基甲烷

μg：微克

μL：微升

μM：微莫耳

UV：紫外線檢測器

ETV：阿巴卡韋

mpk：mg/kg

OD：光密度

pgRNA：前基因組RNA

qPCR：定量聚合酶鏈式反應

一般實驗條件

中間物及最終化合物係藉由急驟層析使用以下儀器中之一者純化：i)Biotage SP1系統及Quad 12/25藥筒模組。ii)ISCO combi-flash層析儀器。矽膠品牌及孔徑：i)KP-SIL 60Å，粒徑：40-60μM；ii)CAS登錄號：矽膠：63231-67-4，粒徑：47微米至60微米矽膠；iii)來自Qingdao Haiyang Chemical有限公司之ZCX，孔：200至300或300至400。

中間物及最終化合物係藉由製備型HPLC於逆相管柱上使用XBridge^TM Prep-C18(5μm,OBDTM 30×100mm)管柱或SunFire^TM Prep-C18(5μm,OBDTM 30×100mm)管柱純化。Waters AutoP純化系統(管柱：XBridgeTM Prep-C18，30×100mm，Sample Manager 2767，Pump 2525，檢測器：Micromass ZQ及UV 2487，溶劑系統：於水中之乙腈及0.1%氫氧化銨)。對於SFC對掌性分離，藉由對掌性管柱(Daicel chiralpak IC,5μm,30×250mm)管柱分離中間物，其中使用Mettler Toledo SFC-Multigram III系統，溶劑系統：95% CO₂及5% IPA(存於IPA中之0.5% TEA)，背壓100巴(bar)，在254nm下進行UV檢測。

使用LC/MS(Waters^TM Alliance 2795-Micromass ZQ)獲得化合物之LC/MS光譜，LC/MS條件係如下(運行時間6min)：酸性條件：A：存於H₂O中之0.1%甲酸；B：存於乙腈中之0.1%甲酸；鹼性條件：A：存於H₂O中之0.01% NH₃．H₂O；B：乙腈；中性條件：A：H₂O；B：乙腈。

質譜法(MS)：通常僅報導指示母核質量之離子，且除非另有說明，否則所引述之質量離子係正重量離子(MH)⁺。

使用Bruker Avance 400MHz獲得NMR光譜。

於Biotage Initiator Sixty微波合成儀中實施微波輔助反應。

於氬氛圍下實施所有涉及空氣敏感試劑之反應。除非另有闡述，否則試劑在自商業供應商收到時未經進一步純化即使用。

藉由上文方案中所概述之一般方法製備以下實例。其意欲闡釋本發明之含義，但決不應代表本發明之含義內之限制：

製備實例

實例1及2：

6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(實例1)及(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(實例2)

程序A：

根據方案1及方案3中所顯示之一般合成途徑製備標題化合物。詳細合成途徑係提供於方案4中。

化合物A ₁ 之製備：

向噻唑-2-甲腈(1.5g,14mmol)存於5mL無水MeOH中之經攪拌溶液中逐滴添加甲氧化鈉(0.74g,14mmol)存於10mL無水甲醇中之溶液。在室溫下攪拌該反應混合物，直至起始材料消失(此係藉由 LC/MS檢驗)為止。其後，以一份添加氯化銨(1.5g,28mmol)，且將該反應混合物攪拌過夜。藉由過濾去除未溶解材料，且濃縮濾液，以提供呈灰色固體之噻唑-2-甲脒鹽酸鹽(化合物A ₁)，其未經進一步純化即直接用於下一步驟中。MS：計算值128(MH⁺)，量測值128(MH⁺)。

化合物B之製備：

向噻唑-2-甲脒鹽酸鹽(0.13g,1.0mmol)、乙醯乙酸甲酯(0.12g,1.0mmol)及2-氯-5-氟苯甲醛(0.16g,1.0mmol)存於CF₃CH₂OH(8mL)中之經攪拌溶液中添加乙酸鉀(0.20g,2.0mmol)。將該反應混合物回流16hr或在150℃下於微波烘箱中加熱2小時。在將其冷卻至室溫後，濃縮該反應混合物，且將殘餘物溶解於乙酸乙酯中並用鹽水洗滌。將有機層經硫酸鈉乾燥並濃縮，且藉由管柱層析(乙酸乙酯/石油醚係1/4至1/2)純化殘餘物，以提供呈黃色固體之4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-甲基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(化合物B)。MS：計算值(MH⁺)366，量測值(MH⁺)366。¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ ppm 9.98(s,1H),7.97(d,J=4.0Hz,1H),7.90(d,J=4.0Hz,1H),7.41(dd,J=8.0,4.0Hz,1H),7.35(dd,J=8.0,8.0Hz,1H),7.18(td,J=8.0,4.0Hz,1H),5.98(s,1H),3.53(s,3H),2.47(s,3H)。

化合物C之製備：

以份形式向4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-甲基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(0.37g,1.0mmol)存於CCl₄(5mL)中之經攪拌溶液中添加NBS(0.20g,1.1mmol)。在室溫下將該反應混合物攪拌1小時後，在真空下去除溶劑，且藉由管柱層析純化殘餘物，以得到呈黃色固體之6-溴甲基-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(化合物C)。MS：計算值429(MH⁺)，量測值429(MH⁺)。

實例1之製備：

向6-溴甲基-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(0.049g,0.11mmol)及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸(0.044g,0.17mmol)存於1,2-二氯乙烷(5mL)中之經攪拌溶液中逐滴添加DIPEA(0.078mL,0.45mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物，直至起始材料消失(此係藉由LC/MS檢驗)為止。將該混合物用EtOAc(50mL)稀釋，並相繼用NH₄Cl飽和水溶液及鹽水洗滌。將有機層分離並經Na₂SO₄乾燥。在真空下濃縮溶劑，且藉由prep-HPLC純化粗產物，以得到6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(實例1)。

實例2之製備：

藉助藉由逆相製備型HPLC(Waters,SunFire^TM Prep-C18)利用存於水中之15%至35%乙腈加0.1% TFA之混合溶劑以40mL/min溶析速率溶析達成6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(實例1)之非鏡像異構體混合物之分離來獲得鏡像異構純(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(實例2)。(+)-化合物D係分離為實例2之非鏡像異構體。

程序B：

實例2之製備：

在替代合成途徑中，藉由使用藉助二氫嘧啶B之立體混合物之SFC對掌性分離獲得之對掌性中間物E合成實例2。詳細合成途徑係提供於方案5中。

化合物E之製備：

藉助利用85%超臨界CO₂/15% EtOH之混合溶劑以100mL/min速率溶析達成4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-甲基-2-噁唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(化合物B)之立體混合物之SFC(SFC-Multigram；IC：5×250mm,5μ)對掌性分離來獲得鏡像異構純(R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-甲基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(化合物E)。期望(-)-鏡像異構體E具有相對較短滯留時間。藉由X射線繞射研究測定(-)-鏡像異構體 E之絕對立體化學(圖1)。

化合物E：[α]_D ²⁰ -55.0(c 0.845,MeOH)。

化合物F：[α]_D ²⁰ +44.6(c 0.175,MeOH)。

化合物G之製備：

以份形式向(R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-6-甲基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(0.37g,1.0mmol)存於CCl₄(5mL)中之經攪拌溶液中添加NBS(0.20g,1.1mmol)。在室溫下將該反應混合物攪拌1小時後，在真空下去除溶劑，且藉由管柱層析純化殘餘物，以得到呈黃色固體之(R)-6-溴甲基-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(化合物G)。MS：計算值445(MH⁺)，量測值445(MH⁺)。

實例2之製備：

向(R)-6-溴甲基-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(0.049g,0.11mmol)及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸(0.044g,0.17mmol)存於1,2-二氯乙烷(5mL)中之經攪拌溶液中逐滴添加DIPEA(0.078mL,0.45mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物，直至起始材料消失(此係藉由LC/MS檢驗)為止。將該混合物用EtOAc(50mL)稀釋，並相繼用NH₄Cl飽和水溶液及鹽水洗滌。將有機層分離並經Na₂SO₄乾燥。在真空下濃縮溶劑，且藉由prep-HPLC純化粗產物，以得到呈淺黃色固體之(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(實例2)。

實例3：

(S)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-[4-2H]-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2-氯-4-氟-[² H1]-苯甲醛代替2-氯-4-氟苯甲醛來製備標題化合物。實例3之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

2-氯-4-氟-[ ² H1]-苯甲醛(化合物H)之製備：

在室溫下將存於二乙醚(4mL)中之2-氯-4-氟苯甲醛(1.6g,4.2mL,10mmol)添加至KCN(0.70g,11mmol)存於D₂O(4.0mL)中之經攪拌溶液中。在將該反應混合物劇烈攪拌3天後，將其用二乙醚(50mL)萃取兩次。用二乙醚(1×20mL)反萃取水層。將有機層經Na₂SO₄乾燥，並在真空下濃縮，以得到呈黃色固體之2-氯-4-氟-[² H1]-苯甲醛(1.7g)，其按原樣用於下一步驟中。同位素純度係藉由¹H NMR測定為90%。¹H NMR(CDCl₃-d,400MHz)：δ ppm 7.99(dd,J=8.78,6.27Hz,1H),7.1-7.24(m,1H),7.13(td,J=8.16,2.26Hz,1H)。

實例4：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(3,5-二氟-吡啶-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用3,5-二氟-吡啶-2-甲脒(對於其合成，請參見：Stolting,J.等人，PCT Int.Appl. 2000,WO 2000058302 A1 20001005)代替噻唑-2-甲脒來製備標題化合物。實例4之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例5：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用(S)- 嗎啉-3-甲酸(Aldrich,CAS：106825-79-0)代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。

實例6：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(3,5-二氟-吡啶-2-基)-5-甲氧基羰基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用3,5-二氟-吡啶-2-甲脒及(S)-嗎啉-3-甲酸代替噻唑-2-甲脒及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例6之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例7：

(R)-6-(2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用5,5-二氟-六氫吡啶-2-甲酸(對於其合成，請參見：Golubev,A.等人，Tetrahedron Lett. 2004,45,1445-1447)代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。

實例8：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-甲基-吡啶-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-甲基-吡啶-2-甲脒代替噻唑-2-甲脒來製備標題化合物。實例8之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

4-甲基-吡啶-2-甲脒(化合物A ₂ )之製備：

以與化合物噻唑-2-甲脒類似之方式利用方案5中所顯示之程序藉由使用4-甲基-吡啶-2-甲腈代替噻唑-2-甲腈來製備4-甲基-吡啶-2-甲脒(化合物A ₂)。MS：計算值(MH⁺)136，量測值(MH⁺)136。

實例9：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-甲基-吡啶-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-甲基-吡啶-2-甲脒及(S)-嗎啉-3-甲酸代替噻唑-2-甲脒及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例9之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例10：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-環丙基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-環丙基-噻唑-2-甲脒(化合物M)代替噻唑-2-甲脒來製備標題化合物。實例10之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

4-環丙基-噻唑-2-甲脒(化合物M)之製備：

在室溫下向2-溴-1-環丙基-乙酮(16g,100mmol)存於EtOH(150mL)中之經攪拌溶液中相繼添加硫脲(8.0g,105mmol)及Cu(OAc)₂(0.90g,5.0mmol)。在80℃下將該混合物加熱1小時，在減壓下去除溶劑。利用飽和NaHCO₃(100mL)將殘餘物中和至pH=8至9，且然後添加DCM(200mL)。分離有機層，且用DCM(200mL×2)進一步萃取水層。將合併之有機層用飽和NaHCO₃(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，並經無水Na₂SO₄乾燥。在過濾及濃縮後，藉由管柱層析(溶析液：EA：PE=1：4)純化殘餘物，以提供呈黃色固體之期望產物J(11g)。¹H NMR(CDCl₃-d,400MHz)：δ ppm 6.06(s,1H),4.86(br s,2H),1.85-1.79(m,1H),0.84-0.74(m,4H)。

在0℃下向化合物J(5.6g,40mmol)及CuBr(8.5g,60mmol)存於CH₃CN(100mL)中之經攪拌溶液中逐滴添加t-BuONO(6.2g,7.2mL,60mmol)。然後將該反應混合物升溫至室溫，並進一步地再攪拌30min。其後，過濾沈澱物，且在減壓下去除溶劑。藉由管柱層析(溶析液：100%石油醚)純化殘餘物，以提供呈含有少量石油醚之淺黃色油狀物之期望產物K(3.5g,43%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)：δ 6.77(s,1H),2.00-1.95(m,1H),0.94-0.85(m,4H)。

將化合物K(3.3g,16mmol)與CuCN(4.3g,49mmol)存於DMAc (15mL)中之混合物加熱至135℃，並持續3小時。將該反應混合物用PE萃取，並經Na₂SO₄乾燥。在減壓下去除溶劑，以提供呈黃色油狀物之粗產物L(0.9g,38%)，其按原樣用於下一步驟中。

以與噻唑-2-甲脒(化合物A ₁)類似之方式利用方案5中所顯示之程序藉由使用4-環丙基-噻唑-2-甲腈代替噻唑-2-甲腈來製備化合物M。¹H NMR(CDCl₃-d,400MHz)：δ 9.68(br,1H),9.56(br,1H),2.23-2.19(m,1H),1.01-0.92(m,4H)。

實例11：

(R)-2-(4-第三丁基-噻唑-2-基)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-第三丁基-噻唑-2-甲脒代替噻唑-2-甲脒來製備標題化合物。實例11之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

4-第三丁基-噻唑-2-甲脒(化合物N)之製備：

以與化合物M類似之方式利用實例10中所顯示之程序藉由使用1-溴-3,3-二甲基-丁-2-酮代替2-溴-1-環丙基-乙酮來製備4-第三丁基-噻唑-2-甲脒(化合物N)。MS：計算值(MH⁺)184，量測值(MH⁺)184。

實例12：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-氟-噻吩-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-氟-噻吩-2-甲腈代替噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例12之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例13：

(S)-4-[6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例1類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用1-甲基-1H-咪唑-2-甲腈及(S)-嗎啉-3-甲酸代替噻唑-2-甲腈及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。

實例14：

(R)-6-((R)-5-羧基-3,3-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

自(R)-6-(5-羧基-3,3-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(化合物O)之非鏡像異構體混合物藉助製備型HPLC分離製備標題化合物。[α]_D ²⁰ -26.9(c 0.110,MeOH)。

(R)-6-(5-羧基-3,3-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(化合物O)之製備

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用5,5-二氟-六氫吡啶-3-甲酸(Shanghai AQ BioPharma Co.Ltd.,CAS：1255666-96-6)代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備化合物O。

實例15：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-甲基-噁唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-甲基-噁唑-2-甲腈及代替噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例15之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例16：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-甲基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-甲基-噻唑-2-甲腈代替噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例16之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例17：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-甲基-噻唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-甲基-噻唑-2-甲腈及(S)-嗎啉-3-甲酸代替噻唑-2-甲腈及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例17之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例18：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4,5-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2-氯- 4,5-二氟-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例18之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例19：

(R)-6-((S)-2-羧基-[3,3-2H2]-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用(R)-[3,3-² H2]-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸鹽酸鹽代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。

(R)-[3,3- ² H2]-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸鹽酸鹽(化合物R)之製備：

將D₂O(10mL)及經預洗滌(利用D₂O)之矽膠(4g)添加至(S)-4-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸二-第三丁酯(4.0g,14mmol)存於無水THF(10mL)中之溶液中。在室溫下將該反應混合物攪拌8天後，藉由過濾去除矽膠。用乙酸乙酯萃取濾液，且濃縮有機相，以得到呈淺黃色油狀物之(R)-[3,3-² H2]-4-側氧基-吡咯啶-1,2-二甲酸二-第三丁酯(化合物P)(4.0g)。¹H NMR(CDCl₃-d,400MHz)：δ ppm 4.55-4.70(m,1H),3.82-3.92(m,2H),1.49(s,9H),1.48(s,9H)。

在冰冷卻下將三氟化二乙胺基硫(DAST)(1.4g,1.2mL,8.7mmol)添加至(R)-[3,3-² H2]-4-側氧基-吡咯啶-1,2-二甲酸二-第三丁酯(1.0g,3.5mmol)存於無水二氯甲烷(15mL)中之溶液中，且在室溫下將所得混合物攪拌20hr。然後將所得混合物傾倒至冰上，並用乙酸乙酯萃取。將有機層用碳酸氫鈉飽和水溶液、接著鹽水洗滌，並經硫酸鈉乾燥。將其過濾，並在真空下濃縮，以得到呈黃色油狀物之(R)-[3,3-² H2]-4,4-二氟-吡咯啶-1,2-二甲酸二-第三丁酯(化合物Q)(0.94g)。¹H NMR(CDCl₃-d,400MHz)：δ ppm 4.32-4.47(m,1H),3.74-3.90(m,2H),1.43-1.52(m,18H)。

向5mL微波小瓶中添加存於1,1,3,3-六氟異丙醇(2mL)中之(R)-[3,3-² H2]-4,4-二氟-吡咯啶-1,2-二甲酸二-第三丁酯(0.30g)。給小瓶加蓋，並於微波爐中在135℃下加熱40min。淺黃色反應混合物變紅。濃縮該反應混合物。將殘餘物溶解於甲醇中，並用10N HCl溶液(0.10mL)處理，並攪拌過夜。濃縮該反應混合物，以得到呈黑色非晶形固體之(R)-[3,3-² H2]-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸鹽酸鹽(化合物R)(0.40g)，其未經進一步純化即按原樣用於下一步驟中。

實例20：

6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1,4-二甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例1類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用1,4-二甲基-1H-咪唑-2-甲脒代替噻唑-2-甲脒來製備標題化合物。

1,4-二甲基-1H-咪唑-2-甲脒(化合物T)之製備：

以與化合物M類似之方式利用實例10中所顯示之程序藉由直接使用2-溴-1,4-二甲基-1H-咪唑并代替2-溴-1-環丙基-乙酮來製備化合物T。MS：計算值(MH⁺)139，量測值(MH⁺)139.

實例21：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4,5-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2-氯-4,5-二氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例21之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例22：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(3-氟-吡啶-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用3-氟-吡啶-2-甲腈代替噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例22之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例23：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-氯-噻吩-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-氯-噻吩-2-甲腈代替噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例23之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例24：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(3-甲基-吡啶-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用3-甲基-吡啶-2-甲腈代替噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例24之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例25：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-三氟甲基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-三氟甲基-噻唑-2-甲脒代替噻唑-2-甲脒來製備標題化合物。實例25之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

4-三氟甲基-噻唑-2-甲脒(化合物U)之製備：

以與化合物M類似之方式利用實例10中所顯示之程序藉由使用2-溴-4-三氟甲基-噻唑(CAS：41731-39-9)代替實例10中自2-溴-1-環丙基-乙酮製得之2-溴-4-環丙基-噻唑來製備4-三氟甲基-噻唑-2-甲脒(化合物U)。MS：計算值(MH⁺)196，量測值(MH⁺)196。

實例26：

6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例1類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯來製備標題化合物。

實例27：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4- 甲基-噻吩-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-甲基-噻吩-2-甲腈代替噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例27之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例28：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-異丙基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-異丙基-噻唑-2-甲脒代替噻唑-2-甲脒來製備標題化合物。實例28之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

4-異丙基-噻唑-2-甲脒(化合物V)之製備：

以與化合物M類似之方式利用實例10中所顯示之程序藉由使用1-溴-3-甲基-丁-2-酮代替2-溴-1-環丙基-乙酮來製備4-異丙基-噻唑-2-甲脒(化合物V)。MS：計算值(MH⁺)170，量測值(MH⁺)170。

實例29：

(R)-4-(4-溴-2-氯-苯基)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-溴-2-氯-苯甲醛代替4-氟-2-氯-苯甲醛來製備標題化合物。實例29之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例30：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氰基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-氰基-2-氯-苯甲醛代替4-氟-2-氯-苯甲醛來製備標題化合物。實例30之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例31：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例1類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例31之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例32：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例1類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用1-甲基-1H-咪唑-2-甲腈代替噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例32之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例33：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(2,4-二氟-苯基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例1類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2,4-二氟-苯甲腈代替噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例33之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例34：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯來製備標題化合物。實例34之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例35：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、1-甲基-1H-咪唑-2-甲腈及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、噻唑-2-甲腈及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例35之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例36：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯及1-甲基-1H-咪唑-2-甲腈代替乙醯乙酸甲酯及噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例36之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例37：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(6-甲基-吡啶-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、6-甲基-吡啶-2-甲腈及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、噻唑-2-甲腈及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例37之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例38：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2,4-二氯-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯及2,4-二氯-苯甲醛代替乙醯乙酸甲酯及2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例38之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例39：

(S)-4-[(R)-6-(2,4-二氯-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯,2,4-二氯-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯,2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例39之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例40：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1-甲基-4-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯及1-甲基-4-三氟甲基-1H-咪唑-2-甲腈代替乙醯乙酸甲酯及噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例40之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例41：

(S)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(3,4-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯及3,4-二氟-苯甲醛代替乙醯乙酸甲酯及2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例41之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例42：

(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、3,4-二氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例42之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例43：

(S)-4-[(S)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-6-(3,4,5-三氟-苯基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、3,4,5-三氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例43之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例44：

(S)-4-[(R)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-6-(2,3,4-三氟-苯基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、2,3,4-三氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例44之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例45：

(S)-4-[(R)-6-(4-溴-2,3-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-溴-2,3-二氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例45之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例46：

(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氯-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、3,4-二氯-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例46之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例47：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2-氯-3-氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例47之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例48：

((S)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(4-氰基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯及4-甲醯基-苯甲腈代替乙醯乙酸甲酯及2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例48之立體化學係藉由將其1H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例49：

(S)-4-[(R)-6-(4-氯-2-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、4-氯-2-氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例49之立體化學係藉由將其1H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例50：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2,3-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯及2,3-二氟-苯甲醛代替乙醯乙酸甲酯及2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例50之立體化學係藉由將其1H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例51：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-5-(2,2,2-三氟-乙氧基羰基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用3-側氧基-丁酸2,2,2-三氟-乙酯及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例51之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例52：

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、4-溴-3-氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例52之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例53：

(S)-4-[(S)-5-乙氧基羰基-6-(3-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、3-氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例53之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例54：

(S)-4-[(S)-5-乙氧基羰基-6-(4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、4-氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例54之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例55：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯及2-氯-3,4-二氟-苯甲醛代替乙醯乙酸甲酯及2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例55之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例56：

(S)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(3,4-二氟-苯基)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、3,4-二氟-苯甲醛及1-甲基-1H-咪唑-2-甲腈代替乙醯乙酸甲酯、2-氯-4-氟-苯甲醛及噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例56之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例57：

(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、3,4-二氟-苯甲醛、1-甲基-1H-咪唑-2-甲腈及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、2-氯-4-氟-苯甲醛、噻唑-2-甲腈及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例57之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例58：

(S)-4-[(R)-6-(2,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧 啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、2,4-二氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例58之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例59：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2,4-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯及2,4-二氟-苯甲醛代替乙醯乙酸甲酯及2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例59之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例60：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用乙醯乙酸乙酯、2-氯-3,4-二氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替乙醯乙酸甲酯、2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例60之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例61：

(2S)-1-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-甲基硫基-1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用4-甲基硫基-噻唑-2-甲腈(化合物Y)代替噻唑-2-甲腈來製備標題化合物。實例61之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

4-甲基硫基-噻唑-2-甲腈(化合物Y)之製備：

向4-溴-噻唑-2-甲醛(5.0g,26mmol)存於EtOH(50mL)中之經攪拌溶液中相繼添加而乙氧基甲氧基-乙烷(14mL)。在80℃下將該混合物加熱24小時後，在減壓下去除溶劑。添加DCM(50mL)。分離有幾層，且進一步用DCM(50mL×2)萃取水層。將合併之有機層用飽和NaHCO₃(30mL)、鹽水(30mL)洗滌，且然後經無水Na₂SO₄乾燥。在減壓下去除溶劑，以提供呈油狀物之粗產物W(7.0g)，其用於下一步驟中。

在室溫下，向化合物W(0.50g,1.9mmol)及CuI(0.36g,1.9mmol)存於DMF(5mL)中之經攪拌溶液中添加MeSNa(0.53g,7.5mmol)。將該反應混合物加熱至130℃，並持續13小時。在減壓下去除溶劑。添加DCM(50mL)。分離有幾層，且進一步用DCM(50mL×2)萃取水層。將合併之有機層用飽和NaHCO₃(30mL)、鹽水(30mL)洗滌，並經無水Na₂SO₄乾燥。在過濾及濃縮後，藉由管柱層析(溶析液：EA：PE=1：20)純化殘餘物，以提供呈油狀物之期望產物X(250mg)。MS：計算值(MH⁺)234，量測值(MH⁺)234。

在室溫，向化合物X(2.0g,7.5mmol)之混合物添加1,4-二噁烷 (5mL)及HCl(1N,5mL)。在該混合物攪拌24小時後，添加DCM(50mL)。分離有幾層，且進一步用DCM(50mL×2)萃取水層。合併之有機層用飽和NaHCO₃(30mL)、鹽水(30mL)洗，然後經無水Na₂SO₄乾燥。在減壓下去除溶劑。在0℃，將殘餘物溶解於DCM(50mL)中，同時添加NH₂OH.HCl及吡啶，然後反應混合物在室溫攪拌過夜。其後，添加更多DCM(100mL)。分離有幾層，且進一步用DCM(50mL×2)萃取水層。合併之有機層用飽和NaHCO₃(100mL)、鹽水(100mL)洗，然後經無水Na₂SO₄乾燥。在減壓下去除溶劑，提供油狀物。在0℃，向此油狀化合物中添加1,4-二噁烷、三氟乙酸酐及三乙胺。該反應混合物在室溫攪拌過夜後，添加更多DCM(100mL)。分離有幾層，且進一步用DCM(50mL×2)萃取水層。合併之有機層用飽和NaHCO₃(100mL)、鹽水(100mL)洗，然後經無水Na₂SO₄乾燥。在過濾及濃縮後，藉由管柱層析(溶析液：EA：PE=1：20)純化殘餘物，提供呈油狀之期望產物D(1.2mg)。MS：計算值(MH⁺)157，量測值(MH⁺)157。

實例62：

(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-甲基硫基-1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸

與實例2類似用方案5中所示之程序B藉由使用4-甲基硫基-噻唑-2-甲腈(化合物Y)及(S)-嗎啉-3-甲酸代替噻唑-2-甲腈及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸製備標題化合物。實例62之立體化學係藉由其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較測定。

實例63：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

與實例2類似用方案5中所顯示之程序B藉由使用2-氯-3-氟苯甲醛、乙醯乙酸乙酯及(S)-嗎啉-3-甲酸代替2-氯-4-氟苯甲醛、乙醯乙酸甲酯及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸製備標題化合物。實例63之立體化學係藉由其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較測定。

實例64：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用2-氯-3-氟苯甲醛及乙醯乙酸乙酯代替2-氯-4-氟苯甲醛及乙醯乙酸甲酯來製備標題化合物。實例64之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例65：

(S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2-溴-4-氟苯甲醛、5-甲基-噁唑-4-甲脒(化合物AB)及(S)-嗎啉-3-甲酸代替2-氯-4-氟苯甲醛、噻唑-2-甲脒及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例65之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

5-甲基噁唑-4-甲脒(化合物AB)之製備：

在65℃下，將5-甲基噁唑-4-甲酸乙酯(CAS：32968-44-8)(2.5g, 16mmol)與氨水(100mL，7M，存於MeOH中)之混合物攪拌48小時。在減壓下去除溶劑，以得到化合物Z(1.94g,98%)。¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ ppm：8.29(s,1H),7.47(s,2H),2.55(s,3H)。MS：計算值(MH⁺)127，量測值(MH⁺)127。

在0℃下，向5-甲基噁唑-4-甲醯胺Z(1.3g,10mmol)存於無水DMF(10mL)中之白色懸浮液中添加三聚氯化氰(3.8g,21mmol)，在0℃下將該反應攪拌2h。小心地利用冰水(20mL)淬滅該反應，且然後利用2N NaOH溶液鹼化至pH 10。用EtOAc(50mL×3)萃取該混合物，將合併之有機層用水(30mL×2)、鹽水(30mL×1)洗滌，且然後經Na₂SO₄乾燥，然後過濾並在減壓下濃縮。藉由急驟層析(Biotage，40g矽膠，存於PE中之EtOAc 30%至100%)純化殘餘物，以提供無色油狀物AA(0.89g,79%)。¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ ppm：8.55(s,1H),2.52(s,3H)。

向5-甲基噁唑-4-甲腈AA(0.76g,7.0mmol)存於無水MeOH(30mL)中之溶液中添加MeONa(0.57g,10mmol)，在35℃下在氮氣下攪拌3h後，添加NH₄Cl(0.75g,14mmol)，使其回流2h。去除溶劑，且藉由急驟層析(Biotage，40g矽膠，存於DCM中之MeOH 5%至35%)純化殘餘物，以提供褐色固體AB(587mg,67%)。¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ ppm：9.11-9.19(m,3H),8.60(s,1H),2.59(s,3H)。MS：計算值(MH⁺)126，量測值(MH⁺)126。

實例66：

(S)-4-[(R)-6-(2-溴-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用2-溴-3-氟苯甲醛、乙醯乙酸乙酯及(S)-嗎啉-3-甲酸代替2-氯-4-氟苯甲醛、乙醯乙酸甲酯及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例 66之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例67：

(R)-4-(2-溴-3-氟-苯基)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用2-溴-3-氟苯甲醛及乙醯乙酸乙酯代替2-氯-4-氟苯甲醛及乙醯乙酸甲酯來製備標題化合物。實例67之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例68：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例1類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用5-甲基-噁唑-4-甲脒(化合物AB)及(S)-嗎啉-3-甲酸代替噻唑-2-甲脒及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例68之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例69：

(S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例1類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2-溴-4-氟苯甲醛、5-甲基-噁唑-4-甲脒(化合物AB)、乙醯乙酸乙酯及(S)-嗎啉-3-甲酸代替2-氯-4-氟苯甲醛、噻唑-2-甲脒、乙醯乙酸甲酯及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例69之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例70：

(S)-4-[(R)-6-(2,3-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧 啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸、乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯且2,3-二氟苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例70之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例71：

(S)-4-[(R)-6-(2-溴-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸、2-溴苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例70之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例73：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸且2-氯-3,4-二氟苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例73之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例74：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用2-氯-3,4-二氟苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例74之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例75：

(S)-4-[(R)-6-(4-氯-2-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸且2-氟-4-氯-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例75之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例77：

(S)-4-[(S)-6-(4-氯-3-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸且3-氟-4-氯-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例77之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例78及79：

(S)-4-[(R)-6-(4-氯-2-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-3-甲基-嗎啉-3-甲酸(實例78)及(R)-4-[(R)-6-(4-氯-2-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-3-甲基-嗎啉-3-甲酸(實例79)

自4-[(R)-6-(4-氯-2-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫- 嘧啶-4-基甲基]-3-甲基-嗎啉-3-甲酸(化合物AC)之非鏡像異構體混合物藉助製備型HPLC分離製備標題化合物。基於SAR知識試驗性指定絕對立體化學。

4-[(R)-6-(4-氯-2-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-3-甲基-嗎啉-3-甲酸(化合物AC)之製備

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用3-甲基嗎啉-3-甲酸(化合物AD)代替(S)-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸且2-氟-4-氯-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備化合物AC。

3-甲基嗎啉-3-甲酸(化合物AD)之製備：

在室溫下，向3-甲基-4-[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基]嗎啉-3-甲酸(Accela ChemBio有限公司，CAS：1052680-53-1，50mg，0.20mmol)存於DCM(1ml)中之溶液中逐滴添加三氟乙酸(1mL)。在室溫下將所得混合物攪拌1小時，且然後在真空下濃縮。殘餘物未經進一步純化即直接用於下一步驟中。

實例80：

(R)-6-((R)-5-羧基-3,3-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-甲基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與方案6中所顯示之實例14類似之方式藉由使用4-甲基-噻唑-2-甲脒代替噻唑-2-甲脒來製備標題化合物。

實例81：

(S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2-溴- 4-氟-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛並使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例81之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例82：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2-氯-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛、使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯且(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例82之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例83：

(S)-4-[(S)-6-(4-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-氯-3-氟-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛、使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯並使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例83之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例84：

(R)-4-(2-溴-4-氟-苯基)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2-溴-4-氟-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例84之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例85：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2,4-二氯-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2,4-二氯-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。實例85之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例86：

3-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-1,3-噻嗪烷-4-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用1,3-噻嗪烷-4-甲酸(WuXi AppTec(Wuhan)有限公司，CAS：60175-95-3)代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。

實例87：

(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-環丙基噻唑-2-基)-5-甲氧基羰基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-環丙基-噻唑-2-甲脒(化合物M)代替噻唑-2-甲脒且(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例87之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例88：

(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-[4-(二氟甲基)噻唑-2-基]-5-甲氧基羰基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用(3S)-嗎啉-3-甲酸及4-(二氟甲基)噻唑-2-甲脒(化合物AL)代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸及噻唑-2-甲脒來製備標題化合物。

4-(二氟甲基)噻唑-2-甲脒(化合物AL)之製備：

向3-溴-2-側氧基-丙酸甲酯(10g,51mmol)及硫脲(4.0g,552mmol)存於EtOH(200mL)中之溶液添加CuOAc(0.3g,2.62mmol)，然後在室溫下攪拌10h。濃縮該混合物，以得到粗產物(16g)。利用NaHCO₃將粗產物鹼化至pH=8，然後用EtOAc(200mL×3)萃取。將有機層用H₂O(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，且然後經無水Na₂SO₄乾燥，且然後濃縮，以得到呈黃色固體之產物化合物AE(8.0g)。

向化合物AE(15g,87mmol)存於DCM(200mL)中之混合物中添加(Boc)₂O(28.48g,130.65mmol)及DMAP(0.37g)。在室溫下將該混合物攪拌過夜。在用EA(200mL)稀釋後，用水、NaHCO₃水溶液(100mL)洗滌該混合物。將有機層乾燥且然後濃縮，以提供淺黃色油狀物。藉由管柱層析於矽膠(PE：EA=10：1)中純化殘餘物，以得到呈淺黃色油狀物之化合物AF(20.0g)。

在-78℃下，向化合物AF(18g,66mmol)存於THF(300mL)中混合物中添加LAH(3.0g,79mmol)。將該混合物保持2hr。在添加NaOH水溶液(3.0mL 15%，存於水中)後，將該混合物用EA(100mL)稀釋，且然後過濾。濃縮濾液，以提供淺黃色油狀物。藉由管柱層析於矽膠(PE：EA=30：1)中純化殘餘物，以得到呈淺黃色油狀物之化合物AG(14.0g)。

在室溫下，向化合物AG(14g,60.79mmol)存於DCM(200mL)中之混合物中添加戴斯-馬丁(Dess-Martin，30.9g，72.95mmol)。將該混合物保持2hr。添加Na₂S₂O₃，然後用水、NaHCO₃水溶液洗滌該混合物。將有機層乾燥並濃縮，以提供淺黃色油狀物。藉由管柱層析於矽膠(PE：EA=10：1)中純化殘餘物，以得到呈淺黃色油狀物之化合物AH(7.0g)。

向化合物AH(7.0g,31mmol)存於DCM(200mL)及EtOH(100mL)中之溶液中添加DAST(7.4g,46.05mmol)。在室溫下將該反應混合物攪拌過夜。將該混合物傾倒至水中，並用DCM(200mL)稀釋，且然後用水(100mL)、飽和NaHCO₃(100mL)洗滌。將有機層乾燥並濃縮，以提供淺黃色油狀物。藉由管柱層析於矽膠(PE：EA=30：1)中純化殘餘物，以得到呈淺黃色固體之化合物AI(5.8g)。

在室溫下，將化合物AI(6.0g,24mmol)存於HCl/EtOAc(60mL)中之溶液攪拌過夜。在去除溶劑後，添加NaHCO₃(100mL)飽和水溶液，且將該混合物用DCM(100mL)稀釋，然後用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌。將有機層乾燥並濃縮，以提供淺黃色油狀物。藉由管柱層析於矽膠(PE：EA=30：1)中純化殘餘物，以得到呈淺黃色油狀物之化合物AJ(3.0g)。

在0℃下，向CuCN(3.6g,40mmol)、NaCN(1.7g,35mmol)及t-BuONO(4.1g,40mmol)存於MeCN(100mL)中之混合物中添加化合物AJ(3.0g,20mmol)。在室溫下將該反應混合物攪拌過夜。在將其用石油醚(100mL)稀釋後，用水、NaHCO₃水溶液(100mL)洗滌該混合物，且將有機層乾燥並濃縮，以提供淺黃色油狀物(1.0g)。粗AK未經進一步純化即直接用於下一步驟中。

在室溫下，向裝填有60mL MeOH之燒瓶中添加Na(16mg，0.69 mmol，0.11當量)。然後將以上化合物AK(1.0g,6.3mmol)添加至所得NaOMe溶液中。在室溫及N₂下將該反應攪拌24hr。然後添加NH₄Cl(230mg,4.3mmol)。在30℃下將該反應攪拌24hr。濃縮該反應，且然後在攪拌下添加1.0mL之異丙醇及10mL之第三丁基甲醚。收集沈澱物，並在真空下乾燥，以得到呈白色固體之期望產物AL(490mg)。

實例89：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-3,3-二甲基-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用(2S)-4,4-二氟-3,3-二甲基-吡咯啶-2-甲酸(CAS：1408278-20-5，對於合成，參見：Hu,Shanghui；Martinez,Carlos A.；Kline,Billie；Yazbeck,Daniel；Tao,Junhua；Kucera,David J.Organic Process Research & Development,2006,10,650-654)代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。

實例90：

(3R)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-2,2-二甲基-硫嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用(3R)-2,2-二甲基硫嗎啉-3-甲酸(WuXi AppTec(Wuhan)有限公司，CAS：774243-35-5)代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。

實例91：

(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]硫嗎啉-3-甲酸

以與方案6中所顯示之實例14類似之方式藉由使用硫嗎啉-3-甲酸 (PharmaBlock(Nanjing)R & D有限公司CAS：20960-92-3)代替5,5-二氟-六氫吡啶-3-甲酸來製備標題化合物。

實例92：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1,4-二甲基-1H-咪唑-2-基)-5-甲氧基羰基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用1,4-二甲基-1H-咪唑-2-甲腈及(S)-嗎啉-3-甲酸代替噻唑-2-甲腈及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例92之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例93：

(S)-4-[(R)-6-(4-溴-2-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用4-溴-2-氟-苯甲醛、乙醯乙酸乙酯及(S)-嗎啉-3-甲酸代替2-氯-4-氟-苯甲醛、乙醯乙酸甲酯及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例93之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例94：

(S)-4-[(R)-6-(4-溴-2-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用4-溴-2-氟-苯甲醛及(S)-嗎啉-3-甲酸代替2-氯-4-氟-苯甲醛及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例94之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例95：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-三氟甲基-噻唑-2- 基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用4-三氟甲基-噻唑-2-甲脒(化合物U)及(S)-嗎啉-3-甲酸代替噻唑-2-甲脒及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例95之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例96：

(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-2-甲基-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用3,4-二氟-2-甲基-苯甲醛、乙醯乙酸乙酯及(S)-嗎啉-3-甲酸代替2-氯-4-氟-苯甲醛、乙醯乙酸甲酯及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例96之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例97：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用2-氯-3-氟-苯甲醛、乙醯乙酸乙酯、1-甲基-1H-咪唑-2-甲腈及(S)-嗎啉-3-甲酸代替2-氯-4-氟-苯甲醛、乙醯乙酸甲酯、噻唑-2-甲腈及(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例97之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例98：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-異丙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用3-側氧基-丁酸異丙酯代替乙醯乙酸甲酯且(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例98之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例99：

(S)-4-[6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-丙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例1類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用3-側氧基-丁酸丙酯代替乙醯乙酸甲酯且(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。

實例100：

(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-異丙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用3,4-二氟-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛、3-側氧基-丁酸異丙酯代替乙醯乙酸甲酯且(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例100之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例101：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-異丙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2-氯-3-氟-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛、3-側氧基-丁酸異丙酯代替乙醯乙酸甲酯且(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例101之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例102：

(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(5- 甲基-噁唑-4-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用5-甲基-噁唑-4-甲脒(化合物AB)代替噻唑-2-甲脒來製備標題化合物。實例102之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例103：

(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用5-甲基噁唑-4-甲脒(化合物AB)代替噻唑-2-甲脒、2-氯-3-氟苯甲醛代替2-氯-4-氟苯甲醛且(3S)-嗎啉-3-甲酸代替(2S)-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例103之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例104：

(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸

自(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸乙酯(酯化合物AN)藉助造化反應及製備型HPLC分離製備標題化合物。

在室溫下，將(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸乙酯(化合物AN)(100mg,0.19mmol)、氫氧化鋰單水合物(78.4mg,1.9mmol)、水(0.5mL)存於甲醇(2mL)中之混合物攪拌12小時。然後用鹽酸(10%)處理該混合物，以調整pH為約4。在過濾後，藉由製備型HPLC分離純化濾液，以提供呈黃色固體之實例104。產率：60%。

(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸乙酯(酯化合物AN)之製備

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用(2R,3S)-2-甲基-嗎啉-3-甲酸乙酯(對於其合成，參見：WO2011025889)代替(2S)-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸來製備化合物AN。

實例105：

(S)-4-[5-第三丁氧基羰基-6-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸

以與實例1類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用3-側氧基-丁酸第三丁酯代替乙醯乙酸甲酯且(3S)-嗎啉-3-甲酸代替(2S)-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。

實例106：

(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸

以與實例104類似之方式利用方案8中所顯示之相同程序藉由使用2-溴-4-氟-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。

實例107及108：

(R)-4-(2-溴-4-氟-苯基)-6-((S)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯(實例107)及(R)-4-(2-溴-4-氟-苯基)-6-((R)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二 氫-嘧啶-5-甲酸乙酯(實例108)

以與實例14類似之方式顯示利用方案6中所顯示之程序C藉由使用5,5-二氟-六氫吡啶-2-甲酸(Nanjing Pharmablock有限公司CAS：1255663-89-8)、2-溴-4-氟-苯甲醛及乙醯乙酸乙酯代替5,5-二氟-六氫吡啶-3-甲酸、2-氯-4-氟-苯甲醛及乙醯乙酸甲酯來製備標題化合物。

實例109及110：

(R)-6-((S)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(實例109)及(R)-6-((R)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(實例110)

以與實例14類似之方式顯示利用方案6中所顯示之程序C藉由使用5,5-二氟-六氫吡啶-2-甲酸(Nanjing Pharmablock有限公司CAS：1255663-89-8)及2-氯-3-氟-苯甲醛代替5,5-二氟-六氫吡啶-3-甲酸及2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。

實例111：

(R)-6-((S)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-苯基)-2-噻唑- 2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯

以與實例14類似之方式顯示利用方案6中所顯示之程序C藉由使用5,5-二氟-六氫吡啶-2-甲酸(Nanjing Pharmablock有限公司CAS：1255663-89-8)、2-氯-苯甲醛及乙醯乙酸乙酯代替5,5-二氟-六氫吡啶-3-甲酸、2-氯-4-氟-苯甲醛及乙醯乙酸甲酯來製備標題化合物。

實例112：

(2R,3S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸

以與實例104類似之方式利用方案8中所顯示之程序藉由使用3,4-二氟-苯甲醛及乙醯乙酸乙酯代替2-氯-4-氟-苯甲醛及乙醯乙酸甲酯來製備標題化合物。

實例113：

(2R,3S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸

以與實例104類似之方式利用方案8中所顯示之程序藉由使用3,4-二氟-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。

實例114：

(2R,3S)-4-[(R)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-6-(2,3,4-三氟-苯基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸

以與實例104類似之方式利用方案8中所顯示之程序藉由使用2,3,4-三氟-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。

實例115：

(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸

以與實例104類似之方式利用方案8中所顯示之程序藉由使用2-氯-3-氟-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。

實例116：

(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸

以與實例104類似之方式利用方案8中所顯示之程序藉由使用2-溴-4-氟-苯甲醛及乙醯乙酸乙酯代替2-氯-4-氟-苯甲醛及乙醯乙酸甲酯來製備標題化合物。

實例117：

(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸

以與實例104類似之方式利用方案8中所顯示之程序藉由使用2-氯-苯甲醛及乙醯乙酸乙酯代替2-氯-4-氟-苯甲醛及乙醯乙酸甲酯來製備標題化合物。

實例118：

(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸

以與實例104類似之方式利用方案8中所顯示之程序藉由使用2-氯-3-氟-苯甲醛及乙醯乙酸乙酯代替2-氯-4-氟-苯甲醛及乙醯乙酸甲酯來製備標題化合物。

實例119：

(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-溴-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸

以與實例104類似之方式利用方案8中所顯示之程序藉由使用2-溴-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛來製備標題化合物。

實例120：

(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-異丙基-嗎啉-3-甲酸

以與實例104類似之方式利用方案8中所顯示之程序藉由使用(2R,3S)-2-異丙基-嗎啉-3-甲酸甲酯(化合物AO)代替(2R,3S)-2-甲基-嗎啉-3-甲酸乙酯來製備標題化合物。

(2R,3S)-2-異丙基-嗎啉-3-甲酸甲酯(化合物AQ)之製備：

(2S,3R)-3-羥基-4-甲基-2-(甲苯-4-磺醯基胺基)-戊酸甲酯(化合物AO)之製備：

在0℃下，向(2S,3R)-2-胺基-3-羥基-4-甲基-戊酸甲酯(0.50g,3.4mmol)及三乙胺(0.69g,6.8mmol)存於二氯甲烷(10mL)中之混合物添加4-甲基-苯磺醯基氯(0.71g,3.7mmol)。在室溫下攪拌2小時後，用水洗滌該混合物，且將有機層分離且然後經硫酸鈉乾燥。在去除溶劑後，殘餘物未經純化即用於下一步驟中。MS：計算值(MH⁺)316，量測值(MH⁺)316。

(2R,3S)-2-異丙基-4-(甲苯-4-磺醯基)-嗎啉-3-甲酸甲酯(化合物AP)之製備：

在0℃下，向(2S,3R)-3-羥基-4-甲基-2-(甲苯-4-磺醯基胺基)-戊酸甲酯(0.4g,1.27mmol)及三氟甲磺酸二苯基乙烯基鋶(0.5g,1.4mmol)存於二氯甲烷(10mL)中之混合物逐滴添加三乙胺。在攪拌12小時後，將該混合物用水稀釋，且然後用乙酸乙酯萃取，然後經硫酸鈉乾燥。在去除溶劑後，藉由急驟層析(利用乙酸乙酯/己烷=1：4溶析)純化殘餘物，以提供呈白色固體之產物。MS：計算值(MH⁺)342，量測值(MH⁺)342。

(2R,3S)-2-異丙基-嗎啉-3-甲酸甲酯(化合物AQ)之製備：

在60℃下，將(2R,3S)-2-異丙基-4-(甲苯-4-磺醯基)-嗎啉-3-甲酸甲酯(0.20g,0.59mmol)與鎂粉(70mg,2.9mmol)存於無水甲醇(5mL)中之混合物攪拌3小時。藉由過濾去除固體，且在減壓下濃縮濾液。呈粗產物之殘餘物未經純化即用於下一步驟中。MS：計算值(MH⁺)188，量測值(MH⁺)188。

實例121：

(S)-4-(((R)-6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氫嘧啶-4-基)甲基)-3-甲基嗎啉-3-甲酸

以與實例78類似之方式利用該程序藉由使用2-氯-4-氟-苯甲醛代替2-氯,3,4-二氟-苯甲醛來製備標題化合物。

實例122：

(S)-4-(((R)-6-(2-溴-4-氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氫嘧啶-4-基)甲基)嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用2-溴-4-氟-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛、使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯並使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例122之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例123：

(3S)-4-[[(4S)-4-(4-溴苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-溴-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛、使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯並使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例123之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例124：

(3S)-4-[[(4S)-4-(3-溴-4-氯苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用3-溴-4-氯-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛、使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯並使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例124之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例125：

(3S)-4-[[(4S)-4-(3-氯-5-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用3-氯-5-氟-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛、使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯並使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例125之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例126：

(3S)-4-[[(4S)-4-(4-氯苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-氯-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛、使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯並使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例126之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例127：

(S)-4-(((R)-6-(2-溴苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氫嘧啶- 4-基)甲基)嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用2-溴-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛、使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯並使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例127之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

實例128：

(3S)-4-[[(4R)-4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案5中所顯示之程序B藉由使用2-溴-3,4-二氟-苯甲醛(化合物AR)代替2-氯-4-氟-苯甲醛、使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯並使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。實例128之立體化學係藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定。

2-溴-3,4-二氟-苯甲醛(化合物AS)之製備：

將2-溴-3,4-二氟苯甲酸(3.7g，16mmol，當量：1.00)溶解於無水THF(20ml)中，且將該溶液冷卻至0℃。逐滴添加BH₃.THF(62.6ml，62.6mmol，當量：4)。使所得溶液升溫至室溫並攪拌過夜。利用冰浴冷卻該溶液，且然後緩慢添加10% Na₂CO₃水溶液(30mL)。在真空下濃縮該懸浮液，以得到白色固體。將殘餘物利用3M HCl水溶液(100mL)酸化，用二氯甲烷(50mL)稀釋，且藉助二氧化矽過濾該混合物。將有機層分離並經硫酸鈉乾燥，且然後接著過濾。在真空下濃縮所得濾液，以得到灰白色固體AR(2.5g)。¹H NMR(DMSO)δ 7.46-7.53(m,1H),7.35-7.41(m,1H),4.51(s,2H),4.44-4.58(m,2H)。

將(2-溴-3,4-二氟苯基)甲醇(化合物AR)(2.55g，11.4mmol，當量：1.00)溶解於二氯甲烷(15ml)中。添加戴斯-馬丁過碘烷(4.85g，11.4mmol，當量：1.00)。在室溫下將該反應混合物攪拌2hr。將該反應混合物經二氧化矽過濾，並用DCM(30ml)洗。濃縮濾液，以得到半固體。將粗產物溶解於EtOAc/DCM中，並裝載至矽膠管柱中(4g)。用EtOAc沖洗矽膠管柱，以得到淺黃色固體(3g)。¹H NMR(DMSO)δ 10.13(s,1H),7.74-7.82(m,1H),7.70(ddd,J=9.5,7.3,0.8Hz,1H)。

實例129：

(3S)-4-[[(4R)-5-乙氧基羰基-4-(2-碘苯基)-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用2-碘-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛、使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯並使用(S)-嗎啉-3-甲酸代替(S)-4,4-二氟-吡咯啶-2-甲酸來製備標題化合物。藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定實例129之立體化學。

實例130：

(2S)-1-[[(4S)-4-(4-溴苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸

以與實例2類似之方式利用方案4中所顯示之程序A藉由使用4-溴-苯甲醛代替2-氯-4-氟-苯甲醛、使用乙醯乙酸乙酯代替乙醯乙酸甲酯來製備標題化合物。藉由將其¹H NMR數據及HPLC滯留時間與實例2比較來測定實例130之立體化學。

實例131：HBV抑制分析

細胞及培養條件：

HepG2.2.15及HepDE19係經穩定轉染之含有HBV基因組之細胞系。兩種細胞系係分別藉由以下文獻中所闡述之公開程序源自於肝胚細胞瘤細胞系Hep G2(American Type Culture Collection,ATCC® HB-8065^TM)：MA Selles等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1987,84,1005-1009及H Guo等人，Journal of Virology 2007,81,12472-12484。將兩種細胞系維持於補充有10%胎牛血清、100U/mL青黴素、100μg/mL鏈黴素及0.5mg/mL之G418之杜貝克氏改良伊氏培養基(Dulbecco's modified Eagle's medium，DMEM)-F12培養基中。

HepG2.2.15細胞組成上支持HBV複製及病毒顆粒之產生，而HepDE19細胞可藉由四環素誘導。於培養基中添加1μg/mL四環素阻抑HepDE19細胞中之HBV複製，而轉換至無四環素培養基重新開始此過程。

活體外抗HBV活性：

將HepG2.2.15細胞接種至96孔板中(每孔100μl培養基中3×0⁴個細胞)，並在37℃下培育過夜。將測試化合物於DMSO中連續半對數稀釋，然後在培養基中稀釋100倍。將100μL經稀釋化合物添加至板中，以在每孔中達到DMSO之0.5%最終濃度。化合物處理後5天，收集培養物上清液用於進一步分析。

對於細胞外HBV DNA之定量PCR檢測，收集100μL培養物上清液，並於用於病毒DNA萃取之MagNA Pure 96核酸純化系統(Roche Applied Science)中進行加工。使萃取樣品經受藉由qPCR達成之HBV DNA量化。測定50%抑制HBV複製之有效化合物濃度(EC₅₀)。

如本文中所闡述測試本發明之化合物抑制HBV活性及活化之能力。在本文中所闡述之以上分析中測試該等實例，並發現在HepG2.2.15分析中其具有小於0.10μM之EC₅₀。發現在HepG2.2.15分析中式I之特定化合物具有小於0.02μM之EC₅₀(參見表3)。

細胞毒性及選擇性指數：

在細胞培養模型中，化合物之表觀抗病毒活性可係宿主細胞在暴露於該化合物中後死亡之結果。為確定測試化合物之抗HBV效應是否歸因於細胞毒性，將HepDE19細胞接種至96孔板中(每孔5×10³個細胞)，並用上文所闡述化合物處理用於EC₅₀測定。處理後5天，藉由添加20μL之CCK-8試劑來量測細胞活力。在37℃下培育2小時後，藉由板讀數器記錄450nm及630nm之波長下之吸光度(OD₄₅₀及OD₆₃₀)。測定各化合物導致50%宿主細胞死亡之濃度(CC₅₀，參見表6)。

該化合物之抑制病毒複製與誘導細胞死亡相比之相對有效性係定義為選擇性指數(CC₅₀值/EC₅₀值)。期望具有給出最大抗病毒活性及最小細胞毒性之較高選擇性指數。基於CC₅₀及EC₅₀數據，測定選擇性指數，如表7中所顯示。

基於CC₅₀及EC₅₀數據，測定選擇性指數，如表7中所顯示。

實例132：小鼠SDPK闡述：實施雄性ICR小鼠中之單一劑量PK以評估其藥物動力學性質。經由各別化合物之靜脈濃注(IV)或經口灌食(PO)向兩組動物給藥。在給藥前使經口投與之動物禁食過夜，且在給藥後4小時重新開始進食。對於IV群組在給藥後2min、5min、15min、30min、1h、2hr、4hr、6hr、8hr及24hr時且對於PO群組在給藥後5min、15min、30min、1h、2hr、4hr、6hr、8hr及24hr時藉由二氧化碳吸入進行安樂死後，經由心臟穿刺收集血液樣品(大約400μL)。將血液樣品置於含有含有肝素鈉之管中，並在4℃下以8000rpm離心6分鐘，以自樣品分離血漿。

在離心後，將所得血漿轉移至清潔管中用於基於LC/MS/MS進行之生物分析。使用WinNonlin® Professional 5.2之非隔室模組計算藥物動力學參數。

SDPK之結果係於表4中給出。

實例133：代謝穩定性研究之闡述：在37℃下，將人類微粒體與測試化合物一起於100mM磷酸鹽緩衝液(pH 7.4)中預培育10min。藉由添加NADPH或NADPH再生系統來起始該反應，以得到400μL之最終培育體積。對於NADPH系統，最終培育含有存於100mM磷酸鹽緩衝液(pH 7.4)中之1μM測試化合物、0.5mg/mL肝微粒體蛋白、1mM NADPH。對於NADPH再生系統，最終培育含有存於100mM磷酸鹽緩衝液(pH 7.4)中之1μM測試化合物、0.5mg/mL肝微粒體蛋白、3mM葡萄糖6-磷酸鹽、1mM NADP、3mM MgCl₂及0.05mg/mL葡萄糖6-磷酸鹽去氫酶。在37℃下0分鐘、3分鐘、6分鐘、9分鐘、15分鐘及30分鐘之培育時間後，將50μL樣品移出，並轉移至維持在4℃含有2μM甲苯磺丁脲(內標準物)之150μL甲醇溶液中，以終止反應。在沈澱及離心後，藉由LC-MS/MS測定殘留在樣品中之化合物之量。亦製備並分析0min及30min處無NADPH或NADPH再生系統之對照。

人類微粒體中之代謝穩定性研究之結果係於表5中給出。

實例134：LYSA闡述：自10mM DMSO儲備溶液一式兩份製備樣品。在利用真空離心蒸發器蒸發DMSO後，將殘餘物溶解於0.05M磷酸鹽緩衝液(pH 6.5)中，攪拌1小時，並搖動2小時。一晚後，使用微量滴定濾板過濾溶液，且然後藉由直接UV量測或藉由HPLC-UV來分析濾液及其1/10稀釋液。另外，自10mM儲備溶液製備四點校準曲線，並用於化合物之溶解度測定。結果單位為μg/mL。若蒸發後溶液中所量測之樣品除以樣品量之計算最大值的百分比大於80%，則報導溶解度大於此值。

Lysa之結果係於表6中給出。

實例A

式I化合物可以本身已知之方式用作用於產生具有以下組份之錠劑的活性成份：

實例B

式I化合物可以本身已知之方式用作用於產生具有以下組份之膠囊的活性成份：

Claims

一種式(I)化合物其中R¹係C_1-6烷基或三氟甲基-C_xH_2x-，其中x係1至6；R²及R³中之一者係經C_1-6烷基、氰基或鹵素取代一次或兩次或三次之苯基；另一者係氫或氘；R⁴係苯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基(sulfanyl)、鹵素或環烷基取代，其中該C_1-6烷基可進一步視情況經鹵素取代；A係、、、、或，其係未經取代或經選自C_1-6烷基、氘及鹵素之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。
如請求項1之化合物，其中R¹係甲基、乙基、丙基、異丙基、第三丁基或三氟甲基甲基；R²及R³中之一者係經氟、氯、溴、碘、甲基或氰基取代一次或兩次或三次之苯基；另一者係氫或氘；R⁴係苯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經甲基、異丙基、第三丁基、二氟甲基、三氟甲基、環丙基、甲基硫基、氟或氯取代；A係、、、、或，其係未經取代或經選自甲基、異丙基、氘及氟之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。
如請求項1之化合物，其中R¹係C_1-6烷基或三氟甲基-C_xH_2x-，其中x係1至6；R²及R³中之一者係經C_1-6烷基、氰基或鹵素取代一次或兩次或三次之苯基；另一者係氫或氘；R⁴係苯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基、鹵素或環烷基取代，其中該C_1-6烷基可進一步視情況經鹵素取代；A係、、、或，其係未經取代或經選自C_1-6烷基、氘及鹵素之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。
如請求項1至3中任一項之化合物，其中R¹係甲基、乙基、丙基、異丙基或三氟甲基甲基；R²及R³中之一者係經氟、氯、溴、碘、甲基或氰基取代一次或兩次或三次之苯基；另一者係氫或氘；R⁴係苯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基，其係未經取代或經甲基、異丙基、三氟甲基、環丙基、甲基硫基、氟或氯取代；A係、、、或，其係未經取代或經選自甲基、異丙基、氘及氟之基團取代；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。
如請求項1或3之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係C_1-6烷基或三氟甲基-C_xH_2x-，其中x係1至6；R²及R³中之一者係經鹵素取代一次或兩次或三次之苯基；另一者係氫或氘； R⁴係，其係未經取代或經C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基或環烷基取代，其中該C_1-6烷基可進一步視情況經鹵素取代；A係、或，其係未經取代或經選自C_1-6烷基、氘及鹵素之基團取代。
如請求項1至3中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係甲基、乙基、丙基、異丙基或三氟甲基甲基；R²及R³中之一者係經氟、氯、溴或碘取代一次或兩次或三次之苯基；另一者係氫或氘；R⁴係，其係未經取代或經甲基、異丙基、三氟甲基、環丙基或甲基硫基取代； A係、或，其係未經取代或經選自甲基、異丙基、氘及氟之基團取代。
如請求項1至3中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經鹵素取代一次或兩次或三次之苯基；另一者係氫； R⁴係； A係，其係未經取代或經C_1-6烷基取代。
如請求項1至3中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係經氟、氯或溴取代一次或兩次或三次之苯基；另一者係氫；R⁴係； A係，其係未經取代或經甲基取代。
如請求項1至3中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係，另一者係氫，其中A¹係氫或氟；A²係氫或氟；A³係氟、氯或溴；限制條件係A¹及A²中之至少一者係氫； R⁴係； A係，其中A⁴係氫或甲基。
如請求項1或3之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係，另一者係氫；R⁴係，其係未經取代或經C_1-6烷基取代； A係，其係經鹵素取代。
如請求項1或3之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經鹵素取代之苯基；另一者係氫；R⁴係，其係經C_1-6烷基取代；A係或，其係未經取代或經鹵素取代。
如請求項1至3中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係經氟或氯取代之苯基；另一者係氫；R⁴係或； A係或，其係未經取代或經氟取代。
如請求項1或3之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經鹵素取代之苯基；另一者係氫；R⁴係；A係或，其係未經取代或經鹵素取代。
如請求項1至3中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體，其中R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係經氟、氯或溴取代之苯基；另一者係氫； R⁴係； A係或，其係未經取代或經氟取代。
如請求項1之化合物，其具有式(Ib)：其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經氰基或鹵素取代兩次或三次之苯基；另一者係氫或氘；R⁴係苯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基；其係未經取代或經C_1-6烷基、鹵素、環烷基或三氟甲基取代一次或兩次；R⁵係氫；R⁶係氫；A係、、或；其係未經取代或經氘或鹵素取代兩次或四次；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。
如請求項15之化合物，其中R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係經氰基、氟、氯或溴取代兩次或三次之苯基；另一者係氫或氘；R⁴係苯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、噻吩基或吡啶基；其係未經取代或經甲基、異丙基、第三丁基、氟、氯、環丙基或三氟甲基取代一次或兩次；R⁵係氫；R⁶係氫；A係、、或；其係未經取代或經氘或氟取代兩次或四次；或其醫藥上可接受之鹽或鏡像異構體或非鏡像異構體。
如請求項15之化合物，其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經氰基或鹵素取代兩次或三次之苯基；另一者係氫或氘；R⁴係噻唑基或咪唑基；其係未經取代或經C_1-6烷基、鹵素、環烷基或三氟甲基取代一次或兩次；R⁵係氫；R⁶係氫；A係、、或；其係未經取代或經氘或鹵素取代兩次或四次。
如請求項15或17之化合物，其中R¹係甲基或乙基；R²及R³中之一者係經氰基、氟、氯或溴取代兩次或三次之苯基；另一者係氫或氘；R⁴係噻唑基或咪唑基；其係未經取代或經甲基、異丙基、第三丁基、環丙基或三氟甲基取代一次或兩次；R⁵係氫；R⁶係氫；A係、、或；其係未經取代或經氘或氟取代兩次或四次。
如請求項15之化合物，其中R¹係C_1-6烷基；R²及R³中之一者係經鹵素取代兩次之苯基；另一者係氫；R⁴係苯基、噁唑基、噻吩基或吡啶基；其係未經取代或經C_1-6烷基、鹵素、環烷基或三氟甲基取代一次或兩次；R⁵係氫；R⁶係氫；A係或；其係未經取代或經鹵素取代兩次。
如請求項15或19之化合物，其中R¹係甲基；R²及R³中之一者係經氟或氯取代兩次之苯基；另一者係氫；R⁴係苯基、噁唑基、噻吩基或吡啶基；其係經甲基、氟或氯取代一次或兩次；R⁵係氫；R⁶係氫；A係或；其係未經取代或經氟取代兩次。
如請求項1至3、15至17及19中任一項之化合物，其選自6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-[4-2H]-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(3,5-二氟-吡啶-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(3,5-二氟-吡啶-2-基)-5-甲氧基羰基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-(2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-甲基-吡啶-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-甲基-吡啶-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-環丙基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-2-(4-第三丁基-噻唑-2-基)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-氟-噻吩-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((R)-5-羧基-3,3-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-甲基-噁唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-甲基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-甲基-噻唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4,5-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-[3,3-2H2]-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1,4-二甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4,5-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(3-氟-吡啶-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-氯-噻吩-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(3-甲基-吡啶-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-三氟甲基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-甲基-噻吩-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-異丙基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯(R)-4-(4-溴-2-氯-苯基)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氰基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(2,4-二氟-苯基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(6-甲基-吡啶-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2,4-二氯-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(R)-6-(2,4-二氯-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1-甲基-4-三氟甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(3,4-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-6-(3,4,5-三氟-苯基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-6-(2,3,4-三氟-苯基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(4-溴-2,3-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氯-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(4-氰基-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯； (S)-4-[(R)-6-(4-氯-2-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2,3-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-5-(2,2,2-三氟-乙氧基羰基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-6-(4-溴-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-5-乙氧基羰基-6-(3-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-5-乙氧基羰基-6-(4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(3,4-二氟-苯基)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2,4-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-甲基硫基-1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸； (2S)-1-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-甲基硫基-1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-溴-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-4-(2-溴-3-氟-苯基)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2,3-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-溴-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-4-(2-溴-苯基)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(4-氯-2-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(S)-6-(4-氯-3-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-3-甲基-嗎啉-3-甲酸；(R)-4-[(R)-6-(2-氯-3,4-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-3-甲基-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((R)-5-羧基-3,3-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-甲基-噻唑-2-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-6-(4-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-4-(2-溴-4-氟-苯基)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2,4-二氯-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；3-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-1,3-噻嗪烷(thiazinane)-4-甲酸；(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(4-環丙基噻唑-2-基)-5-甲氧基羰基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-[4-(二氟甲基)噻唑-2-基]-5-甲氧基羰基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-3,3-二甲基-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(3R)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-2,2-二甲基-硫嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4R)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]硫嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(1,4-二甲基-1H-咪唑-2-基)-5-甲氧基羰基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(4-溴-2-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(4-溴-2-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(4-三氟甲基-噻唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-2-甲基-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-異丙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-丙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-異丙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6- 二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-異丙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(R)-6-((S)-2-羧基-4,4-二氟-吡咯啶-1-基甲基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-(5-甲基-噁唑-4-基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-[5-第三丁氧基羰基-6-(2-氯-4-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(R)-4-(2-溴-4-氟-苯基)-6-((S)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(R)-4-(2-溴-4-氟-苯基)-6-((R)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(R)-6-((S)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((R)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-3-氟-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸甲酯；(R)-6-((S)-2-羧基-5,5-二氟-六氫吡啶-1-基甲基)-4-(2-氯-苯基)-2-噻唑-2-基-1,4-二氫-嘧啶-5-甲酸乙酯；(2R,3S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(S)-6-(3,4-二氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基- 3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-6-(2,3,4-三氟-苯基)-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-溴-4-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-3-氟-苯基)-5-乙氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-溴-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-甲基-嗎啉-3-甲酸；(2R,3S)-4-[(R)-6-(2-氯-4-氟-苯基)-5-甲氧基羰基-2-噻唑-2-基-3,6-二氫-嘧啶-4-基甲基]-2-異丙基-嗎啉-3-甲酸；(S)-4-(((R)-6-(2-氯-4-氟苯基)-5-(甲氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氫嘧啶-4-基)甲基)-3-甲基嗎啉-3-甲酸；(S)-4-(((R)-6-(2-溴-4-氟苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氫嘧啶-4-基)甲基)嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4S)-4-(4-溴苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4S)-4-(3-溴-4-氯苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4S)-4-(3-氯-5-氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4S)-4-(4-氯苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)- 1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸；(S)-4-(((R)-6-(2-溴苯基)-5-(乙氧基羰基)-2-(噻唑-2-基)-3,6-二氫嘧啶-4-基)甲基)嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4R)-4-(2-溴-3,4-二氟苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸；(3S)-4-[[(4R)-5-乙氧基羰基-4-(2-碘苯基)-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]嗎啉-3-甲酸；及(2S)-1-[[(4S)-4-(4-溴苯基)-5-乙氧基羰基-2-(1,3-噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-6-基]甲基]-4,4-二氟吡咯啶-2-甲酸。
一種製備如請求項1至21中任一項之化合物之方法，其包含(a)式(XZ)之化合物與在鹼存在下之反應；(b)式(YZ)之化合物在對掌性分離條件下之反應；其中R¹至R⁴及A係如請求項1至20中任一項中所定義。
如請求項1至3、15至17及19中任一項之化合物，其用作治療活性物質。
一種醫藥組合物，其包含如請求項1至21中任一項之化合物及治療上惰性之載劑。
一種如請求項1至21中任一項之化合物之用途，其用於製備用以治療或預防B型肝炎病毒感染之醫藥。
如請求項1至3、15至17及19中任一項之化合物，其用於治療或預防B型肝炎病毒感染。
如請求項1至3、15至17及19中任一項之化合物，其用作B型肝炎病毒之抑制劑。
如請求項1至3、15至17及19中任一項之化合物，其係如請求項18之方法製造。