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TW200829575A - Multi-functional small molecules as anti-proliferative agents - Google Patents

Multi-functional small molecules as anti-proliferative agents Download PDF

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TW200829575A
TW200829575A TW096133848A TW96133848A TW200829575A TW 200829575 A TW200829575 A TW 200829575A TW 096133848 A TW096133848 A TW 096133848A TW 96133848 A TW96133848 A TW 96133848A TW 200829575 A TW200829575 A TW 200829575A
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TW
Taiwan
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compound
group
substituted
alkyl
kai
Prior art date
Application number
TW096133848A
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English (en)
Inventor
Xiong Cai
Changgeng Qian
Stephen Gould
Hai-Xiao ZHAI
Original Assignee
Curis Inc
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Publication date
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Description

200829575 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種新穎的組合物、方法及應用，利用 一單一小分子以選擇性抑制數種細胞或分子標靶，且特別 有關於多功能小分子，其中一功能為抑制組蛋白去乙驗基 酶（HDAC)，另一功能為抑制涉及異常的細胞增生、分化或 存活之不同細胞或分子路徑。 【先前技術】 對於複雜以及多因子本性的涉及多重致病途徑及許多 分子成分之各種疾病的解明，啟示多標靶治療可能相較於 單一治療更為有好處。最近在腫瘤學、傳染病、心血管疾 病及其他複雜致病的利用2種以上藥劑組合療法，證明了 組:的方式，相較於個別成分，可以提供克服抗藥性、減 v毋性，及某些情形下，共效的療效的優點。 某些癌症已能有效地以此種組合性方式治療，然而使 用細胞毒性藥物之雞尾酒（c〇cktail)組合的治療療程，常 會受制於劑量限制毒性以及藥物交互作用。最近在分子性 ^藥物的進展’已提供新方法來組合癌症治療，係容許 夕仏乾樂物同時使用，或將新的療法與標準的化學或放 療：合’以改善結果，而不會到達劑量限制毒性。然而， 性質之筚Γ等組合之能力’限制於顯示相容性藥理及藥效 2之樂物。此外，要證明組合療法之安全及效力的法令 要求’可能較對應之單一藥劑實 平果W貫驗更為耗費成本及耗時。 H50-9l3l^pF;Kai 200829575 一旦核准，組合策略又可能對病患帶來增加的花費，以及 因為需要更為複雜的投藥實施，而使病人的配合度降低。 於蛋白質及多肽為基礎的療法，製備結合物或2種不 同蛋白質/多肽之大部分或所有胺基酸序列的融合蛋白質 已為普遍的，且保留分離之蛋白質/多肽的個別結合活性。 此方法係藉由將成分蛋白質之結構物獨立折疊，以及以結 合物之大尺寸而容許成分以主要是獨立方式結合到其細胞 標靶而達成。然此種方法並不一般性地適用在小分子療 法’其中即便是微小的結構修飾，亦可能造成得到分子之 標靶結合及/或藥動學/藥熱學性質之重大改變。 組蛋白乙醯化為一可逆的修飾，去乙醯化係由一家族 的酵素所催化，稱為HDAC。HDAC，係由人類的X基因提示， 並分成4個不同的類型万/〇/， 2004， 338:1， 17-31)。於哺乳動物類型I HDACCHDAC1-3及HDAC8)，係 相關於酵母菌 RPD3 HDAC，類型 2CHDAC4-7、HDAC9 及 HDAC10) 相關於酵母菌HDA1，類型4(HDAC11)，及類型3(不同的類 型’其包含與酵母菌Sir2a相關的sirtuin)。
Csordas，万力e见乂，1 990，286: 23-38 教示組蛋 白有關於N末端離胺酸殘基之ε-胺基之後轉譯乙醯化， 其係由組蛋白乙醯基轉移酶（ΗΑΤ1)所催化之反應。乙醯化 中和離胺酸侧鏈之正電荷，並且被認為影響染色質結構。 的確，轉錄因子接近染色質模板，會由於組蛋白高度乙醯 化而增進，且低度乙醯化組蛋白Η4之增加，已被發現在基 因體之轉錄沉默區域（Taunton a/·，Ϊ 996， 1150-9131-PF;Kai 6 200829575 272 : 408-41 1 )。於腫瘤抑制子基因之情形，由於組蛋白修 飾造成之轉錄 >儿默’可能造成致癌性的轉形以及癌症。 目前有數種類型的HDAC抑制劑，被臨床研究人員評估 中。第1個FDA核准的HDAC抑制劑為辛二醯基醯替苯胺羥 肟酸（Suberaylanilide hydroxamic acid)(SAHA, Zolinza®)用於治療皮膚性τ細胞淋巴癌（CTCL)。其他的 HDAC抑制劑，包括羥肟酸衍生物；ρχΜ〇1及UQ824，且 •费 目前正在臨床開發中。於苄醯胺類型之HDAC抑制劑， MS-275，MGCD0103及CI-994已到達臨床試驗階段。M〇urne 事乂（Abstract #4725, AACR 2005)，證明苄醯胺之噻吩基 修飾，會顯著地增進HDAC對抗HDAC1之抑制活性。 使用HDAC抑制劑與其他廣泛分子標靶治療以及標準 化學療法與放射性療法組合，顯示能產生共效作用。共同 以SAHA處理，顯著地增加對於βτ—474及SKBR—3細胞之 EGFR2抗體trastuzumab-誘發性細胞凋亡，以及對於乳癌 ( 細胞之誘發性的共效細胞毒性效果（Bali, 67/儿 及es·，2005，11，3392)。HDAC 抑制劑，例如 SAHA,已被 證明在頭部及頸部癌細胞株中，包括對於gefitinib單一 治療具有抗藥性之細胞株，當與gefitinib組合使用時， 具有共效性的抗增生及細胞凋亡作用（Bruzzese以&1.， Proc. AACR，2004)。將 gefitinib 抗藥性細胞株以 HDAC 抑制劑MS-275預處理，會導致類似於在gefitinib敏感性 NSCLC細胞株中，包括庇護EGFR突變，看到之gefitinib 之生長抑制及細胞凋亡之效果，（witta S E.，以W·， 1150-9131-PF;Kai 7 200829575 66:2，2006，944-50)。HDAC 抑制劑 PXD101 已 經顯示與 EGFR1 抑制劑 Tarceva®(erlotinib) (W02006082428A2)共效性地抑制增生。 同樣地，抑制HDAC活性也已顯示會與抑制血管新生一 起具共效（Kim，MS，eia人，2001，7:4，437-43; Deroanne，CF，eia人，2002，21:3，427-36)。 事實上，在PC3異種移殖體觀察到之HDAC抑制劑FK228 之抗腫瘤活性，依存於血管新生因子之抑制，例VEGF及 bFGF(Sasakawa et al., Biochem. Pharmacol., 2003, 66, 897)。HDAC抑制劑NVP-LAQ824已顯示會抑制血管新生並 且當與血管内皮生長因子受體酪胺酸激酶 PTK787/ZK222584組合使用時，具有更大的抗腫瘤效果 (Qian et al·，Aes·，2004, 64，66260)。抗腫瘤 活性之增加，與前血管新生因子angiopoietin-2、Tie-2 及survivi η在内皮細胞之下調有關，並與缺氧-誘發因子 1-及VEGF在腫瘤細胞之表現下調有關。同樣地，HDAC抑 制劑LBH589，已顯示會指引内皮細胞導致血管新生應答的 降低（Qian et al ·， C///7 Aes， 2006， 12:2, 634-42)。 組蛋白去乙醯基酶抑制劑已顯示在G1 eevec-敏感性及 抗藥性（Bcr/Abl+)人類粒細胞白血病（human myeloid leukemia)細胞，均會促進 Gleevec(imatinib mesylate)-媒介之細胞〉周亡（Yu ei a/·，Aes，2003，63:9, 2118-26 ; Nimmanapal 1 i etal., Cancer Res 63:1 6, 2003, 1150-9131-PF;Kai 8 200829575 5126-35)。同樣地，NVP-LAQ824 與 imatinib mesylate 間 之強力共效，已在BCR/ABL表現粒細胞白血病細胞株K562 中被證明。此等化合物單獨使用時，毒性小，但當組合使 用，會造成顯著的粒腺體損害增加（例如細胞色素c、 Smac/DIABLO及細胞凋亡-誘發因子釋出）、caspase活 化，及細胞凋亡.（Weisberg a/·，2004， 18, 1951) 〇 此外，HDAC抑制劑已顯示與標準化學療法，包括 5-FU、Topotecan、Gemc it abine、Ci splat in、Doxorubicin、 Docetaxle 、Tomoxi fen 、 5-Azacytidine 、Alimta 、 Irinotecan 組合使用時，會共效地阻斷細胞增生 (W02006082428A2)。組合HDAC抑制劑MS-275及核苷類似 物f ludarabine，會明顯地增加白血病細胞中之粒腺體受 傷、caspase 活化，及細胞凋亡（MaggiO，SC·，ei· a/·、 Aes1，2004，64:7，2590-600)。添加 HDAC 抑制劑 SAHA及拓樸異構酶11抑制劑（例如，epirubicin、 doxorubicin、m-AMSA、VM-26 及 teniposide)亦顯示在細 胞死亡方面的共效作用（Marchion, DC.，/ 2004，92:2，223-37)。同樣地，HDAC抑制劑與放射性治 療組合，亦顯示共效效果（Paoluzzi，L，Cancer方/σ/ Mer， 2004, 3:7, 612-3; Entin-Meer, M., Mol Cancer Ther, 2005, 4:12, 1 952-61; Cerna, D, Curr Top Dev Biol, 2006, 73，1 73-204)進一步說明HDAC與其他癌症治療法之間的可 能共效作用。 1150-9131-PF;Kai 9 200829575 再者，HDAC抑制劑亦與絲裂原（mitogen)活化蛋白質 激酶/ ERK激酶（MEK)、Cycl in-依存性激酶（CDK)、蛋白酶 體、HSP90及TRAIL抑制劑，具有共效效果（价/ 人 2006, 69(1), 288-98; Biochem Biophys Res Commun. 2006, 27, 339(4), Un-Ί; Mol Pharmacol. 2005 67(4) : 1166-76 ; Blood, 2005, 105(4), 1768-76; Cancer Res. 2006, 66(7), 3773-81; Acta Haematol. 2006, 115(1-2), 78-90; Clin Cancer Res. 2004, 10(11), 3839-52; Oncogene 2005 ( 24(29)， 4609-23; Mol Cancer Ther. 2003, 2(12), 1273-84; Biochem Pharmacol. 2003, 66(8), 1537-45; 及 2005，4(11)，1772-85)。 目前在上述形式之療法，著重在以投予多重的藥劑來 改善抗藥性問題。然而，多重藥劑因為標靶外的副作用造 成之組合毒性以及藥物交互作用，常會限制此方法之效 果。再者，通常難以將具有不同藥動學的化合物組合成單 , 一劑型，需要在不同時間點服用多重藥物會導致病人配合
C 度的問題，而降低藥物組合的效果。此外，組合療法之健 康保養花費可能高於單一分子療法的花費。再者，組合療 法可能難以得到法令上的核准，因為證明組合2種藥物之 活性/安全性的負擔高於對於單一藥劑者（Dancey J & Chen H，Nai· Aer· Λτ叹 ，200 6，5 : 649)。開發新穎之藥 劑，能夠選擇性而非交互作用的針對多重治療標靶，且為 合理設計的，將能協助改善病人結果並同時避免限制。因 此，仍有許多人致力將目標放在開發選擇性抗癌症藥物， 1150-9131-PF;Kai 10 200829575 以及對於已知抗癌藥物之新的及更有效的組合。 【發明内容】 本案發明人意外地發現，單一化合物可設計並製備成 將至y 2個藥效團（phmacophoR)組合，且該化合物等對 於多重治療標乾具有活性，且對治療疾病有用。再者，於 某些情形’此等分子相較於組合當中分開之包含各別活性 之分子，具有增強的活性。換言之，將藥效團組合到單一 分子，可能提供相較於個別藥效團而言，為共效的效果。 更具體而t，已發現能夠製備出同時包含一分子之多個部 刀包3 .第1部分，能結合辞離子，並因此抑制HDAC及 /或基質金屬蛋白酶⑽P)活性；及至少—第2部分，能結合 至一分離且不同的標靶，因此能提供治療用處。 本發明係關於一種新穎的組合物、方法及應用，利用 一單一小分子以選擇性抑制數種細胞或分子標靶。更且體
而言，本發明係關於多功能小分子…一藥效團功能為 可結合鋅離子並因此抑制辞依存性(例如組蛋白去乙酿基 酶(HDAC)及基質金屬蛋白酶⑽Ps)，共價地結合於一第1 藥效團，該第2藥效團…種以上功能上可抑制涉及細胞 異常增生、分化或存活之—不同細胞或分子路徑或生物學 功月& °更具體而言’本發明係關於多功能小分子，其 種細胞異常增生、分化或存活可在例如以下病症中觀察到 ' 癌症、癌前病變或發育障礙（lesi〇n)、增殖 (hyperplasias)、骨性（dySpiasia)。 1150-9131-PF;Kai 11 200829575 於一較佳具體例’辞結合藥效團’抑制HDAC並連結於 一第2藥效團，該第2藥效團誘發細胞凋亡、抑制血管新 生及/或抑制異常增生。 於一具體例，該多功能小分子之分子量小於1 〇〇〇 g/mol，較佳為小於600 g/mol，最佳為小於550 g/mol。 於一具體例，該第2藥效團擇自於但不限於：化學化合 物，其功能上可抑制下列物質之活性：酪胺酸激酶、 seronine/蘇胺酸激酶、DNA甲基轉移酶（DNMT)、蛋白酶體 及熱休克蛋白質（HSPs)、血管内皮生長因子受體（VEGFR)、 血小管衍生生長因子受體（PDGFR)、纖維母細包生長因子受 體（FGFR)、絲裂原活化蛋白質激酶（MAPK/MEK)、cycl in-依存性激酶（CDK)，及磷脂醯肌醇 4, 5-二磷酸酯 -AKT-rapamycin 路徑之哺乳動物標把[P13K-AKT(RAF， mTOR)]、基質金屬蛋白酶、脂肪酸轉移酶（farnesyl transferase)，及細胞凋亡。 於一最佳具體例，該第2藥效團擇自於但不限於：化學 化合物，其功能上可抑制下列物質之活性：DNMT、EGFR、 ErbB2、ErbB3、ErbB4、HER-2、VEGFR-1、VEGFR-2、 VEGFR-3Flt-3、c-kit、Abl、JAK、PDGFR- α、PDGFR-y3、 IGF-IR、c-Met、FGFR1、FGFR3、FGFR4、c-Ret、Src、Lyn、 Yes、PKC、CDK、Erk、Merk、PI3K-Akt、mTOR、Raf、CHK、 Aurora、HSP90、TRAILR、caspases、IAPs、Bcl-2、Survivin、 MDM2 、 MDM4 。 本發明另一態樣，能利用本發明1種以上化合物，治 1150-9131-PF;Kai 12 200829575 療、預防或防止癌症再發。 於一具體例，本發明 組合’該其他療法包括但 劑、抗體、辅助藥劑（adj 療法、化學治療藥劑、疫 種以上化合物可以與其他療法 不限於：抗瘤藥劑、免疫治療藥 7Ctive ^ent)、裝置、放射性 田及/或去甲基化.藥劑。. 【實施方式】 本發明提供一類新穎的齡 、、荼制，能抑制多重生物聲、、$ 性。本發明之藥劑設計為具 物子活 、有2種以上活性或功能，豆 該化合物包含一第丨藥效團，苴&士入 ，、中 ，、、、、° 0於鋅離子並抑制鋅依 存性，例如HDAC及MMP;及一笛9越^廟 第2藥效團，其共價地結合 於該鋅結合結構，並抑制！ 貝也一 風处 不同的訊息路徑或生物 子功…一具體例’該第1藥效團結合於w並抑制 HDA::於特定具體例，該化合物具有之活性，係處理細胞 異常增生、分化及/或存活。 有利地，此等新藥劑為腫瘤選 擇性及抗瘤性。 最有名的隱抑制劑，包括類似的基本結構特徵，例 如鋅螯合劑、肋族連結基團，及—疏水芳香族區域。已 有多種HDAC抑制劑之結晶構造被解開。户鹰射^㈤如. USA 101：42, 15064-9(2004)； Nature 401:6749, 188-93(1 999)。基於顯示此等結晶構造結合之分析，本案 發明人已開發出一 HDAC抑制劑之藥效團模型，且此藥效團 能加成在各種小分子以產生具有雙重或多重活性的化合 物。由於HDAC抑制劑之廣泛抗腫瘤活性，及其能與其他標 1150-9131-PF;Kai 13 200829575 靶藥劑具共效作用，本多重藥效團模型應能廣泛適用於開 發治療癌症的小分子。 本新穎之多功能藥劑的一般結構，如下式（丨）： A-B-C (I) 或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異構物、外消 旋體、藥學上可接受之鹽、前驅藥及其溶劑合物，其中A 為一藥效團，其為抑制異常的細胞增生、分化或存活之藥 ， 劑。於本發明一較佳態樣，A為一抗癌藥劑，B為一連結基 團且C為一鋅結合結構。 於一較佳具體例，鋅結合藥效團抑制HDAc並連結於一 第2藥效團，該第2藥效團誘發細胞〉周亡、抑制血管新生 及/或抑制異常增生。於一具體例，該多功能小分子之分子 量小於1000 g/mo卜較佳為小於_ g/m〇1，最佳為小於 550 g/mol 。 夕於本發明一具體例，本發明化合物之藥效團可擇自於 (乡數商用或臨床或臨床前評估的抗癌藥劑。此等藥劑可影 響1種以上蛋白質激酶，其中多數已證明為原致癌物。此 等激酶本身可能因過度表現或突變而為致癌性。因此，藉 由抑制此等蛋白質之蛋白質激酶活性，可破壞疾病進展。 於一具體例’該第2藥效團抑制酵素DNA甲基轉移酶 * T)異吊之DNA甲基化樣式，與表觀基因突變或表觀 大變有關’其可能與基因突變具有同樣結果。例如，許多 2瘤顯不尚甲基化及伴隨之腫瘤抑制基因沉默化。數種發 育疾病亦與異常之遍甲基化相Μ。因此，DNA甲基化之 1150-9131-PF;Kai 14 200829575 改變，在發育及增生性疾病扮演重要角色，尤其腫瘤發生。 抑制DNA甲基化，尤其是抑制DNMT，更尤其是DNMT1，被 ^為疋✓口療i日生性疾病之有前途的策略。Azacitidine被 為可為治療低及高風險次型骨髓增生異常綜合症 (myelodysplastic decitabine 目前正在 FDA(Christine 2006; Lewis 以 a/， 2005)審核中。為人廣泛接受地，組蛋白修飾及DNA甲基化 密切相關，一起運作來決定基因表現狀態，並決定細胞命 運（Yoo & Jones、Nai· 处叹 Ak，2006，5，37-）。
Cameron等人揭示去甲基化及組蛋白去乙醯基酶抑制共效 地在癌症中已沉默化之基因的再表現中作用（朐之 1 999，21，103-VHDAC抑制劑 TSA 與 DNMT抑制劑 5-aza-2, - 去氧胞苷共效地作用，以再活化DNA甲基化-沉默化基因 (REF)。HDAC抑制劑降低DNA甲基轉移酶—3B mRNA穩定性， 並下調於子宮内膜細胞中之新生DNA曱基轉移酶活性 (Xiong 以 a人，Cancer 心s·，2005，65，2684)。組合 DNMT 抑制劑（5-aza-dC)及 HDAC 抑制劑（trichostatin A)， 在人類ER-負性乳癌細胞株會誘發ER mRNA表現增加 300-400 倍（針對 5-aza-dC，30-40 倍，針對 TSA，5 倍）（Yang ei a/· CaTJcerAes·，2001, 61,7025)。 於一具體例，該第2藥效團抑制MAP/ERK激酶（MEK)。 MEK抑制劑抑制許多人類腫瘤細胞並顯著地增加hdaC抑 制劑誘發細胞凋亡細胞死亡之效力（Ozaki ef a/.，及仍?c， 2006，339,1171)。HD AC抑制劑VPA抑制血管新生並且增 15 1150-9131-PF/Kai 200829575 加胞外ERK磷酸化。PD98059，為一 MEK抑制劑，抑制VPA-誘發ERK磷酸化。組合VPA及PD98059共效地抑制體外（//? F/iro)及體内（//? 血管新生（Michael i s a/·，Ce/7 厂 2006，13,446)。共投予 HDAC 抑制劑 SAHA 及 MEK 抑制劑 PD184352(或 U0126)於 K562 及 LAMA 84 細 胞，造成共效的粒腺體損害、caspase活化及細胞凋亡增 力口（Yu et al. , Leukemia 2005， 19)。 於一具體例，該第2藥效團抑制Cycl in-依存性激酶 ^ (CDK)。許多遺傳性及表觀遺傳性事件，造成人類癌症中， 萬用的細胞週期cdk過度活性，且此等抑制可造成細胞週 期制止及細胞凋亡（Shapiro， / 67//? 2006, 24，1 770)。以 HDAC抑制劑 LAQ824及 CDK抑制劑 roscovitine組合處理人類白血病細胞，會破壞成熟，並 共效地誘發細胞凋亡，為另一以組合新穎組蛋白去乙醯基 酶及Cyc 1 i η-依存激酶抑制劑對於抗白血病策略之支持 (Rosato a/·，人 Ca/zcer 2005，4,1772)。 \ 共同投予Cyclin-依存激酶抑制劑flavopiridol及HDAC 抑制劑辛二醯基酿替苯胺經將酸（Suberoylanilide hydroxamic acid)及丁酸酯，共效地增加了在野生種及 Bel - 2-或Be卜x(L)-過度表現細胞（U937及HL - 60)中之粒 腺體損害、caspase活化、多（ADP-核糖）聚合酶降解及細 胞死亡，並誘發明顯的群落生成性喪失。組合CDK及HDAC 抑制劑之策略，可能對於過度表現Be 1-2或Bel-x(L)之抗 藥性白血病細胞有用（Dasmahapatra a人，Mol. 1150-9131-PF;Kai 16 200829575
Pharmacol. 2006， 69， 288)。 於一具體例，該第2藥效團抑制蛋白酶體。抑制蛋白 酶體會造成破壞細胞中的蛋白質恆定，可能造成細胞〉周 亡，為一在惡性細胞中可觀察到的現象。 Bortezomib(Velcade⑧），一第l級蛋白酶體抑制劑，許可 為一抗腫瘤劑，會使多種骨髓瘤細胞對HDAC抑制劑 (butyrate and suberoylanilide)-誘發之粒腺體官能障 礙、caspase 9，8及3活化敏感化；及多聚合酶降解（peiei ; 5/·，C";?· Wes·，2004, 10, 3839)· HDAC 抑制劑 (depsipeptide)-誘發細胞凋亡及Bax之粒腺體轉位，在粒 細胞白血病細胞株HL-60及K562中，顯著地由蛋白酶體抑 制劑 bortezomib 所促進增強（Sutheesophon ef a/.，jcb 2006，115,78)。 於一具體例，該第2藥效團促進癌細胞之細胞凋亡。 目前在癌症藥物開發中已探索的細胞凋亡標靶，包括··腫瘤 壞死因子（TNF)-相關性細胞凋亡-誘發配體（TRAIL)受體、 I: 抗細胞凋亡蛋白質之BCL2家族、細胞凋亡抑制劑（IAP)蛋 白質’及 MDM2 。該 HDAC 抑制劑，Suberic bishydroxamate(SBHA)，會使骨髓瘤對TRAIL-誘發細胞凋 t 敗良化（Zhang et al·，Biochem· Pharmacol· , 2QQ3, 66, 1537)。共同投予TNF-相關性細胞凋亡-誘發配體（TRAIL) 及HDAC抑制劑，會共效地於人類粒細胞白血病細胞誘發 細胞凋亡，並導致粒腺體受傷的明顯增加，及活化 caspase 串級。（Rosato ei a人，Mol· Pharmacol.，2003，2, 1273)。 1150-9131-PF/Kai 17 200829575 HDAC抑制劑增進TRAIL於白血病細胞之細胞凋亡-誘發效 力，係藉由多重機制（Shankar eia/·，Int· J· Mol· Med·， 2005， 16, 1125)。 於一具體例，A為一藥效團擇自抗癌化合物，例如但 不限於： 1.酪胺酸激酶 1-1 ErbB 家族（EGFR，ErbB2，ErbB3，ErbB4) 化合物 結構 已知標把 Gefitinib/Iressa⑧ p hnXXci EGFR Er1ot i n i b/Tarceva⑧ 111 EGFR EKB-569 B ,χχ, EGFR， HER-2 Lapitinib/Tykerb /GW-572016 〇 ii—n hn^^c, EGFR, HER-2 Canertinib/CI-1033 o二功 EGFR, HER-2, ErbB3, HrbB4 Mubritinib/TAK165 fVo^ F HER-2 CP-724714 ErbB2 BIBW-2992 NJ〇C〇 '〇a：XXb EGFR, HER-2 BMS-582664 VEGFR-2 1150-9131-PF;Kai 18 200829575
VEGFR 家族-VEGFR-1，VEGFR-2，Flt-3，c-Kit，Abl，JAK PDGFR 家族-PDGFR-a，PDGFR-b，IGF-IR，c-Met FGFR 家族-FGFR1，FGFR3，FGFR4，c-Ret 化合物 結構 已知標乾 Cediranib/AZD-2171 ........................— VEGFl, VEGF2, VEGF3, Fit-1，c-Kit Vatalanib/PTK787 /ZK222584 VEGFR1,2 &3, PDGFR, c-Kit Axitinib/AG-013736 。丫 b、 VEGFR-1, PDGFR, VDGF-2 Sunitinib/Sutent /SU11248 H VEGFR-2，PDGFR，FLT3, c-Kit Sorafen i b/Nexavar /BAY 43-9006 Raf, VEGFR, PDGFR, FLT3, c~Kit, BAY--57-9352 O VEGFR—2 & 3， PDGFR， c-kit 1150-9131-PF/Kai 19 200829575
Pazopanib/GW-786034 VEGFl, VEGF2, VEGF3, PDGFR, c-Kit SU6668 o^H VEGFR-2, PDGFR, FLT3, c-Kit L-21649 ° VEGFR-2, Flt-3 CP-547632 VEGFR-2 Vandetanib/AZD-6474 iX从』 VEGFR-2 M i dostaur i n/PKC412 FLT3, kit, PDGFR Lestaurt i n i b/CEP-7 01 c§〇 FLT3 CHIR-258/TKI-258 CC^Ch FLT3, VEGFR, c-Kit AMN107 Acr-Abl, Kit, PDGFR OSI-930 CK c-Kit, VEGFR Tandutinib/MLN-518 /CT53518 人·Ό-ν -〇 FLT3, PDGFR, c-Kit ABT-869 ^aV:D〇r Fit-3，KDR，VEGFR-3 1150-9131-PF;Kai 20 200829575
Imatinib/Gleevec /STI-571 ό Bcr-Abl, PDGFR, c-Kit Dasatinib/BMS-354825 Bcr-Abl, Src, Fyn Nilotinib/AMN-107 ό Bcr-Abl, cKit, PDGFR AZD-0530 αΛ^。 、ο^ό6〇 Src, Bcr-Abl Bosutinib/SKI-606 apoc /〇XYj Src, Bcr-Abl AG490 Jak AMG706 VEGF, PDGF, Kit BIBF-7055 VEGF-2, PDGF, Kit XL999 FGFR, VEGFR, PDGFR, Flt3 XL880 c-Met, VEGFR2 XL647 EGFR, HER2, VEGFR XL184 VEGFR2 及 Met XL820 KIT, VEGFR 及 PDGFR 1 -3組合之ErbB激酶及Split激酶家族（EGFR及VEGFR) 化合物 結構 已知標靶 Vandetanib/ZD6474 HN^ ryOoy VEGFR, EGFR AEE788 EGFR, HerB2, VEGFR 1 -4 Src 家族激酶：Src，Lyn，Yes 化合物 結構 已知標粗 1150-9131-PF;Kai 21 200829575 CGP76030 H^N-〇 Src, Yes, Fgr，lyn, abl NVP-AAAK980 广p Src SU-6656 Src AZD-0530 Src AZM-475271 Src PP -1 rp 1¾ Src, Abl 2.絲胺酸 / 蘇胺酸激酶·· PKC，CDK，Erk，Mek，PI3K-Akt， raTOR, Raf, CHK, Aurora 化合物 結構 已知標輕 VX-680/MK0457 Aurora AZD-1152 Aurora PHA-739358 Aurora MLN-8054 Aurora Hesperedin AnwetincWinooe! r^\ rHsJ Q V Aurora « Aquhazdine derivative « AM447439 Aurora 1150-9131-PF;Kai 22 200829575
1150-9131-PF;Kai 23 200829575 RADOOl/Everolimus mTOR PD-0325901 HO 户丫、Ο〆8 丫。 f I f ΜΕΚ 1&2 CM040/PD 184352 ’每Λ ΜΕΚ AZD6244/ARRY-142886 \=Ν ΜΕΚ 1&2 PI-103 ΡΙ-3 CHIR-265 ! ·· · B-Raf， VEGFR2
3.DNA甲基轉移酶（DNMT) 化合物 結構 已知標靶 RG108 L^^-rT DNMT Azacitidine 夕H, H0|/0\ ιάωι DNMT Procainamide > “ > 1 DNMT 4.蛋白酶體 化合物 結構 已知標靶 Bortezomib/Ve1cade 蛋白酶體 1150-9131-PF;Kai 24 200829575 salinosporamide A/NBI-0052 Θ赞 。价 蛋白酶體 PR-171 蛋白酶體 5.基質金屬蛋白酶 化合物 結構 已知標把 COL-3 f ο» 基質金屬蛋白酶抑制劑 BMS-275291 ' /宁、Ά‘又 κβ \ _/ - - o^^rmnw 基質金屬蛋白酶抑制劑 6.脂肪酸轉移酶 化合物 結構 已知標靶 SCH66336 脂肪酸轉移酶 R115777 麵 脂肪酸轉移酶 L778123 脂肪酸轉移酶 BMS-214662 〇^0(Τ 1 脂肪酸轉移酶 7·熱休克蛋白質（HSP)，尤其HSP90 化合物 結構 已知標靶 1150-9131-PF;Kai 25 200829575 17AAG/K0S-953 0 HSP90 〇 Λ ^ YI DMAG/K0S-1022/Geldeanamycin τ Γ" T HSP90 CCT018159 意:. > /*# ”一'^ A " HSP90 IPI-504 m o sA〇 HSP90 ^ pH 0 、^^*0人 MHj CNF-1010 ，^丫s ° ^0y kh HSP90 f · 一〇~ \ HSP90 CNF-2024 8.細胞凋亡藥劑：TRAILR， caspases， I APs,
Bcl-2,Survivin, MDM2, MDM4, 化合物 結構 已知標乾 ABT-737 p ^ Bel Obatoclax Q^y /° Bel TP-115C Bel AT-101 Bel IPI-191 Bel 1150-9131-PF;Kai 26 200829575 JNJ-2729199 —— A - MDM2 NU-8001 - MDM2 Nut1 in 2 Ί、 产 ςΛ^、0/〇Ηί ----- MDM2 Smac-mimetic ΧΙΑΡ Smac-mimetic ρ ΧΙΑΡ 於一較佳具體例，A為擇自抗癌化合物之一藥效團， 其特徵在於具有至少一含氮雜環或雜芳基環。 於一較佳具體例，C為一鋅結合結構擇自： w
人丫 A
(a) Re〜；其中w為0或S;Y為不存在、N或CH;Z 為N或CH ; R7及Rg獨立地為氫、〇R，、脂肪族或經取代的 月曰肪私’其中R為氫、醯基、脂肪族或經取代的脂肪族； 但是若R?及R9均存在，則1或R9其中之一需為〇R，且若 Y不存在、L需為〇^;及Rs為氫、醯基、脂肪族、經取代的 脂肪族； () ’其中W為〇或S;J為〇、龍，或NCEh·及 R1〇為氫或低級烷基； 1150-9131-PF;Kai 27 200829575 (c)或CH;且 w'6A. ，·其中w為o或s;匕及Zi獨立地為N、c NH〇
R2~P ⑷ 12 R11 ;其中z、Y及w同前定義；Rn R12獨 立地擇自於··氫或脂肪族；R1、R4R3獨立地擇自於：氯、 經基、胺基、i素、燒氧基、經取代的烧氧基、烧基胺基、 經取代的燒基胺基、二院基胺基、經取代的二烧基胺基、 經取代或未經取代之燒硫基、經取代或未經取代之烧基績 醯基、CF3、CN、N〇2、N3、續酿基、酿基、脂肪族、經取代 的脂肪族、芳基、經取代的芳基、雜芳基、經取代的雜芳 基、雜環及經取代的雜環。 —一 --.................................................................--________」............. ........................ .....— 於最佳具體例、c擇自： 〇 H0、
' /NH2 (a) ，其中Rs擇自於：氫或低級烧基；且 iXx/ ^12 · NH? R2- () ，其中R1、R2及R3獨立地擇自於：氳、 羥基、CF3、N〇2、N3、鹵素、低級烷基、低級烷氧基、低級 烷基胺基、烷氧基烷氧基（較佳為甲氧基乙氧基）、烷基胺 基烷氧基（較佳為甲基胺基乙氧基），苯基、噻吩基、呋喃 基、吡嗪基、經取代的吡嗪基及嗎啉代；及Ri2擇自於：氫或 低級烧基。 於一較佳具體例，該二價β為一直接鍵結或直鏈或分 1150-9131-PF；Kai 28 200829575 支鏈、經取代或未經取代之烷基、經取代或未經取代之烯 基、經取代或未經取代之炔基、芳基烷基、芳基烯基、芳 基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基、雜芳基炔基、雜環基 烷基、雜環基烯基、雜環基炔基、芳基、雜芳基、雜環基、 壞烷基、環烯基、烷基芳羞院基、烷羞芳基烯基、貌基芳 基炔基、烯基芳基烷基、烯基芳基烯基、烯基芳基炔基、 炔基方基烷基、炔基芳基烯基、炔基芳基炔基、烷基雜芳 基烷基、烷基雜芳基烯基、烷基雜芳基炔基、烯基雜芳基 烷基、烯基雜芳基烯基、烯基雜芳基炔基、炔基雜芳基烷 基、炔基雜芳基烯基、炔基雜芳基炔基、烷基雜環基烷基、 烷基雜裱基烯基、烷基雜環基炔基、烯基雜環基烷基、烯 基雜環基烯基、烯基雜環基炔基、炔基雜環基烷基、炔基 ...·——·——·-—〜— —.................................. 雜環基烯基、炔基雜環基块基、烷基芳基、烯基芳基、炔 基芳基、烷基雜芳基、烯基雜芳基，或alkynylherer〇aryl， 其中一或複數個亞甲基可被以下所中斷或終結·· 〇、s、 S(0)、S〇2、N(R8)、c(0)、經取代或未經取代之芳基、經取 代或未經取代之雜芳基、經取代或未經取代之雜環；此等二 價B連結基團包括但不限於··烷基、烯基、炔基、烷基芳基、 烯基芳基、炔基芳基、烷氧基芳基、烷基胺基芳基、烷氧 基烷基、烷基胺基烷基、烷基雜環烷基、烷基雜芳基烷基、 烷基胺基、N(R8)烯基、N(R8)炔基、n(R8)烷氧基烷基、n(R8) 烷基胺基烷基、N(R8)烷基胺基羰基、n(R8)烷基芳基、n(R8) 烯基芳基、N(R8)炔基芳基、N(R8)烷氧基芳基、n(R8)烷基 胺基芳基、N(R8)環烷基、n(R8)芳基、n(R8)雜芳基、n(R8) 1150-9131-PF;Kai 29 200829575 雜環烷基、N(R8)烷基雜環烷基、烷氧基、〇_烯基、〇 —炔基、 0-烧氧基烧基、0-燒基胺基烷基、〇_烷基胺基羰基、〇一烷 基芳基、0_烯基芳基、〇 —炔基芳基、〇-烷氧基芳基、〇一烷 基胺基芳基、0-環烷基、〇—芳基、〇_雜芳基、〇-雜環烷基、 0-烧基雜環烧基、C(〇)烷基、c(〇)一烯基、c(〇i炔 烧基芳基、C(0)稀基芳基、c(〇)炔基芳基、c(0)烷氧基烷 基、C(0)烷基胺基烷基、c(〇)烷基胺基羰基、c(0)環烷基、 C(0)芳基、C(0)雜芳基、c(〇)雜環烷基、c〇N(R8)、c〇N(R〇 ί 烧基、CON(Rs)烯基、C〇N(R8)炔基、c〇N(R8)烷基芳基、C0N(R8) 烯基芳基、C0N(R〇块基芳基、C0N(r8)烷氧基烷基、c〇N(R〇 烧基胺基烧基、C0N(R〇烷基胺基羰基、c〇N(R8)烷氧基芳 基、C0N(R〇烧基胺基芳基、c〇n(R8)環烷基、C0N(R8)芳基、 C丽([)雜 n(r8)c(o)烧基、N(Rs)C(〇)烯基、n(R8)C(0)-炔基、n(r8)c(o) 烧基芳基、N(R8)C(0)烯基芳基、n(R8)C(0)炔基芳基、 N(R〇C(0)烷氧基烷基、N(R8)C(0)烷基胺基烷基、N(R8)C(0) ί f 烷基胺基羰基、N(R8)C(0)烷氧基芳基、N(R8)C(0)烷基胺基 芳基、N(R8)C(0)環烷基、N(R8)C(0)芳基、n(r8)c(o)雜芳 基、N(R8)C(0)雜環烷基、N(R8)C(0)烷基雜環烷基、 NHC(0)NH、NHC(0)NH-烷基、NHC(0)NH-烯基、NHC(0)NH-炔基、NHC(0)NH-烷基芳基、NHC(0)NH-烯基芳基、NHC(0)NH-炔基芳基、NHC(0)NH-烷氧基芳基、NHC(0)NH-烷基胺基芳 基、NHC(0)NH-環烷基、NHC(0)NH-芳基、NHC(0)NH-雜芳基、 NHC(0)NH-雜環烷基、NHC(0)NH-烷基雜環烷基、S-烷基、 1150-9131-PF/Kai 30 200829575 S-烯基、S-炔基、S-烷氧基烷基、S-烷基胺基烷基、S-烷 基芳基、S-烷基胺基羰基、S-烷基芳基、S-炔基芳基、S-烷氧基芳基、S-烷基胺基芳基、S-環烷基、S_芳基、S-雜 芳基、S-雜環烷基、s_烷基雜環烷基、s(o)烷基、s(o)烯 基、SCO)炔基、SCO)烷氧基烷基、s(o)烷基胺基烷基、s(o) 烷基胺基羰基、s(o)烷基芳基、s(o)烯基芳基、s(o)炔基 芳基、s(o)烷氧基芳基、s(o)烷基胺基芳基、s(o)環烷基、 s(o)芳基、s(o)雜芳基、s(o)雜環烷基、s(o)烷基雜環烷 f 基、S(0)2烷基、s(0)2烯基、S(0)2炔基、S(0)2烷氧基烷 基、S(0)2烷基胺基烷基、S(0)2烷基胺基羰基、S(0)2烷基 芳基、S(0)2烯基芳基、S(0)2炔基芳基、S(0)2烷氧基芳基、 S(0)2烷基胺基芳基、S(0)2環烷基、S(0)2芳基、S(0)2雜 芳基、S(0)2雜環烷基、S(0)2烷基雜環烷基、s〇2nh，s〇2nh-烷基、S〇2NH-烯基、SO2NH-炔基、SO2NH-烷基芳基、SO2NH-烯基芳基、S〇2NH-炔基芳基、S〇2NH-環烷基、S〇2NH-芳基、 S〇2NH-雜芳基、SChNH-雜環烷基、S(MH-烷基雜環烷基、烷 基芳基氧基烷氧基、烷基芳基氧基烷基胺基、烷基芳基胺 基烷氧基、烷基芳基胺基烷基胺基、烷基芳基烷基胺基烷 氧基、烷基芳基烷基胺基烷氧基、烯基芳基氧基烷氧基、 烯基芳基氧基烷基胺基、烯基芳基胺基烷氧基、烯基芳基 胺基烷基胺基、烯基芳基烷基胺基烷氧基、烯基芳基烷基 胺基烷基胺基。應瞭解，烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳 基、環烷基、雜環等可進一步經取代。 於一較佳具體例，B為一直鏈烷基、烯基、炔基、芳 1150-9131-PF;Kai 31 200829575 基烧基、芳基稀基、芳基炔基、雜芳基燒基、㈣基婦基、 雜芳基快基、雜環基燒基、雜環基烯基、雜環基块基、芳 基、雜芳基、雜環基、環烧基、環烯基、院基芳基烧基、 烧基芳基稀基、烧基芳基快基、烯基芳基烧基、稀基芳基 烯基、烯基芳基炔基、快基芳基烷基、炔基芳基烯基、炔 基芳基快基、烧基雜芳基烧基、烧基雜芳基烯基、烧基雜 芳基炔基、烯基雜芳基烷基、烯基雜芳基烯基、烯基雜芳 基炔基、炔基雜芳基烷基、炔基雜芳基烯基、炔基雜芳基 炔基、烷基雜環基烷基、烷基雜環基烯基、烷基雜環基炔 基、烯基雜環基烷基、烯基雜環基烯基、烯基雜環基炔基、 炔基雜環基烷基、炔基雜環基烯基、炔基雜環基炔基、烷 基芳基、烯基芳基、炔基芳基、烷基雜芳基、烯基雜芳基， 或alkynyihereroaryi，一或複數個亞甲基可被以下所中 斷或終結··-0— -N(R8)— -C(0)-、-C(0)N(R8)-，或-c(0)0-。 較佳地，C基團經由B中的一脂肪族結構而附著於β。 於一具體例’該連結基團B介於1 -24個原子，較佳為 4-24個原子，較佳為4-18個原子，更佳為4-12個原子， 且最佳為約4-1 0個原子。 於最佳具體例，B擇自於：直鏈Cl-C10烷基、Cl-C10稀 基、C1-C10炔基、Cl-C10烧氧基、烷氧基Cl-C10烧氧基、 C卜C10烷基胺基、烷氧基π-CIO烷基胺基、π-CIO烧基 羰基胺基、C1-C10烷基胺基羰基、芳基氧基C1-C1 0烷氧 基、芳基氧基Cl-C10烷基胺基、芳基氧基Cl-C10烷基胺 基幾基、C1-C10 -烧基胺基烧基胺基幾基、C1-C10烧基（N - 1150-9131-PF;Kai 32 200829575 烷基）胺基烷基-胺基羰基、烷基胺基烷基胺基、烧基幾基 胺基烷基胺基、烷基（N-烷基）胺基烷基胺基、（N-烷基）烷 基羰基胺基烷基胺基、烷基胺基烷基、烷基胺基烷基胺基 烷基、烷基1_哌嗪基烷基、1-哌嗪基烷基、烷基1-哌嗪基、 烯基芳基氧基Cl - C10烷氧基、烯基芳基胺基C1 -C1 0烷氧 基、烯基芳基烷基胺基Cl-C10烷氧基、烯基芳基氧基 C1 -C10烷基胺基、烯基芳基氧基C1-C10烷基胺基羰基、 卜哌嗪基烷基芳基、雜芳基C卜C10烷基、雜芳基C2-C10 烯基、雜芳基C2-CIO炔基、雜芳基Cl-CIO烷基胺基、雜 芳基Cl-C10烷氧基、雜芳基氧基Cl-C10烷基、雜芳基氧 基C2-C10烯基、雜芳基氧基C2-C10炔基、雜芳基氧基 C1-C10烷基胺基、雜芳基氧基C1-C1G烷氧基。於最佳具 體例，C基團經由B中的一脂肪族結構碳鏈而附著於 於一具體例，本發明之多功能扑人Μ A二、/ T T、i
(II)
的雜π I ; 取代之烷基； Q為不存在或經取代或未經昂 X為〇、S、NH，或烷基胺基； 1150-9131-PF;Kai 33 200829575 B及C同前定義。 於一最佳具體例，Ar為苯基、經取代的苯基、萘基、 經取代的萘基、吼°定基、經取代的11比唆基、吱喃基、經取 代的呋喃基、吼洛基、經取代的吼洛基；吼唑基、經取代的 °比♦基、香唑基、經取代的嗔喳基、嗟吩基、或經取代的 噻吩基；Q為不存在或經取代或未經取代之烷基；X為〇、s、 NH，或烷基胺基；R4獨立地擇自於：氫、羥基、胺基、_素、 CF3、CN、Ns、N〇2、續醯基、醯基、經取代或未經取代之燒 ί 基、經取代或未經取代之烯基、經取代或未經取代之炔基、 芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯 基、雜芳基炔基、雜環基烷基、雜環基烯基、雜環基炔基、 芳基、雜芳基、雜環基、環烷基、環烯基、烷基芳基烷基、 烷基芳基烯基、烷基芳基炔基、烯基芳基烷基、烯基芳基 烯基、烯基芳基炔基、炔基芳基烷基、炔基芳基烯基、炔 基芳基炔基、烷基雜芳基烷基、烷基雜芳基烯基、烷基雜 ( 芳基炔基、烯基雜芳基烷基、烯基雜芳基烯基、烯基雜芳 基炔基、炔基雜芳基烷基、炔基雜芳基烯基、炔基雜芳基 炔基、烷基雜環基烷基、烷基雜環基烯基、烷基雜環基炔 基烯基雜環基烷基、烯基雜環基烯基、烯基雜環基炔基、 炔基雜環錢miMu料，錢ί雜環基炔基， 其中ί個以上亞甲基可被以下所中斷或終結：〇、s、s(〇)、 S〇2、N(R8)、C(0)、經取代或未經取代之芳基、經取代或未 左取代之雜芳基、經取代或未經取代之雜環；其中匕為氫、 醯基、脂肪族或經取代的脂肪族；B&c同前定義於最佳 H50-9131-PF;Kai 34 200829575 具體例者。 於一具體例，本發明之多功能化合物為下（ΙΠ)表示之 化合物，或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異構物、 外消旋體、藥學上可接受之鹽、前驅藥及其溶劑合物：
-B—C
^y)-E rkTl 1飞丄>=◦ <22 K23 (III) 其中Χι為N、CR8;其中R8同前面的定義； L為不存在或nh; 基；
Cy為芳基、經取代的芳基、雜芳基，或經取代的雜芳
Ru、R21、r22獨立地擇自於：氫、羥基、胺基、鹵素、 烷氧基、經取代的烷氧基、烷基胺基、經取代的烷基胺基、
二烧基胺基、經取代的：録胺基、經取代或未經取代之 烷硫基、經取代或未經取代之烧基石黃醯基、CF3、CN、N N〇2、、續醯基、醯基、脂肪族、經取代的脂肪族、芳基、經 取代的芳基、雜芳基、經取代 雜環； /方基、雜裱及經取代的 R23為氫或脂肪族； β、C、R)、R2及L同前定義。 於-具體例，本發明之多功能化合物為下式（Η)及⑺ 化合物’或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異 1150-9131-PF/Kai 35 200829575 構物、外消旋體、藥學上可接受之鹽、前驅藥及其溶劑合
其中Ra為羥基、胺基、烷氧基、烷基胺基、二烷基 胺基；
Rb為氫、脂肪族基團、醯基； Rc擇自於：R!; η 為 0、1、2，或 3; G為S或0; B、C及Ri、R2及R3同前定義。 於一具體例，本發明之多功能化合物為下式（νι)及 (VII)表示之化合物，或其幾何異構物、鏡像異構物、非鑛
像異構物、外消旋體、藥學上可接受之鹽、前驅藥及其溶 劑合物：
N N〆 X，Q、Ar C、 (VI) w (VII) 其中Z2為0、s、NH或烷基胺基 Ya為N或CR2。;其中R2。擇自於: 基、經取代的芳基、雜芳基、經取代的曰㈣ 6、^、1及八1^同前定義。 土’ 1150-9131-PF;Kai 36 200829575 於一具體例，本發明之多功能化合物為下式（v 111)及 (IX)表示之化合物，或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡 像異構物、外消旋體、藥學上可接受之鹽、前驅藥及其溶 劑合物：
(VIII)
(IX) 經取 其中CZ擇自於：芳基、經取代的芳基、雜芳其 代的雜芳基及雜環； i X3為NH，烧基胺基0或S; C、B、Y2、Z2、Ar及R8同前定義。 於一具體例，本發明之多功能化合物為 ^ p A(X)及（XI) 表不之化合物，或其幾何異構物、鏡像異構物 構物、外消旋體、藥學上可接受之鹽：及 物： %樂及其溶劑合
1150-9131-PF;Kai 37 200829575 严浐美為方基、經取代的芳基、雜芳基、經取代的雜芳基、 衣兀土、、經取代的環烷基、雜環或經取代的雜環； 其，lt〇、S:S〇、S〇2、NH、經取代或未經取代之烷基胺 土 3 !取代或未經取代之Cl -C3烷基； Υΐ0^ Θ - S^ ΝΗ； ^及ζ10獨立地為ΝΗ、經取代或未經取代之燒基胺 基，或經取代或未經取代之c丨_C3烷基；
Cy為芳基、經取代的关美、雜笔A 幻方暴雜方基、經取代的雜 環烷基，或雜環烷基； R21。獨立地擇自於··氫、經基、胺基、㈣、經取代或 未經取代之料基、經取代或未經取代之㈣胺基、經取 代或未經取代之：烧基胺基、經取代或未經取代之烧硫 ，、經取代或未經取代之烧基續酿基、⑶、⑶、她、心: 石黃醯基、醮基、芳基、經取代的芳基、雜芳基、經取代的 雜芳基、雜環'經取代的雜環、脂肪族、及經取代的脂肪 族； C及Β同前定義。 於-具體例，本發明之多功能化合物為下式（χ⑴表示 之化合物，或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異構物、 外消旋體、藥學上可接受之鹽、前驅藥及其溶劑合物
1150-9131-PF;Kai 38 (XII) 200829575 其中ϋ為N或CH; W20 為 N 或 CH; X20 為不存在、〇、s、S(0)、S(0)2、N(R8)、CF2 或 CrC6 烧基、C2-Ce烯基、C2-C6炔基，其中一或複數個亞曱基可 被以下申斷或終結：0 > S > SO > S〇2 > 為氫、醯基、 脂肪族或經取代的脂肪族； Y2〇獨立地為氫、鹵素、N〇2、CN，或低級烷基； Z2〇為胺基、烷基胺基，或二烷基胺基； Q2〇為芳基、經取代的芳基、雜芳基、經取代的雜芳基、 環烷基，或雜環烷基； V為氫、直鏈或分支鏈、經取代或未經取代之烷基、 、星取代或未經取代之烯基、經取代或未經取代之炔基，其 中一或複數個個亞甲基可被以下所中斷或終結：〇、s、 s(0)、S〇2、N(R8)、c(0)、經取代或未經取代之芳基、經取 代或未、&取代之雜芳基、經取代或未經取代之雜環；經取 代或未經取代之環烷基； 且，其中Q2。及/或V進一步經卜B_c取代； C、B及ϋ同前定義。 ， 於一較：具體例，C為-辞結合結構擇自：
、人丫 A (a) 8 7，其中w為0或S; Y為不存在、N或CH; :+或CH，只7及R9獨立地為氫、經基、脂肪族基團；但 疋…R9均存在，則…9其中之一需為經基，且若] H50-9131-PF;Kai 39 200829575 不存在、R1為絲為氫一肪族基團； η外 Λ 、 J ;其中或S;J為〇、ΝΗ，或NCH.及
Rio為氣或低級烧基； / H3,及
HCW (C)或CH;且 其中W為〇或s; Υι 及Z1獨立地為n、c
，其中z、Y及W同前定義；Ru Ri2獨 ^也擇自於：氳或脂肪dm獨立地擇自於：氫、 經基、胺基、i素、燒氧基、院基胺基、二烧基胺基n CN、N〇2、磺醯基、醯基、护时缺 .._ 月曰肪無、經取代的脂肪族、芳基、 經取代的芳基、雜芳基、經取代的雜芳基、雜環及經取代 的雜環。 於最佳具體例，C擇自： ηο-Λ/ (a) ； ;其中Rs擇自於：氫或低級烧基；且
羥基、CF3、N〇2、_素、低級烷基、低級烷氧基、低級烷基 胺基、烷氧基烷氧基（較佳為甲氧基乙氧基）、烷基胺基烷 氧基（較佳為甲基胺基乙氧基）、苯基、噻吩基、呋喃基、 1150-9131-PF;Kai 40 200829575 吡嗪基、經取代的吡嗪基及嗎啉代；及Riz擇自於：氫或低級 烧基。 於一較佳具體例，該二價B為一直接鍵結或直鏈或分 支鏈、經取代或未經取代之烷基、經取代或未經取代之= 基、經取代或未經取代之炔基、芳基貌基、芳基稀基、芳 基炔基、雜芳基絲、雜芳基烯基、雜芳錢基、雜環基 炫基、雜環基婦基、雜環基炔基、芳基、雜芳基、雜環基= 烷基芳基烷基、烷基芳基烯基、烷基芳基炔基、烯基芳基 烧基、烯基芳基烯基、烯基芳基快基、炔基芳基烧基、块 基芳基烯基、炔基芳基炔基、烷基雜芳基烷基、烷基雜芳 基烯基、烷基雜芳基炔基、烯基雜芳基烷基、烯基雜芳基 婦基、烯基雜芳基炔基、炔基雜芳基烷基、炔基雜芳基^ 基炔基雜芳基炔基、烷基雜環基烷基、烷基雜環基烯基、 烧基雜環錢基、縣雜環基㈣、料雜環基烯基、婦 基雜％基炔基、炔基雜環基烷基、炔基雜環基烯基，或炔 基雜環基炔基，丨中一或複數個s甲基可被以下所中斷或 終結··〇、S、s(o)、s〇2、N(R8)、c(0)、經取代或未經取代 之芳基、經取代或未經取代之雜芳基、經取代或未經取代 之雜裱；此等二價B連結基團包括但不限於··烷基、烯基、 &基'烧基芳基'烯基芳基、炔基芳基、烧氧基芳基、烧 基胺基芳基、烷氧基烷基、烷基胺基烷基、烷基雜環烷基、 烷基雜芳基烷基、烷基胺基、N(R8)烯基、N(R8)炔基、N(Rs) 烷氧基烷基、N(R8)烷基胺基烷基、n(R8)烷基胺基羰基、N(R〇 烷基芳基、N(R8)烯基芳基、N(R8)炔基芳基、N(R8)烷氧基 1150-9131-PF;Kai 41 200829575 芳基、N(R8)烷基胺基芳基、n(R8)環烷基、n(r8)芳基、n(R8) 雜芳基、N(R8)雜環烷基、N(R8)烷基雜環烷基、燒氧基、〇_ 烯基、0-炔基、0-烷氧基烷基、〇〜烷基胺基烷基、〇_烷基 胺基羰基、0-烷基芳基、0-烯基芳基、炔基芳基、〇一烧 氧基芳基、0 _烧基胺基芳基、0 _環貌基、0 -$^ 基、0-雜環烧基、0-烷基雜環烷基、C(o)烧基、c(〇)-烯基、 C(0)炔基、C(0)烧基芳基、C(0)烯基芳基、c(〇)炔基芳基、 c(o)烧氧基烧基、c(o)烧基胺基烧基、c(〇)烧基胺基羰基、 C(0)環烧基、C(0)芳基、c(0)雜芳基、c(0)雜環烷基、 C0N(R8)、C0N(R8)烷基、c〇N(R〇烯基、c〇N(R8)炔基、C0N(R8) 烷基芳基、C0N(R8)烯基芳基、C0N(R8)炔基芳基、c〇N(R8) 烷氧基烷基、C0N(R8)烷基胺基烷基、c〇n(R8)烷基胺基羰 基、C0N(R8)烷氧基芳基、C0N(R8)烷基胺基芳基、c〇N(R〇 環烷基、C0N(R8)芳基、C0N(R〇雜芳基、C0N(r8)雜環烷基、 C0N(R8)烷基雜環烷基、N(R8)C(0)烷基、N(R8)C(0)烯基、 N(R8)C(0)-炔基、N(R8)C(0)烷基芳基、N(R8)C(0)烯基芳 基、n(r8)c(o)炔基芳基、N(R8)C(0)烷氧基烷基、N(R8)C(0) 烷基胺基烷基、N(R8)C(0)烷基胺基羰基、N(R8)C(0)烷氧基 芳基、N(R〇C(0)烷基胺基芳基、N(R〇C(0)環烷基、N(R8)C(0) 芳基、n(r8)c(o)雜芳基、n(r8)c(o)雜環烷基、n(r8)c(o) 烷基雜環烷基、NHC(0)NH、NHC(0)NH-烷基、NHC(0)NH-烯 基、NHC(0)NH-炔基、NHC(0)NH-烷基芳基、NHC(0)NH-烯基 芳基、NHC(0)NH-炔基芳基、NHC(0)NH_烷氧基芳基、 NHC(0)NH-烷基胺基芳基、NHC(0)NH-環烷基、NHC(0)NH- 1150-9131-PF;Kai 42 200829575 芳基、NHC(0)NH-雜芳基、NHC(0)NH-雜環烷基、NHC(0)NH-烧基雜環烧基、S -烧基、S -稀基、S-快基、S -烧氧基烧基、 S-烷基胺基烷基、S-烷基芳基、S-烷基胺基羰基、S-烷基 芳基、S-炔基芳基、S-烷氧基芳基、S-烷基胺基芳基、S-環烧基、S -芳基、S -雜芳基、S -雜環烧基、8-烧基雜環炫 基、s(o)烷基、s(o)烯基、s(o)炔基、s(o)烷氧基烷基、 s(o)烷基胺基烷基、s(o)烷基胺基羰基、s(o)烷基芳基、 s(o)烯基芳基、s(o)炔基芳基、s(o)烷氧基芳基、s(o)烷 基胺基芳基、s(o)環烷基、s(o)芳基、s(o)雜芳基、s(o) 雜環烷基、S(0)烷基雜環烷基、S(0)2烷基、S(0)2烯基、 s(0)2炔基、S(0)2烷氧基烷基、S(0)2烷基胺基烷基、S(0)2 烷基胺基羰基、s(0)2烷基芳基、S(0)2烯基芳基、S(0)2炔 基芳基、S(0)2烷氧基芳基、s(0)2烷基胺基芳基、S(0)2環 烷基、S(0)2芳基、S(0)2雜芳基、S(0)2雜環烷基、S(0)2 烷基雜環烷基、S〇2NH、S〇2NH-烷基、S〇2NH-烯基、SO2NH -炔基、SChNH-烷基芳基、SChNH-烯基芳基、SCMH-炔基芳基、 % SChNH-環烷基、S(hNH-芳基、S(hNH-雜芳基、S〇2NH-雜環烷 基、S〇2NH-烷基雜環烷基、烷基芳基氧基烷氧基、烷基芳 基氧基烧基胺基、烧基芳基胺基烧氧基、烧基芳基胺基院 基胺基、烧基芳基烧基胺基燒氧基、烧基芳基烧基胺基烧 氧基、烯基芳基氧基烷氧基、烯基芳基氧基烷基胺基、烯 基芳基胺基烧氧基、稀基芳基胺基烧基胺基、稀基芳基烧 基胺基烧氧基、稀基芳基烧基胺基烧基胺基。需瞭解烧基、 烯基、炔基、芳基、雜芳基、環烷基、雜環等可經進一步 1150-9131-PF;Kai 43 200829575 取代。 於一較佳具體例，B為一直鏈烷基、烯基、炔基、芳 基燒基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烧基、雜彡基稀基、 雜芳基炔基、雜環基烷基、雜環基烯基、雜環基炔基、芳 基、雜芳基、雜環基一焼基芳基|基、烷基芳基捧基 基芳基炔基、烯基芳基烷基、烯基芳基烯基、烯基芳基炔 基、炔基芳基烷基、炔基芳基烯基、炔基芳基炔基、烷基 雜芳基烷基、烷基雜芳基烯基、烷基雜芳基炔基、烯基雜 芳基烧基、烯基雜芳基烯基、烯基雜芳基炔基、炔基雜芳 基烧基、炔基雜芳基烯基、炔基雜芳基炔基、烷基雜環基 烧基、烧基雜環基烯基、烧基雜環基快基、烯基雜環基烧 基、烯基雜環基烯基、烯基雜環基炔基、炔基雜環基烷基、 快基雜環基烯基，或快基雜環基炔基。一或複數個亞曱基 可被以下所中斷或終結：-〇-、—N(R8)-、-C(〇)-、 -C(0)N(Rs)-，或-C(0)0-。 於最佳具體例，B擇自於：直鏈Cl-C10烷基、n-C10烯 基、Cl-C10炔基、Cl-C10烷氧基、烷氧基Cl-C10烷氧基、 C1-C10烷基胺基、烷氧基Cl-C10烷基胺基、n-C10烷基 羰基胺基、C卜C10烷基胺基羰基、芳基氧基C1-C10烷氧 基、芳基氧基Cl-C10烷基胺基、芳基氧基Cl-C10烷基胺 基羰基、（n-cio-烷基胺基烷基胺基羰基、ci-cio烷基（n-烷基）胺基烷基-胺基羰基、烷基胺基烷基胺基、烷基羰基 胺基烷基胺基、烷基（N-烷基）胺基烷基胺基、（N-烷基）烷 基羰基胺基烷基胺基、烷基胺基烷基、烷基胺基烷基胺基 1150-9131-PF;Kai 44 200829575 烧基、烧基哌嗪基烷基、哌嗪基烷基、烷基哌嗪基、烯基 芳基氧基C1-C10烷氧基、烯基芳基胺基C1-C10烷氧基、 烯基芳基烷基胺基C1-C10烷氧基、烯基芳基氧基C1-Cl0 烧基胺基、烯基芳基氧基C1-C10烷基胺基羰基·及哌嗪基 烷基芳基。 於一具體例，本發明之多功能化合物為式（丨n表示之 化合物，或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異構物、 外消旋體、藥學上可接受之鹽、前驅藥及其溶劑合物：
其中Ar為芳基、經取代的芳基、雜芳基，龙^ 的雜芳基； Q為不存在或經取代或未經取代之烷基； X為0、S、NH，或烧基胺基； 同前定義。 於一最佳具體例，Ar為苯基、經取代的苯基、萘基、 經取代的萘基、吡啶基、經取代的吡啶基、呋喃基、經取 代的呋喃基、吡咯基、經取代的吡咯基；π比唑基、經取代 的吼嗤基'、噁唑基、經取代的噁唑基、噻吩基、或經取代 的嘆吩基；Q為不存在或經取代或未經取代之烧基；X為 〇、S、NH，或烷基胺基；L為氫、羥基、鹵素、低級烷基、 低級烧氧基、烧氧基烧氧基（較佳為甲氧基乙氧基）、烧基 1150-913l-PF;Kai 45 200829575 胺基烧氧基d佳A甲基胺基乙氧基）、低級燒基胺基或低 級-烧基胺基；B及c同於最佳具體例之定義。 於具體例，本發明之多功能化合物為下式⑴！）所示 化合物’或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異構物、 外/肖》疋體藥學土可接受之鹽、前驅藥及其溶劑合物：
(III) 其中X!為N、CR8;其中R8同前面的定義，· L為不存在或nh;
Cy為芳基、經取代的芳基、雜芳基，或經取代的雜芳 基；
、R2!、R22獨立地擇自於··氯、羥基、CF3、N〇2、_ 素、低級烷基、低級烷氧基、低級烷基胺基、烷氧基烷氧 基（車乂佳為甲氧基乙氧基）、烷基胺基烷氧基（較佳為甲基胺 基乙氧基）、笨基、噻吩基、呋喃基、吡嗪基、經取代的吡 嘻基及嗎琳代；及Rlz擇自於··氫或低級烷基； R23為氫或脂肪族； B、C、L、r2，及r3同前定義。 於最佳具體例，1!為CH、C(低級烷基）；L為不存在；Cy 為本基、經取代的苯基、π比咬基、經取代的π比唆基、咬喃 基、經取代的呋喃基、吡咯基、經取代的吡咯基；吡唑基、 1150-9131-PF;Kai 46 200829575 經取代的吡唑基、噁唑基、經取代的噁唑基、嗟吩基、成 經取代的噻吩基；G為0 ; Ri、R2及R3獨立地擇自於· H、 OH、CF3、N〇2、鹵素、低級烷基、低級烷氧基、烷氧基烧氧 基（車父佳為甲氧基乙氧基）、烧基胺基烧氧基（較佳為曱氧某 基乙氧基）、低級烧基胺基及低級二烧基胺基；B及c同 於最佳具體例之定義。 於一具體例，本發明之多功能化合物為下式（Iv)及（v) 表示之化合物，或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異 ’ 構物、外消旋體、藥學上可接受之鹽、前驅藥及其溶劑合 物： R /? Ra
其中Ra為經基、胺基、烧氧基、烧基胺基、二烧基 胺基；
Rb為氫、脂肪族基團、醯基； 擇自於R1; π 為 0、1、2，或 3; G為S或0 ; B、C及R!、{{2及r3同前定義。 於最佳具體例，Ra為羥基、胺基、烷氧基、烷基胺基、 二烷基胺基；Rb為氳、低級烷基、醯基；G為0; Ri、R2、 R3及Rc獨立地擇自於：Η、oh、CF3、N〇2、鹵素、低級烷基、 1150-9131-PF;Kai 47 200829575 低級烷氧基、烷氧基烷氧基（較佳為甲氧基乙氧基）、烷基 胺基烷氧基（較佳為甲氧基胺基乙氧基）、低級烷基胺基及 低級二烧基胺基；B及C同於最佳具體例之定義。 於一具體例，本發明之多功能化合物為下式（VI )及 (VII)表示之化合物，或其翁何異構物、鏡像異構物、非鏡 像異構物、外消旋體、藥學上可接受之鹽、前驅藥及其溶 劑合物：
广、Ar c—B
Z2、N (VI)
其中Z2為〇、S，或NH Y2為N或CR2。；其中R2。擇自於：氫、鹵素、脂肪族、芳 基、經取代的芳基、雜芳基、經取代的雜芳基； X2為不存在、芳基、經取代的芳基、雜芳基、經取代 的雜芳基；雜環；經取代的雜環； 8、〇、卩、1及八1'同前定義。 於最佳具體例’ Z2為〇、s，或NH; Y2為NH、CH、C(低 級烷基）；X2為苯基、經取代的苯基、吡啶基、經取代的吡 °定基、17夫喃基、經取代的吱喃基、σ比洛基、經取代的吼洛 基，°比嗤基、經取代的η比唑基、噁。坐基、經取代的噁峻基、 σ塞吩基、或經取代的。塞吩基；Ar為苯基、經取代的苯基、 萘基、經取代的萘基、吡啶基、經取代的吡啶基、呋喃基、 經取代的呋喃基、吡咯基、經取代的吡咯基；吡唑基、經取 代的吡唑基、噁唑基 '經取代的噁唑基、噻吩基、或經取 1150-9131-PF;Kai 48 200829575 代的噻吩基；Q為不存在或經取代或未經取代之烷基；χ為 〇、S、NH，或烷基胺基；β及c同前於最佳具體例定義。 於一具體例，本發明之多功能化合物為下式（VI丨丨）表 不之化合物，或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異構 物、外消旋體、農學上可接受之鹽」驅藥及其溶劑合物;
其中Cz擇自於：芳基、經取代的芳基、雜芳基、經取 代的雜芳基及雜環； X3 為 NH、0 或 S; C、Β、Υ2、Ζ2、Ar及R8同前定義。 於最佳具體例、C z為苯基、經取代 ’啶基、經取代的嘧啶基、吡嗪基、經取代的吡嗪基、吡 咯基、經取代的吡咯基、噁唑基、經取代的噁唑基、噻唑 基、經取代的噻唑基；Y2為NH、CH、C(低級烷基）；22為〇、 S，或NH; X3為NH、0或S; Ar為苯基、經取代的苯基、萘 基、經取代的萘基、吡啶基、經取代的吡啶基、呋喃基、 經取代的呋喃基、吡咯基、經取代的吡咯基；吡唑基、經取 代的吼唑基、噁唑基、經取代的噁唑基、噻吩基、或經取 代的噻吩基；R8為氫或低級烷基；B及C同前於最佳具體例 定義。 於一具體例，本發明之多功能化合物為下式（IX)或（χ) 表示之化合物，或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異 1150-9131-PF;Kai 49 200829575 構物、外消旋體、 物： 藥學上可接受之鹽、 前驅藥及其溶劑合
其中Cy1G及Cyn各自獨立擇自 评目於：方基、經取代的芳 基、雜芳基、經取代的雜芳基、雜 _ ^ , 万丞雜級、經取代的雜環、環 烷基及經取代的環烷基； Y3〇 為 N、NR8 或 CR8， 取代的脂肪族； X3。為 CRs、NRs、N、〇 或 s · ί 其中R8為氫、醯基、脂肪族或經 W3。為氫、醯基、脂肪族或經取代的脂肪族; B為連結基團； C同第1具體例中之定義。 於一具體例，本發明之多功能化合物為下式（χι)表示 之化合物，或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異構物、 外消旋體、藥學上可接受之鹽、前驅藥及其溶劑合物··
1150-9131-PF;Kai 50 (XI) 200829575 二中Cy4°各獨立擇自芳基、經取代的芳基、雜芳基、 取代的雜芳基、雜環、經取代的雜環、環焼基及經取代 的環烷基； 匕W4°各獨立擇自氯、齒素、醯基、脂肪族、經取代的 脂f族道基、經取代的茨羞^ 雜衣、、星取代的雜環、環烷基及經取代的環烷基； z“為 0、s、s(0)、s〇2、s〇2nh、職、C(〇)或 C⑻ΝίΪ2; γ4。為N或CR8 ’其中r8為氫、醯基、脂肪族或經取代 的脂肪族； X4。為 CR8、NR8、〇 或 S; B為連結基團； C同第1具體例中之定義。 於一具體例，本發明夕客4 :人&上 ^月之夕功旎化合物為下式（XII)或 (XIII)表示之化合物，或其幾何異構物、鏡像㈣物、非 鏡像異構物、外消旋體、藥學上可接受之 溶劑合物： 八
其中Cy及cyi各自獨立擇自於：芳基、 基、雜芳基、經取代的雜芳基、雜環、經取代 烷基及經取代的環烷基； 經取代的 的雜環、 芳 環 或經取代的雜芳
Ar為芳基、經取代的芳基' 雜芳基 1150-9131-PF;Kai 51 200829575 基； Y為N、NR8或CR8 ’其中r8為氫、醢基、脂肪族或經 取代的脂肪族； z 為 〇、S、CR8，或 NR8; 醯基、脂肪族及經取代 附著之原子一起形成一 醯基、脂肪族及經取代 反2°及R21各I狼 的脂肪族；或R2。及Rn可與此等所 雜環或經取代的雜環；
111 為 1、2 或 3; η 為 1、2、3 或 4; 及R23各自獨立擇自於：氫、 的脂肪族； ΧιΓΧ4獨立地為^^’其中^獨立地擇自於：氫、 二=取代之烧基胺基、經取代或未經取代之二统基胺 的脂肪族； 酿基月曰肪族、及經取代 β為連結基團； c同第1具體例中之定義。 於一具體例，本發明之多功能 之介人私 夕力此化合物為下式（XIV)表示 物，或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異㈣ 外消旋體、藥學上可接〜膝 ㈣像異構物、
Rw爲 前驅藥及其溶劑合物··
N
,c (XIV) 52 V5 其中
Cy5。擇自於以下所構成之 雜芳基、經取代的雜芳基、雜環、1方基、經取代的芳基、 及經取代的環烷基· 、衣經取代的雜環、eye 1 oaky 1 R5Q為低級烷基; X广X4獨立地為N或CR2 所構成之族群：氫、經基、胺義’其中R21獨立地擇自於以下 烷基胺基、CF3、CN、No Νί 土、_素、低級燒氧基、低級 、Ns、石黃醯其 C2 - C3烯基、c2—C3炔基· 、·土醯基、〇：丨-(：3烧基、 β為連結基團； c同第1具體例中之定義。 於一具體例，本發明夕 之化合物，或其幾何異構物、T^(xv)^^ 外消旋體、藥學上 象：構物、非鏡像異構物、 Ζλ""2?
其中 之鹽、别驅藥及其溶劑合物： (XV)
Zl、ζ2及23獨立地擇自於 NR、Ν、η+。 释自於以下所構成之族群CR21 8 或s，其中R8為氫、醯基、脂肪旅 M ^ . n ,g ^ L 月曰肪族或經取代的; ，1獨立地擇自於以下所構成之族群：氫、經基、） 1150-9131-PF；Kai 53 200829575 基、幽素、經取代或未經取代之烷氧基、經取代或未經取 代之烧基胺基、經取代或未經取代之二烷基胺基、Cp3、CN、 N〇2、N3、磺醯基、醯基、脂肪族、及經取代的脂肪族；
Xl一X3獨立地為C、N或CR21; Y6。為皿8、 族； Μ獨立地擇自於：氫、羥基、胺基、鹵素、cF3、CN、n3、 N〇2、碩醯基、醯基、經取代或未經取代之烷基、經取代或 未經取代之烯基、經取代或未經取代之炔基、芳基烷基、 芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基、雜芳基 炔基、雜環基烷基、雜環基烯基、雜環基炔基、芳基、雜 芳基、雜環基、環烷基、環烯基、烷基芳基烷基、烷基芳 基烯基、烷基芳基炔基、烯基芳基烷基、稀基芳基烯基、 稀基芳基炔基、快基芳基烧基、快基芳基稀基、快基芳基 块基、烧基雜芳基貌基、烧基雜芳基稀基、烧基雜芳基炔 基、烯基雜芳基烧基、婦基雜芳基烯基、埽基雜芳基块基、 快基雜芳基烧基、炔基雜芳基稀基、炔基雜芳基快基、烷 基雜環基烧基、烧基雜環基稀基、烧基雜環基炔基、婦基 雜環基烧基、稀基雜環基烯基、烯基雜環基快基、快基雜 環基烧基、快基雜環基烯基，或炔基雜環基块基，其中^ 個以上亞甲基可被以下所中斷或終結：〇、s、s(〇)、s⑴、 N(R8)、j⑻、經取代或未經取狀芳基、經取代或未經取 代之雜芳基、經取代或未經取代之雜環；其中R8氫、醯基、 脂肪族或經取代的脂肪族； 1150-9131-PF;Kai 54 200829575 B為連結基團； C同第1具體例中之定義。 於一具體例，本發明 < 多功能化合物為下（χν 化合物’或其幾何異構物、 鏡像異構物、非鏡傻里播札 外消旋體、藥學上可接為夕疏义—兄像異構物、 —二1接m、前驅藥及其察劑合物：
X8 /X、 ^x5 -B-
•C 7 (XVI) 其中 Zi、Z2及7。他^ , 及Z3獨立地擇自於以下所構成之族君 CR21、NRs、N、〇 或 # ，、中Rs為虱、醯基、脂肪族或經昂 代的脂肪族；R2l獨立地擇 ^ 评目於以下所構成之族群··氫、赛 基、胺基、鹵素、锦跑乂方斗、山 未經取代之烷I雇1 r 1 rp _ 、丄取代或未經取代之二蜣基藤基、 CFa、CN ' Nth、N3、磺醯基、醯 ^基、月曰肪無、及經取代的脂 肪族； 族； X〗-Xs獨立地為 Y?〇 為 NRs、〇、s C、“CR21; 、SO、S〇2、脂肪族、及經取代的脂肪 B為連結基團； C同第1具體例中之定義。 一 ；^體例，本發明之多功能化合物為下式（XVII)表 丁之化口 & ’或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異構 物外/肖叙體、藥學上可接受之鹽、前驅藥及其溶劑合物： 1150-9131-PF;Kai 55 (XVII) 200829575
其中 Cy8D及以81各自獨立擇自於··芳基、 芳基、經取代的雜芳基、雜環、經 經取代的環烷基； 、經取代的芳基、雜 雜環、經取代的雜環、環垸基及 COalkyl或經取代的烷基； 為 NR8、〇、S、so、S〇2、 ^為氫、脂肪族、經取代的脂肪族或醯基，· B為連結基團； C同第1具體例中之定義。 本發明尚提供用於預防或治療涉及細胞異常增殖、分 於一具體例，本發明尚提 供使用一種以上本發明之化合物於製造藥劑以終止或減少 涉及細胞異常增殖、分化或生存之疾病或狀態。於較佳具 體例中，該疾病為癌症。於一具體例，本發明係關於一種 治療需要治療之個體中的癌症的方法，包含對於該個體投 予一治療上有效量的本發明之化合物。 用語「癌症」係指任何由於惡性腫瘤細胞增生造成的 癌症，該專細胞例如腫瘤（tUm〇r )、腫瘍（ne〇P 1 asms )，癌 (carcinomas)，肉瘤（sarcomas)、白血病（leukemias)，淋 巴瘤（lymphomas)等。例如癌症，包括但不限於：間皮瘤、 白血病和淋巴瘤’例如，皮膚τ—細胞淋巴瘤（CTCL)、非皮 膚性外周血T-細胞淋巴瘤、與人類τ-細胞嗜淋巴性病毒 1150-9131-PF;Kai 56 200829575 (HTLV)相關的淋巴瘤’例如成人T-細胞白血病/淋巴瘤 (ATLL)、B-細胞淋巴瘤、急性非淋巴細胞白血病、慢性淋 巴細胞性白血病、慢性髓細胞性白血病、急性髓細胞性白 血病，淋巴瘤、多發性骨髓瘤、非霍奇金淋巴瘤 (non-Hpdgkin 1 y观 h· 淋巴性白血病（CLL)、霍奇金淋巴瘤、伯基特淋巴瘤 (Burkitt lymphoma)、成人T細胞白血病淋巴瘤、急性髓 系白血病（AML)、慢性粒細胞性白血病（CML)，或肝細胞癌。 進一步的例子，包括：骨髓發育不良症狀（myelodisplastic syndrome)、童年固體腫瘤，例如，腦瘤、神經母細胞瘤、 視網膜母細胞瘤、Wilms氏腫瘤、骨腫瘤及軟組織肉瘤， 成人的普通固體腫瘤，例如頭部及頸部癌症（例如口腔癌、 喉癌、表咽癌和食^道癌）、消化泌尿癌症（例如前列腺癌、 膀胱癌、腎癌、子宮癌、卵巢癌、睪丸癌）、肺癌（例如小 細胞癌及非小細胞癌）、乳癌、胰臟癌、黑色素癌及其他皮 膚癌、胃癌、腦腫瘤，與Gor 1 i η氏症狀相關的腫瘤（例如 髓母細胞瘤、腦膜瘤等），及肝癌。其他可藉由主題化合物 治療的癌症形式例，包括但不限於：骨骼肌或平滑肌癌、胃 癌、小腸癌、直腸癌（rectum cancer)、唾液腺癌、子宮内 膜癌、腎上腺癌、肛門癌、直腸癌（rectal cancer)、副甲 狀腺癌，及腦垂體癌。 其他此處所述化合物可以預防、治療及研究的額外的 癌症，例如：結腸癌、家族性腺瘤息肉癌，及遺傳性非息 肉結腸癌症’或黑色素癌。再者，癌症包括但不限於：唇癌、 1150-9131-PF;Kai 57 200829575 喉癌、下咽癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、甲狀腺癌（延 髓和乳頭狀甲狀腺癌、腎癌、腎實質癌、子宮頸癌、子宮 體癌、子宮内膜癌、絨毛膜癌、睾丸癌、泌尿癌（urinary carcinoma)、黑色素瘤、腦腫瘤，例如膠質母細胞瘤、星 形細胞痕(asirocxto,贴 外胚腫瘤、膽癌、支氣管癌、多發性骨髓瘤、基底細胞癌 (basalioma)、 畸胎瘤、視網膜母細胞瘤 (retinoblastoma)、脈絡膜黑色素瘤（ch〇r〇idea melanoma)、精母細胞瘤（seminoma)、橫紋肌肉瘤 (Rhabdomyosarcoma)、顧咽管瘤（crani〇pharyngeoma)、骨 肉瘤、軟骨肉瘤、平滑肌肉瘤（my0sarcoma)、脂肪肉瘤、 纖維肉瘤、尤文肉瘤（Ewing sarcoma)，及漿細胞瘤 ) 〇於本發明之一態樣，本發明提供使用一 或多種本發明之化合物於製造治療癌症之藥劑。 於一具體例，本發明包括使用一種以上本發明之化合 物於製造藥劑以預防進一步的細胞異常增殖、分化或生 存。例如本發明之化合物對於預防腫瘤大小變大或達到轉 移狀態為有用的。該主題化合物可以被投予以終止癌症的 進展或者發展，或誘發腫瘤細胞凋亡或者抑制腫瘤血管3 生。此外，本發明包括使用該主題化合物於預防癌症再發 本發明尚包括治療或預防細胞增殖性病症，例如增々 (hyperplasias)、骨性（Dysplasia)及癌前病變。骨性病卷 為能由病理學家從切片辨識之癌前病變最早期的形式。言 主題化合物可以被投予以用來預防該增生、骨性及癌前病 58 1150-9131-PF；Kai 200829575 變以免擴張或變成癌化。癌前病變之例，可能發生於皮膚、 食道癌組織中，乳房及子宮頸内上皮組織。 、、且S療法」，包括將該主題化合物與其他生物學上 活性成分（例如但不限於一第2且不同的抗腫瘤藥劑），及 一非藥物療法（例如 > m a ^ ^ J ^ ^ 予。例如，本發明之化合物可以與其他製藥上活性的化合 物組合投予，較佳為能增強本發明功效的化合物。本發明 之化合物可以與其他藥物療法同日夺（製力單一製備物或分 離^物）或依序地好一般而言，組合療法展望在療法 的單一循環或療程，投予2種以上的藥物。 「組合療法」，包括將主題化合物與其他生物學上的 活性成分(包括但不限於一第2及不同的抗瘤藥劑），及非. 藥物療法（例如但不限於手術或放射線治療）。例如本發明 之化合物可與其他製藥上活性化合物組合使用，較佳化合 物為可以增進本發明化合物之效果者。本發明化合物可以 ( 與其他藥物療法同時（以一單一製備物或分離的製備物）或 依序投予。一般而言，組合療法展望在單一治療循環或過 程投予2種以上的藥物。
於本發明之一態樣，該主題化合物可以與一或多種分 離的藥劑組合投予，該等藥劑調節涉及各種疾病狀態的蛋 白質激酶。此等激酶之例，可包括但不限於：絲胺酸/蘇胺 酸專一性激酶、受體酪胺酸專一性激酶，及非受體酪胺酸 專一性激酶。絲胺酸/蘇胺酸激酶，包括：絲裂原（mit〇gen) 活化蛋白質激酶（MAPK)、減數分裂專一性激酶（MEK)、RAF 1150-9131-PF;Kai 59 200829575 及aurora激酶。受體激酶家族之例，包括表皮生長因子 受體（EGFR)(例 HER2/neu、HER3、HER4、ErbB、ErbB2、ErbB3、 ErbB4、Xmrk、DER、Let23);纖維母細胞生長因子（FGF) 受體（例 FGF-R1 、 GFF-R2/BEK/CEK3 、 FGF-R3/CEK2 、 MF-Μ/ΠΕ、 (HGFR)(勿如，MET、RON、SEA、SEX);胰島素受體（例 IGF I-R); Eph(例 CEK5、CEK8、EBK、ECK、EEK、EHK-卜 EHK-2、ELK、 EPH、ERK、HEK、MDK2、MDK5、SEK); Axl (例 Mer/Nyk、Rse); ’ ： RET;及血小板衍生的生長因子受體（PDGFR)(例PDGFa -R、 PDG/5-R、CSF1-R/FMS、SCF-R/OKIT、VEGF-R/FLT、 NEK/FLK1、FLT3/FLK2/STK-1)。非受體酪胺酸激酶家族， 包括但不限於 BCR-ABL(例 p43abl、ARG);BTK(例 ITK/EMT、 TEC ) ΓCSK^ER、CDK jSYK。 於本發明另一態樣，該主題化合物可以與一或多分離 的藥劑組合投予，該等藥劑調節非激酶之生物學標靶或程 序。此等標靶包括組蛋白去乙醯基酶（HDAC)、DNA甲基轉 # v :， 移酶（DNMT)、熱休克蛋白質（例HSP90)，及蛋白酶體 (proteosome) 〇 於一較佳具體例，主題化合物可以與抗腫瘤藥劑組合 (例如：小分子、單株抗體、反義RNA及融合蛋白質），該等 抗腫瘤藥劑抑制一或多個生物學標把，例如有Zo 1 i nza、 Tarceva、Iressa、Tykerb、Gleevec、Sutent、Sprycel、 Nexavar 、 Sorafinib 、 CNF2024 、 RG108 、 BMS387032 、 Affinitak 、 Avastin 、 Herceptin 、 Erbitux 、 AG24322 、 1150-9131-PF/Kai 60 200829575 PD325901 、 ZD6474 、 PD184322 、 Obatodax 、 ABT737 及
AEE788。此種組合可能增強治療效力至大過將任一藥劑單 獨使用時之效力，且能預防或延緩產生突變耐性變異體Q 於某些較佳具體例，本發明之化合物係與一化療藥劑 組合投 ^ 0- 4b ^ ^ ^ r ^ φ Μ ^ 理。該等藥劑在疾病的不同階段被投予，以使腫瘤萎縮、 摧毀在外科手術後殘餘之癌症細胞、誘發緩解 (remission)、維持緩解，及/或減輕與該癌症或其治療相 關的症狀。該等藥劑之例，包括但不限於：烷基化劑，例如 务子氣衍生物（Mechlorethamine 、 Cylophosphamide 、 Chlorambucil 、 melphalan 、 ifosfamide)、次乙亞胺 (thiotepa 、 hexamethylmelanine)、烧基績酸酉旨 .................................................. -...... ....................................................................................................... .................... … (Busulfan)、肼及三嗓（Altretamine 、 Procarbazine 、 Dacarbazine 及 Temozolomide)、亞硝’基脲（Carmustine、 Lomustine 及 Streptozocin)、異環填醢胺（Ifosfamide) I 及金屬鹽（Carboplatin、Cisplatin 及 Oxal iplatin);植物 驗，例如 Podophy 1 lotoxins(Etoposide 及 Tenisopide)、 紫杉烧（Taxane)(Paclitaxel 及 Docetaxel)、長春生物驗 (Vinca alkaloid)(Vincristine、Vinblastine、Vindesine 及 Vinorelbine)及 Camptothecan 類似物（Irinotecan 及 Topotecan); 抗腫瘤抗生素，例如色黴素 (Chromomycin)(Dactinomycin 及 Plicamycin)、四環黴素 (Anthracycline)(Doxorubicin 、 Daunorub i c i η 、 Epirubicin 、 Mi toxantrone 、 Valrubicin and 1150-9131-PF;Kai 61 200829575
Idarubicin)，及其他抗生素，例如絲裂黴素（Mi tomycin)、 放線菌素（Act inomycin)及博來黴素（Bleomycin);抗代謝 物，例如葉酸拮抗劑（Methotrexate 、 Pemetrexed 、 Raltitrexed、amino pterin)、嘧啶拮抗劑（5-氟 uraci 1、 F1axur i di ^ Gytarab4 ne >— Qapec i Sabine
Gemcitabine)、嘌呤拮抗劑（6-Mercaptopurine 及 6-thioguanine)及腺苷去胺酶抑制劑（Cladribine 、 Fludarabine 、 Mercaptopurine 、 Clofarabine 、 thioguanine、Nelarabine 及 Pentostatin);拓樸異構酶 抑制劑’例如拓樸異構酶 I抑制劑（I ronotecan、 topotecan)及拓樸異構酶 II抑制劑（Amsacrine、 etoposide、etoposide phosphate、teniposide);單株抗 體（Alemtuzumab 、 Gemtuzumab ozogamicin、 Rituximab、 Trastuzumab 、 Ibritumomab Tioxetan 、 Cetuximab 、 Panitumumab、Tositumomab、Bevacizumab);及各種抗腫瘤 劑，例如核苷酸還原酶抑制劑（羥基脲）；皮質類固醇抑制劑 (Mitotane);酵素（天冬醯胺酸酶及Pegaspargase);抗 微小管藥劑（Estramustine);及類視色素 (Retinoid)(Bexarotene 、 Isotretinoin 、 Tretinoin (ATRA)。 於某些較佳具體例，本發明之化合物與一化學保護性 藥劑組合投予。化學保護性藥劑之作用為保護身體或使化 療的副作用極小化。此等藥劑之例，包括但不限於 amfostine 、 mesna ， dexrazoxane 〇 1150-9131-PF;Kai 62 200829575 於本發明之一態樣，該主題化合物係與放射療法組合 投予。放射線通常係以内部傳送（植入放線性材料在癌症部 位附近）或從外部由能放射光子（χ光或gamma射線）或粒子 幸S射之機器傳送。當該組合療法尚包含放射療法，該放射 療^‘寻在秦杳 達成放射治療的任意適當時間實施。例如，於適當案例中， 即使當放射處理從投予治療藥劑中移走數天或甚至數星 期，仍保持有益的效果。 應瞭解本發明之化合物可以與一免疫治療藥劑組合使 用。免疫治療之一形式，為產生宿主起源的活化的全身性 腫瘤專一性免疫反應’係藉由在遠離腫瘤之處投予一疫苗 組合物而產生。已有各種疫苗被提出，包括隔離的腫瘤-抗原疫田’及抗特形（anti-idi〇type)疫苗。其他方法，係 使用來自欲治療之個體的腫瘤細胞或該等細胞的衍生物細 胞（*lSChirrmaChereia/.( 1 995)J.CancerRes.Clin· Oncol· 121 :487)。於美國專利號碼 5, 484, 596，Hanna Jr. 事乂聲灰一禮居於治療可切除癌症以預防再發或轉移之方 法，包含以外科手術移除該腫瘤、將該細胞以膠原蛋白酶 分散’照射該細胞’並且對於該病患以至少3種約1 細 胞之連續劑量接種疫苗。 應瞭解本發明之化合物與一或多種附屬之治療藥劑同 時使用，可能會有好處。用於附屬療法之適當藥劑，包括： 一 5HT!協同劑，例如 一 triptan(例 sumatriptan 或 naratriptan); —腺苷A1協同劑；一 Ep配體；一 NMDA調節 1150-9131-PF;Kai 63 200829575 背J例如一甘胺酸拮抗劑；一鈉通道阻斷劑（例 lamotrigine);—物質p拮抗劑（例如，一 ΝΚι拮抗劑），· 大麻，對乙醯胺基酚（acetaminophen)或非那烯丁 (phenacetin);5-脂氧化酶（lip0Xygenase)抑制劑；白三烯 合物；三環抗抑鬱藥（例amitryptiUine);神經安定抗癲 癇藥物；單胺類攝取抑制劑（例venlafaxine);基質金屬 蛋白酶抑制劑；一氧化氮合成酶（N〇s)抑制劑，例如iN〇s或 nNOS抑制劑；腫瘤壞死因子α釋出、作用之抑制劑；抗體 療法，例如單株抗體療法；抗病毒性藥劑，例如核苷抑制 劑（例lamivudine)或免疫系統調節劑（例，干擾素）；類鴉
片麻醉劑;局部麻醉劑；刺激劑，包括咖啡因；H2-拮抗劑 (例ranitidine);質子幫浦抑制劑（例〇mepraz〇M 劑（例，氫氧化鋁或鎂；抗脹氣藥（例simethic〇ne);充血 劑（例，福林（苯基ephrine)、苯丙醇胺、偽麻黃鹼 (pseudoephedrine)、羥甲唑啉（oxymetaz〇Hne)、腎上腺 素、奈甲吻°定ϋ坐淋（naphazoline)、赛洛。坐 (xylometazoline)、環已丙曱胺（丙基 hexedrine)，或 levo - desoxyephedrine);止咳劑（例，可待因（c〇deine)、 hydrocodone 、 Carmiphen 、 Carbetapentane 或 dextramethorphan);利尿劑；或瀉或非瀉抗組織胺。 基質金屬蛋白(丽P)為一鋅依存性中性内切肽解酶 之家族’共同地能分解基本上的所有基質成分。於藥學發 展有多於20種MMP調節藥劑，幾乎一半為癌症指示。多倫 1150-9131-PF;Kai 64 200829575 多大學的研究人員已報告，於3T3細胞中，HDAC調節MMP 之表現及活性。尤其，藉由trichostatin A(TSA)，已知 能預防腫瘤新生及轉移，能抑制HDAC，減少明膠酶 (gelatinase) A(MMP2; Type IV 膠原蛋白酶），一種基質 金屬委白璐各 NA ^ ^^ 基質金屬蛋白酶本身暗示著腫瘤新生及轉移（Ailenberg M., Silverman M., Biochem Biophys Res Commun. 2002, 298:1 1 0-1 1 5)。另一討論HDAC及MMP關連性的最近文章， 可 l Young ])· k.，et al. , Arthri.ti.s Pesearch STherapy, 2005，7: 503。再者，HD AC與MMPs抑制劑之共通點在於 其鋅結合功能。因此，於本發明之一態樣，本發明之化合 物可使用於作為MMP抑制劑，且可用於治療與MMp失調相 ... .·............................................................................................ -- ..............-..............—.................... ....... * ....... ···. .··· 關或關連的病症。過度表現及活化MMP，已知會引起組織 破壞，且與一些特定的疾病有關連，包括類風濕性關節炎、 牙周病、癌症，及動脈硬化。 該等化合物亦能用於治療涉及、關於或關連於組蛋白 去乙醯基酶（HDAC)失調之病症。已有一些病症暗示或至少 部分由HDAC活性所媒介，其中，HDAC活性已知扮演觸發 病♦之角色’或者其症狀已知或已顯示能藉由於H])ac抑制 劑而減輕。可期待以本發明之化合物治療之類型之病症， 包括以下但不限於：抗增殖性病症（例如癌症）；神經退化 性疾病’包括：予廷頓氏病（Hunt ing ton，s Disease)、聚麵 醯胺病（Polyglut胺disease)、帕金森症、阿爾茨海默氏 症、癲癇、紋狀體黑質退化症（Striat〇nigral 1150-9131-PF;Kai 65 200829575 degenerat 1 on)、漸進性麻痺、扭轉性肌張力障礙、痙攣性 斜頸及障礙、家族性震顫、抽動穢語綜合症（GiUes de la Tourette syndrome)、瀰漫路易體病（Diffuse Uwy b〇dy disease)、漸進性核上神經麻痒（pr〇gressive S U#ranUG1 Θ&Γ ^ ^ ^ ^ >„,s.,dis.eas，e) > ® ^ 血、原發性側索硬化症、脊髓性肌萎縮症、肌萎縮側索硬 化症、肥大性間質性神經病、視網膜色素變性、遺傳性視 神經萎縮症、遺傳性痙f性下半身麻痒.（Hereditary spastic paraplegia)、漸進性運動失調，及 症狀;代謝性疾病’包括:第2型糖尿病;眼之退化性疾病， 包括：青光眼、老年性黃斑變性、紅眼性青光眼 GlaUC〇ma) ;發 Μ 性關節炎（RA)、關節炎、幼车7 坊年型忮性關節炎、移植物抗宿 主病、銀屑病、哮喘、脊柱關節病變 (Sp〇ndylGarthrQpathy)、克 mar〇hn，s Disease)、 發炎性腸病潰瘍性結腸炎、酒精性肝炎、糖M，sjc)eg㈣ 氏症候群、多發性硬化斥 更化症、僵直性脊柱炎（Ankylosing spondylitis)、膜性腎病、梏 推間盤疼痛、全身性紅斑狼瘡· 涉及血管新生的疾病，包括· ’ 匕栝·癌症、銀屑病、類風濕關節炎； 心理病症’包括雙極疾忘 扯、i \ 疾病精神分裂症、躁狂症、抑鬱症 和癡呆；心血管疾病，包衽 括〜贓农竭、狹窄和動脈硬化； 纖維化疾病包括治肝纖維化、 展既纖維化和血管纖維化 (ang10fibr〇ma);傳染病包 枯真i感染，例如念珠菌 (Candida Albicans)、細菌 国丨王為木、病毒性感染，例如皰 1150—9131-PF;Kai 66 200829575 疹（Herpes Simplex)、原蟲感染，例如瘧疾、利甚曼感染 (Leishmania infection)、布氏錐蟲感染（Trypan〇s〇ma brucei infection)、弓漿蟲（T〇x〇plasffl0sis)及 coccidlosis ’以及造血障礙性病症，包括地中海貧血 (t h a 1 a s s e in i a)、負血和錄狀^細胞性貧血〇 於一具體例，本發明之化合物可用於誘發或抑制細胞 调亡，一種在正長發育及恆定上關鍵的生理細胞死亡程 序。細胞凋亡的路徑改變會導致各種人類疾病的致病。本 發明之化合物，作為細胞〉周亡之調節子，對於治療由於細 胞祠亡異常導致的人類疾病為㈣的，該等疾病包括癌症 (尤其，但不限於：濾泡性淋巴瘤、帶有p53基因突變之腫 瘤、激素依賴性乳房腫瘤、前列線及卵巢，以及癌前病變， 例如家族性腺瘤息肉病）、病毒性感染（包括但不限於皰疹 病毋、痘病毒、依波（EB)病毒、辛德畢斯病毒和腺病毒）、 自體免疫疾病（包括但不限於系統性紅斑狼瘡（s y s t e m 土 c lupus)、紅斑狼瘡（erythemat〇sus)、免疫調節性腎炎、類 風濕性關節炎、銀屬病、發炎性腸病、自身免疫性糖尿病）、 神經退化性病症（包括但不限於阿爾茨海默病、與愛滋病相 關的癡呆症、帕金森氏症、肌萎縮侧索硬化症、色素性視 網膜炎、脊髓肌肉萎縮症和小腦退化）、aids、骨髓增生異 吊症狀，再生障礙性貧血，炔血性損傷合併心肌梗塞、中 風、再灌注損傷、心律失常、動脈硬化、毒素誘導或酒精 引起的肝病、血液系統疾病（包括但不限於慢性貧血和再生 I1 旱礙）·生貧血）、骨赂肌系統的退化疾病（包括但不限於骨質 1150-9131-PF；Kai 67 200829575 疏鬆症和關節炎）、阿司匹林敏感鼻竇炎、囊性纖維化、多 發性硬化症、腎病及癌症痛。 於本發明之一悲樣’提供使用本發明之化合物以治療 及/或預防免疫反應或免疫調節之反應及疾病，例如預防或 洽療移殖冬备^ 代部分或全部的組織功能，例如心、腎、肝、骨髓、皮膚、 角膜、血官、肺、胰腺、小腸、肢體、肌肉、神經組織、 十二指腸、小腸、胰腺—胰島細胞，包括異種移植等後產生 的排斥；治療或預防移植物對抗寄主疾病 (graft-Versus-h〇St disease)、自體免疫疾病，例如類風 濕性關節炎，系統性紅斑狼瘡，甲狀腺炎、橋本氏甲狀腺 炎、一多發性硬化症、重症肌無力、第I型糖尿病膜炎、幼 年發病或最近發病糖尿病、膜炎（uveitis)，格雷夫斯病 (Graves disease) ’ 銀屑病（pSoriasis)，皮炎 dermatitis)，克隆氏病（cr〇hn’s disease)、潰瘍性結腸 ^ 血g k、自身抗體媒介的疾病、再生障礙性貧血、依 文氏症狀（Evan’s syndrome)，自身免疫性溶血性貧血等· 並進-步治療會導致異常免疫反應及/或活化之傳染病，例 如外傷或病原誘導免疫失調，包括··例如B型及c型肝炎感 染、HIV、金黃色葡萄球菌感染、病毒性腦炎、敗血症^寄 生蟲病，其中損傷係由於發炎反應所引起（例如痲瘋）；以及 預防或治療循環系統疾病，例如動脈硬化、動脈粥樣硬化、 血官火，多發性結節及心肌炎。此外，本發明可用於預防/ 抑制與基因治療處理相闕連的免疫反應，例如將外來基因 1150-9131-PF;Kai 68 200829575 引入體細胞並表現此編碼的產物。因此，於一具體例，本 發明係關於一種治療需要治療的個體的免疫反應疾病或病 症或免疫凋節性反應或病症的方法，包含對於該個體投予 一治療有效量之本發明之化合物。 ^ 合I诒秦各樣 神經退化性疾病，該神經退化性疾病之非窮舉的 (non-exhaustive)列表，包括：1•病症，沒有其他明顯的 神經仍號下，特徵為漸進性癡呆，例如，阿爾茨海默病丨阿 爾茨海默型的老年性癡呆；及皮克氏症（pick, s disease)(腦葉萎縮）；i〗·結合其他明顯神經異常的漸進 性癡呆症狀，例如A)主要出現在成人的症狀（例如亨廷頓 氏病、多1 .............. -...—.一-— —. ^ 表現、漸進性上眼神經核麻痒（Steel-Richards〇n: szewski)、瀰漫性路易體病，及皮質基底節 (Corticodentatonigral)退化）；且B)主要出現在兒童或年 輕人的症狀（例如Hallervorden-Spatz病及漸進性家族 肌痙攣性癲癇）；III·逐漸發展異常姿勢和運動之症狀，例 如震顫麻痒（帕金森氏病）、紋狀體黑質退化症 (Striatonigral degeneration)、漸進性麻痺、扭轉性肌 張力障礙（扭轉痙攣；肌張力不全肌肉萎縮扭曲症 (Dystonia musculorum deformans))、痙攣性斜頸及其他 障礙家族性震顫，及抽動穢語綜合症（GiUes de la Tourette syndrome); IV·漸進性運動失調之症狀，例如， 小腦退化（例如小腦皮質退化及橄欖腦橋小腦萎縮（〇pCA))，· 1150-9131-PF;Kai 69 200829575 且脊髓小腦退化（Friedreich氏運動失調及相關病症）· v 中央自律神經系統衰退症狀（Shy-Drager症狀）；合 併肌肉弱化及無知覺變化的荒廢的症狀（運動神經元疾 病，例如肌萎縮性側索硬化症、脊髓性肌萎縮（例如小兒脊 髓性肌肉萎縮症(專e Μ (Wohl fart-Kugelberg-Welander)和其他形式的家族性脊 髓性肌萎縮）、原發性側索硬化症、遺傳性痙攣性下半身麻 痺；VII·合併肌肉弱化及知覺變化的荒廢的症狀（漸進神 經肌肉萎縮；慢性家族性多發性神經病變），例如腓肌萎縮 症（Charcot-Marie-Tooth)，肥厚性間質性神經病變 (Dejerine-Sottas),以及各種形式的慢性漸進性神經病變； νΠΙ漸進性視力喪失之症狀，例如視網膜色素性退化 (retinitis pigmentosa)，以及遺傳性視神經萎縮(Leber 氏病）。再者，本發明之化合物能用在核染質（chr⑽ 重新模式化。
水合物、三水合物等。本發明尚
。用g吾「水合物 水合物、三:
本發明之化合物， ’及其衍生物、 片段、類似物、同源 1150-9131-PF;Kai 70 200829575 物、藥學上可接受之鹽或水合物，可以與一藥學上可接受 之載體或賦形劑，一同包含在適於投予之藥學組合物。此 種組合物一般包含：一治療有效量之以上任意化合物，以及 某干上可接受之載體。較佳地，治療癌症之有效量，為 —I棵性引發適念氣 會對於病患造成毒性之量。 本發明之化合物可以藉由任意適當方式投予，包括但 不限於··非經口、經靜脈、肌内、皮下、植入、口服、舌 下、頰、鼻、肺、穿皮、局部、陰道、直腸，透過黏膜投 予等局部投予亦可涉及使用穿皮投予，例如穿皮貼片或 離子電滲透裝置（iontophoresis device)。製藥製備物， 包括含有本發明之化合物作為一有效成分的一固體、半固 體或液體製備物(錠劑、丸粒、片劑、膠囊、栓劑、軟膏、 藥膏、氣溶膠、粉末、液體、乳劑，、糖漿，注射劑 等），係適於以經選擇的模式投予。於—具體例，該藥學组 合物係以口服投予，因此配方為適於口服投予之形式，亦 即固體或液體製備物。適當之固體口服配方物，包括··錠 劑、膠囊、藥片、顆粒劑、丸粒，小袋(sachet)及泡騰 (ef fervescent)，粉末等。適當的液體口服配方物，包括·· 溶液、懸浮液、分散液、乳劑、油等。於本發明一具體例， 該組合物配方為一膠囊。依照此具體例，本發明之組合物 除活性化合物以外，尚包含鈍性的載體或稀釋劑，一硬明 膠膠囊。 通常用作為載體或稀釋劑的純性賦形劑，例如，膠 1150-9131-PF/Kai 71 200829575 (_)、澱粉、糖、纖維素性材料 可用於本發明之配方物。較佳的稀釋 合物’ 該組合物可以、隹一牛a — 為极結曰曰纖維素。 納），及1 朋散劍(例如交物纖維争 :)及-潤滑劑(例如，硬腊酸鎮)，以及可 素 —.....""的〜添"^' —-蛋白酶:： 舌性劑、溶解劑、增塑劑、乳化劑、穩定' 度增加劑、甜味劑、成膜劑，或其任意的組合。再者，本 發明之組合物可為控制性釋放或立即釋放配方的形式。 針對液體配方物，藥學上可接受之載體可為水性或非 水性溶液、料液、乳劑或油。非水性溶劑之例，有：丙二 醇、聚乙二醇’以及可注射的有機醋，例如油酸乙酿。水 —性載體—’ 1包括水、醇性/水性溶液、乳劑或懸浮液，包括越 水及經緩衝介質。油之例，有石油、動物、物或人成I 源的，例如花生油、大豆油、礦物油、《油丄= 魚肝油。溶液或懸浮液也可包括以下成分稀釋劑，例 如：注射用水、鹽液、固定油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或 其他合成溶劑；抗細菌劑，例如苯甲醇或對羥基苯甲酸甲酯· 抗氧化劑，例如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；螯合劑，例如，乙 二胺四乙酸（EDTA);緩衝劑，例如，乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷 酸酯，及用於調整滲透壓的藥劑，例如氣化鈉或葡萄糖。 pH可以用酸或鹼調整，例如鹽酸或氫氧化鈉。 此外，該組合物可尚包含黏結劑（例如，刺槐豆膠 (acacia)、玉米澱粉、明膠、卡波姆（Carbomer)、乙基纖 維素、瓜爾取故基丙基纖維素、經基丙基曱基纖維素、 1150-9131-PF;Kai 72 200829575 聚乙烯基吡咯烷酮）、崩散劑（例如玉米澱粉、馬鈴薯澱粉、 澡酸、二氧化矽、交聯羥甲基纖維素鈉、交聯聚乙烯吡咯 烷酮、瓜爾豆膠，澱粉鈉乙醇酸、Primogel)、各種pH及 離子強度的緩衝劑（例如tris-HCI、乙酸鹽、磷酸鹽），添 如 Tween 20、Tween 80、Pluronic F68、膽酸鹽）、蛋白 酶抑制劑、表面活性劑（例如月桂基硫酸鈉）、通透增強劑、 溶解化劑（例如，甘油、聚乙二醇、環糊精）、流動助劑（例 如，膠體二氧化矽）、抗氧化劑（例如，抗壞血酸、焦亞硫 酸鈉、丁基化羥基苯甲醚）、安定化劑（例如羥基丙基纖維 素、經基丙基甲基纖維素）、增稠劑（例如，卡波姆 劑（例如，蔬糖、阿司巴甜（aspartame)T^ (例如，薄荷、水揚酸甲酯，或柳橙風味）、保存劑（例如， 硫柳汞（Thimerosal)、苯甲醇、對羥基苯甲酸酯 (parabens))、潤滑劑（例如，硬脂酸、硬脂酸鎂、聚乙二 醇、月桂基硫酸鈉）、流動助劑（例如膠體二氧化矽）、塑化 劑（例如，鄰苯二甲酸二乙酯、檸檬酸三乙酯）、乳劑（例如 卡波姆（Carb〇raer)、羥基丙基纖維素、月桂基硫酸鈉）、聚 合物覆膜（例如，洛沙姆（pol〇xamer)或洛沙明 (poloxamine))、覆膜及成膜劑（例如乙基纖維素、丙烯酸 酯、聚甲基丙烯酸酯）及/或佐劑。 於一具體例，該活性化合物，係與將保護此化合物免 於迅速從身體消失的載體一起製備，例如控制性釋放的配 1150-9131-PF;Kai 73 200829575 方’包括植入物以及微膠囊化的遞送系統。可使用生物可 降解、生體可相容的聚合物’例如乙烯乙酸乙稀_、聚無 水物、聚甘醇酸、膠原蛋白、聚原酯，及聚乳酸。製備此 種配方物之方法’對於熟悉此技術之人士為明顯的。此等 - ^ ^ ^ ^ q a I § Inc·購得。微脂體懸浮液（包括含有單株抗體以將目標朝向 受感染細胞之病毋抗原的微脂體）’亦可作為藥學上可接受 之載體。此等可依熟悉此項技術之人士所知的方法製備， 例如美國專利號4, 522, 81 1所敘述者。 將口服用組合物配方為易投予及均勻劑量之劑量單位 尤為有益。此處使用之劑量單位形式，係指針對欲治療之 個體之物理上.分離之單_一劑量i各單位包含既定量之活性 化合物，經計算會與必需的製藥載體一起產生所望之療 效。本發明之劑量單位形式的規格，係由該活性化合物之 獨特特性、欲達成之特定療效、. 除反/σ療個體時之活性化合物 在配方技術上的固有限制，所指定並直接依存。 該藥學組合物可以包含在一定 各杜谷杰、袋或者分配器，並 附加投予的說明書。每日授+ Η *又予可以連績地重複數日至數年 的期間。口服治療可遠蟢# 斤j運、，進仃1週至該病患終身。較佳為 投予連續5天後，評估此疡* 1此病患以決定是否需要再投予。投 予可以連續或間歇，例如i車錶仏、技如 ,R 』如連續冶療數天後，接著是休息期。 本發明之化合物可以在治瘠楚 9… 口療的弟1天以靜脈内投予，在第 天及在後的所有連續的時日以口服投予。 製備含有活性成分之筚人 柰子、、且3物為該技術領域為人所 1150-9131-PF;Kai 74 200829575 头的例如，藉由混合、造粒或打錠的處理。該活性治療 成分，通常係與藥學上可接受且與該活性成分相容的賦形 劑此合。針對口服投予，活性藥劑係與本用途用之添加物 此合，例如載體（vehicle)、安定化劑或鈍性的稀釋劑，並 ^ # ^ ，屢如丄重^ 衣錠、硬或軟明膠膠囊、水性、醇性或油性溶液等上所詳 述者。 。亥化合物投予給病患之量，小於會對於病患造成毒性 的Η。於特定具體例，該化合物對病患的投予量，小於會 使病患血漿中之化合物濃度等於或超過該化合物毒性水平 之ΐ。較佳地，在病患血漿中之該化合物濃度，維持在約 10 ΠΜ。於一具體例，在病患血漿中之該化合物濃度，維持 在約25 ηΜ。於一具體例，在病患血漿中之該化合物濃度， 維持在約50 ηΜ。於一具體例，在病患血漿中之該化合物 濃度，維持在約1GG ηΜ。於-具體例，在病患血漿中之該 化合物濃度，維持在約500 ηΜ。於一具體例，在病患血漿 中之該化合物濃度，維持在約1〇〇〇ηΜ。於一具體例，在 病患血漿中之該化合物濃度，維持在約25〇〇 ηΜ。於一具 體例’在病患血漿中之該化合物濃度，維持在約5〇〇〇ηΜ。 在本發明實施時，該化合物對病患投予之最適量，取決於 所使用之特定化合物，以及欲治療的癌症類型。 定義 以下列出用於敘述本發明之各種用語的定義。此等用 語之定義，除非在個別或一較大群之一部分特殊情況中指 1150~9131-PF;Kai 75 200829575 明以外，定義適用於本份說明書及申請專利範圍。 「脂肪族基團」或「脂肪族」為非芳香 飽和(例如早鍵)或具有！個以上不飽和單元(例如雔鍵及/ 腊肪族基團可為直鏈、分支鏈或環狀，：括碳、 虱或W地息 代的。脂肪族基團較佳為介於約1及約“個原子了，佳^ 介於約4至約24個原子’更佳為介於約4，個原子，更 一般為介於約4至約8個原子。 用語「醯基」代表經取代以羧基之氫、燒基、部分飽 和或完全飽和環烷基、部分飽和或完全飽和雜環、芳基、 及雜芳基。例如酿基包括以下基團：例如（Μ)燒醯基土(例 如甲-^ ^—基：—丙醯基、丁醯基、戊醯基、己醯基、 (C3~ce)m^m 基、環丁基it基、環戊基魏基、環己基羰㈣）、雜環幾基 (例如吡咯啶基羰基、吡咯啶—2 —酮—5 —羰基、哌啶基羰基、 尤秦基％基、四氫呋喃基羰基等）、芳醯基（例如苯甲醯基） 及雜芳醯基（例如噻吩基—2 —羰基、噻吩基—3 —羰基、呋喃 基2羰基、呋喃基—3-羰基、-吡咯基—羰基、π —吡咯 基一 3 —羰基、苯并[b]噻吩基—2-羰基等）。此外醯基之烷基、 壤烧基、雜環、芳基及雜芳基部分，以相對應^義中所 述4 基團 ^和明為「隨意地經取代」，該醢基可為未 取代或隨意地經1個以上取代基取代（通常為1至3個取代 基），取代基獨立地擇自於以下在「經取代」中之定義，或 '者酿基之烧基、環烷基、雜環、芳基及雜芳基部分，可以 1150-9131-PF;Kai 76 200829575 於上列較佳及最佳取代基中列舉的基團。 為求簡化，本說明書定義及指出之化學結構，在對於 熟悉此項技術領域之人士明白的適當結構情形，可為單價 化學結構（例如烷基、芳基等），或者多價。例如Γ烧基」 結構耳-指暴暴基^亂 「燒 基」為一雙價連結構造，其中，熟悉此項技藝之人士將瞭 解此烧基為一雙價基團（例如—CH2-CH2-），等同於用語「亞 烧基」。同樣地，有些情形雙價結構是需要的並敘述為 、「烧基胺基」、「芳氧基」、「烧硫基」、 、「烧基」、「浠基」 厂 氧基 厂 基」、「雜芳基」、「雜環」 〜_」 π巫」、. 基. 瞭解用語 硫基」、「芳基」 「烯基」、「炔基 應的雙價構造。 、「脂肪族」或「環烷基」，熟悉此項技藝之人士 菊扭「烷氧基」、「烷基胺基」、「芳氧基」、「 「雜芳基」、「雜環」、「烷基」 、「脂肪族」或「壞烧基」係指其 用語「烷基」代表具有i至約20個碳原子，或更佳為 1至約12個碳原子之直鏈或分支鏈基團。更佳之烷基基 團，為具有1至約1〇個碳原子之「低級烷基」基團。最佳 者為具有1至約8個碳原子之低級烷基基團。此種基團之 •J匕括·甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、 第二丁基、第三丁基、戊基、異戊基、己基等。 用w 稀基」’代表具有至少1個碳碳雙鍵之2至約 〇個妷原子，或更佳為2至約12個碳原子之直鏈或分支 鏈基團。更佳之烯基基團為具有2至約10個碳原子，較佳 1150-9131-PF/Kai 200829575 為約2至約8個碳原子之「低 丁 < 低、，及席基」基團。烯基基團之 例，包括：乙稀基、烯丙基、丙烯基、丁稀基及4-甲基丁 烯基。用έ吾「烯基及「柄 、 」及低、、及烯基」，代表具有「順式」 及「反式」方向，或者「Ε」及「ζ」方向的基團。 —_胃"m'’^碳參翁.之—2上約、 2 0個石反原子’或更佳為2至約12個石山盾1 ~ △王J U個妷原子之直鏈或分支 鏈基團。更佳之炔基基團為具有2至約lG個碳原子，較佳 為約2至約8個碳房+夕「^a甘 ，、子之低級炔基」基團。炔基基團之 例，包括:块丙基、卜丙块基、2_丙炔基、卜丁炔基、2_ 丁炔基，以及1-戊炔基。 用語「環録」’代表具有3至約12個碳原子之飽和 —的碳環基團—:1語—「環烧基」…，—代表具有3至約12個碳原 子之飽和的碳環基團。更佳的環烷^ ^ ^ 3 ^ ^ - 8個碳原子之「低級擇检其 -a· 低 '、及％说基」基團。此種基團之例包括環 丙基、環丁基、環戊基及環己基。 用語「環稀基」，代表具有3至12個碳原子之部分不 飽和的碳環基團。具有2個雙鍵（可為或不為共輛）之部分 不飽和碳環基團之環烯基基團，可稱為「環院基二稀基」。 更佳的環稀基基團為具有4至約8個碳原子的「低級環烯 基」基團。此種基團之例包括環丁晞基、環戊晞基，及環 己烯基。 用語「烧氧基」，代表直鍵或分支鏈含氧基團，各具 有1至約20個碳原子’較佳地’ i至約12個碳原子的烷 基部分。更佳的烧氧基基團，為具有】至約1〇個，更佳為 1150-9131-PF;Kai 78 200829575 具有1至肖8個碳原子的「低級烷氧基」&團。此種基團 之例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基，&第三丁氧 基0 為烧基基團，具有1個以上烷氧 用語「烧氧基烧基」 基烧基基團。 用語「芳基」單獨或組合，意指一碳環芳香族系統， 包含了-、2或3個環’其中此等環可以突出的(pendent) 方式附著’或者稠合。用語「芳基」，代表芳香族基團， 例如苯基、萘基、四氫萘基、節滿基及聯苯基。 "用語「羰基」單獨或與其他用與組合使用，例如「烷 氧基羧基」，代表（〇〇)。 M r carbanoyl J # ^ ^ , H 如 芳基carbanoy 1燒基」，代表c(q)nh。 用語「雜環（heterocyclyl、heterochcle、 het⑽y仙、het⑽yGlQ)，代表鮮的、部分不飽和 j ’及不飽和的含雜原子的環狀基團，其亦可各稱為「雜 環」、：雜環烯基」及「雜芳基」，其中雜原子可擇自於 擇自於:氮、硫及氧。飽和的雜環基團例，包括含i至4個 =原子之飽和的3至6員雜單環基團（例如料。定基、嗦唾 咬基、六氫㈣基、六氫^秦基等）；包括i至2個氧個原 子及！至3個氮原子之飽和的3至6員雜單環基團（例如嗎 啉基等)，’包括1至2個硫原子及j至3個氮原子之飽和3 至6員雜單環基團（例如嗟_基等）。部分不飽和的雜環 1150-9131-PF;Kai 79 200829575 基團之例，包括二氫替、二氫口比喃、二氮咬喃及二氮嗟 唑。雜環基圏可包括丨個五價的氮，例如 土 |努離子及口比 咬陽離子基圈。用語「雜環」亦包含雜環基團與芳基或環 烧基基團稠合成的基團。此種稠合的二環基團，包括=并 ^夫°南、V本开11 塞吩等。 雜芳基基 至6員之 吡唑基 用語「雜芳基」，代表不飽和的雜環基團 團之例’包括不飽和的包含1至4個氮原子的 雜單環基團，例如吼咯基、吼咯啉基、咪唑基 °比啶基、嘧啶基、°比嗪基、嗒嗪基、三唑基（例如4 Η —丨，2，4 三嗤基、1Η-1，2, 3-三唾基、m3 —三嗤基等）、四… (例如仏四唑基、211_四。坐基等）等；包括^ 5個氮原: --^ ^ ^ ^ Η ^ ^ ^ 0?, ^ ^ 岔其山，社——一-—-—____________________——一 71 r ^ :唑并嗒嗪基（例如四唑并[l，5-b]嗒嗪基等）等；含二々 氧原子之不飽和的3至6員雜單環基團，例如吼喃1、Dj 喃基等，·含硫原子之不飽和3至6 M雜單環基團，例如心 f等;含1至2個氧原子及1至3個氮原子的不飽和3至 員雜單環基團’例如噁唑基、異噁唑基、噁二唑基(例如 :，2,4-嗯二唾基、1>3,…唾基、12,5一惡二唾基等: 等；含1至2個氧原子及個氮原子不飽和的縮合雜 環基團（例如苯并。惡哇基、苯并„惡二錄等），·含^ 2個硫 原子及1 i 3個氮原子的不飽和3至6員雜單環基團，例 如噻唑基、噻二唑基(例如"，[噻二唑基、L 3, “塞二 土 1，2, 5塞—唑基等）等；含1至2個硫原子及^至3 80 H50-9l3i-pp;Kai 200829575 個氮原子的不飽和縮合雜環基團（例如苯并噻唑基、苯并噻 二唑基等）等。 用語「雜環烷基」，代表經雜環取代之烷基基團。更 佳的雜環烷基基團為具有…個碳原子在雜環基團中的 用語「烷硫基」，代表包含將具有丨至約丨0個碳原子 之直鏈或分支鏈烷基基團附著於丨個二價硫原子的基團。 較佳的烷硫基基團，具有i至約20個碳原子或較佳地J至 約12個石厌原子的烷基基團。更佳的烷硫基基團，為具有工 至約10個碳原子之烷基基團的「低級烷硫基」基團。最佳 的蜿硫基基團具有1至約8個碳原子的低級烷基基團。此 種低級烷硫基基團之例，為甲硫基、乙硫基、丙硫基、丁 ...... -·,λ*· *— - — _ 硫基，及己硫基。 ^ 用語「芳烷基」或「芳基烷基」，代表經芳基取代之 烷基基團，例如苄基、二苯基甲基、三苯基甲基、苯基乙 基，及二苯基乙基。 用#「芳氧基」，代表經由氧原子附著於其他基團的 芳基基團。 用語「芳烷氧基」或「芳基烷氧基」，係指經由氧原 子附著於其他基團的芳烷基基團。 用語「胺基烷基」，代表經胺基基團取代之烷基基團。 較佳的胺基烧基基團’具有包含約1至約2 〇個碳原子，較 佳地1至約12個碳原子的烷基基團。更佳的胺基烷基基 團，為具有1至約1 0個碳原子之烷基基團的「低級胺基烷 1150-9131-PF;Kai 81 200829575 基」。最佳的胺基烷基基團，具有1至8個碳原子之低級 烧基基團。此種基團之例包括胺基甲基、胺基乙基等。 用語「院基胺基」代表經1或2個烧基基團取代的胺 基° #父佳的烧基胺基基團具有約1至約2 〇個碳原子，更佳 地至”約比抵 具有1至約1 〇個碳原子之烷基基團的「低級烷基胺基」。 最佳的烷基胺基基團，具有！至約8個碳原子的低級烷基 基團。適當的低級烷基胺基，可為單取代之N—烷基胺基或 二取代之N，N-烷基胺基，例如N-甲基胺基、N—乙基胺基、 N，N-二甲基胺基、N，N-二乙基胺基等。 用語「連結基團」意指一有機結構，其連接一化合物 .的一2部分。連結基團一般而言包含一直接鍵結，或原子例 如氧或硫、一單元例如 或一原子鏈，例如經取代或未經取代之烷基、經取代或未 I取代之烯基、經取代或未經取代之炔基、芳基烷基、芳 基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基、雜芳基炔 基、雜裱烷基、雜環烯基、雜環炔基、芳基、雜芳基、雜 環:環烧基、環稀基、烧基芳基院基、烧基芳基烯基、燒 基芳基炔基、烯㈣錢基、烯基芳基烯基、烯基芳基炔 基、炔基方基烧基、炔基芳基稀基、炔基芳基快基、烧基 ，方基k基、烧基㈣基烯基、㈣雜芳基炔基、烯基雜 方基烧基、烯基雜芳基烯基、烯基雜芳基炔基、快基雜芳 基烧基、炔基雜U烯基、炔基“基歸、㈣雜環烧 基：k基雜％烯基、烧基雜環炔基、烯基雜環貌基、稀基 H50-9131-PF/Kai 82 200829575 雜稀基、烯基雜提_ 碑基雜％炔基、炔基 炔基雜《基、燒基彡 烯基、 方基、烯基雜芳基、炔美 兀基雜 基雜方基、其中1個以上的亞甲美 可以被以下所中斷或線姓 土 一、、 或、K〇、S、S(〇)、S〇2、N(R〇、C(〇)、 經取代或未經取代之雜if .甘士 n 、 ^ ^ ’、义，/、中h為氫、醯基、脂肪族或 經取代之脂肪族。於一呈舻如 具體例，該連結基團B介於丨—24 個原子’較佳為4 - 2 4個馬^ 4個原子，較佳為4-18個原子，更佳 為4-12個原子，最佳為約4_1〇個原子。 〃用語「經取代的」，係指將一給定構造中的一或多個 氯取代為—特絲代基的基團，包括但不限定於：_基、烧 基、—婦基、块基、芳基、雜環基、硫醇基、烷硫基、芳硫 基、烷基硫烧基、芳基硫烧基Γ烧基續醢基:—烧基磺醯基 烷基、芳基磺醯基烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、胺 基羰基、烷基胺基羰基、芳基胺基羰基、烷氧基羰基、芳 氧基羰基、i烷基、胺基、三氟甲基、氰基、硝基、烷基 胺基、芳基胺基、烷基胺基烷基、芳基胺基烷基、胺基烷 基胺基、羥基、烷氧基烷基、羧基烷基、烷氧基羰基烷基、 胺基羰基烷基、醯基、芳烷氧基羰基、羧酸、磺酸、磺醯 基、膦酸、芳基、雜芳基、雜環，及脂肪族基。應瞭解此 取代基可進一步經取代。 此處使用之用語「i素或鹵」，係指擇自於氟、氯、 溴及碳的原子。 此處使用之用語「異常增生」係指不正常細胞生長。 1150-9131-PF/Kai 83 200829575 詞組「附屬療法」，包含以藥劑治療一個體，而減輕 或防止與本發明之組合療法相關連的副作用，包括但不限 於該等藥劑，例如減少抗癌藥物之毒性，例如骨再吸收抑 制劑、心臟保護性藥劑；防止或減少發生與化療、放療或手 勒屢束之息^ (myel〇suppressive)抗癌藥物相關連的感染。 此處使用之用語「血管新生」，係指形成血管。具體 而曰’血管新生為一多步驟過程，其中，内皮細胞於病灶 分解並通過其基底膜侵入’通過腸基質朝向血管新生刺激 源遷移’在遷移尖端的近側增生，組成血管，並再附著於 新合成的基底膜（參見 Folkman eia/·，Adv. Cancer Res.， Vol· 43，pp. 175-20 3(1 985))。抗血管新生藥劑，妨礙此 .〜 〜一i一.....一一…―—_ — ·一 ‘ 過程。妨礙此等步驟中之一些步驟的藥劑例，包 括：七111'011113〇3卩011(1111-1、&11它1〇31：81：111、611(1〇31&1^11、干擾 素α，及化合物，例如阻斷清除並建立新形成的血管遵循 的路徑的酵素活性之基質金屬蛋白酶（ΜΜΡ)抑制劑，及；化 合物，例如· α · ν. /3 · 3抑制劑，其妨礙血管細胞用來橋接 母血管及腫瘤間的分子；藥劑，例如特別的C0X-2抑制劑， 其阻止形成新血管之細胞生長；及蛋白質系化合物，其同時 地妨礙多個此等標靶。 此處使用之用語「細胞〉周亡」’係指計晝性的細胞死 亡，係由當年齡或細胞健康狀態及情形支配，由正常功能 的人類及動物細胞的細胞核發出信號。「細胞凋亡誘發藥 劑」觸發計畫性化的細胞死亡的過程。 1150-9131-PF;Kai 84 200829575 此處使用之用語「癌症」 為不受控制的細胞分裂及此等 係藉由侵入而直接生長在鄰近 运處的部位。 ，指一類疾病或病症，特徵 細胞入侵其他組織之能力， 組織内，或以轉移而植入到 此處-使I之| 之化合物之藥學上可接受之鹽、溶劑合物、水合物、同； 異構體、鏡像異構物、非鏡像異構物、外消旋物等。 此處使用之用語「裝置」，係指_種設備，通常為機 械性或電性，用來實行一特定功能。 此處使用之用語「發育障礙」係指不正常細胞生長， 且通常係指病理學家在切片中能認定之癌前病變早期形 式。 此處使用之用語「增殖（hyperplasia)」，係指過度合 細胞分裂或生長。 詞組「免疫治療藥劑」，係指利用接種，將用於轉送 免疫提供者，例如，其他人或動物之免疫性，給宿主的藥 背丨用W包含使用含有其他個體或動物產生之抗體的血清 或7球蛋白；非專一性全身性刺激；佐劑；活性專一性免 疫療法；及過繼（ad〇ptive)免疫療法。過繼免疫療法，係指 藉由包括對宿主接種經敏感化之淋巴球、轉送因子、免疫 RNA ’或血清或7球蛋白中之抗體，治療疾病的療法或藥 劑0 在瘤形成、腫瘤生長或腫瘤細胞生長上下文的用語「抑 ’可理解為尤其，使初級及次級腫瘤出現延遲，減緩 1150-9131-PF;Kai 85 200829575 初級及次級腫瘤發育’減少發生初級及次級腫瘤、減慢或 減少疾病之二次效果嚴重度、阻止腫瘤生長，及腫瘤退化。 極端地，完全抑制，在此表示為防止或化學防止 (chemoprevention) 〇 部位經由血管及淋巴管而遷移到其他部分，而在其他組織 產生癌症。轉移也用於指在遠處部位生長的二次癌症。 此處使用之用語「腫瘍」，係指由於過度細胞分裂造 成的不正常組織。腫瘍可為良性（非癌化），或惡性（癌化）， 且亦可稱為腫瘤。用語「瘤形成」，為造成腫瘤形成的致 病過程。 此處使用之用語「癌前」，係指非惡性的情形，但若 放著不處理可能會變成惡性。' 一- 用語「增生」意指細胞歷經有絲分裂。 詞組「放射治療藥劑」，係指使用電磁或粒子放射以 治療瘤形成。 此處使用之用語「再發」，係指一段時間的緩解 dss·)後，癌症又再回復。此可能係由於未將起始癌 症中的細胞完全移除，且可能發生於局部（與起始癌症相； 部位）、區域性(起始癌症之鄰近，可能為淋巴結或組織）， 及/或由於轉移而在遠處。 用治療」，係指任何過程、行為、應用、療法等 其中將哺乳動物’包括人類，施以醫療幫助，以直接或 接地改善該哺乳動物的情況。 3 1150—9131-PF;Kai 86 200829575 用語「疫苗」，包括誘發病患之免疫系統藉由攻擊表 現腫瘤關聯性抗原（Teas)之細胞以發動對抗該腫瘤之免疫 反應的藥劑。 此處使用之用語關於治療之個體方法的「有效量之主
^ , t a - ± ^ M 傳遞時，會造成相關於臨床可接受之標準的例如細胞增生 及/或分化狀態及/或細胞生存率改變。此量可進一步放寬
至某程度，一或多種瘤形成病症之症狀，包括但不限於· D 減少癌細胞數；2)減少腫瘤大小；3)抑制（亦即減慢至某個 程度，較佳為停止）癌細胞滲透到周邊器官；4)抑制（亦即 減慢至某個程度，較佳為停止）腫瘤轉移；5)抑制，到某個 程度，的腫瘤生長；6)減輕或減少與該病症相關連之一或 多種症狀；及/或7)減輕或減少與投予抗癌藥劑相關連的副 作用。 田 此處使用之用語「藥學上可接受之鹽」，係指該等鹽 位於充分的醫學判斷之範圍内，適用於人類或較低等動物 的組織接觸，而不會有不利之毒性、刺激性、過敏反應等， 且合理的利益/風險比例為相稱。藥學上可接受之鹽對本技 術領域者為熟知的。例如：s. M· Berge，•詳述藥學 上可接受之鹽於 J· pharmaceutical Sciences， Μ. 卜1 9( 1 977)。該鹽可在最終單離及純化本發明化合物時原 位地製備，或分開地藉由將游離鹼與適當之有機酸反應而 製備。藥學上可接受之鹽之例包括但不限於:無毒酸加成 鹽，為胺基之鹽，係與無機酸，例如鹽酸、氳溴酸、磷酸、 1150-9131-PF;Kai 87 200829575 硫酸及過氯酸，或有機酸，例如：乙酸、馬來酸、酒石酸、 擰檬酸、琥轴酸或丙二酸加成製備，或使用其他本技術領 域之方法，例如離子交換製備。其他藥學上可接受之鹽， 包括但不限於：己酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬胺酸鹽、 酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸 鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡 庚酸鹽、甘油磷酸鹽、葡酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸 鹽、氫碘酸鹽、2-羥基-乙磺酸鹽、乳糖二酸鹽、乳酸鹽、 月桂酸鹽、月桂硫酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、 甲石黃酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草 酸鹽、棕櫚酸鹽、帕莫酸鹽（pam〇ate)、果酸鹽、過硫酸趟、 .一—一…-—— — —— — — 3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽了三甲基乙酸鹽 鹽、硬脂酸鹽、琥轴酸鹽、疏酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、 對曱苯磺酸鹽、十一碳酸鹽、戊鹽等。代表的鹼或鹼土金 屬鹽，包括：鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等。其他藥學上可接受之 鹽，包括適當之使用平衡離子例如氣化物、氫氧化物、觀 酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、具有1至6個碳原子之 烧基、磺酸根及芳基磺酸根，形成的無毒性銨、四級錢及 胺陽離子。 此處使用之用語「藥學上可接受之酯」，係指在體内 水·解之酯，並包括在人體内輕易崩解而離開其母化合物或 其鹽之酯。適當之酯包括例如：衍生自藥學上可接受之脂肪 族鲮酸者，尤其是烷酸、烯酸、環烷酸及烷二酸，其中各 1150-9131-PF;Kai 88 200829575 烧基或烯基結構較佳 為不夕於6個碳原子。特定之酯之 例，包括但不限於·帀 、·次—日、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙 烯酸酯及琥珀酸乙酿。 ^处使用之用浯「藥學上可接受之前驅藥」，意指本 /人類或車父低等動物的組織接觸，而不會有不利之毒性、 刺激f生過敏反應等，且合理的利益/風險比例為相稱，且 對於其使用上為有效者，及當可能時，本發明化合物之兩 性離子。此處使用之「前驅藥」，意指在體内藉由代謝（例 士水解）可轉為本發明所示任何化合物者。許多形式之前驅 藥在本技術領域為已知的，例如：討論於Bundgaard，（ed.)， Design of Prodrug, Elsevier(1985)；Widder, et a 1 * (ed： } ： Enzy^ 1 Vc) 1 ^ Academic
Press(1985);Krogsgaard-Larsen， et al. ， （ed) 、 "Design and Application of Prodrug, Textbook of Drug Design \ and Development, Chapter 5 > 113-191(1991)；Bundgaard, et a1·， Journal of Drug DeliverReviews， 8:1 -38(1992);Bundgaard， J. of Pharmaceutical
Sciences, 77:285 et seq.(1988);Higuchi and Stella(eds.) Prodrug as Novel Drug Delivery System, American Chemical Society(1975);及 Bernard Testa &
Joachimmayer， “Hydrolysis in Drug 及 Prodrugmetabolism: Chemistry, Biochemistry And Enzymology, John Wiley and Sons, Ltd·(2002)。 1150-9131-PF;Kai 89 200829575 此處之用語「藥學上可接受之載體」，意欲包括任意 及所有溶劑、分散介質、覆膜、抗細菌性及抗真菌性藥劑、 等張及吸收延遲劑等與製藥投予相容者’例如，無菌無熱 原水。適當之載體敘述於Remingt〇n，s PhamaceMicU s'GlenGes的暴新 ’ -為冰，引入於 此作為參考。較佳之此種載體或稀釋劑之例，包括但不限 於：水、鹽水、finger’s溶液、葡萄糖溶劑，以及5%人類 血清白蛋白。微脂體及非水性載體，例如固定油，也可使 用。使用此種介質及藥劑在製藥上活性物f，在本技術領 域係為人所知的。除非任意習知介質或藥劑與該活性物質 不相谷，可以考量其於該組合物之使用。附帶的活性化合 物也可包含於該組合物中。 ............______________________________________________________________________________________________________________， 此處使用之用語「癌前」，係指非惡性的情形，但若 不治療可能變成惡性。 、，处使用之用"吾「個體」，意指-動物，該動物較佳 為一哺乳動物。更佳為該哺乳動物為人類。一個體亦指例 如:犬、貓、馬、牛、豬、天竺鼠、魚、鳥等。 本發明之化合物可藉由附加適當的官能基來修飾以增 ‘擇f生的生物特性。此等修飾為此技術領域之人士所知 可b括i曰加對於一既定生物系統（例如血液、淋巴系統、 中樞神心系、统）之生爸穿透性、增加口服性、增加溶解性以 便能以注射投予、改變代謝性及改變排泄速率。 该經合成之化合物可從反應混合物分離，並進一步以 例如管柱層析、高屢液體層析或再結晶等方法純化。熟悉 1150-9131-PF；Kai 90 200829575 此項技術之人應可瞭解，其他合成此處結構式化合物之方 法對於該技術領域之中具有通常知識者為明白的。此外， 各種合成步驟能以替換的順序或次序實施以得到所望之化 合物。對於合成此處所述化合物為有用之合成化學轉換及 ^^ ^ ^ ^ A i ^Μ 次 包括例如·敛述於R. Larock，Comprehensi ve Organic Transformations, VCH Publishers(1989);T.W. Greene 及 P· G. M· Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis, 2d. Ed., John Wiley and Sons(1991)；L. Fieser andm.
Fieser， Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis、John Wiley and Sons( 1 994);及 L. Paquette， ed. , Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons( 1 995)及之後的版本。 此處所述化合物包含一或多個不對稱中心，故能產生 鏡像異構物（enanti〇mer)、非鏡像異構物 (diastereomer) ’及其他立體異構物形式，以絕對立體化 學定義為（R)-或（S)-，或胺基酸，定義為（d) —或（L)-。本 發明意欲包括所有這種可能的異構物，以及其消旋體以及 光學上的純形式。光學異構物可藉由將其各自之光學活性 前驅物以上述程序或將消旋混合物予以解析而製備。此解 析可在解析藥劑存在下，藉由層析或反複地結晶或將一些 此技術領域之人士所知之技術之组合而實施。關於解析之 更細節可見 Jacques，et al·，Enantiomers, Racemates and Resolutions(John Wiley & Sons, 1981)。當此處所 1150-9131-PF;Kai 91 200829575 述化合物包含稀烴性雙鍵、其他不飽和或其他幾何不對稱 中心，且除非有特別指日月’則意指化合物包含…幾何 異構物或順式及反式異構物。同樣地，所有互變異構形式 也包含在内。此處所示任何碳_碳雙鍵之構造，係就方便而 選—’ .，#i 麵麵.灸.—| 定的— 構造；因此，此處任意碳-碳雙鍵或碳_雜原子雙鍵描緣為反 式者’可能為順式、及4’或此兩種以任意比例之混合物。 藥學組合物 本發明之藥學組合物，包含一治療上有效量之本發明 化合物，# i種以上藥學上可接受之載體或賦形劑一起配 方。 此處使用之用語「藥學上可接受之载體或賦形劑」， 意指-無毒性、惰性固體、半固體或液體填充劑、稀釋劑、 膠囊化材料，或任意類型之配方輔材。一些可作為藥學上 可接受之載體之例子，為糖類，例如乳糖、葡萄糖及蔗糖， 環糊精，例如α、万、r —環糊精；澱粉，例如玉米澱粉及 馬鈐薯澱粉；纖維素及其衍生物，例如，羧曱基纖維素鈉、 乙基纖維素及纖維素乙酸酯；粉末化黃蓍樹膠；麥芽；明膠； 滑石；賦形劑，例如可可脂及栓劑蠟；油，例如花生油、綿 籽油、紅花油、蔴油、撖欖油、玉米及黃豆油；二醇，例如 丙二醇；酿，例如油酸乙S旨及月桂酸乙酯；瓊脂；緩衝藥劑， 例如氣氣化鎮及氫氧化銘；無酸；無致熱原水；等張鹽液·林 格氏液；乙醇及磷酸鹽緩衝溶液，及其他無毒性之可相容的 潤滑劑，例如月桂基硫酸鈉及硬脂酸鎂，以及著色劑、釋 ll50'9l3l~PF；Kai 92 200829575 放樂劑、覆膜劑、甜味劑、風味劑及芳香藥劑、保存劑及 抗氧化劑，視配方者之判斷，亦能存在於本組合物中。 •本發明之藥學組合物，可經由口服、非口服、吸入喷 務、局部、經直腸、經鼻、經領、經陰道，或經植入貯存 器’敕佳為經'"投予或I由注射投予。本普脊之。藥學鈕合 物，可包含任意習知無毒性之藥學上可接受之載體、佐劑 (adjuvant)或載體。於一些情形，配方之邱可以用藥學上 可接受之酸、鹼或緩衝液予以調整，以增強配方化合物或 其傳遞形式之安定性。此處使用之用語非經口服 (parenteral)，包括：皮下、皮内、靜脈内、肌肉内、關節 内、動脈内、關節滑液内、不連胸骨内、腱鞘内、病灶内， 及顧内注射或灌流技術。 口服投予之液體劑型，包括藥學上可接受之之乳劑、 微乳劑、溶液、懸浮液、糖漿及耗。除活性化合物以夕卜， 該液體劑型可包含該技術領域常用㈣性稀釋劑，例如： 水或其他溶劑、溶解化劑，及乳化劑，例如乙醇、異丙醇、· 碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、】3一 丁二醇、二甲基甲醯胺、油(尤其，綿籽油、花生油、玉米 油、胚芽油、撖欖油、藏麻油及蔴油）、甘油、四氫糠醇、 聚乙二醇及山梨糖醇酐脂肪酸酯，及其混合物。除了惰性 稀釋劑以外，口服組合物亦可包括佐劑’例如濕化劑、乳 化劑及懸浮劑、甜味劑、風味劑及芳香劑。 注射用之製備物，例如：無菌注射用水性或含油懸浮 液，可依照已知技術’使用適當分散或濕化劑及懸浮劑來 1150-9131-PF;Kai 93 200829575 配方。該無菌之注射用製備物一 懸浮液或乳化液，溶於'，·、函之'主射用溶液、 溶劑，例如:為無：^服之可接受的稀釋劑或 溶劑之中，可採用者:：醇中之溶液。於可接受之載體及 針對此用途、，f聲知—用令為溶料懸浮媒體。 二甘油醋。此外，二广的固定油’包括合成之單或 用物。 月曰肪酉夂，例如，油酸，被用在製備注射 译之配方可藉由以細菌不能通過之過據膜而過 無相固體組合物甲以除菌，該益 -、’且。物可在使用前以無自 體溶解或分散。 、他，"、囷之左射用媒 為了延長藥物作用，常希望減緩皮下 肉 於藥物之吸收。此目的可藉由使用對水溶解性；佳结= 或之非結晶性材料的液體懸浮液來達成。 :溶解之速率而定，而又與結晶尺寸及結晶形式相I: ，可猎由將藥物溶解或懸浮在油性載體，而達成延 口服投予藥物之吸收。注射用貯藏物之形式，可藉由形成 該藥物之微膠囊母體於生物可分解性聚合物，例如曰聚乳酸 =基—心tlde-PQlyglyGQUde)而達成。視藥物 人聚合物之比例’以及該特定聚合物之本質，可以控制華 物釋放速率。其他生物可分解聚合物之例子’包括聚（原㈤ 及聚（無水物）。貯藏物注射用配方，亦可藉由將藥物捕捉 於與體組織相容之微脂體或微乳劑來製備。 94 1150-9l31-PF;Kai 200829575 直腸或陰道投予用之組合物，較佳為栓劑，可藉由混 合本發明化合物以及適當之非刺激性賦形劑或載體，例如 可可脂、聚乙二醇或栓劑蠟混合而製備，栓劑蠟在常溫為 i體但在體溫為液體，故能在直腸或陰道熔解而釋放活性 口服投予用的固體劑型，包括膠囊、錠劑、藥片、藥 粉及顆粒。於此種固體劑型，係將該活性化合物與至少一 種鈍性的藥學上可接受的賦形劑或載體混合，例如，檸檬 酸鈉或磷酸二鈣，及/或：a)充填劑或增量劑，例如澱粉、 礼糠、蔗糖、葡萄糖、甘露醇以及矽酸（silicic acid)、 b)黏結劑’例如：羧基甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯 基比各疋s同、蔗糖及阿拉伯樹膠（acacia)、c)濕潤劑，例 如甘油、d)崩散劑，例如瓊脂—瓊脂、碳酸鈣、馬鈐薯或樹 薯澱粉（tapioca澱粉）、藻酸、某些矽酸鹽，及碳酸鈉、 e)溶液阻滯劑，例如石蠟、f)吸收加速劑，例如四級銨化 合物、g)濕化劑，例如鯨蠟醇，以及甘油單硬脂酯、吸 收州例如咼嶺土及皂黏土（bentonite clay)，及i )潤滑 劑，例如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月 桂基硫酸鈉，及該等之混合物。於膠囊、錠劑以及藥片之 情形，該劑型尚可包含緩衝劑。 相似類型之固體組合物，也可採用為軟及硬殼填充明 膠膠囊之填充劑，此膠囊採用之賦形劑為乳糖，以及高分 子量聚乙二醇等。 该固體劑形録:劑、藥片（dragee)、膠囊、藥片（ρϋΐ) ll50-9131-PF;Kai 95 200829575 及顆粒，可以採用製藥配方技術領域中為人周知的方法， 製成帶有覆膜及殼，例如腸覆膜及其他覆膜。並可任音地 包含不透明藥劑，且亦可為僅釋放活性成分的組合物了或 較佳地’任意地以一延遲的方式，在某一部分的腸道釋放。 …，—包奮聚合物質及蠟。———— 本發明化合物之局部或穿皮投予之劑型，包括.、,由各 (ointment)、糊劑、乳霜（cream)、乳液（i〇ti〇n)、凝膠用、 粉末、溶液、喷霧劑、吸入劑或貼片。該活性成分於無菌 條件與藥學上可接受之葡髀7 Θ ^目+ 授又 < 戟體以及視需要的保存劑或緩衝液 混合。眼用配方、耳華次、 客 、 卄条水、眼用油霄、粉末及溶液，也認 為在本發明範圍以内。 职可二1么月活’化合物以外’該油膏、糊劑、乳霜及凝 膝可i括賦形劑’例如動物性脂肪及植物性脂肪、油、犧、 石蠟、澱粉、黃蓍樹膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、矽二、 膨潤土、料、滑石及氧化辞或其混合物。 在本發明化合物以外，粉末及喷霧劑可包括職形南卜 例如：乳糖、滑石、石夕酸、氣氧化銘、石夕酸約， = 末或八“物。賀霧劑可尚包含慣用的推進劑 碳氫化物。 Μ氣氣 牙皮貼片的額外優點為，將化合物對身體以控制 遞。此種劑型可藉由將化合物溶解或分散在適當媒體中以 製備。吸收增強劑可使用於增加化合 、Μ ^ 〜久々之通量。 ，、速率可由提供一速率控制膜或將該化合物分散於一取人 物母體或凝膠而控制。 、來θ 1150-9131-PF；Kai 96 200829575 針對經肺的遞送，本發明之治療組合物，係以固體或 液體顆粒形配方並投予至該病患，以藉由直接投予，例如 吸進呼吸系統。為實施本發明製備之固體或液體顆粒形式 的活性化合物，包括可吸入大小的顆粒：即，小至足以在吸 入時通過R :¾:喉頭―，—並進入去备夺 溶膠化治療物，尤其氣溶膠化抗生素，為本領域中為人所 知的（例如，參見美國專利號碼5,767,〇68至VanDeva^er d s人，美國專利號碼5,5〇8,269至及恥 98/43, 650，M〇ntg0mery，全部引入於此作為參考）。討論 抗生素的肺的運送，可見於美國專利號碼6,〇14,969，引 入於此作為參考。 此處所使用，本發明化合物「治療有效量」之用語， 意指一化合物能提供欲治療個體一治療效果，於可適用於 任意醫學治療之合理之利益/風險比例内。該療效可為客觀 的（亦即，以某些測試或標記測量）或主觀的（亦即，個體指 ^ 出徵狀或效果的感覺）。上述有效量之該化合物，可介於約 0.1 mg/Kg至約500 mg/Kg，較佳為約i至約5〇岐 有效劑量取決於投予途徑以及是否能與其他藥劑共同使用 而異。然應瞭解到，本發明之化合物及組合物的每日總使 用量係由主治醫師在合理的醫療判斷範圍内決定。對任一 特定病患的特定抑制劑量取決於許多因子，於醫學領域為 人所知的，包含：欲治療的病症以及該病症的嚴重度、所使 用的特定化合物的活性、使用的特定組合物；病患的年齡、 體重、-般健康、性別及飲食;投予時間、投予途徑，及該 1150-9131-PF;Kai 97 200829575 使用的特定化合物的排泄速率；處理的期間；與所使用的特 定化合物組合或同時使用的藥物等。 本發明化合物對人類或其他動物之單次或分次投予的 每曰總劑量，例如為0.01〜50 mg/kg體重，或更通常為Q i 達到該每日劑量。一般而言，於本發明之治療療程，包含 對於需要的病患每日以單次或多次劑量投予約i〇 至約 1 00 0 mg的本發明化合物。 此處所述配方化合物，可藉由例如經靜脈内、經動脈 内、經皮下（subdeoially)、經腹腔、經肌肉内，或經真皮 下（subcutaneously)注射；或口服、經頜、經鼻腔、穿黏膜、 局部，眼用製備物，或吸入，劑量為約〇1至約5〇〇mg/kg 體重，或者介於1 mg及1 000 mg/劑量，各4至小時， 或依照特定藥物之需要投予。此處之方法，係投予有效量 的化合物或化合物組合物，以達到所望的或所述效果一 般而言，本發明之藥學組合物，係每天投予約i至約6次， 或者’連續灌流。此種投予可用作為慢性或急性療法。可 以與製藥上賦形劑或載體組合以製程單一劑型之活性成分 量’視欲治療之主體及特定的投予模式而定。—般的彭： 物包含約5%至約95%活性化合物（w/w)。或者，此等製備物 可包含約20%至約80%活性化合物。 較以上所指劑量較低或較高之劑量可能是需要的。對 任特疋病患的特定抑制劑量取決於許多因子，包含·所 使用的特定化合物的活性、病患的年齡、體重、一般健康、 1150-9131-pf;Kai 98 200829575 性別及飲食、投予時間、排泄速率、藥物 重度及病程、病狀及症狀、病患對該疾病 重度及病程、 師之判斷。 藥物組合、病 疾病之意向、 疾病的嚴 、主治醫 當病患之倍说炸至.Α π 後之情況。然而
而，病患可能需要長期間歇的治療以 明化合 至保持改善 療以防任何 平，視症狀，可將投予劑量或頻率或兩 病狀再發生。 合成方法及實施例 本發明之化合物及處理，將以如下代表性合成流程及 貫施例更為明瞭，該等係僅用於說明，並不用於限制本發 明la圍。對熟悉此領域之人士而言，對於所揭露之具體例， 包括但不限於相關的化學結構、取代基、衍生物、配方及/ 或本發明之方法，在不偏離本發明精神及附帶專利申請範 圍之範躊内進行各種變化及修飾為明顯的。
1150-9131-PF;Kai 99 200829575 2 JOC 3 〇 j〇C H 4 …—一…一 作:一 一…一 ηΛ^〇〇6 5 〇 .XX 丫、Λν Η 、从/」 6 Η ΗΝΧΧ Η〇 少 0 7 又 8 HN^ TOV〇〇i 9 又 HjX^ ί:汾 10 Η 1 ^ Η〇-Ν^^^°γ^γ^Ν 0 11 H 、ΧΛ/」 12 h ΗΝ^Ό^ 1150-9131-PF;Kai 100 200829575 13 〇 ηνΛ, 14 Η众 个。功 15 〇 HN^^^'CI H。、—°ί〇5 16 xc 17 〇 HNXXc, H0、K 人 18 19 Ί〇^αν Η W 20 H’r。功 21 又 Η 22 1150-9131-PF;Kai 101 200829575 23 H XZd 24 h 25 ……―…… r^F 0 HN人〆^Cl Ί〇丫、λν /1。！^ 26 ΗΧΧ H’TpO> ，ο 27 ο ηΧΧ 28 ................χχ ΗΝ Cl H0J 丫、^^〇丫丫^ 29 0 HN^^^CI H ^〇XXN^ 30 χχρ H HN^^^CI Η〇-Νγ-ν^^^°γ^ΑΝ 〇 /0^—〇A^kN^ 31 又 H-XX^ )i〇oiN 32 HN^X^ TO，Vp〇6 /〇 102 1150-9131-PF;Kai 200829575 .1
1150-9131-PF;Kai 103 200829575
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1150-9131-PF;Kai 106 200829575
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1150-9131-PF;Kai 108 200829575
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0101 COOH NH2
Ac^O/Py /
0108: R1 = F; R2 = CI 0111: R1 = H, R2=三
1150-9131-PF;Kai 117 200829575
Scheme 2
0207: R1 = F; R2 = Cl 0208: R1 = H, R2 ==
1150-9131-PF;Kai 118 200829575
Scheme 3
^^COOH HCONH.IX cr v NH 0301
Cl
N 0302
HN03> Ac20 °2N
NH RONa C|/ v N 0303 02N &
NH P〇C丨3 0304 R、
02N
〇 N 0305
n：R .R1 H2hT V、R2 o2n R、o
XXR1 N 0306: R1 = F, R2 = Cl 0307: R1 = H, R2 == •f R1
0308: R1 = F, R2 = Cl 0309: R1 = H, R2 == R1
0310: R1 = F, R2 = CI_ 0311: R1 = H, R2 =三 nh2ohhci, koh
12 R R H50-9l3l-PF;Kai H9 200829575
Scheme 4
HO HO
RX 1 eq. K2CO3 、ΛτΜτΒΓ ο K2C〇3 0401 0 0403 0402
Fe/HCl 0, N02 0404
HCONH2/HCOONH4 POCI3
Cl 〜0
HNX 0408
R1 r2
wherein Y is absent, CrC6 alkyl, C2-C6 akenyl, C2-C6 alkynyl i \,
1150-9131-PF;Kai 120 200829575
Scheme 6 α： h2so4, hno3 0601 02N v、Br 0602 PPh3, Pd(OAc)2 o2n
0603
Fe, HCI h2n
0604
KOH ^ H2N
0605
AcO 、〇
0105 AcO
HN
Li0H.H20 HN HO、 0607
、、产 0606
ΝΗ,ΟΗ
0204：R = Η 0701 R3
ΝΗ,ΟΗ 〇
R3
R1 R2
Scheme 8
j〇：F
0802: R1 =Η, R2=三 R1 又 R Ο
.R1 HIT v、R2 R1——X 0804 R_、〇j
1150-9131-PF;Kai 121 200829575
Scheme 10
\
Scheme 11
1150-9131-PF;Kai 122 200829575
Scheme 12
Scheme 13
HO
K2C03, DMF
1301
Κ2〇〇3, DMF 0401
1302 1303
1150-9131-PF;Kai 123 200829575
Scheme 14
1150-9131-PF;Kai 124 200829575
Scheme 15
實施例1:製備2-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹 唾琳-6-基氧基-N-經基乙醯胺（化合物1) 步驟la· 6, 7-二甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮（化合物0102) 將胺基-4, 5-二曱氧基苯甲酸曱酯0101(2. 1 g，1〇 _〇1)、曱酸錄（〇· 63 g，10 mmol)及甲醯胺（7 ml)之混合 物加以攪拌，並加熱至190〜200°C 2小時。然後將該混合物 冷卻至室溫。分離沉澱物，以水清洗，並乾燥，得到標題 化合物 0102 棕色固體（1. 8g，84. 7%): LCMS·· π/ζ 207[Μ+1] + ; !H NMR(DMSO) (5 3. 87(s, 3H), 3. 89(s, 3H), 7.12(s, 1H), 7.43(s，1H), 7.97(s, 1H)，12.08(bs, 1H)。 步驟lb· 6-羥基-7-甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮（化合物0103) 1150-9131-PF;Kai 125 200829575 將 6,7一 一甲氧基喹唑啉-4(3H)-酮（〇ΐ〇2)(ΐ〇·3 g，50 mmo 1)分次地添加於撼她士上人m jf Λ Λ %稅拌中的甲烷磺酸（68 ml)。接著添加 L-甲硫胺酸（8· 6 g 57 R rnttml、 ^ ^ ^ » 匕W· 5 mmol)，並將得到的混合物加熱 至15 0〜1 6 0 °C 5小日夺。將該混合物冷卻i室溫並倒入於水及 冰的混合物4250—11.I氧、 液（權）中和。分離該沉澱物，以水清洗，並乾燥，以得到 標題化合物0103灰色固體（1〇g、粗製）：LCMS:历々 193[M+1]+ 〇 ^驟lc. 3’4 一氫-7-曱氧基-4 -氧代啥ϋ坐琳__β 一基乙酸酯 (化合物0104) 將6-羥基-7-甲氧基喹唑啉-4(3Η)一酮（〇1〇3)(1〇 g粗 製）、乙酸酐（100 ml)及吡啶（8ml)之混合物，攪拌並加熱 回流3小時。將該混合物冷卻至室溫，並倒入冰與水之混 合物中（250ml)。將沉澱物分離並乾燥以得到該標題產物 0104灰色固體（5.8g，2步驟整體產率5〇%): LCMS:仍々 235[M+1] + ; 〗HNMR(CDC13) 5 2,27(s，3H)，3,89(s，3H)， 7.28(s, 1H), 7.72(s, 1H), 8. 〇8(d, 1H), 12.20(bs, 1H)。 步驟Id· 4-氯-7-曱氧基唾唾啉-6-基乙酸酯（化合物〇1〇5) 將3，4-一鼠-7-甲氧基-4 -氧代啥。坐琳―6 —基乙酸酉旨 (0104)(2.0 g， 8·5 mmol)及磷醯三氯（ph〇sph〇ryl trichloride) (20 ml)之混合物，加以攪拌並加熱回流3小 時。當得到澄清溶液’則於減壓下移除多餘的填醯三氯。 將殘渣溶解於二氯甲烷（50ml)，並將有機層以心阢⑴水溶 126 1150-9131-PF;Kai 200829575 液（20mlx2)及濃鹽水（20mlxl)清洗，以MgS〇4乾燥，過濾 並蒸發’得到標題產物0105黃色固體（I 4g，65%) : LCMS: w/z2Anuny； ^ NMR(CDCla) 5 2.4〇(s, 3H), 4. 03(Sj 3H)，7.44(s，1H)，7.90(s，1H)，8.95(bs，1H)。 —一—步驟么· 一 ▲二(3二氣^二^ 乙酸酯氯化氳（化合物〇 1 〇 8) 將4-氯-7-甲氧基喹唑啉-6-基乙酸酯（〇ι〇5)(1·3 g， 5.1 mmol)及 3'氣-4-氟苯胺 〇1〇6(1.5 g，10.2 _〇1)於 、 異丙醇（45ml)中之混合物，加以攪拌並加熱回流3小時。 將該混合物冷卻至室溫，並分離得到的沉澱物。接著將固 體乾燥，得到標題化合物〇1〇8淡黃色固體（16 g，79%)· LCMS: π/ζ 362 [M+1] + ; 4 NMR(dms〇) 3 2.36(s，3H) 3.98(s, 3H), 7.49(s, 1H), 7. 52(d, 1H), 7. 72(m, 1H), 8.02(dd, 1H), 8.71(s,lH), 8.91(s,lH), 11.4(bs, 1H) 〇 步驟114-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7—曱氧基喹唑啉—6一醇 (化合物0109) 將化合物（0107)(1. 41 g, 3. 5 mmol)、LiOH Η2〇(0· 5 g， 11.7 mmol)於甲醇（100 ml)及H2〇(1〇〇 ml)中之混合物，於 室溫攪拌0. 5小時。將該混合物藉由添加稀乙酸中和。分 離该 >儿贏物並乾燥，得到標題化合物Q 1 〇 g灰色固體（1 . 〇 k 94%): LCMS: /ff/z 320 [M+l] + ； !H NMR(DMSO) ^ 3. 99(s, 3R) 7.20(s, 1H), 7.38(t, 1H), 7. 75(s, 1H), 7.81(m,lH), 8.20(m，lH)，8.46(s，lH), 9.46(s，lH), 9.68(s，lH)。 步驟lg· 2-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）—7—甲氧基喹唑啉 1150-9131-PF/Kai 127 200829575 基氧）乙酸乙酯（化合物0110-1) 將化合物01 09(300 mg，0.94 mmol)及2-溴乙酸乙醋 (163 mg, 0.98 腿〇1)及碳酸鉀（323 mg, 2.35 mmol)於 n，N- 二甲基曱醯胺（6 m 1)中的混合物，攪拌並加熱至4 〇Q 3 0分 濾 〃:1^混 過渡教於減 壓中濃縮。將殘渣以二乙醚清洗，並乾燥，以得到標題化 合物 0110-1 黃色固體（280 mg，74%): LCMS:仍/z 40 6 [ M +1 ] + · 'HNMRCDMSO) 5 1.23(t, 3H), 3. 96(s, 3H), 4.20(q, 2H), 4.95(s, 2H), 7.24(s, 1H), 7.44(t, 1H), 7. 75(m, 1H), 7.82(s，1H)，8.1〇(dd, 1H), 8.51(s, 1H)，9.54(s, 1H)。 步驟lh· 2 (4 -（3-氣-4-氟苯基胺基）- 7-甲氧基唾嗤琳—6 一 基氧基）-N-羥基乙醯胺（化合物1) 對攪拌中的.基胺氯化氫（4·67 g, 67mmol)於甲醇 (24ml)之溶液，於（TC添加氫氧化鉀（561g, ι〇〇Μ〇1)於 甲醇（14ml)溶液。添加後，將混合物於攪拌3〇分鐘並 使於低溫靜置。將得到的沉澱物分離並製備成溶液成以得 游離經基胺。 將上述新鮮製備之羥基胺溶液（1· 4 ml，2. 4mmol)置於 5ml燒瓶。化合物oiiQ —i(25〇 mg, 0· 6 mmol)添加至此溶液 並於0 C攪拌1 〇分鐘，回温至室溫。反應過程以tlc監控。 將混合物以乙酸中和。將混合物減壓濃縮。將殘渣以製備 HPLC精製。以得標題化合物1灰色固體（5〇mg，21%): [CMS: Λ7/ζ 393 [Μ+1] + ； ^NMRCDMSO) 5 3. 96(s, 3H), 4. 62(s, 2H), 7.24(s, 1H), 7.45(t, 1H), 7. 78(m, 1H), 7.86(s,lH), 1150-9131-PF;Kai 128 200829575 8. 10(dd, 1H), 8. 52(s, 1H), 9. 07(s, 1H), 9. 57(s, 1H), 10.80(s, 1H) 實施例2:製備4-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-曱氧基喹 唑啉-6-基氧）-N-羥基丁醯胺（化合物3) 基氧）丁酸乙酯（化合物0110-3) 標題化合物0110-3，係從來自於步驟If之化合物 0 1 09 (200mg， 0.63mmol)，以及 4-溴丁 酸乙酯（135mg, 0.69匪〇1)，使用類似於化合物〇ιι〇-ΐ(實施例1)所述程序 製備成黃色固體（220mg，80.5%): LCMS: /z?/z 434[M+l] + ; 4 NMRCCDCh) 5 1.36(t, 3H), 2. 23(m, 2H), 2. 57(t, 2H), 4.03(s, 3H), 4.32(m, 4H), 7.15(t, 1H), 7. 25(m, 1H), 7.87(s, 1H), 8.00(m,2H), 8.15(bs,lH), 8. 57(s, 1H) 〇 步驟2b· 4-(4 -（3-氯-4-氟苯基胺基）-7 -曱氧基唾σ坐琳-6-基氧基）-Ν-羥基丁醯胺（化合物3) 標題化合物3製備成灰色固體（25 mg, 12%)係從化合 物0 1 1 0-3(200mg, 〇.23mmol)使用類似於針對化合物1(實 施例1)敘述之程序製備：LCMS: 421[M + 1] + ; 4 NMR(DMSO)·· 5 2.06(m，2H), 2.22(t，2H), 3.95(s, 3H), 4.15(t, 2H), 7.21(s, 1H), 7.43(t, 1H), 7. 83(s, 2H), 8.14(dd, 1H), 8.51(s, 1H), 8. 75(s, 1H), 9. 56(s, 1H), 10·50(s, 1H)。 實施例3:製備7-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹 唑啉-6-基氧基）-N-羥基己醯胺（化合物5) 1150-9131-PF/Kai 129 200829575 步驟3a. 6-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-曱氧基喹唑啉-6- 基氧）己酸乙酯（化合物0110-5): 標題化合物0110-5，係從來自於步驟If之化合物 0109(510mg， 1.6mm〇l)，以及 6-溴乙酸乙酯（430mg， 1 ninl·©1 製備成黃色固體（510mg，68%): LCMS: tz7/z 462 [M+1] + ; j 丽R(CDC13): 1.24(t，3H)，1.55(m，2H)，1.74(m，2H)， 1.91(m, 2H), 2.38(m, 2H), 3. 97(s, 3H), 4.13(m, 4H), f % 7.15(t, 1H), 7.25(m, 2H), 7. 60(m, 1H), 7. 86(m, 1H), 7.91(dd，1H)，8.61(s, 1H)。 步驟3b· 7-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7_曱氧基喹唑啉-6- 基氧基）-N_輕基己醯胺（化合物5) 標題化合物5製備成灰色固體（1〇〇 mg，34%)，係從化 合物0 1 1 0-5 (305mg，〇· 66mmol)使用類似於針對化合物 1(實施例1)敘述之程序製備：m.p.2〇6.6〜207,rc(dec); | LCMS: ia/z 449[M+1] + ； !H NMR(DMSO) 5 1.44(m, 2H), 1.64(m, 2H), 1.82(m, 2H), 1.99(t, 2H), 3. 93(s, 3H), 4.12(t5 2H), 7.19(s, 1H), 7.43(t, 1H), 7. 79(m, 2H), B,12(dd, 1H), 8.49(s, 1H), 8. 68(s, 1H), 9. 53(s, 1H), 10·37(s, 1H)。 實施例4 :製備7-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹 °坐琳-6-基氧基）-N-羥基庚醯胺（化合物6) 步驟4a· 7-（4-（3-氯-4-氟苯基胺基）-7-曱氧基喹唑啉-6 - 基氧）庚酸乙酯（化合物0110-6) 1150-9131-PF;Kai 130 200829575 標題化合物0110-6，係從來自於步驟if之化合物 0109(512mg， 1.6mmol)，以及 7-溴庚酸乙酯（438mg， 1. 8mmol )，使用類似於化合物〇11〇-1 (實施例1)所述程序 製備成黃色固體（390mg，53%): LCMS: 476 [M+1 ] + ; 4 lERXiniC丄 丄，·上 —」!丄丄· 1.88(m,2H), 2. 32(t, 2H), 3. 97(s, 3H), 4. 07(t, 2H), 4.12(q, 2H), 7.15(t, 1H), 7. 23(t, 2H), 7. 66(ra, 1H), 7.75(m，lH)，7.87(dd，1H)，8.65(s，lH)。 步驟4b. 7-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7 -曱氧基喧111坐琳-6-基氧基）-N -經基庚醯胺（化合物6) 標題化合物6製備成灰色固體（80 mg，25%)係從化合 物01 1 0-6(323mg，0.68mmol)使用類似於針對化合物1(實 施例1)敘述之程序製備：m.p. 180. 8〜182. 3°C (dec); LCMS: ^ 463 [M+1] + ; ]H NMR(DMSO) 5 1.34(m, 2H), 1.50(m,4H), 1. δΚιη, 2H), 1.96(t, 2H), 3. 92(s, 3H), 4.11(t, 2H), 7.18(s, 1H), 7.43(t, 1H), 7. 78(m, 2H), 8.12(dd, 1H), 8.48(s, 1H), 8.64(s，1H)，9.5〇(s, 1H), 10.33(s，1H)。 實施例5:製備2-(4-(3_乙炔基苯基胺基）-7-甲氧基喹唑 琳-6 -基氧基）-N-經基乙醯胺（化合物7) 步驟5a. 4-(3-乙快基苯基胺基）-7-曱氧基喧°坐琳-6 -基乙 酸酯氯化氫（化合物0111) 將4-氯-7-曱氧基喹唑啉-6-基乙酸酯（0105)(2. 6 g， 1〇·2 mmol)及 3-乙炔基苯胺（0107)(2.4 g，20.5 mmol)於 異丙醇（1 0 0 m 1)之混合物，攪拌並加熱回流3小時。將該 1150-9131-PF;Kai 131 200829575 混合物冷卻至室溫。將沉澱物分離，並乾燥以得到標題化 合物 0111 黃色固體（2.6g，68%)·· LCMS·· ^^ 334[Μ+1Γ; 1H 丽 R(DMSO) 6 2.3,9(s，3H)，3,17(s，1H)，3.98(s，3H)， 7.35(m, 1H), 7.40(s, 1H), 7.47(m, 1H), 7. 72(m, 1H), .lRX〇^ 步驟5b· 4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-甲氧基喹唑啉—6一醇 (化合物0112) 將化合物 0111(2· 0 g, 5. 4 mmol)及 LiOH Η2〇(0· 75 g， 17· 9 mmol)於曱醇（100 m〇及h2〇(1〇〇 mi)之混合物，於室 溫攪拌0 · 5小時。將該混合物藉由添加稀乙酸中和。將沉 澱物分離並乾燥，得到標題化合物〇112灰色固體（1. 52g， 96%): LCMS: ζί/ζ 292 [M+1 ] + ; 'H NMR(DMSO) δ 3.17(s, 1H), 3.98(s, 3H), 7.18(d, 1H), 7.21(s, 1H), 7. 37(t, 1H), 7.80(s, 1H), 7.90(d, 1H), 8. 04(m, 1H), 8.47(s,lH), 9· 41(s，1H)，9· 68(bs，1H)。 步驟5c. 2-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-甲氧基喹唑啉-6 -基氧基）乙酸乙基酯（化合物0113-7) 標題化合物0113-7製備成黃色固體（450 mg，69%)係 從化合物01 1 2 (500mg，1. 72mmol)及 2-溴乙酸乙酯（300mg， 1.8mmol)使用類似於針對化合物0110-1(實施例1)敘述之 程序製備：LCMS: π/ζ 3 78 [M+1] + ; !H NMR(DMSO) 5 1. 22(t， 3H), 3.97(s, 3H), 4.21(q,2H), 4. 97(t, 2H), 7. 22(d, 1H)? 7. 24(s, 1H), 7. 42(t, 1H), 7. 84(m, 2H), 7. 8 6(d, 1H), 7. 96(s, 1H), 8· 51(s，1H)。 1150-9131-PF;Kai 132 200829575 步驟5d· 2-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-甲氧基喹唑啉-6 -基氧基）_N-羥基乙醯胺（化合物7) 標題化合物7製備成灰色固體（1〇〇 mg，23%)係從化合 物01 1 3-7(448mg，1.2mmol)使用類似於針對化合物1(實施 1) ^ ^ ^ ^ ^ ^ (5 4.00(s, 3H), 4.26(s, 1H), 4.65(s, 2H), 7. 27(s, 1H), 7.37(d, 1H), 7.49(t, 1H), 7.73(d, 1H), 7. 85(s, 1H), 8.03(s,lH), 8.78(s,lH), 9.17(bs,lH), 10.60(s, 1H), 10· 85(s, 1H)。 實施例6:製備4-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7 —甲氧基啥嗤 啉-6-基氧基）-N-羥基丁醯胺（化合物9) 步驟6a· 4-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-曱氧基喧嗤琳一 β — — ·...,·〜 · - 一 .........- - - —-*·. * -— 冊. 基氧）丁酸乙酯（化合物0113-9) 標題化合物0113-9，係從化合物〇1 η 2(5〇〇mg， 1· 72_〇1)，以及4-溴丁酸乙酯（349mg，ι· 8匪〇1)，使用 類似於化合物〇 11 〇 -1 (實施例1)所述程序製備成黃色固體 % (438mg, 59°/〇): LCMS: m/z 406 [M+1] + ； !h NMRCCDCh) δ 1.37(t，3H), 2.34(m，2H), 2.56(t，2H)，3.〇7(s，1H)， 4. 03(s，3H), 4· 32(m，4H)，7· 21 (m，1H)，7· 25(s 1H) 7.36(t, 1H), 7.94(s, 1H), 7. 97(m, 1H), 8.20(s,lH), 8· 28(m，1H), 8. 70(s, 1H)。 步驟6b, 4-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-甲氧基喧唾琳—6-基氧基）-N-羥基丁醯胺（化合物9) 標題化合物9製備成灰色固體（60 mg, 31%)係從化合 1150-9131_PF;Kai 133 200829575 物01 13-9(200mg，0.49mmol)使用類似於針對化合物1(實 施例 1)敘述之程序製備：LCMS: π// 393 [Μ+1Γ; 4 NMR(DMSO) 5 2.06(ra, 2H), 2. 22(t, 2H), 3.30(s, 1H), 3.95(s, 3H), 4.16(t, 2H), 7. 19(m, 2H), 7.40(t, 1H), 8· 74(s，1H), 9· 49(s, 1H), 10. 49(s, 1H)。 實施例7:製備6-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-甲氧基喹唑 琳-6-基氧基）-N -經基己醯胺（化合物11) 、 步驟7a. 6-(4-(3-乙快基苯基胺基）-7 -曱氧基啥峻琳- 6 -基氧）己酸乙酯（化合物0113-11) 標題化合物0113-11，係從來自於步驟5b之化合物 01 1 1 2(500mg， I，72mmol)，以及 6-溴乙酸乙酯（4〇lmg， 1 · 8mmo 1)，使用類似於化合物011 〇-1 (實施例1)所述程序 製備成黃色固體（543 mg，73%) : LCMS: /»// 434[M+1 ] + ; 4 丽R(CDCh) 5 1.24(t，3H)，1.53(m，2H), 1.72(m，2H)， r 1.90(m, 2H), 2.37(t, 3H), 3. 08(s, 1H), 3. 97(s, 3H), 4.10(ra,4H), 7.19(s, 1H), 7. 25(m, 2H), 7. 34(t, 1H), 7.67(s，1H), 7.78(m, 1H)，7.84(m, 1H)，8.67(s, 1H)。 步驟7b· 6-(4 -（3 -乙炔基苯基胺基）-7 -甲氧基π查唾琳_6-基氧基）_N-經基己醢胺（化合物11) 標題化合物11製備成灰色固體（110 mg，41%)係從化 合物0113-11(275mg，0· 63mmo 1)使用類似於針對化合物 1(實施例1)敘述之程序製備：m.p.193.4〜195.8°C：(de(：h LCMS: m/z i21 [M+l] + ; 'H NMR(DMSO) 5 1.44(m, 2H), 1150-9131-PF;Kai 134 200829575 1.60(m, 2H), 1.84(m, 2H), 1.99(t, 2H), 3. 93(s, 3H), 4.13(t, 2H), 4,19(s, 1H), 7.19(m, 2H), 7.40(t, 1H), 7. 81(s，1H), 7. 88(d, 1H), 7. 98(s, 1H), 8. 49(s, 1H), 8.68(s，1H)，9.47(s，1H)，i〇39(s，ih)。 琳-6-基氧基）-N-經基庚醯胺（化合物i2) 步驟8a· 6-(4-(3-乙炔基笨基胺基）_7_甲氧基喹唑啉一6一 基氧）庚酸乙酯（化合物0113-12) 標題化合物011 3-12，係從來自於步驟5b之化合物 01 1 1 2(247mg， 0· 85mmol)，以及 7—溴庚酸乙酯（2limg， 0· 89mmol)，使用類似於化合物ouQ — i(實施例丨）所述程序 製備成黃色固體（305 mg，84%): LCMS: 448 [Μ+1Γ; j ——. .… ---...--.....——^— — 一 … NMRCCDCh): ^1. 15(t, /=7. 5 Hz, 3H), 1. 33-1. 60 (m, 6H), 1.81(m, 2H), 2.28(t, /=7.5 Hz, 2H), 3. 92(s, 3H), 4.03(q, /=7. 2 Hz, 2H), 4.12(t, /-6. 6 Hz, 2H), 4. 18(s, 1H), 7.19(m, 2H), 7. 39(t, /=7. 8 Hz, 1H), 7.80(s, 1H), 7.89(d, /=8.1 Hz, 1H), 7. 97(s, 1H), 8. 48(s, 1H), 9·44(s, 1H)。 步驟8b· 7-(4-(3 -乙炔基苯基胺基）-7 -甲氧基喧吐琳-6 一 基氧基）-N-羥基庚醯胺（化合物12) 標題化合物12製備成灰色固體（1〇〇 mg，41%)係從化 合物0113-12(250mg，0· 56mmol)使用類似於針對化合物 1(實施例1)敘述之程序製備：m.p.171.8〜l77.2°C(dec); LCMS: 435 [M+l] + ; 4 NMR(DMSO-A): 36(m， 2H)， 1150-9131-PF;Kai 135 200829575 1.52(m, 4H), 1.83(m, 2H), 1.97(m, 2H), 3. 94(s, 3H), 4. 14(t, /=6. 3 Hz, 2H), 4. 20(s, 1H), 7.21(m, 2H), 7.41(t, /=8,1 Hz, 1H), 7. 83(s, 1H), 7. 90(d, /=8.1 Hz, 1H), 8.00(s, 1H), 8.50(s, 1H), 8. 66(s, 1H), 9. 48(s, 實施例8(方法2):製備7-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-曱 氧基喹唑啉-6-基氧基）-，羥基庚醯胺（化合物12) 步驟8a’ · 3-羥基-4-甲氧基苯甲酸乙酯（化合物0402-1 2) 對於3，4-二羥基苯曱酸乙酯0401 ( 1 2.52 g, 68.7 mmol)溶於DMF(50 mL)之溶液，添加碳酸鉀（9·48 g，68.7 匪〇1)。於將該混合物攪拌15分鐘後，滴加碘甲烷（9. 755 g， 68· 7 mmo 1)溶於DMF( 10 mL)之溶液。將該反應混合物於20 —一— … ….......—-……一—…… — — … °C擾拌24小時。反應後，將該反應物過濾，並將該過濾物 濃縮。將殘渣溶解於二氯甲烷，並以濃鹽水清洗。將該有 機相以硫酸鈉乾燥，過濾，並於真空中濃縮，得到粗製產 品。將該粗製產品以管柱層析精製，以得到標題化合物 0402-12 白色固體（7.1 g， 53%): LCMS: 197 [M+l]+， 4 NMR(DMS0-⑹：j h29(t，/=6·6Ηζ，3H), 3 83(s，3H)， 4.25(q, /=6. 6 Hz, 2H), 7.00(d, /=8. 4 Hz, 1H), 7. 38(d, /=1.8Hz, 1H), 7.43(dd, /=8. 4 Hz, 2.1Hz, 1H), 9. 36(s, 1H) 〇 v驟8b · 3-（7-乙氧基-7-氧代庚氧基）一4 一曱氧基苯曱酸 乙酯（化合物0403-1 2) 將化合物 0402-1 2(6.34 g，32· 3 mm〇1)、7 —溴庚酸乙 1150-9131-PF；Kai 136 200829575 酯（7.66 g，32.3 mmol)及碳酸鉀（13.38 g，96.9 mmol) 溶於D M F (8 0 m L )之混合物’於6 0 C视掉3小時。於反應後， 將混合物過濾。將濾液於真空中濃縮，並將該殘渣溶解於 二氯曱烷，並以濃鹽水清洗2次。將有機相以硫酸鈉乾燥， 86.7%)： LCMS: 353 [M + l]+, !H NMR(DMS0-^6): ^1.17(t, /=6.9 Hz, 3H), 1.31(t, /=7.2 Hz, 3H) 1.39(m, 4H), 1.54(m, 2H), 1.72(m, 2H), 2. 29(t, >7.2 Hz, 2H), 3.83(s, 3H), 3.98(t, >7. 2 Hz, 2H), 4. 〇6(q, /-6. 9 Hz, 2H), 4.29(q, /=1.2 Hz, 2H), 7. 06(d, /=8.4 Hz, 1H), 7.42(d, /=1.8 Hz, 1H), 7. 57(dd, >8.4 Hz, 1.8 Hz, 1H) 〇 步驟8c’ · 5-(7-乙氧基-7-氧代庚氧基）-4—曱氧基—2 —硝 基苯甲酸乙酯（化合物0404-1 2) 將化合物0403-12(9.87 g, 28·0 mmol )溶解於乙酸（2〇 、 mL)，並於2〇°C攪拌。緩慢滴加發煙硝酸（17. 66 g, 28〇. 〇
m_l)。將該混合物於2(rc攪拌}小時。於反應後，將該 混合物倒入冰-水，並以二氯甲烷萃取2次。將合併的有機 相以濃鹽水、NaHC〇3水溶液，及濃鹽水清洗。將合併的有 機相以硫酸鈉乾燥，過濾，並濃縮，以得到標題產物〇4〇4一12 頁色固體（10·75 g， 96.4%)： LCMS: 398 [M+l]+, ]H NMR(DMS0^6)； ^1. net, /=7.2 Hz, 3H), 1.27(t, /=7.2 Ηζ^ 3H), 1.38(m, 4H), 1.53(m, 2H), 1.74(m, 2H), 2. 29(t, Hz, 2H), 3.91(s, 3H), 4. 03(q, /=7.2 Hz, 2H), 1150-9l3l-PF/Kai 137 200829575 4.08(t，/=6.3 Hz，2H)，4.30(q，/=7.2 Hz, 2H)，7.29(s， 1H)，7· 63(s，1H)。 步驟8d’ · 2-胺基—5-(7-乙氧基-7 一氧代庚氧基）—4-甲氧 基苯甲酸乙酯（化合物0405 -1 2) (40 mL)及氣化氫（4 mL)之混合物，攪拌形成澄清的溶液。 分批添加鐵粉（15. 16 g，27· 0 mmol)。將該混合物回流攪 拌30分鐘，接著冷卻至室溫，以1〇%氫氧化鈉溶液調整pH 至8 ’並過;慮。將濾液濃縮以移除乙醇，並以二氯甲烧萃 取2次。將合併的有機相以濃鹽水清洗，並以硫酸納乾燥， 過濾，並濃縮，得到標題產物0405-1 2黃色固體（8. 71 g， 87.8%)： LCMS: 368 [M+l] + , !H NMR(DMS0~^) ： ^ 1.17(t, J:'2— Hz, ^7：2 Hz,), l；37(m：4 1.53(ra, 2H), 1.66(m, 2H), 2. 29(t, /=7.2 Hz, 2H), 3. 74(s, 3H), 3.78(t, /=6. 9 Hz, 2H), 4. 06(q, /=7. 2 Hz, 2H), 4.22(q, /=7. 2 Hz, 2H), 6. 35(s, 1H), 6. 44(s, 2H), 7· 15(s，1H)。 步驟8e · 7 -（7 -甲氧基-4_氧代-3，4 -二氳噎吐琳-6-基 氧）庚酸乙酯 (化合物0406-12) 將化合物 0405-1 2(8· 71 g, 23· 7 mmol)、甲酸銨（1· 48 g，23. 7 _〇1)及曱醯胺（40 mL)之混合物，於180°C攪拌3 小時。反應後，將該混合物冷卻至室溫。將甲醯胺於減壓 下移除，並將殘渣溶解於二氯曱烷，並以濃鹽水清洗。將 1150-9131-PF;Kai 138 200829575 有機相以硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，以得到標題產物 0406-12 灰白色固體（818g，99%): LCMS: 349 [M+1]+，lH NMRCDMSO^e)； ^i.i7(t, /^6. 9 Hz, 3H), 1.38(m, 4H), 1.55(m, 2H), 1.75(m, 2H), 2. 29(t, /=7.2 Hz, 2H), —3t9^ 7. 97(d，/=3·6Ηζ，1H)，12.07(s，1H)。 步驟8f · 7-(4-氯-7-甲氧基喹唑啉-6-基氧）庚酸乙酯 (化合物0407-1 2) 將產物 0406-1 2(8.18 g，23·5 _〇1)及磷醯三氯（5〇 mL)，攪拌回流4小時。於反應後，將多餘的磷醯三氯於減 壓下移除。將殘渣溶於二氯甲烷。並以水、NaHC〇3水溶液 及浪鹽水清洗。將有機相以硫酸鈉乾燥，過濾，並濃縮， 得到標題產物om 367 [M + l]\ NMRCDMSO-^e)： ^1.17(t, /=6. 9 Hz, 3H), 1.38(m, 4H), 1.54(m, 2H), 1.81(m, 2H), 2. 30(t, /=7.2 Hz, 2H), 4. 〇2(s, 3H), 4. 06(q, /=6.9 Hz, 2H), >6·3Ηζ，2H), 7.37(s，1H), 7.45(s, 1H)，8.87(s，1H)。 步驟8g’ · 7-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-曱氧基喹唑啉 -6-基氧）庚酸乙酯（化合物0408-12) 將產物0407-12(5.93 g，16.4 mmol)及3-乙炔基苯胺 (192 g，16.4 mmol)於異丙醇（80 mL)之混合物，回流搜 拌4小日守。反應後將該混合物冷卻至室溫，分離得到之沉 殿物’以異丙醇及醚清洗，並乾燥以得到標題化合物 0408-12 黃色固體（4.93 g，67.1%): LCMS: 448 [M+1J +，ιΗ 1150-9131-PF;Kai 139 200829575 NMRCDMSO-^/b): J1.16(t, /=7. 2 Hz, 3H), 1. 36-1. 59(m, 6H), 1.80(m, 2H), 2. 29(t,, /=7. 2 Hz, 2H), 3. 93(s, 3H), 4.04(q, /=6. 9 Hz, 2H), 4.13(t, /-6. 6 Hz, 2H), 4.19(s, 1H), 7.20(m, 2H), 7. 39(t, /=7. 8 Hz, 1H), 7.81(s, 1H), • 一 ’i〜〜舍''㈣咮本.'.，…、 9.45(s， 1H)。 步驟8h · 7_(4-(3_乙快基本基胺基）一7 -甲氧基啥。坐琳 -6-基氧基-羥基庚醯胺（化合物12) 將新鮮製備的羥基胺溶液（30 mL，110 mmol)置於50 mL 燒瓶。化合物0408-1 2(4.93 g，11.0 mmol)添加至此溶液 並於2 5 °C攪:拌2 4小時。反應後，將混合物以乙酸中和， 將得到的沉澱物分離，以水清洗並乾燥以得標題化合物]2 白色固體（3.99§，83.6%):_174.1〜177.2。<3.1^1^:435 [M+l]+, NMRCDMSO-i/e): ^1.36(m, 2H), 1.52(m, 4H) 1.83(m, 2H), 1.98(m, 2H), 3.94(s, 3H)，4.l4(t，/=6.6
Hz, 2H), 4.20(s, 1H), 7.21(m, 2H), 7.41(t, /=7. 8 Hz, 1H), 7.80(s, 1H), 7.90(d, /=7. 8 Hz, 1H), 8. 〇〇(s, 1H), 8.50(s, 1H), 8.66(s, 1H)，9.48(s，1H), l〇.35(s, ih)。 實施例9:製備2-(4-(3 -氣-4-氟苯基胺基）啥n坐琳—6 -基 氧基）_Ν-羥基乙醯胺（化合物13) 步驟9a. 6-羥基喹唑啉-4(3Η)-酮（化合物0202) 將2-胺基-5-羥基苯曱酸020 1 (30.6 g, 0.2 m〇l)溶 於甲醯胺之溶液，攪拌並加熱至1 9(TC 0. 5小時。使該混合 1150-9131-PF;Kai 140 200829575 物冷卻至室溫。將沉殿物分離，以醚清洗，並乾燥，以得 到標題化合物〇202(32g、棕色固體，產率：99%): LC-MSiff/f 163 [M+l]； !H NMR(DMSO) 5 7.25(dd,1H), 7.40(d,lH), 7. 46(d，1H)，7. 88(s, 1H)。 ^ - ^ ^ ^ b . Zi M J|. C ^ ^ 0203) 將化合物 0202(30.0 g，0· 185 raol)及吡啶（35 ml)於 乙酸酐（275 ml)之混合物，攪拌並於l〇〇°C加熱2小時。
C 將反應混合物倒入冰及水（5 0 〇 m 1 )混合物。分離沉澱物， 以水清洗，並乾燥，得到標題化合物0203(24 g，灰白色 固體，產率：61%): LC-MS π/ζ 205 [M+l ]; 1H-NMR(DMSO) 5 2.32(s,3H), 7.50(dd?lH), 7. 80(d, 1H), 7. 98(s, 1H), …―:.…— — —- — — 8. 02(s,1H) 〇 步驟9c· 4-氯喹唑啉-6_基乙酸酯（化合物〇2〇4) 將化合物 0203(20· 0 g, 〇· 1 m〇l)於 P〇C13(15〇 ml)之 ( 混合物，攪拌並加熱回流2小時。將反應物蒸發並將殘渣 於乙酸乙酯及飽和NaHC〇3水溶液間分相。將有機相以水清 洗，以NazS〇4乾燥並蒸發。將該混合物以管柱層析精製（矽 膠，洗提液：1 ·· 2=乙酸乙酯/石油），得到標題化合物 0204(7.5g，白色固體，產率：35%): LC — MSyff/^ 223 [射 4-NMR(CDC13) (5 2.40(S，3H)，7.74(dd，1H)，8.〇〇(d，1H) 8. 09(d，1H)，9· 〇5(s，ih)。 步驟9d· 4-(3-氯-4—氟苯基胺基）喹唑啉-6—基乙酸酯（化 合物0207) 1150-9131-PF;Kai 141 200829575 將 0204(1.0 g，4.5 mmol)及 3 -氯-4-氟苯胺 Q2〇5(0. 7 g, 5.0 mmol)於異丙醇（45ml)之混合物，攪拌並於90°C加 熱1小時。將該反應冷卻至室溫，並分離沉澱物。將固體 依序以異丙醇及甲醇清洗，乾燥，以得到標題化合物 1H-NMR(DMSO) 5 2. 37(s，3H)，7· 54(t, 1H)，7· 75(m，1H)， 7. 94(dd, 1H), 7. 99(s, 1H), 8. 02(m, 1H), 8. 64(s, 1H), 8. 95(s, 1H)。 步驟9e· 4-(3 -氯-4-氟苯基胺基）啥嗤琳—6 -醇（化合物 0209) 將020 7(0. 8 g，2· 6 mmol)及氫氧化鋁單水合物（〇.丨3 g， 3 · 2 mmo 1)於曱醇（1 〇 m 1) /水（1 5 m 1)之混合物，於室溫攪； 拌1小時。將pH以1^^^ 固體以水清洗，並乾燥，以得到標題化合物〇 2 〇 9 (〇. 6 g， 黃色固體，產率：88%): LC-MS π/ζ 290 [M+1 ];沱-NMR(DMSO) 占 7· 42(s，1H)， 7. 45(m, 1H), 7. 70(d, 1H), 7. 76(s, 1H), 7.86(m，lH), 8.24(q，1H)，8.48(s，lH)，9.61(s，lH)。 步驟9f. 2-(4-(3 -氯-4-氟苯基胺基）喧唾琳-6-基氧）乙酸 乙酯（化合物0210-13) 將 0 209 ( 0· 2 g, 〇· 77 mmol)、3-溴丙酸乙酯（〇· 14g， 〇.85mmol)及 K2C〇3(〇.8g，5.8mmol)於 DMF(15ml)之混合 物，攪拌並加熱至8(TC 2小時。將反應物過濾並將濾液蒸 發。將得到的固體以醚清洗，以得到標題化合物 0210-13(0. 2 g，黃色固體，產率：75%) : mpl61 -163°C ; 1150-9131-PF;Kai 142 200829575 LC-MS m/z 376 [M+l]； lH-NMR(DMSO) 5 1.20(t, 3H), 4.20(q，2H)，4.96(s，2H)，7.45(t，lH)，7.55( dd， 1H)， 7· 78(m，2H)，7· 94(d，1H)，8· 16(dd，1H)，8. 54(s，1H)， 9·69(s.1H) 〇 基）-N-經基乙醯胺（化合物i 3) 於攪拌中之經基胺氯化氫（4·67 g，67mm〇i)於甲醇 (24ml)溶液，於〇°c添加氫氧化鉀（561g，1〇〇_〇1)於甲 醇（14m 1)溶液。添加後，將混合物於〇它攪拌3〇分鐘並使 於低溫靜置。將得到的沉澱物分離並製備成溶液成以得游 離羥基胺。 將上述溶液（1.41111，2.4111111〇1)放入51111燒瓶。化合物 -一 -…一〜—...... —.一— 0210-13(0. lg，〇· 29mmol)添加於此溶液並於 〇。〇授拌] 分鐘，然後回溫至室溫。反應過程以TLC監控。將混合物 以乙酸调整成pH6並然後減壓濃縮。將殘渣以製備hplc精 製，以曱醇/水洗提。收集含產物之譜帶。將溶液蒸發以得 標題化合物13(3〇11^，黃色固體、產率：29%):1^-1^/!7々 363 [M+l]; 1H-NMR(DMSO) 5 4·64(s，2H)，7·46(t，1H) 7.58(d， 1H)， 7. 79(d, 2H), 7. 7(s, 1H), 8. ll(s, 1H) 8.52(s，lH)，9.02(s，lH)，9.67(s，lH)，l〇.96(s，1H)。 實施例10:製備4-(4-(3 -氯-4-氟苯基胺基）喧唾琳―g —美 氧基）-N-經基丁醯胺（化合物1 5) 標題化合物15製備成（20 mg)係從步驟9e之化合物 0209及乙基4-溴丁酸酯使用類似於針對化合物13(實施 1150-9131-PF/Kai 143 200829575 例 9)敘述之程序製備：mpi 28-1 32°C ; LC-MS 391 [M+l]; 1H-NMR(DMS0+D20) 5 2. 05(ra.2H), 2. 24(t,2H), 4.21(t,2H) 7· 46(t，1H)， 7. 54(dd, 1H), 7. 65(m, 1H), 7. 76(d, 1H), 7· 82(m 1H)，7. 99(m, 1H)，8. 43(s, 1H)。 •其^施〜刺—XL:—備—6 二氯二4二—氣〜 氧基）- N-羥基己醯胺（化合物17) 步驟11a· 6-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）喹唑啉-6-基氧）己 酸乙酯（化合物0210-17) 標題化合物0210-17(0.2 g)，係從化合物0209 4- 氣- 4 _氣苯基胺基）啥嗤琳-6 -醇及6 -溴己酸乙|旨，使用类貝 似於製備化合物021 0-1 3(實施例9)之程序製備：lc-MS m/z An [M+l ], "H-NMRCDMSO) 5 1. 13(t, 3H), 1. 45(„!5 2H> —T - —- 一― —… -----------------------------------.—--------------------------------—〜，一-----------------------------......———..一—.....—____________________________________________________________________________ 1. 6 0 (m, 2 Η) 1. 7 6 (m, 2 Η ), 2. 3 0 (t, 2 Η ), 4 7 0 5 (q 2 Η ) 4.11(t, 2Η), 7. 41(d, 1Η), 7.45(dd, 1H), 7. 68(d, 1H) 7.80(m,lH), 7.86(m,lH), 8.13(dd, 1H), 8. 48(s, 1H) 〇 步驟lib· 6-(4-(3 -氯-4-氣苯基胺基）啥。坐琳-g—基氣 基）-N -經基己醯胺（化合物17) 標題化合物17 (3 0 m g )係從化合物〇 21 0 -17使用类員似 於針對化合物13(實施例9)敘述之程序製備 LC-MS[M+1]4191H-NMR(DMS0) (5 1.28(m, 2H), 1.60(ra>2H) 1. 73(m, 2H), 2. 05(t, 2H), 4.17(t, 2H), 7. 25(d, 1H) 7.47(t，1H)，7,55(dd，1H) 7.76(d, 1H) 7.73(m，lH)， 8. 05(m，1H)，8. 48(s，1H)。 ’ 實施例12:製備7-(4-(3 -氯-4-氟苯基胺基）啥唾琳〜義 1150-9131-PF;Kai 144 200829575 氧基）-N-羥基庚醯胺（化合物18) 步驟12a· 7-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）喹唑啉—6-基氧）庚 酸乙酯（化合物〇 21 〇 -1 8) 標題化合物0 21 0 -1 8 (0 · 2 g )，係從步驟9 e之化合物 酸乙醋，使用類似於對於化合物〇21〇-13(實施例9)所述程 序製備：LC-MSm/z 420 [M+1]，A-NMR(DMSO) 51.13(t， 3H), 1.36(m,2H), 1. 46(in, 2H), 1. 54(m, 2H) 1. 78(πι, 2H), 2.27(t, 2H), 4.05(q, 2H), 4.11(t, 2H), 7.41(d, 1H), 7.47(dd, 1H), 7.70(d, 1H), 7.81(m,lH)5 7. 84(m, 1H), 8· 13(dd，1H), 8· 50(s, 1H) o 步驟12b. 7-(4-(3 -氣-4-氟苯基胺基）啥e坐琳-6-基氧 基）-N-羥基庚醯胺(化合物li) —>^ +
標題化合物18(20 mg)係從化合物乙基7-(4-(3-氯 -4-氟苯基胺基）喹唑啉—6-基氧基-庚酸酯（0210 —18)使用 , 類似於針對化合物13(實施例9)敘述之程序製備：LC-MS 433 [M+l], mpl45-149〇C ^ ^-NMRCDMSO) δΐ. 32(m, 2H), L 47(m, 4H) 1, 88(m, 2H), 1.94(t, 2H), 4.12(t, 2H), 7.43(t, 1H), 7.51(dd,lH), 7.71(d, 1H) 7.80(m, 1H) 7.86(d, 1H)，8.15(dd, 1H), 8.51(s，lH)。 實施例13:製備2-(4-(3_乙炔基苯基胺基）喹唑琳—6 一基 氧基）-N-羥基乙醯胺（化合物19) 步驟13a· 4-(3-乙炔基苯基胺基）喹唑琳-6-基乙酸酯（化 合物0208) 1150-9131-PF;Kai 145 200829575 標題化合物0208( 0. 8 g、產率：73%)係從4—氯啥唆 琳-6-基乙酸酯0204及3 -乙炔基苯胺0206使用類似於 針對化合物0 2 0 7 (實施例9)钦述之程序製備：[c - M S 304 [Μ+1]，NMR(DMSO) 5 2. 36(s, 3H), 4· 26(s，1H)，
>, *„1 j........» 5.,3.*C "t) ) ^ ^ C (jL) j[ H j 7 _ 9 5 in 2 H 8. 02(d, 1H), 8. 71(s，1H), 8· 96(s, 1H)。 步驟13 b· 4-(3_乙快基苯基胺基）喧π坐琳—6 —醇（化合物 0211) 標題化合物0211 (0 · 6 g、產率：88%)使用類似於針對 化合物0209(實施例9)敘述之程序製備：LC-MS瓜/> 262 [M+l], lH-NMR(DMSO) 5 4. 17(s, 1H), 7. 19(d, 1H), 7. 36(t， 1H), 7. 43(dd, 1H, 7. 65(d, 1H), . 82(d, ' ..... " ——r-· 1H)，.95(d，1H)，8.10(s, 1H), .48(s，1H)。 步驟13c· 2-(4-( 3 -乙炔基苯基胺基）坐琳—6-基氧基）乙 酸乙基酯（化合物0212-19) 標題化合物0212-19(0· 2 g、產率：75%)係從4-(3-乙 快基苯基胺基）喹唑啉-6-醇0211及2-溴乙酸乙g旨使用 類似於針對化合物0210-13(實施例9)敘述之程序製備： LC-MS m/z 322 [M + 1]，mpl8卜 182 °C VH-NMR(DMSO) 5 1.28(t.3H), 4.20(q, 2H), 4. 25(s, 1H) 4. 32(s, 2H), 7.23(d, 1H), 7.41(t, 1H), 7. 57(dd, 1H), 7. 74(d, 1H), 7.91(d，1H)，7.95(m，1H)，8,10(s，1H), 8.48(s，1H)。 步驟13d. 2-(4-(3-乙炔基苯基胺基）喹唑啉〜6—基氧 基）-N-羥基乙醯胺（化合物i9) 1150-9131-PF;Kai 146 200829575 標題化合物1 2(40 mg)係從2-（4-(3-乙炔基苯基胺基） 喹唑啉-6-基氧基）乙酸乙基酯0212-19使用類似於針對 化合物13(實施例9)敘述之程序製備：LC-MS观/> 335 [M+l]， mp:189-191 °C ，4-NMR(DMSO) 5 4. 27(s. 1H), ^^ s~d. ^ ______1 tj) 7 7 6 ( jh 2 jj ) L83(m，2H)，7.88(s, 1H)，8.10(s，1H)，8.82(m，1H)。 貫施例14 :製備4 - (4 - (3 -乙快基苯基胺基）啥a坐琳—6 一基 氧基）-N -經基丁酿胺（化合物21) 步驟14a· 4-(4-(3 -乙炔基苯基胺基）啥峻琳-6-基氧基）丁 酸乙酯（化合物0212-21) 標題化合物0212-21(0.2 g，78%)係從化合物4-(3- 乙炔基苯基胺基）喹唑啉-6-醇（0211)及4-溴丁酸乙酯使用 類似於針對化合物0210-13(實施例9)敘述之程序製備: LC-MS m/z 376 [ΜΗ], ^-NMRCDMSO) 5 1. 12(t. 3H), 1. 79(m, 2H), 2. 32(t, 2H), 4. 04(q, 2H), 4. 16(t, 2H), 4,21(s,1H), 7.02(dd, 1H), 7.21(d, 1H), 7.39(dd, 1H), T.70(t, 1H), 7.88(s, 1H), 8. 00(m, 1H), 8.51(s,lH), 8, 65(s, 1H)。 步驟14b, 4-(4-(3-乙快基苯基胺基）啥峻琳-6-基氧 基）-N-經基丁醯胺（化合物21) 標題化合物21(50 mg)係從4-(4-(3-乙炔基苯基胺基） 喹唑啉-6-基氧基）丁酸乙酯（〇212-21)使用類似於針對化 合物13(實施例9)敘述之程序製備：LC-MS m/z 363 [M + 1], mpl82-1 86〇C 5 ^-NMRCDMSO) 5 2. 02(m, 2H), 2.20(t, 2H), 1150-9131-PF;Kai 147 200829575 4-16(t, 2H), 4.20(s, 1H), 7. 24(d, 1H), 7. 43(t, 1H), 7-52(dd, 1H), 7.75(d, 1H), 7. 94(m, 2H), 8. 06(s, 1H), 8· 53(s，1H) 實施例15:製備6-(4-(3-乙炔基苯基胺基）喹唑啉—6-基 ————氣I.〕二 N 二羥 | & 步驟15a. 6-(4-(3-乙炔基苯基胺基）喧α坐淋-6-基氧基）己 酸酯（化合物021 2-23) ^ 標題化合物6-(4-(3-乙炔基苯基胺基）喹唑啉—6-基氧 基）己酸乙酯（021 2-23)(0.3 g，64%)係從化合物4-(3-乙 快基苯基胺基）喹唑啉-6-醇（0211)及6-溴己酸乙酯使用類 似於針對化合物0210-13(實施例9)敘述之程序製備： LC-MS m/z 404 [M+1]. …一^ ……....— -'· —~ 〜 卜 —— —.〜·„._· _ 步驟15b· 6-(4-(3-乙炔基基）喹唑啉=6=基氧 基）-Ν-羥基己醯胺（化合物23) 標題化合物23(50 mg)係從6-(4-(3-乙炔基苯基胺基） 、瘦哇啉-6-基氧基）己酸乙酯（〇212-23)使用類似於針對化 合物13(實施例9)敘述之程序製備·· LC-MS π/ζ 391 [M+l ]，mpl 76-182 〇C，UMIKDMSO) 5 1, 46(m，2H)， 1. 60(m, 2H), 1.81(m, 2H), 2. 00(t, 2H), 4. 15(t, 2H), 4.20(s,1H), 7.24(d, 1H), 7.43(t, 1H), 7.52(dd, 1H), 7.72(d，1H), 7.92(m, 2H), 8.04(s, 1H), 8.53(s，lH)。 實施例16: 4-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7-曱氧基喹唑啉 - 6-基氧基）-#-經基丁醯胺（化合物4) 步驟16a· 4-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-甲氡基喹唑啉 1150-9131-PF/Kai 148 200829575 _6 一基氧基）丁酸乙基酯（化合物0110-4) 標題化合物0110 —4製備成黃色固體（600呢，88 4%) 係從步驟If之化合物〇1〇9(5〇〇 mg, 156匪〇1)及5一漠 戊酸甲酉旨（32〇 mg, 1· 64 mmol)使用類似於針對化合物 0110 1 (^ lgms j +. i jj NMRCCDCh)： 1. 80-1. 97(m, 4H), 2. 48(t, >6. 6Hz, 2H), 3.67(s, 3H), 3.97(s, 3H), 4. 18(t, 1=1.2 Hz, 2H), 7.14(t, /^8.7 Hz, 1H), 7. 24(s, 1H), 7.29(s, 1H), 7. 66-7. ll(m5 iH), 7. 96(dd, /=6.9 Hz, 2. 7Hz, 1H), 8· 〇3(s，1H), 8. 66(s，1H)。 步驟16b· 4 -（4-(3-氯-4 - It苯基胺基）- 7-曱氧基喧嗤琳 - 6-基氧基）-#羥基丁醯胺（化合物4) —" '.-内..〜. ·.. "―····.—~ — —；—— 標題化合物4製備成白色固體（140 mg, 35%)，係從化 合物01 1 0-4(40 0 mg，0· 92 mmo 1)使用類似於針對化合物 1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 435 [Μ + 1] + ; 1 NMRCDMSO-^/6)： J 1. 69-1. 84(m, 4H), 2, 07(t, /=6. 6 Hz, 2H), 3.94(s, 3H), 4.15(t, /-6.0 Hz, 2H), 7.21(s, 1H), 7.45(t, /=9.0 Hz, 1H), 7. 78-7. 83(ra, 2H), 8. 13(dd, /=6. 9 Hz, 2.4 Hz, 1H), 8. 03(s, 1H), 8.50(s, 1H), 8. 72(s, 1H), 9. 54(s，1H)，10· 41(s, 1H)。 實施例17: 5_(4-(3_乙炔基苯基胺基）-7-曱氧基喹唑啉 -6-基氧基羥基戊醯胺（化合物10) 步驟17a. 5-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-曱氧基喧峻琳-6 -基氧基）戊酸甲基酯（化合物0113 -10) 1150-9131-PF;Kai 149 200829575 標題化合物0113-10製備成黃色固體（500 mg，72°/〇) 係從化合物Oil 2(500mg，1.7 mmol)及5-溴戊酸甲酯（211 mg，0.89 mmol)使用類似於針對化合物0110-1(實施例1) 敘述之程序製備：LCMS: 406 [M+l]+。 *歩，5 二(-4 - (-3 :乙 〕二》7二軍一一二— 基氧基）-Ν_羥基戊醯胺（化合物10) 標題化合物10製備成白色固體（20 0 mg, 40%)係從化 合物01 1 3-1 0(500 mg, 1.23 _〇1)使用類似於針對化合物 1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS·· 407 [M+l] + ; 4 NMRCDMSO-^e): ^ 1. 71-1. 85(m, 4H), 2. 07(t, /-7. 2 Hz, 2H), 3.93(s, 3H), 4.16(t, /=6. 3 Hz, 2H), 4.20(s, 1H), 7.19(m, 2H), 7.41(t, /=8.1 Hz, 1H), 7. 84(s, 1H), .:.-— — ——--—----.---—，-----—-'—一…-…一·— —-^_—— —^—--—:— — —..— 7.90(dd, /=8. 4 Hz, 1.2 Hz, 1H), 8. 00(t, /-1. 8 Hz, 1H), 8.5〇(s，1H), 8.72(s, 1H)，9.48(s, 1H)，10.40(s, 1H)。 實施例18:製備5-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）喹唑啉-6-基 氡基）-#-羥基戊醯胺（化合物16) 步驟18a. 5-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）喹唑啉-6-基氧基） 戊酸乙基酯（化合物0210-16) 標題化合物0210-16(0.2 g，68%)係從化合物0209 4 -（3-氣-4-氟苯基胺基）喹唑啉-6-醇（0.2 g，0.69 mmol) 及5-溴戊酸甲酯（0.14 g，0.69 mmol)使用類似於針對化 合物 0210-13(實施例 9)敘述之程序製備：LCMS 376 [M+l]+。 步驟18b. 5-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）喹唑啉-6-基氧 1150-9131-PF;Kai 150 200829575 基羥基戊醯胺（化合物16)。 標題化合物16(24mg，67%)係從化合物021 0-1 6(37 mg， 〇· 09 mmol)使用類似於針對化合物i3(實施例9)敘述之程 序製備：mp: 85. 9°C ; LCMS 40 5 [M + l]+. NMR(DMS0-A) 5 ^ 2； 04(t, -/=7. 5-Hzr 2Η)Γ 4,^l· 2H), 7.44(t, /-9Hz,1H), 7.51(dd, /-9 Hz, /-2. 4 Hz, 1H), 7.73(d, /=8. 7 Hz,1H), 7. 82(in, 1H), 7.88(d, /=2. 4,1H) 8.16(dd, /=6, 9 Hz, /=2. 7 Hz 1H), 8. 52(s, 1H), 8. 69(s, 1H), 9.67(s,lH), 10.38(8, 1H) 貫施例19:製備7-(4-(3 -乙快基苯基胺基）嗤唾琳—6 一基 氧基）-#-羥基庚醯胺（化合物24) 步驟19a· 7-(4-(3-乙炔基苯基胺基）喹唑啉-6-基氧基）庚 酸乙酯（化合物0212-24) 標題化合物0212-24(0.21 g, 58%)係從化合物4-(3-乙炔基苯基胺基）喹唑啉-6-醇（021 1 )(0.23 g，0.86 mmol) 及7-溴庚酸乙酯（〇· 20 g，〇· 86 mmol)使用類似於針對化 合物0210-13(實施例9)敘述之程序製備：LCMS 418 [M+l]+。 步驟19b· 7-(4-(3-乙炔基苯基胺基）喹唑啉基氧 基羥基庚醯胺 (化合物24) 標題化合物24(50 mg，42%)係從化合物0212-24(123 邶，〇·29 mmol)使用類似於針對化合物13(實施例9)敛述 之程序製備：1^^^ 405 [»1+1]+，111關以0^^0-心）：51.44(11] 1150-913l-pF;Kai 151 200829575 2H), 1.48(ra, 2H), 1.59(m, 2H), 1.67(m, 2H), 2.11(t, /=7.2 Hz, 2H), 3.50(s, 1H), 4.17(t, /= 6.3 Hz, 2H), 7.28(d, /=7.5 Hz, 1H), 7. 37(t, /=6,9 Hz, 1H), 7.48(d, /=9.0 Hz, 1H), 7.78(dd, /=21.3 Hz, /=7.8 Hz, 1H), 實施例20:實施例1:合成7-(4-(3-氯-4-氟苯基胺 基）-7-(2-甲氧基乙氧基）喹唑啉-6-基氧基）-#-羥基庚醯 胺（化合物30) f % 步驟20a· 3 -輕基-4 -（2-甲氧基乙氧基）苯甲酸乙基醋（化 合物 0402-30) 對0401 ( 1.82 g，10.0 mmol)溶於尤，二甲基甲醯胺 (20 mL)之溶液’添加碳酸鉀（1.38 g，1〇.〇 mmo 1)。將混 "' * ^ ..··.. — - — - — -一 - - - * - - - 合物擾拌15分鐘，然後緩慢滴加2-甲氧基乙基4-甲基苯 磺酸酯（2. 30 g，10· 0 mmol)溶於#，，二甲基甲醯胺（5 mL) 之溶液。將混合物於室溫攪拌48小時並過濾。將濾液於真 , 空中濃縮並將殘渣溶於乙酸乙酯（30 mL)，將有機層以濃鹽 \ 水清洗（2 0 mLx3)並以硫酸鈉乾燥、過濾並蒸發以得標題產 物 0402-30 白色固體（1· 2 g，50%): LCMS: 241 [M+l] +。j NMR(DMSO-de) J'l. 26(t, /=7. 5 Hz, 3H), 3.65(m, /-1. 5 Hz, 2H), 4.11(m, /=4.5 Hz, 2H), 4.21(m, /=4.5 Hz, 2H), 7.00(d, /=9 Hz, 1H), 7.37(m, /=2 Hz, 2H), 9.40(s, 1H) ° 步驟20b· 3-(7-乙氧基-7-側氧基庚氧基）_4-(2-甲氧基乙 氧基）苯甲酸乙基酯（化合物0403-30) 1150-9131-PF;Kai 152 200829575 化合物 0402-30 (204.0 mg, 0·85 mmol)及 7-溴庚酸 乙酯（201.0mg, 0.85mmol)及碳酸鉀（353.0mg, 2.50mmol) 於N，N-二曱基甲醯胺（5 mL)於60°C攪拌3小時。將混合物 過濾。將濾液於真空中濃縮並將殘渣溶於乙酸乙酯（3 〇 ——1切叶一然 燥、過濾並蒸發以得標題產物0403-30黃色固體（325 mg， 96%): LCMS: 397 [M + l]+。 步驟20c· 5-(7 -乙氧基-7-側氧基庚氧基）-4-(2 -曱氧基乙 氧基）- 2-硝基苯甲酸乙基酯（化合物0404-30) 將化合物 0403-30(325.0 mg，0.82 mmol)溶於乙酸（2 raL)並於室溫攪拌。然後，緩慢滴加發煙硝酸（〇. 39 g，6. 〇 mmol)。將混合物攪拌於室溫2小時。倒入冰水（50 mL)並 以乙酸乙酯（20 mLx2)萃取。將合併的有機層以NaHC〇3水 >谷液（1 0 mLX 3)及濃鹽水（1 0 mLX 3)清洗，並以硫酸納乾燥、 過濾、並蒸發以付標題產物〇 4 0 4 - 3 0黃色油（3 3 0 in g，1 〇 〇 %): , LCMS: 442 [M+l]+ 。 步驟20d· 2-胺基-5-(7 -乙氧基-7-側氧基庚氧基）-4-(2- 甲氧基乙氧基）苯甲酸乙酯（化合物0405-30) 將 0404-30 (370.0 mg 0.82 _〇1)、乙醇（4.4 mL)、 1 水（3 mL)及鹽酸（〇· 08 mL)攪拌形成一澄清的溶液。加入鐵 粉（45 9· 0 mg，8· 2 mmol)。將混合物攪拌回流30分鐘並冷 卻至室溫，以1 0%氫氧化鈉溶液於冰水浴中調整至pH為8。 將混合物過濾並將滤、液濃縮以移除乙醇，並以乙酸乙酯（2 〇 mLx2)萃取。將合併的有機層以濃鹽水清洗（1〇 mLx3)並以 1150-9131-PF;Kai 153 200829575 硫酸鈉乾燥、過滤ι並蒸發以得標題產物〇 4 0 5 - 3 0黃色油 (315 mg, 93%): LCMS: 412 [M+1]+ 。 步驟2〇e· 7-(7-(2-甲氧基乙氧基）-4-側氧基-3，4-二氫 啥嗤琳-6-基氧基）庚酸乙酯（化合物0406-30) 04*0 5™0—m^—0r 7 6--^ (48.0 mg, 〇·76 mmol)及甲醯胺（2.46 mL)之混合物，於授 拌1 90°C 3小時。將反應混合物冷卻至室溫。將曱醯胺減壓 移除，並將殘渣溶於乙酸乙酯（30 mL)。將有機層以濃鹽水 f % 清洗（1 〇 niLx5)並以硫酸鈉乾燥、過濾並蒸發以得標題產物 0406-30 白色固體（235 11^，98%):1^丛3:393 [肘+1]+。 步驟20f· 7-(4-氯-7-(2-曱氧基乙氧基）喹唑啉-6-基氧基） 庚酸乙基酯（化合物0407-30) 心.〜…一 ，Γ-f. ——- — 將產物 0406-30(235.0 mg, 0· 6 mmol)及磷醯三氯（3 mL) 之混合物，攪拌回流4小時。當得到澄清溶液，將多餘的 破醯三氣於減壓移除。將殘渣溶於乙酸乙酯（3〇 mL)並將有 I 機層依序以水（1〇 mLx2)、NaHC〇3水溶液（1〇 mLx2)及濃鹽 水（20 mLxl)清洗，以硫酸鈉乾燥、過濾並蒸發以得標題產 物 0407-30 黃色固體（233 mg，94%): LCMS: 411 [M+l]+。 步驟20g. 7-(4-（3-氯-4-氟苯基胺基）一7-(2-曱氧基乙氧 基）^圭吐琳6 -基氧基）庚酸乙g旨（化合物04Q8-30) 將產物 0407-30 (1 1 7.0 m g，0.28 mmol)及 3-氯-4- 氟苯胺（50.0 mg, 0.34 mmol)於異丙醇（3 mL)之混合物， 攪拌回流整夜。將混合物冷卻至室溫，將得到的沉澱分離、 以異丙醇及醚清洗。將固體乾燥以得標題化合物〇4〇8一3〇 U50-9131-PF/Kai 154 200829575 黃色固體（102 mg，70〇/〇: LCMS: 520 [MH]+。 步驟20h· 7 — (4-(3—氯-4-氟苯基胺基）-7 —(2—甲氧基乙氧 基坐琳—6-基氧基）-#-羥基庚醯胺（化合物30)
將新鮮製備的羥基胺溶液（3 mL，2. 0 mmol)置於25 mL 、元瓶 “加 4卜合 ^^一杏备Q县ΐ-O- m g ?— 0 r忍ΠΗΠ Θ l·)-並^摔 室溫24小時。將混合物以乙酸/甲醇中和。將混合物減壓 濃縮。將殘渣以製備HPLC精製以得標題化合物30黃色固 體（85 mg，84%): lcms: 507 [M+1] + ; lH NMR(DMS〇 —d6)j 1.33(m, 2H), 1.50(m, 4H), 1.79(s, 2H), 1.94(t, 2H), 3,29(s，3H)，3.72(s，2H)，4.11(s，2H), 4,25(s，2H)， 7.19(s, 1H), 7.42(t, 1H), 7.79(s, 1H), 8.10(d, 1H), 8： 47(s，1H)，8,65(s，1H)，9.52(s，1H)，10.33(s，1Ή)。 ' ’ ---...... ...... ~--V ........ ..... ·.·.一'一 ..... — — _ 實施例21:製備7_(4_(3一乙快基苯基胺基)Γ7=(2Γ甲氧基— 乙氧基）喧唾啉—6-基氧基羥基庚醯胺（化合物36) 步驟21a· 7-(4-(3-乙炔基苯基胺基）—7-(2-甲氧基乙氧基） 坐琳―6 —基氧基）庚酸乙酯（化合物0408-36) 將產物 0407-30( 1 02.0 mg, 0.25 mmol)及 3-乙炔基苯 胺（35.0 mg，0.3 mmol)於異丙醇（3 mL)之混合物，攪拌回 流整夜。將混合物冷卻至室溫將得到的沉澱分離、以異丙 醇及鱗清洗。將固體乾燥以得標題化合物〇4〇8-36黃色固 體（88 mg，72°/。）·· LCMS·· 491 [M+l]+。 步驟21b. 7-(4-(3-乙炔基苯基胺基）—7 —(2_甲氧基乙氧基） 啥唾啉-6-基氧基羥基庚醯胺（化合物36)
將新鮮製備的羥基胺溶液（3 mL，2 mmol)置於25 mL 1150~9131-PF;Kai 155 200829575 燒瓶。化合物0408-36(88. 0 mg, 〇· 18_〇1)添加至此溶液 並攪拌於室溫24小時。將混合物以乙酸/甲醇中和並減壓 濃縮。將殘渣以製備性HPLC精製以得標題化合物36白色
固體（40 mg，47%): LCMS·· 479 [M+l] + ;咜 NMR(DMSO-d6)J I. ^94 3.72(s, 2H), 4.11(s, 2H), 4. 25(s, 2H), 7.19(s, 1H), 7.42(t, 1H), 7.79(s, 1H), 8.1〇(d, 1H), 8. 47(s, 1H), , 8· 65(s，1H)，9. 52(s，1H), l〇· 33(s, 1H)。 實施例22··製備肀-（4-(3-氣~4-氟苯基胺基）-7~甲氧基喹 唑啉-6-基）-#_羥基戊二醯胺（化合物38) 步驟22a, 7-氯喹唑啉-4(3及)-酮（化合物〇3〇2) 將化合物0301 ( 1 7· 2 g，1 〇 〇 _〇 1)及甲醯胺（2〇 mL) 之混合物，於130°C攪拌30分鐘並於19(TC攪拌4小時。 將混合物冷卻至室溫。然後倒入冰及水混合物。將沉澱物 分離’以水清洗並乾燥以得標題化合物〇3〇2(15 8 g， (：87· 7%)。lH NMR(DMS0一乂）： J 7· 65(dd，1H)，7. 72(d，1H)， 8· 12(d，1H), 8· 36(s, 1H)。 步驟22b· 7-氯-6-硝基喹唑啉酮（化合物〇3〇3) 將化合物0302( 1 8.0 g，mm〇i)分次添加至搜拌中 之冷卻至Q°C濃硫酸（6〇 mL)及發煙硝酸（60 mL)混合物， 將混合物於常溫攪拌i小時，並加熱至45。〇整夜。將混合 物倒入冰水混合物。將沉澱物分離，以水清洗並乾燥。從 乙酸再結晶’以得標題化合物0303(14. 1 g，62· 7%)。j NMR(DMSO-⑺）：^ 8.〇〇(s，1H)，8.27(s, 1H)，8.65(s，1H)， 1150-9131-PF;Kai 156 200829575 12.70(s， 1H)。 乂驟2 2 c · 7曱氣基—6 一石肖基口奎嗤琳一 4 (3 #)—酉同（化合物 0304) 將化合物 0303(4.0 g，18.0mmol)及鈉（2.4g，45_〇1) 小時。將溶液以乙酸中和並以水稀釋以得標題化合物 0304(3.0 g, 77%) 〇 NMR(DMSO-^) ： ^4.10(s, 3H), 7.40(s, 1H)’ 8.24(s，1H)，8.50(s, 1H), 12.67(s, 1H)。 步驟22d. 4-氯-7—甲氧基—6-硝基喹唑啉（化合物〇3〇5) 將化合物 0304(3.8 g，17.2 mmol)懸浮於 p〇Cl3(75 mL) ’將混合物加熱回流4小時。將額外的p〇c 13於真空中 移除。將殘〜^ 液之混合物。將有機層乾燥，並移除溶劑，以得標題化合 物 0305 (3.4 g， 83%)。nmr(dms〇一⑹：j4 〇5(s， 3H)，7.44(s，1H)，8.27(s，1H)，8 53(s，1H)。 步驟22e· #-（3-氯—4 一氟苯基）-7 一甲氧基一 6—硝基喹唑啉 - 4-胺氣化氳（化合物〇3〇7) 將化合物0305(3.4 g，14,2 mmol)及3-氣-4-氟苯胺 (0406)(2.2 g，15.2 mmol)及異丙醇（120 mL)之混合物， 攪拌回流3小時。將混合物冷卻至常溫並將沉澱物分離、 以曱醇及醚清洗並且然後乾燥以得標題化合物〇3〇7(4, 66 g，85%)。4 NMR(DMSO-A): J 4. 1 〇(s，3H), 7· 55(dd， 2H),7.74(m, 1H), 8. 07(dd, 1H), 8. 90(s, 1H), 9. 55(s, 1H), 11· 6(s, 1H)。 1150-9131-PF;Kai 157 200829575 步驟22f. #-(3 -氯-4-氟苯基）-7 -曱氧基-6-硝基喹唑啉 -4-胺（化合物0308) 將化合物 0307(3· 5 g，10· 0 mmol )、鐵屑（11· 2 g， 200· 0 mmol)及乙醇（100 mL)、濃鹽酸（2 mL)及水（30 mL) 一 — 混-合'物功口 ^-回各，小-日·』一過移〜除—鐵^屑—^ 縮至1 / 5體積。將沉澱物分離並乾燥以得標題化合物 0308(2.2 g，69%)。NMR(DMS0-A): J3.97(s，3H)， 5.38(s, 2H), 7.10(s, 1H), 7. 36(s, 1H), 7. 39(t, 1H), 《 7.80(m, 1H), 8.08(dd, 1H), 8. 38(s, 1H), 9. 39(s, 1H) ° 步驟22g· 3-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹唾琳 基胺基甲醢基）丙酸甲醋（化合物0310-38) 將化合物0308(500· 0 mg, ι·57 mmol)及三乙基胺 * ' — -- — — — _ — (165. 0 mg, 1. 65 mmol)溶於二氯曱烷（5〇 mL)。將混合物 冷卻至Ot：並將5-氯-5-側氧基戊酸甲酯（270 mg, 1. 65 ramol)於二氣曱烷（5 mL)之溶液〇°c於20分鐘内滴加至上 ^ 述混合物。將反應混合物冷卻並攪拌於常溫1小時。將混 合物以水（50 mLx2)及濃鹽水（50 mL)清洗。將有機層以 MgSCh乾燥、過濾並濃縮以得標題化合物〇31〇-38(550 mg， 78%)，LC¥S: 448 [Μ+1Γ。 步驟22h. #-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）—7-甲氧基喹唑啉 -6-基）-yV5-羥基戊二醯胺（化合物38) 於攪拌中之羥基胺氯化氫（4.67 g，67 mmol)於甲醇 (24 mL)之溶液，於0°C添加氫氧化鉀（5.61 g，100 mmol) 於曱醇（14 mL)溶液。添加後，將混合物於〇它搜拌3 〇分 1150-9131-PF/Kai 158 200829575 鐘並於‘溫靜置。將得到的沉澱物分離並製備成溶液成以 得游離羥基胺。 將上述新鮮製備之羥基胺溶液（5. 6 mL，10. 〇 mmol) 置於 10 mL 燒槪。將化合物 03 1 0-38( 55〇. 〇 mg，l 23 mm〇1) 鲁伽去‘㈣鲁务於4笔秘寺泰美秦回—溫丞宴善 過程以TLC監控。將混合物以乙酸中和。將混合物減壓濃 縮。將殘潰以製備性HPLC精製以得標題化合物38灰色固 體（250 mg, 45%)： LCMS: 448 [M+1]+； ^ NMRCDMSO-^/e) ： ^ 1. 85(m, 2H), 2. 06(t, /=7.5 Hz, 2H), 2.48(t, /-7.2 Hz, 2H), 4. 00(s, 3H), 7. 24(s, 1H), 7.42(t, /-9.0 Hz, 1H), 7. 80(m, 1H), 8.10(dd, /=7. 2 Hz, 2.7 Hz, 1H), 8.52(s, 1H), 8.70(s, 1H), 8/82(s, 1H), — — ―一 -—’ — — -------------------------.....—...〜_—.——— — ——— _______________ 一 _________________ 9· 48(s, 1H)。9. 79(s，1H), 1〇· 40(s, 1H)。 實施例2 3 :製備^ — ^—“-氯-^氣苯基胺基卜了-甲氧基喹 ................. - -....-… ....... ....... ... 唑啉-6-基）-yV8-羥基辛二醯胺（化合物4〇) 步驟23a· 8-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹唑啉 -6-基胺基）-8-侧氧基辛酸甲基酯（化合物〇31〇一4〇) 標題化合物031 0-40製備成黃色固體（35〇 mg，78%) 係從化合物0308(31 9 mg, Γ·ό _〇ι)及甲基8一氯—8一側氧 基辛酸S旨（227 mg， 1.1 _〇ι)使用類似於針對化合物 031 0-38(實施例22)敘述之程序製備·· LCMS: 489 [M + 1]+。 步驟23b· (4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-曱氧基喹唑啉 - 6-基）-#-羥基辛二醯胺（化合物4〇) 標題化合物40製備成黃色固體（120 mg，30%)係從化 1150-9131-PF;Kai 159 200829575 合物031 0-38(400 mg，0·8 mmol)使用類似於針對化合物 38(實施例22)敘述之程序製備：LCMS: 490 [Μ+1Γ; 4 NMR(DMS0-A): J1.29(in，4H)，1.48(m，2H)，1.59(m，2H)， 1.93(t, /=7. 2 Hz, 2H), 2.45(t, >7. 2 Hz, 2H), 4. 00(s, g 〇 H z 1H) 7.74(m, 1H), 8. 08(d, /=1.2 Hz, 1H), 8. 54(s, 1H), 8.66(s, 1H), 8.83(s, 1H), 9.46(s, 1H), 9.95(s, 1H), 10· 33(s, 1H)。 實施例24:製備V-(4-(3 -乙炔基苯基胺基）-γ —甲氧基啥 唑啉-6-基）-#_羥基戊二醯胺（化合物42) 步驟24a· #-(3 -乙快基苯基）-7 -曱氧基~6 -硝基啥嗤琳一4- 胺氯化氫（化合物0307-42) 一……——".一： …—"—^ ^ —— -------------------------—- - —.....^…———… _ — 標題化合物0307 - 42製備成黃色固體（4. 7 g，— 係從化合物0 305 ( 35 0 mg，0 · 78 mmo l )及3 -乙缺基苯胺 (2.34 g，20.0 _〇1)使用類似於針對化合物0306-38(實 施例 22)敘述之程序製備：LCMS: 321 [M+iy; j NMRCDMSO-^/e): ^4. ll(s, 3H), 4. 24(s, 1H), 7. 42(d, 1H), 7.50(t, 1H), 7. 61(s, 1H), 7. 79(d, 1H), 7. 93(m, 1H), 8.93(s, 1H)，9.57(s，1H), 11.56(bs，1Ή)。 步驟24b· #-(3-乙炔基苯基）-7 -甲氧基喹唑啉—4, 6一di # (化合物0309-42) 標題化合物0309-42製備成黃色固體（2·〇 g，69%)係 從化合物0307-42(3.2 g，1〇.〇 mmol)使用類似於針對化 合物0308-38(實施例22)敘述之程序製備：LCMS: 291 1150—9131-PF;Kai 160 200829575 [M+l] + ; NMR(DMS0~^6)： ^3.95(s, 3H), 4. 14(s, 1H), 5.33(s, 2H), 7.08(m, 2H), 7. 34(m, 2H), 7. 88(m, 1H), 8.04(s, 1H)，8.36(s, 1H), 9.29(s, 1H)。 步驟24c· 5-(4-(3-乙炔基苯基胺基）—7—曱氧基喹唑啉-6 — 標題化合物031 1-42製備成黃色固體（450 mg，77%) 係從化合物0309-42(407 mg，1·4 mmol)及5-氯-5-側氧 基戊酸甲醋（254 mg，1· 54 mmol)使用類似於針對化合物 ' 031 0-38(實施例22)敘述之程序製備：LCMS: 419 [M+l]+。 步驟24d· ^-(4-(3 -乙炔基苯基胺基）—7—甲氧基喹唑啉_6一 基）羥基戊二醯胺（化合物42) 標題化合物42製備成黃色固體（1〇〇 mg，47%)係從化 ' ——-- ' ——…-—-—-- ―一'...---'.--一-—-—...-_…- -———一…―….......——— ......................................................一.…一—一…—............................................. 合物031卜42(211 mg，0.5 mmol)使用類似於針對化合物 38(實施例22)敘述之程序製備： 實施例25 :製備#-(4-(3 -乙炔基苯基胺基）-7-甲氧基喧 # 唑琳-6-基）-yV6-羥基己二醯胺（化合物43) i - 步驟25a. 6-(4-(3-乙炔基苯基胺基）—7-甲氧基喹唑琳一6 -基胺基）-6-側氧基己酸甲酯（化合物〇311-43) 標題化合物031 1-43製備成黃色固體（530 mg, 71%) 係從化合物 0309-42(500 mg, 1·72 mmol)及甲基 6-氯-6- 側氧基己酸酯（323 mg, 1· 81 mmol)使用類似於針對化合物 031 1-42(實施例24)敘述之程序製備：LCMS·· 433 [M+l]+. 步驟25b· #-(4-(3_乙炔基苯基胺基）-7 -甲氧基啥唾琳-6 -基）羥基己二醯胺（化合物43) 1150-9131-PF;Kai 161 200829575 標題化合物43製備成黃色固體（1〇5 mg，24%)係從化 合物031卜43(432 mg，1·〇 _〇1)使用類似於針對化合物 42(實施例24)敘述之程序製備：mp: 191.2〜196.7°C; LCMS: 434 [M+l] + ; 4 NMR(DMS0-A): (5 1.58(m，4H)， 2 Η), 44»( ^ 4.16(s, 1H), 7.18(d5 /=7.8 Hz, 1H), 7. 25(s, 1H), 7.37(t, /=8. 1 Hz, 1H), 7. 84(d, /=8. 4 Hz, 1H), 7. 98(s, 1H), 8.51(s, 1H), 8.66(s, 1H), 8. 82(s, 1H), 9. 42(s, 1H), 9· 73(s，1H), 10· 35(s, 1H)。 實施例26: /-(4-(3-乙炔基苯基胺基）—7—甲氧基喹唑啉 -6-基）羥基辛二醯胺（化合物44) 步驟26a.甲基8-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-甲氧基喹 唑啉-6-基胺基）-8-側氧基辛酸酯（化合物031 1-44) 標題化合物031 1-44製備成黃色固體（15〇 mg，78%) 係從化合物0309-42( 1 20 mg, 〇·4 mmol)及甲基8-氯-8- 侧氧基辛酸酯（91 mg，0· 44 mmo 1)使用類似於針對化合物 031 1-42(實施例24)敘述之程序製備：LCMS: 461 [M+l]+。 步驟26b· #-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-甲氧基喹唑啉一6一 基羥基辛二醯胺（化合物44) 標題化合物44製備成黃色固體（30 mg，20%)係從化合 物031 1 -44( 1 50 mg, 0.3 _〇1)使用類似於針對化合物 42(實施例24)敘述之程序製備：LCMS·· 462 [M+l] + ; 4 NMRCDMSO-^e): 6Π.30(πι, 4Η), 1.51(m, 2Η), 1.62(m, 2H), 1.95(t, /-7. 2 Hz, 2H), 2. 45(t, /=7. 2 Hz, 2H), 4. 00(s, 1150-9131-PF;Kai 162 200829575 3H), 4.18(s, 1H), 7.19(d, /=7. 2 Hz, 1H), 7.26(s, 1H), 7.38(t, /=7. 8 Hz, 1H), 7. 86(d, /=7. 8 Hz, 1H), 7. 99(s, 1H)，8.52(s，1H)，8.83(s，1H)，9.44(s, 1H)。 實施例27:製備3-(4-(2-(4-(3-氣-4-氟苯基胺 稀醢胺（化合物6 6) 步驟2 7 a. (-曱基 3 _ (4 -經基苯基）丙稀酸|旨（化合物 0501-66) 將4-羥基肉桂酸（8,2 g, 50 mmol)及1滴H2S〇4於甲 醇（30 mL)之混合物，加熱回流整夜。然後將溶液蒸發，將 殘渣溶於乙酸乙酯，以飽和的NaHC〇3溶液清洗2次，以濃 鹽水清洗，以lgS〇4乾燥，濃縮以得標題化合物〇5 〇1 -6 6 白色固體（8.7 g，98%): LCMS: 179 [M+l]+。 — 步驟27b. (i1)-甲基3 -（ 4-（ 2-（甲苯磺醯基氧基）乙氧基） 苯基）丙烯酸醋（化合物0502 - 66) 將化合物 0501-66(5.0 g，28.0 mmol)及 2-漠乙醇（3. 9 g，62. 0 mmol)及碳酸鉀於N，二甲基曱醯胺之混合物， 於8 0°攪拌24小時。反應過程以TLC監控。將混合物過濾。 將濾液減壓濃縮。將殘渣以二乙醚请洗，並乾燥以得（^)— 甲基3-(4-(2 -經基乙氧基）苯基）-丙稀酸酯黃色固體（1 6 g， 26·0%): LCMS: 223 [M+l]+ 。 於三乙基胺（0·3 g, 3 mol)及二氣甲烷（2〇 mL)之混合 物’刀-人添加甲本石只醢基氣（285 mg, 1 · 5 mm〇1 )，並掩拌 〇· 5小時。將化合物（i1) -甲基3-(4-(2-羥基乙氧基）苯基） 1150-9131-PF;Kai 163 200829575 丙烯酸S旨（333 mg, 1· 5 mmol)添加至上述混合物，並加熱 回流24小時。將反應混合物添加飽和氯化銨溶液，並將有 機層分離，以濃鹽水清洗、乾燥（MgS〇4)，蒸發，以得化合 物 05 02-66 白色固體（2〇〇 mg, 36%) : LCMS: 377 [M + 1 ] +。 基）-7-甲氧基喹唑啉-6-基氧基）乙氧基）苯基）丙烯酸酯 (化合物05Ό3-66) 將化合物 0 1 09 ( 1 76 mg, 0· 55 mmol)及 05 02-66( 1 52 mg， r " 〇· 94 mmol)及碳酸鉀之混合物，於N，#-二甲基曱醯胺攪 拌於80°C 24小時。反應過程以TLC監控。將混合物過濾。 將濾液減壓濃縮。將殘渣以二乙醚清洗，並乾燥以得標題 化合物 0503-66 黃色固體（281 mg, 98%): LCIS: 524 [M+l]+。 步驟27 d, ( - 3 - (4 - ( 2 - ( 4 - (3 -氯-4 -氟苯基胺基）-7 -甲氧 基喹唑啉-6-基氧基）乙氧基）苯基羥基丙烯醯胺（化合 物66) \ 標題化合物66製備成白色固體（65 mg, 19%)係從化合 物0503-66(346. 0 mg, 0· 66 mmol)使用類似於針對弗合物 1 (實施例 Γ)敘述之程序製備 NMRCDMSO-^/e): ^ 3.93(s, 3H), 4.48(s, 4H), 6.31(d, /-16.2 Hz, 1H), 7.05(d, /-8.1 Hz, 2H), 7.21(s, 1H), 7.44(t, /-9.0 Hz, 1H), 7. 52(d, /-8.1Hz, 2H), 7. 78(d, /=10. 2 Hz, 1H), 7.88(m, 1H), 8. 12(dd, /-6. 6Hz, 2. 7Hz, 1H), 8.50(s, 1H), 8.96(s, 1H), 8.50(s, 1H), 9. 56(s, 1150-9131-PF;Kai 164 200829575 1H)，1 〇· 65(s，1H)。 實施例28:製備#-(4-(3-氯—4-氟苯基胺基）— 7 — (2_甲氧 基乙氧基）喹唑啉-6-基）-yV5-羥基戊二醯胺（化合物68) 乂驟28a. 7-(2-甲氧基乙氧基）-6-硝基喹唑琳—4(3#)一酮 將納（2·07 g, 90 mmol)於0°c添加至2-甲氧基乙醇 (125 mL)，直到鈉溶解。將化合物03〇3(6· 77 g，3〇· 〇匪〇1) 添加至此溶液。將混合物於9〇t：攪拌24小時並以乙酸調 整至pH7。將水（50 mL)添加於此混合物並分離得到的黃色 沉澱物，以水清洗並乾燥以得標題化合物〇3〇4-68黃色固 體（7·〇〇3 g，88%): LCMS·· 266 [M+l]+。 步驟28b· 4-氣-7-(2-甲氧基乙氧基）-6-硝基喹唑琳（化合 …，...---------_——〜—._—........:------------------------------------------------------------------------------------------------- _ 物 0305-68) -—— 將產物 0304-68(5. 30 g, 20. 0 mmol )及碟醯三氯（5〇 mL) 之混合物，攪拌回流5小時。當得到澄清溶液，將多餘的 鱗醯三氯於減壓移除。將殘渣溶於乙酸乙酯（丨〇 〇 mL )並將 有機層依序以水（30 mLx2)、NaHC〇3水溶液（20 mLx2)及濃 鹽水（2 0 mLx 1)依序清洗，以硫酸鈉乾燥、過濾並蒸發以得 標題產物 0305 - 68 黃色固體（5.31 g，94°/。)： LCMS: 284 [M+l]+。 步驟28c· #-(3-氯-4-氟苯基）-7 -（2-甲氧基乙氧基）一 6一硝 基喹唑啉-4-胺（化合物0306-68) 將產物 0305-68(5.31 g，18.7 mmol)及 3-氯-4-氟苯 胺（5.45 g, 37.4 mmol)於異丙醇（150 mL)之混合物攪拌回 1150-9131-PF;Kai 165 200829575 流整仪。將混合物冷卻至室溫將得到的沉澱分離、以甲醇 及醚β洗。將固體乾燥以得標題化合物〇 3 6 6 8黃色固體 (5.70 g, 11%)： LCMS: 393 [M+l]+〇 步驟28d· (3-氣-4-氟苯基）-7-(2-甲氧基乙氧基）喹唑 將 0306-68(5,70 g，14.5 mmol)、乙醇（165 mL)、水 (43. 5 mL)及鹽酸（2. 9 mL)之混合物，攪拌形成一澄清的溶 液。加入鐵粉（16.24 g，290.0 mmol)。將混合物攪拌回流 2小時。冷卻至室溫，以1 〇 %氫氧化鈉溶液於冰水浴調整 至pH為11並過濾。將濾液濃縮以移除乙醇，並以乙酸乙 酯（100 mLx2)萃取，將合併的有機層以濃鹽水清洗（3〇 mLx3) 並以硫酸鈉乾燥、過濾並蒸發以得標題產物〇308_68黃色 …圓.…·- 圓——....-----------------——-—————~――— —— -圓―—一_ — ~ —— 固體（4· 92 g，93%): LCMS: 363 [M + l]+。 ————— 步驟28e. 5-（4-（3-氯_4-氟苯基胺基）-7-（2-甲氧基乙氧 基）喹唑啉-6-基胺基）-5-側氧基戊酸甲基酯（化合物 0310-68) 將5-氣-5-側氧基戊酸曱酯（0.198 g, 1.2 mmol)添加 至化合物 0308-68(0·22 g，0·6 mmol)於 30 mL 二氯甲院 及三乙基胺（0. 48 g，4· 8 mmol)之溶液。將混合物於m 攪拌2小時。將反應混合物以水清洗並以硫酸鈉乾燥、過 濾並蒸發以得標題產物0310-68棕色油（270 mg，92%): LCMS: 491 [M+l]+ 。 步驟28f· #-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-（2-甲氧基乙氧 基）喹唑啉-6 —基羥基戊二醯胺（化合物68) 1150-9131-PF;Kai 166 200829575 對於攪拌中之羥基胺氣化氫（4·67δ，67 mmol)於甲 醇（24 mL)溶液，於〇°c添加氳氧化鉀（5·6ι g，i〇〇 mmol) 於甲醇（14 mL)溶液。添加後，將混合物於攪拌3〇分 鐘並於低溫靜置。將得到的沉澱物分離並製備成溶液成以 —一☆一— 〇 ^ -------- 將上述新鮮製備之羥基胺溶液（6 mL， 4. 0 mmo 1)置於 25 mL燒瓶。將化合物031 0 —68(27〇呢，〇· 55mmol)添加至 此溶液並於室溫揽拌4小時。將混合物以乙酸/曱醇中和。 將混合物減壓濃縮。將殘渣以製備性HPLC精製以得標題化 合物 68 黃色固體（220 mg，75%): LCMS·· 492 [M+l] + ; 4 NMRCDMSO-^) ： 1.83(m, /=7. 5 Hz, 2H), 2. 05(t, /=7. 2 Hz, 2H), 2.43(t, /=6. 9 Hz, 2H), 3.31(s, 3H), 3. 76(t, /=4.5 Hz, 2H), 4.32(t, >4. 2 Hz, 2H), 7.28(s, 1H), /=9 Hz, 1H), 7. 77(ra, 1H), 8.10(m, /=2.1 Hz, 1H), 8.50(s, 1H), 8.67(s, 1H), 8. 752(s, 1H), 9. 33(s, 1H), 9. 77(s，1H)，10. 38(s，1H)。 貫加例29:製備V -（4-(3 -氯_4 -就苯基胺基）-7 -（2 -曱氧 基乙氧基）喹唑啉-6-基）-#-羥基己二醯胺（化合物69) 步驟29a. 6-（4-(3-氣-4-H苯基胺基）-7-（2-甲氧基乙氧 基）喹唑啉-6-基胺基）-6-側氧基己酸甲酯（化合物 0310-69) 將6-氯-6-側氧基己酸甲酯（0.36 g，1·76 _〇1)添加 至化合物 0308 - 68(0. 15 g，0.4 mmol)、25 mL 二氣甲烧及 三乙基胺（0· 1 62 g，1. 6 mmo 1)之溶液。將反應混合物於〇 1150-9131_PF;Kai 167 200829575 °C攪拌2小時。將反應物以水清洗並以硫酸鈉乾燥、過濾 並蒸發以得標題產物031 0-69棕色油（185 mg，92%): LCMS: 505 [M+1]+. 步驟29b. Λ"1-(4 -（3-氣-4-氟苯基胺基）-7-(2~甲氧基乙氧 將新鮮製備的羥基胺溶液（6 mL，4mmol)置於25 mL燒 瓶。化合物031 0-69( 1 85 mg, 0· 38mmol)添加至此溶液並 於室溫攪拌4小時。將混合物以乙酸/曱醇中和。將混合物 減壓濃縮。將殘渣以製備性HPLC精製以得標題化合物69 白色固體（150 mg， 74%): LCMS: 506[M+1]+; ]H NMR(DMSO-d〇: 1.58(m, 4H), 1.98(t, /=5.7 Hz, 2H), 2.46(t, 2Ή), 3. 30(s, 3H), 3. 78(t, 7=4. 2 Hz, 2Ή), ..... r 一 - 一 ___ —一 -T — 4.32(t, /=5.1 Hz, 2H), 7. 28(s, 1H), 7. 39(t, /-9 Hz, W, 7- 79(mj 1H^ 8.11 (m, /=2. 7 Hz, 1H), 8. 50(s, 1Ή), 8.64(s, 1H), 8.75(s, 1H), 9.25(s, 1H), 9. 76(s, 1H), 10,33(s， 1H)。 貫施例30:製備(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）- 7-(2 -甲氧 基乙氧基）喹唑啉-6-基)羥基辛二醯胺（化合物70) / 步驟30a· 8-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7-(2-甲氧基乙氧 基）喹唑啉-6-基胺基）-8_側氧基辛酸甲基酯（化合物 0310-70) 將8-氣-8-側氧基辛酸曱酯（0.496 g，2.4 mmol)添加 化合物 0308-68(0. 21 9 g，0. 6 mmol)、30 mL 二氯曱烷及 三乙基胺（0· 48 g，2· 4 mmol)之溶液。將混合物於0°C攪 1150-9131-PF;Kai 168 200829575 拌2小時。將反應物以水清洗並以硫酸鈉乾燥、過濾並蒸 發以得標題產物0310-70棕色油（281 mg，88%): LCMS·· 533 [M+1]+. ]H NMR(DMSO-d6), 1.35(m, 4H), 1.58(ra, 2H), 1.61(m, 2H), 2.29(t, /=7. 2 Hz, 2H), 2.41(t, /=7. 2 Hz,
Hz, 2H), 7,28(s, 1H), 7.40(t, /=9. 3 Hz, 1H), 7. 78(m, 1Ή), 8.11(m, 1H), 8. 50(s, 1H), 8/74(s, 1H), 9. 24(s, 1H), 9. 76(s, 1H)。 步驟30b· # -（4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7-(2-甲氧基乙氧 基）喹唑啉-6-基羥基辛二醯胺（化合物70)
將新鮮製備的羥基胺溶液（6 mL，4. 0 mmol)置於25 mL 燒瓶。將化合物031 0-70(281 mg, 〇,Μ 一一一— ———-—一，一___— — _________________—— 液並於室溫攪拌4小時。將混合物以乙酸/甲醇中和。將混 合物減壓濃雜。將殘渣以製備性HPLC精製以得標題化合物 70 黃色固體（126 mg, 40%): LCMS: 506 [M+1] + ； ^ NMR(DMS0-七），1.35(m, 4H), l,58(m，/二6·9 Hz, 2H)， 1.61(m, /=7. 2 Hz, 2H), 1.93(t, /=7. 2 Hz, 2H), 2. 42(t, /-7.5 Hz, 2H), 3.35(s, 3H), 3. 77(t, /=4.5 Hz, 2H), 4. 32(t, 7-4. 5 Hz, 2H), 7/28(sV 1Η)Γ 7. 40(t, 7=9. 3 Hz, 1H), 7,78(m, 1H), 8.11(πι, /=2. 4 Hz, 1H), 8.50(s, 1H) 8.62(d, /=1.5 Hz, 1H), 8. 75(s, 1H), 9. 25(s, 1H), 9. 76(s, 1H), 10. 31(s, 1H)。 實施例31:製備7-(4-(3-乙炔基-4-氟苯基胺基）-7 一曱氧 基喹唑啉-6-基氧基）-妗羥基庚醯胺（化合物75) 1150-9131-PF/Kai 169 200829575 步驟31a. 2-溴-卜氟-4-硝基苯（化合物0602) 對卜溴-2-氟苯（35· 0 g，20 0 mmol)於200 mL濃硫酸 之溶液，添加20 mL68%硝酸。將混合物溫度維持在低於20 °C。於添加完成後，將混合物於10 °c攪拌整夜，以冰水稀 一———釋—。—將4寻，到的，固，體一以―過_滤 得標題化合物0602黃色固體（38 g，89%)·· m.p.55,8-56.7 °C, ^ NMRCDMSO-^)： J 7.66(t, /=9 Hz, 1H), 8. 32(m, 1H)，8· 58(dd，/=3 Hz，6 Hz, 1H)。 f 步驟31b· ((2-氟-5-硝基苯基）乙炔基）三甲基矽烷（化合物 0603) 將化合物0602(11.0g，50 mmol )、乙炔基三甲基石夕烧 (7·5 g，75 mmol)、三苯基膦（0.5 g)及鈀（ΓΙ)乙酸酯（0.25 - — —.——________________________ — .一™ " ·λ~ —— —r—，—— — —:—,—--一 g)於125 mL經脫氣三乙基胺之混合物，於i〇〇t於氬氣下 加熱整夜。將反應物冷卻並過濾並將濾液濃縮成暗棕色油 將其減壓蒸餾以得標題化合物〇6〇3淡棕色固體（4 7 g， ( 40%)。4 NMR(CDCh): ^ 〇· 3(s，9H，SiCH)，7· 22(t，/=9. 0
Hz, 1H)，8. 2-8· 5(m，2H)。 ッ驟31c. 4- 1-3 -（（三曱基矽基）乙炔基）苯胺（化合物 0604) ;25mL 甲醇中’混合化合物 〇6〇3(3.5g，14.8 mmol ) 及鐵粉（4ΐ4σ 7/ίπ 、 • %’ 0 mm〇i)。對此混合物添加濃鹽酸及水， 调整為p Η 4 - 5。脂：、日人u Α D 將化合物加熱回流3小時、冷卻，經矽膠 =二將濾液/辰縮以產生一黃色固體殘渣，然後以醚萃取。 ：併的有機相以硫酸鎂乾燥並濃縮以得標題化合物0604 H50-9l3l-PF;Kai 200829575 棕色固體（2.69 g， 88%): LCMS 208 [M+l]+。 步驟31d. 3 -乙炔基-4-乳苯胺（化合物0605) 將上述得到的化合物0604以1〇〇 mg氳氧化鉀於2〇以 甲醇，在室溫處理整夜。將溶液濃縮，以水稀釋，使成中 產生標題化合物0605棕色油（1.49 g，85%): LCMS 13Θ [M+l ] +·將產物用在次一步驟而不進一步精製。 步驟31e. 4-(3-乙炔基-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹唑琳 -6-基乙酸酯（化合物〇6〇6) 將 4-氣-7-曱氧基喹唑啉-6-基乙酸酯（化合物 0 1 05 )(252 mg，1· 0 mmol)及 3-乙炔基-4-氟苯胺（605)(200 mg，1.5 mmol)於異丙醇（10 mL)之混合物，攪拌並加熱回 —：—..— ——... 流3小時。將混合物冷卻至室溫將得到的沉澱分離。將固 體乾燥以得標題化合物〇606 (260 mg, 74. 0%)淡黃色固體： LCMS: 352[M+1]+ 。 步驟31 f· 4-(3-乙炔基-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹唑啉 -6-醇（化合物0607) 將化合物 0606(260 mg, 0. 74 mmol)、LiOH H2〇(25 0 mg， 5·8 mmol)於甲醇（25 ml)及H2〇(25 ml)之混合物，於室溫 攪拌0 · 5小時。將混合物以稀乙酸中和。將沉澱物分離並 乾燥以得標題化合物0607(234 mg，100%)灰色固體：LCMS: 310[M+1]+ 〇 步驟31g. 7-(4-(3-乙炔基-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹唑 啉-6-基氧基）庚酸乙基酯（化合物〇6〇8 - 75) 1150-9131-PF/Kai 171 200829575 標題化合物0608-75製備成黃色固體（300 mg，87· 0〇/〇) 係從化合物607(230 mg，0.74 mmol)及7-溴庚酸乙酯（176 mg，0.74 mmol)使用類似於針對化合物〇11〇_ι(實施例1) 敘述之程序製備：LCMS: 466 [M+l] + . 琳-6-基氧基）-#-經基庚醯胺（化合物75) 標題化合物75製備成白色固體（176呢，70%)係從化 合物06 08(250 rog，0· 54 mmol)使用類似於針對化合物ι(實 施例1)敘述之程序製備：仰150,4〜164.5。(：（(16€〇;1^从8: 453 [M+l]+, NMRCDMSO-i/e)： ^ 1.33(m, 2H), 1.48(ra, 4H), 1.80(m, 2H), 1.94(t, /=7. 2 Hz, 2H), 3.91(s, 3H), 4.10(t, /-6.0 Hz, 2H), 4.51(s, 1H), 7.17(s, 1H), ^ 7：77^ -- 7.98(m, lH)，8.45(s，1Ή)，8.65(s，1H)，9 47(s，1H), 10. 33(s, 1H) 〇 貫施例32 :製備（及）一’羥基一 β 一（7 一甲氧基一4 —(i 一苯基乙 基胺基）喹唑啉-6-基氧基）—己醯胺（化合物77) 步驟32a·(们-7-曱氧基—4-(1-苯基乙基胺基）喹唑啉—6一醇 (化合物070卜77) 將化合物 0105(2.0 g, 8.0 mmol )、苯基乙胺 (2.91 g, 24·0 _〇1)及異丙醇（5〇 mL)之混合物，於6〇°c 稅拌整仪。移除異丙醇，並將殘逢以管柱層析精製以得標 題化合物 07(Π-77(1. 32 g，56%)。LCMS: 296 [M+1].。 步驟32b .(们-乙基6-(7-甲氧基-4-U-苯基乙基胺基）喹 1150-9131-PF/Kai 172 200829575 唑啉-6-基氧基）己酸酯（化合物0702-77) 將化合物 070 1 -77(500.0 mg，1.69mmol)、K2C〇3(700.0 mg, 5· 07 mmol)、6-溴己酸乙酯（378· 0 mg, 1· 69 mmol) 及DMF(20 mL)之混合物於60°C加熱3小時。將DMF減壓移 秦』屬真基暴幕於冰並幕猓真的真爐表 化合物 0702-77(320 mg，43%)。LCMS: 438 [M+l]+。 步驟32c. 羥基-6 -（7-甲氧基-4 -（1-苯基乙基胺基） 喹唑啉-6-基氧基）-己醯胺（化合物77) 將化合物 0702-77(320.0 mg，0.73 mmol)及 1.77 mol/L NH2〇H/MeOH(4.0 mL，6·77 mmol)之混合物於室溫撥 拌0· 5小時。將反應混合物以AcOH中和並濃縮。將殘渣懸 浮於水並將得到的固體分離及乾燥以得粗製產物。將該粗 ~ ^ ^圓―—一.—————————-— — — .——-— _ — — — 製產物以製備性HPLC精製以得標題化合物17(3 12%)〇LCMS: 425 IM+1] + ; !H NMRCDMS^ ^ 1.46(m, 2H), 1.59(m, 5H), 1.82(m, 2H), 2.01(t, /=8.7 Hz, 2H), 3.90(s, 3H), 4.10(t, /=6.3 Hz, 2H), 5. 63(m, 1H), 7.〇9(s, 1H), 7.21(m, 1H), 7. 32(m, 2H), 7.42(d, /=7.2 Hz, 2H), 7.75(s, 1H), 8. 06(d, /=8, 4 Hz, 1H), 8. 27(s, 1H)，8. 67(s, IH), 10. 36(s, 1H)。 實施例33:製備（们-於羥基-6-(4-(1-苯基乙基胺基）一喹 "坐琳-6 —基氧基）己醯胺（化合物78) 步驟33a·(幻—4-(1_苯基乙基胺基）喹唑啉-6_醇（化合物 0701-78) 將化合物 0204( 1.0 g，4.5 mmol)及（们―i-(3-氯-4- 1150-9131-Pf;Kai 173 200829575 氟-苯基）乙胺（0.87 g，5.0 mmol)於異丙醇（45mL)之混合 物’於9 0 C稅择1小時。將混合物冷卻至室溫並將得到的 沉澱物分離。將固體依序以異丙醇及甲醇清洗、乾燥以得 標題化合物苯基乙基胺基）喹唑啉-6-基乙酸酉旨 將上述產物（〇·7 g，2.3 mmo 1)及氫氧化链單水合物 (0.29 g，6.81 mmol)於曱醇（10 mL)/水（15 mL)之混合物 於室溫攪拌1小時。將pH以乙酸調整為4並過濾。將收集 的黃色固體以水清洗，乾燥以得到標題化合物0701-78黃 色固體（0· 42 g， 62%)、LCMS 266 [M+l]+。 步驟33b· (A) -乙基6-(4 -（1-苯基乙基胺基）喧嗤琳-6-基 氧基）己酸酯（化合物〇 7 0 2 - 78 ) 將化合物mo1)、乙"基i=溴己 酸酉旨（0·27 g，1:2 _〇1)及 K2C〇3(〇.8 g，5:8 ^ ..…. .…，……〜… ................ ............_ „ ......................................... ....... DMF(15mL)之混合物攪拌及加熱至8〇°c 2小時。將混合物過 《 遽並將濾液蒸發。將得到的固體以醚清洗以得標題化合物 0 702-78 微黃色固體（〇· 2 g，42. 5%)、LCMS 408 [M+l] +。 步驟33c·(及）-#·經基-6-(4-(1-苯基乙基胺基）啥唑啉一6一 基氧基）己醯胺（化合物78) 標題化合物78製備成微黃色固體（42 mg，26%)係從化 合物0702-78( 1 68 mg, 〇·41 mmol)使用類似於針對化合物 77(實施例32)敘述之程序製備：[CMS 395 [M+l]+，4 NMRCDMSO-i/e): ^ 1.47(m, 2H), 1.52(ra, 2H) 1.65(d, /=7.2 Hz, 3H) 1.71(m, 2H), 2. 05(t, /=3.9 Hz, 2H), 1150-9131-PF;Kai 174 200829575 4.04(t, /=6. 3 Hz, 2H), 5. 56(q, /-6. 3 Hz, lH)7.13(t, /=7, 2 Hz, 1H), 7,26(t, /^7. 8 Hz, 2H), 7. 32(dd, /=2.7, /-9.0 Hz, 1H) 7.39(d, /=7. 2 Hz, 2H), 7. 56(d, /=7, 2 Hz, 1H)，7. 65(m，1H), 8. 26(s, 1H)。 二！^ 氢 一 4 ^ 基 〇 基胺基）喹唑啉-6-基氧基）庚醯胺（化合物79) 步驟34 a.(灼-乙基7-(7-曱氧基-4-(1-苯基乙基胺基）喹 唑啉-6-基氧基）庚酸酯（化合物0702-79) 將化合物 070 1 -79 ( 500 mg, 1.69 mmol)、K2C〇3( 700 mg, 5· 07 mmol )、7-溴庚酸乙酯（401 mg，1 · 69 mmol )及 DMF(20 mL)之混合物，於6〇°C加熱3小時。將DMF減壓移除並將 殘渣懸浮於水。將得到的固體收集並乾燥以得標題化合物 0702-79(340 mg, 44%)。LCMS: 452—而 步驟34b· -於經基-7- (7-甲氧基-4-(1 -苯基乙基胺基） 喹唑啉-6-基氧基）庚醯胺（化合物79) 標題化合物79製備成（41 mg，12%)係從化合物 0702-79(340 mg, 0· 75 mmol)使用類似於針對化合物77 (實 施例 32)敘述之程序製備：LCMS: 439 [ΜΗ] + ; 4 NMRCDMSO-i/e): δ 1. 34(m, 2H), 1.52(m, 4H), 1.58(d, /=7.5 Hz, 2H), 1.80(m, 2H), 1.99(t, /-8. 7 Hz, 2H), 3.89(s, 3H), 4.10(t, /=6.3 Hz, 2H), 5. 62(m, 1H), 7.08(s, 1H), 7.20(m, 1H), 7.31(ra, 2H), 7.41(d, /=7.2 Hz, 2H), 7.74(s, 1H), 8. 05(d, /=8. 1 Hz, 1H), 8. 26(s, 1H)，8· 63(s，1H)，10. 32(s, 1H)。 1150-9131-PF;Kai 175 200829575 實施例35··製備（5W-羥基-7-(7-甲氧基-4-(1-苯基乙 基胺基）喹唑啉-6-基氧基）庚醯胺（化合物80) 步驟35a. (iS〇- 7-甲氧基-4 -（1-苯基乙基胺基）啥唾琳—醇 (化合物0701-80) 1 二.8 成—濟1—色固 Χ„5五JS^jh g j β 2 β ) 係從化合物0 1 05 (750 mg, 3.0 mmol)及（6〇-1-苯基乙胺 ( 1 089 mg，9.0 mmol)使用類似於針對化合物〇7(Π-77(實 施例32)敘述之程序製備：LCMS: 296 [M+l]+。 1 步驟35b. (iS1)-乙基7-(7 -甲氧基-4-(1-苯基乙基胺基）啥 唑啉-6-基氧基）庚酸酯（化合物0702-80) 標題化合物0702-80製備成黃色固體（160 mg, 70. 95%) 係從化合物701-80( 148 mg, 0. 5 _〇1)及7-溴庚酸乙醋 —.·. 〜 —^·—.....·，·..·—'———.·....—一—— — ___ _, __ (120 mg, 0.5 mmol)使用類似於針對化合物0702-77(實施 例32 )敘述之程序製備：LCMS : 45 2 [ M+1 ]+。 步驟35c.(幻-於羥基-7-(7-甲氧基-4-(1-苯基乙基胺基） , 喹唑啉-6-基氧基）庚醯胺（化合物80) v 標題化合物80製備成白色固體（95 mg, 61. 9%)係從化 合物 0702-80( 1 60 mg, 0.35 mmol)及新鮮的.2〇H/CH3〇H(3 mL, 5 · 31 mmo 1)使用類似於針對化合物7 7 (實施例3 2 )敘述 之程序製備：m· ρ· 106· 7〜111· 3°C、LCMS·· 439 [M+l] + , 4 NMRCDMSO-^e): ^ 1.42(m, 6H), L 57(d, /=6. 6 Hz, 3H), 1.79(m, 2H), 1.95(t, /-7.2 Hz, 2H), 3. 88(s, 3H), 4.08(t, /=6. 9 Hz, 2H), 5. 62(m, /=6. 6 Hz, 1H), 7. 06(s, 1H), 7.21(t, /=7.5 Hz, 1H), 7.30(t, /-7. 5 Hz, 2H), 1150-9131-PF;Kai 17 6 200829575 7.41(d, /=7. 5 Hz, 2H), 7. 75(s, 1H), 8.15(d, /=9. 6 Hz, 1H), 8.29(s，1H), 8.6Q(s，1H)，10.30(s, 1H)。 實施例36:製備U)-7-(4-(1-(4-氟苯基）乙基胺基）- 7-甲氧基喹唑啉-6-基氧基）-#-羥基庚醯胺（化合物81) _ ___ 良骤—並 啉-6-醇（化合物0701 -81 ) 標題化合物0701-81製備成黃色固體（495 mg, 52. 71%) 係從化合物 0 1 05 (750 mg, 3·0 mmol)及(4-氟苯基） ' 乙胺（1251 mg, 9. 0 mmol)使用類似於針對化合物 0701-77(實施例32)敘述之程序製備：LCMS: 314 [Μ+1]+。 步驟36b.U)-乙基7-(4-(1-(4-氟苯基）乙基胺基）-7-甲 氧基喹唑啉-6-基氧基）庚馥酯（化合物0702-81 ) ............... — …..〜一=·、—— — — _ 標題化合物〇7〇2 - 81製備成黃石固體（190— 係從化合物0 7 01 - 81 ( 1 5 6 mg, 0 · 5 mm〇 1)及7-溴庚酸乙酯 (120 rag, 0.5 mmol)使用類似於針對化合物〇702-77(實施 , 例32)敘述之程序製備：LCMS: 470 [M+l]+。 步驟36c·(们-7-(4-(1-(4-氟苯基）乙基胺基）-7-甲氧基喹 唑啉-6-基氧基）-#-羥基庚醯胺（化合物81) 標題化合物81製備成白色固體（丨00 mg, 54. 12%)係從 化合物 0702：·81(190 mg， 0· 40 mmol)及新鮮的 Νίί2〇ΙΙ/(：ίί3〇ίΚ3 mL， 5· 31mmol)使用類似於針對化合物 77(實施例32)敘述之程序製備：m. p. 118. 2 —144. 3°C、LCMS : 457 [M+l]+, 'H NMRCDMSO-i/e)： ^ 1.33(m, 2H), 1.47(m, 4H), 1.56(d, /=7. 2 Hz, 3H), 1.78(m, 2H), 1.95(t, /-7.2 1150-9131-PF;Kai 177 200829575
Hz, 2H), 3.87(s, 1H), 4. 07(t, /=6. 0 Hz, 2H), 5.60(m, 1H), 7.06(s, 1H), 7.11(t, /=9. 0 Hz, 2H), 7. 44(m, 2H), 7.71(s, 1H), 8.04(d, /-7.5 Hz, 1H), 8. 25(s, 1H), 8· 65(s, 1H), l〇· 33(s, ih)。 曱氧基喧唾啉-6-基氧基羥基庚醯胺（化合物82) 步驟37a· U)-4-(1-(4-氯苯基）乙基胺基）_7-甲氧基喹唑 琳-6-醇（化合物0701-82) 、標題化合物0701 -82製備成黃色固體（〇·65 g，49%) 係從化合物0105(1.0 g, 4 mmol)及（们-1-（4-氣苯基）乙 胺（1.87 g，12 mmol)使用類似於針對化合物〇7〇1-77(實 施例32)敘述之程序製備：LCfS : 30 0 [ Μ +1 ] +。 '.——---------- 和，，产_..，…丨—^—r——.一—.—..…·_»···______________ __________ 步驟37b·(无）-乙基7-(4-(1 -（4-氣苯基）乙基胺基）-7-甲 氧基I嗤琳-6-基氧基）庚酸韻（化合物〇7〇2-82) 標題化合物0702-82製備成黃色固體（460 mg，56%) I 係從化合物07〇1-82(550 mg，1· 7 mmol)及7-溴庚酸乙酯 (404 mg，1.7 mmol)使用類似於針對化合物〇7〇2-77(實施 例32)敘述之程序製備：LCMS: 486 步驟37c· U)-7-(4-(1-(4-氯苯基）乙基胺基）-7-甲氧基喹 唑啉-6-基氧基）-#-羥基庚醯胺（化合物82) 標題化合物82製備成白色固體（145 mg，29%)係從化
合物 0702-81 51 0 mg, 1· 〇5 mmol)及新鮮的.77 mol/L NH2〇H/MeOH(4.7 raL，8.4 mmol)使用類似於針對化合物 77(實施例32)敘述之程序製備：LCMS: 473 [M + l] + ; 4 1150-9131-PF;Kai 178 200829575 NMR(DMSO-^e) ： ^ 1.34(m, 2H), 1.47(m, 4H), 1.57(d, /=6.9 Hz, 3H), 1.80(m, 2H), 1.97(t, /=7.2 Hz, 2H), 3.89(s, 3H), 4.10(t, /=6.6 Hz, 2H), 5. 57(m, 1H), 7.08(s, 1H), 7.38(d, /-8. 4 Hz, 2H), 7. 43(d, /-8, 4 Hz, 8· 64(s, 1H), 10· 33(s，1H) o 貫施例38 :製備（A)羥基一 7-(7一甲氧基-4 一（K4 一甲氧 基苯基）乙基胺基）喹唑啉-6-基氧基）-庚醯胺（化合物83) 步驟38a· U)-7-甲氧基-4-(1 -（4-甲氧基苯基）乙基胺基） 口奎嗤琳-6-醇 (化合物Ό7Ό1-83) 將化合物 0105(1. 0 g，4.0 _〇1)，（幻一1 一（4-甲氧基 苯基）乙胺（1.81 g，12_0 mmol)及異丙醇（25 mL)i混 物’於6 01：攪拌整夜。將異丙醇移除，並將殘渣以管柱屠 析精製’得標題化合物 0701-83(0.81 g，629〇。LCMS: 326 [M+l]+〇 步驟38b· (τΡ)-乙基7-（7-甲氧基-4-(1 -（4-甲氧基苯基） 乙基胺基）喹唑啉-6-基氧基）庚酸醋（化合物0702-83) 將化合物 070 1 - 83(630 mg, 1.94 mmol)、K2C〇3(804 mg， 5· 8 mmol)、7-溴庚酸乙酯（459 mg, 1 · 94 mmol)及 DMF(20 mL)之混合物，加熱至60°C 3小時。將DMF減壓移除，將 殘渣懸浮於水，並將固體收集並乾燥以得標題化合物 0703-83(440 mg， 47%)。 LCMS: 482 [M+l]+。 步驟38c·(们-#-經基-7 -（7-甲氧基-4-（1 -（4-甲氧基苯基） 1150-9131-PF/Kai 179 200829575 乙基胺基）-喹唑啉-6-基氧基）-庚醯胺（化合物83) 將化合物 0702-83(530 mg, 1.1 mmol)及 1.77 mol/L NH2〇H/MeOH(5 mL，8.8 mmol)之混合物，於室溫攪拌〇 5 小時。將反應混合物以AcOH中和並將混合物濃縮並將殘渣 製備HPLC精製以得標題化合物83( 151 mg, 29%)。LCMS : 469 [M+l] + ； rH NMRCDISO-i/e) ： δ 1.32(πι, 2Η), 1.45(m, 4Η), 1.54(d, /=6. 9 Hz, 3H), 1.78(ra, 2H), 1.95(t, /=7. 2 Hz, 2H), 3.69(s,3H), 3.87(s, 3H), 4. 07(t, /=6. 3 Hz, 2H), 5. 56(m, 1H), 6.87((1, /=8.7 Hz, 2H), 7. 05(s, 1H), 7. 31(d, /=8. 7 Hz, 2H), 7. 70(s, 1H), 7. 96(d, /=8. 1 Hz, TH), 8. 26(s, 1H), 8. 62(s, lH), 10.31(s, lH) 〇 實施例39:製備7-(4-(苄基胺基）-7-甲氧基喹唑啉—6-基 氧基）-水-羥基庚醯胺（化合物85) 步驟39a· 4-(苄基胺基）-7-甲氧基喹唑琳—6-醇（〇701-85) 將苄基胺（1. 28 g，12· 0 mmol)添加至化合物〇1〇5(1.0 g，4·0 mmol)及2-丙醇（50 ml)之混合物。將反應混合物 祝拌回流3小時。將混合物冷卻至室溫並將得到的沉澱物 V離。將固體乾燥以得標題化合物〇 7 〇 1 - 8 5黃色固體（8 5 4 mg, 76%)： LCMS: 282 [M+l]+. 步驟39b· 7-(4-(苄基胺基）-7 -甲氧基喧嗤琳—β —基氧基） 庚酸乙基酯（化合物0702-85) 標題化合物0702-85製備成黃色固體液體（27〇 mg， 62%)係從化合物 〇7〇l-85(281 mg，1·0 mmol)及 7-漠庚酸 1150-9131-PF;Kai 180 200829575 乙酯（236mg，1 mmol)使用類似於針對化合物0702-77(實 施例32)敘述之程序製備：LCMS: 43 8 [M + l]+。 步驟39c. 7-(4-(苄基胺基）—7-曱氧基喹唑啉-6-基氧 基）_N-羥基庚醯胺（化合物85) 標題化合物85製備成黃色固體（64 mg，24%)係從化合 物0702-85(270 mg, 0.62 _〇1)使用類似於針對化合物 77(實施例32)敘述之程序製備：LCMS: 425 [M+1] + ; 4 NMR(DMSO-A): Θ 1.32(m，2Η)，1.42(m，2Η)，1.51(m，2Η)， 1.76(m, 2H), 1.94(t, /-7.2 Hz, 2H), 3. 88(s, 3H), 4.03(t, /-6. 3 Hz, 2H), 4. 76(d, /-5. 4 Hz, 2H), 7. 08(s, 1H), 7.21(t, /-6.0 Hz, 2H), 7. 30(t, /-6.0 Hz, 2H), 7.33(t, /-6.6 Hz, 1H), 7. 63(s, 1H), 8. 29(s, 1H), 8.42(t，/:6·0Ηζ，1H), 8.64(s，1H), l(K32(s，1H)。 實施例40:製備7-(4-(4-氟苄基胺基）— 7—甲氧基喹唑淋 - 6 -基氧基）-於經基庚醯胺（化合物86) 步驟40a· 4-(4 -氟苄基胺基）-7 -甲氧基喹嗤琳—β —醇（化合 物 0701-86) 標題化合物07(Π-86製備成黃色固體（489 mg，54. 5%) 係從化合物0 1 05 (750 mg, 3·0 _〇ι)及（4一氟i苯基）甲胺 (1125 mg，9.0 mmol)使用類似於針對化合物〇7〇1_77(實 施例32)敘述之程序製備：LCMS: 300 [Μ+1]+· 步驟40b· 7-(4-(4-氟苄基胺基）—7-甲氧基喹唑啉_6—基氧 基）庚酸乙基酯（化合物0702-86) 標題化合物0702-86製備成黃色液體（4〇8即，89. 67%) 1150-9131-PF;Kai 181 200829575 係從化合物0701 - 86(300 mg，1 · 0 mmo 1)、7 -溴庚酸乙酯 (237 mg，1.0 mmol)使用類似於針對化合物0702-77(實施 例32)敘述之程序製備：LCMS: 456 [M+l]+. 步驟40c· 7-(4-(4 -氟苄基胺基）-7 -甲氧基啥峻琳-6-基氧 基）-#-羥基庚醯胺（化合物86) 標題化合物86製備成白色固體（ 300 mg, 69. 97%)係從 化合物 0702-86(442 mg， 0· 97 mmol)及新鮮的 NH2〇H/CH3〇H(4 mL， 7. 08mmol)使用類似於針對化合物 77(實施例32)敘述之程序製備：LCMS: 443 [Μ+1] +，1 NMR(DMSO-A): δ 1.31-1. 54(m, 6H), 1. 77(ra, 2H), 1.94(t, /=7. 5 Hz, 2H), 3.88(s, 3H), 4.03(t, /=6. 3 Hz, 2H), 4. 74(d, /=5. 4 Hz, 2H), 7.11(m, 3H), 7. 38(m, 2H), 7.68(s, 1H), 8.30(s, 1H), 8. 40(m, 1H), 8.60(s, 1H), 10.30(s, 1H)。 貫施例41:製備7-(4-(3, 4 -二氟节基胺基）-7 -甲氧基啥 唑琳-6-基氧基）-#-羥基庚醯胺（化合物87) 步驟41a. 4-(3，4-^一氟卞基胺基）-7 -甲氧基喧唾琳-β 一醇 (化合物0701-87) 標題化合物0701-87製備成淡黃色固體（5〇〇 mg， 52. 6%)係從化合物 1 05 (750 mg, 3.0 mmol)及（3，4-二氧 苯基）甲胺（ 1 072 mg, 7.5 mmol)使用類似於針對化合物 0701-77(實施例32)敘述之程序製備：LCMS: 318 [M+l]+. 步驟41b· 7 -（4-(3，4-二氟苄基胺基）-7-甲氧基-4a，5- 二氫喹唑啉-6-基氧基）庚酸乙基酯（化合物0702-87) 1150-9131-PF;Kai 182 200829575 標題化合物0702-87製備成淡黃色固體（205 mg， 86.7%)係從化合物 0701-87(160 mg，0.5 mmol)、7-溴庚 酸乙酯（237 mg， 1, 0 mmol)使用類似於針對化合物 0702-77(實施例32)敘述之程序製備：LCMS: 474 [M+l]+. 步驟41c· 7-(4-（3, 4-二氨苄基胺基）-7-曱氧基喹唑啉-6-基氧基）-妗羥基庚醯胺（化合物87) 標題化合物87製備成白色固體（75 mg，44. 5%)係從化 合物 0702-87(173 mg, 0· 366 mmol)及新鮮的 NH2〇H/CH3〇H(2 mL，3.4 mmol)使用類似於針對化合物77(實施例32)敘述 之程序製備·· LCMS: 461 [M+l] +，4 NMR(DMS0-Α): Θ 1.30(m, 2H), 1.50(m, 4H), 1.77(m, 2H), 1.94(t, /=7.2
Hz, 2H), 3.88(s, 1H), 4. 03(t, /=6. 6 Hz, 2H), 4. 72(d, ’...... ................. ........... .............................. ........................ ..... ........ ...... /=6.0 Hz, 2H), 7.08(s, 1H), 7.19(s, 1H), 7. 35(m, 2H), 7.61(s, 1H), 8.30(s, 1H), 8.46(t, /=6.0 Hz, 1H), 8· 64(s，1H)，10· 32(s，1H)。 實施例42:製備7-(4-(3-氣-4-氟苄基胺基）-7-甲氧基喹 唑啉-6-基氧基）-#-羥基庚醯胺（化合物88) 步驟42a. 4-(3-氯-4-氟苄基胺基）-7-甲氧基喹唑啉-6-醇 (化合物0701-88) 標題化合物070卜88製備成淡黃色固體（500 mg， 50.1%)係從化合物 01 0 5(750 mg，3.0 mmol)及（3-氣-4-氟 苯基）甲胺（ 1435 mg， 9 _〇1)使用類似於針對化合物 070卜77(實施例32)敘述之程序製備·· LCMS: 334 [Μ+1]+· 步驟42b. 7-(4-(3-氣-4-氟苄基胺基）—7-曱氧基喹唑啉 1150-9131-PF;Kai 183 200829575 -6-基氧基）庚酸乙基酯（化合物0702-88) 標題化合物0702-88製備成黃色固體（306 mg，92. 02%) 係從化合物070 1 -88(227 mg, 0· 68 mmol )、7-溴庚酸乙酉旨 (161 mg, 0.68 mmol)使用類似於針對化合物〇7〇2-77(實 施例32)敘进之程序製備:LCMS: 490 [M + 1 ]+. 步驟42c· 7-(4-(3-氯-4-氟节基胺基）-7-曱氧基喹唑啉 - 6 -基氧基）-羥基庚醯胺（化合物88) 標題化合物88製備成白色固體（210 mg, 70. 02%)係從 化合物 0702-88(306 mg, 0· 63 mmol)及新鮮的 NH2〇H/CH3〇H(3 mL，5. 31mmol)使用類似於針對化合物 77(實施例32)敘述之程序製備：m· ρ· 143. 1 °C (decomp·)、 LCMS: 477 [M+l]+, lE NMR(DMS0-^) ： ^ 1.31(m, 2H), ...............................-----............-...............................................—...........-. ......-......................-............ ................- .....— _............................................. 1.48(m，4H), 1.77(m, 2H)，1.94(t，/=7.2 Hz, 2H)， 3.89(s, 3H), 4.04(t, J-6. 6 Hz, 2H), 4.74(d, J= 5.4 Hz, 2H), 7.09(s, 1H), 7.35(d, /=7. 8 Hz, 2H), 7. 54(d, /=8.4 Hz, 1H), 7.63(s, 1H), 8. 35(s, 1H), 8. 58(m, 1H), 8. 65(s, 1H), 10.33(s， 1H), 11. 92(s, 1H)。 實施例4 3 :製備7 - (4 - ( 3 -漠、苄基胺基）-7 -甲氧基喧n坐琳 - 6-基氧基）-妗羥基庚醯胺（化合物89) 步驟43a. 4-(3-溴苄基胺基）-7-甲氧基喹唑啉-6-醇（化合 物 0701-89) 標題化合物070卜89製備成黃色固體（543 mg, 50. 2%) 係從化合物0 1 05 (750 mg，3.0 _〇1)及（3-溴苯基）甲胺 ( 1 674 mg, 9 mmol)使用類似於針對化合物0701 -77(實施 1150-9131-PF;Kai 184 200829575 例32)敘述之程序製備：LCMS: 360 [M+l]+。 步驟43b. 7-(4-(3-溴苄基胺基）-7-曱氧基喹吐啉-6-基氧 基）庚酸乙基酯（化合物0702-89) 標題化合物070 2-89製備成黃色固體（230 rag，89. 15%) 係從化合物0 701-8 941^ (120 mg，0.5 mmol)使用類似於針對化合物0702-77(實施 例32)敘述之程序製備：LCMS: 516 [M+l]+。 步驟43c· 7-(4-(3-溴苄基胺基）-7-曱氧基喹唑啉-6-基氧 基羥基庚醯胺（化合物89) 標題化合物89製備成白色固體（1〇5 mg，53. 96%)係從 化合物 0702-89(200 mg， 0. 39 mmol)及新鮮的 NH2〇H/CH3〇H(3 mL， 5. 31mmol)使用類似於針對化合物 77(實施例32)敘述之程序製備：LCMS: 503 [M+l]+，4 NMRCDMSO-i/e): d 1.31 〜1.56(m, 6H), 1.75(m, 2H), 1.94(t, /=7. 2 Hz, 2H), 3.88(s, 3H), 4. 06(t, /=6. 6 Hz, 2H), 4. 75(d, /=5. 7 Hz, 2H), 7. 08(s, 1H), 7. 27(t, /-7.5 Hz, 1H), 3.7.33(ra, 2H), 7. 42(s, 1H), 7.61(s, 1H), 7.93(s, 1H), 8.30(s, 1H), 8.41(t, /=6.0 Hz, 1H), 8. 60(s， 1H)， 10·29(s, 1H)。 實施例44:製備4-(2-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-甲氧 基喹唑琳-6 -基氧基）乙氧基羥基苄醯胺（化合物92) 步驟44a· 4-(2-溴乙氧基）苯甲酸曱基酯（化合物0502-92) 將化合物4-羥基苯甲酸甲酯（457. 0 mg，3. 0 _〇1)、 K2C〇3( 828 mg，6 mmol)及 1，2-二溴乙烧（1〇 mL)之混合物， 1150-9131-PF;Kai 185 200829575 於1 30°C加熱8小時。將1，2-二溴乙烷減壓移除並將殘渣 懸浮於水。將得到的沉澱物分離並乾燥以得標題化合物 0502-92 白色固體（440 mg，57%)。[CMS: 259 [M+l] +。 步驟44b·甲基4-（2-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7-曱氧 基啥唾琳―6 —基氧基）乙氧基）苯甲酸醋（化合物0503-92) 將化合物 1 09(384 mg, 1.2 mmol)、K2C〇3(276 mg，2 mmol)、化合物 0502-92(311 mg, 1· 2 mmol)及 DMF( 10 mL) 之混合物’於40°C加熱整夜。將DMF減壓移除並將殘渣懸 f ^ 浮於水。收集沉澱物並乾燥以得標題化合物〇5〇3-92白色 固體（430 mg, 72°/〇。LCMS: 25 9 [M+l] +。 步驟44c· 4-(2-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹唑 琳-6 -基氧基）乙氧基）—於·輕基节醯胺（化合物92) 將化合物 0502-92(249 mg, 0.5 mmol)及 1.77 mol/L NH2〇H/MeOH(5 mL，8· 8 5 mmol)之混合物於室溫攪拌〇. 5小 時。將反應混合物以AcOH中和並將混合物濃縮並將殘渣懸 【 浮於水。將得到的沉澱物分離並乾燥以得粗製產物。將該 粗製產物以製備性HPLC精製以得標題化合物92白色固體
(80 mg，32%hLCMS: 439 [Μ+1] + ;NMR(DMS0-A): J 2. 07(s, 2H), 3. 93(s, 3H), 4.50(s, 4H), 7. 08(d, /=8.4 Hz, 2H), 7. 22(s, 2H), 7.44(t, /=9.0 Hz, 1H), 7. 76(m, 3H), 7.89(s, 1H), 8.12(m, 1H), 8.51(s, 1H), 8. 87(s, 1H)， 9·54(s， 1H)， 11· Q5(s， 1H)。 貫施例45·•製備7-(4 —(3 —乙炔基苯基胺基）—7-甲氧基喹 唾啉-6-基氧基甲氧基庚醯胺（化合物95) 1150-9131-PF;Kai 186 200829575 將化合物 0802(544 mg, 1_25 mmol)及 Inodomethane (0804)( 1 77 mg, 1.25 mmol)及碳酸鉀（1.0 g，7.25 mmol) 於N，二甲基曱醯胺（15 mL)之混合物，於室溫攪拌12 小時。將溶劑減壓移除並將殘渣溶於乙酸乙酯（50 mL)。將 有機層以飽和NaHC〇3(2〇 4 洗。將有機層以MgSCh乾燥並濃縮以得標題化合物95微黃 色固體（500 mg, 89%)。m. ρ· 195. 8〜197· 0°C ; LCMS: 449 [M+l] + ; !H NMR(DMSO^e)： ^ 1.35(m, 2H), 1.50(m, 4H), 1.80(m, 2H), 1.94(t5 /=7.2 Hz, 2H), 3. 54(s, 3H), 3.92(s, 3H), 4.12(t, /=6.3 Hz, 2H), 4.19(s, 1H), 7.19(m, 2H), 7.40(t, /=7.8 Hz, 1H), 7. 80(s, 1H), 7.87(d, /-9.6 Hz, 1H), 7. 97(s, 1H), 8. 48(s, 1H), 9· 45(s，1H), 10. 92(s, 1H)。 實施例46:製備乙醯氧基—7 —(4-(3—氯—4_氟苯基胺 基）-7-曱氧基喹唾啉-6-基氧基）庚醯胺（化合物96) 將化合物 0801 (50 mg, 〇· 1〇8 mmol)及 Ac2〇(204 mg， 2.0 mmol)及AcOH(2 mL)之混合物於室溫攪拌1小時。將 反應混合物以NaHCCh飽和溶液中和。將沉澱物分離並乾燥 以得產物 96(42 mg， 77%)。LCMS·· 505 [M+l] + ; j NMRCDMSO-i/e): ^ 1.40(m5 2H), 1.50(ra, 2H), 1.55(m, 2H), 1.80(m, 2H), 2.09(s, 3H), 2.12(m, 2H), 3. 94(s, 3H), 4.13(t, /-6.9 Hz, 2H), 7.20(s, 1H), 7. 43(t, /-9.0 Hz, 1H)， 7. 78(m, 1H)， 7. 84(s, 1H), 8. 12(m, 1H), 8· 49(s，1H), 9. 67(s，1H)。 1150-9131-PF;Kai 187 200829575 實施例47:製備乙醯氧基-7-(4-(3-乙炔基苯基胺 基）-7-甲氧基喹唑啉—6 —基氧基）庚醯胺（化合物97) 標題化合物97製備成固體（45 mg，86· 0%)係從化合物 0802(48 mg，〇·ΐΐ 麗〇1)及 Ac2〇(204 mg，2 mmol)使用類 似於针對化合物9 6 (實施例4 6)敘述之程序製備：LCMS : 476.5 [M+l] + ； NMRCDMSO-i/e)： ^ 1.40(m, 2H), 1.46(m, 2H), 1.58(m, 2H), 1.80(ra, 2H), 2,12(s, 3H), 2.13(m, 2H), 3. 94(s, 3H), 4. 14(t, /=6. 6 Hz, 2H), 4.19(s, 1H), f ' 7.20(d, /=6. 3 Hz, 2H), 7.40(t, /=7. 8 Hz, 1H), 7. 83(s, 1H), 7.89(d, >7. 8 Hz, 1H), 7. 99(s, 1H), 8. 49(s, 1H), 9. 50(s，1H), 11· 55(s, 1H)。 實施例48:製備#-(環己烷羰基氧基）_7 —(4 一（3—乙炔基苯 基胺基）-7-甲氧基喹唑啉-6-基氧基）庚醯胺（化合物98) 化合物0802(21 8 mg，0.5 _〇1)及三乙基胺（75 mg， 0· 75 _〇1)溶於丙酮（2〇mL)及N，N-二甲基甲醯胺（2mL)。 I 將反應混合物冷卻至〇°C及，並將環己烷羰基氯（73 mg，〇. 5 mmo 1)於丙酮（5 mL)之溶液，滴加至上述溶液中。將反應混 合物回溫至常溫並攪拌1小時。將混合物減壓濃縮並將殘 渣以管柱層析精製以得標題化合物98黃色固體（50 mg， 18°/〇): LCMS: 545 [M + l] + ； ]H NMR(DMS0-^): ^ 1. 21-1. 63(in, 15H), 1.81(m, 4H), 2.11(t, /=7. 2 Hz, 2H), 3. 92(s, 3H), 4.12(t， /=7.2 Hz， 2H), 4.17(s， 1H)， 7.19(m, 2H), 7.39(t, /-7. 8 Hz, 1H), 7.81(s, 1H), 7. 88(d, /=8. 4 Hz, 1H), 7.97(s, 1H), 8.47(s, 1H), 9. 45(s, 1H), 11.50(s, 1150-9131-PF;Kai 188 200829575 1H)。 實施例49:製備7_(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-甲氧基喹 唑啉-6-基氧基）-#-(異丁醯基氧基）庚醯胺（化合物99) 標題化合物99製備成黃色固體（1〇〇 mg，44. 0%)係從 化合物 0802(195 mg, 0· 45 mmol)及異丁 醢基氯（48 mg, 〇· 45 mmol)使用類似於針對化合物98(實施例48)敘述之程 序製備：LCMS: 505 [M+l] + ; NMR(DMSO-A): J 1. 10(d， /=7. 2 Hz, 6H), 1.39(in, 2H), 1.47(ra, 2H), 1.56(m, 2H), 1.81(m, 2H), 2.11(t, /=7. 5 Hz, 2H), 2. 68(m, /=7. 2 Hz, 2H), 3.92(s, 3H), 4.12(t, /=6. 6 Hz, 2H), 4.17(s, 1H), ^.19(m, 2H), 7.38(t, /=7.8 Hz, 1H), 7.82(s, 1H), ^B8(d, /-8.7 Hz, 1H), 7. 97(s, 1H), 8. 47(s, 1H), -------- - - —— -— .......... 9. 50(s， 1H), 11·55(s， 1H)。 實施例50 :製備7-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-7-甲氧基喹 唾琳-6-基氧基）-#-(丙醯基氧基）庚醯胺（化合物1〇〇) 標題化合物100製備成黃色固體（1〇〇 mg，41· 〇◦/◦)係從 化合物 0802(218 mg, 0· 5 mmol)及丙醯氯（47 mg, 0· 5 mmol ) 使用類似於針對化合物98 (實施例48)敘述之程序製備： LCMS: 491 [M+l] + ; NMR(DMS0-A):汐 1. 05(t，/=7· 5 Hz, 3H)，1.39(m，2H)，1.48(m，2H), 1.56(m，2H)，1.81(m， 2H), 2.12(t, /=6.6 Hz, 2H), 2.41(q, /=7.5 Hz, 2H), 3.92(s, 3H), 4.12(t, /=6.6 Hz, 2H), 4.18(s, 1H), 2H), 7.38(t, /-7.8 Hz, 1H), 7.80(s, 1H), 7.88(d，/=8.1 小時 z，1H), 7.97(s, 1H), 8.47(s，1H)， 1150-9l3l-PF；Kai 189 200829575 9· 45(s，1H)，11· 53(s，1H)。 實施例51:製備#-(苯甲醯基氧基）-7-(4-(3-乙炔基苯基 胺基）-7-甲氧基喹唑啉-6-基氧基）庚醯胺（化合物101) 標題化合物101製備成黃色固體（150 mg，56. 0%)係從 ^ib ^ 0802(218 mgT 0^^ ^ ^ M ^ mg, 〇. 5 mmol)使用類似於針對化合物98(實施例48)敘述之程序製 備：LCMS: 539 [M+l] + ; WNMRCDMSO-A):汐 1.51(m，4H)， 1.61(m, 2H), 1.84(m5 2H), 2.21(t, /=7.5 Hz, 2H), 3.93(s, 3H), 4.14(t, /-6.9 Hz, 2H), 4.19(s, 1H), 7.19(m, 2H), 7. 38(t, /=7.8 Hz, 1H), 7. 55(m, 2H), 7.72(t, /=7. 8 Hz, 1H), 7. 82(s, 1H), 7. 89(d, /=8. 7 Hz, 1H), 7.99(m, 3H), 8. 48(s, 1H), 9. 48(s, 1H), 11.88(s, 1H) 〇 實施例52:製備7-(4-(3-乙炔基苄基胺基）-7-甲氧基喹 唾琳-6 -基氧基）-#-經基庚醯胺（化合物9 0) 步驟52a· 4-(3-乙炔基苄基胺基）-7-甲氧基喹唑啉-6-醇 (化合物0701-90) 標題化合物70 1 - 90製備成淡黃色固體（406 mg，65%) 係從化合物1 05(520 mg，2.06 mmol)及3-乙快基苄基胺 (600 mg，4.6 mmol)於異丙醇（20 mL)使用類似於針對敘述 之程序製備化合物701-77(實施例32): LCMS: 306 [MH]+。 步驟52b· 7-(4-(3-乙炔基苄基胺基）-7-曱氧基喹唑啉-6-基氧基） 庚酸乙酯（化合物0702-90) 1150-9131-PF;Kai 190 200829575 標題化合物0702-90製備成黃色固體（350 mg，57%) 係從化合物0701-90(406 mg, 1.33 mmol)，碳酸鉀及7-溴庚酸乙酯使用類似於針對化合物0702-77(實施例32)敘 述之程序製備·· LCMS·· 462 [M+l]+。 步驟52c· 7- (4-( 3—乙炔基节基胺基）-7-曱氧基喹唾啉- 6-基氧基）-#-經基庚醮胺（化合物90) 標題化合物90製備成白色固體（30 mg，8. 8%)係從化 合物 0702-90 (350 mg，0· 76 mmol)及新鮮的 NH2〇H/CH3〇H(2 niL，3. 54 mmol)使用類似於針對化合物77 (實施例32)敘述 之程序製備：LCMS: 449 [M+l]+，4 NMR(DMS0-A):汐 1. 30-1.53(m, 6H), 1. 74-1. 78(m, 2H), 1. 92-1. 96(m, 2H), 3.88(s, 3H), 4.04(t, /-6.6 Hz, 2H), 4.11(s, 1H), 4.75(d, /=4. 5 Hz, 2H), 7. 08(s, 1H), 7. 33-7. 37(m, 3H), 7.43(s, 1H), 7.61(s5 1H), 8. 30(s, 1H), 8.41(t, /-6.6 Hz, 1H), 8· 60(s，1H), 10. 29(s, 1H)。 實施例53:製備#-(6-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-甲氧 基喧嗤啉-6-基氧基）己基羥基乙醯胺（化合物1〇3) 步驟53a. 6 -（4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7-曱氧基啥唾琳 -6-基氧基）己-1 一醇（化合物0901 ) 將化合物 0109(1. 1 g，3· 44 mmol)及 K2C〇3(l. 9 g， 13.76 mmol)於DMF(20 mL)之混合物，於40°C攪拌10分 鐘。添加6-溴己-1-醇（〇. 64 g，3. 44 mmol )，將混合物於 6 〇°C攪拌6小時。將DMF減壓移除並將殘渣懸浮於水。將 得到的固體收集並乾燥以得產物090 1 ( 1. 35 g，93%) 4C-MS: 1150-9131-PF;Kai 191 200829575 420 [M+l]+ 步驟53b: 乙醯氧基乙醯胺（化合物0902-1 03) 將氯化經基胺（1.39 g，20 mmol)、乙酸鈉（2.46 g，30 mmol)及乙酸酐（20.4 g, 200 mmol)於乙酸（4〇 mL)之混合 物加熱回流48小時。將反應混合物過渡並濃縮。將殘渣加 水（20 mL)，以乙酸乙酯（30 mLx3)萃取。將有機層收集， 以飽和NaHC〇3水溶液、濃鹽水清洗，乾燥（MgS〇4)、過渡 並濃縮以得化合物0902-1 03黃色液體（2. 11 g，90。/〇。 步驟53c· 乙醯氧基-#-（6-(4_(3-氯-4-氟苯基胺基）- 7-甲氧基喹唑啉~6-基氧基）己基）乙醯胺（化合物0903-103) 將化合物 0902-1 03( 1 1 7 mg， 1. 0 mmol )、化合物 090 1 (21 0 mg，0.5 mmol)及 PPh3(524 mg，2.0 mmol)之混 合物溶於無水THF (5 0 mL)。將反應混合物於室溫攪拌並緩 慢添加（E)-二異丙基二氮烯—1，2-二羧酸酯（404 mg，2.0 mmol)。將混合物加熱回流1小時並濃縮。將殘渣（4. 53 g) 以石夕膠閃式管柱層析精製，石油醚：乙酸乙酯=丨：丨作為洗 提液以得化合物0903-1 03黃色固體（50 mg, 19%)。 步驟53d. ’（6 -（4 -（3-氯-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹唑 淋-6-基氧基）己基）一 羥基乙醯胺（化合物ι〇3) 將化合物0903(50 mg，〇·ΐ _〇1)於甲醇（2 mL)及水 (2 mL)之混合物中，添加 LiOH.H2〇(6 mg，0· 15 mmol)。將 反應混合物於室溫攪拌3 〇分鐘並以乙酸中和。將混合物蒸 發以移除甲醇。將得到的固體過濾以水、二乙醚清洗以得 標題化合物 103 橘色固體（32nig，YoxhLCMS: 477 [Μ+1Γ; 1150-9131-PF;Kai 192 200829575 !H NMR(DMS0-^6)： 5 1.3KH1, 2H), 1.50(m, 4H), 1.82(m, 2H), 1.94(s, 3H), 3.46(t, /=7. 2 Hz, 2H), 3. 97(s, 3H), 4.14(t, /=6. 3 Hz, 2H), 7. 28(s, 1H), 7. 54(t, /=9. 0 Hz, 1H), 7.70(m, 1H), 8. 03(dd, 1H), 8.16(s, 1H), 8. 82(s, 1H), 9. 70(s, 1H) 〇 實施例54:製備菸（6 —(4 —(3-氯—4—氟苯基胺基）—7-甲氧 基喧唾啉-6-基氧基）己基）—於羥基丙醯胺（化合物ι〇6) 步驟54a: (丙醯基氧基）丙醯胺（化合物0902 — 、 將氯化羥基胺（1.39 g, 20 mmol)溶於DMF(20 mL)及 丙酮（20 mL)。將反應物以冰/鹽浴冷卻至—1 〇它。對此冷溶 液’添加Et3N(20 mL，1 20 mmol)，並緩慢添加丙醯氯（7. 4 g，80 mmol)。添加後。將混合物回溫至室溫並攪拌1小時。 ................ - -———-·——...---------------------------------------------- - . .........—…一-……-................· ·---……————…… 加水（50 mL)至反應混合物，以乙酸乙酯（1〇〇 mLx3)萃取。 將有機層收集，以飽和NaHC〇3溶液（20 mLx2)及濃鹽水（20 mL)清洗，乾燥（MgS〇4)、過濾並濃縮以得標題產物〇9〇2-106 橘色液體（3.93 g，100%): LCMS: 146 [M + 1J+。 步驟54b· 7_(4_(3氣_4 -氣苯基胺基）-7-甲氧基喧。坐琳 -6-基氧基羥基-甲基庚醯胺（化合物0903-106) 對化合物 0902-1 06 (795 mg, 5.5 _〇1)、化合物 090卜106(419 mg, 1.0 mmol)及 PPh3(1.31 g，5.0 mmol) 於無水THF(40 mL)之混合物，於室溫緩慢添加（e)-二異丙 基二氮烯-1，2-二魏酸酯（1 · 〇 1 g，5 _〇 1)。將混合物加 熱回流1小時，並濃縮以產生粗製產物0903-1 06(4. 53 g) 使用於次一步驟而不進一步精製。 1150-9131-PF;Kai 193 200829575 步驟54c: #-(6-(4 -（3 -氯-4 -氟苯基胺基）-7 -曱氧基啥唾 琳-6-基氧基）己基）- 經基丙醯胺（化合物1〇6) 對化合物0903-1 06(4.53 g crude)於冰/水浴溫添加 Nih/EtOH溶液（20 mL)。將反應物回溫至室溫並攪拌於室溫 鉴夜。將反應物過濾並將渡液濃縮成象I 層析精製，乙酸乙酯/石油醚（1 ·· 1)作為洗提液以得標題化 合物106白色固體（89 mg， 2步驟總產率 19%): m. p. 1 49. 2-158. 0 °C (dec)； LCMS: 491 [M+l] + ； j NMRCDMSO-^): 50.92(t, /-7. 5 Hz, 3H), 1.33(m, 2H), 1.50(m, 4H), 1.81(m, 2H), 2. 29(m, 2H), 3.46(t, /-7.2 Hz, 2H), 3.90(s, 3H), 4. 09(t, /=5. 4 Hz, 2H), 7.16(s, 1H), 7.41(t, /-9,0 Hz, 1H), 7. 76(s, 1H), 7. 78(s, 1H)? …一 -.-— '— — .___^.卜.. 8.07(dd, 1H), 8.46(s, 1H), 9.51(s, lH), 9.53(s^Th) 〇 貫施例55:製備（A)-#-經基- 5- (5 一（7 一甲氧基一 4 一（1 —苯基 乙基胺基）喹唑啉-6-基）呋喃_2-基）戊-4-炔醯胺（化合物 124) 步驟55a. U)-6-碘-7-曱氧基-#-(1-苯基乙基）喹唑啉_4 — 胺（化合物1001) 將濃 H2S〇4(7.1 g)、乙腈（96 mL)、乙酸（96 mL)及化 合物0308(3.0 g, 9.4 mmol)之水（96 mL)的混合物，冷卻 至0 C並攪拌〇 · 5小時。反應混合物成為澄清溶液。對此 溶液於（TC添加NaN〇2(0.72 g，10.4 _〇1)。將得到的溶 液於室溫攪拌0.5小時，並於5(TC滴加KI(4.68g，28_〇1) 於水（96 mL)之溶液。於添加完成後，將得到的溶液於5〇 1150-9131-pf；Kai 194 200829575 °C攪拌另外〇 · 5小時。將反應混合物冷卻並過濾，以水清 洗並乾燥以得產物1〇〇1黃色固體（2. 5 g，5〇%產率）。ιΗ 丽R(A-DMSO) (J10.12(s，1Η)，9.16(s, 1Η)，8.92(s，1Η)， 8.00(dd, Ji, J2 = 6.9Hz, 2. 4 Hz, 1H), 7.66-7.70(m, 1H), 7. 54(t, J-9. 0 Iz, 20(s, 1H>- LC-MS: 406(M+1) 〇 步驟55b· U)-6-(呋喃-2-基）-7-曱氧基-yV-(1-苯基乙基） 喹唑啉-4-胺（化合物1 002) 將 1001(4.29 g，10 mmol )、2-呋喃硼酸（2· 2 g，20 mmol)、Pd(OAc)2(224 mg，1. 0 mmol)、PPh3(524 mg，2· 0 mmo 1)、二乙基胺（i 〇 mL)及二甲基甲醯胺（3 〇 mL)之混合物 於8 0 C攪拌16小時。將反應混合物冷卻至室溫，並加水 (150 mL)。將得到的混合物以乙酸乙酯（12〇 mLx4)萃取、 乾餘並蒸發。將殘渣以管柱層析精製（乙酸乙酯：石油醚二j : 3)以產生產物002白色固體（2· 5 g， 67%產率）。ιΗ NMRCDMSO-i/e) (5 10. 〇l(s, 1H), 8. 83(s, 1H), 8. 53(s, 1H), 8. 16-8. 17(m, 1H), 7.84-7.86(m, 2H), 7.41(t, J = 8. 1Hz, 1H), 7.29(s, 1H), 7.06(s, 1H), 6.66(s, 1H), 4. 05(s, 3H)。LC-MS : 370(M+1)。 步驟55c. U)-6-(呋喃-2-基）-7-曱氧基(1-苯基乙基） 喹唑啉-4-胺（化合物1 003) 對l〇〇2(1.48g, 4 mmol)於三氟乙酸（2 mL)及乙腈（40 raL)之/谷液’添加nis(650 mg, 5 mmol)。將此溶液於室溫 攪拌10分鐘。將混合物以Na2C〇3水溶液中和並濃縮。將 得到的混合物以乙酸乙酯萃取、以水清洗、乾燥並濃縮以 1150-9131-PF;Kai 195 200829575 得一殘渣，將其以管柱層析精製，以得1〇〇3黃色固體（1· 1 g，58% 產率hWNMRCDMSO-A) 6 i〇.〇8(s，1Η)，8.72(s， 1H), 8.55(s, 1H), 8.15(dd, Ji, J2 = 6. 9 Hz, 2. 7 Hz, 1H), 7.79-7.83(m, 1H), 7.45(t, J = 9. 0 Hz, 1H), 7.31(s, 1H), 7. 00(d, J-3. 6 Hz, 1H), 6. 91 (d, J = 3. 6 Hz, 1H)V 4, 06(s, 3H). LC-MS: 496(M+1)。 步驟55d.U)-甲基5-(5-（7-甲氧基-4-U-苯基乙基胺基） 喹唑啉-6-基）呋喃-2-基）ynoate(化合物1004-124) 將 1 003(250 rag, 〇·5 mmol)、甲基戊-4-炔酸酯（112 mg, 1. 0 mmol) > Pd(0Ac)2(35 mg, 0. 05 mmol) ^ PPh3(13 mg, 0· 05 mmol)、Cul(10 mg, 〇· 〇5 mmol)，Et3N(〇· 5 mL)及 DMF(3 mL)之混合物，於氮氣下於4(rc攪拌小時。將混合物以 -— ———…- -----.‘一 --...·-.--—一 *..... —...............- .... -......— _ 水稀釋（120 mL)並以乙酸乙酯u〇〇 mLx4)萃取。將合併的 有機層濃縮並以管柱層析精製（乙酸乙酯：石油醚=1 : 4)以 得 1 004-1 24 黃色固體（180 mg， 78 % 產率）。LC-MS: 480CM+1)。 步驟55e· U)-#-經基-5-(5-(7-甲氧基-4-(卜苯基乙基胺 基）喹唑啉-6-基）呋喃-2-基）戊-4-炔醯胺（化合物124) 對一含化合物 1 004-1 24(180 mg，0.37 mmol)之燒瓶， 添加羥基胺於甲醇溶液（3· 〇 mL)之溶液。將混合物攪拌於 室溫0 · 5小時。然後以乙酸調整為pH 7。將混合物過濾， 以曱醇清洗，以得產物24白色固體（1〇〇 mg，55 %產率）。 !H NMR(DMSO-^e) 5 1〇.52(s, 1H), 10.13(s, 1H), 8. 85(s, 1H), 8. 79(s, 1H), 8. 53(s, 1H), 8. 12-8. 16(m, 1H), 1150-9131-PF;Kai 196 200829575 7. 79-7. 83(m, 1H), 7. 43(t, J-9. 6 Hz, 1H), 7.30(s, 1H), 7.09(d, J = 3.6Hz, 1H), 6.85(d, J = 3. 6 Hz, 1H), 4. 05(s, 3H)，2.73(1:, J = 7· 2 Hz，2H)，2.26(1:, JN7· 2 Hz，2H)。 LC-MS: 481(M+1)。 實施例56 :製備（終-备與基-6-(5-(7-曱氡基-4-(1 -苯基 乙基胺基）啥嗤琳-6 -基）吱喃-2 -基）己-5 -快醯胺（化合物 125): 步驟56a.U)-甲基6 -（5-(7-甲氧基-4-(1-苯基乙基胺 基） 唾°坐琳-6-基）吱喃-2-基）己-5-炔酸醋（化合物1〇〇4-125) 標題化合物1 004 -1 25製備成黃色固體（180 mg，77%) 係從化合物1 003(250 mg, 0· 5 mmo 1)及己-5-快酸甲酯（1 26 * ——〜』— -卜-—------————-一一……—————-—— — - ... _ _ mg，1· 0 mmol)使用類似於針對化合物1 004-1 24(實施例55) 敘述之程序製備：LCMS: 494 [M+l]+。 步驟56b. (A) - 經基-6 -（5 -（7 -甲氧基-4 -（1-苯基乙基胺 基）喹唑啉-6-基）呋喃-2-基）己-5-炔醯胺（化合物1 25) 標題化合物125製備成白色固體（60 mg，13%)係從化 合物1 004-125( 1 60 mg，0.34 mmol)及羥基胺於甲醇溶液 (3.0 mL)使用類似於針對化合物124(實施例55)敘述之程 序製備：WNMRCDMSO-A) 5 10.43(s，1H)，IO.IKs，1H)， 8.79(s, 1H), 8.73(s, 1H), 8. 53(s, 1H), 8. 12-8. 15(m, 1H), 7. 77-7. 82(m, 1H), 7. 43(t, J = 9. 0 Hz, 1H), 7. 30(s, 1H), 7.09(d, J-3,6 Hz, 1H), 6. 86(d, J-3. 6 Hz, 1H), 4.05(s, 3H), 2.52(t, J = 6. 6 Hz, 2H), 2.10(t, J = 7. 2 Hz, 1150-9131-PF;Kai 197 200829575 2H)，1.72- 1·82(πι，2H)°LC-MS: 495(M+1)。 實施例57:製備5-(4-(3-氯_4-氟苯基胺基）_7-甲氧基喹 唑啉-6-基）戊-4-炔酸曱酯（化合物138) 步驟57a. 5-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7_曱氧基喹唑啉 -6-基)戎-4-块酸甲酯(化合物1101-138) 將 1001(215 mg，〇·5 mmol)、戊-4-炔酸曱酯（224 mg， 2. 0 mmol)、Pd(OAc)2(140 mg, 〇· 2 mmol)、PPh3(52 mg, 0· 2 mmol)、Cul(76 mg，〇· 4 _〇l)、EtsN(2. 5 mL)及 DMF(5 mL) 之混合物，於80°C攪拌16小時。將水（120 mL)添加至此 反應物，並將得到的混合物以乙酸乙酯萃取。將有機相合 併，乾燥、過濾並濃縮以留下一殘渣，將其以管柱層析精 製（乙酸乙酯：石油醚·· 4)以得1101黃色固體（16〇 77 % 產率）。LC-MS: 414(M+lh 步驟57b·甲基5-(4 -（3-氯_4-氟苯基胺基）一 7-甲氧基喹 唾琳-6-基）戊-4-炔酸酯（化合物138) 對 §化曰物 1101 — 138(102 rag, 0.25 ramo 1)之燒瓶， 添加新鮮製備之羥基胺於甲醇（3· 〇 mL)溶液。將混合物於 室溫攪拌0.5小時。以乙酸調整為PH 7。將得到的沉澱物 過濾並以甲醇清洗，以得產物38白色固體（75mg，74%產 率）。HNMR(DMS0-A) 3 i〇.49(s，1H)，9.81(s，1H)， 8-81(s, 1Η), 8.56(s, 1H), 8.55(3, 1H), 8.17>8.20(m, 1H), 7.79-7.84(m, 1H), 7. 42(t, J = 9. 0Hz, 1H), 7.i9(s, 3.94(s, 3H), 2.72(t, J = 7. 2 Hz, 2H), 2. 28(t, J^7. 2 Hz， 2H) 。 LC-MS: 415(M+1)。 1150-9131-PF；Kai 198 200829575 實施例58 :製備6-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹 峻琳-6-基）-N-經基己-5-炔醯胺（化合物139) 步驟58a· 6-（4 -（3-氯-4-氟苯基胺基）-7-曱氧基啥嗤琳 -6-基）己-5-炔酸曱酯（化合物11〇1 -139) 標題化合物1从 產率）係從化合物1001(1.7 g，3.96 _〇1)及甲基己-5-炔酸酯（378 rag， 3· 0 mmol)使用類似於針對化合物 1101-138(實施例57)敘述之程序製備：LCMS: 428 [M+l]+。 步驟58b· 6-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7-曱氧基喹唑啉 -6-基）-N-羥基己-5-炔醯胺（化合物139) 標題化合物139製備成白色固體（80 mg，73 %)係從化 合物1101-139(110 mg，0.2 6 mmol)及新鮮製備之經基胺 於甲醇溶液（3. 0 mL)使用類似於針對化合物138(實施例57) 敘述之程序製備··咜 NMR(DMSO-A) 5 10.42(s，1H)， 9.91(s, 1H), 8.70(s, 1H), 8. 60(s, 1H), 8. 58(s, 1H), 8.16-8.19(m, 1H), 7. 78~7. 85(ra, 1H), 7. 43(t, J-9. 0Hz, 1H), 7.20(s, 1H), 3.95(s, 3H), 2.51(t, J = 7. 2 Hz, 2H), 2_15(t, J = 7· 2 Hz, 2H)， 1·75-1·84(ιη， 2H)。LC-MS·· 429(M+1)。 實施例59:製備5-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7-曱氧基喹 唾琳-6 -基）-經基戊醯胺（化合物144) 步驟59a. 6-(4-（3-氣-4-氟苯基胺基）-7-曱氧基喹唑啉 —6-基）己-5-炔酸曱酯（化合物11〇2 -144) 對 1 1 0 1 -1 38 (500 mg，0·21 mmol)於甲醇（3〇 mL)之溶 1150-9131-PF;Kai 199 200829575 液，添加50 mg Pd/C(10%)。將混合物於氫氣氣氛（丨atm) 於室溫攪拌1 6小時。將混合物過濾並將濾液濃縮以得粗製 產品1102-144(480 rag，94%產率），直接用在次一步驟。 LC-MS: 418(M+1)。 步驟5 9b· 5- (4 — (3_乳氣本基胺基)-7-甲氧基哇。坐琳 -6 -基）-經基戊醢胺（化合物144) 對一含化合物 1 1 02-144(480 mg, 1·14 mmol)之燒瓶， 添加新鮮製備之羥基胺於曱醇（5· 0 mL)溶液。將混合物於 、 室溫攪拌〇 · 5小時。然後以乙酸調整為pH 7。將得到的固 體過濾，以甲醇清洗，以產生產物44白色固體（400 mg，83 % 產率）。4 NMR(DMS0-A) 5 10· 34(s，1H)，9· 69(s，1H)， 8.68(s, 1H), 8.53(s, 1H), 8. 24(s, 1H), 8. 19-8. 23(m, 1H), 7.80-7. 88(m, 1H), 7.41(t, J = 9. 0Hz, 1H), 7, 17(s, 1H), 3.94(s, 3H), 2.71(t, J = 6. 6 Hz, 2H), 2. 00(t, J = 7. 2 Hz, 2H)，1.58-1.60 (m, 4H), 1.26-1·36(πι，MS: , 419(M+1)。 k 實施例60:製備5-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹 唑啉-6-基）-N-羥基戊醯胺（化合物145) 步驟60a· 6-(4-(3-氣-4- It苯基胺基）-7-甲氧基喧峻琳 - 6-基）己-5-炔酸甲酯（化合物1 1 02 -145) 標題化合物1 1 02-145製備成粗製產物（210 mg, 99 % 產率）係從化合物1101 -139(215 mg, 0.5 mmo 1)使用類似 於針對敘述之程序製備化合物1 102-144(實施例59): LCMS·· 432 [M+1].。 1150-9131-PF;Kai 200 200829575 步驟60b. 5-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹唑啉 -6-基）-N -經基戊醯胺（化合物145) 標題化合物145製備成白色固體（90 mg, 43 %)係從化 合物1 1 02-145(21 0 mg, 0.5 _〇1)及新鮮製備之羥基胺於 军醇溶液( 3.4 m L )使 敘述之程序製備·· 4 NMR(MSO-A) 5 10.33(s， 1H)， 9.68(s, 1H), 8,66(s, 1H), 8.52(s, 1H), 8.21(s, 1H), 8. 15-8. 19(m, 1H), 7. 80-7. 85(m, 1H), 7.41(t, J = 9. 0Hz, 1H), 7,16(s, 1H), 3.93(s, 3H), 2.71(t, J-7. 2 Hz, 2H), 1.95(t，J二7.2Hz, 2H)，1.50-1.67(m，4H)，1·26- 1.36(m， 2H) 。 LC-MS: 433(M+1)。 實施例61:製備4-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-曱氧基喹 。坐啉-6-yl硫）羥基丁醯胺（化合物149) 步驟61a· S-4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-曱氧基喹唑啉-6- 基苯甲硫酸酯（化合物1201) 將化合物 1001 (4. 8 g，11 · 4 mmol )、硫苯甲酸（7. 8 g， 56.9 111〇1)、1，10-菲繞啉（0,452，2.3 111111〇1)、碘化銅（0.22 §，1.1111111〇1)及01?£八（2.948，22.8 111111〇1)於曱苯（2〇1111〇 之混合物，於11 (TC在氮氣氣氛中攪拌24小時。完成後， 將溶劑減壓移除，並將殘渣以管柱層析精製，得到粗製標 的化合物棕色固體（1. 〇 g，20%)。LCMS: 440 [M+l] +。 步驟61b· 2-(4-(3 -氯-4-氟苯基胺基）—7-甲氧基喹唑啉 一 6-基硫）乙酸乙酯（化合物1 202-1 49) 將化合物 1201(0.3g，0.68 mmol)及 K2C〇3(0· 14 g，1. 0 1150-9131-PF/Kai * 201 200829575 mmol)於DMF之混合物，於50°C於氮氣環境下攪拌6小時。 以針筒添加乙基4-溴丁酸酯（0.14g，〇·7ΐ_ο1)並授拌 另外3小時。完成反應後，將溶劑減壓除去，並將殘渣以 管柱層析精製以得標的化合物12〇2 —149微黃色固體（5〇 mg， 16%) 〇 LCMS； 450 [Ml ] + ° 步驟61c· 4-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）—7-曱氧基喹唑啉 - 6-基硫羥基丁醯胺（化合物149) 將化合物1202-149(48 mg，0.11 mmol)及新鮮製備之 NihOH曱醇溶液（l77m，3.5mL)之混合物，於室溫擾掉 30分鐘。將混合物以Ac〇h調整為ρη = 7· 0 '並移除溶劑。 將固體收集並以管柱層析精製，以得標的化合物丨49微黃 粉末（14 mg，30%)。LCMS·· 437.7 [M+l] + ; 4 NMR(DMS〇-Α) ^ 10. 72(s, 1H), 9. 82(s/T^ 8. 94(s, 1H), 8： 5(s, 1H), 8.38(m, 1H), 8.19(s, 1H), 8. 06(m, 1H), 7. 39(m, 1H), 7.20(s, 1H), 3.97(s, 3H), 3. 03(m, 2H), 2. 22(m, 2H), 1·91(brs, 2H)。 實施例62:製備5-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基啥 唾啉-6-基硫）-N-羥基戊醯胺（化合物151) 步驟62a· 5-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹唑琳 - 6-基硫）戊酸乙酯（化合物1 202-1 51 ) 標題化合物1 202-1 51製備成微黃色固體（90 mg，28 % 產率）係從化合物1 20 1 (300 mg, 0.68 mmol)使用類似於針 對化合物1 202-1 49(實施例61)敘述之程序製備：LCMS: 464 [M+1].。 1150-9131-PF;Kai 202 200829575 步驟62b· 5-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-7-甲氧基喹唑啉 - 6-基硫）-N-羥基戊醯胺（化合物151) 標題化合物151製備成微黃粉末（25 mg, 29 %)係從化 合物1202-1 51 (87 mg，0.19 mmol)及新鮮製備之羥基胺於 甲醇溶液（1. 77M，4. 0 mL)使用類似於針對化合物1 49(實 施例61)敘述之程序製備·· LCMS: 451.7 [M + l] + ; j NMR(DMS0-A) β l〇.74(brs, 1H)，10.4Q(s，1H), 8.75(s， 1H), 8.21(s, 1H), 7.99(m, 1H), 7. 67(m, 1H), 7. 52(m, 1H), 7. 20(s, 1H), 4. 01(s, 3H), 3. 12(brs, 2H), 2·00(brs， 2H), 1. 67(brs， 4H)。 貫施例63:製備5 -（4 -（3-氯-4-It苯基胺基）-7-曱氧基啥 唑啉-6-基硫羥基戊醯胺（化合物155) 步驟63a. 2-(4-(3 -氯-4-氟苯基胺基）-7~甲氧基。奎唾琳 - 6-基硫）乙酸乙酯（化合物1 202-1 55) 標題化合物1 202-1 55製備成微黃色固體（87 mg，2Θ % 產率）係從化合物1 201 (300 mg, 0.68 mraol)使用類似於在十 對化合物1 202-149(實施例61)敘述之程序製備：Lcms. 492 [M+l]+ 。 步驟63b· 7-(4-(3-氣_4 -亂苯基胺基）-7 -甲氧基啥^坐琳 - 6 -基硫）-N -經基庚醯胺（化合物1 5 5 ) 標題化合物155製備成微黃粉末（28 mg，34 %)係彳足化 合物1 202-1 55(85 mg, 0·19 mmol)及新鮮製備之輕基胺於 曱醇溶液（1.77M，4.0mL)使用類似於針對化合物〗 i 49 (實 施例61)敘述之程序製備：LCMS: 479.7 + . 土 1150-9131-PF;Kai 203 200829575 NMRCDMSO-^/6) δ 10.32(brs, 1H), 9.76(s, 1H), 8.65(s, 1H), 8.51(s, 1H), 8.14(s, 1H), 8. 09(m, 1H), 7. 75(m, 1H), 7.44(m, 1H), 7.19(s, 1H), 3. 97(s, 3H), 3. 08(m, 2H), 1. 92(brs, 2H), 1. 64(brs, 2H), 1. 45(m, 4H), 、( in', ’ 2 H) q 實施例64:製備7-(4-(3_氯-4-氟苯基胺基）-6-甲氧基唾 唑啉-7-基氧基羥基庚醯胺 (化合物161) 、 步驟64a. 4-(7-乙氧基-7-側氧基庚氧基）-3-羥基苯甲酸 乙酯（化合物1301-161) 對於3，4-二羥基苯甲酸乙酯0401 (6. 0 g, 33 mm〇i) 於DMF(50 mL)之溶液，添加碳璇鉀（4· 6 g，33 mmol)。將 混合物於室溫攪拌15分鐘，然後滴加 7-溴庚酸~乙醋 (7· 821 g，33 mmol)於DMF(10 mL)之溶液。將混合物於2〇 °C攪拌12小時。反應後，將混合物過濾並將濾液於真空中 I 濃縮。將得到的殘渣溶於二氯曱烧並以濃鹽水清洗。將有 機相收集並以硫酸鈉乾燥。過濾並濃縮以得粗製產物。將 粗製產物以管柱層析精製（乙酸乙酯/石油醚=1 ·· 10)以得標 題產物 1301-161 白色固體（2. 44 g， 22%): LCMS: 338 [M+l]+, NMRCDMSO-^/e) ： δ 1.177(t, /=7.2 Hz, 3H), 1. 247-1.438(m, 7H), 1. 480-1. 553(m, 2H), 1. 579-1.754 (m, 2H), 2. 245-2. 294(t, /=7. 2 Hz, 2H), 3. 972-4. 063(m, 4H), 4. 1 90-4. 261 (q, /=7.2, 14. 1Hz 2H), 6. 958-6. 986(d, 异8·4 Hz, 1H)，7.358-7.404(m，2H), 9.36(s，1H)。 1150-9131-PF/Kai 204 200829575 步驟64b. 4 -（7-乙氧基-7-側氧基庚氧基）-3-甲氧基苯甲 酸乙酯（化合物1 302-1 61 )
將化合物 1301-161(1.2g，3.55 mmol)、碘甲烷（0.504 g，3,55minol)及碳酸鉀（i.47g，10.65mmol)於 DMF(15mL) ^ 8 0 C if # .3 4> af 〇 ^ t j|f ^ MM M 空中濃縮，將得到的殘渣溶於二氯甲烷，並以濃鹽水清洗 2次。將有機相收集並以硫酸鈉乾燥。過濾並濃縮以得標 題產物 1 302-1 61 白色固體（1. 2 g，97%): LCMS: 353 [M+l]+， ]H NMRCDMSO-^/e) ： ^1. 131-1. 178(t, /=6. 9 Hz， 3H), 1, 267-1. 395(m, 7H), 1. 478-1. 574(m, 2H), 1.665-1.755 (m, 2H), 2. 242-2. 291 (t, /=7. 2 Hz, 2H), 3. 792(s, 3H), 3. 982-4. 063(m, 4Ή), 4. 229-4. 300(q, /=7.2 Hz, 2H), 7. 025-7. 052(d, /=8. 1Hz, 1H), 7. 418-7. 424(d, /-1.8 Hz, lH)，7.529-7.562(dd，/=8.4Hz，1.8Hz，lH)。 步驟64c· 4-(7-乙氧基-7-側氧基庚氧基）-5-甲氧基-2-硝 基苯甲酸乙酯（化合物1 303 -1 61 ) 對於一攪拌中之化合物1302-1 61 ( 1.2 g，3.47 mmol) 於乙酸（1 0 mL)之溶液，於20°c滴加發煙硝酸（2. 18 g，34. 7 mmol)。將反應混合物於20°C攪拌1小時並倒入冰水中， 以二氣甲烷萃取2次。將合併的有機相以濃鹽水、NaHC〇3 水溶液及濃鹽水清洗，並以硫酸鈉乾燥。過濾並濃縮以得 標題產物 1 303-1 61 黃色油（1.375 g，98%): LCMS: 398 [M+l]+ 。 步驟64d. 2-胺基-4-(7-乙氧基-7-側氧基庚氧基）_5 一甲氧 1150-9131-PF;Kai 205 200829575 基苯甲酸乙酯（化合物1 304 -1 61 ) 將 1 303-1 61 ( 1.375 g，3·46 mmol)、乙醇（3〇 mL)、 水（1G mL)及鹽酸（1 raL)之混合物，攪拌形成一澄清的溶 液。對此上述溶液，分次添加鐵粉（2. 〇 g，34. 6 。 將混合物攪掉回流3 0分鐘並冷卻i 氧化鈉溶液將反應混合物之pH調整為8並過濾。將濾液濃 縮以移除乙醇，然後以二氣甲烷萃取2次。將合併的有機 相以濃鹽水清洗並以硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮以得標題產 物 1 304-1 61 黃色固體（1· 07 g，84%) : LCMS: 368 [M+1].。 步驟64e· 7-（6 -甲氧基-4-侧氧基-3，4-二氫喧嗤琳-7-基 氧基）庚酸乙酯（化合物1 305-1 61 ) 將化合物 1304-161(1.07 g，2.92 mmo 1 )、甲酸銨 ' … -—……...—........——......…——.....— — —...... —... —_ (0.184 g，3 mmol)及曱醯胺（1〇 mL)之混合物，於180¾ 攪拌3小時。反應後將混合物冷卻至室溫。將甲醯胺減壓 移除並將殘渣溶於二氣甲烷，並以濃鹽水清洗。將有機相 以硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮以得標題產物1 305-1 61棕色固 體（0.684 g，67%): LCMS·· 349 [M + 1]、 步驟64f. 7-(4-氯-6 -甲氧基喹唑琳-7-基氧基）庚酸乙酯 (化合物 1306-161 ) 將產物 1 305-1 61 (0.684 g，1.97 mmol)及磷醯三氯（20 mL)之混合物，攪拌回流4小時。反應後將多餘的磷醯三氣 減壓移除並將殘渣溶於二氯甲烷，以水、NaHCOs水溶液及 濃鹽水清洗。將有機相以硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮以得標 題產物 1 306-161 黃色固體（0.59 g，82%): LCMS: 367 1150-9131-PF;Kai 206 200829575 [M+l]+ 。 步驟64g. 7-(4-(3-氯-4-氟苯基胺基）-β-甲氧基喹唑啉 -7-基氧基）庚酸乙酯（化合物1307 -1 61 ) 將 1 306-161 (336 mg, 〇·92 mmol)及 3-氣-4-氟苯胺 (141略 〇·91_〇1)於—1^ 流4小時·反應後將混合物冷卻至室溫將得到的沉澱分 離、以異丙醇及醚清洗並乾燥以得標題化合物13〇7 —161黃 色固體（389 mg, 89%): LCMS: 476 [M+l]+。 步驟64h· 7-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）-6-曱氧基喹唑啉 - 7-基氧基羥基庚醯胺（化合物ι61) 對新鮮製備之說基私 >谷液（2 · 5 mL，3 · 75 mmo 1)添加 化合物1 307-1 61 (35 9 mg，〇· 75 mmol)。將得到的反應混
合物於2 51攪拌2 Γ小混合物以乙酸中和， 將得到的沉殿分離，以水清洗並乾燥以得標題化合物1 6 J 白色固體（60 mg， 17%): mp 238·5〜253.4°c、LCMS: 463 [M+l]+， JH NMR(DMSO^a): ^ 1. 23-1. 55(m, 6H), 1.76-1. 8(m, 2H), 1.96(t, /=7. 2 Hz, 2H), 3. 96(s, 3H), 4.13(t, /=6.3 Hz, 2H), 7.19(s, 1H), 7. 20(m, 2H), 7.46(t， /=9 Hz, 1H), 7. 78(d, /=7. 5 Hz, 1H)， 8. 12-8. 15(dd, /=2.4, 6. 9 Hz, 1H), 8.50(s, 1H), 8. 67(s, 1H)，9. 57(s，1H), 10. 35(s，1H)。 實施例65:製備7-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-6-甲氧基嗤 唾啉-7-基氧基）-#—羥基庚醯胺（化合物162) 步驟65a· 7-(4-（3 -乙快基苯基胺基）-6 -甲氧基喧σ圭琳—7 — H50-9131-PF/Kai 207 200829575 基氧基）庚酸乙酯（化合物1 307-1 62) 標題化合物1 307-1 62製備成黃色固體（253 mg，46 % 產率）係從化合物 1 306-1 62(446 mg，1. 22 mmol)、3-乙炔 基苯胺（142 mg，1.22 mmol)及異丙醇（10 mL)使用類似於 針對化合秦4 30 7 =1614^ 448 [M+l]+ 。 步驟65b. 7-(4_(3-乙炔基苯基胺基）-6-甲氧基喹唑啉-7-基氧基羥基庚醯胺（化合物162) 標題化合物162製備成黃色粉末（20 mg，8 %)係從化 合物1307-1 61(246 mg，0.0.55 mmol)及新鮮製備之經基 胺於曱醇溶液（2. 0 mg, 2. 75 mmol )使用類似於針對化合物 161(實施例64)敘述之程序製備：LCMS: 435 [M+l] +，4 ——----------------------—_________________________ 一 NMR(DMS0 - A): J1.301-1.541(m，6H)，1. 7 4 0 -1Γ792(m， 2H)，1.929-1.977(m，2H)，3.959(s，3H)，4.123(t，/=6.6
Hz, 2H), 4. 192(s, 1H), 7. 176-7. 221 (m, 2H), 7. 360-7. 427(m, 1H), 7. 831-7. 890 (m, 2H), 7, 966(m, 1H) 8.504(s, 1H), 8.642(s, 1H), 9. 547(s, 1H), l〇.321(s, 1H)。 貫施例66:製備7-(4-(3-氣-4-氟苯基胺基）—6 -（2 -甲氧 基乙氧基）啥°坐琳-7-基氧基）-#-經基庚醯胺（化合物Μ?) 步驟66a· 4-(7-乙氧基-7-側氧基庚氧基）-3-(2-曱氧基乙 氧基）苯曱酸乙酯（化合物1 302-1 67)
標題化合物1302-167製備成黃色固體（14〇〇 mg，97 % 產率）係從化合物1 301 ( 1 223 mg, 3.62 mmol)、2一甲氯A 1150-9131-PF;Kai 208 200829575 乙基 4-甲基苯磺酸酯（0·834，3·62 _〇1)，DMF(15 mL) 及碳酸鉀（1.50 g，10.86 mmol)使用類似於針對化合物 1 302-1 61 (實施例64)敘述之程序製備：LCMS: 397 [MH]+， NMRCDMSO-^/e): ^1.152(t, /=7. 2 Hz, 3H), 1.264-1.405 (in, T Ή ) γ ^, ^ ^ ίττ- jj, ^ 5 7 2 (； in y 2 H ), v β 0 3 — . 7 3 0 ^ in, = 2 H ) ? 2.267(t, /=7. 2 Hz, 2H), 3.315(s, 3H), 3.650(t, /=5.4 Hz, 2H), 3. 990-4. 062(m, 4H), 4. 089-4. 1 1 9(ra, 3H), 4. 222-4, 293(q, /=7. 2 Hz, 2H), 7. 053(d, /=8. 1Hz, 1H), ^ 7. 447-7. 486(m, 1H), 7. 539-7. 567(dd, /=8. 4 Hz, 1.8Hz, 1H) ° 步驟66b. 4-(7-乙氧基-7-側氧基庚氧基）-5-(2-甲氧基乙 氧基）-2-補基苯甲酸乙酯（化合物1303-1 67) 標題化合物1 303-1 67製備成黃色油（1510 mg, 97 %產 率）係從化合物 1 302-1 67( 1400 mg, 3. 5 mmol)、乙酸（10 mL) 及發煙硝酸使用類似於針對化合物1303-161 (實施例64) , 敘述之程序製備：LCMS: 442 [M+l]+。 \ 步驟66c·乙基 2 -胺基-4-(7-乙氧基-7-侧氧基庚氧 基）-5-(2-甲氧基乙氧基）苯甲酸酯（化合物1 304-1 67) 標題化合物1 304-1 67製備成黃色油（1210 mg, 97%產 率）係從化合物 1 303-1 67( 1 50 0 mg, 3. 4 mmol)、鐵粉（1. 9 g, 34 mmol)、乙醇（30 mL)、水（10 mL)及鹽酸（1 mL)使用 類似於針對化合物1 304-1 6 1 (實施例64)敘述之程序製備： LCMS: 412 [MH]+ 〇 步驟66d. 7-（6 -（2-曱氧基乙氧基）-4-側氧基-3，4-二氫 1150-9131-PF;Kai 209 200829575 坐啉-7-基氧基）庚酸乙酯（化合物1 305-1 67) 標題化合物1 305-1 67製備成黃色固體（859 mg, 85 % 產率）係從化合物1 304-1 67( 1 210 mg，2. 9 mmol)、曱酸錄 (〇·184 g，3 mmol)及甲醯胺（10 mL)使用類似於針對化合 物 13Q5〜46l· [M+l]+。 步驟66e· 7-(4-氯-6-(2-甲氧基乙氧基）喹唑啉-7-基氧基） 庚酸乙酯（化合物1 306-1 67) 標題化合物1 306-1 67製備成黃色固體（572 mg，63 % 產率）係從化合物1305-1 67(859 mg, 2· 2 mmol)及磷醯三 氟（2 0 mL)使用類似於針對化合物1 30 6-1 6 1 (實施例64)敛 述之程序製備：LCMS: 411 [M+l]+。 Ί …—… —〜--— .—.. —______________________________________________..—— ——._..... _________________________________________________ 步驟66f. 7 -（4-(3 -氣-4-|1苯基胺基）-6-（2-甲氧基乙氧 基）喹唑啉-7-基氧基）庚酸乙酯（化合物1 307-1 67) 標題化合物1307 -167製備成黃色固體（238 mg, 76 % 產率）係從化合物 1 306-1 67(251 mg，0· 6 mmol)、3-氯-4- 氟苯胺（90 mg，0· 6 mmol)及異丙醇（5 mL)使用類似於針對 化合物1 307-1 61 (實施例64)敘述之程序製備：LCMS: 520 [M+1].。 步驟66g. 7_(4 -（3-氣-4-氟苯基胺基）-6 -（2-甲氧基乙氧 基）喹唑啉-7-基氧基）-，羥基庚醯胺（化合物167) 標題化合物167製備成黃色固體（20 mg, 9 %產率） 係從化合物1307-1 67(232 mg，0.45 mmol)及新鮮製備之 輕基胺溶液（2 mL, 2.1 mmol)使用類似於針對化合物 1150-9131-PF;Kai 210 200829575 161(實施例64)敘述之程序製備：LCMS: 507 [M+l]+，4 NMR(DMSO-A) : β 1· 314-1. 539(m，6H)，1· 754-1· 801 (m， 2Η), 1. 926-1. 975 (m, 2Η), 3. 368(s, 3H), 3. 770(t, /=4.8 Hz, 2H), 4.135(t, /=6.3 Hz, 2H), 4. 267(t, /=4.8 Hz, 2H), 7. 19(s, 1H), 7. 440(t, /=8.4 Hz, 1H), 7. 764-7. 833(m, 2H), 8. 095-8. 126(dd, /=2.7, 6.9 Hz, 1H), 8. 499(s, 1H), 8. 612(s, 1H), 8. 635(s, 1H), 9·555(s, 1H), 10·314(s, 1H)。 實施例67:製備7-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-6-(2-曱氧基 乙氧基）喹唑啉-7-基氧基）-舲羥基庚醯胺（化合物168) 步驟67a.乙基7-（4-（3 -乙炔基苯基胺基）- 6-(2 -曱氧基 乙氧基）喹唑啉-7-基氧基）庚酸酯（化合物1307-1 68) 標題化合物1 307-1 68製備成黃色固體（214 mg，56 % 產率）係從化合物 1 307-1 67(320 mg，0· 78 mmol)、3-乙炔 基苯胺（92 mg, 0· 78 mmol)、異丙醇（5 mL):使用類似於針 對化合物1 307-1 61 (實施例64)敘述之程序製備：LCMS: 520 [M+1].。 步驟67b. 7-(4-(3-乙炔基苯基胺基）-6-(2-甲氧基乙氧基） 喹唑啉-7-基氧基）-#羥基庚醯胺（化合物168) 標題化合物168製備成黃色固體（30 mg, 15 %產率） 係從化合物1307-178(204 mg，0.42 mmol)及新鮮製備之 經基胺溶液（2 mL，2· 1 mmol)使用類似於針對化合物 161(實施例64)敘述之程序製備：LCMS: 479 [M + l] +，j NMR(DMSO-A): /1· 31 4-1. 539(m，6H)，1. 754-1· 80 0 (m， 1150-9131-PF;Kai 211 200829575 2H), 1. 925-1. 975(m, 2H), 3. 370(s, 3H), 3.771(t, /=4 8 Hz, 2H), 4.131(t, /=6. 3 Hz, 2H), 4.186(s, 1H), 4.275(t /=4.8 Hz, 2H), 7.19(d, /=7.5 Hz, 2H), 7.390(1, /=7 8' Hz’ 1H)，7.847-7.900(m，2H)，7 975(s，1H), 8 487(s， 1H), 8.636(s, 1H), 9. 455(s, 1H), 10.316(s, 1H) 〇 實施例68:製備3-((5 -（4令氣_4_(3_氣节氧基）苯基胺 基坐琳_6_基）咬味_2_基）甲基胺基）（化 合物174) ，： 步驟68a. 2-胺基-5-碘苯曱酸酯（化合物14〇2一174) 甲基2-胺基苯甲酸曱酯（23g，15.2_〇1)溶於2〇〇虬 水及32 mL濃鹽酸；將此溶液冷卻至2(rc •。將28以濃鹽 酸以lOOmL冷水稀釋，製備單氯化碘於鹽酸溶液，加入恰 足量碎冰，使溫度為5°C，約2分鐘期間，於單氯化物中 攪拌（25g，15.5 mmol)。將此單氣化碘溶液快速攪拌進入 曱基2-胺基苯甲酸酯溶液。幾乎立即地，曱基2一胺基一已一 ( 碘苯甲酸酯分離成棕褐至紫黑沉澱。將此混合物攪拌i小 時。過濾，以冷水清洗，並且然後真空乾燥，以產生14〇2-1 W 固體（17.8g，42%): LC — ms: 278 [M+1] +，1hnmr(dms〇 — a): 汐 3.70(s，3 H)，6.64(d, /=9.0 Hz, 1H)，6.78(b，2H)， 7.47(dd? /i = 9.0 Hz, Λ=1.8Ηζ, 1H), 7.90(d, /=1.8 Hz, 1H) 〇 ’ 步驟68b_ 6-碘喹唑啉—4(3i7)-酮（化合物14〇3 —174) 甲基2 一胺基—5 —碘苯甲酸酯（17.8g，64mmm〇l)於190 C.加熱於30 0 mL甲醯胺2小時。將渴合物冷卻至室溫並將 1150-9131-PF/Kai 212 200829575 固體產物過濾並於真空中乾燥。形成的產物1403-174被使 用而不進一步精製（10 g，56.1°/〇): LC-MS: 273 [M+l] + , 4 NMR(DMS0>^)： ^ 7.46(d, /-9.0 Hz, 1H), 8.10(ra, 2H), 8.36(d, /=2·1Ηζ, 1H)，12.40(s, 1H)。 步驟68c· 4-氯-6-碘喹唑啉（化合物1404-1 74) 6-礙喹唑啉—4(3H)-酮（l〇g, 37 mmol)於 POCMIOO mL) 回流整夜。將POCI3於真空中移除。將殘渣溶於CH2Cl2(500 mL) °將有機相以水清洗（1〇〇以）並乾燥（Mgs〇〇。將CH2C12 於真空中移除，並得到 14〇4-174(5. 7 g，5 3%): LC-MS: 291 [M+l]+, ]H NMRCCDCh)： θ 7· 81 (d， /=9. 0 Hz， 1H), 8.21(dd, /i = 9.〇 Hz, /2 = 1.8 Hz, 1H), 8. 65(d, /=1.8 Hz, 1H), 9. 06(s，1H)。 步驟68d.合成，（3 —氯—4 —(3—氟苄氧基）苯基）— 6 —碘喹唑 琳一4 —胺（化合物1405-1 74) 4-氯-6-碘喹唑啉（5.7g，19·7 mmol)及 3-氯-4-(3-氟 苄氧基）苯胺（4·9§, 19·7 mmol)於異丙醇（l50mL)回流整 夜。將混合物冷卻至室溫。將固體產物沉澱、過濾並於真 空中乾餘。產物405-174足夠純且不經精製地使用·（7. 4 g, 74.2%)： LC-MS： 506 [M + l]+, 'H NMR(DMS0-^): ^ 5.29(s, 2 H), 7.18(m, 1H), 7.33(m, 3H), 7.48(m, 1H), 7. 66(m, 1H), 7.74(d, /=9.0 Hz, 1H), 7.90(d, /=2.2 Hz, 1H), 8.37(d，/=9.0 Hz, 1H)，8.94(s, 1H), 9.29(s，1H)。 步驟68e· 5-(4-(3-氯-4-(3-氟苄氧基）苯基胺基）喹唑啉 6-基）吱喃—2-甲酸（化合物1406-174) 1150-9131-PF;Kai 213 200829575
- /vu ^ ] -^ ^ THF(10 mL) ^ 乙醇（5 N-(3-氯-(387 mg, 0. 77 mg, 0.92 mmol
'HNMR(DMSO^)： ^ 5. 20(s, 2 H), 7.17(m, 1Η), 7. 29(πΐ) 3Η), 7.41(m, 2Η), 7. 74(m, 2Η), 7.86(d, /=9. 0 Hz, 1 Η), mL)及 Et3N(0· 3 0 · 0 3 mmo l )添力口 將溶劑真空移除，將殘渣於矽膠管枉声析 提，以得產物 1406-174(240 mg，66_2%) 7.97(s，l H), 8.31(d，/=9.0 Hz，1 h)，8.56(s, 1 Η), 8.96(s，1 H)，9.66(s，1 H)，i〇 ii(s，i h)。
嗤琳-6-基）呋喃-2-基）甲基胺基）丙酸乙酯（化合物 1407-174) 將化合物 1406-174(240 mg, 〇·5 mmol)及乙基 3-胺 基丙酸酯氣化氫（77 mg, 0· 5 mmol)溶於1 〇 mLTHF，然後 加入Et3N(0. 1 mL)。將混合物攪拌1〇分鐘。然後將 NaBH(AcO)3(148 mg，0.7 mmol)添加於此混合物中。將混 合物攪拌另1.小時。將溶劑移除並將殘渣以矽膠管柱層析 精製，以 CH2Cl2/MeOH(100:5)洗提，以得產物 1 407-1 74( 140 mg，47.9%): LOMS: 575 [M+l]+，4 NMR(DMSO-A): β 1.13(t, /=6.9 Hz, 3 H), 2. 43(m, 2H), 2.80(t, /=6.9 Hz, 3 H), 3.76(s, 2 H), 4.01(q, /=6. 9 Hz, 2 H), 5.21(s, 2 H), 6. 46(s, 1 H), 7. 0 3(m, 1 H), 7. 16(m, 1 H), 7. 3 0(m, 1150-9131-PF;Kai 214 200829575 3 H), 7.46(m, 1 Η), 7.82(m, 2 Η), 8. 03(m, 1 Η), 8. 14(m, 1 Η)，8.52(s，1 Η)，8.71(s，1 Η)，9,90(s，1 Η)。 步驟68g· 3-((5_(4-(3-氯-4-(3-氟苄氧基）苯基胺基）喹 吐淋-6-基）呋喃-2-基）甲基胺基）-#—羥基丙醯胺（化合物 174) 將化合物1407-1 74( 1 1 0 mg, 0.1 9mmol)溶於新鮮製備 的NHWH曱醇溶液（1‘，1· 76mol/L)。將混合物攪拌30分 鐘。反應以TLC監控。添加HOAc以將反應混合物之PH調 為7。將溶劑於真空移除並將殘渣以水清洗（丨0mL)。產物 以製備性液體層析精製以產生化合物174黃色固體（41 mg， 37.2°/〇): Mp.l70°C. LC-MS: 562 [M+l] + , NMR(DMS0-^)： ^ 2. 14(t, /=6. 9 Hz, 2 H), 2. 77(t, /-6.9 Hz, 2 H), 3.79(s, 2 H), 5.25(s, 2 H), 6.45(d, /=3.0 Hz, 1 H), 7.03(d, /=3.0 Hz, 1 H), 7.18(m, 1 H), 7.31(m, 3 H), 7. 45(m, 1 H), 7. 72(m, 2 H), 8. 0 0(m, 1 H), 8. 15(d, /=7. 5 Hz, 1 H)，8.53(s, 1 H), 8.71(s，2 H)，9.92(s，1 H)。 實施例69:製備6-((5-(4-(3-氯-4-(3-氟苄氧基）苯基胺 基）喹唑啉-6-基）呋喃-2-基）曱基胺基）-於羥基己醯胺（化 合物177) 步驟69a· 6-((5-(4-(3 -氯- 苄氧基）苯基胺基）口奎 唑啉-6-基）呋喃-2-基）曱基胺基）己酸甲酯（化合物 1407-177) 標題化合物1407-177製備成（260 mg，21.6 %產率） 係從化合物1406-1 74(960 mg，2.0 mmol)及甲基6-胺基 1150-9131-PF;Kai 215 200829575 己酸酯氣化氫（362 mg，2 mmol)使用類似於針對化合物 1407-174(實施例68)敘述之程序製備：LCMS: 603 [M+l]+。 步驟69b· 6-((5-(4-(3_氯-4-(3 -氟苄氧基）苯基胺基）噎 σ坐琳-6 -基）吱喃-2 -基）甲基胺基）-經基己醯胺（化合物 177) 標題化合物177製備成白色固體（22 mg，22 ◦/◦產率） 係從化合物1 407-1 77( 1 00 mg，0.17 mmol)及新鮮製備之 經基胺溶液（1 mL，1. 76mol/L)使用類似於針對化合物 174(實施例68)敘述之程序製備：Mp. 121°C. LC-MS: 604 [M + l]+，4 NMR(DMSO-A): Θ 1.03(t，/=6.0 Hz，2 H)， 1. 18(m, 2 H), 1.47(m, 4 H), 1.92(t, /=6.0 Hz, 2 H), 2. 54(m, 2 H), 3.41(s, 1 H), 3. 78(s, 2 H), 5. 26(s, 2 H), 6.40(s, 1 H), 7.02(s, 1 H), 7.17(m, 1 H), 7. 29(m, 3 H), 7.46(m, 1 H), 7.76(m, 2 H), 7. 99(s, 1 H), 8.16(d, /-8.1Hz, 1 H), 8.53(s, 1 H), 8.70(m, 2 H), 9. 9〇(s, 1 H), 10. 33(s，1 H)。 實施例70:製備7-((5-(4-(3-氯-4-(3-氟苄氧基）苯基胺 基）喹唑琳_ 6-基）呋喃_2-基）曱基胺基）-I經基庚醯胺（化 合物178) 步驟70a. 7-((5-(4-(3-氣-4-(3-氟苄氧基）苯基胺基）喧 唾琳-6 -基）σ夫喃-2 -基）曱基胺基）庚酸乙g旨（化合物 1407-178) 標題化合物1407-1 78製備成（270 mg，21.4 %產率） 係從化合物1406-1 74(960 mg, 2.0 mmol)及曱基乙基7一 1150-9131-PF;Kai 216 200829575 胺基庚酸酯氯化氳氯化氫（41 8 mg，2 mmol)使用類似於 針對化合物1407-1 74(實施例68)敘述之程序製備：LCMS: 631 [M+l]+ 。 步驟70b· 7-((5_(4-(3-氣-4-(3-氟节氧基）苯基胺基）喹 峻琳-6-基）吱喃-2-基）甲基胺基）_#-經基庚醯胺（化合物 178) 標題化合物178製備成白色固體（25 mg，25 %產率） 係從化合物1407-1 78( 1 1 0 mg, 0.17 mmol)及新鮮製備之 經基胺溶液（1 mL， 1. 76mol/L)使用類似於針對化合物 174(實施例68)敘述之程序製備：Mp. 12(TC· LC-MS: 618 [Μ+1Γ，WNMfKDMSO-A): Θ 1.22(m，4H)，1·42(ιη，4H)， 1.90(t, /=7.5 Hz, 2 H), 2. 54(m, 2H), 3. 76(s, 2 H), 5.24(s, 2 H), 6.42(d, /=3.0 Hz, 1 H), 7.01(d, /=3.0 Hz, 1 H),, 7.19(m, 1 H), 7.31(m, 3 H), 7. 44(m5 1 H), 7.70(m, 2 H), 7. 99(s, 1 H), 8. 14(ra, 1 H), 8. 52(s, 1 H), 8.69(m，2 H)，9.89(s，1 H)，10,30(s，1 h)。 貫施例71 :製備7-(4-(3 -氣- 4_(3 - l苄氧基）苯基胺基） 喹唑啉-6-基氧基）-N-羥基庚醯胺（化合物198) 步驟71a· 2-氯-1-(3-氟苄氧基）-4-硝基苯（化合物ι5〇2) 將2-氯-4-硝基酚（35 2，0.2111〇1)，历-氟苄基溴（45.4 g，0· 24 mol)、K2C〇3(55· 2 g，0· 4 mol)及丙酮（8〇〇 mL) 之混合物，於30°C攪拌16小時。將得到的混合物過淚並 以丙酮清洗。將濾液濃縮以得粗製產物，以石油驗清洗， 並乾燥以得產物502黃色固體（55.0 g，9 9%聋率 1150-9131-PF;Kai 217 200829575 NMR(DMS〇-^): ^ 8.33(d, J = 3. 3 Hz, 1H), 8. 21-8. 26(m, 1H), 7. 42-7. 50(m, 2H), 7. 29-7. 33(m, 2H), 7. 1 6-7. 22(m, 1H), 5.39(s, 2H)°LC-MS: 282(M+1)。 步驟71b· 3-氯-4-(3-氟苄氧基）苯胺（化合物1 503) 將 1 502( 1 5 g, 53. 4 mmol)、鐵粉（30 g, 0· 534 mol)、 濃鹽酸（5.4 mL)、乙醇（360 mL)及水（120 mL)之混合物， 回流2小時。將此熱溶液過濾並將濾液濃縮以得產物503 固體（11.0 g， 82°/❹產率）。j NMR(DMS0-A):汐 7.37-7.45(m, 1 Η), 7. 21-7. 26(m, 2H), 7. 09-7. 1 6(in, 1H), 6.90(d, J = 8.7Hz, 1H), 6. 63-6. 34(m, 1H)5 6. 44 (dd, Ji, J2 = 8.7Hz，1.8 Hz，1H), 5.01(s，2H), 4.94(s，2H)。 LC-MS: 252(M+1)。 步驟71c·乙酸4-[3-氯-4-(3-氟-苄基氧基）-苯基胺基]-喹唑啉-6-基酯（化合物1 504-198) 將化合物0204(流程2)(0.85 g，3.8 mmol)及3-氯 -4-3-氟苄氧基）苯胺（ 1 503)( 1.26 g，5.0 mmol)於異丙醇 (20 mL)之混合物，攪拌及加熱於9〇它2〇分鐘。將反應物 冷卻至室溫並將沉澱物分離。將固體以異丙醇及甲醇清 洗、乾燥以得標題化合物1504-198暗黃色固體（1.5 g， 90°/〇)。LC-MS: 438[M+1] + 步驟71d· 4-[3-氯-4-(3-氟-苄基氧基）-苯基胺基]—喹唑 啉-6-醇（化合物1 505-1 98) 將化合物1 504-1 98( 1.5 g，3.4 mmol)氫氧化鋰單水 .合物（0.29 g，6.9 mmol)於甲醇（40 mL)/水（40 mL)之混合 1150-9131-PF;Kai 218 200829575 物，於室溫攪拌4小時。將pH以乙酸調整為4並過濾。將 收集的黃色固體以水清诜，並乾燥以得到標題化合物
1 505-1 98 黃色固體（1.2 g，89%)。LC-MS: 395 [M + 1；T 步驟71e· 7-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄基氧基）-苯基胺基]一喹 嗤啉-6-基氧基卜庚酸乙酯（化合物15〇各_198) 將化合物 1505-198(0.12 g，0·30 mmol)、乙基 3-溴 丙酸酯（72 mg，0.30 _〇1)及 K2C〇3(165 mg，1.2 mmol)於 DMF(5mL)之混合物，攪拌及加熱至6(rc整夜。將反應物過 濾並將濾液蒸發。將得到的固體以醚清洗及並以TLC精 製’得標題化合物1 506-1 98黃色固體（8〇11^，48%)。101^: 551 [M+1 ] + : 4 NMR(DMS0-A) : Θ 1.15(t，/:7·5Ηζ，3H)， 18H)^ l-79(m, 2Η), 2. 29(t, /=7.2 Hz, 2H), L— ’ ----.η.' - - — 〜’ — -— —— — 3.24(s, lH), 4.02(d, /1 = 6. 6 Hz, Λ=14. 4 Hz, 2H), 4.12(t >6. 3 Hz, 2H), 5.24(s, 2H), 7.15(m, 1H), 7.45(m, 3H), ^.48(m, 2H), 7.85(d, /=2. 7 Hz, 1H), 7. 98(d, /=2. 7 Hz, 1H)，8· 47(s, 1H)，9· 57(s，1H)。 步驟71f. 7-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄基氧基）-苯基胺基]—喹 唾啉―6 —基氧基}-庚酸羥基醯胺（化合物198) 對化合物1506-1 98(70 mg, 0.13 mmol)添加將新鮮製 備的說基胺甲醇溶液（〇· 5 mL，〇· 89 mmol)。反應過程以 TLC凰^工。反應元成後，將混合物以乙酸中和並減壓濃縮 至殘、/查’以水稀釋以得標題化合物1 98黃色固體（3 5 mg， 46%)： LC-MS: 539 [M+l] + ； ]H NMR(DMS0-^)： ^ 1.50(m, 8H), 1.79(t, /=6. 6 Hz, 2H), 3. 24(s, 1H), 1.95(m, 2H), 1150-9131-PF;Kai 219 200829575 4.12(1:， /=5·1Ηζ， 2Η), 5. 24(s, 2Η), 7.15(m， 1H), 7.45(m, 3H), 7.48(m, 2H), 7.7〇(d, /=2.7 Hz, 1H), 7.87(s, 1H), 7.97(s, 1H), 8.50(s, 1H), 8. 67(s, 1H), 9. 70(s, 1H)，10. 35(s, 1H)。 貫施例72 :製備7-(4-(3-氯-4 —(3-氟节氧基）苯基胺 基）-7_甲氧基喹唑啉-6-基氧基）—舲羥基庚醯胺（化合物 199) 步驟72a· 4-(3-氯-4-(3-氟苄氧基）苯基胺基）_7—甲氧基 啥嗤琳-6 -基乙酸酯（化合物1 5 〇 4 -1 9 9 ) 將 0105(流程 1 )(253 mg，1·〇 mm〇i)及 1 503(252 mg, 1.0 mmol)於異丙醇（10 mL)之混合物攪拌並加熱回流1小 時。將混合物冷卻至室溫將得到的沉澱分離。將固體乾燥 以得標題化合物1 504-1 99蒼白固體（420 mg，90%): LCMS: 468 [M+1 ]+。 步驟72b· 4 -（3-氯-4-（3-氟辛氧基）苯基胺基）一7一甲氧基 喹唑啉-6-醇（化合物1 505-1 99) 將化合物 1 504-1 99(418 mg，0,89nunol)、LiOH.H2〇(126 mg，3.0 ramol)於甲醇（20 mL)及H2〇(l〇 mL)之混合物，於 室溫攪拌1 0分鐘。將混合物以稀乙酸中和。將沉澱物分 離並乾燥以得標題化合物1505-199灰白色固體（376 mg, 99%)： LCMS: 426 [M+l] + ; !H NMR(DMSO^e) ： ^ 3. 97(s, 3H), 5.24(s, 2H), 7.19(m, 3H), 7. 32(m, 2H), 7.48(m, 1H), 7.74(m, 2H), 8. 〇4(d, /-2.4 Hz, 1H), 8. 43(s, 1H), 9· 35(s，1H), 9· 66(s, 1H)。 1150-9131-PF;Kai 220 200829575 步驟72c· 7-（4-（3-氯-4-（3-氟苄氧基）苯基胺基）〜7〜甲氧 基喹唑啉-6-基氧基）庚酸乙酯（化合物1 506-199) 將化合物 1505-199(170 mg，0.4 mmol)、7-溴庚酸乙 酯（95 11^，0.4 111111〇1)及碳酸鉀（166 11^，1.2 111111〇1)於{\1#-二甲基甲醯胺（10 mL)之混合物，攪拌並加熱至7(rc4小 時。將反應混合物過濾。將濾液減壓濃縮。將殘渣懸浮於 水，收集沉澱並乾燥以得標題化合物1 506-1 99黃色固體 (89 mg， 38%): LCMS: 582 [M+1]、 f 步驟72d· 7-（4 -（3-氯-4-(3-氟苄氧基）苯基胺基）—甲氧 基喹唾琳-6 -基氧基）-N -經基庚醯胺（化合物199) 將化合物1506-199(88 mg，0.15 mmol)及新鮮製備之 1.77 mol/L NH2〇H/MeOH(3 mL，5.3 mmol)之混合物，於室 溫攪拌0· 5小時。將反應混合物以ac〇H中和，將沉殿物八 離並乾燥以得標題化合物199微黃色固體（48 mg，56%). LCMS·· 569 [M+l]+，沱 NMR(DMS0-A): J i.35(m，2H) ί 1· 50(m，4Η), 1. 83(m，2Η)，1. 98(m，2Η)，3. 94(S，3Η) 4.13(m，2H)，5.26(s, 2H)，7.19(m, 2H)，7.36(m，3H)’， 7.48(m，1H)，7.69(m，1H)，7.80(s，1H)，7.95(d，/=2·7
Hz, 1H), 8.45(s, 1H), 8. 68(s, 1H), 9.43(s, 1H) l〇.36(s, 1H)° 生物學試驗： 如同前述，本發明所定義的衍生物，具有抗增生活性。 此等性質可例如使用_種以上下列程序評估： U)-體外（如W⑽試驗，決定受測化合物抑制egfr數 1150-9131-PF;Kai 221 200829575 酶之能力 受測化合物抑制EGFR激酶之能力，使用HTScanTM EGF 义體激 減驗套組（Ceii signaHng Technologies，
Danvers, ΜΑ)評估。EGFR酪胺酸激酶以GST-激酶融合蛋 白質之形式取得，係使用一桿狀病毒表現系統，具有一構 建物其表現具有一胺基末端GST標籤之人類 EGFR(His672-Alal210)(GenBank Accession number. NM一0 05228)。該蛋白質利用谷胱甘肽-瓊脂以單步驟親和層 析精製。抗磷酸化酪胺酸單株抗體，p—Tyr—丨〇〇，被用於偵 測生物素化受質肽之磷酸化（EGFR，
Biotin-PTPlB(Tyr66)。酵素活性係於 6〇 mM HEPES、5 mM MgCl2 5 mM MnCl 2 200 uM ATP、1· 25 mM DTT、3 μΜ Na3V〇4、 1 · 5 mM肽及50 ng EGF受體激酶中測定。已結合抗體，使 用 DELFIA 系統（PerkinElmer，Wellesley, MA)偵測，該系 統由DELFIA®銪標§己抗小鼠IgG(PerkinElmer， #AD0124) 、 DELFIA⑧增強溶液（PerkinElmer， #1244-105)，及 DELFIA⑧鍵撤親和素（streptavidin)包覆 之96井盤（PerkinElmer，AAAND-0005)構成。螢光係於 WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相對螢光單元（RFU) 報告。資料使用GraphPad Prism(v4.0a)繪製成圖，並且 使用S型（s i gmo i da 1)劑量-回應曲線適合度演算法，計算 IC50。 將受測化合物洛解於一甲基亞石風（DMS0)，以得到20 mM 的工作原濃度。各試驗設定如下：添加1 0 0 # 1的1 〇 1150-9131-PF/Kai 222 200829575 ATP到1·25 mM受質肽。將該混合物以去離子水稀 釋，以得到2X ATP/受質混合物（UTp]=4〇〇 _，[受質>3 mft〇。。立即將酵素從-8(rc轉送到冰中。使酵素於冰上解柬。 於輕微地微量離心，使液體沉在小試管底部。立即放 回冰中。添加10/M的DTTU.25 至2 5 ml的4χ 旧^“1^^1酪胺酸激酶緩衝液（24〇_11抑^1)117.5,2〇_
MgCl2, 20 niM MnCl，12 mM NaV〇3)，以配成 DTT/激酶緩衝 液。將1·25 ml的DTT/激酶緩衝液，移到酵素管，以配成 4X反應混合物（[酵素>4 ng///L於4χ反應混合物）。將 12.5/zl的4Χ反應混合物與12_5/ζ1/井的關注的預稀釋 化合物（通常約10" Μ)於室溫溫育5分鐘。添加25// i的 2X ATP/受質混合物至 物。將反應平盤在室溫溫育3〇分鐘。添加50^1/井的停 止緩衝液（50 mM EDTA、PH 8)，以停止該反應。將各反應 25# 1及75// 1去離子水/井，移到96井鏈黴親合物—包覆 平盤，並於室溫溫育β〇分鐘。以200^1/井pbs/t(pbs， 〇· 0 5% Tween-20)清洗3次。將初級抗體、填酸化酪胺酸 mAb(P-Tyr-100)，1:1〇〇〇 於 PBS/T 中，以 1%牛血清白蛋白 (BSA)稀釋。添加1〇〇 # 1/井的初級抗體。於室溫溫育6〇 分鐘。以200//1/井pbs/T清洗3次。將銪標記之抗小鼠
IgG 1:500 於 PBS/T，以 1%BSA 稀釋。添加 100// 1/井經 稀釋的抗體。於室溫溫育30分鐘。以200//1/井PBS/T 清洗5次。添加1〇〇 # 1/井DELFIA⑧增強溶液。於室溫溫 月5分鐘。以適當的時間-解析（Time —Res〇ived)平盤讀取 1150-9131-PF;Kai 223 200829575 儀’ 4貞測發射的61 5 nm螢光。 (b)—體外（in 試驗，其決定受測化合物抑制經egf 刺激之E G F R構酸化的能力
使用標準的組織培養程序使A431細胞生長在T75燒 瓶，直到細胞達到接近匯合（conf luency)(〜〗· 5χ1〇7)細胞； D - MEM，10%FBS)。於無菌狀態，在96井微平盤的每個井， 加入100// 1的細胞懸浮液（x各井的細胞）。接種並監控細 胞密度，直到井間一致地達到匯合；大約3天。以抽氣或手 動置換，從平盤之井移除完整的培養基。將各井之培養基 取代成5 0 // 1的預溫無血清培養基，並溫育4至】6小時。 使用預溫的D-MEM製備2倍系列稀釋的抑制劑，使得最終 抑制劑濃度―，——落於ilM 平盤移除培養基。添加l〇〇Al的系列稀釋抑制劑到細胞 中，並溫育1至2小時。從平盤之井，以抽氣或手動置換， 移除抑制劑。添加無血清培養基使細胞休止（無效 (mock))，或帶1〇〇 ng/ml EGF之無血清培養基。各井使用 100 // 1的休止/活化培養基。於37°C溫育7· 5分鐘。手動 或以抽氣移除活化或刺激培養基。立即將細胞以甲醛於 IX PBS固疋。在貫驗台上於室溫，不振盪地溫育2〇分鐘。 以含0· 1% Triton X-100之IX PBS清洗5次，每次5分鐘。 移除固定溶液。使用一多通道分注器，添加2〇〇 # 1的
Triton 清洗溶液（IX PBS + 0.1% Triton 。使洗液在 至/JEL ’於旋轉器振盥5分鐘。於以手動清洗後，再重覆清 洗步驟4次。使用一多通道分注器，藉由添加1〇〇//1的 1150-9131-PF;Kai 224 200829575 LI-COR 〇dySsey封鎖緩衝液至各井以阻斷細胞/井。於室 酿，在鉍轉器上中度地振盪中，阻斷9〇分鐘。添加2種初 級抗體至含有Odyssey封鎖緩衝液之管中。在添加於井 刖’將初級抗體溶液混合均勻（磷酸化—EGFR Tyrl〇45,（兔； 1 · 100 稀釋；Cell Signaling Technology，2237;總 EGFR， J 昧、，1.500 稀釋；Bi〇s〇urce International, AHR5062)。 從阻斷步驟移除封鎖緩衝液，並添加4〇# i於〇dyssey封 鎖緩衝液中的所望初級抗體或抗體，以覆蓋各井底部。僅 添加100// 1的Odyssey封鎖緩衝液至控制井。於室溫，溫 和振盪下，將初級抗體溫育整夜。將該平盤於室溫、溫和 振盪下，以lx PBS + 0. 1% Tween-20使用大量缓衝液清洗5 次二i ......…、.， … 、+.··.、.·......# ..... -——---.........、-一.. ...
清洗溶液。令洗液在旋轉器上於室溫振盪5分鐘。再反複 清洗步驟4次。將該螢光標記之二次抗體稀釋於〇dyssey 封鎖緩衝液（山羊抗小鼠IRDyeTM 680( 1 ·· 200稀释；LI-COR
Cat· # 926-32220)山羊抗兔子 i RDyeTM 800CW(1 : 800 稀釋； U-C⑽Cat· # 926-3221 1 )。將抗體溶液充分混合，添加 4 0 # 1的二次抗體溶液至各井。於室溫、溫和振盪下，溫 育60分鐘。在溫育中，保護平盤免於受光。以ixPBS + 〇. 1% Tween-20，在室溫、溫和振盪下，使用大量緩衝液清洗5 人5为4里。使用多通道分注器’添加2〇〇"ι的Tween清 洗溶液。使洗液在旋轉器上於室溫振盪5分鐘。重複再清 洗4次。於最終清洗後’從井完全地移除清洗溶液。反轉 言亥平盤，並且溫和地用紙巾輕拍或擦去微量的清洗緩衝 H50-9131-PF/Kai 225 200829575 液。使用Odyssey运紅外影像系統，掃描並债測此平盤於 700 及 800 通道 2 者（700 nm 偵測 iRDyeTM 680 抗體，80 0 nm 偵測IRDyeTM 800CW抗體）。使用0dyssey軟體決定全部對 經填酸化蛋白質（700/800 )之比例，並在Graphpad Pr*ism(V4.〇a)繪製結果。結果可使哥Graphpad Prism(V4· 0a)繪製，並且使用S型（sigm〇idal)拋物線劑量 -回應曲線適合度演算法，計算IC50。 (c)一體外（//7 hd試驗，決定受測化合物抑制ΗΜ(：酵 素活性之能力 HDAC抑制劑使用HDAC螢光測量試驗套組 (M-500’ Biomol、Plymouth Meeting、PA)筛選。可將受試 化合物溶於二甲基亞砜(DMS0)，以得到20 mM工作原濃 ....... *一— … _ 度。螢光使用WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad Prism(v4.0a) 繪圖，並且使用S型（sigmoidal)拋物線劑量—回應曲線適 合度演算法，計算IC50。
各試驗設定如下：將所有的套組成分解凍，於使用前保 持在冰上。將HeLa核萃取物以1 :29稀釋於試驗緩衝液（5Q mM Tris/Cl、PH 8.0，137 mM NaCl, 2·7 mM KC1, 1 ιηΜ
MgC12)。製備Trichostatin A(TSA,正控制組）及受測化 合物於試驗緩衝液（5χ最終濃度）之稀釋物。將Flu〇r de
LysTM基稀釋於試驗緩衝液成i〇〇 uM(50倍=2x最終）。 將Fluor de LysTM顯影劑濃縮物（例50/z 1 +950 // 1試驗緩
衝液）於冷試驗緩衝液稀釋2〇倍。第二，將〇· 2 mM 226 1150-9131-PF;Kai 200829575
Tric^hostatin a 100_倍稀釋於1χ顯影劑（例ι〇 …最終Trichostatin A濃度於1χ顯影劑=2"m;添加 β 1於 HDAC/受質反應後之最線遺庚-彳 取、、、/辰度一1 # M)。添加試驗緩衝液、經 稀釋trichostatinA或受測抑制齊卜至微滴定盤之適當的 井。添加經稀释之HeLa萃取物或其他·ac樣本，至所有 井，除了負控制組。使經稀釋之Flu〇r de LysTM受質及樣 本在微滴定盤中平衡至試驗溫度（例如25或3rc)。藉由 添加經稀釋受質（25/ζ υ至各井並充份混合，以起始化HMc 反應。使HDAC反應進行1小時，接著藉由添加Flu〇r de Ly sTM顯影劑（5 〇 // 1)使反應停止。將平盤在室溫（2& ) 温育10-15分鐘。在能於波長350 —380⑽之範圍激發的微 滴定盤讀取螢光儀，讀取樣本，並偵測在440-460 nm發射 ..... —’.….—- — …- 一— … 之光。 以下表1 -B列舉本發明代表化合物及其活性於HDAC及 EGFR分析。於此等試驗，使用以下的分級，ic5Q: I - 10 /z M， 1〇#Μ>Π>1//Μ，1/ζΜ>ΙΙΙ>〇·1/ζΜ，且 Π$0·1/ζΜ。 表1 -Β
化合物編號 HDAC EGFR HER2/ErB2 VEGFR 1 I IV 2 I IV 3 I IV 4 III IV 5 IV IV 6 IV IV IV III 7 I IV IV 8 I IV 9 III IV 10 III IV 1150-9131-PF;Kai 227 200829575
11 IV IV III 12 IV IV III 13 I IV 14 II IV 15 IV III 16 III IV 17 IV IV 18 IV IV III 19 I IV 21 II III 22 IV IV 23 IV III 24 IV III 30 IV IV III 36 IV IV 38 II IV 40 IV IV III 42 III IV 43 III IV 44 jy IV m 45 I III 50 III III 63 III II 66 III IV 68 II IV 69 III IV 70 IV IV IV 75 IV IV III 76 IV IV III 77 IV IV 78 IV III 79 IV IV III I 80 IV II 81 III III 82 III III .83 IV I 84 IV III 85 IV IV III II 1150-9131-PF;Kai 228 200829575
86 IV III 87 IV III 88 IV IV II 89 IV III 90 IV N/A 91 II IV 92 III IV 93 II IV 94 I IV 102 IV 103 I 107 III 112 I 118 II 121 I 124 I 125 III 138 II 139 II 144 III —..................................——.—..—'—… …一.一…'.....................-.* --…—:--.......................-'…---................... 145 IV IV IV 151 IV IV IV 155 IV IV IV 161 IV III 162 IV IV III 167 IV IV III 168 IV IV III 174 I 177 III IV IV 178 III 198 IV IV IV 199 IV IV IV 200 IV IV IV 201 III IV IV 202 III 203 III 204 II 205 II 1150-9131-PF;Kai 229 200829575 206 IV IV IV 207 IV IV IV 208 IV 209 IV 代表量的化合物使用細胞增生試驗對抗數種不同細胞 株加以分析： 細胞增生試驗： 癌細胞株被接種在具有各種化合物濃度之井平底 盤的各井中，各井5, 〇〇〇〜10, 〇〇〇個細胞。將細胞與化合物 一起在存在〇· 5%胎牛血清下，溫育72小時。生長抑制使 用Perkin Elmer ATPlite套組，藉由三磷酸腺苷（ATP)含 量試驗評估。ATPlite為一 ATP監控系統，利用螢火蟲之 冷光酶（luciferase)。簡言之，將以每井25μ1的哺乳動物 細胞/谷解洛液，添加-於5 〇 μ ΐ-餘 溶解，並且使ΑΤΡ安定。接著添加25μ1的受質溶液於井中， 接著測量發光。 結果如下表C所示。於此等分析，；[ο。使用以下分級：
I^lO/zM，10/zM>II>l//M，l/zMMmO.l/zM 且 IVS
0. 1 β Μ 〇 表C
細胞株 化合物編號 6 12 18 40 44 66 70 79 85 Breast—MCF7 IV Breast JJDAMB468 IV Breast一SkBr3 III Colon—HCT116 III III III Epidermoid一 A431 III Lung—HI703 III III II Lung_H19.75 III III II 1150-9131-PF;Kai 230 200829575
Lung_H2122 III III II Lung_H292 IV Lung_H358 III III II Lung_H460 III III II Lung—HCC827 IV III III Pancreas一BxPC3 III IV III II II II II II II III Pancreas一Capanl II III II Pancreas—CFPAC III in II I II II II II PancreasJPAC II II II II I I I II Pancreas—M i aPaCa2 III III II II II III II II Pancreas__PANCl III III II II II I II II Prostate_22RVl III Prostate_PC3 III III 圖1顯示本發明之化合物例如化合物6及1 2於EFGR 酵素分析及HDAC酵素分析中，相較於eri〇tinib及SAHA， 更具活性。於EFGR酵素分析，本發明之化合物相較於 ^lot15-20—倍。 明之化合物相較於SAHA，更有效約5-10倍。 圖2說明與SAHA及Erl〇tinib比較，化合物μ在抑 制組蛋白乙醯基化及EGFR磷酸化之改善。抑制激酶（EWE) 及非激酶（HDAC)癌症係化合物12之標靶。 表D 5兒明本發明之化合物之效用。例如化合物丨2在各 種癌症細胞株中，相較於Erlotinib及SAHA，更具活性 ( # Μ)來自5種主要類型癌症之細胞株（肺癌、乳 癌則列腺癌、結腸癌及胰臟癌），相較於er丨〇t丨η丨b及 SAHA之組合，對於化合物12更有回應。令人驚言牙地，本 卷明之化合物對於對Tarceva⑧及卜“⑽⑧有抗藥性之細胞 株 '有活性。於此等分析，IC5。使用以下分級：D ^ 5 # μ， 1150-9131-PF；Kai 231 200829575
5 β M>C ^ 0. 5 // Μ, 0·5//Μ>Β—0.05//Μ,及 AS0.05//M。 表D 腫瘤株 腫瘤類型 SAHA Erlotini b Erlotinib/SAH A 寶響; 化合物 12 MDA-MB-231 乳腺癌 B D .麵·i k HCT116 結腸癌 C D ―一卞―一 MCF-7 乳腺癌 C D A MDA-MB-468 乳腺癌 C C 儀娜馨_ A SKBr3 乳癌 C D ,c … ;B PC-3 前列腺癌(Prostate adenocarcinoma) C D Caki-1 腎癌 B B ' B , A431 表皮樣癌 C C 22RV1 前列腺癌（Prostate carcinoma) B B
第3圖顯示對於數種不同癌症細胞株之較大抗增生活 性¥。第3圖進一F 化备¥1較於SM 獨、Erlotinib單獨及SAHA及Erlotinib之組合，更具活 性。 第4圖顯示化合物1 2在誘發結腸及乳癌細胞中之細胞 凋亡的效力。化合物12由量測到增加之Caspase 3&7活 性，誘發細胞凋亡約多了 4-11倍。Erlotinib在濃度<20 // Μ 無活性。所顯示之化合物1 2高於E r 1 〇 t i n i b之活性，代表 本發明之化合物可用於治療對Er 1 οΐ i n i b有抗藥性之腫瘤 細胞。 圖5-10顯示化合物12在各種腫瘤異種移殖模型之作 用。下表E整理進行之體内實驗以得圖5-10所示結果。
表E 1150-9131-PF;Kai 232 200829575 模型 癌症類型 劑量群組 投予方法 投藥策略 (開-關-開) 處理前 腫瘤尺寸 A431 表皮樣癌 (Epidermoid) 載體 6 mg/kg 12 mg/kg 24 mg/kg 48 mg/kg IP 每日1次 共21曰 156±57 刪3 H358 NSCLC 載體 15 mg/kg 30 mg/kg 60 mg/kg IV-2分鐘 灌流 7-7-5 84±23 mm3 H292 NSCLC 載體 15 mg/kg 30 mg/kg 60 mg/kg IV-2分鐘 灌流 7-7-5 116±23 mm3 BxPC3 胰臟癌 載體 10 mg/kg 20 mg/kg 40 mg/kg IV-2分鐘 灌流 7-7-2 201±53 ram3 PC3 前列腺癌 —羞邀—— 10 mg/kg 20 mg/kg 40 mg/kg IV-2分鐘 灌流 7-7-5 195±50 mm3 HCT116 結腸癌 載體 15 mg/kg 30 mg/kg 60 mg/kg SAHA 20 mg/kg IV-2分鐘 灌流 5-2-5 91 ±23 ram3 HCC827(細胞 凋亡/抗增生） NSCLC 載體 30 mg/kg IV-2分鐘 灌流 每曰1次 共3曰 149±36 mm3 BxPC3(細胞凋 亡/抗增生） 胰臟癌 60 mg/kg IV-2分鐘 灌流 單次IV 灌流 ΝΑ 以下列出代表性的體内（i n v i vo)實驗的實驗步驟： 將1-10 X 106人類癌細胞以真皮下植入到去胸腺 (nu/nu)小鼠。當腫瘤到達約100 mm3體積，對於該小鼠尾 部靜脈灌流該化合物。例行地，·需要5群（每群8-1 2隻小 1150-9131-PF;Kai 233 200829575 鼠）進行-般的效力研究，包括—隻負控制，_隻正控制， 及三隻測試組，為同樣化合物的3個劑量。通常—般的研 究使用7-7-5(開-關-開)的療程。腫瘤大小以電子式卡尺 測量’每it 2次以碎秤測量體重。在研究結束時，從經安 樂死的小鼠移除腫瘤。將各腫瘤的一半冰在乾冰，並保存 在-80。C用於PK或西方墨點分析。其他一半以福馬林固 定。將經固定的组織處理並包埋在石蠟中，切片以供免疫 組織染色。 針對HER2之放射性同位素試驗的實驗步驟 將10 nM HER2及〇· 1 mg/ml polyEY製於反應緩衝液， 最後添加2 mM MnCl2、1// Μ ATP及U DMSO。將該反應混 合物於室溫溫育2小時。ΑΤΡ之轉換率為22%。 ~ —----------------------->—，—............. .......—..............----------------_________________________________ HER2(Accession number·· GenBank X03363)以如下方 式定性： 末端GST-標籤化、重組、人類HER2胺基酸 679-1 255，由桿狀病毒於6Y9昆蟲細胞中表現。依據SDS PAGE 及 Coomassie 藍染色之純度 >90%。MW=91 · 6kDa。比活 性40 U/mg，其中一單位活性，定義為，30°C，每分鐘將 lnmol 的磷酸根包含在 30 ug/ml Poly(Glu:Tyr)4:l 基質， 最終ATP濃度ΙΟΟμΜ的量。酵素處於25 mM Tris-HCl、pH 8· 0、100 mM NaCl、0· 05% Tween-20、50%甘油、10 mM 還 原的谷胱甘肽及3 mM DTT中。 參考文獻： 1.Meyer, M. et al., EMBO J. 18, 363-374(1999) 1150-9131-PF;Kai 234 200829575 2.Rahimi， N. et al·， j· Biol Chem 275, 16986-16992(2000) 本發明化合物被發現對抗多種激酶有活性。例如表F 顯示化合物12抑制一些激酶試驗之結果。再者，化合物 12在Her-2試驗中，遠較Erl〇tinib更有活性。
表F 試驗 濃度（//M) 抑制(%) abl激酶 5 57 FGFR2激酶 5 76 FLT-3激酶 5 85 VEGF^R〗激酶 5 64 Lck激酶 5 56 Lyn激酶 5 95 Ret激酶 5 93
Her - 2
化合物 12 IC50=188nM Erlotinib IC50=1473nM 實施例73:製備化合物12之Capti sol配方 Α·製備化合物12於30%Z的之25，30，40，50及60 mg/ml溶液 (i )以酒石酸 30% Captisol配方，係藉由添加2·7 ml水至含〇·9 g Capti sol之小瓶中製備。接著將該混合物於渦流器 (vortexer)上混合，以得到〜3ml的澄清溶液。 為了製備化合物12之25 mg/m 1溶液配方，將1 m 1的 30% Captisol溶液加入於含有25 mg的化合物12及酒石 酸8.6_之小瓶中，將得到之混合物在渦流器卜(^1^}^1〇 上混合或於超音波在30°C振盪15至20分鐘，以得到一澄 1150-9131-PF;Kai 235 200829575 清的黃色溶液。該溶液於室溫為安定的。 為了製備化合物12之30 mg/ml溶液配方，於室溫添 加1 ml的30°/。Captisol溶液到含有30 mg的化合物12 及1 〇 · 4 mg酒石酸（1 · 〇當量）的小瓶中。 為了製備化合物12之40 mg/mi溶液配方。於36°C添 加1 ml的30% Captisol溶液到含有4〇 mg的化合物12及 17.9 mg酒石酸（1· 3當量）的小瓶中。
為了製備50 mg/ml化合物12於Captis〇1之配方， 於37°C添加1 ml的30% Captis〇1到含有5〇邶化合物 12、22.5 mg酒石酸（1· 3 eq)之小瓶中。
為了製備60 mg/ml化合物12於Captis〇1之配方， 於W 26.9 mg酒石酸（1· 3當量)之小瓶中。將溶液以ΪΧ水及 2X D5W稀釋。該稀釋後的溶液在室溫穩定超過12小時。 (i i)以擰檬酸 混合’或於室溫超音波据湯 日收振盪15至20分鐘 黃色溶液。 (i i i )以鹽酸 為了製傭化合物12之25 30% Cap ti sol溶液添加到含有 檸檬酸（1.0當量）之小瓶中， ni g / m 1溶液配方，將1 jjj 1的 25 mg化合物12及11. 1 mg 將得到的混合物在渦流器上 以得到澄清的 為了製備化合物1 2 > 9 I： 〈mg/mi溶液配方，將j m 30% Captisol溶液添加到冬 J s有25 mg化合物12及57. 5 鹽酸（1 · 0當量）之小瓶中 ’將得到的混合物在渦流器」 1150-9131-PF/Kai 236 200829575 合，或於室溫超音波振盪15至20分鐘，以得到澄清的黃 色溶液。 (i i i i)以鈉鹽 為了製備化合物12之7·5 mg/ml溶液配方，將工ml 的30% Captisol溶液添加到含有7· 5 mg北合物12納鹽之 小瓶中，將得到的混合物在渦流器上混合，或於室溫超音 波振盪15至20分鐘，以得到澄清的黃色溶液。 B.溶液之過濾 將來自於Α(ι)之化合物12配方，以〇·2—預殺菌 過渡膜過濾、，回收率> 9 8 %。 製備凍乾粉劑 將來自A(i)及A(iii)之化合物12(25 mg/ml)配方， ' .….......一+-_ — — — ......—.....――—+·，———~ 冷凍乾燥以形成黃色肩處I游〇 禾魚价私方t ?東乾粉劑，在以下溫度化學上是安 及的：-20 C、室溫，及40°C至少2週。可在4°C保存大於 2週而不分解。來自於A(iii)之凟處激齋，在—2〇它安定至 少2週。 D·稀釋研究 將來自A(i)之化合物12配方，以])5W(10-、20_，及 50倍）稀釋，在化學上穩定，並保持在溶液中而不沉澱（>48 小時）。 將來自A(ii)、A(iii)及A(iiii)之化合物12配方， 以D5W(10倍）稀釋，保持在溶液中而不沉澱（>12h)。 實施例7 4 :鈉、鹽酸、擰檬酸及酒石酸鹽或化合物12配方 1150-9131-PF;Kai 237 200829575 在CAPT I SOL之複合體之特性 式I 之測試化合物之鈉、鹽酸、檸檬酸鹽及酒石酸 鹽，係製備於30% CAPTIS0L溶液中，並探討如下： 表G顯示化合物12之鈉、鹽酸、擰檬酸鹽及酒石酸鹽 的生理化學及藥動學（PK)及藥效學（PD)性質。
表G 納 HC1 檸檬酸 酒石酸 溶解度 7. 5 mg/ml 25 mg/ml 25 mg/ml 60 mg/ml pH 10-11 2-3 4-5 3-4 IV組織 南 高 低 高 以D5W稀釋 >10x >10x >10x >50x 於溶液中的 化學安定性 >12 h >12 h >12 h >12 h _ 2-週化學安定性 ND -20¾ ND -20^:、f a、4crc 於人類可遞送之 最高每曰劑量 220-250 mg >750 mg >750 mg >1800 mg 實施例75:比較化合物12於30% CAPTIS0L之組合物、 erlotinib、EGFRi原型，在A549 NSCLC異種移植模型中 的抗腫瘤活性 投予於30% CAPTIS0L之化合物12，會減緩在NSCLC 異種移植模型中之腫瘤生長。如圖11A所示，2 4小時後， 以化合物1 2處理之動物，顯示腫瘤大小增加1 5 0 %，然而， 以載體處理之動物，顯示腫瘤大小約改變240%。如圖11B 所示，以Ero 1 〇t i n i b處理動物，相較於控制組，未顯著地 影響腫瘤大小。 1150-9131-PF;Kai 238 200829575 貫施例76:化合物12於30% Captisol之組合物在jjpac 騰臟癌細胞中的功效 將 120 mg/kg 的化合物 12 於 30% CAPTIS0L、50 mg/kg er 1 ot i n i b或載體，每曰投予給動物，並測量經時（日）的 僅瘤大小變化。如醫12^^^ 於 30%CAPTISOL(iv/ip)之組，相較於 eri〇1：inib(p〇)或載 體，對於腫瘤生長之減緩較大。 f 於小鼠、大鼠及狗中的藥動學研究 用於實施例77-83之實驗方法，敘述如下。 鳶# / PK研究使用小鼠（cDq，雄，25-3〇 、大鼠 (SpraqueDawle，260-300 g)及狗（米格魯，雄，卜^“）。 ，__ __________________ :丨〔*·維持 室溫環境23±rc、 濕度50-70%，及12-小時明亮/12小時黑暗的循環。—一— 樂勒裘。幕化合物12以等莫耳濃度的酒石酸 或HC1或檸檬酸或Na0H溶於3〇% CAms〇L。化合物 靜脈内（iv)灌流投予。對於夂叙舲 、、、 一 對於各動物之IV灌流條件如下 示： 灌流 將J&L液收集在 並於分析前保 J 既.20 mg/kg 及 60 mg/kg，2 分鐘 i. v 大鼠：20 mg/kg，5分鐘i. v.灌流 米格魯：25 mg/kg’ 30分鐘灌流。 企液及組織樣本收集。在各個時間點 含肝素鈉抗凝劑的管中。以離心分離血聚 存於-40°C。 血漿樣本萃取 藉由蛋白沉澱製備血漿樣本 於血漿樣本 1150-9131-PF；Kai 239 200829575 中添加内標。將50#1的血漿與i5〇jul的乙腈合併，振動 此合，並於！〇〇〇〇 rpm離心1〇分鐘。將上清注射入 LC/MS/MS 〇 將樣本與在血漿中作成的標準品比較。此等標準品係 以系歹J稀釋製備。將一内標添加到具有鮮 愈麟廣姜萃屏使用肺及結腸樣本（2〇 —2〇〇叩）於萃 取將組織在〇 · 8 m 1水中均質。冑内標加到此組織均質物 , 中。將此均質物以卜ml乙酸乙酯萃取3次。於蒸發後，將 、 殘渣再溶於〇·1 ml乙腈中，以供LC/MS/MS試驗。 LC/MS/HS分析方法 LC條件如下所示： LC 儀器：Agilent HPLC 1100 系列 .… —-——..... — — _ —— .一…——…—.…............... ΤΤ_1 XJT7 i 一— — — .. .一._—' — 一·—— …… 自動取樣裔：Agilent G1 367A自動取樣器 分析官柱：YMC Pro C18 S3(3//，2.0*50 mm, 120 A) 防濩官柱：YMCProC18S3 防護管柱（3//, 2〇*1〇_，12〇 A) k， 管柱溫度：常溫 移動相：A:乙腈：水：甲酸（5:95:〇1，v/v/v) B··乙腈：水：甲酸（95:5:〇· ι v/v/v) LC梯度程式〇〜imin:移動相a: i〇〇% 1 〜2· 5min:移動相 a: 100% 至 20% 2· 5〜3min:移動相 a: 20% 3〜4min:移動相a: 20%至100% 流速：2 0 0 // 1 / m i η 1150-9131-PF;Kai 240 200829575 自動取樣器溫度：常溫 注射量：5 7/ 1 質譜儀條件如下： 儀器：PE Sciex API 3000 界面：Turbo Ion Spray(Tis) 極性：正離子 掃描：多重反應監控（MRM) f、 於小鼠及大鼠中之單次或多次劑量毒性研究 用於以下毒性研究之實驗方法敘述如下： 實驗設計：
1 ·於小鼠之單次劑量MTD a· CD-1 小鼠，雄，24-26 克 ' · ..................................................................................... b·劑量 〇、50、100、20 0、40 0 mg/kg，iv 灌流 2 分 鐘 c·每組8隻小鼠
I , 2·於大鼠之單次劑量MTD a· Sprague Dawley，雄及雌，240-260 克 b.劑量 0、25、50、1 00、200 mg/kg，iv 灌流 5 分鐘 c·每組6隻大鼠（3雄及3雌）
3·於小鼠7日多次劑量MTD a. CD-1 小鼠、雄、24-26 克 b. 劑量 0、50、1〇〇、200 mg/kg/d ip c. 每組6隻小鼠 d·於第7日最後一次投劑後2小時收集血液及器官， 1150—9131~PF;Kai 241 200829575 供血液學研究。
4.於大鼠7日多次劑量MTD a. Sprague Daw ley、雄及雌、220-250 克 b·劑量 25、50、100、200 mg/kg/d)iv 灌流 5 分鐘 c.每組6隻（3雄及3雌） 於第7日最後一次投劑後2小時收集血液及器官，供 血液學研究。 化合物製備 ί · 將化合物以等莫耳濃度的酒石酸溶解於3〇%
Captisol。原溶液·· 25 mg/ml 酒石酸形於 30% Captiso卜 1 ml/vial，保存在—40°C。例如 1 000 mg 化合物、345 mg 酒石酸（每化合物0.345 mg酒石酸）及40 mi 30% Captisol 或 1 000 mg 化合物、2·3 ml IN HC1(每 mg 化合 物 2· 3 ul IN HC1)、12 克 Captiso；l，添加水到 4〇 ml。將 原溶液在使用前以30% CAPTI SOL稀釋。 ί ;實施例77:測試鹽類於靜脈投予後，在血漿、肺及結腸中 之藥動學 將化合物12於30% CAPTIS0L中之20 mg/kg的鹽酸、 檸檬酸鹽、鈉及酒石酸鹽，以靜脈内投予給小鼠，以決定 靜脈内投予化合物12後，在血聚、肺及結腸中經時（小時又) 的濃度（ng/ml)。此等研究之結果如圖13所示。如此處：
示，對於納、鹽酸及酒石酸鹽，觀察到類似的Μ及Z 藥動學。 Ά 實施例78:化合物12酉己方於小鼠中之藥動學研究 1150-9131-PF;Kai 242 200829575 將化合物 12 於 30% CAPTIS0L 之 20 mg/kg 及 60 mg/kg 的鹽酸鹽，以靜脈内（i v)及腹膜内（i p )投予給小鼠，並決 定半衰期（tl/2)、最大觀察濃度（Cmax)及曲線下面積 (AUC)。如下表Η所示，當靜脈内投予時，化合物12之濃 度與劑量成比例，但腹膜内投予則否。在組織中，化合物 12之半衰其大於在血漿中。 表Η 讎 肺 結腸 20mg^ 60mg/kg 20mgkg 60 mg/1^ 20 m^g 60mg/kg
IV齊廬 Tl/2 (hr) Cmax (uM) AUC (h*ng/ml) 0.2 27.7 715 0.3 61.7 3124 3.9 15.2 1571 1.9 96.9 8313 1.7 8.5 5529 2.2 29.4 13473 IP繼 Tl/2 ㈣ 0.26 0.51 2.2 3.5 NA NA Cmax(uM) 8.5 14.4 7.8 11.6 NA NA AUC (h*ng/ml) 3751 5721 4433 8309 NA NA 實施例79 :化合物12配方於大鼠中之藥動學研究 將化合物 1 2 於 30% CAPTIS0L 中之 20 mg/kg 及 60 mg/kg 的鹽酸鹽，以靜脈内（iv)投予給大鼠，並測量30小時中的 血漿中該化合物濃度（ng/ml)。如圖14所示，在大鼠血漿 中之化合物12濃度，與所投予之化合物12劑量成比例。 實施例80:在小鼠中，化合物12配方之單一劑量IV毒 性研究 將單一劑量的化合物12(25，50， 100，200 or 400 mg/kg)於30% CAPTIS0L，以靜脈内投予給小鼠，並在9曰 當中的體重改變，以評估各種劑量化合物12之毒性。如圖 15所示，至多投予化合物1 2200 mg/kg未造成體重的顯著 1150-9131-PF;Kai 243 200829575 變化。 實施例81:於小鼠中使用化合物12配方之7日重複ip 毒性研究 在7日中重複將各劑量化合物12(25、50、1〇〇、200 或 40 0 mg/kd 測ΐ 7曰當中的體重改變。如圖16所示，重複投予至多化 合物12100 mg/kg，未造成體重的顯著變化。 實施例8 2 :於大鼠使用化合物12配方之單一劑量I v毒 性研究 將單一劑量之化合物12(25、50、1〇〇或200 mg/kg) 於3 0% CAPTISOL，以靜脈内投予給大鼠，並在8日中測量 體重變化’以評估不同化合物12之不同劑量的毒性。如圖 17所示，投予至多200 mg/kg未造成體重的顯著變化。
(III)
表2-A 化合物編號 結構 〜- 1 Η 2 O' wCHj . 1150-9131-PF;Kai 244 200829575
1150-9131-PF/Kai 245 200829575 12 F^c#CHl 13 14 FO# " 15 Vn°H 16 /N'OH 0 XN FOcC- 17 N u ^/N〜〇 18 H,C 19 v^° FW° 20 V/CHi N~〇’ 21 1150-9131-PF;Kai 246 200829575 \ 22 23 μ r /---/ Η 24 /Ν、ΟΗ WCH3 25 /J-r 26 /N、OH H3Cw—^ 〇 FO^： 27 h3c Oc^: 28 0 yCH3 H 〇 29 以。 1150-9131-PF;Kai 247 200829575
Scheme 1
1) H2NNH2 2) HCI
102
110
H
1150-9131-PF;Kai 248 200829575
Scheme 2
實施例1:製備5-((Z)-(5-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基叉） 甲基）-\-經基-2，4-二甲基-111-17比洛-3-魏醯胺（化合物1) 步驟1 a · 5 -氟吲哚琳-2 -酮（化合物1 0 2) 將 KOH(4.07g，73_〇1)添加於化合物.101(6.0g，36 1150-9131-PF;Kai 249 200829575 mmol)、乙二醇（95 mL)及聯胺水合物（2·6 g，52 mmol)之 混合物。將反應混合物於8 0 °C攪拌3小時，然後冷卻至室 溫並倒入冰水中。將上述混合物之pH以1 2 N鹽酸調成pH 卜2並將混合物於室溫攪拌12小時。將混合物以Et0Ac萃 取。收集有機相、蒸發以得到黃色播艘^ 81· 9 %)。LCMS: 152(M+1), 4 NMR(DMS〇-i/6) (5 3· 46(s， 2H)，6· 95(m，3H), 10· 35(s，1H)。 步驟lb· 2-(羥基亞胺基）-3-側氧基丁酸農三了酯（化合物 104) 將化合物1 03 ( 69.52 g，44 mol)於冰醋酸（500 mL)之 溶液，冷卻至5°C，滴加亞硝酸鈉（32. 5 g, 0· 446 mol)於 水（5 0 mL )之冷溶液。將混合物攪拌1小時，並靜置4小時， .................................- - --… ——.——_.十 _..— ^ ^ 於此期間回溫至室溫。將此混合物使用於次一步驟而不經 進一步純化。LCMS:见// 188(M+1)。 步驟lc· 2-篇"三7~基4-乙基3,5-二甲基-1#-吼σ各—2,4-di 羧酸酯（化合物105) 將上述混合物（104)攪拌，並加入一部分鋅粉末（84g， 1 · 2 9 rao 1) ’速度為使混合物溫度低於§ 〇 °c。於添加完成 後，將該混合物加熱至60°C 1小時。將乙醯基乙酸乙酯（6〇 g，〇· 46 mol)添加至上述混合物中並將該混合物回流於85 °C達4小時。趁熱將此混合物過濾以移除鋅粉。將濾液倒 入1公升冰並靜置整夜。將沉澱物過濾以得到產物1〇5(29 g，24· 7%) ’將固體使用於次一步驟而不經進_步純化。 LCMS: π/ζ 268(M+1) 〇 1150-9131-PF;Kai 250 200829575 步驟1(1.2,4-二甲基—1#—吡咯-3-羧酸乙酯（化合物1〇6) 將 105(12 g，45 mmol)於乙醇（325 mL)之溶液，以 1 Μ H2S〇4(24G mL)處理。將該溶液授拌於65。㈢4小時，然後 冷卻至室溫將大部分乙醇蒸發，以二氣甲烷萃取。合併有 機暑並以MgS〇4乾燥。移除溶餐 40%)。將粗製產物以管柱層析精製（矽膠，洗提液1〇/1石 油/乙酸乙醋）以得到棕色固體產物WML 5 g，2〇%)。lcms: Λ7/ζ 168CM + 1), !H NMRCDMSO-^) 5 2.10(s, 3H), 2.35(s, 3H), 4.13(q, 2H), 6.37(s，1H)，10.85(s，1H)。 步驟le. 5-甲醯基-2, 4-二甲基-1#-吡咯-3-羧酸乙酯（化 合物107) 對DMF(2 g，27 mmol)溶液，於l〇°c花30分鐘以滴液 ........... * — ……- —-...... ................... ........................................· 、 — _ 漏斗添加P0Ch(2. 6 mL)於10 mL二氯甲烷。添加後，將該 混合物於室溫攪拌20分鐘。將二氯甲烷（1〇 mL)添加於此 混合物中。當内部溫度降至5 °C，通過一滴液漏斗添加化 合物506於二氯甲烷（10 mL)之溶液於此攪拌中之冷卻的混 合物，期間1小時，然後將此混合物於回流溫度攪拌3 0分 鐘，將該混合物冷卻至30 °C，，加入乙酸鈉（1 7 g，1 25 _〇 1) 於水（100 ml)之溶液，將反應混合物再回流30分鐘，然後 冷卻至室溫，將水層以二氣甲烷萃取（4x100 mL)。將合併 的有機層以濃鹽水清洗、乾燥並蒸發以得到灰色固體產物 107(4. 42 g，90%)。LCMS: /ff/z 196(M+1)，4 NMR(DMSO-A) 5 1.35(t, J3H), 2.23(s, 3H), 2. 48(s, 3H), 4.12(q, 2H), 9. 60(s，1H)，10. 58(s，1H)。 1150-9131-PF;Kai 251 200829575 步驟1 f· 5 -甲醯基-2, 4-二甲基-1万-吡咯-3-羧酸（化合物 108) 將 ΚΟΗ(6·2 g，lllnmol)於水（400 mL)之溶液，添加 至化合物507(7.2 g，3 7mmol)於乙醇（60 mL)之溶液。將 該混合物回流直到反應完成。將談混合物冷卻至室溫並將 水層以二氣甲烷萃取。將水層以IN HC1酸化至PH = 2。以 過濾收集沉澱物，以水清洗並乾燥以得到黃色固體產物 l〇8(5.5g，89%hLCMS: π/ζ168(Μ+1)，^NMRCDMSO-A) ^ 2. 40(s, 3H), 2. 43(s, 3H), 9. 24(s, 1H), 12. 14(bs, 2H)。 步驟lg· 5-((Z)-(5-氟-2 -侧氧基吲哚琳-3-基叉）甲 基）- N-經基-2,4 -二甲基-1Η-σ比洛-3-魏酿胺（化合物1) 將化合物 108(4. 0 g. 24 mmo 1)、1 02(3. 6 g 24 mmol ) 及吡咯啶（2 mL)於乙醇（200 mL)之混合物，攪拌並於78°C 加熱6小時。將混合物過濾以得到黃色固體、乾燥以得到 產物 1(5· 5g，77%)。LCMS: λ?/ζ301(Μ+1)，沱 NMR(DMSO-A) 5 2.39(s, 3H), 2.42(s, 3H), 6.82(m, 2H), 7. 77(s, 1H), 7.80(m, 1H), 10.93(s, 1H), 12.23(s, 1H), 13.86(s, 1H) 〇 實施例2:製備(2-(羥基胺曱醯基）乙基）5-((Z)-(5-氟 -2-侧氧基吲哚啉-3-基叉）曱基）-2, 4-二曱基-1#-吡咯-3-羧醯胺（化合物2) 步驟2a. 3-(5-((Z)-（5-氟-2-側氧基吲哚你-3-基叉）甲 基）-2, 4-二甲基-1#-吡咯-3-羧醯胺基）丙酸曱酯（化合物 1150-9131-PF;Kai 252 200829575 110-2) 對攪;拌ψ + w 兄 τ τ 之 1(0. 5 g，1· 67 mmol)於 DMF(35 mL)之溶 液’於至溫依序添加H0Bt(l. 02 g，7· 52 mmol)、三乙胺 / c\ -I η τ • ’ ί5· 03 _〇1)、ECDI ·ΗΠ(1· 44 g，1· 52 mmol) 及3月女基丙酉夂曱酉旨氯化氫（〇· 7 g，5· 0 mmol)。將該混 合物於室溫攪拌24小時，接著以水（20 mL)、濃鹽水（20 mL) 及飽和重碳酸鹽溶液（2〇以）稀釋，並將溶液之PH值以10 mol/L NaOH調整為u〜12。將混合物過濾並收集固體以水 、凊洗、乾燥以得到粗製黃色固體產物11〇 —2(〇. 44 g， 68.3%hLCMS: ®/z 386(M + 1)，iHnmr(DMSO-A) 5 2.38(s， 3H)，2.41(s，3H)，2.50(t，2H)，3.44(t，2H)，3.62(s，3H)， ' r —.—— 步驟2b· #一（2一（羥基胺甲醯基）乙基）5-((Z)-(5-氟-2-側 氧基叫丨鳴琳-3-基叉）甲基）一2, 4-二甲基-1#-吡咯-3-羧醯 胺（化合物2) 將 NaH(60%，936 mg, 23·4 mmol g)於冰浴中，分次 滴加至經基-氯化錢（lt〇8 g，15.6 mmol)於DMF(25 mL)之 溶液。0· 5 小時後，將 ΐΐ〇-2(〇· 2 g，0· 52 mmol)於 DMS0(3 mL)之溶液，添加至上述混合物中。將該混合物於〇°c攪拌 2小時、過濾，將殘渣以DMF清洗，將DMF於減壓下移除、 精製以得到黃色固體 2(25 mg， 12· 5%)。LCMS: π/ζ 387(M+1), NMRCDMSO-^e) 5 2. 25(t, 2H) 2.41(s, 3H), 2.43(s, 3H), 6.85(m, 2H), 7. 64(t, 1H), 7.71(s, 1H), 7.727(m, 1H), 8. 75(s, 1H), 10.47(s, 1H), 10.89(s, 1H), 1150-9131-PF;Kai 253 200829575 13· 68(s，1H)。 實施例3:製備—(羥基胺甲醯基）丙基）5 —((z)_(5 一氟 -2-側氧基吲哚啉-3-基叉）甲基）—2, 4-二甲基-1#-吡咯-3-羧醯胺（化合物3) 步驟3 a· 4 — (5—任 基）-2, 4-二甲基-1#-吡咯—3-羧醯胺基）丁酸曱酯（化合物 110-3) f 對攪拌中之化合物1(0. 5 g，1, 67 mmol)於DMF(35 mL) 溶液，於室溫依序添加H〇Bt(l. 02 g，7· 52 mmol)、三乙 胺（2.12 mL，15.03 _〇i)、ECDI.HCl(1.44g，1.52 mmol) 及4-胺基丁酸甲酯氣化氫（〇 · 77 g，5 · 〇 _〇 i )。將該混 合物於室溫攪拌24小時並接著以水（2〇 mL)、濃鹽水（20 mL) ' " ’ ' 一一^— —.— — 〜 及飽和重碳酸鹽溶液（2〇 mL)稀釋並將溶.液之PH值以1〇 mol / L NaOH调整為11〜1 2。將混合物過濾，收集該固體， 以水清洗並乾燥以得到粗製黃色固體產物11〇 —3(〇 32 g， C ： 48· 3%)。LCMS: 400(M+1)，4 NMR(DMS0-i/6) (5 1, 77(m， 2H), 2.39(m, 4H), 2. 42(s, 3H), 2.49(s, 3H), 3. 23(t, 2H), 6.85(m, 2H), 7. 60(t, 1H), 7. 67(s, 1H), 7.71(m, 1H)， 10· 89(s, 1H), 13· 68(s， 1H)。 步驟3b· ’（3-（羥基胺甲醯基）丙基）5 一（（z) — (5—氟—2 一侧 氧基吲哚啉-3-基叉）甲基）—2, 4-二甲基-1#-吡咯-3-羧醯 胺（化合物3) 將NaH(60%，900 mg，22.5 mmol g)於冰浴分次添加 至羥基胺氯化氫（1.04 g，15 mmol)於DMF(25 mL)之溶 1150-9131-PF/Kai 254 200829575 液。0· 5 小時後，將化合物 110-3(0· 2 g，0. 5 mmol)於 DMS0(3 mL)之溶液添加至上述混合物中。將該混合物於〇°c攪拌2 小時。將反應物過濾並將殘渣以DMF清洗、乾燥以移除殘 餘的DMF以得黃色固體產物3(21.0mg，10.5%)〇LCMS:/ff/z 401 (M+l), JH NM^ 5 1. 73(t, 2H), 2. 02 (t, 2H), 2.38(s, 3H), 2.41(s, 3H), 2.43(t, 2H), 6. 85(m, 2H), 7.66(t, 1H), 7.72(s, 1H), 7.76(m, 1H), 8.70(s, 1H), , l〇·40(s， 1H)， 10.88(s， 1H), 13·68(s, 1H)。 實施例4:製備yV-(5-(羥基胺甲醯基）戊基）5-((Z)-(5-氟 -2-側氧基吲哚啉-3-基叉）甲基）一2, 4-二甲基-1Θ-吡咯-3-羧醯胺（化合物4) 步驟4a· 6-(5一（（Ζ)-（5-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基叉）甲 〜 -’ --...——— .一 ——…. 基）-2,4-二甲基-1#-吡咯-3一羧醯胺基）己酸甲酯（化合物 110-4) 對稅拌中之化合物1(0.5 g，1.67 mmol)溶於DMF(35 \ mL)溶液’於室溫依序添加H0Bt(l. 02 g，7. 52 _〇1)、三 乙胺（2.12roL，lS.OSmmoihECDucKUg，152龍〇1) 及甲基6-胺基己酸酯氣化氫（〇9ig，5.0_〇1)。將該 混合物攪拌於室溫24小時並接著以水（2〇 mL)、濃鹽水（20 mL)及飽和重碳酸鹽溶液（2〇 mL)稀釋並將溶液之pH值以 1 0 M NaOH調整為1卜12。將混合物過濾並將殘餘的固體以 水清洗並乾燥以得到粗製黃色固體產物n〇_4(〇47 g， 65· 8%) ° LCMS: 428(M+1)，j NMR(DMS0-A) 6 1· 33(m， 2H), 1.54(m, 4H), 2. 32(t, 2H), 2.42(s, 3H), 2.50(s, 1150-9131-PF;Kai 255 200829575 3H), 3.20(t, 2H), 3.59(s, 3H), 6. 85(m, 2H), 7. 60(t, 1H), 7.69(s, 1H), 7.71(m, 1H), 10.88(s, 1H), 13. 67(s, 1H) 〇 步驟4b· 7^(5-(羥基胺甲醯基）戊基）5 一（（z) — (5-氟-2 一側 氧基叫1嗓1-3-基又)平基）_2, 4,二香 胺（化合物4) 將 NaH(60%，846 mg，21.3 mmol g)於 0°C 分次添加至 經基胺氯化氫（0.93 g，14.0 _〇1)於DMF(25 mL)之溶 液。0· 5 小時後，將 ii〇-4(〇. 2 g, 〇· 47 mmol)於 DMS0(3 mL) 之溶液添加至上述混合物中。將該混合物於〇〇c攪拌2小 時並過濾。將收集的固體以！)MF清洗，將殘餘的DMF於減 壓下移除以得到黃色固體產物4(22. 6 mg， 11. 2%)。 -一-一.-......-....-—-...........................................................................................................................—.....................................................一 —................................................................................
in. P. 209. 7 °c (decompose) > LCMS: ^ 429(M+1), !H NMRCDMSO-i/e) 5 1.27(m, 2H), 1. 48(m, 4H), 1.94(t, 2H), 2.38(s, 3H), 2.40(s, 3H), 3.12(t, 2H), 6. 87(m, 2H), 7.60(t, 1H), 7.69(s, 1H), 7. 72(m, 1H), 8. 63(s, 1H), 10.32(s，1H)，l〇.82(s, 1H), 13.65(s，1H)。 貫施例5:製備（/)-5-((5-氟—2 —側氧基吲哚啉_3 —基叉） 甲基-（2-(4-(羥基胺甲醯基）苯氧基）乙基）一2,4一二甲 基-1#-吡咯-3-羧醯胺（化合物8) 步驟5a· 4-(氰基甲氧基）苯甲酸甲酯（化合物2〇1) 於4-羥基苯甲酸甲酯（5· 〇 g，32· 9關〇1)於mf(5〇 之溶液，添加 2-氣乙腈（2.5g，32·9_〇1)及 K2C〇3(136g， 98.6 mmol)。將該混合物於5〇t：攪拌達4小時。將水（ι〇〇 1150-9131-PF；Kai 256 200829575 m 1)加入及將得到的固體過濾以得到產物2 01白色固體 (6· 2 g，98%)。此固體使用於次一步驟而不經進一步純化· LCMS: 192 [M+l]+ 〇 步驟5b· 4-（2-胺基乙氧基）苯甲酸甲酯（化合物202) 將化合物2〇1仏 液’於回流溫度攪拌，於氮氣氣氛下滴加BH3 Me2S(3. 9 mL， 7· 8mmol )30分鐘。將該溶液回流4小時然後冷卻至室溫。 / 添加6N HC 1(3 ml )並將該混合物回流〇. 5小時，然後冷卻 至0 °C。將反應混合物過濾並將該濾液濃縮以得到粗製產 物202白色固體（2· 3 g)。將該粗製產物使用於次一步驟 而不經進一步純化。LCMS: 196 [M+l]+。 步驟5c. (Z) -曱基4 -（2-(5 -（（5-H-2 -側氧基叫卜朵琳-3- " ............—… —…— ———_—— —，—_ — 十—― — 基叉）甲基）-2, 4-二甲基-1#-η比咯—3-羧醯胺基）乙氧基）苯 甲酸酯（化合物203) 對攪拌中之化合物109(0. 5 g，1. 67 _〇1)於THFC150 ( mL)溶液，於 〇°c 依序添加 HOBt(0.34 g，2.8 mmol )、三乙 胺（0. 6 mL，4· 18 mmol)、ECDI.HC1(0· 48 g，2·8 mmol) 及化合物202(0· 6 g，3· 33 mmol)。將該混合物攪拌整夜 於室溫’蒸發以移除溶劑，以水（5〇 mL)、濃鹽水（50 mL) 及飽和重碳酸鈉溶液（5〇 mL)稀釋。將溶液之pH值以ι〇Μ NaOH調整為11〜1 2。將該混合物過濾，以水清洗、乾燥以 得到粗製黃色固體 203(550 mg, 69%)。LCMS: 478 [M+l]+， ]H NMR(DMS0-i/6)： 2.40(s, 3H), 2. 43(s, 3H), 3. 63(m, 2H),3.82(s, 3H), 4. 20(t, 2H), 6. 92(m, 2H), 7. 07(d, 2H), 1150-9131-PF;Kai 257 200829575 7.70(m, 2H), 7. 84(s, lH),7.91(d, 2H), 10.88(s, 1H), 13. 68(s， 1H)。 步驟5〇1.(7)-4-（2-（5-（（5-氟-2-側氧基吲哚啉-3_基叉）甲 基）-2，4-二甲基-1#-。比咯—3 一羧醯胺基）乙氧基）苯甲酸（化 合物8) 將 NaH(60%，650 mg，15.75 mmol)於 0°C 分次添加至 羥基胺氯化氫（750 mg, 1〇·5 mmol)於DMF(15 mL)之溶 液。0· 5小時後’將化合物203 ( 500 mg，1.05 mmol)溶於 DMF(25 mL)之溶液添加至上述混合物中。將該混合物於〇 °C攪拌0. 5小時並過濾。將固體以DMF清洗並將該濾液減 麼濃縮以得到一黃色固體，經過精製以得到產物8黃色固 體（65 mg，17%)。LCMS·· 479 [M+l]+，4 NMR(DMSO-A):汐 .....— —…一.— 2.39(s, 3H), 2.41(s, 3H), 3. 59(m, 2H), 4.15(t, /=5.7 Hz, 2H), 6.83(m, 4H), 7.69(m, 5H), 8.85(s, 1H), l〇.84(s，1H), ll.〇2(s, 1H), 13,67(s，1H)。 貝施例6 :製備（z) — 5 — ((5 —氟-2 -側氧基°引嗓淋-3-基叉） 甲基羥基（甲基）胺基）一6-側氧基己基）一2, 4一二曱 基-1万-吡咯-3-羧醯胺（化合物9) 將 NaH(60%，700 mg，17.55 mmol)於（TC 分次添加至 N-曱基經基胺氯化氫（1 g，；π·7 _〇1)於dmf(15 mL)之 溶液。〇·5小時後添加化合物110-4(0.5 g，y. 15 _〇1) 於DMF(25 mL)之溶液。將該混合物於0°C攪拌15分鐘，過 渡並以DMF清洗。將該濾液減壓濃縮以得到粗製黃色固體 經過精製以得到所望產物9黃色固體（150 mg，35%)。LCMS: 1150-9131-PF;Kai 258 200829575 443 [MH]+, ]H NMRCDMSO-i/e) ： d 1.28(ra, 2H), 1.47(m, 4H), 2.31(m, 2H), 2, 38(s, 3H), 2.40(s, 3H), 3. 06(s? 3H), 3.15(m, 2H), 6.83(m, 2H), 7. 60(t, /-5. 85 Hz, 1H), 7.69(s, 1H), 7.73(m, 1H), 9. 72(s, 1H), 10.86(s, 1H), fs, - W ° 實施例7:製備#-(2-胺基苯基）-5 —((/) —(5—氟—2 —側氧基 吲哚啉-3-基叉）曱基）-2, 4-二甲基-1#一吡咯—3-羧醯胺（化 合物10) 對攪拌中之化合物109(0.2 g，0.67 mmol)於DMF(30 mL)溶液，於 〇°C 依序添加 HOBt(0. 136 g，1· 0 mmol)、三 乙胺（0.24 mL，1.67 mmol)、ECDI.HCl(0.192g，l.Ommol) 及苯-1，2-二胺（0.2 g，2.0 mmol)。將該混合物攪拌72小 時於室温，以水（2 0 mL )、濃鹽水（2 0 mL )及飽和重碳酸納 水溶液（20 mL)稀釋。將溶液之pH值以l〇M NaOH調整為 11〜1 2。將該混合物過濾，以水清洗、乾燥以得到產物1 〇黃 色固體（0.13 g， 50· 03%) 。LCMS: 391 [M+l]+， ^ NMRCDMSO-^/e): ^ 4.83(s, 2H), 6. 58(t, /=7. 2Hz, 1H), 6. 78(d, 1H), 6. 84(m, 1H), 6. 92(t, /^7.8 Hz, 2H), 7,25(d, 1H), 7. 74(m, 2H), 9. 00(s, 1H), 10.90(d, 1H)，13,75(s， 1H)， !H NMR(DMSO-D2〇)占 2.41(s， 3H),2.44(s, 3H), 6. 62(t, /=7. 4 Hz, 1H), 6. 78(d, 1H), 6.89(m, 1H), 6.95(m，2H), 7.19(d, 1H), 7.67(m，2H)。 實施例8 :製備5-( (Z) - (5 -氟-2-側氧基吲π朵琳-3 —基又） 甲基-（2-(4-((方）-3-（經基胺基）-3-側敦基丙-1 —稀基） 1150-9131-PF;Kai 259 200829575 苯氧基）乙基）-2, 4-二甲基-1#-吡咯-3-羧醯胺（化合物i4) 步驟8a· (i〇-曱基3-(4-( 2-溴乙氧基）苯基）丙烯酸酯（化 合物301) 對（E)-甲基3-（4-羥基苯基）丙烯酸酯（2·〇 g，U24
_〇1)於 DMF—(2 A K2C〇3(4. 6 6 g，33. 7 mmol)。將該混合物於90°C攪拌達β 小時並過濾。將濾液蒸發以得到產物3〇1白色固體（3. 〇5 g， 95.2%) 。 LCMS: 286 [M+l]+ 。 步驟8b·(幻-甲基3-（4-（2-(1，3-二側氧基異吲哚啉—2-基）乙氧基）苯基）丙烯酸酯（化合物302) 將化合物301(1·5 g，5.26 mmol)、鄰苯二甲醯亞胺 鉀（1.07 g，5.79 mmol)於 DMF(20 mL)之混合物，於 ί〇〇 -—-----....一—一” - ----- — —- =—.—— ^ °C攪拌4小時。將反應物冷卻並將殘餘的固體過濾。將該 渡液減壓濃縮以得到產物3 0 2白色固體（1. 7 5 g，9 5. 1 %)。 LCMS: 352 [M+l]+ 〇 步驟8c·(幻-甲基3 -（4 -（2-胺基乙氧基）苯基）丙烯酸酉旨 (化合物303) 對化合物 302( 1.85 g，5.26 mmol)於 EtOH(25ml)之懸 浮液，添加聯胺水合物（〇 · 4 mL，7 · 89 mmo 1)。將得到的混 合物回流1 0小時並過濾。將濾液濃縮以得到所望產物 303( 1.1 g，95%)。LCMS: 222 [M+l]+。 步驟8d.(幻-甲基3-(4-（2-(5-(U)-（5-氟-2-側氧基吲 哚啉-3-基叉）甲基）-2, 4-二甲基-1#-吡咯-3-羧醯胺基）乙 氧基）苯基）丙烯酸酯（化合物304) 1150-9131-PF;Kai 260 200829575 對攪拌中之化合物109(0.5 g，1.67 mmol)於DMF(40 mL)溶液，於〇°c依序添加HOBt(0· 34 g，2. 5 mmol)、三乙 胺（0.94 mL，6.68 mmol)、ECDI ·ΗΟ1(0·48 g，2·5 mmol) 及化合物303(0. 44 g，2. 0 mmol)。將該混合物攪拌整夜 於室A ’蒸發，以—水(5〇 mL)、濃鹽水U 酸鈉水溶液（50 mL)稀釋。將溶液之pH值以10M NaOH調整 為11〜1 2。將該混合物過濾，以水清洗、乾燥以得到所望 產物 304 黃色固體（630 mg，75%)。LCMS: 504 [M+l]+，4 NMR(DMSO-A): J 2.39(s，3H)，2.41(s，3H)，3.59(m，2H)， 3.69(s, 3H), 4.15(t, /-4.5 Hz, 2H), 6.45(d, 1H), 6.94(m, 4H), 7. 65(m, 6H), 10.87(s, 1H), 13.66(s, 1H)。 ---- ...- r、....... 十.：〜·—..l.., — — __ 步驟8e. 5-((7)-(5-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基叉）曱 基）-’（2-(4-((i〇-3-(羥基胺基）—3-侧氧基丙-1-烯基）苯 氧基）乙基）-2, 4-二甲基-1及-吡咯-3-羧醯胺（化合物14) NaH(6 0%，894 mg，22. 3 _〇1)於 〇°C 分次添加至羥基 胺氯化氫（ 1.035 g，14.9 mmol)於 DMF(15 mL)之溶液。 0· 5 小時後，將化合物 304(750 mg，1. 49 mmol)於 DMS0(40 mL)之溶液添加至上述混合物中。將該混合物於〇〇c攪拌j 5 分鐘並過濾，以DMF清洗並將該濾液減壓濃縮。將殘渣過 渡以得到標題化合物14黃色固體（25 mg，3. 3%)。LCMS: 505 [M+l]+, lH NMR(DMS0^6)： ^ 2. 38(s, 3H), 2.41(s, 3H), 3.58(m, 2H), 4.13(t, /-5. 4 Hz, 2H), 6. 27(d, 1H), 6.98(m, 4H), 7.41(d, 1H), 7.48(d, 2H), 7. 69(s, 1H), 1150-9131-PF;Kai 261 200829575 7.75(m， 1H)， 7.81(m， 1H)， l(K87(s， 1H)， 13.66(s， 1H)。 實施例9··製備（z)-5 —((5—氟—2-側氧基吲哚啉—3 —基叉） 甲基）U7-(經基-胺基）一7一側氧基庚基）一2, 4一二甲基 4#-吡咯—3,羧醯胺(化合物 步驟9a. U)-甲基7-(5-((5-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基叉） 甲基）-2, 4-二甲基-1#一吡咯-3一羧醯胺基）庚酸酯（化合物 110-15) 對攪拌中之化合物1 09(22〇 () mg， 0.73 mmol)於 DMF(15 mL)溶液’於室溫依序添加H〇Bt(；[48.6 mg，1.1 mmol)、二乙胺（〇· 21 mL，1· 46 mmol)、ECDI .HC1(210· 2 mg， I： L^^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^^ ^ ......—'….…— -——=^:— 一-— mmol)。將該混合物於室溫攪拌μ小時並接著以水γ2〇 mL)、濃鹽水（20 roL)及飽和重碳酸鹽溶液（2〇 mL)稀釋。將 混合物之pH以lONNaOH調整為ιι〜12。將該混合物過濾 並將固體以水清洗、乾燥以得到粗製產物1 1 〇 — 1 5黃色固 體（0.3容，93.2%)。！^1^:442[^+1] + ;111關1?(〇1^〇-心）·· ά 1.31(m, 4H), 1.50(m, 4H), 2.31(t, /=7.35 Hz 2H) 2 · 4 0 ( s，3 H)，2. 4 2 (s，3 H)，3 · 1 9 (m，2 H)，3 · 5 9 (s，3 fj) 6.87(m，2H)，7·71(πι，3Η)，10.91(s，1H)，13.67(s，in)。 步驟9b· (7)-5-((5-氟-2-側氧基吲哚啉-3一基又）甲 基）-#-(7-（經基胺基）- 7-側氧基庚基）—2,4-二曱基—u比 咯-3-羧醯胺（化合物15) 將 NaH( 6 00/〇, 140 mg，3·5 _〇l g)於冰浴溫度添加至 1150-9131-PF;Kai 262 200829575 沒基胺氯化氫（160 nig，2.3職〇 i)於])MF(3 mL)之溶液， 並攪拌〇· 5小時。對此混合物添加110 — 15(100. 〇 mg，〇. 23 mmol)於DMS0(5 mL)之溶液。將得到之混合物於〇。〇授拌 0. 5小時並過濾。將固體以DMF清洗。將合併的濾液減壓 濃縮以得到殘秦將其以製備抵 物黃色固體（63 mg, 63%)。πι. ρ· 221°C (分解）LCMS: 443 [M+l] + ; 'H NMR(DMSO-^e) ： ^ 1.29(m, 4H) 1.48(m, 4H), 1.93(t，/=7. 2Hz, 2H), 2. 38(s, 3H), 2. 40(s, 3H), 3.19(ra, 2H), 6.87(m, 2H), 7. 69(m, 3H), 10.31(s, 1H), 10.87(s, 1H)，13. 65(s，1H)。 實施例l(h製備U)-5-((5-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基叉） 甲基）-#-(8-(羥基胺基）-8-侧氧基辛基）—2, 4-二曱基-1#-吡咯-3 -羧醯胺（化合物 1 6) —— — 步驟10a· (Z)-甲基8-（5-（（5-氟-2-侧氧基吲哚啉-3-基 叉）甲基）-2, 4-二甲基-1#一吡咯-3一羧醯胺基）辛酸酯（化合 物 110-16) 對攪拌中之化合物1 09 (500 mg，1. 67 mmol)於DMF(40 mL)溶液，於室溫依序添加H〇Bt(337. 8 mg，2. 5 mmol)、 三乙胺（0· 94 mL, 6· 68 mmol)、ECDI .HCU477· 8 mg，2· 5 mmol)及8-胺基辛酸甲酯氯化氫（385· 3 mg， 1. 84 mmol)。將該混合物於室溫攪拌24小時並以水（2〇mL)、濃 鹽水（20 mL)及飽和重碳酸鈉溶液（2〇 mL)稀釋。將溶液之 pH值以1 0 N NaOH調整為丨丨〜丨2。將該混合物過濾並將固 體以水清洗、乾燥以得到粗製產物uo —16黃色固體 1150-9131-PF/Kai 263 200829575 (〇· 62 g，86. 1〇/〇)。LCMS: 456 [M + l] + ; j NMR(DMS0-A):汐 1.28(m, 6H), 1.50(m, 4H), 2. 28(t, /=7.35 Hz, 2H), 2.38(s, 3H), 2.40(s,3H), 3.20(m, 2H), 3. 56(s, 3H), 6.84(m, 2H)，7.69(m，3H)，10.87(s, 1H), 13.65(s，1H)。 步驟-l· 〇 b ·(幻，5 (( 基）(8-(羥基胺基）-8-側氧基辛基）-2, 4-二曱基-比 咯-3-羧醯胺（化合物16) 將NaH(60%，736 mg，18·4 mmol)於冰浴溫度添加經 基胺氣化氫（855 mg, 12·3 mmol)於DMF(15 mL)之溶液並 攪拌0 · 5小時。對此混合物添加化合物11 〇 — 16 (5 6 0 mg， 1.23 mmol)於DMS0(25 mL)之溶液。將得到之混合物於〇 °C攪拌0· 5小時並過濾。將固體以DMF清洗。將合併的據 液減壓濃縮以得到殘渣將其以製備性HPLC精製以得到產 物 16 黃色固體（40 mg，7%)。m. ρ· 213· 7°C (分解）。LCMS: 457 [M+l] + ; 'H NMRCDMSO-^/e) ： ^ 1.27(m, 6H) 1.47(m, 4H) 1.92(t, /=6.9 Hz, 2H), 2. 38(s, 3H), 2. 40(s, 3H), 3.18(ra, 2H), 6.87(m, 2H), 7. 70(m, 3H), 8. 66(s, 1H), 10.32(s，1H)，10.88(s, 1H)，13.66(s, 1H)。 實施例11:製備（/)-#-(6-(乙醯氧基胺基）-g —側氧基己 基）_5-（（5-氟-2-側氧基吲哚啉—3-基叉）甲基）一2, 4一二甲 基-1 π比洛-3 -羧醯胺（化合物1 7) 將 AC2〇(1.5 ml)添加至化合物 4(12〇 mg，〇 28_〇1) 於Ac0H(15 mL)之溶液〇f。將該溶液攪拌於室溫達4小時。 將該混合物以飽和重碳酸鈉水溶液調整為7〜8，將得到 1150-9131-PF;Kai 264 200829575 的固體以過渡收集。將殘造以水清洗3次，乾燥以得到所 望產物 17 黃色固體（1〇〇 mg，76%)。LCMS: 471 [M+1 ]， NMR(DMSO-A): ^ 1.32(in, 2H),1.53(m, 4H), 2.l2(m 5H),2.39(s, 3H), 2.41(s,3H), 3. 20(m, 2H), 6. 85(m, 2H) 7, 581 Cm, 1H), 7. 69 (m, 2H), 10.· 84( s, 1HX, 11^ 52 1H)， 13·65(s, 1H)。 ’ 貫施例1 2 :製備（/) — 5 - ((5 -氟—2 -側氧基吲哚琳-3 —基又） 甲基）-#-(6-(異丁醯基氧基胺基）_6 —側氧基己基）—2,私二 甲基-1#·吡咯-3-羧醯胺（化合物18) 將異丁酸酐（7 mL，42· 2 mmol)添加至化合物4(500 mg 1 · 1 7 mmo 1)於AcOH(70 mL)之溶液。將該溶液於室溫攪拌 達4小時並將該混合物以飽和NaHC〇3水溶液調整為仙 7^8 ^ -體以過渡收集，以5洗3次^ 製備性HPLC精製，以得到產物18黃色固體（35mg，69〇。 LCMS: 499 [M+l] + , NMR(DMS0-^)： ^ 1.12(s, 3H) !-14(s, 3H), 1.34(m, 2H), 1.55(m, 4H), 2.11(t, f=6. 9 Hz, 2H), 2.39(s, 3H), 2.41(s,3H), 2. 69(m, lH),3.18(m, 2H),6.83(m, 2H), 7. 63(m, 3H), 10.88(s, 1H), 11.54(S} 1H), 13.66(s， 1H)。 實施例13:製備（Z)-#-(6-(苯曱醯基氧基胺基）—6 —側氧 基己基）-5-((5-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基叉）甲基2, 4一 二曱基-1#-吡咯-3-羧醯胺（化合物19) 將苯甲酸酐（200 mg, 〇· 88 mmol)添加至化合物4(2〇〇 呢，· 〇· 47 _〇1)於AcOH(40 mL)之溶液。將該溶液於室溫 1150-9131-pp;Kai 265 200829575 攪拌達4小時並以飽和重碳酸鈉水溶液調整為pH 7〜8。將 得到的固體以過濾收集，以水清洗3次、乾燥並以製備性 HPLC精製以得到產物19黃色固體（4〇 mg, 16%)cLCMS: 533 [M+l] + , NMRCDMSO-^/e)： ^ 1.35(m, 2H),1.53(ra, 4H), 2. Hz, 2H), 2. 40(s, 3E 41Cs. 3H), 3· 20(m， 2H), 6.85(m,2H), 7. 57(m, 1H), 7. 70(m, 3H),7.99(s, 1H), 8.01(s, 1H), 10.88(s, 1H), 11.88(s, 1H), 13·66(s， 1H)。 實施例14:製備（/)-5 —((5-氟-2-側氧基吲哚啉-3-基叉） 甲基）-2,4-二甲基- #-(6-側氧基-6-(丙醢基氧基胺基）己 基）-1#-吡咯-3-羧醯胺（化合物20) 將丙酸酐（7 mL，54.4 mmol)添加至化合物4(500 mg， ~ · ‘..〇·，···〜,·.— , 一、_· ·_ _ _ _ 1. 17 romol)於AcOH(70 mL)之溶液。將該溶液於室温擾拌 達4小時並將該混合物以飽和NaHC〇3調整為pH 7〜8。將 該混合物過濾，以水清洗3次、乾燥並以製備性HPLC精製 以得到產物 20 黃色固體（180 mg，32%)。LCMS: 485 [M+1 ] +， JH NMRCDMSO-^e): ^ l.〇6(t, /=7. 8 Hz, 3H), 1.31(m, 2H), 1.52(m, 4H), 2.11(t, /=7. 35 Hz, 2H), 2. 38(s, 3H), 2.40(s, 3H), 2.44(m, 2H), 3. 17(m, 2H), 6. 82(ra, 2H), 7. 66(m, 3H), 10. 84(s, 1H), 11. 51(s, 1H), 13. 64(s, 1H) 〇 實施例15:製備（Z)-#-(6-(環己烷羰基氧基胺基）-6 —側 氧基己基5-氟-2-侧氧基吲哚啉—3一基叉）甲 基）-2, 4-二甲基-1#-吡咯—3-羧醯胺（化合物21) 1150-9131-PF/Kai 266 200829575 將環己烷羧酸酐（5mL)及環己烷羧酸（150mg， 117 mmol)添加至化合物 4(500 mg, 1.17 mmol)於 THF(120ml) 及DMF (5 mL)之溶液。將該溶液於室溫攪拌達4小時。將 THF於真空中移除’然後將水（1 〇 〇 ^ 1)加入。將該混合物 以飽和重碳應鈉水溶I ^h pH7^8, 濾收集，以水清洗3次、乾燥並以製備性HpLC精製以得到 產物 21 汽色固體（1〇〇 mg， 13%)°LCMS: 539 [M+1J+，j NMR(DMSO^a)： ^ 1.32(m, 7H), 1.53(m, 5H), 1.66(m, 2H), 1.85(m, 2H), 2. ll(t, /^6.45 Hz, 2H), 2. 39(s, 3H), 2.41(s,3H), 3.20(m, 2H), 6. 85(m, 2H), 7.71(m, 3H), 10· 89(s, 1H), 11· 54(s, 1H)，13.67(s, 1H)。 貫施例16 :製備（Z)-N-(7-(乙醯氧基胺基）—7 —側氧基庚 基）-5-((5 -氟-2-側氧基，引哮琳—3-基叉)甲基y=2「f 基-1H-吡咯-3-羧醯胺（化合物28) 將 Ac2〇(2 ml)添加至化合物 ι5(14() mg，〇 32 _q1) 於20 ml AcOH之溶液。將該溶液於室溫攪拌達4小時。將 飽和NaHC〇3緩慢添加以調整pH至7〜8。以過濾收集該固 體，以水清洗3次、乾燥以得到粗製產物以製備性肝lc精
製以得到產物 28(95 mg，62%)。LCMS: [M+1] +，lH NMR(DMSO-A) θ υοα，4H)，151(m，4H)，2 〇7(m，5们， 2.38(s, 3H), 2.40(s, 3H), 3.19(m, 2H), 6. 84(m, 2H), 7*62(t> >6.0 Hz， 1H)，7.69(S， 1H), 7. 75(m, iH), 實施例17:製備乙基（2)1-(8-(乙醯氧基胺基）—8-側氧 1150-9131-PF;Kai 267 200829575 基辛基）-5-((5-氟U氧基㈣ 二甲基-1H-吡咯-3_綾醯胺（化合物29) 將Ac2〇(3 ml)添加至化合物ι6ί 口物 ibU28 叫，〇· 5 mmol)於 30 ml AcOH之溶液。腺#、〜、六 ^ 4 將該〉谷液於室溫攪拌達4小時。將飽 ^ NaHCa 以水清洗3次、乾燥以得到粗製產物以製備性HPLC精製以 得到產物 29(50 mg，20%)。LCMS: 499 [M+l]+， 瞧⑽0Ι、，6Η)，1.490η，4H)，2.07a，2H)’ 2.12(s, 3H), 2.38(S, 3H), 2.40(s, 3H), 3. 20(m, 2H), 6.85(., 2H), 7.63(t, /=5.6 Hz, lH))7.T0(s, 1H), 7.76(m, 1H), 10.88(s, 1H), 11.53(s, lH), l3.65(s, 1H) ° 生物學試驗： 如同前述，本發明所定義的衍生物，具有抗增生活性。 此等性質可例如使用一種以上下列程序評估： (a)—體外（“κ/汴幻試驗，決定受測化合物抑制受體酪胺 酸激酶之能力
受測化合物抑制受體激酶（VEGFR2及 性之能力，使用HTScanTM受體激酶試驗套組（CeU
Signaling Technologies，Danvers, ΜΑ)評估。VEGFR2 酿 胺酸激酶使用一桿狀病毒表現系統生產，具一構建物，包 含一人類 VEGFR2 cDNA 激酶結構域（Asp805-Vall 356) (GenBank Accession number· AF035121)片段其胺基末端 融合於一 GST-HIS6-凝血酶切開部位。PDGFR —beta酪胺酸 1150-9131-PF;Kai 268 200829575 激酶使用一桿狀病毒表現系統生產，具一構建物，包含一 人類 PDGFR-beta c-DNA(GenBank Accession number. NM-002609)片段（Arg561-Leull06)胺基末端融合於一 GST-HIS6-凝血酶切開部位。該蛋白質利用谷胱甘肽-瓊脂 a ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ E ° m ^ ^ ^ ^ ^ P-Tyr-100，被用於偵測生物素化受質肽之磷酸化（VEGFR2,
Biotin-Gastrin 前驅物 Tyr87); PDGFR-0 生物素化 -FLT3(Tyr589))。酵素活性係於 60 mM HEPES、5 mM MgCl2 5 mM MnCl 2 200 μΜ ATP、1.25 mM DTT、3 uM Na3V〇4、1·5 mM肽及50 ng EGF受體激酶中測定。已結合抗體，使用 DELFIA 系統（PerkinElmer，Wei lesley，MA)债測，該系統 由 DELFIA® 銪標記抗小鼠 lgG(PerkinElmer，#AD0124)、
DELFIA⑧增強溶液^erkTnElmerrH 鏈黴親和素（Streptavidin)包覆之96井盤（PerkinElmer， AAAND-00 05)構成。螢光係於WAIL AC Victor 2平盤讀取儀 測定，並以相對螢光單元（RFU)報告。資料可以使用 GraphPad Prism(v4· 0a)繪製成圖，並且使用 s 型 (3丨21110丨(131)劑量-回應曲線適合度演算法，計算1(：5〇。 將受測化合物溶解於二甲基亞砜（DMS0)，以得到20 mM 的工作原濃度。各試驗設定如下：添加100//1的10mM ATP到1.25 ml的6 mM受貝狀。將該混合物以去離子水稀 釋，以得到2X ATP/受質混合物（[ATP]=400福，[受質>3 mM)。立即將酵素從-80°C轉送到冰中。使酵素於冰上解束。 於4°C輕微地微量離心，使液體沉在小試管底部。立即放 269 1150-9131-PF;Kai 200829575 回冰中。添加10# 1的DTT(1. 25 mM)至2· 5 ml的4χ 11丁3〇311了^1酪胺酸激酶緩衝液（24〇11^1^?£3?[17.5，20祕
MgCl2，20 mM MnCl，12 mM NaVOO，以配成 DTT/激酶緩衝 液。將1· 25 ml的DTT/激酶緩衝液，移到酵素管，以配成 4 X反應混含粉([酵素]=仓 12. 5//1的4X反應混合物與12· 5//1/井的關注的預稀釋 化合物（通常約10# M)於室溫溫育5分鐘。添加25# 1的 2X ATP/受質混合物至25# 1/井的預溫育反應混合物/化合 物。將反應平盤在室溫溫育30分鐘。添加5〇// ly/井的停 止緩衝液（50 mM EDTA、PH 8)，以停止該反應。將各反應 25// 1及75// 1去離子水/井，移到96井鏈黴親合物—包覆 H—:亚—於ΐ—溫土育—!。―以 20 0 # 1/井 pbs/t(pbs， 0.05% Tween-20)清洗3次。將初級抗體、磷酸化酪胺酸 mAb(P-Tyr-lOO)，1:1 00 0 於 PBS/T 中，以 1%牛血清白蛋白 (BSA)稀釋。添加ι00//1/井的初級抗體。於室溫溫育6〇 分鐘。以200 /^1/井PBS/T清洗3次。將銪標記之抗小鼠
IgGl:500於PBS/T，以1%BSA稀釋。添加100//丨/井經
稀釋的抗體。於室溫溫育30分鐘。以2〇〇#丨/井pBS/T 清洗5次。添加100//丨/井DELFIA⑧增強溶液。於室溫溫 育5分鐘。以適當的時間—解析盤讀取 儀，偵測發射的61 5 nm螢光。 (b)—體外（i/7試驗，決定受測化合物抑制仙Ac酵 素活性之能力 HDAC抑制劑使用HDAC螢光測量試驗套組 1150-9131-PF;Kai 270 200829575 (AK-500, Biomol、Plymouth Meeting、PA)筛選。可將受試 化合物溶於二甲基亞礙（DMSO)，以得到20 mM工作原濃 度。螢光使用WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad Prism(v4.0a) 繪圖，並且使用各盤線適 合度演算法，計算IC50。
各試驗設定如下··將所有的套組成分解凍，於使用前保 持在冰上。將HeLa核萃取物以1 : 29稀釋於試驗緩衝液（5〇 mM Tris/Cl ^ PH 8.0, 137 mM NaCl, 2.7 mM KC1, 1 mM
MgC12)。製備TrichostatinA(TSA，正控制組）及受測化 合物於試驗緩衝液（5X最終濃度）之稀釋物。將Flu〇r心
LysTl 將Fluor de LysTM顯影劑濃縮物（例5〇^丨+^
第二，將 0. 2 mM 衝液）於冷試驗緩衝液稀釋2〇倍
Trichostatin A 100-倍稀釋於1χ顯影劑（例1〇#丨於i ml，最終Trichostatin A濃度於1χ顯影劑=2//M;添加 hdac/又貝反應後之最終濃度=1 # M)。添加試驗緩衝液、經 稀釋trichos tat in A或叉測抑制劑，至微滴定盤之適當的 井。添加經稀釋之HeLa萃取物或其他hdac樣本，至所有 井’除了負控制組。使經稀釋之以贿㈣㈣受質及樣 本在微滴定盤中平衡$辞、％、w & / 十對至ΰ式驗、此度（例如25或37°C )。藉由 反應。使HDAC反應進行！小時，接 LysTM顯影劑（50# 1)使反應停止。 添加經稀釋受質⑵⑶至各井並充份混合，以起始化聽 著藉由添加Fluor de 將平盤在室溫（25°C ) H50-9131-PF;Kai 271 200829575 溫育1〇_15分鐘。在能於波長350-380 nra之範圍激發的微 滴疋‘ 4取螢光儀，續取樣本，並彳貞測在44〇_46〇 nm發射 之光。 以下表2-B列舉本發明代表化合物及其活性於hdac、 VEGFR2及PDGFR分析。於此等分析’ IC5。使用以下分級· I =10 M, 10 /ζ Μ>11>1 β Μ, 1/ζ Μ>111>0. 1 # Μ 且 π g 0· 1 // M。 表2 -Β
化合物編號 HDAC VEGFR2 PDGFR 2 III IV III 3 II IV IV 4 III IV IV 8 III 9 I IV 14 - ............ ——..............................IV..................... ............................................-. 15 IV IV III 16 IV IV III
表3_Α 化合物編號1 結才灰 1150-9131-PF;Kai 272 200829575 /
1150-9131-PF;Kai 273 200829575
1150-9131-PF;Kai 274 200829575
20 hn、oh 21 〇HO丫0 rR 22 Η 23 〇 ν° Λ ην、〇η 24 ο V0 Λ 25 〇 ^〇Ακ〜ν^^μ、。η R2Ni 26 πΛ 〜Hn^^Vh H2N^^ 27 0 28 jQf^iT^Y^VH 29 0 Γτ^〜Υ^Υ、。Η 30 31 32 j〇^〜N^VH 1150-9131-PF/Kai 27 5 200829575 / \ 33 0 < H n、。h 34 j^^NY^r〇H 35 O 彳 H xV^ 〜 ..... — ... ..... -- 36 37 Χ^ι^〜ΝΤΥΝ、。Η 38 ^〇Λ 〜Y°V0H 39 0 〜γ^γΝ、。Η 1150-9131-PF;Kai 276 200829575
1150-9131-PF;Kai 277 200829575
Scheme 2
〇 v^、Br 201 Λ〇Λ〇Λ〇^ Hr^
Ph、 H °〜nyV lileO^'OMe 203 〇 Br
202
Br %
HN.qh 1150-9131-PF;Kai 278 200829575
Scheme 3
308 1150-9131-PF/Kai 279 200829575
Scheme 4
實施例1:製備N-羥基-4-(2_(4-胺基苄醯胺）-乙基胺甲 醯基）丁醯胺（化合物29) 步驟la· 三苯甲基乙烷-1,2-二胺（化合物302) 對於乙二胺（30 g，0.5 mol)及三乙胺（50 g，0.5 mol) 於CH2C1 2( 300 mL)之混合物，花2小時滴加氣三苯基曱烷 (28· 0 g，0· 1 mol)於 CH2Cl 2( 200 mL)之溶液。將混合物於 室溫攪拌整夜。將該反應混合物以水清洗（200 mLx4)、以 Na2S〇4乾燥，濃縮以得到化合物302(25 g，83. 3' %)。4 NMRCCDCh) 5 7. 14-7. 49(m, 15H), 3. 78(br, 2H), 2. 87(d, 2H), 2.35(d，2H)°LC-MS: π々 303 (Μ+1)。 步驟lb· 4-硝基-#·(2-(三苯甲基胺基）乙基）苄醯胺（化合 物 303) 1150-9131-PF;Kai 280 200829575 對 302( 1.4 g, 4·6 mmol)於 CH2CI2UOO mL)含三乙胺 (505mg，5 mmol)之溶液，滴加4-確基苯甲醢基氯801(872 mg，4.7 mmol)溶於CH2Cl2(20 mL)之溶液。將該混合物授 掉2小時並以C Η2 C1 2 (2 0 0 m L )稀釋，以水清洗、乾燥並濃 縮以得到化合物3 0 3固體…弘^ 。該產物塞接 用在次一步驟.4 匪 R(CDCl〇 5 8.31(d, 2H)，7.93(d，2H)， 7·19-7·46(πι，15H), 3.55 - 3.57( m，2H)，2· 44-2.46( m， 2Η) 。 LC-MS: π/ζ 452(Μ+1)。 步驟1C. #-（2-胺基乙基）-4-硝基苄醯胺（化合物304) 對稅摔中之化合物303(18.0 g， 0.04 mol)於 CH2CM200 mL)溶液，於室溫滴加三氟乙酸（8 〇 mm〇1)。於 擾拌達0· 5小時、產生多量沉澱。將該溶液過濾並將殘餘 的固體以ClhClulOO mLx2)清洗，以得到產物304白色固體 (12.0忌，93.7%產率）。111關以〇2〇)(5 8.20((1，21〇,7.84((1， 2H), 3.60(t, 2H), 3.15(t, 2H) 〇 LC-MS: 210(M+1) 〇 步驟Id· 4-(2-（4-硝基苄醯胺）乙基胺甲醯基）丁酸甲酯 (化合物307-29) 對 304( 1. 92 g，6 _〇1)於 CH2C12(30 mL)含三乙胺（4 mL) 之/合液’添加4-(甲基過氧基）戊_4 —烯醯基氣於CH2Cl2(5 之/合液。接著將該混合物於室溫攪拌1小時並以200 mL乙 西夂乙酉曰稀帛。將得到的混合物以水清洗（50 mLx3)、乾燥並 /辰細以仔到產物307一29白色固體·NMRU6-DMS0) 5 8. 78 8. 82(m, ιΗ)5 8. 2 9 (d, 2H), 8. 04(d, 2H), 7.94 7.96(m, 1H), 3. 55(s, 3H), 2. 26(t, 2H), 2. 08(t, 1150-9131-PF;Kai 281 200829575 2H)，1.66-1.72(m，ZtOaiNMRaDaOD) 58.31(d，2H)， 8.01(d, 2H), 3.62(s, 3H), 3. 49-3. 51 (m, 2H), 3.40-3.43 (m，2H)，2.32(t, 2H)，2.23(t，2H)，1.84-1.89(m, 2H)。 LC-MS: zp/z 338(M + 1)。 # ^ 4 ^ ^ ^ ) ^ ^ ) ^ ^ (化合物 308-29) 製備含化合物 307-29(674 mg，2 mmol)、鐵粉（1. 1 2 g， 20 mmol)、Et0H(15 mL)及水（0· 5 mL)之混合物。對此混合 物於室溫添加0· 5 mL濃HC1。然後將得到的混合物加熱至 回流。將該反應物攪拌直到以TLC監控起始物質消失。將 該反應混合物冷卻至室溫並過濾。將該濾液濃縮以得到一 殘渣，以矽膠管柱層析精製（乙酸乙酯）以得到產物308-29 白色固體（240 mg, 39 %產率）。4 NMRU6-DMS0) δ 7· 97-8· 01(m， 1H)， 7· 89-7· 92(m， 1H)， 7. 53(d， 2H)， 6.51(d，2H)，6.57(s，2H)，3.57(s，1H)，3.15-3·24(πι， 4H), 2.29(t, 2H), 2.09(t, 2H), 1. 70-1. 75(m, 2H)°LC-MS: 瓜/z 308(M+1)。 步驟If · N-羥基-4-(2-(4-胺基苄醯胺）乙基胺曱醯基）丁 醯胺（化合物29) 製備备基胺於曱醇之溶液：經基胺氯化氫（4.67g， 67mmol)溶解於曱醇（24ml)以得到溶液A。將氫氧化鉀 (5. 61g，l〇〇mm〇i)溶解於甲醇（i4ml)以得到溶液B。將溶 液A冷卻至〇 c。並將溶液B滴加至溶液A中。將該混合 物攪拌30分鐘於〇艺，並於低溫擺置長時間。分離沉澱 1150-9131-PF;Kai 282 200829575 以得到羥基胺溶於甲醇之溶液。 對一含化合物308-29(40 mg，0.13 mmol)之燒瓶，添 加上述輕基胺溶於甲醇之溶液（Q · 5 mL)。將該混合物攪拌 5分鐘·然後使用濃HC1調整為pH 8。於製備TLC分離後， -件到所签產物™2 9 ^ Ψ ^ : ^= 4 :1),(4 0 m g, 9 9 % ^ 率）。4 NMR(DMS0-d6) 5 10.16(s，1H), 8.64(s，1H), 8.02(m, 1H), 7.90(m, 1H), 7.52(d, 2H), 6.51(d, 2H), 5.56(s, 2H), 3.12-3.23(m, 4H), 2. 03(t, 2H), 3. 14(t, i 2H)，1.65-1. 70(m, 2H)。LOMS: 309 (M+1)。Mp·· 158· 9-159· 8〇C。 實施例2:製備4-胺基-N-(2-(乙基（3-(羥基胺基）-3-側 氧基丙基）胺基）乙基）苄醯胺（化合物31) …— ~ ； '一―：…—…......... ，. 「' ——--——— —.一一— —〜： …— 步驟2a. 3-(乙基（2-(4 -石肖基苄醯胺）乙基）胺基）丙酸甲酉旨 (化合物403-31 ) 繁N-(2-(乙基胺基）乙基）—4-硝’基苄醯胺 I 5 mmol)於 DMF(lOml)之溶液，添加 K2C03(1.38g， lOmmol)，然後將3-溴丙酸甲酯（994mg，6mmol)添加至此 混合物。將該混合物於40°C攪拌5小時。然後將固體過濾 移除。將溶劑減壓移除。將殘渣以管柱層析過濾，以得到 1 380 mg 純產物 403-31 (83 %產率）。1H NMR(CDC13) 5 8· 292(t， 1H), 8. 262(t, 1H), 8. 081(t, 1H), 8. 051(t, lH),3.635 (s, 3H), 3. 56(m, 2H), 2. 786(t, 2H), 2. 666(t, 2H), 2.539(m， 4H), 〇.978(t， 3H); LC-MS: 323(M+1)。 步驟2b. 3-((2-(4 -胺基苄醯胺）乙基）（乙基）胺基）丙酸甲 1150-9131-PF;Kai 283 200829575 酯（化合物404-31 ) 對含化合物 403-31 (200mg，〇· 62 mmol)、鐵粉（364mg， 6_ 5 ramol)、甲醇（1 〇 mL)及水（0· 5 mL)之燒瓶，添加1滴 濃鹽酸。將得到的混合物回流3小時，然後冷卻至室溫並 過泰。將該濾液濃縮3L· m ^ ^ ^
醋）以得到 404-31黏液（141mg， 77· 5 %產率）。1H NMRCCDC13) 5 7.698(πι, 2Η), 6. 670 (m, 2Η), 3. 629(s, 3H), f 3. 524(t, 2H), 2. 693(m, 8H), 1. 235(t,3H); LC-MS: 295(M+1)。 步驟2c· 4-胺基—N-(2-(乙基（3-(羥基胺基）-3-側氧基丙 基）胺基）乙基）苄醯胺（化合物31) 對含化合物404-31 (1 18mg，0.4027mmol)之燒瓶，添 ,.〜—-—一.—— — ..一...... 一，….__ 加新鮮之羥基胺（2·42 mmol)於曱醇（1.34 ml )之溶液。將 該混合物攪拌5分鐘，然後使用濃鹽酸調整為pH8，以甲 醇稀釋。將粗製產物以管柱層析精製以得到76 mg化合物 ： 31(64· 5 % 產率）。4 NMR(DMSO-A) 3 1〇· 484(s， 1H)， 8.765 (s, IH), 7.983(s, 1H), 7. 567(m, 2H), 6. 539(d, 2H), 5.597(s， 2H), 2.866(s， 2H), 2. 694(s, 4H), 2·209(ΐ， 2H)， l，〇12(t, 3H); LC-MS: 293(M+1)。 貫施例3:製備4-胺基-N-(2-(乙基（4 —(羥基胺基）—4 一側 氧基丁基）胺基）乙基）节醢胺（化合物32) 步驟3a· 4-(乙基（2-(4-硝基苄醯胺）乙基）胺基）丁酸乙酯 (化合物403-32) 標題化合物403-32使用類似於針對化合物4〇3 — 31 (實 1150-9131-PF;Kai 284 200829575 施例2)敘述之程序，從402以產率51. 8 %製備。4 NMR(CDC l〇 58.28(d, 2H), 8.04(d, 2H),4.08(m, 2H), 3. 52(m, 2H), 2.66(t, 2H), 2.52(m, 4H), 1.81(m, 2H), 1.22(t, 3H), 1·00(t， 3H); LC-MS: 352(M+1)。 步專3 b. 4-(灯 〜(乙基）胺基）T酸乙 酯（化合物404-32) 標題化合物404-32使用類似於針對化合物403-31 (實 施例2)敘述之程序，從403-32以產率52.5 %製備。4 NMR(CDCla) 5 7.658(d, 2H),6.656(d, 2H), 4.109(m, 2H),3469(m, 2H), 2.545(t, 6H), 2.326(t, 2H), 1.816(m, 2H), 1.200(t, 3H)，1.001(t， 3H); LC-MS: 322(M+1)。 步驟3c. 4-胺基-N-(2-(乙基（4-(羥基胺基）-4-侧氧基丁 基）胺基）乙基）苄醯胺（化合物32) 標題化合物32使用類似於針對化合物31(實施例2) 敘述之程序，從404-32以產率63. 3 %製備。4 NMR(甲醇 -ώ) 5 7.61(d, 2H), 6.67(d, 2H), 3. 53(t, 3H), 2. 85(m, 6H), 2.18(t, 2H), 1.89(m, 2H), 1. 16(t, 3H); LC-MS: 309(M+1)。 實施例4:製備N-羥基-5-(乙基（2-(4_胺基苄醯胺）-乙基） 胺基）-5-側氧基戊醯胺（化合物35) 步驟4a. #-(2-(乙基胺基）乙基）-4-硝基苄醯胺（化合物 402) 對N-乙基乙二胺（13.2 g, 160 mmol)及三乙胺（32 g, 320 mmol )於二乙醚（200 mL)之混合物，於0°C滴加4-硝基 1150—9131-PF;Kai 285 200829575 笨曱醢基氯901(15 g，81·1 mmol)於二乙S|(800 mL)之溶 液。接著將該混合物於此溫度攪拌1 5分鐘。將反應混合物 過渡’並將此濾餅懸浮於水（4〇〇 mL)，添加1 〇%鹽酸以調 整PH = 3。將得到之酸化混合物以乙酸乙酯（8〇 mLx3)及15% N aQ H ^ ^ ? ^ ^ ^ ^ 以乙酸乙酯（80 mLx3)萃取並清洗，將合併之有機層以無水 Na2S〇4乾燥，濃縮以得到化合物4〇2(7.5g，39%)白色固 # 體。1H NMR(CDC13) 5 8. 28(d，2H)，7· 95(d，2H)，6. 96(br， 1H), 3.53(t, 2H), 2.89(t, 2H), 2. 69(q, 2H), 1.13(t, 2H) 。 LC-MS: 238(M+1)。 步驟4b·甲基-5-(乙基（2-(4-硝基苄醯胺）乙基）胺 基）-5-侧氧基戊酸酯（化合物4〇5 —35) ...............................-' '…^，-——-~———...——— …― — —’——'— 對於5-甲氧基-5-侧氧基戊酸（〇·9 g，6 _〇1)於 CH2C12(15 mL)之溶液，滴加草醯氣（〇·93 g，7 2 _〇1)， 然後添加1滴DMF於此混合物作為催化劑。將該混合物於 ( 室溫擾拌1.5小時，然後減壓濃縮直到多餘的草醯氯完全 移除。將得到之甲基—5-氯-5-側氧基戊酸酯於ch2C 12(5 mL) 之溶液，於室溫滴加至化合物4〇2(〇.72 g，3 mmol)及三 乙胺（0.61 g，6mmol)於CH2Cl2(l〇 mL)之溶液。將該混合 物於室溫攪拌整夜，以水清洗，以無水Na2S〇4乾燥並濃縮。 將粗製產物以閃式管柱層析（5 〇 %乙酸乙酯/石油）分離，以 得到 0· 74 g of 405-35 白色固體· j NMR(CDC13) 5 8. 28(d， 2H), 8.01(d, 2H), 3. 65(m3 7H), 3.39(q, 2H), 2. 43(t, 2H), 2.38(t, 2H), 1.95(m, 2H), 1.23(t, 3H); LC-MS： 1150-9131-PF;Kai 286 200829575 366(M+1) 〇 步驟4c.甲基-5-(乙基（2_(4-胺基苄醯胺）乙基）胺 基）_5 —侧氧基戊酸酯（化合物406-35) 於包含化合物 405-35(0.74g，2mmol)、鐵粉（1.12g， 20 mmol)、曱醇ς15 mL)及水以 鹽酸。將得到的混合物回流3 h，然後冷卻至室溫並過濾。 將該濾、液濃縮並將殘渣以矽膠管柱層析過濾（乙酸乙酯）以 f 得到 40 6-35 黏液（〇· 56g、產率 83 %)。4 NMR (曱醇-A) 5 ^.99(d, 1H), 7.90(d, 1H), 3. 74(s, 3H), 3. 67(d, 4H), 3-62(q, 2H), 2.45(m, 2H), 2.21(m, 2H), 1.91(m, 2H), 1·19(m, 3H); LC-MS: 336(M+1)。 步驟4d· N-羥基-5-(乙基（2-(4-胺基苄醯胺）乙基）胺 一~....—-一一一―—一—„—„—— .…——... 一_——.———— _————————.................——…— 基）-5-侧氧基戊醯胺（化合物35) 於含化合物406-35( 1 21 mg, 0.36 mmol)之燒瓶，添 加新鮮的羥基胺（2. 16 mmol)於曱醇（1. 2 mL)之溶液。將該 (混合物攪拌5分鐘然後使用經甲醇稀釋之濃鹽酸調整為PH 8。將粗製產物以HPLC精製以得到 40 mg化合物35. 4 NMRCDMSO-i/e) 5 10.23(s, 1H), 8. 62(s, 1H), 8.07-8.19(m, 1H), 7.52(m, 2H), 5.59(d, 2H), 3.21-3.51(m, 6H), 2.27(m, 2H), 1.95(m, 2H), 1.70(m, 2H), 0. 99-1. 08(m, 3H); LC-MS: 337(M+1)。 實施例5:合成N1-(2-(4-胺基苄醯胺）乙基乙基-N4-羥基琥珀醯胺（化合物34) .步驟5a. 4-(乙基（2-(4-硝基苄醯胺）乙基）胺基）-4-側氧 1150-9131-PF;Kai 287 200829575 基丁酸甲酯（化合物4〇5-34) 標題化合物405-34淡黃色固體係從902及4-(甲基過 氧基側氧基丁酸，使用類似於針對化合物405-35(實 施例4)敘述之程序製備，產率77 %。iH NMR(CDCl3) 5 8. 26(d， 241) , 7 v 9^^^^ ^3 , 644st ^3H^T 3 . 6 5 (m, 3.. 48 (^q., 2H)， 2.68(s， 4H), 1.25(t， 3H); LC-MS: 352(M+1)。 步驟5b·曱基4-( (2-（4-胺基苄醯胺）乙基）（乙基）胺 基）-4-側氧基丁酸酯（化合物403-34) 標題化合物406-34白色黏液係從405-34使用類似於 針對化合物405-35(實施例4)敘述之程序製備。1H NMR(曱 醇-A) 5 7.58(d，2Η)，6.55(d, 2Η)，3.69(s，3Η)， 3.58(m, 4H), 3. 46(q, 2H), 2.70(t, 4H), 1.19(m, 3H); ———— ——一————————-一一-————一——..-.————————,————.—— —,._ LC-MS: 322CM+1)。 步驟5c· ^-(2-(4-胺基苄醯胺）乙基乙基-N4-經基琥 珀醯胺（化合物34) 標題化合物3 4白色粉末係從4 0 6 - 3 4使用類似於針對 化合物35(實施例4)敘述之程'序製備。ιΗ 5 10.34(d, 1H), 8. 65(d, 1H), 8. 05(m, 1H), 7. 53(m, 2H), 6 · 5 9 (m，2 H)，5 · 5 8 (d，2 H)，3 · 21 - 3 · 4 8 (m，6 H )，2 · 4 9 ( m， 2H)， 2.20(m’ 2H)， 0.97-1.13(m， 3H); LC-MS: 323(M+1)。 實施例6:製備1^-(2-(4-胺基苄醯胺）乙基）一 Ni—乙基—N6 — 羥基己二醯胺（化合物36) 步驟6a· 6-（乙基（2-(4-硝基苄醯胺）乙基）胺基）-6-側氧 基己酸甲酯（化合物405- 36) 1150-9131-PF/Kai 288 200829575 標題化合物4 0 5 - 3 6白色晶體係從9 0 2使用類似於針對 化合物405-35(實施例4)敘述之程序製備，產率81%. 4 NMRCCDCh) 58.26(d, 2H), 7. 98(d, 2H), 3. 65(s, 3H), 3.64(m, 4H), 3. 47(q, 2H), 2.35(m, 4H), 1.66(m, 4H), 1. .2 4 41, 3 H) ; LC-MS.: 3 8 0 (M+1) ° 步驟6b· 6-((2-(4-胺基苄醯胺）乙基）（乙基）胺基）-6-側 氧基己酸甲酯（化合物406-36) 標題化合物40 6-36白色黏液係從40 5-36使用類似於 針對化合物405-35(實施例4)敘述之程序製備。1H NMR(曱 醇-A) 5 7.67(d，2Η), 6.58(d, 2Η)，3.63(s，3Η), 3.61(m, 4H), 3.46(q, 2H), 2.35(m, 2H), 2.12(m, 2H), 1.69(m，4H)，1·2〇α, 3H); LC-MS: 350(M+1)。 .,.., —Λ—- 、—〜，，+ 一 步驟6c. N1-(2-(4-胺基苄醯胺）乙基hN1-乙基-N6-羥基己 二醯胺（化合物36) 標題化合物36白色粉末係從40 6-36使用類似於針對 | 化合物35(實施例4)敘述之程序製備。1H NMR(DMSO-A) 5 8.20(m, 1H), 7.55(m, 2H), 6.53(m, 2H), 5. 58(d, 2H), 3.25-3.48(ra, 6H), 2.26(m, 2H), 1.88(m, 2H), 1.45(m, 2H), 0.98-l.ll(m，3H); LC-MS: 35KM+1)。 實施例7:製備N-羥基-3-((2-(4-胺基苄醯胺）-乙基）（乙 基）胺基）-3-側氧基丙醯胺（化合物37) 步驟7a· 3-(乙基（2-(4-硝基苄醯胺）乙基）胺基）-3-侧氧 基丙酸甲酯（化合物405-37) 標題化合物405-37黃色固體係從902及3-甲氧基-3- 1150-9131-PF;Kai 289 200829575 側氧基丙酸使用類似於針對化合物405-35(實施例4)敘 述之程序製備，產率 80%。4 NMR(CDC13) 58.27(d，2H)， 8.〇〇(d, 2H), 4.15(s, 3H), 3.69(s, 4H), 3.51(s, 2H), 3.45(q，2H)，1·23(ΐ，3H); LOMS: 338(M+1)。 步驟: 基）_3-側氧基丙酸酯（化合物4〇6_37) 標題化合物40 6-3 7白色黏液係從905-37使用類似於 針對化合物406-35(實施例4)敘述之程序製備。1η匪R(甲 醇 -乂）3 7.57(d，2Η)，6.52(d，2Η)，3.89(s，3Η)， 3.72(d， 4H)， 3. 54(s, 2H), 1. 20(m, 3H); LC-MS: 308CM+1)。 步驟7c. N-羥基-3-((2-(4-胺基苄醯胺）乙基）（乙基）胺 基）_3-侧氧基丙醯胺（化合物π) 標題化合物37白色粉末係從4〇6_37使用類似於針對 化合物35(實施例4)敘述之程序製備。1 nmr(dms〇-a) ( 5 10. 51(s, 1H), 8.89(s, 1H), 8.11(m, 1H), 7. 53(d, 2H) 6.52(m, 2H), 5. 59(d, 2H), 3.27-3.51(m, 6H), 3. 2H), 0·99-1.14(m’ 3H); LC-MS: 3〇9(m+1)。 生物學試驗： 如同前述，本發明所定義的衍生物，具有抗增生活性。 此等性質可例如使用一種以上下列程序評估： (a)—體外（以試驗，決定受測化合物抑制hmc酵 素活性之能力 HDAC抑制劑使用 HDAC螢光測量試驗套組 1150-9131-PF/Kai 290 200829575 (AK-50 0，B iomol、Plymouth Meeting ^ PA)篩選。可將受气 化合物溶於二曱基亞颯（DMSO)，以得到20 mM工作原濃 度。螢光使用WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad 繪圖’並且表用&型-(si柳〇从 合度演算法，計算IC50。
各試驗設定如下：將所有的套組成分解凍，於使用前保 持在冰上。將HeLa核萃取物以1:29稀釋於試驗緩衝液（5〇 mM Tris/Cl ^ PH 8.0, 137 mM NaCl, 2.7 mM KC1, 1 mM
MgC12)。製備Trichostatin A(TSA,正控制組）及受測化 合物於試驗緩衝液（5x最終濃度）之稀釋物。將Fiuor de
LysTM基稀釋於試驗緩衝液成loo uM(50倍=2x最終）。 —一-〜——一 _〜_ —— 將HUOr de LysTMi 丨試驗緩
衝液）於冷試驗緩衝液稀釋2 0倍。第二，將〇 · 2 mM
Trichostatin A 100-倍稀釋於ιχ顯影劑（例1〇// i於j ml;最終Trichostatin A濃度於lx顯影劑=2/zM;添加 HD AC/艾貝反應後之最終濃度=1 # μ )。添加試驗缓衝液、經 稀釋trichostatin Α或受測抑制劑，至微滴定盤之適當的 井。添加經稀釋之HeLa萃取物或其他HDAC：樣本，至所有 井，除了負控制組。使經稀釋之Fluor de LysTM受質及樣 本在微滴定盤中平衡至試驗溫度（例如25或37t：)。藉由 添加經稀釋受質（25/ζ υ至各井並充份混合，以起始化hdac 反應。使HDAC反應進行1小時，接著藉由添加Flu〇r de LysTM顯影劑（50/ζ υ使反應停止。將平盤在室溫（25t：) 1150-9131-PF；Kai 291 200829575 溫月1 0-15为4里。在能於波長3 5 0-38 0 nm之範圍激發的微 滴定盤讀取螢光儀，讀取樣本，並偵測在44〇 —46〇 nm發射 之光。 (b)—體外（//7 試驗，決定受測化合物抑制MMT活 今生之力 DNMT抑制劑使用T基化專一性pcr(msp)篩選。受測化 合物被溶於二甲基亞颯（DMS0)以得到20 mM工作原濃度。 將HT-2 9結腸腺癌細胞播種於6井盤，並以受測化合物或 2.5#M 5-Aza-2’-去氧胞苷處理72小時，每日更換培養 基。於72小時後，使用非有機DNA萃取套組（s452〇,
Chemicon International， Temecula， CA)從細胞收集 DNA。使用 CpCenome DNA Modification Ki*t(S7820、 一 „ ———,_^ —…
Chenucon International Temecula, CA)，進行亞ΐ酸化 學修飾。於一螺旋蓋1· 5一2· 〇 mL微離心管中，添加7. 〇 # l 3M NaOH 至 1. 0/z g DNA 於 l〇〇# L 水（10 ng//z L)並混合。 將DNA於50°C溫育l〇分鐘。將55〇 # L新鮮製備之DNA 修飾試劑I添加並渦流混合。將混合物於5〇〇c於加熱恆溫 器或水浴溫育4-1 6小時，並防照光。將DNA以劇烈渦流混 合再懸浮於DNA修飾試劑π I。將該懸浮液倒入並倒出1 m i 塑膠製微滴頭1 Οχ以將任何殘留的結塊分散。將5 # l充 分懸浮之DNA修飾試劑111添加於管中之DMA溶液。添加 750 /z L DNA修飾試劑11，並短暫地混合。將混合物於室溫 溫育5-10分鐘。將試管於5, 000 X g旋轉10秒以使DNa修 飾藥劑III粒化。丟棄上清。添加L 〇 mL70% EtOH，渦流 1150-9131-PF;Kai 292 200829575 混合，於5, 000 X g離心1〇秒， 並丟棄上清。將此步驟 重覆共…於第3次清洗後，移除上清，將試管於高速 2離心2分鐘，將殘餘的上清移除。對適當樣本添加5〇4 20 mM NaOH/90% EtOH 溶液。脾 ^ … ^ 液將此試管短時間地渦流混合，
-以蘇九粒屢II〜^並复室溫溫京〜5分1。'農試—管於u 〇[X g旋轉ίο秒、以將所有内容物移到試管的尖端。添加γ〇 mL90% EtGH並渦流混合以清洗丸粒。將試管再次旋轉，並 / 移除上清。再重覆此步驟i :欠。於第2次清洗的上清移除 後，將此樣本於高速離心3分鐘。移除其餘的上清，並使 此試管於室溫該燥10-20分鐘。將此於5〇_6〇。(：溫育樣本 15分鐘以洗提DNA，於高速離心2-3分鐘，並移到一新的 5式驗。MSP 使用 CpG IZ pi 6 Ampl ificaticm KitUY800、 " ———-.一〜-一—一 一 一 …·” ^ 一
Chemicon International, Temecula^A^ —其 pi 6基中之甲基化及非甲基化促進子區域。甲基化及非甲 基化DNA ’係以PCR產物之溴化乙錠染色凝膠之凝膠電泳 圖谱灰度知描分析決定。 以下表3-B列舉本發明代表化合物及其活性於jjDAC 及DNMT分析。於此等分析，IC5。使用以下分級：ι>ι 〇 # m， 10// Μ- II- 1 // Μ, 1 // M2 III2 0· 1 // Μ 且 ΐν<〇· 1 # μ 〇 表3 -Β
化合物編號 HDAC 25 I 28 I 29 III 30 II 31 I 1150-9131-PF;Kai 293 200829575
34 I 36 II 第4部分：
表 4-A …
1150-9131-PF;Kai 294 200829575
f I
9 HO-N 10 11 HO-N ! λ~^ g N 12 HV^ 13 HO-N 〇>^\ f 〈Ν_Λ) ΗΝ^γ^ 14 N-OH '0 ! --— 行―-——ΗΝ^γ^ - 15 16 Ν-ΟΗ 17 ΗΝ 人 οχ 卜/飞=J^j人 Η〇-κ 18 ΗΝ^ΊΓ^1 ho ；-〇i^N u «Λ 1150-9131-PF;Kai 295 200829575 f 19 HN 人 0卜厂^ Λ==/ K人 ΗΟ-Ν 20 ΗΝ^Τ^1 ηοΗ 21 ΗΟ-Ν 22 HO 0 23 ΗΝ^γ^ΐ HK^~9iN υ 24 η1κ^?6ν。 25 ΗΟ 0 Ηΐ^Τ^1 26 ηο-Η 27 Η ζ ΗΟ-Ν X 28 HO—U Hf^n 29 η〇βΗΓ 1150-9131-PF;Kai 296 200829575
1150-9131-PF;Kai 297 200829575
1150-9131-PF;Kai 298 200829575
1150-9131-PF;Kai 299 200829575 66 ?Hj ΗΝ^Ύ^ι HO-口 fH3 67 HO 0 一一 L，'..-…一一 一…一.-.〜一 HO O «tx 68 69
Scheme 1
NC
EtOH, HCI
HCI °\^ K2C03
NH4CI, EtOH 103 102
300 1150-9131-PF;Kai 200829575
h2n
Scheme 2 /^nh2 h2n 〇
202
112
nh2oh HO、 1150-9131-PF;Kai 301 200829575
Scheme 4
1150-9131-PF;Kai 302 200829575
Scheme 5
Scheme 6
1150-9131-PF;Kai 303 200829575
Scheme 7
1150-9131-PF；Kai 304 200829575
Scheme 8
1150-9131-PF;Kai 305 200829575
Scheme 10
1101
1103
1150-9131-PF;Kai 306 200829575
Scheme 12
實施例1:製備經基_2_(4_(4_(1_苯基乙基胺 基吡咯并[2,3 —d]嘧啶_6_基）苯氧基）乙醯胺（化合物 17) 步驟la. 2-胺基-5-U〜甲氧基苯基吡咯_3_羧酸乙酯 (化合物402) 對於 EtONa(4.08 g，60 mm〇1)於 Et〇H(6〇 mL)之溶液 於代於氮氣中添加化含物㈣4 (咖 合物攪拌20分鐘及添加2 —溴-4,—甲基氧基—苯乙酮。於 至/孤授祥整夜後’將藏合物濃縮將殘渣放入乙酸乙酯，以 水漢鹽、水清洗、乾燥並濃縮以得到殘渣，以管柱層析精 製以仔到產物402固體（5· 2 g，67 %產率）。1{{ NMR(MS〇 —de) ^1〇.62(s, lH), 7.4l(d, J = 6.6Hz, 2H), 6. 88(d, J = 6. 6 Hz, 2H), 6.30(d, J = 3. 0 Hz, 1H), 5. 59(s, 2H), 4.13(q, J = 6.9Hz, 2H), 3.74(s, 3H), 1.24(t, J = 7. 2Hz, 3 H) 〇 LC-MS: 260(M+1)。 步驟lb. 6 -（4-甲氧基苯基）—7#一吼口各并[2,3_〇η 口密咬_4 一醇 (化合物 403) 將化合物402(4· 7 g, 18 mmol )、甲醯胺（30 mL)、甲 1150-9l31-PF;Kai 307 200829575 酸（7 · 0 mL)及N，N-二甲基甲醯胺（i 5 mL)之混合物加熱至 1 5 0 °C整夜。將該混合物冷卻至室溫並過濾，依序以 i-PrOH、Εΐ2〇清洗以得到產物403固體（3· 7 g，86 %產率）。 !H NMR(DMSO-de) 5 12.22(s, 1H), 11.81(s, 1H), 7. 84(s, I H ^ r ^ ^ J- 6 r ^ 6 τ 9 8 ( dr- 2 H ) v 6.29(d, J = 2.4Hz，1H)，3.78(s，3H)〇LC-MS:241(M+l)。 步驟lc. 4-氯-6-（4-甲氧基苯基）—7#—吡咯并[2, 嘧啶 (化合物404) 對含化合物403(4.0 g，16.7 mmol)之燒瓶，添加 P0C13(32 mL)並將該混合物加熱至回流2小時。將混合物 冷卻並倒入冰水中、添加NaOH至pH 7。將水層以乙酸乙 酯卒取（250 mLx4)。將合併的有機層清洗以濃鹽水、乾燥 並濃縮以得到產物404黃色固體（2·2 g，50 %產率）。j NMR(DMSO-de) δ 12. 93(s, 1H), 8. 55(s, 1H), 7. 98(d, J = 6.9Hz, 2H), 7.07(d, J = 6. 9 Hz, 2H), 6. 98(d, J = 2. 1Hz, 1H)， 3.82(s, 3H)°LC-MS: 260(M+1)。 步驟Id. (R)-6-(4-甲氧基苯基）-#一（1—苯基乙基比咯 并[2,3-(1]嘴唆-4-胺（化合物405) 將化合物404及（R) — ( + ) —aipha 一曱基苄基胺（2.23 g， 2· 5當量）之混合物添加至n-Bu〇H並將得到的混合物加熱 至145 C整仪。然後另一部分（r)一（ + ) —alpha-甲基苄基胺 (440 mg, 0· 5當量）添加至該反應混合物。將混合物冷卻、 過濾，以Et2〇清洗以得到產物405黃色固體（1 · § g，7〇 % 產率 hlNMiKDMSO-d〇 3 ll.88(s，1H)，8.01(s, 1H)， 1150-9131-PF;Kai 308 200829575 7.68- 7.71(m, 3H), 7.39-7.42(m, 2H), 7.25-7.30(m, 2H), 7. 17-7. 19(m, 1H), 6. 93-7. 01 (m, 2H), 5.49-5.51(m, 1H), 3. 77(s，3H), 1.51(d，J = 6·9 Hz，3H)。LC-MS: 345(M+1)。 步驟le. (R)-4-（4-(1-苯基乙基胺基）-7#-池咯并[2, 3-d] 對化合物 405 ( 1.1 3 g，3.0 mmol)於二氯曱烷（80 mL) 之溶液，於0°C於氮氣中花1小時滴加BBrs(3. 0 rnL)於二 氣曱烷（100 mL)之溶液。於添加完成後，使該混合物回溫 % 至室溫並攪拌另外的5小時。然後添加20 mL水。將水層 以乙酸乙酯萃取（100 mLx3)，以濃鹽水清洗，濃縮以得到 產物 406 固體（50 0 mg, 51 %產率）。沱 NMR(DMS0-d6) 5 13. 09(s, 1Ή), 9. 76(br, 1H), 8. 38(d, J = 3. 6 Hz, IH), .. …- - ............-…-… ——-.…- —-…- —…— 一......._ - —_ … ........…_“·— 一、. 7.68- 7· 73(m，3H), 7.55-7.57(m，2H)，7.43-7· 48(m，2H), 7.34-7.39(m, 1H), 6. 94-6. 96(m, 2H), 5.49-5.50 (m, 1H), 1.73(d，J = 6.9Hz，3HhLC-MS: 331(M+1)。 l 步驟If· 00-乙基2-(4 -（4-(1-苯基乙基胺基）-7万-吼咯并 [2, 3-d]嘧啶-6-基）苯氧基）乙酸酯（化合物407-1 7) 對化合物 406( 1 00 mg, 0.3 mmol)及 K2C〇3(70 mg, 0.5 mmol)於二甲基甲醯胺（1·〇 mL)之混合物，添加2-溴乙酸 乙酯（50 mg，0· 3 mmol)並將該混合物於室溫攪拌2〇小時。 添加5 ml水並將該混合物以乙酸乙酯萃取（25 mLx4)，乾 燥並濃縮以得到一殘渣，以管柱層析精製以得到產物 407-1 7 白色固體（40 mg, 32 %產率）。4 NMR(DMS0-d6) δ 11. 89(s, 1H)， 8.01(s， 1H), 7. 67-7. 72(m, 3H), 1150-9131-PF/Kai 309 200829575 7· 39-7· 42(d， J = 8. 1Hz, 2H), 7· 25-7. 31(m， 2Η), 7. 17-7. 20(m, 1H), 6. 94-7. 00(m, 2H), 5. 46~5. 48(m, 1H), 4.80(s, 2H), 4.16(q, J = 6. 9 Hz, 2H), 1.51(d, J = 6. 9 Hz, 3H)， 1·20(ΐ， J=7.2Hz, 3H)°LC-MS: 417(M+1)。 并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苯氧基）乙醯胺（化合物17) 製備羥基胺於甲醇之溶液：羥基胺氯化氫（4· 67g，67 mmol)溶解於曱醇（24 mL)以得到溶液A。將氫氧化鉀（5. 61 g，100 mmol)溶解於甲醇（14 mL)以得到溶液b。將溶液a 〉々卻至0 C ’並將》谷液B滴加至溶液A中。將該混合物於 0QC攪拌30分鐘，並於低溫擺置一段時間。分離沉澱以得 到經基胺溶於曱醇之溶液。 對一含化合物η35mg； mmol)^^, 添加上述羥基胺溶於甲醇之溶液（2· 0 mL)。將該混合物於 室溫攪拌30分鐘。然後使用濃HC1調整為pH 7。將混合 物濃縮以得到一殘渣，以管柱層析精製以得到產物丨7固體 (25 1^，71%產率）。111關1?〇%30-(16) (5 11.91(3，111) 8· 〇3(s，1H)，7· 69-7· 73(m，3H), 7· 41-7. 44(m，2H)， 7. 27-7. 32(m, 2H), 7. 1 9-7. 21 (m, 1H), 6. 96~7. 04(ra, 2H), 6.48-6.50(m，1H), 4.50(s, 2H), 1.53(d, J = 6.9Hz，3H)。 LC-MS:404(M+l)〇Mp:116.8-126.8。 實施例2: (R)-#-羥基-6-(4-(4-( 1-苯基乙基胺基）-7#_比 咯并[2,3-d]嘧啶-6-基）苯氧基）己醯胺（化合物21) 步驟2a· 〇〇-乙基-6-（4-(4-(1-苯基乙基胺基）_7H — n比咯并 1150-9131-PF;Kai 310 200829575 [2, 3-d>密咬-6-基）苯氧基）己酸酯（化合物4〇7 —21) 對化合物 406(330 mg，1. 0 _〇1)及 K2C〇3(21 0 mg，1 · 5 mm〇1)於二甲基甲醯胺（2· 0 mL)之混合物，添加6-溴己酸 乙醋（223 mg，1·〇 _〇1)並將該混合物於40°C攪拌達20 mLx4)、乾燥並》辰縮以得到一殘潰，以管柱層析精製以得到 產物 40 7-21 白色固體（250 mg, 53 °/◦產率）NMR(DMSO-d6) ^H-87(s, lH), 8. 01(s, lH), 7. 66-7. 69(m, 3H), 7.39-7.42(m，2H), 7·25-7.30(m，2H)，7·17-7.19(m, 1H)， 6.92~6.99(m, 2H) 〇 5. 46-^5. 48(m, 1H), 3. 95-4. 07(m, 4H), 2.29(t, J = 7.2Hz, 2H), 1. 68-1. 73(m, 2H), 1.38-1.60 (m, 8H)， 1·ΐ5(ΐ， j=7.2Hz, 3H)°LC-MS: 473(M+1)。 一— — _ 步驟2b. (R)-#-羥基-6-(4 —(4-( i —苯基乙基胺基）-吡咯 并[2, 3-d]σ密咬-6-基）苯氧基）己醯胺（化合物21) 製備羥基胺於甲醇之溶液：將羥基胺氯化氳（4. 67g， 67 mmol)溶解於甲醇（24 mL)以得到溶液a。將氫氧化钾 (5· 61 g，1〇〇 _〇ι)溶解於甲醇（14 ^乙）以得到溶液b。將 溶液A冷卻至並將溶液b滴加至溶液a中。將該混合 物於0 C攪拌3 0分鐘，並於低溫擺置一段時間。分離沉殿 以得到羥基胺溶於甲醇之溶液。 對含化合物407-21(220 mg, 〇·466關〇1)之燒瓶， 添加上述經基胺溶於甲醇之溶液（3· 〇 mL)。將該混合物於 至/凰授拌達2小時。然後使用濃HC1調整為pH 7。將混合 物濃縮以得到一殘渣，以管柱層析精製以得到產物21白色 1150一9工31-PF;Kai 311 200829575 固體（13〇11^，61%產率）。111匪吖〇^130-(16)(5 11.87(3，11〇， 10. 32(s，1H)，8.64(s，1H)，8.00(s，1H)，7.66-7. 69(m， 3H), 7. 39-7. 41(m, 2H), 7.25-7.30(m, 2H), 7.16-7.19(m, 1H)， 6· 92-6· 99(m, 2H)。5· 46-5· 48(m， 1H), 3. 97(t, J~6v 6 -2H)2H), 1. 6 7-1. 72(m, 2H), 1.20-1·39(πι，8H)°LC-MS: 460 (M+1)。 貝施例3:(R)-#-經基一 7 一（4—(4一（i 一苯基乙基胺基）一 7#一 口比 略并[2, 3-d>密啶-6-基）苯氧基）庚醯胺（化合物22) 步驟3a. (R)-乙基-7-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）-。比咯并 [2, 3-d]嘧啶-6-基）苯氧基）庚酸酯（化合物4〇7 —22) 對化合物 406(330 mg，1.0 mmol)及 K2C〇3(21〇mg，1.5 mmo 1)於一甲基甲醯胺（2· 〇 mL)之混合物，添加7-溴庚酸 乙酉旨（237 rag，1 · 〇 _〇 1)並將該混合物4〇 °C擾拌於達20 小時。添加5 m 1水並將該混合物以乙酸乙酯萃取（2 5 mLx4)、乾燥並濃縮以得到一殘渔，以管柱層析精製以得到 產物 40 7-22 白色固體（150 mg, 31 %產率）。j NMR(DMS0-d6) (5 11.87(s, 1H), 8.01(3, 1H), 7. 66-7. 69(m, 3H), 7.41(d, 1 = 7.5 Hz, 2H), 7.25-7.30(m, 2H), 7.17-7.19(m, 1H), 6. 92-6. 99(in, 2H), 5. 46-5. 48(m, 1H), 3. 95-4. 06(m, 4H), 2·24-2·29(t， J = 7.2Hz, 2H), 1. 67-1. 71(m， 2H), 1.3 卜 1·55(πι， 10H), 1. 15(t, J = 7. 2Hz, 3H)。LC-MS: 487(M+1)。 步驟3b· (R)-#-羥基-7-（4-(4-( 1 -苯基乙基胺基）—7#-。比咯 并[2, 3-d],啶-6-基）苯氧基）庚醢胺（化合物22) 1150-9131-PF;Kai 312 200829575 製備羥基胺於曱醇之溶液：將羥基胺氣化氫（4· 67g， 67 mmol)溶解於曱醇（24 mL)以得到溶液a。將氫氧化卸 (5. 61 g，100 mmol)溶解於曱醇（14 mL)以得到溶液b。將 溶液A冷卻至0°C並將溶液B滴加至溶液a中。將該混合 得到羥基胺溶於甲醇之溶液。 對一含化合物407-22( 1 20 mg，〇·247随〇1)之燒瓶， 添加上述羥基胺溶於甲醇之溶液（3· 〇 mL)。將該混合物於 室溫攪拌達2小時。然後使用濃HC1調整為PH 7。將混合 物濃縮以得到一殘渣，以管柱層析精製以得到產物22白色 固體（9〇111容，77%產率）。4麗8(隨80-(16)(5 11.87(3，11〇 10.30(s, 1H), 8. 62(5, 1H), 8. 00(s, 1Ή), 7. 66-7. 69 (m, —-—— ...··— 一-、·一-—.— 一〜.— 3H), 7. 39~7. 42(m, 2H), 7. 25-7. 30(m, 2H), 7.16-7.19(m, 1H)，6.91-6·99(πι，2H)。5.48-5·49(πι，1H)，3.97(t， J = 6.6Hz，2H)，1.93(t，J = 6.9Hz，2H)，1·67- 1.72(m，2H)， 1.20-1.51(m， 10H)°LC-MS: 474(M+1)。 實施例羥基-2-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）—7参吼 咯并[2, 3-¢/]嘧啶-6-基）苄基胺基）乙醯胺（化合物1) 步驟4a·乙基3-胺基-3-亞胺基丙酸酯氣化氫（化合物 104) 對無水乙醇（460 g，10.0 mol)於-30 °C打入無水氫氯 酸，直到得到總重量821gHCl/EtOH溶液（44%(w/w)。 將乙基氰基乙酸酯（452 g)添加至此HCl/EtOH溶液 (292 g)，將該混合物冷卻至冰-鹽浴溫並攪拌1小時，使 1150-9131-PF;Kai 313 200829575 反應物回溫至室溫並靜置整夜。得到白色沉澱1 0 2，將此 混合物直接用在次一步驟。 將得到的混合物添加至醚及K2C〇3(828 g)於水（2500 mL) 溶液之混合物。將醚層分離、以NazS〇4乾燥並過濾。將該 將化合物103(445 g)及氯化銨（149.5 g)於乙醇（1500 rnL)之溶液，加熱至回流8小時。將固體分離並將濾液濃縮。 將殘渣以醚以及丙酮清洗以得到產物1 04(220 g，3步驟魄 i " 產率 33%>LCMS·· 131 [M+l]+, WNMIKDMSO-A): 5 1.22(t， /-6.9 Hz, 3H), 3.68(s, 2H), 4.16(q, /-6. 9 Hz, 2H), 9· 04(s, 2H)，9· 32(s，2H)。 步驟4b. 4-(2-溴乙醯基)苯甲酸甲酯（化合物ι 〇β) ""一 --—.· — — ...... — * …‘— .·.··— 將4-乙醯基苯曱酸曱酯105(8.91 g，50 mmol)懸浮 於乙酸（8 0 mL )並將該混合物攪拌直到成為澄清溶液，然後 將、/臭（8· 39 g，52 mmol )滴加至該混合物，將該混合物於室 ( 溫檀拌直到強橘色消失。將該溶液冷卻至並收集固體， 並以50%甲醇水溶液清洗、乾燥以得到標題化合物 106(9.9 g，77%): LCMS·· 257 [M + l] + ;沱匪R(CDC13): 5:3.96(s, 3H), 4.47(s, 2H), 8. 〇3(t, 1H), 8. 06(t, 1H), 8· 14(t, 1H), 8· 16(t，ih)。 步驟4c· 5-(4-(甲氧基羰基）苯基）—2 —胺基_丨#_吡咯_3_羧 酸乙酯（化合物1 0 7) 將鈉（1·38 g，60 mm〇i)添加至乙醇（15〇 並攪拌直 到納溶解。將反應物冷卻至〇t:，添加乙基2_脒基乙酸酯 314 1150-9131-PF;Kai 200829575 虱化虱（lO.Og，0.06m〇1)溶液並攪拌3〇分鐘。添加4—(2 — 漠乙醯基）苯甲酸甲酉旨106(7.71 g，0.03 mol)。將得到的 此合物於至溫攪拌達24小時。將該反應混合物濃縮，並將 殘邊以乙酸乙g旨溶解，過濾、，將濾液以水清洗。將水相以 乾燥並過濾。將該濾液濃縮並將殘渣以管柱層析過濾以得 到化合物 1 07(7.38 g，85.3%)。LCMS·· 289 [M+l] + ; 4 NMR(DMS0~^6) ： ^ 25(t, /=6.9 Hz, 3H), 3. 82(s, 3H), 4.14(q, >6.9 Hz, 2H), 5.81(s, 2H), 6.71(s, 1H), 7.61(d, /=8. 7 Hz, 2H), 7. 84(d, /-8. 7 Hz, 2H), 10.94(s, 1H) 〇 甲酯（化合物108) + 將 107(7· 0 g，24· 3 mmol)、甲酸（12 mL)及曱醯胺（50 mL)於DMF(24 mL)之混合物，於150°C加熱16小時。將該 反應混合物冷卻並以異丙醇稀釋，分離沉澱，以異丙醇、 己院清洗以得到標題化合物108(4. 1 g，62. 7%)。LCMS: 270 [M+l] + ; 'H NMRCDMSO-i/e) ： (5 2. 30(s, 3H), 6. 84(s, 1H), 7.19(d, /=8. 1Hz, 2H), 7. 70(d, /=8. 1Hz, 2H), 7. 84(s, 1H)， 11.80(s， 1H), 12·24(s， 1H)。 步驟4e. 4-(4-氯-7万-吡咯并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苯甲酸曱 酯（化合物1 〇 9) 將化合物108(4.1 g，15.2 mmol)及磷醯三氣（30 mL) 之混合物，加熱於回流3小時。將多餘的磷醯三氯減壓移 1150-9131-PF;Kai 315 200829575 除。將殘潰溶於乙酸乙S旨將有機層以NaHC〇3水溶液、濃鹽 水清洗、MgS〇4乾燥、過遽並蒸發以得到粗製產物1 〇 9 ( 5. 2 7 g)： LCMS: 288 [M+l] + ; NMR(DMS0-i/6) ； ^ 2. 34(s, 3H), 7.〇2(s, 1H), 7.31(d, /=8. 1Hz, 2H), 7.88(d, /-8.1Hz, 2H), -8. 55(s, 1H), 12. 94(s, 1H) ° 步驟4f· 4-(4-((-1-苯基乙基胺基）-7#-ϋ比π各并[2 嘧啶-6-基）苯曱酸曱酯（化合物11〇) 對化合物 109(8.4 g, 29.0 mmol)於正丁醇（i〇〇mi)之
C 懸洋液，添加U)-苯乙基胺（4.5 g, 37 mmol)。將該混合 物加熱回流整夜。將該反應混合物以冰浴冷卻，並分離沉 殿’以正丁醇及醚清洗、乾燥以得到標題化合物丨1 〇 ( 7. 7 g， Π.3%)： LCMS: 373 [M+l ] +； rH NMRCDMSO-^) ： 5 1.53(d, >6.9 Hz, 3H), 3：87(s, 3H), 5.5l(ra, IH), 7.20(d, 2Hz, 1H), 7.31(t, /=7. 2Hz, 3H), 7.42(d, /=7. 2Hz, 2H), 7.93(t, /=8.4 Hz, 3H), 8.00(d, /=8.4 Hz, 2H), 1; 8·〇9(s, 1H)，12. 20(s, 1H)。 步驟4g· (4-(4-(—苯基乙基胺基）— 7#—n比咯并[2, u] 嘧啶—6 一基）苯基）甲醇（化合物111) 對化合物 110(6. 15 g，16. 5 mmol)於無水 THF(400 mL) 之懸洋液，分次添加LiAlH4(1.88 g，0.0495 mol)。、將得 到的/吧合物加熱回流3 Q分鐘。將該混合物冷卻至室溫並添 加 Η2〇(1· 88 mL)接著添加 15% Na〇H(1· 88 址）及 η2〇(5· 64 水〉谷液。將沉殿過濾移除並將濾液濃縮。將殘渣懸浮於水 並收集沉殿、乾燥以得到標題化合物111(4· 28 g，75· 3%): 1150-9131-PF;Kai 316 200829575 LCMS: 345 [M+l] + ; !H NMR(DMS0~^6) ： 5 1.54(d, /=7. 2Hz, 3H), 4.53(d, /-6.0 Hz, 2H), 5. 20(t, >6.0 Hz, 1H), 5.50(m, 1H), 7.08(s, 1H), 7. 20(t, /=7.5 Hz, 1H), 7.30(t, /=7. 5 Hz, 2H), 7. 40(t, /=8. 1Hz, 4H), 7. 76(t, J 8. 4 Hz, 3H), 8.-05(s, 1H), 11. 99(s, 1H) ° 步驟4h· 6-(4-(氯曱基）苯基一（（们一;[—苯基乙基）-7#-吼咯并[2, 3-Θ]嘧啶-4-胺（化合物112) 對 S0C12(8· 85 g，74· 0 mmol)於甲苯（50 mL)之溶液， 於-l〇°C分次添加化合物ill。將該混合物回溫至0°c並攪 拌2小時。將反應混合物過濾並將固體以甲苯及醚清洗以 得到粗製產物。將粗製產物懸浮於水，並以飽和NaHC〇3水 溶液處理直到pH>7。將固體分離並以水清洗、乾燥以得到 標題化合物 112(1.8 g，67.0%)·· LCMS: 363 [Μ+ΙΓΓα NMR(DMS0-A):5 l.54(d，扣6.9 Hz，3H)，4 79(s，2η)， 5·50(πι， 1Η), 7. 14(s, 1Η), 7. 20(d, /=7. 2Hz, 1Η), 7.30(t, /-7. 2Hz, 2Η), 7. 42(d, /=6. 9 Hz, 2Η), 7.49(d, /=8. 4 Hz, 2H)7.78(d, /=7. 8 Hz, 2H), 7. 82(d, /=8. 4 Hz, 1H) 8·07(s, 1H), 12. 〇6(s， 1H)。 步驟4i.U)-乙基2-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）—7#—啦咯并 [2, 3-θ],唆-6-基）苄基胺基）乙酸酯（化合物ι13_υ 對 DMF(60 mL)， MeOH(30 mL)及 K〇H(448〇 mg， 8〇 匪ol)之混合物’添加乙基2 —胺基乙酸酯氯化氫（1·η & 8· 0 mmol)。將得到的混合物於室溫攪拌分鐘。將Me卵 於40 C減壓移除，並添加化合物1 1 2(724.0 mg，2.0 1150-9131-PF;Kai 317 200829575 mmo 1)。將得到的混合物於室溫攪拌整夜。將DMF減壓移除 並將殘渣懸浮於水。將得到的固體收集並乾燥以得到產物 113-1(285 mg， 33%)。 LCMS: 430 [Μ+1Γ。 步驟4j.(们-#-羥基-2-(4-(4-(卜苯基乙基胺基）—比咯 ~ -弁[2，3 - rf] 口街〇定-6 -基）卞基胺基—）乙，酿胺（化合物1) 將化合物 1 1 3-1 (285 mg, 〇·66 mmol)及 NH2〇H/MeOH(5 mL，8· 85 mmol)於室溫攪拌〇· 5小時。將該反應混合物以 AcOH中和並濃縮。將殘渣懸浮於水及分離得到之沉殿並乾 燥以得到粗製產物。將產物以製備性HPLC精製以得到化合 物 1 淡黃色固體（220 mg, 80%)。LCMS: 417 [M+1 ]+，】!{ NMRCDMSO-i/e) ： 5 1.52(d, /=6.3 Hz, 3H), 3. 02(s, 2H), 3.67(s, 2H), 5.47(m, ΓΗ), 7. 06(s, 1H), 7.17(t, /=6. 9 --- - — ：" — ’：..…— —：-.- ———— .…，
Hz, 1H), 7.28(m5 2H), 7.39(m, 4H), 7. 70(m, /=7. 8 Hz, 2H), 7.78(d, /-8.1Hz, 1H) 8. 03(s, 1H), 8.80(s, 1H), 10.41(s， 1H), 11.99(s, 1H)。 i , 實施例5 :製備（们-#一羥基-3-(4-(4-(1-苯基乙基胺 基）-7#-吼咯并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苄基胺基）_丙醯胺（化 合物2) 步驟5a.(Ti〇-乙基3-(4-(4-(卜苯基乙基胺基）—比咯并 [2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苄基胺基）丙酸酯（化合物113一2) 標題化合物113-2(190 mg， 53%)係從化合物 1 1 2(290.0 mg，〇.8 _〇1)及乙基3 —胺基-丙酸酯氯化氳 (368 mg，2· 4 mmol)，使用類似於針對化合物j丨3 — !(實施 例4)敘述之程序製備：[CMS·· 444[M+1]+。 1150-9131-PF;Kai 318 200829575 步驟5b.(y?)-yV-經基-3- (4-(4-(l -苯基乙基胺基）-7及-°比洛 并[2, 3-Θ]嘧啶_6-基）苄基胺基）-丙醯胺（化合物2) 標題化合物2淡黃色固體（45 mg，24%)係從化合物 113-2(190.0 mg， 0.43 mmol)及 NH2〇H/MeOH(2 mL， 3·43 ，mmol )暴落^猶 丄4實施例—4X敘述.之程康省 LCMS: 431 [Μ + 1]+, NMR(DMS0-^) : 5 1.52(d, /=6. 9 Hz, 3H), 2. 14(t, /-7. 2Hz, 2H), 2. 70(t, /=7. 2Hz, 2H), 3.69(s, 2H), 5.50(m, 1H), 7. 07(s, 1H), 7.19(t, >6.9 Hz, 1H), 7.30(t, /=7. 2Hz, 2H), 7.36(d, /=7. 8 Hz, 2H), 7.42(d, /-7.8 Hz, 2H), 7. 74(m, 3H), 8.05(s, 1H), 11·97(s, 1H)。 實施例6 : (經基-2-(4-(4-(4-(1 -苯基乙基胺基)-7#-σ比咯并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苄基）哌嗪-1-基）乙醯胺（化合 物11) 步驟6a· (Α)-#-（1-苯基乙基）-6-（4-（旅嗪-1-基曱基）苯 基）-7#-吡咯并[2, 3-θ]嘧啶-4-胺（化合物301) 將化合物 112 (〇· 1 g， _〇1)於DMF(20 mL)之混合物，於20°C攪拌1·5小時。將 溶劑於減壓下移除並將殘渣以水清洗、乾燥並以HPLC精製 以得到標題化合物301黃色固體（〇.1〇 g，87.8%): LCMS. 413 [M+l]+ 〇 步驟6b· (i〇 -乙基2-(4-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7#-η比 咯并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苄基）哌嗪-1 -基）乙酸酯（化合物 302-1 1 ) 1150-9131-PF;Kai 319 200829575 將化合物301 ( 0 · 2 5 g，0 · 61 mmo 1 )、2-漠、乙酸乙西旨 (0.11居，0.66 111111〇1)、三乙胺（0.25 8，2.44 111111〇1)於])1^(10 mL)之混合物，於2 5 - 3 0 °C攪;拌整夜。將溶劑減壓蒸發以得 到粗製殘渣302-1 1 (0. 30 g、LCMS: 499 [Μ+1Γ)其直接用 备次一'步.驟而不經進一步純化。 一..…-—... 步驟6c·(们一舲羥基—2一（4-(4-(4-（1-苯基乙基胺基）—7#- 。比17各并[2，3 - Θ]嘧。定-6 -基）苄基）派嗪-1 -基）乙醯胺（化合 物11) 對於經基胺溶於甲醇之溶液（4·〇 mL，7.1 mmol)添加 化合物302-11(0.30 g，0.62 mmol)。將該反應混合物於 25 C攪拌20分鐘。該反應以TLC監控。將該混合物以乙酸 中和並減壓濃縮。將殘渣以製備性HPLC過濾以得到標題化 合物]60—邺 ^ 486 [ΜΗΓΓ.....^ NMRCDMSO-^)： ^i.32(d, /=6.9 Hz, 3H), 2.43(m, 8H), 2.83(s, 2H), 3.44(s, 2H), 5.47(m, 1H), 7. 05(s, 1H), 7·19(ιη， 1H), 7. 29(m, 5H)， 7. 40(d, /=7. 2Hz, 3H), 7.71(d, /=8. 1Hz, 2H), 7. 76(d, /=8. 1Hz, 1H), 8. 02(s, 1H), 11. 96(s,1H)。 實施例7:(幻-於羥基-3_(4-(4-(4 — (1-苯基乙基胺基）—7#— ϋ比17各并[2, 3-J]嘧啶—β-基）苄基）哌嗪-1-基）丙醯胺（化合 物12) 步驟7a.U)-曱基3一（4-（4-（4-U-苯基乙基胺基）一7#-吼 11各并[2, 3-Θ]嘧啶—β-基）苄基）哌嗪-1-基）丙酸酯（化合物 302-12) 1150-9131-PF/Kai 320 200829575 標題化合物302-1 2(0.31 g)係從化合物301 (0.44 g， 1 · 07 mmol)、3-溴丙酸曱酯（0· 20 g，1 · 1 7 mmo 1)及三乙胺 (〇· 43 g, 4. 25 mmol)於DMF(9 mL)使用類似於針對化合物 302-1 1 (實施例6)敘述之程序製備：LCMS: 499 [M+l]+。 吡咯并[2, 3-d/]嘧啶-6-基）苄基）哌嗪—1 —基）丙醯胺（化合 物12) 標題化合物12白色固體（8 〇 mg，26%)係從化合物 3 02-1 2(0· 31 g，〇· 62 mmol)使用類似於針對敘述之程序製 備化合物 11(實施例 6): LCMS: 500 [M+l] + ; 4 NMRCDMSO-i/e) : (5 1.62(d, /=7. 2Hz, 3H), 2.29(t, /=7, 2Hz, 2H), 2.54(m? 8H), 2. 67(t, /=7. 2Hz, 3H), 3. 56(s, 2H), 5.47(m, 1H), 7：00^^ 1H), 7.29(m； 5H), 7.40(d, /=7. 2Hz, 3H), 7.71(d, /=8. 1Hz, 2H), 7. 76(d, /=8·1Ηζ, 1H), 8.02(s, 1H), 11.96(s, 1H)。 實施例8 : (A)-於羥基-4-（4-(4-(4-（1-苯基乙基胺基）-7#-σ比咯并[2, 3-J]嘧啶-6-基）苄基）哌嗓-1-基）丁醯胺（化合 物13) 步驟8a.(i〇 -乙基4-(4 -（4-（4-(1-苯基乙基胺基）_7#-〇比 咯并[2, 3-J]嘧啶-6-基）苄基）哌嗪-1-基）丁酸酯（化合物 302-1 3) 標題化合物302-13(0.39 g)係從化合物301(0.30 g， 0· 74 mmol )、4-溴丁酸乙酯（0.28g，0.82 mmol)、三乙胺 (0·29 g，2·9 mmol)及DMF(9.5 mL)使用類似於針對化合 1150-9131-PF;Kai 321 200829575 物302-1 1 (實施例6)敘述之程序製備·· LCMS: 527 [M+l]+。 步驟8b· U)-趴羥基-4-(4-(4-（4-(1-苯基乙基胺基）-7於 吡咯并[2, 3-ύΠ嘧咬-6-基）苄基）哌嗪-1-基）丁醯胺（化合 物13) _ ^ ζ-2 *0 »ιπ^ — 5 %) ^ ^ 302-13(0.39 g，0.74 mmol)使用類似於針對化合物ιι(實 施例 6)敘述之程序製備：LCMS: 514 [M + l] + ; 4 NMR(DMS0-A)·· 5 1. 53(d, /=7. 2Hz, 3H), 1. 61(m, 2H),1.95(t, /=7. 2Hz, 2H), 2. 37(m, 8H), 3.46(s, 2H), 5.48(m5 1H), 7. 08(s, 1H), 7.17(m, 1H), 7. 29(m, 5H), 7.43(d, >6. 9 Hz, 3H), 7. 74(d, /=8. 4 Hz, 2H), 7.80(d, /=8· 4 Hz，1H)，8· a5(s，1H)，12· a〇(s，1Ή)。 實施例9:(们-於羥基-5-(4-(4-(4-(：1-苯基乙基胺基）-7#-°比咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苄基）哌嗪-1-基）戊醯胺（化合 物14) 步驟9a·(们-曱基5-(4-(4-（4-（1-苯基乙基胺基）一比 咯并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苄基）哌嗪-1-基）戊酸酯（化合物 302-14) 標題化合物302-14(0.40 g)係從化合物3〇1(〇.31 g， 0· 76 mmol)、5-溴戊酸甲酯（0· 178 g，〇· 91 _〇1)、三乙 月女（0.31 g，3·1 ππη 〇 1)及D M F (1 〇 m L)使用類似於針對化合 物302-1 1 (實施例6)敘述之程序製備：[CMS: 527 [MH]+。 步驟9b，（幻-於羥基_5-（4-(4-（4-(卜苯基乙基胺基）-7#- 啦咯并[2, 3_&密咬-6-基）苄基）哌嗪―丨—基）戊醯胺（化合 1150-9131~PF;Kai 322 200829575 物14) 標題化合物14白色固體（30 mg，7%)係從化合物 302-14(0·40 g，0·76 mm〇i)使用類似於針對化合物ιι(實 施例6)敘述之程序製備：LCMS: 528 [M+l] + ; 4
NMRCRMSO-^e): δ ^ 1.29( 2 J /-7. 2Hz, 3H), 1.86(t, /=7. 2Hz, 2H), 2.16(t, /-3. 9 Hz, 2H) 2. 30(m,8H), 3. 39(s, 2H), 5. 43(m, 1H), 7.0(s,lH), 7.12(m，1H)，7.26(m，5H)，7.35(d，/=7.5 Hz, 3H)， 〆 7.76(d, /-8.4 Hz, 2H), 7.80(d, /=8.4 Hz, 1H), 7. 98(s, 1H)。 實施例10:(们-#-羥基-6-（4-（4-(4-(1-苯基乙基胺 基）-7於吼咯并[2，3 - V]嘧啶-6 -基）苄基）旅嗪_ 1 一基）己醯 ............— —— -.一… ’…一 … ^ ..................—一— — _ _ 胺（化合物1 5 ) 步驟10a.(ii〇-乙基6-(4-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7#-吼 咯并[2, 3-θ]嘧啶-6-基）苄基）哌嗪—1 —基）己酸酯（化合物 ( 302-1 5) 標題化合物302-1 5(0.41 g)係從化合物30 1 (0.30 g， 0. 73 mmol)、6-溴己酸乙酯（〇· 21 g，〇· 87 mmol)、三乙胺 (0.29 g，2·9 mmol)及DMF(8 mL)使用類似於針對化合物 302-1 1 (實施例6)敘述之程序製備：LCMS: 555 [M+l]+。 步驟10b· (ii〇-於羥基-6-(4-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7#-吼咯并[2, 3-嘧啶-6-基）苄基）哌嗪-1-基）己醯胺（化合 物15) 標題化合物15白色固體（8〇 mg，20%)係從化合物 1150-9131-PF;Kai 323 200829575 302-15(0.41 g，0.74 mmol)使用類似於針對化合物ΐι(實 施例 6)敘述之程序製備：LCMS: 542 [M+l ] + ; ijj NMRCDMSO-i/e): 5 1. 15(m, 2H), 1.34(m, 2H), 1.41(m, 2ti) 1.51(d, /=6. 9 Hz, 3H), 1.91(t, /=6. 9 Hz, 2H), 2. 20(-^ J_ 6'·' ΉZ-’ 2 H) 2 · in ’ δ、Η') ’、-3,· 3 4 (s·’ ’2 H5 4 8 (m 1H )
7. 6(s, 1H), 7. 18(m, 1H), 7. 29(m, 4H), 7.41(d, /=7. 2H 112, 2H), 7.72(d, /=8. 1Hz, 2H), 7.79(d, /=8. 4 Hz, 1H) 8.03(s, 1H), 8.65(s, 1H), 10.30(s, 1H), 11.98(s 1H)。 實施例11:(A)-#-經基-7-(4-(4-(4-(1-苯基乙基月安 基）-7#-吼咯并[2, 3嘧啶-6-基）苄基）哌嗪―卜基）庚酉龜 胺（化合物16) 步驟lla.(A)-乙基7-(4-（4-（4-（1-苯基乙基胺基）-7#二^ 咯并[2, 3_ΰΠ嘧啶-6-基）苄基）哌嗪-1 —基）庚酸酯（化合 302-16) 標題化合物302-1 6(0. 1 3 g， 23%)係從化合物 301(0.41 g，1.0mmol)、7-溴庚酸乙酯（〇.237 g，lmm〇1)、 三乙胺（0.40g，0·40 mmol)及DMF(6 mL)使用類似於針對 化合物302-1 1 (實施例6)敘述之程序製備：LCMS: 569 [M+l]+。 步驟lib.(们-#-經基_7-(4-(4 -（4-(l-苯基乙基胺基）—7#-°比咯并[2, 3-嘧啶-6-基）苄基）哌嗪-1-基）庚醯胺（化合 物16) 標題化合物16棕色固體（84 mg，66%)係從化合物 1150-9131-PF;Kai 324 200829575 302-1 6(0.1 3 g，0.23 mmol)使用類似於針對化合物11(實 施例 6)敘述之程序製備：LCMS: 556 [ΜΗ] + ; 4 NMRCDMSO-i/e): 5 1. 23(in, 4H), 1. 46(m, 4H), 1. 51(d? /=7. 2Hz, 3H), 1.92(t, /-7. 8 Hz, 2H), 2. 50-2. 80 (m, 8H), -〜一5«*»-«5».：<.», -j..i,…,...'一'一丄,》-1：,.ίί：„.. 7.26(m, 2H), 7. 40(m, 5H), 7. 74(d, /-7.8 Hz, 2H), 7.81(d, /=8vlHz, 1H), 8. 66(s, 1H), 10.34(s, 1H), 12.00(s， 1H)。 f 實施例12· (R)-#-經基-4- (4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7#-σ比 咯并[2,3-〇Π嘧啶-6-基）苯氧基）丙醯胺（化合物19) 步驟12a· (R)-甲基-4-(4-（4-(卜苯基乙基胺基比咯 并[2, 3-d]嘧碇-6-基）苯氧基）了酸酯（化合物407-1 9) 對於化合物 406(250 mg，0.75 mmol)及 K2C〇3(160 mg， 1.2 mmol)於N，N-二曱基曱醯胺（1· 5 mL)之混合物，添加 4-溴丁酸甲酯（1 30 mg，0· 75 mmo 1)並將得到的混合物於 ， 4 0 °C攪拌達2 0小時。添加水（5 m 1)並將該混合物以乙酸乙 酯萃取（25 mLx4)、乾燥並濃縮。將殘渣以管柱層析過濾以 得到產物40 7-19白色固體（202 mg, 63 %產率）·· LC-MS: 43KM + 1)； !H NMRCDMSO-i/e): 51.49(d, J = 6. 6 Hz, 3H), 1.90-1.93(m, 2H), 2.11(t, J = 7. 2Hz, 2H), 3.60(s, 3H), 4. 02(t, J = 6. 0 Hz, 2H), 5. 43-5. 48(m, 1H), 6. 92-6. 98(ra, 2H), 7. 16-7. 18Cm, 1H), 7. 24-7. 29(m, 2H), 7. 39(d, J = 8.4Hz, 2H), 7.65-7.71(m, 3H), 8. 00(s, 1H), 11.87(s, 1H) ° 1150-9131-PF;Kai 325 200829575 步驟12b· (R)-於羥基-4-(4-(4-(1 -苯基乙基胺基）-7#-吼 略并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苯氧基）丙醯胺（化合物19) 對於含化合物407-19(180 mg，0.45 mmol)之燒瓶， 添加經基胺於甲醇之溶液（2· 〇 mL)。將該混合物於室溫攪 葬 1 ^ - 以管柱層析過濾以得到產物19白色固體（6〇 mg，34 %產 率）。LC-MS: 432CM+1); 4 NMR(MS0-A): (5 1. 49(d, J=6. 6 Hz， 3H)， 1.89 - 1.93(m， 2H), 2.10(t， J = 7.2Hz， 2H)， 3.97(t，J = 6.0Hz，2H)，5.43-5.48(m，1H)，6.92-6.98(m， 2H), 7. 16-7. 18(m, 1H), 7. 24-7. 29(m, 2H), 7.38-7.41(d, J = 8.4Hz, 2H), 7. 65-7. 71(m, 3H), 7. 99(s, 1H), 8. 70(s, 1H ), 10.41(s, 1H), 11.88 (s, 1Ή ) ° 實施例13 : (R)-#-羥基-5-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7#-口比 "各并[2, 3-Θ]嘧啶-6 —基）苯氧基）戊醯胺（化合物20) 步驟13a. (R)-甲基-5-(4-(4-(卜苯基乙基胺基）-7#—比咯 并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苯氧基）戊酸酯（化合物407-20) 標題化合物40 7-20白色固體（150呢，87%)係從化合 物 406( 1 30 mg, 0.39 mmol)、K2C〇3(110mg，0.8 mmol)、 5-溴戊酸甲酯（76 mg，0.39 _〇l)使用類似於針對化合物 407-1 9(實施例12)敘述之程序製備·· LC — MS: 445(M+1); 4 NMRCDMSO-i/e): 5 1. 47-1. 54(m, 5H), 1. 88-1. 94(m, 2H), 2.36(t, J = 7.5Hz, 2H), 3. 58(s, 3H), 4. 30-4. 33(m, 2H), 5. 46-5. 50(m, 1H), 6. 91-6. 98(m, 2H), 7. 1 6-7. 18(m, 1H), 7. 24-7. 30(m, 2H), 7.40(d, J = 7. 5 Hz, 2H), 7. 65-7. 68(m, 1150-9131-PF;Kai 326 200829575 3H)， 8. 00(s， 1Η)， 11·87(3， ιΗ)。 步驟13b. (R)-#-羥基—5-(4一（4一（卜苯基乙基胺基）吡 咯并[2, 3-d>密咬-6-基）苯氧基）戊醯胺（化合物2〇) 標題化合物20白色固體（110 mg，73 係從化合物 施例12)敘述之程序製備：L(>MS: 446(M+1); 4 MRmSO-ώ)： δ 1. 50(d, J = 7. 2Hz, 3H), 1. 65-1. 66(m, 4H), 1.98-2.02(111, 2H), 3. 97(m? 2H), 5. 44-5. 49(m, 1H), { 6. 93-6. 99(m, 2H), 7.16-7.18(m, 1H), 7. 25-7. 30(m, 2H), 7.39-7.41(d, J = 8.4Hz, 2H), 7. 66-7. 71 (m, 3H), 8.00(s, 實施例14:(及)一水1 —羥基-#-（4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7#-吼洛开[2，3 -外密啶-6 —基）苯基）號珀醯胺（化合物2 4 )—一 步驟14a· (化合物502) (； 於氮氣氣氛下，於〇〜5t：將化合物104(16. 7 g，100 mmol)導入25 mL乙醇，再導入乙醇鈉（68 g，1〇〇匪〇1)。 將該黃色懸浮液攪拌達20分鐘並將化合物501(12.2 g，50 mmo 1)添加。將得到之混合物於室溫搜拌24小時並減壓濃 縮。將殘渣溶於乙酸乙酯並以水及濃鹽水清洗。將水相以 乙酸乙酯萃取3次。將合併的有機層以MgS〇4乾燥並蒸發 以得到粗製產物 502( 12.1 g，79.5%)。LC-MS: 276(M+1)， !H NMR(DMS0-^) 5 1. 26(t, /=7. 2Hz, 3H), 4. 17(q, /i = 7.2Hz, /2 = 7. 2Hz. 2H), 5. 98(s, 1H), 6.91(s, 1H), 1150-9131-PF;Kai 327 200829575 7. 68(d， /=9. ΟΗζ， 2Η)， 8· 13(d， /=9. ΟΗζ，2Η)， 11.10(s， 1Η)。 步驟14b. 6-(4-硝基苯基）-7#-啦咯并[2, 3 — α嘧啶—4一醇 (化合物503) …’對旅2(5.』一备 (6 raL)於DMF(10 mL)之混合物，於i5〇°c攪拌達22小時。 將該混合物冷卻至室溫並以水稀釋。將得到的沉澱過滤並 以水、異丙醇、醚清洗並乾燥以得到灰色固體5〇3(3 24 g， 69.4%)〇LC-MS:257(M+l), ^NMRCDMSO-i/e)^? 28(s 1H), 7· 95(s， 1H), 8. 11 (d, /=9. 0Hz, 2H), 8 26 (d， ，=9.0Hz，2H)，11.98(s，lH)，12.67(s，1H)。 步驟14 c · 4 -氯-6 - (4 -石肖基苯基）-7 °比塔并[2，3 - j ]资口定 ————----.-— … (化合物5 04) -————一— —— 對於5〇3(〇· 52 g，2.03 mmol)及氧氯化磷（1〇瓜乙）之 混合物，回流3小時。將該暗棕色懸浮液濃縮，以移除氧 氯化碌。將殘渣以乙酸乙酯稀釋’將有機層以飽和NaHCCh 水溶液清洗，以MgS〇4乾燥並蒸發，以得到產物504黃色 固體（0· 13 g，22· 2%)。LC-MS: 275(MH), 4 NMR(DMSO-A) 义 7.42(s, IH), 8.28〜8.37(ffi，4H), 8.67(s，1H)，13.31(s, 1H) 〇 步驟14d. (i〇-6-(4-硝基苯基苯基乙基比咯 并[2,3-¢/]嘧啶—4-胺（化合物505) 將化合物504(5·53 g，20.1 mmol)懸浮於正丁醇（11〇 mL)，並以（yp) —苯乙基胺（4·9 g，40.3 mmol)處理。將該混 H50-9131-pF/Kai 328 200829575
合物於145°C加熱達24小時。將該反應混合物於冰浴冷卻 並將固體過濾並以清洗冷正丁醇及鱗清洗，以得到黑色產 物 505(4.2 g, 58.2%) 。 LC-MS: 360(M+1), ]H NMR(DMS0-A)5 1.52(d, /=6.6 Hz，3H)，5.52(m， 1H)， ,^ ^ J 〇 步驟14e· (y?)-6-(4-胺基苯基）-#-(1-苯基乙基）-7#—!!比咯 并[ 2,3-Θ]嘧啶-4-胺（化合物506) 將化合物 505(5.44 g，15.14 mmol)、鐵屑（8· 48 g， f 0.15 mol)及濃 HC1(1 mL)於乙醇（120 mL)及水（12 mL)之 混合物’回流達2小時。將該混合物以NaOH水溶液調整為 pH= 1 2，並將鐵屑用過濾移除。將該濾液濃縮至產產生一殘 渣，以管柱層析精製以得到產物5 0 6黃色固體（1 · 48 g， 29.7%)。LC-MS: 330(M+1)，4 NMR(DMS0-A)5 1.52(d， /-6· 6 Ηζ，3H)，5.29(s，2H)，5.48(m，1H)，6· 60〜6. 63(m， 2H)，6.81(s，1H), 7. 18-7. 63(m, 9H), 7. 99(s, 1H), ^ 11. 68(s, 1H)。 步驟14f· u)-甲基4一側氧基一4一（4一（4一（1一苯基乙基胺 基）-7#-吼咯并[2, 3-¢/]嘧啶-6-基）苯基-胺基）丁酸酯（化 合物 507-24) 將琥ί白酸單甲酯（4〇1, 6呢，3. 04 mmol)溶於SOC12(20 mL)之溶液，加熱於8(rc達4小時。將該混合物冷卻，並 將溶劑蒸發移除。將混合物於〇 〇c接著滴加於化合物 506(0· 5 g，1· 52 mmol)於 CH2Cl2(3 0 mL)及三乙胺（〇· 86 mL， 6.08 mmol)之懸浮液中，將該混合物於〇〇c攪拌2小時， 1150-9131-PF;Kai 329 200829575 並以 CH2Cl2(l5〇mL)稀釋，並以水清洗（1〇〇mLx3)、a MgS〇4 乾知°將有機溶劑移除以得到粗製產物5〇7 —24黃色固體 (〇· 7 g)，直接用在次一步驟而不經進一步純化。LC_MS: 444(M+1)。 吡咯并[2, 3-J]嘧啶-6-基）苯基）琥珀醯胺（化合物24) 將5 07-24及飽和羥基胺溶於甲醇之溶液（！· 77 mol/L，5· 15 mL)的混合物，於室溫攪拌達2· 5小時。將該 混合物以乙酸調整為PH=7〜8並將溶劑蒸發移除。對此混 合物添加水，並將沉澱過濾並精製以得到產物24黃色固 體（〇·12 g， Π· 8%2 步驟）。LC-MS: 445(M+1)， ^ NMR(DM^^ /=6. 6Hz, 3H), 2. 29(t, /=7. 5Hz, 2H), 2.57(t, /=7. 2Hz, 2H), 5. 47(ra, 1H), 6. 99(s, 1H), 7. 17-7. 42(m, 5H), 7. 65-7. 76(m, 5H), 8. 02(s, 1H), 8.72(s, 1H), 10.06(s, 1H), 10.43(s, 1H), 11.91(s, 1H)。 貫施例15:(^0-11 -經基- 苯基乙基胺基）一7#_ 吡咯并[2,3-ί/]嘧啶-6-基）苯基）戊二醯胺（化合物25) 步驟15a· (Α〇 -曱基5-側氧基-5 -（4 -（4-(1-苯基乙基胺 基）-7#-吡咯并[2, 3-ύΠ嘧啶-6-基）苯基胺基）戊酸酯（化合 物 507-25) 標題化合物507-25紅色黏液（〇·8 g)係從化合物 506 ( 0.5 g， 1.52 _〇1)及戊二酸單曱酯（222.1 mg, 3.04 mmo 1 )使用類似於針對化合物5 0 7-24 (實施例14)敘述之程 1150-9131-PF/Kai 330 200829575 序製備：LC-MS·· 458(M+1)。 步驟151}.(们-#1-經基-7^5-(4-（4-(1-苯基乙基胺基）-7#〜 °比咯并[2, 3-¢/]嘧啶-6-基）苯基）戊二醯胺（化合物25) 標題化合物25黃色固體（0.22 g, 31.6%產率2步驟） 係從羥基胺於甲傳（1. 77 mol/L，3· 44 mL)使用類似於針對 化合物24(實施例14)敘述之程序製備：LC-MS: 459(M+1)， 'Η NMR(DMS0-A) 6 1· 49(d， /:6. 9Hz， 3H), 1· 79(t， /-7.5Hz, 2H), 2.00(t, /=7. 2Hz, 2H), 2.31(t, /=7. 2Hz, 2H), 5. 46(m, 1H), 6. 98(s, 1H), 7.14〜7.41(m， 5H)， 7·61 〜7.75(m, 5H)，8.01(s, 1H)，8.68(s，1H)，9.87(s， 1H)， 10.37(s， 1H)， 11. 90(s， 1H)。 實施例16: (A)-#1-羥基(4-U-苯基乙基胺基）—7#一 0比略并[2，3 - θ]嘧啶-6 -基）苯基）己二醢胺（化合物2 6) 步驟16a. (/) -甲基6-側氧基-6 -（4-(4 -（1-苯基乙基胺 基）-7#-吡咯并[2, 3-ύΠ嘧啶-6-基）苯基-胺基）己酸酯（化 合物 507-26) 標題化合物507_26黃色固體（〇· 44 g)，係從化合物 506(0.25 g， 0.76 mmol)及己二酸單甲酯（243.5 mg，l.52 mmol )，使用類似於針對化合物507-24(實施例14)敘述之 程序製備·· LC-MS: 472(M+1)。 步驟16b. (A)-#1-羥基-#-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）n_ 吼略并[2，3 - Θ]。密咬-6 -基）苯基）己二醯胺（化合物2 6 ) 標題化合物26白色固體（〇.15g，41.8%產率2步驟）， 係從507-26( 0.31 g，0.62 mmol)使用類似於針對化合物 1150-9l31-PF;Kai 331 200829575 24(實施例14)敘述之程序製備：LC-MS: 473(M+1)，沱 NMRCDMSO-^/b) 5 1.51(m, 7H), 1.95(t, /=6. 9Hz, 2H), 2.30(t， /=6. 6Hz，2H)，5.46(m，1H)，6.97(3， 1H), 7. 14〜7· 41 (m，5H)，Ί. 61-7. 75(m, 5H), 8. 01 (s, 1H), 8. 66(s, 1H), 9. 95(s, 1H), 10.34(s, 1H), 11.90(s, 1H)。 實施例17 : (R)-#1-羥基4-(1-苯基乙基胺基）—7#— 吼咯并[2,3-嘧啶-6-基）苯基）辛二醯胺（化合物27) 步驟17a.(们-甲基8-侧氧基一8-(4-(4-（1-苯基乙基胺 基比咯并[2, 3-ύΠ嘧啶-6-基）苯基胺基）辛酸酯（化合 物 507-27) 標題化合物507-27黃色固體（1.12 g)係從化合物 506(0.5 g，1.52 mmol)及軟木酸單曱酯（571.9 mg, 3.04 匪〇1)使用類似於針對化合物507-24(實施例14)敘述之程 序製備：LC-MS·· 500(M + 1)。 步驟17b.(们-#-羥基(4-（4-(1-苯基乙基胺基）-7A 吼咯并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苯基）辛二醯胺（化合物27) 標題化合物27白色固體（〇· 2 g，26. 3%產率2步驟） 係從50 7-27使用類似於針對化合物24(實施例14)敘述之 程序製備。LC-MS: 50KM+1), NMR(DMS0〜〇r6) 5 1. 26- 1. 58(m, 11 Η), i. 89(t, /=1. 2Hz, 2H), 2. 28(t, /=7·2Ηζ, 2H)，5.46(m，1H)，6.98(s, 1H)，7.13〜7.41(m， 5H)，7.61 〜7.75(m，5H)，8.01(s，1H)，8.63(s， 1H), 9.94(s，1H)，1Q.30(S，ih)，11.90(s，1H)。 1150-9131-PF;Kai 332 200829575 實施例18 : (A)-#-(2-(2-(羥基胺基）-2-側氧基乙基胺基） 乙基）-4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7#-吼π各并[2，3 — j]。密a定 -6 -基）苄醯胺（化合物28) 步驟18a· (A)-#-(2-胺基乙基）-4-（4-(1-苯基乙基胺 基）一7及-°比略并[2，3-d]。密咬-6-基）苄醯胺（化合物6〇 1) 將化合物110(2.0 g，5.37 mmol)於乙燒—1，2—二胺 (120 mL)於70 °C攪拌達22小時。將混合物減壓濃縮。將 殘渣溶於3 mL乙醇並以醚稀釋。將得到的沉澱過渡、乾 f 1 燥以得到黃色固體 601(2. 0 g, 93· H): LC-MS: 401 [M+l]+， NMRCDMSO-^/e) : d 1.54(d, 3H), 2. 53(t, /^1. 8 Hz, 1H), 2.72(t, /=6.0 Hz, 2H), 3.30(m, /=6. 0 Hz, 2H), 5.51(m, /-6. 6 Hz, /-7. 8 Hz, 2H), 7. 22(s, 1H), 7. 24(d, /-4. 2Hz, ..... - —.... '.一 .....................................—….....-·.，.·— —…—.....- _ ................................一 1H)，7.31(t, /=7.2Hz, 2H), 7.44(d, /-7.5 Hz, 2H), 7.8(s, 1H), 7.89(d, /-7. 2Hz, 2H), 7. 93(s, 2H), 7. 96(s, lH)，8.09(s，lH)，8.49(t，/-5.7Hz，lH)。 ^ 步驟18b.U)-乙基2-(2-(4-(4-(卜笨基乙基胺基）—7及一〇比 咯并[2, 3-嘧啶-6-基）苄醯胺）乙基胺基）乙酸酯（化合物 602-28) 將 601(1· 0 g，2. 5 mmol)及 2_溴乙酸乙酯（〇· 42 g，2. 5 mmol)溶於N，N-二曱基甲醢胺（25 mL)之溶液於室溫授拌4 小時。將溶劑移除並將殘渣以矽膠管柱層析過濾以得到 602-28(0.79 g， 43.2%)。 LC-MS: 487 [M+l]+。 步驟18c· (A) - (2-(2-(經基胺基）-2-側氧基乙基胺基）乙 基）-4-（4-(1-苯基乙基胺基）-7及-吼咯并[2, 嘧啶-6- 1150-9131-PF;Kai 333 200829575 基）苄醯胺（化合物28) 將 602-28(0. 423 g，0· 87 mmol)及羥基胺於甲醇（1· 77 mol/L，4.91 mL)該混合物於室溫攪拌達2·5小時。將該混 合物以乙酸調整為ΡΗ = 7〜8並將溶劑移除。將得到的混合 物以水稀釋、過滤並將固體精製以得到化合物28黃色固 體（0.09 g, 21.8%); LC-MS: 474 [M+l]+ 1 jj NMR(DMSO-i/6 + D2〇) ： ^ 1.48(d, /-6. 9 Hz, 3H), 2. 60(t, /-6.0 Hz, 2H), 3.04(s, 2H), 3.31(t, 2H), 5.37(m, 1H), 7·14〜7·38(ιη，6H)，7.84(s，4H), 7.98(s，1H)。 實施例19:(们-#-(2-(3-(羥基胺基）—3 —侧氧基丙基胺基） 乙基）-4-(4-(1-苯基乙基-胺基）—7#—α比咯并[2, 3一 j]嘧啶 - 6-基）苄醯胺（化合物29) 步驟19a.(i〇-曱基3 -（2-(4 -（4-(1-苯基乙基胺基）_7#一 吡咯并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苄醯胺）乙基胺基）丙酸酯（化合 物 602-29) 標題化合物602-29固體（〇·29 g, 23· 4%)係從化合物 601(1.0g，2.5mm〇l)及 3-溴丙酸曱酯（0.42g，25_〇1) 於N，N-—曱基甲醯胺（25 mL)，使用類似於針對化合物 602-28(實施例18)敘述之程序製備：LCMS: 487 [MH]+。 步驟19b·(们-(2-(3-(羥基胺基）-3 —側氧基丙基胺基）乙 基）-4-(4-(1-苯基乙基胺基吼咯并[2, 3-J]嘧啶-6- 基）苄醯胺（化合物2 9) 標題化合物29黃色固體（〇.〇4g，產率ΐ3·9%)係從化 合物602 - 29(0.29 g，0.59 mmol)及羥基胺於甲醇（1·77 1150-9131-PF/Kai 334 200829575 mol/L, 6 mL)使用類似於針對化合物28(實施例18)敘述之 程序製備：LC-MS: 488 [M + l]+，4 NMR(DMS〇-A + D2〇): J 1.50(d, /-6. 9 Hz, 3H), 2.15(t, /1-6. 3 Hz, /2-7. 2Hz, 2H), 2.76(m, 4H), 3. 35(m, 2H), 5. 44(m, 1H), 7.16(d, /-6.9 Hz, 2H), 7. 27(t, /-7. 5 Hz, 2H), 7. 39(d, /-7. 2Hz, 2H), 7· 86(m，4H), 8. 03(s, 1H)。 實施例20 : (2-( 6-(經基胺基）-6-側氧基己基胺基） 乙基）-4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7 π比洛并[2，3 - ¢/] °密咬 -6-基）苄醯胺（化合物30) 步驟20a.U)-乙基6-(2 -（4-(4-（1-苯基乙基胺基）-7#-。比 咯并[2, 3-J]嘧啶-6-基）苄醯胺）乙基胺基）己酸酯（化合物 602 - 30) 標題化合物602-30(0.26 g，24.0%)係從化合物 601(0. 8 g，2. 0 mmol)及 6-溴己酸乙酯（〇· 446 g，2. 0 mmol) 於N，N-二甲基甲醯胺（20 mL)使用類似於針對化合物 602-28(實施例18)敘述之程序製備：LC-MS: 543 [M+l] + . 步驟20b·(左）-#-(2-(6-(經基胺基）-6 -側氧基己基胺基）乙 基）-4-（4-（1-苯基乙基胺基）-7#-吼咯并[2, 3-〇^]嘧啶-6-基）苄醢胺（化合物3 0) 標題化合物30黃色固體（0.07 g，27.6%)係從化合物 602 - 30( 0.260 g，0.48 mmol)及羥基胺於曱醇之溶液（1.77 mol/L，6 mL)使用類似於針對化合物28(實施例18)敘述之 程序製備：LC-MS: 530 [M + l]+，4 NMR(DMS〇-A + D2〇):汐 1.23(m, 2H), 1.48(s, 7H), 1.94(s, 2H), 2.83(s, 2H), 1150-9131-PF;Kai 335 200829575 3.03(s，2H)，3.52(s，2H)，5.38(s, 1H)，7.00 〜7.40(m， 6H)，7. 70〜8. l〇(m，5H)。 實施例21 : (A) U2-(7-(羥基胺基）-7 —側氧基庚基胺基） 乙基）-4-（4-（1-苯基乙基"胺基）-比略并[2，3-^/]°密°定 - 6 -基）节酿胺（化合物31) 步驟21a.(A)_乙基7-(2-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）_7#_吼 咯并[2, 3-J]嘧啶—基）苄醯胺）乙基胺基）庚酸酯（化合物 602-31 ) 標題化合物602-31(0· 40 g， 19. 0%)係從化合物 601(1.5 g，3.75 mmol)及 7-溴庚酸乙酯（0.888 g，3.75 mmol)於N，N-二甲基甲醯胺（50 mL)，使用類似於針對化合 物602-28(實施例18)敘述之程序製備：LC-M S: 557 [M+l]+ 〇 步驟21b· U)-於（2-(7-(羥基胺基）-7-側氧基庚基胺基）乙 基）-4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7#-吼略并[2,3 - 密0定~6- 基）苄醯胺（化合物31) 標題化合物31黃色固體（0.072 g，18.7%)係從化合 物 602-31 (0.396 g，0.71 mmol)及羥基胺於甲醇（1.77 mol/L，8 mL)使用類似於針對化合物28(實施例18)敘述之 程序製備：LC-MS: 544 [M+l]+，iNMIKDMSO-A + D2〇): j 1.20(s, 4H), 1.48(s, 7H), 1.93(s, 2H), 2. 69(s, 2H), 2.89(s, 2H), 3.46(s5 2H), 5. 37(s, 1H), 7. 10-7. 50(m, 6H)，7. 85(s, 4H), 7. 99(s，1H)。 實施例22 :製備羥基-6-(4-(4-(1-苯基乙基胺 1150-9131-PF;Kai 336 200829575 基）-7 °比p各并[2，3 - J]哺唆-6 -基）苄基胺基）己醯胺（化合 物32) 步驟22a. -甲基6 -（4-(4-(1 -苯基乙基胺基）-7#-〇比口各 并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苄基胺基）'己酸酯（化合物113-32) 對DMF(10 mL)及Me0H(5 mL)之混合溶液，添加 ΚΟΗ(168·0 mg, 3.0 mmol)及曱基6-胺基己酸酯氣化氫 (545. 0 mg, 3. 0 mmol)。將該混合物於室溫攪拌1〇分鐘， 並將MeOH於40°C減壓移除。對化合物1 1 2(363 mg, 1 mmol) f " 添加上述混合物，並於室溫攪拌整夜。將DMF減壓移除並 將殘渣懸浮於水。將得到的固體收集並乾燥以得到產物 113-32(280 mg， 59%)〇LCMS: 472 [M+1].· 步驟22b. (/〇-#-羥基- 6-(4 -（4-(1-苯基乙基胺基）—7#- π比 咯并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苄基-胺基）己醯胺（化合物32) 將化合物 1 1 3-32(280. 0 mg， 0.59 mmol)及 NH2〇H/MeOH(2· 7 mL, 4· 75 mmol)之混合物，於室溫攪拌 〇· 5 t 小時。將該反應混合物以乙酸中和並濃縮。將殘渣懸浮於 水並將付到的 >儿澱分離並乾燥’以得到粗製產物，經過製 備性HPLC精製，得到產物32淡黃色固體（48 mg, 17%產率 2 步驟）。LCMS·· 473 [M+l]; 1 NMR(DMS0-A): J 1· 27(m， 2H)， 1. 46(ιη, 4H), 1. 52(d, /=7. 2Hz, 3H), 1.94(t， /-7.2Hz, 2H), 2.59(t, /=7. 2Hz, 2H), 3.81(s, 2H), 5.47(m, 1H), 7. 09(s, 1H), 7.19(t, /=7.5 Hz, lH), 7.30(t, >7. 5 Hz, 2H), 7.41(d, /=7. 5 Hz, 4H), 7. 76(m, 3H)，8.05(s, 1H)，l〇.32(s, 1H), 12.〇〇(s, 1H)。 1150-9131-PF;Kai 337 200829575 實施例23 :製備U)-#-羥基-7-(4-(4-(1-苯基乙基胺 基）-7#-吡咯并[2, 3-ύΠ嘧啶-6-基）苄基胺基）庚醯胺（化合 物33)
步驟23a.U)-甲基7-(4-(4-U-苯基乙基胺基）-7#-吼咯 并[2，3- rf] 0密咬-6-基）节基胺基)庚酸g旨（化合物U 標題化合物1 13-33(1 02 mg, 25%)係從化合物112(300 mg, 0.83 nmol)及7-胺基-庚酸酯氯化氫（487 mg，2.49 _〇1)使用類似於針對化合物113-32(實施例22)敘述之程 序製備：LCMS: 486 [M + l]+。 步驟23b. (i〇 - 經基-7-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7#-口比 略并密°定-6-基）苄基-胺基）-庚醢胺（化合物33) 標題化合物33淡黃色固體（28 mg，29%)係從化合物 1 1 3-33(97 mg，0.2 mmol) and NH2〇H/MeOH(3mL，5· 31 mmol) 使用類似於化合物3 2 (實施例2 2)針對敘述之程序製備· LCMS: 487 [M + l] + ; !H NMR: (DMSO-i/e) ： ^ 1.24(m, 2H), Γ. 43(m, 6Η), 1.52(d, /=7. 2Hz, 3H), 1.93(t, /=7. 5 Hz, 2H), 1.95(m, 2H), 3.71(s, 2H), 5.50(m, 1H), 7. 06(s, 1H), 7.19(t, /=7. 2Hz, 1H), 7. 30(t, /=7. 2Hz, 2H), 7.40(d, /=8.1 Hz, 2H), 7.42(d, /=7.5 Hz, 2H), 7.71(t, /=8.1 Hz, 3H), 8.05(s, 1H), 8.62(s,lH), 10.29(s,lH)? 11· 95(s,1H)。 實施例24:製備（7?)-羥基-8-(4-(4-(1-苯基乙基胺 基）-7#-吼咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苄基胺基）-辛醯胺（化 合物3 4) 1150-9131-PF;Kai 338 200829575 步驟24a·(们-甲基8-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7#—比哈 并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苄基胺基）辛酸酯（化合物113-34) 標題化合物113-34固體（110 mg，55%)係從化合物 112(145 mg, 0.4 mmol)及8-胺基辛酸酯氯化氫（250 mg， 1· 2 mmol )使用類似於化合物1得 之程序製備：LCMS: 500 [Μ+1]+· 步驟24b. U)-羥基-8-(4-(4-(1-苯基乙基胺基匕 咯并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苄基-胺基）-辛醯胺（化合物34) f y ' 標題化合物34淡黃色固體（41 mg, 37%)係從化合物 113-34(110 mg，0.22 mmol)及 NH2〇H/MeOH(5mL，8. 85 mm〇l) 使用類似於針對化合物3 2 (實施例2 2 )敘述之程序製備. LCMS·· 501 [M + l] + ; 4 丽R:(DMS0-A):J 1.24(s，8H)， 1.46(m, 4H), 1.53(d, /=6. 9 Hz, 3H), 1.94(t, /=6. 9 Hz, 2H), 3.70(s, 2H), 5. 50(m, 1H), 7. 07(s, 1H), 7.20(t, /=7. 2Hz, 1H), 7.30(t, /=7. 2Hz, 2H), 7.40(d, /=8. 4 Hz, I 2H), 7.43(d, /=7. 2Hz, 2H), 7.71(d, /-8. 4 Hz, 2H), 7.77(d， /=8. 1 Hz, 1H), 8. 06(s, 1H), 8. 67(S) 1H), 10. 33(s， 1H)， 11. 98(s， 1H)。 實施例25:製備（Α)-2-(4-(4-(l-(4-氟苯基）乙基胺 基）-7#-吼咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苯氧基）-#-羥基乙醯胺 (化合物37) 步驟25a.(ii〇 -ΚΙ-（4-氟苯基）乙基）-6-(4-甲氧基苯 基）-7#-吡咯并[2, 3-Θ]嘧啶-4-胺（化合物408) 將化合物404(2.59 g，ΐ〇·〇 _〇1)及氣苯 1150-9131-PF;Kai 339 200829575 基）乙胺（2· 75 g，20. 〇 mm〇i)於 n — Bu〇H(3〇 mL)之混合物， 於140°C攪拌整夜。將混合物冷卻、過濾、以ΕΪ2〇清洗， 以得到產物408黃色固體（2. 3 g， 63%)。[CMS: 363 [M+l]+ 。 步驟25b·(们+(4_(4_仏 [2, 3-密唆-6-基）苯盼（化合物409) 對化合物 408(2.1 g，5.6 mmol)於二氯甲烷（150 mL) 之✓谷液’於0C於氮氣中滴加BBr3(5.7 mL，15·5 mmol)溶 於二氯甲烷（1 90 mL)之溶液，期間1小時。於添加完成後， 使该混合物回溫至室溫並攪拌整夜。然後於—2 〇 °c添加2 0 mL水。將該混合物回溫至室溫，以乙酸乙酯萃取（1 5 〇 mLx3)、以濃鹽水清洗、過濾並濃縮，以得到產物409黃 色固體（1· 6 g，81%)。LCMS·· 349 [M+1].· 步驟25f· (i〇-乙基2-(4-(4-(1-(4-氟苯基）乙基胺 基）-7#-吡咯并[2, 3-ί/]嘧啶-6-基）苯氧基）乙酸酯（化合物 410-37) 對化合物 409(522 11^，1.5 111111〇1)及〖2(：〇3( 345 11^，2.5 _〇1)於Ν，Ν-二甲基甲醯胺（5.0 mL)之混合物，添加7-溴 庚酸乙酯（356 mg, 1.5 mmol)並將該混合物於70°C攪拌達 20小時。將DMF於5 0°C減壓移除，然後添加30 mL乙酸乙 酯被添加。將有機層以水清洗，以無水Na2S〇4乾燥。過濾、 濃縮以得到化合物 41 0-37(385 mg， 51%)。LCMS: 505 [M+l]+。 步驟25g.(们-2-(4-（4-(1 -（4-氟苯基）乙基胺基）-7#-吧咯 1150-9131-pf;Kai 340 200829575 并[2, 3-V]哺咬-6-基）笨氧基）_#—羥基乙醯胺（化合物37) 對含化合物41 0-37( 1 70 mg, 0· 33 mmo 1)之燒槪， 添加飽和經基胺溶於曱醇之溶液（5Q mL)。將該混合物於 室溫授拌30分鐘。然後以乙酸中和至pH 7並濃縮。將殘 邊以水清洗、蒸發以得到粗製產物，經過管柱層析精製， 得到產物 37 白色固體（4〇 mg，25%)·. LCMS: 492 [Μ + 1Γ; 4 NMRCDMSO-de)： ^ 1. 29- 1. 54(m, 9H), 1. 65-1.74(m, 2H), 1.94(t, /-7. 5 Hz, 2H), 3. 98(t, /=6. 3 Hz, 2H), 5. 47(t, ^8.1 Hz, 1H), 6.91(s, 1H), 6. 98(d, /-9.3 Hz, 2H), 7. 42-7. 46(m, 3H), 7.68(d, /=8. 7 Hz, 3H), 8. 02(s, 1H), 8.60(s，1H)，l〇.29(s，1H), 11.87(s，1H)。 實施例26:製備7-(4-(4-(苄基胺基）-7万-吼咯并[2,3-d] ..........产 ~—...—---—卜—-、··._________________________________________________________________ ’唆-6-基）苯氧基羥基庚醯胺（化合物38) 步驟26a· #-苄基-6-(4-甲氧基苯基比咯并[2, 3-Θ] 嘧啶-4-胺（化合物411) 將化合物404(2.59 g，1〇 _〇1)及苯基甲胺（3.21 g， 30 mmol)於n-BuOH(30 mL)之混合物，於140°C攪拌整夜。 將混合物冷卻、過濾，以Et2〇清洗，以得到產物411黃色 固體（3·0 g，93%)。LCMS: 331 [M+l]+。 步驟26b· 4-(4-(苄基胺基）-7万-吡洛并[2,3-密唆-6-基） 苯酚（化合物412) 對化合物411(2.5 g，7.6 mmol)於氣曱烷（202 mL)之 溶液，於0°C於氮氣中花1小時添加BBr3(7. 6 mL，20. 7 mmol) 於二氣甲烷（253 mL)之溶液。於添加完成後，使該混合物 1150-9131-PF;Kai 341 200829575 回溫至室溫並攪拌整夜。然後於—20 °c加水（20 mL)於此混 合物。將該混合物回溫至室溫，以乙酸乙酯萃取（15 0 mLx3)。將有機層以濃鹽水清洗、乾燥、過濾、濃縮以得到 產物 412 黃色固體（1. 43 g，59%)。LCMS: 317 [M + l] +。 步驟2 6 G · 7- (4- (4—(苄基胺基）— -6-基）苯氧基）庚酸乙酯（化合物413-38) 對化合物 41 2(300 mg, 0· 9 mmol)及 K2C〇3( 248 mg，1. 8 / mmol)於N，N-二曱基曱醯胺（4· 〇 mL)之混合物，添加7-溴 庚酸乙酉旨（213 mg, 〇· 9 mmol)並將得到的混合物於70°C攪 掉達20小時。將DMF於5(rc減壓移除，並以3〇 mL乙酸 乙酉旨稀釋。將有機層以水清洗，以無水Na2S〇4乾燥，過濾 並濃縮，以得到化合物41 3-38( 1 50 mg，35%)。LCMS: 473 [M+1]+ 〇 …——— 乂驟26d. 7-(4-(4-(节基胺基比洛并[2，口密口定 -6-基）苯氧基羥基庚醯胺（化合物38) ( 於一含化合物 41 3-38( 1 00 mg, 0.21 mmol)之燒瓶， 添加飽和經基胺溶於甲醇之溶液（4〇 mL)。將該混合物於 至溫攪拌30分鐘。然後以乙酸中和至pH7。將該混合物減 壓濃縮，並將殘渣以水清洗、蒸發。將殘渣以管柱層析過 ;慮以得到產物白色固體（40 mg，42%)。LCMS: 460 [M+1 ] + ; H NMR(DMS0-^) ： ^ 1. 30-1. 54(m, 6H), 1.72(t, /=8. 1 Hz, 2H),1.96(t, /=7. 2Hz, 2H), 4. 00(t, /=6.0 Hz, 2H), 4-81(d, /=4.5 Hz, 2H),7.04(d, /=9. 0 Hz, 2H),7.12(s, 1H), 7. 32-7. 51(m, 5H), 7.73(d, /=8. 4 Hz, 2H), 8. 32(s, 1150一9131-PF;Kai 342 200829575 1H), 9.45(s, 1H)，i〇.36(s，1H)，12.88(s，1H)。 實施例27··製備（们—羥基—4-(4 —(1一苯基乙基胺 基）-7#-吡咯并[2, 3 —嘧啶—6—基）苄醯胺（化合物39) 將化口物 110(149 mg，〇· 4 mmol)及 NH2〇H/MeOH(3mL， 5· 31 mmQl )之混合物，於室溫攪拌I ^ 合物以AcOH中和並濃縮。將殘渣懸浮於水並將得到的沉澱 分離，並乾以得到粗製產物，經過製備性HpLC精製，得 到產物 39 淡黃色固體（42 mg，28%) : LCMS: 374 [M+1 ] + ; 1 NMR: (DMSO-i/e) ： 1.53(d, /=7. 2Hz, 3H), 5. 50(m, 1H), 7.22(m, 2H), 7.31(t, /=7. 5 Hz, 2H), 7.42(d, /=7. 5 Hz, 2H), 7.84(m, 5H), 8. 08(s, 1H), 9. 06(s, 1H), 11.23(s, 1H), 12· 13(s, 1H)。 ————一 -一—-——-….一一一,,-——— ___________________ 實施例28:(尤幻-#—羥基-3 — (4 — ((4-(4 — (1—苯基乙基胺 基）-7#-吼咯并[2,3-Θ]嘧啶-6-基）苯基胺基）曱基）苯基） 丙浠醯胺（化合物4 2 ) 步驟28a·(尤曱基3-(4-（（4-（4-（1-苯基乙基胺 基）-7及-吼咯并[2, 3-J]嘧啶-6-基）苯基-胺基）曱基）苯基） 丙烯酸酯（化合物703-42) 將化合物506(200 mg，0.6 mmol)及4 -甲醯基肉桂酸 (140 mg，0· 8 _〇1)於40 mL甲醇之混合物，回流1小時。 接著添加NaBH3CN(50 mg，〇·8 mmol)並將該混合物擾拌額 外的2小時。將亞硫醯氣（0 · 5 mL )滴加至此混合物並攪拌 3小時。該反應以TLC監控。然後將該混合物減壓濃縮。 將殘渣以水清洗並過濾以得到化合物703-42黃色固體 1150-9131-PF;Kai 343 200829575 (208mg， 68.8%)0LCMS: 504 [M+l]+。 步驟 28b.(尤幻羥基-3-(4-((4-(4-(1-苯基乙基胺 基）-7#-吼咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苯基胺基）甲基）苯基） 丙烯醯胺（化合物42) 將 703-42 醇之溶液（1· 77 mo 1/L，10 mL)之混合物，於室溫授拌6小 時。將該混合物以乙酸調整為 pH7〜8。將溶劑移除並將殘 渣懸浮於水、過濾並精製以得到化合物42黃色固體 (0.060 g，29.0%)。m.p· 265.1 〜294.1 〇C，LC-MS: 505 [M+l]+，iHNMRUOOMHz, DMS0-Α): Θ 1.49(d，/:7·2Ηζ， 3H), 4.32(d, /-4. 8 Hz, 2H), 5.45(m, 1H), 6. 30-6. 50 (m, 1H), 6.60(d, Hz, 2H), 6. 75(s, lh), 7.16(t, /-7· 2Hz, /-6. 6 " ΗζΓΓη), ^ /^7. 5 Hz, 2H), 7.30-7.60(m, 10H), 7. 96(s, 1H), 8. 95(s, 1H), 10.68(s, 1H)， 11.64(s, 1H)。 實施例29 : 經基-4-((4-(4-( 1-苯基乙基胺基）—7#一 ϋ比洛并[2，3 - 密淀-6 -基）苯基胺基）曱基）苄醯胺（化合物 43) 步驟29a.U)-曱基4-((4-(4 - U-苯基乙基胺基）—7#一0比 咯并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苯基胺基）曱基）苯甲酸酯（化合物 706-43) 將化合物506(200 mg, 0.6 mmol)及4-甲醯基苯甲酸 (120 mg，0. 8 mmol)於甲醇（40 mL)之懸浮液，回流1小時。 NaBH3CN(50 mg, 0.8 mmol)接著被添加至此混合物，並揽 1150-9131-PF;Kai 344 200829575 拌另外的2小時。將亞硫醯氯（〇· 2 mL)滴加，並將該混合 物攪拌3小時。該反應以TLC監控。然後將該混合物減壓 濃縮並將殘渣以水清洗並過濾以得到化合物706-43黃色 固體（26 7 mg, 9 3. 0%)。LCMS: 478 [M+l] +。 步驟29 b·以 咯并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苯基_胺基）甲基）苄醯胺（化合物 43) 將706-43(0.267 g，0.56 mmol)及飽和經基胺溶於甲 " 醇之溶液（1· 77 mol/L，8 mL)的混合物，於室溫攪拌6小 時。將該混合物以乙酸調整為PH = 7〜8並將溶劑移除。將 殘渣以水稀釋、過濾並精製以得到化合物43黃色固體 ( 0.065 g, 24.3%): m.p. 1 69. 3-1 70. 9 °C , LC-MS: 479 [M+l] + , 'H NMRC300 MHz, DMSO-^e): ^ 1.49(d, /-7. 2Hz, 3H), 4.34(d, /-5. 4 Hz, 2H), 5.45(m, 1H), 6. 52(t, /-6.0 Hz, 1H), 6.29(d, /-8. 7 Hz, 2H), 6.75(s, 1H), 7.16(t, ( 5 Hz, 1H), 7.27(t, /-7. 2Hz, 2H), 7. 30-7. 50(m, 6H), 7.57(d, /-7. 8 Hz, 1H), 7. 68(d, /-8.1Hz, 2H), 7. 96(s, 1H), 8.94(s，1H)，ll.U(s，ih)，U65s，ih)。 實施例30:製備U)-#-羥基—4-((4-( 4 —(卜苯基乙基胺 基）-7万-吼咯并[2, 3-Θ]嘧啶-6-基）苄基胺基）甲基）苄醯胺 (化合物44) 步驟30a· (Α0-6-(4-(胺基甲基）苯基）一苯基乙 基）-7万-吡咯并[2,3-〇η嘧啶-4-胺（化合物801) 將化合物 1 1 2( 500 mg, ι·38 mmol)於氨水（60 mL)之 1150-9131-PF;Kai 345 200829575 混合物’携掉並於一密閉系加熱至1丨〇t：達24小時。將該 此〇物冷卻至室溫及分離得到之沉澱。將該溶液以水稀釋 调整為PH = 2。將得到的沉澱分離，並乾燥以得標題化合物 801 灰色固體（2〇4 mg，43%): LCMS: 344 [M+l] +。 步驟3〇h·(幻—甲基4-((4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7F吡略 开[2, 3-d]嘧啶-6一基）苄基胺基）甲基）苯曱酸酯（化合物 802-44) 將化合物801 ( 1 70 mg，0· 5 mmol )、4-甲醯基笨甲酸 (75 mg，〇·5 _〇1)及甲醇（4〇 ‘）之混合物，攪拌並加熱 至回流1小時。NaBH3CN(50 mg，0.75 mm〇1)接著被添加， 並將該混合物攪拌回流2小時。之後，添加亞硫醯二氯 (SUlfur〇US dichloride)(90 mg，0.75 合物授拌回流額外的5小時。將溶劑減壓移除Γ並將殘渣 以水清洗，得到粗製產物，以管柱層析精製以得標題化合 物 802一44 灰色固體（220 mg，86%): LCMS: 492 [M+l]+。 步驟30c·(幻―於羥基-4-((4—(4—(1 —苯基乙基胺基於吼 咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）甲基）苄醯胺（化合物44) 對化合物802-44( 1 50 mg，0.3 mmol)添加新鮮製備的 爹工基胺/谷液（1 · 7 mL，3 mmo 1)。將該反應混合物於2〇。〇撲 拌30分鐘，然後回溫至室溫。反應過程以τιχ監控。將該 混合物以乙酸中和並將得到的混合物減壓濃縮，以得一殘 渣，經過製備性HPLC精製，以得到標題化合物44灰色固 體（24 mg，18%)·· LCMS·· 493 [MH] +，· nmr(ms〇 —乂） l-5〇(d, /-6.9 Hz, 3H), 3.68(d, /-12.9 Hz, 4H), 5. 48(m, 346 1150-9131-PF；Kai 200829575 1H), 7.05(s, 1H), 7.17(t, /-7.8 Hz, 1H), 7. 37(t, /-7. 2Hz, 2H), 7.70(m, 6H), 8. 03(s, 1H), 8. 93(s, 1H), 11.12(s， 1H), 11.94(s， 1H)。 實施例31 :製備（尤幻-#~經基-3-(4-((4-(4-(l -苯基乙 基胺基）-7 。比p各并[2，3 - d ]哺°定-6 -基）节基胺基）曱基）笨 基）丙烯醯胺（化合物45) 步驟31a.(尤幻-曱基 3-(4-((4-(4-(1-苯基乙基胺 基）-7#-吼咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苄基胺基）甲基）苯基） f ' 丙烯酸酯（化合物802-45) 標題化合物802-45( 1 53 mg，48%產率）係從801(211 mg， 0.62 mmol)及（E)-曱基3-（4-甲醯基苯基）丙烯酸酯（118 mg，0· 62 mmol)使用類似於針對化合物802-44(實施例30) 敘述之程序製備：LCMS : 51 7 [ M+1 ] +。 步驟31b·(尤幻-經基—3-(4-((4-(4-（1-苯基乙基胺 基比略并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苄基胺基）甲基）苯基） ( 丙烯醢胺（化合物45) 標題化合物45灰色固體（40 mg，26%產率）係從化合物 802-45(154 mg，〇.3〇 _〇1)及新鮮製備的羥基胺於甲醇 (1· 7 mL，3· 0 _〇1)，使用類似於針對化合物44(實施例 30)敘述之程序製備：LCMS: 518 [M+l] + ; 4 NMR(DMS0_/) ^ 1.50(d, /-7. 2Hz, 3H), 3.70(d, /-6. 9 Hz, 4H), 5.48(t, /-9.6 Hz, 1H), 6.39(d, /-15.9 Hz, 1H), 7. 06(s, 1H), 7.18(t, 1H), 7.29(m, 4H), 7.40(d, /-7.5 Hz, 2H), 7.70(d, /-8.1Hz, 2H), 7. 82(d, /-8. 4 Hz, 1H), 8. 04(s, 1150-9131-PF;Kai 347 200829575 U), 12· 00(s，1H)。 實施例32:製備U)-於羥基一4 —(2-(4-(4-(4-（1-苯基乙 基略并[2，3-d]σ密咬-6-基）苄基）旅嗪-1 —基） 乙氧基）丁醯胺（化合物49) 步驟32 a” (幻—2—仏 [2, 3-d]嘧啶-6-基）苄基）哌嗪―卜基）乙醇（化合物9〇 將化合物 112(1.37 g，3.78 mmol )、2-(旅嗪-1 —基） 乙醇（590 mg，4.54 mmol)及碳酸鉀（1.07 g 7.56 mmol) 於#，N-二曱基曱醯胺（2〇 mL)之混合物，於50 °C攪拌整夜。 然後將該混合物冷卻至室温，並將溶劑減壓移除。將殘渣 以水清洗，並乾燥以得標題化合物901棕色固體（1. 552 g， 90.2%)： LCMS: 457 [M+l] + ； ]H NMRCDMSO-i/e): ^ 1.50(d —---------------------------------------—___________________,. _ ^ — 一.—.—_，— —一一———— — — ^7.2, 3H), 2.34(m, 8H), 3. 44(s, ^ 4： 36(^ W 5.48(m5 1H), 7.06(s, 1H), 7.15(t, /-7.5, 1H), 7. 29(m, 6H),, 7.73(d, /-8.1, 2H), 7.79(d, /-8.4, 1H), 8. 04(s, 1H)，12· 00(s, 1H)。 步驟32b· U)-曱基4-（2-（4-（4-（4-（1-苯基乙基胺 基）-7#-吼咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苄基）哌嗪―卜基）乙氧 基）丁酸酯（化合物902-49) 對合物 901 (456mg，1 mmol)溶於 DMF(20 mL)之溶液， 於冰浴溫度添加NaH(24 mg, 1 mmol)。將該混合物於此溫 度攪拌30分鐘，然後添加4-溴丁酸曱酯（231 mg， 1.2mni〇l)，並將該混合物於5〇°C攪拌整夜。將溶劑減壓移 除以得到粗製產物，以管柱層析精製以得標題化合物 1150-9131-PF/Kai 348 200829575 902-49 灰色固體（225mg，40%): LCMS: 481 [M+l]+。 步驟 32c. U)-#-羥基—4—(2-(4-((4-(1-苯基乙基胺 基）-7#-口比咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）甲基）哌嗪-1-基）乙氧 基）丁醯胺（化合物49) 對化合物902-49(147 mg，0· 377 mmol)添加新鮮製備 的經基胺溶液（4· 3 mL，7. 5 mmol)。將該反應物於0°C攪拌 3 0分鐘，然後回溫至室溫。反應過程以TLC監控。將該混 合物以乙酸中和並將混合物減壓濃縮以得一殘渣，以製備 性JPLC精製，以得到標題化合物49灰色固體（70mg，48%): LCMS: 482 [M+l] + ； ]H NMRCDMSO-^) 1.50(d, /-6. 3 Hz, 3H), 1.76(s, 4H), 2. 39(m, 10H), 3.48(m, 4H), 4.17(s, 2H), 4.35(s, 1H), 5.50(t, /-7.5, 1H), 6.76(s, 1H), - ”一....’ — ———一—一 _ 7.24(m, 1H), 7.32(m, 2H), 7. 32(m, 2H), 7. 42(m^ 6H)7 7.82(d, /-8.1, 2H), 8.10(s, 1H), 8.61(s, lH),10.27(s, 1H)。 實施例33:製備U)-N-羥基-5-(2-(4 -（4-(4-(卜苯基乙 基胺基）-7σ比17各并[2, 3-d]。密淀-6 -基）苄基）σ辰嗓-i_基） 乙氧基）戊醯胺（化合物50) 步驟33a. (A) -甲基5-（2-(4-((4 -（1-苯基乙基胺基）一7#— 吼咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）曱基）哌嗪-1-基）乙氧基）戊酸 酯（化合物902-50) 標題化合物902-50 ( 1 31 mg, 29%產率）係從90 1 (361 mg， 0· 79 _〇 1)及5-溴戊酸酯（183 mg, 0· 95職〇1)，使用類 似於針對化合物9 0 2-4 9 (實施例3 2)欽述之程序製備· [CMS · 1150-9131-PF;Kai 349 200829575 517 [M+l]+ 。 步驟33b. U)〜泰麵I R a / l 基-5-(2-(4-(4-(4-(1-苯基乙基胺 、 L 2, 3-d]t啶-6-基）苄基）哌嗪—j—基）乙氧 基）戊酿胺（化合物5 〇) g’ 〇· 23 mmol)及新鮮製備的羥基胺於甲醇 (1·3 i’ 2·3 _01)，使用類似於針對化合物49(實施例 32)敘述之&序製備：L(：ms··⑺[㈣].;$瞧⑽s〇 —^) 1.23(s, 2H), 1.5〇(d, /=6. 9 Hz, 3H), 1.78(t, /-7.5 2H), 2.41(s, 8H), 3.30(s, 2H), 3.48(m, 3H), 4.17(s, 2H), 4.35(s, 1H), 5.50(t, /-8.1Hz, 1H), 6. 75(s, 1H), 7, l8^ HZ，1H^ 7.29(t, /-7. 2Hz, 1H), 7.42(m, 5H), 7.81(d, /^8；^ IH)9(s, Th), 8：6〇(s, 1HX 10·21(s， 1H)。 實施例34:製備U) —羥基-6-(2 —(4 —(4一（4—(1 —苯基乙 基胺基）-7及-吼咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苄基）哌嗪-i —基） 乙氧基）己醯胺（化合物51) 步驟34a. U)-曱基6-（2-（4-（4-（4-（1-苯基乙基胺 基）-7#-吼咯并[2, 3-d]嘧啶-6 —基）苄基）哌嗪y一基）乙氧 基）己酸酯（化合物902-51 ) 標題化合物902-51灰色固體（192 mg，40%產率）係從 901 (375 mg，0.82 mmol)及曱基 6-溴己酸酯（204 mg, 0.98 mmol)，使用類似於針對化合物9〇2 —49(實施例32)敘述之 程序製備：LCMS: 585 [M + l]+。 1150-9131-PF;Kai 350 200829575 步驟34b· (7?)-，羥基-6-(2-(4-(4-(4-(卜苯基乙基胺 基）-7#-吼咯并[2, 3〜d]嘧啶-6-基）苄基）哌嗪—卜基）乙氧 基）己醯胺（化合物51) 標題化合物51灰色固體（120 mg，6 3%產率）係從化合 物902 —叫1⑽ 醇（1.9 mL，3.3 mmol)使用類似於化合物49(實施例32) 針對敘述之程序製備：LCMS : 586 [M+l ] +; j NMR(DMS0-J6) δ 1.00(t, /-8. 1 Hz, 2H), 1.31(t, /-7. 2Hz, 2H), 1. 50(d, /-6.6 Hz, 3H), 1.78(t, /-6.6 Hz, 2H), 2. 37(s, 8H), 3.48(m, 3H), 4.17(s, 2H), 4. 35(s, 1H), 5. 50(t, /-8.1 Hz, 1H), 6.75(s, 1H), 7. 18(t, /-6. 9 Hz, 1H), 7. 29(t, /-7. 2Hz, 1H), 7.42(m, 5H), 7.81(d, /-8.1 Hz, 1H), 8.04(s, 1H), 8.60(s, 1H), 10. 22^^ 實施例35 : 羥基-6-(1-(4-(4-( 1-苯基乙基胺 基）-7#- 各并[2，密12定-6 -基）苄基底唆-4-基胺基） 己醯胺（化合物5 5) 步驟358.{6-[4-（1，4-二氧雜-8-氮雜-螺[4.5]癸-8-基甲 基）-苯基]-7#- ϋ比嘻并[2,3-J] 口密唆-4 -基}-(1-苯基一乙 基）-胺（化合物1001) 對化合物 112(1. 1 g，3. 0 mmol)溶於 DMF(10 mL)之溶 液，添加1，4_二氧雜-8-氮雜-螺[4.5]癸烧（1·〇 g， 7· Ommo 1)。將該反應物1 〇°C攪拌1小時。將溶劑減壓蒸發 並將殘渣以水清洗、乾燥以得到化合物1001棕色固體（1. 2 g，93%產率）LOMS: 469 [M+l]+。 1150-9131-PF;Kai 351 200829575 步驟35b· l-{4-[4-(1-苯基-乙基胺基）-7及-吼咯并[2,3-d] 嘧°定-6-基]-苄基}-π底。定—4-酮（化合物1 002) 將化合物 1001(1. 2 g，2. 6 mmol)於 THF(20 mL)及 20% H2S〇4(40 mL)之溶液，於50°C攪拌4小時。將該混合物以 飽和NaHC〇3申和。分離沉徽並過意，乾操以得到1 〇 〇 2 (1 · 〇 g，92%產率）。LC-MS: 426 [M+1 ]+。 步驟35c· 6 -（l-{4-[4-(1-苯基-乙基胺基）—τη—吡咯并 [2, 3-d]嘧啶-6-基]-苄基}-哌啶-4-基胺基）一己酸甲酯（化 合物 1 003-55) 對化合物1002( 1 30 mg，0. 31 mmol)、6-胺基-己酸甲 酯（46 mg, 0· 31 mmol)及乙酸（18. 6 mg，0· 31 mmol)於 1，2- 二氯乙烷（10 mL)之溶液，以 NaBH(0Ac)3(92 mg，1. 2 mmol) ',r … ’ "—-—' —〜—— ... 處理，並於25t：攪拌整夜。將飽和NaHC〇3(l〇 mL)添加至該 反應混合物並將溶劑減壓蒸發得一殘渣。將殘渣溶於丁肝 並過濾。將濾液濃縮，將粗製產物以TLC精製，以得到化 合物 1 003-55 棕色固體（120 mg，71% 產率）·· LC - MS: 555 [M+l]+。 步驟35d. 6-(1-{4-[4-(1-苯基-乙基胺基）一7#—吡嘻并 [2, 3-d]嘧啶-6_基]-苄基卜派唆-4_基胺基）-己酸羥基酿 胺（化合物55) 對化合物1 003-55(60 mg，0.11_〇1)添加新鮮製備的 羥基胺溶液（1. 0 mL，1 · 8 mmo 1)。將該反應混合物超音波 振盪40分鐘。反應過程以TLC監控。於反應完成後，將該 混合物以乙酸中和。將混合物減壓濃縮並將殘渣以水清洗 1150-9131-PF;Kai 352 200829575
並乾燥以得到標題化合物55黃色固體（42呢，7()%)e uMS 556 [M+l] + ; j NMR(DMS0-A)汐 1.25(m，6H)，i 52(d /-6.6 Hz, 4H), 1.94(m, 5H), 2. 59(t, >7.5 Hz, 3H), 2.79(d, /-11. 1Hz2H), 3. 4(s, 2H), 5.48(m, 1H), 7. 〇7(s ^ ^ y 1H ) , 7 . ,2~6 X m, 1H ), 7. 31 (m, 53 ) 7 4 2 (m 2H), 7.72(d, /=8.1 Hz, 1H), 7. 72(d, /=8.1 Hz, 1H), 7.80(d，/=8.7 Hz，1H), 8.04(s, 1H)，11·98(3，1H)。 貫施例36:(R)-N-羥基-7-(1-(4-(4-(1-苯基乙某胺 % 基）—711-吡咯并[2, 3 — d]嘧啶—6-基）苄基）哌啶〜4 —基胺基） 庚醯胺（化合物56) 步驟36a. 7-（1-{4-[4-(1-苯基-乙基胺基）〜7及—吼p各并 [2, 3-密啶-6-基]-苄基卜哌啶-4-基胺基庚酸甲（化 合物 1003-56) 標題化合物1 003-56黃色固體（60 mg, 36%產率）係從 1002及7-胺基-庚酸甲酯（94 mg, 〇· 588 mmol)使用類似於 I 針對化合物1 003-55(實施例35)敘述之程序製備：LC_MS: 569 [M+l]+ 。 步驟36b. 7-(1-{4-[4-(1-苯基-乙基胺基）—7#-。比嘻并 [2, 3-d]哺咬-6-基]-苄基}-旅11 定-4-基胺基）~庚酸甲醋（化 合物56) 標題化合物56黃色固體（30 mg，50%產率）係從化合 物1003-56(60 mg，0.11 mmol)使用類似於化合物55(實施 例35)針對敘述之程序製備：LC-MS: 570 [Μ + 1Γ; 4 NMRCDMSO-i/e) ^ 1.25(m, 6H), 1.48(ra, 5H), 1.53(d, 1150-9131-PF;Kai 353 200829575 ^=7. 5 Hz, 4H), 1.98(d, /=8.1 Hz, 4H), 2.7(t, /=6. 9 Hz 3H), 2.53(d, /-11.1 Hz 2H), 3. 47(s, 2H), 5. 48(m, 1H), 7.11(s, 1H), 7.19(m, 1H), 7.31(m, 5H), 7.42(m, 2H), 7.74(d, /=8. 4 Hz, 2H), 7.85(d, /=8. 1 Hz, 1H), 8. 〇6(s, 1H), 12. 01 (s, 1H) ° 貫施例37·•製備（R)-N -經基-8-(1-(4-(4-(1〜苯基乙基胺 基）-7Η-π比洛并[2, 3-d]哺咬-6-基）苄基）娘咬-4-基胺基） 辛醯胺（化合物57) ( . 步驟37a. 8-(1-{4-[4 -（1-苯基-乙基胺基）-7#-各并 [2, 3 - (1]σ密ϋ定-6-基]-苄基}_旅咬-4-基胺基）-辛酸甲酉旨（化 合物 1 003-57) 標題化合物1003-57黃色固體（70 mg, 36%產率）係從 1002及8-胺基-辛酸甲酯（102 mg，0.588 mmol)使用類似 於針對化合物10 0 3-55 (實施例35)敘述之程序製備：LC-MS: 583 [M+1].· (, 步驟3 7b. 8 -（1-{4-[4-(1-苯基-乙基胺基）—比洛并 [2, 3-d]嘧啶-6-基]-苄基卜哌啶—4-基胺基）—辛酸羥基醯 胺（化合物57) 標題化合物57黃色固體（4〇 mg，67%產率）係從化合 物1 003-57(60 mg，0.10 _〇1)使用類似於針對化合物 55(實施例35)敘述之程序製備：[CMS: 584 [Μ+1Γ;沱 NMRCDMSO-i/e) δ 1.23(m, 6H), 1.42(m 7H) l 73(d /=6.9 Hz, 4H), 1.96(d, 4H), 2. 64(t, /=6.9 Hz, 3H), 2.80(d, /=11.7 Hz, 2H)5 3. 45 (s, 2H), 5.49(m, 1H), 1150—9131-PF;Kai 354 200829575 7.08(s, 1H), 7.20(m, 1H), 7.31(m, 5H), 7. 42(m, 2H), 7.72(d, /=8. 4 Hz, 2H), 7.80(d, /=7. 8 Hz, 1H), 8. 04(s, 1H), 11. 99(s，1H)。 實施例38:製備（R)-#—羥基—6-(2~(4-(4-(l-苯基乙基胺 基）二7五比鬼并[2， 胺（化合物59) 步驟38a.(yP)-2-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7及-吼咯并 [2, 3-d]嘧啶-6-基）苯氧基）乙腈（化合物11〇1) 將 406(4· 0 g，12. 12 mmol)、K2C〇3(ll. 6 g，90· 60mmol)
及2-氯乙腈（0.91 g，12.12 mmol)於丙酮之混合物，攪拌 於55°C整夜。然後將反應物過濾移除k2c〇3。將濾液蒸發至 乾並將殘餘的固體過濾、以曱醇清洗，並乾燥得到1丨〇 1白 色固體（0.954 g， 21 %)： LCMS: 370 [M + l ] + ; !H NMRCDMSO-^)： δ 1.54(d, /=7. 2Hz, 3H), 5. 22(s, 2H), 5.50(q, /=7. 2Hz, 1H), 7. 02(s, 1H), 7. 16-7. 20(m, 3H), r 7. 28-7. 33(m, 2H), 7.43(d, /=7. 2Hz, 1H), 7.76-7.81(m, κ 3H), 8. 04(s, 1H), 11. 96(s，1H)。 步驟38b. U)-6-(4-(2-胺基乙氧基）苯基）— Kl-苯基乙 基）-7#-吼p各并[2, 3-ί/]密唆-4-胺（化合物11 02) 對 0°C 之 1 1 01 (0.954 g，2.58 mmol)溶於 THF(120mL) 之溶液，緩慢添加AlLiH4(0_ 294 g，7. 74 mmol)。將該混 合物回溫至室溫達20分鐘，然後添加i:i :3(H20: 15% NaOH:H2〇)，過濾並蒸發。以得到11〇2白色固體（0. 788 g， 82. 5 °/〇): LCMS: 374 [M+l] + ; NMR(DMS0-^): ^ 1. 53(d, 1150-9131-PF;Kai 355 200829575 /=6.9 Hz, 3H), 2.88(t, /=5.7 Hz, 2H), 3. 96(t, /=5.7 Hz, 2H), 5.50(q, /=6. 9 Hz, 1H), 6. 96(s, 1H), 7. 02(d, /=6.0Hz, 2H), 7. 17-7. 22(m, 1H), 7.30(t, /-5. 5 Hz, 2H), 7.43(d, /=6. 9 Hz, 2H), 7.7l(d, /=9. 0 Hz, 3H), 8. 04(s5 II ：l-1--e ^ 1 Jtl ^ ^ . . ,…-.,... . ....... ... . …….L.L ..L.. .... 步驟38c.U)-乙基6-(2-(4-(4_(1_苯基乙基胺基）_7及_0比 咯并[2, 3-J]嘧啶-6-基）苯氧基）乙基胺基）己酸酯（化合物 1103-59) 將 6->臭己酸乙酉旨（477 mg，2· 14 mmol)及 1 1 02(400 mg, 1·07 ramol)於DMF(5 mL)之混合物，於5〇。〇授拌整夜。反 應後，將溶劑DMF蒸發並添加2 〇 乙醚。將該混合物過 濾’以乙醚清洗並乾燥以得到丨丨〇 3 — 5 9黃色固體（1 〇 〇呢）: LCMS: 516 [M+l]+。— ——— 步驟38d· U)-舲羥基-6-(2-(4-(4-(卜苯基乙基胺基）—7#- 吼洛并[2, 3-密啶-6-基）苯氧基）乙基胺基）己醯胺（化 合物5 9 ) 對含化合物1 1 03-59( 1 00 mg，0.19 mmol)之燒瓶，添 加羥基胺甲醇溶液（4· 〇 mL)。將該混合物攪拌於室溫3〇分 鐘。然後以乙酸調整為pH7。將混合物濃縮以得到一殘渣， 經過製備HPLC精製，得化合物59白色固體（64呢，67 %)。 LCMS: 503 [M+l] + ； ^ NMR(DMS0-^)： ^ 1. 26-1. 31(m, 2H), 1.53(d, /=6 Hz, 2H), 1.96(t, /-3 Hz, 2H), 2. 79(t, /=6 Hz, 2H), 3. 15-3. 21(ιη, 2H), 4.20(s, 2H), 5. 50(q, /=6.9 Hz, 1H)， 6-98(s， 1H), 7. 02(d, /=6.0 Hz, 2H), 1150-9131-PF/Kai 356 200829575 7. 17-7. 2〇(m, 1H), 7. 30(t, /=5.5 Hz, 2H), 7. 43(d, /=6.9 Hz, 2H), 7.71(d, /=9.0 Hz, 3H), 8. 04(s, 1H), 10.36(s, ih), 11.93(s, 1H)。 實施例39··製備（R)-，羥基-7-(2-(4-(4_(l_苯基乙基胺 基)-7土吨盛并[2，3-d]禮 胺（化合物6 0) 步驟39a·(们-曱基7-(3-(4-(4-(卜苯基乙基胺基）-7#-吼咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苯氧基）丙基胺基）庚酸酯（化合 f 物 1103-60) 標題化合物1 1 03-60( 1 1 2 mg，19%產率）係從1 1 02(400 mg，1.07 mmol)and 7-溴庚酸乙酯（507 mg，2.14 mmol) 使用類似於針對化合物1 1 03-59(實施例38)敘述之程序製 ———備TLC:Ms7 530—[ΜΪΓ]Γ。———— 步驟39b· (R)-#—羥基- 7-(2-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）—7#一 π比咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苯氧基）乙基胺基）庚醯胺（化合 f 物 60) 標題化合物60(73 mg， 69%產率）係從化合物 1 1 03-60( 1 1 0 mg，〇. 20 mmol)使用類似於針對化合物59(實 施例38)敘述之程序製備：LCMS: 5n [M + 1] + ; ,H NMRCDMSO-^): ^ 1.28(s, 4Η)， 1.49-l.54(m， 7Η)， 1.94(t, /=6 Hz, 2H), 2.77(t, /=6 Hz, 2H), 3.15-3. 21(m, 2H), 4.16(s, 2H), 5.52(q, /=6. 9 Hz, 1H), 6. 98(s, 1H), 7.02(d， /=6.0 Hz， 2H)， 7. 17-7.20(m， 1H), 73〇(t， /=5.5 Hz, 2H), 7.43(d, /=6.9 Hz, 2H), 7.71(d, /=9.0 357 1150-9131-PF;Kai 200829575
Hz，3H)，8.04(s，1H)，1(K33(S, 1H)，U92(s，1H)。 貝施例40.製備（A) 經基-g 一（2 一（4 一（4 一（i 一苯基乙基胺 基吼咯并2, 3-d]嘧啶-6-基）苯氧基）乙基胺基）辛醯 胺（化合物61) 步驟並&·( ’)二果 口比咯并[2, 3-V]嘧啶-6-基）苯氧基）丙基胺基）辛酸酯（化合 物 1103-61) 標題化合物1 1 03-61 (95 mg，16%產率）係從11〇2(400 ί % mg, 1. 07 mmol)及 8-溴辛酸酯（507 mg, 2· 14 mmol)使用 類似於針對化合物1 1 0 3-59 (實施例38)敘述之程序製備： LC-MS: 530 [Μ+1Γ。 步驟40b. (R)-#-羥基-8-(2-（4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7#-吡咯并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苯氧基）乙基胺Ϊ )辛醯胺（化合 物61) 標題化合物 61(55 mg, 59%產率）係從化合物 f 1 1 03-61 ( 95 mg，0. 17 mmol)使用類似於針對化合物59(實
I 施例 38)敘述之程序製備：LCMS: 531 [M+l] + ;沱 NMR(DMS0-^): J 1. 26(s, 6H), 1. 42-1. 53(m, 7H), 1.90(t, /=6 Hz, 2H), 2.81(t, /=6 Hz, 2H), 3. 14-3. 18(m, 2H), 4,17(s, 2H), 5.50(q, /=6. 9 Hz, 1H), 6. 95(s, 1H), 7.04(d, /=6.0 Hz, 2H), 7. 15-7. 20(ra, 1H), 7. 30(t, /-5.5 Hz, 2H), 7.43(d, /-6.9 Hz, 2H), 7.71(d, /-9.0 Hz, 3H)，8.04(s，1H)，10.32(s, 1H), 11.92(s，1H)。 實施例41 :製備U)-#-羥基- 6-(4-(4-( 1-苯基乙基胺 1150-9131-PF;Kai 358 200829575 基）-7#-吡咯并[2, 3-J]嘧啶-6-基）苯基胺基）己醯胺（化合 物66) 步驟41a.(R) -乙基6-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）-7H- ^比口各 并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苯基胺基）己酸酯（化合物1 201-66) if lb ^Μ 50 615 (10 . mg, 1, 5 2 mmo l ) M ^ M L· S| (338.7 mg，1.52 mmol)及 DMF(15 mL)之混合物，於 5〇°c 攪拌1 2小時。將溶劑於高真空移除，並將粗製產物以製備 性HPLC精製，得到標的化合物1 201-66(80 mg，1 0%)黃色 固體.LCMS: 472 [M + l]+。 步驟41b·(们-於羥基-6-(4-(4-(卜苯基乙基胺基）-7及1匕 哈并[2, 3 - θ]哺°定-6-基）苯基胺基）己醢胺（化合物66) 將化合物1201-66(80 mg, 0.17 mmol)及新鮮製備的
NH；〇r^ ^ ^ H 將该混合物以AcOH調整為pH7· 0，並將溶劑移除。對固體 添加水，過濾並乾燥，以得化合物6 6黃色固體（5 0 mg， 60%): m.p· 207〜217t：，LCMS: 473 [M + l] + ; iNMiKDMSO-A) β l，36(m，2H)，1·5卜 1.53(d，7H，/二7·2Ηζ)，1.96(t，2H， /二6·9Ηζ)，3.03(m，2H)，5.43〜5.53(m，1H)，5.81(t，1H， J = 5. 4 Hz), 6. 62(d, 2H, /=8. 4 Hz), 6. 79(s, 1H), 7. 19(m, 1H), 7.32(m, 2H), 7.43(m. 2H), 7. 53(d, 2H, /-7. 2Hz), 7.64(d, 1H, /=7.8 Hz), 7. 99(s, 1H), 8. 69(s, 1H), 10·37(s， 1H)， 11·71(s, 1H)。 實施例42:製備（们-於羥基-7 —— (卜苯基乙基胺 基）-7#-吼咯并[2, 3-J]嘧啶-6-基）苯基胺基）庚醯胺（化合 1150-9131-PF;Kai 359 200829575 物67) 步驟42a. (R)-乙基7 -（4-(4-(1-苯基乙基胺基 并[2, 3-d]嘧啶-6-基）苯基胺基）庚酸酯（化合物1 20 1 -67) 標題化合物120卜67黃色固體（105 mg，14%產率）係 5 0 6 ( 5 0 0 m 52 L· 61 C36i) mmol)使用類似於針對化合物1 20 1-66(實施例41)敘述之 程序製備：LC-MS: 486 [M+l]+。 步驟42b. (#)-#-羥基-7-(4-(4-(1-苯基乙基胺基）— 7#ι匕 f'.: . ' 略并[2, 密咬-6-基）苯基胺基）庚醯胺（化合物67)
標題化合物67黃色固體（85 mg，86%產率）係從化合 物1 20 1 -67( 1 03 mg，0.21 mmol)及新鮮製備的羥基胺甲醇 溶液（1. 77 M，5 mL)使用類似於針對化合物66(實施例41) 敘述之程序製備：m. p. 125〜Γ301 了IcMsre NMR(DMSO-A) δ 1. 29(m, 4H), !·41 〜1.51(d 7H /二7·2Ηζ)，1.96(m，2H)，3.03(m，2H)，5·43〜5·53(ιη，1H) ( 5.81(t, 1H, /-5. 4 Hz), 6. 62(d, 2H, /=8. 4 Hz), 6 79(s 1H), 7.19(m, 1H), 7. 32(m, 2H), 7.43(m. 2H), 7.53(^ 2H, /=7. 2Hz), 7.64(d, 1H, /=7. 8 Hz), 7. 98(s> 1H) 8·67(s， 1H)， 10·34(s, 1H), 11. 70(s， 1H)。，， 生物學試驗： 如同前述，本發明所定義的衍生物，呈 頁抗增生活性 此等性質可例如使用一種以上下列程序評估· 體酪月§ (a)—體外試驗，決定受測化合物抑制典 酸激酶之能力 t 1150-9131-PF/Kai 360 200829575 受測化合物抑制受體激酶（EGFR、HER2/ErbB2及 VEGFR2)之能力，使用HTScan™受體激酶試驗套組（Cen Signaling Technologies, Danvers, MA)評估 ° EGFR 酪胺 酸激酶以GST-激酶融合蛋白質之部分純化形式取得，係使 用一榉狀裔毒表現系翁’從一耩 端 GST 標籤之人類 EGFR(HiS672-Ala1210)(GenBank Accession number. NM一0 05228)。該蛋白質利用谷胱甘肽— 瓊脂以單步驟親和層析精製。HER2/ErbB2酪胺酸激酶係使 用一桿狀病毒表現糸統產生’其具一構建物，包含一人類 HER2/ErbB2 c-DNA(GenBank Accession number. NM 004448) 片段（Lys676-Vall255)以胺基末端融合於一 GST標鐵。 VEGFR2赂胺酸激酶係使用係使用一桿狀病毒表現系統產 ' ' …一 ———… — — —’ -------------------------.... 生，其具一構建物，包含一人類VEGFR2 cDNA激酶結構域 (Asp805~Vall356)(GenBank Accession number. AF035121) 片段，以胺基末端融合於一 GST-HIS6-凝血酶切開部位。 該蛋白質利用谷胱甘肽-瓊脂以單步驟親和層析精製。抗碗 酸化酪胺酸單株抗體，P-Tyr-1〇〇，被用於偵測生物素化受 質肽之填酸化（EGFR 、生物素-pTpiB(Tyr66); HER2/ErbB2、生物素化 FLT3(Tyr589); VEGFR2、生物素 -Gastrin 前驅物（Tyr87))。酵素活性係於 6〇 mM HEPES、5 mM MgCh 5 mM MnCl 2 200 μΜ ATP ^ 1. 25 mM DTT ^ 3 μΜ Na3V〇4 > 1· 5 mM肽及50 ng EGF受體激酶中測定。已結合抗體，使 用 D E L F IA 糸統（P e r k i η E1 m e r，W e 11 e s 1 e y，M A) i"貞測，該系 統由DELFIA⑧銪才示ό己抗小鼠IgG(PerkiηΕ1mer， 1150-9131-PF;Kai 361 200829575 #AD0124) 、 DELFIA⑧ 增強溶液（PerkinElmer， #1244-105)，及 DELFIA® 鏈黴親和素（Streptavidin)包覆 之96井盤（PerkinElmer，AAAND-0005 )構成。螢光係於 WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相對螢光單元（RFU) 教告。貴斜使用G 了 aphPi 使用S型（sigmoidal )劑量-回應曲線適合度演算法，計算 IC50。 將受測化合物溶解於二甲基亞砜（DMS〇)，以得到2〇 的工作原濃度。各試驗設定如下：添加1〇〇//1的l〇mM ATP到1· 25 ml的6 mM受質肽。將該混合物以去離子水稀 釋，以得到2X ATP/受質混合物（[atp]=400 mM,[受質]=3 …mM)。立即將酵素從-so t轉送到冰中。使酵素於冰上解凍。 於4 C輕微地微量離心，使液體沉在小試管底部。立即放 回冰中。添加ι〇βΐ的DTT(1.25 mM)至2·5 ml的4χ 耵8(^1^%酪胺酸激酶緩衝液（24〇福肫抑8如7.5,2〇_
MgCl2’ 20 mM MnC1，12 mM NaV〇3)，以配成 m/激酶緩衝 液。將1.25 ml的DTT/激酶緩衝液，移到酵素f，以配成 4X反應混合物（[酵素]=4叫/4於4Χ反應混合物）。將 12.5Μ # 4Χ反應混合物與12.5μ/井的關注的預稀釋 化合物(通常約1〇“)於室溫溫育5分鐘。添加25以的 2ΧΑΤΡ/受質混合物至25私"井的預溫育反應混合物/化人 物。將反應平盤在室溫溫育3G分鐘。添加心"井的停 止緩衝液⑼錢職⑺…以停止該反^將各反應
25//1^75//1 去離子水 / 共，#2；, A 私到9 6井鍵徽親合物—包覆 1150-9131-PF;Kai 362 200829575 平盤，並於室溫溫育60分鐘。以200//1/井PBS/T(PBS， 〇· 0 5% Tween-20)清洗3次。將初級抗體、磷酸化酪胺酸 mAb(P-Tyr-100)，1:1〇〇〇 於 pBS/T 中，以 1%牛血清白蛋白 (BSA)稀釋。添加1 〇〇 # 1 /井的初級抗體。於室溫溫育6 〇 分鐘。以20 0贫1 /并PBS終
IgG 1 : 50 0 於 PBS/T ’ 以 1%BSA 稀釋。添加 1〇〇 # 1/井經 稀釋的抗體。於室溫溫育30分鐘。以200//1/井pbs/T 清洗5次。添加1〇0//丨/井DELFIA®增強溶液。於室溫溫 月5分鐘。以適當的時間-解析（Time_Res〇ive(j)平盤讀取 儀’偵測發射的615 nm螢光。 (b)—體外（in 試驗，其決定受測化合物抑制經egf 刺激之EGFR磷酸化的能力 ................…—…——…"—一_ …—…--一---一——.一一-一—.......——........................................… — 使用k準的組織培養程序使A431細胞生長在T75燒 瓶，直到細胞達到接近匯合（confluency)(〜κ5χΐ〇7)細胞； D-MEM，10%FBS)。於無菌狀態，在96井微平盤的每個井， 加入100#1的細胞懸浮液（x各井的細胞）。接種並監控細 胞密度，直到井間一致地達到匯合；大約3天。以抽氣或手 動置換，從平盤之井移除完整的培養基。將各井之培養基 取代成50 // 1的預溫無血清培養基，並溫育4至16小時。 使用預溫的D-MEM製備2倍系列稀釋的 / 抑制劑濃度，落於，…之範圍。從a:=胞 平盤移除培養基。添加1 〇 0 # 1的系 μ旳糸列稀釋抑制劑到細胞 中，並溫育1至2小時。從平盤之共 卞^之开以抽氣或手動置換， 移除抑制劑。添加無血清纟立表其* π坧養基使細胞休止（無效 1150-9131-PF;Kai 363 200829575 (mock))，或帶100 ng/ml £(^之無血清培養基。各井使用 loo# 1的休止/活化培養基。於3rc溫育7·5分鐘。手動 或以抽氣移除活化或刺激培養基。立即將細胞以4%甲酿於 IX PBS 口疋。在κ驗台上於室溫，不振盪地溫育別分鐘。 ^ Φ ° ·1% ^ ^ 5 ^# 次 5 分鐘。 移除固定溶液。使用一多通道分注器，添加的
Triton 清洗溶液（1X PBS + 〇· 1% Trit〇n χ—1〇〇)。使洗液在 至溫，於旋轉器振盪5分鐘。於以手動清洗後，再重覆清 洗步驟4次。使用一多通道分注器，藉由添加的 LI COR Odyssey封鎖緩衝液至各井以阻斷細胞/井。於室 溫，在旋轉器上中度地振盪中，阻斷9〇分鐘。添加2種初 級抗體至含有一^ ^ ^ ^ ^ ^ 础，將初級抗體溶液混合均勻（磷酸化—EGFR Tyrl〇45,（兔； 1·100 稀釋，Cell Signal ing Technology，2 237;總 EGFR，
J 昧、，1.500 稀釋；Bi〇source internati〇nal，AHR5〇62)。 從阻斷步驟移除封鎖緩衝液，並添加4〇# i於〇dyssey封 鎖緩衝液中的所望初級抗體或抗體，以覆蓋各井底部。僅 添加100 /Z 1的Odyssey封鎖緩衝液至控制井。於室溫，溫 矛振盈下，將初級抗體溫育整夜。將該平盤於室溫、溫和 振盪下，以lx pBS + 〇· 1% Tween-2〇使用大量緩衝液清洗5 一人、5分鐘。使用多通道分注器，添加2〇〇# 1的Tween 清洗溶液。令洗液在旋轉器上於室溫振盪5分鐘。再反複 清洗步驟4次。將該螢光標記之二次抗體稀釋於Odyssey 封鎖緩衝液（山羊抗小鼠IRDyeTM 680( 1:200稀釋；LI-COR 1150-9131-PF;Kai 364 200829575
Cat· # 926-32220)山羊抗兔子 iRDyeTM 800CW( 1 :800 稀釋； LI-COR Cat. # 926-32211 )。將抗體溶液充分混合，添加 4 0 // 1的二次抗體溶液至各井。於室溫、溫和振盈下，溫 育60分鐘。在溫育中，保護平盤免於受光。以ΐχ pbs + 0. 1 % Tween “2皆，在室 次、5分鐘。使用多通道分注器，添加20 0 // 1的Tween清 洗溶液。使洗液在旋轉器上於室溫振盪5分鐘。重複再清 ， 洗4次。於最終清洗後，從井完全地移除清洗溶液。反轉 該平盤，並且温和地用紙巾輕拍或擦去微量的清洗緩衝 液。使用Odyssey遠紅外影像系統，掃描並偵測此平盤於 700 及 800 通道 2 者（70 0 nm 偵測 IRDyeTM 680 抗體，800 nm 4貞測I RDyeTM 80 0CW抗體）。使用Odyssey軟體決定全部對 —……———.'......."—-…'…一 ——…'—-一…-·.一.--------------—-——-------------------------——一—.....——-一一—......——… 經磷酸化蛋白質（700/800)之比例，並在Graphpad Prisin(V4.0a)繪製結果。結果可使用GraphPad Prism(v4.0a)繪製’並且使用S型（si gmoidal )拋物線劑量 I -回應曲線適合度演算法，計算IC50。 (c)一體外FiirW試驗，決定受測化合物抑制HDAc酵 素活性之能力 HDAC抑制劑使用HDAC螢光測量試驗套組 (AK-500, Biomol、Plymouth Meeting、PA)筛選。可將受試 化合物溶於二甲基亞颯（DMS0)，以得到20 mM工作原濃 度。螢光使用WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad P；riSiiKVK)U 繪圖，並且使用S型（s i gmo i da 1)拋物缘劑量—回應曲線適 1150-9131-PF;Kai 365 200829575 合度演算法，計算IC50。
各試驗設定如下··將所有的套組成分解凍，於使用前保 持在冰上。將HeLa核萃取物以1:29稀釋於試驗緩衝液（5〇 niM Tris/Cl ^ PH 8.0, 137 raM NaCl, 2.7 mM KC1, j mM
Mgei^ Tr^ 合物於試驗緩衝液（5x最終濃度）之稀釋物。將Flu〇r化 LysTM基稀釋於試驗緩衝液成！⑽uM(5()倍=2又最終）。 將Fluor de LysTM顯影劑濃縮物（例50 // 1 + 95〇// }試驗緩 衝液）於冷試驗緩衝液稀釋2()倍。第二，將〇· 2禮 Trichostatin A 100-倍稀釋於ιχ顯影劑（例1〇 # i於工 ml;最終Trichostatin A濃度於ΐχ顯影劑=2//M;添加 HDAC /受 1反^ 稀釋tr i chostat i η A或受測抑制劑，至微滴定盤之適當的 井。添加經稀釋之HeLa萃取物或其他HDAC樣本，至所有 井，除了負控制組。使經稀釋之Fluor de LysTM受質及樣 本在微滴定盤中平衡至試驗溫度（例如25或37〇c)。藉由 添加經稀釋受質（25 // 1)至各井並充份混合，以起始化hj)ac 反應。使HDAC反應進行1小時，接著藉由添加Flu〇r de L y s T Μ顯影劑（5 0 // 1)使反應停止。將平盤在室溫（2 5) ✓皿月1 0 -15分鐘。在能於波長3 5 0- 3 8 0 nm之範圍激發的微 滴定盤讀取螢光儀，讀取樣本，並偵測在440-460 nra發射 之光。 以下表4-B列舉本發明代表化合物及其活性於hdAC、 HER2/Erb2、VEGFR2及EGFR分析。於此等試驗，使用以下 1150-9131-PF;Kai 366 200829575 的分級，IC5〇:I^10//M，10/ζΜ>ΙΙ>1//Μ，1//Μ>ΙΙΙ>0·1/ζΜ， 且 IV$ 0· 1 // Μ。 表4_Β
化合物編號 HDAC EGFR HER2/ ErbB2 VEGFR2 …_ 1……… II II II N/A 2 I IV III III 11 I IV IV IV 12 I IV IV III 13 II IV IV III 14 II IV III III 15 III IV III III 16 III IV IV III 17 IV IV IV II 19 III IV III III 20 III IV III III 21 IV IV III II ——…22 — IV IV 4IJ n 24 I IV III III 25 III IV III III 26 IV IV in in 27 IV IV III III 28 I III III III 29 IV IV III III 30 III IV III III 31 IV IV III III 32 III IV III III 33 IV IV III III 34 III III III III 35 III IV III III 36 III III III III 37 IV III III II 38 IV III II II 39 III IV IV III 40 III IV III II 41 III IV III III 42 III IV- II II 1150-9131-PF;Kai 367 200829575
43 III IV III II 44 III IV III III 45 IV I I I 46 III 47 II 49 I 50 II 51 IV 55 II 56 II 57 III IV 58 III III II 59 III 60 III IV IV IV 61 III IV 62 II 63 III 64 III 65 IV g0 IV IV IV If 67 IV IV IV III 第5部分：
(VIII)
(IX)
表5-A 化合物編號 結構 1 1150-9131-PF;Kai 368 200829575
1150-9131-PF;Kai 369 200829575
1150-9131-PF;Kai 370 200829575 27 28 〇 c，Va 成义 29 OH Η H 30 J&XH夕 N、 OH 31 Λ χν<^ s。 32 Η〇-Νγ^·Ν^ 33 -u-'Hj--;------- 34 °γΝΗ 丨〇 / 35 ,Ν，ΗΝώ/Η々 36 f ( 37 38 39 ΊΛΗχ>^ 371 1150-9131-PF;Kai 200829575 40 41 42 .vC丫0 0 43 rVaA^ Η〇^γ^Ν Ο
104
105106
1150-9131-PF;Kai 372 200829575
Scheme 2
202
Scheme 3
301 401
NH2OH
1150-9131-PF/Kai 373 200829575
Scheme 5
實施例1:製備，（2-氯-6-曱基苯基）-2-(6-(4-(2-(輕基 I基)^ 2=侧東基乙基7哌嘗-T二基喷啶：仁言胺基) 噻唑-5-羧醯胺（化合物1) 步驟1 a · 2 -氣逢ti坐（化合物1 〇 2) 將2 fe基嚷峻（101)(20.0 g，200.0 _〇ι)溶於飽和 NaCl(20 mL)水溶液及HC1(60 inL)之溶液，維持在室溫浴。 ^後同日守滴加 NaN〇2( 25 0 mmol)於 H2〇(5 0 mL)及濃 HC1(20 mL)處理。將該反應物於室溫攪拌1小時，以醚萃取，於工 atm濃縮。於真空蒸餾得到產物1〇2淡黃色液體（i〇 7 g， 45%)： NMRCCDCla)^ 7. 24(d, /-3. 6 Hz, 1H), 7. 57(d, 扣3. 3 Hz, 1H)。 步驟lb. 2-氯-#-(2-氣-6-甲基苯基）噻唑_5-羧醯胺（化合 物 103) 1150-9131-PF;Kai 374 200829575 將 2-氯噻唑（ 1 02)(480 mg, 4.0 _〇ι)於 THF(10 mL) 之溶液，冷卻至-78°C，並滴加2. 5 M正丁基鋰於己烷（l 68 mL, 4· 2 romo 1)，期間20分鐘，同時維持溫度在_75°c下。 添加完成後，將該混合物於-78°C攪拌1 5分鐘，然後以2- # ll, Si il ( ^ mmo l ) mL) ^ ^ ^ 4 理。將該混合物於-78°C攪拌達2小時，以飽和Njj4Ci水溶 液淬冷，回溫至室溫，並在EtOAc及IhO間分層。分離Et0Ac f 相，以濃鹽水清洗、乾燥（NazSO4)，並真空下濃縮，得到黃 1 色固體。將粗製產物以管柱層析精製以得到化合物1〇3淡 κ 色固體（0· 95 g， 83%) 。LCMS: 286 [Μ + 1 ]+· NMR(DMS0-d/,)： 5 2.22(s, 3H), 7. 29(m, 2H), 7.41(dd, ——^ 613? ^ ^ 8 · 4 5 ( s，1H)，1 〇 · 4 0 ( s，1H )。 —.〜—------------—^-——____________________________ 步驟lc· 2-氯-#-(2-氣-6-甲基苯基）一舲（4-曱氧基苄基） 噻唑-5 -羧醯胺（化合物1 〇 4) 將-氯-#-(2-氯-6-甲基苯基）噻唑（1〇3)(〇.57 g，2.0 ( 咖〇1)於DMF(5 mL)之溶液，以60% NaH(2 4 _〇1)處理並 於室溫攪拌30分鐘。將該混合物以4-甲氧基苄基氯（〇.38 g，2· 4 mmol)及四丁基碘化銨（〇· 15 mg，〇· 4〇丽〇1)處理， 然後於室溫攪拌1 6小時。將該混合物於H2〇及£：1;〇“間分 層，然後分離EtOAc相，以濃鹽水清洗、乾燥⑶以卯4)並真 空濃縮。將粗製產物以管柱層析精製以得到化合物丨〇4黃 色固體（〇.50g，62%hLCMS: 429 [M+Na] + · iNMRCDMSO-dO: ^ 1.73(s, 3H), 3.60(s, 3H), 4.48(d, /=13.8 Hz, 1H), 5.09(d, /-14. 1 Hz, 1H), 6. 79(d, /-8. 4 Hz, 2H), 7.11(d, 1150-9131-PF;Kai 375 200829575 /=8.7 Hz，2H)，7.29(d, /=6.6 Hz, 1H)，7.44(m，3H)。 步驟Id· 6-氯-2-甲基嘧啶-4-胺（化合物106) 將 4, 6-二氯-2-甲基嘧啶（ 1 05)(20.〇 g，120 mmol)之 溶液置於有氫氧化銨（5〇 mL)之管内。將該管密封並加熱於 125~~12 8$ 製，白色晶體），得到產物化合物1〇6白色固體（12. 4 g， 70%)。LCMS: 144 [M+l]+ 4 NMR(DMS0-Α): θ 2· 27(s, 3H)， 6· 24(s，1H)，7· 08(s，2H)。 步驟le. 2-（（6-氯-2-甲基嘧啶-4-基）甲基）-，（2-氯-6-甲基苯基）- #-(4 -甲氧基苄基）π塞σ坐-5 -魏醢胺（化合物1〇7) 將 4-胺基-6-氯-2-甲基嘧啶（1〇6)(14.0 mg，〇.1〇 mmol)於0°C花30分鐘分次添加至NaH(6〇% dispersi〇n —.——… …—,———一—— ------------------———— ———…一 — 5 0.30 mmol)於THF( 3 0 mL)之懸浮液，然後分次以化合物 104(41· 0 mg，0. 10 mmol)處理。將得到的混合物回流4小 時’冷卻至室溫，並以H2〇( 10 mL)稀釋。將該混合物以1 n HC1(5 raL)酸化，並以EtOAc(3xl〇 mL)萃取。將有機層乾 燥（NazSO4)並条發。將粗製產物以管柱層析精製以得到化合 物 107 淡黃色固體（41 mg，80%): j NMIKDMSO-J 1.72(s，3H)，2.45(s，3H)，3.71(s，3H)，4.40(d，/=14 1
Hz, 1H)5. 19(d, /=13.8 Hz, 1H), 6. 8l(m, 3H), 7. 14(d, /=8.4 Hz, 2H), 7.29(d, /=7.5 Hz, 1H), 7.43(t, /=7 8 Hz, 1H), 7.47(s,1H), 7· 53(d, /,6. 9 Hz， 1H)， 12.07(ds， 1H)。 步驟If· 2-(6-氯-2-曱基嘧啶-4 一基胺基）(2—氯—6-甲 1150-9131-PF;Kai 376 200829575 基本基）°塞嗤_5~·竣酿胺（化合物log) 將化合物 107(10.0 g，19·5 _〇1)溶於 5〇% TFa 於 CH2C12(50 mL)之溶液，以三氟曱烷磺酸（1〇· 〇 g，67· 5mm〇1) 處理。將該反應混合物於室溫攪拌達24小時。將該混合物 ^ ^ ^ ^ m m ^ U ^ # a # ^ >ib ^ # 108 黃色固體（5· 6 g， 87%)。^ NMR(DMS〇-d6): ^ 2. 21(s, 3H), 2. 39(s, 3H), 6. 07(m, 1H), 7. 2 6(m, 2H), 7.37(d, /=6.6 Ηζ,ΙΗ), 8. 20(s, 1H), 9. 85(s, 1H), 11·47(s， 1H)。 步驟lg·沪（2-氯-6-甲基苯基）一2一（2-曱基一6_(哌嗪q一基） 嘧啶-4-基胺基）噻唑-5-羧醯胺（化合物1〇9) 將化合物 108(2· 6 0 g，6· 6 mmol)、哌嗪（5. 6 0 g，66. 0 mmol)、碳酸鉀（1· 82 g，13. 2 mmol)及 DMF(15 mL)之混合 物，於135 C攪拌1 2小時。將溶劑減壓蒸發並將殘渣依序 以水、丙酮及乙酸乙酯清洗，以得到標題化合物丨〇9淡黃 色固體（1.8 g，64%): LCMS·· 444 [M+l]+。 步驟lh. 2-（4-(6-(5-（2-氣-6-甲基苯基胺甲醯基）噻唑 -2-基胺基）- 2 -甲基嘧啶-4-基）哌嗪-1-基）乙酸乙酯（化合 物 110-1) 將化合物109(0. 31 g，0· 70 mmol)、2-溴乙酸乙酯（in mg, 0.70 mmol)、三乙胺（0.28 g，0.70 mmol )及 dmf( 5 mL) 於3 5 °C攪拌達2分鐘。將溶劑減壓蒸發以得到標題化合物 110-1白色固體（333 mg, 90%)，直接用在次一步驟而不經 進一步純化：LCMS: 530 [M+l]+。 1150-9131-PF;Kai 377 200829575 步驟li. #-(2-氣-6-甲基苯基）_2_(6_(4 一（2_(羥基胺 基）-2-侧氧基乙基）哌嗪-卜基广卜甲基嘧啶_4_基胺基）噻 唑-5-羧醯胺（化合物1) 對攪拌中之羥基胺氯化氫（467g，67〇_〇1)於曱 # (24raL)^ m ^ 〇χ ^ 10 0. 溶於甲醇（14mL)之溶液。添加後，將該混合物於〇它攪拌 3 0为鐘，並靜置於〇 C。將得到的沉澱分離，並將製備該 溶液以得到游離羥基胺。 上述新鮮製備的羥基胺溶液（〇·5 mL，〇·89 mm〇1)置於 5 mL燒瓶。將化合物ii〇-i(333 mg，〇·63 mm〇1)於超音波 振盪下以1 ο分鐘添加至此溶液。反應過程以TLC監控。將 該混合物以乙酸中和並接著減壓濃縮。將殘渣以製備性
Iplc過^ 517 [M+l] ; 'H NMRCDMSO-i/e) ^ 2. 20(s, 3H), 2. 38(s, 3H), 2.58(πι, 4Η), 2.90(s, 2H), 3.51(m, 4H), 6. 02(s, 1H), 7.26(m, 2H), 7. 37(m, 1H), 8.20(s, 1H), 8.80(s, 1H), 9.86(s，1H)，l〇.47(s，iH)，.1146(s，iH)。 實施例2:製備’（2 一氣-6-曱基苯基）一5一（6-(4 一（3 一（羥基 胺基）-3-侧氧基丙基）哌嗪—基）_2-曱基嘧啶-4—基胺 基）-4H-吼咯-3-羧醯胺（化合物2) 步驟2a· 3-(4-(6 -（5 -（2-氯-6-曱基苯基胺甲醯基）噻唑 -2-基胺基）-2-甲基嘧啶-4_基）哌嗪—J一基）丙酸甲酯（化合 物 110-2) 標題化合物11〇一2淡黃色固體（〇· 31 g，74%)係從化合 1150-9131-PF;Kai 378 200829575 物 1 09( 0. 35 g，0. 79 mmol)、3-溴丙酸曱酯（〇· 13 g，0· 78 mmol )、Ε)ΙΕΑ(0·21 g, 1.58 mmol)及 DMF(5 mL)，使用類 似於針對化合物實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 530 [M + 1]+. 步驟 2b· #-(2-氣-6-甲基苯基）-2- (6- (4-( 3-(輕基胺 基）-3-侧氧基丙基）哌嗪_1-基）-2-甲基嘧啶-4-基胺基）噻 唑-5-羧醯胺（化合物2)
標題化合物2白色固體（60 mg，19%)係從化合物 110-2(0,31 g, 0.59 _〇1)使用類似於針對化合物1(實施 例 1)敘述之程序製備：LCMS: 531 [M+l] + ； !H NMR(DMS0-^6) ^2. 16(t, /-6.9 Hz, 2H), 2. 24(s, 3H), 2.41(s, 3H), 2. 54(m, 4Ή), 2. 57(t, /=6. 6 Hz, 2H), 3.50(m, 4H), 6. 05(s, 1H), 7. 25(m, 2H), 7. 37(m, 1H), 8.23(s, 1H), 8.88(s, 1H), 9.90(s, 1H), 10.42(s, 1H), 11·51(s， 1H) 〇 貫施例3:製備(2-氯-6 -甲基苯基）-2 -（6 -（4-（4-（經基 胺基）-4-側氧基丁基）哌嗪~卜基）—2-曱基嘧啶-4-基胺基） 噻唑-5-羧醯胺f化合物3) 步驟3a· 4-(4-（ 6-(5-(2_氯-6-甲基苯基胺甲醯基）噻唑 -2-基胺基）-2-甲基嘧啶-4-基）哌嗪—1 —基）丁酸乙酯（化合 物 110-3) 標題化合物110-3淡黃色固體（〇· 22 g，71%)係從化合 物 1 09(0.25 g，0.56 mmol)、4-溴丁酸乙酯（〇.i2g，0.56 mmol)、DIEA(0· 15 g，0· 56 mmol)及 DMF(5 mL)使用類似 1150-9131-PF;Kai 379 200829575 於針對化合物11 0-1 (實施例1)敘述之程序製備：LCMS : 558 [M+1]' 步驟3b· #-(2-氯-6-甲基苯基）-2 -（6-(4-(4-（經基胺 基）-4-侧氧基丁基）旅嗓—1 —基）-2 -甲基喊唆-4_基胺基）《塞 唑二5二羧醯胺广化合〜物.3 ) 標題化合物3白色固體（30 mg，14%)係從化合物 110-3(0.22 g，0.40 mmol)使用類似於針對化合物1(實施 例 1)敘述之程序製備：LCMS: 545 [M+l] + ;沱 NMRCDMSO-^e) J'l. 69(m, 2H), 2. 01(t, /-6. 6 Hz, 2H), 2. 25(s, 3H), 2. 30(t, /-6.9, 2H), 2.41(m, 4H), 2. 55(s, 3H), 3.52(m, 4H), 6. 06(s, 1H), 7.25(m, 2H), 7. 36(m, 1H), 8. 23(s, 1Ή), 8. 70(s, 1H), 9. 90(s, 1H), 10.37(s, —ΓΤΤ·,., .. -.. 一‘一—〜— —V-— «—一一—，—..一》——— 一一，—一 .一 一〜一 — 一〜 1H), 11.50(s, 1H)。 —— 貫施例4:製備(2 -氯-6-甲基苯基）-2-（6 -（4-(5-(¾基 胺基）-5 -側氧基戊基）旅嗓-1-基）-2-甲基鳴咬-4-基胺基） 噻唑-5-羧醯胺（化合物4) 步驟4a·曱基甲基5_(4 -（6-(5 -（2-氯-6 -甲基苯基胺甲醮 基）σ塞嗤-2 -基胺基）- 2-甲基哺σ定-4-基）旅嗪-1-基）戊酸曱 酯（化合物110-4) 標題化合物110-4淡黃色固體（120 mg, 39%)係從化合 物 109(0.24 g, 0.54 mmol)、5-溴戊酸甲酯（〇. i2g, 0. 60 mmol)、DIEA(1· 54 g, 1· 20 mmol)及 DMF(3 mL)使用類似 於針對化合物11 0-1 (實施例1 )敘述之程序製備：lcms · 558 [M+1]+ 〇 1150-9131-PF;Kai 380 200829575 步驟4b· #-（2-氣-6-甲基苯基）-2-（6-(4-(5-(羥基胺 基）-5 -側氧基戊基）略嗓—1-基）—2 -曱基σ密α定—4 -基胺基）嗟 唑-5-羧醯胺（化合物4) 標題化合物4白色固體（30 mg，25%)係從化合物 例 1)敘述之程序製備：LCMS: 559 [Μ+1] + ;沱 NMRCDMSO-i/e) ^ 1. 44(m, 4H), 1.95(t, /=7.5 Hz, 2H), 2.22(s, 3H), 2.26(t, /=6.9 Hz, 2H), 2. 37(m, 7H), f . 3.47(m, 4H), 6. 07(s, 1H), 7. 25(m, 2H), 7. 37(dd, /=2.1 Hz, /=7·2Ηζ，2H)，8.23(s, 1H)，9.93(s, 1H)。 實施例5:製備#-(2-氯-6-甲基苯基）-2-(6-(4-(6-(羥基 胺基）-6-側氧基己基）哌嗪-1-基）-2-甲基嘧咬-4-基胺基） 一 、—·~-—y..，-—,，·*«—..........—··„々—»—〜·.,.”„· —... ...... _________________ 噻唑-5-羧醯胺（化合物5) 步驟5 a· 6-(4 -（6-(5-(2-氯-6 -甲基苯基胺曱醯基）π塞口坐 -2-基胺基）-2-曱基嘧啶-4-基）哌嗪-1-基）己酸乙酯（化合 【，物 110 - 5) 標題化合物110-5棕色固體（120 mg, 41%)係從化合物 109(0.22g， 0.495 mol), 6-溴己酸乙酯（0.12 g, 0.495 mmol)、碳酸鉀（〇_ 22 g，1· 60 _〇1)及 DMF(5 mL)使用類 似於針對化合物110-1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 586 [M + l] + . 步驟5b· N -（2-氣_6-曱基苯基）-2-(6 -（4 -（6-(經基胺 基）-6-側氧基己基）哌嗪-1-基）-2-曱基嘧啶-4-基胺基）噻 唑-5-羧醯胺（化合物5) 1150-9131-PF;Kai 381 200829575 標題化合物5白色固體（30 mg，26%)係從化合物 110-5(120mg，0.20ram〇l)使用類似於針對化合物1(實施 例1)敘述之程序製備：LC-MS: 573 [M+1] + ; !h NMR(DMSO-^b) ^1. 26(m5 2H), 1.49(m， 4H)，丨 93(t J, 2H,z, .2II), 2«. »2 2ζs, 3ΗX, .2,. 2.6(j-=zγ 2Ηz 2H) 2· 48(ni，7H)，3· 47(m, 4H)，6· 04(s，1H) 7 26(m 2H) 7· 37(m，2H)，8· 21 (s，1H)，8. 66(s，1H)，9 88(s 1H) 10.33(s, 1H)， 10·33(s， 1H)。 實施例6:製備K2-氯-6-甲基苯基）一2一（6-(2-(2-（經基 胺基）-2 -側氧基乙基胺基）乙基胺基）-2-曱基u密。定—4 -基胺 基）噻唑-5-羧醯胺（化合物7) 步驟6 a. 2 - (6 - (2 -胺基乙基胺基）-2 -甲基續唆—4 -基胺 基）-#-(2-氯-6-甲基苯基）嗟唾-5 -敌醯胺（化合物201) 將化合物 108(3.0 g，7.6 mmol)於乙烧-1，2 -二胺（50 mL)之溶液，加熱至80°C並攪拌1〇小時。將反應物於真空 濃縮，並將殘渣於H2〇及EtOAc間分層。分離EtOAc相， 以濃鹽水清洗、乾燥（Na2S〇4)並真空濃縮以得標題化合物 201 棕色固體（1.3 g, 40%)。LC-MS: 418 [M+l]+， H-NMR(DMSO-d〇: β 1.86(s，2H)，2.22(s, 3H)，2.36(s， 3H), 2.48(t, /=6.0 Hz, 2H), 2. 76(t, /=6.0 Hz, 2H), 3.15(s, 1H), 5.88(s, 1H), 7.26(m, 2H), 7. 37(dd, /=2.4, /=6.9 Hz, 1H)，8.19(s，1H), 9.83(s，1H)。 步驟6b· 2-(2 -（6 -（5 -（2-氣-6 -甲基苯基胺曱醢基）嗟n坐 -2-基胺基）-2 -曱基嘧啶-4-基胺基）乙基胺基）乙酸乙酯 1150-9131-PF;Kai 382 200829575 (化合物202-7) 對化合物 201 (0.50 g，1·2 mmol)於 DMF(15 mL)之溶 液，添加 2 -漠乙酸乙酯（0· 2 g，1 · 2 mmo 1)及 K2C〇3(41 mg， 0.3 mmol)。將該反應物於30°C攪拌達2小時。將混合物 於真空电濃縮 物 202-7 淡黃色固體（110 mg, 22%): LC-MS: 504 [M + l] +。 步驟6 c · #- (2-氯-6-甲基苯基）-2-(6-(2-（2-(經基胺 基）-2-侧氧基乙基胺基）乙基胺基）-2-曱基嘧啶-4-基胺基） 噻唑-5-羧醯胺（化合物7) 標題化合物7淡黃色固體（42 mg，37%)，係從化合物 202-7(110 mg，0.29 mmol)使用類似於針對化合物ι(實施 例 1)敘述之程序製備：LC-MS: 491 [M+1 ]+, ----- , .— ··.〇—_ M.i:、〜…〜.·”_〜· H-NMRCDMSO-de)： 2.21(s, 3H), 2. 34(s, 3H), 2T6〇(t5 /=6 Hz, 2H), 3.03(s, 2H), 3.11(1, /=5.7 Hz, 2H), 5.86(s，1H)，7.22(m, 2H)，7.36(dd，/=2.1，/=7·2Ηζ， 1H)，8· 18(s，1H)，9·83(s，1H)。 實施例7:製備#~(2-氣—6—曱基苯基）_2_(6_(4〜（7 —(羥基 胺基）-7-側氧基庚基）哌嗪—卜基）_2—甲基嘧啶—私基胺基） 噻唑_5-羧醯胺（化合物6) 步驟7a. 7-(4-(6 -（5-(2-氯-6-甲基苯基胺曱醯基）噻唑 -2-基胺基）-2-甲基嘧啶—4 —基）哌嗪―丨—基）庚酸乙酯（化合 物 110-6) 標題化合物110一6棕色固體（176 mg，59 %)係從化合 物 109(0_ 22 g，0· 50 mmol)、7-溴庚酸乙酯（0· 12 g，〇 5〇6 1150-9131-PF;Kai 383 200829575 mmol)、二異丙基乙基胺（〇· 13 g，1. 〇〇 mmol)及 DMF(5 mL)， 使用類似於針對化合物110_1(實施例1)敘述之程序製備： LCMS: 600 [M+l]+ 。 步驟7b· yV-（2-氣-6-曱基苯基）-2-（6-(4 -（6-（經基胺 基，)=«7二侧乳基庚基屬^二1二基)二2 _笨羞^虞 峻-5 -魏醢胺（化合物6 ) 標題化合物6白色固體（3 2 m g，8 2 % )係從化合物 110-6(40 mg，0.067 mmol)使用類似於針對化合物1(實施 例 1)敘述之程序製備：LC-MS: 587 [MH] + ; j NMR(DMSO-A) β 1· 24(m， 4Η), 1. 44(m, 4Η), 1· 92(t， /=7. 2Hz, 2Η), 2.22(s, 3Η), 2. 26(t, /=6.3 Hz, 2H), 2.38(ds, 7H), 3.48(m, 4H), 6.03(s, 1H), 7.26(m, 2H), 7.37(m, 1H), 8.19(s, 1H), 8. 63(ds, 1H), 9.83(s^, 1H^, 10.28(s， 1H)， 11.43(s， 1H)。 實施例8:製備(2-氯-6-甲基苯基）-2-(6-(2-(3-(羥基 胺基）-3-側氧基丙基胺基）乙基胺基）-2_曱基嘧啶_4-基胺 基）噻唑-5 -羧醯胺（化合物8) 步驟8a· 3-（2-(6-(5-(2-氯-6-甲基苯基胺曱醯基）噻唑 -2-基胺基）-2-甲基嘧啶—4一基胺基）乙基胺基）丙酸甲酯 (化合物202-8) 標題化合物202-8白色固體（4〇〇 mg, 3U)係從化合物 201 ( 1.08 g, 2.6 m〇i)、4一 溴丁酸曱酯（〇.44g, 26mm〇1) 及K2C〇3(0.44 mg, 5.2 _〇1)使用類似於針對化合物 202-7(貫施例6)敘述之程序製備：LCMS 5〇4 [Μ+1]+。 1150-9131-PF;Kai 384 200829575 2· 38(s, 3H)，2. 64(t， 2H)，3.03(t，/=6.6 7· 39(m，1H)，8. 22(s， Η-匪R((DMS0-A): Θ 2.22(s，3H)， /-6. 9 Hz, 2H), 2. 93(t, /=6. 0 Hz, Hz, 2H), 3. 61(s, 3H), 7. 26(m, 3H), 1H)，9· 88(s, 1H)。 U- 基）-3-側氧基丙基胺基）乙基胺基）一2〜甲I ^ ^ ^ r基％、。定-4-基胺基） 噻唑-5-羧醯胺（化合物8) #題化合物8灰白色固體(30 mg，6〇 %)係從化合物 202-8(51 mg，0.10 _〇1)使用類似於針 叮對化合物1 (實施 例 υ欽述之程序製備：LCMS 505 [M+1] + ; lH nmr(dms〇_⑹， 5 2.13(t, /=6.9 Hz 2H), 2. 22(s, 3H)) 2. 36(s, 3H), .2Lmt，—6 Hz, 2H), 2.77(t, 7=6. 9 Hz, 2H), 5. 87(s, 1H), 7.21(m, 3H), 7.39(m, 1H), 8Γΐ 9^ JHg；84(^ 1H)。 實施例9:製備#-（2-氯-6-甲基苯基）〜2-(6 一（2 -（6 -（羥基 月女基）-6 -側氧基己基胺基）乙基胺基）—2 —曱基喊唆-4 —基胺 基）嗟唾-5 -叛醯胺（化合物11) 步驟9a· 6-（2-(6-(5-（2-氯-6-曱基苯基胺甲醯基）噻唑 -2-基胺基）-2-甲基嘧啶-4-基胺基）乙基胺基）己酸乙酯 (化合物202-1 1 ) 標題化合物202-1 1淡黃色固體（1〇〇 mg, 17°/〇)係從化 合物201(0.50 g，i.2mol)、乙基乙基6-溴己酸乙酯（0.27 g，1.2 mmol)及 K2C〇3(41 mg，0.3 mmol)使用類似於針對 化合物202-7(實施例6)敘述之程序製備：H-NMR(CDCl〇: 1150-9131-PF;Kai 385 200829575 δ 1.24(m, 5Η), 1.41(m, 2Η), 1.57(m, 2H), 2.23(t, /=7. 2Hz, 2H),2.34(s, 3H), 2. 50(s, 3H), 2. 57(t, /=5.7 Hz, 2H), 2.84(t, /=5. 7 Hz, 2H), 3. 37(m, 2H), 4.11(q, /=7. 2Hz, 2H), 5.46(ds, 1H), 5. 70(s, 1H), 7.16(ra, 1H), 7 · 2 9 (in，3 H )，8 · 1 5 ( s，1H ) ° 步驟9b. #-(2-氯-6-曱基苯基）-2-(6-(2 -（6-（羥基胺 基）-6-侧氧基己基胺基）乙基胺基）-2-甲基嘧啶—4-基胺基） 噻唑-5-羧醯胺（化合物11) r ' 標題化合物11灰白色固體（34 mg，33 %)係從化合物 202-11(100 mg，0 · 1 8 mm ο 1)使用類似於針對敛述之程序製 備化合物 1(實施例 1): LCMS 547 [M+l] + ; 4 NMR(DMSO-心）， 5 1.25(m, 2H), 1. 47(m, 4H), 1.95(t, /=7. 2Hz 2H),
2.21(s, 3H), 2.37(s, 3H), 2.75(t, /=6. 9 ^ 2H)T 2.91(t, /=6.6 Hz, 2H), 3. 42(ds, 1H), 5. 90(s, 1H), 7.22(m，4H), 8.19(s，lH), 9.8(s，lH)，10.4(ds, 1H)。 ： 實施例10:製備，（2-氯-6-甲基苯基）- 2-(6-(6-(羥基胺 基）-6 -侧氧基己基胺基）-2 -甲基。密咬—4 -基胺基）嗟。坐一5 一 羧醯胺（化合物23) 步驟10a·甲基6-(6-（5-(2-氯—6-甲基苯基胺曱醯基）π塞 唾-2-基胺基）-2-曱基嘧啶-4-基胺基）己酸酯（化合物 301 -23) 將化合物 1 08(240 mg, 0.61 mmol)，DMAC(15 mL)、 KOH(170 mg，3.05mmol)及曱基 6-胺基己酸酯（554 mg, 3 · 0 5 mmo 1 )之溶液，於1 2 0 °C攪拌12小時。將該反應混合 1150-9131-PF;Kai 386 200829575 物以水稀釋、過濾並乾燥。以得到+ 仲巧祖製化合物301-23淡黃 色粉末（88 mg, 30%)，直接用在次— 、 少驟而不經進一步純 化· LCMS: 503 [M+1 ]+。 '' 1〇b* 侧氡基己基慕基)二2 _果基嘧啶二基J.噻唑二5 -羧醯胺 (化合物23) 對化合物301-23(88 mg，〇·18 _〇1)及新鮮製備的 ΝΗ·甲醇溶液（1.77M，2」GmL)之混合物，於室溫㈣ 30分鐘。將該混合物用Ac0H調整為pH = 7〇，並將溶劑移 除。將得到的殘渣以管柱層析精製以得到標題化合物23 白色粉末（25mg，29%): LCMS: 504 [M+1]VHNMR⑽υ6) ^ 11.30(8, 1Η), 10. 29(8, 1Η), 9.80(s, 1H), 8. 6G(s, 1Η ), ^^ 7. 25(m, 2H), 7.12(m, 1H), 5. 83(s, 1H), 3.13(brs, 2H), 2.34(s, 3H), 2.22(s, 3H), 1.93(m, 2H), 1.50(m, 1H), 1·26(m， 2H) 〇 實施例11:製備(2-氣-6-甲基苯基）-2-(6-(7-(羥基胺 基）-7-側氧基庚基胺基）—2-甲基嘧啶-4-基胺基）噻唑一5一 羧醯胺（化合物24) 步驟11a.甲基7 -（6-(5-(2-氣-6-甲基苯基胺甲醯基）噻 唾-2-基胺基）-2-曱基嘧啶-4-基胺基）庚酸酯（化合物 301-24) 標題化合物301-24粗製微黃色固體（120 mg, 38 %) 係從化合物 1 08(240 mg, 0· 61 mmol)、DMAC(15 mL)、KOH(170 1150-9131-PF;Kai 387 200829575 mg，3.05 mmol)及甲基 7-胺基庚酸酯（596 mg，3·05 mmol) 使用類似於針對化合物3 0 1 - 2 3 (實施例1 〇 )敛述之程序製 備：LCMS: 517 [Μ+1Γ。 步驟lib. #-(2 -氯-6-甲基苯基）-2-（6-（7-（經基胺基）-7〜 规氧基庚基農基h 盡生:~5二致釀胺 (化合物2 4 ) 標題化合物24白色固體（35 mg，30 %)係從化合物 301 -24(120 mg，0.23 mmol)及新鮮製備的羥基胺甲醇溶液 (1.77 M, 3.28 mL)使用類似於針對化合物23(實施例1〇) 敘述之程序製備：m· ρ· 150. 7°C (分解），LCMS: 518 [M + 1 ] + ; ^ NMRCDMSO-i/e) δ 11.37(s, 1H), 10.33(s, 1H), 9.85(s 1H), 8.66(s, 1H), 8. 18(s, 1H), 7. 39(dd, 1H, J=2 1 2Hz), 7. 26(m, 2H), 7. 19(m, lH), 5. 82(s, lH) 3.14(brs, 2H), 2. 34(s, 3H), 2. 22(s, 3H), 1.92(m, 2H) 1.47(m， 4H)， 1·27(m， 4H)。 生物學試驗： 如同前述，本發明所定義的衍生物，具有抗增生活性。 此等性質可例如使用一種以上下列程序評估· U)—體外試驗，決定受測化合物抑制酪胺酸激 酶之能力 化合物抑制酪胺酸激酶（Abll，Src，e_Kit> and PDGFR-beta)之活性，使用HTScan™受體激酶分析套組 (Cell Signaling Technologies、Danvers, ΜΑ)分析。Abll 酪胺酸激酶係以部分純化形式從GST-激酶融合蛋白質得 1150-9131-PF;Kai 388 200829575
到，其係使用一桿狀病毒表現系，從帶有一胺基—末端GST & 鐵之表現人類 Abll(Pr〇li8-Ser553)(GenBank Accession number. NM—〇〇5157)之一構建物生產。Src 酪 月女酸激酶以部分純化形式從GST —激酶融合蛋白質得到，其 表現王長人類 Src(Metl-Leu536)(GenBank Accession number. NM-00541 7)之構建物。c —Kit酪胺酸激酶以部分 純化形式從GST-激酶融合蛋白質得到，其係使用一桿狀病 f ' 1 ’ 毒表現系，其帶有一胺基-末端GST標籤之表現人類 c-Kit(Thr544-Val 976)之構建物。PDGFR-beta 酪胺酸激酶 係使用一桿狀病毒表現系生產，其帶有胺基末端融合於一 GST-HIS6-凝血酶切開部位之一人類^沉!^-]^·^ c-DNA(GenBank Accession number. NΜ—002609)片段 (Arg561-Leull06)。該蛋白質利用谷胱甘肽一瓊脂以單步驟 親和層析精製。抗磷酸化酪胺酸單株抗體，p-Tyr-1〇〇，被 / 用於偵測生物素化受質肽之磷酸化（Abll及Src、生物素訊 昔傳遞蛋白質（Tyrl60); c-Kit,生物素化-KDR(Tyr996); PDGFR-0，生物素化-FLT3(Tyr589))。酵素活性於60 mM HEPES、5 mM MgC12 5 mM MnC1 2 200 μΜ ATP、1. 25 mM DTT、 3 μΜ Na3V04、1.5 mM肽及50 ng EGF受體激酶中測定。 已結合抗體，使用 DELFIA 系統（Perki nE 1 mer，We 11 es 1 ey， MA)偵測，該系統由 DELF I A® 銪標記抗小鼠 IgGCPerkinElmer, #AD0124) 、 DELFIA® 增強溶液 (PerkinElmer， #1244-105)，及 DELFIA® 鏈黴親和素 1150-9131-PF;Kai 389 200829575 (streptavidin)包覆之 96 井盤（PerkinElmer，aaand_〇()()5) 構成。螢光係於WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以 相對螢光單元（RFU)報告。資料可以使用Graphpad PriSm(v4.〇a)繪製成圖，並且使用s型（“卵〇^&1)劑量— 回應曲線、適合度演鼻法，計算I〇。 將受測化合物溶解於二甲基亞砜（DMS0)，以得到2〇mM 的工作原濃度。各試驗設定如下：添加i00以丨的丨〇 ATP到1. 25 ml的6 mM受質肽。將該混合物以去離子水稀 釋，以得到2X ATP/受質混合物（[ATP]=4〇〇 _，[受質]=3 mM)。立即將酵素從-801轉送到冰中。使酵素於冰上解凍。
於4°C輕微地微量離心，使液體沉在小試管底部。立即放 回冰—中。添加—l0:1的DTT(1.25峨）至2.5 ml的4X HTScanTM酪胺酸激酶緩衝液（24Y mM—ipipY MgCl2, 2〇 mM MnCU 液。將1.25 ml的DTT/激酶緩衝液，移到酵素管，以配成 4X反應混合物（[酵素；M ng/以L於4X反應混合物）。將 12.5私1的4X反應混合物與井的關注的預稀釋 化合物(通常約1〇#Μ)於室溫温育5分鐘。添加25# i的 2X ΑΊΤ/受質混合物至25# 1/井的預溫育反應混合物/化合 物。將反應平盤在室溫溫育3G分鐘。添&心"井的停 止緩衝液（5〇 mM EDTA ' PH 8) ’以停止該反應。將各反應 25W及75W去離子水/井’移到％井鍵徽親合物_包覆 平盤，並於室溫溫育6 〇分鐘。π A n 月 DU 刀鐘以 200 “ ；[/井 PBS/T(PBS， 〇.〇5% Tween-20)清洗3次。將初級抗體、磷酸化赂胺酸 1150-9131-PF;Kai 390 200829575 1%牛血清白蛋白 。於室溫溫育60 mAb(P-Tyr-100) ， 1:1〇〇〇 於 pbs/t 中，以 (BSA)稀釋。添加100//1/井的初級抗體 將銪標記之抗小鼠 分鐘。以200 // 1 /井PBS/T清洗3次
IgG 1:500於PBS/Τ，以1%BSA稀釋。添加1〇〇以^井經 稀釋的抗體。於室溫温育30分鐘。以2〇〇#丨/井pBs/T 清洗5次。添加1〇〇μ丨/井DELFU⑧增強溶液。於室溫溫 育5分鐘。以適當的時間—解析（Time_Res〇lved)平盤讀取 儀，偵測發射的615 nm螢光。
(b)—體外（化hd試驗，決定受測化合物抑制HDAc酵 素活性之能力 HDAC抑制劑使用HDAC螢光測量試驗套組 (AK — 500, Biomo卜 Plymouth Meeting、PA)篩選。可將受試 化合物溶於二甲基亞颯（DMS0)，以得到20 mM工作原濃 度。螢光使用WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad PrismULOa) 緣圖，並且使用S型（sigmoidal)拋物線劑量—回應曲線適 合度演算法，計算IC50。
各試驗設定如下：將所有的套組成分解滚，於使用前保 持在冰上。將HeLa核萃取物以1 :29稀釋於試驗緩衝液（5〇 mM Tris/Cl > PH 8.0, 137 mM NaCl, 2.7 mM KC1, 1 mM
MgC12)。製備Trichostatin A(TSA，正控制組）及受測化 合物於試驗緩衝液（5χ最終濃度）之稀釋物。將Fluor de LysTM基稀釋於試驗缓衝液成100 UM(50倍=2x最終）。 將Fluor de LysTM顯影劑濃縮物（例50/z H95 0 /Z 1試驗緩 391 1150-9131-PF；Kai 200829575 衝液）於冷試驗緩衝液稀釋2〇倍。
Trichostatin A 100-倍稀釋 一 ：〇.2 mM …々 稀釋於lx顯影劑(例10/M於i ml;最終 Trichostatin A 濃戶 # ^ 於1 ΗΠΑΓ/- π 度於1Χ顯影劑=2"Μ;添加 HDAC/叉貝反應後之最終濃声、 蘇# · 又 ）。添加試驗緩衝液、經 ## trlchostatln A , # ^ 井。添加經稀釋之HeLa萃取物或其& HDAC樣[至所有 井，除了負控制組。使經豨經夕pi ι 稀釋之Flu〇r de LysTM受質及樣 本在微滴定盤中平衡至試驗溫度(例如25或3rc)。藉由 添加經稀釋受質井並充份混合，以起始化眶 反應。使HDAC反應進行！小時，接著藉由添加Fl·化
LysTM顯影劑（50#；!)使反應停止。將平盤在室溫（25。〇 溫育10-15分鐘。在能於波長350-380 nm之範圍激發的微 …_ ..............-............................-......................-.........….......、...—________ 滴定盤讀取螢光儀，讀取樣本，並偵測在44〇_46〇 發射 之光。 以下表5-B列舉本發明代表性化合物及其活性於 HDAC，SRC，c-Kit，PDGF及ABL分析。於此等分析IC5◦使用 以下分級：I - 10// M，10// M>II>1 // M，1 // Μ>ΙΙΙ>〇· 1 // Μ 且 IV$ 0· 1 // Μ。
表5-B
化合物編號 HDAC ABL SRC c-Kit PDGFb Lyn Lck 1 II IV IV IV 2 II IV IV IV 3 II IV IV 4 III IV IV IV 5 IV IV IV IV 1 IV I IV 6 Ί III H IV IV IV IV IV 7 I IV IV 1150-9131-PF;Kai 392 200829575 \
11 IV IV IV IV IV IV IV 23 IV IV IV IV IV IV IV 24 IV IV IV IV IV IV IV 30 I III III -B—C ^210
(XI)
表6-A 化合物編號 結構 1 Η Η 2 Η Η 3 —?F3 — — — ...................... η c"5^ax^WH Η Η 4 Η Η 5 Η Η 6 。成'j〇X^-lr 7 c,^iHja°x/K-r、 8 9 cliSAjaorrW〇H Η H 10 11 CK&AXT〇V^V、™ Η H 12 Η H 13 αΛΛΧ7°^Γ^〇Η Η H (X) 1150-9131-PF;Kai 393 200829575
1150-9131-PF;Kai 394 200829575
N 'COOMe 102
CH3NH2/CH3OH
34 ，么人°h Η H 35 必人xat-V Η H 36 c,AxNja°^0H Η H
Scheme 1 395 1150-9131-PF;Kai 200829575
Scheme 2
Cl
110
1) DPPA, Et3N 2) H2Ot AcOH
201
nh2oh
OH 1150-9131-PF;Kai 396 200829575
Scheme 4
nh2oh ci
人JXCT从 實施例1:製備U)-4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟甲基）苯其 腺基）苯氧基）-於（1 —(羥基胺基）—卜側氧基丙—基）甲違 吡啶醯胺（化合物1) 步驟la·甲基4-氯甲基吡啶酯（化合物1〇2) 於40-48t：將無水—DMm mL)。將該溶液攪拌於室溫達1〇分鐘，花3()分鐘添加化名 物101(100.0 g，813.0随〇1)。將得到的溶液加熱於7 °C(劇烈S〇2產生)16小時，以產生黃色固體。將得到的洛 合物冷卻至室溫，以甲苯（5 〇 〇 n接 #、曲^
Τ不πυυ mL)稀釋，並濃縮至2〇〇 mL 將甲苯添加/濃縮過程重禮2々。脸〜u ^ 里禝Ζ人將得到的溶液及固體於4 浴添加至2 0 0 mL甲醇，以雏姓如、m丄 τ哔以維持内溫在55t以下。將内笔 物於室溫攪拌45分鐘，冷卻至^ / 7句主b C，並滴加Et2〇(200 mL) 將得到的固體過濾，以Et2〇(2〇n τ X ^ ^ ^ UUU0 mL)清洗，於35°C乾燥 知到白黃色固體。於固體溶化 、 U股，合化至熱水（500 mL，約45°C ) 添加NaHCCb以調整dh 5 r-q ^ 9 °將該混合物以乙酸乙酯為 取’將有機相濃縮以得到所望 τ^ I化合物102米白色固骨 1150-9131-PF;Kai 397 200829575 (118· 2 g，85%)。LCMS: 172 [Μ+1Γ。 步驟lb. 4-氯-Λ"-曱基甲基°比。定醢胺（化合物1⑽） 對化合物102(10· 0 g，58· 6 mmol)之曱醇溶液（4 mL)， 於5°C以下，添加CH3NH2(7· 3 g，234· 4 mmol)於曱醇。將 該混合物攢;拌於〇-5°G達2小時。將溶劑於40 —5〇乞蒸發以 得到標題化合物103黑黃色固體（9.8g，98%)。LeMS: m [M+l] + ； NMRCDMSO-^): ^ 2.80(d, 3 Η), 7. 68(dd, f ^1_5·4Ηζ^ ^2=2. 4 Hz, 1H), 7.97(d, /=2. 4 Hz, 1H), 8. 56(d, " 1 H), 8· 82(s, 1 H)。 步驟lc. 4 -（4-胺基苯氧基曱基甲基吡啶醯胺（化合物 105) 4:胺色苯^ mL)之溶液，以卜BuOK(10.29 g, 91.7 _〇υ 到的紅棕色混合物，於室溫攪拌達2小時並接著添加 K2C〇3(6.5 g，47 mmol)及化合物 103(15 () g，87.9 mm〇1)。 I 將該反應物於721攪拌整夜並將溶劑於5〇_6〇t蒸發，留 下反應混合物。將混合物冷卻，並添加飽和NaC1溶液，將 該混合物以乙酸乙酯萃取，將有機層分離，以飽和NaCi溶 液清洗，以NazSO4乾燥並減壓濃縮，以得到化合物丨〇5淡 • 栋固體（17· 9 g，84%)，直接用在次一步驟而不經進一步純 化· LCMS: 244 [M+l]+ 〇 步驟Id· 4-(4-胺基苯氧基）甲基吡啶酸（化合物1〇6) 將化合物 1 05 (32· 4 g，130. 〇 mol)添加至 2 N KOH(20 0 mL)溶液。將該混合物於1()(rc攪拌達2小時。之後，將該 1150-9131-PF;Kai 398 200829575 混合物以EtOAc清洗，將水層調整為pH5。以減壓移除水 相中的水，留下殘渣。將少量水添加至此殘渣並過濾。將 收集的固體以少量水清洗，並乾燥以得到1 06(23. 9 g， 80°/〇): LCMS: 231 [M+l] + ; NMR(DMS0-i/〇: δ 6. 66(dd, ^8. 7 Hzv 2H), 6.^^8 /-8. 7 Hz, 2H), 7. 12(dd, /i = 5. 4
Hz, /2 = 2.7 Hz, 1 H), 7.37(d, /=2.4 Hz, 1 H), 8. 52(d, /=5. 4 Hz, 1 H)。 步驟le. 4-（4-胺基苯氧基）曱基吡啶曱酯（化合物107) < 於0 °C以下，將S0C12 ( 6 mL)滴加至化合物1 〇 6 ( 4· 0 g， 8. 8 mmol)於甲醇（50 mL)之溶液。將該混合物攪拌於70°C 整夜。將溶劑蒸發，並添加EtOAc及水。PH值以NaC〇3及
NaOH調整為8-9。將該混合物以EtOAc萃取3次。收集有 ....... 一 —-...... 一—一...— — —— -·— ———-—一—‘— ·— - — — 一 _ 機相並濃縮，以得到粗製產物，以管柱層析精製以得標題 化合物 107(2.1 g，68%): LCMS: 245 [Μ+1Γ。 步驟If· 4-(4 -（3-(4-氣- 3- (三氟曱基）苯基）脲基）苯氧基） I 甲基吡啶曱酯（化合物109) 將4 -氯-3-（三氣甲基）苯基異氰酸醋（1〇8.) (4.97 g， 20.0 mmol)於CH2C12(12 mL)之溶液，於〇°C滴加化合物 107(4.50 g，20.0 mmol)於 CH2Cl2( 12 mL)之懸浮液。將得 到的混合物攪拌於室溫達22小時。將得到的黃色固體以 過淚收集，並以CH2Cl2(2xlO mL)清洗，以得到化合物1〇9 米白色固體（7.90 g， 85%): LCMS: 466 [M+l]+。 步驟lg· 4-(4-(3 -（4-氣-3 -（三氟曱基）苯基）脲基）苯氧基） 甲基吡啶酸（化合物11 〇) 1150-9131-PF;Kai 399 200829575 將 LiOH.H2〇(l.〇8 g，25.60 mmol)添加至化合物 1〇9(3·0 g，6·4 _〇ι )於8 mL甲醇之溶液。將水（4mL)立 即添加至上述混合物中。將該反應混合物於室溫攪拌1小 時。將上述混合物之PH調整為5及蒸發甲醇。將得到的 固體過渡I得到化合物110灰色 452 [M+l]+ 〇 步驟lh. (/〇-甲基2-(4-(4-(3-（4-氯-3-（三氟甲基）苯基） 脲基）苯氧基）甲基吡啶醯胺）丙酸酯（化合物111 -1) 將Et3N(336.〇mg，3.3 mmol)添加至3-胺基丙酸甲酯 氯化氫（130.0mg, 〇·93 mmol)於6 mL DMF之溶液。於上 述混合物’接著添加化合物11〇(3〇〇. 〇 mg，〇. 67 mmol)、 〇35；1 rag> 〇· 998^ EDCI(191e 〇 mgj 〇/998 _〇 1)。將該混合物於室溫丨8攪拌小時。將溶劑DMF於; °C蒸發及加入1〇〇 mL乙酸乙酯及1〇以水。將有機相 以水π洗，以NadO4乾燥，並蒸發，將標題化合物i 以管柱層析精製（242.0 mg，68 %): LCMS: 537 [M+1]+。 ㈣li·⑺-4-（4-(3普氯一 3 —(三貌甲基）苯基）脲基）苯 虱基(羥基胺基）—卜側氧基丙-2—基）甲基吡啶醯胺 (化合物1 ) 於吖’對授拌中之經基胺氯化氫(4 67g，67 0 _〇1 於甲醇(2“L)溶液，添加氫氧化鉀(561 g，1〇〇〇 於曱醇（14 mL)之☆液。添加後，將該混合物於代擾摔 分鐘’並靜置於低溫。將得到的沉殿分離，並將該溶液製 備以得到游離羥基胺。 1150—9131-PF;Kai 400 200829575 對含化合物11卜1(100_Q mg, 0.19 mmol)之燒瓶，添 加飽和之羥基胺溶於甲醇之溶液（4 G mL)。將該混合物於 室溫攪拌30分鐘。以乙酸調整為pH7。將混合物濃縮以得 到殘渣，以水清洗以得到粗製產物，以管柱層析精製以 得到產物1白色固體(4L. NMR(DMS0^〇： ^ l.28(d, /-6. 9 Hz, 3H), 4. 36(t, /=5.8 Hz, 1H), 7.15(ιη, 3H), 7. 36(s, 1H), 7. 57-7. 67(m, 4H), 8. ll(s, 1H), 8. 45(d, J = 6. 3 Hz, 1H), 8. 56(d, /=7. 8 Hz f ' 1H), 9· 33(s, 1H), 9· 56(s，1H)。 實施例2·製備4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟曱基）苯基）脲基） 苯氧基(3-(羥基胺基）-3-侧氧基丙基）甲基吼啶醯胺 (化合物2) ——…— : 一 ―一 ^ …………—. —.—.....〜…一… 步驟2a· 3-(4-(4-(3_(4-氯-3-(三氟甲基）苯基）脲基）苯 氧基）甲基吡啶醯胺）丙酸甲酯（化合物111 -2 ) 標題化合物111-2(110 mg， 31%)係從化合物 I 110(300.0 mg， 0· 66 mmol)使用類似於針對化合物 111-K實施例1)敘述之程序製備：537 [M+l] + . 步驟2b. 4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟曱基）苯基）脲基）苯氧 基）_ #_ ( 3 _ (經基胺基）-3 -側氧基丙基）甲基σ比σ定酿胺（化合 物2) 標題化合物2固體（50 mg， 47%)係從化合物 1U-2(110.0 mg，0.20 mmol)使用類似於針對化合物1(實 施例 1)敘述之程序製備：LCMS: 468 [M + l] + ; 4 NMR(DMS〇-i/〇: ^ 2.25(t, /=6. 9 Hz, 2H), 3.47(m, 2H), 1150-9131-PF;Kai 401 200829575 7.16(m, 3H), 7. 38(d, /=2.4, 1H), 7. 60-7. 70 (m, 4H), 8.15(s, 1H), 8.50(d, 1H), 8. 78(t, /=6.3 Hz, 1H), 9.43(s，1H), 9.66(s，1H)，10.44(s, 1H)。 實施例3.製備4-(4-(3-(4-氣-3-(三氟甲基）苯基）脲基） 苯氧基）-嚴(4 -(輕基胺基)-4 -側氧基丁基）曱基°比咬醯胺 (化合物3 ) 步驟3a· 4-(4-(4-(3-(4-氣-3-(三氟甲基）苯基）脲基）苯 氧基）曱基吡啶醯胺）丁酸甲酯（化合物111-3) 標題化合物111-3(95 mg，26%)係從化合物1 1 0 (300. 〇 mg, 0.66 mmol)使用類似於針對化合物11卜1(實施例 1) 敘述之程序製備：LCMS: 551 [Μ + 1] + · 步驟3b· 4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟甲基）苯基）脲基）苯氧 基(4-(羥基胺基）-4-側氧基丁基）甲基吼唆醯胺（化合 物3) 標題化合物3固體（45 mg，48%)係從化合物111一3(95 mg, 0· 1 7 mmo 1)使用類似於針對化合物1 (實施例1)敘述之 程序製備：LCMS: 552 [M+1 ] + ;沱 NMR(DMSO-A): δ 1. 70-1. 77(m, 2H), 1.96(t, /=7, 2Hz, 2H), 3. 22-3. 29(m, 2H), 7. 15-7. 19(m, 3H), 7. 37(d, J=2. 7Hz, 1H)， 7.58-7.69(m, 4H), 8. 13(s, 1H), 8.51(d, /=6. 0Hz, 1H), 8. 70(s, 1H), 8. 88(t, /=6. 0Hz, 1H), 9. 06(s, 1H), 9· 89(s，1H), 10· 37(s，1H)。 實施例4:製備4-(4-(3-(4-氣-3-(三氟甲基）苯基）脲基） 苯氧基）-於（6-（輕基胺基）-6-側氧基己基）甲基。比σ定酸胺 1150-9131-PF;Kai 402 200829575 (化合物5) 步驟4a· 6-(4 -（4-(3-(4-氣-3 -（三氟甲基）苯基）脲基）苯 氧基）甲基11比啶醯胺）己酸甲酯（化合物111 一5) 標題化合物111-5(118 mg， 31%)係從化合物 110(观 111-1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 579 [Μ+1]+· 步驟4b· 4-(4-(3-(4-氣-3-(三氟甲基）苯基）脲基）苯氧 基）-#-(6-(羥基胺基）-6-側氧基己基）甲基吼啶醯胺（化合 物5) 標題化合物5固體（50 mg， 62%)係從化合物 11卜5(80.0 mg，0.14 mmol)使用類似於針對化合物j(實 施例1)敘述之程序製備：LCMS: 580 + ; j NMR(DMSO-A):汐 1.18-1.26(m，2H)，1.43- 1·52(πι，4H)， 1.91(t, /=7. 2Hz, 2H), 3. 1 9-3. 23(m, 2H), 7. 11-7. 1 6(m, 3H), 7.36(d, /=2.1 Hz, 1H), 7.55~7.66(m, 4H), 8.09(d, /=2.4 Hz, 1H), 8.48(d, /=5.7 Hz, 1H), 8. 58(s, 1H), 8.71(t, /-6.0 Hz, 1H), 8.1〇(s, 1H), 9.23(s, 1H) 10.26(s， 1H)。 實施例5:製備4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟甲基）苯基）脲基） 苯氧基）-#-(7-(經基胺基）-7-側氧基庚基）曱基吼啶醯胺 (化合物6 )
步驟5a· 7-(4-(4-(3-(4-氯-3-（三氟甲基）苯基）脲基）苯 氧基）曱基吡啶醯胺）庚酸曱酯（化合物1UD 標題化合物111-6(130 mg, 33%)係從化合物 1150-9131-PF;Kai 403 200829575 1 1 0 (300. 0 mg, 0.66 mmol)使用類似於針對化合物 111-1(實施例1)敘述之程序製備·· LCMS: 593 [Μ+1] + · 步驟5b. 4-（4-(34-氣-3-(三氟曱基）苯基）脲基）苯氧 基）-#-(7_(羥基胺基）—7 —側氧基庚基）曱基吼啶醯胺（化合 物6 ) 標題化合物6固體（62 mg， 75%)係從化合物 11卜6(80.0 mg, 0·14 mmol)使用類似於針對化合物i(實 施例 1)敘述之程序製備：LCMS: 594 [M+l] + ; j NMR(DMS0-i/〇： ^ 1. 16-1. 23(m, 4H), 1. 45~1. 49(m, 4H), 1·89-1·94(m, 2H), 3.20-3. 33(m, 2H), 7·11-7·16(m， 3H) 7.36(d，/:2·1 Hz，1H)，7.55 - 7.66(m，4H)，8.15(d， /=2.4 Hz, 1H), 8. 50(d, /=5. 7 Hz, 1H>, 8. 66(s, 1H), --------- ......... ···. ...... .,.--- —- — — 8.78(t, /=6.0 Hz, 1H), 9. 54(s, 1H), 9.79(s, 1H) 10.32(s， 1H)。 實施例6:製備4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟曱基）苯基）脲基） 苯氧基）-#_(8-(經基胺基）-8-侧氧基辛基）曱基吼啶醯胺 (化合物7 ) 步驟6a· 8-(4-(4-(3-(4-氣-3-(三氟甲基）苯基）脲基）苯 氧基）甲基吼咬醯胺）辛酸甲酯（化合物1 Η 一 7) 標題化合物111-7(140 mg, 35%)係從化合物 110(300.0 mg， 〇· 66 mmol)使用類似於針對化合物 111-1(貫施例1)敘述之程序製備：LCMS: β〇7 [M+l]+. 步驟6b· 4-(4-(3-(4-氣-3-(三氟甲基）苯基）脲基）苯氧 基）-舲（8-(羥基胺基）-8-側氧基辛基）曱基吼啶醯胺（化合 1150-9131-PF;Kai 404 200829575 物7) 標題化合物7固體（50 mg, 63%)係從化合物 111-7(80.0 mg，0.13 mmol)使用類似於針對化合物j(實 施例 1)敘述之程序製備：LCMS: 608 CM+1 ；Γ· 4 NMR(DMSO-〇^): <^1.23~1.25(πι, 6H), 1.46-1 51 (m 4H) 1.89-1.94(m，2H), 3·2卜3.34(m，2H)，7·14 —7 l9(m，3H) 7.36(d, /=2.1 Hz, 1H), 7. 55-7. 66(m, 4H), 8. 15(d, /=2.4 Hz, 1H), 8.50(d, /=5.7 Hz, 1H), 8. 66(s, 1H) 8.78(t, /=6.0 Hz, 1H), 9. 54(s, 1H), 9. 79(s, 1H) 10.32(s, 1H) 〇 實施例7:製備4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟曱基）苯基）脲基） 苯氡基）-#-羥基甲基吡啶醯胺（化合物36) "* 1 ^ ’ —— —......... …一—-—….- 〜 標題化合物36白色固體（30 mg, 29%)係從化合物 109(100.0 mg，0.22 mmol)使用類似於針對敘述之程序攀 備化合物 1(實施例 1): LCMS: 467[M+1] + ;沱 NMR(DMS0-/) · ^ 7. 10-7. 18(m, 3H), 7.31(d, /-2.4, 2H), 7. 57-7. 67(m, 4H), 8.10(s, 1H), 8.45(d, /=3. 3Hz, 1H), 8. 99(s, 1H) 9. 09(s，1H), 9· 21(s，1H)，11. 42(s, 1H)。 實施例 8: 製備 1-(4-氣-3-（三氟曱基）笨 基）-3-(4-(2-(5-(經基胺基）-5 -側氧基戊醯胺 >比咬—4〜基^ 氧基）苯基）尿素（化合物9) 步驟8a· 1-(4-(2 -胺基吼啶-4 -基氧基）苯基）-3-(4'氯 -3-（三氟甲基）苯基）尿素（化合物201) 將化合物 1 1 0 ( 345 mg, 0 · 8 mmo 1)、DMF(7 mL)及三乙 1150-9131-PF;Kai 405 200829575
胺（0· 2 mL)之混合物，於6〇°c攪拌1小時。然後將該混合 物冷卻至0°C，添加DPPA(280 mg，1. 〇 _〇1)。將該混合 物攪拌整夜。將H0Ac(3. 5 mL)於水（3. 5 mL)添加至此混合 物。將該混合物於9〇°c加熱1小時，然後倒入冰冷的NaOH 溶液（5 · 2 5 g 於 14 0 mL 萃取並以水清洗。收集有機相並將溶劑減壓移除。將殘渣 以矽膠層析過濾（移動相：乙酸乙酯/甲醇=4 : 1)以得到化 合物 201 微黃色固體（123 即，37. 5%>LC-MS: 423 [M+l]+， !Η NMRCDMSO-^e)： ^ 2.70(s, 1Η), 2. 86(s, 1Η), 5. 78(d, /=2. 4 Hz, 1H), 5.88(s, 1H), 6.10(m, 1H), 7. 02-7. 06(m, 1H), 7. 48-7. 61(m, 4H), 7. 76(d, /=5. 6 Hz, 1H), 8.10(d, /二2.0 Hz，1H), 9.40(s，1H)，9.76(s，1H)。 … 一-------L. . _ — 步驟8b· 5-（4-(4-（3-（4-氯-3-(三氟甲基)苯基)脲基y苯 氧基）吼啶-2-基胺基）-5-側氧基戊酸甲酯（化合物202-9) 將化合物 201 ( 1 20 mg, 0. 3 _〇1)、三乙胺（61 mg，〇· 6 mmol )、Cu 粉末（38mg，0.6 mmol)、Zn 粉末（39mg，〇 β mmol)及二氣曱烷（2 mL)之混合物，加熱至4〇°c。於上述 混合物，添加5-氣-5-側氧基戊酸甲酯（4? mg， 〇. 3 mmol)。該反應以TLC監控。於反應完成後，將溶劑減壓移 除。將殘渣以矽膠層析過濾（移動相：乙酸乙_ /甲醇 = 4:1)，以得到甲基化合物202-9白色固體（160 mg，96. 6%). LC-MS: 551 [M+l]+ 〇 步驟8c· 1-(4-氯-3 -（三氟曱基）苯基）一 3-(4-(2 —(5 —(羥美 胺基）-5-側氧基戊醯胺）吨啶-4-基氧基）苯基）尿素（化合 1150-9131-PF;Kai 406 200829575 物9) 將化合物202-9( 1 60 mg, 〇·3 mmol)溶於新鮮製備的 NH2〇H甲醇溶液（1. 8 mmol)。將該混合物於室溫攪拌整夜。 將该混合物以HOAc中和。將溶劑於真空中移除，並將殘渣 以製備性液體層析過據，以得到化合 12.5%)。熔點：i44〜145t： · lc-MS: 552 [M+l]+， j NMR(DMS0^6): ^ l.72(m, 2H), 1.93(t, /=7.0 Hz, 2H), 2.32(t, /=7·0 Hz， 2H), 6.6(m， 1H)， 7.1〇(m， 2H)， 7 · 5 2 7 · 6 3 (m，5 H)，8 · 1 3 (m，2 H)，8 · 61 (s，1H)，8. 9 9 ( s， 1H)，9.23(s，1H)，i〇.32(s，1H)，1〇 45(s，1H)。 實施例9:製備卜（4-氯-3-(三氟甲基）苯 基—)二3二（4 —(2 — (6 —(羥基胺基）—6-側氧基己醯胺）ϋ比啶-4-基 氧基）苯基)尿素(化合物^ —— — 步驟9a. 6-(4-(4-(3-(4-氣-3-(三氟曱基）苯基）脲基）苯 氧基）0比°疋-2-基胺基）一6-側氧基己酸甲酯（化合物202-1 〇) 標題化合物2〇2一1〇白色固體（100 mg，97%)係從化合 物 2〇1(77· 0 叫，〇· 18 mmol)、三乙胺（36 mg，0. 36 mmol)、 Cu 粉末（12mg，〇18mm〇1)、Zri 粉末（I2mg，0.18mmol) 及二氣曱烧（2 inL)使用類似於針對化合物202-9(實施例8) 敘述之程序製備：LC-MS: 565 [Μ+1]+· 步驟9b· 1 一（4~氣-3-(三氟甲基）苯基）-3-（4-(2-(6-(羥基 胺基側氧基己醯胺）吼啶-4-基氧基）苯基）尿素（化合 物10) 標題化合物1〇白色固體（13 mg，13%)係從化合物 1150-9131-PF;Kai 407 200829575 202-1 0( 1 00 mg，0·18 mmol)及新鮮製備的羥基胺甲醇溶 液（1· 8 mmol)使用類似於化合物9(實施例8)針對敘述之程 序製備：LC-MS: 566 [M + l]+，4 NMR(DMS0j6): j le 45(m 4Η), 1.96(m, 2H), 2.31(m, 2H), 6. 63(m, 1H), 7.1〇(m 2H)V 7. 5 3(m^^^ 2H>, 7, 63(m, 13(m., 2H), 8 6 5(s 1H), 9.19(s, 1H), 9.51(s, 1H), 10.32(s, 1H), 10.41(s 1H)。 實施例10:製備1一（4-氣-3-(三氟甲基）苯 基）-3-(4-(2-(8-(羥基胺基）-8-側氧基辛醯胺）π比啶-4一基 氧基）苯基）尿素（化合物12) 步驟10a· 8-(4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟曱基）苯基）脲基）笨 氧基）吡啶-2 -基胺基）-8 -側氧基辛酸甲醋（化合物2 q 2 — j 2 ) 標題化合物202-1 2白色固體（166 mg, 39· 4%)係從 合物 20 1 (300 mg, 0· 7 mmol)、三乙胺（141 mg，L 4 mm〇1)、
Cu 粉末（45 mg, 0· 7 mmol)、Zn 粉末（45 mg，0· 7 mmol) 及二氣曱烧（10 mL)使用類似於針對化合物2〇2_9(實施例 8)敘述之程序製備：LC-MS: 593 [M + 1J+。 步驟10b. 1-（4-氯-3-(三氟曱基）苯基3-(4一（2一（8一（羥 基胺基）-8-侧氧基辛醯胺）σ比啶—4-基氧基）苯基）尿素（化 合物12) 標題化合物12白色固體（25 mg, 15.6%)係從化合物 202-12(160 mg, 0.3 mmol)及新鮮製備的羥基胺甲醇溶液 (1 · 8 mmo 1)使用類似於針對化合物9 (實施例8 )敘述之程序 製備：熔點：Π1 〜Π5 它· LC-MS: 594 [M+l]+， 4 1150-9131-PF;Kai 408 200829575 NMRCDMSO-^/e): ^ 1.21(s, 4H), 1.47(ra, 4H), 1.90(t, /-7.5 Hz, 2H), 2. 30(t, /=7.5 Hz, 2H), 6. 62(m, 1H), 7. 10(m, 2H), 7.52(ra, 2H), 7. 64(ra, 3H), 8. 12(iu, 2H), 8.59(s, 1H), 8. 93(s, 1H), 9.17(s, 1H), 10.26(s, 1H), 1 0 · 4 0 (s， 1H ) q 貫施例11:製備3-((4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟甲基）苯基） 脲基）苯氧基）吼啶-2-基）甲基胺基）―舲羥基丙醯胺（化合 物13) 步驟11a. 1-(4-氣-3-(三氟甲基）苯基）_3 一（4 一（2 一（羥基曱 基>°比啶-4-基氧基）苯基）尿素（化合物3〇1) 將AlLiH4(0.323 g，8.5 mmol)於氮氣中添加至化合物 1{)9(3.3 g，7· 1 mmo1)於3Ό mL THF之溶液。將該混合物 ， — — -、·.—.——一一―'. 一—，—〜…-------------------------------------------__ 稅拌於室溫達4小時。將然後水（0· 3 mL)，15% NaOH溶液 (0 · 3 mL)及水（〇 · 9 mL )添加至此混合物。該混合物過濾並 濃縮，以得到粗製產物，以管柱層析精製（乙酸乙酯：甲醇 = 9:1)以得化合物 301 白色固體（1· 75 g，47%): LCMS: 438 [M+1].。 步驟lib· 1 -（4-氯-3-（三氟f基）苯基）-3一（4_(2一（氯f基） °比啶-4-基氧基）苯基）尿素（化合物3〇2) 將SOCh(25 mL，25 mmol)於曱苯（22 mL)之溶液冷卻 至-10C °將化合物3〇1(1〇 g，2·3 _〇1)花〇·5小時添 加至上述冷混合物。將溫度緩慢升到〇c>c，並將該混合物 於〇 C攪拌2小時。過濾該冷的反應混合物，並將固體以 甲苯及鱗清洗。將粗製產物懸浮於水，並以Na2C〇3中和。 1150-9131-PF;Kai 409 200829575 將該混合物攪拌l 〇分鐘並過濾。將固體徹底以水清洗， 並於減壓乾燥，以得到標題化合物302白色黃色固體 (0.84 g， 80%): LCMS: 456 [M+l]+。 步驟11c· 3-((4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟甲基）笨基）脲基） 笨氧基比定—2 —基)甲基胺基）丙酸& 將乙基3-胺基丙酸酯氯化氫（27〇mg，176_〇1)於 甲醇之溶液，以KOH中和（66啊，L76随〇1)。將該混合 物於室溫攪拌10分鐘，並將甲醇蒸發。添加DMF(4 mL)及 302(200 mg，〇·44 mmol)。將該混舍物攪拌於室溫8小時。 將DMF減壓蒸發，以得到殘渣，於其中添加3〇乩乙酸酯。 將該混合物以水清洗，以無7"祕乾燥，過濾並濃縮， -得到—i^3!13043 mg，60·5 %)，用在次一步驟不經精製。 LCMS: 53 7 [M +1 ] +。— ......................... ................................— - — 步驟lid· 3-((4-(4-(3-(4-氣-3-(三氟甲基）苯基）脲基） 苯氧基）吼啶-2-基）甲基胺基羥基丙醯胺（化合物13) 製備羥基胺於甲醇溶液··氯化氫（4 67g，67mm〇1)溶 解於甲醇（24 niL)以形成溶液a。氫氧化鉀（5· 61 g，1〇〇 _〇1) /谷解於甲醇（14 mL )以形成溶液b。將溶液a冷卻至〇 °c， 並將/奋液B滴加至溶液a中。將該混合物於〇 t攪拌3 〇 为鐘’將沉澱過濾以得到羥基胺溶於甲醇之溶液。 於含化合物303-1 3( 143 mg，〇·27随〇1)之燒瓶，添 加上述新鮮製備的羥基胺溶於甲醇之溶液（4.0 mL)。將該 此合物於室溫攪拌3〇分鐘，以乙酸調整為。將混合物 濃縮以得到殘渣，以水清洗並以製備HPLC精製，以得到標 1150-9131-PF;Kai 410 200829575 題化合物 13 白色固體（64 mg，45· 2%): LCMS: 524 [M+l] + ; NMR(DMS0-^)： ^ 2.12(t, /=6 Hz, 2H), 2.71(t, /=6 Hz, 2H), 3.72(s, 2H), 6. 73(d, /=6 Hz, 1 H), 6. 95(s, 1 H), 7.10(d, /=9 Hz, 2H), 7. 55-7. 68(m, 4 H), 8.12(s,
1 1)，8 · 34 (L 貫施例12:製備6 -（（4-(4- (3-(4 -氯-3-（三氟曱基）苯基） 脲基）苯氧基）吼啶-2-基）甲基胺基）-#-羥基己醯胺（化合 物16) 步驟12a. 6-((4-(4-(3-（4-氯-3-（三氟曱基）苯基）脲基） 苯氧基）吡啶-2-基）甲基胺基）己酸甲酯（化合物303-1 6) 標題化合物303-1 6( 1 08 mg，43%)係從化合物302(200 mg，0.44 mmol)及甲基 6-胺基己酸酯氯化氫（318 mg, 1·76_〇1)使用類似於針對化合物303 —1 3 (實施例<「^^^^ 之程序製備·· LCMS: 565 [M + l]+。 步驟12b. 6-((4-(4-(3-(4-氣- 3-(三氟甲基）苯基）脲基） 苯氧基）吼咬-2-基）曱基胺基）-#·羥基己醯胺（化合物1 6) 標題化合物16白色固體（48 mg，45 %)係從化合物 303-1 6( 1 08 mg, 0.19 mmol)使用類似於針對化合物13(實 施例11)敘述之程序製備：LCMS: 566 [Μ + 1] + · 4 NMR(DMS0-^)： ^ 1. 20-1. 27(m, 2H), 1. 33-1. 49(m, 4 Η), 2. 43-3. 48(m, 2H), 3. 72(s, 2H), 6. 74(d, /=6 Hz, 1 H), 6.94(s, 1 H), 7.10(d, /=9 Hz, 2H), 7. 55-7. 68(m, 4 H), 8.12(s, 1 H), 8.34(d, /=6 Hz, 1 H), 9.13(s, 1 H), 9· 37(s, 1 H), 9. 36(s, 1H)。 1150-9131-PF;Kai 411 200829575 只施例13:製備7-((4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟曱基）苯基） 脲基）苯氧基）吡啶-2 -基）曱基胺基）_ 羥基庚醯胺（化合 物17) 步驟13a· 7-((4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟甲基）苯基）脲基） 標題化合物303-1 7(87 mg，34 %)係從化合物3〇2(200 mg，0· 44 _〇1)及甲基7-胺基庚酸酯氯化氫（343 mg， 1· 76 mmol)使用類似於針對化合物3〇3 —13(實施例u)敘述 〔之程序製備：LCMS: 579 [M + l]+. 步驟13b. 7-((4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟甲基）苯基）脲基） 苯氧基）吡啶-2-基）甲基胺基）_#—羥基庚醯胺（化合物1 了） 標題化合物17白色固體（36 mg，4i %)係從化合物 —一’…一.一…— 一一'. ———— ———一—— , ΟΠΟ 一 Λ Π ( Ο Π η ^ ρ :一———一―一 -…— 一―^ — mg，υ·15 mmol)使用類似於針對化合物13(實 施例11)敘述之程序製備：LCMS: 580 [M+l] + ;沱 NMR(DMS0~i/〇: δ 1.22(s, 4 H), 1.34-1.37(m, 2H), . l-49(t, /=9 Hz, 2H), 1. 94(t, /:7· 2Hz， 2H), 2. 43-2. 48(ra, 2H), 3. 72(s, 2H), 6. 75(d, /=6 Hz, 1 H), 6.94(s, 1 H), 7.10(d, >9 Hz, 3 H), 7. 55-7. 69(m, 4 Hz), 8.12(s, 1 H), 8.34(d, /=6 Hz, 1 H), 9. 04(s, 1 H), 9· 27(s，1 H), 10· 35(s，1H)。 實施例14:製備8-((4-(4-(3-(4-氣-3-(三氟曱基）苯基） 脲基）苯氧基）吼啶-2-基）甲基胺基）-於羥基辛醯胺（化合 物18) 步驟143. 8-((4-(4-（3-(4-氣-3-(三氟甲基）苯基）脲基） 1150-9131-PF;Kai 412 200829575 苯氧基）吡啶-2-基）甲基胺基）辛酸甲酯（化合物3〇3_18) 標題化合物3〇3-18(118 mg，42 9%)係從化合物 302(200 mg，〇.44 _〇1)及8_胺基辛酸甲酯氣化氫（368 mg，1.76 mm〇i)使用類似於針對化合物3〇3_13(實施例u) 敘述之袞束 步驟14b· 8-((4_(4-(3-(4-氯-3-(三敦曱基）苯基）脲基） 苯氧基）吼咬-2-基）甲基胺基經基辛醯胺（化合物18) 標題化合物18白色固體（73 mg，62 %)係從化合物 303-18(118 mg, 0·20 ramol)使用類似於針對化合物13(實 施例11)敘述之程序製備·· LCMS: 594 [Μ + 1]+· NMRCDMSO-Λ)： ^ 1.24(s, 6 Η), 1. 46-1. 51 (m, 4 Η), 1. 92(t, /^9 Hz, 2H), 3. 21-3. 34(m, 2H), 7. 14-7. 19(m, ———— …一一 — ' --------------------------------------------------一一 ..............__ — 3 H), 7.37(d5 >3 Hz, 1 Η), 7.6 0-7^^4 Hz 1 Η), 8. 50(d, /=6 Hz, 1 H), 8. 66(s, 1 H), 8. 79(t, /=6
Hz, 1 H), 9.38(s，1 H), 9.61(s，1 H), l〇.32(s，1H)。 貫施例15:製備#一（（4-(4一（3-(4一氯一3一（三氟甲基）苯基） 脲基）苯氧基）吼啶-2-基）甲基羥基琥珀醯胺（化合物 19) 步驟15a· 4-(4-(3-(4-氯_3-(三氟曱基）苯基）脲基）苯氧 基）甲基ϋ比唆醢胺（化合物4 01) 將化合物 109(1. 16 g，2. 5 mmol)、ΝΗ3(0. 25 g，15. 0 _〇1)於MeOH(10 mL)之溶液，於室溫攪拌6小時。將溶劑 於減壓下移除，將粗製物以水清洗，以得化合物401淡黃 色固體（1.08 g, 96.2%): LCMS: 451 [M+l]+。 1150-9131-PF;Kai 413 200829575 步驟15b. 1-(4-(2-（胺基甲基）η比咬_4-基氧基）苯 基）-3-(4-氣-3-（三氟曱基）苯基）尿素（化合物402) 將化合物 401(1· 0 g，2. 2 mmol)、bh3(6 mL，1 mol/L)、 THF(lOmL)於密封管之混合物’於氮氣氣氛於攪拌6 小時（油浴）。將混合物冷卻，以 mL)處理，於10 0°C攪拌達2小時。將該反應混合物冷卻， 以Na2C〇3(4 mol/L)調整為pHIO。將溶劑於高真空移除，得 到粗製產物402棕色固體（0.6 g， 67m: LCMS: 437 ’ [M+l]+。 步驟15c. 4-((4-（4-（3-(4-氣-3-（三氟曱基）苯基）脲基） 苯氧基比啶-2-基）甲基胺基）-4-侧氧基丁酸甲酯（化合物 403-1 9) —1 mmoT^ f ί 氧基丁酸（36 111它，0.27 111111〇1)、£0(：1(58 11^，0.30 111111〇1)、 HOBt(40 mg, 0·30 mmol)、三甲基胺（81 mg，0.80 mmol) r 及無水DMF (2 mL)之混合物，於室溫攪拌i 6小時。將溶劑 v 於冋真空下移除並將粗製品以秒膠管柱層析精製 (CH2Cl2/MeOH=10/l)以得標的化合物 403-1 9(78 mg，62 %) 黃色固體。LCMS: 551 [Μ十1]+。 步驟15d· #-((4-(4-(3 -（4-氯-3-(三氟曱基）苯基）脲基） 苯氧基）σ比唆-2-基）曱基羥基琥珀醯胺（化合物1 g) 標題化合物1 9淡黃色固體（63 mg, 81 %)係從化合物 403-1 9(78 mg，0.14 mmol)使用類似於針對化合物13(實 施例11)敘述之程序製備：LCMS: 552 [M+l] + ; 1150-9131-PF/Kai 414 200829575 NMRCDMSO-^/e): 2.20(t, /=6 Hz, 2H), 2. 38(t, /-6 Hz, 2H), 4.28(d, /-6 Hz, 2H), 6. 70(d, /-3Hz, 1H), 6. 84(s, 1H), 7.09(d, /-9Hz, 2H), 7. 55-7, 68(ra, 4H), 8.12(s, 1H), 8.34(d, /-6 Hz, 2H), 8. 44(s, 1H), 8.69(s, 1H), 9. 13(1H), 9. 37(s, 1H), 10, 38(s, 1H) 〇 實施例16:製備#-((4-(4-(3-(4-氣-3(三氟甲基）苯基） 脲基）苯氧基）吼唆-2-基）甲基羥基戊二醯胺（化合物 20) 步驟16a. 4-((4-(4-(3-(4_氯-3-(三氟曱基）苯基）脲基） 苯氧基）吼啶-2-基）甲基胺基）-4-側氧基丁酸甲酯（化合物 403-20 ) 標題化合物4 0 3 - 2 0黃色固體（50 mg，4 4 · 3 %)係從化 丽 5 mg： 0: “^^ 基:5^ 基戊酸(35 mg, 0· 24 mmol)使用類似於化合物403-1 9(實施例15)針對 敘述之程序製備：LCMS: 565 [M+l]+。 步驟16b· # -（（4 -（4 -（3 -（4-氯-3-（三氟甲基）苯基）脲基） 苯氧基比咬-2-基）甲基羥基戊二醯胺（化合物2〇) 標題化合物20淡黃色固體（40 mg，88. 5%)係從化合物 403-20U5 mg’ 〇·〇8 mmol)使用類似於針對化合物13(實 施例11)敛述之程序製備：m. ρ· ι61· 8〜164· 9。〇，lcms: 566 [M+l] ; H NMR(DMS0-^6) ^ 1.69(m, 2H), 1.95(t, /-7. 2Hz, 2H), 2.12(t, /^7>5 Hz, 2H), 4. 27(d, /-5.1 Hz, 2H), 6.74(d, /-3. 6 Hz, 2H), 7. 07(d, /-9.0 Hz, 2H), 7. 62(m, 4H), 8.17(s, 1H), 8.34(d, /-7. 2Hz, 2H), 9.51(s, 1H), 1150-9131-PF;Kai 415 200829575 1H)，10.43(s，1H)，l〇.61(s，1H)。 實施例17:製備((4-(4-(3-(4-氯-3(三氟甲基）苯基） 脈基）本氧基）。比咬-2-基）甲基）-# -沒基己二酿胺（化合物 21) 步輝 17 a · 6- ((4-(4 < 笨氧基）σ比唆-2 -基）曱基胺基）-6 -側氧基己烧過氧酸（化 合物 403-21 ) 標題化合物403-21黃色固體（84 mg，63%)係從化合 物402(100 mg，〇·23 mmol )及6-甲氧基-6 —侧氧基己酸（43 m g，0 · 2 7 m m 〇 1)使用類似於針對化合物4 〇 3 ~ 1 9 (實施例1 5) 敘述之程序製備：LCMS: 581 [M+l]+。 步驟17b· ((4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟甲基）苯基）脲基） ^ ( ΐ χ ^ }- 標題化合物21淡黃色固體（56 mg，69 %)係從化合物 403-21 (80呢，0.14 111111〇1)使用類似於針對化合物13(實 施例11)敘述之程序製備：LCMS: 582 [m+i] + ; ^
NMRCDMSO-^e) ： δ 1.45(s, 4H), 1 94r+ T • Hz, 2H), 2.11(t，/=6Hz，2H)，4.27(d’ /=6HZ’ 2H)，6 74(s，2H)， 7.1〇(d，/-9Hz，2H)，7.56-7.69 (m，4H)，8.12(s，’ ih): 8.34(d，/-6 Hz，2H)，8.69(s，1H)，9.18(s，ih)，9’·42(^ 1H)， 1〇·35(s， 1H)。 ’ ’ 實施例18:製備f ((4-(4-(3-(4各3(三氟¥ w苯基） 脈基）本氧基）吼〇定-2-基）曱基其立 L基辛二醯胺（化合物 23) 1150-9131-PF;Kai 416 200829575 二驟18a· 8 ((4 -（4-(3-(4-氯-3-(三氟甲基）苯基）脲基） 苯氧基）比π疋—2 —基）甲基胺基㈠則氧基辛酸平醋（化合 物 403-23) 私題化口物4〇3-23黃色固體（93mg，67%)係從化合 # 402(1 00 ^ 23 mffl〇l ) A L·! mg，〇· 27 mmol)使用類似於針對化合物4〇3 —19(實施例i5) 敘述之程序製備：LCMS: 607 [MH]+。 步驟18b. #-((4 —(4 一（3_(4一氯一3_(三氟甲基）苯基）脲基） 苯氧基）吡啶-2-基）甲基）羥基辛二醯胺（化合物23) 標題化合物23淡黃色固體(52邶，61%)係從化合物 403-23(88 mg，0.14 _〇1)使用類似於針對化合物13(實 施例η)敘述之程序製備·· LCMS: _ lMR«^ ^Τ2Ϊ-114ΓΓ.^ ΪΗ)) 1.93(t, >6 Hz, 2H), 2.10(t, /^6 Hz, 2H), 4. 26(d, /-6
Hz， 2H), 6.72-6.77(m, 2H), 7. 06(d, /=9Hz， 2H)， 7.56-7.71(m, 4H), 8.19(s, 1H), 8. 34(d, Hz, 2H), 8.69(s，1H), l〇.44(s, 1H), l〇.76(s，1H)。 生物學試驗： 如同前述，、本發明所定義的衍生物，具有抗增生活性。 此等性質可例如使用一種以上下列程序評估： (a)—體外（/τ? F/iro)試驗，決定受測化合物抑制激酶之能 力
Raf激酶試驗，係依照Raf激酶分析套組之實驗步驟 (B~Raf, Upstate, catalog# 17-359; C-Raf, Upstate 1150-9131-PF;Kai 417 200829575 catalog# 1 7-360)並修飾後實施。簡言之，將分析緩衝液、 ATP、受質及Raf激酶，於96井分析盤中混合。最終激酶 分析混合物，包含20 mM MOPS、ρΗ7· 2，25 mM点-甘油構 酸酉旨、5 mM EGTA、1 mM 原飢酸納、1 mM DTT、250am ATP 及 37.5mM 氣化鎂、〇·1// g/weli Raf 激酶，及 i # g/well 之MEK-1受質蛋白質。將分析試樣於室溫溫育30分鐘。將 激酶反應藉由添加EDTA、pH8中止，最終濃度25 mM。將 10 // 1的反應試樣點墨於硝基纖維素及藉由添加1 # g/ml 的抗-磷酸-MEK-1抗體於阻斷溶液（Licor Bioscience， catalogue # 927-40000)實施墨點法。將硝基纖維素濾紙 接著以2級IRDye 800CW山羊抗兔抗體（LicorBioscience， catalogue # 926-32211^ imagerCLicor BioscTence)X^ —- 化合物抑制VEGFR2激酶活性之能力使用HTScan™ VEGFR2 激酶試驗套組（Cell Signaling Technologies， Danvers, ΜΑ)評估。VEGFR2赂胺酸激酶使用一桿狀病毒表 現系統生產，具一構建物，包含一人類VEGFR2 cDNA激酶 結構域（八3?805-¥&1 1 356)(661^31^八(^6331〇11111111^61\ AF035121 )片段其胺基末端融合於一（JST-HIS6-凝血酶切開 部位。PDGFR-beta酪胺酸激酶使用一桿狀病毒表現系統 生產，具一構建物，包含一人類PDGFR —betac-DNA(GenBank
Accession number. NM—002609 )>1 段（Arg561-Leull06)胺 基末多而融合於一 GST-HIS6-凝血酶切開部位。該蛋白質利 用谷胱甘肽-瓊脂以單步驟親和層析精製。抗磷酸化酪胺酸 1150-9131-PF;Kai 418 200829575 單株抗體，P-Tyr-1 00，被用於偵測生物素化受質肽之鱗酸 化（VEGFR2，Biotin-Gastrin 前驅物 Tyr87))。酵素活性係 於 60 mM HEPES、5 iiiM MgCl2 5 mM MnCl 2 200 μΜ ATP、1· 25 mM DTT、3 μΜ Na3V〇4、1.5 mM 肽及 50 ng EGF 受體激酶中 磁定。已結合〜i ^ M DELFIΑ ^ (Perkin Wei lesley，MA)偵測，該系統由DELFIA®銪標記抗小鼠 IgG(PerkinElmer， #AD〇124) 、 DELFIA® 增強溶液 (PerkinElmer，#1 244-1 05)，及 DELFIA® 鏈黴親和素 (3什6?七3〃1心1〇包覆之96井盤（？6^1^111161'，人八八帅-00 05) 構成。螢光係於WALLAC Vi ctor 2平盤讀取儀測定，並以 相對螢光單元（RFU)報告。資料可以使用GraphPad Pr i s m (v 4 · 0 a )繪製成歐 回應曲線適合玉演算法，計—瓦—了C 5 0厂一一一――—~ 一一〜 將受測化合物溶解於二曱基亞砜（DMS0)，以得到20 mM 的工作原濃度。各試驗設定如下：添加100/zl的10 mM ATP到1.25 ral的6 mM受質肽。將該混合物以去離子水稀 釋，以得到2X ATP/受質混合物（[ATP]=400 mM，[受質]=3 mM)。立即將酵素從-8(TC轉送到冰中。使酵素於冰上解凍。 於4°C輕微地微量離心，使液體沉在小試管底部。立即放
回冰中。添加10//1的DTT(1.25 mM)至2.5 ml的4X 11丁3(^1^肘酪胺酸激酶緩衝液（24〇禮11肿£^1)[17.5，2()岫
MgCl2，20 mM MnCl’ 12 mM NaV〇3)，以配成 DTT/激酶緩衝 液。將1· 25 ml的DTT/激酶緩衝液，移到酵素管，以配成 4X反應混合物（[酵素]=4 ng///L於4X反應混合物）。將 1150-9131-PF/Kai 419 200829575 12.5// 1的4X反應混合物與12·5#丨/井的關注的預稀釋 化合物(通常約1〇/ζ Μ)於室溫溫育5分鐘。添加25" i的 2X ATP/受質混合物至25〜井的預溫育反應混合物/化合 物。將反應平盤在室溫溫育3〇分鐘。添加5〇 # "井的停 ^~ ^ ^ 應。將各反應 25// 1及75// 1去離子水/井，移到96井鏈黴親合物—包覆 平盤，並於室溫溫育60分鐘。以200 # i/井PBS/TCPBS， 〇·〇5% Tween-20)清洗3次。將初級抗體、磷酸化酪胺酸 f -Tyr-100) ’ 1:1〇〇〇 於 PBS/T 中，以 1%牛血清白蛋白 (BSA)稀釋。添加loo#」/井的初級抗體。於室溫溫育6〇 为鐘。以200//1/井PBS/Τ清洗3次。將銪標記之抗小鼠 IgG 1: 5αα 於 PBS/T，以 清洗5次。添加loo# i/井DELFIA⑧增強溶液。於室溫溫 月5为鐘。以適當的時間—解析（Time—Res〇ived)平盤讀取 儀’摘測發射的61 5 nm螢光。
C (b)—體外（/；? 試驗，決定受測化合物抑制hdac酵 素活性之能力 HDAC抑制劑使用HDAC螢光測量試驗套組 (AK-50 0, Biomol、Plymouth Meeting、PA)篩選。可將受試 化合物溶於二甲基亞砜（DMS0)，以得到20 mM工作原濃 度。螢光使用WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad Prism(v4.0a) 繪圖’並且使用S型（s i gmo i da 1 )拋物線劑量-回應曲線適 420 1150-9131-PF;Kai 200829575 合度演算法，計算IC50。 各試驗設定如下：將所有的套組成分解凍，於使用前保 持在冰上。將HeLa核萃取物以1 : 29稀釋於試驗緩衝液（5 〇
mM Tns/Cl、PH 8.0，137 mM NaCl，2.7 mM KC1，1 mM M g C12)。製備T r i冰 組)及受測化 合物於試驗緩衝液（5X最終濃度）之稀釋物。將Fiuor de LysTM基稀釋於試驗緩衝液成1〇〇 uM(50倍=2x最終）。 ， 將Fluor de LysTM顯影劑濃縮物（例50 // 1 + 950 // 1試驗緩
衝液）於冷試驗緩衝液稀釋2〇倍。第二，將〇. 2 mM
Trichostatin A 100-倍稀釋於lx顯影劑（例1〇//1於工 ml;最終Trichostatin A濃度於1χ顯影劑添加 HDAC/ x _質反應後之最終濃度=1 # Μ)。添加試驗緩衝液、經 稀釋trichos tat in Α或受測抑制劑，至微滴定盤之適當的 井。添加經稀釋之HeLa萃取物或其他HDAC:樣本，至所有 井’除了負控制組。使經稀釋之Fiuor de LysTM受質及樣 i； 本在微滴定盤中平衡至試驗溫度（例如25或37Ό )。藉由 添加經稀釋受質（25// υ至各井並充份混合，以起始化hdac 反應。使HDAC反應進行1小時，接著藉由添加Flu〇r仏
LysTM顯影劑（50// 1)使反應停止。將平盤在室溫（25^ ) 溫育10-15分鐘。在能於波長35〇_38〇nm之範圍激發的微 滴定盤讀取螢光儀，讀取樣本，並谓測在44〇-46〇 nm發射 之光。 以下表6-B列舉本發明代表性化合物及其活性於 HDAC，分析。於此等分析，ic“使用以下分 1150-9131-PF;Kai 421 200829575 級：Ι^10//Μ，10//Μ>ΙΙ>1/ζΜ，1//Μ>ΙΙΙ>0·1/ζΜ 且 IV $ 0· 1 // Μ ο ^20
第7部分： V (XII) 表6-Β
化合物編號 HDAC B-Raf C-Raf VEGFR2 PDGFR/5 cKit 1 II 2 II 3 II 5 III II II IV III IV 6 III 7 II III III IV 9 III IV 10 II 12 III IV IV IV IV 16 III 17 III III 18 III III 19 III 20 LLI -------------------- LV 21 III IV III IV 23 III IV III IV 25 II 26 II 27 III 28 III 31 / II 32 III IV 33 II 34 III 36 I II
表7-A 1150-9131-PF;Kai 422 200829575 化合物編號 結構 1 ^X>-s N Nv^0 Β、〇Η 2 ΝΗ, Br-nfy-O V ° 'ΟΗ 3 〇"Ί 斗; y 1 y~s η 0 4 χνδ 0 \〇Η 5 0^0 άνΑ Ν\κ \^β^ΟΗ 0 6 >« OH 7 严 2 ,_/~\_〇 \ ilXnv-s Ν ν^° Η、οη 8 人 ν>^ \ 0 \〇Η 423 1150-9131-PF;Kai 200829575
9 仁 V Β、οη 10 。、Η 11 νά η~οη 12 、八Ν 13 ν-οη Γ2 〇Η n^V"Nv\ /~ 0 iX>-s Ν’ Ν\ 〜 ^/^^CH 14 Vh2 f~\-〇 ρ 仁 η/Η '^CH 15 Ο-。 N^W )=7 Η 、工仁S cHh 16 ^2 <f~V〇 〇：Vs^ W s ho/ ^^^CH 17 ^ /~V-〇 H N V <Kh ^^^CH 1150-9131-PF;Kai 424 200829575
18 Γ2 〇 19 CH 20 ...............................o............................ inXn>-s Br i{、〇H 21 今δ OH Η», Μ 22 Χ^Η Ο 23 Ο^Ο …—砂.......................................— ΗΛνλΓ 24 .^ ο 25 r 8 0：νΗ %。 Η、ΟΗ 26 V Β、ΟΗ 27 χνδ Bf OH 1150-9131-PF;Kai 425 200829575
1150-9131-PF;Kai 426 200829575
1150-9131-PF;Kai 427 200829575
1150-9131-PF;Kai 428 200829575 / \
Scheme 1
103 104
Scheme 2
1150-9131-PF;Kai 429 200829575
Scheme 3
305
Scheme 4
n
MsCI/EtjN
Scheme 5
1150-9131-PF;Kai 430 200829575
Scheme 6
601 602 PMB 603 PMB
PMB 605
貫施例1 :製備2 - ( 6 -胺基-8 - (6 -溴苯并[j] [ i，3 ]二側氧 基1-5-基硫）-9及-嘌呤-9-基羥基乙醯胺（化合物i) 步驟la· 5-溴-6-碘苯并[θ] [1，3]二氧雜環戊烯（化合物 -j…^ Q 'ST ——…. — ^ 11/ | .......… 一 -·— - —. 一·.....'— 將化合物101(10· 〇 g，50. 0 mmol)、無水乙腈（150 mL)、TFA(11· 4 g, 100. 〇 mmol)& NIS(33. 7 g，150. 0 mmol) 之溶液’於室溫攪拌達24小時。將溶劑於減壓下移除並將 粗製品以石夕膠管柱層析精製（石油）以得化合物丨〇2白色固 體（18.5g，91%): iNMFKDMSO-A) β 5.99(s，2H)，7.10(s， 1H), 7· 26(s，1H)。 步驟lb· 6-胺基—7及-嘌呤—8(9及)—硫酮（化合物i〇4) 將4,5,6-三胺基硫酸嘧啶（5Q.〇 g，223 〇 _〇1)、 Ι^ΟΗ(19·7 g，493.0 mmol)及水（ 500 mL)之混合物，加熱 至80 C直到所有固體溶解。將該溶液冷卻至0〜5°C，並將 pH以IN HC1調整為7· 〇，其中，游離鹼結晶為白色針狀 1150-9131-PF;Kai 431 200829575 物（27· 6 g，99%)。將 4, 5, 6-三胺基嘧啶 103(10. 0 g，80. 0 mmol)、硫尿素（18· 3 g，240· 0 mmol)於 1，2-二氯苯（60 mL) 之混合物於1 6 〇 °C攪拌14小時。冷卻至室溫並使該混合物 硬化。倒出澄清液體，將固體磨碎，並以濃鹽水稀釋。將 該混合物於室…I 得到粗製產物。將該 粗製產物以濃鹽水及醚清洗、乾燥以得到標題化合物1 04 淡黃色固體（7· 35 g，54· 9%)。4 NMR(DMSO-A) J 6. 77(s， 2H), 8.08(s，1H)，12.06(s，1H)，13.05(s，1H)。 步驟lc· 8-(6-溴苯并[d][l，3]二側氧基卜5-基硫）-9F 嘌呤-6-胺（化合物105) 將化合物 l〇4(5.0g, 30.0mmol)、化合物 102(14.7g， 45· 0 mmol )、新銅試劑（neocUpr〇ine)水合物（〇.625 g，3.0 mmol )、CuI(〇.571g，3.0 mmol)及 NaO- i-Bu(3· 5 g，36. 0 mmol)於無水DMF(100 mL)之混合物，於ll(Tc (油浴）於氮 氣氣氛攪拌達24小時。將溶劑於高真空下移除並將粗製品 以矽膠管柱層析精製（ChCh/MeOH : 3〇/1)以得標的化合物 105 黃色固體（5.3 g， 48.2%)·· LCMS·· 366 [M] + ; 4 NMRCDMSO-i/e) ^ 6.09(s, 2H), 7. 02(s, 1H), 7.11(s, 2H), 7· 35(s，1H)，8. 〇6(s，1H)。 步驟Id· 2-(6-胺基-8-(6-溴苯并[j][i，3]二侧氧基卜5一 基硫）-9及-嘌呤-9-基）乙酸乙酯（化合物1〇6-1) 將化合物 105(1.0 g，2.73 mmol )、Cs2C〇3(1.5g，4.64 mmol)、2->臭乙酸乙酯（〇· 685 g，4· 1 mmol)及無水腿F(40 m L)之 合物，於室溫擾摔6小時。將溶劑於高真空下移除 1150-9131-PF;Kai 432 200829575 並將粗製品以矽膠管柱層析精製（CH2Cl2/MeOH: 100/1)以 得標題化合物1〇6_1(0· 65 g，52. 6%)白色固體.LCMS: 452 [M]+。 步驟le· 2-(6-胺基-8-(6-溴苯并[〇r][i，3]二側氧基卜5-& ^ Ϊ ^ ^ 1> 對攪拌中之羥基胺氯化氫（4.67 g，67.0 mmol)於甲 醇（24 niL)溶液，於〇°C添加氫氧化鉀（5. 61 g，1()〇· 〇 _〇1) 曱醇（14 mL)溶液。添加後，將該混合物於攪拌3〇分 鐘，並於低温靜置。將得到的沉澱分離，並將該溶液製備 以得到游離羥基胺。 將化合物1 0 6-1 ( 300 mg，〇·μ隨〇1)之飽和nh2qh溶 液(1:—77M’_ 5 mL)於室溫攪拌30分鐘。將該混合物以Ac〇h 凋整為pH 7. 0，並將溶劑移除。將固體以水稀釋並過濾以 得化合物1白色固體（85mg，29 2%)Qm p. 23(rc(分解）， LCMS: 439 [ΜΓ;沱 NMRCDMSO-A) j 4· 84(s，2H)，6. 〇4(s:
2H), 7.00(s, 1H), 7.26(s, 1H), 8. 04(s, 2H), 8. 24(s, 1H), 9.11(s, 1H), 10. 98(s, 1H) ° 實施例2:製備4-(6_胺基-8_(6_漠苯并[jni，3]二侧氧 基1-5-基硫）-9f嘌呤-9-基）_於羥基丁醯胺（化合物3) 步驟2a. 4-(6-胺基—8_(6_演苯并[jni，3]二側氧基卜5 — 基硫）-9及-嘌呤-9-基）丁酸乙酯（化合物1〇6_3) 標題化合物1G6-3白色固體（28Qmg，21·4%)係從化合 物 105(1.0 g，2.73 mmol)、Cs2C〇3(l 5 g’ 4 64 _^、 4-溴丁酸乙醋（800 mg，“ _)使用類似於針對化合物 1150-9131-PF;Kai 433 200829575 106_1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 480.34 [M]+。 步驟2b· 4-(6-胺基-8-(6-溴苯并[ί/][1，3]二側氧基卜5-基硫）-9万-嘌呤-9-基）-於羥基丁醯胺（化合物3) 標題化合物3白色固體（207 mg, 76%)係從化合物 4 0 6-3(280 jR g r 0 ^ 5 8 ^ Ν Η ζ Ο Η ^ (1. 7 7 M 5 5 m L) 用類似於針對化合物1 (實施例1)敘述之程序製備：m. p. 164. 7-18L 0°C , LCMS: 468 [M+l] + ; ]H NMRCDMSO-i/e) ^ 1.93(s, 4H), 4.14(t, 2H, /=6.3 Hz), 6. 07(s, 2H), ； 6.84(s, 1H), 7.34(s, 1H), 7. 35(s, 2H), 8.12(s, 1H), 8· 70(s, 1H)，l〇. 35(s，1H)。 實施例3:製備5-(6-胺基-8-(6-溴苯并[θ][1，3]二側氧 基卜5-基硫）-9#_嘌呤-9-基）-#-羥基戊醯胺（化合物4) 步驟3a· 5-(6-胺基-8-(6-溴苯并["[1，3]二側氧基1 = 5-基硫）-9#-嘌呤-9-基）戊酸甲酯（化合物106-4) 標題化合物1〇6-4淡黃色固體（463 mg, 35. 3%)係從化 | 合物 1〇5(1· 〇 g，2· 73 mmol)、Cs2C〇3(l. 5 g，4· 64 mmol)、 乙基5-溴戊酸酯（800 mg, 4· 1 mol)使用類似於針對化合 物106-1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 480 [M]+。 步驟3b· 5-(6-胺基-8-( 6-溴苯并[ί/][1，3]二侧氧基1-5-基硫）-9 σ票呤-9 -基）-#-經基戊醯胺（化合物4 ) 標題化合物4白色固體（130 mg, 28%)係從化合物 106-4(463 mg，〇· 96 mmol)及 NH2〇H 溶液（1.77M，5mL)使 用類似於針對化合物1(實施例丨）敘述之程序製備：m p. 191.8〜195.7 t：， LCMS: 481[M] + ； NMR(DMSO-^e) ^ 1150-9131-PF;Kai 434 200829575 1.43(q, 2H, /1 = 6. 9 Hz, 1. 68(m, 2H), 1.94(t, 2H，/=7.5 Hz), 4.14(t，2H，；6·9 Hz)), 61〇(s，2H)， 6.86(s, 1H), 7.37(s, 1H), 7. 39(s, 2H), 8.15(s, 1H), 8.67(s, 1H)， 10·33(s, iH)。 實施例“ 〜 基1-5-基硫嗓呤-9〜基）〜舲經基己醢胺（化合物5) 步驟4a. 6-(6-胺基-8-(6〜溴笨并u][1，3]二側氧基卜5一 基硫）-9#-嗓呤-9_基）己暖乙酯（化合物1〇6一5) 標題化合物1〇6-5黃色固體（〇35g，25·2%)係從化 合物 105(1· 0 g，2. 73 mm〇1)、Cs2C〇3(1· 5 g，4· 64 _〇, 6-漢己酸乙酉旨（914 mg，4·1 mol)使用類似於針對化合物 106-1(貫施例1)敘述之程序製備：[CMS: 508 [M]+。 步驟—4b厂6:(6:胺基-8一(^^苯并-而3]二側氧基!:5: 基硫）-9#-嘌呤-9-基）-展羥基己醯胺（化合物5) 標題化合物5淡黃色固體（200 mg，57. 6%)係從化合物 1 06-5(350 mg, 0.7 _〇1)及 NH2〇H 溶液（ΐ·77Μ，5mL)使用 類似於針對化合物1 (實施例1)敘述之程序製備：m. ρ· 159·6 〜169°C，LCMS: 496 [M + l] + ;沱 NMR(DMSO-A) J 1. 18(q, 2H, /1 = 6. 3 Hz, /2 = 14. 7 Hz) 1. 48(m, 2H), 1. 65(m, 2H), 1.90(t, 2H, >7.5 Hz), 4. 14(t, 2H, /=6.9 Hz), 6.11(s, 2H), 6.86(s, 1H), 7. 39(s, 1H), 7.41(s, 2H), 8.17(s, 1H)，8.68(s，1H)，10.33(s，1H)。 實施例5:製備7-(6_胺基_8-(6-溴苯并[j][i，3]二側氧 基卜5-基硫）-9#-嘌呤-9-基）-#-羥基庚醯胺（化合物6) 435 1150-9131-PF/Kai 200829575 步驟5a· 7-(6-胺基- 8-(6-溴苯并[d][i，3]二側氧基i 一5一 基硫）-9 σ票呤-9 -基）庚酸乙(化合物1 〇 6 - 6 ) 標題化合物106 - 6黃色固體（542 mg，43.7%)係從化 合物 105(1.0 g，2.73 nunol)、Cs2C〇3(l. 5 g，4.64 niniol)、 7 -》臭庚酸乙S曰（9 7 2 in g，4 · 1 m o 1)使用類似於針對化合物 106-1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 522 [M]+。 步驟5b. 7-(6-胺基-8-(6-溴苯并[ί/][1，3]二侧氧基1-5 -基硫）-9 σ票呤-9 -基）-經基庚醯胺（化合物6 ) 標題化合物6白色固體（130 mg，24. 8%)係從化合物 1 06-6(542 mg, 0.66 mmol)及 NH2OH 溶液（1.77M，5mL)使 用類似於針對化合物1 (實施例1)敘述之程序製備：m. p. 1 93. 9-193. 9°C , LCMS: 511 [M+l] + ; !H NMR(DMS〇-^6) δ —„—..—__—„——— — 一_〜 — ' ------------------------------------------------------------------------------------ -......................__________________________________________________ … ..... _ 1.20(m, 4H), 1.43(m, 2H), 1.62(m, 2H), 1.90(t, 2H, /=7. 5 Hz), 4.13(t, 2H, /-6. 9 Hz), 6.10(s, 2H), 7.00(s, 1H), 6.83(s, 1H), 7.37(s, 1H), 7.42(s, 2H)? 8.16(s, 1H)，8.65(s, 1H)，10. 32(s, 1H)。 實施例6 :製備6-(6-胺基-8-(2-碘-5-曱氧基苯基 硫）-9及-嘌呤-9-基羥基己醯胺（化合物11) 步驟6a. 8-(3-甲氧基苯基硫）-9及-嘌呤-6-胺（化合物201) 將化合物104(2. 0 g，12 _〇1)、1-峨-3-曱氧基苯 (4·21 g，18 mmol), 1，1〇-菲繞啉水合物（〇·24 g，1.2 mmol)、Cul(0. 23 g，1· 2 mmol)及 NaOi-Bu(l. 38 g，14. 4 mmol)於無水DMF(20 mL)之混合物，於ll〇°C (油浴）於氮氣 氣氛攪拌達24小時。將溶劑於高真空下移除並將粗製品以 1150-9131-PF;Kai 436 200829575 石夕勝管柱層析精製（CH2Cl2/MeOH：:：3〇/1)以得標的化合物 201 黃色固體（0.86 g，26%): LCMS: 274 [M+1].。 步驟6b. 8-(2-硬-5-甲氧基苯基硫）—9於嘌呤-6-胺（化合 物 202) ^ ^ 0. 6 9 mg, 2 . 5.2 mmol ) > NISC3 . 4 g, 15 . L2 mmol)、二氟乙酸（ι· 44 g, 12· 6 mmol)及乙腈（150 mL)之 混合物，於室溫攪拌達4小時。將溶劑移除並將殘渣懸浮 於飽和NaHC〇3水溶液，將得到的固體收集並乾燥以得到化 合物 202 淡黃色固體（81〇 mg，8〇%): LCMS: 4⑽[M+1] +。 步驟6c· 6-(6-胺基—8-(2-碘-5-甲氧基苯基硫）-9H-嘌呤 -9-基）己酸乙@旨（化合物2〇3_ii) ——————將—化合物 202( 1 02 1 〇. 25 mmol)、CS2C〇3(98 mg，0. 3 mmol) > ^ 之混合物，於6(TC攪拌達2小時。將溶劑於高真空下移除 並將粗製品以矽膠管柱層析精製（乙酸乙酯/石油醚=1 /2) 以得到化合物203-1 1黃色固體(52 mg，則。LCMS: 542 [M+l]+ 〇 步驟6d· 6”H(2,5_甲氧基苯基硫）督嗓吟 -9-基）-#-羥基己醯胺（化合物u) 對授拌中經基胺氣化氫（4 67 g，67mm〇1)於甲醇（24 …之溶液，於吖添加氫氧化鉀(5.61 g，100mmol)於甲 醉（14 mL)之溶液。添加後，將該混合物於ye授拌3〇分 鐘’並靜置於低溫。將得到的沉殿分離，並將該溶液製備 以得到游離羥基胺。 1150-913l-PF;Kai 437 200829575 將化合物203-1 1 (50 mg, 0·09 mmol)及新鮮製備的 NH2〇H/Me〇H(1.77 M，3 raL，5.3 _〇1)之混合物，於室溫 櫈拌15分鐘。將該反應混合物以AcOH中和，並將溶劑移 除以得到粗製產物。將粗製產物以製備Hplc精製以得到標 题 ^ 11 ^ 31% ); LCMS ： 5 2 9 [ Mi l ]+, Vfj NMRCDMSO-^e)： ^ 1.18(m, 2H), 1.42(m, 2H), 1.64(m5 2H) 1.86(t, /=6. 9 Hz, 2H), 3. 62(s, 3H), 4.12(t, /=7. 2Hz, 2H), 6.49(d, /=2. 7 Hz, 1H), 6.70(dd, //=3. 0 Hz, /,= 8.4 Hz, 1H), 7.51(s, 2H), 7. 78(d, /=8.1 Hz, 1H), 8.19(s, 1H), 8. 65(s, 1H)，10· 29(s，1H)。 實施例7:製備7-(6-胺基_8-(2—碘—5—曱氧基苯基 硫）-9#-嘌呤-9-基）-#-羥基庚毽胺（化合物12) 步驟7a: 7-（6 -胺基-8 -（2-破-5-甲氧基苯基硫）一9及-嘌呤 -9-基）庚酸乙酯（化合物203-12) 標題化合物203 -12黃色固體（72 mg，22%)係從化合 物 202(239 mg， 〇·6 mmol) 、 Cs2C〇3(391 mg， 1·2 mmol)、 7-溴庚酸乙酯（156 mg，〇·66 m〇1)及無水MF(5以）使用 類似於針對化合物2〇3_11(實施例6)敘述之程序製備·· LCMS: 556 [M+1]+ 〇 步驟7b. 7-（6-胺基一8-（2-碘-5-曱氧基苯基硫）一9#-嘌呤 - 9-基羥基庚醯胺（化合物12) 標題化合物12淡白色固體（11 mg，16%)係從化合物 203-1 2(71 mg，〇·ΐ3_ο1)及 NH2〇H/MeOH(1.77M，3mL，5.3 mmo 1)使用類似於針對化合物1丨（實施例6 )敘述之程序製 1150-9131-PF;Kai 438 200829575 備：LCMS: 543 [M + l]+，4 NMR(DMS0-A): j i. 16(m，4H)， 1.37(m, 2H), 1.61(m, 2H), 1.87(t, /=7 8 Hz 2H) 3.61(s, 3H), 4.12(t, >6. 9 Hz, 2H), 6.49(d, /=3. 0 Hz, 1H), 6.70(dd, /；=2.7Hz, /,= 8. 7 Hz, 1H), 7.5i(s, 2H), "./½ 8. ^ , . ,8-.19 X«s, , 1«H) 3 β-4 ^ s 1H) 10·30(s, 1H)。 實施例8:製備2-(3-(6-胺基-9-(戊-4—炔基）_9#—嗓呤 - 8-基硫）苯氧基）-yV-經基乙醯胺（化合物14) ί 、 步驟8 a · 8 -溴-9 σ票呤_ 6 -胺（化合物3 〇 2) 將溴（9.36 g, 58·5 mmol)於攪拌中添加至η2〇(25 mL)，然後將化合物301(1. 1 g, 8· 1 _〇1)添加至此溶液。 將該混合物於室温攪拌整夜。將多餘的溴移除並將溶劑蒸 發以得到化合物™302淡黃色固體H 28 g，: 1¾ ^ 製產物而不經進一步純化：LC-MS : 214 [ M+1 ]+。 步驟8b· 8-溴-9-(戊-4-炔基）-9#-嘌呤-6—胺（化合物 , 303-14) i 將化合物 302( 1· 7 g，8· 1 _〇1)、5—氯戊-卜炔（1 7 g， 16. 2 mmol)、Cs2C〇3(5. 8 g，17· 8 mmol)及 25 mL DMF 之混 合物，加熱至85°C並攪拌整夜。然後DMF於真空中移除。 將殘、/查以管柱層析過濾（二氯甲烧：甲醇〇 ·· 1)以得到化 合物 303-14(51211^，23°/〇白色固體：1^一]^:280 [1^+1]+， WNMRCDMSO-A) J 1·91(ιη，2H)，2.22(m，2H)，2.79(t， /-2.4 Hz, 1H), 4.18(t, /-7. 2Hz, 2H), 7.36(s, 2H), 8· ll(s，1H)。 1150-9131-PF;Kai 439 200829575 步驟8c. 3-(6-胺基-9-(戊-4-炔基）-9#-嘌呤-8-基硫）苯 酚（化合物304-14) ! 將 3-巯基苯酚（134 mg，1.1 mmol)及 NH3|I]H2〇(60 mg， 3.5 mmol)溶解於2 mL甲醇，將該混合物攪拌於70°C達 〇 · 5小時。然後l播^ 一 m m o l )，於 3 mL甲醇添加於此混合物中。將該混合物攪拌於60°C整 夜。將溶劑於真空中移除，並將殘渣以矽膠管柱層析過濾 (CH2C12: MeOH=40:l)以得到化合物 304-14( 1 70 mg，74%) 白色固體· LC-MS: 326 [M+l]+，j NMR(DMSO-A); J 1· 80(πι， 2Η)，2.22(m，2Η)，2.76(t，/二2.4 Hz, 1Η)，4.18(t， /-7, 2Hz, 2H), 6. 59-6. 75(m, 3H), 7. 14(t, /-7. 5 Hz, 1H), 7. 44(b, 2H), 8· 15(s, 1H)，9· 66(s, 1H)。 步驟8d. 2-(3-(6 -胺基- 9- (戊-4-炔基）-9#-嗓呤-8 -基硫） 苯氧基）乙酸曱酯（化合物305 -14) 將化合物 304-14(120 mg，0.37 mmo 1)、K2C〇3( 1 53 mg， 1 · 1 mmo 1)及2 -澳乙酸乙酉旨（92 mg，0· 55 mmo 1)之混合物， 溶解於5 mL DMF。將該混合物加熱至7 0 °C並授拌4小時。 將溶劑於真空中移除並將殘渣以石夕膠管柱層析過據（dC 1 2 : MeOH=20:l)以得到化合物305-14白色固體（86 mg，59%): LC-MS: 398 [M+l]+ 。 步驟8e. 2-(3_(6 -胺基-9-(戊-4 -炔基）-9#- °票呤—8 —基硫） 苯氧基羥基乙醯胺（化合物14) 標題化合物14白色固體（5 0 mg，5 7 % )係從化合物 305-14(86 mg，0.22 mmol)使用類似於針對化合物ιι(實 1150-9131-PF;Kai 440 200829575 施例6)敘述之程序製備：m.p· 16 5〜166°C, LC-MS: 39 9 [M+1 ]+，4 NMR(DMS0-A): θ 1· 84(m，2H)，2· I5(m，2H)， 2. 78(t, J=2. 4 Hz, 1H), 4.19(t, J=1. 2Hz, 2H)5 4. 44(s, 2H), 6. 84-6. 96(m, 3H), 7.26(m, 1H), 7. 43(b, 2H), 8 · 1五4s， 1Η X，8 · =9上 ts， 1HX li 81 實施例9 :製備4-(3-(6-胺基-9-(戊-4-炔基）— 9#_嗓呤 -8-基硫）苯氧基）-#-經基丁醮胺（化合物16) 步驟9a. 4-(3-(6 -胺基-9-(戊-4 -炔基）-9#-嗓呤—8-基硫） 苯氧基）丁酸乙酯（化合物305-16) 標題化合物305-16白色固體（120 mg, 64 %)係從化合 物 304( 1 35 mg，0· 42 mmol)、K2C〇3(165 mg，1.2 mmol)及 4-溴丁酸乙醋（123 mg，0. 63 mmol)使用類似於針對化合物 3 0 5-14 (實施例8)敘述之程序製備：LC-MS : 440 [ M+1 f 步驟9b· 4-(3-(6-胺基-9-(戊-4-炔基）-9#-嘌呤-8-基硫） 苯氧基）-1經基丁醯胺（化合物16 ) 標題化合物16白色固體（50 mg，48 %)係從化合物 305-1 6(1 1 0 mg, 0.25 mmol)使用類似於針對化合物11(實 施例6)敘述之程序製備：m.p. 159〜162°C，LC-MS: 427 [Μ+1]+, !Η NMRCDMSO-^): ^ 1.83(m, 4H) ^ 2. 04-2. 18(m, 4H)，2.77(t，/:2.4 Hz，1H), 3.90(t，/:6.0 Hz, 2H), 4.20(t, /-8.1Hz, 2H), 6. 80-6. 90(m, 3H), 7. 24(m, 1H), 7· 42(b，2H), 8· 14(s，1H)，8. 68(s, 1H), 10· 37(s，1H)。 實施例10:製備6-(3-(6-胺基-9-(戊-4-炔基）-9#-嘌呤 -8-基硫）苯氧基經基己醯胺（化合物18) 1150-9131-PF;Kai 441 200829575 基）-9#-嘌呤—8-基硫） 步驟 10a· 6-(3-(6-胺基-9-(戊—4-炔 苯氧基）己酸乙酯（化合物305-18) 標題化合物305-18白色固體（238 mg，85 4 %)係從化 304( 1 94 mg, 0.60 mraol).K2C〇3(247 mg, L8mmol) ^ ^ ^ ^ (4 43 0 . 89 ^ ^ ^ ^ # 合物3 0 5 -14 (實施例 [MH]+. 敛述之程序製備：LC-MS: 468 步驟1Gb. 6_(3令胺基.（戊 苯氧基羥基己醯胺（化合物18) 私題化口物18白色固體（5〇 mg，45· 8 %)係從化合物 305-18(110 mg，0.24 mmol)使用類似於針對化合物u(實 施例6)敘述之程序製備. m_ 〜—一…—_…— 一 P· 169.1^172.1 °C , LC-MS： 455 [M+T] NMR(DMS0 - A): d 1·33(m， 2H) ， 1·49(m, 2H) ， 1.63(m， 2Η)，1· 81(m，2Η)，1· 95(t，/=7. 2Hz，2Η)，2. 17(m，2Η)， 2. 81(t, /-2. 4 Hz, 1H), 3.89(t, /-6.0 Hz, 2H), 4. 22(t, /-7. 5 Hz, 2H), 6. 82-6. 89(ra, 3H), 7. 24(m, 1H), 7.48(b, 2H)，8.16(s, lH)，8.69(s, 1H), l〇.35(s, 1H)。 貫施例11 :製備3 —(2-(6-胺基-8-(6-溴苯并[¢/] [ i，3 ]二 侧氧基卜5-基硫）-9#—嘌呤—9 —基）乙基胺基）—#—羥基丙醯 胺（化合物20) 步驟11a· 2-(6-胺基-8-(6-溴苯并[θ][1，3]二側氧基卜5-基硫）-9#-嘌呤-9-基）乙基乙酸酯（化合物401-20) 將化合物 105-1(8.66 g，23.65 mmol)、Cs2C〇3( 11. 53 1150-9131-PF;Kai 442 200829575 g， 3 5 · 4 7 mmo 1)、2 -漠乙酸乙西旨（5.92 g，35.47 mmo 1)及 無水DMF (1 5 0 mL)之混合物，於5 〇。〇撥拌達2小時。將溶 劑於高真空下移除並將粗製品以矽膠管柱層析精製 (CH2Cl2/MeOH = 6 0/l)以得標的化合物401-20淡黃色固體 ，(工一0—....备，..一 生丄 ^ 步驟lib· 2-(6-胺基-8-(6-溴苯并[d][l，3]二側氧基1 一5-基硫）-9 H-11票吟-9-基）乙醇（化合物402-20) 將化合物 40卜20(4.0 g，8.84 mmol)於 MeOH(80 mL) 之懸浮液，以 K2C〇3(3. 67 g，26.53 mmol)於 50°C 處理 1 小時。將反應物過濾並濃縮以得標題化合物4 〇 2 - 2 0淡白色 固體（1. 3 g，35. 7%): LCMS: 41〇 [Μ + 1 ] + ; 4 NMR(DMS0-Α): ^ 3.72(t, 2H, /=5.4 Hz), 4. 28(t, 2H, >5.4 Hz), 5·^ —3:ΤηζΓ 6：10 TB^ 7· 35(s，3H), 8· 16(s，1H)。 步驟11c· 2-(6-胺基-8-(6-溴苯并二侧氧基丨一5一 基硫）-9於嘌呤-9-基）乙基曱烷磺酸酯（化合物4〇3 —2〇) 將化合物402-20(0.6 g，1.46 mmol)溶解於熱無水二 噁烷（35 mL)。將該溶液冷卻至45。〇並以NEt3(〇. 61 4.39 _〇1)及 MsCl(251.2 mg，2·2 _〇1)處理達 20 分鐘。 將混合物濃縮，並以矽膠管柱層析精製（CH2Ch/Me〇H=6〇/l) 以得化合物403-20淡黃色固體（〇68 g，95 5%): 487 [M+l]+ 。 步驟lid· 3-(2-(6-胺基—8 —(6 —漠苯并[d][1，3]:側氧基 卜5-基硫）-9H-嘌呤-9-基）乙基胺基）丙酸曱酯（化合物 1150-9131-PF;Kai 443 200829575 404-20) 將3-胺基丙酸甲酯氯化氫（494·5即，3.54 mmol) 溶解於 DMF(4.8 mL)及 NEt3(0.74 mL，5·31 mmol)，接著 添加至上述溶液。將該混合物於攪拌〇 · 5小時，然後 ^ m gv 0 ^ 3 1) - ^ 物於80°C攪拌12小時。將DMF於高真空下移除，並將粗 製產物以石夕膠管柱層析精製（CH2C12/Me〇H；=5〇/1)以得標的 化合物404-20黏稠黃色固體（121 mg，69%): LCMS: 495 [M+l]+。 步驟lie· 3-(2-(6-胺基-8-(6-溴苯并U][l，3]二側氧基 卜5-基硫）-9#-嘌呤-9-基）乙基胺基）—於羥基丙醯胺（化合 物20) ’—一.—„„〜一 —、，一 _—一——、— — —^ 一.—_ 標題化合物2〇淡白色固體（33 mg, 1 6. 5 %)係從化合 物404-20(200 mg，〇·4〇 mmol)及新鮮製備的NH2〇H甲醇 溶液（1· 77 M，10 mL)使用類似於針對化合物n(實施例6) 敘述之程序製備：LCMS: 496 [M+l] + ; 4 NMR(DMS0-A):汐 2.05(t, 2H, /=6. 9 Hz), 2. 69(t, 2H, /=6. 9 Hz), 2. 83(t, 2H, J = 6.3 Hz), 4.22(t, 2H, /=6.3 Hz), 6.10(s, 2H), 6.88(s, IH), 7. 36(s, 1H), 7. 37(s, 2H), 8.16(s, 1H) ° 貫施例12 :製備6 - (2 - (6 -胺基-8 - (6 -漠苯并[d] [ 1，3 ]二 側氧基1-5-基硫）-9分-嘌呤-9-基）乙基胺基）羥基己醯 胺（化合物23) 步驟12a. 6-(2-(6-胺基-8-(6-溴笨并[(!][!，叫二側氧基 卜5-基硫）-9H-嘌呤-9-基）乙基胺基）己酸曱酯（化合物 1150-9131-PF;Kai 444 200829575 404-23) 標題化合物404-23黏稠黃色固體（117呢，23.6 %) 係從化合物4〇3一20(45〇 mg，〇·92 _〇1)、甲基6一胺基己 酸酯虱化氫（1.67 g, 9.21 _〇1)及 ΚΟΗ(0·52 g，9.21 施例U)敘述之程序製備：LCMS: 537 [MH]+。 貫施例12b· 6〜（2-(6-胺基—8-(6-溴苯并[ί/][ΐ，3]二側氧 基1 5基硫嘌呤—9-基）乙基胺基）-，羥基己醯胺（化 合物23) 標題化合物23淡白色固體（22 mg，18·8 %)係從化合 物404-23 ( 1 1 7 mg，〇· 22 mmol)及新鮮製備的ΝΗ2ΟΉ曱醇 溶液（1. 77 M，4 mL)使用類似於針對化合物11(實施例6) 敘述之程序製備：LCMS: 538 [Μ + 1Γ; 4 NMR(DMS〇-Ayn 1.26(m, 4H), 1. 43(m, 2H), 1.70(s, 1H), 1.90(t, 2H, /=7. 2Hz), 2.44(t, 2H, /=7. 2Hz), 2.81(t, 2H, /=6. 0 Hz), 4.22(t, 2H, /,6e〇 Hz), 6.08(s, 2H), 6. 84(s, 1H), 7.34(s, 1H), 7.35(s, 2H), 8.15(s, 1H), 8. 65(s, 1H), 10_31(s, IH)0 實施例13:製備7—(2-(6 —胺基-8_(6-溴苯并[L3]二 側氧基卜5-基硫）_9#—嘌呤—9-基）乙基胺基）—γ—羥基庚醯 胺（化合物24) 步驟13a· 7-(2-(6-胺基- 8-(6-溴苯并[d][l，3]二側氧基 卜5-基硫）-9H〜嘌呤-9-基）乙基胺基）庚酸乙酯（化合物 404-24) 1150-9131-PF;Kai 445 200829575 標題化合物404-24黏稠黃色固體（ns呢，27 %)係 從化合物403-20(373 mg，0.76 mmol)、7-胺基庚酸乙酯氣 化氫（1.6 g， 7.6 mmol)及 KOH(0.43 g，7.6 mmol)於
MeOH(1.0 mL)使用類似於針對化合物404一2〇(實施例Π) 数述、之餐存 步驟13b. 7-(2-(6-胺基-8-(6-溴苯并[〇r][i，3]二側氧基 1-5-基硫）-9#-嘌呤-9-基）乙基胺基羥基庚醯胺（化合 物24) 標題化合物24淡白色固體（47 mg，40. 5 %)係從化合 物404-24( 1 1 8 mg，0.21 mmol)及新鮮製備的NH2〇H曱醇 溶液（1.77 M，4 mL)使用類似於針對化合物h(實施例6) 敘述之程序製備：m.p· 193〜197°C· LCMS: 552 [M+l] + ; 4 〜一r..____n,— — _ _ —_ _ — NMRCDMSO-i/e) ： δ 1.17(m, 6H), 1.44(m, 2H), 1.91(t, 2H, /-7. 2Hz), 2.43(t, 2H, /=7. 2Hz), 2. 82(t, 2H, /-6.0 Hz), 4.22(t, 2H, /=6.0 Hz), 6. 08(s, 2H), 6. 83(s, 1H), 7.34(s, 1H), 7.36(s, 2H), 8. 15(s, 1H), 8. 65(s, 1H)5 10· 31(s, 1H)。 實施例14:製備6-(2-(6_胺基-8-(6-碘苯并[jhu]二 側氧基卜5-基硫）—9#—嘌呤-9-基）乙基胺基）-水—羥基己醯 胺（化合物38) 步驟14a. 8-(6-碘苯并[d][l，3]二側氧基卜5-基硫）—9H-嘌呤-6-胺（化合物ι〇5-38) 將化合物 104(0.8 g，4.78 mmol)、5, 6-二碘苯并 [θ][1，3]—氧雜環戊浠（2·68 g，7.18 mmol)、新銅試劑 1150-9131-PF;Kai 446 200829575 (neocuproine)水合物（0· 1 0 g，〇· 48 mmol )、Cul (0· 091 g， ◦ · 48 mmol)及 NaO- i-Bu(0· 55 g，5. 74 mmol)於無水 DMF(4〇 mL)之混合物，於110°C (油浴）於氮氣氣氛攪拌達24小時。 將溶劑於高真空下移除並將粗製品以石夕膠管柱層析精製 (C E2 C I 2 / Ee O H = 30Z # # M ^ ^ 5 (0.35 mg, 17.6%): LCMS: 414 [M+l] + ； 'H NMR(DMS0-^6)： ^ 6.09(s, 2H), 7.01(s, 1H), 7. 22(s, 2H), 7.51(s, 1H), 8· 08(s，1H)，13. 20(s, 1H)。 步驟14b· 2-(6-胺基-8-(6-蛾苯并[J][l，3]二側氧基l一5一 基硫）-9及-嘌呤-9-基）乙基乙酸酯（化合物401 -38) 將化合物 105-38(3.89 g，9.41 mmol )、Cs2C〇3(3.68g， 11 · 3 mmol)、2-溴乙酸乙酯（1. 89 g，11 · 3 mmol)及無水 DMF (5 0 mL)之混合物厂於5 拌^達^ 真空下移除並將粗製品以矽膠管柱層析精製 (CI^Clz/MeOH^BO/l)以得標的化合物401-38淡黃色固體 (2·95 g，62·8%): LCMS: 500 [M+l]+。 步驟14c. 2-(6-胺基-8-(6-硤苯并[d][l，3]二側氧基1-5 -基硫）-9#-嘌呤-9-基）乙醇（化合物402-38) 將化合物 401-38(2. 95 g，5.91 _〇1)於 MeOH(70mL) 之懸浮液，以K2C〇3(0. 98 g，7· 1 mmol)於50°C處理1小時。 將反應物過濾並濃縮以得標題化合物402-38淡白色固體 (1. 33 g, 49. 3%): LCMS: 458 [M + l] + ； ^ NMR(DMS0-^) ： ^ 3.72(t, 2H, /=5. 4 Hz), 4. 27(t, 2H, /=5. 4 Hz), 5. 02(t, 1H, /=5. 4 Hz), 6.07(s, 2H), 6. 88(s, 1H), 7. 34(s, 2H), 1150-9131-PF;Kai 447 200829575 7· 47(s，1H)，8. 15(s, 1H) 〇 步驟14d· 2-(6-胺基-8-(6-碘苯并二側氧基卜5一 基硫）-9#-嘌呤-9-基）乙基曱烷磺酸酯（化合物403-38)
將化合物402-38(0.52 g，1」3 _〇1)溶解於熱無水 ^ ^ 2 m 45°G RE Ϊ 3 ( 〇 47 mL 3. 39 _ol )及 MsCl(194 mg，1.70 _〇i )處理達 2〇 分鐘。 將混合物濃縮並以矽膠管柱層析精製（CH2Cl2/Me〇H = 6〇/1) 以得化合物403-38淡黃色固體（585 mg，96.7%): LCMS: 536 [M+l]+ 。 步驟14e. 6-(2-(6-胺基-8-(6-碘苯并[d] [ 1，3]二側氧基 1-5-基硫）-9H-嘌呤-9-基）乙基胺基）己酸曱酯（化合物 404-38) 一 ^ — —— —： 1 3 將 KOH(785 mg，14 mmol)之 MeOH(4 ml)溶液，於 〇。〇滴加 到甲基6-胺基己酸酯氯化氫（2543 mg, 14 mmol)之 M e 0 Η (4 m 1)溶液。將该混合物於〇 c授掉0 · 5小時，過渡， 將濾液直接用在次一步驟。將化合物403-38(500 mg，（K 934 mmol)及NEt3(472 mg, 4.67 mmol)添加至上述濾液。將得 到的混合物於6 5 °C授拌整夜。將該溶液濃縮並以石夕膠管柱 層析精製（CH2Cl2/MeOH = 150/l)以得化合物404-38淡白色 固體（77 mg, 14%): LCMS: 585 [M+l]+。 步驟14f. 6-(2_(6-胺基-8-(6-鐵苯并[d][l，3]二側氧基 1-5-基硫）-9H-嘌呤_9_基）乙基胺基）-N-羥基己醯胺（化合 物38) 標題化合物38淡白色固體（17 mg, 22 %)係從化合物 1150-9131-PF;Kai 448 200829575 404-38(77 mg, 0.13 mmol)及新鮮製備的NH2〇H甲醇溶液 (1·77 Μ, 3 mL)使用類似於針對化合物11(實施例6)敘述 之程序製備：ιη·ρ· 154〜160°C, LCMS: 586 [M + l] + ; 4 NMRCDMSO-^/e): 1.23(m, 4H)1.44(m, 2H), 1.91(t, 2H, J-7· 4 Hz)-，2· .2H)，2· 81(*t，2H, -6·-.3…Uz)，4· 2H, /=6. 8 Hz), 6.06(s, 2H), 6. 82(s, 1H), 7. 35(s, 2H), 7· 47(s，1H)，8· 15(s，1H), 8. 64(s, 1H)。 實施例15:製備7-(2-(6-胺基-8-(6-碘苯并[d][l，3]二 f i 側氧基卜5-基硫）-9H_嘌呤-9-基）乙基胺基）-N-羥基庚醯 胺（化合物39) 步驟15a· 7-(2-(6-胺基- 8-(6-埃苯并[d][l，3]二侧氧基 1 -5-基硫）-9Ή_嗓呤-9-基）乙基胺基）庚酸乙g旨（化合物 404-39) 標題化合物404-39淡白色固體（100 mg，π %)係從化 合物40 3-14(5 00 mg，0· 93 mmol)、7-胺基庚酸乙酯氣化 ^ . 氫（2936 mg，14 mmol)及 K0H(785 mg, 14 mmol)於 MeOH(8· 0 mL)，使用類似於針對化合物404-38(實施例14)敘述之程 序製備：LCMS: 613 [M+l]+。 步驟15b· 7-(2-(6-胺基-8-(6-碘苯并[(!][!，3]二側氧基 1 - 5 -基硫）_9Η_ϋ票吟-9 -基）乙基胺基-經基庚酿胺（化合 物39) 標題化合物3 9淡白色固體（3 0 m g，31 % )係從化合物 404-39(100 mg, 0.16 mmol)及新鮮製備的nh2〇H曱醇溶液 (1·77 M，3 mL)使用類似於針對化合物ιι(實施例6)敘述 1150-9131-PF;Kai 449 200829575 之程序製備：πι·Ρ· 106〜115Ό LCMS: 600 [M + l] + ； ^ NMR(DMSO-A): ^ 1.26(m, 6H)1. 47(m, 2H), 1. 69(s, lH),1.91(t, 2H, /-7.4 Hz), 2. 44(t, 2H), 2.81(t, 2H, /-6. 6 Hz), 4.21(t, 2H, /=6. 3 Hz), 6. 06(s, 2H), 6. 82(s, 1H)， 10. 3G(s， 1H)。 實施例16:製備8-(2-(6-胺基-8-(6-溴苯并[cH[l，3]二 側氧基1 - 5 -基琉）-9 Η -嘌呤-9 -基）乙基胺基）-經基辛醯 r " 胺（化合物41) 步驟1 6a· 8-(2-( 6_胺基-8-(6-溴苯并[d] [ 1，3 ]二側氧基 1-5-基硫）-9H-嘌呤-9-基）乙基胺基）辛酸甲酯（化合物 404-41) —_,,_〜 ^u — 標題化合物4〇4-41黏稠淡黃色固體（21 〇 mg，44 '%) ' 係從化合物403-20 (41 0 mg，0.84 mmol)、8-胺基辛酸甲 酯氯化氫（760 11^，3.63 111111〇1)及1(；011(203 11^，3.63 111111〇1) ( 於Me〇H( 6· 0 mL)使用類似於針對化合物404-20(實施例11) 敘述之程序製備·· LC-MS: 566.8 [M+l]+. 步驟1 6b· 8-(2-(6_胺基-8-(6-溴苯并[d] [ 1，3 ]二侧氧基 1 一 5 -基硫）-9 Η _ ϋ票呤-9 -基）乙基胺基）-N ~經基辛醯胺（化合 物41) 標題化合物41淡白色固體（50 mg，24 %)係從化合物 404-41 (210即，0.37 111111〇1)及新鮮製備的腿2〇11曱醇溶液 (1·77 M，3.5 mL)使用類似於針對化合物11(實施例6)敘 述之程序製備：m.p· 173〜175°C，LC-MS: 567.8 [M+l] + ; 4 1150-9131-PF；Kai 450 200829575 NMR(300 MHz'DMSO-A): d 1·ΐ8(πι，6H)，1·26(πι，2H)， 1.45(m， 2H), 1. 69(s, 1H), 1. 91(t, 2H, /=7. 2Hz), 2.44(t, 2H, >6. 3 Hz), 2. 82(t, 2H, /=6. 3 Hz), 4. 22(t, 2H, /=6. 3 Hz), 6. 08(s, 2H), 6. 83(s, 1H), 7. 34(s, 1H), 7 . 3 5 ( s , M ) , . 15 ( s , 1Ή ) , 8 . 6 4 ( S ) I H ) , 1 〇 . 3 〇 ( S r 1H ) ° 貫施例17:製備4-(2-(6-胺基—s-(6-溴苯并[j][i，3]二 侧氧基1-5-基硫）-9#-嘌呤-9-基）乙氧基）— #—羥基丁醯胺 (化合物27) f 步驟17a· 4-(2-(6-胺基-8-(6-溴苯并二側氧基 1 -5-基硫）-9及-嘌呤-9-基）乙氧基）丁酸乙酯（化合物 501-27)
-〜_ Μ ^ 合 ^ 402'20(82 —mg，〇. 2 mm〇U 之溶液，添加K0H(13 mg，0·22 mmol)。將該混合物於室 溫攪拌1小時，然後添加4-溴丁酸乙酯（39 mg，〇· 2 mm〇1) 及Bu4NI(3 mg)。將該混合物加熱至55t：並攪拌整夜。將 (:該溶液冷卻至室溫及以CH2Cl2(l〇 mL)稀釋，以h2〇(3 mL x 5)清洗。將有機層分離並以Na2S〇4乾燥，過濾並濃縮，以 留下一殘渣，以矽膠管柱層析精製（CH2Cl2/Me〇H=18〇/1 with 0.5% Et3N)以得 50卜 27(64 mg，61%)淡黃色固體。 LC-MS: 525. 7 [Μ+1]+. !Η NMR(300 MHz^DMSO-^e): ^ 1. 14(t, 3H, >7.2Hz), 1.81(m, 2H), 2. 35(t, 2H, /=7. 2Hz), 3.29(m, 2H), 4.00(m, 6H), 6. 08(s, 2H), 6.61(s, 2H), 7. 16(s, 1H), 7. 19(s, 1H), 8· 01(s, ih)。 步驟17b. 4-(2-(6-胺基-8-(6-溴笨并[d][l,3]二側氧基 1150-9131-PF;Kai 451 200829575 1 -5-基硫）-9H-嗓吟-9-基）乙氧基）〜N〜羥基丁醯胺（化合物 27) 標題化合物37白色固體（34 mg，35 %)係從化合物 501-27(98 mg，0.19 mmol)及新鮮製備的NH2〇H曱醇溶液 (1· 77 Μ, 4 mL) # 6 >^ it 之程序製備：m.p. 209〜211°C，LC-MS: 512 8 [Μ+1] + · 4
NMR( 300 MHz、DMSO-A): θ 1· 77(m，2H)，2 06(t 2H /=7.2Hz), 3.29(m, 2H), 3.8 9(t, 2H, /=7 2Hz) 3 98(t 2H, /=6. 9 Hz), 6.08(s, 2H), 6. 77(s, 2H), 7.16(s, 1H), 7.20(s, 1H)，8.01(s，1H)，8.78(s, 1H)，1〇 46(s，π)。 實施例18:製備5-(2-(6 -胺基-8-(6 -漠苯并[j][i 3]二 侧氧基卜5-基硫）-9#-嘌呤-9-基）乙氧基）-#—羥基戊醯胺 (化合物28) 步驟18a. 5-(2-(6-胺基-8-(6-溴苯并[j] [ 1，3]二側氧基 1-5-基硫）-9及-嘌呤-9_基）乙氧基）戊酸曱酯（化合物 501-28) 標題化合物501-28淡黃色固體（180 mg, 56 %)係從化 合物 402-20(250 mg, 0· 61 mmol)、K0H(38 mg，〇· 67 mmol)、 5-溴戊酸甲酯（119 mg，0· 61 mmol)及 BiuNI(l〇 mg)使用類 似於針對化合物27 (實施例1 7 )敘述之程序製備·· LC-MS : 525·8 [M+l]+ 。 步驟18b. 5-(2-(6-胺基-8-(6-溴苯并[^/][1，3]二側氧基 1 - 5 -基硫）-9 嗓σ令-9-基）乙氧基）-#經基戍酿胺（化合物 28) 1150-9131-PF;Kai 452 200829575 標題化合物28白色固體（1 2 0 mg，6 6 %)係從化合物 50卜28(180 mg，0.19 mmol)及新鮮製備的NH2OH曱醇溶液 (1·77 M，6 mL)使用類似於針對化合物11(實施例6)敘述 之程序製備：m.p· 181 〜183°C, LC-MS: 526·8 [M+l] + ; j
NMR(30 0 MHz > DMSO-^) : # 1. 49(m, ，2H /=6.9 Hz), 3.29(ra, 2H), 3. 96(m, 4H), 6. 08(s, 2H) 6.59(s, 2H), 7.17(s, 1H), 7.19(s, 1H), 8.01(s, 1H), 8. 67(s, 1H), 10· 32(s, 1H)。 〆 、 貫施例1 9 :製備6-(2-(6-胺基-8-(6-漠苯并[j] [ i 3 ]二 侧氧基1-5- 基硫）-9 #-嘌呤_ 9 -基）乙氧基）-羥基己醯胺（化合物2 9 ) 步驟 卜5-基硫）-9於嘌呤-9-基）乙氧基）己酸乙酯（化合物 501-29) 標題化合物50 1-29淡白色固體（2〇〇呢，59 %)係從化 C 合物 4〇2 —20(250 呢，0.61 _ol)、K0H(38mg，〇·67πιπκ)υ、 6-溴己酸乙酯（136 mg，0· 61 mmol)及 BiuNI (10 mg)使用類 似於針對化合物2 7 (實施例1 7 )敘述之程序製備：LCMS : 552 [M+1]+ 。 步驟19b· 6-(2-(6-胺基-8-(6-溴苯并[ΰΊ[1，3]二側氧基 卜5-基硫）-9F嘌呤-9-基）乙氧基）—舲羥基己醯胺（化合物 29) 標題化合物29淡白色固體（45 mg，23 %)係從化合物 50 1-29 (20〇!1^，0.36 111111〇1)及新鮮製備的關2〇{1曱醇溶液 1150-9131-PF;Kai 453 200829575 (1 · 7 7 Μ，5 mL )使用類似於針對化合物11 (實施例6 )敎述 之程序製備：m.p· 168〜177°C，LCMS·· 539 [M+l] + ; !h NMR(DMSO-A)·· β 1.21(m，2H) 1.50(m，4H)，1.90(t，211 /-7.3 Hz), 3. 96(m, 4H), 6. 08(s, 2H), 6. 57(s, 2H) ^ ^ ^ 7 v 2 4 (s, 1H ), 8. 01 (s, 1H), 8. 64 (s, 1H ) 10· 31(s, 1H)。 實施例20:製備7-(2-(6 -胺基-8-(6 -溴苯并[J][i，3]二 側乳基1 - 5 -基硫）-9 σ票吟-9-基）乙氧基）-經基庚醯胺 (化合物30) 步驟20a· 7-(2-(6 -胺基- 8_(6 -溴苯并[3][1，3]二側氧基 1 - 5 -基硫）-9 嘌呤-9 -基）乙氧基）庚酸乙酯（化合物 501-30) ---··""…'·a"·‘--〜...4..· . “ —-— —— _ 標題化合物501-30淡白色固體（200 mg, 58 %)係從化 合物 402-20(250 11^，0.61111111〇1)、1(011(38 11^，0.67 111111〇1)、 7-溴庚酸乙酯（145 呢，0.61 mmol)及 BiuNI(10 mg，0.027 mmol)使用類似於針對化合物27(實施例17)敘述之程序製 備：LCMS: 566 [Μ+1Γ。 步驟20b· 7-(2-(6-胺基-8-(6-溴苯并[J] [ 1，3 ]二側氧基 1 -5-基硫）-9及-嘌呤-9-基）乙氧基）-#一羥基庚醯胺（化合物 30) 標題化合物30淡白色固體（45 mg，23%)係從化合物 5(H-30 (200 mg，0.35 mmol)及新鮮製備的NH2〇h甲醇溶液 (1 _ 77 Μ，5 mL)使用類似於針對化合物11 (實施例6 )敘述 之程序製備：m.p. 107 〜111°C，LCMS: 553 [M+1].; 4 1150-9131-PF;Kai 454 200829575 NMR(DMS〇-^)： ^ 1.22(m, 4H) 1.46(m, 4H), 1.90(t, 2H, /-7.4 Hz), 3.92(m, 4H), 6. 08(s, 2H), 6. 57(s, 2H),
7.16(s， 1H)， 7. 20(s, 1H), 8. 01(s, 1H); !H NMR(DMSO-^6 + D2〇) ： ^ l.20(m, 4H) 1.45(m, 4H), 1.88(t, 2 Ht. ΰ 2 ^ ? ^ 6t G 6 C s , 2 H) , 7. 13(s，1H)，7· 18(S, ih)，8. 02(s，1H)。 實施例21:製備7〜（6 —胺基_8 —(6 —氣苯并[^^,3]二側氧 基 1-5- 基硫）_9τ7-嗓呤-9-基）-#_羥基庚醯胺（化合物31) 步驟21a. 8-(6'氯苯并二側氧基卜5 —基硫）—9#一 嘌呤-6 -胺（化合物1 〇 5 - 31) 將化合物104(0.5 g，3.64 mmol), 5-氯-6-蛾苯并 [ί/][1，3] —氧雜環戊烯（ι·27 g，5.47 mmol)、新銅試劑 (neocuproine)水合物（62· 3 mg，0· 36 mmol)、Cul(57 mg， 〇· 36 mmol)及 NaO - i-Bu(345 mg，4· 37 mmol )於無水 DMF(25 mL)之混合物，於ll〇°C (油浴）於氮氣氣氛攪拌達24小時。 將溶劑於高真空下移除並將粗製品以矽膠管柱層析精製 (CH2Cl2/MeOH = 30/l)以得標的化合物105-31黃色固體 (281 mg, 24%): LCMS: 322 [M + l] + ； NMR(DMS0-^6) ： ^ 6.12(s, 2H), 7.05(s, 1H), 7. 22(s, 2H), 7. 27(s, 1H) 8. 07(s, 1H), 13_ 23(s, 1H)。 步驟21b. 7-(6-胺基-8-(6-氣苯并[θ][1，3]二側氧基卜5一 基硫）-9#_嘌呤-9-基）庚酸乙酯（化合物106-31) 將化合物 105-31(403 mg，1·25 mmol )、Cs2C〇3 (692 2 1150-9131-PF;Kai 455 200829575 mg，2.13mmol)、7-溴庚酸乙酯（446 mg，188m〇1)及無 水DMF(25 niL)之混合物，於85t攪拌6小時。將溶劑於 高真空下移除並將粗製品以矽膠管柱層析精製 ((：112(：12/116〇11=10 0/1)以得標的化合物1〇6 — 31黃色黏稠固 體（23 0 mgr-384 ^ 1.16(m, 7H), 1.44(m, 2H), 1.65(m, 2H), 2. 24(t, 2H, /=7. 2Hz), 4. 02(q, 2H, /1 = 6. 9 Hz, Λ = 14. 1 Hz), 4. 14(t, f, 2H, /-6. 9 Hz), 6.11(s, 2H), 6. 88(s, 1H), 7. 27(s, 1H), ' 7. 40(s，2H)，8· 15(s, 1H)。 步驟21c· 7-(6-胺基-8-(6-氯苯并〇][l，3]二侧氧基卜5一 基石瓜）-9 σ示呤-9 -基）- #-經基庚醯胺（化合物31) 標題化合—物31淡白色固體（75 mg, 55· 5 %)係從化合 "—————:——.—………-.…———…—— .…. 物 d 1 06-31 ( 140 mg，0.29 mmol)及新鮮製備的 nh2〇H 曱 醇溶液（1.77M，4mL)使用類似於針對化合物11(實施例 6)敘述之程序製備：m.P. 128〜134°C，LCMS: 465 [M+l] + ; ί lR NMR(DMS0^6)： ^ 1.20(m, 4H), 1.40(ra, 2H), 1.65(m, 2H), 1.90(t, 2H, /=7.5 Hz), 4.13(t, 2H, /=6.9 Hz), 6-H(s, 2H), 6.89(s, 1H), 7. 28(s, 1H), 7.40(s, 2H), 8· 15(s，1H), 8· 66(s，1H), 10· 33(s，1H)。 實施例22:製備7-(6 —胺基-8 —(6_碘苯并[ί/Πι，3]二侧氧 基1-5-基硫）-9#—嘌呤-9_基）_#_羥基庚醯胺（化合物32) 步驟22a. 8-(6-碘苯并[d][i，3]二側氧基卜5-基硫）-9及-噪呤-6-胺（化合物1〇5 —32) •將化合物 1〇4(〇· 8 g，4. 78 mmol)、5, 6-二碘苯并 1150-9131-PF;Kai 456 200829575 [d][l，3]二氧雜環戊烯（2·68 g，7.18 _〇1 )、新銅試劑 (neocuproine)水合物（1〇〇 即，〇· 48 mmol)、Cul(91. 1 mg， 0· 48 mmol)及 NaO-ί-Bu(0· 55 g，5· 74 mmol)於無水 DMF(40 mL)之混合物，於lio°c (油浴）於氮氣氣氛攪拌達24小時。 ^ ψ 0 ^ (CH2Cl2/MeOH=30/l)以得標的化合物1 05-32黃色固體 (348 mg, 17. 6°/〇)： LCMS: 414 [M+l] + ； ]H NMRCDMSO-i/e): 6.09(s, 2H), 7.01(s, 1H), 7. 22(s, 2H), 7.51(s, 1H), f·-, 8· 08(s，1H), 13. 20(s，1H)。 步驟22b· 7-(6-胺基-8-(6-碘苯并[θ][1，3]二側氧基卜5 — 基硫）-9#-嘌呤-9-基）庚酸乙酯（化合物l〇6-32) 標題化合物1 06-32黃色黏稠固體（250 mg，53.5 * * * '' ~ ~ ... -一..…—r—— ·.·——· 係從化合物 d 105-32(300 mg, 0.82 mmol)、cS2c〇3(454 7 mg，1· 40 mmol)、7-溴庚酸乙酯（292· 7 mg，ι· 23 m〇l)及 無水DMF(1 5 mL)使用類似於針對化合物106-31 (實施例21 )
、 敘述之程序製備：LCMS: 570 [Μ+1]+·沱 NMR(DMS0-A): J
1 ·20(m，7H)，1 ·44(m，2H)，1 65(m，2H)，2 23(t 2H J-7.2Hz), 4.02(q, 2H, /1 = 6. 9 Hz, /2=14. 1HZ), 4 l3(t 2H, /=6. 9 Hz), 6.08(s, 2H), 6. 82(s, 1H), 7.44(5 2H) 7· 50(s, 1H)，8. 16(s，1H)。 步驟22c. 7-(6-胺基-8-(6-碘苯并[〇η[ι，3]二側氧基卜5一 基硫）-9τ7-嘌呤-9_基）-於經基庚醯胺（化合物32) 標題化合物32淡白色固體（135 mg，36 8 %)係從化合 物106-32(244 mg，0.43 mmol)及新鮮製備的NH2〇h甲醇 1150-9131-PF;Kai 457 200829575 溶液（1.77 Μ, 6 mL)使用類似於針對化合物11(實施例6) 敘述之程序製備：m.p. 200〜203°C，LCMS: 557 [M+l] + ; 4 NMRCDMSO-^e): 1.20(ra, 4H), 1.43(m, 2H), 1.62(ra, 2H), 1.90(t, 2H, /=7. 5 Hz), 4.11(t, 2H, /=6. 9 Hz), 6. 07(s, ) ^ 0 0 (s 1H ) r 6 r (s, 1H ), 7. 42 (s, 2 H ), 7. 5 0 C s r 1H)，8.15(s，1H)，8.66(s, 1H)，l〇.32(s，1H)。 實施例23:製備7-(4-胺基-2-(6-氯苯并[i/][l, 3]二側氧 基1 - 5-基硫）-1#-咪唑并[4, 5-c]吡啶-1 -基）-#—羥基庚醯 1 胺（化合物34) 步驟23a· 2-氯-N-(4-甲氧基苄基）一3-硝基口比啶—4-胺（化 合物602) 對授拌中之化合物601d g，5· 18 mmol)於DMF(8. 6 mL) ..... ...........—----------------------------------------------------.......... 溶液，添加（4-甲氧基苯基）甲胺（〇· 71 g，5· 18關〇1)及三 乙胺（0· 644 mL)。將該反應混合物攪拌於室溫達2小時。 將該混合物蒸發以移除DMF並以矽膠管柱層析精製 i (Et〇Ac/石油於1〇:1)以得到602黃色固體（1.32§，87%): LCMS: 294 [M+l] + ； NMR(DMS0^6)： ^ 3 72(s 3H) —-,,3HZ), ,81(d, 1H,/=,7HJ；；9；；：； 2H, /-9.0 Hz), 7.25(d, 2H, /=8.4 Hz), 7. 95(d, 1H, >5.4 Hz), 8·02(ΐ, 1H，/:5.7 Hz)。 步驟23b. 2H(4-甲氧基节基）口比0定一 3,4一二胺（6〇3) 對攪拌中之化合物602(1.32 g，4 49 mm〇1)於甲醇（66 ⑹溶液，添加水(6·6 mL)、鐵粉末(2·5ι & a」 辰HC1 /奋液（1 mL)。將泫反應混合物於室溫攪拌训分 458 1150-9131-PF；Kai 200829575 鐘，然後加熱回流整夜。將該混合物以6N Na〇H調整為pH 11。將得到的固體過濾並以甲醇（10niL)清洗。將合併的濾 液濃縮，以留下一殘渣，以矽膠管柱層析精製（Et〇Ac/石油 於2:1)以得到6〇3淡綠色固體（712呢，lcms:
^ ^ 3. 73(s, 3H), 4. 31(d, 2BT /-5.7Hz), 4.81(s, 2H), 6. 33(m, 2H), 6. 90(d, 2H, /=8.7
Hz)，7.26(d，2H，/=9.0 Hz), 7.34(d, 1H, /=5.1 Hz)。 步驟23c· 4-氣-1 -（4-曱氧基苄基）-一咪唑并[4,5 — c]u比 咬-2(3#)-硫酮（化合物604) 將化合物 603 (2 g，7· 6 mmol)、二硫化碳（2.88 g，3 7· 9 _〇1)、氫氧化奸（2.12 g，37·9 mmol)於乙醇（11·5 mL) 及水（1 · 5 mL)之混合物加熱回流整夜。將反應物冷卻至宮 溫’添加1 〇 〇 mL水。將該混合物以乙酸調整為pH 7，然 後分2次以二氯甲烷萃取。將萃取物於減壓濃縮，並以石夕 膠管柱層析精製（EtOAc/石油於5:1)以得到化合物604白 色固體（2 g，86%h LCMS·· 306 [M] + ;NMR(DMS0-心）：/ 3.68(s? 3H), 6.41(s, 2H), 6.86(d, 2H, /=8.7 Hz), 7.36(m，3H), 8.07(d，1H，/=5.4Hz), 13.74(s, 1H)。 步驟23d. 4-胺基-1 -（4-甲氧基苄基）-1#-。米唾并[4,5 — c] 11比啶-2(3#)-硫酮（化合物605) 將化合物 604(1 g，3.25 mmol )及鈉醯胺（3g，77 mmol ) 於25 mL氨水之混合物，放至無空氣密封管，並於攪拌室 溫30小時。將該混合物冷卻至-40°C，並打開管。小心添 加乙醇至反應物，直到不發生氣體。添加200 mL水，並將 1150-9131-PF;Kai 459 200829575 該混合物以乙酸調整為pH 7。將得到的混合物過濾以得到 粗製品’以石夕膠管柱層析精製（二氯甲烷/甲醇於5〇:1)以 得到化合物 605 白色固體（718 mg，77%): LCMS: 287 [M] + ; NMRCDMSO-^e)： ^ 3.68(s, 3H), 5.31(s, 2H), 6. 06(s, 7,33(d, 2H, /=8.4Hz), 7. 64(d, 1H, >5. 7 Hz), 12.53(s, 1H) 〇 r 步驟23e· 2 —(6—氯苯并[θ][1，3]二側氧基卜5-基 硫）-：l-(4-甲氧基苄基及一咪唑并[4, 5 — c]吡啶—4—胺（化 合物 606-34) 將化合物 605 (543 mg，1.9 mmol)、5-氯—β-埃苯并 [d][l，3]二氧雜環戊烯（1.07 g，3·79 mmol)、新銅試判
-圓.-.,.^ - ----------…〜__________________________________—______ I ^ Vi I 、. '' 一 -，- ...... . .....Μ ” (neocuproine)水合物（4〇 mg，〇·ΐ9 mmol)、Cul(36 mg， 0· 19 mmo 1)及 NaO i-Bu(273 mg，2. 84 mmol)於無水])Mf (24 mL)之混合物，於ll(TC (油浴）於氮氣氣氛攪拌達24小時。 I 將溶劑於高真空下移除並將粗製品以矽膠管柱層析精製 (CihCh/MeOH於100/1)以得到標的化合物606-34棕色固體 (506 mg, 61%): LCMS: 441 [M+l] + ; !H NMRCDMSO-^) ： ^ 3.69(s, 3H), 5.37(s, 2H), 6. 04(s, 2H), 6.41(s, 2H), 6.55(s, 1H), 6.80(d, 2H, /-8. 7 Hz), 7. 04(d, 2H, /-9.3 Hz)，7. 17(s, 1H), 7· 73(s, 1H)。 步驟23f· 2-(6-氯苯并[d/][l，3]二側氧基卜5-基硫）-1#— 咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-胺（607-34) 將化合物 606-34(506 mg, 1. 14 mmol)溶解於 TFA(4 mL) 1150-9131-PF;Kai 460 200829575 並於80 C攪拌2小時。將該溶液蒸發，將殘渣以飽和NaHC〇3 調整為pH 7並過濾。將沉澱以矽膠管柱層析精製 (ClhCh/MeOH於30/1)以得到標的化合物6〇7_34黃色固體 (300 mg, 82°/〇)： LCMS: 321 [M+l] + ； ^ NMR(DMSO-^e): ^ 6. 11 (s, 2H), 6. 5 6(ra, 3H), 7. 〇4(s, 1H), 7. 26(s, 1H), 7. 49(s, 2H)，12· 25(s，1H)。 步驟23g· 7-(4-胺基-2-(6-氯苯并[jhu]二侧氧基卜5 一 基硫）-1#-咪唑并[4, 5-c]吡啶—卜基）庚酸乙酯（化合物 《608-34) 將化合物 607-34(300 mg，〇· 935 mmol)、7-溴庚酸乙 酉曰（333 mg, 1. 403 mmol)、Cs2C〇3(517 rag，1. 59 mmol)於 DMF (1 2 mL)之混合物，於85°C攪拌達2小時。將DMF於真 空蒸發，並將殘渣以矽膠管柱層析過濾(二氯甲烧/甲醇於 100:1)以得化合物 608-34 白色固體（300 mg，67%): LCMS: 477 [M+l] + ； ^ NMR(DMSO^s)： ^ L15(in5 ?H), 1.42(m5 ( 2H), 1.58(m, 2H), 2.21(t, 2H, /=7. 2Hz), 4. 02(q, 2H, /=7. 5 Hz), 4.16(t, 2H, >7. 2Hz), 6. 08(s, 2H), 6. 37(s, 2H), 6.73(s, 1H), 6.80(d, 1H, /=5. 1 Hz), 7. 25(s, 1H), 7. 70(d, 1H，/=6. 0 Hz)。 步驟23h· 7-(4-胺基-2-(6-氯苯并[^/][；1，3]二側氧基n — 基硫）-1#-味嗤并[4, 5-c]吼啶-卜基）_#—羥基庚醯胺（化合 物34) 標題化合物34白色固體（98 mg, 34 %)係從化合物 6 08-34(300 mg, 0· 63 mmol)及新鮮製備的nh2〇h甲醇溶液 1150-9131-PF;Kai 461 200829575 (1.77 M，3 mL)使用類似於針對化合物11(實施例6)敘述 之程序製備：m.p· 144〜148°C，LCMS: 464 [Μ+1] + ; ιΗ NMRCDMSO-i/e): ^ 1.22(m, 4H), 1.42(ra, 2H), 1.65(m, 2H), 1.90(t, 2H, /=7. 2Hz), 4.29(t, 2H, /=6.9 Hz), 6.14(s, 8.51(s, 2H)，10.32(s，1H)，13.04(s，1H)。 實施例2 4 :製備7 - (4 -胺基-2 - ( 6 -漠苯并[¢/] [ 1，3 ]二側氧 基1-5 -基硫）-1 味°坐并[4，5-c]吼ϋ定-1 -基）經基庚醯 ( % 胺（化合物35) 步驟 24a. 2-(6-溴苯并[心[1，3]二側氧基卜5-基 硫）-1-（4-甲氧基节基）- 1及-口米嗤并[4，5-c] σ比唆-4-胺 (606-35) 標題化合物60 6-35棕色固體（584 mg, 49 %)係從化合 物 605(700 mg，2.44 mmol)、5 -溴-6-碳苯并[θ][1，3]二 氧雜％l 戊細（1· 20 g，3· 66 mmol)、新銅試劑（neocuproine) / ; 水合物（51 mg，0· 244 _〇1)、Cul (46 mg，0· 244 mmol) 及 NaO ί-Bu(234 mg, 2· 44 mmol)於無水 DMF(31 mL)使用類 似於針對化合物6 0 6-34 (實施例23)敘述之程序製備：]^1^8: 485 [M+l] + ； ]H NMRCDMSO-^): ^ 3.29(s, 3H), 5. 39(s, 2H), 6.04(s, 2H), 6.54(s, 1H), 6.81(m, 3H), 6.91(d, 1H, /-5.4 Hz), 7.06(d, 2H, /-8.6 Hz), 7. 29(s, 1H), 7. 71(d，1H, /:6· 0 Hz)。 步驟24b· 2-(6-溴苯并U][l，3]二側氧基卜5-基硫）-1於 咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-胺（化合物607-35) 1150-9131-PF;Kai 462 200829575 化合物 606-35(557 mg，ι· 15 _〇1)溶解於 TFA(4 mL) 並於80 C攪拌2小時。將該溶液蒸發，將殘渣以飽和NaHC〇3 調整為pH 7，並過濾。將沉澱以矽膠管柱層析精製 (CihCh/MeOH於30/1)以得到標的化合物6〇7一35白色固體 LCMS: 3 6.5 [ iH ^ NMR CDMSO Λ 6.07(s, 2H), 6.58(s, 2H), 6. 69(d, 1H, /-6.0 Hz), 6.98(s，1H)，7.34(s，1H)，7.47(d，1H，/=5·7Ηζ)。 步驟24c· 7-(4-胺基-2-(6-溴苯并[7][1，3]二側氧基卜5 — ( 基硫）-1#-咪唑并[4, 5-c]吡啶-卜基）庚酸乙酯（化合物 608-35) 標題化合物608-35白色固體（240 mg，56%)係從化合 物 607-35(302 mg, 0· 827 mmol)、7-溴庚酸乙酯（294 mg， ' ' "： ：〜、·...〜—^--· -.τ 一.._ _ 1· 24 ramol)、Cs2C〇3(457 mg, 1. 406 mmol)於 DMF(12 mL) 使用類似於針對化合物60 8-34(實施例23)敘述之程序製 備：LCMS·· 521 [M+l] + ; 4 NMR(DMSO-A): ^ 1· 16(m, 7H), ( 1.41(ra, 2H), 1.58(m, 2H), 2.21(t, 2H, /=7.5 Hz), 4.02(q, 2H, /=6. 9 Hz), 4.16(t, 2H, /=6. 9 Hz), 6. 07(s, 2H), 6.40(s, 2H), 6.67(s, 1H), 6.80(d, 1H, /-5. 7 Hz), 7. 36(s, 1H), 7. 71(d，1H, /=5· 7 Hz)。 步驟24d. 7-(4-胺基-2-(6 -溴苯并[d] [1,3]二側氧基1-5- 基硫）-1#-味唾并[4, 5-c]吼ϋ定-1-基）-#-經基庚醯胺（化合 物35) 標題化合物35白色固體（182 mg，79%)係從化合物 608-35(236 mg，0.453 mmol)及新鮮製備的.2〇Η甲醇溶 1150-9131-PF;Kai 463 200829575 液（1·77 Μ, 3 mL)使用類似於針對化合物11(實施例6)敘 述之程序製備：m.p. 179〜181°C，LCMS·· 508 [M + l] + ;沱 NMR(DMS0^6): ^ i.l7(m, 4H), 1.36(ra, 2H), 1.57(m, 2H), l-88(t, 2H, /=6. 9 Hz), 4.15(t, 2H, /=7. 2Hz), 6. 08(s, 2H), 6. 43(s, 2H), 6. 67(s, 1~H), 6. 81(d, 1H, 4 Hz), 7-36(s, 1H), 7.71(d, 1H, /-5.7 Hz), 8. 66(s, 1H), 10·32(s, 1H)。 實施例25:製備7_(4_胺基-2-(6-碘苯并[θ][1，3]二側氧 基卜5-基硫）-ΐ咪唑并[4, 5-c]吡啶-卜基）-V-羥基庚醯 胺（化合物3 6 ) 步驟25a. 2-(6-碘苯并[心[1，3]二侧氧基卜5-基 硫）-1-（4-甲氧基苄基）-1#-咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-胺（化 ——_————~................— ^ ^ 合物 606-36) 標題化合物606-36棕色固體（734 mg，55%)係從化合 物 605(725 mg，2.53 mmol)，5,6-二埃苯并[〇Π[1，3]二 氧雜環戊烯（1· 89 g，5. 06 _〇1)、新銅試劑（neocuproine) 水合物（53 mg，0.253 mmol)、Cul(48 mg, 0.253 mmol) 及 NaOi-Bu(365 mg, 3.80 mmol)於無水 DMF(32 mL)使用類 似於針對化合物606-34(實施例23)敘述之程序製備：LCMS: 533 [M+l] + ； !H NMRCDMSO-^): ^ 3. 69(s, 3H), 5. 35(s, 2H), 6.01(s, 2H), 6.47(s, 1H), 6.80(d, 2H, /-9.0 Hz), 7· 〇6(d，2H，/二8· 6 Hz), 7. 41(s, 1H)。 步驟25b· 2-(6-碘苯并[J][l，3]二側氧基卜5-基硫）-l#-咪唑并[4, 5-c]吡啶-4-胺（化合物607-36) 1150-9131-PF;Kai 464 200829575 化合物 606-36 (730 mg，1. 37 mmol)溶解於 TFA(4. 8 mL) 並於80 C攪拌2小時。將該溶液蒸發並將殘渣以飽和 NaHC〇3調整為pH 7並過濾。將沉澱以矽膠管柱層析精製 (CLCh/MeOH於30/1)以得到標的化合物6〇7 —36黃色固體 45 2 6-m [ ^ 6.09(s, 2H), 6.73(m, 3H), 7. 03(s, 1H), 7. 52(m, 2H), 12.45(s， 1H)。 步驟25c· 7-(4-胺基-2-(6-碘苯并[j] [ 1，3]二側氧基 基硫）-1分·咪唑并[4, 5-c]吡啶-卜基）庚酸乙酯（化合物 608-36) 標題化合物6 08-36白色固體（149 mg, 61%)係從化合 物 60 7-3 6 ( 1 78 mg，0· 432 romol)、7-溴庚酸乙酯（154 mo· ^ —......—――—--------------------............—__ 0· 648 mmol)、Cs2C〇3( 239 mg, 〇· 734 romol)於 DMF(6· 3 mL) 使用類似於針對化合物6〇8 —34(實施例23)敘述之程序製 備：LCMS: 569 [M+l] + ;沱 NMR(DMSO-A): θ 1. 16(m，7H)， 1·42(πι， 2Η), 1. 57(m, 2H), 2. 22(t, 2H, /=7· 2Hz)， 4.03(q, 2H, /=7. 5 Hz), 4.15(t, 2H, /=7. 2Hz), 6. 〇4(s, 2H), 6.39(s, 2H), 6. 65(s, 1H), 6.80(d, 1H, /=6. 〇 Hz), 7. 48(s, 1H), 7· 71(d，1H，/=5· 7 Hz)。 步驟25d· 7-(4-胺基- 2-(6-蛾苯并[ύΠ[1，3]二側氧基i 一 5一 基硫）-1#-咪嗤并[4, 5-c]吡啶-卜基）-#-羥基庚醯胺（化 合物36) 標題化合物36白色固體（45 mg, 33%)係從化合物 608-36( 140 mg, 〇·246 mmol)及新鮮製備的 NH2〇H 甲醇溶 1150-9131-PF/Kai 465 200829575 液（1.77 M，3 mL)使用類似於針對化合物11(實施例6)敘 述之程序製備：m.p· 191 〜193。0，LCMS: 556 [Μ+1Γ; 4 NMR(DMSO-^e)： ^ 1.18(m, 4H), 1.37(m, 2H), 1.57(ra, 2H), 1.89(t, 2H, >6. 9 Hz), 4. 14(t, 2H, /=7. 2Hz), 6. 04(s, 6 r 4 2 ( s , 6. 6 6 (s, 1E)T 6. 8 0 (d ^ 4 H ^ 1 Hz ), 7.49(s, 1H), 7.71(d, 1H, /=5.7 Hz), 8. 66(s, 1H), 10· 31(s, 1H)。 實施例26··製備6-(4-胺基-2-(6-碘苯并[d][l, 3]二側氧 基1-5-基硫）-iH-味唾并[4,5-(2]°比°定-1-基）-N-經基己醢 胺（化合物42) 步驟26a· 6-(4-胺基-2-(6-碘苯并[d][l，3]二側氧基1-5- 基硫）-1H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-1-基）己酸乙酯（化合物 _________ __^ f — — 608-42) — ——— 標題化合物608-42白色固體（260 mg, 64%)係從化合 物 607-36 ( 300 mg，〇· 73 mmol)、6-溴己酸乙酯（243 mg, 1·〇9 mmol)、Cs2C〇3(404 mg，1.24 mmol)於 DMF(4.0 mL) 使用類似於針對化合物6 〇 8 - 3 4 (實施例2 3)敘述之程序製 備：LCMS: 555 [M + l] + ; 4 NMR(DMS0-A): J 1·14(ΐ，2H， /=7.2Hz), 1.19(m, 2Η), 1.47(m, 2H), 1.57(m, 2H), 2.19(t, 2H, /=7. 2Hz), 4.01(q, 2H, /-7. 2Hz), 4.16(t, 2H, /=6. 9 Hz), 6.05(s, 2H), 6. 55(s, 2H), 6. 68(s, 1H), 6.83(d, 1H, /=6.0 Hz), 7. 48(s, 1H), 7. 70(d, 1H, /=6.0 Hz)。 步驟26b· 6-(4-胺基-2-(6:碘苯并[d][i，3]二側氧基1-5一 1150-9131-PF;Kai 466 200829575 基硫）-1 Η-咪唑并[4, 5-c]吡啶-1-基）—N-羥基己醯胺（化 合物42) 標題化合物42白色固體（107 mg，42%)係從化合物 608-42(260 mg, 〇· 47 mmol)及新鮮製備的nh2〇H甲醇溶液 (1· 77 之知序製備：πι·ρ· 189〜193°C，LCMS: 542 [M+l] + ; 4 NMR(DMS0^6)： ^ i.2〇(m, 2H), 1.44(m, 2H), 1.56(m, 2H), 1.87(t, 2H, /=7. 2Hz), 4.13(t, 2H, /=7. 2Hz), 6. 05(s, 2H), 6.36(s, 2H), 6. 67(s, 1H), 6.78(d, 1H, >6. 0 Hz), 7.48(s，1H), 7.70(d, 1H, /:5.7 Hz)。 生物學試驗： —一—一士—ϋ述，本發明所定義的衍生物，具有抗增生活性 此等性質可例如使用一種以上下列程序評估: (a)-體外（心/㈣試驗，決定受測化合物抑制Hsp9(^ 子伴侣活性之能力
Hsp90分子伴侣試驗被實施以測量Hsp9〇蛋白質將^ 熱變性之發光酶蛋白質再折疊之能力。HSP90首先於❹ 缓衝液（25 mM Tris、pH7.5、8 mM MgSQ4、Ggi% 牛 ^ J3 蛋白及10%甘油）中，於室溫在各種濃度的受測化合⑸ 溫育3〇分鐘。將發光酶蛋白質添加至變性現合物，並方 心溫育8分鐘。最後HSP9G及發光酶於變性混合物中$ 濃度各為。.375㈣及。.125“。將變性混合物 復I緩衝液(25mMTris、終
.。T 球蛋白及 10% 甘油、〇.5mMATP、2mMDTT 4 67 1150-9131-PF；Kai 200829575 5 mM KCl、〇· 3/z M HSP70 及 〇· 15# M HSP40)稀釋。該復性 反應於室溫温育1 50分鐘，接著將1 0 /ζ 1已復性樣本於 90 // 1 的螢光素（iuci f erin)試劑（Lucl ite，PerkinElmer
Life Science)中稀釋。將該混合物於黑暗中溫育5分鐘， 之後於TopGount爷盤^ 讀取發光信號。 (b)—體外（//7 試驗，決定受測化合物抑制HDAC酵 素活性之能力 ( HDAC抑制劑使用 HDAC 螢光測量試驗套組 (AK-5 0 0, Biomol、Plymouth Meeting、ΡΑ)篩選。可將受試 化合物溶於二甲基亞砜（DMS0)，以得到20 mM工作原濃 度二螢光使用WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad PrismULia) 繪圖，並且使用S型（sigmoidal )拋物線劑量-回應曲線適 合度演算法，計算IC50。 〔 各試驗設定如下：將所有的套組成分解凍，於使用前保
持在冰上。將HeLa核萃取物以1 :29稀釋於試驗緩衝液（5〇 mM Tris/Cl > PH 8.0, 137 mM NaCl, 2.7 mM KC1, 1 mM
MgC12)。製備Trichostatin A(TSA，正控制組）及受測化 合物於試驗緩衝液（5x最終濃度）之稀釋物。將Flu〇r de LysTM基稀釋於试驗緩衝液成1 q 〇 uM( 50倍=2x最終）。 將Fluor de LysTM顯影劑濃縮物（例50// H95〇/z !試驗緩 衝/夜）於冷试驗緩衝液稀釋2 0倍。第二，將〇 2 in Μ Trichostatin A 100-倍稀釋於ιχ顯影劑（例1〇#丨於玉 1150-9131-PF;Kai 468 200829575 ml’·最終TrichQStatin A濃度於1χ顯影劑=2//M;添加 AC/又負反應後之最終濃度=丨# M)。添加試驗緩衝液、經 稀釋trichostatin A或受測抑制劑，至微滴定盤之適當的 井。添加經稀釋之HeLa萃取物或其他HDAC樣本，至所有 井’除子务控餐^^ 本在微滴定盤中平衡至試驗溫度（例如25或3rc )。藉由 外、加經稀釋夂質（2 5 # 1)至各井並充份混合，以起始化HDAC 反應。使HDAC反應進行1小時，接著藉由添加Fluor de LysTM顯影劑（50// 1)使反應停止。將平盤在室溫（25<t ) 育10-15分鐘。在能於波長35〇-38〇 nm之範圍激發的微 滴定盤讀取螢光儀，讀取樣本，並偵測在44〇-46〇 nm發射 之光。 一-一——_一__^ —„一一... — ,…一————,—— — —一— ————— 以下表7-B列舉本發明代表性化合物及其活性於
HDAC及HSP90分析。於此等分析，IC5{)使用以下分級：I -10//M，10# M>II>1//Μ, 1//Μ>ΙΙΙ>0· 1//Μ 且 IV $ 〇. 1 // Μ。 表7-Β
化合物編號 HDAC HSP90 5 III III 6 IV III 12 IV 13 I I 14 III 16 IV I 18 IV I 20 I III 23 IV III 24 IV III 1150-9131-PF;Kai 469 200829575
27 I I 28 II I 29 II I 30 IV I 31 IV II 32 IV IV 33 I III 一一一…一——34 …一一…一— … II^ -— 35 IV II 36 IV III 37 I III 38 III III 39 IV III 40 I I 41 IV
表8-A
1150-9131-PF/Kai 470 200829575
1150-9131-PF;Kai 471 200829575
Scheme 1
nh2oh
ja' 〇H TBDMSCI.EtaN —,M, ft
OTBDMS 1) BuLi/THF/-78°C 2) (MeO)3B 3) HCI/H20
OTBDMS HO、,
OH 0101 0102 1150-9131-PF;Kai 472 200829575
Scheme 2
實施例1 :製備5-(5-氣-2, 4-二羥基苯基）— #_乙基 -4-（4-(4_(羥基胺基>-4-侧氧基丁氧基）苯基）異噁唑 羧 ϋϋϊΤ)'^" ——〜 ---- 步驟la: (4-溴苯氧基）（桌三厂差）二曱基矽烷（化合物 0101) 將Et3N(16.7 g，115.6 mmol)滴加至化合物4-溴笨紛 (10.0 g，57·8 mmol)及 TBSC1(11.3 g，75.14 _〇1)於 DMC( 100 ml)之溶液，於室溫並將該混合物攪拌2小時。將 溶劑移除後添加2 0 0 m 1石油_1。將有機層以水及濃鹽水清 洗。以無水NazSO4乾燥，以一短矽膠管柱過濾、蒸發以得 到 0101 無色油（16· 6 g，100 %):沱匪R(CDCh) : Θ 〇· 18(s， 6 小時），2.71(t， /=6 Hz, 2H), 0. 98(s, 9H), 6. 70-6. 73(m，2H)，7. 30-7· 33(m，2H)。 步驟lb: 4-(第三丁基二甲基矽基氧基）苯基有機硼酸（化 1150-9131-PF;Kai 473 200829575 合物0102) 對化合物 01 01 ( 1.548 g，5.389 mmol)於無水 THF(2〇 m 1)之溶液，於-78°C於氮氣下，花1 5分鐘滴加2. 5 Μ n-BuLi 己烧溶液（2 · 5 m 1，6 · 3 2 6 mmo 1，）。之後，將該混合物-78 C棍掉^^達0 · 5小時’化1 5分鐘滴加二甲基不朋酸酉旨（7 3 〇 mg， 7.029 mmol)至該混合物。將該混合物於-78°C攪拌額外的 1小時’並回溫至室溫。將該反應混合物以鹽酸水溶液（至 pH 5-7)淬冷。將溶劑移除並將殘渣以DCM萃取。將有機層 以濃鹽水清洗，以無水硫酸鈉乾燥，濃縮以得到一殘渣， 以石油（2 ml)清洗，以得到產物〇1〇2白色固體（1. 102 g， 810/〇): LCMS: 253 [M+l]+。 步驟lc: 1-(5-氯-2,4-二羥基苯基）乙酮（化合物〇1〇3) 對 4-氯間苯二酴（21.25 g，（Π 47' 乙醚（100 ml)之懸浮液，於氮氣下滴加乙酸（8· 75 ml)。將 該反應混合物於8 0 °C攪拌整夜，然後冷卻至室溫。將該混 合物倒入350 mL 10% w/v乙酸鈉水溶液並劇烈授拌達2· 5 小時。沉澱出一淡棕色固體，將其過濾、以水及石油醚清 洗、乾燥以得到0103白色棕色固體（18.49 g，67.4%): LCMS·· 187 [Μ + 1Γ 〇 步驟Id: 1-(2,4-雙（苄基氧基）-5-氣苯基）乙酮（化合物 0104) 將卞基氣（23.72 g， 0.187 mol)添加至化合物 0 1 03( 1 7.49 g，0.094 mol)及碳酸鉀（32.33 g，0.234 mol) 於乙腈（320 ml)之混合物。將該混合物加熱至回流48小時 1150-9131-PF/Kai 474 200829575 並冷卻至室溫。將該混合物蒸發至幾乎乾燥後，過濾並將 固體以水清洗，以移除KAO3，於真空中乾燥。將固體以石 油（3 5 0 m 1)及乙酸乙酯（1 5 m 1)清洗，以得到產物〇 1 〇 4棕 色固體（37 g, 1〇〇%): LCMS: 367 [M+1] + · lfI NMR(CDCl3): 7· 37-7· 54(m，10Η)，7. 70(s，1Η)。 步驟le: 4-(2,4-雙（苄基氧基）-5-氯苯基）-2,4-二側氧基 -丁酸乙酯（化合物〇 1 〇 5) 對化合物 0104(5· 0 g，13. 63 mmol)於無水 THF(30 ml) 之溶液，緩慢添加6〇% NaH(l· 64 g，40· 89 mmol)。將該 混合物於室溫授拌30分鐘後，添加二乙基草酸酯（3. 98 g， 27· 26 mmol)，並將該混合物於6〇°C攪拌40分鐘。然後冷 卻至室溫，並添加乙酸（2· 7 g，44. 98 mmol) 〇 ί發接近乾―， 添加1 00 ml乙酸乙酯，以水及濃鹽水清洗、以無水硫薇 納乾燥。將有機相蒸發並將殘渣以1 〇 — 2〇 mL乙醇清洗， 過濾得到化合物0105淡黃色固體（5. 0 g，79%): LCMS: 467 [Μ+Ι]^^ NMR(DMS〇-^): ^ 1.16(t, /=6 Hz, 3H), 4. 20(q, /=6 Hz, 2H), 5.36(s, 2H), 5. 39(s, 2H), 7. 23(s, 1H), 7.29(s, 1H)，7·38-7·55(ιπ，10H)，7.89(s，1 H)。 步驟If: 5-(2,4-雙（苄基氧基）-5 -氯苯基）異嚼嗤-3_叛酸 乙酯（化合物01 〇 6 ) 輕基胺氣化氫（0.89 g， 12.8 mmol)添加至化合物 01 05(5.00 g，1〇·7 mmol)於絕對乙醇（100 ml)之懸浮液。 將該反應混合物加熱回流4小時，並冷卻至室溫。將該混 1150-9131-PF;Kai 475 200829575 合物過濾並將固體以乙醇清洗，並於45°C真空中乾燥以得 到化合物 0106 淡黃色固體（4. 8 g, 97 %) : LCMS: 464 [M+1 ]+· 'H NMRCCDCh): δ 1.40(t, /=6 Hz, 3H), 4. 42(q, /=6 Hz, 2H), 5.12(s, 2H), 5.15(s, 2H), 6.61(s, 1 H), 7.01(s, 1H ) ^ 1 . 8. Μ 1H ) 〇 步驟lg: 5-(2,4-雙（苄基氧基）-5 —氯苯基）—，乙基異噁唑 -3-羧醯胺（化合物0107) 對含0106(4.40 g，9.51 mmol)之燒瓶，添加乙基胺 於乙醇（2·0 M，40 ml，80 mmol)溶液。將該混合物加熱至 8 0 C並攪拌5小時。將該混合物冷卻至冰浴溫度、過渡並 將固體以冷乙醇清洗、於真空中乾燥以得到〇丨〇 7白色固體 (4.10 g, 93 %)： LCMS: 463 [M+l] + . ]H NMR(CDC13)： ^ • 28(t，/=6Hz，3H)，3.44-3.53 (m，2H)，5.10(s，2H)， 5.16(s, 2Ή), 6.59(s, I H), 6.81(t, /=6 Hz, 1H), 7. 08(s, 1H), 7· 25-7· 40(m，l〇H), 7. 97(s，1 H)。 步驟lh·· 5-(2,4-雙（苄基氧基）— 5 —氯苯基）—4 一溴—舲乙基一 異噁唑-3-羧醯胺（化合物〇1〇8) 將漠於乙酸（〇·6 M，306.0 ml, 183.6 mmol)之溶液， 於室溫添加至攪拌中之〇1〇7(8·5〇 g，18 36 _〇1)及乙酸 鉀（3.97 g，40.50 mm〇i)於乙酸（127 ml)之懸浮液。將該 混合物於室溫攪拌5分鐘，並將飽和N&S03溶液添加至此 溶液。將混合物濃縮至接近乾，添加水（5〇 mL)並將該混合 物過濾。將固體以水、冷乙醇（2〇 ml)清洗並乾燥以得到化 合物 0108 白色固體（8. 50 g，85· 4%): LCMS: 543 [Μ+1] + · 1150-9131-PF;Kai 476 200829575 4 丽R(CDCl3): β 1.26(t，/=6Hz，3H)，3·45-3.54(m，2H)， 5.06(s, 2H), 5.11(s, 2H), 6.61(s, 1 H), 6. 73(t, /-6 Hz, 1H), 7·25-7·39(πι，10H), 7.52(s，1 H)。 步驟li: 5 -（2,4-雙（苄基氧基）-5-氯苯基）-#-乙基—4_(4 — 羥基:苯 於 0102(1.40g，5·53 mmol)及 0108(2.50，4.61 mmol)
於混合溶劑DMF(25 ml)及水（5 ml)之混合物，添加碳酸氫 鈉（1.61 g，13.83 mmo 1)。對此混合物添加二氯雙（三苯基 膦）妃（388 mg, 0· 553 mmol )，並將該混合物加熱至90°C 並擾拌整夜。將溶劑於真空移除，並將殘渣在乙酸乙酯及 水間分層。將有機層以水及濃鹽水清洗、以無水硫酸鈉乾 燥、過濾並蒸發。將殘渣以矽膠管柱層析過濾（石油醚/乙 ——.〜— 一 — —... ..... 酸乙酯=3/1)以得到產物 0 1 09(2.00 g，78%): LCMS: 555 [M+l]+. NMRCDMSO-Λ): ^ l.〇7(t, /=6 Hz, 3H), 3. 18-3. 25(m, 2H), 5. 05(s, 2H), 5. 26(s, 2H), 6. 66(d, /-3 Hz, 2H), 6.98(d, /=3 Hz, 2H), 7.07-7.10(m, 3H), 7.29-7.31(m, 3H), 7. 38-7. 48(m, 6H), 8. 88(t, /=3 Hz, 1H)，7. 56(s, 1 H)。 步驟lj: 4-(4-(5-(2,4-雙（苄基氧基）-5-氣苯基）—3 —(乙 基-胺曱醯基）異噁唑-4-基）苯氧基）丁酸乙酯（化合物 0110-1) 將 0109(500 mg, 0.901 mmol )、4-溴丁 酸乙酯（193 mg, 〇·991 ramol)及 K2C〇3( 374 mg，2.703 mmol)於 CH3CN(20 ml) 之混合物，攪拌於8 0 °C整夜。濃縮後，將殘渣以乙酸乙酯 1150-9131_PF;Kai 477 200829575 萃取。將有機層以水及濃鹽水清洗、以無水硫酸鈉乾燥、 過渡、蒸發。將固體以冷乙醇清洗以得到化合物011 〇 -1白 色固體（480 mg, 80%): LCMS: 669 [M+1 ] +。1 NMR(DMS0-心）： ^ 1. 14-1. 20(m, 6H), 1.94(t, /=6 Hz, 2H), 2.45(t, /-6 Hz , , a, i Qr：3 . 217 (_t r 6Hz v 2 H ) ? 5. 0 3 ( s 2H), 5.26(s, 2H), 6. 84(d, /=9 Hz, 2H), 7. 05-7. 11 (m, 5H), 7.28-7.30(m, 3H), 7. 36-7. 47(m, 6H), 8.89(t, >6 Hz, 1H)。 步驟lk: 4-（4-（5 -（5-氯-2,4-二羥基苯基）一3 一（乙基-胺曱 醢基）異^惡0坐··4-基）苯氧基）丁酸乙酯（化合物Qiii-i) 對化合物 0 1 1 0-1 (850 mg, 1.27 mmol)於二氯曱烧（16 m 1)之冰浴冷卻溶劑，於氮氣下添加硼二氣甲烷於二氯甲 液 〇 於〇°C攪拌15分鐘。然後回溫至室溫並攪拌額外的35分 鐘。將該反應混合物冷卻至〇t：。將反應藉添加飽和重碳 酸鈉水溶液（16 ml)。攪拌5分鐘後，將二氯甲烷於真空中 移除。並將殘渣於乙酸乙酯（12〇 及水（6〇 1111)間分層。 將有機相以水及濃鹽水清洗、以無水硫酸鈉乾燥、蒸發並 將殘渣以矽膠管柱層析過濾（石油醚/乙酸乙酯=2/1)以得 到 01U-1 (205 mg, 33%)·· LCMS·· 489 [MH]+。 步驟11: 5-(5-氯-2,4-二羥基苯基）—於乙基—4 —(4-(4-(羥 基胺基）-4-側氧基丁氧基）苯基）異噁唑—3_羧醯胺（化合物 1) 製備羥基胺於甲醇溶液··羥基胺氯化氫（4. 67g，67 1150-9131-PF；Kai 478 200829575 mmol)溶解於曱醇（24mL)以形成溶液a。氫氧化鉀（56i g， 100 mmol)溶解於甲醇（14 mL)以形成溶液b。將溶液A冷 卻至0 C ’並將溶液B滴加至溶液A中。將該混合物於〇 °C攪拌30分鐘。將沉澱過濾掉，得到濾液為羥基胺溶於曱 醇之-容液。— 於含化合物0111-1(200 mg, 0.41 mmol)之燒瓶，添 加沒基胺於甲醇之溶液（4 · 〇 m 1)。將該混合物於室溫攪拌 30分鐘。然後以1 · 2 Μ鹽酸調整為PH4。將混合物濃縮並 將殘渣溶於乙酸乙酯（2 0 0 m 1)。將有機層以水清洗、以無 水硫酸鈉乾燥、濃縮。將殘渣以矽膠管柱層析過濾（乙酸乙 酯）以得到化合物1白色固體（96mg， 49%) : LCMS : 4了6 [M+l] + . !H NMRCDMSO-^)： β l.〇6(t，/=6 Hz，3H)， 1.87-1 2H), 3. 92(t, /-6 Hz, 2H), 6. 57(s, 1H), 6. 84(d, /=9 Hz, 2H), 7. 10-7. 15(m, 3H), 8. 68(s, 1H), 8. 85(t, /=6 Hz, 1H)，10.07(s，1H)，10.40(S，1H)，l〇.60(s，ih)。 貫施例2··製備5-(5-氯-2, 4-二羥基苯基）_n-乙基 -4-（4-(5-(羥基胺基）-5-側氧基戊基氧基）苯基）異噁唑 -3-叛醯胺（化合物2) 步驟2a·· 5-(4-(5-(2,4_雙（苄基氧基）-5-氯苯基）-3-(乙 基胺甲醯基）異噁唑-4-基）苯氧基）戊酸乙酯（化合物 0110-2) 標題化合物 0110-2(320 mg，52 %)係從 qi〇9(5〇〇 mg， 0.90 mmol)及乙基5-溴戊酸酯（226 mg，log mm〇i)使用 1150-9131-PF;Kai 479 200829575 類似於針對化合物〇11()-1(實施例^敘述之程序製備： LCMS: 683 [M+l]+ 。 步驟2b: 5-(4-（5-（5-氯-2,4-二羥基苯基）-3-（乙基一胺甲 醯基）異噁唑-4-基）苯氧基）戊酸乙酯（化合物〇m一2) ‘誠化合、物 0111 - 2 (肛 ^ 296 m g, 〇·44 mmol)使用類似於針對化合物〇11〇 —丨（實施例丨）敘述 之程序製備：LCMS: 503 [M+1].· 步驟2c: 5-(5-氯-2,4-二羥基苯基）1-乙基一4一（4-(5-(羥 基基）-5 -側氧基戊基氧基）苯基）異嚼唾—3 -魏醯胺（化合 物2) 標題化合物2(50 mg，64 %)係從化合物〇in—2(81 mg， ο：!!111®01)使用類似於針對化合物1(實施例丨）敘述之程序 I備：LCMS: 490 [M+l]+. iH NMROMSO-A): j 1 〇8(t，/二6
Hz, 3H), 1.6 6(s, 4H), 2. 00(t, /=6 Hz, 2H), 3. 19-3. 28(m, 2H), 3.93(t, /=6 Hz, 2H), 6.59(s, 1H) 5 6.8 6 (d, /-9 Hz, 2H), 7.12-7.16(m, 3H), 8. 68(s, 1H), 8. 85(t, /^6 Hz, 1H), l〇.〇8(s, 1H), 10.40(s，1H), l〇.6〇(s，ih)。 貫施例3 ··製備5-(5-氯-2, 4-二羥基苯基）_N_乙基 -4-(4-(6-(羥基胺基）-6-側氧基己基氧基）苯基）異噁唑 -3-叛醯胺（化合物3) 步驟3a: 6-（4-(5-(2, 4-雙（苄基氧基）氯苯基）_3_(乙 基胺曱醯基）異噁唾-4-基）苯氧基）己酸乙酯（化合物 0110-3) 標題化合物 0110-3(800 mg, 66 %)係從 QiQg(i 〇〇 g， 1150-9131-PF;Kai 480 200829575 1·80 mmol)及6-溴己酸乙酯（〇·44 g，197 _〇1)使用類 似於針對化合物0110-1(實施例：^敘述之程序製備：LCMS: 697 [M+1].。 步驟3b: 6 -（4-(5 -（5-氯-2, 4-二羥基苯基3 —(乙基_胺甲 ^ ) i s〇xazo4- 4- l. ) ^ ^ ) £, ^ g| ( qh 標題化合物 01 1 1-3(300 mg, 58 %)係從 οπό —3(700 mg， 1 · 0 nimo 1)使用類似於針對化合物〇 11 〇 — 1 (實施例1)敘述之 程序製備.· LCMS: 517 [M+l]+。 f 步驟3c: 5-(5-氣-2,4-二羥基苯基）-n-乙基—4-(4 -（6-(經 基胺基）-6-側氧基己基氧基）苯基）異噁唑—3_羧醯胺（化合 物3) —標題化合物3(80 〇·5 mmol)使用類似於針對化合物K實施例1M^^^ 製備：LCMS·· 504 [Μ‘+1]+· j NMR(DMS0-A): J 1· 〇8(t，/=6
Hz， 3H), 1· 32-1· 39(m, 2Η), 1· 47-1· 55(m， 2Η)， 、I 64一L 69(m，2Η)，I 94(t，/=6 Hz，2Η)，3. 18-3· 26(m， 2H), 3.90(t, /=6 Hz, 2H), 6. 54(s, 1H), 6. 84(d, /-9 Hz, 2H), 7.07-7.14(m, 3H), 8. 67(s, 1H), 8.85(t, /=6 Hz, IH), l〇.〇7(s，1H), l〇.34(s，1H)，1〇.61(s，1H)。 實施例4:製備5-(5-氯—2, 4-二羥基苯基）-N—乙基 —4-（4-(7-(羥基胺基）-7—側氧基庚基氧基）苯基）異噁唑 一3-羧醯胺（化合物4) 步驟4a·· 7-(4-(5-(2,4-雙（节基氧基）—5 —氯苯基）—3 —(乙 基-胺甲醯基）異噁唑-4-基）苯氧基）庚酸乙酯（化合物 U50-9131-PF;Kai 481 200829575 0110-4) 標題化合物 0110-4(1.0g，78%)係從 0109(1.〇g J 8 mmol)及7-溴庚酸乙酯（510 mg，2· 15 mmol)使用類似於針 對化合物0110-1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 710 [M+1 ] 〇 步驟4b: 7-(4 -（5-(5-氯-2,4-二羥基苯基）—3一（乙基—胺甲 醯基）異噁唑-4-基）苯氧基）庚酸乙酯（化合物〇111 一4) 標題化合物 0111-4(0.82 g，91.6 %)係從 〇11〇 —4(1 〇 r ' ‘ g，1.4 mmol)使用類似於針對化合物Olio —1(實施例1)敘 述之程序製備：LCMS: 531 [M+l]+。 步驟4(：:5-（5-氯-2,4-二羥基苯基）-#-乙基-4-（4-(7-(經 基-胺基）-7 -側氧基庚基氧基）苯基）異嗔嗤-3-魏醯胺（化 "…一 —…一—--……_________________ 合物4) 標題化合物4(120 mg，15 %)係從化合物0111-4(800 mg，1.5 mmol)使用類似於針對化合物1(實施例1)敘述之 f ; 程序製備：LCMS: 518 [M+l]+。4 NMR(DMSO-A):汐 1· 〇8(t， Hz, 3H), 1. 23-1. 31(m, 2H), 1. 32-1.39(m, 2H), ^47-1.55(111, 2H), 1.64-1.69(m, 2H), 1.93(t, /-6 Hz, 2H), 3. 21-3. 27(m, 2H), 3. 92(t, /=6 Hz, 2H), 6. 59(s, !H), 6.86(d, /-9 Hz, 2H), 7.10-7.16(m, 3H), 8. 65(s, !H), 8.85(t, /=6 Hz, 1H), 10. 07(s, 1H), 10.34(s, 1H), 10·61(s， 1H)。 實施例5:製備5-(5-氣-2,4-二羥基苯基）-於（3-(羥基-胺基）-3-側氧基丙基）-4-(4-甲氧基苯基）異噁唑-3-羧醯 1150-9131-PF;Kai 482 200829575 胺（化合物5) 步驟5a: 5-(2,4-雙（苄基氧基）-5-氣苯基）-4-溴-異噁唑 -3-羧酸乙酯（化合物〇2〇1) 對化合物 0106(6.26 g, 13.49 mmol)及乙酸卸（2.80 g， 2 9 · 7 6 mm〇l)於乙酸(9 3 m l 酸（0· 6 M，225 ml, 134· 9 mmol)之溶液並攪拌5分鐘。對 此混合物添加將飽和Na2S〇3水溶液。濃縮後，添加水（5〇 ml)、過濾。將固體以水及冷乙醇（20 ml)清洗，於真空下 乾燥’以得到化合物020 1白色固體（5. 8 g，79%) : LCMS: 544 [M+l]+. ]H MR(MSO-de): ά 1.34(t, /=6 Hz, 3H), 4. 37-4. 45(m, 2H), 5. 27(s, 2H), 5. 35(s, 2H), 7. 26(s, 1 H)，7· 35-7. 51(m，10H), 7· 65(s，1 H)。 步驟5b: 5-(2, 4-雙（苄基氧基）-5-氯苯基）-4-(4-曱氧基 苯基）異噁唑-3-羧酸乙酯（化合物0202) 對於4-曱氧基苯基有機硼酸（4.03 g，26.51 mm〇l)， 〇201(12.1g，22.36 mmol)、碳酸氫鈉（5.64 g，67.14mmol) 於混合溶劑DMF (25 ml)及水（5 ml)之混合物，添加二氣雙 6三苯基膦）鈀（1.94 mg, 2.76 mmol)。將該混合物加熱至 9 0°C並攪拌整夜。將溶劑於真空中移除並將殘渣於乙酸乙 酉曰及水間分層.將有機層以水及濃鹽水清洗、以無水硫酸 納乾知、過滤、並療發以得到粗製產物’以砍膠管柱層析精 製（石油醚/乙酸乙酯=4/1)以得到產物0202(8. 4 g，66%)。 LCMS: 570 [M+l]+ 〇 步驟5c: 5-(2,4-雙（节基氧基）- 5-氯苯基）- 4-(4 -曱氧基一 1150-9131-PF;Kai 483 200829575 苯基）異噁唑-3-羧酸（化合物0203) 於 0202(4.21 g，7.40 mmol)於混合溶劑 THF(8〇 ml)、 H2〇(80 ml)及甲醇（80 ml)之溶液，添加 LiOHH2〇(62i mg， 14· 80 mmol)。將該混合物於室溫攪拌3〇分鐘。然後以12 M HG1 4 - ^ # 4¾ ^ # # # ^ # α 酯萃取（1 0 0 m 1 χ 3)。將有機層以無水硫酸鈉乾燥、過濾 並蒸發以得到化合物0203黃色固體（398 g，μ 542 [M+l] + . ]H NMRCDMSO-^)： ^ 3. 75(s, 3H), 5. 06(s, 2H), 5.25(s, 2H), 6. 85(d, /=9 Hz, 2H), 7. 08-7. 14(m, 4H), 7·37-7.45(m，10H), 11.64(s, iH)。 步驟5d: 3-(5-（2,4-雙（节基氧基）一5一氯苯基）-4一（4_甲氧 基苯基）異噁唑-3-羧醯胺基）丙酸乙酯（化合物〇2〇4-5) 將矜0?(98〇11^，2.21111111〇1)、化合物〇2〇3(1〇〇§，184 mmol)及 DIEA(953 mg, 7.38 mmol)於 DMF(5 mL)之混合物， 於室溫攪拌30分鐘。對此混合物，添加乙基3一胺基丙酸 酯氯化氫（370 mg，2.4 mmol)。將得到的混合物於室溫攪 拌整夜，並將混合物於真空中濃縮。將殘渣溶於乙酸乙酯 (240 ml)並以水清洗（15 ml χ 3)、以無水硫酸鈉乾燥、過 濾並蒸發。將殘渣以矽膠管柱層析過濾（石油醚/乙酸乙酯 = 4/1)以得到所望產物 0204-5(7〇〇 mg，29%): 641 [M+1]、 步驟5e: 3 -（5-(5-氯-2,4-二羥基苯基）一4一（4—曱氧基一苯 基）異噁唑-3-羧醯胺基）丙酸乙酯（化合物〇2〇5一5) 於冰浴冷卻之化合物0204-5(690 mg，；l〇8 _〇1)於 484 1150-9131-PF;Kai 200829575 -一氣曱^元（14ml)之〉谷液’於氛氣下添加删二氯曱烧於二氣 甲烧（3 · 3 m 1，3· 3 mmo 1)之1 · 0 Μ溶液。將該反應混合物 於0 C攪拌1 5分鐘，再於室溫攪拌35分鐘。將該反應混 合物冷卻至0°C，並藉添加飽和重碳酸鈉水溶液（14 mi)萃 泠—翁择务令 乙醋（12 0 m 1)及水（6 0 m 1)間分層。將有機相以水及濃鹽水 清洗、以無水硫酸納乾燦、過濾、並蒸發。將殘渣以碎膠管 柱層析過濾（石油/乙酸乙酯=2 /1)以得到產物 0205-5(350 mg，70%)·· LCMS: 461 [M+1 ]+· 4 NMR(DMSO-A): ^ 1.20(t， J = 6Hz， 3H), 2. 56(t, Hz, 2H), 3.46-3.50(m, 2H), 3.75(s, 3H), 4. 06(q, J = 6Hz, 3H), 6.61(s, 1H), 6.88(d, /=9 Hz, 2H), 7. 14~7. 19(m, 3H), 8.93(t，/=6 Hz，1H)，10.08(s，1H)，l〇.61(s，1H)。 步驟5f: 5-(5-氯-2, 4-二羥基苯基）u3-(羥基胺 基）-3-侧氧基丙基）-4-(4-曱氧基苯基）異噁唑-3-羧醯胺 (化合物5 ) 標題化合物5棕色固體（80 mg，24%)係從化合物 0205-5(340 mg，0.74 mmol)使用類似於針對化合物1(實 施例1)敘述之程序製備：LCMS: 448 [M+l]+。4 NMR(DMS0-A): J 2.28(t，J = 6Hz，2H)，3·44(ΐ，/:6 Hz， 2H), 3.78(s, 3H), 6. 57(s, 1H), 6. 88-6. 92 (m, 2H), 7.11-7.18(m，3H)，8.88(t, /=6 Hz，1H), 10.44(s，1H)。 實施例6:製備5-(5-氣-2,4-二羥基苯基(羥基胺 基）-4 -側氧基丁基）-4-(4 -曱氧基苯基）異鳴、嗤-3_魏醯胺 1150-9131-PF;Kai 485 200829575 (化合物6) 步驟6a:甲基 4_(5_(2，4-雙（节基氧基）一5-氣苯 基）-4-(4-甲氧基苯基）異噁唑-3-羧醯胺基）丁酸酯（化合 物 0204-6) 標題化合物 0204-6 (442 mg，37 %)係從 0203(1· 00 mg， 1· 84 mmol)及 4-胺基丁酸曱酯氯化氫（368 mg，2. 40 mmol)使用類似於針對化合物0204-5(實施例5)敘述之程 序製備：LCMS: 641 [Μ+1Γ。 步驟6b: 4-(5-(5-氯-2,4-二羥基苯基）一4-(4-甲氧基苯基） 異噁唑-3-羧醯胺基）丁酸甲酯（化合物〇2〇5 - 6) 標題化合物 0205-6(233 mg，73 %)係從 0204-6(442 mg， 〇· 69 mmol)使用類似於針對化合物〇205-5(實施例5)敘述 ~ ~.…—…一……*……… —— _ _ _ _ 之程序製備：LCMS: 461 [Μ+1]+· — 步驟6c: 5-(5-氯-2,4-二羥基苯基羥基胺基）_4_ 侧氧基丁基）-4-(4-曱氧基苯基）異噁唑_3_羧醯胺（化合物 6) 標題化合物6(100 mg，42 %)係從化合物〇2〇5_6(233 mg，0.51圓〇使用類似於針對化合物i(實施例n救述之 程序製備：LCMS: 462 [M+1] + . 1h 隱⑽s〇i): ^ 1.65-1.75(,, 2H), l.97(t, /=6Hz> 2h)j 3>15_3i22(m) 2H)，3.73(s，3H)，6,59(s，1H)，6.8?(d，/=9Hz，2H)， 7.12-7.17(m，3H)，8.71(S，1H)，89〇(t，/=6Hz，ih), 10.08(3, 1H), 10.37(3, 1H), 1〇< 6〇(§ 1R) 〇 實施例7:製備5-(5务2，[二絲苯基）—#_(6_(經基胺 1150-9131-PF;Kai 486 200829575 基）-6 -側氧基己基）-4-(4 -曱氧基苯基）異嗔唾—3 -幾醢胺 (化合物8) 步驟7a: 6 -（5 -（2,4-雙（苄基氧基）-5-氯苯基）-4-（4-甲氧 基苯基）異°惡吐-3-魏醯胺基）己酸甲g旨（化合物0204 - 8) 標題化合物 〇2〇4-8 (500 mg，41 %)係從 〇 2 03 ( 1 · 0 〇 mg， 1 · 84 mmol )及甲基 6-胺基己酸酉旨氯化氫（503 mg，2.40 _〇 1)使用類似於針對化合物0204-5 (實施例5)敘述之程 序製備：LCMS: 669 [M+l] + . NMR(DMS0-^)：汐 1.43- 1.56(m, 4H), 2. 27(t, /=6 Hz, 2H), 3. 15-3. 22(m, 2H), 3.58(s, 3H), 3. 74(s, 3H), 5. 04(s, 2H), 5. 26(s, 2H), 6.59(s, 1H), 6. 84(d, /-9 Hz, 2H), 7. 06-7. 1 〇(m> 4H), 7.29(t, /-3 Hz, 3H), 7. 38-7. 47(m, 7H), 8. 88(t, /=6 Hz, 1H) o 步驟7b: 6-(5-(5-氣-2, 4-二羥基苯基）-4-（4-曱氧基一笨 基）異噁唑-3-羧醯胺基）己酸甲酯（化合物0205-8) 標題化合物 0205-8(21 6 mg，59 %)係從 0204-8(500 mg 0 · 7 5 mmo 1)使用類似於針對化合物〇 2 0 5- 5 (實施例5)敘述 之程序製備：LCMS: 489 [Μ+1Γ。4 NMR(DMSO-A): j 1.43- 1.56(m, 4H), 2. 25(t, /=6 Hz, 2H), 3. 15-3. 22(m5 2H), 3.58(s, 3H), 3. 73(s, 3H), 6. 59(s, 1H), 6. 87(d, /=9 Hz, 2H), 7.12-7·17(πι，3H), 8· 84(t, /=6 Hz，1H)， 10·08(s, 1H)， 10.60(s， 1H)。 步驟7c: 5-(5-氯-2, 4-二羥基苯基(6-(羥基-胺 基）-6 -側氧基己基）-4-(4-甲氧基苯基）異°惡11 坐-竣酿胺 1150-9131-PF;Kai 487 200829575 (化合物8) 標題化合物8(100 mg，50 %)係從化合物0205-8(200 mg, 0· 41 mmol )使用類似於針對化合物1 (實施例1)敘述之 程序製備：LCMS: 490 [M + l] + · !H NMR(DMS0-^): ^ 1. 43-1. 53(m, 4H), 1. 93 (4:, /= 6 BzT 3.1 5^-3. 22 (m, 2Η), 3.73(s, 3Η), 6.59(s, 1H), 6. 87(d, /-9 Hz, 2H), 7. 12-7. 17(ra, 3H), 8. 66(s, 1H), 8. 84(t, /=6 Hz, 1H), 10. 08(s, 1H), 10. 33(s, 1H)，10· 60(s, 1H)。 實施例8:製備5-(5-氣-2, 4-二羥基苯基）-#—(7 —(羥基胺 基）7 -側氧基庚基）-4_(4-甲氧基苯基）異σ惡υ坐-3 —叛酿胺 (化合物9) 步驟8a:乙基7_(5-(2, 4-雙（苄基氧基）-5-氯苯 基）-4-(4-甲氧基苯基）異噁唑-3-羧醯胺基）庚酸酯（化合 物 0204-9) 標題化合物 0204-9(640 mg, 52 %)係從 0203(1. 00 mg, 1·84 mmol)及甲基7-胺基庚酸酯氣化氫（5〇3 mg，2·4〇 mmol)使用類似於針對化合物〇2〇4-5(實施例5)敘述之程 序製備：LCMS: 697 [M + l]+。 步驟8b··乙基7 -（5 -（5-氯-2,4-二羥基苯基）-4-(4-甲氧 基苯基）異噁唑-3-羧醯胺基）庚酸酯（化合物〇2〇5_9) 標題化合物 0205-9 (274 mg，62 %)係從 02〇4_9(600 mg， 〇·86 mmol)使用類似於針對化合物Q2〇5-5(實施例5)敘述 之程序製備：LCMS: 517 + 步驟8c: 5-(5-氯-2,4-二羥基苯基）—N—(7—(羥基一胺 1150-9131-PF;Kai 488 200829575 基）-7-側氧基庚基）-4-(4-曱氧基苯基）異噁唑—3-羧醯胺 (化合物9) 標題化合物9(90 mg，34 %)係從化合物〇205-9(9 0 mg， 34 %)使用類似於針對化合物1 (實施例丨）敘述之程序製備： L C M S : 5 0 4 [ Μ +1 ] +。1Η N M R (D M S 0 - A): β 1 · 2 2 (s，4 Η) τ 1.43-1.49(m, 4Η), 1.92(t, /=6 Hz, 2H), 3. 13-3. 20(m, 2H), 3.71(s, 3H), 6.57(s, 1H), 6. 87(d, /=9 Hz, 2H), 7.10-7.15(m, 3H), 8. 84(t, /=6 Hz, 1H), 10.06(s, 1H), f 10. 30(s，1H), 10. 58(s, 1H)。 實施例9··製備5-(5-氯-2,4-二羥基苯基羥基 胺基）-8-側氧基辛基）-4-(4-甲氧基苯基）異噁唑-3-羧醯 胺（化合物10) 步驟9a: 8-(5-（2,4-雙（苄基氧基）一5-氯苯基）-4-（4-甲氧 基苯基）異噁唑-3-羧醯胺基）辛酸甲酯（化合物0204-1 0) 標題化合物 0204-1 0(450 mg, 44 %)係從 0203(800 mg， I 1 · 48 mmol)及8-胺基辛酸甲酯氯化氫（400 mg， 1· 91 mmol)使用類似於針對化合物〇2〇4-5(實施例5)敘述之程 序製備：LCMS: 697 [M+l]+。 步驟‘9b:甲基8-（5-(5-氯-2, 4-二羥基苯基）-4-（4-曱氧 基苯基）異噁唑-3-羧醯胺基）辛酸酯（化合物0205-1 0) 標題化合物 0205-1 0(274 mg，62 %)係從 0204-1 0(450 mg, 0.65 mmol)使用類似於針對化合物〇2〇5-5(實施例5) 敘述之程序製備：LCMS: 517 [M+1P。 步驟9c: 5-(5-氯-2,4-二羥基苯基於（8-(羥基胺基）一8- 1150-9131-PF;Kai 489 200829575 側氧基辛基）- 4-(4 -甲氣其贫# 土禾基）異π惡。坐_ 3 -叛酿胺（化合物 10) 標題化合物10(70 mg 71 g’ 71 %)係從化合物 0205-1 0 ( 1 00 mg, 0. 19 mmol)使用類似於斜 力针對化合物1(實施例1)敘述之 ^ ^ ^ 518 Γ M41 π + ΐττ Η NMR (DMS0-de^) ： S' 1. 23(sr- 6H), 1.43-1.49(m, λ^\ , n ^ 1.93(t， /=6 Hz, 2H)， 3-15-3.20(,, 2H)) 3.73(s, 3H)) 6. 59(s, 1H), 6. 87(d> g /=9 Hz, 2H), 7.12-7.17(m, 3H), 8. 64(s, 1H), 8. 84(t, /=6 Hz, 1H), 10.〇8(s ]u\ 1n on/ VSj !«), 10.33(8, 1H), 10.60(8, 1H) 〇 生物學試驗： 此等性質可例如使用-種以上下列程序評估: ⑷-體夕K/—⑽試驗，決定受測化合物抑制Hsp9〇 ^ 子伴侣活性之能力 Hsp90分子伴侣試驗被實施以測量Hsp9〇蛋白質將受 熱變性之發光酶蛋白質再折疊之能力。嶋首先於㈣ 蛋白及10%甘油)中，於室溫在各種濃度的受測化合物中 溫了 3。分鐘。將發光酶蛋白質添加至變性混合物，並於 50 °C溫| 8分鐘。最後_〇及發光酶於變性現合物 濃度各為。.375 “及。.125//M。將變性混合物之5纠樣 本以25川复性緩衝液(25 _ Tris、ρΗ7. 5、“μ μ眞、 〇.〇1% 牛 7 球蛋白及 10% 甘油、0.5mMATP、2mMDTT、 丄本發明所定^ I .鲁 -------------------------------------------------- 1150-9131-PF/Kai 490 200829575 5 mM KCl、0· 3/z M HSP70 及 〇· 15// M HSP40)稀釋。該復性 反應於室溫溫育150分鐘，接著將丨〇 #丨已復性樣本於 90//1 的螢光素（iuciferin)試劑（Luclite，PerkinElmer
Li fe Science)中稀釋。將該混合物於黑暗中溫育5分鐘， 之養於TopCou n屯 讀取發光信號。 (b) HSP90競爭結合（螢光極化）試驗。 異硫氰酸螢光素酯（FITC)標記GM，係從 InvivoGen(ant-fg卜1)購得。介於HSP90及經標記GM之交 互作用，形成螢光極化試驗之基礎。游離及快速翻滾之FI Τ〇 標記GM會相關於經激發光之極化平面，發射隨機的光， 造成較低之極化（mp)值。當GM結合於HSP90，複合體翻滾 -·«. · · 、 ,… _ 減，且發射的光被極化，造成較高的mp值。此競爭結合 試檢係於96-井盤中實施，且各試驗包含10及5〇nM的經 才示 δ己 GM 及精製 HSP90 蛋白質（Assay Design, SPP-776F)。 此分析緩衝液包含 20mM HEPES(pH 7.3)、50mM KC1、ImM DTT、50mM MgCh、20mM Na2Mo〇4、0· 01% NP40 及 〇· img/mi 牛r球蛋白。化合物稀釋於DMS0，並在經標記GM添加至 最終分析液前，濃度範圍係從2〇uM至2nM。mp值係於在4 °C温育24小時後，以BioTek Synergy II減去背景值決定。 (c) 體外η 试驗，決定受測化合物抑制hdAC酵 素活性之能力 HDAC抑制劑使用HDAC螢光測量試驗套組 (AK-500, Biomol、Plymouth Meeting、PA)篩選。可將受試 491 1150-9131-PF;Kai 200829575 化合物溶於二甲基亞砜（DMS0)，以得到2〇 工作原濃 度。螢光使用WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad Prism(v4〇a) 繪圖，並且使用S型（sigmoidal)拋物線劑量-回應曲線適 -一合度演算法〜‘ 各試驗設定如下：將所有的套組成分解凍，於使用前保 持在冰上。將HeLa核萃取物以1:29稀釋於試驗緩衝液（5〇 , mM Tris/Cl ^ PH 8.0, 137 mM NaCl, 2.7 mM KC1, 1 mM 1 MgC12)。製備Trichostatin A(TSA，正控制組）及受測化 合物於試驗緩衝液（5X最終濃度）之稀释物。將Flu〇r de LysTM基稀釋於試驗緩衝液成i〇〇 uM(5〇倍=2χ最終）。
衝液）於冷試驗緩衝液稀釋2 0 i Γ — 〇；2 mM
Trichostatin A 100-倍稀釋於ιχ顯影劑（例於j ml;最終Trichostatin A濃度於lx顯影劑=2//M;添加 ( HDAC/受質反應後之最終濃度=1//"。添加試驗緩衝液、經 稀釋trichostatin A或受測抑制劑，至微滴定盤之適當的 井。添加經稀釋之HeLa萃取物或其他HDAC樣本，至所有 井，除了負控制組。使經稀釋之Flu〇r de LysTM受質及樣 本在微滴定盤中平衡至試驗溫度（例如25或37。〇)。藉由 添加經稀釋受質（25/z 1)至各井並充份混合，以起始化HMC 反應。使HDAC反應進行1小時，接著藉由添加Flu〇r化 LysTM顯影劑（50 // 1)使反應停止。將平盤在室溫（25) 溫育10-15分鐘。在能於波長35〇 — 38〇11111之範圍激發的微 1150-9131-PF/Kai 492 200829575 滴定盤讀取螢光儀，讀取樣本，並偵測在440-46 0 nm發射 之光。 以下表8-B列舉本發明代表化合物及及其活性於HDAC and HSP90分析。於此等分析IC5G，使用以下分級：I - 10 /z M， 1 〇 μ M > 11 > 1 M J- IV ^ 0. 1 μ Μ ° - 表8-Β 化合物編號 HDAC HSP90 1 II IV 2 III 3 III 4 III 5 III Cy4〇 ί W4〇 第9部分：
(XI)
表9-A 化合物編號 結構 1 2 3 4 Λ_ο1，# 5 6 7 0 0 Ν 1150-9131-PF;Kai 493 200829575 8 ο 9 10 11 12 ^r°OaNi>^°^ o 13 14 15 16 17 Scheme 1
1150-9131-PF/Kai 494 200829575
Scheme 2 H〇J〇^ +
0201 N 0202 v 0108
\ EDCI, DMAP \ HOBt, DMF
實施例1:製備(5-((5-第三丁基噁唑-2-基）曱基硫）噻 唑-2-基）-1-(4-(羥基胺基）_4_侧氧基丁基）哌啶-4-羧醯 胺（化合物1) 步驟1 a : α -疊氮三級丁基乙酮（化合物〇 1 〇 2) 於配有磁攪拌子之1 L圓底燒瓶，添加α -氯三級丁 基乙酮01 01 (33· 5 g，〇· 25 mol )、丙酮（400 ml)及疊氮化 鈉（21.2 g，0.325 mol)。將該反應混合物於25°C攪拌整 夜，過濾。將固體以丙酮清洗。將該濾液於真空中濃縮以 得標題化合物0102油（34. 3 g，100°/。）。該粗製品直接用於 次一步驟而不經進一步純化。1H NMR(CDCh):汐1. 17(s， 9H)，4. 07(s，2H)。 步驟lb: α -胺基三級丁基乙酮氯化氫（化合物0103) 於配有磁攪拌子之2 L圓底燒瓶，添加化合物 01 02(34· 3 g，245 mmol)、甲醇（1100 ml)、濃 HC 1(24 ml) 及10%Pd/C(4.2g，濕，〜40%水）。將該反應混合物於氫氣 氛攪拌整夜。將該混合物以矽藻墊過濾，並以曱醇沖洗。 將該濾液於4 0 °C以下減壓濃縮。將得到的濕固體與異丙醇 (2 X 1 0 0 m 1 )共沸，然後添加無水醚（1 〇 〇 m 1)。將該混合 1150-9131-PF;Kai 495 200829575 物擾拌5分鐘。將固體產物以過濾、收集，並將濾餅以二乙 醚清洗，於真空中乾燥以得到化合物〇1〇3(28 () g，91%乂 NMR(DMSO^e): ^ 1.13(s, 9H), 4.〇6(s, 2H), 8. 34(s! 3H)。 ’ 步驟1 c : π 2 (氨乙醯基胺基）三級丁基乙酮（化合物 0104) 二乙胺（35 ml, 250 mmol)添加至經冷卻（一5。〇)之化合 物0103於CH2C1 2( 350 ml)之溶液。於得到的之冷卻至—1〇 °C之混合物，花15分鐘滴加α -氣乙醯基氯（8. 8 ml，11〇 匪〇1)於CH2CM20 ml)之溶液，同時維持反應溫度低於一5 °C。將該反應混合物攪拌1小時，以1 N HC1 (200 ml)萃 冷。將有機相分離，以1 N HC 1 (200 ml)及水（50 ml)清洗、 乾燥（NadCh)、過濾並蒸發以得到化合物〇 1 〇4白色固體 (18. 9 g, 98%): ^ NMRCCDCla): ^ 1.21(s, 9H), 4. 09(s, 2H), 4. 30(s，2H)，7. 35(s, 1H)。 步驟Id: 5-農三：Γ差-2-氯曱基噁唑（化合物0105) 於配有磁攪拌子之1 〇〇 ml圓底燒瓶，添加化合物 01 04(9. 534 g，49· 9 mmol)及 POC13(30 ml)。將該反應混 合物加熱至1 05°C並攪拌1小時。冷卻至室溫後，將該反 應混合物小心倒入冰中。將該混合物以醚萃取6次。將有 機萃取物合併，以飽和重碳酸鈉中和至pH 7-8。將有機相 分離，依序以飽和重碳酸鈉、水及濃鹽水清洗，乾燥（MgS〇4) 及於真空中濃縮。將粗製品於減壓蒸餾，以得到標題化合 物 0105 無色油（7.756 g，70%): bp. 49°C/0.25 _Hg. j 1150-9131-PF;Kai 496 200829575 NMRCCDCla)： ^ 1.32(s, 9H), 4. 60(s, 2H), 6. 70(s, 1H) ° 步驟le: 5-硫氰酸噻唑-2_胺（化合物〇1〇7) 將2-胺基-5-溴噻唑溴化氫〇1〇6(53 〇g，0.2〇4mol) 及硫氮酸鉀（78· 5 g，〇· 808 mol)於甲醇（1· 4 L)之混合物， ―於室〜1 並以10% NaOH調整溶液Μ為ph = 12。將得到的固體過濾 以得到標題產物〇1〇7棕色固體（14. 0 g，44%): LCMS: 157 [M+1]+ 〇 步驟If: 5-((5-第三丁基噁唑—2 —基）甲基硫）噻唑-2 一胺 (化合物0108) 對化合物 0107(3· 14 g，20 mmol)於絕對 EtOH(200 ml) 之溶液’於室溫分次添加NaBH4(1· 6 g，4〇 mm〇i)。將混合 物攪拌 一~~一 '—，一一一一.------------------------—— — __ — — — 小時，然後緩慢導入丙酮（100 ml)。1小時後—， 添加化合物 0105(3. 5 g，20 mmol)於 EtOH(30 ml)之溶液， 並將得到的暗色反應混合物加熱至回流1小時。將得到的 混合物冷卻、於真空中濃縮，然後於Et〇Ac及濃鹽水間分 層。將有機相分離、乾燥（MgS04)及於真空中濃縮以得到粗 製固體。將粗製品以二乙醚/己烷研磨，以得化合物〇丨〇8 淡紅棕色固體（3.1g，57%): LCMS: 270 [M+l]+。 步驟lg:第三丁基4-(5-((5-第三丁基噁唑_2-基）甲基 硫）嗟唾-2-基-胺甲醯基）哌啶-1-羧酸酯（化合物〇1〇9) 對化合物 0 1 08(750 mg, 2.79 mmol), 1-(第三-丁氧 基羰基）哌啶-4-羧酸（ 960 mg，4· 18 _〇1)、DMAP(510 mg， 4. 18 mmol)於 DMF 之溶液，添加 EDAC(802 mg，4· 18 mmol) 1150-9131-PF;Kai 497 200829575 及HOBt(560 mg，4.18 mmo 1)。將該混合物加熱至50°C並 授拌整夜。將該混合物以EtOAc稀釋並以濃鹽水、HC1水 溶液、飽和NaHCCh及濃鹽水清洗。將有機相以硫酸鈉乾燥 並以矽膠管柱層析精製（乙酸乙酯/石油醚=1 ·· 2至純乙酸乙 麻)，以I秈 [M+1]、 步驟lh:肸（5-((5-第三丁基噁唑-2-基）甲基硫）噻唑一2 一 基）哌啶-4-羧醯胺（化合物〇11〇) '對化合物0109(1.0 g，2 mmol)於二氯甲烷（20 ml)之 混合物’添加TFA (2 m 1)。將該反應混合物於3 0 °C攪拌3 小時。反應後，將該混合物以飽和NaHC〇3調整為PH 7-8， 並以乙酸乙酯萃取。將有機相以硫酸鈉乾燥、濃縮以得到 標題化合物 0110(620 mg，82%): mp 178.5-18(TC，LCMS: 381[M+1]+, ]11 NMRCCDCls): ^1.164(s, 9H), 1.720-1.795 (m, 2H), 1. 923-1.969(m, 2H), 2. 714-2.777(m, 1H), & 2.889(t, /=12Hz, 2H), 3.281(s, 1H), 4. 046(s, 1H), 6.708(s, 1H), 7.393(s，1H), 8.844(m, 1H)。 步驟li·· 4-(4-(5-((5-第三丁基噁唑-2-基）甲基硫）噻唑 -2-基胺甲醯基）哌啶—i一基）丁酸乙酯（化合物 對 0 1 1 0 ( 300 mg, 0·789 mmol)於 DMF(10 ml)之溶液， 添加4-廣丁酸乙酯（1 53 mg，0. 789 mmol)。將該反應混合 物於室溫攪拌30分鐘。將K2C〇3(108 mg，0.789 mmol)添 加至此混合物並將得到的混合物於室溫攪拌整夜。將該混 合物以水清洗，以CHzC 12萃取。將有機相以硫酸鈉乾燥、 1150-9131-PF;Kai 498 200829575 濃縮以得到粗製產物。將粗製產物以矽膠管柱層析精萝（乙 酸乙醋/石油ehtei-l:l to 100%乙酸乙酯）以得到標題 化合物 0111(180 mg, 46%)，LCMS: 496 [M + l]+。 步驟lj:妗（5-((5-第三丁基噁唑-2-基）甲基硫）噻唑一 2 一 基）-1 - ( 4 -(說基胺基）-4 -側氧基丁基）旅皮^ 合物1) 將新鮮製備的羥基胺溶液（2.1 ml, 3.6 mmol)置於10 ml燒瓶。將化合物〇111(18〇 mg，〇·36 _〇1)添加至此溶 液並於2 5 C摺:掉4小時。將該混合物以乙酸中和並將曱醇 移除。將殘渣以製備性HPLC過濾以得到標題化合物1白色 固體（25 mg，14%): mp 176-180°C，LCMS: 482 [M+l]+，j NMRCDMSO-^) ： ^ 1. 149(s, 9Ή), 1. 352(m, 2Ή)， 1· 720-2· 320(m，10H)，2· 403(m，1H)，2. 5—7i(m厂而 2H), 6. 696(s, 1H), 7. 350(s, 1H), 8. 747(s, 1H), 10·440(s， 1H), 12. 326(s， 1H)。 實施例2:製備(5 —((5—第三丁基噁唑-2-基）曱基硫）噻 唾-2-基）-l-(5-(經基胺基）-5 -側氧基戊基）旅唆-4 -緩醯 胺（化合物2) 步驟2a: 5-(4-(5-((5-第三丁基噁唑-2-基）曱基硫）噻唑 -2-基胺甲醯基）哌啶—卜基）戊酸甲酯（化合物〇111一2) 標題化合物0111-2黃色固體（126 mg，38. 7%)係從化 合物 01 1 0(250mg，0· 658mmol)、5-溴戊酸甲酯（128 mg, 〇· 658 mmol)、K2C〇3(90· 8 mg，0· 658 mmol)，及 DMF(5 ml) 使用類似於針對化合物0111-1(實施例丨）敘述之程序製備： 1150-9131-PF;Kai 499 200829575 LCMS·· 495 [M+l]+。 步驟2b:於（5-((5-第三丁基噁唑—2-基）甲基硫）噻唑一 2 一 基）-1-(5-(羥基-胺基）-5-側氧基戊基）哌啶—4-羧醯胺（化 合物2 ) 彳示彳匕合物 2黃色固體（2 0 m.g，15 8 % )伟從化^"物 011卜2(126 mg，0.255 mmol)及新鮮製備的羥基胺溶液 (1.5 ml，2.55 mmol)使用類似於針對化合物丨（實施例d 敘述之程序製備：Μ·ρ·: 93-97°C; LCMS: 496 [M+1].· 1 NMR(DMSO-^e) : δ 1.148(s, 9H), 1. 353-1. 949(m, 10H), 2. 187-2. 227(in, 2H), 2.408(m, 1H), 2. 837(d, /-11.1, 2H), 4. 026(s, 2H), 6. 696(s, 1H), 7. 355(s, 1H)， 8. 647(s, 1H), 10.314(s, 1H), 12. 190(s, 1H) 〇 實施例3:製備於（5-((5-第三丁基ΐ唑=2=i)曱基硫)噻 σ坐- 2 -基）-1 - (6 -(經基胺基）-6 -側氧基己基）π辰。定-4 -叛醯 胺（化合物3) 步驟3a:乙基6-(4-(5-((5-第三丁基°惡唾-2-基）曱基硫） 噻唑-2-基-胺甲醯基）哌啶-1-基）己酸酯（化合物om一3) 標題化合物0111-3黃色固體（210 mg，51%)係從化合 物 0 1 1 0 (30 0 mg，0· 789 mmol)、6-溴己酸乙酯（176 mg， 0· 789 mmol)、K2C〇3(108 mg，0· 789 _〇1)及 DMF(5 ml)使 用類似於針對化合物0111-1(實施例1)敘述之程序製備： LCMS: 523 [M + 1]+。 步驟3b: #·(5-((5-第三丁基噁唑-2-基）曱基硫）噻唑-2-基）-1-(6-(經基胺基）-6 -側氧基己基）旅°定-4-魏醯胺（化 1150-9131-PF;Kai 500 200829575 合物3)
標題化合物3育色固體（3〇 mg，15·8%)係從化合物 0111-3(210 mg，0.40 mmol)及新鮮製備的羥基胺溶液（2.5 ml，4·0 mmol)使用類似於針對化合物丨（實施例n敘述之 序 備· Μ·ρ· · 12 7 130 C ; L/CMS· 510 [Μ士1]+ 】II NMRCDMSO-^/e) \ δ 1.158(s, 9H), 1. 218-1. 927(m, 14H), 2. 204-2. 254(m, 2H), 2. 402(m, 1H), 2. 619(m, 2H), 4.033(s, 2H), 6.698(s, 1H), 7. 377(s, 1H), 8. 669 (s, 1H), 1 0. 345(s，1H), 12· 354(s，1H)。 實施例4:製備N-(5-((5-第三丁基噁唑-2-基）曱基硫）噻 唑-2-基）-1-(7-(羥基胺基）-7-側氧基庚基）哌啶-4-羧醯 胺（化合物4) 步驟4a:乙基7_(4-(5 -（（5-第三丁基噁唑-2-基）甲基硫） 噻唑-2-基胺甲醯基）哌啶-1-基）庚酸酯（化合物0111-4) 標題化合物0111-4黃色固體（370 mg，62%)係從化合 物 01 1 0(423 mg， 1. 113 mmol)、7-溴庚酸乙酯（260 mg， 1. 113 mmol)、K2C〇3(154 mg，1. 113 mmol)及 DMF(5 ml)使 用類似於針對化合物0111 -1 (實施例1)敘述之程序製備： LCMS: 537 [Μ+1Γ。 步驟4b: #-(5-((5-第三丁基噁唑-2-基）甲基硫）噻唑-2-基）-1-(7-(經基-胺基）-7 -侧氧基庚基瓜咬-4-鲮醢胺（化 合物4) 標題化合物4黃色固體（20 mg，6%)係從化合物 01 1 1-4(370 mg，0.69 mmol)及新鮮製備的羥基胺溶液（4.0 1150-9131-PF;Kai 501 200829575 in 1，6. 9 mmo 1)使用類似於針對化合物1 (實施例1)救述之 程序製備：Μ·ρ·: 113-115°C; LCMS: 524 [Μ+ΙΓ;1!! 匪R(DMSO-A) : J 1. 153(s，9Η), 1· 215-1· 483(m，4Η)， 1. 545-1, 628(m, 4H), 1.708-1.892(m, 6H), 1.917-2.224 -m.,.) „, * ίί ：w^,,, j,. 2.,, · , 2._. »5.2... *, ,,4-, , . ^ . 2 ίί) ^ ..1, - ?-—. 2H), 6. 701(s, 1H), 7. 361(s, 1H), 8. 655(s, 1H), 10. 361(s, 1H), 12.216(s, 1H)。 實施例5:製備4-(4-(2-(5-((5-第三丁基噁唑-2-基）甲 基硫）噻唑-2-基胺基）-2-側氧基乙基）苯氧基）-，羥基丁 醯胺（化合物9) 步驟5a: 2-(4-(4-甲氧基-4-側氧基丁氧基）苯基）乙酸（化 合物 0202-9) 對 MeONa(1.08 g，20 mmol)於 MeOH(2 0^^i 於〇°C於氮氣中添加化合物〇2〇1(1· 52 g，10 mmol)。將該 混合物攪拌10分鐘，添加4-溴丁酸乙酯（1. 94 g，10 mmo 1)。於5 0 °C攪拌整夜後，將該混合物以乙酸調整為ρΗ 6-7 ’並濃縮。將殘渣倒入於乙酸乙酯，以水、濃鹽水清洗、 乾燦並濃縮以得到一殘渣，以管柱層析精製（洗提液：乙酸 乙醋/石油鱗1/5)以得到產物0202-9固體（841 mg，33%): JH NMRCDMSO-^)： 5l2.24(s, 1H), 7.15(d, /=8. 7 Hz, 2H), 6.85(d, /=8. 7 Hz, 2H), 3. 95(t, /-6. 3 Hz, 2H), 3.59(s, 3H), 3.47(s，2H), 2.49(m，2H)，1.95(m, 2H)。 步驟5b:甲基4-(4-(2-(5-（（ 5-第三丁基噁唑_2-基）甲基 硫）售唾-2-基胺基）—2-側氧基乙基）苯氧基）丁酸酯（化合 1150-913l-PF;Kai 502 200829575 物 0203-9) 將 0202-9(0.189 g， 0.75 mmol)， 0108(0.135 g, 0.5mmol) 、 EDCI(0·143 g， 0.75 mmol) 、 DMAP(0·092 g, 0.75mmol)、H0Bt(0.101 g，0.75 mmol)於 DMF(5 ml)之溶 ---^ ^ l ^ άϋΧ '4 〜瓜時―。上 (5 0 m 1)，並以水及濃鹽水清洗、乾燥並濃縮以得到一殘 渣，以管柱層析精製（洗提液··乙酸乙酯/石油醚=1/3)以得 到產物 0203-9 固體（40 mg，16 %): 4 NMR(DMS0-A): 512.43(s, 1H), 7.39(s, 1H), 7.19(d, /=8. 7 Hz, 2H), 6.86(d, /=8.7 Hz, 2H), 6.69(s, 1H), 4. 04(s, 2H), 3.95(t, /=6.3 Hz, 2H), 3.65(s, 2H), 3. 59(s, 3H), 2.50(t，/=3.3 Hz，2H), 1.95(m，2H)，1.13(s，9H)。 .—·*〜™™——-—. — — 步驟5c: 4-(4-(2-(5-((5-第三丁基噁唑-2-基)甲―基硫)¾ 唾-2-基-胺基）-2-側氧基乙基）苯氧基）—n呈基丁醯胺（化 合物9) i 製備羥基胺於曱醇溶液：羥基胺氯化氫（4. 67g，67 mmol)溶解於曱醇（24 mL)以形成溶液A。氳氧化鉀（5· 61 g， 100 mmol)溶解於甲醇（14 mL)以形成溶液B。於〇°c對溶液 A滴加溶液B。將該混合物於〇。〇授拌3 0分鐘，並將固體 過濾以得到羥基胺溶於甲醇之溶液。 於一含化合物0203-9 (40 mg, 0.080 mmol)之燒瓶， 添加經基胺於曱醇之溶液（6·〇 mL)。將該混合物於室溫撲 拌1小時。然後以濃HC1調整為PH 7。將混合物濃縮以得 到一殘渣，以水清洗以得到產物9固體（丨8 mg，44 %產率）。 1150-9131-PF;Kai 503 200829575 w_S(w6)j12.43(s，1h)，i().39i(s，ih), 8 68(s， 1H), 7.36(s, 1H), 7.l8(d, /=8. 7 Hz, 2H), 6. 84(d, /=8. 7
Hz, 2H), 6. 67(s, ΙΗ") λ πw 4· 〇l(s, 2H), 3. 90(t, /-6 Hz, 2H),
3. 63(s, 2H), 2 IK t τη nTT ( ) U， /=7·2ΗΖ， 2H)， L 19(m， 2H)， 實施例6:製備5 —m (5-((5 一弟三丁基。惡ϋ坐—2-基）曱 基硫）噻吐-2-基胺基）一2一相 土 ^ ^侧氧基乙基）苯氧基）-#—羥基戊 醯胺（化合物10) 步驟6a· 2 (4—(5—曱氧基—5 —側氧基戊基氧基）苯基）乙酸 (化合物0202-10) 標題化合物0202-1 0 i色固體（322 mg，24%)係從化 合物 020 1 ( 0. 76 g，5 mmol)及 5一 溴戊酸甲酯（〇 98g， 5mmol )使用類似於¥ϊΐ^^12 () 2:9 (^ ^ θίϋί 序製備:^
Hz, 2H), 6.91(d, /=8. 7 Hz, 2H), 3. 94(t, /-6.0 Hz, 2H), 3. 59(s, 3H), 3.48(s, 2H), 2.38(t, /=7. 2Hz, 2H), 1·69(m, 4H)。 步驟6b:甲基-5-(4-(2-(5K(5-第三丁基噁唑-2-基）甲 基硫）-嗟唑-2 -基胺基）-2 -側氧基乙基）苯氧基）戊酸酯（化 合物 0203-1 0) 將 0202-10(0.193 g, 〇·75 mmol) 、 0108(0.135 g， 0·5ππη〇1)、EDCI(0.143 g，〇·75 mmol)、DMAP(0.092 g， 0· 75ramol)、ΗΟΒΐ(0· 101 g，〇· 75 mmol)於 DMF(5 ml)之溶 液，攪拌於40°C 4小時，之後，將該混合物倒入乙酸乙酯 1150-9131-PF;Kai 504 200829575 (50 ml)，並以水及濃鹽水清洗、乾燥並濃縮以得到一殘 渣，以管柱層析精製（乙酸乙酯/石油醚=1/3)以得到產物 020 3-1 0 固體（45 mg, 12 %)。NMR(DMSO-A) : 5 12. 45(s， 1H), 7.39(s, 2H), 7.20(d, /-9.0 Hz, 2H), 6. 87(d, /=9.0 ^ 3. 9 3 (t , „ y=6 . 3 Hz , „ 2H), 3.65(s, 2H), 3. 58(s, 3H), 2. 37(t, /=6. 0 Hz, 2H), 1.69(m，4H)，1. 137(s, 9H)。 步驟6c: 5-(4 -（2-(5 -（（5-第三丁基噁唑-2-基）甲基硫）噻 唑-2-基-胺基）-2-側氧基乙基）苯氧基）-，羥基戊醯胺（化 合物10) 標題化合物10黃色固體（17mg，38 %產率）係從化合 物0203-1 0(45 mg，0· 087 mmol)及新鮮製備的經基胺溶於 甲醇之溶液（6 · 0 m L)使用類似於針對化合物9 (m _5y 敛述之程序製備：I NMRCDMS0-A): 5 12. 43(s， 1H)， 10.36(s, 1H), 8.69(s, 1H), 7. 38(s, 1H), 7.20(d, /=9.0 Hz, 2H), 6.86(d, /=9. 0 Hz, 2H), 6. 69(s, 2H), 4. 04(s, 2H), 3.92(t, /-6.0 Hz, 2H), 1.99(t, /-6.0 Hz, 2H), 1. 64(m，4H), 1. 14(s，9H)。 實施例7:製備6-(4-(2-(5-((5-第三丁基噁唑-2-基）甲基 硫）噻唑-2-基胺基）-2-側氧基乙基）苯氧基）己酸曱酯（化 合物11) 步驟7a·· 2-(4-(6-曱氧基-6-側氧基己基氧基）苯基）乙酸 (化合物0202-11) 標題化合物0202-1 1黃色固體（950mg，34%)係從化 1150-9131-PF/Kai 505 200829575 合物 0201 (0.76 g，5_〇1)及 5 —溴戊酸甲酯（2.22g，10 raraol)使用類似於針對化合物〇2〇2-9(實施例5)敘述之程 序製備·· HNMR(DMS0-〇r6)·· 512.22(s，1H)，7.14(d，/=8.4
Hz, 2H), 6.85(d, /=8. 4 Hz, 2H), 3. 92(t, /=6. 3 Hz, 2H), 3.47(s, 2H), 2.32(t, /=7._5„Hz, 2H), 1·69(πι，2H)，1.55(m, 2H), 14〇(m，2h)。 步驟7b: 6-（4 -（2-(5-((5-第三丁基噁唑-2-基）甲基硫）- 。塞唾-2-基胺基）-2-側氧基乙基）苯氧基）己酸甲酯（化合物 0203-11) 標題化合物0203-1 1黃色固體（63mg, 16%)係從化合 物0202-9使用類似於針對化合物〇2〇3 —9(實施例5)敘述 之程序製備：」H fMR(DMSO-A):十12· 6. 67(s, 1H), 4. Q2(s, 2H), 3. 89(t, 7=6. 3 Hz, 2H), 3. 63(s, 2H), 3. 55(s, 3H), 2. 30(t, /=7. 2Hz， 2H) 1.67(m，2H)，1.55(m，2H)，1.37(m，2H)，hii(s，9H)。 步驟7c: 6-(4-（2 -（5-((5-第三丁基。惡唾—2-基）甲基硫）一 σ塞嗤-2 -基胺基）-2 -側氧基乙基）苯氧基）己酸曱g旨（化人物 11) 標題化合物11黃色固體（82mg，42 %產率）係從化合 物0203-1 1 (1 93 mg，0.363 mmol)及新鮮製備的經基胺容 於甲醇之溶液（6· 0 mL)使用類似於針對化合物9(實施例5) 敘述之程序製備：4 nmr(dmso-a)·· 512.46(s 10.35(s，1H)，8.68(s，1H)，7.39(s，1H)，7.18(d，/=8 4 1150-9131-PF;Kai 506 200829575
Hz, 2H), 6.85(d, /=8. 4 Hz, 2H), 6.70(s, 1H), 4. 04(s, 2H), 3.92(t, >6.3Hz, 2H), 3. 65(s, 3H), 1.96(t, /=6.3 Hz, 2H), 1. 69(m, 2H), 1. 54(m, 2H), 1. 37(m, 2H), 1.143(s, 9H)。 實施例8:,製備，H呈基-7-(4-(2-(5-((5-異丙基噪ϋ坐一2 一 基）曱基硫）噻唑-2-基胺基）-2-側氧基乙基）苯氧基）庚醯 胺（化合物1 2 ) 步驟8a: 2-(4_(7-甲氧基-7-侧氧基庚基氧基）苯基）乙酸 ^ (化合物 0202-1 2) 標題化合物0202-1 2黃色固體（219mg，15%)係從化合 物0 2 01使用類似於針對化合物〇 2 0 2 - 9 (實施例5)敘述之 程序製備：NMR(DMSO-A): 5 12. 22(s，1H)，7. 14(d， /-8.1 Hz, 2H), 6.84(d, /=8.1 Hz； 2¾
Hz, 2H), 3.55(s, 3H), 3. 44(s, 2H), 2.30(t, /=7. 2Hz, 2H)，1·68(πι，2H)，1.54(m，2H), 1·35(ιη，4H)。 步驟8b:甲基7-(4-(2-(5 -（（5-第三丁基。惡唾—2-基）甲 基硫）-嗟唾-2-基胺基）-2-側氧基乙基）苯氧基）庚酸酯（化 合物 0203-12) 標題化合物0203-12黃色固體（100mg，26 %)係從化 合物0202-1 2使用類似於針對化合物〇203-9(實施例5)敘 述之程序製備：iH NMR(DMSO-A): 5 12. 45(s，1H), 7. 3 9(s, 1H), 7.20(d, /=8.4 Hz, 2H), 6.86(d, /=8.4 Hz, 2H), 6.69(s, 1H), 4.04(5, 2H), 3.91(t, /=6.3 Hz, 2H), 3-65(8, 2H), 3.57(s, 3H), 2.30(t, /=7. 2Hz, 2H), 1150-9131-PF;Kai 507 200829575 1.65(m, 2H), 1.51(m, 2H), 1.34(m, 4H), i.13(s, 9H) ° 步驟8c: #-經基-7-(4-(2-(5-((5__異丙基噁唑_2_基）甲基 硫）-塞嗤-2-基胺基）-2-侧氧基-乙基）苯氧基）庚醯胺（化 合物12) ^通化合物1 _2固體（6 5 mg，6 § %產率）係從化合物 0203-1 2( 95 mg，0.174 _〇1)及新鮮製備的羥基胺溶於甲 醇之溶液（10.0 mL)使用類似於針對化合物9(實施例5)敘 述之程序製備：]H NMR(DMSO-成5 12>45(δ? 1Η)> 10.33(8, 1Η), 8.66(s, 1H), 7. 39(S) iH), 7. 20(d, /=8.4 Hz, 2H), 6.87(d, /=8. 4 Hz, 2H), 6. 69(s, 1H), 4. 04(s, 2H), 3.91(t, /=6. 3 Hz, 2H), 3. 65(s, 2H), 3. 57(s, 3H), 2. 30(t’ /=7. 2Hz，2H)’ l.65(m，2H)， 153(m，烈）， 1. 34(mΓ 4H), 生物學試驗： 如同則述，本發明所疋義的衍生物，具有抗增生活性。 此等性質可例如使用一種以上下列程序評估· (a)—體外F/ird試驗，決定受測化合物抑制cM活性 之能力 材料：
CDK2/cyclinE (CDK2 之 Accession number: EMBL M68520，CyclinE1 之 Accessi〇n _ber: GenBank 匪一00 1 238): 末端6His-加標籤、重組全長CM2複合 末端GST-加標籤、重組全長cyclinE1。兩者皆由桿狀 病毒於Sf21細胞中表現。精製使用Ni2 + /NTA瓊脂。 1150-9131-PF;Kai 508 200829575 SDS-PAGE及考馬西（Coomassie)蘭染色，得合併之純度為 76%。CDK2 MW = 34kDa，cyclinEl MW = 74kDa。比活性 1336U/mg，其中CDK2/cy 1 inEl之1單位活性定義為於 °C每分鐘lnmol磷酸根進入〇.lmg/ml組蛋白 H1，最終 ATP 濃度為 ΙΟΟμΜ。緣素U、mg/ml 於…5QmM— Tris/HCl pj 7· 5、150mM NaCl、0· 03% Brij-35、0· ImM EGTA、〇· 2mM PMSF、
ImM 苯并肺（benzamidine)、0· 1% 2-疏基乙醇、27〇mM 藉 糖。 CDK6/cyclinD3(Accession number :CDK6 為 GenBank X66365、cyclin D3 為 EMBL M90814): N-末端、6His —加標 戴全長人類cdk6複合於N -末端 GST -加標籤全長人類 cycl in D3，表現於Sf 21細胞。精製使用谷胱甘肽—瓊脂， 以 C ΑΚ ^ 丽=38kDa(cdk6)i 中cdk6/cyclinD3活性的1單位，定義為於3〇〇c每分鐘 1 nmo 1鱗酸根進入〇 · 1 mg/m 1組蛋白Η1，最終ATP濃度為 ΙΟΟμΜ。酵素於 〇· 1 mg/mi 於 5〇mMTris-HC1、pH 7. 5、270mM 嚴糖、150mM NaCl，lmM 苯并脒、〇· 2mM PMSF、〇· 1% 2-疏 基乙醇、0· ImM EGTA、0· 03% Bri j 35。 組蛋白（Hist〇n)Hl(CDK2 & 6 之受質）：Sigma cat# H4524，分離之富離胺酸部分係來自小牛胸腺、純度93%、
Mw-21.5kDa’ 原濃度為於 20 mg/ml = 930/zM 溶於 DW。 反應緩衝液：20 mM HEPES(pH 7.5)、1〇 MgCl2、1 mM EGTA、〇· 02% Bri j 35、〇· 02 mg/ml BSA、〇· 1 NasVCh、 1150-9131-PF;Kai 509 200829575 2 mM DTT 。 [r -33P]-ATP: Perkin Elmer cat# NEG602H1MC (EasyTides)、l〇 mCi/ml = 10/zCi///l、100//1 於小瓶， 比活性= 3000 Ci/mm〇l、3·3-5//M 於 50mMTricine(pH7.6)， ίό έ» ^ ° 分析條件： CDK2/cyclinE: 〇·5 ηΜ CDK2/cyclinE 及 5/ζΜ Histon HI於反應緩衝液中，加上i# μ ATP及1% DMSO最後。於 室溫溫育2小時。 ATP轉換速率：4. 5% CDK6/cyclinD3: 50 nM CDK6/cyclinD3 及 5 // M Histon HI於反應援衝液中，加上μ ATP及1% DMSO最後。於 室溫溫育 g 小每―Γ————————————-――——―了 ATP轉換速率：13% (b)—體外（/a F/iro)試驗，決定受測化合物抑制HDAC酵 素活性之能力 HDAC抑制劑使用 HDAC 螢光測量試驗套組 (AK-500, Biomol、Plymouth Meeting、PA)蒒選。可將受試 化合物 >谷於一甲基亞石風（)，以得到2q視工作原濃 度。螢光使用WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad Prism(v4.0a) 緣圖’並且使用S型（si gmo i da 1)拋物線劑量-回應曲線適 合度演算法，計算IC50。 各試驗設定如下：將所有的套組成分解凍，於使用前保 1150-9131-PF/Kai 510 200829575 持在冰上。將HeLa核萃取物以1:29稀釋於試驗緩衝液（5〇 Tris/Cl . PH 8.0, 137 mM NaCl, 2.7 mM KC1, 1 mM MgC12)。製備Trich〇statinA(TSA，正控制組）及受測化 合物於試驗緩衝液（5x最終濃度）之稀釋物。將Η⑽r心 LysTM基稀釋於試驗緩衝液成1〇〇 uM(5〇倍=^最終）。 將Fluor de LysTM顯影劑濃縮物（例50 // 1 + 95〇// }試驗緩 衝液）於冷試驗緩衝液稀釋20倍。第二，將〇. 2 mM Trichostatin A 100-倍稀釋於1X顯影劑（例1〇// i於j ml;最終Trichostatin A濃度於lx顯影劑=2//M;添加 HD AC/受貝反應後之最終濃度=1 # μ)。添加試驗緩衝液、經 稀釋trichostatin Α或受測抑制劑，至微滴定盤之適當的 井。添加經稀釋之HeLa萃取物或其他HDAC樣本，至所有 井，除了負控制組。使經稀釋之Flu〇r de LysTM受質及樣 本在微滴定盤中平衡至試驗溫度（例如25或37°C )。藉由 添加經稀釋受質（25// 1)至各井並充份混合，以起始化HDAC 反應。使HDAC反應進行1小時，接著藉由添加Fiuor de LysTM顯影劑（50// 1)使反應停止。將平盤在室溫（25t：) 溫育10-15分鐘。在能於波長350-380 nm之範圍激發的微 滴定盤讀取螢光儀，讀取樣本，並偵測在440-460 nm發射 之光。 以下表9-B列舉本發明代表化合物及及其活性於HDAC and CDK分析。於此等分析，IC5G使用以下分級：I - 1 〇 // M， 1〇//Μ>ΙΙ>1/ζΜ，1/zMMIIMKIaM 及 IVS0.1//M。
表9 -B 1150-9131-PF/Kai 511 200829575 化合物編號 HDAC CDK2/cyclinE CDK6/cyclinD 1 I 2 II 3 II 4 III 5 III IV III 6 III IV III 7 IV IV III 8 III IV 9 III IV 10 III IV 第1 〇部分：
表丄0二A 化合物編號 結構 1 Λ η， 0 ctJ〇° 2 0 3 0 aJ〇° 1150-9131-PF;Kai 512 200829575 4 hjC-N^^Y^oh 0 C1^° 5 HjC-nv^^^anhoh 0 C1X?° 6 j^jj Ηιε-Ν\^^^^γΝν〇Η 0 、N， CIJ^° 7 身X) 。丫糾 Η〆%, φ^Λ/νΛΗ， 0 „J〇° 8 ，方VX) ογ^ 0 V、 Cp^NA^^Y^OH oH ° aJ〇° 9 h,c"N'ch, ύ 。 > 10 ίγΝΗ h)c*"N^chj φ^ΐ^^ΟΗ 0 ai^° 513 1150-9131-PF/Kai 200829575
Scheme 1 OBn 人 O^NH NaBH4/THF OBn 〇人r toluene, pTsOH o^° 0100 0101 i? nh2 HBr/HOAV ^ A ^ . H "O 0104
0105
0109, DCM EDCI, DMAP
1150-9131-PF;Kai 514 200829575
Scheme 2 OH
實施例1:製備（A〇 - 4-（4 -（（4’-氯聯苯-2-基）甲基）派唤-1~· 基）·Ί(4-(4-（（2-（經基胺基）-2-側氧基乙基）（甲基）胺 基）-1_(苯基硫）-丁- 2-基胺基）-3_石肖基苯基績酿基）节酿 胺（化合物1) 步驟la:U)-苄基5-側氧基-四氫呋喃-3-基胺基曱酸酯 (化合物0101) 對硼氫化鈉（8.38 g，0.223 mol)於 THF(290 ml)之攪 1150-9131-PF;Kai 515 200829575 拌的漿狀物，花3小時於rc添加咖（46g，〇ΐ85ιη〇ι) 於THF(29Gml)之溶液。於室溫㈣1小時後，將該反應混 口物小心地以6 N Hem化至pH 2，然後減壓濃縮至體積 為約1 /4。將侍到的溶液以水稀釋，i以醚分“欠萃取， …、後將口併的有機萃取物減壓濃縮至異質㈣。將黃色殘 渣倒入於含岸Ts0H⑽mg)之甲苯(2〇“υ，然後使用 Dean-Stark裝置將水共沸移除。將該混合物回流5小時 後將甲笨減壓移除以得到黏稠殘渣，以醚研磨得到 0101(37 g， 85%)白色晶體。LCMS·· 236 沱 NMR(DMSO^e)： ^ 2.39(dd, 1H, 6 Hz, /^Ιδ.ΟΗζ), 2.86(dd, 1Η, /；=8.1 Hz, Λ-Ι7.7 Hz), 4.11(dd, 1H, /；13： 6—HZL^9· 3 Hz^ 4.319(m, 1H), 4. 43(dd, 1H, 〜—...........................................—---------------—. — /,=6.0 Hz, Λ=9.0 Hz), 5.05(s, 2H), 7^^ _ 5H), 7. 88(d，1H, 7=4. 5 Hz) 〇 步驟lb:U)-苄基l-羥基-4—(甲基胺基）-4_侧氧基丁一 2 — 基胺基甲酸酯（化合物0102) 0101(5.04 g，21.4mmol)添加至甲胺（3106g，lm〇1) 於乙醇（100ml)之溶液’並攪拌15分鐘，於此期間，Qi〇i 逐漸溶解，並產生新的固體。將溶劑減壓蒸發以得到 0102(5· 016 g，88%)白色固體，用於次一步驟反應而不經 進一步純化。LCMS: 267 [M+l] + ; 4 NMR(DMSO-A): j 2.18(dd，1H，//=8.4 Ηζ，Λ=14·1 Hz)，2.31(dd，1H， /；=6.3 Hz, Λ-14.4Ηζ), 2. 54(d, 3H, /=5. 1 Hz), 3. 33(ra, 1H), 3. 82(m, 1H), 4. 703(m, 1H), 5. 00(s, 2H), 6. 98(d, 1150-9131-PF;Kai 516 200829575 1Η，/=8·4Ηζ)，7.35(m，5H)，7.68(m，1H)。 步驟lc:U)-苄基4-(甲基胺基）-4-側氧基-1-(苯基硫） 丁-2-基胺基甲酸酯（化合物0103) 將 0102(5.02 g，18.85 mmol)、（PhS )2(8. 23 g，37· 70 mmol)及 PBu3(9.44 g，40.98 mmol)於曱苯（100 ml)之溶 液，加熱至80°C並攪拌1 8小時。將混合物冷卻，添加石 油醚（5 0 0 m 1)。將沉澱過濾並以石油醚清洗，以得到 0103(5.45 g，80.7%)白色固體，用於次一步驟反應而不經 進一步純化。LCMS: 359 [M+1] + JHNMR(DMS0-A):汐 2.39(m， 1H), 2.55(d5 3H, >3. 9 Hz), 3. 068(m, 2H), 3. 33(m, 1H), 3.98(m, 1H), 5. 00(s, 2H), 7.18(m, 1H), 7. 35(m, 10H), 7·78(m， 1H)。 -一-——、〜……-一—— — “-、.-^〜 — 步驟Id: (7?)-3-胺基曱基-4-(苯基硫）丁醯胺（化合物 0104) 將 0103(5.4 g，15.06 mmol)溶解於乙酸（1〇〇 ml)及 40% HBr水溶液（9· lg)之混合物並授拌於8〇它達4小時。 冷卻後’將水（1 〇 〇 m 1)添加於此混合物，以二氯曱烧（5 m 1 X 2)萃取。將該溶液以6N K0H調整為PH=12，以二氯甲烷 (100 ml X 3)萃取，將萃取物以無水硫酸鈉乾燥，減壓蒸 發以得到0104(2.5 g，74%)無色油，用於次一步驟反應而 不經進一步純化。LCMS: 225 [Μ+1]+· 4 NMR(DMSO-A): Θ 2.11(dd, 1H, /；=7.8 Hz, /^=14.4 Hz), 2.31(dd, 1H, /^5.1 Hz, Λ=15.〇Ηζ), 2.56(d, 3H, /=4. 5 Hz), 2. 86(dd, 1H, /,= 6.6 Hz, /,= 12.6 Hz), 3. 03(dd, 1H, Hz, 1150-9131-PF；Kai 517 200829575 /,= 12.6 Hz), 3.12(m, 1H), 7. 17(m, 1H), 7. 33(m, 4H), 7. 86(m, 1H)。 步驟 le:U)-#-甲基-3_(2-硝基-4-磺醯胺基苯基胺 基）-4-(苯基硫）丁醯胺（化合物0105) 對 0104(2、5g，11.14mniol)於 DMF(36 ml)之溶液，添 加 4-氟-3-硝基苯磺醯胺（2.7g，12.26mmol)及 DIPEA(1.9 ml)。將該混合物攪拌達4小時。將溶劑於真空中蒸發並將 殘渣以矽膠管柱層析過濾（二氯甲烷/曱醇=50 :1)以得 0105(2· 6 g， 55%)黃色固體。LCMS·· 425 [Μ+1]+· !H NMRCDMSO-^)： ^ 2.55(d, 3H, /=5. 2Hz), 2. 63(m, 2H), 3.34(d, 2H, /=11.4Hz), 4. 38(ra, 1H), 7. 07(d, 1H, /=9.0
Hz), 7.23(ra, 7H), 7. 72(dd, 1H, //=2.1 Hz, /,= 9.0 Hz), 一.....— —.—--.·— .… • .. . ...... - --- . ΐ- -V-'' . 1 " t.·’·-.- - ' .... «... Λ -. --------------------—· . .. „ , .,. ..... 8. 〇〇(d, 1H, /-4. 5 Hz), 8. 39(d, 1H, /-2.1Hz), 8. 68(d, 1H, /=9· 6 Hz) 〇 步驟If :(们-4-（4-（甲基胺基）-1-(苯基硫）丁 -2-基胺 基）-3-硝基苯磺醯胺（化合物〇1〇6) 將 0105(2 g, 4.7 mmol)及 BH3於 THF(17 ml)之 1 Μ 溶液’攪拌16小時，並以甲醇（5 ml)及濃HC1 (2 ml)處理。 將得到的混合物攪拌於8 〇。〇達2小時，冷卻至室溫，以4 M NaWO3調整至pH=1〇。將該溶液以水稀釋（1〇〇 ml)，以 二氣甲烷（100 ml X 2)萃取。將萃取物濃縮，並以矽膠管 柱層析精製（二氣甲烷/甲醇=30:1)以得0106(1.2 g，62%) 黃色固體。LCMS: 411 [M+1 ]+· 4 NMR(DMS0-A) : θ 1. 90(m， 2H)^ 2.28(s, 3H), 2.61(t, 2H, /=6. 6 Hz), 3.36(m, 2H), H50-9131-PF；Kai 518 200829575 4.19(ffl, 1H), 7.22(m, 7H), 7.73(dd, 1H, /；=2. 7 Hz, 人二9.3 Hz)，8.39(d，1H，/=2.7 Hz), 8.52(m，1H)。 步驟lg:(A)-乙基2-(甲基（3-(2-硝基-4-磺醯胺基苯基胺 基）-4-(苯基硫）丁基）胺基）乙酸醋（化合物0107-1) 將 0106(313 mg，〇· 762 mm〇l)、2-溴乙酸乙 0·762 mmol) 、 Na2C〇3(323 mg, 3.05 mmol)於 DMF(11 ml) 之混合物，於50°C攪拌1 6小時。將DMF於真空争蒸發， 並將殘渣以矽膠管柱層析過濾（二氯曱烷/甲醇=30 :1)以得 f ： 0107-1(323 mg， 85%)黃色固體。LCMS: 497 [M+l]+ 。 j NMR(DMSO-^e)： ^ 1.15(t, 3H, /=7. 5 Hz), 1.83(m, 1H), 1.95(m, 1H), 2.24(s, 3H), 2. 54(ra, 2H), 3.21(s, 2H), 3. 38(m, 2H), 4. 04(q, 2H, /-7. 2Hz), 4. 16(ra, 1H), 7.22(m, 8H), 7.70(dd, 1H, /；-2. 7 Hz, /^=9. 3 Hz), 1H, /=2·7Ηζ), 8.52(d，1H，/=8.7Hz)。 步驟 lh:U)-乙基 2-((3-(4-(#-(4-(4-((4，-氯聯苯-2-基） ， 甲基）旅嗪-卜基）-苯曱醯基）磺醯胺基）_2-硝基苯基胺 基）_4-(苯基硫）丁基）（甲基）胺基）乙酸酯（化合物gbh) 將 0107(323 mg， 〇.651mmol) 、 0109(291 mg， 〇·71β mmol)、EDCI(155 mg，〇· 814 mmol)及 DMAP(40 mg，〇· 326 mmol)於無水二氯甲烷（4 ml)之混合物，於室溫攪拌16小 時。將該混合物以二氣曱烷（50 ml)稀釋，以濃鹽水清洗（5〇 ml )、以無水硫酸鈉乾燥、過濾並濃縮。將殘渣以矽膠管柱 層析過濾（二氯甲烷/甲醇=1〇〇:1)以得0108 —1(1〇7 mg， 18. 6%)黃色固體。LCMS: 443 [M/2 + l]+。 1150-9131-PF;Kai 519 200829575 步驟11:(们-4-（4_((4’-氯聯苯-2-基）甲基）哌唤—;1-基-（4-（4-((2-(輕基胺基）-2 -側氧基乙基）（甲基）胺 基）-1-(苯基硫）丁- 2-基胺基）-3 -硝基-苯基項醯基）苄醯 胺（化合物1) 對攪拌中經基胺氯化氫（4.67 g，67 mmol)於甲醇（24 ml)之溶液，於〇°C添加（5.61 g，100 mmol)氳氧化鉀於甲 醇（14 ml)之溶液。添加後，將該混合物於0°C攪拌30分 鐘，並靜置於低溫。將得到的沉澱分離以得到游離羥基胺 於曱醇溶液。 將 0108-1(107 mg，0· 121 mmol)及 NH2OH 溶液（1. 77 M， 3 m 1)之混合物，於室溫撲拌15分鐘。將該混合物以乙酸 調整為pH 7. 0。將該溶液濃縮至小體積，並添加及水。將 ------- …一. —. 1—十™. ..…_____ __· 沉澱過濾，將收集的固體以製備性HPLC精製，以得到化合 物 1(47 mg, 44. 6%)黃色固體· Μ·ρ· : 179〜201°C，LCMS: 872 [M+l] + . !H NMR(DMSO-^e): ^ 1.97(m, 2H), 2. 34(s, 3H), I ； 2.41(m, 4H), 2. 66(m, 2H), 3. 12(m, 2H), 3. 22(m, 4H), 3.35(m, 2H), 3.41(s, 2H), 4. 20(s, 1H), 6. 87(d, 2H, /=8. 4 Hz), 7.19(m, 7H), 7.49(m, 7H), 7. 75(d, 2H, /=8.1 Hz), 7.83(d, 1H, /=8.7 Hz), 8. 42(d, 1H, /-9.9 Hz), 8. 50(s，1H), 8. 95(s，1H)，10. 61(s，1H)。 步驟1 j:乙基4-(哌嗪-卜基）苯曱酸酯（化合物〇 11 〇) 將哌嗪（12· 80 g，0· 15 mol)、4-氟苯曱酸乙酯（8. 4 g， 0.05 mol)及 K2C〇3(13.80 g，0.10 m〇l)於 DMSO(20 ml)之 混合物，於1 2 0 °C攪拌6小時。將該混合物倒入水。將該 1150-9131-PF/Kai 520 200829575 混合物以乙酸乙酯萃取，將有機層以水及濃鹽水清洗、以 硫酸鈉乾燥、濃縮以得到化合物0110(12. 4〇g，83 %)白色 固體。LCMS: 235 [M+l]+。 步驟lk: 4-(4-(2-溴苄基）哌嗪-1-基）苯甲酸乙酯（化合物 0111) 將化合物 0110(3.778 g，16.10 mmol)、2~ 溴苄基溴 (4. 000 g，16. 10 mmol)，及 DIEA(3. 4 ml)於乙腈（32 ml) 之混合物，於室溫攪拌達2小時。將沉澱過濾以得到化合 物 0111(5.20g，80%)白色固體。LCMS: 403 [Μ + 1]+· 4 NMRCDMSO-^): ^ 1.29(t, /-7. 2Hz, 3H), 2. 55-2. 59(m, 4H), 3. 29-3. 34(m, 4H), 3. 60(s, 2H), 4.25(q, /=7. 2Hz, 2H), 6.97(d, /=9 Hz, 2H), 7.19-7.25(m, 1H), 7. 38(t, /=7.2Hz, 1H), 7.52(d, /=7. 2Hz, 1H), 7.61(d, /=7. 8 Hz, 1H)，7. 77(d，/=9 Hz, 2H)。 步驟11:乙基4-(4 -（（4，-氯聯苯-2-基）甲基）哌嗪—1-基） 苯甲酸酯 (化合物0112) 將化合物G111 (6· 915 g，〇· 〇17 mol )、4-氯苯基有機 硼酸（3.520 g，0.023 mol)、雙（三苯基膦）鈀二氯（24〇呢， 0.340 mmol)及 2 Μ 碳酸鈉（11·25 mL)於 7:3:2 DME/水 / 乙 醇（100 mL)之混合物’於90°C攪拌5小時。將該混合物冷 卻至室温並以乙酸乙醋萃取。將萃取物以無水硫酸鈉乾 燥、過濾，並濃縮。將殘渣以矽膠管柱層析過濾（乙酸乙酯 /石油醚=2/5)以得到產物（6· 40 g，86· 7 %)。LCMS. 435 1150-9131-PF;Kai 521 200829575 [M+l ]+。 步驟Ιπκ 4 -（4-((4’-氯聯苯-2-基）曱基）哌嗪-1-基）苯曱 酸（化合物0109) 將化合物0112(2.40 g，5.53 mmol)及氫氧化鋰水合 物（0 · 7 〇 g，1 6 · 6 8 mmo 1)於混合溶劑二噁烷（4 6 m 1)及水（18 ml)之混合物，於95°C攪拌整夜。將溶劑減壓移除並將殘 渣以1 M HC1 (15 mL)處理、過濾以得到化合物0109(2. 10 g， 93 %)白色固體。LCMS: 407 [M+l]+。 實施例2:製備（们-4-（4-（（4, -氣聯苯-2-基）甲基）哌嗪-1-基）-（4-（4-（（3-(羥基胺基）-3-侧氧基丙基）（曱基）胺 基）-1-(苯基硫）-丁 -2-基胺基）-3-硝基苯基磺醯基）苄醯 胺（化合物2) - a -- - —.I. V 一〜——〜叫一, …—l.. 如—......…--一——….....—, 步驟2a:(们-甲基3-(曱基（3-(2-硝基-4-磺醯胺基苯基 胺基）-4-(苯基硫）-丁基）胺基）丙酸酯（化合物〇1〇7-2) 標題化合物0107-2黃色固體（247 mg, 45.0%)係從化 合物 01 06(454 mg, 1. 11 _〇1)、3-溴丙酸曱酯（185 mg， 1. 11 ramol)、Na2C〇3(469 mg，4· 44 _〇1)於 DMF(15 ml)使 用類似於針對化合物0107-1(實施例1)敘述之程序製備： LCMS: 497 [M+l]+ 。 步驟 2b: U)-甲基 3-（（3-(4-(^(4-（4-（（4,-氯聯苯-2-基）甲基）哌嗪-l-yl)苯甲醯基）磺醯胺基）-2-硝基苯基胺 基）-4-(苯基硫）丁基）（曱基）胺基）丙酸酯（化合物0108-2) 標題化合物0108 - 2黃色固體（231 mg, 52.5%)係從化 合物 01 07-2(247 mg，0.497 mmol)，0 1 09(222 mg，0.547 1150-9131-PF;Kai 522 200829575 mmol)、EDCI(119 mg，〇· 621 mmol)及 DMAP(31 mg, 〇· 249 匪〇 1)使用類似於針對化合物〇丨q 7 —丨（實施例丨）敘述之程 序製備：LCMS: 443 [Μ/2 + ：Π+。 步驟2c: U)-4-（4-（（4’ -氣聯苯_2-基）甲基）哌嗪〜^ 基）-#-（4-(4-（（3-（羥基胺基）一3一側氧基丙基）（甲基）胺 基）-1-(苯基硫）丁-2-基胺基）-3-硝基苯基磺醯基）苄醯胺 (化合物2 ) 標題化合物2黃色固體（53 mg，38. 4%)使用類似於針 對化合物1(實施例1)敘述之程序製備：Mp: 13〇〜138 °C。LCMS·· 886 [M+l]+. 4 NMR(DMS0-A):汐 2· 05(m，2H)， 2.29(s, 3H), 2.40(m, 6H), 2. 98(m, 4H), 3.17(m, 6H), 3.39(s, 2H), 4.20(s, 1H), 6. 83(d, 2H, /=8.4 Hz), 6.99(d, 1H, /-9. 3 Hz), 7. 41(m, 13H), 7. 73(d, 2H,
Hz), 7.82(d, 1H, /=9 Hz), 8. 28(d, 1H, /=8.1 Hz), 8.47(s, 1H), 8.88(s，1H), 10.56(s，1H)。 實施例3:製備U)-4-(4-( (4,-氣聯苯-2-基）甲基）-哌嗓 -：1-基）-^(4-（4-((4-(羥基胺基）-4-側氧基丁基）（甲基） 胺基）-1-(苯基硫）丁-2-基胺基）-3-硝基苯基磺醯基）节醯 胺（化合物3) 步驟3a:(^P)-乙基4-(曱基（3-(2-琐基-4-績醯胺基苯基胺 基）-4-(苯基硫）-丁基）胺基）丁酸酯（化合物〇1〇7-3) 標題化合物0107-3黃色固體（198mg，52%)係從化合 物 0106(300mg，0.731 mmol)、4-溴丁 酸乙酯（143 mg, 〇. 731 mmol)、Na2C〇3(310 mg, 2·924 mmol)於 DMF(10 ml)使用類 1150-9131-PF;Kai 523 200829575 似於針對化合物01 0 7-1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 525 [M+l]+. NMRCDMSO-^): ^ 1.15(t, 3H, /=6. 9 Hz), 1.60(m, 2H), 1.83(m, 1H), 1.95(m, 1H), 2. 09(s, 3H), 2.22(m, 5H), 3. 36(m, 2H), 4.01(q, 2H, /=6.9 Hz), 4.12(m, 1H), 7.06(d, 1H, /=9.0 Hz), 7 ·27(m, 7H), 7.72(dd, 1H, //=2.1, Λ=9. 0), 8.40(d, 1H, /=2.1 Hz), 8· 50(d，1H，/=9. 3 Hz)。 步驟 3b:U)-乙基 4-（（3-（4-(，（4-(4-((4’-氣聯苯-2-基） f " 甲基）哌嗪-：l-基）-苯甲醯基）磺醯胺基）-2-硝基苯基胺 基）-4-(苯基硫）丁基）（甲基）胺基）-丁酸酯（化合物 0108-3) 標題化合物0108-3黃色固體（150 mg，43.6%)係從化 合物 0 1 07-3( 1 98mg，0.377mmol)，0109(230 mg，0.566 mmol)、EDCK108 mg，0. 566 _〇1)及 DMAP(23 mg，0. 189 mmol)使用類似於針對化合物〇l〇8-1(實施例1)敘述之程 (」 序製備：LCMS: 457 [Μ/2 + 1Γ·沱 NMR(DMS0-Α): β 1. 16(t， 3H, /=7. 2Hz), 1.76(mr 2H), 2. 06(m, 2H), 2. 32(t, 2H, /=7.5 Hz), 2.40(m, 4H), 2. 55(m, 3H), 2. 80(m, 4H), 3.16(m, 4H), 3. 24(m, 2H), 3. 39(s, 2H), 4. 04(q, 2H, /=6. 9 Hz), 4.12(m, 1H), 6. 82(d, 2H, /=9. 0 Hz), 6. 97(d, 1H, /=9.6 Hz), 7.47(m, 14H), 7. 73(d, 2H, /=8. 7 Hz), 7.82(d, 1H, /-9. 6 Hz), 8. 24(d, 1H, /=8.4 Hz), 8. 48(s, 1H) ° 步驟3c: (^-4-(4-( (4’ -氣聯苯-2-基）曱基）哌嗪-1 一 1150-9131-PF;Kai 524 200829575 基(4-((4-(經基胺基）〜4〜側氧基丁基）（曱基）胺 基）-1-(苯基硫）丁 -2-基胺基硝基-苯基磺醯基）节隨 胺（化合物3) 標題化合物3黃色固體（19 mg，12·8%)使用類似於針 對化合物1(實施例1)救述之程序製備：lcms: 900 [Μ + 1] + · WNMIUDMSO-A): β 1·64(,，2H)，i.93(m，4H)，2 67(m，· 2Η), 2.40(m, 6Η), 3.13(m, 4H), 3. 38(s, 2H), 4. 06(s, 1H), 6.79(d, 2H, /=9.3 Hz), 6.86(d, 1H, /=9.6 Hz), 7.32(m, 14H), 7. 73(m, 3H), 8. 32(m, 1H), 8.43(s, 1H), 8· 70(m，1H)，10. 42(m，1H)。 實施例4:製備（们-4-（4-((4’-氯聯苯—2-基）甲基）一哌嗓 -卜基(4-(4-((5-（羥基胺基）-5-侧氧基戊基）（曱基） «屮〜的….‘r、L 〜 胺基）-l-(苯基硫）丁 - 2-基胺基）-3~硝基苯基磺醯基）苄醯 胺（化合物4) 步驟4a:(A) -甲基5-（甲基（3-(2-硝基-4-石黃醯胺基苯基 胺基）-4-(苯基硫）-丁基）胺基）戊酸酯（化合物〇1 〇7-4) 標題化合物0107-4黃色固體（194mg, 51%)from化合 物 01 06 (30Omg，0· 731 mmol)、5-溴戊酸甲酯（143 mg，0· 731 mmol)、Na2C〇3(310 mg, 2· 924 mmol)於 DMF(l〇 ml)使用類 似於針對化合物01 07-1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 525 [M+l]+. !H NMRCDMSO-^e)： ^ 1.36(m, 2H), 1.44(m, 2H), 1.83(m, 1H), 1.95(m, 1H), 2. 08(s, 3H), 2. 24(m, 5H), 2.44(m, 1H), 3. 35(m, 2H), 3. 56(s, 3H), 4.12(m, 1H), 7. 06(d, 1H, /=9. 3 Hz), 7. 32(m, 8H), 7.71(dd, 1H, 1150-9131-PF;Kai 525 200829575 //-2.4, /,= 9.0), 8.41(d, 1H, /=1.5Hz), 8.51(d, 1H, /=8.4 Hz) 〇 步驟 4b:(疋)-甲基 5-（（3-(4--（4-（4-( (4’ -氯聯苯-2-基）甲基）哌嗪-1-基）苯甲醯基）磺醯胺基）-2-硝基苯基胺 基）-4 -(苯基硫）丁基）（甲基）胺基）戊酸酯（化合物〇 1 〇 8 - 4 ) 標題化合物0108 - 4黃色固體（167 mg，49.4%)係從化 合物 01 07-4( 1 94mg，0.370mmol)，01 09(225 mg，0.555 mmol)、EDCI(106 mg, 0· 555 mmol)及 DMAP(230 mg，0. 189 匪ol)使用類似於針對化合物0108-1 (實施例1)敘述之程 序製備：LCMS: 457 [M/2 + 1]' 4 NMR(DMS0-Α): θ 1· 45(m， 3H), 2.32(m, 3H), 2.40(m, 4H), 2.60(m, 2H), 2. 72(m, 2H), 3.07(m, 3H), 3. 14(m, 4H), 3.25(m, 2H), 3. 56(s, 2Η), 4.06(m, 1Η), 6.79(d, 2Η, /=775 Hz), 6.90(m7 lH), 7.26(m, 6H), 7. 49(m, 5H), 7. 75(m, 2H), 8.16(d, 1H, /=7, 2Hz), 8.28(d, 1H, /=8.6 Hz), 8. 44(d, 1H, /-2.1 Hz) 〇 步驟4c:(A)-4 -（4-((4’ -氯聯苯-2 -基）曱基）旅嗓一1一 基）-（4-(4-((5-（經基胺基）-5-侧氧基戊基）（甲基）胺 基）-1-(苯基硫）丁-2-基胺基）-3 -硝'基苯基績醯基）苄醯胺 (化合物4) 標題化合物4黃色固體（50 mg, 30%)使用類似於針對 化合物1(實施例1)敘述之程序製備：Μ. p. : 126〜130°C， LCMS: 914 [M + l]+. NMR(DMS0-A)汐 l.47(m，4H)， 1.95(m, 2H), 2.10(m, 2H), 2.40(m, 4H), 2. 64(m, 3H), 1150-9131-PF/Kai 526 200829575 3.15(m, 4H), 3. 39(s, 2H), 4.10(m, 1H), 6. 80(d, 2H, /-8. 7 Hz), 6.93(d, 1H, /-9.0 Hz), 7. 24(m, 7H), 7. 48(m, 6H), 7.72(d, 2H, /=8.7 Hz), 7.81(d, 1H, /=9.6 Hz), 8.21(m，1H), 8.46(d, 1H，/二 2.1 Hz), 8.70(s, 1H)， 10.38(s, 1H) 〇 實施例5:製備U)-4-(4-((4，-氯聯苯-2-基）甲基）—哌嗪 -1-基）-#-（4-（4 -（（6-（經基胺基）-6-侧氧基己基）（甲基） 胺基）_1-(苯基硫）丁-2-基胺基）-3 -頌基苯基確S篮基）节醢 胺（化合物5) 步驟5δ:(Α) -乙基6-（曱基（3-(2 -确基-4-績酿胺基苯基胺 基）-4 -(苯基硫）-丁基）胺基）己酸g旨（化合物0107 - 5) 標題化合物0107-5黃色固體（220 mg, 54. 5%)係從化 合物 0106(300mg，0.731 mmo 1 )、6 -漠己酸乙酉旨（163 mg, 0· 731 mmol)、Na2C〇3(310 mg，2· 924 mmol)於 DMF(10 ml) 使用類似於針對化合物0107-1(實施例1)敘述之程序製備： LCMS: 553 [M + l]+. ]H NMR(DMSO-^e): ^ 1.17(m, 5H), 1.31(m, 2H), 1.45(m, 2H), 1.81(m, 1H), 1.96(m, 1H), 2.08(s, 3H), 2.20(m, 4H), 2. 43(m, 2H), 3. 33(m, 2H), 4.03(q, 2H, /=6. 9 Hz), 4.12(m, 1H), 7. 04(d, 1H, /=9.6 Hz), 7.30(m, 7H), 7. 69(dd, 1H, //=2.1, Λ-9. 0), 8. 39(d, 1H, /=2.1 Hz), 8.51(d, 1H, /=8.7 Hz)。 步驟 5b:U)-乙基 6-((3-（4-（#-(4-(4-((4’-氯聯苯-2-基） 曱基）哌嗪-1-基）苯曱醯基）磺醯胺基）-2-硝基苯基胺 基）-4-(苯基硫）丁基）（曱基）胺基）-己酸酯（化合物 1150-9131-PF;Kai 527 200829575 0108-5) 標題化合物0108 - 5黃色固體（165 mg，48%)係從化合 物 0107-5(202mg, 0·365mmol)， 0109(163mg, 0.402mmol) 、 EDCI(87mg， 0.457 mmol)及 DMAP(190mg，
0.1 52 _〇l)於無水二氯甲烷（2· 6 ml )使用類似於針對化合 物0108-1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS:471[M/2 + l]+· !H NMR(DMSO-^e): 6Γ 1.21(ιη, 5H), 1.51(m, 4H), 2. 09(m5 2H), 2.26(t, 2H, /=6. 6 Hz), 2. 28(m, 4H), 2. 60(m, 3H), 3 · 15 (m，4 H)，3 · 3 9 (s，2 H)，4 · 0 6 (m, 3 H)，6 · 8 0 ( d，2 H， /=9. 3 Hz), 6.93(d, 1H, /=9. 6 Hz), 7. 48(m, 13H), 7. 72(d, 2H, /=9.3 Hz), 7.82(d, 1H, /=9.6 Hz), 8. 18(m, 1H), 8.47(s， 1H)。 步驟:氣聯苯:2:1了f基—)哌嗪―卜 基）_於（4-(4-((6-(羥基胺基）_6_側氧基己基）（甲基）胺 基）-1-(苯基硫）丁-2-基胺基）_3_硝基_苯基磺醯基）节醯 胺（化合物5) 標題化合物5黃色固體(1“g，28%)使用類似於針斟 化合物1(實施例1)敘述之程序製備H 928 [叫广4 /=7.5 Hz)，2.09(m，2H)，2 4〇u，4H)，2 66(s， 2.91(m，2H)，3.13(m，6H)，3.41(m，4H)，4. 13(心 6.80(d, 2H, /=9. 3 Hz), 6. 93(d, 1H, /=9. 3 Hz), 7.
腫⑽’㈨：^ L2G(m，2H)，1. 48(ra，4H)，1.93(t，2H 3H) 1H) 26(m 8H), 7.48(m, 6H), 7 ί〇 r A οτγ r 、 0
^2(d, 2H, /=8. 7 Hz), 7. 82(dd, iH //=1. 8 Hz, /^=9. 0 Hz") 〇 1n/ , ^ nz;> 8.19(m, 1H), 8.46(d, 1H, /.2. 4 1150-9131-PF;Kai 528 200829575
Hz)， 8.68(s， 1H)， 10.35(s， 1H)。 貫施例6:製備（A)-4 -（4 -（（4，-氯聯苯-2 -基）甲基）-旅σ秦 -卜基）（4-（4-（（7-（羥基胺基）-7-側氧基庚基）（甲基） 胺基）-1-(苯基硫）丁 -2-基胺基）-3-硝基苯基磺醯基）苄醯 胺(化合物6) 步驟6a:(A)-乙基7-(曱基（3-(2-硝基-4-磺醯胺基苯基胺 基）-4-(苯基硫）-丁基）胺基）庚酸酯（化合物〇1〇7-6) 標題化合物0107-6黃色固體（224mg，54%)係從化合 ί '物 01 06 (300mg，0· 731 mmol)、7-溴庚酸乙酯（173 mg，0. 731 _〇1)、Na2C〇3(310 mg，2· 924 mmol)於 DMF(10 ml)使用類 似於針對化合物01 0 7-1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 567 [M+l]+. !H NMRCDMSO-^e)： ^ 1.16(m, 7H), 1.30(m, ..—........〜 — 〜人 __— 2H), 1.45(m, 2H), 1.81(m, 1H), 1.96(m, 1H), 2. 09(s, 3H), 2.22(m, 4H), 2.46(m, 2H), 3. 33(m, 2H), 4. 03(q, 2H, /=6.9 Hz), 4.12(m, 1H), 7.05(d, 1H, /=9.6 Hz), r : 7.33(m, 7H), 7. 70(m, 1H), 8.40(s, 1H), 8. 54(d, 1H, /=8.1 Hz) 〇 步驟 6b:(i〇 -乙基 7-((3-(4 -(4-(4-((4’-氯聯苯-2-基） 曱基）哌嗪-1 -基）苯曱醯基）石黃醯胺基）-2 -硝基苯基胺 基）-4-(苯基硫）丁基）（曱基）胺基）-庚酸酯（化合物 0108-6) 標題化合物0108-6黃色固體（190 ml, 41%)係從化合 物 0 1 07-6(220mg, 0.395 mmol), 0 1 09(241mg, 0.593 ramol)、EDCI(94 mg, 0· 494 mmol)及 DMAP(240 mg，0· 196 1150-9131-PF;Kai 529 200829575 _〇1)使用類似於針對化合物〇1〇8_1(實施例1)敘述之程 序製備：LCMS: 478 [M/2 + 1].· 4 匪R(DMSO-A):汐 1· 16(t， 3H, /=7. 5 Hz), 1.25(m, 5H), 1.49(m, 3H), 2.10(m, 2H), 2.25(t， 2H, /=7. 2Hz), 2. 40(m, 4H), 2. 60(m， 3H)， 2. 85^ 2H), 3.15(m, 4H), 3. 24(m, 2H>, 3, 39(s, 2H), 4.03(q, 2H, /=7. 2Hz), 4. 08(m, 1H), 6.80(d, 1H, /=9.3 Hz), 6.93(m, 1H), 7. 38(m, 13H), 7.76(m, 4H), 8.19(d, 1H，/=7.5 Hz), 8.46(d，1H，/=1.5Hz)。 步驟6c:(/0-4 -（4 -（（4’ -氯聯苯-2-基）甲基）旅嗪一卜 基）一#-(4-(4-((7-（羥基胺基）-7-側氧基庚基）（甲基）胺 基）-1-(苯基硫）丁- 2-基胺基）-3 -頌基苯基續酿基）节酿胺 (化合物6) 標題化合物6黃色固體（6 0 mg, 33%)使用類似於針對 化合物1(實施例1)敘述之程序製備：M.p，： 125〜130。(：。 LCMS: 942 [Μ+1Γ· 4 NMRCDMSO-A): Θ 1.21(m，4H)， 1. 46(m, 4H), 1· 92(t, 2H， /=5. 2Hz), 2. 10(m, 2H), 2.40(m, 4H), 2. 58(s, 3H), 2.85(m, 4H), 3. 14(m, 4H) 3.35(m, 2H), 3. 39(s, 2H), 4. 09(m, 1H), 6.80(d, 2H, /=8.7Hz), 6.93(d, 1H, /=9.3Hz), 7. 26(m, 7H), 7.48(m, 6H), 7.73(d, 2H, /=9.0 Hz), 7.81(dd, 1H, /；=1.8 Hz, /,= 9.0 Hz), 8.21(m, 1H), 8.46(d, 1H, /=1. 8 Hz), 8. 67(s 1H)， 10.34(s， 1H)。 實施例7:製備(4-( (4’ -氣聯苯-2-基）甲基）〜 旅嗓_1-基）-5-（4-（4-（一甲基胺基）_1-（苯基硫）丁—2 —基 1150-9131-PF;Kai 530 200829575 胺基）-3_确基苯基績醯基胺甲醢基）苯基）—N5—經基戊二醯 胺（化合物7 ) 步驟7a:篇*三7"羞4 -氟-3 -确基苯曱酸酯（化合物〇2〇1) 對4-氟-3-硝基苯曱酸（370 mg, 2 _〇1)溶於1〇 mL t-BuOH 之溶液，添力a (Boc)2〇(872 mg，4 _〇1)及 dMAP(24 mg，0· 2 ramo 1)。將該溶液攪拌達24小時。將溶劑蒸發。 將殘渣溶於乙酸乙酯並以IN HC1清洗。將分離的有機相 發。將殘渣使用矽膠閃式管柱層析，以12. 5% EtOAc/石油 f _洗提，以得到化合物 0201 (240mg， 8%)。4 NMRCDMSO-i/e): ^ 1.55(s, 9H)? 7. 69(m, 1H), 8. 26(m, 1H), 8.48(m, 1H)。 步驟7 b :第三丁基3 -石甫基-4 -（派嗪-1 一基）苯甲酸g旨（化 合物0202) 將哌嗪（451 mg，5.2 mmol)、第三丁基4-氟_3-硝 基-苯甲酸酯（211 mg，0· 9 mmol)及 K2C〇3(234 mg，1. 7 _〇1) ， 於DMF(10 ml)之混合物，於120°C攪拌6小時。將該混合 物倒入水及以乙酸乙酯萃取。將有機相以水清洗（1 00 m 1 )、於真空中濃縮。將殘渣以矽膠閃式管柱層析過濾，以 25%乙酸乙酯/石油醚洗提，以得0202( 1 90 mg，7〇· 7%)。 LC-MS: 308 [Μ+1]+· 4 匪 R(CDCh): J 1.58(s，9H)， 1.84(s, 1H), 3.01(m5 4H), 3. 12(m, 4H), 7. 03(d, /-6.0 Hz, 1H), 8.02(dd, /-2.1, 6.0 Hz, 1H), 8. 33(d, /-2.1 Hz， 1H)。 步驟7c:第三丁基4-(4-(2 -溴苄基）旅唤-i —基）_3 -石肖基 1150-9131-PF;Kai 531 200829575 苯曱酸酯（化合物0203) 將 0202(262 mg，0.85 _〇1)，2-溴苄基溴（161 mg, 0·65 mmol)及 DIEA(149 mg, 1·3 mmol)於乙腈（6 mi)之混 合物，於2 5 °C攪拌達2小時並過濾。將固體施用矽膠管柱 層析，以6酸乙酯洗提，以得到0203(320 mg，78· 7%)。 LC-MS: 476 [M+l ] + 〇 ]H NMRCCDCh) ： δ 1.57(s, 9H), 2. 67(t, /=4.8 Hz, 4H), 3.18(t, J = 4. 8 Hz, 4H), 3. 66(s, 2H), 7.03(d, /=8.4 Hz, 1H), 7. 12(m, 1H), 7. 28(m, 1H), 7.45(m, 1H), 7. 56(m, 1H), 8. 〇〇(dd, /=2.1, 6.0 Hz, 1H), 8. 33(d，/=2. 1 Hz，1H)。 步驟7d:篇二7~基4-（4-（（4，-氯聯苯-2-基）甲基）旅嘻 -1-基）-3-硝基苯甲酸酯（化合物〇2〇4) 將 0203(160mg, 0.3mmoiy、4 -氯苯基#戒蝴酸（5 〇· 3 mmol)、雙（三苯基膦）鈀二氯（7 mg，0· 01 mmol)及 2M 碳酸鈉（0.15 mL)於混合溶劑DME/水/乙醇（7/3/2，5 πιΙ〇 之混合物，於9 0 °C攪拌整夜並以乙酸乙酯萃取。將萃取物 乾燥（MgSOO、過濾，並濃縮。將殘渣以矽膠閃式管柱分析 過濾，以5%-40%乙酸乙酯/石油醚洗提，以得到 0204(90 mg, 52. 7%)〇LC-MS: 508 [M+l]+. ^ NMR(CDCls) ： ^ 1.57(s, 9H), 2.50(t, /=4.8 Hz, 4H), 3.10(t, J-4. 8 Hz, 4H), 3.43(s, 2H), 7.00(d5 /=8.7 Hz, 1H), 7. 25(m, 1H), 7.32(m5 2H), 7. 35(m, 4H), 7.49(m, 1H), 8.00(m, iH)> 8. 32(d，/=2. 1 Hz，1H)。 步驟7e:第三丁基3-胺基-4-(4-((4氯聯苯-2-基）曱 1150-9131-PF;Kai 532 200829575 基）-哌嗪-1-基）苯甲酸酯（化合物0205) 將化合物 4705( 1 3· 4 g，26 mmol)溶於甲醇（300 ml)， 並將該溶液加熱至60°C。於該溶液，添加鐵粉末（14. 6 g， 260 mmol)及稀 HC1(2· 3 g 於 10 mL CH3〇H)。將該混合物 攪拌4小時，然後將溶劑於真空移除。將殘渣以石夕膠閃式 管柱層析過濾，以10% MeOH/CH2Cl2洗提以得到0205(6. 0 g， 50.3%hLC-MS: 478 [Μ+1]+· 4 匪R(CDC13):汐 1.55(s， 9H), 2.52(br, 4H), 2.91(br, 4H), 3. 39(s, 2H), 3.91(s, 2H), 6.95(m, 1H), 7. 24(m, 1H), 7. 33(m, 4H), 7. 38(m, 4H)，7. 52(m，1H)。 步驟7f:第三丁基4-(4-((4，-氯聯苯-2-基）甲基）哌嗪 -1-基）-3-（5-曱氧基-5-側氧基戊醯胺）苯甲酸酯（化合物 0206-7) ——— 對 0205(1 g， 2 mmol)及 DIEA(516 mg， 4 mmol)於 CH2C12(20 ml)之混合物，於〇°C添加5-氯-5-側氧基戊酸 甲酯（343 mg, 2 _〇1)。然後將該混合物回溫至室溫並授 拌1小時。將溶劑於真空中移除，並將殘渣施用矽膠管柱 層析，以25% EtOAc/石油醚洗提，得 0206-7( 1. 03 g， 81· 1%)。LC-MS: 60 6 [Μ+1] + · 4 NMR(CDCh)·· θ 1· 57(s，9H)， 2.04(ra, 2H), 2.45(m, 4H), 2. 54(br, 4H), 2. 84(t, /-4.5 Hz, 4H), 3.46(S, 2HRS), 3. 66(s, 3H), 7.11(m, 1H), 7.23(m, 1H), 7. 38(m, 6H), 7. 57(m, 1H), 7.71(m, 1H), 8. 23(s，1H), 8· 87(s, 1H)。 步、驟 7g: 4-(4-( (4’ -氯聯苯-2-基）曱基）哌嗪-1 一 1150-9131-PF/Kai 533 200829575 基）-3-(5-甲氧基-5-側氧基戊醯胺）苯曱酸（化合物 0207-7) 對 0206-7(900 mg，1·5 mmol)於 CH2CI2UO ml)之溶 液/4、加一氟乙酸（1 m 1)。將得到的混合物於室溫授拌整 夜。將溶劑於真空中移除以得到0207—7(760 mg，93·2%)。 將化合物用於次一步驟反應而不經進一步純化。LC_MS: 550 [M+1]+ 。 步驟7h:U)-节基4-(二曱基胺基）_4_侧氧基_丨_(苯基硫） 丁-2-基胺基曱酸酯（化合物0208) 將化合物 0101(24 g, 〇·1 mol)添加至 Me2NH(45 g，1 m〇l)於CHAMSOO ml)之溶液。將該混合物攪拌整夜。以 過濾收集該固體。添加曱苯（5〇〇 mL)使固體溶解，再加入 (PhS)2(32. 7 g, 0. 15 混合物加熱至80°C並攪拌18小時。將溶劑於真空中移 除將殘渣施用矽膠閃式管柱層析，以50% Et〇Ac/石油醚 洗提，以得 0208(1 3· 4 g，35· 3%)。LC-MS: 373 [Μ+1] + ·沱 NMR(CDCla)：^ 2.46(m, 1H), 2. 82(s, 3H), 2. 84(s, 3H), 2·88(πι，1H)，3·20(πι，ih)，3·33(ιη，1H)，413(ιη，1H), 5.〇7(s，2H)，6.30(d，/=9·0 Hz， 1H)，715(m，1H)， 7· 32(m，9H)。 步驟7i:U)-3 —胺基—N，N —二曱基—4_(苯基硫）丁醯胺（化合 物 0209): 於 0208(664 mg，ΐ·8 麵〇1)於 12 mL HOAc 之溶液， 於至溫添加HBr(432 mg，40%水溶液）。將該混合物加熱 1150-9131-PF;Kai 534 200829575 至8 0°C並攪拌2小時。將該混合物以Κ0Η調整為pH>12， 以EtOAc萃取。將萃取物以水清洗並乾燥。將溶劑於真空 中移除以得到0209 (305 mg, 71.8%)。產物使用於次一步 驟反應而不經進一步純化。 ^ ^ 7 j . (^) Hy N-^ ^ ^ S^. ^ ^ ά 基）-4-(苯基硫）丁醯胺（化合物0210): 將 0209(424 mg，1.8_〇1)、4_ 氟-3-硝基-苯磺醯胺 (396 mg, 1· 8 mmol)及 DIPEA(232 mg，1· 8 mmol)於 DMF(10 mL) 之溶液攪拌4小時。將該混合物倒入水，並以EtOAc (5 0ml) 萃取。將萃取物以水清洗、乾燥（NadCh)、濃縮。將殘渣施 用於矽膠閃式管柱層析，以5% MeOH/CH2Cl2洗提以得 021 0(680 mg, 87. 2%)。LC-MS: 439 [M+l] + . NMRCDMSO-^e)： ^ 2. 77(8, 3H), 2. 89(s, 3H), 3. 00(m^^ 3.40(d, /-6. 5 Hz, 2H), 4.40(b, 1H), 7. 06(d, /-10.0 Hz, 1H), 7.19(m, 1H), 7.25(m, 2H), 7. 32(m, 4H), 7. 72(m, 1H), 8. 38(d, /-2,3 Hz, 1H), 8. 75(d, /-10.0 Hz, 1H) 步驟7k: (#)-4-(4-（二甲基胺基）一i一（苯基硫）丁 —2 —基胺 基）-3 -梢基苯續醯胺（化合物〇 211) 將化合物 0210(6. 7g, 15 mmol)及 1M BH3 於 THF(30 ml) 之混合物’授拌1 6小時。對得到的混合物，承加Me〇H(8ml ) 及濃HC1 (3 ml)並將該混合物於80°C攪拌3小時。將該混 合物冷卻至室溫’以4M Na2C〇3調整為pHl 〇。對此混合物 添加乙酸乙酯（300 mL)。將分離的有機層以水清洗（7〇 m 1)、乾燥（MgS04)、過滤並濃縮。將殘渣施用秒膠閃式管 1150-9131-PF;Kai 535 200829575 柱層析，以 20% Me0H/CH2Cl2 洗提以得 0211(3.0 g， 46.3%)°LC-MS: 425 [M+l]+. WNMRCCDCh): Θ 1.86(m， 1H), 2.04(m, 1H), 2.21(s, 6H), 2. 30(m, 1H), 2. 50(m, 1H), 3.13(d, /=5.7Hz, 2H), 4.00(m, 1H), 5. 22(br, 2H), 6. 74(d, 7=9. 3 Hz, 1H), 7. 23(m, 3H), 7. 34(m, 2H), 7.72(d, /=9. 3 Hz, 1H), 8. 63(s, 1H), 8. 97(d, /=8. 1 Hz, 1H)。 步驟71:(i〇-甲基5-(2-(4-（（4’-氣聯苯-2-基）曱基）哌 嗓-1-基）-5-(4-( 4-(二甲基胺基）-1 -（苯基硫）丁-2-基胺 基）-3-硝基苯基磺醯基胺曱醯基）苯基胺基）—5-侧氧基戊 酸酯（化合物0212-7) 將 0207-7(549 mg， 1 mm〇l) 、 0211(297 mg, 〇· 7 —一….一一-- υν-· —^ 〜价〜 他〜― ww.l
、EDAC(390 mg, 2 mmol)及 DMAP(244 mg, 2 mmS 於二氯甲烷（20 ml)之混合物於25°C攪拌整夜。將該混合 物以飽和NhCKlOO ml)清洗、乾燥（MgS〇4)、過濾，並濃 縮。將殘渣施用矽膠閃式管柱層析，以5%曱醇/CH2Cl2洗 提以得到 0212-7(32411^，48.4%)。1^-1^:956 [1«+1]+·1!! NMR(DMSO-^6 + D2〇)： ^ 1.79(m, 2H), 2. 07(m, 2H), 2.31(m5 4H), 2.48(m, 4H), 2.67(s, 6H), 2. 74(m, 4H), 3. 03(m, 2H), 3.31(m, 2H), 3. 40(s, 2H), 3. 52(s, 3H), 4. 05(m, 1H), 6.90(m, 1H), 7. 25(m, 5H), 7. 35(m, 2H), 7.50(m, 5H), 7.59(m, 1H), 7. 79(m, 1H), 8.10(d, /-9.0 Hz, 1H), 步驟7m: 2-(4-（（4’ -氣聯苯一2-基）甲基）哌嗪―；[一 1150-9131-PF;Kai 536 200829575 基）-5-(4^(4-(二甲基胺基）-1 -（苯基硫）丁 — 2-基胺基）一 3一 硝基苯基磺醯基胺甲醯基）苯基）-N5-羥基戊二醯胺（化合 物7)
將化合物0212-7(100 mg，〇·1 mmol )添加於飽和NH2OH 於甲δ?· (0，5 6 in L, 1 · 7 6 in ο 1 / L )溶液。將該混合物於超音波 下反應5分鐘。然後將該混合物以稀HOAc中和。將溶劑於 真空中移除。將殘渣以製備性液體層析過濾以得到7(20 mg， 20.9°/〇黃色固體.仏？：146它.111題以關30-^/6+〇2〇):/ 1.76(m, 2H), 2. 00(br, 4H), 2. 26(m, 2H), 2. 36(m, 4H), 2. 64(m, 1 OH), 3.01(m, 2H), 3.15(m, 1H), 3. 29(m, 1H), 3.41(m, 2H), 4. 05(m, 1H), 6.91(m, 1H), 7. 04(m, 6H), 7.31(m, 8H), 7. 55(ra, 1H), 7. 72(m, 1H), 8. 04(s, 1H), 8.31(s，lH)。 〜—〜—————————-—--- 實施例8:製備U)-以-(2-(4-（（4’ -氯聯苯-2-基）曱基）-旅嗪-1-基）-5 -（4 -（4-(二甲基胺基）-1-(苯基硫）丁—2 一基 胺基）-3-梢基苯基石黃醯基胺甲醢基）苯基）-N6-經基己二醯 胺（化合物8) 步驟8a:農二7"省4-(4-((4，-氯聯苯-2-基）甲基）派口秦 -1-基）-3-(6 -乙氧基-6 -側氧基己醢胺）苯曱酸酯（化合物 0216-8) 標題化合物021 6-8(500 mg， 75. 4%)係從化合物 0 205(500 mg, 1 mmol)、DIEA(250 mg，2 mmol)及乙基 6- 氣-6-側氧基己酸酯（192 mg，1 mmol)使用類似於針對化合 物206-7(實施例7)敘述之程序製備：LC-MS·· 634 [Μ+1] + · 1150-9131-PF/Kai 537 200829575 !H NMRCCDCla)： ^ 1.25(t? /=7. 4 Hz, 3H),1.57(s, 9H), 1.69(m, 4H), 2. 34(m, 4H), 2. 55(br, 4H), 2. 84(br, 4H), 3.47(s, 2H), 4.12(q, /=7. 4 Hz, 2H), 7. 14(g, /=2. 1 Hz, 1H), 7.26(m, 2H), 7.40(m, 6H), 7. 52(m, 1H), 7.31(dd, >2· 1，8· 1 Hz，lH)，8· 19@ 步驟 8b: 4-(4-（（4’ -氯聯苯-2-基）甲基）哌嗪-1一 基）-3-(6-乙氧基-6-侧氧基己醯胺）苯甲酸（化合物 0207-8) 對 0206-8(500 mg，0.79 _〇1)於 CH2C12(10 ml)之溶 液，添加三氟乙酸（1 ml )。將該溶液於室溫攪拌整夜。將 溶劑於真空中移除以得到0207-8(380 mg，83. 2%)。產物 使用於次一步驟反應而不經進一步純化。LC-MS: 578 [M+l]\ !Η NMR(CDCls): ^ 1.22(t, /=7. 2Hz, 3Η), 1.62(br, 4Η), 2.30(br, 4Η), 2. 93(br, 4H), 3.19(s, 2H), 3. 54(s, 2H), 4.03(q, /=7. 2Hz, 2H), 4. 47(s, 2H), 6. 98(m, 1H), 7.24(m, 3H), 7.30(m, 1H), 7.45(m, 4H), 7. 57(m, 1H), 7. 74(m，1H)，8· 20(s，1H)，8· 58(s, 1H)。 步驟8c:(及）-乙基6-（2-（4 -（（4’-氯聯苯-2-基）曱基）派嗓 -1-基）-5-(4-（4-(二甲基胺基）-1 -（苯基硫）丁 —2-基胺 基）-3-硝基苯基磺醯基胺甲醯基）苯基胺基）-6-側氧基己 酸酯（化合物0212-8) 將 0207-8(480 mg， 0.8 mmol) 、 0211(293 mg， 0.7 mmol) 、 EDAC(191 mg， 1 mmol)及 DMAP(122 mg， 1 mmol) 於二氣甲烧（2 0 mL )之混合物，於2 5 °C攪拌整夜。將該混 1150-9131-PF;Kai 538 200829575 合物以飽和NlhCl (1 00 mL)清洗，並乾燥（MgS04)、過濾 並濃縮。將殘渣施用矽膠閃式管柱層析，以15%肀錄 /CH2CI2 洗提以得到 〇212*~8(420 mg， 60.0%)。 NMR(DMSO-A):汐 1·13(ΐ, /二7·4Ηζ，3H)，1.52(br，4H)’ 2. 1 0 (m, 2 Η ), 2, 3 0 (in, 4 Η ), 2. 55 (m, 4 Η ), 2. 7 2 (s, 611 ^ 2.84(m, 4H), 3. 09(m, 2H), 3. 28(ra, 2H), 3. 42(ra, 2il), 3.97(q, /=7.4 Hz, 2H), 4.12(s, 1H), 6. 96(m, 7.00(ra, 1H), 7.15(m, 3H), 7. 18(m, 1H), 7. 26(m, 7.30(m, 2H), 7.39(m，1H), 7.48(m, 4H)，7.60(m, 1H)， 7.80(m，1H)，8·20(ιη，1H)，8.48(m，1H)，8.80(s，1H)， 9. 5(br， 1H)。 步驟8d: (iO-yf -（2-(4-（（4’ -氯聯苯-2-基）甲基）哌唤-1 一 基）- 5-（4 -（4-（二甲基胺基）-1 -（苯基硫）丁—2-基胺基）-3 -琐基苯基石黃醢基胺甲醯基）苯基經基己二醯胺（化合 物8) 〇 將化合物0212-8(100 mg, 0.1 mmo 1)添加至飽和NH2OH 於甲醇（0· 56mL，1 · 76 mol/L)溶液。將該溶液超音波振盪 5分鐘。然後將該混合物以乙酸中和。將溶劑於真空中移 除。將殘渣以製備性HPLC過濾以得到化合物8(2〇 mg, 20. 6%)黃色固體。Μρ· :150°C。LC-MS: 971 [M+l]+. 4 NMR(DMSO~i/6+D2〇) ： δ 1.50(br, 4Η), 1.95(m, 2H), 2. 05(m, 2H), 2.29(m, 2H), 2.49(br, 4H), 2. 66(s, 6H), 2. 72(br, 4H), 3.04(m, 2H), 3.30(m, 2H), 3.40(m, 2H), 4.05(m, 1H), 6.86(d, /=9.6 Hz, 1H), 6. 94(d, /=8.1 Hz, 1H), 1150-9131_PF;Kai 539 200829575 7.18(m, 6H), 7.31(m, 2H), 7. 47(m, 5H), 7. 55(d, /=8.1 Hz, 1H), 7.78(d, /=9. 0 Hz, 1H), 8.17(br, 1H), 8.39(s, 1H)。 實施例9··製備U)-#-(2-(4-((4，-氯聯苯—2-基）甲基）旅 嗓-1 -基)- 5 - ( 4 -( 4 -（二甲基胺基)一卜 基）-3-硝基苯基磺醯基胺甲醯基）苯基）羥基辛二醯胺 (化合物9) 步驟9a:茗三7*差4-(4-((4,-氯聯苯-2-基）甲基）哌嗪 -1-基）-3-（8-曱氧基-8一側氧基辛醯胺）苯曱酸酯（化合物 0206-9) 將化合物 0205(500 mg，！ _〇1)及 ΜΕΑ(193 呢，15 mm〇l)^2Q mL CH.Ch之l合物’冷卻至代。於此溶液添 加 8-側氧基辛im216- 氯 mg，1 mmol)。將該混合 物回溫至室溫並攪拌〗n士 h時。將溶劑於真空中移除，並將 殘潰施用於石夕膠管挺；k 曰析，以25% EtOAc/石油醚洗提，以 得 0206-9(630 mg π 0 g， 92·7%) 。 LC-MS: 648 [Μ+1]' 4 NMRCDMSO-^/e)： ^ 1 3qr • 9(m，2H)，1. 53(s，9H)，1· 64(m，4Ηλ 1. 75(m, 2H), 2.3〇(m 9ϋλ 、 5 2H), 2.38(m, 2H), 2. 50(b, 4H), 2.84(t, /-5.7 Hz, au\ 0 、 4HX 3.46(s, 2H), 3.66(s, 3H), 7.14(m, 1H), 7.26(m ιυλ 、 !H), 7.39(m, 5H), 7.51(m, 1H), 7. 73(m, 1H), 8. 19(s , VS，邝），8. 88(m, 1H)。 步驟 9b: 4-(4-(U，〜& 氣聯苯-2-基）曱基）旅唤-1 - 基）-3-(8-甲氧基-相，丨斤β 1則氧基辛醯胺）苯甲酸（化合物 0207-9) 1150-9131-PF;Kai 540 200829575 對於化合物 0206-9(720 mg, 1· 1 mmol)於 10 mL CH2CI2 之溶液’添加1 mL三氟乙酸。將該溶液於室溫攪拌整夜， 將溶劑於真空中移除以得到產物〇2〇7 —9(55〇呢，83.6%)， 使用於次一步驟反應而不經進一步純化。[e-MS: 592 [M+l]+〇 步驟9c: (i〇 -甲基8-(2-（4-((4,-氯聯苯-2-基）甲基）哌 嗪-1-基）-5-(4-(4-(二甲基胺基）-1-(苯基硫）丁 —2-基胺 基）-3-硝基苯基磺醯基胺甲醯基）苯基胺基）_8_側氧基辛 礞 酸酯（化合物0212-9) 將化合物 02 0 7-9(540 mg，0. 9 mmol)、021 1 (38 7 mg, 0· 9 mmol)、EDAC(382 mg, 2 mmol)及 DMAP(244 mg，2 mmol) 於二氯甲烷（20 mL)之混合物，於25°C攪拌整夜。將該混 ........ -……....- 匕.… ................................. 『. 合物以飽和NH4C1(100 ml)清洗，乾燥（MgS04)、過濾，並 濃縮。將殘渣施用矽膠閃式管柱層析，以15%曱醇/CH2C12 洗提以得到 0212-9(423 11^,46.7°/〇。1^.3:9 98 [1«+1] + · !H NMRCDMSO-i/e): 5 1.26(m, 4H), 1.50(ra, 4H), 2. 07(m, 2H), 2.22(m, 4H), 2.46(m, 4H), 2. 67(s, 6H), 2. 76(b, 4H), 3.04(ra, 2H), 3.40(m, 2H), 3. 54(s, 3H), 4. 05(m, 1H), 6.89(d, /-10.0 Hz, 1H), 6. 98(d, /-10.0 Hz, 1H), 7.18(m, 1H), 7.25(m, 3H), 7. 29(m, 2H), 7. 37(m, 2H), 7.47(m, 5H), 7. 58(m, 1H), 7.81(m, 1H), 8.12(d, /-10.0 Hz, 1H)，8.22(s, 1H)，8.44(m，1H)，8.67(s，1H)。 步驟9d:(A)U2-(4-((4’ -氯聯苯-2-基）甲基）°底唤-1-基）-5-（4-（4-（二曱基胺基）-1-(苯基硫）丁-2-基胺基）-3- 1150-9131-PF;Kai 541 200829575 石肖基苯基確醢基胺甲醯基）苯基）-f ~·經基辛二醯胺（化合 物9) 0 將化合物 021 2-9(300 mg, 〇·3 mmol)添加至 ΝΗ2ΟΗ 於 曱醇（1 · 7 m 1，1 · 76 mo 1 /L)飽和溶液。將該混合物超音波 振盪5分鐘。然後將該混合物以乙酸中和。將溶劑於真空 中移除。將殘渣以製備性HPLC過濾以得到化合物9 (丨7 mg， SJ^hlNMRCCDsOD): ά 1.32(m，6H)，1.59(m，4H)， 2.06(m, 2H), 2.19(m, 2H), 2.35(ra, 2H), 2. 88(s, 6H), f 2.94(b, 4H), 3.26(m, 2H), 3.31(m, 6H), 4. 04(s, 1H), 6.80(m, 1H), 7.07(m, 3H), 7.21(m, 2H), 7. 32(ra, 1H), 7.39(m, 2H), 7.45(m, 5H), 7. 68(m, 2H), 7. 80(m, 1H), 8· 31(s, 1H)，8. 58(πι，1H)。 生物學試驗： 如同前述，本發明所定義的衍生物，具有抗增生活性。 此等性質可例如使用一種以上下列程序評估： I (a)Bc1 — 2及Bel-XL競爭結合（螢光極化）試驗 背景:
Be 1 2及Be 1 -xL為抗細胞凋亡蛋白質，其生物學功能 可被原細胞凋亡蛋白質例如Bak、Bad及Bax經由蛋白質 父互作用而抑制。抗細胞凋亡蛋白質與原細胞凋亡蛋白質 之間的交互作用，主要由Bak， Bad， Bax之 Bcl-2H〇m〇l〇gy(BH)3 結構域結合於 Bcl_2 及 Bcl—xL 之疏 水性溝而進行。已證βΗ3肽單獨誘發細胞凋亡，鼓勵了設 計或鑑別一化學化合物，能利用阻斷Bcl_2或Bcl-xL與其 1150-9131-PF;Kai 542 200829575 下游結合夥伴之交互作用，而模擬BH3肽之作用。此等化 學化合物期待以高親和性與Bc卜xL或Bcl_2蛋白質之疏水 性溝結合。一經標記BH3肽可用於競爭結合並監控化=物 與Bcl-2及Bcl-xL蛋白質之間的交互作用。 理由及方法： 從 CalBi〇chem(l97216)購入一 26—mer 螢光素 (flU〇reSCein) 標 記 之 BH3 肽 (NLWAAQRYGRELRRMSDKFVD)。Bel-xL 或 Bcl—2 及肽之交互 作用瓜成此螢光極化試驗之基礎。游離及快速翻滾之B⑽ 標記肽會相關於經激發光之極化平面，發射隨機的光，造 成較低之極化（mP)值。當此肽結合於Bcl-xl或Bcl —2，複 合體翻滾減慢，且發射的光被極化，造成較高的mP值。此 競爭結合試驗係於96-井盤中實施，且各試驗包含i及 ΙΟΟηΜ之經標記肽，及精製Bel-xL(R&D System, 894-BX-050)或 Bc卜 2 蛋白質⑽ System, 827-BC-050)。此分析緩衝液包括i2〇mM磷酸納（pjj 7. 55)、 0. 01% BSA及0· 1%疊氮化鈉。化合物於dms〇稀釋，並添 加至农終为析液濃度為2〇uM至2nM。mP值於3小時室溫溫 育後’以BioTek Synergy II減去背景值決定。 (b)—體外（//? 試驗，決定受測化合物抑制HDAC酵 素活性之能力 HDAC抑制劑使用HDAC螢光測量試驗套組 (AK-500, Biomol、Plymouth Meeting、PA)篩選。可將受試 化合物》谷於一曱基亞硬（DMS0)，以得到20 πιΜ工作原濃 1150-9131-PF/Kai 543 200829575 度。螢光使用WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad PriSm(v4e〇a) 緣圖’並且使用S型（s i gmo i da 1)拋物線劑量-回應曲線適 合度演算法，計算IC50。 各試驗設定如下：將所有的套組成分解;東，於使用前保 持在冰上。將HeLa核萃取物以1 : 29稀釋於試驗緩衝液（5〇 mM Tris/Cl ^ PH 8.0, 137 mM NaCl, 2.7 mM KC1, 1 mM MgC12)。製備Trichostatin A(TSA,正控制組）及受測化 合物於試驗緩衝液（5x最終濃度）之稀釋物。將Flu〇rde LysTM基稀釋於試驗緩衝液成1〇〇 uM(50倍=2x最終）。 將Fluor de LysTM顯影劑濃縮物（例50// H950 // 1試驗緩
衝液）於冷試驗緩衝液稀釋2 0倍。第二，將〇 · 2 mM * ...... —一—_...” — __
Trichostatin A 100-倍稀釋於ιχ顯影劑（例1〇/7厂 ml;最終Trichostatin A濃度於1X顯影劑=2//M;添加 HDAC/受質反應後之最終濃度=1//趵。添加試驗緩衝液、經 稀釋trichostatin A或受測抑制劑，至微滴定盤之適當的 井。添加經稀釋之HeLa萃取物或其他HDA(：樣本，至所有 井，除了負控制組。使經稀釋之Flu〇r de LysTM受質及樣 本在微滴定盤中平衡至試驗溫度（例如25或3rc )。藉由 添加經稀釋文貝（25 // 1 )至各井並充份混合，以起始化hdac 反應。使HDAC反應進行1小時，接著藉由添加Flu〇r心 LysTM顯影劑（50 /z 1)使反應停止。將平盤在室溫（25它） μ月10 15分釦。在能於波長35〇 —38〇11111之範圍激發的微 滴疋盤靖取螢光儀，讀取樣本，並偵測在發射 1150~9131-PF;Kai 544 200829575 之光。 以下表 1 O-Β列舉本發明代表化合物及及其活性於 HDAC及Bel-2分析.於此等分析，IC5〇使用以下分級：I ^ 10// Μ, 10/ζ Μ>ΙΙ>1 β Μ, 1 β Μ>ΙΙΙ>0. 1 μ Μ 及 IV S 0 · 1 // Μ 〇 表 10_Β
化合物編號 HDAC Bel-2 1 II IV 2 III 3 III 4 III 5 III 第11部分 表 11-Α R50，N/Cy50
(XIV) 化合物編號 結構
1150-9131-PF;Kai 545 200829575 6 7 8 Ο^Λο^^Υ^οη 9 〇Λ〇^αΝ- 10 、Nxr · 11 σϋ、 12 、χτ rj^Y^N Ο 13 、χτ ού^ν、。Η 0 14 、χτ (Χ^^Λ，η 15 、Νχτ、 αΧ^ν、。Η ο 16 〇iw^a,〇H 17 ccX。人。η 18 、xr CCA/O^H^ 1150-9131-PF;Kai 546 200829575
、 19 20 0 21 οΧ〇^λν,η 22 0 23 ccXu, 24 〇όυ^ν、〇Η 25 σ、 Οόο^χ, 26 、xr 0 27 I 28 、Nxr ο 29 、xr 1150-9131-PF;Kai 54 7 200829575
Scheme 1
104
Scheme 2
實施例1 :製備於羥基-6-（4-（（4一曱氧基苯基）（甲基）胺 基）喹唾啉-2-基胺基）己醯胺（化合物4) 步驟la· 2-氯-#-(4-甲氧基苯基）喹唑啉—4-胺（化合物 102) 將化合物2, 4_二氯喹唑啉101(9.9 g，50 mmol)及化 合物4-甲氣基苯胺（6.15 g，50 mmol)於甲醇之混合物， 於室溫攪拌達2小時。將反應物蒸發並將殘渣以管柱層析 使用乙酸乙酯/石油醚（5/1)作為洗提液過濾，以得到化合 1150-9131-PF/Kai 548 200829575 物 102(8.1 g， 55 %): LC—MS: 286 [M+1]+。 步驟lb· 2-氣-f(4—甲氧基苯基）_，甲基喹唑啉一4一胺（化 合物103) 對化合物 102(8· 1 g，28· 4 _〇1)於 DMF(150 mL)之溶
液’添加NaE(L 幾分鐘，接著加入CH31(6· 0 5 g，42· 6 mmol)。加入後，將 該混合物於室溫攪拌18小時。將反應物以乙酸乙酯稀釋， 並以水及濃鹽水清洗、乾燥並濃縮以產生粗製產物，以管 柱層析精製，使用乙酸乙酯/石油醚（5/1)作為洗提液以得 到化合物103黃色固體（7·2 g，· 51 %產率）：LC-MS: 3〇〇 [M + 1]+。 步驟^ 胺基）己酸甲酯（化合物1 〇4一4) 將K0H(248.6 mg，4.44 _〇1)添加至甲基6-胺基己 酸酷氣化！L(0.806 g，4·44 mmol)於甲醇（10 mL)之溶液， 並將該混合物於室溫攪拌丨〇分鐘。然後將溶液移除，添加 DMA (10 mL)及化合物 103(0.19 g，0.635 mmo 1)。將該混 合物於120°C攪拌3小時。將DMA減壓蒸發及添加50此 乙酸乙S旨。將該混合物以水清洗，以無水硫酸納乾燥及濃 縮以得化合物104-4白色固體（170 mg，65 %): LC-MS: 409 [M+1]、 步驟Id· 羥基-6-(4 -（（4-甲氧基苯基）（甲基）胺基）啥唾 琳-2 -基胺基）己醢胺（化合物4) 製備羥基胺於甲醇之溶液：羥基胺氯化氫（4. 67g，6了 1150-9131-PF;Kai 549 200829575 mmol)溶解於曱醇（24 mL)以形成溶液A。氫氧化鉀（5· 61 g， 100 mmol)溶解於曱醇（14 mL)以形成溶液b。將溶液a冷 卻至0 °C，並將溶液B滴加至溶液A中。將該混合物於〇 °C攪拌3 0分鐘。將沉澱過濾掉，形成濾液為羥基胺於甲醇 之溶液々 對含化合物1 04-4(340 mg, 0.831 _〇ι)之燒瓶，添 加羥基胺於甲醇之溶液（5. 0 mL)。將該混合物於室溫攪拌 1小時並接著以乙酸調整為p Η 7。將混合物濃縮以得到一 ξ ： · 、 ' 殘渣，過濾並以水清洗以得到產物4白色固體（15〇 mg，44 %): LC-MS: 410 [M+l] + ; NMRCDMSO-i/e)： ^ l〇.35(s, 1H) 7.31(m, 2H), 7.15(d, /-9.0 Hz, 2H), 6. 96(d, /=9. 0 Hz, 2H), 6.76(m, 2H), 6.61(m, 1H), 3. 77(s, 3H), 3. 42(s, 3H), 1.97(t, /-7.2Hz, 2H), 1.58(m, 4H), 1. 35(m, 2H)； 'H NMR(DMSO-^6 + D2〇)： ^ 7. 30(m, 2H), 7. 22(d, /=9. 〇 Hz 2H), 6.93(d, /-9.0 Hz, 2H), 6. 80(m, 1H), 6. 77(ra, iH), ( 3. 73(s, 3H), 3. 38(s, 3H), 3. 31 (t, /=7. 2Hz 2H) 1.94(t，/=7·2Ηζ, 2H), 1.52(m, 4H), 1.32(m，2H)。 實施例2:製備於羥基-7-(4-((4-甲氧基苯基）（甲基）胺 基）喹唑啉-2-基胺基）庚醯胺（化合物5) 步驟2a.甲基7-（4-((4-甲氧基苯基）（甲基）胺基）唆唾 啉-2-基胺基）庚酸酯（化合物104 - 5) 標題化合物1 04-5(400 mg, 89 %)係從化合物1〇3(3〇6 mg, 1. 022 mmol )、7-胺基庚酸乙酯氣化氫（1· 5 g，7 156 mmol)及K0H(400 mg，7. 156 mmol)使用類似於針對化人物 1150-9131-PF/Kai 550 200829575 104-4(實施例1)敘述之程序製備：LC-MS: 437 [Μ+1Γ。 步驟2b _ 羥基-7-（4 -（（4-曱氧基苯基）（甲基）胺基）喹唑 啉-2-基胺基）庚醯胺（化合物5) 標題化合物5(90 mg，23 %)係從化合物1〇4-5(40 0 mg， 〇 ·以 似於針對化合物4(實施例1)敘述之程序製備：LC-MS: 424 [M+l]+. 'H NMRCDMSO-i/e): δ 10.37(s, 1H), 8. 72(s 1H), 7.32(m, 2H), 7.15(d, /=8. 7 Hz, 2H), 6. 97(d, /=8. 7 Hz, 2H), 6.81(m, 2H), 6. 65(m, 1H), 3. 78(s, 3H), 3.43(s, 4H), 1.97(t, /=7.2Hz, 2H), 1.55(m, 4H), 1.33(m, 4H); !11 NMR(DMSO-i/6 + D2〇) : δ 7.31(m, 2H), 7. 14(d, /=8. 4 Hz, 2H), 6.96(d, /-8. 4 Hz, 2H), 6.81(m, 1H), 6. 63(m, 1H), 3. 77(s, 3H), 3. 41(s, 3H), 3. 34(m, 2H), 1.96(1:, /=7.2Hz 2H), 1.56(m，4H)，1.33(m, 4H)。 實施例3:製備羥基-8 -（4-((4-甲氧基苯基）（甲基）胺 基）喹唑啉-2-基胺基）辛醯胺（化合物6) 步驟3a.曱基8-（4 -（（4-曱氧基苯基）（曱基）胺基）喹唑 啉-2-基胺基）辛酸酯（化合物104-6) 標題化合物 104-6(114 mg, 26 %)係從化合物 1 03(0.299 g，1 mmol)、8-胺基辛酸甲酯氯化氫（6.51 g， 31.05 mmol)及 Κ0Η(1·739 g，31.05 mmol)使用類似於針 對化合物104-4(實施例1)敘述之程序製備：LC-MS: 437 [M+l]+。 步驟3b. 羥基-8-（4-（（4-甲氧基苯基）（甲基）胺基）喹嗅 1150-9131-PF；Kai 551 200829575 琳-2 -基胺基）辛醯胺（化合物6 ) 標題化合物6(21 mg，18 %)係從化合物ι〇4 6(114 μ， 0.261 mmol)及新鮮製備的經基胺甲醇溶液（2以）使用類 似於針對化合物4(實施例1)敘述之程序製備：LC_MS: 438 [M+l]+. VH NMRCDMSO-^) ： 10. 32(s, 1R), 8. 66(s, 1H>, 7.05(m, 2H), 7.22(m, 2H), 7. 〇〇(m, 2Η)> 6> 76(m> 2H)> 3.78(s, 3H), 3.47(s, 3H), 3. 38(m, 2H), l.94(t, /=7.5 Hz’ 2H)，1.62(m，2H)，1.49U，2H)，l32(m，6H)。 實施例4:製備於羥基-5-(4-((4 一曱氧基苯基）（曱基）胺 基）喹唑啉—2-基氧基）戊醯胺（化合物9) 步驟4a. 5-(4-((4-甲氧基苯基）（曱基）胺基）喹唑啉_2_基 氧基）戊-卜醇（化合物201-9) 將NaH(0_6 g，0.015 mol)於攪拌中於70°C添加至戊 -1，5-二醇（1〇·4 g，〇· 1 mol)。添加化合物1〇3並將該混 合物70 C於攪拌3小時。反應後，將該混合物以乙酸乙酯 稀釋’並以水及濃鹽水清洗、乾燥並濃縮得到化合物 201-9( 1.768 g, 48 °/〇)： LC-MS: 368 [M+l]+o 步驟4b· 5-（4-（（4-曱氧基苯基）（甲基）胺基）喹唑啉-2-基 氧基）戊酸（化合物202-9) 對化合物 20卜9( 1.768 g，48 mmol)於丙酮（150 mL) 之溶液’於0°C滴加J0ne，s試劑（i〇 mL)。添加後，將該 混合物於室溫授拌1小時。添加異丙醇（丨〇 mL )添加並攪 摔。將得到的固體過濾移除，並將濾液蒸發以留下殘渣， 將其以乙酸乙酯萃取。將乙酸乙酯以水並以濃鹽水清洗、 552 1150-9131-PF;Kai 200829575 乾燥並濃縮得化合物202-9(1· 44 g，79 %)。LC-MS·· 382 [M+l]+ 。 步驟4c·曱基5-(4 -（（4-曱氧基苯基）（曱基）胺基）喹唑 啉-2-基氧基）戊酸酯（化合物203-9)
對化合物202-9(1—U 之溶液，於0°C滴加S0C12(2 mL)。添加後，將該混合物於 室溫攪拌16小時。將反應物蒸發以得到化合物203-9( 1.4 g， 94 %): LC-MS: 396 [M+l]+ 。 步驟4d· 羥基-5-(4-((4-甲氧基苯基）（甲基）胺基）喹唑 啉-2-基氧基）戊醯胺（化合物9) 標題化合物9(98 mg，50 %)係從化合物203-9( 1 97.5 mg, 0.5 mmol)及新鮮製備的羥基胺甲醇溶液（5 mL)使用 類似於針對化合物4(實施例1)敘述之程序製備：LC-MS: 397.1 [M+l] + ； ]H NMRCDMSO-^/e): ^ 10.39(s, 1H), 8.71(s, 1H), 7.51(m, 2H), 7. 23(d, /=9. 0 Hz, 2H), 7. 00(d, /=9.0 Hz, 2H), 6.89(m, 2H), 4. 35(t, >6. 0 Hz, 2H), 3. 79(s, 3H)，3.46(s，3H), 2.05(t, /=6·9Ηζ, 2H)，1·72(πι，4H)。 實施例5··製備於羥基-6-(4-((4-甲氧基苯基）（甲基）胺 基）喹唑啉-2-基氧基）己醯胺（化合物1〇) 步驟5a· 5 -（4-((4-甲氧基苯基）（甲基）胺基）喹唑啉-2-基 氧基）戊-1-醇（化合物201-10) 標題化合物201-1 0(2.204 g，51 %)係從化合物 1 03(2. 99 g，〇· 〇1 m〇l)、NaH(0· 6 g, 0· 015 mol)及己烷 -1，6-二醇（11· 8 g， 0· 1 m〇l)使用類似於針對化合物 1150-9131-PF;Kai 553 200829575 20卜9(實施例4)敘述之程序製備·· LC-MS: 382 [M+l]+。 步驟5b. 6-（4 -（（4-曱氧基苯基）（甲基）胺基）喹唑啉-2-基 氧基）己酸（化合物202-1 0 ) 標題化合物 202-1 0(2.204 g，96 °/〇係從化合物 201- 10((2. 204 g，5· 8 類似於針對化合物202-9 (實施例4)敘述之程序製備： LC-MS: 396 [M+l]+ 。 步驟5c·甲基6-(4 -（（4-甲氧基苯基）（甲基）胺基）喹唑 啉-2-基氧基）己酸酯（化合物203-1 0) 標題化合物 203-1 0(1.995 g， 88%)係從化合物 202- 1 0(2.2 g，5.54mmol)，S0Cl2(3mL)&Me0H(35mL) 使用類似於針對化合物203-9(實施例4)敘述之程序製備： LC-MS: 410 [Mll]+ 〇 步驟5d. 經基-6-(4 -（（4-曱氧基苯基）（曱基）胺基奎唾 琳-2-基氧基）己醯胺（化合物10) 標題化合物10(35 mg，17%)係從化合物203-1 0(204.5 mg，0·5 mmol)及新鮮製備的羥基胺甲醇溶液（5 mL)使用 類似於針對化合物4(實施例1)敘述之程序製備：LC-MS: 411 [M + l] + ; !H NMRCDMSO-^e): ^ 10.37(s, 1H), 8. 69(s, 1H), 7.52(m, 2H), 7. 23(d, /=9. 0 Hz, 2H), 7.00(d, /=9.0 Hz, 2H), 6.89(ra, 2H), 4. 34(t, >6. 3 Hz, 2H), 3.79(s, 3H), 3.46(s, 3H), 2.00(m, 2H), 1.76(m, 2H), 1.59(m, 2H), 1·43(m, 2H)。 實施例6 :製備#-羥基-7_(4-（（4-甲氧基苯基）（甲基）胺 1150-9131-PF;Kai 554 200829575 基）喹唑啉-2-基氧基）庚醯胺（化合物ii) 步驟6a. 7 -（4 -（（4-甲氧基苯基）（甲基）胺基）喹唑啉—2 一基 氧基）庚-1-醇（化合物201-11) 標題化合物20 1-1 1 (652 mg， 17 %)係從化合物 1 0 3 ( 2 . 8 7 3 居 烧-1,7 - —醇（7.622 g，57.7 mmol)使用類似於針對化合物 20卜9(實施例4)敘述之程序製備：LC-MS: 396 [M+l]+。 步驟6b· 7 -（4-（（4-甲氧基苯基）（甲基）胺基）喹唑啉-2-基 氧基）庚酸 (化合物202-1 1 ) 標題化合物202-1 1 (657 mg， 97 %)係從化合物 201- 11(652 mg, 1.65 mmol)及 Jone’ s 試劑（5 mL)使用類 —.…,.._〜— 似於針對化合物202-9(實施例4)敘述之程序製備：lc-MS : 410 [M+1].。 步驟6c· 7 -（4 -（（4-甲氧基苯基）（曱基）胺基）喧嗤琳—2-基 氧基）庚酸甲酯（化合物203-1 1 ) 標題化合物203-1 1 ( 600 mg， 88 %)係從化合物 202- 1 1 (657 mg，1.6 mmol)and S0C12(1 mL)使用類似於針 對化合物203-9(實施例4)敘述之程序製備：LC-MS: 424 [M+l]+。 步驟6d· #-羥基-7 -（4-（（4-甲氧基苯基）（曱基）胺基）啥哇 琳- 2_基氧基）庚酿胺（化合物11) 標題化合物11(200 mg，33 %)係從化合物203-1 1 (600 mg，1. 42 mmol )及新鮮製備的經基胺溶於甲醇之溶液（1 〇 〇 1150-9131-PF;Kai 555 200829575 mL)使用類似於針對敘述之程序製備化合物9(實施例4)·· LC-MS: 438 [M+l] + ； ^ NMRCDMSO-i/e): 10.34(s, 1H) 8.66(s, 1H)，7·52(ιη，2H)，7.23(d，/=9.0 Hz，2H)， 7.00(d, /=9.0 Hz, 2H), 6.89(m, 2H), 4. 34(t, /=6. 0 Hz, 3. 7 9(s, 3H), 3. 46(s, 3H), 1. 97(t, /= 7e 2Rz 2H) 1.76(m，2H), 1.54(m，2H), 1.43(m, 2H), i.35(m，2H)。 生物學試驗： 如同前述，本發明所定義的衍生物，具有抗增生活性。 此等性質可例如使用一種以上下列程序評估· (a) —體外（i/7 η化〇)試驗，決定受測化合物抑制受體酪胺 酸激酶之能力 受測化合物抑制受體激酶（VEGFR2及pDGFR —^^^活 性之能力，使用HTScan™受體f 試1
Signaling Technologies，Danvers, ΜΑ)評估。VEGFR2 酪 fe酸激酶使用一桿狀病毒表現系統生產，具一構建物，包 含一人類VEGFR2 cDNA激酶結構域 (Asp805~Vall356)(GenBank Accession number. AF035121) 片段其胺基末端融合於一 GST—HIS6—凝血酶切開部位。 PDGFR-beta酪胺酸激酶使用一桿狀病毒表現系統生 產，具一構建物，包含一人類PDGFR-beta c—MA(GenBank Accession number·題一0026〇9)片段（紅以61 一 LeuU〇6)胺 基末鈿融合於一 GST-HIS6-凝血酶切開部位。該蛋白質利 用谷胱甘肽-瓊脂以單步驟親和層析精製。抗磷酸化酪胺酸 單株抗體，P-Tyr-1〇〇,被用於偵測生物素化受質肽之磷酸 556 1150~9131-PF/Kai 200829575 化（VEGFR2，Biotin-Gastrin 前驅物 Tyr87); PDGFR-/?， 生物素化-FLT3(Tyr5 89))。酵素活性係於60 mM HEPES、5 mM MgCl2 5 mM MnCl 2 20 0 μΜ ATP、1· 25 mM DTT、3 μΜ Na3V〇4、 1· 5 mM肽及50 ng EGF受體激酶中測定。已結合抗體，使 用 DELFIA 系統（Perkin^ 統由 DELFIA®銪標記抗小鼠 IgG(PerkinElmer，#AD0124)、 DELFIAWf 強溶液（PerkinElmer，#1 244-1 05)，及 DELFIA ⑧ 鏈黴親和素（Streptavidin)包覆之96井盤（PerkinElmer， €八人八0-0 00 5 )構成。螢光係於—1^1^(：¥41:〇^2平盤讀取儀 測定，並以相對螢光單元（RFU)報告。資料可以使用
GraphPad Prism(v4.0a)繪製成圖，並且使用 §型 (sigmoidal )劑量-回應曲線適合度演算法，計算iC5〇。 將受測化合物溶解於二曱基亞颯（DMS0)，以得 的工作原濃度。各試驗設定如下：添加1 0 0 // 1的1 〇 _ ATP到1. 25 ml的6 mM受質肽。將該混合物以去離子水稀 【 釋，以得到2X ATP/受質混合物（[ATP]=40 0 mM，[受質]=3 mM)。立即將酵素從-80°C轉送到冰中。使酵素於冰上解柬。 於4°C輕微地微量離心，使液體沉在小試管底部。立即放
回冰中。添加10/z 1的DTT(1. 25 mM)至2· 5 ml的4X 11丁3〇&11了^1酪胺酸激酶緩衝液（24〇11^11£^5^0111^2()11^ MgCl2，20 mM MnCl，12 mM NaV〇3)，以配成 DTT/激酶緩衝 液。將1. 25 ml的DTT/激酶緩衝液，移到酵素管，以配成 4X反應混合物（[酵素]=4 ng/#L於4X反應混合物）。將 12· 5 // 1的4X反應混合物與12· 5 // 1/井的關注的預稀釋 1150-9131-PF;Kai 557 200829575 化合物（通常約10#M)於室溫溫育5分鐘。添加25//l的 2X ATP/文質混合物至25// 1/井的預溫育反應混合物/化合 物。將反應平盤在室溫溫育3〇分鐘。添加5〇 # "井的停 止緩衝液（50 mM EDTA、PH 8)，以停止該反應。將各反應 25// 1及75//1去離子水/井，移到96井鏠黴親合物—包覆 平盤，並於室溫溫育60分鐘。以200//1/井pBS/T(pBS， 0· 05% Tween-20)清洗3次。將初級抗體、磷酸化酪胺酸 mAb(P-Tyr_100)，1··1 000 於 PBS/T 中，以 1%牛血清白蛋白 (BSA)稀釋。添加100^1/井的初級抗體。於室溫溫育6〇 分鐘。以200 /zl/井PBS/T清洗3次。將銪標記之抗小鼠
IgG 1:500於PBS/T，以UBSA稀釋。添加i〇0/z丨/井經 稀釋的抗體。於室溫溫育30分鐘。以2〇〇//丨/井pBS/T 清洗5次。添加1〇〇"1/井D E 液;於室溫温 育5分鐘。以適當的時間-解析^丨㈣―Res〇lved)平盤讀取 儀，偵測發射的615 nm螢光。 (b)—體外試驗，決定受測化合物抑制HDAc酵 素活性之能力 HDAC抑制劑使用HDAC螢光測量試驗套組 (AK-50 0, Biomol、Plymouth Meeting、PA)篩選。可將受試 化合物溶於二甲基亞砜（DMS0)，以得到20 mM工作原濃 度。螢光使用WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad Prism(v4〇a) 緣圖，並且使用S型（s i gmo i da 1)拋物線劑量—回應曲線適 合度演算法，計算IC50。 1150-9131-PF;Kai 558 200829575 各試驗設定如下：將所有的套組成分解凍，於使用前保 持在冰上。將HeLa核萃取物以丨：29稀釋於試驗緩衝液（5〇 mM Tris/Cl > PH 8.0, 137 mM NaCl, 2.7 mM KC1, 1 mM MgC12)。製備Trich〇statinA(TSA，正控制組）及受測化
合物於試驗緩衝液(5x最終濃度)之糠释 LysTM基稀釋於試驗緩衝液成丨⑽uM(5〇倍=2χ最終 將Fluor de LysTM顯影劑濃縮物（例5〇// 1 + 95〇// i試驗緩 f 衝液）於冷試驗緩衝液稀釋20倍。第二，將0.2 mM
Tnchostatin A 100-倍稀釋於1χ顯影劑（例於工 ml;最終Trichostatin A濃度於lx顯影劑=2#M;添加 HMC/受質反應後之最終濃度=1#们。添加試驗緩衝液、經 __ .^稀釋」:1^11031^1^11 A或受測抑制劑，至微滴定盤之適當的 井。添加經稀釋之ieLr萃取物或其他—_ 井，除了負控制組。使經稀釋之Fiuor de LysTM受質及樣 本在微滴定盤中平衡至試驗溫度（例如25或37。〇。藉由
( 添加經稀釋受質（25#丨）至各井並充份混合，以起始化HDAC 反應。使HDAC反應進行1小時，接著藉由添加Flu〇r de
LysTM顯影劑（50//丨）使反應停止。將平盤在室溫（25χ：) /皿月10-15分鐘。在能於波長mo-mo ηιη之範圍激發的微 滴定盤讀取螢光儀，讀取樣本，並偵測在44〇 —46〇 發射 之光。 (c)以榮光染料測量抗腫瘤血管（τ·〇Γ Vasculature)活性 以下實驗證明化合物損害腫瘤血管之能力 於CaNT生腫瘤小鼠之腫瘤功能性血管體積，係使用螢 1150-9131-PF;Kai 559 200829575 光染料 Hoechst 33342,依照 Smith 等人（Brit J Cancer 57 247-253，1 988)之方法測定。將螢光染料溶於鹽水使成 6· 25 mg/ml，並於腹腔内藥物處理6小時或24小時後，以 靜脈注射10 mg/kg。1分鐘後，將動物殺死，將腫瘤切出 並冷涞;於3個層次切I孤 .片，並於UV光X使用配 備洛射螢光（epif lU0rescence)2 〇lympus顯微鏡觀察。血 官由其勞光外輪廉識別，血管體積基於Chalkley所述方法
Natl Cancer Inst, 4, 47-53, 3個不從層次之切片中，計數至 以相對於控制組，血管體積之減
使用點記分系統定量（j 1 943)。所有估計值係從在 少100個視野所得。結果 少百分比表示。
(XV) 1150-9131-PF;Kai 560 200829575
1150-9131-PF;Kai 561 200829575
Fe/HCI
105
1150-9131-PF;Kai 562 200829575
Scheme 2
207 208
HN 、
貫施例1 :製備7-(4-(苯并呋喃-5-基胺基）— 7-曱氧基啥 嗤琳-6-基氧基羥基庚醯胺（化合物2) 步驟la. 2-溴-1-氟-4-硝基苯（化合物1〇2) 對化合物101(8· 75 g，500 mmol)之硫酸（5〇ml)溶液， 添加68% HN〇3(4 mL)，使反應物溫度維持在低於4〇°C。添 加後’將該混合物於2〇°c攪拌1小時。將該混合物以3〇〇 mL 冰水稀釋並過濾。將收集的固體從石油酯再結晶，以得標 題化合物102白色固體（8 〇62，73.3%):111關1?(0肘30-心）： β 8. 6(dd，1H)，8. 3(m，1H)，7. 7(t，1H)。 步驟lb· ((2-1-5-硝基苯基）乙炔基）三曱基矽烷（化合物 103) 將化合物 102(2· 5g，11 · 4mmol )、三苯基膦（0.114 g， 563 1150-9131-PF;Kai 200829575 〇· 44 _〇1)，1巴（II)氯（〇· 〇45g，0· 26mmol)及三乙胺（28ml) 之此合物’於氮氣中攪拌並加熱至1 〇〇它丨6小時。將該混 口物冷部至室溫並將沉澱過濾。將固體以三乙胺清洗並將 。併的濾液蒸發以留下暗棕色油，於減壓於1 2〇。〇蒸餾出， 以件化合春以 [M+1]. 〇 步驟lc· 5-硝基苯并呋喃（化合物1〇4) _ 將化合物 103(7· 30 g，30. 8 mmol)、乙酸鈉（10. 1 g， 123 _〇1)及N，N-二甲基曱醯胺（70 mL)之混合物攪拌並加 熱至10〇°C 16小時。將沉澱過濾並以N，N一二甲基甲醯胺清 洗。將合併的濾液蒸發以留下一殘渣，將其以一短的矽膠 官柱精製（洗提液··乙酸乙酯/石油醚=1 / 1 〇 )以得標題化合 物 104 棕色固體（3. 0 g，— 步驟Id·苯并呋喃-5-胺（化合物105) 將化合物 1 04( 1. 89 g，11. 63 mmol)、鐵粉末（6. 5 g，116mmol)，36.5% HCl(lml)、乙醇（30 mL)及水（6 mL)之 混合物，攪拌並加熱至1 〇〇°c 3小時。將沉澱過濾並以乙醇 清洗。將合併的濾液蒸發以留下一殘渣，將其溶解於二氯 甲烷（50 raL)。將有機層以NaHC〇3水溶液（2 0 mLx2)及濃鹽 水（20 mLxl)清洗並以MgS〇4乾燥、過濾並蒸發以得到標題 化合物 105 棕色固體（〇·8 g，51%): LC-MS:134 [M+l]1;1!! NMRCDMSO-i/e)： 5 4.8(s, 2H), 6. 57(m, 1H), 6. 67(m, 1H), 6.69(ra, 1H), 7.21(d, /-9.3 Hz, 1H), 7.74(d, /=2. 4 Hz, 1H) ° 1150-9131-PF;Kai 564 200829575 步驟1 e. 6，7-二甲氧基喹唑琳—4(3#)-酮（化合物1 〇7) 將化合物106(2.1 g，1〇随〇1)、甲酸錢（0.63 g，1〇 mmol)及甲醯胺（7 mL)之混合物，攪拌並加熱至ig〇〜goo。〇 達2小時。將該混合物冷卻至室溫並將得到的沉澱分離， 以水清洗並乾燥以得標題北合物1 〇7棕色固體（1. 8 g， 84.7%): LCMS: 207 [M+l] + ； ^ NMR(DMS0-^) ： δ 3. 87(s, 3H), 3.89(s, 3H), 7.12(s, 1H), 7.43(s, 1H), 7. 97(s, 1H)， 12.08(bs， 1H)。 步驟1 f· 6-羥基-7-甲氧基喹唑啉一4(3及)_酮甲烷磺酸酯 (化合物108) 分次添加化合物107(10.3 g，5 0 mmol)至一攪拌中的 甲烧石黃酸（68 mL)。接著添加L-曱硫胺酸（8. 6 g，57. 5 mmol) 並將該混合物加熱至1 5 0〜1 6 0 °C 5小時。將該混合物冷卻至 至>jdl並倒入冰及水（2 5 0 mL)混合物。將該混合物以氫氧化 納水溶液（40%)中和。將得到的沉澱分離，以水清洗並乾燥 以得標題化合物108灰色固體（1〇 g，粗製品）：LCMS: 193 [M+l]+, !H NMRCDMSO-i/e)： ^ 2. 99(s, 3H), 3. 88(s, 3H), 7.08(s, 1H), 7.36(s, 1H), 7. 89(s, 1H), 9. 83(bs, 1H), 11·86(bs, 1H)。 步驟lg· 7-甲氧基-4-側氧基—3,4-二氫喹e坐啭基乙酸 酯（化合物109) 將化合物108(10 g,粗製品）、乙酸酐（100 mL)及吡 咬（8 mL)之混合物，攪拌並加熱至回流3小時。將該混合 物冷卻至室溫並倒入冰及水（25〇 mL)之混合礙ί。將得到的 1150-9131-PF;Kai 565 200829575 >儿版分離並乾燥以得標題產物1 q 9灰色固體（5. 8 g，5 0 % 2 步驟總產率）：LCMS; 235 [Μ+1Γ;沱丽R(CDC13): J 2.27(s， 3H), 3.89(s, 3H), 7.28(s, 1H), 7. 72(s, 1H), 8. 08(d, /二6. 0 Hz，1H)，12. 20(bs，1H)。 步驟1 h. 4 -氯-7-曱氧基嗤嗅琳-6-基乙醜_ (化合物11 〇 ) 將化合物109(2.0 g, 8.5 mmol)及磷醯三氯（2〇 mL) 之混合物’授拌並加熱至回流3小時。得到澄清溶液後， 將多餘的磷醯三氣減壓移除。將殘渣溶於二氯曱烷（5〇11^) 將有機層清洗以NaHC〇3水溶液（20 mLx2)及濃鹽水（2〇 mLxl ) 清洗，並以MgS〇4乾燥、過濾並蒸發以得到標題產物丨丨〇黃 色固體（1.4 g， 65%): LCMS: 253 [M + l]+。 步驟li. 4-(苯并呋喃—5-基胺基）-7_甲氧基喹唑啉—6 一醇 (化合物 111 Γ ——————-———————————————————〜———一 將化合物 110(0,151 g，0·6ππηο1)及 105(0.20 g， 1.504 mmol)於異丙醇（2 mL)之混合物，攪拌並加熱至回流 整夜。將該混合物冷卻至室溫並過濾以得到標題產物m 白色固體（0.169g， 92%): LCMS: 308 [M+1J+。 步驟lj.乙基7-(4-(苯并呋喃-5-基胺基）-7-曱氧基喹唑 啉-6-基氧基）庚酸酯（化合物Π2 - 2) 將化合物111 (〇· 1 69 g，0· 55mmol )、7-溴庚酸乙醋 (0.13 g，0.55 mmol)及碳酸鉀（〇.38g，2.75mmol)於 N，N- 二甲基甲醯胺（5mL)之混合物，於60°C攪拌3小時。將沉 澱過濾，將濾液倒入水。將得到的沉澱過濾，以乙酸乙醋 清洗並乾燥以得到標題化合物112-2灰色固體（0.2〇7g， 1150-9131-PF;Kai 566 200829575 81%)。 步驟lk· 7-(4-(苯并呋喃-5-基胺基）—7—曱氧基喹唑啉一6一 基氧基羥基庚醯胺（化合物2) 對授拌中之經基胺氣化氫（4·67 g，67 mmol)於甲醇 (24 mL)溶液，於炫添加氫氣北啣 甲醇（14 mL)之溶液。添加後，將該混合物於〇它攪拌3 〇 为釦，並靜置於低溫。將得到的沉澱分離，並將該溶液製 備以得到游離羥基胺。
將新鮮製備的羥基胺溶液（2.5 mL)置於1〇 mL燒瓶。 將化a物1 1 2-2(207mg，0·45 mmol)添加至此溶液並攪拌 於2 5 C達〇. 5小時。將該混合物以乙酸中和，並將得到的 》冗’殿分離’以水清洗及乾燥以得到標題化合物2白色固體 (97 mg, -451 [M+1了+? TH NMRCDMSO-^)： ^ 1.33(m, 2H), 1.43(m, 2H), 1.51(m, 2H) 1.82(m, 2H), 1.94(m, 2H), 3. 90(s, 3H), 4. 15(ra, 2H), 7.03(m, 1H), 7.22(s, 1H, 7.50(m, 1H, 7.70(d, /=2. 7 Hz, 1H, 7.90(d, /^2.1 Ηζ,ΙΗ, 8. 03(s, 1H), 8. 06(d, /-2.4
Hz, 1H), 8.65(s, 1H), 8.71(s, 1H), l〇.33(s, 1H), 10.84(s, 1H) 〇 貫施例2 :製備7 —(4 —(苯并呋喃—5 —基胺基）— 6_甲氧基喹 ϋ坐琳-7-基氧基）-#—經基庚酷胺（化合物6) 步驟2a·甲基4-（苄基氧基）-3-甲氧基苯曱酸酯（化合物" 202) 將化合物 201(18· 2 g, 0· 1 mol)、碳酸鉀（34. 55 g， 1150-9131-PF;Kai 567 200829575 0.25 mol)於N，N-二甲基甲醯胺之混合物中，滴加节基溴 (14.5 ml, 0.105 mol)。將反應物加熱至它並攪拌2小 時。將該混合物冷卻至室溫並過濾。將該濾液濃縮並將殘 渣溶於乙酸乙酯500 mL。將有機層以水及濃鹽水清洗（丨〇〇 )、以JgS 〇4乾燥' 展 白色固體（26 g, 95%): LCMS: 273 [Μ+1]+。 步驟2b·甲基4-（苄基氧基）-5-甲氧基-2-補基苯甲酸酯 (化合物203) 將 HN〇3(45 mL，0.963 mol)及 H0Ac(45 mL)之混合物， 置於冰浴並攪拌。滴加化合物202( 1 0.3 g，50 mmol)於 200ml HOAc之溶液。添加後，將該反應混合物於_1(rc攪 拌達20min。將該混合物倒到冰及水（250 mL)混合物，並 以氫氧化鈉水溶液（40%)中和。以過i分離沉澱，以 並乾燥以得標題化合物203灰色固體（30g，98%): LCMS: 318 [M+l]+ 。 步驟2c·曱基2-胺基-4-（苄基氧基）-5-甲氧基苯甲酸酯 (化合物204) 將化合物203(10 g，粗製品）、鐵粉末（54 g， 〇.96mol)、乙醇（1〇〇 mL)及H2〇(20 mL)之混合物攪拌並加 熱至回流3小時。將該混合物冷卻至室溫並以氫氧化鈉水 溶液中和（1 〇%)。將反應物過濾並將該濾液濃縮以得到一殘 渔，將其以二氯曱烷萃取（2〇〇 mL X 2)。將合併的有機層 以濃鹽水清洗並以MgS〇4乾燥，過濾並濃縮以得標題化合 物 204 灰色固體（14. 5 g，85%): LCMS: 288 [M+l] +。 1150-9131-PF;Kai 568 200829575 步驟2d· 7-(苄基氧基）-6-曱氧基喹唑啉_4(3H)_酮（化合 物 205) 將化合物 204(7.5 g，25 mmol)、甲酸銨（[·】g，22· 4 mmo 1)及甲醢胺（6 0 mL )之混合物攪拌並於18 〇〜丨9 〇 〇c (油浴 溫)加熱達2 4、時。然後得到的 沉澱分離，以水清洗並乾燥以得到標題化合物2 〇 5棕色固 體（6·5 g，95%): LCMS: 283 [M+l]+。 步驟2e· 7-(苄基氧基）—4_氯-6-曱氧基喹唑啉（化合物 206) 將化合物205(6.5g，8.5 mmol)及磷醯三氣（4Q mL)之 混合物’擾拌並加熱至回流3小時。當得到一澄清溶液， 將多餘的磷醯三氯減壓移除。將殘渣溶於二氣甲烷（2〇〇 ‘) 將有機層以 NaHC〇3 水溶液〇〇 mLi3 Ϊ鹽 ^ 清洗並以MgSCh乾燥、過濾並蒸發以得到標題化合物2〇 6 黃色固體（1.4 g，65%): LCMS: 301[Μ+1Γ。 步驟2f· ΛΚ苯并呋喃—5-基）-7-(苄基氧基）—6-曱氧基啥 唑啉-4-胺（化合物207) 將化合物 206(0.5 g，1.5 mmol)及化合物 105(0.2 g 1 · 5 mmo 1)於異丙醇（5 mL)之混合物，攪拌並加熱至回流3 小時。將該混合物冷卻至室溫並過濾以得到標題產物2〇7 白色固體（ 0.546g，91%): LCMS: 398 [M+l]+。 步驟2g. 4-(苯并吱喃—5-基胺基）-6 -曱氧基啥唾琳—7 一醇 (化合物208) 將化合物 207(0.51 g, 1.3 mmol)及 Pd/C(0.2 g)於甲 1150-9131-PF/Kai 569 200829575 醇（6 mL )之混合物於室溫攪拌達4小時。分離沉澱並乾燥 以得到標題化合物208灰色固體（〇. 4 g，100%): LCMS: 308 [M+l]+。 步驟2小時。乙基7_(4-(苯并呋喃-5 —基胺基）-6-曱氧基 查生兔-7 -基氧基)庚酿'酯209-6) 將化合物208(0.4 g，1·3_〇1)、7 -溴庚酸乙酯（〇·31 g，1 · 3 mmo 1)及碳酸卸（0· 89g)於Ν，Ν-二甲基甲醯胺（15mL) 之混合物，於6 0 °C攪拌3小時。以過濾分離沉澱，將濾液 倒入水中。將得到的固體過濾，以乙酸乙酯清洗並乾燥以 得到標題化合物 209-6 灰色固體（0· 6 g， 100%):LC~MS:464[M+1]+ 〇 步驟2i· 7-(4-(苯并呋喃-5-基胺基）-6-甲氧基喹唑啉-7 -i 氧 ί ) -i6了 一一^ — 標題化合物6白色固體（96 mg， 16%)係從化合物 209-6(600mg，1· 3 mmol)及新鮮製備的 NH2〇H/MeOH(7. 3 mL， 13 mmol)使用類似於針對化合物2(實施例1)敘述之程序製 備：nip 214〜217°C，LC-MSdSUM+ir;1!! NMR(DMS0-d6): (5 1.34(m，2 小時），1.45(m，2H)，1.53(m，2H)，1.79(m， 2H), 1.97(m, 2H), 3. 97(s, 3H, 4. 97(m, 2H), 7.00(m, 1H, 7.16(s3 1H), 7.58(m, 1H, 7. 62(d, /=9. 0 Hz, 1H), 7. 90(s, 1H), 8.00(d, /=2.1 Ηζ,ΙΗ), 8.07(d, /-1. 2Hz, 1H), 8.41(s，1H)，8.67(s，1H)，9.53(s，1H), 10.34(s, 1H)。 生物學試驗： 如同前述，本發明所定義的衍生物，具有抗增生活性。 1150-9131-PF/Kai 570 200829575 此等性質可例如使用一種以上下列程序評估： (a)—體外試驗，決定受測化合物抑制受體酪胺 酸激酶之能力 受測化合物抑制受體激酶（VEGFR2及PDGFR-beta)活 性之能力，使用liTScanTM受體激酶試驗套組（Ce】工
Signaling Technologies，Danvers，ΜΑ)評估。VEGFR2 酪 胺酸激酶使用一桿狀病毒表現系統生產，具一構建物，包 广 含一人類VEGFR2 cDNA激酶結構域（Asp805-Vall356) (GenBank Accession number. AF0351 21 )片段其胺基末端 融合於一 GST-HIS6-凝血酶切開部位。PDGFR-beta酪胺酸 激酶使用一桿狀病毒表現系統生產，具一構建物，包含一 人類 PDGFR-betac~DNA(GenBank Accession number. NM一002609)片段（Arg561-Leull06)胺基末端融合於一 GST-HIS6-凝血酶切開部位。該蛋白質利用谷胱甘肽—瓊脂 以單步驟親和層析精製。抗磷酸化酪胺酸單株抗體， 、 P-Tyr-100，被用於偵測生物素化受質肽之磷酸化（VEGFR2,
Biotin-Gastrin 前驅物 Tyr87); PDGFR-/3，生物素化 -FLT3(Tyr589))。酵素活性係於 60 mM HEPES、5 mM MgCl2 5 mM MnCl 2 20 0 μΜ ATP、1·25 mM DTT、3 μΜ Na3V〇4、1.5 mM肽及50 ng EGF受體激酶中測定。已結合抗體，使用 DELFIA 系統（PerkinElmer，Wei lesley，MA)摘測，該系統 由 DELFIA® 銪標記抗小鼠 lgG(PerkinElmer，#AD0124)、 DELFIA ⑧增強溶液（PerkinElmer，#1244-1 05)，及 DELFIA ⑧ 鏈黴親和素（Streptavidin)包覆之96井盤（PerkinElmer， 1150-9131-PF;Kai 571 200829575 AAAND-0 0 05 )構成。螢光係於WALLACVictor2平盤讀取儀 測定’並以相對螢光早元（R F U)報告。資料可以使用 GraphPad Prism(v4.0a)緣製成圖，並且使用 s型 (sigmoidal )劑量-回應曲線適合度演算法，計算IC5〇。 將受測化合物溶解於二甲基亞礙（DMS0)，以得到2〇 mM 的工作原濃度。各試驗設定如下··添加100# 1的1〇mM ATP到1· 25 ml的6 mM受質肽。將該混合物以去離子水稀 釋，以得到2X ATP/受質混合物（[ATP] = 400 _，[受質]=3 m Μ )。立即將酵素從-8 0 C轉送到冰中。使酵素於冰上解;東。 於4°C輕微地微量離心，使液體沉在小試管底部。立即放 回冰中。添加10// 1的DTT(1· 25 roM)至2· 5 ml的4X HTScanT£^^^^
MgCl2，20 mM MnCl，12 mM NaVOs)，以配成 DTT/激酶緩衝 液。將1· 25 ml的DTT/激酶緩衝液，移到酵素管，以配成 4X反應混合物（[酵素]=4 ng//zL於4χ反應混合物）。將 12. 5# 1的4Χ反應混合物與22.5^1/井的關注的預稀釋 化合物（通常約10/zM)於室溫溫育5分鐘。添加25// }的 2X ATP/受質混合物至25// 1/井的預溫育反應混合物/化合 物。將反應平盤在室溫溫育30分鐘。添加5〇// "井的停 止緩衝液（50 mM EDTA、PH 8)，以停止該反應。將各反應 25// 1及75/z 1去離子水/井，移到96井鏈黴親合物-包覆 平盤，並於室溫溫育60分鐘。以200 // 1/井pbs/T(PBS, 0.05% Tween-20)清洗3次。將初級抗體、磷酸化酪胺酸 mAb(P-Tyr-100)，1:1 00 0 於 PBS/T 中，以 1%牛血清白蛋白 1150-9131-PF;Kai 572 200829575 (BSA)稀釋。添加1〇〇//1/井的初級抗體。於室溫溫育6〇 分鐘。以200 /U/井PBS/T清洗3次。將銷標記之抗小鼠 IgG 1:500於PBS/T，以1%BSA稀釋。添加井經 稀釋的抗體。於室溫溫育3〇分鐘。以2〇〇〆^井PM” 清诜5次。添加100// [/井DELFIA⑧增強溶液。於室溫溫 月5刀4里。以適當的時間_解析（(^11^_以3〇1乂以）平盤讀取 (b)—體外（以試驗，決定受測化合物抑制仙μ酵 素活性之能力 HDAC抑制劑使用HDAC螢光測量試驗套組 (AK-500, Biomol、Plymouth Meeting、pA)篩選。可將受試 化合物溶於二曱基亞以得到20 ιηΜ工作原濃 度。螢光使用WALLAC Victor 2平盤讀取儀測定，並以相 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad prism(v4〇a) 、*、曰圖並且使用S型（si gm〇i da 1)拋物線劑量—回應曲線適 合度演算法，計算IC50。 各試驗設定如下：將所有的套組成分解凍，於使用前保 持在冰上。將HeLa核萃取物以1:29稀釋於試驗缓衝液（5q mM Tris/Cl > PH 8.0, 137 mM NaCl, 2.7 mM KC1, 1 mM MgC12)。製備TrichostatinACTSA,正控制組）及受测化 合物於試驗緩衝液（5x最終濃度）之稀釋物。將Flu〇r de LysTM基稀釋於试驗緩衝液成1⑽仙（5〇倍=2χ最終）。 將Fluor de LysTM顯影劑濃縮物（例5〇// 1 + 95〇// ^試驗緩 衝液）於冷試驗繅衝液稀釋2〇倍。第二，將〇· 2 _ 1150-9131-PF;Kai 573 200829575
Tnchostatin A 100-倍稀釋於1χ顯影劑（例i〇# i於】 ml’·最終Trichostatin A濃度於1χ顯影劑添加 HDAC/受質反應後之最終濃度七们。添加試驗緩衝液、經 稀釋tnchostatin A或受測抑制劑，至微滴定盤之適當的 井。添加經稀釋之HeLa萃取物或其他^^胁^ 井，除了負控制組。使經稀釋之Flu〇r de LysTM受質及樣 本在微滴定盤中平衡至試驗溫度（例如25或37。〇。藉由 添加經稀釋受質（25 // 1 )至各井並充份混合，以起始化jjdac 反應。使HDAC反應進行1小時，接著藉由添加Flu〇；r de LysTM顯影劑（50 // 1)使反應停止。將平盤在室溫（25〇c ) 溫育10-15分鐘。在能於波長35〇 —380 nm之範圍激發的微 滴定盤讀取螢光儀，讀取樣本，並偵測在440-460 nm發射 ——————…一’.. - —-—，-一. —……——..—一——.—…— —............................................... 之光。 以下表1 2-B列舉本發明代表化合物及及其活性於 HDAC，VEGFR2及PDGFR分析。於此等分析，iCs◦使用以下 分級：I-10//M，10//Μ>ΙΙ>1/ζΜ，1//Μ>ΙΙΙ>0·1#Μ 及 IV S 0· 1 // Μ。 表 12ΗΒ
化合物編號 HDAC EGFR HER2/ErbB VEGFR2 2 IV IV IV II 6 IV II 9 III 10 IV 11 IV 第13部分： 1150-9131-PF;Kai 574 (XVI) 200829575 r %
c 表 13-A 化合物編號 結構 1 H s Χ^Τ"〇Η 2 3 。 4 tersi5 H ——10--———'1———――—…’_ 5 0 6 H 7 Η ΗΝ ν〇Η ° 8 Ο 广ύ Η 9 ΗΝ又八X， 1150-9131-PF;Kai 575 200829575 /
10 HN 人，^^、OH 。 11 HN又八〜\。》 12 0 13 ,〇H 14 〇 15 0 〇 丫 ……...................................C/"-—-—--….-—..................................................................-… 16 17 ^〇r各。^ 18 〇丫、 19 ^〇r各'^ 20 〇丫 K、 1150-9131-PF/Kai 576 200829575
實施例 1:製備於（5-(羥基胺甲醯基）戊 基）-2-(3-((Ε)-2-(σϋ 〇定-2-基）乙浠基）-1及-11引嗤―6 —基硫） 苄醯胺（化合物15) 步驟la. 3-碘-6-硝基_1#-吲唑（化合物102) 將 6-硝基吲唑（23 g, 141 mmol)於 DMF(100 mL)之溶 液中，添加碳酸鉀（39 g, 282 mmol )，同時維持反應溫度 $ 30°C。將先溶於 DMF 之碘（62 g，244 mmol)溶液（50 mL)， 花2小時添加，同時維持反應溫度$ 35°C。將反應混合物 1150-9131-PF;Kai 577 200829575 於2 5 °C攪拌。反應完成後，於該混合物添加硫代硫酸鈉溶 液（34 g，215 mmol)及碳酸鉀（0.23 g)預溶於水（228 ml) 之溶液，同時維持溶液溫$ 30°C。將該混合物於室溫授動 達20分鐘。加水（340 mL)，使固體沉澱，將漿狀物於室溫 攪動達20分鐘。將固體過濾，以水清洗(k 空烘箱乾燥12小時（50°C及25 _Hg)以得標題化合物1〇2 黃色固體（39 g, 95% 產率）：LCMS: 289 [M+l]; 4 NMRCDMSO-de)： 5 14. 21(s， 1H), 8.47(s, 1H), 7· 97-8· 01(m，1H), 7.67-7.70 (d，/=8.7 Hz, 1H)。
步驟lb. 3-碘-6_硝基-1-(四氫- 2H-旅喃-2-基）-1H-吲口坐 (化合物103) ———£ 化合物—10 2 (2 L ^一. — ‘—...— THF(6 0g)之溶液，小心地添加甲烧硫酸（11 〇 4 mmol)。對此混合物，然後花費！小時添加DHp(17 g，2〇2 mmol)於二氯曱烷（30 g)之溶液，將反應溫度維持在<25 °C。將該混合物於25°C攪動5小時（以HPLC得知反應完 成）。然後將該混合物小心地加入丨〇% NaHC〇3水溶液 (11· lg NaHCCh溶於111 g水），保持溶液溫度為室溫。 將該混合物於25t授動1小時，分層。將有機層清洗以ι〇% NaCK12() g)水溶液清洗，分層。將有機層於5〇。〇減壓濃 縮，以移除多餘的溶劑。將得到的漿狀物以乙腈（5〇忌）稀 釋’於-5°C授動達2小時。將漿狀物過濾，並將固體以冷 乙腈（20 g)沖洗。將固體於室溫減麼乾燥，以得化合^ 103(24g，85% 產率）·· iHNMR(DMSO-d〇。3 8.79(s，1H) 1150-9131-PF/Kai 578 200829575 8.03 8.〇7(m) 1H)5 7.6 9-7.72(d, /=54 Hz, 1H), 6.11 6.l5(m) 1H)j 3. 82-3. 88(m, 2H), 2. 34-2. 38(m, 1H), 2. 01-2. 〇8(m> 2H), 1. 56-1. 76(m, 3H) 〇 步驟lc·(幻-6-硝基-3 —(2-(σ比啶—2—基）乙烯基卜（四氳 ^ % ι 〇 4 ) 將化θ物i〇3(24. 4g，65· 4 mmol)添加至2 -乙烯基吡 啶（9.82g，93·4_〇1)、Ν，舲二異丙基乙基胺（i6.2g，i25 _〇1)及—鄰甲苯基膦（l72g，5.65 mmol)於 DMF(163 g) 之/奋液添加PdC 12(0. 38g，2. 1 mmol)並將該混合物於1〇〇 C攪動1 2小時（直到將反應物藉由HpLC得知完成）。然後 將該混合物冷卻至45t，添加異丙醇（8〇 g)。將該混合物 於—45^動30分鐘，以水稀釋（400 mL)，並將該混合物 於25 C攪動1小時。將得到的漿狀物過濾，以水（25 沖洗，將固體與異丙醇（100 g)合併。將該混合物於55。〇 攪動30分鐘，然後於1(rc攪動3〇分鐘，過濾，將固體以 冷異丙醇（2x10 mL)清洗。將固體於真空烘箱乾燥12小時 (50C 及 25 _Hg)以得化合物 i〇4(22g，96% 產率）：LCMS: 351 [M+1]。 步驟Id· (i〇-3-(2-〇比啶-2-基）乙烯基）-1-(四氫- 2H-哌喃 -2 -基）-1及-σ引唾-6 -胺（化合物1 〇 5) 將化合物1 04(22.0g, 62.9mmol)溶解於氣化銨（25.5g of NHAl於80g水）水溶液及乙醇（120 mL)。添加鐵粉末 (14· lg，252 mmol)並將該混合物於50 °C攪動達2小時（直 到將反應由HPLC得知完成）然後將該混合物冷卻至22°C及 1150-9131-PF;Kai 579 200829575 添加THF(300 mL)。將該混合物於室溫攪動1小時，並以 矽藻土過濾。將濾餅以THF(60 mL)沖洗，並將該濾液於50 °C減壓濃縮成體積約50 ml。將濃縮物冷卻至室溫，以水 稀釋（ 20 0 mL)及於室溫攪動1小時。將該混合物過濾，以 己燒（20 mL)清洗，於真空供箱乾燥12小時（501及25^ 以得化合物 105(15g，75% 產率）：LCMS: 321 [M+l] + ; 1H NMR(DMSO-de): 5 8. 57-8. 59(m, 1H), 7.76-7.81(m, 3H), 7.63- 7.66 (d, /=7. 8 Hz, 1H), 7. 42~7. 48(d, /=16.5 Hz, f 、、1H)，7. 23-7· 28(m，1H)，6. 63-6. 66 (m，2H)，5· 56-5· 60(m, 1H)， 5. 47(s, 2H), 3. 88-3. 92(d, /=10.8 Hz， 1H)， 3.64- 3.72(m，1H)，2·30-2.50 (m，1H)。1.91-2.07(m，2H)， 1·53-1 · 59(m，3H)。 S·'--,-.· — . .....v:‘.〜......一 - 步驟le· (i〇-6-碘-3-(2-(。比啶-2-基）乙烯基）-1-(四氫 -2H-旅喃-2-基）-1及-吲吐（化合物ι〇β) 對化合物l〇5(l〇.〇g, 31·3 mmol)溶於乙酸（65 mL)之 (溶液’於0°C花1小時添加亞硝酸鈉（3· 5g，5〇· 7 mmol)溶 於水（3 0 m 1)之溶液。將該混合物於〇 t擾拌1小時，於〇 °C花10分鐘添加HC1(5. 6 mL稀釋於1〇 mL水）之溶液。將 該混合物於o°c攪拌1小時。以HPLC監控偶氮（diazolium salts)鹽之形成。於〇它花5分鐘添加二氯曱烷mL) 至此偶氮鹽溶液，並於〇°c花i小時添加碘化鉀（1〇· 62g， 63.9 _〇1)及碘（3.96 g，15.6 mmol)溶於水（30 mL)之溶 液。將该反應混合物於〇它攪動達2小時（直到HpLc得知 反應完成）。然後於〇°c將該混合物倒入2〇 %硫氫化鈉之 1150-9131-PF;Kai 580 200829575 水 >谷液（2 0 g硫代硫酸鈉於i 〇 〇 mL水）及二氣曱烧（4〇 mL)，攪動並分層。將水層以二氣甲烷（2x4〇ml)於〇〇c萃取 並合併。於QC化10分鐘添加3 Μ氫氧化納水溶液（17〇 mL) 於此合併的有機層’直到將水相成驗性（Ph = 9 -12)。此分層 不明顯’因形成乳化態。添加28 %氫氧化銨(1〇 mL)及水 (2 0 niL )溶液’並將該混合物於1 〇 授動3 〇分鐘，使靜置 1 2小時以得到澄清分層。分層並將水層以二氯曱烧（2 χ 6 〇 mL )萃取。將合併的有機層濃縮，以含;5夕膠之玻璃溶製管柱 與一氯甲烧分離’以得化合物l〇6(8.8g· 65%產率）：LCMS · 432 [M+l] ; NMR(DMSO-de): δ 8. 60-8. 62(d, /=4. 8 Hz, 1H)， 8. 26(s, 1H), 8.01 - 8.03(d， /=8. 4 Hz，1H)， 7. 88-7. 93(d5 /-16.5 Hz，1H)， 7· 79-7. 82(m， 1H)， 7· 68-7· 71 (d，；7: 8 ’Hz，冗 7. 52H), 7.29-7·31(ιη，1H)，5.91-5.93(m，1H)，3·90-4.00(m，2H)， 2· 49-2. 59(m， 1H), 2· 08-2. 20(m， 2H), 1. 70-1. 86(m, 3H)。 步驟1 f · 2，2二硫水揚酸二氣（化合物1 〇 8) 將 2, 2’ -二硫水揚酸 1 07(3.22 g，1〇·5 mmol)溶解 於甲苯（30 mL)，並添加亞硫醯氯（2 mL)及DMF(0. 2 mL)。 將該混合物於80°C攪拌整夜。將溶劑蒸發以得到化合物 108黃色固體（3· 2 g，89%產率）。 步驟1 g · 2，2 ’ -二硫-(乙基己酸酯）-基-苄酸胺（化合物 109-15) 將K0H(878 mg，15. 6 6 mmol)添加至曱基5-胺基己酸 1150-9131-PF;Kai 581 200829575 酯氯化氫於甲醇（5 mL)之溶液。將該混合物於室溫攪拌 10分鐘。然後將該混合物濃縮。於0°C添加化合物108(1. 41 g，4· 12 mmol)溶於THF(5 mL)之溶液。將該混合物攪拌1 小時。於溶液THF蒸發後，加入乙酸乙S旨（200 mL)。將有 機層以水及濃鹽水清洗、以無水硫酸納乾操並蒸發以得到 109- 15 白色固體（1. 23 g, 53%產率）：LCMS: 561 [M+l] + ; 4 NMR(DMS0-A): Θ 1.30-1.38(m， 4H)， 1.48-1.60(m， 8H)， 2.29(t, /=7. 5 Hz, 4H), 3. 20-3. 26(m, 4H), 3.30(s, 6H) ^ ， 7. 24-7. 27(m, 2H), 7. 29-7. 44(m, 2H), 7. 57-7. 62(m, 4H), 8. 57(t, /=6 Hz，2H)。 步驟lh.曱基6-(2-巯基苄醯胺）己酸酯（化合物110-15) 將化合物 109-15(831 mg, 1.48 mmol)溶於乙醇（l〇mL) 並冷卻至0°C。分次添加硼氫化鈉（130 mg，2.96 mmol)， 並將該混合物攪拌1小時。將鹽酸（3 M，10 mL)添加於此 混合物並將該混合物以乙酸乙酯萃取（80 mL X 3)。將有機 ^ 層以濃鹽水清洗、以無水硫酸鈉乾燥並蒸發以得到化合物 110- 15，其用在次一步驟不經精製（〇· 49 g，59%產率）： LCMS: 282 [M+l]+ 。 步驟 li· 甲基 6-(2-(1-(四氮-2H-旅喃-2_ 基）-3-((方)-2-〇比口定-2-基）乙稀基）-1#-吲嗤-6-基硫）苄 醯胺）己酸酯（化合物111-15) 將化合物 106(600 mg，1.40 mmol)於 DMF(6 mL)之溶 液添加至[1，Γ -雙（二苯基-膦）二茂鐵]二氣—鈀（Π)複 合二氯曱烷（50 mg)及碳酸勰（ 680 mg)於二氯甲烷（50 mg) 1150-9131-PF;Kai 582 200829575 之混合物。添加化合物110_1 5(490 mg，174 mm〇1)並將 该混合物於80 C攪拌整夜。將該混合物冷卻至室溫並添加 乙酸乙酯（10 mL)並攪拌達2〇分鐘。接著水（14 mL)被添加 並將該混合物攪拌額外的4〇分鐘。將該混合物過濾，將固 體以水及乙酸乙勝清洗、乾燥以 體（50〇11^，61%產率）：1^肘3:58 5 [^1+1] + ;111關以0%80-心）： ^ 1. 30-1. 38(m, 2H), 1.48-1.60(m, 6H), 1. 72-1. 80(m, , 1Η)， 1·97-2·06(πι， 2H)， 2.28(t, /=7.5 Hz, 2H)， 2. 34-2. 44(m, 1H), 3. 20-3. 26(m, 2H), 3. 33(s, 3H), 3.56-3.80 (m, 1H), 3. 88-3. 92(m, 1H), 5. 90-5. 94(m, 1H), 7.00-7.03(m, 1H), 7. 19-7. 23(m, 1H), 7. 28-7. 34(m, 3H), 7： 50-7· 57(m，1H乂 7· 65(m，2H)，7. 69(d，/=7· 8 Hz，1H)， 7· 79-U3( J7h)7 7：9™ 小時 z, 1H)，8.44(t，/=5·4Ηζ，1H)，8·60-8·63(πι，1H)。 步驟1 j· 6-(2-(3-（（幻-2-(吼啶-2-基）乙烯基）-i及―吲唑 ( -6-基硫）苄醯胺）己酸甲酯（化合物112-15) 將化合物 111-15(386 mg，0.66 _〇ι )、p__Ts〇jj(630 mg，）、曱醇（6 mL)及水（1 mL)合併並於6〇°c攪拌1小時。 將該混合物減壓濃縮。重複此過程3次。然後將該混合物 以乙酸乙酯（60 mL)萃取3次。將有機層以水及濃鹽水清 洗、以無水硫酸鈉乾燥、蒸發以得到一殘渣，以管柱層析 精製以得化合物112-15白色固體（150 mg，45%產率）·· LCMS: 501 [M+l] + ; ]H NMRCDMSO-^)： ^ 1. 30-1. 38(m, 2H), 1.47-1.56(m, 4H), 1.95(t, /-6. 9 Hz, 2H), 3. 18>3. 25(m, 1150-9131-PF;Kai 583 200829575 2H), 3. 56(s, 3H), 7. 06-7. 1 0(m, 1H), 7. 1 5-7. 1 9(m, 1H), 7.20-7.34(m，3H), 7.45-7.48(m，1H)，7.54-7·59(πι，2H)， 7·65-7·68(πι，1H), 7·78-7.84(m，1H)，7·91-7·ΐ8(πι，1H)， 8.19(d，/=8.1 小時 z，1H)，8·42(ΐ， /=5.4 Hz， 1H)， 8. 6 0 ~ 8. 6 3 (m, 1H ), 1 3. 3 2(s, 1H) ° 步驟Ik.於（5-(羥基胺甲醯基）戊基）- 2-(3-((E)-2-(吼啶 -2-基）乙烯基）-l#-吲唾-6-基硫）苄醯胺（化合物1 5) 製備羥基胺於甲醇之溶液：羥基胺氯化氫（4.67g，67 mmol)溶解於甲醇（24 mL)以形成溶液A。氫氧化钟（5. 61 g， 100 mmol)溶解於甲醇（14 mL)以形成溶液B。將溶液A冷 卻至0 °C，並將溶液B滴加至溶液A中。將該混合物攪拌 3 0分鐘於0 °C，並將沉殺過濾以得到羥基胺溶於甲醇之溶 液。 於含化合物112-15(150 mg, 0.28 mmol)之燒瓶，添 加羥基胺溶於甲醇之溶液（4. 0 mL)。將該混合物於室溫攪 拌30分鐘。並以乙酸調整為PH 6-7。將混合物濃縮以得 到一殘渣，將其放入乙酸乙酯（200 mL)並以水清洗、以無 水硫酸鈉乾燥及濃縮得化合物15白色固體（11〇 mg，49% 產率）：LCMS: 502 [M+l] + ; j NMR(DMS0-心）：Θ 1.28-1.29(m，2H)，1·31-1.34(m，4H)，2.29(t，/=7·5Ηζ， 2H), 3. 21-3. 25(m, 2H), 7. 06-7. 08(m, 1H), 7. 1 7-7. 20(ra, 1H), 7. 26-7. 33(m, 3H), 7. 46-7. 49(m, 1H), 7. 54-7. 68(m, 3H), 7. 78-7. 84(m, 1H), 7. 94(d, /-16. 2Hz, 1H), 8.19(d, /=8.7 Hz, 1H), 8.43(t, /-5.4 Hz, 1H), 8. 60-8. 62(m, 1150-9131-PF;Kai 584 200829575 1H)。 實施例 2 : 製備於（6 -（經基胺甲酿基）己 基）-2-(3-(( -2-0比唆-2-基）乙烯基）-1#-吲嗤-6 一基硫） 苄醯胺（化合物 16) 步驟2 a · 2，2 ’ -二硫-(乙基庚酸酉旨）-基-节酿胺（化合物 109- 16) 標題化合物1 0 9 -1 6 (3 · 4 2 g， 6 7 %)係從化合物 1 08(2.83 g，8.24 mmol)及7-胺基庚酸乙酯氣化氫（6·90 g，32· 96 mmol)使用類似於針對化合物109-15(實施例1) 敘述之程序製備：LCMS: 617 [M + l]+。 步驟2b·乙基7-(2-髄基苄醯胺）庚酸酯（化合物ι10 — 16) 標題化合物1 10-1 6(400 mg， 100 %)係從化合物 1 0 9-1 6(40 0 mg, 0· 649 mmol)使用類似於針對化合物 110- 15(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 310 [M+1J+。 步驟 2c· 7-(2-(1-(四氫 -2H-旅喃-2 -基）-3-((f)一2-（π比口定 -2 -基）乙烯基）-1 ΰ弓丨唾-6 -基硫）苄醯胺）庚酸乙酯（化合 物 111 -16) 標題化合物1 1 1 -1 6(620 mg， 94 %)係從化合物 1 10-1 6(400 mg，1.29 mmol)及 1 06(460 mg，1·〇8 _〇ι) 使用類似於針對化合物111-15(實施例1)敘述之程序製備· LCMS: 613 [M+l]+ 〇 步驟2d· 7-(2-(3 -（（幻-2-(咄啶-2-基）乙烯基叫|〇坐 -6-基硫）节酿胺）庚酸乙酉旨（化合物112_16) 標題化合物1 1 2-1 6(360 mg， 6 9 %)係從化合物 1150-9131-PF;Kai 585 200829575 11卜1 6 (600 mg, 0· 98 mmol)使用類似於針對化合物 112-15(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 529 [M+l]+。 步驟2e. #-(6-(羥基胺曱醯基）己基）-2-(3-(U)-2-(。比啶 -2-基）乙烯基）-1及-吲唑-6-基硫）苄醯胺（化合物16)
標題化合物1 6 (306 mg，59 %)係從化合物11 2-W mg，0.67 mmol)使用類似於針對化合物15(實施例1)敘述 之程序製備：LCMS: 516 [M+l] + ; 4 NMR(DMSO-A): β 1.23-L30(m, 4H), 1. 32-1. 36(m, 4H), 1.94(t, /=7. 2Hz, 2H), 3.21-3.25(m, 2H), 7. 06-7. 08(m, 1H), 7. 16-7. 20(m, 1H), 7.26-7.33(m，3H), 7.46-7.49(m，1H)，7.54-7.65(m, 3H), 7. 78-7. 84(m, 1H), 7. 94(d, /=16. 2Hz, 1H), 8.19(d, /-8.7 Hz, 1H), 8.43(t, /=5. 4 Hz, 1H), 8. 60-8. 62(m, — -· ~~·-..一 ·- - - - — -- ......， .... .... ..... - 1H)。 R23
第 14 部分： cy81—x8〇4y8。 (χγΐΐ)
表 14 - A
化合物編號 結構 1 F 2 η〇,χΓ〇$：Λ, 3 ηλ/’$Α, Ο F 1150-9131-PF;Kai 586 200829575
4 P〇^Y〇H X H。、〆 5 HYr〇VH i ° φ：；α F 6 H〇lH h Λ r^NY0H i U φ：:Ά F 7 OH ΗΝγ〇 ν〇Ϊ：Λ, F 8 F 9 F 10 Γ^°^Τ° H Cl v ry'YS HO^NH ^Br 11 广0』丫〇 Cl OH \=N 12 。/:5灰 H， WN 13 广 o'N 丫0 Cl 14 HYr〇YH ? Ά:成 WN’ 15 Η〇1Η η r^Y°H ? wN’ 16 Ά成 \=N 587 1150-9131-PF;Kai 200829575
108 實施例1 :製備3, 4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺 基(4-(羥基胺基）—4 —側氧基丁氧基）苄醯胺（化合物D ψμ ia.亨塞一mum物 -—- 於〇°C將化合物苯曱醯基氯i〇1(；i4〇 g，1 m〇l)於添 加甲醇（100 mL)。將該混合物於攪拌5分鐘，並濃縮 以得到化合物甲基苯曱酸酯黃色油（135 g， 99 %): LC-MS: 137 [M +1]+ 〇 步驟lb· 羥基苄醯胺（化合物logy) 製備經基胺溶於甲醇之溶液：羥基胺氯化氫（；[07. 41 g，1.56 mol)溶解於甲醇（552 mL)以形成溶液A。氫氧化 鉀（ 1 29.03 g，2.30 mol)溶解於甲醇（322 mL)以形成溶液 B。將溶液A冷卻至〇°C，並將溶液b滴加至溶液a中。將 該混合物於Q °C攪拌3 0分鐘。將沉澱過濾濾掉，濾液形成 羥基胺溶於曱醇之溶液。 1150-9131-PF;Kai 588 200829575 苯曱酸甲酯 1 02(27.2g 0 ，· mol) >谷解於上述經基胺 溶於甲醇之溶液（8 74 mL)。將該溫人私从^ )对4此合物於室溫攪拌30分 鐘，並接著以乙酸調整為pH 7。將混合物濃縮以得到一殘 渣，將其以水清洗以得到化合物1〇3白色固體（25 g，91 %) ° LG_MS! 138 [M+1]+ 〇 步驟lc· 4-(苄醯胺氧基）丁酸乙酯（化合物 於 0C 將化合物 103(6.9 g，50 mm〇i)溶解於 DMF(1〇〇 “ mL)，將NaH(2·4 g，60 _〇1)添加於其中。將該混合物於 ^ 0°C攪拌數分鐘，並加入4-溴丁酸乙酯（9·7 g，5〇 _〇1)， 將該混合物於室溫攪拌3小時。以蒸發將DMF移除，並將 殘渣溶於cihci2，以水及濃鹽水清洗、以無水Na2S〇4乾燥、 濃縮以得到化合物」04 -1黃色油（2.3g，18%): LCMS: 252 [Μ +1 ] + 〇 ————--——————————————’——…—…. 步驟Id· 4-(胺基氧基）丁酸酯硫酸曱酯（化合物iM — D 對化合物104-1(2.3 g，9 mmol)於甲醇（30 mL)之溶 I 液，添加濃H2S〇4(0· 898 g，9 mmol)。將該混合物於40°C 攪拌整夜。將甲醇移除並將殘渣以乙酸乙酯稀釋，以水及 濃鹽水清洗、乾燥並濃縮得化合物1〇5 —1(〇. 693 g，33 %)。 LCMS: 134 [M+1]+ 。 步驟le. 3, 4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基）苯甲酸（化合 物 107) 將 2-鼠-4-埃苯胺（1〇 g，0.057 mol)及 2，3，4-二氟本 甲酸106(13.5 g，0.057 mol)溶液之一部分（約5 %)於 50 - 55 °C添加至攪拌中之鋰醯胺（4.35 g，0.182 mol)於40 1150-9131-PF;Kai 589 200829575 mL THF之漿狀物。約15-30分鐘後，放熱、釋出氣體，並 觀察到顏色變化。將其他部分的溶液以丨—2小時緩慢添 加。然後’維持溫度在45_55°C。將該混合物攪拌直到將 反應視為完成（利用LC-MS)。然後，將最終混合物冷卻至 c [並轉移到另〜外 (47 raL)，加25 mL乙腈。攪拌，以40 mL 50 %氫氧化鈉 溶液處理後，將底部水相拋棄。將有機相減壓濃縮，並使 用CH2Cl2/MeOH(15/l)作為洗提液以管柱層析精製，以得化 f 1合物107棕色固體（15.9 2，71%產率）：1^%3:394 [祕+1] + ; 4 NMR(DMSO - A): Θ 1 3.735(s， 1H), 9. 144(s, 1H)， 7.794(m, 1H), 7.617(m, 1H), 7.412(m, 1H), 7. 096(m, 1H), 6· 827(m, 1H)。 步驟If· 4-(3，4-二氟-2_(2 -氟-4-埃苯基胺基）苄醯胺氧 基）丁酸甲酯（化合物108-1) 將化合物 107(1· 179 g，3 mmol)、EDCI HC1(0. 86 g， f 4· 5 mmol)、HOBt(0· 61 g, 4· 5 mmol)、DIPEA(1. 55 g，12 k. ?：, mmol)及甲基4-（胺基氧基）丁酸酯硫酸酯i〇5(0e693 g，3 mmol)之混合物，於50°C攪拌16小時。將該混合物以乙酸 乙酯稀釋，以水及濃鹽水清洗、以無水硫酸鈉乾燥及濃縮 得化合物 108-1 油（367 mg，24 %)。LCMS: 509 [M+l] +。 步驟lg· 3,4-二氟-2-(2-氟-4-蛾苯基胺基）-#~(4-(輕基 d-胺基）-4-侧氧基丁氧基）苄醯胺（化合物1) 製備羥基胺溶於曱醇之溶液：羥基胺氯化氫（4. 67g， 6 7 _〇1)溶解於甲醇（24mL)以形成溶液A。氳氧化鉀（5.61 1150-9131-PF;Kai 590 200829575 g，100 mmol)溶解於曱醇（14 mL)以形成溶液B。將溶液A 冷卻至0°C，並將溶液B滴加至溶液A中。將該混合物於 0°C攪拌30分鐘並將沉澱過濾掉。濾液形成羥基胺於甲醇 之溶液。 於含化合物10 8 -1 ( 3 67^^^ ^ 加羥基胺於甲醇之溶液（5· 0 mL)。將該混合物於室溫攪拌 1小時，並使用乙酸調整為PH 7。將混合物濃縮以得到一 殘渣，經水清洗以得到產物1固體（l〇7mg，29 %產率）： ^ LC-MS: 510 [M + l] + ； !H NMR(DMSO-^e): ^ 1 0.350(s, 1H), 8.681(s, 1H), 7.558(d, /=9. 0 Hz, 1H), 7. 364(m, 2H), 7· 148(m, 1H), 6· 641(m, 1H), 3. 676(t，/=6. 1 小時 z，2H) 2·043(m， 2H)， 1.763(m， 2H)。 實施例 2:製備 3, 4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺 基）-1-(5-(羥基胺基）-5-側氧基戊基氧基）苄醯胺（化合物 2) 『 步驟2a. 5 -（>酿胺氧基）戍酸曱酉旨（化合物104 - 2) κ ^ 標題化合物1 04-2(2. 74 g， 22 %)係從化合物 103(4.691g， 34mmol)、NaH(1.632g， 40.8mmol)及 5-溴戊酸曱酯（6· 63 g， 34 mmo 1)使用類似於針對化合物 104-1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 252 [Μ+1Γ。 步驟2b. 5-(胺基氧基）戊酸甲酯（化合物105-2) 標題化合物105-2(1.015 g， 63 %)係從化合物 1 04-2(2.74 g，11 mmol)及濃 H2SO4U· 126 g，11 mmol)使 用類似於針對化合物105-1(實施例1)敘述之程序製備： 1150-9131-PF;Kai 591 200829575 LCMS: 148 [M+l]+ 〇 步驟2c. 5-(3, 4 -二說-2-(2 -氣_4 -埃苯基胺基）苯节醯胺 氧基）戊酸甲酯（化合物108-2) 標題化合物1 08-2(988 mg， 55 %)係從化合物 1 0 7(1. 3 57 &，3 · 4圹 HOBt(0· 699 g，5· 18 mmol)、DIPEAC1· 337 g, 10·35 mmol) 及甲基5-（胺基氧基）戊酸酯i〇5 一2(0.508 g，3.45 mmol) 使用類似於針對化合物108-1(實施例1)敘述之程序製備： LCMS: 522 [M+1]+。 步驟2(1.3,4-二|^-2-(2-氧-4-蛾苯基胺基）-7^-(5-(經基 胺基）-5-側氧基戊基氧基）苄醯胺（化合物2) 標題化合物2(119mg，45 %)係從化合物1 08-2(261 mg， ¥ 〜w ———，.奶——一—’一柯一.....汁….1 ....... 一...一 _ . 0· 5 ramol)及新鮮製備的羥基胺於甲醇（5. 〇 mL)使用類似於 針對化合物1(實施例1)敘述之程序製備：LC-MS: 524 [M+l] + ; !H NMRCDMSO-i/e)： ^ 1 1.733(s, 1H), 1 0.390(s, 1H), 8. 841(s, 1H), 8. 654(s, 1H), 7. 581(m, 1H), 7.384(m, 2H), 7.186(m, 1H), 6. 664(m, 1H), 3. 778(m, 2H)，1.972(t, /=6.() Hz，2H), 1.55()(ιη，4H)。 實施例3:製備3, 4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺 基）-#-(6-(羥基胺基）-6-側氧基己基氧基）苄醯胺（化合物 3) 步驟3a· 6-(苄醯胺氧基）己酸乙酯（化合物104-3) 標題化合物104-3(0· 761 g， 12 %)係從化合物 103(3.179 g，23 mmol)、NaH(l·38 g，34· 5 mmol)及 6- 1150-9131-PF;Kai 592 200829575 溴己酸乙酯（5· 114 g，23 mmol)使用類似於針對化合物 104-1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 279 [M + l]+。 步驟3b. 6-（胺基氧基）己酸甲酯（化合物105-3) 標題化合物1 05-3(0.362 g， 62 %)係從化合物 104-3(958 g, 3. 43 mmol)Λ ^ gr 3,· 43 mmol) 使用類似於針對化合物105-1(實施例1)敘述之程序製備： LCMS·· 162 [Μ+1Γ。 步驟 3c· 6-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺 基）benzami-do氧基）己酸曱酯（化合物108-3) 標題化合物 1 08-3(250 mg， 17 %)係從化合物 1 07( 1.056 g， 2.69 mmol) 、EDCI HC1(0. 77 g, 40·035mm〇l)、HOBt(0· 545 g，4.035 mmol)、DIPEA(2.085 g，1 6014 mmo 1)及 6-(胺基氧基）己酸曱酯 105-3(0.696 g， 2.69mmol)使用類似於針對化合物108-1(實施例1)敘述之 程序製備：LCMS: 537 [Μ+1Γ。 I 步驟3d. 3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺基）-#-(6-(羥基 胺基）-6-側氧基己基氧基）苄醯胺（化合物3) 標題化合物3(50mg，20 %產率）係從化合物1 08-3(250 mg，0. 47 mmol)及新鮮製備的羥基胺於甲醇（8.0 mL)使用 類似於針對化合物1(實施例1)敘述之程序製備：LC-MS: 538 [M+l] + ; NMR(DMSO-^e): ^ 1 1.750 (s, 1H), 1 0.352(s, 1H), 8, 742(s, 1H), 8. 673(s, 1H), 7. 580 (m, 1H), 7.374(m, 2H), 7.199(m, 1H), 7.660 (m, 1H), 3. 764(m, 2H), 1.942(m，2H), 1.521(m，4H)，1.297(m, 2H)。 1150-9131-PF/Kai 593 200829575 實施例 4:製備 3, 4-二氟-2-(2-氟-4-碘苯基胺 基）-於（7-(羥基胺基）-7-側氧基庚基氧基）苄醯胺（化合物 4) 步驟4a· 7-(苄醯胺氧基）庚酸乙酯（化合物104-4) 標題化合物104-4(0· 635 g， 22 %)係從化合物 103(1.38 g，10 mmol)、NaH(0·48 g，12 mmol)及 6-溴己 酸乙酯（2· 37 g，10 mmol)使用類似於針對化合物1 〇4-1 (實 施例1)敘述之程序製備：LCMS: 294 [M+l]+。 步驟4b· 7-(胺基氧基）庚酸甲酯（化合物105-4) 標題化合物1 05-4(227 mg， 60 %)係從化合物 1 04-4(635 mg，2.17 _〇1)及濃 H2S〇4(223· 6 g，2. 17 mmol) 使用類似於針對化合物10 5 -1 (實施例1)敘述之程序製備： ' 一· .一·•一、一-一^— _ LCMS: 176 [M+l]+ 〇 步驟4c. 7-(3，4-二氟- 2-(2 -氟-4-破苯基胺基）苄醯胺氧 基）庚酸曱酯（化合物108-4) 標題化合物108-4(178 mg，25 %)係從化合物1〇7(501 mg, 1. 27 mmol) - EDCI HC1 (364 rag, 1. 905 mmol) - H0Bt(257 mg, 1. 905 mmol)、DIPEA(656 mg，5· 08 mmol)及 7-(胺基 氧基）庚酸曱酯1 05-4(223 mg, 1·27 mmol)使用類似於針 對化合物108-1(實施例1)敘述之程序製備：LCMS: 551 [M+l]+。 步驟4d· 3,4-二氟-2-(2-氟-4-蛾苯基胺基）—#—(7 —(經基一 胺基）_7-側氧基庚基氧基）苄醯胺（化合物4) 標題化合物4(89mg，54%產率）係從化合物i〇8-4(178 1150-9131-PF;Kai 594 200829575 mg，〇· 3 mmol)及新鮮製備的羥基胺於甲醇（g o mL)使用類 似於針對化合物丨（實施例丨）敘述之程序製備：lcms: 552 CM+1] + ； ]H NMR(DMSO^e): ^ 1 1.699(s, 1H), l〇.329(s, 1H)’ 8.881(s, 1H): 8.645(3, 1H), 7. 575(m, 1H), 1 · 381 (in, 2H), 7. 191 (in, 1H), 6. 6 57(hi, 1H) 3 752Ct
Hz, 2H), 1.934(t, /=7. 2Hz, 2H), 1.482(m, 4H), 1·263(m, 4H)。 生物學試驗： 如同前述，本發明所定義的衍生物，具有抗增生活性。 此等性質可例如使用一種以上下列程序評估： (a)MEK酵素分析 〜一一本—發明化合物之活性可用以下程序決定。N-末端6-His 加標籤 MEK: U ΪΓ&Υ 表 i 方去精製（Ahn et al·，1 994，265，966-970)， 並以Raf-1活化。MEK1之活性，係藉由測量τ —33p_磷酸根 k r - P-ATP引入到n-末端His標籤，激酶突變 (K5 2R)ERK2來評估。其表現於E. c〇H並經習知方法精製。 此试驗實施於96-井聚丙烯盤。溫育混合物（1〇〇#L)包含 20 mM Hepes pH 7· 4、1〇 _ MgCl· sub. 2，ImM EGTA、0· 02%
Bri j、〇· 〇2mg/ml BSA、loo · mu· M 原釩酸鈉、2mM DTT、 〇· 5 nM MEK1及1 /z M ERK2。抑制劑被懸浮於DMSO，所有 反應’包含控制組，係實施於最終濃度為1% DMS0。反應 於 1 // Μ ATP(含 0· 5/z Ci T」3p—ATp/weU)存在下實施，並 於常溫溫育120分鐘。添加等體積25% TCA以中止反應， 595 1150-9131-PF;Kai 200829575 並使蛋白質沉澱。將沉澱的蛋白質捕集於玻璃纖維B濾 盤，並將多餘的經標記ATP使用Tomtec MACH III收集劑 (harvester)洗掉。將平盤風乾，之後添加3〇//L/weU的
Packard Microscint 20，使用 perkin Elmer TopCount 計 數平盤。於此試驗，本發明化合翁^ (b)細胞ERK 1/2磷酸化試驗 本發明化合物之MEK 1 /2抑制性質，可藉由以下體外 細胞試驗決定。抑制基底（basal)ERKl/2磷酸化，係藉由 將細胞與化合物一起溫育1小時，並定量在經固定細胞上 之Perk信號，並常態化至總ERK信號，以決定。 材料及方法··從ATCC得到Malme-3M細胞，並使於 RPMI -1 6 4 0補充有1 〇%胎牛血清之培養基中生長。將細胞 ^«一 — .」丨— 丨 _ 以1 5, 000 cel Is/wel 1播種於96-井盤，並使附著1-2小 時。然後將經稀釋之化合物添加至最終濃度1 % DMS0。1小 時後，將細胞以PBS清洗，並固定於3. 7%多聚甲醛於PBS15 分鐘。接著用PBS/0.1% Triton X-100清洗。將細胞於 Odyssey封鎖緩衝液（LI-COR Biosciences)中封鎖至少1 小時。將抗磷酸化 ERK 1/2(Cell Signaling #9106，單株） 及 Total ERK 12(Santa Cruz Biotechnology #sc_94，多 株）之抗體，添加至此等細胞並至少溫育1小時。以 PBS/0. 1% TritonX-100清洗後，將細胞與螢光標記之2級 抗體（山羊抗兔 IgG-IRDye800，Rockland及山羊抗小鼠 IgG-Alexa Fluor 680，Molecular Probes)溫育額外 1 小 時。然後清洗細胞，並使用 Odyssey Infrared Imaging 1150-9131-PF;Kai 596 200829575
Systemai-COR Biosciences)於2波長分析榮光。鱗酸化 ERK信號，常態化為總ERK信號。 (c)一體外（ya wy試驗，決定受測化合物抑制hmc酵 素活性之能力 HDAC抑制劑使舰 (AK-500, Biomo卜 Plymouth Meeting、PA)篩選。可將受試 化合物溶於二甲基亞砜（DMS0)，以得到2〇 mM工作原濃 f 度。螢光使用WALLAC Vict〇r 2平盤讀取儀測定，並以相 ^ 對螢光單位（RFU)報告。資料使用GraphPad Prisra(v4 ()a) 繪圖，並且使用S型（sigmoidal)拋物線劑量_回應曲線適 合度演算法，計算IC50。 一一—一——一各試驗設定如下：將所有的套組成分解凍，於使用前保 持在冰上。將lieU核59 # #
Tris/Cl ^ PH 8.0, 137 ml NaCl, 2.7 raM KC1, 1 mM MgC12)。製備Trich〇statinA(TSA，正控制組）及受測化 (合物於試驗緩衝液（5χ最終濃度）之稀釋物。將F1⑽r心 LysTM基稀釋於試驗緩衝液成1〇〇 uM(5〇倍=2χ最終）。 將Fluor de LysTM顯影劑濃縮物（例50# 1 + 950 /ζ 1試驗緩 衝液）於冷試驗緩衝液稀釋20倍。第二，將0.2 _ 丁richostatin A 1〇〇-倍稀釋於1χ顯影劑（例1〇//丨於ι ml;最終Tnchostatin A濃度於1χ顯影劑=2//M;添加 HDAC/又貝反應後之最終濃度=丨# M)。添加試驗緩衝液、經 稀釋trichos tat in A或受測抑制劑，至微滴定盤之適當的 井。添加經稀釋之HeLa萃取物或其他HDAC樣本，至所有 1150-9131-PF;Kai 597 200829575 井，除了負控制組。使經稀釋之Fluc)r de LysTM受質及樣 本在微滴定盤中平衡至試驗溫度（例如25或3rc)。藉由 添加經稀釋受質（25#!)至各井並充份混合，以起始化HMC 反應。使HDAC反應進行1小時，接著藉由添加Flu〇r化 Ly&™ .顯影劑(50只1)使反^ 月10-15分鐘。在能於波長35〇_38〇nm之範圍激發的微 滴定盤讀取螢光儀，讀取樣本，並偵測在44〇_46〇nm發射 之光。 以下表14-B列舉本發明代表化合物及及其活性於 HDAC及MEK分析。於此等分析，IC5。使用以下分級：1^ 1MM，10//MMIM//M，1/zMMIIMKl/zM 及 ιν^0·1/ζΜ。 表 14 - Β
化合物編號…- 1 II III 2 III 3 ~ry m 4 IV 此處參照之專利及科學性文獻建立對於熟悉此項技術 之人士可得之知識。所有美國專利及公開或未公開的美國 專利申請案，引入於此作為參考。所有此處引用的公開的 外國專利及專利申請案，係作為參考。所有此處引用之其 他公開的參考文獻、文件、手稿及科學性文獻，係作為參 考。 雖然本發明已具體地顯示並參照其較佳具體例說明， 但應瞭解’對於熟悉此象技術之人士而言，可在不偏離本 發明.附屬之專利申請範圍的範疇下，對本發明之形式及細 1150-9131-PF;Kai 598 200829575 節進行各種改變。 【圖式簡單說明】 前述及其他本發明的目標、特徵及優點，將由以上本 發明'較佳具體例參照附圖之更I定教述而更為顧'明。其中 同類的參照符號代表不同視點的相同的部分。該等圖式不 一定按比例，而是著重於說明本發明的原理。 第1 (a)圖顯示EGFR酵素試驗結果。 第1 (b)顯示HDAC酵素試驗結果。 第2圖顯示在MDA-MB-468乳癌細胞株中之HDAC及 EGFR抑制。第2(a)圖顯示Ac-H4累積，第2(b)圖顯示Ac_H3 累積，第2(c)圖顯示EGFR抑制。 第3圖顯示對抗數種不ΐ癌^ ~± : % 3(a)圖為胰臟癌（BxPC3)，第 3(b)圖為 NSCLC(H1 703)，第 3(c)為圖乳癌（MDA-MB-468)，第3(d)圖為前列腺癌（PC3)。 第4圖顯示化合物12在誘發癌症細胞中之細胞祠亡之 效力。第4(a)圖為HCT-11 6(結腸，24小時），第4(b)圖為 SKBr3(乳房，24小時）。 第5圖顯示化合物12於A431類表皮（Epiderm〇id)腫 瘤異種移植模型（IP投藥）之效力。 第6圖顯示化合物12於H358 NSCLC異種移植模型（2 分鐘IV灌流）之效力。 第7圖顯示化合物12於H292 NSCLC異種移植模型（2 分鐘IV灌流）之效力。 1150-9131-PF;Kai 599 200829575 第8圖顯示化合物12於BxPC3騰臟癌異種移植模型 (2分鐘IV灌流）之效力。 第9圖顯示化合物12於PC3前列腺癌異種移植模型（2 分鐘IV灌流）之效力。 第1 0圖顯示化合物12於HCT116結腸^痒異^重矛夕才直模 型（2分鐘IV灌流）之效力。 苐11A圖顯示在A549 NSCLC異種移植模型中，將動物 以化合物12或載體處理時，腫瘤大小的變化百分比。 第11B圖顯示顯示在A549 NSCLC異種移植模型中，將 動物以Er 1 ot i n i b處理，及控制組，腫瘤大小的變化百分 比。 第1 2A圖顯不在HPAC膜臟癌細胞中，將動物以化合物 1 2、Er 1 〇t ini b或載體處理時，腫瘤大小之變化百分比。 第1 2B圖顯示顯示在HPAC胰臟癌細胞中，將動物以化 合物12、Erlotinib或載體處理時，體重之變化百分比。 第1 3圖顯示投予化合物12之鹽酸、檸檬酸、鈉及酒 石酸鹽後，在血漿、肺及結腸中的化合物1 2濃度。 第14圖顯示在投予化合物12於30% CAPTIS0L之小鼠 血漿中，化合物12的濃度。 第15圖顯示投予IV劑量化合物12(25、50、100、200 及40 0 mg/kg)於3 0% CAPTIS0L後，小鼠體重變化百分比。 第16圖顯示於重複IP投藥化合物12(25、50、100、 200及40 0 mg/kg)於3 0% CAPTIS0L7日後，小鼠體重變化 百分比。 1150-9131-PF;Kai 600 200829575 第17圖顯示以IV投藥化合物12(25、50、100、200 mg/kg)於30% CAPTISOL後，大鼠體重變化百分比。 【主要元件符號說明】 無0 1150-9131-PF;Kai 601

Claims (1)

  1. 200829575 十、申請專利範圍： 1· 一種多功能小分子化合物，其中之—功能為抑制組 蛋白去乙醯基酶（HDAC)，另-功能為抑制涉及異常細胞增 生、分化或存活之至少另一細胞或分子路徑。 2·如申請專利範圍第丨項所述之多功能小分子化合 物，其中該細胞或分子路徑擇自於··酪胺酸激酶、絲胺酸〆 蘇胺酸激酶、DNA甲基轉移酶、蛋白酶體、基質金屬蛋白 酶、脂肪酸轉移酶（farnesyl transferase)、熱休克蛋白 質及細胞调亡。 3·如申請專利範圍第丨項所述之多功能小分子化合 物，其中該細胞或分子路徑為EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、 VEGFR'2、VEGFR-3Flt-3、c-kit、Abl、 JAK、PDGFR-a、PDGFR-b、IGF-IR、C-Met、FGFR1、FGFR3、 FGFR4 、 c-Ret 、 Src 、 Lyn 、 Yes 、 pkc 、 CDK 、 Erk 、 Merk 、 PI3K-Akt、mTOR、Raf、CHK、Aurora、HSP90、TRAILR、 caspases 、 IAPs 、 Be卜2 、 Survivin 、 MDM2 、 MDM4 。 4· 一種化合物，以（i)表示， A-B-C(I) 或其幾何異構物、鏡像異構物、非鏡像異構物、外消 方疋體、藥學上可接受之鹽、前驅藥及溶劑合物，其中A為 一抗癌藥劑之藥效團，其抑制涉及異常細胞增生、分化或 存活之至少1種細胞或分子路徑；B為一連結基團且C為 一鋅結合結構。 5·如申請專利範圍第4項所述之化合物，其中該抗癌 1150-9131-PF;Kai 602 200829575 藥劑擇自於以下物質之抑制劑：EGFR、ErbB2、ErbB3、 ErbB4、HER-2、VEGFR-：l、VEGFR-2、VEGFR-3Flt-3、c-kit、 Abl 、 JAK 、 PDGFR-a 、 PDGFR_b 、 IGF-IR 、 c-Met 、 FGFR1 、 FGFR3、FGFR4、c-Ret、Src、Lyn、Yes、PKC、CDK、Erk、 ^erk- f mTOR- Raf - CHK - Aurora > HSP90- TRAILR - caspases 、 IAPs 、 Bel-2 、 Survivin 、 MDM2 、 MDM4 o 6 ·如申請專利範圍第4項所述之化合物，其中[為一 鋅結合結構，其擇自於以下所構成之族群··
    ;其中W為〇或S; γ為不存在、μ CH;Z
    代的脂肪族；
    (b) ;其中 Rn為氫或低級烷基； w為〇或s;j為〇、NH，或NCH3;及
    ，其中W為〇或s; 獨立地為N、c
    Y及W與上述定義相同；Rii、 1150-9131-pF;Kai 603 200829575 R:獨立地擇自於:氳或脂肪族；R'、m獨立地擇自於: 虱、經基、胺基、齒素、燒氧基、經取代的烧氧基、烧基 胺基、經取代㈣基胺基、二烧基胺基、經取代的二烧基 胺基、經取代或未經取代之烧硫I、經取代或未經取代之 燒基績醯基、CF3、CN、N〇2、N3、績醯基、醯基、脂肪族、 經取代的脂肪族、芳基、經取代的芳基、雜芳基、經取代 的雜芳基、雜環及經取代的雜環。 7·如申請專利範圍第6項所述之化合物，其中c為一 辞結合結構擇自於以下所構成之族群： η〇-Λ/ k . (a) r8 ;其中R8擇自於：氳或低級烷基；以及 R1 NH2 -—R Ο.......................................- -- —— νΑΝΛ/ -— (b) ^12 ;其中Ri、R2及r3獨立地擇自於：氫、 羥基、CF3、N〇2、N3、_素、低級烷基、低級烷氧基、低紹 烷基胺基、烷氧基烷氧基、烷基胺基烷氧基苯基、噻吩基 呋喃基、吡嗪基、經取代的吡嗪基及嗎啉代（m〇rph〇iin〇) 且Rn擇自於··氫或低級烷基。 8 ·如申请專利範圍第4項所述之化合物，其中b為一 直接鍵結或直鏈或分支鏈、經取代或未經取代之烷基、經 取代或未經取代之烯基、經取代或未經取代之炔基、芳基 烧基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基、 雜芳基炔基、雜環基烧基、雜環基烯基、雜環基炔基、芳 基、雜芳基、雜環基、環烷基、環烯基 '烷基芳基烷基、 1150-9131-PF;Kai 604 200829575 烧基芳基烯基、烧基芳基炔基、烯基芳基烧基、蝉基芳基 烯基、烯基芳基炔基、炔基芳基烷基、炔基芳基烯基、炔 基方基炔基、烷基雜芳基烷基、烷基雜芳基烯基、烷基雜 芳基炔基、烯基雜芳基烷基、烯基雜芳基烯基、烯基雜芳 基块基、炔基雜芳基烷基、烘基雜芳基烯基、炔基雜芳基 炔基、烷基雜環基烷基、烷基雜環基烯基、烷基雜環基炔 基、烯基雜環基烷基、烯基雜環基烯基、烯基雜環基炔基、 炔基雜環基烷基、炔基雜環基烯基、炔基雜環基炔基、烷 基芳基、烯基芳基、炔基芳基、烷基雜芳基、烯基雜芳基， 或alkynylhereroaryi，其中一或複數個亞甲基可被以下 所中斷或終結：0、S、S(0)、s〇2、N(R8)、c(〇)、經取代或 -未經取代之，芳基、經取代或未經取代之雜芳基、經取代或 未經取代之雜環，其中Rs與申請專利範圍第^ 同。 9·如申請專利範圍第4項所述之化合物，其中B為一 直鏈，為烷基、烯基、炔基、芳基烷基、芳基烯基、芳基 炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基、雜芳基炔基、雜環基烷 基、雜環基烯基、雜環基炔基、芳基、雜芳基、雜環基、 環烷基、環烯基、烷基芳基烷基、烷基芳基烯基、烷基芳 基炔基、烯基芳基烷基、烯基芳基烯基、烯基芳基炔基、 炔基芳基烷基、炔基芳基烯基、炔基芳基炔基、烷基雜芳 基烧基烧基雜芳基烯基、烧基雜芳基炔基、烯基雜芳基 烷基、烯基雜芳基烯基、烯基雜芳基炔基、炔基雜芳基烷 基、炔棊雜芳基烯基、炔基雜芳基炔基、烷基雜環基烷基、 605 1150-9131-PF/Kai 200829575 烧基雜環基烯基、烧基雜環基炔基、烯基雜環隸基、稀 基雜裱基烯基、烯基雜環基炔基、炔基雜環基烷基、炔基 雜環基烯基、炔基雜環基炔基、烷基芳基、烯基芳基、炔 基芳基、烷基雜芳基、烯基雜芳基，或alkynylherer〇aryl， 其中——或複數個亞甲基可被以下所中斷或終結：—〇 一、 -N(R8)-、-c(0)-、—c(〇)n(R8)一，或—c(〇)〇-，其中 r8 與申 請專利範圍第6項之定義相同。 I 0 ·如申請專利範圍第4項所述之化合物，其中b介於 1 -24個原子，較佳為4_24個原子，又較佳為4-18個原 子’更佳為4-12個原子，且最佳為約4-1〇個原子。 II ·如申请專利範圍第4項所述之化合物，其中b擇自 於：直鏈 Cl-C10 烧基、C1-C10 烯基、C1-C10 炔基、Cl-C10 ' — -一.......-一 —-一， — --------____________________________ ____________ _______— 烧氧基、烷氧基Cl-C10烷氧基、C1-C10烷基胺基、烷氧 基C1-C10烧基胺基、C1-C10烷基羰基胺基、C1-C10烷基 胺基羰基、芳基氧基Cl-C10烷氧基、芳基氧基Cl-C10烷 基胺基、芳基氧基C1-C1G烷基胺基羰基、C1-C10-烷基胺 基烧基胺基羰基、C1-C10烷基（N-烷基）胺基烷基-胺基羰 基、烷基胺基烷基胺基、烷基羰基胺基烷基胺基、烷基（N-烷基）胺基烷基胺基、（N-烷基）烷基羰基胺基烷基胺基、烷 基胺基烷基、烷基胺基烷基胺基烷基、烷基哌嗪基烷基、 哌嗪基烷基、烷基哌嗪基、烯基芳基氧基Cl-C10烷氧基、 烯基芳基胺基C1-C10烷氧基、烯基芳基烷基胺基C1—cl〇 烷氧基、烯基芳基氧基Cl-CIO烷基胺基、烯基芳基氧基 C1:C10烷基胺基羰基、哌嗪基烷基考基、雜芳基c卜C10 1150-9131-PF/Kai 606 200829575 烧基、雜芳基C2-C1G稀基、雜芳基C2_C1()块基、雜芳基 n-cio烷基胺基、雜芳基c卜cl〇 &氧基、雜芳基氧基 n-cio烧基、雜芳基氧基C2_nG烯基、雜芳基氧基c2_ci〇 炔基、雜芳基氧基n-C10烷基胺基、雜芳基氧基n-C10 炫氧基。 12·如申請專利範圍帛4項所述之化合物，其巾c為一 鋅結合結構擇自於以下所構成之族群： W R9、子人A (a) 7，其中w為0或S; Y為不存在、N或CH; Z 為N或CH，R7及R9獨立地為氫、經基、脂肪族基團，但是 若…均存在，則…其中之-必需為經基，且若Y ^ Λ Rs全氫或脂肪族基團； 略 — (、） ’其中？為0或S;J為〇、NH或NCH3;及Rn 為氮或低級烧基； (c) 或CH;以及
    ’其中W為〇或s;匕及Ζι獨立地為n、 nh2 ⑷1¾ ” ^獨立地擇自於氣或脂:：及¥與前述定義相同;R"、 虱、羥基、胺基、_素、 评 cf3、cn、n〇2、磺醯基 二烷基胺基、二烷基胺基、 土、月旨肪族、經取代的脂肪族、 1150-9131-PF;Kai 607 200829575 方基、經取代的芳基、雜关美缚敗 雊方暴、，&取代的雜芳基、雜環及 經取代的雜環。 13·如申請專利範圍第4項所述之化合物，其中c為 一鋅結合結構，其擇自於以下所構成之族群： 'V ;其中R8擇自於：氫或低級烷基； R! nh2 (a) K · 以及 其中Ri、R2及R3獨立地擇自於：氫、 羥基、CF3、N〇2、_素、低級烷基、低級烷氧基、低級烷基 胺基、烷氧基烷氧基、烷基胺基烷氧基、苯基、噻吩基、 呋喃基、吡嗪基、經取代的吡嗪基及嗎啉代；且擇自於： 氳或抵氣燒基 14.如申請專利範圍第4項所述之化合物，其中b為一 直接鍵結或直鏈或分支鏈、經取代或未經取代之烷基、經 取代或未經取代之烯基、經取代或未經取代之炔基、芳基 烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基、 雜芳基炔基、雜環基烷基、雜環基烯基、雜環基炔基、芳 基、雜芳基、雜環基、烷基芳基烷基、烧基芳基烯基、烷 基芳基炔基、烯基芳基烷基、烯基芳基烯基、烯基芳基炔 基、快基芳基烷基、炔基芳基烯基、炔基芳基炔基、烷基 雜芳基烧基、烷基雜芳基烯基、烷基雜芳基炔基、烯基雜 芳基烧基、稀基雜芳基婦基、烯基雜芳基炔基、快基雜芳 基烧基、炔基雜芳基烯基、炔基雜芳基炔基、烷基雜環基 1150-9131-PF/Kai 608 200829575 =基、録«基職、院基雜環基快基、稀基雜環基烧 土 基烯基、歸基雜環基炔基、炔基雜環基烧基、 块基雜環基縣、祕雜環基块基，其巾_或複數個亞甲 基可被以下所中斷或終結：0、s、s(〇)、s〇2、n(r8)、c(〇)、 經取代或未絲狀料、絲代m取叙雜芳基、 經取代或未經取代之雜環；其中R8之定義與中請專利範圍 第12項相同。 1 5·如申請專利範圍第4項所述之化合物，其中B為 直鏈烧基、烯基、炔基、芳基炫基、芳基烯基、芳基炔基 ㈣基㈣、料基縣、”基㈣、雜環錢基、雜 環基烯基、雜環基块基、芳基、雜芳基、雜環基、烧基芳 基烧基、烷基 、炔基芳基 烯基、炔基芳基炔基、烷基雜芳基烷基、烷基雜芳基烯基、 ㈣雜芳基快基、烯基雜芳基烧基、烯基雜芳基烯基、稀 基雜芳基炔基、炔基雜芳基烷基、炔基雜芳基烯基、炔基 雜芳基炔基、烷基雜環基烷基、烷基雜環基烯基、烷基雜 環基炔基、烯基雜環基烷基、烯基雜環基烯基、烯基雜環 基炔基、炔基雜環基烷基、炔基雜環基烯基，或炔基雜環 基炔基’其中一或複數個亞甲基可被以下所中斷或終 結：-0-、-N(R8)-、-C(〇)_、-C(〇)N(R〇-，或-c(0)0-，其 中R8與申請專利範圍第12項之定義相同。 1 6·如申請專利範圍第4項所述之化合物，其中b擇自 於：直鏈 Cl-C10 烷基、Cl-C10 烯基、Cl-C10 炔基、Cl-C10 1150-9131-PF;Kai 609 200829575 烷氧基、烷氧基C1-C10烷氧基、c卜CIO烷基胺基、烷氧 基C1-C10烷基胺基、Cl-C10烷基羰基胺基、Cl-C10烷 基胺基羰基、芳基氧基Cl-C10烷氧基、芳基氧基Cl-C10 烷基胺基、芳基氧基C1-C10烷基胺基羰基、C1-C10-烷基 胺基-燒基胺基藥基、C1-C14院基（N-跪基)胺基烧基胺基 罗炭基、烧基胺基烧基胺基、烧基毅基胺基烧基胺基、烧基 (N-烷基）胺基烷基胺基、（N-烷基）烷基羰基胺基烷基胺 基、烷基胺基烷基、烷基胺基烷基胺基烷基、烷基哌嗪基 f * 烷基、哌嗪基烷基、烷基哌嗪基、烯基芳基氧基Cl-CIO烷 氧基、烯基芳基胺基Cl-CIO烷氧基、烯基芳基烷基胺基 Cl-C10烷氧基、烯基芳基氧基Cl-C10烷基胺基、烯基芳 基氧基C1-C1Q烧基胺基幾基及旅嗪基烧基芳基。 .—、〜一―——— _ _ 1 7. —種藥學組合物，包含申請專利範圍第i或4項之 化合物作為活性成分，及一藥學上可接受之載體。 18· —種治療於一需要之個體中之細胞增生性病症的 ( 藥學組合物，包含一治療上有效量之申請專利範圍第17項 之藥學組合物。 1 9· 一種治療及/或預防於一需要之個體中之免疫反應 或免疫媒介反應及疾病的藥學組合物，包含—治療上有效 量之申請專利範圍第17項之藥學組合物。 ”" 2 0 · —種治療一 藥學組合物，包含一 之藥學組合物。 需要之個體中之神經退化性疾病的的 治療上有效量之申請專利範圍第17項 1150-9131-PF;Kai 610
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