TW200304818A - Kinase inhibitors - Google Patents

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200304818 ⑴ 玫、發明镜明 (發明說明應敘明：發明所屬之技術領域、先前技術、内容、實施方式及圖式簡單說明) 技術領域 有至少400種酶被確認為蛋白質激酶。此等酶會催化標 的蛋白質受質之磷醯化作用。磷醯化作用經常為磷酸根基 團從ATP至蛋白質受質之轉移反應。在磷酸根所轉移之標 的受質中之特定結構，係為酪胺酸、絲胺酸或蘇胺酸殘基 。由於此等胺基酸殘基係為磷醯基轉移之標的結構，故此 等蛋白質激酶常被稱為酪胺酸激酶或絲胺酸/蘇胺酸激 酶。 在酶胺酸、絲胺酸及蘇胺酸殘基上之磷酿化反應與抵抗 之磷酸酶反應，係涉及無數細胞過程，此等過程係為對各 種不同胞内訊息（典型上係經過細胞受體所媒介）、細胞功 能之調節及細胞過程之活化或失活之回應之基礎。蛋白質 激酶之階式反應經常參與胞内訊息轉導，且為達成此等細 胞過程所必須。由於其到處存在於此等過程中，故可發現 蛋白質激酶作為漿膜之一個完整部份或作為細胞質酶或 被定位於核中，經常作為酶複合物之成份。在許多情況中 ，此等蛋白質激酶係為決定細胞過程於何處及何時發生在 胞内之酶與結構蛋白質複合物之必要元素。 蛋白質酪胺酸激酶 蛋白質酪胺酸激酶（PTK)為會催 化特定酪胺酸殘基在細胞蛋白質中之轉醯化作用之酶。此 等受質蛋白質（經常是酶本身）之此種轉譯後修改，係充作 用以調節細胞增生、活化或分化之分子開關（關於回顧， 可參閱 Schlessinger與 Ulrich，1992，Neuron9 : 383-391)。迷行或過 200304818 (2) 度PTK活性已在許多疾病狀態中發現，包括良性與惡性增 生性病症，以及由於免疫系統之不適當活化作用所造成之 疾病（例如自身免疫病症），同種移植排斥，及移植物抗宿 主疾病。此外，内皮細胞專一受體ΡΤΚ，譬如KDR與Tie-2 ，會媒介血管生成過程，且因此涉及支援癌症及其他涉及 不適當血管形成之疾病（例如糖尿病患者之視網膜病，由 於與老化有關聯之斑點變性所致之脈絡膜新血管生成作 用，牛皮癖’關節炎，早產之視網膜病，幼兒血管瘤）之 發展。 酪胺酸激酶可為受體型（具有胞外跨膜與胞内功能部位） 或非受體型（完全為胞内）。 受鑀鎔脣遽激游⑺7X)· RTK係包括大族群之具有各種不 同生物活性之跨膜受體。目前已確認至少十九（19)種不同 RTK亞族群。受體酪胺酸激酶（RTK)族群，係包括對於多種 細胞類型之生長與分化具決定性之受體（Yarden與 Ullrich, Ann· Rev. Biochem. 57 ·· 433-478,1988 ； Ullrich 與

Schlessinger，Cell61 : 243-254，1990)。RTK之此種固有功能，係 於配位體結合時被活化，其會造成受體與多種細胞受質之 磷醯化作用，及接著造成多種細胞回應（Ullrich&Schlessinger， 1990，Cell61 : 203-212)。因此，受體酪胺酸激酶所媒介之訊 息轉導，係經由與特定生長因數（配位體）之胞外交互作用 而被引發，典型上係接著為受體二聚合作用，固有蛋白質 酪胺酸激酶活性之刺激，及受體轉磷醯化作用。於是對胞 内訊息轉導分子產生結合位置，及導致與一範圍之胞體漿 200304818 Ο) 1^™ 發出訊息分子形成複合物，該發出訊息分子會促進適當細 胞回應（例如細胞分裂、分化、代謝作用、胞外微環境之 改變）；參閱 Schlessinger與 Ullrich，1992，Neuron9 : 1-20 〇 具有SH2 (src同種性-2)或磷酸酪胺酸結合（PTB)功能部位 之蛋白質，係以高親和力結合經活化之酪胺酸激酶受體及 其受質，以傳播訊息至細胞中。此兩個功能部位會辨識磷 酸酪胺酸（Fantl等人，1992，Cell69: 413-423; Songyang等人，1994, Mol· Cell· Biol.14: 2777-2785; Songyang等人，1993, Cell72: 767-778 ;及 Koch 等人，1991，Science252 ·· 668-678 ； Shoelson，

Curr· Opin. Chem· Biol. ( 1997)， 1(2)， 227-234 ； Cowburn，

Curr.Opin.Struct.Biol· (1997)，7(6)，835-838)。數種與受體酪胺 酸激酶（RTK)結合之胞内受質蛋白質，已被確認。可將其 區分成兩種主要族群··（ 1)具有催化功能部位之受質；與 (2)缺乏此種功能部位，但充作接合體，並與具催化活性 之分子結合之受質（Songyang等人，1993, Cell72 : 767_778)。在 受體或蛋白質及其受質之SH2或PTB功能部位間交互作用 之專一性，係決定於緊鄰地圍繞磷醯基化酪胺酸殘基之胺 基酸殘基。例如，在S Η 2功能部位與在特定受體上圍繞磷 酸酪胺酸殘基之胺基酸順序之間，於結合親和力上之差異 ，係與在其受質磷醯化作用分佈形態上所發現之差異有關 聯（Songyang等人，1993, Cell72 : 767-778)。觀察指出各受體酪 胺酸激酶之功能，不僅決定於其表現型式與配位體可利用 性，而且決定於被特定受體活化之下游訊息轉導途徑之陣 列，以及彼等刺激之計時與延續時間。因此，磷醯化作用 200304818

⑷ 係提供一個重要調節步騾，其係決定經由專一生長因數受 體以及分化因數受體所補充之發出訊息途徑之選擇性。

數種受體路胺酸激酶，譬如FGFR-l、PDGFR、TIE-2及c-Met ，及結合至其上之生長因數，已被指出在血管生成上扮演 一項角色，惟一部份可間接促進血管生成（Mustonen與Alitalo, J. CellBiol. 129 : 895-898，1995)。一種此類受體酪胺酸激酶， 稱為胎兒肝臟激酶l^(FLK-l)，係為RTK之第III型亞組之一 員。關於人類FLK-1之一種替代名稱，係為含激酶插入功 能部位之受體三（KDR)(Terman等人，Oncogene6 : 1677-83，1991) 。關於FLK-1/KDR之另一種替代名稱，係為血管内皮細胞 生長因數受體2三（VEGFR-2)，因其係以高親和力結合VEGF 。FLK-1/VEGFR-2之老鼠變型，亦已被稱為NYK(Oelrichs等人 ，Oncogene8(l) : 11-15，1993)。DNA編碼之老鼠、大老鼠及人 類FLK_1已被單離，且核苷酸與編碼之胺基酸順序已被報 告（Matthews等人，Proc.Natl· Acad. Sci.USA，88 : 9026-30，1991 ; Terman等人 ，1991，如前文出處 ；Terman等人 ，Biochem.Biophys.Res. Comm· 187 : 1579- 86，1992 ; Sarzani 等人， 如前文出處；及Millauer等人，Cell72 : 835-846，1993)。許多研 究，譬如在Millauer等人（如前文出處）中所報告者，指出 VEGF與FLK-1/KDR/VEGFR-2為一種配位體-受體對，其在血 管内皮細胞增生上，及血管形成與發芽上，個別稱為脈管 發生與血管生成，係扮演一個重要角色。 另一種第III型亞組RTK，稱為似fms赂胺酸激酶-1三（Fit-1) ，係與 FLK-1/KDR有關聯（DeVries等人，Science255; 989-991，1992 -10- 200304818

;Shibuya等人，Oncogene5 : 519-524，1990)。關於 Flt-l之一種 替代名稱為血管内皮細胞生長因數受體Ie(VEGFR-I)。迄 今，已發現 FLK-1/KDR/VEGFR-2與 Flt-1/VEGFR-l亞族群之成 員，主要係在内皮細胞上表現。此等亞組成員係特別地被 配位體之血管内皮細胞生長因數（VEGF)族群之成員所刺 激（Klagsburn與D’Amore，細胞活素&生長因數回顧7 : 259-270, 1996) 。血管内皮細胞生長因數（VEGF)係以較高親和力結合 至Flt-l，勝於對FLK-1/KDR，且為有絲分裂原，朝向血管内 皮細胞（Terman等人，1992,如前文出處；Mustonen等人，如前文 出處；DeVries等人，如前文出處）。鹹認Flt-l在血管發展期 間，對於内皮機體形成係為必要的。Flt-l表現係與在老鼠 胚中之早期血管發展有關聯，及與在傷口癒合期間之新血 管生成作用有關聯（Mustonen與Alitalo,如前文出處）。Flt-l在 單細胞、破骨細胞及成骨細胞中，以及在成人組織（譬如 腎小球）中之表現，指出此受體之另一種功能，其係與細 胞生長無關聯（Mustonen與Alitalo,如前文出處）。 如前文所述，最近証據指出VEGF在正常與病理學血管 生成之刺激上，扮演一項角色（Jakeman等人，内分泌學期刊 133 : 848-859，1993 ; Kolch等人，乳癌研究與治療 36 : 139- 155, 1995 ; Ferrara等人，内分泌回顧 18(1) ; 4-25，1997 ; Rermra等人， 血管生成之調節（L.D.Goldberg 與 E.M.Rosen 編著），209-232, 1997) 。此外，VEGF已被牵連在血管滲透性之控制與加強 上（Connolly等人，J.Biol· Chem·264 : 20017-20024，1989 ; Brown 等人，血管生成之調節（L_D. Goldberg與E.M.Rosen編著 200304818 ⑹

)，233-269， 1997)。 源自mRNA之替代接合之VEGF之不同形式，已經報告， 包括由Ferrara等人所述之四類物種（J· Cell· Biochem.47 : 211-218，1991)。VEGF之兩種經分泌及主要與細胞有關聯之 物種，已被Ferrara等人（如前文出處）確認’且已知此蛋白 質係以二硫化物連結之二聚體形式存在。

VEGF之數種有關聯之同系物，最近已經確認。但是， 其在正常生理學與疾病過程中之角色，則尚未被解釋。此 外，VEGF族群之成員經常與VEGF在許多組織中共表現， 且通常能夠與VEGF形成異種二聚體。此性質可能會改變 異種二聚體之受體專一性與生物作用，且進一步使其專一 功能之解釋複雜化，如下文所示（Korpelainen與Alitalo, Curr.Opin.CellBiol·，159- 164，1998及其中引述之參考資料）。

胎盤生長因數（P1GF)具有一種胺基酸順序，其顯示對 VEGF順序之顯著同種性（Park等人，J.BioLChem.269: 25646-54, 1994; Maglione等人，Oncogene8: 925-31，1993)。與 VEGF—樣， P1GF之不同物種係源自mRNa之替代接合，且蛋白質係以二 聚體形式存在（Park等人，如前文出處）。P1GF-1與P1GF-2係以 高親和力結合至Flt-Ι，且P1GF-2亦密切結合至神經匹林-1 (Migdal等人，J.Biol.Chem. 273(35) : 22272-22278)，但均不結合 至FLK-l/KDR (Park等人，如前文出處）。已報告當VEGF以低 濃度存在時（主要是由於異種二聚體形成），P1GF會強化 VEGF對於内皮細胞之血管滲透性與有絲分裂原作用兩者 (Park等人，如前文出處）。 -12- 200304818

(7) VEGF-B係被製成兩種異構重組物（167與185殘基），其亦 顯示結合Flt-1/VEGFR-l。其可在尿激酶型血纖維蛋白溶酶 原活化劑與血纖維蛋白溶酶原活化劑抑制劑1之胞外基質 降解之調節，細胞黏連，及經過調製錶現與活性之潛移上 ，扮演一項角色（Pepper等人，Proc.Natl. Acad. Sci. U.S.A.( 1998)， 95(20): 11709-11714)。 VEGF_C最初係被無性繁殖成VEGFR-3/FU-4用之配位體，

其主要係以淋巴内皮細胞表現。在其完整處理形式中， VEGF-C亦可結合KDR/VEGFR-2，並刺激内皮細胞在活骨豊夕卜 之增生與潛移，及在活體内模式中之血管生成（Lymboussaki 等人，Am.J.Pathol.(1998)，153(2) : 395-403 ; Witzenbichler等人， Am.J.Pathol.(1998)，153(2)，381-394)。VEGF-C之轉基因過度表現 ，會造成只有淋巴管之增生與腫大，然而血管不受影嚮。 與VEGF不同，VEGF-C之表現不會因缺氧而引致（Ristimaki 等人，J.Biol.Chem· (1998)，273 (14)，8413-8418)。

最近發現之VEGF-D於結構上極類似VEGF-C。據報告 VEGF-D係結合並活化至少兩種VEGFR，VEGFR-3/Flt-4與 KDR/VEGFR-2 〇其最初係被無性繁殖成供成纖維細胞用之 c-fos可引致之有絲分裂原，且最突出地表現於肺臟與皮膚 之間葉細胞中（Achen等人，Proc.Natl.Acad.Sci. U.S.A.(1998)，95(2)， 548-553及其中之參考資料）。 如同關於VEGF，VEGF-C與VEGF-D已被請求，當被注入皮 膚組織中時，在活體内Miles檢測中會引致增加血管滲透性 (PCT/US97/14696 ; WO98/07832, Witzenbichler等人，如前文出處） -13- 200304818

。此等配位體在表現彼等之組織中，於調制血管滲透性過 大與内皮回應上之生理學角色與重要性，仍然不確定。 最近已報告一種病毒編碼之新穎類型血管内皮生長因 數VEGF-E (NZ_7VEGF)，其係優先地利用KDR/Flk-l受體，並 帶有有效之有絲分裂活性，未具有肝素結合功能部位 (Meyer 等人，EMBOJ.(1999)，18(2)，363-374 ; Ogawa 等人， J.Biol.Chem.(1998)，273(47)，31273-31282)。VEGF-E順序對哺乳動 物VEGF具有25%同種性，且被副痘病毒Orf病毒（OV)編碼。 此副痘病毒會影嚮綿羊與山羊，及有時為人類，以產生具 有血管生成之損傷。VEGF-E為約20kDa之二聚體，未具有基 本功能部位，亦未具有對肝素之親和力，但具有存在於所 有哺乳動物VEGF中之特徵性半胱胺酸結頭主體，且令人 驚訝地發現具有類似VEGF-A之肝素結合VEGF165異構重組 物之功效與生物活性，意即兩種因數均會刺激組織因數 (TF)釋出，活體外經培養血管内皮細胞之增生、向化性及 發芽，以及活體内血管生成。類似VEGF165，已發現VEGF-E 會以高親和力結合至VEGF受體-2 (KDR)，而造成受體自磷 酸化作用，及在自由態胞内Ca2+濃度上之兩相上升，然而 與VEGF165成對比，VEGF-E不會結合至VEGF受體·1 (Flt_l)。 基於來自VEGF與VEGFR之其他同系物之發現，及配位體 與受體之異種二聚合作用之前例，此種VEGF同系物之作 用可能涉及VEGF配位體異種二聚體之形成，及/或受體 之異種二聚合作用，或結合至尚未發現之VEGFR (Witzenbichler等人，如前文出處）。而且，最近報告指出神經 200304818

匹林- l(Migdal 等人，如前文出處）或 VEGFR_3/Flt-4 (Witzenbichler 等人，如前文出處），或KDR/ VEGFR-2以外之受體，可能涉 及引致血管滲透性（Stacker，S A , Vitali，A，Domagala，T，Nice，E 及 Wilks，AF，” 血管生成與癌症”會議，Amer Assoc CancerRes， 1998年 1 月，Orlando, FL; Williams, Diabetelogia40: S118-120 (1997)) 。直到目前為止，尚未揭示KDR在VEGF所媒介之血管滲透 性過大上之基本角色之直接註據。

非受體酪胺酸激西聲 非受體酪胺酸激酶係代表細胞酶 之聚集，其缺乏胞外與跨膜順序。目前，已確認超過二十 四種個別非受體酪胺酸激酶，包括十一（11)種亞族群（Src， Frk，Btk，Csk，Abl，Zap70, Fes/Fps，Fak，Jak，Ack及 LIMK)。目前，非 受體酪胺酸激酶之Six亞族群，係由最大數目之PTK所組成 ，且包含 Src，Yes, Fyn，Lyn，Lck，Blk，Hck，Fgr 及 Yrk。此等酶 之Src亞族群已被連接至腫瘤生成與免疫回應。非受體酪 胺酸激酶之更詳細討論，係提供於Bolen，1993，Oncogene8 : 2025-2031中，其係併於本文供參考。

許多酪胺酸激酶，無論是RTK或非受體酪胺酸激酶，已 發現其係涉及細胞發出訊息途徑，此等途徑係涉及許多致 病症狀，包括癌症、牛皮癬及其他過高增生性病症或過高 免疫回應。 先前技術 化合物調制之發展 鑒於PTK對於細胞增生、與異 常細胞增生有關聯之疾病與病症之控制、調節及調制之推 測重要性，已進行許多嘗試，使用多種研究途徑以確認受 -15- 200304818

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體與非受體酶胺酸激酶π抑制劑”，包括使用突變型配位體 (美國專利申請案4,966,849)、可溶性受體與抗體（申請案編 號 W094/10202 ; Kendall&Thomas，1994，Pr〇c. Natl.Acad. Sci90 : 10705-09 ; Kim等人，1993，Nature362 ·· 841-844)、RNA配位體 (Jellinek 等人，Biochemistry33 ·· 10450-56 ; Takano 等人，1993, Mol.Bio.Cell4: 358A; Kinsella等人，1992, Exp.CellRes.199: 56-62 ;Wright等人，1992, J.CellularPhys.152 : 448-57)及酪胺酸激酶抑 制劑（WO94/03427; WO92/21660; W091/15495; WO94/14808;美 國專利 5,330,992 ; Mariani等人，1994，Proc.Am_Assoc_CancerRes.35 :2268)。

最近，已進行嘗試以確認充作酪胺酸激酶抑制劑之小分 子。例如，雙單環狀、雙環狀或雜環狀芳基化合物 (PCTWO92/20642)及次乙晞基-氮吲哚衍生物（PCTWO94/14808) 已被一般性地描述為酪胺酸激酶抑制劑。苯乙晞基化合物 (美國專利5,217,999)、苯乙婦基取代之吡啶基化合物（美國 專利5,302,606)、某些喹唑啉衍生物（EP申請案0566266A1 ;

ExpertOpin· Ther.Pat.(1998)，8(4) ; 475-478)、硒基吲哚與硒化物 (PCTWO94/03427)、三環狀多羥基化合物（PCTW092/91660)及苄 基膦酸化合物（PCTW091/15495)已被描述為作為酷胺酸激酶 抑制劑使用之化合物，用於治#癌症。苯胺基蜂琳 (PCTW097/34876)與喹唑啉衍生化合物（PCTW097/22596 ; PCTW097/42187)已被描述為血管生成與血管滲透性之抑制 劑。 此外，已進行嘗試以確認充作絲胺酸/蘇胺酸激酶抑制 -16- 200304818

(11) 劑之小分子。例如’雙（啕哚基順丁烯二醯亞胺）化合物已 被描述為抑制特定PKC絲胺酸/蘇胺酸激酶異構重組物 ，其訊息轉導功能係與VEGF-相關疾病中之改變血管渗透 性有關聯（PCTW097/40830 ; PCTWO97/40831)。

Plk-Ί激Sfe抑制劑

Plk-Ι為絲胺酸/蘇胺酸激酶，其係為細胞循環進展之重 要調節劑。其在有絲分裂紡錘體裝置之組裝與動態功能上 ’係扮演關键角色。Plk-Ι與相關激酶亦已被証實係密切地 涉及其他細胞循環調節劑譬如環素依賴性激酶之活化與 失活。高程度之Plk-Ι表現係與細胞增生活性有關聯。其經 常被發現於不同起源之惡性腫瘤中。預期Plk-Ι之抑制劑係 經由使涉及有絲分裂纺錘體與不適當地活化之環素依賴 性激酶之過程瓦解，而阻斷癌細胞增生。

Cde2 /環音B激醢抑制劑（Cdc2亦被稱為cdkl)

Cdc2 /環素B為另一種絲胺酸/蘇胺酸激酶，其係歸屬 於環素依賴性激酶（cdk)族群。此等酶係涉及細胞循環進展 不同時期之間之關鍵性轉移。贼信未經控制之細胞增生， 其係為癌症之正字標記’係依賴此等細胞中提高之cdk活 性。藉由cdc2 /環素B激酶抑制劑，抑制癌細胞中提高之 edk>舌性，可壓抑增生作用’並可恢復細胞循環進展之正 常控制。 特別地藉由調制受體與非受體酪胺酸及絲胺酸/蘇胺 &數轉之活性，以調節與調制異常或不適當細胞增生、分 化或新陳代謝作用，以抑制訊息轉導與細胞增生之有效小 17- 200304818

(12) 化合物之確認，因此係為一般所期望的。特定言之，特別 地抑制酪胺酸激酶功能之方法與化合物之確認將是有利 的，該赂胺酸激酶係為血管生成過程或血管滲透性過大之 形成所必須，而導致水腫、水腹、滲液、滲出物及巨分子 外滲與基質沈積，以及有關聯之病症。 發明内容 本發明係提供式I化合物，

其外消旋-非對映異構物混合物、光學異構物、藥學上 可接受之鹽、前體藥物或生物活性新陳代謝產物，其中 在式（I)結構中之虛線表示選用之雙鍵； X 為 CR1或 NR1 ; Y 為 Ο、CRq或 N ; Q 為 N、NR2或 Ο ; R3對各存在處係獨立為氫、羥基、經取代或未經取代之 烷基或經取代或未經取代之烷氧基； 當X為CR1，Y為CRq，Q為Ο，且有一個雙键在X與Y之間 時；或當X為CR1，Y為N，Q為Ο，且有一個雙键在X與Y 之間時；或當X為CR1，Y為Ο，Q為N，且有一個雙键在Q 與嘧啶基環之間時，則 R1為

Z^0A-Z^Z100 -18- 200304818 (13)

烷基、莕基、四氫萘 苯並4峻基、苯並 其中Z100為硝基、视情況經取代之 視情況被Rb取代之基團，選自包括環 基、苯並噻吩基、呋喃基、噻吩基、 p塞唑基

p塞峻 基 苯並吱喃基、2，3 -二氫苯並吱喃基、啕哚基、異，^

基、四氫哌喃基、四氫呋喃基、六氫吡啶基、吡唑基、吡 咯基、嘮唑基、異嘧唑基、嘮二唑基、嘧二唑基、二氫吲 哚基、吲唑基、苯並異嘧唑基、吡啶並-嘮唑基、吡啶並_ 噻唑基、嘧啶並-嘮唑基、嘧啶並_嘍唑基及苯並咪唑基； S巳為1，且Di、Gj、jj、Li及Μι各獨立選自包括CRa與N 時’其條件是Di、Gi、j!、Lg叫中至少兩個為CRa ;或

鬲&為〇，且Di、Gi、Li 及 Μι之一為 NRa時，Di、Gi、L 1 及Μ!之一為CRa ’且其餘部份係獨立選自包括[以與n ; 當b為1，且D2、g2、j2、：^及m2各獨立選自包括CR^ N 時’其條件是D2、G2、J2、L2及M2中至少兩個為CRa ;或 當 b為 〇，且 〇2、G2、L2及 M2之一為 NRa時，D2、G2、L2 及M2之一為CRa，且其餘部份係獨立選自包括〇1^與N ; ~與Rb各表示一或多個取代基，且對各存在處係獨立選 自包括氫、卣素、-CN、-Ν〇2、-(：(0)0Η、-C(0)H、-OH、_C(0)0-^ 基、-Z105-C(O)N(R)2、-Z105-N(R)-C(O)-Z200、-Z105-N(R)-S(〇)2- -19- 200304818 (14) Z200、-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200、Rc、CH2〇Rc、四唑基、三 氟甲基羰基胺基、三氟甲基磺醯胺基，及視情況經取代之 基團，選自包括羧醯胺基、烷基、烷氧基、芳基、烯基、 芳氧基、雜芳基氧基、芳燒基、決基、胺基、胺基燒基、 醒胺基、雜芳基硫基及芳硫基； Z1G5對各存在處係獨立為共價键或（Ci-CQ ; z2G()對各存在處係獨立為視情況經取代之（Ci-cy、視情 況經取代之苯基或視情況經取代之-(Ci-C6)-苯基；

Rc對各存在處係獨立為氫、視情況經取代之烷基、視情 況經取代之芳基、-CH2-NRdRe、-W-(CH2)t_NRdRe、-W-(CH2)t-0 烷基、-W-(CH2)t-S-烷基或-W-(CH2)t-OH ;

Rd與Re對各存在處係獨立為Η、烷基、烷醯基或S02-烷 基；或Rd、Re及彼等所連接之氮原子一起形成五-或六-員 雜環； t對各存在處係獨立為2至6之整數； W對各存在處係獨立為直接键結或Ο、S、S(O)、S(0)2或 NRf ；

Rf對各存在處係獨立為Η或烷基； Ζ11()為共價鍵或視情況經取代之（Ci-CQ，其係視情況被 一或多個取代基取代，取代基選自包括烷基、CN、OH、 鹵素、N〇2、COOH、視情況經取代之胺基及視情況經取代 之苯基； Z111為共價键、視情況經取代之（Ci-CQ或視情況經取代 之-(CH2)n-環烷基-(CH2)n·;其中視情況經取代之基團係 -20- 200304818

(15) 視情況被一或多個取代基取代，取代基選自包括烷基、 CN、OH、鹵素、N〇2、COOH、視情況經取代之胺基及視情 況經取代之苯基；或R1為經取代或未經取代之碳環狀或雜 環狀環，與環2稠合； ；-N(S02R)- ； -CH2〇- ； -CH2S- ； -CH2N(R)- ； -CH(NR). ； -CH2N(C(0)R))-；-CH2N(C(0)0R)- ； -CH2N(S02R)- ； -CH(NHR)- ； -CH(NHC(0)R)-； -CH(NHS02R)- ； -CH(NHC(0)0R)- ； -CH(0C(0)R)- ； -CH(0C(0)NHR) ；-CH=CH- ； -C(=NOR)- ； -C(O)- ； -CH(OR)- ； -C(0)N(R)- ； -N(R)C(0)-；-N(R)S(0)p- ； -0C(0)N(R)- ； -N(R)-C(0)-(CH2)n-N(R).—N(R)C(0)0-;-N(R)-(CH2)n+l-C(0).、-S(0)pN(R)_ ; -0-(CR2)n+i-C(0)-、 -0-(CR2)n+l-〇_、-N(C(0)R)S(0)p- ; -N(R)S(0)pN(R)- ; -N(R)-C(0)-(CH2)n-〇-' -C(0)N(R)C(0)- ； -S(0)pN(R)C(0)- ； -0S(0)pN(R)- ； -N(R)S (0)p0- ; -N(R)S(0)pC(0)-; -S0pN(C(0)R)· ; -N(R)SOpN(R)- ; -C(0)0-；-N(R)P(0Rg)0- ； -N(R)P(ORg)- ； -N(R)P(0)(0Rg)0- ； -N(R)P(0)(0Rg)-;-N(C(0)R)P(0Rg)0- ; -N(C(0)R)P(0Rg)· ; -N(C(0)R)P(0)(0Rg)0-或-N(C(0)R)P(0Rg)-; p為1或2 ; R對各存在處係獨立為Η、視情況經取代之烷基、視情 況經取代之芳烷基或視情況經取代之芳基；

Rg對各存在處係獨立為Η或視情況經取代之基團，選自 包括烷基、芳烷基、環烷基及芳基； 或當R與Rg在含磷基團中時，R、Rg、氮原子及磷原子 ，一起形成五-或六-員雜環；或 200304818 (16)

A為NRS〇2，且R、Ra及氮原子一起形成視情況經取代之 五或六-員雜環，經稠合至環1 ; η對各存在處係獨立為〇至6之整數； Rq係選自包括氫、烷氧烷基、烷基、視情況經取代之芳 烷基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之環烷基烷 基、視情況經取代之雜芳燒基、視情況經取代之（雜環垸 基）烷基及_基；其中芳烷基、環烷基、環烷基烷基、雜 芳烷基及（雜環烷基）烷基係各視情況被一、二、三、四或 五個取代基取代，取代基獨立選自包括烷氧基、烷氧烷基 、燒基、氰基、卣基、鹵燒基、禮基、#呈燒基及硝基；或 當X為NR1，且R3各為Η時，則Y為N，Q為CR2，有一個 雙鍵在Υ與Q之間，及

R為 ’其中Ra為Η或-〇jy[e ; A 為-NH-CO-、-NH-S〇2-、-NH-C(0)0-或-NH_C(0)_NH-;B為N-甲基-吲哚-2-基、（氟基）（三氟甲基）苯基、苯基或 爷基；

R2為Η、4· _六氫p比淀基、

氫吡啶· 4 -基，或 _( \ 當X為CR1，且R3之一不為η時 一個雙键在X與γ之間，及 則Υ為Ν， 、Ν·乙基六 •，或 Q為NR2，有 -22- 200304818

(17)

其中Z1()()為硝基、視情況經取代之胺基、，或 視情況被Rb取代之基團，選自包括環烷基、萘基、四氫萘 基、苯並邊吩基、吱喃基、屬吩基、苯並4峻基、

苯並噻唑基、 、噻唑基 苯並呋喃基、2，3 -二氫苯並呋喃基、吲哚基、異嘮唑基、 四氫喊喃基、四氫吱喃基、六氫吡啶基、吡唑基、吡嘻基 、吟峻基、異屬也基、吟二唑基、p塞二唑基、二氫吲哚基 、吲峻基、苯並異P塞味基、P比咬並-吟也基、P比淀並-魂也 基、♦淀並-p亏嗤基、喊淀並-P塞ΧΪ坐基及苯並味峻基，

當a為1，且Di、Gi、Ji、1^及…丨各獨立選自包括0^^與N 時，其條件是Dl、Gi、h、Li及Μι中至少兩個為CRa ;或 當 a為 0，且Di、Gi、Li 及 Μ!之一為 NRa 日辜，Di、Gi、Li 及Μ!之一為CRa，且其餘部份係獨立選自包括CRa與N ; 當b為1，且D2、G2、J2、L2及M2各獨立選自包括CRa與N ，其條件是D2、G2、J2、L2及M2中至少兩個為CRa ;或 當 b 為 0，且 D2、G2、1^2及 Μ〕之一為 NRa時，D]、G2、L2 及M2之一為CRa，且其餘部份係獨立選自包括CRa與N ;

Ra與Rb各表示一或多個取代基，且對各存在處係獨立選 自包括氫、li 素、-CN、-N〇2、-C(0)0H、-C(0)H、-OH、-C(0)0- -23-

200304818 (18) 烷基、-2105-(：(0)风1〇2、-2105-风1〇-(：(0)-2200、-2105-1^(11)-8(〇)2- Z200、-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200、Rc、CH2〇Rc、四唑基、三氟 甲基羰基胺基、三氟甲基磺醯胺基，及視情況經取代之基 團，選自包括羧醯胺基、烷基、烷氧基、芳基、晞基、芳 氧基、雜芳基氧基、芳烷基、炔基、胺基、胺基烷基、總 胺基、雜芳基硫基及芳硫基； Z1G5對各存在處係獨立為共價键或（Ci-CQ ; Z200對各存在處係獨立為視情況經取代之（Ci-cy、視情 況經取代之苯基或視情況經取代之-(Ci-cy-苯基；

Re對各存在處係獨立為氫、視情況經取代之烷基、視情 況經取代之芳基、_CH2-NRdRe、_W-(CH2)t-NRdRe、-W-(CH2)r〇 烷基、-W-(CH2)t_S·烷基或-W-(CH2)t-〇H ;

Rd與Re對各存在處係獨立為Η、烷基、烷醯基或S〇2_燒 基；或Rd、Re及彼等所連接之氮原子一起形成五·或六-員 雜環； t對各存在處係獨立為2至6之整數； W對各存在處係獨立為直接鍵結或Ο、S、S(O)、S(〇)2或 NRf ；

Rf對各存在處係獨立為Η或烷基； Ζ110為共價键或視情況經取代之（C卜C6)，其係視情況被 一或多個取代基取代，取代基選自包括烷基、CN、OH、 鹵素、N〇2、COOH、視情況經取代之胺基及視情況經取代 之苯基； Z111為共價鍵、視情況經取代之（Ci-CQ或視情況經取代 200304818

(19) 之-(CH2)n-環烷基-(CH2)n_ ;其中該視情況經取代之基團係 視情況被一或多個取代基取代，取代基選自包括烷基、 CN、OH、鹵素、N〇2、COOH、視情況經取代之胺基及視情 況經取代之苯基；或R1為經取代或未經取代之碳環狀或雜 環狀環，與環2稠合； ；-N(S〇2R)- ； -CH2〇- ； -CH2S- ； -CH2N(R)- ； -CH(NR)- ； -CH2N(C(0)R))-；-CH2N(C(0)0R)- ； -CH2N(S02R)- ； -CH(NHR)- ； -CH(NHC(0)R)-； -CH(NHS〇2R)- ; -CH(NHC(0)0R)- ; -CH(0C(0)R)- ; -CH(0C(0)NHR) ;-CH=CH- ; -C(=NOR)· ; -C(O)- ; -CH(OR)- ; -C(0)N(R)- ; -N(R)C(0)-；-N(R)S(0)p- ； -0C(0)N(R)- ； -N(R)-C(0)-(CH2)nN(R)- ^ -N(R)C(0)0-；-N(R).(CH2)n+l-C(0). ^ -S(0)pN(R)- ； -〇.(CR2)n+l-C(0). > -0-(CR2)n+i-〇·、-N(C(0)R)S(0)p- ; -N(R)S(0)pN(R)-; -N(R)-C(〇HCH2)n-0-、_C(0)N(R)C(0)· ; -S(0)pN(R)C(0)-; -0S(0)pN(R)- ； -N(R)S(0)p0- ； -N(R)S(0)pC(0)- ； -S0pN(C(0)R)-； -N(R)SOpN(R)- ； -C(0)0- ； -N(R)P(0Rg)0- ； -N(R)P(ORg)-； -N(R)P(0)(0Rg)0_ ; _N(R)P(0)(0Rg)- ; -N(C(0)R)P(0Rg)0-; -N(C(0)R)P(0Rg)- ; -N(C(0)R)P(0)(0Rg)0-或-N(C(0)R)P(0Rg)-; p為1或2 ; R對各存在處係獨立為Η、視情況經取代之烷基、視情 況經取代之芳烷基或視情況經取代之芳基；

Rg對各存在處係獨立為Η，或視情況經取代之基團，選 自包括燒基、芳燒基、環燒基及芳基； 或當R與Rg在含磷基團中時，R、Rg、氮原子及磷原子 -25- 200304818

(20) ，一起形成五-或六-員雜環；或 A為NRS〇2，且R、Ra及氮原子一起形成視情況經取代之 五-或六-員雜環，經稠合至環1 ; R2為-Z101-Z102 ; 為共價键、-(Ci_C6)·、-(Ci_C6)-0-、-(Ci-C6)-C(0)-、 -(Ci-C6)-C(0)0- ^ -(Ci-C6)-C(0)-NH- ^ -(0^06)-0(0)^((01-06))- 或視情況經取代之苯基； Z102為氫、視情沉經取代之燒基、視情況經取代之環燒 基、視情況經取代之飽和或不飽和雜環族基團或視情況經 取代之飽和或不飽和雜雙環基； 該經取代之雜環基或經取代之雜雙環基具有一或多個 取代基，各獨立選自包括羥基、氰基、視情況經取代之燒 氧基、視情況經取代之續醯胺基、視情況經取代之脲基、 視情況經取代之羧醯胺基；視情況經取代之胺基、嗣基、 飽和或不飽和芳族或視情況經取代之雜環族基團； 其中雜環族基團包含一或多個氮原子、一或多個氧原子 或其組合，且其中該氮原子係獨立視情況被經取代或未經 取代之烷基、經取代或未經取代之芳基或經取代或未經取 代之芳烷基取代；或 R2為式B-E ; B為羥基，或視情況經取代之基團，選自包括環燒基、 氮環烷基、胺基、胺基烷基磺醯基、烷氧烷基、烷氧基、 胺基烷羰基、烷基烯基、胺基烷基、烷基烯基黢基及胺基 烷羰基； -26- 200304818

(21) E為視情況經取代之基團，選自包括氮環烷基、氮環烷 基羰基、氮環烷基磺醯基、氮環烷基烷基、雜芳基、雜芳 基羰基、雜芳基磺醯基、雜芳烷基、氮環烷基羰基胺基、 雜芳基羰基胺基及芳基；及 η對各存在處係獨立為0至6之整數。

前述式（I)化合物之一種較佳化合物，表示較佳組群A， 係為其中X為CR1，Y為CRq，Q為Ο，且有一個雙键在X與Y

之間；或X為CR1，Y為N，Q為Ο，且有一個雙鍵在X與Y 之間；或X為CR1，Y為Ο，Q為N，且有一個雙键在Q與嘧 啶基環之間。 較佳組群A之一種較佳化合物，表示較佳組群B，係為 其中該化合物具有式（II)，

其中

Rq係選自包括氫、燒氧燒基、燒基、視情況經取代之芳 烷基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之環烷基烷 基、視情況經取代之雜芳烷基、視情況經取代之（雜環烷 基）烷基及自基，其中芳烷基、環烷基、環烷基烷基、雜 -27- 200304818 (22) 芳烷基及（雜環烷基）烷基係各視情況被一、二、三、四或 五個取代基取代’取代基獨立選自包括燒1氧基、&氧垸*基 、燒基、氰基、鹵基、_燒基、輕基、經燒基及硝基； A 係選自包括-N(R)-C(0)_(CH2)n-N(R)-、-N(R)-、-N(R)C(0)-及 -N(R)S(0)p-; Z100係選自包括視情況經取代之芳基與視情況經取代 之雜芳基； η為0; p為2;及R為氫。 較佳組群Β之一種較佳化合物，表示較佳組群C，係為 其中Rq為氫。 較佳組群C之一種較佳化合物，表示較佳組群D，係為 其中化合物為： N-[4-(4-胺基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基]甲基 苯基）脲； N-[4-(4-胺基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5_基）苯基]-N，-(3-甲基 苯基）脲； n_[4-(4•胺基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基]甲基 苯基）脲； N_ [4-(4•胺基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基]-N’-(3_氣冬 基）脲； 5-[4-(1，3-苯並呤唑-2-基胺基）苯基]呋喃旅[2，>d]邊< •4-胺； 胺基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5·基）苯基]苯甲癌< ;或 200304818

(23) N-[4-(4-胺基咬喃並[2,3-d]喊淀-5-基）苯基]苯續酸胺。 較佳組群B之另一種較佳化合物，表示較佳組群E，係 為其中Rq係選自包括燒基與函基。 較佳組群E之一種較佳化合物，表示較佳組群F，係為 其中化合物為： N-[4-(4 -胺基-6-甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5 -基）苯基 ]-N’-(2-甲基苯基）脲； N-[4-(4 -胺基-6-甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5 -基）苯基 ]-N’-(4-甲基苯基）脲； N-[4-(4-胺基_6_甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基]苯 甲醯胺； N-[4-(4-胺基-6-甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基]苯 磺醯胺； N-[4-(4 -胺基-6-甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶_5_基）苯基 ]-N'-(3-甲基苯基）脲； N_[4-(4 -胺基-6-甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5 -基）苯基 ]-Nf-(3-氯苯基）脲； Ν-[4_(4·胺基-6-甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基 ]-N’-(3-甲氧苯基）脲； Ν·[4_(4 -胺基_6_溴基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5 -基）苯基 ]_N’-(3-甲基苯基）脲； N-[4-(4 -胺基-6-甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5 -基）苯基 ]-Ν^(3-溴苯基）脲； N-[4-(4 -胺基-6-甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5 -基）苯基 -29- 200304818 (24) ]-N’-(3-乙基苯基）脲； . N-[4-(4 -胺基-6-甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5 -基）苯基 ]-N’-(3,5-二甲基苯基）脲； N-[4-(4 -胺基-6-甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5 -基）苯基 ]-N’-(3,5-二氯苯基）脲； ^•[4_(4-胺基-6-甲基呋喃並[2,3-(1]嘧啶-5-基）苯基 卜N’-[2-氟基-5-(三氟甲基）苯基]脲；

1-[4-(4-胺基-6 -甲基-咬喃並[2,3_d]墙淀-5-基）-苯基 ]-3-(4-氣基-苯基）-月尿，或 1-[4-(4 -胺基-6 -甲基-咬喃並[2,3_d] 口密淀-5-基）-苯基 ]-3-(3-三氟甲基·苯基）-脲。 較佳組群A之另一種較佳化合物，表示較佳組群G，係 為其中化合物具有式（III)，

其中 A 係選自包括一個键結、-N(R)C(0)-及-N(R)-C(0)-(CH2)n-N(R)·; Z1QQ係選自包括-N〇2、胺基、經取代之胺基及視情況經 取代之芳基； -30- 200304818 (25) R為氫；且η為0。 較佳組群G之一種較佳化合物，表示較佳組群Η，係為 其中Α為一個鍵結；且Z1G()係選自包括-Ν〇2，經取代之胺 基，及胺基。 較佳組群Η之一種較佳化合物，表示較佳組群I，係為： 3-(4-硝基苯基）異嘮唑並[5,4-d]嘧啶-4-胺；或3-(4-胺基 苯基）異噚唑並[5,4-d]嘧啶-4-胺。

較佳組群G之另一種較佳化合物，表示較佳組群J，係 為其中 A 係選自包括-N(R)C(0)_與-N(R)-C(0)-(CH2)n_N(R)-;且 Z1G()為視情況經取代之芳基。 較佳組群J之一種較佳化合物，表示較佳組群K，係為 N-[4-(4-胺基異噚唑並[5,4-d]嘧啶-3-基）苯基]甲 基苯基）脲； N-[4-(4-胺基異嘮唑並[5,4_d]嘧啶-3-基）苯基]-Nf-(3-乙 基苯基）脲； N-[4-(4-胺基異呤唑並[5,4-d]嘧啶-3-基）苯基]-Ν’·（3-氯 苯基）脲； Ν-[4-(4-胺基異噚唑並[5,4-d]嘧啶-3-基）苯基]苯甲醯 胺； N-[4-(4-胺基異崎唑並[5,4-d]嘧啶-3-基）苯基]-N’-[3-( 三氟甲基）苯基]脲；或 Ν-[4-(4·胺基異噚唑並[5,4-d]嘧啶-3-基）苯基]-Nf-[2-氟 基-5-(三氟甲基）苯基]脲。 -31 - 200304818

另一種較佳式（I)化合物，表示較佳組群L，係為其中X 為NR1 ;兩個R3各為Η ; Y為N ; Q為CR2 ;且有一個雙键在 Υ與Q之間。 較佳組群L之一種較佳化合物，表示較佳組群Μ，為 ^2-{4-[7-胺基-3-(4-六氫吡啶基）-111-吡唑並[4,3-(1]嘧 啶-1-基]-2 -甲氧苯基]-1-甲基-1Η-2-啕哚羧醯胺；

N2-{4-[7_胺基-3-(4-六氫吡啶基）-lH-吡唑並[4,3-d]嘧 淀-1-基]-2 -甲氧苯基丨^-象基-々、三氟甲基）苯甲酸胺； Nl-[4-(7-胺基_1Η-吡唑並[4,3_d]嘧啶-1-基）-2 -甲氧苯 基]-2 -氟基- 4- (三氟甲基）苯甲酸胺； 川-{4-[7-胺基-3-(4-六氫吡啶基）-111-吡唑並[4,3-(1]嘧 淀-1-基]-2 -甲氧苯基}-1-苯續酸胺； ^-{4-[7_胺基-3-(4-六氫吡啶基）-111-吡唑並[4,3-(1]嘧啶 -1-基]-2-甲氧苯基}胺基甲酸芊酯；

^^{4-[7-胺基-3-(4-六氫吡啶基）-111-吡唑並[4,3-(1]嘧啶 -1-基]-2-甲氧苯基}->^-苯基脲； N2-{4-[7-胺基-3-(1-四氫-2H-4-哌喃基-4 -六氫吡啶基 )-1Η-吡唑並[4,3-d]嘧啶-1-基]-2-甲氧苯基卜1-甲基-1H-2-吲哚羧醯胺； Ν2-{4·[7_胺基-3-(1-乙基-4-ΤΓ氮p比淀基）-1 Η- p比η坐並 [4,3-(1]^3密淀-1-基]-2-甲氧苯基}-1-甲基-111-2-1?5丨嗓幾酿胺

Nl_{4_[7_胺基- 3-(4 -六氫吡啶基）-1Η-吡唑並[4,3-d]嘧 淀-1-基]苯基}-1-苯績酸胺， -32- (27) 200304818 N2- {4-[7 -胺基- 3·(4_六氫吡啶基 ㈡姻基Η-甲基―”二了 Ν2-{4_[7-胺基 _3_(1，2,3,6·四氫 ryl， -吨啶基）_1Η_吡唑並 [4,3-(!]嘧啶-1-基]-2-甲氧苯基}_1_ 暴_ 1H-2 -啕哚羧醯胺 群N，係為其中X 且有一個雙键在 另一種較佳式（I)化合物，表示較佳系且 為CR1 ; R3之一不為Η; γ為n，（）為Nr2 · X與Y之間。

涵蓋之任何化合 述任何方法中之 於另一方面，本發明係針對被式（〗）所 物，包括本文所列舉之物種，於本文中所 用途，譬如： 一種在病患中抑制一或多種蛋白質激酶活性之方法，其 包括對該病患投予治療上有效量之式（1)化合物，或其生 理學上可接受之鹽、前體藥物或生物活性新陳代謝產物； 一種方法，其中該蛋白質激酶係選自包括KDR，fgfh， PDGFR/?，PDGFRa，IGF-1R，c_Met，Flt-1，Flt-4，TIE_2，TIE-1 Lck

Src，fyn，Lyn，Blk，hck，fgr及 yes ; 一種在病患中影嚮過高增生性病症之方法，其包括對> 病患投予治療上有效量之式（I)化合物，或其生理學上 接受之鹽、前體藥物或生物活性新陳代謝產物； 一種在病患中影嚮血管生成之方法，其包括對該病患投 予治療上有效量之式（I)化合物，或其生理學上可接受之 鹽、前體藥物或生物活性新陳代謝產物； 一種方法，其中蛋白質激酶為蛋白質絲胺酸/蘇胺酸數 -33- 200304818

(28) 酶或蛋白質酪胺酸激酶； 一種在病患中治療一或多種潰瘍之方法，其包括對該病 患投予治療上有效量之式（I)化合物，或其生理學上可接 受之鹽、前體藥物或生物活性新陳代謝產物； 一種方法，其中該一或多種潰瘍係因細菌或真菌感染所 造成；或該一或多種潰瘍係為Mooren溃瘍；或該一或多種 潰瘍為潰瘍性結腸炎之徵候；

一種在病患中治療症狀之方法，其包括對該病患投予治 療上有效量之式（I)化合物，或其生理學上可接受之鹽、 前體藥物或生物活性新陳代謝產物，其中該症狀為眼睛症 狀、心與血管症狀、癌症、Crow-Fukase (POEMS)徵候簇、糖 尿病症狀、鐮狀細胞貧血、慢性發炎、系統性狼瘡、絲球 體性腎炎、滑膜炎、炎性腸疾病、克隆氏病、絲球體性腎 炎、風濕性關節炎、骨關節炎、多發性硬化、移植物排斥 、Lyme疾病、敗血病、vonHippelLindau疾病、類天癌瘡、牛 皮癖、柏哲德氏病、多囊腎臟疾病、纖維變性、結節病、 肝硬化、甲狀腺炎、黏性過大徵候簇、Osier-Weber-Ren(iu 疾病、慢性堵塞肺病、氣喘或灼傷後之水腫、外傷、放射 、中風、缺氧、絕血、即桌南刺激被候族、初期摇搞、月 經過多、子宮内膜組織異位形成、肺高血壓、嬰兒血管瘤 ，或被單純疱疹、帶狀疱疹、人類免疫不全病毒、副痘病 毒、原生動物感染，或毒衆體病’ 一種方法，其中眼睛症狀為眼睛或斑點水腫、眼晴新血 管疾病、鞏膜炎、放射狀角膜切開術、葡萄膜炎、破璃體 -34- (29) (29)200304818

火、近视、眼凹陷、悛性視網膜脫落、雷射後治療併發症 、結合艇炎、Stargairdt氏疾病、Eales氏疾病、視網膜病或斑 點變性； 一種方法，其中心與血管症狀為動脈粥瘤硬化、再狹窄 、、、巴血/再灌/主傷害、血管堵塞或頸動脈阻塞疾病； 一種方法，其中癌症為固態腫瘤、肉瘤、纖維肉瘤、骨 瘤、黑色素瘤、視網膜胚細胞瘤、橫紋肌肉瘤、神經膠質 母細胞瘤、神經胚細胞瘤、畸胎癌、造血惡性病症、卡波 西氏肉瘤、霍奇金（Hodgkin)氏疾病、淋巴瘤、骨骑細胞瘤 、白血病或惡性水腹； 一種方法，其中糖尿病症狀為胰島素依賴性糖尿病音光 眼、糖尿病患者之視網膜病或小血管病·， ，一種在病患中降低生育力之方法’該方法包括對病患投 予有效量之式（I)化合物或其生理學上可接受之鹽、前體 藥物或生物活性新陳代謝產物之步驟； 一種方法，其中化合物或其生理學上可接受之鹽、前體 藥物或生物活性新陳代謝產物係以有效促進血^ : 脈管發生之量投予； 〆 一種方法’其中蛋白質激酶為TIE- 2 ; 一種方法，其中式⑴化合物，或其生理學上可接受之 鹽、I體藥物或生物活性新陳代謝產物係與血管生成前生 長因數合併投藥； 一種万法，其中血管生成前生長因數係選自包括 VEGF-B，VEGF-C，VEGF_D，VEGF-E，HGF，FGM，fgf_2 ,其衍生物 -35 - 200304818

(30) 及抗碘型抗體； 一種方法，其中病患係患有貧血、絕血、梗塞、移植排 斥、傷口、壞疽或壞死；或 一種方法，其中蛋白質激酶活性係涉及τ細胞活化作用 、B細胞活化作用、肥大細胞去顆粒化作用、單細胞活化 作用、炎性回應之加強作用或其組合。

於另一方面，本發明係針對一種醫藥組合物，其包含式 (I)化合物及藥學上可接受之載劑或稀釋劑。 發明詳述

經過真核細胞循環之進展，係藉由被稱為環素依賴性激 酶（CDK)之激酶族群所控制（Myerson等人，EMBO期刊511 : 2909-2917 (1992))。CDK活化作用之調節很複雜，但需要CDK 與調節亞單位環素族群之一員缔合（Draetta，細胞生物學趨 勢期刊，3 :287-289(1993)); Murray與 Kirschner，Nature, 339: 275-280 (1989) ; Solomon等人，細胞之分子生物學，3 : 13-27 (1992))。進 一步調節程度係經由使CDK亞單位之磷醯化作用活化與 失活而發生（Draetta，細胞生物學趨勢期刊，3 : 287-289 (1993)) ;Murray與 Kirschner，Nature，339 ·· 275-280 (1989) ; Solomon等人， 細胞之分子生物學，3 ·· 13-27 (1992); Ducommun等人，EMBO期刊 ，10 : 3311-3319 (1991) ; Gautier等人，Nature，339 : 626-629 (1989); Gould與 Nurse，Nature，342: 39-45 (1989); Krek與 Nigg，EMBO期刊，10 ·· 3331-3341 (1991) ; Solomon等人，Cell，63 ·· 1013-1024 (1990))。不 同環素/ CDK複合物之配位活化與失活，係為經過細胞循 環之正常進展所必須（Pines，生化科學上之趨勢，18: 195-197 -36- 200304818

(31) (1993) ; Sherr，Cell，73 : 1059-1065 (1993))。關键性 G1-S與 G2-M兩 種轉移，係藉由不同環素/ CDK活性之活化作用所控制。 在G1中，環素D/CDK4與環素E/CDK2兩者，被認為會媒介S· 期之展開（Matsushima等人，分子與細胞生物學，14 : 2066-2076

(1994) ; Ohtsubo與 Roberts，Science，259 : 1908-1912 (1993) ; Quelle 等人，基因與發展，7: 1559-1571 (1993) ; Resnitzky等人，分子與 細胞生物學，14 ·· 1669-1679 (1994))。經過S-期之進展需要環素 A/ CDK2之活性（Girard等人，Cell，67 : 1169-1179 (1991) ; Pagano等 人，EMBO期刊，11 : 961-971 (1992) ; Rosenblatt等人，美國國家科 學院會刊，89 : 2824-2828 (1992) ; Walker與 Mailer，Nature，354 : 314-317 (1991); Zindy等人，生物化學與生物物理研究通信，182

:1H4-1154 (1992))，然而環素 A/cdc2 (CDK1)與環素 B/cdc2之活 化作用係為中期展開所需要的（Draetta，細胞生物學趨勢期 刊，3:287-289 (1993));Murray與 Kirschner，Nature，339:275-280 (1989) ;Solomon等人，細胞之分子生物學，3 : 13-27 (1992) ; Girard等人 ，Cell，67 : 1169-1179 (1991) ; Pagano等人，EMBO期子，11 : 961-971 (1992) ; Rosenblatt等人，美國國家科學院會刊，89 ·· 2824-2828 (1992) ; Walker與 Mailer，Nature，354 : 314-317 (1991) ; Zindy等人， 生物化學與生物物理研究通信，182 ·· 1144-1154 (1992))。因此 ，CDK調節控制之喪失為在過高增生性疾病與癌症中之常 見事件，實不令人驚請（Pines,細胞生物學上之現行見解，4 ·· 144-148 (1992) ; Lees，細胞生物學上之現行見解，7 : 773-780 (1995) ; Hunter與 Pines，Cell，79 : 573-582 (1994))。因此，CDK之 選擇性抑制係為本發明之一項目的。 -37- 200304818 (32)

本發明化合物另外可用於治療一或多種折磨哺乳動物 之疾病，其特徵為在血管增生性病症、纖維變性病症、腎 小球環間膜細胞增生性病症及代謝疾病領域上之細胞增 生。血管增生性病症包括關節炎與再狹窄。纖維變性病症 包括肝硬化與動脈粥瘤硬化。腎小球環間膜細胞增生性病 症包括絲球體性腎炎、糖尿病患者之腎病、惡性腎硬變症 、血栓形成微血管病徵候簇、器官移植排斥及非炎性腎血 管球病變。代謝病症包括牛皮癖、糖尿病、慢性傷口癒合 、發炎、神經變性疾病、斑點變性及糖尿病患者之視網膜 病。 涉及媒介或保持此等疾病狀態之激酶之抑制劑，係代表 此等病症之新穎治療劑。此種激酶之實例包括但不限於·· (l)c-Src之抑制（Brickell，於腫瘤生成上之重要回顧，3: 401-406 (1992) ; Courtneidge，癌症生物學討論會，5 : 236-246 (1994)，raf (Powis，藥理學與治療學，62 : 57-95 (1994))，及在癌症中之環 素依賴性激酶（CDK) 1，2及4 (Pines，細胞生物學上之現行見解， φ 4 : 144-148 (1992) ; Lees，細胞生物學上之現行見解，7 : 773-780 (1995) ; Hunte與 Pines，Cell，79 : 573-582 (1994))，（2)於再狹窄中 CDK2或PDGF-R激酶之抑制（Buchdunger等人，美國國家科學 院會刊，92 ·· 2258_2262 (I"5))，（3)於阿耳滋海默氏症中CDK5 與GSK3激酶之抑制（Hosoi等人，生物化學期刊（東京），117 : 741-749 (1995) ; Aplin等人，神經化學期刊，67 : 699-7〇7 (1996)，（4) 於骨質疏鬆症中c-Src激酶之抑制（Tanaka等人，Nature，383 : 528-531(1996)，（5)於第2型糖尿病中GSK-3激酶之抑制 -38- 200304818

(33) (Borthwick等人，生物化學與生物物理研究通信，21〇 : 738-745

(1995) ，（6)於發炎中p38激酶之抑制（Badger等人，藥理學與實 驗治療學期刊，279 : 1453-1461 (1996))，（7)於涉及血管生成之 疾病中VEGF-R1-3與TIE-1與·2激酶之抑制（Shawver等人，現代 藥物發現，2 : 50-63 (1997))，（8)於病毒感染中UL97激酶之抑 制（He等人，病毒學期刊，71 : 405-411 (1997))，（9)於骨骼與造血 疾病中 CSF-1R 激 酶 之 抑 制 （Myers 等 人 ， Bioorganic&MedicinalChemistryLetters，7 : 421-424 (1997)，及（10)於 自身免疫疾病與移植排斥中L c k激酶之抑制（Myers等人， Bioorganic&MedicinalChemistryLetters，7 : 417-420 (1997))。

另外可能的是，某些激酶之抑制劑，可在激酶未被錯誤 調節，但其係為維持此疾病狀態所必要時之疾病治療上， 具有利用性。於此情況中，激酶活性之抑制係用以作為此 等疾病之治療藥劑或姑息藥。例如，許多病毒，譬如人類 乳頭狀瘤病毒，會瓦解細胞循環並驅動細胞至細胞循環之 S-期中（Vousden，FASEB期刊，7 : 872-879 (1993))。於病毒感染 後，藉由抑制譬如CDK2之自發性S-期引發活性，以防止細 胞進入DNA合成中，可經由防止病毒複製，瓦解病毒生命 期。此相同原理可用以保護身體之正常細胞免於循環專一 之化學治療劑之毒性（Stone等人，癌症研究，56 : 3199-3202 (1996) ; Kohn等人，細胞生物化學期刊，54 : 44-452 (1994))。CDK2 或4之抑制，將防止進展至正常細胞之循環中，並限制細 胞毒素作用在S-期、G2或有絲分裂上之毒性。再者，亦已 証實CDK2 /環素E活性，會調節NF-kB。CDK2活性之抑制會 -39- 200304818 (34)

刺激NF-kB依賴性之基因表現，此為一種經由與p300共活化 劑交互作用所媒介之事件（Perkin等人，Science，275 : 523_527 (1997)>NF-kB會調節涉及炎性回應之基因（譬如造血生長因 數、化學細胞活素及白血球黏連分子）（Baeuerle與Henkel,免 疫學之年度回顧，12 : 141-179 (1994))，並可能涉及細胞内細 胞凋零訊息之壓抑（Beg與 Baltimore，Science，274 ·· 782-784 (1996) ;Wang等人，Science，274 : 784-787 (1996); VanAntwerp等人，Science， 274 ·· 787-789 (1996))。因此，CDK2之抑制可壓抑因細胞毒素 藥物經由涉及NF-kB之機制所引致之細胞凋零。因此，這 指出CDK2活性之抑制亦可在其他情況中具有利用性，其 中NF-kB之調節在疾病之病因學上，係扮演一項角色。另 一項實例可取自真菌感染：麴菌病為在免疫傷害病患中之 一種常見感染（Armstrong，臨床傳染性疾病，16 : 1_7 (1993))。麴 菌激酶Cdc2/CDC28或NimA之抑制（Osmani等人，EMBO期刊，1 0 :2669-2679 (1991) ; Osmani等人，Cell，67 : 283-291 (1991))可造成 真菌之制止或死亡，改善患有此等感染之病人之治療結果 下述為式（I)化合物之較佳取代基。Ra與Rb較佳係各獨立 為 F、a、Br、I、CH3、N〇2、OCF3、OCH3、CN、C02CH3、CF3 、第三-丁基、吡啶基、羧基，或視情況經取代之基團， 選自包括崎唆基、爷基、苯續酸基、苯氧基、苯基、胺基 、四吐基、苯乙晞基、芳硫基及雜芳硫基；CH2〇Rc ’其中 Rc為氫或視情況經取代之挺基或芳基；且-W-(CH2)t-NRdRe ，其中t為約1至約6之整數；W為直接键結、Ο、S、S(O)、 -40 - 200304818 (35) S(0)2或NRf，其中Rf為H或烷基，且Rd與Re係獨立為Η、烷 基、烷醯基或S02-烷基；或Rd、Re及彼等所連接之氮原子 一起形成五-或六-員雜環。 於一項具體實施例中，R2為下式氧環烷基

其中η為1、2或3。 於另一項具體實施例中，R2為下式

其中m為0、1、2或3，且Rg為Η或-(CH2)pN(R4)R5，其中p 為約2至約6之整數。R4與R5各獨立為H、氮雙環烷基或Y-Z ，其中 Y係選自包括-(3(0)-、-((^2)1)-、-8(0)2-、-(：(0)0-、-8〇21«1-、-CONH-、（CH2)qO-、-(CH2)qNH-及-(CH2)qS(0)r-;其中 p 為 0 至 約6之整數，q為0至約6之整數，及r為0、1或2;以及Z為 經取代或未經取代之烷基、胺基、芳基、雜芳基或雜環烷 基，或R4、R5及氮原子一起形成3,4,5，6或7-員經取代或未 經取代之雜環基或雜雙環基。 於另一項具體實施例中，r2為下式 -41 - 200304818

其中m為1、2或3。a與b各獨立為0至約6之整數，惟當 此兩種取代基連接至相同碳原子時，a為1至約6。Q為 NR4R5或-〇R6。各R4與R5係獨立為Η、氮雙環烷基或Υ·Ζ， 其中 Υ係選自包括-C(0)-、-(CH2)p-、-S(0)2、-C(0)0、-S02NH-、-CONH-、（CH2)q〇-、-(CH2)qNH-及-(CH2)qS(0)r-;其中 ρ 為 0 至 約6之整數，q為0至約6之整數，及r為0、1或2;且Z為經 取代或未經取代之烷基、胺基、芳基、雜芳基或雜環烷基 。R4、R5及氮原子亦可一起形成3,4,5,6或7-員經取代或未 經取代之雜環基或雜雙環基。

於另一項具體實施例中，r2為下式

其中η為1、2或3 ;且R4為Η、氮雙環烷基或Υ·Ζ，其中Y 係選自包括-C(0)-、-(CH2)p-、-S(0)2·、-C(0)0-、-S〇2NH-、-CONH-、（CH2)q〇-、（CH2)qNH·及-(Ci^qSCCOr ;其中 p為 0至約 6之整數 ，9為0至約6整數，及r為0、1或2 ;且Z為經取代或未經取 -42- 200304818 (37) 代之烷基、胺基、芳基、雜芳基或雜環烷基 於另一項具體實施例中，R2為下式

其中m為0、1、2或3。R5為Η、氮雙環烷基或Y-Z，其中 Υ係選自包括-C(0)-、-(CH2)p-、-S(0)2-、-C(0)0_、-S02NH-、-C0NH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-及-(CH2)qS(0)r;其中 p為 0至約 6之整 數，q為0至約6之整數，及r為0、1或2 ;且Z為經取代或未 經取代之烷基、胺基、芳基、雜芳基或雜環烷基。R6表示 一或多個取代基，獨立選自包括氫、羥基、酮基，及經取 代或未經取代之烷基、芳基、雜芳基、烷氧羰基、烷氧烷 基、胺基羰基、烷羰基、芳基羰基、雜芳基羰基、胺基烷 基及芳烷基，其條件是鄰近氮原子之碳原子未被羥基取代 於另一項具體實施例中，R2為下式 -R4 -43- 200304818

(38) 其中R4為Η、氮雙環烷基或Y-Z，其中Y係選自包括-cco)-、-(CH2)p-、-S(0)2-、-C(0)0-、-S〇2NH-、-CONH-、（CH2)q〇-、 -(CH2)qNH-及-(CH2)qS(0)r-;其中p為0至約6之整數，q為0至 約6之整數，及r為0、1或2 ;且Z為經取代或未經取代之烷 基、胺基、芳基、雜芳基或雜環烷基。 於另一項具體實施例中，R2為下式

FU r5 其中m為1至約6之整數；且R4與R5各獨立為Η、氮雙環 烷基或Υ-Ζ，其中Υ係選自包括/⑴)-、^!^：^-、^…：^-、/…：^-、-SO2NH-、-CONH-、（CH2)q〇-、-(CH2)qNH-及-(CH2)qS(0)r-;其 中p為0至約6之整數，q為0至約6之整數，及r為0、1或2 ;且Z為經取代或未經取代之烷基、胺基、芳基、雜芳基 或雜環烷基。R4、R5及氮原子亦可一起形成3,4,5,6或7- 員經取代或未經取代之雜環基或雜雙環基。 於另一項具體實施例中，R2為下式

-44- 200304818

其中η為0至約4之整數；且r為0或1。當r為〇時，m為0 至6之整數。當r為1時，m為1至6之整數。Q為-NR4R5或·〇R6 。各R4與R5係獨立為Η、氮雙環烷基或Y-Z，其中Y係選自 包括-C(0)-、-(CH2)p-、-S(0)2-、-C(0)0-、-S02NH-、-C0NH-、（CH2)q0-、-(CH2)qNH-及 _(CH2)qS(0)r"·，其中 p為 0 至約 6之整數 ’ q為 0 至約6之整數，及r為0、1或2 ;且Z為經取代或未經取代之 烷基、胺基、芳基、雜芳基或雜環烷基。R4、R5及氮原子

亦可一起形成3,4,5或6 -員經取代或未經取代之雜環族基 團。R6為氫或經取代或未經取代之烷基。 於另一項具體實施例中，R2為下式

其中η為0至約4之整數，且m為0至約6之整數。R4為Η、 氮雙環烷基或Υ-Ζ，其中Υ係選自包括-C(0)-、-(CH2)p-、-S(0)2-、睡C(0)0-、-S02NH-、-CONH-、（CH2)qO囑、-(CH2)qNH-及-(CH2)qS(0)r-;其中p為0至約6之整數，q為〇至約6之整數，及r為0、1 或2 ;且Z為經取代或未經取代之烷基、胺基、芳基、雜 芳基或雜環燒基。R6為氫或經取代或未經取代之燒基。 於上述R2之具體實施例中，包括-N(R4)R5基團，此基團 可形成下式之雜環族基團 -45- 200304818 (40)

其中R7, R8, R9, R10, Rll，R12, R13及R14各獨立為低碳烷基 或氫；或取代基R7與尺8 ; R9與RlO ; Rll與Rl2 ;或Rl3與Rl4 中之至少一對一起為氧原子；或R7與R9中至少一個為氰基 、CONHR45、COOR15、CH2OR15 或 CH2NR15(R16)，其中 R15與 R16各獨立為H、氮雙環烷基或Y-Z，其中Y係選自包括{(0)-、-(CH2)p·、-S(0)2-、<(0)0-、-S〇2NH-、-CONH-、（CH2)q〇-、 -(CH2)qNH-及-(CH2)qS(0)r ;其中p為0至約6之整數，q為0至 約6之整數，及r為0、1或2 ;且Z為經取代或未經取代之烷 基、胺基、芳基、雜芳基或雜環烷基；或Rl5、Rl6及氮原

子一起形成3,4,5，6或7 -員經取代或未經取代之雜環基或 雜雙環基；X為 Ο、S、SO、S〇2、CH2、CHORn或 NR17，其中 Rl7為氫、經取代或未經取代之烷基、芳基、芳烷基、《C_NH2 、-C(0)Ri7或-C(0)0R18，其中R48為氫、經取代或未經取代之 燒基、芳基或芳燒基；及t為0或1。 R4、R5及氮原子亦可一起形成下式雜環族基團 N R2〆

其中Rl9與尺2〇各獨立為氫或低碳烷基；或R19與r2〇一起 -46- 200304818 (41) 為氧原子。R21與尺22各獨立為Η、氮雙環坑基或Y-Z ’其中 Υ係選自包括-C(0)-、-(CH2)p-、-S(〇)2-、-c(0)〇-、-so2NH-、-CONH· 、（CH2)q〇-、-(CH2)qNH_ 及-(CH2)qS(〇)r-;其中 P為 〇至約 6之整 數，q為0至約6之整數，及r為〇、1或2;且Z為經取代或未 經取代之烷基、胺基、芳基、雜芳基或雜環烷基。R21、 R22及氮原子亦可一起形成3，4，5或6 -員經取代或未經取代 之雜環族基團。m為1至約6之整數；及η為0至約6之整數 〇 R4 ' R5及氮原子亦可一起形成下式雜環族基團

IN

其中nl為l至6之整數。R23為CH20H、NRR，、C(0)NR，R或C00R ’其中R與r，各獨立為氫或經取代或未經取代之烷基、芳 基或芳境基。 R4、R5及氮原子亦可一起形成下式雜環族基團

R 24 其中R24為經取代或未經取代之烷基、芳基或芳烷基、 羧基、氰基、C(0)0R25、CH2OR25、CH2NR26R27或 C(0)NHR26 ° R25為經取代或未經取代之烷基、芳基、芳烷基、雜環 -47- 200304818 (42) 基或雜芳基。R26與尺27各獨立為Η、氮雙環烷基或Y-Z，其 中 Υ係選自包括-C(O)-、-(CH2)p-、-S(0)2-、-c(0)0-、-S〇2NH-、 -CONH-、（CH2)q〇-、-(CH2)qNH-及-(CH2)qS(0)r ;其中 p 為 0 至約 6之整數，q為0至約6之整數，及r為0、1或2;且Z為經取 代或未經取代之烷基、胺基、芳基、雜芳基或雜環烷基。 R2 6、R27及氮原子亦可一起形成3，4，5或6 -員經取代或未經 取代之雜環族基團。

於式（I)化合物之一個子集中，R4與R5中至少一個係為式 Y-Z，其中Z為下式 Ν τ

其中T為C(O)、S、SO、S〇2、CHOR或NR，其中R為氫或經 取代或未經取代之烷基、芳基或芳烷基；及η為0、1或2 〇 於另一項具體實施例中，尺4與尺5中至少一個為式γ-Z， 其中Ζ為-N(R28)R29，且R28與R29各獨立為經取代或未經取 代之羧基烷基、烷氧羰基烷基、羥烷基、烷基磺醯基、烷 羰基或氰基烷基。R28與尺29，伴隨著氮原子一起，亦可形 成五-或六-員雜環族基團。 於又另一項具體實施例中，R4與R5中至少一個為式Y-Z ，其中Z為式N(R3〇)R31。R30與R31各獨立為氫、燒基、燒 氧羰基、烷氧烷基、羥烷基、胺基羰基、氰基、烷羰基或 -48- 200304818

(43) 芳烷基。 於另一項具體實施例中，尺4與R5中至少一個為Y-Z，其 中Z為下式

X--y

各X係獨立為CH或N。R32為氫、氰基或經取代或未經取 代之烷基、烷氧羰基、烷氧烷基、羥烷基、胺基羰基、烷 羰基或芳烷基。 R4與R5之一亦可為Y-Z，其中Z為下式

闩32

其中 g為 0或 1;且 T為 C(O)、Ο、S、SO、S〇2、CH2、CHOR17 或nr17。r17為氫、經取代或未經取代之烷基、芳基、芳 烷基、-C(NH)NH2、·〇(0)ί118、C(0)NH2 或-C(0)0R18，其中 R18 為氫、經取代或未經取代之烷基、芳基或芳烷基。R32為 氫、氰基或經取代或未經取代之烷基、烷氧羰基、烷氧烷 基、羥烷基、胺基羰基、烷羰基或芳烷基。 R4與R5之一亦可為Y-Z，其中Z為下式

-49- 32 200304818 (44) 其中g為0、1或2;且R32為氫、氰基或經取代或未經取 代之烷基、烷氧羰基、烷氧烷基、羥烷基、胺基羰基、烷 羧基或芳燒基。 Z亦可為下式

屬 其中 g為 0、1、2或 3，且T為 0、S、S0、S〇2、CH2、CHOR17 或NR47。R47為氫、經取代或未經取代之燒基、芳基、芳 烷基、-C(NH)NH2、-c(o)r17 或 _C(0)0R18，其中 R18為氫、經 取代或未經取代之烷基、芳基或芳烷基。R32為氫、氰基 或經取代或未經取代之烷基、烷氧羰基、烷氧烷基、羥烷 基、胺基羰基、烷羰基或芳烷基。 R4與R5之一亦可為Y-Z，其中Z為下式

R32 其中R32為氫、氰基或經取代或未經取代之烷基、烷氧 羧基、烷氧烷基、羥烷基、胺基羰基、烷羰基、硫代烷氧 基或芳烷基；及R33為氫或經取代或未經取代之烷基、烷 -50- 200304818 (45) 氧黢基、燒氧貌基、胺基黢基、全齒燒基、晞基、燒談基 或芳燒基。 於式（I)化合物之另一個子集中，R2為下式

其中 m為 0 或 1 ; R34,尺35, R36, R37, R38, R39, ^40及 R41各獨 立為甲基或氫；或取代基R34與R35 ; R36與尺37 ;尺38與r39 ;或R40與R4I中之至少一對，一起為氧原子。R42為Η、氮 雙環烷基或Υ-Ζ，其中Υ係選自包括/⑴)-、·^!^：^-、^…：^-、-C(0)0-、-S〇2NH-、-CONH-、（CH2)q〇-、-(CH2)qNH-及-(CH2)qS(0)r ;其中p為0至約6之整數，q為0至約6之整數，及r為0、1 或2 ;且Z為經取代或未經取代之烷基、胺基、芳基、雜 芳基或雜環烷基。 於一項較佳具體實施例中，r42為下式

-51 - 200304818

(46) 其中 u為 〇 或 1 ; 1143，1144，1?45，反46，《47，^48，1{49及汉50各獨立 為甲基或氫；或取代基尺43與R44 ;尺45與R46 ;尺47與R48 ;或 尺49與尺5〇中之至少一對，一起為氧原子。R51為Η、氮雙環 烷基或V-L，其中V係選自包括-C(O)-、-(CH2)p-、-S(0)2-、 -C(0)0-、-S〇2NH_、_CONH-、（CH2)qO-、-(CH2)qNH-及-(CH2)qS(〇)r- :其中p為0至約6之整數，q為〇至約6之整數，及r為0、1 或2 ;且L為經取代或未經取代之烷基、胺基、芳基、雜 芳基或雜環烷基。 於式（I)化合物之另一個子集中，R2為下式

^60 其中 h、i、j、k及 1係獨立為 〇 或 1 ; r52，r53，r54，r55，r56, R57, R58, R59, Rg及Rh各獨立為甲基或氫；或取代基R52與R53 ;R54與尺55 ;尺56與R57 ;或R58與R59中之至少一對，一起為 氧原子。R6〇為Η、氮雙環烷基或γ-ζ，其中Y係選自包括 -C(O)- ^ -(CH2)p- ^ -S(0)2- ^ -C(0)0- > <S〇2NH- > -CONH- ^ (CH2)qO-、-(CH2)q丽-及-(^2^(0)1:-;其中p為〇至約6之整數，q為〇 至約6之整數，及r為0、1或2 ;且z為經取代或未經取代之 燒基、胺基、芳基、雜芳基或雜環燒基。 -52- 200304818

其中 v 為 0 或 1 ; R61，R62, R63, R64, R65, R66,及67及 R68各獨立 為低碳虎基或氫；或取代基R61與R62 ; r63與r64 ; r65與r66 ;及R67與R68中之至少一對，一起為氧原子；及r69為Η、 氮雙環烷基或V-L，其中V係選自包括/㈨)-、-^^)^』…)^ 、-C(0)0·、-S〇2NH-、-CONH-、（CH2)q〇-、-(CH2)qNH-及(Cl^qSCOV •，其中p為0至約6之整數，q為0至約6之整數，及r為0、1 或2 ;且L為經取代或未經取代之烷基、胺基、芳基、雜 芳基或雜環烷基。 式（I)化合物可以其與藥學上可接受酸之鹽存在。本發 明包括此種鹽。此種鹽之實例包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫 酸鹽、甲烷磺酸鹽、硝酸鹽、順丁烯二酸鹽、醋酸鹽、擰 檬酸鹽、反丁烯二酸鹽、酒石酸鹽（例如（ + )-酒石酸鹽、（-)-酒石酸鹽或其混合物，包括外消旋混合物）、琥珀酸鹽、 苯甲酸鹽，及與胺基酸（譬如麩胺酸）之鹽。此等鹽可藉熟 諳此藝者已知之方法製備。 -53- (48) 200304818

某些具有酸性取代基之式（1)化合物，可以其與藥學上 可接受驗之鹽存在。本發明包括此種鹽。此種鹽之實例包 括鈉鹽、鉀鹽、離胺酸鹽及精胺酸鹽。此等鹽可藉熟諳此 蟄者已知之方法製備。 某些式（I)化合物及其鹽，可以超過一種結晶形式存在 ’且本發明包括各結晶形式及其混合物。 木些式（I)化合物及其鹽，亦可以溶劑合物，例如水合 物之开y式存在，且本發明包括各溶劑合物及其混合物。 某些式（I)化合物可含有一或多個對掌中心，並以不同 光學活性形式存在。當式⑴化合物含有一個對掌中心時 ’此化合物係以兩種對掌異構物形式存在，且本發 兩種對掌異構物，及對掌異構物之混合物。此等對掌 物了精热讀此藝者已知之方法解析，例如藉由形成非對陕 異構物鹽，其可藉由例如結晶化作用進行分離；形 映異構物衍生物或複合物，其可藉由例如結晶化作用 •液相或液相層析法分離；一種對掌異構物與一種里 構物專一性試劑之選擇 . 4, ± ' 〆、 應，例如酵素酯化作用；或氣 履相或液相層析法，在對掌 、 ^ , 旱〖生％境中，例如在對掌性擔 眼上，例如具有經結合對掌性配位體之一 溶劑存在下。應明h 對掌性 』疋在精由上述分離程式之一，你 所要之對掌異構物轉化成另_ 使 另一個步驟以釋出所要之對掌 而要 堂田Μ仏#丄 /、構物形式。或者，特定對 旱兴構物可精由不對稱合成 柳W 文用尤學活性試劑、辱暂 、觸媒或溶劑合成而得，戈菸 又貝 飞猎由不對稱轉變，使一種對掌 -54 - (49)200304818

異構 當 映異 之方 對掌 之各 某 何異 構物 某 〇由： 環應 分離 合物 某 係包 本文 舉例 為· 唑基 吡畊 系統 稠合 ，其 物轉化成另一種。 式（I)化合物含有超過一個對掌中心時，其可以非對 構物开y式存在。非對映異構物對可藉熟諳此藝者已知 刀離例如層析或結晶化作用，而在各對中之個別 /、構物可按上述分離。本發明係包括式（j)化合物 非對映異構物及其混合物。 些式（I)化合物可以不同互變異構物形式或以不同幾 構物存在，且本發明係包括式（I)化合物之各互變異 及/或幾何異構物及其混合物。 I 2()化口物可以可分離之不同安定構形形式存在 1¾繞不對稱單鍵之限制旋#，例如由於隸現象或 斤致之扭轉不對稱性，可允許不同構形異構物之 發月係包括式⑴化合物之各構形異構物及其混 二’⑴化合物可以兩性離子性形式存在，且本發日， :式⑴化合物之各兩性離子性形式及其混合Η 、用《雜方秩基團’包括雜芳基環系統“列如，到 :目:而言，其不應被解釋為限制本 '吩基…基…、…基、喧二峻基、吟二 引坐基、呋喃、吡咯、咪唑、吡唑、- 、、 、嗟唑類、異嘍唑、噚峻基或四唑二峻、、:啶、 ，其中碳環狀芳族環、礙環狀非芳族υ ?万基'承 至-或多個其他雜芳基環(例*， 3 #芳基環係 不應被解釋為限制本發明之m +广目的而言 你為：苯並（b),塞 -55- (50) 200304818 吩基、苯並咪唑基、苯並嘮唑基、苯並嘧唑基、笨並嘆一 。坐基、苯並噚二唑、巧哚、四氫巧哚、氮吲哚、4丨嗅、奎 琳、咪咬並ρ比症、ρ奎峻Ρ林嘌呤、ρ比咯並[2,3_d]，咬、ρ比上 並[3，4-d]13密淀）及其Ν -氧化物。經取代之雜方基較佳係被 或多個取代基取代，取代基各獨立選自包括卣素、參其

烷基、烷氧基、燒基-0-C(0)…燒氧燒基、雜環妗A 經取代之苯基、硝基、胺基、單取代胺基或二 心卷、视 取代胺 情況 基0 於本文中使用之雜環族（雜環基）基團係指雜戸 *衣族基 ，其係為不飽和、部份飽和或飽和。 於本文中使用之雜雙環基係指具有一或多個雜原 團 雙環狀基團，其係為飽和、部份不飽和或不飽和 於本文中使用之芳烷基係為芳族取代基，並 μ y、诉精由 予之 一至約六個破原子之脂族基團連接至化合物 為芊基 較佳芳 具有 境基 於本文中使用之雜芳烷基係為雜芳族取 丞，其作 具有一至约六個碳原子之脂族基團連接古. “精由 文土 合物， 於本文中使用之雜環烷基係為非芳族環系统， 8個原子，且包含至少一個雜原子，譬如、氮死’―其具有3 於本文中使用之（雜環烷基）烷基/ 1虱、氧或硫。 經過堍 基連接至母分子。 於本文中使用之環捷基係為飽和或部 、雙環狀或二％狀烴環系統，具有三至十 l和單環狀 於本文中使用之環烷基烷基係 個蚊原子。 …，經過燒基連接 -56- 200304818

(51) 至母分子。 於本文中使用之脂族基團或符號表示法，譬如n(C〇-C6)” ，係包括直鏈、分枝狀或環狀烴類，其係為完全飽和或含 有一或多個不飽和單位。當此基團為C〇時，係意謂該部份 基團不存在，或換言之，為一個鍵結。 於本文中使用之烷氧烷基為烷氧基，其係經過烷基連接 至母分子。較佳為1至6個碳原子之烷氧基，及1至6個碳原 子之烷基。 於本文中使用之芳族基團（或芳基）包括芳族碳環狀環 系統（例如苯基），及經稠合之多環狀芳族環系統（例如莕 基與1，2,3,4-四氫蓁基）。 於本文中使用之π天然胺基酸’’ 一詞，係指此項技藝中已 知之二十三種天然胺基酸，如下（藉其三字母頭字語表示） :Ala，Arg，Asn，Asp, Cys，Cys-Cys，Glu，Gln，Gly，His，Hyl，Hyp，lie， Leu，Lys，Met，Phe，Pro，Ser，Thr，Trp，Tyr及 Val。非天然胺基酸一 詞係指式NH2-(C(X)2)n-COOH化合物，其係為α -(當η為1時） 或/S -(當η為2時）胺基酸，其中X對各存在處係獨立為熟諳 此藝者所明暸之任何側鏈部份基團；非天然胺基酸之實例 包括但不限於：羥脯胺酸、高脯胺酸、4 -胺基-苯丙胺酸 、石-(2 -奈基）丙胺酸、正白胺酸、緣己基丙胺酸、0-(3-p比淀基）丙胺酸、/3-(4 -ρ比淀基）丙胺酸、α-胺基異丁酸、 尿利酸、Ν，Ν-四甲基甲脒基-組胺酸、Ν-甲基-丙胺酸、Ν-甲基-甘胺酸、Ν -甲基-麩胺酸、第三·丁基甘胺酸、α-胺 基丁酸、第三-丁基丙胺酸、鳥胺酸、α-胺基異丁酸、冷 -57- 200304818

(52) -丙胺酸、7-胺基丁酸、5 -胺基戊酸、12 -胺基十二烷酸 、2-胺基氫茚-2-羧酸等，及其衍生物，尤其是其中胺氮 已被單-或二-烷基化者。 於本文中使用之許多部份基團或取代基，係被稱為無論 是，，經取代或未經取代，，或”視情況經取代Π。當一種部份基 團被此等術語之一修改時’其係表示熟諳此藝者已知可用 於取代之此部份基團之任何部份’可被取代’其包括一或 多個取代基，其中若超過一個取代基，則各取代基係獨立 經選擇。此種用於取代之方式係為此項技藝中所習知，及 /或由本揭示内容所陳述。對舉例之目的而言，其不應被 解釋為限制本發明之範圍’作為取代基之基團’其一些實 例係為：烷基（其本身亦可被取代，譬如CF3)、烷氧基（其 本身可被取代，譬如OCF3)、鹵素或鹵基（F，Cl，Br，I)、經 基、硝基、酮基、CN、COH、COOH、胺基、N-烷胺基或N，沁 二烷胺基（其中烷基亦可被取代）、酯類（-C(O)-OR，其中R 為譬如烷基、芳基等之基團，其可被取代）、芳基（最佳為 苯基，其可被取代）及芳烷基（其可被取代）。 本發明化合物具有抗血管生成性質。此等抗血管生成性 質係至少部份由於抑制血管生成過程所必須之蛋白質路 胺酸激酶所致。因此，此等化合物可作為活性劑使用，以 抵抗一些疾病狀態，譬如關節炎、動脈粥瘤硬化、再狹窄 、牛皮癬、血管瘤、心肌衰弱血管生成、冠狀與大腦侧枝 、絶血性肢血ί生成、絕血/再灌注傷害、傷口癒合、消 化性潰瘍、螺旋桿菌有關聯之疾病、病毒引致之血管生成 -58- 200304818

(53) 病症、骨折、CrowFukase徵候簇（POEMS)、初期搐搦、月經 過多、貓抓熱、皮膚發紅、新血管青光眼，及視網膜病’ 譬如與糖尿病患者之視網膜病有關聯者，早產之視網膜病 或與老化有關聯之斑點變性。此外，一些此等化合物可作 為活性劑使用，以抵抗固體腫瘤、惡性水腹、vonHiPPelLindau 疾病、造血癌，及過高增生性病症，譬如甲狀腺增生（尤 其是格雷武司氏症），及囊腫（譬如多囊卵巢徵候簇 (Stein-Leventhal徵候簇）之特徵性卵巢基質之血管過多狀態） ，及多囊腎臟疾病，因為此種疾病需要血管細胞增生’以 供生長及/或轉移。 再者，一些此等化合物可作為活性劑使用，以抵抗灼傷 、慢性肺臟疾病、中風、息肉、過敏性反應、慢性與過敏 性發炎、延遲型過敏性、卵巢過度刺激徵候簇、與腦部腫 瘤有關聯之大腦水腫、高空病、外傷或缺氧所引致之大腦 或肺水腫、眼睛與斑點水腫、水腹、絲球體性腎炎，及其 中血管滲透性過大、滲液、滲出物、蛋白質外滲或水腫為 疾病現象之其他疾病。此等化合物亦可用於治療其中蛋白 質外滲會導致纖維蛋白與胞外基質沈積，促進基質增生之 病症（例如瘢瘤、纖維變性、肝硬化及腕随道徵候簇：）。增 加之VEGF生產會加強炎性過程，譬如單細胞反射增進與 活化作用。本發明化合物亦將可用於治療炎性病症’譬如 炎性腸疾病（IBD)與克隆氏病。 VEGF為獨特的，因其係為已知會助長血管滲透性過大 及水腫形成之唯一血管生成生長因數。事實上，與許多其 -59- 200304818

(54) 他生長因數之表現或施行有關聯之血管滲透性過大及水 腫，顯示係經由VEGF生產所媒介。炎性細胞活素會刺激 VEGF生產。缺氧會造成VEGF在許多組織中之顯著向上調 節，因此涉及梗塞、閉塞、絕血、貧血或循環性損堂之狀 況，典型上會招致VEGF/VPF所媒介之回應。血管渗透性過 大、有關聯之水腫、改變之經内皮交換及巨分子外丨來，其 經常伴隨著血球遊出，其可能會造成過度基質沈積、迷行 基質增生、纖維變性等。因此，VEGF所媒介之渗透性過 大’可顯著地助長具有此等病原學特徵之病症。 由於胚胞植入、胎盤發育及胚胎發生係為血管生成依賴 性’故某些本發明化合物可作為避孕藥劑及抗生育齋】使用 可想像得到的是，上文列不之病症係藉由乎及 KDR/VEGFR-2及 / 或 Flt-1/VEGFR-l及 / 或 TIE-2酪胺酸激酶、 蛋白質酪胺酸激酶活性，被媒介至可觀程度。藉由 田抑制此 因 等赂胺酸激酶之活性，則所列示病症之進展係被和卩_ 為此疾病狀態之血管生成或血管滲透性過大成俗# 々货、被嚴 重地削減。某些本發明化合物之作用，由於其對縣^ 了疋酪胺 酸激酶 明化合 此等受 酸激酶之選擇性，故造成若使用較低選擇性之酪胺 抑制劑時會發生之副作用減到最低限度。某些本發 物亦為FGFR、PDGFR、c-Met及IGF-1-R之有效抑制劑。 體激酶可在各種病症中直接或間接加強血管生成# ^ & 增生性回應，因此其抑制可阻止疾病進展。

Tie-2(TEK)為近來發現之内皮細胞專一受體酪胺酸激 -60- 200304818

(55)

族群之一員，其係涉及關键性血管生成過程，譬如血管分 枝、發芽、改造、成熟及安定性。Tie-2為第一種哺乳動物 受體酷胺酸激酶，已對其確認出催動劑配位體（例如血管 生成素1 (nAngln)，其會刺激受體自磷酸化作用與訊息轉導 )與拮抗劑配位體（例如血管生成素2(nAng2，’)）兩者。Tie-2及 其配位體表現之剔除與轉基因操控，顯示Tie-2發出訊息之 緊密空間與暫時控制，係為新血管分佈之適當發展所必須 。現行模式指出Tie-2激酶被Angl配位體刺激，係直接涉及 新血管之分枝、發芽及向外生長，以及在保持咖管完整性 及謗發靜止期上重要之外被内皮載體細胞之反射增進與 交互作用。Tie_2之Angl刺激不存在，或Tie-2自磷酸化作用 被Ang2抑制（其係在血管退化位置，於高程度下產生），可 造成喪失血管結構與間質接觸’而造成内皮細胞死亡，尤 其是在生長/生存刺激不存在下。但是，此狀況較複雜， 因為最近已報告至少雨種其他Tie-2配位體（Ang3與Ang4)， 且各種催動與拮抗血管生成素之異寡聚合作用，於是改變 其活性之能力，已被I正實。以配位體·受體交互作用 為標的，作為抗血管生成治療途徑，因此較不有利，而激 酶抑制策略較佳。

Tie-2(，，ExTek，，）之可溶性胞外功能部位，可用以瓦解腫瘤 血管分佈在乳房腫瘤異種移植與肺臟轉移模式中，及在腫 瘤細胞所媒介之眼睛新血管生成作用中之建立。藉由腺病 毒感染，毫克/毫并移度之ExTek在I齒動物中之活體内 生產，可歷經7-10天達成，未具有不利副作用。此等結果 -61 - 200304818

(56) 指出Tie-2發出訊息途徑在正常健康動物中之瓦解，可良好 地被容許。對ExTek之此等Tie-2抑制回應，可為配位體之重 要多價螯合作用，及/或具有全長Tie-2之非生產性異種二 聚體之產生。 最近，Tie-2表現之顯著向上調節，已被發現於人類關節 炎關節之血管滑膜血管翳内，與在不適當新血管生成作用 中之角色一致。此項發現指出Tie-2在風濕性關節炎之進展 上，係扮演一項角色。點突變產生Tie-2之構成上活化形式 ，已伴隨著人類靜脈畸型病症而被確認。因此，Tie-2抑制 劑可用於治療此種病症，及用於不適當新血管生成作用之 其他狀況。 本發明化合物具有抵抗蛋白質激酶之抑制活性。意即， 此等化合物會調制藉由蛋白質激酶之訊息轉導。本發明化 合物會抑制來自絲胺酸/蘇胺酸及酪胺酸激酶種類之蛋 白質激酶。特定言之，此等化合物會選擇性地抑制 KDR/FLK-1/VEGFR-2酪胺酸激酶之活性。某些本發明化合物 亦會抑制其他酪胺酸激酶之活性，譬如F1M/VEGFR-1， Flt-4/VEGFR_3, Tie-1，Tie-2, FGFR，PDGFR，IGF_1R，c-Met，Src_亞族 群激酶，譬如Lck，hck，fgr，Src，fyn，yes等。此外，一些本發明 化合物會顯著地抑制絲胺酸/蘇胺酸激酶，譬如PKC、MAP 激酶、erk、CDK、Plk-1或Raf-1，其在細胞增生與細胞循環進 展中係扮演一項必要角色。本發明整體化合物對特定蛋白 質激酶之功效與專一性，通常可經由在取代基（意即Rl，R2, R3, A及環1)之性質、數目及排列，以及構形限制上之變異 -62- 200304818

(57) 而改變且達最佳化。此外，某些化合物之新陳代謝產物， 亦可具有顯著蛋白質激酶抑制活性。 本發明之化合物，當被投予需要此種化合物之個人時， 會抑制在此等個人中之血管滲透性過大及水腫形成。贼信 此等化合物係藉由抑制KDR酪胺酸激酶之活性而發生作 用，該激酶係涉及血管滲透性過大與水腫形成之過程。 KDR酷胺酸激酶亦可被稱為FLK-1赂胺酸激酶、NYK酿胺酸 激酶或VEGFR-2赂胺酸激酶。當血管内皮細胞生長因數 (VEGF)或另一種活化配位體（譬如VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E 或HIVTat蛋白質）結合至位在血管内皮細胞表面上之KDR酪 胺酸激酶受體時，KDR酶胺酸激酶係被活化。在此種KDR 赂胺酸激酶活化作用之後，發生血管之滲透性過大，且流 體從血流移動，通過血管壁進入組織間隙空間中，於是形 成水腫區域。血球遊出亦經常伴隨著此回應。同樣地，過 度血管滲透性過大可能會瓦解在重要組織與器官（例如肺 臟與腎臟）中越過内皮之正常分子交換，於是造成巨分子 外滲與沈積。在對KDR刺激之此種急性回應之後，鹹信其 會促進後續血管生成過程，則延長之KDR酿胺酸激酶刺激 作用，會造成血管内皮細胞之增生與向化性，及新血管之 形成。藉由抑制KDR酪胺酸激酶活性，無論是藉由阻斷活 化配位體之產生，藉由阻斷活化配位體結合至KDR酪胺酸 激酶受體，藉由防止受體二聚合作用與轉磷醯化作用，藉 由抑制KDR酪胺酸激酶之酶活性（抑制此酶之磷醯化功能） 或藉由會中斷其下游發出訊息作用之一些其他機制 -63- 200304818

(58) (D.Mukhopedhyay等人，CancerRes.58 : 1278-1284 (1998)及其中之 參考資料），則滲透性過大，以及有關聯之外滲，隨後之 水腫形成與間質沈積，及血管生成回應，均可被抑制及降 至最低。 本發明之一組較佳化合物，具有抑制KDR酪胺酸激酶活 性之性質，而不會顯著地抑制Flt-Ι酪胺酸激酶活性（Flt-Ι酪 胺酸激酶亦被稱為VEGFR-1酪胺酸激酶）。KDR酪胺酸激酶 與Flt-Ι酪胺酸激酶兩者，係經由VEGF個別結合至KDR酪胺 酸激酶受體及結合至Flt-Ι赂胺酸激酶受體而被活化。本發 明之某些較佳化合物係為獨特的，因其會抑制一種被活化 配位體所活化之VEGF-受體酪胺酸激酶（KDR)之活性，但不 會抑制其他受體酪胺酸激酶，譬如Flt-1，其亦被某些活化 配位體所活化。依此方式，本發明之某些較佳化合物，因 此在其酪胺酸激酶抑制活性上具有選擇性。 於一項具體實施例中，本發明係提供一種在病患中治療 蛋白質激酶所媒介症狀之方法，其包括對該病患投予治療 上或預防上有效量之一或多種式（I)化合物。 ’’蛋白質激酶所媒介之症狀’’或’’藉由蛋白質激酶活性所 媒介之症狀’’係為一種醫療症狀，譬如疾病或其他不期望 之身體狀態，其發生或進展係至少部份依至少一種蛋白質 激酶之活性而定。此蛋白質激酶可為例如蛋白質酷胺酸激 酶或蛋白質絲胺酸/蘇胺酸激酶。 待治療病患可為任何動物，且較佳為哺乳動物，譬如馴 養動物或家畜動物。病患更佳為人類。 -64- (59) (59)200304818 ，，治療上有效量，’為一種式（I)化合物，或兩種或多種此類 化合物組合之量，其會完全或部份抑制症狀之進展’或至 少部份減輕症狀之一或多種病徵。治療上有效量亦可為預 防上有效之量。治療上有效之量係依病患大小與性別、待 治療之症狀、症狀之嚴重性及所尋求之結果而定。對特定 病患而言，治療上有效量可藉由熟諳此藝者已知之方法測 定。 本發明方法可用於治療蛋白質激酶所媒介之症狀’譬如 任何上述症狀。於一項具體實施例中，蛋白質激酶所媒介 症狀之特徵為不期望之血管生成、水腫或基質沈積。例如 ，該症狀可為一或多種潰癌，譬如因細菌或真囷感染所造 成之潰瘍、Mooren潰瘍及潰瘍性結腸炎。此症狀亦可由於 微生物感染所致，譬如Lyme疾病、敗血病、敗血性休克， 或被單純疱疹、帶狀疱疹、人類免疫不全病毒、原生動物 、毒漿體或副痘病毒感染；血管生成病症，譬如 vonHippelLindau疾病、多囊腎臟疾病、類天疮瘡、柏哲德氏 病及牛皮癬；生殖症狀，譬如子宮内膜組織異位形成、卵 巢高刺激作用徵候簇、初期搐搦或月經過多；纖維變性與 水腫症狀，譬如結節病、纖維變性、肝硬化、甲狀腺炎、 黏性過大徵候簇系統、Osler-Weber-Rendu疾病、慢性堵塞肺 病、氣喘，及灼傷、外傷、放射、中風、缺氧或絕血後之 水腫；或炎性/免疫學症狀，譬如系統性狼瘡、慢性發炎 、絲球體性腎炎、滑膜炎、炎性腸疾病、克隆氏病、風濕 性關節炎、骨關節炎、多發性硬化及移植物排斥。適當蛋 -65- 200304818

(60) 白質激酶所媒介之症狀，亦包括鐮狀細胞貧血、骨質疏鬆 症、骨質石化病、腫瘤所引致之血鈣過高症及骨質轉移。 可藉由本發明方法治療之其他蛋白質激酶所媒介之症狀 ，包括眼睛症狀，譬如眼睛與斑點水腫、眼睛新血管疾病 、鞏膜炎、放射狀角膜切開術、葡萄膜炎、玻璃體炎、近 視、眼凹陷、慢性視網膜脫落、雷射後併發症、結合膜炎 、Stargardt氏疾病及Eales疾病，此外為視網膜病與斑點變性 〇 本發明化合物亦可用於治療心與血管症狀，譬如動脈粥 瘤硬化、再狹窄、血管堵塞及頸動脈阻塞疾病。本發明化 合物亦可用於治療癌症相關適應徵，譬如固態腫瘤、肉瘤 (尤其是Ewing氏肉瘤與骨肉瘤）、視網膜胚細胞瘤、橫紋肌 肉瘤、神經胚細胞瘤、神經膠質母細胞瘤，造血惡性病症 ，包括白血病與淋巴瘤，腫瘤所引致之胸膜或心包滲液， 及惡性水腹。 本發明化合物亦可用於治療肺高血壓，尤其是在患有血 栓性插塞疾病（JThoracCardiovascSurg，2001，122 (1)，第 65_73 頁） ，Crow-Fukase (POEMS)徵候簇，及糖尿病症狀，譬如青光眼 、糖尿病患者之視網膜病及小血管病之病人中。 激酶之Src，Tec，Jak，Map，Csk，NF /c B及Syk族群，在免疫功能 調節上係扮演樞軸角色。Src族群目前包括Fyn，Lck，Fgr，Fes， Lyn，Src，Yrk，Fyk，Yes，Hck及Blk。Syk族群目前據瞭解僅包括 Zap與Syk。TEC族群包括Tec，Btk，Rlk及Itk。激酶之Janus族群 ，係涉及生長因數及預發炎細胞活素訊息經過許多受體之 -66- 200304818

(61) 轉導。雖然BTK與ITK，其為Tec激酶族群之成員，在免疫 生物學上係扮演一個較不是很明瞭之角色，但其藉由抑制 劑之調制’可註實治療上是有利的。Csk族群目前據暸解 係包括 Csk與 Chk。激酶 RIP，IRAK-1，IRAK_2, NIK，p38MAp激酶，

Jnk，IKK-1及IKK-2係涉及主要預發炎細胞活素譬如TNF與 IL-1之訊息轉導途徑。由於式（I)化合物抑制一或多種此等 激酶之能力’故其可充作可用於維持同種移植物、治療自 身免疫病症及治療敗血病與敗血性休克之免疫調節劑。經 由此等化合物調節T細胞、B -細胞、肥大細胞、單細胞及 嗜中性白血球之潛移或活化作用之能力，其可用以治療此 種自身免疫疾病與敗血病。移植物排斥，無論是對固體器 官而言之宿主對移植物，或對骨髓而言之移植物對宿主， 其預防均受到目前可取得之免疫抑制劑之毒性所限制，故 將得利於具有經改良治療指數之有效藥物。基因標的實驗 已証實Src在破骨細胞生物學中之必要角色，此等細胞係 負責骨質耗損。式I化合物，經由其調節Src之能力，亦可 用於治療骨質疏鬆症、骨質石化病、柏哲德氏疾病、腫瘤 所引致之血鈣過高症，及用於治療骨質轉移。 多種蛋白質激酶已被証實係為原致癌基因。染色體斷裂 (在染色體5上之ltk激酶斷裂點），如在Abl基因與BCR (費城 染色體）情況中之移位作用，在例如c-Kit或EGFR情況中之 截斷，或突變（例如Met)，均會造成產生調節不良之蛋白 質，使彼等從原致癌基因轉化成致癌基因產物。在其他腫 瘤中，腫瘤生成係藉由自分泌物或副分泌物配位體/生長 -67- 200304818

(62) 因數受體交互作用驅動。src-族群激酶之成員，典型上係 涉及下游訊息轉導，於是加強腫瘤生成，且其本身可因過 度表現或突變而變成致癌基因。藉由抑制此等蛋白質之蛋 白質激酶活性，則此疾病過程可被瓦解。血管再狹窄可涉 及FGF及/或PDGF促進之平滑肌及内皮細胞增生。FGFR、 PDGFR、IGF1-R及c-Met於活體内之配位體刺激係為血管生成 前，並加強血管生成依賴性之病症。FGFr、PDGFr、c-Met或 IGF1-R激酶活性個別或組合之抑制，可為抑制此等現象之 有效策略。因此’會抑制正常或迷行c-kit、c-met、c-fms、src_ 族群成員 ’ EGFr ' erbB2 ' erbB4 ' BCR_AM' PDGFr ' FGFr ' IGF1-R 及其他受體或細胞溶質酪胺酸激酶之激酶活性之式（1)化 合物，可有價值地用於治療良性與新生物增生性疾病。 在許多病理學症狀（例如，固態原發性腫瘤與轉移、卡 波西氏肉瘤、風濕性關節炎、由於不適當眼睛新血管生成 作用所致之失明、牛皮癖及動脈粥瘤硬化）中，疾病進展 係全憑持續之血管生成。經常藉由疾病組織或有關聯炎性 細胞所產生之多肽生長因數，及其相應内皮細胞專一受體 酪胺酸激酶（例如 KDR/VEGFR-2、Flt-l/VEGFR]、Tie-2/Tek及 Tie) ，係為刺激内皮細胞生長、潛移、機體形成、分化，及建 立必要之新功能性血管分佈所必須。由於VEGF在媒介血 管滲透性過大上之血管滲透性因數活性之結果，故亦認為 VEGFR激酶之VEGF-刺激在形成腫瘤水腹、大腦與肺水腫、 胸膜與心包滲液、延遲型過敏性反應，在外傷、灼傷、絕 血後之組織水腫與器官機能障礙，糖尿病併發症、子宮内 -68- (63) (63)200304818 膜組織異位形成、成人呼吸困難徵候簇（ARDS)、心肺後分 流有關聯之低血壓與滲透性過大，及眼睛水腫導致音光眼 或由於不適當新血管生成作用所致之失明上，係扮演重要 角色。除了 VEGF以外，近來確認之VEGF-C與VEGF-D，及病 毒編碼之VEGF-E或HIV-Tat蛋白質，亦可經過VEGFR激酶之 刺激，造成血管滲透性過大回應。KDR/VEGFR-2及/或Tie_2 亦在所選擇之造血幹細胞群集中表現。此群集之某些成員 在本性上係為有多種作用的，並可以生長因數刺激，以分 化至内皮細胞中，及參與脈管發生之血管生成過程。因此 ，其已被稱為内皮原始粒子細胞（EPC)(J.Clin.Investig.l03 : 1231-1236 (1999))。在一些原始粒子中，Tie-2可於其反射增 進、黏連性、調節及分化上，扮演一項角色（血液期刊 ，4317-4326(1997))。能夠阻斷内皮細胞專一激酶之激酶活性 之某些根據式（I)之藥劑，因此可抑制涉及此等狀況之疾 病進展。 鹹認Tie-2之拮抗劑配位體（Ang2)之血管去安定化作用， 會在内皮中引致不安定”塑性’’狀態。於高VEGF含量存在下 ，可造成強效血管生成回應；但是，於VEGF或VEGF-相關 刺激不存在下，可發生顯著血管退化與内皮細胞凋零 (Genesand Devel.13 : 1055-1066 (1999))。以類似方式 ’ Tie-2激酶 抑制劑於VEGF-相關刺激存在或不存在下，可個別為血管 生成前的或抗血管生成的。 式（I)化合物或其鹽或其含有治療上有效量之醫藥組合 物，可用於治療蛋白質激酶所媒介之症狀，譬如良性與新 -69- 200304818

(64) 生物增生性疾病，及免疫系統病症，如上述。例如，此種 疾病包括自身免疫疾病，譬如風濕性關節炎、甲狀腺炎、 第1型糖尿病、多發性硬化、結節病、炎性腸疾病、克隆 氏病、重症肌無力及全身性紅斑狼瘡；牛皮癬、器官移植 排斥（例如腎臟排斥、移植物對宿主疾病），良性與新生物 增生性疾病，人類癌症，譬如肺臟、乳房、胃、膀胱、結 腸、胰臟、即巢、前列腺及直腸癌，以及造血惡性病症（ 白血病與淋巴瘤），及涉及不適當血管形成之疾病，例如 糖尿病患者之視網膜病，早產之视網膜病，由於與老化有 關聯之斑點變性所致之脈絡膜新血管生成作用，及在人類

中之幼兒血官瘤。此外，此種抑制劑可用於治療涉及VEGF 所媒介水腫、水腹、滲液及滲出物之病症，包括例如斑點 水腫、大腦水腫、急性肺臟傷害及成人呼吸困難徵候簇 (ARDS)。 本發明化合物亦可用於預防上述疾病。 可想像彳于到的疋，上文列示之病症係藉由涉及仰仰受 體（例如KDR、順及/或Tie_2)之蛋白質路胺酸激酶活性， 被媒介至可觀程度。藉由抑制此等受體酷胺酸激酶之活性 ，則所列示病症之進展你# v ^ 延展係被抑制，因為此疾病狀態之血管 生成成份係被嚴重地削減。本發明化合物之作用，由於其 對I特疋酪胺酸激酶之選擇性，故造成若使用較低選擇性 之酶胺酸㈣抑制劑時會發生之副作用減到最低限度。 、另方面本發明係提供如上文最初定義之式（I)化 合物’作為藥劑使用’ #別是作為蛋白質激酶活性，例如 -70- 200304818 (65) 赂胺酸激酶活性、絲胺酸激酶活性及蘇胺酸激酶活性之抑 制劑。於又另一方面，本發明係提供如上文最初定義之式 (I)化合物在藥劑製造上之用途，供使用於蛋白質激酶活 性之抑制。 在本發明中，下述定義可適用：

”生理學上可接受之鹽”係指保持自由態鹼之生物有效 性與性質之鹽，且其係經由與無機酸或有機酸反應而獲得 ，該無機酸譬如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸，該有 機酸譬如磺酸、羧酸、有機磷酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、 對-甲苯磺酸、柳酸、乳酸、酒石酸等。 醫藥配方

本發明化合物可以其本身或以醫藥組合物投予人類病 患，其中係將其與適當載劑或賦形劑，於治療或改善血管 滲透性過大、水腫及有關聯病症之劑量下混合。亦可將此 等化合物之混合物，以單純混合物或以適當調配之醫藥組 合物投予病患。治療上有效劑量，進一步指一或多種足以 造成防止或減弱不適當新血管生成作用，過高增生性病症 、水腫、與VEGF-有關聯之滲透性過大及/或與VEGF-有關 聯低血壓之進展之化合物量。關於本申請案化合物之調配 與投藥之技術，可參閱最新版之”Remington氏醫藥科學'’， Mack 出版公司（Easton，PA)。 投藥途徑 適當投藥途徑可包括例如口服、眼藥水、直腸、經黏膜 、局部或腸投藥；非經腸傳輸，包括肌内、皮下、髓内注 -71 - 200304818

射，以及鞘内、直接室内、靜脈内、腹膜内、鼻内或眼球 内注射。 或者，吾人可以局部而非系統方式投予此化合物，例如 經由將此化合物直接注射至水腫位置中，其經常是在積貯 或延緩釋出配方中。 再者，吾人可以標的藥物傳輸系統投予此藥物，例如在 以内皮細胞專一抗體塗覆之脂質體中。 組合物/配方 本發明之醫藥組合物可以本身已知之方式製成，例如利 用習用混合、溶解、粒化、糖衣錠製造、研碎、乳化、包 膠、陷入或凍乾方法。 供本發明使用之醫藥組合物，因此可以習用方式調配， 使用一或多種生理學上可接受之載劑，包括賦形劑與輔助 劑，其有助於將活性化合物加工處理成可於藥學上使用之 製劑。適當配方係依所選擇之投藥途徑而定。 對注射而言，可將本發明之藥劑調配於水溶液中，較佳 係在生理學上可相容之緩衝劑中，譬如Hanks氏溶液、Ringer 氏溶液，或生理食鹽水緩衝劑。對於經黏膜投藥而言，係 於配方中使用適於滲透障壁之浸透劑。此種浸透劑係為此 項技藝中一般已知的。 對口服投藥而言，可容易地經由將活性化合物與此項技 藝中所習知之藥學上可接受之載劑合併，以調配此等化合 物。此種載劑使得本發明之化合物能夠被調配成片劑、丸 劑、糖衣錠、膠囊、液體、凝膠、糖漿、漿液、懸浮液等 -72- 200304818

(67) ，供待治療之病人口服攝食。供口服使用之醫藥製劑，可 以下述方式獲得，將活性化合物與固體賦形劑合併，視情 況研磨所形成之混合物，及若需要則於添加適當輔助劑後 ，加工處理此顆粒混合物，以獲得片劑或糖衣錠核芯。適 當賦形劑為特別是填料，譬如糖類，包括乳糖、蔗糖、甘 露醇或花楸醇；纖維素製劑，例如玉米澱粉、小麥澱粉、 稻米澱粉、馬鈴薯澱粉、明膠、西黃蓍樹膠、甲基纖維素 、羥丙甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉及/或聚乙烯基四氫 吡咯酮（PVP)。若需要，可添加崩解劑，譬如交聯聚乙烯 基四氫吡咯酮、瓊脂，或海藻酸或其鹽，譬如海藻酸鈉。 糖衣錠核芯具有適當塗層。對此項目的而言，可使用濃 糖溶液，其可視情況含有阿拉伯膠、滑石、聚乙烯基四氫 吡咯酮、聚羧乙烯凝膠、聚乙二醇及/或二氧化鈦、漆溶 液及適當有機溶劑或溶劑混合物。可將染料或色素添加至 片劑或糖衣錠塗層中，以供識別或表現活性化合物劑量之 不同組合之特徵。 可以口服方式使用之醫藥製劑，包括由明膠製成之推送 配合膠囊，以及由明膠與增塑劑（譬如甘油或花楸醇）製成 之軟式密封膠囊。推送配合之膠囊，可含有活性成份，並 混合填料，譬如乳糖，黏合劑，譬如澱粉，及/或潤滑劑 ，譬如滑石或硬脂酸鎂，及視情況選用之安定劑。在軟式 膠囊中，可使活性化合物溶解或懸浮於適當液體中，譬如 脂肪油類、液體石蠟或液態聚乙二醇。此外，可添加安定 劑。所有供口服投藥之配方，應呈適於此種投藥之劑量。 -73- 200304818

(68) 對面頰投藥而言，此等組合物可採取以習用方式調配之 片劑或錠劑形式。 對於藉吸入投藥而言，使用於本發明之化合物可合宜地 從加壓包裝或霧化器，利用適當推進劑，例如二氯二氟甲 烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他適當氣 體，以氣溶膠噴霧形式傳輸。在加壓氣溶膠之情況中，可 經由提供閥門以傳輸經計量之量，決定劑量單位。膠囊與 藥筒，例如供使用於吸入器或吹藥器之明膠，可經調配成 含有此化合物與適當粉末基料（如乳糖或澱粉）之粉末混 合物。 可調配此等化合物，藉由注射供非經腸投藥使用，例如 快速注射或連續灌注。注射用之配方可以單位劑量形式呈 現，例如在安飯瓶或在多劑量容器中，並使用添加之防腐 劑。此等組合物可採取多種形式，譬如懸浮液、溶液或乳 化液，在油性或水性媒劑中，並可含有調配劑，譬如懸浮 、安定化及/或分散劑。 供非經腸投藥用之醫藥配方，包括呈水溶性形式之活性 化合物之水溶液。此外，可將活性化合物之懸浮液，按適 當方式製成油性注射懸浮液。適當親脂性溶劑或媒劑，包 括脂肪油類，譬如芝麻油，或合成脂肪酸酯類，譬如油酸 乙酯或甘油三酯，或脂質體。含水注射懸浮液可含有會增 加懸浮液黏度之物質，譬如羧甲基纖維素鈉、花楸醇或葡 聚醣。此懸浮液亦可視情況含有適當安定劑或會增加化合 物溶解度之作用劑，以允許製備高度濃縮溶液。 -74- 200304818

(69) 或者，活性成份可呈粉末形式，以在使用之前，以適當 媒劑賦形，例如無菌不含熱原水。 亦可將此等化合物調配成直腸組合物，譬如栓劑或保留 灌腸劑，例如含有習用栓劑基料，譬如可可豆脂或其他甘 油酯。

除了前述配方以外，亦可將此等化合物調配成積貯製劑 。此種長期作用配方可藉植入法投藥（例如以皮下方式或 肌内方式或經由肌内注射）。因此，例如，可將此等化合 物與適當聚合體或疏水性物質（例如在可接受之油中作成 乳化液）或離子交換樹脂一起調配，或作成節制性地可溶 之衍生物，例如作成節制性地可溶之鹽。

供本發明疏水性化合物用之醫藥載劑，其實例為共溶劑 系統，包含爷醇、非極性介面活性劑、水可溶混之有機聚 合體及水相。此共溶劑系統可為VPD共溶劑系統。VPD為3 % w/v苄醇，8 % w/v非極性介面活性劑聚花楸酸酯80，及65 % w/v聚乙二醇300，在無水乙醇中補足體積之溶液。此VPD 共溶劑系統（VPD : 5 W)，係由使用水溶液中之5 %葡萄糖， 以1 ·· 1稀釋之VPD所組成。此共溶劑系統會良好地溶解疏 水性化合物，且其本身在系統投藥時會產生低毒性。當然 ，共溶劑系統之比例可相當大地改變，而不會破壞其溶解 度與毒性特徵。再者，共溶劑成份之身分可以改變：例如 ，可使用其他低毒性非極性介面活性劑，以代替聚花楸酸 酯80 ;聚乙二醇之破片大小可以改變；其他生物可相容之 聚合體，可取代聚乙二醇，例如聚乙婦基四氫吡咯酮；及 -75- 200304818

(70) 其他糖類或多醣類可替代葡萄糖。 或者，可採用供疏水性醫藥化合物用之其他傳輸系統。 脂質體與乳化液係為供疏水性藥物用之傳輸媒劑或載劑 之習知實例。某些有機溶劑，譬如二甲亞颯，亦可採用， 惟經常係以較大毒性為代價。此外，此等化合物可使用延 緩釋出系統傳輸，譬如含有此治療劑之固體疏水性聚合體 之半滲透性基質。各種延緩釋出物質已被確立，且係為熟 諳此藝者所習知。延緩釋出膠囊可依其化學性質而定，釋 出此等化合物歷經數週，達到超過100天。依治療試劑之 化學性質與生物安定性而定，可採用蛋白質安定化作用之 其他策略。 此等醫藥組合物亦可包含適當固體或凝膠相載劑或賦 形劑。此種載劑或賦形劑之實例，包括但不限於碳酸鈣、 磷酸鈣、各種糖類、澱粉、纖維素衍生物、明膠及聚合體 ，譬如聚乙二醇。 許多本發明之有機分子化合物，可以具有藥學上可相容 抗衡離子之鹽提供。藥學上可相容之鹽，可以許多酸形成 ，包括但不限於鹽酸、硫酸、醋酸、乳酸、酒石酸、韻果 酸、琥珀酸等。鹽類係比其相應之自由態鹼形式，具有較 可溶於水性或其他質子性溶劑中之傾向。 有效劑量 適用於本發明之醫藥組合物，包括其中以有效量包含活 性成份以達成其意欲目的之組合物。更明確言之，治療上 有效量係意謂有效阻止被治療病患現有病徵之發展或使 -76- 200304818

(71) 其減輕之量。有效量之測定係良好地在熟諳此藝者之能力 範圍内。 對任何在本發明方法中使用之化合物而言，治療上有效 劑量可首先自細胞檢測進行估計。例如，可在細胞與動物 模式中調配一劑量，以達成一循環濃度範圍，其包括在細 胞檢測中所測得之IC50 (意即，達成特定蛋白質激酶活性 最高抑制作用一半之待測化合物濃度）。在一些情況中， 於3至5 %血清白蛋白存在下測定IC50是適合的，因為此種 測定係近似血漿蛋白質在化合物上之結合作用。此種訊息 可用以更精確地測定可用於人類之劑量。再者，供系統投 藥之最佳化合物，係在安全地可於血漿中達成之含量下， 有效地抑制蛋白質激酶在完整細胞中發出信號。 治療上有效劑量，係指會造成病患中之病徵改善之化合 物量。此種化合物之毒性與治療功效，可藉標準醫藥程式 ，在細胞培養物或實驗動物中測定，例如用以測定最大容 許劑量（MTD)及ED50 (對50%最大回應之有效劑量）。在毒性 與治療作用間之劑量比，係為治療指數，且其可以MTD與 ED50間之比例表示。顯示高治療指數之化合物係為較佳的 。得自此等細胞培養物檢測與動物研究之數據，可用於調 配供使用於人類之劑量範圍。此種化合物之劑量，較佳係 位於循環濃度之範圍内，其包含ED50，具有極少或無毒性 。此劑量可在此範圍内改變，依所採用之劑量形式及所利 用之投藥途徑而定。正確配方、投藥途徑及劑量，可由個 別醫師，鑒於病患症狀作選擇（參閱，例如Fingle等人，1975,f -77- 200304818

(72) 治療學之藥理學基礎”，第1章第1頁）。在危險期治療中， 可能需要趨近MTD之急性大丸劑或灌注之投藥，以獲得快 速回應。 劑量之量與間隔，可個別地調整，以提供足以保持激酶 調製作用之活性部份之血漿含量，或最低有效濃度（MEC) 。MEC將對每一種化合物作改變，但可自活體外數據估計 :例如，使用本文中所述之檢測，達成蛋白質激酶之50-90 %抑制作用所必須之濃度。達成MEC所必須之劑量，係依 個別特性與投藥途徑而定。但是，HPLC檢測或生物檢測可 用以測定血漿濃度。 劑量間隔亦可使用MEC值決定。化合物應使用一種服用 法進行投藥，此服用法係保持血漿含量高於MEC歷經10-90 %時間，較佳係在30-90%之間，且最佳係在50-90%之間， 直到達成所要之病徵改善為止。在局部投藥或選擇性吸收 之情況中，藥物之有效局部濃度可能與血漿濃度無關。 所投予組合物之量，當然係依被治療病患、病患體重、 疾患之嚴重性、投藥方式及指定醫師之判斷而定。 包裝 若需要，此等組合物可呈現於包裝或分配裝置中，其可 含有一或多個含有活性成份之單位劑量形式。此包裝可包 含例如金屬或塑膠箔，譬如氣泡包裝。此包裝或分配裝置 可伴隨著投藥說明書。亦可製備包含本發明之化合物而被 調配在可相容醫藥載劑中之組合物，置於適當容器中，並 貼上用以治療所指示症狀之標籤。 -78- 200304818

(73) 在一些配方中，可有利地使用呈極小尺寸粒子形式之本 發明化合物，例如藉由流體能研磨所獲得者。 本發明化合物在醫藥組合物製造上之用途，係藉由下文 描述作說明。在本說明文中，π活性化合物’’ 一詞，係表示 本發明之任何化合物，但特別是前述實例之一之最後產物 之任何化合物。 a) 膠囊 於膠囊之製備中，可將10重量份數之活性化合物與240 重量份數之乳糖解凝集與摻合。可將混合物填入硬明膠膠 囊中，各膠囊含有一單位劑量或一單位劑量之一部份之活 性化合物。 b) 片劑 片劑可製自下列成份。 重量份數 活性化合物 10 乳糖 190 玉米澱粉 22 聚乙晞基四氫吡咯酮 10 硬脂酸鎂 3 可將活性化合物、乳糖及一部份澱粉解凝集、摻合，並 可將所形成之混合物以聚乙晞基-四氫吡咯酮在乙醇中之 溶液粒化。可將乾燥顆粒與硬脂酸鎂及其餘澱粉掺合。然 後，使混合物在壓片機中壓縮，獲得片劑，各含有一單位 劑量或一單位劑量之一部份之活性化合物。 -79- 200304818 (74) c) 腸溶性物皙塗覆之_片劑 片劑可藉上文（b)中所述之方法製成。片劑可以習用方 式，使用20%醋酸酞酸纖維素與3%酞酸二乙酯在乙醇： 二氯甲烷（1 : 1)中之溶液，經腸溶性物質塗覆。 d) 检劑 在栓劑之製備中，可將100重量份數之活性化合物摻入 1300重量份數之甘油三酯栓劑基料中，並將混合物製成栓 劑，各含有治療上有效量之活性成份。 在本發明之組合物中，此活性化合物若需要可伴隨著其 他可相容之具藥理學活性之成份。例如，本發明化合物可 與一或多種其他藥劑合併投藥，該其他藥劑會抑制或防止 VEGF或血管生成素產生，使得對VEGF或血管生成素之胞 内回應減弱，阻斷胞内訊息轉導，抑制血管滲透性過大， 減少發炎，或抑制或防止水腫形成或新血管生成作用。本^ 發明化合物可在該其他藥劑之前、之後或同時投藥，無^ 是那一個投藥過程均適合。該其他藥劑包括但不限於抗水 腫類固醇、NSAID、ras抑制劑、抗TNF劑、抗IL1劑、抗組織 胺類、PAF-拮抗劑、COX-1抑制劑、COX-2抑制劑、N〇合成 酶抑制劑、Akt/PTB抑制劑、IGF-1R抑制劑、PKC抑制劑及pl3 激酶抑制劑。本發明化合物與該其他藥劑，係加成地戈掉 效地發生作用。因此，會抑制血管生成、血管滲透性過大 及/或抑制水腫形成之此種物質組合之投藥，可比任— 一種 物質單獨投藥，提供從過高增生性病症、血管生成、血管 滲透性過大或水腫之有害作用之較大舒解。在惡性病症之 -80 · 200304818

(75) 治療中，係期望與抗增生或細胞毒化學療法或放射之組合 本發明亦包括式（I)化合物作為藥劑之用途。 本發明之另一方面，係提供式（I)化合物或其鹽在藥劑 製造上之用途，該藥劑係用以治療哺乳動物特別是人類中 之血管滲透性過大、血管生成依賴性病症、增生性疾病及 /或免疫系統病症。

本發明亦提供一種治療血管滲透性過大、不適當新血管 生成作用、增生性疾病及/或免疫系統病症之方法，其包 括對需要其治療之哺乳動物，特別是人類，投予治療上有 效量之式（I)化合物。 化合物在抑制此等蛋白質激酶上之活體外功效，可藉由 下文詳述之程式測得。

化合物之功效可經由待測化合物相對於對照物，抑制外 源受質（例如合成肽（Z.Songyang等人，Nature.373 : 536-539)之磷 酿化作用之量測得。 使用桿狀病毒系統之KDR酪胺酸激酶製造： 人類KDR胞内功能部位之密碼順序（aa789-1354)係經過 PCR，使用單離自HUVEC細胞之cDNA產生。多HisMlR序亦在 此蛋白質之N-末端引進。使此片段無性繁殖至轉染載體 PVL1393中，於Xbal與Notl位置。重組桿狀病毒（BV)係經由 共轉染，使用BaculoGold轉染試劑（PharMingen)產生。重組BV 係經空斑純化，及經過Western分析確認。為製造蛋白質， 使SF-9細胞在SF-900-II培養基中，於2x106 /毫升下生長，並 -81 - 200304818

(76) 於每細胞0.5空斑形成單位（MOI)下感染。在感染後48小時， 採集細胞。 KDR之純化 藉由將50毫升TritonX-100溶胞緩衝劑（20mMTris，ρΗ8·0, 137mMNaCl，10% 甘油，1% TritonX-100, ImMPMSF，10微克 / 毫 升抑肽酶，1微克/毫升亮肽素）添加至得自1升細胞培養 物之細胞丸粒中，使表現（His)6KDR(aa789-1354)之SF-9細胞溶 解。使溶胞產物在19,000 rpm下，於SorvalSS-34轉子中，於4 °C下離心30分鐘。將此細胞溶胞產物施加至5毫升NiCl2螯 合之瓊脂糖管柱中，此管柱已使用50mMHEPES，PH7·5, 0.3MNaCl達成平衡。將KDR使用含有0.25M咪唑之相同緩衝 劑溶離。使用SDS-PAGE及度量激酶活性之ELISA檢測（下文） 分析管柱溶離份。使已純化之KDR交換至25mMHEPES，pH7.5, 25mMNaCl, 5mMDTT緩衝劑中，並儲存於_80°C下。 人類Tie-2激酶製造與純化 人類Tie-2胞内功能部位之密碼順序（aa775-1124)係經過 PCR，使用單離自人類胎盤之cDNA作為模板而產生。多His6 順序係於N -末端引進，並使此構造物無性繁殖至轉染載 體pVL1939中，於Xbal與Notl位置處。重組BV係經由共轉染 ，使用BaculoGold轉染試劑（PharMingen)產生。使重組BV經空 斑純化，並經過Western分析確認。為製造蛋白質，使SF-9 昆蟲細胞在SF-900-II培養基中，於2x106 /毫升下生長，並 在MOI為0.5下感染。於篩選中使用之His-標記激酶之純化， 係類似關於KDR所述。 -82-

200304818 (77) 人類Flt-1酪胺酸激酶製造與純化 使用桿狀病毒表現載體 pVL1393 (PharMingen，LosAngeles，CA) 。將一種使多His6編碼之核嘗酸順序’放置在對於使人類 之整個胞内激酶功能部位編碼（胺基酸786-1338)之核 嘗酸區域為5,處。該使此激酶功能部位編碼之核苷酸順序 ，係經過PCR，使用單離自HUVEC細胞之cDNA基因庫產生 。此組胺酸殘基使得能夠以類似關於KDR* ZAP70之方式’ 進行此蛋白質之親和純化。使SF-9昆蟲細胞在0.5多重性下 感染，在感染後48小時採集。 EGFR酪胺酸激酶來源 EGFR係購自Sigma公司（Cat#E-3641 ; 500單位/ 50微升），且 EGF配位體係得自致癌基因研究產物/ Calbiochem>^司（Cat #PF01 卜 1〇〇) 〇 ZAP70之表現 所使用之桿狀病毒表現載體為pVL1393 (Pharmingen， LosAngeles，CA)。將使胺基酸m(H)6LVPR9S編碼之核苷酸順序 ，放置在對於使ZAP70之全體編碼（胺基酸1-619)之區域為5’ 處。該使ZAP70密碼區域編碼之核苷酸順序，係經由PCR ，使用單離自Jurkat不滅T-細胞之cDNA基因庫產生。此組胺 酸殘基使得能夠進行此蛋白質之親和純化（見下文）。 LVPR9S橋接物係構成藉由凝血酶之蛋白分解性分裂用之 識別順序’使得能夠自酶移除親和標記。使SF-9昆蟲細胞 在感染之多重性為〇 · 5下感染，並在感染後48小時採集。 ZAP70之萃取與純化 -83- 200304818

(78) 使 SF-9細胞在由 20mMTris，ρΗ8·0, 137mMNaCl，10% 甘油，1% TritonX-100，ImMPMSF，1微克/毫升亮肽素，10微克/毫升抑 肽酶及ImM正鈒酸鈉所組成之緩衝劑中溶解。將可溶性溶 胞產物施加至螯合之瓊脂糖HiTrap管柱（Pharmacia)中，此管 柱已在50mMHEPES，pH7.5, 0.3MNaCl中達成平衡。將融合蛋白 質以250mM咪唑溶離。將此酶儲存在含有50mMHEPES，ρΗ7·5, 50mM NaCl及5mMDTT之緩衝劑中。 蛋白質激酶來源

Lck，Fyn，Src，Blk，Csk及Lyn，以及其截頭形式，可市購獲 得（例如得自Upstate生物技術公司（SaranacLake，N.Y)與 SantaCruz生物技術公司（SantaCruz，Ca·))，或使用習用方法， 純化自已知之天然或重組來源。 PTK之酶連結之免疫吸附檢測（ELISA) 酶連結之免疫吸附檢測（ELISA)，係用以檢測及度量酪胺 酸激酶活性之存在。ELISA係根據已知擬案進行，其係描 述於例如Voller等人，1980，”酶連結之免疫吸附檢測”：臨床 免疫學手冊，第2版，由Rose與Friedman編著，第359-371頁，美國 微生物學學會（Washington，D.C·)中。 所揭示之擬案係經修改，以測定關於特定PTK之活性。 例如，用以進行ELISA實驗之較佳擬案，係提供於下文。 修改此等擬案，以測定對於受體PTK族群之其他成員，以 及非受體酪胺酸激酶之化合物活性，係良好地在熟諳此藝 者之能力範圍内。為達測定抑制劑選擇性之目的，故採用 通用PTK受質（例如聚（Glu4Tyr)無規貝ij共聚物， -84- 200304818 (79) 20,000-50,000MW)，伴隨著ATP(典型上為5//M)，其濃度為在 檢測中之表觀Km之大約兩倍下。 下述程式係用以檢測本發明化合物對於KDR，Flt-1，Flt-4, Tie-15 Tie-2, EGFR，FGFR，PDGFR，IGF-l-R，c-Met，Lck，hck，Blk，Csk， Src，Lyn，fgr，Fyn及ZAP70酶胺酸激酶活性之抑制作用： 緩衝劑與溶液： PGT聚（Glu，Tyr)4 : 1 於-20°C下儲存粉末。使粉末溶於磷酸鹽緩衝之鹽水（PBS) 中，提供50毫克/毫升溶液。 在-20°C下儲存1毫升液份。當製造層板時，在GibcoPBS 中稀釋至250微克/毫升。 反應緩衝劑：lOOmMHepes，20mMMgC12, 4mMMnC12, 5mMDTT， 0.02%BSA? 200 β MNaV045 pH7.10 ATP :在-20°C下儲存lOOmM液份。在水中稀釋至20 # M 洗滌緩衝劑：PBS，具有0.1%Tween20 抗體稀釋緩衝劑：〇·1%牛血清白蛋白（BSA)，在PBS中 TMB受質：在即將使用之前，將TMB受質與過氧化物溶 液以9 : 1混合，或使用得自Neogen之K_Blue受質 終止溶液：1M磷酸 程式 1.層板製備： 使PGT儲備液（50毫克/毫升，經冷康）在PBS中稀釋至250 微克/毫升。於Corning經修改之平底高親和力ELISA板 (Corning # 25805-96)之每一井中添加125微升。添加125微升 -85- 200304818

(80) PBS至空白試驗井中。以密封膠帶覆蓋並於37°C下培養過 夜。以250微升洗滌緩衝劑洗滌lx，並在37t乾燥培養器中 乾燥約2小時。 將已塗覆之板，在4 °C下儲存於密封袋中，直到使用為 止。 2. 酪胺酸激酶反應： 在4x濃度下，於水中之20%DMSO内，製備抑制劑溶液 〇 -製備反應緩衝劑。 -製備酶溶液，以致使所要之單位係以50微升表示，例 如對KDR係製成1毫微克/微升，以獲得在反應中每井總 共50毫微克。儲存在冰上。 -自lOOmM儲備液，在水中製造4xATP溶液至20 // Μ。儲存 在冰上。 •每井添加50微升酶溶液（典型上為5_50毫微克酶/井， 依激酶之比活性而定）。 -添加25微升4χ抑制劑。 -添加25微升4χΑΤΡ，供抑制劑檢測。 •在室溫下培養10分鐘。 -藉由每井添加50微升0.05NHC1，使反應停止。 -洗滌層板。 * *反應之最後濃度：5 /z MATP，5%DMS0 3. 抗體結合 -在0.1%BSA (於PBS中）内，藉2個步騾稀釋（ΙΟΟχ，然後是 -86- 200304818

(81) 200x)，將PY20-HRP (Pierce)抗體（磷酸酪胺酸抗體）之1毫克/ 毫升液份，稀釋至50毫微克/毫升。 每井添加100微升Ab。於室溫下培養1小時。在4°C下培 養1小時。 -將層板洗滌4x。 4. 顏色反應 -製備TMB受質，且每井添加100微升。 -監測650毫微米下之OD，直至達到0.6為止。 -以1M磷酸終止。在板讀取器上振盪。 -讀取鄰近450毫微米處之OD。 最適宜培養時間與酶反應條件，係稍微地隨著酶製劑而 改變，並以經驗方式對各批號進行測定。 對Lck而言，所使用之反應緩衝劑為lOOmMMOPSO, ρΗ6·5, 4mMMnC12, 20mMMgC12, 5mMDTT，0.2%BSA，200mMNaV04，在類 似檢測條件下。 式（I)化合物在疾病治療上可具有治療利用性，該疾病 係涉及經確認（包括未在本文中提及者）及至今尚未經確 認之蛋白質酷胺酸激酶，其係被式（I)化合物抑制。

Cdc2來源 人類重組酶與檢測緩衝液，可市購而得（NewEnglandBiolabs， Beverly，MA.USA)，或使用習用方法，純化自已知之天然或 重組來源。

Cdc2檢測 可使用之擬案係為所購買之試劑所備有者，惟有少許修 -87- 200304818 (82) 正。簡言之，此反應係在緩衝劑中進行，其包含 50mMTrispH7.5，lOOmMNaCl，ImMEGTA，2mMDTT，0.01%Brij，5% DMSO及lOmM MgC12 (商用緩衝劑），經補充新的300Mmatp (31 // Ci /毫升）及30微克/毫升組織蛋白類型IIIss最後濃度。 將80微升之反應體積，其中含有數單位酶，在25°C下，於 抑制劑存在或不存在下操作20分鐘。藉由添加120微升10 %醋酸，使反應終止。自未摻入之標識物中分離出受質， 其方式是將混合物在磷醯基纖維素紙上產生斑點，接著為 5分鐘之3次洗滌，各使用75 mM磷酸。藉々計數器，於液 態閃爍體存在下，度量計數。 PKC激酶來源 PKC之催化亞單位可市購而得（Calbiochem)。 PKC激酶檢測 按照已發表之程式，採用放射性激酶檢測（Yasuda，I·， Kirshimoto, A·，Tanaka，S·，Tominaga，M·，Sakurai，A·，Nishizuka，Y.生 物化學與生物物理研究通信，3 : 166, 1220-1227 (1990))。簡言 之，所有反應均在激酶緩衝劑中進行，其包含 50mMTris-HClpH7.5, 10mMMgC12, 2mMDTT，ImMEGTA，100//MATP， 8 # M肽，5 % DMSO及33PATP (8Ci/mM)。將化合物與酶在反應 容器中混合，並藉由添加ATP與受質混合物，以引發反應 。在藉由添加1 0微升終止緩衝劑（5mMATP，在75 mM轉酸中 )，使反應終止之後，將一部份混合物滴加在磷醯基纖維 素濾紙上形成斑點。將有斑點之試樣在75 mM磷酸中，於 室溫下洗滌3次，歷經5至15分鐘。放射性標記之摻入量， -88- 200304818

(83) 係藉由液體閃爍計數定量。

Erk2酶來源 重組老鼠酶與檢測缓衝液可市購而得（NewEnglandBiolabs， Beverly，MA.USA)，或使用習用方法，純化自已知之天然或 重組來源。

Erk2酶檢測 簡言之，反應係在緩衝劑中進行，其包含50mMTds，ρΗ7·5, ImMEGTA，2mMDTT，0.01%Brij，5%DMSO及 lOmMMgCl (商用緩 衝劑），經補充新的100 # MATP (31 /z Ci /毫升）及30 // M髓磷 脂鹼性蛋白質，在供應商建議之條件下進行。反應體積及 檢測所摻入放射活性之方法，係如關於PKC檢測所述（見上 文）。 T-細胞活化之活體外模式 在藉由有絲分裂原或抗原活化時，係引致T-細胞分泌 IL-2，其為一種支援其隨後增生期之生長因數。因此，吾 人可度量IL-2之製自原發性T·細胞或適當T·細胞系，或其 細胞增生，作為T-細胞活化作用之替代品。此兩種檢測係 充分地描述於文獻中，且其參數係經充分記載（在免疫學 之目前擬案，第2卷，7.10.1-7.11.2中）。 簡言之，T-細胞可經由與同種異基因刺激細胞共培養而 被活化，此為一種被稱為單向混合淋巴細胞反應之過程。 回應子與刺激子末梢血液單核細胞，係藉Ficoll-Hypaque梯 度（Pharmacia)純化，根據製造者之指示進行。刺激細胞係 經由以絲裂黴素C (Sigma)或9"照射處理，以有絲分裂方式 -89- 200304818 (84) 失活。回應子與刺激子細胞係在二對一之比例下，於待測 化合物存在或不存在下共培養。典型上係將105個回應子 與5xl〇4個刺激子混合，並將其覆蓋（200微升體積）在u型底 微滴定板（CostarScientific)中。將此等細胞在RPMI1640中培養 ，其中係補充熱失活之牛胎兒血清（Hyclone實驗室）或得自 男性供應者之經匯集人類AB血清，5xlO_5M2-鏡基乙醇及〇·5 %DMSO。將此培養物在採集之前（典型上為第三天），以0.5 μ Ci之3H胸甞（Amersham)脈衝一天。採集培養物（Betaplate採 集器，Wallac)，並藉液體閃爍（Betaplate，Wallac)評估同位素 吸收。 可使用相同培養系統，藉由度量IL-2之製造，以評估T-細胞活化作用。在培養起始後十八至二十四小時，移除上 層清液，並按照製造者之指示’藉ELISA (R與D系統）度量 IL-2濃度。 T-細胞活化之活體内模式 化合物之活體内功效，可在直接度量丁_細胞活化作用或 對其而言已t正實T-細胞為效應子之已知動物模式中進行 測試。T-細胞可經由T-細胞受體之固定部份與單株抗-CD3 抗體（Ab)之連接，在活體内活化。在此模式中’ BALB/c老 鼠係在放血之前兩小時，以腹膜腔内方式給予10微克抗 -CD3Ab。接受待測藥物之動物，係在抗-CD3Ab投藥之前一 小時，以單一劑量之化合物預處理。預發炎細胞活素幹擾 素-7 (IFN- T)與腫瘤壞死因子(TNF- α )，其為T-細胞活化 作用之指示劑，其血清含量係藉ELISA度量。一種類似模 -90- 200304818

(85) 式係採用以專一抗原（譬如键孔青貝血藍質（KLH))引動之 活體内T-細胞，接著為流出淋巴節細胞以相同抗原之續發 性活體外激發。如前文，細胞活素製造之度量，係用以評 估經培養細胞之活化狀態。簡言之，C57BL/6老鼠係於第零 天，使用在完全Freund氏佐劑（CFA)中乳化之100微克KLH， 以皮下方式免疫。動物係在免疫之前一天，及接著在免疫 後第一天、第二天及第三天，以化合物預處理。在第4天 採集流出之淋巴節，且其細胞係於每毫升6xl06下，在組 織培養基（RPMI1640，經補充熱失活之牛胎兒血清（Hyclone 實驗室），5χ1(Γ5Μ2-巯基乙醇及0.5%DMSO)中培養二十四及 四十八小時。然後，藉ELISA評估培養物上層清液之自分 泌T-細胞生長因數間白血球活素·2(ΙΙ^·2)及/或IFN- 7含量。 此等主要化合物亦可在人類疾病之動物模式中測試。其 實例為實驗性自身免疫腦脊髓炎（ΕΑΕ)與膠原引致之關節 炎（CIA)。模擬人類多重硬化方面之ΕΑΕ模式，已被描述於 大老鼠與小老鼠中（回顧之FASEBJ.5 : 2560_2566，1991 ;老鼠 模式：Lab.Invest.4 (3):278, 1981;齧齒動物模式：J.Immunoll46(4) :1163-8, 1991)。簡言之，小老鼠或大老鼠係以髓磷脂鹼性 蛋白質（MBP)，或其神經原肽衍生物及CFA之乳化液，使其 免疫。急性疾病可經由添加細菌毒素（譬如百日咳博德特 氏菌）引致。復發/減輕之疾病，係經由T-細胞自MBP /肽 免疫動物之繼承轉移而引致。 CIA可在DBA/1老鼠中，使用第II型膠原，藉免疫引致 (J.Immunol : 142 (7) : 2237-2243)。老鼠將早在抗原激發後十天 -91 - 200304818

即發展關節炎徵候，並可在免疫後評分，歷經長達九十天 。在EAE與CIA兩種模式中，化合物可以預防方式或在疾病 開始時投藥。有效藥物應降低嚴重性及/或發生率。 某些本發明之化合物，其會抑制一或多種血管生成受體 PTK，及/或蛋白質激酶，譬如涉及媒介炎性回應之lck， 其可降低關節炎在此等模式中之嚴重性與發生率。 此等化合物亦可在老鼠同種移植模式中測試，無論是皮 膚（回顧於 Ann.Rev.Immunol·，10 : 333-58, 1992 ;移植：57 (12): 1701-17D6，1994 中）或心臟（Am.J.Anat. : 113 : 273，1963)。簡言之 ，係將全厚度皮膚移植物從C57BL/6老鼠移植至BALB/c老鼠 。移植物係每天檢查排斥之註據，於第六天開始。在老鼠 新生心臟移植模式中，新生心臟係以異位元元方式從 C57BL/6老鼠移植至成年CBA/J老鼠之耳翼。心臟係於移植 後四至七天開始跳動，而排斥可以目視方式評估，使用解 剖顯微鏡以尋找跳動停止。 細胞受體PTK檢測 下述細胞檢測係用以測定本發明不同化合物對於KDR/ VEGFR2之活性與作用之程度。採用專一配位體刺激之類似 受體PTK檢測，可使用此項技藝中習知之技術，沿著相同 細胞系針對其他酪胺酸激酶加以設計。 在人類臍靜脈内皮細胞（HUVEC)中之VEGF所引致之KDR 磷醯化作用，係按WesternBlots進行度量： 1. HUVEC細胞（得自匯集之供體）係購自Clonetics (SanDiego, CA)，並根據製造者指示進行培養。只有早期繼 -92- 200304818 (37) 代（3-8)使用於此檢測。使細胞在100毫米碟形物（Falcon，供 組織培養用；BectonDickinson ; Plymouth，England)中，使用全 EBM培養基（Clonetics)培養。 2. 為評估化合物之抑制活性，使細胞胰蛋白酶化，並 在 6-井群集板（Costar ; Cambridge, MA)之各井中，於 0·5-1·0χ105 個細胞/井下接種。 3. 接種後3-4天，層板典型上係為90-100%連合。自所有 井中移除培養基，將細胞以5-10毫升PBS沖洗，並以5毫升 未添加補充物（意即血清I几餓）之ΕΒΜ基本培養基培養18-24 小時。 4. 將抑制劑之序列稀釋液，在1毫升ΕΒΜ培養基中（25 // Μ，5 // Μ或1 // Μ最後濃度）添加至細胞中，並於37°C下培 養一小時。然後，將人類重組VEGF165 (R&D系統）添加至所 有井中，於2毫升EBM培養基中，最後濃度為50毫微克/毫 升，並在37°C下培養10分鐘。未經處理或僅以VEGF處理之 對照細胞，係用以評估背景磷醯化作用及被VEGF引致之 磷酸化作用。 然後，將所有井以5-10毫升含有ImM正釩酸鈉（Sigma)之冷 PBS沖洗，並使細胞溶解，及在200微升RIPA緩衝劑（50mM Tris-HCl) pH7，150mMNaCl，1 % ΝΡ-40，0·25 % 脫氧膽酸鈉， ImMEDTA)中刮除，緩衝劑中含有蛋白酶抑制劑（PMSFlmM， 抑肽酶1微克/毫升，胃蛋白酶抑制素1微克/毫升，亮肽 素1微克/毫升，釩酸NalmM，氟化NalmM)及1微克/毫升 Dnase(所有化學品均得自Sigma化學公司，StLouis，MO)。將溶 -93- 200304818 (88) 胞產物在14,000 rpm下旋轉30分鐘，以脫除核。 然後，藉由添加冷（-20°C )乙醇（2體積），歷經最少為1小 時或最多為過夜，使等量蛋白質沈澱。使丸粒在含有5 % 冷-競基乙醇（BioRad ; Hercules，CA)之Laemli試樣緩衝劑中重配 ，並煮沸5分鐘。藉由聚丙婦醯胺凝膠電泳（6%，1.5毫米Novex， SanDeigo，CA)使蛋白質解析，並使用Novex系統轉移至硝基 纖維素薄膜上。在以牛血清白蛋白（3%)阻斷後，以抗-KDR 多株抗體（C20, SantaCruz生物科技；SantaCruz，CA)或以抗磷酸 酪胺酸單株抗體（4G10，Upstate生物科技，LakePlacid，NY)在4 °C下，將蛋白質探測過夜。在洗滌及以山羊抗兔子或山羊 抗老鼠IgG之HRP-共軛F(ab)2培養1小時後，使用放射化學發 光（ECL)系統（Amersham生命科學期刊，ArlingtonHeight，IL)觀看 譜帶。 活體内子宮水腫模式 此檢測係度量化合物抑制老鼠中子宮重量急騾增加之 能力，該重量增加係發生在雌激素刺激後之最初數小時。 已知子宮重量增加之此種早期開始，係由於子宮血管分佈 之增加滲透性所造成之水腫。Cullinan-Bove與Koss (内分泌 學（1993)，133 : 829-837)証實雌激素刺激之子宮水腫與 VEGFmRNA在子宮中增加表現之緊密暫時關係。此等結果 已利用單株抗體對VEGF中和而確認，其係顯著地降低雌 激素刺激後子宮重量上之急騾增加（W097/42187)。因此，此 系統可充作VEGF發出訊息及有關聯滲透性過大與水腫之 活體内抑制模式。 -94- 200304818

物質： 所有激素均講自Sigma公司（St丄ouis，Mo)或 CalBiochem (LaJolla，CA)，為經康乾之粉末，及根據供應商說 明書製備。 媒劑成份（DMSO, CremaphorEL)可購自 Sigma公司（St丄ouis， MO)。 老氣（Balb/c，8_12週大）可購自 Taconic(Germantown，NY)，並收 容在無病原之動物設備中，根據設置之動物照顧與利用委 員會指引進行。 方法： 第1天： 對Balb/c老鼠給予12.5單位懷孕牝馬之血清促 性腺激素（PMSG)之腹膜腔内（i.p.)注射。 第3天：老鼠以腹膜腔内接受15單位人類絨毛膜促性 腺激素（hCG)。 第4天：將老鼠隨機區分成5-10隻之數組群。藉腹膜腔 内、靜脈内或口服途徑投予待測化合物，依溶解度與媒劑 而定，其劑量範圍為1-100毫克/公斤。媒劑對照物僅接受 媒劑，且留置兩組未經處理。 三十分鐘後，實驗、媒劑及其中一個未經處理組，係給 予17雌二醇（500微克/公斤）之腹膜腔内注射。2-3小時 後，藉由C〇2吸入，使動物犧牲。在中線切開後，單離出 各子宮，並藉由正好低於子宮頸及在子宮與輸卵管接合處 切斷，以移除之。在稱重（濕重）之前，小心移除脂肪與結 缔組織，而不幹擾子宮之完整性。將子宮沾吸，以移除流 體，其方式是在兩片濾紙之間，以裝滿水之一升玻璃瓶壓 95- 200304818 (90) 縮。在沾吸後，將子宮稱重（吸乾重量）。 量間之差異，係取為子宮之流體含量。將 體含量，與未經處理或媒劑處理組作比I 驗測定其意義。使用未經刺激之對照組， 應。 某些本發明之化合物，其係為血管生成 之抑制劑，其在新血管生成作用之基質鹰 亦可顯示活性。此基質膠膜新血管生成作 新血管在以皮下方式植入之胞外間質之 形成，其係因會產生腫瘤細胞之血管生成 致（關於實例可參閱：Passaniti，A·，等人， 67(4), 519-528 ; Anat.Rec.(1997)，249(1)，63_73 ; 63(5)，694-701 ; Vase. Biol.(1995)，15(11)，1857-6: 操作超過3 - 4天，且終點包括在移除植入 處理之動物對照組之後，新血管生成作用 像記分，顯微鏡微血管密度測定及血紅 法）。此模式可替代地採用bFGF或HGF作肩 所有參考資料，包括期刊論文、專利及 請案，其陳述内容係以全文併於本文供4 實施方式 下述實例係為說明目的，而非欲被解釋 範圍。 製備1 4-硝基-1H-5-吡唑羧醯肜

於潮濕與吸乾重 處理組之平均流 交。藉Student氏試 以監測雌二醇回 受體酪胺酸激酶 -膜植入模式中， 用模式，係涉及 透明”玻璃球’’内 前因數存在而引 Lab.Investig.(1992)5 Int.J.Cancer (1995), I。此模式較佳係 物對未以抑制劑 之巨觀目視/影 素定量（Drabkin方 ，刺激物。 已公告之專利申 卜考。 為限制本發明之 -96- 200304818

(91) 將4-硝基_1H_5-吡唑羧酸（10.0克，64毫莫耳）在二氯甲烷 (150毫升）中之懸浮液，以氯化草醯（8.9克，71毫莫耳）與數 滴N，N -二甲基甲醯胺處理。將混合物於環境溫度下攪拌18 小時。於減壓下移除溶劑，然後使殘留物溶於丙嗣（40毫 升）中。使溶液在冰浴中冷卻，接著慢慢添加氫氧化 銨水溶液（60毫升），同時保持混合物溫度低於l〇°C。使混 合物溫熱至環境溫度，然後以水（60毫升）稀釋。在減壓下 藉蒸發移除丙酮，並使所形成之漿液在冰浴中冷卻，接著 藉過濾收集沈澱物，及以水洗滌。使如此收集之物質在高 真空下乾燥，產生標題化合物（9克，90%)為白色固體： iHNMR (DMSO-d6, 400MHz) 5 14.1 (bs，1H)，8.70 (s，1H)，8.05 (s，1H)， 7.82 (s，lH) ; RP-HPLC (HypersilHSC18,5微米，100A，250X4.6毫米； 5%·100%乙腈_〇.05m醋酸銨，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）tr5.82 分鐘；MS : MH+157.1 製備2 4-硝某-1H-5·吡唑甲腈 將4_硝基·ιΗ-5-吡唑羧醯胺（7.80克，50毫莫耳）在二氯甲烷 (300毫升）與吡啶（3〇毫升）中之懸浮液，以光氣在甲苯中之 溶液（20% ’ 50亳升）處理。將混合物於環境溫度下攪拌16 小時’然後將水（2〇亳升）慢慢添加至混合物中，接著是6Ν 鹽酸水落液（50亳升）與鹽水（15毫升）。將混合物以二氯甲烷 (5X50愛升）與酷酸乙酯（3χ5〇毫升）萃取。合併有機溶液，並 以硫酸誤脫水乾燥，過濾，及使濾液濃縮至體積約15〇毫 升’接著將其以1Ν鹽酸水溶液（25毫升），然後以鹽水（15毫 -97- 200304818

(92) 升）萃取。將有機層以硫酸鎂脫水乾燥，然後過濾，並使 濾液在減壓下濃縮，產生標題化合物，為黃褐色固體（6.3 6 克，92%): iHNMR (DMSO-d6, 400MHz) 514.99bs，1H)，9.15 (s，1H) ;RP-HPLC(HypersilHSC18,5微米，100A，250X4.6毫米；5%·100% 乙月青-0.05M醋酸銨，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）tr12.05分鐘； MS : MH+137.0 製備3 1H·吡唑並「4,3-dl嘧啶-7_胺 將4-硝基-1H-5-吡唑甲腈（6.25克，45.3毫莫耳）在乙醇（100 毫升）中，以10%鈀/碳（0.50克）處理，並於帕爾振盪器中 ，在50psi下氫化18小時。經過矽藻土墊，藉過濾移除觸媒 。然後，將濾液以甲脒醋酸鹽（37.7克，0.363莫耳）處理，接 著將混合物於回流下加熱一小時。使混合物冷卻，然後於 減壓下移除大約50毫升溶劑。藉過滤分離所形成之沈澱物 ，並以醋酸乙酯洗滌（3X25毫升），然後拋棄。使濾液於減 壓下濃縮至體積大約40毫升。將混合物加熱，以溶解全部 物質，然後施加至矽膠管柱，將其以醋酸乙酯/甲醇（8 ·· 2)溶離。濃縮適當溶離份，獲得標題化合物（3.85克，61%) ，當藉iHNMR測定時，其含有18重量％甲脒醋酸鹽：iHNMR (DMSO-d6, 400MHz) ά 13.3bs，1H)，8·15 (s，1H) 8.07 (s，1H)，7.47 (bs， 2Η) ; RP-HPLC (HypersilHSC18,5微米，100Α，250X4.6毫米；5%-100 %乙腈-0.05 M醋酸銨，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）tr4.95分鐘 ;MS : MH+136.1，M-H+134.1 製備4 -98- 200304818

(93) 唑並 f4,3-dl嘧啶-7-胺 將1H-峨峻並[4,3-d]嘧啶_7•胺（82%純，2 85克，17 3毫莫耳） 在Ν，Ν·二甲基甲酿胺（4〇亳升）中’以N-碘基琥珀醯亞胺（3 8 克’ 16.9毫莫耳）處理。將混合物於8(Γ(：油浴中加熱15小時 ’然後冷卻及於減壓下濃縮。將乙醇（2〇毫升）與水（1〇毫升 )添加殘留物中’接著攪拌及在冰浴中冷卻。藉過濾收集 沈殿物’並以水洗條。使濾液在減壓下濃縮，然後添加水 (20¾升）’並再一次藉過濾收集固體，及以水洗滌。將如 此分離 < 固體合併’並於高真空下乾燥，而得所要之標題 化合物，為褐色粉末：1HNMR (DMS〇 d6, 4〇〇μηζ) δ 13.2 (s，1H)， 8.21 (s，1H)，7.39 (bs，2H) ; RP-HPLC (HypersilHSC18,5微米，100A， 250X4.6^米，5%_i〇0%乙腈_〇 〇5M醋酸銨，歷經25分鐘，丨亳升 / 分鐘）tr8.58分鐘；ms:mh+262 〇 m_h+259 9 製備5 -甲氣某-1-硝基茉 知5氣基-2-硝基酚（3 〇克，191亳莫耳）、碳酸鉀（2.5〇克 ’ 21.〇笔莫耳）及硫酸二甲酯（2.65克，21.0毫莫耳）在丙酮中 之此&物毛環境溫度下攪拌24小時。於減壓下移除溶劑 然後知水（30¾升）與二氯曱烷（3〇毫升）添加至殘留物中 知口併之有機物質溶液以硫酸鎂脫水乾燥，然後過濾， 並使濾液I減壓下濃縮，提供油。使其在矽膠上藉急騾式 ::斤純：’使用二氯甲、庑/庚烷(7 : 3)作為溶離劑，提供 ^心化口物’為結晶性固體（3.24克，100% ) : IhNMR (CDCI3, 400MHz) 5 7.96 1H)，6.80 (m，1H)，6.73 (m5 1H)，3·96 (s，3H); -99- 200304818

(94) RP-HPLC(HypersilHSC18,5微米，ι〇〇α，250Χ4·6毫米；5%-1〇〇% 乙腈_0·05Μ醋酸铵，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）tij7.82分鐘； MS : MH+172.2 製備6 4二{丨（A ,.氳甲.基）磺醯基1氧某丨-1 · 2 · 3 · 6 _四新.-1 -毗畦淼 JL三·丁酯

標題化合物係根據揭示於Wustrow, D.J” Wise, L.D”合成 ，1991，第993-995頁中之方法合成，其全文係併於本文供參考 製備7 _4 - (4，4，5，甲某-l，3,2_二氣硼伍圜-2 -某）-ΐ，2·3· 6 二 氫-1 - 吡啶羧酸第三-丁酯 將4-{[(二氟甲基）橫g|基]氧基卜ι，2,3,6-四氫- ΐ_ρ比咬參 酸第三-丁醋（1.8克，2.42毫莫耳）、2,3-二甲基丁二醇二蝴 (1.4克，5.44¾莫耳）、酸酸_ (1 6克，16.32毫莫耳）及[1 雙（二苯基膦基）二環戊二晞鐵]二氯鈀（π)與二氯甲烷複人 物（0.27克’ 0.33愛莫耳）在ν，Ν·二甲基甲醯胺（30亳升）中之 混合物，於85°C油浴中加熱17小時。在減壓下蒸發溶劑 然後將殘留物以二氯甲烷（30毫升）研製。使混合物經過矽 藻土床過濾，接著在減壓下蒸發溶劑，並使殘留物 辱膠 上藉急驟式層析純化，以庚燒/醋酸乙酿（8 : 2)作 y F為溶離 劑。使適當溶離份在減壓下濃縮，提供標題化合 7，為結 晶性固體（〇·87克，52% ) ; TLCRF0.44，庚烷/醋酸 、° ^ G (8 -100- 200304818

(95) :2 )，藉PMA /熱使其形象化，矽膠6〇F254板；1HNMR (CDC13， 400MHz) 5 6.46 (m，1H)，3_94 (m，2H)，3.43 (m，2H)，2.21 (m，2H)，1.45 知 (s，9H)，1·26 (s，12H) ' 製備8 - ϋ基-1-(3 -甲氧基-4·硝基苯基η-吡唑並丨4,3-dl嘧 症· 7 -胺 將3_碘基-1H-吡唑並[4,3-d]嘧啶-7-胺（500毫克，1.92毫莫 耳）與4-氟基-2_甲氧基-1-硝基苯（36〇毫克，2· ^毫莫耳）在 馨 Ν，Ν-二甲基甲醯胺（5亳升）中之混合物，以在油中之6〇% 氫化鈉（92亳克，2.30亳莫耳）處理，然後於8yc油浴中加熱 17小時。在減壓下藉蒸發移除溶劑，接著使殘留物溶於最 少量之熱N，N -二甲基甲醯胺中，並施加至矽膠管柱，及 以醋酸乙酯溶離，於濃縮適當溶離份後，提供標題化合物 (405 毫克，51%)，為黃色固體：1HNMR (DMSO-d6，400MHz) 5 8.38 (s，1H)，8.10 (d5 1H)，7.47 (s，1H)，7·30 (m，1H)，7.15 (bs5 2H)， 3.98 (s，3H) ; RP-HPLC (HypersilHSC18, 5微米，100A，250X4.6毫米 ;5 % -100%乙腈- 0.05M醋酸铵，歷經25分鐘，1毫升/分鐘 )tr16.17分鐘；MS:MH+413.1，M-H+411.1 製備9 4 -「7 -胺基-1-(3-甲氣基-4·硝某笨基）-1Η -外h冲_ #『4,3-dl 上密咬-3-基1-1，2,3,6·四氫-1-?比咬藏酸第三-丁酯 將3 -蛾基-1-(3-甲氧基-4-硝基苯基）-1Η-ρ比吐並[4,3-d] 口密違-7 -胺（300亳克，0.728毫莫耳）、4_(4,4,5,5-四甲基 -1，3,2-二氧测伍圜-2-基）_1，2,3,6-四氫-1_咕淀複酸第三- -101 - (96) (96)200304818 丁酯（270¾克，0.874¾莫耳）、碳酸鈉（185亳克，I·%毫莫耳 )及肆（彡苯膦）鈀（0)(50亳克，〇.〇44毫莫耳）在丨，2_二甲氧基 乙燒（6毫升）與水（3笔升）中之混合物，於85它油浴中加熱 1.75小時。將4-(4,4,5,5-四甲基二氧硼伍圜_2•基 )-1，2,3,6-四氫-1-吡啶羧酸第三-丁酯（45亳克，〇146毫莫耳 )添加至混合物中，然後於85¾油浴中再加熱16小時。在 減壓下蒸發溶劑’接著使殘留物於水（1 〇毫升）與醋酸乙酯 (15亳升）之間作分液處理。分離液層，然後將水層以醋酸 乙酉旨（10¾升），一氟甲燒（2〇毫升），接著以甲醇在二氯甲 烷中之1〇%溶液（20毫升）萃取。將如此獲得之有機溶液合 併並蒸發成殘留物’將其在矽膠上藉急驟式層析純化，使 用醋酸乙酯作為溶離劑，提供標題化合物，為黃色固體

(205毫克，60% )·· iHNMRDMSO，^，400MHz) 5 8.40 (s，1H)，8.10 (d, 1H)，7.50 (m，1H)，7·42 (s，1H)，7.31 (d5 1H)，7.1 (bs，2H)，4.13 (m， 2H)，3.99 (s，3H)，3.58 (m，2H)，2.67 (m，2H)，1.44 (s，9H) RP一HPLC (HypersilHSC18,5 微米，100A，250X4.6 亳米；5% -100% 乙腈 -0.05M醋酸銨，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）tr2i.42分鐘；MS : M-H+466.3 製備10 4-「7-胺Jfe-l-(4·胺基-3-甲氧笨基）-lH-吡唑並Γ4,3-cn嘧 咬-3-基 1-1 一 六氫卩比淀#酸第三-丁酿 使4-[7 -胺基-1-(3 -甲氧基-4_硝基苯基）·1Η·吡唑並 [4,3-d]^症基]-1，2,3,6 -四氫- Ι- p比淀幾酸第三-丁酉旨 -102- 200304818 (97) (200亳克，0.428亳莫耳）與10%鈀/碳（100毫克）在甲醇（20 毫升）中之混合物，於帕爾振盪器中，在55psi下氫化18小時 。經過矽藻土墊，藉過濾移除觸媒，並使濾液在減壓下濃 縮，然後使殘留物溶於甲醇（20毫升）中。添加氧化鉑 (IV)(100亳克），並使混合物於帕爾振盪器中，在55psi下氫 化30小時。經過矽藻土墊，藉過濾移除觸媒，並使濾液在 減壓下濃縮，提供標題化合物，為褐色固體（175亳克，93 % ) : iHNMR (DMSO-d6, 400MHz) 5 8·22 (s，1H)，6.96 (d，1H)，6.84 (d5 1H)，6·74 (d，1H)，6.5 (bs，2H)，5·75 (bs，2H)，4.03 (m，2H)，3.76 (s，3H)， 3.22 (m，1H)，2.93 (m，2H)，1.7-2.1 (m，4H)，1.42 (s，9H) RP-HPLC (HypersilHSC18，5 微米，100A，250X4.6 毫米；5 %-100 % 乙腈 -0.05M醋酸銨，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）tr 16.93分鐘；MS : MH+440.2 實例1 N 2 - { 4 ·二[. .·7 -胺.基-3 - ( 4 -六氤外匕遗某1 Η - p叱咬並「4,3 _ d 1口密 症二1二基J_-2-甲基-1H-1吲哚藉醯胺 使4-[7-胺基-1-(4_胺基-3_甲氧苯基）_111_吡唑並[4,3-(1] 嘧啶-3-基]-1-六氫吡啶羧酸第三_丁酯（75亳克，〇171毫莫 耳）溶於二氯甲燒（5亳升）與吡啶（〇·5亳升）中，然後使混合 物於冰浴中冷卻至5 °C。添加二氯甲烷（丨亳升）中之^甲基 啕哚羰基氯（0.188亳莫耳），接著將混合物攪拌1〇分鐘。在 減壓下藉蒸發移除溶劑，然後使殘留物溶於丙酮（3毫升） 與6N鹽酸水溶液（6亳升）中。將混合物於85t油浴中加熱i 小時。於減壓下移除溶劑，並使此物質藉預備之逆相層析 -103- 200304818 (98) 純化。冷柬乾燥，獲得白色粉末（65亳克），將其以二氯甲 烷（25毫升）與5N氫氧化鈉水溶液（10毫升）處理。分離液層 ^ ，接著將水層以二氯甲烷萃取（2x10毫升）。將有機溶液合 -併，並以硫酸鍰脫水乾燥，然後過滤。使滤液濃縮，而得 標題化合物（30毫克），為白色固體：iHNMR (DMSO-d6, 400MHz) 5 9.48 (s5 1H)，8.29 (s5 1Η)5 8·10 (d，1H)，7.71 (d，1H)，7.58 (d，1H)，7.36 (m，2H)，7.27 (s，1H)，7.15 (m，2H)，6.59 (bs，2H)，4.04 (s，3H)，3.89 (s， 3H)，3.19 (m，1H)，3.07 (m，2H)，2.63 (m，2H)，1.87 (m，4H) ; RP-HPLC ,· (HypersilHSC18，5微米，l〇〇A，250X4.6 毫米；5 %-100% 乙腈 -0.05M醋酸銨，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）tr15.03分鐘；MS : ΜΗ+497·3，Μ·Η+495·2 實例2 N2-M-[7-胺基-3-(4-六氫吡啶某VlH_吡唑並l~4,3_dl嘧

淀-1-基1_2_甲氧苯基}-2_氟基- 4- (三氟甲基）苯甲酸月安 標題化合物（25毫克）係以關於製備N2-{ 4-[7-胺基-3-(4-六氫吡啶基）-1Η-吡唑並[4,3-d]嘧啶-1-基]-2 -甲氧苯基 卜1-甲基-1H-2-吲哚羧醯胺所述之方式，製自4-[7-胺基 -1-(4-胺基-3-甲氧苯基）-1Η-吡唑並[4,3-d]嘧啶-3-基]-1-六氫吡啶羧酸第三-丁酯（75毫克，0.171毫莫耳）與氯化2-氟 基-4·(三氟甲基）苯甲醯：iHNMRpMSO-dhMOMHzWigqbs， 1H)，8.29 (m，2H)，7.98 (t，1H)，7.90 (d，1H)，7.74 (d5 1H)，7.26 (d5 1H)， 7.15 (m，1H)，6.6 (bs，2H)，3.93 (s，3H)，3.18 (m5 1H)，3.06 (m，2H)，2.66 (m，2H)，1.87-1.97 (m，4H) ; RP-HPLC (HypersilHSC18, 5微米，100A， 250X4.6毫米；5% -100%乙腈-〇·〇5Μ醋酸鼓，歷經25分鐘，1毫 -104- 200304818

(99) 升 / 分鐘）tr15.38分鐘；mS:MH+530.2，M_H+528.2 實例3 , Ιιϋ-胺基j 苯基）-3-碘基-1H-吡唑並「4.3-dl嘧嗆 ' _ 7 _ 胺 " 將3-碘基-1-(3 -甲氧基-4-硝基苯基）·ιη-吡唑並[4,3-d] ’咬-7-胺（300亳克，0.728毫莫耳）在乙醇（1〇毫升）與水（5亳 升）中’於80°C油浴中加熱，然後添加二亞硫酸鈉（635毫克 ’ 3·64毫莫耳）。18小時後，在減壓下藉蒸發移除溶劑，並 馨 使此物質藉預備之逆相層析純化。冷；東乾燥，獲得135毫 克物質，使其溶於Ν，Ν-二甲基甲醯胺中，並施加至鹼性 離予交換樹脂管柱，且以甲醇溶離。使溶離劑在減壓下濃 輪，提供標題化合物（80毫克）：iHNMR (DMSO_d6, 400 MHz) 占 8·28 (s，1H)，7·01 (s，1H)，6·96 (d，1H)，6·76 (d，1H)，5.28 (bs，2H)， 3·8〇 (s，3H) ; RP-HPLC (HypersilHSC18, 5微米，100A，250X4.6 毫 米；5 % -100%乙腈-0.05M醋酸铵，歷經25分鐘，1毫升/分鐘 )trl3.08分鐘；MS ·· MH+383.1 _ 實例4

Nl_『4-_(7-胺基-1H-吡唑並『4.3-dl嘧啶·1_某V2 -甲氫笨- 基1-2氟甚-4- , (三氟甲基）苯甲醯胺醋酸鹽 . 使1 - (4 -胺基-3 -甲氧苯基）_ 3 -蛾基· 1 Η - ρ比峻並[4，3 - d ] 口密 啶·7-胺（80毫克，0.209亳莫耳）在二氯甲烷（5毫升）與吡啶 (0·5亳升）中，於冰浴中冷卻至5°C，然後逐滴添加2-氟基 三氟曱基）苯甲醯氯（52亳克，0.230毫莫耳）。使溶液溫 -105- 200304818

(100) 熱至環境溫度，歷經30分鐘，接著藉蒸發移除溶劑。使殘 留物溶於甲醇（10亳升）中，添加10%鈀/碳（50毫克），並使 混合物在大氣壓力及60°C下，氫化1小時。經過碎藻土勢 ，藉過濾移除觸媒，然後使濾液濃縮，並使此物質藉預備 之逆相層析純化。冷凍乾燥，產生標題化合物（25毫克）， 為白色固體：kNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 9.98 (s，1H)，8.32 (m， 3H)，7.99 (t，1H)，7.89 (d，1H)，7.75 (d，1H)，7.32 (d，1H)，7.18 (m，1H)， 6.7 (bs，2H)，3·93 (s，3H)，1.60 (s，3H) ; RP-HPLC (HypersilHSC18, 5微 米，100A，250X4.6亳米；5%-100%乙腈-0.05M醋酸銨，歷經 25分鐘，1毫升 / 分鐘）tr18.75分鐘 ;MS : ΜΗ + 447·1，Μ-Η + 445·1 實例5 ]^1-{4-丨7-胺基-3-(4-六氤吡啶某>)-111-吡唑並丨4,3-(11嘧 啶_-1-基1-2_甲氣茉基卜1-笨磺醯胺雙醋酸鹽 標題化合物係以關於製備Ν2-{ 4-[7-胺基-3 _(4·六氫吡啶 基）-1Η-吡唑並[4,3-d]嘧啶-1-基]-2 -甲氧苯基卜1-甲基 -1H-2-蚓哚羧醯胺所述之方式，製自4-[7-胺基-1-(4-胺基 -3 -甲氧苯基）-1Η-吡唑並[4,3-d]嘧啶-3-基]-1·六氫吡啶羧 酸第三丁酯與氯化苯磺醯：iHNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 8.2 (s，1H)，7.73 (m，2H)，7.38 (m，3H)，7.12 (山 1H)，6.80 (s，1H)，6.68 (m， 1H)，3.67 (s，3H)，3.15 (m，@H)5 2.69 (m，2H)，1.7-2.0 (m，13H); RP-HPLC (HypersilHSC18, 5微米，100A，250X4.6毫米；5% -100% 乙腈-0.05M醋酸銨，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）tr11.93分鐘； MS : ΜΗ+480·2，Μ·Η+378·1 -106- 200304818 (101) 實例6 ]^-{4-「7-胺基-3-(4-六氤吡啶基）-111-吡唑並[4,3-(11嘧啶 -1-基卜2 -甲氧笨基丨胺基甲酸芊酯雙醋酸鹽 標題化合物係以關於製備N 2 - { 4 - [ 7 -胺基_ 3 - (4 -六氫外匕 淀基）-111-?比”坐並[4,3-d]p密淀-1-基]-2-甲氧苯基}-1-甲基 -1H-2-吲哚羧醯胺所述之方式，製自4-[7-胺基-1-(4-胺基 -3 -甲氧苯基）-1Η-吡唑並[4,3-d]嘧啶-3-基]-1-六氫吡啶羧 酸第三丁酯與氯甲酸芊酯：iHNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 8·9 (bs，1Η)，8.27 (s，1Η)，7.89 (d，1Η)，7.3-7.4 (m，5Η)，7.17 (s，1Η), 7·06 (d， 1H)，6.6 (bs，2H)，5.18 (s，2H)，3.86 (s，3H)，3.18 (m，1H)，3.08 (m，2H)， 2.69 (m5 2H)，1.87-1.98 (m，2H)，1.76 (s，6H); RP-HPLC (HypersilHSC18, 5微米，100A，250X4.6毫米；5% -100%乙腈-0.05M醋酸銨，歷經 25分鐘，1 毫升 / 分鐘）tr14.27分鐘；MS : MH+474.2, M-H+472.2 實例7 ：^-(4-「7-胺某-3-(4_六氫吡啶基）-111-吡唑並『4,3-(11嘧啶 -1-某1-2-甲氣苯基}·Ν-笨基脲 標題化合物係以關於製備Ν2-{4-[7-胺基-3-(4-六氫吡啶 基）·1Η-吡唑並[4,3_d]嘧啶_1_基]-2-甲氧苯基卜1·甲基 -ΙΗ-2-啕哚羧醯胺所述之方式，製自4-[7-胺基-1-(4-胺基 -3 -甲氧苯基）-1Η-吡唑並[4,3-d]嘧啶-3-基]-1-六氫吡啶羧 酸第三-丁酯與異氰酸苯酯：iHNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 9.40 (s，1H)，8.44 (s，1H)，8.33 (d，1H)，8.23 (s，1H)，7.47 (d，2H)，7.31 (m5 2H)，7.19 (s，1H)，7.06 (m，1H)，7.00 (m，1H)，6.5 (bs，2H)，3·95 (s，3H)， 3-3.2 (m，3H)，2.71 (m，2H)，1.9-2.0 (m，4H) ; RP-HPLC (HypersilHS C18, -107- 200304818 (102)

5微米，100A，250X4_6毫米；5%-1〇0%乙腈-〇.05M醋酸銨，歷經 25分鐘，1 亳升 / 分鐘）tfl3 〇2分鐘；MS : MH+459 l M f iH 8 !氤-2H-4-哌喃基 啶 集卜2-甲氣笨某 i哮胺順丁烯二酸鹽 將Ν2·{4_[7-胺基-3-(4_六氫吡啶基）_1H_吡唑並[4,3_d]嘧 足1基]-2 -甲乳夺基卜甲基嗓叛酸胺（32〇亳克， 〇·645亳莫耳）、四氳-4乩哌喃-4-酮（129毫克，1.29亳莫耳）及 二乙醯氧基硼氫化鈉（275毫克，1.29毫莫耳）在ι，2_二氯乙 燒（15亳升）中之混合物，於75。〇下加熱3小時。將混合物以 飽和礙酸氫鈉水溶液（2〇毫升）處理，並分離液層。將水層 以二氯甲燒萃取（3X20亳升），然後使合併之有機溶液以硫 酸鎂脫水乾燥，過濾並使濾液在減壓下濃縮。使殘留物於 石夕膠上藉急驟式層析純化，然後將此物質（19〇亳克）在酷酸 乙醋（10亳升）與乙醇（丨亳升）之混合物中，加熱至回流。將 醋酸乙酯（4毫升）中之順丁烯二酸（85毫克），添加至混合物 中’接著使其在回流下加熱30分鐘。使混合物冷卻至環境 溫度’然後藉過濾收集固體，產生標題化合物（220毫克） :IhNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 9.49 (s，1H)，9.15 (bs，1H)，8.33 (s， 1H)，8·13 (d5 1H)，7.71 (d，1H)，7.59 (d，1H)，7·35 (m，3H)5 7.28 (s，1H)， 7.16 (m，2H)，6·8 (bs，2H)，6.02 (s，2H)，4.04 (s，3H)，3.99 (m，1H)，3.94 (s，1H)，3·2_3·6 (m，8H)，2.31 (m，4H)，2_0 (m，2H)，1.70 (m，2H); RP-HPLC(HypersilHSC18,5微米，l〇〇A，250X4.6亳米；5%-l〇〇% 200304818

(103) 乙腈-0.05M醋酸銨，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）trl5.63分鐘； MS : ΜΗ+581_2，Μ·Η+579·2 實例9 Ν2-{ 4-|~7_胺基- 3- (1-乙某-4-六氫ρ比症某）- lH-p比峻並， Γ4,3_(11嘧啶-1-基1-2 -甲氣苯基卜1-曱某哚羧醯^ 順丁烯二酸鹽 標題化合物係以關於製備N2_{ 4 - [ 7 -胺基-3 - (1 ·四氯 _2H-4_味喃基-4 -六氫ρ比淀基比唆並[4,3-d]喊淀-1-基 ]-2 -甲氧苯基}-1-甲基-1H-2-啕嗓複醯胺順丁婦二酸鹽所 述之方式，製自^-{4-[7-胺基-3-(4-六氳吡啶基）-111-吡唑 並[4,3-(1]嘧淀-1-基]-2-甲氧苯基}-1-甲基-1幵-2^?1嗓羧醯 胺與乙醛：iHNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 9.49 (s，1H)，9.10 (bs，1H)， 8.33 (s，1H)，8.13 (d，1H)，7.71 (d5 1H)，7.59 (d5 1H)，7.28-7.35 (m，3H)， 7.15 (m，2H)，6.80 (bs，2H)，6.01 (s，2H)，4.04 (s，3H)，3.94 (s，3H)，3.62 (m, 2H)，3.38 (m，1H)，3.16 (m，4H)，2.26 (m，4H)，1.27 (t5 3H); RP-HPLC (HypersilHSC18, 5微米，100A，250X4.6毫米；5 % -100% 乙腈-0.05M醋酸銨，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）tr15.77分鐘； MS : MH+525.0, M-H+523.0 製備11 3-碘基-1 - (4-硝基茇某）-ΐΗ·吡砷嘧啶_7-_胺 標題化合物係按關於3-碘基-1-(3- f氧基硝基苯基 )·1Η-吡唑並[4,3-d]嘧啶-7-胺之製備所述，製自3-碘基_1H_ 吡唑並[4,3-d]嘧啶-7 -胺與1_氟基-4 -硝基苯。1hnMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 8.40-8.50 (m，3H)，7.79 (d，2H)，7·11 (bs，2H); -109- 200304818 ㈣ RP-HPLC (HypersilHSC18, 5微米，ιοοΑ，250X4.6毫米；5% -100% 乙腈-0.05M醋酸銨，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）tr15.98分鐘 ” 製備12 、 4 -『7 -胺基-1-(4 -硝基笨某彳Η-?比峻並「4,3-d 1喊症-3-基 ~1二丄，2，3 j -四氫'1 -吡啶勒酸第三丁酯 標題化合物係以關於製備4 - [ 7 -胺基_ 1 - (3 ·甲氧基-4 -硝 基苯基）-1Η·吡唑並[4,3-d]嘧啶-3·基]·1，2,3,6-四氫-1-吡 啶羧酸第三-丁酯所述之方式，製自3-碘基-1-(4-硝基苯基 · )-1H-吡唑並[4,3-d]嘧啶-7-胺與 4-(4,4,5,5-四甲基-1，3,2-二氧硼伍圜-2-基）_1，2,3,6-四氫-1-吡啶羧酸第三-丁酯： iHNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 8.44 (m，3H)，7.76 (d，2H)，7.53 (m，1H)， 7·05 (bs，2H)，4.13 (m，2H)，3.58 (m，2H), 2.67 (m，2H)，1.44 (s，9H); RP-HPLC(HypersilHSC18,5微米，l〇〇A，250X4.6亳米；5%-100% 乙腈-0.05M醋酸銨，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）tr21.70分鐘； MS : ΜΗ+438.1，Μ·Η+436·1 製備13 _ 4-Γ7胺某-1-(4胺基笨某V1H-吡唑並f4,3-dl嘧啶_3-甚_ 1-1 -六氫吡啶羧酸第三-丁酯 標題化合物係以如關於製備4-[7-胺基-1-(4-胺基-3-甲 氧苯基）-1Η·吡唑並[4,3-d]嘧啶-3-基]-1-六氫吡啶羧酸第 三-丁酯所述之相同方式，製自4-[7-胺基·1-(4_4基苯基 ” )-111-外1:唆並[4,3-(1]口密淀-3-基]-1，2,3,6-四氫-1-峨淀羧酸 · 第三-丁酯：RP-HPLC(HypersilHSC18,5微米，100Α，250Χ4.6 亳 米；5% -100%乙腈-〇·〇5Μ醋酸銨，歷經25分鐘毫升/分鐘 -110- 200304818

(105) )tr16.07分鐘；MS : MH+410.2 實例10 ， ]^1-丨4-『7-胺基-3-(4-六氫吡啶基）-1沁吡唑並「4,3-(11嘧啶 、 -1-基1笨基卜1-笨磺醯胺雙醋酸鹽 灰 標題化合物係以關於製備N2-{ 4-[7-胺基-3-(4-六氫吡啶 基）-1Η-吡唑並[4,3-d]嘧啶-1-基]-2-甲氧苯基}-1-甲基 -1H-2-吲哚羧醯胺所述之方式，製自4_ [7-胺基-1-(4-胺基苯 基）-1Η-吡唑並[4,3-d]嘧啶-3·基]-1-六氫吡啶羧酸第三-丁 _· 酯與氯化苯磺醯：iHNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 8.22 (s，1H)，7.75 (m，2H)，7.45 (m，3H)，7.14 (d，2H)，7·02 (d，2H)，6.5 (bs，1H)，3·0-3·3 (m， 3H)，2.77 (m，2H)，2.0 (m，4H)，1.89 (s，6H) ; RP-HPLC (HypersilHSC18, 5微米，100A，250X4.6毫米；5% -100%乙腈-0.05M醋酸銨，歷經 25分鐘，1 毫升 / 分鐘）tr11.63分鐘；MS ·· MH+ 450.0，M-H+448.0 實例11

N2-{4-「7-胺基-3-(4-六藎，口比咬基）_lH_外b吨#f4,3-dl。密淀 1 -基1本基卜1-甲基-1H-2-41嗓轉酸月安 標題化合物係以關於製備N2-{4_ [7-胺基-3-(4·六氫吡啶 基）-1Η-吡唑並[4,3-d]嘧啶-1_基]-2·甲氧苯基}-1-甲基 -1H-2-吲哚羧醯胺所述之方式，製自4-[7-胺基-1-(4-胺基苯 基）-1Η-吡吐並[4,3-d]嘧啶-3-基]-1-六氫吡啶幾酸第三-丁 酯與 1 -甲基啕哚羰基氯·· iHNMR (DMSO-d6, 400 MHz) (5 10.85 (s，

1H)，8.28 (s，1Η)，8·03 (d，2H)，7.74 (d，1H)，7.58 (d，1H)，7.53 (d5 2H)， 7.37 (s，1H)，7.34 (t，1H)，7.15 (t，1H)，6.5 (bs 1.4H)，4.04 (s，3H)，3.19 (m，1H)，3.10 (m，2H)5 2.70 (m，2H)，1.84-2.0 (m，4H) ; RP-HPLC -111 - 200304818 (106) 麵_ (HypersilHSC18，5微米，100A，250X4.6 毫米；5% - l〇〇% 乙腈 -0·05Μ醋酸銨，歷經25分鐘，1毫升/分鐘）tr14.42分鐘；MS : MH+467.1，M-H+465.1 實例12 「4,3-dl 口密淀_1_基1-2甲氣笨基卜1-甲基-1Η_2·ρ?1 p朵舞聽 雙醋酸鹽 標題化合物係藉由4-[7-胺基_1-(3 -甲氧基-4-硝基苳基 )-111-吡唑並[4,3-引嘧啶-3-基]-1，2,3,6-四氫-1-吡啶羧酸 第三丁酯之甲醇性溶液，於10% Pd-C存在下，在55psi氫下 ，氫化12小時，提供4-[7-胺基-1-(4-胺基-3-甲氧苯基）-11^ 吡唑並[4,3-d]嘧啶-3-基]-l，2,3,6-四氫-l-吡啶羧酸第三-丁酯，然後以關於製備N2-{4-[7-胺基·3-(4-六氫吡啶基 )-111-吡唑並[4,3-(1]嘧啶-1-基]-2-甲氧苯基}-1-甲基-11^2-吲哚羧醯胺所述之方式，與1 -甲基吲哚羰基氯反應而製成 ·· iHNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 9.49 (bs，1H)，8.35 (s，1H)，8.12 (d， 1H)，7·71 (d，1H)，7.60 (m，1H)，7.46 (s，1H)，7·32 (m，3H)，7.16 (m，2H)， 4.04 (s，3H)，3.94 (s，3H)，3.50 (m，2H)，2.96 (m，2H)，2·54 (m，2H)，1.88 (s，6H) ; RP-HPLC (HypersilHSC18, 5微米，100A，250X4.6毫米；5% -100%乙腈-0.05M醋酸銨，歷經25分鐘，1亳升/分鐘）tr15.42 分鐘；MS : MH+495.2, M-H+493.3 實例13 N-[4-(4_胺基呋喃並f2.3-dl嘧啶-5-某）茉基卜NK4 -甲基 笨基）脲 -112- 200304818

(107)

實例13A 基_ 1 - (4 -硝基茉某彳λ西因 將2-溴基-1-(4·硝基苯基）乙酮（5克，2〇·5毫莫耳）與硝酸 銀（5克’ 29.4¾莫耳）在水（250毫升）與丙酮（15〇亳升）中之混 ’ 合物，加熱至回流，歷經4小時，然後冷卻至室溫。過滤 此懸浮液，並將濾液以二氯甲烷萃取兩次。使合併之萃液 脫水乾燥（Na2S〇4) ’過濾及濃縮。使濃縮液於矽膠上藉急 驟式管柱層析純化，使用2 : 1己燒/醋酸乙酯，提供3.7 籲 克（50% )所要之產物。Rf=〇.4(l : 1己烷/醋酸乙酯）。

實例13B 2 -胺―基」( 4 -硝基茉基）· 3 - T?夬喃甲月青 將實例13A (5克，27.6亳莫耳）與丙二腈（2.74克，41.4毫莫 耳）在甲醇（8.6¾:升）中之混合物，於室溫下，以二乙胺（丨.43 毫升，13.8毫莫耳）處理，攪拌1小時，並倒入水中。將所 形成之懸浮液過濾，並將濾餅以水洗滌，然後於矽膠上藉 急騾式管柱層析純化，使用1 : i醋酸乙酯/己烷，提供5 | 克（80% )所要之產物。MS(DCI)m/e247(M+NH4)+.

實例13C Ν’-Ι·,·3 -氰基-iz丄基）-2 -咭喃某1醯亞胺某甲-將實例13B (2克，8.7毫莫耳）與硫酸銨（115毫克，〇·87毫莫 、 耳）在甲酸三乙酿（40毫升）中之混合物，加熱至回流，歷經 4小時’冷卻至-20 C ’以乙醇中之2Μ氨（80毫升，160毫莫 耳）處理，溫熱至室溫，並攪拌5小時。藉真空過濾收集所 形成之沈丨殿物’以水與乙醇洗條並乾燥，提供2.2克（98% ) -113- 200304818 (108) 所要之產物。MS(ESI(-))m/e255(M-H)' 實例13D · K 4 -硝基笨基）呋喃並f 2，3 - d 1癌啶-4 -胺 將實例13C (120毫克，0.47毫莫耳）在丨，2-二氯苯（5毫升） 中之懸浮液，於Smith合成器微波中，在250T：下加熱15分鐘 ’以THF稀釋，及濃縮。使濃縮液於矽膠上藉急騾式管拄 層析純化，使用5%甲醇/二氯甲烷，提供98毫克（82% ) 所要之產物。MS(ESI(-))m/e255(M-H)- ; iHNMR (DMSO-d6) 6 8.37-8.33 (m，2H)，8.29 (s，2H)，8.19 (s，1H)，7.80-7.75 (m，2H)，6·80 (brs， 2H);對 C12H8N4O3之分析計算值：c，56.25 ; H，3.15 ; N，21.87. 實測值：C，56.32 ; H，3.17 ; N，21.86.

實例13R K4-胺基苯_基）呋喃並『夂3_dl嘧啶 將實例13D (140毫克，0.55毫莫耳）與NH4CI (3〇毫克，〇 55 毫莫耳）在2 : 1乙醇/水（9毫升）中之混合物，加熱至 ，以鐵粉（61毫克，1·1毫莫耳）處理，加熱至8〇。^，序㉟2 小時，冷卻至室溫，經過矽藻土（Celite®)過濾， 及 >辰縮。 使濃縮液於碎膠上藉急驟式管柱層析純化，使用 川2 · 1己規* /醋酸乙酯，提供95毫克（77 % )所要之產物。 MS(ESI(+))m/e227(M+H)+ -114- 200304818 (109)

實例13F 基呋喃並『2,3-dl嘧啶-5-盡基l_N’-(4-甲其 苯基）胧 將實例13E (50毫克，0.22毫莫耳）在二氯甲烷（3毫升）中之 0 C懸浮液，以異氰酸對·曱苯酯（〇 〇31毫升，〇·24毫莫耳） 處理，溫熱至室溫，並攪拌過夜。藉真空過濾收集所形成 之沈澱物，以二氯甲烷洗滌並乾燥，提供55毫克（70% )所 要之產物。MS (ESI(+))m/e360 (M+H)+; iHNMRpMSO-dyS 8.80 (s， 1H)，8.60 (s5 1H)，8.25 (s，1H)，7·92 (s，1H)，7.6 (d，J=8.4Hz，2H)，7·43 (d， J=8.7Hz，2H)，7.35 (d，J=8.4Hz，2H)，7.10 (d，J=8.1Hz，2H)，6.52 (brs， 2H)，2.25 (7, 3H);對 C2〇H17N502之分析計算值：c，66.84 ; H，4.77 ;Ν，19·49·實測值：C，66.58 ; Η，4·65 ; Ν，19·42· 實例14 N:丄4二(j-胺基咬喃並|~2,3-dl嘧啶_5-某、1某-甲基 苯基）脲 所要之產物係經由以異氰酸間-甲苯酯取代實例13F中 之異氰酸對-甲苯酿而製成。MS (ESI(+))m/e360 (Μ+Η)+ ; iHNMR (DMS0-d6) 5 8.84 (s，1Η)，8·65 (s5 1Η)，8.25 (s5 1Η)，7.93 (s， 1H)，7.62-7.59 (m，2H)，7.45-7.42 (m，2H)，7.31 (brs，1H)，7.25 (d， J=8.1Hz，1H)，7.17 (t5 J=7.2Hz，1H)，6.80 (d，J=7.2Hz，1H)，6.54 (brs， 2H)，2.28 (s，3H);對 c2〇Hl7N5〇2 · 〇_25H2〇之分析計算值·· C5 66.00 ; H，4·85 ; N，19·25·實測值·· C，66.15 ; H，4·68 ; N，19.31. 實例15 Ν-『4-(4:|基^失喃並『2,3-d~]嘧啶，5-基）茉某i-N，彳2 -甲基 -115- 200304818 (110) 苯基）脈 所要之產物係而經由以異氰酸鄰-甲苯酯取代實例13F 中之異氰酸對甲苯酯而製成。MS (ESI(+))m/e360(M+H)+ ; ^NMR (DMSO-d6) 5 9.19 (s，1H)，8.25 (s，1H)，7·98 (s，1H)，7.92 (s， 1H)，7.84 (d，J=7.8 Hz，1H)，7.62 (d，J=8.7Hz，2H)，7.44 (d，J=9.0 Hz， 2H)，7.20-7.13 (m，2H)，6.96 (dt，J=7.4, 0.9Hz，1H)，6.52 (brs，2H)，2·26 (s，3H)，對 C2〇H17N5〇2 · 〇·25Η20之分析計算值：C，66.01; H, 4.85 ;N，19·25·實測值：C，65.907 ; H，4.74 ; N，18.98. 實例16 ^-丄4-(4-胺1^|並丨2,3_(11嘧啶-5-某）茉基1_沖_(3_氣茉 基）月尿 所要之產物係經由以異氰酸3 ·氯苯酯取代實例13F中之 異氰酸對-甲苯酯而製成。MS(ESI⑴)m/e378，38〇(m+H)+ ; hNMR (DMSO-d6) (5 8.94 (s，2H)，8.25 (s，1H)，7.93 (s，1H)，7.73-7.72 (m，1H)，7.61 (d，J二 8.4Hz，2H)，7.44 (d，J=8.4Hz，2H)，7.32-7.29 (m，2H)， 7.03 (dt，J=6.5, 2·2Ηζ，1H);對 CbHbCINsC^ · 0·25Η2Ο之分析計 算值：C，59.38; Η, 3.80; N5 18.22.實測值：C，59.42; H，3·80;Ν, 18.12.

實例1 7 5·ϋ·(1，3-1並啐吨-2_某胺基）苯某1咗喃並丨2,3_dl嘧啶 -4-胺 -116- 200304818 (111) 將實例13E (80毫克，0.35毫莫耳）在吡啶（3毫升）中之溶液 ’經由套管逐滴添加至1，1-硫羰基二咪唑（63亳克，0.35亳 莫耳）在吡啶（3亳升）中之0 °C溶液内。將反應物於0 °C下攪 拌1.5小時，以2·胺基酚（393毫克，0.359毫莫耳）處理，溫熱 ' 至室溫，攪拌過夜，以1-乙基-3-(3-二甲胺基丙基）碳化二 亞胺鹽酸鹽（81毫克，0.42毫莫耳）處理，並加熱至55°C，歷 經8小時。使混合物濃縮，並使殘留物於醋酸乙酯與水之 間作分液處理。將水相以醋酸乙酯萃取三次，並將合併之 0 萃液以鹽水洗滌，脫水乾燥（Na2S〇4)，過濾及濃縮。使濃 縮液於矽膠上藉急騾式管柱層析純化，使用醋酸乙酯，提 供 31 毫克（25% )所要之產物。MS (ESI(+))m/e344 (M+H)+ ; iHNMR (DMSO-d6) 5 10.82 (s，1H)，2.56 (s，1H)，7.94 (s，1H), 7.93-7.89 (m，2H)，7.56-7.48 (m，4H)，7.24 (dt，J=7.2, 1.2Hz，1H)，7.15 (dt，J=7.8， 1·2Ηζ，1H)，6.54 (brs，2H)·對C18H13N5O2 · 〇·25Η2〇之分析計算值 :C，65.61 ; Η，3·91 ; Ν，20.13·實測值：C，65.75 ; Η，3.96 ; Ν，19.78. 實例18 _ U 4 - (4 -胺基吱喃並『2，3 - d h密咱：-5 -基）宏基1苯甲祕脸 將實例13E (74毫克，0.33毫莫耳）在二氯甲烷（3毫升）中之 〇°C懸浮液，以吡啶（0.032毫升；〇·4亳莫耳）與氯化苯甲醯 (0.040毫升，〇·34毫莫耳）處理，於〇。〇下攪拌1小時，溫熱 至室溫，並攪捽過夜。將混合物以己烷研製，並藉真空過 濾收集沈澱物，以二氯甲烷及水洗滌，及於矽膠上藉急騾 式管柱層析純化，使用醋酸乙酯，提供46毫克（42% )所要 之產物。MS (ESI(+))m/e331 (M+H)+ ; iHNMRpMSO-dySlCMl (s， -117- 200304818

(112) 1H)，8.26 (s，1H)，7.99-7.94 (m，5H)，7.62-7.50 (m，5H)，6·50 (brs，2H); 對 C19H14N4〇2 · 〇.25H20之分析計算值：C，68.15 ; H，4.36 ; N， 16.73.實測值：C，68.20 ; H，4.21 ; N，19.78· 實例19 Ν·『4·.(4-嚴—基吱喃並f2,3-d~|嘧啶-5-盖1苯碏醯胺 將實例13E (0.05克，0·22毫莫耳）在二氯甲烷（4毫升）中之〇 °C懸浮液，以吡啶（0.022毫升，0.26毫莫耳）與氯化苯磺醯 (0.03毫升，0·23毫莫耳）處理，於〇°C下攪拌1小時，溫熱至 室溫，並攪拌過夜。將反應混合物以水稀釋，並以二氯甲 燒萃取兩次。將合併之萃液以鹽水洗滌，脫水乾燥（Na2S〇4) ’過濾及濃縮。將濃縮液以二氯甲燒/己燒研製，提供52 毫克（64% )所要之產物。MS (ESI(+))m/e367 (m+h)+ ; 1hnmr (DMS〇.d6) 5 10.51 (s? 1H)5 8.23 (s? 1H)? 7.88 (s5 1H)? 7.84-7.81 (m5 2H)5 7.64-7.54 (m，3H)，7.38 (d，J=8.5Hz，2H)，7.22 (d，J=8.5Hz，2H)，6.45 (brs，2H) ’ 對 C18H14N4O3S之分析計算值：c，59.01 ; H，3·85 ; N， 15.29.實測值：C，58·77 ; H，3 88 ; N，15 18 實例20

胺基-6-甲i咬喃並嘧啶·5_甚、黎某 甲基茉篡 實例20A 】-(4 -硝甚笨基）丙· ^ _ 將THF中《〇.5MZnCl2 (6〇毫升，3〇毫莫耳）於thf 毫升） 中之/合液，在罜溫下，經由注射器，以THF中之2M氯化乙 基鎂（15¾升，30¾莫耳）逐滴處理，以冰浴冷卻約1〇分鐘 -118- 200304818 ，於室溫下！覺拌20分鐘，冷卻至（TC，並以卿仙3)4(173克 ，1.5¾莫耳），及氯化4-硝基苯甲醯（612克，％毫莫耳）在 THF (20毫升）中之溶液，相繼處理。將混合物於〇它下攪拌 40分叙，以水稀釋，並以醋酸乙酯萃取三次。將合併之萃 液以飽和Na2C03、水及鹽水洗滌，脫水乾燥（MgS〇4)，過 濾及丨辰縮。使濃縮液於矽膠上藉急驟式管柱層析純化，使 用6 : 1己烷/醋酸乙酯，提供2.17克（4〇% )所要之產物。 Rf=0.6 (3 : 1己燒/醋酸乙酯）。

實例20B ?二.、/臭基-1-(4-硝某笨基）丙_1_西同 將溴（0.805毫升，15.6毫莫耳）在CC14 (10毫升）中之溶液， 逐滴添加至實例20A (2.8克，15.6毫莫耳）在cci4 (20毫升）中 之溶液内’於室溫下攪拌1小時，以1 ·· 1飽和NaHC〇3/1〇% NaHS〇3使反應淬滅，並以二氯甲燒萃取。將合併之萃液以 水洗務，脫水乾燥（Na2S〇4) ’過滤及濃縮，提供3 95克（98 % )所要之產物。尺尸0·62 (2 : 1己烷/醋酸乙酯）。

實例20C 2 - 基_ 1 _ (4麵硝基笨某、丙· 1 _ _ 將LiOH· H2〇 (642毫克，15.3毫莫耳）在水（15亳升）中之溶 液，逐滴添加至實例20B (3.95克，15.3毫莫耳）在DMF (54亳 升）中之0 °C溶液内，於0 °C下攪拌1小時，以水稀釋，並以 醋酸乙酯萃取三次。將合併之萃液以鹽水洗滌，脫水乾燥 (Na2S〇4)，過滤及濃縮’提供2·65 (89% )所要之產物。 (2 : 1己烷/醋酸乙酯）。 -119- 200304818 (114) mwmm

實例20D 5-(4-胺基苯某）-6 -甲某咭喃並「2,3 _dl嘧啶-4-胺 所要之產物係經由以實例20C取代實例13B-13E中之實例 13A 而製成。1HNMR (300MHz，DMSO-dQ 5 2.33 (s，3H)，5.33 (s，2H)， 6_13 (brs，2H)，6.70 (m，2H)，7.08 (m，2H)，8.16 (s，1H);對 C13H12N4〇 之分析計算值·· C，64.99 ; Η，5·03 ; N，23.32·實測值：C，64.67 ; H，5.02 ;N，23.05.

實例20E N-丨4-(4-胺基-6-甲某哇喃並「2,3-dl嘧啶-5-某）茉某 甲某笨基）脲 所要之產物係經由以實例20D與異氰酸鄰·甲苯酯，個別 取代實例13F中之實例13E與異氰酸對-甲苯酯而製成。1Η NMR (500MHz，DMSO-d6) 5 2·26 (s，3Η)，2.37 (s，3Η)，6.18 (brs，2Η)， 6.97 (t，J=7.5Hz，1Η)，7·16 (t，J=7.8Hz，1Η)，7.19 (d，J=7.5Hz，1Η)，7.36 (d，J=8.4Hz，2H)，7.63 (d，J=8.4Hz，2H)，7·83 (d，J=7.8Hz，1H)，7.98 (s， 1H)，8.19 (s，1H)，9.17 (s5 1H);對 C2lH19N502 · 0.25H2〇之分析計 算值：C，66.74 ; H，5·20 ; N，18.53.實測值：C，66.63 ; H，4.90 ; N， 18.55. 實例21 N-『4-(4 -胺基-6-甲基咬喃並[2,3_d~| 口密淀-5-基）笨基 甲基笨某）服 所要之產物係經由以實例20D取代實例13F中之實例13Ε 而製成。1HNMR (500MHz，DMSO-d6)52.25 (s，3Η)，2·37 (s5 3Η)， 6.18 (brs，2Η)，7.10 (d，J=8.4Hz，2Η)，7.35 (m，4Η)，7.61 (d，J=8.4Hz， -120- 200304818 (115) 2Η)，8·19 (s，1Η)，8.59 (s，1Η)，8.78 (s，1Η);對 C21H19N5〇2 · 〇·4Η2〇 之分析計算值：C，66.27 ; H，5.24 ; N，18.40·實測值：C，65.84 ; H，4.80 ; N，18.07. 實例22 N-f4-(4-胺基-6-甲基呋喃並f2,3-dl嘧啶-5-某）苯基1苯 甲醯胺 所要之產物係經由以實例20D取代實例18中之實例13E而 製成。MS(DCI)m/e345(M+H)+ ; iHNMR (300MHz，DMSO-d6) δ 2.39 (s， 3H)，6.23 (brs，2H)，7·43 (m，2H)，7.59 (m，3H)，7.96 (m，2H)，7.98 (m， 2H)，8.20 (s5 1H)，10.42 (s5 1H);對 C20H16N4〇2 · 〇·5Η2〇之分析計 算值：C，67.98 ; H，4.85 ; N，15.85·實測值：C，67.83 ; H，4 .73 ; N， 15.61. 實例23 N-f4-(4-胺基-6-甲基呋喃並f2,3-dl嘧啶-5-基）笨基1笨 磺醯胺

所要之產物係經由以實例20D取代實例19中之實例13E而 製成。MS (DCI)m/e381(M+H)+; iHNMR (300MHz，DMSO-d6) (5 2.30 (s，3H)，6.16 (brs，2H)，7.24 (d，J=8.4Hz，2H)，7.30 (d5 J=8.4Hz，2H)， 7.57(t，J= 7.6Hz5 2H)，7.64 (t，J=7.3Hz，1H)，7.80 (d，J=7.2Hz，2H)，8.19 (s，1H)，10.49 (s，1H);對 CWHWN403S · l_0H2〇之分析計算值： C，57.28 ; H，4.55 ; N，14.06·實測值·· C，57.67, Η ; 4·13 ; N，14.04. 實例24 N-『4-(4-胺基-6-甲基呋喃並「2,3-dl嘧啶-5-基）苯基 甲基苯基）脲 -121 - 200304818

(116) 所要之產物係經由以實例20D與異氰酸間-甲苯酯，個別 取代實例13F中之實例13E與異氰酸對-甲苯酯而製成。MS (DCI)m/e374 (M+H)+; hNMR (300MHz，DMSO-d6) (5 2.29 (s，3H)，2.37 (s，3H)，6.22 (brs，2H)，6.80 (d，J=7.1Hz，1H)，7.17 (t，J=7.6Hz，1H)，7.31 (m，1H)，7.35 (d，J=8.5Hz，2H)，7.62 (d，J=8.8Hz，2H)，8.19 (s，1H)，8.65 (s，1H)，8.83 (s，1H);對 C2lH19N5〇2之分析計算值·· C，67.55 ; H， 5.13 ; N，18.75·實測值：C，67·32 ; H，5.11 ; N，18.70. 實例25 N-「4-(4-胺基_6 -甲基呋喃並[2,3-dl嘧啶-5-某）苯基 卜N、（3-氣茉基）脲 所要之產物係經由以實例20D與異氰酸3-氯苯酯，個別 取代實例13F中之實例13E與異氰酸對-甲苯酯而製成。MS (DCI) m/e394 (M+H)+ ; iHNMR (300MHz，DMSO-d6) 5 2·37 (s，3H)， 6·21 (brs，2H)，7.03 (dt5 J=6.4，2.0Hz，1H)5 7.31 (m，2H)，7.36 (d， J=8.5Hz，2H)，7.62 (d，J=8.8Hz，2H)，7.73 (m，1H)，8.19 (s，1H)，8.93 (s， 1H)，8.94 (s，1H);對 C20H16C1N5〇2 · 〇·35Η2〇之分析計算值·· C， 60.03 ; Η, 4.21 ; N，17.50·實測值：C，60.51 ; H，3.88 ; N，17.02. 實例26 N-f4-(4_胺某·6·甲基呋喃並f2,3-dl嘧啶-5-基）笨基 1-N丨( 3 -甲氧苯基）月尿 所要之產物係經由以實例20D與異氰酸3 -甲氧苯酯，個 別取代實例13F中之實例13E與異氰酸對-甲苯酯而製成。 MS (DCI)m/e390 (M+H)+ ； ^NMR (300MHz5 DMSO-d6) 5 2.37 (s? 3H), 3.74 (s，3H)，6.21 (brs，2H)，6.56 (m，1H)，6.95 (m，1H)，7.18 (s，1H)， -122- 200304818

(117) 7.20 (m，1H)，7.35 (d，J=8.5Hz，2H)，7.62 (d，J=8.5Hz，2H)，8·19 (s，1H)， 8·73 (s，1H)，8.83 (s，1H);對 C21H19N503之分析計算值：c，64 77 ;H，4.92 ; N，17.98.實測值：C，64.41 ; H，4.83 ; N，17.71. 實例27 Ν-Γ4-(4 -月安基-6-溴基咬喃並f2,3-dl 口密咬-5·某）苯基

甲某茉某）服 實例27A 5-(4-硝基笨某）口夫喃並r2,3-d~l 口密淀_4_某胺某甲酸第三_ 丁酯 將實例13D (0.44克，1·7毫莫耳）在THF(20毫升）中之〇°C懸 浮液，以60% NaH油分散液（172毫克，4·25亳莫耳）處理，於 〇°C下攪捽15分鐘，以二碳酸二-第三-丁酯（450亳克，2.04 毫莫耳）處理，在〇 °C下攪拌1小時，並以飽和NH4C1使反應 淬滅。將混合物以醋酸乙酯萃取三次，並將合併之萃液以 水及鹽水洗滌，脫水乾燥（Na2S〇4)，過濾及濃縮。使濃縮 液於矽膠上藉急騾式管柱層析純化，使用2 : 1己烷/醋酸 乙酯，提供550毫克（89% )所要之產物。MS (ESI(+))m/e357 (Μ+Η)+· 6 ->臭基- 5- (4-硝基本基）吟喃姐『2,3-dlp密淀-4 -基胺基甲 將實例27A (350毫克，0.98毫莫耳）在DMF (10毫升）中之0 °C溶液，以Br2 (0.102毫升，1.98毫莫耳）處理，溫熱至室溫 ，並攪拌1小時。使反應冷卻直0°c，以1 : 1之10%NaHS〇3 -123- 200304818

(118) /飽和NaHC〇3使反應淬滅，並以醋酸乙酯萃取三次。將合 併之萃液以水及鹽水洗滌，脫水乾燥（Na^SOzO，過濾及濃 縮，提供400毫克（93% )所要之產物。MS (ESI㈠)m/e433,435 (M-H)- 實例27£ 6 -溪基-5-『4-((『（3 -甲基本基）胺某1凝基丨胺基）笨基1咬 喃並『2,3-d 密症-4·基胺基甲酸第三-丁酯 所要之產物係經由以實例27B與異氰酸間-甲苯酯，個別 取代實例13E與13F中之實例13D與異氰酸對-甲苯酯而製成 。MS (ESI(-))m/e536,538 (M-H)-.

實例27D N-「4-(4-胺基-6-溴基呋喃並『2,3·(Π嘧啶-5-某）笨基 卜ΝΉ-甲_基笨某m 將實例27C (94毫克，0· 17毫莫耳）在二氯甲烷（4毫升）中之 (TC懸浮液，以TFA (1毫升）處理，溫熱至室溫，攪拌1小時 及濃縮。使濃縮液藉急騾式管柱層析純化，使用5 %甲醇 /二氯甲烷，提供64毫克（88 % )所要之產物。MS (ESI(+))m/e438, 440 (M+H)+ ; iHNMR (DMSO-d6)(J 8.88 (s，1H)，8.66 (s，1H)，8.24 (s，1H)，7.64 (d，J=8.4Hz，2H)，7.41 (d，J=8.7Hz，2H)，7.32 (brs，1H)，7.25 (d，J=8.7Hz，1H)，7.17 (t，J=7.6Hz，1H)，6.81 (d，J=7.8Hz， 1H)，6.48 (brs，2H)，2·29 (s，3H);對 C20H16N5O2B1： · H2〇之分析計 算值：C，52.65 ; H，3.98 ; N，15.35.實測值：C，52.50 ; H，3.77 ; N， 15.10. 實例28 -124- 200304818

(119) N-『4-(4-胺一基-6-甲基咬喃並『2,3-d]^密淀_5_基）茉某

溴苽某）脲 實例28A 6-甲基-5-(4-硝羞苯基）呋喃並f2,3_dl嘧啶-4-胺 所要之產物係經由以實例20C取代實例l3B-13D中之實例 13A而製成。

實例28B 6 -甲基-5 - ( _4二硝基茉篡）呋喃並『2，3 - d 1嘧啶-4 -基胺基甲 酸第三-丁酯 所要之產物係經由以實例28A取代實例27A中之實例13D 而製成。

實例28C 5-『4-({『（3-溴苯基）胺基1羰基丨胺基）茉基1_6_甲基呋喃 並『2，3_d~|嘧啶-4·基胺基甲酸第三-丁酯 所要之產物係經由以實例28B與異氰酸3 -溴苯酯，個別 取代實例13E與13F中之實例13D與異氰酸對-甲苯酯而製成

實例28D N-[4-(4•胺基-6-甲基咬喃並『2,3-dlp密淀-5-基）苯基 1 -Ν’-( 3 -溪笨基）月尿 所要之產物係經由以實例28C取代實例27D中之實例27C 而製成。1HNMR (300MHz，DMSO-d6) 5 2.40 (s，3Η)，5.93 (brs，2Η)， 7.16 (m，1H)，7·25 (t，J=7.98Hz，1H)，7.36 (m，3H)，7·65 (m，2H)，7.89 (t， J=1.84Hz? 1H)，8.34 (s，1H)，9.11 (s5 1H)，9.12 (s，1H);對 -125- 200304818

(120) C20Hi6BrN5〇2 · 1.4CF3C〇2H之分析計算值：C，44_23 ; H，3.02 ; N，12.05·實測值：C，44.42 ; H，3.03 ; N，11.79· 實例29 3-(4 -硝基笨某）異吟嗤並f5,4_dl續症-4-胺_

實例29A 5 ·胺基· 3 _ (4 ·硝基笨基）異吟η坐-4 -甲月眚 將甲醇中之0.5M甲醇鈉（62.8毫升，31.4毫莫耳）與丙二赌 (2.07克，31.4亳莫耳）之混合物，於〇°c下攪拌！〇分鐘，然後 以N - [(Z )· 2 -氯基-2 - (4 •硝基苯基）乙烯基]輕胺（根據美國 專利案號5,567,843中所述程式製成，6.3克，31.4毫莫耳）在 THF (30毫升）中之溶液逐滴處理，溫熱至室溫，並檀掉兩 小時。將混合物以水（500毫升）稀釋，及過濾。將濾餅以水 與己烷洗滌並乾燥，提供5_4克（75%產率）所要之產物。Ms (ESI㈠）m/e229 (M-H)'

實例29B 3-(4 -硝基笨基）異口号峻並r5.4_dl 口密淀-4-將實例 29A (3.0克，13毫莫耳）、（NH4)2S〇4 (172亳克，！ 3 毫莫耳）及HC(OCH2CH3)3(1〇5毫升）之混合物，加熱至回流， 歷經6小時，然後趁熱過濾。將濾液以乙醇中之飽和NH3 (150毫升）處理，於室溫下攪掉過夜及過濾。將濾餅以乙醇 洗滌並乾燥，提供1.84克（55%產率）所要之產物。 實例30 3 - (4 -胺基苯基）異今峰祓「5，4 d 1 口密淀-將實例29B (124毫克，0·5毫莫耳）在濃HC1 (2亳升）中之〇〇c -126- (121) (121)200304818 懸浮液，以SnCl2 (450亳杳）名、、g wri M古， 毛兑）在很HC1 (1¾升）中之溶液處理， 溫熱至室溫，攪拌3小時及過噹。彳*、♦、、 、/慮 使濾硬於醋酸乙酯與飽 和NaHC〇3之間作分液處理，並脾古播 並將有機相以鹽水洗滌，脫水 乾燥（MgS〇4)，過m縮，提供η毫克（η心所要之產物 。MS (ESI㈠)m/e226 (M-H)' ^14-(4-胺基異)苯某卜n，_门·曱 基笨基）服 將實例30 (126毫克，〇·3亳莫耳）在DMF(2毫升）中之代溶 液，於室溫下，以吡啶（0.121毫升，15毫莫耳）與異氰酸％ 甲基苯醋（0.038毫升，0.3毫莫耳）處理，並攪拌過夜。將反 應’/m合物倒入冰水中，並過濾。使濾餅自醋酸乙酯/己燒 再結晶’提供87毫克（80%產率）所要之產物。ms (ESI(+))m/e 361 (M+H)+ ; iHNMR (DMSO-d6)5 9·00 (s，1H)，8.69 (s，1H)，8.42 (s， 1H)，7.68 (q，J=15, 8.7Hz，4H)，7.10-7.40 (m，3H)，6.82 (d，J=7.2Hz，1H)， 2.28 (s，3H)· 實例32 >^丄4-(4-胺基異崎唑並「5,4-(11痛啶-3_基）苯基1->1，-(3-乙 i苯基）Μ 所要之產物係經由以異氰酸3 -乙基苯酯取代實例3 1中 之異氰酸間-甲苯酯而製成。1HNMR (DMSO_d6) 5 9.00 (s，1Η)， 8.87 (s，1H)，8.42 (s，1H)，7.66 (q，J=15, 8.7Hz，4H)，7.10-7.40 (m，3H)， 6·83 (d，J=7.2Hz，1Η)，2.59 (q，J=7.5Hz，2Η)，1.20 (t，J=7.5Hz，3Η). 實例33 -127- 200304818

(122) N-^^4-r4-聆芊¾喑唑-ϋ5,4-dl嘧啶·3-基）苯某l-N上j^J^ 苯基）脈 所要之產物係經由以異氰酸3 -氯苯酯取代實例3 1中之 異氰酸間-甲苯酯而製成。MS (ESI(+))m/e380 (M+H)+ ; !HNMR (DMSO-d6) δ 9·07 (s，1H)，9·00 (s，1H)，8.42 (s，1H)，7.60-7.80 (m，5H)， 7.20-7.40 (m，2H)，6.90-7.10 (m，1H)· 實例34 N-f4_(4-fe其纂崎唑並[5,4-dl嘧啶-3-某）茉某1苯 所要之產物係經由以實例20取代實例18中之實例13E而 製成。MS (ESI(+))m/e332 (M+H)+; hNMR (DMSO-d6) 5 10.48 (s，1H)， 8·42 (s，1H)，7.90-8.10 (m，4H)，7.50-7.80 (m，5H). 實例35 K-『4-(4-胺基-6_甲基呋喃並「2,3-dl嘧啶-5_某）茉基 Ι-Ν^Π -乙某苯基）服 所要之產物係經由以實例20D與異氰酸3 -乙基苯酯，個 別取代實例13F中之實例13Ε與異氰酸對·甲苯酯而製成。1Η NMR (500MHz，DMSO_d6) δ 1.19 (t，J=7_7Hz，3Η)，2.37 (s5 3Η)，2·59 (q， J= 7·6Ηζ，2H)，6.19 (brs，2H)，6·84 (d，J=7.5Hz，1H)，7_19 (t，J=7.8Hz， 1H)，7.27 (d，J=8.1Hz，1H)，7.34 (m，1H)，7.35 (m，2H)，7.62 (m，2H)， 8.19 (s，1H)，8.64 (s，1H)，8.80 (s，1H);對 C22H21N5O2 · 〇·25Η2〇之 分析計算值：C，67.42 ; Η, 5·53 ; N，17.87.實測值：C，67.48 ; H，5·24 ；N5 18.17. 實例36 -128- 200304818

(123) N-『4-(4 -胺基-6-甲墓咕喃並|~2,3-dl 口密淀-5-甚、苯莘 1-N’-( 3，5 -二甲基苯基、月尿 所要之產物係經由以實例20D與異氰酸3,5-二甲基苯酯 ，個別取代實例13F中之實例13E與異氰酸對-甲苯酯而製成 。MS (DCI)m/e388 (M+H)+; hNMR (500MHz，DMSO-d6) δ 2.27 (s，6H)， 2.37 (s，3H)，6.18 (brs，2H)，6.63 (s，1H)，7.09 (s，2H)，7.35 (d，J=8.4Hz， 2H)，7.61 (d，J=8.4Hz，2H)，8.19 (s，1H)，8.54 (s，1H)，8.79 (s，1H);對 C22H2iN5〇2 · 0·25Η2〇之分析計算值：C，67·42 ; H，5.53 ; N，17.87. 實測值：C，67.13 ; H，5.20 ; N，17·96.

攻二『4-(4•胺基-6- 基呋喃並f2,3_dl痛啶-5-某、茉某 L^〇,5-二氯笨某）月尿 所要之產物係經由以實例20D與異氰酸3,5-二氯苯酯，個 別取代實例13F中之實例13E與異氰酸對-曱苯酯而製成。 kNMR (500MHz，DMSO-d6) 5 2.37 (s5 3H)，6.19 (brs，2H)，7.17 (s，1H)， 7.38 (d5 J=8.4Hz? 2H)? 7.56 (s? 2H)? 7.63 (d? J=8.4Hz? 2H)? 8.19 (s? 1H)9 9·04 (s，1H)，9_10 (s，1H);對 C20H15CI2N5O2 · 〇.25H2〇之分析計算 值：C，55.51 ; H，3·61 ; N，16·18·實測值：C，55.14;H3.32;N，15.99· -129- 200304818

(124) 實例38 N-「4-(4-胺基-6-甲基呋喃並『2,3-dl嘧啶-5-基）笨基 氟基- 5-(三氣甲基）茉基1脲 所要之產物係經由以實例20D與異氰酸2 -氟基-5-三氟甲 基苯酯，個別取代實例13F中之實例13E與異氰酸對-甲苯酯 而製成。MS (DCI)m/e446 (M+H)+ ; iHNMR (500MHz，DMSO-d6)<5 2.38 (s5 3H)，6.20 (brs，2H)，7.38-7.42 (m，3H)，7.51 (m，1H)，7.64 (d， J=8.4Hz，2H)，8.19 (s5 1H)，8.64 (dd，J=2.2, 7.2Hz，1H)，8·95 (d，J=2.5Hz， 1H)，9.34 (s，1H);對 C21H15F4N5〇2 · 〇·25Η2〇之分析計算值：C， 56.07 ; H，3.47 ; N，15.57.實測值：C，55.89 ; H，3·20 ; N，15.80· 實例39 1-「4-(4-胺基-6-甲基-呋喃並「2,3-(11嘧啶-5-某）-笨基 1-3-(4-氰基-笨基）-脲 所要之產物係經由以實例20D與異氰酸4-氰基苯酯，個 別取代實例13F中之實例13E與異氰酸對·甲苯酯而製成。 MS (DCI)m/e385 (M+H)+ ; iHNMR (500MHz，DMSO-dQ 5 2.37 (s，3H)， 6.19 (brs，2H)，7.38 (d，J=8.73Hz，2H)，7·63 (d，J=8.73Hz，2H)，7.66 (d， J=8.73Hz，2H)，7.74 (d5 J=8.73Hz，2H)，8.19 (s，1H)，9.03 (s，1H)，9.25 (s， 1H);對 C2lH16N6〇2 · 〇.5CH2Cl2之分析計算值：C，60.50 ; H，4_01 ;N，19.69.實測值·· C，60.15 ; H，4.28 ; N，19.75·

-130- 200304818

(125) 實例40 1-『4·(4·月安基-6-甲基謹岐喃並『2,3·(Π 口密淀-5-基）-笨某 1·3-Π-三氟甲基-苯基服 所要之產物係經由以實例20D與異氰酸3 -三氟甲基苯酯 ，個別取代實例13F中之實例13Ε與異氰酸對-甲苯酯而製成 。MS (ESI)m/e428 (M+H)+; iHNMR (500MHz，DMSO_d6) 5 2.38 (s，3Η)， 6.20 (bfs，2H)，7.33 (d，J=7.49Hz，1H)，7.37 (d5 J=8.11Hz，2H)，7.53 (t， J=7.80Hz，1H)，7.61 (d，J=8.11Hz，1H)，7.64 (d，J=8.11Hz，2H)，8.04 (s， # 1H)，8.20 (s，1H)，8.96 (s，1H)，9.09 (s，1H);對 C2iH16F3N502之分析 計算值：C，59.02 ; H，3.77 ; N，16.39.實測值：C，58·79 ; H，3.64 ;N，16.23. 實例41 Ν-[4·(4-胺基異g号峻並「5,4-dl。密咬-3-基）装甚1 ·ν，·『3 - i三 氟甲基）苯基1服 所要之產物係經由以異氰酸3 ·三氟甲基苯酯取代實例 31中之異氰酸間-甲苯基酯而製成。MS (ESI(+))m/e415.1 (M+H)+ ; iHNMR (DMSO-d6) 5 9.17 (s，1H)，8·41 (s5 1H)，8.02 (s，1H)， 7.45-7.80 (m，7H)，7·35 (d，J=8.4Hz，1H). 實例42 (4 -胺基異.口咢口坐並f 5，4垂d 口密症 3 -基、苹莘1 一『2 _氩 基-5-(三氟甲基）茉某1月展

所要之產物係經由以異氰酸2-氟基_5_三氟甲基苯醋取代 實例31中之異氰酸間-甲苯酯而製成。MS (ESI(+))m/e433.0 (M+H)+ ; kNMR (DMSO-d6)5 9·50 (s 1H)， -131 - 200304818

(126) 9.00 (d，J=2Hz，1H)，8.24 (dd，J=7.2, 2Hz，1H)，8.41 (s，1H)， 7.40·7·80 (m，6H)· -132

Claims (1)

1. 200304818 拾、申請專利範圍 1 . 一種式I化合物，

   其外消旋-非對映異構物混合物、光學異構物、藥學 上可接受之鹽、前體藥物或生物活性新陳代謝產物， 其中 在式（I)結構中之虛線表示選用之雙键； X 為 CR1或 NR1 ; Y 為 Ο、CRq或 N ; Q 為 N、NR2或 Ο ; R3對各存在處係獨立為氫、羥基、經取代或未經取 代之院基或經取代或未經取代之烷氧基； 當X為CR1，Y為CRq，Q為0，且有一個雙鍵在X與Y 之間時；或當X為CR1，Y為N，Q為Ο，且有一個雙键在 X與Y之間時；或當X為CR1，Y為Ο，Q為N，且有一個 雙鍵在Q與嘧啶基環之間時，則

   或視情況被Rb取代之基團，選自包括環烷基、莕基、 200304818

   四氫莕基、苯並噻吩基、呋喃基、嘧吩基、苯並噚唑

   Q、嘧唑基、苯 並吱喃基、2，3 -二氫苯並吱喃基、吲哚基、異崎唑基、 四氫喊喃基、四氫嗅喃基、六氫吡啶基:唑基、吡 洛基、号峻基、異遽峻基、崎二唆基、邊二咬基、二 氫吲哚基、啕唑基、苯並異嘍唑基、吡啶並-呤唑基、 p比淀並-p塞嗤基、喊淀並-崎π坐基、p密淀並-p塞嗤基及苯 並咪嗤基； 當a為1，且Di、Gi、Ji、1^及]^丨各獨立選自包括CRa與 N時，其條件是Di、Gi、Ji、Li及Μι中至少兩個為CRa ; 或 當 a為 0，且Di、Gi、L!及 Μ!之一為 NRa時，Di、G!、Li 及Mi之一為CRa，且其餘部份係獨立選自包括CRa與N ; 當b為1，且D2、G2、J2、L2及M2各獨立選自包括CRa與 N時，其條件是D2、G2、J2、L]及M2中至少兩個為CRa ; 或 當 b 為 0，且 、G2、1^2及 Μ]之一為 NRa時，D2、G]、L2 及M2之一為CRa，且其餘部份係獨立選自包括0心與N ; Ra與Rb各表示一或多個取代基，且對各存在處係獨 立選自包括氫、自素、_CN、_N〇2、-C(0)0H、-C(0)H、_OH 、-C(0)0-烷基、-Z105-C(O)N(R)2、-Z105-N(R)-C(O)-Z200、 -Z105-N(R)-S(O)2-Z200、-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200、Rc、CH2〇Rc 、四唑基、三氟甲基羰基胺基、三氟甲基磺醯胺基，及 200304818

   視情況經取代之基團，選自包括羧醯胺基、烷基、烷 氧基、芳基、晞基、芳氧基、雜芳基氧基、芳烷基、 炔基、胺基、胺基烷基、醯胺基、雜芳基硫基及芳硫 基； z1G5對各存在處係獨立為共價键或（Ci-cy ; Z20G對各存在處係獨立為視情況經取代之（Cl-C6)、視 情況經取代之苯基或視情況經取代之-(Ci-Cd-苯基； 1^對各存在處係獨立為氫、視情況經取代之烷基、視 情況經取代之芳基、-CH2-NRdRe、-W-(CH2)t-NRdRe、 -W_(CH2)t-0烷基、-W-(CH2)t-S-烷基或-W-(CH2)t-〇H ; Rd與Re對各存在處係獨立為Η、烷基、烷醯基或S02-烷基；或Rd、Re及彼等所連接之氮原子一起形成五-或 六-員雜環； t對各存在處係獨立為2至6之整數； W對各存在處係獨立為直接键結或Ο、S、S(O)、S(0)2 或 NRf ; Rf對各存在處係獨立為Η或烷基； Ζ11()為共價鍵或視情況經取代之（Ci-CQ，其係視情況 被一或多個取代基取代，取代基選自包括烷基、CN、 OH、鹵素、N〇2、COOH、視情況經取代之胺基及視情況 經取代之苯基； Z111為共價鍵、視情況經取代之（Ci-CJ或視情況經取 代之-(CH2)n·環烷基-(CH2)n-;其中視情況經取代之基團 係視情況被一或多個取代基取代，取代基選自包括烷 -3- 200304818

   基、CN、OH、鹵素、N〇2、COOH、視情況經取代之胺基及 視情況經取代之苯基；或R1為經取代或未經取代之碳 環狀或雜環狀環，與環2稠合； A 為共價鍵、; -S_ ; -S(0)p- ; -N(R)· ; -N(C(0)0R)·; -N(C(0)R)- ; -N(S〇2R)- ; -CH20- ; _CH2S_ ; -CH2N(R)- ; -CH(NR)-；-CH2N(C(0)R))- ； -CH2N(C(0)0R)- ； -CH2N(S〇2R)- ； -CH(NHR)-;-CH(NHC(0)R)- ; -CH(NHS〇2R)- ; -CH(NHC(0)0R)· ; -CH(0C(0) R)- ; -CH(0C(0)NHR) ; -CH=CH- ; -C(=NOR)- ; -C(O)- ; -CH(OR)議 ;-C(0)N(R)- ; -N(R)C(0)- ; -N(R)S(0)p· ; _0C(0)N(R)_ ; -N(R)-C(0)-(CH2)n-N(R)_、_N(R)C(0)0- ; _N(R)_(CH2)n+l_C(0)· 、-S(0)pN(R)- ; -0-(CR2)n+l-C(0)- 、-0-(CR2)n+i-0-、 -N(C(0)R)S(0)p- ; -N(R)S(0)pN(R)- ; -N(R)-C(0)-(CH2)n-0-、 -C(0)N(R)C(0)- ; -S(0)pN(R)C(0)- ; -0S(0)pN(R)· ; -N(R)S(0)p0-;-N(R)S(0)pC(0)- ; -S0pN(C(0)R)- ; -N(R)SOpN(R)- ; -C(0)0· ;-N(R)P(0Rg)0- ; -N(R)P(ORg)- ; -N(R)P(0)(0Rg)0· ; -N(R)P(0) (ORg)· ; -N(C(0)R)P(0Rg)0- ; -N(C(0)R)P(0Rg)- ; -N(C(0)R)P(0) (ORg)O-或-N(C(0)R)P(0Rg)-; p為1或2 ; R對各存在處係獨立為Η、視情況經取代之燒基、視 情況經取代之芳烷基或視情況經取代之芳基； Rg對各存在處係獨立為Η，或視情況經取代之基團， 選自包括烷基、芳烷基、環烷基及芳基； 或當R與Rg在含磷基團中時，R、Rg、氮原子及磷原 子，一起形成五-或六-員雜環；或 -4- 200304818

   A為NRS02，且R、Ra及氮原子一起形成視情況經取代 之五或六_員雜環，經稠合至環j ; η對各存在處係獨立為〇至6之整數；

   Rq係選自包括氫、堍氧烷基、烷基、視情況經取代 之芳烷基、視情況經取代之環烷基、視情況經取代之 環烷基烷基、視情況經取代之雜芳烷基、視情況經取 代之（雜環燒基）燒基及齒基；其中芳燒基、環燒基、環 燒基燒基、雜芳燒基及（雜環燒基）燒基係各視情況被一 一 一、四或五個取代基取代，取代基獨立選自包 括貌氧基、貌氧燒4、燒基、氰基、齒基、㈣基、 經基、幾烷基及硝基；< 當X為NRl，且化3各為Η0#，則YM, QwR2，有一 個雙键在Y與Q之間，及

   马 ，其中Ra為Η或-OMe ; _ A 為-NH-CO-、-NH-S〇2·、-NH-C(〇)〇-或-NH-C(0)-NH-; B為N-曱基_啕哚_2_基、（氟基）（三氟甲基）苯基、苯基 或苄基；

   N-乙基 -5 200304818

   當X為CR1，且R3之一不為Η時，則Y為N，Q為NR2 有一個雙键在X與Y之間，及 R1為 R D n)a IA 1 γ

   Mp：L2 / Μ】 -2^2100 其中Z1()()為硝基、視情況經取代之胺基 ，或視情況被Rb取代之基團，選自包括環烷基、萘基 、四氫莕基、苯並碟吩基、吱喃基、碟吩基、苯並崎 唑基

   、苯並嘧唑基、 IN 、IN 、嘧唑 基、苯並呋喃基、2,3-二氫苯並呋喃基、啕哚基、異嘮 口生基、四氫咬喃基、四氫吱喃基、六氫吡淀基、吡唑 基、P比洛基、P号峻基、異4咬基、吟二也基、P塞二也 基、二氫，嗓基、，吐基、苯並異P塞吐基、P比淀並-吟 吃基、被淀並-邊峻基、喊淀並唆基、墙咬並-P塞峻 基及苯並咪唑基； 當a為1，且Di、Gi、Ji、乙丨及^^各獨立選自包括CRa與 N時，其條件是Di、Gi、Ji、Li及Μι中至少兩個為CRa ; 或 當 a為 0，且 Di、Gi、Li&Mi之一為 NRa時，D!、G!、 及Mi之一為CRa，且其餘部份係獨立選自包括CRa與N ; 當b為1，且D2、G2、J2、L2及M2各獨立選自包括CRa與 200304818

   N ’其條件是D2、G]、了2、：2及乂2中至少兩個為CRa ;或 當 b 為 0，且 D2、G2、L2及]VI2之一為 NRa 時，D2、G2、L〗 及M2之一為CRa，且其餘部份係獨立選自包括CRa與N ; Ra與Rb各表示一或多個取代基，且對各存在處係獨立, 選自包括氫、鹵素、-CN、-N〇2、-C(0)0H、-C(0)H、-OH、 -C(0)0-烷基、·Ζ105-(：(Ο)Ν(ίΙ)2、-Ζ105-Ν(ΙΙ)·€：(Ο)-Ζ200、-Ζ105-Ν (R)-S(0)2-Z200、-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200、Rc、CH2〇Rc、四 唑基、三氟甲基羰基胺基、三氟甲基磺醯胺基，及視 情況經取代之基團，選自包括羧醯胺基、烷基、烷氧 基、芳基、烯基、芳氧基、雜芳基氧基、芳烷基、炔 基、胺基、胺基烷基、醯胺基、雜芳基硫基及芳硫基 z1()5對各存在處係獨立為共價键或（Ci-cy ; Z2()()對各存在處係獨立為視情況經取代之、視 情況經取代之苯基或視情況經取代之-(CpCd-苯基； Rc對各存在處係獨立為氫、視情況經取代之烷基、視 情況經取代之芳基、-CH2-NRdRe、-W-(CH2)t_NRdRe、 -W-(CH2)t-0烷基、-W_(CH2)t-S-烷基或-W_(CH2)t-OH ; Rd與Re對各存在處係獨立為Η、烷基、烷醯基或S02-烷基；或Rd、Re及彼等所連接之氮原子一起形成五-或 六-員雜環； t對各存在處係獨立為2至6之整數； W對各存在處係獨立為直接鍵結或Ο、S、S(O)、S(0)2 或 NRf ; 200304818

   Rf對各存在處係獨立為Η或烷基； Ζ110為共價鍵或視情況經取代之（Ci-Cs)，其係視情況 被一或多個取代基取代，取代基選自包括烷基、CN、 OH、鹵素、N〇2、COOH、視情況經取代之胺基及視情況 經取代之苯基； Z111為共價鍵、視情況經取代之（Ci-CQ或視情況經取 代之-(CH2)n-環烷基_(CH2)n-;其中該視情況經取代之基 團係視情況被一或多個取代基取代，取代基選自包括 烷基、CN、OH、鹵素、N〇2、COOH、視情況經取代之胺基 及視情況經取代之苯基；或R1為經取代或未經取代之 碳環狀或雜環狀環，與環2稠合； A 為共價键、-0·; -S_; -S(0)p-; -N(R)-; -N(C(0)0R)-; -N(C(0) R)· ;-N(S〇2R)-; -CH2O-; -CH2S-; -CH2N(R)-; -CH(NR)-; -CH2N(C(0) R))- ； -CH2N(C(0)0R)- ； -CH2N(S〇2R)- ； -CH(NHR)- ； -CH(NHC(0) R)- ； -CH(NHS02R)- ； -CH(NHC(0)0R)- ； -CH(0C(0)R)- ； -CH(0C(0) NHR) ; -CH=CH- ; -C(=NOR)- ; -C(O)- ; -CH(OR)- ; -C(0)N(R)-; -N(R)C(0)- ； -N(R)S(0)p- ； -0C(0)N(R)- ； -N(R)-C(0)-(CH2)nN(R)-、-N(R)C(0)0-;-N(RHCH2)n+i-C(0)-、-S(0)pN(R)-;-0-(CR2)n+i-C (0)_、-0-(CR2)n+l-〇-、-N(C(0)R)S(0)p-; -N(R)S(0)pN(R)-; -N(R)-C (0)-(CH2)n-0-、-C(0)N(R)C(0)- ; -S(0)pN(R)C(0)- ; -0S(0)pN(R)_ ;-N(R)S(0)p0-; -N(R)S(0)pC(0)·; _S0pN(C(0)R)·; _N(R)SOpN(R)-;-C(0)0- ; -N(R)P(0Rg)0- ; -N(R)P(ORg)· ; -N(R)P(0)(0Rg)0-; -N(R)P(0)(0Rg)-; -N(C(0)R)P(0Rg)O; -N(C(0)R)P(0Rg)-; -N(C(0) R)P(0)(0Rg)0-或·Ν((3(0)ί〇Ρ(ΟΓ^)-; 200304818

   p為1或2 ; R對各存在處係獨立為Η、視情況經取代之烷基、視 情況經取代之芳烷基或視情況經取代之芳基； Rg對各存在處係獨立為Η，或視情況經取代之基團， 選自包括烷基、芳烷基、環烷基及芳基； 或當R與Rg在含磷基團中時，R、Rg、氮原子及磷原 子，一起形成五-或六-員雜環；或 A為NRS〇2，且R、Ra及氮原子一起形成視情況經取代 之五-或六-員雜環，經稠合至環1 ; R2為·Ζ101-Ζ102 ; 為共價键、-(Ci-C6)·、-(Ci_C6)-〇-、-(Ci-C6)-C(0)-、 -(Ci-C6>C(0)0- > -(Ci-C6)-C(0)-NH. > -(Ci-C6)-C(0)-N((Ci-C6))- 或視情況經取代之苯基； z1G2為氫、視情況經取代之烷基、視情況經取代之環 烷基、視情況經取代之飽和或不飽和雜環族基團或視 情況經取代之飽和或不飽和雜雙環基； 該經取代之雜環基或經取代之雜雙環基具有一或多 個取代基，各獨立選自包括羥基、氰基、視情況經取 代之烷氧基、視情況經取代之磺醯胺基、視情況經取 代之脲基、視情況經取代之羧醯胺基；視情況經取代 之胺基、酮基、飽和或不飽和芳族或視情沉經取代之 雜環族基團； 其中雜環族基團包含一或多個氮原子、一或多個氧 原子或其組合，且其中該氮原子係獨立視情況被經取 200304818

   代或未經取代之燒基、經取代或未經取代之芳基或經 取代或未經取代之芳烷基取代；或 R2為式B-E ; B為羥基，或視情況經取代之基團，選自包括環烷基 、氮维燒基、胺基、胺基fe基續酸基、fe氧fe基、燒 氧基、胺基燒談基、貌基錦基、胺基燒基、燒基婦基 羰基及胺基烷羰基； E為視情況經取代之基團，選自包括氮環烷基、氮環 烷基羰基、氮環烷基磺醯基、氮環烷基烷基、雜芳基 、雜芳基羰基、雜芳基磺醯基、雜芳烷基、氮環烷基 羰基胺基、雜芳基羰基胺基及芳基；及 η對各存在處係獨立為0至6之整數。 2.根據申請專利範圍第1項之化合物，其中X為CR1，Υ為 CRq，Q為Ο，且有一個雙鍵在X與Υ之間；或X為CR1，Υ 為N，Q為Ο，且有一個雙键在X與Y之間；或X為CR1， Y為Ο，Q為N，且有一個雙键在Q與嘧啶基環之間。 3 .根據申請專利範圍第2項之化合物，其具有式（II)，

   其中 (II)， 200304818

   Rq係選自包括氫、烷氧烷基、烷基、視情況經取代 〈方燒基、視情況經取代之環烷基、視情沉經取代之 衣k基燒基、視情況經取代之雜芳烷基、視情況經取 代之（雜裱烷基）烷基及_基，其中芳烷基、環烷基、環 ^基燒基、雜芳燒基及（雜環烷基）烷基各視情況獨立被 、一、三、四或五個取代基取代，取代基選自包括 埏氧基、烷氧烷基、烷基、氰基、齒基、齒烷基、羥 基、羥烷基及硝基； A係選自包括-N⑻-C(0)-(CH2)n-N(R)·、-N(R)-、-N⑻C(O)-及-N(R)s(〇)p-; z100係選自包括視情況經取代之芳基與視情沉經取 代之雜芳基； n為〇 ; p為2 ;且R為氫。 根據申請專利範圍第3項之化合物，其中Rq為氫。 5 ·根據申請專利範圍第4項之化合物，其係選自包括 N-[4-(4-胺基呋喃並[2,3_d]嘧啶-5-基）苯基]-甲 基苯基）脲； N-[4-(4_胺基吃喃並[2,3-d]口密症-5-基）苯基]-Ν·-( 3 -甲 基苯基）脲； Ν-[4-(4-胺基吱喃並[2,3-d] 口密症-5-基）苯基]甲 基苯基）脲； Ν-[4-(4-胺基吱喃並[2,3-d]嘧症基）苯基]3 -氯 苯基）脲； 5_[4-(1，3-苯並崎唑-2-基胺基）苯基]呋喃旅[2,3_引嘧 -11 - 200304818

   啶-4 -胺； N-[4-(4-胺基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基]苯甲醯 胺；及 N-[4-(4-胺基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基]苯磺醯 胺。 6 ·根據申請專利範圍第3項之化合物，其中Rq係選自包括 烷基與齒基。 7 .根據申請專利範圍第6項之化合物，其係選自包括 N-[4-(4·胺基-6 -甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基 ]-ϊ^·(2-甲基苯基）脲； Ν-[4-(4-胺基-6-甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基 ]_N’-(4-甲基苯基）脲； N-[4-(4 -胺基-6 -甲基咬喃並 苯甲醯胺； N-[4-(4 -胺基-6 -甲基咬喃並[2,3-d]p密淀-5-基）豕基] 苯續醯胺； Ν-[4-(4·胺基-6 -甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基 ]-Ν^(3·甲基苯基）脲； Ν-[4-(4 -胺基-6 -甲基咬喃並[2,3-d]p密淀-5-基）苯基 ]-N’-(3-氯苯基）脲； N-[4-(4 -胺基-6-甲基咬喃並[2,3-d] p密淀-5-基）苯基 ]-N’-(3-甲氧苯基）脲； N-[4-(4-胺基-6_溴基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基 ]-N’-(3-甲基苯基）脲； 200304818

   N-[4-(4-胺基-6·甲基呋喃並[2,3·d]嘧啶-5-基）苯基 ]-1^’-(3-溴苯基）脲； N_[4-(4-胺基-6 -甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基 ]-Nf-(3-乙基苯基）脲； N-[4-(4-胺基-6-甲基呋喃並[2,3-d]嘧啶-5-基）苯基 ]-Nf-(3,5-二甲基苯基）脲； 1^-[4-(4-胺基-6-甲基呋喃並[2,3-(1]嘧啶-5-基）苯基 ]-N'-(3,5-二氯苯基）脲； JH N-[4-(4 -胺基-6 -甲基咬喃並[2,3-d]p密症-5-基）苯基 ]-N’-[2_氟基-5-(三氟甲基）苯基]脲； 1 一 [4-(4-胺基-6-甲基-呋喃並[2,3_d]嘧啶-5-基）-苯基 ]-3·(4-亂基-苯基）-脈；及 1-[4-(4-胺基-6-甲基-呋喃並[2,3-(1]嘧啶-5-基）-苯基 ]-3_(3·三氟甲基-苯基）-脲。 8 ·根據申請專利範圍第2項之化合物，其具有式（III)，

   其中 Α係選自包括一個键結、-N(R)C(0)-及-N(R)-C(0)- -13- 200304818

   (CH2)n-N(R).； Z1QQ係選自包括-N〇2、胺基、經取代之胺基及視情況 經取代之芳基； R為氫；及η為0。 9 .根據申請專利範圍第8項之化合物，其中 Α為一個键結；且係選自包括-Ν〇2、經取代之胺 基及胺基。

   10. 根據申請專利範圍第9項之化合物，其係選自包括 3-(4-硝基苯基）異哼唑並[5,4-d]嘧啶-4-胺；與 3-(4-胺基苯基）異哼唑並[5,4-d]嘧啶-4-胺。 11. 根據申請專利範圍第8項之化合物，其中 A 係選自包括-N(R)C(0)·與-N(R)-C(〇HCH2)n-N(R)_ ;且 Z1G()為視情況經取代之芳基。 12. 根據申請專利範圍第11項之化合物，其係選自包括

   Ν-[4-(4·胺基異崎唑並[5,4-d]嘧啶-3-基）苯基]-Ν’·（3-甲基苯基）脲； >^-[4-(4-胺基異嘮唑並[5,4-(1]嘧啶-3-基）苯基]以’-(3-乙基苯基）脲； Ν-[4·(4-胺基異嘮唑並[5,4-d]嘧啶-3-基）苯基]-Nf-(3- 氯苯基）脲； 1^-[4-(4-胺基異嘮唑並[5,4-(1]嘧啶_3-基）苯基]苯甲 醯胺； N_[4-(4-胺基異呤唑並[5,4-d]嘧啶-3-基）苯基 ]-NL[3-(三氟甲基）苯基]脲；及 -14- 200304818

   N-[4-(4-胺基異噚唑並[5,4-d]嘧啶-3-基）苯基]-NL[2· 氟基-5-(三氟甲基）苯基]脲。 13. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中X為NR1 ;兩個 R3各為Η ; Y為N ; Q為CR2 ;且有一個雙键在Y與Q之間 〇 14. 根據申請專利範圍第13項之化合物，其中化合物或其藥 學上可接受之鹽係為 N2_{4-[7-胺基-3-(4-六氫吡啶基）-lH-吡唑並[4,3-d]嘧 啶-1-基]-2 -甲氧苯基}-1-甲基哚羧醯胺； >^2-{4_[7-胺基-3-(4-六氫吡啶基）-111-吡唑並[4,3-(1]嘧 淀-1·基]-2 -甲氧苯基}-2 -氣基- 4- (三氣甲基）苯甲SS胺； Nl-[4_(7-胺基-1H-吡唑並[4,3_d]嘧啶-1·基）-2 -甲氧苯 基]-2-氟基-4-(三氟甲基）苯甲醯胺； >11-{4-[7-胺基-3-(4-六氫吡啶基）_111-吡唑並[4,3-(1]嘧 淀-1-基]-2-甲氧苯基}-1-苯橫驢胺， N-{ 4-[7-胺基- 3-(4 -六氫吡啶基）_1H-吡唑並[4,3-d]嘧 啶-1-基]-2-甲氧苯基}胺基甲酸芊酯； 1^_{4-[7-胺基-3-(4-六氫吡啶基）-111-吡唑並[4,3 4]嘧 啶-1-基]-2-甲氧苯基丨-N-苯基脲； 1^2-{4-[7-胺基-3-(1-四氫-211-4-哌喃基-4-六氫吡啶基 )·1Η-吡唑並[4,3-d]嘧啶-1-基]-2-甲氧苯基}-1-甲基 丨嗓幾酸胺； N2-{4-[7-胺基-3-(1-乙基-4 -六氫吡啶基）-1Η-吡唑並 [4,3-〇1]嘧啶_1-基]-2-曱氧苯基}-1-曱基-111-2-41哚羧醯 200304818 胺； Nl-{4_[7-胺基_3-(4-六氫吡啶基）-lH-吡唑並[4,3-d]嘧 淀-1-基]苯基}-l-豕續醒胺， >^2-{4-[7-胺基-3-(4-六氫吡啶基）-111-吡唑並[4,3-(1]嘧 啶-1-基]苯基}-1-甲基-1H-2-W哚羧醯胺；或 1^2-{4-[7-胺基-3-(1，2,3,6-四氫-4-吡啶基）-111-吡唑並 [4,3-(1]嘧啶-1-基]-2-甲氧苯基}-1-甲基-111-2-钊哚羧醯 胺。 15. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中X為CR1 ; R3之 一不為Η ; Y為N，Q為NR2 ;且有一個雙鍵在X與Y之間 〇 16. —種在病患中抑制一或多種蛋白質激酶活性之醫藥組 合物，其包含治療上有效量之根據申請專利範圍第1項 之化合物或其生理學上可接受之鹽、前體藥物或生物 活性新陳代謝產物。 17. 根據申請專利範圍第16項之醫藥組合物，其中該蛋白質 激酶係選自包括 KDR，FGFR-1，PDGFR/3，PDGFRa，IGF-1R， c-Met，Flt-1，Flt_4，TIE-2，TIE-1，Lck, Src，fyn，Lyn，Blk，hck，fgr及 yes o 18. —種在病患中影嚮過高增生性病症之醫藥組合物，其 包含治療上有效量之根據申請專利範圍第1項之化合 物或其生理學上可接受之鹽、前體藥物或生物活性新 陳代謝產物。 19. 一種在病患中影嚮血管生成之醫藥組合物，其包含治 200304818

   療上有效量之根據申請專利範圍第1項之化合物或其 生理學上可接受之鹽、前體藥物或生物活性新陳代謝 產物。 20. 根據申請專利範圍第16項之醫藥組合物，其中蛋白質激 酶為蛋白質絲胺酸/蘇胺酸激酶或蛋白質酪胺酸激酶 〇 21. —種在病患中治療一或多種潰瘍之醫藥組合物，其包 含治療上有效量之根據申請專利範圍第1項之化合物 或其生理學上可接受之鹽、前體藥物或生物活性新陳 代謝產物。 22·根據申請專利範圍第21項之醫藥組合物，其中該一或多 種潰瘍係因細菌或真菌感染所造成；或該一或多種潰 瘍為Mooren潰瘍；或該一或多種潰瘍為潰瘍性結腸炎之 徵候。 23. —種在病患中治療症狀之醫藥組合物，其包含治療上 有效量之根據申請專利範圍第1項之化合物，或其生理 學上可接受之鹽、前體藥物或生物活性新陳代謝產物 ，其中該症狀為眼睛症狀、心與血管症狀、癌症、 Crow-Fukase (POEMS)徵候簇、糖尿病症狀、鐮狀細胞貧血 、慢性發炎、系統性狼瘡、絲球體性腎炎、滑膜炎、 炎性腸疾病、克隆氏病、絲球體性腎炎、風濕性關節 炎、骨關節炎、多發性硬化、移植物排斥、Lyme疾病、 敗血病、vonHippelLindau疾病、類天癌瘡、牛皮癖、柏哲 德氏病、多囊腎臟疾病、纖維變性、結節病、肝硬化

   200304818 、甲狀腺炎、黏性過大徵候簇、Osler-Weber-Rendu疾病、 慢性堵塞肺病、氣喘或灼傷後之水腫、外傷、放射、 中風、缺氧、絕血、卵巢高刺激作用徵候簇、初期搐 搦、月經過多、子宮内膜組織異位形成、肺高血壓、 嬰兒血管瘤，或被單純疱疹、帶狀疱疹、人類免疫不 全病毒、副痘病毒、原生動物感染，或毒漿體病。

   24·根據申請專利範圍第23項之醫藥組合物，其中眼睛症狀 為眼睛或斑點水腫、眼睛新血管疾病、鞏膜炎、放射 狀角膜切開術、葡萄膜炎、玻璃體炎、近視、眼凹陷 、慢性視網膜脫落、雷射後治療併發症、結合膜炎、 Stargardt氏疾病、Eales氏疾病、視網膜病或斑點變性。 25. 根據申請專利範圍第23項之醫藥組合物，其中心與血管 症狀為動脈粥瘤硬化、再狹窄、絕血/再灌注傷害、 血管堵塞或頸動脈阻塞疾病。

   26. 根據申請專利範圍第23項之醫藥組合物，其中癌症為固 態腫瘤、肉瘤、纖維肉瘤、骨瘤、黑色素瘤、視網膜 胚細胞瘤、橫紋肌肉瘤、神經膠質母細胞瘤、神經胚 細胞瘤、畸胎癌、造血官能不足惡性病症、卡波西氏 肉瘤、霍奇金（Hodgkin)氏疾病、淋巴瘤、骨髓細胞瘤、 白血病或惡性水腹。 27.根據申請專利範圍第23項之醫藥組合物，其中糖尿病症 狀為胰島素依賴性糖尿病青光眼、糖尿病患者之視網 膜病或小血管病。 28· —種在病患中降低生育力之醫藥組合物，該醫藥組合 -18- 200304818

   物包含有效量之根據申請專利範圍第1項之化合物或 其生理學上可接受之鹽、前體藥物或生物活性新陳代 謝產物之步騾。 29.根據申請專利範圍第19項之醫藥組合物，其中化合物或 其生理學上可接受之鹽、前體藥物或生物活性新陳代 謝產物，係以有效促進血管生成或脈管發生之量投藥

   30. 根據申請專利範圍第17項之醫藥組合物，其中蛋白質激 酶為TIE-2。 31. 根據申請專利範圍第29項之醫藥組合物，其中式（I)化合 物或其生理學上可接受之鹽、前體藥物或生物活性新 陳代謝產物，係與血管生成前生長因數合併投藥。 32. 根據申請專利範圍第31項之醫藥組合物，其中血管生成 前生長因數係選自包括VEGF，VEGF-B，VEGF_C，VEGF-D， VEGF-E，HGF，FGF-1，FGF-2，其衍生物及抗碘基型抗體。

   33. 根據申請專利範圍第29項之醫藥組合物，其中病患係患 有貧血、絕血、梗塞、移植排斥、傷口、壞疽或壞死 34. 根據申請專利範圍第16項之醫藥組合物，其中蛋白質激 酶活性係涉及T細胞活化作用、B細胞活化作用、肥大 細胞去顆粒化作用、單細胞活化作用、炎性回應之加 強作用或其組合。 35. —種醫藥組合物，其包含根據申請專利範圍第1項之化 合物，及藥學上可接受之載劑或稀釋劑。 -19- 200304818 陸、(一）、本案指定代表圖為：第 圖 (二）、本代表圖之元件代表符號簡單說明： 1

   柒、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

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