SK19495A3

SK19495A3 - Pharmaceutical compositions

Info

Publication number: SK19495A3
Application number: SK194-95A
Authority: SK
Inventors: Mark A D Collins; Maria I Chicarelli-Robinson; Justin S Bryans; Christopher J Latham; Stephen J Brocchini
Original assignee: Xenova Limited British Body Co
Priority date: 1992-08-14
Filing date: 1993-08-16
Publication date: 1995-11-08
Also published as: SK19595A3; GB2284420B; JPH08504176A; RU95108387A; WO1994004512A1; ES2111169T3; DE69316370T2; JPH08504175A; KR950702967A; ZA935968B; DE69316370D1; FI950616A7; WO1994004513A1; EP0672036A1; BR9306904A; TW334427B; IL106696A0; HU9500437D0; US5700804A; ATE162186T1

Description

Oblasť, techniky

Predkladaný vynález sa zaoberá zlúčeninami, ktoré sú použiteľné ako modulátory multiplitnej rezistencie liečiva (MDR), ich prípravou a farmaceutickými a veterinárnymi prípravkami, ktoré ich obsahujú.

Doterajší stav techniky

Rezistencia nádorov voči liečbe s niektorými cytotoxickými činidlami je prekážkou úspechu chemoterapeutickej liečby rakoviny. Nádor si vytvára získanú rezistenciu voči cytotoxickému činidlu použitému pri predchádzajúcej liečbe. Niekedy sa dá pozorovať taktiež vnútorná rezistencia alebo krížová rezistencia voči cytotoxickému činidlu, ktoré nebolo doposiaľ proti nádoru použité a ktoré nesúvisí ani štruktúrne ani mechanizmom účinku s činidlom použitým predtým. Tento fenomén multiplitná rezistencia voči léčivu (MDR). doposiaľ používané k modulovaniu MDR, sa súhrnne nazýva Látky, ktoré boli tzv. modultátory rezistencie voči léčivu (RMA) majú slabý farmakokinetický profil a/alebo sú pri koncentráciách požadovaných pre moduláciu MDR toxické.

Podstata vynálezu

Nedávno derivátov má sa zaoberá bolo pozorované, že vlastnosti modulátorov diketopiperazínovými všeobecný vzorec A:

rad diketopiperazínových

MDR. Predkladaný vynález derivátmi, ktoré majú

(A) kde všetky R₁₄ a R₁₅ sú rovnaké alebo odlišné a môžu nezávisle od seba byť H alebo alkyl C₁-C₆, za predpokladu, že aspoň jeden zo substituentov R₁₄ alebo R₁₅ je alkyl a všetky Rj až R₁₀ sú rovnaké alebo odlišné a môžu nezávisle od seba byť H alebo alkyl C₁-C₆ nesubstituovaný alebo substituovaný jedným alebo niekoľkými halogénovými atómami, alkoxyl Cj-Cg, alkyltio /-0₆, substituovaný fenyl, -NHCOR¹¹, -NHSO2R¹³SO2N(R^{1 2} ) , N(R¹¹R¹

-OCOR¹¹, -CH2OCOR¹¹, -CH 2SOR¹¹, halogén ,

-kyáno, hydroxyl,

-SO 2R¹³ nitro,

-CH₂S(O)

-CH₂NHCO(CH₂)_nco ₂r³¹,

-O(CH₂) -CH 2NHC0R¹P 1 3 ), kde

-CH ₂COOH, -CON(R^{1 2} ) , rN(R^L1R¹²), \ -CH2NHCOOR¹³je

-NfR¹¹JCOR¹²,

-CH ₂0H, poprípade

-COOR¹ — SOR¹

-O(CH₂)_nCO ₂R³

-CH2SR¹ alebo

-NHCOCF ₃

-NHCO(CH₂) _nCO2R¹¹, -NHCO(CH2) nOCOR¹¹ a -NHCO(CH2) „OR¹¹ t pričom n je 0 alebo celé číslo 1 až 6, každé R¹¹ a R¹² sú nezávisle od seba H alebo alkyl alebo pokiaľ sú R¹¹ a R¹²pripojené na ten istý atóm dusíka môžu poprípade vytvárať nasýtený päť-alebo šesťčlenný heterocyklický kruh; a R¹³ je alkyl Cj-C₆; alebo ktorákoľvek skupina R_x a R_z, R₂ a R₃, R₃ a R₄, R₄ a R_s, R_s a R₇, R₇ a R_a, R₈ a R_g, R₉ a R₁₀ vytvára s atómom uhlíka, na ktorý je naviazaná, benzénový kruh, poprípade substituovaný. Predkladaný vynález sa zaoberá taktiež farmaceutický prijateľnými sólami, poprípade esterami uvedených látok, a ich využitím pri príprave modulátorov multiplitnej rezistencie voči liečivu.

Číslice 1 až 10 označujú polohy v kruhu fenylovej skupiny vzorca A. Písmená a a b sa vzťahujú k samým fenylovým kruhom.

Pokiaľ ľubovoľné dve susediace skupiny R_x až R₁₀vytvárajú s atómom uhlíka na ktorý sú naviavazané, benzénový kruh, môže byť tento kruh nesubstituovaný alebo substituovaný v ktorejkoľvek polohe označenej R_x až R₁₀. Benzénový kruh poprípade vytvára spoločne s kruhmi a a b štruktúru substituovaného naftalénu.

Pokiaľ je kruh a alebo b substituovaný fenyl, môže byt benzénové jadro substituované jedným alebo viacerými substituentami v ktoréjkoľvek z polôh orto, metá a para, napríklad jedným, dvomi alebo tromi substituentami, ktoré môžu byt rovnaké alebo rozdielne, a nezávisle od seba vybrané z vyššie uvedených možností špecifikovaných pre skupiny R_x až - R₁₀, okrem vodíka.

Alkylová skupina môže byt lineárna alebo rozvetvená, * alebo môže obsahovať cykloalkylovú skupinu. Najčastejšia alkylovú skupina C_x-C₆ je alkylová skupina C₁-C₄, napr. metyl, ¹ etyl, propyl, i-propyl, n-butyl, sec-butyl, terc-butyl alebo cyklopropylmetyl. Halogén je napr. fluór, chlór, bróm alebo jód. Halogén-substituovaná alkylová skupina C_x-C₆ môže byt substituována jedným až tromi halogénovými atómami, napr. trifluórmetyl.

Najčastejšou alkoxylovou skupinou C_x-C₆ je alkoxylová * skupina C_X-C₄, napr. metoxy, etoxy, propoxy, i-propoxy, n-butoxy, sec-butoxy, terc-butoxy. Najčastejšou alkyltio * skupinou Cy-Cg je alkyltio skupina C_x-C₄, napr. metyltio, etyltio, propyltio, i-propyltio, n-butyltio, sec-butyltio_zterc-butyltio.

Pokiaľ R^ixa R¹² sú spolu s atómom dusíka, na ktorý sú pripojené, súčasťou heterocyklu, ide napr. o N,N-tetrametylénovú skupinu.

V zlúčeninách, ktoré majú všeobecný vzorec A môže pri laboratórnej teplote dochádzať k voľnej rotácii okolo jednoduchých väzieb pripojújicich kruhy a a b k dvojitým väzbám v polohách 3 a 6 2,5-piperazíndionového kruhu. Polohy a 6 a polohy 3 a 5 v obidvoch kruhoch a i b je možné preto považovať za rovnocenné. Z uvedeného vyplýva, že nasledujúce dvojice substituentov je možno považovať za zameniteľné: R_xa R₅; R₂ a R₄; R₆ a R₁₀, R ₇ a R_g.

Jedna ze skupín R₁₄ a R₁₅ je alkyl C₁-C₆ a druhá vodík alebo alkyl Cý-Cg. Pokiaľ sú obidve skupiny R₁₄ a R₁₅ alkyl C;-C₆, môžu byť tieto alkyly rovnaké alebo rozdielne. Výhodné alkylové skupiny pre R₁₄ a R₁₅ sú metyl, etyl a cyklopropylmetyl. Napríklad R₁₄ je alkyl C₁-C₆ a R_1S je H alebo alkyl CyC^ alebo R₁₅ je alkyl CyCg a R₁₄ je H alebo alkyl C₁-C₆. Jednou z možných kombinácií je metyl, etyl a cyklopropylmetyl pre R₁₄ a H, metyl, etyl a cyklopropylmetyl pre R₁₅. Druhou z možných kombinácií je metyl, etyl a cyklopropylmetyl pre R₁₅ a H, metyl, etyl a cyklopropylmetyl pre R₁₄.

Je výhodné, pokiaľ je jeden z kruhov a a b nesubstituovaný alebo substituovaný iba jednou skupinou a druhý kruh nesubstituovaný, alebo substituovaný v jednej alebo viacerých polohách, t.j. od dvoch do šestich. Mono-substituovaný kruh môže mať substituent v ktorejkoľvek polohe 2 až 6, napríklad v polohe 3 alebo 4, najmä v polohe 4. Napríklad pokiaľ je mono-substituovaný kruh b, je jedna zo skupín R₆ až R₁₀ iná ako H, výhodne skupina R₇ alebo R₈, výhodnejšie R₈. Pokiaľ je mono-substituovaný kruh a, je jedna zo skupín R₃ až R₅ iná ako H, výhodne skupina R₂ alebo R₃, výhodnejšie R₃. Pokiaľ je jeden z kruhov a alebo b monosubstituovaný, skupiny R₃ až R₅, respektíve R₆ až R₁₀ sú výhodne halogén (napr. fluór), alkoxy (napr. metoxy) alebo acetamido (-NHAc, kde Ac znamená acetyl).

Pokiaľ je jeden z kruhov a alebo b nesubstituovaný, alebo mono-substituovaný ako je uvedené v predchádzajúcom odstavci, môže druhý kruh mať akúkoľvek sústavu substituentov. Napríklad môže tento druhý kruh zostať nesubstituovaný, alebo mať jeden až tri substituenty v ktorýchkolvek polohách 2 až 6.

Tento kruh môže napríklad mať jeden substituent v ktorejkoľvek polohe 2 až 6. Poprípade môže mať dva substituenty, v polohách 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6- alebo 3,5-, alebo tri substituenty v polohách 2,3,4-, 2,3,5-, 2,3,6-, alebo 3,4,5-.

Teda pre kruh a, v prípade že je mono-substituovaný, sú štyri zo skupín R₃ až R₅ H a jedna je iná. V prípade, že tento kruh a je disubstituovaný, sú tri zo skupín R₃ až R₅vodík a dve sú iné. Napríklad iné ako H sú R _x a R₂, alebo R_xa R₃, alebo R_x a R₄, alebo R_ľ a R₅, alebo R₂ a R₃, alebo R₂a R₄ a v každom prípade sú zostávajúce tri skupiny R_L až R₅ H. V prípade, že kruh a je trisubstituovaný, sú dve zo skupín R₃ až R ₅ Ha tri sú iné. Napríklad iné ako H sú R_u R₂ a R₃, alebo R_lz R₂ a R₄, alebo R_lz R₂ a R₅, alebo R₂, R₃ a R₄, a v každom prípade sú zostávajúce dve skupiny R_x až R₅ H.

Pokiaľ je uvedeným kruhom kruh b, teda, v prípade že je mono-substituovaný, sú štyri zo skupín R₆ ažR₁₀Ha jedna je iná. V prípade, že tento kruh b je disubstituovaný, sú tri zo skupín R₆ až R₁₀ H a dve sú iné. Napríklad iné ako H sú R₆a R₇, alebo R₆ a R₈, alebo R₆ a R_g, alebo R₆ a R₁₀, alebo R₇ a R_a, alebo R₇ a R_g a v každom prípade sú zbývající tri skupiny R₆ až R₁₀ H. V prípade, že kruh b je trisubstituovaný, sú dve zo skupín R₆ až R₁₀ H a tri sú iné. Napríklad iné ako H sú R₆, R₇ a R_s, alebo R₆, R₇ a R₉, alebo R₆, R₇ a R₁₀, alebo R₇, R₈ a R_g, a v každém prípade sú zostávajúce dve skupiny R₆ až R ₃₀ H.

Alternatívne, akékoľvek dva susediace substituenty v spomenutom druhom kruhu, môžu spolu s uhlíkovými atómami, na ktoré sú naviazané tvoriť kompletný ďalší benzénový kruh poprípade substituovaný, čo veie ku vniku ev. substituovanej naftylovej skupiny. V prípade kruhu a tvoria napríklad R₃a R₂, alebo R₂ a R₃ spolu s atómami 2a 3 alebo 3a 4, ev. substituovaný benzénový kruh, ktorý zase tvorí s kruhom a naftylovú skupinu, nesubstituovanú alebo substituovanú jednou alebo viacerými skupinami bližšie špecifikovanými vyššie pre skupiny R₃ až R₁₀. V prípade kruhu b tvoria napríklad R_s a R₇, alebo R₇ a R₈ spolu s atómami 2 a 3 alebo 3a 4, ev. substituovaný benzénový kruh, ktorý zase tvorí s kruhom b naftylovú skupinu, nesubstituovanú alebo substituovanú jednou alebo viacerými skupinami bližšie špecifikovanými vyššie pre skupiny R₁ až R₁₀. Najčastejšie je naftylová skupina v obidvoch prípadoch nesubstituovaná, alebo mono-substituovaná v polohách 1, 2, 3 alebo 4, výhodne v polohe 4. Napríklad R₃ a R₂ spolu s kruhom a, alebo R₆ a R₇spolu s kruhom b, tvoria 4-dimetylamino-l-naftylovú skupinu.

V rade výhodných zlúčenín, ktoré majú všeobecný vzorec A sú všetky skupiny R₆ až R₁₀ H. V inom výhodnom rade zlúčenín je jedna zo skupín R₆ až R₁₀ hydroxy, alkoxy, NHCOR¹¹, -CO2R¹¹, -N(R^1XR¹²), -0(CH2)nN(R¹¹R¹²), -SO2R¹³, -CON(R^{X X}R^{X 2} ) , N0₂, -SO₂N(R^{1 2}) , -SOR¹³, N/R^COR¹² alebo halogén a ostatné štyri zo skupín R₆ až R₁₀ sú H. Vhodnou alkoxylovou skupinou je napríklad OMe alebo OBuⁿ. Vhodnou skupinou NHCOR¹¹ je napríklad -NHAc. Vhodnou skupinou -CO2R^1X je napríklad -COOH alebo -COOMe. Vhodnou skupinou -N(R^X1R¹²) je napríklad NMe 2 alebo N,N-tetrametylén. Vhodnou skupinou -CON(R¹¹R¹²) je napríklad -CONH2. Vhodnou skupinou -SO2R¹³ je napríklad -SO2Me, skupinou -SO₂N(R¹¹R¹²) je napríklad -SO2NMe2. Vhodnou skupinou -SOR¹³ je napríklad -SOMe, skupinou -N(R¹¹)COR¹² je napríklad -NMeCOBu*¹. Typickým halogénom je F alebo Cl. Výhodnou skupinou R8 je alkoxy, najmä OMe, OBu¹¹ ; NHCOR¹¹, najmä NHAc; -CO^jR¹¹, najmä -CO 2H alebo -CO2Me; -CON(R¹¹R¹²),najmä -CONH2; NO ₂ ; N(R^1]-R¹²), najmä NMe 2 alebo N, N-tetrametylén; -SOR¹³, najmä -SOMe; -SO2N(R^XXR^X2), najmä -SO₂NMe₂; alebo halogén, najmä F alebo Cl; a ostatné substituenty R₆,R₇,R₉ a R₁₀ sú H.

Vo vyššie uvedenom rade zlúčenín znamenajú R_T až R₅ H, alebo jedna alebo dve zo skupín R_x až R₅ sú iné ako H a ostatné sú H. Napríklad iné ako H sú skupiny R_lfR₂ a R₃. Alternatívne, iné ako H sú R₃ a R₃, alebo R₂ a R₃. Zostávajúce skupiny R> až R₅ odlišné od H, sú výhodne alkoxy, napr. OMe alebo OBu, halogén napr. Cl alebo F, hydroxy, -N(R¹¹R¹²), -COOR¹¹, -CH2SCOR¹³, -CH2SR¹¹, -NHCOR¹¹, -0(CH2)_nN(R¹¹R¹²), -O(CH2)nCOOR^x1, -CH2NHCO(CH₂)_nCOOR¹¹, -NHCOCH₂COOR¹¹,

-NHCOCH2OCOR¹³, -NHCOCH2COOR¹³ a CF₃. Tak isto výhodné je, pokiaľ skupiny R_x a R₂, R₂ a R₃, R₃aR₄, R₄a R₅ vytvárajú s atómom uhlíka na ktorý sú naviazané, benzénový kruh.

Mimoriadne výhodné sú tie zlúčeniny, v ktorých všetky skupiny R₆, R₇, R_g a R₁₀ H a R₈ sú niektorou zo skupín H, OMe, -NHAc, -COOH, -COOMe, -CONH₂, NO₂, -NMe₂, N,N-tetrametylén,

-SO₂Me, -SOMe, a -SO₂NMe₂ a každá zo skupín R_x až R₅ sú ako bolo definované vyššie. V týchto zlúčeninách sú R_x až R₅nezávisle od seba H, halogén, alkoxy C^Cg, nitro, -CH₂SCOR¹³, -CH2SR¹¹, -COOR¹¹, -OCOR¹³, CF3, -0(CH2)nNÍR¹¹R¹²), -O(CH2)„COOR¹¹, -CH2NHCO(CH2)„COOR¹¹, -NHCO(CH2)„OR¹¹,

N(R^1J-R¹²), -NHCO(CH2)„OCOR¹¹, -NHCO(CH2)COOR¹¹ a -CH2NHCOOR¹³alebo skupiny R1aR₂, R₂ a R₃, R₃ a R₄, R₄ a R₅ vytvárajú s atómom uhlíka na ktorý sú naviazané, benzénový kruh.

Výhodnejšie je, pokiaľ skupiny R_ľ a R₂ sú nezávisle od seba H, nitro alebo halogén, R₃ je H, hydroxy, -O(CH₂)„NÍR¹¹R¹²), -OCOR¹³, -O(CH2)„COOR¹¹, -CH2NHCO(CH₂)„COOR¹¹, alkoxy C_rC₆,

-NHCO(CH₂)„OR¹¹, -NHCO(CH₂)„OCOR¹¹, -N(R^1]R¹²), -CHjNHCOOR¹³,

-CH2SR¹¹, NHCOR¹¹; R₄ je H, halogén, alkoxy C^Cj, -CH₂SCOR¹³,

-CH^R¹¹, -COOR¹¹; a R₅ je H, skupiny R_x a R₂, R₂ a R₃, R₃ a R₄, uhlíka na ktorý sú naviazané, nitro alebo halogén; alebo

R₄ a R₅ vytvárajú s atómom poprípade substituovaný benzénový kruh.

V jednom prevedení je R_s NHAc, skupiny R₆, R₇, R_g a R₁₀ sú H alebo halogén, napr. Cl alebo F; R₂ je H, R₃ je halogén, C1 alebo F, alkoxy C_x-C₆ napr. OMe, -NÍR^R¹²), napr. NMe 2 alebo -NHCOOR¹³ napr. -NHCOOBu¹¹; R4 je H a R₅ je halogén, napr. F, Cl, Br alebo CF₃.

V druhom prevedení je R₈ OMe, skupiny R₆, R₇, R_g a R₁₀ sú H; R₃ je H, nitro alebo halogén, napr. Cl; R₂ je H; R₃ je H, hydroxy, -OCOR¹³ napr. OAc, -NHCO(CH2)„OCOR¹¹ napr. -NHCOCH2OAc alebo -NHCO(CH₂)„OR¹¹ napr. -NHCOCH₂OH; R₄ je H a R₅ je H alebo halogén napr. F alebo Cl; alebo skupiny R₁a R₂, R₂ a R₃, R₃ a R₄, R₄ a R_s vytvárajú s atómom uhlíka na ktorý sú naviazané, benzénový kruh.

V treťom prevedení sú skupiny R_x, R₆, R₇, R₈, R_g a R₁₀ H;

R 2 je H, -CH₂SCOR¹³ napr. -CH2SAc alebo -CHjSR¹¹ napr. -CH2SH; R₃ je -CH2SR¹¹ napr. -CH2SMe, -CH2SCOR¹³ napr. -CH2SAc, -NHCO(CH₂)„COOR¹¹ napr. -NHCO(CH2)3COOMe, -0(CH2)„COOR¹¹ napr. -0(CH2)₄COOH, -O(CH₂) „N(R¹¹R¹²) napr. -0(CH2)3NMe2, alebo -N(R¹¹R¹²) napr. NMe 2; a obidve skupiny R₄ a R₅ sú H alebo vytvárajú s atómom uhlíka na ktorý sú naviazané, benzénový kruh.

V ďalšom prevedení predkladaného vynálezu je zlúčenina, ktorá má všeobecný vzorec A bližšie špecifikovaná všeobecným vzorcom Aa:

(Aa) kde R₁₄ a R₁₅ môžu byt rovnaké alebo rozdielne, nezávisle od seba H alebo CH₃, pričom aspoň jedna skupina by mala byt CH₃.

Niektoré diketopiperazíny majú využitie ako činidlá. Yokoi a kol. v J. Antibiotics vol XLI 494-501 (1988) uvádza štúdium vzťahov medzi a biologickou neihumicinu, Micromonospora

XLIII No. 8. pp 1018-1020 zlúčeniny, označené mediátory zvyšujúce cytotoxicitu vincristinu.

Všeobecný vzorec A zahrňuje nové diketopiperazínové zlúčeniny. Predkladaný vynález teda prináša diketopiperazínové aktivitou pre zlúčeniny neihuensis.

bioaktívne

No. 4 .

PP štruktúrou príbuzných rad diketopiperazínov mikroorgani zmov J. Antibiotics vol izolovanej z

Kamei a kol. v uvádza, že dve piperafizín A a B, diketopiperazínové sú použiteľné ako zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec A, ako je definované vyššie, a farmaceutický prijateľné soli alebo estery uvedených zlúčenín; s výnimkou zlúčenín kde (i) všetky skupiny R_x až R₁₀ sú H; a (ii) obidve skupiny R₁₄ a R₁₅ sú Me, R₈ je OMe a ostatné zo skupín R₃ až R₁₀ sú H.

Nasledujú konkrétne príklady zlúčenín predkladaného vynálezu. Číslovanie zlúčenínn sa vzťahuje k ďalšiemu textu. ( 3Z,6Z)-3-benzylidén-6-(4-metoxybenzylidén)-1-mety1-2,5-piperazindion (zlúčenina 1);

( 3 Z , 6Z)-6-benzylidén-3-(4-metoxybenzylidén)-1-mety1-2,5-piperazindion (zlúčenina 121);

(3Ζ , 6Ζ)-3 ,6-dibenzylidén-l-metyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 122);

metylester 4-(3Z,6Z)-3-benzylidén-l-metyl-2,5-dioxopiperazín-6-ylidén)metylbenzoovej kyseliny, (zlúčenina 124 ) ;

4- ( 3Z,6Z)-3-benzylidén-l-mety1-2,5-dioxopiperazín-6-yliden)metylbenzoová kyselina, (zlúčenina 125);

( 3Z , 6Z)-3-(3-hydroxymetylbenzylidén-6-benzylidén-l,4-dimetyl-

2,5-piperazindion (zlúčenina 126);

( 3Z,6Z)-3-benzylidén-l-metyl-6-(4-nitrobenzylidén)-

2.5- piperazindion (zlúčenina 127);

N, N-tetrametylén-4-((3Z,6Z)-3-benzylidén-l-metyl-

2.5- dioxopiperazín-6-ylidén)metylbenzamid (zlúčenina 128) ;

( 3 Z , 6Z)-6-(4-aminobenzylidén)-3-benzylidén-l-metyl-

2.5- piperazindion (zlúčenina 129);

- ( ( 3Z,6Z)-3-benzylidén-l-metyl-2,5-dioxopiperazín-6-ylidén)metylbenzamid (zlúčenina 130);

( 3Z , 6Z ) - 3-(4-acetamidobenzylidén)-6-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 131);

(3Z,6Z)-3-(2,6-dichlórbenzylidén)-6-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 132);

( 3Z , 6Z)-6-(4-metoxybenzylidén)-1-mety1-3-(2-nitrobenzylidén)-2,5-piperazindion (zlúčenina 133);

(3Z,6Z)-6-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-3-(4-N-metylacetamidobenzylidén)-2,5-piperazindion (zlúčenina 134);

(3Z,6Z)-6-(2,6-dichlórbenzylidén)-3-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 135);

( 3Z , 6Z)-3-(4-metoxybenzylidén)-1-mety1-6-(2-nitrobenzylidén)-2,5-piperazindion (zlúčenina 136);

( 3Z , 6Z)-6-(4-acetamidobenzylidén)-3-(4-metoxybenzylidén)-1-metyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 137);

(3Z , 6Z)-3-(4-(3-N,N-dimetylaminopropoxy)benzylidén)-6-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-2,5-piperazindion hydrochlorid (zlúčenina 138);

( 3 Z , 6Z)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-3-(4-trifluórmetylbenzylidén)10

-2,5-piperazindion (zlúčenina 139);

( 3Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-3-(1-naftylmetylén)-2,5-piperazindion (zlúčenina 140);

( 3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(4-dimetylaminobenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 141);

( 3 Z,6Z)-6-benzylidén-3-(2-metoxybenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 142);

( 3Z,6Z)-3-(4-aminobenzylidén)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 143);

( 3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(2-fluorobenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 144);

( 3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(4-fluorobenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 145);

( 3 Z,6Z)-6-benzylidén-3-(2,4-difluorobenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 146);

( 3Z,6Z)-3-(4-acetoxymetylbenzylidén)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-2, 5-piperazindion (zlúčenina 147);

( 3Z,6Z)-3-(3-acetoxymetylbenzylidén)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 148);

( 3 Z,6Z)-6-benzylidén-3-(4-etoxybenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 149);

( 3Z,6Z)-3,6-dibenzylidén-l,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 150);

(3 Z,6Z)-6-benzylidén-3-(2,6-dichlórbenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 151);

( 3Z,6Z)-6-(4-aminobenzylidén)-3-(4-metoxybenzylidén)-1-metyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 152);

( 3Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-3-(4-N-metylacetamidobenzylidén)-2,5-piperazindion (zlúčenina 153);

(3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(3,4-dichlórbenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 154);

(3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(3-chlórbenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 155);

( 3 Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-3-(4-metylsulf inylbenzylidén ) -2,5-piperazindion (zlúčenina 156);

N,N-dimety1-4-((3Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-2,511 dioxopiperazín-3-ylidén)metylbenzénsulfonamid (zlúčenina 157 ) ;

(3 Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-3-(2-N-metyltrimetylacetamidobenzylidén)-2,5-piperazindion (zlúčenina 158);

(3Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-3-(4-fenylbenzylidén)-2,5-piperazindion (zlúčenina 159);

metylester 4-((3Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-2,5-dioxo-piperazín-3-ylidén)metylbenzoovej kyseliny (zlúčenina 160);

(3Z,6Z)-6-benzylidén-3- (4-brómbenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 161);

(3Z,6Z)-3-(2,4-difluórbenzylidén)-6-(4-metoxybenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 162);

( 3Z,6Z)-3-(4-brómbenzylidén)-6-(4-metoxybenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 163);

(3 Z,6Z)-3-(4-fluórbenzylidén)-6-(4-metoxybenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 164);

(3Z,6Z)-3-(2,6-dichlórbenzylidén)-1,4-dimetyl-6-(2-nitrobenzylidén)-2,5-piperazindion (zlúčenina 165);

(3Z,6Z)-6-benzylidén-l-cyklopropylmetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindion (zlúčenina 166);

(3Z,6Z)-3-benzylidén-l-cyklopropylmetyl-6-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindion (zlúčenina 167);

(3Z,6Z)-6-benzylidén-l-cyklopropylmetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-4-metyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 168);

(3Z,6Z)-3,6-dibenzylidén-l-etyl-4-metyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 169);

( 3Z,6Z)-3-benzylidén-l-cyklopropylmetyl-6-(4-metoxybenzylidén) -4-metyl-2,5-piperazindion (zlúčenina 170);

Zlúčeniny so všeobecným vzorcom A, známe i nové, sa dajú pripraviť podlá postupu, ktorý zahrňuje nasledujúce kroky:

(i) kondenzácia zlúčeniny so všeobecným vzorcom I

kde R₆ až R₁₀ a R₁₅ majú vyššie uvedený význam a sú poprípade chránené, so zlúčeninou so všobecným vzorcom II:

€II>

kde R i až R₅ majú vyššie uvedený význam a sú poprípade chránené, v prítomnosti zásady a organického rozpúšťadla, smerujúce ku vzniku zlúčeniny so všeobecným vzorcom A, v ktorom R₁₄ je H; alebo (ii) kondenzácia zlúčeniny so všeobecným vzorcom ľ:

(ľ) kde R₁až R₅ a R₁₄ majú vyššie uvedený význam a sú poprípade chránené, so zlúčeninou, ktorá má všeobecný vzorec III:

(III) význam a sú poprípade chránené, v prítomnosti zásady a organického rozpúšťadla, smerujúce ku vzniku zlúčeniny so všeobecným vzorcom A, v ktorom R_x5 je H; alebo prevedenie zlúčenín so všeobecným vzorcom A, pripravených postupon (i) alebo (ii) a v ktorých R₁₄ resp. R₁₅ predstavujú

H, na odpovedajúce zlúčeniny so všeobecným vzorcom A,v ktorých R₁₄ resp. R₁₅ predstavujú alkylovú skupinu C^C^, reakciou s alkylačným činidlom a/alebo, pokiaľ je to žiaduce, odstránenie poprípade prítomných chrániacich skupín a/alebo, pokiaľ je to žiaduce, prevedenie jednej zlúčeniny so všeobecným vzorcom A na inú zlúčeninu so všeobecným vzorcom A a/alebo, pokiaľ je to žiaduce prevedenie zlúčeniny so všeobecným vzorcom A na jej farmaceutický prijateľnú soľ alebo ester a/alebo, pokiaľ je to žiaduce, prevedenie soli alebo esteru na voľnú zlúčeninu a/alebo, pokiaľ je to žiaduce, separácia zmesi izomérov zlúčenín so všeobecným vzorcom A na jednotlivé izoméry.

Zlúčeninu, ktorá má všeoobecný vzorec A, pripravenú priamou kondenzáciou I a II alebo 1' a III, je možno modifikovať, pokiaľ je to žiaduce, prevedením jednej alebo niekoľkých zo skupín R_x až R₁₀ na iné skupiny R₄ až R₁₀. Tieto prípadné zmeny sa dajú uskutočniť podľa známych postupov. Napríklad zlúčeninu, ktorá má všeobecný vzorec A v ktorom R_ľaž R₁₀ sú esterové skupiny sa dá premeniť na zlúčeninu, ktorá má všeobecný vzorec A v ktorom odpovedajúce substituenty sú voľné -COOH skupiny, kyslou alebo alkalickou hydrolýzou pri vhodnej teplote, napr. laboratórna teplota až 100 °C.

Zlúčeninu,ktorá má všeobecný vzorec A v ktorom jedna alebo niekoľko zo skupín R₁ až R_lo sú voľné -COOH skupiny, sa dá premeniť na zlúčeninu, ktorá má všeobecný vzorec A v ktorom odpovedajúce substituenty sú esterifikované, napr. reakciou karboxylovej kyseliny s vhodným alkanolom Ο_χ-Ο₆ v prítomnosti

I, 3-dicyklohexylkarbodiimidu v inertnom rozpúšťadle.

Zlúčeninu, ktorá má všeobecný vzorec A v ktorom jedna alebo niekoľko zo skupín R₄ až R_lo sú voľné -COOH skupiny, sa dá premeniť na zlúčeninu, ktorá má všeobecný vzorec A v ktorom odpovedajúce substituenty sú -CON(R¹¹R¹²), v ktorých R¹¹a R¹² majú vyššie uvedený význam, napr. reakciou s amoniakom alebo amínom v prítomnosti 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu v inertnom rozpúšťadle.

Zlúčeninu, ktorá má všeobecný vzorec A v ktorom jedna alebo niekoľko zo skupín R_x až R_L0 sú voľné -COOH skupiny, sa dá premeniť na zlúčeninu, ktorá má všeobecný vzorec A v ktorom odpovedajúce substituenty sú CH ₂0H redukciou, napr. účinkom boranu v inertnom rozpúšťadle.

Zlúčeninu, ktorá má všeobecný vzorec A v ktorom jedna alebo niekoľko zo skupín R_x až R_lo sú nitroskupiny, sa dá premeniť na zlúčeninu, ktorá má všeobecný vzorec A v ktorom odpovedajúce substituenty sú aminoskupiny redukciou za standartných podmienok, napr. katalytickou hydrogenáciou.

Ochrana skupín R_ľ až R₁₀ ktorejkoľvek zlúčeniny, ktorá má všeobecný vzorec I, ľ, II a III sa dá zaradiť pred krokom (i) alebo (ii), ak sú tieto skupiny R_x až R₁₀ v podmienkach kondenzácie nestabilné alebo s kondenzačnou reakciou nekompatibilné, napr. -COOH, CH₂0H alebo amino. Na záver syntézy je nutné chrániace skupiny odstrániť. Na ochranu R_x až ktorékoľvek uskutočniť v hydrid sodný, cézny, octan trietylamín, bežné chrániace skupiny postupmi odštepiť.

¹ a III sa dá výhodne napr. t-butoxid draselný, sodný, uhličitan fluorid draselný na hliníku alebo rozpúšťadla, napr. dimetylformamid, štandartnými

II alebo I

R₁₀ sa dajú použiť a nasledovne je známymi

Kondenzáciu I a prítomnosti zásady, uhličitan draselný, uhličitan sodný, fluorid draselný v prostredí alebo v prípade t-butoxide v t-butanole, alebo v zmesi t-butanolu a dimetylformamidu. Reakčná teplota sa najčastejšie pohybuje medzi O °C a teplotou varu rozpúšťadla.

Alkylácia zlúčenín, ktoré majú všeobecný vzorec A, kde R₁₄ resp. R₁₅ predstavujú H, sa dá uskutočniť príslušnými bežnými alkylačnými činidlami ako sú alkylhalogenidy, napríklad alkyljodid alebo dialkylsulfáty v prítomnosti zásady v organickom rozpúšťadle. Ako zásada sa dá použiť napríklad hydrid sodný, uhličitan sodný alebo uhličitan draselný.

Vhodným rozpúšťadlom je potom DMF. Inou možnou zásadou je napríklad vodný hydroxid sodný, ako rozpúšťadlá je možno použiť napr. dioxan, THF alebo DMF.

Zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec I sa dajú pripraviť reakciou 1,4-di-acetyl-2,5-piperazindionu so zlúčeninou, ktorá má všeobecný vzorec III, ako bola definovaná vyššie, v prítomnosti zásady v organickom rozpúšťadle. Produktom reakcie je zlúčenina, ktorá má všeobecný vzorec I, kde R₁₅ je H; a, pokiaľ je to žiaduce, alkyláciou produktu, ktorý má všeobecný vzorec I za vzniku zlúčeniny, ktorá má všeobecný vzorec I v ktorom R₁₅ je alkylová skupina C₁-C₆. Analogicky sa dajú pripraviť zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec ľ, reakciou 1,4-diacetyl-2,5-piperazindionu so zlúčeninou, ktorá má všeobecný vzorec II, ako bola definovaná vyššie, v prítomnosti zásady v organickom rozpúšťadle. Produktom reakcie je zlúčenina, ktorá má všeobecný vzorec I, kde R₁₄ je H; a, pokiaľ je to žiaduce, alkyláciou produktu, ktorý má všeobecný vzorec ľ za vzniku zlúčeniny, ktorá má všeobecný vzorec ľ,v ktorom R₁₄ je alkylová skupina Cj-Cj.

Pokiaľ je to nevyhnutné, je možno produkt so všeobecným vzorcom I resp. ľ separovať od ostatných reakčných produktov chromatograf icky.

Reakcia 1,4-diacetyl-2,5-piperazindionu so zlúčeninou, ktorá má všeobecný vzorec III resp. II je výhodné urobiť v podmienkach uvedených pre kondenzáciu látok I a II, alebo 1' a III.

Alkyláciu zlúčeniny, ktorá má všeobecný vzorec I resp. I', v ktorých R₁₄, resp. R₁₅ je H je výhodné uskutočniť rovnakými alkylačnými činidlami a v rovnakých podmienkach, ako bolo uvedené pre alkyláciu zlúčeniny, ktorá má všeobecný vzorec A, kde R₁₄ je H. Alkylácia zlúčeniny, ktorá má všeobecný vzorec I, kde R₁₅ je H, vedie ku zmesi produktov obsahujúcej zlúčeninu so všeobecným vzorcom I, kde R₁₅ je alkylová skupina Cy-Cg a izomér, ktorý má všeobecný vzorec IV, kde R₁₅ je alkylová skupina ύ_χ-ύ₆:

(IV)

Alkylácia zlúčeniny, ktorá má všeobecný vzorec ľ, kde R₁₄ je H, vedie ku zmesi produktov obsahujúcej zlúčeninu, ktorá má všeobecný vzorec 1' kde R₁₄ je alkylová skupina C₁-C₆ a izomér so všeobecným vzorcom IV, kde R₁₄ je alkylová skupina 0_χ-0₆:

Zmes zlúčenín I a IV, resp. 1' a 1', v ktorých R₁₄ resp. R₁₅sú iné ako H, sa dajú ľahko chromatograficky rozdeliť, napr. na silikagéle. Vhodnými elučnými činidlami sú octan etylnatý a hexán alebo metanol a dichlórmetán.

Substituované banzaldehydy, ktoré majú všeobecný vzorec

II a III sú známe, alebo je sa dajú pripraviť bežnými spôsobmi z ľahko dostupných východiskových látok. 1,4-diacetyl-2,

5-piperazindion, východisková látka pre prípravu zlúčenín, ktoré majú všeobecný vzorec I, je možno pripraviť reakciou

2,5-piperazindionu (glycín anhydrid) s acetylačným činidlom. Acetyláciu je možno uskutočniť bežným acetylačným činidlom, napr. anhydridom kyseliny octovej, varom pod spätným chladičom, alebo alternatívne pri teplote nižšej v prítomnosti

4-dimetylaminopyridínu.

Zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec I, kde R₁₅ je H sa dajú taktiež pripraviť mikrovlnovým ožiarením zmesi 1,

4-diacetyl-2,5-piperazindionu, zlúčeniny so všeobeným vzorcom

III a fluoridu draselného na hliníku ako zásady, v neprítomnosti rozpúšťadla.

Zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec I, kde R_1S je H sa dajú alternatívne pripraviť priamo reakciou

2,5-piperazindionu (glycín anhydrid) so zmesou obsahujúcou zlúčeninu, ktorá má všeobecný vzorec III, octan sodný a anhydrid kyseliny octovej pri zvýšenej teplote, napr. varom pod spätným chladičom.

Zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec ľ, kde R₁₄ je H sa dajú pripraviť analogickými postupmi, len so zámenou zlúčenín, ktoré majú všeobecný vzorec III vo všetkých prípadoch zlúčeninami, ktoré majú všeobecný vzorec II.

Zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec A sa dajú ďalej pripraviť postupom,ktorý zahrňuje mikrovlnové ožarovanie zmesi, ktorá obsahuje:

(i) zlúčeninu so všeobecným vzorcom I, ako je definovaná vyššie, kde R₁₅ je H alebo alkyl C_x-C₆, zlúčeninu so všeobecným vzorcom II a fluorid draselný na hliníku, alebo (ii) zlúčeninu so všeobecným vzorcom I', ako je definovaná vyššie, kde R₁₄ je H alebo alkyl C_x-C₆, zlúčeninu so všeobecným vzorcom III a fluorid draselný na hliníku, alebo (iii) 1,4-diacetyl-2,5-piperazindion, zlúčeninu so všeobecným vzorcom II, zlúčeninu so všeobecným vzorcom III a fluorid draselný na hliníku.

Ožarovanie sa uskutočňuje v neprítomnosti rozpúšťadla. Vzniknuté zlúčeniny, v ktorých obidve skupiny R₁₄ a R₁₅ sú H, sa dajú ďalej alkylovať príslušnými alkylačnými činidlami, ako boli uvedené vyššie.

Zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec A sa dajú taktiež pripraviť priamou kondenzáciou 1,4-diacetyl-2,5-piperazindionu, zlúčeniny so všeobecným vzorcom II a zlúčeniny so všeobecým vzorcom III v prítomnosti zásady v organickom rozpúšťadle. Vhodné zásady, rozpúšťadlá a reakčné podmienky sú tie isté ako bolo uvedené vyššie, napr. pre kondenzáciu zlúčenín I a II.

Alternatívny priamy spôsob prípravy zlúčenín, ktoré majú všeobecný vzorec A predstavuje kondenzácia 2,5-piperazindionu, zlúčeniny so všeobecným vzorcom II a zlúčeniny so všeobecným vzorcom III v prítomnosti octanu sodného a anhydridu kyseliny octovej za vyššej teploty, napr. za varu pod spätným chladičom.

Alternatívny spôsob prípravy zlúčenín, ktoré majú všeobecný vzorec I zahrňuje reakciu zlúčeniny, ktorá má všeobecný vzorec V :

O R_e

o R_e kde R₆ až R₁₀ sú tie isté ako bolo definované vyššie, X je halogén a R' je alkyl C₁-C₆, s amoniakom, a následovné raakciu s anhydridom kyseliny octovej.

Analogicky je možno pripraviť zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec

1' reakciou zlúčeniny so všeobecným vzorcom

(V) kde R_x až R₅, X a R'sú tie isté ako bolo definované vyššie s amoniakom, a následovné reakciou s anhydridom kyseliny octovej.

X v zlúčeninách so všeobecným vzorcom V alebo V je najčastejšie jód. R' je napríklad alkylová skupina C_x-C₄ ako je metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, sec-butyl alebo terc-butyl.

Prehľad o syntetických cestách smerujúcich k 3,6-disubstituovaným 2,5-piperazindionom je uvedený v Heterocycles, 1983, 20, 1407 (C. Shin).

Zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec A sa dajú bežnými postupmi premeniť na farmaceutický prijateľné soli, ev. soli sa dajú premeniť na voľné zlúčeniny. Medzi vhodné soli patria soli farmaceutický prijateľných anorganických alebo organických zásad. Príkladom anorganických zásad sú amoniak, uhličitany, hydroxidy a hydrogénuhličitany kovov skupiny I a skupiny II, napr. sodíka, draslíka, horčíka a vápnika. Príkladom anorganických zásad sú alifatické a aromatické amíny, napr. metylamín, trietylamín, benzylamín, dibenzylamín, alebo d- alebo D-fenyl-etylamín, a heterocyklické zásady ako je piperidín, 1-metyl-piperidín a morfolín.

Zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec A sa dajú premeniť taktiež na farmaceutický prijateľné estery. Medzi vhodné estery patria rozvetvené alebo nerozvetvené, nasýtené alebo nenasýtené C^-C. alkylestery, Výhodné zlúčeniny so charakterizované súborom v nasledujúcej tabuľke 1. o zlúčeninách sú uvedené v Diketopiperazínové deriváty, napr. metyl, etyl a vinylestery. všeobecným vzorcom A sú substituentov a očíslované Ďalšie charakteristické údaje tabuľke 5 v príklade 16. ktoré nie sú substituované na atóme dusíka piperazínového kruhu a ktoré sa dajú alkyláciou premeniť na zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec A, sú charakterizované súborom substituentov v tabuľke 2.

TABUĽKA

O	X	x	x	x	x	x	x	x	x	x	X
č'	X	x	x	x	x	x	x	x	x	x	X
&	s	x	δ	£ r	x í	x	r	9 OY	OJ	0^	g
£	X	x	x	x	x	δ OJ 5	x	x	x	x	x
£	x	x	x	x	x	x	x	x	x	x	x
£	x	x	x	x	x	x	x	x	x	x	x
£	x	x	x	x	x	x	x	x	x	x	x
r? Oí	x	x	x	x	x	x	x	x	x	x	i
OJ	x	x	x	x	x	x	x	x	x	x	x
i «	x	x	x	x	x	x	x	x	x	x	x
LT) x—( K	x	x	ž	ž	s	á	ž	s	£	á	s
•e cT	s	s	x	x	x	ž	x	x	x	x	x
Zlúč. Čí S .	<—< 2	(N S	ΓΊ S	xí” íl	125	\D íl	n	CO n	σ\ íl	-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------1 130 j	rH 3

Ο ρΓ

X

x

X

x

X

x

X

x

&

g

%

g

i

ž

m b

x

í

x

CO §

x

^X) 6

x

§

x

£

x

- benzene -

x

s

x

£

x

ž

x

£

Ú

x

r~< u

x

.x

x

rn Pi

x

I

x

É

x

Pu

x

CO &

x

< Pi

ú

í

x

ΰ

í

x

m 6 ?

x

LT) T—< Pi

s

£

s

x

s

ž

s

ž

s

ž

s

ž

s

ž

xr ▼H Pi

x

s

x

í{

ž

s

£

ž

>υ '3 ^1-1 v N >G

J ÍN ⁴ ΓΊ > <—í

n n í~<

’T ΓΊ

in ΓΊ r4

\D ΓΊ rH

n r~4

CO n H

0Ϊ m

o tT r4

rH xr rH

n xt r4

n

xr rH

in rr r—1

to xr r-H

< f—<

CO 5T r—i

σ> f—j

o in H

α áT

ú

x

X

x

K

x

í?

K

CO

I

d

x

ä

CO I

x

&

s ff

x

u.

ώ

x

s

x

ŕ

Ä

x

d

Ú

x

ú

x

s

x

ž*

x

d

x

m K

x

g

x

tí

g

x

§

x

g

x

Ä³

x

í?

x

ú

x

LO X

s

ž

s

ž

s

Γ7 f CO ?

v co ?

U 1 CO ?

tí

xt* «

ž

x

ž

s

ž

£

ž

s

x

s

>o a Ή ^υN '»- >c

Ί H rH ; s

CM in r-4

n in r4

s f4

tn m r~l

KD m r-l

t ä

s rd

cn in r*4

o iD rH

•H kO »~4

(N iD r-1

ΓΊ U? rM

3 «—4

in iD «—<

KD iD f—<

r· KD r4

3 rH

Οϊ to rH


O tí	x	sc
á'	x	x
í?	š	d
ŕ	x	x
£	x	x
£	x	x
£	x	x
rn	x	g
CO	x	x
▼H a	x	x
ld (	v CO 9	á
’C* < tí	á	x
i >υ 1 '£1 *-< o N ,p >c.	? «Η 1	171

C i bj >

PRÍKLAD

m

O <—4

in

rr

CO

n

ΙΟ

U>

o oF

x

pf

x

pľ

x

CJ >: o

OMe

Φ x o

x

K tí

x

tí *

x

X

*r*

x

pf

u

x

r—4 o

x

·< tí

x

pf

x

OAc

x

OEt

0 < x z

- Benzene -

x

ΓΧ x z

x

p?

x

rx o z

x

1 OAc

x

pT

<—4 u

x

o x

·—4 o

x

o < o

Zlúč. 1

Čí S .

CM

(M ÍM

ΓΊ 04

v (M

in OJ

v? OJ

rOJ

CO 1⁰¹

Ch OJ

o n

r“4 ΓΊ

OJ cn

PRÍPRAVA

víz príklad

o «—<

tn

r-(

o r~H

r*

tn

ΓΊ r~4

ch

Γ'

Ch

m

r*

in

Γ'

r-

m

o pT

K

x

r-< O

x

pT

x

pT

x

Φ x o

x

<u x o

u

x

Φ x o

® x o

x

® x o

Φ x o

x

K. p;

x

<\ o x

x

o p:

x

<—I u

x

pT

x

-a K

x

pT

x

o

x

x o

u < o

x

u ž z

u < 0)

*—< o

υ < o Γ» x o

υ r. δ

x

<D O to

cn o

c 5 CQ O

T CU o

OJ CO

CO

x o

x

o z

x

tn

x

Λ

x

o š z

r

x

Zlúč. č í s.

ΓΊ n

^r n

in n

<0 n

r* n

CO n

Ch n

o

«-<

(N 1

ΓΊ

M·

in

i£> <

r«T

CO

Ch

o in

r~4 in

PRÍPRAVA

fxj »—< >

PRÍKLAD j

m

in

<n

r-

o

in

r-

in

m

r-

m

in

ΓΊ <—<

cn

Γ'

o pT

x

pT

x

J

x

d) X o

x

<u x o

o x ta A x u

υ < o A X u

d) x v> A x u

<P O w A X υ

x

tu x o

x

® x o

o s x

o x o

(U x o

x

Ό Pi

x

pT

x

k

x

pT

u x o

x

o o ta x x a X u

d) x o

u x

x

tu x o

x

o o m x x A δ

r. x x A x u

CJ o m fX δ

u,

x

£

x

u < U) <x x u

d) o u

υ < ta r. x o

x to A x υ

x

K

x

P ffl

x

u m

x

o x

x

txľ u

Zlúč.

>o

CM in

cn in

•T in

in in

VO in

in

CO m

σχ in

o iD

r*4

CM MD

ΓΊ vo

T? VO

m vo

vo vo

r* ID

CO vo

cn vo

o r-

PRI

ΓΜ í—4 >

PRÍKLAD

σ>

07

ľ'

ω

m

in

θ'

σ»

r*

Γ'

07

Γ'

r-

in

12

r*

n r4

tr>

O pT

x

X

x

X

x

X

x

pT

x

e. Φ

u

o á x

0 x o

x

r^- X o O

υ < ω x u

o á x

0 š x

u á x

Cs X x o u

ta o Ό O

*5 m o U o

Φ x o

fl) x o

x

rv Φ

o x o

Φ x o

Φ

K Pí

x

•Z

x

X

x

Φ c Φ

o Pí

x

N C Φ m 1

oT

x

cT

x

£

x

Φ x o

r> o x

x

u,

x

® x o

Φ x o

u á x

Φ x o o u §

x o

u

u < o c. x u o u

x o r. x u o u

x

oľ

x

oT

a.

x

Φ r o

x

x u

u CD

x

«—< υ

<—1 u

x

’U a r-H N

00 '1-4 >o

fM r-

ΓΊ r-

T r-

m r-

kD r-

rr-

CD

Ch r-

o CD

r-< CO

(N CO

ΓΊ CD

’O’ CD

in CO

CD CO

CD

CD CO

Ch CO

PRIPR/

tn

Ch

in

m

ΓΊ rH

15 j

¹⁵

r-

ΓΊ rH

CH

r-

n rH

VO

x

X

x

X

x

Φ x o

υ g x-r

x

Φ x o

x

Φ x o

u g z

z u

x

• x

x

φ x o

Φ Xo

Φ x o

CJ o o <\ x o o

Φ x rs o o r- rs x u o o x z rs x u

v ω r. O U M r. X u o u x z rs x u

Φ x rs o u rs X Ό O

x r. o u M rs x u o

<-( o x e. Φ K rs x o o

u x r. Φ rs rs X u o

Φ x f. o u r· rs x u o υ x x rs x o

x rs o u rs x u p

rs Φ rs rs X u o

x

x o r x u

x

OJ x o

Φ x o

φ x o

x

X

x

u.

x

06

rH ch

(M Ch

ΓΊ σ\

Ch

in o

vo Ch

ro

co C\

Ch σ\

o o rH

rH O rH

CM O rH

ΓΊ O rH

•^r o <—<

in o rH

Rakovinové bunky s multiplitnou rezistenciou voči liečivu (tzv. MDR bunky) vyvolávajú zníženie intracelulárnej akumulácie liečiva v porovnaní s odpovedajúcimi bunkami, ktoré sú voči liečivu senzitívne. Štúdie využívajúce in vitro derivované MDR bunkové línie ukázali, že MDR je často spojená so zvýšenou expresiou glykoproteínu plazmatickej membrány (P-gp), ktorý viaže liečivo. P-gp pravdepodobne pôsobí ako effluxná pumpa pre rad hydrofóbnych zlúčenín. Transfekčné štúdie využívajúce naklonovaný P-gp ukázali, že jeho nadprodukcia môže udeliť bunkám fenotyp MDR: viz.napr. Ann. Rev. Biochem 58, 137-171 (1989).

i Najdôležitejšou funkciou P-gp v normálnom tkanive je export intracelulárnych toxínov z bunky. Existujú podklady pre tvrdenie, že nadprodukcia P-gp hrá klinickú úlohu pri multiplitnej rezistencie voči liečivu. Pre rad foriem ludskej rakoviny - leukémie, lymfómov, sarkómov a karcinómov bola stanovená zvýšená hladina P-gp mRNA alebo proteínu. V niektorých prípadoch bolo skutočne pozorované zvýšenie hladiny P-gp pri biopsii nádoru po recidíve z chemoterapie.

* Ukázalo sa, že inhibícia funkcie P-gp v bunkách s MDR sprostredkovanou P-gp, viedla k výlučnej akumulácii • protirakovinových agens v bunkách. Napríklad Verapamil, známy blokátor vápnikového kanálu, senzibilizuje bunky s MDR na vinea alkaloidy in vitro i in vivo : Cancer Res. , 41, 1967-1972 (1981). Navrhnutý mechanizmus účinku zahrňuje kompetíciu s protirakovinovým agens o väzbu s P-gp. Bol opísaný rad štruktúrne nepríbuzných látok, ktoré modifikujú rezistenciu práve uvedeným mechanizmom, napr. tamoxifen (Novaldex:ICI) a analogy, a cyklosporín A a jeho deriváty.

Pri biologických testoch bolo pozorované, že zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec A, nové i známe a ich farmaceutický prijateľné soli a estery (tu: predkladané zlúčeniny) modifikujú multiplitnú rezistenciu voči liečivu. Výsledky testov sú uvedené v príklade 15, ktorý nasleduje. Predkladané zlúčeniny sa dajú preto využiť ako činidlá modifikujúce multiplitnú rezistenciu voči liečivu, tzv.

modultátory rezistencie voči liečivu (RMA). Predkladané zlúčeniny modulujú, napr. znižujú alebo rušia multiplitnú rezistenciu voči liečivu. Predkladané využiť pre posilovanie cytotoxicity voči nádorovým bunkám. Tento spôsob predkladaných zlúčenín do nádorovej účinkom určitého cytotoxického terapeutický účinok

Multiplitná jednej z vystavená pošili antineoplastika. voči cytotoxickému činidlu je alebo vylúčená. U pacienta podanie ktorá je

Tým sa alebo buniek zlúčeniny sa dajú preto činidiel cytotoxických napr. zahrňuje bunky, činidla.

chemoterapeutika rezistencia nádorových tak počas chemoterapie znížená, (človek, zviera) s nádorovým ochorením sa dá teda liečiť rezistencia voči chemoterapeutiku spôsobom, ktorý zahrňuje podanie jednej z predkladaných zlúčenín. Predkladané zlúčeniny je vhodné podávať v množstve, které účinne zvyšuje cytotoxicitu podávaného chemoterapeutika. V kontextu s predkladaným vynálezom sú vhodnými chemoterapeutikami a antineoplastikami vinea alkaloidy napr. vineristín a vinblastín; antracyklinové antibiotiká napr. daunorubicín a doxorubicín; mitoxantron; actinomycín D a plicamycín.

Predkladané zlúčeniny je možno podávať v rôznych liekových formách, napr. orálne ako tablety, kapsule potahované tablety, kvapalné roztoky alebo suspenzie, alebo parenterálne napr. intramuskulárne, intravenózne alebo podkožné. Predkladané zlúčeniny je možno teda podávať injekčné i infúzne.

Dávkové množstvá sú ovpyvňované mnohými faktormi, ako je napr. vek, hmotnosť a celkový stav pacienta, cesta podania. Typické dávky upravené podlá cesty podania pre dospelého pacienta sa pohybujú v rozsahu 0,001 až 10 mg/kg, výhodnejšie 0,01 až 5 mg/kg vzhľadom k telesnej hmotnosti. Tieto dávky sú podávané napr. 1 až 5 x denne bolus infúziou, niekoľkohodinovou infúziou a/alebo opakovane.

Diketopiperazín so všeobecným vzorcom A alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ alebo ester sa dá použiť na prípravu farmaceutického alebo veterinárneho prípravku, ktorý ďalej obsahuje farmaceutický alebo veterinárne prijateľný nosič alebo riedidlo. Uvedené prípravky je možno pripraviť nasledujúcimi bežnými postupmi a dajú sa podávať v farmaceutický alebo veterinárne prijateľných formách. Predkladaný vynález teda dáva činidlo použiteľné ako modulátor multiplitnej rezistencie voči liečivu zahrňujúce ktorúkoľvek z predladaných zlúčenín.

Napríklad tuhá orálna lieková forma obsahuje vedľa účinnej zložky riedidlá ako sú laktóza, dextróza, sacharóza, celulóza, obilný alebo zemiakový bramborový škrob; zmäkčovadlá ako je kremík, mastenec, kys. steárová, horečnatá alebo vápenatá soľ kys. steárovej a/alebo polyetylénglykoly;spojivá ako sú škroby, arabské gumy, želatína, metylcelulóza, karboxymetylcelulóza, alebo polyvinylpyrrolidón; disintegračné činidlá ako je škrob, kys. alginová, soli kys. alginové alebo sodné glykoláty škrobu; effervescens zmesi; farvivá; sladidlá; zvlhčovadlá ako je lecitín, polysorbáty, laurylsulfáty. K týmto prípravkom vedú známe postupy, napríklad mixovanie, granulácia, tabletovanie, poťahovanie cukrom alebo inými poťahmi.

Kvapalné disperzie pre orálne podávanie sú napr. sirupy, emulzie a suspenzie. Sirupy obsahujú ako nosič napr. sacharózu alebo sacharózu s glycerolom a/alebo manit a/alebo sorbit. Sirupy pre diabetiky môžu ako nosič obsahovať iba látky, napr. sorbit, ktorých metabolickým produktom nie je glukóza, alebo len veľmi malé množstvo glukózy. Suspenzie a emulzie obsahujú ako nosič prírodnú gumu, agar, alginát sodný, pektín, metylcelulózu, karboxymetylcelulózu alebo polyvinylalkohol·

Suspenzie a roztoky pre intramuskulárne injekcie obsahujú vedia účinnej zložky farmaceutický prijateľný nosič ako je napr. sterilná voda, olivový olej, etyl oleát, glykoly napr. propylénglykol a pokiaľ je to žiaduce, vhodné množstvo lidokain hydrochloridu. Niektoré z predkladaných zlúčenín sú nerozpustné vo vode. Tieto zlúčeniny je možno uzatvoriť do liposómov.

Príklady realizácie vynálezu

Referenčný príklad 1: Príprava (3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindionu (3) (schéma 1)

Schéma 1

OMe (9>

v

(3)

1,4-Diacetyl-2,5-piperazindion (8)

1,4-Diacetyl-2,5-piperazindion bol pripravený podlá opísaného postupu (S.M.Marcuccio, J.A.Elix: Aust. J. Chem., 1984, 37, 1791).

(3Z)-l-Acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindion (9) (3Z)-l-Acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindion bol pripravený podl'a opísaného postupu (T. Yokoi, L.-M. Yang, T. Yokoi, R.-Y. Wu, K.-H. Lee: J. Antibiot., 1988, 41, 494).

(3Z , 6Z)-6-benzylidén-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindion (3 )

Zmes (3Z)-l-Acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindionu (9) (1,0 g, 3,6 mmol), benzaldehydu (430 ^ul, 4.2 mmol) a trietylamínu (1,14 ml, 8,2 mmol) v suchom DMF (20 ml) bola zohrievaná 18 hodín pri 130 °C. Reakčná zmes bola ochladená na laboratórnu teplotu a vliata do octanu etylnatého (100 ml). Vzniknutá žltá zrazenina bola prefiltrovaná a vysušená. Výťažok 360 mg (31 %).

c₁₉h₁₆n₂o₃ ^XH NMR (400 MHz, d₆-DMS0):

3,80 (3H, s, O-Me); 6,77 (1H, s, CH=C); 6,78 (1H

CH=C); 6,98 (2H, d, J=8 Hz, 2xC-H na Ar-OMe); 7,30-

(7H, m, Ph a 2xC-H na Ar-OMe); 10,15 (2H, br.s, N-H).

NMR (100 MHz, d₆-DMSO):

58,68; 117,66; 118,03; 118,77; 128,11; 128,92; 129

131,53; 132,11; 132,69; 134,44; 136,59; 161,39; 161

161,71.

ms (desorpčná chemická ionizácia, amoniak): m/z (% relatívnej intenzity) : 321 (100) MH⁺. ir : KBr (difúzny odraz):

v max (cm^-1) : 1620, 1700, 3100, 3220.

elementárna analýza:

vypočítané pre C₁₉H₁₆N₂O₃: C 71,24; H 5,03; N 8,74 namerané C 70,92; H 5,02; N 8,80

C 70,89; H 5,06; N 8,79 %

Referenčný príklad 2: Príprava (3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindionu (3) (schéma 2)

Schéma 2

(3)

Zlúčenina 16 vedie po reakcii s amoniakom a nasledovne acetanhydridom k l-acetyl-3-benzylidén-2,5-piperazindionu (18) .

Zlúčenina 18 ďalej kondenzuje v prítomnosti uhličitanu cézneho alebo trietylamínu v DMF s 4-metoxybenzaldehydom na zlúčeninu 3.

Referenčný príklad 3: Príprava l-acetyl-3-benzylidén-2,5-piperazindionu

1,4-Diacetyl-2,5-piperazindion (25,0 g, 126 (zlúčenina 8 v referenčnom príklade 1) bol zohrievaný (200 ml) na 120-130 °C s trietylamínom (17,6 ml, 126 a benzaldehydom (13,0 ml, 126 mmol). Po 4 hodinách bola zmes ochladená na laboratórnu teplotu a vliata do octanu etylnatého (1000 ml), 3 v tejto fázy a rozpúšťadlo zo zmesi mmol) v DMF mmol) x premytá solným roztokom. Zraženiny vytvorené boli odfiltrované.

odparené vo vákuu, octan etylnatý/hexán zlúčeniny vo forme žltej tuhej látky.

Filtrát bol sušený (MgSO₄) Zvyšok bol rekryštalizovaný s výtazkom 11,78 g titulnej

^XH NMR (CDC1₃	400	MHz) t =	2,69	(3H,s)	, 4,54	(2H, s),
7,20 (1H, s),	7,40	(3H, m	), 7,48	(2H,	m) , 7	,93 (1H,
br.s).
MS (DCI, NH₃):	262	(MNH ₄ ⁺,	20 %) ,	245 (M	Ή⁺, 53	%), 220
(52 %), 204 (100	%) ,	203 (100	%) .
Mikroanalýza	C		H		N
vypočítané	63	,93	4,95		11,47
namerané	64	,11	5,02		11,41
	64	,05	4,90		11,44
enčný príklad	4 :	Príprava	1-ace	tyl-3-	(4-acet	amido-

je (10,0 g, uvedený (8,24 mmol) v referenčnom benzylidén)-2,5-piperazindionu

1,4-Diacetyl-2,5-piperazindion pripravený podľa postupu, ktorý príklade 1, 4-acetamidobenzaldehyd a trietylamín (7ml, 50 mmol) boli miešané v a zahrievané na 120 °C. Po 2 1/2 hodinách bola ochladená na laboratórnu teplotu, zriedená octanom etylnatým g, 50 mmol)

DMF (40 ml) reakčná zmes (100 ml) a miešaná cez noc. Vyzrážaný produkt bol oddelený, premytý octanom etylnatým a vysušený s výťažkom 8,46 g (56 %) vo forme tuhej žltej látky.

^ľH NMR (CDC1₃+CF₃COOH, 400 MHz) t

2,32 (3H,s), 2,72

Mikroanalýza	C	H	N
vypočítané	59,80	5,02	13,95
namerané	60,08	5,09	13,89

60,11

5,07

13,86

Referenčný príklad 5: Príprava zlúčeniny 96 l-Acetyl-3-benzylidén-2,5-piperazindion (1 ekvivalent), pripravený podlá postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 3, a metylester 5-(4-formylfenoxy)pentánoovej kyseliny boli zahrievané v prítomnosti Cs₂CO₃ (1-1,1 ekvivalent) v DMF na 80-100 °C počas 1-8 hodín. Titulná zlúčenina bola pripravená s výťažkom 39 %.

Tým istým postupom, ale s nahradením metylesteru

5-(4-formylfenoxy)pentánoovej kyseliny (kde je benzaldehyd sustituovaný v polohe 4 skupinou -O(CH₂)₄COOMe) príslušne substituovaným benzaldehydom, boli pripravené nasledujúce zlúčeniny:

Zlúčenina	Výťažok (%)	Zlúčenina	Výťažok (%)
21	66	25	37
34	56	89	37
38	84	43	54
44	44	45	91
48	69	51	68
52	72	54	69

55	73	59	50
61	44	62	63
66	15	75	49
76	60	85	15
89	37	90	74
93	69	94	39
95	26	96	39
102	45

Referenčný príklad 6: Príprava zlúčeniny 31 l-Acetyl-3-benzylidén-2,5-piperazindion (1 ekvivalent), pripravený podlá postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 1, a 3-acetoxybezaldehyd (1 ekvivalent) boli zohrievané v prítomnosti trietylaminu (1-2 ekvivalenty) v DMF na 130 °C po dobu 2-6 hodín. Titulná zlúčenina bola pripravená s výťažkom 61 %.

Tým istým postupom, ale s nahradením

3-acetoxybezaldehydu príslušne substituovaným benzaldehydom, boli pripravené nasledujúce zlúčeniny:

Zlúčenina	Výťažok (%)
23	16
34	43
32	41
65	27
74	77
10 5	50

Referenčný príklad 7: Príprava píklad zlúčeniny 103 l-Acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindion (1 ekvivalent) zlúčenina 9, pripravený podlá postupu, který je uvedený v referenčnom príklade 1, a 2-fluórbenzaldehyd (1 ekvivalent) boli zohrievané v prítomnosti Cs₂CO₃ (1-1,1 ekvivalent) v DMF na 80-100 °C počas 1-6 hodín. Titulná zlúčenina bola pripravená s výťažkom 69 %.

Tým istým postupom, ale s nahradením 2-fluórbenzaldehydu príslušne substituovaným benzaldehydom, s výnimkou zlúčeniny 84, ktorá bola pripravená kondenzáciou s 4-acetoxy-2-chlórbenz- aldehydem, boli pripravené nasledujúce zlúčeniny:

Zlúčenina	Výťažok (%)	Zlúčenina	Výťažok (%)
26	80	63	71
29	70	69	20
37	21	70	10
41	34	73	38
46	16	80	45
47	46	81	5
49	60	83	41
50	56	84	malý
53	77	87	33
57	49	91	74
60	71	100	20
		103	69

Referenčný príklad 8: Príprava zlúčeniny 28 l-Acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindion (1 ekvivalent) zlúčenina 9, pripravený podlá postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 1, a 2-nitrobenzaldehyd (1 ekvivalent) boli zohrievané v prítomnosti trietylamínu (1-2 ekvivalenty) v DMF na 130 °C počas 2-6 hodín. Titulná zlúčenina bola pripravená s výťažkom 45 %.

Referenčný príklad 9: Príprava zlúčeniny 77 l-Acetyl-3-(4-acetamidobenzylidén)-2,5-piperazindion (1 ekvivalent), pripravený podlá postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 4, a 2,4-difluórbenzaldehyd (1 ekvivalent) boli zohrievané v prítomnosti Cs₂C0₃ (1-1,1 ekvivalent) v DMF na 80-100 °C počas 1-6 hodín. Titulná zlúčenina bola pripravená s výťažkom 60 %.

Tým istým postupom, ale s nahradením

2,4-difluórbenzaldehydu príslušne substituovaným benzaldehydom boli pripravené nasledujúce zlúčeniny:

Zlúčenina	Výťažok (%)	Zlúčenina	Výťažok (%)
42	50	40	40
68	26	58	22
72	41	71	36
79	11	78	16
92	68	82	16

Referenčný príklad 10: Príprava zlúčeniny 22

1,4-Diacetyl-2,5-piperazindion (1 ekvivalent), pripravený podľa postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 1, a benzaldehyd (2,1 ekvivalentu) boli zohrievané v prítomnosti trietylamínu (2,5 ekvivalentu) v DMF na 130 °C počas 8 hodín. Titulná zlúčenina bola pripravená s výťažkom 89 %.

Referenčný príklad 11: Príprava zlúčeniny 35

1,4-Diacetyl-2,5-piperazindion (1 ekvivalent), pripravený podľa postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 1, a 3-nitrobenzaldehyd (1 ekvivalent) reagovali v prítomnosti trietylamínu (1 ekvivalent) v DMF pri laboratórnej teplote počas 18-20 hodín. Titulná zlúčenina bola pripravená s výťažkom 9 % spolu s l-acetyl-3-(3-nitrobenzylidén)-2,5-piperazindionom (66 %).

Referenčný príklad 11a: Príprava l-acetyl-3-(4-dimetylaminobenzylidén)-2,5-piperazindionu

1,4-Diacetyl-2,5-piperazindion (1 ekvivalent), pripravený podľa postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 1, a 4-dimetylaminobenzaldehyd (1 ekvivalent) boli zohrievané v prítomnosti trietylamínu v DMF na 130 °C počas 24 hodín. Titulná zlúčenina bola pripravená s výťažkom 18 %.

Referenčný príklad 12: Príprava zlúčeniny 86 l-Acetyl-3-(4-dimetylaminobenzylidén)-2,5-piperazindion (1 ekvivalent), pripravený podľa postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 11a, a 4-acetamidobenzaldehyd (1 ekvivalent) boli zohrievané v prítomnosti Cs₂C0₃ (1 ekvivalent) v DMF na 80 °C počas 2-6 hodín. Titulná zlúčenina bola pripravená s výťažkom 56 %.

Referenčný príklad 13: Vzájomné konverzie referenčných zlúčenín (i) Zlúčenina 31, pripravená podľa postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 6 reagovala s vodným hydroxidom lítnym vo zmesi MeOH a THF pri laboratórnej teplote počas 2-3 hodín za vzniku zlúčeniny 33 s výťažkom 91 %.

(ii) Zlúčenina 61, pripravená podľa postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 5, reagovala s vodným hydroxidom lítnym vo zmesi MeOH a THF pri laboratórnej teplote počas 3 hodín za vzniku zlúčeniny 64 s výťažkom 57 %.

(iii) Zlúčenina 96, pripravená podľa postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 5, reagovala s vodným hydroxidom sodným v THF pri laboratórnej teplote počas 4 hodín za vzniku zlúčeniny 97 s výťažkom 54 %.

(iv) Zlúčenina 37, pripravená podlá postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 7, reagovala s vodným hydroxidom sodným v THF pri laboratórnej teplote počas 8 hodín za vzniku zlúčeniny 36 s výťažkom 30 %.

(v) Zlúčenina 56, pripravená podlá postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 7, reagovala s kyselinou trifluóroctovou v dichlórmetáne pri laboratórnej teplote počas 12 hodín za vzniku zlúčeniny 67 s výťažkom 96 %.

(vi) Zlúčenina 87, pripravená podlá postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 7, reagovala s vodným hydroxidom sodným v THF pri laboratórnej teplote počas 4 hodín za vzniku zlúčeniny 88 s výťažkom 69 %.

(vii) Zlúčenina 65, pripravená podlá postupu, ktorý je uvedený referenčnom príklade 6, bola katalytický hydrogenovaná na 10 % paládiu na uhlíku v niekoľkých kvapiek kyseliny zlúčeniny 39 s výťažkom 38 %. V dichlórmetáne v prítomnosti trifluóroctovej za vzniku tých istých podmienkach bola hydrogenovaná zlúčenina 74 za vzniku zlúčeniny 30 s výťažkom

%.

(viii) Zlúčenina 93, pripravená podľa postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 5, bola hydrolyzovaná vodným hydroxidom sodným vo zmesi MeOH a THF pri laboratórnej teplote počas 18 hodín za vzniku zlúčeniny 101 s výťažkom 72 %.

(ix) Zlúčenina 58, pripravená podľa postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 9, bola hydrolyzovaná vodným hydroxidom sodným v THF pri laboratórnej teplote počas 3 hodín za vzniku zlúčeniny 104 s výťažkom 90 %.

Referenčný príklad 14: Príprava zlúčeniny 27 l-Acetyl-3-(4-metoxybenzylidén) - 2 ,5-piperazindion (1 ekvivalent), zlúčenina 9 pripravená podľa postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 1, a 2-naftaldehyd (1 ekvivalent) boli zohrievané v prítomnosti Cs₂CO₃ (1-1,1 ekvivalentu) v DMF na 80-100 °C počas 1-6 hodín. Titulná zlúčenina bola pripravená s výťažkom 84 %.

Referenčný príklad 15: Príprava solí

Zlúčenina 98, tj. hydrochlorid zlúčeniny 102, bola pripravená reakciou roztoku zlúčeniny 102 v THF s 2 M kyselinou chlorovodíkovou, s nasledujúcou sonikáciou až do vzniku čirého roztoku. Rozpúšťadlo bolo odparené vo vákuu a zvyšný roztok lyofilizovaný za vzniku zlúčeniny 98.

Zlúčenina 99 bola pripravená prebublávaním roztoku odpovedajúcej východiskovej volnej zásade v THF plynným chlorovodíkom a potom odparená do sucha.

Referenčný príklad 15: Príprava (3Z)-l-acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindionu 9 a l-acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-4-mety1-2,5-piperazindionu 10 (schéma 3)

Schéma 3

(13) R H (9) R · Ac

(10) R Ac

Zlúčenina 12 vedie po reakcii s amoniakom k

3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindionu 13. Zlúčenina 13 ďalej reaguje s acetanhydridom za vzniku (3Z)-l-acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindionu 9.

Metylácia zlúčeniny 12 iódmetánom v prítomnosti uhličitanu draselného v DMF vedie ku vzniku zlúčeniny 14. Zlúčenina 14 ďalej reaguje s amoniakom a potom s acetánhydridom za vzniku l-acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-4-metyl-2,5-piperazindionu 10.

Príklad 1: Príprava (3Z,6Z)-3-benzylidén-6-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-2,5-piperazindionu 1 (schéma 4)

Schéma 4

(8)

(10) (11)

T

d) ( 3 Z)-l-Acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-4-metyl-2,5-piperazindion 10 a l-acetyl-5-metoxy-3-(4-metoxybenzylidén )-3,6-dihydropyrazín-2-on 11

Zmes (3Z)-l-acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)- 2,5-piperazindionu 9 (2,0 g, 7,3 mmol), iódmetánu (0,46 ml, 7,3 mmol) a uhličitanu draselného (800 mg, 7,5 mmol) v suchom DMF (50 ml) bola miešaná v atmosfére suchého dusíka 3 dni. Potom bola reakčná zmes vliata do octanu etylnatého (500 ml) a premytá vodou (4 x 100 ml) a solným roztokom. Organická fáza bola oddelená, sušená (MgSO₄) a rozpúšťadlo odparené vo vákuu. Odparok bol chromatografovaný na silikagéle elučnou zmesou EtOAc:hexán (1:1), s výťažkom 1,38 (66 %) (3Z)-l-acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-4-metyl-2,5-piperazindionu 10 ako tuhej žltej látky a 0,278 g (11,8 %) l-acetyl-5-metoxy-3-(4-metoxybenzylidén)-3,6-dihydropyrazín-2-onu 11 ako tuhej svetlo žltej látky.

(3 Z)-l-Acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-4-mety1-2,5-piperazindion 10:

C₁₅H₁₆N₂O₄ *Η NMR (400 MHz, CDC1₃):

t: 2,63 (3H, s, Ac); 2,95 (3H, s, N-Me); 3,87 (3H, s, O-Me);

4,52 (2H, s, N-CH₂-CO) 6,93 (2H, d, J=8 Hz, aróm.); 7,26 (1H, s, C=CH); 7,29 (2H, d, J=8 Hz, aróm.).

ms (desorpčná chemická ionizácia, amoniak):

m/z (% relatívnej intenzity) : 306 (34 %) MNH₄ ⁺; 289 (100 %);

216 (14 %) .

ir :KBr (difúzny odraz):

v max (cm'¹) : 1690, 1700, 3000.

elementárna analýza:

vypočítané pre C₁₅H₁₆N₂O₄: C 62,49; H 5,59; N 9,72 namerané C 62,48; H 5,58; N 9,68

C 62,51; H 5,65; N 9,67 % l-acetyl-5-metoxy-3-(4-metoxybenzylidén)-3,6-dihydropyrazín-2-on 11

Ci ₅H_{3 6}N₂O₄ *H NMR (400 MHz, CDC1₃):

t: 2,68 (3H, s, Ac); 3,86 (3H, s, Ar-OMe); 3,99 (3H, s,

O-Me); 4,44 (2H, s, N-CH₂-CO); 6,95 (2H, d, J=8 Hz, aróm.); 7,32 (1H, s, C=CH); 8,03 (2H, d, J=8 Hz, aróm.).

ms (desorpčná chemická ionizácia, amoniak):

m/z (% relatívnej intenzity) : 289 (100 %) MH⁺; 247 (14 %). ir : KBr (difúzny odraz):

v max (cm^-1) : 1610, 1690, 1700, 1740, 2950.

elementárna analýza: vypočítané pre C₁₅H₁₆N₂O₄: C 62,49; H 5,59; N 9,72 namerané C 62,52; H 5,59; N 9,64

C 62,52; H 5,64; N 9,66 % ( 3Z,6Z)-3-benzylidén-6-(4-metoxybenzylidén)-1-mety1-2,5-piperazindion 1

Zmes (3Z)-l-Acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-4-mety1-2,5-piperazindionu 10 (200 mg, 0,69 mmol) a hydridu. sodného (60 % disperzia v oleji, 28 mg, 0,69 mmol) v suchom DMF (10 ml) bola miešaná pri laboratórnej teplote 18 hodín. Ďalej bol pridaný benzaldehyd (71 _;ul, 0,69 mmol) a reakčná zmes miešaná ďalších 18 hodín. Potom bola zriedená octanom etylnatým (100 ml) a premytá solným roztokom (4 x 50 ml). Organická fáza bola oddelená, vysušená (MgSO₄) a rozpúšťadlo odparené vo vákuu. Odparok bol chromatografovaný na silikagéle elučnou zmesou dichlórmetán s 1 % metanole s výťažkom 48 mg (21 %) titulnej zlúčeniny ako tuhej žltej látky.

C 2 oH i θΝ ₂O ₃ ^XH NMR (400 MHz, CDC1₃):

t: 3.06 (3H, s, N-Me); 3,87 (3H, s, Ar-OMe); 6,93 (2H, d,

J=8 Hz, 2xC-H na Ar-OMe); 7,06 (1H, s, Ph-CH=C); 7,23 (2H, d, J=8 Hz, 2xC-H na Ar-OMe); 7,27 (1H, s, MeOAr-CH=C); 7,30-7,48 (5H, m, Ph), (1H, br.s, N-H) .

¹³C NMR (100 MHz, CDC1₃):

t: 36,62; 55,34; 113,86; 116,80; 121,30; 126,02; 126,14;

128,47; 128,78; 129,06; 129,45; .131,11; 133,07; 159,66;

159,68; 159,95.

ms (desorpčná chemická ionizácia, amoniak): 335 (100 %) MH⁺. ir : KBr (difúzny odraz):

v max (cm^-1) : 1690, 3000, 3180, 3400.

elementárna analýza:

vypočítané pre C_2OH_1SN₂O₃: C 71,84; H 5,43; N 8,38 namerané

C 71,81; H 5,31; N 8,31

C 71,80; H 5,25; N 8,31 %

Príklad 2: Príprava (3Z,6Z)-3-benzylidén-6-(4-metoxybenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindionu 2 (schéma 5)

Schéma 5

(3) Rj· H v

(3Z,6Z)-3-benzylidén-6-(4-metoxybenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion 2

Zmes (3Z,6Z)-3-benzylidén-6-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindionu 3 (0,5 g, 1,56 mmol), hydridu sodného (60 % disperzia v oleji, 125 mg, 3,1 mmol) a metyljodidu (243 _zul, 3, 9 mmol) v suchom DMF (50 ml) bola miešaná pri laboratórnej teplote 4 dni. Potom bolo rozpúšťadlo odparené vo vákuu a odparok chromatografovaný na silikagéle elučnou zmesou EtOAc:hexán 1:3 s výťažkom 220 mg (40 %) titulnej zlúčeniny ako tuhej žltej látky.

C 2 2 oN 2θ 3 ^XH N MR (400 MHz, CDC1₃):

t: 2,95 (3H, s, N-Me); 3,04 (3H, s, N-Me); 3,85 (3H, s,

O-Me); 6,90 (2H, d, J=8 Hz, 2xC-H na Ar-OMe); 7,19 (1H, s, C=CH); 7,21 (1H, s, C=CH); 7,30-7,56 (7H, m, Ph a 2 x CH na Ar-OMe).

ms (desorpčná chemická ionizácia,amoniak): m/z (% relatívnej intenzity) : 349 (100 %) MH⁺.

Príklad 3: Príprava zlúčeniny 146

Zlúčenina 54 (1 ekvivalent) pripravená podlá postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 5, reagovala s hydridom sodným (2,0-3,5 ekvivalentu) v DMF pri 0 °C 10-90 minút. Výsledný roztok ďalej reagoval s metyljodidem (2,0-5,0 ekvivalentov) v DMF pri laboratórnej teplote 3-48 hodín. Rozpúšťadlo bolo odparené vo vákuu a odparok chromátografovaný s výťažkom 49 % zlúčeniny 146.

Analogickým postupom boli pripravené ďalšie zlúčeniny, ktoré majú obecný vzorec A, nahradením východiskovej zlúčeniny 54 príslušne N-nesubstituovaným 1,3-dibezylidén-2,5-piperazindionom, ktorý mal požadovaný súbor substituentov na aromatickom kruhu jednej z benzylidénových skupín, napr. ktorákoľvek zo zlúčenín pripravených v referenčných príkladoch. Nasledujúce zlúčeniny boli pripravené podľa tohto postupu.

Zlúčenina	Výťažok (%)	Zlúčenina Výťažok (%)
139	31	141	50
142	50	143	41
144	41	145	51
147	94	149	42
150	43	151	54
153	26	154	71
155	42	156	42
157	24	159
160	13	161	13

Metyláciou (3Z,6Z)-6-(2,6-dichlórbenzylidén)-3-(2-nitrobenzylidén)-2,5-piperazindionu v analogických podmiankach bola pripravená zlúčenina 165 s výťažkom 23 %. Zlúčenina 153 bola pripravená zo zlúčeniny 34.

Charakteristické údaje týchto zlúčenín sú uvedené v príklade 16.

Príklad 4: Príprava zlúčeniny 162

Zlúčenina 69 (1 ekvivalent) pripravená podlá postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 7, reagovala s hydridom sodným (2,0-3,5 ekvivalentu) v DMF pri 0 °C 10-90 minút. Výsledný roztok ďalej reagoval s metyljodidom (2,0-5,0 ekvivalentov) v DMF pri laboratórnej teplote 3-48 hodín. Rozpúšťadlo bolo odparené vo vákuu a odparok chromatografovaný s výťažkom 13 % zlúčeniny 162.

Analogickým postupom boli pripravené zlúčeniny 163 a 164.

Zlúčenina	Výťažok (%)
163	9
164	20

Charakteristické údaje týchto zlúčenín sú uvedené v príklade 16.

Príklad 5: Príprava zlúčeniny 131 (3 Z)-l-Acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-4-mety1-2,5-piperazindion 10 (1 ekvivalent) pripravená podľa postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 1, reagovala s 4-acetamidobenzaldehydom (1 ekvivalent) a Cs₂CO₃ (1-1,1 ekvivalenta) v DMF pri 80-100 °C 2-5 hodín. Zlúčenina 131 bola pripravená s výťažkom 48 %.

Analogickým postupom boli pripravené ďalšie zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec A, nahradením

4-acetamidobenzaldehydu príslušne substituovaným benzaldehydom, čo vedie k požadovanému súboru substituentov na kruhu a finálneho produktu. Analogickým postupom boli pripravené nasledujúce zlúčeniny.

Zlúčenina	Výťažok (%)
132	56
133	34
134	67

Charakteristické údaje týchto zlúčenín sú uvedené v príklade 16.

Príklad 6: Príprava zlúčenín 121, 122, 170 l-Acetyl-3-benzylidén-2,5-piperazindion 18 pripravený podlá postupu, ktorý je uvedený v referenčnom príklade 2, bol N-metylovaný pôsobením metyljodidu (2,0 ekvivalenty) v prítomnosti Na₂CO₃ (1 ekvivalent) v DMF pri laboratórnej teplote 24 hodín. Rozpúšťadlo bolo odparené vo vákuu a odparok chromatografovaný. Produkt, l-acetyl-3-benzylidén-4-metyl-2,5-piperazindion, pripravený s 4-metoxybenzaldehydom v ekvivalenta) v DMF pri 80 °C 121 s výťažkom 35 %.

Analogickým postupom s benzaldehydom bola pripravená s výťažkom 45 %, ďalej reagoval prítomnosti Cs₂CO₃ (1-1,1

206 hodín, za vzniku zlúčeniny nahradením 4-metoxybenzaldehydu zlúčenina 122 s výťažkom 68 %.

Zlúčenina 121, pripravená vyššie uvedeným postupom, reagovala s hydridom sodným (1,1 ekvivalent) a brómmetylcyklopropánom (1,0 ekvivalent) v DMF pri laboratórnej teplote 4 dni, za vzniku zlúčeniny 170 s výťažkom

Charakteristické údaje týchto· zlúčenín sú uvedené v príklade 16.

Príklad 7: Príprava zlúčenín 124, 125, 128 a 130

Metylester 4-((3Z)-l-acetyl-2,5-dioxopiperazin-3-ylidén)metylbenzoovej kyseliny (1 ekvivalent) bol N-alkylovaný v polohe 4 piperazínového kruhu pôsobením metyljodidu (2,0 ekvivalenty) v prítomnosti Na₂CO₃ v DMF pri laboratórnej teplote 28 hodín. Rozpúšťadlo bolo odparené a odparok chromatografovaný. Produkt (1 ekvivalent), pripravený s výťažkom 51 %, ďalej reagoval s benzaldehydom (1 ekvivalent) v prítomnosti Cs₂C0₃ (1,1 ekvivalentu) v DMF pri 90 °C 2-5 hodín, za vzniku zlúčeniny 124 s výťažkom 54 %.

Hydrolýzou zlúčeniny 124 vodným NaOH vo zmesi metanol tetrahydrofurán pri laboratórnej teplote 5 hodín, bola pripravená zlúčenina 125 s výťažkom 79 %.

Zlúčenina 125 (1 ekvivalent) reagovala s EtOCOCl (1 ekvivalent) a trietylamínom (1 ekvivalent) v dichlórmetáne pri 0 °C 30 minút. Reakciou výsledného roztoku s amoniakom bola pripravená zlúčenina 130 s výťažkom 82 %.

Alternatívne rekaciou s pyrolidínom (1 ekvivalent) vznikla zlúčenina 128 s výťažkom 39 %.

Charakteristické údaje týchto zlúčenín sú uvedené v príklade 16.

Príklad 8: Príprava zlúčenín 127, 129, 137, 152, 171 l-Acetyl-3-(4-nitrobenzylidén)-2,5-piperazindion pôsobením metyljodidu Na₂CO₃ (1 ekvivalent) v hodín. N-metylovaný produkt

N-metylovaný ekvivalenty) laboratórnej pripraven s výťažkom 34 v polohe v prítomnosti teplote 30

%.

bol (2,0

DMF pri bol (i) príprava zlúčenín 127 a 129.

N-metylovaný produkt ďalej reagoval s benzaldehydom (1 ekvivalent) v prítomnosti Cs ₂CO ₃ (1 ekvivalent) v DMF pri °C 4 hodiny, za vzniku zlúčeniny 127 s výťažkom 67 %. Zlúčenina 127 bola katalytický hydrogenovaná na 10 % paládiu na uhlíku v dichlórmetáne v prítomnosti niekoľkých kvapiek kyseliny trifluóroctovej pri laboratórnej teplote 16 hodín, za vzniku zlúčeniny 129 s výťažkom 17 %.

(ii) príprava zlúčenín 171, 152, 137

N-metylovaný produkt ďalej reagoval s 4-metoxybenzaldehydom v prítomnosti Cs ₂CO ₃ (1 ekvivalent) v DMF pri 80 °C 4 hodiny, za vzniku zlúčeniny 171 s výťažkom 38 %. Zlúčenina 171 bola katalytický hydrogenovaná na 10 % paládiu na uhlíku v dichlórmetáne v prítomnosti niekoľkých kvapiek kyseliny trifluóroctovej pri laboratórnej teplote 16 hodín, za vzniku zlúčeniny 152 s výťažkom 95 %. Zlúčenina 152 bola acetylovaná acetánhydridom v prítomnosti trietylamínu a DMAP za vzniku nízkeho výťažku zlúčeniny 137.

Príklad 9: Príprava zlúčenín 135, 136 l-Acetyl-3-(4-nitrobenzylidén)-2,5-piperazindion bol

N-metylovaný v polohe 4 s výťažkom 31 % postupným pôsobením hydridu sodného (1,1 ekvivalent) v THF pri 0 °C, 60 minút a metyljodidu (5,0 ekvivalentov) pri laboratórnej teplote 18 hodín. Nasledujúca reakcia s 4-metoxybenzaldehydom (1 ekvivalent) v prítomnosti Cs₂CO₃ v DMF pri 90 °C 2 hodiny, viedla ku vzniku zlúčeniny 136 s výťažkom 32 %.

Analogickým postupom z východiskového l-acetyl-3-(2,6-dichlórbenzylidén)-2,5-piperazindionu bola pripravená zlúčenina 135 s výťažkom 26 % pri N-metylácii a 47 % pre nasledujúcu kondenzáciu s aldehydom.

Príklad 10: Príprava zlúčenín 166 a 167 l-Acetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindion reagoval s brómmetylcyklopropánom (1 ekvivalent) v DMF v prítomnosti Na₂CO₃ (1 ekvivalent) pri 50 °C 48 hodín. Produkt, pripravený s výťažkom 11 % bol kondenzovaný s benzaldehydom (1,0 ekvivalent) v prítomnosti Cs₂CO₃ v DMF pri 90 °C 2-5 hodiny za vzniku zlúčeniny 167 s výťažkom 30 %.

Analogicky bola pripravená zlúčenina 166 z východiskového l-acetyl-3-benzylidén-2,5-piperazindionu reakciou s brómmetylcyklopropánom (1,04 ekvivalentu) v DMF v prítomnosti Na₂CO₃(1,1 ekvivalent) pri 80-85 °C 5 hodín. Produkt, pripravený s výťažkom 12 % bol kondenzovaný s 4-metoxybenzaldehydom (1 ekvivalent) v prítomnosti Cs₂CO₃ (1,1 ekvivalentu) v DMF pri 80 °C 2 hodiny za vzniku zlúčeniny 166 s výťažkom 29 %.

Príklad 11: Príprava zlúčeniny 148 l-Acetyl-3-(4-acetoxybenzylidén)-6-benzylidén-2,5-piperazindion postupne reagoval s hydridom sodným (2,0-3,5 ekvivalentu) v DMF pri 0 °C, 10-90 minút a metyljodidom (2,

0-5,0 ekvivalentov) v DMF pri laboratórnej teplote 3-48 hodín. Rozpúšťadlá boli odparené vo vákuu a odparok chromátografovaný s výťažkom 32 % zlúčeniny 148 a 30 % vediajšeho produktu, kde R ₁₁=R₁₂=Me, R₇=CH₂OH, R_rR₆ a R₈-R₁₀=H.

Príklad 12: Príprava zlúčeniny 140 a 158 (3 Z,6Z)-3-Benzylidén-6-(1-naftylmetylén)-2,5-piperazindion pripravený reakciou l-acetyl-3-benzylidén-2,5-piperazindionu (1 ekvivalent) s 1-naftaldehydom v prítomnosti Cs₂CO₃(1-1,1 ekvivalentu) v DMF pri 80-100 °C 1-6 hodín bol metylovaný postupne reakciou s hydridom sodným (2,0-3,5 ekvivalentu) v DMF pri 0 °C, 10-90 minút a metyljodidom v DMF pri laboratórnej teplote 3-48 hodín. Rozpúšťadlá boli odparené vo vákuu a odparok chromatografovaný s výťažkom 51 % zlúčeniny 140.

Analogickým postupom bola pripravená zlúčenina 158, metyláciou (3 Z , 6Z)-3-benzylidén-6-(2-N-metyltrimetylacetamidobenzylidén)-2,5-piperazindionu s výťažkom 49 %.

Príklad 13: Vzájomné konverzie zlúčenín, ktoré majú obecný vzorec A (i) Zlúčenina 1, pripravená podľa postupu, ktorý je uvedený v príklade 1 reagovala BBr₃ (10,0 ekvivalentov) v dichlórmetáne pri laboratórnej teplote 2-5 hodín za vzniku zlúčeniny 123 s výťažkom 45 %.

(ii) Zlúčenina 122 reagovala postupne s hydridom sodným a etyljodidom (1 ekvivalent) v DMF pri laboratórnej teplote. Rozpúšťadlá boli odparené vo vákuu a odparok chromátografovaný s výťažkom 40 % zlúčeniny 169.

(iii) Zlúčenina 1 reagovala s brómmetylcyklopropánom (1,5 ekvivalentu) v DMF v prítomnosti Na ₂C0 ₃ (1,0 ekvivalent) pri °C 4 hodiny za vzniku zlúčeniny 168 s výťažkom 11 %.

Príklad 14 : Farmaceutický prípravok

Príprava tabliet s hmotnosťou 0,15 g s obsahom 25 mg zlúčeniny predkladaného vynálezu:

Prípravok pre 10 000 tabliet:

zlúčenina predkladaného vynálezu (250 g) laktóza (800 g) obilný škrob (415 g) mastenec (30 g) magnézium stearát (5 g)

Bolo zmiešané : zlúčenina predkladaného vynálezu, laktóza a polovica množstva obilného škrobu. Zmes bola presiata sitom 0,5 mm mesh. Obilný škrob (10 g) bol suspendovaný v teplej vode (90 ml). Vzniknutá pasta bola použitá ku granulácii prášku. Granulát bol vysušený a rozomletý na malé kúsky na site 1,4 mm mesh. Bol pridaný zvyšok škrobu,mastenec a magnézium stearát, zmes starostlivo miešaná a stlačená do tabliet.

Príklad 15: Testovanie zlúčenín A ako modulátorov MDR

Materiály a postupy

Myšia bunková línie EMT6 (karcinóm mliečnej žlazy) a MDR sublínie AR 1,0 boli kultivované v médiu RPMI 1640 s obsahom 10 % fetálneho teľacieho séra a 2 mM glutamínu pri 37 °c v atmosfére 5 % CO₂. Bunky boli pasážované medzi 1 ku 200 a 1 ku 2000 v prípade rodičovskej bunkovej línie a medzi 1 ku 20 a 1 ku 200 v prípade MDR sublínie, po trypsínizácii (0,25 % trypsín, 0,2 gl^_1, EDTA).

1) Test akumulácie liečiva AR 1,0 bunky boli nepriehľadných kultivačných Testovacie médium obsahovalo (DNR), cytotoxické činidlo 2 μΜ) .

v testovacom

100 μΜ. známeho Výsledky

Zlúčeniny,ktoré majú všeobecný vzorec médiu v rade koncentrácií Súčasťou každého testu bola modifikátora rezistencie, ako boli vyjadrené v % maxima naočkované do 96 jamčekových doštičiek (Canberra Packard). zmes triciovaného Daunorubicidinu a neznačený DNR (0,25 pCi/ml;

A boli rozpustené v rozsahu 100 nM až titrácia Verapamilu, pozitívnej kontroly, akumulácie, pričom 100 % akumulácia nastáva v prítomnosti 100 μΜ Verapamilu. Výsledky testu sú uvedené v tabuľke 3.

Tabuľka 3

Zlúčenina Akumulácia ' Zlúčenina Akumulácia

č. ΙΟ_5ο(μΜ) alebo %max. č. Ι<2₅₀(μΜ) alebo %max.

1	20 μΜ
121	8 0 μΜ	122	100 μΜ
124	32 % max	126	45 % max
131	50 μΜ	132	8 μΜ
133	39 % max	134	50 % max
135	15 μΜ	136	36 % max
137	44 % max	138	100 μΜ
139	30 μΜ	140	10 μΜ
140	10 μΜ	141	25 μΜ
142	40 μΜ	143	45 % max

144	2 5 μΜ	145	3 5 μΜ
146	3 5 μΜ	147	40 μΜ
148	65 μΜ	149	3 0 μΜ
150	50 μΜ	151	20 μΜ
153	80 μΜ	154	3 0 μΜ
155	20 μΜ	156	30 % max
157	3 0 μΜ	158	20 μΜ
159	15 % max	160	3 5 μΜ
161	20 μΜ	162	15 μΜ
163	20 μΜ	164	20 μΜ
165	7 μΜ	166	10 μΜ
167	10 μΜ	168	12 μΜ
169	25 μΜ	170	10 μΜ

2) Zvýšenie toxicity doxorubicínu

Pre zlúčenina, ktoré majú všeobecný vzorec A sa testovala schopnosť zvyšovať toxicitu doxorubicínu v bunkách AR 1,0. V počiatočných proliferačných testoch boli zlúčeniny titrované proti fixnej koncentrácii doxorubicínu (5,0-1 μΜ), ktorý sám je voči AR 1,0 bunkám netoxický. Po štvordennej inkubácii s doxorubicínom bolo pomnoženie buniek stanovené pomocou kolorimetrického sulforhodamín B testu (Skehan a kol.; J. Natl. Cancer. Inst. 82 pp 1107-1112 (1990)).

Zlúčeniny, ktoré sensibilizovali AR 1,0 bunky na 0,8-1, 7 μΜ doxorubicín bez výraznejších vlastných toxických účinkov, boli vybrané pre ďalšie štúdie. Bunky boli inkubované štyri dni s rôznymi koncentráciami doxorubicínu v rozsahu 0, 5 nM-50 μΜ v prítomnosti subtoxickej hladiny Verapamilu, stanovenej z predchádzajúcich experimentov. Pomnoženie buniek bolo stanovené vyššie opísaným postupom (Skehan a kol., loc cit.). boli vypočítané hodnoty IC₅₀ (koncentrácia nutná k 50 % zníženiu pomnoženia buniek v porovnaní s kontrolou) pre samotný doxorubicín a doxorubicín s Verapamilom a použité k výpočtu indexu zvýšenia (PI):

IC₅₀ pre Doxorubicín samotný

PI = -------------------------------IC₅₀ pre Doxorubicín plus RMA

Zlúčenina	Index zvýšenia (PI)
164	7,5 (pri 3 μΜ)
166	10 (pri 3 μΜ)
166	10 (pri 5 μΜ)
167	6 (pri 3 μΜ)
168	20 (pri 3 μΜ)

Príklad 16: Charakterizácia zlúčenín,ktoré majú všeobecný vzorec A

Zlúčeniny pripravené v príkladoch 1 až 13 boli charakterizované pomocou bežných spektroskopických techník (hmotové spektrum, ^XH NMR a IR) a mikroanalýzy. Výsledky sú uvedené v tabuľke 5.

TABUĽKA 5

rH		r*
•	cn	m
r-l	•	•
	in	00

CM

MD CTi Γ**

• σ\ m

o · ·

r* co

Ch	00	^0
•	r4	n
o	•	•
r*	in	oo

CO	n	CO
•	xr	m
H	•	•
	in	CO

	X-X	x			o o	o	m
	X	X—X		o	O 00	CO	CO
	rH X
	X	CM	CM	r*	r* to	m	CM
	u	x	n
o		Ό	•	X
m		x-*·	r<	X—X	x—x >—v	X-X.	«*X ^~x
jr<	CO			X	x x	x	x x
Q	ΓΊ	in	m	in	rH CM	rH	m n
	•	in		x	x x	X	x X
<jO	•	•	e	ω ό	ω	ω ω
Ό	rH	Γ'	r*		---		-X-* Xx-

			Ό
		*b	fO					»-x« .
x		χ-χ	o	o			CO	N
χ-χ	x—	x	P	rUx-x	x	CM	x o
«	w		e	o	tn	Ό	*	co m
«X	x	x	X ·	o	x		r-	II ♦
x	x	M	x —	Um	x	X		»Ό Γ*
en	r-H	<—<	«Η 4->	Q	m	CM	X		•
*		'w'	d)			'x'	o	- 1	s-*
n			f—<	K			N	Ό	ε
o	r-	CO	σ> Cn	rH	-ď	o	x	x in	x
o	o	CM	en C	o	<—<	Ολ	CO	X m	x
				Ľ>	•	*	II	CM ·
m	r*	r-	r* ω	u	n	kO	h)

X	<#P Λ¹
in		o	O	O
n	r*	CM	CM	CM
m	CM	'x-'	\x·	'x-''

Ο

in

f* rH

to ι-í ch

n ιη σχ

ο

to

• f* ch

• CM ·

CO ·

•

CO · ·

tn « i-4

to m

r*

\w f

to r4

Tf

ΓΊ F*

CO ΓΊ

M*

in in 1-4

o co co

O

to

• to 00

• CM ·

CO ·

•

co · ·

LA · rH

to in

r-

vo t r-

to xr r4

o

VO

cm n

tO 1-í

o

Ch ΓΊ

n n o

o

r*

• Ό O

* m ·

Ch ·

•

CO · ·

m · cvj

to in

r-

vo «r co

to rf r4

c H

z

<J X Z

o x z

1

x

*4

«4

*4

in

·.

K

*.

«4

CO

N

ΓΊ

4 «4

CO

r4

*—4

*-4

*-4,

.»4

m

*-«4

*4

^—4 ^-4,

*-4

Z—4

tn

x

in

•

*^4

*—4 *-4. X—4

*-44 *—4

CM

r4

o

tn

W

ω

73

«

e

73

tn tn

ω

e

•

f-

•

*-4.

tn

tn co ω

X x

•

*4

·».

«4.

r-

*.

v

•4 «4

»4

«4

o

II '

CO

tn

4.

•4 4 «4

CM <H

CO

F'

r-

m

X

x

X

x

X x

X

in

>75 X

•

X

XXX

4 *.

ΓΊ

n

CO

r4

«—í

CM

v

in

CM

•

t—» ť*> H

r4

H

•

v

CM

k

vo

CM CM CTt

73 tn

'*—·*

*—

'>—'

*—*

χ—4.

*4-*

,—4.

ώ sr

'«—’

F-

4

«4 *—*

4.

xi

*4_*

4—» *-_* »4Z

S-* *4—·

F-

^4,

^4

Z—4 *->4

m

tM

N

1

E 73

N

ro

m

1

X

XXX

.H O

r—í

O

Ch

*$·

X

cn

’S*

x

g to tn

Ch

CM

CO

»4

* in

x

«4

r-H O

co in m

H in H

Ch

F·

»-4

i-4 ΓΊ

<J o

σ>

rH

CM

r>

to

O

tD

I CO CO

O

ΓΊ

X

X σ

r- X

U o

f cm ir

U CM rH

•*r

4

«4

4 4

Q ·

•

II

•

II

Ό · *

M·

CM ·

II

r—<

Q ·

• · ·

O · ·

•

E

ω

in tn

O m

co

F*

r*

f*

h)

CO

*7)

*O CM to

F'

r-

F-

•^F-

h)

O n

e f* f-

O CO 05

f·

X-* n-''

<*> r· ¹ to

K

«> <M <*> r4 O O

K)

2% 00%

00% 10%

r

1

ⁿ

P

- H

P

r4

’-l 4

4· 4 Xf,

f—í

S p _t <*>

x H

♦ M· 4 S t-

♦ v E í

\ H

tjl

o

Γ*

o

E g O

u

X X

Q

A Λ, f-l

Q

ZJE

£ E H

Q

*4-*

*. *

Λ>

«4

4 4

o n

o

vo ch σι

to ch

o r- o

co to

o

to f*

to

in vo cm

n cn

1—í

n n n

n r>

n n n

Ch

Xf

ΓΊ

II

•4

o

O

o

OJ

Γ4

x cO

O

x ΙΛ

x_

X o

x_

CM

o

U

u

in

to

r*

CM

r*H

»—í

i-4

r4


		68.53 4.95 11.59
		68.47 4.96 11.57
		69.15 4.93 12.10
		U X Ζ
o vo co σ» σ\ ο n co ν ο <r u ο n η £ m χ ······ co · C0 · ιηηηηΓ^Γ'Γ'ΙίΝΓ^ΐΐ »— ο t-j m t-j ω CM « t - Μ _Μι e to ε ε to ω-σ ι εό δ rdlH * ··· · (\j . Η * υωϊΚΚΙΚΚΕηΧϊοχ Ο · TÍ η Ν η Η Η Ν · tn <Μ ·γΗ	<-< <ν m co α> »(Ν <ν <-t ο to ο —««. <3 ♦ · · · · X ·γ> r> η rH Γ* to ι « κ x χ x a HocoinHNHNn U σι μ· - - ' - - ο · · ε to ό ιη ·σ to Ο γ~ r~	κ ~ ο - - - (Μ Ν ιη — —m κ to to to · ό ο * ·. * σι Γ' ιι η η <-> X X X ·* »□ Ο 10 ΓΊ Η Η · . · . · Ε ι ε ό ι ε λ g ιη to σι * - ·- r- - icocootNXXroXX % · · · · to nt · m <H Ό m to r- r·'
<Η> ο ^sď Ε ± Η £ £ Q K σ\ 04 «-< ο	Λ» Ο Ο Μ η a a U Η Ε ο Q ο 04 η	** ^1-1 O M X + Z 4 \ g]c ^H£ £ _Q » *. tn co 10 ”t m r>
η ο κ» 55 η x 4 CM Ο	σ\ rH ΟΊ 11 ÍXJ Ο Μ υ	0\ rM ΓΊ II m O m x” 8 U
128	129	130

rH

m ό

O CO H

σ> γ~ t

« ω o

• ·

σ · ·

OJ · o

in n >

Ό M· H

en

Ό O

o in v

O Ό O

• σ' σ'

• ·

σ * *

m · o

in en vo

Ό ’f H

r*

CM CO

tn o in

n oi o

• o σ

• in ·

σ' · ·

Cn · H

in v o

Ό Tľ H

U Z Z

>1

z

*

íľ <u

' - - -z

* * * í7

X

Z-X

z—>.

r-l

z-^.

en

z—. z·—. φ z···»

OJ *·

·. ,—*

tfl CO T5

to CO

*—*

e

>

to CO Z <0

CO -P -P > Ό

O _Λ V)

<-<lí)T3

to

Ό

O CO

a -

K.

•t

σ\

«>

·> «.

•fc

VO

* * *. *· o

r. *·Ζ

-Z

K

z

en

z

z z

z

z z

CM

z

Z Z Z Z v

Z Z Z Z ~Z

g X m Y en *-*

K n

CM

rH

•

* CM

m en

CM

rH r4

•

’Sŕ

h to

n n (N H .

H rl H H (Λ rl

m '

<✓

r*

—. *»/

^«z *—»

0»*

S_z” V_z*

•w*

*--* *—·*—* ŕ'-

*—z z ^_z s—z v.z·

-r

1

e

n

1

ΰ

M 1

Ό

rH CM VO

vo

CM

- σ'

h σ' t'

CO

rH

VO

ό ra

H O Ό σ» Ό o

tn n Ό r- «J en

Ono

m co

cn

o

CM

Z

O CO CO

en

o o

(M

* en

o 0

U en co σ» o n

fin w o oh

Q · ·

• ·

•

vo ·

o · ·

•

• ·

• P

Q.....

~ · · · · P ·

U oj m

en m

10

r*·

o

*^f*·

U oj m

vo

r- o-

o·

E r-

CO XI

U n mo o o

e t*· r* r* co xi co

*> AO ° O

dP -

Γ* *-* H

\O ° O r· .HE

o vo r* m* *r en

rH

Kí z

M

♦ Z

ΙΠ

z

<*> ? <*> o <*> Λ

X ♦ i—i

in o d

x 1—(

o o ω

θ'

Γ)

φ o <h Γ»

ž έ q

c h n

in

Q

•H q

*

* * ».

*<*>

n \o

en en r*

en

θ'

θ' o n

OJ o

o σ vo

r*

cm σ

σ co en

*-*cn

en

*-* en

en en en

in

σ

o

II

en

OJ

II

H

u

o

M

n

o

z

M

fM

m

Z

o

a

o

s.

z

Z n

z

n

°o

8

U

U -r

U

Ί·

in

vo

n

CO

en

r4

rH

	Ch	03
•	m	rH
m	*	«
	Ť
KO
	K0	o
•	in	r4
in	•	•
v?
CO
03	n	m
•	«e	OJ
in	•	•
kD	-f

en 1 X x x x	en 1 X X	en 1 XXXXXXXX
Hin>in^Hnn	ΗΐηΗΠΗΜΟσιΓ-	ΗΓ'ΐηΗΗΜΜΗΌΗ
U Ό - -	q o ch - * m m o r-	(j n
q · · · E « « <n	Q . . E V) . . . .	Q •EUiwO'UWUiin
O r- r- t-'	U co r- ό o n oi	U >· '—.*—

	ľsl
Φ	C
CL	Φ
ω	4->
	C
•	f—
c
4-»
o	Nl
ε
ΧΣ	ε
O
Φ	•
L_	4-D
O	o
ΓΊ	ε
>	.C

c	JZ
L_	G)
'<Ú
ε	O
D	ε






1 ono - - · D CM CM O • · . · Λ x x x M CM x - x . x x x x x tn ω m r** x» —» E —· x-» - κ,Ι ffi X SC X r-< rH VO rH H rS tí) 0> CM U ...>o\cooio\ Q . β ω « e · · . · '-*tOenr4CM	σ» > 5T co in in H H H O σι ......o orr^rvoencMCv · en · . XXxxxxCMX t** «—x —x x-> «. -. —·* CM η 1 X X X X X X - x H σ> W H M H <N Π —x X) Qc) x x x x x x X x Q^gfflOMOanffl	CDClj 2.98 (3H, s), 3.00 (3H, s), 7.10-7.44 (11H, m)	x x χχ th 4J (n (Q -x. G - x-H _Λ X x X CM X (X m x x x CO {X-P CM H H . '-'«sa) 'x'— ^rM rH H 1 r-ι co P tno co in o (J Ch Q) C rl rl CM n Q · r> **4 · « « « UNOWbt'M'-E
O M rH p -* ** X. •U. S -'H sg*u x x£^Q σ^ vo > VO H en ΓΊ en	334, MH*, 100% 318 (20%), 290 (30%), 277 (20%) . DCI/NHj	337 100% DCI/NHj	K> 2 ^uS^Q r* en en
CO n II o Z o CJ X_ cF	en en en II O M z~ 8 υ	vo en m 6 ÍM ru x” fM ď	vo en en n k* ru O <\l x” o <xj O
142	143	144	145


r·									SO
tO tO	ΓΊ								in n n
• in	CO								• rH SO
r*· ·	•								CM · ·
SO M·	C'								r- so r-
Ό									CM
Ό \£)	í								CO Ch
in	CO								• o in
r- ·	«								CM · ·
so	t								r. so r-
σ>									rH
r* in	rH								C* CM CO
• sn	OS								♦ rH C-
r* ·	•								CM · ·
tO Tf									r- so r~
u x z			U X Z

	-x	'X
X“·*.	-^CM	— vo		CO CO CM	CO		. >	·	o	CO CM CO CM Ό CM
cn	ω — ω	M		(M <J	Ch			x-^ r*»	CM	rH OS O O OS
				• · ·	•		ε <o	m ω
*	*	*rH	CO	> *í n	CM		«.	*	co r-	r* to CO CM rH
x	X os K	X ’T	CM				x x	x x	CM
n	n · h	rH ·					os cm	cm vo
	-to		r*	x—.	X~X	x—x	X—'	—·	r-	* -—K <-> χ-χ
KJ	1	1	r% 1	ε u «	u	ω	Κ»		K>l xxxxxxxx
rH tO	σ\ in «-t	o	rH rH				h in in	CO o	rH rH Γ*	rH rH CM CM M M ČI
O θ'	Os CO tH	cm m	u	x x x x x	O *r cm	r~ o	U-r -
Q ·	• · x—» ·	• *	Q ·	CO (M CM	ΓΊ	Ό	Q · ·	• ·	O · g	cn to Ό tr o tn -p
U CM	cm so g r-	r- r- g	U c-	*—»		****	o > r-	xr co	U > ~	S-Z’SX^'w'SWS-/'.-/
							aŕ		<*>
			<*>	m			^Μ r	»	O O m
			CO	x			_kX		rH X
			-	z			♦ Z		Z

			x °	H			L. E H		♦ H
			οτ •*w	u Q					S u £ Q
			v-*
			x				* K
			rH CO				<7\ tO		m
			os so				<· so		SO
			n r>				CH ΓΠ		cn
							CO		CM
									tO
							m		CO
M							11		II
Uj
rj			«♦				m
o			o				o		o
			ΓΜ
z			Z				z		z
<			fSJ fxj				s		ÍSJ
x			x				x		x
o <M			n						Oj
u			u				u		u
to			t				CO		σ\
M·
rH			rH				rH		<H

6Ί


	in		H xf
	σι o o		c- tn r-
	» H rl		• Oi ·
	r-4 · ·		o · o
	CD 5* C-		MO H
	σι		CM VO
	CO rd σι		co ľ' t-
	• H O		• (h .
	rH · ·		o · o
	co u· r-		r- m h
	n		<n Ch
	o co d		d in c-
	• H N		• o ·
	CM · ·		o · o
	co ·* r-		r- in <s
	U X Z		Q X Z
			o
			* CM ·
cm σι	co co tn σ co		E · ci oiin^
• Ch	CM CM O Ch r*·	X^MS	-^r- cm σι σι X
r- ·		XXX XXXXX	1 · · · d
•H CM	o r- t— r— cm cm	nniNODMHCMH	O vo m CM rH -
n *	r»	- - -o - - - - ·.	d CM Ό
• * ·	♦ . ·» . * *· ·	C0C0T5 · E Ό C0 Ό CO	. . - » - «
C K — —v	t** <· “·· ^x -	X-' X-P x»· (X Χ-» X-p X—p X-p X-p	c- r- o
κ> 1 O X X	dl x x x x x x	n 1	_ml x x x M
H H H N W	ΗΗΓ*ΗΗΗΠΓΊ	h o n to in n o k in	HO - Ί· d d Λ
θ’*--··	θ’* ------	U o CO CO 01 *H CM d co	U ’T - - - -
Q · E W CO	Q · g co E n co to	Q........	Q · X E CO <0 CO
u c-	q r- — — — — — —	U d d co co t-t-r-c-	(J [S (S

			<#>
*» o	dP ** ·* o σι m o	<K> o	, HO * o d h
O wT	o 2 2	o	o ^M *- «
H £	<-< ' ^ω °	rH	H X
z	*Ä		* z
-x	λ Z df - ·-		- ·»-^ x
4 ^K	_t <#> Ju o co	4	♦ x dP d H
g u	x O H in CM M	E	Ego υ
£ Q	£ co - v d d X	£	si s \o * q
	— — Z		*χρ χρχ
*>	- dP - — X	*.	- *. Λ>
cn	r- σι o <* h co n	o	o r- σι o
r-<	co co <-i o in n O	tn	m o co cm
n	d d — ·μ· d d Q	r>	n co
CO			σ.
rH	((		CO
ΓΊ			CO

u	r-4		II
	u
CXJ	csi	•n
o	o	o	o
oj	rxi
Z «3	x	c	x

	X r- 8®	x o CM	x a
u	O d	O	u
o	r-<	CM	m
in	in	in	in
rH	rH		rH


	67.86 5.00 7.67
	67.83 4.96 7.60
	68.09 4.86 7.94
	O X Z
σχ ' ιη ο σχ r- ~ι · σχ σ Ό · r · · - ® r-» <Ν <μ X CM rH · ·. *. · „'-'t'· M 1 E Ό CO CO CO rH ΙΑ CM ' - - U^r^rXXXXX Q · · i£> cm rH en en U ľ' >	CDClj 7.41-7.30 (m,8H), 7.27 (S,1H), 7.22 (S,1H), 7.17 (S1H), 2.98 (s,6H)	CO - ' cm σ\ οχ t' cm σχ · r-- XX . . CM . CM CM H f' CM CM - <n Ό Ό · - - · τ· · Γ' x M 1 X X en x x h to o m· Ό h en en U xo m ·ί· - - ·. O > * · E co to to w υΓ'Γ'Γ'-''—
CO rH O CA JA <* <n o xo 'σχ^1-1o^co _K Ί· >»m + ^ + 1^ + O x CO Ä m· en	<p 2 o O w rH tC < z t?? H g ° U S - <*> en m o in in h n n	> o O n rH X .«Λ + Ό H S ΓΊ Q Ϊ Q Λ> rH O co tn o
ΛΙ r^-í U <M O Z <5 X” R U	II rH U OJ o nj ^.in sTcm 8<n U n	o CO r> II ω m O 2 o (\l X_ nj U
154 i 1	155	156






- <ν σ> to cm σι σ> Ό ... -σ> r- <ν <ν X <Μ (\ · — κ - _Μ ι e cn ra <η rH m <N - - - - U O xr x x x x O · · co «-t n n U co r	0 - -X ~ r~ +» <u to (0 ·— Ό 0 * >.<—< - * in » XffirH® X X -«r X _o tO 4J H U '-H H · Ctí ,n Φ <0 -H — r~ S H 5430 t giCffpC^HCOH O ΐβεΟΦ-Ηοοη -to · Ή τ4 *0 X5 · · · · Ό<νκ>·ηβ>Γ'>ΕΓ'	K. - - -x - -x **** X“x —·. X“ ΓΠ tO W CO (0 (0 * * * VO * ·> O ϊ X ϊ σι X X n cn n o · h h · '—'VO •n 1 1 rH r* (n vo m φ φ cn O σν o co co O H CN č · · · · “> · · · **. U (N cn cn vo £ > > > E
» ·% ♦ p 5 \ i ^w z U ~ Q -<#> r- o Γ' o <n «-(	397:399, (1:1), 100% DCI/NHj	385 100%
* o CM X O CM X CM CM U	II k » rj O H <M ^+! xV Rôt U n	II OJ h n O N z n «\r Rco U r>
160	161	162


ta	r-	VO
r- ta r~	* r* <r	n o tn
• v	• <n tn	• tn tn
CO « ·	CO · ·	tn · ·
tn tj· vo	vo tn r-	tn m ta
tn	CM
co vo vo	σι tn	O CO vo
•	• h tn	• ’t m
CD · ·	CD · ·	tn · ·
tn v vo	vo tn r-	tn m ta
CO		r-
O CD vo	co co in	tn o n
• ·ντ tn	• (N VO	• tn r-
σ\ · ·	00 · ·	tn · ·
tn v vo	vo tn r-	tn m ta
u x z	U X Z	U X Z
%		K
.....>x	.....-x	- - -x x - - -
K z—<k z—·» Z·—* (\ *	Λ Z-» », z«~ x·. J“·	·« * — rH CO λ*'» “*—->->
m tn βΐΌ <n e-k	a tn tn ό E Ό	tn tn tn '-z tn -u -p Ό
M
* w ·. O -	- * * * . tn	* * σ\ o * * *
X K K X X K n	X X X X X X ta	X X X (M «ŕ xxxx
n n n (N H n * n	n n n μ (N c\ ·	O H H * · H H H H
m	%-»» »—· s— -V—*’ s^· fx.	—<-- V-* fX (X >—''-o' X^ X-
•n 1 ·	K> 1	Kl 1 1
<-(Η<Νΐη<Ν<ΝΓ^ηΓ'	<-icor-(tnr>oeovo	rH rH tn ta ta ta C VO ta Γ-
CJtaOCOtar-tr-tOt	UtaOCDtaHHCM	U CO CO O (N ~ta »τί· tn VO «Η
Q.......z-.z-^	O.......—.	Q · · · · —» · — · · · ·
Ucvitatavor-r-r- E Ό	ΟίΝηηνοΓ'Γ'Γ' E	U « n r* t' e > E r- t·' r- co
ΚΊ		<*>
Ä	X	ta O VO (ŕf
2	&	in o ta
\	. x	vf rl VO
<* H	<* H	\ X
ta O o	O Q	H . Xf >x#
M O Q	O Q	tn H CO rH
-t rH	H	·· v ·· ot
·« ««		X vo χνο
r* o	r«	0\ ·· CM ·· CM
CM o	vo	’C ta ta ta o
•<r h	n	·<*
	vo
	VO
II	co	N
	H	ru
k		rH
CQ	U.	u
K)	n
O H	o	o
	rj
^+1		5ζ

K r* rvOi	x_
U	u	U M·
CO		tn
VO	VO	vo
rH	H	r4

<υ ω & Η
Mikroanalýza	namerané	73.56 5.90 7.44
73.59 5.77 7.46
vypočítané	73.78 5.92 7.48
U Ä Ä
« S Z x r~H	rozpúšťadlo 6 vždy 400 MHz	1 1 m k in ir> co <n (N o - •v m ω en o n n z-, m • E E co o -’ίηηΌΓ'Γ'Γ' - Ό OKO K <0 O x~. λ. λ λ ' p Μ1 E 1 ΕΌΌ t» Λ <-< <ν - r- ιη - - - - - ~ ο μ}· OoK^oStCJEMSKvciK Q · <Ν · · Η <s Π N Η Η . . <-( Ο Ο —Ό Ο — — Γ- '—
d) O< ω • e i 4-> 0 £ X	m/z, intenzita	Λ> Ο Ο μ <—< κ -V ® Η ν υ ^s Q m Γ η
Sumárny vzorec molek. hmotn. 1	r* ο Η Ο (Μ 'Ζ* <Μ <Μ X ΚΙ (Μ Ο
£		166






EEe'o' ω'-σ ‘muľ'O ΕΕΛ Κ Κ X ϊ XX XXX XXX C4 r\i <-< cn -η cm ·.Η η cm - ,-Η *4· <-η K, N N Ν Ηθσ\ιηωΐΦθΧΐηοα)Χΐηη> OfHdOinvottCir'OoiCMt^ci'trco Q .... \|\| . . \|\| · . . \|\| ... UoorMdi-jo'Dt-jr'r't^i-sr-r-c^	........χ χχχχχχχχ^ ΝΝΗΗΝΓΧΝΝ · Μ 1 ΗΟΓ'ΟιησιίηΜ'ώΓ^ UOnOO^D^rlN Q.......... υοοΗηηη'ΟΓ'Γ' E	σ\ H CM CO • vo σι σ\ r* · · · <Ti n (N o CM * * K K *. · r~ E r, i -o ty « -p H CM X - - - U O K S K K Q · h cm cm r> m U Γ- —x-
Λ> Ο Ο Μ γΗ X t- ^Η Ε υ * Q ιη Γ' Γ)	tÉ° Λ> ? 2 ° H Q v σ\ CO n	<> o O _M<H X X h V ^υ Q CO n n
ΚΙ ο <Μ Ζ ΙΜ (Μ ζ κι ΙΜ υ	Kl o (M Z IM Ä «*» IM O	IM O CM Z O IM x_ CM O
167	168	169


74.20 6.28 7.26
73.95 6.24 7.15
74.21 6.23 7.21
u x x
r^doifflinoo^o ot^r^xocococorHoo n M M M M M MM M M MM W« I Mm MM MM MM MM MM Mm Mm ΟΓ^ΗΗ(ΝΓ)(Ν()Η(Ν(\ • e « aOtf w E e e fS %-x 't--' —* s—* ’ M- MM- Sm*	^Λoxxxxxxxx QMňNHHCNNM ^(OWOfflMOOO \J - X-X — Xm> — X-ď ♦ M H^OnCONinHH UO^OfN^^ifin Q........ υΓ)Γ>>Γ'Γ'Γ'Γ'Κ
£r- O £ M ♦ ' in <#> ľ> S o ° u £ m <-i q v M σι cih CO n rH n n <	> dŕ o ÍL —i O ° af «» hs o Ch 00 m o
m O OJ % # OJ X r OJ U	to O K) x” o OJ υ
170	171

Claims

1. Diketopiperazín, ktorý má všeobecný vzorec A:

(A) kde všetky R₁₄ a R₁₅ sú rovnaké alebo odlišné a môžu nezávisle od seba byt H alebo alkyl C₁-C₆, za predpokladu, že aspoň jeden zo substituentov R₁₄ alebo R_1S je alkyl C₁-C₆; a všetky R_x až R₁₀ sú rovnaké alebo odlišné a môžu nezávisle od seba byt H alebo alkyl 0_χ-0₆nesubstituovaný alebo substituovaný jedným alebo niekoľkými halogénovými atómami, alkoxyl C_x-C₆, Cj-Cg, halogén, hydroxyl, fenyl, -kyáno, -NHSO^¹³

N(R^{X 2} )

-CH 20C0R¹

-CH jjSCOR¹

-CH₂NHCO(CH₂) _nC0 ₂R -NHCO(CH₂)_nCO₂R¹¹, pričom n je 0 alebo nezávisle

R¹¹ a R¹²vytvárať kruh ;

od seba alkyltio nitro, poprípade substituovaný f

),

-CH₂C00H, -C00R¹¹, ^:1R¹²), -SOR¹³, SO₂N(R ²), -O(CH₂)_nC0₂R³¹

-CH jNHCOOR¹³, kde m je

-N(R³¹)COR^{X 2}, ¹¹ a -NHC0(CH₂)_n0R

-NHCOR¹

Hr12

-OCOR¹-CH^R¹ alebo 2

-NHCOCF ₃

1 1 t

sú pripojené nasýtený päťa R¹³ je alkyl a R₃, a Rio

-CH₂OH, -SO₂R¹³, -CON(R -0(CH2)nN(R¹¹R¹-CH 2NHC0R¹¹, -CH2S(O)_mR¹³1 1 f

-NHCO(CH₂)_nOCOR celé číslo 1 až 6, každé R¹¹ a R¹²

H alebo alkyl Cj-C₆ alebo pokiaľ sú na rovnaký atóm dusíka môžu poprípade alebo šestičlenný heterocyklický

Cj^-Cg,· alebo ktorákoľvek skupina

R ₂ a R ₃, R ₃ a R₄, R₄aR₅, R₆aR_7/R₇ a R _s, R₉ a R_xo tvorí s atómom uhlíka, na ktorý pripojená, benzénový kruh, poprípade substituovaný, ďalej farmaceutický prijateľné soli, poprípade estery uvedených a R₂, a R₉,

Rx r₈ je

- 76 látok, s výnimkou zlúčenín kde:

(i) všetky skupiny R₃ až R₁₀ sú H; alebo (ii) obidve skupiny R₁₄ a R₁₅ sú Me, R₀ je OMe a ostatné zo skupín R₄ až R₁₀ sú H.

2. Zlúčenina podlá nároku 1,vyznačujúca sa tým, že jedna zo skupín R₁₄ a R₁₅ je metyl, etyl alebo cyklopropylmetyl a druhá je H, metyl, etyl alebo cyklopropylmetyl.

3. Zlúčenina podlá nároku 1 alebo 2, vyznačujúca sa t ý m , že jedna zo skupín R₆ až R₁₀ je hydroxy, halogén, alkoxy, -NHCOR¹¹, -COOR¹¹, -SO₂R¹³,

-CON(R¹¹R¹²), N0₂, -SO₂N(R¹¹R¹²) , -SOR¹³ a N(R³¹COR¹²),

a ostatné štyri zo skupín R₆ až R₁₀ sú H. 4 . Zlúčenina podľa nároku 3, v yznačujú c a sa tým, že R₈ je hydroxy, halogén, alkoxy, -NHCOR¹¹ -COOR¹¹, -SO₂R¹³, -CONtR^R¹ -SOR¹³ a N(R¹¹COR¹²), a R₆, R₇, ²), NO 2, -SO R₈ a R-l ₀ sú H. ₂N(R^{3 3}R^{3 2}) 5 . Zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov vyznačuj ú c a sa tým, že R_x je H halogén alebo NO ₂; R 2 je H, R₃ je H, -NHCOR¹¹

-N(R³¹COR¹²) , alkoxy ί\-(Ζ₆ alebo halogén; R₄ je H a R₅ je H alebo halogén.

6. Zlúčenina podlá ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3, vyznačujúca sa tým, že ktorékoľvek dve susediace skupiny z Rj až R₁₀ tvoria spolu s atómom uhlíka, na ktorý sú pripojené, poprípade substituovaný benzénový kruh.

7. Zlúčenina podlá nároku 1 zo skupiny ( 3Z,6Z)-3-benzylidén-6-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-2,5-piperazindion;

( 3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-2,5-piperazindion;

( 3Z,6Z)-3,6-dibenzylidén-l-metyl-2,5-piperazindion;

( 3Z,6Z)-3-benzylidén-6-(4-hydroxybenzylidén)-l-metyl-2,5-piperazindion;

metylester 4-(3Z,6Z)-3-benzylidén-l-metyl-2,5-dioxopiperazín-6-ylidén)metylbenzoovej kyseliny

4—(3 Z,6Z)-3-benzylidén-l-metyl-2,5-dioxopiperazín-6-ylidén)metylbenzoová kyselina;

( 3Z,6Z)-3-(3-hydroxymetyIbenzylidén-6-benzylidén-1,4-dimetyl-

2,5-piperazindion;

( 3Z,6Z)-3-benzylidén-l-metyl-6-(4-nitrobenzylidén)-

2.5- piperazindion;

N,N-tetrametylén-4-((3Z,6Z)-3-benzylidén-1-mety1-

2.5- dioxopiperazín-6-ylidén)metylbenzamid;

( 3Z,6Z)-6-(4-aminobenzylidén)-3-benzylidén-1-metyl-

2.5- piperazindion;

4 - ( (3 Z,6Z)-3-benzylidén-l-metyl-2,5-dioxopiperazín-6-ylidén)metylbenzamid;

(3Z,6Z)-3-(4-acetamidobenzylidén)-6-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-3-(2,6-dichlórbenzylidén)-6-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-2,5-piperazindion;

( 3Z,6Z)-6-(4-metoxybenzylidén)-1-mety1-3-(2-nitrobenzylidén)-2,5-piperazindion;

( 3Z, 6Z)-6-(4-metoxybenzylidén)-1-mety1-3-(4-N-metylacetamidobenzylidén)-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-6-(2,6-dichlórbenzylidén)-3-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-2,5-piperazindion;

( 3Z,6Z)-3-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-6-(2-nitrobenzylidén)-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-6-(4-acetamidobenzylidén)-3-(4-metoxybenzylidén)-1-metyl-2,5-piperazindion;

(3Ζ , 6Ζ)-3-(4-(3-Ν,N-dimetylaminopropoxy)benzylidén)-6-(4-metoxybenzylidén)-l-metyl-2,5-piperazindion hydrochlorid;

(3 Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimety1-3-(4-trifluórmetylbenzylidén)-2,5-piperazindion;

(3 Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimety1-3-(1-naftylmetylén)-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(4-dimetylaminobenzylidén)-1,4-dimety 1-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(2-metoxybenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion;

( 3Z,6Z)-3-(4-aminobenzylidén)-6-benzylidén-l,4-dimety1-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(2-fluorobenzylidén)-1,4-dimety1-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(4-fluorobenzylidén)-1,4-dimety1-2,5-piperazindion;

(3 Z,6Z)-6-benzylidén-3-(2,4-difluorobenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-3-(4-acetoxymetylbenzylidén)-6-benzylidén-l,4-dimety1-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-3-(3-acetoxymetylbenzylidén)-6-benzylidén-l,4-dimety1-2,5-piperazindion;

(3 Z,6Z)-6-benzylidén-3-(4-etoxybenzylidén)-1,4-dimety1-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-3,6-dibenzylidén-l,4-dimetyl-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(2,6-dichlórbenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-6-(4-aminobenzylidén)-3-(4-metoxybenzylidén)-1-metyl-2,5-piperazindion;

(3 Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimety1-3-(4-N-metylacetamidobenzylidén)-2,5-piperazindion;

(3 Z,6Z)-6-benzylidén-3-(3,4-dichlórbenzylidén)-1,4-dimety 1-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(3-chlórbenzylidén)-1,4-dimety1-2,5-piperazindion;

- 79 ( 3 Z ,6Z) - 6-benzylidén-l,4-dimetyl-3-(4-metylsulfinylbenzylidén)-2,5-piperazindion;

N,N-dimetyl-4-((3Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-2, 5dioxopiperazín-3-ylidén)metylbenzénsulfonamid;

( 3 Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-3-(2-N-metyltrimetylacetamidobenzylidén)-2,5-piperazindion;

( 3Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-3-(4-fenylbenzylidén)-2,5-piperazindion;

metylester 4-((3Z,6Z)-6-benzylidén-l,4-dimetyl-2,5-dioxo-piperazín-3-ylidén)metylbenzoovej kyseliny;

( 3Z,6Z)-6-benzylidén-3-(4-brómbenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-3-(2,4-difluórbenzylidén)-6-(4-metoxybenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion;

( 3Z,6Z)-3-(4-brómbenzylidén)-6-(4-metoxybenzylidén)-1,4-dimetyl-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-3-(4-fluórbenzylidén)-6-(4-metoxybenzylidén)-1,4-dimety1-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-3-(2,6-dichlórbenzylidén)-1,4-dimetyl-6-(2-nitrobenzylidén)-2,5-piperazindion;

( 3 Z,6Z)-6-benzylidén-l-cyklopropylmetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-3-benzylidén-l-cyklopropylmetyl-6-(4-metoxybenzylidén)-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-6-benzylidén-l-cyklopropylmetyl-3-(4-metoxybenzylidén)-4-metyl-2,5-piperazindion;

( 3Z,6Z)-3,6-dibenzylidén-l-etyl-4-metyl-2,5-piperazindion;

(3Z,6Z)-3-benzylidén-l-cyklopropylmetyl-6-(4-metoxybenzylidén)-4-mety1-2,5-piperazindion.

8. Farmaceutický alebo veterinárny prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje farmaceutický alebo veterinárne prijateľný nosič alebo riedidlo a ako účinnú zložku zlúčeninu, ktorá je nárokovaná v ktoromkoľvek z predchádzajúcich nárokov.

9. Spôsob prípravy zlúčeniny, ktorá je definovaná v nároku

1, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje nasledujúce kroky:

(a) kondenzácia zlúčeniny, ktorá má všeobecný vzorec I kde R₆ až R₁₀ a R₁₅ majú význam ako je definované v nároku 1 a sú poprípade chránené, so zlúčeninou, ktorá má všeobecný vzorec II:

kde R₄ až R₅ majú význam ako je definované v nároku 1 a sú poprípade chránené, v prítomnosti zásady a organického rozpúšťadla, smerujúce ku vzniku zlúčeniny, ktorá má všeobecný vzorec A, v ktorom R₁₄ je H; alebo (b) kondenzácia zlúčeniny, ktorá má všeobecný vzorec ľ:

kde R_x až R₅ a R₁₄ majú význam la sú poprípade chránené, všeobecný vzorec III:

ako je definované v nároku so zlúčeninou, ktorá má (III) kde majú poprípade význam ako je definované v nároku chránené, v prítomnosti zásady la sú a organického rozpúšťadla a (c) pokial je to žiaduce, premena zlúčenín, ktoré majú všeobecný vzorec A, v ktorom R₁₄ resp. R₁₅ predstavujú H, na odpovedajúce zlúčeniny, ktoré majú všeobecný vzorec A, v ktorom R₁₄ resp. R₁₅ predstavujú alkylovú skupinu Cj-C₆, reakciou s alkylačným činidlom a/alebo, pokiaľ je to žiaduce, odstránenie poprípade prítomných chrániacich skupín a/alebo, pokiaľ je to žiaduce, premena jednej zlúčeniny so všeobecným vzorcom A na inú zlúčeninu so všeobecným vzorcom A a/alebo, pokiaľ je to žiaduce, premena zlúčeniny so všeobecným vzorcom A na jej farmaceutický prijateľnú soľ alebo ester a/alebo, pokiaľ je to žiaduce, premena soli alebo esteru na voľnú zlúčeninu a/alebo, pokiaľ je to žiaduce, separácia zmesi izomérov zlúčenín so všeobecným vzorcom A na jednotlivé izoméry.

10. Použitie zlúčeniny definovanej v ktoromkoľvek z nárokov 1 až 8 ako modulátora multiplitnej rezistencie voči liečivu.

11. Použitie diketopiperazínu, ktorý má všeobecný vzorec A (A) kde všetky nezávisle

R x 4 od a Ri ₅seba predpokladu, že aspoň

R₁₅ je alkyl C_rC₆; a sú rovnaké byť. H jeden všetky alebo odlišné a môžu alebo alkyl C^Cj, za zo substituentov R₁₄ alebo R 3 až R j, ₀ sú rovnaké alebo odlišné a môžu nezávisle od seba byt H alebo alkyl Ci-C₆nesubstituovaný alebo substituovaný jedným alebo niekoľkými halogénovými atómami, Ci-C₆, halogén, hydroxyl, fenyl, -kyáno, -NHSC^R¹³N(R^{3 2} ) -CH 2OCOR¹-CH2SCOR¹-CH ₂NHCO(CH ₂) _nCO ₂R -NHCO(CH₂)_nCO₂R^1X, pričom n je 0 alebo nezávisle R¹¹ a R¹²vytvárať kruh ;

substituovaný jedným alkoxyl alkyltio nitro, poprípade substituovaný -ch₂cooh, -coor¹¹, “r¹²), -SOR¹³, SO₂N(R ²), -O(CH₂)_nCO₂R¹¹

-CH2NHCOOR¹³, kde m je 1

-N(R³¹)COR^{X 2}, ¹¹ a -NHCO(CH₂)_nor a R^{1 2}

-NHCOR¹ ^{1 2} —OCOR¹-CHjSR¹alebo

-CH₂OH,

-SO₂R¹³, -CON(R -O(CH₂)_nN(R¹¹R¹

-CH 2NHCOR¹¹, -CH₂S(O)_mR¹³

1 1 t

-NHCO(CH₂)_nOCOR celé číslo 1 až 6, každé R¹¹

H alebo alkyl Cj-Cj alebo pokial sú na rovnaký atóm dusíka môžu poprípade alebo šesťičlenný heterocyklický Cj-C₆; alebo ktorákoľvek skupina R_x

R 2 ³ R 3 í R 3 ^a R 4 t R 4 ^a R 5 r 3^8 1^8

R_g a R₁₀ tvorí s atómom uhlíka,na ktorý je pripojená, benzénový kruh, poprípade substituovaný, ďalej použitie farmaceutický prijateľných solí, poprípade esterov uvedených látok, pri príprave liečiv, ktoré slúžia ako modulátory multiplitnej rezistencie voči a R₂, a R_g, od seba pripojené nasýtený päta R¹³ je alkyl a R 3 <

a Rio liečivu.

f

-NHCOCF3,

1 1 f sú

12. Použitie zlúčenín definovaných v ktoromkoľvek z nárokov

1 až 7 ako modulátorov multiplitnej rezistencie voči liečivu podľa nároku 11.