RU2828702C1 - "mira" strain of feline calicivirus virus of feline calicivirus infection for making biopreparations for diagnosis and specific prevention of feline calicivirus infection - Google Patents
"mira" strain of feline calicivirus virus of feline calicivirus infection for making biopreparations for diagnosis and specific prevention of feline calicivirus infection Download PDFInfo
- Publication number
- RU2828702C1 RU2828702C1 RU2024111016A RU2024111016A RU2828702C1 RU 2828702 C1 RU2828702 C1 RU 2828702C1 RU 2024111016 A RU2024111016 A RU 2024111016A RU 2024111016 A RU2024111016 A RU 2024111016A RU 2828702 C1 RU2828702 C1 RU 2828702C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- feline calicivirus
- virus
- mira
- infection
- Prior art date
Links
- 241000714201 Feline calicivirus Species 0.000 title claims abstract description 85
- 208000006339 Caliciviridae Infections Diseases 0.000 title claims abstract description 38
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 48
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 20
- 241000710198 Foot-and-mouth disease virus Species 0.000 claims description 2
- 244000037640 animal pathogen Species 0.000 claims description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 abstract description 20
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 abstract description 16
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 abstract description 13
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 abstract description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 8
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 abstract description 7
- 241000282324 Felis Species 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 abstract description 5
- 241000714198 Caliciviridae Species 0.000 abstract description 4
- 241000369696 Vesivirus Species 0.000 abstract description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 abstract 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 16
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 8
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 7
- 241001135893 Themira Species 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 5
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 4
- 101000768957 Acholeplasma phage L2 Uncharacterized 37.2 kDa protein Proteins 0.000 description 3
- 101000823746 Acidianus ambivalens Uncharacterized 17.7 kDa protein in bps2 3'region Proteins 0.000 description 3
- 101000916369 Acidianus ambivalens Uncharacterized protein in sor 5'region Proteins 0.000 description 3
- 101000769342 Acinetobacter guillouiae Uncharacterized protein in rpoN-murA intergenic region Proteins 0.000 description 3
- 101000823696 Actinobacillus pleuropneumoniae Uncharacterized glycosyltransferase in aroQ 3'region Proteins 0.000 description 3
- 101000786513 Agrobacterium tumefaciens (strain 15955) Uncharacterized protein outside the virF region Proteins 0.000 description 3
- 101000618005 Alkalihalobacillus pseudofirmus (strain ATCC BAA-2126 / JCM 17055 / OF4) Uncharacterized protein BpOF4_00885 Proteins 0.000 description 3
- 102100020724 Ankyrin repeat, SAM and basic leucine zipper domain-containing protein 1 Human genes 0.000 description 3
- 101000967489 Azorhizobium caulinodans (strain ATCC 43989 / DSM 5975 / JCM 20966 / LMG 6465 / NBRC 14845 / NCIMB 13405 / ORS 571) Uncharacterized protein AZC_3924 Proteins 0.000 description 3
- 101000823761 Bacillus licheniformis Uncharacterized 9.4 kDa protein in flaL 3'region Proteins 0.000 description 3
- 101000819719 Bacillus methanolicus Uncharacterized N-acetyltransferase in lysA 3'region Proteins 0.000 description 3
- 101000789586 Bacillus subtilis (strain 168) UPF0702 transmembrane protein YkjA Proteins 0.000 description 3
- 101000792624 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YbxH Proteins 0.000 description 3
- 101000790792 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YckC Proteins 0.000 description 3
- 101000819705 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YlxR Proteins 0.000 description 3
- 101000948218 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YtxJ Proteins 0.000 description 3
- 101000718627 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Putative RNA polymerase sigma-G factor Proteins 0.000 description 3
- 101000641200 Bombyx mori densovirus Putative non-structural protein Proteins 0.000 description 3
- 101000947633 Claviceps purpurea Uncharacterized 13.8 kDa protein Proteins 0.000 description 3
- 101000948901 Enterobacteria phage T4 Uncharacterized 16.0 kDa protein in segB-ipI intergenic region Proteins 0.000 description 3
- 101000805958 Equine herpesvirus 4 (strain 1942) Virion protein US10 homolog Proteins 0.000 description 3
- 101000790442 Escherichia coli Insertion element IS2 uncharacterized 11.1 kDa protein Proteins 0.000 description 3
- 101000788354 Escherichia phage P2 Uncharacterized 8.2 kDa protein in gpA 5'region Proteins 0.000 description 3
- 101000770304 Frankia alni UPF0460 protein in nifX-nifW intergenic region Proteins 0.000 description 3
- 101000797344 Geobacillus stearothermophilus Putative tRNA (cytidine(34)-2'-O)-methyltransferase Proteins 0.000 description 3
- 101000748410 Geobacillus stearothermophilus Uncharacterized protein in fumA 3'region Proteins 0.000 description 3
- 101000772675 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) UPF0438 protein HI_0847 Proteins 0.000 description 3
- 101000631019 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) Uncharacterized protein HI_0350 Proteins 0.000 description 3
- 101000768938 Haemophilus phage HP1 (strain HP1c1) Uncharacterized 8.9 kDa protein in int-C1 intergenic region Proteins 0.000 description 3
- 101000785414 Homo sapiens Ankyrin repeat, SAM and basic leucine zipper domain-containing protein 1 Proteins 0.000 description 3
- 101000782488 Junonia coenia densovirus (isolate pBRJ/1990) Putative non-structural protein NS2 Proteins 0.000 description 3
- 101000811523 Klebsiella pneumoniae Uncharacterized 55.8 kDa protein in cps region Proteins 0.000 description 3
- 101000818409 Lactococcus lactis subsp. lactis Uncharacterized HTH-type transcriptional regulator in lacX 3'region Proteins 0.000 description 3
- 101000878851 Leptolyngbya boryana Putative Fe(2+) transport protein A Proteins 0.000 description 3
- 101000758828 Methanosarcina barkeri (strain Fusaro / DSM 804) Uncharacterized protein Mbar_A1602 Proteins 0.000 description 3
- 101001122401 Middle East respiratory syndrome-related coronavirus (isolate United Kingdom/H123990006/2012) Non-structural protein ORF3 Proteins 0.000 description 3
- 241001430197 Mollicutes Species 0.000 description 3
- 101001055788 Mycolicibacterium smegmatis (strain ATCC 700084 / mc(2)155) Pentapeptide repeat protein MfpA Proteins 0.000 description 3
- 101000740670 Orgyia pseudotsugata multicapsid polyhedrosis virus Protein C42 Proteins 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 101000769182 Photorhabdus luminescens Uncharacterized protein in pnp 3'region Proteins 0.000 description 3
- 101000961392 Pseudescherichia vulneris Uncharacterized 29.9 kDa protein in crtE 3'region Proteins 0.000 description 3
- 101000731030 Pseudomonas oleovorans Poly(3-hydroxyalkanoate) polymerase 2 Proteins 0.000 description 3
- 101001065485 Pseudomonas putida Probable fatty acid methyltransferase Proteins 0.000 description 3
- 101000711023 Rhizobium leguminosarum bv. trifolii Uncharacterized protein in tfuA 3'region Proteins 0.000 description 3
- 101000948156 Rhodococcus erythropolis Uncharacterized 47.3 kDa protein in thcA 5'region Proteins 0.000 description 3
- 101000917565 Rhodococcus fascians Uncharacterized 33.6 kDa protein in fasciation locus Proteins 0.000 description 3
- 101000790284 Saimiriine herpesvirus 2 (strain 488) Uncharacterized 9.5 kDa protein in DHFR 3'region Proteins 0.000 description 3
- 101000936719 Streptococcus gordonii Accessory Sec system protein Asp3 Proteins 0.000 description 3
- 101000788499 Streptomyces coelicolor Uncharacterized oxidoreductase in mprA 5'region Proteins 0.000 description 3
- 101001102841 Streptomyces griseus Purine nucleoside phosphorylase ORF3 Proteins 0.000 description 3
- 101000708557 Streptomyces lincolnensis Uncharacterized 17.2 kDa protein in melC2-rnhH intergenic region Proteins 0.000 description 3
- 101000649826 Thermotoga neapolitana Putative anti-sigma factor antagonist TM1081 homolog Proteins 0.000 description 3
- 101000827562 Vibrio alginolyticus Uncharacterized protein in proC 3'region Proteins 0.000 description 3
- 101000778915 Vibrio parahaemolyticus serotype O3:K6 (strain RIMD 2210633) Uncharacterized membrane protein VP2115 Proteins 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 3
- 238000013081 phylogenetic analysis Methods 0.000 description 3
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 3
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000833492 Homo sapiens Jouberin Proteins 0.000 description 2
- 101000651236 Homo sapiens NCK-interacting protein with SH3 domain Proteins 0.000 description 2
- 102100024407 Jouberin Human genes 0.000 description 2
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 2
- KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 2-(diethylamino)ethyl 4-aminobenzoate;(2s,5r,6r)-3,3-dimethyl-7-oxo-6-[(2-phenylacetyl)amino]-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid;hydrate Chemical compound O.CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1.N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 0.000 description 1
- 208000031295 Animal disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 206010053172 Fatal outcomes Diseases 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007476 Maximum Likelihood Methods 0.000 description 1
- 206010028034 Mouth ulceration Diseases 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 208000006595 Necrotizing Ulcerative Gingivitis Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 206010051497 Rhinotracheitis Diseases 0.000 description 1
- 206010039424 Salivary hypersecretion Diseases 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 210000002200 mouth mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 208000026451 salivation Diseases 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 206010040872 skin infection Diseases 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 201000008587 ulcerative stomatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
Abstract
Description
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии, может быть использовано для разработки и изготовления средств диагностики и специфической профилактики калицивирусной инфекции кошек.The invention relates to the field of veterinary virology and biotechnology and can be used to develop and manufacture diagnostic and specific prophylactic means for calicivirus infection in cats.
Возбудитель калицивирусной инфекции кошек (калицивироза кошек) принадлежит к семейству Caliciviridae, роду Vesivirus и представляет собой безоболочечный вирус икосаэдрической формы, геном которого представлен одноцепочечной положительной РНК [1, 2]. Заболевание характеризуется поражением верхних дыхательных путей, конъюнктивитом, язвенным стоматитом, в более редких случаях артритами, пневмонией, энтеритами, отеками подкожной клетчатки и системной инфекцией с летальным исходом [3, 4]. Калицивирозом кошек болеют домашние и дикие представители семейства кошачьих [5, 6]. Восприимчивы к инфекции кошки любой породы и возраста, но тяжелее болезнь протекает у котят в возрасте до 1 года [5]. Распространенность калицивирусной инфекции в популяции кошек высока (50-90%), особенно среди животных, содержащихся в приютах и питомниках [3, 7, 8]. Вакцины против калицивирусной инфекции кошек применяются уже около пятидесяти лет, однако, калицивирус характеризуется высокой степенью изменчивости и большим антигенным разнообразием штаммов, что значительно снижает эффективность применяющихся вакцин. Изучение генетической структуры штаммов вируса калицивироза, циркулирующих на территории Российской Федерации, и использование этих штаммов при производстве вакцин, значительно облегчит разработку средств специфической профилактики, обеспечивающих надежную защиту от данной инфекции.The causative agent of feline calicivirus infection (feline calicivirusosis) belongs to the Caliciviridae family, Vesivirus genus and is a non-enveloped icosahedral virus with a genome represented by single-stranded positive RNA [1, 2]. The disease is characterized by damage to the upper respiratory tract, conjunctivitis, ulcerative stomatitis, and, in rare cases, arthritis, pneumonia, enteritis, subcutaneous tissue edema and systemic infection with a fatal outcome [3, 4]. Feline calicivirus infection affects domestic and wild representatives of the feline family [5, 6]. Cats of any breed and age are susceptible to the infection, but the disease is more severe in kittens under 1 year of age [5]. The prevalence of calicivirus infection in the cat population is high (50-90%), especially among animals kept in shelters and nurseries [3, 7, 8]. Vaccines against feline calicivirus infection have been used for about fifty years, however, calicivirus is characterized by a high degree of variability and a large antigenic diversity of strains, which significantly reduces the effectiveness of the vaccines used. Studying the genetic structure of calicivirus strains circulating in the territory of the Russian Federation and using these strains in vaccine production will significantly facilitate the development of specific prophylaxis agents that provide reliable protection against this infection.
В настоящее время известны следующие штаммы вируса калицивироза кошек, которые применяются для диагностики калицивирусной инфекции, а также для производства вакцин против данного заболевания:Currently, the following strains of feline calicivirus are known, which are used for the diagnosis of calicivirus infection, as well as for the production of vaccines against this disease:
- штамм «F-9» [9];- strain "F-9" [9];
- штамм G1 [7];- strain G1 [7];
- штамм «Ларс» [10];- strain "Lars" [10];
- штамм «Эшли» [11];- strain “Ashley” [11];
- штамм «Фауна» [12];- strain "Fauna" [12];
- штамм «Перс» [13].- strain "Persian" [13].
Штаммы «F-9» и «G1» входят в состав импортных ассоциированных вакцин против инфекционных болезней кошек. Данные о штамме «F-9» представлены в GenBank, однако, исследования показывают, что с момента его выделения, вирус калицивироза претерпел значительные генетические изменения, и вакцины на основе штамма «F-9» (и альтернативного ему «F-255») не могут обеспечить надежную защиту от заражения новыми штаммами [14]. Кроме того, на территории РФ импортные препараты, изготовленные на основе этих штаммов имеют высокую стоимость.Strains "F-9" and "G1" are included in imported associated vaccines against infectious diseases of cats. Data on the strain "F-9" are presented in GenBank, however, studies show that since its isolation, the calicivirus has undergone significant genetic changes, and vaccines based on the strain "F-9" (and the alternative "F-255") cannot provide reliable protection against infection with new strains [14]. In addition, in the territory of the Russian Federation, imported drugs made on the basis of these strains are expensive.
Штамм калицивирусной инфекции «Эшли» запатентован в 2016 г. для изучения противовирусной активности препаратов в отношении возбудителя калицивироза кошек и не применяется для изготовления вакцин [11].The Ashley strain of calicivirus infection was patented in 2016 to study the antiviral activity of drugs against the causative agent of feline calicivirus and is not used to make vaccines [11].
Штамм «Фауна» вируса калицивироза кошек запатентован в 2023 г. для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики калицивироза кошек [12].The Fauna strain of feline calicivirus was patented in 2023 for the production of biopreparations for the diagnosis and specific prevention of feline calicivirus [12].
Штамм «Перс» вируса калицивироза кошек запатентован в 2023 г. для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики калицивироза кошек [13].The Persian strain of feline calicivirus was patented in 2023 for the production of biopreparations for the diagnosis and specific prevention of feline calicivirus [13].
Наиболее близким предполагаемому изобретению по совокупности существенных признаков является штамм «Ларс» калицивироза кошек, используемый для изготовления отечественной ассоциированной вакцины «Мультифел», однако, молекулярно-генетические свойства данного штамма не изучены [10].The closest to the proposed invention in terms of the set of essential features is the Lars strain of feline calicivirus, used to produce the domestic associated vaccine Multifel; however, the molecular genetic properties of this strain have not been studied [10].
Генетически штаммы вируса калицивирусной инфекции принадлежат к одной разнообразной геногруппе, однако, в Восточной Азии была описана вторая геногруппа. Филогенетический анализ обычно приводит к «звездообразной» филогении. Это генетическое разнообразие сопровождается антигенным разнообразием, хотя перекрестная реактивность достаточна, чтобы все изоляты считались принадлежащими к одному серотипу. При исследовании пространственного и временного распределения штаммов вируса калицивирусной инфекции была описана очень высокая генетическая и антигенная сложность штаммов вируса FCV, при этом в популяции кошек циркулирует множество различных штаммов вируса FCV, и ни один отдельный полевой штамм не преобладает в ней [3, 6].Genetically, FCV strains belong to a single diverse genogroup, although a second genogroup has been described in East Asia. Phylogenetic analysis typically results in a "star-shaped" phylogeny. This genetic diversity is accompanied by antigenic diversity, although there is sufficient cross-reactivity that all isolates are considered to belong to a single serotype. Studies of the spatial and temporal distribution of FCV strains have described a very high genetic and antigenic complexity of FCV strains, with many different FCV strains circulating in the feline population and no single field strain predominating [3, 6].
Задача, на решение которой направлено настоящее изобретение, заключается в расширении арсенала производственных штаммов вируса калицивироза кошек, обладающих новыми биологическими и генетическими характеристиками, и пригодных для изготовления средств диагностики и специфической профилактики данного заболевания. Указанная задача решена в результате депонирования нового штамма «Мира» вируса калицивироза кошек, который может быть использован для проведения лабораторных исследований и изготовления средств вакцинопрофилактики.The task, which the present invention is aimed at solving, consists in expanding the arsenal of production strains of the feline calicivirus virus, possessing new biological and genetic characteristics, and suitable for the manufacture of diagnostic means and specific prevention of this disease. The said task has been solved as a result of depositing the new strain "Mir" of the feline calicivirus virus, which can be used for conducting laboratory studies and manufacturing means of vaccine prevention.
Изолят вируса калицивироза кошек, послуживший источником для получения штамма «Мира» был выделен из клинического материала (смыв с ротовой полости), полученного от кота, принадлежащего частному владельцу (г. Москва), в 2022 году.The isolate of feline calicivirus, which served as the source for obtaining the "Mira" strain, was isolated from clinical material (oral swab) obtained from a cat belonging to a private owner (Moscow) in 2022.
Штамм «Мира» депонирован во Всероссийской государственной коллекции экзотических типов вируса ящура и других патогенов животных (ГКШМ) ФГБУ «ВНИИЗЖ», под регистрационным номером: № 458 - деп / 23-33 - ГКШМ ФГБУ «ВНИИЗЖ».The Mira strain is deposited in the All-Russian State Collection of Exotic Types of Foot-and-Mouth Disease Virus and Other Animal Pathogens (GKShM) of the All-Russian Research Institute of Animal Health, under the registration number: No. 458 - dep / 23-33 - GKShM of the All-Russian Research Institute of Animal Health.
Экспериментально подтверждена возможность использования штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивироза кошек для изготовления средств диагностики и профилактики данного заболевания.The possibility of using the “Mir” strain of the virus has been experimentally confirmedFeline calicivirusfeline calicivirus for the production of diagnostic and preventive means for this disease.
Для получения штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек, обладающего оптимальными биотехнологическими свойствами, использовали перевиваемую культуру клеток почки кошки (CRFK). В результате проведения серии последовательных пассажей на данной культуре клеток из ранее выделенного изолята был получен штамм «Мира» вируса Feline calicivirus калицивироза кошек, имеющий стабильные биотехнологические свойства и пригодный для использования при проведении лабораторных исследований, изготовлении диагностических препаратов и препаратов специфической профилактики данного заболевания. Штамм адаптирован к перевиваемой культуре клеток почки кошки (CRFK), что позволяет в промышленных масштабах получать вирусный материал штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивироза кошек с титрами инфекционной активности от 6,5 до 7,5 lg ТЦД50/см3.To obtain the Mira strain of the feline calicivirus feline calicivirus infection virus with optimal biotechnological properties, a continuous culture of cat kidney cells (CRFK) was used. As a result of a series of successive passages on this cell culture, the Mira strain of the feline calicivirus feline calicivirus infection virus was obtained from the previously isolated isolate. The strain has stable biotechnological properties and is suitable for use in laboratory studies, the manufacture of diagnostic drugs and drugs for the specific prevention of this disease. The strain is adapted to the continuous culture of cat kidney cells (CRFK), which allows for industrial-scale production of viral material of the Mira strain of the feline calicivirus feline calicivirus infection virus with infectious activity titers from 6.5 to 7.5 lg TCID 50 /cm 3 .
Идентификация и филогенетическое родство штамма «Мира» калицивируса кошек.Identification and phylogenetic relationships of the feline calicivirus strain "Mira".
Проводили генетическую идентификацию полученного вируса и сравнительный анализ последовательности кДНК. Использовали обратную транскрипцию и полимеразную цепную реакцию (ОТ-ПЦР). Для идентификации и филогенетического анализа осуществляли секвенирование.Genetic identification of the obtained virus and comparative analysis of the cDNA sequence were performed. Reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) were used. Sequencing was performed for identification and phylogenetic analysis.
Редактор выравнивания последовательностей BioEdit использовался для анализа необработанных последовательностей. Выравнивания, содержащие полногеномные последовательности, были построены с использованием программы Clustal_W. Эволюционная история была выведена с использованием критерия максимального правдоподобия, основанного на 3 параметрах классической модели Tamura. Дерево было нарисовано в масштабе, с длиной ветвей, измеренной в количестве замен на сайт. Эволюционный анализ был проведен в MEGA6. Выравнивание аминокислотных последовательностей проводили с использованием Clustal X.The BioEdit sequence alignment editor was used to analyze the raw sequences. Alignments containing whole-genome sequences were constructed using the Clustal_W program. Evolutionary history was inferred using a maximum likelihood criterion based on the 3 parameters of the classical Tamura model. The tree was drawn to scale, with branch lengths measured in substitutions per site. Evolutionary analysis was performed in MEGA6. Amino acid sequence alignments were performed using Clustal X.
Дендрограмма основана на сравнении нуклеотидных последовательностей генных областей ORF2 (F-область, белок VP1) и ORF3 (белок VP2) кДНК вируса Feline calicivirus калицивироза кошек (FСV) (был взят участок длиной 324 п.н. - позиции в геноме 7253…7576 п.н.). Штамм «Мира» имеет большое количество нуклеотидных отличий от других заявленных штаммов, при этом относится к геногруппе II (Фиг. 1).The dendrogram is based on a comparison of the nucleotide sequences of the gene regions ORF2 (F-region, VP 1 protein) and ORF3 (VP 2 protein) of the cDNA of the feline calicivirus (FCV) virus (a 324 bp long region was taken - positions in the genome 7253...7576 bp). The "Mira" strain has a large number of nucleotide differences from other declared strains, while it belongs to genogroup II (Fig. 1).
Сущность изобретения отражена на графических изображениях:The essence of the invention is reflected in the graphic images:
Фиг. 1 - Филогенетическое древо для вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек штамма «Мира».Fig. 1 - Phylogenetic tree for the feline calicivirus strain "Mira".
Фиг. 2 - Состояние монослоя клеточной линии CRFK до (А) и после (Б) репродукции вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек штамма «Мира».Fig. 2 - The state of the CRFK cell line monolayer before (A) and after (B) reproduction of the feline calicivirus strain "Mira" virus.
Сущность изобретения пояснена в перечне последовательностей, в котором:The essence of the invention is explained in the sequence listing, in which:
SEQ ID NO:1 представляет последовательность нуклеотидов кДНК вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек штамма «Мира»;SEQ ID NO:1 represents the cDNA nucleotide sequence of the feline calicivirus strain "Mira";
SEQ ID NO:2 представляет последовательность аминокислот белков вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек штамма «Мира».SEQ ID NO:2 represents the amino acid sequence of proteins of the feline calicivirus strain "Mira".
Штамм «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек характеризуется следующими признаками и свойствами.The "Mira" strain of the feline calicivirus infection is characterized by the following signs and properties.
Морфологические признаки.Morphological features.
Штамм «Мира» вируса калицивирусной инфекции кошек относится к семейству Caliciviridae, роду Vesivirus, виду Feline calicivirus и обладает морфологическими признаками, характерными для представителей калицивирусов: диаметр вирионов составляет 37-40 нм, вирионы без суперкапсидной оболочки, кубического типа симметрии, состоят из 32 капсомеров.The "Mira" strain of the feline calicivirus infection virus belongs to the Caliciviridae family, the Vesivirus genus, the Feline calicivirus species and has morphological features characteristic of caliciviruses: the diameter of the virions is 37-40 nm, the virions are without a supercapsid membrane, have a cubic type of symmetry, and consist of 32 capsomeres.
Антигенные свойства.Antigenic properties.
Все циркулирующие штаммы калицивируса представляют собой единый серотип. У переболевших кошек в сыворотках крови образуются антитела, выявляемые в реакции нейтрализации (РН). Вирус стабильно нейтрализуется гомологичной антисывороткой в РН в культуре клеток CRFK. Инокуляция в организм животного штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек сопровождается образованием вируснейтрализующих антител в крови в титре от 3,00±0,52 log2 SN50 у морских свинок.All circulating strains of calicivirus represent a single serotype. In cats that have recovered from the disease, antibodies are formed in the blood serum, which are detected in the neutralization reaction (NR). The virus is stably neutralized by homologous antiserum in RN in the CRFK cell culture. Inoculation of the feline calicivirus virus "Mira" strain of feline calicivirus infection into the animal's body is accompanied by the formation of virus-neutralizing antibodies in the blood in a titer of 3.00±0.52 log 2 SN 50 in guinea pigs.
Устойчивость к внешним факторам.Resistance to external factors.
Вирус достаточно устойчив во внешней среде. На поверхностях при температуре (22±2)°С сохраняет активность в течение 24 ч, а при температуре 10°С и ниже - в течение 30 дней. Относительно стабилен в кислой среде при pH 4,0. Практически не чувствителен к эфиру, хлороформу. Чувствителен к формальдегиду, глутаровому альдегиду, хлорсодержащим дезинфицирующим средствам. Переносит двукратное размораживание и оттаивание.The virus is quite stable in the external environment. On surfaces at a temperature of (22±2)°C it remains active for 24 hours, and at a temperature of 10°C and below - for 30 days. Relatively stable in an acidic environment at pH 4.0. Practically insensitive to ether, chloroform. Sensitive to formaldehyde, glutaraldehyde, chlorine-containing disinfectants. Tolerates double defrosting and thawing.
Дополнительные признаки и свойства:Additional features and properties:
Патогенность - патогенен для естественно-восприимчивых животных.Pathogenicity - pathogenic for naturally susceptible animals.
Вирулентность - вирулентен для естественно-восприимчивых животных при интраназальном заражении.Virulence - virulent to naturally susceptible animals when infected intranasally.
Безвреден для кроликов, морских свинок и белых мышей при внутримышечном и подкожном заражении.Harmless to rabbits, guinea pigs and white mice in case of intramuscular and subcutaneous infection.
Стабильность - сохраняет исходные биологические свойства при пассировании в чувствительных биологических системах в течение 5 пассажей (срок наблюдения) в перевиваемой культуре клеток CRFK.Stability - retains its original biological properties when passaged in sensitive biological systems for 5 passages (observation period) in a continuous culture of CRFK cells.
Контаминация бактериями, грибами, микоплазмами и посторонними вирусами - штамм «Мира» не контаминирован бактериями, грибами, микоплазмами и посторонними вирусами.Contamination with bacteria, fungi, mycoplasma and foreign viruses - the "Mira" strain is not contaminated with bacteria, fungi, mycoplasma and foreign viruses.
Условия хранения.Storage conditions.
При хранении штамма в нативном состоянии при температуре -70±5°С допустимая длительность хранения без освежения составляет 12 мес., а при хранении в лиофилизированном состоянии при той же температуре - 10 лет.When storing the strain in its native state at a temperature of -70±5°C, the permissible shelf life without refreshment is 12 months, and when stored in a lyophilized state at the same temperature - 10 years.
Биотехнологические характеристики.Biotechnological characteristics.
Штамм «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек репродуцируется в перевиваемой культуре клеток почки кошки (CRFK). Репродукция вируса в культуре клеток CRFK сопровождается специфическим цитопатическим действием, приводящим к округлению клеток и деструкции монослоя через 24-36 ч культивирования. Биологические свойства характеризовали путем определения инфекционной активности вируса каждого пассажа в перевиваемой культуре клеток CRFK. При культивировании вирус штамма «Мира» накапливается в титре не менее 6,50±0,25 lg ТЦД50/см3 и сохраняет исходные характеристики при пассировании в течение не менее 5 пассажей (срок наблюдения).The strain "Mira" of feline calicivirus is reproduced in a continuous culture of cat kidney cells (CRFK). Reproduction of the virus in the CRFK cell culture is accompanied by a specific cytopathic effect, leading to cell rounding and destruction of the monolayer after 24-36 hours of cultivation. Biological properties were characterized by determining the infectious activity of the virus at each passage in a continuous culture of CRFK cells. When cultivated, the virus of the "Mira" strain accumulates in a titer of at least 6.50±0.25 lg TCID 50 /cm 3 and retains the original characteristics when passaging for at least 5 passages (observation period).
Гено- и хемотаксономические характеристики.Geno- and chemotaxonomic characteristics.
Штамм «Мира» калицивируса кошек относится к семейству Caliciviridae, роду Vesivirus, виду Feline calicivirus (FCV). Геном представляет собой 7700 н.о. одноцепочечной РНК положительной полярности с тремя открытыми рамками считывания (ORF).The feline calicivirus strain "Mira" belongs to the Caliciviridae family, genus Vesivirus, species Feline calicivirus (FCV) . The genome is a 7700 nt single-stranded RNA of positive polarity with three open reading frames (ORFs).
5’-NTR (нетранслируемый регион) соответствует 1…19 н.о., ORF1 (ему соответствует продукт, который называется polyprotein precursor - предшественник полипротеина, из которого формируются 2C, протеаза, РНК-полимераза) - 20…5310 н.о., ORF2 (структурный белок VP1) - 5311…7320 н.о., ORF3 (белок VP2 с неизвестной функцией) - 7321…7637 н.о. ORF2 делится на шесть областей (A-F) и включает в себя различные нуклеотидные замены. Геномные области A, B, D и F в значительной степени консервативны, в то время как области C и E более изменчивы. Рекомбинация является распространенным механизмом эволюции FCV. Большинство зарегистрированных событий рекомбинации в геноме калицивирусов происходят в ORF1, ORF2. Область F ORF2 (7253-7329 п.н. и начальная область ORF3 (7465-7524 п.н.) консервативны и, следовательно, удобны для точной идентификации FCV. При этом большинство зарегистрированных событий рекомбинации в геноме FCV происходят в генном участке капсидной (ORF2) области, исходя из этого, для проведения филогенетического анализа использовали именно этот генный участок (5310…5674 н.о.).5'-NTR (untranslated region) corresponds to 1...19 nt, ORF1 (it corresponds to the product called polyprotein precursor - a precursor of the polyprotein from which 2C, protease, RNA polymerase are formed) - 20...5310 nt, ORF2 (structural protein VP 1 ) - 5311...7320 nt, ORF3 (protein VP 2 with unknown function) - 7321...7637 nt. ORF2 is divided into six regions (AF) and includes various nucleotide substitutions. Genomic regions A, B, D and F are largely conserved, while regions C and E are more variable. Recombination is a common mechanism of FCV evolution. Most of the registered recombination events in the calicivirus genome occur in ORF1, ORF2 . The F ORF2 region (7253-7329 bp) and the initial ORF3 region (7465-7524 bp) are conserved and, therefore, convenient for precise identification of FCV. At the same time, the majority of registered recombination events in the FCV genome occur in the gene region of the capsid (ORF2) region, based on this, this gene region (5310…5674 nt) was used for phylogenetic analysis.
Сущность предлагаемого изобретения пояснена примерами его использования, которые не ограничивают объем изобретения.The essence of the proposed invention is explained by examples of its use, which do not limit the scope of the invention.
Пример 1. Биологические и вирусологические исследования штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек.Example 1. Biological and virological studies of the “Mira” strain of the feline calicivirus .
Биологические и вирусологические методы включали адаптацию вируса, выделенного из патологического материала, полученного от заболевшего кота, к культуре клеток CRFK. Для выделения вируса, вирусную суспензию вносили на освобожденный от ростовой среды монослой перевиваемой культуры клеток CRFK и экспонировали в течение 60 мин. при температуре (37,0±0,5)°С. Затем вносили поддерживающую среду ПСС с добавлением 2% фетальной сыворотки крови КРС и антибиотиков (стрептомицин 100 мкг/см3 и пенициллин 100 ЕД/см3). Инфицированную культуру инкубировали при температуре (37,0±0,5)°С до появления специфического цитопатического действия (ЦПД) через 12-16 ч, которое характеризовалось округлением клеток и деструкцией монослоя. При поражении не менее 80% площади монослоя (24-36 ч) культуральные флаконы промораживали при температуре минус (45,0±5,0)°С и после оттаивания при комнатной температуре производили сбор вируса с последующим отбором проб для исключения микробной контаминации и определения инфекционной активности вируса методом титрования в культуре клеток CRFK. Клеточный монослой до действия вируса представлен на фиг. 2А, после формирования ЦПД - на фиг. 2Б. Титрование вируса проводилось микрометодом по общепринятой методике в культуре клеток CRFK в 96-луночных планшетах. Инфекционная активность вируса в культуре клеток CRFK при репродукции в течение 5 пассажей составила 7,22±0,44 lg ТЦД50/см3. Полученные данные, свидетельствуют о хорошей адаптационной активности штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек к данной клеточной культуре. Первое проявление ЦПД вируса в культуре клеток CRFK наблюдается через 12-16 ч культивирования. Через 24-36 ч культивирования большая часть клеток округлялась, собиралась в агрегаты и отслаивалась от субстрата.Biological and virological methods included adaptation of the virus isolated from pathological material obtained from a sick cat to the CRFK cell culture. To isolate the virus, the viral suspension was added to a monolayer of a continuous CRFK cell culture freed from the growth medium and exposed for 60 min at a temperature of (37.0 ± 0.5) ° C. Then, the PSS maintenance medium was added with 2% fetal bovine serum and antibiotics (streptomycin 100 μg/cm 3 and penicillin 100 U/cm 3 ). The infected culture was incubated at a temperature of (37.0 ± 0.5) ° C until the specific cytopathic effect (CPE) appeared after 12-16 h, which was characterized by cell rounding and monolayer destruction. When at least 80% of the monolayer area was affected (24-36 h), the culture flasks were frozen at minus (45.0±5.0)°C and after thawing at room temperature, the virus was collected with subsequent sampling to exclude microbial contamination and determine the infectious activity of the virus by titration in the CRFK cell culture. The cell monolayer before the virus action is shown in Fig. 2A, after the formation of the CPE - in Fig. 2B. The virus was titrated by the micromethod according to the generally accepted technique in the CRFK cell culture in 96-well plates. The infectious activity of the virus in the CRFK cell culture during reproduction during 5 passages was 7.22±0.44 lg TCID 50 /cm 3 . The data obtained indicate good adaptive activity of the Mir strain of the Feline calicivirus feline calicivirus infection virus to this cell culture. The first manifestation of the CPE of the virus in the CRFK cell culture is observed after 12-16 hours of cultivation. After 24-36 hours of cultivation, most of the cells became rounded, aggregated, and peeled off from the substrate.
Пример 2. Контроль стабильности биологической активности штамма «Мира» вируса калицивирусной инфекции кошек.Example 2. Control of the stability of biological activity of the “Mira” strain of feline calicivirus infection virus.
Контроль стабильности биологической активности штамма определяли в течение 5 последовательных пассажей в культуре клеток CRFK. Результаты изучения стабильности штамма по его биологической активности в течение 5 пассажей представлены в таблице 1. В ходе проведенных исследований установлено, что штамм «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек в течение 5 последовательных пассажей в культуре клеток CRFK проявлял стабильную биологическую активность, которая находилась в пределах от 6,50±0,25 lg ТДЦ50/см3 до 7,50±0,25 lg ТДЦ50/см3.The stability control of the biological activity of the strain was determined during 5 consecutive passages in the CRFK cell culture. The results of the study of the stability of the strain by its biological activity during 5 passages are presented in Table 1. The conducted studies established that the "Mira" strain of the feline calicivirus calicivirus infection during 5 consecutive passages in the CRFK cell culture exhibited stable biological activity, which was in the range from 6.50±0.25 lg TDC 50 /cm 3 to 7.50±0.25 lg TDC 50 /cm 3 .
Пример 3. Получение антигена вируса калицивирусной инфекции кошек штамма «Мира».Example 3. Obtaining the antigen of the feline calicivirus infection virus strain "Mira".
Для приготовления антигена в культуру клеток CRFK, выращенную в культуральных флаконах с площадью рабочей поверхности 300 см2, предварительно слив с них ростовую среду, вносили вируссодержащий материал в дозе 0,001 ТЦД50/кл. Флаконы помещали на один час в термостат при температуре (37,0±0,5)°С для контакта клеток культуры с вирусом. После этого вносили поддерживающую среду ПСС с добавлением 2% сыворотки крови КРС. Инфицированную культуру инкубировали при (37,0±0,5)°С до появления ЦПД вируса. При поражении площади монослоя не менее 80% культуральные флаконы подвергали замораживанию при температуре минус (45,0±0,5)°С. Стерильный инфицированный монослой дезагрегировали с рабочей поверхности флаконов путем его разморозки при температуре (20±2)°С и периодического встряхивания. По окончании разморозки интенсивным встряхиванием остатки монослоя удаляли с рабочей поверхности, затем соблюдая условия асептики инфицированную суспензию собирали в общую емкость. Из собранного материала отбирали пробу для контроля. Контроль вируссодержащего материала штамма «Мира» вируса калицивироза кошек осуществляли по показателю отсутствия контаминации грибами, бактериями и микоплазмами. Контроль контаминации грибами и бактериями вируссодержащего материала штамма «Мира» вируса калицивирусной инфекции кошек проводили по ГОСТ 28085 [15]. Контроль контаминации микоплазмами осуществляли в соответствии с требованиями ГФ XIV, том II, с. 2997-3008 (ОФС.1.7.2.0031.15) [16]. Нативный вируссодержащий материал с активностью не ниже 6,5 lg ТЦД50/см3 хранили при температуре не выше минус (20±2)°С и использовали для изготовления вакцинных и диагностических препаратов.For the preparation of antigen in a CRFK cell culture grown in culture flasks with a working surface area of 300 cm2, after draining the growth medium from them, virus-containing material was added at a dose of 0.001 TCD50/kl. The flasks were placed in a thermostat at a temperature of (37.0 ± 0.5) ° C for one hour to bring the culture cells into contact with the virus. After this, the PSS maintenance medium with the addition of 2% bovine blood serum was added. The infected culture was incubated at (37.0 ± 0.5) ° C until the CPE of the virus appeared. When the monolayer area was affected by at least 80%, the culture flasks were frozen at a temperature of minus (45.0 ± 0.5) ° C. The sterile infected monolayer was disaggregated from the working surface of the flasks by defrosting it at a temperature of (20 ± 2) ° C and periodic shaking. After defrosting, the remains of the monolayer were removed from the working surface by vigorous shaking, then, observing aseptic conditions, the infected suspension was collected in a common container. A sample was taken from the collected material for control. Control of virus-containing material of the Mir strain of feline calicivirus was carried out according to the indicator of absence of contamination by fungi, bacteria and mycoplasmas. Control of contamination by fungi and bacteria of virus-containing material of the strain "Mira" of the feline calicivirus infection virus was carried out according to GOST 28085 [15]. Control of contamination by mycoplasmas was carried out in accordance with the requirements of the State Pharmacopoeia XIV, Volume II, pp. 2997-3008 (OFS.1.7.2.0031.15) [16]. Native virus-containing material with an activity of not less than 6.5 lg TCD50/cm3stored at a temperature not exceeding minus (20±2)°C and used for the production of vaccines and diagnostic preparations.
Пример 4. Получение гипериммунной сыворотки против антигена вируса калицивирусной инфекции кошек штамма «Мира».Example 4. Obtaining hyperimmune serum against the antigen of the feline calicivirus infection virus strain "Mira".
Штамм «Мира» вируса Feline calicivirus калицивироза кошек использовали для получения высокоактивной гипериммунной сыворотки, предназначенной для оценки иммунобиологических свойств вируса калицивироза кошек. Для гипериммунизации животных применяли антиген вируса калицивирусной инфекции кошек штамма «Мира», полученный по методике, описанной в примере 3. Кроликов в количестве 4 голов иммунизировали в дозе 2,0 см3 внутримышечно двукратно через 21 день, отбор крови осуществляли на 14 сутки после последней иммунизации. Полученную сыворотку крови исследовали на наличие антител против антигена вируса калицивирусной инфекции кошек штамма «Мира». Титр антител определяли в реакции нейтрализации микрометодом (РМН). Данные, представленные в таблице 2, показывают, что получены диагностические сыворотки со специфической активностью 7,25-8,25 log2 SN50 в РМН.The Mira strain of feline calicivirus was used to obtain a highly active hyperimmune serum intended to evaluate the immunobiological properties of feline calicivirus. The Mira strain feline calicivirus infection virus antigen obtained by the method described in Example 3 was used for hyperimmunization of animals. Four rabbits were immunized at a dose of 2.0 cm3 intramuscularly twice after 21 days, blood was collected on the 14th day after the last immunization. The obtained blood serum was examined for the presence of antibodies against the Mira strain feline calicivirus infection virus antigen. The antibody titer was determined in the neutralization reaction by the micromethod (RMN). The data presented in Table 2 show that diagnostic sera with a specific activity of 7.25-8.25 log 2 SN 50 in the RMN were obtained.
Пример 5. Изучение антигенной активности штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек на морских свинках.Example 5. Study of the antigenic activity of the “Mira” strain of the feline calicivirus infection virus in guinea pigs.
Для изучения антигенной активности штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек использовали вируссодержащий материал с биологической активностью равной 7,0 lg ТЦД50/см3, полученный по методике, описанной в примере 3. Подопытным морским свинкам в количестве 5 голов вводили вируссодержащий материал в область холки в дозе 1,0 см3 однократно. Морских свинок в количестве 5 голов оставили в качестве контроля. Титр антител к антигену вируса калицивироза кошек в сыворотках крови морских свинок определяли через 21 сутки после иммунизации в РМН по общепринятой методике.To study the antigenic activity of the "Mira" strain of the feline calicivirus feline calicivirus infection virus, virus-containing material with a biological activity equal to 7.0 lg TCID 50 /cm 3 was used, obtained according to the method described in Example 3. Five experimental guinea pigs were injected with virus-containing material in the withers area at a dose of 1.0 cm 3 once. Five guinea pigs were left as a control. The titer of antibodies to the feline calicivirus antigen in the blood serum of guinea pigs was determined 21 days after immunization in the RMN according to the generally accepted method.
Результаты исследований антигенной активности штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек показывают, что титр антител у иммунизированных морских свинок составил 3,00±0,52 log2 SN50. У контрольных животных антител к вирусу калицивирусной инфекции кошек не выявлено.The results of studies of the antigenic activity of the "Mira" strain of the feline calicivirus virus show that the antibody titer in immunized guinea pigs was 3.00±0.52 log 2 SN 50 . No antibodies to the feline calicivirus virus were detected in the control animals.
Пример 6. Определение патогенности для кошек штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек.Example 6. Determination of the pathogenicity of the “Mira” strain of the feline calicivirus infection for cats.
Патогенность штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек изучали на естественно восприимчивых животных (беспородные котята в возрасте 2-3 мес.). Животных разделили на две группы по 4 головы в каждой - подопытную и контрольную. Подопытным котятам инокулировали интраназально вируссодержащую культуральную жидкость штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек в объеме 1,0 см3 с титром инфекционной активности 7,0 lg ТЦД50/см3. Животным контрольной группы инокулировали интраназально 0,9% раствор хлорида натрия в объеме 1,0 см3. На 3-4 сутки после заражения у 3 из 4 животных подопытной группы наблюдали характерные клинические признаки калицивироза кошек: повышение температуры тела, отказ от корма, слюнотечение, катаральный ринит, язвенные поражения на слизистой ротовой полости и языка. Гибели животных не наблюдалось. Специфичность заболевания животных подтверждена исследованиями биоматериала методом ПЦР.Pathogenicity of the feline calicivirus virus "Mira" strain was studied on naturally susceptible animals (mongrel kittens aged 2-3 months). The animals were divided into two groups of 4 animals each - experimental and control. The experimental kittens were inoculated intranasally with virus-containing culture fluid of the feline calicivirus virus "Mira" strain in a volume of 1.0 cm 3 with an infectious activity titer of 7.0 lg TCID 50 /cm 3 . The animals of the control group were inoculated intranasally with 0.9% sodium chloride solution in a volume of 1.0 cm 3 . On the 3-4th day after infection, 3 of the 4 animals in the experimental group showed characteristic clinical signs of feline calicivirus: increased body temperature, refusal to eat, salivation, catarrhal rhinitis, ulcerative lesions on the oral mucosa and tongue. No deaths were observed. The specificity of the animal disease was confirmed by PCR studies of the biomaterial.
Таким образом, штамм «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек, полученный в соответствии с предлагаемым изобретением, обладает высокой биологической, антигенной активностью, пригоден для изготовления инактивированных вакцин, определения их иммуногенной активности, а также диагностических целей, и расширяет арсенал новых отечественных производственных штаммов вируса Feline calicivirus калицивироза кошек.Thus, the "Mira" strain of the Feline calicivirus feline calicivirus infection virus, obtained in accordance with the proposed invention, has high biological and antigenic activity, is suitable for the production of inactivated vaccines, determining their immunogenic activity, as well as diagnostic purposes, and expands the arsenal of new domestic production strains of the Feline calicivirus feline calicivirus virus.
Источники информации, принятые во внимание при составлении описания изобретения к заявке на выдачу патента Российской Федерации на изобретение «Штамм «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики калицивирусной инфекции кошек».Sources of information taken into account when preparing the description of the invention for the application for the issuance of a patent of the Russian Federation for the invention "The "Mira" strain of the Feline calicivirus calicivirus infection of cats for the manufacture of biopreparations for the diagnosis and specific prevention of calicivirus infection of cats."
1.Guo J., Ding Y., Sun F., Zhou H., He P., Chen J., Guo J., Zeng H., Long J., Wei Z., Ouyang K., Huang W., Chen Y. Co-circulation and evolution of genogroups I and II of respiratory and enteric feline calicivirus isolates in cats. Transbound Emerg Dis. 2022 Sep;69(5):2924-2937. doi: 10.1111/tbed.14447. Epub 2022 Jan 17. PMID: 34982847; PMCID: PMC9787975.1.Guo J., Ding Y., Sun F., Zhou H., He P., Chen J., Guo J., Zeng H., Long J., Wei Z., Ouyang K., Huang W., Chen Y. Co-circulation and evolution of genogroups I and II of respiratory and enteric feline calicivirus isolates in cats. Transbound Emerg Dis. 2022 Sep;69(5):2924-2937. doi: 10.1111/tbed.14447. Epub 2022 Jan 17. PMID: 34982847; PMCID: PMC9787975.
2. Palombieri A., Sarchese V., Giordano M.V., Fruci P., Crisi P.E., Aste G., Bongiovanni L., Rinaldi V., Sposato A., Camero M., Lanave G., Martella V., Marsilio F., Di Martino B., Di Profio F. Detection and Characterization of Feline Calicivirus Associated with Paw and Mouth Disease. Animals (Basel). 2022 Dec 23;13(1):65. doi: 10.3390/ani13010065. PMID: 36611675; PMCID: PMC9818015.2. Palombieri A., Sarchese V., Giordano M.V., Fruci P., Crisi P.E., Aste G., Bongiovanni L., Rinaldi V., Sposato A., Camero M., Lanave G., Martella V., Marsilio F. ., Di Martino B., Di Profio F. Detection and Characterization of Feline Calicivirus Associated with Paw and Mouth Disease. Animals (Basel). 2022 Dec 23;13(1):65. doi: 10.3390/ani13010065. PMID: 36611675; PMCID: PMC9818015.
3. Hofmann-Lehmann R., Hosie M.J., Hartmann K., Egberink H., Truyen U., Tasker S., Belák S., Boucraut-Baralon C., Frymus T., Lloret A., Marsilio F., Pennisi M.G., Addie D.D., Lutz H., Thiry E., Radford A.D., Möstl K. Calicivirus Infection in Cats. Viruses. 2022 Apr 29;14(5):937. doi: 10.3390/v14050937. PMID: 35632680; PMCID: PMC9145992.3. Hofmann-Lehmann R., Hosie M.J., Hartmann K., Egberink H., Truyen U., Tasker S., Belák S., Boucraut-Baralon C., Frymus T., Lloret A., Marsilio F., Pennisi M.G., Addie D.D., Lutz H., Thiry E., Radford A.D., Möstl K. Calicivirus Infection in Cats. Viruses. 2022 Apr 29;14(5):937. doi: 10.3390/v14050937. PMID: 35632680; PMCID: PMC9145992.
4. Алипер Т. И., Непоклонов Е. А., Мухин А. Н. и др. Диагностика и профилактика инфекционных болезней собак и кошек: руководство для практикующих ветеринарных врачей. Под ред. Т. И. Алипера. М.: ЗооВетКнига; 2017. 300 с.4. Aliper T. I., Nepoklonov E. A., Mukhin A. N., et al. Diagnostics and prevention of infectious diseases of dogs and cats: a guide for practicing veterinarians. Ed. T. I. Aliper. Moscow: ZooVetKniga; 2017. 300 p.
5.Рахманина М.М. Калицивирусная инфекция кошек: биологические свойства возбудителя, эпизоотология, специфические средства и методы профилактики: Автореф. диcс. … д-ра ветеринар. наук. М.; 2005.5. Rakhmanina M.M. Calicivirus infection of cats: biological properties of the pathogen, epizootology, specific means and methods of prevention: Abstract of a Doctor of Veterinary Sciences dissertation. Moscow; 2005.
6. Komina A., Krasnikov N., Kucheruk O., Zhukova E., Yuzhakov A., Gulyukin A. Distribution and genetic diversity of Feline calicivirus in Moscow metropolitan area. J Vet Sci. 2022 Nov;23(6):e92. doi: 10.4142/jvs.22182. PMID: 36448438; PMCID: PMC9715382.6. Komina A., Krasnikov N., Kucheruk O., Zhukova E., Yuzhakov A., Gulyukin A. Distribution and genetic diversity of Feline calicivirus in Moscow metropolitan area. J Vet Sci. 2022 Nov;23(6):e92. doi: 10.4142/jvs.22182. PMID: 36448438; PMCID: PMC9715382.
7. Hou J., Sánchez-Vizcaíno F., McGahie D., Lesbros C., Almeras T., Howarth D., O'Hara V., Dawson S., Radford A.D. European molecular epidemiology and strain diversity of feline calicivirus. Vet Rec. 2016 Jan 30;178(5):114-5. doi: 10.1136/vr.103446. Epub 2016 Jan 25. PMID: 26811440; PMCID: PMC4752659.7. Hou J., Sánchez-Vizcaíno F., McGahie D., Lesbros C., Almeras T., Howarth D., O'Hara V., Dawson S., Radford A.D. European molecular epidemiology and strain diversity of feline calicivirus. Vet Rec. 2016 Jan 30;178(5):114-5. doi: 10.1136/vr.103446. Epub 2016 Jan 25. PMID: 26811440; PMCID: PMC4752659.
8. Bergmann M., Speck S., Rieger A., Truyen U., Hartmann K. Antibody Response to Feline Calicivirus Vaccination in Healthy Adult Cats. Viruses. 2019 Jul 31;11(8):702. doi: 10.3390/v11080702. PMID: 31370359; PMCID: PMC6723298.8. Bergmann M., Speck S., Rieger A., Truyen U., Hartmann K. Antibody Response to Feline Calicivirus Vaccination in Healthy Adult Cats. Viruses. 2019 Jul 31;11(8):702. doi: 10.3390/v11080702. PMID: 31370359; PMCID: PMC6723298.
9. Вакцина против калицивироза, вирусного ринотрахеита и панлейкопении кошек Нобивак Tricat Trio. - URL: https://www.vetlek.ru/directions/?id=112 (дата обращения 29.05.23 г.).9. Vaccine against calicivirus, viral rhinotracheitis and panleukopenia in cats Nobivac Tricat Trio. - URL: https://www.vetlek.ru/directions/?id=112 (date of access 05/29/23).
10. Пат. 2 184 567 Российская Федерация, МПК A61K 39/125(2006.01), C12N 7/00(2006.01). Штамм feline calicivirus, используемый для контроля иммуногенной активности вакцин, изготовления специфических лечебно-профилактических и диагностических биопрепаратов [Текст]/ Рахманина М.М., Элизбарашвили Э.И., Уласов В.И.; заявитель и патентообладатель ФГБУ «ВГНКИ». - № 2001113087/13; заявл. 2001.05.16; опубл. 2002.07.10.10. Patent 2 184 567 Russian Federation, IPC A61K 39/125(2006.01), C12N 7/00(2006.01). Feline calicivirus strain used to control the immunogenic activity of vaccines, manufacture of specific therapeutic, prophylactic and diagnostic biopreparations [Text] / Rakhmanina M.M., Elizbarashvili E.I., Ulasov V.I.; applicant and patent holder FGBU "VGNKI". - No. 2001113087/13; declared 2001.05.16; published 2002.07.10.
11. Пат. 2 628 196 Российская Федерация, МПК A61K 39/125(2006.01), C12N 7/00(2006.01). Штамм Эшли вируса калицивироза кошек для изучения противовирусной активности препаратов в отношении калицивироза кошек [Текст]/ Глотова Т.И., Семенова О.Э., Глотов А.Г.; заявитель и патентообладатель ФГБУ «ВГНКИ». - № 2016121721; заявл. 2016.06.01; опубл. 2017.08.14.11. Patent. 2 628 196 Russian Federation, IPC A61K 39/125(2006.01), C12N 7/00(2006.01). Ashley strain of feline calicivirus for studying antiviral activity of drugs against feline calicivirus [Text]/ Glotova T.I., Semenova O.E., Glotov A.G.; applicant and patent holder FGBU "VGNKI". - No. 2016121721; declared. 2016.06.01; published. 2017.08.14.
12. Пат. 2 804 623 Российская Федерация, МПК A61K 39/125(2006.01), C12N 7/00(2006.01). Штамм «Фауна» вируса калицивироза кошек Feline calicivirus для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики калицивироза кошек [Текст]/ Галкина Т.С., Комарова А.А., Доронин М.И., Киселев А.М.; заявитель и патентообладатель ФГБУ «ВНИИЗЖ». - № 2023113417; заявл. 2023.05.23; опубл. 2023.10.03.12. Patent 2 804 623 Russian Federation, IPC A61K 39/125(2006.01), C12N 7/00(2006.01). Feline calicivirus strain "Fauna" for the manufacture of biopreparations for the diagnosis and specific prevention of feline calicivirus [Text]/ Galkina TS, Komarova AA, Doronin MI, Kiselev AM; applicant and patent holder FGBU "ARRIAH". - No. 2023113417; declared 2023.05.23; published 2023.10.03.
13. Пат. 2 804 639 Российская Федерация, МПК A61K 39/125(2006.01), C12N 7/00(2006.01). Штамм «Перс» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики калицивирусной инфекции кошек [Текст]/ Галкина Т.С., Комарова А.А., Доронин М.И.; заявитель и патентообладатель ФГБУ «ВНИИЗЖ». - № 2023112435; заявл. 2023.05.11; опубл. 2023.10.03.13. Patent 2 804 639 Russian Federation, IPC A61K 39/125(2006.01), C12N 7/00(2006.01). Strain "Pers" of the Feline calicivirus virus of feline calicivirus infection for the manufacture of biopreparations for the diagnosis and specific prevention of feline calicivirus infection [Text] / Galkina T.S., Komarova A.A., Doronin M.I.; applicant and patent holder FGBU "ARRIAH". - No. 2023112435; declared 2023.05.11; published 2023.10.03.
14. Глотова Т.И., Семенова О.В., Никонова А.А., Глотов А.Г., Вяткин Ю.В., Бондарь А.А. Выделение и филогенетический анализ калицивируса кошек в Сибири. Вопросы вирусологии. 2018; 63(6):268-274. DOI: http://dx.doi.org/ 10.18821/0507-4088-2018-63-6-268-274.14. Glotova T.I., Semenova O.V., Nikonova A.A., Glotov A.G., Vyatkin Yu.V., Bondar A.A. Isolation and phylogenetic analysis of feline calicivirus in Siberia. Questions of Virology. 2018; 63(6):268-274. DOI: http://dx.doi.org/ 10.18821/0507-4088-2018-63-6-268-274.
15. ГОСТ 28085-13 «Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. Метод бактериологического контроля стерильности».15. GOST 28085-13 "Biological medicinal products for veterinary use. Method of bacteriological control of sterility".
16. ГФ ХIV, т. 2, с. 2997-3008. Испытания на присутствие микоплазм (ОФС.1.7.2.0031.15).16. State Pharmacopoeia XIV, v. 2, pp. 2997-3008. Tests for the presence of mycoplasmas (OPS.1.7.2.0031.15).
Таблица 1Table 1
Стабильность штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошек при репродукции в культуре клеток CRFKStability of the feline calicivirus strain "Mira" during reproduction in CRFK cell culture
(n=3, p<0,005)(n=3, p<0.005)
вирусаvirus
Таблица 2Table 2
Специфическая активность штамма «Мира» вируса Feline calicivirus калицивирусной инфекции кошекSpecific activity of the strain "Mira" of the virus Feline calicivirus calicivirus infection of cats
(n=3, p<0,005)(n=3, p<0.005)
--->--->
<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?><?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE ST26SequenceListing PUBLIC "-//WIPO//DTD Sequence Listing <!DOCTYPE ST26SequenceListing PUBLIC "-//WIPO//DTD Sequence Listing
1.3//EN" "ST26SequenceListing_V1_3.dtd">1.3//EN" "ST26SequenceListing_V1_3.dtd">
<ST26SequenceListing dtdVersion="V1_3" fileName="FCV Mira.xml" <ST26SequenceListing dtdVersion="V1_3" fileName="FCV Mira.xml"
softwareName="WIPO Sequence" softwareVersion="2.1.2" softwareName="WIPO Sequence" softwareVersion="2.1.2"
productionDate="2023-06-17">productionDate="2023-06-17">
<ApplicationIdentification><ApplicationIdentification>
<IPOfficeCode>RU</IPOfficeCode><IPOfficeCode>RU</IPOfficeCode>
<ApplicationNumberText>0</ApplicationNumberText><ApplicationNumberText>0</ApplicationNumberText>
<FilingDate>2023-06-17</FilingDate><FilingDate>2023-06-17</FilingDate>
</ApplicationIdentification></ApplicationIdentification>
<ApplicantFileReference>514</ApplicantFileReference><ApplicantFileReference>514</ApplicantFileReference>
<EarliestPriorityApplicationIdentification><EarliestPriorityApplicationIdentification>
<IPOfficeCode>RU</IPOfficeCode><IPOfficeCode>RU</IPOfficeCode>
<ApplicationNumberText>0</ApplicationNumberText><ApplicationNumberText>0</ApplicationNumberText>
<FilingDate>2023-06-17</FilingDate><FilingDate>2023-06-17</FilingDate>
</EarliestPriorityApplicationIdentification></EarliestPriorityApplicationIdentification>
<ApplicantNamelanguageCode="ru">ФГБУ"Федеральный центр охраны<ApplicantNamelanguageCode="ru">FGBU"Federal Security Center
здоровья животных " (ФГБУ"ВНИИЗЖ")</ApplicantName>Animal Health (FSBI "ARRIAH")</ApplicantName>
<ApplicantNameLatin>FGBI "ARRIAH"</ApplicantNameLatin><ApplicantNameLatin>FGBI "ARRIAH"</ApplicantNameLatin>
<InventorNamelanguageCode="ru">ГалкинаТатьяна<InventorNamelanguageCode="ru">GalkinaTatiana
Сергеевна</InventorName>Sergeevna</InventorName>
<InventorNameLatin>Galkina Tatiana Sergeevna</InventorNameLatin><InventorNameLatin>Galkina Tatiana Sergeevna</InventorNameLatin>
<InventionTitlelanguageCode="ru">Штамм «Мира» вируса Feline <InventionTitlelanguageCode="en">The "Mira" strain of the Feline virus
Calicivirus калицивирусной инфекции кошек для изготовления Calicivirus feline calicivirus infection for manufacturing
биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики biopreparations for diagnostics and specific prevention
калицивируснойинфекциикошек</InventionTitle>feline calicivirus infection</InventionTitle>
<SequenceTotalQuantity>2</SequenceTotalQuantity><SequenceTotalQuantity>2</SequenceTotalQuantity>
<SequenceDatasequenceIDNumber="1"><SequenceDatasequenceIDNumber="1">
<INSDSeq><INSDSeq>
<INSDSeq_length>5289</INSDSeq_length><INSDSeq_length>5289</INSDSeq_length>
<INSDSeq_moltype>DNA</INSDSeq_moltype><INSDSeq_moltype>DNA</INSDSeq_moltype>
<INSDSeq_division>PAT</INSDSeq_division><INSDSeq_division>PAT</INSDSeq_division>
<INSDSeq_feature-table><INSDSeq_feature-table>
<INSDFeature><INSDFeature>
<INSDFeature_key>source</INSDFeature_key><INSDFeature_key>source</INSDFeature_key>
<INSDFeature_location>1..5289</INSDFeature_location><INSDFeature_location>1..5289</INSDFeature_location>
<INSDFeature_quals><INSDFeature_quals>
<INSDQualifier><INSDQualifier>
<INSDQualifier_name>mol_type</INSDQualifier_name><INSDQualifier_name>mol_type</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>genomic DNA</INSDQualifier_value><INSDQualifier_value>genomic DNA</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier></INSDQualifier>
<INSDQualifier id="q1"><INSDQualifier id="q1">
<INSDQualifier_name>organism</INSDQualifier_name><INSDQualifier_name>organism</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>FCV</INSDQualifier_value><INSDQualifier_value>FCV</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier></INSDQualifier>
</INSDFeature_quals></INSDFeature_quals>
</INSDFeature></INSDFeature>
</INSDSeq_feature-table></INSDSeq_feature-table>
<INSDSeq_sequence>atgtctcaaactctgagcttcgtgcttaaaactcacagtgtccgaaagg<INSDSeq_sequence>atgtctcaaactctgagcttcgtgcttaaaactcacagtgtccgaaagg
actttgtgcactctgtcaagttaacacttgcacggaggcgcgatcttcagtatatttataacaagctctcactttgtgcactctgtcaagttaacacttgcacggaggcgcgatcttcagtatatttataacaagctctc
acgcactatacgtgctgaggcttgcccttcttgtgctagttacgacgtatgtcctaactgcacctctggtacgcactatacgtgctgaggcttgcccttcttgtgctagttacgacgtatgtcctaactgcacctctggt
gacgtcccggatgacgggtcttcgacaatgtcgattccatcatgggaggatgtcacaaagtcttcaacctgacgtcccggatgacgggtcttcgacaatgtcgattccatcatgggaggatgtcacaaagtcttcaacct
actctctcctgctctctgaggacacctccgacgagttatgccctgaggacttggttaatgtggctgctcaactctctcctgctctctgaggacacctccgacgagttatgccctgaggacttggttaatgtggctgctca
tatccgtaaggcgctatccactcagtcccacccggctaatgctgaaatgtgcaaagaacagctcactttctatccgtaaggcgctatccactcagtcccacccggctaatgctgaaatgtgcaaagaacagctcactttc
ttattagtcatggctgaggcgatgctgccccaacgatcccgagcgtcaatcccactgcaccaacaacacattattagtcatggctgaggcgatgctgccccaacgatcccgagcgtcaatcccactgcaccaacaacaca
cggctgcacggttggaatggagggagaaattcttctctaaacctcttgactttctccttgaaagagttggcggctgcacggttggaatggagggagaaattcttctctaaacctcttgactttctccttgaaagagttgg
tgtgtcaaaagatattctccaaactactgcgatttggaaaattatcttggaaaaagcatgctattgtaaatgtgtcaaaagatattctccaaactactgcgatttggaaaattatcttggaaaaagcatgctattgtaaa
tcctatggagagcagtggttcactgctgccaaacaaaagttaagggaaatgaaaaactttgagagtgatatcctatggagagcagtggttcactgctgccaaacaaaagttaagggaaatgaaaaactttgagagtgata
cgctaaaacctcttattggtggatttatagatggtctacggttcttgaccgtggacaacccaaacccgatcgctaaaacctcttattggtggatttatagatggtctacggttcttgaccgtggacaacccaaacccgat
gggtttcctcccaaaactcatagggcttgtaaaacccctgaatttggcgatgattattgataatcatgaagggtttcctcccaaaactcatagggcttgtaaaacccctgaatttggcgatgattattgataatcatgaa
aacacaatatctggctggatcatcacattaaccgcaataatggagctatacaacatcaccgaatgcaccaaacacaatatctggctggatcatcacattaaccgcaataatggagctatacaacatcaccgaatgcacca
tagatattataacatcagtcattacggctttctatgataaaattggcaaggcaaccaaattttacagttgtagatattataacatcagtcattacggctttctatgataaaattggcaaggcaaccaaattttacagttg
tgttaaggcgctgttcactggatttagatctgaggacgtagcgaattccttttggtacatggcagcagcgtgttaaggcgctgttcactggatttagatctgaggacgtagcgaattccttttggtacatggcagcagcg
attctatgttacctgatcactgggttaatcccaaacaacggcagattttcaaagataaaagcttgcctggattctatgttacctgatcactgggttaatcccaaacaacggcagattttcaaagataaaagcttgcctgg
ccggagcgacaactcttgtatcaggtatagttgccacacaaaagctagctgcaatgttcgcaacatggaaccggagcgacaactcttgtatcaggtatagttgccacacaaaagctagctgcaatgttcgcaacatggaa
ctctgagtccattgttaatgagttgtcagcaagaactgttgccctatcagagctaaacaatccaacaacactctgagtccattgttaatgagttgtcagcaagaactgttgccctatcagagctaaacaatccaacaaca
acgtctgacacggattcggtagaacgactgctagaattggctaagatcttgcatgaggagatcaagattcacgtctgacacggattcggtagaacgactgctagaattggctaagatcttgcatgaggagatcaagattc
atactctaaaccccatcatgcaatcatacaatccaatcttgagaaatttaatgtcaaccttggacggtgtatactctaaaccccatcatgcaatcatacaatccaatcttgagaaatttaatgtcaaccttggacggtgt
tataacatcatgcaacaagaggaaagctattgctcggaagagacaggtgccagtttgttacatattaacttataacatcatgcaacaagaggaaagctattgctcggaagagacaggtgccagtttgttacatattaact
ggcccacctggatgtgggaaaacaaccgcagctcaagcattagctaagaaattgtctgatcaagagccgtggcccacctggatgtgggaaaacaaccgcagctcaagcattagctaagaaattgtctgatcaagagccgt
cggtaattaaccttgatgttgatcatcatgacacatatactggaaatgaggtatgtatcattgatgagttcggtaattaaccttgatgttgatcatcatgacacatatactggaaatgaggtatgtatcattgatgagtt
tgattcgtctgacaaggtagactatgcaaattttgtgattgggatggtaaactctgctcctatggtgttatgattcgtctgacaaggtagactatgcaaattttgtgattgggatggtaaactctgctcctatggtgtta
aattgtgacatgcttgagaacaagggaaagctcttcacctcaaagtatataattatgacttccaactctgaattgtgacatgcttgagaacaagggaaagctcttcacctcaaagtatataattatgacttccaactctg
aaactccagtgaaaccctcttccaagcgcgcaggtgcattctaccgaagggttactatcatcgatgtaacaaactccagtgaaaccctcttccaagcgcgcaggtgcattctaccgaagggttactatcatcgatgtaac
taacccttttgtggagtcgcacaagcgtgcaaggcctgggacgtctgttcctcgtagctgctataagaaataacccttttgtggagtcgcacaagcgtgcaaggcctgggacgtctgttcctcgtagctgctataagaaa
aacttctcccatctctcacttgctaaacgaggggccgagtgctggtgcaaggaatacgttcttgaccctaaacttctcccatctctcacttgctaaacgaggggccgagtgctggtgcaaggaatacgttcttgacccta
aggggcttcaacaccaaagcatgaaggctccccctcctacctttcttaacattgactctttagctcagacaggggcttcaacaccaaagcatgaaggctccccctcctacctttcttaacattgactctttagctcagac
gatgaagcaagacttcttgctcaagaacatggcttttgaggctgaagatgggtgcgcagaacatcgatatgatgaagcaagacttcttgctcaagaacatggcttttgaggctgaagatgggtgcgcagaacatcgatat
gggtttgtgtgtcaacaggaagaggttgaaactgttcgcaggctcctcaacgcggttagggcaaggatgagggtttgtgtgtcaacaggaagaggttgaaactgttcgcaggctcctcaacgcggttagggcaaggatga
atgctaccttcactgtgtgtgttggacccgagacctcgcactcgattggttgcactgcgcacgtgttaacatgctaccttcactgtgtgtgttggacccgagacctcgcactcgattggttgcactgcgcacgtgttaac
tcccaatgagacctttaatggaaagaagtttgttgtgtcacgatgtaacgaagcatcactttctgccctttcccaatgagacctttaatggaaagaagtttgttgtgtcacgatgtaacgaagcatcactttctgccctt
gaaggtaactgtgtaaagtcagctttgggcgtgtgtatgtcagataaggatctcactcatttatgccactgaaggtaactgtgtaaagtcagctttgggcgtgtgtatgtcagataaggatctcactcatttatgccact
tcattaaagggaaaattgtcaatgacagtgttaggttggatgaactacccgccaatcagcatgtggtaactcattaaagggaaaattgtcaatgacagtgttaggttggatgaactacccgccaatcagcatgtggtaac
cgttaattcggtgtttgatttggcctgggctgttcgtcgtcatctcacactggcagggcagtttcaagctcgttaattcggtgtttgatttggcctgggctgttcgtcgtcatctcacactggcagggcagtttcaagct
atcagagccgcatatgatgtgcttactgtccccgacaagatccctgcaatgttgcgtcactggatggatgatcagagccgcatatgatgtgcttactgtccccgacaagatccctgcaatgttgcgtcactggatggatg
agacctccttttctgatgaccacgttgtaacacaatttgtaacacctggtggcatagtcatcctggagtcagacctcctttctgatgaccacgttgtaacacaatttgtaacacctggtggcatagtcatcctggagtc
ttgcggtggtgcacgcatctgggctttaggtcgcaacgtgatccgagcaggaggtgtcaccgcaaccccattgcggtggtgcacgcatctgggctttaggtcgcaacgtgatccgagcaggaggtgtcaccgcaacccca
accggaggatgtgttaggttaatgggattatctgcgccaaccatgccatggtccgagatctttcgtgagcaccggagaggatgtgttaggttaatgggattatctgcgccaaccatgccatggtccgagatctttcgtgagc
tcttctctctcttaggtagaatttggtcatctgtcaaagtatcagccctagtactaactgctcttggaattcttctctctcttaggtagaatttggtcatctgtcaaagtatcagccctagtactaactgctcttggaat
gtacgcatctagatttagaccaaaatcggaagcaaaaggaaaaaccaaattgaagattgggacatacagggtacgcatctagatttagaccaaaatcggaagcaaaaggaaaaaccaaattgaagattgggacatacagg
ggtcgcggtgtagcgctgactgatgacgagtacgatgagtggcgcgaacacaacgcctccagaaaattggggtcgcggtgtagcgctgactgatgacgagtacgatgagtggcgcgaacacaacgcctccagaaaattgg
atttgtcagtggaggatttcttaatgttgcgccatcgtgccgctctaggagccgacgacaatgatgcagtatttgtcagtggaggatttcttaatgttgcgccatcgtgccgctctaggagccgacgacaatgatgcagt
aaaattccggtcgtggtggaactccagaaccaaaatggccaatgattatgaggatgtcaccgtaattggcaaaattccggtcgtggtggaactccagaaccaaaatggccaatgattatgaggatgtcaccgtaattggc
aaaggtggcgtcaaacatgaaaagatcagaaccaataccctaaaagctgtggatcgtggttatgacgtcaaaaggtggcgtcaaacatgaaaagatcagaaccaataccctaaaagctgtggatcgtggttatgacgtca
gctttgctgaggaatcaggaccaggcaccaagttccacaagaatgcaattggatctgtcacagatgtttggctttgctgaggaatcaggaccaggcaccaagttccacaagaatgcaattggatctgtcacagatgtttg
tggggagcacaaaggctattgcatccacatgggccacggtgtttacgcatccgtagctcacgtggtgaaatggggagcacaaaggctattgcatccacatgggccacggtgtttacgcatccgtagctcacgtggtgaaa
ggggattcatttttcttgggtgaaaggatttttgatcttaagactaatggtgaattttgctgctttcgcaggggattcatttttcttgggtgaaaggatttttgatcttaagactaatggtgaattttgctgctttcgca
gcacgaaaattctacctagtgctgcacctttcttttctgggaagcccactcgtgatccgtggggatccccgcacgaaaattctacctagtgctgcacctttcttttctgggaagcccactcgtgatccgtggggatcccc
cgtggcaactgagtggaagcctaaaatgtacacaacaacctctggaaagattctggggtgctttgcaacacgtggcaactgagtggaagcctaaaatgtacacaacaacctctggaaagattctggggtgctttgcaaca
acttcaactgaaactcacccgggagactgtggcctcccatatattgatgacaacgggagggtgaccggccacttcaactgaaactcacccgggagactgtggcctcccatatattgatgacaacgggaggtgaccggcc
tccacactggctctgggggacccaaaaccccaagtgccaagttggtggtgccatatgtgcatattgacattccacactggctctggggacccaaaaccccaagtgccaagttggtggtgccatatgtgcatattgacat
gaagactaaatccgtcactgctcaaaagtatgacgtaacaaagcctgatataagttacaaaggcttaattgaagactaaatccgtcactgctcaaaagtatgacgtaacaaagcctgatataagttacaaaggcttaatt
tgtaagcaattggatgagattaggattataccaaaaggcacacgtctccatgtctccccagcccacactgtgtaagcaattggatgagattaggattataccaaaaggcacacgtctccatgtctccccagcccacactg
aggattatcaagaatgctcacaccaacccgcatcacttggaagcggggatccccgctgtccaaaatctctaggattatcaagaatgctcacaccaacccgcatcacttggaagcggggatccccgctgtccaaaatctct
cactgctatagttgttgattctctaaaaccatactgtgagaacgttgagggtcctccacatgatgttttgcactgctatagttgttgattctctaaaaccatactgtgagaacgttgaggtcctccacatgatgttttg
cacagagttcaaaagatgcttatcgaccacctttcaggctttgtccctatgaacatttcctcggaaacctcacagagttcaaaagatgcttatcgaccacctttcaggctttgtccctatgaacatttcctcggaaacct
ctatgctctcagctttccacaaactcaatcatgatacttcctgtggaccatacttgggtggcagaaagaactatgctctcagctttccacaaactcaatcatgatacttcctgtggaccatacttgggtggcagaaagaa
agatcacatggctaacggtgagccggacaagcagttattggatctcctgtctgcaaaatggaaattggcaagatcacatggctaacggtgagccggacaagcagttattggatctcctgtctgcaaaatggaaattggca
acccaaggcatagcactaccacatgagtacacaattgggctaaaggacgagttaaggcccgtggagaaggacccaaggcatagcactaccacatgagtacacaattgggctaaaggacgagttaaggcccgtggagaagg
ttagtgaagggaagagaaggatgatttggggttgtgatgttggcgtcgctactgtctgtgcagctgcgttttagtgaagggaagagaaggatgatttggggttgtgatgttggcgtcgctactgtctgtgcagctgcgtt
caagggtgttagcgatgccatcacagcaaaccaccagtacgggcctatacaggttggtatcaacatggatcaagggtgttagcgatgccatcacagcaaaccaccagtacgggcctatacaggttggtatcaacatggat
agccccagcgtcgaagcgctgttccaaaggatcaaaagcgcggccaaggtatttgcggtcgattattccaagccccagcgtcgaagcgctgttccaaaggatcaaaagcgcggccaaggtatttgcggtcgattattcca
aatgggattcgacccaatcgcctcgtgtcagtgcagcttcaattgacatccttcgttacttttccgatcgaatgggattcgacccaatcgcctcgtgtcagtgcagcttcaattgacatccttcgttacttttccgatcg
ctctccaattgttgactcagcctctaacacactgaagagccctcctgttgcaatctttaatggtgttgctctctccaattgttgactcagcctctaacacactgaagagccctcctgttgcaatctttaatggtgttgct
gtaaaagtgtcctctggcttaccatctggaatgcctcttacctcagtaatcaattcccttaatcattgtcgtaaaagtgtcctctggcttaccatctggaatgcctcttacctcagtaatcaattcccttaatcattgtc
tgtatgttgggtgtgccattcttcaatccctagaagctaaggccattcccgtcacttggaaccttttctctgtatgttgggtgtgccattcttcaatccctagaagctaaggccattcccgtcacttggaaccttttctc
aacttttgatatcatgacttacggggatgatggtgtctacatgtttcctattatgtatgcaagtattagtaacttttgatatcatgacttacggggatgatggtgtctacatgtttcctattatgtatgcaagtattagt
gaccaaatttttggaaatctttcttcctatggcctgaaaccaactcgggttgacaagtccgttggagcaagaccaaatttttggaaatctttcttcctatggcctgaaaccaactcgggttgacaagtccgttggagcaa
ttgagcctattgatcctgactctgttgttttcttgaagagaacaatcacaaggacacctcaggggataagttgagcctattgatcctgactctgttgttttcttgaagagaacaatcacaaggacacctcaggggataag
gggtttacttgatcgcagctctataataagacaattctattatattaaaggtgagaactccgatgactgggggtttacttgatcgcagctctataataagacaattctattatattaaaggtgagaactccgatgactgg
aagagccccccaaaacatattgacccaacatctcgagggcaacagctttggaatgcctgtctgtacgctaaagagccccccaaaacatattgacccaacatctcgagggcaacagctttggaatgcctgtctgtacgcta
gccaacatggcttggagtttttcaacaaggtttacaggctggccgagagggctgttgaatatgaagagctgccaacatggcttggagtttttcaacaaggtttacaggctggccgagagggctgttgaatatgaagagct
gcactttgaacccccaacatatgcttcggctttggatcattacaacagccagttcaatggcgtggaggcggcactttgaacccccaacatatgcttcggctttggatcattacaacagccagttcaatggcgtggaggcg
cggtctgaccagatcgactcgagtggcatgaccgccctacactgtgatgtgttcgaagtt</INSDSeq_cggtctgaccagatcgactcgagtggcatgaccgccctacactgtgatgtgttcgaagtt</INSDSeq_
sequence>sequence>
</INSDSeq></INSDSeq>
</SequenceData></SequenceData>
<SequenceDatasequenceIDNumber="2"><SequenceDatasequenceIDNumber="2">
<INSDSeq><INSDSeq>
<INSDSeq_length>1763</INSDSeq_length><INSDSeq_length>1763</INSDSeq_length>
<INSDSeq_moltype>AA</INSDSeq_moltype><INSDSeq_moltype>AA</INSDSeq_moltype>
<INSDSeq_division>PAT</INSDSeq_division><INSDSeq_division>PAT</INSDSeq_division>
<INSDSeq_feature-table><INSDSeq_feature-table>
<INSDFeature><INSDFeature>
<INSDFeature_key>source</INSDFeature_key><INSDFeature_key>source</INSDFeature_key>
<INSDFeature_location>1..1763</INSDFeature_location><INSDFeature_location>1..1763</INSDFeature_location>
<INSDFeature_quals><INSDFeature_quals>
<INSDQualifier><INSDQualifier>
<INSDQualifier_name>mol_type</INSDQualifier_name><INSDQualifier_name>mol_type</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>protein</INSDQualifier_value><INSDQualifier_value>protein</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier></INSDQualifier>
<INSDQualifier id="q2"><INSDQualifier id="q2">
<INSDQualifier_name>organism</INSDQualifier_name><INSDQualifier_name>organism</INSDQualifier_name>
<INSDQualifier_value>FCV</INSDQualifier_value><INSDQualifier_value>FCV</INSDQualifier_value>
</INSDQualifier></INSDQualifier>
</INSDFeature_quals></INSDFeature_quals>
</INSDFeature></INSDFeature>
</INSDSeq_feature-table></INSDSeq_feature-table>
<INSDSeq_sequence>MSQTLSFVLKTHSVRKDFVHSVKLTLARRRDLQYIYNKLSRTIRAEACP<INSDSeq_sequence>MSQTLSFVLKTHSVRKDFVHSVKLTLARRRDLQYIYNKLSRTIRAEACP
SCASYDVCPNCTSGDVPDDGSSTMSIPSWEDVTKSSTYSLLLSEDTSDELCPEDLVNVAAHIRKALSTQSSCASYDVCPNCTSGDVPDDGSSTMSIPSWEDVTKSSTYSLLLSEDTSDELCPEDLVNVAAHIRKALSTQS
HPANAEMCKEQLTFLLVMAEAMLPQRSRASIPLHQQHTAARLEWREKFFSKPLDFLLERVGVSKDILQTTHPANAEMCKEQLTFLLVMAEAMLPQRSRASIPLHQQHTAARLEWREKFFSKPLDFLLERVGVSKDILQTT
AIWKIILEKACYCKSYGEQWFTAAKQKLREMKNFESDTLKPLIGGFIDGLRFLTVDNPNPMGFLPKLIGLAIWKIILEKACYCKSYGEQWFTAAKQKLREMKNFESDTLKPLIGGFIDGLRFLTVDNPNPMGFLPKLIGL
VKPLNLAMIIDNHENTISGWIITLTAIMELYNITECTIDIITSVITAFYDKIGKATKFYSCVKALFTGFRVKPLNLAMIIDNHENTISGWIITLTAIMELYNITECTIDIITSVITAFYDKIGKATKFYSCVKALFTGFR
SEDVANSFWYMAAAILCYLITGLIPNNGRFSKIKACLAGATTLVSGIVATQKLAAMFATWNSESIVNELSSEDVANSFWYMAAAILCYLITGLIPNNGRFSKIKACLAGATTLVSGIVATQKLAAMFATWNSESIVNELS
ARTVALSELNNPTTTSDTDSVERLLELAKILHEEIKIHTLNPIMQSYNPILRNLMSTLDGVITSCNKRKAARTVALSELNNPTTTSDTDSVERLLELAKILHEEIKIHTLNPIMQSYNPILRNLMSTLDGVITSCNKRKA
IARKRQVPVCYILTGPPGCGKTTAAQALAKKLSDQEPSVINLDVDHHDTYTGNEVCIIDEFDSSDKVDYAIARKRQVPVCYILTGPPGCGKTTAAQALAKKLSDQEPSVINLDVDHHDTYTGNEVCIIDEFDSSDKVDYA
NFVIGMVNSAPMVLNCDMLENKGKLFTSKYIIMTSNSETPVKPSSKRAGAFYRRVTIIDVTNPFVESHKRNFVIGMVNSAPMVLNCDMLENKGKLFTSKYIIMTSNSETPVKPSSKRAGAFYRRVTIIDVTNPFVESHKR
ARPGTSVPRSCYKKNFSHLSLAKRGAECWCKEYVLDPKGLQHQSMKAPPPTFLNIDSLAQTMKQDFLLKNARPGTSVPRSCYKKNFSHLSLAKRGAECWCKEYVLDPKGLQHQSMKAPPPTFLNIDSLAQTMKQDFLLKN
MAFEAEDGCAEHRYGFVCQQEEVETVRRLLNAVRARMNATFTVCVGPETSHSIGCTAHVLTPNETFNGKKMAFEAEDGCAEHRYGFVCQQEEVETVRRLLNAVRARMNATFTVCVGPETSHSIGCTAHVLTPNETFNGKK
FVVSRCNEASLSALEGNCVKSALGVCMSDKDLTHLCHFIKGKIVNDSVRLDELPANQHVVTVNSVFDLAWFVVSRCNEASLSALEGNCVKSALGVCMSDKDLTHLCHFIKGKIVNDSVRLDELPANQHVVTVNSVFDLAW
AVRRHLTLAGQFQAIRAAYDVLTVPDKIPAMLRHWMDETSFSDDHVVTQFVTPGGIVILESCGGARIWALAVRRHLTLAGQFQAIRAAYDVLTVPDKIPAMLRHWMDETSFSDDHVVTQFVTPGGIVILESCGGARIWAL
GRNVIRAGGVTATPTGGCVRLMGLSAPTMPWSEIFRELFSLLGRIWSSVKVSALVLTALGMYASRFRPKSGRNVIRAGGVTATPTGGCVRLMGLSAPTMPWSEIFRELFSLLGRIWSSVKVSALVLTALGMYASRFRPKS
EAKGKTKLKIGTYRGRGVALTDDEYDEWREHNASRKLDLSVEDFLMLRHRAALGADDNDAVKFRSWWNSREAKGKTKLKIGTYRGRGVALTDDEYDEWREHNASRKLDLSVEDFLMLRHRAALGADDNDAVKFRSWWNSR
TKMANDYEDVTVIGKGGVKHEKIRTNTLKAVDRGYDVSFAEESGPGTKFHKNAIGSVTDVCGEHKGYCIHTKMANDYEDVTVIGKGGVKHEKIRTNTLKAVDRGYDVSFAEESGPGTKFHKNAIGSVTDVCGEHKGYCIH
MGHGVYASVAHVVKGDSFFLGERIFDLKTNGEFCCFRSTKILPSAAPFFSGKPTRDPWGSPVATEWKPKMMGHGVYASVAHVVKGDSFFLGERIFDLKTNGEFCCFRSTKILPSAAPFFSGKPTRDPWGSPVATEWKPKM
YTTTSGKILGCFATTSTETHPGDCGLPYIDDNGRVTGLHTGSGGPKTPSAKLVVPYVHIDMKTKSVTAQKYTTTSGKILGCFATTSTETHPGDCGLPYIDDNGRVTGLHTGSGGPKTPSAKLVVPYVHIDMKTKSVTAQK
YDVTKPDISYKGLICKQLDEIRIIPKGTRLHVSPAHTEDYQECSHQPASLGSGDPRCPKSLTAIVVDSLKYDVTKPDISYKGLICKQLDEIRIIPKGTRLHVSPAHTEDYQECSHQPASLGSGDPRCPKSLTAIVVDSLK
PYCENVEGPPHDVLHRVQKMLIDHLSGFVPMNISSETSMLSAFHKLNHDTSCGPYLGGRKKDHMANGEPDPYCENVEGPPHDVLHRVQKMLIDHLSGFVPMNISSETSMLSAFHKLNHDTSCGPYLGGRKKDHMANGEPD
KQLLDLLSAKWKLATQGIALPHEYTIGLKDELRPVEKVSEGKRRMIWGCDVGVATVCAAAFKGVSDAITAKQLLLDLLSAKWKLATQGIALPHEYTIGLKDELRPVEKVSEGKRRMIWGCDVGVATVCAAAFKGVSDAITA
NHQYGPIQVGINMDSPSVEALFQRIKSAAKVFAVDYSKWDSTQSPRVSAASIDILRYFSDRSPIVDSASNNHQYGPIQVGINMDSPSVEALFQRIKSAAKVFAVDYSKWDSTQSPRVSAASIDILRYFSDRSPIVDSASN
TLKSPPVAIFNGVAVKVSSGLPSGMPLTSVINSLNHCLYVGCAILQSLEAKAIPVTWNLFSTFDIMTYGDTLKSPPVAIFNGVAVKVSSGLPSGMPLTSVINSLNHCLYVGCAILQSLEAKAIPVTWNLFSTFDIMTYGD
DGVYMFPIMYASISDQIFGNLSSYGLKPTRVDKSVGAIEPIDPDSVVFLKRTITRTPQGIRGLLDRSSIIDGVYMFPIMYASISDQIFGNLSSYGLKPTRVDKSVGAIEPIDPDSVVFLKRTITRTPQGIRGLLDRSSII
RQFYYIKGENSDDWKSPPKHIDPTSRGQQLWNACLYASQHGLEFFNKVYRLAERAVEYEELHFEPPTYASRQFYYIKGENSDDWKSPPKHIDPTSRGQQLWNACLYASQHGLEFFNKVYRLAERAVEYEELHFEPPTYAS
ALDHYNSQFNGVEARSDQIDSSGMTALHCDVFEV</INSDSeq_sequence>ALDHYNSQFNGVEARSDQIDSSGMTALHCDVFEV</INSDSeq_sequence>
</INSDSeq></INSDSeq>
</SequenceData></SequenceData>
</ST26SequenceListing></ST26SequenceListing>
<---<---
Claims (1)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2828702C1 true RU2828702C1 (en) | 2024-10-16 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2184567C1 (en) * | 2001-05-16 | 2002-07-10 | Федеральное государственное учреждение Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов - центр качества ветеринарных препаратов и кормов | Strain feline calicivirus used for control of immunogenic activity of vaccines, preparing specific curative-prophylaxis and diagnostic biopreparations |
| RU2628096C1 (en) * | 2016-06-01 | 2017-08-14 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Сибирский федеральный научный центр агробиотехнологий Российской академии наук (СФНЦА РАН) | Cats calicivirus ashley virus strain for study of drug antiviral activity related to cats calicivirus |
| RU2804639C1 (en) * | 2023-05-11 | 2023-10-03 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ") | Pers feline calicivirus strain of feline calicivirus infection for the manufacture of biological products for the diagnostics and specific prevention of feline calicivirus infection |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2184567C1 (en) * | 2001-05-16 | 2002-07-10 | Федеральное государственное учреждение Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов - центр качества ветеринарных препаратов и кормов | Strain feline calicivirus used for control of immunogenic activity of vaccines, preparing specific curative-prophylaxis and diagnostic biopreparations |
| RU2628096C1 (en) * | 2016-06-01 | 2017-08-14 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Сибирский федеральный научный центр агробиотехнологий Российской академии наук (СФНЦА РАН) | Cats calicivirus ashley virus strain for study of drug antiviral activity related to cats calicivirus |
| RU2804639C1 (en) * | 2023-05-11 | 2023-10-03 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ") | Pers feline calicivirus strain of feline calicivirus infection for the manufacture of biological products for the diagnostics and specific prevention of feline calicivirus infection |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Hofmann-Lehmann R. et al., Calicivirus Infection in Cats. Viruses. 2022 Apr 29; 14 (5): 937. doi: 10.3390/v14050937. PMID: 35632680; PMCID: PMC9145992. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107184969A (en) | A kind of A types Sai Nika paddy viral inactivation vaccines and its preparation method and application | |
| RU2593718C1 (en) | Inactivated emulsion vaccine against foot-and-mouth disease types a, o, asia-1 | |
| RU2451745C2 (en) | A 2045/KYRGYZSTAN/ 2007 STRAIN OF FOOT-AND-MOUTH DISEASE VIRUS Aphtae epizooticae TYPE A FOR ANTIGENIC AND IMMUNOGENIC PERFORMANCE CONTROL OF FOOT-AND-MOUTH DISEASE VACCINES AND FOR PRODUCTION OF BIOPREPARATIONS FOR DIAGNOSIS AND SPECIFIC PREVENTION OF FOOT-AND-MOUTH DISEASE TYPE A | |
| RU2828702C1 (en) | "mira" strain of feline calicivirus virus of feline calicivirus infection for making biopreparations for diagnosis and specific prevention of feline calicivirus infection | |
| CN100503816C (en) | A kind of recombinant pseudorabies-porcine reproductive and respiratory syndrome genetically engineered strain and its application | |
| RU2804623C1 (en) | Fauna feline calicivirus strain for the manufacture of biological products for the diagnostics and specific prevention of feline calicivirus | |
| RU2804639C1 (en) | Pers feline calicivirus strain of feline calicivirus infection for the manufacture of biological products for the diagnostics and specific prevention of feline calicivirus infection | |
| RU2665849C1 (en) | Inactivated emulsion vaccine against foot-and-mouth disease type o | |
| WO2004062360A1 (en) | Method of producing specific pathogen free hamster for the preparation of a variety of biological products | |
| RU2140452C1 (en) | Foot and mouth virus disease type a strain n 1707 "armenia-98" used for preparing diagnostic and vaccine preparations | |
| RU2770815C1 (en) | Strain "tyumen/2019" of the virus of infectious nodular dermatitis (lumpy dermatitis) of cattle dermatitis nodularis bovum of the genus capripoxvirus for the manufacture of biological products for the diagnosis and specific prevention of infectious nodular dermatitis of cattle | |
| RU2806603C1 (en) | Lavr strain of alphaherpesvirus 1 virus of infectious feline rhinotracheitis for production of biological products for diagnosis and specific prevention of infectious feline rhinotracheitis | |
| RU2563522C1 (en) | STRAIN O №2102/Zabaikalsky/2010 FMD VIRUS Aphtae epizooticae OF TYPE O FOR CONTROL OF ANTIGENIC AND IMMUNOGENIC ACTIVITY OF FMD VACCINES AND FOR PRODUCTION OF BIOLOGICAL PRODUCTS FOR DIAGNOSTICS AND SPECIFIC PROPHYLAXIS OF FMD OF TYPE O | |
| RU2817267C1 (en) | Archie strain of virus carnivore protoparvovirus 1 of parvoviral enteritis of dogs for producing biopreparations for diagnosing and specific prevention of canine parvovirus enteritis | |
| RU2708335C1 (en) | Strain "privolzhsky" of a virus of nodular dermatitis in cattle dermatitis nodularis bovum, a genus capripoxvirus for manufacturing biopreparations for diagnostics and specific prevention of infectious dermatitis of bovine animals | |
| RU2796988C1 (en) | Rich strain of the canine coronavirus enteritis virus for the manufacture of biological products for the diagnosis and specific prevention of canine coronavirus enteritis | |
| RU2294760C2 (en) | Sorbed inactivated vaccine against foot-and-mouth disease of type a | |
| RU2806604C1 (en) | Sheba strain of carnivore protoparvovirus 1 virus of feline panleukopenia for production of biological products for diagnosis and specific prevention of feline panleukopenia | |
| RU2603255C9 (en) | Strain a №2155/baikal/2013 of murrain virus aphtae epizooticae type a for control of antigenic and immunogenic activity and to produce biopreparations for diagnostics and specific prevention of murrain type a | |
| RU2191825C1 (en) | "bio-92" viral strain of infectious bursal poultry disease for manufacturing vaccines, diagnostic and other biopreparations | |
| RU2826730C1 (en) | Strain "sat-2/north african/2012" of aphtae epizooticae foot-and-mouth disease virus of genotype sat-2/vii/ghb-12 for production of biopreparations for diagnosis and specific prevention of foot-and-mouth disease | |
| RU2825899C1 (en) | Live cultural dry vaccine against porcine reproductive-respiratory syndrome and method for preparing vaccine | |
| RU2348690C2 (en) | Amur strain no 1987 of asia-1 type murrain virus for antigenic and immunogenic performance control of vaccines and for production of medicines for diagnostics and specific prevention of asia-1 type murrain | |
| RU2827230C1 (en) | Associated vaccine against panleukopenia, calicivirus, viral rhinotracheitis and feline rabies | |
| RU2793828C1 (en) | O/kenya/2017 strain of fmd virus aphtae epizooticae genotype o/ea-2 for the manufacture of biological products for the diagnosis and specific prevention of fmd genotype o/ea-2 |