RU2813185C1 - Method of quantitative determination of 4-ohycoumarin drugs derivatives - Google Patents
Method of quantitative determination of 4-ohycoumarin drugs derivatives Download PDFInfo
- Publication number
- RU2813185C1 RU2813185C1 RU2023110793A RU2023110793A RU2813185C1 RU 2813185 C1 RU2813185 C1 RU 2813185C1 RU 2023110793 A RU2023110793 A RU 2023110793A RU 2023110793 A RU2023110793 A RU 2023110793A RU 2813185 C1 RU2813185 C1 RU 2813185C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- minutes
- warfarin
- fepromarone
- acenocoumarol
- solutions
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 30
- 239000003814 drug Substances 0.000 title description 20
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 53
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 35
- PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N warfarin Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=CC=C1 PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 33
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- VXIXUWQIVKSKSA-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxycoumarin Chemical class C1=CC=CC2=C1OC(=O)C=C2O VXIXUWQIVKSKSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- VABCILAOYCMVPS-UHFFFAOYSA-N acenocoumarol Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 VABCILAOYCMVPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 229960002054 acenocoumarol Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 229960005080 warfarin Drugs 0.000 claims abstract description 19
- KYNMKEMSEAXQAD-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-3-[1-(4-nitrophenyl)-3-oxopentyl]chromen-2-one Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)CC)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 KYNMKEMSEAXQAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- WHQCHUCQKNIQEC-UHFFFAOYSA-N benzbromarone Chemical compound CCC=1OC2=CC=CC=C2C=1C(=O)C1=CC(Br)=C(O)C(Br)=C1 WHQCHUCQKNIQEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 14
- BHAAPTBBJKJZER-UHFFFAOYSA-N p-anisidine Chemical compound COC1=CC=C(N)C=C1 BHAAPTBBJKJZER-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000005220 pharmaceutical analysis Methods 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical class OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000000987 azo dye Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 2
- KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N phenolphthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2C(=O)O1 KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- MLIWQXBKMZNZNF-KUHOPJCQSA-N (2e)-2,6-bis[(4-azidophenyl)methylidene]-4-methylcyclohexan-1-one Chemical compound O=C1\C(=C\C=2C=CC(=CC=2)N=[N+]=[N-])CC(C)CC1=CC1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 MLIWQXBKMZNZNF-KUHOPJCQSA-N 0.000 description 1
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical group C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- WWBYDEQHYAEHLT-UHFFFAOYSA-N Acenocumarol Chemical compound OC=1OC2=CC=CC=C2C(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WWBYDEQHYAEHLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000167854 Bourreria succulenta Species 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005811 Viola adunca Nutrition 0.000 description 1
- 240000009038 Viola odorata Species 0.000 description 1
- 235000013487 Viola odorata Nutrition 0.000 description 1
- 235000002254 Viola papilionacea Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006149 azo coupling reaction Methods 0.000 description 1
- -1 benzpromarone (I) Chemical compound 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019693 cherries Nutrition 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- RXKJFZQQPQGTFL-UHFFFAOYSA-N dihydroxyacetone Chemical group OCC(=O)CO RXKJFZQQPQGTFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- HHFAWKCIHAUFRX-UHFFFAOYSA-N ethoxide Chemical compound CC[O-] HHFAWKCIHAUFRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical group 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- SMQUZDBALVYZAC-UHFFFAOYSA-N salicylaldehyde Chemical compound OC1=CC=CC=C1C=O SMQUZDBALVYZAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- KYITYFHKDODNCQ-UHFFFAOYSA-M sodium;2-oxo-3-(3-oxo-1-phenylbutyl)chromen-4-olate Chemical compound [Na+].[O-]C=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=CC=C1 KYITYFHKDODNCQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 229960002647 warfarin sodium Drugs 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Abstract
Description
Изобретение относится к фармацевтическому анализу, а именно к анализу медицинских препаратов с помощью оптических средств, и может быть использовано для количественного определения лекарственных средств производных 4-оксикумарина, а именно, бензпромарона (I), нитрофарина (II), фепромарона (III), варфарина (IV) и аценокумарола (синкумара) (V) в субстанциях.The invention relates to pharmaceutical analysis, namely to the analysis of medical preparations using optical means, and can be used for the quantitative determination of drugs derived from 4-hydroxycoumarin, namely benzpromarone (I), nitrofarin (II), fepromarone (III), warfarin (IV) and acenocoumarol (syncumar) (V) in substances.
Цель изобретения состояла в разработке чувствительной методики количественного определения исследуемых препаратов с использованием метода фотоэлектроколориметрии.The purpose of the invention was to develop a sensitive method for the quantitative determination of test drugs using the photoelectrocolorimetry method.
Ниже приводятся методики идентификации и количественного определения исследуемых препаратов.Below are methods for identifying and quantifying the study drugs.
Производные 4-оксикумарина по физическим свойствам представляют собой белые или белые слегка с кремоватым оттенком кристаллические вещества, практически нерастворимы в воде, мало растворимы в этаноле, растворимы в растворах гидроксидов щелочных металлов, ацетоне, диоксане. [1-3, 5-7].According to their physical properties, 4-hydroxycoumarin derivatives are white or white with a slightly creamy tint crystalline substances, practically insoluble in water, slightly soluble in ethanol, soluble in solutions of alkali metal hydroxides, acetone, and dioxane. [1-3, 5-7].
Подлинность исследуемых препаратов устанавливают по ИК и УФ спектрам. Раствор фепромарона в этаноле имеет максимумы поглощения при 307 м 313 нм; в 0,1 м растворе NaOH - при 307 нм [5, 6, 7]. Аценокумарол в этаноле - при 284 и 306 нм [3].The authenticity of the drugs under study is determined by IR and UV spectra. A solution of fepromarone in ethanol has absorption maxima at 307 m 313 nm; in 0.1 m NaOH solution - at 307 nm [5, 6, 7]. Acenocoumarol in ethanol - at 284 and 306 nm [3].
После предварительной обработки производных 4-оксикумарина раствором щелочи, проходящей с разрывом лактонного кольца, образуется фенольное соединение, вступающее в реакцию азосочетания (образуются азокрасители от ярко-оранжевого до вишнево-красного цвета) [3, 4, 5].After pre-treatment of 4-hydroxycoumarin derivatives with an alkali solution, which causes the lactone ring to break, a phenolic compound is formed that enters into an azo coupling reaction (azo dyes from bright orange to cherry red are formed) [3, 4, 5].
Для установки подлинности этих веществ используют сплавление со щелочами. При этом происходит разложение препарата и образование соли салициловой кислоты. После прибавления соляной кислоты выпадает салициловая кислота, которую идентифицируют раствором железа (3+) хлорида. Образуется сине-фиолетовое окрашивание [3, 4, 5].To establish the authenticity of these substances, fusion with alkalis is used. In this case, the drug decomposes and the formation of a salicylic acid salt occurs. After adding hydrochloric acid, salicylic acid precipitates, which is identified with a solution of iron (3+) chloride. A blue-violet color is formed [3, 4, 5].
Для подтверждения наличия алифатической спиртовой группы проводят реакцию ацетилирования уксусным ангидридом [3, 5].To confirm the presence of an aliphatic alcohol group, an acetylation reaction with acetic anhydride is carried out [3, 5].
Наличие алифатической кетонной группы в исследуемых препаратах подтверждают реакцией препарата с салициловым альдегидом в присутствии концентрированной серной кислоты и нагреванием в течение 15 мин. Раствор приобретает оранжевое или красно-оранжевое окрашивание [5].The presence of an aliphatic ketone group in the studied preparations is confirmed by reacting the preparation with salicylic aldehyde in the presence of concentrated sulfuric acid and heating for 15 minutes. The solution acquires an orange or red-orange color [5].
Для идентификации препаратов, содержащих нитрогруппу в ароматическом кольце (нитрофарин, аценокумарол) проводят восстановление нитрогруппы в аминогруппу цинковой пылью в соляной кислоте. Затем обрабатывают нитритом натрия в кислой среде в присутствии мочевины и через 1 мин прибавляют раствор Р-нафтола. Появляется красное окрашивание азокрасителя [3, 5].To identify drugs containing a nitro group in the aromatic ring (nitrofarin, acenocoumarol), the nitro group is reduced to an amino group with zinc dust in hydrochloric acid. Then it is treated with sodium nitrite in an acidic medium in the presence of urea and after 1 minute a solution of P-naphthol is added. A red color of the azo dye appears [3, 5].
Количественное определение производных 4-оксикумарина основано на кислотных свойствах, обусловленных наличием алифатической ОН-группы. Это определение проводится методом нейтрализации гидроксидом натрия в ацетоне в присутствии фенолфталеина [5].Quantitative determination of 4-hydroxycoumarin derivatives is based on the acidic properties due to the presence of an aliphatic OH group. This determination is carried out by neutralization with sodium hydroxide in acetone in the presence of phenolphthalein [5].
Известен способ количественного определения варфарина методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методика основана на концентрировании варфарина натрия на бумажные фильтры марки «синяя лента», десорбции его дистиллированной водой под действием ультразвука, фильтрации через мембранный фильтр и количественном определении с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием диодно-матричного детектора при длине волны 210 нм [Голуб А.А. Определение варфарина в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Голуб А.А., Ивашкевич Л.С. Здоровье и окружающая среда. - №27. - 2017. - С. 226-229.].There is a known method for the quantitative determination of warfarin by reverse-phase high-performance liquid chromatography. The technique is based on the concentration of warfarin sodium on blue ribbon paper filters, its desorption with distilled water under the influence of ultrasound, filtration through a membrane filter and quantitative determination using high-performance liquid chromatography using a diode array detector at a wavelength of 210 nm [Golub A. A. Determination of warfarin in the air of the working area using high-performance liquid chromatography. Golub A.A., Ivashkevich L.S. Health and environment. - No. 27. - 2017. - P. 226-229.].
Прототипом заявленного способа является количественное определение 4-оксикумарина оптическим методом в диапазоне концентраций 0,01-10 мкг/мл [Авторское свидетельство SU 1497527 Способ определения 4-оксикумарина. 30.07.1989. бюл. №28. 5 с.]. Способ включает растворение исследуемого вещества в метиловом спирте, обработку полученного раствора 0,5% водным раствора перйодата калия, концентрированной 35-38% соляной кислотой, а также 25% водным раствором гидроксида аммония, при их объемном соотношении 1:0,5:0,5 соответственно. После чего производят измерение интенсивности флуоресценции. Возбуждение проводят при 346 нм, флуоресценцию регистрируют при 418 нм. Чувствительность методики составляет 0,01 мкг/мл. Однако при использовании данной методики невозможно определение синкумарина, фепромарона, нитрофарина и ряда других производных 4-оксикумарина.The prototype of the claimed method is the quantitative determination of 4-hydroxycoumarin by an optical method in the concentration range of 0.01-10 μg/ml [Copyright certificate SU 1497527 Method for determination of 4-hydroxycoumarin. 07/30/1989. Bulletin No. 28. 5 p.]. The method involves dissolving the test substance in methyl alcohol, treating the resulting solution with a 0.5% aqueous solution of potassium periodate, concentrated 35-38% hydrochloric acid, as well as a 25% aqueous solution of ammonium hydroxide, with a volume ratio of 1:0.5:0, 5 respectively. Then the fluorescence intensity is measured. Excitation is carried out at 346 nm, fluorescence is recorded at 418 nm. The sensitivity of the technique is 0.01 μg/ml. However, using this technique it is impossible to determine syncoumarin, fepromarone, nitrofarin and a number of other 4-hydroxycoumarin derivatives.
Таким образом, приведенные методики идентификации и количественного определения производных 4-оксикумарина являются малочувствительными и неспецифичными.Thus, the presented methods for the identification and quantitative determination of 4-hydroxycoumarin derivatives are insensitive and nonspecific.
Разработанный способ определения лекарственных препаратов заключался во взаимодействии производных 4-оксикумарина в диоксане со спиртовым раствором п-анизидина в концентрированной соляной кислоте при комнатной температуре и перемешивании. Образуются окрашенные продукты - азометины [7].The developed method for determining drugs consisted of the interaction of 4-hydroxycoumarin derivatives in dioxane with an alcohol solution of p-anisidine in concentrated hydrochloric acid at room temperature and stirring. Colored products are formed - azomethines [7].
Аналогичные реакции проходят и с остальными производными 4-оксикумарина. В качестве химического реактива предлагается спиртовый раствор п-анизидина в концентрированной соляной кислоте. п-Анизидин - кристаллическое вещество, температура плавления 57,2°С, температура кипения 243°С, растворим в горячей воде, спирте, диэтиловом эфире [7].Similar reactions occur with other 4-hydroxycoumarin derivatives. An alcoholic solution of p-anisidine in concentrated hydrochloric acid is proposed as a chemical reagent. p-Anisidine is a crystalline substance, melting point 57.2°C, boiling point 243°C, soluble in hot water, alcohol, diethyl ether [7].
Задачей, на решение которой направлено изобретение, являлась в разработка чувствительной методики количественного определения производных 4-оксикумарина в субстанциях, обеспечивающей повышение доступности проведения анализа, точности определения, чувствительности, специфичности для данной группы химических веществ, отсутствие использования токсичных реактивов, а также простоту выполнения.The problem to be solved by the invention was the development of a sensitive method for the quantitative determination of 4-hydroxycoumarin derivatives in substances, ensuring increased accessibility of analysis, determination accuracy, sensitivity, specificity for this group of chemicals, absence of the use of toxic reagents, as well as ease of implementation.
Технический результат настоящего изобретения состоит в расширении номенклатуры способов количественного определения производных 4-оксикумарина путем разработки экспрессной чувствительной методики количественного определения бензпромарона (I), нитрофарина (II), фепромарона (III), варфарина (IV) и аценокумарола (V) в субстанциях с относительной ошибкой не более ±0,77%. в отсутствии использования токсичных реактивов.The technical result of the present invention is to expand the range of methods for the quantitative determination of 4-hydroxycoumarin derivatives by developing a rapid, sensitive method for the quantitative determination of benzpromarone (I), nitrofarin (II), fepromarone (III), warfarin (IV) and acenocoumarol (V) in substances with a relative error no more than ±0.77%. without the use of toxic reagents.
Технический результат достигается тем, что в способе количественного определения производных 4-оксикумарина, включающем растворение анализируемой пробы, выдерживание до полного растворения при комнатной температуре, дальнейшую обработку приготовленных растворов субстанций бензпромарона (I), нитрофарина (II), фепромарона (III), варфарина (IV) или аценокумарола (V) химическим реактивом, измерение оптической плотности окрашенных растворов, определение содержания вещества в субстанции по предварительно построенным калибровочным графикам, согласно изобретению, навеску бензпромарона (I), нитрофарина (II), фепромарона (III), варфарина (IV) или аценокумарола (V) растворяют в диоксане при комнатной температуре, к аликвоте субстанций добавляют каплями в течение 10 минут избыток по отношению к определяемому компоненту раствора п-анизидина в смеси этанола 96 масс. % и соляной кислоты концентрированной, при в объемном соотношении этанола и кислоты соляной концентрированной 17:3 соответственно, реакционную смесь выдерживают 5 минут до образования ярко-желтого окрашивания, затем выдерживают еще 3 минуты, фотоколориметрируют растворы при длине волны 364 нм относительно раствора сравнения - диоксана.The technical result is achieved by the fact that in the method for the quantitative determination of 4-hydroxycoumarin derivatives, including dissolving the analyzed sample, keeping until completely dissolved at room temperature, further processing of the prepared solutions of the substances benzpromarone (I), nitrofarin (II), fepromarone (III), warfarin ( IV) or acenocoumarol (V) with a chemical reagent, measurement of the optical density of colored solutions, determination of the substance content in the substance using pre-built calibration graphs, according to the invention, weighing benzpromarone (I), nitrofarin (II), fepromarone (III), warfarin (IV) or acenocoumarol (V) is dissolved in dioxane at room temperature, an excess relative to the determined component of a solution of p-anisidine in an ethanol mixture of 96 wt. is added dropwise to an aliquot of the substances over 10 minutes. % and concentrated hydrochloric acid, with a volume ratio of ethanol and concentrated hydrochloric acid of 17:3, respectively, the reaction mixture is kept for 5 minutes until a bright yellow color is formed, then kept for another 3 minutes, the solutions are photocolorimetered at a wavelength of 364 nm relative to the reference solution - dioxane .
Сущность заявленного способа заключалась в растворении анализируемой пробы в диоксане, выдерживании до полного растворения и доведении объемов растворов до метки тем же растворителем, дальнейшей обработке аликвотной части приготовленного раствора химическим реактивом в кислой среде. После появления окрашивания растворы доводят до метки растворителем и фотоэлектроколориметрируют.The essence of the claimed method was to dissolve the analyzed sample in dioxane, hold until completely dissolved and bring the volumes of solutions to the mark with the same solvent, and further treat an aliquot of the prepared solution with a chemical reagent in an acidic environment. After coloration appears, the solutions are brought to the mark with a solvent and photoelectrocolorimetered.
Предлагаемый способ количественного определения 4-оксикумарина заключается во взаимодействии растворов исследуемых препаратов бензпромарона (I), нитрофарина (II), фепромарона (III), варфарина (IV) или аценокумарола (V) с раствором химического реактива в кислой среде, приводящий к образованию окрашенных продуктов. В качестве химического реактива предлагается спиртовый раствор п- анизидина в концентрированной соляной кислоте.The proposed method for the quantitative determination of 4-hydroxycoumarin consists in the interaction of solutions of the studied drugs benzpromarone (I), nitrofarin (II), fepromarone (III), warfarin (IV) or acenocoumarol (V) with a solution of a chemical reagent in an acidic environment, leading to the formation of colored products . An alcoholic solution of p-anisidine in concentrated hydrochloric acid is proposed as a chemical reagent.
Пример реализации способаExample of method implementation
Ниже приведены методики приготовления спиртового раствора п-анизидина в концентрированной соляной кислоте, растворов исследуемых препаратов и методика их количественного определения.Below are the methods for preparing an alcohol solution of p-anisidine in concentrated hydrochloric acid, solutions of the drugs under study, and the method for their quantitative determination.
Приготовление спиртового раствора химического реактива. 0,5 г п-анизидина в конической колбе емкостью 200,0 мл растворяют в 100 мл-смеси: 85 мл этанола 96 масс. % и 15 мл концентрированной соляной кислоты при комнатной температуре и перемешивании. Сохраняют полученный раствор в склянке из темного стекла в течение 2 суток.Preparation of an alcohol solution of a chemical reagent. 0.5 g of p-anisidine in a conical flask with a capacity of 200.0 ml is dissolved in a 100 ml mixture: 85 ml of ethanol 96 wt. % and 15 ml of concentrated hydrochloric acid at room temperature and stirring. Store the resulting solution in a dark glass bottle for 2 days.
Изготовление растворов исследуемых препаратов.Preparation of solutions of study drugs.
В мерных колбах емкостью 50,00 мл растворяют точно отвешенные навески растертых порошков бензпромарона (I) около 0,01 г, нитрофарина (II) около 0,002 г, фепромарона (III) около 0,01 г, варфарина (IV) около 0,0025 г и аценокумарола (V) около 0,004 г сначала в 25 мл диоксана при комнатной температуре и перемешивании. Выдерживают 5 мин до полного растворения навесок. Объемы растворов доводят до метки диоксаном и встряхивают.In volumetric flasks with a capacity of 50.00 ml, dissolve accurately weighed portions of ground powders of benzpromarone (I) about 0.01 g, nitrofarin (II) about 0.002 g, fepromarone (III) about 0.01 g, warfarin (IV) about 0.0025 g and acenocoumarol (V) about 0.004 g, first in 25 ml of dioxane at room temperature and stirring. Leave for 5 minutes until the samples are completely dissolved. The solution volumes are adjusted to the mark with dioxane and shaken.
Количественное определение исследуемых препаратов.Quantitative determination of study drugs.
В мерные колбы емкостью 20,00 мл помещают 3,0 мл растворов бензпромарона (I) и фепромарона (III), 7,0 мл растворов нитрофарина (II), варфарина (IV) и аценокумарола (V) и прибавляют каплями спиртового раствора химического реактива - 3,0 мл 0,5 масс. %-ного спиртового раствора п-анизидина в концентрированной соляной кислоте при комнатной температуре и перемешивании в течение 10 мин. Затем реакционную смесь выдерживают еще 5 мин. Появляется ярко-желтое окрашивание. Выдерживают 3 мин. Объемы растворов доводят до метки диоксаном и измеряют оптическую плотность поглощения окрашенных растворов с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 при длине волны 364 нм, в кювете с поглощающим слоем 10,0 мм. Раствор сравнения - диоксан.In volumetric flasks with a capacity of 20.00 ml, place 3.0 ml of solutions of benzpromarone (I) and fepromarone (III), 7.0 ml of solutions of nitrofarin (II), warfarin (IV) and acenocoumarol (V) and add drops of an alcohol solution of the chemical reagent - 3.0 ml 0.5 wt. % alcohol solution of p-anisidine in concentrated hydrochloric acid at room temperature and stirring for 10 minutes. Then the reaction mixture is kept for another 5 minutes. A bright yellow color appears. Stand for 3 minutes. The volumes of solutions are brought to the mark with dioxane and the optical absorption density of the colored solutions is measured using a KFK-2 photoelectrocolorimeter at a wavelength of 364 nm, in a cuvette with an absorbing layer of 10.0 mm. The reference solution is dioxane.
Построение калибровочных графиков исследуемых препаратов бензпромарона (I), нитрофарина (II), фепромарона (III), варфарина (IV) или аценокумарола (V).Construction of calibration graphs of the studied drugs benzpromarone (I), nitrofarin (II), fepromarone (III), warfarin (IV) or acenocoumarol (V).
В мерных колбах емкостью 50,00 мл растворяют точно отвешенные навески растертых порошков бензпромарона (I) около 0,01 г, нитрофарина (II) около 0,002 г, фепромарона (III) около 0,01 г, варфарина (IV) около 0,0025 г и аценокумарола (V) около 0,004 г сначала в 25 мл диоксана при комнатной температуре и перемешивании. Выдерживают 5 мин до полного растворения навесок. Объемы растворов доводят до метки диоксаном и встряхивают.In volumetric flasks with a capacity of 50.00 ml, dissolve accurately weighed portions of ground powders of benzpromarone (I) about 0.01 g, nitrofarin (II) about 0.002 g, fepromarone (III) about 0.01 g, warfarin (IV) about 0.0025 g and acenocoumarol (V) about 0.004 g, first in 25 ml of dioxane at room temperature and stirring. Leave for 5 minutes until the samples are completely dissolved. The solution volumes are adjusted to the mark with dioxane and shaken.
В мерные колбы емкостью 20,00 мл помещают объемы 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0 мл растворов бензпромарона (I) и фепромарона (III), объемы 5,0; 6,0; 7,0; 8,0;9,0 мл растворов нитрофарина (II), варфарина (IV) и аценокумарола (V) прибавляют каплями спиртового раствора химического реактива - 3,0 мл 0,5 масс. %-ного спиртового раствора п-анизидина в концентрированной соляной кислоте при комнатной температуре и перемешивании в течение 10 мин. Затем реакционную смесь выдерживают еще 5 мин. Появляется ярко-желтое окрашивание. Выдерживают 3 мин. Объемы растворов доводят до метки диоксаном и измеряют оптическую плотность поглощения окрашенных растворов с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 при длине волны 364 нм, в кювете с поглощающим слоем 10,0 мм. Раствор сравнения - диоксан.Volumes of 2.0 are placed in volumetric flasks with a capacity of 20.00 ml; 2.5; 3.0; 3.5; 4.0 ml of solutions of benzpromarone (I) and fepromarone (III), volumes 5.0; 6.0; 7.0; 8.0;9.0 ml of solutions of nitrofarin (II), warfarin (IV) and acenocoumarol (V) are added drops of an alcohol solution of a chemical reagent - 3.0 ml of 0.5 wt. % alcohol solution of p-anisidine in concentrated hydrochloric acid at room temperature and stirring for 10 minutes. Then the reaction mixture is kept for another 5 minutes. A bright yellow color appears. Stand for 3 minutes. The volumes of solutions are brought to the mark with dioxane and the optical absorption density of the colored solutions is measured using a KFK-2 photoelectrocolorimeter at a wavelength of 364 nm, in a cuvette with an absorbing layer of 10.0 mm. The reference solution is dioxane.
Количественное определение исследуемых препаратов.Quantitative determination of study drugs.
Подчинения интенсивности поглощения окрашенных растворов закону Бугера-Ламберта-Бера находятся в пределах концентраций для субстанций бензпромарона от 0,020 до 0,040 мг/мл раствора, для субстанции нитрофарина от 0,010 до 0,018 мг/мл раствора; для субстанции фепромарона от 0,020 - до 0,040 мг/мл раствора; для субстанции варфарина от 0,0125 до 0,0225 мг/мл раствора; для субстанции аценокумарола от 0,020 до 0,036 мг/мл раствора.The subordination of the absorption intensity of colored solutions to the Bouguer-Lambert-Beer law is within the concentration range for benzpromarone substances from 0.020 to 0.040 mg/ml of solution, for nitrofarin substance from 0.010 to 0.018 mg/ml of solution; for fepromarone substance from 0.020 to 0.040 mg/ml solution; for warfarin substance from 0.0125 to 0.0225 mg/ml solution; for the substance acenocoumarol from 0.020 to 0.036 mg/ml solution.
Коэффициенты а и b в исследуемых препаратах вычислены после обработки калибровочных графиков методом наименьших квадратов и представлены на фиг. 2-6 (в таблицах 2-6), (где X - среднее значение определений, S - стандартное отклонение, Sx - стандартное отклонение средней величины, ΔХ - полуширина доверительного интервала величины, Е - относительная ошибка среднего результата).Coefficients a and b in the studied preparations were calculated after processing the calibration graphs using the least squares method and are presented in Fig. 2-6 (in tables 2-6), (where X is the average value of the determinations, S is the standard deviation, Sx is the standard deviation of the average value, ΔХ is the half-width of the confidence interval of the value, E is the relative error of the average result).
Относительная ошибка определения не превышает ±0,77%.The relative error of determination does not exceed ±0.77%.
Разработанный способ количественного определения лекарственных средств производных 4-оксикумарина - прост в выполнении и дает воспроизводимые результаты.The developed method for the quantitative determination of drugs derived from 4-hydroxycoumarin is easy to perform and gives reproducible results.
Результаты количественного определения бензпромарона (I) в субстанции приведены па фиг. 1, нитрофавина (II) в субстанции на фиг. 2, фепромарона (III) в субстанции на фиг. 3, варфарина (IV) в субстанции на фиг. 4, аценокумарола (V) в субстанции на фиг. 5.The results of the quantitative determination of benzpromarone (I) in the substance are shown in Fig. 1, nitrofavin (II) in the substance in FIG. 2, fepromarone (III) in the substance in FIG. 3, warfarin (IV) in the substance in FIG. 4, acenocoumarol (V) in the substance in FIG. 5.
На фиг. 6 представлены сравнительные данные, подтверждающие преимущества предлагаемого способа количественного определения лекарственных средств производных 4-оксикумарина в субстанциях, перед аналогом.In fig. 6 presents comparative data confirming the advantages of the proposed method for the quantitative determination of drugs in 4-hydroxycoumarin derivatives in substances over an analogue.
Разработанный способ количественного определения является доступным, специфичным для данной группы химических веществ, не требует использования токсичных реактивов, а также является простым в выполнении и дает воспроизводимые результаты.The developed quantitative determination method is accessible, specific for a given group of chemicals, does not require the use of toxic reagents, is also easy to perform and gives reproducible results.
ЛИТЕРАТУРАLITERATURE
[1] Регистр лекарственных средств России. Энциклопедия лекарств. РЛС. Ежегод. сб. М.: МЕДпрессинформ. - 2002. - 1504 с.[1] Register of Medicines of Russia. Encyclopedia of drugs. Radar. Annually. Sat. M.: MEDpressinform. - 2002. - 1504 p.
[2] АЦЕНОКУМАРОЛ. Вадемекум /на англ.яз./, - PoLfa. - 1993. - С. 28.[2] ACENOCUMAROL. Vademekum /in English/, - PoLfa. - 1993. - P. 28.
[3] Методы идентификации фармацевтических препаратов / Максютина Н.П., Каган Ф.Е., Митченко Ф.А., Кириченко Л.А., Когет Т.А. - К.: Здоровья. - С. 1978. - С.С. 101, 103, 105, 106, 109, 110, 215, 218.[3] Methods for identifying pharmaceuticals / Maksyutina N.P., Kagan F.E., Mitchenko F.A., Kirichenko L.A., Koget T.A. - K.: Health. - S. 1978. - S.S. 101, 103, 105, 106, 109, 110, 215, 218.
[4] Анализ фармакопейных препаратов по функциональным группам / Мелентьева Г.А., Цуркап А.А., Гулимова Т.А. - Рязань1990. - 200 с.[4] Analysis of pharmacopoeial drugs by functional groups / Melentyeva G.A., Tsurkap A.A., Gulimova T.A. - Ryazan 1990. - 200 s.
[5] Беликов В.Г. Фармацевтическая химия. - Учебное пособие. М.: МЕДпрессинформ. - 2007: - С. 388-398.[5] Belikov V.G. Pharmaceutical chemistry. - Tutorial. M.: MEDpressinform. - 2007: - P. 388-398.
[6] Туркевич М.М. Фармацевтична Учбовий - К: Вища школа. - 1973. - С. 254.[6] Turkevich M.M. Pharmaceutical Uchboviy - K: Vishcha school. - 1973. - P. 254.
[7] Химический энциклопедический словарь /ХЭС/ - М.: Советская энциклопедия. = 1983. - С.С. 47, 206, 387, 527, 617.[7] Chemical encyclopedic dictionary /HES/ - M.: Soviet Encyclopedia. = 1983. - S.S. 47, 206, 387, 527, 617.
Claims (1)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2813185C1 true RU2813185C1 (en) | 2024-02-07 |
Family
ID=
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1497527A1 (en) * | 1987-12-10 | 1989-07-30 | Курский Государственный Медицинский Институт | Method of analysis of 4-oxycumarin |
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1497527A1 (en) * | 1987-12-10 | 1989-07-30 | Курский Государственный Медицинский Институт | Method of analysis of 4-oxycumarin |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ZHANG D. et al. Method Optimization: Analysis of Benzbromarone and Tolfenamic Acid in Citrus Tissues and Soil Using Liquid Chromatography Coupled With Triple-Quadrupole Mass Spectrometry // Front. Plant Sci., 2020, V.6(11), pp.1-9. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ashwell | [12] Colorimetric analysis of sugars | |
| Hamad et al. | A simple single jar “on–off fluorescence” designed system for the determination of mitoxantrone using an eosin Y dye in raw powder, vial, and human biofluids | |
| Godman et al. | The composition of the LE and hematoxylin bodies of systemic lupus erythematosus | |
| Duke et al. | Rapid qualitative test for alcoholic hydroxyl group | |
| Hamad | A green fluorescence turn-off system for meclofenoxate determination by Cilefa Pink B dye | |
| Seitz et al. | Fluorescence derivatization | |
| Zha et al. | Indirect signal amplification strategy with a universal probe-based lateral flow immunoassay for the rapid quantitative detection of fumonisin B1 | |
| CN106093322A (en) | A rapid detection method for quantum dot immunochromatographic test strips with multiple residues of β-agonists | |
| RU2813185C1 (en) | Method of quantitative determination of 4-ohycoumarin drugs derivatives | |
| CN101598716B (en) | Test strip for fast testing gossypol and preparation method and application thereof | |
| Derayea et al. | Utility of dansyl chloride for the establishment of a sensitive spectrofluorimetric approach for estimating midodrine hydrochloride: application to content uniformity testing | |
| Cotty et al. | Method for the direct measurement of acetylsalicylic acid in human blood | |
| Palit | Detection of acids, bases, and salts at micronormal concentrations in organic solvents | |
| Masood et al. | Development and application of spectrophotometric method for quantitative determination of Metronidazole in pure and tablet formulations | |
| RU2740909C1 (en) | Method of quantitative determination of morpholine derivatives | |
| ANTON et al. | The distribution of 5-hydroxyindoleacetic acid in various animals and its fluorometric analysis in diverse biological material | |
| CN101365952B (en) | Assay, kit and apparatus for detection of artemisinin derivatives | |
| RU2684101C1 (en) | Method for quantitative determination of piperidine (butyrophenone group) | |
| RU2488110C1 (en) | Method for photoelectrocolorimetric determination of sulphanilamide preparations | |
| Ulu | Highly sensitive spectrofluorimetric determination of ephedrine hydrochloride in pharmaceutical preparations | |
| Al-Abachi et al. | Application of promethazine hydrochloride as a chromogenic reagent for the spectrophotometric determination of certain sulphonamide drugs | |
| Devagondanahalli et al. | Determination of cinnarizine in pure and pharmaceutical formulations | |
| RU2492471C2 (en) | Method for quantitative determination of biguanidine derivatives | |
| Dechene | The determination of rutin in tablets | |
| RU2776961C1 (en) | Method for quantifying fluoroquinolone derivatives (or floxacins) |