RU2777180C1 - Method for differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient - Google Patents
Method for differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient Download PDFInfo
- Publication number
- RU2777180C1 RU2777180C1 RU2022105885A RU2022105885A RU2777180C1 RU 2777180 C1 RU2777180 C1 RU 2777180C1 RU 2022105885 A RU2022105885 A RU 2022105885A RU 2022105885 A RU2022105885 A RU 2022105885A RU 2777180 C1 RU2777180 C1 RU 2777180C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- patient
- timp
- metalloproteinase
- tissue inhibitor
- oral fluid
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента и может быть использовано в дифференциальной диагностике воспалительных заболеваний и злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений.The invention relates to medicine, namely to a method for differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region by the content of biomarkers in the patient's oral fluid and can be used in the differential diagnosis of inflammatory diseases and malignant neoplasms of the oral cavity in dental, oncological and surgical medical institutions.
Известен способ прогнозирования и диагностики плоскоклеточного рака головы и шеи по содержанию матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов в плазме крови пациента, включающий исследования плазмы венозной крови, при этом сыворотку крови забирали стандартным способом у больных плоскоклеточным раком головы и шеи после постановки диагноза до начала лечебных процедур. Сыворотку хранили при температуре -50°С не более 10 месяцев и размораживали не более 1 раза для иммуноферментного определения содержания матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов с использованием наборов для твердофазного иммуноферментного анализа на ИФА-анализаторе (см. Клишо Е.В., Матриксные металлопротеиназы и их тканевые ингибиторы при плоскоклеточном раке головы и шеи, автореферат диссертации д.м.н., Томск, 2011 г., с. 43).A known method for predicting and diagnosing squamous cell carcinoma of the head and neck by the content of matrix metalloproteinases and their tissue inhibitors in the patient's blood plasma, including studies of venous blood plasma, while the blood serum was taken in a standard way from patients with squamous cell carcinoma of the head and neck after diagnosis before the start of treatment procedures . The serum was stored at a temperature of -50°C for no more than 10 months and thawed no more than 1 time for enzyme immunoassay determination of the content of matrix metalloproteinases and their tissue inhibitors using kits for enzyme-linked immunosorbent assay on an ELISA analyzer (see Klisho E.V., Matrix metalloproteinases and their tissue inhibitors in squamous cell carcinoma of the head and neck, dissertation abstract, MD, Tomsk, 2011, p. 43).
Однако известный способ при своем использовании имеет следующие недостатки:However, the known method in its use has the following disadvantages:
- обладает недостаточной точностью дифференциальной диагностикой образований слизистой оболочки ретромолярной области в день обращения пациента,- has insufficient accuracy in differential diagnosis of formations of the mucous membrane of the retromolar region on the day of the patient's visit,
- обладает недостаточной чувствительностью дифференциальной диагностики воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки ретромолярной области,- has insufficient sensitivity for the differential diagnosis of inflammation and squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the retromolar region,
- недостаточность вероятности выявления процессов воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки полости рта в организме пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних,- insufficiency of the probability of detecting the processes of inflammation and squamous cell carcinoma of the oral mucosa in the patient's body, both in the early stages of the disease, and in the later ones,
- сложность подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала,- the complexity of preparing the patient within a certain time frame for the collection and storage of diagnostic material,
- возможность инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала,- the possibility of infection "through the blood" during the sampling of diagnostic material,
- сложность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).- the difficulty of taking diagnostic material from people with poor venous filling (including the elderly and children).
Задачей изобретения является создание способа дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области по содержанию биомаркеров в роговой жидкости пациента.The objective of the invention is to create a method for the differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region according to the content of biomarkers in the patient's horny fluid.
Техническим результатом является достижение значительного повышения диагностической точности дифференциальной экспресс-диагностики воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки ретромолярной области в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки ретромолярной области, достижение высокой вероятности выявления процесса воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки ретромолярной области в организме пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента к определенным временным рамкам для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).The technical result is to achieve a significant increase in the diagnostic accuracy of differential rapid diagnostics of inflammation and squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the retromolar region on the day of the patient's visit, a significant increase in the sensitivity of the differential diagnosis of inflammation and squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the retromolar region, achieving a high probability of detecting the process of inflammation and squamous cell carcinoma of the mucous membrane retromolar area in the patient's body, both in the early stages of the disease and in the later stages, a significant simplification of the patient's preparation for certain time frames for the collection and storage of diagnostic material, the absence of infection "through the blood" during the collection of diagnostic material, as well as the possibility of taking diagnostic material in persons with poor venous filling (including the elderly and children).
Технический результат достигается тем, что предложен способ дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследования ротовой жидкости пациента, выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований, при этом ротовую жидкость забирают у пациента для дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, в качестве биомаркера при экспресс определении образования слизистой оболочки ретромолярной области по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают тканевой ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) и определяют их количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) группы клинического контроля принимают уровень 108,86-163,76 нг./мл., а тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) группы клинического контроля принимают уровень 11,48-16,32 нг./мл., при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 487,78-635,48 нг./мл. и тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 53,01-70,25 нг./мл., то диагностируют воспаление слизистой оболочки ретромолярной области, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 244,67-417,65 нг./мл. и тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 22,92-41,74 нг./мл., то диагностируют плоскоклеточный рак слизистой оболочки ретромолярной области при определении стоматологического здоровья, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента. При этом при необходимости долговременного хранения роговой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°C, забирают супернатант в количестве 300 мкл., помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°С. При этом в процессе до выполнения или после окончания консервативного лечения образования слизистой оболочки ретромолярной области, в том числе стоматологического лечения, пациенту дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, но результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.The technical result is achieved by the fact that a method is proposed for differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region according to the content of biomarkers in the patient's oral fluid, including studies of the patient's oral fluid, the oral fluid is taken from the patient before or not earlier than 30 minutes after the patient has eaten, centrifugation oral fluid of the patient at 3000 rpm./min. for 15 minutes with cooling to plus 5°C, dilution of the oral fluid with saline in a ratio of 1:100 and repeated centrifugation at 3000 rpm. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, placing the material of the patient's oral fluid ready for research into a cuvette and performing the enzyme immunoassay method on a plate based on monoclonal antibodies, followed by analysis of the research results, while the oral fluid is taken from the patient for differential diagnosis of education mucous membrane of the retromolar region according to the content of biomarkers in the patient's oral fluid, as a biomarker in the rapid determination of the formation of the mucous membrane of the retromolar region by the amount of biomarkers in the oral fluid, tissue inhibitor of metalloproteinase 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) and determine their quantitative content in the oral fluid of the patient, while for the quantitative content of the biomarker in the oral fluid of the matrix tissue inhibitor of the metalloprotein einase 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) of the clinical control group take the level of 108.86-163.76 ng / ml., and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2 ) clinical control groups take a level of 11.48-16.32 ng / ml, while if the content in the oral fluid of tissue inhibitor of metalloproteinase 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) is determined in the amount of 487.78 -635.48 ng/ml. and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the amount of 53.01-70.25 ng / ml., then inflammation of the mucous membrane of the retromolar region is diagnosed, while if the content in the patient's oral fluid is determined tissue inhibitor of metalloproteinase 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) in the amount of 244.67-417.65 ng / ml. and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the amount of 22.92-41.74 ng / ml., then squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the retromolar region is diagnosed when determining dental health, then according to the results obtained determining the content of biomarkers in the patient's oral fluid predicts the patient's treatment tactics. In this case, if it is necessary to store the patient's horny fluid for a long time, it is centrifuged at 3000 rpm before analysis. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, the supernatant is taken in an amount of 300 μl, placed in a salicaps tube and immediately frozen in a freezer at a temperature of minus 80°C. At the same time, in the process, before performing or after the end of conservative treatment of the formation of the mucous membrane of the retromolar region, including dental treatment, the patient is additionally subjected to control determinations of the content of biomarkers in the patient's oral fluid, but the results of which are judged on the effectiveness of the selected treatment of the patient.
Способ осуществляют следующим образом. Ротовую жидкость забирают у пациента для дифференциальной экспресс-диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области. Выполняют забор ротовой жидкости пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугируют при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, разбавляют ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугируют при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещают в кювету и выполняют метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител. При этом при необходимости долговременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°C, забирают супернатант в количестве 300 мкл., помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°С.The method is carried out as follows. The oral fluid is taken from the patient for differential express diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region. The oral fluid of the patient is taken before or not earlier than 30 minutes after the patient has taken food. The patient's oral fluid is centrifuged at 3000 rpm. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, dilute the oral fluid with saline in a ratio of 1:100 and centrifuge again at 3000 rpm. within 15 minutes with cooling to plus 5°С. The material of the patient's oral fluid, ready for research, is placed in a cuvette and the enzyme immunoassay method is performed on a plate based on monoclonal antibodies. At the same time, if long-term storage of the patient's oral fluid is necessary, it is centrifuged at 3000 rpm before analysis. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, the supernatant is taken in an amount of 300 μl, placed in a salicaps tube and immediately frozen in a freezer at a temperature of minus 80°C.
В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают тканевой ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) и определяют их количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) группы клинического контроля принимают уровень 108,86-163,76 нг./мл., а тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) нг./мл.As a biomarker for differential express diagnostics of the formation of the mucous membrane of the retromolar region, according to the amount of biomarkers in the oral fluid, a tissue inhibitor of metalloproteinase 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) and a tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 ( TIMP 2 / TIMP 2) and determine their quantitative content in the patient's oral fluid. At the same time, the level of 108.86-163.76 ng / ml is taken as the quantitative content of the biomarker in the oral fluid of tissue inhibitor of metalloproteinase 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) of the clinical control group, and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) ng./ml.
Если определяют содержание в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 487,78-635,48 нг./мл. и тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 53,01-70,25 нг./мл., то диагностируют воспаление слизистой оболочки ретромолярной области.If the content in the oral fluid of the tissue inhibitor of metalloproteinase 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) is determined in the amount of 487.78-635.48 ng / ml. and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the amount of 53.01-70.25 ng / ml, then inflammation of the mucous membrane of the retromolar region is diagnosed.
Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 244,67-417,65 нг.мл. и тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 22,92-41,74 нг./мл., то диаг ностируют плоскоклеточный рак слизистой оболочки ретромолярной области.If the content of a tissue inhibitor of metalloproteinase 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) in the amount of 244.67-417.65 ng.ml is determined in the oral fluid of the patient. and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the amount of 22.92-41.74 ng / ml, then squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the retromolar region is diagnosed.
Затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.Then, according to the obtained results of determining the content of biomarkers in the oral fluid of the patient, the tactics of treating the patient are predicted.
При этом в процессе до выполнения или после окончания консервативного лечения образования слизистой оболочки ретромолярной области, в том числе стоматологического лечения, пациенту дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.At the same time, in the process, before performing or after the end of conservative treatment of the formation of the mucous membrane of the retromolar region, including dental treatment, the patient is additionally subjected to control determinations of the content of biomarkers in the patient's oral fluid, the results of which are used to judge the effectiveness of the selected treatment for the patient.
Среди существенных признаков, характеризующих предложенный способ дифференциальной экспресс-диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, отличительными являются:Among the essential features that characterize the proposed method of differential express diagnostics of the formation of the mucous membrane of the retromolar region according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient, the distinctive ones are:
- отсутствие выполнения забора венозной крови у пациента для экспресс исследований новообразований слизистой оболочки ретромолярной области,- lack of venous blood sampling from a patient for express studies of neoplasms of the mucous membrane of the retromolar region,
- выбор в качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики слизистой оболочки ретромолярной области по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости тканевой ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,- selection of tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) as a biomarker for differential express diagnostics of the mucous membrane of the retromolar region by the amount of biomarkers in the oral fluid and determination of its quantitative content in the patient's oral fluid,
- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 108,86-163,76 нг./мл. отсутствие образования слизистой оболочки ретромолярной области у пациента,- diagnosis when determining the content in the patient's oral fluid of the matrix tissue inhibitor of metalloproteinase 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) in the amount of 108.86-163.76 ng / ml. lack of formation of the mucous membrane of the retromolar region in the patient,
- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 487,78-635,48 нг./мл. воспаление слизистой оболочки ретромолярной области пациента,- diagnosis when determining the content of tissue inhibitor of metalloproteinase 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) in the patient's oral fluid in the amount of 487.78-635.48 ng / ml. inflammation of the mucous membrane of the patient's retromolar area,
- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 244,67-417,65 нг./мл. плоскоклеточного рака слизистой оболочки ретромолярной области пациента,- diagnosing when determining the content of tissue inhibitor of metalloproteinase 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) in the patient's oral fluid in the amount of 244.67-417.65 ng / ml. squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the retromolar region of the patient,
- выбор в качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики слизистой оболочки ретромолярной области по количеству содержания биомаркеров в роговой жидкости тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,- selection of tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) as a biomarker for differential express diagnostics of the mucous membrane of the retromolar region by the amount of biomarkers in the horny fluid and determination of its quantitative content in the patient's oral fluid,
- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 1 1,48-16,32 нг./мл. отсутствие образования слизистой оболочки ретромолярной области у пациента,- diagnosis when determining the content of tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the patient's oral fluid in the amount of 1 1.48-16.32 ng / ml. lack of formation of the mucous membrane of the retromolar region in the patient,
- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 53,01-70,25 нг./мл. воспаление слизистой оболочки ретромолярной области пациента,- diagnosing when determining the content of tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the patient's oral fluid in the amount of 53.01-70.25 ng / ml. inflammation of the mucous membrane of the patient's retromolar area,
- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 22,92-41,74 нг./мл. плоскоклеточного рака слизистой оболочки ретромолярной области пациента,- diagnosing when determining the content of tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the patient's oral fluid in the amount of 22.92-41.74 ng / ml. squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the retromolar region of the patient,
- прогнозирование по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента тактики его лечения,- forecasting, based on the obtained results of determining the content of biomarkers in the oral fluid of the patient, the tactics of his treatment,
- выполнение при необходимости долговременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугирования при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, забора супернатанта в количестве 300 мкл., помещения в пробирку «salicaps» и немедленной заморозки в морозильной камере при температуре минус 80°С,- performing, if necessary, long-term storage of the patient's oral fluid before performing the analysis of its centrifugation at 3000 rpm. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, supernatant sampling in the amount of 300 µl, placement in a salicaps tube and immediate freezing in a freezer at a temperature of minus 80°C,
- дополнительное осуществление в процессе до выполнения или после окончания консервативного лечения образования слизистой оболочки ретромолярной области, в том числе стоматологического лечения, пациенту дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.- additional implementation in the process before or after the end of conservative treatment of the formation of the mucous membrane of the retromolar region, including dental treatment, the patient is additionally subjected to control determinations of the content of biomarkers in the patient's oral fluid, the results of which are used to judge the effectiveness of the selected treatment for the patient.
Экспериментальные исследования предложенного способа дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента в клинических условиях показали его высокую эффективность. Способ дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента при своем использовании обеспечивает достижение значительного повышения точности дифференциальной экспресс-диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки ретромолярной области, достижение высокой вероятности выявления процесса воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки ретромолярной области в организме пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей). Кроме того, предложенный способ дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области по содержанию биомаркеров в роговой жидкости пациента при практическом использовании значительное повышение качества жизни пациентов.Experimental studies of the proposed method for the differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient in clinical conditions have shown its high efficiency. The method for differential diagnosis of formation of the mucous membrane of the retromolar region according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient, when used, provides a significant increase in the accuracy of differential express diagnostics of the formation of the mucous membrane of the retromolar region on the day of the patient's visit, a significant increase in the sensitivity of the differential diagnosis of inflammation and squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the retromolar region , achieving a high probability of detecting the process of inflammation and squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the retromolar region in the patient's body, both in the early stages of the disease and at later stages, a significant simplification of the patient's preparation within a certain time frame for the collection and storage of diagnostic material, the absence of infection "through the blood » during sampling of diagnostic material, as well as the possibility of sampling diagnostic material from persons with poor venous filling (including among the elderly and children). In addition, the proposed method for the differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region according to the content of biomarkers in the horny fluid of the patient in practical use significantly improves the quality of life of patients.
Реализация предложенного способа дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента иллюстрируется следующими клиническими примерами.The implementation of the proposed method for the differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient is illustrated by the following clinical examples.
Пример 1. Пациент Ф., 47 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «образование слизистой оболочки ретромолярной области нижней челюсти слева».Example 1. Patient F., 47 years old, was admitted to the department with a presumptive diagnosis: "formation of the mucous membrane of the retromolar region of the lower jaw on the left."
Ротовую жидкость забирали у пациента для дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области нижней челюсти слева. Выполняли забор роговой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований.The oral fluid was taken from the patient for differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region of the lower jaw on the left. The corneal fluid was taken from the patient before or not earlier than 30 minutes after the patient's meal, the patient's oral fluid was centrifuged at 3000 rpm. for 15 minutes with cooling to plus 5°C, dilution of the oral fluid with saline in a ratio of 1:100 and repeated centrifugation at 3000 rpm. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, placing the material of the patient's oral fluid ready for research into a cuvette and performing the enzyme immunoassay method on a plate based on monoclonal antibodies, followed by analysis of the research results.
В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области нижней челюсти слева по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирали тканевой ингибитор металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) и тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) и определяли их количественное содержание в ротовой жидкости пациента.Tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) and determined their quantitative content in the patient's oral fluid.
В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 582,88 нг./мл. и тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 63,05 нг./мл.As a result of the performed analysis, the content of the tissue inhibitor of metalloproteinase 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) in the amount of 582.88 ng / ml was established in the oral fluid of the patient. and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the amount of 63.05 ng / ml.
На основании полученных результатов диагностировали воспаление слизистой оболочки ретромолярной области нижней челюсти слева слева. Клинический диагноз также подтверждали клиническим обследование полости рта пациента. В связи с полученными данными пациенту было назначено консервативное лечение слизистой оболочки ретромолярной области нижней челюсти слева слева.Based on the results obtained, inflammation of the mucous membrane of the retromolar region of the lower jaw was diagnosed on the left-left. The clinical diagnosis was also confirmed by a clinical examination of the patient's oral cavity. In connection with the data obtained, the patient was prescribed conservative treatment of the mucous membrane of the retromolar region of the lower jaw on the left to the left.
Пример 2. Пациентка П., 32 года, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «образование слизистой оболочки ретромолярной области верхней челюсти слева справа».Example 2. Patient P., aged 32, was admitted to the department with a presumptive diagnosis: "formation of the mucous membrane of the retromolar region of the upper jaw on the left to the right."
Ротовую жидкость забирали у пациентки для дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области верхней челюсти слева. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациенткой, центрифугировали ротовую жидкость пациентки при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, разбавлением ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное цен трифугирование при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациентки в кювету и выполнение метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований.The oral fluid was taken from the patient for the differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region of the upper jaw on the left. The oral fluid was taken from the patient before or not earlier than 30 minutes after the patient's meal, the patient's oral fluid was centrifuged at 3000 rpm. for 15 minutes with cooling to plus 5°C, dilution of the oral fluid with saline in a ratio of 1:100 and repeated centrifugation at 3000 rpm. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, placing the material of the patient's oral fluid ready for research into a cuvette and performing the enzyme immunoassay method on a plate based on monoclonal antibodies, followed by analysis of the research results.
В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области верхней челюсти слева по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирали матриксную металлопротеиназу 2 / matrix metalloproteinase 2 (ММП 2 / ММР 2) и матриксную металлопротеиназу 8 / matrix metalloproteinase 8 (ММП 8 / ММР 8) и определяли их количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.Matrix metalloproteinase 2 / matrix metalloproteinase 2 (MMP 2 / MMP 2) and matrix metalloproteinase 8 / matrix metalloproteinase 8 (MMP 8 / MMP 8) and determined their quantitative content in the oral fluid of the patient.
В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 / tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (ТИМП 1 / TIMP 1) в количестве 346,73 нг./мл. и тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 36,75 нг./мл.As a result of the performed analysis, the content of tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP 1 / TIMP 1) in the oral fluid of the patient was determined in the amount of 346.73 ng/ml. and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the amount of 36.75 ng / ml.
На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки ретромолярной области верхней челюсти слева справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными, пациентке было назначено комбинированное лечение: предоперационная лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования на 1-м этапе, лимфодиссекция шеи на стороне поражения с резекцией слизистой оболочки ретромолярной области верхней челюсти слева справа на 2-м этапе.Based on the results obtained, cancer of the mucous membrane of the retromolar region of the upper jaw was diagnosed from the left to the right. The clinical diagnosis was also confirmed by morphological verification of the biopsy material of the tumor and/or lymph node, if necessary. In connection with the data obtained, the patient was prescribed a combined treatment: preoperative radiation therapy for the tumor and regional metastasis pathways at the 1st stage, lymph node dissection of the neck on the side of the lesion with resection of the mucous membrane of the retromolar region of the upper jaw on the left to the right at the 2nd stage.
Установленные клинические диагнозы впоследствии подтвердились результатами выполненной морфологической верификации предварительно взятого у всех пациентов биопсийного материала из очага поражения.The established clinical diagnoses were subsequently confirmed by the results of the morphological verification of biopsy material taken from all patients previously taken from the lesion.
При этом в процессе до выполнения или после окончания консервативного лечения образования слизистой оболочки ретромолярной области, в том числе стоматологического лечения, пациенту дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.At the same time, in the process, before performing or after the end of conservative treatment of the formation of the mucous membrane of the retromolar region, including dental treatment, the patient is additionally subjected to control determinations of the content of biomarkers in the patient's oral fluid, the results of which are used to judge the effectiveness of the selected treatment for the patient.
Claims (3)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2777180C1 true RU2777180C1 (en) | 2022-08-01 |
Family
ID=
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116626205A (en) * | 2023-07-10 | 2023-08-22 | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 | Biomarkers for bruxism and uses thereof |
| RU2830935C1 (en) * | 2024-05-08 | 2024-11-26 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for diagnosing chronic inflammation of mucous membrane of prosthetic bed in patients with replacement removable prostheses |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2232391C2 (en) * | 2002-09-05 | 2004-07-10 | ООО "Медицинская диагностика" | Method for differential diagnostics of malignant neoplasms and somatic nonmalignant diseases |
| US8023119B2 (en) * | 2008-10-29 | 2011-09-20 | National Taiwan University | Method for analyzing mucosa samples with optical coherence tomography |
| RU2533241C1 (en) * | 2013-08-29 | 2014-11-20 | Екатерина Владимировна Кочурова | Qualitative differential instant diagnostic technique for new growths of oral floor mucosa shown by patient's oral fluid biomarkers |
| RU2544173C1 (en) * | 2014-03-25 | 2015-03-10 | Ирина Николаевна Усманова | Differential diagnostic technique for keratolytic processes of oral mucosa classified among white manifestations |
| RU2737523C1 (en) * | 2019-12-05 | 2020-12-01 | Ольга Владимировна Красникова | Method for diagnosing premalignant diseases of oral mucosa |
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2232391C2 (en) * | 2002-09-05 | 2004-07-10 | ООО "Медицинская диагностика" | Method for differential diagnostics of malignant neoplasms and somatic nonmalignant diseases |
| US8023119B2 (en) * | 2008-10-29 | 2011-09-20 | National Taiwan University | Method for analyzing mucosa samples with optical coherence tomography |
| RU2533241C1 (en) * | 2013-08-29 | 2014-11-20 | Екатерина Владимировна Кочурова | Qualitative differential instant diagnostic technique for new growths of oral floor mucosa shown by patient's oral fluid biomarkers |
| RU2544173C1 (en) * | 2014-03-25 | 2015-03-10 | Ирина Николаевна Усманова | Differential diagnostic technique for keratolytic processes of oral mucosa classified among white manifestations |
| RU2737523C1 (en) * | 2019-12-05 | 2020-12-01 | Ольга Владимировна Красникова | Method for diagnosing premalignant diseases of oral mucosa |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Anastasios K. Markopoulos et al. Salivary Markers for Oral Cancer Detection. Open Dent J. 2010; 4: 172-178. PMID: 21673842. Ya-Ting Chang et al. Verification of Saliva Matrix Metalloproteinase-1 as a Strong Diagnostic Marker of Oral Cavity Cancer. Cancers (Basel). 2020 Aug; 12(8): 2273. GIORGINI E. et al. Insights on diagnosis of oral cavity pathologies by infrared spectroscopy: A review // Journal of Molecular Structure, 2013, V.1051, pp.226-232. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116626205A (en) * | 2023-07-10 | 2023-08-22 | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 | Biomarkers for bruxism and uses thereof |
| RU2830935C1 (en) * | 2024-05-08 | 2024-11-26 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for diagnosing chronic inflammation of mucous membrane of prosthetic bed in patients with replacement removable prostheses |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4486153B2 (en) | Methods and devices for diagnosing appendicitis | |
| Zhang et al. | Plasma mitochondrial DNA levels were independently associated with lung injury in elderly hip fracture patients | |
| RU2777180C1 (en) | Method for differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient | |
| RU2533241C1 (en) | Qualitative differential instant diagnostic technique for new growths of oral floor mucosa shown by patient's oral fluid biomarkers | |
| RU2782092C1 (en) | Method for the differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the lip according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient | |
| RU2782093C1 (en) | Method for differential diagnosis of buccal mucosa formation by the content of biomarkers in the patient's oral fluid | |
| RU2786804C1 (en) | Method for the differential diagnosis of inflammation and squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the tongue by the content of biomarkers in the oral fluid of the patient | |
| RU2535076C1 (en) | Method of qualitative differential express-diagnostics of lip mucosa neoplasms by content of biomarkers in patient's oral fluid | |
| RU2533248C1 (en) | Qualitative differential instant diagnostic technique for periglottis growths shown by patient's oral fluid biomarkers | |
| RU2648765C1 (en) | Method for qualitative determination of dental status of patient with inflammation of alveolar mucosa based on content of biomarkers in oral fluid | |
| US9625451B2 (en) | Method for diagnosing chronic sinusitis | |
| RU2361220C1 (en) | Diagnostic technique for inflammatory destruction of paranasal and ear sinuses | |
| RU2157528C1 (en) | Method for predicting malignant neoplasm to be the case | |
| RU2695063C1 (en) | Method for qualitative determination of the dental status of a patient with squamous cell carcinoma of the oral mucosa in inflammation of the mucous membrane of the alveolar process of the jaw by the content of the biomarkers in the oral fluid | |
| RU2688209C1 (en) | Method for predicting course of isolated form of acantholytic pervasive cavity | |
| RU2276364C1 (en) | Method for predicting traumatic brain compression outcome | |
| RU2386400C1 (en) | Method for prediction of variability of pemphigus clinical form | |
| Saad et al. | Schistosoma mansoni and endocarditis: from egg to free DNA detection in Egyptian patients and infected BALB/c mice | |
| CN108318688B (en) | Application of Smad3 protein in peripheral blood exosomes as a molecular marker, liver cancer detection kit | |
| RU2796243C1 (en) | Method for determining the risk of development of purulent-septic complications after radical surgical treatment of gastric cancer | |
| Abdel Kader et al. | Evaluation of some salivary enzymes as a diagnostic biomarker for progression of periodontal disease. | |
| RU2312360C1 (en) | Method for screening-diagnosing liver fibrosis cases using salivary biochemical tests | |
| RU2521196C1 (en) | Qualitative instant diagnostic technique for maxillary and mandibular malignant growth by patient's blood serum and oral fluid biomarkers | |
| RU2247391C2 (en) | Early diagnosis method for diagnosing external genital endometriosis in women | |
| RU2260807C1 (en) | Method for predicting obligate precancerous lesion turn into early laryngeal carcinoma in male patients |