RU2624065C1 - Strain psychrobacter cibarius arc 13 vkpm b-12351 is destructor of oil and oil products - Google Patents
Strain psychrobacter cibarius arc 13 vkpm b-12351 is destructor of oil and oil products Download PDFInfo
- Publication number
- RU2624065C1 RU2624065C1 RU2016110699A RU2016110699A RU2624065C1 RU 2624065 C1 RU2624065 C1 RU 2624065C1 RU 2016110699 A RU2016110699 A RU 2016110699A RU 2016110699 A RU2016110699 A RU 2016110699A RU 2624065 C1 RU2624065 C1 RU 2624065C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- oil
- strain
- vkpm
- oil products
- arc
- Prior art date
Links
- 241000782964 Psychrobacter cibarius Species 0.000 title claims abstract description 10
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims abstract description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 20
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 18
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 13
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 11
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 3
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 3
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- GQEZCXVZFLOKMC-UHFFFAOYSA-N 1-hexadecene Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC=C GQEZCXVZFLOKMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002283 diesel fuel Substances 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- YCOZIPAWZNQLMR-UHFFFAOYSA-N pentadecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC YCOZIPAWZNQLMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- BGHCVCJVXZWKCC-UHFFFAOYSA-N tetradecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC BGHCVCJVXZWKCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000670472 Exiguobacterium mexicanum Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241000168225 Pseudomonas alcaligenes Species 0.000 description 1
- 241000187561 Rhodococcus erythropolis Species 0.000 description 1
- 241000187562 Rhodococcus sp. Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- UZILCZKGXMQEQR-UHFFFAOYSA-N decyl-Benzene Chemical compound CCCCCCCCCCC1=CC=CC=C1 UZILCZKGXMQEQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 1
- 239000000295 fuel oil Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000003350 kerosene Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010705 motor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A62—LIFE-SAVING; FIRE-FIGHTING
- A62D—CHEMICAL MEANS FOR EXTINGUISHING FIRES OR FOR COMBATING OR PROTECTING AGAINST HARMFUL CHEMICAL AGENTS; CHEMICAL MATERIALS FOR USE IN BREATHING APPARATUS
- A62D3/00—Processes for making harmful chemical substances harmless or less harmful, by effecting a chemical change in the substances
- A62D3/02—Processes for making harmful chemical substances harmless or less harmful, by effecting a chemical change in the substances by biological methods, i.e. processes using enzymes or microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Production Of Liquid Hydrocarbon Mixture For Refining Petroleum (AREA)
Abstract
Description
Область техники, к которой относится изобретениеFIELD OF THE INVENTION
Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии, экологии, охране окружающей среды и представляет собой новый бактериальный штамм Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ В-12351, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов. Штамм может быть использован для очистки акваторий водоемов, береговой линии, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, при температуре от +4 до +20°С и солености 30 г/л.The invention relates to the field of biotechnology, microbiology, ecology, environmental protection and is a new bacterial strain Psychrobacter cibarius ARC 13 VKPM B-12351 with the ability to degrade oil and oil products. The strain can be used to clean the waters of water bodies, coastlines contaminated with oil and oil products, at temperatures from +4 to + 20 ° C and salinity of 30 g / l.
Уровень техникиState of the art
Из уровня техники известен штамм Rhodococcus sp. - деструктор нефтяных углеводородов (патент РФ №2518349, приоритет 11.04.2013, опубл. 10.06.2014.). Данный штамм показал высокую степень деструкции углеводородов при температуре +30°С. Однако данный штамм не способен производить утилизацию углеводородов при низких температурах.The prior art strain Rhodococcus sp. - destructor of petroleum hydrocarbons (RF patent No. 2518349, priority 04/11/2013, publ. 06/10/2014.). This strain showed a high degree of destruction of hydrocarbons at a temperature of + 30 ° C. However, this strain is not capable of producing hydrocarbon utilization at low temperatures.
Известен штамм Pseudomonas alcaligenes В-1, способный утилизировать нефть, мазут, керосин, нафталин, пентадекан, тетрадекан, гексадецен, фенилдекан, пристан уже на 5 день при 20-30°С. Штамм эффективно осуществляет биодеградацию углеводородов в широком диапазоне концентраций (патент РФ 2133770, приоритет 25.03.1998, опубл. 27.07.1999). Недостатком данного штамма также является то, что он не утилизирует нефтезагрязнения при низких температурах.Known strain Pseudomonas alcaligenes B-1, capable of utilizing oil, fuel oil, kerosene, naphthalene, pentadecane, tetradecane, hexadecene, phenyldecane, prystan already for 5 days at 20-30 ° C. The strain effectively carries out biodegradation of hydrocarbons in a wide range of concentrations (RF patent 2133770, priority 25.03.1998, publ. 27.07.1999). The disadvantage of this strain is that it does not utilize oil pollution at low temperatures.
Известен штамм Exiguobacterium mexicanum ВКПМ В-11011, обладающий способностью быстро утилизировать нефть, дизельное топливо, масло моторное, газовый конденсат и используемый для очистки почв и водоемов, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, в широком диапазоне температур от +4 до +37°С (патент РФ №2523584, приоритет 2013-03-27, опубл. 20.07.2014). Недостатком штамма является то, что он не способен утилизировать нефтезагрязнения при высокой солености воды до 30 г/л.The known strain of Exiguobacterium mexicanum VKPM B-11011, with the ability to quickly utilize oil, diesel fuel, motor oil, gas condensate and used to clean soils and water bodies contaminated with oil and oil products, in a wide temperature range from +4 to + 37 ° C (patent RF №2523584, priority 2013-03-27, publ. 07.20.2014). The disadvantage of the strain is that it is not able to utilize oil pollution at high salinity of water up to 30 g / l.
Наиболее близким аналогом является штамм Rhodococcus erythropolis, депонирован под регистрационным номером ВКМ Ac-2613D, применяемый для очистки пресноводных, солоноватоводных и морских объектов и донных отложений и обеспечивающий деструкцию нефти в водных объектах при температуре от +2 до +25°С и солености до 2,7% (патент РФ 2553336 20.08.2013, опубл. 10.06.2015). Недостатком изобретения является то, что штамм утилизирует углеводороды в условиях, богатых по питательным веществам (в состав среды входит пептон 5 г/л и сахароза 15 г/л). В реальных условиях утилизации углеводородных загрязнений количество питательных веществ значительно снижено.The closest analogue is the strain Rhodococcus erythropolis, deposited under registration number VKM Ac-2613D, used to clean freshwater, brackish-water and marine objects and bottom sediments and providing for the destruction of oil in water bodies at temperatures from +2 to + 25 ° С and salinity up to 2 , 7% (RF patent 2553336 08/20/2013, publ. 06/10/2015). The disadvantage of the invention is that the strain utilizes hydrocarbons in conditions rich in nutrients (the composition of the medium includes peptone 5 g / l and sucrose 15 g / l). Under real conditions of hydrocarbon pollution utilization, the amount of nutrients is significantly reduced.
Раскрытие изобретенияDisclosure of invention
Задачей настоящего изобретения является получение бактериального штамма, способного осуществлять деструкцию нефти и нефтепродуктов при температуре от +4°С до +20 и солености 30 г/л.The objective of the present invention is to obtain a bacterial strain capable of degrading oil and oil products at temperatures from + 4 ° C to +20 and salinity of 30 g / L.
Поставленная задача решается тем, что получен штамм Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ В-12351, способный осуществлять деструкцию нефти и нефтепродуктов в водной среде, который может быть использован для очистки акваторий водоемов, береговой линии, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, при температуре от +4 до +20°С и солености 30 г/л.The problem is solved by the fact that the obtained strain Psychrobacter cibarius ARC 13 VKPM B-12351, capable of degrading oil and oil products in the aquatic environment, which can be used to clean the water bodies of water bodies, coastlines contaminated with oil and oil products at temperatures from +4 to + 20 ° С and salinity of 30 g / l.
Штамм выделен из портовой зоны города Мурманск 3 июня 2014 года. Штамм депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ФГУП ГосНИИгенетика (ВКПМ, Москва, 1-й Дорожный пр., д. 1) под регистрационным номером ВКПМ В-12351.The strain was isolated from the port zone of the city of Murmansk on June 3, 2014. The strain was deposited in the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms FSUE GosNIIgenetika (VKPM, Moscow, 1st Dorozhny pr., 1) under registration number VKPM V-12351.
Идентификация штамма была осуществлена на основании изучения его культурально-морфологических и физиолого-биохимических характеристик, а также на основании изучения последовательности гена 16S pPHK.The strain was identified based on a study of its cultural-morphological and physiological-biochemical characteristics, as well as on the basis of a study of the 16S pPHK gene sequence.
Полученный штамм характеризуется следующими признаками.The resulting strain is characterized by the following features.
Культурально-морфологические признакиCultural and morphological features
Колонии бледно-розовые, округлые, блестящие, однородной структуры, мягкой консистенции, с ровным краем. Размеры колонии до 1,2 мм. Клетки округлые, размером 0,9-1,3×1,5-2,0 мкм, неподвижные. Окраска по Граму отрицательная.The colonies are pale pink, round, shiny, uniform in structure, soft consistency, with a smooth edge. Colony sizes up to 1.2 mm. The cells are round, 0.9-1.3 × 1.5-2.0 μm in size, motionless. Gram stain is negative.
Физиолого-биохимические признакиPhysiological and biochemical characteristics
Штамм растет при температуре от +4 до +20°С, в аэробных условиях. Оптимум роста от +4 до +10°С. Растет при рН 4,0-8,0. Растет на плотных и жидких питательных средах с содержанием NaCl 30 г/л. Способен расти в жидкой среде с углеводородами в качестве единственного источника углерода и энергии.The strain grows at temperatures from +4 to + 20 ° C, under aerobic conditions. The optimum growth is from +4 to + 10 ° C. Grows at pH 4.0-8.0. It grows on solid and liquid nutrient media with a NaCl content of 30 g / l. Able to grow in a liquid medium with hydrocarbons as the sole source of carbon and energy.
Штамм поддерживается пересевами 1 раз в 14 дней на плотной питательной среде modPCA следующего состава, г/л: K2HPO4 - 1,5; KH2PO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 5,0; дрожжевой экстракт - 2,5; D-глюкоза - 1,0; агар - 14; рН 7,0, или жидкой питательной среде №1 следующего состава, г/л: K2HPO4 - 1,5; KH2PO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 0,5; дрожжевой экстракт - 0,1; рН 7,0. В жидкой питательной среде в качестве углеводородного субстрата использовали смесь товарной нефти Возейского месторождения (плотность 37,9°API, сернистость 0,66%, характеризуется как тяжелая, вязкая, с высоким содержанием смол и асфальтенов) и дизельного топлива в соотношении 1:1 по объему.The strain is maintained by reseeding 1 time in 14 days on a solid nutrient medium modPCA of the following composition, g / l: K 2 HPO 4 - 1,5; KH 2 PO 4 0.75; MgSO 4 - 1.0; (NH 4 ) 2 SO 4 - 4.0; NaCl - 30; casein hydrolyzate - 5.0; yeast extract - 2.5; D-glucose - 1.0; agar - 14; pH 7.0, or liquid nutrient medium No. 1 of the following composition, g / l: K 2 HPO 4 - 1.5; KH 2 PO 4 0.75; MgSO 4 - 1.0; (NH 4 ) 2 SO 4 - 4.0; NaCl - 30; casein hydrolyzate - 0.5; yeast extract - 0.1; pH 7.0. In a liquid nutrient medium, a mixture of marketable oil from the Vozeyskoye field (density 37.9 ° API, sulfur content 0.66%, characterized as heavy, viscous, with a high content of resins and asphaltenes) and diesel fuel in a 1: 1 ratio was used as a hydrocarbon substrate volume.
Также штамм может храниться при +6±2°С в лиофилизированном состоянии с использованием сухого обезжиренного молока в качестве защитной среды.Also, the strain can be stored at + 6 ± 2 ° C in a lyophilized state using skimmed milk powder as a protective medium.
Осуществление изобретенияThe implementation of the invention
Пример 1. Выделение и культивирование Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ В-12351.Example 1. Isolation and cultivation of Psychrobacter cibarius ARC 13 VKPM B-12351.
Штамм выделен из образцов грунта береговой линии порта города Мурманск 3 июня 2014 года. Образец грунта массой 5±2 г вносили в 100 мл питательной среды №1. Культивирование проводили при температуре +4°С, на орбитальном шейкере (130 об/мин). Время культивирования 7 суток. Полученную накопительную культуру вносили в количестве 10 мл в 100 мл питательной среды №1. Было проведено не менее 30 пассажей накопительной культуры. Выделение штамма из накопительной культуры проводили на среде modPCA, полученную чистую культуру далее культивировали на среде №1.The strain was isolated from soil samples of the coastline of the port of the city of Murmansk on June 3, 2014. A soil sample weighing 5 ± 2 g was added to 100 ml of nutrient medium No. 1. Cultivation was carried out at a temperature of + 4 ° C, on an orbital shaker (130 rpm). The cultivation time is 7 days. The resulting accumulative culture was made in the amount of 10 ml in 100 ml of nutrient medium No. 1. At least 30 passages of the accumulative culture were carried out. The strain was isolated from the accumulative culture on modPCA medium; the resulting pure culture was further cultivated on medium No. 1.
Пример 2. Исследование нефтеокисляющей активности Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ В-12351.Example 2. The study of the oil-oxidizing activity of Psychrobacter cibarius ARC 13 VKPM B-12351.
Штамм, выращенный на жидкой питательной среде №1, вносили в качестве инокулята в 100 мл питательной среды №1. В качестве контроля была использована питательная среда без добавления культуры. После проведения культивирования при температуре +4°С, 130 об/мин в течение 7 суток проводилась экстракция углеводородов гексаном согласно ГОСТ 31953-2012, хроматографическая оценка убыли углеводородов проводилась на приборе DSA 100 , оснащенном микрокапиллярной колонкой DB-1ms, газ-носитель - гелий, расход газа - 39 мл/мин, детектор - ПИД, температура детектора - 320°С. Измерения проводили в условиях температурного градиента в термостате от 60 до 320°С. Результаты анализа были обработаны при помощи программного обеспечения OpenLAB CDS (Agilent).The strain grown in liquid nutrient medium No. 1, was introduced as inoculum in 100 ml of nutrient medium No. 1. As a control, a culture medium was used without adding culture. After cultivation at a temperature of + 4 ° C, 130 rpm for 7 days, hydrocarbons were extracted with hexane according to GOST 31953-2012, a chromatographic assessment of hydrocarbon losses was carried out on a DSA 100 device equipped with a DB-1ms microcapillary column, carrier gas - helium, gas flow rate - 39 ml / min, detector - PID, detector temperature - 320 ° С. The measurements were carried out under a temperature gradient in a thermostat from 60 to 320 ° C. The analysis results were processed using OpenLAB CDS software (Agilent).
Суммарная убыль для среднекипящей и высококипящей фракции составляла не менее 50% за 7 суток культивирования при температуре +4°С и солености среды 30 г/л.The total decrease for the medium boiling and high boiling fractions was not less than 50% for 7 days of cultivation at a temperature of + 4 ° C and salinity of the medium 30 g / L.
Пример 3. Способ производства препарата на основе Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ В-12351.Example 3. A method of manufacturing a drug based on Psychrobacter cibarius ARC 13 VKPM B-12351.
Штамм Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ В-12351, выращенный на среде РСА при температуре +4°С в течение 7 суток, вносят в жидкую питательную среду следующего состава, г/л: K2HPO4 - 1,5; KH2PO4 - 0,75; MgSO4 - 1,0; (NH4)2SO4 - 4,0; NaCl - 30; гидролизат казеина - 5,0; дрожжевой экстракт - 2,5; D-глюкоза - 1,0; рН 7,0. Далее культивируют при температуре +10°С на орбитальном шейкере в течение 3 суток до конечного титра 109 КОЕ/мл. В полученную суспензию клеток в питательной среде вносят защитную среду (сухое обезжиренное молоко в количестве 10%). Далее полученную жидкую биомассу замораживают и обезвоживают методом лиофилизации. Полученную сухую биомассу штамма Psychrobacter cibarius ARC 13 ВКПМ В-12351 смешивают с питательным премиксом (сухое обезжиренное молоко) в соотношении 1:10.The strain Psychrobacter cibarius ARC 13 VKPM B-12351, grown on PCA at a temperature of + 4 ° C for 7 days, is introduced into a liquid nutrient medium of the following composition, g / l: K 2 HPO 4 - 1.5; KH 2 PO 4 0.75; MgSO 4 - 1.0; (NH 4 ) 2 SO 4 - 4.0; NaCl - 30; casein hydrolyzate - 5.0; yeast extract - 2.5; D-glucose - 1.0; pH 7.0. Then cultivated at a temperature of + 10 ° C on an orbital shaker for 3 days to a final titer of 10 9 CFU / ml. A protective medium (10% skimmed milk powder) is added to the resulting suspension of cells in a nutrient medium. Next, the resulting liquid biomass is frozen and dehydrated by lyophilization. The resulting dry biomass of the strain Psychrobacter cibarius ARC 13 VKPM B-12351 is mixed with nutrient premix (skimmed milk powder) in a ratio of 1:10.
Таким образом, получен штамм, способный осуществлять деструкцию нефти и нефтепродуктов при температуре от +4°С до +20°С и солености 30 г/л, способный расти в жидкой среде с углеводородами в качестве единственного источника углерода и энергии.Thus, a strain is obtained that is capable of degrading oil and oil products at temperatures from + 4 ° C to + 20 ° C and salinity of 30 g / l, capable of growing in a liquid medium with hydrocarbons as the sole source of carbon and energy.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016110699A RU2624065C1 (en) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | Strain psychrobacter cibarius arc 13 vkpm b-12351 is destructor of oil and oil products |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016110699A RU2624065C1 (en) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | Strain psychrobacter cibarius arc 13 vkpm b-12351 is destructor of oil and oil products |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2624065C1 true RU2624065C1 (en) | 2017-06-30 |
Family
ID=59312376
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016110699A RU2624065C1 (en) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | Strain psychrobacter cibarius arc 13 vkpm b-12351 is destructor of oil and oil products |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2624065C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697380C1 (en) * | 2018-11-15 | 2019-08-13 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок" | Pseudoalteromonas nigrifaciens strain for decomposition of oil and oil products |
| RU2699977C1 (en) * | 2018-11-15 | 2019-09-12 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок" | Psychrobacter cibarius arc 35 vkpm v-13081 strain destructor of oil and oil products |
| RU2699962C1 (en) * | 2018-11-15 | 2019-09-12 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок" | Psychrobacter cryohalolis arc 36 vkpm v-13082 strain - destructor of oil and oil products |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2404138C2 (en) * | 2008-07-30 | 2010-11-20 | ООО "ЛУКОЙЛ-Нижневолжскнефть" | Method of obtaining biopreparation for sea water purification from oil (versions) |
| WO2011153364A1 (en) * | 2010-06-02 | 2011-12-08 | Eudes De Crecy | Evolving microorganisms on complex hydrocarbons |
| RU2553338C2 (en) * | 2013-08-20 | 2015-06-10 | Открытое акционерное общество "Нефтяная компания "ЛУКОЙЛ" | Pseudomonas azotoformans STRAIN FOR CLEANING SEA WATER AND COASTAL AREAS FROM OIL IN HIGH LATITUDE CONDITIONS |
-
2016
- 2016-03-23 RU RU2016110699A patent/RU2624065C1/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2404138C2 (en) * | 2008-07-30 | 2010-11-20 | ООО "ЛУКОЙЛ-Нижневолжскнефть" | Method of obtaining biopreparation for sea water purification from oil (versions) |
| WO2011153364A1 (en) * | 2010-06-02 | 2011-12-08 | Eudes De Crecy | Evolving microorganisms on complex hydrocarbons |
| RU2553338C2 (en) * | 2013-08-20 | 2015-06-10 | Открытое акционерное общество "Нефтяная компания "ЛУКОЙЛ" | Pseudomonas azotoformans STRAIN FOR CLEANING SEA WATER AND COASTAL AREAS FROM OIL IN HIGH LATITUDE CONDITIONS |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2697380C1 (en) * | 2018-11-15 | 2019-08-13 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок" | Pseudoalteromonas nigrifaciens strain for decomposition of oil and oil products |
| RU2699977C1 (en) * | 2018-11-15 | 2019-09-12 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок" | Psychrobacter cibarius arc 35 vkpm v-13081 strain destructor of oil and oil products |
| RU2699962C1 (en) * | 2018-11-15 | 2019-09-12 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Арктический Научно-Проектный Центр Шельфовых Разработок" | Psychrobacter cryohalolis arc 36 vkpm v-13082 strain - destructor of oil and oil products |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2624067C2 (en) | Strain nocardia coeliaca arc12 vkpm ac-1990 is destructor of oil and oil products | |
| RU2624065C1 (en) | Strain psychrobacter cibarius arc 13 vkpm b-12351 is destructor of oil and oil products | |
| RU2624053C2 (en) | Strain psychrobacter maritimus arc 7 vkpm v-12347-destructor of oil and oil products | |
| RU2624055C2 (en) | Strain psychrobacter fozii arc 5 vkpm b-12345 is destructor of oil and oil products | |
| RU2699977C1 (en) | Psychrobacter cibarius arc 35 vkpm v-13081 strain destructor of oil and oil products | |
| RU2624054C2 (en) | Strain leucobacter aridicollis arc 6 vkpm as-1992 destructor of oil and oil products | |
| RU2624052C2 (en) | Strain arthrobacter rhombi arc 8 vkpm as-1987-destructor of oil and oil products | |
| RU2694610C1 (en) | Pseudomonas extremaustralis arc 38 vkpm b-13084 strain - destructor of oil and oil products | |
| RU2142997C1 (en) | Strain arthrobacter sp for degradation of crude oil and petroleum products | |
| RU2624059C2 (en) | Strain cobetia marina arc 11 vkpm b-12350 is destructor of oil and oil products | |
| RU2624051C2 (en) | Strain psychrobacter cibarius arc 9 bkpm b-12348 is destructor of oil and oil products | |
| RU2624058C2 (en) | Strain nocardia coeliaca arc 1 vkpm ac-1991 is destructor of oil and oil products | |
| RU2691689C1 (en) | Yarrowia lipolytica strain - an oil and oil product destructor | |
| RU2624063C1 (en) | STRAIN ARTHROBACTER RHOMBI ARC 16 VKPM Ac-1988 - DESTRUCTOR OF OIL AND OIL PRODUCTS | |
| RU2624061C1 (en) | Arthrobacter strain rhombi arc 15 vkpm as-1989 - destructor of oil and oil products | |
| RU2624069C1 (en) | STRAIN SALINIBACTERIUM AMURSKYENSE ARC 14 VKPM Ac-1993 - DESTRUCTOR OF OIL AND OIL PRODUCTS | |
| RU2624056C2 (en) | Strain halomonas boliviensis arc 3 vkpm b-12344 is destructor of oil and oil products | |
| RU2624050C2 (en) | Strain cobetia marina arc 10 vkpm b-12349 is destructor of oil and oil products | |
| RU2699962C1 (en) | Psychrobacter cryohalolis arc 36 vkpm v-13082 strain - destructor of oil and oil products | |
| RU2699990C1 (en) | Arthrobacter psychrochitiniphilus arc 42 vkpm as-2076 strain - destructor of oil and oil products | |
| RU2700078C1 (en) | Yarrowia lipolytica arc 49 vkpm y-4348 strain destructor of oil and oil products | |
| RU2694199C1 (en) | Strain paeniglutamicibacter antarcticus arc 43 vkpm ac-2077 - destructor of oil and oil products | |
| RU2699988C1 (en) | Marinomonas rhizoma arc 45 vkpm-13091 strain - destructor of oil and oil products | |
| RU2699987C1 (en) | Pseudoalteromonas prydzensis arc 46 vkpm v-13104 strain - destructor of oil and oil products | |
| RU2699984C1 (en) | Yarrowia lipolytica arc 48 vkpm y-4347 strain - destructor of oil and oil products |