RU2681285C1 - Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation - Google Patents
Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation Download PDFInfo
- Publication number
- RU2681285C1 RU2681285C1 RU2017142225A RU2017142225A RU2681285C1 RU 2681285 C1 RU2681285 C1 RU 2681285C1 RU 2017142225 A RU2017142225 A RU 2017142225A RU 2017142225 A RU2017142225 A RU 2017142225A RU 2681285 C1 RU2681285 C1 RU 2681285C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- brucella
- cultivation
- neotomae
- nutrient medium
- agar
- Prior art date
Links
- 241001148112 Brucella neotomae Species 0.000 title claims abstract description 24
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 title claims abstract description 24
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims abstract description 24
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 24
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims abstract description 23
- 241000589562 Brucella Species 0.000 claims abstract description 16
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 12
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 10
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 claims abstract description 9
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 9
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 29
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 8
- 239000006402 liver broth Substances 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 7
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 abstract description 9
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 abstract description 7
- 206010006500 Brucellosis Diseases 0.000 abstract description 4
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 abstract 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 abstract 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 21
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 13
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 13
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 8
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 3
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 3
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N Sulphur dioxide Chemical compound O=S=O RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000021336 beef liver Nutrition 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 2
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241001022653 Brucella neotomae 5K33 Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N Chick antidermatitis factor Natural products OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 208000004023 Legionellosis Diseases 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N Lycopene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1C(=C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=C)CCCC2(C)C UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 206010035148 Plague Diseases 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 208000034784 Tularaemia Diseases 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005842 biochemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001746 carotenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000005473 carotenes Nutrition 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003771 laboratory diagnosis Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 235000021073 macronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006241 metabolic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 150000002829 nitrogen Chemical class 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229940055726 pantothenic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- JVBXVOWTABLYPX-UHFFFAOYSA-L sodium dithionite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])=O JVBXVOWTABLYPX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004296 sodium metabisulphite Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000005979 thermal decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N vitamin A aldehyde Natural products O=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и микробиологии, именно к разработке питательных сред, которые создают оптимальные условия для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae.The invention relates to biotechnology and microbiology, namely to the development of nutrient media that create optimal conditions for the cultivation of Brucella species Brucella neotomae.
Известна питательная среда - для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae, содержащая, г/л: печеночный настой, к 500 мл которого добавляют 500 мл водопроводной воды, 10 г сухого пептона, 5 г химически чистого хлористого натрия и 25 г агар-агара, промытого водопроводной водой и хорошо отжатого, рН среды устанавливают 7,8. Затем среду варят до полного расплавления агара и разливают в необходимую посуду (по 1-2 л). В дальнейшем среду автоклавируют при 115°С в течение 20 минут, отстаивают, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, предварительно смоченный теплой водой, и вновь устанавливают рН 7,1-7,2. Среду разливают в необходимую посуду и стерилизуют при 115°С в течение 20 минут. (Профилактика и лабораторная диагностика бруцеллеза людей. Методические указания МУ 3.1.7.1189-03. С. 53)A known nutrient medium is for the cultivation of Brucella neotomae brucella, containing, g / l: liver infusion, 500 ml of tap water, 10 g of dry peptone, 5 g of chemically pure sodium chloride and 25 g of agar agar, washed with tap are added to 500 ml water and well wrung out, the pH of the medium is set to 7.8. Then the medium is cooked until the agar is completely melted and poured into the necessary dishes (1-2 l each). Subsequently, the medium is autoclaved at 115 ° C for 20 minutes, sedimented, filtered through a cotton-gauze filter, previously moistened with warm water, and the pH is again adjusted to 7.1-7.2. The medium is poured into the necessary dishes and sterilized at 115 ° C for 20 minutes. (Prevention and laboratory diagnosis of brucellosis in humans. Guidelines MU 3.1.7.1189-03. P. 53)
Недостатком данной среды является низкая питательная ценность для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae.The disadvantage of this environment is the low nutritional value for the cultivation of brucella species Brucella neotomae.
Наиболее близкой к заявляемому изобретению является питательная среда для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae, содержащая, г/л: мясопептонный агар для выращивания бруцеллезного микроба, основой которой является мясная вода - до 1000,0 мл; пептон ферментативный - 10,0 г; натрия хлорид - 5,0 г; кровь - 10,0 г; агар микробиологический - 15,0-20,0 г; рН 7,3±0,2. Среду автоклавируют 30 мин при температуре 121°С (М.С. Поляк; В.И. Сухаревич; М.Э. Сухаревич. Питательные среды для медицинской и санитарной микробиологии. СПб.: ЭЛБИ-СПб. - 2008. - С. 64-65.; С. 269).Closest to the claimed invention is a nutrient medium for the cultivation of brucella species Brucella neotomae, containing, g / l: meat-peptone agar for growing brucellosis microbe, the basis of which is meat water - up to 1000.0 ml; enzymatic peptone - 10.0 g; sodium chloride - 5.0 g; blood - 10.0 g; microbiological agar - 15.0-20.0 g; pH 7.3 ± 0.2. The medium is autoclaved for 30 min at a temperature of 121 ° C (M.S. Polyak; V.I. Sukharevich; M.E. Sukharevich. Nutrient media for medical and sanitary microbiology. St. Petersburg: ELBI-St. Petersburg. - 2008. - P. 64 -65 .; S. 269).
Недостатком данной среды является необходимость длительного выращивания, ввиду позднего роста возбудителя.The disadvantage of this environment is the need for prolonged cultivation, due to the late growth of the pathogen.
Целью изобретения является разработка рецептуры питательной среды плотной для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae, которая обеспечивает активный рост уже через 24 ч.The aim of the invention is to develop a formulation of a nutrient medium dense for the cultivation of brucella species Brucella neotomae, which provides active growth after 24 hours
Сущность предполагаемого изобретения заключается в том, что в качестве основного источника азотистого питания в предлагаемой среде используют печеночный отвар, пептон ферментативный, сыворотку крови плодов коровы жидкую, для поддержания изотоничности среды и окислительно-восстановительного потенциала - натрий хлористый, в качестве стимулирующих добавок - глюкозу, глицерин и натрия метабисульфит, а также агар микробиологический, питьевую воду, при следующем соотношении ингредиентов, г/л:The essence of the proposed invention lies in the fact that hepatic broth, enzyme peptone, liquid blood serum of cow fruits are used as the main source of nitrogen nutrition in the proposed medium, sodium chloride is used to maintain the isotonicity of the medium and the redox potential, and glucose is used as stimulating additives, glycerin and sodium metabisulfite, as well as microbiological agar, drinking water, in the following ratio of ingredients, g / l:
В качестве исходного сырья используют печень крупного рогатого скота, содержащую 70-75% воды, 12-14% белка, 2-6% липидов, 2-8% углеводов, коферменты, витамины, гормоны, разнообразные низкомолекулярные органические вещества, а также катионы и анионы натрия, калия, марганца, кальция, меди, железа, цинка, магния, хлора, йода, серы в общем количестве не более 1%, ферментов - 2,5%. В печени содержится 50-100 мг/100 г свободных аминокислот (при расчете на азот). Общее содержание азота всех азотсодержащих экстрактивных веществ печени составляет примерно 250-300 мг/100 г, причем значительная часть этого азота приходится на долю полипептидов (Б.В. Петровский. Большая медицинская энциклопедия. Москва. Издательство «Советская энциклопедия». 1982 г. Том №19. С. 458-459). Поэтому печеночный отвар является хорошей питательной субстанцией при производстве питательных сред. Кроме того, печень богата макроэлементами, мг/кг: цинк - 3,0; марганец - 0,1; медь - 0,7; кобальт - 0,002; йод - 0,02; макроэлементами, в %: калия - 0,26; магния - 0,2; серы - 0,002; аминокислотами, в г/кг: аргинина - 2,5; гистидина - 3,6; треонина - 2,5; лейцина - 6,3; изолейцина - 1,5; аргинина-2,5; фенилаланина - 4,5; и витаминами, мг/кг: каротина (витамин А) - 1,6; В1-0,1; В2 - 0,3; В3 (пантотеновая кислота) - следы; В4 (холин) - 50,0; В5 - 6,0; В6 - 1,0. (И.В. Петрухин, 1989, С. 1-526). (М.Ф. Нестерин, И.М. Скурихин. Химический состав пищевых продуктов. Москва. «Пищевая промышленность». 1979. 247 с).Cattle liver containing 70-75% water, 12-14% protein, 2-6% lipids, 2-8% carbohydrates, coenzymes, vitamins, hormones, various low molecular weight organic substances, as well as cations and anions of sodium, potassium, manganese, calcium, copper, iron, zinc, magnesium, chlorine, iodine, sulfur in the total amount of not more than 1%, enzymes - 2.5%. The liver contains 50-100 mg / 100 g of free amino acids (calculated on nitrogen). The total nitrogen content of all nitrogen-containing extractive substances of the liver is approximately 250-300 mg / 100 g, and a significant part of this nitrogen is accounted for by polypeptides (BV Petrovsky. Big Medical Encyclopedia. Moscow. Publishing House "Soviet Encyclopedia". 1982 Volume No. 19. S. 458-459). Therefore, liver broth is a good nutrient in the production of culture media. In addition, the liver is rich in macronutrients, mg / kg: zinc - 3.0; Manganese - 0.1; copper - 0.7; cobalt - 0.002; iodine - 0.02; macrocells, in%: potassium - 0.26; magnesium - 0.2; sulfur - 0.002; amino acids, in g / kg: arginine - 2.5; histidine - 3.6; threonine - 2.5; leucine - 6.3; isoleucine - 1.5; arginine-2.5; phenylalanine - 4.5; and vitamins, mg / kg: carotene (vitamin A) - 1.6; B 1 -0.1; B 2 - 0.3; In 3 (pantothenic acid) - traces; B 4 (choline) - 50.0; B 5 - 6.0; At 6 - 1.0. (I.V. Petrukhin, 1989, p. 1-526). (M.F. Nesterin, I.M. Skurikhin. Chemical composition of food products. Moscow. "Food Industry". 1979. 247 p.).
Печень говяжья - субпродукт, ГОСТ 2.114-95. Производитель: мясокомбинат, г. Светлоград Ставропольского края.Beef liver is an offal, GOST 2.114-95. Manufacturer: meat factory, Svetlograd, Stavropol Territory.
Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей - ГОСТ 13805-76. Производитель ООО «НПО «Порт-Петровск».Dry enzymatic peptone for bacteriological purposes - GOST 13805-76. Producer of LLC NPO Port-Petrovsk.
Сыворотка крови плодов коров жидкая С 273 К 350. Срок годности до 2018 года, стерильная. Производство г. Минск.Blood serum of cow fruit liquid C 273 K 350. Shelf life until 2018, sterile. Production Minsk.
Натрий хлористый, хч, ГОСТ 4233-77, партия 24. Бактерии нуждаются в минимальном количестве солей. Будучи растворены в питательной среде и находясь в состоянии электролитического распада, ионизируемые минеральные соединения являются одновременно катализаторами различных химических процессов, происходящих в микробной клетке.Sodium chloride, hch, GOST 4233-77, batch 24. Bacteria need a minimum amount of salts. Being dissolved in a nutrient medium and being in a state of electrolytic decay, ionized mineral compounds are simultaneously catalysts of various chemical processes occurring in a microbial cell.
Глюкоза кристаллическая - ЧДА, партия 20140327, ООО «МСД Торговая компания». Срок годности 3 года. С внесением в питательную среду глюкозы в концентрации 1% улучшаются ее ростовые свойства.Crystalline glucose - ChDA, batch 20140327, LLC “MSD Trading Company”. Shelf life 3 years. With the introduction of glucose in a nutrient medium at a concentration of 1%, its growth properties improve.
Глицерин - ГОСТ 6259-75, партия 21/2015. Дата выпуска 04.2015. Срок годности 3 года. С внесением в питательную среду глицерина в концентрации 2% - улучшаются ее ростовые свойства.Glycerin - GOST 6259-75, lot 21/2015. Release Date 04.2015. Shelf life 3 years. With the introduction of glycerol in a nutrient medium at a concentration of 2%, its growth properties are improved.
Натрия метабисульфит - ГОСТ 11683-76, в средах переходит в гидросульфит натрия, при нагревании происходит термическое разложение с выделением двуокиси серы (SO2), что способствует нейтрализации продуктов жизнедеятельности культивируемых микроорганизмов.Sodium metabisulphite - GOST 11683-76, in environments passes into sodium hydrosulphite, when heated, thermal decomposition occurs with the release of sulfur dioxide (SO 2 ), which helps to neutralize the waste products of cultivated microorganisms.
Агар микробиологический - агар бактериологический (европейский тип). Производитель: «Pronadisa», Испания. Партия LF 15130184. Срок годности до 10.2017 г. Дата изготовления: октябрь 2013 г. Порошок светло-кремового цвета сероватого оттенка, запах без постороннего, свойственный студню с массовой долей сухого агара 0,85%. Температура плавления студня с массовой долей сухого агара 0,85% не ниже 80°С, температура застудневания - 30-37°С, прочность студня не менее 350±40 г. Главная особенность агара - его желирующая способность при 90°С.Microbiological agar - bacteriological agar (European type). Producer: "Pronadisa", Spain. Lot LF 15130184. Shelf life until 10.2017. Production date: October 2013. Light cream powder, grayish tint, odorless, characteristic of jelly with a mass fraction of dry agar of 0.85%. The melting temperature of the jelly with a mass fraction of dry agar of 0.85% is not lower than 80 ° C, the gelation temperature is 30-37 ° C, the strength of the jelly is at least 350 ± 40 g. The main feature of the agar is its gelling ability at 90 ° C.
Питьевая вода - ГОСТ Р 51232-98, отвечает всем гигиеническим требованиям. Вода составляет 80-90% от клеточной массы микроорганизмов и играет важную роль в их физиологических функциях. Она входит в состав структурных элементов клетки, служит средой для биохимических реакций, источником кислорода в процессах метаболизма, непосредственно участвует в метаболических реакциях, например в реакциях гидролиза. Вода является хорошим растворителем, обеспечивая клетку питательными веществами. Вода - важнейший компонент всех питательных сред. При отсутствии воды замедляются или полностью прекращаются процессы жизнедеятельности микроорганизмов.Drinking water - GOST R 51232-98, meets all hygienic requirements. Water makes up 80-90% of the cell mass of microorganisms and plays an important role in their physiological functions. It is part of the structural elements of the cell, serves as a medium for biochemical reactions, a source of oxygen in metabolic processes, and is directly involved in metabolic reactions, for example, in hydrolysis reactions. Water is a good solvent, providing the cell with nutrients. Water is an essential component of all culture media. In the absence of water, the vital processes of microorganisms slow down or completely stop.
Приготовление печеночного отвара.Cooking liver broth.
Способ приготовления питательной основы для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae заключается в следующем: фарш из свежей говяжьей печени заливают питьевой водой (1 л на 1 кг фарша), затем настаивают 3 ч при 25-30°С или 6-10 ч при 4-10°С, затем варят около 2 ч; после варки отвар фильтруют через ватно-марлевый фильтр и стерилизуют при 115-120°С 20 мин. (Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. Москва «Медицина» 1982. 82. с).A method of preparing a nutrient base for the cultivation of Brucella neotomae brucella is as follows: minced meat from fresh beef liver is poured with drinking water (1 l per 1 kg of minced meat), then insisted for 3 hours at 25-30 ° C or 6-10 hours at 4-10 ° C, then cook for about 2 hours; after cooking, the broth is filtered through a cotton-gauze filter and sterilized at 115-120 ° C for 20 minutes. (Birger M.O. Handbook of microbiological and virological research methods. Moscow "Medicine" 1982. 82. p).
Приготовление питательной среды плотнойPreparation of a dense culture medium
Питательную среду на основе печеночного отвара для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae на основе печеночного отвара готовят следующим образом: соединяют, г/л: печеночный отвар – 500 мл; пептон ферментативный - 10,0 г; натрий хлористый - 5,0 г; агар микробиологический - 15,0 г; водопроводная вода - до 1 литра. Затем среду кипятят до полного растворения ингредиентов, устанавливают рН 7,2±0,1 с помощью 20% раствора натрия гидроокиси, добавляют глюкозу - 10,0; глицерин - 20,0; натрия метабисульфит - 0, 3; тщательно перемешивают, разливают по 330 мл питательной среды в градуированные флаконы объемом 450 мл, затем стерилизуют при 1 атм. в течение 20 мин. После стерилизации охлаждают до 56°С, стерильно над факелом добавляют в каждый флакон по 25,0 мл сыворотки крови плодов коровы жидкой (т.е. на 1 л среды 75 мл сыворотки), затем разливают на чашки Петри по 35-40 мл питательной среды. Подсушенные чашки помещают в термостат на 48 ч при 37°С - проверяют на стерильность.A nutrient medium based on a liver broth for cultivating brucella of the species Brucella neotomae based on a liver broth is prepared as follows: connect, g / l: liver broth - 500 ml; enzymatic peptone - 10.0 g; sodium chloride - 5.0 g; microbiological agar - 15.0 g; tap water - up to 1 liter. Then the medium is boiled until the ingredients are completely dissolved, the pH is adjusted to 7.2 ± 0.1 using a 20% sodium hydroxide solution, glucose is added - 10.0; glycerin - 20.0; sodium metabisulfite - 0, 3; mix thoroughly, pour 330 ml of culture medium into graduated 450 ml bottles, then sterilize at 1 atm. within 20 minutes After sterilization, it is cooled to 56 ° C, 25.0 ml of blood serum of cow fruit is added sterilely over the torch to each vial (i.e., 75 ml of serum per 1 liter of medium), then 35-40 ml of nutrient are poured into Petri dishes Wednesday. Dried cups are placed in a thermostat for 48 hours at 37 ° C - checked for sterility.
Сочетанное применение вышеописанных ингредиентов обеспечивает существенное усиление ростовых качеств при культивировании бруцелл вида Brucella neotomae, а именно образование колоний микроорганизма в значительно ранние сроки - уже через 24±1ч на пластинках питательного агара. Готовую питательную среду плотную используют для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae.The combined use of the above ingredients provides a significant increase in growth quality during the cultivation of Brucella neotomae brucella, namely, the formation of microorganism colonies at a much earlier time - after 24 ± 1 h on nutrient agar plates. The solid nutrient medium is used for the cultivation of Brucella neotomae species.
Качество полученной среды оценивают в соответствии с методическими указаниями (МУ 3.3.2.2124-06) «Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза, легионеллеза», Москва, 2007 г., с использованием вирулентных культур, выделенных от крыс, морских свинок, мышей: Brucella neotomae биотип 1 325; Brucella neotomae биотип 1 66/2; Brucella neotomae 5K 33; Brucella neotomae 65/196.The quality of the resulting medium is evaluated in accordance with the guidelines (MU 3.3.2.2124-06) “Monitoring of diagnostic nutrient media according to biological indicators for plague, cholera, anthrax, tularemia, brucellosis, legionellosis” pathogens, Moscow, 2007, using virulent cultures isolated from rats, guinea pigs, mice: Brucella neotomae biotype 1,325; Brucella neotomae biotype 1 66/2; Brucella neotomae 5K 33; Brucella neotomae 65/196.
Испытуемые культуры выращивают в бактериологических пробирках на поверхности скошенного агара, рН 7,2±0,1, при температуре 37°С в течение 48 ч. Двухсуточные культуры тест-штаммов бруцелл смывают с поверхности скошенного агара 0,9% раствором натрия хлорида, доводят концентрацию микробной взвеси до 10 единиц по оптическому стандарту мутности ОСО 42-28-85 ФГБУ НЦЭСМП МЗ России, эквивалентную 1,7×109 бруцелл в 1 мл. Полученную микробную взвесь культуры разводят сначала до концентрации 1×109 м.к./мл, затем серийными десятикратными разведениями до 1×10-6 и 1×10-7 м.к./мл. В процессе разведения перенос взвеси в следующую пробирку производят стерильной пипеткой объемом 1 мл, меняя пипетку для каждого разведения. По 0,1 мл каждой культуры бруцелл вида Brucella neotomae из разведений 10-6 (100 м.к.) и 10-7 (10 м.к.) высевают на 3 чашки Петри с испытуемыми средами и равномерно распределяют покачиванием по всей поверхности. Посевы инкубируют при температуре 37±1°С.The test cultures are grown in bacteriological tubes on the surface of mowed agar, pH 7.2 ± 0.1, at a temperature of 37 ° C for 48 hours. Two-day cultures of test strains of brucella are washed off the surface of mowed agar with 0.9% sodium chloride solution, adjusted microbial suspension concentration up to 10 units according to the optical turbidity standard OSO 42-28-85 FSBI NTsESMP MZ of Russia, equivalent to 1.7 × 10 9 brucella in 1 ml. The resulting microbial suspension of the culture is diluted first to a concentration of 1 × 10 9 MK./ml, then serial ten-fold dilutions to 1 × 10 -6 and 1 × 10 -7 MK./ml. During the dilution process, the suspension is transferred to the next test tube with a 1 ml sterile pipette, changing the pipette for each dilution. 0.1 ml of each Brucella neotomae species brucella culture from dilutions of 10 -6 (100 mk) and 10 -7 (10 mk) are plated on 3 Petri dishes with test media and evenly distributed by swaying over the entire surface. Crops are incubated at a temperature of 37 ± 1 ° C.
Оценку ростовых свойств питательной среды плотной для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae проводят путем подсчета количества выросших колоний бруцелл посуточно на пластинках агара с плотной питательной средой через каждые 24-48-72-120 ч. В качестве контроля используют агар Альбими.The growth properties of the nutrient medium dense for the cultivation of Brucella neotomae brucella are assessed by counting the number of brucella colonies grown daily on agar plates with a dense nutrient medium every 24-48-72-120 hours. Albimi agar is used as a control.
Пример 1. Культуры выращивали на питательной среде плотной для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae, содержащей, г/л: печеночный отвар - 300 мл; пептон сухой ферментативный - 8,0 г; сыворотку крови плодов коровы жидкую - 25,0 мл; натрий хлористый - 4,0 г; глюкозу - 5,0 г; глицерин - 15,0 мл; натрия метабисульфит - 0, 1 г; агар микробиологический - 13,0 г; питьевая вода - остальное. При таком соотношении ингредиентов на испытуемой среде при культивировании бруцелл вида Brucella neotomae через 40 часов обнаруживался видимый рост колоний, через 48 ч отмечался интенсивный рост в виде газона при посеве 0,1 мл из разведения 10-1, при посеве из разведения 10-6 вырастало 77 колоний, из разведения 10-7 вырастало 11 типичных по морфологии колоний, а на агаре Альбими рост отсутствовал и на 5 сутки при посеве 10 м.к. и 100 м.к., на 6 сутки вырастало 10 колоний из разведения 10-6.Example 1. The culture was grown on a nutrient medium dense for the cultivation of brucella species Brucella neotomae, containing, g / l: liver broth - 300 ml; dry enzymatic peptone - 8.0 g; liquid blood serum of cow fruits - 25.0 ml; sodium chloride - 4.0 g; glucose - 5.0 g; glycerin - 15.0 ml; sodium metabisulfite - 0, 1 g; microbiological agar - 13.0 g; drinking water - the rest. With this ratio of ingredients on the test medium, when brucella of the species Brucella neotomae was cultivated, visible colony growth was detected after 40 hours, intensive growth in the form of a lawn was observed after 48 h when sowing 0.1 ml from a dilution of 10 -1 , when sowing from a dilution of 10 -6 it grew 77 colonies, from a breeding of 10 -7, 11 colonies typical of morphology grew, and on Albimi agar there was no growth for 5 days when sowing 10 mk. and 100 mk, on the 6th day 10 colonies grew from a 10 -6 dilution.
Пример 2. Культуры выращивали на питательной среде плотной для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae, содержащей, г/л: печеночный отвар - 500,0 мл; пептон сухой ферментативный - 10,0 г; сыворотку крови плодов коровы жидкую - 75,0 мл; натрий хлористый - 5,0 г; глюкозу - 10,0 г; глицерин - 20,0 мл; натрия метабисульфит - 0,3 г; агар микробиологический - 15,0 г; питьевая вода - остальное.Example 2. The culture was grown in a nutrient medium dense for cultivation of brucella species Brucella neotomae, containing, g / l: hepatic broth - 500.0 ml; dry enzymatic peptone - 10.0 g; liquid blood serum of cow fruits - 75.0 ml; sodium chloride - 5.0 g; glucose - 10.0 g; glycerin - 20.0 ml; sodium metabisulfite - 0.3 g; microbiological agar - 15.0 g; drinking water - the rest.
При таком соотношении ингредиентов на испытуемой среде при культивировании бруцелл вида Brucella neotomae колонии начинали формироваться уже через 24 часа, а через 48 ч отмечался интенсивный сплошной рост в виде газона при посеве 0,1 мл из разведения 10-1, при посеве из разведения 10-6 вырастало 112 колоний, из разведения 10-7 вырастало 37 типичных по морфологии колоний, на агаре Альбими начальный рост обнаруживался в конце 4 суток только при посеве из разведения 10-6 в количестве 18 колоний.With such a ratio of ingredients in the test medium when cultured species Brucella Brucella neotomae colony began to form after 24 hours and after 48 hours was observed intense continuous growth in a lawn during sowing 0.1 ml of dilution 10 -1 dilution of at seeding 10 - 6, 112 colonies grew, from a 10 -7 dilution 37 of the colonies typical of morphology grew, on Albimi agar, the initial growth was detected at the end of 4 days only when sowing from a 10 -6 dilution in the amount of 18 colonies.
Пример 3. Культуры выращивали на питательной среде плотной для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae, содержащей, г/л: печеночный отвар - 700,0 мл; пептон сухой ферментативный - 12,0 г; сыворотку крови плодов коровы жидкую - 125,0 мл; натрий хлористый - 6,0 г; глюкозу - 15,0 г; глицерин - 25,0 мл; натрия метабисульфит - 0, 5 г; агар микробиологический - 17,0 г; питьевая вода - остальное.Example 3. The culture was grown in a nutrient medium dense for cultivation of brucella species Brucella neotomae, containing, g / l: hepatic broth - 700.0 ml; dry enzymatic peptone - 12.0 g; blood serum of cow fruit liquid - 125.0 ml; sodium chloride - 6.0 g; glucose - 15.0 g; glycerin - 25.0 ml; sodium metabisulfite - 0.5 g; microbiological agar - 17.0 g; drinking water - the rest.
При таком соотношении ингредиентов на испытуемой среде при культивировании бруцелл вида Brucella neotomae колонии начинали формироваться через 57 часов, через 48 ч отмечался интенсивный рост в виде газона при посеве 0,1 мл из разведения 10-1, при посеве из 10-6 разведения вырастало 48 колоний, из разведения 10-7 вырастало 7 типичных по морфологии колоний, а на агаре Альбими рост отсутствовал даже на 5 сутки при посеве и 10 м.к., и 100 м.к., на 6 сутки вырастало 6 колоний из разведения 10-6.With this ratio of ingredients on the test medium during the cultivation of Brucella species Brucella neotomae, colonies began to form after 57 hours, after 48 hours there was intensive growth in the form of a lawn when sowing 0.1 ml from a dilution of 10 -1 , when sowing from 10 -6 dilutions grew 48 colonies, from a breeding of 10-7, 7 colonies typical of morphology grew, and on Albimi agar there was no growth even for 5 days when sowing both 10 mk and 100 mk, 6 colonies from a dilution of 10 - 6 grew 6 .
Таким образом, заявленная питательная среда плотная для культивирования бруцелл вида Brucella neotomae (пример №2) является оптимальной по количеству подобранных ингредиентов, что позволяет получить достаточное количество колоний в максимально ранние сроки -уже через 24±1 ч.Thus, the claimed nutrient medium dense for the cultivation of brucella of the species Brucella neotomae (example No. 2) is optimal in terms of the number of selected ingredients, which allows to obtain a sufficient number of colonies in the earliest possible time - after 24 ± 1 h.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017142225A RU2681285C1 (en) | 2017-12-04 | 2017-12-04 | Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017142225A RU2681285C1 (en) | 2017-12-04 | 2017-12-04 | Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2681285C1 true RU2681285C1 (en) | 2019-03-05 |
Family
ID=65632778
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017142225A RU2681285C1 (en) | 2017-12-04 | 2017-12-04 | Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2681285C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2756601C1 (en) * | 2020-09-21 | 2021-10-04 | Федеральное казённое учреждение здравоохранения "Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Enriched solid nutrient medium for cultivating brucella biomass |
| RU2764139C1 (en) * | 2021-02-12 | 2022-01-13 | Федеральное казённое учреждение здравоохранения "Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Dense nutrient medium with kombucha hydrolysate, stimulating the accumulation of bacterial mass of brucella |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2148638C1 (en) * | 1998-06-22 | 2000-05-10 | Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт | Synthetic nutrient medium for brucella culturing |
| RU2299238C2 (en) * | 2005-07-22 | 2007-05-20 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федерального агентства по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения | Nutrient medium for brucella culturing |
| RU2415918C2 (en) * | 2009-02-09 | 2011-04-10 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения "Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФГУЗ "ИркутскНИПЧИ Сибири и ДВ" Роспо | Nutrient medium for brucella l-forms recovery and cultivation |
| RU2580028C1 (en) * | 2014-12-26 | 2016-04-10 | Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella |
-
2017
- 2017-12-04 RU RU2017142225A patent/RU2681285C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2148638C1 (en) * | 1998-06-22 | 2000-05-10 | Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт | Synthetic nutrient medium for brucella culturing |
| RU2299238C2 (en) * | 2005-07-22 | 2007-05-20 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федерального агентства по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения | Nutrient medium for brucella culturing |
| RU2415918C2 (en) * | 2009-02-09 | 2011-04-10 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения "Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФГУЗ "ИркутскНИПЧИ Сибири и ДВ" Роспо | Nutrient medium for brucella l-forms recovery and cultivation |
| RU2580028C1 (en) * | 2014-12-26 | 2016-04-10 | Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2756601C1 (en) * | 2020-09-21 | 2021-10-04 | Федеральное казённое учреждение здравоохранения "Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Enriched solid nutrient medium for cultivating brucella biomass |
| RU2764139C1 (en) * | 2021-02-12 | 2022-01-13 | Федеральное казённое учреждение здравоохранения "Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Dense nutrient medium with kombucha hydrolysate, stimulating the accumulation of bacterial mass of brucella |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2433170C1 (en) | Nutrient liquid medium for culturing plague microbe of vaccine strain eb | |
| RU2681285C1 (en) | Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation | |
| RU2412240C1 (en) | Culture medium for growing legionella | |
| RU2580028C1 (en) | Heavy nutrient medium for the cultivation of brucella | |
| RU2626568C1 (en) | Dense nutrient medium for cultivation and collection of biomass of plague microbe of ypestis ev vaccine strain | |
| CN101659983A (en) | Method for detecting number of viable bacillus | |
| RU2415923C1 (en) | Method for production of fermentative hydrolysate of fresh white cabbage and nutritive medium for cultivation lactobacteria based thereon | |
| RU2688335C1 (en) | Dense nutrient medium for cultivation of brucellosis agent | |
| RU2702174C1 (en) | Dense nutrient medium for cultivation and collection of biomass of vaccine strain of plague microbe yersinia pestis ev | |
| JP2010075145A (en) | Culture medium for measuring number of general living bacteria | |
| RU2681499C1 (en) | Nutrient medium on basis of secondary product of beef hydrolyzate for cultivation of microorganisms | |
| RU2460774C1 (en) | Nutrient medium for legionella cultivation | |
| RU2687364C2 (en) | DENSE NUTRIENT MEDIUM FOR CULTIVATION OF INFECTIOUS EPIDIDYMITIS AGENT OF RAMS B.ovis | |
| RU2748808C1 (en) | Dense universal nutrient medium for growing brucella biomass | |
| RU2681116C2 (en) | Dense nutrient medium for storage of plague microbe | |
| RU2708029C1 (en) | Nutrient medium for cultivation of yersinia pestis ev | |
| RU2415922C1 (en) | Nutrient medium for lactic acid bacilli cultivation | |
| RU2748492C1 (en) | Dense nutrient medium for monitoring the number of live microbial cells of the vaccine strain of the plague microbe y.pestis ev | |
| RU2425871C1 (en) | Nutrient medium for legionella cultivation | |
| RU2348686C2 (en) | Nutrient medium for microorganism cultivation | |
| RU2460768C1 (en) | Solid nutrient medium for legionella cultivation | |
| RU2827845C1 (en) | Elective nutrient medium for pseudomonas aeruginosa recovery | |
| RU2529364C1 (en) | Biphasic transport nutrient medium for isolation and growing brucellar microbe | |
| RU2764139C1 (en) | Dense nutrient medium with kombucha hydrolysate, stimulating the accumulation of bacterial mass of brucella | |
| RU2841541C1 (en) | Universal culture medium for culturing bacteria based on hydrolyzate of mink carcasses |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191205 |