RU2531947C1 - Method for prediction of risk of cardiovascular mortality in patients suffering from chronic ischemic heart failure combined with type 2 diabetes mellitus - Google Patents
Method for prediction of risk of cardiovascular mortality in patients suffering from chronic ischemic heart failure combined with type 2 diabetes mellitus Download PDFInfo
- Publication number
- RU2531947C1 RU2531947C1 RU2013129365/15A RU2013129365A RU2531947C1 RU 2531947 C1 RU2531947 C1 RU 2531947C1 RU 2013129365/15 A RU2013129365/15 A RU 2013129365/15A RU 2013129365 A RU2013129365 A RU 2013129365A RU 2531947 C1 RU2531947 C1 RU 2531947C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- heart failure
- patients
- cells
- diabetes mellitus
- cardiovascular
- Prior art date
Links
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 title claims abstract description 47
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 title claims abstract description 26
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 title claims abstract description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 17
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 title claims description 9
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 title description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 52
- 206010007558 Cardiac failure chronic Diseases 0.000 claims abstract description 38
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 claims abstract 3
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 claims abstract 3
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 30
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 claims description 13
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims description 8
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 10
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 8
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 abstract description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 abstract 1
- 231100000225 lethality Toxicity 0.000 abstract 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 18
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 15
- 102400001263 NT-proBNP Human genes 0.000 description 9
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 8
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 8
- 230000007211 cardiovascular event Effects 0.000 description 8
- 238000011161 development Methods 0.000 description 8
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 8
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 8
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 7
- 208000004476 Acute Coronary Syndrome Diseases 0.000 description 6
- 206010053172 Fatal outcomes Diseases 0.000 description 6
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 6
- 230000034994 death Effects 0.000 description 6
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 6
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 6
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 6
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 6
- 108010008064 pro-brain natriuretic peptide (1-76) Proteins 0.000 description 6
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 206010048554 Endothelial dysfunction Diseases 0.000 description 5
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000008694 endothelial dysfunction Effects 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 4
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 4
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 4
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 4
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 3
- 101800001904 NT-proBNP Proteins 0.000 description 3
- 108020001621 Natriuretic Peptide Proteins 0.000 description 3
- 102000004571 Natriuretic peptide Human genes 0.000 description 3
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 3
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 3
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 239000000692 natriuretic peptide Substances 0.000 description 3
- 231100001160 nonlethal Toxicity 0.000 description 3
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 3
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 3
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 3
- PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N 2'-(4-ethoxyphenyl)-5-(4-methylpiperazin-1-yl)-2,5'-bibenzimidazole Chemical compound C1=CC(OCC)=CC=C1C1=NC2=CC=C(C=3NC4=CC(=CC=C4N=3)N3CCN(C)CC3)C=C2N1 PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000016971 Proto-Oncogene Proteins c-kit Human genes 0.000 description 2
- 108010014608 Proto-Oncogene Proteins c-kit Proteins 0.000 description 2
- JLRGJRBPOGGCBT-UHFFFAOYSA-N Tolbutamide Chemical compound CCCCNC(=O)NS(=O)(=O)C1=CC=C(C)C=C1 JLRGJRBPOGGCBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 2
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000008753 endothelial function Effects 0.000 description 2
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 2
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000000250 revascularization Effects 0.000 description 2
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 2
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 101100177544 Arabidopsis thaliana FC2 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010003211 Arteriosclerosis coronary artery Diseases 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 101800000407 Brain natriuretic peptide 32 Proteins 0.000 description 1
- -1 CD34 Proteins 0.000 description 1
- 241000272470 Circus Species 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010020565 Hyperaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010027525 Microalbuminuria Diseases 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010042434 Sudden death Diseases 0.000 description 1
- 208000001871 Tachycardia Diseases 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000998548 Yersinia ruckeri Alkaline proteinase inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 230000003178 anti-diabetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003472 antidiabetic agent Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 208000037849 arterial hypertension Diseases 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 210000000270 basal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 210000005242 cardiac chamber Anatomy 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 239000002771 cell marker Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 210000002358 circulating endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000028831 congenital heart disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008094 contradictory effect Effects 0.000 description 1
- 208000026758 coronary atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000000254 damaging effect Effects 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000994 depressogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000035487 diastolic blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000003205 diastolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000004104 gestational diabetes Diseases 0.000 description 1
- 230000004217 heart function Effects 0.000 description 1
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 201000007119 infective endocarditis Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 208000023589 ischemic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000003475 metalloproteinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000001617 migratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 208000008494 pericarditis Diseases 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000000861 pro-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 208000004124 rheumatic heart disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000011301 standard therapy Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006794 tachycardia Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 238000011870 unpaired t-test Methods 0.000 description 1
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004218 vascular function Effects 0.000 description 1
- 230000006439 vascular pathology Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Область техники, к которой относится изобретениеFIELD OF THE INVENTION
Изобретение относится к медицине, а именно кардиологии, может быть использовано при определении риска сердечно-сосудистой летальности пациентов с хронической сердечной недостаточностью (ХСН) ишемической этиологии, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа, по определению количества прогениторных клеток иммунофенотипа CD34+, CD 133 dim, CD45- в периферической крови. Данный параметр может быть использован в качестве прогностического критерия для оценки вероятности неблагоприятного прогноза по сердечно-сосудистой летальности.The invention relates to medicine, namely cardiology, can be used to determine the risk of cardiovascular mortality in patients with chronic heart failure (CHF) of ischemic etiology, combined with
Уровень техникиState of the art
Хроническая сердечная недостаточность (ХСН) широко распространена в популяции, что представляет собой важную медицинскую, социальную и экономическую проблему. ХСН - это комплексный синдром, представляющий собой исход многих сердечно-сосудистых заболеваний, таких как инфаркт миокарда, приводящий к потере части миокарда, который не восстанавливается за счет эндогенных репаративных процессов; артериальная гипертония, приводящая к развитию диффузного фиброза сердца; воспалительные и аутоиммунные, генетические заболевания миокарда, пороки сердца. Подавляющее число больных с ХСН представлены постинфарктной сердечной недостаточностью. Хотя за последние 20 лет был сделан существенный прогресс в лечении ХСН, прогноз ее остается фатальным, и все виды имеющейся терапии направлены только на ограничение ее прогрессирования. Во многом это обусловлено тем, что важнейшие подгруппы пациентов с ХСН достаточно не исследованы. Это особенно касается пациентов, у которых ХСН сочетается с метаболическими расстройствами, такими как метаболический синдром, сахарный диабет 2 типа (СД2) и ожирение. Известно, что пациенты с ХСН, сочетающейся с инсулинорезистентностью и СД2, характеризуются значительно более тяжелым течением и плохим прогнозом, что диктует необходимость более ранней диагностики такого сочетания и более агрессивного ведения таких больных. Качество и продолжительность жизни больного с ХСН во многом зависят от наличия, выраженности и сочетания так называемых факторов риска (ФР) неблагоприятного прогноза. Объективная риск-стратификация у больных ХСН с учетом независимых ФР не всегда возможна в связи с различной этиологией ХСН, индивидуальными особенностями ее течения, наличием сопутствующей патологии, влияющей на прогностическую ценность ФР. К ФР относят целый ряд показателей, таких как возраст, наличие ИБС, сахарного диабета, тяжесть ХСН, тахикардия, снижение массы тела, низкая фракция изгнания левого желудочка, снижение результатов теста 6-минутной ходьбы, повышение уровней мозгового натрийуретического пептида, мочевой кислоты, креатинина, тропонина, показатели «ремоделирования» камер сердца и пр. [Swedberg К. The task force for the diagnosis and treatment of chronic heart failure of the European Society of Cardiology. Guidelines for the diagnosis and treatment of chronic heart failure: executive summary (update 2005). Eur. Heart J. 2005; 26(22):1115-40].Chronic heart failure (CHF) is widespread in the population, which is an important medical, social and economic problem. CHF is a complex syndrome, which is the outcome of many cardiovascular diseases, such as myocardial infarction, leading to the loss of part of the myocardium, which is not restored due to endogenous reparative processes; arterial hypertension, leading to the development of diffuse fibrosis of the heart; inflammatory and autoimmune, genetic diseases of the myocardium, heart defects. The vast majority of patients with heart failure are represented by post-infarction heart failure. Although significant progress has been made in the treatment of heart failure over the past 20 years, its prognosis remains fatal, and all types of available therapy are aimed only at limiting its progression. This is largely due to the fact that the most important subgroups of patients with heart failure have not been sufficiently investigated. This is especially true for patients in whom CHF is combined with metabolic disorders such as metabolic syndrome,
В последние годы особое внимание привлечено к исследованию клеточных маркеров тяжести различных заболеваний, в том числе сердечно-сосудистых, что обусловлено большим количеством исследований состояния стволовых и прогениторных клеток при различных патологиях и обнаружением связей между количественными и качественными характеристиками различных типов этих клеток и клиническими характеристиками пациентов.In recent years, special attention has been drawn to the study of cellular markers of the severity of various diseases, including cardiovascular, due to a large number of studies on the state of stem and progenitor cells in various pathologies and the discovery of the relationship between the quantitative and qualitative characteristics of various types of these cells and the clinical characteristics of patients .
По современным представлениям ключевую роль в регенеративных процессах в организме играют стволовые клетки, способные к самовоспроизведению, дифференцировке и к воспроизведению различных клеток других видов, то есть к трансформации через этапы клеток-предшественников в высокодифференцированные органо-специфичные клетки, например, в клетки эндотелия сосудов, кардиомиоциты, клетки крови, гепатоциты и другие [Iwami Y., Masuda Н., Asahara Т. Endothelial progenitor cells: past, state of the art, and future. J Cell Mol Med 2004; 8:488-497]. Помимо этого важнейшим механизмом стимуляции процессов регенерации тканей стволовыми и прогениторными клетками является их способность продуцировать большое количество биологически активных молекул, стимулирующих восстановительные процессы в тканях.According to modern concepts, the key role in the regenerative processes in the body is played by stem cells capable of self-reproduction, differentiation and reproduction of various cells of other species, i.e., transformation through the stages of progenitor cells into highly differentiated organ-specific cells, for example, into vascular endothelial cells, cardiomyocytes, blood cells, hepatocytes and others [Iwami Y., Masuda N., Asahara T. Endothelial progenitor cells: past, state of the art, and future. J Cell Mol Med 2004; 8: 488-497]. In addition, the most important mechanism for stimulating tissue regeneration processes by stem and progenitor cells is their ability to produce a large number of biologically active molecules that stimulate regenerative processes in tissues.
Многие, если не все, заболевания сердечно-сосудистой системы связаны с дисфункцией эндотелия сосудов. Особая роль в процессе восстановления эндотелиального слоя и в поддержании его нормальной функции отводится циркулирующим в периферической крови предшественникам эндотелиальных клеток (ПЭК) [Wassmann S., Werner N., Czech Т., Nikening G. Improvement of endothelial function by systemic transfusion of vascular progenitor cells. Circ Res 2006; 99: Е74]. Впервые популяция ПЭК была изолирована из циркулирующей мононуклеарной фракции в 1997 г. Asahara с сотр. [Asahara Т., Murohara Т., Sullivan A. et al. Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis. Science 1997; 275:964-966]. Эти клетки были охарактеризованы авторами как клетки с низкой экспрессией или полным отсутствием на своей поверхности общего лейкоцитарного антигена CD45 и наличием специфичных для предшественников (CD34) и зрелого эндотелия (рецепторы 2 типа к VEGF (VEGF-R2)) клеточных маркеров. В последующем было продемонстрировано, что эти клетки представлены в циркуляции несколькими субпопуляциями, в частности субпопуляция, несущая маркер CD133+, представляет ранние предшественники эндотелиальных клеток, мобилизованные из костного мозга и в определенных условиях способные дифференцироваться в клетки с эндотелиальным фенотипом [Yang С, Zhang Z.H., Li Z.J. et al. Enhancement of neovascularization with cord blood CD133+ cell-derived endothelial progenitor cell transplantation. Thromb Haemost. 2004: 91(6):1202-1212].Many, if not all, diseases of the cardiovascular system are associated with vascular endothelial dysfunction. A special role in the process of restoring the endothelial layer and in maintaining its normal function is assigned to the endothelial cell precursors (PEC) circulating in the peripheral blood [Wassmann S., Werner N., Czech T., Nikening G. Improvement of endothelial function by systemic transfusion of vascular progenitor cells. Circ Res 2006; 99: E74]. For the first time, the PEC population was isolated from the circulating mononuclear fraction in 1997 by Asahara et al. [Asahara T., Murohara T., Sullivan A. et al. Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis. Science 1997; 275: 964-966]. These cells were characterized by the authors as cells with low expression or complete absence on their surface of the common leukocyte antigen CD45 and the presence of specific cell precursors (CD34) and mature endothelium (
Относительно недавно было показано, что увеличение количества циркулирующих предшественников эндотелиальных клеток (ПЭК) может отражать наличие васкулярной патологии, эндотелиальной дисфункции и служить биомаркером заболеваний сосудов, а уменьшение пула ПЭК может приводить к нарушениям адаптивного ангиогенеза. Показано, что метаболический синдром и СД2 могут существенно влиять на количество и функциональные характеристики ПЭК при данных патологиях [Vasa М., Fichtlscherer S., Aicher A. et al. Number and migratory activity of circulating endothelial progenitor cells inversely correlate with risk factors for coronary artery disease. Circ Res. 2001; 89:E1-E7].More recently, it has been shown that an increase in the number of circulating endothelial cell precursors (PECs) may reflect the presence of vascular pathology, endothelial dysfunction and serve as a biomarker of vascular diseases, and a decrease in the PEC pool can lead to impaired adaptive angiogenesis. It was shown that metabolic syndrome and T2DM can significantly affect the number and functional characteristics of PEC in these pathologies [Vasa M., Fichtlscherer S., Aicher A. et al. Number and migratory activity of circulating endothelial progenitor cells inversely correlate with risk factors for coronary artery disease. Circ Res. 2001; 89: E1-E7].
У больных с сердечной недостаточностью часто имеется дисфункция эндотелия [Agnoletti L, Curello S, Bachetti T, Malacarne F, Gaia G, Comini L, Volterrani M, Bonetti P, Parrinello G, Cadei M, Grigolato PG, Ferrari R. Serum from patients with severe heart failure downregulates eNOS and is proapoptotic: role of tumor necrosis factor-alpha. Circulation. 1999 Nov 9;100(19):1983-91]. Однако работ, посвященных исследованию популяций циркулирующих клеток-предшественников при сердечной недостаточности крайне мало и результаты их противоречивы [Shantsila Е, Wrigley BJ, Shantsila А, Тарр LD, Gill PS, Lip GY. Monocyte-derived and CD34+/KDR+endothelial progenitor cells in heart failure. J Thromb Haemost. 2012 Jul; 10(7):1252-61]. Недавно показано, что сахарный диабет 2 типа обладает повреждающим действием на ПЭК и их мобилизацию из «костно-мозговой ниши», что может приводить к снижению количества этих клеток в циркуляции, нарушению их участия в репарации эндотелия сосудов и в ангиогенезе, а следовательно, и в восстановлении тканей после ишемического повреждения [Террег О.М., Galiano R.D., Capla J.M. et al. Human endothelial progenitor cells from type II diabetics exhibit impaired proliferation, adhesion, and incorporation into vascular structures. Circulation. 2002; 106:2781-2786]. Это может приводить к прогрессированию заболеваний ишемической природы и ухудшению их прогноза. Однако способов прогнозирования сердечно-сосудистой летальности у больных с ХСН, ассоциированной с сахарным диабетом, по количеству циркулирующих в крови стволовых и прогениторных клеток не описано.Patients with heart failure often have endothelial dysfunction [Agnoletti L, Curello S, Bachetti T, Malacarne F, Gaia G, Comini L, Volterrani M, Bonetti P, Parrinello G, Cadei M, Grigolato PG, Ferrari R. Serum from patients with severe heart failure downregulates eNOS and is proapoptotic: role of tumor necrosis factor-alpha. Circulation. 1999 Nov 9; 100 (19): 1983-91]. However, there is very little work devoted to the study of populations of circulating precursor cells in heart failure and their results are contradictory [Shantsila E, Wrigley BJ, Shantsila A, Tarr LD, Gill PS, Lip GY. Monocyte-derived and CD34 + / KDR + endothelial progenitor cells in heart failure. J Thromb Haemost. 2012 Jul; 10 (7): 1252-61]. Recently it has been shown that
Из уровня техники известен способ прогнозирования риска сердечно-сосудистой летальности у больных с различными формами хронической сердечной недостаточности по уровню мозгового натрийуретического пептида (NT-proBNP) и тканевого ингибитора матриксных металлопротеаз (TIMP-I) в периферической крови. Повышение уровня NT-proBNP≥1520fmol/ml и TIMP-I≥865ng/mL позволяет выделять среди пациентов с ХСН больных высокого риска, для которых необходимы интенсивное лечение как сердечной недостаточности, так и осложнений (Соломахина Н.И., Беленков Ю.Н. Прогностическое значение тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ-1 (TIMP-I) у больных ХСН // Сердечная недостаточность. - 2010. - №5. - С.281 - 284.; Соломахина Н.И. Уровни NT-proBNP и сердечно-сосудистая смертность у больных хронической сердечной недостаточностью пожилого и старческого возраста // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2009.- №8, S2. - С.303).The prior art method for predicting the risk of cardiovascular mortality in patients with various forms of chronic heart failure by the level of cerebral natriuretic peptide (NT-proBNP) and tissue matrix metalloprotease inhibitor (TIMP-I) in peripheral blood. Increasing the level of NT-proBNP≥1520fmol / ml and TIMP-I≥865ng / mL allows distinguishing among high-risk patients with heart failure who require intensive treatment of both heart failure and complications (Solomakhina N.I., Belenkov Yu.N. The prognostic value of a matrix inhibitor of matrix metalloproteinases-1 (TIMP-I) in patients with heart failure // Heart failure. - 2010. - No. 5. - P.281 - 284 .; Solomakhina NI. Levels of NT-proBNP and cardiovascular mortality in patients with chronic heart failure of the elderly and senile age // Cardiovascular therapist ia and prevention. - 2009.- No. 8, S2. - P.303).
Однако представленный способ не учитывает, что сопутствующие метаболические расстройства, такие как метаболический синдром, ожирение и сахарный диабет 2 типа, могут влиять на прогностическую ценность уровня NT-proBNP (Taylor JA, Christenson RH, Rao K, Jorge M, Gottlieb SS. B-type natriuretic peptide and N-terminal pro B-type natriuretic peptide are depressed in obesity despite higher left ventricular end diastolic pressures. Am Heart J. 2006; 152:1071-1076.; Martin Andreas, Harald Zeisler, Ammon Handisurya, Maximilian В Franz, Michael Gottsauner-Wolf, Michael Wolzt, Alexandra Kautzky-Wilier. N-terminal-pro-brain natriuretic peptide is decreased in insulin dependent gestational diabetes mellitus: a prospective cohort trial. Cardiovasc Diabetol. 2011; 10:28; Susana Gonzalez, Eric S. Kilpatrick, Stephen L. Atkin. The Biological Variation of N-Terminal Pro-Brain Natriuretic Peptide in Postmenopausal Women with Type 2 Diabetes: A Case Control Study. PLoS One. 2012; 7(11):e47191; Henrik Reinhard, Niels Wiinberg, Peter R Hansen, Andreas Kjaer, Claus L Petersen, Kaj Winther, Hans-Henrik Parving, Peter Rossing, Peter К Jacobsen. NT-proBNP levels, atherosclerosis and vascular function in asymptomatic type 2 diabetic patients with microalbuminuria: peripheral reactive hyperaemia index but not NT-proBNP is an independent predictor of coronary atherosclerosis. Cardiovasc Diabetol. 2011; 10:71). Это диктует необходимость поиска новых предикторов неблагоприятного исхода для пациентов с ХСН, сочетающейся с метаболическими расстройствами, прежде всего сахарным диабетом. Помимо этого убедительно показано, что использование нескольких предикторов в дополнение к уровням натрийурептических пептидов позволяет значительно повышать прогнозирование исходов сердечно-сосудистых заболеваний (Zethelius В, Berglund L, Sundstrom J, Ingelsson E, Basu S, Larsson A, Venge P, Arnlov J. Use of multiple biomarkers to improve the prediction of death from cardiovascular causes. N Engl J Med 2008; 358:2107-2116), что делает актуальным разработку новых предикторов неблагоприятного прогноза хронической сердечной недостаточности, особенно при ее сочетании с метаболическими расстройствами, которые могут влиять на прогностическую ценность классических биомаркеров тяжести и прогноза хронической сердечной недостаточности.However, the method presented does not take into account that concomitant metabolic disorders such as metabolic syndrome, obesity and
Раскрытие изобретенияDisclosure of invention
Задачей изобретения является создание нового способа прогнозирования сердечно-сосудистой летальности у больных с хронической сердечной недостаточностью, ассоциированной с сахарным диабетом 2 типа.The objective of the invention is to provide a new method for predicting cardiovascular mortality in patients with chronic heart failure associated with
Техническим результатом, на достижение которого направлено заявленное изобретение, является разработка нового клеточного маркера сердечно-сосудистой летальности у больных с хронической сердечной недостаточностью ишемической этиологии, при ее сочетании с сахарным диабетом.The technical result, to which the claimed invention is directed, is the development of a new cell marker of cardiovascular mortality in patients with chronic heart failure of ischemic etiology, with its combination with diabetes mellitus.
Прогнозирование сердечно-сосудистой летальности у больных с хронической сердечной недостаточностью, ассоциированной с сахарным диабетом 2 типа, основано на измерении, например, с помощью проточной цитофлуориметрии, количества циркулирующих в крови прогениторных клеток определенного иммунофенотипа, а именно - иммунофенотипа CD34+, CD133 dim, CD45- (клетки характеризуются наличием на их поверхности маркера CD34, слабым присутствием маркера CD133 и отсутствием маркера CD45). Снижение количества циркулирующих прогениторных клеток иммунофенотипа CD34+, CD 133 dim, CD45- менее 300 клеток на миллион лейкоцитов у больных с хронической сердечной недостаточностью ишемической этиологии, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа, негативно сказывается на течении хронической сердечной недостаточности и, прежде всего, на показателях выживаемости, и может служить очевидным предиктором сердечно-сосудистой летальности.The prognosis of cardiovascular mortality in patients with chronic heart failure associated with
Краткое описание чертежейBrief Description of the Drawings
Изобретение поясняется чертежами, где на фиг.1 представлен пример детекции субпопуляций предшественников среди мононуклеаров периферической крови. При этом на фиг.1А показано выделение живых клеток на основании соотношения красной (Hoechst-Red) и голубой (Hoechst-Blue) флуоресценции Хехста 33342; на фиг.1Б -выделение мононуклеаров (лифоциты, НК-клетки, моноциты) на сновании светорассеяния, на фиг.1В Идентификация CD34+/CD45-Low предшественников; на фиг.1Г - определение базового уровня флюоресценции клеток в каналах РЕ и PerCP с помощью изотопических иммуноглобулинов; на фиг.1Д - детекция KDR-положительных (РЕ+) и С0133-положительных (PerCP+) клеток.The invention is illustrated by drawings, where figure 1 presents an example of detection of subpopulations of precursors among mononuclear cells of peripheral blood. At the same time on figa shows the selection of living cells based on the ratio of red (Hoechst-Red) and blue (Hoechst-Blue) fluorescence Hoechst 33342; on figb - the allocation of mononuclear cells (lyphocytes, NK cells, monocytes) on the basis of light scattering, figv Identification of CD34 + / CD45-Low precursors; on figg - determination of the baseline level of fluorescence of cells in the channels of PE and PerCP using isotopic immunoglobulins; on fig.1D - detection of KDR-positive (PE +) and C0133-positive (PerCP +) cells.
На фиг.2 представлена диаграмма, демонстрирующая показатели летальности, частоты нефатальных сердечно-сосудистых событий и несердечно-сосудистых событий у больных ХСН ишемического генеза в зависимости от исходного количества циркулирующих прогениторных клеток.Figure 2 presents a diagram showing the mortality rate, the frequency of non-fatal cardiovascular events and non-cardiovascular events in patients with chronic heart failure of ischemic origin, depending on the initial number of circulating progenitor cells.
Осуществление изобретенияThe implementation of the invention
Учитывая, что и сахарный диабет, и сердечная недостаточность сопряжены с развитием дисфункции эндотелия и ишемии тканей, уровень циркулирующих прогениторных клеток, связанный с эндотелиальной дисфункцией и ишемией, может явиться важным биомаркером тяжести заболевания и прогноза у больных, имеющих сочетание этих патологий. Однако этот вопрос пока не был исследован при сердечной недостаточности, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа.Considering that both diabetes mellitus and heart failure are associated with the development of endothelial dysfunction and tissue ischemia, the level of circulating progenitor cells associated with endothelial dysfunction and ischemia can be an important biomarker of disease severity and prognosis in patients with a combination of these pathologies. However, this issue has not yet been investigated in heart failure, combined with
По результатам проведенных исследований был найден критерий, позволяющий с высокой степенью достоверности прогнозировать риск сердечно-сосудистой летальности у пациентов с хронической сердечной недостаточностью ишемической этиологии, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа. В качестве такого критеря выступает количественное содержание циркулирующих в периферической крови прогениторных клеток иммунофенотипа CD34+, CD133 dim, CD45-. При этом снижение количества циркулирующих прогениторных клеток ниже 300 клеток на миллион лейкоцитов принимают в качестве маркера неблагоприятного прогноза течения заболевания, проявляющегося в прогрессировании сердечной недостаточности и увеличении сердечно-сосудистой летальности.Based on the results of the studies, a criterion was found that allows a high degree of certainty to predict the risk of cardiovascular mortality in patients with chronic heart failure of ischemic etiology, combined with
Для измерения количественного содержания циркулирующих в периферической крови прогениторных клеток осуществляют забор периферической крови в пробирку с ЭДТА в качестве антикоагулянта, выделяют мононуклеарную фракцию с помощью раствора Hisopaque-1077 (Sigma-Aldrich, кат. №10771) в соответствии с инструкцией производителя, измеряют количество циркулирующих прогениторных клеток иммунофенотипа CD34+, CD 133 dim, CD45-, например, с помощью проточной цитофлуориметрии и соответствующих флуоресцентно меченных антител, и при обнаружении измеренного количества циркулирующих прогениторных клеток ниже 300 клеток на миллион лейкоцитов делают вывод о неблагоприятном прогнозе течения заболевания, проявляющегося в прогрессировании сердечной недостаточности и увеличении сердечно-сосудистой летальности.To measure the quantitative content of progenitor cells circulating in peripheral blood, peripheral blood is taken into a tube with EDTA as an anticoagulant, the mononuclear fraction is isolated using Hisopaque-1077 solution (Sigma-Aldrich, cat. No. 10771) in accordance with the manufacturer's instructions, the number of circulating progenitor cells of CD34 +, CD 133 dim, CD45- immunophenotype, for example, by flow cytometry and corresponding fluorescently labeled antibodies, and when a measured amount of circus is detected proliferating cells below 300 cells per million leukocytes conclude that the prognosis of the disease is poor, manifested in the progression of heart failure and an increase in cardiovascular mortality.
Краткое описание проведенного исследованияBrief description of the study
В работу были включены 55 пациентов с хронической сердечной недостаточностью, развившейся после острого инфаркта миокарда (ИМ). Средний возраст составил 60,1±6,3 года (возрастной интервал от 40 до 73 лет), 47 мужчин и 8 женщин. У всех пациентов диагностирована сердечная недостаточность II-III функциональный класс (ФК) по классификации Нью-Йоркской Ассоциации Сердца (NYHA) (70% больных со II ФК и 30% - с III ФК по NYHA). У 25 больных из них ХСН сочеталась с сахарным диабетом 2 типа. Фракция выброса (ФВ) левого желудочка у всех больных на момент включения составляла менее 40%.55 patients with chronic heart failure developed after acute myocardial infarction (MI) were included in the work. The average age was 60.1 ± 6.3 years (age range from 40 to 73 years), 47 men and 8 women. All patients were diagnosed with heart failure II-III functional class (FC) according to the classification of the New York Heart Association (NYHA) (70% of patients with FC II and 30% with FC III according to NYHA). In 25 patients, CHF was combined with
Для оценки структурно-функционального состояния сердца всем обследуемым проводилась трансторакальная ЭХО-КГ на ультразвуковом аппарате iE 33 фирмы «Philips». Для повышения точности измерений в каждом случае усредняли значения, полученные в 5 последовательных сердечных циклах. В ходе исследования определяли структурные и функциональные показатели сердца, допплеровские показатели диастолической функции ЛЖ.To assess the structural and functional state of the heart, all examinees underwent transthoracic ECHO-KG on an Philips iE ultrasound machine. To increase the accuracy of measurements in each case, the values obtained in 5 consecutive cardiac cycles were averaged. During the study, structural and functional indicators of the heart, Doppler indices of LV diastolic function were determined.
Критерием исключения служило наличие инфаркта миокарда и инсульта давностью менее 12 месяцев, перикардита, ревматического порока сердца, инфекционного эндокардита, тяжелой сопутствующей патологии (злокачественных заболеваний, хронических заболеваний легких, почечной недостаточности, коллагенозов, заболеваний печени).The exclusion criterion was the presence of myocardial infarction and stroke less than 12 months old, pericarditis, rheumatic heart disease, infectious endocarditis, severe concomitant pathology (malignant diseases, chronic lung diseases, renal failure, collagenoses, liver diseases).
В качестве контрольной группы было обследовано 20 лиц сопоставимого возраста и пола без сердечно-сосудистых заболеваний.As a control group, 20 individuals of comparable age and gender without cardiovascular diseases were examined.
Количество циркулирующих прогениторных клеток (ЦПК) оценивали с помощью цитофлуориметрии в потоке по представленной ниже методике.The number of circulating progenitor cells (CPCs) was estimated by flow cytometry using the following procedure.
Протокол анализа циркулирующих предшественников (маркеры CD45, c-Kit, CD34, KDR, CD133).The analysis protocol of circulating precursors (markers CD45, c-Kit, CD34, KDR, CD133).
Взятие крови из кубитальной вены осуществлялось в утренние часы (между 9-10 ч), натощак, после 10-минутного отдыха и адаптации пациента/донора к окружающей обстановке, в положении сидя на стуле. 10 мл крови забирали в пробирку с ЭДТА в качестве антикоагулянта. Полученный образец крови при комнатной температуре доставляли в лабораторию для дальнейшего анализа. Оценку количества циркулирующих предшественников проводили с использованием метода проточной цитофлюориметрии. Из образцов крови выделяли мононуклеарную фракцию с помощью раствора Hisopaque-1077 (Sigma-Aldrich, кат. №10771) в соответствии с инструкцией производителя.Blood sampling from the cubital vein was carried out in the morning (between 9-10 hours), on an empty stomach, after 10 minutes of rest and adaptation of the patient / donor to the environment, in a sitting position. 10 ml of blood was collected in a tube with EDTA as an anticoagulant. The resulting blood sample at room temperature was delivered to the laboratory for further analysis. The number of circulating precursors was estimated using flow cytometry method. A mononuclear fraction was isolated from blood samples using Hisopaque-1077 solution (Sigma-Aldrich, cat. No. 10771) in accordance with the manufacturer's instructions.
Полученные клетки ресуспендировали в 150 мкл фосфатно-солевого буфера (ФСБ) с 2% бычьим сывороточным альбумином (конечная концентрация ~ 108/мл). Клеточную суспензию разделяли на 2 пробы:The resulting cells were resuspended in 150 μl of phosphate-buffered saline (PBS) with 2% bovine serum albumin (final concentration ~ 10 8 / ml). The cell suspension was divided into 2 samples:
1) пробу для выявления предшественников (100 мкл);1) a sample to detect precursors (100 μl);
2) пробу с изотипическими контролями (50 мкл клеточной суспензии + 50 мкл ФСБ с 2% альбумином).2) a sample with isotypic controls (50 μl of cell suspension + 50 μl of FSB with 2% albumin).
Добавляли по 20 мкл на пробу флуоресцентно-меченные антитела и инкубировали в темном месте при легком перемешивании при комнатной температуре в течение 2 ч. Использовали следующие комбинации антител:20 μl per sample of fluorescently labeled antibodies was added and incubated in a dark place with gentle stirring at room temperature for 2 hours. The following combinations of antibodies were used:
1) CD45-FITC (Beckton Dickinson, BD, кат №555482), KDR-PE (R&D Systems, кат. №FAB357P), CD133-Biot (Miltenyi Biotec, кат №130-090-852), Str-PerCP (Jackson Immunoresearch, кат №016-120-084, добавляли после 1 ч инкубации), CD34-APC (BD, №555824),1) CD45-FITC (Beckton Dickinson, BD, cat. No. 555482), KDR-PE (R&D Systems, cat. No. FAB357P), CD133-Biot (Miltenyi Biotec, cat. No. 130-090-852), Str-PerCP (Jackson Immunoresearch, cat No. 016-120-084, was added after 1 h of incubation), CD34-APC (BD, No. 555824),
2) CD45-FITC (BD, №555482), IgG-PE (BD, №555749), IgG-PerCP (R&D, №IC003C), Str-PerCP (Jackson Immunoresearch, кат №016-120-084, добавляли после 1 ч инкубации), CD34-APC (BD, №555824).2) CD45-FITC (BD, No. 555482), IgG-PE (BD, No. 555749), IgG-PerCP (R&D, No. IC003C), Str-PerCP (Jackson Immunoresearch, cat No. 016-120-084, was added after 1 h incubation), CD34-APC (BD, No. 555824).
По истечении периода окраски антителами разбавляли каждую пробу ФБС до объема 1,5 мл и осаждали центрифугированием при ускорении 300g×10 мин, удаляли супернатант, ресуспендировали в 600 мкл ФСБ (300 мкл для изотипического контроля) и добавляли Хехст 33342 (Invitrogen кат №Н21492) до конечной концентрации 10 мкг/мл. Инкубировали 20-90 мин при комнатной температуре. Анализировали клетки на проточном цитофлюориметре с использованием возбуждения на длинах волн 355, 488 и 635 нм, например проточном цитофлюориметре/сортировщике MoFlo (Beckman Colter, США), или LSR Fortessa (BD). При этом накапливали не менее 2 млн Хехст-положительных событий для первой пробы и не менее 1 млн - для пробы с изотипическими контролями.After the staining period with antibodies, each PBS sample was diluted to a volume of 1.5 ml and precipitated by centrifugation at an acceleration of 300g × 10 min, the supernatant was removed, resuspended in 600 μl of PBS (300 μl for isotypic control) and Hoechst 33342 (Invitrogen Cat No. H21492) was added. to a final concentration of 10 μg / ml. Incubated for 20-90 min at room temperature. Cells were analyzed on a flow cytometer using excitation at wavelengths of 355, 488 and 635 nm, for example, a flow cytometer / sorter MoFlo (Beckman Colter, USA), or LSR Fortessa (BD). At the same time, at least 2 million Hoechst-positive events were accumulated for the first sample and at least 1 million for a sample with isotypic controls.
Анализ данных осуществлялся при помощи программного обеспечения цитометра, (Summit для Beckman Coulter и FACSDiva для BD), или специализированного программного обеспечения FlowJo (Treestar Inc, США) или Kaluza (Beckman Coulter). Анализ проводился по следующей схеме:Data analysis was performed using the cytometer software (Summit for Beckman Coulter and FACSDiva for BD), or specialized software FlowJo (Treestar Inc, USA) or Kaluza (Beckman Coulter). The analysis was carried out according to the following scheme:
1. Выделение фракции живых мононуклеаров крови1. Isolation of a fraction of living blood mononuclear cells
a) На гистограмме Хехст красный (650-690 нм, линейная шкала), Хехст голубой (420-450 нм, линейная шкала) выделяли область живых клеток. Эти клетки характеризовались менее интенсивным окрашиванием и преобладанием голубой компоненты флюоресценции Хехста. Отображение этих клеток предсталено на гистограмме прямого/бокового светорассеяния (Фиг.1А).a) On the histogram Hoechst red (650-690 nm, linear scale), Hoechst blue (420-450 nm, linear scale), the region of living cells was identified. These cells were characterized by less intense staining and the predominance of the blue Hoechst fluorescence component. The display of these cells is presented on the histogram of direct / side light scattering (Figa).
b) На гистограмме (прямое, боковое светорассеяние) выделяли область лимфоцитов/НК-клеток/моноцитов (мононуклеаров) и отображали эти клетки на гистограмме [CD45, CD34] (Фиг.1Б).b) On the histogram (direct, lateral light scattering), the region of lymphocytes / NK cells / monocytes (mononuclear cells) was isolated and these cells were displayed on the histogram [CD45, CD34] (Fig. 1B).
2. Определение CD34+ предшественников и содержания среди них KDR+ и CD133+ клеток2. Determination of CD34 + precursors and the content of KDR + and CD133 + cells among them
a) На гистограмме [CD45, CD34] выделяли клетки с высокой экспрессией CD34 и пониженной экспрессией CD45 (CD34+/CD45-Low, Фиг.1В). Эти клетки представляют собой большинство циркулирующих предшественников. Рассчитывали число CD34+/CD45-Low клеток на 1 миллион мононуклеаров, выделенных в п.1b. Отображали эти клетки на гистограмме [KDR, CD133] или [IgG-PE, IgG-PerCP] для изотипического контроля.a) On the histogram [CD45, CD34], cells with high expression of CD34 and reduced expression of CD45 (CD34 + / CD45-Low, Fig. 1B) were isolated. These cells represent the majority of circulating precursors. The number of CD34 + / CD45-Low cells per 1 million mononuclear cells isolated in item 1b was calculated. These cells were displayed on a histogram of [KDR, CD133] or [IgG-PE, IgG-PerCP] for isotypic control.
b) С помощью пробы с изотипическим контролем определяли верхнюю границу базовой флюоресценции клеток в каналах РЕ и PerCP (Фиг.1Г). На гистограмме [KDR-PE, CD133-PerCP] выделяли клетки, интенсивность флюоресценции которых в каналах РЕ и PerCP превышала базовую флюоресценцию (Рис.1Д). Рассчитывли, какой % из CD34+ клеток экспрессирует KDR и CD133.b) Using a test with isotypic control, the upper limit of the basal cell fluorescence in the PE and PerCP channels was determined (Fig. 1G). On the histogram [KDR-PE, CD133-PerCP], cells were isolated whose fluorescence intensity in the PE and PerCP channels exceeded the basal fluorescence (Fig. 1E). It was calculated which% of the CD34 + cells expresses KDR and CD133.
Воспроизводимость и контролиReproducibility and controls
CD34+ CD45-Low популяция практически всегда четко различима и обладает интенсивной окраской CD34. Среди 120 образцов мононуклеаров, проанализированных на Факультете фундаментальной медицины МГУ им. М.В.Ломоносова, в 98,3% из них удалось четко различить эту популяцию клеток. В случае, когда популяция неразличима, проверяли юстировку прибора и корректность регистрации в канале АРС. Если юстировка верна и параметры регистрации в канале АРС в норме, осуществляли замену антитела к CD34. Если даже с новыми антителами популяция CD34+ CD45-Low не регистрировалась или регистрировалась не четко, проверяли все реагенты, используемые в пробоподготовке, и при необходимости их заменяли.CD34 + CD45-Low population is almost always clearly distinguishable and has an intense color CD34. Among 120 samples of mononuclear cells analyzed at the Faculty of Fundamental Medicine of Moscow State University M.V. Lomonosov, in 98.3% of them it was possible to clearly distinguish this population of cells. In the case when the population is indistinguishable, the alignment of the device and the correctness of registration in the APC channel were checked. If the alignment is correct and the registration parameters in the APC channel are normal, the anti-CD34 antibody is replaced. If even with new antibodies, the CD34 + CD45-Low population was not registered or was not clearly registered, all reagents used in sample preparation were checked and replaced if necessary.
Отрицательными контролями покраски на KDR, c-Kit, CD 133 служат клетки, окрашенные изотипическими антителами, конъюгированные с соответствующей специфическим антителам флюоресцентной меткой (Стерпавидин-РPerCP для CD133). Положительный контроль для CD34 не требуется т.к. присутствует практически в каждом образце. CD133 экспрессирован почти на всех CD34+ CD45-Low клетках, хотя и в меньшей степени. Сравнение уровня интенсивности свечения PerCP в изотипическом контроле и в пробе, окрашенной на CD133, позволяет понять, есть ли специфическое окрашивание CD133. Положительным контролем окрашивания на KDR являются CD45+ моноциты, т.к. они несут на поверхности все эти антигены, хотя и в умеренном количестве.Negative controls for staining with KDR, c-Kit, CD 133 are cells stained with isotypic antibodies conjugated to a fluorescent label corresponding to specific antibodies (Sterpavidin-PerCP for CD133). Positive control is not required for CD34. present in almost every sample. CD133 is expressed on almost all CD34 + CD45-Low cells, although to a lesser extent. Comparison of the level of intensity of luminescence of PerCP in the isotypic control and in the sample stained for CD133 allows us to understand whether there is a specific staining of CD133. A positive control for staining for KDR are CD45 + monocytes, as they carry all these antigens on the surface, albeit in moderation.
Надежность и достоверность подсчета популяций была оценена при помощи параллельной пробоподготовки, окраски и анализа двух проб из одного исходного образца крови. При этом различия по относительному содержанию CD34+ CD45-Low клеток составляли менее 10%.The reliability and reliability of population counting was evaluated using parallel sample preparation, staining and analysis of two samples from the same initial blood sample. The differences in the relative content of CD34 + CD45-Low cells were less than 10%.
Статистическую обработку всех результатов исследования осуществляли с помощью пакетов статистических программ Microsoft Excel 2003, STATISTICA 6.0, SPSS, реализованных на PC IBM Pentium IV. Для проведения сравнения при нормальном распределении переменных применяли параметрический метод (непарный t-тест), при отклонении от нормального - непараметрический (тест Манна-Уитни); величины выражали как среднее±стандартное отклонение. Кумулятивная выживаемость исследовалась методом Каплана-Мейера, различия между группами оценивали с учетом критерия Уилкоксона. Частоту неблагоприятных событий в группах сравнивали с помощью дисперсионного анализа (односторонний критерий Фишера).Statistical processing of all research results was carried out using the statistical software packages Microsoft Excel 2003, STATISTICA 6.0, SPSS, implemented on an IBM Pentium IV PC. For comparison, the parametric method (unpaired t-test) was used for the normal distribution of variables, and the nonparametric method (Mann-Whitney test) was used for deviation from the normal one; values were expressed as mean ± standard deviation. Cumulative survival was studied using the Kaplan-Meyer method, differences between groups were evaluated taking into account the Wilcoxon criterion. The frequency of adverse events in the groups was compared using analysis of variance (one-way Fisher test).
Больных наблюдали в течение 3-х лет в НКО ФГБУ РКНПК МЗ РФ от начала и до конца испытания или до момента летального исхода каждого конкретного больного.Patients were observed for 3 years in the NPO FGBU RKNPK Ministry of Health of the Russian Federation from the beginning to the end of the test or until the death of each individual patient.
Все больные находились на многокомпанентной стандартной терапии по поводу ХСН и ИБС, больные с сахарным диабетом получали соответствующую антидиабетическую терапию.All patients underwent multicomponent standard therapy for heart failure and coronary heart disease, patients with diabetes received appropriate antidiabetic therapy.
В контрольной группе за период наблюдения не отмечено ни одного случая возникновения сердечно-сосудистого заболевания.In the control group for the observation period, not a single case of cardiovascular disease was noted.
У больных ХСН летальных исходов было 3 - в результате сердечно-сосудистых причин, а именно - 2 случая внезапной смерти на фоне декомпенсации ХСН и один случай смерти в результате декомпенсации ХСН. Все летальные исходы за время наблюдения были у больных с ХСН, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа.In patients with CHF, there were 3 deaths due to cardiovascular causes, namely, 2 cases of sudden death on the background of CHF decompensation and one death case as a result of CHF decompensation. All deaths during the follow-up were in patients with heart failure, combined with
В 11 случаях были нелетальные сердечно-сосудистые события - повторные госпитализации, из них у 6 больных по поводу декомпенсации ХСН, у 5 больных по поводу прогрессирования ИБС (развитие острого коронарного синдрома, потребовавшего интраваскулярной реваскуляризации - стентирования). У 4 больных причиной госпитализации была декомпенсация сахарного диабета.In 11 cases there were non-lethal cardiovascular events - repeated hospitalizations, of which 6 patients had decompensated heart failure, 5 patients had progressive coronary heart disease (the development of acute coronary syndrome requiring intravascular revascularization - stenting). In 4 patients, the cause of hospitalization was decompensation of diabetes mellitus.
Трехлетняя выживаемость в общей группе ХСН составила 94% при 100% выживаемости в группе контроля. При этом в подгруппе ХСН с сопутствующим сахарным диабетом 2 типа трехлетняя выживаемость составила 88% при 100% выживаемости в группе ХСН без сахарного диабета.Three-year survival in the total group of CHF was 94%, with 100% survival in the control group. Moreover, in the subgroup of CHF with
Количество ЦПК у больных контрольной группы составило в среднем 649.9±276.8 клеток на миллион лейкоцитов, у всех больных с ХСН - 793.0±456.0 клеток на миллион лейкоцитов.The number of CPC in patients of the control group averaged 649.9 ± 276.8 cells per million leukocytes, in all patients with heart failure - 793.0 ± 456.0 cells per million leukocytes.
При разделении всех больных с ХСН на две группы - больных со стабильным течением без повторных госпитализаций и летальных исходов и больных с прогрессирующим течением и повторными госпитализациями и летальными исходами - обнаружено, что уровень ЦПК в первой группе составил 634.9±415.5 клеток на миллион лейкоцитов, а во второй - 460.8±411.3 клеток на миллион лейкоцитов, p>0,05, то есть была только тенденция к более большему количеству ЦПК у больных ХСН со стабильным течением.When dividing all patients with CHF into two groups — patients with a stable course without repeated hospitalizations and fatal outcomes and patients with a progressive course and repeated hospitalizations and fatal outcomes — it was found that the CPC level in the first group was 634.9 ± 415.5 cells per million leukocytes, and in the second, 460.8 ± 411.3 cells per million leukocytes, p> 0.05, that is, there was only a tendency to a greater number of CPC in patients with chronic heart failure with a stable course.
У больных с летальными исходами количество ЦПК в начале исследования составило 149.3±92.7 клеток на миллион лейкоцитов, а у всех остальных больных, включая случаи всех госпитализаций и стабильное течение ХСН - 610.5±413.7 клеток на миллион лейкоцитов, то есть было более чем в 4 раза ниже (p<0,01). При этом уровень ЦПК у больных со всеми случаями госпитализаций по поводу сердечно-сосудистых событий и декомпенсации сахарного диабета составил в среднем 554.3±426.1 клеток на миллион лейкоцитов, что также было выше значения у больных с летальными исходами, но существенно не отличалось от больных со стабильным течением ХСН. У больных со стабильным течением количество ЦПК составило 634.9±415.5 клеток, что более чем в 4 раза выше, чем у больных с летальными исходами ХСН (p<0,05). Учитывая значительное снижение количества ЦПК у больных, у которых в течение трехлетнего наблюдения наблюдались летальные исходы ХСН, был проведен анализ всех исходов ХСН в зависимости от исходного уровня ЦПК.In patients with fatal outcomes, the number of CPCs at the beginning of the study was 149.3 ± 92.7 cells per million leukocytes, and in all other patients, including cases of all hospitalizations and a stable course of heart failure, it was 610.5 ± 413.7 cells per million leukocytes, i.e. more than 4 times lower (p <0.01). At the same time, the CPC level in patients with all cases of hospitalizations for cardiovascular events and decompensation of diabetes mellitus amounted to an average of 554.3 ± 426.1 cells per million leukocytes, which was also higher than in patients with fatal outcomes, but did not significantly differ from patients with stable during CHF. In patients with a stable course, the number of CPCs was 634.9 ± 415.5 cells, which is more than 4 times higher than in patients with fatal heart failure (p <0.05). Given the significant reduction in the number of CPCs in patients who had fatal heart failure during a three-year follow-up, an analysis of all heart failure outcomes was performed depending on the initial level of CPC.
Для этого все больные с ХСН были разделены на группы в зависимости от количества циркулирующих прогениторных клеток. В первую группу вошли пациенты с ХСН, у которых количество ЦПК было ниже максимального разброса этого показателя в группе контроля (относительно здоровые люди) - менее наименьшего показателя в группе контроля. Таких больных было 12. Количество ЦПК у них было менее 300 клеток на миллион лейкоцитов. 43 больных составили группу, у которой исходный уровень ЦПК был в пределах разброса в группе контроля и выше. Обе группы были сопоставимы по возрасту, полу, тяжести ХСН и др. показателям.For this, all patients with CHF were divided into groups depending on the number of circulating progenitor cells. The first group included patients with heart failure, in whom the number of CPC was below the maximum dispersion of this indicator in the control group (relatively healthy people) - less than the smallest indicator in the control group. There were 12 such patients. The number of CPCs in them was less than 300 cells per million leukocytes. 43 patients constituted a group in which the initial level of CPC was within the scatter in the control group and higher. Both groups were comparable in age, gender, severity of heart failure, and other indicators.
В первой группе больных с ХСН и исходно сниженным количеством ЦПК дожитие в течение 3 лет наблюдения с учетом сердечно-сосудистой смертности составило 75%, что достоверно ниже, чем в группе больных ХСН с исходно нормальным уровнем ЦПК (100%) (p<0,05). Среди остальных неблагоприятных событий в группе со сниженным исходно количеством ЦПК было три госпитализации в связи с декомпенсацией ХСН и одна - в связи с декомпенсацией сахарного диабета. Ни одной госпитализации в связи с прогрессированием ИБС (острым коронарным синдромом или повторным инфарктом миокарда не наблюдалось). В целом неблагоприятных событий в этой группе было 7, включая случаи смерти, что составило 58,3%, сердечно-сосудистых событий было 6, что составило 50%, 1 госпитализация было в связи с декомпенсацией сахарного диабета.In the first group of patients with CHF and an initially reduced amount of CPC, the survival for 3 years of observation, taking into account cardiovascular mortality, was 75%, which is significantly lower than in the group of patients with CHF with an initially normal level of CPC (100%) (p <0, 05). Among the remaining adverse events in the group with an initially reduced amount of CPC, there were three hospitalizations in connection with decompensation of heart failure and one in connection with decompensation of diabetes mellitus. Not a single hospitalization due to the progression of coronary heart disease (acute coronary syndrome or recurrent myocardial infarction was observed). In general, there were 7 adverse events in this group, including deaths, which amounted to 58.3%, cardiovascular events were 6, which amounted to 50%, 1 hospitalization was due to decompensation of diabetes mellitus.
В группе больных с ХСН, у которых исходно уровень ЦПК был в пределах разброса в контрольной группе или превышал его, за 3 года наблюдения не отмечено ни одного летального исхода, 5 госпитализаций по поводу развития острого коронарного синдрома, 3 госпитализации по поводу декомпенсации ХСН и 3 по поводу декомпенсации сахарного диабета. Всего 11 неблагоприятных событий за 3 года наблюдения (25,6%), что было в два раза меньше, чем в группе со сниженным исходным количеством ЦПК (p<0,02). Полученные результаты показывают, что у больных ХСН с исходно сниженным количеством ЦПК (ниже 300 клеток на миллион лейкоцитов) с высокой достоверностью более часто наблюдаются летальные исходы, связанные с прогрессированием ХСН, чем у больных с исходно нормальным уровнем ЦПК. Снижение ЦПК ниже 300 клеток на миллион лейкоцитов было связано с возрастанием летальности от сердечно-сосудистых причин на 25% (выживаемость в группе с низким количеством ЦПК - 75%, у остальных больных, включая больных с прогрессирующим течением - 100% при 0% летальности за 3 года), различия достоверны, p<0,01 с учетом критерия Уилкоксона-Манна-Уитни и одностороннего теста Фишера.In the group of patients with heart failure whose initial level of CPC was within the scatter in the control group or exceeded it, over 3 years of follow-up there was not a single fatal outcome, 5 hospitalizations for the development of acute coronary syndrome, 3 hospitalizations for decompensation of heart failure and 3 about decompensation of diabetes. A total of 11 adverse events over 3 years of observation (25.6%), which was two times less than in the group with a reduced initial amount of CPC (p <0.02). The results show that in patients with heart failure with an initially reduced amount of CPC (below 300 cells per million leukocytes), fatal outcomes associated with progression of heart failure are more often observed with higher reliability than in patients with an initially normal level of CPC. A decrease in CPC below 300 cells per million leukocytes was associated with an increase in mortality from cardiovascular causes by 25% (survival in the group with a low number of CPC is 75%, in other patients, including patients with a progressive course, it is 100% at 0% mortality per 3 years), the differences are significant, p <0.01, taking into account the Wilcoxon-Mann-Whitney criterion and the one-way Fisher test.
При оценке данных по всем сердечно-сосудистым событиям (сердечно-сосудистая летальность, острый коронарный синдром, госпитализации по поводу декомпенсации ХСН), исключая госпитализации по поводу декомпенсации сахарного диабета, у больных с исходно низкими значениями ЦПК их было 50% при 18, 6% у больных с нормальными и повышенными значениями ЦПК (p<0,01). Причем следует подчеркнуть, что в группе с низкими значениями ЦПК не было ни одного случая острого коронарного синдрома, а все нелетальные сердечно-сосудистые события были представлены декомпенсацией ХСН. В то же время у больных с нормальным и повышенным уровнем ЦПК среди нелетальных сердечно-сосудистых событий более половины составило развитие острого коронарного синдрома, потребовавшего интраваскулярной реваскуляризации (стентирования).When evaluating data on all cardiovascular events (cardiovascular mortality, acute coronary syndrome, hospitalization for decompensation of heart failure), excluding hospitalizations for decompensation of diabetes mellitus, in patients with initially low values of CPC they were 50% at 18, 6% in patients with normal and elevated CPK values (p <0.01). Moreover, it should be emphasized that in the group with low CPC values there was not a single case of acute coronary syndrome, and all non-lethal cardiovascular events were represented by decompensation of heart failure. At the same time, in patients with normal and elevated levels of CPC among non-lethal cardiovascular events, more than half was the development of acute coronary syndrome, which required intravascular revascularization (stenting).
ХСН, возникающая после перенесенного инфаркта миокарда, является результатом процесса постинфарктного ремоделирования сердца. Развитие некроза части миокарда и последующее формирование рубцовой ткани приводит к изменению формы, размеров и толщины стенок левого желудочка сердца - их истончению в зоне рубца и гипертрофии неповрежденного участка стенки миокарда в ответ на повышенную гемодинамическую нагрузку. Изменение формы левого желудочка приводит к снижению его насосной функции, что и ведет к развитию ХСН. Снижение показателя насосной функции - фракции выброса левого желудочка - всегда связано с ухудшением прогноза. С другой стороны на процесс ремоделирования сердца и его восстановления после инфаркта может оказывать влияние уровень адаптивного ангиогенеза и функция эндотелия, на которые, в частности, могут оказывать влияние циркулирующие прогениторные клетки, которые могут мобилизоваться из костного мозга в ответ на факторы роста и цитокины, секретируемые клетками поврежденного миокарда, выходить в кровоток и по механизму хоуминга приходить в поврежденный миокард, где они могут оказывать эффекты, способствующие регенерации/репарации миокарда: встраиваться в поврежденный эндотелий и улучшать его функцию, участвовать в ангио-васкулогенезе и улучшать кровоснабжение миокарда, а также, что немаловажно, секретировать широкий набор факторов роста и цитокинов, улучшающих функциональное состояние кардиомиоцитов и подавляющих их апоптоз, что способствует улучшению функции сердца и препятствует прогрессированию сердечной недостаточности. Поэтому снижение количества ЦПК, которое вероятнее всего происходит в результате нарушений их мобилизации из костного мозга под влиянием сопутствующего сахарного диабета, может вносить существенный вклад в прогноз больных с ХСН, особенно при ее сочетании с сахарным диабетом 2 типа.CHF that occurs after a myocardial infarction is the result of postinfarction remodeling of the heart. The development of necrosis of part of the myocardium and the subsequent formation of scar tissue leads to a change in the shape, size and thickness of the walls of the left ventricle of the heart - their thinning in the scar zone and hypertrophy of the undamaged portion of the myocardial wall in response to increased hemodynamic load. Changing the shape of the left ventricle leads to a decrease in its pumping function, which leads to the development of heart failure. A decrease in the pumping function indicator - ejection fraction of the left ventricle - is always associated with a worsening prognosis. On the other hand, the process of heart remodeling and its recovery after a heart attack can be affected by the level of adaptive angiogenesis and endothelial function, which, in particular, can be affected by circulating progenitor cells that can be mobilized from the bone marrow in response to growth factors and cytokines secreted cells of the damaged myocardium, enter the bloodstream and by the mechanism of homing come into the damaged myocardium, where they can have effects that contribute to the regeneration / repair of the myocardium: to adapt to damaged endothelium and improve its function, participate in angio-vasculogenesis and improve myocardial blood supply, and also, importantly, secrete a wide range of growth factors and cytokines that improve the functional state of cardiomyocytes and suppress their apoptosis, which helps to improve heart function and inhibits progression heart failure. Therefore, the decrease in the number of CPCs, which most likely occurs as a result of violations of their mobilization from the bone marrow under the influence of concomitant diabetes mellitus, can make a significant contribution to the prognosis of patients with heart failure, especially when combined with
Таким образом, снижение количества циркулирующих прогениторных клеток (иммунофенотипа CD34+, CD133 dim, CD45-) менее 300 клеток на миллион лейкоцитов у больных ХСН ишемической этиологии, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа, негативно сказывается на течении ХСН и прежде всего на показателях выживаемости и может служить очевидным предиктором сердечно-сосудистой летальности.Thus, a decrease in the number of circulating progenitor cells (immunophenotype CD34 +, CD133 dim, CD45-) of less than 300 cells per million leukocytes in patients with chronic heart failure of ischemic etiology, combined with
Способ прогнозирования сердечно-сосудистой летальности по уровню ЦПК апробирован в научно-консультативном отделе НИИ кардиологии им. А.Л. Мясникова ФГБУ «РКНПК» МЗ РФ. Он дал достоверно положительные результаты и найдет применение в медицинской практике.A method for predicting cardiovascular mortality by CPC level has been tested in the scientific advisory department of the Cardiology Institute named after A.L. Myasnikov Federal State Budgetary Institution "RKNPK" Ministry of Health of the Russian Federation. He gave significantly positive results and will find application in medical practice.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013129365/15A RU2531947C1 (en) | 2013-06-27 | 2013-06-27 | Method for prediction of risk of cardiovascular mortality in patients suffering from chronic ischemic heart failure combined with type 2 diabetes mellitus |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013129365/15A RU2531947C1 (en) | 2013-06-27 | 2013-06-27 | Method for prediction of risk of cardiovascular mortality in patients suffering from chronic ischemic heart failure combined with type 2 diabetes mellitus |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2531947C1 true RU2531947C1 (en) | 2014-10-27 |
Family
ID=53382156
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013129365/15A RU2531947C1 (en) | 2013-06-27 | 2013-06-27 | Method for prediction of risk of cardiovascular mortality in patients suffering from chronic ischemic heart failure combined with type 2 diabetes mellitus |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2531947C1 (en) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2641843C2 (en) * | 2016-05-31 | 2018-01-22 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ульяновский государственный университет" | Method for prediction of risk of death for patients with acute decompensation of chronic cardiac insufficiency |
| RU2687067C1 (en) * | 2017-05-30 | 2019-05-07 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр комплексного изучения Арктики имени академика Н.П. Лавёрова Российской академии наук ФГБУН ФИЦКИА РАН | Method of early prognosis of cardiovascular pathology in men who worked by rotating scheme in the arctic region |
| RU2748529C1 (en) * | 2020-09-01 | 2021-05-26 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр кардиологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ кардиологии" Минздрава России) | Method for determining etiology of chronic heart failure |
| CN113640516A (en) * | 2021-08-16 | 2021-11-12 | 天津医科大学总医院 | Application of peripheral blood EPCs as a predictor of survival time in the elderly |
| RU2790190C1 (en) * | 2021-11-18 | 2023-02-15 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Иркутский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for predicting the risk of decompensated heart failure against the background of rheumatoid arthritis |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2191544C1 (en) * | 2001-10-04 | 2002-10-27 | Московская медицинская академия им. И.М.Сеченова | Method for predicting complications and lethal outcomes in patients suffering from cardiac insufficiency |
| RU2444981C1 (en) * | 2010-08-09 | 2012-03-20 | Государственное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "Иркутский государственный институт усовершенствования врачей Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of predicting chronic heart failure progressing |
-
2013
- 2013-06-27 RU RU2013129365/15A patent/RU2531947C1/en active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2191544C1 (en) * | 2001-10-04 | 2002-10-27 | Московская медицинская академия им. И.М.Сеченова | Method for predicting complications and lethal outcomes in patients suffering from cardiac insufficiency |
| RU2444981C1 (en) * | 2010-08-09 | 2012-03-20 | Государственное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "Иркутский государственный институт усовершенствования врачей Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of predicting chronic heart failure progressing |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| АКОПЯН Ж.А. и др. Влияние высокой концентрации глюкозы на способность мезенхимальных стромальных клеток контролировать рост кровеносных сосудов // Сахарный диабет, 2011, N2, [он-лайн], [найдено 06.05.2014]. Найдено из Интернет: < URL: http://cyberleninka.ru/article/n/vliyanie-vysokoy-kontsentratsii-glyukozy-na-sposobnost-mezenhimalnyh-stromalnyh-kletok-kontrolirovat-rost-krovenosnyh-sosudov. ZETHELIUS B. et al. Use of Multiple Biomarkers to Improve the Prediction of Death from Cardiovascular Causes // N Engl J Med., 2008, May, 15;358(20):2107-16 * |
| КОЧЕГУРА Т.Н. И ДР. Влияние сопутствующего сахарного дибета 2 типа на количество циркулирующих прогениторных клеток у больных с ишемической кардиомиопатией // Сахарный диабет, 2011, N3, стр. 36-43. * |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2641843C2 (en) * | 2016-05-31 | 2018-01-22 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ульяновский государственный университет" | Method for prediction of risk of death for patients with acute decompensation of chronic cardiac insufficiency |
| RU2687067C1 (en) * | 2017-05-30 | 2019-05-07 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр комплексного изучения Арктики имени академика Н.П. Лавёрова Российской академии наук ФГБУН ФИЦКИА РАН | Method of early prognosis of cardiovascular pathology in men who worked by rotating scheme in the arctic region |
| RU2748529C1 (en) * | 2020-09-01 | 2021-05-26 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр кардиологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ кардиологии" Минздрава России) | Method for determining etiology of chronic heart failure |
| CN113640516A (en) * | 2021-08-16 | 2021-11-12 | 天津医科大学总医院 | Application of peripheral blood EPCs as a predictor of survival time in the elderly |
| CN113640516B (en) * | 2021-08-16 | 2024-05-10 | 天津医科大学总医院 | Application of peripheral blood EPCs as life time prediction marker for old and elderly people |
| RU2790190C1 (en) * | 2021-11-18 | 2023-02-15 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Иркутский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for predicting the risk of decompensated heart failure against the background of rheumatoid arthritis |
| RU2796311C1 (en) * | 2022-05-19 | 2023-05-22 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук"(Томский НИМЦ) | Method for predicting the progression of heart failure in patients with obstructive sleep apnea syndrome |
| RU2828974C1 (en) * | 2024-05-22 | 2024-10-21 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Казанский Государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for predicting clinical course of chronic heart failure in patients with ischemic heart disease |
| RU2845329C1 (en) * | 2025-02-24 | 2025-08-15 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Method for determining progression of cardiac failure of ischemic genesis |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Scheubel et al. | Age-dependent depression in circulating endothelial progenitor cells inpatients undergoing coronary artery bypass grafting | |
| Lombardo et al. | Type 2 diabetes mellitus impairs the maturation of endothelial progenitor cells and increases the number of circulating endothelial cells in peripheral blood | |
| Langley et al. | Extracellular matrix proteomics identifies molecular signature of symptomatic carotid plaques | |
| Kalay et al. | The relationship between inflammation and slow coronary flow: increased red cell distribution width and serum uric acid levels | |
| Foris et al. | Biomarkers in pulmonary hypertension: what do we know? | |
| Sičaja et al. | Red blood cell distribution width as a prognostic marker of mortality in patients on chronic dialysis: a single center, prospective longitudinal study | |
| Shrestha et al. | Renal Dysfunction Is a Stronger Determinant of Systemic Neutrophil Gelatinase–Associated Lipocalin Levels Than Myocardial Dysfunction in Systolic Heart Failure | |
| CA2920652C (en) | Methods and kits for predicting the risk of having a cardiovascular disease or event | |
| Quesnel et al. | Alveolar fibroblasts in acute lung injury: biological behaviour and clinical relevance | |
| Wekesa et al. | Predicting carotid artery disease and plaque instability from cell-derived microparticles | |
| Santos-Gomes et al. | An overview of circulating pulmonary arterial hypertension biomarkers | |
| RU2531947C1 (en) | Method for prediction of risk of cardiovascular mortality in patients suffering from chronic ischemic heart failure combined with type 2 diabetes mellitus | |
| JP2014517313A (en) | Systems and methods for cytomic vascular health profiling | |
| Zorkun et al. | Determinants of coronary collateral circulation in patients with coronary artery disease | |
| JP7403162B2 (en) | How to predict response to cardiovascular regeneration | |
| Gorog et al. | First direct comparison of platelet reactivity and thrombolytic status between Japanese and Western volunteers: possible relationship to the “Japanese paradox” | |
| Golab-Janowska et al. | Elevated inflammatory parameter levels negatively impact populations of circulating stem cells (CD133+), early endothelial progenitor cells (CD133+/VEGFR2+), and fibroblast growth factor in stroke patients | |
| Galati et al. | Circulating dendritic cells are severely decreased in idiopathic pulmonary fibrosis with a potential value for prognosis prediction | |
| JP2012531605A (en) | Method for predicting cardiovascular mortality risk | |
| Introcaso et al. | Improvement of neutrophil gelatinase-associated lipocalin sensitivity and specificity by two plasma measurements in predicting acute kidney injury after cardiac surgery | |
| US20100173339A1 (en) | Platelet activation markers as indicators for anti-platelet therapy | |
| EP3724662A1 (en) | Circulating angiopoietin-2 (ang-2) and insulin-like growth factor-binding protein 7 (igfbp7) for the prediction of stroke | |
| Martínez-Sales et al. | Circulating endothelial cells in patients with heart failure and left ventricular dysfunction | |
| Xu et al. | [Retracted] Changes of Serum D‐Dimer, NT‐proBNP, and Troponin I Levels in Patients with Acute Aortic Dissection and the Clinical Significance | |
| JP2013228229A (en) | Inspection method of cardiovascular event onset risk |