RU2520346C2 - Pharmaceutical composition for treatment and prophylaxis of bacterial infection - Google Patents
Pharmaceutical composition for treatment and prophylaxis of bacterial infection Download PDFInfo
- Publication number
- RU2520346C2 RU2520346C2 RU2012141906/10A RU2012141906A RU2520346C2 RU 2520346 C2 RU2520346 C2 RU 2520346C2 RU 2012141906/10 A RU2012141906/10 A RU 2012141906/10A RU 2012141906 A RU2012141906 A RU 2012141906A RU 2520346 C2 RU2520346 C2 RU 2520346C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pharmaceutical composition
- bacteriophages
- bacteriophage
- sodium
- treatment
- Prior art date
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 6
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 title claims 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 title claims 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 title 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 claims abstract description 38
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 10
- 239000007788 liquid Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims abstract description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims abstract description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract 2
- -1 sodium disubstituted phosphate Chemical class 0.000 claims description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 abstract 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical class [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 13
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 3
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 2
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 2
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 2
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 2
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 2
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 1
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 1
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001430197 Mollicutes Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 102000029797 Prion Human genes 0.000 description 1
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 241001138501 Salmonella enterica Species 0.000 description 1
- 241001354013 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis Species 0.000 description 1
- 241000607726 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Heidelberg Species 0.000 description 1
- 241000607128 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Infantis Species 0.000 description 1
- 241001477038 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Newlands Species 0.000 description 1
- 241001135250 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Oranienburg Species 0.000 description 1
- 241000531795 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Paratyphi A Species 0.000 description 1
- 241000577483 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Paratyphi B Species 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- BDKZHNJTLHOSDW-UHFFFAOYSA-N [Na].CC(O)=O Chemical compound [Na].CC(O)=O BDKZHNJTLHOSDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000003831 antifriction material Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 1
- AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N oxazine, 1 Chemical compound C([C@@H]1[C@H](C(C[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)N(C)C)[C@H](O)C[C@]21C)=O)CC1=CC2)C[C@H]1[C@@]1(C)[C@H]2N=C(C(C)C)OC1 AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000011265 semifinished product Substances 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к производству медико-биологических препаратов, и может быть использовано при получении бактериофагов.The invention relates to biotechnology, in particular the production of biomedical preparations, and can be used to obtain bacteriophages.
В настоящее время на территории Российской Федерации наблюдается рост спроса на лекарственные препараты, содержащие бактериофаги. Как следствие является актуальной проблема массового и безопасного промышленного получения больших количеств различных бактериофагов.Currently, in the Russian Federation, there is an increase in demand for drugs containing bacteriophages. As a consequence, the urgent problem of mass and safe industrial production of large quantities of various bacteriophages.
Вопросы безопасности используемых биологических препаратов стоят перед всеми производителями в данной области промышленности. Известные технологии производства бактериофагов используют различные продукты животного происхождения, что может привести как к аллергизации, так и возможному заражению посторонними вирусами животных, микоплазмами и прионами, содержащимися в продуктах животных.The safety issues of biological products used are faced by all manufacturers in this industry. Known technologies for the production of bacteriophages use various products of animal origin, which can lead to both allergization and possible infection with extraneous animal viruses, mycoplasmas and prions contained in animal products.
Наиболее близкой к заявляемой по технической сущности и достигаемому результату, выбранной в качестве прототипа, является питательная среда, защищенная патентом РФ 1526225 от 27.05.1995 года. Среда содержит в качестве источника органического азота и физиологически активных веществ свиной пептон, однако сырьем для него служат свиные желудки.Closest to the claimed technical essence and the achieved result, selected as a prototype, is a nutrient medium protected by RF patent 1526225 from 05/27/1995. The medium contains pork peptone as a source of organic nitrogen and physiologically active substances, however, the pork stomachs serve as a raw material for it.
Задача, решаемая предлагаемым изобретением, - создание безопасной среды для культивирования бактериофагов, обладающего высокой литической активностью, на основе сырья неживотного происхождения.The problem solved by the invention is the creation of a safe environment for the cultivation of bacteriophages with high lytic activity, based on raw materials of non-animal origin.
Технический результат от использования изобретения заключается в повышении безопасности среды и уменьшении ее себестоимости.The technical result from the use of the invention is to increase the safety of the environment and reduce its cost.
Указанный результат достигается тем, что среда для культивирования бактериофагов содержит глюкозу, натрий хлористый, натрий двузамещенный фосфорнокислый, дрожжевой автолизат жидкий и очищенную воду при следующем соотношении компонентов, мас.% на 1 л:The specified result is achieved by the fact that the medium for the cultivation of bacteriophages contains glucose, sodium chloride, sodium disubstituted phosphate, yeast liquid autolysate and purified water in the following ratio, wt.% Per 1 l:
Глюкоза 0,2-0,3Glucose 0.2-0.3
Натрий хлористый 0,25-0,35Sodium chloride 0.25-0.35
Натрий двузамещенный фосфорнокислый 0,15-0,25.Sodium disubstituted phosphate 0.15-0.25.
В качестве гидролизат неживотного сырья используется дрожжевой автолизат жидкий, в количестве, соответствующем 0,12-0,15% аминного азота в готовой среде, или экстракт дрожжей сухой в количестве 0,2-0,5% от объема среды.As a hydrolyzate of non-animal raw materials, a liquid yeast autolysate is used in an amount corresponding to 0.12-0.15% of amine nitrogen in the finished medium, or dry yeast extract in an amount of 0.2-0.5% of the medium volume.
Вода - остальное.Water is the rest.
Среду для культивирования бактериофагов готовят следующим образом.Bacteriophage culture medium is prepared as follows.
Расчетное количество гидролизата неживотного сырья загружают в реактор, заливают водой очищенной и перемешивают. Добавляют натрий гидроксид до рН 7,7-7,8. Кипятят 40 мин, вносят расчетное количество натрия уксуснокислого и натрия двузамещенного фосфорнокислого и через 5 мин глюкозу. Затем коррегируют рН до первоначального раствором натрия гидроксида.The estimated amount of hydrolyzate of non-animal feed is loaded into the reactor, filled with purified water and mixed. Sodium hydroxide is added to pH 7.7-7.8. Boil for 40 minutes, add the calculated amount of sodium acetic acid and sodium disubstituted phosphate and after 5 minutes glucose. Then the pH is adjusted to the initial sodium hydroxide solution.
Культивирование бактериофагов проводят следующим образом.The cultivation of bacteriophages is carried out as follows.
Смыв суточной агаровой культуры бактерий засевают в емкость с предлагаемой средой. Плотность посева 4,5-5,5·106 микробных тел в 1 мл среды. Одновременно в среду вносят фильтрат фаголизата. Посев выдерживают в термостате при 36-38°С в течение 18-22 часов.Wash off the daily agar culture of bacteria seeded in a container with the proposed environment. Sowing density 4.5-5.5 · 10 6 microbial bodies in 1 ml of medium. At the same time, phagolysate filtrate is introduced into the medium. Sowing is kept in the thermostat at 36-38 ° C for 18-22 hours.
Изобретение будет описано далее с помощью следующих не ограничивающих примеров.The invention will be described further using the following non-limiting examples.
Пример 1. Приготовление питательной средыExample 1. Preparation of a nutrient medium
Питательную среду для культивирования бактериофагов готовят следующим образом. В реактор добавляют 5 г экстракта дрожжей сухого, очищенной воды до 1 л и перемешивают. Добавляют натрий гидроксид до рН 7,7-7,8. Кипятят 40 мин, вносят 0,3 г натрия уксуснокислого и 0,2 г натрия двузамещенного фосфорнокислого и через 5 мин 0,25 г глюкозы. Затем коррегируют рН до первоначального раствором натрия гидроксида.A nutrient medium for the cultivation of bacteriophages is prepared as follows. 5 g of dry, purified water yeast extract up to 1 L are added to the reactor and mixed. Sodium hydroxide is added to pH 7.7-7.8. Boil for 40 minutes, add 0.3 g of sodium acetate and 0.2 g of sodium disubstituted phosphate and after 5 minutes 0.25 g of glucose. Then the pH is adjusted to the initial sodium hydroxide solution.
Пример 2. Получение стафилококкового бактериофагаExample 2. Obtaining staphylococcal bacteriophage
Питательную среду для культивирования стафилококкового бактериофага готовят аналогично Примеру 1. В качестве гидролизата неживотного происхождения используют дрожжевой автолизат жидкий. В реактор заливают 100 литров подготовленной культуральной среды и производят посев стафилококка из расчета 4,5·106 микробных тел на 1 мл среды. В среду одновременно вносят фильтрат стафилококкового бактериофага. Культивирование бактериофагов проводят при температуре (37±1)°С в условиях постоянного перемешивания мешалкой со скоростью 100 об/мин и аэрирования путем подачи стерильного воздуха в объеме (1,5±0,5) л на 1 л среды. Культивирование бактериофагов заканчивают при просветлении культуральной жидкости, оцениваемом визуально как мутность менее 5 единиц по ОСО 42-28-86 П.A nutrient medium for the cultivation of staphylococcal bacteriophage is prepared similarly to Example 1. As a hydrolyzate of non-animal origin, a liquid yeast autolysate is used. 100 liters of prepared culture medium are poured into the reactor and staphylococcus is inoculated at the rate of 4.5 · 10 6 microbial bodies per 1 ml of medium. Staphylococcal bacteriophage filtrate is simultaneously introduced into the medium. The cultivation of bacteriophages is carried out at a temperature of (37 ± 1) ° C under constant stirring with a stirrer at a speed of 100 rpm and aeration by supplying sterile air in a volume of (1.5 ± 0.5) L per 1 liter of medium. The cultivation of bacteriophages is completed when the clarification of the culture fluid is estimated visually as a turbidity of less than 5 units according to the TOC 42-28-86 P.
Очистку производят стерилизующей фильтрацией: фаголизаты из ферментеров путем подачи стерильного сжатого воздуха фильтруют под давлением 0,08 МПа.Cleaning is carried out by sterilizing filtration: phagolysates from fermenters are filtered by supplying sterile compressed air under a pressure of 0.08 MPa.
Полученный препарат стафилококкового бактериофага характеризуется литической активностью по методу Аппельмана не ниже 10-4. При этом препарат свободен от каких-либо продуктов животного происхождения.The resulting preparation of staphylococcal bacteriophage is characterized by lytic activity according to the Appelman method of not less than 10 -4 . In this case, the drug is free from any products of animal origin.
Пример 3. Получение фармацевтической композиции на основе стафилококкового бактериофага в таблетках с желудочно-резистентным покрытиемExample 3. Obtaining a pharmaceutical composition based on staphylococcal bacteriophage in tablets with a gastro-resistant coating
Препарат, полученный в Примере 2, используют для получения фармацевтической композиции. 100 литров отфильтрованного фаголизата с титром по Аппельману не менее 10-4 подают на ультрафильтрационную установку с помощью насоса под давлением (0,03±0,01) МПа. Концентрированные бактериофаги под давлением (0,015±0,005) МПа подают на каскад микропористых мембран. К 1,05 л стерильного концентрата фаголизатов с титром по Аппельману не менее 10-7 добавляют 0,006 кг полимера (например, МаКМЦ).The preparation obtained in Example 2 is used to obtain a pharmaceutical composition. 100 liters of filtered phagolysate with an Appelman titer of at least 10 -4 are fed to the ultrafiltration unit using a pump under pressure (0.03 ± 0.01) MPa. Concentrated bacteriophages under pressure (0.015 ± 0.005) MPa are fed to the cascade of microporous membranes. To 1.05 L of sterile concentrate of phagolysates with an Appelman titer of at least 10 -7, add 0.006 kg of polymer (for example, MAKMTS).
После полного растворения полимера смесь соединяют с наполнителем из кальция карбоната и лактозы или маннита в соотношении 80:15 мас.ч. К 1 л фаголизата добавляют 0,15-0,25 кг наполнителя. Все компоненты наполнителя перед сушкой предварительно стерилизуют. После тщательного перемешивания влажную массу выкладывают тонким слоем на дно кассеты, накрывают стерильной тканью и сушат в сублимационной установке при вакууме от - (7,0-15) Па в течение 28-32 часов до влажности 3-4%. Массу протирают через сито с размером отверстий 1 мм, соединяют со стерильной смесью технологических добавок из микрокристаллической целлюлозы (МКЦ), карбоксиметилкрахмала (КМК), кальция или магния стеарата в соотношении 3:1:1 - 4:2:1 из расчета 15-20% от таблетируемой сухой массы, тщательно перемешивают, прессуют в таблетки и покрывают желудочно-резистентной оболочкой.After complete dissolution of the polymer, the mixture is combined with a filler of calcium carbonate and lactose or mannitol in a ratio of 80:15 wt.h. 0.15-0.25 kg of filler is added to 1 liter of phagolysate. All components of the filler are pre-sterilized before drying. After thorough mixing, the wet mass is spread in a thin layer on the bottom of the cassette, covered with a sterile cloth and dried in a sublimation unit under vacuum from - (7.0-15) Pa for 28-32 hours to a moisture content of 3-4%. The mass is wiped through a sieve with a hole size of 1 mm, combined with a sterile mixture of technological additives from microcrystalline cellulose (MCC), carboxymethyl starch (CMC), calcium or magnesium stearate in a ratio of 3: 1: 1 - 4: 2: 1 at a rate of 15-20 % of tableted dry mass, thoroughly mixed, pressed into tablets and coated with a gastro-resistant membrane.
1 таблетка массой 0,09-0,11 г эквивалентна 20 мл жидких бактериофагов стафилококков с титром не ниже 10-4 (по Аппельману). Активность фагов сохранялась без изменения в течение 2 лет при температуре 2-10°С. Литическую активность бактериофага определяют при растворении 5 таблеток в 100 мл питательной среды (1 таблетка в 20 мл). Приготовлено 20 экспериментально-производственных серий бактериофага стафилококка в таблетках с кислотоустойчивым покрытием.1 tablet weighing 0.09-0.11 g is equivalent to 20 ml of liquid staphylococcus bacteriophages with a titer of at least 10 -4 (according to Appelman). Phage activity remained unchanged for 2 years at a temperature of 2-10 ° C. The lytic activity of the bacteriophage is determined by dissolving 5 tablets in 100 ml of culture medium (1 tablet in 20 ml). Prepared 20 experimental-production series of staphylococcus bacteriophage in tablets with an acid-resistant coating.
Пример 4. Получение таблетированного дизентерийного бактериофага.Example 4. Obtaining tableted dysenteric bacteriophage.
Таблетированный дизентерийный бактериофаг получали по технологии, описанной в примере 3, без предварительной концентрации фаголизатов, поскольку активность данных бактериофагов превышает лимитированный титр 10-7. Приготовлено 6 экспериментальных серий таблетированного дизентерийного бактериофага. При растворении 1 таблетки массой 0,09-0,11 г в 20 мл питательной среды титр бактериофага был не ниже 10-4.A tablet dysenteric bacteriophage was obtained according to the technology described in example 3 without preliminary concentration of phagolysates, since the activity of these bacteriophages exceeds a limited titer of 10 -7 . Prepared 6 experimental series of pelletized dysenteric bacteriophage. When dissolving 1 tablet weighing 0.09-0.11 g in 20 ml of culture medium, the bacteriophage titer was not less than 10 -4 .
Пример 5. Получение таблетированного секстафага (пиобактерифага).Example 5. Obtaining tableted sextaphage (pyobacteriophage).
Секстафаг представляет собой смесь шести фагов: фильтратов фаголизатов культур стафилококков, стрептококков, синегнойной палочки, кишечной палочки, клебсиелл и протея. После сведения в один объем в равных соотношениях фильтратов фаголизатов вышеперечисленных культур смесь концентрируют в 100 раз и используют для приготовления таблеток, как описано в примере 3. Приготовлено 16 экспериментальных серий секстафага в таблетках. При растворении 1 таблетки массой 0,09-0,11 г в 20 мл питательной среды титры всех фагов не ниже 10-3 и сохраняются при температуре 2-10°С не менее одного года.Sextaphage is a mixture of six phages: filtrate phagolysates of staphylococcus cultures, streptococci, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Klebsiella and Proteus. After mixing in one volume in equal proportions of the filtrate phagolysates of the above cultures, the mixture is concentrated 100 times and used to prepare tablets, as described in example 3. Prepared 16 experimental series of sextafage in tablets. When dissolving 1 tablet weighing 0.09-0.11 g in 20 ml of culture medium, the titers of all phages are not lower than 10 -3 and stored at a temperature of 2-10 ° C for at least one year.
Пример 6. Получение таблетированного бактериофага сальмонеллезного.Example 6. Obtaining a tableted bacteriophage of salmonella.
Жидкий бактериофаг сальмонеллезный гр. А, В, С, D, Е представляет собой стерильный очищенный фильтрат фаголизатов сальмонелл: гр. А - Salmonella paratyphi A; гр. В - S. paratyphi В, S.typhimurium, S. heidelberg; гр. C-S. newport, S. choleraesuis, S. oranienburg, S. infantis; гр. D-S. dublin, S. enteritidis; гр. E-S. anatum, S. newlands.Liquid bacteriophage salmonella gr. A, B, C, D, E is a sterile purified filtrate of salmonella phagolysates: gr. A - Salmonella paratyphi A; column B - S. paratyphi B, S. typhimurium, S. heidelberg; column C-S. newport, S. choleraesuis, S. oranienburg, S. infantis; column D-s. dublin, S. enteritidis; column E-s. anatum, S. newlands.
Получение концентрированного бактериофага:Obtaining a concentrated bacteriophage:
- Стерильные фильтраты фаголизатов с титром не менее 10-5 концентрируют в 50-100 раз с помощью мембранной ультрафильтрации до титра по Аппельману 10-7. Затем полученные концентраты подвергают стерилизующей фильтрации через каскад микропористые мембраны с размером пор от 0,45 до 0,22 мкм. После этого концентрированные бактериофаги сводят в один объем и в дальнейшем используют для приготовления таблеток.- Sterile filtrates of phagolysates with a titer of at least 10 -5 are concentrated 50-100 times using membrane ultrafiltration to an Appelman titer of 10 -7 . Then, the obtained concentrates are subjected to sterilizing filtration through a cascade of microporous membranes with pore sizes from 0.45 to 0.22 μm. After this, concentrated bacteriophages are reduced to one volume and subsequently used for the preparation of tablets.
- К 100 мл концентрированного бактериофага добавляют стабилизатор (полусинтетическое высокомолекулярное соединение - метилцеллюлозу 0,6 г и смесь сахаров - сорбит 20 г, лактозу 34 г). После растворения ингредиентов стабилизированную гелеобразную массу вымешивают наполнителями - кальция карбонатом 38 г и натрия альгинатом 7,4 г (обеспечивающим каркас избирательной распадаемости таблетированных фагов (потенциальную желудочную резистентность). Соотношение бактериофага и наполнителей составляет 1:1. Все наполнители перед сушкой предварительно стерилизуют в сушильно-стерилизационном шкафу дважды с суточным интервалом в течение 4-х часов при температуре 110°С. После тщательного перемешивания полученную гомогенную пастообразную массу выкладывают тонким слоем на дно кассеты, накрывают стерильной тканью и вакуумно или сублимационно высушивают в сублимационной установке до влажности 3-4%. Технологические потери при сушке и измельчении компенсируются за счет сухого остатка бактериофага, поэтому реальный выход полуфабриката соответствует регламентной суммарной загрузке компонентов. Сухую массу протирают через сито с размером отверстий 1 мм, соединяют со стерильной массой целевых добавок (вспомогательных антифрикционных веществ - 1,0 г магния стеарата), тщательно перемешивают и прессуют в таблетки массой 0,2 г, эквивалентные по объему 20 мл коммерческого препарата.- A stabilizer is added to 100 ml of concentrated bacteriophage (a semisynthetic high-molecular compound - 0.6 g methyl cellulose and a sugar mixture - sorbitol 20 g, lactose 34 g). After dissolving the ingredients, the stabilized gel mass is kneaded with excipients — calcium carbonate 38 g and sodium alginate 7.4 g (providing a framework for the selective disintegration of tabletted phages (potential gastric resistance). The ratio of bacteriophage and excipients is 1: 1. All excipients are pre-sterilized in an oven before drying. sterilization cabinet twice with a daily interval for 4 hours at a temperature of 110 ° C. After thorough mixing, the resulting homogeneous pasto different masses are laid out in a thin layer on the bottom of the cassette, covered with a sterile cloth and vacuum or freeze-dried in a sublimation unit to a moisture content of 3-4%. Technological losses during drying and grinding are compensated by the dry residue of the bacteriophage, so the actual yield of the semi-finished product corresponds to the regulated total load of the components. The dry mass is wiped through a sieve with a hole size of 1 mm, combined with a sterile mass of target additives (auxiliary antifriction substances - 1.0 g of magnesium stearate), carefully flax mixed and compressed into tablets weighing 0.2 g, equivalent to 20 ml by volume commercial preparation.
Пример 7. Получение таблетированного Секстафага (Пиобактериофага поливалентного).Example 7. Obtaining tableted Sextaphage (Pyobacteriophage polyvalent).
Препарат получают аналогично примеру 6. К 130 мл концентрированного бактериофага добавляют стабилизатор (полусинтетическое высокомолекулярное соединение - метилцеллюлозу 1,0 г и смесь сахаров - сорбит 15 г, лактозу 20 г). После растворения ингредиентов стабилизированную гелеобразную массу вымешивают наполнителями - кальция карбонатом 80 г и натрия альгинатом 14 г (обеспечивающим каркас избирательной распадаемости таблетированных фагов (потенциальную желудочную резистентность). Соотношение бактериофага и наполнителей составляет 1,3:1. Последующий технологический процесс аналогичен примеру 6.The preparation is prepared analogously to Example 6. A stabilizer is added to 130 ml of concentrated bacteriophage (a semisynthetic high-molecular compound - 1.0 g methyl cellulose and a sugar mixture - 15 g sorbitol, 20 g lactose). After dissolving the ingredients, the stabilized gel mass is kneaded with fillers — calcium carbonate 80 g and sodium alginate 14 g (providing a framework for the selective disintegration of tabletted phages (potential gastric resistance). The ratio of bacteriophage and fillers is 1.3: 1. The subsequent process is similar to example 6.
Прессуют в таблетки массой 0,153 г, эквивалентные по объему 20 мл коммерческого препарата.Compressed into tablets weighing 0.153 g, equivalent in volume to 20 ml of a commercial preparation.
Таким образом, получаемые препараты бактериофагов характеризуются повышенной чистотой за счет снижения примесей, имеющих животное происхождение, что положительно влияет на организм человека, во время их приема, за счет снижения риска возникновения аллергических реакций.Thus, the resulting preparations of bacteriophages are characterized by high purity due to the reduction of impurities of animal origin, which positively affects the human body during their administration, by reducing the risk of allergic reactions.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012141906/10A RU2520346C2 (en) | 2012-10-02 | 2012-10-02 | Pharmaceutical composition for treatment and prophylaxis of bacterial infection |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012141906/10A RU2520346C2 (en) | 2012-10-02 | 2012-10-02 | Pharmaceutical composition for treatment and prophylaxis of bacterial infection |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012141906A RU2012141906A (en) | 2014-04-10 |
| RU2520346C2 true RU2520346C2 (en) | 2014-06-20 |
Family
ID=50435817
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012141906/10A RU2520346C2 (en) | 2012-10-02 | 2012-10-02 | Pharmaceutical composition for treatment and prophylaxis of bacterial infection |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2520346C2 (en) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU64612A1 (en) * | 1944-02-04 | 1944-11-30 | Ф.Е. Сергиенко | The method of obtaining dry bacteriophage |
| SU508078A1 (en) * | 1972-12-28 | 1978-08-25 | Горьковский Научно-Исследовательский Институт Эпидемиологии И Микробиологии | Culture medium for producing dry dysenteric bacteriophage |
| RU2059723C1 (en) * | 1993-05-20 | 1996-05-10 | Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных | Method of phage preparation preparing |
| RU2241446C2 (en) * | 2002-06-27 | 2004-12-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" | Bacteriophage-containing pharmaceutical composition and method for its preparing |
| RU2410084C1 (en) * | 2009-06-19 | 2011-01-27 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Sextaphage (pyobacteriophage polyvalent) or bacteriophage salmonellous pharmaceutical composition and method for producing thereof |
-
2012
- 2012-10-02 RU RU2012141906/10A patent/RU2520346C2/en active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU64612A1 (en) * | 1944-02-04 | 1944-11-30 | Ф.Е. Сергиенко | The method of obtaining dry bacteriophage |
| SU508078A1 (en) * | 1972-12-28 | 1978-08-25 | Горьковский Научно-Исследовательский Институт Эпидемиологии И Микробиологии | Culture medium for producing dry dysenteric bacteriophage |
| RU2059723C1 (en) * | 1993-05-20 | 1996-05-10 | Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных | Method of phage preparation preparing |
| RU2241446C2 (en) * | 2002-06-27 | 2004-12-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" | Bacteriophage-containing pharmaceutical composition and method for its preparing |
| RU2410084C1 (en) * | 2009-06-19 | 2011-01-27 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Sextaphage (pyobacteriophage polyvalent) or bacteriophage salmonellous pharmaceutical composition and method for producing thereof |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2012141906A (en) | 2014-04-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2647694A2 (en) | Dead lactobacillus biomass for antimicrobial use and a production method therefor | |
| CN102008016B (en) | Probiotic solid powder and preparation method thereof | |
| RU2410084C1 (en) | Sextaphage (pyobacteriophage polyvalent) or bacteriophage salmonellous pharmaceutical composition and method for producing thereof | |
| WO2018103118A1 (en) | Fermented soybean whey beverage and preparation method thereof | |
| JP2023027088A (en) | How to make pullulan | |
| CN104127410A (en) | Ornidazole injection liquid | |
| KR101425712B1 (en) | Method of tynadallized Lactobacillus acidophilus | |
| CN103251547B (en) | Activated probiotic skin cream and preparation method thereof | |
| RU2520346C2 (en) | Pharmaceutical composition for treatment and prophylaxis of bacterial infection | |
| TW201641021A (en) | Probiotic buccal tablet and its preparation method | |
| CN106011209A (en) | Preparation method of collagen peptide | |
| RU2626568C1 (en) | Dense nutrient medium for cultivation and collection of biomass of plague microbe of ypestis ev vaccine strain | |
| CN103239497B (en) | Enrofloxacin clathrate compound and preparation method thereof | |
| RU2460774C1 (en) | Nutrient medium for legionella cultivation | |
| JP2011126831A (en) | Agent for improving intestinal flora balance and method for producing the same | |
| CN117717550A (en) | Antibacterial drugs based on the complex of stephanatine and taurine and preparation method thereof | |
| RU2415922C1 (en) | Nutrient medium for lactic acid bacilli cultivation | |
| RU2178646C2 (en) | Method to manufacture liquid or dry ferment for sour milk products | |
| CN108670957A (en) | One kind acidification amoxicillin soluble powder for animals and preparation method thereof | |
| RU2149008C1 (en) | Method of biopreparation preparing | |
| CN109943494B (en) | Culture medium and preparation method thereof | |
| RU2392310C2 (en) | Enrichment medium for excretion of cholera vibrio | |
| CN112587563A (en) | Antibacterial Chinese and western medicine powder for amoxicillin and scutellaria baicalensis for livestock and preparation method thereof | |
| CN111714467B (en) | Bacillus licheniformis viable bacteria enteric capsule and preparation method thereof | |
| RU2241446C9 (en) | Bacteriophage-containing pharmaceutical composition and method for its preparing |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HE9A | Changing address for correspondence with an applicant | ||
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20180716 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner |