[go: up one dir, main page]

RU2599416C1 - ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ - Google Patents

ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ Download PDF

Info

Publication number
RU2599416C1
RU2599416C1 RU2015137387/10A RU2015137387A RU2599416C1 RU 2599416 C1 RU2599416 C1 RU 2599416C1 RU 2015137387/10 A RU2015137387/10 A RU 2015137387/10A RU 2015137387 A RU2015137387 A RU 2015137387A RU 2599416 C1 RU2599416 C1 RU 2599416C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
plantarum
strain
bacillus amyloliquefaciens
amyloliquefaciens subsp
plants
Prior art date
Application number
RU2015137387/10A
Other languages
English (en)
Inventor
Владимир Кузьмич Чеботарь
Сергей Викторович Ерофеев
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "БИСОЛБИ ПЛЮС"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "БИСОЛБИ ПЛЮС" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "БИСОЛБИ ПЛЮС"
Priority to RU2015137387/10A priority Critical patent/RU2599416C1/ru
Priority to US15/756,871 priority patent/US20200029571A1/en
Priority to RS20180250A priority patent/RS20180250A1/sr
Priority to TR2018/06559T priority patent/TR201806559T1/tr
Priority to CN201680064147.4A priority patent/CN110520519A/zh
Priority to BG112709A priority patent/BG67257B1/bg
Priority to UAA201803272A priority patent/UA121062C2/ru
Priority to PCT/RU2016/000599 priority patent/WO2017039491A1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2599416C1 publication Critical patent/RU2599416C1/ru
Priority to PH12018550036A priority patent/PH12018550036A1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A01N63/22Bacillus
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/07Bacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству. Штамм Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, обладающий высокой фунгицидной активностью против фитопатогенных грибов и бактерицидной активностью против фитопатогенных бактерий, депонирован в Ведомственной коллекции ФГБНУ ВНИИСХМ под номером RCAM03458. Штамм Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum RCAM03458 может быть использован в сельском хозяйстве в качестве эффективного средства для защиты растений от фитопатогенных грибов и бактерий, улучшения питания сельскохозяйственных культур и увеличения продуктивности растений. При этом для эффективного использования штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 в составе различных биопрепаратов титр бактерий должен составлять 104-109 кл/мл. Изобретение позволяет повысить урожайность сельскохозяйственных культур. 16 табл.

Description

Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству и касается нового штамма ризосферных бактерий p. Bacillus в качестве средства для повышения продуктивности растений и их защиты от фитопатогенных микроорганизмов.
Современное высокоэффективное сельскохозяйственное производство невозможно без применения удобрений и средств защиты растений. Так, широкое использование минеральных удобрений, в первую очередь азотных, позволило за последние 50 лет более чем в 5 раз поднять урожайность основных сельскохозяйственных культур в развитых странах. Однако процесс получения и применения минеральных азотных удобрений является наиболее энергоемким - на него расходуется до от 30 до 50% всей энергии, потребляемой в сельскохозяйственном производстве.
В настоящее время известно множество микробиологических препаратов для сельского хозяйства различного назначения: ростостимулирующих, а также подавляющих развитие фитопатогенных бактерий и грибов.
Микроорганизмы могут стимулировать их рост (Azospirillum), связывать азот (Rhizobium), предотвращать заболевания растений (Pseudomonas или Bacillus), или же уничтожать вредных насекомых (Streptomyces).
Известен «Способ обработки семян», описанный в заявке №2170987 Великобритании с приоритетом от 14.02.85 г., МКИ 4 A01C 1/06, опубликованный в ИСМ №10 за 1987 г. Указанный способ предусматривает обработку семян составом, состоящим из микроорганизмов, носителя, например отрубей, и клея, такого как смола гатти. Наиболее благоприятные результаты получаются при обработке семян пшеницы.
Известен патент РФ №2140138 на группа изобретений «Способ предпосевной обработки семян овощных культур и способ получения препарата для предпосевной обработки семян овощных культур» по заявке №98120341 с приоритетом от 13.11.1998 г. на имя ЗАО ССПР «СОРТСЕМОВОЩ», МПК A01C 1/06, опубликовано 27.10.1999 г.
Указанные способы осуществляются с помощью биофунгицидного препарата, содержащего штамм бактерий Bacillus subtilis Ч-13 (депонирован под рег. номером ВНИИСХМ Д-606 в группе эпифитных микроорганизмов). Способ получения биофунгицидного препарата заключается в смешивании культуральной жидкости, содержащей штамм B.s. Ч-13, который предварительно культивируют в жидкой стерильной питательной среде, с эмульсией ПВА, водным разбавителем и стерильным мелом или доломитом в определенных пропорциях. Изобретения позволяют повысить эффективность защиты овощных культур от фитопатогенных грибов путем предпосевной обработки семян.
Известен патент РФ №2099947 на изобретение «Биопрепарат Фитоспорин для защиты растений от болезней» по заявке 96121980 с приоритетом от 15.11.1996 г. на имя Института Микробиологии и вирусологии НАН Украины (UA) и НПО «Башкирское» (RU), МПК A01N 63/00; C12N 1/20; C12R1:125, публикация 27.12.1997 г.
Основу биопрепарата «Фитоспорин» составляет штамм бактерий Bacillus subtilis ВНИИСХМ 128 с концентрацией клеток 109-1010 на 1 мл физраствора в количестве 92-98 об. % и наполнитель в количестве 2-8 об. %. При этом штамм Bacillus subtilis ВНИИСХМ 128 характеризуется высокой антагонистической активностью в отношении фитопатогенных бактерий и грибов, что позволяет использовать его для защиты различных видов сельскохозяйственных (зерновых и бобовых) и декоративных древесных растений путем предпосевной обработки семян.
Известен патент РФ №2478290 на изобретение «Биопрепарат для стимуляции роста и защиты растений от болезней, повышения урожайности и почвенного плодородия» патенту РФ №2478290 (заявка №2011145665) с приоритетом от 11.11.2011 г. на имя ООО «Бациз», МПК A01N 63/02, А01С 1/06, C12N 1/20, C12R 1/07, публикация заявки 20.05.2012 г., патента - 10.04.2013 г.
Биопрепарат содержит биомассу Bacillus amyloliquefaciens ВКПМ В-11008 и гуматы при следующем соотношении компонентов, об. %: биомасса вегетативных клеток и спор бактерий Bacillus amyloliquefaciens ВКПМ В-11008 - 1,24÷4,30×1010 КОЕ/мл культуральной жидкости и содержанием спор 94% от общего количества КОЕ - 99,0, гуматы - 1,0. Биопрепарат позволяет защитить растения от грибных и бактериальных болезней, улучшить фитосанитарное состояние почвы и повысить ее плодородие, увеличить урожайность культур.
Недостатком является ограниченная область применения (только зерновые культуры: пшеница и ячмень), а также необходимость высокого значения титра клеток и спор штамма-продуцента в составе препарата для эффективного его применения.
Известен патент РФ №2528058 на изобретение «Штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens, обладающий фунгицидным и бактерицидным действием, и биологический препарат на его основе для защиты зерновых растений от заболеваний, вызываемых фитопатогенными грибами» по заявке 2013125726 с приоритетом от 04.06.2013 г. на имя ФГУП «ГосНИИгенетика», МПК A01N 63/02, А01С 1/06, C12N 1/20, C12R 1/07, публикация 10.09.2014 г.
Описан штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens ВКПМ В-11475, обладающий фунгицидным и бактерицидным действием. Также предложен биологический препарат для защиты зерновых растений от заболеваний, вызываемых фитопатогенными грибами. Биологический препарат получают путем смешивания активного начала в виде культуральной жидкости указанного штамма с титром 2-3×109 КОЕ/мл и носителя в виде мелкодисперсных гранул диатомита в соотношении по объему 1:3 с последующим высушиванием.
Изобретения позволяют повысить урожайность зерновых растений и уменьшить процент их зараженности фитопатогенными грибами.
Недостатком является ограниченная область применения (только зерновые культуры) и отсутствие у штамма бактерицидной активности.
Известны патентная заявка Китая CN 102703354 (A) от 03.10.2012 г. на бактерии штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum B203, проявляющего фунгицидный эффект против антракноза клубники и некоторых др. болезней, вызываемых грибами; МПК A01N 63/00, 63/02; A01P 3/00; C12N 1/20; C12R 1/07 и патентная заявка Китая CN 104195072 (A) от 10.12.2014 г. на базе национальной заявки CN 20141385641 с приоритетом от 06.08.2014 г. на бактерии штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum B232, проявляющего фунгицидный эффект против дотихициевого некроза тополя и некоторых других грибковых болезней; МПК A01N 63/00; A01P 3/00; C12N 1/20; C12R 1/07.
Недостатком описанных штаммов является ограниченная область их применения (клубника, тополь) и отсутствие у них бактерицидной активности. Кроме того, в патентах не указаны титры препарата, при которых они эффективны для контроля грибных болезней клубники и, соответственно, тополя.
Известна патентная заявка Румынии RO 127468 (A2) от 29.06.2012 г. на базе национальной заявки RO 20100001379 с приоритетом от 21.12.2010 г. на изобретение «Штамм Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum B100 для роста сельскохозяйственных культур», МПК A01N 63/00; C12N 1/20.
Штамм проявляет фунгицидный (продукция липопептидных и поликетидных антибиотиков) и бактерицидный эффект против широкого спектра фитопатогенных грибов в почве и бактериальных болезней фруктовых деревьев, а также стимулирующий эффект за счет эндофитного производства ростовых факторов. Способен продуцировать ряд ферментов: протеазы, лактоназы, амилазы, фитазы и целлюлазы. Способен растворять неорганические соединения фосфора, селена. Может использоваться для укрепления зерна зерновых культур (пшеницы и кукурузы) в регионах с дефицитом селена.
В данной публикации не указан титр Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum В100, который необходим в препарате при использовании штамма этих бактерий для контроля болезней растений. Недостатком также является ограниченная область применения (зерновые культуры и плодовые деревья).
Известна также международная заявка WO 2012130221 (A2) от 24.03.2012 г. на базе национальной заявки Германии DE 20111015803 с приоритетом от 01.04.2011 г. на изобретение «Средство против фитопатогенных микроорганизмов», МПК A01N 63/00; C07K 14/32; C12N 1/20; C12R 1/07.
Описан новый штамм Bacillus amyloliquefaciens subsp. Plantarum_AB101, который характеризуется высокой эффективностью против болезни корневой гнили ("черная парша") в картофеле, вызванной Rhizoctonia solani.
Разработан противогрибковый препарат Бактериоцин для лечения грибных и других микробных и вирусных инфекций, который получают на основе спор бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum AB101, имеющих сильный эффект в отношении грамположительных бактерий.
Штамм Bacillus amyloliquefaciens subsp. Plantarum AB101 продуцирует 10 различных веществ: фунгицидных (различных групп антибиотических веществ: дипептидных, липопептидных и сидерофоров), бактерицидных (поликетидов и бактериоцинов) и антивирусных, против широкого спектра болезней растений и особенно против корневой гнили картофеля, вызываемой фитопатогенным грибом Rhizoctonia solani. Может использоваться в сельском хозяйстве, защите растений и биотехнологии.
В данной публикации не указан титр Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum AB101, который необходим в препарате при использовании штамма этих бактерий для контроля болезней растений.
Недостатком также является ограниченная область применения - в основном описан эффект против корневой гнили картофеля, вызываемой фитопатогенным грибом Rhizoctonia solani.
Известен патент №2495119 на изобретение «Штамм бактерий Bacillus subtilis 8A в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от фитопатогенных микроорганизмов» по заявке №2012151104 с приоритетом от 29.11.2012 г. на имя ГНУ ВНИИСХМ Россельхозакадемии, который выбран в качестве прототипа.
Штамм депонирован в коллекции ГНУ ВНИСХМ Россельхозакадемии 14.11.2011 г. под номером RCAM 00876 в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от фитопатогенных микроорганизмов. Указанный штамм обладает высокой фунгицидной и бактерицидной активностью. Установлена также высокая ростостимулирующая активность штамма Bacillus subtilis 8A и биопрепарата на его основе, что приводит к повышению урожайности растений. Опытным путем подтверждено, что эффективность штамма обусловлена способностью его бактерий создавать с растениями микробно-растительную систему путем колонизирования ризосферы и корневой системы растений.
В связи с тем что штаммы бактерий таксономической группы Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum депонированы в территориально удаленных от заявителя коллекциях (в том числе в других государствах), а также, что в некоторых публикациях не указан титр штамма бактерий, который необходим при его использовании в биопрепарате, в качестве прототипа выбран доступный заявителю штамм бактерий Bacillus subtilis 8A, депонированный в коллекции ГНУ ВНИСХМ.
Задачей изобретения является выявление штамма ризосферных бактерий, пригодного для использования в сельском хозяйстве в качестве средства для защиты растений от фитопатогенных микроорганизмов, улучшения питания сельскохозяйственных культур, увеличения продуктивности растений, а также позволяющего расширить арсенал подобных средств.
Указанная задача решается за счет того, что в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от фитопатогенных микроорганизмов в сельском хозяйстве используется штамм ризосферных бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, позволяющий расширить арсенал подобных средств.
Штамм ризосферных бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 был выделен из корней озимой пшеницы с. Лира, произрастающей на черноземных почвах Краснодарского края Российской Федерации.
Штамм депонирован в Ведомственной коллекции полезных микроорганизмов сельскохозяйственного назначения (RCAM) ФГБНУ ВНИИСХМ 09.07.2015 г. под номером RCAM 03458 в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от фитопатогенных микроорганизмов (копия справки о депонировании прилагается).
Штамм Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 характеризуется следующими морфолого-культуральными и физиолого-биохимическими признаками.
Клетки имеют форму правильных палочек с закругленными концами и монополярным перитрихиальным расположением жгутиков. Размер клеток (0,9-1,8) мкм. Штамм образует споры, расположенные в центре клетки, положительно окрашивается по Граму. Через 24 часа роста на жидкой питательной среде наблюдается накопление поли-β-оксибутирата. Рост в жидкой и полужидкой питательной среде микроаэрофильный, метаболизм дыхательный и бродильный. На мясопептонном агаре образует сухие колонии кремового цвета, пастообразной консистенции с неровными изрезанными краями. Диаметр колоний (5-12) мм. Оптимальная температура для роста 33°C. При температуре более 45°C и менее 15°C рост замедленный. Оптимальное значение pH среды 6,8, рост происходит также при pH от 4,5 до 9,0. Штамм гидролизует казеин, желатину, крахмал и лакмусовое молоко. Лакмус при этом обесцвечивается. Штамм обладает сильной каталазной активностью, амилазной, протеазной, липазной и фосфолипазной активностью. Штамм способен расти при 50°C, 10% NaCl и 0,001% лизоцима.
В качестве единственного источника углерода штамм использует с образованием кислоты арабинозу, ксилозу, маннит, глюкозу, галактозу, фруктозу, мальтозу, сорбит, глицерин, декстрин, крахмал и с образованием щелочи рамнозу и дульцит. Использует преимущественно минеральные формы азота - соли аммония и нитраты, а также аминокислоты и белки.
Опытным путем было установлено, что штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 увеличивает урожай растений и проявляет антагонистические свойства по отношению к возбудителям болезней сельскохозяйственных культур, в частности:
- пшеница озимая и яровая - против мучнистой росы (Erysiphe graminis), бурой ржавчины (Puccinia recondita), фузариозной корневой гнили (Fusarium culmorum), базального бактериоза (Pseudomonas syringae);
- ячмень яровой - против плесневения семян (Penicillium, Alternaria), корневых гнилей (Bipolaris sorokiniana), темно-бурой пятнистости (Drechlera sorokiana);
- капуста белокочанная и цветная - против сосудистого бактериоза (Xan-thomonas campestris), черной ножки (Rhizoctonia solani), питиозной корневой гнили (Pythium irregulare);
- картофель - против фитофтороза (Phytophtora infestans), ризоктониоза (Rhizoctonia solani), фузариозного увядания (Fusarium oxysporum);
- сахарная свекла - против корнееда (Pythium debarianum, Phoma betae), церкоспороза (Cercospora beticola).
- подсолнечник - против белой гнили (Sclerotinia sclerotiorum), фомопсиса (Phomopsis helianthi);
- лен - против фузариоза (Fusarium avenaceum Sacc, Fusarium oxysporum v. orthoceros f. lini (Boll) Bilai), бактериоза (Clostridium macerans Schard).
Опытным путем было также установлено, что штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 обладает фунгицидной активностью против фитопатогенных грибов Fusarium culmorum, Fusarium graminearum, Fusarium sporotrichioides, Erysiphe graminis, Phytophtora infestans, Rhizoctonia solani, Pythium irregular, Plasmopara viticola, Uncinula necator, Botrytis cinerea, а также бактерицидной активностью против фитопатогенных бактерий Xan-thomonas campestris, Pseudomonas syringae, Clavibacter michiganense.
В таблицах 1, 2 представлены результаты проверки антагонистической активности против фитопатогенных микроорганизмов 3-х штаммов ризосферных бактерий: Pseudomonas fluorescens AP-33 (микробный препарат Планриз), Bacillus subtilis ВНИИСХМ 128 (микробный препарат Фитоспорин), Bacillus subtilis 8А (прототип), Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 (заявляемый штамм).
Бактерицидную активность проверяли на 5 штаммах фитопатогенных бактерий: Pseudomonas syringae 8300, Pseudomonas syringae 2314, Erwinia carotovora A-1, Erwinia carotovora 3391, Clavibacter michiganense 17-1.
Вначале высевали бактерии бактериологической петлей сплошным газоном на поверхности питательного агара и культивировали 48 часов при 28°C. В день проверки на бактерицидную активность высевали сплошным газоном на голодном картофельном агаре штаммы указанных фитопатогенных бактерий. Затем переносили на поверхность только что засеянной среды вырезанные стерильным пробочным сверлом агаровые блочки со зрелой культурой тестируемых бактерий. Перенос осуществляли с помощью стерильного скальпеля и прокаленного пинцета. Чашки с блочками культивировали в течение 24 часов при температуре 28°C, после чего замеряли диаметр зоны ингибирования вокруг блочков.
Результаты измерений представлены в Таблице 1.
Figure 00000001
Из данных, приведенных в Таблице 1, видно, что заявленный штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 обладает большей антагонистической активностью по отношению к фитопатогенным бактериям по сравнению с прототипом - штаммом Bacillus subtilis 8А.
Фунгицидную активность проверяли в отношении 5 фитопатогенных грибов: Phytophtora infestans, Rhizoctonia solani, Fusarium culmorum, Fusarium solani, Pythium ultimum с использованием метода «колодцев».
В разогретый и остывший до температуры 37°C картофельно-декстрозный агар добавляли суспензию спор грибов (105 КОЕ/мл) из расчета 1 мкл суспензии на 1 мл среды. Полученную смесь разливали по чашкам Петри, после застывания в ней делали прокаленным пробочным сверлом 4 ровных сквозных отверстия, расположенных квадратом. В эти отверстия заливали по 100 мкл бактериальной суспензии с титром клеток 108 КОЕ/мл. Одна чашка была оставлена с пустыми «колодцами» как контрольный вариант. Все чашки с «колодцами» культивировали в течение 72 ч при температуре 28°C. Фунгицидную активность определяли как зоны ингибирования роста фитопатогенного гриба вокруг «колодцев». Результаты измерений представлены в Таблице 2.
Figure 00000002
Из данных, приведенных в Таблице 2, видно, что заявленный штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 обладает большей антагонистической активностью по отношению к фитопатогенным грибам по сравнению со штаммом-прототипом Bacillus subtilis 8А.
Как показал анализ полногеномного секвенирования, такая активность штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 обусловлена наличием в его геноме генов, кодирующих продукцию фунгицидных и бактерицидных веществ: сурфактинов, фенгицинов, бацилломицина Д, циклических липопептидов, бациллобактина, бациллолизина, бациллена, макролактина, плантазолицина, амилоциклизина (Таблица 3).
Нерибосомные синтезированные пептиды (НСП) включают в себя широкий круг структурно неоднородных антибиотических соединений. Наиболее известные и изученные НСП включают сурфактины, фенгицины и итурины.
Итурины и фенгицины известны как основные факторы, определяющие антифунгальную активность различных бацилл [1].
Фенгицины особенно активны в отношении мицелиальных грибов [2].
Сурфактины необходимы для формирования биопленки и распространение бактерий в окружающей среде, тем самым способствуя их колонизации в корнях и тканях растений и проявлению их биоконтрольной активности [3]. Кроме того, сурфактины и, в меньшей степени, фенгицины способны запускать защитные механизмы растений [1].
Figure 00000003
Кроме липопептидов кластер генов dhb вовлечен в синтез сидерофора бациллибактина. Бактериальные сидерофоры имеют высокое сродство для трехвалентного железа и способны эффективно связывать его в железодефицитных средах, например в грунтах, в результате чего ионы железа становятся менее доступны фитопатогенам и тем самым способствуют биоконтрольной деятельности сидерофор-продуцирующих бактерий [4]. Оперон dhb, управляющий синтезом бациллибактина, сходен с таким же опероном у грамотрицательных бактерий, продуцирующих энтеробактин.
Штамм Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 имеет три больших кластера генов, кодирующих поликетиды: дифицидин, бациллен и макролактин (Таблица 3). Все три метаболита обладают широкой антибактериальной активностью в отношении патогенов растений и человека и могут быть потенциально использованы в медицине [5, 6].
Геном штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 содержит кластер генов для производства двух рибосомно продуцируемых небольших пептидов: плантазолицина и амилоциклизина (Таблица 3). Плантазолицин является новым типом рибосомально продуцируемых небольших пептидов с узким спектром антимикробной активности в отношении других бацилл, особенно В. anthracis (возбудитель сибирской язвы) [7]. Кроме того, этот метаболит способен подавлять нематоды, образующие галлы (новообразования) на корнях растений. Несколько других грамположительных бактерий, включая Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus, Corynebacterium urealyticum DSM7109 и Brevibacterium linens BL2 также имеют похожий биосинтетический кластер в своих геномах [8]. Амилоциклизин - это циклический пептид, принадлежащий к группе бактериоцинов. Он обладает высокой антибактериальной активностью в отношении тесно связанных грамположительных бактерий - это преимущество может использоваться для подавления бактериальных конкурентов в ризосфере [7]. Кластер генов acn, управляющий синтезом этого бактериоцина, широко распространен среди видов рода Bacillus/Paenibacillus таксономических групп. Еще один небольшой пептид мерасцидин был найден в нескольких видах Bacillus amyloliquefaciens subsp. Plantarum [9], но штамм BS89 содержит лишь фрагментарные части всего кластера генов и может быть не в состоянии синтезировать мерасцидин.
Экспериментально установлено, что штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 обладает не только фунгицидной активностью против фитопатогенных бактерий и фитопатогенных грибов, но и фитостимулирующим эффектом по отношению к различным сельскохозяйственным культурам (например, редис, пшеница).
Анализ ростостимулирующей активности штаммов бактерий проводили по оригинальной методике с использованием растений редиса сорта «Дуро» и пшеницы сорта «Веда». Для этого семена сначала стерилизовали в течение 2-х минут в 70% этаноле и отмывали в стерильной водопроводной воде. Затем семена замачивали на 30 мин в суспензии бактерий с титром клеток 107 КОЕ/мл и раскладывали в стерильные влажные камеры по 20 шт. в 3-кратной повторности. Контрольные семена замачивали в стерильной водопроводной воде. Далее растения инкубировали в фитотроне 72 ч при t=28°C. После инкубирования измеряли длину корешков и побегов, а ростостимулирующую активность тестируемых штаммов бактерий рассчитывали по отношению к контрольным проросткам. Результаты представлены в таблицах 4, 5.
Figure 00000004
Из данных, приведенных в Таблице 4, видно, что заявленный штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 обладает более сильной ростостимулирующей активностью на проростках редиса по сравнению со штаммом-прототипом Bacillus subtilis 8A.
Figure 00000005
Из данных, приведенных в Таблице 5, видно, что заявленный штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 обладает более сильной ростостимулирующей активностью на проростках пшеницы по сравнению со штаммом-прототипом Bacillus subtilis 8А.
Высокая ростостимулирующая активность штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 предположительно вызвана способностью продуцировать целый ряд витаминов: тиамина (B1), рибофлавина (B2), никотинат (B3), пантотенат (B5), биотин (B7), фолат (B9), кобаламин (B12), менакуинон (K2) (Таблица 6). Витамины - незаменимые элементы питания, произведенные с помощью различных растений и бактерий [10]. Основная физиологическая роль витаминов состоит в том, чтобы служить в качестве кофакторов в многочисленных метаболических процессах и в качестве антиоксидантов. Из восьми известных витаминов группы B шесть из них были обнаружены в геноме Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 аннотации онтологии KEGG (используя KAAS сервер) и интеллектуального анализа генома (Таблица 6). Это: тиамин (B1), рибофлавин (B2), пантотенат (B5), витамин B6 (пиридоксин), биотин (B7) и фолат (B9). Кроме того, был обнаружен белок, синтезирующий кобаламин CobW (Prokka_00310), который участвует в синтезе витамина В12, и двух ферментов, участвующих в метаболизме никотината (витамин B3), а именно никотинат-фосфорибозилтрансфераза (Prokka_02867) и никотинат-нуклеотидпирофосфорилаза (Prokka_02473). Кроме того, в геноме штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 была обнаружена диметилметакуинонметилтрансфераза (Prokka_02063) - фермент, который катализирует последний шаг в биосинтезе витамина K2. Эти результаты позволяют предположить, что Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 может быть также способен производить витамины B3, В12 и К2.
Figure 00000006
Ниже приведен пример получения биопрепарата на основе штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 в жидкой форме.
Маточная культура
Для получения маточной культуры штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 использовали жидкую питательную среду КСБ (картофельно-сахарозный бульон), для чего сначала готовили картофельный отвар, нарезав 200 г очищенного картофеля ломтиками и отварив его в 800 мл дистиллированной воды в течение 20 минут, затем отвар отфильтровали через ватно-марлевый фильтр, добавили в него 10 г сахарозы и довели значение pH смеси до 7,0.
Полученную жидкую питательную среду разлили в 750 мл качалочные колбы по 100 мл и стерилизовали 30 минут при 1 атм. Затем провели инокуляцию питательной среды в колбах из расчета: 1 пробирка со скошенным питательным агаром (ПА), содержащим чистую культуру Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 на 1 колбу. После этого колбы поместили на качалку (180 об/мин) и культивировали в течение 48 ч при температуре 28°C. Таким образом, в колбах получили маточную культуру Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 с титром бактерий около 4·109 КОЕ/мл, которая может храниться в холодильнике до 1 месяца при температуре 4-6°C для последующего засева в ферментеры.
Рабочая культура
Рабочую культуру штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 для промышленного культивирования получали в ферментерах на среде с мелассой и кукурузным экстрактом. Норма инокуляции маточной культурой 1-3%, продолжительность культивирования 72 часа при температуре 33°C. При выращивании рабочих культур допускается повышение температуры до 37°C. Так получили концентрат бактериальной суспензии на основе штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 с титром бактерий не менее 1·109 КОЕ/мл.
Жидкая форма микробного препарата на основе штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89
Полученный концентрат бактериальной суспензии на основе штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 развели стерильной водой в соотношении 1:10 или 1:20 в зависимости от получаемого титра концентрата бактериальной суспензии. Полученную жидкую форму выдерживали в течение 3-5 дней при температуре 20-25°C до получения титра бактерий не менее 1·108 КОЕ/мл препарата, после чего микробный препарат готов к использованию в сельском хозяйстве. Жидкий препарат стерильно разливали в полиэтиленовые бутылки или канистры, предварительно ополаскивая их спиртом.
Срок хранения полученного препарата составляет не менее 24 мес.
Экспериментально установлено, что для эффективного использования штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 в составе различных микробных препаратов, концентрация (количество жизнеспособных клеток и спор) его бактерий должна составлять 104-109 клеток в 1 мл культуральной жидкости, так как использование штамма в концентрации менее 104 кл/мл ведет к снижению антагонистического и ростостимулирующего эффекта, а увеличение концентрации свыше 109 кл/мл не приводит к его увеличению.
Эффективность микробного препарата, полученного указанным выше способом на основе заявляемого штамма ризосферных бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, была проверена в вегетационных опытах на озимой пшенице сорта «Веда» и редисе сорта «Дуро Краснодарское»
Для проведения этих опытов сосуды объемом по 3 л (для пшеницы и редиса) набивали почвой до веса 3,4 кг. Перед посадкой семян почву проливали до полной полевой влагоемкости водопроводной водой объемом 200 мл. Семена редиса и пшеницы были предварительно отобраны по размеру, простерилизованы и пророщены в стерильных чашках Петри со стерильной фильтровальной бумагой.
Одинаковые по размеру ростки растений поделили на три части. Одну часть ростков в течение 30 мин инокулировали в жидком препарате на основе штамма-прототипа Bacillus subtilis 8A с титром 107 КОЕ/мл, другую часть - в препарате, полученном указанным выше способом на основе заявляемого штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 с титром 107 КОЕ/мл, а третью часть проростков обработали стерильной водой (контроль). Через 25 дней провели измерение биомассы растений редиса, а через 30 дней - измерение биомассы растений пшеницы. Результаты опытов приведены в Таблицах 7 и 8.
Figure 00000007
Figure 00000008
Сравнение данных, полученных по результатам вегетационных опытов на пшенице сорта «Веда» и редисе сорта «Дуро Краснодарское», приведенных в таблицах 7 и 8, позволяют сделать вывод, что биопрепарат, полученный на основе заявленного штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, является более эффективным при воздействием на пшеницу и редис по сравнению с препаратом на основе штамма-прототипа Bacillus subtilis 8A.
Опытным путем было установлено, что для обработки семян сельскохозяйственных растений оптимальным является применение 10% раствора микробного препарата на основе заявляемого штамма ризосферных бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, а для вегетирующих растений - (0,1-3)% его раствор.
Эффективность использования штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 для увеличения продуктивности и качества продукции была проверена в полевых опытах на зерновых, овощных и технических культурах (яровой, озимой пшенице, ячмене, картофеле, капусте, льне, подсолнечнике, сахарной свекле) с применением трех биопрепаратов: Фитоспорина на основе штамма бактерий Bacillus subtilis ВНИИСХМ 128), препарата на основе штамма-прототипа Bacillus subtilis 8A и препарата на основе заявленного штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, полученного указанным выше способом.
Полевой опыт с яровой пшеницей районированного сорта «Лада» проводили в Краснодарском крае на почве: чернозем мощный среднесуглинистый, среднегумусный, гумус по Тюрину - 3,24%, нитратный азот - 8,3 мг/кг, фосфор - 64 мг/кг, калий - 150 мг/кг, pH водная 6,46.
Полевой опыт проводили согласно методике проведения исследований в Географической сети опытов ВИУА (Оценка эффективности микробных препаратов в земледелии / Под ред. Завалина А.А. - М.: Россельхозакадемия, 2000 г. - 82 с.). Посевная площадь делянки 40 м2, учетная - 30 м2. Повторность опыта четырехкратная. Посев пшеницы проводили на участке, предшественником которой был пар. Фон удобрения - N6P52 (аммофос). Предпосевная обработка - культивация на глубину 5-7 см, норма высева яровой пшеницы 5,0 млн всхожих зерен на гектар.
В день посева часть семян пшеницы ничем не обрабатывали (контроль), другую часть семян обрабатывали жидким биопрепаратом Фитоспорин на основе штамма Bacillus subtilis 128 ВНИИСХМ (стандарт), третью часть семян - жидким биопрепаратом на основе штамма Bacillus subtilis 8A (прототип), а последнюю часть семян - жидким препаратом на основе штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, полученным описанным выше способом. При этом обработку семян пшеницы проводили из расчета на 1 т семян - 1 л соответствующего биопрепарата на 9 л воды с добавлением 20-30 г Na-КМЦ - натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы.
Перед посевом проводили культивацию почвы, для чего в нее дополнительно вручную вносили минеральные удобрения в виде аммофоса (N6P52) согласно схеме опыта, после чего осуществляли посев семян пшеницы с выделением определенных посевных зон согласно обработке соответствующим биопрепаратом и зону контроля (без обработки).
Некорневую обработку растений проводили в фазу 3-5 листьев и в фазу конца кущения начала выхода в трубку путем их опрыскивания вручную с помощью ранцевого опрыскивателя из расчета 1 л соответствующего биопрепарата на 300 л воды на гектар.
Агротехника выращивания пшеницы соответствовала зональной технологии. Учет урожая сплошной, поделяночный, произведен комбайном САМПО-130. Урожай приведен к 100% чистоте и 14% влажности. Количество клейковины определяли по ГОСТ 13586.1/68, количество белка - по ГОСТ 10846/91. Статистическая оценка достоверности полученных результатов проведена на основе дисперсионного анализа при 95% уровне значимости. Результаты опыта с яровой пшеницей приведены в Таблице 9.
Figure 00000009
Полевой опыт с озимой пшеницей сорта «Мироновская 808» проводили в Ульяновской области на почве: чернозем выщелоченный среднемощный суглинистый, среднегумусный, гумус по Тюрину - 2,89%, нитратный азот - 9,5 мг/кг, фосфор - 79 мг/кг, калий - 140 мг/кг, pH водная 6,62.
Посевная площадь делянки 30 м2, учетная - 25 м2. Повторность опыта четырехкратная. Посев пшеницы проводили на участке, предшественником которой был пар. Фон удобрения - N6P52 (аммофос). Предпосевная обработка - культивация на глубину 5-7 см, норма высева озимой пшеницы 4,8 млн. всхожих зерен на гектар.
В день посева часть семян пшеницы ничем не обрабатывали (контроль), другую часть семян обрабатывали жидким биопрепаратом Фитоспорин на основе штамма Bacillus subtilis 128 ВНИИСХМ (стандарт), третью часть семян - жидким биопрепаратом на основе штамма Bacillus subtilis 8A (прототип), а последнюю часть семян - жидким препаратом на основе штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, полученным описанным выше способом.
При этом обработку семян пшеницы проводили из расчета на 1 т семян - 1 л соответствующего биопрепарата на 9 л воды с добавлением 20-30 г Na-КМЦ - натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы.
Во всех вариантах опыта посев проводили при дополнительном внесении минерального удобрения в виде аммофоса (N6P52), который вносили вручную под предпосевную культивацию согласно схемы опыта, после чего осуществляли посев семян пшеницы с выделением определенных посевных зон согласно обработке соответствующим биопрепаратом и зоны контроля.
Некорневую обработку растений проводили в фазу кущения и в фазу начала выхода в трубку путем их опрыскивания вручную ранцевым опрыскивателем из расчета 1 л соответствующего биопрепарата на 200 л воды на 1 га.
Агротехника выращивания озимой пшеницы соответствовала зональной технологии. Уборку урожая проводили комбайном САМПО-130. Урожай приведен к 100% чистоте и 14% влажности. Количество клейковины определяли по ГОСТ 13586.1/68.
Статистическая оценка достоверности полученных результатов проведена на основе дисперсионного анализа при 95% уровне значимости.
Результаты опыта с озимой пшеницей приведены в Таблице 10.
Figure 00000010
Полевой опыт с яровым ячменем, сорт «Прерия», проводили в Краснодарском крае на почве: чернозем мощный среднесуглинистый, среднегумусный, гумус по Тюрину - 3,24%, нитратный азот - 8,3 мг/кг, фосфор - 64 мг/кг, калий - 150 мг/кг, pH водная 6,46.
Посевная площадь делянки 40 м2, учетная - 30 м2. Повторность опыта четырехкратная. Посев ячменя проводили на участке, предшественником которой был пар. Фон удобрения - N6P52 (аммофос). Предпосевная обработка - культивация на глубину 5-7 см, норма высева - 4,0 млн всхожих зерен на 1 га.
В день посева часть семян ячменя ничем не обрабатывали (контроль), другую часть семян обрабатывали жидким биопрепаратом Фитоспорин на основе штамма Bacillus subtilis 128 ВНИИСХМ (стандарт), третью часть семян - жидким биопрепаратом на основе штамма Bacillus subtilis 8A (прототип), а последнюю часть семян - жидким препаратом на основе штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, полученным описанным выше способом. При этом обработку семян ячменя проводили из расчета на 1 т семян - 1 л соответствующего биопрепарата на 9 л воды с добавлением 20-30 г Na-КМЦ - натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы.
Перед посевом проводили культивацию почвы, для чего в нее дополнительно вручную вносили минеральные удобрения в виде аммофоса (N6P52) согласно схеме опыта, после чего осуществляли посев семян ячменя с выделением определенных посевных зон согласно обработке соответствующим биопрепаратом и зону контроля (без обработки).
Некорневую обработку растений проводили в фазу 3-5 листьев и в фазу конца кущения начала выхода в трубку путем их опрыскивания вручную с помощью ранцевого опрыскивателя из расчета 1 л соответствующего биопрепарата на 300 л воды на 1 гектар.
Агротехника выращивания ярового ячменя соответствовала зональной технологии. Учет урожая - сплошной, поделяночный, произведен комбайном САМПО-130. Урожай приведен к 100% чистоте и 14% влажности.
Количество белка определяли по ГОСТ 10846/91.
Статистическая оценка достоверности полученных результатов проведена на основе дисперсионного анализа при 95% уровне значимости.
Результаты опыта с яровым ячменем приведены в Таблице 11.
Figure 00000011
Из данных, приведенных в таблицах 9, 10 и 11, следует, что биопрепарат, полученный на основе заявленного штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, оказывает более сильное воздействие на урожайность и улучшение качества зерновых сельскохозяйственных культур по сравнению с биопрепаратом на основе штамма-прототипа Bacillus subtilis 8A.
Полевой опыт с картофелем сорта «Невский» проводили в Ленинградской области на почве: слабоподзолистая суглинистая, гумус по Тюрину - 2,30%, нитратный азот - 22,1 мг/кг, фосфор - 315 мг/кг, калий - 52 мг/кг, pH водная 5,6.
Посадочный материал: отобранные от одной прогретой и перебранной семенной партии картофеля клубни. Масса посадочных клубней 60-70 грамм, глазки наклюнулись. Предшественник: однолетние травы на зеленый корм. Фон удобрений: органические удобрения под картофель не вносили, минеральные удобрения вносили под нарезку гребней из расчета N100P110K130.
Площадь опытной делянки - 50 м2, площадь учетной делянки - 25 м2. Повторность в опыте - четырехкратная. Схема посадки 75×30 см, что означает густоту посадки - 44000 штук клубней на 1 гектар. К периоду уборки - густота стояния растений в среднем составляла 43500 штук на гектар.
В день посева часть клубней картофеля ничем не обрабатывали (контроль), другую часть клубней обрабатывали жидким биопрепаратом Фитоспорин на основе штамма Bacillus subtilis 128 ВНИИСХМ (стандарт), третью часть - жидким биопрепаратом на основе штамма Bacillus subtilis 8A (прототип), а последнюю часть - жидким препаратом на основе штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, полученным описанным выше способом. При этом предпосадочную обработку клубней картофеля проводили из расчета 1 л соответствующего биопрепарата на 9 л воды на 1 тонну клубней.
Посадку картофеля проводили клоновой сажалкой с шириной междурядий 75 см и густотой посадки 400 шт. на 100 м2 с выделением посевных зон согласно обработке соответствующим биопрепаратом и зоны контроля.
Уход за растениями: междурядные обработки - две довсходовые и одна послевсходовая; опрыскивание растений гербицидом: Титус (0,03 кг/га) + Тренд (0,2 кг/га) и инсектицидом Актара, ВДГ (0,06 кг/га), штанговой аппаратурой OH-600 с нормой расхода рабочей жидкости 300 л/га. Опрыскивание растений в каждой из выделенных зон проводили вручную с помощью ранцевого опрыскивателя раствором соответствующего биопрепарата из расчета - 1 л биопрепарата на 300 л воды на гектар: первое - в фазе полных всходов, второе - в фазе бутонизации. Предуборочное скашивание ботвы: БД-4-7. Уборка урожая: картофелекопателем КТН-2Б с подбором клубней вручную.
Результаты опыта с картофелем приведены в Таблице 12.
Figure 00000012
Полевой мелкоделяночный опыт с капустой белокочанной сорта «Подарок» проводили в Ленинградской области на почве: подзолистая суглинистая, гумус по Тюрину - 3,50%, нитратный азот - 30,5 мг/кг, фосфор - 280 мг/кг, калий - 40 мг/кг, pH водная 6,0.
Для получения рассады семена капусты белокочанной сорта «Подарок» высевали в ящики с торфо-минеральным субстратом. Субстрат для набивки ящиков готовили следующим образом: дерново-подзолистую супесчаную почву опытного поля ГНУ ВНИИСХМ (30%) смешали с торфяным грунтом марки «Терравита», производства ЗАО МНПП «Фарт» (50%) и отмытым кварцевым песком (20%), куда добавили раствор азофоски из расчета 100% NPK. Полученный субстрат тщательно перемешали и набили в 4 ящика по 10 кг в каждый.
Для капусты в опыте использовали 0,1% раствор биопрепаратов: на основе штамма Bacillus subtilis 128 ВНИИСХМ (Фитоспорин - стандарт); на основе штамма-прототипа Bacillus subtilis 8A; на основе заявляемого штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, полученного описанным выше способом. В каждый из трех ящиков вносили по 1 л 0,1% раствора одного из указанных биопрепаратов, в четвертый ящик - воду (контроль).
«Школку» капусты выращивали в теплице при температуре 15-20°C.Пикировку растений проводили в фазе 2-3 настоящих листьев в торфяные горшочки объемом 0,5 литра с грунтом.
При этом одновременно с посадкой растений капусты из определенного ящика в торфяные горшочки в лунки вносили 0,1% раствор того же препарата, который прежде вносили в его субстрат (в контроле - воду), в количестве 1 мл раствора на растение. Повторность выращивания рассады капусты 30-кратная.
Затем рассаду в фазе 4-5 настоящих листьев вместе с комом грунта высаживали на постоянное место в почву с выделением зон посадки в соответствии с обработкой одним из указанных биопрепаратов или водой. Размер делянок - 5 м2, расстояние между рядками - 50 см, между растениями в рядке - 35 см. Агротехника выращивания капусты - общепринятая. Для борьбы с вредителями растения дважды обрабатывали 0,15% раствором инсектицида димофоса (40% эмульсия), а также проводили подкормку минеральными удобрениями: через 3 недели после высадки рассады N35P20K30 и в фазу розетки листьев N30P20K35.
В процессе вегетации в каждой выделенной зоне посева согласно способу предыдущей обработки одним из биопрепаратов, дважды проводили опрыскивание растений 0,5% раствором соответствующего биопрепарата из расчета 2 л/га (2 л на 400 л воды на 1 га) ручным ранцевым опрыскивателем SOLO-456. Контроль - без опрыскивания. Повторность опыта четырехкратная.
Результаты опыта с капустой представлены в Таблице 13.
Figure 00000013
Из данных, приведенных в таблицах 12 и 13, следует, что биопрепарат, полученный на основе заявленного штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, оказывает более сильное воздействие на урожайность (продуктивность) овощных сельскохозяйственных культур по сравнению с биопрепаратом на основе штамма-прототипа Bacillus subtilis 8A.
Полевые опыты на сахарной свекле сорта «Рамонская односеменная 47» проводили в учебно-опытном хозяйстве Башкирского государственного аграрного университета, Республика Башкортостан на почве: выщелоченный чернозем. Содержание гумуса в почве - 5,8%, реакция среды pH 6,5, содержание фосфора по Чирикову - 91,1 мг/кг, содержание калия по Чирикову - 130,8 мг/кг. Сумма поглощенных оснований достаточно высокая 54-56 мг/экв., степень насыщенности основаниями - 96-98%.
Норма высева семян - около 5,5 кг/га. Густота стояния растений к уборке 80 тыс. шт/га. Способ посева сахарной свеклы - широкополосный, ширина междурядий - 45 см, стыковых - 50 см. Оптимальная глубина посева семян в почву 3-4 см. Площадь опытной делянки - 50 м2, площадь учетной делянки - 25 м2. Повторность опыта четырехкратная.
Вся площадь посева сахарной свеклы выла поделена на четыре зоны. В каждой выделенной зоне обработку посевов сахарной свеклы проводили 0,5% раствором одного из биопрепаратов: на основе штамма Bacillus subtilis 128 ВНИИСХМ (Фитоспорин - стандарт); на основе штамма-прототипа Bacillus subtilis 8А; на основе заявляемого штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, полученного описанным выше способом, в контроле - без обработки.
Обработку проводили путем опрыскивания растений в каждой из выделенных зон посева 0,5% раствором одного из указанных биопрепаратов из расчета 2 л биопрепарата на 400 л воды на гектар с помощью ручного ранцевого опрыскивателя SOLO-456 дважды: в фазе 4-6 настоящих листьев и в фазе смыкания ботвы в рядках. Контроль без опрыскивания. Повторность четырехкратная.
Результаты опыта с сахарной свеклой представлены в Таблице 14.
Figure 00000014
Полевые опыты на подсолнечнике масличном и льне масличном проводили в Ставропольском крае на почве: чернозем среднемощный, среднесуглинистый, среднегумусный, гумус по Тюрину - 3,71%, нитратный азот - 6,2 мг/кг, фосфор - 75 мг/кг, калий - 180 мг/кг, pH водная 7,15. Агротехника: предшественник яровой ячмень, подсолнечник и лен высевали сеялкой точного высева СКС-610 с порционным высевающим агрегатом.
Варианты опыта предполагали посев семян льна и подсолнечника без обработки (контроль) и с обработкой семян биопрепаратами: Фитоспорином (на основе штамма Bacillus subtilis 128), препаратом на основе штамма-прототипа Bacillus subtilis 8A и препаратом на основе заявляемого штамма Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 из расчета 2,0 л/т, а также с обработкой этими биопрепаратами растений по вегетации из расчета 1,0 л/га.
Опыт мелкоделяночный, посевная площадь делянки 30 м2, учетная - 25 м2. Повторность опыта четырехкратная. Уборку семян льна и подсолнечника проводили малогабаритным комбайном «Винтерштайгер» и определяли урожай во всех вариантах опыта.
Результаты опытов приведены в Таблицах 15 и 16.
Figure 00000015
Figure 00000016
Из данных, приведенных в таблицах 14, 15 и 16, следует, что биопрепарат, полученный на основе заявленного штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, обладает более сильным воздействием на урожайность (продуктивность) технических сельскохозяйственных культур: сахарной свеклы, льна, подсолнечника по сравнению с биопрепаратом на основе штамма-прототипа Bacillus subtilis 8А.
Т.е. результаты испытаний биопрепарата, созданного на основе штамма бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, подтвердили в полевых опытах эффективность его применения для повышения урожая при возделывании таких сельскохозяйственных культур, как: пшеница, ячмень, картофель, капуста, сахарная свекла, лен, подсолнечник, что доказывает перспективность его использования в сельском хозяйстве.
Таким образом, штамм ризосферных бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 является пригодным для использования в сельском хозяйстве в качестве эффективного средства повышения продуктивности растений и их защиты от болезней, вызываемых фитопатогенными микроорганизмами, и расширяет арсенал подобных средств.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Ongena M, Jourdan E, Adam A, Paquot M, Brans A, Joris B, Arpigny JL, Thonart P. 2007. Surfactin and fengycin lipopeptides of Bacillus subtilis as elicitors of induced systemic resistance in plants. Environ Microbiol 9: 1084-1090.
2. Malfanova N, Franzil N, Lugtenberg B, Chebotar V, Ongena M. 2012. Cyclic lipopeptide profile of the plant-beneficial endophytic bacterium Bacillus subtilis C8.Arch Microbiol 194: 893-899.
3. Bais HP, Fall R, Vivanco JM. 2004. Biocontrol of Bacillus subtilis against infection of Arabidopsis roots by Pseudomonas syringae is facilitated by biofilm formation and surfactin production. Plant Physiol 134: 307-319.
4. Kloepper J, Leong J, Teintze M. and Schroth MN. 1980. Pseudomonas siderophores: a mechanism explaining disease suppressive soils. Current Microbiology 4: 317-320.
5. Chen X.-H., R. Scholz, M. Borriss, H. Junge, G. Mogel, S. Kunz, and R. Borriss. 2009. Difficidin and bacilysin produced by plant-associated Bacillus amyloliquefaciens are efficient in controlling fire blight disease. J. Biotechnol. 140: 38-44.
6. Chen XH, Koumoutsi A, Scholz R, Eisenreich A, Schneider K, et al. 2007. Comparative analysis of the complete genome sequence of the plant growth promoting bacterium Bacillus amyloliquefaciens FZB42. Nat Biotechnol 25: 1007-1014.
7. Scholz R, Molohon KJ, Nachtigall J, Vater J, Markley AL, Sussmuth RD, Mitchell DA, BorrissR. 2011. Plantazolicin, a novel microcin B17/streptolysin S-like natural product from Bacillus amyloliquefaciens FZB42. J Bacterid. 193: 215-224.
8. Molohon, K.J.; Melby, J.O.; Lee, J.; Evans, B.S.; Dunbar, K.L.; Bumpus, S.B.; Kelleher, N.L.; Mitchell, D.A. "Structure determination and interception of biosynthetic intermediates for the plantazolicin class of highly discriminating antibiotics." ACS Chem. Biol., 6: 1307-1313 (2011). doi: 10.1021/cb200339d
9. He P, Hao K, Blom J, Rückert C, Vater J et al. 2013. Genome sequence of the plant growth promoting strain Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum B9601-Y2 and expression of mersacidin and other secondary metabolites. J Biotechnol 164: 281-291.
10. Palacios OA., Bashan Y, de-Bashan LE. 2014. Proven and potential involvement of vitamins in interactions of plants with plant growth-promoting bacteria: an overview. Biol. Fertil. Soils 50: 415-432.

Claims (1)

  1. Штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89, депонированный в ФГБНУ ВНИИСХМ под номером RCAM03458, в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от болезней, вызываемых фитопатогенными микроорганизмами.
RU2015137387/10A 2015-09-02 2015-09-02 ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ RU2599416C1 (ru)

Priority Applications (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015137387/10A RU2599416C1 (ru) 2015-09-02 2015-09-02 ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ
US15/756,871 US20200029571A1 (en) 2015-09-02 2016-09-01 Bacterial strain bacillus amyloliquefaciens subsp plantarum bs89 as agent for increasing productivity of plants and protecting same from diseases
RS20180250A RS20180250A1 (sr) 2015-09-02 2016-09-01 Soj bakterija bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum bs89 kao sredstvo povećanja produktivnosti biljaka i njihove zaštite od bolesti
TR2018/06559T TR201806559T1 (tr) 2015-09-02 2016-09-01 Bakteri̇yel tür bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum bs89 bi̇tki̇ veri̇mli̇li̇ği̇ni̇ ve onlarin hastaliktan korunmasini artirma vasitasi
CN201680064147.4A CN110520519A (zh) 2015-09-02 2016-09-01 细菌菌株解淀粉芽孢杆菌植生亚种bs89作为提高植物生产力和防止植物疾病的方法
BG112709A BG67257B1 (bg) 2015-09-02 2016-09-01 Бактериален щам bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum bs89 като средство за повишаване на продуктивността на растенията и тяхната защита срещу болести
UAA201803272A UA121062C2 (ru) 2015-09-02 2016-09-01 Штамм бактерий bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum bs89 в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от болезней
PCT/RU2016/000599 WO2017039491A1 (ru) 2015-09-02 2016-09-01 Штамм бактерий bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum bs89 в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от болезней
PH12018550036A PH12018550036A1 (en) 2015-09-02 2018-04-02 Bacterial strain bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum bs89 as a means of increasing plant productivity and their protection from diseases

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015137387/10A RU2599416C1 (ru) 2015-09-02 2015-09-02 ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2599416C1 true RU2599416C1 (ru) 2016-10-10

Family

ID=57127618

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015137387/10A RU2599416C1 (ru) 2015-09-02 2015-09-02 ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ

Country Status (9)

Country Link
US (1) US20200029571A1 (ru)
CN (1) CN110520519A (ru)
BG (1) BG67257B1 (ru)
PH (1) PH12018550036A1 (ru)
RS (1) RS20180250A1 (ru)
RU (1) RU2599416C1 (ru)
TR (1) TR201806559T1 (ru)
UA (1) UA121062C2 (ru)
WO (1) WO2017039491A1 (ru)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2673155C1 (ru) * 2017-11-08 2018-11-22 Общество с ограниченной ответственностью "Исследовательский Центр "ФитоИнженерия" Штамм Bacillus amyloliquefaciens, обладающий антибактериальной и фунгистатической активностью, и микробиологический препарат на его основе против болезни растения, вызываемой фитопатогенным микроорганизмом
CN110205273A (zh) * 2019-06-11 2019-09-06 山东碧蓝生物科技有限公司 一种具有促生长及抗病作用的解淀粉芽孢杆菌及其应用
RU2701500C1 (ru) * 2018-09-28 2019-09-26 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Национального исследовательского центра "Курчатовский институт" (НИЦ "Курчатовский институт" - ГосНИИгенетика) Штамм спорообразующих бактерий Bacillus amyloliquefaciens, обладающий фунгицидным действием против фитопатогенных грибов, вызывающих заболевания овощных растений, биологический препарат на его основе
RU2724464C1 (ru) * 2019-12-02 2020-06-23 Общество с ограниченной ответственностью «Агрофирма «Урожайная» Штаммы, биопрепарат, способ получения биопрепарата и способ биологической защиты сельскохозяйственных культур от фузариоза
CN115399182A (zh) * 2022-08-25 2022-11-29 贵州省植物园(贵州省园林科学研究所、贵州省植物研究所) 一种结合微生物手段的食用玫瑰黑斑病的绿色防控方法
CN115505552A (zh) * 2022-11-24 2022-12-23 云南省农业科学院农业环境资源研究所 解淀粉芽孢杆菌、菌剂和生物制剂及其应用
RU2804144C2 (ru) * 2019-02-11 2023-09-26 Эвоник Оперейшнс Гмбх Композиции, содержащие бактерии, продуцирующие бациллен, или его препараты

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX2020013203A (es) 2018-06-06 2021-04-28 Amvac Hong Kong Ltd Consorcios microbianos que producen acido dipicolinico y metodos para seleccionar microbios para la formulacion conjunta con portadores.
CN113271780B (zh) 2018-09-28 2023-03-28 Fmc公司 解淀粉芽孢杆菌fcc1256组合物和控制植物病原体的方法
CN110106127B (zh) * 2019-06-18 2022-11-18 青岛农业大学 一种复合菌剂在黄连木种苗培育中的应用及培育方法
CN111154671B (zh) * 2019-12-19 2023-03-31 云南天腾化工有限公司 一种生防菌及其应用
CN116179392A (zh) * 2022-04-11 2023-05-30 成都特普生物科技股份有限公司 枯草芽孢杆菌、用途、菌株的获得方法和菌剂的制备方法
CN115029269B (zh) * 2022-06-21 2024-01-30 新疆农业大学 一种产脂肽类抗菌素的梨火疫病菌拮抗细菌及其发酵方法和应用
CN115181693B (zh) * 2022-06-23 2023-08-22 中国科学院天津工业生物技术研究所 一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用
CN116240149B (zh) * 2023-04-07 2023-10-17 黑龙江八一农垦大学 一种解淀粉芽胞杆菌及其防治芸豆普通细菌性疫病的应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2201678C2 (ru) * 2001-02-19 2003-04-10 Байгузина Фаниля Абузаровна Биопрепарат для защиты растений от грибных и бактериальных болезней
RO127468A2 (ro) * 2010-12-21 2012-06-29 Institutul De Cercetare-Dezvoltare Pentru Protecţia Plantelor Tulpină de bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum cu acţiuni benefice diverse asupra plantelor de cultură
CN102703354A (zh) * 2012-06-08 2012-10-03 江苏农林职业技术学院 一种解淀粉芽孢杆菌植物亚种及应用
RU2478290C2 (ru) * 2011-11-11 2013-04-10 Общество с ограниченной ответственностью "Бациз" Биопрепарат для стимуляции роста и защиты растений от болезней, повышения урожайности и почвенного плодородия
RU2495119C1 (ru) * 2012-11-29 2013-10-10 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИСХМ Россельхозакадемии) ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis 8A В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ ФИТОПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ
RU2528058C1 (ru) * 2013-06-04 2014-09-10 Федеральное государственное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") Штамм бактерий bacillus amyloliquefaciens, обладающий фунгицидным и бактерицидным действием, и биологический препарат на его основе для защиты зерновых растений от заболеваний, вызываемых фитопатогенными грибами

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1952116A (zh) * 2006-04-18 2007-04-25 兰州大学 一株解淀粉芽孢杆菌菌株及其应用
CN102199563B (zh) * 2011-03-25 2012-06-27 南京大学 一种防治植物病害的生防菌及其制备方法
KR101424952B1 (ko) * 2012-03-27 2014-08-01 한국생명공학연구원 식물 생장 촉진 또는 식물 병 방제 활성을 갖는 바실러스 균주 및 이의 용도
CN104195072A (zh) * 2014-08-06 2014-12-10 江苏农林职业技术学院 一种解淀粉芽孢杆菌植物亚种b232及其应用
CN104694430B (zh) * 2015-03-09 2018-03-13 珠海真绿色技术有限公司 解淀粉芽孢杆菌植物亚种zfh‑3及其应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2201678C2 (ru) * 2001-02-19 2003-04-10 Байгузина Фаниля Абузаровна Биопрепарат для защиты растений от грибных и бактериальных болезней
RO127468A2 (ro) * 2010-12-21 2012-06-29 Institutul De Cercetare-Dezvoltare Pentru Protecţia Plantelor Tulpină de bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum cu acţiuni benefice diverse asupra plantelor de cultură
RU2478290C2 (ru) * 2011-11-11 2013-04-10 Общество с ограниченной ответственностью "Бациз" Биопрепарат для стимуляции роста и защиты растений от болезней, повышения урожайности и почвенного плодородия
CN102703354A (zh) * 2012-06-08 2012-10-03 江苏农林职业技术学院 一种解淀粉芽孢杆菌植物亚种及应用
RU2495119C1 (ru) * 2012-11-29 2013-10-10 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИСХМ Россельхозакадемии) ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis 8A В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ ФИТОПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ
RU2528058C1 (ru) * 2013-06-04 2014-09-10 Федеральное государственное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") Штамм бактерий bacillus amyloliquefaciens, обладающий фунгицидным и бактерицидным действием, и биологический препарат на его основе для защиты зерновых растений от заболеваний, вызываемых фитопатогенными грибами

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2673155C1 (ru) * 2017-11-08 2018-11-22 Общество с ограниченной ответственностью "Исследовательский Центр "ФитоИнженерия" Штамм Bacillus amyloliquefaciens, обладающий антибактериальной и фунгистатической активностью, и микробиологический препарат на его основе против болезни растения, вызываемой фитопатогенным микроорганизмом
RU2701500C1 (ru) * 2018-09-28 2019-09-26 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Национального исследовательского центра "Курчатовский институт" (НИЦ "Курчатовский институт" - ГосНИИгенетика) Штамм спорообразующих бактерий Bacillus amyloliquefaciens, обладающий фунгицидным действием против фитопатогенных грибов, вызывающих заболевания овощных растений, биологический препарат на его основе
RU2804144C2 (ru) * 2019-02-11 2023-09-26 Эвоник Оперейшнс Гмбх Композиции, содержащие бактерии, продуцирующие бациллен, или его препараты
CN110205273A (zh) * 2019-06-11 2019-09-06 山东碧蓝生物科技有限公司 一种具有促生长及抗病作用的解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN110205273B (zh) * 2019-06-11 2021-02-09 山东碧蓝生物科技有限公司 一种具有促生长及抗病作用的解淀粉芽孢杆菌及其应用
RU2724464C1 (ru) * 2019-12-02 2020-06-23 Общество с ограниченной ответственностью «Агрофирма «Урожайная» Штаммы, биопрепарат, способ получения биопрепарата и способ биологической защиты сельскохозяйственных культур от фузариоза
WO2021112723A1 (ru) * 2019-12-02 2021-06-10 Общество С Ограниченной Ответственностью "Агрофирма "Урожайная" Штаммы для биологической защиты сельскохозяйственных культур от фузариоза
CN115399182A (zh) * 2022-08-25 2022-11-29 贵州省植物园(贵州省园林科学研究所、贵州省植物研究所) 一种结合微生物手段的食用玫瑰黑斑病的绿色防控方法
CN115399182B (zh) * 2022-08-25 2023-06-23 贵州省植物园(贵州省园林科学研究所、贵州省植物研究所) 一种结合微生物手段的食用玫瑰黑斑病的绿色防控方法
CN115505552A (zh) * 2022-11-24 2022-12-23 云南省农业科学院农业环境资源研究所 解淀粉芽孢杆菌、菌剂和生物制剂及其应用
RU2840733C1 (ru) * 2024-12-24 2025-05-28 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии" Штамм бактерий bacillus velezensis w017 в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от болезней
RU2846736C1 (ru) * 2024-12-26 2025-09-12 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии" Штамм бактерий bacillus amiloliquefaciens к-3618 в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от фитопатогенных бактерий и фитопатогенных грибов

Also Published As

Publication number Publication date
BG67257B1 (bg) 2021-02-26
BG112709A (bg) 2018-06-15
RS20180250A1 (sr) 2018-07-31
UA121062C2 (ru) 2020-03-25
TR201806559T1 (tr) 2018-06-21
CN110520519A (zh) 2019-11-29
WO2017039491A1 (ru) 2017-03-09
US20200029571A1 (en) 2020-01-30
PH12018550036A1 (en) 2018-09-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2599416C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum BS89 В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ
CN111356761B (zh) 用于植物病原体的生物防治的方法和组合物
US10154670B2 (en) Compositions comprising Bacillus strains and methods of use to suppress the activities and growth of fungal plant pathogens
AU2002227228B2 (en) Bacterial inoculants for enhancing plant growth
RU2478290C2 (ru) Биопрепарат для стимуляции роста и защиты растений от болезней, повышения урожайности и почвенного плодородия
EP2676536A1 (en) Method for producing plant seed containing endophytic micro-organisms
CN108271340A (zh) 用于改进的植物性状的经过设计的复合内生菌组合物和方法
JP2018508471A5 (ja) 植物の成長に利益をもたらす及び植物病害を治療するための微生物組成物
WO2005082149A1 (ja) バチルス属細菌を用いた植物病害の防除方法および防除剤
KR102411304B1 (ko) 식물의 저항성을 증진시키는 바실러스 잔톡실리 균주 및 이의 용도
CN112877258A (zh) 一株枯草芽孢杆菌jx-20菌株及其应用
US20220132862A1 (en) Pseudomonas sp. strain, composition comprising the same, and uses thereof
KR20140071145A (ko) 신균주인 페니바실러스 폴리믹사 ab-15 균주 및 이의 용도
CN116918832A (zh) 一种复合生防菌剂、制备方法、应用与应用方法
RU2558291C2 (ru) Полифункциональное средство для растениеводства
Pustika et al. Control of bacterial leaf blight and rice blast with antagonist microbial in the agroecosystem of irrigated rice
RU2625977C1 (ru) Штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens OPS-32 для получения биопрепарата комплексного действия для защиты сельскохозяйственных растений от фитопатогенных грибов, стимуляции их роста и повышения урожайности
KR100479925B1 (ko) 길항 미생물 바실러스속 비아이지21003과 그것을 함유한 펠릿 종자의 제조방법
RU2846734C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus atrophaeus AD22 В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ СОИ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ ФИТОПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ
KR20140028777A (ko) 억새의 근권 토양으로부터 분리한 식물 생장을 촉진하는 바실러스 서브틸리스 js 균주 및 이의 용도
KR102768367B1 (ko) 미생물 유래 화합물을 포함하는 식물병 방제용 조성물 및 이의 용도
CN115786172B (zh) 一株贝莱斯芽孢杆菌及其组合物和应用
RU2800426C9 (ru) Штамм bacillus amyloliquefaciens p20 в качестве средства для борьбы с ризоктониозом картофеля
CN108812700A (zh) 一种含中生菌素和枯草芽孢杆菌的颗粒剂
KR20240113656A (ko) 스트렙토마이세스 올리보레티쿨리 kra21-80 균주를 이용한 식물병 방제용 조성물 및 이의 용도