RU2475530C2 - ИНГИБИТОР РЕПРОДУКЦИИ ВИРУСА ГРИППА А НА ОСНОВЕ ЭКСТРАКТА БАЗИДИАЛЬНОГО ГРИБА Laetiporus sulphureus - Google Patents
ИНГИБИТОР РЕПРОДУКЦИИ ВИРУСА ГРИППА А НА ОСНОВЕ ЭКСТРАКТА БАЗИДИАЛЬНОГО ГРИБА Laetiporus sulphureus Download PDFInfo
- Publication number
- RU2475530C2 RU2475530C2 RU2011110826/10A RU2011110826A RU2475530C2 RU 2475530 C2 RU2475530 C2 RU 2475530C2 RU 2011110826/10 A RU2011110826/10 A RU 2011110826/10A RU 2011110826 A RU2011110826 A RU 2011110826A RU 2475530 C2 RU2475530 C2 RU 2475530C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- influenza
- extract
- fungus
- inhibitor
- Prior art date
Links
- 240000005995 Laetiporus sulphureus Species 0.000 title claims abstract description 27
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 title claims abstract description 12
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 239000000284 extract Substances 0.000 title abstract description 36
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims abstract description 23
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 13
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 claims description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 31
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 27
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 abstract description 15
- 235000007714 Laetiporus sulphureus Nutrition 0.000 abstract description 11
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 abstract description 11
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 29
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 25
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 24
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 23
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 18
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 18
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 13
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 11
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 11
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 11
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- PGZUMBJQJWIWGJ-ONAKXNSWSA-N oseltamivir phosphate Chemical compound OP(O)(O)=O.CCOC(=O)C1=C[C@@H](OC(CC)CC)[C@H](NC(C)=O)[C@@H](N)C1 PGZUMBJQJWIWGJ-ONAKXNSWSA-N 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 229940061367 tamiflu Drugs 0.000 description 9
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 8
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- 241001500351 Influenzavirus A Species 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 6
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- XUYJLQHKOGNDPB-UHFFFAOYSA-N phosphonoacetic acid Chemical compound OC(=O)CP(O)(O)=O XUYJLQHKOGNDPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 3
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 3
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 3
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 3
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- YQEPMZLWYOAQNI-UHFFFAOYSA-N 7-demethoxyegonol Chemical compound C1=C2OCOC2=CC(C=2OC3=CC=C(C=C3C=2)CCCO)=C1 YQEPMZLWYOAQNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 2
- 231100000111 LD50 Toxicity 0.000 description 2
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 2
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 2
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 2
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 2
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 2
- 102000027549 TRPC Human genes 0.000 description 2
- 108060008648 TRPC Proteins 0.000 description 2
- MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N aciclovir Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COCCO)C=N2 MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004150 aciclovir Drugs 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 244000309464 bull Species 0.000 description 2
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- VOLZBKQSLGCZGC-UHFFFAOYSA-N egonol Chemical compound C1=C2OCOC2=CC(C2=CC=3C=C(CCCO)C=C(C=3O2)OC)=C1 VOLZBKQSLGCZGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000000054 fungal extract Substances 0.000 description 2
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 2
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 208000000412 Avitaminosis Diseases 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- VQAALSWNEMBLIX-UHFFFAOYSA-N Egonol glucoside Natural products COc1cc(CCCOC2CC(CO)C(O)C(O)C2O)cc3cc(oc13)c4ccc5OCOc5c4 VQAALSWNEMBLIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 206010021135 Hypovitaminosis Diseases 0.000 description 1
- 241000222689 Laetiporus Species 0.000 description 1
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 206010061291 Mineral deficiency Diseases 0.000 description 1
- 241000208125 Nicotiana Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- RAMYDZNQLYKTGB-UHFFFAOYSA-N O-beta-D-Glucopyranoside-Egonol Natural products C=1C=2C=C(C=3C=C4OCOC4=CC=3)OC=2C(OC)=CC=1CCCOC1OC(CO)C(O)C(O)C1O RAMYDZNQLYKTGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000474 Poliomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 241000222383 Polyporales Species 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 description 1
- 230000010530 Virus Neutralization Effects 0.000 description 1
- 208000003152 Yellow Fever Diseases 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- RAMYDZNQLYKTGB-MXCHMSEPSA-N egonol beta-D-glucoside Chemical compound C=1C=2C=C(C=3C=C4OCOC4=CC=3)OC=2C(OC)=CC=1CCCO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O RAMYDZNQLYKTGB-MXCHMSEPSA-N 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000028 nontoxic concentration Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- VSZGPKBBMSAYNT-RRFJBIMHSA-N oseltamivir Chemical compound CCOC(=O)C1=C[C@@H](OC(CC)CC)[C@H](NC(C)=O)[C@@H](N)C1 VSZGPKBBMSAYNT-RRFJBIMHSA-N 0.000 description 1
- 229960003752 oseltamivir Drugs 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000009979 protective mechanism Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000004223 radioprotective effect Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 208000030401 vitamin deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к противовирусным средствам и может быть использовано в медицине, вирусологии и фармакологии. Ингибитор репродукции вируса гриппа А представляет собой водный экстракт базидиального гриба Laetiporus sulphureus, полученный путем экстракции биомассы измельченного гриба водой при соотношении 1:1 или 1:2 с последующим удалением нерастворимого осадка. Предложенный ингибитор проявляет высокий ингибирующий эффект в отношении вируса гриппа А. Индекс нейтрализации вируса в культуре клеток MDCK составляет 2.5-7 lg. Титры вирусов гриппа А в гомогенатах легких инфицированных мышей составляют (4,67±0,6)-(6,0±0,57) lgЭИД50/мл±I95. 2 з.п. ф-лы, 6 табл., 4 пр.
Description
Изобретение относится к противовирусным средствам, в частности к ингибитору репродукции вируса гриппа типа А субтипов H5N1 и H1N1, и может быть использовано в медицине, вирусологии и фармакологии.
Вирус гриппа А является самым известным и распространенным из более сотни вирусов, вызывающих инфекционные заболевания верхних дыхательных путей. Ежегодно эпидемии гриппа в мире приводят к 3,5 миллионам случаев тяжелых заболеваний и к 300-500 тыс. случаев со смертельным исходом [CDC 2005. Centers for Disease Control. Prevention and control of influenza recommendations of the advisory committee on immunization practices (ACIP) // MMWR. - 2005. - V.54 (RR08). - P.1-40. Available from URL: http://www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/rr5408a1.html].
Новые эпидемичные штаммы вируса гриппа А возникают каждые 1-2 года в результате точечных мутаций в двух поверхностных гликопротеинах - гемагглютинине (НА) и нейраминидазе (NA). Используя разнообразие и изменчивость антигенной структуры вирионов, вирус гриппа способен обходить защитные механизмы иммунитета человека, и поэтому длительного иммунитета против вируса нет ни после естественной инфекции, ни после прививания в отличие от натуральной оспы, желтой лихорадки, полиомиелита или кори.
Поэтому в настоящее время борьба с заболеванием основывается на лечении гриппа с применением этиотропных, патогенетических и симптоматических средств. Поиск новых эффективных в отношении гриппа лекарственных веществ является одной из приоритетных задач здравоохранения.
Гриб Laetiporus sulphureus - серно-желтый трутовик - принадлежит к экологической группе дереворазрушающих грибов-базидиомицетов. В природе встречается на живых и сухостойных стволах деревьев лиственных и хвойных пород, у которых вызывает бурую сердцевинную гниль. Известно, что гриб обладает сложным составом различных биологически активных веществ. В плодовых телах присутствуют следующие группы соединений: тритерпены (до 0,5%), фенольные соединения (0,7-4%), аминокислоты (1-6,5%), углеводы: манит (0,5-2,0%), водорастворимые полисахариды (0,5-2,5%), щелочерастворимые полисахариды (24-62%), хитин (2-5%), белки (12,8-45,1%), липиды (0,6-1%), органические кислоты (2-8%), макро- и микроэлементы (3,5-9%). Выделено 2 новых полисахарида: латипоран А и латиглюкан 1. Впервые для данного гриба обнаружено присутствие алкалоидов и природных соединений [Агафонова С.В. Автореф. канд. дис. Изучение химического состава и особенностей накопления биологически активных соединений в плодовых телах Laetiporus sulphureus (Bull., Fr.), Иркутск, 2007. - 22 с.].
Установлено также, что среди вторичных метаболитов, обнаруженных в экстракте из данного гриба, присутствовали такие, как egonol, demethoxyegonol, egonol glucoside [Jordan К. Zjawtony Biologically Active Compounds from Aphyllophorales (Polypore) Fungi. - J. Nat. Prod. - 2004. - № 67(2). - P.300-310].
Природа пигмента лаетипораксантина, определяющего окраску плодовых тел, была изучена в 70-е годы XX столетия. Пигмент по своей структуре отнесен к каротиноидам, среди которых многие характеризуются биологической активностью [Valadon L.R.G., Mummery R.S.A. A new carotenoid from Laetiporus sulphureus I Ann. Bot. - 1969. - Vol.33. - P.879].
На основе глубинного мицелия Laetiporus sulphureus получена биологически активная добавка (БАД) - Летипорин. Пищевая добавка нетоксична и рекомендована в республике Беларусь для восстановления витаминной и минеральной недостаточности, повышения иммунной устойчивости к простудным заболеваниям [Бабицкая В.Г., Щерба В.В., Гвоздкова Т.С. Новые биологически активные добавки на основе глубинного мицелия базидиальных грибов. Успехи медицинской микологии. - М.: Национальная Академия микологии, 2006. - Т.6. - С.178-181].
Известны антиоксидантная и антимикробная активность гриба Laetiporus sulphureus [Тихонова О.В., Ершова Е.Ю., Лурье Л.М., Куляева В.В., Катруха Г.С., Камзолкина О.В., Ефременкова О.В., Дудник Ю.В. Антимикробные свойства представителей вида Laetiporus sulphureus (Fr.) Bond et sing // Успехи медицинской микологии: под ред. Ю.В. Сергеева. - 2001. - Т.1. - Гл.6. - С.313-315; Тихонова О.В., Лурье Л.М., Ершова Е.Ю., Ефременкова О.В., Дудник Ю.В. Изучение глубинной культуры Laetiporus sulphureus // Современная микология в России. - М., 2002. - С.257; Капич А.Н., Гвоздкова Т.С., Квачева З.Б., Николаева С.Н., Шишкина Л.Н., Галкин С., Кхатакка Н., Конопля Е.Ф., Верещако Г.Г., Ходосовская A.M., Рудковская Я.А. Антиоксидантная, радиопротекторная и антивирусная свойства мицелиального экстракта гриба Laetiporus sulphureus // Успехи медицинской микологии: под ред. Ю.В.Сергеева. - М. - 2004. - Т.3. - С.146; Turkoglu A. Duru M.E., Mercan N., Kivrak I., Gezer К. Antioxidant and antimicrobial activities of Laetiporus sulphurous (Bull.) Murril // Food Chemistry. - 2007. - 101. - P.267-273]. Упоминается в ряду других базидиальных грибов как продуцент соединений, подавляющих развитие вирусных заболеваний растений, например табачной мозаики [патент JP 1272508 (А), 1989].
Известно использование экстракта из культуральной биомассы гриба Laetiporus sulphureus в качестве противовирусного средства в отношении растительных вирусов (патент Японии №1272508, МПК A01N 63/04, опубл. 31.10.1989 г.).
Одним из наиболее близких аналогов (прототипом) является применение водного экстракта из мицелия гриба Laetiporus sulphureus в качестве противовирусного средства в отношении вируса герпеса 1 типа (ВПГ-1). Установлено, что экстракты мицелия этого гриба проявляли активность в отношении вариантов вируса простого герпеса первого типа (ВПГ-1), устойчивых к ингибиторам ацикловиру и фосфоноуксусной кислоте, обладающим высокой избирательностью антивирусного эффекта. Работа проведена на экспериментальной модели герпетической инфекции в перевиваемых культурах клеток глиомы - С-6, полученных из опухоли мозга крысы, а также в клетках почки африканской желтой мартышки - Vero [Квачева З.Б., Капич А.Н., Вотяков В.И., Николаева С.Н. Противовирусная активность экстрактов мицелия базидиального гриба Laetiporus sulphureus / Успехи медицинской микологии. - 2005. - Т.5. - С.271-273]. Для оценки противовирусной активности экстракта мицелия гриба его разводили водой и добавляли в нетоксичных концентрациях в культуры клеток одновременно с инфицированием соответствующим вариантом ВПГ-1. Перед этим определяли максимально переносимую дозу препарата. Противовирусную активность препаратов констатировали по снижению инфекционной активности вируса. При внесении экстракта мицелия в различных концентрациях (0,1%; 0,2%; 0,4% и 0,8%) в инфицированные культуры клеток наблюдали выраженный вирусингибирующий эффект в отношении всех исследованных вариантов ВПГ-1 - чувствительных и резистентных к ацикловиру и фосфоноуксусной кислоте. Вирусингибирующая концентрация экстракта мицелия (0,2% раствор) была в 4 раза меньше его максимально переносимой дозы. Снижение инфекционной активности вируса для разных вариантов ВПГ-1 составляло от 2,8 до 3,2 lgТЦД50/мл.
Однако в прототипе исследовались экстракты, полученные из культивируемого мицелия гриба Laetiporus sulphureus, которые обладают ингибирующей активностью только в отношении вируса герпеса 1 типа (ВПГ-1).
Техническим результатом заявленного технического решения является обеспечение возможности получения средства на основе водного экстракта базидиального гриба Laetiporus sulphureus, обладающего ингибирующим действием в отношении вируса гриппа типа А.
Указанный технический результат достигается тем, что ингибитор репродукции вируса гриппа А представляет собой водный экстракт базидиального гриба Laetiporus sulphureus, полученный путем экстракции биомассы измельченного гриба водой при соотношении 1:1 или 1:2 с последующим удалением нерастворимого осадка.
Биомассу гриба получают из плодовых тел и экстрагируют измельченную биомассу гриба водой при соотношении 1:2 или путем культивирования на жидкой питательной среде на основе овсяного отвара и экстрагируют измельченную биомассу гриба водой при соотношении 1:1.
В предлагаемом изобретении водные экстракты и извлеченные из них полисахариды исследовались с использованием вирусной модели на перевиваемой культуре клеток MDCK, инфицированной штаммами вируса гриппа A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) и A/Moscow/226/2009 (H1N1)v. С помощью инвертированного микроскопа регистрировали цитопатическое действие (ЦПД) в монослое клеток и определяли наличие или отсутствие вируса в среде культивирования по реакции гемагглютинации (РГА) с 1% эритроцитами кур. После определения 50%-ных инфицирующих доз (ИД50) вируса (в lgТЦД50/мл) в контроле и при инкубировании с препаратами рассчитывали индексы нейтрализации (ИН) вируса in vitro (в lg):
ИН = ИД50контроль - ИД50опыт.
На модели лабораторных мышей, инфицированных штаммами вируса гриппа A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) и A/Moscow/226/2009 (H1N1)v, по разнице между титрами вируса в гомогенатах легких в контроле и в опыте оценивался индекс подавления продукции (ИПП) вируса под влиянием препарата in vivo.
Ниже приведены примеры 1-3 получения экстрактивных веществ из плодовых тел, мицелия и полисахаридов гриба Laetiporus sulphureus.
Пример 1. Получение экстракта из плодовых тел гриба. 100 г измельченного замороженного плодового тела суспендировали в 200 мл стерильной дистиллированной воды и выдерживали на кипящей водяной бане 30 мин, освобождали от осадка центрифугированием в течение 40 мин при 10000 об/мин. Содержание сухих веществ составляло 5 мг/мл (образец №08-09). Образец хранился 6 мес при температуре - 20°С.
Пример 2. Получение экстракта из плодовых тел гриба. 200 г измельченного замороженного плодового тела суспендировали в 400 мл стерильной дистиллированной воды и выдерживали на кипящей водяной бане 30 мин, освобождали от осадка центрифугированием в течение 40 мин при 10000 об/мин. Содержание сухих веществ составляло 5 мг/мл (образец №09-12).Образец хранился 1 год при температуре - 20°С.
Пример 3. Получение экстракта из биомассы гриба, полученной культивированием на питательной среде. Использовали 27-суточную культуру гриба, полученную путем культивирования на жидкой питательной среде на основе овсяного отвара в стационарном состоянии. Биомассу гриба в количестве 5 г, отделенную от культуральной жидкости (КЖ) через капроновый фильтр, замораживали, затем измельчали, добавляли 5 мл дистиллированной воды, обрабатывали на ультразвуковом дезинтеграторе при амплитуде 24 мкм, доводили объем до 25 мл, центрифугировали 20 минут при 10000 об/мин. Содержание сухих веществ в образце составляло 1 мг/мл (образец №09-61).
Пример 4. Определение противовирусной активности образцов экстракта гриба Laetiporus sulphureus на культуре клеток.
Культура клеток. Для тестирования противовирусной активности препаратов использовали перевиваемую культуру клеток MDCK, полученных из коллекции культур клеток ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор». В стерильном месте суспензию разводили предварительно подогретой до температуры +37°С средой RPMI-1640, содержащей 5% сыворотки крови плодов коровы, до концентрации 1,0-1,5×105 клеток/мл. По 100 мкл суспензии клеток MDCK вносили в 96-луночные планшеты 12-канальной автоматической пипеткой. Планшеты с клетками помещали в термостат при температуре +37°С, 5% CO2 и 100% влажности на 2-3 сут до образования клеточного монослоя.
Определение токсичности образца. Для определения токсических доз препаратов экстракты разводили в несколько раз и оценивали наличие токсического действия в монослоях культуры клеток MDCK с помощью инвертированного микроскопа. Для этого делали разведения исходного препарата в 5 раз, в 10, 100, 1000, 10000, 100000, 1000000 раз средой RPMI-1640, содержащей 5% сыворотки крови плодов коровы, вносили по 150 мкл в соответствующие лунки планшета и ставили в термостат при температуре +37°С, 5% СO2 и 100% влажности на 2 сут. Через 2 сут с помощью инвертированного микроскопа оценивали наличие токсического действия в монослоях клеток MDCK, инкубированных с разными концентрациями грибных экстрактов. В качестве контроля использовали монослой культуры клеток MDCK без препарата. Определяли минимально токсическую концентрацию (МТК) и максимально переносимую концентрацию (МПК), равную половине концентрации вещества, не оказывающей на клетки токсического действия. В исследованиях противовирусной активности препаратов использовали МПК или более низкие концентрации.
Определение противовирусной активности образцов in vitro. Для оценки противовирусной эффективности водных экстрактов базидиальных грибов на культуре клеток MDCK использовали штамм вируса гриппа птиц A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) и штамм пандемического вируса гриппа A/Moscow/226/2009 (H1N1)v из коллекции ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор», наработанные на 10-суточных куриных эмбрионах (КЭ). Концентрацию вируса в исследуемых образцах определяли путем титрования на КЭ или на клетках MDCK, рассчитывали и выражали в lgЭИД50/мл (десятичных логарифмах 50%-ных эмбриональных инфицирующих доз в мл) или в lgТЦД50/мл (десятичных логарифмах 50%-ных тканевых цитопатических доз в мл) соответственно по методу Спирмана-Кербера. Наработанные и использованные в работе серии вирусаллантоисной жидкости (ВАЖ) со штаммами вируса гриппа хранили при -70°С. Концентрация вируса в вирусаллантоисной жидкости (ВАЖ) составляла по разным экспериментам от 7,5 до 9,5 lgЭИД50/мл.
Для определения противовирусной активности препаратов in vitro использовали максимально переносимые концентрации (МПК) препаратов. В среде Axcevir-MDCK (Stem Alpha, Франция), содержащей 2 мкг/мл трипсина ТРСК (Sigma, США), готовили 8 разведений ВАЖ с десятикратным шагом. Для определения противовирусной активности препаратов на монослой клеток MDCK вносили 50 мкл выбранного разведения препарата и 100 мкл 1-8-го разведений ВАЖ. Клетки инкубировали 2 сут при температуре 37°С в атмосфере 5% СО2 в термостате ТС-1/80 СПУ (Россия). Через 2 сут в каждой лунке с помощью инвертированного микроскопа регистрировали цитопатическое действие в монослое клеток и определяли наличие вируса гриппа в среде культивирования по реакции гемагглютинации с 1% эритроцитами кур. На основании этого определяли титры вируса гриппа в lgТЦД50/мл в контроле (ИД50 in vitro без препарата) и в опыте (ИД50 in vitro с препаратом), а затем высчитывали индекс его нейтрализации (ИН) под влиянием препарата: ИН = ИД50контроль - ИД50опыт (lg).
В качестве контроля использовали:
1. Контроль клеток MDCK, культивируемых в питательной среде Axcevir-MDCK, содержащей 2 мкг/мл трипсина трипсина ТРСК.
2. Контроль репродукции вируса гриппа A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) или A/Moscow/226/2009 (H1N1)v с 1 до 8 разведения с десятикратным шагом в клетках MDCK, культивируемых в питательной среде Axcevir-MDCK, содержащей 2 мкг/мл трипсина ТРСК.
Статистическая обработка данных. При расчетах 50% инфицирующих доз в каждом единичном повторе использовали метод Спирмана-Кербера определяли 95%-ный доверительный интервал (I95) и сравнивали по z-критерию. Для нескольких повторов определяли среднее значение показателя (М) и ошибку среднего (m), достоверность различия средних величин устанавливали с помощью t-критерия Стьюдента.
| Таблица 1 | ||||
| Результаты противовирусной активности экстракта из плодового тела Laetiporus sulphureus в культуре клеток MDCK, инфицированных A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) | ||||
| № препарата и его разведение | Содержание сухого вещества в препарате, мг/мл | Конечная концентрация сухих веществ препарата в культуральной жидкости, мг/мл | Инфекционность вируса (титр ВАЖ) в клетках MDCK (ИД50 в IgTЦД50/мл) | Индекс нейтрализации ИД50конт-ИД50опыт (lg) |
| 08-09 (1:5) | 5,0 | 0,3 | 2,5 | 7 |
| Контроль вируса без препарата | 9,5 | 0 | ||
В таблице 1 представлены результаты противовирусной активности экстракта из плодового тела гриба (образец 08-09). Следует отметить, что экстракт не оказывал токсического действия на клетки MDCK даже в исходных разведениях.
Как видно из таблицы 1, экстракт из плодового тела в сравнении с контролем проявил высокий ингибирующий эффект в отношении вируса гриппа птиц, индекс нейтрализации составил 7 lg, действующая на вирус доза препарата составляла 0,3 мг/мл.
Несмотря на то что при хранении образца в течение полугода при отрицательной температуре (-20°С) индекс нейтрализации снизился на 2 lg, его противовирусная активность оставалась высокой, индекс нейтрализации вируса составил 5 lg (табл.2).
| Таблица 2 | ||||
| Результаты противовирусной активности экстракта из плодового тела Laetiporus sulphureus в культуре клеток MDCK, инфицированных A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) после 6 мес хранения | ||||
| № препарата и его разведение | Содержание сухого вещества в препарате, мг/мл | Конечная концентрация сухих веществ препарата в культуральной жидкости, мг/мл | Инфекционность вируса (титр ВАЖ) в клетках MDCK (ИД50 в ТЦД50/мл) | Индекс нейтрализации ИД50конт-ИД50опыт (lg) |
| 08-09 (1:5) хранение 6 мес | 5,0 | 0,3 | 2,5 | 5 |
| Контроль вируса без препарата | 7,5 | 0 | ||
В таблице 3 представлены результаты противовирусной активности экстракта из плодового тела Laetiporus sulphureus после 1 года хранения.
Полученные результаты свидетельствуют о высокой противовирусной активности экстрактов, хранящихся в морозильной камере длительное время. Даже при разведении экстракта 1:100 индекс нейтрализации составил 2 lg.
| Таблица 3 | ||||
| Результаты противовирусной активности экстракта из плодового тела Laetiporus sulphureus в культуре клеток MDCK, инфицированных A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) после 1 года хранения | ||||
| № препарата и его разведение, срок хранения при t -20°С | Содержание сухого вещества в препарате, мг/мл | Конечная концентрация сухих веществ препарата в культуральной жидкости, мг/мл | Инфекционность вируса (титр ВАЖ) в клетках MDCK (ИД50 в lgТЦL50/мл) | Индекс нейтрализации ИД50конт-ИД50опыт (lg) |
| 09-12 (исх.) | 5,0 | 1,67 | 2,5 | 5 |
| 09-12 (исх.) 1 год хранения |
5,0 | 1,67 | 2,5 | 5 |
| 09-12 1:100 1 год хранения |
5,0 | 0,067 | 5,5 | 2 |
| Контроль вируса без препарата | 7,5 | 0 | ||
Сравнивая результаты по всем образцам, можно сделать вывод о том, что антивирусная активность гриба в отношении штамма вируса гриппа A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) зависит от количественного содержания действующих компонентов. В плодовых телах их, в пересчете на сухие вещества, содержится больше, чем в мицелии. Биологические компоненты гриба выдерживают без потери активности длительное хранение в замороженном состоянии. Минимальная доза экстракта (по сухому веществу), оказывающая ингибирующий эффект в культуре клеток, составляет 0,01 мг/мл, а на лабораторных животных (мышах) - 1,0 мг в сутки.
В таблице 4 представлены результаты противовирусной активности грибного экстракта из мицелия гриба Laetiporus sulphureus, полученного культивированием на жидкой питательной среде.
Как видно из таблицы 4, эффективность экстракта из мицелия гриба (образец 09-61), полученного в культуре, была ниже, чем экстрактов из плодовых тел. Но следует учесть, что достижение относительно высокого индекса нейтрализации 2,5 lg было достигнуто при конечной концентрации сухих веществ в препарате 0,01 мг/мл, в то время как для экстракта из плодового тела для достижения индекса нейтрализации 2 lg конечная концентрация составляла 0,067 мг/мл, что больше в 6,7 раз. Результаты показывают, что мицелий гриба, полученный в культуре, содержит, как и плодовое тело, активные соединения, ингибирующие инфицирование вирусом гриппа A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) культуры клеток MDCK.
Кроме того, авторами была проведена оценка изменения инфекционности пандемического штамма вируса гриппа A/Moscow/226/2009 (H1N1)v в клетках MDCK при внесении в среду культивирования экстракта №09-12 в концентрации 5 мг/мл или Тамифлю. Усредненные результаты для нескольких повторов этих экспериментов в сравнении с контролем представлены в таблице 5.
| Таблица 5 | |||
| Инфекционность штамма вируса гриппа A/Moscow/226/2009 (H1N1)v в клетках MDCK при инкубировании с экстрактом базидиальных грибов или Тамифлю и в Контроле (М±m) | |||
| Штамм вируса гриппа | Инфекционность вируса в клетках MDCK (ИД50 в lgТЦД50/мл) через 3 сут после заражения при инкубировании с препаратами: | ||
| 09-12 (5 мг/мл) | Тамифлю | Контроль | |
| A/Moscow/226/2009 | 2,3±0,1* | 2,7±0,1* | 5,4±0,1 |
| (H1N1)v | n=1 | n=4 | n=4 |
| Примечание: * - достоверное отличие от контрольной группы (р=0,05); n - число повторов. | |||
Представленные в таблице 5 данные свидетельствуют о достоверном снижении инфекционности вируса гриппа в культуре клеток MDCK при инкубировании с экстрактом 09-12 на 3,1 lg. Инфекционность вируса гриппа в клетках MDCK при использовании Тамифлю также была ниже, чем в контроле на 2,7 lg.
Далее была изучена противовирусная активность данного грибного экстракта по способности подавлять продукцию штаммов вируса гриппа A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) и A/Moscow/226/2009 (H1N1)v при оценке индекса подавления размножения (ИПР) вируса в легких у лабораторных мышей через 4 сут после заражения (см. ниже табл.6).
Пример 5. Определение противовирусной активности гриба Laetiporus sulphureus на животных. Исследование выполнено на линейных мышах Balb/c, полученных из питомника лабораторных животных ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор», массой 14-17 г. Проведение исследований и содержание животных осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» [Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. №755].
Инфицирование мышей вирусом гриппа производили интраназально под легким эфирным наркозом при введении в обе ноздри суммарно 40 мкл соответствующего разведения вируса. Мышей инфицировали штаммами вируса гриппа A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) в дозе 10 ЛД50 (50%-ных летальных доз), равной 1,6±0,4 lgЭИД50/гол., и A/Moscow/226/2009 (H1N1)v в дозе 10 ИД50 (50%-ных инфицирующих доз), равной 1,3±0,3 lgЭИД50/гол. Определение концентрации ВГ в легких проводили через 4 сут после заражения вирусом гриппа при титровании объединенных гомогенатов легких для мышей каждой группы на 9-суточных КЭ, рассчитывали по методу Спирмана-Кербера и выражали в lgЭИД50/мл.
В качестве препарата сравнения в экспериментах in vivo использовали Тамифлю (озельтамивир), который вводили мышам один раз в сутки перорально из расчета 30 мкг/г массы в объеме 0,2 мл сразу после заражения и далее в течение 4 сут после заражения вирусом гриппа.
Статистическая обработка данных. При расчетах титров вируса гриппа в биологических образцах в каждом единичном повторе использовали метод Спирмана-Кербера, определяли 95%-ный доверительный интервал (I95) и сравнивали по z-критерию. Для нескольких повторов определяли среднее значение показателя (М) и ошибку среднего (m), достоверность различия средних величин устанавливали с помощью t-критерия Стьюдента.
В таблице 6 представлены результаты определения титров вируса гриппа в легких у мышей через 4 сут после инфицирования штаммами A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) или A/Moscow/226/2009 (H1N1)v.
Как видно из таблицы 6, при введении препарата 09-12 в концентрации 5 мг/мл титры вируса в легких у инфицированных мышей были достоверно ниже, чем в соответствующей контрольной группе (табл.6). Было показано, что при введении препарата 09-12 мышам, инфицированным штаммом вируса гриппа A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1), индекс подавления продукции (ИПП) вируса в легких составлял 1,16 lg, а при введении Тамифлю он был равен 1,33 lg. При этом через 4 сут концентрация вируса гриппа в гомогенатах легких у мышей, инфицированных штаммом вируса гриппа A/Moscow/226/2009 (H1N1)v, получавших препараты 09-12 и Тамифлю, была достоверно ниже контроля на 0,75 lg.
| Таблица 6 | |||
| Титры штаммов вируса гриппа A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) или A/Moscow/226/2009 (H1N1)v в легких у мышей через 4 сут после инфицирования при пероральном введении грибного экстракта из Laetiporus sulphureus или Тамифлю в сравнении с контролем | |||
| Штамм вируса гриппа | Титры вируса гриппа (в lgЭИД50/мл±I95) в гомогенатах легких у инфицированных мышей, получавших препараты: | ||
| 09-12 (5 мг/мл) | Тамифлю | Контроль | |
| A/chicken/Kurgan/05/2005 (H5N1) | 4,67±0,6* | 4,5±0,62* | 5,83±0,55 |
| A/Moscow/226/2009 (H1N1)v | 6,0±0,57* | 6,0±0,69* | 6,75±0,49 |
| Примечание: * - достоверное отличие от контрольной группы при р<0,05. | |||
Как видно из таблиц 3, 5 и 6, экстракт 09-12 в исходной концентрации после года хранения показал достоверное снижение титра вируса гриппа птиц A(H5N1) и пандемического вируса гриппа A(H1N1/09)v не только на клеточной культуре, но и на лабораторных животных.
В процессе подавления репродукции вируса гриппа участвует широкий спектр химических соединений, входящих в состав гриба, обеспечивающих антивирусное действие препаратов на основе гриба Laetiporus sulphureus.
Claims (3)
1. Ингибитор репродукции вируса гриппа А, представляющий собой водный экстракт базидиального гриба Laetiporus sulphureus, полученный путем экстракции биомассы измельченного гриба водой при соотношении 1:1 или 1:2 с последующим удалением нерастворимого осадка.
2. Ингибитор репродукции вируса гриппа А по п.1, отличающийся тем, что получают биомассу гриба из плодовых тел и экстрагируют измельченную биомассу гриба водой при соотношении 1:2.
3. Ингибитор репродукции вируса гриппа А по п.1, отличающийся тем, что получают биомассу гриба путем культивирования на жидкой питательной среде на основе овсяного отвара и экстрагируют измельченную биомассу гриба водой при соотношении 1:1.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011110826/10A RU2475530C2 (ru) | 2011-03-22 | 2011-03-22 | ИНГИБИТОР РЕПРОДУКЦИИ ВИРУСА ГРИППА А НА ОСНОВЕ ЭКСТРАКТА БАЗИДИАЛЬНОГО ГРИБА Laetiporus sulphureus |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011110826/10A RU2475530C2 (ru) | 2011-03-22 | 2011-03-22 | ИНГИБИТОР РЕПРОДУКЦИИ ВИРУСА ГРИППА А НА ОСНОВЕ ЭКСТРАКТА БАЗИДИАЛЬНОГО ГРИБА Laetiporus sulphureus |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2011110826A RU2011110826A (ru) | 2012-09-27 |
| RU2475530C2 true RU2475530C2 (ru) | 2013-02-20 |
Family
ID=47078089
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011110826/10A RU2475530C2 (ru) | 2011-03-22 | 2011-03-22 | ИНГИБИТОР РЕПРОДУКЦИИ ВИРУСА ГРИППА А НА ОСНОВЕ ЭКСТРАКТА БАЗИДИАЛЬНОГО ГРИБА Laetiporus sulphureus |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2475530C2 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2580296C1 (ru) * | 2015-02-26 | 2016-04-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор") | ПРОТИВОВИРУСНОЕ СРЕДСТВО НА ОСНОВЕ СУХОГО ЭКСТРАКТА ПЛОДОВОГО ТЕЛА КСИЛОТРОФНОГО БАЗИДИОМИЦЕТА Bjerkandera adusta |
| RU2830096C1 (ru) * | 2023-12-21 | 2024-11-12 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Способ получения средства на основе экстрактов из базидиальных грибов, обладающего противовирусным действием |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050238655A1 (en) * | 2004-01-06 | 2005-10-27 | Paul Stamets | Antiviral activity from medicinal mushrooms |
| US20060013825A1 (en) * | 2004-07-16 | 2006-01-19 | Medimush Aps | Immune modulating compounds from fungi |
| RU2366697C2 (ru) * | 2007-07-03 | 2009-09-10 | Закрытое Акционерное Общество "Дижафарм" | Средство, обладающее системным действием, его применение, фармкомпозиции, способы лечения и профилактики |
-
2011
- 2011-03-22 RU RU2011110826/10A patent/RU2475530C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050238655A1 (en) * | 2004-01-06 | 2005-10-27 | Paul Stamets | Antiviral activity from medicinal mushrooms |
| US20060013825A1 (en) * | 2004-07-16 | 2006-01-19 | Medimush Aps | Immune modulating compounds from fungi |
| RU2366697C2 (ru) * | 2007-07-03 | 2009-09-10 | Закрытое Акционерное Общество "Дижафарм" | Средство, обладающее системным действием, его применение, фармкомпозиции, способы лечения и профилактики |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| JORDAN K. ZJAWIONY. Biologically Active Compounds from Aphyllophorales (Polypore) Fungi. // J. Nat. Prod., 2004, 67(2), p.300-310. * |
| КВАЧЕВА З.Б. И ДР. Противовирусная активность экстрактов мицелия базидиального гриба Laetiporus sulphurous. Успехи медицинской микологии. 2005, т.5, с.271-273. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2580296C1 (ru) * | 2015-02-26 | 2016-04-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор") | ПРОТИВОВИРУСНОЕ СРЕДСТВО НА ОСНОВЕ СУХОГО ЭКСТРАКТА ПЛОДОВОГО ТЕЛА КСИЛОТРОФНОГО БАЗИДИОМИЦЕТА Bjerkandera adusta |
| RU2830096C1 (ru) * | 2023-12-21 | 2024-11-12 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Способ получения средства на основе экстрактов из базидиальных грибов, обладающего противовирусным действием |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2011110826A (ru) | 2012-09-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2882588T3 (es) | Actividad antiviral de setas medicinales y sus constituyentes activos | |
| Serkedjieva | Antiviral activity of the red marine alga Ceramium rubrum | |
| Shibnev et al. | Antiviral activity of Inonotus obliquus fungus extract towards infection caused by hepatitis C virus in cell cultures | |
| JP2003192606A (ja) | 楠茸の肝臓保健製剤 | |
| Adetunji et al. | Efficacy of phytochemicals of medicinal plants for the treatment of human echinococcosis: Echinococcal disease, hydatidosis, or hydatid disease drug discovery | |
| Zime-Diawara et al. | The antimalarial action of aqueous and hydro alcoholic extracts of Artemisia annua L. cultivated in Benin: In vitro and in vivo studies | |
| Doostmohammadian et al. | In ovo evaluation of antiviral effects of aqueous garlic (Allium sativum) extract against a velogenic strain of Newcastle disease virus | |
| RU2475530C2 (ru) | ИНГИБИТОР РЕПРОДУКЦИИ ВИРУСА ГРИППА А НА ОСНОВЕ ЭКСТРАКТА БАЗИДИАЛЬНОГО ГРИБА Laetiporus sulphureus | |
| RU2480227C2 (ru) | Противовирусное средство на основе меланина | |
| Susantiningsih et al. | Schizonticidal effect of a combination of Amaranthus spinosus L. and Andrographis paniculata Burm. f./Nees extracts in Plasmodium berghei-infected mice | |
| CN102755355B (zh) | 抗a型流感病毒或肠病毒的药物组合物 | |
| Serkedjieva et al. | Antiinfluenza virus effect of extracts from marine algae and invertebrates | |
| RU2118163C1 (ru) | Лекарственное средство для лечения вирусных заболеваний | |
| RU2283126C1 (ru) | Средство для профилактики и лечения вирусного гриппа птиц | |
| RU2846561C1 (ru) | Противовирусное средство на основе экстракта культивируемого мицелия ксилотрофного гриба-базидиомицета Daedaleopsis tricolor (bull.) Bondartsev et Singer | |
| RU2475529C2 (ru) | ИНГИБИТОР РЕПРОДУКЦИИ ВИРУСА ГРИППА А НА ОСНОВЕ ЭКСТРАКТА БАЗИДИАЛЬНОГО ГРИБА Phallus impudicus | |
| KR101194868B1 (ko) | 산초나무 추출물을 함유하는 항 바이러스용 조성물 | |
| RU2367133C1 (ru) | Средство для предпосевной обработки семян гороха | |
| RU2580305C1 (ru) | ПРОТИВОВИРУСНОЕ СРЕДСТВО НА ОСНОВЕ СУХОГО ЭКСТРАКТА ЛИШАЙНИКА Cetraria islandica | |
| Ledoux et al. | In vitro antiviral activity against SARS-CoV-2 of 28 Strychnos extracts | |
| Ibragimova et al. | Toxicity and antiviral activity of the extracts of submerged mycelium of nematophagous Duddingtonia flagrans fungus in vero cell culture | |
| RU2464033C1 (ru) | Усниновая кислота и ее окисленное производное в качестве ингибиторов репродукции вируса гриппа | |
| RU2584751C1 (ru) | ПРОТИВОВИРУСНОЕ СРЕДСТВО НА ОСНОВЕ СУХОГО ЭКСТРАКТА ПЛОДОВОГО ТЕЛА БАЗИДИОМИЦЕТА Coprinus comatus | |
| RU2838993C1 (ru) | Способ получения экстракта из высшего растения Сабельника Залесова (Comarum salesovianum), обладающего противогриппозной активностью | |
| André et al. | Anti-Trypanosomal Activity of Guiera senegalensis on Trypanosoma brucei Infected Mice |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180323 |