RU2468023C1

RU2468023C1 - Новые производные оксазолидинона с циклическим амидоксимом или циклическим амидразоном и содержащие их фармацевтические композиции

Info

Publication number: RU2468023C1
Application number: RU2011116164/04A
Authority: RU
Inventors: Йоунг Лаг ЧО; Санг Еун ЧАЕ; Сунг Йоон БАЕК; Йеон Ок КИМ; Сеонг Дзин КИМ; Хианг Соок ЛИ; Дзу Хиун ПАРК; Тае Кио ПАРК; Сунг Хо ВОО; Йонг Зу КИМ
Original assignee: Легокем Байосайенсез, Инк.
Priority date: 2008-09-24
Filing date: 2009-09-22
Publication date: 2012-11-27
Also published as: BRPI0918964A2; KR101023174B1; US8242113B2; EP2331529A4; ZA201101894B; EP2331529B1; ES2526120T3; CA2737299C; BRPI0918964B1; EP2331529A2; WO2010036000A3; KR20100034522A; AU2009297294A1; AU2009297294B2; US20110178293A1; CN102171207A; RU2011116164A; CA2737299A1; JP5511824B2; CN102171207B

Abstract

Описывается производное оксазолидинона общей формулы

где значения радикалов приведены в формуле изобретения, и фармацевтическая антибиотическая композиция, включающая в качестве активного ингредиента новое производное оксазолидинона, его гидрат, сольват, изомер или фармацевтически приемлемую соль. Данные соединения характеризуются широким антибактериальным спектром и высокой антибактериальной активностью против грам-положительных и грам-отрицательных резистентных бактерий, низкой токсичностью и могут применяться в качестве антибиотика. 2 н. и 5 з.п. ф-лы, 3 табл., 106 пр.

Description

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к новым производным оксазолидинона, представленным химической формулой 1, в частности к новым производным оксазолидинона, содержащим группу циклического амидоксима или циклического амидразона.

[Химическая формула 1]

Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим антибиотическим композициям, включающим в качестве эффективного ингредиента новые производные оксазолидинона, представленные химической формулой 1, их пролекарства, гидраты, сольваты, изомеры или фармацевтически приемлемые соли.

Уровень техники

Со времени открытия пенициллина фармацевтическими компаниями во всем мире были разработаны многочисленные антибиотики, включая β-лактамные антибиотики против бактериальных инфекций, сульфонамиды, тетрациклины, аминогликозиды, макролиды, хинолоны, гликопептиды, и другие подобные препараты. И, кроме того, в результате неправильного применения или применения антибиотиков непрерывно появляются новые резистентные к действию антибиотиков бактерии или полирезистентные бактерии. Вследствие этого во всем мире растет озабоченность по поводу этих проблем. Международное микробиологическое сообщество выражает обеспокоенность тем, что по мере развития резистентности к антибиотикам в ближайшем будущем может наблюдаться широкое распространение новых резистентных бактерий, на которые не оказывают действия любые применяемые в настоящее время антибиотики.

В целом, бактериальные патогены могут быть подразделены на грамположительные или грамотрицательные бактерии. В частности, очень важными являются грамположительные бактерии, например, Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus, и кислотоустойчивые бактерии. Это связано с тем, что, после того как они появляются в больничной среде, их трудно уничтожить и они имеют тенденцию превращаться в неподдающиеся лечению резистентные бактерии. Такие резистентные бактерии включают метициллин-резистентные Streptococcus (MRSA), метициллин-резистентные коагулаза-отрицательные Streptococcus (MRCNS), пенициллин-резистентные Streptococcus pneumoniae, полирезистентные Enterococcus faecium, или другие подобные бактерии.

Для эффективного клинического лечения грамположительных бактерий часто применяют гликопептидный антибиотик ванкомицин. Однако ванкомицин проявляет различные виды токсичности и, с момента появления ванкомицин-резистентных Enterococcus (VRE) в 1990 годах, постоянно появляются бактерии, резистентные к ванкомицину и другим антибиотикам на основе гликопептидов.

И в отношении таких антибиотиков, как β-лактамы, хинолоны и макролиды, применяемых для лечения инфекций верхних дыхательных путей, вызываемых специфическими грам-негативными бактериями, включающими Haemophilus influenzae (H. influenzae) и Moraxella catarrhalis (M. catarrhalis), появляются резистентные бактерии, такие как хинолон-резистентные Staphylococcus aureus (QRSA). Поэтому в настоящее время проводятся исследования по созданию новых антибиотиков.

Соответственно, для того чтобы коренным образом решить проблему резистентности к антибиотикам, крайне необходимо создать антибиотики с новой химической структурой и новым механизмом уничтожения микробов. В связи с этим, с тех пор как в 1984 году впервые было сообщено фирмой DuPont об антибиотике с новой химической структурой на основе оксазолидинона (European Paten Publication No. 127902), многие фармацевтические компании разработали и синтезировали ряд производных оксазолидинона.

Эти производные оксазолидинона являются новыми синтетическими антибиотиками и могут вводиться перорально. Антибиотики на основе оксазолидинона имеют полностью отличающуюся от классических антибиотиков химическую основу. Так как они ингибируют начальную стадию белкового синтеза, они проявляют исключительную противобактериальную активность против бактерий, резистентных к действию антибиотиков, в частности грамположительных бактерий, таких как метицилин-резистентные Staphylococcus aureus (MRSA), метицилин-резистентные Staphylococcus epidermidis (MRSE), хинолон-резистентные Staphylococcus aureus (QRSA), ванкомицин-резистентные Enterococcus (VRE) и полирезистентные Mycobacterium tuberculosis (MDRTB).

В качестве примеров соединений оксазолидинона, включающих оксазолидиноновое кольцо, в патентных документах US Patent Nos. 4948801, 4461773, 4340606, 4476136, 4250318 и 4128654 описаны производные 3-фенил-2-оксазолидинона, имеющие один или два заместителя (заместителей), и в патентном документе EP 0312000, публикациях J. Med. Chem. 32, 1673(1989), J. Med. Chem. 33, 2569 (1990), Tetrahedron Lett. 45,123(1989) и других подобных публикациях описаны производные 3-[(монозамещенный)фенил]-2-оксазолидинона, представленные химической формулой A.

[Химическая формула A]

И производные оксазолидинона, представленные химической формулой B и химической формулой C, были синтезированы фирмой Pharmacia & Upjohn (патентные документы WO 93/23384, WO 95/14684 и WO 95/07271). Соединение химической формулы B, "линезолид", является первым антибиотиком на основе оксазолидинона, одобренным Управлением по контролю качества продовольствия и медикаментов США (FDA), и он продается на рынке под торговым названием "зивокс" для перорального введения и инъекций. Однако большинство синтетических соединений оксазолидинона характеризуются рядом недостатков, ограничивающих их применение, таких как токсичность, низкая эффективность in vivo и низкая растворимость. Что касается линезолида, то его растворимость в воде составляет только около 3 мг/мл, что ограничивает его применение для инъекций.

[Химическая формула B]

[Химическая формула C]

В патентном документе WO 93/09103 раскрыты фенильные производные оксазолидинона, имеющие гетероциклическое кольцо, включая пиридин, тиазол, индол, оксазол, хинол и так далее, в 4-положении фенильной группы. Но заместителями гетероциклического кольца являются только простая алкильная группа или аминогруппа, и активность этих производных является отнюдь невысокой.

Для решения этих проблем в патентном документе WO 01/94342 раскрыты фенилпроизводные оксазолидинона, имеющие различные производные пиридина или фенила в 4-положении фенильной группы. Синтетические соединения имеют широкий спектр антибактериального действия и высокую антибактериальную активность. Несмотря на то, что соединения оксазолидинона, имеющие различные производные пиридина в 4-положении фенильной группы оксазолидинона, обладают более широким спектром антибактериального действия и высокой антибактериальной активностью по сравнению с линезолидом, тем не менее большинство из них имеют растворимость в воде 30 мкг/мл или менее, и поэтому они имеют ограниченное применение при приготовлении инъекционных препаратов.

TR-700 и TR-701, представленные химической формулой D, разработаны фирмой Dong-A Pharmaceutical и лицензия на них недавно продана фирме Trius Therapeutics. TR-701 является пролекарством TR-700, и это средство находится сейчас на II стадии клинических испытаний. Проблема растворимости в случае TR-700 решается путем образования из него пролекарства TR-701, и TR-700 обладает антибактериальной активностью, превосходящей антибактериальную активность линезолида. Однако соединение проявляет более высокую токсичность (цитотоксичность, свойства по отношению к моноаминоксидазе, миелосупрессия, и так далее), чем линезолид, и поэтому ожидается, что оно будет иметь много ограничений для применения.

[Химическая формула D]

На основании вышеизложенного, можно сделать вывод, что еще не найдено соединение, которое имеет значительно более высокую антибактериальную активность, удовлетворительную растворимость и более низкую токсичность.

Описание изобретения

Задача, решаемая изобретением

Авторы настоящего изобретения синтезировали новые производные оксазолидинона с целью получения антибиотиков, имеющих значительно более высокую антибактериальную активность по сравнению с существующими антибиотиками, и имеющие более высокую растворимость для более простого приготовления из них пероральных и инъекционных препаратов. Было подтверждено, что новые производные оксазолидинона согласно настоящему изобретению обладают значительно более высокой антибактериальной активностью и значительно улучшенным спектром антибактериального действия.

В частности, соединение циклического амидоксима или циклического амидразона, представляемое настоящим изобретением, еще не было исследовано. В то время как циклический амидоксим или амидразон являются относительно хорошо известными соединениями, соединение циклического амидоксима или циклического амидразона, раскрываемые в настоящем изобретении, практически неизвестны. Введение циклической формы дает в результате значительно улучшенную абсорбционную способность и позволяет получать соль, имеющую соответствующую основность, в результате чего сильно повышается растворимость в воде. Повышенная растворимость в воде позволяет изготавливать инъекционные препараты без использования пролекарства и с низкой токсичностью.

Соответственно, задачей настоящего изобретения является разработка новых производных оксазолидинона, в частности новых соединений оксазолидинона с группой циклического амидоксима или группой циклического амидразона, с тем, чтобы повысить их растворимость, и разработка способов их получения.

Другой задачей настоящего изобретения является разработка фармацевтических антибиотических композиций, включающих в качестве активного ингредиента новые производные оксазолидинона, их пролекарства, гидраты, сольваты, изомеры или фармацевтически приемлемые соли.

Новые производные оксазолидинона согласно настоящему изобретению могут быть использованы для лечения внутрибольничной пневмонии, внебольничной пневмонии, осложненных инфекций кожи и структуры кожи, неосложненных инфекций кожи и структуры кожи, или инфекций, вызванных бактериями, резистентными к действию антибиотиков, в частности септицемии, вызванной ванкомицин-резистентными Enterococcus faecium (VRE) или линезолид-резистентными Enterococcus faecalis, или для комбинированной терапии заболеваний, связанных с грамм-отрицательными бактериями.

Решение задачи

Далее будут подробно описаны варианты осуществления настоящего изобретения.

Настоящее изобретение относится к новым производным оксазолидинона, представленным химической формулой 1, в частности новым соединениям оксазолидинона с группой циклического амидоксима или группой циклического амидразона. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим антибиотическим композициям, включающим в качестве активного ингредиента новое производное оксазолидинона, представленное химической формулой 1, его пролекарство, гидрат, сольват, изомер или фармацевтически приемлемую соль.

[Химическая формула 1]

в химической формуле 1,

R₁ представляет водород, (C₁-C₆)алкил или (C₃-C₆)циклоалкил;

Y представляет -O- или -N(R₂)-;

R₂ представляет водород, циано, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₆)-циклоалкил, -(CH₂)_mOC(=O)R₁₁, -(CH₂)_mC(=O)R₁₂, -(CH₂)_mC(=S)R₁₂, или -SO₂R₁₃, где алкил в R₂ может быть дополнительно замещен с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из группы, состоящей из (C₂-C₆)алкенила, (C₂-C₆)алкинила, галогена, галоген(C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)алкил(C₂-C₆)алкинила, гидроксила, (C₃-C₆)циклоалкила и циано;

R₁₁-R₁₃ независимо представляют водород, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)алкокси, амино, (C₃-C₆)циклоалкил, (C₂-C₆)алкенил, (C₂-C₆)-алкинил или (C₁-C₆)алкилкарбонил, где алкил, алкокси, или амино в R₁₁-R₁₃ могут быть дополнительно замещены с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из галогена, амино, гидроксила, циано, (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)-алкилкарбонилокси и гидрокси(C₁-C₆)алкила;

m представляет целое число от 0 до 2;

X₁ и X₂ независимо представляют водород или фтор;

P представляет -O-, -NH-, или пятичленный ароматический гетероцикл со следующей структурой

Q представляет водород, -C(=O)R₃, -C(=S)R₄, -C(=O)NR₅R₆, -C(=S)NR₅R₆, или пятичленный ароматический гетероцикл со структурой, выбранной из следующих структур:

R₃ и R₄ независимо представляют водород, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)алкокси, (C₃-C₆)циклоалкил, (C₂-C₆)алкенил или (C₂-C₆)-алкинил;

R₅ и R₆ независимо представляют водород, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₆)циклоалкил или (C₂-C₆)алкенил;

R₇ представляет водород, галоген, (C₁-C₆)алкил или (C₃-C₆)-циклоалкил; и

алкил в R₃-R₇ может быть дополнительно замещен с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из группы, состоящей из гидроксила, циано, галогена, (C₁-C₆)-алкилкарбонилокси и амино.

Используемый здесь термин "алкил" включает линейные и разветвленные структуры. Например, термин "(C₁-C₆)алкил" включает все возможные позиционные и геометрические изомеры, такие как метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, гексил и другие подобные алкилы.

Термин "(C₃-C₆)циклоалкил" включает все возможные позиционные и геометрические изомеры, такие как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклопропилметил, и другие подобные циклоалкилы.

Термин "(C₂-C₆)алкенил" включает все возможные позиционные и геометрические изомеры, такие как винил, пропенил, 1- и 2-бутенил, пентенил, и другие подобные алкенилы.

Термин "(C₂-C₆)алкинил" включает все возможные позиционные и геометрические изомеры, такие как ацетиленил, пропаргил, 1-пропинил, 2-пентинил, и другие подобные алкинилы.

Производные оксазолидинона согласно настоящему изобретению могут быть представлены химической формулой 2 или 3:

[Химическая формула 2]

[Химическая формула 3]

В химических формулах 2 и 3, R₂, X₁, X₂, P и Q являются такими же, как в химической формуле 1.

Более предпочтительно, чтобы производные оксазолидинона согласно настоящему изобретению включали соединения, представленные химическими формулами 4-9:

[Химическая формула 4]

[Химическая формула 5]

[Химическая формула 6]

[Химическая формула 7]

[Химическая формула 8]

[Химическая формула 9]

В химических формулах 4-9,

R₂ представляет водород, циано, (C₁-C₆)алкил, (C₃-C₆)-циклоалкил,

-(CH₂)_mOC(=O)R₁₁, -(CH₂)_mC(=O)R₁₂, -(CH₂)_mC(=S)R₁₂ или -SO₂R₁₃, где алкил в R₂ может быть дополнительно замещен с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из группы, состоящей из (C₂-C₆)алкенила, (C₂-C₆)алкинила, галогена, галоген(C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)алкил(C₂-C₆)алкинила, гидроксила, (C₃-C₆)циклоалкила и циано;

R₁₁-R₁₃ независимо представляют водород, (C₁-C₆)алкил, (C₁-C₆)алкокси, амино, (C₃-C₆)циклоалкил, или (C₁-C₆)-алкилкарбонил, где алкил, алкокси или амино в R₁₁-R₁₃ могут быть дополнительно замещены с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из галогена, амино, гидроксила, циано, (C₁-C₆)алкила, (C₁-C₆)алкилкарбонилокси и гидрокси(C₁-C₆)алкила;

m представляет целое число от 0 до 2;

P представляет -O-, -NH- или пятичленный ароматический гетероцикл со следующей структурой

Q представляет водород, -C(=O)R₃, -C(=S)R₄, -C(=O)NR₅R₆, -C(=S)NR₅R₆, или пятичленный ароматический гетероцикл со структурой, выбранной из следующих структур

R₃ и R₄ независимо представляют водород, (C₁-C₆)алкил или (C₁-C₆)алкокси;

R₅ и R₆ независимо представляют водород или (C₁-C₆)алкил; и

алкил в R₃-R₆ может быть дополнительно замещен с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из группы, состоящей из гидроксила, циано, галогена, (C₁-C₆)-алкилкарбонилокси и амино.

Примеры новых производных оксазолидинона согласно настоящему изобретению включают следующие соединения, но объем настоящего изобретения ими не ограничивается:

Новые производные оксазолидинона согласно настоящему изобретению имеют группу циклического амидоксима или группу циклического амидразона и могут быть приготовлены в виде пролекарств, гидратов, сольватов, изомеров или фармацевтически приемлемых солей, для того чтобы улучшить абсорбцию в организме или повысить растворимость. Поэтому пролекарства, гидраты, сольваты, изомеры или фармацевтически приемлемые соли также входят в объем настоящего изобретения.

Новые производные оксазолидинона согласно настоящему изобретению могут быть превращены в фармацевтически приемлемые соли. Термин "фармацевтически приемлемые соли" относится к "солям присоединения кислоты", подходящих для введения соединений этого изобретения, и они включают метансульфонат, этансульфонат, фумарат, сукцинат, гидрохлорид, цитрат, малат, тартрат и (менее предпочтительно) гидробромид, фосфат, сульфат и другие подобные соли. Кроме того, соответствующая основная соль включает, например, соль щелочного металла (например, натриевую соль) или соль щелочноземельного металла (например, соль кальция или магния), соль органического амина (например, триэтиламина, морфолина, N-метилпиперидина, N-этилпиперидина, дибензиламина, N,N-дибензилэтиламина и трис-(2-гидроксиэтил)амина), или аминокислоты (например, N-метил-d-глутамина и лизина). Соли могут включать один или более катион (катионов) или анион (анионов) в зависимости от числа заряженных группы (групп) и валентности соответствующего катиона (катионов) или аниона (анионов). Предпочтительной фармацевтически приемлемой основной солью является натриевая соль. Однако для того чтобы облегчить выделение соли во время ее приготовления, предпочтительной может являться соль, менее растворимая в выбранном растворителе.

Производное оксазолидинона настоящего изобретения может присутствовать либо в форме сольвата, например в виде гидрата, либо не в сольватированной форме. Сольваты производных оксазолидинона согласно настоящему изобретению включают все фармацевтически активные сольватированные формы.

Производные оксазолидинона настоящего изобретения могут быть введены в форме пролекарства, которое трансформируется в организме человека или животного с образованием активного ингредиента настоящего изобретения. Пролекарство может быть образовано путем введения соответствующей группы или заместителя, способных модифицировать или улучшать физические и/или фармакологические свойства исходного соединения. Примеры пролекарства включают эфиры соединений настоящего изобретения и их фармацевтически приемлемые соли, которые могут подвергаться гидролизу in vivo.

В данной области техники известны различные типы форм пролекарств. Например, смотрите следующие публикации:

a) Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985) и Methods in Enzymology, Vol. 42, p.309-396, edited by K. Widder, et al. (Academic press, 1985);

b) A Textbook of Drug Design и Development, edited by Krogsgaard-Larsen и H. Bundgaard, Chapter 5 "Design and Application of Prodrugs ", by H. Bundgaard p. 113-191 (1991);

c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);

d) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988); и

e) N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Bull., 32, 692 (1984).

Примеры пролекарства согласно настоящему изобретению включают следующие соединения.

Как показано в приведенных выше примерах, фосфонатная или ацетильная группа может быть присоединена по гидроксильной группе, так что после введения пролекарство трансформируется в активную форму. В качестве варианта, может быть присоединена аминокислота или может быть образована карбонатная форма. Форму пролекарства используют главным образом в случаях относительно низкой растворимости или низкой абсорбционной способности. Использование пролекарства помимо повышения растворимости и абсорбционной способности может приводить к улучшению абсорбции, распределения, метаболизма и экскреции (ADME) и PK профиля.

Соединение настоящего изобретения имеет хиральный центр в позиции C-5 кольца оксазолидинона. Предпочтительный диастереомер производного оксазолидинона согласно настоящему изобретению представлен химической формулой 1. По сравнению с эпимером, представленным химической формулой 1b, он проявляет улучшенные свойства в отношении моноаминоксидазы.

[Химическая формула 1b]

В случае использования смеси эпимеров относительно хирального центра оксазолидинона, для того чтобы достигать сопоставимого фармакологического эффекта по сравнению со случаем, когда используют только один зеркальный изомер, можно регулировать ее количество с учетом доли энантиомеров (или диастереомеров).

Кроме того, некоторые соединения настоящего изобретения в зависимости от их заместителя (заместителей) могут иметь другой хиральный центр. Все оптические изомеры, диастереомеры и смеси, имеющие антибактериальную активность, входят в объем настоящего изобретения. Метод получения оптически активных форм (например, перекристаллизация, хиральный синтез, ферментативное разделение, биотрансформация или разделение смесей с помощью хроматографии) и метод измерения антибактериальной активности являются известными в этой области техники.

Так как соединения, представленные химической формулой 1, или их соли могут таутомеризироваться, и даже если только один из возможных таутомеров приведен в химических формулах или схемах реакций в описании заявки, то настоящее изобретение охватывает все таутомеры, имеющие антибактериальную активность, и не ограничивается таутомерной формой, приведенной в химических формулах или схемах реакций.

Кроме того, соединение настоящего изобретения может проявлять полиморфизм. Поэтому все полиморфные соединения, имеющие антибактериальную активность, входят в объем настоящего изобретения.

Новые производные оксазолидинона согласно настоящему изобретению могут быть получены с помощью альтернативных способов в зависимости от того, какие они имеют заместители. Например, они могут быть получены согласно способам, приведенным в качестве примеров на схемах 1-6. Способы получения, приведенные на схемах 1-6, являются только примерами, и они могут быть легко модифицированы специалистами в этой области в зависимости от конкретных заместителей. Соответственно, примеры способов в схемах 1-6 не ограничивают способ получения соединений оксазолидинона настоящего изобретения. Если не указано иначе, то определения для заместителей в схемах реакций являются такими же, как в химической формуле 1.

Производные оксазолидинона химической формулы 1 согласно настоящему изобретению могут быть синтезированы с помощью различных методик синтеза, в зависимости от X₁, X₂, Y, P и Q. Характерные методы синтеза в случаях, когда X₁ является атомом фтора (F), и X₂ является атомом водорода (H), приведены в качестве примеров в схемах 1-5. И случай, когда оба, и X₁ и X₂, являются H или F, приведен в качестве примера на схеме 6.

Синтезы соединений циклического амидразона, когда Y является атомом азота (N-R₂), методы синтеза в случае, когда P является NH, приводятся в качестве примеров на схемах 1 и 2, метод синтеза в случае, когда P является ароматическим гетероциклом (например, триазолом), приводится в качестве примера на схеме 3, и случай, когда P является атомом кислорода (O), приводится в качестве примера на схеме 4. Кроме того, метод синтеза соединений циклического амидоксима, когда Y является O, приводится в качестве примера на схеме 5.

Согласно схеме 1, 3,4-дифторнитробензол взаимодействует с этаноламином с получением соединения I. После защиты спиртовой и аминной групп последовательно с помощью трет-бутилдиметилсилила (TBS) и трет-бутилоксикарбонила (boc) (соединение II), нитрогруппу восстанавливают до амина с использованием Pd/C (соединение III). Присоединяют бензилоксикарбонильную группу (cbz) с использованием бензилхлорформиата (Cbz-Cl) с получением соединения IV. Соединение IV взаимодействует с (R)-глицидил бутиратом и н-бутиллитием (n-BuLi) с образованием хирального соединения V. Соединение V реагирует с метансульфонилхлоридом (Ms-Cl) (соединение VI), и затем с азидом натрия (NaN₃) (соединение VII). После превращения азидной группы в амин с использованием Pd/C в атмосфере газообразного водорода, присоединяют группу cbz с использованием Cbz-Cl с образованием соединения VIII. Соединение VIII обрабатывают с помощью хлористоводородной кислоты для удаления защитных групп (boc и tbs) с получением соединения IX, которое взаимодействует с метансульфонилхлоридом (Ms-Cl) с образованием соединения X. Взаимодействие соединения X с гидразином и затем взаимодействие с триметилортоформиатом дает соединение циклического амидразона XII. После удаления группы cbz из соединения XII (соединение XIII), в него может быть введен целый ряд групп Q. Кроме того, после удаления формильной группы может быть введен целый ряд групп R₂. Конкретные примеры описаны при получении соединений.

[Схема 1]

Согласно схеме 2, в случае, когда Q является ароматическим гетероциклом, не содержащим карбонильную группу, в соединение VI сначала вводят группы P и Q. Реакция с аминоизоксазолом приведена в качестве примера на схеме 2. Соединение VI взаимодействует с аминоизоксазолом с аминогруппой, защищенной группой boc, с образованием соединения XIV. Удаление boc и tbs групп с помощью хлористоводородной кислоты дает соединение XV, последующее мезилирование и затем реакция с гидразином приводили к образованию соединения XVII, которое взаимодействовало с триметилортоформиатом с образованием соединения циклического амидразона. После удаления формильной группы, вводили различные R₂ группы. Конкретные примеры описаны при получении соединений.

[Схема 2]

Согласно схеме 3, случай, когда P является ароматическим гетероциклом, подразделяется на 1) когда Q является H и 2) когда Q является заместителем, отличным от H. Сначала, для соединения, в котором Q является H, азидное соединение (соединение VII) взаимодействует с 2,5-норборнадиеном с образованием триазольного соединения (соединение XVIII). Удаление boc и tbs групп с помощью хлористоводородной кислоты дает соединение XIX. Мезилирование (соединение XX), обработка с помощью гидразина и затем с помощью триметилортоформиата дает соединение циклического амидразона. Соединения, в которых Q является заместителем, отличным от H, может быть получено следующим образом; соединение XXI дихлортозилгидразона получают, как показано, путем реакции тозилгидразида и хлорангидрида. Взаимодействие амина XIII и тозилгидразона XXI дает промежуточное соединение циклического амидразона, которое после удаления формильной группы получают с различными R₂ группами. Конкретные примеры описаны при получении соединений.

[Схема 3]

Случай, когда P является атомом кислорода (O), и Q является H, приведен в качестве примера на схеме 4. Соединение, в котором P является O, и Q является ароматическим гетероциклом, может быть синтезировано по схеме 2. Для соединения, в котором Q является H, осуществление защиты спиртовой группы соединения V с помощью бензоила дает соединение XXII. Удаление boc и tbs защитных групп с помощью хлористоводородной кислоты (соединение XXIII) и мезилирование дает соединение XXIV, которое взаимодействует с гидразином с образованием соединения XXV. Во время реакции с гидразином обнаружено, что бензоильная группа удаляется. Соединение гидразина реагирует с триметилортоформиатом с образованием соединения циклического амидразона. После удаления формильной группы вводят различные R₂ группы. Конкретные примеры описаны при получении соединений.

[Схемы 4]

Метод синтеза соединения циклического амидоксима, в котором Y является O, приводится в качестве примера на схеме 5. В зависимости от того, P-Q является ли OH, или не является, случаи подразделяются на 1) и 2).

1) Если P-Q на является OH, P и Q группы вводят в соединение VI в соответствии со схемами 1-4 с образованием соединения XXVI, которое обрабатывают с помощью хлористоводородной кислоты для удаления boc и tbs групп, получая соединение XXVII. Соединение XXVII подвергают реакции Мицунобу с гидроксифталимидом с получением соединения XXVIII. Удаление фталимида с помощью гидразина и затем взаимодействие с триметилортоформиатом дает соединение циклического амидоксима.

2) Когда P-Q является OH, спиртовая группа оксазолидиноновой части должна быть защищена с помощью бензоильной группы (соединение XXIII). Реакция Мицунобу с гидроксифталимидом дает соединение XXIX. Удаление фталимида с помощью гидразина и затем реакция с триметилортоформиатом дает соединение циклического амидоксима. И опять, бензольную группу удаляют во время реакции с гидразином. Соединение циклического амидоксима может также быть получено путем реакции с триметилортоформиатом.

[Схема 5]

Случаи, когда X₁ является F, и X₂ является H, были описаны на схемах 1-5. Согласно схеме 6, соединение, в котором оба, и X₁ и X₂, являются H или F, может быть синтезировано таким же образом, как в схемах 1-5, с той только разницей, что в качестве исходного материала используют 4-фторнитробензол или 3,4,5-три-фторнитробензол.

*[Схема 6]

Композиции настоящего изобретения могут находиться в соответствующей форме для перорального введения (например, в форме таблетки, пастилки, твердой или мягкой капсулы, водной или масляной суспензии, эмульсии, диспергируемого порошка или гранулы, сиропа или эликсира), в соответствующей форме для топического применения (например, в форме крема, мази, геля, водного или масляного раствора или суспензии), в соответствующей форме для окулярного введения, в соответствующей форме для введения путем ингаляции (например, в форме тонкоизмельченного порошка или жидкого аэрозоля), в соответствующей форме для введения путем инсуффляции (например, в форме тонкоизмельченного порошка), или в соответствующей форме для парентерального введения (например, в форме водного или масляного стерильного раствора для внутривенной, подкожной, сублингвальной или внутримышечной инъекции, или ректального суппозитория).

Помимо соединений настоящего изобретения, фармацевтические композиции настоящего изобретения могут дополнительно включать (то есть могут быть приготовлены в виде лекарственной формы вместе с) один или более известный препарат(ы), выбранный из применяемых в медицине антибактериальных средств (например, из β-лактама, макролида, хинолона или аминогликозида) и противовоспалительных средств (например, из противогрибкового триазола или амфотерицина), или могут быть введены в комбинации с одним или более известным лекарственным средством (средствами). Для усиления терапевтического эффекта композиции могут дополнительно содержать карбапенем, например меропенем или имипенем. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут быть введены в комбинации или приготовлены в виде лекарственной формы вместе с бактерицидным увеличивающим проницаемость белком (BPI) или ингибитором выкачивающего насоса, для того чтобы повысить активность против грамотрицательных бактерий и бактерий, резистентных к антибиотикам.

Соединения настоящего изобретения могут быть введены в комбинации или приготовлены в виде лекарственной формы вместе с витамином, например, витамином B, таким как витамин B2, витамин B6 или витамин B12, и фолиевая кислота. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут быть введены в комбинации или приготовлены в виде лекарственной формы вместе с ингибитором циклооксигеназы (COX), в частности, ингибитором COX-2. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут быть введены в комбинации или приготовлены в виде лекарственной формы вместе с антибактериальным средством, активным против грамположительных бактерий или грамотрицательных бактерий.

Композиции настоящего изобретения могут быть приготовлены с помощью широко используемого известного фармацевтического вспомогательного средства. Соответственно, композиция, предназначенная для перорального введения, может включать, например, одно или более окрашивающее вещество, подсластитель, ароматизатор и/или антисептик. Предпочтительно, чтобы фармацевтическая композиция для внутривенного введения могла включать (например, для того чтобы повысить стабильность) соответствующий бактерицид, антиоксидант, восстановитель, или вещество, усиливающее экскрецию.

Композиция для перорального введения может находиться в форме твердой желатиновой капсулы, приготовленной путем смешения активного ингредиента с инертным твердым разбавителем, например, карбонатам кальция, фосфатом кальция или каолином, или в форме мягкой желатиновой капсулы, приготовленной путем смешения активного ингредиента с водой или маслом, например, арахисовым маслом, жидким парафином или оливковым маслом.

Водная суспензия обычно включает одно или более суспендирующее средство (средства), например, натрий карбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовую камедь или гуммиарабик, или диспергирующее или смачивающее средство (средства), например, лецитин, продукт конденсации оксида алкилена с жирной кислотой (например, полиоксиэтиленстеарат), продукт конденсации оксида этилена с длинноцепочечным алифатическим спиртом, например, гептадекаэтиленоксицетанол, продукт конденсации оксида этилена с неполным эфиром, полученным из жирной кислоты и гексита, например, моноолеат полиоксиэтиленсорбита, продукт конденсации оксида этилена с неполным эфиром, полученным из жирной кислоты и ангидрида гексита, например, моноолеат полиэтиленсорбита, помимо активного ингредиента в форме тонкоизмельченного порошка. Водная суспензия может дополнительно включать один или более антисептик (антисептиков) (например, этил или пропил п-гидроксибензоат), антиоксидант (антиоксидантов) (например, аскорбиновую кислоту), окрашивающее средство (средства), ароматизатор (ароматизаторы), и/или подсластитель (подсластители) (например, сахарозу, сахарин или аспартам).

Масляная суспензия может быть приготовлена путем суспендирования активного ингредиента в растительном масле (например, арахисовом масле, оливковом масле, сезамовом масле или кокосовом масле) или минеральном масле (например, жидком парафине). Масляная суспензия может дополнительно включать загуститель, например, пчелиный воск, парафиновый воск или цетиловый спирт. Кроме того, могут быть добавлены упомянутый выше подсластитель или ароматизатор для получения композиции для перорального введения, имеющей хороший вкус. Композиция может быть подвергнута консервированию путем добавления антиоксиданта, такого как аскорбиновая кислота.

Диспергируемый порошок или гранула, подходящие для приготовления водной суспензии путем добавления к ним воды, помимо активного ингредиента включают диспергирующее или смачивающее средство, суспендирующее средство и один или более антисептик (антисептиков). Примеры соответствующих диспергирующих или смачивающих средств и суспендирующих средств описаны ранее. Кроме того, в состав может входить вспомогательное вещество, такое как подсластитель, ароматизатор и окрашивающее средство.

Дополнительную информацию по лекарственным формам можно найти в монографии Comprehensive Medicinal Chemistry, Volume 5, Chapter 25.2 (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press, 1990.

Количество активного ингредиента, смешанного с одним или более вспомогательным веществом (веществами), для приготовления лекарственной формы одноразовой дозы может изменяться, разумеется, в зависимости от субъекта, которому необходимо введение этой дозы, и конкретного способа введения. Например, лекарственная форма для перорального введения человеку может включать, в большинстве случаев, от 50 мг до 5 г соединения в качестве активного ингредиента вместе с соответствующим количеством вспомогательного средства (содержание может изменяться в интервале примерно от 5 до 98% от суммарной массы композиции). Обычно разовая доза может включать примерно от 200 мг до 2 г активного ингредиента. Дополнительную информацию по способу введения и схемы введения можно найти в монографии Comprehensive Medicinal Chemistry, Volume 5, Chapter 25.3 (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press, 1990.

Подходящей фармацевтической композицией настоящего изобретения является лекарственная форма разовой дозы, подходящая для перорального введения, например, таблетка или капсула, включающая от 0,1 мг до 1 г, предпочтительно, от 100 мг до 1 г, соединения настоящего изобретения. В частности, предпочтительной является таблетка или капсула, включающая от 50 мг до 800 мг соединения настоящего изобретения.

Кроме того, фармацевтические композиции настоящего изобретения могут представлять собой лекарственную форму, подходящую для внутривенной, подкожной или внутримышечной инъекции, например, инъекцию, включающую от 0,1% масса/объем до 50% масса/объем (от 1 мг/мл до 500 мг/мл) соединения настоящего изобретения.

Каждому пациенту соединение настоящего изобретение может быть введено внутривенно, подкожно или внутримышечно, например, в дозе от 0,1 мг/кг до 20 мг/кг в день. Соответствующую композицию вводят от одного до четырех раз в день. В другом варианте осуществления, соединение настоящего изобретения вводят в дозе от 1 мг/кг до 20 мг/кг в день. Доза для внутривенного, подкожного или внутримышечного введения может быть введена путем болюсной инъекции. В качестве варианта, доза для внутривенного введения может представлять собой непрерывную инъекцию в течение некоторого периода времени. Кроме того, каждому пациенту может быть введена однодневная доза для перорального введения, которая приблизительно может быть эквивалента однодневной дозе для парентерального введения. Соответствующую композицию вводят от одного до четырех раз в день.

По сравнению с линезолидом, который поставляется на рынок фирмой Pfizer, производные оксазолидинона настоящего изобретения проявляют антибактериальную активность при значительно более низких концентрациях против различных бактерий, резистентных к уже существующим антибиотикам, включая грамположительные бактерии, такие как Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, и так далее, и грамотрицательные бактерии, такие как Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis, и так далее, в частности, высокую антибактериальную активность против линезолид-резистентных Enterococcus faecalis.

Осуществление изобретения

Далее будут описаны примеры и эксперименты. Однако следующие примеры и эксперименты приводятся только с цель иллюстрации, и их не следует рассматривать в качестве ограничения объема настоящего изобретения.

[Пример синтеза 1] Получение соединения I

После растворения 3,4-дифторнитробензола (158 г, 0,99 моль) в ацетонитриле (800 мл) и добавления этаноламина (117 г, 1,9 моль), смесь перемешивали в течение 4 часов при кипячении с обратным холодильником. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, концентрировали при пониженном давлении, растирали с диэтиловым эфиром, и фильтровали с получением желтого соединения I (199 г, 0,99 моль, 100%).

¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,97 (д, 1H, J=8,8 Гц), 7,87 (дд, 1H, J₁=11,6 Гц, J₂=2,4 Гц), 6,65 (т, 1H, J=8,8 Гц), 5,10-4,87 (ушир.с, 1H), 3,97-3,83 (м, 2H), 3,43-3,37 (м, 2H).

[Пример синтеза 2] Получение соединения II

Соединение I (100 г, 0,5 моль), трет-бутилдиметилсилилхлорид (TBS-Cl, 97 г, 0,65 моль) и имидазол (51 г, 0,75 моль) растворяли в дихлорметане (700 мл) при 0°С и после медленного нагревания до комнатной температуры перемешивали в течение ночи. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, растворяли в этилацетате и промывали с помощью 0,5н. HCl, промывали последовательно с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и насыщенного водного раствора хлорида натрия (рассола), сушили с помощью безводного сульфата натрия, и концентрировали при пониженном давлении с количественным получением соединения с tbs группой, присоединенной к спирту. Это соединение растворяли в THF (500 мл) и добавляли 1,2 эквивалента Boc₂O и 0,1 эквивалента 4-диметиламинопиридина (DMAP). После перемешивания в течение 3 часов при комнатной температуре добавляли аммиачную воду (30 мл). После перемешивания еще в течение 20 минут раствор концентрировали при пониженном давлении. Концентрат снова растворяли в этилацетате, последовательно промывали с помощью 0,5н. HCl, насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и насыщенного водного раствора хлорида натрия (рассола), сушили с помощью безводного сульфата натрия, и концентрировали при пониженном давлении с количественным получением соединения II.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 8,06-7,98 (м, 1H), 7,95 (дд, 1H, J₁=10,2 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,57 (т, 1H, J=7,8 Гц), 3,80 (т, 2H, J=5,4 Гц), 3,73 (т, 2H, J=4,8 Гц), 1,42 (с, 9H), 0,81 (с, 9H), 0,01 (с, 6H).

[Пример синтеза 3] Получение соединения III

Соединение II (92 г, 0,22 моль) растворяли в метаноле (600 мл) и после добавления Pd/C (6 г) перемешивали в течение 4 часов в атмосфере водорода, подаваемого из баллона. Реакционную смесь фильтровали с помощью целита и концентрировали при пониженном давлении с количественным получением соединения III (86 г) в виде бесцветного масла.

¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d₁) δ 6,99 (т, 1H, J=12,0 Гц), 6,44-6,30 (м, 2H), 3,81-3,63 (м, 4H), 3,63-3,52 (м, 2H), 1,50 (с, 3H), 1,35 (с, 6H), 0,86 (с, 9H), 0,03 (с, 6H).

[Пример синтеза 4] Получение соединения IV

Соединение III (86 г, 0,22 моль) растворяли в дихлорметане (300 мл). После добавления водного 1н. раствора NaOH (300 мл), медленно добавляли по каплям при перемешивании бензилхлорформиат (Cbz-Cl, 38 мл, 0,27 моль). После перемешивания в течение 1 часа при комнатной температуре органический слой отделяли, промывали дважды с помощью воды, сушили с помощью безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении с количественным получением соединения IV (116 г) в виде желтого масла.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,44-7,32 (м, 6H), 7,18 (т, 1H, J=8,1 Гц), 6,96 (д, 1H, J=8,4 Гц), 6,84-6,66 (ушир.с, 1H), 5,20 (с, 2H), 3,82-3,63 (м, 2H), 3,63-3,58 (м, 2H), 1,51 (с, 3H), 1,35 (с, 6H), 0,86 (с, 9H), 0,02 (с, 6H).

[Пример синтеза 5] Получение соединения V

Соединение IV (116 г, 0,22 моль) растворяли в THF (400 мл) и после медленного добавления по каплям при -78°С н-бутиллития (2,5M раствора в н-гексане, 90 мл, 0,23 моль) перемешивали в течение 20 минут. После добавления (R)-глицидилбутирата (31,5 мл, 0,23 моль) и последующего перемешивания в течение 3 часов при медленном нагревании до комнатной температуры, доводили раствор до pH ~6 с помощью водного раствора хлорида аммония и концентрировали при пониженном давлении. Концентрат растворяли в растворе 80% этилацетат/гексан, последовательно промывали с помощью воды и насыщенного водного раствора хлорида натрия (рассола), сушили с помощью безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Концентрат разделяли с помощью колоночной хроматографии, используя раствор 40% этилацетат/гексан, с получением соединения V (45 г, 0,093 моль, 42%) в виде бесцветного масла.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 7,50-7,48 (м, 1H), 7,30-7,28 (м, 1H), 7,17-7,16 (м, 1H), 4,74-4,70 (м, 1H), 4,03-4,02 (м, 1H), 3,98 (м, 2H), 3,75 (м, 3H), 3,65 (м, 2H), 1,51 (с, 3H), 1,36 (с, 6H), 0,85 (с, 9H), 0,02 (с, 6H).

[Пример синтеза 6] Получение соединения VI

Соединение V (45 г, 0,093 моль) растворяли в дихлорметане (300 мл) и после добавления последовательно триэтиламина (26 мл, 0,186 моль) и по каплям метансульфонилхлорида (MsCl, 10,9 мл, 0,14 моль) при 0°С перемешивали в течение 20 минут. После нагревания до комнатной температуры и затем перемешивания в течение 1 часа, раствор концентрировали при пониженном давлении. Концентрат растворяли в этилацетате, последовательно промывали с помощью 0,5н. HCl, насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и насыщенного водного раствора хлорида натрия (рассола), сушили с помощью безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением соединения VI (50 г, 0,089 моль, 96%) в виде желтого масла.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,46 (дд, 1H, J₁=11,6 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,29 (м, 1H), 7,13 (м, 1H), 4,94-4,88 (м, 1H), 4,50-4,39 (м, 2H), 4,12 (м, 1H), 3,92 (м, 1H), 3,72 (м, 2H), 3,64-3,62 (м, 2H), 3,08 (с, 3H), 1,49 (с, 3H), 1,34 (с, 6H), 0,83 (с, 9H), 0,00 (с, 6H).

[Пример синтеза 7] Получение соединения VII

Соединение VI (50 г, 0,089 моль) растворяли в DMF (200 мл) и после добавления NaN₃ (7,16 г, 0,11 моль) перемешивали в течение 3 часов при 80°С. Раствор охлаждали до комнатной температуры, разбавляли с помощью этилацетата, последовательно промывали с помощью воды, насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и насыщенного водного раствора хлорида натрия (рассола), сушили с помощью безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении с количественным получением соединения VII (47 г, 0,089 моль) в виде бесцветного маслянистого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 7,48 (дд, J₁=8,2 Гц, J₂=1,4 Гц) 7,30 (м, 1H), 7,16 (м, 1H), 4,81-4,79 (м, 1H), 4,09-4,08 (м, 1H), 3,86 (м, 1H), 3,74 (м, 2H), 3,62-3,59 (м, 1H), 1,51 (с, 3H), 1,36 (с, 6H), 0,85 (с, 9H), 0,02 (с, 6H).

[Пример синтеза 8] Получение соединения VIII

Соединение VII (47 г, 0,089 моль) растворяли в метаноле (400 мл) и после добавления Pd/C (3,5 г) перемешивали в течение 4 часов в атмосфере водорода, подаваемого из баллона. Раствор фильтровали через целит и концентрировали при пониженном давлении. Концентрат растворяли в дихлорметане (130 мл) и, после добавления водного 1н. раствора NaOH (130 мл), медленно добавляли по каплям при перемешивании Cbz-Cl (15,5 мл, 0,11 моль). После перемешивания в течение 2 часов при комнатной температуре органический слой отделяли, промывали с помощью воды и насыщенного водного раствора хлорида натрия (рассола), сушили с помощью безводного сульфата натрия, концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии, используя раствор 20% этилацетат/гексан, с получением соединения VIII (50,5 г, 0,082 моль, 92%) в виде светло-желтого масла.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,46-7,43 (м, 1H), 7,36-7,35 (м, 1H), 7,31 (с, 6H), 7,11 (м, 1H), 5,09 (с, 2H), 4,75 (м, 1H), 4,01 (т, 1H, J=8,4 Гц), 3,76-3,50 (м, 1H), 1,49 (с, 3H), 1,34 (с, 6H), 0,83 (с, 9H), 0,01 (с, 6H).

[Пример синтеза 9] Получение соединения IX

Соединение VIII (50,5 г, 0,082 моль) растворяли в дихлорметане (100 мл), после добавления 4н. раствора HCl в диоксане (130 мл) перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре и концентрировали при пониженном давлении с количественным получением соединения IX (36 г, 0,082 моль) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 7,69 (т, 1H, J=6,0 Гц), 7,44-7,40 (м, 1H), 7,32 (с, 6H), 7,09-7,07 (м, 1H), 6,88 (т, 1H, J=9,2 Гц), 5,03 (с, 2H), 4,71-4,68 (м, 1H), 4,08-4,03 (м, 2H), 3,73-3,69 (м, 1H), 3,60-3,57 (м, 3H), 3,39-3,34 (м, 2H), 3,18-3,15 (м, 2H).

[Пример синтеза 10] Получение соединения XII

Соединение IX (36 г, 0,082 моль) растворяли в дихлорметане (300 мл), и после медленного добавления по каплям последовательно триэтиламина (34,5 мл, 0,245 моль) и метансульфонилхлорида (MsCl, 9,5 мл, 0,123 моль) при 0°С перемешивали в течение 10 минут. Раствор нагревали до комнатной температуры, перемешивали в течение 2 часов, разбавляли с помощью дихлорметана, последовательно промывали с помощью воды, насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и насыщенного водного раствора хлорида натрия (рассола), сушили с помощью безводного сульфата натрия, и концентрировали при пониженном давлении. Полученное твердое вещество растирали с растворителем диэтиловым эфиром и фильтровали с получением соединения X (30,5 г, 0,063 моль, 77%) в виде белого твердого вещества.

Соединение X (20 г, 0,042 моль) добавляли к этанолу (100 мл) и после добавления моногидрата гидразина (H₂NNH₂-H₂O, 50 мл) перемешивали в течение 2 часов при 60°С. Раствор концентрировали при пониженном давлении с получением соединения XI (17,4 г, 0,042 моль) в виде масла.

Соединение XI (17,4 г, 0,042 моль) добавляли к уксусной кислоте (200 мл) и после добавления триметилортоформиата (100 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 8 часов. Раствор отгоняли при пониженном давлении, растворяли в дихлорметане, последовательно промывали с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и насыщенного водного раствора хлорида натрия (рассола), сушили с помощью безводного сульфата натрия и концентрировали при пониженном давлении. Концентрат разделяли с помощью колоночной хроматографии, используя раствор 5% метанол/дихлорметан, с получением соединения XII (5,8 г, 0,013 моль, 31%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,52 (с, 1H), 7,55-7,53 (м, 1H), 7,30-7,28 (м, 6H), 7,19-7,18 (м, 1H), 7,11-7,08 (м, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,27 (т, J=6 Гц, 1H), 5,08 (с, 2H), 4,77 (м, 1H), 4,03-4,00 (м, 1H), 3,97 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,81-3,76 (м, 1H), 3,70 (т, J=5,1 Гц, 2H), 3,65-3,60 (м, 1H), 3,59-3,54 (м, 1H).

[Пример синтеза 11] Получение соединения XIII

Соединение XII (5 г, 0,011 моль) растворяли в метаноле (100 мл) и после добавления Pd/C (0,5 г) перемешивали в течение 4 часов в атмосфере водорода, подаваемого из баллона. Раствор фильтровали через целит и концентрировали при пониженном давлении с получением соединения XIII (3,2 г, 0,010 моль, 91%) в виде маслянистого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,43 (с, 1H), 7,65-7,63 (м, 1H), 7,40-7,36 (м, 2H), 7,12 (с, 1H), 4,65-4,62 (м, 1H), 4,09-4,06 (м, 1H), 3,89-3,86 (м, 1H), 3,85 (т, J=5,1 Гц, 2H), 3,70 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,88-2,85 (м, 1H), 2,82-2,79 (м, 1H).

[Пример синтеза 12] Получение соединения XV

Boc-3-аминоизоксазол (1,22 г, 6,6 ммоль) растворяли в DMF (40 мл) и после добавления 50% NaH (0,32 г, 6,6 ммоль) перемешивали в течение 30 минут. После медленного добавления по каплям соединения VI (3,6 г, 6,6 ммоль), растворенного в DMF (10 мл), раствор перемешивали при 80°С в течение 4 часов. Раствор охлаждали до комнатной температуры, разбавляли с помощью этилацетата, промывали дважды с помощью воды, сушили с помощью безводного сульфата натрия, и концентрировали при пониженном давлении с получением соединения XIV (4,16 г, 6,4 ммоль).

Соединение XIV (4,16 г, 6,4 ммоль) растворяли в дихлорметане (20 мл), после добавления 4н. раствора HCl в диоксане (20 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, концентрировали при пониженном давлении и растирали с растворителем диэтиловым эфиром с получением соединения XV (2,2 г, 6,2 ммоль, 94%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,39 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,52 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,18 (дд, J₁=8,4 Гц, J₂=1,8 Гц, 1H), 7,10 (т, J=9,3 Гц, 1H), 6,00 (д, J=2,2 Гц, 1H), 4,86 (м, 1H), 4,11 (т, J=9 Гц, 1H), 3,80-3,19 (м, 7H).

[Пример синтеза 13] Получение соединения XIX

Соединение VII (0,613 г, 1,2 ммоль) растворяли в диоксане (10 мл), после добавления 2,5-норборнадиена (0,6 мл, 6 ммоль) перемешивали в течение 4 часов при кипячении с обратным холодильником, и охлаждали до комнатной температуры. Раствор концентрировали при пониженном давлении, растворяли в дихлорметане, промывали с помощью воды и сушили с помощью сульфата натрия с получением соединения XVIII (триазол, 98%), которое обрабатывали с помощью хлористоводородной кислоты, как в примере синтеза 9, с получением соединения XIX (0,35 г, 1,1 ммоль, 92%).

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,18 (с, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,39 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,09-7,00 (м, 2H), 5,11 (м, 1H), 4,82 (д, J=4,8 Гц, 2H), 4,18 (т, J=9,0 Гц, 1H), 3,84 (м, 1H), 3,59 (т, J=6,0 Гц, 2H), 3,19 (т, J=6,0 Гц, 2H).

[Пример синтеза 14] Получение соединения XXVII-b

Соединение VI (12 г, 21 ммоль) растворяли в DMF (100 мл) и после добавления NaN₃ (1,65 г, 26 ммоль) перемешивали при 80°С в течение 3 часов. Раствор охлаждали до комнатной температуры, разбавляли с помощью смеси этилацетат/гексан (150 мл/30 мл), промывали 3 раза с помощью дистиллированной воды (200 мл), сушили с помощью безводного сульфата натрия, концентрировали при пониженном давлении, и разделяли с помощью колоночной хроматографии, используя раствор 30% этилацетат/гексан, с получением соединения VII (9,6 г, 19 ммоль, 89%). Соединение VII (9,6 г, 19 ммоль) растворяли в метаноле (120 мл), после добавления Pd/C (1 г) перемешивали в течение 4 часов в атмосфере водорода, подаваемого из баллона, и фильтровали через целит с получением соединения амина (8,6 г, 95%). Соединение амина (8,6 г) растворяли в дихлорметане (120 мл) и, после добавления насыщенного водного раствора NaHCO₃ (40 мл) и затем добавления тиофосгена (1,6 мл, 21 ммоль) при 0°С, перемешивали в течение 2 часов. Органический слой сушили с помощью сульфата натрия, отгоняли при пониженном давлении, растворяли в метаноле (150 мл), перемешивали в течение ночи при кипячении с обратным холодильником, концентрировали при пониженном давлении, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения XXVI-b (2,6 г, 7,6 ммоль), которое обрабатывали с помощью хлористоводородной кислоты, как в примере синтеза 9, с количественным получением соединения XXVII-b.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,35 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 6,99-6,89 (м, 2H), 6,70 (т, J=9,2 Гц, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,10-3,91 (м, 6H), 3,88-3,78 (м, 3H), 3,32 (т, J=5,2 Гц, 2H).

[Пример синтеза 15] Получение соединения XXVII-a

Гидрохлорид соединения XXVII-a (3,4 г, 9,8 ммоль, 85%) получали из соединения VI, как в примере синтеза 14, используя Ac₂O вместо тиофосгена.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ 7,69 (т, 1H, J=6,0 Гц), 7,46 (дд, 1H, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,41-7,26 (м, 5H), 7,18-7,11 (м, 1H), 7,00 (т, 1H, J=9,6 Гц), 6,21-5,73 (м, 2H), 5,03 (с, 2H), 4,74-4,66 (м, 1H), 4,07 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,76-3,70 (м, 1H), 3,60 (т, 2H, J=5,7 Гц), 3,42-3,33 (м, 2H), 3,19 (т, 2H, J=5,7 Гц).

[Пример синтеза 16] Получение соединения XXVIII-a

Гидрохлорид соединения XXV-a (1,69 г, 4,86 ммоль), гидроксифталимид (0,83 г, 5,11 ммоль), трифенилфосфин (1,34 г, 5,11 ммоль) и триэтиламин (0,7 мл, 4,87 ммоль) добавляли к THF (20 мл). После медленного добавления по каплям при перемешивании диизопропил азодикарбоксилата (DIAD, 1,15 мл, 5,84 ммоль), раствор перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре. После фильтрации фильтрат концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения XXVIII-a (1,49 г, 3,26 ммоль, 88%).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=7,86 (м, 2H), 7,76 (м, 2H), 7,38 (дд, J=8,8, 1,6 Гц, 1H), 7,00 (дд, J=8,8, 1,6 Гц, 1H), 6,69 (т, J=6,0 Гц, 1H), 6,13 (т, J=4,0 Гц), 4,92 (ушир.с, 1H), 4,75 (м, 1H), 4,42 (т, J=3,6 Гц, 1H), 4,00 (т, J=6 Гц, 1H), 3,70 (м, 2H), 3,60 (м, 1H), 3,50 (ушир.с, 2H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 457 (M+H⁺) для C₂₂H₂₁FN₄O₆.

[Пример синтеза 17] Получение соединения XXIII

Соединение V (26 г, 0,053 моль) растворяли в дихлорметане (180 мл) и после медленного добавления последовательно по каплям диизопропилэтиламина (DIPEA, 13 мл, 0,079 моль) и бензоилхлорида (Bz-Cl, 7,4 мл, 0,064 моль) при 0°С перемешивали в течение 10 минут. После нагревания до комнатной температуры, добавляли небольшое количество DMAP и раствор перемешивали в течение 2 часов. Раствор концентрировали при пониженном давлении, растворяли в этилацетате, последовательно промывали с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и насыщенного водного раствора хлорида натрия (рассола), сушили с помощью безводного сульфата натрия, и концентрировали при пониженном давлении с количественным получением соединения XXII (31 г, 0,053 моль), которое обрабатывали с помощью хлористоводородной кислоты, как в примере синтеза 9, с количественным получением соединения XXIII.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ 7,88 (д, J=7,8 Гц, 2H), 7,63 (т, 1H, J=7,2 Гц), 7,46 (т, 2H, J=7,2 Гц), 7,41 (дд, 1H, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,11 (д, 1H, J=9,0 Гц), 6,88 (т, 1H, J=9,0 Гц), 5,02 (м, 1H), 4,54-4,45 (м, 2H), 4,16 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,88 (м, 1H), 3,54 (т, 2H, J=6,0 Гц), 3,13 (т, 2H, J=6,0 Гц).

Методы синтеза целевых соединений из промежуточных соединений, полученных в примерах синтезов 1-17, иллюстрируются с помощью следующих примеров.

[Пример 1] Получение соединения 1

Соединение XIII (0,1 г, 0,31 ммоль), полученное в примере синтеза 11, растворяли в дихлорметане (3 мл), после добавления по каплям последовательно DIPEA (0,1 мл, 0,6 ммоль) и Ac₂O (0,06 мл, 0,6 ммоль) перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре, концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 1 (0,098 г, 0,27 ммоль, 87%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d₄) δ=8,54 (с, 1H), 7,59 (дд, J=13,6, 2,4 Гц, 1H), 7,20 (дд, J=13,6, 2,4 Гц, 1H), 7,13 (т, J=8,8, Гц, 1H), 6,88 (с, 1H), 6,19 (т, J=6,0 Гц, 1H), 4,81 (м, 1H), 4,05 (т, J=8 Гц, 1H), 3,99 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,80 (дд, J=8,8, 6,8 Гц, 1H), 3,73 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,69 (м, 2H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 364 (M+H⁺) для C₁₆H₁₈FN₅O₄.

[Пример 2] Получение соединения 2

Соединение 1 (0,7 г, 1,93 ммоль), 4 н. хлористоводородную кислоту, растворенную в 1,4-диоксане (3 мл, 12 ммоль) и Pd/C (70 мг) добавляли в THF (20 мл) и перемешивали в течение 2 часов в атмосфере газообразного водорода. Раствор фильтровали через целит и концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 2 (0,72 г, 1,93 ммоль, 100%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,34-8,31 (м, 2H), 7,68 (дд, J=13,6, 2,4 Гц, 1H), 7,56 (т, J=8,8 Гц, 1H), 7,41 (дд, J=13,6, 2,4 Гц, 1H), 4,76 (м, 1H), 4,15 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,78 (м, 3H), 3,46 (м, 2H), 3,35 (т, J=8,4 Гц, 2H), 1,83 (с, 3H).

LCMS: 336 (M+H⁺) для C₁₅H₁₈FN₅O₃.

[Пример 3] Получение соединения 3

Соединение 2 (0,11 г, 0,34 ммоль) растворяли в метаноле (3 мл), после добавления DIPEA (0,17 мл, 1 ммоль) и диметилсульфата (52 мг, 0,41 ммоль) перемешивали в течение 6 часов при комнатной температуре и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 3 (29 мг, 0,083 ммоль, 24%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,52 (дд, 1H, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,18-7,62 (м, 1H), 7,10 (т, 1H, 8,4 Гц), 6,90 (с, 1H), 6,70 (т, 1H, J=6,0 Гц), 4,82-4,75 (м, 1H), 4,04 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,85 (т, 2H, J=4,8 Гц), 3,82 (т, 1H, 4,8 Гц), 3,74-3,60 (м, 2H), 2,99 (т, 2H, J=4,8 Гц), 2,79 (с, 3H), 2,02 (с, 3H).

LCMS: 350 (M+H⁺) для C₁₆H₂₀F-₁-N₅O₃.

[Пример 4] Получение соединения 4

Соединение 2 (0,21 г, 0,63 ммоль) растворяли в DMF (3 мл), после добавления DIPEA (0,17 мл, 1 ммоль) и аллилбромида (0,1 г, 0,8 ммоль) перемешивали в течение 6 часов при комнатной температуре, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 4 (80 мг, 0,21 ммоль, 33%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,51 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,15-7,09 (м, 2H), 6,92 (с, 1H), 6,18 (ушир.т, 1H), 6,02 (м, 1H), 5,30-5,22 (м, 2H), 4,79 (м, 1H), 4,05 (т, J=9 Гц, 1H), 3,82 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,79-3,58 (м, 6H), 3,00 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 376 (M+H⁺) для C₁₈H₂₂F-₁-N₅O₃.

[Пример 5] Получение соединения 5

Соединение 5 (34 мг, 0,091 ммоль, 43%) получали из соединение 2, как в примере 4, используя пропаргилбромид.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,51 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,16-7,11 (м, 2H), 6,95 (с, 1H), 6,00 (ушир.т, 1H), 4,79 (м, 1H), 4,04 (т, J=9 Гц, 1H), 3,85 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,82 (д, J=2,4 Гц, 2H), 3,79-3,62 (м, 3H), 3,13 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,31 (т, J=2,4 Гц, 1H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 374 (M+H⁺) для C₁₈H₂₀F-₁-N₅O₃.

[Пример 6] Получение соединения 6

Соединение 2 (30 мг, 0,08 ммоль), DIPEA (66 мкл, 0,40 ммоль) и этилйодид (20 мкл, 0,24 ммоль) последовательно добавляли в дихлорметан (2 мл) при 0°С и перемешивали в течение 8 часов при кипячении с обратным холодильником. Раствор концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 6 (5 мг, 0,01 ммоль, 13%) в виде желтой пены.

¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d₄) δ=7,57 (дд, J=15 Гц, 1H), 7,18 (с, 2H), 7,08 (с, 1H), 6,31 (т, J=6,0 Гц, 1H), 4,83 (м, 1H), 4,07 (т, J=8,0 Гц, 1H), 3,90 (т, J=4,2 Гц, 2H), 3,83 (дд, J=8,0, 7,2 Гц, 1H), 3,74-3,65 (м, 2H), 3,12 (т, J=5,4 Гц, 3H), 3,05 (кв., J=6,6 Гц, 2H), 2,06 (с, 3H), 1,31 (т, J=6,6 Гц, 3H).

LCMS: 364 (M+H⁺) для C₁₇H₂₂FN₅O₃.

[Пример 7] Получение соединения 7

Соединение 2 (0,1 г, 0,3 ммоль) растворяли в DMF (3 мл), после добавления 1 эквивалента K₂CO₃, 2 эквивалентов хлорацетонитрила и каталитического количества KI нагревали в течение 6 часов при 80°С, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 7 (107 мг, 0,287 ммоль, 96%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,40 (дд, 1H, J₁=13,2 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,01 (дд, 1H, J₁=8,4 Гц, J₂=1,2 Гц), 6,69 (т, 1H, J=9,3 Гц), 6,14 (д, 1H, J=5,4 Гц), 4,78-4,72 (m 1H), 4,40 (т, 2H, J=5,4 Гц), 4,00 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,76-3,66 (м, 2H), 3,61 (т, 1H, J=6,0 Гц), 3,55 (т, 2H, J=5,4 Гц), 3,03 (с, 3H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 374 (M+H⁺) для C₁₇H₁₉FN₆O₃.

[Пример 8] Получение соединения 8

Соединение 2 (0,1 г, 0,3 ммоль) растворяли в DMF (3 мл) в течение 6 часов при 200°С после добавления 1 эквивалента K₂CO₃ и 2 эквивалентов 1,1,1-трифтор-2-йодэтана и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 8 (11 мг, 0,026 ммоль, 9%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,52 (дд, 1H, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,18-7,07 (м, 2H), 6,86 (с, 1H), 6,32-6,24 (м, 1H), 4,90-4,76 (м, 1H), 4,04 (т, J=8,7 Гц), 3,84 (т, 2H, J=4,5 Гц), 3,81-3,76 (м, 1H), 3,62-3,52 (м, 2H), 3,24 (т, 4,5 Гц), 2,02 (с, 3H).

LCMS: 418 (M+H⁺) для C₁₇H₁₉F₄N₅O₃.

[Пример 9] Получение соединения 9

Соединение 2 (150 мг, 0,40 ммоль), DIPEA (200 мкл, 1,20 ммоль) и цианоген бромид (63 мг, 0,60 ммоль) последовательно добавляли в дихлорметан (2 мл) при 0°С и перемешивали в течение 0,5 часа. Раствор концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 9 (25 мг, 0,07 ммоль, 17%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d₄) δ=7,60 (дд, J=13,2, 2,4 Гц, 1H), 7,20 (дд, J=13,2, 2,4 Гц, 1H), 7,13 (т, J=8,8, Гц, 1H), 6,89 (с, 1H), 4,80 (м, 1H), 4,05 (т, J=9,2 Гц, 1H), 3,85-3,61 (м, 2H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 361 (M+H⁺) для C₁₆H₁₇FN₆O₃.

[Пример 10] Получение соединения 10

Соединение 2 (5 мг, 0,013 ммоль), DIPEA (4 мкл, 0,026 ммоль) и ацетилхлорид (1,5 мкл, 0,02 ммоль) последовательно добавляли в дихлорметан (2 мл) при 0°С и перемешивали в течение 1,5 часа. После добавления дихлорметана (30 мл), раствор промывали с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (15 мл), сушили с помощью сульфата магния, концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 10 (2 мг, 0,004 ммоль, 30%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₄) δ=7,57 (дд, J=13,2, 2,4 Гц, 1H), 7,20 (дд, J=9,6, 2,4 Гц, 1H), 7,13 (т, J=9,6, Гц, 1H), 6,85 (с, 1H), 6,03 (т, J=6,0 Гц, 1H), 4,80 (м, 1H), 4,06 (м, 2H), 3,79 (дд, J=9,0, 6,6 Гц, 2H), 3,71 (м, 2H), 3,62 (м, 1H) 2,03 (с, 3H).

LCMS: 378 (M+H⁺) для C₁₇H₂₀FN₅O₄.

[Пример 11] Получение соединения 11

Соединение 2 (30 мг, 0,08 ммоль), (1H-бензотриазол-1-илокси)трипирролидинофосфония гексафторфосфат (PyBOP, 105 мг, 0,20 ммоль), цианоуксусную кислоту (14 мг, 0,16 ммоль) и DIPEA (40 мкл, 0,24 ммоль) последовательно добавляли в DMF (2 мл) при 0°С и перемешивали в течения 1,5 часа при комнатной температуре. После добавления дихлорметана (30 мл) раствор промывали 3 раза с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, сушили с помощью сульфата магния, концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 11 (5 мг, 0,01 ммоль, 13%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d₄) δ=7,61 (дд, J=13,2, 2,8 Гц, 1H), 7,25 (дд, J=13,2, 2,8 Гц, 1H), 7,13 (т, J=8,8, Гц, 1H), 6,85 (с, 1H), 6,19 (т, J=6,0 Гц, 1H), 4,81 (м, 1H), 4,07 (м, 2H), 3,85 (м, 3H), 3,75 (т, J=6,0 Гц, 2H), 3,68 (м, 2H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 403 (M+H⁺) для C₁₈H₁₉FN₆O₄.

[Пример 12] Получение соединения 12

Соединение 2 (200 мг, 0,54 ммоль), PyBOP (700 мг, 1,34 ммоль), гликолевую кислоту (82 мг, 1,07 ммоль) и DIPEA (266 мкл, 1,61 ммоль) последовательно добавляли в DMF (2 мл) при 0°С и перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. После добавления дихлорметана (100 мл) раствор промывали 3 раза с помощью дистиллированной воды, сушили с помощью сульфата магния, концентрировали при пониженном давлении, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 12 (83 мг, 0,21 ммоль, 39%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,25 (т, J=6 Гц, 1H), 7,62 (дд, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 7,37 (т, J=8,8 Гц, 1H), 7,32 (дд, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 7,07 (т, J=2,0 Гц, 1H), 4,74 (м, 1H), 4,53 (т, J=6,0 Гц, 1H), 4,32 (д, J=6 Гц, 2H), 4,12 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,89 (т, J=4,6 Гц, 2H), 3,75-3,69 (м, 3H), 3,40 (м, 2H), 1,83 (с, 3H).

LCMS: 394 (M+H⁺) для C₁₇H₂₀FN₅O₅.

[Пример 13] Получение соединения 13

Соединение 2 (35 мг, 0,09 ммоль), DIPEA (45 мкл, 0,28 ммоль) и циклопропанкарбонилхлорид (13 мкл, 0,14 ммоль) последовательно добавляли в дихлорметан (3 мл) при 0°С и перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Раствор концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 13 (13 мг, 0,03 ммоль, 33%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,25 (т, J=6 Гц, 1H), 7,6 (д, J=13,8 Гц, 1H), 7,39 (т, J=9,0 Гц, 1H), 7,32 (д, J=13,8 Гц, 1H), 7,10 (м, 1H), 4,75 (м, 1H), 4,12 (т, J=9,0 Гц, 1H), 3,90 (с, 2H), 3,74 (т, J=6,6 Гц, 1H), 3,70 (с, 2H), 3,42 (т, J=5,4 Гц, 2H), 2,69 (т, J=6,0 Гц, 1H), 1,83 (с, 3H), 0,85 (д, J=6,0 Гц, 3H).

LCMS: 404 (M+H⁺) для C₁₉H₂₂FN₅O₄.

[Пример 14] Получение соединения 14

Соединение 2 (30 мг, 0,08 ммоль), триэтиламин (23 мкл, 0,16 ммоль) и триметилсилилизоцианат (63 мкл, 0,40 ммоль) последовательно добавляли в дихлорметан (3 мл) при 0°С и перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. После добавления дихлорметана (30 мл) раствор промывали дважды с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, сушили с помощью сульфата магния, концентрировали при пониженном давлении, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 14 (8 мг, 0,02 ммоль, 26%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,26 (т, J=6,0 Гц, 1H), 7,60 (дд, J=15,0,2,4 Гц, 1H), 7,37-7,30 (м, 2H), 6,96 (д, J=2,0 Гц, 1H), 6,32 (с, 2H), 4,74 (м, 1H), 4,12 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,78-3,67 (м, 4H), 3,40-3,28 (м, 3H), 1,83 (с, 3H).

LCMS: 379 (M+H⁺) для C₁₆H₁₉FN₆O₄.

[Пример 15] Получение соединения 15

Соединение 15 (25 мг, 0,059 ммоль, 42%) получали из соединение 2, как в примере 6, используя карбонилдиимидазол (437 мг, 2,7 ммоль) и этаноламин.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,69 (с, 1H), 7,54 (дд, 1H, J₁=13,2 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,16 (дд, 1H, J₁=9,0 Гц, J₂=1,8 Гц), 7,10-7,08 (м, 1H), 6,87 (т, 1H, J=6,0 Гц), 6,78 (с, 1H), 6,72 (т, 1H, J=6,0 Гц), 4,83-7,49 (м, 1H), 4,04 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,95 (т, 2H, J=4,8 Гц), 3,84-3,78 (м, 1H), 3,76 (т, 2H, J=5,4 Гц), 3,72 (т, 2H, J=4,8 Гц), 3,67 (дд, 2H, J₁=6,0 Гц, J₂=4,8 Гц), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 423 (M+H⁺) для C₁₈H₂₃FN₆O₅.

[Пример 16] Получение соединения 16

Соединение 16 (15 мг, 0,032 ммоль, 25%) получали из соединение 2, как в примере 15, используя карбонилдиимидазол и диэтаноламин.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ 7,70-7,62 (м, 1H), 7,37-7,30 (м, 2H), 7,1 (с, 1H), 4,81-4,76 (м, 1H), 4,45-4,40 (м, 2H), 4,14 (т, 1H, J=9,0 Гц), 4,01-3,94 (м, 2H), 3,82-3,78 (м, 4H), 3,55 (д, 2H, J=4,8 Гц), 3,48-3,42 (м, 1H), 3,42-3,38 (м, 2H), 3,20-3,16 (м, 2H), 1,94 (с, 3H), 1,29 (т, 2H, J=7,2 Гц).

LCMS: 467 (M+H⁺) для C₂₀H₂₇FN₆O₆.

[Пример 17] Получение соединения 17

Соединение 17 (31 мг, 0,075 ммоль, 88%) получали из соединение 2, как в примере 11, используя дифторуксусную кислоту.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,61 (дд, 1H, J₁=13,2 Гц, J₂=3,0 Гц), 7,22 (дд, 1H, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,14 (т, 1H, J=9,0 Гц), 6,90 (с, 1H), 6,77 (т, 1H, J=53,4 Гц), 6,04 (т, 1H, J=6,3 Гц), 4,83-4,79 (м, 1H), 4,08 (т, 2H, J=4,8 Гц), 4,05 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,88-3,80 (м, 1H), 3,78 (т, 2H, J=4,8 Гц), 3,75-3,69 (м, 1H), 3,69-3,60 (м, 1H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 414 (M+H⁺) для C₁₇H₁₈F₃N₅O₄.

[Пример 18] Получение соединения 18

Соединение 2 (35 мг, 0,09 ммоль), DIPEA (45 мкл, 0,28 ммоль) и метансульфонилхлорид (11 мкл, 0,14 ммоль) последовательно добавляли в дихлорметан (3 мл) при 0°С и перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Раствор концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 18 (13 мг, 0,03 ммоль, 33%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,26 (т, J=5,4 Гц, 2H), 7,61 (д, J=13,8 Гц, 1H), 7,43 (т, J=9,6 Гц, 1H), 7,33 (д, J=9,6 Гц, 1H), 7,21 (с, 1H), 4,75 (м, 1H), 4,13 (т, J=8,4 Гц, 1H), 3,84 (с, 1H), 3,74 (т, J=8,4 Гц, 1H), 3,56 (с, 2H), 3,41 (т, J=5,4 Гц, 2H), 2,98 (с, 3H), 1,83 (с, 3H).

LCMS: 414 (M+H⁺) для C₁₆H₂₀FN₅O₅S.

[Пример 19] Получение соединения 19

Соединение 2 (30 мг, 0,08 ммоль), DIPEA (66 мкл, 0,40 ммоль) и метилизотиоцианид (6 мкл, 0,24 ммоль) последовательно добавляли в дихлорметан (2 мл) при 0°С и перемешивали в течение 12 часов. Раствор концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 19 (17 мг, 0,03 ммоль, 38%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₄) δ=7,78 (с, 1H), 7,58 (дд, J=13,2, 2,4 Гц, 1H), 7,21 (дд, J=13,2, 2,4 Гц, 1H), 7,13 (т, J=8,4, Гц, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,96 (т, J=6,0 Гц, 1H), 4,80 (м, 1H), 4,59 (т, J=5,4 Гц, 2H), 4,05 (т, J=7,5 Гц, 1H), 3,81-3,77 (м, 3H), 3,71 (м, 1H), 3,65 (м, 1H), 3,20 (д, J=4,8 Гц, 1H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 409 (M+H⁺) для C₁₇H₂₁FN₆O₃S.

[Пример 20] Получение соединения 20

Соединение 2 (50 мг, 0,13 ммоль), триэтиламин (55 мкл, 0,39 ммоль) и амидосульфонилхлорид (145 мкл, 0,26 ммоль) последовательно добавляли в дихлорметан (3 мл) при 0°С и перемешивали в течение 12 часов при комнатной температуре. После добавления дихлорметана (30 мл) раствор промывали дважды с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, сушили с помощью сульфата магния, концентрировали при пониженном давлении, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 20 (5 мг, 0,01 ммоль, 10%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,26 (т, J=4,8 Гц, 1H) 7,60 (дд, J=13,2, 2,4 Гц, 1H), 7,42 (т, J=8,8 Гц, 1H), 7,32 (дд, J=13,2, 2,4 Гц, 1H), 7,12 (с, 1H), 7,05 (с, 2H), 4,74 (м, 1H), 4,12 (т, J=9,2 Гц, 1H), 3,81 (т, J=5,2 Гц, 2H), 3,73 (дд, J=9,2, 6,4 Гц, 1H), 3,50-3,38 (м, 4H), 1,83 (с, 3H).

LCMS: 414 (M+H⁺) для C₁₅H₁₉FN₆O₅S.

[Пример 21] Получение соединения 21

Соединение 2 (50 мг, 0,13 ммоль), триэтиламин (36 мкл, 0,26 ммоль) и диметиламиносульфонилхлорид (16 мкл, 0,15 ммоль) последовательно добавляли в DMF (1 мл) при 0°С и перемешивали в течение 12 часов при комнатной температуре. После добавления дихлорметана (30 мл), раствор промывали дважды с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (10 мл), сушили с помощью сульфата магния, концентрировали при пониженном давлении, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 21 (6 мг, 0,01 ммоль, 10%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=7,62 (дд, J=13,2, 2,4 Гц, 1H), 7,19 (дд, J=13,2, 2,0 Гц, 1H), 7,12 (т, J=8,8 Гц, 1H), 6,94 (с, 1H), 6,00 (т, J=6,0 Гц, 1H), 4,80 (м, 1H), 4,05 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,85 (т, J=4,4 Гц, 2H), 3,79 (дд, J=8,8, 6,8 Гц, 1H), 3,71-3,60 (м, 4H), 3,03 (с, 6H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 443 (M+H⁺) для C₁₇H₂₃FN₆O₅.

[Пример 22] Получение соединения 22

Соединение 22 (36 мг, 0,085 ммоль, 78%) получали из соединение 2, как в примере 11.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,26 (т, J=6,0 Гц, 1H), 7,50 (д, J=13,8 Гц, 1H), 7,37 (т, J=9,0 Гц, 1H), 7,24 (д, J=9,0 Гц, 1H), 5,86 (с, 1H), 5,61 (м, 1H), 4,72 (м, 1H), 4,11 (м, 1H), 3,72 (м, 1H), 3,41-3,35 (м, 2H), 3,08 (м, 2H), 2,86 (м, 2H), 1,83 (с, 3H), 1,31 (с, 3H), 1,24 (с, 3H).

LCMS: 422 (M+H⁺) для C₁₉H₂₄FN₅O₅.

[Пример 23] Получение соединения 23

Соединение 2 (30 мг, 0,08 ммоль), PyBOP (105 мг, 0,20 ммоль), Boc-Gly-OH (28 мг, 0,16 ммоль) и DIPEA (40 мкл, 0,24 ммоль) последовательно добавляли в DMF (2 мл) при 0°С и перемешивали в течение 1,5 часа при комнатной температуре. После добавления дихлорметана (30 мл), раствор промывали 3 раза с помощью дистиллированной воды (10 мл), сушили с помощью сульфата магния, концентрировали при пониженном давлении, разделяли с помощью колоночной хроматографии, и после добавления 4н хлористоводородной кислоты, растворенной в 1,4-диоксане (3 мл), перемешивали в течение 0,5 часа. Продукт концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 23 (10 мг, 0,02 ммоль, 29%).

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,29 (т, J=6 Гц, 1H), 8,10 (с, 3H), 7,62 (дд, J=15,0, 2,4 Гц, 1H), 7,40 (т, J=8,8 Гц, 1H), 7,34 (дд, J=15,0, 2,4 Гц, 1H), 7,20 (с, 1H), 4,74 (м, 1H), 4,13 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,99-3,94 (м, 3H), 3,74 (т, J=4,0 Гц, 2H), 3,42 (т, J=4,8 Гц, 2H), 1,83 (с, 3H).

LCMS: 393 (M+H⁺) для C₁₇H₂₁FN₆O₄.

[Пример 24] Получение соединения 24

Соединение 24 (200 мг, 0,48 ммоль, 34%) получали из соединение 2, как в примере 7, используя этилбромацетат.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,50 (дд, 1H, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,13 (дд, 1H, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,10 (т, 1H, J=8,4 Гц), 6,89 (с, 1H), 6,70 (т, 1H, J=6,0 Гц), 4,82-4,79 (м, 1H), 4,25-4,21 (м, 2H), 4,04 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,84 (т, 2H, J=4,2 Гц), 3,82-3,80 (м, 1H), 3,77 (с, 2H), 3,66 (т, 2H, J=4,2 Гц), 3,24 (т, 2H, J=4,2 Гц), 2,02 (с, 3H).

LCMS: 422 (M+H⁺) для C₁₉H₂₄FN₅O₅.

[Пример 25] Получение соединения 25

Соединение 24 (100 мг, 0,24 ммоль) растворяли в метаноле (2 мл), после добавления аммиачной воды (0,5 мл) перемешивали в течение ночи при 100°С в закрытой пробирке, концентрировали при пониженном давлении, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 25 (20 мг, 0,051 ммоль, 21%).

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,25 (т, 1H, J=5,6 Гц), 7,56 (д, 1H, 14,0 Гц), 7,83-7,26 (м, 2H), 7,21-7,08 (м, 2H), 6,91 (с, 1H), 4,75-4,71 (м, 1H), 4,11 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,82-3,69 (м, 3H), 3,50-3,40 (м, 2H), 3,31 (с, 2H), 3,03 (т, 2H, J=4,4 Гц), 1,83 (с, 3H).

LCMS: 393 (M+H⁺) для C₁₇H₂₁FN₆O₄.

[Пример 26] Получение соединения 26

Соединение 24 (100 мг, 0,24 ммоль) растворяли в метаноле (20 мл), после добавления раствора гидроксиламина в метаноле (20 мл) (получаемого путем добавления 2,4 г KOH к 2,4 г NH₂OH-HCl и затем фильтрацией) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, концентрировали при пониженном давлении, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 26 (22 мг, 0,054 ммоль, 23%).

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,30-8,20 (м, 1H), 7,35-7,25 (м, 1H), 7,10-7,00 (м, 1H), 6,87 (с, 1H), 5,33-5,28 (м, 1H), 4,71-7,64 (м, 1H), 4,11 (т, 2H, J=9,0 Гц), 4,04 (т, 2H, J=8,4 Гц), 3,17 (с, 2H), 2,91 (т, 2H, J=6,6 Гц), 1,83 (с, 1H).

LCMS: 409 (M+H⁺) для C₁₇H₂₁FN₆O₅.

[Пример 27] Получение соединения 27

Соединение 24 (110 мг, 0,26 ммоль) растворяли в THF (10 мл) и после добавления 2M раствора LiBH₄ (0,2 мл, 0,4 ммоль) перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре. После добавления небольшого количества воды раствор отделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 27 (24 мг, 0,063 ммоль, 29%) в виде светло-желтого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,54 (дд, 1H, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,16 (дд, 1H, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,12 (т, 1H, J=8,4 Гц), 6,90 (с, 1H), 5,98 (т, 1H, J=6,0 Гц), 4,87 (м, 1H), 4,05 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,97 (м, 2H), 3,85 (т, 2H, J=4,2 Гц), 3,82-3,6 (м, 3H), 3,07 (т, 2H, J=4,2 Гц), 3,00 (м, 2H), 2,04 (с, 3H).

LCMS: 380 (M+H⁺) для C₁₇H₂₂FN₅O₄.

[Пример 28] Получение соединения 28

Соединение XXVIII-a (0,22 г, 0,49 ммоль) и гидразин (моногидрат, 1 мл) растворяли в метаноле (10 мл), перемешивали в течение 2 часов при кипячении с обратным холодильником, концентрировали при пониженном давлении и после добавления триметилортоформиата (5 мл) и уксусной кислоты (5 мл) перемешивали в течение 4 часов при кипячении с обратным холодильником. Раствор концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 28 (32 мг, 0,10 ммоль, 20%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,25 (т, J=6 Гц, 1H), 7,60 (дд, J=14,0, 2,4 Гц, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,38 (т, J=8,8 Гц, 1H), 7,31 (дд, J=9,2, 2,0 Гц, 1H), 4,74 (м, 1H), 4,12 (т, J=9,2 Гц, 1H), 4,04 (т, J=3,6 Гц, 2H), 3,75-3,67 (м, 3H), 3,41 (т, J=5,6 Гц, 2H), 1,83 (с, 3H).

LCMS: 337 (M+H⁺) для C₁₅H₁₇FN₄O₄.

[Пример 29] Получение соединения 29

Соединение 2 (100 мг, 0,27 ммоль) растворяли в хлороформе (3 мл) и после добавления насыщенного водного раствора NaHCO₃ (3 мл) и затем добавления тиофосгена (0,021 мл) при 0°С перемешивали в течение 30 минут. Органический слой отделяли, и добавляли аммиачную воду (1 мл). Раствор разбавляли с помощью THF (10 мл) и отгоняли при пониженном давлении с удалением половины количества растворителя. После еще одного добавления аммиачной воды (2 мл), раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Раствор отгоняли при пониженном давлении и растирали с этиловым эфиром с получением соединения 29 (80 мг, 0,20 ммоль, 74%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,27 (т, 1H, J=4,8 Гц), 7,98 (с, 1H), 7,62 (дд, 1H, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,59-7,46 (м, 1H), 7,42 (т, 1H, J=9,0 Гц), 7,34 (д, 1H, J=9,0 Гц), 7,16 (с, 1H), 7,51-6,89 (ушир.с, 2H), 4,79-4,69 (м, 1H), 4,37 (т, 2H, J=4,2 Гц), 4,13 (т, 1H, J=9,6 Гц), 3,79-3,70 (м, 3H), 3,42 (т, 2H, J=4,8 Гц), 3,38-3,29 (м, 1H), 1,83 (с, 3H).

LCMS: 395 (M+H⁺) для C₁₆H₁₉FN₆O₃S.

[Пример 30] Получение соединения 30

Соединение 2 (100 мг, 0,27 ммоль) растворяли в хлороформе (3 мл), после добавления насыщенного водного раствора NaHCO₃ (3 мл) и затем добавления тиофосгена (0,021 мл) при 0°С перемешивали в течение 30 минут. Органический слой отделяли, отгоняли при пониженном давлении, и после добавления метанола (5 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Раствор отгоняли при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 30 (31 мг, 0,20 ммоль, 74%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ 7,60 (дд, 1H, J₁=13,2 Гц, J₂=1,2 Гц), 7,25-7,18 (м, 1H), 7,16 (т, 1H, J=8,4 Гц), 6,96 (с, 1H), 6,51 (ушир.с, 1H), 4,86-4,79 (м, 1H), 4,64-4,54 (м, 2H), 4,19 (с, 3H), 4,06 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,88-3,76 (м, 3H), 3,74-3,66 (м, 2H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 410 (M+H⁺) для C₁₇H₂₀FN₅O₄S.

[Пример 31] Получение соединения 31

Соединение 31 (26 мг, 0,061 ммоль, 32%) получали из соединение 2, как в примере 30, используя этанол вместо метанола.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ 7,60 (д, J=12,0 Гц), 7,24-7,18 (м, 1H), 7,15 (т, 1H, J=8,4 Гц), 6,97 (с, 1H), 6,32 (ушир.с, 1H), 4,88-4,76 (м, 1H), 4,75-4,64 (м, 2H), 4,64-4,53 (м, 2H), 4,06 (т, 1H, J=8,4 Гц), 3,88-3,77 (м, 3H), 3,74-3,60 (м, 2H), 2,03 (с, 3H), 1,46 (т, 3H, J=6,6 Гц).

LCMS: 424 (M+H⁺) для C₁₈H₂₂FN₅O₄S.

[Пример 32] Получение соединения 32

Соединение 32 (23 мг, 0,052 ммоль, 22%) получали из соединения 2, как в примере 30, используя этиленгликоль вместо метанола.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,62 (дд, 1H, J₁=12,6 Гц, J₂=1,8 Гц), 7,23-7,19 (м, 1H), 7,18 (т, 1H, 9,0 Гц), 7,06 (с, 1H), 6,42 (т, 1H, J=6,6 Гц), 4,96-4,86 (ушир.с, 1H), 4,86-4,77 (м, 1H), 4,65 (т, 2H, J=3,6 Гц), 4,59 (т, 2H, J=4,8 Гц), 4,07 (т, 1H, 9,0 Гц), 3,98-3,89 (м, 2H), 3,88-3,79 (м, 3H), 3,72-3,65 (м, 2H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 440 (M+H⁺) для C₁₈H₂₂FN₅O₅S.

[Пример 33] Получение соединения 33

Соединение 33 (16 мг, 0,036 ммоль, 35%) получали из соединения 2, как в примере 30, используя аминоэтанол вместо метанола.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,28 (т, 1H, J=5,4 Гц), 7,67-7,58 (м, 1H), 7,43 (т, 1H, J=9,0 Гц), 7,38-7,31 (м, 1H), 7,20 (с, 1H), 4,08 (т, 1H, J=5,4 Гц), 4,78-4,70 (м, 1H), 4,39 (т, 2H, J=4,8 Гц), 4,13 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,81-3,75 (м, 2H), 3,58 (т, 2H, J=4,2 Гц), 3,53 (т, 2H, J=5,7 Гц), 3,42 (т, 2H, J=5,4 Гц), 1,83 (с, 3H).

LCMS: 439 (M+H⁺) для C₁₈H₂₃FN₆O₄S.

[Пример 34] Получение соединения 34

Соединение 2 (50 мг, 0,13 ммоль) растворяли в этаноле (5 мл) и после добавления DIPEA (0,03 мл, 0,2 ммоль), NaF (7 мг, 0,17 ммоль) и этилдитиоацетата (0,019 мл, 0,16 ммоль) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Раствор отгоняли при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 34 (10 мг, 0,025 ммоль, 19%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,62 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,25-7,21 (м, 2H), 7,16 (т, J=8,4 Гц, 1H), 6,94 (с, 1H), 5,93 (ушир.т, 1H), 4,81 (м, 1H), 4,73 (т, J=5,2 Гц, 2H), 4,06 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,83-3,62 (м, 5H), 2,81 (с, 3H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 394 (M+H⁺) для C₁₇H₂₀FN₅O₃S.

[Пример 35] Получение соединения 35

Соединение 35 (35 мг, 0,086 ммоль, 65%) получали из соединения 2, как в примере 6, используя карбонилдиимидазол и этанол.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,58-7,56 (м, 1H), 7,19-7,18 (м, 1H), 7,13-7,10 (м, 1H ), 6,92 (с, 1H), 6,21 (м, 1H), 4,80 (м, 1H), 4,33-4,32 (м, 2H), 4,06-4,03 (м, 1H), 3,99 (м, 2H), 3,81-3,77 (м, 3H), 3,71-3,66 (м, 2H), 2,03 (с, 3H), 1,38 (т, J=6,3 Гц, 3H).

LCMS: 407 (M+H⁺) для C₁₈H₂₂FN₅O₅.

[Пример 36] Получение соединения 36

Соединение 36 (14 мг, 0,034 ммоль, 74%) получали из соединение 2, как в примере 11, используя пировиноградную кислоту.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,27 (т, J=6,0 Гц, 1H) 7,61 (дд, J₁=13,2 Гц, J₂=3,0 Гц, 1H), 7,40 (т, J=9,0 Гц, 1H), 7,33 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,18 (с, 1H), 4,74 (м, 1H), 4,13 (т, J=9 Гц, 1H), 3,90 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,77-3,72 (м, 3H), 3,42-3,30 (м, 2H), 2,33 (с, 3H), 1,83 (с, 3H).

LCMS: 406 (M+H⁺) для C₁₈H₂₀FN₅O₅.

[Пример 37] Получение соединения 37

Соединение 37 (13 мг, 0,033 ммоль, 65%) получали из соединение 2, как в примере 4, используя хлорацетон.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,52 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,15 (дд, J₁=8,4 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,11 (т, J=8,4 Гц, 1H), 6,89 (с, 1H), 6,09 (ушир.т, 1H), 4,79 (м, 1H), 4,04 (т, J=9 Гц, 1H), 3,85 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,79-3,62 (м, 5H), 3,12 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,26 (с, 3H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 392 (M+H⁺) для C₁₈H₂₂FN₅O₄.

[Пример 38] Получение соединения 38

Соединение 37 (7 мг, 0,018 ммоль) растворяли в дихлорметане (2 мл) и после добавления 2M раствору LiBH₄ перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. После добавления небольшого количества воды раствор отделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 38 (3,6 мг, 0,009 ммоль, 50%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,54 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,15 (дд, J₁=8,4 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,11 (т, J=8,4 Гц, 1H), 6,89 (с, 1H), 6,09 (ушир.т, 1H), 4,79 (м, 1H), 4,04 (т, J=9 Гц, 1H), 3,85 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,79-3,62 (м, 5H), 3,12 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,26 (с, 3H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 394 (M+H⁺) для C₁₈H₂₄FN₅O₄.

[Пример 39] Получение соединения 39

Соединение 39 (15 мг, 0,039 ммоль, 74%) получали из соединения 2, как в примере 4, используя 3-хлор-2-метилпропен.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,51 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,15-7,09 (м, 2H), 6,91 (с, 1H), 6,06 (ушир.т, 1H), 4,97 (с, 1H), 4,93 (с, 1H), 4,79 (м, 1H), 4,04 (т, J=9 Гц, 1H), 3,81 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,78-3,61 (м, 3H), 3,48 (с, 2H), 2,94 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,03 (с, 3H), 1,83 (с, 3H).

LCMS: 390 (M+H⁺) для C₁₉H₂₄FN₅O₃.

[Пример 40] Получение соединения 40

Соединение 40 (11 мг, 0,027 ммоль, 34%) получали из соединения 2, как в примере 4, используя 2,3-дихлор-1-пропен.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,52 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,15-7,09 (м, 2H), 6,91 (с, 1H), 6,23 (ушир.т, 1H), 5,49 (с, 1H), 5,42 (с, 1H), 4,79 (м, 1H), 4,04 (т, J=9 Гц, 1H), 3,85 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,79-3,62 (м, 5H), 3,08 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 410 (M+H⁺) для C₁₈H₂₁ClFN₅O₃.

[Пример 41] Получение соединения 41

Соединение 2 (228 мг, 0,68 ммоль), циклобутанон (0,076 мл, 1,02 ммоль) и NaBH(OAc)₃ (187 мг, 0,88 ммоль) растворяли в дихлорметане (20 мл) и после добавления уксусной кислоты (1 мл) перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. Раствор разбавляли с помощью дихлорметана, последовательно промывали с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и насыщенного водного раствора хлорида натрия (рассола), сушили с помощью безводного сульфата натрия, и концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 41 (200 мг, 0,51 ммоль, 75%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,51 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,15-7,09 (м, 2H), 6,95 (с, 1H), 6,09 (ушир.т, 1H), 4,79 (м, 1H), 4,03 (т, J=9 Гц, 1H), 3,82 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,78-3,61 (м, 3H), 3,41 (м, 1H), 2,91 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,21-2,11 (м, 4H), 2,03 (с, 3H), 1,81-1,72 (м, 2H).

LCMS: 390 (M+H⁺) для C₁₉H₂₄FN₅O₃.

[Пример 42] Получение соединения 42

Соединение 42 (15 мг, 0,039 ммоль, 79%) получали из соединения XIII, как в примере 11.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,64 (т, J=5,6 Гц, 1H), 8,42 (с, 1H), 7,61 (дд, J₁=14 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,38 (т, J=8,8 Гц, 1H), 7,33 (дд, J₁=8,8 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,12 (с, 1H), 4,78 (м, 1H), 4,14 (т, J=9,2 Гц, 1H), 3,84 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,75-3,47 (м, 7H).

LCMS: 389 (M+H⁺) для C₁₇H₁₇FN₆O₄.

[Пример 43] Получение соединения 43

Соединение XIII (190 мг, 0,6 ммоль) и карбонилдиимидазол (143 мг, 0,9 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл) и после добавления триэтиламина (0,25 мл, 1,8 ммоль) перемешивали в течение 6 часов при комнатной температуре. После отгонки 1/3 объема раствора при пониженном давлении растворяли в дихлорметане (5 мл) и этаноле (10 мл), и перемешивали в течение 36 часов при комнатной температуре. Раствор промывали с помощью дистиллированной воды, сушили с помощью сульфата магния, концентрировали при пониженном давлении, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 43 (23 мг, 0,058 ммоль, 29%).

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,38 (с, 1H), 7,56 (дд, J₁=14 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,45 (ушир.т, 1H), 7,35-7,28 (м, 2H), 7,01 (с, 1H), 4,69 (м, 1H), 4,10 (т, J=9,2 Гц, 1H), 3,95 (кв., J=6,6 Гц, 2H), 3,80-3,3 (м, 7H), 1,09 (т, J=6,6 Гц, 3H).

LCMS: 394 (M+H⁺) для C₁₇H₂₀FN₅O₅.

[Пример 44] Получение соединения 44

Соединение XIII (190 мг, 0,6 ммоль) и карбонилдиимидазол (143 мг, 0,9 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл) и после добавления триэтиламина (0,25 мл, 1,8 ммоль) перемешивали в течение 6 часов при комнатной температуре. После отгонки 1/3 объема раствора при пониженном давлении растворяли в THF (5 мл) и этиламине (50 мг), перемешивали в течение 36 часов при комнатной температуре, и кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. Раствор промывали с помощью дистиллированной воды, сушили с помощью сульфата магния, концентрировали при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 44 (35 мг, 0,089 ммоль, 45%).

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,53 (с, 1H), 7,59 (д, J=13 Гц, 1H), 7,19 (д, J=9 Гц, 1H), 7,13 (д, J=9 Гц, 1H), 6,88 (с, 1H), 5,75 (ушир.с, 1H), 5,28 (ушир.с, 1H), 4,81 (м, 1H), 4,04 (т, J=8,2 Гц, 1H), 3,98-3,15 (м, 9H), 1,08 (т, J=6,6 Гц, 3H).

LCMS: 393 (M+H⁺) для C₁₇H₂₁FN₆O₄.

[Пример 45] Получение соединения 45

Соединение 45 (840 мг, 2,1 ммоль, 95%) получали из соединения XIII, как в примере 11, используя дифторуксусную кислоту.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=9,18 (т, J=5,6 Гц, 1H), 8,42 (с, 1H), 7,61 (дд, J₁=14 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,38 (т, J=8,8 Гц, 1H), 7,32 (дд, J₁=8,8 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,12 (с, 1H), 6,26 (т, J=53 Гц, 1H) 4,82 (м, 1H), 4,16 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,84 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,80-3,53 (м, 5H).

LCMS: 400 (M+H⁺) для C₁₆H₁₆F₃N₅O₄.

[Пример 46] Получение соединения 46

Соединение 46 (750 мг, 1,8 ммоль, 84%) получали из соединения 45, как в примере 2.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ 9,17-9,30 (м, 1H), 8,43-8,28 (м, 1H), 7,67 9dd, 1H, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,61 (т, 1H, J=9,0 Гц), 7,44-7,36 (м, 1H), 6,27 (9t, 1H, J=53,4 Гц), 4,85-4,80 (м, 1H), 4,19 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,81-3,75 (м, 2H), 3,38-3,32 (м, 2H).

LCMS: 372 (M+H⁺) для C₁₅H₁₆F₃N₅O₃.

[Пример 47] Получение соединения 47

Соединение 47 (16 мг, 0,037 ммоль, 25%) получали из соединения 46, как в примере 12.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,57 (дд, 1H, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,21 (дд, 1H, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,13 (т, 1H, J=9,0 Гц), 6,96-6,90 (м, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,94 (т, 1H, J=54,0 Гц), 4,88-4,83 (м, 1H), 4,12 (т, 1H, J=9,0 Гц), 4,06 (т, 2H, J=5,4 Гц), 3,90-3,81 (м, 1H), 3,80-3,74 (м, 3H), 3,74-3,66 (м, 1H), 3,64 (с, 2H).

LCMS: 430 (M+H⁺) для C₁₇H₁₈F-₃-N₅O₅.

[Пример 48] Получение соединения 48

Соединение 48 (16 мг, 0,04 ммоль, 61%) получали из соединения 46, как в примере 6.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,48 (дд, 1H, J₁=13,2 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,23 (т, 1H, J=5,4 Гц), 7,16-7,08 (м, 2H), 6,94 (с, 1H), 5,94 (т, 1H, J=54,0 Гц), 4,86-4,82 (м, 1H), 4,10 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,88-3,84 (м, 1H), 3,83 (т, 2H, J=4,8 Гц), 3,78-3,73 (м, 1H), 3,73-3,64 (м, 1H), 3,02 (т, 2H, J=4,8 Гц), 3,00-2,94 (м, 3H), 1,23 (т, 2H, 7,2 Гц).

LCMS: 400 (M+H⁺) для C₁₇H₂₀F-₃-N₅O₃.

[Пример 49] Получение соединения 49

Соединение 49 (15 мг, 0,037 ммоль, 57%) получали из соединения 46, как в примере 5.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 7,51 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,16-7,11 (м, 2H), 6,96 (с, 1H), 6,89 (ушир.т, 1H), 5,94 (т, J=54,0 Гц, 1H), 4,84 (м, 1H), 4,11 (т, J=9,0 Гц, 1H), 3,89-3,64 (м, 7H), 3,13 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,31 (т, J=2,4 Гц, 1H).

LCMS: 410 (M+H⁺) для C₁₈H₁₈F-₃-N₅O₃.

[Пример 50] Получение соединения 50

Соединение 50 (15 мг, 0,037 ммоль, 68%) получали из соединения 46, как в примере 7.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 7,53 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,17-7,13 (м, 2H), 7,01 (ушир.т, 1H), 6,96 (с, 1H), 5,94 (т, J=54,0 Гц, 1H), 4,85 (м, 1H), 4,11 (т, J=9,0 Гц, 1H), 3,98 (с, 2H) 3,89-3,66 (м, 5H), 3,15 (т, J=4,8 Гц, 2H).

LCMS: 411 (M+H⁺) для C₁₇H₁₇F-₃-N₆O₃.

[Пример 51] Получение соединения 51

Соединение 51 (155 мг, 0,36 ммоль, 86%) получали из соединения XIII, как в примере 11, используя дихлоруксусную кислоту.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,99 (т, J=6,0 Гц, 1H), 8,42 (с, 1H), 7,61 (д, J=12 Гц, 1H), 7,38 (т, J=9,0 Гц, 1H), 7,31 (д, J=9 Гц, 1H), 7,12 (с, 1H), 6,49 (с, 1H), 4,81 (м, 1H), 4,16 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,84 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,74-3,66 (м, 3H), 3,55 (т, J=5,2 Гц, 2H).

LCMS: 432 (M+H⁺) для C₁₆H₁₆Cl-₂-FN₅O₄.

[Пример 52] Получение соединения 52

Соединение 52 (250 мг, 0,6 ммоль, 92%) получали из соединения XIII, как в примере 11, используя изоксазолкарбоновую кислоту.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=9,32 (т, J=5,6 Гц, 1H), 8,75 (д, J=1,2 Гц, 1H) 8,42 (с, 1H), 7,60 (дд, J₁=14 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,38 (т, J=8,8 Гц, 1H), 7,33 (дд, J₁=8,8 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,11 (д, J=1,2 Гц, 1H), 4,88 (м, 1H), 4,18 (т, J=9,2 Гц, 1H), 3,88-3,82 (м, 3H), 3,69 (т, J=5,2 Гц, 2H), 3,64 (т, J=5,6 Гц, 2H).

LCMS: 417 (M+H⁺) для C₁₈H₁₇-FN₆O₅.

[Пример 53] Получение соединения 53

Соединение XIII (4,5 г, 14 ммоль) растворяли в дихлорметане (75 мл) и после добавления насыщенного водного раствора NaHCO₃ (75 мл) и тиофосгена (1,1 мл, 14 ммоль) при 0°С перемешивали в течение 1 часа. Органический слой сушили с помощью сульфата натрия, отгоняли при пониженном давлении, растворяли в метаноле (120 мл), перемешивали в течение ночи при кипячении с обратным холодильником, концентрировали при пониженном давлении, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 53 (3,18 г, 8,05 ммоль, 58%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,55 (с, 1H), 7,58 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,21 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,7 Гц, 1H), 7,13 (т, J=8,4 Гц, 1H), 6,89 (с, 1H), 6,71 (т, J=6,3 Гц, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,13-4,08 (м, 2H), 4,05 (м, 1H), 4,01 (с, 3H), 3,99 (т, J=5,0 Гц, 2H), 3,90 (м, 1H), 3,74 (т, J=5,0 Гц, 2H).

LCMS: 396 (M+H⁺) для C₁₆H₁₈FN₅O₄S.

[Пример 54] Получение соединения 54

Соединение 54 (210 мг, 0,51 ммоль, 65%) получали из соединение XIII, как в примере 53, используя этанол вместо метанола.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,54 (с, 1H), 7,58 (дд, J₁=14 Гц, J₂=2,8 Гц, 1H), 7,21 (дд, J₁=14 Гц, J₂=3,8 Гц, 1H), 7,13 (т, J=8,4 Гц, 1H), 6,88 (с, 1H), 6,75 (т, J=6,3 Гц, 1H), 4,96 (м, 1H), 4,54-4,44 (м, 2H), 4,09-4,02 (м, 3H), 3,98 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,92 (м, 1H), 3,73 (т, J=4,8 Гц, 2H), 1,31 (т, J=7 Гц, 3H).

LCMS: 410 (M+H⁺) для C₁₇H₂₀FN₅O₄S.

[Пример 55] Получение соединения 55

Соединение 55 (52 мг, 0,12 ммоль, 52%) получали из соединения XIII, как в примере 53, используя изопропанол вместо метанола.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,55 (с, 1H), 7,58 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,22 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,7 Гц, 1H), 7,13 (т, J=8,4 Гц, 1H), 6,88 (с, 1H), 6,57 (т, J=6,3 Гц, 1H), 5,54 (м, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,12-4,06 (м, 2H), 4,02 (м, 1H), 3,99 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,92 (м, 1H), 3,73 (т, J=4,8 Гц, 2H), 1,32 (д, J=6 Гц, 3H), 1,27 (д, J=6 Гц, 3H).

LCMS: 424 (M+H⁺) для C₁₈H₂₂FN₅O₄S.

[Пример 56] Получение соединения 56

Соединение 56 (36 мг, 0,088 ммоль, 57%) получали из соединения XIII, как в примере 53, используя этиламин вместо метанола.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,54 (с, 1H), 7,58 (дд, 1H, J₁=13,2 Гц, J₂₌2,4 Гц), 7,20-7,19 (м, 1H), 7,13 (т, 1H, J=9,0 Гц), 6,88 (с, 1H), 4,92-4,96 (м, 1H), 4,10-4,06 (м, 3H), 3,99 (т, 2H, J=4,8 Гц), 1,44-1,43 (м,2H), 1,21 (т, 3H, J=7,2 Гц).

LCMS: 409 (M+H⁺) для C₁₇H₂₁FN₆O₃S.

[Пример 57] Получение соединения 57

Соединение XXVII-b, получение в примере синтеза 14, подвергали реакции Мицунобу, как в примере 16. Затем получали соединение 57 (84 мг, 0,23 ммоль, 31%), как в примере 28.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,25 (с, 1H), 7,62 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,30 (т, J=9 Гц, 1H), 7,24 (дд, J₁=9 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 6,73 (ушир.т, 1H), 4,94 (м, 1H), 4,21-4,04 (м, 4H), 4,01 (с, 3H), 3,90 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,80 (т, J=4,8 Гц, 2H).

LCMS: 369 (M+H⁺) для C₁₅H₁₇FN₄O₄S.

[Пример 58] Получение соединения 58

Соединение 53 (400 мг, 1,01 ммоль) растворяли в метаноле (20 мл), после добавления 4н. раствора HCl в диоксане (2 мл) и 10% Pd/C (50 мг) перемешивали в течение 2 часов в атмосфере водорода, подаваемого из баллона, фильтровали через целит, и отгоняли при пониженном давлении с количественным получением соединения 58 в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,51 (дд, J₁=14 Гц, J₂=1,8 Гц, 1H), 7,16-7,10 (м, 2H), 6,89 (с, 1H), 6,78 (ушир.т, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,10-3,98 (м, 6H), 3,88-3,81 (м, 3H), 3,32 (т, J=4,8 Гц, 2H).

LCMS: 368 (M+H⁺) для C₁₅H₁₈FN₅O₃S.

[Пример 59] Получение соединения 59

Соединение 58 (150 мг, 0,41 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл), после добавления DIPEA (0,14 мл, 0,82 ммоль) и ацетоксиацетилхлорида (0,066 мл, 0,61 ммоль) при 0°С перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов. Раствор отгоняли при пониженном давлении и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 59 (31 мг, 0,066 ммоль, 16%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 7,58 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,22-7,11 (м, 2H), 6,83 (с, 1H), 6,69 (т, J=6,0 Гц, 1H), 5,08 (с, 2H), 4,96 (м, 1H), 4,10-3,89 (м, 9H), 3,74 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,20 (с, 3H).

LCMS: 468 (M+H⁺) для C₁₉H₂₂FN₅O₆S.

[Пример 60] Получение соединения 60

Соединение 58 (0,013 мг, 0,035 ммоль) растворяли в DMF (2 мл), после добавления DIPEA (0,01 мл, 0,07 ммоль) и йодметана (0,003 мл, 0,035 ммоль) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 60 (3,1 мг, 0,0081 ммоль, 23%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,52 (дд, J₁=14 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,15 (дд, J₁=9 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,11 (т, J=9 Гц, 1H), 6,90 (с, 1H), 6,76 (ушир.т, 1H), 4,94 (м, 1H), 4,10-3,85 (м, 7H), 3,82 (т, J₁=4,8 Гц, 2H), 2,99 (т, J₁=4,8 Гц, 2H), 2,79 (с, 3H).

LCMS: 382 (M+H⁺) для C₁₆H₂₀FN₅O₃S.

[Пример 61] Получение соединения 61

Соединение 61 (15 мг, 0,038 ммоль, 45%) получали из соединения 58, как в примере 60, используя йодэтан вместо йодметана.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,51 (дд, J₁=14 Гц, J₂=1,8 Гц, 1H), 7,15 (дд, J₁=8,4 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,11 (м, 1H), 6,92 (с, 1H), 6,77 (ушир.т, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,11-4,02 (м, 3H), 4,01 (с, 3H), 3,88-3,85 (м, 1H), 3,83 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,02 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,98-2,94 (м, 2H), 1,24 (т, J=7,2 Гц, 3H).

LCMS: 396 (M+H⁺) для C₁₇H₂₂FN₅O₃S.

[Пример 62] Получение соединения 62

Соединение 62 (15 мг, 0,037 ммоль, 67%) получали из соединения 58, как в примере 60, используя аллилбромид вместо йодметана.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,51 (дд, 1H, J₁=13,2 Гц, J₂=1,8 Гц), 7,15 (дд, 1H, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,11 (т, 1H, 8,4 Гц), 6,92 (с, 1H), 6,68 (т, 1H, J=6,0 Гц), 6,08-5,96 (м, 1H), 5,29 (дд, 1H, J₁=10,2 Гц, J₂=1,8 Гц), 5,24 (дд, 1H, J₁=10,2 Гц, J₂=1,8 Гц), 4,98-4,88 (м, 1H), 4,12-4,04 (м, 2H), 4,02-3,98 (м, 1H), 4,01 (с, 3H), 3,86 (дд, 1H, J₁=9,6 Гц, J₂=7,2 Гц), 3,82 (т, 2H, J=4,2 Гц), 3,58 (д, 2H, J=6,0 Гц), 3,00 (т, 2H, J=4,8 Гц).

LCMS: 408 (M+H⁺) для C₁₈H₂₂FN₅O₃S.

[Пример 63] Получение соединения 63

Соединение 63 (36 мг, 0,089 ммоль, 68%) получали из соединения 58, как в примере 60, используя пропаргилбромид вместо йодметана.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,53 (дд, 1H, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,16 (дд, 1H, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,13 (т, 1H, 8,4 Гц), 6,96 (с, 1H), 6,69 (т, 1H, J=6,0 Гц), 4,98-4,90 (м, 1H), 4,14-3,98 (м, 3H), 4,01 (с, 3H), 3,90-3,82 (м, 1H), 3,85 (т, 2H, J=6,6 Гц), 3,83 (д, 2H, J=2,4 Гц), 3,13 (т, 2H, J=5,4 Гц), 2,31 (т, 1H, J=2,4 Гц).

LCMS: 406 (M+H⁺) для C₁₈H₂₀FN₅O₃S.

[Пример 64] Получение соединения 64

Соединение 64 (16 мг, 0,038 ммоль, 74%) получали из соединения 58, как в примере 60, используя 1-бром-2-бутин вместо йодметана.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 7,52 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,16 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,12 (т, 8,4 Гц, 1H), 6,95 (с, 1H), 6,70 (т, J=6,0 Гц, 1H), 4,94 (м, 1H), 4,13-3,75 (м, 11H), 3,12 (т, J=5,4 Гц, 2H), 1,87 (т, J=2,4 Гц, 3H).

LCMS: 420 (M+H⁺) для C₁₉H₂₂FN₅O₃S.

[Пример 65] Получение соединения 65

Соединение 65 (22 мг, 0,054 ммоль, 64%) получали из соединения 58, как в примере 60, используя бромацетонитрил вместо йодметана.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 7,56 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,17 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,14 (т, 8,4 Гц, 1H), 6,96 (с, 1H), 6,68 (т, J=6,0 Гц, 1H), 4,95 (м, 1H), 4,12-3,86 (м, 11H), 3,15 (т, J=5,4 Гц, 2H).

LCMS: 407 (M+H⁺) для C₁₇H₁₉FN₆O₃S.

[Пример 66] Получение соединения 66

Соединение 66 (15 мг, 0,034 ммоль, 54%) получали из соединения 58, как в примере 60, используя 2,3-дихлорпропен вместо йодметана.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 7,52 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,16 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,11 (т, 8,4 Гц, 1H), 6,92 (с, 1H), 6,73 (т, J=6,0 Гц, 1H), 5,49 (с, 1H), 5,42 (с, 1H), 4,94 (м, 1H), 4,12-3,84 (м, 9H), 3,72 (с, 2H), 3,08 (т, J=5,4 Гц, 2H).

LCMS: 442 (M+H⁺) для C₁₈H₂₁ClFN₅O₃S.

[Пример 67] Получение соединения 67

Соединение 67 (18 мг, 0,043 ммоль, 84%) получали из соединения 58, как в примере 41, используя циклопропанкарбоксальдегид.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 7,51 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,18 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,11 (т, 8,4 Гц, 1H), 7,01 (т, J=6,0 Гц, 1H), 6,91 (с, 1H), 4,95 (м, 1H), 4,12-3,83 (м, 9H), 3,13 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,82 (д, J=7,2 Гц, 2H), 1,08 (м, 1H), 0,57 (м, 2H), 0,21 (м, 2H).

LCMS: 422 (M+H⁺) для C₁₉H₂₄FN₅O₃S.

[Пример 68] Получение соединения 68

Соединение 68 (19 мг, 0,045 ммоль, 76%) получали из соединения 58, как в примере 41, используя циклобутанон.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 7,51 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,16-7,09 (м, 2H), 6,95 (с, 1H), 6,64 (ушир.т, 1H), 4,94 (м, 1H), 4,11-3,98 (м, 6H), 3,87 (м, 1H), 3,82 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,42 (м, 1H), 2,91 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,23-2,12 (м, 4H), 1,81-1,73 (м, 2H).

LCMS: 422 (M+H⁺) для C₁₉H₂₄FN₅O₃S.

[Пример 69] Получение соединения 69

Соединение 69 (24 мг, 0,053 ммоль, 47%) получали из соединения 58, как в примере 60, используя этилбромацетат вместо йодметана.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,52 (дд, 1H, J₁=13,2 Гц, J₂=1,8 Гц), 7,15 (дд, 1H, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,11 (т, 1H, 8,4 Гц), 6,91 (с, 1H), 6,83 (т, 1H, J=6,6 Гц), 4,98-4,90 (м, 1H), 4,26-4,21 (м, 2H), 4,13-3,97 (м, 3H), 4,01 (с, 3H), 3,85 (т, 2H, J=4,2 Гц), 3,78 (с, 2H), 3,24 (т, 2H, J=4,8 Гц), 1,03 (т, 3H, J=7,2 Гц).

LCMS: 454 (M+H⁺) для C₁₉H₂₄FN₅O₅S.

[Пример 70] Получение соединения 70

Соединение 69 (17 мг, 0,037 ммоль) растворяли в THF (2 мл) и после добавления 2M раствора LiBH₄ (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После добавления небольшого количества воды раствор отделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 70 (6,5 мг, 0,016 ммоль, 43%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, хлороформ-d₁) δ 7,53 (дд, 1H, J₁=13,2 Гц, J₂=1,8 Гц), 7,17 (дд, 1H, J₁=8,4 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,12 (т, 1H, 9,0 Гц), 6,90 (с, 1H), 6,73 (т, 1H, J=6,0 Гц), 4,98-4,90 (м, 1H), 4,18-4,04 (м, 2H), 4,04-3,98 (м, 1H), 4,01 (с, 3H), 3,96 (т, 2H, J=4,8 Гц), 3,87 (дд, 1H, J₁=9,0 Гц, J₂=7,2 Гц), 3,84 (т, 2H, J=4,8 Гц), 3,07 (т, 2H, J=4,8 Гц), 3,00 (т, 2H, J=4,8 Гц).

LCMS: 412 (M+H⁺) для C₁₇H₂₂FN₅O₄S.

[Пример 71] Получение соединения 71

Соединение 71 (84 мг, 0,19 ммоль, 76%) получали из соединения 58, как в примере 60, используя бромэтилацетат вместо йодметана.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 7,51 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,16-7,07 (м, 2H), 6,91-6,89 (м, 2H), 4,95 (м, 1H), 4,40 (т, J=5,4 Гц, 2H) 4,13-3,86 (м, 7H), 3,83 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,15 (т, J=5,4 Гц, 2H), 3,09 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,10 (с, 3H).

LCMS: 454 (M+H⁺) для C₁₉H₂₄FN₅O₅S.

[Пример 72] Получение соединения 72

Соединение 72 (54 мг, 0,12 ммоль, 61%) получали из соединения 58, как в примере 53.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ=9,56 (т, J=6 Гц, 1H), 7,62 (дд, J₁=14 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,43 (т, J=9 Гц, 1H), 7,34 (дд, J₁=9 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,17 (с, 1H), 4,92 (м, 1H), 4,41 (ушир.т, 2H), 4,17 (т, J₁=9 Гц, 1H), 3,99 (с, 3H), 3,88 (с, 3H), 3,85-3,76 (м, 5H).

LCMS: 442 (M+H⁺) для C₁₇H₂₀FN₅O₄S₂.

[Пример 73] Получение соединения 73

Соединение XIII (223 мг, 0,69 ммоль) и NaF (38 мг, 1,3 эквивалента) растворяли в этаноле (10 мл) и после добавления этилдиацетата (0,1 мл, 1,2 эквивалента) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После отгонки при пониженном давлении смесь растворяли в этилацетате, промывали с помощью рассола, сушили с помощью сульфата натрия, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 73 (220 мг, 0,58 ммоль, 84%) в виде белого твердого вещества.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,52 (с, 1H) 7,91 (ушир.т, 1H), 7,56 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,17 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,7 Гц, 1H), 7,11 (т, J=8,4 Гц, 1H), 6,87 (с, 1H), 4,98 (м, 1H), 4,28-4,24 (м, 1H), 4,12-4,07 (m 2H), 3,97 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,86-3,84 (м, 1H), 3,71 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,58 (с, 3H).

LCMS: 380 (M+H⁺) для C₁₆H₁₈-FN₅O₃S.

[Пример 74] Получение соединения 74

Соединение 73 (220 мг, 0,58 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл) и после добавления 4M раствора HCl в диоксане (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, и концентрировали при пониженном давлении с количественным получением соединения 74 (240 мг) в форме гидрохлоридной соли.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=10,5 (ушир.т, 1H), 7,70 (д, J=14 Гц, 1H), 7,61 (т, J=8,8 Гц, 1H), 7,42 (д, J=8,8 Гц, 1H), 5,00 (м, 1H), 4,20 (м, 1H), 3,94-3,78 (м, 5H), 3,62 (ушир.т, 2H), 2,45 (с, 3H).

LCMS: 352 (M+H⁺) для C₁₅H₁₈-FN₅O₂S.

[Пример 75] Получение соединения 75

Соединение 75 (35 мг, 0,090 ммоль, 42%) получали из соединения 74, как в примере 7.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,74 (ушир.т, 1H), 7,55 (дд, J₁=14 Гц, J₂=1,8 Гц, 1H), 7,18-7,12 (м, 2H), 6,96 (с, 1H), 5,01 (м, 1H), 4,32 (м, 1H), 4,12-4,04 (м, 2H), 3,96 (с, 2H), 3,88-3,83 (м, 3H), 3,15 (т, J=4, Гц, 2H), 2,98-2,94 (м, 2H), 1,24 (т, J=4,2 Гц, 2H), 2,61 (с, 3H).

LCMS: 391 (M+H⁺) для C₁₇H₁₉-FN₆O₂S.

[Пример 76] Получение соединения 76

Соединение 76 (35 мг, 0,086 ммоль, 36%) получали из соединения 74, как в примере 12.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,80 (м, 1H), 7,56 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,19-7,17 (м, 1H), 7,13-7,10 (м, 1H), 5,00-4,96 (м, 1H), 4,48 (д, J=4,2 Гц, 2H), 4,29-4,25 (м, 1H), 4,10-4,07 (м, 2H), 4,05 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,86-3,83 (м, 1H), 3,74 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,27 (т, J=4,8 Гц, 1H), 2,58 (с, 3H).

LCMS: 410 (M+H⁺) для C₁₇H₂₀FN₅O₄S.

[Пример 77] Получение соединения 77

Соединение 77 (350 мг, 0,84 ммоль, 79%) получали путем реакции соединения XIII с Ph₂CHCH₂CH₂OC(S)CHF₂ в течение ночи при комнатной температуре, как описано в публикации Bioorg. Med. Chem. Lett. 2006, 16, 3475-3478.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,55 (с, 1H), 8,48 (ушир.т, 1H), 7,56 (дд, J₁=14 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,20 (дд, J₁=8,8 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,14 (т, J=8,8 Гц, 1H), 6,89 (с, 1H), 6,22 (т, J=56 Гц, 1H), 5,03 (м, 1H), 4,34 (м, 1H), 4,16 (т, J=8,8 Гц, 1H), 4,06 (м, 1H), 3,99 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,82-3,73 (м, 3H).

*LCMS: 416 (M+H⁺) для C₁₆H₁₆F₃N₅O₃S.

[Пример 78] Получение соединения 78

Соединение 77 подвергали взаимодействию, как в примере 74. Затем получали соединение 78 (26 мг, 0,061 ммоль, 35%), как в примере 5.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,65 (ушир.т, 1H), 7,49 (дд, J₁=14 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,14-7,13 (м, 2H), 6,96 (с, 1H), 6,22 (т, J=56 Гц, 1H), 5,03 (м, 1H), 4,34 (м, 1H), 4,15 (т, J=8,8 Гц, 1H), 4,04 (м, 1H), 3,86-3,78 (м, 5H), 3,14 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,31 (т, J=1,8 Гц, 1H).

LCMS: 426 (M+H⁺) для C₁₈H₁₈F₃N₅O₂S.

[Пример 79] Получение соединения 79

Соединение VI, полученное в примере синтеза 6, подвергали взаимодействию, как в примере синтеза 12, используя гидроксиизоксазол вместо boc-аминоизоксазола. Затем получали соединение 79 (53 мг, 0,14 ммоль, 28%), как в примере синтеза 10.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,71 (д, J=2 Гц, 1H), 8,42 (с, 1H), 7,65 (дд, J₁=14 Гц, J₂=2,0 Гц, 1H), 7,41-7,37 (м, 2H), 7,07 (с, 1H), 6,39 (д, J=2 Гц, 1H), 5,10 (м, 1H), 4,81 (м, 1H), 4,49 (м, 1H), 4,21 (т, J=9,2 Гц, 1H), 3,93 (м, 1H), 3,84 (т, J=5,6 Гц, 2H), 3,70 (т, J=4,8 Гц, 2H).

LCMS: 390 (M+H⁺) для C₁₇H₁₆-FN₅O₅.

[Пример 80] Получение соединения 80

Соединение VI подвергали взаимодействию, как в примере синтеза 12, используя boc-аминотиазол вместо boc-аминоизоксазола. Затем получали соединение 80 (26 мг, 0,064 ммоль, 16%), как в примере синтеза 10.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,55 (с, 1H), 7,57 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,21 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,7 Гц, 1H), 7,13-7,08 (м, 2H), 6,84 (с, 1H), 6,55 (д, J=3,6 Гц, 1H), 5,34 (ушир.с, 1H), 4,97 (м, 1H), 4,10 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,99 (т, J=5,4 Гц, 2H), 3,92-3,79 (м, 3H), 3,73 (т, J=5,4 Гц, 2H).

LCMS: 405 (M+H⁺) для C₁₇H₁₇-FN₆O₃S.

[Пример 81] Получение соединения 81

Соединение 81 (35 мг, 0,094 ммоль, 25%) получали из соединения XIX, как в примере синтеза 10.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,49 (с, 1H), 7,77 (д, J=1 Гц, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,41 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,08-7,04 (м, 2H), 6,84 (д, J=1 Гц, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,06 (м, 1H), 4,78 (д, J=4 Гц, 2H), 4,14 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,94-3,64 (м, 7H).

LCMS: 374 (M+H⁺) для C₁₆H₁₆-FN₇O₃.

[Пример 82] Получение соединения 82

Соединение 82 (84 мг, 0,24 ммоль, 73%) получали из соединения 81, как в примере 2.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,37 (с, 1H), 8,19 (с, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,64-7,56 (м, 2H), 7,35 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,08-7,04 (м, 2H), 5,18 (м, 1H), 4,85 (д, J=5,2 Гц, 2H), 4,27 (т, J=9,2 Гц, 1H), 3,93 (м, 1H), 3,78 (ушир.т, 2H), 3,35 (ушир.т, 2H).

LCMS: 346 (M+H⁺) для C₁₅H₁₆-FN₇O₂.

[Пример 83] Получение соединения 83

Соединение 82 (62 мг, 0,16 ммоль) растворяли в метаноле (5 мл) и после добавления 4M раствора HCl в диоксане (0,1 мл), формалина (0,2 мл) и Pd/C (6 мг) подвергали взаимодействию в течение 2 часов при комнатной температуре в атмосфере водорода, подаваемого из баллона. Раствор фильтровали через целит, растворяли в дистиллированной воде (10 мл), нейтрализовали, экстрагировали с помощью дихлорметана, сушили с помощью сульфата натрия, и концентрировали при пониженном давлении с получением соединения 83 (34 мг, 0,086 ммоль, 54%).

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=7,78 (с, 1H), 7,75 (с, 1H), 7,39-7,00 (м, 3H), 6,88 (с, 1H), 5,08 (м, 1H), 4,80 (д, J=4,4 Гц, 2H), 4,15 (т, J=9,2 Гц, 1H), 3,95 (м, 1H), 3,80 (т, J=4,6 Гц, 2H), 2,98 (т, J=4,6 Гц, 2H) 2,79 (с, 3H).

LCMS: 360 (M+H⁺) для C₁₆H₁₈-FN₇O₂.

[Пример 84] Получение соединения 84

Соединение 84 (26 мг, 0,068 ммоль, 74%) получали из соединения 82, как в примере 5.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=7,79 (с, 1H), 7,76 (с, 1H), 7,39-7,03 (м, 3H), 6,94 (с, 1H), 5,08 (м, 1H), 4,80 (д, J=3,6 Гц, 2H), 4,15 (т, J=9,2 Гц, 1H), 3,95 (м, 1H), 3,84-3,82 (м, 4H), 3,12 (ушир.т, 2H), 2,34 (с, 1H).

LCMS: 384 (M+H⁺) для C₁₈H₁₈-FN₇O₂.

[Пример 85] Получение соединения 85

Соединение 85 (81 мг, 0,21 ммоль, 31%) получали из соединения XV, как в примере синтеза 10.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,49 (с, 1H), 8,02 (д, J=2,0 Гц, 1H), 7,54 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,17 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,7 Гц, 1H), 7,08 (т, J=8,4 Гц, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,86 (д, J=2,0 Гц, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,06 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,94 (т, J=5,0 Гц, 2H), 3,87-3,57 (м, 5H).

LCMS: 389 (M+H⁺) для C₁₇H₁₇-FN₆O₄.

[Пример 86] Получение соединения 86

Соединение 86 (35 мг, 0,097 ммоль, 71%) получали из соединения 85, как в примере 2.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,40 (с, 1H), 8,30 (с, 1H), 7,70 (д, J=13 Гц, 1H), 7,60 (т, J=8,4 Гц, 1H), 7,41 (д, J=8,4 Гц, 1H), 6,03 (с, 1H), 5,86 (д, J=2,0 Гц, 1H), 4,92 (м, 1H), 4,20 (т, J=7,8 Гц, 1H), 3,89-3,36 (м, 7H).

LCMS: 361 (M+H⁺) для C₁₆H₁₇-FN₆O₃.

[Пример 87] Получение соединения 87

Соединение 87 (15 мг, 0,036 ммоль, 35%) получали из соединения 86, как в примере 12.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ=8,39 (д, J=1,2 Гц, 1H), 7,62 (дд, J₁=14 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,38-7,33 (м, 1H), 7,07 (с, 1H), 6,56 (т, J=6 Гц, 1H), 6,00 (д, J=1,2 Гц, 1H), 4,91-4,87 (м, 1H), 4,54-4,52 (м, 1H), 4,32 (д, J=6,0 Гц, 2H), 4,18-4,15 (м, 1H), 3,89 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,83-3,80 (м, 1H), 3,70 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,46-3,43 (м, 2H).

LCMS: 419 (M+H⁺) для C₁₈H₁₉-FN₆O₅.

[Пример 88] Получение соединения 88

Соединение 88 (210 мг, 0,46 ммоль, 42%) получали из соединения 86, как в примере 59.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,07 (д, 1H, J=1,8 Гц), 7,58 (дд, 1H, J₁=13,2 Гц, J₂₌3,0 Гц), 7,21 (дд, 1H J₁=8,4 Гц, J₂=2,4 Гц), 7,11 (т, 1H, J=8,4 Гц), 6,82 (с, 1H), 5,88 (д, 1H, J=1,8 Гц), 5,08 (с, 2H), 4,96-5,00 (м, 1H), 4,40 (т, 1H, J=6,6 Гц), 4,09 (т, 1H, J=9,0 Гц), 4,02 (т, 2H, J=4,8 Гц), 3,77-3,78 (м, 1H), 3,74-3,76 (м, 1H), 3,66-3,62 (м, 1H).

LCMS: 461 (M+H⁺) для C₂₀H₂₁-FN₆O₆.

[Пример 89] Получение соединения 89

Соединение 89 (36 мг, 0,096 ммоль, 68%) получали из соединения 86, как в примере 3.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 8,07 (д, J=1,2 Гц, 1H), 7,51 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,15 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,09 (т, 8,4 Гц, 1H), 6,89 (с, 1H), 5,87 (д, J=1,2 Гц 1H), 4,97 (м, 1H), 4,42 (т, J=6 Гц, 1H), 4,08 (т, J=8,4 Гц, 1H), 3,87-3,60 (м, 5H), 2,98 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,79 (с, 3H).

LCMS: 375 (M+H⁺) для C₁₇H₁₉-FN₆O₃.

[Пример 90] Получение соединения 90

Соединение 90 (15 мг, 0,039 ммоль, 45%) получали из соединения 86, как в примере 6.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,07 (д, 1H, J=1,6 Гц), 7,51 (дд, 1H, J₁=13,6 Гц, J₂₌2,4 Гц), 7,15 (дд, 1H, J₁=9,2 Гц, J₂₌2,4 Гц), 7,09 (т, 1H, J=8,8 Гц), 6,91 (с, 1H), 5,87 (дд, 1H, J=1,6 Гц), 4,99-4,93 (м, 1H), 4,40 (т, 1H, J=6,4 Гц), 4,07 (т, 1H, J=9,0 Гц), 3,86-3,81 (м, 3H), 3,78-3,72 (м, 1H), 3,64 (т, 1H, J=3,2 Гц), 3,62-3,58 (м, 1H), 3,01 (т, 2H, J=4,8 Гц), 2,95 (т, 2H, J=7,07 Гц), 1,23 (т, 3H, J=7,0 Гц).

LCMS: 389 (M+H⁺) для C₁₈H₂₁-FN₆O₃.

[Пример 91] Получение соединения 91

Соединение 91 (25 мг, 0,063 ммоль, 64%) получали из соединения 86, как в примере 5.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ 8,07 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,53 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,16 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,11 (т, 8,4 Гц, 1H), 6,95 (с, 1H), 5,87 (д, J=1,8 Гц 1H), 4,96 (м, 1H), 4,35 (т, J=6,6 Гц, 1H), 4,08 (т, J=9 Гц, 1H), 3,87-3,60 (м, 7H), 3,13 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,31 (т, J=2,4 Гц, 1H).

LCMS: 399 (M+H⁺) для C₁₉H₁₉-FN₆O₃.

[Пример 92] Получение соединения 92

Соединение 92 (240 мг, 0,75 ммоль, 32%) получали из соединения XXIII, как в примере синтеза 10.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,55 (с, 1H), 7,61 (дд, J₁=13 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,25 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,7 Гц, 1H), 7,14 (т, J=8,4 Гц, 1H), 6,90 (с, 1H), 4,79 (м, 1H), 4,04-3,99 (м, 5H), 3,79-3,73 (м, 3H), 2,58 (ушир.с, 1H).

LCMS: 323 (M+H⁺) для C₁₄H₁₅-FN₄O₄.

[Пример 93] Получение соединения 93

Соединение 93 (190 мг, 0,65 ммоль, 74%) получали из соединения 92, как в примере 2.

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ=7,73 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,60 (т, J=9 Гц, 1H), 7,45 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 4,75 (м, 1H), 4,11 (т, J=9,0 Гц, 1H), 3,88 (м, 1H), 3,78 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,70-3,55 (м, 2H), 3,36 (т, J=4,8 Гц, 2H).

LCMS: 295 (M+H⁺) для C₁₃H₁₅-FN₄O₃.

[Пример 94] Получение соединения 94

Соединение 93 (150 мг, 0,51 ммоль) растворяли в метаноле (5 мл), формальдегиде (37% водный раствор, 0,21 мл, 2,55 ммоль) и после добавления уксусной кислоты (0,03 мл, 0,51 ммоль) и NaBH₃CN (48 мг, 0,77 ммоль) перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Раствор отгоняли при пониженном давлении, растворяли в дихлорметане (100 мл), последовательно промывали с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и насыщенного водного раствора хлорида натрия (рассола), сушили с помощью безводного сульфата натрия, концентрировали при пониженном давлении, и разделяли с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 94 (71 мг, 0,23 ммоль, 45%).

¹H ЯМР (600 МГц, ДМСО-d₆) δ=7,59 (дд, J₁=13,8 Гц, J₂=2,4 Гц, 1H), 7,33-7,30 (м, 2H), 6,84 (с, 1H), 5,23 (т, J=5,4 Гц, 1H), 4,70 (м, 1H), 4,07 (т, J=9,0 Гц, 1H), 3,82 (м, 1H), 3,71 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,69-3,54 (м, 2H), 2,87 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,61 (с, 3H).

LCMS: 309 (M+H⁺) для C₁₄H₁₇-FN₄O₃.

[Пример 95] Получение соединения 95

Соединение 95 (300 мг, 0,86 ммоль) получали из 4-фтор-нитробензола по схеме 6, как в синтезе соединения 1.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,56 (с, 1H), 7,55 (м, 2H), 7,11 (с, 1H), 7,07 (м, 2H), 6,00 (ушир.т, 1H), 4,79 (м, 1H), 4,07 (т, J=9,6 Гц, 1H), 4,02 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,81 (м, 1H), 3,76 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,72-3,61 (м, 2H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 346 (M+H⁺) для C₁₆H₁₉N₅O₄.

[Пример 96] Получение соединения 96

Соединение 96 (42 мг, 0,13 ммоль, 48%) получали из соединения 95, как в примере 3.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,48 (д, J=9,0 Гц, 2H), 7,22 (с, 1H), 7,02 (д, J=9,0 Гц, 2H), 5,93 (ушир.т, 1H), 4,77 (м, 1H), 4,05 (т, J=9,6 Гц, 1H), 3,81 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,79-3,58 (м, 3H), 3,01 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,80 (с, 3H), 2,03 (с, 3H).

LCMS: 332 (M+H⁺) для C₁₆H₂₁N₅O₃.

[Пример 97] Получение соединения 97

Соединение 97 (540 мг, 1,4 ммоль) получали из 4-фтор-нитробензола по схеме 6, как в синтезе соединения 53.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,56 (с, 1H), 7,55 (д, J=9,0 Гц, 2H), 7,11 (с, 1H), 7,07 (д, J=9,0 Гц, 2H), 6,69 (ушир.т, 1H), 4,94 (м, 1H), 4,13-4,05 (м, 3H), 4,04-3,99 (м, 5H), 3,90 (м, 1H), 3,76 (т, J=4,8 Гц, 2H).

LCMS: 378 (M+H⁺) для C₁₆H₁₉N₅O₄S.

[Пример 98] Получение соединения 98

Соединение 98 (160 мг, 0,44 ммоль, 62%) получали из соединения 97, как в примере 60.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,48 (д, J=9,0 Гц, 2H), 7,21 (с, 1H), 7,02 (д, J=9,0 Гц, 2H), 6,69 (ушир.т, 1H), 4,92 (м, 1H), 4,13-4,08 (м, 2H), 4,01-3,95 (м, 4H), 3,86 (м, 1H), 3,81 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,01 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,80 (с, 3H).

LCMS: 364 (M+H⁺) для C₁₆H₂₁N₅O₃S.

[Пример 99] Получение соединения 99

Соединение 99 (340 мг, 0,96 ммоль) получали из 4-фтор-нитробензола по схеме 6, как в синтезе соединения 81.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,55 (с, 1H), 7,80 (д, J=1 Гц, 1H), 7,75 (д, J=1 Гц, 1H), 7,40 (д, J=9,0 Гц, 2H), 7,09 (с, 1H), 7,03 (д, J=9,0 Гц, 2H), 5,08 (м, 1H), 4,81 (д, J=4 Гц, 2H), 4,17 (т, J=8,4 Гц, 1H), 4,00-3,97 (м, 4H), 3,73 (т, J=4,8 Гц, 2H).

LCMS: 356 (M+H⁺) для C₁₆H₁₇-N₇O₃.

[Пример 100] Получение соединения 100

Соединение 100 (280 мг, 0,76 ммоль) получали из 4-фторнитробензола по схеме 6, как в синтезе соединения 85.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,55 (с, 1H), 8,06 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,54 (д, J=9 Гц, 2H), 7,10 (с, 1H), 7,06 (д, J=9 Гц, 2H), 5,89 (д, J=1,8 Гц, 1H), 4,96 (м, 1H), 4,10 (т, J=9 Гц, 1H), 3,99 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,89 (м, 1H), 3,75-3,72 (м, 3H), 3,62 (м, 1H).

LCMS: 371 (M+H⁺) для C₁₇H₁₈-N₆O₄.

[Пример 101] Получение соединения 101

Соединение 101 (37 мг, 0,10 ммоль, 68%) получали из соединения 100, как в примере 89.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,07 (с, 1H), 7,48 (д, J=9 Гц, 2H), 7,21 (с, 1H), 7,01 (д, J=9 Гц, 2H), 5,87 (с, 1H), 4,95 (м, 1H), 4,40 (ушир.т, J=6 Гц, 1H), 4,09 (т, J=9 Гц, 1H), 3,85 (т, J=8,4 Гц, 1H), 3,80 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,89 (м, 1H), 3,76-3,59 (м, 2H), 3,00 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,80 (с, 3H).

LCMS: 357 (M+H⁺) для C₁₇H₂₀-N₆O₃.

[Пример 102] Получение соединения 102

Соединение 102 (24 мг, 0,069 ммоль, 37%) получали, как в примере 57, из соединения XXVII-c, которое получали из 4-фтор-нитробензола по схеме 6, как в примере синтеза 14.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=7,56 (с, 1H), 7,54 (д, J=9 Гц, 2H), 7,06 (д, J=9 Гц, 2H), 6,67 (ушир.т, 1H), 4,93 (м, 1H), 4,21 (т, J=4,8 Гц, 2H), 4,13-4,07 (м, 3H), 4,01 (с, 3H), 3,88 (т, J=9 Гц, 1H), 3,77 (т, J=4,8 Гц, 2H).

LCMS: 351 (M+H⁺) для C₁₅H₁₈-N₄O₄S.

[Пример 103] Получение соединения 103

Соединение 103 (350 мг, 0,90 ммоль) получали из 3,4,5-три-фторнитробензола по схеме 6, как в синтезе соединения 81.

¹H ЯМР (600 МГц, CDCl₃) δ=8,54 (с, 1H), 7,77 (д, J=1 Гц, 1H), 7,75 (д, J=1 Гц, 1H), 7,15 (с, 1H), 7,13 (с, 1H), 6,69 (с, 1H), 5,11 (м, 1H), 4,81 (д, J=4 Гц, 2H), 4,15 (т, J=8,8 Гц, 1H), 4,02-3,98 (м, 3H), 3,65 (т, J=4,8 Гц, 2H).

LCMS: 392 (M+H⁺) для C₁₆H₁₅-F₂N₇O₃.

[Пример 104] Получение соединения 104

Соединение 104 (23 мг, 0,061 ммоль, 62%) получали из соединения 103, как в примере 83.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=7,79 (с, 1H), 7,74 (с, 1H), 7,11 (с, 1H), 7,09 (с, 1H), 6,65 (с, 1H), 5,11 (м, 1H), 4,81 (д, J=4 Гц, 2H), 4,16 (т, J=9 Гц, 1H), 3,95 (м, 1H), 3,73 (т, J=4,8 Гц, 2H), 2,99 (т, J=4,8 Гц, 2H).

LCMS: 378 (M+H⁺) для C₁₆H₁₇-F₂N₇O₂.

[Пример 105] Получение соединения 105

Соединение 105 (640 мг, 1,6 ммоль) получали из 3,4,5-триф-торнитробензола по схеме 6, как в синтезе соединения 85.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,54 (с, 1H), 8,08 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,29 (с, 1H), 7,27 (с, 1H), 6,71 (с, 1H), 5,89 (д, J=1,6 Гц, 1H), 4,99 (м, 1H), 4,54 (т, J=6,4 Гц, 1H), 4,08 (т, J=9 Гц, 1H), 4,00 (т, J=4,8 Гц, 2H), 3,90-3,73 (м, 2H), 3,69-3,62 (м, 3H).

LCMS: 407 (M+H⁺) для C₁₇H₁₆-F₂N₆O₄.

[Пример 106] Получение соединения 106

Соединение 106 (24 мг, 0,061 ммоль, 74%) получали из соединения 105, как в примере 89.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ=8,06 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,23 (с, 1H), 7,18 (с, 1H), 6,65 (с, 1H), 5,90 (д, J=1,6 Гц, 1H), 4,99 (м, 1H), 4,92 (т, J=6,4 Гц, 1H), 4,06 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,89-3,61 (м, 5H), 3,00 (т, J=4,8 Гц, 2H).

LCMS: 393 (M+H⁺) для C₁₇H₁₈-F₂N₆O₃.

[Пример испытания 1] Измерение антибактериальной активности in vitro

Для испытания антибактериальной активности производных оксазолидинона, синтезированных в примерах 1-106, было проведено исследование активности in vitro следующим образом.

Антибактериальную активность in vitro производных оксазолидинона из примеров 1-106 оценивали с помощью способа микроразбавления питательной среды в сравнении с ростом бактерий в необработанной контрольной группе. Определяли минимальную ингибирующую концентрацию антибиотика, при которой рост бактерий может быть ингибирован вплоть до 90% (MIC₉₀, мкг/мл). Измерение MIC₉₀ проводили c помощью способа микроразбавления питательной среды в соответствии с документом Института клинических и лабораторных стандартов США [Clinical and Laboratory Standards Institute Document. (2000) Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Test for Bacteria that Grow Aerobically-Fifth Edition: M7-A5. CLSI, Villanova, PA].

1) Бактерии, подвергаемые испытанию.

Антибактериальную активность определяли в отношении 14 видов бактерий, включая метициллинчувствительные Staphylococcus aureus (MSSA), метициллинрезистентные Staphylococcus aureus (MRSA), ванкомицинрезистентные Enterococcus (VRE), линезолидрезистентные и ванкомицинрезистентные Enterococcus faecalis (LVRE), Haemophilus influenzae и Moraxella catarrhalis (S. aureus, S. aureus ^MR , S. epidermidis, S. epidermidis ^MR , E. faecalis, E. faecalis ^VanA , E. faecalis ^{VanA LR} , E. faecium ^VanA , E. faecium, E. coli, P. aeruginosa, K. pneumoniae, H. influenzae и M. catarrhalis). Результаты для MIC₉₀в отношении наиболее важных двух бактерий, MRSA и LVRE, приведены в табл.1.

2) Приготовление испытуемого соединения

Испытуемые соединения (соединения 1-106, то есть производные оксазолидинона, синтезированные в примерах 1-106) растворяли в ДМСО при концентрации 10240 мкг/мл и последовательно разбавляли в два раза с помощью ДМСО. Испытуемые соединения в растворе ДМСО затем разбавляли в 20 раз с помощью стерильной дистиллированной воды. Конечная концентрация испытуемого соединения в антибактериальных инкубациях составляла от 0,0625 до 128 мкг/мл. Конечная концентрация ДМСО, который использовали в качестве вспомогательного средства, составляла 2,5% (по объему). Линезолид (химическая формула B) использовали в качестве соединения сравнения. Результаты антибактериальной активности испытуемых соединений приведены в таблице 1.

[Химическая формула B]

Таблица 1 Антибактериальная активность (MIC₉₀, мкг/мл) соединений, представленных химической формулой 1
Соед.	MRSA¹	LVRE²	Соед.	MRSA¹	LVRE²	Соед.	MRSA¹	LVRE²
Линезолид	2	32	36	2	8	72	0,5	2
1	1	8	37	2	8	73	0,0625	2
2	2	16	38	4	8	74	0,25	2
3	2	8	39	2	8	75	0,25	2
4	1	8	40	2	8	76	0,5	2
5	1	8	41	2	4	77	0,5	4
6	2	8	42	8	32	78	0,5	4
7	1	8	43	2	32	79	8	>64
8	4	16	44	8	64	80	2	16
9	0,5	8	45	1	4	81	1	16
10	4	32	46	2	16	82	2	32
11	1	8	47	2	8	83	1	16
12	2	8	48	4	16	84	0,5	16
13	4	16	49	1	8	85	0,5	16
14	2	8	50	2	16	86	0,5	8
15	4	8	51	1	4	87	0,5	8
16	128	>128	52	2	16	88	0,5	8
17	1	8	53	0,5	8	89	0,5	8
18	4	16	54	0,5	4	90	2	8
19	0,5	4	55	2	8	91	0,5	8
20	16	64	56	4	8	92	1	64
21	2	4	57	0,25	2	93	1	32
22	16	128	58	0,25	4	94	1	64
23	32	64	59	0,5	2	95	1	16
24	2	16	60	0,25	2	96	2	16
25	4	32	61	0,5	4	97	0,5	8
26	16	64	62	0,0625	2	98	1	16
27	4	64	63	0,5	4	99	2	32
28	2	16	64	2	8	100	0,5	32
29	0,5	4	65	0,5	4	101	1	32
30	1	4	66	0,5	4	102	0,25	4
31	1	8	67	0,5	4	103	0,25	16
32	8	32	68	0,25	2	104	2	32
33	2	8	69	2	8	105	0,5	16
34	0,5	4	70	1	4	106	0,5	16
35	2	8	71	0,5	4
1. метициллин-резистентные Staphylococcus aureus 2. линезолид-резистентные и ванкомицин-резистентные Enterococcus faecalis

Как видно из таблицы 1, производные оксазолидинона настоящего изобретения продемонстрировали мощную антибактериальную активность в отношении некоторых грамположительных бактерий, резистентных к существующим антибиотикам, таких как метициллинрезистентные Staphylococcus aureus и ванкомицинрезистентные Enterococcus faecalis, при значительно более низких концентрациях по сравнению с соединением сравнения линезолидом. Хотя в таблице 1 это и не показано, но они были также эффективны в отношении различных грамположительных бактерий, и некоторые из них были эффективны в отношении грамотрицательных бактерий, таких как Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis. В частности, так как они демонстрируют высокую антибактериальную активность в отношении линезолидрезистентного Enterococcus faecalis, они могут эффективно применяться против линезолидрезистентных бактерий, которые постоянно распространяются в настоящее время.

Соответственно, очевидно, что производные оксазолидинона настоящего изобретения могут применяться в качестве антибиотиков, обладающих широким спектром антибактериального действия в отношении грамположительных бактерий.

[Пример испытания 2] Определение растворимости в воде

Определяли растворимость в воде метансульфонатов (MSA) репрезентативных соединений среди производных оксазолидинона химической формулы 1. Линезолид химической формулы B использовали в качестве соединения сравнения. Результаты приведены в табл.2.

Определение растворимости осуществляли с помощью метода ¹H ЯМР в соответствии со следующей методикой. Сначала, метансульфонат (100 мг) соединения добавляли к D₂O (0,5 мл). После приготовления насыщенного раствора путем энергичного встряхивания в течение 30 минут, раствор фильтровали и отбирали из него аликвоту 0,3 мл. Добавляли к ней раствор соединения сравнения (0,3 мл) (В этом примере испытания использовали ДМСО, разбавленный с помощью D₂O) с точно известной концентрацией. Из ¹H ЯМР спектра раствора, рассчитывали интегральное отношение пика образца к пику сравнения (ДМСО). Так как концентрация раствора сравнения является известной, из интегрального отношения может быть вычислено количество молей образца. Затем, вычисляли растворимость образца.

Таблица 2 Растворимость метансульфоната в воде
Соединение	Линезолид	83	89	94
Растворимость (мг/мл) (растворимость в %)	3 (0,3%)	117 (12%)	129 (13%)	136 (14%)

Как видно из таблицы, растворимость соединений, представленных химической формулой 1, в воде составляет более чем 10%, так как они могут быть приготовлены в форме солей. В отличие от этого, растворимость линезолида в воде составляет только 0,3%. Другими словами, растворимость соединений настоящего изобретения в воде до 50 раз выше, чем растворимость линезолида. Это преимущество позволяет приготавливать на основе соединений настоящего изобретения антибиотики, которые могут быть введены перорально или внутривенно в виде болюса, что не осуществимо для линезолида. Кроме того, так как они эффективны в отношении линезолид-резистентных бактерий, а также в отношении MRSA и VRE, на их основе могут быть приготовлены исключительные по своим свойствам антибиотики, способные заменить линезолид.

[Пример испытания 3] Цитотоксичность и ингибирование MAO (моноаминоксидазы)

1) Определение цитотоксичности путем анализа с помощью MTT (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия бромида)

Анализ с помощью MTT является количественным колориметрическим определением жизнеспособных клеток млекопитающего и пролиферации клеток. Он основан на восстановлении тетразолиевой соли MTT с помощью митохондриальной сукцинат-дегидрогеназы жизнеспособных клеток с образованием голубого продукта формазана. Анализ позволяет оценивать клеточное дыхание и количество продукта формазана для живых клеток, присутствующих в культуре. Для этого испытания клетки яичника китайского хомячка (CHO-K1) получали из Американской коллекции типовых культур (ATCC (USA)). Пересеянные клетки CHO выделяли из колбы с культурой путем обработки с помощью раствора трипсин-EDTA, и высевали на 96-луночном микропланшете по 5000 клеток на каждую лунку. После культивирования в течение 24 часов в инкубаторе при 37°С и 5% CO₂, клетки обрабатывали с помощью производных оксазолидинона согласно настоящему изобретению, синтезированных в приведенных выше примерах, при 7 различных концентрациях. После дополнительного культивирования в течение еще 48 часов в инкубаторе при 37°С и 5% CO₂, добавляли в каждую лунку 15 мкл раствора MTT с концентрацией 5 мкг/мл. Клетки дополнительно инкубировали в инкубаторе при 37°С и 5% CO₂ в течение еще около 2 часов. Затем культуральную среду удаляли и добавляли в каждую лунку 100 мкл раствора ДМСО. После встряхивания микропланшета в течение 30 минут, измеряли поглощение при 550 нм с помощью планшет-ридера Spectramax plus 190 (фирмы Molecular Devices, USA). Снижение поглощения групп, обработанных соединением, по сравнению с необработанной контрольной группой является признаком снижения жизнеспособности клеток, что позволяет оценить цитотоксичность соединений. После вычисления процентов поглощения при различных концентрациях по сравнению с контрольной группой с помощью программы обработки статистических данных GraFit (version 5.0.12), поставляемой фирмой Erithacus Software, была рассчитана величина CC₅₀, то есть концентрация соединений согласно настоящему изобретению, при которой пролиферация клеток снижается на 50%.

2) Ингибирование MAO

Известно, что линезолид действует как неселективный обратимо действующий ингибитор моноаминоксидаз, и может, по-видимому, взаимодействовать с адренергическими или серотонинергическими лекарственными средствами. Синтезированные в примерах производные оксазолидинона согласно настоящему изобретению подвергали испытанию на ингибирование моноаминоксидазы A (MAO A) и моноаминоксидазы B (MAO B). Набор для проведения анализа MAO-GLO был поставлен фирмой Promega (USA), и ферменты MAO A и MAO B были приобретены у фирмы Sigma-Aldrich (USA). Из альдегидного продукта, полученного в результате действия фермента MAO на аминогруппу субстрата, получают метиловый эфир люциферина. Затем добавляют реагент для обнаружения люциферина для инактивации ферментов MAO. Эстераза и люцифераза, входящие в реагент, окисляют люциферин, вследствие чего излучается свет. Световое излучение регистрируют для измерения активности MAO. Световое излучение регистрировали с помощью прибора LEADseeker (фирмы Amershan Bioscience, Sweden). Активность MAO измеряли в присутствии соединений согласно настоящему изобретению при 3,9-500 мкM и сравнивали с необработанной контрольной группой. Линезолид использовали в качестве соединения сравнения. Для измерения активности соединений, представленных химической формулой 1, при ингибировании MAO, может быть определена величина IC₅₀, то есть концентрация соединений, при которой ферментная активность ингибируется на 50% (Эта величина связана с константой ингибирования K_i). Концентрация ингибитора, при которой скорость гидролиза субстрата снижается на 50% (то есть величина IC₅₀) может быть определена из графика в логарифмических координатах относительной скорости гидролиза (в сравнении с неингибированной контрольной группой) от концентрации соединений химической формулы 1.

Эффект ингибирования MAO соединениями химической формулы 1 измеряли путем определения константы ингибирования K_i.

Уравнение 1

K_i=IC₅₀/{1+([S]/K_m)}

В уравнении 1, K_m является константой Михаэлиса-Ментена, то есть концентрацией субстрата, при которой скорость ферментативной реакции составляет половину от максимальной, и IC₅₀ является концентрацией ингибитора, при которой скорость гидролиза субстрата снижается на 50%. Величину IC₅₀ определяли путем построения графика в логарифмических координатах относительной скорости гидролиза (в сравнении с неингибированной контрольной группой) от концентрации соединений химической формулы 1. Использовали программу обработки статистических данных GraFit (version 5.0.12), поставляемую фирмой Erithacus Software.

Результаты испытаний на цитотоксичность и ингибирование MAO для репрезентативных соединений из производных оксазолидинона химической формулы 1, приведены в табл.3.

Так как соединение сравнения линезолид проявляет значительную ингибирующую активность в отношении ферментов MAO и имеется вероятность того, что он вызывает токсические или другие побочные эффекты, много усилий было приложено для поиска соединения, у которого отсутствует эффект ингибирования MAO. В целом, соединения на основе оксазолидинона демонстрируют такой сильный эффект ингибирования MAO, что они могут быть использованы в качестве ингибиторов MAO. Однако хотя ингибитор MAO и может обеспечивать терапевтический эффект для тех, кому это необходимо, но когда его используют в качестве антибиотика, он может приводить к токсическим или другим побочным эффектам. Соответственно, определение эффекта ингибирования MAO для антибиотиков на основе оксазолидинона является безусловно обязательным, и антибиотик, характеризующийся меньшим эффектом ингибирования MAO, является предпочтительным.

Линезолид и TR-700 химической формулы D, разработанный фирмой Trius Therapeutics, использовали в качестве соединений сравнения. Так как TR-701 является пролекарством TR-700, то использовали TR-700.

Таблица 3 Испытания на цитотоксичность и ингибирование MAO
	CC₅₀(мкM)	MAOA (мкM)	MAOB (мкM)
Линезолид	>130	7,9	4,3
TR-700	28	<2,0	6,1
53	>130	24	58
83	>130	19	207
89	>130	5,2	>250
94	>130	4	176
102	>130	89	84

Как видно из табл.3, TR-700 проявляет существенную величину цитотоксического эффекта, а также и мощный ингибирующий эффект в отношении MAO A и MAO B. В отличие от этого, большинство соединений настоящего изобретения являются безопасными с точки зрения цитотоксичности и проявляют в 10 раз меньший ингибирующий эффект, чем TR-700.

Так как соединения настоящего изобретения проявляют высокую растворимость и высокую антибактериальную активность при меньшей токсичности, они являются исключительно многообещающими кандидатами для применения в качестве антибиотиков следующего поколения.

Настоящая заявка содержит объект изобретения, относящийся к заявке на патент Кореи No. 10-2008-0093712, зарегистрированной Ведомством по интеллектуальной собственности Кореи 24 сентября 2008 года, содержание которой приводится здесь путем ссылки на нее.

Несмотря на то, что настоящее изобретение описано с помощью конкретных вариантов осуществления, для специалистов в этой области является очевидным, что могут быть сделаны различные изменения и модификации без отклонения от сущности и объема изобретения, определяемого в следующих далее пунктах формулы изобретения.

Промышленная применимость

Как было описано выше, новые производные оксазолидинона настоящего изобретения проявляют спектр антибактериального действия в отношении резистентных бактерий, включая метицилин-резистентные Staphylococcus (MRSA), низкую токсичность, и высокую антибактериальную активность в отношении бактерий, резистентных к существующим антибиотикам, таких как Staphylococcus aureus и Enterococcus faecalis, в частности высокую антибактериальную активность в отношении линезолидрезистентного Enterococcus faecalis. Поэтому они могут эффективно применяться в качестве антибиотиков 2-го поколения на основе оксазолидинона. Кроме того, из производных оксазолидинона с группой циклического амидоксима или группой циклического амидразона согласно настоящему изобретению может быть легко приготовлена лекарственная форма для перорального введения или инъекции, так как они имеют более высокую растворимость в воде, чем другие существующие соединения оксазолидинона.

Claims

1. Новое производное оксазолидинона, представленное химической формулой 1, его гидрат, сольват, изомер или фармацевтически приемлемая соль:

где R₁ представляет водород или (C₁-С₆) алкил;
Y представляет -О- или -N(R₂)-;
R₂ представляет водород, циано, (C₁-С₆) алкил, (С₃-С₆)-циклоалкил, - (CH₂)_mOC (=O)R₁₁, -(СН₂)_mС (=O)R₁₂, -(СН₂)_mС (=S)₁₂ или -SO₂R₁₃, где алкил в R₂ может быть дополнительно замещен с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из группы, состоящей из (С₂-С₆) алкенила, (С₂-С₆) алкинила, галогена, галоген (С₁-С₆) алкила, (С₁-С₆) алкил (С₂-С₆) алкинила, гидроксила, (С₃-С₆)циклоалкила и циано; R₁₁-R₁₃ независимо представляют водород, (С₁-С₆)алкил, (С₁-С₆)алкокси, амино, (С₃-С₆) циклоалкил или (C₁-C₆) алкилкарбонил, где алкил, алкокси, или амино в R₁₁-R₁₃ могут быть дополнительно замещены с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из галогена, амино, гидроксила, циано, (С₁-С₆)алкила, (С₁-С₆)алкилкарбонилокси и гидрокси(С₁-С₆)алкила;\
m представляет целое число от 0 до 2;
Х₁ и Х₂ независимо представляют водород или фтор;
Р представляет -О-, -NH- или пятичленный ароматический гетероцикл со следующей структурой:

Q представляет водород, -C(=O)R₃, -C(=S)R₄, -C(=O)NR₅R₆, C(=S)NR₅R₆ или пятичленный ароматический гетероцикл со структурой, выбранной из следующих структур:

R₃ и R₄ независимо представляют водород, (С₁-С₆)алкил или (C₁-C₆) алкокси;
R₅ и R₆ независимо представляют водород или (С₁-С₆) алкил;
R₇ представляет водород; и
алкил в R₃ и R₄ может быть дополнительно замещен с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из группы, состоящей из циано и галогена.

2. Новое производное оксазолидинона по п.1, которое представлено химической формулой 2 или 3, его гидрат, сольват, изомер или фармацевтически приемлемая соль:

где R₂, Х₁ Х₂, Р и Q такие, как определено в п.1.

3. Новое производное оксазолидинона по п.2, которое представлено химической формулой 4, 5, или 6, его гидрат, сольват, изомер или фармацевтически приемлемая соль:

где R₂ представляет водород, циано, (С₁-С₆)алкил, (С₃-С₆)-циклоалкил, -(CH₂)_mOC (=O)R₁₁, - (СН₂)mС (=O)R₁₂, -(CH₂)_mC(=S)R₁₂ или -SO₂R₁₃, где алкил в R₂ может быть дополнительно замещен с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из группы, состоящей из (С₂-С₆)алкенила, (С₂-С₆)алкинила, галогена, галоген(С₁-С₆)алкила, (С₁-С₆)алкил (С₂-С₆)алкинила, гидроксила, (С₃-С₆)циклоалкила и циано; R₁₁-R₁₃ независимо представляют водород, (С₁-С₆)алкил, (С₁-С₆)алкокси, амино, (С₃-С₆) циклоалкил, или (С₁-С₆)-алкилкарбонил, и алкил, алкокси или амино в R₁₁-R₁₃ могут быть дополнительно замещены с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из галогена, амино, гидроксила, циано, (С₁-С₆)алкила, (С₁-С₆)алкилкарбонилокси и гидрокси (С₁-С₆)алкила;
m представляет целое число от 0 до 2;
Р представляет -О-, -NH- или пятичленный ароматический гетероцикл со следующей структурой:

Q представляет водород, -C(=O)R₃, -C(=S)P₄, -C(=O)NR₅R₆, -C(=S)NR₅K₆ или пятичленный ароматический гетероцикл со структурой, выбранной из следующих структур:

R₃ и R₄ независимо представляют водород, (С₁-С₆)алкил или (С₁-С₆)алкокси;
R₅ и R₆ независимо представляют водород или (С₁-С₆)алкил; и алкил в R₃ и R4 может быть дополнительно замещен с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из группы, состоящей из циано и галогена.

4. Новое производное оксазолидинона по п.2, которое представлено химической формулой 7, 8 или 9, его гидрат, сольват, изомер или фармацевтически приемлемая соль:

где Р представляет -O-, -NH- или пятичленный ароматический гетероцикл со следующей структурой:

R₃ и R₄ независимо представляют водород, (С₁-С₆)алкил или (С₁-С₆)алкокси;
R₅ и R₆ независимо представляют водород или (С₁-С₆) алкил; и алкил в R₃ и R₄ может быть дополнительно замещен с помощью одного или более заместителя (заместителей), выбранного из группы, состоящей из циано и галогена.

5. Новое производное оксазолидинона по п.3, которое выбирают из следующих соединений, его гидрат, сольват, изомер или фармацевтически приемлемая соль:

6. Новое производное оксазолидинона по п.4, которое выбирают из следующих соединений, его гидрат, сольват, изомер или фармацевтически приемлемая соль:

7. Фармацевтическая антибиотическая композиция, включающая в качестве активного ингредиента новое производное оксазолидинона по любому из пп.1-6, его гидрат, сольват, изомер или фармацевтически приемлемую соль.