RU2337698C1 - Противодиабетическое средство с гиполипидемической активностью для лечения и профилактики сахарного диабета ii типа - Google Patents
Противодиабетическое средство с гиполипидемической активностью для лечения и профилактики сахарного диабета ii типа Download PDFInfo
- Publication number
- RU2337698C1 RU2337698C1 RU2007104249/15A RU2007104249A RU2337698C1 RU 2337698 C1 RU2337698 C1 RU 2337698C1 RU 2007104249/15 A RU2007104249/15 A RU 2007104249/15A RU 2007104249 A RU2007104249 A RU 2007104249A RU 2337698 C1 RU2337698 C1 RU 2337698C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- animals
- diabetes
- treatment
- serpisten
- type
- Prior art date
Links
- 230000000055 hyoplipidemic effect Effects 0.000 title claims abstract description 5
- 239000003472 antidiabetic agent Substances 0.000 title claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims description 4
- 229940125708 antidiabetic agent Drugs 0.000 title claims 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 title abstract description 38
- 150000002061 ecdysteroids Chemical group 0.000 claims abstract description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 9
- NKDFYOWSKOHCCO-YPVLXUMRSA-N 20-hydroxyecdysone Chemical compound C1[C@@H](O)[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@@](C)(O)[C@H](O)CCC(C)(O)C)CC[C@]33O)C)C3=CC(=O)[C@@H]21 NKDFYOWSKOHCCO-YPVLXUMRSA-N 0.000 claims abstract description 6
- HXWZQRICWSADMH-SEHXZECUSA-N 20-hydroxyecdysone Natural products CC(C)(C)CC[C@@H](O)[C@@](C)(O)[C@H]1CC[C@@]2(O)C3=CC(=O)[C@@H]4C[C@@H](O)[C@@H](O)C[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C HXWZQRICWSADMH-SEHXZECUSA-N 0.000 claims abstract description 6
- NKDFYOWSKOHCCO-UHFFFAOYSA-N beta-ecdysone Natural products C1C(O)C(O)CC2(C)C(CCC3(C(C(C)(O)C(O)CCC(C)(O)C)CCC33O)C)C3=CC(=O)C21 NKDFYOWSKOHCCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 241000208838 Asteraceae Species 0.000 claims abstract description 5
- 241001282601 Serratula coronata Species 0.000 claims abstract description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 11
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 5
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000012937 correction Methods 0.000 abstract description 2
- 241000047412 Serratella Species 0.000 abstract 1
- 208000026099 carbohydrate metabolic disease Diseases 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 47
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 31
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 22
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 15
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 14
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 14
- 229960003105 metformin Drugs 0.000 description 12
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 10
- 208000007241 Experimental Diabetes Mellitus Diseases 0.000 description 9
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 8
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 8
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 8
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 7
- AXDJCCTWPBKUKL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-aminophenyl)-(4-imino-3-methylcyclohexa-2,5-dien-1-ylidene)methyl]aniline;hydron;chloride Chemical compound Cl.C1=CC(=N)C(C)=CC1=C(C=1C=CC(N)=CC=1)C1=CC=C(N)C=C1 AXDJCCTWPBKUKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000017011 Glycated Hemoglobin A Human genes 0.000 description 6
- 108010014663 Glycated Hemoglobin A Proteins 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 6
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 6
- 229940123208 Biguanide Drugs 0.000 description 5
- 230000003178 anti-diabetic effect Effects 0.000 description 5
- 150000004283 biguanides Chemical class 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 5
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 5
- UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol Chemical compound OC.CCOC(C)=O UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 5
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 5
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 4
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 4
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 4
- HIMXGTXNXJYFGB-UHFFFAOYSA-N alloxan Chemical compound O=C1NC(=O)C(=O)C(=O)N1 HIMXGTXNXJYFGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 4
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 4
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 4
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 3
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 206010036067 polydipsia Diseases 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 241000133174 Serratula Species 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 2
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004130 lipolysis Effects 0.000 description 2
- 108010022197 lipoprotein cholesterol Proteins 0.000 description 2
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 2
- YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N sulfonylurea Chemical class OC(=N)N=S(=O)=O YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- LLJFMFZYVVLQKT-UHFFFAOYSA-N 1-cyclohexyl-3-[4-[2-(7-methoxy-4,4-dimethyl-1,3-dioxo-2-isoquinolinyl)ethyl]phenyl]sulfonylurea Chemical compound C=1C(OC)=CC=C(C(C2=O)(C)C)C=1C(=O)N2CCC(C=C1)=CC=C1S(=O)(=O)NC(=O)NC1CCCCC1 LLJFMFZYVVLQKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003255 Carthamus tinctorius Nutrition 0.000 description 1
- 244000020518 Carthamus tinctorius Species 0.000 description 1
- 206010010071 Coma Diseases 0.000 description 1
- 208000002249 Diabetes Complications Diseases 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002253 anti-ischaemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000023852 carbohydrate metabolic process Effects 0.000 description 1
- 235000021256 carbohydrate metabolism Nutrition 0.000 description 1
- 230000034303 cell budding Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 108010071981 cyanhemoglobin Proteins 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- LJQKCYFTNDAAPC-UHFFFAOYSA-N ethanol;ethyl acetate Chemical compound CCO.CCOC(C)=O LJQKCYFTNDAAPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 229960003468 gliquidone Drugs 0.000 description 1
- 230000009229 glucose formation Effects 0.000 description 1
- ZNNLBTZKUZBEKO-UHFFFAOYSA-N glyburide Chemical compound COC1=CC=C(Cl)C=C1C(=O)NCCC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(=O)NC2CCCCC2)C=C1 ZNNLBTZKUZBEKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 238000002657 hormone replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002366 lipolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229940127017 oral antidiabetic Drugs 0.000 description 1
- 239000003538 oral antidiabetic agent Substances 0.000 description 1
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- -1 predian Chemical compound 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармации, а именно к лекарственным препаратам противодиабетического действия, и может быть использовано в качестве нового средства для коррекции нарушений углеводного обмена с целью профилактики и лечения сахарного диабета II типа. Средство представляет собой экдистероидсодержашую субстанцию, выделенную из надземной части растений серпухи венценосной Serratula coronata L. (Asteraceae), представляющую собой смесь 20-гидоксиэкдизона в количестве не менее 75% и 25S-инокостерона в количестве не менее 10%. Предлагаемое средство для лечения инсулиннезависимого диабета (диабета II типа) обладает не только сахароснижающим действием, но и гиполипидемической активностью. 3 табл., 12 ил.
Description
Изобретение относится к фармакологии, а именно к лекарственным препаратам и пищевым добавкам противодиабетического действия, и может быть использовано в качестве нового средства для коррекции нарушений углеводного обмена с целью профилактики и лечения сахарного диабета II типа.
Сахарный диабет является следствием относительного или абсолютного дефицита инсулина. В соответствии с классификацией ВОЗ различают две формы заболевания: инсулинзависимый (сахарный диабет I типа) и инсулиннезависимый (сахарный диабет II типа). Сахарный диабет I типа характеризуется абсолютной недостаточностью образования инсулина b-клетками островков Лангерганса поджелудочной железы и требует заместительной гормонотерапии препаратами инсулина. Больные сахарным диабетом II типа нуждаются в назначении пероральных противодиабетических препаратов, к которым относятся производные сульфонилмочевины и бигуаниды. Сахароснижающий эффект производных сульфонилмочевины обусловлен повышением под их действием секреции инсулина b-клетками островков поджелудочной железы, усилением действия инсулина, циркулирующего в кровотоке, усилением утилизации глюкозы скелетными мышцами и печенью, торможением образования глюкозы из жира в печени и липолиза жировой ткани. Лечение производными сульфонилмочевины показано при сахарном диабете II типа средней тяжести у взрослых. Эти препараты противопоказаны при инсулинзависимом диабете, заболеваниях крови, сопровождающихся снижением в крови количества лейкоцитов и тромбоцитов, и в ряде других случаев. Наименее выраженным побочным действием из всех препаратов этой группы обладают манинил, предиан, глюренорм. Второй группой пероральных противодиабетических средств являются бигуаниды. Эти препараты эффективны при наличии в организме эндогенного или экзогенного происхождения, поскольку не влияют на его синтез и высвобождение из b-клеток островков поджелудочной железы. Бигуаниды потенцируют действие инсулина путем усиления утилизации глюкозы скелетными мышцами, торможения образования глюкозы из жиров, уменьшения всасывания глюкозы в тонком кишечнике, усиления липолиза и снижения интенсивности синтеза жира. Противопоказаниями к использованию бигуанидов служат сахарный диабет I типа, истощение, поражение печени, почек, коматозные состояния, заболевания, сопровождающиеся гипоксией (Маковецкий А.Г., Велихов В.К. Сахарный диабет. М., 1987. 102 С.).
Задачей изобретения является расширение арсенала средств гиполипидемического и противоишемического действия, получение препарата низкой себестоимости из доступного растительного сырья, обладающего повышенной эффективностью.
Техническим результатом настоящего изобретения является создание средства из возобновляемого дешевого растительного сырья для лечения инсулиннезависимого диабета (диабета II типа), обладающего не только сахароснижающим действием, но и обладающим гиполипидемической активностью, поскольку развитие диабета, как правило, сопровождается выраженным сдвигом в состоянии липидного обмена.
Технический результат достигается тем, что в качестве средства, обладающего противодиабетической и гиполипидемической активностью, при терапии и профилактике сахарного диабета II типа применяют экдистероидсодержащую субстанцию, выделенную из надземной части растений серпухи венценосной Serratula coronata L. (Asteraceae), представляющей собой смесь 20-гидоксиэкдизона в количестве не менее 75% и 25S-инокостерона в количестве не менее 10%.
Известна смесь экдистероидов, выделенных по способу, описанному в патенте РФ №2153346, содержащая 20-гидроксиэкдизона не менее 75% и 25S-инокостерона не менее 10% со структурными формулами, указанными ниже, являющихся действующими веществами, проявляющими физиологическую активность.
Предлагаемое средство, названное нами «Серпистен», представляет собой белый кристаллический порошок, не имещий запаха, малорастворимый в воде, хорошо растворимый в метаноле и 70%-ном этаноле.
Смесь фитоэкдистероидов получают известным способом (по патенту 2153346) следующим образом.
Заготовку сырья, предпочтительно листьев, осуществляют в фазу вегетации, массовой бутонизации или начала цветения. Экспериментально установлено, что в эти фазы развития содержание действующих экдистероидов максимально. Исследование распределения экдистероидов в растениях серпухи венценосной проводили у средневозрастных генеративных особей. По содержанию экдистероидов серпуха венценосная намного превосходит рапонтик сафлоровидный. Использование надземной части растения в отличие от корневищ рапонтика значительно облегчает заготовку и переработку экдистероидсодержащего растительного сырья.
Измельченное растительное сырье (надземная часть растения рода Serratula семейства Asteraceae) неоднократно экстрагируют водой при температуре не выше 100°С не более 1 ч при постоянном перемешивании и соотношении сырье экстрагент - 1:10 соответственно. Густой водный экстракт упаривают при пониженном давлении, обрабатывают смесью этилацетат-метанол, взятой при соотношении 4:1, или хлороформ-метанол при соотношении 6:1. Процедуру повторяют до полного извлечения экдистероидов из густого экстракта. Органические извлечения упаривают досуха, затем экдистероиды очищают путем хроматографии на оксиде алюминия в системе хлороформ-метанол или этилацетат-метанол возрастающей полярности и перекристаллизацией в системе этилацетат-метанол или этилацетат-этанол при соотношении 9:1.
Пример осуществления способа
6 кг измельченных листьев растения рода Serratula семейства Asteraceae заливают 60 л воды и экстрагируют в течение 1 часа при температуре 50°С при постоянном перемешивании, затем экстракт сливают, а растительное сырье подвергают повторной экстракции. Объединенный экстракт упаривают в вакуумном роторно-пленочном испарителе при пониженном давлении до 2 л. 2 л густого экстракта обрабатывают трижды 8 л смеси этилацетат-метанол при соотношении 4:1 при постоянном перемешивании и фильтруют. Фильтрат упаривают досуха, остатки объединяют и переносят на колонку с оксидом алюминия и элюируют смесью хлороформ-метанол возрастающей полярности. Элюат собирают в колбы по 1 л и определяют в них содержание экдистероидов методом тонкослойной хроматографии (ТСХ). Целевые фракции, содержащие экдистероиды, упаривают досуха и перекристаллизовывают в смеси этилацетат-метанол (9:1).
Таким образом, способ позволяет получать субстанцию Серпистен, представляющую собой смесь фитоэкдистероидов, содержащую не менее 75% 20-гидроксиэкдизона и не менее 10% инокостерона (белый кристаллический порошок, не имеет запаха, малорастворим в воде (1,9 г/л), хорошо растворим в 70%-ном этаноле (61 г/л) и метаноле (75 (г/л)). Выход 42 г или 0,7% к массе сырья, что составляет 70% к теоретически рассчитанному выходу.
Известен способ выделения 20-гидроксиэкдизона и 25S-инокостерона (патент РФ 2155599, позволяющий получить индивидуальные соединения из смеси фитоэкдистероидов и смешивать их в эффективном количестве.
Изобретение подтверждается фотографиями.
Фиг.1. Нормальное строение островка Лангерганса поджелудочной железы интактной крысы. 20-й день. Окраска гематоксилин-эозин. Ув. 40×7.
Фиг.2. Нормальное строение островка Лангерганса поджелудочной железы интактной крысы. 20-й день. Окраска гематоксилин-эозин. Ув. 40×7.
Фиг.3. Нормальное строение островка Лангерганса поджелудочной железы интактной крысы. 20-й день. Окраска альдегидфуксин. Ув. 20×7.
Фиг.4. Нормальное строение островка Лангерганса поджелудочной железы интактной крысы. 20-й день. Окраска альдегидфуксин. Ув. 20×7.
Фиг.5. Аллоксановый диабет у крысы. 20-е сутки. Нарушение строения островков Лангерганса. Окраска гематоксилин-эозин. Ув. 40×7.
Фиг.6. Аллоксановый диабет у крысы. 20-е сутки. Нарушение строения островков Лангерганса. Лизис клеток и уменьшение количества ядер. Окраска гематоксилин-эозин. Ув. 40×7.
Фиг.7. Аллоксановый диабет у крысы. 10-е сутки. Разрушение островка Лангерганса. Лизис клеток и уменьшение количества ядер. Окраска гематоксилин-эозин. Ув. 40×7.
Фиг.8. Аллоксановый диабет у крысы. 20-е сутки. Разрушение островка Лангерганса. Лизис клеток, замещение стромальными элементами. Окраска альдегид фуксин. Ув. 20×7.
Фиг.9. Восстановление островка Лангерганса поджелудочной железы подопытной крысы через 20 дней лечения метформином. Увеличение количества ядер и клеток. Окраска гематоксилин-эозин. Ув. 40×7.
Фиг.10. Восстановление островка Лангерганса поджелудочной железы подопытной крысы через 20 дней лечения метформином. Увеличение количества ядер и клеток. Окраска альдегидфуксин. Ув. 20×7.
Фиг.11. Восстановление островка Лангерганса поджелудочной железы подопытной крысы через 20 дней лечения Серпистеном. Увеличение количества ядер и клеток. Окраска гематоксилин-эозин. Ув. 40×7.
Фиг.12. Восстановление островка Лангерганса поджелудочной железы подопытной крысы через 20 дней лечения Серпистеном. Заметное увеличение размеров самого островка, количества ядер и синтезирующих инсулинклеток. Окраска альдегидфуксин. Ув. 20×7.
Проверка противодиабетической и гиполипидемической активности субстанции Серпистен осуществлялась в ЗАО «Адаптоген» (г.Санкт-Петербург). Эксперименты выполнялись на нелинейных белых крысах при внутрижелудочном пути введения на модели аллоксанового диабета. Животных содержали в стандартных условиях вивария при естественном освещении. Воду и пищу (стандартизованный брикетированный корм) животным предоставляли без ограничений. Работа выполнялась в соответствии с «Методическими рекомендациями по экспериментальному изучению новых пероральных гипогликемических фармацевтических средств» [1986].
Аллоксановый диабет вызывали однократным подкожным введением водного раствора аллоксангидрата (фирма ICN Biomedicals, США) в дозе 150 мг/кг голодавшим в течение суток крысам массой 180-200 г. Исследовались следующие группы животных: интактные; нелеченые крысы с диабетом; животные с диабетом, получавшие ежедневно в течение 23 дней препарат метморфин (200 мг/кг), взятый нами за прототип, производства фирмы «Польфа-Кутно А/О», Польша., рег. №008422 от 22.08.1997 г; животные с диабетом, получавшие ежедневно в течение 23 дней препарат Серпистен (5 мг/кг). Препараты вводились внутрижелудочно 1 раз в день в крахмальном геле.
Введение препаратов начинали на третий день после введения аллоксана, когда уровень глюкозы крови повысился по сравнению с контролем приблизительно в 3 раза [Гацура В.В., Саратиков А.С., 1977; Николайчук Л.В., 1988]. Каждая группа содержала по 20 животных обоего пола. В ходе эксперимента фиксировали общее состояние животных, потребление воды, массу тела.
В сыворотке крови определяли уровень глюкозы, общих липидов, триглицеридов, холестерина по общепринятым методам [Медицинские..., 2002].
В эритроцитах определяли концентрацию гемоглобина и гликозилированного гемоглобина. Содержание гемоглобина оценивали гемоглобинцианидным методом, предложенным Кушаковским М.С. [1968] с помощью стандартного набора реагентов (НПФ «Абрис+»). Гликозилированный гемоглобин определяли спектрофотометрически [Медицинские..., 2002].
Кроме этого, проводили исследование гистологического строения поджелудочной железы экспериментальных животных при окрашивании срезов гематоксилин-эозином и альдегидфуксином.
Применение нового средства приводит к увеличению выживаемости животных в условиях аллоксанового диабета и уменьшает такое проявление данной патологии, как полидипсия. При экспериментальном сахарном диабете II типа Серпистен снижает уровень гипергликемии и концентрацию гликозилированнного гемоглобина в крови экспериментальных животных, оказывая тем самым профилактическое действие в отношении развития основных осложнений сахарного диабета. На фоне лечения Серпистеном уровень общих липидов, холестерина и β-липопротеинов нормализовались практически до уровня интактных животных, что свидетельствует о гиполипидемическом действии исследованного вещества.
Пример 1. Влияние препарата Серпистен на физикальные показатели крыс с экспериментальным диабетом.
Показано позитивное влияние исследуемого препарата и препарата сравнения (метформин - группа бигуанидов) на выживаемость животных. Достоверное изменение веса животных было зарегистрировано только через 20 дней эксперимента и только в группе нелеченых животных. В то же время потребление воды - показатель, который считается одним из «больших» симптомов сахарного диабета, достоверно изменялся во всех группах животных. Наиболее выраженная полидипсия наблюдалась в группе нелеченых животных на 20 день эксперимента. Применение препарата Серпистен приводило к значимому снижению потребления воды (табл.1).
| Таблица 1 Результаты физикального исследования у крыс с экспериментальным диабетом |
|||
| Группы животных | Процент выживших животных | Масса тела, г | Суточное потребление воды, мл |
| Через 10 дней | |||
| Интактные животные (n=20) | 100 | 180±5 | 15±1 |
| Нелеченые крысы с диабетом (n=14) | 70 | 185±10 | 45±2* |
| Животные с диабетом, получавшие метформин (200 мг/кг) (n=20) | 100 | 185±5 | 25±3* ** |
| Животные с диабетом, получавшие Серпистен (5 мг/кг) (n=20) | 100 | 180±5 | 20±3** |
| Через 20 дней | |||
| Интактные животные (n=20) | 100 | 195±10 | 17±2 |
| Нелеченые крысы с диабетом (n=10) | 50 | 165±10* | 55±2* |
| Животные с диабетом, получавшие метформин (200 мг/кг) (n=16) | 80 | 180±5 | 20±3** |
| Животные с диабетом, получавшие Серпистен (5 мг/кг) (n=20) | 75 | 182±10 | 24±6** |
| Обозначение: (*) - здесь и далее различия статистически значимы по сравнению с интактными животными, при р<0,05; (**) - здесь и далее различия статистически значимы по сравнению с нелечеными животными, при р<0,05. | |||
Пример 2. Влияние препарата Серпистен на уровень глюкозы и степень гликозилирования гемоглобина у крыс с экспериментальным диабетом.
Как видно из представленных в табл.2 данных, у экспериментальных нелеченых животных наблюдается хорошо выраженная гипергликемия. При лечении исследуемым препаратом Серпистен наблюдалось достоверное снижение уровня глюкозы, практически до уровня интактных животных. При применении препарата сравнения позитивные, изменения на уровень глюкозы были аналогичны, но несколько менее выражены.
Как и многие белки, гемоглобин в процессе функционирования в организме человека при контакте с глюкозой способен неферментативно гликозилироваться, т.е. присоединять глюкозу. Эффект гликозилирования зависит только от величины и длительности гипергликемии. У экспериментальных животных уровень гликозилированного гемоглобина закономерно увеличивается к 10 дню эксперимента и еще более выражено увеличивается к 20 дню эксперимента. Под влиянием препарата Серпистен к 10 дню лечения уровень гликозилированного гемоглобина достоверно понижается. К 20 дню под влиянием исследуемого препарата и метформина концентрация HbA1c также была ниже уровня нелеченых животных в 2 раза, однако уровень интактных животных не достигался.
Параллельно снижался уровень неизмененного гемоглобина, достоверно снижаясь в группе нелеченых животных, при применении препаратов уровень гемоглобина несколько повышался, но уровень интактных животных не достигался (табл.2).
| Таблица 2 Уровень глюкозы и степень гликозилирования гемоглобина у крыс с экспериментальным диабетом |
|||
| Группы животных | Глюкоза, ммоль/л | HbA1c, мкмоль фруктозы/г Hb | Гемоглобин, г/л |
| Через 10 дней | |||
| Интактные животные (n=10+) | 4.5±0.4 | 4.5±0.5 | - |
| Нелеченые крысы с диабетом (n=10) | 16.2±1.5* | 8.4±0.8* | - |
| Животные с диабетом, получавшие метформин (200 мг/кг) (n=10) | 6.6±0.8** | 5.1±0.6** | - |
| Животные с диабетом, получавшие Серпистен (5 мг/кг) (n=10) | 5.6±0.2** | 6.2±0.3* ** | - |
| Через 20 дней | |||
| Интактные животные (n=10) | 4.2±0.5 | 4.5±0.5 | 159±2 |
| Нелеченые крысы с диабетом (n=10) | 18.6±1.2* | 12.5±1.3* | 109±9* |
| Животные с диабетом, получавшие метформин (200 мг/кг) (n=10) | 6.4±0.6* ** | 6.2±0.6* ** | 124±15* |
| Животные с диабетом, получавшие Серпистен (5 мг/кг) (n=10) | 5.4±0.3** | 6.5±0.5* ** | 112±13* |
| Обозначение: (+) - Здесь и далее: для исследования кровь отбирали у 10 животных, выбранных случайным образом, за исключением группы нелеченых животных | |||
Пример 3. Влияние препарата Серпистен на показатели липидного обмена у крыс с экспериментальным диабетом.
При развитии диабета наблюдаются выраженные сдвиги в состоянии липидного обмена. Отмечается увеличение общих липидов и холестерина в сыворотке крови животных без лечения к 10 дню, которое незначительно увеличивалось к 20 дню. На фоне лечения Серпистеном и препаратом сравнения оба показателя нормализовались и к 20 дню снижались практически до уровня интактных животных. Схожие изменения наблюдались в уровне β-липопротеинов, что также характеризовало положительную динамику процесса при лечении Серпистеном.
Несколько другие тенденции установлены в отношении триглицеридов, уровень которых достоверно не изменялся ни в одной группе животных к 10 дню эксперимента. К 20 дню эксперимента у нелеченых крыс уровень триглицеридов также не изменился, а при применении метформина и Серпистена достоверно снижался, что свидетельствует о липолитическом действии препаратов.
| Таблица 3 Показатели липидного обмена у крыс с экспериментальным диабетом |
||||
| Группы животных | Общие липиды, г/л | Холестерин, ммоль/л | Триглицериды, ммоль/л | β-липопротеиды, г/л |
| Через 10 дней | ||||
| Интактные животные (n=10) | 10.2±0.3 | 1.4±0.3 | 2.5±0.2 | 2.0±0.3 |
| Нелеченые крысы с диабетом (n=10) | 17.4±1.2* | 7.2±0.2* | 2.8±0.4 | 4.5±0.1* |
| Животные с диабетом, получавшие метформин (200 мг/кг) (n=10) | 10.6±0.6** | 2.6±0.3* ** | 2.6±0.1 | 2.2±0.3** |
| Животные с диабетом, получавшие Серпистен (5 мг/кг) (n=10) | 10.2±0.5** | 2.7±0.4* ** | 2.5±0.2 | 2.0±0.2** |
| Через 20 дней | ||||
| Интактные животные (n=10) | 10.1±0.3 | 1.2±0.2 | 2.5±0.2 | 2.0±0.3 |
| Нелеченые крысы с диабетом (n=10) | 18.5±1.3* | 7.6±0.3* | 2.9±0.4 | 4.5±0.2* |
| Животные с диабетом, получавшие метформин (200 мг/кг) (n=10) | 11.6±1.2** | 1.7±0.3** | 1.6±0.1* ** | 2.2±0.3** |
| Животные с диабетом, получавшие Серпистен (5 мг/кг) (n=10) | 10.6±1.0** | 1.5±0.2** | 1.5±0.2* ** | 2.1±0.3** |
Пример 4. Данные гистологического исследования поджелудочной железы.
Строение островков Лангерганса поджелудочной железы интактных крыс представлено на фиг.1-4.
Результаты гистологических исследований поджелудочной железы крыс с экспериментальным диабетом свидетельствуют о нарушениях строения островков Лангерганса (фиг.5-8).
Результаты гистологических исследований поджелудочной железы при лечении крыс с экспериментальным диабетом Серпистеном и препаратом сравнения метформином наглядно демонстрируют восстановление островков Лангерганса и свидетельствуют о выраженном противодиабетическом действии препарата Серпистен (фиг.9-12).
Таким образом, субстанция Серпистен, представляющая собой смесь экдистероидов 20-гидроксиэкдизона и 25S-инокостерона из надземной части растений серпухи венценосной, обладает выраженным противодиабетическим действием:
- серпистен оказывет позитивное влияние на состояние животных, увеличивая выживаемость животных в условиях аллоксанового диабета и уменьшая такое проявление данной патологии, как полидипсия;
- при экспериментальном сахарном диабете Серпистен снижает уровень глюкозы и концентрацию гликозилированнного гемоглобина в крови экспериментальных животных, оказывая тем самым профилактическое действие в отношении развития основных осложнений сахарного диабета;
- при развитии диабета наблюдаются выраженные сдвиги в состоянии липидного обмена, на фоне лечения Серпистеном уровень общих липидов, холестерина и β-липопротеинов нормализуется практически до уровня интактных животных, что свидетельствует о гиполипидемическом действии исследованного вещества и может быть дополнительным критерием эффективности терапии.
Claims (1)
- Противодиабетическое средство с гиполипидемической активностью для лечения и профилактики сахарного диабета II типа, содержащее экдистероидсодержащую субстанцию, выделенную из надземной части растений серпухи венценосной Serratula coronata L. (Asteraceae), представляющую собой смесь 20-гидоксиэкдизона в количестве не менее 75% и 25S-инокостерона в количестве не менее 10%.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007104249/15A RU2337698C1 (ru) | 2007-02-06 | 2007-02-06 | Противодиабетическое средство с гиполипидемической активностью для лечения и профилактики сахарного диабета ii типа |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007104249/15A RU2337698C1 (ru) | 2007-02-06 | 2007-02-06 | Противодиабетическое средство с гиполипидемической активностью для лечения и профилактики сахарного диабета ii типа |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2007104249A RU2007104249A (ru) | 2008-08-20 |
| RU2337698C1 true RU2337698C1 (ru) | 2008-11-10 |
Family
ID=39747391
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2007104249/15A RU2337698C1 (ru) | 2007-02-06 | 2007-02-06 | Противодиабетическое средство с гиполипидемической активностью для лечения и профилактики сахарного диабета ii типа |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2337698C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2572334C2 (ru) * | 2013-12-06 | 2016-01-10 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Луфатен" | Клатратный комплекс арабиногалактана или гуммиарабика с 20-гидроксиэкдизоном, способ его получения (варианты), фармацевтическая композиция и лекарственное средство |
| RU2776671C2 (ru) * | 2019-07-11 | 2022-07-22 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Исследовательский Центр "Парк Активных Молекул" (Ооо "Ниц Пам") | Применение клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном для нормализации обмена веществ, повышения неспецифической резистентности, роста и развития животных |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2246963C1 (ru) * | 2003-05-20 | 2005-02-27 | Иркутская государственная сельскохозяйственная академия- ФГОУ ВПО | Онкологический растительный сбор для лечения рака |
| RU2276991C1 (ru) * | 2005-02-09 | 2006-05-27 | Институт биологии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук | Тонизирующее и актопротекторное средство "серпистен" |
-
2007
- 2007-02-06 RU RU2007104249/15A patent/RU2337698C1/ru active IP Right Revival
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2246963C1 (ru) * | 2003-05-20 | 2005-02-27 | Иркутская государственная сельскохозяйственная академия- ФГОУ ВПО | Онкологический растительный сбор для лечения рака |
| RU2276991C1 (ru) * | 2005-02-09 | 2006-05-27 | Институт биологии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук | Тонизирующее и актопротекторное средство "серпистен" |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Турищев С.Н. Фитотерапия. - М., 2003, с.160-165. Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология. - М., 2000, с.516-520 Телятьев В.В. Целебные клады. - Иркутск, 1991, с.250. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2572334C2 (ru) * | 2013-12-06 | 2016-01-10 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Луфатен" | Клатратный комплекс арабиногалактана или гуммиарабика с 20-гидроксиэкдизоном, способ его получения (варианты), фармацевтическая композиция и лекарственное средство |
| RU2776671C2 (ru) * | 2019-07-11 | 2022-07-22 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Исследовательский Центр "Парк Активных Молекул" (Ооо "Ниц Пам") | Применение клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном для нормализации обмена веществ, повышения неспецифической резистентности, роста и развития животных |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2007104249A (ru) | 2008-08-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4353982B2 (ja) | 糖尿病処置用相乗作用組成物 | |
| Eddouks et al. | Inhibition of endogenous glucose production accounts for hypoglycemic effect of Spergularia purpurea in streptozotocin mice | |
| Prince et al. | Antidiabetic and antihyperlipidaemic effect of alcoholic Syzigium cumini seeds in alloxan induced diabetic albino rats | |
| CN101297880B (zh) | 含根皮苷的活性提取物及其用途 | |
| US20010021397A1 (en) | Naturally extracted and synthetic hypoglycemic or hypolipidemic compositions | |
| CA3022247C (en) | Composition for treating diabetic disease | |
| US20030165581A1 (en) | Compositions for treating diabetes mellitus, methods of use and manufacturing process of the same | |
| RU2337698C1 (ru) | Противодиабетическое средство с гиполипидемической активностью для лечения и профилактики сахарного диабета ii типа | |
| US20110166226A1 (en) | Process for obtaining an extract rich in rosmarinic acid (ra) from the plant origanum vulgare and its use for the treatment of diabetes | |
| Xiao et al. | Red honeybush (Cyclopia genistoides) tea mitigates oxidative imbalance and hyperlipidemia, while improving glucose homeostasis in type 2 diabetic rats | |
| Epoh et al. | Evaluation of acute and sub-acute toxicity of the aqueous extract from the fruit of Solanum indicum Linn.(Solanaceae) in Rats | |
| RU2310464C2 (ru) | Противовоспалительное средство "цивилин" | |
| Taiwo et al. | Glycaemic activity of Ficus exasperata in fructose-induced glucose intolerance in rats | |
| Ajibade et al. | Histopathological and toxicological effects of crude saponin extract from Phyllanthus niruri, L (Syn. P. franternus. Webster) on organs in animal studies | |
| RU2139718C1 (ru) | Средство для лечения сахарного диабета | |
| Radhika et al. | Effect of the aqueous extract of Sesbania grandiflora Linn in alloxan induced diabetes in albino rats | |
| NL2028915B1 (en) | Preparation method of traditional chinese medicine extract with antihypertensive effect | |
| RU2195300C1 (ru) | Антидиабетическое средство | |
| Ayyub et al. | Effect of Ethanolic Extract of Centella asiatica against Streptozocin and High Fat Diet Induced Diabetes and Hyperlipidemia in Rats | |
| Nagy et al. | Biochemical profiles and histopathological analysis of Cleome droserifolia methanolic extract on alloxan induced diabetic rats | |
| Sengottaiyan et al. | Hypoglycemic and hypolipidemic activity of Solanum nigrum in alloxan induced diabetic albino rats | |
| NKONO et al. | Effect of the aqueous extract of Gymnema sylvestre on some metabolic disturbances in a model of insulin resistant induced by dexamethasone and high sucrose diet on rat | |
| KR20090003661A (ko) | 달개비 및 가시오가피 추출물을 포함하는 당뇨병 예방 및치료용 기능성 음료 및 제조방법 | |
| KR101278390B1 (ko) | 왕겨초액을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| Muorah et al. | AMELIORATIVE EFFECT OF METHANOLIC EXTRACT OF MANIHOT ESCULENTA SEED ON ALLOXAN INDUCED DIABETIC PANCREATIC DAMAGE IN MALE WISTAR RATS |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090207 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20120220 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20130207 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20160210 |
|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20160930 |