RU2368619C2 - Способ получения соматотропного гормона со сниженным содержанием агрегата его изоформ, способ получения антагониста соматотропного гормона со сниженным содержанием агрегата его изоформ и общим суммарным содержанием трисульфидной примеси и/или дефенилаланиновой примеси - Google Patents
Способ получения соматотропного гормона со сниженным содержанием агрегата его изоформ, способ получения антагониста соматотропного гормона со сниженным содержанием агрегата его изоформ и общим суммарным содержанием трисульфидной примеси и/или дефенилаланиновой примеси Download PDFInfo
- Publication number
- RU2368619C2 RU2368619C2 RU2005113152/13A RU2005113152A RU2368619C2 RU 2368619 C2 RU2368619 C2 RU 2368619C2 RU 2005113152/13 A RU2005113152/13 A RU 2005113152/13A RU 2005113152 A RU2005113152 A RU 2005113152A RU 2368619 C2 RU2368619 C2 RU 2368619C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- peg
- aggregate
- anion exchange
- isoforms
- sth
- Prior art date
Links
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 title claims abstract 23
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 title claims abstract 23
- 239000012535 impurity Substances 0.000 title claims abstract 20
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract 11
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 title claims abstract 6
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 title claims abstract 5
- 239000005556 hormone Substances 0.000 title claims abstract 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 title abstract 6
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 claims abstract 23
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 claims abstract 5
- JVIPLYCGEZUBIO-UHFFFAOYSA-N 2-(4-fluorophenyl)-1,3-dioxoisoindole-5-carboxylic acid Chemical compound O=C1C2=CC(C(=O)O)=CC=C2C(=O)N1C1=CC=C(F)C=C1 JVIPLYCGEZUBIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 4
- 229920001425 Diethylaminoethyl cellulose Polymers 0.000 claims abstract 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims 4
- IIRDTKBZINWQAW-UHFFFAOYSA-N hexaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCOCCO IIRDTKBZINWQAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- UWHCKJMYHZGTIT-UHFFFAOYSA-N tetraethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCO UWHCKJMYHZGTIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- -1 PEG-5 Chemical compound 0.000 claims 3
- 239000012614 Q-Sepharose Substances 0.000 claims 3
- 101000611641 Rattus norvegicus Protein phosphatase 1 regulatory subunit 15A Proteins 0.000 claims 3
- YZUUTMGDONTGTN-UHFFFAOYSA-N nonaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO YZUUTMGDONTGTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- ZIBGPFATKBEMQZ-UHFFFAOYSA-N triethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCO ZIBGPFATKBEMQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 claims 1
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 claims 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 claims 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 claims 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 claims 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 claims 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 abstract 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 abstract 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения пэгилированного соматотропного гормона. Способ получения соматотропного гормона (СТГ) со сниженным содержанием агрегата его изоформ предусматривает отделение изоформ СТГ посредством анионообменного хроматографирования с применением анионообменной смолы для снижения содержания упомянутого агрегата до не более чем 10% (мас.), исходя из общей массы упомянутых изоформ и упомянутого агрегата. При этом осуществляют загрузку упомянутого СТГ, включающего дефенилаланиновую и/или трисульфидную примесь и/или его агрегат, на анионообменную смолу, выбранную из группы, включающей диэтиламиноэтилцеллюлозу и Q-сефарозу. Загрузку осуществляют при значении проводимости загрузки анионообменной смолы, меньшем либо равном 10 мСм/см, при pH загрузки анионообменной смолы от 5 до 10 и при загрузке анионообменной смолы СТГ, включающим упомянутую примесь или упомянутый агрегат, составляющую не более чем 10 г белка/л объема, заполненного анионообменной смолой. Изобретение позволяет получить соматотропный гормон со сниженным содержанием агрегата его изоформ, а также его антагонист со сниженным содержанием агрегата его изоформ и общим суммарным содержанием трисульфидной примеси и/или дефенилаланиновой примеси. 3 н. и 5 з.п. ф-лы, 5 ил., 8 табл.
Description
Текст описания представлен в факсимильном виде.
Claims (8)
1. Способ получения соматотропного гормона (СТГ) со сниженным содержанием агрегата его изоформ, который предусматривает отделение изоформ СТГ посредством анионообменного хроматографирования с применением анионообменной смолы для снижения содержания упомянутого агрегата до не более чем 10 мас.%, исходя из общей массы упомянутых изоформ и упомянутого агрегата, для чего осуществляют загрузку упомянутого СТГ, включающего дефенилаланиновую и/или трисульфидную примесь и/или его агрегат, на анионообменную смолу, выбранную из группы, включающей диэтиламиноэтилцеллюлозу и Q-сефарозу, причем загрузку осуществляют при значении проводимости загрузки анионообменной смолы, меньшем либо равном 10 мСм/см, при pH загрузки анионообменной смолы от 5 до 10 и при загрузке анионообменной смолы СТГ, включающим упомянутую примесь или упомянутый агрегат, составляющей не более чем 10 г белка/л объема, заполненного анионообменной смолой.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что СТГ содержит одну или несколько изоформ СТГ PEG-1, PEG-2, PEG-3, PEG-4, PEG-5, PEG-6, PEG-7, PEG-8 и PEG-9, агрегат, трисульфидную примесь и дефенилаланиновую примесь, неполиэтиленгликолизированную примесь СТГ и свободные молекулы PEG.
3. Способ по п.2, дополнительно включающий стадии:
разделения упомянутых изоформ СТГ на избранные изоформы; и
объединения упомянутых избранных изоформ с получением обогащенного пула упомянутых избранных изоформ.
разделения упомянутых изоформ СТГ на избранные изоформы; и
объединения упомянутых избранных изоформ с получением обогащенного пула упомянутых избранных изоформ.
4. Способ по п.1, дополнительно включающий стадию объединения, на которой осуществляется объединение дискретных количеств упомянутых изоформ СТГ с получением объединенного СТГ посредством метода, выбранного из группы, включающей электрофорез в капиллярах, электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия, ионообменную хроматографию, гидрофобную хроматографию, анионообменную хроматографию, катионообменную хроматографию, высокоэффективную жидкостную хроматографию с обращенной фазой, высокоэффективную жидкостную гель-хроматографию, афинную хроматографию и их комбинации.
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что упомянутый объединенный СТГ содержит одну или несколько PEG-1, PEG-2, PEG-3, PEG-4, PEG-5, PEG-6, PEG-7, PEG-8 и PEG-9.
6. Способ по п.5, отличающийся тем, что объединенная фракция СТГ PEG-4, PEG-5 и PEG-6 содержит по меньшей мере около 70 мас.%, исходя из общей массы упомянутых изоформ СТГ PEG-1, PEG-2, PEG-3, PEG-4, PEG-5, PEG-6, PEG-7, PEG-8 и PEG-9 и упомянутого агрегата.
7. Способ получения антагониста СТГ со сниженным содержанием агрегата его изоформ, который предусматривает отделение изоформ антагониста СТГ на анионообменной смоле посредством анионообменного хроматографирования для снижения содержания упомянутого агрегата до не более чем 6 мас.%, исходя из общей массы упомянутых изоформ и агрегата, для чего осуществляют загрузку упомянутого СТГ, включающего дефенилаланиновую и/или трисульфидную примесь и/или его агрегат, на анионообменную смолу, выбранную из группы, включающей диэтиламиноэтилцеллюлозу и Q-сефарозу, причем загрузку осуществляют при значении проводимости загрузки анионообменной смолы, меньшем либо равном 10 мСм/см, при pH загрузки анионообменной смолы от 5 до 10 и при загрузке анионообменной смолы СТГ, включающим упомянутую примесь или упомянутый агрегат, составляющей не более чем 10 г белка/л объема, заполненного анионообменной смолой.
8. Способ получения антагониста СТГ со сниженным общим суммарным содержанием трисульфидной примеси, дефенилаланиновой примеси и агрегата его изоформ, предусматривающий отделение изоформ антагониста СТГ на анионообменной смоле посредством анионообменного хроматографирования для снижения общего содержания трисульфидной примеси, дефенилаланиновой примеси и упомянутого агрегата до уровня, меньшего либо равного 15 мас.%, исходя из общей массы упомянутых изоформ и упомянутого агрегата, для чего осуществляют загрузку упомянутого СТГ, включающего дефенилаланиновую примесь и/или трисульфидную примесь и/или его агрегат, на анионообменную смолу, выбранную из группы, включающей диэтиламиноэтилцеллюлозу и Q-сефарозу, причем загрузку осуществляют при значении проводимости загрузки анионообменной смолы, меньшем либо равном 10 мСм/см, при pH загрузки анионообменной смолы от 5 до 10 и при загрузке анионообменной смолы СТГ, включающим упомянутую примесь или упомянутый агрегат, составляющей не более чем 10 г белка/л объема, заполненного анионообменной смолой.
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US41222702P | 2002-09-20 | 2002-09-20 | |
| US60/412,227 | 2002-09-20 | ||
| US10/646,798 | 2003-08-25 | ||
| US10/646,798 US20040048315A1 (en) | 2002-08-28 | 2003-08-25 | Method for the preparation of growth hormone and antagonist thereof having lower levels of isoform impurities thereof |
| US10/662,884 | 2003-09-16 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2005113152A RU2005113152A (ru) | 2005-10-27 |
| RU2368619C2 true RU2368619C2 (ru) | 2009-09-27 |
Family
ID=35864143
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2005113152/13A RU2368619C2 (ru) | 2002-09-20 | 2003-09-22 | Способ получения соматотропного гормона со сниженным содержанием агрегата его изоформ, способ получения антагониста соматотропного гормона со сниженным содержанием агрегата его изоформ и общим суммарным содержанием трисульфидной примеси и/или дефенилаланиновой примеси |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| AR (1) | AR041350A1 (ru) |
| RU (1) | RU2368619C2 (ru) |
| TW (1) | TWI318629B (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4880913A (en) * | 1986-12-02 | 1989-11-14 | Schwab & Co. Ges.M.B.H. | Process for the preparation of an immunoglobulin which can be administered intravenously and is stable in liquid form |
| US5969109A (en) * | 1990-02-28 | 1999-10-19 | Bona; Constantin | Chimeric antibodies comprising antigen binding sites and B and T cell epitopes |
| RU2180595C2 (ru) * | 1996-05-31 | 2002-03-20 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Конъюгаты интерферона |
-
2003
- 2003-09-22 RU RU2005113152/13A patent/RU2368619C2/ru active
- 2003-09-22 AR ARP030103444 patent/AR041350A1/es active IP Right Grant
- 2003-09-22 TW TW92126051A patent/TWI318629B/zh not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4880913A (en) * | 1986-12-02 | 1989-11-14 | Schwab & Co. Ges.M.B.H. | Process for the preparation of an immunoglobulin which can be administered intravenously and is stable in liquid form |
| US5969109A (en) * | 1990-02-28 | 1999-10-19 | Bona; Constantin | Chimeric antibodies comprising antigen binding sites and B and T cell epitopes |
| RU2180595C2 (ru) * | 1996-05-31 | 2002-03-20 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Конъюгаты интерферона |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AR041350A1 (es) | 2005-05-11 |
| RU2005113152A (ru) | 2005-10-27 |
| TW200502248A (en) | 2005-01-16 |
| TWI318629B (en) | 2009-12-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Weaver et al. | The structural basis of ankyrin function. II. Identification of two functional domains. | |
| Thomas et al. | Environmental cadmium is not sequestered by metallothionein in rainbow trout | |
| BR112015014723B1 (pt) | Método cromatográfico de isolamento e purificação de albumina de soro humano recombinante de alta pureza | |
| JPH06316593A (ja) | 蛋白質の精製方法 | |
| Bonnet et al. | Isolation and chemical characterization of two distinct “link proteins” from bovine nasal cartilage proteoglycan complex | |
| Anderson et al. | Proton surface‐charge density in soils with structural and pH‐dependent charge | |
| RU2368619C2 (ru) | Способ получения соматотропного гормона со сниженным содержанием агрегата его изоформ, способ получения антагониста соматотропного гормона со сниженным содержанием агрегата его изоформ и общим суммарным содержанием трисульфидной примеси и/или дефенилаланиновой примеси | |
| Venkateswarlu et al. | Determination of ionic (plus lonizable) fluoride in biological fluids: Procedure Based on Adsorption of Fluoride Ion on Calcium Phosphate | |
| Davey et al. | Interaction between heparin and human pregnancy-associated plasma protein A (PAPP-A): a simple purification procedure | |
| Jaffe | Hydrodynamic characterization of the Triton X-100 solubilized lactogenic hormone receptor of rat liver | |
| Ding et al. | Mixed-mode reversed phase/positively charged repulsion chromatography for intact protein separation | |
| US20060223986A1 (en) | Process for selectively isolating IgY antibodies from egg yolk of an anseriform bird and igy antibodies obtained thereby | |
| CN116120392B (zh) | 聚体蛋白的纯化方法 | |
| Baker et al. | The isolation of “link proteins” from bovine nasal cartilage | |
| Fornsted | Affinity chromatographic studies on antigen-antibody dissociation | |
| Giri et al. | The shape of proteins S15 and S18 from the small subunit of the Escherichia coli ribosome | |
| Strege et al. | Anion-exchange chromatography of DNA restriction fragments | |
| Lee et al. | Lectin affinity electrophoresis for the separation of fluorescently labeled sugar derivatives | |
| DE69223929T2 (de) | Verfahren zur Bindung des Immunoglobulin G an Protein A | |
| Cachia et al. | Ion-exchange high-performance liquid chromatographic purification of bovine cardiac and rabbit skeletal muscle troponin subunits | |
| Lacey et al. | Isolation of mammalian brain tubulin by amino-activated gel chromatography | |
| Fornstedt et al. | Influence of buffer composition on protein adsorption on agarose (Sepharose 6B) | |
| CN108840922A (zh) | 分离白蛋白非结合物、白蛋白结合物和小分子化合物的方法 | |
| RU2146944C1 (ru) | Способ очистки инсулина | |
| Li et al. | High-performance liquid chromatography of proteins on deformed nonporous agarose beads: immuno-affinity chromatography, exemplified with human growth hormone as ligand and a combination of ethylene glycol and salt for desorption of the antibodies |