RU2342374C2

RU2342374C2 - Фтор- и трифторалкилсодержащие гетероциклические сульфонамидные ингибиторы образования бета-амилоида и их производные

Info

Publication number: RU2342374C2
Application number: RU2005133434/04A
Authority: RU
Inventors: Энтони Фрэнк КРЕФТ (US); Энтони Фрэнк КРЕФТ; Линн РЕСНИК (US); Линн Ресник; Скотт Кристиан МАЙЕР (US); Скотт Кристиан Майер; Джордж ДИАМАНТИДИС (US); Джордж ДИАМАНТИДИС; Дерек Сесил КОУЛ (US); Дерек Сесил Коул; Тинчжун ВАН (US); Тинчжун Ван; Рокко Джон ГАЛАНТЕ (US); Рокко Джон Галанте; Молли ХОУК (US); Молли Хоук; Бойд Линн ХАРРИСОН (US); Бойд Линн Харрисон; Миншэн ЧЖАН (US); Миншэн ЧЖАН
Original assignee: Уайт
Priority date: 2003-03-31
Filing date: 2004-03-26
Publication date: 2008-12-27
Also published as: NO20054263D0; CN101274926A; RU2005133434A; SG167669A1; ZA200507896B; TWI336698B; CN1780829A; US7547725B2; CN1780829B; NO20054263L; WO2004092155A1; TW200504047A; CO5640049A2; BRPI0408962A; US7300951B2; EP1608638A1; ECSP056128A; AR043940A1; US20040198778A1; AU2004230844A1

Abstract

Настоящее изобретение относится к фтор- и трифторалкилсодержащим гетероциклическим сульфонамидам общей формулы I

где Т - СНО, COR₈ и C(OH)R₁R₂;

R₁ и R₂ - водород, C_1-6алкил;

R₃ - водород;

R₄ - (CF₃)_nалкил, (CF₃)_nалкилфенил и (F)_nциклоалкил;

N равен 1-2;

R₅ - водород, галоген, диен, конденсированный с Y, когда Y означает С, и диен, конденсированный с Y, когда Y означает С, и замещенный галогеном;

W, Y и Z - С, CR₆ и N, при условии, что, по меньшей мере, один из W, или Y, или Z должен быть С;

R₆ - водород, галоген и С_1-6алкил;

Х - S и NR₇;

R₇ - С_1-6алкил и

R₈ - С_1-6алкил.

Соединения могут быть использованы для ингибирования образования бета-амилоида и для лечения болезни Альцгеймера. Описаны также способ получения соединений I, фармацевтическая композиция и применение соединений, промежуточные соединения, используемые в синтезе. 9 н. и 39 з.п. ф-лы, 5 табл.

Description

Данное изобретение относится к фтор- и трифторалкилсодержащим гетероциклическим сульфонамидным ингибиторам образования бета-амилоида и их производным, к способам их получения, композициям, содержащим их, и способам лечения с их использованием. В частности, такие ингибиторы применимы при лечении болезни Альцгеймера.

Предпосылки создания изобретения

Болезнь Альцгеймера (AD) является наиболее распространенной формой деменции (потери памяти) у престарелых. Основными паталогическими изменениями при AD, обнаруженными в головном мозге, являются внеклеточные отложения белка бета-амилоида в форме бляшек и ангиопатия и внутриклеточные нейрофибриллярные переплетения агрегированного гиперфосфорилированного тау-белка. Последние данные показывают, что повышенные уровни бета-амилоида в головном мозге не только предшествуют тау-патологии, но также коррелируют с когнитивными ухудшениями. Кроме предположения о причинной роли бета-амилоида при AD, последние исследования показали, что агрегированный бета-амилоид токсичен для нейронов в клеточной культуре.

Бета-амилоидный белок состоит, главным образом, из пептидов в 39-42 аминокислоты и образуется из более крупного белка-предшественника, называемого амилоидным белком-предшественником (АРР), при последовательном воздействии протеаз бета- и гамма-секретазы. Хотя изредка, случаи раннего наступления AD связаны с генетическими мутациями в АРР, которые приводят к сверхпродуцированию или общего бета-амилоида, или его более агрегированной (aggregation-prone) изоформе в 42 аминокислоты. Кроме того, люди с синдромом Дауна имеют дополнительную хромосому, которая содержит ген, кодирующий АРР, и, таким образом, имеют повышенные уровни бета-амилоида и позднее в жизни постоянно развивающуюся AD.

Сохраняется потребность в композициях, полезных при ингибировании образования бета-амилоида и при лечении эффектов состояний, связанных с ним.

Краткое изложение сущности изобретения

Указанные соединения полезны для лечения состояний, при которых повышены уровни бета-амилоида (например, AD, синдром Дауна). Системное введение указанных соединений субъектам с риском появления или страдающих от таких болезней, снижает уровни белка бета-амилоида с последующим уменьшением токсичных бета-амилоидных агрегатов в головном мозге пациентов.

Неожиданно было обнаружено, что трифторалкил- и фторсодержащие гетероциклические сульфонамиды формулы (I) обладают неожиданно хорошей ингибирующей активностью в отношении бета-амилоида. Соединения формулы (I) характеризуются повышенной устойчивостью к окислению (метаболическая устойчивость фазы 1) по сравнению с соответствующими соединениями, не содержащими трифторалкильных или фторгрупп. Кроме того, было обнаружено, что соединения формулы (I), идентифицированные в данном описании, обладают повышенными метаболической устойчивостью и периодом полувыведения из кровообращения, и, таким образом, усиленной биологической активностью по сравнению с соответствующим соединением, не содержащим трифторалкильных или фторгрупп.

Кроме того, было обнаружено, что трифторалкил- и фторсодержащие соединения формулы (I) имеют повышенную эффективность по сравнению с соответствующими нефторированными соединениями. Таким образом, ожидается, что соединения изобретения будут полезны в более низких дозах, чем соединения известного уровня техники.

Указанные и другие аспекты изобретения будут очевидны для специалистов в данной области после прочтения последующего подробного описания изобретения.

Подробное описание изобретения

В первом аспекте изобретение раскрывает соединения формулы (I), содержащие их фармацевтические композиции и их применение в модуляции образования бета-амилоида у субъектов, с риском появления или страдающих от AD или других болезней, являющихся результатом повышенных уровней белка бета-амилоида в мозге. Следовательно, настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I)

где Т выбирают из группы, состоящей из СНО, COR₈ и C(OH)R₁R₂;

R₁ и R₂ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, низшего алкила, замещенного низшего алкила, CF₃, алкенила, замещенного алкенила, алкинила и замещенного алкинила;

R₃ выбирают из группы, состоящей из водорода, низшего алкила и замещенного низшего алкила;

R₄ выбирают из группы, состоящей из (CF₃)_nалкила, (CF₃)_n(замещенного алкила), (CF₃)_nалкилфенила, (CF₃)_nалкил(замещенного фенила) и (F)_nциклоалкила;

N равен 1-3;

R₅ выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, CF₃, диена, конденсированного с Y, когда Y означает C, и замещенного диена, конденсированного с Y, когда Y означает C;

W, Y и Z независимо выбирают из группы, состоящей из С, CR₆ и N, при условии, что, по меньшей мере, один из W или Y или Z должен представлять собой С;

R₆ выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, низшего алкила и замещенного низшего алкила;

Х выбирают из группы, состоящей из O, S, SO₂ и NR₇;

R₇ выбирают из группы, состоящей из водорода, низшего алкила, замещенного низшего алкила, бензила, замещенного бензила, фенила и замещенного фенила; и

R₈ выбирают из группы, состоящей из низшего алкила, CF₃, фенила и замещенного фенила;

и их фармацевтически приемлемым солям и/или гидратам или пролекарствам.

Из указанных соединений предпочтительными представителями являются соединения, в которых R₄ представляет собой (CF₃)_nалкил, такой как CF₃, CF₃CH₂, CH(CH₃)CH₂CF₃, CH(CH₂CF₃)₂ или CH(CF₃)₂. Другими предпочтительными представителями являются соединения, в которых R₄ представляет собой (F)_nциклоалкил, предпочтительно (F)₂циклоалкил, более предпочтительно (F)₂циклогексан и бицикло[3.1.0]гексан, и наиболее предпочтительно 4,4-дифторциклогексан и 4,4-дифторбицикло[3.1.0]-3-гексан.

В одном воплощении Т представляет собой С(ОН)R₁R₂, R₁ и R₂ представляют собой водород, R₃ представляет собой водород, R₄ представляет собой (CF₃)₂СН, предпочтительно, R₄ имеет S-стереохимию, R₅ представляет собой галоген и W означает C, X означает S, Y означает CH, Z означает CH, с сульфонамидной группой, присоединенной к С-2 тиофенового кольца.

В другом воплощении Т представляет собой СНО, R₁ и R₂ представляют собой водород, R₃ представляет собой водород, R₄ представляет собой CH(CH₃)CH₂CF₃, R₅ представляет собой галоген и W означает C, X означает S, Y означает CH, Z означает CH, с сульфонамидной группой, присоединенной к С-2 тиофенового кольца.

В другом воплощении Т представляет собой С(О)R₈, R₁ и R₂ представляют собой водород, R₃ представляет собой водород, R₄ представляет собой CF₃CH₂(CH₃)CH, R₅ представляет собой галоген, R₈ представляет собой СН₃ и W означает C, X означает S, Y означает CH, Z означает CH, с сульфонамидной группой, присоединенной к С-2 тиофенового кольца.

В еще одном воплощении Т представляет собой C(OH)R₁R₂, R₁ и R₂ представляют собой водород, R₃ представляет собой водород, R₄ представляет собой (CH₂CF₃)₂CH, R₅ представляет собой галоген и W означает C, X означает S, Y означает CH, Z означает CH, с сульфонамидной группой, присоединенной к С-2 тиофенового кольца.

В еще одном воплощении Т представляет собой C(OH)R₁R₂, R₁ и R₂ представляют собой СН₃, R₃ представляет собой водород, R₄ представляет собой CF₃CH₂(CH₃)CH, R₅ представляет собой галоген и W означает C, X означает S, Y означает CH, Z означает CH, с сульфонамидной группой, присоединенной к С-2 тиофенового кольца.

В другом воплощении Т представляет собой C(OH)R₁R₂, R₁ представляет собой СН₃, R₂ представляет собой водород, R₃ представляет собой водород, R₄ представляет собой (CF₃)₂CH, R₅ представляет собой галоген и W означает C, X означает S, Y означает CH, Z означает CH, с сульфонамидной группой, присоединенной к С-2 тиофенового кольца.

В еще одном воплощении Т представляет собой C(OH)R₁R₂, R₁ и R₂ представляют собой водород, R₃ представляет собой водород, R₄ представляет собой (F)₂циклоалкил, R₅ представляет собой галоген и W означает C, X означает S, Y означает CH, Z означает CH, с сульфонамидной группой, присоединенной к С-2 тиофенового кольца.

Место присоединения гетероциклического W-X-Y-Z-C кольца к группе SO₂ не ограничивает настоящее изобретение. Однако в одном предпочтительном воплощении кольцо присоединено к группе SO₂ через атом углерода. Однако кольцо может быть присоединено через гетероатом N.

Соединения изобретения могут содержать один или несколько асимметричных атомов углерода, и некоторые соединения могут содержать один или несколько асимметричных (хиральных) центров, и, таким образом, могут образовывать оптические изомеры и диастереомеры. Хотя стереохимия в формуле (I) не показана, когда соединения формулы (I) содержат один или несколько хиральных центров, по меньшей мере, хиральный центр β-аминоспирта является S-стереохимическим. Наиболее предпочтительно атом углерода, к которому присоединены N, R₃ и R₄, является S-стереохимическим. Таким образом, изобретение включает такие оптические изомеры и диастереомеры, а также рацемические смеси и расщепленные энантиомерно чистые стереоизомеры, а также другие смеси R- и S-стереоизомеров и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты и пролекарства.

Термин "алкил" используется в данном описании для обозначения как линейных, так и разветвленных насыщенных алифатических углеводородных групп с одним-десятью атомами углерода, предпочтительно с одним-восемью атомами углерода и наиболее предпочтительно с одним-шестью атомами углерода; используемый в данном описании термин "низший алкил" относится к линейным и разветвленным насыщенным алифатическим углеводородным группам с одним-шестью атомами углерода; подразумевается, что термин "алкенил" включает как линейные, так и разветвленные алкильные группы с, по меньшей мере, одной двойной углерод-углеродной связью и двумя-восемью атомами углерода, предпочтительно с двумя-шестью атомами углерода; подразумевается, что "алкинильная" группа перекрывает как линейные, так и разветвленные алкильные группы с, по меньшей мере, одной тройной углерод-углеродной связью и двумя-восемью атомами углерода, предпочтительно с двумя-шестью атомами углерода.

Термины "замещенный алкил", "замещенный алкенил" и "замещенный алкинил" относятся к алкильной, алкенильной и алкинильной группам, описанным выше, содержащим от одного до трех заместителей, предпочтительно независимо выбранных из группы, состоящей из галогена, CN, OH, NO₂, амино, арила, гетероциклической группы, замещенного арила, замещенной гетероциклической группы, алкокси, замещенного алкокси, арилокси, замещенного арилокси, алкилкарбонила, алкилкарбокси, алкиламино и арилтио. Указанные заместители могут быть присоединены к любому атому углерода алкильной, алкенильной или алкинильной группы, при условии, что присоединение составляет стабильную химическую группу.

Термин "циклоалкил" используется в данном описании для обозначения углеродного насыщенного кольца, содержащего более 3 атомов углерода, образующих стабильное кольцо. Термин "циклоалкил" может включать группы, где две или более циклоалкильных групп конденсированы с образованием стабильного полициклического кольца. Предпочтительно термин "циклоалкил" относится к кольцу, содержащему примерно 4-9 атомов углерода и более предпочтительно примерно 6 атомов углерода.

Термин "замещенный циклоалкил" используется в данном описании для обозначения циклоалкильной группы, описанной выше, содержащей от одного до пяти заместителей, предпочтительно независимо выбранных из группы, состоящей из водорода, галогена, CN, OH, NO₂, амино, алкила, замещенного алкила, алкенила, замещенного алкенила, алкинила, алкокси, арилокси, замещенного алкилокси, алкилкарбонила, алкилкарбокси, алкиламино, замещенного алкиламино, арилтио, гетероциклической группы, замещенной гетероциклической группы, аминоалкила и замещенного аминоалкила.

Термин "арил" используется в данном описании для обозначения карбоциклической ароматической системы, которая может быть монокольцевой или системой из нескольких ароматических колец, конденсированных или соединенных вместе так, что, по меньшей мере, одна часть конденсированных или соединенных колец образует конъюгированную ароматическую систему. Арильные группы включают, но, не ограничиваясь ими, фенил, нафтил, бифенил, антрил, тетрагидронафтил, фенантрил и индан.

Термин "замещенный арил" относится к арилу, имеющему указанные выше значения, содержащему один-четыре заместителя, предпочтительно независимо выбранные из группы, состоящей из галогена, CN, OH, NO₂, амино, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, алкокси, арилокси, замещенного алкилокси, алкилкарбонила, алкилкарбокси, алкиламино и арилтио.

Термин "диен" относится к ненасыщенному углеводороду или диолефину, имеющему две двойные связи. Термин "замещенный диен" относится к диену, замещенному одним-двумя заместителями, предпочтительно независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, CN, OH, NO₂, амино, алкила, замещенного алкила, циклоалкила, замещенного циклоалкила, алкенила, замещенного алкенила, алкинила, замещенного алкинила, алкокси, замещенного алкокси, арилокси, замещенного арилокси, алкилкарбонила, замещенного алкилкарбонила, алкилкарбокси, замещенного алкилкарбокси, алкиламино, замещенного алкиламино, арилтио или замещенного арилтио.

Как "диен", так и "замещенный диен" используют в контексте R₅, воплощении, в котором замещенный диен представляет собой 3-хлор-1,2-бутадиен, который конденсирован с тиофеновым кольцом по R₅ и Y с образованием бензотиофена. Другие подходящие диены включают 1,3-бутадиенил и 2-трифторметил-1,3-бутадиенил. Однако можно легко выбрать другие подходящие замещенные и незамещенные диены из числа соединений согласно данному описанию.

Термин "замещенный бензил" относится к бензильной группе, замещенной в бензильном кольце одним или несколькими заместителями, предпочтительно независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, CN, OH, NO₂, амино, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, алкокси, арилокси, замещенного алкилокси, алкилкарбонила, алкилкарбокси, алкиламино и арилтио.

Термин "гетероциклическая группа" используется в данном описании для описания стабильного 4-7-членного моноциклического или стабильного полициклического гетероциклического кольца, которое является насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным и которое включает атомы углерода и от одного до четырех гетероатомов, предпочтительно независимо выбранных из группы, состоящей из атомов N, O и S. Атомы N и S могут быть окисленными. К гетероциклическим также относится любое полициклическое кольцо, в котором любое из гетероциклических колец, имеющих указанные выше значения, конденсировано с арильным кольцом. Гетероциклическое кольцо может быть присоединено к любому гетероатому или атому углерода, при условии, что полученная структура является химически стабильной. Такие гетероциклические группы включают, например, тетрагидрофуранил, пиперидинил, пиперазинил, 2-оксопиперидинил, азепинил, пирролидинил, имидазолил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, оксазолил, изоксазолил, морфолинил, индолил, хинолинил, тиенил, фурил, бензофуранил, бензотиенил, тиаморфолинил, тиаморфолинилсульфоксид, изохинолинил и тетрагидротиопиранил.

Термин "замещенная гетероциклическая группа" используется в данном описании для описания гетероциклической группы, описанной выше, содержащей один-четыре заместителя, предпочтительно независимо выбранных из группы, состоящей из галогена, CN, OH, NO₂, амино, алкила, замещенного алкила, циклоалкила, замещенного циклоалкила, алкенила, замещенного алкенила, алкинила, замещенного алкинила, алкокси, замещенного алкокси, арилокси, замещенного арилокси, алкилкарбонила, замещенного алкилкарбонила, алкилкарбокси, замещенного алкилкарбокси, алкиламино, замещенного алкиламино, арилтио или замещенного арилтио.

Когда используются термины "замещенный алкил" или "замещенный алкилфенил", замещение может иметь место в алкильной группе или в соответствующем базовом соединении.

Термин "алкокси" используется в данном описании для обозначения группы OR, где R представляет собой алкил или замещенный алкил.

Термин "арилокси" используется в данном описании для обозначения группы OR, где R представляет собой арил или замещенный арил.

Термин "арилтио" используется в данном описании для обозначения группы SR, где R представляет собой арил или замещенный арил.

Термин "алкилкарбонил" используется в данном описании для обозначения группы RCO, где R представляет собой алкил или замещенный алкил.

Термин "алкилкарбокси" используется в данном описании для обозначения группы COOR, где R представляет собой алкил или замещенный алкил.

Термин "аминоалкил" относится как к вторичным, так и к третичным аминам, где алкильные или замещенные алкильные группы, которые могут быть одинаковыми или различными, содержат один-восемь атомов углерода, и место присоединения находится у атома азота.

Термин "галоген" относится к Cl, Br, F или I.

Термин "кольцевая" структура включает моноциклическую структуру, мостиковую циклическую структуру и конденсированную циклическую структуру, если тип кольцевой структуры не определен иначе.

Соединения настоящего изобретения можно использовать в форме солей, образованных с фармацевтически или физиологически приемлемыми кислотами или основаниями. Такие соли включают, но не ограничиваясь ими, соли, полученные с органическими и неорганическими кислотами, такими как уксусная, молочная, лимонная, винная, янтарная, фумаровая, малеиновая, малоновая, миндальная, яблочная, хлористоводородная, бромистоводородная, фосфорная, азотная, серная, метансульфоновая, толуолсульфоновая и подобные известные приемлемые кислоты и их смеси. Другие соли включают соли диэтаноламина, этилендиамина и соли щелочных или щелочноземельных металлов, такие как натриевые (например, гидроксид натрия), калиевые (например, гидроксид калия), кальциевые (например, гидроксид кальция) или магниевые (например, гидроксид магния).

Указанные соли, а также другие соединения изобретения, могут находиться в форме сложных эфиров, карбаматов и других обычных "пролекарственных" формах, которые при введении в такой форме превращаются in vivo в активный фрагмент. В данном предпочтительном воплощении пролекарства представляют собой сложные эфиры. См., например, B. Testa and J. Caldwell, "Prodrugs Revisited: The "Ad Hoc" Approach as a Complement to Ligand Design", Medicinal Research Reviews, 16(3):233-241, ed., John Wiley & Sons (1996).

В одном воплощении соединения формулы (I) представляют собой тиофенсульфонамиды, более предпочтительно 5-галогентиофенсульфонамиды и наиболее предпочтительно 5-галогентиофенсульфонамиды с β-ответвлениями в боковой цепи первичного спирта. Таким образом, в связи с формулой (I), соединение изобретения, желательно, имеет структуру, в которой R₁ и R₂ представляют собой водород; R₃ представляет собой водород; R₄ представляет собой (CF₃)₂CH S-стереохимии, R₅ представляет собой галоген, W означает C, X означает S, Y означает CH, Z означает CH, с сульфонамидной группой, присоединенной к С-2 тиофенового кольца.

В другом воплощении соединения формулы (I) представляют собой фурансульфонамиды. Таким образом, в связи с формулой (I), соединение изобретения имеет структуру, в которой X представляет собой О. В одном предпочтительном воплощении фурансульфонамиды характеризуются β-ответвлениями в боковой цепи первичного спирта.

Еще в другом воплощении соединения формулы (I) представляют собой пиразолсульфонамиды. Таким образом, в связи с формулой (I), соединение имеет структуру, в которой Х представляет собой NR₇, W представляет собой N и Z и Y представляют собой C или CR₆, при условии, что, по меньшей мере, один из Y или Z должен представлять собой С.

Указанные и другие соединения изобретения можно получить, следуя схемам, которые проиллюстрированы ниже.

Синтез

Соединения настоящего изобретения можно получить рядом способов, хорошо известных специалистам в области органического синтеза. Соединения настоящего изобретения можно получить с использованием способов, описанных ниже, наряду с методами синтеза, известными в области органического синтеза, или вариантами таких способов, осуществленных специалистами в данной области. (См., для общего представления, Comprehensive Organic Synthesis, "Selectivity, Strategy & Efficiency in Modern Organic Chemistry", ed., I. Fleming, Pergamon Press, New York (1991); Comprehensive Organic Chemistry, "The Synthesis and Reactions of Organic Compounds", ed. J.F. Stoddart, Pergamon Press, New York (1979)). Предпочтительные способы включают, но не ограничиваясь ими, способы, описанные ниже.

Первый способ получения состоит во взаимодействии 1,2-аминоспирта II с соответствующим сульфонилгалогенидом в присутствии основания, такого как триэтиламин (ТЕА), и в подходящем растворителе, с получением соединений формулы III. Затем, в случае соединений, где R₁ и R₂ представляют собой водород, окисление первичного N-сульфонилспирта хлорхроматом пиридиния (РСС), реагентом Десса-Мартина периодинаном [D.B. Dess, J.C. Martin, J. Org. Chem., 48:4155 (1983)] или в условиях по Сверну [Omura et al., J. Org. Chem., 41:957 (1976)] дает соответствующий альдегид IV, который можно подвергнуть взаимодействию с реактивами Гриньяра (RMgX, где R представляет собой органический радикал и Х представляет собой галоген) и получить вторичные спирты V в виде смеси диастереомеров, которые можно разделить высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ) (схема 1).

Второй способ получения включает взаимодействие α-аминокислоты или сложного эфира IX с соответствующим сульфонилгалогенидом в присутствии основания, такого как триэтиламин, и в подходящем растворителе, с получением соединений формулы Х (схема 2). Промежуточную N-сульфонилкислоту Х (R_x=H) можно превратить в соответствующий первичный спирт VIII (R₁=R₂=H), используя стандартную методику, с применением алюмогидрида лития (LiAlH₄), B₂H₆ или хлорангидрида циануровой кислоты/NaBH₄. Промежуточный сложный N-сульфонилэфир Х (R_x=алкил, Bn) также можно восстановить до соответствующего первичного спирта VIII (R₁=R₂=H), используя стандартную методику с применением LiAlH₄. Альтернативно, промежуточный N-сульфонилэфир Х (R_x=алкил, Bn) можно превратить в альдегид IV с помощью DIBAL. Наконец, промежуточный сложный N-сульфонилэфир Х (R_x=алкил, Bn) можно подвергнуть взаимодействию с 2 эквивалентами реактива Гриньяра и получить третичные спирты III с R₁=R₂. Альтернативно, в случае третичных спиртов III, где R₁ не равен R₂, можно получить по Вейнребу соответствующий амид N-сульфонилкислоты и затем подвергнуть взаимодействию с R₁MgX и R₂MgX.

В варианте второго способа получения первичных спиртов сначала α-аминокислоту или сложный эфир (или их N-защищенное производное) VI превращают в соответствующий первичный 1,2-аминоспирт VII (с использованием методики, описанной в предыдущем разделе), который затем после удаления защитной группы (при необходимости) подвергают взаимодействию с соответствующим сульфонилгалогенидом (схема 3), получая соединения формулы VIII.

Для получения соединений, происходящих от неприродных α-аминокислот, содержащих бета-ответвления в боковой цепи аминокислоты, на схеме 4 представлен способ получения, основанный на работе Hruby (Tet. Lett., 38:5135-5138 (1997)). Такой способ вызывает образование α,β-ненасыщенного амида XIV вспомогательного хирального вещества Эванса из ацилбромида XI через последовательность реакций Хорнера-Эммонса с последующим присоединением соли медной кислоты с органическим веществом с образованием сопряжения, захватом полученного енолят-аниона XV N-бромсукцинамидом (NBS), заменой бромида XVI азид-анионом (предоставляемым азидом тетраметилгуанидиния (TMGA) или азидом натрия) с получением XVII, последующим восстановлением до 1,2-аминоспирта и последующим сульфированием с получением целевого соединения XVIII.

Когда гетероцикл, присоединенный в сульфонамидной группе в вышеописанных спиртах, представляет собой тиофен, соответствующее сульфоновое производное ХХ можно получить окислением тиофена XIX 3-хлорпероксибензойной кислотой (МСРВА) (схема 5).

При альтернативном способе получения сульфонамидов производных неприродных 1,2-аминоспиртов используют модификацию Бухерера синтеза α-аминокислот по Стрекеру (схема 6). При таком пути альдегид XXI подвергают взаимодействию с цианид-анионом и карбонатом аммония, получая гидантоин XXII, который гидролизуют до α-аминокислоты XXIII. Затем полученное соединение восстанавливают до XXIV и сульфируют, получая нужные соединения формулы XXV. Альтернативно, промежуточную аминокислоту XXIII можно сначала сульфировать с получением соединения XXVI, которое затем восстанавливают до XXV. Рацемические продукты XXIII, XXV или XXVI специалист в данной области может расщепить до нужного S-энантиомера с использованием стандартной методики.

Для сульфонамидов, образованных от 1,2-аминоспиртов в ряду вторичных спиртов с R₁=H и R₂=CF₃ (соединение XXVII), разработан способ получения, приведенный на схеме 7, исходя из альдегида IV (полученного, как показано на схеме 1).

Когда гетероцикл, присоединенный к сульфонамидной группе в вышеописанных спиртах, представляет собой тиофен, соответствующие производные 5-иод- и 5-фтортиофенов можно получить конверсией производного 5-бромтиофена XXVIII (полученного, как показано на схеме 1) до промежуточного соединения 5-триалкилоловотиофена XXIX, которое можно превратить или в 5-иодтиофен (XXXI) обработкой иодидом натрия и хлорамином Т, или в аналог 5-фтортиофена (ХХХ) обработкой реагентом SELECTELUOR® (Aldrich Chem. Co.) (схема 8).

Другой способ получения хирально чистых N-сульфонил-1,2-аминоспиртов, происходящих от α-аминокислот, приведен на схеме 9. В данном способе сначала получают α,β-ненасыщенный амид XXXIV вспомогательного хирального вещества Эванса из бромацетилбромида XI через последовательность реакций по Хорнеру-Эммонсу. Присоединение соли медной кислоты с органическим веществом с образованием сопряжения и протонирование полученного енолят-аниона дает XXXV, который затем превращают в соответствующий енолят и электрофильно аминируют тризилазидом с образованием ключевого промежуточного соединения XXXVI (J. Am. Chem. Soc., 109:6881-6883 (1987)). Затем промежуточный азид XXXVI гидролизуют до α-азидокислоты XXXVII и восстанавливают до хирально чистой α-аминокислоты XXXVIII, которую можно превратить в соответствующие N-сульфонил-1,2-аминоспирты способами, описанными выше (например, схемы 2 или 3).

Наконец, хирально чистые α-аминокислоты XLI - одни из возможных синтетических предшественников хиральных N-сульфонил-2-аминоспиртов XLIII, также можно получить с использованием вариантов асимметричного синтеза α-аминокислот по Стреккеру, как представлено на схемах 10 (J. Org. Chem., 61:440-441 (1996)) и 11 (J. Org. Chem., 54:1055-1062 (1989)).

Способ получения хирально чистых трифторалкил- или фторсодержащих гетероциклических сульфонамидов формулы (I) представлен на схемах 12 и 13. Схема 12 отображает методики, описанные в литературе, для образования подходящего аминоэфира XLVII [W.H. Vine et al., J. Med. Chem., 1981, 24:1043-1047; и R. Keese et al., Synthesis, 1996, 695-696]. На основании литературных сведений и указаний в данном описании специалисту в данной области будет очевидно, что, в зависимости от нужного аминоэфира, можно легко выбрать другой трифторметилальдегид на стадии 3, в зависимости от заместителей, выбранных для R_4' и R_3', другое вспомогательное хиральное вещество на стадии 4 или использовать другие реагенты, заместители или другие условия реакции на любой из показанных стадий. Однако, если R_3' не равен R_4', тогда на стадии 3 схемы 12 получают смесь олефиновых изомеров, которую надо разделить перед стадией 4.

Согласно схеме 13, аминоэфир XLVIII отфильтровывают; обнаружено, что перекристаллизация на данной стадии, которая описана в литературе как существенная, не требуется. Промежуточный сложный аминоэфир XLVIII превращают в N-бензиламиноспирт с помощью DIBAL-H. N-Бензиламиноспирт XLIX гидролизуют в присутствии подходящего катализатора, получая аминоспирт L. Катализатор удаляют фильтрованием и раствор концентрируют до твердого вещества. Аминоспирт L сульфируют, используя BSA/триэтиламин/DMAP (или другой подходящий агент, например TMSCl/аминное основание) и нужный гетероциклический сульфонилхлорид. Реакцию гасят для удаления силильной эфирной группы (например, водной смесью HCl/ТГФ) и фильтруют (например, используя слой SiO₂) со смесью этилацетат/гексан в соотношении, которое допускает кристаллизацию хирально чистого трифторметилсодержащего гетероциклического сульфонамида формулы (I) по изобретению.

В дополнение к полезности для получения соединений изобретения способ по схеме 13 можно легко использовать для получения трифторалкил-, включая трифторметил- и фторсодержащих соединений. Более конкретно, данный способ может быть полезен для получения других трифторалкил-, трифторметил- или фторсодержащих сульфонамидов из диастереомерной смеси аминоэфира, имеющего, по меньшей мере, один хиральный центр и, по меньшей мере, одну трифторалкильную или фторгруппу, присоединенную к, по меньшей мере, одному хиральному центру через алкильную группу, или, по меньшей мере, одну фторгруппу, присоединенную к циклоалкильной группе. Как определено в данном описании, алкильная группа может присоединять один или несколько трифторалкилов непосредственно к хиральному центру. Альтернативно, трифторалкил может располагаться в заместителе замещенной алкильной группы.

Соединения изобретения также можно получить взаимодействием вторичного спирта V с хлорхроматом пиридиния (PCC) или реагентом Десса-Мартина периодинаном [D.B. Dess, J.C. Martin, J. Org. Chem., 48:4155 (1983)] c образованием соответствующего альдегида LI (схема 14).

Другой способ получения трифторметилированных или фторированных гетероциклических сульфонамидов включает обработку трифторметилированного или фторированного альдегида дегидратирующим агентом и хиральным сульфинамидом с образованием трифторметилированного или фторированного хирального сульфинамида. Специалист в данной области сможет легко определить подходящий дегидратирующий агент для использования в настоящем способе, включающий, без ограничений, этоксид титана, сульфат магния или молекулярные сита, такие как молекулярные сита 4Å. Затем трифторметилированный или фторированный хиральный сульфинамид можно обработать цианирующим агентом с образованием трифторметилированного или фторированного диастереомерного α-аминонитрила соответственно. Выбор цианирующего реагента для использования в настоящем изобретении находится в компетенции специалиста в данной области и может включать, среди прочих, цианид этилизопропоксиалюминия. Затем трифторметилированный или фторированный диастереомерный α-аминонитрил можно выделить и, необязательно, очистить с использованием методов, хорошо известных специалистам в данной области. Альтернативно, трифторметилированный или фторированный диастереомерный α-аминонитрил можно быть гидролизован до трифторметилированной или фторированной α-аминокислоты соответственно, с использованием методов и агентов, хорошо известных специалистам в данной области. Затем трифторметилированную или фторированную α-аминокислоту можно восстановить до трифторметилированного или фторированного β-аминоспирта соответственно, с использованием методов и агентов, хорошо известных специалистам в данной области. Трифторметилированный или фторированный β-аминоспирт можно подвергнуть взаимодействию с гетероциклическим сульфонилхлоридом с образованием соответствующего трифторметилированного или фторированного гетероциклического сульфонамида настоящего изобретения.

В одном воплощении изобретение относится к способу получения трифторметилированного или фторированного гетероциклического сульфонамида, включающему стадии

(а) фильтрования смеси диастереомеров аминоэфира, причем указанный аминоэфир имеет, по меньшей мере, один хиральный центр и, по меньшей мере, одну трифторметильную или фторгруппу, присоединенную к, по меньшей мере, одному хиральному центру через алкильную группу;

(b) обработки аминоэфира DIBAL-H в толуоле с образованием N-бензиламиноспирта;

(с) гидрирования N-бензиламиноспирта в присутствии катализатора и образования аминоспирта;

(d) сульфирования аминоспирта со стадии (с) гетероциклическим сульфонилхлоридом и

(е) кристаллизации сульфированного продукта со стадии (d) с образованием хирально чистого трифторметилированного или фторированного гетероциклического сульфонамида.

В еще одном воплощении изобретение относится к способу получения трифторметилированного или фторированного гетероциклического сульфонамида, включающему стадии

(а) обработки трифторметилированного или фторированного альдегида дегидратирующим агентом и хиральным сульфинамидом с образованием трифторметилированного или фторированного хирального сульфинамида;

(b) обработки указанного трифторметилированного или фторированного хирального сульфинамида цианирующим агентом с образованием трифторметилированного или фторированного диастереомерного α-аминонитрила;

(с) гидролиза указанного трифторметилированного или фторированного диастереомерного α-аминонитрила до трифторметилированной или фторированной α-аминокислоты;

(d) восстановления указанной трифторметилированной или фторированной α-аминокислоты до трифторметилированного или фторированного β-аминоспирта и

(е) взаимодействия указанного трифторметилированного или фторированного β-аминоспирта с гетероциклическим сульфонилхлоридом с образованием указанного трифторметилированного или фторированного гетероциклического сульфонамида.

Способы применения

Соединения формулы (I) являются ингибиторами образования бета-амилоида. В предварительных исследованиях с использованием специфических анализов на протеазы показано, что представители соединений формулы (I) обнаруживают специфическое ингибирование в отношении протеазной активности. Таким образом, соединения настоящего изобретения полезны для лечения и предупреждения различных состояний, при которых модуляция уровней бета-амилоида обеспечивает лечебное благоприятное действие. Такие состояния включают, среди прочих, например, амилоидную ангиопатию, амилоидную церебральную ангиопатию, системный амилоидоз, болезнь Альцгеймера (AD), наследственное внутримозговое кровоизлияние с амилоидозом по типу Дутча, миозит телец включения, синдром Дауна, умеренное когнитивное ухудшение (MCI).

Кроме того, соединения формулы (I) можно использовать при получении реагентов, полезных в диагностике состояний, связанных с аномальными уровнями бета-амилоида. Например, соединения формулы (I) можно использовать для получения антител, которые будут полезны в различных диагностических анализах. Способы получения моноклональных, поликлональных, рекомбинантных и синтетических антител или их фрагментов хорошо известны специалистам в данной области. (См., например, E. Mark and Padlin, "Humanization of Monoclonal Antibodies", Chapter 4, The Handbook of Experimental Pharmacology, Vol. 113, The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, Springer-Verlag (June, 1994); способ Kohler and Milstein и многие известные его модификации, заявка на патент РСТ № РСТ/GB85/00392; публикация заявки на патент Великобритании № GB2188638А; Amit et al., Science, 233:747-753 (1986); Queen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86:10029-10033 (1989); публикация международного патента № WO90/07861; и Riechmann et al., Nature, 332:323-327 (1988); Huse et al., Science, 246:1275-1281 (1988).) Альтернативно, соединения формулы (I) сами по себе могут быть использованы в таких диагностических анализах. Независимо от выбранного реагента (например, антител или соединения формулы (I)), подходящие диагностические формы, включающие, например, радиоиммуноанализы и твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA), хорошо известны специалистам в данной области и не являются ограничением такого воплощения изобретения.

Ингибирующая активность в отношении бета-амилоида многих соединений настоящего изобретения определена с использованием анализа на освобождение активатора (Repressor Release Assay (RRA)). См. таблицу 5, ниже. Соединение считается активным в RRA, если оно приводит к, по меньшей мере, 1,5-кратному возрастанию люциферазной активности в концентрации 20 мкг/мл и является нетоксичным.

Кроме того, в данной области хорошо известны клеточные, бесклеточные и in vivo методы скрининга для детекции ингибиторов образования бета-амилоида. Такие анализы, среди прочих, могут включать радиоиммуноанализы и твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA). См., например, P.D. Mehta et al., Techniques in Diagnostic Pathology, vol.2, eds., Bullock et al., Academic Press, Boston, pages 99-112 (1991), публикация Международного патента № WO 98/22493, Европейский патент № 0652009 и патенты США №№ 5703129 и 5592846. Выбор подходящего скрининг-анализа in vitro или in vivo не является ограничением настоящего изобретения.

Фармацевтическая композиция

Фармацевтическую композицию данного изобретения можно вводить субъекту любым желаемым способом с учетом конкретного состояния, для которого она выбрана. Субъектом называют любое подходящее млекопитающее, включая человека, домашних животных (например, собак и кошек) и домашний скот, которое признано как находящееся или имеющее риск возникновения одного или нескольких состояний, для которых желательна модуляция уровней бета-амилоида. Таким образом, соединения изобретения полезны для лечения и/или предупреждения ряда состояний у людей и животных. Используемый в данном описании термин "предупреждение" охватывает предупреждение симптомов у субъекта, который идентифицирован как имеющий риск возникновения состояния, но у которого оно пока не диагностировано и/или у которого пока отсутствуют его симптомы.

Указанные соединения можно доставлять или вводить любым подходящим путем доставки, например, среди прочих, пероральным способом, инъекцией, ингаляцией (включая пероральную, интраназальную и внутритрахеальную), внутривенным, подкожным, внутримышечным, сублингвальным, интракраниальным, эпидуральным, внутритрахеальным, ректальным, вагинальным способом. Наиболее желательно доставлять соединения перорально, путем ингаляции или подходящим парентеральным путем. Соединения можно ввести в композицию в сочетании с обычными фармацевтическими носителями, которые физиологически совместимы. Необязательно, одно или несколько соединений изобретения можно смешивать в другими активными веществами.

Подходящие физиологически совместимые носители может легко выбрать специалист в данной области. Например, подходящие твердые носители включают, среди прочих, одно или несколько веществ, которые также могут действовать как корригенты, смазывающие вещества, солюбилизаторы, суспендирующие агенты, наполнители, глиданты, способствующие прессованию, связующие вещества или вещества, способствующие дезинтеграции таблетки, или инкапсулирующий материал. В порошках носитель представляет собой тонкоизмельченное твердое вещество, которое находится в смеси с тонкоизмельченным активным ингредиентом. В таблетках активный ингредиент смешивают в подходящих пропорциях с носителем, имеющим свойства, необходимые для прессования, и прессуют в нужную форму нужного размера. Порошки и таблетки предпочтительно содержат до 99% активного ингредиента. Подходящие твердые носители включают, например, фосфат кальция или дикальцийфосфат, стеарат магния, тальк, крахмал, сахара (включая, например, лактозу и сахарозу), целлюлозу (включая, например, микрокристаллическую целлюлозу, метилцеллюлозу, натрийкарбоксиметилцеллюлозу), поливинилпирролидон, низкоплавкие воски, ионообменные смолы и каолин.

Жидкие носители можно использовать при получении растворов, суспензий, эмульсий, сиропов и эликсиров. Активный ингредиент по данному изобретению можно растворить или суспендировать в фармацевтически приемлемом жидком носителе, таком как вода, органический растворитель их смесь или фармацевтически приемлемые масла или жир. Жидкий носитель может содержать другие подходящие фармацевтические добавки, такие как солюбилизаторы, эмульгаторы, буферы, суспендирующие вещества, загустители, регуляторы вязкости, стабилизаторы или регуляторы осмоса. Подходящими примерами жидких носителей для перорального и парентерального введения являются вода (в частности, содержащая добавки, указанные выше, например производные целлюлозы, предпочтительно раствор натрийкарбоксиметилцеллюлозы), спирты (включая одноатомные спирты и многоатомные спирты, например гликоли) и их производные и масла (например, фракционированное кокосовое масло, арахисовое масло, кукурузное масло и сезамовое масло). Для парентерального введения носитель также может представлять собой эфир жирной кислоты, такой как этилолеат и изопропилмиристат. Стерильные жидкие носители используют в стерильных жидких композициях для парентерального введения.

Необязательно, в композиции изобретения могут быть включены добавки, обычно используемые при получении фармацевтических композиций. Такие компоненты включают, например, подслащивающие вещества или другие корригенты, красители, консерванты и антиоксиданты, например витамин Е, аскорбиновую кислоту, ВНТ и ВНА.

Жидкие фармацевтические композиции, представляющие собой растворы или суспензии, могут быть введены, например, путем внутримышечной, интраперитонеальной или подкожной инъекции. Стерильные растворы также можно вводить внутривенно. Композиция для перорального введения может быть композицией или в жидкой, или в твердой форме.

Соответственно, когда фармацевтическую композицию получают для применения в виде ингаляции, ее получают в виде жидких стандартных доз с использованием соединения изобретения и фармацевтического носителя, подходящего для доставки с помощью насоса для аэрозольного спрея или в виде сухого порошка для инсуффляции. Для применения в виде аэрозолей соединение изобретения вводят в композицию, которую заключают в аэрозольную упаковку вместе с газообразным или жидким пропеллентом, например дихлордифторметаном, диоксидом углерода, азотом, пропаном и т.п., с обычными компонентами, такими как сорастворители и увлажнители, которые могут быть необходимы или желательны. Например, изобретение обеспечивает доставку отмеряемой дозы для пероральной или интраназальной ингаляции за одно или два срабатывания. Соответственно, доза доставляется за одно или два срабатывания. Однако можно легко определить другие подходящие способы доставки.

Предпочтительно, фармацевтическая композиция находится в стандартной дозированной форме, например в виде таблеток или капсул. В такой форме композиция подразделена на стандартные дозы, содержащие подходящие количества активного ингредиента; стандартные дозированные формы могут представлять собой композиции в упаковке, например упакованные порошки, флаконы, ампулы, предварительно заполненные шприцы или саше, содержащие жидкости. Стандартная дозированная форма может представлять собой, например, капсулу или таблетку как таковую, или она может представлять собой подходящее число любых таких композиций в форме упаковки.

Как описано в данном описании, терапевтически или профилактически полезное количество соединения изобретения представляет собой количество соединения, которое облегчает симптомы заболевания, например, AD или которое предотвращает появление симптомов или появление более тяжелых симптомов. Полезные количества соединения могут изменяться в зависимости от композиции и способа доставки. Например, для того, чтобы доставить биологически эквивалентное количество лекарственного средства, перорально можно доставлять большие количества, чем в случае, когда композиция получена для инъекции или ингаляции. Соответственно, отдельная доза (т.е. на единицу) соединения изобретения составляет интервал от примерно 1 мкг/кг до примерно 10 г/кг. Однако, поскольку соединения изобретения имеют улучшенную биологическую активность по сравнению с подобными соединениями, лишенными трифторалкильных или фтор-заместителей по изобретению, можно выбрать такие подходящие дозы в более узком интервале, например, от примерно 1 мкг/кг до примерно 200 мг/кг, более предпочтительно от примерно 10 мкг/кг до примерно 10 мг/кг и наиболее предпочтительно от примерно 100 мкг/кг до примерно 1 мг/кг. Желательно, чтобы указанные количества предоставлялись как ежесуточные. Однако дозировка, используемая при лечении или предупреждении специфического когнитивного недостатка или другого состояния, может быть установлена избирательно лечащим врачом. Учитываются такие факторы, как специфический когнитивный недостаток и масса, возраст и реакция пациента. Например, на основании профиля активности и действенности соединений данного изобретения начальная доза от примерно 375-500 мг в сутки с постепенным повышением до суточной дозы примерно 1000 мг в сутки может обеспечить нужный уровень дозировки для человека.

Альтернативно, может быть желательно применение устройств с отсроченной доставкой для того, чтобы пациенту избежать необходимости принимать лекарство ежедневно. "Отсроченная доставка" определяется как задержка высвобождения активного вещества, т.е. соединения изобретения, после помещения в область доставки, с последующим пролонгированным высвобождением вещества в более позднее время. Специалистам в данной области известны подходящие устройства для отсроченной доставки. Примеры подходящих устройств для отсроченной доставки включают, среди прочих, например, гидрогели (см., например, патенты США №№ 5266325, 4959217 и 5292515), осмотический насос, такой как описан Alza (патенты США №№ 4295987 и 5173752) или Merk (Европейский патент № 314206); гидрофобные пленочные материалы, такие как этиленметакрилат (ЕМА) и этиленвинилацетат (EVA); способные к биологическому рассасыванию полимерные системы (см., например, публикацию Международного патента № WO 98/44964, Bioxid and Cellomeda; патенты США №№ 5756127 и 5854388); описаны другие способные к биологическому рассасыванию имплантируемые устройства, как состоящие, например, из сложных полиэфиров, полиангидридов или сополимеров молочной кислоты и гликолевой кислоты (см., например, патент США № 5817343 (Alkermes Inc)). Для использования в таких устройствах для отсроченной доставки соединения изобретения могут быть введены в композиции, описанные в данном описании.

В другом аспекте изобретение относится к фармацевтическому набору для доставки продукта. Соответственно, набор содержит упаковку или емкость с соединением, введенным в композицию для желаемого способа доставки. Например, если набор создается для введения ингаляцией, он может содержать суспензию, содержащую соединение изобретения, полученную для доставки в виде аэрозоля или спрея определенной дозы путем ингаляции. Соответственно, набор содержит инструкции по дозированию и вкладыш относительно активного агента. Необязательно, набор также может содержать инструкции для контроля уровней продукта в системе кровообращения и материалы для осуществления таких анализов, включая, например, реагенты, луночные планшеты, емкости, маркеры или метки и т.п. Такие наборы легко упаковываются способом, подходящим для лечения по нужному показанию. Например, набор также может содержать инструкции по применению распылительного насоса или другого устройства для доставки.

Другие подходящие компоненты для таких наборов будут очевидны для специалиста в данной области, с учетом нужного показания и способа доставки. Дозы могут повторяться ежесуточно, еженедельно или ежемесячно, в предварительно установленные промежутки времени или как прописано.

Примеры

Следующие примеры приводятся для иллюстрации получения и активности характерных представителей соединений изобретения и для иллюстрации их эффективности в скрининг-анализе. Специалисту в данной области будет понятно, что хотя в приведенных примерах указываются определенные реагенты и условия, указанные реагенты и условия не являются ограничением настоящего изобретения.

Пример 1

5-Хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид

А. Способ 1

1. 2-Метил-4,4,4-трифторбутаналь

К 2-метил-4,4,4-трифтор-1-бутанолу (7,5 г, 53 ммоль) в метиленхлориде (CH₂Cl₂) (125 мл) при 0°С добавляют периодинан Десса-Мартина (26,5 г, 63,3 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 25°С и перемешивают в течение 20 мин. К полученной смеси добавляют диэтиловый эфир (Et₂O, 200 мл) и затем раствор Na₂S₂O₃ (20,0 г, 185 ммоль) в насыщенном водном растворе бикарбоната натрия (NaHCO₃) (200 мл) и 100 мл воды. Молочно-белую смесь перемешивают до тех пор, пока обе фазы не станут гомогенными. Фазы разделяют и органический экстракт промывают насыщенном водным раствором NaHCO₃ (25 мл) и водным 1 н. раствором Na₂S₂O₃ (25 мл) и сушат с использованием сульфата магния (MgSO₄). Растворители удаляют перегонкой при атмосферном давлении, получая 2-метил-4,4,4-трифторбутанальдегид (6,5 г, 88%). Спектр ¹Н ядерного магнитного резонанса (ЯМР) соответствует спектру, о котором сообщается в литературе (J. Fluorine Chem., 36:163-170 (1987)).

2. 5-(3,3,3-Трифтор-1-метилпропил)имидазолидин-2,4-дион

К цианиду натрия (18,4 г, 375 ммоль) и карбонату аммония (39,0 г, 500 ммоль) в Н₂О (450 мл) добавляют 2-метил-4,4,4-трифторбутанальдегид (17,5 г, 125 ммоль) в этаноле (450 мл). Реакционную смесь нагревают при 90°С в течение 17 час. После охлаждения до 25°С примерно 500 мл растворителя удаляют в вакууме. Добавляют концентрированную HCl для подкисления смеси до рН от примерно 1 до примерно 2, и выпадает осадок. Смесь фильтруют и промывают 1 н. хлористоводородной кислотой, получая 5-(3,3,3-трифтор-1-метилпропил)имидазолидин-2,4-дион в виде белого твердого вещества (15,5 г, 59%).

Масс-спектр (-ESI): 309 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₇H₉F₃N₂O₂: С, 40,01; Н, 4,32; N, 13,33.

Найдено: С, 39,91; Н, 4,10; N, 13,20.

3. N-[(5-Хлортиен-2-ил)сульфонил]-5,5,5-трифторизолейцин

5-(3,3,3-Трифтор-1-метилпропил)имидазолидин-2,4-дион (15,54 г, 73,95 ммоль) растворяют в 150 мл водного раствора гидроксида натрия (NaOH, 11,83 г, 295,8 ммоль). Раствор нагревают микроволновым облучением в герметично закрытом сосуде в течение 1 часа (условия микроволнового облучения: 15 мин при примерно 100% мощности, 150°С, 50 ф/д², затем 5 мин при 0% мощности, затем 15 мин при примерно 100% мощности, 150°С, 50 ф/д², затем последовательность повторяют). Воду и гидроксид аммония удаляют из реакционной смеси в вакууме и полученную смесь неочищенной аминокислоты и NaOH используют в следующей реакции без дополнительной очистки.

Смесь неочищенной аминокислоты и NaOH растворяют в 300 мл воды. Смесь охлаждают до примерно 0°С на ледяной бане. 5-Хлортиофен-2-сульфонилхлорид (17,6 г, 81 ммоль) растворяют в 100 мл тетрагидрофурана (ТГФ) и добавляют по каплям к реакционной смеси в течение 0,5 час. После постепенного нагревания реакционной смеси в течение 1 часа до 25°С и перемешивания в течение 16 час удаляют ТГФ в вакууме и затем смесь подкисляют до рН примерно 1 1 н. хлористоводородной кислотой. Примерно через 15 мин из молочно-белой смеси начинает выпадать осадок. Через 1 час смесь охлаждают до 0°С в течение 1 часа и затем фильтруют. Осадок промывают 1 н. хлористоводородной кислотой, получая N-[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]-5,5,5-трифторизолейцин в виде белого твердого вещества (15,2 г, 56%).

Масс-спектр (-ESI): 364 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₀H₁₁F₃NO₄S₂: С, 32,84; Н, 3,03; N, 3,83.

Найдено: С, 32,45; Н, 2,94; N, 3,79.

4. 5-Хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид

К N-[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]-5,5,5-трифторизолейцину (15,2 г, 41,6 ммоль) в ТГФ (500 мл) при 0°С добавляют по каплям 1М раствор боран-тетрагидрофуранового комплекса в ТГФ (208 мл, 208 ммоль). Через 15 мин реакционную смесь нагревают до 25°С и перемешивают в течение 18 час. Затем реакцию постепенно гасят 10% раствором АсОН в МеОН (100 мл). Летучие вещества удаляют в вакууме. Затем остаток растворяют в этилацетате (EtOAc) (500 мл), раствор промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ (3×100 мл), сушат с использованием сульфата натрия (Na₂SO₄) и концентрируют до белого твердого вещества (13,3 г, выход 91%). Диастереомеры разделяют методом ВЭЖХ (колонка с силикагелем Luna, МТВЕ-гексан 3:7, диастереомер 1 элюируется при 10,9 мин, диастереомер 2 элюируется при 15,3 мин). Диастереомер 2 расщепляют на чистые энантиомеры препаративной хиральной SFC [chiralpack AD, изопропанол-диоксид углерода 3:7, энантиомер 1 элюируется при 4,5 мин, энантиомер 2 элюируется при 5,6 мин]. Затем энантиомер 1 перекристаллизовывают из смеси EtOAc/гептан, 1:4, получая 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид, т.пл. 136-137°С.

[α]_D ²⁵=+45,62° (с=1% раствор, МеОН).

Масс-спектр (-ESI): 350 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₀H₁₃ClF₃NO₃S₂: С, 34,14; Н, 3,72; N, 3,98.

Найдено: С, 34,12; Н, 3,45; N, 3,88.

В. Способ 2

1. (4R)-4-Бензил-3-(4,4,4-трифторбутаноил)-1,3-оксазолидин-2-он

К раствору 4,4,4-тритформасляной кислоты (10,00 г, 70,38 ммоль) в ТГФ (150 мл) при -78°С добавляют триэтиламин (10,3 мл, 73,9 ммоль) и пивалоилхлорид (9,1 мл, 74 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 0°С и перемешивают в течение 1,5 час. В отдельной колбе раствор н-BuLi (31 мл, 2,5М в гексане, 77 ммоль) добавляют в течение 10 мин к охлажденному до -78°С раствору (R)-(+)-4-бензил-2-оксазолидинона (13,7 г, 77,4 ммоль) в ТГФ (150 мл) и смесь перемешивают в течение 1 часа.

Густую взвесь смешанного ангидрида охлаждают до -78°С и выливают через капельную воронку в раствор литированного оксазолидинона. Смесь оставляют постепенно нагреваться до 25°С на ночь. Затем смесь разбавляют EtOAc (500 мл) и промывают 1 н. хлористоводородной кислотой (500 мл), насыщенным водным раствором NaHCO₃ (500 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (500 мл), затем сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Флэш-хроматография (элюент EtOAc-гексан, 1:4) дает (4R)-4-бензил-3-(4,4,4-трифторбутаноил)-1,3-оксазолидин-2-он (18,29 г, 86%) в виде бесцветного масла.

[α]_D ²⁵=-89,10° (с=1% раствор, ДМСО).

Масс-спектр (-ESI): 300 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₄H₁₄F₃NO₃: С, 55,82; Н, 4,68; N, 4,65.

Найдено: С, 56,03; Н, 4,67; N, 4,62.

2. (4R)-4-Бензил-3-[(2R)-4,4,4-трифтор-2-метилбутаноил]-1,3-оксазолидин-2-он

К раствору бис(триметилсилил)амида натрия (57 мл, 1,0М в ТГФ, 57 ммоль) в ТГФ (250 мл) при -40°С добавляют по каплям в течение 15 мин раствор (4R)-4-бензил-3-(4,4,4-трифторбутаноил)-1,3-оксазолидин-2-она (15,60 г, 51,78 ммоль) в ТГФ (250 мл). Через 1 час добавляют иодметан (4,2 мл, 67 ммоль). Через 3 часа реакционную смесь нагревают до -20°С в течение примерно 20 мин. Смесь гасят насыщенным водным раствором хлорида аммония (NH₄Cl) (300 мл) и затем экстрагируют EtOAc (2×300 мл), сушат с использованием Na₂SO₄ и концентрируют. Флэш-хроматография (элюент EtOAc-гексан, 1:9) дает (4R)-4-бензил-3-[(2R)-4,4,4-трифтор-2-метилбутаноил]-1,3-оксазолидин-2-он (12,04 г, 74%) в виде бесцветного масла.

[α]_D ²⁵=-98,68° (с=1% раствор, ДМСО).

Масс-спектр (+EI): 315 (М+Н)⁺.

Анализ.

Вычислено для C₁₅H₁₆F₃NO₃: С, 57,14; Н, 5,11; N, 4,44.

Найдено: С, 57,18; Н, 5,24; N, 4,38.

3. (2R)-4,4,4-Трифтор-2-метилбутан-1-ол

Раствор боргидрида лития (23 мл, 2,0М в ТГФ, 45 ммоль) при 0°С добавляют по каплям к раствору (4R)-4-бензил-3-[(2R)-4,4,4-трифтор-2-метилбутаноил]-1,3-оксазолидин-2-она (12,9 г, 40,9 ммоль) и воды (810 мкл, 45,0 ммоль) в диэтиловом эфире (200 мл). Реакционной смеси дают нагреться до 25°С, через 1 час охлаждают до 0°С и гасят водным 1 н. раствором NaOH (124 мл). Смесь нагревают до 25°С и перемешивают до тех пор, пока оба слоя не станут гомогенными. Слои разделяют, органический экстракт промывают рассолом, сушат с использованием MgSO₄ и концентрируют. Флэш-хроматография (элюент эфир-петролейный эфир, 3:7) дает (2R)-4,4,4-трифтор-2-метилбутан-1-ол (5,05 г, 87%) в виде бесцветного масла. Спектр ¹Н ЯМР идентичен спектру, описанному в литературе (J. Med. Chem., 37:1282-1297 (1994)).

4. (S)-N-[(3R)-Метил-4,4,4-трифторбутилиден]-п-толуолсульфинамид

К (2R)-4,4,4-трифтор-2-метилбутан-1-олу (2,90 г, 20,4 ммоль) в CH₂Cl₂ (50 мл) при 0°С добавляют периодинан Десса-Мартина (10,24 г, 24,49 ммоль). Через 15 мин реакционную смесь нагревают до 25°С и перемешивают в течение 1 часа. Затем полученную смесь разбавляют диэтиловым эфиром (50 мл) и добавляют к раствору Na₂S₂O₃ (11,29 г, 71,44 ммоль) в насыщенном водном растворе NaHCO₃ (100 мл). Молочно-белую смесь перемешивают до тех пор, пока оба слоя не станут гомогенными. Фазы разделяют, органический экстракт сушат (MgSO₄) и фильтруют, получая раствор (2R)-4,4,4-трифтор-2-метилбутаналя, который используют на следующей стадии без удаления растворителей.

К раствору неочищенного альдегида добавляют этоксид титана (IV) (15 мл, 20% Ti, 82 ммоль), затем (S)-(+)-толуолсульфинамид (3,48 г, 22,4 ммоль) и раствор кипятят с обратным холодильником в течение 3 час. Затем смесь охлаждают до 0°С и добавляют воду (75 мл) для осаживания солей титана. Суспензию фильтруют через реагент целит® и остаток на фильтре промывают CH₂Cl₂. Слои фильтрата разделяют и водный слой экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические экстракты сушат с использованием Na₂SO₄ и концентрируют. Флэш-хроматография (элюент EtOAc-гексан, 1:9) дает (S)-N-[(3R)-метил-4,4,4-трифторбутилиден]-п-толуолсульфинамид (3,03 г, 54%) в виде желтого масла. Масс-спектр (-ESI): 276 (М-Н)^-.

5. N-[(1S,2R)-1-Циано-4,4,4-трифтор-2-метилбутил]-4-метилбензолсульфинамид

К цианиду диэтилалюминия (16 мл, 1,0М в толуоле, 16 ммоль) в ТГФ (40 мл) при 0°С добавляют изопропанол (изо-PrOH) (840 мкл, 11,0 ммоль). Через 15 мин полученный раствор добавляют к раствору (S)-N-[(3R)-метил-4,4,4-трифторбутилиден]-п-толуолсульфинамида (3,03 г, 10,9 ммоль) в ТГФ (60 мл), охлажденному до -78°С. Через 15 мин реакционную смесь нагревают до 25°С. Через 1 час тонкослойная хроматография (ТСХ, EtOAc-гексан, 1:9) показывает, исходное вещество израсходовано. Смесь охлаждают до -78°С и добавляют насыщенный водный раствор хлорида аммония (100 мл). Полученную суспензию фильтруют через реагент целит® и остаток на фильтре промывают EtOAc (100 мл). Слои фильтрата разделяют и водный слой экстрагируют EtOAc. Объединенные органические экстракты сушат с использованием Na₂SO₄ и концентрируют. Неочищенная смесь, которая, согласно ¹Н ЯМР, представляет собой смесь диастереомеров 1:3, осаждают смесью диэтиловый эфир/гексан и собирают продукт. Две дополнительные порции продукта получают, повторяя процедуру осаждения с концентрированным фильтратом. N-[(1S,2R)-1-Циано-4,4,4-трифтор-2-метилбутил]-4-метилбензолсульфинамид (2,34 г, 70%) получают в виде отдельного диастереомера.

[α]_D ²⁵=+35,46° (с=1% раствор, CHCl₃).

Масс-спектр (+ESI): 305 (М+Н)⁺.

Анализ.

Вычислено для C₁₃H₁₅F₃N₂OS: С, 51,31; Н, 4,97; N, 9,20.

Найдено: С, 51,16; Н, 4,96; N, 9,08.

6. Гидрохлорид 5,5,5-трифтор-L-аллоизолейцина

Суспензию N-[(1S,2R)-1-циано-4,4,4-трифтор-2-метилбутил]-4-метилбензолсульфинамида (2,34 г, 7,69 ммоль) в концентрированной хлористоводородной кислоте (75 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 18,5 час. После охлаждения до 25°С реакционную смесь несколько раз промывают диэтиловым эфиром. Водный слой концентрируют, получая смесь 5,5,5-трифтор-L-аллоизолейцина, NH₄Cl и толуолсульфоновой кислоты (2,35 г). Неочищенную аминокислоту используют на следующей стадии без дополнительной очистки. Масс-спектр (-ESI): 309 (M-H)^-.

7. (2S,3R)-2-Амино-5,5,5-трифтор-3-метилпентан-1-ол

К раствору боргидрида лития (7,7 мл, 2,0н в ТГФ, 15 ммоль) в ТГФ (20 мл) при 0°С добавляют хлортриметилсилан (3,9 мл, 31 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 25°С и через 30 мин добавляют по каплям к суспензии неочищенного гидрохлорида аминокислоты (7,7 ммоль) в ТГФ (60 мл), охлажденной до 0°С. Смесь нагревают до 25°С и через 21 час гасят метанолом (МеОН). Летучие вещества удаляют в вакууме, получая остаток, который растворяют в примерно 50 мл водного 1 н. раствора NaOH, экстрагируют хлороформом (CHCl₃) (4×75 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют, получая (2S,3R)-2-амино-5,5,5-трифтор-3-метилпентан-1-ол, в виде желтого масла (1,07 г, 81%). Масс-спектр (+ESI): 172 (M+H)⁺.

8. 5-Хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид

К (2S,3R)-2-амино-5,5,5-трифтор-3-метилпентан-1-олу (1,07 г, 6,25 ммоль) и триэтиламину (0,87 мл, 6,2 ммоль) в CH₂Cl₂ (15 мл) при 0°С добавляют по каплям раствор 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорида (1,34 г, 6,25 ммоль) в CH₂Cl₂ (15 мл). Реакционную смесь нагревают до 25°С и перемешивают в течение 24 час. Затем ее разбавляют EtOAc (100 мл) и промывают 0,1 н. водной хлористоводородной кислотой (50 мл) и рассолом (50 мл). Водный слой экстрагируют EtOAc (50 мл). Объединенные органические экстракты сушат с использованием Na₂SO₄ и концентрируют. Флэш-хроматография (элюент EtOAc-гексан, 3:7) дает 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид (1,66 г, 75%) в виде белого твердого вещества. Перекристаллизация (EtOAc-гептан, 1:4) дает белые иглы (1,39 г, выход 84%), т.пл. 136-137°С.

Анализ.

Найдено: С, 34,24; Н, 3,97; N, 3,87.

С. Способ 3

1. (4S)-4-Бензил-3-(бромацетил)-1,3-оксазолидин-2-он

К раствору S-(-)-4-бензил-2-оксазолидинона (20,0 г, 112,86 ммоль) в ТГФ (200 мл) при -78°С добавляют по каплям 2,5М раствор н-BuLi в гексане (47,4 мл, 118,51 ммоль). Раствор перемешивают при -78°С в течение 30 мин и затем добавляют бромацетилбромид (25,0 г, 10,81 мл, 124,15 ммоль). Раствор оставляют нагреваться до 25°С на ночь (19 час). Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Смесь разбавляют этилацетатом (200 мл) и органический слой промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ (2×50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное коричневое масло (34 г). Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией, элюент EtOAc-гексан, 1:4, получая (4S)-4-бензил-3-(бромацетил)-1,3-оксазолидин-2-он в виде бесцветного масла (33,2 г, 98,6%). Масс-спектр (-ESI): 297 (М-Н)^-.

2. Диметил-2-[(4S)-4-бензил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]-2-оксоэтилфосфонат

(4S)-4-Бензил-3-(бромацетил)-1,3-оксазолидин-2-он (33,0 г, 110,68 ммоль) и триэтилфосфин (39,2 мл, 33,2 ммоль) нагревают при 120°С в течение 18 час. Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Реакционную смесь охлаждают до 25°С, разбавляют этилацетатом (200 мл) и органический слой промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ (2×50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая диметил-2-[(4S)-4-бензил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]-2-оксоэтилфосфонат в виде неочищенного желтого масла (36 г, 99,3%). Масс-спектр (-ESI): 326 (М-Н)^-.

3. (4S)-4-Бензил-3-[(2E)-5,5,5-трифторпент-2-еноил]-1,3-оксазолидин-2-он

К раствору диметил-2-[(4S)-4-бензил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]-2-оксоэтилфосфоната (36 г, 109,97 ммоль) в ТГФ (200 мл) при -78°С добавляют KHMDS (0,5 М, 242 мл, 120,97 ммоль). Раствор оставляют нагреваться до 25°С на 30 мин и при -20°С добавляют 3,3,3-трифторпропиональдегид (13,55 г, 120,97 ммоль). Раствор оставляют нагреваться до 25°С на ночь (19 час). Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Реакцию гасят, добавляя насыщенный водный раствор NaHCO₃ (50 мл). Водный слой промывают этилацетатом (3×100 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая светло-коричневое масло (32,1 г). Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая (4S)-4-бензил-3-[(2E)-5,5,5-трифторпент-2-еноил]-1,3-оксазолидин-2-он в виде бесцветного масла (17,7 г, 55,1%).

Масс-спектр (-ESI): 312 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₅H₁₄NF₃O₃: С, 57,51; Н, 4,50; N, 4,47.

Найдено: С, 57,05; Н, 4,75; N, 4,52.

4. (4S)-4-Бензил-3-[(3S)-5,5,5-трифтор-3-метилпентаноил]-1,3-оксазолидин-2-он

Взвесь комплекса бромид меди (I)-диметилсульфид (9,45 г, 45,96 ммоль) в ТГФ (200 мл) и диметилсульфиде (100 мл) как сорастворителе охлаждают до -40°С и добавляют по каплям в течение 10 мин метилмагнийбромид (30,64 мл, 91,93 ммоль). Суспензию перемешивают в течение 40 мин, нагревая до -15°С. Зеленоватую суспензию охлаждают до -40°С и при -40°С добавляют по каплям раствор (4S)-4-бензил-3-[(2E)-5,5,5-трифторпент-2-еноил]-1,3-оксазолидин-2-она (12 г, 38,30 ммоль)в ТГФ (15 мл). Реакционную смесь оставляют нагреваться до 25°С на ночь (18 час). Реакцию гасят насыщенным водным раствором NH₄Cl (20 мл). Образуется осадок. Его отфильтровывают, маточную жидкость разбавляют EtOAc (250 мл) и органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (NaCl, 100 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное полутвердое вещество. Неочищенное полутвердое вещество не растворяется в CH₂Cl₂, MeOH и EtOAc и частично растворяется в диметилсульфоксиде (ДМСО). Неочищенный продукт обрабатывают 1 н. HCl (100 мл) и водный слой промывают EtOAc (2×150 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая желтое масло (12,1 г). Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией, элюент EtOAc-гексан, 1:4, получая (4S)-4-бензил-3-[(3S)-5,5,5-трифтор-3-метилпентаноил]-1,3-оксазолидин-2-он в виде бесцветного масла (8,2 г, 67,8%).

Масс-спектр (+ESI): 330 (М+Н)⁺.

Анализ.

Вычислено для C₁₆H₁₈NF₃O₃: С, 58,36; Н, 5,51; N, 4,25.

Найдено: С, 58,36; Н, 5,70; N, 4,19.

5. (S)-3-[(2S,3R)-2-Азидо-5,5,5-трифтор-3-метилпентаноил]-4-бензил-1,3-оксазолидин-2-он

Раствор (4S)-4-бензил-3-[(3S)-5,5,5-трифтор-3-метилпентаноил]-1,3-оксазолидин-2-она (8,2 г, 24,90 ммоль) в ТГФ (100 мл) охлаждают до -78^оС и добавляют по каплям в течение 10 мин KHMDS (калийгексаметилдисилазан, 59,7 мл, 29,88 ммоль). После перемешивания при -78°С в течение 1 часа через канюлю добавляют в течение 10 мин предварительно охлажденный (-78°С, 50 мин) раствор 2,4,6-триизопропилбензолсульфонилазида (10,1 г, 32,37 ммоль). После дополнительной 10-минутной выдержки при -78°С через воронку добавляют в один прием ледяную уксусную кислоту (6,7 мл, 112,05 ммоль). После 5-минутной выдержки при -78°С добавляют безводный ацетат калия (9,77 г, 99,6 ммоль). Баню для -78°С убирают и реакционную смесь оставляют нагреваться до 25°С на ночь (19 час). Реакционную смесь разбавляют EtOAc (200 мл) и органическую фазу промывают насыщенным водным раствором одноосновного фосфата калия (2×100 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (100 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая желтое масло (9,5 г). Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией, элюент EtOAc-гексан, 1:4, получая (S)-3-[(2S,3R)-2-азидо-5,5,5-трифтор-3-метилпентаноил]-4-бензил-1,3-оксазолидин-2-он в виде бесцветного масла (7,2 г, 73,7%).

Масс-спектр (-ESI): 342 (М-N₂)^-.

6. (2S,3R)-2-Азидо-5,5,5-трифтор-3-метилпентановая кислота

К раствору (S)-3-[(2S,3R)-2-азидо-5,5,5-трифтор-3-метилпентаноил]-4-бензил-1,3-оксазолидин-2-она (7,2 г, 19,44 ммоль) в ТГФ:Н₂О (3:1, 120 мл) в атмосфере N₂ при 0°С добавляют моногидрат гидроксида лития (LiOH) (1,63 г, 38,88 ммоль). Реакцию контролируют методом ТСХ (EtOAc/гексан, 1:2). Через 3 часа добавляют твердый NaHCO₃ (6,0 г). Суспензию разбавляют насыщенным водным раствором NaHCO₃ (20 мл) и Н₂О (40 мл) и экстрагируют EtOAc (3×100 мл). Органический слой экстрагируют насыщенным водным раствором NaHCO₃ (20 мл). EtOAc содержит вспомогательное хиральное вещество, и его отбрасывают. Объединенные слои NaHCO₃ подкисляют до рН менее 2. Подкисленный водный слой экстрагируют EtOAc (3×100 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая (2S,3R)-2-азидо-5,5,5-трифтор-3-метилпентановую кислоту в виде желтого масла (3,2 г, 98%). Масс-спектр (-ESI): 183 (М-N₂)^-.

7. 5,5,5-Трифтор-L-аллоизолейцин

(2S,3R)-2-Азидо-5,5,5-трифтор-3-метилпентановую кислоту (3,2 г, 17,27 ммоль), 10% палладий-на-углероде (0,79 г), ледяную уксусную кислоту (37 мл) и воду (90 мл) помещают в гидрогенизатор Парра в атмосфере водорода (40 ф/д²) и встряхивают. Через 20 час реакционную смесь фильтруют через слой целита®, который тщательно был промыт водой (20 мл). Фильтрат концентрируют при пониженном давлении, получая белое твердое вещество. Твердое вещество растирают с EtOAc (200 мл), отфильтровывают и еще раз промывают EtOAc (200 мл), затем сушат на воздухе, получая 5,5,5-трифтор-L-аллоизолейцин в виде белого твердого вещества (2,7 г, 96%). Масс-спектр (-ESI): 184 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₆H₁₀NF₃O₂+0,12HCl: С, 38,13; Н, 5,50; N, 6,94.

Найдено: С, 38,03; Н, 5,38; N, 7,39.

8. (2S,3R)-2-Амино-5,5,5-трифтор-3-метилпентан-1-ол

К раствору боргидрида лития (14,5 мл 2М раствора в ТГФ, 29 ммоль) при перемешивании при 0°С добавляют по каплям в течение 30 мин хлортриметилсилан (7,38 мл, 58 ммоль). Ледяную баню убирают и полученную суспензию перемешивают при 25°С в течение 30 мин. Реакционную смесь охлаждают до 0°С и добавляют по частям в течение 15 мин 5,5,5-трифтор-L-аллоизолейцин (2,7 г, 16,98 ммоль) в виде твердого вещества. Реакционную смесь оставляют нагреваться до 25°С на бане с тающим льдом. После 3-суточной выдержки при 25°С реакционную смесь охлаждают до 0°С и осторожно в течение 30 мин добавляют метанол (22 мл). Раствор перемешивают при 25°С еще в течение 40 мин и затем концентрируют при пониженном давлении на водяной бане при 60°С. Полученную взвесь подщелачивают 20% раствором гидроксида натрия (10 мл). Добавляют воду (10 мл) и весь водный слой экстрагируют метиленхлоридом (100 мл) и экстракт сушат над MgSO₄. Органическую фазу фильтруют и упаривают, получая (2S,3R)-2-амино-5,5,5-трифтор-3-метилпентан-1-ол в виде неочищенного масла (2,6 г, 89,6%). Масс-спектр (-ESI): 170 (М-Н)^-.

9. 5-Хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид

К раствору (2S,3R)-2-амино-5,5,5-трифтор-3-метилпентан-1-ола (2,6 г, 15,18 ммоль) и триэтиламина (4,2 мл, 30,38 ммоль) в метиленхлориде (50 мл), охлажденному до 0°С, при перемешивании добавляют по каплям раствор 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорида (4,8 г, 18,22 ммоль) в метиленхлориде (5 мл). Через 15 мин ледяную баню убирают и реакционную смесь оставляют достигать 25°С на ночь. Реакцию гасят, выливая в насыщенный раствор бикарбоната натрия (25 мл) и добавляя метиленхлорид (150 мл). Органическую фазу отделяют, последовательно промывают 1 н. водной хлористоводородной кислотой, Н₂О и рассолом и сушат над MgSO₄. Органическую фазу фильтруют и упаривают, получая неочищенное масло (6,1 г), которое очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента смесь этилацетат-гексан, 1:6. Получают указанное в заголовке соединение 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого аморфного твердого вещества (5,15 г, 96,4%). Продукт содержит примеси. Белое аморфное твердое вещество дополнительно очищают перекристаллизацией из смеси EtOAc-гептан, 1:4. Смесь растворителей добавляют к 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамиду, нагревают для получения раствора, оставляют охлаждаться до 25°С на 3 часа и затем хранят при 0°С в течение 19 часов. Выпавшее в осадок белое кристаллическое вещество отфильтровывают, промывают охлажденным на льду гептаном, получая белое кристаллическое твердое вещество (2,7 г, 40,9%). Перекристаллизованное вещество все еще содержит примеси. Белое твердое вещество (2,7 г) дополнительно очищают препаративной хиральной ВЭЖХ [SFC, AD, 25×0,46 см; подвижная фаза гексан-изо-PrOH, 8:2 (1 мл/мин)], получая 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого кристаллического твердого вещества, т.пл. 132-133°С (0,93 г, 14,1%, хиральная чистота 100%, аналитическая чистота 100%).

Масс-спектр (-ESI): 350 (M-H)^-.

Анализ.

Найдено: С, 34,44; Н, 3,70; N, 3,74.

При сравнительном исследовании соединения данного примера и подобного соединения, не содержащего трифторметильные группы и отличающегося стереохимией относительно центра С-2, но идентичного в других отношениях, соединение данного примера демонстрирует существенно более длительную метаболическую стабильность (период полувыведения ~193 минуты против 12,7 минут) в анализе метаболизма фазы I на микросомах печени крысы.

При сравнительном исследовании соединения данного примера и соответствующего аналога, лишенного трифторметильных групп, соединение данного примера демонстрирует существенно большую метаболическую стабильность в анализе фазы 1 и 2 метаболизма на микросомах печени крысы (период полувыведения 14 мин против 2 мин), мыши (период полувыведения 10 мин против 2 мин), человека (период полувыведения 22 мин против 13 мин) и собаки (31 мин против 4 мин).

Таким образом, соединение изобретения остается в кровотоке более длительное время, чем его соответствующие аналоги без CF₃, причем возрастает его биологическая доступность.

Пример 2

5-Хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид

А. Способ 1

1. (4S)-4-Бензил-3-[(3S)-3-этил-5,5,5-трифторпентаноил]-1,3-оксазолидин-2-он

Взвесь комплекса бромид меди (I)-диметилсульфид (1,26 г, 6,13 ммоль) в ТГФ (20 мл) и диметилсульфиде (10 мл) как сорастворителе охлаждают до -40°С и добавляют по каплям в течение 10 мин этилмагнийбромид (3М раствор в диэтиловом эфире, 4,08 мл, 12,26 ммоль). Взвесь перемешивают в течение 40 мин, нагревая ее до -15°С. Зеленоватую взвесь охлаждают до -40°С и при -40°С добавляют по каплям раствор (4S)-4-бензил-3-[(2E)-5,5,5-трифторпент-2-еноил]-1,3-оксазолидин-2-она (полученного, как в примере 1, способ 3, часть С) (1,6 г, 5,10 ммоль) в ТГФ (5 мл). Реакционную смесь оставляют нагреваться до 25°С на ночь (18 час). Реакцию гасят насыщенным водным раствором NH₄Cl (20 мл). Образуется осадок, который отфильтровывают. Маточную жидкость разбавляют EtOAc (250 мл) и органический экстракт промывают насыщенным водным раствором NaCl (100 мл). Органический экстракт сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное полутвердое вещество. Неочищенное полутвердое вещество не растворяется в CH₂Cl₂, MeOH или EtOAc, но частично растворяется в ДМСО. Неочищенный продукт обрабатывают 1 н. HCl (100 мл) и водный раствор промывают EtOAc (2×150 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая желтое масло (1,41 г). Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией, элюент EtOAc-гексан, 1:4, получая (4S)-4-бензил-3-[(3S)-3-этил-5,5,5-трифторпентаноил]-1,3-оксазолидин-2-он в виде бесцветного масла (0,96 г, 55%).

Масс-спектр (+ESI): 344 (М+Н)⁺.

Анализ.

Вычислено для C₁₇H₂₀NF₃O₃: С, 59,47; Н, 5,87; N, 4,08.

Найдено: С, 59,58; Н, 5,91; N, 4,03.

2. (S)-3-[(2S,3R)-2-Азидо-3-этил-5,5,5-трифторпентаноил]-4-бензил-1,3-оксазолидин-2-он

К раствору (4S)-4-бензил-3-[(3S)-3-этил-5,5,5-трифторпентаноил]-1,3-оксазолидин-2-она (0,9 г, 2,62 ммоль) в ТГФ (10 мл), охлажденному до -78°С, добавляют по каплям в течение 10 мин KHMDS (0,5М раствор в толуоле, 6,3 мл, 3,14 ммоль). После перемешивания при -78°С в течение 1 часа через канюлю добавляют в течение 10 мин предварительно охлажденный (-78°С, 50 мин) раствор 2,4,6-триизопропилбензолсульфонилазида (1,04 г, 3,38 ммоль) в 20 мл ТГФ. После дополнительной 10-минутной выдержки при -78°С через воронку добавляют в один прием ледяную уксусную кислоту (0,7 мл, 11,79 ммоль). После 5-минутной выдержки при -78°С добавляют безводный ацетат калия (1,07 г, 10,48 ммоль). Баню для -78^оС убирают и реакционную смесь оставляют нагреваться до 25°С на ночь (19 час). Реакционную смесь разбавляют EtOAc (200 мл) и промывают насыщенным водным раствором одноосновного фосфата калия (2×100 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (100 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая желтое масло (1,09 г). Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией, элюент EtOAc-гексан, 1:4, получая (S)-3-[(2S,3R)-2-азидо-3-этил-5,5,5-трифторпентаноил]-4-бензил-1,3-оксазолидин-2-он в виде бесцветного масла (0,587 г, 59%). Масс-спектр (-ESI): 357 (М-N₂)^-.

3. (2S,3R)-2-Азидо-3-этил-5,5,5-трифторпентановая кислота

К раствору (S)-3-[(2S,3R)-2-азидо-3-этил-5,5,5-трифторпентаноил]-4-бензил-1,3-оксазолидин-2-она (287 мг, 0,746 ммоль) в ТГФ:Н₂О (3:1, 4 мл) в атмосфере N₂ при 0°С добавляют моногидрат LiOH (62,66 мг, 1,49 ммоль). Реакцию контролируют методом ТСХ (EtOAc/гексан, 1:2). Через 3 часа добавляют твердый NaHCO₃ (1,0 г). Взвесь разбавляют насыщенным водным раствором NaHCO₃ (2 мл) и Н₂О (4 мл) и экстрагируют EtOAc (3×50 мл). Органический слой экстрагируют насыщенным водным раствором NaHCO₃ (10 мл). EtOAc содержит вспомогательное хиральное вещество, и его отбрасывают. Объединенные водные экстракты подкисляют до рН менее 2, экстрагируют EtOAc (3×50 мл), экстракт сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая (2S,3R)-2-азидо-3-этил-5,5,5-трифторпентановую кислоту в виде желтого масла (130 мг, 94%).

Масс-спектр (-ESI): 197 (М-N₂)^-.

4. (2S,3R)-2-Амино-3-этил-5,5,5-трифторпентан-1-ол

К серой взвеси алюмогидрида лития (LAH, 110,6 мг, 2,91 ммоль) в ТГФ (2 мл) при 0°С добавляют по каплям в течение 5 мин (2S,3R)-2-азидо-3-этил-5,5,5-трифторпентановую кислоту (130 мг, 0,583 ммоль). Полученную взвесь оставляют нагреваться до 25°С на 19 час. Реакцию гасят, добавляя последовательно при 0°С Н₂О (0,5 мл), 1 н. раствор NaOH (1,5 мл) и Н₂О (0,5 мл). Белый осадок, образовавшийся через 5 час, отфильтровывают, органический растворитель сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая (2S,3R)-2-амино-3-этил-5,5,5-трифторпентан-1-ол в виде неочищенного масла (120 мг, 96%). Масс-спектр (+ESI): 186 (М+Н)⁺.

5. 5-Хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид

К раствору (2S,3R)-2-амино-3-этил-5,5,5-трифторпентан-1-ола (120 мг, 0,701 ммоль) и триэтиламина (0,1 мл, 1,4 ммоль) в метиленхлориде (50 мл), охлажденному до 0°С, при перемешивании добавляют по каплям раствор 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорида (220 мг, 0,841 ммоль) в метиленхлориде (5 мл). Через 15 мин ледяную баню убирают и реакционную смесь оставляют достигать 25°С на ночь. Дополнительно добавляют метиленхлорид (15 мл) и реакционную смесь выливают в насыщенный раствор бикарбоната натрия (25 мл). Органическую фазу отделяют и последовательно промывают 1 н. хлористоводородной кислотой, Н₂О и рассолом и сушат над MgSO₄. Органическую фазу фильтруют и упаривают, получая неочищенное масло (0,36 г), которое очищают флэш-хроматографией с использованием в качестве элюента смеси этилацетат-гексан, 1:4. Получают указанное в заголовке соединение 5-хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид в виде масла (125 мг, 53%). Масло (125 мг) дополнительно очищают препаративной хиральной ВЭЖХ [SFC, AD, 25×0,46 см; подвижная фаза гексан-ipa, 8:2 (1 мл/мин)], получая 5-хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого кристаллического твердого вещества (0,15 г, 6,4%, хиральная чистота 100%, аналитическая чистота 100%).

Масс-спектр (-ESI): 364 (M-H)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₁H₁₅NClF₃O₃S₂+0,24С₄Н₈О₂: С, 37,50; Н, 4,08; N, 3,73.

Найдено: С, 37,12; Н, 4,41; N, 3,62.

В. Способ 2

1. 2-Этил-4,4,4-трифтормасляная кислота

Раствор диизопропиламина (17,1 г, 169 ммоль) в ТГФ (180 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют по каплям в течение 15 мин 2,5М раствор н-бутиллития (н-BuLi, 67,6 мл) в гексане и полученный раствор перемешивают в течение 0,5 час при 0°С. По окончании указанного периода реакционную смесь охлаждают до -78°С и в течение 0,5 час добавляют по каплям раствор 4,4,4-трифтормасляной кислоты (10,0 г, 70,4 ммоль) в ТГФ (20 мл). Полученный раствор дополнительно перемешивают в течение 0,5 час при -78°С. По окончании указанного периода добавляют по каплям в течение 15 мин этилиодид (6,19 мл, 77,4 ммоль). Полученный раствор перемешивают в течение 15 мин при -78°С и затем нагревают до 25°С в течение 24 час. По окончании указанного периода реакционную смесь гасят, добавляя постепенно Н₂О (~20 мл). После концентрирования остаток подкисляют до рН 1 2 н. хлористоводородной кислотой и затем экстрагируют Et₂O (400 мл). Затем органический слой сушат с использованием MgSO₄. После концентрирования полученный остаток используют непосредственно в следующей реакции без дополнительной очистки.

2. 2-Этил-4,4,4-трифторбутанол

Раствор LAH (2,74 г, 72,3 ммоль) в Et₂O (230 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют по каплям раствор 2-этил-4,4,4-трифтормасляной кислоты (12,3 г, 72,3 ммоль) в Et₂O (20 мл), раствор перемешивают в течение 15 мин при 0°С и затем 2 часа при 25°С. По окончании указанного периода раствор гасят, добавляя по каплям Н₂О (2,74 мл), 15% раствор NaOH (2,74 мл) и Н₂О (8,22 мл) при энергичном перемешивании. Добавляют твердый Na₂SO₄ для того, чтобы осушить растворитель, и полученную смесь перемешивают в течение 1 часа. Полученную взвесь фильтруют и остаток на фильтре промывают избытком Et₂O. После концентрирования неочищенный продукт очищают на хроматографе Biotage Flash^ТМ 40, элюент Et₂O:РЕ от 20:80 до 30:70, получая 2-этил-4,4,4-трифторбутанол в виде масла (6,18 г, выход 55% для двух стадий).

3. 2-Этил-4,4,4-трифтормасляный альдегид

Раствор 2-этил-4,4,4-трифторбутанола (6,18 г, 39,6 ммоль) в CH₂Cl₂ (50 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют в один прием реагент Десса-Мартина периодинан (20,16 г, 47,5 ммоль) и раствор перемешивают в течение 1 часа при 0°С. После дополнительного перемешивания в течение 5 час при 25°С реакция завершается, по данным ЯМР. Раствор разбавляют Et₂O (100 мл) и к полученному раствору добавляют Na₂S₂O₃ (55 г) в насыщенном водном растворе NaHCO₃ (100 мл). Полученную смесь перемешивают в течение 0,5 час. Слои жидкостей разделяют, органический слой дополнительно промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ (50 мл) и рассолом (50 мл) и затем сушат с использованием Na₂SO₄. Большую часть растворителя удаляют перегонкой с использованием колонки Вигре (колбу нагревают при температуре от примерно 50 до примерно 55°С, и температура насадки составляет примерно 38°С). Полученный остаток в реакционной колбе используют непосредственно в следующей реакции без дополнительной очистки (альдегид очень летучий).

4. 5-(1-Этил-3,3,3-трифторпропил)имидазолидин-2,4-дион

Раствор неочищенного 2-этил-4,4,4-трифтормасляного альдегида (6,10 г, 39,6 ммоль) в Н₂О (100 мл) перемешивают при 0°С. К полученному раствору добавляют цианид натрия (5,82 г, 119 ммоль), карбонат аммония (15,2 г, 158 ммоль) и EtOH (100 мл). Реакционную смесь нагревают при 90°С в течение 3 суток. После охлаждения до 25°С и концентрирования полученный остаток подкисляют до рН от примерно 1 до примерно 2 концентрированной HCl. Образовавшееся твердое вещество отфильтровывают, промывают 2 н. HCl и избытком Н₂О и затем сушат в течение ночи с вакуумным насосом, получая 5-(1-этил-3,3,3-трифторпропил)имидазолидин-2,4-дион (2,74 г, выход 31% для двух стадий). Масс-спектр (+ESI): 225 (M+H)⁺ и (-ESI): 223 (М-Н)^-.

5. 2-[(5'-Хлор-2'-тиенил)сульфониламино]-3-этил-5,5,5-трифторпентановая кислота

Раствор 5-(1-этил-3,3,3-трифторпропил)имидазолидин-2,4-диона (1,76 г, 7,85 ммоль) в 20 мл водного раствора NaOH (1,26 г, 31,4 ммоль) нагревают микроволновым облучением в герметично закрытом флаконе в течение 0,5 час (условия микроволнового облучения: 15 мин при примерно 100% мощности, 150°С, 50 ф/д²; затем 5 мин при 0% мощности; затем 15 мин при примерно 100% мощности, 150°С, 50 ф/д²). После охлаждения до 25°С воду и аммиак удаляют из реакционной смеси в вакууме и полученную неочищенную смесь натриевой соли аминокислоты растворяют в Н₂О (15 мл). К полученному раствору при 0°С добавляют ТГФ (25 мл) и затем добавляют по каплям раствор 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорида (1,87 г, 8,64 ммоль) в ТГФ (5 мл). После выдержки в течение 18 час при 25°С реакционную смесь концентрируют и остаток подкисляют до рН 1 2 н. хлористоводородной кислотой. Полученный водный слой экстрагируют Et₂O (2×100 мл) и полученный органический слой промывают рассолом (20 мл) и сушат с использованием MgSO₄. После концентрирования неочищенный остаток перекристаллизовывают из смеси EtOAc:гексан для удаления побочных продуктов. Концентрирование фильтрата дает продукт в виде твердого вещества (1,31 г, 44%). Масс-спектр (+ESI): 380 (M+H)⁺ и (-ESI): 378 (М-Н)^-.

6. 5'-Хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2'-сульфонамид

Раствор 2-[(5'-хлор-2'-тиенил)сульфониламино]-3-этил-5,5,5-трифторпентановой кислоты (2,19 г, 5,77 ммоль) в ТГФ (60 мл) перемешивают в атмосфере азота при 25°С. Добавляют по каплям 1,0М раствор комплекса боран·ТГФ в ТГФ (23,1 мл) и полученный раствор перемешивают в течение 18 час при 25°С. По окончании указанного периода реакция завершается, по данным ТСХ (МеОН:CHCl₃, 10:90). Реакционную смесь гасят, добавляя постепенно 10% уксусную кислоту (НОАс) в МеОН (80 мл). После концентрирования остаток растворяют в EtOAc (200 мл), промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ (3×20 мл) и рассолом (20 мл) и затем раствор сушат с использованием Na₂SO₄. После концентрирования неочищенный продукт (2,20 г) очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc:РЕ от 20:80 до 30:70, получая одну из двух пар рацемических смесей (0,623 г). Затем полученное соединение очищают дополнительно с использованием условий хиральной ВЭЖХ (колонка с Chiracel^ТМ AD; 25×2,2 см, 254 нм впрыски 0,5 мл; подвижная фаза: 25 мл/мин, 12% MeCN в гексане; продукт соответствует пику один, R_f=6,7, чистота >99,9%), получая энантиомерно чистый 5'-хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2'-сульфонамид в виде белого твердого вещества, т.пл. 128-129°С (0,238 г, выход 45% для конкретного энантиомера).

Масс-спектр (-ESI): 364 (M-H)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₁H₁₅ClF₃NO₃S₂: С, 36,12; Н, 4,13; N, 3,83.

Найдено: С, 36,22; Н, 4,20; N, 3,78.

Пример 3

5'-Хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(1-гидроксиэтил)бутил]тиофен-2'-сульфонамид

А. 5'-Хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(формил)бутил]тиофен-2'-сульфонамид

Раствор 5'-хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2'-сульфонамида (полученного, как в примере 2, 0,100 г, 0,273 ммоль) в CH₂Cl₂ (4 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют в один прием реагент Десса-Мартина периодинан (0,151 г, 0,355 ммоль) и раствор перемешивают в течение 1 часа при 0°С. После дополнительного перемешивания в течение 1 часа при 25°С реакция завершается, по данным ТСХ (EtOAc:PE, 30:70). Раствор разбавляют Et₂O (50 мл) и к полученному раствору добавляют Na₂S₂O₃ (0,363 г) в насыщенном водном растворе NaHCO₃ (10 мл). Полученную смесь перемешивают в течение 0,5 час. Слои жидкостей разделяют, органический слой дополнительно промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ (5 мл) и рассолом (5 мл) и затем сушат (Na₂SO₄). После концентрирования неочищенный продукт очищают препаративной хроматографией на пластинах, элюент EtOAc:PE, 30:70, получая 5'-хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(формил)бутил]тиофен-2'-сульфонамид в виде твердого вещества (0,036 г, 36%).

В. 5'-Хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(1-гидроксиэтил)бутил]тиофен-2'-сульфонамид

Раствор 5'-хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(формил)бутил]тиофен-2'-сульфонамида (0,035 г, 0,0962 ммоль) в ТГФ (3 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют по каплям 1,4М раствор (0,206 мл) метилмагнийбромида в смеси толуол:ТГФ и полученный раствор перемешивают в течение 1 часа при 25°С. По окончании указанного периода реакция завершается, по данным ТСХ (EtOAc:PE, 30:70). Раствор гасят насыщенным водным раствором NH₄Cl (2 мл) и экстрагируют Et₂O (20 мл). Органический слой промывают рассолом (3 мл) и затем сушат с использованием Na₂SO₄. После концентрирования неочищенный продукт очищают препаративной хроматографией на пластинах, элюент EtOAc:PE, 30:70, получая 5'-хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(1-гидроксиэтил)бутил]тиофен-2'-сульфонамид в виде не совсем белого твердого вещества (0,027 г, 73%).

Масс-спектр (-ESI): 378 (M-H)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₂H₁₇ClF₃NO₃S₂: С, 37,94; Н, 4,51; N, 3,69.

Найдено: С, 38,35; Н, 4,32; N, 3,29.

Пример 4

5'-Хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропил]тиофен-2'-сульфонамид

А. 3,3,3-Трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропиламин

Раствор 4,4,4,4',4',4'-гексафтор-DL-валина (0,500 г, 2,22 ммоль) в ТГФ (20 мл) перемешивают в атмосфере азота при 25°С. Добавляют по каплям 1,0М раствор комплекса боран·ТГФ в ТГФ (6,66 мл) и полученный раствор перемешивают в течение 4 час при 25°С. По окончании указанного периода реакция завершается, по данным ТСХ (EtOAc:EtOH:H₂O, 10:2:1). Реакционную смесь гасят, добавляя постепенно 10% НОАс в МеОН (23 мл). После концентрирования остаток растворяют в Et₂O (200 мл), промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ (3×20 мл) и рассолом (20 мл) и затем сушат с использованием Na₂SO₄. После концентрирования полученный остаток используют непосредственно в следующей реакции без дополнительной очистки.

В. 5'-Хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропил]тиофен-2'-сульфонамид

Раствор 3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропиламина (0,400 г, 1,89 ммоль) в CH₂Cl₂ (20 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют по каплям триэтиламин (Et₃N, 0,369 мл, 2,65 ммоль), затем в один прием 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорид (0,492 г, 2,27 ммоль) и полученный раствор перемешивают в течение 18 час при 25°С. По окончании указанного периода реакция завершается, по данным ТСХ (EtOAc:РЕ, 30:70). После гашения МеОН и концентрирования остаток растворяют в Et₂O (200 мл), промывают 1 н. водной хлористоводородной кислотой (20 мл), насыщенным водным раствором NaHCO₃ (20 мл) и рассолом (20 мл) и затем сушат (MgSO₄). После концентрирования неочищенный продукт (2,20 г) очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc:РЕ от 10:90 до 30:70, получая 5'-хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропил]тиофен-2'-сульфонамид в виде не совсем белого твердого вещества (0,108 г, выход 14% для двух стадий, рацемическая смесь).

Масс-спектр (-ESI): 390 (M-H)^-.

Анализ.

Вычислено для C₉H₈ClF₆NO₃S₂: С, 27,59; Н, 2,06; N, 3,58.

Найдено: С, 28,24; Н, 1,90; N, 3,48.

Пример 5

5'-Хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-S-(гидроксиметил)пропил]тиофен-2'-сульфонамид

А. Метил-2-амино-3-(трифторметил)-4,4,4-трифторбутаноат

Раствор 4,4,4,4',4',4'-гексафтор-DL-валина (2,00 г, 8,89 ммоль) в смеси CH₂Cl₂:MeOH (4:1, 50 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют по каплям 2,0М раствор тетраметилсилана (TMS)-диазометана в гексане (5,33 мл) и полученный раствор перемешивают в течение 3 час при 25°С. По окончании указанного периода реакция завершается, по данным ТСХ (10% МеОН:хлороформ). После концентрирования полученный остаток используют непосредственно в следующей реакции без дополнительной очистки.

В. Метил-2-[(5'-хлор-2'-тиенил)сульфониламино]-3-трифторметил-4,4,4-трифторбутаноат

Раствор метил-2-амино-3-(трифторметил)-4,4,4-трифторбутаноата (1,34 г, 5,60 ммоль) в CH₂Cl₂ (10 мл) перемешивают в атмосфере азота при 25°С. Добавляют по каплям пиридин (10 мл, 126 ммоль), затем в один прием 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорид (1,82 г, 8,40 ммоль) и полученный раствор перемешивают в течение 72 час при 25°С. По окончании указанного периода реакция завершается, по данным ТСХ (EtOAc:РЕ, 20:80). После гашения Н₂О смесь разбавляют Et₂O (200 мл). Органический слой промывают 1 н. водной хлористоводородной кислотой (20 мл), насыщенным водным раствором NaHCO₃ (20 мл) и рассолом (20 мл) и затем сушат (MgSO₄). После концентрирования неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc:РЕ от 5:95 до 25:75, получая метил-2-[(5'-хлор-2'-тиенил)сульфониламино]-3-трифторметил-4,4,4-трифторбутаноат в виде твердого вещества (1,61 г, 69%). Масс-спектр (-ESI): 418 (M-H)^-.

С. 5'-Хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-S-(гидроксиметил)пропил]тиофен-2'-сульфонамид

Взвесь LAH (0,146 г, 3,84 ммоль) в Et₂O (17 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. К полученной смеси добавляют по каплям раствор метил-2-[(5'-хлор-2'-тиенил)сульфониламино]-3-трифторметил-4,4,4-трифторбутаноата (1,61 г, 3,84 мл) в Et₂O (3 мл). После перемешивания при указанной температуре в течение 0,25 час реакция завершается, по данным ТСХ (EtOAc:РЕ, 30:70). Полученную смесь (при энергичном перемешивании) гасят, добавляя по каплям Н₂О (0,146 мл), 15% водный раствор NaOH (0,146 мл) и Н₂О (0,438 мл), и затем дополнительно перемешивают в течение 2 час при 25°С. Полученную взвесь сушат (Na₂SO₄) и затем фильтруют. После концентрирования неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc:РЕ от 5:95 до 40:60, получая 5'-хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропил]тиофен-2'-сульфонамид в виде твердого вещества (0,590 г, 39%, рацемическая смесь). Затем выделяют активный энантиомер 5'-хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-S-(гидроксиметил)пропил]тиофен-2'-сульфонамид (0,185 г) в виде не совсем белого твердого вещества (т.пл. 148-150°С), используя хиральную ВЭЖХ (колонка с Chiralpak® AS; 2×25 см, 254 нм, впрыски по 0,5 мл; подвижная фаза: 15 мл/мин, 8% IPA в смеси гексан/0,1% ТФК (примесь); продукт соответствует пику два, R_f=12,3, чистота 98,5%).

Масс-спектр (-ESI): 389,9 (M-H)^-.

Анализ.

Вычислено для С₉Н₈ClF₆NO₃S₂: С, 27,59; Н, 2,06: N, 3,58.

Найдено: С, 27,76; Н, 1,96; N, 3,47.

При сравнительном исследовании соединения данного примера и подобного соединения, лишенного трифторметильных групп, но идентичного в других отношениях, соединение данного примера демонстрирует существенно более высокую эффективность (примерно от 72 часов до примерно 133 часов) в клеточном анализе и существенно более продолжительную метаболическую стабильность (период полувыведения 46 мин против 10 мин в анализе метаболизма на микросомах печени трансгенной мыши (Tg2576)). Таким образом, соединение изобретения можно использовать в более низких дозах, чем соответствующие соединения, лишенные трифторметильных групп.

Пример 6

5-Хлор-N-[(1R,2S)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид

А. (4R)-4-Бензил-3-(бромацетил)-1,3-оксазолидин-2-он

К раствору R-(-)-4-бензил-2-оксазолидинона (15,0 г, 84,65 ммоль) в ТГФ (200 мл) при -78°С добавляют по каплям 2,5М раствор н-BuLi в гексане (34 мл, 84,65 ммоль). Раствор перемешивают при -78°С в течение 30 мин и затем добавляют бромацетилбромид (18,65 г, 7,8 мл, 124,15 ммоль). Раствор оставляют нагреваться до 25°С на ночь (19 час). Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Смесь разбавляют этилацетатом (200 мл) и органический слой промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ (2×50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное коричневое масло (24,6 г). Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией, элюент EtOAc-гексан, 1:4, получая (4R)-4-бензил-3-(бромацетил)-1,3-оксазолидин-2-он в виде бесцветного масла (19,9 г, 79,6%). Масс-спектр (+ESI): 300, 299 (М+Н)⁺.

В. Диэтил-2-[(4R)-4-бензил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]-2-оксоэтилфосфонат

(4R)-4-Бензил-3-(бромацетил)-1,3-оксазолидин-2-он (19,7 г, 66,07 ммоль) и триэтилфосфит (33,99 мл, 198,2 ммоль) нагревают при 120°С в течение 18 час. Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Реакционную смесь охлаждают до 25°С и разбавляют этилацетатом (200 мл). Органический слой промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ (2×50 мл), слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая диэтил-2-[(4R)-4-бензил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]-2-оксоэтилфосфонат в виде неочищенного желтого масла (14,27 г, 60,77%). Масс-спектр (-ESI): 326 (М-Н)^-.

С. (4R)-4-Бензил-3-[(2E)-5,5,5-трифторпент-2-еноил]-1,3-оксазолидин-2-он

К раствору диэтил-2-[(4R)-4-бензил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3-ил]-2-оксоэтилфосфоната (14,27 г, 40,17 ммоль) в ТГФ (200 мл) при -78°С добавляют KHMDS (0,5 М, 88 мл, 44,63 ммоль). Раствор нагревают до 25°С в течение 30 мин и при -20°С добавляют 3,3,3-трифторпропиональдегид (5,0 г, 44,63 ммоль). Раствор оставляют нагреваться до 25°С на ночь (19 час). Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Реакцию гасят, добавляя насыщенный водный раствор NaHCO₃ (50 мл). Водный слой промывают этилацетатом (3×100 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая светло-коричневое масло (32,1 г). Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая (4R)-4-бензил-3-[(2E)-5,5,5-трифторпент-2-еноил]-1,3-оксазолидин-2-он в виде бесцветного масла (3,7 г, 29,4%).

Масс-спектр (+ESI): 314 (М+Н)⁺.

Анализ.

Вычислено для C₁₅H₁₄NF₃O₃+0,25Н₂О: С, 56,70; Н, 4,60; N, 4,41.

Найдено: С, 56,44; Н, 4,49; N, 4,41.

D. (4R)-4-Бензил-3-[(2R,3S)-2-бром-3-этил-5,5,5-трифторпентаноил]-1,3-оксазолидин-2-он

Взвесь комплекса бромид меди (I)-диметилсульфид (1,57 г, 7,66 ммоль) в ТГФ (20 мл) и диметилсульфиде (10 мл) как сорастворителе охлаждают до -40°С и добавляют по каплям в течение 10 мин метилмагнийбромид (5 мл, 15,3 ммоль). Взвесь перемешивают в течение 40 мин, нагревая до -15°С. Зеленоватую взвесь охлаждают до -40°С и при -40°С добавляют по каплям раствор (4R)-4-бензил-3-[(2E)-5,5,5-трифторпент-2-еноил]-1,3-оксазолидин-2-она (2 г, 6,38 ммоль) в ТГФ (5 мл). Реакционную смесь оставляют нагреваться до 25°С на ночь (20 час). Черную взвесь охлаждают до -78°С и добавляют по частям N-бромсукцинимид (2,3 г, 12,76 ммоль). Смесь нагревают до -40°С и дополнительно перемешивают в течение 30 мин. По окончании указанного периода черная взвесь приобретает цвет от зеленоватого до синего. Образуется осадок, который отфильтровывают. Маточную жидкость разбавляют EtOAc (150 мл) и органический слой промывают насыщенным раствором NaCl (50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая (4R)-4-бензил-3-[(2R,3S)-2-бром-3-этил-5,5,5-трифторпентаноил]-1,3-оксазолидин-2-он в виде зеленого полутвердого вещества (1,6 г, 59,58%). Масс-спектр (-ESI): 421, 420 (М-Н)^-.

Е. (4R)-3-[(2S,3S)-2-Азидо-3-этил-5,5,5-трифторпентаноил]-4-бензил-1,3-оксазолидин-2-он

К раствору (4R)-4-бензил-3-[(2R,3S)-2-бром-3-этил-5,5,5-трифторпентаноил]-1,3-оксазолидин-2-она (1,6 г, 3,79 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляют азид натрия (0,468 г, 7,119 ммоль). Взвесь перемешивают при 25°С в течение 20 час и удаляют растворитель в вакууме. Неочищенный продукт растворяют в EtOAc (100 мл) и органический слой промывают Н₂О (3×20 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (20 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая желтое масло (1,4 г). Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией, элюент EtOAc-гексан, 1:4, получая (4R)-3-[(2S,3S)-2-азидо-3-этил-5,5,5-трифторпентаноил]-4-бензил-1,3-оксазолидин-2-он в виде бесцветного масла (1,21 г, 83,2%). Масс-спектр (-ESI): 357 (М-N₂)^-, 380, 381.

F. (2S,3S)-2-Амино-3-этил-5,5,5-трифторпентан-1-ол

К серой взвеси LAH (100 мг, 2,65 ммоль) в ТГФ (3 мл) при -10°С добавляют по каплям в течение 5 мин раствор (4R)-3-[(2S,3S)-2-азидо-3-этил-5,5,5-трифторпентаноил]-4-бензил-1,3-оксазолидин-2-она (300 мг, 0,78 ммоль) в ТГФ (2 мл). Полученную взвесь оставляют нагреваться до 25°С на 19 час. Реакцию гасят, добавляя последовательно при 0°С Н₂О (0,3 мл), 1 н. раствор NaOH (0,9 мл) и Н₂О (0,3 мл). Осадок, образовавшийся через 5 час, отфильтровывают. Маточную жидкость сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая (2S,3S)-2-амино-3-этил-5,5,5-трифторпентан-1-ол в виде светло-желтого масла (145 мг, 98%). Масс-спектр (-ESI): 184 (М-Н)^-.

G. 5-Хлор-N-[(1S,2S)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид

К раствору (2S,3S)-2-амино-3-этил-5,5,5-трифторпентан-1-ола (145 мг, 0,78 ммоль) и триэтиламина (0,22 мл, 1,56 ммоль) в метиленхлориде (5 мл), охлажденному до 0°С, при перемешивании добавляют по каплям раствор 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорида (225 мг, 0,861 ммоль) в метиленхлориде (5 мл). Через 15 мин ледяную баню убирают и реакционную смесь оставляют достигать 25°С на ночь. Дополнительно добавляют метиленхлорид (15 мл) и реакцию гасят, выливая смесь в насыщенный раствор бикарбоната натрия (25 мл). Органическую фазу отделяют и последовательно промывают 1 н. водной хлористоводородной кислотой, Н₂О и рассолом и сушат над MgSO₄. Органическую фазу фильтруют и упаривают, получая неочищенное масло (0,250 г), которое очищают флэш-хроматографией, элюент этилацетат-гексан, 1:6. Получают указанное в заголовке соединение 5-хлор-N-[(1S,2S)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид в виде масла (140 мг, 53,8%). Неочищенное масло дополнительно очищают перекристаллизацией из смеси EtOAc-гептан, 1:4. Систему смешанного растворителя добавляют к 5-хлор-N-[(1S,2S)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамиду, нагревают для получения раствора, оставляют охлаждаться до 25°С на 3 часа и затем хранят при 0°С в течение 19 часов. Выпавшее в осадок белое кристаллическое вещество отфильтровывают, промывают охлажденным на льду гептаном, получая 5-хлор-N-[(1S,2S)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого кристаллического твердого вещества (50 мг, 19,2%, хиральная чистота 91%, аналитическая чистота 100%).

Масс-спектр (-ESI): 364 (M-H)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₁H₁₅NClF₃O₃S₂+0,10С₄Н₈О₂: С, 36,55; Н, 4,25; N, 3,74.

Найдено: С, 36,94; Н, 4,15; N, 3,57.

Пример 7

5-Хлор-N-[4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид

А. 4,4,4-Трифторбутаналь

К раствору этил-4,4,4-трифторбутаноата (5 г, 29,38 ммоль) в CH₂Cl₂ (50 мл) в атмосфере N₂ при -70°С добавляют диизобутилалюмогидрид (35 мл, 35,26 ммоль). Через 6 час добавляют 1 н. HCl (6 мл), после нагревания до -60°С реакционную смесь выливают в Н₂О (5 мл) и экстрагируют CH₂Cl₂ (2×50 мл). Объединенные органические экстракты промывают Н₂О (2×10 мл). Органические экстракты сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая 4,4,4-трифторбутанальдегид в виде бесцветного невязкого масла (3,7 г, 100%).

В. 5-(3,3,3-Трифторпропил)имидазолидин-2,4-дион

Цианид натрия (4,31 г, 88,04 ммоль) и 4,4,4-трифторбутанальдегид (3,7 г, 29,34 ммоль) добавляют к карбонату аммония (9,1 г, 117,4 ммоль) в Н₂О (60 мл). Черную реакционную смесь нагревают до 90°С. Через 1 час смесь становится гомогенной, и перемешивают при 90°С в течение 18 час. После охлаждения до 25°С примерно 60 мл растворителя удаляют в вакууме. Добавляют концентрированную HCl (4 мл) для подкисления смеси до рН примерно 2, и образуется осадок. Его отфильтровывают. Маточную жидкость промывают EtOAc (3×50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая 5-(3,3,3-трифторпропил)имидазолидин-2,4-дион в виде коричневого масла (3,95 г, 69,7%). Масс-спектр (-ESI): 195 (М-Н)^-.

С. 5,5,5-Трифторнорвалин

5-(3,3,3-Трифторпропил)имидазолидин-2,4-дион (0,9 г, 4,59 ммоль) растворяют в 10 мл водного раствора NaOH (0,734 г в 10 мл Н₂О, 18,35 ммоль). Раствор распределяют в два специальных сосуда для микроволновой технологии. Раствор нагревают микроволновым облучением: в герметично закрытых сосудах в течение 1 часа. Условия микроволнового облучения: 15 мин при примерно 100% мощности, 150°С, 50 ф/д², затем 5 мин перерыв, мощность 0%. Последовательность операций повторяют дважды или до тех пор, пока не произойдет реакция. Воду и аммиак удаляют из реакционной смеси в вакууме и полученную смесь неочищенного 5,5,5-трифторнорвалина (1,1 г, 140%) и NaOH используют в следующей реакции без дополнительной очистки. Масс-спектр (+ESI): 172 (М+Н)⁺.

D. N-[(5-Хлортиен-2-ил)сульфонил]-5,5,5-трифторнорвалин

К смеси неочищенного 5,5,5-трифторнорвалина (0,785 г, 4,59 ммоль) и NaOH, растворенной в ТГФ (10 мл) и 2 н. растворе NaOH (10 мл), добавляют по каплям в течение 30 мин раствор 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорида (1,32 г, 5,04 ммоль) в ТГФ (10 мл). Через 60 мин реакционную смесь постепенно нагревают до 25°С и перемешивают в течение 16 час. ТГФ удаляют в вакууме и смесь подкисляют до рН примерно 2 1 н. HCl. Через 15 мин из молочно-белого раствора начинает выпадать осадок. Через 60 мин смесь охлаждают до 0°С в течение 45 мин и затем фильтруют. Выпавший осадок промывают 1 н. HCl (10 мл), получая белое твердое вещество. Белое твердое вещество отделяют от фильтра. Его растворяют в EtOAc (100 мл). Водный слой промывают EtOAc (3×50 мл) и органические слои промывают насыщенным водным раствором NaCl (50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая N-[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]-5,5,5-трифторнорвалин в виде темно-красного масла (1,1 г, 68,3%). Масс-спектр (-ESI): 350 (М-Н)^-.

Е. 5-Хлор-N-[4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид

К раствору N-[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]-5,5,5-трифторнорвалина (1,0 г, 2,84 ммоль) в ТГФ (10 мл) при 0°С в течение 30 мин добавляют по каплям комплекс боран-ТГФ (1М раствор, 15 мл, 14,21 ммоль). Реакционную смесь оставляют нагреваться до 25°С на 18 час и затем гасят реакцию, добавляя 50 мл 10% уксусной кислоты в метаноле. После выпаривания растворителя неочищенный продукт растворяют в EtOAc и раствор промывают 1 н. HCl, Н₂О и насыщенным раствором NaHCO₃. Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное масло (0,83 г), которое очищают флэш-хроматографией, элюент этилацетат-гексан, 1:6. Получают указанное в заголовке соединение 5-хлор-N-[4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид (0,46 г, 48%) в виде бесцветного масла. Масс-спектр (-ESI): 337 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₁H₁₅NClF₃O₃S₂+0,30С₄Н₈О₂: С, 33,64; Н, 3,71; N, 3,85.

Найдено: С, 34,01; Н, 3,65; N, 3,67.

Примеры 8 и 9

5-Хлор-N-{(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-[(1S)-1-гидроксиэтил]-2-метилбутил}тиофен-2-сульфонамид

и

5-хлор-N-{(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-[(1R)-1-гидроксиэтил]-2-метилбутил}тиофен-2-сульфонамид

К 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамиду (полученному так, как описано в примере 1, 290 мг, 0,824 ммоль) в CH₂Cl₂ (15 мл) при 0°С добавляют реагент Десса-Мартина периодинан (410 мг, 0,989 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 25°С. Через 10 мин ТСХ (EtOAc:гексан, 3:7) показывает наличие исходного вещества. Дополнительно добавляют периодинан Десса-Мартина (410 мг, 0,989 ммоль), и через 15 мин ТСХ показывает, что исходное вещество израсходовано. Добавляют диэтиловый эфир (30 мл), затем водный 1 н. раствор Na₂S₂O₃ (25 мл) и насыщенный водный раствор NaHCO₃ (25 мл). Молочно-белый раствор энергично перемешивают до тех пор, пока обе фазы не станут гомогенными. Слои разделяют и водную фазу экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные органические экстракты сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Флэш-хроматография (элюент EtOAc:гексан, 3:7) дает 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(формил-2-метилбутил)]тиофен-2-сульфонамид (100 мг, 35%) в виде белого твердого вещества.

К 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(формил-2-метилбутил)]тиофен-2-сульфонамиду (100 мг, 0,286 ммоль) в ТГФ (3 мл) при 0°С добавляют по каплям раствор (1,4М, 0,61 мл) метилмагнийбромида в смеси ТГФ/толуол (0,86 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 25°С и перемешивают в течение 3 час. Затем реакцию гасят насыщенным водным раствором хлорида аммония, смесь экстрагируют EtOAc (2×40 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Флэш-хроматография (элюент EtOAc:гексан, 3:7) дает 5-хлор-N-{(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-[1-гидроксиэтил]-2-метилбутил}тиофен-2-сульфонамид (75 мг, 74%) в виде смеси диастереомеров 3:1. Диастереомеры разделяют ВЭЖХ (колонка с силикагелем Zorbax® 25×5 см, элюент метил-трет-бутиловый эфир (МТВЕ)-гексан, 3:2, диастереомер 1 элюируется при 11,4 мин, диастереомер 2 элюируется при 14,1 мин).

Диастереомер 1: масс-спектр (-ESI): 364 (M-H)^-.

Диастереомер 2: масс-спектр (-ESI): 364 (M-H)^-.

Пример 10

5-Хлор-N-[(1S,2S)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид

А. Гидрохлорид 5,5,5-трифтор-L-изолейцина

К гидрохлоридной соли (S)-(-)-α-метилбензиламина (0,340 г, 2,16 ммоль) в 20 мл смеси МеОН/Н₂О, 1:1, добавляют цианид калия (0,139 г, 2,13 ммоль) и (2S)-4,4,4-трифтор-2-метилбутанол (0,300 г, 2,14 ммоль, получен по методике, описанной в примере 1, способ 2, но с использованием в качестве вспомогательного хирального вещества (S)-(-)-4-бензил-2-оксазолидинона) и реакционную смесь перемешивают в течение 17 час. Метанол удаляют в вакууме и продукт экстрагируют EtOAc. Органический экстракт промывают 0,1 н. водной хлористоводородной кислотой, сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Флэш-хроматография (элюент EtOAc:гексан, 1:9) дает α-аминонитрил (0,224 г, 39%) в виде желтого масла. ¹Н ЯМР показывает, что продукт представляет собой смесь диастереомеров 3:1.

К смеси диастереомеров (0,224 г, 0,829 ммоль) добавляют серную кислоту (3 мл) и раствор перемешивают в течение 22 час. Затем реакционную смесь выливают на измельченный лед (~10 г). Добавляют для нейтрализации кислоты концентрированный водный раствор гидроксида аммония. Полученную смесь экстрагируют EtOAc, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют, получая в результате амид (0,224 г, 94%), который используют на следующей стадии без дополнительной очистки.

Смесь амида (0,224 г, 0,777 ммоль) и 5% палладия/С (Pd/C, 40 мг) встряхивают в течение 2 суток в аппарате Парра при давлении водорода (Н₂) 3 атм. Смесь фильтруют через слой целита® и удаляют растворитель в вакууме, получая итоговый амин в виде белого твердого вещества (128 мг, 90%), который используют на следующей стадии без дополнительной очистки.

Амин (128 мг, 0,695 ммоль) в концентрированной хлористоводородной кислоте (3 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 24 час. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и концентрируют, получая смесь гидрохлоридной соли аминокислоты (соотношение диастереомеров 3:1) и 1 эквивалента хлорида аммония в виде белого твердого вещества (183 мг, 95%). Масс-спектр (+ESI): 186 (М+Н)⁺.

В. (2S,3S)-2-Амино-5,5,5-трифтор-3-метилпентан-1-ол

К раствору боргидрида лития (1,0 мл, 2,0н в ТГФ, 2,0 ммоль) в ТГФ (5 мл) при 0°С добавляют хлортриметилсилан (0,51 мл, 4,01 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 25°С и через 30 мин к суспензии, охлажденной до 0°С, добавляют по каплям неочищенную гидрохлоридную соль аминокислоты (184 мг, 0,669 ммоль) в ТГФ (5 мл). Смесь нагревают до 25°С и через 21 час реакцию гасят МеОН. Летучие вещества удаляют в вакууме и полученный остаток растворяют в водном 1 н. растворе NaOH, экстрагируют CHCl₃ (4×20 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют, получая аминоспирт в виде желтого масла (92 мг, 81%), который, согласно его спектрам ¹Н ЯМР, представляет собой смесь диастереомеров 3:1. Масс-спектр (+ESI): 172 (M+H)⁺.

С. 5-Хлор-N-[(1S,2S)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид

К аминоспирту (168 мг, 0,981 ммоль) в CH₂Cl₂ (10 мл) добавляют триэтиламин (170 мкл, 1,20 ммоль) и 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорид (256 мг, 1,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 25°С в течение 21 часа. Раствор разбавляют EtOAc (50 мл), дважды промывают 0,1 н. HCl, сушат и концентрируют. Тщательное удаление примесей и несущественного диастереомера флэш-хроматографией (элюент EtOAc-гексан, 3:7) дает 5-хлор-N-[(1S,2S)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид (97 мг, 28%) в виде белого твердого вещества, т.пл. 99-100°С. ВЭЖХ (колонка с силикагелем Zorbax®, элюент МТВЕ-гексан, 3:2) показывает смесь диастереомеров 97:3. Хиральная ВЭЖХ (колонка AD, элюент изопропанол-гексан, 1:9) показывает энантиомерную чистоту >99%.

[α]_D ²⁵=+8,95° (с=1% раствор, МеОН).

Масс-спектр (-ESI): 350 (М-Н)^-.

Анализ.

Найдено: С, 34,43; Н, 3,70; N, 3,91.

Пример 11

(2S,3S)-2-(5-Хлор-3-метилбензо[b]тиофен-2-сульфонил)амидо-5,5,5-трифтор-3-этилпентан-1-ол

А. (R)-4-Бензил-3-(2-R-бром-3-S-этил-5,5,5-трифторпентаноил)оксазолидин-2-он

К комплексу бромид меди (I)-диметилсульфид (328 мг, 1,56 ммоль) в ТГФ/ДМС (2:1, 60 мл), охлажденному до -40°С, добавляют этилмагнийбромид (1,06 мл, 3М раствор в ТГФ, 3,2 ммоль). Раствор перемешивают в течение 10 мин, нагревая до -15°С. Смесь снова охлаждают до -40°С и добавляют (R)-4-бензил-3-(5,5,5-трифторпент-2-еноил)оксазолидин-2-он (полученный, как описано в примере 6, часть С, 416 мг, 1,3 ммоль) в ТГФ (15 мл). Раствор перемешивают при 25°С в течение 16 час. Раствор снова охлаждают до -78°С и добавляют N-бромсукцинимид (473 мг, 2,6 ммоль) в ТГФ (10 мл). Раствор нагревают до 0°С и встряхивают при 0°С в течение 3 час. Реакцию гасят смесью 1:1 насыщенного раствора карбоната аммония и 0,5 н. раствора бисульфата калия (15 мл). Органическую фазу декантируют и концентрируют, получая (R)-4-бензил-3-(2-R-бром-3-S-этил-5,5,5-трифторпентаноил)оксазолидин-2-он, идентифицированный жидкостной хроматографией-масс-спекрометрией (ЖХ-МС).

В. 3-(2-S-Азидо-3-S-этил-5,5,5-трифторпентаноил)-4R-бензилоксазолидин-2-он

К (R)-4-бензил-3-(2R-бром-3S-этил-5,5,5-трифторпентаноил)оксазолидин-2-ону, растворенному в диметилформамиде (ДМФА, 10 мл), добавляют азид натрия (172 мг, 2,6 ммоль). Раствор перемешивают в течение 72 час, разбавляют водой (20 мл), экстрагируют этилацетатом (2×20 мл) и концентрируют, получая 3-(2-S-азидо-3-S-этил-5,5,5-трифторпентаноил)-4R-бензилоксазолидин-2-он, идентифицированный ЖХ-МС.

С. (2S,3S)-2-Азидо-3-этил-5,5,5-трифторпентановая кислота

3-(2-S-Азидо-3-S-этил-5,5,5-трифторпентаноил)-4-бензилоксазолидин-2-он растворяют при 0°С в смеси ТГФ и воды, 2:1 (20 мл), и добавляют моногидрат гидроксида лития (1,4 ммоль, 60 мг). Раствор встряхивают в течение 1 часа при 0°С и затем добавляют насыщенный раствор карбоната натрия (20 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом (20 мл). Водную фазу подкисляют 2 н. хлористоводородной кислотой, экстрагируют этилацетатом (20 мл), получая (2S,3S)-2-азидо-3-этил-5,5,5-трифторпентановую кислоту, идентифицированную ЖХ-МС.

D. (2S,3S)-2-Амино-3-этил-5,5,5-трифторпентан-1-ол

(2S,3S)-2-Азидо-3-этил-5,5,5-трифторпентановую кислоту растворяют в ТГФ (5 мл) при 0°С и добавляют алюмогидрид лития (1М раствор в ТГФ) (1 мл, 1 ммоль). Полученный раствор перемешивают при 40°С в течение 2 час. Реакцию гасят, последовательно добавляя воду (60 мкл), 15% водный раствор гидроксида натрия (60 мкл) и воду (150 мкл) при энергичном перемешивании между каждым добавлением. Затем смесь фильтруют и концентрируют, получая (2S,3S)-2-амино-3-этил-5,5,5-трифторпентан-1-ол.

Е. (2S,3S)-2-(5-Хлор-3-метилбензо[b]тиофен-2-сульфонил)амидо-5,5,5-трифтор-3-этилпентан-1-ол

К раствору (2S,3S)-2-амино-3-этил-5,5,5-трифторпентан-1-ола (0,1 ммоль) в ТГФ (2 мл) добавляют триэтиламин (83,7 мкл, 0,6 ммоль) и 5-хлор-3-метилбензо[b]тиофен-2-сульфонилхлорид (28 мг, 0,1 ммоль). Раствор перемешивают в течение 16 час и концентрируют. Растворитель удаляют, остаток растворяют в МеОН (1,5 мл) и очищают полупрепаративной ВЭЖХ с обращенной фазой (ОФ)-ВЭЖХ, используя условия, описанные ниже.

Условия полупрепаративной ОФ-ВЭЖХ:

Колонка: колонка с Phenomenex® С18, Luna®, 21,6 мм×60 мм, 5 мкМ.

Растворитель А: вода (буфер 0,02% ТФК).

Растворитель В: ацетонитрил (буфер 0,02% ТФК).

Градиент растворителя: время 0: 10% В; 2,5 мин: 10% В; 14 мин: 90% В.

Объемный расход: 22,5 мл/мин.

Продукт, соответствующий пику, собирают, основываясь на УФ-поглощении, и концентрируют, получая указанное в заголовке соединение, 1,7 мг, время удерживания при ВЭЖХ 2,97 мин, наблюдаемый ион 428 (М-Н).

Пример 12

(2S,3R)-2-(5-Хлор-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-сульфонил)амидо-5,5,5-трифтор-3-фенилпентан-1-ол

Следуя, по существу аналогичной методике примера 11, но с использованием фенилмагнийбромида и 5-хлор-1,3-диметилпиразол-4-сульфонилхлорида, получают (2S,3R)-2-(5-хлор-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-сульфонил)амидо-5,5,5-трифтор-3-фенилпентан-1-ол, 7,1 мг, время удерживания при ВЭЖХ 2,25 мин, наблюдаемый ион 424 (М-Н).

Пример 13

Синтез трифторметилсодержащего гетероциклического сульфонамида

В одном воплощении способ, показанный на схеме 13, осуществляют с использованием описанных ниже примеров реагентов и условий. Однако специалисту в данной области будет понятно, что некоторые условия реакции, например время, температуры, катализаторы и некоторые реагенты, можно изменять.

Согласно схеме 13, аминоэфир XVIII (250 г, 0,64 моль) суспендируют в толуоле (4 л) и суспензию нейтрализуют до рН 7-8 0,4н раствором NaOH (1,6 л). Слои разделяют, органическую фазу промывают водой (1,6 л) и затем сушат над Na₂SO₄ (250 г). Раствор в толуоле охлаждают до температуры от -68°С до -62°С и обрабатывают 25% раствором диизобутилалюмогидрида (DIBAL-H) в толуоле (1278 мл, 1,9 мол, 3 экв.), поддерживая температуру ниже -60°С. Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 1 часа. Реакцию гасят 10% водным раствором NaOH (128 мл), затем дигидратом цитрата натрия (500 г) и безводным сульфатом натрия (385 г). После перемешивания в течение 1 часа твердые вещества удаляют фильтрованием и раствор концентрируют до масла. Полученное масло растворяют в диэтиловом эфире (2,6 л), охлаждают до 5°С и обрабатывают 1 н. раствором HCl в эфире (750 мл). После перемешивания в течение 30 минут твердые вещества собирают фильтрованием, промывают эфиром и сушат в вакууме, получая 189 г (85%) бензиламина в виде белого твердого вещества. Бензиламин (150 г, 0,43 моль) в метаноле (150 мл) гидрируют при 40 ф/д² в присутствии катализатора 40 г 10% Pd/C. Через 1,5 часа катализатор удаляют фильтрованием и раствор концентрируют до твердого вещества. Твердое вещество растирают в смеси эфир/гексан, собирают фильтрованием и сушат, получая 94,8 г (90%) аминоспирта в виде твердого вещества.

Аминоспирт (100,2 г, 0,41 моль) в CH₂Cl₂ (1150 мл) обрабатывают N,O-бис(триметилсилил)ацетамидом (BSA, 110 мл, 0,45 моль), затем триэтиламином (152,4 мл, 1,09 моль) и диметиламинопиридином (DMAP, 13 г). Через 15 минут добавляют раствор сульфонилхлорида (105,5 г, 0,49 моль) в CH₂Cl₂ (186 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 19 часов (в течение ночи). Добавляют ТГФ (450 мл) и 5% водную HCl (800 мл) и смесь перемешивают в течение 1 часа. Слои разделяют и органический слой промывают 5% раствором NaHCO₃ и затем водой. Раствор концентрируют, получая масло, и пропускают через слой силикагеля, элюируя смесью 30% EtOAc/гексан. Фракции, содержащие продукт, концентрируют в вакууме, что промотирует кристаллизацию. Добавляют гексан, твердые вещества собирают фильтрованием, получая 87,1 г (55%) целевого соединения в виде белого твердого вещества. Концентрирование маточной жидкости дает вторую порцию целевого соединения, 12,6 г, выход 8%.

Пример 14

5-Хлор-N-[1-(4,4-дифторциклогексил)-2-гидроксиэтил]тиофен-2-сульфонамид

А. {[(5-Хлортиен-2-ил)сульфонил]амино}(4,4-дифторциклогексил)уксусная кислота

Амино(4,4-дифторциклогексил)уксусную кислоту (2,68 г, 10,973 ммоль) растворяют в 2 н. растворе NaOH (20 мл). Раствор охлаждают до 0°С и добавляют по каплям (5 мин) раствор 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорида (3,25 г, 12,42 ммоль) в ТГФ (10 мл). Раствор оставляют нагреваться до 25°С на ночь. Через 19 час ТГФ удаляют в вакууме и смесь подкисляют до рН от примерно 1 до примерно 2 2 н. HCl (20 мл). Водный слой промывают EtOAc (4×50 мл). Объединенные органические слои сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая {[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]амино}(4,4-дифторциклогексил)уксусную кислоту в виде неочищенного масла (3,8 г, 98,2%).

Масс-спектр (-ESI): 372 (M-H)^-.

В. 5-Хлор-N-[1-(4,4-дифторциклогексил)-2-гидроксиэтил]тиофен-2-сульфонамид

К взвеси LAH (0,406 г, 10,70 ммоль) в ТГФ (20 мл) при 0°С добавляют по каплям в течение 20 мин {[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]амино}(4,4-дифторциклогексил)уксусную кислоту (2,0 г 5,35 ммоль).

Реакционную смесь нагревают при 70°С в течение 18 час. Реакционную взвесь (светло-коричневого цвета) охлаждают до 0°С и реакцию гасят Н₂О (1,5 мл), 1 н. раствором NaOH (4,5 мл) и Н₂О (1,5 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 4 час, получая белую взвесь. Взвесь фильтруют, затем маточную жидкость сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме, получая неочищенное масло (1,68 г). Неочищенный продукт очищают хроматографией на Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:2, получая 5-хлор-N-[1-(4,4-дифторциклогексил)-2-гидроксиэтил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого аморфного твердого вещества (0,15 г, 7,8%).

Масс-спектр (-ESI): 358 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₂H₁₆ClNF₂O₃S₂·0,17EtOAc: С, 41,02; Н, 4,49; N, 3,76.

Найдено: С, 40,63; Н, 4,67; N, 3,74.

Пример 15

5-Хлор-N-[1-(6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-гидроксиэтил]тиофен-2-сульфонамид

А. Метиламино(6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)ацетат

К раствору амино(6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)уксусной кислоты (1,0 г, 5,23 ммоль) в смеси CH₂Cl₂:МеОН (4:1) при 0°С добавляют по каплям в течение 10 мин TMSCHN₂ (10,5 мл) до тех пор, пока смесь не станет устойчиво неоново-желтой. Реакционную смесь оставляют нагреваться до 25°С на 19 час. Растворитель удаляют в вакууме, получая метиламино(6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)ацетат в виде светло-желтого масла (0,9 г, 84,11%). Масс-спектр (-ESI): 206 (М+Н)⁺.

В. Метил{[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]амино}(6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)ацетат

Раствор 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорида (1,26 г, 4,82 ммоль) в CH₂Cl₂ (10 мл) добавляют по каплям (5 мин) к раствору метиламино(6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)ацетата (0,9 г, 4,38 ммоль) в CH₂Cl₂ (10 мл) и триэтиламине (1,22 мл, 8,77 ммоль), охлажденному до 0°С. Раствор оставляют нагреваться до 25°С на ночь (19 час). Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:4) показывает, что реакция завершилась. Реакционную смесь разбавляют CH₂Cl₂ (100 мл) и органический слой промывают 1 н. HCl (20 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (20 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное не совсем желтое твердое вещество (1,69 г). Неочищенный продукт очищают на хроматографе Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:4, получая метил{[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]амино}(6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)ацетат в виде бесцветного масла (0,230 г, 12,23%). Масс-спектр (-ESI): 384 (М+Н)⁺.

С. 5-Хлор-N-[1-(6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-гидроксиэтил]тиофен-2-сульфонамид

К взвеси LAH (0,030 г, 0,78 ммоль) в ТГФ (50 мл) при 0°С добавляют по каплям в течение 20 мин метил{[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]амино}(6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)ацетат (0,154 г 0,38 ммоль). Взвесь (серого цвета) оставляют нагреваться до 25°С в течение 19 час. Реакционную взвесь охлаждают до 0°С и реакцию гасят Н₂О (0,5 мл), 1 н. раствором NaOH (1,5 мл) и Н₂О (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 4 час, получая белую взвесь. Взвесь фильтруют, затем маточную жидкость сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют в вакууме, получая неочищенное желтое масло (0,162 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:4, получая 5-хлор-N-[1-(6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-гидроксиэтил]тиофен-2-сульфонамид в виде бесцветного масла (0,105 г, 77,7%).

Масс-спектр (-ESI): 356 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₃H₁₄ClNF₂O₄S₂·0,20EtOAc: С, 41,41; Н, 3,84; N, 3,56.

Найдено: С, 41,08; Н, 3,90; N, 3,47.

Пример 16

5-Хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-формил-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамида (полученного, как описано в примере 1, 3,0 г, 8,53 ммоль) в CH₂Cl₂, насыщенном водой (20 мл), перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют в один прием реагент Десса-Мартина периодинан (7,59 г, 17,90 ммоль). Полученную суспензию перемешивают при 25°С, контролируя развитие реакции анализом методом ТСХ (EtOAc/гексан, 1:2). Так как скорость конверсии исходного вещества снижается, дополнительно добавляют 2-мл порции CH₂Cl₂, насыщенного водой (три порции в течение 15 мин). После выдержки при 25°С в течение 19 час реакция, по данным ТСХ, завершается. Раствор разбавляют Et₂O (50 мл) и добавляют раствор тиосульфата натрия (Na₂S₂O₃, 93,83 ммоль, 14,8 г, 11 экв.) в 80% насыщенном водном растворе бикарбоната натрия (50 мл). Смесь быстро перемешивают в течение 10 мин до тех пор, пока обе фазы станут прозрачными. Слои разделяют и водный слой экстрагируют эфиром (30 мл). Объединенные органические слои последовательно промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и рассолом (15 мл), затем сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное масло (2,67 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 60, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-формил-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид в виде бесцветного масла (2,65 г, 88,93%).

Масс-спектр (+ESI): 350 (М+Н)⁺.

Анализ.

Вычислено для C₁₀H₁₁ClNF₂O₃S₂·0,35Н₂О: С, 33,34; Н, 2,83; N, 3,87.

Найдено: С, 33,74; Н, 3,31; N, 3,93.

Пример 17

N-[(1S,2R)-1-Ацетил-4,4,4-трифтор-2-метилбутил]-5-хлортиофен-2-сульфонамид

А. 5-Хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(1-гидроксиэтил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-формил-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамида (полученного, как описано в примере 16, 1,0 г, 2,86 ммоль) в ТГФ (10 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют по каплям 3М раствор метилмагнийбромида в этиловом эфире (1,9 мл, 5,71 ммоль) и полученный раствор перемешивают в течение 1 часа при 25°С. По окончании указанного периода реакция завершается, по данным ТСХ (EtOAc/гексан, 1:2). Раствор гасят насыщенным водным раствором NH₄Cl (10 мл) и экстрагируют эфиром (40 мл). Органический слой промывают рассолом (20 мл) и затем сушат над MgSO₄, получая неочищенное масло (0,867 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 60, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(1-гидроксиэтил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид в виде бесцветного масла (0,495 г, 49,5%). Масс-спектр (-ESI): 356 (М-Н)^-.

В. N-[(1S,2R)-1-Ацетил-4,4,4-трифтор-2-метилбутил]-5-хлортиофен-2-сульфонамид

Раствор 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(1-гидроксиэтил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамида (0,390 г, 1,06 ммоль) в CH₂Cl₂, насыщенном водой (30 мл), перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют в один прием реагент Десса-Мартина периодинан (0,95 г, 2,23 ммоль). Полученную суспензию перемешивают при 25°С, контролируя развитие реакции анализом методом ТСХ (EtOAc/гексан, 1:2). Так как скорость конверсии исходного вещества снижается, дополнительно добавляют 1-мл порции CH₂Cl₂, насыщенного водой (три порции в течение 15 мин). После выдержки при 25°С в течение 19 час реакция, по данным ТСХ, завершается. Раствор разбавляют Et₂O (50 мл) и добавляют раствор тиосульфата натрия (Na₂S₂O₃, 11,83 ммоль, 4,8 г, 11 экв.) в 80% насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (40 мл). Смесь быстро перемешивают в течение 10 мин до тех пор, пока обе фазы станут прозрачными. Слои разделяют и водный слой экстрагируют эфиром (20 мл). Объединенные органические слои последовательно промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и рассолом (15 мл), затем сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное масло (0,38 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая N-[(1S,2R)-1-ацетил-4,4,4-трифтор-2-метилбутил]-5-хлортиофен-2-сульфонамид в виде белого твердого вещества (0,265 г, 73,10%).

Масс-спектр (-ESI): 362 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₁H₁₃ClNF₃O₃S₂: С, 36,32; Н, 3,6; N, 3,85.

Найдено: С, 36,08; Н, 3,2; N, 3,74.

Пример 18

5-Хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(1-гидрокси-1-метилэтил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор N-[(1S,2R)-1-ацетил-4,4,4-трифтор-2-метилбутил]-5-хлортиофен-2-сульфонамида (полученного, как описано в примере 17, 0,100 г, 0,275 ммоль) в ТГФ (5 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют по каплям 3М раствор метилмагнийбромида в этиловом эфире (0,266 мл, 0,824 ммоль) и полученный раствор перемешивают в течение 19 час при 25°С. По окончании указанного периода реакция завершается, по данным ТСХ (EtOAc/гексан, 1:2). Раствор гасят насыщенным водным раствором NH₄Cl (10 мл) и экстрагируют эфиром (40 мл). Органический слой промывают рассолом (20 мл) и затем сушат над MgSO₄, получая неочищенное масло (0,110 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:4, получая 5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(1-гидрокси-1-метилэтил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого твердого вещества (0,049 г, 46,6%).

Масс-спектр (-ESI): 378 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₂H₁₇ClNF₃O₃S₂: С, 37,94; Н, 4,51; N, 3,69.

Найдено: С, 37,45; Н, 4,03; N, 3,68.

Пример 19

4-Бром-5-хлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

А. Метил-4,4,4,4',4',4'-гексафтор-dl-валинат

Раствор 4,4,4,4',4',4'-гексафтор-dl-валина (1,1 г, 4,88 ммоль) в смеси CH₂Cl₂:МеОН (4:1, 25 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют по каплям раствор TMS-диазометан (2,0М раствор в гексане, 20 мл, 19,55 ммоль) и полученный неоново-зеленоватый раствор перемешивают в течение 19 час при 25°С. По окончании указанного периода реакция, по данным ТСХ (10% МеОН в хлороформе), завершается. После концентрирования полученный остаток метил-4,4,4,4',4',4'-гексафтор-dl-валината (1,1 г) используют непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки. Масс-спектр (-ESI): 238 (М-Н)^-.

В. Метил-N-[(4-бром-5-хлортиен-2-ил)сульфонил]-4,4,4,4',4',4'-гексафтор-dl-валинат

Раствор метил-4,4,4,4',4',4'-гексафтор-dl-валината (1,0 г, 4,18 ммоль) в CH₂Cl₂ (10 мл) перемешивают в атмосфере N₂ при 25°С. Добавляют по каплям пиридин (0,81 мл, 10,04 ммоль), затем в один прием добавляют 4-бром-5-хлортиофен-2-сульфонилхлорид (1,486 г, 5,05 ммоль) и полученный раствор перемешивают в течение 19 час при 25°С. По окончании указанного периода, по данным ТСХ (EtOAc-гексан, 1:4), реакция завершается. После гашения водой (1,0 мл) смесь разбавляют CH₂Cl₂ (30 мл). Органический слой последовательно промывают 1 н. водной хлористоводородной кислотой (10 мл), насыщенным водным раствором NaHCO₃ (10 мл) и рассолом (15 мл), затем сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное масло (2,1 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая метил-N-[(4-бром-5-хлортиен-2-ил)сульфонил]-4,4,4,4',4',4'-гексафтор-dl-валинат в виде белого твердого вещества (1,62 г, 83,07%). Масс-спектр (-ESI): 497 (М-Н)^-.

С. 4-Бром-5-хлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

К раствору метил-N-[(4-бром-5-хлортиен-2-ил)сульфонил]-4,4,4,4',4',4'-гексафторвалината (1,45 г 2,907 ммоль) в ТГФ (20 мл) в атмосфере N₂ при 0°С добавляют боргидрид лития (LiBH₄) (5,82 мл, 11,64 ммоль). Реакционную смесь оставляют нагреваться до 25°С на 19 час. Реакционную смесь охлаждают до 0°С, реакцию гасят 2 н. HCl (постепенное добавление), разбавляют эфиром (40 мл) и органический слой последовательно промывают 1 н. водной хлористоводородной кислотой (10 мл), насыщенным водным раствором NaHCO₃ (10 мл) и рассолом (15 мл), затем сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное масло (1,3 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая 4-бром-5-хлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого твердого вещества (1,13 г, 84,32%).

Масс-спектр (-ESI): 469 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₉H₇ClBrNF₆O₃S₂: С, 22,97 Н, 1,50; N, 2,98.

Найдено: С, 23,11; Н, 1,16; N, 2,78.

Пример 20

4-Бром-5-хлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор 4-бром-5-хлортиофен-2-сульфонилхлорида (0,193 г, 0,654 ммоль) в CH₂Cl₂ (1,0 мл) добавляют по каплям (5 мин) к раствору (2S)-2-амино-3,3,3-трифтор-3-(трифторметил)бутан-1-ола (полученного согласно способу примера 13, 0,115 г, 0,548 ммоль) в CH₂Cl₂ (10 мл) и пиридине (0,9 мл, 1,09 ммоль), охлажденному до 0°С. Раствор оставляют нагреваться до 25°С на ночь (19 час). Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:1) показывает, что реакция завершилась. Реакционную смесь разбавляют CH₂Cl₂ (100 мл) и органический слой промывают 1 н. HCl (2×50 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (50 мл), сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное не совсем белое твердое вещество (0,270 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая 4-бром-5-хлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого твердого вещества (39 мг, 15,11%). Масс-спектр (-ESI): 469 (М-Н)^-.

Пример 21

5-Хлор-4-фтор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

А. 5-Хлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-4-(трибутилстаннил)-2-сульфонамид

К раствору 4-бром-5-хлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамида (полученного, как описано в примере 19, 0,9 г, 1,91 ммоль) в 1,4-диоксане (42 мл) добавляют бис(трибутилолово) (0,939 г, 2,87 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (0,221 г, 0,191 ммоль). Коричневый раствор кипятят с обратным холодильником в течение ночи (19 час). Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:1) показывает, что реакция завершилась. Затем взвесь фильтруют, удаляют растворитель в вакууме, получая желтое масло (1,31 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая 5-хлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-4-(трибутилстаннил)-2-сульфонамид в виде белого твердого вещества (0,220 г, 18,86%). Масс-спектр (-ESI): 554 (М-Н)^-.

В. 5-Хлор-4-фтор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор 5-хлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-4-(трибутилстаннил)-2-сульфонамида (0,220 г, 0,396 ммоль) в сухом ацетонитриле (10 мл) перемешивают в атмосфере азота при 25°С. Добавляют в один прием реагент Selectfluor® (0,147 г, 0,416 ммоль) и раствор перемешивают в течение 19 час при 25°С. Через 3 часа начинает появляться белый осадок. Через 19 час отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция не завершилась. В основном, присутствует исходное вещество. Реакционную смесь нагревают при 80°С в течение 6 час. Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Затем взвесь фильтруют, удаляют растворитель в вакууме, получая желтое масло (0,11 г). Неочищенный продукт очищают препаративной ОФ-ВЭЖХ (колонка с Primeshere^ТМ, 2×25 см, элюент 55% MeCN в 0,01% водном растворе трифторуксусной кислоты (ТФК), объемный расход=25 мл/мин, R_t 4,401 мин), получая 5-хлор-4-фтор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид в виде аморфного белого твердого вещества (0,004 г, 24,69%). Масс-спектр (-ESI): 408 (М-Н)^-.

Пример 22

4-Бром-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

А. Этил-N-[(5-бромтиофен-2-ил)сульфонил]-4,4,4,4',4',4'-гексафтор-dl-валинат

Раствор этил-4,4,4,4',4',4'-гексафтор-dl-валината (1,64 г, 6,48 ммоль), полученного, как описано в литературе (J. Med. Chem., 1981, 24, 1043-1047), в CH₂Cl₂ (10 мл) перемешивают в атмосфере N₂ при 25°С. Добавляют по каплям пиридин (0,81 мл, 10,04 ммоль), затем в один прием добавляют 5-бромтиофен-2-сульфонилхлорид (2,034 г, 7,77 ммоль) и полученный раствор перемешивают в течение 19 час при 25°С. По окончании указанного периода, по данным ТСХ (EtOAc-гексан, 1:4), реакция завершается. После гашения водой (2,0 мл) смесь разбавляют CH₂Cl₂ (40 мл). Органический слой последовательно промывают 1 н. водной хлористоводородной кислотой (20 мл), насыщенным водным раствором NaHCO₃ (20 мл) и рассолом (15 мл), сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное масло (3,3 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая этил-N-[(5-бромтиен-2-ил)сульфонил]-4,4,4,4',4',4'-гексафтор-dl-валинат в виде белого твердого вещества (2,40 г, 80,0%). Масс-спектр (-ESI): 477 (М-Н)^-.

В. 5-Бром-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

К раствору этил-N-[(5-бромтиен-2-ил)сульфонил]-4,4,4,4',4',4'-гексафторвалината (2,4 г 5,02 ммоль) в ТГФ (20 мл) в атмосфере N₂ при 0°С добавляют LiBH₄ (20 мл, 20,07 ммоль). Реакционную смесь оставляют нагреваться до 25°С на 19 час. Реакционную смесь охлаждают до 0°С, реакцию гасят 2 н. HCl (постепенное добавление), разбавляют эфиром (50 мл) и органический слой последовательно промывают 1 н. водной хлористоводородной кислотой (10 мл), насыщенным водным раствором NaHCO₃ (10 мл) и рассолом (15 мл), затем сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное масло (2,31 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая 5-бром-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого твердого вещества (1,3 г, 59,63%).

Масс-спектр (-ESI): 435 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₉H₈BrNF₆O₃S₂: С, 24,78; Н, 1,85; N, 3,21.

Найдено: С, 24,74; Н, 1,32; N, 3,11.

Пример 23

4-Фтор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

А. N-[3,3,3-Трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-5-(трибутилстаннил)-2-сульфонамид

К раствору 5-бром-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамида (полученного, как описано в примере 22, 1,2 г, 2,75 ммоль) в 1,4-диоксане (40 мл) добавляют бис(трибутилолово) (1,36 г, 4,13 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (0,32 г, 0,275 ммоль). Коричневый раствор кипятят с обратным холодильником в течение ночи (19 час). Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Затем взвесь фильтруют, удаляют растворитель в вакууме, получая желтое масло (1,4 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-5-(трибутилстаннил)-2-сульфонамид в виде белого твердого вещества (0,400 г, 27,97%). Масс-спектр (-ESI): 520 (М-Н)^-.

В. 5-Фтор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-5-(трибутилстаннил)-2-сульфонамида (0,400 г, 0,76 ммоль) в сухом ацетонитриле (10 мл) перемешивают в атмосфере азота при 25°С. Добавляют в один прием реагент Selectfluor® (0,285 г, 0,806 ммоль) и раствор перемешивают в течение 19 час при 25°С. Через 3 часа начинает появляться белый осадок. Через 19 час отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция не завершилась. В основном, присутствует исходное вещество. Реакционную смесь нагревают при 80°С в течение 6 час. Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Затем взвесь фильтруют, удаляют растворитель в вакууме, получая желтое масло (0,191 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая 5-фтор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид в виде аморфного белого твердого вещества (0,010 г, 34,72%). Масс-спектр (-ESI): 374 (М-Н)^-.

Пример 24

5-Бром-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор 5-бромтиофен-2-сульфонилхлорида (0,149 г, 0,568 ммоль) в CH₂Cl₂ (1,0 мл) добавляют по каплям (5 мин) к раствору (2S)-2-амино-4,4,4-трифтор-3-(трифторметил)бутан-1-ола (0,100 г, 0,474 ммоль) в CH₂Cl₂ (10 мл) и пиридине (0,1 мл, 0,95 ммоль), охлажденному до 0°С. Раствор оставляют нагреваться до 25°С на ночь (19 час). Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Реакционную смесь разбавляют CH₂Cl₂ (10 мл) и органический слой промывают 1 н. HCl (2×10 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (10 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное не совсем белое твердое вещество (0,120 г). Неочищенный продукт перекристаллизовывают из смеси CH₂Cl₂:гексан (1:7), получая 5-бром-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого распушенного твердого вещества (0,0541 г, 27,05%). Масс-спектр (-ESI): 435 (М-Н)^-.

Пример 25

5-Фтор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

А. N-[(1S)-3,3,3-Трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-5-(трибутилстаннил)-2-сульфонамид

К раствору 5-бром-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамида (полученного, как описано в примере 24, 1,1 г, 2,52 ммоль) в 1,4-диоксане (40 мл) добавляют бис(трибутилолово) (1,36 г, 4,13 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (0,32 г, 0,275 ммоль). Коричневый раствор кипятят с обратным холодильником в течение ночи (19 час). Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Затем взвесь фильтруют, удаляют растворитель в вакууме, получая желтое масло (1,05 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-5-(трибутилстаннил)-2-сульфонамид в виде белого твердого вещества (0,350 г, 26,7%). Масс-спектр (-ESI): 520 (М-Н)^-.

В. 5-Фтор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-5-(трибутилстаннил)-2-сульфонамида (0,400 г, 0,76 ммоль) в сухом ацетонитриле (10 мл) перемешивают в атмосфере азота при 25°С. Добавляют в один прием реагент Selectfluor® (0,285 г, 0,806 ммоль) и раствор перемешивают в течение 19 час при 25°С. Через 3 часа начинает появляться белый осадок. Через 19 час отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция не завершилась. В основном, присутствует исходное вещество. Реакционную смесь нагревают при 80°С в течение 6 час. Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Затем взвесь фильтруют, удаляют растворитель в вакууме, получая желтое масло (0,078 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая 5-фтор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид в виде аморфного белого твердого вещества (0,0061 г, 2,8%).

Масс-спектр (-ESI): 374 (М-Н)^-.

Пример 26

5-Хлор-N-[4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил]тиофен-2-сульфонамид

А. Иодид (3,3,3-трифторпропил)трифенилфосфония

К раствору 1-иод-3,3,3-трифторпропана (19,3 г, 86,1 ммоль) в толуоле (50 мл) при 23°С добавляют трифенилфосфин (25,8 г, 98,5 ммоль). Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником и перемешивают в течение 28 час. Полученную смесь охлаждают до 0°С на ледяной бане и фильтруют, чтобы собрать белый твердый продукт. Продукт промывают толуолом (3х) и сушат на воздухе, получая чистый продукт в виде белого твердого вещества (33,4 г, 80%).

В. Этиловый эфир 4,4,4-трифтор-2-(трифенил-λ⁵-фосфанилиден)масляной кислоты

К суспензии иодида (3,3,3-трифторпропил)трифенилфосфония (23,5 г, 48,4 ммоль) в ТГФ (100 мл) при -78°С в атмосфере азота через капельную воронку постепенно добавляют раствор бис(триметилсилил)амида калия (0,5М в толуоле, 175 мл). Полученную смесь перемешивают при -78°С в течение 45 мин и затем добавляют по каплям этилхлорформиат (чистый, 5,0 мл). Затем реакционную смесь нагревают до -20°С в течение 3 час при перемешивании. Затем реакцию гасят, выливая реакционную смесь в рассол (100 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (100 мл×2). Органический экстракт сушат (Na₂SO₄) и концентрируют при пониженном давлении. Флэш-хроматография со смесью этилацетат-гексан (0-100%) на колонке с силикагелем (120 г) дает продукт в виде светло-желтого твердого вещества. Перекристаллизация полученного вещества из Et₂O дает чистый продукт в виде белого твердого вещества (6,7 г, 32%). Масс-спектр (+ESI): 431 (М+Н)⁺.

С. Этиловый эфир 4,4,4-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)бут-2-еновой кислоты

К раствору этилового эфира 4,4,4-трифтор-2-(трифенил-λ⁵-фосфанилиден)масляной кислоты (2,0 г, 4,65 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляют 1 мл гидрата трифторацетальдегида (технического). Смесь герметично закрывают в пробирке высокого давления и нагревают при 100°С в течение 3,5 час. После охлаждения до 23°С реакционную смесь элюируют через слой силикагеля (100 г) и Na₂SO₄ Et₂O (100 мл) для удаления побочных продуктов трифенилфосфиноксида и воды. Элюент перегоняют для удаления E₂O, получая продукт в виде бесцветной жидкости (1,0 г, 86%).

D. Этиловый эфир 4,4,4-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)масляной кислоты

Этиловый эфир 4,4,4-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)бут-2-еновой кислоты (5,0 г, 20,0 ммоль) в ТГФ (20 мл) обрабатывают Pd/C (2,5 г, 5%) и Н₂ (1 атм) при 25°С в течение 17 час. Реакционную смесь фильтруют через реагент целит®, промывают фильтр E₂O (50 мл), фильтрат перегоняют для удаления E₂O и ТГФ, получая продукт в виде бесцветной жидкости (5,0 г, 99%).

Е. 4,4,4-Трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)бутан-1-ол

К суспензии LAH (1,0 г) в E₂O (100 мл) при 25°С постепенно добавляют этиловый эфир 4,4,4-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)масляной кислоты (5,0 г, 19,8 ммоль). Полученную смесь перемешивают при кипячении с обратным холодильником в течение 4 час. После охлаждения смеси реакцию последовательно гасят водой (1,0 мл), 15% водным раствором NaOH (1,0 мл) и водой (3,0 мл). После перемешивания полученной смеси при 25°С в течение 17 час добавляют Na₂SO₄ (20 г) и продолжают перемешивание при 25°С в течение 1 часа. Полученную суспензию фильтруют через слой целита® и Na₂SO₄. Фильтрат перегоняют для удаления всех растворителей, получая требуемый продукт в виде бесцветной жидкости (1,7 г, 41%). Масс-спектр (-ESI): 269 [М+OAc]^-.

F. 4,4,4-Трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)бутиральдегид

Раствор 4,4,4-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)бутан-1-ола (1,5 г, 7,14 ммоль) в CH₂Cl₂, насыщенном водой (30 мл), перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют в один прием реагент Десса-Мартина периодинан (6,35 г, 14,99 ммоль). Полученную суспензию перемешивают при 25°С, контролируя развитие реакции анализом ТСХ (EtOAc/гексан, 1:2). Так как скорость конверсии исходного вещества снижается, дополнительно добавляют 2-мл порции CH₂Cl₂, насыщенного водой (три порции в течение 15 мин). После выдержки при 25°С в течение 19 час реакция, по данным ТСХ, завершается. Раствор разбавляют Et₂O (50 мл) и добавляют раствор тиосульфата натрия (Na₂S₂O₃, 73,33 ммоль, 11,6 г, 11 экв.) в 80% насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (50 мл). Смесь быстро перемешивают в течение 10 мин до тех пор, пока обе фазы станут прозрачными. Слои разделяют и водный слой экстрагируют эфиром (30 мл). Объединенные органические слои последовательно промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и рассолом (15 мл), затем сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют до 50% их первоначального объема, получая 4,4,4-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)бутиральдегид в виде раствора (20 мл). Масс-спектр (+ESI): (М+Н)⁺.

G. 5-(3,3,3-Трифтор-1-(2,2,2-трифторэтил)пропил)имидазолидин-2,4-дион

К цианиду натрия (0,425 г, 8,65 ммоль) и карбонату аммония (0,9 г, 11,54 ммоль) в Н₂О (30 мл) добавляют 4,4,4-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)бутиральдегид (0,6 г, 2,88 ммоль) в этаноле (30 мл). Черную реакционную смесь нагревают до 90°С. Через 1 час смесь становится гомогенной, и ее перемешивают при 90°С в течение 18 час. После охлаждения до 25°С примерно 40 мл растворителя удаляют в вакууме. Добавляют концентрированную HCl (4 мл) для подкисления смеси до рН 1-2, и образуется осадок. Его отфильтровывают. Маточную жидкость промывают EtOAc (3×50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая 5-(3,3,3-трифтор-1-(2,2,2-трифторэтил)пропил)имидазолидин-2,4-дион в виде коричневого масла (1,01 г, 100%). Масс-спектр (+ESI): 279, 280 (М+Н)⁺.

Н. 5,5,5-Трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)-dl-норвалин

5-(3,3,3-Трифтор-1-(2,2,2-трифторэтил)пропил)имидазолидин-2,4-дион (1,0 г, 3,59 ммоль) растворяют в 10 мл водного раствора NaOH (0,575 г в 10 мл Н₂О, 14,38 ммоль). Раствор распределяют в два специальных сосуда для микроволновой технологии. Раствор нагревают микроволновым облучением в герметично закрытых флаконах в течение 1 часа. Условия микроволнового облучения: 15 мин при примерно 100% мощности, 150°С, 50 ф/д², затем 5 мин перерыв, мощность 0%. Последовательность операций повторяют до тех пор, пока не произойдет реакция. Воду и аммиак удаляют из реакционной смеси в вакууме и полученную смесь неочищенного 5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)-dl-норвалина (0,92 г, 100%) и NaOH используют в следующей реакции без дополнительной очистки. Масс-спектр (+ESI): 254 (М+Н)⁺.

I. N-[(5-Хлортиен-2-ил)сульфонил]-5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)-dl-норвалин

Смесь неочищенного 5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)-dl-норвалина (0,92 г, 3,56 ммоль) и NaOH растворяют в воде (10 мл). Смесь охлаждают до 0°С на ледяной бане. 5-Хлортиофен-2-сульфонилхлорид (0,852 г, 3,9 ммоль) растворяют в ТГФ (10 мл) и раствор добавляют по каплям к реакционной смеси в течение 10 мин. Через 60 мин реакционную смесь постепенно нагревают до 25°С и перемешивают в течение 16 час. ТГФ удаляют в вакууме и смесь подкисляют до рН <2 1 н. HCl. Через 15 мин из молочно-белой смеси начинает выпадать осадок. Через 60 мин смесь охлаждают в холодильнике в течение 45 мин и затем фильтруют. Выпавший осадок промывают 1 н. HCl (10 мл), получая белое твердое вещество, которое отлипает. Его растворяют в EtOAc (100 мл). Водный слой промывают EtOAc (3×50 мл) и органические слои промывают насыщенным водным раствором NaCl (50 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая N-[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]-5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)-dl-норвалин в виде коричневого масла (1,3 г, 86,3%). Масс-спектр (+ESI): 434 (М+Н)⁺.

J. Метил-N-[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]-5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)-dl-норвалинат

К раствору N-[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]-5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)-dl-норвалина (1,3 г, 5,23 ммоль) в смеси CH₂Cl₂:МеОН (4:1) добавляют по каплям в течение 10 мин при 0°С TMSCHN₂ (6 мл, 12 ммоль) до устойчивого неоново-желтого цвета. Когда добавление по каплям заканчивают, реакционную смесь оставляют нагреваться до 25°С на 19 час. Растворитель удаляют в вакууме, получая метил-N-[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]-5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)-dl-норвалинат (0,5 г, 37,31%). Масс-спектр (-ESI): 434 (М-Н)^-.

К. 5-Хлор-N-[4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил]тиофен-2-сульфонамид

К раствору метил-N-[(5-хлортиен-2-ил)сульфонил]-5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)-dl-норвалината (0,5 г, 1,11 ммоль) в ТГФ (10 мл) при 0°С в атмосфере N₂ добавляют по LiBH₄ (2,28 мл, 4,46 ммоль). Реакционную смесь оставляют нагреваться до 25°С на 19 час. Реакционную смесь охлаждают до 0°С и гасят реакцию 2 н. HCl (постепенное добавление), смесь разбавляют эфиром (40 мл) и затем органический слой последовательно промывают 1 н. водной хлористоводородной кислотой (10 мл), насыщенным водным раствором NaHCO₃ (10 мл) и рассолом (15 мл), затем сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное масло (0,362 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 12, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая 5-хлор-N-[4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил]тиофен-2-сульфонамид в виде бесцветного масла (0,001 г, 2,36%). Масс-спектр (-ESI): 418 (М-Н)^-.

Пример 27

5-Хлор-N-[(1S)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил]тиофен-2-сульфонамид

А. 4-Метил-N-[(1Z)-4,4,4-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)бутилиден]бензолсульфинамид

К неочищенному органическому экстракту 4,4,4-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)бутиральдегида (полученного, как описано в примере 26, часть F, 0,6 г, 2,88 ммоль) в эфире (5 мл) добавляют этоксид титана(IV) (2,63 г, 11,54 ммоль), затем (S)-(+)-толуолсульфинамид (0,537 г, 3,46 ммоль) и раствор кипятят с обратным холодильником в течение 5 час. Затем смесь охлаждают до 0°С и добавляют воду (35 мл) для осаждения солей титана. Суспензию фильтруют через слой целита® и остаток на фильтре промывают CH₂Cl₂. Слои фильтрата разделяют и водный слой экстрагируют CH₂Cl₂. Объединенные органические экстракты сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное желтое масло (1,05 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:9, получая 4-метил-N-[(1Z)-4,4,4-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)бутилиден]бензолсульфинамид в виде желтого масла (0,41 г, 41,2%). Масс-спектр (-ESI): 344 (М-Н)^-.

В. 4-Метил-N-[(1S)-4,4,4-трифтор-1-изоциано-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил]бензолсульфинимид

К цианиду диэтилалюминия (0,233 мл, 1,73 ммоль) в ТГФ (10 мл) при 0°С добавляют изопропиловый спирт (76 мг, 1,27 ммоль). Через 15 мин полученный раствор добавляют к раствору 4-метил-N-[(1Z)-4,4,4-трифтор-2-(2,2,2-трифторэтил)бутилиден]бензолсульфинамида (0,4 г, 1,158 ммоль) в ТГФ (10 мл), охлажденному до -78°С. Через 15 мин реакционную смесь нагревают до 25°С. Через 5 час ТСХ (EtOAc-гексан, 1:4) показывает, что исходное вещество израсходовано. Смесь охлаждают до -78°С и добавляют насыщенный водный раствор NH₄Cl (30 мл). Полученную суспензию фильтруют через слой целита® и остаток на фильтре промывают EtOAc (2×50 мл). Слои фильтрата разделяют и водный слой экстрагируют EtOAc. Объединенные органические экстракты сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное масло (0,360 г).

Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 40, элюент EtOAc-гексан, 1:6, получая 4-метил-N-[(1S)-4,4,4-трифтор-1-изоциано-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил]бензолсульфинимид в виде бесцветного масла (0,065 г, 15,18%). Масс-спектр (-ESI): 371 (М-Н)^-.

С. 5,5,5-Трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)-L-норвалин

Раствор 4-метил-N-[(1S)-4,4,4-трифтор-1-изоциано-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил]бензолсульфинимида (0,065 г, 0,170 ммоль) в концентрированной HCl (10 мл) нагревают при 100°С в течение 19 час. После охлаждения смеси до 25°С ее промывают несколько раз диэтиловым эфиром. Водный слой концентрируют в вакууме, получая смесь 5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)-L-норвалина, NH₄Cl и 4-метилбензолсульфиновой кислоты (0,045 г, 100%). Неочищенную аминокислоту используют на следующей стадии без дополнительной очистки. Масс-спектр (+ESI): 255 (М+Н)⁺.

D. (2S)-2-Амино-5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)пентан-1-ол

К раствору LiBH₄ (0,35 мл, 0,71 ммоль) в ТГФ (5 мл) при 0°С добавляют хлортриметилсилан (0,112 мл, 0,885 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 25°С и через 30 мин добавляют по каплям к суспензии неочищенной гидрохлоридной соли 5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)-L-норвалина (0,045 г, 0,177 ммоль) в ТГФ (1 мл), охлажденной до 0°С. Смесь нагревают до 25°С и через 21 час реакцию гасят МеОН. Летучие вещества удаляют в вакууме, получая остаток, который растворяют в 1 н. водном растворе NaOH (5 мл) и экстрагируют CH₂Cl₂ (4×10 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая (2S)-2-амино-5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)пентан-1-ол в виде неочищенного светло-желтого масла (0,046 г, 100%). Неочищенный аминоспирт используют на следующей стадии без дополнительной очистки. Масс-спектр (+ESI): 240 (М+Н)⁺.

Е. 5-Хлор-N-[(1S)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорида (0,193 г, 0,654 ммоль) в CH₂Cl₂ (1,0 мл) добавляют по каплям (5 мин) к раствору (2S)-2-амино-5,5,5-трифтор-3-(2,2,2-трифторэтил)пентан-1-ола (0,042 г, 0,175 ммоль) в CH₂Cl₂ (1,0 мл) и пиридине (1,0 мл, 1,09 ммоль), охлажденному до 0°С. Раствор оставляют нагреваться до 25°С на ночь (19 час). Отбирают аликвоту, и ТСХ (EtOAc-гексан, 1:2) показывает, что реакция завершилась. Реакционную смесь разбавляют CH₂Cl₂ (10 мл) и органический слой промывают 1 н. HCl (2×5 мл) и насыщенным водным раствором NaCl (5 мл). Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая неочищенное не совсем белое твердое вещество (0,014 г). Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ12, элюент EtOAc-гексан, 1:4, получая 5-хлор-N-[(1S)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого твердого вещества (0,003 г, 4,1%). Масс-спектр (+ESI): 420 (М+Н)⁺.

Пример 28

4,5-Дихлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор боргидрида лития (2М в ТГФ, 19,8 мл) при 25°С добавляют к раствору этилового эфира 2-амино-4,4,4-трифтор-3-трифторметилмасляной кислоты (5 г, 19,8 ммоль), полученного, как описано в литературе (J. Med. Chem., 1981, 24, 1043-1047), в ТГФ (80 мл) и перемешивают в течение 4 час. К реакционной смеси очень осторожно добавляют 2М HCl до тех пор, пока рН не станет ниже 2. Органический растворитель удаляют в вакууме и водный слой нейтрализуют насыщенным раствором NaHCO₃ до рН=7. Водный слой экстрагируют EtOAc (2×50 мл), органические экстракты сушат над Na₂SO₄ и концентрируют, получая 3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропиламин в виде желтого масла (3,2 г, выход 77%). Неочищенное масло имеет достаточную чистоту для использования в последующей реакции.

В. 4,5-Дихлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор 3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропиламина (0,192 г, 0,9 ммоль) в ТГФ (1 мл) перемешивают в атмосфере азота при 25°С. Добавляют пиридин (0,147 мл, 1,82 ммоль), затем 4,5-дихлортиофен-2-сульфонилхлорид (0,226 г, 0,391 ммоль) в ТГФ (1 мл) и полученный раствор перемешивают в течение 18 час при 25°С. После концентрирования остаток растворяют в EtOAc (15 мл) и раствор промывают 1 н. водной хлористоводородной кислотой (10 мл) и рассолом (10 мл) и затем сушат (Na₂SO₄). После концентрирования неочищенный продукт очищают препаративной ТСХ, элюент EtOAc-гексан, 30:70, получая 4,5-дихлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого твердого вещества (0,037 г, выход 9%, рацемическая смесь). Масс-спектр (-ESI): 423,9 (М-Н)^-.

Пример 29

N-[(1S)-3,3,3-Трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-3-сульфонамид

Раствор (1S)-3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропиламина (полученного согласно способу примера 13, 0,100 г, 0,4 ммоль) в CH₂Cl₂ (1 мл) перемешивают в атмосфере азота при 25°С. Добавляют пиридин (0,097 мл, 1,2 ммоль), затем 3-тиофенсульфонилхлорид (0,072 г, 0,4 ммоль) в CH₂Cl₂ (0,5 мл) и полученный раствор перемешивают в течение 18 час при 25°С. Неочищенную реакционную смесь загружают в samplet TsOH Syntage^ТМ и после концентрирования очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 12, элюент EtOAc-гексан, 30:70, получая N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-3-сульфонамид в виде белого твердого вещества (0,053 г, выход 35%).

Масс-спектр (-ESI): 355,9 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₉H₈ClF₆NO₃S₂: С, 30,25 Н, 2,54; N, 3,92.

Найдено: С, 30,55; Н, 2,27; N, 3,77.

Пример 30

2,5-Дихлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-3-сульфонамид

Следуют методике, описанной в примере 29, за исключением того, что используют 2,5-дихлортиофен-3-сульфонилхлорид, получая 2,5-дихлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-3-сульфонамид в виде белого твердого вещества (0,026 г, выход 17%). Масс-спектр (-ESI): 423,8 (М-Н)^-.

Пример 31

N-[(1S)-3,3,3-Трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

Следуют методике, описанной в примере 29, за исключением того, что используют 2-тиофенсульфонилхлорид, получая N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого твердого вещества (0,024 г, выход 17%). Масс-спектр (-ESI): 355,9 (М-Н)^-.

Пример 32

4,5-Дихлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

Следуют методике, описанной в примере 29, за исключением того, что используют 4,5-дихлортиофен-2-сульфонилхлорид, получая 4,5-дихлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид в виде белого твердого вещества (0,050 г, выход 29%). Масс-спектр (-ESI): 423,8 (М-Н)^-.

Пример 33

(3,3,3-Трифтор-1-гидроксиметил-2-трифторметилпропил)амид тиофен-2-сульфоновой кислоты

К раствору 3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропиламина (полученного согласно способу примера 28, часть А, 105 мг, 0,5 ммоль) в CH₂Cl₂ (1 мл) добавляют пиридин (100 мкл) и 2-тиофенсульфонилхлорид (90,5 мг, 0,5 ммоль) в CH₂Cl₂ (1 мл). Раствор перемешивают в течение от примерно 8 до примерно 16 час при 25°С и затем концентрируют. Добавляют EtOAc (1 мл) и раствор промывают 1М HCl (1 мл) и рассолом (1 мл), сушат над Na₂SO₄ и концентрируют. Неочищенное твердое вещество очищают с помощью хроматографической системы Biotage Flash^ТМ 12, элюируя смесью EtOAc/гексан (2:3), получая (3,3,3-трифтор-1-гидроксиметил-2-трифторметилпропил)амид тиофен-2-сульфоновой кислоты в виде белого твердого вещества.

Следующие соединения (примеры 33-35, таблица 1) получают, используя 2-тиофенсульфонилхлорид, 3-тиофенсульфонилхлорид и 2,5-дихлортиофен-3-сульфонилхлорид и методику, описанную в примере 33.

Таблица 1 (Данные* ЖХ-МС: молекулярный ион и время удерживания)
RSO ₂ Cl	3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропиламин
2-тиофенсульфонилхлорид	Пример 33 (356 М-Н); 2,063 мин
3-тиофенсульфонилхлорид	Пример 34 (356 М-Н); 2,013 мин
2,5-дихлортиофен-3-сульфонилхлорид	Пример 35 (424 М-Н); 2,564 мин
*ВЭЖХ/МС Hewlett Packard Series 1100, колонка c Luna C18, 2×30 мм, элюирование с градиентом от 40% смеси ацетонитрил/вода (0,1% НСООН) до 100% ацетонитрила (0,1% НСООН) в течение 3 минут при объемном расходе 0,6 мл/мин.

Пример 36

Дибром-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

К раствору 3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропиламина (полученного согласно способу примера 28, часть А, 105 мг, 0,5 ммоль) в CH₂Cl₂ (1 мл) добавляют пиридин (100 мкл) и 4,5-дибромтиофен-2-сульфонилхлорид (170 мг, 0,5 ммоль) в CH₂Cl₂ (1 мл). Раствор перемешивают в течение от примерно 8 до примерно 16 час при 25°С и затем концентрируют. Добавляют EtOAc (1 мл) и раствор промывают 1М HCl (1 мл) и рассолом (1 мл), сушат над Na₂SO₄ и концентрируют. Неочищенное твердое вещество растворяют в ДМСО (0,5 мл), очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (прибор для ВЭЖХ Gilson®, колонка c Luna® C18, 100×30 мм, элюирование с градиентом от 40% смеси ацетонитрил/вода (0,075% ТФК) до 100% ацетонитрила (0,075% ТФК) в течение 15 минут при объемном расходе 20 мл/мин), получая указанное в заголовке соединение (13,8 мг) в виде белого твердого вещества.

Следующие соединения (примеры 36-39, таблица 2) получают, используя 4,5-дибромтиофен-2-сульфонилхлорид, 2-бром-5-хлортиофен-2-сульфонилхлорид, 3-бром-2,5-дихлортиофен-2-сульфонилхлорид и бензотиофен-2-сульфонилхлорид и методику, описанную в примере 36.

Таблица 2 (Данные* ЖХ-МС: молекулярный ион и время удерживания)
RSO ₂ Cl	3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропиламин
4,5-дибромтиофен-2-сульфонилхлорид	Пример 36 (514,1 М-Н); 1,882 мин
3-бром-5-хлортиофен-2-сульфонилхлорид	Пример 37 (470,1 М-Н); 1,699 мин
4-бром-2,5-дихлортиофен-3-сульфонилхлорид	Пример 38 (504,0 М-Н); 1,916 мин
бензотиофен-2-сульфонилхлорид	Пример 39 (406,2 М-Н); 1,508 мин
*ВЭЖХ/МС Hewlett Packard Series 1100, колонка c Luna C18, 2×30 мм, элюирование с градиентом от 40% смеси ацетонитрил/вода (0,1% НСООН) до 100% ацетонитрила (0,1% НСООН) в течение 3 минут при объемном расходе 0,6 мл/мин.

Пример 40

5-Хлор(3,3,3-трифтор-1-гидроксиметилпропил)тиофен-2-сульфонамид

А. 2-Амино-4,4,4-трифторбутан-1-ол

Раствор триметилсилилхлорида (1,38 г, 12,73 ммоль) добавляют к раствору боргидрида лития (3,2 мл, 2,0М в ТГФ) и ТГФ (5 мл) при 25°С. После перемешивания в течение 5 мин добавляют по частям в течение 5 мин 2-амино-4,4,4-трифтормасляную кислоту (0,50 г, 3,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 48 час. Реакцию гасят, добавляя осторожно по каплям МеОН (5 мл). Растворитель выпаривают и остаток обрабатывают раствором гидроксида калия (КОН) (20%, 6 мл). Водную фазу экстрагируют 3 раза, используя дихлорметан (каждый раз по 10 мл). Органические фазы объединяют и сушат над безводным сульфатом натрия. После фильтрования растворитель выпаривают, получая 2-амино-4,4,4-трифторбутан-1-ол в виде масла (0,174 г, 38%). Масло используют непосредственно в следующей реакции без дополнительной очистки.

В. 5-Хлор(3,3,3-трифтор-1-гидроксиметилпропил)тиофен-2-сульфонамид

К раствору 2-амино-4,4,4-трифторбутан-1-ола (0,161 г, 1,12 ммоль) в сухом CH₂Cl₂ (4 мл) при 25°С в атмосфере азота добавляют по каплям Et₃N (0,17 мл, 1,23 ммоль) и затем также по каплям добавляют раствор 5-хлортиофен-2-сульфонилхлорида (0,243 г, 1,12 ммоль) в дихлорметане (1 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 18 час при 25°С. Затем реакцию гасят, выливая реакционную смесь в делительную воронку, содержащую насыщенный раствор NaHCO₃. Дополнительно добавляют CH₂Cl₂ (15 мл). После экстрагирования органический слой промывают 1 н. HCl, дистиллированной водой и рассолом. Затем органическую фазу сушат над MgSO₄ и концентрируют до неочищенного твердого вещества. После концентрирования неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией, элюент гексан:EtOAc, от 4:2 до 2:1, получая 5-хлор(3,3,3-трифтор-1-гидроксиметилпропил)тиофен-2-сульфонамид в виде прозрачного масла, которое кристаллизуется в вакууме (0,191 г, 53%).

Масс-спектр (-ESI): 321,9 (M-H)^-.

Анализ.

Вычислено для C₈H₉ClF₆NO₃S₂: С, 29,68 Н, 2,80; N, 4,33.

Найдено: С, 29,75; Н, 2,72; N, 4,10.

Пример 41

5-Хлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-[(1R)-1-гидроксиэтил)]-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

А. 5-Хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-S-(формил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор 5-хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-S-(гидроксиметил)пропил]тиофен-2-сульфонамида (полученного согласно способу примера 5, 0,200 г, 0,511 ммоль) в CH₂Cl₂ (10 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют в один прием реагент Десса-Мартина периодинан (0,325 г, 0,767 ммоль) и раствор перемешивают в течение 1 часа при 0°С. После дополнительного перемешивания в течение 1 часа при 25°С реакция, по данным ТСХ (EtOAc:РЕ, 30:70), завершается. Раствор разбавляют Et₂O (100 мл) и к полученному раствору добавляют Na₂S₂O₃ (1,0 г) в насыщенном водном растворе NaHCO₃ (10 мл). Полученную смесь перемешивают в течение 0,5 час. Слои жидкостей разделяют и органический слой дополнительно промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ (10 мл) и рассолом (10 мл) и затем сушат (Na₂SO₄). После концентрирования полученный остаток (0,190 г, 95%) используют непосредственно в следующей реакции без дополнительной очистки.

В. 5-Хлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-[(1R)-1-гидроксиэтил)]-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид

Раствор 5-хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-S-(формил)пропил]тиофен-2-сульфонамид (0,188 г, 0,482 ммоль) в ТГФ (5 мл) перемешивают в атмосфере азота при 0°С. Добавляют по каплям метилмагнийбромида (0,482 мл, 3М раствор в Et₂O) и полученный раствор перемешивают в течение 2 час при 25°С. По окончании указанного периода реакция завершается, по данным ТСХ (EtOAc:РЕ, 30:70). Раствор гасят насыщенным водным раствором NH₄Cl (10 мл) и затем экстрагируют Et₂O (100 мл). Органический слой промывают рассолом (10 мл) и затем сушат (Na₂SO₄). После концентрирования неочищенный продукт очищают препаративной хроматографией на пластинах, элюент EtOAc:РЕ, 30:70, затем хиральной ВЭЖХ [колонка с Chiracel® OJ; 2×25 см, 254 нм, вспрыски 0,6 мл; подвижная фаза: 10 мл/мин 10% EtOH в 7200; продукт соответствует пику один, R_f=6,106, чистота 99,9%], получая основной диастереомер 5-хлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-[(1R)-1-гидроксиэтил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид в виде не совсем белого твердого вещества (0,043 г, 22%).

Масс-спектр (-ESI): 404 (М-Н)^-.

Анализ.

Вычислено для C₁₀H₁₀ClF₆NO₃S₂: С, 29,60; Н, 2,48; N, 3,45.

Найдено: С, 29,59; Н, 2,40; N, 3,41.

Пример 42

Анализ ELISA Aβ40/42

А. Краткое описание анализа

Исходные растворы соединений в ДМСО разводят до концентрации 2 мкМ и ниже в среде для выращивания клеток. Затем соединения применяют к клеткам СНО, содержащим плазмиду АРР-REP-NL [Sudhir et al., J. Biol. Chem., 267:25602-25608 (1992)], в течение 22 часов. После периода кондиционирования среду собирают, разводят в буфере для анализа, содержащем белок и образцы, контроли и синтетические пептидные стандарты инкубируют в планшете для препаративного ELISA. Используя сэндвич-ELISA с антителами, специфически направленными против карбоксильного конца бета-амилоида 40 или 42 [аналогично способу, описанному в Haugabook et al., J. Neurosci. Methods, 108:171-179 (2001), но используя козий антимышиный IgG1 (источник Southern Biotech) в качестве связывающего фрагмента, 6Е10 в качестве иммобилизованного антитела (источник SENETEK), кроличьи анти-Аβ40 и анти-Аβ42 (источник QCB) и антикроличий IgG APL осла (H+L, источник Southern Biotech) в качестве идентифицирующего антитела], количественно определяют влияние обработки соединением на продуцирование клетками внеклеточного бета-амилоида. Затем клетки, обработанные соединением, инкубируют в среде для выращивания клеток, содержащей MTS-формазан. После короткого инкубационного периода планшеты, содержащие MTS/среду, прочитывают на спектрофотометре и определяют степень, в которой токсичность соединения влияет на метаболизм и способность клеток синтезировать бета-амилоид.

В. Материалы для анализа

(i) Испытуемые образцы: образцы соединений поступают в виде исходных 20М растворов в 100% ДМСО.

(ii) Клетки APP-REP-NL: подходящие клеточные линии получают еженедельно с использованием разведений 1:100 и культивируют в DMEM с добавлением 1Х антибиотика/фунгицида 100 мкг/мл антибиотика G418 и 10% сертифицированной фетальной телячьей сыворотки. Клетки также консервируют в жидком азоте. Периодически оценивают продуцирование бета-амилоида и клетки или оставляют в культуре, или заменяют предшественниками при полной экспрессии.

(iii) Антитела: являются кондиционными партиями, которые уже определены как подходящие в данном анализе. Антитела хранят небольшими замороженными аликвотами при -80°С, которые оттаивают и используют.

(iv) Реагенты: являются реагентами наивысшей доступной чистоты. Некоторые реагенты являются "лот-специфическими" ("lot specific"), и могут использоваться реагенты только от определенного изготовителя и определенной партии.

(v) Пластиковая посуда: является посудой наивысшего доступного качества.

С. Критерии активности

Соединение считается активным, если оно имеет ЕС₅₀ для уменьшения Аβ40 <100 мкМ и нетоксично в дозах вблизи ЕС₅₀.

D. Стандартный ингибитор бета-амилоида

Эталонный ингибитор гамма-секретазы DAPT (LY374973, AN37124: Dovey H.F. et al., J. Neurochem., 76:173-181 (2001)) получают, как описано в WO 98/22494 и испытывают в ELISA Aβ40/42, получая Aβ40ЕС₅₀=171 нМ и Aβ42ЕС₅₀=128 нМ.

Пример 43

Анализ на высвобождение репрессора (RRA)

Соединения, полученные, как описано выше в примерах, испытывают в RRA согласно опубликованным методам [Shuey D.J., Sheiffele P., Jones D., Cockett M.I. and Quinet E.M. (1999), "Repressor release: a useful tool for monitoring amyloid precursor protein (APP) proteolysis in mammalian cells", Society for Neuroscience Abstracts, Vol.25, 29^th Annual Meeting of Society for Neuroscience, Maiami Beach, Florida, October 23-28, 1999]. Коротко, данный анализ осуществляют следующим образом.

А. Культивирование клеток

Клетки СНО-К1 выращивают в полных средах DMEM (DMEM, обогащенная глюкозой, с 10% фетальной телячьей сыворотки, 1% аминокислот, не являющихся незаменимыми, и 1% пенициллина-стрептомицина) при 37°С с 5% СО₂. Два миллиона клеток высевают в 10-см чашки за 24 часа до трансфекции.

Временные трансфекции выполняют, как рекомендовано Gibco BRL, с использованием ее системы липофектамин-плюс® (Lipofectamine Plus®). Сначала 6 мкг pRSVO-luc и 6 мкг конструкции ДНК APP-lacI добавляют к 460 мкл среды для трансфекции Opti-Mem и инкубируют с 30 мкл реагента плюс® в течение 15 минут. Затем липидную смесь из 40 мкл реагента липофектамин-плюс® и 460 мкл среды для трансфекции Opti-Mem инкубируют со смесью ДНК-реагент плюс в течение 15 минут. Во время инкубации смеси ДНК-липид клетки СНО-К1 один раз промывают и помещают в 5,0 мл среды DMEM без пенициллина-стрептомицина. Затем препарат ДНК-липид наносят слоем на такие клетки и инкубируют при 37°С в течение ночи.

Полтора миллиона трансфицированных клеток на лунку (общий объем 100 мкл) высевают в стерильные непрозрачные 96-луночные культуральные планшеты Cultur-Plate^TM, Packard, в чистую полную среду DMEM (DMEM без фенолового красного) и инкубируют при 37°С с 5% СО₂ в течение 3-5 часов.

В. Разведение соединений

Соединения разводят с использованием двух разных схем; одну схему используют для соединений, поступающих в чистом виде (взвешенный порошок во флаконах), а другую схему используют для соединений, поступающих в растворе (20 мМ в ДМСО в 96-луночных планшетах). Для обеих схем получают свежие среды 25 мМ Hepes и 25 мМ Hepes/1% ДМСО, которые используют в качестве разбавителей. Hepes/ДМСО используют как контрольный разбавитель во всех экспериментальных планшетах.

Следующая таблица показывает стадии разведения соединения (следует отметить, что последней стадией является добавление соединения к системе клетки/среда в планшете для культивирования тканей).

Таблица 3
	Концентрация	Разведение
Исходный раствор	10 мг/мл	х мг соединения (флакон), разведенные в 100% ДМСО
Разведение 1	1 мг/мл	20 мкл исходного раствора, 180 мкл 25 мМ Hepes
Разведение 2	200 мкг/мл	60 мкл разведения 1, 240 мкл 25 мМ Hepes
Разведение 3 (в планшете)	20 мкг/мл	11,3 мкл разведения 2 (в 100 мкл клеток/лунка)

Поскольку некоторые соединения поступают в 96-луночном оформлении в концентрации 20 мМ, далее приводится схема их разведения (следует отметить, что среднюю молекулярную массу указанных соединений используют для вычисления их разведений, и, как и выше, последней стадией является добавление соединения к системе клетки/среда в планшете для культивирования тканей).

Таблица 4
	Концентрация	Разведение
Исходный раствор (начальная концентрация)	-	20 мМ раствор
Разведение 1	примерно 200 мкг/мл	6 мкл исходного раствора, 194 мкл 25 мМ Hepes
Разведение 2 (в планшете)	примерно 20 кг/мл	11,3 мкл разведения 2 (в 100 мкл леток/лунка)

Как только соединения разведены, их применяют, при двукратном повторе, к клеткам в планшетах для культивирования тканей (подготовленных, как указано выше). Клетки инкубируют с соединением при 37°С с 5% СО₂ дополнительно в течение 36-48 часов.

С. Измерения в анализе

Проводят анализы с люциферазой (реагент LucLit®, Packard) и считывают результаты на приборе TopCount®, Packard. Из каждого 96-луночного планшета удаляют среду и заменяют 100 кл PBS на лунку (с Mg²⁺ или Са²⁺). В каждую лунку добавляют равный объем (100 мкл) лизис/субстратного буфера LucLit® и планшеты герметично закрывают и встряхивают в темноте на ротационном шейкере в течение от примерно 15 до примерно 30 минут при комнатной температуре. Затем производят считывание люциферазы на приборе TopCount®. Результаты выражают в относительных единицах освещенности (RLU) и обрабатывают и анализируют по программе MS Excell®, как указано ниже.

D. Анализ результатов

Результаты анализа в отношении соединений, описанных в качестве примеров в данном описании, приведены в таблице ниже. Соединение считается активным в RRA, если оно приводит к 1,5-кратному, по меньшей мере, возрастанию люциферазной активности в концентрации 20 мкг/мл и не является токсичным, что определяют по ослаблению сигнала (≤0,75-кратное возрастание). Кратность возрастания представляет количество люциферазной активности (измеренное в относительных единицах освещенности) по сравнению с контрольным разбавителем. SEM представляет среднеквадратическую ошибку среднего значения для кратности возрастания (не показана). Найдено, что все соединения являются нетоксичными.

Е. Стандартный ингибитор бета-амилоида

Эталонный ингибитор гамма-секретазы DAPT (LY374973, AN37124: Dovey H.F. et al., J. Neurochem., 76:173-181 (2001)) получают, как описано в публикации Международного патента № WO 98/22494, и испытывают в RRA, получая 18,5-28,1-кратное возрастание люциферазной активности при 20 мкг/мл.

Таблица 5 Примеры соединений изобретения
Пример №	Данные RRA*	Название
1	3,2 3,7	5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид
2	3,7 4,3 5,4	5-хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид
3	4,3	5'-хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(1-гидроксиэтил)бутил]тиофен-2'-сульфонамид
4	3,7	5'-хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропил]тиофен-2'-сульфонамид
5	3,8	5'-хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-S-(гидроксиметил)пропил]тиофен-2'-сульфонамид
6	4,2	5-хлор-N-[(1R,2S)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид
7	3,9	5-хлор-N-[4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид
8	2,8	5-хлор-N-{(1S,2R)-4,4,4-трифтор-[(1S)-1-гидроксиэтил]-2-метилбутил}тиофен-2-сульфонамид
9	2,8	5-хлор-N-{(1S,2R)-4,4,4-трифтор-[(1R)-1-гидроксиэтил]-2-метилбутил}тиофен-2-сульфонамид
10	5,2	5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид
11	4,2	(2S,3S)-2-(5-хлор-3-метилбензо[b]тиофен-2-сульфонил)амидо-5,5,5-трифтор-3-этилпентан-1-ол
12	1,6	(2S,3R)-2-(5-хлор-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-сульфонил)амидо-5,5,5-трифтор-3-фенилпентан-1-ол
14	6,2 5,8	5-хлор-N-[1-(4,4-дифторциклогексил)-2-гидроксиэтил]тиофен-2-сульфонамид
15	4,7	5-хлор-N-[1-(6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-гидроксиэтил]тиофен-2-сульфонамид
16	3,9	5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-формил-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид
17	3,6	N-[(1S,2R)-1-ацетил-4,4,4-трифтор-2-метилбутил]-5-хлортиофен-2-сульфонамид
18	2,9	5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(1-гидрокси-1-метилэтил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид
19		4-бром-5-хлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
20		4-бром-5-хлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
21		5-хлор-4-фтор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
22		5-бром-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
23		5-фтор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
24		5-бром-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
25		5-фтор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
26		5-хлор-N-[4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил]тиофен-2-сульфонамид
27		5-хлор-N-[(1S)-(4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил)]тиофен-2-сульфонамид
28		4,5-дихлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
29		N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-3-сульфонамид
30		2,5-дихлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-3-сульфонамид
31		N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
32		4,5-дихлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
33		(3,3,3-трифтор-1-гидроксиметил-2-трифторметилпропил)амид тиофен-2-сульфоновой кислоты
34		(3,3,3-трифтор-1-гидроксиметил-2-трифторметилпропил)амид тиофен-3-сульфоновой кислоты
35		(3,3,3-трифтор-1-гидроксиметил-2-трифторметилпропил)амид 2,5-дихлортиофен-3-сульфоновой кислоты
36		4,5-дибром-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
37		3-бром-5-хлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
38		4-бром-2,5-дихлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-3-сульфонамид
39		(3,3,3-трифтор-1-гидроксиметил-2-трифторметилпропил)амид бензо[b]тиофен-2-сульфоновой кислоты
40	3,8 4,2	5-хлор-(3,3,3-трифтор-1-гидроксиметилпропил)тиофен-2-сульфонамид
41	6,2	5-хлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-[(1R)-гидроксиэтил]-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид
*Кратность возрастания APPI, все соединения испытывают при 20 г/мл.

Все публикации, цитированные в данном описании, включены в него в качестве ссылок. Хотя изобретение описано со ссылками на определенные предпочтительные воплощения, следует иметь в виду, что можно осуществить модификации, не отходя от существа изобретения. Подразумевается, что такие модификации входят в объем прилагаемой формулы изобретения.

Claims

1. Соединение формулы (I)

R₁ и R₂ независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, C_1-6алкила;

R₃ представляет собой водород;

R₄ выбирают из группы, состоящей из (CF₃)_nалкила, (CF₃)_nалкилфенила, и (F)_nциклоалкила;

N равен 1-2;

R₅ выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена, диена, конденсированного с Y, когда Y означает С, и диена, конденсированного с Y, когда Y означает С и замещенного галогеном;

W, Y и Z независимо выбирают из группы, состоящей из С, CR₆ и N, при условии, что, по меньшей мере, один из W или Y, или Z должен быть С;

R₆ выбирают из группы, состоящей из водорода, галогена и С_1-6алкила;

Х выбирают из группы, состоящей из S и NR₇;

R₇ выбирают из группы, состоящей из С_1-6алкила; и

R₈ представляет собой С_1-6алкил;

или его фармацевтически приемлемая соль или гидрат.

2. Соединение по п.1, где R₅ представляет собой галоген.

3. Соединение по п.2, где R₅ представляет собой хлор, бром или фтор.

4. Соединение по любому из пп.1-3, где R₁ и R₂ каждый представляет собой водород.

5. Соединение по п.1, где W представляет собой С, и Z представляет собой CR₆.

6. Соединение по п.1, где Х представляет собой S, и W, Y и Z независимо выбирают из С или CR₆, при условии, что один из W, Y или Z представляет собой С.

7. Соединение по п.1, где R₄ выбирают из группы, состоящей из (CF₃)_nC_1-6алкила и (CF₃)_n(С_1-6алкил)фенила S-стереохимии.

8. Соединение по п.1, где Х представляет собой S, W представляет собой С, Y представляет собой CH, Z представляет собой СН, R₅ представляет собой хлор, R₄ представляет собой CF₃СН₂СНСН₃, R₃, R₁ и R₂ каждый представляет собой водород, имеющее стереохимию 1S, 2R.

9. Соединение по п.1, где Х представляет собой S, W представляет собой С, Y представляет собой СН, Z представляет собой СН, R₅ представляет собой хлор, R₄ представляет собой CF₃CHCF₃, и R₃, R₁ и R₂ каждый представляет собой водород, имеющее стереохимию 1S.

10. Соединение по п.1, где W представляет собой N, и Х представляет собой NR₇.

11. Соединение по п.1, где соединение выбирают из группы, включающей

5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид;

5-хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид;

5'-хлор-N-[(1S,2R)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(1-гидроксиэтил)бутил]тиофен-2'-сульфонамид;

5'-хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-(гидроксиметил)пропил]тиофен-2'-сульфонамид;

5'-хлор-N-[3,3,3-трифтор-2-(трифторметил)-1-S-(гидроксиметил)пропил]тиофен-2'-сульфонамид;

5-хлор-N-[(1R,2S)-2-этил-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид;

5-хлор-N-[4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)бутил]тиофен-2-сульфонамид;

5-хлор-N-{(1S,2R)-4,4,4-трифтор-[(1S)-1-гидроксиэтил]-2-метилбутил}тиофен-2-сульфонамид;

5-хлор-N-{(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-[(1R)-1-гидроксиэтил]-2-метилбутил}тиофен-2-сульфонамид;

5-хлор-N-[(1S,2S)-4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид;

(2S,3S)-2-(5-хлор-3-метилбензо[b]тиофен-2-сульфонил)амидо-5,5,5-трифтор-3-этилпентан-1-ол;

(2S,3R)-2-(5-хлор-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-сульфонил)амидо-5,5,5-трифтор-3-фенилпентан-1-ол;

5-хлор-N-[1-(4,4-дифторциклогексил)-2-гидроксиэтил]тиофен-2-сульфонамид;

5-хлор-N-[1-(6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-гидроксиэтил]тиофен-2-сульфонамид;

5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-формил-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид;

N-[(1S,2R)-1-ацетил-4,4,4-трифтор-2-метилбутил]-5-хлортиофен-2-сульфонамид;

5-хлор-N-[(1S,2R)-4,4,4-трифтор-1-(1-гидрокси-1-метилэтил)-2-метилбутил]тиофен-2-сульфонамид;

4-бром-5-хлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

4-бром-5-хлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

5-хлор-4-фтор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

5-бром-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

5-фтор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

5-бром-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

5-фтор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

5-хлор-N-[4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил]тиофен-2-сульфонамид;

5-хлор-N-[(1S)-(4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил)]тиофен-2-сульфонамид;

4,5-дихлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-3-сульфонамид;

2,5-дихлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-3-сульфонамид;

N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

4,5-дихлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

(3,3,3-трифтор-1-гидроксиметил-2-трифторметилпропил)амид тиофен-2-сульфоновой кислоты;

(3,3,3-трифтор-1-гидроксиметил-2-трифторметилпропил)амид тиофен-3-сульфоновой кислоты;

(3,3,3-трифтор-1-гидроксиметил-2-трифторметилпропил)амид 2,5-дихлортиофен-3-сульфоновой кислоты;

4,5-дибром-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

3-бром-5-хлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

4-бром-2,5-дихлор-N-[3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

(3,3,3-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(трифторметил)пропил)амид бензо[b]тиофен-2-сульфоновой кислоты;

5-хлор-(3,3,3-трифтор-1-гидроксиметилпропил)тиофен-2-сульфонамид и

5-хлор-N-[(1S)-3,3,3-трифтор-1-[(1R)-гидроксиэтил]-2-(трифторметил)пропил]тиофен-2-сульфонамид;

или его фармацевтически приемлемая соль, или гидрат.

12. Соединение по п.1, представляющее собой 5-хлор-N-[(1S)-(4,4,4-трифтор-1-(гидроксиметил)-2-(2,2,2-трифторэтил)бутил)]тиофен-2-сульфонамид или его фармацевтически приемлемую соль, или гидрат.

13. Соединение по п.1, где R₅ представляет собой галоген, R₄ выбирают из группы, состоящей из (CF₃)_n(С_1-6алкила) и (CF₃)_n(С_1-6алкил)фенила, S-стереохимии, и R₃, R₁ и R₃ все представляют собой Н.

14. Соединение по п.1, где Т представляет собой C(OH)R₁R₂, R₁, R₂ и R₃ представляют собой Н, и R₄ представляет собой (F)_nциклоалкил.

15. Соединение по п.1, где Т представляет собой C(OH)R₁R₂, R₁, R₂ и R₃ представляют собой Н, и R₄ представляет собой (CF₃)_nалкил.

16. Соединение по п.1, где Т представляет собой C(OH)R₁R₂, R₁ представляет собой СН₃, R₂ представляет собой Н, R₃ представляет собой Н, и R₄ представляет собой (CF₃)_nалкил.

17. Соединение по п.1, где Т представляет собой СНО, R₃ представляет собой Н, и R₄ представляет собой (CF₃)_nалкил.

18. Соединение по п.1, где Т представляет собой C(OH)R₁R₂, R₁, R₂ и R₃ представляют собой Н, и R₄ представляет собой (CF₃)₂СН S-стереохимии.

19. Соединение по п.1, где Т представляет собой СНО, R₃ представляет собой Н, и R₄ представляет собой СН(СН₃)СН₂CF₃ S-стереохимии.

20. Соединение по п.1, где Т представляет собой C(O)R₈, R₃ представляет собой Н, R₄ представляет собой СН(СН₃)СН₂CF₃ S-стереохимии, и R₈ представляет собой СН₃.

21. Соединение по п.1, где Т представляет собой C(OH)R₁R₂, R₁, R₂ и R₃ представляют собой Н, и R₄ представляет собой СН(СН₂CF₃)₂ S-стереохимии.

22. Соединение по п.1, где Т представляет собой C(OH)R₁R₂, R₁, R₂ и R₃ представляют собой Н, и R₄ представляет собой СН(СН₃)СН₂CF₃ S-стереохимии.

23. Соединение по п.1, где Т представляет собой C(OH)R₁R₂, R₁ представляет собой СН₃, R₂ и R₃ представляют собой Н, и R₄ представляет собой СН(CF₃)₂ S-стереохимии.

24. Соединение по п.1, где Т представляет собой C(OH)R₁R₂, R₁, R₂ и R₃ представляют собой Н, и R₄ представляет собой (F)_n-циклоалкил.

25. Соединение по п.1, где фармацевтически приемлемую соль выбирают из группы, состоящей из солей органических кислот, солей неорганических кислот, солей оснований и их смесей.

26. Соединение по п.25, где соли органических и неорганических кислот выбирают из группы, состоящей из солей уксусной кислоты, молочной кислоты, лимонной кислоты, винной кислоты, янтарной кислоты, фумаровой кислоты, малеиновой кислоты, малоновой кислоты, миндальной кислоты, яблочной кислоты, хлористоводородной кислоты, бромистоводородной кислоты, фосфорной кислоты, азотной кислоты, серной кислоты, метансульфоновой кислоты, толуолсульфоновой кислоты и их смесей.

27. Соединение по п.25, где соли оснований выбирают из группы, состоящей из солей гидроксида натрия, гидроксида лития и гидроксида калия и их смесей.

28. Фармацевтическая композиция, ингибирующая образование бета-амилоида, содержащая соединение по п.1 и физиологически совместимый носитель.

29. Фармацевтический набор, ингибирующий образование бета-амилоида, содержащий контейнер, содержащий фармацевтическую композицию по п.28.

30. Способ получения трифторметилированного или фторированного гетероциклического сульфонамида по п.1, включающий

(а) фильтрование смеси диастереомеров аминоэфира, где указанный аминоэфир содержит, по меньшей мере, один хиральный центр и, по меньшей мере, одну трифторметильную или фторгруппу, присоединенную к, по меньшей мере, одному хиральному центру через алкильную группу;

(b) обработку аминоэфира DIBAL-Н в толуоле с образованием N-бензиламиноспирта;

(c) гидрирование N-бензиламиноспирта в присутствии катализатора и образования аминоспирта;

(d) сульфирование аминоспирта со стадии (с) гетероциклическим сульфонилхлоридом, и

(e) кристаллизацию сульфированного продукта со стадии (d) с получением хирально чистого трифторметилированного или фторированного гетероциклического сульфонамида.

31. Способ по п.30, где стадию кристаллизации осуществляют с использованием этилацетата и гексана.

32. Способ получения трифторметилированного или фторированного гетероциклического сульфонамида по п.1, включающий

(a) обработку трифторметилированного или фторированного альдегида дегидратирующим агентом и хиральным сульфинамидом с образованием трифторметилированного или фторированного хирального сульфинамида;

(b) обработку указанного трифторметилированного или фторированного хирального сульфинимида цианирующим агентом с образованием трифторметилированного или фторированного диастереомерного α-аминонитрила;

(c) гидролиз указанного трифторметилированного или фторированного диастереомерного α-аминонитрила до трифторметилированной или фторированной α-аминокислоты;

(d) восстановление указанной трифторметилированной или фторированной α-аминокислоты до трифторметилированного или фторированного β-аминоспирта, и

(e) взаимодействие указанного трифторметилированного или фторированного β-аминоспирта с гетероциклическим сульфонилхлоридом с образованием указанного трифторметилированного или фторированного гетероциклического сульфонамида.

33. Способ по п.32, дополнительно включающий

(f) экстрагирование указанного трифторметилированного или фторированного гетероциклического сульфонамида.

34. Способ по п.32 или 33, дополнительно включающий очистку указанного трифторметилированного или фторированного гетероциклического сульфонамида.

35. Способ по п.34, где указанный трифторметилированный или фторированный гетероциклический сульфонамид очищают с использованием хроматографии.

36. Способ по п.32, где указанный дегидратирующий агент представляет собой этоксид титана, сульфат магния или молекулярные сита 4Å.

37. Способ по п.32, где указанный хиральный сульфинамид представляет собой S-(+)-толуолсульфинамид или трет-бутансульфинамид.

38. Способ по п.32, где указанный цианирующий агент представляет собой цианид этилизопропоксиалюминия.

39. Способ по п.32, где указанный дегидратирующий агент представляет собой этоксид титана, указанный хиральный сульфинамид представляет собой S-(+)-толуолсульфинамид и указанный цианирующий агент представляет собой цианид этилизопропоксиалюминия.

40. Применение соединения по п.1 или композиции по пп.28 и 29 при получении лечебного средства, примененимого для введения млекопитающему субъекту для ингибирования образования бета-амилоида.

41. Применение по п.40, где указанное соединение вводят перорально, инъекцией или ингаляцией.

42. Соединение формулы