RU2253672C2 - Бактериальный пробиотический препарат - Google Patents
Бактериальный пробиотический препарат Download PDFInfo
- Publication number
- RU2253672C2 RU2253672C2 RU2002118732/13A RU2002118732A RU2253672C2 RU 2253672 C2 RU2253672 C2 RU 2253672C2 RU 2002118732/13 A RU2002118732/13 A RU 2002118732/13A RU 2002118732 A RU2002118732 A RU 2002118732A RU 2253672 C2 RU2253672 C2 RU 2253672C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bacteria
- balance
- narine
- strain
- biomass
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims description 15
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 title claims description 9
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 title claims description 9
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 title claims description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 32
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 30
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 claims abstract description 21
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 208000035404 Autolysis Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 claims abstract description 12
- 230000028043 self proteolysis Effects 0.000 claims abstract description 12
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 108010053775 Nisin Proteins 0.000 claims abstract description 11
- NVNLLIYOARQCIX-MSHCCFNRSA-N Nisin Chemical compound N1C(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)[C@@H]([C@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)[C@H](N)[C@H](C)CC)CSC[C@@H]1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]2C(NCC(=O)N[C@H](C)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CS[C@@H]2C)C(=O)N[C@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]2C(N[C@H](C)C(=O)N[C@@H]3C(=O)N[C@@H](C(N[C@H](CC=4NC=NC=4)C(=O)N[C@H](CS[C@@H]3C)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N[C@H]([C@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=3NC=NC=3)C(=O)N[C@H](C(C)C)C(=O)NC(=C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(O)=O)=O)CS[C@@H]2C)=O)=O)CS[C@@H]1C NVNLLIYOARQCIX-MSHCCFNRSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 235000010297 nisin Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 239000004309 nisin Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 claims abstract description 8
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000010257 thawing Methods 0.000 claims abstract description 7
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims abstract 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims abstract 2
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 30
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 9
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 3
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 abstract description 14
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 abstract description 12
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 abstract description 10
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 abstract description 9
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 abstract description 2
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000002183 duodenal effect Effects 0.000 abstract 1
- 208000000718 duodenal ulcer Diseases 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 21
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 20
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 19
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 7
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 7
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 5
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 208000027244 Dysbiosis Diseases 0.000 description 4
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 4
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 4
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 4
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 230000000767 anti-ulcer Effects 0.000 description 3
- -1 carbipicillin Chemical compound 0.000 description 3
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 3
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 3
- 230000007140 dysbiosis Effects 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 2
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 2
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 2
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 description 2
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 2
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 2
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 2
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 2
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 2
- ZFRKQXVRDFCRJG-UHFFFAOYSA-N skatole Chemical compound C1=CC=C2C(C)=CNC2=C1 ZFRKQXVRDFCRJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- ZJZHQGPJCMNEDT-TWZKVBNYSA-N (2s,5r,6r)-6-[[(2r)-2-amino-2-phenylacetyl]amino]-3,3-dimethyl-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid;(2s,5r,6r)-3,3-dimethyl-6-[(5-methyl-3-phenyl-1,2-oxazole-4-carbonyl)amino]-7-oxo-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1.N([C@@H]1C(N2[C@H](C(C)(C)S[C@@H]21)C(O)=O)=O)C(=O)C1=C(C)ON=C1C1=CC=CC=C1 ZJZHQGPJCMNEDT-TWZKVBNYSA-N 0.000 description 1
- SGKRLCUYIXIAHR-AKNGSSGZSA-N (4s,4ar,5s,5ar,6r,12ar)-4-(dimethylamino)-1,5,10,11,12a-pentahydroxy-6-methyl-3,12-dioxo-4a,5,5a,6-tetrahydro-4h-tetracene-2-carboxamide Chemical compound C1=CC=C2[C@H](C)[C@@H]([C@H](O)[C@@H]3[C@](C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@H]3N(C)C)(O)C3=O)C3=C(O)C2=C1O SGKRLCUYIXIAHR-AKNGSSGZSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 3,7-bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WZRJTRPJURQBRM-UHFFFAOYSA-N 4-amino-n-(5-methyl-1,2-oxazol-3-yl)benzenesulfonamide;5-[(3,4,5-trimethoxyphenyl)methyl]pyrimidine-2,4-diamine Chemical compound O1C(C)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1.COC1=C(OC)C(OC)=CC(CC=2C(=NC(N)=NC=2)N)=C1 WZRJTRPJURQBRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000304886 Bacilli Species 0.000 description 1
- 241000606125 Bacteroides Species 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 208000036649 Dysbacteriosis Diseases 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- IECPWNUMDGFDKC-UHFFFAOYSA-N Fusicsaeure Natural products C12C(O)CC3C(=C(CCC=C(C)C)C(O)=O)C(OC(C)=O)CC3(C)C1(C)CCC1C2(C)CCC(O)C1C IECPWNUMDGFDKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 1
- 241000194034 Lactococcus lactis subsp. cremoris Species 0.000 description 1
- OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N Lincomycin Natural products CN1CC(CCC)CC1C(=O)NC(C(C)O)C1C(O)C(O)C(O)C(SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108010040201 Polymyxins Proteins 0.000 description 1
- 241000208474 Protea Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 235000014962 Streptococcus cremoris Nutrition 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 229910001514 alkali metal chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 210000004246 corpus luteum Anatomy 0.000 description 1
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229960003722 doxycycline Drugs 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 230000000369 enteropathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- PLHJDBGFXBMTGZ-WEVVVXLNSA-N furazolidone Chemical compound O1C([N+](=O)[O-])=CC=C1\C=N\N1C(=O)OCC1 PLHJDBGFXBMTGZ-WEVVVXLNSA-N 0.000 description 1
- 229960001625 furazolidone Drugs 0.000 description 1
- IECPWNUMDGFDKC-MZJAQBGESA-N fusidic acid Chemical compound O[C@@H]([C@@H]12)C[C@H]3\C(=C(/CCC=C(C)C)C(O)=O)[C@@H](OC(C)=O)C[C@]3(C)[C@@]2(C)CC[C@@H]2[C@]1(C)CC[C@@H](O)[C@H]2C IECPWNUMDGFDKC-MZJAQBGESA-N 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- 238000003771 laboratory diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- AUJXLBOHYWTPFV-UHFFFAOYSA-N levomycin Chemical compound CN1C(=O)C(C)NC(=O)C(NC(=O)C=2N=C3C=CC=CC3=NC=2)COC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)C2N(C)C(=O)C(C)NC(=O)C(NC(=O)C=3N=C4C=CC=CC4=NC=3)COC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)C1CSC2SC AUJXLBOHYWTPFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N lincomycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N 0.000 description 1
- 229960005287 lincomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003458 metachromatic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 229940051921 muramidase Drugs 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 1
- 235000019371 penicillin G benzathine Nutrition 0.000 description 1
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 1
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229940074386 skatole Drugs 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000021262 sour milk Nutrition 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- ASWVTGNCAZCNNR-UHFFFAOYSA-N sulfamethazine Chemical compound CC1=CC(C)=NC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 ASWVTGNCAZCNNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXRZBTAEDBELFD-UHFFFAOYSA-N sulfamethopyrazine Chemical compound COC1=NC=CN=C1NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 KXRZBTAEDBELFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000031068 symbiosis, encompassing mutualism through parasitism Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
- 235000008939 whole milk Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и медицинской микробиологии и представляет собой лечебно-профилактический препарат на основе лактобактерий вида Lactobacillus acidophilus. Бактериальный пробиотический препарат содержит биомассу живых бактерий штамма Lactobacillus acidophilus N.V. Ер 317/402-Х “Баланс-Наринэ” и в качестве источника клеточного детрита, внеклеточных и внутриклеточных метаболитов - биомассу бактерий штамма Lactobacillus acidophilus N.V. Ер 317/402-Х “Баланс-Наринэ”, подвергнутую многократному замораживанию-оттаиванию или автолизу, при следующем содержании компонентов, мас.%: биомасса живых бактерий штамма L. acidophilus N.V. Ер 317/402-Х “Баланс-Наринэ” 1,0-99,0, биомасса бактерий штамма L. acidophilus N.V. Ер 317/402-Х “Баланс-Наринэ”, подвергнутая многократному замораживанию-оттаиванию или автолизу в качестве источника клеточного детрита, внеклеточных и внутриклеточных метаболитов - остальное. Кроме того, препарат дополнительно содержит лизоцим в количестве 0,5-30,0 мг на 1 мл препарата и/или низин в количестве 0,001-0,1 мг на 1 мл препарата. Полученный препарат обладает широким спектром антагонистической активности, в частности, в отношении патогенных бактерий Helicobacter pylori, вызывающих различные формы гастритов и язв желудка и двенадцатиперстной кишки и высоким содержанием полезных веществ, необходимых для коррекции дисбактериозов и различных желудочно-кишечных заболеваний. 1 з.п. ф-лы, 2 табл.
Description
Изобретение относится к биотехнологии и медицинской микробиологии и представляет собой лечебно-профилактический препарат на основе лактобактерий вида Lactobacillus acidophilus. Функции нормальной микрофлоры в организме являются жизненно важными и очень обширными: синтезирующая, регуляторная, десенсибилизирующая, дезинтоксикационная, ферментативная, защитная и иммуностимулирующая.
Препараты и продукты, содержащие в своем составе лактобактерии, широко используются для профилактики и лечения дисбактериозов и нормализации микрофлоры кишечника людей, перенесших стрессовые воздействия, антибиотико- и химиотерапию.
За рубежом широко используют препараты-пробиотики и продукты лечебного питания на основе штаммов лактобактерий вида Lactobacillus acidophilus (патент США №3639666; патент Франции №2622452; патент Швейцарии №637297; патент ФРГ 2421066; патент Японии №05227946; Международная заявка (WO) №93/09793).
Однако препараты зарубежных фирм-разработчиков ориентированы на создание, преимущественно, лечебно-профилактических средств и БАД в сухой форме (таблетки, капсулы). Указанные препараты имеют существенные недостатки, связанные с низкой лечебно-профилактической активностью.
Известен бактериально-ферментный препарат, включающий биомассу бифидобактерий 106-108 КОЕ и ферментный компонент лизоцим в количестве 5-20 мг в одной дозе (патент РФ №2071339, МПК А 61 К 35/74, опубл. 10.01.97 г.).
Известен бактериально-ферментный препарат, включающий бактериальный симбиоз Streptococcus lactis. Streptococcus cremoris и Streptococcus diacetylactis и продукты ферментативного гидролиза протиолитическим ферментом сывороточных белков (патент РФ №2084161, МПК А 23 С 9/12, опубл. 20.07.97 г.).
Наиболее близким техническим решением (прототипом) является пробиотический препарат “Микростим”, содержащий жизнеспособные клетки штамма L.plantarum 8-РА-3 и их метаболиты (Пробиотические микроорганизмы - современное состояние вопроса и перспективы использования. Международная научно-практическая конференция памяти Г.И.Гончаровой. Сборник материалов. М., 28-29 мая 2002, с.49). Однако вышеуказанные аналоги и прототип имеют недостаточный спектр антагонистической активности, в частности, в отношении патогенных бактерий Helicobacter pylori, вызывающих различные формы гастритов и язв желудка и двенадцатиперстной кишки.
Техническим результатом предлагаемого изобретения является создание препарата, обладающего более широким спектром антагонистической активности, в частности, в отношении патогенных бактерий Helicobacter pylori, вызывающих различные формы гастритов и язв желудка и двенадцатиперстной кишки и значительно большим содержанием полезных веществ, необходимых для коррекции дисбактериозов и различных желудочно-кишечных заболеваний.
Указанный технический результат достигается тем, что бактериально-ферментный препарат, включающий биомассу живых пробиотических бактерий,согласно изобретению, препарат содержит биомассу бактерий штамма Lactobacillus acidophilus N.V. Ер 317/402-Х "Баланс-Наринэ", а в качестве источника клеточного детрита, внеклеточных и внутриклеточных метаболитов содержит биомассу бактерий штамма Lactobacillus N.V. Ер 317/402-Х “Баланс-Наринэ”, подвергнутую многократному замораживанию-оттаиванию или автолизу, при следующем содержании компонентов, мас.%:
биомасса бактерий
штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ер 317/402-Х
"Баланс-Наринэ" 1,0-99,0
биомасса бактерий штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-Х
"Баланс-Наринэ", подвергнутая многократному замораживанию-оттаиванию или автолизу остальное до 100%
Кроме того, препарат дополнительно содержит лизоцим в количестве 0,5-30,0 мг на 1 мл препарата и/или низин в количестве 0,001-0,1 мг на 1 мл препарата.
Штамм Lactobacillus acidophilus N.V. Ep 317/402-Х (авторское наименование "Баланс-Наринэ") получен селекцией исходной культуры Lactobacillus acidophilus N.V. Ep 317/402 "Наринэ" и направленного отбора по следующим показателям (заявка на патент РФ №2001125048, МПК С 12 N 1/20, приоритет 12.09.2001 г.):
- антагонистическая активность по отношению к микроорганизмам, вызывающим желудочно-кишечные заболевания, в частности, патогенных бактерий Helicobacter pylori, вызывающих различные формы гастритов и язв желудка и двеннадцатиперстной кишки;
- способность продуцировать полезные вещества (витамины, аминокислоты, антиоксиданты);
- устойчивость мембранных структур бактериальных клеток к внешним факторам (кислотность, температура и т.п), обеспечивающая сохранение высокого титра лактобактерий в процессе хранения.
Штамм Lactobacillus acidophilus N.V. Ep 317/402-Х "Баланс-Наринэ" депонирован под №МЦКМ В-17 в Коллекции Межрегионального центра коррекции микроценоза человека (г.Новосибирск) и имеет следующие свойства, культурально-морфологические: неподвижные аспорогенные палочки 2-20×0,8-0,9 мкм, клетки расположены одиночно или в виде коротких цепочек, неподвижны, грамположительные спор и капсул не образуют. По Граму окрашиваются положительно. При окрашивании метиленовой синью в клетках наблюдаются четко выраженные метахроматические зерна. Гомоферментативные, микроаэрофилы. Колонии образуют клубки в виде перепутанных нитей. Физиологические: минимальная температура роста 20°С, оптимальная - +37-39°С. Штамм имеет повышенную протеолитическую, ароматообразующую, антагонистическую активность, синтезирует в молоке витамины, аминокислоты. Клетки бактерии не образуют индола и скатола, желатину не разжижают, энергично сбраживают лактозу. Штамм непатогенен и нетоксичен. Температурный диапазон роста штамма 20-48°С. Физиологический диапазон рН жизнедеятельности бактерий штамма - 3,8-6,5. Каталазоотрицательный. Разлагает глюкозу без образования газа. Логарифмическая фаза роста в сыворотке или молочной среде (обезжиренном молоке) заканчивается к 8-14 часам с образованием равномерного сгустка. Сбраживает: лактозу, глюкозу, сахарозу, мальтозу, сорбит, дульцит, галактозу. Не сбраживает - маннит, глицерин. Индол не образует. Штамм продуцирует значительное количество безвредных антибиотических веществ, подавляющих рост и развитие как грамположительных (St aureus), так и грамотрицательных (Е. соli) патогенных бактерий, в том числе всех без исключения бактерий-возбудителей дезинтерии и дезинтериоподобных заболеваний. Штамм высокочувствителен к антибиотикам:
бензилпенициллину, стрептомицину, эритромицину, карбипицилину, линкомицину, цифобиду, левомицитину, доксициклину, фуразолидону. Штамм слабочувствителен к антибиотикам: гентамицину, тетрациклину, олететрину, кефзолу, рифампицину, ампициллину, канамицину, нитроксалину, фузидину, клофорану, полимиксину, ампиоксу. Не чувствителен к антибиотикам: сульфодиметоксину, сульфадимезину, бисептолу, торавиду, сульфалену. Антагонистическая активность штамма, выраженная в миллиметрах, зон угнетения роста патогенных тест-штаммов Флекснера и штамма Зонне, протея, энтеропатогенной кишечной палочки, золотистого стафилококка составляет не менее 15 мм. Кроме того, штамм Lactobacillus acidophilus N.V. Ер 317/402-Х "Баланс-Наринэ" устраняет прилипание бактерий Helicobacter pylori к стенкам желудочно-кишечного тракта.
В цельном молоке с содержанием СОМО 8-10% динамика роста и кислотообразования выглядит следующим образом. Среда культивирования: молоко коровье цельное, нормализованное или обезжиренное (обрат). Температура культивирования: 37-39°С. Время инкубации: 5-7 ч, в зависимости от температуры инкубации количество закваски, вносимой в молоко, 1,5-2%. Штамм Lactobacillus acidophilus N.V. Ep 317/402-Х "Баланс-Наринэ" может быть использован в бактериальных заквасках, а также для приготовления лечебно-диетических продуктов. Селекция предлагаемого штамма проведена путем традиционного пассирования первоначального штамма 317/402 на молочно-сывороточной среде без внесения каких-либо искусственных химических веществ-мутагенов, а потому штамм не обладает потенциальной опасностью.
Клеточный детрит, внеклеточные и внутриклеточные метаболиты бактерий штамма Lactobacillus acidophilus N.V. Ep 317/402-Х "Баланс-Наринэ" включают комплекс бактериальных ферментов, которые получают, например, путем многократного замораживания-оттаивания биомассы бактерий и обработки ультразвуком замороженных клеток бактерий. При этом освобождаются ферменты и другие внеклеточные и внутриклеточные метаболиты.
Лизоцим (мурамидаза) является ферментом класса гидролаз мол. массы 14-93 тыс. Дальтон, вызывает лизис многих грамположительных патогенных бактерий, растворяя их клеточные стенки. Лизоцим получают, например, из яичного белка путем его экстракции водой при рН 3,0-4,0 и содержании хлорида щелочного металла в реакционной среде 0,5-4,0 мас.% с одновременным нагреванием реакционной среды до 80-95°С и последующим отделением осадка балластных белков.
Фермент низин синтезируется молочно-кислыми бактериями Streptococcus lactis и представляет не индивидуальное вещество, а семейство близких по структуре и физико-химическим свойствам полипептидов. Низин проявляет активность в отношении многих грамотрицательных бактерий, в том числе Helicobacter pylori.
Ниже приведены примеры составов препарата.
Пример 1:
Биомасса бактерий
штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-Х
"Баланс-Наринэ" 10,0 мл
Биомасса бактерий штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ер 317/402-Х "Баланс-Наринэ",
подвергнутая многократному
замораживанию-оттаиванию или автолизу, 990,0 мл
Пример 2:
Биомасса бактерий
штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-Х 500,0 мл
Биомасса бактерий штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-Х "Баланс-Наринэ",
подвергнутая многократному
замораживанию-оттаиванию или автолизу, 500,0 мл
Пример 3:
Биомасса бактерий
штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-Х
"Баланс-Наринэ" 990,0 мл
Биомасса бактерий штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-Х "Баланс-Наринэ",
подвергнутая многократному
замораживанию-оттаиванию или автолизу, 10,0 мл
Лизоцим 1000 мг
Низин 1 мг
Пример 4:
Биомасса бактерий штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-X
"Баланс-Наринэ" 100,0 мл
Биомасса бактерий штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-Х "Баланс-Наринэ",
подвергнутая многократному
замораживанию-оттаиванию или автолизу,
"Баланс-Наринэ" 900,0 мл
Лизоцим 500,0 мг
Пример 5:
Биомасса бактерий
штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-Х
"Баланс-Наринэ" 500,0 мл
Биомасса бактерий штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-Х "Баланс-Наринэ",
подвергнутая многократному
замораживанию-оттаиванию или автолизу, 500,0 мл
Лизоцим 30000 мг
Пример 6:
Биомасса бактерий
штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-Х
"Баланс-Наринэ" 900,0 мл
Биомасса бактерий штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-Х "Баланс-Наринэ",
подвергнутая многократному
замораживанию-оттаиванию или автолизу, 100,0 мл
Низин 1,0 мг
Пример 7:
Биомасса бактерий
штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ep 317/402-Х
"Баланс-Наринэ" 900,0 мл
Биомасса бактерий штамма Lactobacillus
acidophilus N.V. Ер 317/402-Х "Баланс-Наринэ",
подвергнутая многократному
замораживанию-оттаиванию или автолизу, 100,0 мл
Низин 100,0 мг
Пример 8. Технология получения противогастритного и противоязвенного бактериально-ферментного препарата "Баланс-Наринэ-Ф"
Первый вариант. Закваска лактобактерий, приготовленная на основе штамма L. acidophilus N.V. Ер 317/402-Х "Баланс-Наринэ", была использована для приготовления кисломолочных продуктов лечебно-диетического питания. В качестве основы используют молоко, которое нормализуют по массовой доле жира. Затем молоко подвергают "глубокой" пастеризации при температуре (92±2)°С с выдержкой не менее 15 мин и охлаждают до температуры заквашивания +35°С. Сквашивают молоко в резервуарах для кисломолочных напитков с охлаждаемой рубашкой и снабженных специальными мешалками для равномерного перемешивания молочного сгустка. В молоко вносят производственную закваску на основе жидкой закваски лактобактерий (штамм L. acidophilus N.V. Ер 317/402-Х "Баланс-Наринэ") в количестве (2-5)% от массы нормализованной смеси. Полученную смесь сквашивают при температуре (+38±1)°С в течение (4,0-5,0) ч. Окончание сквашивания определяют по образованию достаточно прочного сгустка и кислотности, которая должна быть не более 100°Т. По окончании сквашивания продукт охлаждают до температуры (+25-30)°С, подавая в межстенное пространство резервуара ледяную воду. Затем сгусток перемешивают (10-15) мин. Перемешанный сгусток сразу же подают на розлив, а затем доохлаждают до температуры (6±2)°С в холодильной камере.
Далее часть полученного продукта (биомассы бактерий) подвергают многократному замораживанию-оттаиванию и обрабатывают ультразвуком замороженных клеток бактерий. Из полученных компонентов приготавливают бактериально-ферментный препарат "Баланс-Наринэ-Ф" в соответствии с примерами 1 и 2.
Кроме того, в препарат дополнительно вводят лизоцим и/или низин в соответствии с примерами 3-7.
Второй вариант. Биомассу живых пробиотических бактерий получают так же, как в первом варианте. Далее часть живых пробиотических бактерий (до охлаждения) продолжают сквашивать при температуре (+38±1)°С в течение (14,0-16,0) ч. Окончание сквашивания определяют по образованию достаточно прочного сгустка и кислотности, которая должна быть не менее 180°Т. По окончании сквашивания продукт охлаждают до температуры (+25-30)°С, подавая в межстенное пространство резервуара ледяную воду. Затем сгусток перемешивают (10-15) мин. Перемешанный сгусток подают на розлив, а затем доохлаждают до температуры (6±2)°С в холодильной камере и выдерживают в течение времени (не менее 1 месяца), достаточного для приобретения кислотности 350°С и более. Из полученных компонентов приготавливают бактериально-ферментный препарат "Баланс-Наринэ-Ф" в соответствии с примерами 1 и 2.
Кроме того, в препарат дополнительно вводят лизоцим и/или низин в соответствии с примерами 3-7.
Пример 9. Исследование бактериально-ферментного препарата "Баланс-Наринэ-Ф" на антагонистическую активность
А. По отношению к патогенным бактериям Helicobacter pylori
Прилипание бактерий Helicobacter pylori к стенкам желудочно-кишечного тракта моделировалось на известной их способности прикрепляться к клеткам раковых клеток (аденокарциномы) кишечника, например, к монослою клеток НТ29. Для этого клетки НТ29 культивируют на обезжиренных стеклах при 37°С в минимальной модифицированной среде Дульбекко (ДМЕМ), содержащей 10% галактозы и диализованную телячью плазму в атмосфере 10% СО2 и 90% воздуха и используют до 2-го деления.
Бактерии Helicobacter pylori культивируют отдельно на пластинах Мюллера-Хиттона на 10%-ной овечьей крови в течение 72 часов при 37°С в атмосфере 5% О2, 10% СО2 и 85% азота. С пластинок соскребают и собирают бактерии и промывают в физрастворе. Клетки Helicobacter pylori наносят на монослой клеток НТ29 в количестве 106 кл/см2 и подвергают инкубации в течение 2 часов при 37°С с последующим отмыванием неприкрепившихся клеток. Количество клеток Helicobacter pylori, прикрепившихся к клеткам НТ29, определяют тестом на уреазу. Интенсивность реакции считывают со спектрофотометра на длине волны 550 нм.
В суспензию исследуемого бактериально-ферментного препарата "Наринэ-Ф" на основе штамма лактобактерий Lactobacillus acidophilus N.V. Ер 317/402-Х "Баланс-Наринэ" помещают пластинки с монослоями бактерий Helicobacter pylori, прилипших к клеткам НТ29, и инкубируют в течение 1 часа с последующим промыванием пластинок с монослоями и тестированием на уреазу. Заявляемый препарат способен снизить содержание прикрепленных клеток Helicobacter pylori к монослою клеток НТ29 с 106 кл/см2 (до обработки) до 10 кл/см2 (после обработки).
Это подтверждает, что заявляемый бактериально-ферментный препарат Наринэ-Ф" обладает повышенной антагонистической активностью в отношении патогенных бактерий Helicobacter pylori, вызывающих гастрит или язву желудка, и, таким образом, обладает противогастритным и противоязвенным свойствами.
Б. Антагонистическая активность заявляемого препарата была изучена методом in vitro при совместном выращивании с патогенными тест-штаммами по зоне задержке роста тест-микробов методом штриховых кодов (таблица 1).
| Таблица 1 | ||||
| Антагонистическая активность бактериально-ферментного препарата "Наринэ-Ф" | ||||
| Препаративная | Зоны задержки роста тест-культур (мм) | |||
| форма | Sh. sonne | Salmonella typhim | Escherichia coli | Candida albicans |
| L. acidophilus N.V. Ер 317/402-Х "Баланс-Наринэ" | 17-19 | 21-23 | 20-21 | 15-17 |
Антагонистическая активность бактериально-ферментного препарата "Баланс-Наринэ-Ф" и его колонизационная активность наиболее полно была изучена in vivo на организменно-популяционной модели - лабораторных мышах в хроническом эксперименте.
- Исследования были проведены на племенных мышах обоего пола колонии ICR в течение 3 лет на 18 поколении рандомбринга в количестве 900 самок и 450 самцов.
- Препарат лактобактерий производился на основе штамма L. acidophilus N.V. Ер 317/402-Х "Баланс-Наринэ" на молочной среде с добавлением внутриклеточных и внеклеточных продуктов метаболизма и низина или лизоцима.
- Препарат лактобактерий применялся в дозе 0,1 мл на голову в сутки в течение 1 месяца ежедневно.
- Бактериологические исследования фекалиев мышей проводилось в соответствии с методическими указаниями “Дисбактериоз кишечника и методы его лабораторной диагностики”.
- Проводилось наблюдение за выживаемостью, весом мышей.
- На основании данных о числе желтых тел и мест имплантации живых и мертвых эмбрионов определяли пост- и преимплантационную смертность зародышей.
| Таблица 2 | ||||
| Бактериологические исследования кишечной микрофлоры молодняка мышей колонии ICR по годам | ||||
| Название микроорганизмов | Количество микробов в 1 г фекалий мышей | |||
| Контроль 1-й год. | Племенной молодняк 1-й год. | Племенной молодняк 2-й год | Племенной молодняк 3-й год | |
| 1. Lactobacillus | 105 | 108 | 106-109 | 108-1010 |
| 2. Bifidobacterium | 105 | 109 | 106-1010 | 108-1010 |
| 3. Bacteroides | 105-106 | 106-108 | 106-109 | 108-1010 |
| 4. Escherichia (lac+) | 105-106 | 105-108 | 105-108 | 109 |
| 5. Escherichia (Lac-) | 105-106 | 105-106 | 105 | - |
| 6.Escherichia (слабофер.) | 105-106 | 105-106 | 105 | - |
| 7. Escherichia (гемол.) | 105-106 | 105-107 | 105-106 | - |
| 8. Enterococcus | 105 | 105-107 | 105-108 | 105-109 |
| 9. Staphiococcus | 105-106 | - | - | - |
| 10. Proteus | 105-106 | - | - | - |
| 11. Clostridium | 105-106 | 102 | - | - |
| 12. Грибы Candida | 105-108 | 104 | 103 | - |
Результаты бактериологического исследования молодняка первого поколения, полученного от родителей, получавших жидкий препарат лактобактерий, показали, что произошло не только значительное снижение уровня патогенной и условно-патогенной микрофлоры, но и увеличение бифидо- и лактобактерий почти в равной степени с 105 до 108-109 микробных тел в 1 г фекалий (табл.2).
Бактериологические исследования фекалий племенного молодняка следующих поколений показали наличие сформировавшегося барьерного эффекта гастро-инстестинальной микрофлоры по отношению к таким патогенным микроорганизмам, как Salmonella, Staphylococcus aureus, Clostridium digficile, грибы Candida, Proteus и др. Это является результатом колонизирующей способности кишечника мышей бактериально-ферментного препарата "Баланс-Наринэ-Ф". Более раннее становление микрофлоры новорожденных мышат через коррекцию микрофлоры родителей обеспечило хорошую защищенность организма и возможность противостоять инфекции извне.
Таким образом, экспериментальные исследования на животных, профилактика и лечение больных людей в условиях стационара и амбулаторно показывают, что заявляемый бактериально-ферментный препарат обладает высокой антагонистической активностью, противогастритными и противоязвенными свойствами и повышенным сроком сохранности при высоком титре, что позволяет использовать его как препарат для лечения гастритов и язв желудочно-кишечного тракта, иммунокоррекции организма; лечить дисбактериозы бактериального и вирусного происхождения, диспепсию и дезинтерию без применения антибиотиков.
Claims (2)
1. Бактериальный пробиотический препарат, содержащий биомассу живых лактобактерий и источник метаболитов, отличающийся тем, что он содержит биомассу живых бактерий штамма Lactobacillus acidophilus N.V. Ер 317/402-Х “Баланс-Наринэ”, а в качестве источника клеточного детрита, внеклеточных и внутриклеточных метаболитов - биомассу бактерий штамма Lactobacillus acidophilus N.V. Ер 317/402-Х “Баланс-Наринэ”, подвергнутую многократному замораживанию-оттаиванию или автолизу, при следующем содержании компонентов, мас.%:
Биомасса живых бактерий
штамма L. acidophilus
N.V. Ер 317/402-Х “Баланс-Наринэ” 1,0-99,0
Биомасса бактерий штамма
L. acidophilus N.V. Ер 317/402-Х
“Баланс-Наринэ”, подвергнутая
многократному замораживанию-
-оттаиванию или автолизу в качестве
источника клеточного детрита,
внеклеточных и внутриклеточных
метаболитов Остальное
2. Бактериальный пробиотический препарат по п.1, отличающийся тем, что он дополнительно содержит лизоцим в количестве 0,5-30,0 мг на 1 мл препарата и/или низин в количестве 0,001-0,1 мг на 1 мл препарата.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002118732/13A RU2253672C2 (ru) | 2002-07-12 | 2002-07-12 | Бактериальный пробиотический препарат |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002118732/13A RU2253672C2 (ru) | 2002-07-12 | 2002-07-12 | Бактериальный пробиотический препарат |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2002118732A RU2002118732A (ru) | 2004-08-20 |
| RU2253672C2 true RU2253672C2 (ru) | 2005-06-10 |
Family
ID=35834775
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002118732/13A RU2253672C2 (ru) | 2002-07-12 | 2002-07-12 | Бактериальный пробиотический препарат |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2253672C2 (ru) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1656025A4 (en) * | 2003-08-18 | 2007-12-05 | Bio Balance Corp | STABLE LIQUID PROBIOTIC COMPOSITION, PREPARATION AND CORRESPONDING APPLICATIONS |
| RU2341273C1 (ru) * | 2007-06-18 | 2008-12-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Читинская медицинская компания" | Способ лечения стафилококкового бактерионосительства в носоглотке |
| RU2352346C2 (ru) * | 2007-05-24 | 2009-04-20 | Иван Ильич Таранов | СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНИ ЖЕЛУДКА И ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ, АССОЦИИРОВАННОЙ С Helicobacter pylori |
| RU2617952C2 (ru) * | 2011-09-09 | 2017-04-28 | Джованни МОНЬЯ | Композиция, содержащая N-ацетилцистеин в сочетании с пробиотическими бактериями, способная восстанавливать собственный барьерный эффект желудка, который утрачивается во время фармалогического лечения желудочной гиперацидности |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0482530A2 (de) * | 1990-10-25 | 1992-04-29 | Karl Heinz Hölzel | Zusammensetzung zur Regulierung der Darmflora |
| RU2146454C1 (ru) * | 1999-05-18 | 2000-03-20 | Анисимова Таисия Ивановна | Штамм бактерий lactobacillus acidophilus n.v.ep 317/402 "наринэ" ааа, используемый при приготовлении препаратов, диетических и лечебно-профилактических продуктов для лечения дисбактериоза и его последствий |
| RU2174012C2 (ru) * | 1995-06-14 | 2001-09-27 | Валио Ой | Способы профилактики или лечения аллергии |
-
2002
- 2002-07-12 RU RU2002118732/13A patent/RU2253672C2/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0482530A2 (de) * | 1990-10-25 | 1992-04-29 | Karl Heinz Hölzel | Zusammensetzung zur Regulierung der Darmflora |
| RU2174012C2 (ru) * | 1995-06-14 | 2001-09-27 | Валио Ой | Способы профилактики или лечения аллергии |
| RU2146454C1 (ru) * | 1999-05-18 | 2000-03-20 | Анисимова Таисия Ивановна | Штамм бактерий lactobacillus acidophilus n.v.ep 317/402 "наринэ" ааа, используемый при приготовлении препаратов, диетических и лечебно-профилактических продуктов для лечения дисбактериоза и его последствий |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Пробиотические микроорганизмы - современное состояние вопроса и перспективы использования. Международная научно-практическая конференция памяти Галины Ивановны Гончаровой. Сборник материалов. М., 28-29 мая, 2002, с.49. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1656025A4 (en) * | 2003-08-18 | 2007-12-05 | Bio Balance Corp | STABLE LIQUID PROBIOTIC COMPOSITION, PREPARATION AND CORRESPONDING APPLICATIONS |
| RU2352346C2 (ru) * | 2007-05-24 | 2009-04-20 | Иван Ильич Таранов | СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНИ ЖЕЛУДКА И ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ, АССОЦИИРОВАННОЙ С Helicobacter pylori |
| RU2341273C1 (ru) * | 2007-06-18 | 2008-12-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Читинская медицинская компания" | Способ лечения стафилококкового бактерионосительства в носоглотке |
| RU2617952C2 (ru) * | 2011-09-09 | 2017-04-28 | Джованни МОНЬЯ | Композиция, содержащая N-ацетилцистеин в сочетании с пробиотическими бактериями, способная восстанавливать собственный барьерный эффект желудка, который утрачивается во время фармалогического лечения желудочной гиперацидности |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gilliland | Acidophilus milk products: a review of potential benefits to consumers | |
| RU2126446C1 (ru) | Штамм молочнокислых бактерий lactobacillus acidophilus и композиция против диареи | |
| Gilliland | Health and nutritional benefits from lactic acid bacteria | |
| AU751284B2 (en) | Strain of bacteria of the species lactobacillus paracasei subsp. paracasei, composition thereof for use in food and product containing said strain | |
| KR100386144B1 (ko) | 헬리코박터 파일로리 （Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ）제균성 식음료 제품 | |
| Wendakoon et al. | Lack of therapeutic effect of a specially designed yogurt for the eradication of Helicobacter pylori infection | |
| KR101618391B1 (ko) | 높은 옥살산 분해능을 갖는 유산균 | |
| US20080102061A1 (en) | Use hydrolyzed medium containing microorganisms medicinally | |
| US7927584B2 (en) | Lactic bacteria useful as probiotics | |
| US10687543B2 (en) | Probiotic bacterial molecules and their use in methods to treat/prevent infection by harmful bacteria and to provide nutritional health | |
| ES2654246T3 (es) | Probióticos metabólicamente activos | |
| ES2545209T3 (es) | Método de obtención de una nueva cepa de Bifidobacterium bifidum con actividad frente a la infección por Helicobacter pylori | |
| JP2007518693A (ja) | 安定な液体プロバイオティクス組成物、その調製および適用 | |
| RU2165454C1 (ru) | Штамм бактерий bifidobacterium bifidum № 791/баг, используемый для получения жидкого концентрата бифидобактерий, кисломолочных лечебно-диетических продуктов и биологически активных добавок | |
| US6746672B2 (en) | Isolated bifidobacteria that produce siderophores which inhibit growth of lactococcus lactis | |
| RU2203946C1 (ru) | Штамм бактерий lactobacillus acidophilus n.v. ep 317/402-x "баланс-наринэ", используемый для приготовления противогастритного и противоязвенного кисломолочного продукта | |
| RU2270248C1 (ru) | Штамм бифидобактерий bifidobacterium lactis 668, используемый для приготовления кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, биологически активных добавок, бактериальных препаратов и косметических средств | |
| ES2296635T3 (es) | Bifidobacteria capaz de prevenir la diarrea. | |
| CN107812018A (zh) | 一种灭活益生菌制品、制备方法及其应用 | |
| RU2253672C2 (ru) | Бактериальный пробиотический препарат | |
| RU2326938C2 (ru) | Консорциум штаммов лактобактерий и способ получения на его основе препарата, используемого в качестве биологически активной добавки или закваски для производства кисломолочных продуктов | |
| RU2431663C2 (ru) | ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ПРОТИВОАЛЛЕРГИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО (ВАРИАНТЫ) И ШТАММ Lactobacillus acidophilus 100 аш ПА, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКОГО ПРОТИВОАЛЛЕРГИЧЕСКОГО СРЕДСТВА | |
| JPH01502340A (ja) | 家畜の胃腸病の予防及び処置のための製剤 | |
| RU2376366C2 (ru) | Консорциум штаммов лактобактерий и способ получения на его основе биологически активной добавки или закваски для производства кисломолочных продуктов | |
| JP4023791B2 (ja) | 抗菌物質産生乳酸菌およびそれを用いた機能性食品 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE Effective date: 20150227 |