RU2103365C1 - Method for producing ribonucleic acid - Google Patents
Method for producing ribonucleic acid Download PDFInfo
- Publication number
- RU2103365C1 RU2103365C1 RU96111168/13A RU96111168A RU2103365C1 RU 2103365 C1 RU2103365 C1 RU 2103365C1 RU 96111168/13 A RU96111168/13 A RU 96111168/13A RU 96111168 A RU96111168 A RU 96111168A RU 2103365 C1 RU2103365 C1 RU 2103365C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- ribonucleic acid
- extract
- solution
- biomass
- precipitation
- Prior art date
Links
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 title claims abstract description 18
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 21
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 9
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims abstract description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims abstract description 7
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 6
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 12
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 8
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 8
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 abstract description 5
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 abstract description 3
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 3
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 3
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 230000007022 RNA scission Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- -1 for example Proteins 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 1
- 108010027350 protosubtilin Proteins 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 238000001226 reprecipitation Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано для поучения рибонуклеиновой кислоты, применяемой в медицинской и химической промышленности для получения различных препаратов. The invention relates to the microbiological industry and can be used to teach ribonucleic acid used in the medical and chemical industries to obtain various drugs.
Известен способ получения рибонуклеиновой кислоты, включающий экстракцию рибонуклеиновой кислоты из кормовых дрожжей в подогретом растворе хлористого натрия в щелочной среде, отделение биомассы и осаждение рибонуклеиновой кислоты из экстракта минеральной кислотой с последующими промывкой и сушкой осадка [1]. A known method of producing ribonucleic acid, including extraction of ribonucleic acid from feed yeast in a heated solution of sodium chloride in an alkaline medium, separation of biomass and precipitation of ribonucleic acid from the extract with mineral acid, followed by washing and drying the precipitate [1].
Недостатком известного способа является сравнительно малый выход готового продукта (60% от теоретического) и высокая загрязненность примесями (содержание основного продукта 88%). The disadvantage of this method is the relatively low yield of the finished product (60% of theoretical) and high contamination with impurities (the content of the main product is 88%).
Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является известный способ получения рибонуклеиновой кислоты, который включает экстракцию рибонуклеиновой кислоты из различных дрожжей раствором хлористого натрия в нагретой щелочной среде, осаждение и отделение биомассы, осаждение из экстракта рибонуклеиновой кислоты хлористым кальцием и обработку полученного осадка минеральной кислотой [2]. The closest in technical essence to the proposed is a known method for producing ribonucleic acid, which involves extraction of ribonucleic acid from various yeast with a solution of sodium chloride in a heated alkaline medium, precipitation and separation of biomass, precipitation from calcium chloride ribonucleic acid extract and processing of the resulting precipitate with mineral acid [2 ].
Недостатком известного способа является недостаточно высокая степень чистоты целевого продукта и, в частности, загрязненность белками, содержащимися в сырье. The disadvantage of this method is the insufficiently high degree of purity of the target product and, in particular, contamination with proteins contained in raw materials.
Изобретение направлено на уменьшение содержания белка в готовом препарате. The invention is directed to reducing the protein content in the finished product.
Это достигается тем, что осуществляют последовательно: экстрагирование рибонуклеиновой кислоты из биомассы дрожжей в нагретой щелочной среде; отделение биомассы дрожжей; обработку экстракта рибонуклеиновой кислоты протеолитическим ферментом, вводимом из расчета от 10 е.а. до 100 е.а. на 1 л экстракта; снижение рН раствора до 3,8-4,2; его нагрев до 80-100oС; осветление раствора; осаждение рибонуклеиновой кислоты хлористым кальцием и обработку полученного осадка минеральной кислотой.This is achieved by the fact that they are carried out sequentially: extraction of ribonucleic acid from yeast biomass in a heated alkaline medium; separation of yeast biomass; treatment of the ribonucleic acid extract with a proteolytic enzyme introduced at a rate of 10 ea up to 100 e.a. per 1 liter of extract; lowering the pH of the solution to 3.8-4.2; its heating to 80-100 o C; clarification of the solution; precipitation of ribonucleic acid with calcium chloride and processing the precipitate with mineral acid.
Отличием предлагаемого способа от известного является то, что перед осаждением рибонуклеиновой кислоты из экстракта экстракт обрабатывают протеолитическим ферментом из расчета от 10 е.а. до 100 е.а. на 1 л экстракта, затем уменьшают рН раствора до 3,8-4,2, нагревают его до 80-100oС и осветляют.The difference between the proposed method and the known one is that before precipitation of ribonucleic acid from the extract, the extract is treated with a proteolytic enzyme at a rate of 10 ea. up to 100 e.a. per 1 liter of extract, then reduce the pH of the solution to 3.8-4.2, heat it to 80-100 o C and lighten.
За счет указанной совокупности отличительных и известных признаков удалось снизить содержание белка в получаемой РНК и тем самым повысить чистоту целевого продукта. В частности, обработка экстракта РНК протеолитическими ферментами позволяет разложить белки, содержащиеся в экстракте. Опытным путем установлено, что если вводить ферменты в количестве менее 10 е.а., то процесс ферментолиза идет очень медленно, и для достижения заметного результата необходимо значительное время, что снизит выход целевого продукта, так как одновременно будет идти процесс разложения РНК. Если вводить ферменты в количестве более 100 е.а., то, как показали опыты, процесс идет столь активно, что приводит к расщеплению РНК. Due to this combination of distinctive and well-known features, it was possible to reduce the protein content in the resulting RNA and thereby increase the purity of the target product. In particular, the treatment of the RNA extract with proteolytic enzymes allows the decomposition of the proteins contained in the extract. It has been experimentally established that if enzymes in an amount of less than 10 ea are introduced, the fermentolysis process is very slow, and to achieve a noticeable result, considerable time is required, which will reduce the yield of the target product, since RNA decomposition will take place simultaneously. If enzymes are introduced in an amount of more than 100 ea, then, as experiments have shown, the process is so active that it leads to RNA cleavage.
Уменьшение рН раствора позволяет обеспечить осаждение белков. При этом, если рН больше 4,2, то процесс осаждения практически не идет, а снижение рН до величины менее 3,8 приводит к выпадению РНК, и ее нежелательным потерям. Нагрев раствора обеспечивает коагуляцию белков, содержащихся в нем. При этом, если температура раствора менее 80oС, то процесс коагуляции практически не идет, а верхний предел (100oС) обусловлен температурой кипения раствора (если не принимать во внимание закон Рауля).Decreasing the pH of the solution allows protein precipitation. Moreover, if the pH is greater than 4.2, then the precipitation process practically does not occur, and a decrease in pH to below 3.8 leads to the loss of RNA, and its undesirable losses. Heating the solution ensures coagulation of the proteins contained in it. Moreover, if the temperature of the solution is less than 80 o C, then the coagulation process practically does not go, and the upper limit (100 o C) is due to the boiling point of the solution (if you do not take into account the Raoult law).
При проведении операции осветления раствор освобождается от осажденных и скоагулировавших белков, что благотворно сказывается на качестве целевого продукта. During the clarification operation, the solution is freed from the precipitated and coagulated proteins, which has a beneficial effect on the quality of the target product.
В процессе проведения экспериментов проверялось влияние последовательности выполнения составляющих его операций. В частности обработке ферментом подвергали уже осажденную хлористым кальцием РНК с последующими корректировкой pН, нагревом, осветлением, повторным осаждением. During the experiments, the influence of the sequence of operations of its constituent operations was checked. In particular, RNA already precipitated with calcium chloride was subjected to enzyme treatment, followed by pH adjustment, heating, clarification, and reprecipitation.
Установлено, что если обработку ферментами осуществлять до осаждения РНК, то ее содержание в готовом продукте составляет до 98,8%, а при обработке после осаждения - только 75,6%. Анализ на присутствие белков и продуктов их частичного гидролиза дает отрицательную реакцию в препарате, полученном при последовательном проведении ферментолиза и высаждении кальциевой соли РНК, и положительную реакцию, свидетельствующую о присутствии белков в препарате, полученном при обработке ферментом после осаждения кальциевой соли РНК. It was found that if enzyme treatment is carried out before RNA precipitation, its content in the finished product is up to 98.8%, and during processing after precipitation, only 75.6%. An analysis for the presence of proteins and products of their partial hydrolysis gives a negative reaction in the preparation obtained by sequentially carrying out fermentolysis and precipitation of the calcium salt of RNA, and a positive reaction indicating the presence of proteins in the preparation obtained by treatment with the enzyme after precipitation of the calcium salt of RNA.
Нагрев щелочного раствора при осуществлении экстракции РНК из дрожжей необходим для ее ускорения, так как чем выше температура, тем выше эффективность процесса. Экстракция в принципе может идти и при температурах, близких к комнатным, но процесс этот становится очень длительным, а качество целевого продукта ухудшается. Heating an alkaline solution during the extraction of RNA from yeast is necessary to accelerate it, since the higher the temperature, the higher the efficiency of the process. Extraction, in principle, can also occur at temperatures close to room temperature, but this process becomes very lengthy, and the quality of the target product deteriorates.
В общем случае способ реализуется следующим образом. Исходное сырье, в качестве которого могут быть использованы любые дрожжи (хлебопекарные, пивные, кормовые, белково-витаминный концентрат и т.п.), заливают водным раствором, содержащим щелочь (NaOH, аммиак, КОН, и т.д.) с pН 7,0-9,5, нагревают до 60-100oС при перемешивании и выдерживают при достигнутой температуре от 10 до 60 мин для осуществления экстракции. Эмпирическое установлено, что чем выше температура раствора и рН, тем меньше времени необходимо для завершения экстракции.In the General case, the method is implemented as follows. The feedstock, which can be used as any yeast (baking, brewery, fodder, protein-vitamin concentrate, etc.), is poured with an aqueous solution containing alkali (NaOH, ammonia, KOH, etc.) with pH 7.0-9.5, heated to 60-100 o With stirring and maintained at the temperature reached from 10 to 60 minutes to carry out the extraction. It has been empirically established that the higher the temperature of the solution and pH, the less time is needed to complete the extraction.
После этого биомассу отделяют от полученного экстракта любым из известных приемов - фильтрованием, сепарацией, центрифугированием. After that, the biomass is separated from the obtained extract by any of the known methods - filtration, separation, centrifugation.
Полученный экстракт обрабатывается любым из известных ферментных препаратов, содержащим протеолитические ферменты, например, протосубтилин или панкреатин. Для обеспечения процесса обработки в соответствии с регламентом применения данного ферментного препарата корректируется рН раствора с помощью кислот или щелочей, и раствор нагревается или охлаждается до оптимальной для использования данного препарата температуры. Процесс ферментолиза осуществляется при установленной регламентом температуре и постоянном перемешивании в течение необходимого для его завершения времени. После завершения процесса ферментолиза рН реакционной среды доводят до 3,8-4,2 введением любой из известных минеральных кислот (серная, соляная и т.д.). The extract obtained is processed by any of the known enzyme preparations containing proteolytic enzymes, for example, protosubtilin or pancreatin. To ensure the processing process in accordance with the regulations for the use of this enzyme preparation, the pH of the solution is adjusted using acids or alkalis, and the solution is heated or cooled to the optimum temperature for use of this preparation. The process of fermentolysis is carried out at a temperature established by the regulation and constant stirring for the time necessary for its completion. After completion of the fermentolysis process, the pH of the reaction medium is adjusted to 3.8-4.2 by the introduction of any of the known mineral acids (sulfuric, hydrochloric, etc.).
Полученный экстракт нагревают при перемешивании до 80-100oС. При этом происходит коагуляция белковых примесей. Затем раствор осветляют путем удаления выпавших осадков любым из известных приемов - центрифугированием, фильтрованием, сепарированием.The resulting extract is heated with stirring to 80-100 o C. When this occurs, coagulation of protein impurities. Then the solution is clarified by removing precipitates by any of the known methods - centrifugation, filtration, separation.
В полученный осветленный раствор РНК вносят хлористый кальций, в результате чего она осаждается в виде нерастворимой кальциевой соли РНК. Полученный осадок отфильтровывают, ресуспендируют и промывают в охлажденной до 0-5oС воде, а затем доводят рН суспензии до 1-2 любой минеральной кислотой (соляная, серная, фосфорная и т.д.). В результате в осадок выпадает свободная РНК. Ее отделяют от раствора любым из известных методов, промывают водой и каким-либо органическим растворителем (этанол, ацетон, изопропанол) и сушат. Выход продукта составил 73% от теоретического. По описанной выше методике осуществлялись серии опытов для выявления оптимальных параметров технологического процесса и последовательности выполнения операций.Calcium chloride is added to the resulting clarified RNA solution, whereby it precipitates in the form of an insoluble calcium RNA salt. The resulting precipitate is filtered off, resuspended and washed in water cooled to 0-5 o С, and then the pH of the suspension is adjusted to 1-2 with any mineral acid (hydrochloric, sulfuric, phosphoric, etc.). As a result, free RNA precipitates. It is separated from the solution by any of the known methods, washed with water and some organic solvent (ethanol, acetone, isopropanol) and dried. The product yield was 73% of theoretical. By the method described above, a series of experiments were carried out to identify the optimal parameters of the process and the sequence of operations.
Для удобства результаты некоторых экспериментов приведены в табл. 1 и 2. For convenience, the results of some experiments are given in table. 1 and 2.
Таким образом, из полученных данных следует, что получение максимально чистой РНК обеспечивает заявленная совокупность операций с указанным порядком их выполнения и оптимальными условиями проведения. Thus, it follows from the data obtained that obtaining the purest RNA provides the claimed combination of operations with the indicated order of their execution and optimal conditions for carrying out.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96111168/13A RU2103365C1 (en) | 1996-06-14 | 1996-06-14 | Method for producing ribonucleic acid |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96111168/13A RU2103365C1 (en) | 1996-06-14 | 1996-06-14 | Method for producing ribonucleic acid |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2103365C1 true RU2103365C1 (en) | 1998-01-27 |
| RU96111168A RU96111168A (en) | 1999-07-20 |
Family
ID=20181444
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU96111168/13A RU2103365C1 (en) | 1996-06-14 | 1996-06-14 | Method for producing ribonucleic acid |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2103365C1 (en) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2392328C2 (en) * | 2008-04-02 | 2010-06-20 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИТАЛАНГ" | Method of high-polymeric rna manufacture from yeast |
| RU2403288C1 (en) * | 2009-07-27 | 2010-11-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИТАЛАНГ" | Method of producing high-polymeric rna from dry baker's yeast |
| RU2430969C2 (en) * | 2009-09-09 | 2011-10-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИТАЛАНГ" | High-polymer rna from baker's yeast, free from impurity associations of rna with proteins and polysaccharides |
| RU2435862C1 (en) * | 2010-06-15 | 2011-12-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИТАЛАНГ" | Method for producing high-polymer rna from used beer yeast |
| RU2510854C2 (en) * | 2010-09-06 | 2014-04-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИТАЛАНГ" | METHOD OF PRODUCING PROTEIN-FREE BIOLOGICALLY ACTIVE HIGH-POLYMERIC RNA PREPARATION FROM DRY BAKER'S YEAST Saccharomyces cerevisiae |
| RU2781833C1 (en) * | 2022-08-19 | 2022-10-18 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Промомед Рус" | Method for producing double-stranded ribonucleic acid from saccharomyces cerevisiae yeast cells |
-
1996
- 1996-06-14 RU RU96111168/13A patent/RU2103365C1/en not_active IP Right Cessation
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2392328C2 (en) * | 2008-04-02 | 2010-06-20 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИТАЛАНГ" | Method of high-polymeric rna manufacture from yeast |
| RU2403288C1 (en) * | 2009-07-27 | 2010-11-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИТАЛАНГ" | Method of producing high-polymeric rna from dry baker's yeast |
| RU2430969C2 (en) * | 2009-09-09 | 2011-10-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИТАЛАНГ" | High-polymer rna from baker's yeast, free from impurity associations of rna with proteins and polysaccharides |
| RU2435862C1 (en) * | 2010-06-15 | 2011-12-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИТАЛАНГ" | Method for producing high-polymer rna from used beer yeast |
| RU2510854C2 (en) * | 2010-09-06 | 2014-04-10 | Общество с ограниченной ответственностью "ВИТАЛАНГ" | METHOD OF PRODUCING PROTEIN-FREE BIOLOGICALLY ACTIVE HIGH-POLYMERIC RNA PREPARATION FROM DRY BAKER'S YEAST Saccharomyces cerevisiae |
| RU2781833C1 (en) * | 2022-08-19 | 2022-10-18 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Промомед Рус" | Method for producing double-stranded ribonucleic acid from saccharomyces cerevisiae yeast cells |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111793145A (en) | Process for improving quality and yield of sodium chondroitin sulfate co-produced collagen peptide | |
| US6080843A (en) | Gelatin and method of manufacture | |
| RU2103365C1 (en) | Method for producing ribonucleic acid | |
| CN113234181B (en) | Preparation method of chondroitin sulfate | |
| RU2081915C1 (en) | Method of sodium nucleinate preparing | |
| US4165250A (en) | Riboflavin purification | |
| US5061627A (en) | Method for preparing enzymes from crustaceans | |
| JP4388698B2 (en) | Methods for recovering and purifying recombinant proteins from cells | |
| SU1664245A1 (en) | Method for protein producing | |
| CN111675637B (en) | Method for preparing taurine by enzymolysis of freshwater mussel meat under assistance of high-voltage pulse electric field | |
| US2415826A (en) | Extraction of purine nucleotides from biologic substances | |
| SU1708845A1 (en) | Method for ribonucleic acid preparation from the yeast cells | |
| EP0805201B1 (en) | Method of obtaining a biomass of microorganisms with a low nucleic acids content | |
| RU2007930C1 (en) | Method for processing cotton glumes into pectin | |
| RU2215425C2 (en) | Method for producing of fermentative protein hydrolyzates from sea hydrobionts for microbiological and/or feed purposes | |
| CN116694234B (en) | Method for rapidly preparing bone gelatin | |
| SU1551725A1 (en) | Method of preparing sorbent for processing beverages | |
| SU1717072A1 (en) | Method for obtaining hydrolyzate from blood elements | |
| SU442800A1 (en) | The method of obtaining the drug for parenteral protein nutrition | |
| RU2269913C1 (en) | Method for producing of chitin | |
| SU557785A1 (en) | A method of processing microbial biomass | |
| CN110437974A (en) | Highland barley seedlings by enzymolysis-membrane filtering circulating device and the method for preparing shellfish polypeptide using the device | |
| RU2128218C1 (en) | Method of preparing microorganism biomass at low nucleic acid content | |
| JPS61181394A (en) | Method of isolating and collecting ribonucleic acid | |
| SU782363A1 (en) | Process for isolating enzyme preparation of glutaminase-asparaginase |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20050615 |