RU2018110364A

RU2018110364A - Усовершенствованное продуцирование иммуноглобулинов

Info

Publication number: RU2018110364A
Application number: RU2018110364A
Authority: RU
Inventors: Маттиас УОБЛ; Бао ДУОНГ
Original assignee: Трианни, Инк.
Priority date: 2015-08-24
Filing date: 2016-08-24
Publication date: 2019-09-26
Also published as: IL257411B2; WO2017035252A1; US20170058052A1; EP3341485A1; CA2995717A1; US20200190218A1; IL257411B1; KR20180038055A; IL257411A; EP3341485A4; AU2016311268B2; CN108138200A; JP2018525007A; EP3340786A4; AU2016311268A1; WO2017035241A1; EP3341485B1; US20180230238A1; EP3340786A1; JP2021168662A

Claims

1. Генетически модифицированное животное с нарушенным аллельным исключением в гене тяжелой цепи иммуноглобулина, позволяющим проводить отбор B-лимфоцитов, каждый из которых способен коэкспрессировать два или более различных антигенных рецепторов на клетку и/или биспецифический антигенный рецептор.

2. Генетически модифицированное животное по п.1, где экзоны в одной или более частях генов тяжелой цепи иммуноглобулина животного, кодирующих константную область, заменяют так, чтобы аллельного исключения не происходило после реаранжировки V(D)J на стадии развития В-лимфоцитов.

3. Генетически модифицированное животное по п. 1, где изменения в гене тяжелой цепи иммуноглобулина позволяют осуществлять индуцибельную инактивацию и/или активацию экспрессии одного или более экзонов в одной или более частях гена тяжелой цепи иммуноглобулина, кодирующих константную область.

4. Ген тяжелой цепи иммуноглобулина у генетически модифицированного животного по п. 1, у которого часть одного или более экзонов константных областей или все эти экзоны помещены в открытую рамку считывания в ориентации, противоположной ориентации реаранжированных сегментов гена V(D)J в том же самом гене тяжелой цепи иммуноглобулина.

5. Ген тяжелой цепи иммуноглобулина у генетически модифицированного животного по п.1, где ДНК-кластер встроен для предотвращения экспрессии экзона константной области из реаранжированного сегмента гена V(D)J на одной и той же хромосоме.

6. Генетически модифицированное животное по п. 1, у которого после одновременной инъекции двух различных антигенов, или сначала одного антигена, а затем второго другого антигена, продуцируются В-лимфоциты, каждый из которых коэкспрессирует или последовательно экспрессирует два или более различных антигенных рецептора и/или биспецифический антигенный рецептор.

7. В-клетки генетически модифицированного животного по п. 6, где гетеродимеризация двух антигенных рецепторов достигается благодаря событию развития или дифференцировки, либо она может быть индуцирована.

8. Генетически модифицированное животное по п. 1, где два реаранжированных гена тяжелой цепи иммуноглобулина в отдельных В-клетках животного экспрессируют генные продукты, которые эффективно не гомодимеризуются друг с другом.

9. B-клетки генетически модифицированного животного по п. 8, где гомодимеризация двух различных генных продуктов тяжелой цепи не осуществляется или является нежелательной в отличие от гетеродимеризации.

10. Генетически модифицированное животное с нарушенным аллельным исключением в гене легкой цепи иммуноглобулина, позволяющим проводить отбор B-лимфоцитов, каждый из которых способен коэкспрессировать два или более различных антигенных рецепторов на клетку и/или биспецифический антигенный рецептор.

11. Генетически модифицированное животное по п. 10, где экзоны в одном или более генах легкой цепи иммуноглобулина животного, кодирующих константную область, заменяют так, чтобы аллельного исключения не происходило после реаранжировки VJ на стадии развития В-лимфоцитов.

12. Генетически модифицированное животное по п. 10, где изменения в одном или более генах легкой цепи иммуноглобулина у генетически модифицированного животного позволяют осуществлять индуцибельную инактивацию и/или активацию экспрессии частей гена тяжелой цепи иммуноглобулина, кодирующих константную область.

13. Ген легкой цепи иммуноглобулина у генетически модифицированного животного по п. 10, у которого часть одного или более экзонов константных областей или все эти экзоны помещены в рамку считывания в ориентации, противоположной ориентации реаранжированных сегментов гена VJ в том же самом гене легкой цепи иммуноглобулина.

14. Ген легкой цепи иммуноглобулина у генетически модифицированного животного по п. 10, где ДНК-кластер встроен для предотвращения экспрессии экзона константной области из реаранжированного сегмента гена VJ на одной и той же хромосоме.

15. Ген легкой цепи иммуноглобулина у генетически модифицированного животного по п. 10, где экзон константной области модифицирован так, чтобы он был совместим для ассоциации с одним, но не с обоими аллелями тяжелой цепи в одной и той же клетке.

16. Генетически модифицированное животное по п. 10, у которого после одновременной инъекции двух различных антигенов, или сначала одного антигена, а затем второго другого антигена, продуцируются В-лимфоциты, каждый из которых коэкспрессирует или последовательно экспрессирует два или более различных антигенных рецептора и/или биспецифический антигенный рецептор.

17. Первичные B-клетки, иммортализованные В-клетки или гибридомы, происходящие от генетически модифицированного животного по п. 10.

18. Генетически модифицированное животное по п. 1, где изменения в гене тяжелой цепи иммуноглобулина позволяют продуцировать биспецифические антитела, состоящие только из тяжелых цепей.

19. Часть белка иммуноглобулина или весь белок иммуноглобулина, транскрибируемый из генов тяжелой цепи иммуноглобулина по любому из пп. 4 и 5, или из генов легкой цепи иммуноглобулина по любому из пп. 13-15.

20. Часть белка иммуноглобулина или весь белок иммуноглобулина, происходящие от клеток по любому из пп. 7, 9 и 17.